KR20210038906A

KR20210038906A - 비정상적 acvr1 발현과 연관된 질환을 치료하는 방법 및 그에 사용하기 위한 acvr1 억제제

Info

Publication number: KR20210038906A
Application number: KR1020217005329A
Authority: KR
Inventors: 스티븐 엘. 워너; 데이비드 제이. 베어스; 아담 시디퀴-제인; 클리포드 제이. 왓콧; 제이슨 마크 폴크스; 스테판 패트릭 안토니; 파울 플린; 유지 후지와라; 유카 아리카와
Original assignee: 스미토모 다이니폰 파마 온콜로지, 인크.
Priority date: 2018-07-26
Filing date: 2019-07-26
Publication date: 2021-04-08
Also published as: EP3826684A4; AU2019310590A1; CN112512597A; US11040038B2; US20200085823A1; CA3103995A1; WO2020023910A9; MX2021000977A; JP2021530554A; EP3826684A1; WO2020023910A1

Abstract

하기 화학식 (I)을 갖는 ACVR1 억제제의 입체이성질체, 호변이성질체, 제약상 허용되는 염 및 전구약물을 포함한 화학식 (I)을 갖는 ACVR1 억제제를 투여함으로써 질환의 치료를 필요로 하는 대상체에서 질환을 치료하는 방법이 개시되며, 여기서 R¹, R², R³, 및 R⁴는 본원에 정의된 바와 같다. 치료로부터 이익을 얻을 수 있는 대상체는 그의 ACVR1 유전자에서 돌연변이를 가질 수 있다. 암 (예를 들어, 미만성 내인성 뇌교 신경교종 (DIPG)) 및 유전 장애 (예를 들어, 진행성 골화성 섬유이형성증 (FOP))를 비롯한 다양한 질환이 기재된 방법을 사용하여 치료될 수 있다.

Description

비정상적 ACVR1 발현과 연관된 질환을 치료하는 방법 및 그에 사용하기 위한 ACVR1 억제제

상호 참조

본 출원은 2018년 7월 26일에 출원된 미국 가출원 일련 번호 62/703,862의 이익을 주장하며, 이는 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.

발명의 분야

본 개시내용은 ACVR1 억제제로서 활성을 갖는 화합물을 투여하는 것을 포함하는 치료 용도 및 치료 방법을 제공한다. 본 개시내용은 또한 ACVR1 억제제로서 활성을 갖는 화합물을 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 또한, 본 개시내용은 ACVR1 억제제로서 활성을 갖는 화합물의 신규 형태를 제공한다.

골 형태발생 단백질 (BMP)은 신체 내 다양한 기관 전반에 걸쳐 조직 아키텍처를 조정하는데 본질적인 역할을 하는 다면발현성 성장 인자이다. BMP 리간드는 세린/트레오닌 키나제 수용체의 형질전환 성장 인자 베타 (TGF-b) 슈퍼패밀리에 속하는 골 형태발생 단백질 수용체 (BMPR)와 상호작용하며 (Ikushima, H. and K. Miyazono, Biology of Transforming Growth Factor-beta Signalin. Curr Pharm Biotechnol, 2011), 이는 이러한 배경기술의 교시와 관련하여 본원에 참조로 포함된다. 리간드는 유형-II 수용체에 결합하고, 이는 이어서 유형-I 수용체를 동원하여 이형체 복합체를 형성한다. 복합체로서, 유형-II 수용체는 유형-I 수용체를 인산화하며, 이는 유형-I 수용체가 활성이게 하고 하류 신호전달 분자를 인산화하도록 한다. 이들 수용체를 활성화시키는 하류 효과는 주로 SMAD 단백질 패밀리에 의해 수행된다. SMAD는 인산화되어 세포막으로부터 핵으로 신호를 전달하고, 여기서 이들은 유전자 발현을 조절하기 위한 전사 인자로서 기능하며 (Massague, J., J. Seoane, and D. Wotton, Smad transcription factors. Genes Dev, 2005. 19(23): p. 2783-810), 이는 이러한 배경기술의 교시와 관련하여 본원에 참조로 포함된다.

만성 질환, 예컨대 암 및 염증을 갖는 개체에서, BMP 신호전달은 구성적으로 활성화되어 빈혈로 이어진다. 이러한 상태는 통상적으로 만성 질환에 의한 빈혈 (ACD)로 지칭되고, 암 환자와 연관된 쇠약 증상이며 (Cullis, J.O., Diagnosis and management of anaemia of chronic disease: current status. Br J Haematol, 2011. 154(3): p. 289-300), 이는 이러한 배경기술의 교시와 관련하여 본원에 참조로 포함된다. 암 환자에서의 만성 빈혈은 극도의 약화 및 피로로 이어지며, 이는 이들 개체에서 불량한 삶의 질로 이어진다. 이들 환자에서, 2가지 BMP 유형-I 수용체, ALK2 (언급된 바와 같음, 또한 ACVR1로도 공지됨) 및 ALK3을 통한 BMP 신호전달은 헵시딘으로 불리는 펩티드 호르몬의 간 발현을 유도하며 (Steinbicker, A.U., et al., Perturbation of hepcidin expression by BMP type I receptor deletion induces iron overload in mice. Blood, 2011. 118(15): p. 4224-30), 이는 이러한 배경기술의 교시와 관련하여 본원에 참조로 포함된다.

헵시딘은 철 엑스포터인 페로포르틴의 분해를 촉진함으로써 혈청 철 수준을 감소시키고, 이는 대식세포 및 다른 세포 유형에 저장되는 철의 증가를 야기하고, 헤모글로빈 및 적혈구 (RBC) 기능에 철을 이용불가능하게 만든다. 환자가 철 섭취를 보충하는 것은 ACD를 역전시키지 않는데, 이는 섭취된 철이 활성화된 BMP 경로 및 높은 혈청 헵시딘 수준으로 인해 단순히 저장되기 때문이다. 현재, 암에서 ACD는 환자의 신체 활동을 제한하는 것에 의해 관리되고, 수혈은 가장 중증인 사례에서 사용된다. 이들 환자에서 BMP 신호전달의 억제는 그의 삶의 질에서 진정한 차이를 제공할 잠재력을 갖고, 궁극적으로는 이들이 요법, 방사선, 또는 수술에 반응하는 방식에 긍정적으로 영향을 미칠 수 있으며 (Steinbicker, A.U., et al., Inhibition of bone morphogenetic protein signaling attenuates anemia associated with inflammation. Blood, 2011. 117(18): p. 4915-23; Coyne, D.W., Hepcidin: clinical utility as a diagnostic tool and therapeutic target. Kidney Int, 2011. 80(3): p. 240-4; Theurl, I., et al., Pharmacologic inhibition of hepcidin expression reverses anemia of chronic disease in rats. Blood, 2011), 이들 각각은 이러한 배경기술의 교시와 관련하여 본원에 참조로 포함된다.

ACD에서의 그의 기능에 더하여, BMP 신호전달은, 특히 유방암, 전립선암, 및 골로 빈번하게 전이되는 다른 암에서 암 세포의 성장 및 전이에서 중추적 역할을 한다 (Ye, L., M.D. Mason, and W.G. Jiang, Bone morphogenetic protein and bone metastasis, implication and therapeutic potential. Front Biosci, 2011. 16: p. 865-97). BMP 및 BMPR은 보다 덜 전이성인 것 및 또한 골경화성 골 전이를 생성하는 전립선암 세포와 비교하여 전이성 유방암 세포에서 보다 고도로 발현된다 (Bobinac, D., et al., Expression of bone morphogenetic proteins in human metastatic prostate and breast cancer. Croat Med J, 2005. 46(3): p. 389-96). 암 세포의 침습 및 전이에 영향을 미치는 것에 더하여, BMP 경로는 또한 골 미세환경에 영향을 미치는 것으로 밝혀졌다. 연구는 BMP 신호전달의 억제가 전립선암 골 전이의 전임상 모델에서 골 종양 부담 및 골용해성 질환을 유의하게 감소시킨다는 것을 밝혀내었다. 이들 결과는 BMP 억제제가 골 전이를 예방하는데 적용될 수 있음을 시사한다.

또한, BMP 억제제는 암 외의 다중 질환 적응증을 치료할 잠재력을 갖는다. ACD는 류마티스 관절염, 전신 루푸스, 만성 신장 질환, 및 많은 다른 염증성 질환을 포함한 다른 질환을 앓는 개체에 영향을 미치는 파괴적인 상태이다. 추가적으로, 진행성 골화성 섬유이형성증 (FOP)으로 불리는 희귀 소아기 유전 질환은 alk2 유전자에서의 활성화 돌연변이에 의해 유발되는 것으로 밝혀졌다 (Kaplan, F.S., et al., Investigations of activated ACVR1/ALK2, a bone morphogenetic protein type I receptor, that causes fibrodysplasia ossificans progressiva. Methods Enzymol, 2010. 484: p. 357-73). 이러한 질환에서 ALK2에서의 돌연변이는 섬유성 조직 (근육, 건, 인대 등)이 손상되었을 때 골화를 유발한다. FOP의 동물 모델에서 수행된 연구는 ALK2의 억제가 FOP와 연관된 "플레어-업"을 감소시키고 모델에서 복구된 조직의 골화를 예방한다는 것을 시사한다.

한 실시양태에서, 본 개시내용은 치료 유효량의 화학식 (2)의 화합물:

또는 그의 결정질 염을 투여하는 것을 포함하는, 미만성 내인성 뇌교 신경교종 (DIPG)의 치료를 필요로 하는 대상체에서 DIPG를 치료하는 방법을 제공한다.

한 측면에서, 결정질 염은 산 부가염이다. 한 측면에서, 산 부가염은 염산 염이다. 한 측면에서, 염산 염은 1가이다. 한 측면에서, 결정질 염 형태는 무수이다. 한 측면에서, 대상체는 소아 환자이다. 한 측면에서, 대상체는 약 1주 내지 약 22세이다. 한 측면에서, 대상체는 약 18세 이하이다. 한 측면에서, 대상체는 약 10세 이하이다. 한 측면에서, 대상체는 약 8세 이하이다. 한 측면에서, 대상체는 약 6세 이하이다. 한 측면에서, DIPG는 새롭게 진단된 것이거나 또는 재발성이다. 한 측면에서, DIPG는 침윤성 신경교종, 등급 II 내지 IV의 조직학적 진단을 갖는 뇌교 종양을 특징으로 한다. 한 측면에서, 방법은 방사선 요법을 투여하는 것을 추가로 포함한다. 한 측면에서, 방사선의 투여는 화합물 또는 그의 결정질 염의 투여 전에 이루어진다. 한 측면에서, 방사선의 투여는 화합물 또는 그의 결정질 염의 투여 후에 이루어진다. 한 측면에서, 방사선의 투여는 화합물 또는 그의 결정질 염의 투여 전 및 후 둘 다에 이루어진다. 한 측면에서, 방법은 1종 이상의 추가의 치료제를 투여하는 것을 추가로 포함한다. 한 측면에서, 방사선은 성분 작용제로서 투여될 수 있다. 한 측면에서, 화합물 또는 그의 결정질 염의 투여는 DIPG와 연관된 1종 이상의 징후 또는 증상을 감소 또는 완화시킨다. 한 측면에서, 1종 이상의 징후 또는 증상은 언어 또는 언어 패턴의 변형, 대상체의 얼굴 또는 신체의 한 측면을 이동시키는 능력의 상실, 균형 상실, 조정력 상실, 보행 또는 움직임의 어려움, 시력 문제, 청력 문제, 두통, 오심, 구토, 비통상적 졸림증, 에너지 수준의 변형, 행동 변화, 및 학교 생활에서의 변화로 이루어진 군으로부터 선택된다. 한 측면에서, 화합물 또는 그의 결정질 염의 투여는 무진행 생존을 달성한다. 한 측면에서, 무진행 생존은 1개월 이상, 2개월 이상, 3개월 이상, 4개월 이상, 5개월 이상, 6개월 이상, 7개월 이상, 8개월 이상, 9개월 이상, 10개월 이상, 11개월 이상, 1년 이상, 2년 이상, 3년 이상, 또는 5년 이상이다. 한 측면에서, 방법은 종양 성장의 용적축소 또는 뇌척수액 전환 중 1종 이상을 추가로 포함한다. 한 측면에서, 대상체는 ACVR1 유전자에서 1개 이상의 돌연변이를 포함하는 미리 결정된 유전자 프로파일을 갖는다. 한 측면에서, ACVR1 유전자에서의 1개 이상의 돌연변이는 활성화 돌연변이이다. 한 측면에서, ACVR1 유전자에서의 1개 이상의 돌연변이는 R206H, G328V, R258G, 또는 그의 조합으로부터 선택된 1개 이상의 아미노산 잔기에서의 아미노산 치환을 포함하는 ACVR1 폴리펩티드를 코딩한다. 한 측면에서, ACVR1 폴리펩티드에서의 아미노산 치환은 R206H를 포함한다. 한 측면에서, 화합물 또는 그의 결정질 염은 경구로 투여된다. 한 측면에서, 화합물 또는 그의 결정질 염은 1주에 약 10 mg 내지 약 320 mg의 범위의 용량으로 투여된다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 30 mg 내지 약 240 mg의 범위이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 60 mg 내지 약 180 mg의 범위이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 30 mg 내지 약 120 mg의 범위이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 60 mg 내지 약 120 mg의 범위이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 60 mg이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 90 mg이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 120 mg이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 180 mg이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 210 mg이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 240 mg이다. 한 측면에서, 화합물 또는 그의 결정질 염은 약 320 mg 이하, 약 240 mg 이하, 약 210 이하, 약 180 이하, 약 120 이하, 약 90 이하, 약 60 이하, 또는 약 30 이하의 매주 용량으로 투여된다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 60 mg 이하이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 90 mg 이하이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 120 mg 이하이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 180 mg 이하이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 210 mg 이하이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 240 mg 이하이다. 한 측면에서, 용량은 1주 1회 투여된다. 한 측면에서, 용량은 1주 과정에 걸쳐 2회 이상의 하위-용량, 3회 이상의 하위-용량, 4회 이상의 하위-용량, 5회 이상의 하위-용량, 6회 이상의 하위-용량, 또는 매일의 하위-용량으로 투여된다. 한 측면에서, 대상체는 소아 환자이고, 용량은 용량 범위의 약 80% 내지 100%이다. 한 측면에서, 용량은 용량 범위의 80%, 85%, 90%, 또는 95%로 조정된다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 8 mg 내지 약 320 mg의 범위이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 24 mg 내지 약 240 mg의 범위이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 24 mg 내지 약 120 mg의 범위이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 48 mg 내지 약 120 mg의 범위이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 72 mg 내지 약 120 mg의 범위이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 96 mg 내지 약 120 mg의 범위이다. 한 측면에서, 대상체는 적어도 약 0.1 ng/mL의 미리 결정된 헵시딘 수준을 갖는다. 한 측면에서, 미리 결정된 헵시딘 수준은 약 10 ng/mL 내지 약 200 ng/mL의 범위이다. 한 측면에서, 방법은 화합물 또는 그의 결정질 염이 투여된 후 대상체에서 헵시딘 수준을 결정하는 것을 추가로 포함한다. 한 측면에서, 방법은 화합물 또는 그의 결정질 염이 투여된 후 대상체에서 트랜스페린 포화 수준을 결정하는 것을 추가로 포함한다. 한 측면에서, 트랜스페린 포화 수준은 약 50% 미만이다. 한 측면에서, 트랜스페린 포화 수준은 약 45% 미만이다. 한 측면에서, 트랜스페린 포화 수준은 약 40% 미만이다. 한 측면에서, 화합물 또는 그의 결정질 염은 1회 이상의 치료 사이클에 걸쳐 투여되며, 여기서 각각의 사이클은 4주를 포함한다. 한 측면에서, 방법은 치료 사이클 사이에 1회 이상의 치료 휴지기를 추가로 포함한다. 한 측면에서, 치료 휴지기는 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 6일, 1주, 2주, 3주, 또는 4주로부터 선택된다.

한 실시양태에서, 본 개시내용은 ACVR1의 억제에 감수성인 질환 또는 장애의 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 화학식 (2)의 화합물:

또는 그의 결정질 염을 투여하는 것을 포함하는, ACVR1의 억제에 감수성인 질환 또는 장애를 치료하는 방법을 제공하며, 여기서 화합물은 1주에 약 10 mg 내지 약 320 mg의 범위의 용량으로 투여된다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 30 mg 내지 약 240 mg의 범위이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 60 mg 내지 약 180 mg의 범위이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 30 mg 내지 약 120 mg의 범위이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 60 mg 내지 약 120 mg의 범위이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 60 mg이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 90 mg이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 120 mg이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 180 mg이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 210 mg이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 240 mg이다. 한 측면에서, 화합물 또는 그의 결정질 염은 약 320 mg 이하, 약 240 mg 이하, 약 210 이하, 약 180 이하, 약 120 이하, 약 90 이하, 약 60 이하, 또는 약 30 이하의 매주 용량으로 투여된다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 60 mg 이하이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 90 mg 이하이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 120 mg 이하이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 180 mg 이하이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 210 mg 이하이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 240 mg 이하이다. 한 측면에서, 대상체는 소아 환자이고, 용량은 용량 범위의 약 80% 내지 100%이다. 한 측면에서, 용량은 용량 범위의 80%, 85%, 90%, 또는 95%이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 8 mg 내지 약 320 mg의 범위이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 24 mg 내지 약 240 mg의 범위이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 24 mg 내지 약 120 mg의 범위이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 48 mg 내지 약 120 mg의 범위이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 72 mg 내지 약 120 mg의 범위이다. 한 측면에서, 용량은 1주에 약 96 mg 내지 약 120 mg의 범위이다. 한 측면에서, 용량은 1주 1회 투여된다. 한 측면에서, 용량은 1주 과정에 걸쳐 2회의 하위-용량으로 투여된다. 한 측면에서, 용량은 1주 과정에 걸쳐 3회의 하위-용량으로 투여된다. 한 측면에서, 용량은 1주 과정에 걸쳐 4회의 하위-용량으로 투여된다. 한 측면에서, 용량은 1주 과정에 걸쳐 5회의 하위-용량으로 투여된다. 한 측면에서, 용량은 1주 과정에 걸쳐 6회의 하위-용량으로 투여된다. 한 측면에서, 용량은 매일의 하위-용량으로 투여된다. 한 측면에서, 대상체는 ACVR1 유전자에서 1개 이상의 돌연변이를 포함하는 미리 결정된 유전자 프로파일을 갖는다. 한 측면에서, ACVR1 유전자에서의 1개 이상의 돌연변이는 활성화 돌연변이이다. 한 측면에서, ACVR1 유전자에서의 1개 이상의 돌연변이는 R206H, G328V, R258G, 또는 그의 조합으로부터 선택된 1개 이상의 아미노산 잔기에서의 아미노산 치환을 포함하는 ACVR1 폴리펩티드를 코딩한다. 한 측면에서, ACVR1 폴리펩티드에서의 아미노산 치환은 R206H를 포함한다. 한 측면에서, 화합물 또는 그의 결정질 염은 경구로 투여된다. 한 측면에서, 질환 또는 장애는 미만성 내인성 뇌교 신경교종, 등급 II 내지 IV의 침윤성 신경교종의 조직학적 진단을 갖는 뇌교 종양, 고형 종양, 진행성 골화성 섬유이형성증, 및 만성 질환에 의한 빈혈 중 1종 이상으로부터 선택된다. 한 측면에서, 질환 또는 장애는 미만성 내인성 뇌교 신경교종이다. 한 측면에서, 질환 또는 장애는 침윤성 신경교종 - 등급 II 내지 IV의 조직학적 진단을 갖는 뇌교 종양이다. 한 측면에서, 질환 또는 장애는 고형 종양이다. 한 측면에서, 질환 또는 장애는 진행성 골화성 섬유이형성증이다. 한 측면에서, 질환 또는 장애는 만성 질환에 의한 빈혈이다. 한 측면에서, 화합물 또는 그의 결정질 염은 고체 투여 제제로서 투여된다. 한 측면에서, 화합물 또는 그의 결정질 염은 액체 투여 제제로서 투여된다. 한 측면에서, 대상체는 용량의 임의의 변형을 결정하기 위해 헵시딘 수준에 대해 모니터링된다. 한 측면에서, 대상체는 1개 이상의 기관에서의 화합물의 축적에 대해 모니터링된다. 한 측면에서, 결정질 염은 산 부가염이다. 한 측면에서, 산 부가염은 염산 염이다. 한 측면에서, 염산 염은 1가이다. 한 측면에서, 결정질 염 형태는 무수이다.

한 실시양태에서, 본 개시내용은 1종 이상의 제약상 허용되는 부형제 및 화학식 (2)의 화합물:

또는 그의 결정질 염을 포함하는 경구 고체 제약 조성물을 제공하며, 여기서 화합물은 유리 염기 중량을 기준으로 약 5 mg 내지 약 125 mg의 농도로 제제화된다.

한 측면에서, 결정질 염은 산 부가염이다. 한 측면에서, 산 부가염은 염산 염이다. 한 측면에서, 염산 염은 1가이다. 한 측면에서, 결정질 염 형태는 무수이다. 한 측면에서, 제약 조성물은 젤라틴 캡슐이다. 한 측면에서, 젤라틴 캡슐은 유리 염기 중량을 기준으로 (i) 5 mg, (ii) 25 mg, 또는 (iii) 125 mg 농도이다. 한 측면에서, 젤라틴 캡슐은 유리 염기 중량을 기준으로 (i) 30 mg, (ii) 60 mg, (iii) 90 mg, 또는 (iv) 120 mg 농도이다. 한 측면에서, 1종 이상의 제약 부형제는 미세결정질 셀룰로스, 락토스 1수화물, 크로스카르멜로스 소듐, 스테아르산마그네슘, 또는 그의 조합으로부터 선택된다.

한 실시양태에서, 본 개시내용은 화학식 (2)의 화합물:

또는 그의 결정질 염; 및

a) 1종 이상의 완충제;

b) 임의로, 1종 이상의 보존제;

c) 임의로, 1종 이상의 용매;

d) 임의로, 1종 이상의 맛 차폐제; 및

e) 임의로, 1종 이상의 추가의 pH-조정제

를 포함하는 경구 액체 제약 조성물을 제공한다.

한 측면에서, 결정질 염은 산 부가염이다. 한 측면에서, 산 부가염은 염산 염이다. 한 측면에서, 염산 염은 1가이다. 한 측면에서, 결정질 염 형태는 무수이다. 한 측면에서, 조성물의 pH는 약 2.0 내지 약 5.0이다. 한 측면에서, 조성물의 pH는 약 2.0 내지 약 3.5이다. 한 측면에서, 조성물의 pH는 약 2.0이다. 한 측면에서, 완충제는 시트르산, 타르타르산, 말산, 또는 아세트산으로부터 선택된다. 한 측면에서, 완충제는 말산이다. 한 측면에서, 말산은 DL-말산이다. 한 측면에서, 조성물은 1종 이상의 보존제를 포함한다. 한 측면에서, 보존제는 벤조산, 벤조산나트륨, 메틸 파라-히드록시 벤조에이트, 프로필 파라-히드록시 벤조에이트, 또는 프로필렌 글리콜로부터 선택된다. 한 측면에서, 보존제는 벤조산이다. 한 측면에서, 벤조산은 보존제 및 완충제이다. 한 측면에서, 조성물은 1종 이상의 맛 차폐제를 포함한다. 한 측면에서, 맛 차폐제는 수크랄로스, 글리세린, 시클로덱스트린, HP-β-시클로덱스트린, α-시클로덱스트린, β-시클로덱스트린, 또는 그의 조합으로부터 선택된다. 한 측면에서, 맛 차폐제는 HP-β-시클로덱스트린 및 수크랄로스의 조합물이다. 한 측면에서, 조성물은 화학식 (2)의 화합물 또는 그의 결정질 염을 약 10 mg/mL의 농도로 포함한다. 한 측면에서, 조성물은 말산을 최대 약 6.7 mg/mL의 농도로 포함한다. 한 측면에서, 조성물은 말산을 약 1.3 mg/mL의 농도로 포함한다. 한 측면에서, 조성물은 HP-β-시클로덱스트린을 최대 약 300 mg/mL의 농도로 포함한다. 한 측면에서, 조성물은 HP-β-시클로덱스트린을 최대 약 150 mg/mL의 농도로 포함한다. 한 측면에서, 조성물은 수크랄로스를 최대 약 2.0 mg/mL의 농도로 포함한다. 한 측면에서, 조성물은 수크랄로스를 약 1.0 mg/mL의 농도로 포함한다. 한 측면에서, 조성물은 벤조산을 최대 약 3.0 mg/mL의 농도로 포함한다. 한 측면에서, 조성물은 벤조산을 최대 약 2.0 mg/mL의 농도로 포함한다. 한 측면에서, pH는 염산에 의해 약 2.0으로 조정된다. 한 측면에서, 용매는 물이다.

한 실시양태에서, 본 개시내용은 화합물 (2)

N⁴-(2,2'-비피리딘-3-일)-N²-(3-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)피리미딘-2,4-디아민의 염의 결정질 형태를 제공한다.

한 측면에서, 염은 제약상 허용되는 염이다. 한 측면에서, 제약상 허용되는 염은 HCl 염이다. 한 측면에서, 결정질 형태는 형태 A를 포함한다. 한 측면에서, 결정질 형태는 본질적으로 형태 A로 이루어진다. 한 측면에서, 형태 A는 불순물을 실질적으로 함유하지 않는다.

한 실시양태에서, 본 개시내용은 N⁴-(2,2'-비피리딘-3-일)-N²-(3-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)피리미딘-2,4-디아민 무수 염산 염의 형태 A를 제공한다.

한 실시양태에서, 본 개시내용은 13.53, 16.14, 17.67, 18.38, 24.96, 및 28.18로부터 선택된 1개 이상의 2θ 값을 포함하는 X선 회절 패턴 (XRPD)을 특징으로 하는 N⁴-(2,2'-비피리딘-3-일)-N²-(3-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)피리미딘-2,4-디아민 무수 염산 염의 형태 A를 제공한다.

한 측면에서, 형태는 열거된 2θ 값 중 2개 이상을 특징으로 한다. 한 측면에서, 형태는 열거된 2θ 값 중 3개 이상을 특징으로 한다. 한 측면에서, 형태는 열거된 2θ 값 중 4개 이상을 특징으로 한다. 한 측면에서, 형태는 열거된 2θ 값 중 5개 이상을 특징으로 한다. 한 측면에서, 형태는 열거된 2θ 값 중 6개 모두를 특징으로 한다. 한 측면에서, 형태는 추가로 6.71, 19.25, 23.98, 및 29.60으로부터 선택된 1개 이상의 2θ 값을 특징으로 한다. 한 측면에서, 형태는 열거된 2θ 값 중 2개 이상을 특징으로 한다. 한 측면에서, 형태는 열거된 2θ 값 중 3개 이상을 특징으로 한다. 한 측면에서, 형태는 열거된 2θ 값 중 4개 모두를 특징으로 한다. 한 측면에서, X선 분말 회절계는 반사 모드로, Cu kα, Kα1 (Å): 1.540598, Kα2 (Å): 1.544426, Kα2/Kα1 강도 비 0.50의 X선 파장, 및 45 kV, 40 mA의 X선 튜브 셋팅으로 사용된다. 한 측면에서, 2θ 값은 +/-0.2 2θ 내이다.

한 실시양태에서, 본 개시내용은 도 12와 실질적으로 동일한 X선 회절 패턴 (XRPD)을 특징으로 하는, N⁴-(2,2'-비피리딘-3-일)-N²-(3-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)피리미딘-2,4-디아민 무수 염산 염의 형태 A를 제공한다.

한 실시양태에서, 본 개시내용은 196.2℃, 214.8℃, 및 274.0℃ 중 1개 이상에서의 흡열을 특징으로 하는, N⁴-(2,2'-비피리딘-3-일)-N²-(3-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)피리미딘-2,4-디아민 무수 염산 염의 형태 A를 제공한다.

한 측면에서, 형태는 추가로 198.9℃, 218.0℃, 및 275.9℃ 중 1개 이상에서의 피크 흡열을 특징으로 한다. 한 측면에서, 형태는 추가로 274.0℃의 개시 온도를 특징으로 한다. 한 측면에서, 형태는 추가로 150℃까지 1.7%의 중량 손실을 특징으로 한다.

한 실시양태에서, 본 개시내용은 도 15와 실질적으로 동일한 TGA-DSC 온도기록도를 특징으로 하는, N⁴-(2,2'-비피리딘-3-일)-N²-(3-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)피리미딘-2,4-디아민 무수 염산 염의 형태 A를 제공한다.

한 실시양태에서, 본 개시내용은 본 개시내용의 결정질 형태를 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 한 측면에서, 조성물은 고체 투여 제제이다. 특정한 측면에서, 고체 투여 제제는 화합물이 본 개시내용의 결정질 형태인 본 개시내용의 경구 고체 제약 조성물이다. 한 측면에서, 조성물은 액체 투여 제제이다. 특정한 측면에서, 액체 투여 제제는 화합물이 본 개시내용의 결정질 형태인 본 개시내용의 경구 액체 제약 조성물이다.

한 실시양태에서, 본 개시내용은 화합물이 본 개시내용의 결정질 형태인 본 개시내용의 임의의 방법을 제공한다.

한 실시양태에서, 본 개시내용은 본 개시내용의 결정질 형태를 단독으로 또는 방사선 또는 추가의 치료제와 조합하여 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 한 측면에서, 조성물은 고체 투여 제제이다. 한 측면에서, 조성물은 액체 투여 제제이다.

본 개시내용의 한 실시양태는 본 개시내용의 임의의 화합물을 투여하는 것을 포함하는 본 개시내용의 임의의 방법을 포함한다.

본 개시내용의 한 실시양태는 본 개시내용의 1종 이상의 치료에서의 본 개시내용의 임의의 화합물의 용도를 포함한다.

본 개시내용의 한 실시양태는 본원에 개시된 바와 같은 1종 이상의 질환 또는 장애의 치료를 위한 본 개시내용에 따른 의약의 제조를 포함한다.

본 개시내용의 한 실시양태는 요법에서의 본 개시내용의 화합물의 용도를 포함한다.

간략하게, 본 개시내용의 실시양태는 ACVR1 유전자에서 1개 이상의 돌연변이를 포함하는 미리 결정된 유전자 프로파일을 갖는 질환의 치료를 필요로 하는 대상체에게 하기 화학식 (I)을 갖는 ACVR1 억제제:

또는 그의 입체이성질체, 제약상 허용되는 염, 호변이성질체 또는 전구약물을 포함하는 치료 요법을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 질환을 치료하는 방법을 제공하며, 여기서 R¹, R², R³, 및 R⁴는 본원에 정의된 바와 같다.

본 개시내용의 추가 실시양태는 미만성 내인성 뇌교 신경교종 (DIPG)의 치료를 필요로 하는 대상체에게 하기 화학식 (I)을 갖는 ACVR1 억제제:

또는 그의 입체이성질체, 제약상 허용되는 염, 호변이성질체 또는 전구약물을 포함하는 치료 요법을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 DIPG를 치료하는 방법을 제공하며, 여기서 R¹, R², R³, 및 R⁴는 본원에 정의된 바와 같다.

본 개시내용의 추가의 실시양태는 진행성 골화성 섬유이형성증 (FOP)의 치료를 필요로 하는 대상체에게 하기 화학식 (I)을 갖는 ACVR1 억제제:

또는 그의 입체이성질체, 제약상 허용되는 염, 호변이성질체 또는 전구약물 및 치료제를 포함하는 치료 요법을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 FOP를 치료하는 방법을 제공하며, 여기서 R¹, R², R³, 및 R⁴는 본원에 정의된 바와 같다.

본 개시내용의 한 실시양태는 비정상적 ACVR1 발현 (예를 들어, 발현된 단백질에서의 돌연변이)과 연관된 질환, 예컨대 DIPG 및 FOP의 치료를 위한 화학식 (I)의 ACVR1 억제제의 용도를 포함한다.

하나 이상의 측면 및 실시양태는 구체적으로 기재되지 않았더라도 상이한 실시양태에 포함될 수 있다. 즉, 모든 측면 및 실시양태는 임의의 방식 또는 조합으로 조합될 수 있다.

개시내용의 이들 및 다른 측면은 하기 상세한 설명을 참조하면 명백해질 것이다.

도면에서, 동일한 참조 번호는 유사한 요소를 식별한다. 도면에서 요소의 크기 및 상대 위치는 반드시 축척에 맞게 그려진 것은 아니며, 이들 요소 중 일부는 도면 판독의 개선을 위해 임의로 확대되고 위치가 정해진다. 또한, 도시된 바와 같은 요소의 특정한 형상은 특정한 요소의 실제 형상에 관한 어떠한 정보를 전달하고자 의도되는 것은 아니며, 단지 도면에서의 인식 용이를 위해 선택되었다.
도 1은 BMP2 자극된 HepG2 세포에서의 화합물 2에 의한 SMAD1/5 인산화의 억제를 보여주는 데이터를 제시한다.
도 2a 및 도 2b는 BMP-2 자극의 존재 (도 2a) 또는 BMP-2 자극의 부재 (도 2b) 하에서의 화합물 2에 의한 HepG2 세포에서의 헵시딘 발현의 억제를 보여준다.
도 3은 화합물 2가 주어진 군에 대한 혈장 철 수준을 보여준다. 흑색 막대는 투르펜틴 오일이 투여된 군을 나타낸다.
도 4a는 마우스에서 정맥내로 및 경구로 전달된 화합물 2의 뇌 약동학을 보여주고, 도 4b는 혈장 및 뇌 조직에서의 화합물 2의 농도를 보여준다.
도 5는 화합물 2의 약동학 및 독성 시험의 결과를 보여준다.
도 6a는 IGR-OV1 세포에서의 화합물 2에 대한 용량-반응 곡선을 보여준다. 도 6b는 7개의 세포주에 대한 비교 IC₅₀ 데이터를 보여준다.
도 7은 이종이식편 모델에서의 종양 부피에 대한 화합물 2의 효과를 보여준다.
도 8은 다양한 돌연변이를 갖는 ALK2/ACVR1에 대한 화합물 2의 활성을 보여준다.
도 9a는 더 캔서 게놈 아틀라스(The Cancer Genome Atlas) (TCGA) 범 암 및 메모리얼 슬로안 케터링(Memorial Sloan Kettering) (MSK) IMPACT 데이터베이스에서의 ACVR1 돌연변이 분포의 롤리팝 다이어그램을 보여준다. 도 9b는 TCGA 범 암 및 MSK IMPACT 데이터베이스에서의 상이한 성인 종양 유형에 걸쳐 발견되는 염색체 이상의 분포를 보여준다. 도 9c는 ACVR1에서 유전자 이상을 갖는 대상체가 ACVR1 변경이 없는 대상체와 비교하여 6개월만큼 더 짧은 생존 시간을 갖는다는 것을 나타내는 카플란-마이어 곡선을 보여준다.
도 10은 화합물 2를 포함하는 경구 액체 제제의 시험관내 감각 연구의 결과를 예시한다. 쓴맛을 측정하고, 퀴닌과의 비교를 위해 전환시켰다.
도 11은 화합물 2를 포함하는 경구 액체 제제의 시험관내 감각 연구의 결과를 예시한다. 쓴맛을 측정하고, 퀴닌과의 비교를 위해 전환시켰다.
도 12는 화합물 2 모노-HCl 염 형태 A (812608-08-A1)의 XRPD 패턴이다.
도 13a 및 13b는 화합물 2 HCl 염 결정 형태의 XRPD 오버레이이다.
도 14는 등가물을 입증하기 위한 화합물 2 HCl 염 형태 A 배치의 XRPD 오버레이이다.
도 15는 화합물 2 HCl 형태 A (812608-12-A)의 TGA/DSC 곡선을 보여준다.
도 16은 가열 후 화합물 2 HCl 형태 A (812608-12A_218C)의 DSC를 보여준다.
도 17은 안정성을 입증하기 위한 가열 전 및 후의 화합물 2 HCl 염 형태 A의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 18은 화합물 2 푸마레이트 형태 A (812608-12-B)의 TGA/DSC 곡선을 보여준다.
도 19는 제한된 EtOH 잔류물이 검출된 (약 1.6%), 화합물 2 푸마레이트 형태 A (812608-12-B)의 1H-NMR 스펙트럼을 보여준다.
도 20a는 화합물 2 유리 염기 형태 A (812608-05-A)의 DVS 플롯을 보여주고; 도 20b는 DVS 시험 전 및 후의 화합물 2 유리 염기 형태 A의 XRPD 오버레이를 보여주고; 도 20c는 화합물 2 HCl 염 형태 A (812608-12-A)의 DVS 플롯을 보여주고; 도 20d는 DVS 시험 전 및 후의 화합물 2 HCl 염 형태 A의 XRPD 오버레이를 보여주고; 도 20e는 화합물 2 푸마레이트 형태 A (812608-12-B)의 DVS 플롯을 보여주고; 도 20f는 DVS 시험 전 및 후의 화합물 2 푸마레이트 형태 A의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 21은 실온에서 화합물 2의 2개의 염 및 유리 염기의 동역학적 용해도 파일을 보여준다.
도 22는 안정성 시험 전 및 후의 샘플의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 23은 화합물 2 HCl 염 형태 A 샘플의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 24는 화합물 2 HCl 염 형태 A (812608-16-A)의 TGA/DSC 곡선을 보여준다.
도 25는 화합물 2 HCl 염 형태 C (812608-21-A2)의 XRPD 패턴을 보여준다.
도 26은 화합물 2 HCl 염 형태 C (812608-21-A2)에 대한 TGA/DSC 곡선을 보여준다.
도 27은 가열 전 및 후의 화합물 2 HCl 염 형태 C (812608-27-B)의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 28은 가열 전 및 후의 화합물 2 HCl 염 형태 C (812608-27-B)의 DSC 오버레이를 보여준다.
도 29는 가열 전 및 후의 샘플 (812608-27-C)의 XRPD 오버레이를 보여주며, N₂ 하에 약 170℃로 가열되고, 30℃로 냉각되고, 주위 조건에 노출된 경우, HCl 염 형태 C+D의 혼합물을 함유하는 샘플이 형태 A+C의 혼합물로 전환됨을 보여준다.
도 30은 가열 전 및 후의 샘플 (812608-27-D)의 XRPD 오버레이를 보여주며, N₂ 하에 약 140℃로 가열되고, 30℃로 냉각되고, 주위 조건에 노출된 경우, HCl 염 형태 C+E의 혼합물을 함유하는 샘플이 형태 A+C의 혼합물로 전환됨을 보여준다.
도 31은 화합물 2 HCl 염 형태 G (812608-21-A3_C)에 대한 XRPD 오버레이를 보여준다. HCl 염 형태 C (812608-21-A3, THF/H₂O로부터 증발에 의해 수득됨)를 6일 동안 주위 조건 (21±1.5℃, 60±20%RH)에 노출시킨 후 형태 변화가 관찰되었고, HCl 염 형태 G로 명명된다.
도 32a, 32b, 및 32c는 화합물 2를 비교자로서 공지된 CNS 약물과 비교한 차트를 보여준다. 다중 파라미터 스코어 ("myMPO")는 BBB 침투를 예측하기 위해 물리-화학적 특성을 취합하였다. 스코어가 높을수록 (5가 이상적임), CNS 침투 가능성이 더 우수하다.
도 33a 및 도 33b는 화합물 2의 분말 캡슐 제제와 액체 제제 사이의 비교 결과를 보여주며, 이는 단일 종에서의 2개의 제제 사이의 대등한 혈장 농도를 입증한다.

본 개시내용은 ACVR1 억제제를 투여함으로써 비정상적 ACVR1 발현 (예를 들어, 발현된 단백질에서의 돌연변이)과 연관된 질환 (예를 들어, 암, 예를 들어 미만성 내인성 뇌교 신경교종 (DIPG); 유전 장애 (예를 들어, 진행성 골화성 섬유이형성증 (FOP)) 등)을 치료하는 방법에 관한 것이다.

본 개시내용을 보다 상세히 제시하기 전에, 본원에 사용될 특정 용어의 정의를 제공하는 것이 그의 이해에 도움이 될 수 있다. 추가의 정의는 본 개시내용 전반에 걸쳐 제시된다.

"아미노"는 -NH₂ 라디칼을 지칭한다.

"시아노" 또는 "니트릴"은 -CN 라디칼을 지칭한다.

"할로"는 -F, -Cl, -Br 또는 -I 라디칼을 지칭한다.

"히드록시" 또는 "히드록실"은 -OH 라디칼을 지칭한다.

"이미노"는 =NH 치환기를 지칭한다.

"니트로"는 -NO₂ 라디칼을 지칭한다.

"옥소"는 =O 치환기를 지칭한다.

"티옥소"는 =S 치환기를 지칭한다.

"알킬"은 탄소 및 수소 원자만으로 이루어지고, 포화 또는 불포화이고 (즉, 1개 이상의 이중 (알케닐) 및/또는 삼중 (알키닐) 결합을 함유함), 1 내지 12개의 탄소 원자 (C₁-C₁₂ 알킬), 바람직하게는 1 내지 8개의 탄소 원자 (C₁-C₈ 알킬) 또는 1 내지 6개의 탄소 원자 (C₁-C₆ 알킬)를 갖고, 단일 결합에 의해 분자의 나머지에 부착되는 직쇄형 또는 분지형 탄화수소 쇄 라디칼, 예를 들어, 메틸, 에틸, n-프로필, 1-메틸에틸 (이소-프로필), n-부틸, n-펜틸, 1,1-디메틸에틸 (t-부틸), 3-메틸헥실, 2-메틸헥실, 에테닐, 프로프-1-에닐, 부트-1-에닐, 펜트-1-에닐, 펜타-1,4-에닐, 에티닐, 프로피닐, 부티닐, 펜티닐, 헥시닐 등을 지칭한다. 1개 이상의 탄소-탄소 이중 결합을 포함하는 알킬은 알케닐이다. 1개 이상의 탄소-탄소 삼중 결합을 포함하는 알킬은 알키닐이다. 명세서에서 달리 구체적으로 언급되지 않는 한, 알킬 기는 임의로 치환된다.

"알콕시"는 화학식 -OR_a의 라디칼을 지칭하며, 여기서 R_a는 1 내지 12개의 탄소 원자를 함유하는 상기 정의된 바와 같은 알킬 라디칼이다. 명세서에서 달리 구체적으로 언급되지 않는 한, 알콕시 기는 임의로 치환될 수 있다.

"융합된"은 개시내용의 ACVR1 억제제 내의 기존 고리 구조에 융합된 본원에 기재된 임의의 고리 구조를 지칭한다. 융합된 고리가 헤테로시클릴 고리인 경우에, 융합된 헤테로시클릴 고리 또는 융합된 헤테로아릴 고리의 부분이 되는 기존 고리 구조 상의 임의의 탄소 원자는 질소 원자로 대체될 수 있다.

"헤테로시클릴" 또는 "헤테로시클릭 고리"는 2 내지 12개의 탄소 원자, 및 질소, 산소 및 황으로 이루어진 군으로부터 선택된 1 내지 6개의 헤테로원자를 포함하는 안정한 3- 내지 18-원 비-방향족 고리 라디칼을 지칭한다. 명세서에서 달리 구체적으로 언급되지 않는 한, 헤테로시클릴 라디칼은 모노시클릭, 비시클릭, 트리시클릭 또는 테트라시클릭 고리계일 수 있고, 이는 융합된 또는 가교된 고리계를 포함할 수 있고; 헤테로시클릴 라디칼 내의 질소, 탄소 또는 황 원자는 임의로 산화될 수 있고; 질소 원자는 임의로 4급화될 수 있고; 헤테로시클릴 라디칼은 부분 또는 완전 포화될 수 있다. 이러한 헤테로시클릴 라디칼의 예는 디옥솔라닐, 티에닐[1,3]디티아닐, 데카히드로이소퀴놀릴, 이미다졸리닐, 이미다졸리디닐, 이소티아졸리디닐, 이속사졸리디닐, 모르폴리닐, 옥타히드로인돌릴, 옥타히드로이소인돌릴, 2-옥소피페라지닐, 2-옥소피페리디닐, 2-옥소피롤리디닐, 옥사졸리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 4-피페리도닐, 피롤리디닐, 피라졸리디닐, 퀴누클리디닐, 티아졸리디닐, 테트라히드로푸릴, 트리티아닐, 테트라히드로피라닐, 티오모르폴리닐, 티아모르폴리닐, 1-옥소-티오모르폴리닐, 및 1,1-디옥소-티오모르폴리닐을 포함한다. 명세서에서 달리 구체적으로 언급되지 않는 한, 헤테로시클릴 기는 임의로 치환될 수 있다.

본원에 사용된 용어 "치환된"은 적어도 1개의 수소 원자가 비-수소 라디칼, 예컨대 아미노, 시아노, 히드록실, 이미노, 니트로, 옥소, 티옥소, 할로, 알킬 및 알콕시에의 결합에 의해 대체된 상기 기 (예를 들어, 알킬, 알콕시 및/또는 헤테로시클릴) 중 임의의 것을 의미하며, 각각의 상기 라디칼은 또한 상기 치환기 중 1개 이상에 의해 임의로 치환될 수 있다. "치환된"은 또한 1개 이상의 수소 원자가 NR_gR_h, NR_gC(=O)R_h, NR_gC(=O)NR_gR_h, NR_gC(=O)OR_h, NR_gSO₂R_h, OC(=O)NR_gR_h, OR_g, SR_g, SOR_g, SO₂R_g, OSO₂R_g, SO₂OR_g, NSO₂R_g, 또는 SO₂NR_gR_h에 의해 대체된 상기 기 중 임의의 것을 포함한다. "치환된"은 또한 1개 이상의 수소 원자가 C(=O)R_g, C(=O)OR_g, C(=O)NR_gR_h, CH₂SO₂R_g 또는 CH₂SO₂NR_gR_h에 의해 대체된 상기 기 중 임의의 것을 의미한다. 상기에서, R_g 및 R_h는 동일하거나 상이하고, 독립적으로 수소 또는 임의로 치환된 알킬이다.

"전구약물"은 생리학적 조건 하에 또는 가용매분해에 의해 본원에 기재된 생물학적 활성 염으로 전환될 수 있는 ACVR1 억제제를 나타내는 것으로 의도된다. 따라서, 용어 "전구약물"은 제약상 허용되는 생물학적 활성 ACVR1 억제제의 전구체를 지칭한다. 일부 측면에서, 전구약물은 대상체에게 투여될 때 불활성이지만, 생체내에서 예를 들어 가수분해에 의해 활성 ACVR1 억제제로 전환된다. 전구약물 ACVR1 억제제는 종종 대상 유기체에서 용해도, 조직 적합성 또는 지연 방출의 이점을 제공한다 (예를 들어, 문헌 [Bundgard, H., Design of Prodrugs (1985), pp. 7-9, 21-24 (Elsevier, Amsterdam] 참조). 전구약물에 대한 논의는 문헌 [Higuchi, T., et al., "Pro drugs as Novel Delivery Systems," A.C.S. Symposium Series, Vol. 14, 및 Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987]에서 제공되며, 둘 다는 전문이 본원에 참조로 포함된다. 용어 "전구약물"은 또한 이러한 전구약물이 대상체에게 투여된 경우에 활성 ACVR1 억제제를 생체내 방출하는 임의의 공유 결합된 담체를 포함하는 것으로 의도된다. 본원에 기재된 바와 같이 활성 ACVR1 억제제의 전구약물은 전형적으로, 변형이 상용 조작으로 또는 생체내에서 모 활성 ACVR1 억제제로 절단되도록 하는 방식으로, 활성 ACVR1 억제제에 존재하는 관능기를 변형시킴으로써 제조된다. 전구약물은 히드록시, 아미노 또는 메르캅토 기가, 활성 ACVR1 억제제의 전구약물이 대상체에게 투여되는 경우에 절단되어 각각 유리 히드록시, 유리 아미노 또는 유리 메르캅토 기를 형성하는 임의의 기에 결합된 ACVR1 억제제를 포함한다. 전구약물의 예는 활성 ACVR1 억제제의 히드록시 관능기의 아세테이트, 포르메이트 및 벤조에이트 유도체, 또는 아민 관능기의 아세트아미드, 포름아미드 및 벤즈아미드 유도체 등을 포함한다.

본원의 개시내용은 또한 1개 이상의 원자가 상이한 원자 질량 또는 질량수를 갖는 원자에 의해 대체됨으로써 동위원소-표지된 화학식 (I)의 모든 제약상 허용되는 ACVR1 억제제를 포괄하는 것으로 의도된다. 개시된 ACVR1 억제제 내로 혼입될 수 있는 동위원소의 예는 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 플루오린, 염소, 및 아이오딘의 동위원소, 예컨대 각각 ²H, ³H, ¹¹C,¹³C, ¹⁴C, ¹³N,¹⁵N, ¹⁵O, ¹⁷O, ¹⁸O, ³¹P, ³²P, ³⁵S, ¹⁸F, ³⁶Cl, ¹²³I, 및 ¹²⁵I를 포함한다. 이들 방사성표지된 ACVR1 억제제는, 예를 들어 작용 부위 또는 방식, 또는 약리학상 중요한 작용 부위에 대한 결합 친화도를 특징화함으로써 ACVR1 억제제의 유효성을 결정하거나 측정하는 것을 돕는데 유용할 수 있다. 특정 동위원소-표지된 화학식 (I)의 ACVR1 억제제, 예를 들어 방사성 동위원소가 혼입된 것은 약물 및/또는 기질 조직 분포 연구에 유용하다. 방사성 동위원소 삼중수소, 즉 ³H, 및 탄소-14, 즉 ¹⁴C는 그의 혼입의 용이성 및 즉시 검출 수단의 관점에서 이러한 목적에 특히 유용하다.

보다 무거운 동위원소, 예컨대 중수소, 즉 ²H로의 치환은 더 큰 대사 안정성으로부터 생성된 특정의 치료 이점, 예를 들어, 증가된 생체내 반감기 또는 감소된 투여량 요건을 제공할 수 있고, 따라서 일부 상황에서 바람직할 수 있다.

양전자 방출 동위원소, 예컨대 ¹¹C, ¹⁸F, ¹⁵O 및 ¹³N으로의 치환은 기질 수용체 점유율을 검사하기 위한 양전자 방출 단층촬영 (PET) 연구에 유용할 수 있다. 동위원소-표지된 화학식 (I)의 ACVR1 억제제는 일반적으로 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 통상적인 기술에 의해, 또는 이전에 사용된 비-표지된 시약 대신 적절한 동위원소-표지된 시약을 사용하는 하기 제시된 바와 같은 제조예 및 실시예에 기재된 것과 유사한 방법에 의해 제조될 수 있다.

본원의 개시내용은 또한 개시된 ACVR1 억제제의 생체내 대사 생성물을 포괄하는 것으로 의도된다. 이러한 생성물은, 예를 들어 주로 효소적 과정으로 인해, 투여된 ACVR1 억제제의 산화, 환원, 가수분해, 아미드화, 에스테르화 등으로부터 생성될 수 있다. 따라서, 개시내용은 본 개시내용의 ACVR1 억제제를 대상체에게 그의 대사 생성물이 생성되기에 충분한 기간 동안 투여하는 것을 포함하는 방법에 의해 생산된 ACVR1 억제제를 포함한다. 이러한 생성물은 전형적으로 개시내용의 방사성표지된 ACVR1 억제제를 검출가능한 용량으로 동물, 예컨대 래트, 마우스, 기니 피그, 원숭이, 또는 인간에게 투여하고, 대사가 일어나기에 충분한 시간을 허용하고, 소변, 혈액 또는 다른 생물학적 샘플로부터 그의 전환 생성물을 단리함으로써 확인된다.

"안정한 ACVR1 억제제" 및 "안정한 구조"는 반응 혼합물로부터 유용한 정도의 순도로의 단리, 및 효과적인 치료제로의 제제화를 견디기에 충분히 강건한 ACVR1 억제제를 나타내는 것으로 의도된다.

단어 "임의적인" 또는 "임의로"의 사용은 후속적으로 기재된 사건 또는 상황이 발생할 수 있거나 또는 발생하지 않을 수 있고, 기재는 사건 또는 상황이 발생한 경우 및 발생하지 않은 경우를 포함한다는 것을 의미한다. 예를 들어, "임의로 치환된 아릴"은 아릴 라디칼이 치환될 수 있거나 또는 치환되지 않을 수 있고, 기재는 치환된 아릴 라디칼 및 치환을 갖지 않는 아릴 라디칼 둘 다를 포함한다는 것을 의미한다.

"제약상 허용되는 염"은 산 및 염기 부가염 둘 다를 포함한다.

"제약상 허용되는 산 부가염"은 무기 산 예컨대 염산, 브로민화수소산, 황산, 질산, 인산 등, 및 유기 산 예컨대 아세트산, 2,2-디클로로아세트산, 아디프산, 알긴산, 아스코르브산, 아스파르트산, 벤젠술폰산, 벤조산, 4-아세트아미도벤조산, 캄포르산, 캄포르-10-술폰산, 카프르산, 카프로산, 카프릴산, 탄산, 신남산, 시트르산, 시클람산, 도데실황산, 에탄-1,2-디술폰산, 에탄술폰산, 2-히드록시에탄술폰산, 포름산, 푸마르산, 갈락타르산, 겐티스산, 글루코헵톤산, 글루콘산, 글루쿠론산, 글루탐산, 글루타르산, 2-옥소-글루타르산, 글리세로인산, 글리콜산, 히푸르산, 이소부티르산, 락트산, 락토비온산, 라우르산, 말레산, 말산, 말론산, 만델산, 메탄술폰산, 뮤신산, 나프탈렌-1,5-디술폰산, 나프탈렌-2-술폰산, 1-히드록시-2-나프토산, 니코틴산, 올레산, 오로트산, 옥살산, 팔미트산, 파모산, 프로피온산, 피로글루탐산, 피루브산, 살리실산, 4-아미노살리실산, 세바스산, 스테아르산, 숙신산, 타르타르산 (예를 들어, L-(+)-타르타르산), 티오시안산, p-톨루엔술폰산, 트리플루오로아세트산, 운데실렌산 등에 의해 형성된 염을 지칭한다.

"제약상 허용되는 염기 부가염"은 무기 염기 또는 유기 염기를 유리 산에 첨가하여 제조된 염을 지칭한다. 무기 염기로부터 유도된 염은 나트륨, 칼륨, 리튬, 암모늄, 칼슘, 마그네슘, 철, 아연, 구리, 망가니즈, 알루미늄 염 등을 포함한다. 바람직한 무기 염은 암모늄, 나트륨, 칼륨, 칼슘 및 마그네슘 염이다. 유기 염기로부터 유도된 염은 1급, 2급, 및 3급 아민, 자연 발생 치환된 아민을 포함한 치환된 아민, 시클릭 아민 및 염기성 이온 교환 수지, 예컨대 암모니아, 이소프로필아민, 트리메틸아민, 디에틸아민, 트리에틸아민, 트리프로필아민, 디에탄올아민, 에탄올아민, 데아놀, 2 디메틸아미노에탄올, 2 디에틸아미노에탄올, 디시클로헥실아민, 리신, 아르기닌, 히스티딘, 카페인, 프로카인, 히드라바민, 콜린, 베타인, 베네타민, 벤자틴, 에틸렌디아민, 글루코사민, 메틸글루카민, 테오브로민, 트리에탄올아민, 트로메타민, 퓨린, 피페라진, 피페리딘, N 에틸피페리딘, 폴리아민 수지 등의 염을 포함한다. 특히 바람직한 유기 염기는 이소프로필아민, 디에틸아민, 에탄올아민, 트리메틸아민, 디시클로헥실아민, 콜린 및 카페인이다.

일부 실시양태에서, 제약상 허용되는 염은 4급 암모늄 염 예컨대 4급 아민 알킬 할라이드 염 (예를 들어, 메틸 브로마이드)을 포함한다.

종종 결정화는 개시내용의 ACVR1 억제제의 용매화물을 생산한다. 본원에 사용된 용어 "용매화물"은 개시내용의 ACVR1 억제제의 1개 이상의 분자를 용매의 1개 이상의 분자와 함께 포함하는 응집체를 지칭한다. 용매는 물일 수 있고, 이 경우에 용매화물은 수화물일 수 있다. 대안적으로, 용매는 유기 용매일 수 있다. 따라서, 본 개시내용의 ACVR1 억제제는 1수화물, 2수화물, 반수화물, 1.5수화물, 3수화물, 4수화물 등을 포함한 수화물, 뿐만 아니라 상응하는 용매화 형태로 존재할 수 있다. 개시내용의 ACVR1 억제제는 진성 용매화물일 수 있는 한편, 다른 경우에, 개시내용의 ACVR1 억제제는 단지 우발적 물을 보유할 수 있거나 또는 물 플러스 일부 우발적 용매의 혼합물일 수 있다.

개시내용의 ACVR1 억제제, 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 호변이성질체는 1개 이상의 비대칭 중심을 함유할 수 있고, 따라서 거울상이성질체, 부분입체이성질체, 및 절대 입체화학의 관점에서 아미노산에 대해 (R)- 또는 (S)- 또는, (D)- 또는 (L)-로서 정의될 수 있는 다른 입체이성질체 형태를 생성할 수 있다. 본 개시내용은 모든 이러한 가능한 이성질체, 뿐만 아니라 그의 라세미 및 광학적으로 순수한 형태를 포함하는 것으로 의도된다. 광학 활성 (+) 및 (-), (R)- 및 (S)-, 또는 (D)- 및 (L)-이성질체는 키랄 합성단위체 또는 키랄 시약을 사용하여 제조될 수 있거나, 또는 통상적인 기술, 예를 들어 크로마토그래피 및 분별 결정화를 사용하여 분해될 수 있다. 개별 거울상이성질체의 제조/단리를 위한 통상적인 기술은 적합한 광학적으로 순수한 전구체로부터의 키랄 합성, 또는 예를 들어 키랄 고압 액체 크로마토그래피 (HPLC)를 사용한 라세미체 (또는 염 또는 유도체의 라세미체)의 분해를 포함한다. 본원에 기재된 ACVR1 억제제가 올레핀계 이중 결합 또는 다른 기하학적 비대칭 중심을 함유하는 경우에, 달리 명시되지 않는 한, ACVR1 억제제는 E 및 Z 기하 이성질체 둘 다를 포함하는 것으로 의도된다. 마찬가지로, 모든 호변이성질체 형태가 또한 포함되는 것으로 의도된다.

"입체이성질체"는 동일한 결합에 의해 결합된 동일한 원자로 구성되지만 상호교환가능하지 않은 상이한 3차원 구조를 갖는 ACVR1 억제제를 지칭한다. 본 개시내용은 다양한 입체이성질체 및 그의 혼합물을 고려하고, 분자들이 서로 중첩될 수 없는 거울상인 2종의 입체이성질체를 지칭하는 "거울상이성질체"를 포함한다.

용어 "실질적으로"는 유의한 정성적 또는 정량적 정도를 지칭한다. 예로서, 화합물의 특정한 특징화를 언급하기 위해 문맥에서 사용되는 경우에, 용어는 언급된 특징화 방법, 예컨대 예를 들어 XRPD, DSC, 또는 TGA에 의한 물질 유사성에 기초하여 화학 물질을 확인하는 능력을 지칭한다. 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 인지되는 바와 같이, 이러한 기술에 대한 오차 범위는 용어 "실질적으로" 내에 포괄된다. 또한, 본원에 사용된 "실질적으로 순수한"은, 형태와 관련하여 사용된 경우에, 화합물의 중량을 기준으로 ACVR1 억제제, 예컨대 화합물 2의 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 98.5, 99, 99.1, 99.2, 99.3, 99.4, 99.5, 99.6, 99.7, 99.8, 99.9 중량% 초과 및 또한 100 중량%와 동등한 것을 포함한, 90 중량% 초과의 순도를 갖는 화합물을 의미한다. 나머지 물질은 화합물의 다른 형태(들), 및/또는 반응 불순물 및/또는 그의 제조로부터 발생하는 가공 불순물을 포함한다. 예를 들어, 화합물 2의 결정질 형태는, 이 시점에 관련 기술분야에 공지되어 있고 일반적으로 허용되는 수단에 의해 측정 시 90 중량% 초과의 순도를 갖는다는 점에서 실질적으로 순수한 것으로 간주될 수 있고, 여기서 나머지 10 중량% 미만의 물질은 화합물 2의 다른 형태(들) 및/또는 반응 불순물 및/또는 가공 불순물을 포함한다. 실질적으로 순수함을 정의하는 또 다른 방식은 하기와 같다: 특정한 다형체 형태와 관련하여 본원에 사용된 용어 "실질적으로 순수한"은 다형체 형태가 화합물의 임의의 다른 물리적 형태를 10 중량% 미만, 바람직하게는 5 중량% 미만, 보다 바람직하게는 3 중량% 미만, 가장 바람직하게는 1 중량% 미만으로 포함한다는 것을 의미한다.

"호변이성질체"는 분자의 한 원자로부터 동일한 분자의 또 다른 원자로의 양성자 이동, 예를 들어 케톤으로부터 엔올로의 양성자 이동을 통한 전환을 지칭한다. 본 개시내용은 임의의 상기 ACVR1 억제제의 호변이성질체를 포함한다.

"제약 조성물"은 생물학적 활성제를 대상체, 예를 들어 인간에게 전달하기 위해 관련 기술분야에서 일반적으로 허용되는 1종 이상의 치료제 및 매질의 제제를 지칭한다. 이러한 매질은 모든 제약상 허용되는 담체, 희석제, 또는 부형제를 포함한다. "제약상 허용되는 담체, 희석제, 또는 부형제"는 미국 식품 의약품국에 의해 인간 또는 가축에서의 사용에 허용되는 것으로 승인된 임의의 아주반트, 담체, 부형제, 활택제, 감미제, 희석제, 보존제, 염료/착색제, 향미 증진제, 계면활성제, 습윤제, 분산제, 현탁화제, 안정화제, 등장화제, 용매, 또는 유화제를 포함한다.

"화학요법제" 또는 "항암제"는 암 세포를 파괴하거나, 또는 암 세포의 성장을 정지시키거나 느리게 하는 화학물질이다.

"종양"을 포함한 "암"은 신체 기관 및 시스템의 정상 기능을 방해하는 세포의 비제어된 성장 및/또는 비정상적으로 증가된 세포 생존 및/또는 아폽토시스의 억제를 지칭한다. "암" (예를 들어, 종양)은 고형 및 비-고형 암을 포함한다. 암 또는 종양을 갖는 대상체는 대상체의 신체에 존재하는 객관적으로 측정가능한 수의 암 세포를 갖는다. "암"은 양성 및 악성 암 (각각, 예를 들어, 양성 및 악성 종양), 뿐만 아니라 휴면 종양 또는 미세전이를 포함한다.

"전이"는 암의 그의 원발성 부위로부터 신체의 다른 장소로의 확산을 지칭한다. "전이"는 그의 원래 위치로부터 이동하여 생명유지 기관에 파종된 암이며, 이는 궁극적으로 이환 기관의 기능 악화를 통해 대상체의 사망으로 이어질 수 있다. 전이는 순차적 과정으로, 암 세포는 원발성 종양으로부터 분리되어, 림프 및 혈관 내로 침투하고, 혈류를 통해 순환하여 신체 내의 다른 정상 조직의 원위 병소에서 성장 (전이)할 수 있다. 새로운 부위에서, 세포는 혈액 공급을 확립하고, 성장하여 생명을 위협하는 덩이를 형성할 수 있다. 전이는 국부 또는 원위 전이일 수 있다. 종양 세포 내의 자극 및 억제 분자 경로 둘 다가 이러한 거동을 조절하고, 새로운 부위에서 종양 세포와 숙주 세포 사이의 상호작용이 또한 중요하다.

본원에 사용된 "치료하는" 또는 "치료"는 관심 질환 또는 상태, 예를 들어, 암을 갖는 대상체, 예컨대 인간에게 의약 또는 의료 관리를 투여하는 것을 지칭하며, (i) 질환 또는 상태를 억제하는 것, 즉 그의 발생을 정지시키는 것; (ii) 질환 또는 상태를 완화시키는 것, 즉 질환 또는 상태의 퇴행을 유발하는 것; 또는 (iii) 기저 질환 또는 상태는 다루지 않으면서 질환 또는 상태로부터 발생한 증상 (예를 들어, 통증, 체중 감소, 기침, 피로, 약화 등)을 완화시키는 것을 포함한다. 본원에 사용된 용어 "질환" 및 "상태"는 상호교환가능하게 사용될 수 있거나, 또는 특정한 병 또는 상태가 공지된 병원체를 갖지 않을 수 있고 (이에 병인이 아직 확인되지 않음), 따라서 아직 질환으로서 인식되지는 않지만 단지 바람직하지 않은 상태 또는 증후군으로서만 인식된다는 점에서 (여기서 다소 구체적인 증상 세트가 임상의에 의해 확인되었음) 상이할 수 있다.

"대상체"는 인간, 가축, 예컨대 실험 동물 (예를 들어, 개, 원숭이, 래트, 마우스 등), 가정용 애완동물 (예를 들어, 고양이, 개, 토끼 등), 및 가축류 (예를 들어, 돼지, 소, 양, 염소, 말 등), 및 비-가축 (예를 들어, 곰, 코끼리, 호저 등)을 포함한다. 실시양태에서, 대상체는 포유동물이다. 실시양태에서, 대상체는 인간이다. 용어 "환자"는 용어 "대상체"와 상호교환가능하게 사용될 수 있다.

FD&C 법령은 "소아"를 그의 진단 또는 치료 시 21세 이하인 대상체로서 정의한다. 소아 하위집단은 (i) 신생아 - 출생시부터 생애 첫 28일까지; (ii) 영아 - 29일째부터 2세 미만까지; (iii) 소아 - 2세부터 12세 미만까지; 및 (iv) 청소년 - 12세에서 21세로서 추가로 특징화된다. 정의에도 불구하고, 감수성 환자 집단 및 임상 시험 평가에 따라, 승인 규제 라벨은 소아 집단의 범위를, 예컨대, 예를 들어 22세까지의 소아 환자로 구체적으로 변경하는 문구를 포함할 수 있다.

"유효량" 또는 "치료 유효량"은 대상체, 예컨대 인간에게 투여되는 경우에 대상체의 암을 치료하기에 충분한 ACVR1 억제제 또는 조성물의 양을 지칭한다. "유효량"을 구성하는 ACVR1 억제제 또는 조성물의 양은 ACVR1 억제제 또는 조성물, 치료될 상태 및 그의 중증도, 투여 방식, 치료 지속기간, 및/또는 치료될 대상체의 연령에 따라 달라질 것이지만, 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 그 자신의 지식 및 본 개시내용에 기초하여 상용적으로 결정될 수 있다. 실시양태에서, "유효량"은 1종 이상의 적응증, 증상, 징후, 진단 시험, 활력 징후 등에서의 통계적으로 유의한 변화에 의해 측정되는 바와 같이 치료를 행한다 (예를 들어, 치료, 예방, 억제, 완화, 촉진, 개선, 증가, 감소 등). 다른 실시양태에서, "유효량"은 1종 이상의 적응증, 증상, 징후, 진단 시험, 활력 징후 등에서의 통계적으로 유의한 변화의 결여에 의해 측정되는 바와 같이 상태를 억제, 관리, 또는 예방한다.

본원에 사용된 "통계적으로 유의한"은 스튜던트 t-검정을 사용하여 계산했을 때 0.050 이하의 p 값을 지칭하며, 이는 측정되는 특정한 사건 또는 결과가 우연히 발생할 가능성이 없음을 나타낸다.

본 기재에서, 임의의 농도 범위, 백분율 범위, 비 범위, 또는 정수 범위는, 달리 나타내지 않는 한, 열거된 범위 내의 임의의 정수 값, 및 적절한 경우에, 그의 분율 (예컨대 정수의 1/10 및 1/100)을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 또한, 중합체 서브유닛, 크기 또는 두께와 같은 임의의 물리적 특색과 관련하여 본원에 열거된 임의의 수 범위는, 달리 나타내지 않는 한, 열거된 범위 내의 임의의 정수를 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 본원에 사용된 용어 "약"은, 달리 나타내지 않는 한, 나타낸 범위, 값, 또는 구조의 ± 20%, ± 10%, ± 5% 또는 ± 1%를 의미한다. 본원에 사용된 단수 용어는 열거된 성분의 "하나 이상"을 지칭하는 것으로 이해되어야 한다. 대안적 사용 (예를 들어, "또는")은 대안 중 하나, 둘 다, 또는 그의 임의의 조합을 의미하는 것으로 이해되어야 한다.

문맥상 달리 요구되지 않는 한, 본 명세서 및 청구범위 전반에 걸쳐, 용어 "함유하다" 및 그의 변형어, 예컨대 "함유한다" 및 "함유하는", 뿐만 아니라 동의어, 예컨대 "포함하다" 및 "갖는다" 및 그의 변형은 개방형의 포괄적인 의미로; 즉, "포함하나 이에 제한되지는 않는" 것으로 해석되어야 하며, 따라서 목록에서 항목의 열거는 이러한 기술의 물질, 조성물, 장치, 및 방법에서 또한 유용할 수 있는 다른 유사 항목을 배제하는 것이 아니다. 포함하는, 비롯한, 또는 갖는과 같은 용어의 동의어로서 개방형 용어 "함유하는"이 개시내용을 기재하고 청구하는데 사용되지만, 본 발명의 기술 또는 그의 실시양태는 대안적으로, 언급된 성분"으로 이루어진" 또는 언급된 성분"으로 본질적으로 이루어진"과 같은 보다 제한적인 용어를 사용하여 기재될 수 있다.

달리 정의되지 않는 한, 본원의 모든 기술 과학 용어는 본 개시내용이 속하는 기술분야의 통상의 기술자에 의해 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다.

본 명세서 전반에 걸쳐 "하나의 실시양태" 또는 "한 실시양태"에 대한 언급은 실시양태와 관련하여 기재된 특정한 특색, 구조, 또는 특징이 본 개시내용의 적어도 하나의 실시양태에 포함된다는 것을 의미한다. 따라서, 본 명세서 전반에 걸쳐 다양한 위치에서의 어구 "하나의 실시양태에서" 또는 "한 실시양태에서"의 출현은 반드시 모두 동일한 실시양태를 지칭하는 것이 아니다. 유사하게, 용어 "가능할 수 있다" 및 "할 수 있다" 및 그의 변형은 비제한적 것으로 의도되며, 따라서 실시양태가 특정 요소 또는 특색을 포함하는 것이 가능할 수 있다 또는 포함할 수 있다는 언급은 그러한 요소 또는 특색을 함유하지 않는 본 기술의 다른 실시양태를 배제하는 것이 아니다. 또한, 특정한 특색, 구조, 또는 특징은 하나 이상의 실시양태에서 임의의 적합한 방식으로 조합될 수 있다.

하기 기재에서, 본 개시내용의 다양한 실시양태의 완전한 이해를 제공하기 위해 특정의 구체적 세부사항이 제시된다. 그러나, 관련 기술분야의 통상의 기술자는 개시내용이 이들 세부사항 없이 실시될 수 있음을 이해할 것이다.

약리학

미만성 내인성 뇌교 신경교종 (DIPG)은 교뇌로 불리는 뇌간의 일부에서 발견되는 뇌 종양이다. 교뇌는 본질적인 신체 기능, 예컨대 심박동, 호흡, 삼킴, 눈 움직임, 시각, 및 균형을 제어한다. 성인에서 발생하는 조직학적으로 유사한 병변보다 상당히 덜 빈번하기는 하지만, 소아에서의 고등급 신경교종은 임상 신경-종양학에서 주요 미충족 필요를 나타낸다. 문헌 [Jones C et al., Paediatric and adult malignant glioma: close relatives or distant cousins?, Nat Rev Clin Oncol. 2012 May 29; 9(7):400-13]을 참조하며, 이는 DIPG의 이러한 배경기술의 교시와 관련하여 본원에 참조로 포함된다.

DIPG 종양은 보편적으로 치명적이고, 중앙값 전체 생존은 9-12개월이다. DIPG는 미만성 침윤성이고, 더 낮은 등급의 조직학 영역을 보유할 수 있지만, 대부분은 뇌 피질의 WHO 등급 IV 다형성 교모세포종 (GBM)과 구별불가능하다. 이들 소아에서 생존을 개선시키기 위한 노력은 지금까지 실패하였다. 이들 종양의 외과적 절제는 그의 해부학적 위치로 인해 가능하지 않고, 성인 GBM 문헌으로부터의 유망한 표적에 기초한 임상 시험은 어떠한 이익도 나타내지 않았다. 예를 들어, 문헌 [Warren, Diffuse intrinsic pontine glioma: poised for progress, Front Oncol. 2012; 2:205, 및 Taylor et al., ACVR1 mutations in DIPG: lessons learned from FOP, Cancer Res., 2014 Sep 1: 74(17): 4565-4570]을 참조하고, 이들 각각은 DIPG의 이러한 배경기술의 교시와 관련하여 본원에 참조로 포함된다.

언급된 바와 같이, DIPG는 거의 독점적으로 소아에게 영향을 미친다. 마이클 모셔 패배 DIPG 재단(Michael Mosier Defeat DIPG Foundation)에 따르면, 미국에서 대략 200-400명의 소아가 매년 DIPG로 진단된다. 이들 소아는 전형적으로 4세 내지 11세이다. DIPG는 소아의 모든 뇌 종양의 대략 10-15%를 차지한다.

DIPG는 신체 기능을 방해할 수 있고, 소아가 움직이고, 소통하고, 심지어 먹고 마시는 능력을 박탈할 수 있는 공격성 종양이다. DIPG 종양이 성장하기 시작함에 따라, 이는 뇌에 의해 조절되는 본질적인 신체 기능을 제어하는 신경에 압력을 가할 수 있다. DIPG를 갖는 소아는 복시, 감소된 눈 움직임, 안면 약화 또는 비대칭, 및 팔 및 다리 약화를 겪을 수 있다. 이들은 또한 걷기, 협응, 말하기, 씹기, 및 삼킴에 문제를 가질 수 있다. 종양이 진행됨에 따라, 이는 또한 호흡 및 심박동을 방해할 수 있으며, 이는 궁극적으로 소아의 사망을 유발한다.

북즈코윅즈(Buczkowicz) 등은 임상적으로 전형적인 DIPG가 다양한 조직학적 스펙트럼을 나타낸다는 것을 입증하였다. 문헌 [Buczkowicz et al., Histopathological spectrum of paediatric diffuse intrinsic pontine glioma: diagnostic and therapeutic implications, Acta Neuropathol. 2014 Oct;128(4):573-81. doi: 10.1007/s00401-014-1319-6. Epub 2014 Jul 22]을 참조하고, 이는 DIPG의 배경기술의 교시와 관련하여 본원에 참조로 포함된다. 따라서, 이러한 맥락에서, DIPG는 침윤성 신경교종 - 등급 II 내지 IV의 조직학적 진단을 갖는 뇌교 종양으로서 특징화될 수 있다. 뇌간의 원발성 종양은 임상 소견 및 자기 공명 영상화 (MRI)를 사용한 신경영상화 연구에 기초하여 진단될 수 있다. DIPG의 추정상 진단은 조직학적 진단의 부재 하에 전형적인 영상화 특색에 기초하여 이루어질 수 있다. 점차적으로, 조사 연구로의 진입 및 종양의 분자 특징화 둘 다를 위한 조직학적 확인을 수득할 수 있다. 정위 바늘 생검을 사용하는 새로운 접근법은 또한 생검을 보다 안전하게 만들 수 있다. 생검은 진단이 영상화 소견에 기초하여 확실하지 않을 때 뇌교 종양에 대해 권장될 수 있다. 이에 따라, 성상세포 종양이 뇌간에서 두드러진다. WHO 등급 1 종양, 예컨대 모양세포성 성상세포종 및 신경절교종은 유리한 예후를 갖고, 중뇌의 덮개를 포함한 뇌간 전반에 걸쳐, 교뇌 내에 국소적으로, 또는 종종 외생인 경수연수 접합부에서 발생할 수 있다. 다른 뇌간 위치에서 교뇌 외부에서 발생하는 저등급 미만성 성상세포종 (WHO 등급 2)은 보다 유리한 예후를 갖는 종양인 경향이 있다. DIPG는 진단 시 생검할 때 미만성 성상세포종 (WHO 등급 2) 내지 교모세포종 (WHO 등급 4)의 범위일 수 있는 미만성 성상세포종이다. 사후 평가에서, DIPG는 또한 일반적으로 형태학적 기준에 의하면 역형성 성상세포종 (WHO 등급 3) 또는 교모세포종 (WHO 등급 4)이지만, WHO 등급 2 영역이 또한 확인될 수도 있다. 조직학적 등급에 상관없이 DIPG의 대략 80%는 WHO에 의해 미만성 정중선 신경교종으로 분류될 수 있다. 모든 미만성 정중선 신경교종, H3 K27M-돌연변이체는 조직학적 등급에 상관없이 이러한 진단을 갖는 소아의 불량한 예후를 반영하여 WHO 등급 4이다. 예를 들어, 문헌 [Ballester et al., Morphologic characteristics and immunohistochemical profile of diffuse intrinsic pontine gliomas. Am J Surg Pathol 37 (9): 1357-64, 2013, 및 Louis DN et al., The 2016 World Health Organization Classification of Tumors of the Central Nervous System: a summary. Acta Neuropathol 131 (6): 803-20, 2016]을 참조하며, 이들 각각은 DIPG 및 관련 질환의 특징화 및 진단과 관련하여 본원에 참조로 포함된다.

테일러(Taylor) 등은 DIPG 사례의 1/4이 ACVR1에서 체세포 돌연변이를 보유한다는 것을 확인시켜 주는 전체 게놈 서열분석 연구를 공개하였다. 이 유전자는 유형 I 골 형태발생 단백질 (BMP) 수용체 ALK2를 코딩하며, 이는 배선에서 돌연변이될 경우 연부 조직을 골로 변형시키는 선천성 기형 증후군인 진행성 골화성 섬유이형성증 (FOP)을 유발하는 것과 동일한 영향을 받은 잔기를 갖는다. 이러한 예상외의 연관성은 종양발생에서의 발생 생물학 과정의 중요성을 가리키고, FOP 연구원이 소아 신경종양학에 대해 어렵게 얻은 기계론적 이해 및 약물 개발에서 광범위한 경험을 제공한다. 예를 들어, 문헌 [Taylor et al., ACVR1 mutations in DIPG: lessons learned from FOP, Cancer Res., 2014 Sep 1: 74(17): 4565-4570]을 참조하며, 이는 이러한 배경기술의 교시와 관련하여 본원에 참조로 포함된다.

상기 언급된 바와 같이, 진행성 골화성 섬유이형성증 (FOP)은 ACVR1에서의 산발성 배선 돌연변이로 인해 1,500,000명의 정상 출산 중 1명에서 발생하는, 골격 기형 및 장애초래 이소성 골화의 상염색체 우성 장애이다. 문헌 [Shore EM et al., A recurrent mutation in the BMP type I receptor ACVR1 causes inherited 및 sporadic fibrodysplasia ossificans progressiva, Nat Genet. 2006 May; 38(5):525-7]을 참조하고, 이는 FOP의 이러한 배경기술의 교시와 관련하여 본원에 참조로 포함된다. FOP는 근육 조직 및 결합 조직, 예컨대 건 및 인대가 점차적으로 골에 의해 대체 (골화)되어, 움직임을 제약하는 골격의 외부에 골 (골격외 또는 이소성 골)을 형성하는 장애이다. 이러한 과정은 일반적으로 유아기에, 목 및 어깨에서 시작하여 신체 아래 및 사지로 진행하여 눈에 띄게 된다. 골격외 골 형성은 관절이 영향을 받게 됨에 따라 이동성의 점진적인 상실을 유발한다. 입을 완전히 벌릴 수 없는 것은 말하기 및 섭식에 어려움을 유발할 수 있다. 시간 경과에 따라, 이러한 장애를 갖는 사람은 그의 섭식 문제로 인해 영양실조를 겪을 수 있다. 이들은 또한 폐의 확장을 제한하는 늑곽 주위의 가외의 골 형성의 결과로서 호흡 곤란을 가질 수 있다. FOP를 갖는 개체의 근육에 대한 임의의 외상, 예컨대 낙상 또는 침습적 의료 절차는 근육 종창 및 염증 (근염) 에피소드에 이어서 손상된 영역에서 보다 신속한 골화를 촉발할 수 있다. 플레어-업이 또한 바이러스 질병, 예컨대 인플루엔자에 의해 유발될 수 있다.

DIPG에 새롭게 기재된 5개의 돌연변이 부위, 뿐만 아니라 코딩된 ALK2 단백질의 GS 및 키나제 도메인에 걸쳐 추가의 5개 부위는 또한 FOP 사례에서도 확인된다. 문헌 [Kaplan FS et al., Classic and atypical fibrodysplasia ossificans progressiva (FOP) phenotypes are caused by mutations in the bone morphogenetic protein (BMP) type I receptor ACVR1, Hum Mutat. 2009 Mar; 30(3):379-90]을 참조하며, 이는 FOP 및 DIPG의 이러한 배경기술의 교시와 관련하여 본원에 참조로 포함된다.

FOP 및 DIPG 둘 다를 관리하기 위한 효과적인 치료가 필요하다. 방사선은 새롭게 진단된 DIPG에 대한 전통적인 요법이다. 통상적인 제한된 필드 방사선은 DIPG를 갖는 소아의 90% 초과에서 반응을 생성한다. 이러한 반응은 수명이 짧지만, 평균 약 6개월 내지 9개월 지속된다. 방사선 요법의 선량을 증가시키기 위한 여러 시험이 수행되었고, 어떠한 것도 생존을 개선시키지 못했다. 수술은 둘 다의 상태에서 배제되고, ALK2/ACVR1에서 발견되는 활성화 돌연변이는 수용체의 세포질 부분에만 영향을 미치기 때문에, 치료 항체는 부적합한 것으로 보인다.

특정 실시양태에서, 개시내용의 방법은 미만성 내인성 뇌교 신경교종 (DIPG) 및 진행성 골화성 섬유이형성증 (FOP)을 비롯한 비정상적 ACVR1 발현의 치료에 유용하다.

본원에 개시된 특정 방법은 치료를 필요로 하는 대상체에 대한 치료 요법을 선택하게 한다. 즉, 본 개시내용은 치료 요법을 선택하는 방법 뿐만 아니라 치료 방법 자체를 제공한다. 다른 실시양태는 대상체가 미리 결정된 유전자 프로파일을 갖는 것에 기초하여 치료 요법을 선택하고 대상체에서 질환을 치료하는 방법을 제공한다. 다양한 실시양태에서, 본 개시내용의 방법은 대상체로부터 샘플을 수득하는 단계 및 유전자 프로파일을 결정하는 단계를 추가로 포함한다.

본원에 제공된 실시양태는 대상체의 유전자 프로파일에 기초하여 대상체에 대한 치료 요법을 선택하는 방법을 포함한다. 이러한 유전자 프로파일은 임의의 적합한 방식 (예를 들어, 마이크로어레이, 역전사 폴리머라제 연쇄 반응 (RT-PCR), RNA/DNA 서열분석 등)으로 생성될 수 있다.

일부 실시양태에서, 유전자 프로파일은 ACVR1 유전자에서 1개 이상의 돌연변이를 포함한다. 용어 "유전자"는 코딩 서열 뿐만 아니라 조절 영역, 예컨대 프로모터, 인핸서, 및 종결 영역을 포함할 수 있다. 상기 용어는 대안적 스플라이스 부위로부터 생성된 변이체와 함께, mRNA 전사체로부터 스플라이싱된 모든 인트론 및 다른 DNA 서열을 추가로 포함할 수 있다. 특정한 단백질을 코딩하는 유전자 서열은 특정한 단백질의 발현을 지시하는 DNA 또는 RNA일 수 있다. 이들 핵산 서열은 RNA로 전사되는 DNA 가닥 서열 또는 특정한 단백질로 번역되는 RNA 서열일 수 있다. 핵산 서열은 전장 단백질로부터 유래된 전장 핵산 서열 뿐만 아니라 비-전장 서열 둘 다를 포함한다.

다양한 실시양태에서, 치료를 받는 대상체는 ACVR1 유전자에서 1개 이상의 돌연변이를 갖는다. 실시양태에서, 대상체는 이러한 돌연변이(들)를 포함하는 미리 결정된 유전자 프로파일을 갖는다. 일부 실시양태에서, ACVR1 유전자에서의 1개 이상의 돌연변이는 미스센스 돌연변이, 프레임시프트 돌연변이, 중복 (즉, 카피수 변이), 스플라이스 부위 돌연변이, 또는 그의 조합을 포함한다.

실시양태에서, 1개 이상의 돌연변이는 (P197F198)L, C509S, D185G, D185N, D433N, E38FS, F265S, G225D, G264S, G328E, G328R, G328V, G328W, G356D, G50C, H320Y, I323V, K31E, K345Q, L196P, L251S, M34I, N100D, N481I, P115S, P455A, Q207E, Q278P, R201I, R206C, R206H, R258G, R258S, R307Q, R325A, R375C, R375P, R401M, R490H, S130F, S226N, S41F, S440G, S469C, S56L, T298S, V234M, V91M, W98R, 또는 그의 조합을 포함한다. 실시양태에서, ACVR1 유전자에서의 1개 이상의 돌연변이는 R206H, G328V, R258G, 또는 그의 조합을 포함한다. 특정 실시양태에서, ACVR1 유전자에서의 1개 이상의 돌연변이는 R206H를 포함한다.

일부 실시양태에서, ACVR1 유전자에서의 1개 이상의 돌연변이는 미스센스 돌연변이를 포함한다. 일부 실시양태에서, 미스센스 돌연변이는 C509S, D185N, D433N, F265S, G225D, H320Y, I323V, K31E, K345Q, M34I, N100D, N481I, P115S, P455A, Q278P, R206C, R401M, S130F, S226N, S41F, S41F, S440G, S469C, S56L, T298S, V234M, V91M, 또는 W98R이다. 일부 실시양태에서, ACVR1 유전자에서의 1개 이상의 돌연변이는 프레임시프트 돌연변이를 포함한다. 일부 실시양태에서, 프레임시프트 돌연변이는 E38fs이다. 일부 실시양태에서, ACVR1 유전자에서의 1개 이상의 돌연변이는 스플라이스 부위 돌연변이를 포함한다. 일부 실시양태에서, 스플라이스 부위 돌연변이는 G264S이다.

본원에 사용된 바와 같이, 돌연변이에 대한 약칭 언급은 (자연 발생 아미노산)(그러한 아미노산의 위치)(및 돌연변이체 펩티드에 존재하는 아미노산)을 나타낸다. 예를 들어, P197L은 위치 197의 프롤린이 류신으로 대체된 것을 나타낸다. 또 다른 예에서, (P197F198)L은 위치 197의 프롤린 및 위치 198의 페닐알라닌이 집합적으로 단일 류신으로 대체된 것을 나타낸다.

이러한 돌연변이는 임의의 적합한 방법을 사용하여 검출될 수 있다. 실시양태에서, 돌연변이는 샘플을 시약 (예를 들어, 항체 또는 핵산 프라이머)과 접촉시키고, 시약 및 마커(들)의 복합체를 생성하고, 복합체를 검출함으로써 검출된다. 항체는 공지된 기술, 예컨대 수동 결합에 따라 진단 검정에 적합한 고체 지지체에 접합될 수 있다. 항체는 공지된 기술, 예컨대 다색 유동 세포측정법을 포함한 유동 세포측정법에 따라 진단 검정을 위해 세포 표면 항원에 접합될 수 있다. 항체는 공지된 기술에 따라 검출가능한 표지 또는 기, 예컨대 방사성표지, 효소 표지, 및 형광 표지에 접합될 수 있다.

다양한 실시양태에서, ACVR1 억제제의 유효량이 대상체에게 투여된다. 실시양태에서, ACVR1 억제제는 암의 치료를 위해 투여된다. 고형 종양 및 백혈병을 포함한 매우 다양한 암이 본원에 개시된 방법에 적용가능하다. 실시양태에서, 암은 고형 암이다. 일부 실시양태에서, 암은 뇌암이다. 일부 실시양태에서, 암은 자궁암, 난소암, 또는 자궁경부암이다. 일부 실시양태에서, 암은 자궁암이다. 일부 실시양태에서, 자궁암은 자궁내막암이다. 일부 실시양태에서, 암은 폐암이다. 일부 실시양태에서, 암은 유방암이다. 일부 실시양태에서, 암은 결장암이다.

일부 실시양태에서, 암은 고형 종양을 포함한다. 일부 실시양태에서, 암은 진행된 고형 종양을 포함한다. 일부 실시양태에서, 암은 진행된 전이성 또는 진행성 고형 종양을 포함한다. 실시양태에서, 암은 뇌 또는 자궁 종양을 포함한다. 실시양태에서, 암은 비-고형 암이다. 다양한 실시양태에서, 암은 전-전이성 암이다. 다양한 실시양태에서, 암은 전이성 암이다.

다양한 실시양태에서 치료될 수 있는 암의 유형은 뇌암, 자궁암, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 유방암, 결장암, 위장암, 조혈 또는 림프성 암, 피부암, 및 골암을 포함한다.

일부 실시양태에서, 암은 뇌암 (예를 들어 뇌간 신경교종, 소뇌 성상세포종, 상의세포종, 수모세포종, 천막상 원시 신경외배엽 종양, 시각 경로 및 시상하부 신경교종)이다. 다양한 실시양태에서, 뇌암은 뇌 종양이다. 다양한 실시양태에서, 뇌암은 신경교종 (예를 들어 뇌간, 뇌 성상세포종, 시각 경로 및 시상하부)이다. 일부 실시양태에서, 신경교종은 고등급 신경교종이다. 일부 실시양태에서, 뇌암은 뇌간 신경교종이다. 일부 실시양태에서, 뇌암은 DIPG이다. 일부 실시양태에서, 암은 중추 신경계암 (예를 들어, 중추 신경계 림프종)이다. 일부 실시양태에서, 암은 신경모세포종이다.

일부 실시양태에서, 암은 자궁암, 난소암, 또는 자궁경부암이다. 일부 실시양태에서, 암은 자궁암이다. 일부 실시양태에서, 자궁암은 자궁내막암이다. 일부 실시양태에서, 자궁내막암은 자궁체부 자궁내막암이다. 실시양태에서, 암은 난소암 (예를 들어, 난소 선암종)이다.

일부 실시양태에서, 암은 폐암 (예를 들어 비소세포, 소세포)이다. 특정 실시양태에서, 폐암은 소세포 폐암이다. 일부 실시양태에서, 암은 유방암이다.

일부 실시양태에서, 암은 위장암이다. 일부 실시양태에서, 암은 상부 호흡 소화관암이다. 일부 실시양태에서, 암은 대장암이다. 일부 실시양태에서, 암은 결장암이다.

일부 실시양태에서, 암은 요로암이다. 일부 실시양태에서, 암은 전립선암이다.

실시양태에서, 암은 조혈 또는 림프성 암이다. 다양한 실시양태에서, 암은 백혈병 (예를 들어 급성 림프구성 백혈병, 급성 골수 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 모발상 세포, 급성 T 세포 백혈병 등) 또는 림프종 (예를 들어 AIDS-관련, 버킷, 피부 T-세포 호지킨, 비-호지킨, 원발성 중추 신경계)이다.

실시양태에서, 암은 피부암이다. 다양한 실시양태에서, 암은 흑색종 (예를 들어, 피부 흑색종)이다. 실시양태에서, 암은 골암이다. 일부 실시양태에서, 암은 골 종양 (예를 들어 골육종, 악성 섬유성 조직구종)이다.

특정한 유형의 암과 연관된 예시적인 돌연변이를 표 1에 제시한다.

표 1.

ACVR1 억제제의 유효량은 치료 후 종양 세포의 수를 감소시킬 수 있고/거나, 전이의 수를 감소시킬 수 있고/거나, 종양 부피를 감소시킬 수 있고/거나, 암 세포의 아폽토시스를 유도할 수 있고/거나, 암 세포 사멸을 유도할 수 있고/거나, 암 세포에서 방사성-감수성을 유도할 수 있고/거나, 암 세포 근처에서 혈관신생을 억제할 수 있고/거나, 암 세포 증식을 억제할 수 있고/거나, 종양 성장을 억제할 수 있고/거나, 전이를 방지할 수 있고/거나, 전이의 수를 감소시킬 수 있고/거나, 기대 수명을 증가시킬 수 있고/거나, 대상체의 수명을 연장시킬 수 있고/거나, 암-연관 통증을 감소시킬 수 있고/거나, 암의 재발 또는 재발생을 감소시킬 수 있다. 다양한 실시양태에서, ACVR1 억제제의 투여 효과는 객관적 방사선촬영 평가에 의해 평가될 수 있다.

다른 실시양태에서, 질환은 유전 장애이다. 일부 실시양태에서, 질환은 FOP이다.

실시양태에서, 본원에 기재된 치료 방법은 대상체에게 유효량의 ACVR1 억제제를 투여하는 것을 포함한다. 다양한 실시양태에서, ACVR1 억제제는 하기 화학식 (I)을 갖는 ACVR1 억제제:

또는 그의 입체이성질체, 제약상 허용되는 염, 호변이성질체 또는 전구약물이며,

여기서:

R¹은 H 또는 C₁-C₆ 알콕시이고;

R²는 C₁-C₆ 알콕시 또는 헤테로시클릴이고;

R³은 할로 또는 C₁-C₆ 알콕시이고;

R⁴는 H 또는 C₁-C₆ 알킬이다.

따라서, 실시양태에서, 개시내용의 방법은 ACVR1 유전자에서 1개 이상의 돌연변이를 포함하는 미리 결정된 유전자 프로파일을 갖는 대상체에게 하기 화학식 (I)을 갖는 ACVR1 억제제:

또는 그의 입체이성질체, 제약상 허용되는 염, 호변이성질체 또는 전구약물을 포함하는 치료 요법을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 R¹, R², R³, 및 R⁴는 본원에 정의된 바와 같다.

추가 실시양태에서, 개시내용의 방법은 대상체에게 하기 화학식 (I)을 갖는 ACVR1 억제제:

또는 그의 입체이성질체, 제약상 허용되는 염, 호변이성질체 또는 전구약물을 포함하는 치료 요법을 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 미만성 내인성 뇌교 신경교종 (DIPG)을 치료하는 방법을 포함하며, 여기서 R¹, R², R³, 및 R⁴는 본원에 정의된 바와 같다.

ACVR1 억제제 (I)의 특정 실시양태에서, R¹은 H이다.

ACVR1 억제제 (I)의 일부 실시양태에서, R¹은 C₁-C₆ 알콕시이다. 일부 실시양태에서, C₁-C₆ 알콕시는 메톡시이다.

ACVR1 억제제 (I)의 실시양태에서, R²는 C₁-C₆ 알콕시이다. 특정한 실시양태에서, C₁-C₆ 알콕시는 메톡시이다.

ACVR1 억제제 (I)의 다른 실시양태에서, R²는 헤테로시클릴이다. 특정 실시양태에서, 헤테로시클릴은 임의로 치환된 피페라지닐이다. 특정한 실시양태에서, 임의로 치환된 피페라지닐은 C₁-C₆ 알킬 또는 C₁-C₆ 히드록실알킬로 치환된다.

ACVR1 억제제 (I)의 일부 실시양태에서, R³은 할로이다. 특정한 실시양태에서, 할로는 클로로이다.

ACVR1 억제제 (I)의 추가 실시양태에서, R³은 C₁-C₆ 알콕시이다. 특정 실시양태에서, C₁-C₆ 알콕시는 메톡시이다.

ACVR1 억제제 (I)의 실시양태에서, R⁴는 H이다. 일부 실시양태에서, R⁴는 C₁-C₆ 알킬이다. 특정 실시양태에서, C₁-C₆ 알킬은 메틸이다.

다른 특정 실시양태에서, ACVR1 억제제는 표 2의 ACVR1 억제제로부터 선택된다.

표 2.

예시적인 ACVR1 억제제

IC₅₀ (nM), 여기서: ++는 1,000 nM 내지 10 nM이고; +++는 10 nM 미만임

특정한 실시양태에서, ACVR1 억제제는

또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구약물이다. 표 2와 관련하여 참조의 용이성을 위해, 특정한 실시양태에서, ACVR1 억제제는 화학식 (2)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다.

특정한 실시양태에서, ACVR1 억제제는

또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구약물이다.

특정한 실시양태에서, ACVR1 억제제는

또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구약물이다.

특정한 실시양태에서, ACVR1 억제제는

또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구약물이다.

특정한 실시양태에서, ACVR1 억제제는

또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구약물이다.

특정한 실시양태에서, ACVR1 억제제는

또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구약물이다.

다양한 실시양태에서, 제약상 허용되는 염은 산 부가염이다. 일부 실시양태에서, 산 부가염은 염산 염이다.

상기 제시된 바와 같은 화학식 (I)의 ACVR1 억제제의 임의의 실시양태, 및 상기 제시된 바와 같은 화학식 (I)의 ACVR1 억제제에서 본원에 제시된 구체적 치환기 중 임의의 것 (예를 들어, R¹-R⁴)은 독립적으로 다른 실시양태 및/또는 화학식 (I)의 ACVR1 억제제의 치환기와 조합되어 상기 구체적으로 제시되지 않은 개시내용의 실시양태를 형성할 수 있는 것으로 이해된다. 또한, 치환기의 목록이 특정한 실시양태 및/또는 청구항에서의 임의의 특정한 R 기에 대해 열거된 경우에, 각각의 개별 치환기는 특정한 실시양태 및/또는 청구항으로부터 삭제될 수 있고 치환기의 나머지 목록은 개시내용의 범주 내에 있는 것으로 간주될 것임이 이해된다. 본 기재에서, 도시된 화학식의 치환기 및/또는 가변기의 조합은 이러한 기여가 안정한 ACVR1 억제제를 생성하는 경우에만 허용되는 것으로 이해된다.

본 개시내용의 ACVR1 억제제는 본원에 참조로 포함되는 US 2016/0214944에 기재된 방법을 포함한, 관련 기술분야에 공지된 임의의 수의 방법에 따라 제조될 수 있다.

유리 염기 또는 산 형태로 존재하는 개시내용의 모든 ACVR1 억제제는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 방법에 의해 적절한 무기 또는 유기 염기 또는 산을 사용한 처리에 의해 그의 제약상 허용되는 염으로 전환될 수 있다. 개시내용의 ACVR1 억제제의 염은 표준 기술에 의해 그의 유리 염기 또는 산 형태로 전환될 수 있다.

본원에 기재된 ACVR1 억제제 (즉, 화학식 (I)의 ACVR1 억제제)는 1종 이상의 다른 추가의 치료제와 조합되어 사용될 수 있다. ACVR1 억제제의 투여량은 임의의 약물-약물 반응을 위해 조정될 수 있다.

따라서, 실시양태에서, 개시내용의 방법은 대상체에게 하기 화학식 (I)을 갖는 ACVR1 억제제:

또는 그의 입체이성질체, 제약상 허용되는 염, 호변이성질체 또는 전구약물 및 추가의 치료제를 포함하는 치료 요법을 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 고형 종양, DIPG, 또는 FOP를 치료하는 방법을 포함하며, 여기서 R¹, R², R³, 및 R⁴는 본원에 정의된 바와 같다.

다양한 실시양태에서, 추가의 치료제는 레티노산 수용체 감마 효능제; mTOR 억제제; 액티빈 A 항체; 키나제 억제제; ACVR1 항체; TAK1 억제제; 포스포디에스테라제 억제제; HDAC 억제제; 화학요법제; 면역요법제; 세포 요법; 펩티드 또는 종양 용해물 백신; 이리노테칸; GM-CSF를 함유하는 TTRNA-DC 백신, TTRNA-xALT; 인테그린 억제제; IL-12 요법; 안티네오플라스톤 요법; 이미퀴모드; 종양용해 아데노바이러스; WEE1 억제제; WT1 단백질 유래 펩티드 백신; peg화 인터페론 알파 2b; 키나제 항체; 스무슨드 억제제; 튜불린 억제제; 텔로머라제 억제제; CD40 효능제; GM-CSF 효능제; IDO 억제제; 및 방사성 아이오딘 표지된 모노클로날 항체 8H9.64 중 1종 이상을 포함한다.

실시양태에서, 추가의 치료제는 레티노산 수용체 감마 효능제; mTOR 억제제; 액티빈 A 항체; 키나제 억제제; ACVR1 항체; TAK1 억제제; 및 포스포디에스테라제 억제제 중 1종 이상을 포함한다. 일부 실시양태에서, 추가의 치료제는 HDAC 억제제; 화학요법제; 면역요법제; 세포 요법; 펩티드 또는 종양 용해물 백신; 이리노테칸; GM-CSF를 함유하는 TTRNA-DC 백신, TTRNA-xALT; 인테그린 억제제; IL-12 요법; 안티네오플라스톤 요법; 이미퀴모드; 종양용해 아데노바이러스; WEE1 억제제; WT1 단백질 유래 펩티드 백신; peg화 인터페론 알파 2b; 키나제 항체; 키나제 억제제; 스무슨드 억제제; 튜불린 억제제; 텔로머라제 억제제; CD40 효능제; GM-CSF 효능제; IDO 억제제; 및 방사성 아이오딘 표지된 모노클로날 항체 8H9 중 1종 이상을 포함한다.

실시양태에서, 키나제 억제제는 시클린 의존성 키나제 (CDK)를 억제한다. 일부 실시양태에서, CDK는 CDK9 또는 CDK7이다. 일부 실시양태에서, CDK는 CDK9이다. 다양한 실시양태에서, CDK9 억제제는 siRNA, 알보시딥, 또는 그의 전구약물, 디나시클립, 또는 그의 조합이다. 특정한 실시양태에서, CDK9 억제제는 알보시딥 또는 그의 전구약물이다. 이러한 전구약물의 예 (예를 들어, 포스페이트 전구약물)는 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 9,758,539에 기재되어 있다. 실시양태에서, 키나제 억제제는 포스포이노시티드 3-키나제 (PI3K)를 억제한다.

다양한 실시양태에서, 면역요법제는 면역 체크포인트 억제제이다. 일부 실시양태에서, 면역 체크포인트 억제제는 PD-1 억제제이다. 특정한 실시양태에서, PD-1 억제제는 펨브롤리주맙, 니볼루맙, 또는 그의 조합이다. 일부 실시양태에서, 면역 체크포인트 억제제는 PD-L1 억제제이다. 특정 실시양태에서, PD-L1 억제제는 아테졸리주맙, 아벨루맙, 두르발루맙, 또는 그의 조합이다.

일부 실시양태에서, 키나제 항체는 약물 접합체를 포함한다.

특정한 실시양태에서, 레티노산 수용체 감마 효능제는 팔로바로텐이다. 특정한 실시양태에서, mTOR 억제제는 라파마이신 또는 에베롤리무스이다. 특정한 실시양태에서, 액티빈 A 항체는 REGN2447이다. 특정한 실시양태에서, 키나제 억제제는 사라카티닙, 모멜로티닙, 도르소모르핀, 이마티닙, 크리조티닙, 다사티닙, 베바시주맙, 에를로티닙, 반데타닙, 리보시클립, 크레놀라닙, 아베마시클립, ONC201, 실렌기티드, 알보시딥, 또는 그의 전구약물이다. 특정한 실시양태에서, 포스포디에스테라제 억제제는 디피리다몰이다. 특정한 실시양태에서, HDAC 억제제는 SAHA, 보리노스타트, 또는 파노비노스타트이다. 특정한 실시양태에서, 면역요법제는 MDV9300이다. 특정한 실시양태에서, 세포 요법은 자가 수지상 세포를 포함한다. 특정한 실시양태에서, 펩티드 또는 종양 용해물 백신은 K27M 펩티드 또는 린도페피무트를 포함한다. 특정한 실시양태에서, 이리노테칸은 대류 증진 전달에 의해 투여된다. 특정한 실시양태에서, 인테그린 억제제는 실렌기티드이다. 특정한 실시양태에서, 안티네오플라스톤 요법은 아텐게날(Atengenal) 또는 아스투게날(Astugenal)이다. 특정한 실시양태에서, 종양용해 아데노바이러스는 DNX-2401이다. 특정한 실시양태에서, WEE1 억제제는 AZD1775이다. 특정한 실시양태에서, WT1 단백질 유래 펩티드 백신은 DSP-7888이다. 특정한 실시양태에서, 키나제 항체는 니모투주맙, 에르비툭스, 또는 ABT-414이다. 특정한 실시양태에서, 스무슨드 억제제는 비스모데깁이다. 특정한 실시양태에서, 튜불린 억제제는 메벤다졸이다. 특정한 실시양태에서, 텔로머라제 억제제는 이메텔스타트이다. 특정한 실시양태에서, CD40 효능제는 APX005M이다. 특정한 실시양태에서, GM-CSF 효능제는 레오바이러스를 함유하는 사르그라모스팀이다. 특정한 실시양태에서, IDO 억제제는 인독시모드이다.

한 실시양태에서, 추가의 치료제는 화학요법제이다. 특정한 실시양태에서, 화학요법제는 멜팔란, 겜시타빈, 테모졸로미드, 시클로포스파미드, 플루다라빈, 독소루비신, 이리노테칸, 레날리도미드, 발프로산, 클로로퀸, 카르보플라틴, 에토포시드, 이포스파미드, 포말리도미드, 또는 로무스틴이다.

상기 방법은 또한 방사선 요법과 조합되어 수행될 수 있으며, 여기서 방사선 요법과 조합된 ACVR1 억제제의 양은 상기 질환을 치료하는데 효과적이다.

한 실시양태에서, 방사선은 화학식 (I)의 화합물에 의한 치료 전에 제공된다. 한 실시양태에서, 방사선은 화학식 (I)의 화합물에 의한 치료 후에 제공된다. 한 실시양태에서, 방사선은 화학식 (I)의 화합물에 의한 치료 전 및 후 둘 다에 제공된다. 한 실시양태에서, 화학식 (I)의 화합물에 의한 치료는 대상체가 재-조사되기 전에 연장된 기간을 허용하여, 방사선 요법과 연관된 부작용의 감소를 가능하게 한다.

방사선 요법을 투여하는 기술은 관련 기술분야에 공지되어 있고, 이들 기술은 본원에 기재된 조합 요법에 사용될 수 있다. 이러한 조합 요법에서의 개시내용의 ACVR1 억제제의 투여는 본원에 기재된 바와 같이 결정될 수 있다.

일부 실시양태에서, 본원에 기재된 치료 요법은 외과적 절제를 추가로 포함한다. 이러한 기술은 관련 기술분야에 공지되어 있다.

다양한 실시양태에서, 대상체는 그의 질환에 대해 이전 치료를 받았다. 이러한 실시양태에서, 대상체는 이전 치료에 대해 불응성이거나 불내성일 수 있다. 본원에 사용된 "불응성"은, 본원에 참조로 포함되는 문헌 [Eur J Cancer. 2016 Jul;62:132-7]에 기재된 바와 같이, 대상체가 RECIST에 의한 진행성 질환을 나타냄을 가리킨다. 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 이해되는 바와 같이, 대상체는 표적 병변의 적어도 20% 증가가 존재하는 경우에 RECIST에 기초하여 "진행성 질환"을 갖는 것으로 간주된다. DIPG의 경우 "완전 반응"은 모든 표적 병변의 소멸을 지칭한다. DIPG에서 "부분 반응"은 표적 병변의 합의 적어도 30% 감소를 지칭하고, "안정 질환"은 PR에 부합하는 충분한 수축도 아니고 PD에 부합하는 충분한 증가도 아니다. 본원에 사용된 "불내성"은 대상체가 유효량의 치료제의 유해 효과를 용인할 수 없거나 용인할 의향이 없다는 것을 의미한다. 일부 실시양태에서, 대상체는 선행 치료 요법에 대해 불내성이다.

특히 DIPG의 경우, 화학식 (I)의 화합물에 의한 치료의 유효성은 전체 생존 (OS) 또는 무진행 생존 (PFS)에 기초하여 측정될 수 있으며, 이는 수주, 수개월, 또는 수년에 기초하여 계산될 수 있다. 한 실시양태에서, 화학식 (I)의 화합물에 의한 치료는 6개월 이상, 9개월 이상, 1년 이상, 또는 5년 이상의 OS를 제공한다. 한 실시양태에서, 화학식 (I)의 화합물에 의한 치료는 적어도 6개월, 적어도 9개월, 적어도 1년, 또는 적어도 5년의 PFS를 제공한다.

실시양태에서, 치료될 대상체는 1종 이상의 마커의 미리 결정된 수준을 갖는다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 마커는 철 조절에 대한 것이다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 마커는 헵시딘 수준, 종양 부담, 트랜스페린 포화, c-반응성 단백질 (CRP), 심장 마커 (B-유형 나트륨이뇨 펩티드 (BNP), N-말단 프로 B-유형 나트륨이뇨 펩티드 (NT-프로BNP)), 혈청 철, 총 철, 페리틴, 트랜스페린, 가용성 트랜스페린 수용체 (STR), 총 철 결합 능력 (TIBC), 포스포-SMAD, 또는 그의 조합을 포함한다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 마커는 철 패널 (즉, 혈청 철, 페리틴, 트랜스페린, STR, 및 TIBC)을 사용하여 평가된다. 다양한 실시양태에서, 1종 이상의 마커는 ACVR1의 하류의 포스포-신호전달 경로에 존재한다. 추가 실시양태에서, 1종 이상의 마커는 ACVR1/SMAD 신호전달의 하류의 유전자 발현 마커이다.

다양한 실시양태에서, 치료될 대상체는 역치 값 초과의 미리 결정된 마커 (예를 들어, 헵시딘) 수준을 갖는다.

기준선 수준은 집단으로부터 유도될 수 있다. "집단"은 유사한 명시된 특징의 대상체 또는 샘플의 임의의 군분류이다. 군분류는, 예를 들어 임상 파라미터, 임상 평가, 치료 요법, 질환 상태, 상태의 중증도 등에 따를 수 있다.

일부 실시양태에서, 집단은 무작위로 선택된다. 일부 실시양태에서, 집단은 약 2, 약 5, 약 10, 약 25, 약 50, 약 75, 또는 약 100명의 대상체를 포함하는 군이다. 일부 실시양태에서, 집단은 약 200, 약 300, 약 500, 약 1,000, 약 1,500, 약 2,000, 약 3,000, 약 5,000, 또는 약 10,000명의 대상체를 포함하는 군이다. 일부 실시양태에서, 집단은 약 10,000명 미만의 대상체를 포함하는 군이다. 다른 실시양태에서, 집단은 약 10,000명 초과의 대상체를 포함하는 군이다.

일부 실시양태에서, 집단은 암을 갖는 개체 및 암을 갖지 않는 개체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 집단의 일부는 고형 암을 갖는다. 일부 실시양태에서, 집단의 일부는 뇌암을 갖는다. 일부 실시양태에서, 집단의 일부는 자궁암을 갖는다.

일부 실시양태에서, 집단은 암을 갖지 않는 군이다. 일부 실시양태에서, 집단은 고형 암을 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 집단은 뇌암을 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 집단은 자궁암을 갖지 않는다.

일부 실시양태에서, 집단은 암을 갖는 군이다. 실시양태에서, 집단은 고형 암을 갖는다. 일부 실시양태에서, 집단은 뇌암을 갖는다. 일부 실시양태에서, 집단은 자궁암을 갖는다. 일부 실시양태에서, 집단은 대상체와 동일한 유형의 암을 갖는다.

실시양태에서, 마커 (예를 들어, 헵시딘)의 발현 수준은 기준선 발현 수준보다 적어도 약 10% 더 높다. 일부 실시양태에서, 발현 수준은 적어도 약 1% 초과, 적어도 약 2% 초과, 적어도 약 3% 초과, 적어도 약 4% 초과, 적어도 약 5% 초과, 적어도 약 7% 초과, 적어도 약 12% 초과, 적어도 약 15% 초과, 적어도 약 17% 초과, 적어도 약 20% 초과, 적어도 약 22% 초과, 적어도 약 25% 초과, 적어도 약 27% 초과, 적어도 약 30% 초과, 적어도 약 32% 초과, 적어도 약 35% 초과, 적어도 약 37% 초과, 적어도 약 40% 초과, 적어도 약 45% 초과, 적어도 약 50% 초과, 적어도 약 75% 초과, 또는 적어도 약 90% 초과이다. 특정 실시양태에서, 마커 (예를 들어, 헵시딘)는 상향-조절된다. "상향-조절" 또는 "상향-조절된"은 단백질 존재의 증가 및/또는 그의 유전자 발현의 증가를 지칭한다.

일부 실시양태에서, 마커 (예를 들어, 헵시딘)의 발현 수준은 기준선 발현 수준 미만이다. 실시양태에서, 마커의 발현 수준은 기준선 발현 수준보다 적어도 10% 더 낮다. 일부 실시양태에서, 발현 수준은 적어도 약 1% 미만, 적어도 약 2% 미만, 적어도 약 3% 미만, 적어도 약 4% 미만, 적어도 약 5% 미만, 적어도 약 10% 미만, 적어도 약 12% 미만, 적어도 약 15% 미만, 적어도 약 17% 미만, 적어도 약 20% 미만, 적어도 약 22% 미만, 적어도 약 25% 미만, 적어도 약 27% 미만, 적어도 약 30% 미만, 적어도 약 32% 미만, 적어도 약 35% 미만, 적어도 약 37% 미만, 적어도 약 40% 미만, 적어도 약 45% 미만, 적어도 약 50% 미만, 적어도 약 75% 미만, 또는 적어도 약 90% 미만이다. 특정 실시양태에서, 마커 (예를 들어, 헵시딘)는 하향-조절된다. "하향-조절" 또는 "하향-조절된"은 단백질 존재의 감소 및/또는 그의 유전자 발현의 감소를 지칭한다.

마커 (예를 들어, 헵시딘)의 발현의 측정은 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법을 사용하여 단백질 또는 핵산 수준에서 결정될 수 있다. 일부 실시양태에서, 마커 발현은 샘플을 시약 (예를 들어, 항체 또는 핵산 프라이머)과 접촉시키고, 시약 및 마커(들)의 복합체를 생성하고, 복합체를 검출함으로써 검출된다. 항체는 공지된 기술, 예컨대 수동 결합에 따라 진단 검정에 적합한 고체 지지체에 접합될 수 있다. 항체는 공지된 기술, 예컨대 다색 유동 세포측정법을 포함한 유동 세포측정법에 따라 진단 검정을 위해 세포 표면 항원에 접합될 수 있다. 항체는 공지된 기술에 따라 검출가능한 표지 또는 기, 예컨대 방사성표지, 효소 표지, 및 형광 표지에 접합될 수 있다.

적합한 면역검정의 예는 이뮤노블롯팅, 면역침전, 면역형광, 화학발광, 전기-화학발광 (ECL), 및 ELISA를 포함한다. 마커의 상향- 또는 하향-조절은 또한, 예를 들어 cDNA 어레이, 클론 혼성화, 차등 디스플레이, 차등 스크리닝, FRET 검출, 액체 마이크로어레이, PCR, RT-PCR, 생어 서열분석, 질량-병렬 (차세대) 서열분석, 분자 비콘, 마이크로전기 어레이, 올리고뉴클레오티드 어레이, 폴리뉴클레오티드 어레이, 유전자 발현의 연속 분석 (SAGE), 및/또는 감산 혼성화를 사용하여 검출될 수 있다.

발현은 치료 전 대상체로부터 수집된 샘플에서 결정될 수 있다. 이러한 실시양태에서, 발현 수준은 특정한 치료에 대한 반응성을 예측하는데 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 발현 수준은 대상체에게 투여되는 치료를 결정하기 위해 적어도 부분적으로 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 샘플은 치료 요법이 투여되기 약 28일 전에 수집된다. 일부 실시양태에서, 샘플은 치료 요법이 투여되기 약 14일 전에 수집된다. 일부 실시양태에서, 샘플은 치료 요법이 투여되기 약 7일 전에 수집된다. 일부 실시양태에서, 샘플은 치료 요법이 투여되기 약 72시간 전에 수집된다. 일부 실시양태에서, 샘플은 치료 요법이 투여되기 최대 약 6시간 전에 수집된다.

구체적 실시양태에서, 샘플은 치료의 제1 사이클의 제1일, 투여전, 투여 0.5시간 후, 투여 2시간 후, 투여 4시간 후, 투여 6시간 후, 투여 8시간 후, 투여 12시간 후, 및/또는 투여 24시간 후에 수집된다. 구체적 실시양태에서, 샘플은 치료의 제1 사이클의 제1일, 투여전, 투여 0.5시간 후, 투여 2시간 후, 투여 4시간 후, 투여 6시간 후, 및/또는 투여 24시간 후에 수집된다. 구체적 실시양태에서, 샘플은 치료의 제1 사이클의 제1일, 투여전, 투여 2시간 후, 투여 6시간 후, 및/또는 투여 24시간 후에 수집된다. 일부 실시양태에서, 샘플은 치료 용량이 대상체에게 투여된 후에 수집될 수 있다. 또 다른 구체적 실시양태에서, 샘플은 또한 치료의 제1 사이클의 제8일, 투여전에 수집된다. 일부 실시양태에서, 샘플은 치료의 제1 사이클의 제1일, 제7일, 제14일, 제21일, 및 제28일 중 1회 이상, 투여전에 수집된다. 구체적 실시양태에서, 샘플은 치료의 제1 사이클의 제21일, 투여전, 투여 0.5시간 후, 투여 2시간 후, 투여 4시간 후, 투여 6시간 후, 투여 8시간 후, 투여 12시간 후, 및/또는 투여 24시간 후에 수집된다. 구체적 실시양태에서, 샘플은 치료의 제1 사이클의 제21일, 투여전, 투여 0.5시간 후, 투여 2시간 후, 투여 4시간 후, 투여 6시간 후, 및/또는 투여 24시간 후에 수집된다. 구체적 실시양태에서, 샘플은 치료의 제1 사이클의 제21일, 투여전, 2시간, 및 6시간째에 수집된다. 구체적 실시양태에서, 샘플은 치료의 제1 사이클의 제21일, 투여전, 투여 2시간 후, 투여 6시간 후, 및/또는 투여 48시간 후에 수집된다. 구체적 실시양태에서, 샘플은 치료 사이클의 제8일, 제21일, 및 제23일에 수집된다.

또 다른 구체적 실시양태에서, 샘플은 또한 치료의 제2 사이클의 제1일, 투여전에 수집된다. 일부 실시양태에서, 샘플은 제2 사이클의 1일 전 7일 내에 수집된다. 또 다른 구체적 실시양태에서, 샘플은 또한 치료의 제2 사이클의 제1일에 치료 4시간 후에 수집된다. 일부 실시양태에서, 샘플은 치료의 제2 사이클의 제1일, 제7일, 제14일, 제21일, 및 제28일 중 1회 이상, 투여전에 수집된다. 일부 실시양태에서, 샘플은 치료의 제2 사이클의 제1일, 제8일, 제15일, 제22일, 및 제29일 중 1회 이상 수집된다. 일부 실시양태에서, 샘플은 치료의 제2 사이클의 제21일, 투여전에 수집된다. 추가의 구체적 실시양태에서, 샘플은 또한 치료의 임의의 추가의 사이클 (예를 들어, 제3, 제4, 제5 등)의 제1일, 투여전에 수집된다. 일부 구체적 실시양태에서, 샘플은 치료의 임의의 추가의 사이클 (예를 들어, 제3, 제4, 제5 등) 동안 본원에 기재된 스케줄 중 하나에 따라, 투여전에 수집된다. 또 다른 구체적 실시양태에서, 샘플은 또한 치료가 완료된 후에 수집된다. 이러한 실시양태에서, 샘플은 치료의 완료의 14일 내에 수집될 수 있다.

이해되는 바와 같이, 수집된 샘플의 유형은 시험되는 마커에 기초하여 선택될 것이다. 임의의 적합한 샘플 (예를 들어, 혈장, 혈청, 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 등)이 사용될 수 있다.

상향- 또는 하향-조절은 값을 관련 참조 수준과 비교함으로써 평가될 수 있다. 예를 들어, 1종 이상의 마커의 양이 값으로 나타내어질 수 있고, 이는 예를 들어 수행된 검정에 의해 샘플 중 마커(들)의 수준(들)을 측정함으로써 유도될 수 있다. 실시양태에서, 시스템 및 방법은 검정되는 샘플에 마커가 존재하는지의 정량적 검출, 즉 검정되는 샘플 중 마커의 실제 양 또는 상대 존재비의 분석 또는 평가를 제공한다. 이러한 실시양태에서, 정량적 검출은 절대적일 수 있거나, 또는 방법이 샘플 내의 2종 이상의 상이한 마커를 검출하는 방법인 경우, 상대적일 수 있다. 따라서, 용어 "정량하는"이 샘플 중 마커를 정량화하는 것과 관련하여 사용되는 경우, 이는 절대적 또는 상대적 정량화를 지칭할 수 있다. 절대적 정량화는 공지된 농도(들)의 1종 이상의 대조군 마커를 포함시키고, 검출된 마커 수준을 공지된 대조군 마커와 (예를 들어, 표준 곡선의 생성을 통해) 관련시킴으로써, 예를 들어 정규화함으로써 달성될 수 있다. 대안적으로, 상대적 정량화는 2종 이상의 상이한 마커 사이의 검출된 수준 또는 양의 비교에 의해 달성될 수 있고, 이는 예를 들어 서로에 대해, 2종 이상의 마커 각각의 상대적 정량화를 제공할 수 있다.

다양한 실시양태에서, 1종 이상의 마커의 수준은 ACVR1 억제제가 투여된 후에 모니터링된다.

실시양태에서, ACVR1 억제제의 투여 및 1종 이상의 마커 사이의 관계는 스피어만 순위 상관관계 통계를 사용하여 정량화될 수 있다.

일부 실시양태에서, 1종 이상의 마커는 헵시딘을 포함한다. 일부 실시양태에서, 대상체는 적어도 약 0.1 ng/mL, 약 0.2 ng/mL, 약 0.3 ng/mL, 약 0.4 ng/mL, 약 0.5 ng/mL, 약 0.6 ng/mL, 약 0.7 ng/mL, 약 0.8 ng/mL, 약 0.9 ng/mL, 약 1 ng/mL, 약 1.5 ng/mL, 약 2 ng/mL, 약 2.5 ng/mL, 약 3 ng/mL, 약 4 ng/mL, 약 5 ng/mL, 약 6 ng/mL, 약 7 ng/mL, 약 8 ng/mL, 약 9 ng/mL, 약 10 ng/mL, 약 12.5 ng/mL, 약 15 ng/mL, 약 20 ng/mL, 약 25 ng/mL, 약 30 ng/mL, 약 35 ng/mL, 약 40 ng/mL, 약 45 ng/mL, 약 50 ng/mL, 약 55 ng/mL, 약 60 ng/mL, 약 65 ng/mL, 약 70 ng/mL, 약 75 ng/mL, 약 80 ng/mL, 약 85 ng/mL, 약 90 ng/mL, 약 95 ng/mL, 약 100 ng/mL, 약 105 ng/mL 약 110 ng/mL, 약 115 ng/mL, 약 120 ng/mL, 약 125 ng/mL, 약 130 ng/mL, 약 135 ng/mL, 약 140 ng/mL, 약 145 ng/mL, 약 150 ng/mL, 약 155 ng/mL, 약 160 ng/mL, 약 165 ng/mL, 약 170 ng/mL, 약 175 ng/mL, 약 180 ng/mL, 약 185 ng/mL, 약 190 ng/mL, 약 195 ng/mL, 또는 약 200 ng/mL의 미리 결정된 헵시딘 수준을 갖는다.

다양한 실시양태에서, 대상체는 약 0.1 ng/mL 내지 약 5 ng/mL, 약 10 ng/mL, 약 15 ng/mL, 약 20 ng/mL, 약 25 ng/mL, 약 30 ng/mL, 약 35 ng/mL, 약 40 ng/mL, 약 45 ng/mL, 약 50 ng/mL, 약 55 ng/mL, 약 60 ng/mL, 약 65 ng/mL, 약 70 ng/mL, 약 75 ng/mL, 약 80 ng/mL, 약 85 ng/mL, 약 90 ng/mL, 약 95 ng/mL, 약 100 ng/mL, 약 105 ng/mL 약 110 ng/mL, 약 115 ng/mL, 약 120 ng/mL, 약 125 ng/mL, 약 130 ng/mL, 약 135 ng/mL, 약 140 ng/mL, 약 145 ng/mL, 약 150 ng/mL, 약 155 ng/mL, 약 160 ng/mL, 약 165 ng/mL, 약 170 ng/mL, 약 175 ng/mL, 약 180 ng/mL, 약 185 ng/mL, 약 190 ng/mL, 약 195 ng/mL, 또는 약 200 ng/mL의 미리 결정된 헵시딘 수준을 갖는다.

다양한 실시양태에서, 대상체는 약 0.5 ng/mL 내지 약 5 ng/mL, 약 10 ng/mL, 약 15 ng/mL, 약 20 ng/mL, 약 25 ng/mL, 약 30 ng/mL, 약 35 ng/mL, 약 40 ng/mL, 약 45 ng/mL, 약 50 ng/mL, 약 55 ng/mL, 약 60 ng/mL, 약 65 ng/mL, 약 70 ng/mL, 약 75 ng/mL, 약 80 ng/mL, 약 85 ng/mL, 약 90 ng/mL, 약 95 ng/mL, 약 100 ng/mL, 약 105 ng/mL 약 110 ng/mL, 약 115 ng/mL, 약 120 ng/mL, 약 125 ng/mL, 약 130 ng/mL, 약 135 ng/mL, 약 140 ng/mL, 약 145 ng/mL, 약 150 ng/mL, 약 155 ng/mL, 약 160 ng/mL, 약 165 ng/mL, 약 170 ng/mL, 약 175 ng/mL, 약 180 ng/mL, 약 185 ng/mL, 약 190 ng/mL, 약 195 ng/mL, 또는 약 200 ng/mL의 미리 결정된 헵시딘 수준을 갖는다.

다양한 실시양태에서, 대상체는 약 1 ng/mL 내지 약 5 ng/mL, 약 10 ng/mL, 약 15 ng/mL, 약 20 ng/mL, 약 25 ng/mL, 약 30 ng/mL, 약 35 ng/mL, 약 40 ng/mL, 약 45 ng/mL, 약 50 ng/mL, 약 55 ng/mL, 약 60 ng/mL, 약 65 ng/mL, 약 70 ng/mL, 약 75 ng/mL, 약 80 ng/mL, 약 85 ng/mL, 약 90 ng/mL, 약 95 ng/mL, 약 100 ng/mL, 약 105 ng/mL 약 110 ng/mL, 약 115 ng/mL, 약 120 ng/mL, 약 125 ng/mL, 약 130 ng/mL, 약 135 ng/mL, 약 140 ng/mL, 약 145 ng/mL, 약 150 ng/mL, 약 155 ng/mL, 약 160 ng/mL, 약 165 ng/mL, 약 170 ng/mL, 약 175 ng/mL, 약 180 ng/mL, 약 185 ng/mL, 약 190 ng/mL, 약 195 ng/mL, 또는 약 200 ng/mL의 미리 결정된 헵시딘 수준을 갖는다.

다양한 실시양태에서, 대상체는 약 5 ng/mL 내지 약 10 ng/mL, 약 15 ng/mL, 약 20 ng/mL, 약 25 ng/mL, 약 30 ng/mL, 약 35 ng/mL, 약 40 ng/mL, 약 45 ng/mL, 약 50 ng/mL, 약 55 ng/mL, 약 60 ng/mL, 약 65 ng/mL, 약 70 ng/mL, 약 75 ng/mL, 약 80 ng/mL, 약 85 ng/mL, 약 90 ng/mL, 약 95 ng/mL, 약 100 ng/mL, 약 105 ng/mL 약 110 ng/mL, 약 115 ng/mL, 약 120 ng/mL, 약 125 ng/mL, 약 130 ng/mL, 약 135 ng/mL, 약 140 ng/mL, 약 145 ng/mL, 약 150 ng/mL, 약 155 ng/mL, 약 160 ng/mL, 약 165 ng/mL, 약 170 ng/mL, 약 175 ng/mL, 약 180 ng/mL, 약 185 ng/mL, 약 190 ng/mL, 약 195 ng/mL, 또는 약 200 ng/mL의 미리 결정된 헵시딘 수준을 갖는다.

다양한 실시양태에서, 대상체는 약 10 ng/mL 내지 약 20 ng/mL, 약 25 ng/mL, 약 30 ng/mL, 약 35 ng/mL, 약 40 ng/mL, 약 45 ng/mL, 약 50 ng/mL, 약 55 ng/mL, 약 60 ng/mL, 약 65 ng/mL, 약 70 ng/mL, 약 75 ng/mL, 약 80 ng/mL, 약 85 ng/mL, 약 90 ng/mL, 약 95 ng/mL, 약 100 ng/mL, 약 105 ng/mL 약 110 ng/mL, 약 115 ng/mL, 약 120 ng/mL, 약 125 ng/mL, 약 130 ng/mL, 약 135 ng/mL, 약 140 ng/mL, 약 145 ng/mL, 약 150 ng/mL, 약 155 ng/mL, 약 160 ng/mL, 약 165 ng/mL, 약 170 ng/mL, 약 175 ng/mL, 약 180 ng/mL, 약 185 ng/mL, 약 190 ng/mL, 약 195 ng/mL, 또는 약 200 ng/mL의 미리 결정된 헵시딘 수준을 갖는다.

다양한 실시양태에서, 대상체는 약 12.5 ng/mL 내지 약 20 ng/mL, 약 25 ng/mL, 약 30 ng/mL, 약 35 ng/mL, 약 40 ng/mL, 약 45 ng/mL, 약 50 ng/mL, 약 55 ng/mL, 약 60 ng/mL, 약 65 ng/mL, 약 70 ng/mL, 약 75 ng/mL, 약 80 ng/mL, 약 85 ng/mL, 약 90 ng/mL, 약 95 ng/mL, 약 100 ng/mL, 약 105 ng/mL 약 110 ng/mL, 약 115 ng/mL, 약 120 ng/mL, 약 125 ng/mL, 약 130 ng/mL, 약 135 ng/mL, 약 140 ng/mL, 약 145 ng/mL, 약 150 ng/mL, 약 155 ng/mL, 약 160 ng/mL, 약 165 ng/mL, 약 170 ng/mL, 약 175 ng/mL, 약 180 ng/mL, 약 185 ng/mL, 약 190 ng/mL, 약 195 ng/mL, 또는 약 200 ng/mL의 미리 결정된 헵시딘 수준을 갖는다.

다양한 실시양태에서, 대상체는 약 25 ng/mL 내지 약 35 ng/mL, 약 40 ng/mL, 약 45 ng/mL, 약 50 ng/mL, 약 55 ng/mL, 약 60 ng/mL, 약 65 ng/mL, 약 70 ng/mL, 약 75 ng/mL, 약 80 ng/mL, 약 85 ng/mL, 약 90 ng/mL, 약 95 ng/mL, 약 100 ng/mL, 약 105 ng/mL 약 110 ng/mL, 약 115 ng/mL, 약 120 ng/mL, 약 125 ng/mL, 약 130 ng/mL, 약 135 ng/mL, 약 140 ng/mL, 약 145 ng/mL, 약 150 ng/mL, 약 155 ng/mL, 약 160 ng/mL, 약 165 ng/mL, 약 170 ng/mL, 약 175 ng/mL, 약 180 ng/mL, 약 185 ng/mL, 약 190 ng/mL, 약 195 ng/mL, 또는 약 200 ng/mL의 미리 결정된 헵시딘 수준을 갖는다.

헵시딘 수준은 또한 몰 농도로 측정될 수 있다. 일부 실시양태에서, 미리 결정된 헵시딘 수준은 적어도 4 nM이다. 일부 이러한 실시양태에서, 대상체는 여성이다. 일부 실시양태에서, 미리 결정된 헵시딘 수준은 적어도 4.1 nM이다. 일부 이러한 실시양태에서, 대상체는 여성이다. 일부 실시양태에서, 미리 결정된 헵시딘 수준은 적어도 8.5 nM이다. 일부 이러한 실시양태에서, 대상체는 여성이다. 일부 실시양태에서, 미리 결정된 헵시딘 수준은 적어도 7.5 nM이다. 일부 이러한 실시양태에서, 대상체는 남성이다. 일부 실시양태에서, 미리 결정된 헵시딘 수준은 적어도 7.8 nM이다. 일부 이러한 실시양태에서, 대상체는 남성이다.

다양한 실시양태에서, 헵시딘 수준은 ACVR1 억제제가 투여된 후에 모니터링된다.

다양한 실시양태에서, 대상체는 역치 값보다 낮은 미리 결정된 트랜스페린 포화를 갖는다. "트랜스페린 포화"는 혈청 철을 총 철-결합 능력으로 나눈 값을 지칭하고, 관련 기술분야에 공지된 임의의 기술을 사용하여 결정될 수 있다.

실시양태에서, 대상체는 약 50% 미만의 트랜스페린 포화를 갖는다. 일부 이러한 실시양태에서, 대상체는 남성이다. 실시양태에서, 대상체는 약 45% 미만의 트랜스페린 포화를 갖는다. 일부 이러한 실시양태에서, 대상체는 여성이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 약 40% 미만의 트랜스페린 포화를 갖는다. 일부 실시양태에서, 대상체는 약 35% 미만의 트랜스페린 포화를 갖는다. 일부 실시양태에서, 대상체는 약 30% 미만의 트랜스페린 포화를 갖는다. 일부 실시양태에서, 대상체는 약 25% 미만의 트랜스페린 포화를 갖는다. 일부 실시양태에서, 대상체는 약 20% 미만의 트랜스페린 포화를 갖는다. 일부 실시양태에서, 대상체는 약 15% 미만의 트랜스페린 포화를 갖는다. 일부 이러한 실시양태에서, 대상체는 여성이다.

일부 실시양태에서, 대상체는 약 12% 내지 약 50% 범위의 트랜스페린 포화를 갖는다. 일부 실시양태에서, 대상체는 약 15% 내지 약 50% 범위의 트랜스페린 포화를 갖는다. 일부 이러한 실시양태에서, 대상체는 남성이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 약 12% 내지 약 45% 범위의 트랜스페린 포화를 갖는다. 일부 이러한 실시양태에서, 대상체는 여성이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 약 20% 내지 약 40% 범위의 트랜스페린 포화를 갖는다. 일부 실시양태에서, 대상체는 약 30% 내지 약 45% 범위의 트랜스페린 포화를 갖는다. 일부 실시양태에서, 대상체는 약 25% 내지 약 35% 범위의 트랜스페린 포화를 갖는다. 일부 실시양태에서, 대상체는 약 15% 내지 약 25% 범위의 트랜스페린 포화를 갖는다. 일부 실시양태에서, 대상체는 약 20% 내지 약 30% 범위의 트랜스페린 포화를 갖는다.

다양한 실시양태에서, 트랜스페린 포화 수준은 ACVR1 억제제가 투여된 후에 모니터링된다.

다양한 실시양태에서, 대상체는 허용되는 간 기능을 갖는다. 이러한 실시양태에서, 대상체의 빌리루빈은 (길버트 증후군과 연관되지 않는 한) ≤1.5x 정상 상한치 (ULN)이고, 대상체의 아스파르테이트 아미노트랜스퍼라제 (AST/SGOT), 알라닌 아미노트랜스퍼라제 (ALT/SGPT) 및 알칼리성 포스파타제는 ≤2.5x ULN이다 (간 전이가 존재하는 경우, ≤5x ULN이 허용됨).

일부 실시양태에서, 대상체는 허용되는 신장 기능을 갖는다. 이러한 실시양태에서, 대상체의 계산된 크레아티닌 클리어런스는 ≥30 mL/분이다.

일부 실시양태에서, 대상체는 허용되는 혈액학적 상태를 갖는다. 이러한 실시양태에서, 대상체의 과립구 계수는 ≥1500개 세포/mm³이고, 혈소판 계수는 ≥100,000개 (plt/mm³)이고, 헤모글로빈은 ≥8 g/dL이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 ACVR1 억제제의 제1 투여의 14일 내에 수혈을 받지 않았다.

일부 실시양태에서, 대상체는 허용되는 응고 상태를 갖는다. 이러한 실시양태에서, 대상체의 프로트롬빈 시간 (PT)은 1.5x 정상 한계 내이고, 활성화 부분 트롬보플라스틴 시간 (aPTT)은 1.5x 정상 한계 내이다.

특정 실시양태에서, 대상체는 22세 이하, 21세 이하, 20세 이하, 19세 이하, 18세 이하, 17세 이하, 16세 이하, 15세 이하, 14세 이하, 13세 이하, 12세 이하, 11세 이하, 10세 이하, 9세 이하, 8세 이하, 7세 이하, 6세 이하, 5세 이하, 4세 이하, 3세 이하, 2세 이하, 또는 1세 이하의 환자이다. 일부 실시양태에서, 환자는 22세 이하 또는 18세 이하로 정의될 수 있는 소아 환자이다. 다시 말해서, 일부 실시양태에서, 환자는 최대 22세의 소아이다. 다른 실시양태에서, 환자는 최대 18세의 소아이다. 일부 실시양태에서, 환자는 약 3세 내지 약 10세이다. 일부 실시양태에서, 환자는 약 3세 내지 약 5세이다. 일부 실시양태에서, 환자는 약 5세 내지 약 10세이다. 일부 실시양태에서, 환자는 약 6세 내지 약 10세이다. 일부 실시양태에서, 환자는 약 6세 내지 약 8세이다.

다양한 실시양태에서, ACVR1 억제제는 화학식 (I)의 ACVR1 억제제 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구약물, 및 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 제약 조성물로서 제제화된다.

따라서, 본 개시내용은 본원에 기재된 방법에 사용하기 위한 ACVR1 억제제를 포함하는 조성물을 제공한다. 실시양태에서, ACVR1 억제제는 경구 투여를 위해 제제화된다. 다양한 실시양태에서, ACVR1 억제제는 정제, 캡슐 (예를 들어, 젤라틴 캡슐), 또는 용액으로서 제제화된다. 특정한 실시양태에서, ACVR1 억제제는 부형제와 함께 제제화된다. 특정 실시양태에서, ACVR1 억제제는 젤라틴 캡슐로서 제제화된다. 일부 실시양태에서, 젤라틴 캡슐은 5 mg, 25 mg, 또는 125 mg 농도로 제제화된다. 일부 실시양태에서, 캡슐은 30 mg, 90 mg, 또는 120 mg 농도로 제제화된다. 특정 실시양태에서, ACVR1 억제제는 경구 용액으로서 제제화된다. 일부 실시양태에서, 용액은 5 mg/mL 증분, 10 mg/mL 증분, 20 mg/mL 증분, 또는 30 mg/mL 증분으로 제제화된다. 일부 실시양태에서, 용액은 성인 용량의 약 80% 내지 약 100%의 소아 용량을 제공하도록 제제화된다. 일부 실시양태에서, 용액은 약 24 내지 약 30 mg, 약 48 내지 약 60 mg, 약 72 내지 약 90 mg, 약 96 내지 약 120 mg의 농도로 제제화된다. 일부 실시양태에서, 용액은 30 mg, 60 mg, 90 mg, 또는 120 mg 농도로 제제화된다. 일부 실시양태에서, 용액은 24 mg, 48 mg, 72 mg, 또는 96 mg 농도로 제제화된다.

개시내용의 제약 조성물은 ACVR1 억제제를 적절한 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제와 조합함으로써 제조될 수 있고, 이는 고체, 반고체, 액체 또는 기체상 형태의 제제, 예컨대 정제, 캡슐, 분말, 과립, 연고, 용액, 좌제, 주사, 흡입제, 겔, 마이크로구체, 및 에어로졸로 제제화될 수 있다. 이러한 제약 조성물의 전형적인 투여 경로는 경구, 국소, 경피, 흡입, 비경구, 설하, 협측, 직장, 질, 및 비강내를 포함한다. 본원에 사용된 용어 비경구는 피하 주사, 정맥내, 근육내, 흉골내 주사 또는 주입 기술을 포함한다. 개시내용의 제약 조성물은 환자에게 조성물을 투여할 때 그 안에 함유된 활성 성분이 생체이용가능하도록 제제화된다.

개시내용의 제약 조성물은 고체 또는 액체 형태일 수 있다. 한 측면에서, 담체(들)는 미립자이며, 이에 조성물은 예를 들어 정제 또는 분말 형태이다. 담체(들)는 액체일 수 있고, 조성물은 예를 들어 경구 시럽, 주사액, 또는 예를 들어 흡입 투여에 유용한 에어로졸이다.

경구 투여가 의도되는 경우에, 제약 조성물은 바람직하게는 고체 또는 액체 형태이고, 반고체, 반액체, 현탁액 및 겔 형태가 고체 또는 액체로서 본원에서 고려되는 형태 내에 포함된다.

경구 투여를 위한 고체 조성물로서, 제약 조성물은 분말, 과립, 압축 정제, 환제, 캡슐, 츄잉 검, 웨이퍼 등의 형태로 제제화될 수 있다. 이러한 고체 조성물은 전형적으로 1종 이상의 불활성 희석제 또는 식용 담체를 함유할 것이다. 또한, 하기 중 1종 이상이 존재할 수 있다: 결합제 예컨대 카르복시메틸셀룰로스, 에틸 셀룰로스, 미세결정질 셀룰로스, 트라가칸트 검 또는 젤라틴; 부형제 예컨대 전분, 락토스 또는 덱스트린, 붕해제 예컨대 알긴산, 알긴산나트륨, 프리모겔, 옥수수 전분 등; 윤활제 예컨대 스테아르산마그네슘 또는 스테로텍스; 활택제 예컨대 콜로이드성 이산화규소; 감미제 예컨대 수크로스 또는 사카린; 향미제 예컨대 페퍼민트, 메틸 살리실레이트 또는 오렌지 향미제; 및 착색제.

제약 조성물이 캡슐, 예를 들어 젤라틴 캡슐의 형태인 경우, 이는 상기 유형의 물질에 더하여 액체 담체, 예컨대 폴리에틸렌 글리콜 또는 오일을 함유할 수 있다.

본 방법에 사용하기 위한 제약 조성물은 액체, 예를 들어 엘릭시르, 시럽, 용액, 에멀젼 또는 현탁액의 형태일 수 있다. 액체는 예를 들어 경구 투여 또는 주사에 의한 전달을 위한 것일 수 있다. 경구 투여가 의도되는 경우에, 제약 조성물은, 예를 들어 치료 화합물(들)에 더하여 감미제, 보존제, 염료/착색제 및 향미 증진제 중 1종 이상을 함유한다. 주사에 의한 투여가 의도되는 조성물 중에는, 계면활성제, 보존제, 습윤제, 분산제, 현탁화제, 완충제, 안정화제 및 등장화제 중 1종 이상이 포함될 수 있다.

개시내용의 특정 실시양태에서 사용되는 액체 제약 조성물은, 이것이 용액이든, 현탁액이든 다른 유사 형태이든, 하기 아주반트 중 1종 이상을 포함할 수 있다: 멸균 희석제 예컨대 주사용수, 염수 용액, 바람직하게는 생리 염수, 링거액, 등장성 염화나트륨, 고정 오일 예컨대 용매 또는 현탁 매질로서의 역할을 할 수 있는 합성 모노 또는 디글리세리드, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세린, 프로필렌 글리콜 또는 다른 용매; 항박테리아제 예컨대 벤질 알콜 또는 메틸 파라벤; 항산화제 예컨대 아스코르브산 또는 중아황산나트륨; 킬레이트화제 예컨대 에틸렌디아민테트라아세트산; 완충제 예컨대 아세테이트, 시트레이트 또는 포스페이트 및 장성 조정제 예컨대 염화나트륨 또는 덱스트로스. 비경구 제제는 유리 또는 플라스틱으로 제조된 앰플, 일회용 시린지 또는 다중 용량 바이알에 봉입될 수 있다. 생리 염수는 바람직한 아주반트이다. 주사가능한 제약 조성물은 바람직하게는 멸균된다. 실시양태에서, 제약 조성물은 주사를 위해 제제화된다. 일부 실시양태에서, 제약 조성물은 볼루스 주사를 위해 제제화된다. 실시양태에서, 제약 조성물은 주입을 위해 제제화된다.

비경구 또는 경구 투여가 의도되는 개시내용의 실시양태에 사용되는 액체 제약 조성물은 적합한 투여량이 수득되도록 하는 양의 ACVR1 억제제를 함유해야 한다.

특정 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 ACVR1 억제제는 전신 방식보다는 국부 방식으로, 예를 들어 종종 데포 제제 또는 지속 방출 제제로 기관 내로의 ACVR1 억제제의 직접 주사를 통해 투여된다. 구체적 실시양태에서, 장기 작용 제제는 이식에 의해 (예를 들어, 피하로 또는 근육내로) 또는 근육내 주사에 의해 투여된다. 또한, 다른 실시양태에서, 약물은 표적화된 약물 전달 시스템으로, 예를 들어 기관-특이적 항체로 코팅된 리포솜으로 전달된다. 이러한 실시양태에서, 리포솜은 기관에 대해 선택적으로 표적화되고 그에 의해 흡수된다. 또 다른 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 화합물은 급속 방출 제제의 형태, 연장 방출 제제의 형태, 또는 중간 방출 제제의 형태로 제공된다.

개시내용의 특정 실시양태에 사용될 제약 조성물은 국소 투여가 의도될 수 있고, 이러한 경우에 담체는 적합하게는 용액, 에멀젼, 연고 또는 겔 베이스를 포함할 수 있다. 베이스는 예를 들어 페트롤라툼, 라놀린, 폴리에틸렌 글리콜, 벌 왁스, 미네랄 오일, 희석제 예컨대 물 및 알콜, 및 유화제 및 안정화제 중 1종 이상을 포함할 수 있다. 증점제는 국소 투여를 위한 제약 조성물에 존재할 수 있다. 경피 투여가 의도되는 경우에, 조성물은 경피 패치 또는 이온영동 장치를 포함할 수 있다.

개시내용의 특정 실시양태에서 사용하기 위한 제약 조성물 (예를 들어 고체 또는 액체 형태)은 치료 화합물(들)에 결합하여 전달을 보조하는 작용제를 포함할 수 있다. 이러한 능력을 발휘할 수 있는 적합한 작용제는 모노클로날 또는 폴리클로날 항체, 단백질 또는 리포솜을 포함한다.

소수성 제약 화합물을 위한 전달 시스템이 사용될 수 있다. 리포솜 및 에멀젼은 본원에서 유용한 전달 비히클 또는 담체의 예이다. 특정 실시양태에서, N-메틸피롤리돈과 같은 유기 용매가 또한 사용된다. 추가의 실시양태에서, 본원에 기재된 화합물은 지속-방출 시스템, 예컨대 치료제를 함유하는 고체 소수성 중합체의 반투과성 매트릭스를 사용하여 전달된다. 다양한 지속-방출 물질이 본원에서 유용하다. 일부 실시양태에서, 지속-방출 캡슐은 화합물을 수주 내지 최대 100일 초과 동안 방출한다. 치료 시약의 화학적 성질 및 생물학적 안정성에 따라, 단백질 안정화를 위한 추가의 전략이 사용된다.

실시양태에서, ACVR1 억제제 및 추가의 치료제는 함께 리포솜 제제로 제제화된다.

개시내용의 특정 실시양태에서 사용되는 제약 조성물은 제약 기술분야에 널리 공지된 방법론에 의해 제조될 수 있다. 예를 들어, 주사에 의해 투여되도록 의도되는 제약 조성물은 용액을 형성하도록 ACVR1 억제제를 멸균 증류수와 조합함으로써 제조될 수 있다. 일부 실시양태에서, 개시내용의 방법에 따른 투여를 위한 제약 조성물(들)은 치료제가 용액으로, 현탁액으로, 또는 둘 다로 존재하는 액체 형태를 취한다. 일부 실시양태에서, 치료제가 용액 또는 현탁액으로서 투여되는 경우에, 작용제의 제1 부분은 용액으로 존재하고, 작용제의 제2 부분은 액체 매트릭스 중 현탁액 중의 미립자 형태로 존재한다. 일부 실시양태에서, 액체 조성물은 겔 제제를 포함한다. 다른 실시양태에서, 액체 조성물은 수성이다.

특정 실시양태에서, 유용한 수성 현탁액은 현탁화제로서 1종 이상의 중합체를 함유한다. 유용한 중합체는 수용성 중합체, 예컨대 셀룰로스 중합체, 예를 들어 히드록시프로필 메틸셀룰로스, 및 수불용성 중합체, 예컨대 가교 카르복실-함유 중합체를 포함한다. 본원에 기재된 특정 제약 조성물은, 예를 들어 카르복시메틸셀룰로스, 카르보머 (아크릴산 중합체), 폴리(메틸메타크릴레이트), 폴리아크릴아미드, 폴리카르보필, 아크릴산/부틸 아크릴레이트 공중합체, 알긴산나트륨 및 덱스트란으로부터 선택된 점막점착성 중합체를 포함한다.

제약 조성물은 또한 ACVR1 억제제의 용해도를 보조하기 위한 가용화제를 임의로 포함한다. 용어 "가용화제"는 일반적으로 작용제의 미셀 용액 또는 참용액을 형성하는 작용제를 포함한다. 특정 허용되는 비이온성 계면활성제, 예를 들어 폴리소르베이트 80은, 안과용으로 허용되는 글리콜, 폴리글리콜, 예를 들어 폴리에틸렌 글리콜 400, 및 글리콜 에테르와 같이 가용화제로서 유용하다.

또한, 제약 조성물은 임의로 산, 예컨대 아세트산, 붕산, 시트르산, 락트산, 인산 및 염산; 염기, 예컨대 수산화나트륨, 인산나트륨, 붕산나트륨, 시트르산나트륨, 아세트산나트륨, 락트산나트륨 및 트리스-히드록시메틸아미노메탄; 및 완충제, 예컨대 시트레이트/덱스트로스, 중탄산나트륨 및 염화암모늄을 비롯한 1종 이상의 pH 조정제 또는 완충제를 포함한다. 이러한 산, 염기 및 완충제는 조성물의 pH를 허용되는 범위로 유지하는데 필요한 양으로 포함된다.

추가적으로, 제약 조성물은 또한 임의로, 조성물의 오스몰랄농도를 허용되는 범위가 되게 하는데 필요한 양으로 1종 이상의 염을 포함한다. 이러한 염은 나트륨, 칼륨 또는 암모늄 양이온 및 클로라이드, 시트레이트, 아스코르베이트, 보레이트, 포스페이트, 비카르보네이트, 술페이트, 티오술페이트 또는 비술파이트 음이온을 갖는 것을 포함하고; 적합한 염은 염화나트륨, 염화칼륨, 티오황산나트륨, 중아황산나트륨 및 황산암모늄을 포함한다.

다른 제약 조성물은 미생물 활성을 억제하기 위해 임의로 1종 이상의 보존제를 포함한다. 적합한 보존제는 수은-함유 물질, 예컨대 메르펜 및 티오메르살; 안정화된 이산화염소; 및 4급 암모늄 화합물, 예컨대 벤즈알코늄 클로라이드, 세틸트리메틸암모늄 브로마이드 및 세틸피리디늄 클로라이드를 포함한다.

균질 용액 또는 현탁액의 형성을 용이하게 하기 위해 계면활성제가 첨가될 수 있다. 계면활성제는 치료 화합물(들)과 비-공유적으로 상호작용하여 용해 또는 균질한 현탁액 수성 전달 시스템을 용이하게 하는 화합물이다. 실시양태에서, 제약 조성물은 물리적 안정성을 증진시키기 위해 1종 이상의 계면활성제를 포함한다. 적합한 비이온성 계면활성제는 폴리옥시에틸렌 지방산 글리세리드 및 식물성 오일, 예를 들어, 폴리옥시에틸렌 (60) 수소화 피마자 오일; 및 폴리옥시에틸렌 알킬에테르 및 알킬페닐 에테르, 예를 들어, 옥톡시놀 10, 옥톡시놀 40 등을 포함한다.

또 다른 제약 조성물은 필요한 경우에 화학적 안정성을 증진시키기 위해 1종 이상의 항산화제를 포함한다. 적합한 항산화제는, 단지 예로서, 아스코르브산 및 메타중아황산나트륨을 포함한다.

특정 실시양태에서, 수성 현탁액 조성물은 단일-용량 재밀봉불가능한 용기에 포장된다. 대안적으로, 다중-용량 재밀봉가능한 용기가 사용되며, 이 경우에 조성물에 보존제가 포함되는 것이 전형적이다.

개시내용의 일부 실시양태에서 사용하기 위한 제약 조성물은, 예를 들어 좌제 형태로의 직장 투여가 의도될 수 있으며, 이는 직장에서 용융되어 ACVR1 억제제를 방출할 것이다. 직장 투여를 위한 조성물은 적합한 비자극성 부형제로서 유질 베이스를 함유할 수 있다. 이러한 베이스는 라놀린, 코코아 버터 및 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다.

개시내용의 실시양태에서 사용하기 위한 제약 조성물은 고체 또는 액체 투여 단위의 물리적 형태를 변형시키는 다양한 물질을 포함할 수 있다. 예를 들어, 조성물은 ACVR1 억제제 주위에 코팅 쉘을 형성하는 물질을 포함할 수 있다. 코팅 쉘을 형성하는 물질은 전형적으로 불활성이고, 예를 들어 당, 쉘락, 및 다른 장용 코팅제로부터 선택될 수 있다. 대안적으로, 활성 성분은 젤라틴 캡슐 내에 넣을 수 있다.

특정 실시양태에서 사용되는 제약 조성물은 에어로졸로서 투여될 수 있는 투여 단위로 이루어질 수 있다. 용어 에어로졸은 콜로이드 성질의 시스템으로부터 가압 패키지를 사용하는 시스템의 범위의 다양한 시스템을 나타내는데 사용된다. 전달은 액화 또는 압축 기체에 의해 또는 활성 성분을 분배하는 적합한 펌프 시스템에 의해 이루어질 수 있다. ACVR1 억제제의 에어로졸은 활성 성분(들)을 전달하기 위해 단일 상, 2상, 또는 3상 시스템으로 전달될 수 있다. 에어로졸의 전달은 함께 키트를 형성할 수 있는 필요한 용기, 활성화제, 밸브, 보조용기 등을 포함한다. 관련 기술분야의 통상의 기술자는 과도한 실험 없이 바람직한 에어로졸을 결정할 수 있다.

상기 실시양태 중 임의의 것에서, ACVR1 억제제 또는 그의 제약상 허용되는 염은 유효량으로 투여되며, 이는 사용되는 구체적 ACVR1 억제제의 활성; ACVR1 억제제의 대사 안정성 및 작용 기간; 환자의 연령, 체중, 전반적 건강, 성별 및 식이; 투여 방식 및 시간; 배출 속도; 약물 조합; 특정한 장애 또는 상태의 중증도; 및 요법을 겪는 대상체를 포함한 다양한 인자에 따라 달라질 것이다.

본원에 기재된 방법의 독성 및 치료 효능은 세포 배양물 또는 실험 동물에서의 표준 제약 절차에 의해, 예를 들어 투여된 ACVR1 억제제에 대한 IC₅₀ 및 LD₅₀을 결정함으로써 결정될 수 있다. 투여를 위해, 유효량 (또한 용량으로도 지칭됨)은 초기에 시험관내 검정 및/또는 동물 모델 연구로부터의 결과에 기초하여 추정될 수 있다. 예를 들어, 특정한 표적에 대해 세포 배양물에서 결정된 바와 같은 IC₅₀을 포함하는 순환 농도 범위를 달성하도록 동물 모델에서 용량이 제제화될 수 있다. 투여량은 사용되는 투여 형태 및 이용되는 투여 경로에 따라 달라질 수 있다. 정확한 제제화, 투여 경로 및 투여량은 환자의 상태를 고려하여 개별 의사에 의해 선택될 수 있다. (예를 들어, 문헌 [Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis Of Therapeutics, Ch. 3, 9^th ed., Ed. by Hardman, J., and Limbard, L., McGraw-Hill, New York City, 1996, p.46] 참조.)

대상체에게 투여될 조성물은 1개 이상의 투여 단위의 형태를 취하며, 예를 들어 정제는 단일 투여 단위일 수 있고, 에어로졸 형태의 개시내용의 1종 이상의 치료제의 용기는 복수의 투여 단위를 보유할 수 있다. 이러한 투여 형태를 제조하는 실제 방법은 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지되어 있거나 자명할 것이며; 예를 들어 문헌 [Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Edition (Philadelphia College of Pharmacy and Science, 2000)]을 참조한다. 개시내용의 방법의 특정 실시양태를 사용하여 투여되는 제약 조성물은, 임의의 경우에, 본 개시내용의 실시양태의 교시에 따른 질환의 치료를 위한 유효량의 ACVR1 억제제 또는 그의 제약상 허용되는 염을 함유할 것이다.

본원에 기재된 ACVR1 억제제는 넓은 투여량 범위에 걸쳐 효과적이다. 예를 들어, 성인 인간의 치료에서, 1일에 약 5 mg 내지 약 500 mg, 약 10 mg 내지 약 320 mg, 약 30 mg 내지 약 240 mg, 및 1일에 약 30 mg 내지 약 180 mg의 투여량이 일부 실시양태에서 사용되는 투여량의 예이다. 일부 실시양태에서, 용량은 1일에 약 30 mg 내지 약 120 mg이다. 일부 실시양태에서, 용량은 1일에 약 30 mg 내지 약 60 mg이다. 일부 실시양태에서, 용량은 1일에 약 60 mg 내지 약 240 mg이다. 일부 실시양태에서, 용량은 1일에 약 60 mg 내지 약 180 mg이다. 일부 실시양태에서, 용량은 1일에 약 60 mg 내지 약 120 mg이다. 일부 실시양태에서, 용량은 1일에 약 120 mg 내지 약 240 mg이다. 일부 실시양태에서, 용량은 1일에 약 120 mg 내지 약 180 mg이다. 일부 실시양태에서, 용량은 1일에 약 180 mg 내지 약 240 mg이다.

특정한 실시양태에서, 용량은 1일에 약 5 mg이다. 특정한 실시양태에서, 용량은 1일에 약 10 mg이다. 특정한 실시양태에서, 용량은 1일에 약 25 mg이다. 다른 실시양태에서, 용량은 1일에 약 30 mg이다. 다른 실시양태에서, 용량은 1일에 약 60 mg이다. 다른 실시양태에서, 용량은 1일에 약 120 mg이다. 특정한 실시양태에서, 용량은 1일에 약 125 mg이다. 다른 실시양태에서, 용량은 1일에 약 180 mg이다. 다른 실시양태에서, 용량은 1일에 약 240 mg이다. 다른 실시양태에서, 용량은 1일에 약 250 mg이다. 다른 실시양태에서, 용량은 1일에 약 320 mg이다. 다른 실시양태에서, 용량은 1일에 약 325 mg이다.

또 다른 예로서, 성인 인간의 치료에서, 1주에 약 5 mg 내지 약 500 mg, 약 10 mg 내지 약 320 mg, 약 30 mg 내지 약 240 mg, 및 1주에 약 30 mg 내지 약 180 mg의 투여량이 일부 실시양태에서 사용되는 투여량의 예이다. 일부 실시양태에서, 용량은 1주에 약 30 mg 내지 약 120 mg이다. 일부 실시양태에서, 용량은 1주에 약 30 mg 내지 약 60 mg이다. 일부 실시양태에서, 용량은 1주에 약 60 mg 내지 약 240 mg이다. 일부 실시양태에서, 용량은 1주에 약 60 mg 내지 약 180 mg이다. 일부 실시양태에서, 용량은 1주에 약 60 mg 내지 약 120 mg이다. 일부 실시양태에서, 용량은 1주에 약 120 mg 내지 약 240 mg이다. 일부 실시양태에서, 용량은 1주에 약 120 mg 내지 약 180 mg이다. 일부 실시양태에서, 용량은 1주에 약 180 mg 내지 약 240 mg이다.

특정한 실시양태에서, 용량은 1주에 약 5 mg이다. 특정한 실시양태에서, 용량은 1주에 약 10 mg이다. 특정한 실시양태에서, 용량은 1주에 약 25 mg이다. 다른 실시양태에서, 용량은 1주에 약 30 mg이다. 다른 실시양태에서, 용량은 1주에 약 60 mg이다. 다른 실시양태에서, 용량은 1주에 약 120 mg이다. 특정한 실시양태에서, 용량은 1주에 약 125 mg이다. 다른 실시양태에서, 용량은 1주에 약 180 mg이다. 다른 실시양태에서, 용량은 1주에 약 240 mg이다. 다른 실시양태에서, 용량은 1주에 약 250 mg이다. 다른 실시양태에서, 용량은 1주에 약 320 mg이다. 다른 실시양태에서, 용량은 1주에 약 325 mg이다.

본원에 제시된 바와 같이, 소아 용량은 성인 용량의 약 80% 내지 100%일 수 있다.

일부 실시양태에서, 용량은 증량된다. 한 실시양태에서, 용량은 1주에 30 mg에서 시작하여, 1주에 120 mg까지 30 mg 증분으로 증량된다. 한 실시양태에서, 용량은 1주에 30 mg에서 시작하여, 수준을 유지한다. 한 실시양태에서, 용량은 1주에 30 mg에서 시작되여, 1주에 60 mg의 최종 용량까지 증량된다. 한 실시양태에서, 용량은 1주에 30 mg에서 시작하여, 1주에 60 mg의 중간 용량까지 증량되고, 이는 추가로 1주에 90 mg의 최종 용량까지 증량된다. 한 실시양태에서, 용량은 1주에 30 mg으로 시작하여, 1주에 60 mg의 제1 중간 용량, 1주에 90 mg의 제2 중간 용량까지 증량되고, 이는 추가로 1주에 120 mg의 최종 용량까지 증량된다. 한 실시양태에서, 용량은 1주에 60 mg에서 시작하여, 수준을 유지한다. 한 실시양태에서, 용량은 1주에 60 mg에서 시작되여, 1주에 90 mg의 최종 용량까지 증량된다. 한 실시양태에서, 용량은 1주에 60 mg에서 시작하여, 1주에 90 mg의 중간 용량까지 증량되고, 이는 추가로 1주에 120 mg의 최종 용량까지 증량된다.

실시양태에서, ACVR1 억제제는 1일에 약 10 mg/m² 내지 약 500 mg/m² 범위의 용량으로 투여된다. 실시양태에서, ACVR1 억제제는 1일에 약 150 mg/m² 내지 약 350 mg/m² 범위의 용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, ACVR1 억제제는 1일에 약 200 mg/m² 내지 약 300 mg/m² 범위의 용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, ACVR1 억제제는 1일에 약 220 mg/m² 내지 약 260 mg/m² 범위의 용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, ACVR1 억제제는 1일에 약 230 mg/m² 내지 약 250 mg/m² 범위의 용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, ACVR1 억제제는 1일에 약 235 mg/m² 내지 약 245 mg/m² 범위의 용량으로 투여된다. 구체적 실시양태에서, ACVR1 억제제는 1일에 약 240 mg/m²의 용량으로 투여된다.

실시양태에서, ACVR1 억제제는 1주에 약 10 mg/m² 내지 약 500 mg/m² 범위의 용량으로 투여된다. 실시양태에서, ACVR1 억제제는 1주에 약 150 mg/m² 내지 약 350 mg/m² 범위의 용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, ACVR1 억제제는 1주에 약 200 mg/m² 내지 약 300 mg/m² 범위의 용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, ACVR1 억제제는 1주에 약 220 mg/m² 내지 약 260 mg/m² 범위의 용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, ACVR1 억제제는 1주에 약 230 mg/m² 내지 약 250 mg/m² 범위의 용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, ACVR1 억제제는 1주에 약 235 mg/m² 내지 약 245 mg/m² 범위의 용량으로 투여된다. 구체적 실시양태에서, ACVR1 억제제는 1주에 약 240 mg/m²의 용량으로 투여된다.

정확한 투여량은 ACVR1 억제제, 투여 경로, 화합물이 투여되는 형태, 치료될 대상체, 대상체의 표적, 체중, 상태의 중증도, 암의 유형, 이전 또는 공동 치료적 개입, 특발증을 포함한 신체적 및 생리학적 인자, 및 담당 의사의 선호도 및 경험에 좌우될 것이다.

일부 실시양태에서, ACVR1 억제제의 유효량은 단일 용량으로 투여된다. 전형적으로, 이러한 투여는 작용제를 신속하게 도입하기 위해 주사, 예를 들어, 정맥내 주사에 의해 이루어질 것이다. 그러나, 다른 경로가 적절하게 사용된다. 개시내용의 화합물의 단일 용량은 또한 급성 상태의 치료에 사용될 수 있다.

일부 실시양태에서, ACVR1 억제제의 유효량은 다중 용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 투여는 1일에 약 1회, 2회, 3회, 4회, 5회, 6회, 또는 6회 초과이다. 일부 실시양태에서, 투여는 1주에 약 1회, 2회, 3회, 4회, 5회, 6회, 또는 6회 초과이다. 다른 실시양태에서, 투여는 1개월 약 1회, 2주마다 1회, 1주 1회, 또는 격일 1회이다. 또 다른 실시양태에서, 투여는 약 6, 10, 14, 28일, 2개월, 6개월, 또는 1년 초과 동안 계속된다. 일부 경우에, 연속 투여는 필요한 만큼 길게 달성되고 유지된다. 일부 실시양태에서, ACVR1 억제제는 연속 1, 7, 14, 21, 또는 28일 동안 투여된다. 일부 실시양태에서, ACVR1 억제제는 매주 투여된다. 일부 실시양태에서, ACVR1 억제제는 4-주 사이클의 제1주, 제2주, 제3주, 및 제4주에 투여된다. 일부 실시양태에서, 4-주 사이클은 1회 이상의 휴지기를 포함한다. 일부 실시양태에서, 4-주 사이클은 휴지기를 포함하지 않고, 투여는 연속적이다.

다양한 실시양태에서, ACVR1 억제제는 매일 투여된다. 다양한 실시양태에서, ACVR1 억제제는 매주 투여된다. 각각의 이러한 실시양태에서, ACVR1 억제제는 실질적으로 동일한 시간에 취한다. 일부 실시양태에서, ACVR1 억제제는 (예를 들어, 적어도 6시간 동안의) 공복 후에 투여된다. 특정한 실시양태에서, 대상체는 투여 후 적어도 1시간 동안 금식한다.

ACVR1 억제제의 투여는 필요한 만큼 길게 계속될 수 있다. 일부 실시양태에서, ACVR1 억제제는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 14, 또는 28일 초과 동안 투여된다. 일부 실시양태에서, ACVR1 억제제는 28, 14, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 또는 1일 미만 동안 투여된다. 일부 실시양태에서, ACVR1 억제제는 1, 4, 8, 12, 16, 20, 24, 28, 32, 36, 40, 44, 48, 또는 52주 초과 동안 투여된다. 일부 실시양태에서, ACVR1 억제제는 52, 48, 44, 40, 36, 32, 28, 24, 20, 16, 12, 8, 4, 또는 1주 미만 동안 투여된다.

일부 실시양태에서, ACVR1 억제제는 예를 들어 만성 효과의 치료를 위해 계속해서 만성적으로 투여된다.

일부 실시양태에서, 추가의 치료제는 (예를 들어, 유지 요법으로서) 만성적으로 투여될 수 있다. 다른 이러한 실시양태에서, 추가의 1종 이상의 치료제는 제2 치료 요법으로서 투여될 수 있다.

일부 실시양태에서, ACVR1 억제제는 투여량으로 투여된다. 화합물 약동학에서의 대상체간 가변성으로 인해, 특정 실시양태에서 개별화된 투여 요법이 제공된다. 치료제의 투여는 본 개시내용에 비추어 상용 실험에 의해 발견될 수 있고/거나 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 유도될 수 있다.

투여량 및 간격은 목적하는 약리학적 효과를 유지하기에 충분한 활성 종의 혈장 수준을 제공하도록 개별적으로 조정될 수 있다. 이들 혈장 수준은 최소 유효 농도 (MEC)로 지칭된다. MEC를 달성하는데 필요한 투여량은 개체 특징 및 투여 경로에 좌우될 것이다. HPLC 검정 또는 생물검정을 사용하여 혈장 농도를 결정할 수 있다.

투여 간격은 또한 MEC 값을 사용하여 결정할 수 있다. 일부 실시양태에서, 치료 방법은 혈장 수준을 MEC 초과로 시간의 10-90% 동안 유지시키는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 혈장 수준은 시간의 30-90% 동안 MEC 초과로 유지된다. 일부 실시양태에서, 혈장 수준은 시간의 50-90% 동안 MEC 초과로 유지된다. 예를 들어, 특정 실시양태에서, 치료제의 유효량은 1일에 대략 2.5 mg/m² 내지 1500 mg/m²의 범위일 수 있다. 예를 들어, 특정 실시양태에서, 치료제의 유효량은 1주에 대략 2.5 mg/m² 내지 1500 mg/m²의 범위일 수 있다. 추가의 예시적인 양은 매일 또는 매주 0.2-1000 mg, 2-500 mg, 및 20-250 mg의 범위이다.

국부 투여 또는 선택적 흡수의 경우에, 치료제의 유효 국부 농도는 혈장 농도와 관련되지 않을 수 있고, 관련 기술분야에 공지된 다른 절차를 사용하여 정확한 투여량 및 간격을 결정할 수 있다.

일부 실시양태에서, 제약 조성물로 제공되는 ACVR1 억제제의 농도는 100%, 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%,14%, 13%, 12%, 11%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0.5%, 0.4%, 0.3%, 0.2%, 0.1%, 0.09%, 0.08%, 0.07%, 0.06%, 0.05%, 0.04%, 0.03%, 0.02%, 0.01%, 0.009%, 0.008%, 0.007%, 0.006%, 0.005%, 0.004%, 0.003%, 0.002%, 0.001%, 0.0009%, 0.0008%, 0.0007%, 0.0006%, 0.0005%, 0.0004%, 0.0003%, 0.0002%, 또는 0.0001% w/w, w/v 또는 v/v 미만이다.

일부 실시양태에서, 제약 조성물로 제공되는 ACVR1 억제제의 농도는 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 19.75%, 19.50%, 19.25% 19%, 18.75%, 18.50%, 18.25% 18%, 17.75%, 17.50%, 17.25% 17%, 16.75%, 16.50%, 16.25% 16%, 15.75%, 15.50%, 15.25% 15%, 14.75%, 14.50%, 14.25% 14%, 13.75%, 13.50%, 13.25% 13%, 12.75%, 12.50%, 12.25% 12%, 11.75%, 11.50%, 11.25% 11%, 10.75%, 10.50%, 10.25% 10%, 9.75%, 9.50%, 9.25% 9%, 8.75%, 8.50%, 8.25% 8%, 7.75%, 7.50%, 7.25% 7%, 6.75%, 6.50%, 6.25% 6%, 5.75%, 5.50%, 5.25% 5%, 4.75%, 4.50%, 4.25%, 4%, 3.75%, 3.50%, 3.25%, 3%, 2.75%, 2.50%, 2.25%, 2%, 1.75%, 1.50%, 125%, 1%, 0.5%, 0.4%, 0.3%, 0.2%, 0.1%, 0.09%, 0.08%, 0.07%, 0.06%, 0.05%, 0.04%, 0.03%, 0.02%, 0.01%, 0.009%, 0.008%, 0.007%, 0.006%, 0.005%, 0.004%, 0.003%, 0.002%, 0.001%, 0.0009%, 0.0008%, 0.0007%, 0.0006%, 0.0005%, 0.0004%, 0.0003%, 0.0002%, 또는 0.0001% w/w, w/v, 또는 v/v 초과이다.

일부 실시양태에서, 제약 조성물로 제공되는 ACVR1 억제제의 농도는 약 0.0001% 내지 약 50%, 약 0.001% 내지 약 40 %, 약 0.01% 내지 약 30%, 약 0.02% 내지 약 29%, 약 0.03% 내지 약 28%, 약 0.04% 내지 약 27%, 약 0.05% 내지 약 26%, 약 0.06% 내지 약 25%, 약 0.07% 내지 약 24%, 약 0.08% 내지 약 23%, 약 0.09% 내지 약 22%, 약 0.1% 내지 약 21%, 약 0.2% 내지 약 20%, 약 0.3% 내지 약 19%, 약 0.4% 내지 약 18%, 약 0.5% 내지 약 17%, 약 0.6% 내지 약 16%, 약 0.7% 내지 약 15%, 약 0.8% 내지 약 14%, 약 0.9% 내지 약 12%, 약 1% 내지 약 10% w/w, w/v 또는 v/v의 범위이다.

일부 실시양태에서, 제약 조성물로 제공되는 ACVR1 억제제의 농도는 약 0.001% 내지 약 10%, 약 0.01% 내지 약 5%, 약 0.02% 내지 약 4.5%, 약 0.03% 내지 약 4%, 약 0.04% 내지 약 3.5%, 약 0.05% 내지 약 3%, 약 0.06% 내지 약 2.5%, 약 0.07% 내지 약 2%, 약 0.08% 내지 약 1.5%, 약 0.09% 내지 약 1%, 약 0.1% 내지 약 0.9% w/w, w/v 또는 v/v의 범위이다.

개시내용의 실시양태에 사용된 ACVR1 억제제 또는 그의 제약상 허용되는 유도체는 또한 1종 이상의 다른 치료제의 투여와 동시에, 그 전에, 또는 그 후에 투여될 수 있다. 예를 들어, 제1 치료제 (예를 들어, ACVR1 억제제)가 투여될 수 있고, 충분한 기간 후에 제2 치료제가 투여된다. 이러한 실시양태에서, 제1 치료제와 제2 치료제의 투여 사이의 기간은 "치료 중단" 또는 "휴지기"로 지칭될 수 있다. "치료 중단" 또는 "휴지기"는 또한 치료 사이클 사이의 기간을 지칭할 수 있다. 일부 실시양태에서, 이러한 치료 중단 또는 휴지기는 약 12시간 내지 약 48시간의 범위이다. 일부 실시양태에서, 이러한 치료 중단 또는 휴지기는 약 18 내지 약 36시간의 범위이다. 일부 실시양태에서, 이러한 치료 중단 또는 휴지기는 약 24 내지 약 48시간의 범위이다. 일부 실시양태에서, 치료 중단 또는 휴지기는 약 2 내지 약 10일의 범위이다. 일부 실시양태에서, 치료 중단 또는 휴지기는 약 3 내지 약 5일의 범위이다. 일부 실시양태에서, 치료 중단 또는 휴지기는 약 5일 내지 약 9일의 범위이다. 일부 실시양태에서, 치료 중단 또는 휴지기는 약 7일이다. 다양한 실시양태에서, ACVR1 억제제는 연속 21일 동안 투여되고, 이어서 7일 치료 중단 또는 휴지기가 이어진다. 일부 실시양태에서, 치료 중단 또는 휴지기는 약 30일이다. 다양한 실시양태에서, ACVR1 억제제는 사이클 사이에 치료 중단 또는 휴지기 없이 연속 4주 사이클 동안 매주 투여된다. 관련 기술분야의 통상의 기술자는 통상의 기술 및 지식에 기초하여 적절한 투여 스케줄을 도출할 수 있다. 실시양태에서, ACVR1 억제제, 및 방사선 요법 및 추가의 치료제 중 1종 이상은 순차적으로 투여된다.

실시예

실시예 1:

예시적인 ACVR1 억제제의 시험

야생형 및 돌연변이체 ACVR1의 억제

화합물 2는 표준 검정 절차에 따라 시험되어, 야생형 ACVR1, FOP/DIPG 돌연변이 R206H, 및 DIPG에서 발견된 2종의 추가의 돌연변이체 키나제 (G328V 및 R258G)의 강력한 생화학적 억제를 입증하였다.

간략하게, 카세인-기반 기질을 제조하였다. 각각의 ACVR1 키나제를 기질 혼합물에 첨가하고, 고온/저온 33P-ATP (10 μM)를 첨가하여 반응을 개시하였다. 이어서 필터 결합 방법을 사용하여 활성을 측정하였다.

키나제에 대한 IC₅₀ 값을 하기 표 3에 열거한다.

표 3.

SMAD1/5 인산화의 억제

SMAD 단백질은 TGFβ 수용체 하류의 신호전달에 수반되는 전사 인자이다. TGFβ 수용체 ALK2는 골 형태발생 단백질, 예컨대 BMP2에 의해 활성화될 때 SMAD를 인산화하고, 이는 SMAD 핵 전위, 전사 개시, 및 펩티드 호르몬 헵시딘을 코딩하는 HAMP와 같은 유전자의 증가된 발현으로 이어진다. 따라서, ALK2를 표적화하는 화합물은 BMP 유도된 SMAD 인산화를 억제하여야 한다. 화합물 2의 시험관내 효력을 평가하기 위해, HepG2 세포를 다양한 농도의 화합물 2의 존재 또는 부재 하에 ALK2 리간드 BMP2로 자극하였다. 도 1에 제시된 결과는 화합물 2에 의한 SMAD1/5 인산화의 명백한 농도-의존성 억제를 보여준다 (EC50 = 162 nM).

헵시딘 발현의 억제

화합물 2의 시험관내 효능을 평가하기 위해, HepG2 세포를 다양한 농도의 화합물 2의 존재 또는 부재 하에 ALK2 리간드 BMP-2로 자극하고, 생성된 헵시딘 발현 수준을 qPCR에 의해 측정하였다. 도 2a에 제시된 결과는 화합물 2에 의한 헵시딘 전사의 강한, 용량 반응성 억제를 보여준다 (EC₅₀ < 1 nM). 기저 헵시딘 전사에 대한 효과를 또한 측정하였고 (BMP-2 자극의 부재 하), 결과를 도 2b에 제시한다. 이들 실험 조건 하에, 화합물 2는 용량 반응성 방식으로 헵시딘 발현을 억제하였다 (IC₅₀ ~100 nM).

투르펜틴 오일 (TO)은 상승된 헵시딘 수준을 비롯하여, 마우스에서 연관 침지에 의해 급성 염증 반응을 유도하는 것으로 공지되어 있다. 본 발명자들은 이 모델을 사용하여 시험 화합물을 생체내 효능에 대해 평가하였다 (도 3).

이들 데이터는 화합물 2를 사용한 처리 전 및/또는 처리 동안의 평가 시 헵시딘이 가치있는 예측 및/또는 예후 마커일 수 있다는 것을 시사한다.

DIPG 세포주에 대한 증식 검정

화합물 2를 ACVR1 돌연변이체 (G328V 돌연변이된 세포주) 및 야생형 DIPG 세포주에 대한 증식 검정에서 시험관내 시험하였다. 결과는 pSMAD1/5 억제 검정에서 관찰된 값과 유사한, 돌연변이된 세포주에 대한 선택적 활성을 입증한다.

실시예 2:

ACVR1 억제제의 약역학 및 독성학 시험

DIPG에 대한 효과적인 치료를 위해, 화합물 2는 뇌로 분포될 필요가 있고, 보다 중요하게는 뇌의 교뇌 영역으로 상당히 깊은 침투를 달성할 필요가 있다. 뇌로의 화합물 2의 일반적 분포를 평가하기 위해, 예비 뇌 PK 연구를 수행하였다. 뇌 조직 농도는 뇌에서의 매우 우수한 분포를 보여준다 (도 4a). 계산된 PK 파라미터를 표 4 및 표 5에 제시한다.

표 4.

표 5.

추가적으로, 혈장 및 뇌 조직에서의 화합물 2 농도의 비교를 수행하였고, 결과를 도 4b 및 표 6에 제시한다.

표 6.

뇌 내 화합물 2의 침투를 추가로 조사하기 위해, 또 다른 연구를 수행하였다. 이 연구에서, 마우스에게 단일 경구 용량의 화합물 2를 투여하고, 투여 1시간 및 2시간 후에 뇌 조직을 수집하였다. 화합물 2 농도를 MALDI-TOF 질량 분광측정법에 의해 뇌의 조직 절편에서 측정하였다.

1 그램의 뮤린 뇌 세포를 0.5 μg 내지 50 μg 범위의 공지된 농도의 화합물 2와 혼합하였다. 화합물 2를 100 mg/kg으로 경구로 투여하여 4마리의 마우스를 처리하였다. 처리 전 및 처리 1, 2, 및 4시간 후에 샘플을 채취하였다. 이어서, 화합물 2로 처리된 뮤린 모방체 모델 및 실제 샘플을 함께 분석하였다.

추가의 약동학 및 조직 분포 연구를 수행하여 다중 마우스 기관에서의 화합물 2 노출을 포괄적으로 평가하였다. CD-1 수컷 마우스에게 20% 솔루톨 및 80% 염수 중에 제제화된 화합물 2를 20 mg/kg으로 PO로 투여하였다. 혈장 및 기관을 9개의 시점에 수집하고, 약물 농도를 LC-MS/MS에 의해 결정하였다. 화합물 2는 수집된 모든 조직에서 검출가능하였고, 대부분의 조직은 혈장과 비교하여 상승된 약물 농도를 입증하였다. 결과는 뇌 및 간을 포함한 임상적으로 관련된 표적 기관에서의 노출을 확인시켜 주었다 (표 7).

표 7

주: 결과는 평균으로 표현됨, n=3마리 동물/군 (별개 방법); * 혈장 및 골수 샘플은 ng/mL로 나타내어진다.

화합물 2 유리 염기를 인간에서 시험하였다. 화합물 2의 경구 약동학을 DIPG의 치료를 위한 단일 인간 환자에서 결정하였다. 제제는 유리 염기 화합물 2로, 15일 동안은 매일 젤라틴 캡슐, 이어서 20-일은 현탁액 기간에 의하였다. 주스에 용해시키고 9일 동안 경비위관을 통해 투여함으로써 투여를 재개하였다. 공칭 용량은 240 mg/m2 (PO)이다. 혈액 샘플을 4개의 시점에 수집하고, 약물 농도를 LC-MS/MS에 의해 결정하였다.

경구로 투여된 화합물 2는 흡수되어, 단일 인간에서 투여 24시간 후에 혈장에서 검출되었고, 기준선으로의 복귀는 연장되었다. 추가의 PK 파라미터를 평가하였다.

화합물 2의 약동학 및 독성학을 래트에서 시험하였다. 공복 암컷 스프라그-돌리 (SD) 래트의 혈장에서 화합물 2의 정맥내 (IV) 및 경구 (PO) 약동학을 결정하였다. 사용된 제제는 둘 다의 투여 경로에 대해 20% 솔루톨 및 80% 염수였다. 공칭 용량은 2 mg/kg (IV) 및 20 mg/kg (PO)이었다. 샘플을 8개의 시점에 채취하고, 약물 농도를 LC-MS/MS에 의해 결정하였다. IV 및 PO 투여의 경우의 혈장 농도를 도 5에 제시하고, 이 데이터로부터의 PK 계산을 표 8에 제시한다.

표 8.

비-GLP 독성학 연구에서는, SD 래트에게 20% 솔루톨 중 400, 200 또는 100 mg/kg 화합물 2 HCl 염 또는 비히클 대조군을 7일 동안 투여하였다.

실시예 3:

용량 반응의 비교 시험

7종의 세포주에 대해 세포 생존율에 대한 화합물 2의 효과를 조사하였다. 상이한 시험 물품 농도와의 인큐베이션 후에 셀타이터-글로(CellTiter-Glo) 발광 세포 생존율 검정을 사용하여 선택된 세포주에서 50% 억제 농도 (IC₅₀)를 결정하였다.

세포주를 화합물 2로 9가지 농도로 삼중으로 처리하였고, 시스플라틴을 참조 화합물로서 사용하고, 배양 배지 중에 0.5%(v/v) DMSO를 비히클 대조군으로서 첨가하였다.

물질 및 시약

일반적 세포 배양 시약 및 플라스틱.

96-웰 편평 투명 바닥 블랙 폴리스티렌 TC-처리된 마이크로플레이트 (Cat# 3340, 코닝(Corning)).

백실(Backseal) 흑색 접착 바닥 밀봉 (Cat# 6005189, 퍼킨 엘머(Perkin Elmer)).

셀타이터-글로® 발광 세포 생존율 검정 (Cat. #.: G7572, 프로메가(Promega). -20℃에서 저장)

기질은 96-웰 플레이트에서 검정당 100μl로의 1,000회 검정에 충분하다.

하기를 포함한다:

1 x 100 mL 셀타이터-글로® 완충제

1 x 바이알 셀타이터-글로® 기질 (동결건조됨)

시약 제조

셀타이터-글로 완충제를 해동시키고, 사용 전에 실온으로 평형화시켰다.

동결건조된 셀타이터-글로 기질을 사용 전에 실온으로 평형화시켰다.

적절한 부피 (100 mL)의 셀타이터-글로 완충제를 셀타이터-글로 기질이 담긴 호박색 병으로 옮겨 동결건조된 효소/기질 혼합물을 재구성하였다. 이로서 셀타이터-글로 시약을 형성하였다.

내용물을 부드럽게 볼텍싱하거나, 와류시키거나 또는 뒤집어 혼합하여 균질 용액을 수득하였다.

반수 최대 억제 농도 IC₅₀의 결정

로그 성장 기간 동안 세포를 수거하여 카운트-스타(Count-star)를 사용하여 세포 수를 카운팅하였다.

배양 배지를 사용하여 세포 농도를 3.33x10⁴개 세포/mL로 조정하였다.

90 μL 세포 현탁액을 3개의 96-웰 플레이트 (플레이트 A 및 B)에 3x10³개 세포/웰의 최종 세포 밀도로 첨가하였다. (세포 농도는 데이터 베이스 또는 밀도 최적화 검정에 따라 조정될 것임).

T0 판독 플레이트의 경우:

T0 판독을 위해 10 μL 배양 배지를 플레이트 A의 각각의 웰에 첨가하였다.

플레이트 및 그의 내용물을 실온에서 대략 30분 동안 평형화시켰다.

흑색 스티커를 플레이트의 바닥에 두어 광을 차단하였다.

100 μL 셀타이터-글로를 각각의 웰에 첨가하였다.

내용물을 오비탈 진탕기 상에서 2분 동안 혼합하여 세포 용해를 유도하였다.

플레이트를 실온에서 10분 동안 인큐베이션하여 발광 신호를 안정화시켰다.

엔비젼 멀티 라벨(EnVision Multi Label) 판독기를 사용하여 발광 (T0)을 기록하였다.

시험 판독 플레이트의 경우:

10x 용액을 제조하였다 (작업 농도: 배지 중 시험 물품 10μM, 3.16-배 연속 희석으로 10개 용량 수준을 달성함).

플레이트 B의 각각의 웰 (각각의 약물 농도에 대해 삼중)에 시험 물품 및 참조 대조군 둘 다의 10 μL (10x) 약물 용액을 분배하였다 (배양 배지 중 용매 최종 농도: 0.5% [v/v]).

시험 플레이트 B를 5% CO₂ 하에 37℃의 가습 인큐베이터에서 72시간 동안 인큐베이션한 다음, CTG 검정에 의해 측정하였다.

플레이트 및 그의 내용물을 RT에서 대략 30분 동안 평형화시켰다.

흑색 스티커를 플레이트의 바닥에 두어 광을 차단하였다.

100 μL 셀타이터-글로를 각각의 웰에 첨가하였다.

발광을 기록하였다.

데이터 분석

데이터를 그래프패드 프리즘 5.0을 사용하여 그래프로 나타내었다.

절대 IC₅₀ (EC₅₀)을 계산하기 위해, S자형 용량 반응을 갖는 비선형 회귀 모델을 사용하여 용량-반응 곡선을 피팅하였다. 생존율을 계산하기 위한 식을 하기에 제시하며, 그래프패드 프리즘 5.0에 의해 생성된 용량-반응 곡선에 따라 절대 IC₅₀ (EC₅₀)을 계산하였다.

생존율 (%) = (Lum시험 물품-Lum배지 대조군)/ (Lum처리 없음-Lum배지 대조군)x100%.

도 6a는 IGR-OV1 세포주에 대한 용량-반응 곡선을 보여준다. IGR-OV1은 ACVR1 돌연변이체 (P455A) 세포주이다. 도 6b는 C-33a, SK-OV-3, AN3-CA, CaSki, HeLa, 및 HEC-1-A (야생형 ACVR1) 대비 IGR-OV1 (돌연변이체 ACVR1) 세포주에 대한 결과의 비교를 보여준다.

실시예 4:

생체내 Jurkat 이종이식편 모델

이종이식편 모델에서 종양 부피에 대한 화합물 2의 효과를 조사하였다. 동물을 하기 조건으로 수용하였다:

동물을 온도 및 명/암 주기가 조절되는 환기 마우스 케이징 시스템 (애니멀 케어 시스템즈(Animal Care Systems), 콜로라도주 센티니얼)에 수용하였다.

온도: 22.7-23.9℃

습도: 10%

베딩: 옥수수 속대 (애니멀 케어 시스템즈, 1/4" 방사선조사)

사료: 방사선조사된 글로벌, 대두 단백질-무함유, 압출형 설치류 사료 (엔비고(Envigo), Cat. No: 2920X.CS)

물: RO 물, 자유롭게

Jurkat 세포를 10% FBS가 보충된 RPMI1640 배지에서 배양하고, 37℃에서 5% CO₂ 하에 인큐베이션하였다. 세포를 1주에 2회, 또는 필요에 따라 계대배양하였다.

세포를 무혈청 배지 중에서 세척한 후, 1:1, 무혈청 배지:매트리겔의 용액 중에 현탁시켰다. 주입 부피는 200 μL였다. 마우스의 뒷옆구리에 1x10⁷개 세포/마우스로 피하로 주사하였다.

동물 종양 부피 및 체중을 매주 2회 측정하고 기록하였다. 평균 종양 부피가 >100 mm³에 도달하면 처리를 개시하였다. 마우스를 종양 부피별로 계층화하여 각각의 동물 케이지에서 유사한 평균 출발 종양 부피가 되게 한 다음, 각각의 케이지를 처리군으로의 배치를 위해 무작위로 선택하였다.

종양 부피 측정은 길이 (최장 직경) 및 너비 (최장 직경에 수직) 둘 다를 측정하는 캘리퍼를 사용하여 매주 2회 행하였다. 종양 부피를 L x W x W / 2로 계산하였다.

50 mg/kg (Qd)의 화합물 2의 HCl 염을 마우스에게 투여될 20% 솔루톨, 80% 덱스트로스 (5% 덱스트로스 용액) 중에 제제화하였다. 결과를 도 7에 나타낸다.

실시예 5:

성인 인간 암에서의 ACVR1 돌연변이의 분석

ACVR1 돌연변이의 유전자 구성을 분석하여 어떠한 돌연변이가 구조 (I)의 화합물에 의한 치료로부터 이익을 가져올 수 있을지 평가하였다. cBioPortal.org에서 공중 이용가능한 서열 데이터베이스 및 분석 도구를 사용하여, 암 환자의 조직에서 ACVR1 돌연변이를 분석하였다. 결과를 다양한 암 또는 기능-획득 활성과 연관된 문헌에서의 ACVR1의 공지된 돌연변이와 비교하였다. 다중 돌연변이가 ACVR1 내에서 발견되었다. FOP 협회는 ACVR1의 이상 활성화를 구동할 수 있는 돌연변이를 확인하고 이해하기 위해 광범위한 작업을 수행해왔다. 이들 돌연변이는 L196P, R206H, Q207E, R258S, G328E/R, 및 G356D를 포함한다. 성인 암에서 확인된 ACVR1 돌연변이는 대부분의 공지된 FOP 돌연변이를 포함하지만, 또한 그의 ACVR1 돌연변이 프로파일에서 보다 적은 "핫스팟" 및 미지의 유의성의 많은 변경과 함께 보다 큰 다양성을 입증한다. 다중 암 유형에서 이들 희귀 돌연변이의 조사로부터의 결과를 본원에 제시한다.

생화학적 연구는 세포내 도메인에서의 돌연변이가 ACVR1/ALK2 키나제 활성에 대해 활성화 효과를 가질 수 있음을 나타낸다. 많은 공지된 돌연변이는 수용체 리간드에 반응하여 수용체의 활성을 증진시킨다. 도 8에 제시된 바와 같이, 화합물 2는 다양한 돌연변이를 갖는 ALK2 수용체를 억제하는데 있어서 효과적이었다.

cBioPortal.org 브라우저를 사용하여, 더 캔서 게놈 아틀라스 (TCGA) 범 암 및 메모리얼 슬로안 케터링 (MSK) IMPACT 데이터베이스로 ACVR1에서의 돌연변이에 대해 조사하였다. 도 9a는 ALK2 활성의 조절에서 소정의 역할을 하는 것으로 생각되는 글리신-세린 조절 도메인 및 단백질 키나제 도메인에서의 일부 반복 돌연변이 (핫스팟)를 포함하여; ACVR1 돌연변이의 분포를 보여주는 롤리팝 다이어그램을 보여준다. 도 9b는 상이한 성인 종양 유형에 걸쳐 발견된 여러 유형의 염색체 이상 (돌연변이, 증폭, 결실 및 융합)의 분포를 보여준다. 도 9c는 ACVR1에서 유전자 이상을 갖는 대상체가 ACVR1 변경이 없는 대상체와 비교하여 6개월만큼 더 짧은 생존 시간을 갖는다는 것을 나타내는 카플란-마이어 곡선을 보여준다. 분석은 ACVR1 유전자에서의 돌연변이 및 융합에 집중되었다.

표 9에 제시된 바와 같이, MSK Impact 및 TCGA 데이터베이스 통계는 21289명의 환자 집단으로부터 147명의 고유 대상체에서 0.69%의 ACVR1 전체 돌연변이율이 발견되었음을 나타낸다.

표 9.

종양 유형별 돌연변이의 분석은 ACVR1 돌연변이를 갖는 147명의 고유 환자 중에서, 34%는 부인과암을 갖고, 18%는 위장암을 갖고, 14%는 흉부암을 갖고, 13%는 흑색종을 갖고, 6%는 비뇨생식기암을 갖고, 5%는 신경계암을 갖고, 4%는 두경부암을 갖고, 3%는 다른 암을 갖고, 2%는 유방암을 갖는다는 것을 보여주었다.

표 10은 아미노산 위치에 의해 카테고리화된 상위 돌연변이 빈도를 보여준다.

표 10.

사용된 데이터베이스에서 종양 유형에 걸쳐 총 117개의 고유 돌연변이가 발견되었다. FOP 및 DIPG와 연관된 많은 정규 돌연변이는 다양한 성인 암 사이에서 동일한 위치에서 발견되는 가장 흔한 돌연변이, 예컨대 R206H, R375C/H, G356D, G328W/E/V/R, R258G/W 중의 것이었다. 미지의 유의성의 많은 신규 돌연변이가 또한 검출되었고, 이는 암에서 소정의 역할을 할 수 있는 추가의 유전자 변경을 시사한다. 뮤테이션 어세서(Mutation Assessor), SIFT, 및 폴리펜2(PolyPhen2) 알고리즘을 사용하여 cBioPortal.org로부터의 영향 평가를 수행하여 단백질 기능에 대한 돌연변이의 영향을 예측하였다.

표 11은 SIFT 알고리즘에 의해 유해 영향을 갖는 것으로 예측된 데이터 세트에서 확인된 ACVR1 돌연변이를 보여준다. SIFT 알고리즘은 돌연변이의 55%가 유해한 것으로, 돌연변이의 35%가 허용되는 것으로, 돌연변이의 10%가 미확인된 영향을 갖는 것으로 예측하였다.

표 11.

표 12는 폴리펜 2 알고리즘에 의해 손상 가능성이 있거나 아마도 손상 영향을 가질 것으로 예측된 데이터 세트에서 확인된 ACVR1 돌연변이를 보여준다. 폴리펜2 알고리즘은 돌연변이의 48%가 아마도 손상 영향을 가질 것으로, 돌연변이의 10%가 손상 영향 가능성이 있는 것으로, 돌연변이의 31%가 양성으로, 돌연변이의 11%가 미확인된 영향을 갖는 것으로 예측하였다.

표 12.

표 13은 돌연변이 평가자 알고리즘에 의해 높은, 중간, 또는 낮은 영향을 갖는 것으로 예측된 데이터 세트에서 확인된 ACVR1 돌연변이를 보여준다. 돌연변이 평가자 알고리즘은 돌연변이의 8%가 높은 영향을 갖고, 돌연변이의 28%가 중간 영향을 갖고, 돌연변이의 35%가 낮은 영향을 갖고, 돌연변이의 19%가 중립적 영향을 갖고, 돌연변이의 10%가 미확인된 영향을 갖는 것으로 예측하였다.

표 13.

이들 알고리즘은 정규 및 고유 돌연변이 둘 다가 단백질 기능에 영향을 미칠 수 있다는 것을 나타낸다. SIFT 알고리즘을 사용하여, 본 발명자들의 검색 내에서 발견된 모든 정규 돌연변이는 유해한 것으로서 카테고리화되었고, 이는 이것이 ACVR1 유전자에서 활성화 돌연변이를 예측하는데 있어서 유용한 도구일 수 있음을 시사한다. 일부 경우에, 특정 부위에서의 상이한 아미노산 치환은 돌연변이 영향에 대해 상이한 효과를 가졌다. 이들 예측 알고리즘의 추가의 조사가 요망된다.

다음으로, 특정 암 하위유형을 다양한 해부학적 부위에 대해 가장 통상적인 돌연변이 또는 공지된 활성화 돌연변이의 존재에 대해 분석하고, SIFT 영향 스코어를 암 하위유형별로 계산하였다.

부인과암. 부인과암은 가장 많은 돌연변이를 기록하였고 (43개), FOP 및 DIPG에서 발견되는 많은 정규 돌연변이를 포함하였다. SIFT 알고리즘은 ACVR1 돌연변이 및 부인과암을 갖는 환자 (n=50) 중에서, 환자의 45%가 유해 영향을 갖는 돌연변이를 갖고, 40%가 허용되는 영향을 갖는 돌연변이를 갖고, 15%가 미규정된 영향을 갖는 돌연변이를 갖는 것으로 예측하였다. 부인과암 하위세트에서 확인되는 공지된 활성화 및/또는 통상적 돌연변이를 표 14에 제시한다.

표 14.

위장암. SIFT 알고리즘은 ACVR1 돌연변이 및 위장암을 갖는 환자 (n=27) 중에서, 환자의 52%가 유해 영향을 갖는 돌연변이를 갖고, 40%가 허용되는 영향을 갖는 돌연변이를 갖고, 8%가 미규정된 영향을 갖는 돌연변이를 갖는 것으로 예측하였다. 위장암 하위세트에서 확인되는 공지된 활성화 및/또는 통상적 돌연변이를 표 15에 제시한다.

표 15.

흉부암. SIFT 알고리즘은 ACVR1 돌연변이 및 흉부암을 갖는 환자 (n=21) 중에서, 돌연변이의 76%가 유해 영향을 갖고, 14%가 허용되는 영향을 갖고, 10%가 미규정된 영향을 갖는 것으로 예측하였다. 흉부암 하위세트에서 확인되는 공지된 활성화 및/또는 통상적 돌연변이를 표 16에 제시한다.

표 16.

흑색종. SIFT 알고리즘은 ACVR1 돌연변이 및 흑색종을 갖는 환자 (n=19) 중에서, 환자의 58%가 유해 영향을 갖는 돌연변이를 갖고, 32%가 허용되는 영향을 갖는 돌연변이를 갖고, 11%가 미규정된 영향을 갖는 돌연변이를 갖는 것으로 예측하였다. 흑색종 하위세트에서 확인되는 공지된 활성화 및/또는 통상적 돌연변이를 표 17에 제시한다.

표 17.

신경계암. 신경계암은 정규 돌연변이의 높은 발생률 (30%)을 입증하였다. SIFT 알고리즘은 ACVR1 돌연변이 및 신경계암을 갖는 환자 (n=7) 중에서, 환자의 100%가 유해 영향을 갖는 돌연변이를 갖는 것으로 예측하였다. 신경계암 하위세트에서 확인되는 공지된 활성화 및/또는 통상적 돌연변이를 표 18에 제시한다.

표 18.

실시예 6:

진행된 고형 종양을 갖는 환자에게 경구로 투여하는 화학식 2의 화합물의 최초 인간 연구를 위한 임상 시험 연구 설계

시험의 Ia상 부분은 진행된 또는 진행성 고형 종양을 갖는 환자에 대한 3+3 변형된 용량 증량을 포함할 것이다. 투여는 체표면적을 기준으로 계산될 것이고, 투여는 28-일 치료 주기에서 연속 21일 동안 수행될 것이다. 최대 20명의 대상체가 등록될 것이다. 보관 조직이 시험의 Ia상 부분에 등록된 환자의 유전자 검사를 위해 요청될 것이고, ACVR1 돌연변이 상태를 결정하기 위해 보관 조직에 대해 차세대 서열분석이 수행될 것이다.

최대 허용 용량의 결정 후, 추가의 대상체가 시험의 Ib상 부분에 등록될 것이다. 등록 환자는 진행된 전이성 또는 진행성 고형 종양의 조직학적으로 확인된 진단을 가질 것이다. 등록 환자는 또한 그의 상태에 임상 이익을 제공하는 것으로 공지된 확립된 요법에 대해 불응성이거나 또는 그에 대해 불내성일 것이다. Ib상 부분의 경우, 투여는 체표면적을 기준으로 계산될 것이고, 투여는 28-일 치료 주기에서 연속 21일 동안 수행될 것이다. 보관 조직이 시험의 Ib상 부분에 등록된 환자의 유전자 검사를 위해 요청될 것이고, ACVR1 돌연변이 상태를 결정하기 위해 보관 조직에 대해 차세대 서열분석이 수행될 것이다.

화합물 2의 효력 및 반감기를 기준으로 대체 요법은 매주 1회이다. 다른 대체 요법은 1주에 2회 용량, 1주에 3회 용량, 1주에 4회 용량, 1주에 5회 용량, 또는 1주에 6회 용량이다. 각각의 이러한 요법은 4주의 주기로 투여하는 것을 포함한다. 따라서, 한 요법은 4주 주기에 걸쳐 매주 1회이고, 이는 휴지기 없이 매주 연속 투여를 발생시킬 것이다. 대안적 사이클은 1회 이상의 휴지기, 예컨대 3주 투여 및 1주 휴지기, 2주 투여 및 2주 휴지기, 1주 투여 및 3주 휴지기, 또는 대안적으로 교대로 투여 주 및 휴지기 주, 즉 1주 투여 및 1주 휴지기 또는 격주 투여를 포함한다. 모든 이들 실시양태의 경우, 화합물 2의 용량은 균등하거나 또는 증량될 수 있다. 하나의 출발 용량은 약 24 내지 30 mg의 범위일 수 있다. 하나의 출발 용량 또는 증량 용량은 약 48 내지 60 mg의 범위일 수 있다. 추가의 증량 용량은 약 72 내지 90 mg 및 약 96 내지 120 mg의 범위일 수 있다. 한 실시양태에서, 출발 용량은 매주 약 60 mg일 수 있고, 이는 유지되거나 또는 매주 약 90 mg으로 증량된다. 매주 약 90 mg의 용량은 유지되거나 또는 매주 약 120 mg으로 증량될 수 있다.

실시예 7 -

경구 고체 제제

화합물 2의 히드로클로라이드 염을 3가지 경구 용량 농도 (5, 25, 및 125 mg 용량 [유리 염기 기준])로 제제화하였다. 증가하는 양의 활성 제약 성분을 3종의 유사한 블렌드로 제제화하였고, 표 19를 참조한다. 블렌드 중 통상의 부형제를 사용하여 생성물을 즉시 방출용으로 제제화하였다. 약물을 #3, 경질 젤라틴 캡슐 안에 넣었다.

표 19:

블렌드 중 부형제, 5, 25, 및 125 mg 농도 캡슐

실시예 8 -

경구 액체 제제

DIPG 요법을 위한 소아 집단을 고려하여, 예를 들어 정제 또는 캡슐 형태보다 화합물 2에 대한 경구 액체 제제를 개발하였다. 화합물 2는 쓴맛이 두드러지기 때문에, 액체 제제는 상당한 분석 및 평가를 필요로 하였다.

먼저, 표 20에 나타낸 바와 같이, 다양한 부형제를 저장 조건 (초기, 60℃ 1,2,4W, 40℃ 2,4W, 5, 25℃ 4W) 하에 완충제로서 스크리닝하였다.

표 20

완충제

부형제를 침전 및 분해 불순물에 대해 스크리닝하였다. 침전물과 관련하여, pH 3 조건에서는 변화가 거의 관찰되지 않았지만, pH 4 및 pH 5 조건에서 많은 샘플에서 침전이 발견되었다. 불순물과 관련하여, 분해는 pH-의존적인 것으로 보였고, pH 5 및 pH 4는 pH 3보다 더 많은 분해를 유발하였다. 가장 적은 분해는 pH 3의 10mM 말레이트 완충제에서 관찰되었다. 말레이트 완충제는 다른 시험된 완충제와 비교하여 화학적 및 물리화학적으로 더 안정하였다.

다음으로, 표 21에 나타낸 바와 같이, 다양한 부형제를 저장 조건 (초기, 60℃ 1,2,4W, 40℃ 2,4W, 25℃ 4W, 5℃ 4W) 하에 보존제로서 스크리닝하였고, 여기서 각각의 샘플의 pH는 화합물 2의 용해 후 NaOH 또는 HCl을 사용하여 표적 pH로 조정하였다.

표 21

보존제

부형제를 침전 및 분해 불순물에 대해 스크리닝하였다. 시트레이트 및 말레이트 완충제 중에 벤조산나트륨을 함유하는 샘플에서 침전이 발견되었다. 분해와 관련하여, 보존제는 많은 차이를 나타내지 않았지만, 프로필렌 글리콜이 가장 적은 분해를 야기하는 것으로 보였다. 벤조산은 산성 조건 하에서의 그의 화학적 안정성 및 보존제 효과에 기초하여 보존제 중에서 가장 적합한 것으로 여겨졌다.

다음으로, 표 22에 나타낸 바와 같이, 다양한 부형제를 저장 조건 (초기, 60℃ 1,2,4W, 40℃ 2,4W, 25℃ 4W, 5℃ 4W) 하에 맛 차폐제로서 스크리닝하였고, 여기서 각각의 샘플의 pH는 화합물 2의 용해 후 NaOH 또는 HCl을 사용하여 표적 pH로 조정하였다.

표 22

부형제를 침전 및 분해 불순물에 대해 스크리닝하였다. 침전물과 관련하여, 글리세린이 가장 적은 침전을 야기하였지만, 전체 부형제가 대략 유사한 것으로 보였다. 분해와 관련하여, 글리세린이 가장 적은 분해를 야기하였지만, 전체 부형제가 대략 유사한 것으로 보였다. 스크리닝의 결과는 바람직한 작용제를 산출하지 못했고, 따라서 시험관내 감각 연구는 모든 맛-차폐제 중에서 수행되었다. 맛 센서에 관한 상세한 정보는 인센트(Insent)™ 제조업체, 인텔리전트 센서 테크놀로지, 인크.(Intelligent Sensor Technology, Inc.)로부터, 예를 들어, http://www.insent.co.jp/en/index.html에서 찾아볼 수 있다. 추가로, 공개된 종설 논문 [Tahara and Toko, Electronic Tongues - A Review, IEEE Sensors Journal, Volume 13, No. 8, pp 3001-11, August 2013]을 참조할 수 있다. 이들 각각은 맛 센서 기술과 관련하여 본원에 참조로 포함된다.

표 23은 시험관내 감각 연구에서 연구된 시험 샘플을 제공하며, 이는 쓴맛을 "상대값" 및 "CPA 값"으로 추정한 다음 각각의 시험 샘플에 대해 퀴닌 농도로 전환하였다.

표 23

시험의 결과를 도 10에 제공한다. 퀴닌 역치는 약 0.03 mM (3.00E-02)이다. 수크랄로스와 같은 인공 감미제에 의한 쓴맛 차폐는 "감각 차폐"인 것으로 여겨지고, 따라서 센서 결과치에서의 변화는 빈약하다. 그러나, 용액 중의 인공 감미제 농도가 공지된 경우, 쓴맛이 얼마나 많이 억제될 지에 대한 예측치 및 그 때의 가상 센서 결과치를 계산하는 것이 가능하다. 센서 반응에 기초하면, 15% HP-β-CD/ 0.1% 수크랄로스는 맛-차폐 능력을 갖는다.

표 24는 시험관내 감각 연구에서의 제2 세트의 시험 샘플 연구를 제공한다.

표 24

시험 결과를 도 11에 제공한다. 센서 반응에 기초하면, 15% HP-β-CD/0.1% 수크랄로스는 맛-차폐 능력을 갖는다.

보존제 효능의 연구는 USP40을 참조하여 수행하였고, 이는 이러한 프로토콜과 관련하여 본원에 참조로 포함된다. 모든 원형 제제는 카테고리 3 생성물에 요구되는 항미생물 유효성의 기준을 통과하였다. 그러나, 아스페르길루스 브라실리엔시스(Aspergillus brasiliensis)의 생존 수가 모니터링되었고, 따라서 추가의 제제 연구 및 보존제 시험을 수행하였다. 다시, USP40을 참조한다. 제제를 표 25에 제시한다.

표 25

모든 원형 제제는 카테고리 3 생성물에 요구되는 항미생물 유효성의 14일 및 28일 기준을 통과하였다. 보존제 효능은 pH-의존성인 것으로 확인되었다. 0.2% 벤조산를 갖고 및 pH 2인 제제는 보다 우수한 보존 효과를 제공하는 것으로 여겨진다.

경구 액체 제제의 한 실시양태를 표 26에 제시한다.

표 26

경구 액체 제제에 대한 대안적 실시양태를 표 27에 제시한다.

표 27

실시예 9:

염 평가 및 다형체 스크리닝

염 형태가 유리 염기 형태에 비해 이점을 제공할 것인지를 평가하기 위해 염 스크리닝으로 염기성 화합물, 화합물 2를 평가하였다. 확인된 임의의 적합한 염 후보에 대해, 예비 다형체 스크리닝을 수행하여 그의 다형성 위험을 평가할 것이다.

요약

10종의 산 (HCl의 2가지 몰비) 및 3종의 용매계를 사용하여 33종의 조건 하에 염 스크리닝을 수행하였다. 모든 스크리닝 실험으로부터, 총 12개의 결정질 히트를 단리하고, X선 분말 회절 (XRPD), 열중량측정 분석 (TGA), 및 시차 주사 열량측정 (DSC)에 의해 특징화하였다. 양성자 핵 자기 공명 (¹H NMR) 또는 이온 크로마토그래피 (IC)와 조합된 고성능 액체 크로마토그래피 (HPLC)에 의해 염 히트의 화학량론적 비를 결정하였다. 히트의 물리적 특성에 기초하여, 평가를 위한 염 리드로서 무수 HCl 염 형태 A 및 푸마레이트 형태 A를 선택하였다.

HCl 염 형태 A 및 푸마레이트 형태 A의 염 리드를 300 mg 규모로 제조하고, 흡습성, pH 2, 5, 및 7 완충제 중에서의 동역학적 용해도, 및 40℃/75%RH 하에 1주 동안의 고체-상태 안정성에 대해 평가하였다. 평가 결과에 의해 제시된 바와 같이 (참조물로서 유리 염기 형태 A를 사용함):

a) 유리 염기 형태 A, HCl 염 형태 A, 및 푸마레이트 형태 A는 모두 약간 흡습성이었고, DVS 시험 후 형태 변화는 없었고;

b) 유리 염기 형태 A와 비교하여, HCl 염 형태 A는 pH 2, 5 및 7 완충제에서 증가된 용해도를 나타내었고, pH 7 완충제에서 불균등화가 관찰되었다. 푸마레이트 형태 A는 pH 2 및 5 완충제에서 감소된 용해도를 나타내었고, 형태 변화가 관찰되었지만, pH 7 완충제에서는 증가된 용해도가 관찰되었고, 형태 변화는 없었고;

c) 유리 염기 형태 A, HCl 염 형태 A 및 푸마레이트 형태 A는 모두 40℃/75%RH 하에 1주 동안 우수한 물리화학적 특성을 나타내었다. 특징화 및 평가 결과를 표 28에 요약한다.

수집된 결과에 기초하면, HCl 염 형태 A가 바람직한 후보 형태이다. 따라서, HCl 염 (모노)에 대해 다형성 평가 연구를 수행하였다. HCl 염 형태 A로 출발하여, 슬러리 전환, 증발, 느린 냉각 및 역용매 첨가의 상이한 방법을 사용하여 32가지 조건 하에 예비 다형체 스크리닝을 수행하였다. XRPD 비교에 기초하여, HCl 염 형태 A 외에, 5종의 추가의 결정질 형태 (HCl 염 형태 C~G)를 스크리닝으로부터 수득하였고, TGA 및 DSC에 의해 특징화하였다. 조사 결과에 기초하면, HCl 염 형태 A 및 C는 각각 무수물 및 수화물인 것으로 추측되었다. 증발에 의한 HCl 염 형태 D 및 E의 재-제조는 각각 HCl 염 형태 C+D 및 C+E를 함유하는 혼합물을 생성하였다. 혼합물의 ¹H NMR 및 가열 실험의 결과로서, HCl 염 형태 D 및 E는 수화물일 수 있다. 물질의 제한된 양으로 인해, 잠재적 HCl 염 형태 F 및 G는 확인되지 않았다. 염 및 다형체 스크리닝 둘 다로부터 수득된 HCl 염 형태의 상세한 특징화 데이터 및 XRPD 오버레이를 표 29A, 도 12, 및 도 13a 및 13b에 요약한다. 도 12는 HCl 염 형태 A의 XRPD 패턴을 도시한다. 도 13a는 HCl 염 결정 형태 A, C, D, 및 E의 오버레이를 도시한다. 도 13b는 형태 B, F, 및 G를 도시한다. 각각의 형태는 또한 "유형"으로 지칭될 수 있고, 용어는 상호교환가능하게 사용된다.

표 28

염 리드 및 유리 염기의 특징화 및 평가 요약

--: 이용가능하지 않음.

*: 매우 소량의 유리 염기 형태 A가 남은 것에 의해 유발될 수 있음.

**: 25℃/80%RH에서의 수분 흡수에 기초함: 매우 흡습성 - > 15%, 흡습성 - 2~15%, 약간 흡습성 - 0.2~2%, 비-흡습성 - < 0.2%.

표 29A

HCl 염 형태의 특징화

*: 화학량론적 비는 HPLC/IC에 의해 결정되었다. **: 샘플을 증발로부터 수득하였다.

--: 샘플의 제한된 양으로 인해 측정되지 않음.

언급된 바와 같이, 도 12는 HCl 염 형태 A의 XRPD 패턴을 도시한다. 형태 A에 대한 XRPD의 표로 나타낸 버전은 하기 표 29B에서와 같고, 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 인지되는 바와 같이, 오차 범위는 +/- 약 0.2°2θ임에 주목한다:

표 29B

화합물 2 HCl 염 형태 A

화합물 2의 예비 염 스크리닝 및 HCl 염 (모노)의 다형체 스크리닝의 결과로서, 모노-HCl 염 형태 A가 추가의 개발을 위한 바람직한 후보이다.

세부사항: 염 스크리닝 및 리드 재-제조

7.5 및 5.1의 추정 pKa 값 및 실온 (RT, 25 ± 3℃)에서의 유리 염기 (812608-05-A)의 대략적인 용해도에 따라, 10종의 염 형성제 및 3종의 용매 시스템을 스크리닝에 사용하였다. 유리 염기 (~15 mg)를 유리 바이알 내에 선택된 용매로 분산시키고, 상응하는 염 형성제를 1:1의 몰 충전 비로 첨가하였다 (HCl/유리 염기의 경우, 둘 다 1:1 및 2:1의 2개의 비를 사용함). 유리 염기 및 산의 혼합물을 실온에서 3.5일 동안 교반하였다. 더 많은 고체 히트를 수득하기 위해, 수득한 투명한 용액 (812608-08-B0/B5/B10)을 5℃로 옮기고, 추가로 2.5일 동안 교반하였다. 마지막으로, 812608-08-B0/B10의 투명한 용액에, n-헵탄 0.5 mL를 첨가하고, 5℃에서 추가로 2일 동안 교반하였다.

모든 생성된 고체를 단리하고, 50℃에서 2.5시간 동안 건조시킨 후 XRPD에 의해 분석하였다. 표 30에 요약된 바와 같이, 총 12개의 결정질 히트가 수득되었고, 이를 XRPD, TGA, 및 DSC에 의해 특징화하였고, ¹H NMR 또는 HPLC/IC에 의해 화학량론을 결정하였다. 특징화 데이터를 표 31에 요약하였다.

표 30

염 스크리닝 결과의 요약

FB: 유리 염기.

표 31

결정질 히트의 특징화 요약

*: 술페이트의 경우 황색 분말이 HPLC 순도 99.61 면적%로 수득되었고, 다른 모든 히트는 백색 분말이었다.

염 리드의 재-제조 및 특징화

특징화 결과에 기초하여, 2개의 염 리드 (HCl 염 형태 A 및 푸마레이트 형태 A)가 염 리드로서 부합되어, 수백 밀리그램으로 재-제조하였다. 선택 기준은 하기를 포함하나 이에 제한되지는 않는다: 1) 겉보기 무정형 할로의 부재 하의 예리한 XRPD 피크, 2) TGA에서의 무시할 만한 중량 손실, 3) DSC에서 예리한 용융 피크를 갖는 순수한 열 사건. 상세한 제조 절차를 표 32에 기재하였고, 특징화 데이터는 상기 표 28에 요약하였다.

표 32

염 리드의 제조 절차

HCl 염 형태 A

HCl 염 형태 A는 도 14의 XRPD 결과에 의해 입증된 바와 같이 성공적으로 재-제조되었다. 도 15의 TGA 및 DSC 데이터에 따르면, 샘플은 150℃까지 1.7%의 중량 손실 및 196.2, 214.8 및 274.0℃ (개시 온도)에서 3개의 흡열을 나타내었다. 196.2℃에서의 작은 흡열은 남아있는 매우 소량의 유리 염기 형태 A의 용융에 의해 유발될 수 있다. 도 16에 제시된 바와 같이, HCl 염 형태 A 샘플을 218℃로 가열한 후, 냉각 동안 약 202.0℃에서 발열이 관찰되었고, 가열 후 수득된 샘플의 DSC는 여전히 213.8 및 273.9℃ (개시 온도)에서 흡열을 나타내었다. 샘플을 218℃로 가열하고, RT로 다시 냉각시키고, 주위 조건에 노출시킨 후에 어떠한 형태 변화도 관찰되지 않았다는 사실과 조합하여, 213.8℃에서의 신호는 형태 전이에 의해 유발된 것으로 추측되었다. 화학량론적 비는 HPLC/IC에 의해 0.97 (산/염기)로서 결정되었다. 150℃ 전에 제한된 점진적인 TGA 중량 손실이 관찰되었고 190℃ 전에 DSC에서 유의한 열 사건은 관찰되지 않았기 때문에, 샘플은 무수 HCl 염인 것으로 추측되었다.

푸마레이트 형태 A

푸마레이트 형태 A는, 푸마레이트 형태 A 배치의 XRPD 오버레이를 도시한 도 17에서의 XRPD 결과에 의해 입증된 바와 같이, 성공적으로 재-제조되었다. 도 18의 TGA 및 DSC 데이터에 따르면, 샘플은 150℃까지 1.0%의 중량 손실 및 228.5 및 233.9℃ (피크 온도)에서 2개의 흡열을 나타내었다. 화학량론적 비는 ¹H NMR에 의해 0.94 (산/염기)인 것으로 결정되었고 (도 19), 제한된 EtOH 잔류물이 검출되었다 (~1.6%). 150℃ 전에 제한된 TGA 중량 손실이 관찰되었고, 200℃ 전에 DSC에서 유의한 열 사건은 관찰되지 않았고, 제한된 용매 잔류물이 관찰되었기 때문에, 샘플은 무수 푸마레이트인 것으로 추측되었다.

염 리드의 평가

2개의 염 리드의 물리화학적 특성을 더 잘 이해하기 위해, 참조물로서 유리 염기 형태 A를 사용하여 흡습성, 동역학적 용해도, 및 고체-상태 안정성에 대한 추가의 평가 연구를 수행하였다.

흡습성

DVS 등온 플롯을 25℃에서 수집하여 고체 형태 안정성을 습도의 함수로서 조사하였다. 모든 무수 샘플을 0% RH에서 사전-평형화시켜, 비결합된 용매 또는 물을 제거한 후 시작하였다. 0.60~1.04%, 최대 80%RH의 수분 흡수에 의해 입증된 바와 같이, 유리 염기 형태 A 및 둘 다의 염 형태는 약간 흡습성이었고, DVS 평가 후 고체 형태 변화는 관찰되지 않았다 (도 20a, 20b, 20c, 20d, 20e, 및 20f).

95%RH에서 푸마레이트 유형 A에 대해 유의한 수분 흡수 증가 (4.56%)가 관찰되었지만, HCl 염 유형 A에 대해서는 95%RH에서 단지 1.40% 수분 흡수만이 관찰되었다.

동역학적 용해도

대조군으로서 유리 염기 형태 A (812608-05-A)를 사용하여, 2종의 염 리드의 동역학적 용해도를 pH 2, 5, 및 7 완충제 중에서 측정하여 그의 용해도 및 불균등화 위험을 평가하였다. 모든 용해도 샘플 (초기 고체 로딩 ~10 mg/mL)을 롤링 인큐베이터 상에서 25 rpm의 속도로 롤링되도록 유지하고, 각각 RT (19 ± 3℃)에서 1, 2, 4, 및 24시간째에 샘플링하였다. 원심분리 후에, 상청액을 HPLC 및 pH 시험을 위해 수집하고, 습윤 케이크를 XRPD 특징화를 위해 수집하였다. 투명한 용액이 수득되면, 용액에 대해 정확한 농도를 측정하였다.

결과를 표 33A에 요약하고, 동역학적 용해도 프로파일을 도 21에 나타낸다 (파선은 투명한 용액이 수득되었음을 나타냄). 유리 염기 형태 A와 비교하여, HCl 염 형태 A는 pH 2, 5, 및 7 완충제에서 증가된 용해도를 나타내었다. pH 2 및 5 완충제에서, 고체는 수득되지 않았다. pH 7 완충제에서, HCl 염 유형 A를 1, 2, 및 4시간 동안 현탁시킨 후에 유리 염기 형태 A로의 형태 변화가 관찰되었다 (제한된 고체가 1 및 2시간의 시점에 수득되었고, 1개의 추가의 넓은 피크가 2시간 시점에 관찰되었음). 24시간 후에 새로운 회절 피크가 관찰되었다. 푸마레이트 형태 A는 pH 2 및 5 완충제에서 감소된 용해도를 나타내었고, 형태 변화가 관찰되었지만, pH 7 완충제에서는 증가된 용해도가 관찰되었고, 형태 변화는 없었다. 유리 염기 형태 A의 경우, pH 5에서 유리 염기 형태 A를 현탁시킨 후 1 및 2시간의 시점에 1개의 추가의 넓은 피크 (강조됨)가 관찰된 것을 제외하고, 어떠한 형태 변화도 관찰되지 않았다.

표 33A

RT에서의 동역학적 용해도 결과의 요약

S: 용해도, mg/mL 단위, pH: 상청액의 최종 pH, FC: 고체 형태 변화.

G: 겔-유사 물질이 수득되어 데이터가 수집되지 않음.

N/A: 분석을 위한 고체가 없음. *: 2θ

7.6°에서 1개의 추가의 넓은 피크가 관찰됨.

고체-상태 안정성

유리 염기 형태 A, HCl 염 형태 A 및 푸마레이트 형태 A의 고체-상태 안정성을 40℃/75%RH 하에 1주 동안 평가하였다. 안정성 샘플은 XRPD에 특징화하여 임의의 고체 형태 변화를 체크하고, HPLC에 의해 특징화하여 순도 변화를 체크하였다. 모든 결과를 표 33B에 요약하고, XRPD 데이터를 도 22에 나타내며, 이는 안정성 시험 후에 어떠한 형태 변화 또는 유의한 HPLC 순도 감소도 관찰되지 않았음을 보여주었고, 이는 시험된 조건 하에 유리 염기 형태 A 및 2개의 염 둘 다의 우수한 물리화학적 안정성을 나타내었다.

표 33B

유리 염기 및 염 리드의 안정성 평가 요약

FC: XRPD 결과에 기초한 형태 변화.

수집된 결과에 기초하면, HCl 염 형태 A가 후보 형태이다.

HCl 염 (모노)에 대한 다형성 평가

따라서, HCl 염 (모노)에 대해 다형성 평가 연구를 수행하였다. 슬러리 전환, 증발, 느린 냉각 및 역용매 첨가 방법을 사용하여 32가지 조건 하에 예비 다형체 스크리닝을 수행하였다. XRPD 비교에 기초하여, HCl 염 형태 A 외에, 5종의 새로운 결정질 형태 (HCl 염 형태 C~G)를 스크리닝으로부터 수득하였고, TGA 및 DSC에 의해 특징화하였다. 조사 결과에 기초하면, HCl 염 형태 C는 수화물인 것으로 추측되었다. 증발에 의한 HCl 염 형태 D 및 E의 재-제조는 각각 HCl 염 형태 C+D 및 C+E를 함유하는 혼합물을 생성하였다. 혼합물의 ¹H NMR 및 가열 실험의 결과로서, HCl 염 형태 D 및 E는 수화물일 수 있다. 물질의 제한된 양으로 인해, 잠재적 HCl 염 형태 F 및 G는 완전하게 확인되지 않았다.

무수물 HCl 염 형태 A

HCl 염 형태 A (812608-16-A)를 다형체 스크리닝을 위해 재-제조하였고, 상세한 제조 절차는 표 34에 제시한다. 도 23에 제시된 바와 같이, HCl 염 유형 A는 성공적으로 재-제조되었다. 도 24의 TGA 및 DSC 데이터에 의해 제시된 바와 같이, 150℃까지 2.0% 중량 손실 및 220.7 및 274.8℃ (개시 온도)에서 2개의 흡열 피크가 관찰되었다. 산/유리 염기의 화학량론은 HPLC/IC에 의해 1.01인 것으로 결정되었다. 도 24의 제한된 TGA 중량 손실 및 순수한 DSC 곡선으로 인해, HCl 염 형태 A는 무수물인 것으로 추측되었다.

표 34

HCl 염 유형 A의 제조 절차

수화물 HCl 염 형태 C

HCl 염 형태 C (812608-21-A2)를 CHCl₃/MeOH (1:1, v/v) 용액의 증발로부터 수득하였다 (도 25). 도 26의 TGA 및 DSC 데이터에 의해 제시된 바와 같이, 150℃까지 3.1% 중량 손실, 98.8℃에서 넓은 흡열 피크 및 267.5℃ 및 275.5℃ (피크 온도)에서 2개의 예리한 피크가 관찰되었다. 산/유리 염기의 화학량론은 HPLC/IC에 의해 1.01인 것으로 결정되었다.

HCl 염 형태 C를 확인하기 위해, 가열 실험을 수행하였다. HCl 염 유형 C (812608-27-B)를 N₂ 하에 170℃로 가열하고, 30℃로 냉각시키고, 주위 조건에 노출시킨 후에, 어떠한 형태 변화도 관찰되지 않았다. 그러나, HCl 염 형태 C는 뚜껑 개방 하에 260℃로 가열한 후 HCl 염 형태 A로 바뀌었다 (뚜껑 크림핑 하에서는 264.9℃에서 흡열). 도 27을 참조한다. 또한, HCl 염 형태 C (812608-27-B)를 170℃로 가열하고, 30℃로 다시 냉각시키고, 주위 조건에 노출시킨 후에, DSC에서 넓은 피크가 여전히 관찰되었고, 이는 수분의 재-흡수에 의해 유발될 수 있다. XPRD 결과 및 형태 C가 상이한 수성 시스템에서 수득될 수 있다는 사실을 조합하면, HCl 염 형태 C는 수화물인 것으로 추측되었다 (모노 HCl 염 모노-수화물의 이론적 물 함량은 3.4%임). 도 28은 가열-전 및 가열-후의 HCL 형태 C의 DSC 오버레이를 보여준다.

완전히 확인되지 않은 형태 (D - G)

도 13a 및 13b의 XRPD 오버레이를 참조한다. HCl 염 형태 D (812608-23-A2)는 DCM/MeOH (우수한 용매)/DCM (역용매) 중 역용매 첨가로부터 수득되었고, 수득된 투명한 용액을 먼저 5℃ 및 -20℃로 옮긴 다음, RT에서 증발시켰다. TGA 및 DSC 데이터에 의해 입증된 바와 같이, 150℃까지 2.4% 중량 손실 및 다중 흡열이 관찰되었다. 산/유리 염기의 화학량론은 HPLC/IC에 의해 1.02인 것으로 결정되었다.

HCl 염 형태 D를 확인하기 위해, DCM/MeOH (우수한 용매)/DCM (역용매) 중 역용매 첨가에 의해 재-제조를 시도한 다음, RT에서 증발시켰다. XRPD에 의해 결정된 바와 같이, HCl 염 형태 C+D의 혼합물 (812608-27-C)을 재-제조로부터 수득하였다. 몇몇 가외의 피크가 관찰되었으며, 이는 새로운 형태에 기인한 것일 수 있거나 또는 HCl 염 형태 D의 참조 샘플의 상대적으로 더 낮은 결정화도로 인한 것일 수 있다. TGA 및 DSC는 150℃까지 4.8%의 2-단계 중량 손실을 입증하였고, 다중 흡열이 관찰되었다. HCl 염 형태 C+D의 혼합물을 함유하는 샘플을 N₂ 하에 170℃로 가열하고, 30℃로 냉각시키고, 주위 조건에 노출시킨 후에, 형태 A+C의 혼합물이 관찰되었다 (도 29). NMR에 의해 MeOH가 검출되지 않았고 제한된 DCM이 검출되었기 때문에, 형태 D는 수화물일 수 있다.

다시 도 13a 및 13b를 참조하면, THF/H₂O (우수한 용매)/EtOH (역용매) 중 역용매 첨가에 이어서 RT에서의 증발로부터 HCl 염 형태 E (812608-23-A5)가 수득되었다. TGA 및 DSC에 의해 입증된 바와 같이, 150℃까지 13.5% 중량 손실 및 105.8℃ 및 273.6℃ (피크 온도)에서 2개의 흡열 피크가 관찰되었다. 산/유리 염기의 화학량론은 샘플의 제한된 양으로 인해 결정되지 않았다.

HCl 염 형태 E를 확인하기 위해, THF/H₂O (우수한 용매)/EtOH (역용매) 중 역용매 첨가에 이어서 RT에서의 증발에 의해 재-제조를 시도하였다. XRPD에 의해 결정된 바와 같이, HCl 염 유형 C+E의 혼합물 (812608-27-D)을 재-제조로부터 수득하였다. 몇몇 가외의 피크가 관찰되었으며 (강조됨), 이는 새로운 형태에 기인한 것일 수 있거나 또는 HCl 염 형태 E의 참조 샘플의 상대적으로 더 낮은 결정화도로 인한 것일 수 있다. TGA 및 DSC에 의해 입증된 바와 같이, 150℃까지 7.8%의 2-단계 중량 손실 및 다중 열 사건이 관찰되었다. HCl 염 형태 C+E의 혼합물을 함유하는 샘플을 N₂ 하에 140℃로 가열하고, 30℃로 냉각시키고, 주위 조건에 노출시킨 후에, 형태 A+C의 혼합물이 관찰되었다 (도 30). NMR에 의해 THF가 검출되지 않았고 제한된 EtOH가 검출되었기 때문에, 유형 E는 수화물일 수 있다.

다시 도 13a 및 13b를 참조하면, H₂O/아세톤 중 역용매 첨가에 이어서 RT에서의 증발로부터 (812608-23-A6), 또는 HCl 염 형태 C (812608-23-A1, MeOH/H₂O로부터의 증발에 의해 수득됨)를 주위 조건 (21 ± 1.5℃, 60±20%RH)에 6일 동안 노출시킨 후에, 낮은 결정화도를 갖는 새로운 형태가 수득되었고, HCl 염 형태 F로서 명명되었다. TGA 및 DSC에 의해 입증된 바와 같이, 150℃까지 7.3% 중량 손실 및 120.6 및 274.7℃ (피크 온도)에서 2개의 흡열 피크가 관찰되었다.

마지막으로, 도 13a 및 13b 및 또한 도 31을 참조하면, HCl 염 형태 C (812608-21-A3, THF/H₂O로부터의 증발에 의해 수득됨)를 주위 조건 (21±1.5℃, 60±20%RH)에 6일 동안 노출시킨 후에 형태 변화가 관찰되었고, HCl 염 형태 G로서 명명되었다. TGA 및 DSC에 의해 입증된 바와 같이, 이러한 형태 G에 대해 150℃까지 8.9% 중량 손실 및 다수의 열 사건이 관찰되었다.

결과

유리 염기 화합물 2에 대해 염 스크리닝을 수행하였다. 33회의 염 스크리닝 실험으로부터 총 12개의 염 히트가 수득되었다. 무수물 HCl 염 형태 A 및 푸마레이트 형태 A를 흡습성, 상이한 pH 완충제에서의 동역학적 용해도, 및 고체-상태 안정성을 비롯한 추가의 평가를 위한 염 리드로서 선택하였다. 그 결과, HCl 염 형태 A 및 푸마레이트 형태 A 둘 다는 약간 흡습성이었고, 40℃/75%RH/1주의 조건 하에 우수한 물리화학적 안정성을 나타내었다. 유리 염기 형태 A와 비교하여, HCl 형태 A는 pH 2, 5, 및 7 완충제에서 증가된 용해도를 나타내었지만, pH 7 완충제에서 불균등화 및 형태 변화가 관찰되었다.

특징화 및 평가 결과에 기초하여, 무수물 HCl 염 형태 A가 바람직한 염 후보였고, HCl 염 (모노)에 대해 다형체 스크리닝을 수행하였다. XRPD 비교에 기초하여, 무수 HCl 염 형태 A 외에, 32가지의 조건 하에서의 예비 다형체 스크리닝으로부터 5종의 새로운 결정질 형태 (함수 HCl 염 형태 C 및 HCl 염 형태 D~G)를 수득하였고, 새로운 형태를 TGA 및 DSC에 의해 특징화하였다.

화합물 2의 예비 염 스크리닝 및 HCl 염 (모노)의 다형체 스크리닝의 결과로서, HCl 염 형태 A는 활성 제약 성분으로서의 개발을 위한 바람직한 실시양태이다.

염 및 다형성 스크리닝을 위한 기기 및 방법

대략적인 용해도

유리 염기 형태 A (812608-05-A)의 대략적인 용해도를 12가지의 용매 중에서 RT에서 측정하였다. 각각의 실험을 위해, 대략 2 mg의 샘플을 3 mL 유리 바이알에 첨가하였다. 이어서, 표 35의 용매를 고체가 시각적으로 용해될 때까지 또는 1 mL의 총 부피에 도달할 때까지 바이알에 단계적으로 첨가하였다 (50, 50, 200, 200, 500 μL). 표 35에 요약된 용해도 결과를 사용하여 염 스크리닝 설계에서 용매 선택을 가이드하였다.

표 35

RT에서 출발 유리 염기의 대략적인 용해도

*: 고체를 50℃에서 용해시킴.

사용된 용매에 대한 약어

용매 약어를 표 36에 열거한다.

표 36

용매 약어 목록

기기 및 방법

XRPD

XRPD 분석을 위해, 반사 모드의 패널리티컬(PANalytical) X선 분말 회절계를 사용하였다. XRPD 파라미터를 표 37에 열거한다.

표 37

XRPD 시험에 대한 파라미터

TGA 및 DSC

TGA 데이터는 TA 인스트루먼츠(TA Instruments)로부터의 TA Q500/Q5000 TGA를 사용하여 수집하였고, DSC는 TA 인스트루먼츠로부터의 TA Q200/Q2000 DSC를 사용하여 수행하였다. 사용된 상세한 파라미터를 표 38에 열거한다.

표 38

TGA 및 DSC 시험에 대한 파라미터

HPLC

애질런트(Agilent) 1100/1260 HPLC를 사용하였고, 순도 및 용해도 측정을 위한 상세한 크로마토그래피 조건을 표 39에 열거한다.

표 39

순도/용해도 시험을 위한 크로마토그래피 조건 및 파라미터

*: 샘플 812608-12-A에 대한 동역학적 용해도 시험 및 화학량론적 비에 사용됨.

^#: 샘플 812608-08-A1/08-C2/ 08-A3/ 08-B4/16-A/21-A2/23-A2에 대한 화학량론적 비에 사용됨.

이온 크로마토그래피

화학량론적 비를 결정하기 위한 반대 이온 (음이온) 함량 측정을 위한 이온 크로마토그래피 (IC) 방법을 표 40에 열거하였다.

표 40

PO₄ ^3- ,Cl^-, SO₄ ^2- 함량 측정을 위한 IC 방법

동적 증기 수착

SMS (서피스 메저먼트 시스템즈(Surface Measurement Systems)) DVS 인트린식(DVS Intrinsic)을 통해 동적 증기 수착 (DVS)을 측정하였다. 25℃에서의 상대 습도를 LiCl, Mg(NO₃)₂ 및 KCl의 조해점에 대해 보정하였다. DVS 시험에 대한 실제 파라미터를 표 41에 열거하였다.

표 41

DVS 시험에 대한 파라미터

용액 NMR

용액 NMR을 브루커 400M NMR 분광계 상에서 DMSO-d6을 사용하여 수집하였다.

pH 완충제의 제조 절차

원액 제조

0.2 M 염산: 진한 염산 8.25 mL를 500 mL 부피 플라스크에 첨가한다. 정제수로 소정의 부피로 희석하고 잘 혼합한다.

0.2 M 수산화나트륨: 2.0 g의 수산화나트륨을 250 mL 부피 플라스크에 칭량하여 넣는다. 이를 적절한 부피의 정제수로 용해시키고, 소정의 부피로 희석한다. 잘 혼합한다.

0.2 M 염화칼륨: 2.98 g의 염화칼륨을 200 mL 부피 플라스크 내로 칭량하여 넣는다. 이를 적절한 부피의 정제수로 용해시키고, 소정의 부피로 희석한다. 잘 혼합한다.

0.2 M 일염기성 인산칼륨: 5.44 g의 일염기성 인산칼륨 (KH₂PO₄)을 200 mL 부피 플라스크 내로 칭량하여 넣는다. 적절한 부피의 정제수를 첨가하고, 모든 고체가 완전히 용해될 때까지 초음파처리한다. 정제수로 소정의 부피로 희석하고 잘 혼합한다.

0.2 M 칼륨 비프탈레이트 용액: 8.17 g의 칼륨 비프탈레이트 [KHC₆H₄(COO)₂]를 200 mL 부피 플라스크 내로 칭량하여 넣는다. 적절한 부피의 정제수를 첨가하고, 모든 고체가 완전히 용해될 때까지 초음파처리한다. 정제수로 소정의 부피로 희석하고 잘 혼합한다.

pH 2.0 완충제: 0.2 M 염화칼륨 용액 25 mL를 100 mL 부피 플라스크로 옮기고, 0.2 M 염산 용액 6.5 mL를 첨가한다. 충분한 정제수를 표적 부피에 가깝게 첨가하고, pH 2.0으로 조정한다. 정제수로 소정의 부피로 희석하고, 잘 혼합하고, pH 미터로 pH를 체크한다.

pH 5.0 완충제: 12.5 mL의 0.2 M 칼륨 비프탈레이트 용액 및 5.6 mL의 0.2 M 수산화나트륨 용액을 50 mL 부피 플라스크로 옮긴다. 충분한 정제수를 표적 부피에 가깝게 첨가하고, pH 5.0으로 조정한다. 정제수로 소정의 부피로 희석하고, 잘 혼합하고, pH 미터로 pH를 체크한다.

pH 7.0 완충제: 12.5 mL의 0.2 M 일염기성 인산칼륨 용액 및 7.28 mL의 0.2 M 수산화나트륨 용액을 50 mL 부피 플라스크로 옮긴다. 충분한 정제수를 표적 부피에 가깝게 첨가하고, pH 7.0으로 조정한다. 정제수로 소정의 부피로 희석하고, 잘 혼합하고, pH 미터로 pH를 체크한다.

실시예 10:

뇌 침투에 대한 예측 모델링

화합물 2를 혈액 뇌 장벽 (BBB)을 통한 화합물의 진입을 허용할 것이라는 예측 특징에 대해 평가하였다. 다중 파라미터 스코어 ("myMPO")는 BBB 침투를 예측하기 위해 물리-화학적 특성을 취합하였다. 비교자로서 다수의 CNS 약물을 사용하여 훈련을 수행하였다. 스코어가 높을수록 (5가 이상적임), CNS 침투 가능성이 더 우수하다. 훈련으로부터 상이한 결론이 도출될 수 있지만, 하나의 결론은 화합물 2가 이 목록의 아랫쪽에 있지만, 효과적이기에 충분하게 장벽을 가로지르는 약물과 중첩된다는 것이다. 표 42는 특히 화합물 2에 대한 분석을 제공하고, 비교자에 대해서는 도 32를 참조한다. 따라서, 예측 모델링은 화합물 2가 비교적 약하기는 하지만 뇌 투과제임을 시사한다.

표 42

실시예 11:

비글 개에서의 단일 경구 용량 후 화합물 2의 2종의 현탁액 제제의 약동학 및 상대 생체이용률

연구의 목적은 비글 개에게 위관영양에 의해 2종의 용량 수준으로 화합물 2의 2종의 현탁액 제제를 투여하고, 혈장 농도의 결정, 약동학적 파라미터의 유도를 위해 혈액 샘플을 수집하고, 2종의 현탁액 제제의 상대 생체이용률을 결정하는 것이다. 화합물 2의 약동학은 캡슐로의 경구 투여 후에 평가될 것이고, 경구 액체 제제 대비 이러한 투여 형태의 상대 생체이용률을 결정하였다.

이 연구는 표 43, 표 44, 및 표 45에 약술된 바와 같이 7일 휴약 기간에 의해 분리된 3개의 기간에 걸친 경구 경로에 의한 시험 항목의 투여를 수반한다. 표 45에 약술된 연구의 제3 기간은 임의적인 것으로 간주되고, 단지 스폰서의 요청 시에만 수행될 것이다. 투여일 전에, 4:00 pm에 개에서 음식을 제거하고, 투여 2시간 후에 재도입할 것이다.

표 43:

기간 1 화합물 2 제제 1 (pH 약 2)

표 44:

기간 2 화합물 2 제제 2 (pH 약 3)

표 45:

기간 3 화합물 2, 캡슐 형태

제제의 경구 투여의 경우, 시험 항목을 위관을 통해 투여한 후, 10 mL의 수돗물을 투여하였다. 캡슐의 경구 투여의 경우, 캡슐을 혀 뒷쪽에 두어 삼키도록 한 후, 10 mL의 수돗물을 투여하였다. 이어서, 구강을 검사하여 캡슐을 삼켰는지 확인하였다. 투여되는 투여 제제의 실제 부피는 동물의 가장 최근에 스케줄링된 체중에 기초하여 계산될 것이다.

보다 구체적으로, 2 및 5 mg/kg의 화합물 2의 경구 용량을 제제 #1 (표 43) 및 제제 #2 (표 44)의 용액으로서 수컷 비글 개에게 투여하였고, 투여는 잘 허용되었고, 제제 #2 (표 44)로 5 mg/kg 화합물 2가 투여된 단지 1마리의 개에서 약한 구토가 관찰되었다.

제제 #1 (표 43) 및 제제 #2 (표 44)로서 용액으로의 화합물 2에 대한 약동학적 파라미터를 화합물 2 분말의 캡슐 (표 45)로의 투여에 대한 데이터와 함께 표 46에 제시한다.

표 46:

2종의 액체 제제 (표 43 및 44) 또는 캡슐 내의 분말 (표 45)로의 경구 투여 후 수컷 비글 개에서의 화합물 2에 대한 약동학적 파라미터

ND - 말기를 규정하는 시점의 불충분한 수로 인해 결정되지 않음.

말기에 대한 선형 상관 계수는 0.98 - 1.00의 범위였다. AUC_0-T최종에서 AUC_0-∞의 외삽은 1.84 - 12.48%의 범위였다.

데이터에 대해 제시된 포맷을 제제 #1 (표 43) 및 #2 (표 44)와 매칭시키기 위해 기술 통계학을 재계산하였다.

화합물 2를 용액으로서 각각 제제 #1 (표 43) 및 제제 #2 (표 44)로 및 캡슐 내의 분말 (표 45)로서 2 및 5 mg/kg의 용량으로 경구 투여한 후, 투여 0.5시간 후에 단일 대표 종으로서 모든 개에서 정량 한계 (0.5 ng/mL)를 초과하는 화합물 2의 혈장 농도가 관찰되었다.

T_max 값은 제제 #1 (표 43), 제제 #2 (표 44), 및 캡슐 내의 분말 (표 45)에 대해 둘 다의 용량에서 유사하였고, 3.0 - 4.7시간의 범위였다. 제제 #1 (표 43), 제제 #2 (표 44), 및 캡슐 내의 분말 (표 45)에 대한 둘 다의 용량에서의 평균 혈장 반감기 (t_1/2), 전신 클리어런스 (CL/F), 분포 부피 (Vz/F) 및 평균 체류 시간은 각각 2.3 - 5.6시간, 20 - 33 L/kg/hr, 85 - 237 L/kg 및 5.23 - 9.32시간의 범위였다.

각각의 제제에 대해, 2 mg/kg에서 5 mg/kg의 용량 증가 (2.5-배)에 대한 평균 C_max 및 AUC_0-∞의 증가를 비교하였다. C_max 및 AUC_0-∞에 대한 값은 제제 #1 (표 43)의 경우 4.1 및 4.0이었고, 제제 #2 (표 44)의 경우 1.9 및 2.1이었고, 캡슐 내의 분말 (표 45)의 경우 1.7 및 1.8이었다.

제제 #1 (표 43), 제제 #2 (표 44), 및 캡슐 내의 분말 (표 45)의 경우 2 mg/kg 및 5 mg/kg의 용량에서의 화합물 2에 대한 혈장 노출을 화합물 2의 C_max 및 AUC_0-∞ 둘 다를 사용하여 비교하였다. 제제 #1 (표 43), 제제 #2 (표 44), 및 캡슐 내의 분말 (표 45)을 비교한 경우, 각각의 용량에서 평균 C_max 및 AUC_0-∞ 값 사이에 어떠한 통계적으로 유의한 차이도 관찰되지 않았다. 그러나, 각각의 용량 수준 및 제제에서 3마리의 개 사이에 가변 혈장 농도가 관찰되었다.

동일한 개별 개가 제제 #1 (표 43) 및 제제 #2 (표 44) 둘 다를 제공받았기 때문에, 개별 개에 대해 제제 #2 (표 44) 대비 제제 #1 (표 43)에 대한 C_max 및 AUC_0-∞에 기초하여 화합물 2의 상대 생체이용률을 비교할 수 있다. C_max 및 AUC_0-∞에 대해, 평균 상대 생체이용률은 각각 2 mg/kg의 용량에서 0.70 ± 0.26 및 0.78 ± 0.24였고, 5 mg/kg의 용량에서 1.22 ± 0.30 및 1.34 ± 0.06이었다 (n = 3, ±SD).

요약하면, 본 개시내용은 제제 #1 (표 43), 제제 #2 (표 44), 및 캡슐 내의 분말 (표 45)로서 제조된 화합물 2를 사용한 경구 위관영양에 의한 비글 개의 경구 투여 연구를 포함한다. 화합물 2는 투여 0.5시간 후에 혈장에 나타났고, 평균 C_max 값은 2 및 5 mg/kg의 용량에서 각각 6.78 - 14.90 ng/mL 및 22.23 - 27.81 ng/mL 범위였고, 평균 T_max 값은 둘 다의 용량에 걸쳐 3.0 - 4.7시간 범위였다. 혈장 반감기, 클리어런스, 분포 부피, 및 평균 체류 시간은 용량 및 제제에 따라 명백한 통계적으로 유의한 차이를 나타내지 않았다. 그러나, 추가의 검토는 예상외의 이점을 입증할 수 있다. 그럼에도 불구하고, 데이터는 용량을 2.5-배 증가시키는 것이 제제 #1 (표 43)의 경우 화합물 2에 대한 평균 C_max 및 평균 AUC_0-∞의 보다 큰 (상승작용적) 용량 비례 증가를 발생시키고, 제제 # 2 (표 44) 및 캡슐 내의 분말 (표 45)의 경우 용량 비례 증가에 근접하게 한다는 것을 입증한다.

2 및 5 mg/kg의 용량에서 평균 C_max, AUC0-_T최종, 및 AUC_0-∞ 값을 비교한 경우, 제제 #1 (표 43), 제제 #2 (표 44), 및 캡슐 내의 분말 (표 45) 사이에 어떠한 유의한 차이도 존재하지 않았다. C_max 및 AUC_0-∞에 기초하여 제제 #2 (표 44)와 비교하여 제제 #1 (표 43)의 화합물 2의 상대 생체이용률을 계산한 것은 각각 2 mg/kg의 용량에서 0.70 및 0.78의 평균 값을, 5 mg/kg의 용량에서 1.22 및 1.34의 평균 값을 산출하였다.

따라서, 개에서 인간으로의 약동학의 직접 상관관계는 이용가능하지 않을 수 있지만, 경구 액체 제제 대비 경구 캡슐 제제의 투여 시 개에서 개로의 약동학의 직접 비교의 결과는 이루어질 수 있다. 결과는 캡슐 제제의 생체이용률이 2종의 경구 액체 제제와 유사함을 입증한다. 도 33a 및 33b에 제시된 바와 같이, 시험된 종에서 화합물 2의 혈장 농도는 분말 제제 (표 45)와 액체 제제 (표 43) 사이에서 대등하였다. 혈장 반감기, 클리어런스, 분포 부피 및 평균 체류 시간은 용량 및 제제에 걸쳐 실질적인 차이를 나타내지 않았다.

실시양태 및 측면:

다양한 조합으로 포함될 수 있는 본 개시내용의 실시양태 및 측면은 하기를 포함한다:

1. 치료 유효량의 화학식 (2)의 화합물:

또는 그의 결정질 염을 투여하는 것을 포함하는, 미만성 내인성 뇌교 신경교종 (DIPG)의 치료를 필요로 하는 대상체에서 DIPG를 치료하는 방법.

2. 실시양태 1에 있어서, 결정질 염이 산 부가염인 방법.

3. 실시양태 2에 있어서, 산 부가염이 염산 염인 방법.

4. 실시양태 3에 있어서, 염산 염이 1가인 방법.

5. 실시양태 1 - 4 중 어느 하나에 있어서, 결정질 염 형태가 무수인 방법.

6. 실시양태 1 - 5 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 소아 환자인 방법.

7. 실시양태 1 - 5 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 약 1주 내지 약 22세인 방법.

8. 실시양태 1 - 7 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 약 18세 이하인 방법.

9. 실시양태 1 - 8 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 약 10세 이하인 방법.

10. 실시양태 1 - 9 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 약 8세 이하인 방법.

11. 실시양태 1 - 10 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 약 6세 이하인 방법.

12. 실시양태 1 - 11 중 어느 하나에 있어서, DIPG가 새롭게 진단된 것이거나 또는 재발성인 방법.

13. 실시양태 1 - 12 중 어느 하나에 있어서, DIPG가 침윤성 신경교종, 등급 II 내지 IV의 조직학적 진단을 갖는 뇌교 종양을 특징으로 하는 것인 방법.

14. 실시양태 1 - 13 중 어느 하나에 있어서, 방사선 요법을 투여하는 것을 추가로 포함하는 방법.

15. 실시양태 14에 있어서, 방사선의 투여가 화합물 또는 그의 결정질 염의 투여 전에 이루어지는 것인 방법.

16. 실시양태 15에 있어서, 방사선의 투여가 화합물 또는 그의 결정질 염의 투여 후에 이루어지는 것인 방법.

17. 실시양태 16에 있어서, 방사선의 투여가 화합물 또는 그의 결정질 염의 투여 전 및 후 둘 다에 이루어지는 것인 방법.

18. 실시양태 1 - 17 중 어느 하나에 있어서, 1종 이상의 추가의 치료제를 투여하는 것을 추가로 포함하는 방법.

19. 실시양태 1 - 18 중 어느 하나에 있어서, 화합물 또는 그의 결정질 염의 투여가 DIPG와 연관된 1종 이상의 징후 또는 증상을 감소 또는 완화시키는 것인 방법.

20. 실시양태 19에 있어서, 1종 이상의 징후 또는 증상이 언어 또는 언어 패턴의 변형, 대상체의 얼굴 또는 신체의 한 측면을 이동시키는 능력의 상실, 균형 상실, 조정력 상실, 보행 또는 움직임의 어려움, 시력 문제, 청력 문제, 두통, 오심, 구토, 비통상적 졸림증, 에너지 수준의 변형, 행동 변화, 및 학교 생활에서의 변화로 이루어진 군으로부터 선택된 것인 방법.

21. 실시양태 1 - 20 중 어느 하나에 있어서, 화합물 또는 그의 결정질 염의 투여가 무진행 생존을 달성하는 것인 방법.

22. 실시양태 21에 있어서, 무진행 생존이 1개월 이상, 2개월 이상, 3개월 이상, 4개월 이상, 5개월 이상, 6개월 이상, 7개월 이상, 8개월 이상, 9개월 이상, 10개월 이상, 11개월 이상, 1년 이상, 2년 이상, 3년 이상, 또는 5년 이상인 방법.

23. 실시양태 1 - 22 중 어느 하나에 있어서, 종양 성장의 용적축소 또는 뇌척수액 전환 중 1종 이상을 추가로 포함하는 방법.

24. 실시양태 1 - 23 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 ACVR1 유전자에서 1개 이상의 돌연변이를 포함하는 미리 결정된 유전자 프로파일을 갖는 것인 방법.

25. 실시양태 24에 있어서, ACVR1 유전자에서의 1개 이상의 돌연변이가 활성화 돌연변이인 방법.

26. 실시양태 25에 있어서, ACVR1 유전자에서의 1개 이상의 돌연변이가 R206H, G328V, R258G, 또는 그의 조합으로부터 선택된 1개 이상의 아미노산 잔기에서의 아미노산 치환을 포함하는 ACVR1 폴리펩티드를 코딩하는 것인 방법.

27. 실시양태 26에 있어서, ACVR1 폴리펩티드에서의 아미노산 치환이 R206H를 포함하는 것인 방법.

28. 실시양태 1 - 27 중 어느 하나에 있어서, 화합물 또는 그의 결정질 염이 경구로 투여되는 것인 방법.

29. 실시양태 1 - 28 중 어느 하나에 있어서, 화합물 또는 그의 결정질 염이 1주에 약 10 mg 내지 약 320 mg의 범위의 용량으로 투여되는 것인 방법.

30. 실시양태 29에 있어서, 용량이 1주에 약 30 mg 내지 약 240 mg의 범위인 방법.

31. 실시양태 29에 있어서, 용량이 1주에 약 60 mg 내지 약 180 mg의 범위인 방법.

32. 실시양태 29에 있어서, 용량이 1주에 약 30 mg 내지 약 120 mg의 범위인 방법.

33. 실시양태 29에 있어서, 용량이 1주에 약 60 mg 내지 약 120 mg의 범위인 방법.

34. 실시양태 29에 있어서, 용량이 1주에 약 60 mg인 방법.

35. 실시양태 29에 있어서, 용량이 1주에 약 90 mg인 방법.

36. 실시양태 29에 있어서, 용량이 1주에 약 120 mg인 방법.

37. 실시양태 29에 있어서, 용량이 1주에 약 180 mg인 방법.

38. 실시양태 29에 있어서, 용량이 1주에 약 210 mg인 방법.

39. 실시양태 29에 있어서, 용량이 1주에 약 240 mg인 방법.

40. 실시양태 1 - 28 중 어느 하나에 있어서, 화합물 또는 그의 결정질 염이 약 320 mg 이하, 약 240 mg 이하, 약 210 이하, 약 180 이하, 약 120 이하, 약 90 이하, 약 60 이하, 또는 약 30 이하의 매주 용량으로 투여되는 것인 방법.

41. 실시양태 40에 있어서, 용량이 1주에 약 60 mg 이하인 방법.

42. 실시양태 40에 있어서, 용량이 1주에 약 90 mg 이하인 방법.

43. 실시양태 40에 있어서, 용량이 1주에 약 120 mg 이하인 방법.

44. 실시양태 40에 있어서, 용량이 1주에 약 180 mg 이하인 방법.

45. 실시양태 40에 있어서, 용량이 1주에 약 210 mg 이하인 방법.

46. 실시양태 40에 있어서, 용량이 1주에 약 240 mg 이하인 방법.

47. 실시양태 29 - 46 중 어느 하나에 있어서, 용량이 1주 1회 투여되는 것인 방법.

48. 실시양태 29 - 46 중 어느 하나에 있어서, 용량이 1주 과정에 걸쳐 2회 이상의 하위-용량, 3회 이상의 하위-용량, 4회 이상의 하위-용량, 5회 이상의 하위-용량, 6회 이상의 하위-용량, 또는 매일의 하위-용량으로 투여되는 것인 방법.

49. 실시양태 29 - 48 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 소아 환자이고, 용량이 용량 범위의 약 80% 내지 100%인 방법.

50. 실시양태 49에 있어서, 용량이 용량 범위의 약 80%, 85%, 90%, 또는 95%로 조정된 것인 방법.

51. 실시양태 49에 있어서, 용량이 1주에 약 8 mg 내지 약 320 mg의 범위인 방법.

52. 실시양태 49에 있어서, 용량이 1주에 약 24 mg 내지 약 240 mg의 범위인 방법.

53. 실시양태 49에 있어서, 용량이 1주에 약 24 mg 내지 약 120 mg의 범위인 방법.

54. 실시양태 49에 있어서, 용량이 1주에 약 48 mg 내지 약 120 mg의 범위인 방법.

55. 실시양태 49에 있어서, 용량이 1주에 약 72 mg 내지 약 120 mg의 범위인 방법.

56. 실시양태 49에 있어서, 용량이 1주에 약 96 mg 내지 약 120 mg의 범위인 방법.

57. 실시양태 1 - 56 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 적어도 약 0.1 ng/mL의 미리 결정된 헵시딘 수준을 갖는 것인 방법.

58. 실시양태 57에 있어서, 미리 결정된 헵시딘 수준이 약 10 ng/mL 내지 약 200 ng/mL의 범위인 방법.

59. 실시양태 1 - 58 중 어느 하나에 있어서, 화합물 또는 그의 결정질 염이 투여된 후 대상체에서 헵시딘 수준을 결정하는 것을 추가로 포함하는 방법.

60. 실시양태 1 - 59 중 어느 하나에 있어서, 화합물 또는 그의 결정질 염이 투여된 후 대상체에서 트랜스페린 포화 수준을 결정하는 것을 추가로 포함하는 방법.

61. 실시양태 60에 있어서, 트랜스페린 포화 수준이 약 50% 미만인 방법.

62. 실시양태 60에 있어서, 트랜스페린 포화 수준이 약 45% 미만인 방법.

63. 실시양태 60에 있어서, 트랜스페린 포화 수준이 약 40% 미만인 방법.

64. 실시양태 1 - 63 중 어느 하나에 있어서, 화합물 또는 그의 결정질 염이 1회 이상의 치료 사이클에 걸쳐 투여되며, 여기서 각각의 사이클은 4주를 포함하는 것인 방법.

65. 실시양태 64에 있어서, 치료 사이클 사이에 1회 이상의 치료 휴지기를 추가로 포함하는 방법.

66. 실시양태 65에 있어서, 치료 휴지기가 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 6일, 1주, 2주, 3주, 또는 4주로부터 선택된 것인 방법.

67. ACVR1의 억제에 감수성인 질환 또는 장애의 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 화학식 (2)의 화합물:

또는 그의 결정질 염을 투여하는 것을 포함하는, ACVR1의 억제에 감수성인 질환 또는 장애를 치료하는 방법이며, 여기서 화합물은 1주에 약 10 mg 내지 약 320 mg의 범위의 용량으로 투여되는 것인 방법.

68. 실시양태 67에 있어서, 용량이 1주에 약 30 mg 내지 약 240 mg의 범위인 방법.

69. 실시양태 67에 있어서, 용량이 1주에 약 60 mg 내지 약 180 mg의 범위인 방법.

70. 실시양태 67에 있어서, 용량이 1주에 약 30 mg 내지 약 120 mg의 범위인 방법.

71. 실시양태 67에 있어서, 용량이 1주에 약 60 mg 내지 약 120 mg의 범위인 방법.

72. 실시양태 67에 있어서, 용량이 1주에 약 60 mg인 방법.

73. 실시양태 67에 있어서, 용량이 1주에 약 90 mg인 방법.

74. 실시양태 67에 있어서, 용량이 1주에 약 120 mg인 방법.

75. 실시양태 67에 있어서, 용량이 1주에 약 180 mg인 방법.

76. 실시양태 67에 있어서, 용량이 1주에 약 210 mg인 방법.

77. 실시양태 67에 있어서, 용량이 1주에 약 240 mg인 방법.

78. 실시양태 67 - 77 중 어느 하나에 있어서, 화합물 또는 그의 결정질 염이 약 320 mg 이하, 약 240 mg 이하, 약 210 이하, 약 180 이하, 약 120 이하, 약 90 이하, 약 60 이하, 또는 약 30 이하의 매주 용량으로 투여되는 것인 방법.

79. 실시양태 78에 있어서, 용량이 1주에 약 60 mg 이하인 방법.

80. 실시양태 78에 있어서, 용량이 1주에 약 90 mg 이하인 방법.

81. 실시양태 78에 있어서, 용량이 1주에 약 120 mg 이하인 방법.

82. 실시양태 78에 있어서, 용량이 1주에 약 180 mg 이하인 방법.

83. 실시양태 78에 있어서, 용량이 1주에 약 210 mg 이하인 방법.

84. 실시양태 78에 있어서, 용량이 1주에 약 240 mg 이하인 방법.

85. 실시양태 67 - 84 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 소아 환자이고, 용량이 용량 범위의 약 80% 내지 100%인 방법.

86. 실시양태 85에 있어서, 용량이 용량 범위의 약 80%, 85%, 90%, 또는 95%인 방법.

87. 실시양태 85에 있어서, 용량이 1주에 약 8 mg 내지 약 320 mg의 범위인 방법.

88. 실시양태 85에 있어서, 용량이 1주에 약 24 mg 내지 약 240 mg의 범위인 방법.

89. 실시양태 85에 있어서, 용량이 1주에 약 24 mg 내지 약 120 mg의 범위인 방법.

90. 실시양태 85에 있어서, 용량이 1주에 약 48 mg 내지 약 120 mg의 범위인 방법.

91. 실시양태 85에 있어서, 용량이 1주에 약 72 mg 내지 약 120 mg의 범위인 방법.

92. 실시양태 85에 있어서, 용량이 1주에 약 96 mg 내지 약 120 mg의 범위인 방법.

93. 실시양태 67 - 92 중 어느 하나에 있어서, 용량이 1주 1회 투여되는 것인 방법.

94. 실시양태 67 - 92 중 어느 하나에 있어서, 용량이 1주 과정에 걸쳐 2회의 하위-용량으로 투여되는 것인 방법.

95. 실시양태 67 - 92 중 어느 하나에 있어서, 용량이 1주 과정에 걸쳐 3회의 하위-용량으로 투여되는 것인 방법.

96. 실시양태 67 - 92 중 어느 하나에 있어서, 용량이 1주 과정에 걸쳐 4회의 하위-용량으로 투여되는 것인 방법.

97. 실시양태 67 - 92 중 어느 하나에 있어서, 용량이 1주 과정에 걸쳐 5회의 하위-용량으로 투여되는 것인 방법.

98. 실시양태 67 - 92 중 어느 하나에 있어서, 용량이 1주 과정에 걸쳐 6회의 하위-용량으로 투여되는 것인 방법.

99. 실시양태 67 - 92 중 어느 하나에 있어서, 용량이 매일의 하위-용량으로 투여되는 것인 방법.

100. 실시양태 67 - 99 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 ACVR1 유전자에서 1개 이상의 돌연변이를 포함하는 미리 결정된 유전자 프로파일을 갖는 것인 방법.

101. 실시양태 100에 있어서, ACVR1 유전자에서의 1개 이상의 돌연변이가 활성화 돌연변이인 방법.

102. 실시양태 101에 있어서, ACVR1 유전자에서의 1개 이상의 돌연변이가 R206H, G328V, R258G, 또는 그의 조합으로부터 선택된 1개 이상의 아미노산 잔기에서의 아미노산 치환을 포함하는 ACVR1 폴리펩티드를 코딩하는 것인 방법.

103. 실시양태 102에 있어서, ACVR1 폴리펩티드에서의 아미노산 치환이 R206H를 포함하는 것인 방법.

104. 실시양태 67 - 103 중 어느 하나에 있어서, 화합물 또는 그의 결정질 염이 경구로 투여되는 것인 방법.

105. 실시양태 67-104 중 어느 하나에 있어서, 질환 또는 장애가 미만성 내인성 뇌교 신경교종, 등급 II 내지 IV의 침윤성 신경교종의 조직학적 진단을 갖는 뇌교 종양, 고형 종양, 진행성 골화성 섬유이형성증, 및 만성 질환에 의한 빈혈 중 1종 이상으로부터 선택된 것인 방법.

106. 실시양태 105에 있어서, 화합물 또는 그의 결정질 염이 고체 투여 제제로서 투여되는 것인 방법.

107. 실시양태 105에 있어서, 화합물 또는 그의 결정질 염이 액체 투여 제제로서 투여되는 것인 방법.

108. 실시양태 67 - 107 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 용량의 임의의 변형을 결정하기 위해 헵시딘 수준에 대해 모니터링되는 것인 방법.

109. 실시양태 67 - 108 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 1개 이상의 기관에서의 화합물의 축적에 대해 모니터링되는 것인 방법.

110. 실시양태 67 - 109 중 어느 하나에 있어서, 결정질 염이 산 부가염인 방법.

111. 실시양태 110에 있어서, 산 부가염이 염산 염인 방법.

112. 실시양태 111에 있어서, 염산 염이 1가인 방법.

113. 실시양태 110 - 112 중 어느 하나에 있어서, 결정질 염 형태가 무수인 방법.

114. 1종 이상의 제약상 허용되는 부형제 및 화학식 (2)의 화합물:

또는 그의 결정질 염을 포함하는 경구 고체 제약 조성물이며, 여기서 화합물은 유리 염기 중량을 기준으로 약 5 mg 내지 약 125 mg의 농도로 제제화되는 것인 경구 고체 제약 조성물.

115. 실시양태 114에 있어서, 결정질 염이 산 부가염인 제약 조성물.

116. 실시양태 115에 있어서, 산 부가염이 염산 염인 제약 조성물.

117. 실시양태 116에 있어서, 염산 염이 1가인 제약 조성물.

118. 실시양태 115 - 117 중 어느 하나에 있어서, 결정질 염 형태가 무수인 제약 조성물.

119. 실시양태 114 - 118 중 어느 하나에 있어서, 젤라틴 캡슐인 제약 조성물.

120. 실시양태 119에 있어서, 젤라틴 캡슐이 유리 염기 중량을 기준으로 (i) 5 mg, (ii) 25 mg, 또는 (iii) 125 mg 농도인 제약 조성물.

121. 실시양태 119에 있어서, 젤라틴 캡슐이 유리 염기 중량을 기준으로 (i) 30 mg, (ii) 60 mg, (iii) 90 mg, 또는 (iv) 120 mg 농도인 제약 조성물.

122. 실시양태 114 - 121 중 어느 하나에 있어서, 1종 이상의 제약 부형제가 미세결정질 셀룰로스, 락토스 1수화물, 크로스카르멜로스 소듐, 스테아르산마그네슘, 또는 그의 조합으로부터 선택된 것인 제약 조성물.

123. 화학식 (2)의 화합물:

또는 그의 결정질 염; 및

(i) 1종 이상의 완충제;

(ii) 임의로, 1종 이상의 보존제;

(iii) 임의로, 1종 이상의 용매;

(iv) 임의로, 1종 이상의 맛 차폐제; 및

(v) 임의로, 1종 이상의 추가의 pH-조정제

를 포함하는 경구 액체 제약 조성물.

124. 실시양태 123에 있어서, 결정질 염이 산 부가염인 제약 조성물.

125. 실시양태 124에 있어서, 산 부가염이 염산 염인 제약 조성물.

126. 실시양태 125에 있어서, 염산 염이 1가인 제약 조성물.

127. 실시양태 124 - 126 중 어느 하나에 있어서, 결정질 염 형태가 무수인 제약 조성물.

128. 실시양태 123 - 127 중 어느 하나에 있어서, pH가 약 2.0 내지 약 5.0인 제약 조성물.

129. 실시양태 128에 있어서, pH가 약 2.0 내지 약 3.5인 제약 조성물.

130. 실시양태 128에 있어서, pH가 약 2.0인 제약 조성물.

131. 실시양태 123 - 130 중 어느 하나에 있어서, 완충제가 시트르산, 타르타르산, 말산, 또는 아세트산으로부터 선택된 것인 제약 조성물.

132. 실시양태 131에 있어서, 완충제가 말산인 제약 조성물.

133. 실시양태 132에 있어서, 말산이 DL-말산인 제약 조성물.

134. 실시양태 123 - 133 중 어느 하나에 있어서, 1종 이상의 보존제를 포함하는 제약 조성물.

135. 실시양태 134에 있어서, 보존제가 벤조산, 벤조산나트륨, 메틸 파라-히드록시 벤조에이트, 프로필 파라-히드록시 벤조에이트, 또는 프로필렌 글리콜로부터 선택된 것인 제약 조성물.

136. 실시양태 135에 있어서, 보존제가 벤조산인 제약 조성물.

137. 실시양태 136에 있어서, 벤조산이 보존제 및 완충제인 제약 조성물.

138. 실시양태 123 - 137 중 어느 하나에 있어서, 1종 이상의 맛 차폐제를 포함하는 제약 조성물.

139. 실시양태 138에 있어서, 맛 차폐제가 수크랄로스, 글리세린, 시클로덱스트린, HP-β-시클로덱스트린, α-시클로덱스트린, β-시클로덱스트린, 또는 그의 조합으로부터 선택된 것인 제약 조성물.

140. 실시양태 138에 있어서, 맛 차폐제가 HP-β-시클로덱스트린 및 수크랄로스의 조합물인 제약 조성물.

141. 실시양태 123 - 140 중 어느 하나에 있어서, 화학식 (2)의 화합물 또는 그의 결정질 염을 약 10 mg/mL의 농도로 포함하는 제약 조성물.

142. 실시양태 123 - 141 중 어느 하나에 있어서, 말산을 최대 약 6.7 mg/mL의 농도로 포함하는 제약 조성물.

143. 실시양태 142에 있어서, 말산을 약 1.3 mg/mL의 농도로 포함하는 제약 조성물.

144. 실시양태 123 - 143 중 어느 하나에 있어서, HP-β-시클로덱스트린을 최대 약 300 mg/mL의 농도로 포함하는 제약 조성물.

145. 실시양태 144에 있어서, HP-β-시클로덱스트린을 최대 약 150 mg/mL의 농도로 포함하는 제약 조성물.

146. 실시양태 123 - 145 중 어느 하나에 있어서, 수크랄로스를 최대 약 2.0 mg/mL의 농도로 포함하는 제약 조성물.

147. 실시양태 146에 있어서, 수크랄로스를 약 1.0 mg/mL의 농도로 포함하는 제약 조성물.

148. 실시양태 123 - 147 중 어느 하나에 있어서, 벤조산을 최대 약 3.0 mg/mL의 농도로 포함하는 제약 조성물.

149. 실시양태 148에 있어서, 벤조산을 최대 약 2.0 mg/mL의 농도로 포함하는 제약 조성물.

150. 실시양태 123 - 149 중 어느 하나에 있어서, pH가 염산에 의해 약 2.0으로 조정된 것인 제약 조성물.

151. 실시양태 123 - 150 중 어느 하나에 있어서, 용매가 물인 제약 조성물.

152. 화합물 (2)

N⁴-(2,2'-비피리딘-3-일)-N²-(3-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)피리미딘-2,4-디아민의 염의 결정질 형태.

153. 실시양태 152에 있어서, 염이 제약상 허용되는 염인 결정질 형태.

154. 실시양태 153에 있어서, 제약상 허용되는 염이 HCl 염인 결정질 형태.

155. 실시양태 152 - 154 중 어느 하나에 있어서, 형태 A를 포함하는 결정질 형태.

156. 실시양태 152 - 154 중 어느 하나에 있어서, 본질적으로 형태 A로 이루어진 결정질 형태.

157. 실시양태 155 또는 156에 있어서, 형태 A가 불순물을 실질적으로 함유하지 않는 것인 결정질 형태.

158. N⁴-(2,2'-비피리딘-3-일)-N²-(3-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)피리미딘-2,4-디아민 무수 염산 염의 화합물 형태 A.

159. 13.53, 16.14, 17.67, 18.38, 24.96, 및 28.18로부터 선택된 1개 이상의 2θ 값을 포함하는 X선 회절 패턴 (XRPD)을 특징으로 하는 N⁴-(2,2'-비피리딘-3-일)-N²-(3-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)피리미딘-2,4-디아민 무수 염산 염의 화합물 형태 A.

160. 실시양태 159에 있어서, 형태가 열거된 2θ 값 중 2개 이상을 특징으로 하는 것인 형태 A.

161. 실시양태 159에 있어서, 형태가 열거된 2θ 값 중 3개 이상을 특징으로 하는 것인 형태 A.

162. 실시양태 159에 있어서, 형태가 열거된 2θ 값 중 4개 이상을 특징으로 하는 것인 형태 A.

163. 실시양태 159에 있어서, 형태가 열거된 2θ 값 중 5개 이상을 특징으로 하는 것인 형태 A.

164. 실시양태 159에 있어서, 형태가 열거된 2θ 값 중 모든 6개를 특징으로 하는 것인 형태 A.

165. 실시양태 157 - 164 중 어느 하나에 있어서, 추가로 6.71, 19.25, 23.98, 및 29.60으로부터 선택된 1개 이상의 2θ 값을 특징으로 하는 형태 A.

166. 실시양태 165에 있어서, 형태가 열거된 2θ 값 중 2개 이상을 특징으로 하는 것인 형태 A.

167. 실시양태 165에 있어서, 형태가 열거된 2θ 값 중 3개 이상을 특징으로 하는 것인 형태 A.

168. 실시양태 165에 있어서, 형태가 열거된 2θ 값 중 모든 4개를 특징으로 하는 것인 형태 A.

169. 실시양태 158 - 168 중 어느 하나에 있어서, X선 분말 회절계가 반사 모드로, Cu kα, Kα1 (Å): 1.540598, Kα2 (Å): 1.544426, Kα2/Kα1 강도 비 0.50의 X선 파장, 및 45 kV, 40 mA의 X선 튜브 셋팅으로 사용되는 것인 형태 A.

170. 실시양태 158 - 169 중 어느 하나에 있어서, 2θ 값이 +/-0.2 2θ 내인 형태 A.

171. 도 12와 실질적으로 동일한 X선 회절 패턴 (XRPD)을 특징으로 하는, N⁴-(2,2'-비피리딘-3-일)-N²-(3-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)피리미딘-2,4-디아민 무수 염산 염의 화합물 형태 A.

172. 196.2℃, 214.8℃, 및 274.0℃ 중 1개 이상에서의 흡열을 특징으로 하는, N⁴-(2,2'-비피리딘-3-일)-N²-(3-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)피리미딘-2,4-디아민 무수 염산 염의 화합물 형태 A.

173. 실시양태 172에 있어서, 추가로 198.9℃, 218.0℃, 및 275.9℃ 중 1개 이상에서의 피크 흡열을 특징으로 하는 형태 A.

174. 실시양태 172 또는 173에 있어서, 추가로 274.0℃의 개시 온도를 특징으로 하는 형태 A.

175. 실시양태 172 - 174 중 어느 하나에 있어서, 추가로 150℃까지 1.7%의 중량 손실을 특징으로 하는 형태 A.

176. 도 15와 실질적으로 동일한 TGA-DSC 온도기록도를 특징으로 하는, N⁴-(2,2'-비피리딘-3-일)-N²-(3-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)피리미딘-2,4-디아민 무수 염산 염의 화합물 형태 A.

177. 실시양태 152 - 176 중 어느 하나의 결정질 형태를 포함하는 제약 조성물.

178. 실시양태 176에 있어서, 고체 투여 제제로서의 제약 조성물.

179. 실시양태 114 - 122 중 어느 하나에 있어서, 화합물이 실시양태 152 - 176 중 어느 하나의 결정질 형태인 경구 고체 제약 조성물.

180. 실시양태 176에 있어서, 액체 투여 제제로서의 제약 조성물.

181. 실시양태 123 - 151 중 어느 하나에 있어서, 화합물이 실시양태 152 - 176 중 어느 하나의 결정질 형태인 경구 액체 제약 조성물.

182. 실시양태 1 - 113 중 어느 하나에 있어서, 화합물이 실시양태 152 - 176 중 어느 한 실시양태의 결정질 형태인 방법.

다양한 조합으로 포함될 수 있는 본 개시내용의 추가의 실시양태 및 측면은 하기를 포함한다:

1'. ACVR1 유전자에서 1개 이상의 돌연변이를 포함하는 미리 결정된 유전자 프로파일을 갖는 질환의 치료를 필요로 하는 대상체에게 하기 화학식 (I)을 갖는 ACVR1 억제제:

또는 그의 입체이성질체, 제약상 허용되는 염, 호변이성질체 또는 전구약물을 포함하는 치료 요법을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 질환을 치료하는 방법이며,

여기서:

R¹은 H 또는 C₁-C₆ 알콕시이고;

R²는 C₁-C₆ 알콕시 또는 헤테로시클릴이고;

R³은 할로 또는 C₁-C₆ 알콕시이고;

R⁴는 H 또는 C₁-C₆ 알킬인

방법.

2'. 실시양태 1'에 있어서, 질환이 암인 방법.

3'. 실시양태 2'에 있어서, 암이 고형 암인 방법.

4'. 실시양태 2' 또는 3'에 있어서, 암이 뇌암, 자궁암, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 유방암, 결장암, 위장암, 조혈 또는 림프성 암, 피부암, 또는 골암인 방법.

5'. 실시양태 2'-4' 중 어느 하나에 있어서, 암이 뇌암인 방법.

6'. 실시양태 5'에 있어서, 뇌암이 뇌간 신경교종인 방법.

7'. 실시양태 5' 또는 6'에 있어서, 뇌암이 미만성 내인성 뇌교 신경교종 (DIPG)인 방법.

8'. 실시양태 2'-4' 중 어느 하나에 있어서, 암이 자궁암, 난소암, 또는 자궁경부암인 방법.

9'. 실시양태 8'에 있어서, 자궁암이 자궁내막암인 방법.

10'. 실시양태 2'-4' 중 어느 하나에 있어서, 암이 폐암인 방법.

11'. 실시양태 10'에 있어서, 폐암이 비소세포 폐암인 방법.

12'. 실시양태 2'-4' 중 어느 하나에 있어서, 암이 유방암인 방법.

13'. 실시양태 2'-4' 중 어느 하나에 있어서, 암이 결장암인 방법.

14'. 실시양태 2'-4' 중 어느 하나에 있어서, 암이 흑색종인 방법.

15'. 실시양태 1'에 있어서, 질환이 진행성 골화성 섬유이형성증인 방법.

16'. 미만성 내인성 뇌교 신경교종 (DIPG)의 치료를 필요로 하는 대상체에게 하기 구조 (I)을 갖는 ACVR1 억제제:

또는 그의 입체이성질체, 제약상 허용되는 염, 호변이성질체 또는 전구약물을 포함하는 치료 요법을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 DIPG를 치료하는 방법이며,

여기서:

R¹은 H 또는 C₁-C₆ 알콕시이고;

R²는 C₁-C₆ 알콕시 또는 헤테로시클릴이고;

R³은 할로 또는 C₁-C₆ 알콕시이고;

R⁴는 H 또는 C₁-C₆ 알킬인

방법.

17'. 실시양태 1'-16' 중 어느 하나에 있어서, 치료 요법이 치료제를 투여하는 것을 추가로 포함하는 것인 방법.

18'. 실시양태 1'-17' 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 소아 대상체인 방법.

19'. 진행성 골화성 섬유이형성증 (FOP)의 치료를 필요로 하는 대상체에게 하기 화학식 (I)을 갖는 ACVR1 억제제:

또는 그의 입체이성질체, 제약상 허용되는 염, 호변이성질체 또는 전구약물 및 치료제를 포함하는 치료 요법을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 FOP를 치료하는 방법이며,

여기서:

R¹은 H 또는 C₁-C₆ 알콕시이고;

R²는 C₁-C₆ 알콕시 또는 헤테로시클릴이고;

R³은 할로 또는 C₁-C₆ 알콕시이고;

R⁴는 H 또는 C₁-C₆ 알킬인

방법.

20'. 실시양태 16'-19' 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 ACVR1 유전자에서 1개 이상의 돌연변이를 포함하는 미리 결정된 유전자 프로파일을 갖는 것인 방법.

21'. 실시양태 1'-15' 및 20' 중 어느 하나에 있어서, ACVR1 유전자에서의 1개 이상의 돌연변이가 미스센스 돌연변이, 프레임시프트 돌연변이, 스플라이스 부위 돌연변이, 또는 그의 조합을 포함하는 것인 방법.

22'. 실시양태 1'-15', 20', 및 21' 중 어느 하나에 있어서, 1개 이상의 돌연변이가 (P197F198)L, C509S, D185G, D185N, D433N, E38FS, F265S, G225D, G264S, G328E, G328R, G328V, G328W, G356D, G50C, H320Y, I323V, K31E, K345Q, L196P, L251S, M34I, N100D, N481I, P115S, P455A, Q207E, Q278P, R201I, R206C, R206H, R258G, R258S, R307Q, R325A, R375C, R375P, R401M, R490H, S130F, S226N, S41F, S440G, S469C, S56L, T298S, V234M, V91M, W98R, 또는 그의 조합을 포함하는 것인 방법.

23'. 실시양태 1'-15' 및 20' 중 어느 하나에 있어서, ACVR1 유전자에서의 1개 이상의 돌연변이가 미스센스 돌연변이를 포함하는 것인 방법.

24'. 실시양태 21' 또는 23'에 있어서, 미스센스 돌연변이가 C509S, D185N, D433N, F265S, G225D, H320Y, I323V, K31E, K345Q, M34I, N100D, N481I, P115S, P455A, Q278P, R206C, R401M, S130F, S226N, S41F, S41F, S440G, S469C, S56L, T298S, V234M, V91M, 또는 W98R인 방법.

25'. 실시양태 1'-16' 및 20' 중 어느 하나에 있어서, ACVR1 유전자에서의 1개 이상의 돌연변이가 프레임시프트 돌연변이를 포함하는 것인 방법.

26'. 실시양태 21' 또는 25'에 있어서, 프레임시프트 돌연변이가 E38fs인 방법.

27'. 실시양태 1'-15' 및 20' 중 어느 하나에 있어서, ACVR1 유전자에서의 1개 이상의 돌연변이가 스플라이스 부위 돌연변이를 포함하는 것인 방법.

28'. 실시양태 21' 또는 27'에 있어서, 스플라이스 부위 돌연변이가 G264S인 방법.

29'. 실시양태 1'-15' 및 20'-22' 중 어느 하나에 있어서, ACVR1 유전자에서의 1개 이상의 돌연변이가 R206H, G328V, R258G, 또는 그의 조합을 포함하는 것인 방법.

30'. 실시양태 1'-15', 20'-22', 및 29' 중 어느 하나에 있어서, ACVR1 유전자에서의 1개 이상의 돌연변이가 R206H를 포함하는 것인 방법.

31'. 실시양태 1'-30' 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 적어도 약 0.1 ng/mL의 미리 결정된 헵시딘 수준을 갖는 것인 방법.

32'. 실시양태 31'에 있어서, 미리 결정된 헵시딘 수준이 약 10 ng/mL 내지 약 35 ng/mL의 범위인 방법.

33'. 실시양태 1'-32' 중 어느 하나에 있어서, ACVR1 억제제가 투여된 후 헵시딘 수준을 결정하는 것을 추가로 포함하는 방법.

34'. 실시양태 1'-33' 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 약 50% 미만의 미리 결정된 트랜스페린 포화 수준을 갖는 것인 방법.

35'. 실시양태 1'-33' 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 약 45% 미만의 미리 결정된 트랜스페린 포화 수준을 갖는 것인 방법.

36'. 실시양태 1'-33' 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 약 40% 미만의 미리 결정된 트랜스페린 포화 수준을 갖는 것인 방법.

37'. 실시양태 1'-36' 중 어느 하나에 있어서, ACVR1 억제제가 1일에 약 10 mg 내지 약 320 mg의 범위의 용량으로 투여되는 것인 방법.

38'. 실시양태 37'에 있어서, 용량이 1일에 약 30 mg 내지 약 240 mg의 범위인 방법.

39'. 실시양태 37' 또는 38'에 있어서, 용량이 1일에 약 60 mg 내지 약 180 mg의 범위인 방법.

40'. 실시양태 37'-39' 중 어느 하나에 있어서, 용량이 1일에 약 25 mg; 1일에 약 30 mg; 1일에 약 60 mg; 1일에 약 120 mg; 1일에 약 125 mg; 1일에 약 180 mg; 1일에 약 240 mg; 1일에 약 250 mg; 1일에 약 320 mg; 또는 1일에 약 325 mg인 방법.

41'. 실시양태 1'-40' 중 어느 하나에 있어서, R¹이 H인 방법.

42'. 실시양태 1'-40' 중 어느 하나에 있어서, R¹이 C₁-C₆ 알콕시인 방법.

43'. 실시양태 42'에 있어서, C₁-C₆ 알콕시가 메톡시인 방법.

44'. 실시양태 1'-43' 중 어느 하나에 있어서, R²가 C₁-C₆ 알콕시인 방법.

45'. 실시양태 44'에 있어서, C₁-C₆ 알콕시가 메톡시인 방법.

46'. 실시양태 1'-45' 중 어느 하나에 있어서, R²가 헤테로시클릴인 방법.

47'. 실시양태 46'에 있어서, 헤테로시클릴이 임의로 치환된 피페라지닐인 방법.

48'. 실시양태 47'에 있어서, 임의로 치환된 피페라지닐이 C₁-C₆ 알킬 또는 C₁-C₆ 히드록실알킬로 치환된 것인 방법.

49'. 실시양태 1'-48' 중 어느 하나에 있어서, R³이 할로인 방법.

50'. 실시양태 49'에 있어서, 할로가 클로로인 방법.

51'. 실시양태 1'-48' 중 어느 하나에 있어서, R³이 C₁-C₆ 알콕시인 방법.

52'. 실시양태 51'에 있어서, C₁-C₆ 알콕시가 메톡시인 방법.

53'. 실시양태 1'-52' 중 어느 하나에 있어서, R⁴가 H인 방법.

54'. 실시양태 1'-52' 중 어느 하나에 있어서, R⁴가 C₁-C₆ 알킬인 방법.

55'. 실시양태 54'에 있어서, C₁-C₆ 알킬이 메틸인 방법.

56'. 실시양태 1'-40' 중 어느 하나에 있어서, 하기 구조를 갖는 방법:

.

57'. 실시양태 1'-40' 중 어느 하나에 있어서, 하기 구조를 갖는 방법:

.

58'. 실시양태 1'-40' 중 어느 하나에 있어서, 하기 구조를 갖는 방법:

.

59'. 실시양태 1'-40' 중 어느 하나에 있어서, 하기 구조를 갖는 화합물:

.

60'. 실시양태 1'-40' 중 어느 하나에 있어서, 하기 구조를 갖는 방법:

.

61'. 실시양태 1'-40' 중 어느 하나에 있어서, 하기 구조를 갖는 방법:

.

62'. 실시양태 17'-61' 중 어느 하나에 있어서, 치료제가

레티노산 수용체 감마 효능제; mTOR 억제제; 액티빈 A 항체; 키나제 억제제; ACVR1 항체; TAK1 억제제; 포스포디에스테라제 억제제; HDAC 억제제; 화학요법제; 면역요법제; 세포 요법; 펩티드 또는 종양 용해물 백신; 이리노테칸; GM-CSF를 함유하는 TTRNA-DC 백신, TTRNA-xALT; 인테그린 억제제; IL-12 요법; 안티네오플라스톤 요법; 이미퀴모드; 종양용해 아데노바이러스; WEE1 억제제; WT1 단백질 유래 펩티드 백신; peg화 인터페론 알파 2b; 키나제 항체; 스무슨드 억제제; 튜불린 억제제; 텔로머라제 억제제; CD40 효능제; GM-CSF 효능제; IDO 억제제; 및

방사성 아이오딘 표지된 모노클로날 항체 8H9.64

로부터 선택된 것인 방법.

63'. 실시양태 17'-62' 중 어느 하나에 있어서, 치료제가

레티노산 수용체 감마 효능제; mTOR 억제제; 액티빈 A 항체; 키나제 억제제; ACVR1 항체; TAK1 억제제; 및 포스포디에스테라제 억제제

로부터 선택된 것인 방법.

64'. 실시양태 17'-62' 중 어느 하나에 있어서, 치료제가

HDAC 억제제; 화학요법제; 면역요법제; 세포 요법; 펩티드 또는 종양 용해물 백신; 이리노테칸; GM-CSF를 함유하는 TTRNA-DC 백신, TTRNA-xALT; 인테그린 억제제; IL-12 요법; 안티네오플라스톤 요법; 이미퀴모드; 종양용해 아데노바이러스; WEE1 억제제; WT1 단백질 유래 펩티드 백신;

peg화 인터페론 알파 2b; 키나제 항체; 키나제 억제제; 스무슨드 억제제; 튜불린 억제제; 텔로머라제 억제제; CD40 효능제; GM-CSF 효능제;

IDO 억제제; 및 방사성 아이오딘 표지된 모노클로날 항체 8H9

로부터 선택된 것인 방법.

65'. 실시양태 17'-64' 중 어느 하나에 있어서, 키나제 억제제가 시클린 의존성 키나제 (CDK)를 억제하는 것인 방법.

66'. 실시양태 65'에 있어서, CDK가 CDK9 또는 CDK7인 방법.

67'. 실시양태 65'에 있어서, CDK가 CDK9인 방법.

68'. 실시양태 66' 또는 67'에 있어서, CDK9 억제제가 siRNA, 알보시딥, 또는 그의 전구약물, 디나시클립, 또는 그의 조합인 방법.

69'. 실시양태 17'-64' 중 어느 하나에 있어서, 키나제 억제제가 포스포이노시티드 3-키나제 (PI3K)를 억제하는 것인 방법.

70'. 실시양태 17'-62' 및 64' 중 어느 하나에 있어서, 면역요법제가 면역 체크포인트 억제제인 방법.

71'. 실시양태 70'에 있어서, 면역 체크포인트 억제제가 PD-1 억제제인 방법.

72'. 실시양태 71'에 있어서, PD-1 억제제가 펨브롤리주맙, 니볼루맙, 또는 그의 조합인 방법.

73'. 실시양태 70'에 있어서, 면역 체크포인트 억제제가 PD-L1 억제제인 방법.

74'. 실시양태 73'에 있어서, PD-L1 억제제가 아테졸리주맙, 아벨루맙, 두르발루맙, 또는 그의 조합인 방법.

75'. 실시양태 17'-64' 중 어느 하나에 있어서, 키나제 항체가 약물 접합체를 포함하는 것인 방법.

76'. 실시양태 17'-65' 중 어느 하나에 있어서,

레티노산 수용체 감마 효능제가 팔로바로텐이거나; mTOR 억제제가 라파마이신 또는 에베롤리무스이거나; 액티빈 A 항체가 REGN2447이거나; 키나제 억제제가 사라카티닙, 모멜로티닙, 도르소모르핀, 이마티닙, 크리조티닙, 다사티닙, 베바시주맙, 에를로티닙, 반데타닙, 리보시클립, 크레놀라닙, 아베마시클립, ONC201, 실렌기티드, 알보시딥, 또는 그의 전구약물이거나; 포스포디에스테라제 억제제가 디피리다몰이거나; HDAC 억제제가 SAHA, 보리노스타트, 또는 파노비노스타트이거나; 화학요법제가 멜팔란, 겜시타빈, 테모졸로미드, 시클로포스파미드, 플루다라빈, 독소루비신, 이리노테칸, 레날리도미드, 발프로산, 클로로퀸, 카르보플라틴, 에토포시드, 이포스파미드, 포말리도미드, 또는 로무스틴이거나;

면역요법제가 MDV9300이거나; 세포 요법이 자가 수지상 세포를 포함하거나; 펩티드 또는 종양 용해물 백신이 K27M 펩티드 또는 린도페피무트를 포함하거나; 이리노테칸이 대류 증진 전달에 의해 투여되거나; 인테그린 억제제가 실렌기티드이거나; 안티네오플라스톤 요법이 아텐게날 또는 아스투게날이거나; 종양용해 아데노바이러스가 DNX-2401이거나; WEE1 억제제가 AZD1775이거나; WT1 단백질 유래 펩티드 백신이 DSP-7888이거나; 키나제 항체가 니모투주맙, 에르비툭스, 또는 ABT-414이거나; 스무슨드 억제제가 비스모데깁이거나; 튜불린 억제제가 메벤다졸이거나;

텔로머라제 억제제가 이메텔스타트이거나; CD40 효능제가 APX005M이거나; GM-CSF 효능제가 레오바이러스를 함유하는 사르그라모스팀이거나; IDO 억제제가 인독시모드인 방법.

77'. 실시양태 1'-76' 중 어느 하나에 있어서, 치료 요법이 외과적 절제, 방사선 요법, 또는 그의 조합을 추가로 포함하는 것인 방법.

78'. 실시양태 1'-77' 중 어느 하나에 있어서, 제약상 허용되는 염이 산 부가염인 방법.

79'. 실시양태 78'에 있어서, 산 부가염이 염산 염인 방법.

상기 기재된 다양한 실시양태는 조합되어 추가의 실시양태를 제공할 수 있다. 본 명세서에 언급되고/거나 출원 데이터 시트에 열거된 모든 미국 특허, 미국 특허 출원 공개, 미국 특허 출원, 비-미국 특허, 비-미국 특허 출원, 및 비-특허 공개는 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 실시양태의 측면은 필요에 따라 추가의 실시양태를 제공하기 위해 다양한 특허, 출원, 및 공개의 개념을 이용하도록 변형될 수 있다.

본원에 기재된 실험을 위한 시험 화합물을 언급된 바와 같이 유리 또는 염 형태로 사용하였다.

관찰된 구체적 반응은 선택된 특정한 활성 화합물 또는 담체가 존재하는지 여부, 뿐만 아니라 제제의 유형 및 사용되는 투여 방식에 따라 그에 의존하여 달라질 수 있고, 이러한 예상된 변경 또는 결과에서의 차이는 본 발명의 실시에 따라 고려된다.

상기 상세한 설명에 비추어 실시양태에 이들 및 다른 변화가 이루어질 수 있다. 일반적으로, 하기 청구범위에서, 사용된 용어는 청구범위를 명세서 및 청구범위에 개시된 구체적 실시양태로 제한하는 것으로 해석되어서는 안되고, 이러한 청구범위가 부여하는 전체 범주의 등가물과 함께 모든 가능한 실시양태를 포함하는 것으로 해석되어야 한다. 따라서, 청구범위는 개시내용에 의해 제한되지 않는다.

Claims

치료 유효량의 화학식 (2)의 화합물:

또는 그의 결정질 염을 투여하는 것을 포함하는, 미만성 내인성 뇌교 신경교종 (DIPG)의 치료를 필요로 하는 대상체에서 DIPG를 치료하는 방법.
제1항에 있어서, 결정질 염이 산 부가염인 방법.
제2항에 있어서, 산 부가염이 염산 염인 방법.
제3항에 있어서, 염산 염이 1가인 방법.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 결정질 염 형태가 무수인 방법.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 소아 환자인 방법.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 약 1주 내지 약 22세인 방법.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 약 18세 이하인 방법.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 약 10세 이하인 방법.
제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 약 8세 이하인 방법.
제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 약 6세 이하인 방법.
제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, DIPG가 새롭게 진단된 것이거나 또는 재발성인 방법.
제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, DIPG가 침윤성 신경교종, 등급 II 내지 IV의 조직학적 진단을 갖는 뇌교 종양을 특징으로 하는 것인 방법.
제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 방사선 요법을 투여하는 것을 추가로 포함하는 방법.
제14항에 있어서, 방사선의 투여가 화합물 또는 그의 결정질 염의 투여 전에 이루어지는 것인 방법.
제15항에 있어서, 방사선의 투여가 화합물 또는 그의 결정질 염의 투여 후에 이루어지는 것인 방법.
제16항에 있어서, 방사선의 투여가 화합물 또는 그의 결정질 염의 투여 전 및 후 둘 다에 이루어지는 것인 방법.
제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 1종 이상의 추가의 치료제를 투여하는 것을 추가로 포함하는 방법.
제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물 또는 그의 결정질 염의 투여가 DIPG와 연관된 1종 이상의 징후 또는 증상을 감소 또는 완화시키는 것인 방법.
제19항에 있어서, 1종 이상의 징후 또는 증상이 언어 또는 언어 패턴의 변형, 대상체의 얼굴 또는 신체의 한 측면을 이동시키는 능력의 상실, 균형 상실, 조정력 상실, 보행 또는 움직임의 어려움, 시력 문제, 청력 문제, 두통, 오심, 구토, 비통상적 졸림증, 에너지 수준의 변형, 행동 변화, 및 학교 생활에서의 변화로 이루어진 군으로부터 선택된 것인 방법.
제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물 또는 그의 결정질 염의 투여가 무진행 생존을 달성하는 것인 방법.
제21항에 있어서, 무진행 생존이 1개월 이상, 2개월 이상, 3개월 이상, 4개월 이상, 5개월 이상, 6개월 이상, 7개월 이상, 8개월 이상, 9개월 이상, 10개월 이상, 11개월 이상, 1년 이상, 2년 이상, 3년 이상, 또는 5년 이상인 방법.
제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 종양 성장의 용적축소 또는 뇌척수액 전환 중 1종 이상을 추가로 포함하는 방법.
제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 ACVR1 유전자에서 1개 이상의 돌연변이를 포함하는 미리 결정된 유전자 프로파일을 갖는 것인 방법.
제24항에 있어서, ACVR1 유전자에서의 1개 이상의 돌연변이가 활성화 돌연변이인 방법.
제25항에 있어서, ACVR1 유전자에서의 1개 이상의 돌연변이가 R206H, G328V, R258G, 또는 그의 조합으로부터 선택된 1개 이상의 아미노산 잔기에서의 아미노산 치환을 포함하는 ACVR1 폴리펩티드를 코딩하는 것인 방법.
제26항에 있어서, ACVR1 폴리펩티드에서의 아미노산 치환이 R206H를 포함하는 것인 방법.
제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물 또는 그의 결정질 염이 경구로 투여되는 것인 방법.
제1항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물 또는 그의 결정질 염이 1주에 약 10 mg 내지 약 320 mg의 범위의 용량으로 투여되는 것인 방법.
제29항에 있어서, 용량이 1주에 약 30 mg 내지 약 240 mg의 범위인 방법.
제29항에 있어서, 용량이 1주에 약 60 mg 내지 약 180 mg의 범위인 방법.
제29항에 있어서, 용량이 1주에 약 30 mg 내지 약 120 mg의 범위인 방법.
제29항에 있어서, 용량이 1주에 약 60 mg 내지 약 120 mg의 범위인 방법.
제29항에 있어서, 용량이 1주에 약 60 mg인 방법.
제29항에 있어서, 용량이 1주에 약 90 mg인 방법.
제29항에 있어서, 용량이 1주에 약 120 mg인 방법.
제29항에 있어서, 용량이 1주에 약 180 mg인 방법.
제29항에 있어서, 용량이 1주에 약 210 mg인 방법.
제29항에 있어서, 용량이 1주에 약 240 mg인 방법.
제1항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물 또는 그의 결정질 염이 약 320 mg 이하, 약 240 mg 이하, 약 210 이하, 약 180 이하, 약 120 이하, 약 90 이하, 약 60 이하, 또는 약 30 이하의 매주 용량으로 투여되는 것인 방법.
제40항에 있어서, 용량이 1주에 약 60 mg 이하인 방법.
제40항에 있어서, 용량이 1주에 약 90 mg 이하인 방법.
제40항에 있어서, 용량이 1주에 약 120 mg 이하인 방법.
제40항에 있어서, 용량이 1주에 약 180 mg 이하인 방법.
제40항에 있어서, 용량이 1주에 약 210 mg 이하인 방법.
제40항에 있어서, 용량이 1주에 약 240 mg 이하인 방법.
제29항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, 용량이 1주 1회 투여되는 것인 방법.
제29항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, 용량이 1주 과정에 걸쳐 2회 이상의 하위-용량, 3회 이상의 하위-용량, 4회 이상의 하위-용량, 5회 이상의 하위-용량, 6회 이상의 하위-용량, 또는 매일의 하위-용량으로 투여되는 것인 방법.
제29항 내지 제48항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 소아 환자이고, 용량이 용량 범위의 약 80% 내지 100%인 방법.
제49항에 있어서, 용량이 용량 범위의 약 80%, 85%, 90%, 또는 95%로 조정된 것인 방법.
제49항에 있어서, 용량이 1주에 약 8 mg 내지 약 320 mg의 범위인 방법.
제49항에 있어서, 용량이 1주에 약 24 mg 내지 약 240 mg의 범위인 방법.
제49항에 있어서, 용량이 1주에 약 24 mg 내지 약 120 mg의 범위인 방법.
제49항에 있어서, 용량이 1주에 약 48 mg 내지 약 120 mg의 범위인 방법.
제49항에 있어서, 용량이 1주에 약 72 mg 내지 약 120 mg의 범위인 방법.
제49항에 있어서, 용량이 1주에 약 96 mg 내지 약 120 mg의 범위인 방법.
제1항 내지 제56항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 적어도 약 0.1 ng/mL의 미리 결정된 헵시딘 수준을 갖는 것인 방법.
제57항에 있어서, 미리 결정된 헵시딘 수준이 약 10 ng/mL 내지 약 200 ng/mL의 범위인 방법.
제1항 내지 제58항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물 또는 그의 결정질 염이 투여된 후 대상체에서 헵시딘 수준을 결정하는 것을 추가로 포함하는 방법.
제1항 내지 제59항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물 또는 그의 결정질 염이 투여된 후 대상체에서 트랜스페린 포화 수준을 결정하는 것을 추가로 포함하는 방법.
제60항에 있어서, 트랜스페린 포화 수준이 약 50% 미만인 방법.
제60항에 있어서, 트랜스페린 포화 수준이 약 45% 미만인 방법.
제60항에 있어서, 트랜스페린 포화 수준이 약 40% 미만인 방법.
제1항 내지 제63항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물 또는 그의 결정질 염이 1회 이상의 치료 사이클에 걸쳐 투여되며, 여기서 각각의 사이클은 4주를 포함하는 것인 방법.
제64항에 있어서, 치료 사이클 사이에 1회 이상의 치료 휴지기를 추가로 포함하는 방법.
제65항에 있어서, 치료 휴지기가 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 6일, 1주, 2주, 3주, 또는 4주로부터 선택된 것인 방법.
ACVR1의 억제에 감수성인 질환 또는 장애의 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 화학식 (2)의 화합물:

또는 그의 결정질 염을 투여하는 것을 포함하는, ACVR1의 억제에 감수성인 질환 또는 장애를 치료하는 방법이며, 여기서 화합물은 1주에 약 10 mg 내지 약 320 mg의 범위의 용량으로 투여되는 것인 방법.
제67항에 있어서, 용량이 1주에 약 30 mg 내지 약 240 mg의 범위인 방법.
제67항에 있어서, 용량이 1주에 약 60 mg 내지 약 180 mg의 범위인 방법.
제67항에 있어서, 용량이 1주에 약 30 mg 내지 약 120 mg의 범위인 방법.
제67항에 있어서, 용량이 1주에 약 60 mg 내지 약 120 mg의 범위인 방법.
제67항에 있어서, 용량이 1주에 약 60 mg인 방법.
제67항에 있어서, 용량이 1주에 약 90 mg인 방법.
제67항에 있어서, 용량이 1주에 약 120 mg인 방법.
제67항에 있어서, 용량이 1주에 약 180 mg인 방법.
제67항에 있어서, 용량이 1주에 약 210 mg인 방법.
제67항에 있어서, 용량이 1주에 약 240 mg인 방법.
제67항 내지 제77항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물 또는 그의 결정질 염이 약 320 mg 이하, 약 240 mg 이하, 약 210 이하, 약 180 이하, 약 120 이하, 약 90 이하, 약 60 이하, 또는 약 30 이하의 매주 용량으로 투여되는 것인 방법.
제78항에 있어서, 용량이 1주에 약 60 mg 이하인 방법.
제78항에 있어서, 용량이 1주에 약 90 mg 이하인 방법.
제78항에 있어서, 용량이 1주에 약 120 mg 이하인 방법.
제78항에 있어서, 용량이 1주에 약 180 mg 이하인 방법.
제78항에 있어서, 용량이 1주에 약 210 mg 이하인 방법.
제78항에 있어서, 용량이 1주에 약 240 mg 이하인 방법.
제67항 내지 제84항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 소아 환자이고, 용량이 용량 범위의 약 80% 내지 100%인 방법.
제85항에 있어서, 용량이 용량 범위의 약 80%, 85%, 90%, 또는 95%인 방법.
제85항에 있어서, 용량이 1주에 약 8 mg 내지 약 320 mg의 범위인 방법.
제85항에 있어서, 용량이 1주에 약 24 mg 내지 약 240 mg의 범위인 방법.
제85항에 있어서, 용량이 1주에 약 24 mg 내지 약 120 mg의 범위인 방법.
제85항에 있어서, 용량이 1주에 약 48 mg 내지 약 120 mg의 범위인 방법.
제85항에 있어서, 용량이 1주에 약 72 mg 내지 약 120 mg의 범위인 방법.
제85항에 있어서, 용량이 1주에 약 96 mg 내지 약 120 mg의 범위인 방법.
제67항 내지 제92항 중 어느 한 항에 있어서, 용량이 1주 1회 투여되는 것인 방법.
제67항 내지 제92항 중 어느 한 항에 있어서, 용량이 1주 과정에 걸쳐 2회의 하위-용량으로 투여되는 것인 방법.
제67항 내지 제92항 중 어느 한 항에 있어서, 용량이 1주 과정에 걸쳐 3회의 하위-용량으로 투여되는 것인 방법.
제67항 내지 제92항 중 어느 한 항에 있어서, 용량이 1주 과정에 걸쳐 4회의 하위-용량으로 투여되는 것인 방법.
제67항 내지 제92항 중 어느 한 항에 있어서, 용량이 1주 과정에 걸쳐 5회의 하위-용량으로 투여되는 것인 방법.
제67항 내지 제92항 중 어느 한 항에 있어서, 용량이 1주 과정에 걸쳐 6회의 하위-용량으로 투여되는 것인 방법.
제67항 내지 제92항 중 어느 한 항에 있어서, 용량이 매일의 하위-용량으로 투여되는 것인 방법.
제67항 내지 제99항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 ACVR1 유전자에서 1개 이상의 돌연변이를 포함하는 미리 결정된 유전자 프로파일을 갖는 것인 방법.
제100항에 있어서, ACVR1 유전자에서의 1개 이상의 돌연변이가 활성화 돌연변이인 방법.
제101항에 있어서, ACVR1 유전자에서의 1개 이상의 돌연변이가 R206H, G328V, R258G, 또는 그의 조합으로부터 선택된 1개 이상의 아미노산 잔기에서의 아미노산 치환을 포함하는 ACVR1 폴리펩티드를 코딩하는 것인 방법.
제102항에 있어서, ACVR1 폴리펩티드에서의 아미노산 치환이 R206H를 포함하는 것인 방법.
제67항 내지 제103항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물 또는 그의 결정질 염이 경구로 투여되는 것인 방법.
제67항 내지 제104항 중 어느 한 항에 있어서, 질환 또는 장애가 미만성 내인성 뇌교 신경교종, 등급 II 내지 IV의 침윤성 신경교종의 조직학적 진단을 갖는 뇌교 종양, 고형 종양, 진행성 골화성 섬유이형성증, 및 만성 질환에 의한 빈혈 중 1종 이상으로부터 선택된 것인 방법.
제105항에 있어서, 화합물 또는 그의 결정질 염이 고체 투여 제제로서 투여되는 것인 방법.
제105항에 있어서, 화합물 또는 그의 결정질 염이 액체 투여 제제로서 투여되는 것인 방법.
제67항 내지 제107항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 용량의 임의의 변형을 결정하기 위해 헵시딘 수준에 대해 모니터링되는 것인 방법.
제67항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 1개 이상의 기관에서의 화합물의 축적에 대해 모니터링되는 것인 방법.
제67항 내지 제109항 중 어느 한 항에 있어서, 결정질 염이 산 부가염인 방법.
제110항에 있어서, 산 부가염이 염산 염인 방법.
제111항에 있어서, 염산 염이 1가인 방법.
제110항 내지 제112항 중 어느 한 항에 있어서, 결정질 염 형태가 무수인 방법.
1종 이상의 제약상 허용되는 부형제 및 화학식 (2)의 화합물:

또는 그의 결정질 염을 포함하는 경구 고체 제약 조성물이며, 여기서 화합물은 유리 염기 중량을 기준으로 약 5 mg 내지 약 125 mg의 농도로 제제화되는 것인 경구 고체 제약 조성물.
제114항에 있어서, 결정질 염이 산 부가염인 제약 조성물.
제115항에 있어서, 산 부가염이 염산 염인 제약 조성물.
제116항에 있어서, 염산 염이 1가인 제약 조성물.
제115항 내지 제117항 중 어느 한 항에 있어서, 결정질 염 형태가 무수인 제약 조성물.
제114항 내지 제118항 중 어느 한 항에 있어서, 젤라틴 캡슐인 제약 조성물.
제119항에 있어서, 젤라틴 캡슐이 유리 염기 중량을 기준으로 (i) 5 mg, (ii) 25 mg, 또는 (iii) 125 mg 농도인 제약 조성물.
제119항에 있어서, 젤라틴 캡슐이 유리 염기 중량을 기준으로 (i) 30 mg, (ii) 60 mg, (iii) 90 mg, 또는 (iv) 120 mg 농도인 제약 조성물.
제114항 내지 제121항 중 어느 한 항에 있어서, 1종 이상의 제약 부형제가 미세결정질 셀룰로스, 락토스 1수화물, 크로스카르멜로스 소듐, 스테아르산마그네슘, 또는 그의 조합으로부터 선택된 것인 제약 조성물.
화학식 (2)의 화합물:

또는 그의 결정질 염; 및
(i) 1종 이상의 완충제;
(ii) 임의로, 1종 이상의 보존제;
(iii) 임의로, 1종 이상의 용매;
(iv) 임의로, 1종 이상의 맛 차폐제; 및
(v) 임의로, 1종 이상의 추가의 pH-조정제
를 포함하는 경구 액체 제약 조성물.
제123항에 있어서, 결정질 염이 산 부가염인 제약 조성물.
제124항에 있어서, 산 부가염이 염산 염인 제약 조성물.
제125항에 있어서, 염산 염이 1가인 제약 조성물.
제124항 내지 제126항 중 어느 한 항에 있어서, 결정질 염 형태가 무수인 제약 조성물.
제123항 내지 제127항 중 어느 한 항에 있어서, pH가 약 2.0 내지 약 5.0인 제약 조성물.
제128항에 있어서, pH가 약 2.0 내지 약 3.5인 제약 조성물.
제128항에 있어서, pH가 약 2.0인 제약 조성물.
제123항 내지 제130항 중 어느 한 항에 있어서, 완충제가 시트르산, 타르타르산, 말산, 또는 아세트산으로부터 선택된 것인 제약 조성물.
제131항에 있어서, 완충제가 말산인 제약 조성물.
제132항에 있어서, 말산이 DL-말산인 제약 조성물.
제123항 내지 제133항 중 어느 한 항에 있어서, 1종 이상의 보존제를 포함하는 제약 조성물.
제134항에 있어서, 보존제가 벤조산, 벤조산나트륨, 메틸 파라-히드록시 벤조에이트, 프로필 파라-히드록시 벤조에이트, 또는 프로필렌 글리콜로부터 선택된 것인 제약 조성물.
제135항에 있어서, 보존제가 벤조산인 제약 조성물.
제136항에 있어서, 벤조산이 보존제 및 완충제인 제약 조성물.
제123항 내지 제137항 중 어느 한 항에 있어서, 1종 이상의 맛 차폐제를 포함하는 제약 조성물.
제138항에 있어서, 맛 차폐제가 수크랄로스, 글리세린, 시클로덱스트린, HP-β-시클로덱스트린, α-시클로덱스트린, β-시클로덱스트린, 또는 그의 조합으로부터 선택된 것인 제약 조성물.
제138항에 있어서, 맛 차폐제가 HP-β-시클로덱스트린 및 수크랄로스의 조합물인 제약 조성물.
제123항 내지 제140항 중 어느 한 항에 있어서, 화학식 2의 화합물 또는 그의 결정질 염을 약 10 mg/mL의 농도로 포함하는 제약 조성물.
제123항 내지 제141항 중 어느 한 항에 있어서, 말산을 최대 약 6.7 mg/mL의 농도로 포함하는 제약 조성물.
제142항에 있어서, 말산을 약 1.3 mg/mL의 농도로 포함하는 제약 조성물.
제123항 내지 제143항 중 어느 한 항에 있어서, HP-β-시클로덱스트린을 최대 약 300 mg/mL의 농도로 포함하는 제약 조성물.
제144항에 있어서, HP-β-시클로덱스트린을 최대 약 150 mg/mL의 농도로 포함하는 제약 조성물.
제123항 내지 제145항 중 어느 한 항에 있어서, 수크랄로스를 최대 약 2.0 mg/mL의 농도로 포함하는 제약 조성물.
제146항에 있어서, 수크랄로스를 약 1.0 mg/mL의 농도로 포함하는 제약 조성물.
제123항 내지 제147항 중 어느 한 항에 있어서, 벤조산을 최대 약 3.0 mg/mL의 농도로 포함하는 제약 조성물.
제148항에 있어서, 벤조산을 최대 약 2.0 mg/mL의 농도로 포함하는 제약 조성물.
제123항 내지 제149항 중 어느 한 항에 있어서, pH가 염산에 의해 약 2.0으로 조정된 것인 제약 조성물.
제123항 내지 제150항 중 어느 한 항에 있어서, 용매가 물인 제약 조성물.
화합물 (2)

N⁴-(2,2'-비피리딘-3-일)-N²-(3-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)피리미딘-2,4-디아민의 염의 결정질 형태.
제152항에 있어서, 염이 제약상 허용되는 염인 결정질 형태.
제153항에 있어서, 제약상 허용되는 염이 HCl 염인 결정질 형태.
제152항 내지 제154항 중 어느 한 항에 있어서, 형태 A를 포함하는 결정질 형태.
제152항 내지 제154항 중 어느 한 항에 있어서, 본질적으로 형태 A로 이루어진 결정질 형태.
제155항 또는 제156항에 있어서, 형태 A가 불순물을 실질적으로 함유하지 않는 것인 결정질 형태.
N⁴-(2,2'-비피리딘-3-일)-N²-(3-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)피리미딘-2,4-디아민 무수 염산 염의 화합물 형태 A.
13.53, 16.14, 17.67, 18.38, 24.96, 및 28.18로부터 선택된 1개 이상의 2θ 값을 포함하는 X선 회절 패턴 (XRPD)을 특징으로 하는 N⁴-(2,2'-비피리딘-3-일)-N²-(3-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)피리미딘-2,4-디아민 무수 염산 염의 화합물 형태 A.
제159항에 있어서, 형태가 열거된 2θ 값 중 2개 이상을 특징으로 하는 것인 형태 A.
제159항에 있어서, 형태가 열거된 2θ 값 중 3개 이상을 특징으로 하는 것인 형태 A.
제159항에 있어서, 형태가 열거된 2θ 값 중 4개 이상을 특징으로 하는 것인 형태 A.
제159항에 있어서, 형태가 열거된 2θ 값 중 5개 이상을 특징으로 하는 것인 형태 A.
제159항에 있어서, 형태가 열거된 2θ 값 중 모든 6개를 특징으로 하는 것인 형태 A.
제157항 내지 제164항 중 어느 한 항에 있어서, 추가로 6.71, 19.25, 23.98, 및 29.60으로부터 선택된 1개 이상의 2θ 값을 특징으로 하는 형태 A.
제165항에 있어서, 형태가 열거된 2θ 값 중 2개 이상을 특징으로 하는 것인 형태 A.
제165항에 있어서, 형태가 열거된 2θ 값 중 3개 이상을 특징으로 하는 것인 형태 A.
제165항에 있어서, 형태가 열거된 2θ 값 중 모든 4개를 특징으로 하는 것인 형태 A.
제158항 내지 제168항 중 어느 한 항에 있어서, X선 분말 회절계가 반사 모드로, Cu kα, Kα1 (Å): 1.540598, Kα2 (Å): 1.544426, Kα2/Kα1 강도 비 0.50의 X선 파장, 및 45 kV, 40 mA의 X선 튜브 셋팅으로 사용되는 것인 형태 A.
제158항 내지 제169항 중 어느 한 항에 있어서, 2θ 값이 +/-0.2 2θ 내인 형태 A.
도 12와 실질적으로 동일한 X선 회절 패턴 (XRPD)을 특징으로 하는, N⁴-(2,2'-비피리딘-3-일)-N²-(3-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)피리미딘-2,4-디아민 무수 염산 염의 화합물 형태 A.
196.2℃, 214.8℃, 및 274.0℃ 중 1개 이상에서의 흡열을 특징으로 하는, N⁴-(2,2'-비피리딘-3-일)-N²-(3-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)피리미딘-2,4-디아민 무수 염산 염의 화합물 형태 A.
제172항에 있어서, 추가로 198.9℃, 218.0℃, 및 275.9℃ 중 1개 이상에서의 피크 흡열을 특징으로 하는 형태 A.
제172항 또는 제173항에 있어서, 추가로 274.0℃의 개시 온도를 특징으로 하는 형태 A.
제172항 내지 제174항 중 어느 한 항에 있어서, 추가로 150℃까지 1.7%의 중량 손실을 특징으로 하는 형태 A.
도 15와 실질적으로 동일한 TGA-DSC 온도기록도를 특징으로 하는, N⁴-(2,2'-비피리딘-3-일)-N²-(3-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)피리미딘-2,4-디아민 무수 염산 염의 화합물 형태 A.
제152항 내지 제176항 중 어느 한 항의 결정질 형태를 포함하는 제약 조성물.
제176항에 있어서, 고체 투여 제제로서의 제약 조성물.
제114항 내지 제122항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물이 제152항 내지 제176항 중 어느 한 항의 결정질 형태인 경구 고체 제약 조성물.
제176항에 있어서, 액체 투여 제제로서의 제약 조성물.
제123항 내지 제151항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물이 제152항 내지 제176항 중 어느 한 항의 결정질 형태인 경구 액체 제약 조성물.
제1항 내지 제113항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물이 제152항 내지 제176항 중 어느 한 항의 결정질 형태인 방법.