KR19990087234A

KR19990087234A - 4-아닐리노퀴나졸린 유도체

Info

Publication number: KR19990087234A
Application number: KR1019980706632A
Authority: KR
Inventors: 앤드류 피터 토마스; 로랑 프랑스와 앙드레 에네퀸; 크레이그 죤스톤
Original assignee: 돈 리사 로얄; 제네카 리미티드; 아놀드 그레이엄 도날드, 브루노 암젤리시; 제네카-파마 소시에떼아노님
Priority date: 1996-03-05
Filing date: 1997-02-28
Publication date: 1999-12-15
Also published as: ATE211134T1; AU1866497A; CA2244897C; NO311427B1; NO984085D0; KR100489174B1; AU719327B2; IL125954A; EP0885198A1; EP0885198B1; TW542826B; ES2169355T3; CA2244897A1; NZ331191A; NO984085L; JP2000517291A; CN1212684A; CN1116286C; DK0885198T3; PT885198E

Abstract

본 발명은 하기 화학식 I의 퀴나졸린 유도체 또는 그것의 염, 그 제조 방법, 그리고 하기 화학식 1의 화합물 및 그것의 약학적으로 허용가능한 염을 활성 성분으로서 함유하는 약학 조성물에 관한 것이다.

화학식 I

상기 식 중,

R¹은 수소 또는 메톡시이고,

R²은 메톡시, 에톡시, 2-메톡시에톡시, 3-메톡시프로폭시, 2-에톡시에톡시, 트리플루오로메톡시, 2,2,2-트리플루오로에톡시, 2-히드록시에톡시, 3-히드록시프로폭시, 2-(N,N-디메틸아미노)에톡시, 3-(N,N-디메틸아미노)프로폭시, 2-모르폴리노에톡시, 3-모르폴리노프로폭시, 4-모르폴리노부톡시, 2-피페리디노에톡시, 3-피페리디노프로폭시, 4-피페리디노부톡시, 2-(피페라진-1-일)에톡시, 3-(피페라진-1-일)프로폭시, 4-(피페라진-1-일)부톡시, 2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시, 3-(4-메틸피페라진-1-일)프로폭시 또는 4-(4-메틸피페라진-1-일)부톡시이고,

(R³)₂를 포함하는 페닐기는 2-플루오로-5-히드록시페닐, 4-브로모-2-플루오로페닐, 2,4-디플루오로페닐, 4-클로로-2-플루오로페닐, 2-플루오로-4-메틸페닐, 2-플루오로-4-메톡시페닐, 4-브로모-3-히드록시페닐, 4-플루오로-3-히드록시페닐, 4-클로로-3-히드록시페닐, 3-히드록시-4-메틸페닐, 3-히드록시-4-메톡시페닐 및 4-시아노-2-플루오로페닐 중에서 선택된다.

화학식 1의 화합물 및 그것의 약학적으로 허용가능한 염은 VEGF의 효과를 억제하고 암 및 류마티스성 관절염을 비롯한 많은 질병을 치료하는 데 유용한 성질을 갖는다

Description

4-아닐리노퀴나졸린 유도체

통상적으로 혈관 형성은 배 형성 현상, 상처 치유 및 여성 생식 기능을 비롯한 다양한 과정에서 중요한 역할을 한다. 불필요한 또는 병인성 혈관 형성 현상은 당뇨성 망막증, 건선, 암, 류마티스성 관절염, 죽종(粥腫), 카포시 육종 및 혈관종[문헌 : Fan등, 1995, Trends Pharmacol. Sci. 16:57-66; Folkman, 1995, Nature Medicine 1:27-31]을 비롯한 질환과 관련이 있다. 혈관 투과성의 변형은 정상의 생리적 과정 및 병인성 생리적 과정 모두에서 중요한 역할을 하는 것으로 여겨진다[문헌 : Cullinan-Bove 등, 1993 Endocrinology 133:829-837: Senger등, 1993, Cancer and Metastasis Reviews, 12: 303-324]. 시험관내에서 내피 세포 성장 촉진 활성을 갖는 몇 개의 폴리펩티드는 산성 및 염기성 섬유아세포 성장 인자(aFGF & bFGF) 및 혈관 내피 성장 인자(VEGF)를 포함하는 것으로 간주되어 왔다. 이들의 수용체의 발현성이 제한됨으로 인하여, VEGF 성장 인자의 활성은 FGFs 성장 인자 활성과는 대조적으로 내피 세포에 대하여 비교적 큰 특이성을 갖는다. 최근의 자료들은 VEGF가 정상의 혈관 형성 현상 및 병인성 혈관 형성 현상[문헌 : Jakeman등, 1993, Endocrinology,133: 848-859; Kolch등, 1995, Breast Cancer Research and Treatment,36:139-155] 및 혈관 투과성[문헌 : Connolly등, 1989, J. Biol. Chem. 264:20017-20024] 모두에 대한 중요한 자극 물질이라는 것을 보여주고 있다. 항체를 통한 VEGF의 울혈에 의해 VEGF 작용을 길항시키므로써 종양 성장을 억제할 수 있다[문헌 : Kim등, 1993, Nature 362:841-844].

수용체 티로신 키나아제(RTKs)는 세포의 플라스마 멤브레인을 거쳐 생화학적 신호를 전달하는 데 있어서 중요하다. 이러한 트랜스멤브레인 분자는 특징적으로 플라스마 멤브레인 내의 한 세그먼트를 통해 세포내 티로신 키나아제 영역과 연결되는 세포외 리간드 결합 영역으로 이루어진다. 수용체에 리간드를 결합시키므로써 수용체와 연관한 티로신 키나아제 활성을 자극하게 되므로, 상기 수용체 및 기타의 세포외 분자 모두에 대한 티로신 잔류물의 인산화 반응을 유도한다. 티로신 인산화와 같은 이러한 변화는 다양한 세포 응답을 유도하는 시그널 다단계(cascade)를 개시한다. 현재까지, 아미노산 서열 동족체에 의해 정의되는 19 개 이상의 뚜렷한 RTK 아과가 확인되었다. 현재 이들 아과 중 하나는 fms 형 티로신 키나아제 수용체, 즉 Flt 또는 Flt 1, 키나아제 삽입 영역 함유 수용체, 즉 KDR(Flk-1로도 일컬음) 및 또 다른 fms 형 티로신 키나아제 수용체, 즉 Flt4를 포함한다. 이들 관련 RTKs, Flt 및 KDR 중 두 가지는 높은 친화도로 VEGF와 결합하는 것이 알려져 왔다[문헌 : De Vries등, 1992, Science 255: 989-991; Terman 등, 1992, Biochem. Biophys. Res. Comm. 1992, 187: 1579-1586]. 비정형 세포에서 발현하는 이들 수용체에 대한 VEGF의 결합은 세포 단백질 및 칼슘 플럭스의 티로신 인산화 상태의 변화와 관련되어 왔다.

유럽 특허 출원 제0326330호는 특정한 퀴놀린 식물 살균제, 퀴나졸린 식물 살균제 및 시놀린 식물 살균제를 개시하고 있다. 또한 이들 식물 살균제 중 어떤 것은 살충 활성 및 진드기 박멸 활성을 갖는 것으로 기술되어 있다. 그러나 개시되어 있는 화합물 중 어떠한 것도 인간과 같은 동물에게 임의의 목적으로 사용할 수 있다는 것은 논의되거나 기술된 바가 없다. 특히, 상기 유럽 특허 공개 문헌에는 VEGF와 같은 성장 인자에 의해 중재되는 혈관 형성 작용 및/또는 증가된 혈관 투과성과 관련한 어떤 것도 개시되어 있지 않다.

유럽 특허 제0566226호에는 표피 성장 인자(EGF) 수용체 티로신 키나아제에 대하여 활성을 갖는 화합물이 기재되어 있다. 본 발명의 화합물들은 유럽 특허 제0566226호에 기재된 광의의 일반적인 범주에 포함되기는 하나, 놀랍게도 본 발명가들은 본 발명의 화합물이 유럽 특허 제0566226호의 어디에도 개시된 바 없는 특성인 VEGF에 대해 매우 우수한 억제 활성을 갖는다는 것을 발견하였다. 또한 본 발명의 화합물의 범위에 들지 않는 유럽 특허 제0566226호의 화합물은 시험했을 때 VEGF 수용체 티로신 키나아제에 대해 뚜렷한 억제 활성을 타나내지 않았다.

본 발명은 VEGF의 효과를 놀랄 정도로 억제하는 화합물의 발견을 기초로 하는 것으로, 이 화합물은 암, 당뇨병, 건선, 류마티스성 관절염, 카포시 육종, 혈관종, 급성 및 만성 신장병증, 죽종, 동맥 재발협착증, 자가면역 질환, 급성 염증 및 망막 혈관 증식을 나타내는 안질환과 같은 혈관 형성 및/또는 증가된 혈관 투과성과 관련한 질환 치료에 유용한 특성을 갖는다. 본 발명의 화합물은 VEGF 수용체 티로신 키나아제에 대해 높은 효능을 가지나, EGF 수용체 티로신 키나아제에 대해서도 약간의 활성을 갖는다. 또한 본 발명의 화합물은 EGF 수용체 티로신 키나아제 또는 FGF R1 수용체 티로신 키나아제에 대해서보다 VEGF 수용체 티로신 키나아제에 대해 실질적으로 더 높은 효능을 갖는다.

본 발명은 퀴나졸린 유도체, 그것의 제조 방법, 그것을 활성 성분으로 함유하는 약학 조성물, 혈관 형성 및/또는 증가된 혈관 투과성과 관련한 질환의 치료 방법, 그것의 의약으로서의 용도, 그리고 인간과 같은 항온 동물에서의 혈관 형성 억제 및/또는 혈관 투과성 감소 효과를 발휘하는 데 유용한 의약의 제조에 퀴나졸린 유도체를 사용하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 하기 화학식 I의 퀴나졸린 유도체 또는 그것의 염을 제공한다.

상기 식 중,

R¹은 수소 또는 메톡시이고,

R¹은 메톡시가 바람직하다.

R²은 메톡시, 에톡시, 2-메톡시에톡시, 3-메톡시프로폭시, 트리플루오로메톡시, 2,2,2-트리플루오로에톡시, 2-히드록시에톡시, 3-히드록시프로폭시, 2-(N,N-디메틸아미노)에톡시, 3-(N,N-디메틸아미노)프로폭시, 2-모르폴리노에톡시, 3-모르폴리노프로폭시, 2-피페리디노에톡시, 3-피페리디노프로폭시, 2-(피페라진-1-일)에톡시 또는 3-(피페라진-1-일)프로폭시가 유리하다. 또한 R²은 2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시 및 3-(4-메틸피페라진-1-일)프로폭시가 유리하다.

R²는 메톡시, 에톡시, 2-메톡시에톡시, 3-메톡시프로폭시, 2,2,2-트리플루오로에톡시, 2-히드록시에톡시, 3-히드록시프로폭시, 2-(N,N-디메틸아미노)에톡시, 3-(N,N-디메틸아미노)프로폭시, 2-모르폴리노에톡시, 3-모르폴리노프로폭시, 2-피페리디노에톡시, 3-피페리디노프로폭시, 2-(피페라진-1-일)에톡시 또는 3-(피페라진-1-일)프로폭시가 바람직하다. 또한 R²는 2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시 및 3-(4-메틸피페라진-1-일)프로폭시가 바람직하다.

R²은 2-메톡시에톡시, 2-히드록시에톡시, 3-(N,N-디메틸아미노)프로폭시, 2-모르폴리노에톡시, 3-모르폴리노프로폭시 또는 3-(피페라진-1-일)프로폭시가 더욱 바람직하며, 2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시 및 3-(4-메틸피페라진-1-일)프로폭시 가 특히 더 바람직하다.

R²은 2-메톡시에톡시, 2-모르폴리노에톡시, 3-모르폴리노프로폭시 및 2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시가 특히 바람직하다.

R²은 2-메톡시에톡시 및 3-모르폴리노프로폭시가 더욱 특히 바람직하다.

본 발명의 특정한 일면으로, (R³)₂를 포함하는 페닐기는 2-플루오로-5-히드록시페닐, 4-브로모-2-플루오로페닐, 2,4-디플루오로페닐, 4-클로로-2-플루오로페닐, 2-플루오로-4-메틸페닐, 2-플루오로-4-메톡시페닐, 4-브로모-3-히드록시페닐, 4-플루오로-3-히드록시페닐, 4-클로로-3-히드록시페닐, 3-히드록시-4-메틸페닐 및 3-히드록시-4-메톡시페닐 중에서 선택되는 것이 바람직하다.

(R³)₂를 포함하는 페닐기는 3-히드록시-4-메틸페닐 및 4-클로로-2-플루오로페닐, 특히 4-클로로-2-플루오로페닐이 바람직하다. 4-브로모-2-플루오로페닐이 (R³)₂를 포함하는 페닐기로 특히 바람직하다.

본 발명의 바람직한 화합물은 다음과 같다.

4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-7-(2-메톡시에톡시)퀴나졸린,

6,7-디메톡시-4-(2-플루오로-5-히드록시아닐리노)퀴나졸린,

4-(4-클로로-3-히드록시아닐리노)-6,7-디메톡시퀴나졸린,

4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(2-메톡시에톡시)퀴나졸린,

4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6,7-디메톡시퀴나졸린,

4-(3-히드록시-4-메틸아닐리노)-6-메톡시-7-(3-모르폴리노프로폭시)퀴나졸린,

4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-7-(3-히드록시프로폭시)-6-메톡시퀴나졸린,

4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(2-모르폴리노에톡시)퀴나졸린,

4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(3-모르폴리노프로폭시)퀴나졸린,

4-(3-히드록시-4-메틸아닐리노)-6-메톡시-7-(2-메톡시에톡시)퀴나졸린 및 이들의 염, 특히 이들의 염산염.

기타 바람직한 본 발명의 화합물은 다음과 같은 것들이 있다.

4-(4-브로모-2-플루오로아닐리노)-6,7-디메톡시퀴나졸린,

4-(2-플루오로-4-메틸아닐리노)-6,7-디메톡시퀴나졸린,

6,7-디메톡시-4-(3-히드록시-4-메틸아닐리노)퀴나졸린,

4-(4-브로모-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(2-메톡시에톡시)퀴나졸린,

4-(2-플루오로-4-메틸아닐리노)-6-메톡시-7-(2-메톡시에톡시)퀴나졸린,

4-(3-히드록시-4-메틸아닐리노)-7-(2-메톡시에톡시)퀴나졸린,

4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시)퀴나졸린,

4-(4-브로모-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(3-모르폴리노프로폭시)퀴나졸린,

4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-7-(3-모르폴리노프로폭시)퀴나졸린,

4-(4-시아노-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(3-모르폴리노프로폭시)퀴나졸린,

4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(3-메톡시프로폭시)퀴나졸린,

4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(2-에톡시에톡시)퀴나졸린,

4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-7-(2-히드록시에톡시)-6-메톡시퀴나졸린,

4-(4-브로모-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시)퀴나졸린,

4-(4-브로모-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(2-모르폴리노에톡시)퀴나졸린,

4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(4-모르폴리노부톡시)퀴나졸린,

4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(3-(4-메틸피페라진-1-일)프로폭시)퀴나졸린 및 이들의 염, 특히 이들의 염산염.

다음과 같은 화합물이 더욱 바람직하다.

4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6,7-디메톡시퀴나졸린,

4-(3-히드록시-4-메틸아닐리노)-6-메톡시-7-(2-메톡시에톡시)퀴나졸린,

4-(3-히드록시-4-메틸아닐리노)-7-(2-메톡시에톡시)퀴나졸린,

4-(4-브로모-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(모르폴리노에톡시)퀴나졸린,

다음과 같은 화합물이 더욱 특히 바람직하다.

4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6,7-디메톡시퀴나졸린,

4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(3-모르폴리노프로폭시)퀴나졸린 및 이들의 염, 특히 이들의 염산염.

기타 특히 바람직한 화합물은 다음과 같다.

4-(4-브로모-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(2-모르폴리노에톡시)퀴나졸린 및 이들의 염, 특히 이들의 염산염.

더욱 특히 바람직한 화합물은 다음과 같다.

특히 바람직한 화합물은 다음과 같다.

4-(4-브로모-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(모르폴리노에톡시)퀴나졸린 및 이들의 염, 특히 이들의 염산염.

더욱 바람직한 화합물은 다음과 같다.

4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(3-모르폴리노에톡시)퀴나졸린,

4-(4-브로모-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(3-모르폴리노프로폭시)퀴나졸린 및 이들의 염, 특히 이들의 염산염이 있으며, 이들 중 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(2-메톡시에톡시)퀴나졸린, 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노) -6-메톡시-7-(3-모르폴리노프로폭시)퀴나졸린 및 이들의 염, 특히 이들의 염산염이 특히 바람직하다.

혼동을 피하기 위해, 본 명세서에서 어떤 기가 '전술한' 또는 '앞에 기재된'이라는 용어로 한정되는 경우에는, 그 기는 첫 번째로 서술되는 가장 넓은 범위의 정의 뿐아니라 그 기들의 바람직한 정의 각각, 그리고 전부를 총괄하는 표현으로 이해하여야 한다.

본 명세서에서, "알킬"이란 용어는 직쇄 및 분지쇄 알킬기를 모두 포함하나, 참고로 "프로필"과 같은 특정한 알킬기는 직쇄형만을 갖는 것이다. 유사한 규칙을 다른 일반명에도 적용한다. 특별한 언급이 없는 한, 상기 용어 "알킬"이란 탄소 원자 수가 1 내지 6, 바람직하게는 1 내지 4 인 사슬을 말하는 것이다.

본 명세서에 사용된 "알콕시"란 용어는 앞에서 정의한 알킬기가 산소 원자에 연결된 것을 의미한다.

본 명세서에서 사용된 "아릴"이란 용어는 C_6-10방향족기를 포함하며, 이것은 필요에 따라, 할로게노, 알킬, 알콕시, 시아노, 니트로 또는 트리플루오로메틸(여기서, 알킬 및 알콕시란 앞에서 정의한 바와 같음)로부터 선택되는 하나 이상의 치환체를 함유할 수 있다. 본 명세서에서 사용된 "아릴옥시"란 용어는 앞에서 정의한 아릴기가 산소 원자에 연결된 것을 의미한다.

본 명세서에서 사용된 "설포닐옥시"란 용어는 알킬설포닐옥시 및 아릴설포닐옥시를 포함하는 것으로서, 여기서 "알킬" 및 "아릴"이란 앞에서 정의한 바와 같다.

전술한 화학식 I에서, 수소는 퀴나졸린기의 2 위치, 5 위치 및 8 위치에 존재할 것이다.

본 발명의 범위내에서는 화학식 I의 퀴나졸린 또는 그것의 염은 호변이성(tautomerism) 현상을 보일 수 있으나 본 명세서에 제시된 화학식들은 가능한 호변 이성체 형태들 중 단 하나만을 나타낼 수 있는 것을 인식해야 한다. 본 발명은 VEGF 수용체 티로신 키나아제 활성을 억제하는 것이면 어떠한 호변 이성체 형태든 포함하므로, 본 명세서내에 화학식으로 표현된 특정한 호변 이성체 형태만으로 한정하는 것은 아니다.

또한 화학식 I의 특정한 퀴나졸린 및 그것의 염은 용매화된 형태로 존재할 수 있을 뿐 아니라 수화된 형태와 같이 비용매화 형태로도 존재할 수 있다. 본 발명은 VEFG 수용체 티로신 키나아제 활성을 억제하는 이러한 모든 용매화된 형태를 포괄하는 것으로 이해하여야 한다.

본 발명은 전술한 바와 같은 화학식 I의 화합물 뿐만 아니라 그것의 염에 관한 것이다. 약학 조성물에 사용되는 염은 약학적으로 허용가능한 염일 것이나, 기타의 염들도 화학식 I의 화합물 및 그것의 약학적으로 허용가능한 염의 제조에 유용할 수 있다. 본 발명의 약학적으로 허용가능한 염은, 예를 들면 전술한 화학식 I의 화합물의 산 부가반응염을 포함할 수 있는 데, 이들은 충분히 염기성이므로 상기한 약학적으로 허용 가능한 염을 형성할 수 있다. 이러한 산 부가반응 염으로는 수소 할라이드(특히 염화수소산 또는 브롬화 수소산, 염화수소산이 특히 바람직함)와의 염 또는 황산 또는 인산과의 염 또는 트리플루오로아세트산, 시트르산 또는 말레산과의 염과 같은 약학적 허용 음이온을 내는 무기산 또는 유기산과의 염을 포함한다. 또한 화학식 I의 화합물이 충분히 산성인 경우, 약학적으로 허용가능한 염은 약학적 허용 양이온을 낼 수 있는 무기 염기 또는 유기 염기를 사용하여 형성될 수 있다. 이러한 무기 염기 또는 유기 염기의 예로는 나트륨염 또는 칼륨염과 같은 알칼리 금속염, 칼슘염 또는 마그네슘 염과 같은 알칼리 토금속염, 암모늄염 또는 예를 들면, 메틸아민, 디메틸아민, 트리메틸아민, 피페리딘, 모르폴린 또는 트리스-(2-히드록시에틸)아민과의 염을 포함한다.

화학식 I의 화합물 또는 그것의 염 및 본 발명의 기타 화합물(후술됨)은 화학적으로 관련된 화합물들을 제조하는 데 적용될 수 있는 공지된 임의의 방법에 의해 제조될 수 있다. 이같은 방법은 예를 들면, 유럽 특허 출원 제0520722호, 제0566226호, 제0602851호 및 제0635498호에 기술된 방법을 포함한다. 이같은 방법들은 본 발명의 추가 특징을 이루며, 후술하였다. 필요한 출발물질은 유기 화학분야의 통상의 제법으로 제조할 수 있다. 이같은 출발물질의 제법은 첨부된 실시예에 개시되어 있으나, 이들 실시예에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아니다. 선택적으로 필요한 출발물질은 후술한 것들과 유사한 과정에 의해 얻어질 수 있으며, 이는 유기 화학분야의 당업자의 기술 범주내에 있다.

따라서 후술하는 방법 (a) 내지 (g) 및 (i) 내지 (v)는 본 발명의 추가의 특징을 이룬다.

화학식 I의 화합물의 합성

(a) 하기 화학식 III의 화합물을 하기 화학식 IV의 화합물과 반응시키므로써 화학식 I의 화합물 및 그것의 염을 제조할 수 있다.

(상기 식 중, R¹및 R²는 앞에 기재된 바와 같으며, L¹은 치환가능한 기임)

(상기 식 중, R³은 앞에 기재된 바와 같음)

간편한 치환가능한 기 L¹는, 예컨대 할로게노, 알콕시(C_1-4알콕시가 바람직함), 아릴옥시 또는 설포닐옥시 기이며, 구체적으로는 클로로, 브로모, 메톡시, 페녹시, 메탄설포닐옥시 또는 톨루엔-4-설포닐옥시 기이다.

반응은 산 또는 염기의 존재하에 실행되는 것이 유리하다. 산의 예로는, 염화수소와 같은 무수 무기산이 있다. 염기는, 예컨대 피리딘, 2,6-루티딘, 콜리딘, 4-디메틸아미노피리딘, 트리에틸아민, 모르폴린, N-메틸모르폴린 또는 디아자비시클로[5.4.0]운덱-7-엔과 같은 유기 아민 염기 또는 예컨대, 알칼리 금속 탄산염 또는 수산화물 또는 알칼리 토금속 탄산염 또는 수산화물, 예를 들면 탄산나트륨, 탄산칼륨, 탄산칼슘, 수산화나트륨 또는 수산화칼륨이 있다. 선택적으로, 상기 염기는, 예를 들면 수화나트륨과 같은 알칼리 금속 수화물, 또는 예를 들면, 아미드화 나트륨 또는 비스(트리메틸실릴)아미드화 나트륨과 같은 알칼리금속 아미드 또는 알칼리 토금속 아미드가 있다. 반응은 비활성 용매 또는 희석제, 예를 들면 메탄올, 에탄올, 이소프로판올 또는 에틸 아세테이트와 같은 알칸올 또는 에스테르, 염화 메틸렌, 트리클로로메탄 또는 사염화탄소와 같은 할로겐화된 용매, 테트라히드로푸란 또는 1,4-디옥산과 같은 에테르, 톨루엔과 같은 방향족 탄화수소 용매 또는 N,N-디메틸포름아미드, N,N-디메틸아세트아미드, N-메틸피롤리딘-2-온 또는 디메틸설폭시드와 같은 쌍극성 반양성자성 용매의 존재하에서 실행되는 것이 바람직하다. 반응은, 예를 들면 10 내지 150℃, 바람직하게는 20 내지 80℃의 온도 범위에서 실행되는 것이 간편하다.

본 발명의 화합물은 상기 방법으로부터 유리 염기의 형태로 얻어질 수 있거나 또는 선택적으로 식 H-L¹산(식 중, L¹은 전술한 것과 동일한 의미임)과의 염 형태로 얻어질 수 있다. 염으로부터 유리 염기의 형태를 얻고자 한다면, 종래의 방법에 따라 염을 앞에 기재된 염기로 처리할 수 있다.

(b) 하기 화학식 II의 기가 하나의 히드록시기를 함유하는 페닐기를 나타내는 경우, 화학식 I의 화합물 및 그것의 염은 하기 화학식 V의 화합물을 탈보호하므로써 제조될 수 있다.

(상기 식 중, R³은 앞에 기재된 바와 같음)

(상기 식 중, R¹, R²및 R³은 앞에 기재된 바와 같으며, P는 페놀성 히드록시 보호기를 나타냄)

페놀성 히드록시 보호기 P의 선택은 유기 화학자의 표준 지식 범위 내에서 이루어 지는 것으로, 예를 들면 에테르(예, 메틸, 메톡시메틸, 알릴 및 벤질), 실릴 에테르(예, t-부틸디페닐실릴 및 t-부틸디메틸실릴), 에스테르(예, 아세테이트 및 벤조에이트) 및 카보네이트(예, 메틸 및 벤질)을 비롯한 문헌["Protective Groups in Organic Synthesis" T.W. Greene 및 R.G.M. Wuts, 2판, Wiley 1991]과 같은 표준 문헌에 포함되어 있다. 이러한 페놀성 히드록시 보호기의 제거는 전술한 것과 같이 표준 문헌에 기재된 반응 조건을 비롯한 변환에 관하여 공지된 임의의 방법에 의해 또는 관련 방법에 의해 실행될 수 있다. 반응 조건은, 출발 화합물 또는 생성 화합물 내의 다른 부위들에서 불필요한 반응을 일으키지 않고 히드록시 유도체를 생성되게 하는 것이 바람직하다. 예컨대, 보호기 P가 아세테이트이면, 상기 변환 반응은 퀴나졸린 유도체 및 그것의 모노- 및 디-알킬화된 유도체를 앞에서 기재한 암모니아를 비롯한 염기로 처리하므로써 실행하는 것이 간편할 수 있다. 상기 변환 반응은 바람직하게는 물 또는 알코올(예, 메탄올 또는 에탄올)과 같은 양성자성 용매 또는 공용매의 존재하에 실행된다. 이러한 반응은 앞에 기재된 부가의 비활성 용매 또는 희석제의 존재하에, 0 내지 50℃, 간편하게는 약 20℃의 온도에서 실행될 수 있다.

(c) 화학식 I의 화합물 및 그것의 염은, 간편하게 앞에 기재된 염기의 존재하에 하기 화학식 VI의 화합물을 하기 화학식 VII의 화합물과 반응시키므로써 제조할 수 있다.

(상기 식 중, R¹및 R³은 앞에 기재된 바와 같음)

R⁴-L¹

(상기 식 중, L¹은 앞에 기재된 바와 같으며, R⁴는 메틸, 에틸, 2-메톡시에틸, 3-메톡시프로필, 2-에톡시에틸, 트리플루오로메틸, 2,2,2-트리플루오로에틸, 2-히드록시에틸, 3-히드록시프로필, 2-(N,N-디메틸아미노)에틸, 3-(N,N-디메틸아미노)프로필, 2-모르폴리노에틸, 3-모르폴리노프로필, 4-모르폴리노부틸, 2-피페리디노에틸, 3-피페리디노프로필, 4-피페리디노부틸, 2-(피페라진-1-일)에틸, 3-(피페라진-1-일)프로필, 4-(4-메틸피페라진-1-일)부틸, 2-(4-메틸피페라진-1-일)에틸, 3-(4-메틸피페라진-1-일)프로필 또는 4-(4-메틸피페라진-1-일)부틸이고, L¹은 치환가능한 기로서, 예컨대 브로모기 또는 메탄설포닐옥시기와 같은 할로게노기 또는 설포닐옥시기이다. 상기 반응은 바람직하게는 염기(전술한 방법 (a)에서 정의함)의 존재하에서, 그리고 유리하게는 비활성 용매 또는 희석제(전술한 방법 (a)에서 정의함)의 존재하에서 실행되며, 10 내지 150℃, 간편하게는 약 50℃의 온도에서 실행하는 것이 유리하다.

(d) 화학식 I의 화합물 및 그것의 염은 하기 화학식 VIII의 화합물을 하기 화학식 IX의 화합물과 반응시키므로써 제조할 수 있다.

R²-H

(상기 식 중, L¹, R¹, R²및 R³은 앞에 기재된 바와 같음)

상기 반응은 간편하게는 염기(전술한 방법 (a)에서 정의함)의 존재하에, 그리고 유리하게는 비활성 용매 또는 희석제(전술한 방법 (a)에서 정의함)의 존재하에서 실행되며, 일정한 온도 범위, 예를 들면 10 내지 150℃, 간편하게는 약 100℃의 온도에서 실행하는 것이 유리하다.

(e) R²가 R⁵C_1-4알콕시, 특히 R⁵C_1-3알콕시인 화학식 I의 화합물 및 그것의 염(식 중, R⁵은 메톡시, 에톡시, 히드록시, N,N-디메틸아미노, 모르폴리노, 피페리디노, 피페라진-1-일 또는 4-메틸피페라진-1-일 중에서 선택됨)은 하기 화학식 X의 화합물을 하기 화학식 XI의 화합물과 반응시키므로써 제조될 수 있다.

(상기 식 중, L¹, R¹및 R³은 앞에 기재된 바와 같으며, R⁶은 C_1-4알콕시, 특히 C_1-3알콕시임)

R⁵-H

(상기 식, 중 R⁵는 앞에 기재된 바와 같음)

반응은 간편하게, 염기(전술한 방법 (a)에서 정의함)의 존재하에 실행될 수 있으며, 유리하게는 비활성 용매 또는 희석제(전술한 방법 (a)에서 정의함)존재하에서 실행되며, 일정한 온도 범위, 예를 들면 0 내지 150℃, 간편하게는 약 50℃에서 실행하는 것이 유리하다.

중간체의 합성

(i) 화학식 III의 화합물 및 그것의 염은 본 발명의 추가적인 특징을 이룬다. L¹이 할로게노인 화학식 III의 화합물은, 예를 들면 하기 화학식 XII의 화합물을 할로겐화시키므로써 제조될 수 있다.

(상기 식 중, R¹및 R²는 앞에 기재된 바와 같음)

간편한 할로겐화제는 무기산 할라이드,예를 들면 염화 티오닐, 인(III)염화물, 인(V)옥시염화물, 및 인(V)염화물을 포함한다. 할로겐화 반응은, 예를 들면 염화 메틸렌, 트리클로로메탄 또는 사염화탄소와 같은 할로겐화된 용매, 또는 벤젠 또는 톨루엔과 같은 방향족 탄화수소 용매와 같은 비활성 용매 또는 희석제의 존재하에서 실행되는 것이 간편하다. 그 반응은 일정한 온도 범위, 예를 들면 10℃ 내지 150℃, 바람직하게는 40℃ 내지 100℃에서 실행하는 것이 간편하다.

본 발명의 추가 특징을 이루는 화학식 XII의 화합물 및 그것의 염은, 예를 들면 하기 화학식 XIII의 화합물을 앞에 기재된 화학식 IX의 화합물과 반응시키므로써 제조할 수 있다.

(상기 식 중, R¹및 L¹는 앞에 기재된 바와 같음)

그 반응은, 간편하게 염기(전술한 방법 (a)에서 정의함)의 존재하에 실행될 수 있으며, 유리하게는 비활성 용매 또는 희석제 (전술한 방법 (a)에서 정의함)존재하에서 실행되며, 일정한 온도 범위, 예를 들면 10 내지 150℃, 간편하게는 약 100℃의 온도에서 실행하는 것이 유리하다.

또한, 화학식 XII의 화합물 및 그것의 염은 하기 화학식 XIV의 화합물을 고리화시키므로써 제조할 수 있다.

(상기 식 중, R¹및 R²는 앞에 기재된 바와 같으며, A¹은 히드록시, 알콕시(C_1-4알콕시가 바람직함) 또는 아미노기임)

상기 고리화 반응은 A¹이 히드록시 또는 알콕시 기인 화학식 XIV의 화합물을 고리화를 일으키는 데 효과적인 포름아미드 또는 그것의 등가물과 반응시키므로써 실행될 수 있으며, 이로써 [3-(디메틸아미노)-2-아자프롭-2-에닐리덴]디메틸암모늄 클로라이드와 같은 화학식 XII의 화합물 또는 그것의 염이 얻어진다. 고리화 반응은 용매로서 포름아미드의 존재하에 또는 에테르(예, 1,4-디옥산)와 같은 비활성 용매 또는 희석제의 존재하에 실행되는 것이 간편하다. 고리화 반응은 고온, 바람직하게는 80℃ 내지 200℃의 온도에서 실행되는 것이 간편하다. 또한 화학식 XII의 화합물은 A¹이 아미노기인 화학식 XIV의 화합물을 고리화를 일으키는 데 효과적인 포름산 또는 그것의 등가물로 고리화시키므로써 제조될 수 있으며 이로써 화학식 XII의 화합물 또는 그것의 염이 얻어진다. 고리화를 일으키는 데 효과적인 포름산의 등가물은, 예를 들면 트리-C_1-4알콕시메탄, 구체적으로, 트리에톡시메탄 및 트리메톡시메탄을 포함한다. 고리화반응은 설폰산(예, p-톨루엔 설폰산)과 같은 무수산의 촉매량 존재하에, 그리고 예컨대 염화 메틸렌, 트리클로로메탄 또는 사염화탄소와 같은 할로겐화된 용매, 디에틸에테르 또는 테트라히드로푸란과 같은 에테르, 또는 톨루엔과 같은 방향족 탄화수소 용매와 같은 비활성 용매 또는 희석제의 존재하에 실행되는 것이 간편하다. 고리화 반응은 일정한 온도 범위, 예를 들면 10℃ 내지 100℃, 바람직하게는 20℃ 내지 50℃의 온도에서 실행하는 것이 간편하다.

본 발명의 추가 특징을 이루는 앞에 기재된 화학식 XIV의 화합물 및 그것의 염은, 예를 들면 하기 화학식 XV의 화합물 내의 니트로기를 환원시키므로써 제조할 수 있다.

(상기 식 중, R¹, R²및 A¹은 앞에 기재된 바와 같음)

니트로기의 환원은 이같은 변환에 대해 공지된 임의의 과정에 따라 간편하게 실행될 수 있다. 환원 반응은, 예컨대 팔라듐 또는 백금과 같은 수소화 반응을 촉매화하는 데 유효한 금속 촉매와 앞에 기재된 비활성 용매 또는 희석제의 존재하에 니트로 화합물의 용액을 수소화시키므로써 실행될 수 있다. 추가의 환원제는, 예를 들면 활성철(예컨대, 염산과 같은 산의 희석 용액으로 철 분말을 세척하므로써 제조됨)과 같은 활성 금속이다. 그러므로 예를 들면 물 및 알코올(예, 메탄올 또는 에탄올)의 혼합물과 같은 용매 또는 희석제의 존재하에 니트로 화합물 및 활성 금속을 일정한 온도, 예를 들면 50℃ 내지 150℃, 간편하게는 약 70℃의 온도로 가열하므로써 환원시킬 수 있다.

본 발명의 추가 특징을 이루는 화학식 XV의 화합물 및 그것의 염은, 예를 들면 하기 화학식 XVI의 화합물을 전술한 화학식 IX의 화합물과 반응시키므로써 제조할 수 있다.

(상기 식 중, R¹, L¹및 A¹는 앞에 기재된 바와 같음)

화학식 XVI의 화합물과 화학식 IX의 화합물의 반응은 앞에 기재된 방법(d)에서와 같은 조건하에서 실행되는 것이 간편하다.

화학식 XV의 화합물 및 그것의 염은, 예를 들면 하기 화학식 XVII의 화합물을 전술한 화학식 VII의 화합물과 반응시키므로써 제조할 수 있다.

(상기 식 중, R¹및 A¹는 앞에 기재된 바와 같음)

화학식 XVII의 화합물과 화학식 VII의 화합물의 반응은 앞에 기재된 방법(c)에서와 같은 조건하에서 실행하는 것이 간편하다.

또한 화학식 III의 화합물 및 그것의 염은 하기 화학식 XVIII의 화합물을 전술한 화학식 VII의 화합물과 반응시키므로써 제조할 수 있는 바, 이로써 L¹이 L²로 표시된 화학식 III의 화합물을 얻었다.

(상기 식 중, R¹은 앞에 기재된 바와 같으며, L²은 치환가능한 보호기를 나타냄)

L²가 페녹시기를 나타내며, 이것이 필요에 따라 할로게노, 니트로 및 시아노로부터 선택된 최대 5 개, 바람직하게는 최대 2 개의 치환체를 보유할 수 있는 화학식 XVIII의 화합물을 간편하게 사용할 수 있다. 반응은 앞에 기재된 방법(c)의 조건하에서 간편하게 실행할 수 있다.

전술한 화학식 XVIII의 화합물 및 그것의 염은, 예를 들면 하기 화학식 XIX의 화합물을 탈보호시키므로써 제조할 수 있다.

(상기 식 중, R¹, P 및 L²는 앞에 기재된 바와 같음).

탈보호 반응은 문헌 공지된 방법에 의해 실행될 수 있는데, 예를 들면 P가 벤질기를 나타내는 경우, 탈보호는 수소화에 의해 또는 트리플루오로아세트산으로 처리하므로써 실행될 수 있다.

화학식 III의 특정 화합물은, 필요에 따라 L¹기가 상이한 화학식 III의 또 다른 화합물로 전환될 수 있다. 그러므로, 예를 들면 L¹이 할로게노가 아닌, 예를 들면 임의로 치환된 페녹시인 화학식 III의 화합물은, L¹이 할로게노가 아닌 화학식 III의 화합물을 가수분해하므로써 L¹이 할로게노인 화학식 III의 화합물로 전환시켜서 전술한 화학식 XII의 화합물을 제조하고, 이후 이와 같이 제조한 화학식 XII의 화합물에 할라이드를 도입하므로써 L¹이 할로겐인 화학식 III의 화합물을 얻었다.

(ii) 본 발명의 추가 특징을 이루는 화학식 V의 화합물 및 그것의 염은, 예를 들면 전술한 화학식 III의 화합물을 하기 화학식 XX의 화합물과 반응시키므로써 제조할 수 있다.

(상기 식 중, R³및 P는 앞에 기재된 바와 같음)

반응은, 예를 들면 앞에 기재된 방법(a)와 같이 실행될 수 있다.

또한 화학식 V의 화합물 및 그것의 염은 하기 화학식 XXI의 화합물을 전술한 화학식 IX의 화합물과 반응시키므로써 제조할 수 있다.

(상기 식 중, R¹, L¹, R³및 P는 앞에 기재된 바와 같음)

반응은, 예를 들면 앞에 기재된 방법 (d)와 같이 실행될 수 있다.

또한 화학식 V의 화합물 및 그것의 염은 하기 화학식 XXII의 화합물을 전술한 화학식 VII의 화합물과 반응시키므로써 제조될 수 있다.

(상기 식 중, R¹, R³및 P는 앞에 기재된 바와 같음)

반응은, 예를 들면 앞에 기재된 방법(c)에서와 같이 실행될 수 있다.

화학식 XXI의 화합물 및 그것의 염은, 예를 들면 하기 화학식 XXIII의 화합물을 앞에 기재된 화학식 XX의 화합물과 반응시키므로써 제조할 수 있다.

(상기 식 중, R¹및 L¹은 앞에 기재된 바와 같으며, 4 위치 및 7 위치의 L¹은 동일하거나 또는 상이할 수 있음)

화학식 XXII의 화합물 및 그것의 염은 앞에 기재된 방법(a)의 조건하에서 전술한 화학식 XIX의 화합물 및 화학식 XX의 화합물을 반응시켜서 하기 화학식 XXIV의 화합물을 얻고, 그후 그 화합물을, 예를 들면 앞에 기재된 방법(i)에서와 같이 탈보호시키므로써 제조할 수 있다.

(상기 식 중, R¹, R³및 P는 앞에 기재된 바와 같음)

(iii) 앞에 기재된 화학식 VI의 화합물 및 그것의 염은, 예를 들면 앞에 기재된 방법(i)에 따라 하기 화학식 XXV의 화합물을 탈보호시키므로써 제조할 수 있다.

(상기 식 중, R¹, R³및 P는 앞에 기재된 바와 같음)

화학식 XXV의 화합물 및 그것의 염은 앞에 기재된 방법(a)의 조건하에 전술한 화학식 XIX의 화합물 및 화학식 IV의 화합물을 반응시키므로써 제조할 수 있다.

(iv) 전술한 화학식 VIII의 화합물 및 그것의 염은 전술한 방법(a)에 따라 전술한 화학식 XXIII의 화합물 및 화학식 IV의 화합물을 반응시키므로써 제조할 수 있다.

(v) 전술한 화학식 X의 화합물 및 그것의 염은, 예를 들면 전술한 화학식 VI의 화합물을 하기 화학식 XXVI의 화합물과 반응시키므로써 제조할 수 있다.

L¹-R⁶-L¹

(상기 식 중, L¹및 R⁶은 앞에 기재된 바와 같음)

반응은, 예를 들면 앞에 기재된 방법(c)와 같이 실행될 수 있다.

또한, 화학식 X의 화합물 및 그것의 염은, 예를 들면 앞에 기재된 방법(b)에 따라 하기 화학식 XXVII의 화합물을 탈보호시키므로써 제조할 수 있다.

(상기 식 중, L¹, R⁶, R¹, R³및 P는 앞에 기재된 바와 같음)

화학식 XXVII의 화합물 및 그것의 염은, 예를 들면 앞에 기재된 화학식 XXII의 화합물과 화학식 XXVI의 화합물을 앞에 기재된 방법(c)에서와 같은 조건하에서 반응시키므로써 제조할 수 있다.

화학식 I의 화합물의 약학적으로 허용가능한 염이 요구되는 경우, 예를 들면 상기 화합물을, 예컨대 종래의 방법을 사용하여 산(약학적으로 허용가능한 음이온을 함유한 산)과 반응시키므로써 제조할 수 있다.

본 명세서에 기재된 많은 중간체들, 예를 들면 화학식 III, V, XII, XIV 및 XV의 화합물은 신규한 것으로서, 이들은 본 발명의 추가 특징으로 제공된다.

또한, 화학식 VI, VIII, X, XXI, XXII, XXIV, XXV 및 XXVII의 중간체는 본 발명의 추가 특징으로 제공된다.

본 발명의 화합물은 Flt 및/또는 KDR과 같은 VEGF수용체와 관련한 티로신 키나아제 활성을 효과적으로 억제하며 혈관 형성 및/또는 증가된 혈관 투과성을 억제하는 화합물로 확인되었으며 이는 본 발명의 목적이다. 이러한 특성들은, 예를 들면 이하에 설명된 하나 이상의 과정을 사용하여 평가될 수 있다.

(a) 시험관내 수용체 티로신 키나아제 억제 테스트

본 분석은 티로신 키나아제 활성을 억제하는 테스트 화합물의 성능을 측정하는 것이다. 전체 유전자 합성(문헌 : Edwards M. International Biotechology Lab 5(3), 19-25, 1987)에 의해 또는 클로닝에 의해 DNA 암호화 VEGF 또는 표피 성장 인자(EGF)수용체 세포질 도메인을 제조할 수 있다. 그 후, 이들을 적당한 발현 시스템에서 발현시키므로써 티로신 키나아제 활성을 갖는 폴리펩티드를 얻을 수 있다. 예를 들면, VEGF 및 EGF 수용체 세포질 도메인은 곤충 세포의 재조합 단백질의 발현에 의해 얻어지는 것으로, 이들은 고유한 티로신 키나아제 활성을 보인다는 것이 이 밝혀졌다. VEGF 수용체 Flt(진뱅크(Genbank) 기탁 번호 X51602)인 경우, Shibuya 등(Oncogene, 1990, 5: 519-524)에 의해 기술된, 세포질 도메인의 대부분을 암호하며, 메티오닌 783으로 시작하고, 말단 코돈을 포함하는 1.7 kb DNA 단편을 cDNA로부터 분리하고 배큘로비루스 치환(transplacement) 벡터[예, pAc YM1(참고 문헌 The Baculovirus Expression System: A Laboratory Guide, L. A. King and R. D. Possee. Chapman and Hall, 1992) 또는 pAc360 또는 pBlueBacHis(인비트로겐 코오포레이션에서 시판)]내로 클로닝하였다. 바이러스성 DNA(예, 파르밍겐 배큘로골드(Pharmingen BaculoGold))를 사용하여 이 재조합 작제물로 곤충 세포(예, 소포도프테라 프루쥐페르다 21(Sf21)(Sopodoptera frugiperda 21(Sf21))를 동시에 형질감염시켜서 재조합 배큘로비루스를 형성하였다[재조합 DNA 분자 어셈블리에 관한 방법 및 제조합 배큘로비루스의 제조 방법과 사용 방법에 관한 자세한 사항은 표준 문헌, 예를 들면 Sambrook 등, 1989, Molecular cloning - A Laboratory Manual, 2판 , Cold Spring Harbour Laboratory Press and O'Reilly 등, 1992, Baculovirus Expression Vectors - A Laboratory Manual, W. H. Freeman and Co, New York에서 찾아볼 수 있다]. 분석에 사용되는 기타의 티로신 키나아제에 대해, 메티오닌 806(KDR, 진뱅크 기탁 번호 L04947) 및 메티오닌 668(EGF 수용체, 진뱅크 기탁번호 X00588)으로 시작하는 세포질 단편을 유사한 방법으로 클로닝하고 발현시켰다.

cFlt 티로신 키나아제 활성을 발현시키기 위해서, Sf21세포를 플라크-정제 cFlt 재조합 비루스로 3회 감염시키고 48 시간 후 수확하였다. 수확된 세포를 얼음 냉각되고 인산염 완충된 염수 용액(PBS)(10 mM 인산 나트륨 pH 7.4, 138 mM NaCl, 2.7 mM KCl)를 사용하여 세척하고 그 후 세포 천만개 당 1 ㎖ HNTG/PMSF를 사용하여 얼음 냉각된 HNTG/PMSF(20 mM Hepes pH 7.5, 150 mM NaCl, 10% v/v 글리세롤, 1% v/v Triton X100, 1.5 mM MgCl₂, 1 mM 에틸렌 글리콜-비스(β아미노에틸 에테르)N,N,N',N'-테트라 아세트산(EGTA), 1 mM PMSF(플루오르화 페닐메틸설포닐); 메탄올 중에 새롭게 제조된 100 mM 용액을 사용하기 바로 전 PMSF를 첨가함) 중에 재현탁시켰다. 그 현탁액을 10 분간 13,000 rpm, 4℃에서 원심분리하고, 그 상청액(효소 모액)을 제거하고 -70℃에서 분획으로 저장하였다. 효소 희석제(100 mM Hepes pH 7.4, 0.2 mM Na₃VO₄, 0.1% v/v Triton X100, 0.2 mM 디티오트레이톨)로 희석하므로써 상기 분석에서 모액 효소의 새로운 배치들 각각을 적정하였다. 종래의 배치에 대해, 모액 효소를 효소 희석제로 2000분의 1로 희석하고 희석된 효소 50 ㎕를 각각의 분석 웰에 대해 사용하였다.

기질 용액 모액을 티로신, 예를 들면 Poly(Glu, Ala, Tyr)6:3:1(Sigma P3899)를 함유하는 랜덤 공중합체로부터 제조하고, -20℃에서 PBS 중의 1 ㎎/㎖ 모액으로서 저장하고, 그것을 플레이트 코우팅을 위해 PBS로 500분의 1로 희석하였다.

분석하기 전 날, 희석된 기질 용액 100 ㎕를, 모든 분석 플레이트 웰(Nunc maxisorp 96 웰 면역 플레이트 ; 밀봉하여 4℃에서 하룻밤 동안 방치함)내로 분배하였다.

분석하는 날, 그 기질 용액을 배출하고 그 분석 플레이트 웰을 PBST(0.05% v/v Tween 20을 함유하는 PBS)로 1회 세척하고 50 mM Hepes pH 7.4로 1 회 세척였다.

테스트 화합물을 10% 디메틸설폭시드(DMSO)로 희석하고 그 희석된 화합물 25 ㎕를 세척된 분석 플레이트 내의 웰에 주입하였다. "전체" 대조 웰은 화합물 대신 10% DMSO를 함유하였다. 8 μM의 아데노신-5'-트리포스페이트(ATP)를 함유하는 40 mM MnCl₂25 ㎕를 모든 테스트 웰에 첨가하였다. 단 "블랭크(blank)" 대조군 웰은 ATP 없이 MnCl₂를 함유하였다. 반응을 개시하기 위해 새롭게 희석된 효소 50 ㎕를 각각의 웰에 첨가하고 그 플레이트를 실온에서 20 분 동안 항온시켰다. 그 후, 액체를 배출하고 웰들을 PBST로 2 회 세척하였다. 0.5% w/v 소의 혈청 알부민(BSA)을 함유하는 PBST로 6000 분의 1로 희석한, 마우스 IgG 항 포스포티로신 항체(Upstate Biotechnology Inc. 제품 번호 05∼321) 100 ㎕를, 각각의 웰에 첨가하고 플레이트를 실온에서 1 시간 동안 항온한 후 액체를 배출하고 웰을 PBST로 2 회 세척하였다. 0.5% w/v BSA을 함유하는 PBST로 500 분의 1로 희석한, 고추냉이 퍼옥시다아제(HRP) 연결된 양의 항 마우스 Ig 항체(Amersham 제품 NXA 931) 100 ㎕를 첨가하고 그 플레이트를 실온에서 1 시간 동안 항온한 후 액체를 배출하고 웰을 PBST로 2 회 세척하였다. 새로 제조한 50 mM 포스페이트-시트레이트 완충액 pH 5.0 + 0.03% 과붕산 나트륨(증류수 100 ㎖ 당 과붕산 나트륨(PCSB) 캡슐(Sigma P4922)을 갖는 하나의 포스페이트 시트레이트 완충액으로 제조됨) 50 ㎖ 중에 하나의 50 ㎎ ABTS 정제(Boehringer 1204 521)를 사용하여 새로 제조한 2,2'-아지노-비스(3-에틸벤즈티아졸린-6-설폰산)(ABTS) 용액 100 ㎕를 각각의 웰에 첨가하였다. 그 후, "전체"대조군 웰의 광학적 밀도가 플레이트 판독 분광 광도계를 사용하여 405 ㎚에서 약 1.0으로 측정될 때 까지 플레이트를 실온에서 20 분 내지 60 분 동안 항온하였다. "블랭크"(ATP 부재) 및 "전체"(화합물 부재)대조군 값을 사용하여 테스트 화합물의 희석 범위를 결정하였으며 이로써 효소 활성이 50%억제되는 것을 알았다.

(b) 시험관내 HUVEC 증식 분석

본 분석은 인간의 정맥 내피 세포(HUVEC)의 성장 인자 자극된 증식을 억제하는 테스트 화합물의 성능을 측정한다.

HUVEC 세포를 MCDB 131(Gibco BRL) + 7.5% v/v 태내 송아지의 혈청(FCS) 중에서 분리하고, 96 개의 웰 플레이트에서 웰 당 1000 개의 세포의 농도로 MCDB 131 + 2% v/v FCS + 3 ㎍/㎖ 헤파린 + 1 ㎍/㎖ 히드로코르티손 중에서 계대배양하였다(2 내지 8 회). 최소 4 시간 후, 그것을 적당한 성장 인자(즉, VEGF 3 ng/㎖, EGF 3 ng/㎖, 또는 b-FGF 0.3 ng/㎖) 및 화합물과 함께 사용하였다. 그 후 그 배양물을 7.5% CO₂를 사용하여 37℃에서 4 일간 항온하였다. 4 일 째에 그 배양물을 트리튬 표지 티미딘(Amersham 제품 TRA 61) 1 μCi/웰로 펄스하고(pulse) 4 시간 동안 항온하였다. 그 세포를 96개의 웰 플레이트 수확기(Tomtek)를 사용하여 수확한 후 그베타 플레이트 카운터를 사용하여 트리튬 혼입량을 분석하였다. 세포내에 방사능(cpm으로 표현됨)을 혼입시키므로써 화합물들에 의해 성장 인자 자극된 세포 증식의 억제 정도를 측정하였다.

(c) 생체내 레트 자궁 부종 분석

본 테스트는 에스트로겐 자극 후 처음 4 시간 내지 6 시간 내에 일어나는 레트의 급격한 자궁 중량 증가를 억제하는 화합물의 성능을 측정한다. 초기의 자궁 중량 증가는 자궁 맥관계의 투과능 증가에 의해 야기되는 부종에 기인하는 것으로 오래전부터 알려져 왔으며 최근에는 Cullinan-Bove 및 Koos(문헌 : Endocrinology, 1993, 133:829-837)이 자궁내 VEGF mRNA 발현 증가와 주기적으로 밀접한 관계가 있다는 것을 입증하였다. 본 발명자들은 레트를 VEGF에 대한 중화용 단일클론 항체로 전처리하므로써 자궁 중량의 급격한 증가가 현저히 감소되어, 이로써 중량의 증가가 실질적으로 VFGF에 의해 완화된다는 것을 확인하였다.

20 일 내지 22일 된 레트의 그룹에 일정한 용매 중의 에스트라디올 벤조에이트(2.5 ㎍/레트) 또는 용매만을 피하내로 일회 투여하여 처리하였다. 후자는 무자극 대조군으로 사용된다. 에스트라디올 벤조에이트를 투여하기 전에 테스트 화합물을 다양한 시간에서 경구 투여하였다. 에스트라디올 벤조에이트를 투여한 지 다섯 시간 째에 레트를 고통 없이 치사시키고 그들의 자궁을 적출하고, 블로팅한(blot) 후, 중량을 달았다. 테스트 화합물 및 에스트라디올 벤조에이트로 처리한 그룹 및 에스트라디올 벤조에이트만으로 처리한 그룹에서의 자궁 중량의 증가를 스튜던트(Student) T 테스트를 사용하여 비교하였다. 에스트라디올 벤조에이트의 효과 억제는 p < 0.05일 때 현저할 것으로 간주된다.

본 발명은 약학적 허용 부형제 또는 담체와 함께 앞에 기재된 화학식 I의 화합물 및 그것의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 약학 조성물을 추가로 제공한다.

그 조성물은, 예를 들면 정제 또는 캡슐과 같은 경구 투여용으로 적당한 형태, 정맥내, 피하내, 근육내, 혈관내 또는 점적 주사용으로 적당한 형태를 비롯한 멸균 용액, 현탁액 또는 에멀션과 같은 비경구 주사용으로 적당한 형태, 연고 또는 크리임과 같은 국소 투여용으로 적당한 형태, 또는 좌약과 같은 직장내 투여용으로 적당한 형태일 수 있다. 일반적으로 이 조성물은 종래의 방법에 따라 종래의 부형제를 사용하여 제조될 수 있다.

본 발명의 조성물은 단위 투여 형태로 제공되는 것이 유리하다. 화합물은 통상 항온 동물에게 투여될 것이며 동물 몸 1 m²당 5∼5000 ㎎의 범위 내에서, 즉 약 0.1∼100 ㎎/㎏ 단위 투여 형태로 투여될 것이다. 단위 투여량, 예를 들면 1∼100 ㎎/㎏, 바람직하게는 1∼50 ㎎/㎏이 사용될 것이며 이는 통상의 치료 유효 투여량을 제공한다. 정제 또는 캡슐과 같은 단위 투여량 형태는 대개, 예를 들면 활성 성분 1∼250 ㎎을 함유할 것이다.

본 발명은 추가로, 앞에 기재된 화학식 I의 화합물 및 그것의 염을 인간 또는 동물의 치료에 사용하는 방법을 제공한다.

본 발명자들은 현재 본 발명의 화합물이 VEGF 수용체 티로신 키나아제를 억제하므로 혈관 형성 작용 억제 및/또는 혈관 투과성을 감소시키는 성능을 갖는다는 것을 밝혔다.

추가로, 본 발명은 화학식 I의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염을 약제로 사용하는 것에 관한 것이며, 간편하게는 화학식 I의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염을 인간과 같은 항온 동물에서의 혈관 형성 작용 억제 및/또는 혈관 투과성을 감소시키는 작용을 하는 약제로서 사용하는 것에 관한 것이다.

그러므로, 본 발명은 추가로 인간과 같은 항온 동물에서의 혈관 형성 작용 억제 및/또는 혈관 투과성을 감소시키는 작용을 하는 약제의 제조에 화학식 I의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염을 사용하는 것에 관한 것이다.

본 발명은 추가로, 전술한 화학식 I의 화합물 및 그것의 약학적으로 허용가능한 염을 투여하여 인간과 같은 치료를 요하는 항온 동물에서 혈관 형성 작용 억제 및/또는 혈관 투과성을 감소시키는 효과를 나타내는 방법을 제공한다.

전술한 바와 같이, 특정 질환의 치료 또는 예방에 요구되는 투여량은 치료되는 숙주, 투여 경로, 치료하고자 하는 병의 경중에 따라 좌우될 것이다. 바람직하게는 매일 1∼50 ㎎/㎏을 투여한다. 그러나, 그 일일 투여량은 치료되는 숙주, 투여 경로, 치료하고자 하는 병의 경중에 따라 좌우될 것이다. 따라서, 최적 투여량은 임의의 특정한 환자를 치료하는 의사에 의해 결정된다.

앞에 기재된 혈관 형성 작용 억제 및/또는 혈관 투과성 감소 치료법은 단독의 치료 요법으로 또는 본 발명의 화합물 외에 다른 물질 및/또는 치료법을 하나 이상 병행하여 적용할 수 있다. 이러한 병행 치료는 개개의 치료 성분들을 동시에, 연속적으로 또는 불연속적으로 투여하므로써 수행될 수 있다. 종양의학 분야에서는 각각의 암 환자들을 치료하기 위해 상이한 치료 형태를 병합하여 사용하는 것이 통상적인 관행이다. 종양 의학 분야에서, 앞에 기재된 혈관 형성 작용 억제 및/또는 혈관 투과성 감소 치료법외에 이러한 기타 병행 치료(들)은 수술, 방사능 치료 또는 화학 치료이다. 화학 치료는 하기한 세 개의 주된 카테고리에 드는 치료제들을 포함할 수 있다.

(i) 앞에 기재된 것과 상이한 메카니즘에 의해 작용하는 기타의 항혈관 형성제(예, 리노마이드, 인테그린 αvβ3 기능의 억제제, 안지오스타틴, 라족신, 탈리도마이드),

(ii) 항에스트로겐(예, 타목시펜, 토레미펜, 라록시펜, 드롤록시펜, 요오독시펜), 프로게스토겐(예, 메게스트롤 아세테이트), 아로마타아제 억제제(예, 아나스트로졸, 레트라졸, 보라졸, 엑세메스탄), 항프로게스토겐, 항안드로겐(예, 플루아미드, 닐루타미드, 비칼루타미드, 시프로테론 아세테이트), LHRH 작용 물질 및 길항 물질(예, 고세렐린 아세테이트, 루프롤라이드), 테스토스테론 5α-디히드로리덕타아제의 억제제(예, 피나스테라이드), 항침입제(예, 마리마스타트와 같은 메탈로프로테인나아제 억제제 및 유로키나아제 플라스미노겐 활성화제 수용체 기능의 억제제) 및 성장 인자 기능 억제제(상기 성장 인자는, 예를 들면 혈소판 유도된 성장인자 및 헤파토사이트 성장 인자를 포함하며, 상기 억제제는 성장 인자 항체, 성장 인자 수용체 항체, 티로신 키나아제 억제제 및 세린/트레오닌 키나아제 억제제를 포함함)과 같은 세포 성장 증식 억제제 및

(iii) 항 신진대사산물(예, 메토트렉세이트와 같은 항엽산제, 5-플루오로우라실과 같은 플루오로피리미딘, 퓨린 동족체, 아데노신 동족체, 시토신 아라비노사이드), 항종양 항생제(예, 독소루비신, 다우노마이신, 에피루비신 및 이다루비신과 같은 안트라시클린류, 미토마이신-C, 닥티노마이신, 미트라마이신), 백금 유도체(예, 시스플라틴, 카보플라틴), 알킬화제(예, 질소 머스타드, 멜팔란, 클로람부실, 부술판, 시클로포스파미드, 이포스파미드, 니트로조우레아, 티오테파), 항유사분열제(예, 빈크리스틴과 같은 빈카 알칼로이드 및 탁솔, 탁소테레와 같은 탁소이드), 토포아이소머라아제 억제제(예, 에토포시드 및 테니포시드와 같은 에피포도필로톡신류, 암사카린, 토포테칸)와 같은 종양 의학 분야에서 사용되는 항증식작용/항종양성 약물 및 이들의 결합물.

전술한 바와 같이 본 발명에서 기재된 화합물은 혈관 형성 작용 억제 및/또는 혈관 투과성 감소 효과를 갖는 것을 특징으로 한다. 그러므로, 본 발명의 이 같은 화합물은 암, 당뇨병, 건선, 류마티스성 관절염, 카포시 육종, 혈관종, 급성 및 만성 신장병증, 죽종, 동맥 재발협착증, 자가면역 질환, 급성 염증, 그리고 망막 혈관 증식을 나타내는 안질환을 비롯한 다양한 범위의 질환에 유용할 것이다. 특히, 이 같은 본 발명의 화합물은 일차의 고형 종양 및 재발성 고형 종양(예, 결장암, 유방암, 전립선 암, 폐암 및 피부암)의 성장을 지연시키는 데 유리하다. 더욱 특히 이같은 본 발명의 화합물은 VEGF와 관련한 일차의 고형 종양 및 재발성 고형 종양, 특히 성장 및 전개가 VEGF에 따라 현저하게 좌우되는 종양, 예를 들면 결장암, 유방암, 전립선 암, 폐암 및 피부암과 같은 특정 종양의 성장을 억제할 것으로 기대된다.

또한 본 발명의 화합물은 VEGF가 혈관 형성 작용에 기여하는 인자이며 EGF는 혈관 형성 작용에 덜 기여하는 인자인 암과 같은 전술한 어떠한 질환에도 특히 유용할 수 있다.

치료약으로서의 용도 외에도, 화학식 I의 화합물 및 그것의 약학적으로 허용가능한 염은 새로운 치료제 연구 분야로서 고양이, 개, 토끼, 원숭이, 레트 및 마우스와 같은 실험용 동물에서의 VEGF 수용체 키나아제 활성 억제제의 효과를 평가하는 생체내 및 생체외 시험 시스템을 개발시키고 표준화시키는 데 약리적 수단으로 사용된다.

본 명세서 내에 사용된 "에테르"란 용어는 디에틸 에테르를 의미하는 것이다.

본 발명은 특별한 언급이 없는 한 이하의 실시예에 의해 설명될 것이나, 실시예는 본 발명을 한정하는 것은 아니다.

(i) 진공 중의 회전 증발에 의해 증발을 실행하고 여과에 의해 건조제와 같은 잔류 고체를 제거한 후 본 작업을 실행하였다.

(ii) 주위 온도, 즉 18℃ 내지 25℃ 및 아르곤과 같은 비활성 기체 대기하에서 수술을 하였다.

(iii) E. Merck(독일, 담스타드 소재)로부터 입수한 Merck Kieselgel 실리카(Art. 9385) 또는 Merck Lichroprep RP-18(Art. 9303) 역상 실리카 상에서의 컬럼 크로마토그래피(플래쉬 과정을 사용) 및 중간 압력 액체 크로마토그래피(MPLC)를 실행하였다.

(iv) 단지 예시의 목적으로 수율을 수록하였으나, 이는 반드시 달성할 수 있는 최대값이어야 하는 것은 아니다.

(v) 용융점은 보정되지 않았으며 Mettler SP62 자동화 용융점 장치, 오일 배쓰 장치 또는 Koffler 고온 플레이트 장치를 사용하여 측정하였다.

(vi) 화학식 I의 최종 생성물의 구조를 핵(일반적으로 양성자)자기 공명법 및 질량 분광 분석법에 의해 확인하였으며, 양성자 자기 공명 화학 전이 값을 δ 스캐일 상에서 측정하였으며 피크 다중도는 다음과 같이 표현하였다. s. 단일선, d. 이중선, t. 삼중선, m. 다중선, br. 넓은 선, q. 사중선

(vii) 중간체는 일반적으로 확실하게 확인되지는 않으며 순도는 박층 크로마토그래피(TLC), 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC), 적외선-레드(IR) 또는 NMR 분석에 의해 평가되었다.

(viii) 이하의 약어를 사용하였다.

DMF N,N-디메틸포름아미드,

DMSO 디메틸설폭시드,

THF 테트라히드로푸란,

DMA N,N-디메틸아세트아미드,

TFA 트리플루오로아세트산.

실시예 1

4-클로로-7-(2-메톡시에톡시)퀴나졸린 염산염(624 ㎎, 2.27 mmol) 및 4-클로로-2-플루오로아닐린(305 ㎕, 2.6 mmol)을 이소프로판올(20 ㎖) 중에 용해한 용액을 환류로 30 분간 가열하였다. 용매를 증발 제거하고 잔류물을 에틸아세테이트와 물 사이에 분배시켰다. 유기층을 분리하고 탄산수소나트륨 수용액으로 세척한 후 물로 세척하고 건조시키고(MgSO₄), 용매를 증발 제거하였다. 잔류물을 에테르로 분쇄하여 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-7-(2-메톡시에톡시)퀴나졸린(662 ㎎, 84%)을 백색 고체로 얻었다.

m.p. 140∼141℃

¹H NMR 스펙트럼 :(DMSOd₆) 3.35(s, 3H); 3.74(t, 2H); 4.29(t, 2H); 7.21(s, 1H); 7.28(d, 1H); 7.35(d, 1H); 7.6(m, 2H); 8.36(d, 1H); 8.43(s, 1H); 9.75(s, 1H)

MS-ESI:347[MH]⁺

원소분석 : C₁₇H₁₅N₃O₂FCl

실측치 C 58.49 H 4.41 N 12.08

이론치 C 58.70 H 4.31 N 12.08%

출발 물질은 다음과 같이 제조하였다.

포름아미드(30 ㎖) 중의 2-아미노-4-플루오로벤조산(3 g, 19.3 mmol)의 용액을 150℃에서 6 시간 동안 가열하였다. 그 반응 혼합물을 얼음/물(1/1)(250 ㎖)에 부었다. 침전된 고체를 여과 수집하고 물로 세척한 후 건조시켜 7-플루오로-3,4-디히드로퀴나졸린-4-온(2.6 g, 82%)을 얻었다.

나트륨(400 ㎎, 17 mmol)을 2-메톡시에탄올(10 ㎖)에 조심스럽게 첨가하고 그 혼합물을 환류로 30 분간 가열하였다. 얻은 용액에 7-플루오로-3,4-디히드로퀴나졸린-4-온(750 ㎎, 4.57 mmol)을 첨가하고 그 혼합물을 환류로 15 시간 동안 가열하였다. 그 혼합물을 냉각시키고 물(250 ㎖)에 부었다. 농축 염산으로 그 혼합물의 pH를 4로 하여 산성화시켰다. 얻은 고체 생성물을 여과 수집하고 물 및 에테르의 순으로 세척하고 진공하에서 건조시켜 7-(2-메톡시에톡시)-3,4-디히드로퀴나졸린-4-온(580 ㎎, 58%)을 얻었다.

염화티오닐(15 ㎖) 및 DMF(0.1 ㎖) 중의 7-(2-메톡시에톡시)-3,4-디히드로퀴나졸린-4-온(500 ㎎, 2.2mmol)의 용액을 3 시간 동안 환류로 가열하였다. 휘발성 물질을 증발 제거하여 4-클로로-7-(2-메톡시에톡시)퀴나졸린 염산염(520 ㎎, 83%)을 크림색 고체로 얻었다.

실시예 2

이소프로판올(10 ㎖) 중의 2-플루오로-5-히드록시아닐린(183 ㎎, 1.4 mmol) 및 4-클로로-6,7-디메톡시퀴나졸린 염산염(342 ㎎, 1.3 mmol)을 환류로 2 시간 동안가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고 침전된 생성물을 여과 수집하고 이소프로판올로 세척한 후 건조시켜서 6,7-디메톡시-4-(2-플루오로-5-히드록시아닐리노)퀴나졸린 염산염(66 ㎎, 15%)을 고체로 얻었다.

m.p. 219∼220℃

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆) 3.99(s, 3H); 4.01(s, 3H); 6.81(dd, 1H); 6.90(dd, 1H); 7.20(t, 1H); 7.31(s, 1H); 8.15(s, 1H), 8.81(s, 1H); 9.72(s, 1H); 11.28(s, 1H)

MS-ESI:316[MH]⁺

원소분석 : C₁₆H₁₄N₃O₃F HCl 0.5H₂O 0.5C₃H₈O

실측치 C 53.5 H 5.3 N 9.9

이론치 C 53.8 H 5.1 N 10.7%

출발물질은 다음과 같이 제조하였다.

4,5-디메톡시안트라닐산(19.7 g) 및 포름아미드(10 ㎖)의 혼합물을 교반하고 190℃에서 5 시간 동안 가열하였다. 그 혼합물을 약 80℃로 냉각시키고 물(50 ㎖)을 첨가하였다. 그 혼합물을 상온에서 3 시간 동안 보관하였다. 침전물을 분리하고 물로 세척한 후 건조시켜 6,7-디메톡시-3,4-디히드로퀴나졸린-4-온(3.65 g)을 얻었다.

이렇게 얻은 물질의 분획(2.06 g), 염화티오닐(20 ㎖) 및 DMF(1 방울)의 혼합물을 교반하고 환류로 2 시간 동안 가열하였다. 휘발성 물질을 증발 제거하여 4-클로로-6,7-디메톡시퀴나졸린 염산염을 얻었다.

에탄올(100 ㎖) 중의, 4-클로로-5-메톡시카르보닐옥시-2-플루오로니트로벤젠(1.2 g, 4.8 mmol)(EP 61741 A2에 기재됨) 및 차콜상의 10% 팔라듐 촉매(500 ㎎)를 1 기압의 수소 대기하에서 18 시간 동안 교반하였다. 차콜상의 10% 팔라듐 촉매(500 ㎎)으로 이루어진 추가 배치를 첨가하고 그 혼합물을 수소 하에서 추가로 3 시간 동안 교반하였다. 촉매를 규조토를 통해 여과 제거하고 여과액으로부터 용매를 증발 제거하였다. 잔류물을 염화메틸렌/헥산(1/4) 용출물로 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 2-플루오로-5-메톡시카르보닐옥시아닐린(0.42 g, 47%)을 오일로서 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆) 3.82(s, 3H); 5.33(s, 2H); 6.32(dt, 1H); 6.57(dd, 1H), 6.98(dd, 1H)

MS-ESI: 186[MH]⁺

농축 수성 암모니아(15 ㎖)를 메탄올(10 ㎖) 중의 2-플루오로-5-메톡시카르보닐옥시아닐린(400 ㎎, 2.16 mmol)의 용액에 첨가하였다. 그 혼합물을 2 시간 동안 교반한 후, 대부분의 용매를 증발 제거하였다. 얻은 현탁액을 물로 희석하고 pH를 7로 산성화시키고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 추출물을 물로 세척하고, 건조시키고(MgSO₄), 용매를 증발 제거하여 2-플루오로-5-히드록시아닐린(200 ㎎, 73%)을 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼:(DMSOd₆) 4.90(s, 2H); 5.84(dd,1 H); 6.17(dd, 1H); 6.65(ddd, 1H); 8.80(s, 1H)

실시예 3

이소프로판올(10 ㎖) 중의, 4-클로로-6,7-디메톡시퀴나졸린 염산염(500 ㎎, 1.916 mmol)(실시예 2의 출발물질에 대해 기술된 바와 같이 제조함) 및 4-클로로-3-히드록시아닐린(300 ㎎, 2.09 mmol)(영국 특허 제1427658호에 기술됨)의 혼합물을 2 시간 동안 환류로 가열하였다. 그 혼합물을 냉각시키고 고체 생성물을 여과 수집하고, 이소프로판올로 세척하고 건조시켜서 4-(4-클로로-3-히드록시아닐리노)-6,7-디메톡시퀴나졸린 염산염(605 ㎎, 86%)을 얻었다.

m.p. > 250℃

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆) 4.02(s, 3H); 4.04(s, 3H); 7.15(dd, 1H); 7.34-7.44(m, 3H); 8.28(s, 1H); 8.82(s, 1H); 10.52(s, 1H); 11.24(s, 1H).

MS : 332[MH]⁺

원소분석 : C₁₆H₁₄N₃O₃Cl 1HCl

실측치 C 52.4 H 4.2 N 11.3

이론치 C 52.2 H 4.1 N 11.4%

실시예 4

DMF(110 ㎖) 중의 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-7-히드록시-6-메톡시퀴나졸린(2.2 g, 6.88 mmol) 및 탄산칼륨(2.84 g, 20.6 mmol)의 용액에 2-브로모에틸 메틸 에테르(712 ㎕, 7.56 mmol)을 첨가하였다. 그 혼합물을 60℃에서 10 시간 동안 교반한 후 상온에서 2일간 교반하고 용매를 증발 제거하고 미정제 생성물을 에틸아세테이트/석유에테르(4/1) 용출물로 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 얻은 고체를 고온 에탄올 중에 용해시키고 에탄올성 염화수소를 첨가하였다. 냉각후 얻은 고체를 여과 수집하고 에탄올로 세척하고 진공하에서 건조시켜 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(2-메톡시에톡시)퀴나졸린 염산염(1.74 g, 62%)을 얻었다.

m.p. 225∼257℃

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆; CD₃COOD) 3.36(s, 3H); 3.79(t, 2H); 4.02(s, 3H); 4.34(t, 2H); 7.33(s, 1H); 7.46(dd, 1H); 7.60-7.68(m, 2H); 8.15(s, 1H); 8.79(s, 1H)

MS-ESI:378-380[MH]⁺

원소분석: C₁₈H₁₇N₃O₃ClF 1HCl

실측치 C 52.1 H 4.6 N 10.1

이론치 C 52.19 H 4.38 N 10.14%

출발 물질을 다음과 같이 제조하였다.

디옥산(100 ㎖) 중의 2-아미노-4-벤질옥시-5-메톡시벤즈아미드(J. Med. Chem. 1977, vol 20, 146-149, 10 g, 0.04 mol) 및 골드 시약(7.4 g, 0.05 mol)의 혼합물을 교반하고 24 시간 동안 환류로 가열하였다. 아세트산 나트륨(3.02 g, 0.037 mol) 및 아세트산(1.65 ㎖, 0.029 mol)을 상기 반응 혼합물에 첨가하고 추가로 3 시간 동안 가열하였다. 휘발성 물질을 증발 제거하고, 그 잔류물에 물을 첨가한 후, 고체를 여과 수집하여 물로 세척하고 건조시켰다. 아세트산으로 재결정하여 7-벤질옥시-6-메톡시-3,4-디히드로퀴나졸린-4-온(8.7 g, 84%)을 얻었다.

7-벤질옥시-6-메톡시-3,4-디히드로퀴나졸린-4-온(2.82 g, 0.01 mol), 염화티오닐(40 ㎖) 및 DMF(0.28 ㎖)의 혼합물을 교반하고 환류로 1 시간 동안 가열하였다. 휘발성 물질을 증발제거하고 잔류물을 톨루엔과 공비(共沸)시켜서 7-벤질옥시-4-클로로-6-메톡시퀴나졸린 염산염(3.45 g)을 얻었다.

이소프로판올(40 ㎖) 중의, 4-클로로-2-플루오로아닐린(444 ㎕, 4 mmol) 및 7-벤질옥시-4-클로로-6-메톡시퀴나졸린 염산염(1.2 g, 3.5 mmol)의 용액을 1.5 시간 동안 환류시켰다. 냉각 후, 침전물을 여과 수집하고 이소프로판올, 에테르의 순으로 세척하고 진공하에서 건조하여 7-벤질옥시-4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시퀴나졸린 염산염(1.13 g, 71%)을 얻었다.

m.p. 239∼242℃

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆) 4.0(s, 3H); 5.36(s, 2H); 7.39-7.52(m, 9H); 8.1(s, 1H); 8.75(s, 1H).

MS-ESI:401[MH]⁺

원소분석 C₂₂H₁₇N₃O₂ClF 1HCl

실측치 C 59.2 H 4.3 N 9.4

이론치 C 59.21 H 4.07 N 9.41%

TFA(10 ㎖) 중의 7-벤질옥시-4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시퀴나졸린 염산염(892 ㎎, 2 mmol)의 용액을 50 분간 환류시켰다. 냉각 후, 그 혼합물을 얼음에 부었다. 침전물을 여과 수집하고, 메탄올(10 ㎖) 중에 용해하고 수성 암모니아로 pH 11로 염기성으로 만들었다. 증발에 의해 농축시킨 후, 고체 생성물을 여과 수집하고, 물 및 에테르의 순으로 세척하고 진공하에서 건조시켜 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-7-히드록시-6-메톡시퀴나졸린(460 ㎎, 72%)을 황색 고체로 얻었다.

m.p. 141∼143℃

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆) 3.95(s, 3H); 7.05(s, 1H); 7.35(d, 1H); 7.54-7.59(m, 2H); 7.78(s, 1H); 8.29(s, 1H)

MS-ESI:320-322[MH]⁺

실시예 5

이소프로판올(7 ㎖) 중의, 4-클로로-6,7-디메톡시퀴나졸린 염산염(147 ㎎, 0.56 mmol)(실시예 2에서 출발물질에 대하여 기술된 바와 같이 제조함) 및 4-클로로-2-플루오로아닐린(82 ㎎, 0.56 mmol)의 혼합물을 2 시간 동안 환류로 가열하였다. 그 혼합물을 냉각시키고, 고체 생성물을여과 수집하고, 이소프로판올로 세척하고 건조하여 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6,7-디메톡시퀴나졸린 염산염(102 ㎎, 49%)을 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆) 4.00(s, 6H); 7.37(s, 1H); 7.42(d, 1H); 7.60(t, 1H); 7.67(dd, 1H); 8.27(s, 1H); 8.80(s, 1H)

MS-ESI:334[MH]⁺

실시예 6

DMF(0.5 ㎖) 중의 4-(3-클로로프로필)모르폴린(J. Am. Chem. Soc. 1945, 67, 736, 174 ㎎, 1.06 mmol)을 DMF(5 ㎖) 중의 4-(3-t-부틸디페닐실일옥시-4-메틸아닐리노)-7-히드록시--6-메톡시퀴나졸린(471 ㎎, 0.88 mmol) 및 탄산칼륨(200 ㎎, 1.45 mmol)의 교반한 현탁액에 첨가하였다. 그 후, 그 혼합물을 100℃에서 2.5 시간 동안 가열하였다. 용매를 증발 제거하고 잔류물을 염화메틸렌과 물 사이에 분배시켰다. 생성물을 염화메틸렌으로 추출하고 추출물들을 합하여 상분리지에 통과시켰다. 용매를 증발 제거하여 황색 오일을 얻었다. 이 오일을 THF(4 ㎖)중에 용해하고 테트라-n-부틸암노늄 플루오라이드(THF 중의 1 M 용액 2 ㎖, 2 mmol)를 첨가하였다. 그혼합물을 상온에서 72 시간 동안 교반하고 용매를 증발 제거하고 잔류물을 염화메틸렌과 탄산수소나트륨 포화 수용액 사이에 분배시켰다. 수성 상을 염화메틸렌(3 × 20 ㎖)로 추출하고 추출물들을 합하여 상분리지에 통과시키고 용매를 증발 제거하였다. 잔류물을 메탄올/염화메틸렌(1/9) 용출물로 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 4-(3-히드록시-4-메틸아닐리노)-6-메톡시-7-(3-모르폴리노프로폭시)퀴나졸린을 연황색 고체(225 ㎎, 두단계에 걸쳐 60%)을 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆) 2.0(m, 2H); 2.15(s, 3H); 2.4(m, 4H); 3.6(t, 4H); 3.95(s, 3H); 4.20(t, 2H); 7.05(s, 1H); 7.15(s, 1H); 7.35(s, 1H); 7.85(s, 1H); 8.40(s, 1H); 9.25(s, 2H)

MS-ESI:425[MH]⁺

출발 물질은 다음과 같이 제조하였다.

7-벤질옥시-6-메톡시-3,4-디히드로퀴나졸린-4-온(5.18g, 18.4 mmol)(실시예 4의 출발물질에 대해 기술된 바와 같이 제조함), DMF(1 ㎖) 및 염화티오닐(70 ㎖)의 혼합물을 환류로 아르곤하에서 2 시간 동안 가열하였다. 그 혼합물을 냉각시키고, 과잉의 염화티오닐을 증발 제거하고 잔류물을 톨루엔과 공비시켜서 건조하였다. 얻은 미정제 7-벤질옥시-4-클로로-6-메톡시퀴나졸린 염산염을 이소프로판올(50 ㎖) 중에 현탁시키고 3-히드록시-4-메틸아닐린(2.60 g, 21.1 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 3 시간 동안 환류로 가열하고 냉각시켰다. 침전된 고체를 여과 수집하고, 이소프로판올로 세척하고 건조시켜 7-벤질옥시-4-(3-히드록시-4-메틸아닐리노)-6-메톡시퀴나졸린(4.7 g, 60%)을 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆) 2.15(s, 3H); 4.0(s, 3H); 5.35(s, 2H); 6.95(dd, 1H); 7.15(m, 2H); 7.35-7.55(m, 5H); 8.25(s, 1H); 8.75(s, 1H); 9.6(s, 1H); 11.2(s, 1H)

DMF(50 ㎖) 중의 7-벤질옥시-4-(3-히드록시-4-메틸아닐리노)-6-메톡시퀴나졸린(4.11 g, 9.69 mmol)에 이미다졸(1.45 g, 21.6 mmol)을 첨가하고 완전히 용해될 때 까지 그 혼합물을 상온에서 교반하였다. t-부틸디페닐실일 클로라이드(2.5 ㎖, 9.6 mmol)를 적가하고 반응 혼합물을 상온에서 72 시간 동안 교반하였다. 탄산수소나트륨 포화 수용액을 첨가하고 생성물을 염화메틸렌으로 추출하였다. 용매를 증발 제거하여 축축한 고체를 얻었으며 이것을 DMF(40 ㎖), 메탄올(40 ㎖) 및 에틸아세테이트(40 ㎖)의 혼합물에 용해하였다. 차콜상의 10% 팔라듐 촉매(500 ㎎)을 첨가하고 그 혼합물을 1 기압의 수소 하에서 36 시간 동안 교반하였다. 규조토를 통해 촉매를 여과 제거하고 여과액으로부터 용매를 증발 제거하였다. 미정제 생성물을 메탄올/염화메틸렌(1/9) 용출물로 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 4-(3-t-부틸디페닐실일옥시-4-메틸아닐리노)-7-히드록시-6-메톡시퀴나졸린(2.2 g, 두단계에 걸쳐 42%)을 황색 고체로 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼: (DMSOd₆) 1.1(s, 9H); 2.35(s, 3H); 3.90(s, 3H); 6.9(m, 2H); 7.1(d, 1H); 7.4(m, 6H); 7.5(d, 1H); 7.7(m, 5H); 7.85(s, 1H); 9.05(s, 1H); 10.2(s, 1H)

MS-ESI : 536[MH]⁺

실시예 7

메탄올(5 ㎖), 트리클로로메탄(5 ㎖) 및 DMF(1 ㎖) 중의 7-(3-벤질옥시프로폭시)-4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시퀴나졸린 염산염(180 ㎎, 0.4 mmol) 및 차콜상의 5% 팔라듐 촉매(50 ㎎)의 혼합물을 1 기압의 수소하에서 2 시간 동안 교반하였다. 규조토를 통해 촉매를 여과 제거하고 용매를 증발 제거하였다. 잔류물을 에틸아세테이트와 탄산수소나트륨 수용액 사이에 분배시키고, 유기층을 분리하고 건조시키고(MgSO₄) 용매를 증발 제거하였다. 그 잔류물을 에틸아세테이트/헥산으로부터 재결정하여 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-7-(3-히드록시프로폭시)-6-메톡시퀴나졸린(48 ㎎, 33%)을 얻었다.

m.p. 199-201℃

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆) 1.92(t, 2H); 3.60(t, 2H); 3.95(s, 3H); 4.20(t, 2H); 4.55(t, 1H); 7.18(s, 1H); 7.33(dd, 1H); 7.51(dd, 1H); 7.55(td, 1H); 7.78(s, 1H); 8.38(s, 1H); 8.32(s, 1H); 9.50(s, 1H)

MS-ESI:378[MH]⁺

원소분석 : C₁₈H₁₇N₃O₃FCl

실측치 C 57.2 H 4.6 N 11.0

이론치 C 57.2 H 4.5 N 11.1%

출발물질은 다음과 같이 제조하였다.

5℃에서 염화메틸렌(20 ㎖) 중의, 트리부틸포스핀(376 ㎎, 1.9 mmol) 및 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-7-히드록시-6-메톡시퀴나졸린(200 ㎎, 0.63 mmol)(실시예 4의 출발물질에 대해 기술된 바와 같이 제조함)에 3-벤질옥시-1-프로판올(150 ㎕, 0.9 mmol)의 용액을 첨가하였다. 얻은 혼합물에 1,1'-아조디카르보닐디피페리딘(480 ㎎, 1.9 mmol)을 첨가하고 그 혼합물을 5℃에서 1 시간 동안 교반한 후 상온으로 냉각시키고 하룻밤동안 교반하였다. 에테르(10 ㎖)를 첨가하고 그 혼합물을 15 분 동안 교반하고 침전된 고체를 여과 제거하였다. 여과액으로부터 휘발성 물질을 증발 제거한 후, 잔류물을 에틸아세테이트와 물 사이에 분배시켰다. 유기층을 분리하고, 건조(MgSO₄)시킨 후, 용매를 증발 제거하였다. 잔류물을 아세톤 중에 용해하고, 에테르 중의 염화수소(1 M 용액 0.6 ㎖, 0.6 mmol)를 첨가하였다. 얻은 침전된 생성물을 여과 수집하고 건조하여 7-(3-벤질옥시프로폭시)-4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시퀴나졸린 염산염(90 ㎎, 31%)을 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆) 2.22(t, 2H); 3.74(t, 2H); 4.10(s, 3H); 4.37(t, 2H); 4.60(s, 2H); 7.34-7.56(m, 7H); 7.68(t, 1H); 7.76(dd, 1H); 8.38(s, 1H); 8.90(s, 1H); 11.73(s, 1H)

실시예 8

DMF(3 ㎖) 중의 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-7-히드록시-6-메톡시퀴나졸린(63 ㎎, 0.2 mmol)(실시예 4의 출발물질에 대해 기술된 바와 같이 제조함) 및 탄산칼륨(95 ㎎, 0.69 mmol)에 4-(2-클로로에틸)모르폴린 염산염(40 ㎎, 2.1 mmol)을 첨가하고 그 혼합물을 3 시간 동안 100℃에서 가열하였다. 그 혼합물을 냉각시키고 휘발성 물질을 증발 제거하고 잔류물을 물과 염화메틸렌 사이에 분배시켰다. 유기상을 분리하고 상분리지를 통과시키고 용매를 증발 제거하였다. 잔류물을 아세톤 중에서 용해하고 에테르 중의 염화수소(1 M 용액 0.2 ㎖, 0.2 mmol)를 첨가하였다. 침전된 생성물을 여과 수집하고 건조하여 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(2-모르폴리노에톡시)퀴나졸린 염산염(50 ㎎, 50%)을 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆)3.6(m, 2H); 3.85(m, 4H); 3.95(s, 3H); 4.6(m, 2H); 7.35(m, 2H); 7.6(m, 2H); 8.05(s, 1H); 8.55(s, 1H)

MS-ESI:433[MH]⁺

원소분석 : C₂₁H₂₂N₄O₃FCl 2HCl

실측치 C 50.5 H 4.9 N 10.9

이론치 C 49.9 H 4.89 N 11.1%

실시예 9

4-(3-클로로프로필)모르폴린(J. Am. Chem. Soc. 1945, 67, 736, 2.26 g, 13.8 mmol)을 DMF(100 ㎖) 중의 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-7-히드록시-6-메톡시퀴나졸린(2.21 g, 6.9 mmol)(실시예 4의 출발물질에 대해 기술된 바와 같이 제조함) 및 탄산칼륨(6.5 g, 47 mmol)에 첨가하였다. 그 혼합물을 110℃에서 4 시간 동안 가열하고 냉각시켰다. 휘발성 물질을 증발 제거하고 잔류물을 염화메틸렌과 물사이에 분배시켰다. 유기상을 분리하고 염수로 세척하고 상분리지를 통과시키고 용매를 증발 제거하였다. 잔류물을 염화메틸렌/메탄올/암모니아(수용액)(100/8/1) 용출물로 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 그 생성물을 아세톤 및 이소프로판올 중에 용해하고, 에테르 중의 염화수소(1 M 용액 4.8 ㎖, 4.8 mmol)을 첨가하였다. 침전된 생성물을 여과 수집하고 아세톤 및 물로 세척하여 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(3-모르폴리노프로폭시)퀴나졸린 염산염(2.16 g, 65%)을 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆) 2.25(m, 2H); 3.7-3.9(br s, 4H); 3.95(s, 3H); 4.25(t, 2H); 7.2(s, 1H); 7.3(dt, 1H); 7.55(m, 2H); 7.95(s, 1H); 8.40(s, 1); 9.85(br s, 1H); 11.0(br s. 1H)

MS-ESI:447[MH]⁺

원소분석 C₂₂H₂₄N₄O₃FCl 1HCl 0.5C₃H₆O

실측치 C 54.7 H 5.6 N 10.8

이론치 C 55.1 H 5.5 N10.9%

실시예 10

트리클로로메탄(24 ㎖) 및 메탄올(24 ㎖)의 혼합물 중의 4-(3-아세톡시-4-메틸아닐리노)-6-메톡시-7-(2-메톡시에톡시)퀴나졸린(2.38 g, 6 mmol)의 용액에 농축 수성 암모니아(8 ㎖)를 첨가하였다. 그 혼합물을 환류로 8 시간 동안 가열하고 휘발성 물질을 증발 제거하였다. 잔류물을 물로 분쇄하고, 얻은 고체를 여과 수집하고 염화메틸렌/에탄올로부터 재결정하였다. 그 생성물을 염화메틸렌/에탄올의 혼합물 중에 재용해시키고 에탄올 중의 염화수소 포화 용액을 첨가하였다. 용매를 부분적으로 증발 제거하고 혼합물을 냉각시켰다. 얻은 침전물을 여과 수집하고 에테르로 세척하고 진공하에서 건조하여 4-(3-히드록시-4-메틸아닐리노)-6-메톡시-7-(2-메톡시에톡시)퀴나졸린 염산염(1.68 g, 80%)을 얻었다.

m.p. 270℃(분해)

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆; CF₃COOD) 2.17(s, 3H); 3.35(s, 3H); 3.78(t, 2H); 4.00(s, 3H); 4.33(t, 2H); 6.96(d, 1H); 7.08(s, 1H); 7.16(d, 1H); 7.3(s, 1H); 8.09(s, 1H). 8.81(s, 1H)

MS-ESI: 378[MNa]⁺

원소분석 C₁₉H₂₁N₃O₄1HCl

실측치 C 58.0 H 5.9 N 10.7

이론치 C 58.2 H 5.7 N 10.%

출발물질은 다음과 같이 제조하였다.

상온에서 2-메틸-5-니트로페놀(2.5 g, 16.3 mmol) 및 1 M 수산화나트륨(24.5 ㎖)의 혼합물에 아세트산 무수물(1.9 ㎖, 20.3 mmol)을 첨가하였다. 그 혼합물을 40 분 동안 교반한 후, 고체를 여과 제거하였으며 여과액을 에틸아세테이트로 추출하였다. 유기 추출물들을 합하여 염수로 세척하고, 건조시키고(MgSO₄), 용매를 증발 제거하여 2-아세톡시-4-니트로톨루엔(3.1 g, 100%)을 얻었다. 이 물질(3.1 g, 15.9 mmol) 및 차콜상의 10% 팔라듐 촉매(0.12 g)의 혼합물을 에틸 아세테이트(50 ㎖) 중에 상온에서 1 기압의 수소하에 2 시간 동안 교반하였다. 규조토를 통해 촉매를 여과 제거하고 여과액으로부터 용매를 증발 제거하여 3-아세톡시-4-메틸아닐린(2.45 g, 94%)을 얻었다.

7-벤질옥시-4-클로로-6-메톡시퀴나졸린(2.18 g, 7.25 mmol)(실시예 4의 출발물질에 대해 기술된 바와 같이 제조함), 3-아세톡시-4-메틸아닐린(1.32 g, 8 mmol) 및 이소프로판올(50 ㎖)의 혼합물을 교반하고 환류로 1 시간 동안 가열하였다. 그 혼합물을 상온으로 냉각시켰다. 침전물을 여과 수집하고, 이소프로판올 및 에테르로 세척하여 4-(3-아세톡시-4-메틸아닐리노)-7-벤질옥시-6-메톡시퀴나졸린을 얻었다.

메탄올(50 ㎖), DMF(12 ㎖) 및 트리클로로메탄(50 ㎖)중의, 4-(3-아세톡시-4-메틸아닐리노)-7-벤질옥시-6-메톡시퀴나졸린(2.68 g, 5.75 mmol) 및 차콜상의 10% 팔라듐 촉매(0.27 g)의 혼합물을 상온에서 1.5 기압의 수소하에 30 분 동안 교반하였다. 규조토를 통해 촉매를 여과 제거하고 여과액으로부터 용매를 증발 제거하였다. 잔류물을 에테르로 분쇄하고 여과 수집하고 50℃에서 진공하에 건조하여 4-(3-아세톡시-4-메틸아닐리노)-7-히드록시-6-메톡시퀴나졸린(2.1 g, 100%)을 얻었다.

DMF(30 ㎖) 중의 4-(3-아세톡시-4-메틸아닐리노)-7-히드록시-6-메톡시퀴나졸린(1.51 g, 4 mmol)의 용액에 탄산칼륨(2.2 g, 16 mmol)을 첨가하고 그 혼합물을 15 분 동안 교반하였다. 그 후 2-브로모에틸 메틸 에테르(667 ㎎, 4.8 mmol)을 적가하였다. 그 혼합물을 상온에서 1 시간 동안 교반한 후, 60℃에서 17 시간 동안 가열하고 마지막으로 냉각시켰다. 그 불용성 물질을 여과 제거하고 여과 패드를 DMF로 세척하였다. 여과액을 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배시키고 유기층을 분리하고 염수로 세척한 후 건조시키고(MgSO₄) 용매를 증발 제거하였다. 잔류물을 염화메틸렌/메탄올(95/5에 이어서 93/7) 용출물로 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 정제된 생성물을 에테르로 분쇄하여 4-(3-아세톡시-4-메틸아닐리노)-6-메톡시-7-(2-메톡시에톡시)퀴나졸린(1.34 g, 84%)을 백색 분말로 얻었다.

m.p. 180-183℃

¹H NMR 스펙트럼(CDCl₃) 2.16(s, 3H); 2.34(s, 3H); 3.47(s, 3H); 3.87(t, 2H); 3.99(s, 3H); 4.31(t, 2H); 6.98(s, 1H); 7.21(d, 1H); 7.24(d, 1H); 7.42(d, 1H); 7.50(s, 1H); 8.64(s, 1H)

MS-ESI:420[MNa]⁺

원소분석: C₂₁H₂₃N₃O₅

실측치 C 63.1 H 6.1 N 10.4

이론치 C 63.5 H 5.8 N 10.6%

실시예 11

이소프로판올(7 ㎖) 중의 4-클로로-6,7-디메톡시퀴나졸린 염산염(130 ㎎, 0.5 mmol)(실시예 2의 출발물질에 대해 기술된 바와 같이 제조함) 및 4-브로모-2-플루오로아닐린(95 ㎎, 0.5 mmol)의 혼합물을 환류로 2 시간 동안 가열하였다. 그 혼합물을 상온으로 냉각시키고 침전된 고체 생성물을 여과 수집하고, 이소프로판올 및 에테르로 세척하고 건조시켜 4-(4-브로모-2-플루오로아닐리노)-6,7-디메톡시퀴나졸린 염산염(124 ㎎, 60%)을 회백색 고체로 얻었다.

HPLC 특성

컬럼 - 200 × 4.6 ㎜ C18 ODS 하이퍼실(Hypersil)(샌돈(Sandon)의 상표명) 역상 5 ㎛

용매 - 유속 1.5 ㎖/분

0 분 ∼ 3 분 - H₂O/CH₃CN(95/5) 0.03M 트리에틸아민

3 분 ∼ 17 분 - 구배 H₂O/CH₃CN (95/5 로부터 5/95); 일정함 0.03M 트리에틸아민

체류 시간 - 13.01 분

실시예 12

이소프로판올(7 ㎖) 중의 4-클로로-6,7-디메톡시퀴나졸린 염산염(130 ㎎, 0.5 mmol)(실시예 2의 출발물질에 대해 기술된 바와 같이 제조함) 및 2-플루오로-4-메틸아닐린(63 ㎎, 0.5 mmol)의 혼합물을 환류로 2 시간 동안 가열하였다. 그 혼합물을 상온으로 냉각시키고 침전된 고체 생성물을 여과 수집하고, 이소프로판올 및 에테르로 세척하고 건조시켜 4-(2-플루오로-4-메틸아닐린)-6,7-디메톡시퀴나졸린 염산염(87 ㎎, 50%)을 회백색 고체로 얻었다.

HPLC 특성

용매 - 유속 1.5 ㎖/분

0 분 ∼ 3 분 - H₂O/CH₃CN(95/5) 0.03M 트리에틸아민

체류 시간 - 12.32 분

실시예 13

이소프로판올(7 ㎖) 중의 4-클로로-6,7-디메톡시퀴나졸린 염산염(130 ㎎, 0.5 mmol)(실시예 2의 출발물질에 대해 기술된 바와 같이 제조함) 및 3-히드록시-4-메틸아닐린(62 ㎎, 0.5 mmol)의 혼합물을 환류로 2 시간 동안 가열하였다. 그 혼합물을 상온으로 냉각시키고 침전된 고체를 여과 수집하고, 이소프로판올 및 에테르로 세척한 후 건조시켜 6,7-디메톡시-4-(3-히드록시-4-메틸아닐리노)퀴나졸린 염산염(98 ㎎, 56%)을 회백색 고체로 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆) 2.14(s, 3H); 3.98(s, 3H); 4.00(s, 3H); 6.97(d 1H); 7.12(s, 1H); 7.14(d, 1H); 7.38(s, 1H); 8.27(s, 1H); 8.77(s, 1H); 9.65(br s, 1H)

MS-ESI: 312[MH]⁺

원소분석 C₁₇H₁₇N₃O₃1HCl

실측치 C 59.1 H 5.4 N 11.8

이론치 C 58.6 H 5.2 N 12.1%

실시예 14

이소프로판올(7 ㎖) 중의 4-클로로-6-메톡시-7-(2-메톡시에톡시)퀴나졸린 염산염(107 ㎎, 0.4 mmol) 및 4-브로모-2-플루오로아닐린(76 ㎎, 0.4 mmol)의 혼합물을 환류로 2 시간 동안 가열하였다. 그 혼합물을 상온으로 냉각시키고 침전된 고체를 여과 수집하고, 이소프로판올 및 에테르로 세척한 후 건조시켜 4-(4-브로모-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(2-메톡시에톡시)퀴나졸린 염산염(151 ㎎, 82%)을 회백색 고체로 얻었다.

m.p. 200-204℃

¹H NMR 스펙트럼: (DMSOd₆; TFA) 3.36(s, 3H); 3.79(t, 2H); 4.02(s, 3H); 4.39(t, 2H); 7.37(s, 1H); 7.54-7.61(m, 2H); 7.81(dd, 1H); 8.16(s, 1H); 8.86(s, 1H)

MS-ESI: 442[MH]⁺

원소분석 : C₂₀H₂₁N₃O₄BrF 0.95HCl

실측치 C 47.56 H 4.01 N 9.29

이론치 C 47.32 H 3.96 N 9.20%

출발 물질은 다음과 같이 제조하였다.

아세톤(60 ㎖) 중의, 에틸 4-히드록시-3-메톡시벤조에이트(9.8 g, 50 mmol), 2-브로모에틸 메틸 에테르(8.46 ㎖, 90 mmol) 및 탄산칼륨(12.42 g, 90 mmol)의 혼합물을 환류로 30 시간 동안 가열하였다. 그 혼합물을 냉각시키고 고체를 여과 제거하였다. 여과액으로부터 휘발성 물질을 증발 제거하고 잔류물을 헥산으로 분쇄하여 에틸 3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)벤조에이트(11.3 g, 89%)를 백색 고체로 얻었다.

m.p. 57-60℃

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆) 1.31(t, 3H); 3.29(s, 3H); 3.32(s, 3H); 3.68(m, 2H); 4.16(m, 2H); 4.28(q, 2H); 7.06(d, 1H); 7.45(d, 1H); 7.65(dd, 1H)

MS-FAB:255[MH]⁺

0℃에서 에틸 3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)벤조에이트(9.5 g, 37 mmol)을 교반한 농축 질산(75 ㎖)에 적가하였다. 그 혼합물을 상온으로 냉각시키고 추가로 90분 동안 교반하였다. 그 혼합물을 물로 희석하고 염화메틸렌으로 추출하고 건조시키고(MgSO₄), 용매를 증발 제거하였다. 잔류물을 헥산으로 분쇄하여 에틸 5-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)-2-니트로벤조에이트(10.6 g, 95%)를 오렌지색 고체로 얻었다.

m.p. 68-69℃

¹H NMR 스펙트럼:(DMSOd₆) 1.27(t, 3H); 3.30(s, 3H); 3.69(m, 2H); 3.92(s, 3H); 4.25(m, 2H); 4.29(q, 2H); 7.30(s, 1H); 7.65(s, 1H)

MS-CI: 300[MH]⁺

메탄올(150 ㎖) 중의, 에틸 5-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)-2-니트로벤조에이트(10.24 g, 34 mmol), 시클로헥산(30 ㎖) 및 차콜상의 10% 팔라듐 촉매(2.0 g)의 혼합물을 환류로 5 시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고 염화메틸렌으로 희석하였다. 여과에 의해 촉매를 제거하고 여과액으로부터 휘발성 물질을 증발 제거하였다. 그 잔류물을 에틸아세테이트/헥산으로 재결정하여 에틸 2-아미노-5-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)벤조에이트(8.0 g)을 담황색 고체로 얻었다. 이 생성물에 포름아미드(80 ㎖)를 첨가하고, 그 혼합물을 170℃에서 18 시간 동안 가열하였다. 고압 증발시켜 용매의 거의 반을 제거하고 잔류물을 하룻밤 방치시켰다. 고체 생성물을 여과 수집하고, 에테르로 세척하고 건조하여 6-메톡시-7-(2-메톡시에톡시)-3,4-디히드로퀴나졸린-4-온(5.3 g, 두단계에 걸쳐 62%)을 회색 고체로 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼: (DMSOd₆) 3.35(s, 3H); 3.74(m, 2H), 3.89(s, 3H); 4.26(m, 2H); 7.15(s, 1H); 7.47(s, 1H); 7.89(s, 1H); 12.03(br s, H)

MS-CI:251[MH]⁺

염화티오닐(50 ㎖) 중의 6-메톡시-7-(2-메톡시에톡시)-3,4-디히드로퀴나졸린-4-온(5.1 g, 20 mmol)의 혼합물에 DMF(0.5 ㎖)를 첨가하였다. 그 혼합물을 교반하고 3 시간 동안 환류로 가열한 후 냉각시키고 과잉의 염화티오닐을 증발 제거하였다. 잔류물을 염화메틸렌 중에 현탁시키고 탄산수소나트륨 수용액으로 세척하였다. 수성상을 염화메틸렌으로 추출하고 추출물들을 합하여 건조시켰다(MgSO₄). 미정제 생성물을 염화메틸렌/헥산으로 재결정하여 4-클로로-6-메톡시-7-(2-메톡시에톡시)퀴나졸린(2.8 g, 51%)을 미세한 백색 고체로 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆) 3.37(s, 3H); 3.77(m, 2H); 4.01(s, 3H); 4.37(m, 2H); 7.40(s, 1H); 7.49(s, 1H); 8.88(1H)

MS-CI: 269[MH]⁺

실시예 15

이소프로판올(7 ㎖) 중의 4-클로로-6-메톡시-7-(2-메톡시에톡시)퀴나졸린 (107 ㎎, 0.4 mmol)(실시예 14의 출발물질에 대해 기술된 바와 같이 제조함) 및 2-플루오로-4-메틸아닐린(50 ㎎, 0.4 mmol)의 혼합물을 환류로 2 시간 동안 가열하였다. 그 혼합물을 상온으로 냉각시키고 침전된 고체를 여과 수집하고, 이소프로판올 및 에테르로 세척하고 건조시켜 4-(2-플루오로-4-메틸아닐리노)-6-메톡시-7-(2-메톡시에톡시)퀴나졸린 염산염(95 ㎎, 60%)을 회백색 고체로 얻었다.

HPLC 특성

용매 - 유속 1.5 ㎖/분

0 분 ∼ 3 분 - H₂O/CH₃CN(95/5) 0.001 M 트리에틸아민

3 분 ∼ 17 분 - 구배 H₂O/CH₃CN (95/5 로부터 5/95); 일정함 0.001 M 트리에틸아민

체류 시간 - 10.46 분

실시예 16

이소프로판올(20 ㎖) 중의 4-클로로-7-(2-메톡시에톡시)퀴나졸린 염산염(450 ㎎, 1.6 mmol)(실시예 1의 출발물질에 대해 기술된 바와 같이 제조함) 및 3-히드록시-4-메틸아닐린(280 ㎎, 2.27 mmol)의 혼합물을 환류로 30 분 동안 가열하였다. 용매를 증발 제거하고 이어서, 잔류물을 이소프로판올로 분쇄하였다. 얻은 고체를 여과 수집하고 이소프로판올로 세척한 후 진공하에서 건조시켜 4-(3-히드록시-4-메틸아닐리노)-7-(2-메톡시에톡시)퀴나졸린 염산염(428 ㎎, 74%)을 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆) 2.18(s, 3H); 3.38(s, 3H); 3.8(t, 2H); 4.35(t, 2H); 7.05(d, 1H); 7.15(m, 2H); 7.35(s, 1H); 7.52(d, 1H); 8.75(d, 1H); 8.85(s, 1H); 9.7(br s, H)

MS-ESI:326[MH]⁺

원소분석 : C₁₈H₁₉N₃O₃1HCl

실측치 : C 59.6 H 5.8 N 11.7

이론치 : C 59.7 H 5.5 N 11.6%

실시예 17

염화메틸렌(10 ㎖) 중의, 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-7-히드록시-6-메톡시-퀴나졸린(225 ㎎, 0.7 mmol)(실시예 4의 출발 물질에 대하여 기재된 바와 같이 제조함) 및 트리부틸포스핀(420 ㎎, 2.1 mmol)의 교반한 현탁액에 염화메틸렌(1 ㎖) 중의 1-(2-히드록시에틸)-4-메틸피페라진(112 ㎎, 0.78 mmol)의 용액을 첨가하였다. 그 후 1,1'-(아조디카르보닐)디피페리딘(525 ㎎, 2.1 mmol)을 상기 혼합물에 분획으로 첨가하였다. 얻어진 투명한 연황색 용액을 3.5 시간 동안 교반한 후 하룻밤 방치하였다. 반응 혼합물을 에테르(8 ㎖)로 급냉시키고 침전물을 여과 제거하였다. 여과액으로부터 용매를 증발 제거하고 잔류물을 아세톤에 용해시키고 염산염이 침전될 때 까지 1 M 에테르성 염화수소로 처리하였다. 침전물을 여과 수집하고 메탄올 중에 용해시킨 후, 과량의 트리에틸아민으로 염기성으로 만들었다. 휘발성 물질을 증발 제거하고 잔류물을 염화메틸렌/메탄올/0.88 수성 암모니아(100/8/1) 용출물로 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 얻어진 정제 오일을 에테르로 분쇄하고 여과 수집한 후 건조하여 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시)퀴나졸린(79 ㎎, 25%)을 백색 고체로 얻었다.

m.p. 173-175℃

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆) 2.10(s, 3H); 2.3(m, 4H); 2.5(m, 4H); 2.75(t, 2H); 3.95(s, 3H); 4.25(t, 2H); 7.21(s, 1H); 7.30(dd, 1H); 7.50(d, 1H); 7.55(dd, 1H); 7.75(s, 1H); 8.30(s, 1H); 9.50(s, 1H)

MS-ESI : 446[MH]⁺

원소분석 C₂₂H₂₅N₅O₂FCl

실측치 C 59.1 H 5.8 N 15.5

이론치 C 59.3 H 5.7 N 15.7%

출발 물질은 다음과 같이 제조하였다.

무수 에탄올(150 ㎖) 중의 1-메틸피페라진(1.26 g, 13 mmol) 및 탄산칼륨(5.0 g, 36 mmol)의 혼합물을 2-브로모에탄올(2.36 g, 19 mmol)에 적가하고, 그 혼합물을 환류로 18 시간 동안 가열하였다. 그 혼합물을 냉각시키고 침전물을 여과 제거하였으며 휘발성 용매를 증발 제거하였다. 잔류물을 아세톤/염화메틸렌으로 처리하고 불용성 물질을 여과 제거하고 여과액으로부터 용매를 증발 제거하여 1-(2-히드록시에틸)-4-메틸피페라진(870 ㎎, 48%)을 연갈색 오일로 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼 : (CDCl₃) 2.18(s, 3H); 2.3-2.7(br m, 8H); 2.56(t, 2H); 3.61(t, 2H)

MS-ESI: 145[MH]⁺

실시예 18

DMF(20 ㎖) 중의, 4-클로로-6-메톡시-7-(3-모르폴리노프로폭시)퀴나졸린(2.5 g, 7.41 mmol) 및 4-브로모-2-플루오로아닐린(1.55 g, 8.15 mmol)의 용액을 150℃에서 4 시간 동안 환류로 가열하였다. 혼합물을 에테르(200 ㎖)로 희석하고 얻은 침전물을 여과 수집하였다. 고체를 염화메틸렌과 물 사이에 분배시키고, 1 M 수산화나트륨 수용액으로 수성층의 pH를 8.5로 조절하였다. 유기층을 분리하고 염수로 세척하고 건조시키고(MgSO₄), 용매를 증발 제거하였다. 잔류물을 염화메틸렌/메탄올(9/1) 용출물로 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 정제된 고체를 메탄올 및 염화메틸렌 중에 용해하고 2.2 M 에테르성 염화수소(3 ㎖)를 첨가하였다. 휘발성 물질을 증발 제거하고 잔류물을 에테르 중에 다시 현탁시키고 여과 수집하고 진공하에서 건조시켜 4-(4-브로모-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(3-모르폴리노프로폭시)퀴나졸린 염산염(1.61 g, 26%)을 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼 :(DMSOd₆; CF₃COOD) 2.3-2.4(m, 2H); 3.15(t, 2H); 3.34(t, 2H); 3.54(d, 2H); 3.76(t, 2H); 4.02(s, 3H); 4.04(m, 2H); 4.33(t, 2H); 7.41(s, 1H); 7.5-7.65(m, 2H); 7.80(dd, 1H), 8.20(s, 1H); 8.9(s, 1H)

원소분석 C₂₂H₂₄N₄O₃BrF 0.4H₂O 1.9HCl

실측치 C 46.5 H 5.0 N 9.9

이론치 C 46.5 H 4.7 N 9.9%

출발 물질은 다음과 같이 제조하였다.

4-히드록시-3-메톡시벤조산(4.5 g, 26.8 mmol), 3-모르폴리노프로필 클로라이드(9.5 g, 58.0 mmol)(J. Am. Chem. Soc. 1945, 67, 736에 따라 제조됨), 탄산칼륨(8.0 g, 58 mmol), 요오드화칼륨(1.0 g, 0.22 mmol) 및 DMF(80 ㎖)의 혼합물을 교반하고 3 시간 동안 100℃에서 가열하였다. 고체를 여과 제거하고 여과액을 증발시켰다. 잔류물을 에탄올(50 ㎖) 중에 용해하고 2 M 수산화나트륨(50 ㎖)을 첨가하고 혼합물을 90℃에서 2 시간 동안 가열하였다. 부분적으로 증발시킨 후, 그 혼합물을 농축 염산으로 산성화시키고 에테르로 세척한 후, 디아이온(Diaion)(미쯔비시(Mitsubishi)의 상표명) HP20SS 수지 컬럼상에서 물을 용출하고 이어서 염산(pH 2)중의 메탄올 구배물(0 으로부터 25%)을 용출시켜 정제하였다. 용매를 부분적으로 증발시키고 동결건조하여 3-메톡시-4-(3-모르폴리노프로폭시)벤조산(8.65 g, 97%)을 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆; TFA) 2.17-2.24(m, 2H); 3.10-3.16(m, 2H); 3.30(t, 2H); 3.52(d, 2H); 3.71(t, 2H); 3.82(s, 3H); 4.01(br d, 2H); 4.14(t, 2H); 7.08(d, 1H); 7.48(d, 1H); 7.59(dd, 1H)

MS-ESI: 296[MH]⁺

TFA(25 ㎖) 중의 3-메톡시-4-(3-모르폴리노프로폭시)벤조산(7.78 g, 23.5 mmol)의 용액에 0℃에서 발연 질산(1.5 ㎖, 36.2 mmol)을 서서히 첨가하였다. 냉각용 배쓰를 제거하고 반응 혼합물을 상온에서 1 시간 동안 교반하였다. TFA를 증발 제거하고 그 잔류물에 얼음을 첨가하였다. 침전물을 여과 수집하고 최소의 물로 세척하고, 이어서 톨루엔 및 에테르로 세척하였다. 고체를 오산화인 상에서 진공하에 건조하여 5-메톡시-4-(3-모르폴리노프로폭시)-2-니트로벤조산(7.54 g)을 얻었으며 이것을 추가로 정제하지 않고 사용하였다.

¹H NMR 스펙트럼:(DMSOd₆; TFA) 2.16-2.23(m, 2H); 3.10-3.17(m, 2H); 3.30(t, 2H); 3.52(d, 2H); 3.66(t, 2H); 3.93(s, 3H); 4.02(br d, 2H); 4.23(t, 2H); 7.34(s, 1H); 7.61(s, 1H)

MS-EI:340[M]⁺

염화티오닐(15 ㎖) 및 DMF(0.05 ㎖)를 5-메톡시-4-(3-모르폴리노프로폭시)-2-니트로벤조산(7.54 g)에 첨가하였다. 그 혼합물을 50℃에서 1 시간 동안 가열하고, 과량의 염화티오닐을 증발 제거하고 톨루엔과 2회 공비시켰다. 얻어진 고체를 THF(200 ㎖)중에 현탁시키고 암모니아를 사용하여 30 분 동안 이 혼합물에 기포를 발생시켰다. 침전물을 여과 제거하고 THF로 세척하였다. 증발에 의해 여과액을 농축한 후 생성물을 결정화하고 여과 수집하여 5-메톡시-4-(3-모르폴리노프로폭시)-2-니트로벤즈아미드(5.25 g)를 밝은 황색 결정으로 얻었으며 이것을 추가로 정제하지 않고 사용하였다.

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆; TFA) 2.17-2.24(m, 2H); 3.11-3.18(m 2H); 3.31(t, 2H); 3.53(d, 2H); 3.67(t, 2H); 3.93(s, 3H); 4.03(br d, 2H); 4.21(t, 2H); 7.17(s, 1H); 7.62(s, 1H)

MS-EI:339[M]⁺

메탄올(150 ㎖) 중의 5-메톡시-4-(3-모르폴리노프로폭시)-2-니트로벤즈아미드(5.67 g)의 현탁액에 농축 염산(30 ㎖)을 첨가하고 그 혼합물을 60℃로 가열하였다. 5-메톡시-4-(3-모르폴리노프로폭시)-2-니트로벤즈아미드가 용해될 때, 상기 반응 혼합물에 철 분말(5.6 g, 100 mmol)을 한 분획씩 첨가하고 그후 이것을 90℃로 가열하였다. 냉각후, 불용성 물질을 규조토를 통해 여과 제거하고 휘발성 물질을 증발 제거하고 잔류물을 디아이온(미쯔비시의 상표명) HP20SS 수지 컬럼상에서 물로 용출하고 이어서 염산(pH 2)으로 용출하여 정제하였다. 증발에 의해 분획을 농축시키므로써 침전물을 얻었으며 이것을 여과 수집하여 오산화인 상에서 진공하에서 건조시키므로써 2-아미노-5-메톡시-4-(3-모르폴리노프로폭시)벤즈아미드 염산염(4.67 g, 75%)을 베이지색 결정으로 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆; TFA) 2.22-2.28(m, 2H); 3.12(br t, 2H); 3.29(t, 2H); 3.51(d, 2H); 3.75(t, 2H); 3.87(s, 3H); 4.00(gr d, 2H); 4.12(t, 2H); 7.06(s, 1H); 7.53(s, 1H)

MS-EI: 309[M]⁺

디옥산(35 ㎖) 중의 2-아미노-5-메톡시-4-(3-모르폴리노프로폭시)벤즈아미드(4.57 g, 12.25 mol) 및 골드 시약(2.6 g, 15.89 mmol)의 혼합물을 5 시간 동안 환류로 가열하였다. 아세트산 나트륨(1.0 g) 및 아세트산(0.55 ㎖)을 상기 반응 혼합물에 첨가하고 추가로 3 시간 동안 가열하였다. 혼합물을 상온으로 냉각시키고 휘발성 물질을 증발 제거하였다. 잔류물의 pH를 2 M 수산화나트륨으로 7로 조절하고 디아이온(미쯔비시의 상표명) HP20SS 수지 컬럼상에서 물 중의 메탄올(0 으로부터 60%의 구배)로 용출하여 정제하였다. 증발에 의해 분획을 농축시키므로써 침전물을 얻었으며 이것을 여과 수집하고 오산화인 상에서 진공하에 건조시키므로써 6-메톡시-7-(3-모르폴리노프로폭시)-3,4-디히드로퀴나졸린-4-온(3.04 g, 78%)을 백색 고체로 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼: (CDCl₃) 2.10(q, 2H); 2.48(m, 4H); 2.56(t, 2H); 3.72(t, 4H); 4.00(s, 3H); 4.24(t, 2H); 7.18(s, 1H); 7.60(s, 1H); 8.00(s, 1H); 10.86(br s, 1H)

MS-EI:319[M]⁺

6-메톡시-7-(3-모르폴리노프로폭시)-3,4-디히드로퀴나졸린-4-온(683㎎, 2 mmol) 및 염화티오닐(8 ㎖)의 혼합물을 환류로 30 분 동안 가열하였다. 과량의 염화티오닐을 증발 제거하고 톨루엔으로 2회 공비시켰다. 잔류물을 염화메틸렌 중에 현탁시키고 그 혼합물에 탄산수소나트륨 10% 수용액을 첨가하였다. 유기층을 분리하고 건조시키고(MgSO₄) 용매를 증발 제거하였다. 잔류물을 에테르로 분쇄하고, 고체를 여과 수집하고 에테르로 세척하고 진공하에서 건조하여 4-클로로-6-메톡시-7-(3-모르폴리노프로폭시)퀴나졸린(590 ㎎, 87%)을 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼 : (CDCl₃) 2.10-2.16(m, 2H); 2.48(br s, 4H); 2.57(t, 2H); 3.73(t, 4H); 4.05(s, 3H); 4.29(t, 2H); 7.36(s, 1H); 7.39(s, 1H); 8.86(s, 1H)

MS-ESI: 337[MH]⁺

실시예 19

이소프로판올(5 ㎖) 중의 4-클로로-7-(3-모르폴리노프로폭시)퀴나졸린 염산염(238 ㎎, 0.69 mmol) 및 4-클로로-2-플루오로아닐린(145 ㎎, 1 mmol)의 혼합물을 환류로 1 시간 동안 가열하였다. 용매를 증발 제거하고 잔류물을 물과 에틸아세테이트사이에서 분배시키고 수성층의 pH를 탄산수소나트륨으로 8로 조절하였다. 유기층을 분리하고 염수로 세척한 후 건조시키고(MgSO₄) 용매를 증발 제거하였다. 잔류물을 염화메틸렌/아세토니트릴/메탄올(60/30/10에 이어서 60/20/20) 용출물로 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 얻은 반 정도 정제된 고체를 염화메틸렌/메탄올(95/5) 용출물로 중성 알루미나상의 크로마토그래피에 의해 다시 정제하였다. 얻은 백색 고체를 염화메틸렌 중에 용해하고 4 M 에테르성 염화수소(0.5 ㎖)을 첨가하였다. 휘발성 물질을 증발 제거하고, 잔류물을 염화메틸렌, 메탄올 및 에테르의 순으로 첨가하여 분쇄하였다. 침전된 고체를 여과 수집하고 진공하에서 건조하여 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-7-(3-모르폴리노프로폭시)퀴나졸린 염산염(35 ㎎, 10%)을 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆;CF₃COOD) 2.3(m, 2H); 3.13(t, 2H); 3.34(t, 2H); 3.52(d, 2H); 3.68(t, 2H); 4.01(d, 2H); 4.34(t, 2H); 7.37(s, 1H); 7.46(d, 1H); 7.54(dd, 1H); 7.61(t, 1H); 7.71(d, 1H); 8.71(d, 1H); 8.93(s, 1H)

MS-ESI:417[MH]⁺

원소분석 C₂₁H₂₂N₄O₂CIF 0.8H₂O 1.75HCl

실측치 C 50.9 H 5.2 N 11.5

이론치 C 50.9 H 5.2 N 11.3%

출발 물질은 다음과 같이 제조하였다.

상온에서 나트륨 금속(2.2 g, 95 mmol)을 벤질알코올(50 ㎖)에 조심스럽게 첨가하였다. 그 혼합물을 상온에서 30 분간 교반한 후 80℃에서 1 시간 동안 가열하였다. 그 혼합물을 40℃로 냉각하고 7-플루오로-3,4-디히드로퀴나졸린-4-온(3.9 g, 24 mmol)(실시예 1에서 출발 물질에 대하여 기술된 바와 같이 제조함)을 첨가하였다. 그 후 반응 혼합물을 교반하고 130℃에서 4 시간 동안 가열한 후 하룻밤 동안 상온으로 냉각시켰다. 혼합물을 물로 급냉시키고 얻은 침전물을 에테르(150 ㎖)를 첨가하여 분쇄한 후 여과 수집하고 60℃의 진공하에서 4 시간 동안 건조하여 7-벤질옥시-3,4-디히디로퀴나졸린-4-온(5.33 g, 89%)을 얻었다.

7-벤질옥시-3,4-디히디로퀴나졸린-4-온(5.3 g, 21 mmol)을 무수 DMF(50 ㎖)중에 현탁시키고 수화 나트륨(미네랄 오일 중의 60% 현탁액 1 g, 25 mmol)을 첨가하였다. 수소 가스 방출이 중단된 후, 반응물을 상온으로 냉각시킨 후, 클로로메틸피발레이트(4.1 g, 27 mmol)를 10 분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 30 분 동안 교반한 후 그것을 시트르산 수용액(pH 5, 250 ㎖)에 붓고 에테르로 추출하였다(3 × 300 ㎖). 추출물들을 합하여 염수로 세척하고, 건조시키고(MgSO₄), 용매를 증발 제거하였다. 얻은 고체를 이소헥산으로 분쇄하고 여과 수집하고 진공하에서 건조하여 7-벤질옥시-3-메틸피발로일-3,4-디히드로퀴나졸린-4-온(6.9 g, 90%)을 얻었다.

에틸 아세테이트(300 ㎖), 메탄올(40 ㎖), DMF(40 ㎖) 및 아세트산(0.7 ㎖) 중의 7-벤질옥시-3-메틸피발로일-3,4-디히드로퀴나졸린-4-온(6.85 g, 18.7 mmol)의 용액에 차콜상의 5% 팔라듐 촉매(0.7 g, 50% 수용액)을 첨가하였다. 그 혼합물을 대기압의 수소하에서 4.5 시간 동안 격렬하게 교반하였다. 규조토를 통해 촉매를 여과 제거하고 여과액을 증발시켜 약 60 ㎖로 농축하고 물(300 ㎖)로 희석하고 에테르로 추출하였다(3 × 300 ㎖). 추출물들을 합하여 염수로 세척하고, 건조시키고(MgSO₄), 휘발성 물질을 증발 제거하였다. 얻은 미정제 고체를 아세톤(200 ㎖) 및 아세트산(0.2 ㎖) 중에 용해하고 0℃로 냉각하였다. 과망간산칼륨(1.8 g)을 첨가하고 혼합물을 10 분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(250 ㎖)에 붓고 에틸아세테이트(250 ㎖)를 첨가하였다. 침전물을 여과 제거하고 유기상을 분리하고 수성상을 에틸아세테이트로 다시 추출하였다(2 × 100 ㎖). 추출물들을 합하여 물 및 염수로 세척하고, 건조시키고(MgSO₄), 휘발성 물질을 증발 제거하여 7-히드록시-3-메틸피발로일-3,4-디히드로퀴나졸린-4-온(4.05 g, 78%)을 크림색 고체로 얻었다.

5℃에서 7-히드록시-3-메틸피발로일-3,4-디히드로퀴나졸린-4-온(750 ㎎, 2.7 mmol)을 염화메틸렌(40 ㎖) 중에 현탁시키고 1-(3-히드록시프로필)모르폴린(490 ㎎, 3.4 mmol) 및 트리페닐포스핀(890 ㎎, 3.4 mmol)을 첨가하였다. 그 혼합물을 5℃에서 5 분간 교반하고 디에틸 아조디카르복실레이트(590 ㎎, 3.4 mmol)을 5 분에 걸쳐 첨가하였다. 반응 혼합물을 5℃에서 30분간 교반한 후 상온에서 1 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 염화메틸렌, 에틸아세테이트, 아세토니트릴/에틸아세테이트(1/5), 마지막으로 아세토니트릴/에틸아세테이트/수성 암모니아(50/50/0.5)의 순으로 용출시킨 컬럼 크로마토그래피에 의해 직접 정제하였다. 정제된 생성물을 에테르/이소헥산으로 분쇄하고 여과 수집하여 3-메틸피발로일-7-(3-모르폴리노프로폭시)-3,4-디히드로퀴나졸린-4-온(745 ㎎, 68%)을 얻었다.

메탄올성 포화 암모니아(20 ㎖) 중의 3-메틸피발로일-7-(3-모르폴리노프로폭시)-3,4-디히드로퀴나졸린-4-온(680 ㎎, 1.6 mmol)의 용액을 6 시간 동안 40℃에서 교반한 후 상온에서 18 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발 제거하고 잔류물을 에테르/이소헥산으로 분쇄하였다. 얻은 고체를 여과 수집하여 7-(3-모르폴리노프로폭시)-3,4-디히드로퀴나졸린-4-온(450 ㎎, 92%)을 백색 고체로 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆) 1.9(m, 2H); 2.35(t, 4H); 2.4(t, 2H); 3.55(t, 4H); 4.15(t, 2H); 7.05(m, 2H); 7.97(d, 1H); 8.02(s, 1H)

염화티오닐(5 ㎖) 중의 7-(3-모르폴리노프로폭시)-3,4-디히드로퀴나졸린-4-온(200 ㎎, 0.69 mmol)및 DMF(0.1 ㎖)의 혼합물을 1 시간 동안 환류로 가열하였다. 그 용액을 톨루엔으로 희석하고 휘발성 물질을 증발 제거하였다. 잔류물을 염화메틸렌 중에 용해하고 에테르를 첨가하였다. 얻어진 침전물을 여과 수집하고 에테르로 세척하고 진공하에서 건조하여 4-클로로-7-(3-모르폴리노프로폭시)퀴나졸린 염산염(238 ㎎, 100%)을 얻었다.

1-(3-히드록시프로필)모르폴린을 다음과 같이 제조하였다.

모르폴린(94 ㎎, 1.08 mol)을 톨루엔(750 ㎖) 중의 3-브로모-1-프로판올(75 ㎎, 0.54 mol)의 용액에 적가한 후 그 반응 혼합물을 80℃에서 4 시간 동안 가열하였다. 그 혼합물을 상온으로 냉각시키고 침전된 고체를 여과 제거하였다. 여과액으로부터 휘발성 물질을 제거하고 얻은 황색 오일을 0.4 ㎜Hg 내지 0.7 ㎜Hg에서 증류에 의해 정제하여 1-(3-히드록시프로필)모르폴린(40 g, 50%)을 무색 오일로 얻었다.

b.p. 68-70℃(∼0.5 ㎜Hg)

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆) 1.65-1.78(m, 2H); 2.50(t, 4H); 2.60(t, 2H); 3.68(t, 4H); 3.78(t, 2H); 4.90(br d, 1H)

실시예 20

50℃로 가열한 이소프로판올(5 ㎖) 중의, 4-클로로-6-메톡시-7-(3-모르폴리노프로폭시)퀴나졸린(202 ㎎, 0.6 mmol)(실시예 18에서의 출발 물질에 대하여 기술한 바와 같이 제조함) 및 4-시아노-2-플루오로아닐린(100 ㎎, 0.72 mmol)(미국 특허 제4,120,693호)의 용액에 5 M 이소프로판올성 염화수소(1.5 ㎖)를 첨가하였다. 그후 그 혼합물을 80℃로 2 시간 동안 가열하고 상온으로 냉각시킨 후 하룻밤 방치하였다. 얻은 침전물을 여과 수집한 후 고체를 염화메틸렌과 물 사이에 분배시키고 1 M 수산화나트륨 수용액(0.8 ㎖)을 첨가하였다. 유기층을 분리하고 염수로 세척하고 건조(MgSO₄)시키고 용매를 증발 제거하였다. 잔류물을 염화메틸렌/메탄올(94/6) 용출물로 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 정제된 고체를 염화메틸렌 중에 용해하고 2.2 M 에테르성 염화수소를 첨가하였다. 침전된 생성물을 여과 수집하고, 에테르로 세척하고, 진공하에서 건조하여 4-(4-시아노-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(3-모르폴리노에톡시)퀴나졸린 염산염(125 ㎎, 39%)을 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆; CF₃COOD) 2.3-2.4(m, 2H); 3.15(t, 2H); 3.36(t, 2H); 3.54(d, 2H); 3.75(t, 2H); 4.02(d, 2H); 4.04(s, 3H); 4.34(t, 2H); 7.44(s, 1H); 7.8-7.9(m, 2H); 8.11(d, 1H); 8.25(s, 1H); 8.94(s, 1H)

원소분석 C₂₃H₂₄N₅O₃F 0.5H₂1.9HCl 0.07 에테르 0.15 염화메틸렌

실측치 C 52.7 H 5.4 N 12.9

이론치 C 52.7 H 5.3 N 13.1%

실시예 21

0℃로 냉각시킨 염화메틸렌(20 ㎖) 중의 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-7-히드록시-6-메톡시퀴나졸린(250 ㎎, 0.8 mmol)(실시예 4에서의 출발 물질에 대하여 기술한 바와 같이 제조함), 트리페닐포스핀(228 ㎎, 0.96 mmol) 및 3-메톡시-1-프로판올(71 ㎎, 0.8 mmol)의 혼합물에 디에틸 아조디카르복실레이트(123 ㎕, 0.88 mmol)을 적가하였다. 그후 그 혼합물을 상온으로 가온하고 18 시간 동안 교반하였다. 얻은 침전물을 여과 제거하고 여과액으로부터 용매를 증발 제거하였다. 잔류물을 염화메틸렌/메탄올/농축 수성 암모니아(100/8/1) 용출물로 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 정제된 오일을 에테르성 염화수소로 처리한 후 휘발성 물질을 증발 제거하였다. 잔류물을 에테르로 분쇄하고 고체를 여과 수집하여 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(3-메톡시프로폭시)퀴나졸린 염산염(100 ㎎, 32%)을 황색 고체로 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆) 2.10(m, 2H); 3.25(s, 3H); 3.5(t, 2H); 4.00(s, 3H); 4.25(t, 2H); 7.4(s, 1H); 7.45(dd, 1H); 7.60(m, 2H); 8.25(s, 1H); 8.8(s, 1H); 11.5(s, 1H)

MS-ESI:392[MH]⁺

원소분석 C₁₉H₁₉N₃O₃FCl 0.1H₂O 1HCl

실측치 C 52.7 H 4.4 N 10.1

이론치 C 53.1 H 4.7 N 9.8%

실시예 22

0℃로 냉각시킨 염화메틸렌(20 ㎖) 중의 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-7-히드록시-6-메톡시퀴나졸린(250 ㎎, 0.8 mmol)(실시예 4에서의 출발 물질에 대하여 기술한 바와 같이 제조함), 트리페닐포스핀(228 ㎎, 0.96 mmol) 및 2-에톡시에탄올(71 ㎕, 0.8 mmol)의 혼합물에 디에틸 아조디카르복실레이트(123 ㎕, 0.88 mmol)을 적가하였다. 그 후 그 혼합물을 상온으로 가온하고 18 시간 동안 교반하였다. 얻은 침전물을 여과 제거하고 여과액으로부터 용매를 증발 제거하였다. 잔류물을 염화메틸렌/메탄올(96/4) 용출물로 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 얻어진 정제된 오일을 아세톤 중에 용해하고 물(80 ㎕) 및 에테르성 염화수소의 순으로 처리하였다. 얻은 과립형 고체를 여과 수집하여 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(2-에톡시에톡시)퀴나졸린 염산염(96 ㎎, 31%)을 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆) 1.15(t, 3H); 3.50(q, 2H); 3.8(t, 2H); 4.00(s, 3H); 4.30(t, 2H); 7.35(s, 1H); 7.40(dd, 1H); 7.60(dd, 1H); 7.65(dd, 1H); 8.25(s, 1H); 8.8(s, 1H); 11.53(s, 1H)

MS-ESI: 392[MH]⁺

원소분석 C₁₉H₁₉N₃O₃FCl 1HCl

실측치 C 53.2 H 4.6 N 10.1

이론치 C 53.28 H 4.71 N 9.81%

실시예 23

THF(1 ㎖) 중의 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-7-(에톡시카르보닐메톡시)-6-메톡시퀴나졸린(150 ㎎, 0.3 mmol)의 용액에 수소화붕소 리튬(THF 중의 2 M 용액 150 ㎕, 0.15 mmol)을 첨가하고 그 혼합물을 1.5 시간 동안 교반하였다. 반응혼합물을 염화 암모니아 수용액으로 급냉시키고 에틸아세테이트로 추출하였다. 추출물들을 합하여 물로 세척하고, 건조(MgSO₄)시키고, 증발에 의해 농축시켰다. 헥산을 첨가하고, 혼합물을 냉각시키고 침전된 고체를 여과 수집하여 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-7-(2-히드록시에톡시)-6-메톡시퀴나졸린(30 ㎎, 23%)을 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼: (DMSOd₆) 3.82(t, 2H); 3.98(s, 3H); 4.18(t, 2H); 4.92(t, 1H); 7.20(dd, 1H); 7.54-7.63(m, 2H); 7.72(s, 1H); 7.92(s, 1H); 8.60(s, 1H)

MS-ESI: 364[MH]⁺

출발 물질은 다음과 같이 제조하였다.

NMP(60 ㎖) 중의 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-7-히드록시-6-메톡시퀴나졸린(3.0 g, 9 mmol)(실시예 4의 출발물질에 대해 기술된 바와 같이 제조함), 에틸브로모아세테이트(1.11 ㎖, 10 mmol) 및 탄산칼륨(2.84 g, 20.6 mmol)의 혼합물을 3 시간 동안 90 ℃로 가열하였다. 그 혼합물을 냉각시키고 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 추출물들을 합하여 물로 세척하고, 건조(MgSO₄)하고 증발에 의해 농축하였다. 헥산을 첨가하고, 그 혼합물을 냉각시키고, 침전된 고체를 여과 수집하여 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-7-(에톡시카르보닐메톡시)-6-메톡시퀴나졸린(1.75 g, 48%)을 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆) 1.20(t, 3H); 3.95(s, 3H); 4.18(q, 2H); 4.98(s, 2H); 7.08(s, 1H); 7.30(dd, 1H); 7.48-7.58(m, 2H); 7.82(s, 1H); 8.34(s, 1H); 9.57(s, 1H)

실시예 24

염화메틸렌(5 ㎖) 중의, 4-(4-브로모-2-플루오로아닐리노)-7-히드록시-6-메톡시퀴나졸린(146 ㎎, 0.4 mmol), 트리페닐포스핀(314 ㎎, 1.2 mmol) 및 1-(2-히드록시에틸)-4-메틸피페라진(86 ㎎, 0.6 mmol)(실시예 17에서의 출발 물질에 대하여 기술한 바와 같이 제조함)의 현탁액에 디에틸 아조디카르복실레이트(209 ㎎, 1.2 mmol)을 적가하였다. 그후 그 혼합물을 상온으로 1 시간 동안 가온하고 염화메틸렌/메탄올(90/10에 이어서 80/20) 용출물로 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 정제된 생성물을 에테르로 분쇄하고 여과 수집하고 진공하에서 건조하였다. 고체를 염화메틸렌 중에 용해하고 3 M 에테르성 염화수소(0.5 ㎖)를 첨가하였다. 휘발성 물질을 증발제거하여 얻은 오일을 에테르로 분쇄하였다. 고체를 여과 수집하고 에테르로 세척하고 진공하에서 건조하여 4-(4-브로모-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시)퀴나졸린 염산염(100 ㎎, 41%)을 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼: (DMSOd₆; CF₃COOD; 60℃) 2.89(s, 3H); 3.55-3.7(m, 8H); 3.74(t, 2H); 4.04(s, 3H); 4.68(t, 2H); 7.49(s, 1H); 7.55(m, 1H); 7.56(s, 1H); 7.75(d, 1H); 8.29(s, 1H); 8.84(s, 1H)

MS-EI : 490[M]⁺

원소분석 C₂₂H₂₅N₅O₂BrF 1H₂O 2.7HCl 0.2 에테르

실측치 C 43.9 H 5.1 N 11.0

이론치 C 44.0 H 5.1 N 11.3%

출발 물질을 다음과 같이 제조하였다.

이소프로판올(200 ㎖) 중의 7-벤질옥시-4-클로로-6-메톡시퀴나졸린 염산염(8.35 g, 24.8 mmol)(실시예 4의 출발물질에 대해 기술된 바와 같이 제조함) 및 4-브로모-2-플루오로아닐린(5.65 g, 29.7 mmol)의 용액을 환류로 4 시간 동안 가열하였다. 침전된 고체를 여과 수집하고 이소프로판올 및 에테르의 순으로 세척한 후 진공하에서 건조하여 7-벤질옥시-4-(4-브로모-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시퀴나졸린 염산염(9.46 g, 78%)을 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼:(DMSOd₆; CD₃COOD) 4.0(s, 3H); 5.37(s, 2H); 7.35-7.5(m, 4H); 7.52-7.62(m, 4H); 7.8(d, 1H); 8.14(9s, 1H); 8.79(s, 1H)

MS-ESI: 456[MH]⁺

원소분석 C₂₂H₁₇O₂N₃BrF 0.9HCl

실측치 C 54.0 H 3.7 N 8.7

이론치 C 54.2 H 3.7 N 8.6%

TFA(90 ㎖) 중의 7-벤질옥시-4-(4-브로모-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시퀴나졸린 염산염(9.4 g, 19.1 mmol)의 용액을 50 분간 환류로 가열하였다. 그 혼합물을 냉각시키고 얼음에 부었다. 얻은 침전물을 여과 수집하고, 메탄올(70 ㎖) 중에 용해하였다. 용액의 pH를 암모니아 농축 수용액으로 9 내지 10으로 조절하였다. 혼합물을 증발시켜 처음 부피의 반으로 농축하였다. 얻은 침전물을 여과 수집하고, 물 및 에테르의 순으로 세척하고 진공하에서 건조시켜 4-(4-브로모-2-플루오로아닐리노)-7-히드록시-6-메톡시퀴나졸린(5.66 g, 82%)을 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼:(DMSOd₆; CD₃COOD) 3.95(s, 3H); 7.09(s, 1H); 7.48(s, 1H); 7.54(t, 1H); 7.64(d, 1H); 7.79(s, 1H); 8.31(s, 1H)

MS-ESI: 336[MH]⁺

원소분석 C₁₅H₁₁O₂N₃BrF

실측치 C 49.5 H 3.1 N 11.3

이론치 C 49.5 H 3.0 N 11.5%

실시예 25

염화메틸렌(5 ㎖) 중의, 4-(4-브로모-2-플루오로아닐리노)-7-히드록시-6-메톡시퀴나졸린(146 ㎎, 0.4 mmol)(실시예 24에서의 출발 물질에 대하여 기술한 바와 같이 제조함), 트리페닐포스핀(314 ㎎, 1.2 mmol) 및 4-(2-히드록시에틸)모르폴린(79 ㎎, 0.6 mmol)의 현탁액에 디에틸 아조디카르복실레이트(209 ㎎, 1.2 mmol)을 적가하였다. 그후 그 혼합물을 상온에서 1 시간 동안 교반하고 염화메틸렌/메탄올(95/5에 이어서 90/10) 용출물로 컬럼 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고체를 얻었다. 고체를 염화메틸렌/메탄올 중에 용해하고, 2 M 에테르성 염화수소(0.5 ㎖)를 첨가하였다. 그 혼합물을 증발에 의해 농축시키고 얻은 침전물을 여과 수집하고 에테르로 세척하고 진공하에서 건조하여 4-(4-브로모-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(2-모르폴리노에톡시)퀴나졸린 염산염(155 ㎎, 70%)을 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆; CF₃COOD) 3.3(t, 2H); 3.6(d, 2H); 3.75(m, 2H); 3.8(m, 2H); 4.0(m, 2H); 4.03(s, 3H); 4.7(t, 2H); 7.5(s, 1H); 7.55-7.65(m, 2H); 7.8(d, 1H); 8.26(s, 1H); 8.9(s, 1H)

MS-ESI:477[M]⁺

원소분석 C₂₁H₂₂N₄O₃BrF 0.4H₂O 2.0HCl

실측치 C 45.3 H 4.5 N 9.8

계산치 C 45.2 H 4.5 N 10.0%

실시예 26

모르폴린(70 ㎖) 중의 7-(4-클로로부톡시)-4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시퀴나졸린(3.64 g, 8.87 mmol)의 용액을 2 시간 동안 110℃에서 가열하였다. 그 혼합물을 냉각시키고 에틸아세테이트와 물 사이에 분배시켰다. 유기층을 분리하고 염수로 세척하고 건조(MgSO₄)시키고 휘발성 물질을 증발 제거하였다. 잔류물을 염화메틸렌/메탄올(92/8) 용출물로 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 정제된 고체 생성물을 염화메틸렌 중에 용해하고 3 M 에테르성 염화수소를 첨가하였다. 휘발성 물질을 증발 제거하고, 잔류물을 에테르로 분쇄하였다. 고체를 여과 수집하고 에테르로 세척하고 60℃의 진공하에서 건조시켜 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(4-모프롤리노부톡시)퀴나졸린 염산염(3.8 g, 78%)을 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆; CF₃COOD) 1.85-2.0(m, 4H); 3.09(t, 2H); 3.2-3.3(t, 2H); 3.46(d, 2H); 3.74(t, 2H); 4.0(d, 2H); 4.03(s, 3H)l 4.27(s, 2H); 7.42(s, 1H); 7.46(d, 1H); 7.63(t, 1H); 7.68(d, 1H); 8.21(s, 1H); 8.88(s, 1H)

MS-ESI: 461[MH]⁺

원소분석 C₂₃H₂₆N₄O₃ClF 1.95HCl 0.6H₂O 0.08에테르

실측치 C 50.8 H 5.3 N 10.0

이론치 C 51.0 H 5.5 N 10.2%

출발 물질은 다음과 같이 제조하였다.

DMF(75 ㎖) 중의 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-7-히드록시-6-메톡시퀴나졸린(3 6 g, 11.3 mmol)(실시예 4에서의 출발 물질에 대하여 기술한 바와 같이 제조함), 1-브로모-4-클로로부탄(1.95 ㎖, 16.9 mmol) 및 탄산칼륨(4.66 g, 33.8 mmol)의 혼합물을 40℃에서 4 시간 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각시키고 염화메틸렌과 물 사이에 분배하였다. 수성층을 2 M 염화수소로 pH를 7로 조절하였다. 유기층을 분리하고 염수로 세척하고 건조(MgSO₄)시키고 휘발성 물질을 증발 제거하였다. 잔류물을 염화메틸렌/에틸 아세테이트(1/1) 용출물로 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 정제된 고체 생성물을 펜탄으로 분쇄하고 여과 수집하고 진공하에서 건조하여 7-(4-클로로부톡시)-4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시퀴나졸린(3.64 g, 79%)을 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆; CF₃COOD) 1.9-2.1(m, 4H); 3.76(t, 2H); 4.01(s, 3H); 4.28(t, 2H); 7.33(s, 1H); 7.46(d, 1H); 7.63(t, 1H); 7.70(d, 1H); 8.08(s, 1H); 8.88(s, 1H)

실시예 27

1-메틸피페라진(2 ㎖) 중의 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-7-(3-클로로프로폭시)-6-메톡시퀴나졸린(150 ㎎, 0.38 mmol)의 현탁액을 3 시간 동안 100℃로 가열하였다. 그 혼합물을 냉각시키고 탄산나트륨 수용액(pH 11.5)과 에틸 아세테이트 사이에 분배시켰다. 유기층을 분리하고 염수고 세척하고 건조(MgSO₄)시키고 증발에 의해 휘발성 물질을 제거하였다. 잔류물을 염화메틸렌 중에 용해하고 에테르를 첨가하였다. 얻은 침전물을 여과 수집하고 이소프로판올 및 에테르로 세척하고 건조하였다. 고체를 염화메틸렌 중에 용해하고 2.2 M 에테르성 염화수소(1 ㎖)를 첨가하였다. 처음의 부피를 반으로 농축시키고, 얻은 침전물을 여과 수집하고 에테르로 세척하고 진공하에서 건조하여 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(3-(4-메틸피페라진-1-일)프로폭시)퀴나졸린 염산염(158 ㎎, 75%)을 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆; CF₃COOD; 60℃) 2.35(m, 2H); 2.95(s, 3H); 3.43(t, 2H); 3.52-3.7(m, 8H); 4.03(s, 3H); 4.34(t, 2H); 7.41(s, 1H); 7.45(d, 1H); 7.6-7.7(m, 2H); 8.11(s, 1H); 8.8(s, 1H)

MS-EI: 460[MH]⁺

원소분석 C₂₃H₂₇N₅O₂FCl 0.7H₂O 2.75HCl

실측치 C 48.6 H 5.6 N 11.9

이론치 C 48.2 H 5.5 N 12.1%

출발 물질은 다음과 같이 제조하였다.

DMF(20 ㎖) 중의 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-7-히드록시-6-메톡시퀴나졸린(957 ㎎, 3 mmol)(실시예 4에서의 출발 물질에 대하여 기술한 바와 같이 제조함), 1-브로모-3-클로로프로판(2.36 g, 15 mmol) 및 탄산칼륨(2.1 g, 15 mmol)의 혼합물을 40℃에서 1.5 시간 동안 가열하였다. 그 혼합물을 냉각시키고 물로 희석하고 에틸아세테이트로 추출하였다(3 × 50 ㎖). 유기 추출물들을 합하고, 물 및 염수로 세척하고 건조(MgSO₄)시키고 증발에 의해 휘발성 물질을 제거하였다. 잔류물을 헥산/에틸아세테이트로 분쇄하고 여과 수집하고 진공하에서 건조하여 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-7-(3-클로로프로폭시)-6-메톡시퀴나졸린(650 ㎎, 55%)을 얻었다.

¹H NMR 스펙트럼 : (DMSOd₆) 2.26(m, 2H); 3.82(t, 2H); 3.95(s, 3H); 4.26(t, 2H); 7.20(s, 1H); 7.32(dd, 1H); 7.48-7.60(m, 2H); 7.80(s, 1H); 8.35(s, 1H); 9.52(s, 1H)

MS-EI: 396[MH]⁺

실시예 28

이하에서는 화학식 I의 화합물 또는 그것의 약학적 허용염(이하에서는 화합물 X로 언급함)을 포함하는 대표적인 치료용 또는 예방용 약학적 투여 형태를 예시한다.

(a) 정제 I	㎎/정제
화합물 X	100
락토오스 Ph. Eur	182.75
크로스카멜로오스 나트륨	12.0
옥수수 전분 페이스트(5% w/v 페이스트)	2.25
마그네슘 스테아레이트	3.0

(b) 정제 II	㎎/정제
화합물 X	50
락토오스 Ph. Eur	223.75
크로스카멜로오스 나트륨	6.0
옥수수 전분	15.0
폴리비닐 피롤리돈(5% w/v 페이스트)	2.25
마그네슘 스테아레이트	3.0

(c) 정제 III	㎎/정제
화합물 X	1.0
락토오스 Ph. Eur	93.25
크로스카멜로오스 나트륨	4.0
옥수수 전분 페이스트(5% w/v 페이스트)	0.75
마그네슘 스테아레이트	1.0

(d) 캡슐	㎎/캡슐
화합물 X	10
락토오스 Ph. Eur	488.5
마그네슘 스테아레이트	1.5

(e) 주사액 I	50 ㎎/㎖
화합물 X	5.0% w/v
1 N 수산화나트륨 용액	15.0% w/v
0.1 N 염산(pH를 7.6으로 조절하는 데 사용함)
폴리에틸렌 글리콜 400	4.5% w/v
주사용 물	총 100%가 되는 잔량

(f) 주사액 II	10 ㎎/㎖
화합물 X	1.0% w/v
나트륨 포스페이트 BP	3.6% w/v
0.1 N 수산화 나트륨 용액	15.0% w/v
주사용 물	총 100%가 되는 잔량

(g) 주사액 III	1 ㎎/㎖, pH 6으로 완충함
화합물 X	0.1% w/v
나트륨 포스페이트 BP	2.26% w/v
시트르산	0.38% w/v
폴리에틸렌 글리콜 400	3.5% w/v
주사용 물	총 100%가 되는 잔량

주

이상의 제제는 약학 분야에 알려져 있는 통상의 방법으로 제조할 수 있다. 정제 (a) 내지 (c)는 종래의 방법에 의해 장용피복할 수 있다. 예를 들면 셀룰로오스 아세테이트 프탈레이트 장용피를 제조할 수 있다.

Claims

하기 화학식 I의 퀴나졸린 유도체 및 그것의 염:

화학식 I

상기 식 중,

R¹은 수소 또는 메톡시이고,

R²은 메톡시, 에톡시, 2-메톡시에톡시, 3-메톡시프로폭시, 2-에톡시에톡시, 트리플루오로메톡시, 2,2,2-트리플루오로에톡시, 2-히드록시에톡시, 3-히드록시프로폭시, 2-(N,N-디메틸아미노)에톡시, 3-(N,N-디메틸아미노)프로폭시, 2-모르폴리노에톡시, 3-모르폴리노프로폭시, 4-모르폴리노부톡시, 2-피페리디노에톡시, 3-피페리디노프로폭시, 4-피페리디노부톡시, 2-(피페라진-1-일)에톡시, 3-(피페라진-1-일)프로폭시, 4-(피페라진-1-일)부톡시, 2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시, 3-(4-메틸피페라진-1-일)프로폭시 또는 4-(4-메틸피페라진-1-일)부톡시이고,

(R³)₂를 포함하는 페닐기는 2-플루오로-5-히드록시페닐, 4-브로모-2-플루오로페닐, 2,4-디플루오로페닐, 4-클로로-2-플루오로페닐, 2-플루오로-4-메틸페닐, 2-플루오로-4-메톡시페닐, 4-브로모-3-히드록시페닐, 4-플루오로-3-히드록시페닐, 4-클로로-3-히드록시페닐, 3-히드록시-4-메틸페닐, 3-히드록시-4-메톡시페닐 및 4-시아노-2-플루오로페닐 중에서 선택된다.
제1항에 있어서, R¹은 메톡시인 퀴나졸린 유도체.
제1항 또는 제2항에 있어서, (R³)₂를 함유하는 페닐기는 4-클로로-2-플루오로페닐 또는 4-브로모-2-플루오로페닐인 퀴나졸린 유도체.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, R²은 메톡시, 에톡시, 2-메톡시에톡시, 3-메톡시프로폭시, 트리플루오로메톡시, 2,2,2-트리플루오로에톡시, 2-히드록시에톡시, 3-히드록시프로폭시, 2-(N,N-디메틸아미노)에톡시, 3-(N,N-디메틸아미노)프로폭시, 2-모르폴리노에톡시, 3-모르폴리노프로폭시, 2-피페리디노에톡시, 3-피페리디노프로폭시, 2-(피페라진-1-일)에톡시, 3-(피페라진-1-일)프로폭시, 2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시 또는 3-(4-메틸피페라진-1-일)프로폭시인 퀴나졸린 유도체.
제4항에 있어서, R²은 2-메톡시에톡시, 2-모르폴리노에톡시, 3-모르폴리노프로폭시 또는 2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시인 퀴나졸린 유도체.
제5항에 있어서, R²은 2-메톡시에톡시 또는 3-모르폴리노프로폭시인 퀴나졸린 유도체.
제1항에 있어서, 4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(2-메톡시에톡시)퀴나졸린,

4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(2-모르폴리노에톡시)퀴나졸린,

4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(3-모르폴리노프로폭시)퀴나졸린,

4-(4-클로로-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시)퀴나졸린,

4-(4-브로모-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(3-모르폴리노프로폭시)퀴나졸린 중에서 선택되는 퀴나졸린 유도체 및 그것의 염.
제1항에 있어서, 4-(4-브로모-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(2-메톡시에톡시)퀴나졸린,

4-(4-브로모-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시)퀴나졸린,

4-(4-브로모-2-플루오로아닐리노)-6-메톡시-7-(2-모르폴리노에톡시)퀴나졸린 중에서 선택되는 퀴나졸린 유도체 및 그것의 염.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 약학적으로 허용가능한 염 형태인 퀴나졸린 유도체.
(a) 하기 화학식 III의 화합물을 하기 화학식 IV의 화합물과 반응시켜서 제1항에 정의된 화학식 I의 화합물 및 그것의 염을 제조하는 방법,

(b) 하기 화학식 V의 화합물을 탈보호시켜서 하기 화학식 II의 기가 하나의 히드록시기를 함유하는 페닐기를 나타내는 것인 화학식 I의 화합물 및 그것의 염을 제조하는 방법,

(c) 하기 화학식 VI의 화합물을 하기 화학식 VII의 화합물과 반응시키는 방법,

(d) 하기 화학식 VIII의 화합물을 하기 화학식 IX의 화합물과 반응시키는 방법,

(e) 하기 화학식 X의 화합물을 하기 화학식 XI의 화합물과 반응시켜서 R²가 R⁵C_1-4알콕시(식 중, R⁵은 메톡시, 에톡시, 히드록시, N,N-디메틸아미노, 모르폴리노, 피페리디노, 피페라진-1-일 또는 4-메틸피페라진-1-일 중에서 선택됨)인 화학식 I의 화합물 및 그것의 염을 제조하는 방법, 이어서

화학식 I의 퀴나졸린 유도체의 염이 요구되는 경우, 상기 방법(a) 내지 (e)에 의해 제조된 화합물을 산 또는 염기와 반응시켜서 소정의 염을 제조하는 것이 특징인, 제1항에 정의된 화학식 1의 퀴나졸린 유도체 또는 그것의 염을 제조하는 방법.

화학식 III

(상기 식 중, R¹및 R²는 제1항에 정의된 바와 같으며, L¹은 치환가능한 기임)

화학식 IV

(상기 식 중, R³은 제1항에 정의된 바와 같음)

화학식 II

(상기 식 중, R³은 제1항에 정의된 바와 같음)

화학식 V

(상기 식 중, R¹, R²및 R³은 제1항에 정의된 바와 같으며, P는 페놀성 히드록시 보호기를 나타냄)

화학식 VI

(상기 식 중, R¹및 R³은 제1항에 정의된 바와 같음)

화학식 VII

R⁴-L¹

(상기 식 중, L¹은 앞에서 정의한 바와 같으며 R⁴는 메틸, 에틸, 2-메톡시에틸, 3-메톡시프로필, 2-에톡시에틸, 트리플루오로메틸, 2,2,2-트리플루오로에틸, 2-히드록시에틸, 3-히드록시프로필, 2-(N,N-디메틸아미노)에틸, 3-(N,N-디메틸아미노)프로필, 2-모르폴리노에틸, 3-모르폴리노프로필, 4-모르폴리노부틸, 2-피페리디노에틸, 3-피페리디노프로필, 4-피페리디노부틸, 2-(피페라진-1-일)에틸, 3-(피페라진-1-일)프로필, 4-(피페라진-1-일)부틸, 2-(4-메틸피페라진-1-일)에틸, 3-(4-메틸피페라진-1-일)프로필 또는 4-(4-메틸피페라진-1-일)부틸임)

화학식 VIII

(상기 식 중, R¹및 R³는 제1항에 정의된 바와 같으며, L¹은 앞에서 정의한 바와 같음)

화학식 IX

R²-H

(상기 식 중, R²은 제1항에 정의된 바와 같음)

화학식 X

(상기 식 중, L¹은 앞에서 정의한 바와 같으며, R¹및 R³은 제1항에 정의한 바와 같으며, R⁶은 C_1-4알콕시임)

화학식 XI

R⁵-H

(상기 식 중, R⁵는 앞에서 정의한 바와 같음)
약학적으로 허용가능한 부형제 또는 약학적으로 허용가능한 담체와 함께 활성 성분으로서 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 정의된 화학식 1의 퀴나졸린 유도체 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 약학 조성물.
제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 정의된 화학식 1의 화합물 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염 유효량을 혈관 형성 작용 억제 및/또는 혈관 투과능 감소 치료를 요하는 온혈 동물에 투여하여 혈관 형성 작용 억제 및/또는 혈관 투과성 감소 치료를 실시하는 방법.
제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 약제로서 유용한 퀴나졸린 유도체.