JP3005618B2 - アスペルギルス属酵母のプロモーター - Google Patents

アスペルギルス属酵母のプロモーター

Info

Publication number
JP3005618B2
JP3005618B2 JP6007137A JP713794A JP3005618B2 JP 3005618 B2 JP3005618 B2 JP 3005618B2 JP 6007137 A JP6007137 A JP 6007137A JP 713794 A JP713794 A JP 713794A JP 3005618 B2 JP3005618 B2 JP 3005618B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
fragment
promoter
sequence
gene
dna
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
JP6007137A
Other languages
English (en)
Other versions
JPH0751067A (ja
Inventor
ボエル エスパー
クリステンセン トベー
ファブリシウス ウォルデケ ヘレ
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Novo Nordisk AS
Original Assignee
Novo Nordisk AS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=8102403&utm_source=***_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=JP3005618(B2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Novo Nordisk AS filed Critical Novo Nordisk AS
Publication of JPH0751067A publication Critical patent/JPH0751067A/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP3005618B2 publication Critical patent/JP3005618B2/ja
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/80—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for fungi
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/52—Genes encoding for enzymes or proenzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/67—General methods for enhancing the expression
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/16—Hydrolases (3) acting on ester bonds (3.1)
    • C12N9/18—Carboxylic ester hydrolases (3.1.1)
    • C12N9/20—Triglyceride splitting, e.g. by means of lipase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2405—Glucanases
    • C12N9/2408—Glucanases acting on alpha -1,4-glucosidic bonds
    • C12N9/2411—Amylases
    • C12N9/2414—Alpha-amylase (3.2.1.1.)
    • C12N9/2417—Alpha-amylase (3.2.1.1.) from microbiological source
    • C12N9/242—Fungal source
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
    • C12N9/6421—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from mammals
    • C12N9/6478—Aspartic endopeptidases (3.4.23)
    • C12N9/6481—Pepsins (3.4.23.1; 3.4.23.2; 3.4.23.3)

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】 【０００１】 【産業上の利用分野】本発明はアスペルギルス（Ａｓｐ
ｅｒｇｉｌｌｕｓ）のプロモーターに関する。 【０００２】 【従来の技術】今日までに、組換えＤＮＡ技術によるポ
リペプチドまたはタンパクを生産するため数多くの方法
が開発されてきた。主な興味は細菌および酵母に集中さ
れてきたのであり、例えば大腸菌（Ｅ． ｃｏｌｉ）、
バシルス・ズブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉ
ｌｉｓ）およびサッカロミセス・セレビシエー（Ｓａｃ
ｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）は例え
ば発現および選択系に関して詳細に特徴化されているも
のである。 【０００３】上記の微生物のほかに、アスペルギルス・
ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ）のような
糸状菌は、詳細に特徴化されている組換えＤＮＡベクタ
ー用の宿主微生物として有望な候補であり、酵素を商業
的に生産するのに広範囲に用いられている微生物であ
る。形質転換された宿主微生物から形質転換細胞を選択
できる選択マーカーが用いられる形質転換系の開発に、
特に努力が集中されてきた。 【０００４】過去数年間にアスペルギルス・ニドランス
（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｄｕｌａｎｓ）の形質
転換のための各種選択マーカーが報告され、菌の細胞分
化を制御する遺伝学的および分子学的方法を研究する目
的で糸状菌Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｄｕｌａｎｓ
の組込み形質転換の手法が近年になり開発されてきた。 【０００５】Ａ． ｎｉｄｕｌａｎｓの形質転換は、Ｎ
ｅｕｒｏｓｐｏｒａ ｃｒａｓｓａｐｙｒ−４遺伝子
（Ｂａｌｌａｎｃｅ，Ｄ．Ｊ．ら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂ
ｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，第１１２巻、
（１９８３年）、２８４〜２８９頁）、Ａ． ｎｉｄｕ
ｌａｎｓ ａｍｄＳ遺伝子（Ｔｉｌｂｕｒｎ，Ｊ．Ｇ．
ら、Ｇｅｎｅ、第２６巻、（１９８３年）、２０５〜２
２１頁）、Ａ． ｎｉｄｕｌａｎｓ ｔｒｐＣ遺伝子
（Ｙｅｌｔｏｎ，Ｍ．Ｍ．ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａ
ｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，第８１巻、（１９８４
年）、１４７０〜１４７４頁）およびＡ． ｎｉｄｕｌ
ａｎｓ ａｒｇＢ遺伝子（Ｊｏｈｎ，Ｍ．Ａ．およびＰ
ｅｂｅｒｄｙ，Ｊ．，Ｍｉｃｒｏｂ．Ｔｅｃｈｎｏ
ｌ．，第６巻、（１９８４年）３８６〜３８９頁）を含
むプラスミドを用いて説明されてきた。形質転換するＤ
ＮＡは、比較的低い頻度（典型的には１０００個未満の
形質転換体／１μｇのＤＮＡ）で宿主ゲノムに組込まれ
ることが分かった。 【０００６】ごく最近に、Ａ．ｎｉｄｕｌａｎｓのａｍ
ｄＳ遺伝子を用いるＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅ
ｒの形質転換が報告され（Ｋｅｌｌｙ，Ｊ．Ｍ．とＨｙ
ｎｅｓ，Ｍ．Ｊ．，ＥＭＢＯ Ｊｏｕｒｎａｌ、第４
巻、（１９８５年）、４７５〜４７９頁）、ａｍｄＳは
単一の窒素源としてのアセタミド上では強力には成長で
きないＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒの形質転換
に使用される有力な選択マーカーであることが示され
た。Ａ．ｎｉｄｕｌａｎｓのａｒｇＢ遺伝子を用いるＡ
ｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒの形質転換も、最近
報告された（Ｂｕｘｔｏｎ，Ｆ．Ｐ．ら、Ｇｅｎｅ、第
３７巻、（１９８５年）、２０７〜２１４頁）。 【０００７】 【発明が解決しようとする課題】糸状菌Ａｓｐｅｒｇｉ
ｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅにおける異種タンパクの発現の
ための系は、主として、この菌における遺伝子発現の制
御法が十分には知られておらず且つクローニングベクタ
ー上に好適な選択可能な遺伝子マーカーが欠如している
ことにより、これまでは開発されなかった。 【０００８】 【課題を解決するための手段、発明の作用および効果】
本発明によれば、上記の形質転換技法を用いて、異種タ
ンパクを高水準で発現させまたはＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕ
ｓ ｏｒｙｚａｅにおける同種タンパクの産生を増進さ
せることができる。本明細書において用いられる「異種
タンパク」という表現はＡ． ｏｒｙｚａｅによっては
産生されないタンパクを意味し、一方「同種タンパク」
という表現はＡ． ｏｒｙｚａｅ自体によって産生され
るタンパクを意味する。 【０００９】更に具体的には、Ａ． ｎｉｇｅｒおよび
Ａ． ｎｉｄｕｌａｎｓの形質転換に用いたマーカー遺
伝子を使用することによって、所望なタンパク生成物を
暗号化するＤＮＡで形質転換したＡ． ｏｒｙｚａｅ株
の選択が可能である。これら前者の菌類とＡ． ｏｒｙ
ｚａｅとの系統発生的距離（Ｒａｐｅｒ，Ｋ．Ｂ．およ
びＦｅｎｎｅｌｌ，Ｄ．Ｉ．，（１９６５年）Ｔｈｅ
Ｇｅｎｕｓ Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）のために、これ
はまったく予知されないものであった。 【００１０】本発明は、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ、具体
的にはＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅおよびＡ
ｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒにおけるタンパク生
成物の発現に極めて効果的なプロモーターであって、Ｔ
ＡＫＡ−アミラーゼプロモーターまたは任意に上流活性
化配列が先行する上記プロモーターの機能的部分として
特徴化されるものを提供する。 【００１１】使用した形質転換法は、Ａ． ｎｉｄｕｌ
ａｎｓの形質転換法の変法（Ｂａｌｌａｎｃｅ，Ｄ．
Ｊ．ら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃ
ｏｍｍｕｎ．，第１１２巻、（１９８３年）、２８４〜
２８９頁、Ｔｉｌｂｕｒｎ，Ｊ．Ｇ．ら、Ｇｅｎｅ、第
２６巻、（１９８３年）、２０５〜２２１頁）、Ｙｅｌ
ｔｏｎ，Ｍ．Ｍ．ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．
Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，第８１巻、（１９８４年）、１
４７０〜１４７４頁）およびＡ．ｎｉｇｅｒの形質転換
についてのＢｕｘｔｏｎらの方法、（Ｇｅｎｅ、第３７
巻、（１９８５年）、２０７〜２１４頁）に類似の方法
であった。本発明の方法では、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ
ｏｒｙｚａｅは、宿主株のゲノム中に組込むことがで
きるが、形質転換前は宿主株に有しない選択マーカーを
含むベクター系で形質転換される。 【００１２】好ましい選択マーカーはａｒｇＢ（Ａ．
ｎｉｄｕｌａｎｓまたはＡ． ｎｉｇｅｒ）、ｔｒｐＣ
（Ａ． ｎｉｄｕｌａｎｓ）、ａｍｄＳ（Ａ． ｎｉｄ
ｕｌａｎｓ）またはｐｙｒ４（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ
ｃｒａｓｓａ）遺伝子、またはＤＨＦＲ（ジヒドロフォ
レートレダクターゼまたはその変異株）遺伝子である。
更に好ましい選択マーカーはａｒｇＢまたはａｒｍＳ遺
伝子である。野生型Ａ． ｏｒｙｚａｅ株は通常はａｒ
ｇＢ+ である（すなわち、ａｒｇＢ遺伝子がＡ． ｏｒ
ｙｚａｅにおいて機能的である）。 【００１３】ａｒｇＢを選択マーカーとして選択する場
合には、このマーカーに対して遺伝子に欠損を有する
Ａ． ｏｒｙｚａｅのａｒｇＢ変異株を宿主株として用
いなければならない。Ａ． ｏｒｙｚａｅのａｒｇＢ変
異株はＦ．Ｐ．Ｂｕｘｔｏｎらが報告したのと同様にし
て調製することができる（Ｇｅｎｅ、第３７巻、（１９
８５年）、２０７〜２１４頁）。ａｒｇＢ変異株はオル
ニチントランスカルバミラーゼ遺伝子に欠損を有する変
異株として定義される。他方、ａｍｄＳ遺伝子は、野生
型Ａ． ｏｒｙｚａｅ株がこの遺伝子を含まないので、
この野生株の形質転換の選択マーカーとして用いること
ができる。 【００１４】遺伝子配列を促進する機能を暗号化するＤ
ＮＡ配列は、典型的にはプロモーター、転写ターミネー
ターおよびポリアデニル化シグナルである。当業界にお
いて周知のように上流活性化配列およびエンハンサー配
列が先行することのあるプロモーターはＡｓｐｅｒｇｉ
ｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅにおいて強力な転写活性を示す
ことができる如何なるＤＮＡ配列であってもよく、アミ
ラーゼ、グルコアミラーゼ、プロテアーゼ、リパーゼ、
セルラーゼおよび解糖酵素のような細胞外および細胞内
タンパクのいずれをも暗号化する遺伝子から誘導するこ
とができる。 【００１５】好適なプロモーターはＡ． ｏｒｙｚａｅ
ＴＡＫＡアミラーゼ、Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅ
ｈｅｉアスパラギン酸プロテイナーゼ、Ａ． ｎｉｇｅ
ｒグルコアミラーゼ、Ａ． ｎｉｇｅｒ中性α−アミラ
ーゼ、Ａ． ｎｉｇｅｒ酸安定α−アミラーゼおよびＲ
ｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉリパーゼについての
遺伝子から誘導することができる。解糖酵素の遺伝子か
らのプロモーターの例は、ＴＰＩ，ＡＤＨおよびＰＧＫ
である。 【００１６】本発明による好ましいプロモーターは、
Ａ．ｏｒｙｚａｅ ＴＡＫＡ−アミラーゼプロモーター
である。ＴＡＫＡアミラーゼは周知のα−アミラーゼ
（Ｔｏｄａら、Ｐｒｏｃ．Ｊａｐａｎ Ａｃａｄ．，第
５８巻、シリーズＢ（１９８２年）、２０８〜２１２
頁）である。プロモーター領域を暗号化するＤＮＡは、
ＴＡＫＡ−アミラーゼゲノム性クローンから誘導した。
プロモーターおよびプロモーターの上流の領域の配列
を、プレ領域およびＴＡＫＡ−アミラーゼについての構
造遺伝子の５′末端と共に図１に示す。 【００１７】実施例２に更に詳細に説明されるように、
プレ領域およびプロモーターおよび上流活性化配列を含
むＴＡＫＡ−アミラーゼを暗号化するＤＮＡ配列は、
Ａ．ｏｒｙｚａｅ ｍｙｃｅｌｉｕｍから誘導され、Ｂ
ａｍＨＩを消化したｐＢＲ３２２に挿入されて、プラス
ミドｐＴＡＫＡ １７を生成した（図２を参照された
い）。ｐＴＡＫＡ １７ Ａ． ｏｒｙｚａｅから誘導
されたＤＮＡは５．５kbＢａｍＨＩ／Ｓａｕ ３ＡＩ−
ＢａｍＨＩ／Ｓａｕ ３ＡＩフラグメントとして示さ
れ、プロモーターおよび上流活性化配列は位置０で開始
する２．１kbフラグメントを表わす。 【００１８】ＢｇｌII部位までのプロモーターおよび上
流活性化配列の確立されたＤＮＡ配列を、図１に示す。
プロモーターは、ＴＡＫＡ−アミラーゼプレ配列のＭｅ
ｔ（１）コドンに先行するヌクレオチド−１で終了す
る。プレ配列を暗号化するヌクレオチド配列は６３個の
ヌクレオチドから構成され、成熟ＴＡＫＡ−アミラーゼ
はヌクレオチド６４に対応する位置から開始する。 【００１９】ｐＴＡＫＡ １７から、プロモーターに対
して上流の配列を含む全プロモーター配列またはその機
能的部分は、当業者に公知の手段によって誘導すること
ができる。プロモーター配列は、プロモーター配列を、
例えば所望なタンパク生成物またはことなるプレ領域
（シグナルペプチド）を暗号化する遺伝子のような他の
ＤＮＡとの連結を促進する特異的な制限部位を導入する
ために、リンカーを備えていてもよい。 【００２０】本発明による方法では、（ＳａｌＩ部位の
開始を表わす）ヌクレオチド−１１４４（図１を参照さ
れたい）からヌクレオチド−１０の配列を、プロモータ
ー領域の十分に機能する部分の一例として使用した。本
発明のもう一つの態様では、ヌクレオチド−１１７６か
ら−１までのヌクレオチド配列は、ｐＴＡＫＡ １７か
らの未だ配列されていない１．０５kbフラグメントが先
行した。各種のフラグメントを使用できることは、当業
者にとって明らかである。本発明はまた、上記のヌクレ
オチド配列を有するプロモーター及び上流活性化配列の
ほかに、その機能的部分、及び機能的に同等なヌクレオ
チド配列を有するプロモーター及び上流活性化配列を含
む。ここで、機能的部分、及び機能的に同等なヌクレオ
チド配列を有するプロモーター及び上流活性化配列と
は、具体的には、上記のヌクレオチド配列に対して１個
又は複数個のヌクレオチドの除去、付加及び／又は他の
ヌクレオチドによる置換により修飾されたヌクレオチド
を有するが、なお上記の生来のプロモーター及び上流活
性化配列の生物学的機能を維持している修飾されたプロ
モーター又は上流活性化配列であって、上記ヌクレオチ
ドの除去、付加及び／又は他のヌクレオチドによる置換
による修飾の程度が、本特許出願の優先権主張日当時に
周知であった、例えば部位特定変異誘発などの手段によ
り可能な程度のものを言う。 【００２１】本発明の一態様によれば、プロモーターお
よび上流活性化配列は、図１におけるヌクレオチド−１
１４４からヌクレオチド−１０の配列を表わす下記の配
列または機能的に同等なヌクレオチド配列を有する。 【００２２】 GTCGACGC ATTCCGAATA CGAGGCCTGA TTAATGATTA CATACGCCTC CGGGTAGTAG ACCGAGCAGC CGAGCCAGTT CAGCGCCTAA AACGCCTTAT ACAATTAAGC AGTTAAAGAA GTTAGAATCT ACGCTTAAAA AGCTACTTAA AAATCGATCT CGCAGTCCCG ATTCGCCTAT CAAAACCAGT TTAAATCAAC TGATTAAAGG TGCCGAACGA GCTATAAATG ATATAACAAT ATTAAAGCAT TAATTAGAGC AATATCAGGC CGCGCACGAA AGGCAACTTA AAAAGCGAAA GCGCTCTACT AAACAGATTA CTTTTGAAAA AGGCACATCA GTATTTAAAG CCCGAATCCT TATTAAGCGC CGAAATCAGG CAGATAAAGC CATACAGGCA GATAGACCTC TACCTATTAA ATCGGCTTCT AGGCGCGCTC CATCTAAATG TTCTGGCTGT GGTGTACAGG GGCATAAAAT TACGCACTAC CCGAATCGAT AGAACTACTC ATTTTTATAT AGAAGTCAGA ATTCATAGTG TTTTGATCAT TTTAAATTTT TATATGGCGG GTGGTGGGCA ACTCGCTTGC GCGGGCAACT CGCTTACCGA TTACGTTAGG GCTGATATTT ACGTGAAAAT CGTCAAGGGA TGCAAGACCA AAGTAGTAAA ACCCCGGAAG TCAACAGCAT CCAAGCCCAA GTCCTTCACG GAGAAACCCC AGCGTCCACA TCACGAGCGA AGGACCACCT CTAGGCATCG GACGCACCAT CCAATTAGAA GCAGCAAAGC GAAACAGCCC AAGAAAAAGG TCGGCCCGTC GGCCTTTTCT GCAACGCTGA TCACGGGCAG CGATCCAACC AACACCCTCC AGAGTGACTA GGGGCGGAAA TTTAAAGGGA TTAATTTCCA CTCAACCACA AATCACAGTC GTCCCCGGTA TTGTCCTGCA GAATGCAATT TAAACTCTTC TGCGAATCGC TTGGATTCCC CGCCCCTAGT CGTAGAGCTT AAAGTATGTC CCTTGTCGAT GCGATGTATC ACAACATATA AATACTAGCA AGGGATGCCA TGCTTGGAGG ATAGCAACCG ACAACATCAC ATCAAGCTCT CCCTTCTCTG AACAATAAAC CCCACAG 【００２３】もう一つの態様によれば、プロモーターお
よび上流活性化配列は、図１におけるヌクレオチド−１
１７６から−１までの配列を表わす下記の配列または機
能的に同等なヌクレオチド配列を有する。 【００２４】 AGATCTGCCC TTATAAATCT CCTAGTCTGA TCGTCGACGC ATTCCGAATA CGAGGCCTGA TTAATGATTA CATACGCCTC CGGGTAGTAG ACCGAGCAGC CGAGCCAGTT CAGCGCCTAA AACGCCTTAT ACAATTAAGC AGTTAAAGAA GTTAGAATCT ACGCTTAAAA AGCTACTTAA AAATCGATCT CGCAGTCCCG ATTCGCCTAT CAAAACCAGT TTAAATCAAC TGATTAAAGG TGCCGAACGA GCTATAAATG ATATAACAAT ATTAAAGCAT TAATTAGAGC AATATCAGGC CGCGCACGAA AGGCAACTTA AAAAGCGAAA GCGCTCTACT AAACAGATTA CTTTTGAAAA AGGCACATCA GTATTTAAAG CCCGAATCCT TATTAAGCGC CGAAATCAGG CAGATAAAGC CATACAGGCA GATAGACCTC TACCTATTAA ATCGGCTTCT AGGCGCGCTC CATCTAAATG TTCTGGCTGT GGTGTACAGG GGCATAAAAT TACGCACTAC CCGAATCGAT AGAACTACTC ATTTTTATAT AGAAGTCAGA ATTCATAGTG TTTTGATCAT TTTAAATTTT TATATGGCGG GTGGTGGGCA ACTCGCTTGC GCGGGCAACT CGCTTACCGA TTACGTTAGG GCTGATATTT ACGTGAAAAT CGTCAAGGGA TGCAAGACCA AAGTAGTAAA ACCCCGGAAG TCAACAGCAT CCAAGCCCAA GTCCTTCACG GAGAAACCCC AGCGTCCACA TCACGAGCGA AGGACCACCT CTAGGCATCG GACGCACCAT CCAATTAGAA GCAGCAAAGC GAAACAGCCC AAGAAAAAGG TCGGCCCGTC GGCCTTTTCT GCAACCCTGA TCACGGGCAG CGATCCAACC AACACCCTCC AGAGTGACTA GGGGCGGAAA TTTAAAGGGA TTAATTTCCA CTCAACCACA AATCACAGTC GTCCCCGGTA TTGTCCTGCA GAATGCAATT TAAACTCTTC TGCGAATCGC TTGGATTCCC CGCCCCTAGT CGTAGAGCTT AAAGTATGTC CCTTGTCGAT GCGATGTATC ACAACATATA AATACTAGCA AGGGATGCCA TGCTTGGAGG ATAGCAACCG ACAACATCAC ATCAAGCTCT CCCTTCTCTG AACAATAAAC CCCACAGAAG GCATTT 【００２５】本発明のもう一つの見地によれば、後者の
配列では、ｐＴＡＫＡ １７からの１．０５kb未配列の
上流領域（図２における位置０〜１．０５）が先行して
もよい。ターミネーターおよびポリアデニル化配列はプ
ロモーターと同じ源から誘導することができる。エンハ
ンサー配列を構造中に挿入してもよい。 【００２６】発現した生成物は細胞の***を要する細胞
内に蓄積させて、生成物を単離することができる。この
付加的工程を回避し且つ細胞内で発現した生成物の可能
な分解量を最少限にするには、生成物を細胞から分泌す
るのが好ましい。この目的のため、所望な生成物の遺伝
子は、発現した生成物を細胞の分泌経路内への効果的に
向けるプレ領域を有する。自然に起こるシグナルまたは
リーダーペプチドまたはその機能的部分あるいは分泌を
行う合成配列であることができるこのプレ領域は、一般
的には分泌の際に所望な生成物から開裂して、培養液か
ら単離する準備のできた成熟生成物を残す。 【００２７】このプレ領域は、如何なる有機物源からの
ものであっても分泌されるタンパクの遺伝子から誘導す
ることができる。本発明によれば、プレ領域はＡｓｐｅ
ｒｇｉｌｌｕｓ種からのグルコアミラーゼまたはアミラ
ーゼ遺伝子、Ｂａｃｉｌｌｕｓ種からのアミラーゼ遺伝
子、Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉからのリパー
ゼまたはプロテイナーゼ遺伝子、Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓ
ｉａｅからのα−因子の遺伝子または仔牛プロキモシン
遺伝子から誘導することができる。 【００２８】更に好ましくは、プレ領域はＡ． ｏｒｙ
ｚａｅ ＴＡＫＡアミラーゼ、Ａ．ｎｉｇｅｒ中性α−
アミラーゼ、Ａ． ｎｉｇｅｒ酸安定α−アミラーゼ、
Ｂ． ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓα−アミラーゼ、Ｂ
ａｃｉｌｌｕｓ ＮＣＩＢ１１８３７からのマルトース
原性アミラーゼ、Ｂ． ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈ
ｉｌｕｓまたはＢ． ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ ｓ
ｕｂｔｉｌｉｓｉｎから誘導される。有効なシグナル配
列は、Ａ． ｏｒｙｚａｅ ＴＡＫＡ−アミラーゼシグ
ナル、Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉアスパラギ
ン酸プロテイナーゼシグナルおよびＲｈｉｚｏｍｕｃｏ
ｒ ｍｉｅｈｅｉリパーゼシグナルである。ＴＡＫＡ−
アミラーゼシグナルは下記の配列を有する。 【００２９】 【化１】 【００３０】プロモーターおよびターミネーター配列に
機能的に連結した所望な生成物の遺伝子は、選択マーカ
ーを含むベクターに組込むことができ、または宿主株の
ゲノム中に組込むことができる別個のベクターまたはプ
ラスミド上に置いてもよい。本明細書で用いる「ベクタ
ー系」という表現は単一ベクターまたはプラスミドまた
は宿主ゲノム中に組込まれる全ＤＮＡ情報を含む２種類
以上のベクターまたはプラスミドを包含する。ベクター
またはプラスミドは、線状または閉じた円形分子であっ
てもよい。本発明の好ましい態様によれば、Ａ． ｏｒ
ｙｚａｅは２個のベクターであって、一つは選択マーカ
ーを含み、もう一つは宿主株に導入される残りの異種Ｄ
ＮＡから成り、プロモーター、所望な生成物および転写
ターミネーターの遺伝子およびポリアデニル化配列を含
むもので共形質転換される。 【００３１】通常は、Ａ． ｏｒｙｚａｅ形質転換体は
安定であり、選択マーカーの不在で培養することができ
る。形質転換体が不安定になる場合には、選択マーカー
を用いて培養の際に選択してもよい。形質転換細胞を、
次に問題のマーカーに対応する選択圧で培養する。 【００３２】本発明はＡ． ｏｒｙｚａｅにおいて多種
多様なポリペプチドまたはタンパク生成物を高収率で製
造する方法を提供する。Ａ． ｏｒｙｚａｅは長年にわ
たり例えばＴＡＫＡ−アミラーゼ酵素およびタンパク分
解酵素の生産に商業的規模で用いられてきており、従っ
てこの微生物の醗酵技術は十分に開発されており、この
微生物は食品工業において使用されることが証明されて
いる。 【００３３】本発明は、原則として如何なるポリペプチ
ドまたはタンパク生成物でも高収量での工業的生産に
Ａ． ｏｒｙｚａｅの使用可能性を提供する。かかる生
成物の例はキモシンまたはプロキモシンおよび他のレン
ネット、プロテアーゼ、アミログルコシダーゼ、Ａｓｐ
ｅｒｇｉｌｌｕｓからの酸安定アミラーゼ、菌のリパー
ゼまたは原生生物のリパーゼおよび熱に安定な細菌また
は菌のアミラーゼである。 【００３４】本発明をプロキモシン、Ｒｈｉｚｏｍｕｃ
ｏｒ ｍｉｅｈｅｉアスパラギン酸プロテイナーゼ、Ｔ
ＡＫＡ−アミラーゼおよびＲｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉ
ｅｈｅｉからのリパーゼの生産によって説明する。これ
らの酵素の遺伝子は、下記に更に詳細に説明するよう
に、ｃＤＮＡライブラリーまたはゲノムライブラリーか
ら得た。 【００３５】 【実施例】以下の実施例において出発物質として使用し
たプラスミドは次の通りである。 p285 (ATCC No. 20681) PCAMG91 Boelら、EMBO Journal、第３巻、（1984
年）、1581〜1585頁。 pIC19R Marsh ら、Gene、第32巻、（1984年）、
481〜485 頁。 pSal43 Berse ら、Gene、第25巻、（1983年）、
109〜117 頁、John &Peberdy, Enzyme Microb.Techno
l.。 【００３６】p3SR2 J.M.Kelly およびM.J.Hyne
s, EMBO Journal 、第４巻（1985年）、 475〜479 頁。 pBR322 Bolivar, F. ら、Gene、第２巻（1977
年）、95〜113 頁。 pBR327 Covarrubias, L. ら、Gene、第13巻、
（1981年）、25〜35頁。 pUC9, pUC13およびpUC19 Vieiraら、Gene、第19
巻、（1982年）、 259〜268 頁、およびMessing, Meth.
in Enzymology、第 101巻、（1983年）、20〜27頁。 【００３７】使用した菌類は次の通りである。A. niger ATCC 1015, ATCC 10582A. oryzae ATCC 20423, IFO 4177, ATCC 101
1, ATCC 9576, ATCC 14488〜11491, ATCC 11601 および
ATCC 12892。E. coli MC1000 (Casabadan, M.J. および
Cohen, S.N., J.Mol.Biol., 第 138巻、 179〜207 頁)
(NCIB 11956) 。Rhizomucor miehei CBS 370.65 【００３８】実施例１ プロキモシン遺伝子を含むプラ
スミド２８５′ｐｒｏＣの調製 プレプロキモシン遺伝子を仔牛の胃のｃＤＮＡライブラ
リーから単離し、Ｇ−ＣテイリングによってｐＢＲ３２
２のＰｓｔＩ部位に挿入して（Ｃｈｉｒｇｗｉｎら、Ｂ
ｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第１８巻、（１９７９年）、
５２９４頁およびＴｒｕｅｌｓｅｎら、Ｎｕｃｌｅｉｃ
Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，第６巻、（１９７９年）、３
０６１頁）、ｐＲ２６を得た。 【００３９】ｐＵＣ９をＳａｌＩで切断し、切断をクレ
ノーポリメラーゼで満たし、Ｔ４リガーゼで連結した。
生成するプラスミドをＢａｍＨＩ−ＥｃｏＲＩで切断し
て、２．７kbの大きなフラグメントをプロキモシン遺伝
子のＮ末端を含むｐＲ２６からの０．４７kb ＢａｍＨ
Ｉ−ＥｃｏＲＩフラグメントと連結し、ｐＵＣ９′を作
った。ｐＵＣ９′は、プロキモシン遺伝子のＮ末端にＨ
ｉｎｄIII 部位を含む。 【００４０】ｐＵＣ１３をＢａｍＨＩ−ＮａｒＩで切断
して、ＮａｒＩ−ＸａｍＩと大きなそれぞれの小型フラ
グメントをプロキモシン遺伝子のＣ末端を含むｐＲ２６
の０．６４kb ＸｍａＩ−ＢｃｌＩフラグメントと連結
して、プラスミドｐＵＣ１３′を得た。ｐＵＣ１３′
は、プロキモシン遺伝子のＣ末端にＸｂａＩ部位を含
む。ｐＵＣ１３′の０．６５kb ＸｍａＩ−ＸｂａＩフ
ラグメントを、ｐＵＣ９′の０．４６kb ＨｉｎｄIII
−ＸｍａＩおよびｐ２８５の１１kb ＸｂａＩ−Ｈｉｎ
ｄIII フラグメントと連結して、図３に示されるように
プロキモシン遺伝子を含むプラスミドｐ２８５′ｐｒｏ
Ｃを生成させた。 【００４１】実施例２ Ａ．ｏｒｙｚａｅ ＴＡＫＡ−
アミラーゼＡ遺伝子のクローニング じゃがいも澱粉上で成長させたＡ．ｏｒｙｚａｅ Ｈｗ
３２５から、Ｋａｐｌａｎらの方法（Ｂｉｏｃｈｅ
ｍ．Ｊ．，第１８３巻、（１９７９年）、１８１〜１８
４頁）によって、ｍＲＮＡを調製した。ＴＡＫＡ−アミ
ラーゼ遺伝子の１０５０bpを含む部分ｃＤＮＡクローン
を、ｍＲＮＡをＴＡＫＡ−アミラーゼにおけるアミノ酸
２９５〜２９９についての暗号化配列に相補的な４−マ
ー・オリゴヌクレオチド混合物 【００４２】 【化２】 【００４３】で特異的に感作することによって得た（Ｔ
ｏｄａら、Ｐｒｏｃ．Ｊａｐａｎ Ａｃａｄ．，第５８
巻、シリーズＢ、（１９８２年）、２０８〜２１２
頁）。クローニング法は、Ｇｕｂｌｅｒ ＆ Ｈｏｆｆ
ｍａｎｎ，Ｇｅｎｅ、第２５巻、（１９８３年）、２６
３〜２６９頁記載の方法に準じた。ｃＤＮＡクローンの
両端および中央手での配列は、ＴＡＫＡ−アミラーゼの
アミノ酸配列に対応する配列が存在することを示した。 【００４４】ゲノムクローンの単離 Ａ．ｏｒｙｚａｅ Ｈｗ ３２５からの菌糸を収穫し
て、Ｂｏｅｌらの上記文献に記載のＡ． ｎｉｇｅｒに
ついて用いた方法に従ってＤＮＡを調製するために加工
した。Ｓａｕ３Ａで部分消化することによって生成した
３〜１０kbの制限フラグメントを、ＢａｍＨＩで消化し
て、脱リン酸化したｐＢＲ３２２と連結した（Ｎｅｗ
Ｅｎｇｌａｎｄ Ｂｉｏｌａｂｓ）。 【００４５】５０，０００個の組換体をオリゴヌクレオ
チドプローブＮＯＲ−１６８（上記）でスクリーニング
して、７個がＴＡＫＡ−アミラーゼを暗号化するＤＮＡ
を含むことを見出した。一つのクローンをｍＲＮＡ開始
２．１kb上流を有するプロモーター領域を更に使用する
のに選択した。プラスミドｐＴＡＫＡ １７についての
制限マップを図２に示す。 【００４６】Ｅ． ｃｏｌｉ株に移したｐＴＡＫＡ １
７を１９８７年２月２３日にDeutsche Sammlung von Mi
kroorganismen (DSM), Griesebachstrasse 8, D-3400,
Goettingenに寄託され、受託番号ＤＳＭ ４０１２を与
えられた。ＤＳＭは１９７７年のブダペスト条約で認定
された国際寄託当局であり、上記の条約のそれぞれ第９
規則および第１１規則に従って、公衆による寄託および
入手の永続性を付与している。 【００４７】実施例３ Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅ
ｈｅｉ ｃＤＮＡライブラリーの構成 真菌類Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉ（この菌種
の形態学的および系統学的説明については、 Shipper,
M.A.A., On the genera Rhizomucor and Parasitella,
Studies in mycology, Institute of the Royal Nethe
rlands Academyof Science and Letters, 第１７号
（１９７８年）、５３〜７１頁を参照されたい）はチー
ズ製造におけるミルクの凝固に広く用いられている酸プ
ロテイナーゼ（Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉプ
ロテイナーゼ、以下ＲＭＰと省略する）を分泌する。 【００４８】Ｅ． ｃｏｌｉにおいてこのタンパクのｃ
ＤＮＡ組換えクローンを得るために、全ＲＮＡをＢｏｅ
ｌら（ＥＭＢＯ Ｊ．，第３巻、１０９７〜１１０２
頁、１９８４年）およびＣｈｉｒｇｗｉｎら（Ｂｉｏｃ
ｈｅｍｉｓｔｒｙ（Ｗａｓｈ．）、第１８巻、５２９４
〜５２９９，１９７９年）の方法によってホモゲナイズ
したＲ． ｍｉｅｈｅｉ ｍｙｃｅｌｉｕｍから抽出し
た。ポリ（Ａ）含有ＲＮＡを、ＡｖｉｖとＬｅｄｅｒ
（ＰＮＡＳ，ＵＳＡ，第６９巻、１４０８〜１４１２
頁、１９７２年）によって報告されたオリゴ（ｄＴ）−
セルロース上で親和クロマトグラフィーを２サイクル行
うことによって得た。 【００４９】オリゴ（ｄＴ）で感作した相補性ＤＮＡを
合成して、ＧｕｂｌｅｒとＨｏｆｆｍａｎ（Ｇｅｎｅ，
第２５巻、２６３〜２６９頁、１９８３年）が報告した
方法に従って二重鎖とした。二重鎖を、Ｒｏｙｃｈｏｕ
ｄｈｕｒｙら（Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ，
第３巻、１０１〜１０６頁、１９７６年）によって報告
された方法によって、ｄＣＴＰおよび末端デオキシヌク
レオチジル・トランスフェラーゼと連結した。プラスミ
ドｐＢＲ３２７をＰｓｔＩで線形化して、ｄＧＴＰと連
結した。 【００５０】オリゴ（ｄＣ）を連結したｄｓｃＤＮＡ
を、Ｐｅａｃｏｃｋらが記載した方法（Ｂｉｏｃｈｉ
ｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ，第６５５巻、２４３〜
２５０頁、１９８１年）によってこのオリゴ（ｄＧ）を
連結したベクターにアニーリングして、Ｅ． ｃｏｌｉ
ＭＣ１０００のｈｓｄＲ- ，Ｍ+ 誘導体（Ｃａｓａｄ
ａｂａｎとＣｏｈｅｎ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，第１
３８巻、１７９〜２０７頁、１９８０年）を形質転換し
て組換えクローンを生成させるのに用いた。ＲＭＰ特異的なｃＤＮＡ組換体の同定 １６個のヘプタデカマー・オリゴデオキシリボヌクレオ
チド 【００５１】 【化３】 【００５２】の混合物であって、その一つが Tyr-Tyr-P
he-Trp-Asp-Alaを暗号化する領域においてＲＭＰ ｍＲ
ＮＡに相補的であるもの（ＢｅｃｈとＦｏｌｔｍａｎ
ｎ，Ｎｅｔｈｍｉｌｋ Ｄａｉｒｙ Ｊ．，第３５巻、
２７５〜２８０頁、１９８１年）をＡｐｐｌｉｅｄ Ｂ
ｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．製のＤＮＡ合成装置上で
合成し、ポリアクリルアミドゲル電気泳動法によって精
製した。 【００５３】Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉ ｃ
ＤＮＡライブラリーからの約１０，０００個のＥ． ｃ
ｏｌｉ組換体をＷｈａｔｍａｎ ５４０濾紙に移した。
コロニーを、Ｇｅｒｇｅｎらが記載した方法によってリ
ーシスして、固定した（Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ
Ｒｅｓ．，第７巻、２１１５〜２１３５頁、１９７９
年）。フィルターを、Ｂｏｅｌら（ＥＭＢＯ Ｊ．，第
３巻、１０９７〜１１０２頁、１９８４年）によって記
載された方法によって32Ｐ−標識したＲＭＰ特異的ヘプ
タデカマー混合物と交雑した。 【００５４】フィルターの交雑と洗浄は４０℃で行い、
次いでインテンシファイヤー・スクリーンを用いて２４
時間オートラジオグラフィーを行った。ミニプレプ（Ｍ
ｉｎｉｐｒｅｐ）プラスミドＤＮＡは、標準的な方法
（ＢｉｒｎｂｏｉｍとＤｏｌｙ，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃ
ｉｄｓ Ｒｅｓ．，第７巻、１５１３〜１５２３頁、１
９７９年）によって交雑するコロニーから単離し、ｃＤ
ＮＡインサートのＤＮＡ配列をＭａｘａｍとＧｉｌｂｅ
ｒｔの方法（Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ．，第６
５巻、４９９〜５６０頁、１９８０年）によって確立し
た。 【００５５】ｐＲＭＰ１０１６は、ｍＲＮＡの５′未翻
訳末端の部分を含み、次いで６９個の酸の長いプレプロ
領域と３００個のアミノ酸をＲＭＰタンパクの成熟部分
に暗号化する領域中に伸びていることを示した。ｐＲＭ
Ｐ１０１６はＲＭＰ ｍＲＮＡの完全な３′末端に対応
するインサートを含まなかったので、ｃＤＮＡライブラ
リーをクローンｐＲＭＰ１０１６からの32Ｐニックが翻
訳された３′特異的制限フラグメントで再度スクリーニ
ングすることによって、クローンｐＲＭＰ２９３１を単
離した。 【００５６】このクローンは３′未翻訳領域の部分とＲ
ＭＰタンパクのカルボキシ末端部分を暗号化する２７０
個のトリプレットを有する開放読み込み枠を含む。それ
故、ｐＲＭＰ１０１６およびｐＲＭＰ２９３１は著しく
オーバーラップしており、２個のクローンの結合した配
列は、Ｒ． ｍｉｅｈｅｉプレプロＲＭＰ ｃＤＮＡの
配列を与える。１４１６個のヌクレオチドの総ては、ｃ
ＤＮＡクローニング法から生成するＧ：Ｃテイルの間に
配列した。 【００５７】確立したＤＮＡ配列を図４および図５に、
ＲＭＰへの前駆体の推定アミノ酸配列と共に示す。第４
ａおよびｂ図では、水平線はｃＤＮＡライブラリーのス
クリーニングに用いた合成オリゴ混合物の位置を示して
いる。矢印は、元のＲＭＰの成熟において加工が起こる
位置を示している。ヌクレオチドは開始Ｍｅｔコドンに
おける第一の塩基から番号を付け、アミノ酸は成熟ＲＭ
Ｐにおける第一の残基から番号を付けている。 【００５８】このｃＤＮＡ配列から、ＲＭＰは６９個の
アミノ酸のプロペプチドで４３０個のアミノ酸の長い前
駆体として合成されると結論することができる。この前
駆体における推定上のシグナルペプチダーゼ加工部位
（ｖｏｎ Ｈｅｉｊｎｅ，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅ
ｍ．，第１３３巻、１７〜２１頁、１９８３年）は、Ａ
ｌａ（−４８）およびＡｒｇ（−４７）の間にあると考
えられ、成熟ＲＭＰはＧｌｕ−１およびＡｌａ（＋１）
の間での自動タンパク分解性開裂によって生成する。Ｒ
ＭＰのｃＤＮＡで推定したアミノ酸配列は、以前報告さ
れた部分的アミノ酸配列（ＢｅｃｈとＦｏｌｔｍａｎ
ｎ，Ｎｅｔｈ−Ｍｉｌｋ Ｄａｉｒｙ Ｊ．，第３５
巻、２７５〜２８０頁、１９８１年）と良好に一致して
いる。 【００５９】ＲＭＰ ｃＤＮＡを用いて更に構成作業を
促進するため、次のようにしてクローンｐＲＭＰ２９３
１において同定されたＴＡＡ停止コドンに対して３′の
ＢａｎＩ部位にＨｉｎｄIII リンカーを挿入した。すな
わち、２５μｇ ｐＲＭＰ２９３１をＰｓｔＩで消化し
てＲＭＰ ｃＤＮＡを得た。このインサートを１％アガ
ロースゲル電気泳動法で精製し、ゲルから電気溶出し、
フェノールおよびクロロホルム抽出によって精製し、Ｎ
ａＣｌおよびエタノールで沈澱させた。 【００６０】ＲＭＰの３′半分を暗号化するこのフラグ
メントをＢａｎＩで消化し、ＢａｎＩ付着制限部位末端
を４個のｄＮＴＰとＥ． ｃｏｌｉ ＤＮＡポリメラー
ゼのＫｌｅｎｏｗフラグメントとの混合物で満たした。
これらの満たした末端にＴ４−ＤＮＡリガーゼ反応にお
いてＨｉｎｄIII リンカーを加えた。連結反応混合物を
フェノールとクロロホルムで抽出して、ＤＮＡを４Ｍ酢
酸アンモニウム／エタノールで沈澱させた。 【００６１】精製したＤＮＡを過剰量のＨｉｎｄIII 酵
素で消化して、３８０bpフラグメントを６％ポリアクリ
ルアミドゲル上で精製した。ＲＭＰ開放読取り枠の３′
末端とＴＡＡ停止コドンを含むこのフラグメントを、Ｈ
ｉｎｄIII で消化してアルカリ性ホスファターゼで処理
したｐＩＣ１９Ｒに連結した。この連結混合物を用いて
競合するＥ． ｃｏｌｉ細胞を形質転換し、形質転換体
をアンピシリン含有寒天プレート上で選択した。 【００６２】プラスミドＤＮＡを形質転換体から精製
し、正確な組換体を制限エンドヌクレアーゼ消化とアガ
ロースゲル電気泳動法によって同定した。かかる正確な
組換体、ｐＲＭＰ３′から、２１０bp ＢｇｌII／Ｈｉ
ｎｄIII フラグメントを６％ポリアクリルアミドゲル電
気泳動法によって単離した。このフラグメントはアミノ
酸２９７〜２９９でＢｇｌII部位からのＲＭＰ ｃＤＮ
Ａの３′末端を含み、ＴＡＡ停止コドン中を通って、挿
入されたＨｉｎｄIII リンカーまで伸びている。 【００６３】ＲＭＰ ｃＤＮＡの５′部分は、１％アガ
ロースゲル電気泳動法によって９９７bp ＨｉｎｄIII
／ＢｇｌIIとしてｐＲＭＰから単離した。ＨｉｎｄIII
部位は、プロセグメントにおいて残基−３６，−３５に
対応する位置においてＲＭＰ−ＤＮＡ中に配置されてい
る。９９７bp５′フラグメントをＨｉｎｄIII で消化し
てホスファターゼ処理したｐＩＣ１９Ｒ中で２１０bp
３′フラグメントに連結した。 【００６４】この連結混合物を用いて、組換体をＥ．ｃ
ｏｌｉから得て、３′部分に結合したＲＭＰの５′部分
を有する正確なプラスミドｐＲＭＰは制限酵素分析によ
って同定した。ｐＲＭＰの構成を図６に示す。ｐＲＭＰ
はＲＭＰプレ領域およびプロセグメントの５′半分を暗
号化しない。 【００６５】実施例４ 活性ＲＭＰを分泌するように設
計したＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ発現ベクターの構成 この実施例では、プラスミドをグルコアミラーゼプロモ
ーター、シグナルおよびターミネーター配列の制御下に
ＲＭＰを発現するように設計して構成した。グルコアミ
ラーゼプロモーターおよびターミネーター配列をベクタ
ーｐＣＡＭＧ９１でクローン化したグルコアミラーゼゲ
ノム遺伝子から誘導した。ｐＣＡＭＧ９１の構成はＢｏ
ｅｌら（ＥＭＢＯ Ｊｏｕｒｎａｌ，第３巻、１９８４
年、１５８１〜１５８５頁）によって報告されており、
プラスミドｐＣＡＭＧ９１のエンドヌクレアーゼ制限マ
ップは図７に示す。 【００６６】ｐＣＡＭＧ９１をＳａｌＩおよびＰｓｔＩ
制限エンドヌクレアーゼで消化した。上記消化物から、
アガロースゲル上で６９８bpフラグメントを単離した。
このＳａｌＩ−ＰｓｔＩフラグメントはグルコアミラー
ゼｍＲＮＡの１４０bp ３′未翻訳部分を暗号化する領
域を含む。 【００６７】この３′フラグメントはＴ４−ＤＮＡポリ
メラーゼで処理して、ＸｂａＩリンカーの添加およびＸ
ｂａＩ制限酵素での消化の前に制限部位を「ブラント・
エンド」させた。このグルコアミラーゼ遺伝子の３′末
端をＸｂａＩで線形化したｐＵＣ１３に連結してグルコ
アミラーゼ遺伝子ポリ（Ａ）付加領域を含むプラスミド
ｐＡＭＧ／Ｔｅｒｍを生成させた。ｐＡＭＧ／Ｔｅｒｍ
の構成は、図８に示す。 【００６８】Ａ．ｎｉｇｅｒグルコアミラーゼ遺伝子の
３′末端は、ｐＡＭＧ／Ｔｅｒｍからの７００bp Ｘｂ
ａＩフラグメントとして得た。このターミネーターフラ
グメントを、ＸｂａＩで消化してホスファターゼ処理し
たｐＩＲ１９Ｒに連結した。この連結混合物を用いて、
Ｅ． ｃｏｌｉから組換体が得られ、正確なプラスミド
ｐＩＣＡＭＧ／ＴｅｒｍであってｐＩＣ１９Ｒの多重ク
ローニング部位のＨｉｎｄIII 部位に面するターミネー
ターフラグメントの５′末端を有するものは制限酵素分
析によって同定した。 【００６９】ｐＩＣＡＭＧ／Ｔｅｒｍの構成を、図８に
示す。ｐＩＣＡＭＧ／Ｔｅｒｍから、グルコアミラーゼ
ターミネーター（ＡＭＧターミネーター）領域を１％ア
ガロースゲル電気泳動法によって、７５０bp Ｈｉｎｄ
III ／ＣｌａＩ制限フラグメントとして単離した。ｐＣ
ＡＭＧ９１から、グルコアミラーゼプロモーター（ＡＭ
Ｇプロモーター）を、グルコアミラーゼシグナルペプチ
ドを暗号化する領域、ヘキサペプチド−プロセグメント
および３．５kb ＣｌａＩ／ＢｓｓＨIIフラグメントと
してのｐＢＲ３２２アンピシリン耐性遺伝子（Ａｍｐ）
と共に、１％アガロースゲル電気泳動法によって単離し
た。 【００７０】合成ＢｓｓＨII／ＨｉｎｄIII リンカー
は、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ Ｉｎｃ．
製ＤＮＡ合成装置上で合成した２種類の合成３１マー・
オリゴヌクレオチドから調製した。合成リンカーは下記
の構造を有する。 【００７１】 【化４】 【００７２】このリンカーを、３．５kbグルコアミラー
ゼプロモーターを含むフラグメントおよび７５０bpグル
コアミラーゼターミネーターを含むフラグメントとの連
結反応に用いた。連結混合物を用いてＥ． ｃｏｌｉを
形質転換して、正確な組換体、ｐ６７３は制限エンドヌ
クレアーゼ消化によって同定した。単離したｐ６７３は
ＨｉｎｄIII クローニングベクターであり、この中に適
当なＨｉｎｄIII ｃＤＮＡフラグメントをグルコアミラ
ーゼヘキサペプチドプロセグメントおよびグルコアミラ
ーゼ転写ターミネーター領域の間に挿入することができ
る。 【００７３】挿入したｃＤＮＡはグルコアミラーゼプロ
モーターによって転写制御され、翻訳された融合生成物
の分泌はグルコアミラーゼシグナルペプチドとグルコア
ミラーゼヘキサペプチドプロセグメントとによって指示
される。ｐ６７３をＨｉｎｄIII で消化して、アルカリ
性ホスファターゼで処理して、ｐＲＭＰの消化物から精
製した１．２kb ＨｉｎｄIII と連結した。 【００７４】連結混合物を用いてＥ．ｃｏｌｉを形質転
換し、ＲＭＰを発現させるために正確な位置に挿入され
たＲＭＰ ｃＤＮＡを有する組換体ｐ６８６は制限エン
ドヌクレアーゼ消化によって単離されて特徴化された。
ｐ６８６は以下の構造：グルコアミラーゼシグナルペプ
チド、グルコアミラーゼヘキサプロペプチド、ＲＭＰか
らのプロペプチドのアミノ酸−４５から−１、成熟ＲＭ
Ｐの３６１個のアミノ酸を有するＲＭＰ前駆体を暗号化
する。ｐ６８６の構成を、図９に示す。 【００７５】実施例５ 本発明の好ましい態様では、プレプロＲＭＰの開放読取
り枠を、Ａ．ｎｉｇｅｒからのグルコアミラーゼ遺伝子
またはＡ．ｏｒｙｚａｅからのＴＡＫＡ−アミラーゼ遺
伝子からのプロモーターの制御下において発現プラスミ
ドに挿入すべきである。これを行うために、ＢａｍＨＩ
制限エンドヌクレアーゼ部位を、次の工程によってプレ
プロＲＭＰのシグナルペプチドの開始メチオニンコドン
の５′に挿入した。 【００７６】ｐＲＭＰ１０１６を、ｃＤＮＡにおいてア
ミノ酸残基Ｓｅｒ（−６６）およびＧｌｎ（−６５）に
対応する位置で切断するＤｄｅＩと、ｃＤＮＡにおいて
アミノ酸残基Ｌｙｓ（−３６）およびＬｅｕ（−３５）
に対応する位置で切断するＨｉｎｄIII で消化した。精
製する８９bp ＤｄｅＩ／ＨｉｎｄIII フラグメントを
８％ポリアクリルアミドゲル上で精製し、フェノールお
よびクロロホルム抽出の後電気溶出し、エタノール沈澱
した。以下の配列を有する合成ＤＮＡフラグメントは、
アプライドバイオシステム社製ＤＮＡ合成装置上で２個
のオリゴヌクレオチドとして合成した。 【００７７】 【化５】 【００７８】このフラグメントは、開始Ｍｅｔ−コドン
に対してＢａｍＨＩ付着末端５′および３′末端にＤｄ
ｅＩ付着末端を有する。これら２個のオリゴヌクレオチ
ドは、ＡＴＰおよびＴ４ポリヌクレオチドキナーゼでキ
ナーゼ化し、互いにアニーリングして、次いでＢａｍＨ
Ｉ／ＨｉｎｄIII で消化した。ｐＵＣ１３ベクター中で
ｐＲＭＰ１０１６から精製した８９bp ＤｄｅＩ／Ｈｉ
ｎｄIII ＲＭＰフラグメントに連結した。 【００７９】連結混合物を用いて、Ｅ． ｃｏｌｉ細胞
を形質転換し、正確な組換え体をミニプレプ精製プラス
ミド上で制限酵素消化によって同定した。正確な組換え
プラスミドを配列して、使用したオリゴヌクレオチドの
配列を証明した。かかる正確なプラスミドｐＲＭＰ５′
をＢａｍＨＩおよびＨｉｎｄIII で消化して、開始Ｍｅ
ｔコドン、ＲＭＰシグナルペプチドおよびＲＭＰプロセ
グメントの部分を有する１１０bp ＢａｍＨＩ／Ｈｉｎ
ｄIII フラグメント１０％ポリアクリルアミドゲル電気
泳動法によって精製した。 【００８０】このフラグメントを電気溶出し、フェノー
ルおよびクロロホルム抽出し、エタノールで沈澱した。
ＲＭＰ開放読み込み枠の残りおよびＡＭＧターミネータ
ー配列をＥｃｏＲＩで消化し、ＨｉｎｄIII で部分消化
した後プラスミドｐ６８６から得た。これによって、
１．９kbフラグメントを放出し、このフラグメントをア
ガロースゲル電気泳動法、電気溶出フェノールおよびク
ロロホルム抽出の後、エタノールで沈澱させた。この
１．９kbフラグメントを、ＢａｍＨＩおよびＥｃｏＲＩ
で消化したｐＵＣ１３ベクター中で、ｐＲＭ５′からの
１１０bp ＢａｍＨＩ／ＨｉｎｄIII に連結した。 【００８１】この連結混合物を用いて、Ｅ． ｃｏｌｉ
細胞を形質転換し、正確な組換え体をミニプレプ精製プ
ラスミド上で制限酵素消化によって同定した。かかる正
確な組換体は、ｐＲＭＰＡＭＧＴｅｒｍであった。ｐＲ
ＭＰＡＭＧＴｅｒｍの構成を図１０に示す。 【００８２】実施例６ Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉ
ｇｅｒグルコアミラーゼプロモーターによってＡ．ｏｒ
ｙｚａｅ中で活性ＲＭＰを分泌するように設計されたＡ
ｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ発現ベクターの構成 グルコアミラーゼプロモーターを以下のようにして単離
した。２５μｇのｐＣＡＭＧ９１をＥｃｏＲＩおよびＢ
ｓｓＨII制限エンドヌクレアーゼで消化した。この二重
消化の後、２７０bp ＤＮＡフラグメントをアガロース
ゲル電気泳動法によって単離することができた。 【００８３】このフラグメントは、プロモーター領域の
一部分、５′未翻訳領域およびグルコアミラーゼ遺伝子
（ＡＭＧ遺伝子）のシグナルペプチドをカバーする。ア
ガロースゲルからＤＮＡを電気溶出した後、フラグメン
トをフェノールおよびクロロホルム抽出し、次いでエタ
ノール沈澱することによって精製した。次いで、２７０
bpの長いフラグメントをＳｆａＮＩで消化した。 【００８４】この酵素は、グルコアミラーゼ遺伝子の開
始ＡＴＧメチオニンコドンに対して５′に開裂部位を有
する。完全に消化した後、ＤＮＡをＤＮＡポリメラーゼ
Ｉの大きなフラグメント（Ｋｌｅｎｏｗ）および４個の
ｄＮＴＰ総てで処理して、ＤＮＡ上にブラントエンドを
生成させた。このＤＮＡに、ＤＮＡリガーゼを有するＢ
ｇｌIIリンカーを加えて、ＤＮＡをＢｇｌII制限酵素の
過剰量で消化した。 【００８５】１０％ポリアクリルアミドゲル上でＤＮＡ
フラグメントを分離した後、１７５bp ＢｇｌIIフラグ
メントを電気溶出によって単離することができた。この
フラグメントは、開始メチオニンコドンに対して５′の
ＳｆａＮＩ制限部位に対応する位置に挿入されたＢｇｌ
IIリンカーを有する。このＤＮＡ切片をＢｇｌIIで消化
したアルカリホスファターゼ処理したｐＩＣ１９Ｒベク
ターに連結して、この連結混合物を用いてＥ． ｃｏｌ
ｉ細胞を形質転換した。 【００８６】生成する形質転換体の中で、正確なプラス
ミドをミニプレププラスミド上で制限酵素消化すること
によって同定した。かかる正確なプラスミドｐＢ４０
４．１をＮｓｉＩおよびＢｇｌIIで消化して、グルコア
ミラーゼ遺伝子の５′未翻訳領域をプロモーター領域の
３′部分の約１００bpと共に含む０．１６bpフラグメン
トを放出した。このフラグメントを、ポリアクリルアミ
ドゲル電気泳動法、電気溶出、フェノールおよびクロロ
ホルム抽出およびエタノール沈澱によって精製した。 【００８７】このフラグメントをｐＣＡＭＧ９１からの
グルコアミラーゼプロモーター領域の残りの部分に結合
させるため、以下の工程を行った。２５μｇのｐＣＡＭ
Ｇ９１をＢｓｓＨIIで消化した後、更にＮｄｅＩで部分
的に消化した。フラグメント末端を４個総てのｄＮＴＰ
およびＤＮＡポリメラーゼのＫｌｅｎｏｗフラグメント
で満たした後、１．４kb ＤＮＡフラグメントを１％ア
ガロースゲル上で単離した。 【００８８】このフラグメントは、総てのプロモーター
領域を５′未翻訳領域およびシグナルペプチド暗号化領
域と共に含んでいた。このフラグメントを電気溶出、フ
ェノールおよびクロロホルム抽出およびエタノール沈澱
によって、ＤＮＡを濃縮した。ＮｓｉＩで消化した後、
ＤＮＡを１％アガロースゲル上で流して、１．２kbＮｄ
ｅＩ−ＮｓｉＩフラグメントを電気溶出によって単離し
た。 【００８９】このＤＮＡは上記反応でＮｄｅＩ部位にブ
ラントエンドを生じ、これをＮｒｕＩ−ＢｇｌIIで消化
したｐＩＣ１９Ｒベクター中でのｐＢ４０１．１からの
０．１６kb ＮｓｉＩ−ＢｇｌIIフラグメントに連結さ
せた。連結混合物を用いて、Ｅ． ｃｏｌｉ細胞を形質
転換し、精製する形質転換体の中から、正確な組換体を
ミニプレププラスミドの制限酵素消化によって同定し
た。上記の正確な組換体、ｐＢ４０８．３をＨｉｎｄII
I およびＢｇｌIIで消化して、グルコアミラーゼ（ＡＭ
Ｇ）プロモーターを１％アガロースゲル上で１．４kbフ
ラグメントとして単離した。 【００９０】このフラグメントを電気溶出、フェノール
およびクロロホルム抽出およびエタノール沈澱した。こ
のグルコアミラーゼプロモーターフラグメントを次に、
ＨｉｎｄIII −ＥｃｏＲＩで消化したｐＵＣ１９ベクタ
ー中のｐＲＭＰＡＭＧＴｅｒｍからの２．０ＢａｍＨＩ
−ＥｃｏＲＩフラグメントに連結した。連結混合物を用
いて、Ｅ． ｃｏｌｉ細胞を形質転換し、精製する形質
転換体の中から、正確な組換体をミニプレププラスミド
の制限酵素消化によって同定した。 【００９１】上記の正確な組換体の一つｐ７７８を大規
模に成長させて、組換えプラスミドを単離して、プラス
ミド調製物をＣｓＣｌ／臭化エチジウム遠心分離によっ
て精製した。このプラスミドをグルコアミラーゼプロモ
ーターおよびターミネーター配列の制御下においてＲＭ
Ｐの合成を指示する。ｐ４０８．３の構成を図１１に示
し、ｐ７７８の構成を図１２に示す。 【００９２】実施例７ Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒ
ｙｚａｅ ＴＡＫＡ−アミラーゼプロモーターによる活
性ＲＭＰを分泌させるように設計されたＡｓｐｅｒｇｉ
ｌｌｕｓ発現ベクターの構成 Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ ＴＡＫＡ−ア
ミラーゼゲノム遺伝子を含むプラスミドｐＴＡＫＡ １
７（実施例２を参照されたい）５０μｇをＳａｌＩで消
化した。この酵素は、成熟ＴＡＫＡ−アミラーゼのアミ
ノ酸残基２６に対応する位置においてゲノムＤＮＡでの
制限部位を有する。 【００９３】もう一つのＳａｌＩ制限部位はこの位置に
対して約１３００個のヌクレオチドだけ上流の、上流プ
ロモーター領域の５′末端に配設される。ＳａｌＩ消化
の後、この１３００bpプロモーターを含むフラグメント
をアガロースゲル電気泳動法によって精製し、ＤＮＡを
フェノールおよびクロロホルム抽出およびエタノール沈
澱によって精製した。次いで、ＤＮＡをエクソヌクレア
ーゼIII 緩衝液中に溶解して、Ｈｅｎｉｋｏｆｆ，Ｓ．
（Ｇｅｎｅ，第２８巻、３５１〜３５９頁、１９８４
年）の方法に従ってエクソヌクレアーゼIII で消化し
た。 【００９４】反応を停止して、それぞれのＤＮＡ末端に
おいて約１３０bpの欠失を得た。この方法ではＴＡＫＡ
−アミラーゼ遺伝子の暗号か領域のＳａｌＩ部位からの
約１３０bpの欠失は、開始メチオニンコドンの上流に多
重クローニング部位リンカーを導入する機会を生じる。
エクソヌクレアーゼIII で処理したＤＮＡを、Ｈｅｎｉ
ｋｏｆｆ，Ｓ．（Ｇｅｎｅ，第２８巻、３５１〜３５９
頁、１９８４年）の方法に従ってＳ１ヌクレアーゼIII
で消化し、フェノールおよびクロロホルムで抽出した後
エタノールで沈澱した。 【００９５】Ｓ１ヌクレアーゼで処理したＤＮＡを補修
して連結可能なブラントエンドを得ることは、Ｈｅｎｉ
ｋｏｆｆ，Ｓ．（Ｇｅｎｅ，第２８巻、３５１〜３５９
頁、１９８４年）の方法に従って、４個のｄＮＴＰ総て
とＤＮＡポリメラーゼＩのＫｌｅｎｏｗフラグメントを
用いて行った。ＤＮＡをＥｃｏＲＩで消化して、１３０
０bp ＳａｌＩフラグメントで切断して、２群のフラグ
メントを生成した。一つの群は約３８０bpの長さであ
り、蒸溜領域を表わしたが、他の群は６２０bpの長さで
あり、プロモーター領域を含んでいた。 【００９６】ＥｃｏＲＩ消化生成物のこれらの群をアガ
ロースゲル上で分離して、約６２０bpの長さのＤＮＡフ
ラグメントを電気溶出して、ＥｃｏＲＩ／ＳｍａＩで消
化したｐＵＣ１９ベクターに連結した。連結混合物を用
いて、競合するＥ． ｃｏｌｉ細胞を形質転換し、組換
体から、ミニプレププラスミドＤＮＡを単離した。これ
らの欠失変異株を制限酵素消化によって特徴化して、開
始メチオニンコドンに対して５′の欠失末端を有するプ
ラスミドを同定した。 【００９７】所望な特徴を有する数個の候補を配列さ
せ、ＡＴＧ−メチオニンコドンにおけるＡに対して９bp
を欠失した５′を有する変異株（ｐ９）を選択して、更
に構成した。ｐ９をＥｃｏＲＩおよびＨｉｎｄIII で消
化して、フラグメントを含む６４５bp ＴＡＫＡ−アミ
ラーゼプロモーターをアガロースゲル電気泳動法、フェ
ノールおよびクロロホルム抽出およびエタノールでの沈
澱によって単離した。 【００９８】ｐＴＡＫＡ １７をＳａｌＩおよびＥｃｏ
ＲＩで消化して、ＴＡＫＡ−アミラーゼプロモーター上
流領域を含む５１０bpフラグメントを、アガロースゲル
電気泳動法、フェノールおよびクロロホルム抽出および
エタノールでの沈澱によって単離した。これらの２個の
プロモーター領域を互いに連結させ、且つＳａｌＩおよ
びＨｉｎｄIII で消化したＩＣ１９Ｒベクターに連結さ
せた。 【００９９】連結混合物を用いて、Ｅ． ｃｏｌｉ細胞
を形質転換し、正確な組換体を、ミニプレプとして抽出
されたプラスミドを制限酵素で消化することによって同
定した。かかる組換体の一つｐ７１９では、Ａｓｐｅｒ
ｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅからのＴＡＫＡ−アミラー
ゼプロモーターフラグメントは、多数の各種制限酵素消
化液によって削除することができる１．１kbの移動可能
なフラグメントとして見出されている。ｐ７１９の構成
を図１３に示す。 【０１００】ｐＲＭＰＡＭＧＴｅｒｍから、プレプロＲ
ＭＰ開放読取り枠およびグルコアミラーゼターミネータ
ー領域（ＡＭＧＴｅｒｍ）を、ＢａｍＨＩおよびＥｃｏ
ＲＩで消化した後２kbフラグメントとして単離した。こ
のフラグメントを、アガロースゲル電気泳動法、次いで
フェノールおよびクロロホルム抽出およびエタノールで
の沈澱によって精製した。 【０１０１】Ａ． ｏｒｙｚａｅからのＴＡＫＡ−アミ
ラーゼからのプロモーターを、ｐ７１９をＳａｌＩおよ
びＢａｍＨＩで消化した後に得られる１．１kbフラグメ
ントとして単離した。このフラグメントを、アガロース
ゲル電気泳動法、フェノールおよびクロロホルム抽出、
次いでエタノールでの沈澱によって精製した。１．１kb
プロモーターフラグメントをＳａｌＩおよびＥｃｏＲＩ
で消化したｐＵＣ１９ベクターにおいてｐＲＭＰＡＭＧ
Ｔｅｒｍからの２kb ＢａｍＨＩ／ＥｃｏＲＩフラグメ
ントに連結した。 【０１０２】連結混合物を用いて、Ｅ． ｃｏｌｉ細胞
を形質転換し、精製する組換体から、正確な組換体を、
ミニプレププラスミドを制限酵素で消化することによっ
て同定した。かかる正確な組換体の一つｐ７７７を大規
模に成長させて、組換えプラスミドを単離し、プラスミ
ド調製物をＣｓＣｌ／臭化エチジウム遠心分離によって
精製した。ｐ７７７の構成を図１４に示す。 【０１０３】実施例８ Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒ
ｙｚａｅ ＴＡＫＡ−アミラーゼプロモーターの制御下
によるＲｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉリパーゼを
分泌させるように設計されたＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ発
現ベクターの構成 Ｅ．ｃｏｌｉにおけるリパーゼｃＤＮＡクローンの構成
および同定 特異的オリゴヌクレオチドプローブを構成させることが
できる情報を得るため、精製したＲｈｉｚｏｍｕｃｏｒ
ｍｉｅｈｅｉリパーゼ（Ｍｏｓｋｏｗｉｔｚ，Ｇ．
Ｊ．ら、Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ．，第２
５巻、１９７７年、１１４６〜１１５０頁）について部
分配列を決定した。 【０１０４】以下の説明では、ＲＭＬという略号をＲｈ
ｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉリパーゼについて用い
た。菌糸体および低分子量物質を除去したＲｈｉｚｏｍ
ｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉの培養液からの上澄液を、陰イ
オン交換クロマトグラフィーに付した。カラムからの主
要な脂肪分解性分画を、凍結乾燥する前に脱塩および限
外濾過した。次いで、凍結乾燥した粉末を、親和性クロ
マトグラフィーに付した。 【０１０５】カラムからの貯蔵したリパーゼ分画を脱塩
して、限外濾過によって濃縮した。次いで、この濃縮液
を疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ）に付し
て、ＨＩＣ−精製からのリパーゼを用いてアミノ酸配列
を決定した。配列の決定は、元の酵素（Ｎ−末端配列）
およびリパーゼをＡｒｍｉｌｌａｒｉａ ｍｅｌｌｅａ
プロテアーゼを用いてタンパク分解性消化を行った後に
得られる選択されたフラグメントの両方について行っ
た。配列の決定は、Ｔｈｉｍ，Ｌ．ら、（ＦＥＢＳ Ｌ
ｅｔｔ．１９８７年、印刷中）によって報告されたのと
同じ方法でGas Phase Sequencer (Applied Biosystems
Model ４７０Ａ）で行った。 【０１０６】ＲＭＬを、酵素の基質に対する比率を１：
４０（モル：モル）としたことを除いてＭｏｏｄｙら
（ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ．，第１７２巻、１９８４年、１
４２〜１４８頁）によって報告されたのと同じＡｒｍｉ
ｌｌａｒｉａ ｍｅｌｌｅａプロテアーゼを用いて消化
した。得られたフラグメントをＨＰＬＣによって分離し
て、ＵＶ吸収を２８０nmおよび２１４nmで観察した。オ
リゴヌクレオチドプローブの構成のための好適なフラグ
メントを同定するには、これらのフラグメントはＴｒｙ
および／またはＴｙｒを含むので、２８０nmおよび２１
４nmの間で高い比率を示したペプチドのみを配列した。
以下のＮ−末端配列が、元のＲＭＬを使用することによ
って見出された。 【０１０７】 【化６】 【０１０８】タンパク分解性消化液から単離されたフラ
グメントの一つは、配列 Arg-Thr-Val-Ile-Pro-Gly-Ala
-Thr-Try-Asp-X-Ile-Hisを有し、このフラグメントを特
異的オリゴヌクレオチドプローブの合成に用いた。Ｒｈ
ｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉからのアスパラギン酸
プロテイナーゼ（ＲＭＰ）組換体を単離するために構成
された実施例３からの上記生物のｃＤＮＡライブラリー
も用いてリパーゼに特異的な組換体を同定した。オリゴ
ヌクレオチドの混合物を、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙ
ｓｔｅｍｓ Ｉｎｃ．製ＤＮＡ合成装置で合成した。 【０１０９】 【化７】 【０１１０】を有する混合物は、アミノ酸 Gly-Ala-Thr
-Trp-Aspを暗号化する領域においてＲＭＬ ｍＲＮＡに
相補的であった。このペンタペプチドは、精製したＲＭ
Ｌタンパクのタンパク分解性フラグメントから得られる
アミノ酸配列のセグメントとして同定された（上記参
照）。Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉ ｃＤＮＡ
ライブラリーを、ＲＭＰ特異的混合物でスクリーニング
するのに記載した方法と同様にして３２Ｐ−キナーゼし
たリパーゼオリゴヌクレオチド混合物でスクリーニング
した。交雑およびフィルターの最初の洗浄は、４３℃で
行った。オートラジオグラフィーの後、フィルターを４
７℃で洗浄した。 【０１１１】強力な交雑を示したコロニーを単離して、
対応するプラスミドにおいて挿入されたｃＤＮＡを配列
してＲＭＬ特異的組換体を同定した。かかる２個の組換
体ｐ３５３．７およびｐ３５３．１６は、約１．２kbの
インサートを有した。これらの２種類の組換体から得ら
れるＤＮＡ配列は、シグナルペプチドの中央で開始し、
ポリＡテイルにまで伸びている。 【０１１２】この領域では、長い開放読取り枠を同定で
きた。２個の組換え体は、開始メチオニンコドンを有す
るシグナルペプチドの５′部分についての配列を含まな
いので、合成オリゴヌクレオチド（５８４） 5′CGAGAGGGGATGAGGGGTGG 3′ 584 を合成した。このオリゴヌクレオチド５８４は、ポリペ
プチド領域で見られるアミノ酸配列 Pro-Pro-Leu-Ile-Pro-Ser-Arg を暗号化する領域におけるＲＭＬ ｍＲＮＡに相補的で
ある。 【０１１３】オリゴ５８４をＴ４ポリヌクレオチドキナ
ーゼおよび３２Ｐ−γ−ＡＴＰを用いて高い比活性にま
でキナーゼ処理した後、記載された方法（Ｂｏｅｌ，
Ｅ．ら、ＰＮＡＳ，ＵＳＡ，第８０巻、２８６６〜２８
６９頁、１９８３年）によって、Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ
ｍｉｅｈｅｉ ｍＲＮＡでのＡＭＶリバース・トラン
スクリプターゼとのプライマー伸長反応に用いた。プラ
イマー伸長反応生成物を１０％ポリアクリルアミド／尿
素ゲル上で電気泳動して、２個のｃＤＮＡ生成物を分割
した。 【０１１４】これらの２個のｃＤＮＡ、すなわち一つは
１５０個のヌクレオチドの長さであり、もう一方は１６
０個のヌクレオチド長さのものを、両方とも電気溶出
し、ＤＮＡ配列のための化学的分解法によって配列し
た。両者のｃＤＮＡはプライマー領域から伸びており、
開始メチオニンコドンに対して位置９のヌクレオチド
５′までの読取り可能な配列を生じた。この配列は、リ
パーゼ組換えｃＤＮＡプラスミドから得られた配列であ
ることを示した。 【０１１５】２個のプライマー伸長ｃＤＮＡ生成物の長
さは、リパーゼｍＲＮＡの５′末端（ＣＡＰ−部位）が
図１５に示した第一のＡヌクレオチドに対して約５また
は１５ヌクレオチド５′に配列される。菌類からのｍＲ
ＮＡの５′末端の位置におけるマイクロヘテロゲナイェ
ティは、極めて一般的である。２個のクローン化したｐ
３５３．７およびｐ３５３．１６から得られる配列をプ
ライマー伸長分析からの配列と結合することにより、Ｒ
ＭＬ前駆体のアミノ酸配列を確立することができる。 【０１１６】ＤＮＡ配列およびＲＭＬ前駆体の対応する
アミノ酸配列を図１５に示す。図１５では、水平線はｃ
ＤＮＡ合成およびｃＤＮＡライブラリースクリーニング
に用いられた合成オリゴの位置を示している。矢印は、
元のＲＭＬの成熟において加工が起こる位置を示す。ヌ
クレオチドは、開始Ｍｅｔコドンでの最初の塩基から番
号を付け、アミノ酸は成熟した元のＲＭＬにおける最初
の残基から番号を付ける。 【０１１７】ＲＭＬを開始Ｍｅｔコドンから伸びている
開放読み込み枠によって暗号化し、次いで停止コドンに
達する前に３６３コドンを通る。この前駆体では、最初
のアミノ酸残基は、典型的な疎水性シグナルペプチドか
ら成る。ｖｏｎ Ｈｅｉｊｎｅ（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃ
ｈｅｍ．，第１１３巻、１７〜２１頁、１９８３年）の
生産則によれば、シグナルペプチドは、それぞれ、位置
−７１および−７０でのＡｌａ−およびＶａｌ残基の間
のシグナルペプチダーゼ開裂によって以下のプロペプチ
ドから開裂する。 【０１１８】Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉから
の培養液の上澄みから得られる精製ＲＭＬのＮ末端アミ
ノ酸配列分析は活性ＲＭＬ酵素のＮ末端として Ser-Ile
-Asp-Gly-Gly-Ile-Argを同定したので、ＲＭＬ前駆体の
プロペプチドは前駆体における次の７０個のアミノ酸残
基から成っていた。このＮ末端Ｓｅｒ残基から始めて、
成熟ＲＭＬは停止コドンに達するまでに２６９個の残基
を通って伸びる。 【０１１９】この成熟２９５００ダルトン酵素では、リ
パーゼ基質結合部位は、多数のリパーゼに保存されてい
る残基Ｓｅｒ（１４４）の付近に配置される。ＲＭＬ
ｍＲＮＡの３′末端では、１０４個のヌクレオチドがＴ
ＡＡ停止コドンとポリ（Ａ）テイルとの間の未翻訳領域
として配置された。このポリ（Ａ）テイルに対して２３
ヌクレオチド５′では、７ＡＴ塩基対から成る反復構造
が見出されたが、典型的な真核生物のポリアデニル化シ
グナルは同定されなかった。 【０１２０】本発明の好ましい具体例では、ＲＭＬ ｃ
ＤＮＡについて多くの変更を行った。これらの変更は、
開放読み込み枠に対して制限エンドヌクレアーゼ部位
５′および３′をクローニングおよび付加の際に、ｃＤ
ＮＡに加えたＧ：Ｃテイルの除去を含む。多くの好都合
な制限部位も、ｃＤＮＡのシグナルペプチドおよびプロ
ペプチド領域に導入された。ｐ３５３．１６をＦｎｕＤ
IIで消化して、アガロースゲル電気泳動によって８８０
bp ＤＮＡフラグメント（ＲＭＬ ｃＤＮＡの３′末
端）を単離した。このフラグメントを電気溶出し、フェ
ノールおよびクロロホルムで抽出し、エタノールで沈澱
した。 【０１２１】ＲＭＬ ｃＤＮＡの３′末端を次いでＳａ
ｍＩで消化し且つアルカリ性ホスファターゼで処理した
ｐＵＣ１９ベクターに連結した。連結反応を用いて、競
合するＥ． ｃｏｌｉ細胞を形質転換し、精製した形質
転換体から正確な組換体をミニプレププラスミドの制限
酵素消化によって同定した。一つのかかる好適な組換体
ｐ４３５．２をＢａｎIIおよびＨｉｎｄIII で消化し、
０．６９kbフラグメントをアガロースゲル電気泳動法で
単離した。このフラグメントを電気溶出し、フェノール
およびクロロホルムで抽出し、エタノールで沈澱した。
ＲＭＬ ｃＤＮＡのフラグメントは、３′未翻訳領域に
結合したｐＵＣ１９多重クローニング部位の主要部分を
有していた。 【０１２２】ＲＭＬ ｃＤＮＡの５′末端を、合成オリ
ゴヌクレオチドを用いて再設計して、好都合な制限部位
を導入した。合成フラグメント（ＲＭＬ５′）のＤＮＡ
配列を図１８に示す。導入した制限部位の位置および個
々に合成したオリゴヌクレオチドの結合部位を水平線乃
至垂直／水平線によって示す。精製するフラグメント
（ＲＭＬ５′）を２％アガロースゲル上で１５０bpフラ
グメントとして精製し、電気溶出し、フェノールおよび
ＣＨＣｌ3 で抽出し、更に連結反応を行う前にエタノー
ルで沈澱した。 【０１２３】ｐ３５３．７をＢａｎＩおよびＢａｎIIで
消化して、３８７bp ＲＭＬフラグメントを１０％ポリ
アクリルアミド電気泳動法によって精製した。このフラ
グメントを電気溶出し、フェノールおよびクロロホルム
で抽出した後、エタノール沈澱をして、次いで合成ＲＭ
Ｌ５′フラグメントおよびＢａｍＨＩ／ＨｉｎｄIIIで
消化したｐＵＣ１３ベクターにおいてｐ４３５．２から
の０．６９kb ＢａｎII／ＨｉｎｄIII フラグメントに
連結した。 【０１２４】連結反応を用いて、競合するＥ． ｃｏｌ
ｉを形質転換して、精製する形質転換体から正確な組換
体をミニプレププラスミド上で制限酵素消化することに
よって同定した。一つのかかる正確な組換体ｐＢ５４４
では、合成部分を配列して予想した構造を確認した。ｐ
Ｂ５４４の構成を図１６に示す。ｐＢ５４４からプレプ
ロＲＭＬ ｃＤＮＡをアガロースゲル電気泳動法によっ
て、１．２kb ＢａｍＨＩフラグメントとして単離し
た。 【０１２５】Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ
ＴＡＫＡ−アミラーゼ遺伝子からのプロモーターおよび
Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒグルコアミラーゼ
遺伝子からのターミネーターに基づく発現ベクターを、
以下のようにして調製した。ｐ７１９（実施例７参照）
刃ＳａｌＩおよびＢａｍＨＩで消化した。生成する１．
１kb ＴＡＫＡ−アミラーゼプロモーターフラグメント
をアガロースゲル電気泳動法によって精製した。ｐＩＣ
ＡＭＧ／Ｔｅｒｍ（実施例４参照）は、ＢａｍＨＩおよ
びＥｃｏＲＩで消化した。 【０１２６】生成する０．７５kb ＴＡＫＡ−アミラー
ゼターミネーターフラグメントをアガロースゲル電気泳
動法によって精製した。フェノールおよびクロロホルム
抽出の後、これらの２種類のフラグメントをエタノール
で沈澱し、ＳａｌＩ／ＥｃｏＲＩで消化したｐＵＣ１９
ベクターに連結した。連結反応を用いて、Ｅ． ｃｏｌ
ｉを形質転換して、精製する形質転換体から正確な組換
体をミニプレププラスミド上で制限酵素消化することに
よって同定した。一つのかかる正確な組換体ｐ７７５を
ＢａｍＨＩで消化して、アルカリ性ホスファターゼで処
理した。 【０１２７】ｐＢ５４４からの１．２kb ＢａｍＨＩ
ＲＭＬプレプロｃＤＮＡフラグメントをこのｐ７７５ベ
クターに連結して、Ｅ． ｃｏｌｉ中に形質転換した。
プロモーターとターミネーターとの間で正確な位置に挿
入されたＲＭＬプレプロｃＤＮＡを有する組換えｐ７８
７を、Ｅ． ｃｏｌｉ形質転換体から抽出したミニプレ
ププラスミド上で制限酵素による消化によって同定し
た。ｐ７８７プラスミドＤＮＡを大規模に成長させて、
プラスミド調製物をＣｓＣｌ／臭化エチジウム遠心分離
によって精製した。ｐ７８７の構成を図１７に示す。 【０１２８】実施例９ Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒ
ｙｚａｅの形質転換（一般的処理法） １００mlのＹＰＤ（sherman ら、Methods in Yeast Gen
etics, Cold Spring Harbor Laboratory, １９８１年）
にＡ．ｏｒｙｚａｅ，ＩＦＯ ４１７７またはそのａｒ
ｇＢ変異株の胞子を接種して、振盪しながら３７℃で約
２日間培養した。ミラクロスを通して濾過することによ
って菌糸を回収して、０．６ＭのＭｇＳＯ4 ２００mlで
洗浄した。 【０１２９】菌糸を１５mlの１．２ＭのＭｇＳＯ4 ，１
０mMのＮａＨ2 ＰＯ4 ，pH＝５．８に懸濁させた。懸濁
液を氷で冷却し、ＮｏｖｏｚｙｍR ２３４、バッチ１６
８７を１２０ml含む緩衝液１mlを加えた。５分後、１ml
の１２mg／ml ＢＳＡ（Ｓｉｇｍａ，Ｈ２５型）を加え
て、緩やかに撹拌しながら１．５〜２．５時間３７℃で
インキュベーションし、顕微鏡下で検討した試料中にお
いて多数の原形質体が観察されるようになるまで継続し
た。 【０１３０】懸濁液をミラクロスを通して濾過し、濾液
を無菌チューブに移して、５mlの０．６Ｍソルビトー
ル、１００mMトリス−ＨＣｌ，pH＝７．０を積層した。
１０００ｇで１５分間遠心分離を行い、原形質体をＭｇ
ＳＯ4 クッションの上部から収集した。２容量のＳＴＣ
（１．２Ｍのソルビトール、１０mMのトリス−ＨＣｌ，
pH＝７．５，１０mMのＣａＣｌ2 ）を原形質体懸濁液に
加えて、混合物を１０００ｇで５分間遠心分離した。原
形質体ペレットを３mlのＳＴＣに再懸濁して、再度成型
した。これを繰り返した。最後に、原形質体を０．２〜
１mlのＳＴＣに再懸濁した。 【０１３１】１００μｌの原形質体分散液を５〜２５μ
ｇの適当なＤＮＡを１０μｌのＳＴＣに懸濁したものと
混合した。ａｒｇＢ株からの原形質体をｐＳａｌ４３Ｄ
ＮＡ（Ａ． ｎｉｄｕｌａｎｓ ａｒｇＢ遺伝子を担持
するプラスミド）およびａｒｇＢ+ 株からの原形質体を
ｐ３ＳＲ２（Ａ． ｎｉｄｕｌａｎｓ ａｒｇＢ遺伝子
を担持するプラスミド）と混合した。 【０１３２】混合物を室温で２５分間放置した。０．２
mlの６０％ＰＥＧ４０００（ＢＤＨ２９５７６），１０
mMのＣａＣｌ2 および１０mMのトリス−ＨＣｌ，pH＝
７．５を加えて、注意深く混合し（２回）、最後に０．
８５mlの上記溶液を加えて、注意深く混合した。混合物
を室温で２５分間放置し、２５００ｇで１５分間遠心分
離し、ペレットを再度２mlの１．２Ｍソルビトールに懸
濁した。もう一回沈降させてから、原形質体を適当なプ
レートに塗布した。 【０１３３】ｐＳａｌ４３で形質転換したａｒｇＢ株か
らの原形質体を炭素および窒素源として、それぞれグル
コースおよび尿素を有し且つ浸透圧安定のために１．２
Ｍソルビトールを含む最少限のプレート（Ｃｏｖｅ，Ｂ
ｉｏｃｈｅｍ，Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ，第１１３
巻、１９６６年、５１〜５６頁）に拡げた。 【０１３４】ｐ３ＳＲ２で形質転換したａｒｇＢ+ 株か
らの原形質体を、１．０Ｍスクロース、pH＝７．０、窒
素源として１０mMのアセタミド、およびバックグラウン
ド成長を抑制する２０mMのＣｓＣｌを含む最少限のプレ
ート（Ｃｏｖｅ，Ｂｉｏｃｈｅｍ，Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａ
ｃｔａ，第１１３巻、１９６６年、５１〜５６頁）に塗
布した。３７℃で４〜７日間インキュベーションした
後、胞子を回収して、滅菌水に懸濁し、塗布して単一コ
ロニーとした。この処理法を繰り返して、２回の再分離
の後、単一コロニーの胞子を定義した形質転換体として
保存した。 【０１３５】実施例１０ 野生型Ａ．ｏｒｙｚａｅにお
けるＴＡＫＡ−アミラーゼの発現 ｐＴＡＫＡ １７を、実施例９に記載したようにＡ．
ｎｉｄｕｌａｎｓからのａｍｄＳ遺伝子を含むｐ３ＳＲ
２で共形質転換することによって、Ａ．ｏｒｙｚａｅ
ＩＦＯ ４１７７中に形質転換した。上記のように調製
した原形質体を等量のｐＴＡＫＡ １７およびｐ３ＳＲ
２であってそれぞれ約５μｇを用いた混合物とインキュ
ベーションした。単一窒素源としてアセタミドを用いる
ことができる９個の形質転換体を、２回再度単離した。 【０１３６】ＹＰＤ（Ｓｈｅｒｍａｎら、１９８１年）
上で３日間成長させた後、培養液上澄みをＳＤＳ−ＰＡ
ＧＥによって分析した。ゲルを、コマージー・ブリリア
ント・ブルーＲで染色した。最良の形質転換体は、形質
転換していないＩＦＯ ４１７７の１０〜２０倍のアミ
ラーゼを生成した。一つの形質転換体を更に研究するた
めに選択して、２リットルＫｉｅｌｅｒ醗酵装置中で４
％大豆ミール上で成長させ、成長中にグルコースを供給
した。醗酵中に、培養液を激しく撹拌した。 【０１３７】これらの条件下では、ＩＦＯ ４１７７は
約１ｇ／ｌを生じ、形質転換体は酵素活性として測定し
たところ約１２ｇ／ｌのアミラーゼであった。酵素活性
を澱粉を分解する能力として測定した（Ｃｅｒｅａｌ
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，第１６巻、１９３９年、７１２〜
７２３頁）。使用した澱粉はＭｅｒｃｋ Ａｍｙｌｕｍ
ｓｏｌｕｂｉｌｅｅｒｇ Ｂ．６であり、分析はpH
４．７および３７℃で行った。外部からβ−アミラーゼ
を加えなかった。 【０１３８】実施例１１ Ａ．ｏｒｙｚａｅにおけるＲ
ＭＰの発現 実施例７からのｐ７７７または実施例６からのｐ７７８
を、実施例９に記載の処理法によってｐ３ＳＲ２と共に
共形質転換することによってＩＦＯ−４１７７中へ形質
転換した。形質転換体を選択して、実施例９に記載のよ
うに再度単離した。 【０１３９】形質転換体をＹＰＤ中で３日間成長させ、
上澄みをＳＤＳ−ＰＡＧＥの後にＷｅｓｔｅｒｎ ｂｌ
ｏｔｔｉｎｇおよびＥＬＩＳＡを行って分析した。ｐ７
７７およびｐ７７８からの形質転換体の上澄液は、ＲＭ
Ｐ抗体と反応するタンパク５０〜１５０mg／ｌを含んで
いた。プロテイナーゼは、Ｒ． ｍｉｅｈｅｉで生成し
たプロテイナーゼと比較して過剰にグリコシル化した。
２つの形状のうち、一方はプロ型であり、他方は加工さ
れた成熟プロテイナーゼであると思われた。 【０１４０】ｐ７７８の２種類の形質転換体およびｐ７
７７の３種類の形質転換体を、上記ＴＡＫＡ−アミラー
ゼ形質転換体と同様に醗酵装置中で成長させた。ｐ７７
８の２種類の形質転換体は、Ｋｕｎｉｔｚ法（Ｋｕｎｉ
ｔｚ，Ｍ．，Ｊｏｕｒ．Ｇｅｎ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，第
１８巻、１９３５年、４５９〜４６６頁）によるミルク
凝固活性として測定したところ、約０．２ｇ／ｌおよび
０．４ｇ／ｌのＲＭＰを生じ、ｐ７７７の３種類の形質
転換体は約０．５ｇ／ｌ，２．４ｇ／ｌおよび３．３ｇ
／ｌのＲＭＰを生じ、組換えＲＭＰの特異的活性はＲｈ
ｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉの活性と同じであると
考えられた（これについては、後で確認した）。 【０１４１】ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびＳＤＡ−ＰＡＧＥ
の後にＷｅｓｔｅｒｎ−ｂｌｏｔｔｉｎｇおよびＥＬＩ
ＳＡを行ったところ、大規模で培養する場合には、１つ
の形状のＲＭＰのみが存在することが判った。ＲＭＰは
これらの成長条件下でも、過剰にグリコシル化した。ゲ
ル上にみられるタンパクの量は、酵素活性から予測され
た量とよく相関を有した。 【０１４２】ＲＭＰを親和性クロマトグラフィーおよび
寸法排除クロマトグラフィーによって培養液の上澄みか
ら精製した。精製した組換えＲＭＰのＮ−末端配列を、
Ｔｈｉｍら（ＴＥＢＳ Ｌｅｔｔ，１９８７年、印刷
中）によって報告されたのと同様に気相配列装置を用い
て、測定した。 【０１４３】組換えＲＭＰの２つの形状はＮ−末端にお
ける加工が不均一であることを示した。一つの形状はAl
a-Asp-Gly-Ser-Val-Asp-Thr-Pro-Gly-Tyr-のＮ−末端配
列を有し、もう一方はGly-Ser-Val-Asp-Thr-Pro-Gly-Ty
r-Tyr-Asp-のＮ−末端配列を有した。Ｎ−末端でのかか
る不均一加工も、Ｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉからの元の
ＲＭＰについて記載されている（Ｐａｑｕｅｔ，Ｄ．
ら、Ｎｅｔｈ．Ｍｉｌｋ Ｄａｉｒｙ Ｊ．，第３５
巻、１９８１年、３５８〜３６０頁）。組換えＲＭＰの
不均一加工は元のＲＭＰの不均一加工と良好な相関を有
し、Ａ．ｏｒｙｚａｅは本発明によれば正確な領域で組
換えＲＭＰを加工することができることが判った。 【０１４４】実施例１２ Ａ．ｏｒｙｚａｅにおけるプ
ロキモシンの産生に就いての発現単位の構成 この構成は、Ａ．ｏｒｙｚａｅアミラーゼプロモーター
の制御下でＡ．ｏｒｙｚａｅ ＴＡＫＡ−アミラーゼ遺
伝子からのシグナルペプチド配列がすぐ先行するプロキ
モシン遺伝子を含む。この構成は更に、Ａ．ｎｉｇｅｒ
グルコアミラーゼ遺伝子とＥ．ｃｏｌｉ複製体からのタ
ーミネーターを含む。ｐ２８５′ｐｒｏＣ（実施例１参
照）からの約４３０bp ＢａｍＨＩ／ＸｍａＩフラグメ
ントおよび以下の配列 【０１４５】 【化８】 【０１４６】を有する合成オリゴマーをＥｃｏＲＩ−Ｘ
ｍａＩ切断ｐＵＣ１９プラスミド中に挿入して、プラス
ミドｐＴｏＣ５０ａを生成した。ｐＴｏＣ５０ａをＥｃ
ｏＲＩ−ＳａｃIIで切断し、ｐＵＣ１９を含む大きなフ
ラグメントとプロキモシン遺伝子（プロキモシン′）の
５′部分を単離した。このフラグメントをｐＴＡＫＡ
１７からの０．６kb ＥｃｏＲＩ−ＢａｎＩフラグメン
トおよび以下の合成オリゴマーと連結した。 【０１４７】 【化９】 【０１４８】形質転換の後、Ａ．ｏｒｙｚａｅ ＴＡＫ
Ａ−アミラーゼ遺伝子（プレＴＡＫＡ）からのシグナル
配列に融合し且つ約５００bp上流のＴＡＫＡ−アミラー
ゼ配列が先行するプロキモシン遺伝子（プロキモシ
ン′）の５′部分を含むプラスミドｐＴｏＣ５１を単離
した。ｐＴｏＣ５１の構成を図１９に示す。 【０１４９】ｐＲ２６をＨｉｎｆＩで切断して、ＤＮＡ
ポリメラーゼＩおよび４個のｄＮＴＰの大きなフラグメ
ント（Ｋｌｅｎｏｗ）で処理し、ＸｍａＩで切断した。
プロキモシン遺伝子の３′末端を含む７５０bpフラグメ
ントを単離した。このフラグメントの３′末端でのＨｉ
ｎｄIII を挿入するために、ｐＵＣ９をＸｍａＩ／Ｈｉ
ｎｃIIで切断して、大きなフラグメントをプロキモシン
遺伝子の３′末端を含む７５０bpフラグメントに連結し
た。 【０１５０】ｐＴＡＫＡ １７からの５．６kb Ｅｃｏ
ＲＩ−ＣｌａＩフラグメントを単離して、同じプラスミ
ドからの２．６kb ＣｌａＩ−ＨｉｎｄIII フラグメン
トおよびＡ．ｎｉｇｅｒグルコアミラーゼ遺伝子ターミ
ネーターおよびポリＡ部位を含むｐＩＣＡＭＧ／Ｔｅｒ
ｍ（実施例４参照）からの０．７kb ＥｃｏＲＩ−Ｈｉ
ｎｄIII と連結した。生成するプラスミドはｐＴｏＣ５
２として図２０に示す。 【０１５１】ｐＴｏＣ５２をＨｉｎｄIII で切断し、Ｅ
ｃｏＲＩで部分的に切断し、６．４kbフラグメントを単
離した。これをｐＴｏＣ５１からの０．９kb ＥｃｏＲ
Ｉ−ＸｍａＩフラグメントおよびプロキモシン遺伝
子（′プロキモシン）の３′部分を含むｐＵＣ９′ＰＣ
からの０．７kb ＸｍａＩ−ＨｉｎｄIII フラグメント
と連結した。生成するプラスミドはｐＴｏＣ５６と呼ば
れ、図２０に示す。 【０１５２】実施例１３ Ａ．ｏｒｙｚａｅにおけるプ
ロキモシンの発現 ｐ３ＳＲ２（ａｍｄＳ遺伝子）またはｐＳａｌ４３（ａ
ｒｇＢ遺伝子）と共形質転換することによって、ｐＴｏ
Ｃ５６をＡ．ｏｒｙｚａｅ ＩＦＯ ４１７７またはａ
ｒｇＢ変異株に形質転換した。選択的培地で成長する形
質転換体を、実施例９と同様に２回再度単離した。 【０１５３】形質転換体をＹＰＤ中で３日間成長させ、
上澄液のプロキモシン含量をＳＤＳ−ＰＡＧＥ後Ｗｅｓ
ｔｅｒｎブロット上でＥＬＩＳＡによって分析した。形
質転換体は、上澄液中に１〜１０mg／ｌのプロキモシン
の寸法免疫反応性タンパクを産生した。他の免疫反応性
タンパクは上澄液中に検出されなかった。 【０１５４】実施例１４ Ａ．ｏｒｙｚａｅにおけるＲ
ＭＬの発現 実施例８からのｐ７８７を、実施例９に記載の方法によ
ってｐ３ＳＲ２で共形質転換することによってＩＦＯ−
４１７７中に形質転換した。形質転換体を実施例９と同
様に選択して、再度単離した。３日間成長させた形質転
換体のＹＰＤ培養液からの上澄液を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ
の後にＷｅｓｔｅｒｎブロットおよびＥＬＩＳＡを行っ
て分析した。最良の形質転換体は、タンパク１リットル
当り２mgの成熟ＲＭＬの寸法を産生した。上澄液におけ
るリパーゼ活性を、トリブチリンを開裂する能力として
計測した（ＮＯＶＯ法ＡＦ ９５．１／３−ＧＢ）。こ
の測定によって上澄液に２mg／ｌの活性リパーゼが存在
することが判った。
【図面の簡単な説明】 【図１】図１は、ＴＡＫＡ−アミラーゼプロモーターお
よび上流プロモーター領域のＤＮＡ−配列を示す図であ
る。 【図２】図２は、プラスミドｐＴＡＫＡ １７のエンド
ヌクレアーゼ制限マップを示す図である。 【図３】図３は、プラスミドｐ２８５′ｐｒｏＣの構成
を示す図である。 【図４】図４は、３文字省略によって与えられる推定ア
ミノ酸配列を有するプレプロＲｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍ
ｉｅｈｅｉアスパラギン酸プロテイナーゼのＤＮＡ配列
を示す図である。 【図５】図５は図４の続きの図である。 【図６】図６は、プラスミドｐＲＭＰの構成を示す図で
ある。 【図７】図７は、プラスミドｐＣＡＭＧ９１のエンドヌ
クレアーゼ制限マップを示す図である。 【図８】図８はプラスミドｐＩＣＡＭＧ／Ｔｅｒｍの構
成を示す図である。 【図９】図９は、プラスミドｐ６８６の構成を示す図で
ある。 【図１０】図１０は、プラスミドｐＲＭＰＡＭＧＴｅｒ
ｍの構成を示す図である。 【図１１】図１１は、プラスミドｐＢ４０８．３の構成
を示す図である。 【図１２】図１２は、プラスミドｐＢ７７８の構成を示
す図である。 【図１３】図１３は、プラスミドｐＢ７１９の構成を示
す図である。 【図１４】図１４は、プラスミドｐ７７７の構成を示す
図である。 【図１５】図１５は、３文字省略によって与えられる推
定アミノ酸配列を有するプレプロＲｈｉｚｏｍｕｃｏｒ
ｍｉｅｈｅｉリパーゼｃＤＮＡの配列を示す図であ
る。 【図１６】図１６は、プラスミドｐＢ５４４の構成を示
す図である。 【図１７】図１７は、プラスミドｐ７８７の構成を示す
図である。 【図１８】図１８は、合成フラグメントＲＭＬ５′のＤ
ＮＡ配列を示す図である。 【図１９】図１９は、プラスミドｐＴｏＣ５１の構成を
示す図である。 【図２０】図２０は、プラスミドｐＴｏＣ５６の構成を
示す図である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 トベー クリステンセン デンマーク国，2800 リュンクビュ, １．テーホー．ボーレバーデン 10 (72)発明者 ヘレ ファブリシウス ウォルデケ デンマーク国，3540 リュンゲ，ステン デュッセベイ 12

Claims (1)

  1. (57)【特許請求の範囲】 １．アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）におけ
    るタンパク生成物の発現に好適なプロモーター及び上流
    活性化配列であって、以下のヌクレオチド配列 AGATCTGCCC TTATAAATCT CCTAGTCTGA TCGTCGACGC ATTCCGAATA CGAGGCCTGA TTAATGATTA CATACGCCTC CGGGTAGTAG ACCGAGCAGC CGAGCCAGTT CAGCGCCTAA AACGCCTTAT ACAATTAAGC AGTTAAAGAA GTTAGAATCT ACGCTTAAAA AGCTACTTAA AAATCGATCT CGCAGTCCCG ATTCGCCTAT CAAAACCAGT TTAAATCAAC TGATTAAAGG TGCCGAACGA GCTATAAATG ATATAACAAT ATTAAAGCAT TAATTAGAGC AATATCAGGC CGCGCACGAA AGGCAACTTA AAAAGCGAAA GCGCTCTACT AAACAGATTA CTTTTGAAAA AGGCACATCA GTATTTAAAG CCCGAATCCT TATTAAGCGC CGAAATCAGG CAGATAAAGC CATACAGGCA GATAGACCTC TACCTATTAA ATCGGCTTCT AGGCGCGCTC CATCTAAATG TTCTGGCTGT GGTGTACAGG GGCATAAAAT TACGCACTAC CCGAATCGAT AGAACTACTC ATTTTTATAT AGAAGTCAGA ATTCATAGTG TTTTGATCAT TTTAAATTTT TATATGGCGG GTGGTGGGCA ACTCGCTTGC GCGGGCAACT CGCTTACCGA TTACGTTAGG GCTGATATTT ACGTGAAAAT CGTCAAGGGA TGCAAGACCA AAGTAGTAAA ACCCCGGAAG TCAACAGCAT CCAAGCCCAA GTCCTTCACG GAGAAACCCC AGCGTCCACA TCACGAGCGA AGGACCACCT CTAGGCATCG GACGCACCAT CCAATTAGAA GCAGCAAAGC GAAACAGCCC AAGAAAAAGG TCGGCCCGTC GGCCTTTTCT GCAACGCTGA TCACGGGCAG CGATCCAACC AACACCCTCC AGAGTGACTA GGGGCGGAAA TTTAAAGGGA TTAATTTCCA CTCAACCACA AATCACAGTC GTCCCCGGTA TTGTCCTGCA GAATGCAATT TAAACTCTTC TGCGAATCGC TTGGATTCCC CGCCCCTAGT CGTAGAGCTT AAAGTATGTC CCTTGTCGAT GCGATGTATC ACAACATATA AATACTAGCA AGGGATGCCA TGCTTGGAGG ATAGCAACCC ACAACATCAC ATCAAGCTCT CCCTTCTCTG AACAATAAAC CCCACAGAAG GCATTT を有するもの、あるいは上記ヌクレオチド配列に対して
    １個又は複数個のヌクレオチドの除去、付加及び／又は
    他のヌクレオチドによる置換により修飾されているヌク
    レオチド配列を有し上記プロモーター及び上流活性化配
    列の生物学的機能を維持しているプロモーター及び上流
    活性化配列。 ２．上流活性化配列に対して、プラスミドｐＴＡＫＡ
    １７における位置０〜１．０５の１．０５kbの配列決定
    されていない上流領域が先行する、請求項１に記載のプ
    ロモーターおよび上流活性化配列。 ３．以下のヌクレオチド配列 GTCGACGC ATTCCGAATA CGAGGCCTGA TTAATGATTA CATACGCCTC CGGGTAGTAG ACCGAGCAGC CGAGCCAGTT CAGCGCCTAA AACGCCTTAT ACAATTAAGC AGTTAAAGAA GTTAGAATCT ACGCTTAAAA AGCTACTTAA AAATCGATCT CGCAGTCCCG ATTCGCCTAT CAAAACCAGT TTAAATCAAC TGATTAAAGG TGCCGAACGA GCTATAAATG ATATAACAAT ATTAAAGCAT TAATTAGAGC AATATCAGGC CGCGCACGAA AGGCAACTTA AAAAGCGAAA GCGCTCTACT AAACAGATTA CTTTTGAAAA AGGCACATCA GTATTTAAAG CCCGAATCCT TATTAAGCGC CGAAATCAGG CAGATAAAGC CATACAGGCA GATAGACCTC TACCTATTAA ATCGGCTTCT AGGCGCGCTC CATCTAAATG TTCTGGCTGT GGTGTACAGG GGCATAAAAT TACGCACTAC CCGAATCGAT AGAACTACTC ATTTTTATAT AGAAGTCAGA ATTCATAGTG TTTTGATCAT TTTAAATTTT TATATGGCGG GTGGTGGGCA ACTCGCTTGC GCGGGCAACT CGCTTACCGA TTACGTTAGG GCTGATATTT ACGTGAAAAT CGTCAAGGGA TGCAAGACCA AAGTAGTAAA ACCCCGGAAG TCAACAGCAT CCAAGCCCAA GTCCTTCACG GAGAAACCCC AGCGTCCACA TCACGAGCGA AGGACCACCT CTAGGCATCG GACGCACCAT CCAATTAGAA GCAGCAAAGC GAAACAGCCC AAGAAAAAGG TCGGCCCGTC GGCCTTTTCT GCAACGCTGA TCACGGGCAG CGATCCAACC AACACCCTCC AGAGTGACTA GGGGCGGAAA TTTAAAGGGA TTAATTTCCA CTCAACCACA AATCACAGTC GTCCCCGGTA TTGTCCTGCA GAATGCAATT TAAACTCTTC TGCGAATCGC TTGGATTCCC CGCCCCTAGT CGTAGAGCTT AAAGTATGTC CCTTGTCGAT GCGATGTATC ACAACATATA AATACTAGCA AGGGATGCCA TGCTTGGAGG ATAGCAACCG ACAACATCAC ATCAAGCTCT CCCTTCTCTG AACAATAAAC CCCACAG、 を有する請求項１又は２に記載のプロモーターおよび上
    流活性化配列。
JP6007137A 1986-03-17 1994-01-26 アスペルギルス属酵母のプロモーター Expired - Lifetime JP3005618B2 (ja)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DK122686A DK122686D0 (da) 1986-03-17 1986-03-17 Fremstilling af proteiner
DK1226/86 1986-03-17

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP62060276A Division JPH0665316B2 (ja) 1986-03-17 1987-03-17 アスペルギルス オリザにおけるタンパク生成物の製造法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPH0751067A JPH0751067A (ja) 1995-02-28
JP3005618B2 true JP3005618B2 (ja) 2000-01-31

Family

ID=8102403

Family Applications (4)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP62060276A Expired - Lifetime JPH0665316B2 (ja) 1986-03-17 1987-03-17 アスペルギルス オリザにおけるタンパク生成物の製造法
JP6007137A Expired - Lifetime JP3005618B2 (ja) 1986-03-17 1994-01-26 アスペルギルス属酵母のプロモーター
JP35675997A Expired - Lifetime JP3903165B2 (ja) 1986-03-17 1997-12-25 アスペルギルス・オリザによるタンパク質の製造方法
JP2002265161A Pending JP2003153696A (ja) 1986-03-17 2002-09-11 アスペルギルス・オリザによるタンパク質の製造方法

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP62060276A Expired - Lifetime JPH0665316B2 (ja) 1986-03-17 1987-03-17 アスペルギルス オリザにおけるタンパク生成物の製造法

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP35675997A Expired - Lifetime JP3903165B2 (ja) 1986-03-17 1997-12-25 アスペルギルス・オリザによるタンパク質の製造方法
JP2002265161A Pending JP2003153696A (ja) 1986-03-17 2002-09-11 アスペルギルス・オリザによるタンパク質の製造方法

Country Status (9)

Country Link
EP (3) EP1502952A3 (ja)
JP (4) JPH0665316B2 (ja)
AT (2) ATE98993T1 (ja)
CA (1) CA1341593C (ja)
DE (2) DE3752379T2 (ja)
DK (1) DK122686D0 (ja)
ES (1) ES2061446T5 (ja)
FI (2) FI108147B (ja)
IE (2) IE63169B1 (ja)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2010536334A (ja) * 2007-08-13 2010-12-02 ティーエムオー リニューアブルズ リミティド エタノール生産用好熱性微生物

Families Citing this family (978)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5198345A (en) * 1985-04-15 1993-03-30 Gist-Brocades N.V. Vectors in use in filamentous fungi
US6004785A (en) * 1985-08-29 1999-12-21 Genencor International Inc. Heterologous polypeptides expressed in filamentous fungi, processes for making same, and vectors for making same
DE3650202T3 (de) * 1985-08-29 2004-06-03 Genencor International, Inc., South San Francisco Expression von heterologen Polypeptiden in filamentösen Pilzen, Verfahren zu deren Herstellung und Vektoren zu deren Herstellung.
US5364770A (en) 1985-08-29 1994-11-15 Genencor International Inc. Heterologous polypeptides expressed in aspergillus
US5536661A (en) * 1987-03-10 1996-07-16 Novo Nordisk A/S Process for the production of protein products in aspergillus
US5766912A (en) 1986-03-17 1998-06-16 Novo Nordisk A/S Humicola lipase produced in aspergillus
US5447862A (en) * 1987-02-04 1995-09-05 Ciba-Geigy Corporation Pectin lyase genes of aspergillus niger
DE3854249T2 (de) * 1987-08-28 1996-02-29 Novo Nordisk As Rekombinante Humicola-Lipase und Verfahren zur Herstellung von rekombinanten Humicola-Lipasen.
US5292448A (en) * 1988-05-10 1994-03-08 Lever Brothers Company, Division Of Conopco, Inc. Enzymatic detergent composition
CA1341226C (en) * 1988-08-16 2001-05-01 Wim Van Hartingsveldt Gene replacement as a tool for the construction of aspergillus strains
JP2757945B2 (ja) * 1989-09-08 1998-05-25 キッコーマン株式会社 アルカリプロテアーゼプロモーター、同ターミネーター及びこれらからなる遺伝子発現用ユニット、並びにアルカリプロテアーゼのゲノム遺伝子
WO1991013971A1 (en) * 1990-03-13 1991-09-19 Hawaii Biotechnology Group, Inc. Neurospora expression system
DE4009676A1 (de) * 1990-03-26 1991-10-02 Rhein Biotech Proz & Prod Gmbh Dna-sequenz, umfassend ein fuer xylosereduktase und/oder xylitoldehydrogenase codierendes strukturgen
JPH04121194A (ja) * 1990-09-11 1992-04-22 Tax Adm Agency アスペルギルスオリゼの新規プロモーター
DE69231137T2 (de) * 1991-03-22 2001-02-15 Novo Nordisk As Verfahren zur Herstellung von Peroxidasen in einem Aspergillusstamm
ATE123524T1 (de) * 1991-03-22 1995-06-15 Novo Nordisk As Herstellungsverfahren für chymosin.
ES2121854T3 (es) 1991-05-01 1998-12-16 Novo Nordisk As Enzimas estabilizadas.
WO1993000426A1 (en) * 1991-06-25 1993-01-07 Novo Nordisk A/S Mammalian pancreatic lipase and variant thereof
ZA932568B (en) * 1992-04-24 1993-11-12 Baylor College Midecine A Non Production of recombinant human lactoferrin
DK39693D0 (da) † 1993-04-02 1993-04-02 Novo Nordisk As Enzym
DK47493D0 (da) * 1993-04-27 1993-04-27 Novo Nordisk As Fremgangsmaade til fremstilling af ost
CN1189558C (zh) 1993-10-08 2005-02-16 诺沃奇梅兹有限公司 淀粉酶变体
EP2199386A1 (en) 1993-10-08 2010-06-23 Novozymes A/S Amylase variants
BE1009488A4 (fr) * 1994-06-17 1997-04-01 Solvay Systeme d'expression, vecteur d'integration et cellule transformee par ce vecteur d'integration.
BE1008267A3 (fr) * 1994-01-28 1996-03-05 Solvay Systeme d'expression, vecteur d'integration et cellule transformee par ce vecteur d'integration.
BE1008737A3 (fr) * 1994-01-28 1996-07-02 Solvay Systeme d'expression, vecteur d'integration et cellule transformee par ce vecteur d'integration.
EP0749473B1 (en) 1994-03-08 2005-10-12 Novozymes A/S Novel alkaline cellulases
JPH09510617A (ja) 1994-03-29 1997-10-28 ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ アルカリ性バチルスアミラーゼ
DE69532283T2 (de) * 1994-06-17 2004-09-23 Novozymes A/S EIN PILZ, IN DEM DAS areA-GEN VERÄNDERT IST, UND EIN areA-GEN AUS ASPERGILLUS ORYZAE
GB9413419D0 (en) * 1994-07-04 1994-08-24 Danisco Amylase enzyme
US6051431A (en) * 1994-07-22 2000-04-18 Dsm N.V. Selection marker gene free recombinant strains: a method for obtaining them and the use of these strains
US6300114B1 (en) * 1994-07-29 2001-10-09 Rohm Enzyme Finland Oy Sequences of xylanase and xylanase expression vectors
US5935836A (en) * 1994-07-29 1999-08-10 Rohm Enzyme Finland Oy Actinomadura xylanase sequences and methods of use
US7816129B2 (en) 1994-07-29 2010-10-19 Ab Enzymes Gmbh Production and secretion of proteins of bacterial origin in filamentous fungi
AU3741995A (en) * 1994-10-26 1996-05-23 Novo Nordisk A/S Enzymatic detergent composition
DE69535877D1 (de) * 1994-12-21 2008-12-11 Hansens Lab Mikrobiell erzeugtes rennin mit verbesserter milchgerinnungsaktivität und verfahren zu dessen herstellung
AR000862A1 (es) 1995-02-03 1997-08-06 Novozymes As Variantes de una ó-amilasa madre, un metodo para producir la misma, una estructura de adn y un vector de expresion, una celula transformada por dichaestructura de adn y vector, un aditivo para detergente, composicion detergente, una composicion para lavado de ropa y una composicion para la eliminacion del
ATE315083T1 (de) 1995-03-17 2006-02-15 Novozymes As Neue endoglukanase
AU5002096A (en) * 1995-03-30 1996-10-16 Novo Nordisk A/S Alkaline lipolytic enzyme
US5919746A (en) * 1995-03-30 1999-07-06 Novo Nordisk A/S Alkaline lipolytic enzyme
US6936289B2 (en) 1995-06-07 2005-08-30 Danisco A/S Method of improving the properties of a flour dough, a flour dough improving composition and improved food products
AU699331C (en) 1995-06-07 2005-08-25 Dupont Nutrition Biosciences Aps A method of improving the properties of a flour dough, a flour dough improving composition and improved food products
DE69628311T3 (de) 1995-09-08 2012-05-16 Novozymes A/S Verhütung des verschmierens beim stone-washing
AU1092897A (en) * 1995-12-15 1997-07-14 Novo Nordisk A/S A funguns wherein the area, pepc and/or pepe genes have been inactivated
EP0877801B1 (en) 1996-01-19 2005-04-27 Novozymes Biotech, Inc. Morphological mutants of filamentous fungi
AU2692897A (en) 1996-04-30 1997-11-19 Novo Nordisk A/S Alpha-amylase mutants
CN1110554C (zh) * 1996-06-10 2003-06-04 诺沃奇梅兹生物技术有限公司 米曲霉5－氨基乙酰丙酸合成酶及编码此酶的核酸
AU3336597A (en) 1996-07-05 1998-02-02 Novo Nordisk A/S A transcription factor
AU4772697A (en) 1996-11-04 1998-05-29 Novo Nordisk A/S Subtilase variants and compositions
WO1998020116A1 (en) 1996-11-04 1998-05-14 Novo Nordisk A/S Subtilase variants and compositions
WO1998026057A1 (en) 1996-12-09 1998-06-18 Novo Nordisk A/S Reduction of phosphorus containing components in edible oils comprising a high amount of non-hydratable phosphorus by use of a phospholipase, a phospholipase from a filamentous fungus having phospholipase a and/or b activity
US5821102A (en) * 1997-01-21 1998-10-13 Novo Nordisk Biotech Inc. Nucleic acids encoding polyeptides having absidia lipase activity
US5891669A (en) 1997-03-17 1999-04-06 Novo Nordisk A/S, Novoalle, Methods for producing polypeptides in respiratory-deficient cells
ATE414775T1 (de) 1997-05-16 2008-12-15 Novozymes Inc Polypeptide mit prolyldipeptidylaminopeptidase- aktivität und dafür kodierende nukleinsäuren
CN1163597C (zh) 1997-10-30 2004-08-25 诺维信公司 α-淀粉酶突变体
ES2241189T3 (es) 1997-12-22 2005-10-16 Novozymes A/S Carbohidrato oxidasa y su uso para la coccion.
BR9814404A (pt) * 1997-12-22 2000-10-10 Dsm Nv " clonagem de expressão em fungos filamentosos "
DK2305799T3 (en) 1998-02-27 2016-07-25 Novozymes As Maltogenic alpha-amylase variants
EP2287318B1 (en) 1998-06-10 2014-01-22 Novozymes A/S Mannanases
AU752215B2 (en) 1998-07-21 2002-09-12 Dupont Nutrition Biosciences Aps Foodstuff
ATE332968T1 (de) 1998-10-26 2006-08-15 Novozymes As Erstellung und durchmusterung von interessierenden dna-banken in zellen von filamentösen pilzen
TR200101497T2 (tr) 1998-11-27 2001-11-21 Novozymes A/S Lipolitik enzim varyantları
US7220542B2 (en) 2000-07-17 2007-05-22 Van Den Brink Johannes Maarten Expression cloning in filamentous fungi
EP2278016B1 (en) 1999-03-22 2012-09-26 Novozymes Inc. Promoter sequences derived from Fusarium Venenatum and uses thereof
BRPI0009362B8 (pt) 1999-03-30 2019-08-20 Novozymes As variante de uma alfa-amilase precursora, e, uso de uma variante de alfa-amilase
ES2532606T3 (es) 1999-03-31 2015-03-30 Novozymes A/S Polipéptidos con actividad de alfa-amilasa alcalina y ácidos nucleicos que los codifican
AU3419200A (en) 1999-03-31 2000-10-23 Novozymes A/S Polypeptides having alkaline alpha-amylase activity and nucleic acids encoding same
JP4526638B2 (ja) 1999-06-01 2010-08-18 月桂冠株式会社 タンパク質の高発現システム
CN101550410A (zh) 1999-07-09 2009-10-07 诺维信公司 葡糖淀粉酶变体
EP2206786A1 (en) 1999-08-31 2010-07-14 Novozymes A/S Novel proteases and variants thereof
EP1980614A3 (en) 1999-11-10 2009-04-08 Novozymes A/S Fungamyl-like Alpha-Amylase Variants
HUP0203751A3 (en) 2000-01-10 2005-01-28 Maxygen Holdings Ltd Redwood C G-csf conjugates
US6350599B1 (en) 2000-01-12 2002-02-26 Novozymes A/S Pullulanase variants and methods for preparing such variants with predetermined properties
DE60138364D1 (de) 2000-02-11 2009-05-28 Bayer Healthcare Llc Gerinnungsfaktor vii oder viia konjugate
EP2221365A1 (en) 2000-03-08 2010-08-25 Novozymes A/S Variants with altered properties
DE60142226D1 (de) 2000-03-14 2010-07-08 Novozymes As Pilz transkriptionsaktivator zur verwendung in verfahren zur herstellung von polypeptiden
WO2002000852A2 (en) 2000-06-26 2002-01-03 Novozymes A/S Lipolytic enzyme
JP4855632B2 (ja) 2000-08-01 2012-01-18 ノボザイムス アクティーゼルスカブ 変更された性質を有するα−アミラーゼ突然変異体
EP1317528A2 (en) 2000-09-05 2003-06-11 Novozymes A/S Lipoxygenase
US20040091994A1 (en) 2000-10-13 2004-05-13 Carsten Andersen Alpha-amylase variant with altered properties
YU48703A (sh) 2001-02-27 2006-05-25 Maxygen Aps Novi interferonu beta-slični molekuli
IL157842A0 (en) 2001-03-22 2004-03-28 Novo Nordisk Healthcare Ag Coagulation factor vii derivatives
US7264954B2 (en) 2001-04-20 2007-09-04 Novozymes A/S Lipoxygenase
EP1950305A1 (en) 2001-05-09 2008-07-30 Monsanto Technology, LLC Tyr a genes and uses thereof
DE60234523D1 (de) 2001-05-15 2010-01-07 Novozymes As Alpha-amylasevariante mit veränderten eigenschaften
CA2444960C (en) 2001-05-18 2011-08-09 Danisco A/S Method of improving dough and bread quality
MXPA03011194A (es) 2001-06-06 2004-02-26 Novozymes As Endo-beta-1,4-glucanasa.
EP2277997B1 (en) 2001-06-26 2013-09-18 Novozymes A/S Polypeptides having cellobiohydrolase I activity and polynucleotides encoding same
US7063962B2 (en) 2001-07-20 2006-06-20 Novozymes A/S DNA sequences for regulating transcription
KR20040039444A (ko) 2001-09-27 2004-05-10 노보 노르디스크 헬스 케어 악티엔게젤샤프트 인간 응고 인자 ⅶ 폴리펩티드
DE60209817T2 (de) 2001-12-19 2006-10-12 Dsm Ip Assets B.V. Verfahren zur inaktivierung von amylase in gegenwart von protease
WO2003054186A1 (en) * 2001-12-21 2003-07-03 Dsm Ip Assets B.V. New rennets
JP4495904B2 (ja) * 2002-03-01 2010-07-07 天野エンザイム株式会社 改変プロモーター
AU2003231028A1 (en) 2002-04-22 2003-11-03 Novozymes Biotech, Inc. Methods for increasing homologous recombination of a nucleic acid sequence
US20030199038A1 (en) 2002-04-22 2003-10-23 Novozymes Biotech, Inc. Method for preparing polypeptide variants
EP2216405A1 (en) 2002-05-03 2010-08-11 Monsanto Technology LLC Speed specific USP promoters for expressing genes in plants
WO2003100048A1 (en) 2002-05-29 2003-12-04 Dsm Ip Assets B.V. Method for the purification of microbial protease
CN1694953B (zh) 2002-08-30 2010-05-12 诺维信股份有限公司 制备哺乳动物胰蛋白酶的方法
WO2004031378A2 (en) 2002-10-01 2004-04-15 Novozymes A/S Family gh 61 polypeptides
JP2004141029A (ja) 2002-10-23 2004-05-20 Amano Enzyme Inc イソマルトース生成酵素の遺伝子が欠損した、真菌類に属する微生物
JP4490284B2 (ja) 2002-11-18 2010-06-23 ノボザイムス，インコーポレイティド 菌類細胞において遺伝子を発現するためのプロモーター変異体
BRPI0317124B1 (pt) 2002-12-11 2016-05-17 Novozymes As composição detergente, e, processos para lavar um tecido e uma superfície dura
DK1576152T3 (da) 2002-12-17 2007-04-10 Novozymes As Varmestabile alfa-amylaser
ES2331067T5 (es) 2002-12-20 2013-12-26 Novozymes A/S Polipéptidos que tienen actividad celobiohidrolasa II y polinucleótidos para su codificación
MXPA05007653A (es) 2003-01-17 2005-09-30 Danisco Metodo.
DK2287317T3 (en) 2003-01-17 2015-01-05 Dupont Nutrition Biosci Aps A process for preparing a protein ester or an ester of a protein subunit
US20050196766A1 (en) 2003-12-24 2005-09-08 Soe Jorn B. Proteins
US7955814B2 (en) 2003-01-17 2011-06-07 Danisco A/S Method
EP1923455A3 (en) 2003-02-18 2009-01-21 Novozymes A/S Detergent compositions
US7001369B2 (en) 2003-03-27 2006-02-21 Scimed Life Systems, Inc. Medical device
US7303877B2 (en) 2003-03-31 2007-12-04 Novozymes, Inc. Methods for producing biological substances in enzyme-deficient mutants of Aspergillus
NZ542924A (en) 2003-04-28 2008-01-31 Novozymes As Method of producing a phospholipase which comprises processing an expressed fungal peptide so as to cleave off a peptide from the C- terminal end and/or a peptide from the N-terminal end to obtain a core peptide
ES2347658T3 (es) 2003-05-02 2010-11-03 Novozymes Inc. Variantes de beta-glucosidasas.
AU2004247802B2 (en) 2003-06-19 2010-08-05 Novozymes A/S Proteases
US20060236414A1 (en) 2003-06-19 2006-10-19 Novozymes A/S Proteases and methods for producing them
ES2517245T3 (es) 2003-06-25 2014-11-03 Novozymes A/S Enzimas para el tratamiento de almidón
MXPA06000212A (es) 2003-06-25 2006-03-21 Novozymes As Enzimas para procesar almidon.
CA2538349C (en) 2003-06-25 2014-08-12 Novozymes A/S Polypeptides having alpha-amylase activity and polynucleotides encoding same
DK2377931T3 (da) 2003-08-25 2013-07-08 Novozymes Inc Varianter af glycosidhydrolase
CN1863908B (zh) 2003-09-09 2010-08-04 诺和诺德医疗保健公司 凝固因子ⅶ多肽
EP1678296B1 (en) 2003-10-23 2011-07-13 Novozymes A/S Protease with improved stability in detergents
EP1687419B1 (en) 2003-10-28 2010-02-03 Novozymes North America, Inc. Hybrid enzymes
ES2437198T3 (es) 2003-10-28 2014-01-09 Novozymes Inc. Polipéptidos con actividad de beta-glucosidasa y polinucleótidos aislados que codifican los polipéptidos
ES2332592T3 (es) 2003-10-30 2010-02-09 Novozymes A/S Modulos de union a carbohidratos.
CN1906303B (zh) 2003-11-19 2013-06-05 金克克国际有限公司 丝氨酸蛋白酶、编码丝氨酸酶的核酸以及包含它们的载体和宿主细胞
US7985569B2 (en) 2003-11-19 2011-07-26 Danisco Us Inc. Cellulomonas 69B4 serine protease variants
JP5697294B2 (ja) 2003-12-24 2015-04-08 デュポン ニュートリション バイオサイエンシーズ エーピーエス 糖脂質アシル基転移酵素変異体及びその製造方法
GB0716126D0 (en) 2007-08-17 2007-09-26 Danisco Process
US7906307B2 (en) 2003-12-24 2011-03-15 Danisco A/S Variant lipid acyltransferases and methods of making
US7718408B2 (en) 2003-12-24 2010-05-18 Danisco A/S Method
JP5059412B2 (ja) 2004-01-06 2012-10-24 ノボザイムス アクティーゼルスカブ アリシクロバシラスｓｐ．のポリペプチド
DK2314605T3 (da) 2004-01-30 2014-06-16 Novozymes Inc Polypeptider med cellulolytisk forøgende aktivitet og polynukleotider, der koder for disse
DK2322630T3 (en) 2004-02-12 2017-02-13 Novozymes Inc Polypeptides with xylanase activity and polynucleotides encoding them
AU2005215852B2 (en) 2004-02-25 2010-04-22 Novozymes A/S Fungal cell wall degrading enzyme
GB0405637D0 (en) 2004-03-12 2004-04-21 Danisco Protein
RU2381813C2 (ru) 2004-03-22 2010-02-20 Зольвай Фармасьютиклз Гмбх Пероральные фармацевтические композиции на основе продуктов, содержащих липазы, прежде всего панкреатин, и пав
WO2005100582A2 (en) 2004-03-25 2005-10-27 Novozymes Inc. Methods for degrading or converting plant cell wall polysaccharides
EP1776461A2 (en) 2004-04-16 2007-04-25 DSMIP Assets B.V. Fungal promoters for expressing a gene in a fungal cell
US7148404B2 (en) 2004-05-04 2006-12-12 Novozymes A/S Antimicrobial polypeptides
WO2005118795A2 (en) 2004-05-27 2005-12-15 Genencor International, Inc. Aspergillus kawachi acid-stable alpha amylase and applications in granular starch hydrolysis
US7413887B2 (en) 2004-05-27 2008-08-19 Genecor International, Inc. Trichoderma reesei glucoamylase and homologs thereof
WO2005121351A2 (en) 2004-05-27 2005-12-22 Novozymes, Inc. Methods for transforming and expression screening of filamentous fungal cells with a dna library
WO2005121333A1 (en) 2004-06-14 2005-12-22 Novozymes A/S Signal peptide for producing a polypeptide
CN101006174B (zh) 2004-06-21 2010-05-26 诺维信公司 以相同取向稳定保持的至少两个orf的多拷贝
WO2005123911A2 (en) 2004-06-21 2005-12-29 Novozymes A/S Proteases
EP1769070A4 (en) 2004-06-29 2007-12-12 Novozymes Inc POLYPEPTIDES WITH ALPHA-GLUCOSIDASE ACTIVITY AND POLYNUCLEOTIDES THAT CODE
JP4955546B2 (ja) 2004-07-05 2012-06-20 ノボザイムス アクティーゼルスカブ 変更された性質を有するα−アミラーゼ変異体
AU2005263954B2 (en) 2004-07-16 2011-04-07 Dupont Nutrition Biosciences Aps Enzymatic oil-degumming method
US20080248558A1 (en) 2004-09-10 2008-10-09 Novozymes A/S Methods For Preventing, Removing, Reducing, or Disrupting Biofilm
EP2298872A3 (en) 2004-09-30 2011-08-10 Novozymes A/S Polypeptides having lipase activity and polynucleotides encoding same
AR050895A1 (es) 2004-10-04 2006-11-29 Novozymes As Polipeptidos que tienen actividad de fitasa y polinucleotidos que los codifican
PL1797178T3 (pl) 2004-10-04 2013-02-28 Dupont Nutrition Biosci Aps Fitaza pochodząca od Citrobacter freundii i jej homologi
GB0422052D0 (en) 2004-10-04 2004-11-03 Dansico As Enzymes
BRPI0517539A (pt) 2004-10-04 2008-10-14 Novozymes As polipeptìdeo isolado, polinucleotìdeo isolado, construto de ácido nucleico, vetor de expressão recombinante, célula hospedeira recombinante, métodos para produzir o polipeptìdeo, e para melhorar o valor nutricional de uma ração animal, célula de planta, parte de planta ou planta transgênica, animal não-humano, transgênico, ou produtos, ou elementos do mesmo, uso de pelo menos um polipeptìdeo, aditivo de ração animal, e, composição de ração animal
GB0423139D0 (en) 2004-10-18 2004-11-17 Danisco Enzymes
GB0424940D0 (en) 2004-11-11 2004-12-15 Danisco Transcription factors
WO2006053565A2 (en) 2004-11-19 2006-05-26 Novozymes A/S Polypeptides having antimicrobial activity and polynucleotides encoding same
ES2552635T3 (es) 2004-12-22 2015-12-01 Novozymes A/S Polipéptidos con actividad de glucoamilasa y codificación de polinucleótidos
ES2363094T3 (es) 2005-01-10 2011-07-20 Novozymes A/S Proceso para la producción de ésteres alquílicos de ácidos grasos a partir de triglicéridos y alcoholes que utilizan una combinación de dos enzimas lipolíticas.
DK2410048T3 (en) 2005-01-24 2016-11-28 Dsm Ip Assets Bv A process for the preparation of a compound of interest in a filamentous fungal cell
EP1700907A1 (en) 2005-03-11 2006-09-13 Unilever N.V. Liquid bleaching composition
EP1700904A1 (en) 2005-03-11 2006-09-13 Unilever N.V. Liquid detergent composition
MX2007011479A (es) 2005-03-22 2007-11-20 Novozymes As Polipeptidos y acidos nucleicos que codifican a los mismos.
AR053066A1 (es) 2005-04-26 2007-04-18 Novozymes As Arabinofuranosidasas
US7824884B2 (en) 2005-04-27 2010-11-02 Novozymes, Inc. Polypeptides having endoglucanase activity and polynucleotides encoding same
US8329652B2 (en) 2005-05-10 2012-12-11 Neoloch Aps Neuritogenic peptides
BRPI0614914A2 (pt) 2005-07-29 2011-04-19 Solvay Pharm Gmbh processos para a fabricação de pó de pancreatina esterilizada
US9198871B2 (en) 2005-08-15 2015-12-01 Abbott Products Gmbh Delayed release pancreatin compositions
US11266607B2 (en) 2005-08-15 2022-03-08 AbbVie Pharmaceuticals GmbH Process for the manufacture and use of pancreatin micropellet cores
EP2360246A1 (en) 2005-08-16 2011-08-24 Novozymes A/S Polypeptides of strain bacillus SP. P203
ES2415872T3 (es) 2005-08-19 2013-07-29 The Procter & Gamble Company Composición detergente para lavado de ropa, sólida que comprende un tensioactivo detersivo aniónico y una tecnología de potenciación del calcio
CA2620125C (en) 2005-08-26 2013-08-20 Novozymes A/S Polypeptides having antimicrobial activity and polynucleotides encoding same
MX2008003376A (es) 2005-09-12 2008-03-27 Novozymes North America Inc Interesterificacion de aceite enzimatico.
WO2007031559A2 (en) 2005-09-14 2007-03-22 Novo Nordisk Health Care Ag Human coagulation factor vii polypeptides
US7855279B2 (en) 2005-09-27 2010-12-21 Amunix Operating, Inc. Unstructured recombinant polymers and uses thereof
NZ589570A (en) 2005-09-30 2012-06-29 Novozymes Inc Methods for enhancing the degradation or conversion of cellulosic material
US7858360B2 (en) 2005-10-17 2010-12-28 Novozymes A/S Use of fungal mutants for expression of antibodies
WO2007053619A2 (en) 2005-11-01 2007-05-10 Bio-Cat, Inc. A composition with a fungal (yeast) lipase and method for treating lipid malabsorption in cystic fibrous as well as people suffering from pancreatic lipase insufficiency
US20080280328A1 (en) 2005-11-18 2008-11-13 Novozymes A/S Glucoamylase Variants
EA014783B1 (ru) * 2005-11-29 2011-02-28 ДСМ АйПи АССЕТС Б.В. Связывающий днк-сайт активатора транскрипции, пригодный для экспрессии генов
EP2412726B1 (en) 2006-02-14 2016-06-15 University Of Tasmania Through The Menzies Research Institute Metallothionein-derived peptide fragments
EP1999257B1 (en) 2006-03-20 2011-06-22 Novozymes, Inc. Polypeptides having endoglucanase activity and polynucleotides encoding same
WO2007115201A2 (en) 2006-03-30 2007-10-11 Novozymes, Inc. Polypeptides having endoglucanase activity and polynucleotides encoding same
EP2004789B1 (en) 2006-03-31 2012-08-29 Novozymes A/S A stabilized liquid enzyme composition
WO2007112739A1 (en) 2006-04-04 2007-10-11 Novozymes A/S Phytase variants
US10072256B2 (en) 2006-05-22 2018-09-11 Abbott Products Gmbh Process for separating and determining the viral load in a pancreatin sample
CA2657975A1 (en) 2006-06-29 2008-01-03 Dsm Ip Assets B.V. A method for achieving improved polypeptide expression
CN101512001A (zh) 2006-07-14 2009-08-19 诺维信股份有限公司 提高真菌细胞中基因表达的方法
CN101511997B (zh) 2006-07-14 2013-09-04 诺维信股份有限公司 用于产生具有生物学活性的分泌型多肽的方法
BRPI0714870A2 (pt) 2006-07-21 2013-05-28 Novozymes Inc mÉtodo para produzir um polipeptÍdeo secretado tendo atividade biolàgica, proteÍna de fusço isolada, polinucleotÍdeo isolado, construÇço de proteÍna de fusço, vetor de expressço, cÉlula hospedeira féngica, mÉtodos para degradar ou conventer um material celulàsico e para produzir uma substÂncia
WO2009048488A1 (en) 2007-10-09 2009-04-16 Danisco Us, Inc., Genencor Division Glucoamylase variants with altered properties
BRPI0719181A2 (pt) 2006-10-10 2014-08-05 Danisco Us Inc Genencor Div Variantes de glucoamilase com propriedades alteradas
DK2089524T3 (da) 2006-11-30 2013-01-21 Novozymes As DNase ekspression i rekombinante værtsceller
MX2009005733A (es) 2006-12-18 2009-06-08 Danisco Us Inc Genencor Div Nuevas lacasas, composiciones y metodos de uso.
CA2673527A1 (en) 2006-12-21 2008-07-24 Danisco Us Inc. Compositions and uses for an alpha-amylase polypeptide of bacillus species 195
JP5124593B2 (ja) 2007-01-25 2013-01-23 デュポン ニュートリション バイオサイエンシーズ エーピーエス 形質転換バチルス・リケニフォルミス細胞からの脂質アシルトランスフェラーゼの製造
US8143046B2 (en) 2007-02-07 2012-03-27 Danisco Us Inc., Genencor Division Variant Buttiauxella sp. phytases having altered properties
US20080220498A1 (en) 2007-03-06 2008-09-11 Cervin Marguerite A Variant Buttiauxella sp. phytases having altered properties
CN101784666A (zh) * 2007-02-15 2010-07-21 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 用于生产感兴趣的化合物的重组宿主细胞
US20100011511A1 (en) 2007-02-20 2010-01-21 Novozymes A/S Enzyme Foam Treatment For Laundry
WO2008110513A1 (en) 2007-03-09 2008-09-18 Novozymes A/S Thermostable asparaginases
EP2126089A2 (en) 2007-03-09 2009-12-02 Danisco US, INC., Genencor Division Alkaliphilic bacillus species a-amylase variants, compositions comprising a-amylase variants, and methods of use
ES2376059T3 (es) 2007-03-14 2012-03-08 Danisco Us Inc. La a-amilasa de trichoderma reesei es una enzima maltogénica.
CA2681392C (en) 2007-03-26 2017-08-01 Novozymes A/S Hafnia phytase
DE102007016139A1 (de) 2007-03-30 2008-10-02 Jenabios Gmbh Verfahren zur regioselektiven Oxygenierung von N-Heterozyklen
CN101679993A (zh) 2007-05-09 2010-03-24 诺维信公司 适于选择产生目标多肽的文库克隆的表达克隆方法
US8093016B2 (en) 2007-05-21 2012-01-10 Danisco Us Inc. Use of an aspartic protease (NS24) signal sequence for heterologous protein expression
SG148934A1 (en) 2007-06-11 2009-01-29 Novozymes As A process for combined biopolishing and bleach clean-up
US9808595B2 (en) 2007-08-07 2017-11-07 Boston Scientific Scimed, Inc Microfabricated catheter with improved bonding structure
JP2010535484A (ja) 2007-08-08 2010-11-25 ノボザイムス バイオファーマ デーコー アクティーゼルスカブ トランスフェリン変異体と複合体
US8609386B2 (en) 2007-09-18 2013-12-17 Novozymes A/S Polypeptides having tyrosinase activity and polynucleotides encoding same
US8592194B2 (en) 2007-10-09 2013-11-26 Danisco Us Inc. Glucoamylase variants with altered properties
US7618801B2 (en) 2007-10-30 2009-11-17 Danison US Inc. Streptomyces protease
US7541026B2 (en) 2007-11-05 2009-06-02 Danisco Us Inc., Genencor Division Alpha-amylase variants with altered properties
NZ584434A (en) 2007-11-05 2011-12-22 Danisco Us Inc VARIANTS OF BACILLUS sp. TS-23 ALPHA-AMYLASE WITH ALTERED PROPERTIES
JP2009118783A (ja) * 2007-11-15 2009-06-04 Gekkeikan Sake Co Ltd 糸状菌タンパク質分泌生産の改善
CN101868537B (zh) 2007-11-20 2013-11-06 丹尼斯科美国公司 具有改变性质的葡糖淀粉酶变体
BRPI0820552A2 (pt) 2007-11-27 2014-10-14 Novozymes As Polipetídeo isolado, polinucleotídeo isolado, construção de ácido nucléico, vetor de expressão recombinante, célula hospedeira recombinante, métodos para produzir o polipeptídeo, para produzir uma proteína, e para degradar ou converter um material de biomassa, planta, parte vegetal ou célula vegetal transgêncica, método, composição, e. uso do polipeptídio.
WO2009073709A1 (en) 2007-12-06 2009-06-11 Novozymes A/S Polypeptides having acetylxylan esterase activity and polynucleotides encoding same
BRPI0823506A8 (pt) 2007-12-13 2018-05-15 Danisco Us Inc Genencor Div composições e métodos para a produção de isoprene
KR20100105849A (ko) 2007-12-19 2010-09-30 노보자임스 에이/에스 셀룰로오스 가수분해 향상 활성을 가지는 폴리펩티드 및 그것을 암호화하는 폴리뉴클레오티드
EP2546338A1 (en) 2008-01-02 2013-01-16 Danisco US Inc. A process of obtaining ethanol without glucoamylase using pseudomonas saccharophila g4-amylase and variants thereof
US20110034367A1 (en) 2008-02-01 2011-02-10 Novozymes A/S Liquid Enzyme Composition
CN101970634B (zh) 2008-02-04 2014-01-22 丹尼斯科美国公司 具有改变性质的TS23α-淀粉酶变体
ES2807603T3 (es) 2008-03-26 2021-02-23 Novozymes As Composiciones enzimáticas líquidas estabilizadas
EP2283124B1 (en) 2008-04-18 2016-05-25 Danisco US Inc. Buttiauxella sp. phytase variants
ZA201007564B (en) 2008-04-23 2012-01-25 Goodyear Tire & Rubber Isoprene synthase variants for improved microbial production of isoprene
EP2123772A1 (en) 2008-04-29 2009-11-25 DSM IP Assets B.V. Beta-lactam antibiotic producing strains
WO2009134670A2 (en) 2008-04-30 2009-11-05 Danisco Us Inc., Genencor Division New chimeric alpha-amylase variants
DK2281034T3 (en) 2008-04-30 2016-01-25 Dupont Nutrition Biosci Aps A method using alcohol dehydrogenase Pseudoglucanobacter saccharoketogenes
WO2009140623A2 (en) 2008-05-15 2009-11-19 Selexys Pharmaceuticals Corporation Anti-psgl-1 antibodies and methods of identification and use
MX2010013122A (es) 2008-06-06 2011-01-21 Danisco Inc Composicion de enzima de sacarificacion y metodo de sacarificacion de la misma.
US8709777B2 (en) 2008-06-06 2014-04-29 Novozymes A/S Variants of a family 44 xyloglucanase
MX360255B (es) 2008-06-06 2018-10-26 Danisco Us Inc Composiciones y metodos que comprenden proteasas microbianas variantes.
EP2623591B1 (en) 2008-06-06 2016-08-24 Danisco US Inc. Geobacillus stearothermophilus alpha-amylase (AMYS) variants with improved properties
MX2010013108A (es) 2008-06-06 2010-12-21 Danisco Inc Produccion de glucosa a partir de almidon usando alfa-amilasas de bacillus subtilis.
CA2726274C (en) 2008-06-06 2018-11-20 Danisco Us Inc. Variant alpha-amylases from bacillus subtilis and methods of use, thereof
JP2011526790A (ja) 2008-07-02 2011-10-20 ダニスコ・ユーエス・インク 分離された条件下および／または安全操業条件下における、ｃ５炭化水素を含まないイソプレン組成物及びその製造方法
BRPI0915728A2 (pt) 2008-07-07 2015-10-27 Basf Se composição enzimática, processo para preparar a composição, uso da composição enzimática, e, composição detergente.
CA2737195A1 (en) 2008-09-15 2010-03-18 The Goodyear Tire & Rubber Company Conversion of prenyl derivatives to isoprene
WO2010031062A1 (en) 2008-09-15 2010-03-18 Danisco Us Inc. Increased isoprene production using the archaeal lower mevalonate pathway
US8470581B2 (en) 2008-09-15 2013-06-25 Danisco Us Inc. Reduction of carbon dioxide emission during isoprene production by fermentation
EP2344629B1 (en) 2008-09-15 2018-01-24 Danisco US Inc. Systems using cell culture for production of isoprene
MX2011003178A (es) 2008-09-25 2011-04-21 Danisco Inc Mezclas de alfa-amilasa y metodos para usar esas mezclas.
MX2011003132A (es) 2008-09-26 2011-04-21 Novozymes As Variantes de fitasa de hafnia.
EP2362902B1 (en) 2008-11-11 2012-10-24 Danisco US, Inc., Genencor Division Compositions and methods comprising a subtilisin variant
EP2647692A3 (en) 2008-11-11 2014-01-22 The Procter and Gamble Company Compositions and methods comprising serine protease variants
KR20110095260A (ko) 2008-11-11 2011-08-24 다니스코 유에스 인크. 하나 이상의 조합가능 돌연변이를 포함하는 바실러스 서브틸리신
AR074106A1 (es) 2008-11-11 2010-12-22 Danisco Us Inc Composiciones y metodos que comprenden una variante de subtilisina
ES2667812T3 (es) 2008-11-20 2018-05-14 Novozymes Inc. Polipéptidos que tienen actividad potenciadora amilolítica y polinucleótidos que codifican los mismos
EP2373788A1 (en) 2008-12-04 2011-10-12 Novozymes Inc. Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
WO2010068800A1 (en) 2008-12-12 2010-06-17 Novozymes, Inc. Polypeptides having aspartic endopeptidase activity and polynucleotides encoding same
WO2010068650A1 (en) 2008-12-12 2010-06-17 Novozymes, Inc. Polypeptides having lipase activity and polynucleotides encoding same
US20110269206A1 (en) 2008-12-15 2011-11-03 Novozymes, Inc Polypeptides Having Catalase Activity And Polynucleotides Encoding Same
WO2010074955A1 (en) 2008-12-16 2010-07-01 Novozymes, Inc. Polypeptides having carboxypeptidase activity and polynucleotides encoding same
US20110271407A1 (en) 2008-12-16 2011-11-03 Novozymes, Inc. Polypeptides Having Alpha-Mannosidase Activity And Polynucleotides Encoding Same
US8338121B2 (en) 2008-12-19 2012-12-25 Novozymes, Inc. Methods for determining cellulolytic enhancing activity of a polypeptide
WO2010080532A1 (en) 2008-12-19 2010-07-15 Novozymes, Inc. Methods for increasing hydrolysis of cellulosic material in the presence of cellobiose dehydrogenase
CN102325889A (zh) 2008-12-19 2012-01-18 诺维信股份有限公司 增加纤维素材料水解的方法
WO2010080408A2 (en) 2008-12-19 2010-07-15 Novozymes, Inc. Methods for increasing enzymatic hydrolysis of cellulosic material in the presence of a peroxidase
US8349325B2 (en) 2008-12-23 2013-01-08 Abbott Laboratories Soluble FMS-like tyrosine kinase-1 (sFLT-1) antibody and related composition, kit, methods of using, and materials and method for making
UA103216C2 (uk) 2008-12-23 2013-09-25 Даніско А/С Поліпептид з ксиланазною активністю
WO2010078457A2 (en) 2008-12-30 2010-07-08 Danisco Us Inc. Methods of producing isoprene and a co-product
CN102361973B (zh) 2009-01-21 2015-09-02 诺维信公司 具有酯酶活性的多肽和编码该多肽的核酸
CN102388134A (zh) 2009-01-28 2012-03-21 诺维信股份有限公司 具有β-葡糖苷酶活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸
WO2010088463A2 (en) 2009-01-30 2010-08-05 Novozymes, Inc. Polypeptides having expansin activity and polynucleotides encoding same
WO2010088447A1 (en) 2009-01-30 2010-08-05 Novozymes A/S Polypeptides having alpha-amylase activity and polynucleotides encoding same
US20110046060A1 (en) 2009-08-24 2011-02-24 Amunix Operating, Inc., Coagulation factor IX compositions and methods of making and using same
CN116925238A (zh) 2009-02-03 2023-10-24 阿穆尼克斯制药公司 延伸重组多肽和包含该延伸重组多肽的组合物
CN102369213A (zh) 2009-02-06 2012-03-07 诺维信生物制药丹麦公司 纯化方法
WO2010091221A1 (en) 2009-02-06 2010-08-12 Novozymes A/S Polypeptides having alpha-amylase activity and polynucleotides encoding same
DK2396347T3 (en) 2009-02-11 2017-07-24 Albumedix As ALBUMIN VARIANTS AND CONJUGATES
JP2010183885A (ja) * 2009-02-13 2010-08-26 Kobe Univ タンパク質の製造方法およびそれに用いる発現ベクター
WO2010099431A2 (en) 2009-02-27 2010-09-02 Monsanto Technology Llc Hydroponic apparatus and methods of use
CN102341495A (zh) 2009-03-10 2012-02-01 丹尼斯科美国公司 巨大芽孢杆菌菌株DSM90相关的α-淀粉酶及其使用方法
WO2010104390A2 (en) 2009-03-11 2010-09-16 Dsm Ip Assets B.V. Preparation of alpha-ketopimelic acid
US8563268B2 (en) 2009-03-17 2013-10-22 Novozymes A/S Polypeptide having tyrosinase activity
WO2010107560A2 (en) 2009-03-18 2010-09-23 Danisco Us Inc. Fungal cutinase from magnaporthe grisea
WO2010111143A2 (en) 2009-03-23 2010-09-30 Danisco Us Inc. Cal a-related acyltransferases and methods of use, thereof
CA2752007A1 (en) 2009-03-24 2010-09-30 Novozymes A/S Polypeptides having acetyl xylan esterase activity and polynucleotides encoding same
US20120045822A1 (en) 2009-04-01 2012-02-23 Danisco Us Inc. Cleaning System Comprising An Alpha-Amylase And A Protease
US8877479B2 (en) 2009-04-08 2014-11-04 Danisco Us Inc. Halomonas strain WDG195-related alpha-amylases, and methods of use, thereof
EP2421986A1 (en) 2009-04-22 2012-02-29 DSM IP Assets B.V. Process for the production of a recombinant polypeptide of interest
US8518686B2 (en) 2009-04-23 2013-08-27 Danisco Us Inc. Three-dimensional structure of isoprene synthase and its use thereof for generating variants
EP2248893A1 (en) 2009-05-06 2010-11-10 Novozymes A/S DFPase Enzymes from Octopus Vulgaris
EP3473711B1 (en) 2009-05-19 2020-11-04 DuPont Nutrition Biosciences ApS Amylase polypeptides
US20120058222A1 (en) 2009-05-19 2012-03-08 Danisco A/S Use
DK2435561T3 (en) 2009-05-29 2018-11-05 Novozymes Inc PROCEDURES FOR IMPROVING THE DEGRADATION OR CONVERSION OF CELLULOSE SUBSTANCES
EP2438163B1 (en) 2009-06-02 2015-01-21 Novozymes Inc. Polypeptides having cellobiohydrolase activity and polynucleotides encoding same
TWI434921B (zh) 2009-06-17 2014-04-21 Danisco Us Inc 從生物異戊二烯組合物製造燃料成分之方法及系統
TW201412988A (zh) 2009-06-17 2014-04-01 Danisco Us Inc 使用ｄｘｐ及ｍｖａ途徑之改良之異戊二烯製造
NZ597118A (en) 2009-06-25 2013-10-25 Dupont Nutrition Biosci Aps A method for increased expression of a variant lipolytic enzyme
CA2767169A1 (en) 2009-07-07 2011-01-13 Novozymes, Inc. Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
KR101870378B1 (ko) 2009-07-17 2018-06-25 릭스하스피탈렛 보체 활성화의 억제제로서의 ｍａｓｐ 이소형
US8734782B2 (en) 2009-07-22 2014-05-27 Dsm Ip Assets B.V. Host cell for the production of a compound of interest
MX2012001060A (es) 2009-07-24 2012-03-14 Novozymes As Carbohidrato-oxidasas.
WO2011014458A1 (en) 2009-07-28 2011-02-03 Novozymes, Inc. Polypeptides having phytase activity and polynucleotides encoding same
WO2011017093A1 (en) 2009-08-07 2011-02-10 Danisco Us Inc. Alpha-amylase blend for starch processing and method of use thereof
US9273320B2 (en) 2009-08-07 2016-03-01 Novozymes A/S Method of producing a sweet protein
MX2012002032A (es) 2009-08-19 2012-03-26 Danisco Variantes de glucoamilasa.
WO2011022465A1 (en) 2009-08-19 2011-02-24 Danisco Us Inc. Combinatorial variants of glucoamylase with improved specific activity and/or thermostability
CN102482658B (zh) 2009-08-21 2015-07-15 诺维信公司 具有异淀粉酶活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸
EP3269804B1 (en) 2009-09-17 2020-11-11 Novozymes, Inc. Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
CN102712916B (zh) 2009-09-18 2015-11-25 诺维信股份有限公司 具有β-葡糖苷酶活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸
MX2012003387A (es) 2009-09-25 2012-04-10 Novozymes As Uso de variantes de proteasa.
AU2010299799B2 (en) 2009-09-25 2015-10-29 Novozymes A/S Subtilase variants
CA2775347A1 (en) 2009-09-29 2011-04-07 Novozymes A/S Polypeptides having xylanase activity and polynucleotides encoding same
BR112012006982B1 (pt) 2009-09-29 2021-12-21 Novozymes, Inc. Célula hospedeira microbiana transgênica, métodos para produzir um polipeptídeo, para produzir um mutante de uma célula precursora, para inibir a expressão de um polipeptídeo, para produzir uma proteína, para degradar ou converter um material celulósico, para produzir um produto de fermentação, para fermentar um material celulósico, construções de ácido nucleico, vetor de expressão, polipeptídeo isolado tendo atividade intensificadora celulolítica, polinucleotídeo isolado que codifica o mesmo, e, composição detergente
US8586829B2 (en) 2009-09-30 2013-11-19 Novozymes A/S Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
ES2551141T3 (es) 2009-09-30 2015-11-16 Novozymes Inc. Polipéptidos derivados de Thermoascus crustaceus con actividad de aumento celulolítico y polinucleótidos que codifican los mismos
MX356389B (es) 2009-10-23 2018-05-28 Danisco Us Inc Metodos para reducir sacaridos azules.
US8541651B2 (en) 2009-10-23 2013-09-24 Novozymes, Inc. Cellobiohydrolase variants and polynucleotides encoding same
CA2776336A1 (en) 2009-10-29 2011-05-19 Novozymes, Inc. Polypeptides having cellobiohydrolase activity and polynucleotides encoding same
CN104694517B (zh) 2009-11-06 2019-06-28 诺维信股份有限公司 具有木聚糖酶活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸
EP2496693B1 (en) 2009-11-06 2017-10-25 Novozymes, Inc. Polypeptides having cellobiohydrolase activity and polynucleotides encoding same
EP3222716B1 (en) 2009-11-06 2020-08-19 Novozymes, Inc. Composition for saccharification of cellulosic material
GB0920089D0 (en) 2009-11-17 2009-12-30 Danisco Method
CN102869771B (zh) 2009-11-30 2017-05-24 诺维信公司 具有葡糖淀粉酶活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸
EP2507370B1 (en) 2009-11-30 2015-02-11 Novozymes A/S Polypeptides having glucoamylase activity and polynucleotides encoding same
US8557541B2 (en) 2009-12-01 2013-10-15 Novozymes A/S Polypeptides having glucoamylase activity and polynucleotides encoding same
US9096843B2 (en) 2009-12-01 2015-08-04 Novo Nordisk A/S Peptidyl α-hydroxyglycine α-amidating lyases
EP2507369A1 (en) 2009-12-03 2012-10-10 Novozymes A/S Variants of a polypeptide with lipolytic activity and improved stability
DK2509427T3 (da) 2009-12-09 2017-11-13 Novozymes As Fremgangsmåder til fremstilling af GH8-xylanasevarianter
DK3190183T3 (da) 2009-12-09 2019-10-14 Danisco Us Inc Sammensætninger og fremgangsmåder omfattende proteasevarianter
CN102753680B (zh) 2009-12-11 2015-05-13 诺维信公司 蛋白酶变体
US8741609B2 (en) 2009-12-21 2014-06-03 Danisco Us Inc. Detergent compositions containing Geobacillus stearothermophilus lipase and methods of use thereof
CA2783972A1 (en) 2009-12-21 2011-07-14 Christian Adams Detergent compositions containing thermobifida fusca lipase and methods of use thereof
US20120258900A1 (en) 2009-12-21 2012-10-11 Danisco Us Inc. Detergent compositions containing bacillus subtilis lipase and methods of use thereof
EP2501792A2 (en) 2009-12-29 2012-09-26 Novozymes A/S Gh61 polypeptides having detergency enhancing effect
EP2521771A1 (en) 2010-01-04 2012-11-14 Novozymes A/S Stabilization of alpha-amylases towards calcium depletion and acidic ph
US8617856B2 (en) 2010-01-07 2013-12-31 Wisconsin Alumni Research Foundation Fatty acid-producing hosts
EP2357220A1 (en) 2010-02-10 2011-08-17 The Procter & Gamble Company Cleaning composition comprising amylase variants with high stability in the presence of a chelating agent
US9896673B2 (en) 2010-02-10 2018-02-20 Novozymes A/S Compositions of high stability alpha amylase variants
EP2534244A1 (en) 2010-02-11 2012-12-19 DSM IP Assets B.V. Host cell capable of producing enzymes useful for degradation of lignocellulosic material
EP2536832B1 (en) 2010-02-18 2015-02-25 Danisco US Inc. Amylase from nesterenkonia and methods of use thereof
JP5833576B2 (ja) 2010-02-25 2015-12-16 ノボザイムス アクティーゼルスカブ リゾチームの変異体及びそれをコードするポリヌクレオチド
WO2011104284A1 (en) 2010-02-25 2011-09-01 Novozymes A/S Polypeptides having antimicrobial activity
EP2542673A2 (en) 2010-03-03 2013-01-09 Novozymes, Inc. Xylanase variants and polynucleotides encoding same
JP6148013B2 (ja) 2010-03-05 2017-06-14 リグショスピタレト 補体活性化のキメラ抑制分子
US20110229921A1 (en) 2010-03-18 2011-09-22 Abbott Laboratories METHODS OF ASSAYING URINARY NEUTROPHIL GELATINASE-ASSOCIATED LIPOCALIN (uNGAL) IN THE PROGNOSIS OF CADAVERIC KIDNEY TRANSPLANT FUNCTION IN A PATIENT, INCLUDING A PATIENT DIAGNOSED WITH DELAYED GRAFT FUNCTION (DGF), A METHOD OF ASSAYING uNGAL IN THE ASSESSMENT OF RISK OF DGF IN A PATIENT DIAGNOSED WITH EARLY GRAFT FUNCTION (EGF), AND RELATED KITS
WO2011114251A1 (en) 2010-03-18 2011-09-22 Danisco A/S Foodstuff
CA2794113A1 (en) 2010-03-26 2011-09-29 Novozymes A/S Thermostable phytase variants
MX2012011153A (es) 2010-03-31 2012-11-29 Novozymes Inc Variantes de celobiohidrolasa y polinucleotidos que codifican las mismas.
WO2011127802A1 (en) 2010-04-14 2011-10-20 Novozymes A/S Polypeptides having glucoamylase activity and polynucleotides encoding same
PL2558573T3 (pl) 2010-04-15 2017-08-31 Danisco Us Inc. Kompozycje i sposoby obejmujące warianty proteazy
ES2625751T3 (es) 2010-05-06 2017-07-20 The Procter & Gamble Company Productos de consumo con variantes de proteasa
WO2011150157A2 (en) 2010-05-28 2011-12-01 Danisco Us Inc. Detergent compositions containing streptomyces griseus lipase and methods of use thereof
WO2011153317A1 (en) 2010-06-04 2011-12-08 Novozymes, Inc. C4 dicarboxylic acid production in filamentous fungi
US8835604B2 (en) 2010-06-12 2014-09-16 Adenium Biotech Aos Antimicrobial peptide variants and polynucleotides encoding same
US8933282B2 (en) 2010-06-17 2015-01-13 Danisco Us Inc. Fuel compositions comprising isoprene derivatives
CN103080126B (zh) 2010-06-21 2016-05-11 诺维信股份有限公司 具有c4-二羧酸转运蛋白活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸
BR112012028031A2 (pt) 2010-06-21 2019-09-24 Novozymes Inc célula hospedeira, e , métodos para produzir um ácido dicarboxílico c4 e para aumentar a produção de ácido dicarboxílico c4.
CN103068988A (zh) 2010-06-25 2013-04-24 诺维信公司 具有启动子活性的多核苷酸
WO2011163558A1 (en) 2010-06-25 2011-12-29 Abbott Laboratories Materials and methods for assay of anti-hepatitis c virus (hcv) antibodies
DK2585591T3 (en) 2010-06-25 2015-02-23 Novozymes As Polynucleotides with leader sequence function
CN103068989B (zh) 2010-06-25 2015-09-09 诺维信公司 具有启动子活性的多核苷酸
US8581042B2 (en) 2010-06-30 2013-11-12 Novozymes A/S Polypeptides having beta-glucosidase activity and polynucleotides encoding same
US8945898B2 (en) 2010-07-01 2015-02-03 Dsm Ip Assets B.V. Recombinant host cell with deficiency in non-ribosomal peptide synthase production
GB201011513D0 (en) 2010-07-08 2010-08-25 Danisco Method
US8865448B2 (en) 2010-07-30 2014-10-21 Cleanvantage Llc Aspergillus containing beta-glucosidase, beta-glucosidases and nucleic acids encoding the same
CN103261429B (zh) 2010-08-12 2021-04-09 诺维信股份有限公司 包含具有纤维素分解增强活性的多肽和液剂的组合物及其用途
BR112013003466A2 (pt) 2010-08-17 2016-11-22 Carlsberg Breweries As método de melhorar a estabilidade coloidal da cerveja, e, uso de snapalysin
WO2012022777A1 (en) 2010-08-19 2012-02-23 Novozymes A/S Induced sporulation screening method
WO2012030858A2 (en) 2010-08-30 2012-03-08 Novozymes A/S Polypeptides having hemicellulolytic activity and polynucleotides encoding same
US9187742B2 (en) 2010-08-30 2015-11-17 Novozymes, Inc. Polypeptides having cellobiohydrolase activity and polynucleotides encoding same
US20130111677A1 (en) 2010-08-30 2013-05-09 Novozymes A/S Concentrated Soak Wash
WO2012030799A1 (en) 2010-08-30 2012-03-08 Novozymes A/S Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
US8624082B2 (en) 2010-08-30 2014-01-07 Novozymes A/S Polypeptides having xylanase activity and polynucleotides encoding same
EP2611901B1 (en) 2010-08-30 2016-05-11 Novozymes A/S Polypeptides having beta-glucosidase activity, beta-xylosidase activity, or beta-glucosidase and beta-xylosidase activity and polynucleotides encoding same
CN103492545A (zh) 2010-08-30 2014-01-01 诺维信公司 两次浸泡洗涤
WO2012030844A1 (en) 2010-08-30 2012-03-08 Novozymes A/S Polypeptides having endoglucanase activity and polynucleotides encoding same
WO2012031910A2 (en) 2010-09-10 2012-03-15 Dsm Ip Assets B.V. Method for preparing alpha-ketopimelic acid by c1-elongation
EP2616483A1 (en) 2010-09-16 2013-07-24 Novozymes A/S Lysozymes
JP5759132B2 (ja) * 2010-09-21 2015-08-05 月桂冠株式会社 糸状菌ペプチダーゼの生産方法
WO2012044836A1 (en) 2010-09-30 2012-04-05 Novozymes, Inc. Variants of polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
DK2622068T3 (en) 2010-09-30 2016-10-17 Novozymes Inc Variants of polypeptides having cellulolytic enhancing ACTIVITY AND POLYNUCLEOTIDES ENCODING THEM
JP2012075369A (ja) * 2010-09-30 2012-04-19 Toyota Motor Corp シス作用エレメント及びその利用
MX343295B (es) 2010-10-01 2016-11-01 Novozymes As Polipeptidos que tienen actividad de endopeptidasa y polinucleotidos que codifican para los mismos.
CN105886485B (zh) 2010-10-01 2019-09-24 诺维信股份有限公司 β-葡糖苷酶变体及其编码多核苷酸
WO2012058293A1 (en) 2010-10-26 2012-05-03 Novozymes North America, Inc. Methods of saccharifying sugarcane trash
JP2014502148A (ja) 2010-10-27 2014-01-30 ダニスコ・ユーエス・インク イソプレン生産の向上を目的としたイソプレン合成酵素変異体
US8728804B2 (en) 2010-10-29 2014-05-20 Novozymes A/S Polypeptides having succinyl-CoA: acetoacetate transferase activity and polynucleotides encoding same
WO2012058603A1 (en) 2010-10-29 2012-05-03 Novozymes A/S Recombinant n-propanol and isopropanol production
EP2635689B1 (en) 2010-11-02 2015-04-15 Novozymes, Inc. Methods of pretreating cellulosic material with a gh61 polypeptide
US9212354B2 (en) 2010-11-04 2015-12-15 Novozymes Inc. Polypeptides having cellobiohydrolase activitiy and polynucleotides encoding same
CN103298932B (zh) 2010-11-08 2016-08-10 诺维信公司 具有葡糖淀粉酶活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸
EP2637515B1 (en) 2010-11-08 2017-09-06 Novozymes A/S Polypeptides having glucoamylase activity and polynucleotides encoding same
US20120115244A1 (en) 2010-11-09 2012-05-10 Abbott Laboratories Materials and methods for immunoassay of pterins
MX356647B (es) 2010-11-12 2018-06-07 Novozymes As Polipeptidos que tienen actividad de fosfolipasa c y polinucleotidos que codifican los mismos.
WO2012062220A1 (en) 2010-11-12 2012-05-18 Novozymes A/S Polypeptides having endoglucanase activity and polynucleotides encoding same
EP2640833B1 (en) 2010-11-18 2016-08-24 Novozymes, Inc. Chimeric polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
CN103339259B (zh) 2010-11-30 2016-01-13 诺维信股份有限公司 用于在真菌细胞中表达基因的启动子
EP2649188A1 (en) 2010-12-06 2013-10-16 Novozymes North America, Inc. Methods of hydrolyzing oligomers in hemicellulosic liquor
US8924138B2 (en) 2010-12-07 2014-12-30 Vnomics Corp. System and method for measuring and reducing vehicle fuel waste
US9284588B2 (en) 2010-12-16 2016-03-15 Novozymes, Inc. Promoters for expressing genes in a fungal cell
SI2654781T1 (sl) 2010-12-21 2018-10-30 Selexys Pharmaceuticals Corporation Protitelesa proti P-selektinu in postopki za njihovo uporabo in identifikacijo
WO2012088450A1 (en) 2010-12-22 2012-06-28 Danisco Us Inc. Biological production of pentose sugars using recombinant cells
SG191235A1 (en) 2010-12-22 2013-07-31 Danisco Us Inc Compositions and methods for improved isoprene production using two types of ispg enzymes
WO2012098246A1 (en) 2011-01-20 2012-07-26 Novozymes A/S Expression of plant peroxidases in filamentous fungi
US9080161B2 (en) 2011-01-26 2015-07-14 Novozymes, Inc. Polypeptides having cellobiohydrolase activity and polynucleotides encoding same
WO2012103350A1 (en) 2011-01-26 2012-08-02 Novozymes A/S Polypeptides having cellobiohydrolase activity and polynucleotides encoding same
MX337942B (es) 2011-01-26 2016-03-29 Novozymes As Polipeptidos que tienen actividad de endoglucanasa y polinucleotidos que codifican los mismos.
CN110628803A (zh) 2011-01-26 2019-12-31 诺维信公司 具有纤维二糖水解酶活性的多肽及编码该多肽的多核苷酸
US9157075B2 (en) 2011-01-26 2015-10-13 Novozymes, Inc. Polypeptides having cellobiohydrolase activity and polynucleotides encoding same
US9434972B2 (en) 2011-01-31 2016-09-06 Novozymes North America, Inc. Processes for enzymatic refining of pretreated cellulosic material for saccharification
MX2013007997A (es) 2011-02-23 2013-08-21 Novozymes Inc Polipeptidos que tienen actividad de incremento celulolitico y polinucleotidos que codifican para los mismos.
WO2012114231A2 (en) 2011-02-23 2012-08-30 Dupont Nutrition Biosciences Aps Method
US8722387B2 (en) 2011-02-28 2014-05-13 Novozymes, Inc. Microorganisms for C4-dicarboxylic acid production
DK3339442T3 (da) 2011-03-09 2022-06-20 Novozymes Inc Fremgangsmåder til forøgelse af den cellulolyseforbedrende aktivitet af et polypeptid
WO2012122477A1 (en) 2011-03-10 2012-09-13 Novozymes A/S Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
EP2683732B1 (en) 2011-03-11 2016-08-24 DSM IP Assets B.V. Vector-host system
EP2689011B1 (en) 2011-03-25 2017-10-25 Novozymes A/S Method for degrading or converting cellulosic material
WO2012135719A1 (en) 2011-03-31 2012-10-04 Novozymes, Inc. Cellulose binding domain variants and polynucleotides encoding same
WO2012135659A2 (en) 2011-03-31 2012-10-04 Novozymes A/S Methods for enhancing the degradation or conversion of cellulosic material
US20140031272A1 (en) 2011-04-08 2014-01-30 Danisco Us Inc. Compositions
MX2013012325A (es) 2011-04-28 2013-11-01 Novozymes Inc Polipeptidos que tienen actividad de endoglucanasa y polinucleotidos que codifican los mismos.
US9624518B2 (en) 2011-04-29 2017-04-18 Novozymes, Inc. Methods for enhancing the degradation or conversion of cellulosic material
BR112013026675A2 (pt) 2011-04-29 2016-11-29 Danisco Us Inc composições detergentes contendo mananase de bacillus sp., e métodos de uso das mesmas
WO2012149325A1 (en) 2011-04-29 2012-11-01 Danisco Us Inc. Detergent compositions containing geobacillus tepidamans mannanase and methods of use thereof
WO2012149317A1 (en) 2011-04-29 2012-11-01 Danisco Us Inc. Detergent compositions containing bacillus agaradhaerens mannanase and methods of use thereof
WO2012151480A2 (en) 2011-05-05 2012-11-08 The Procter & Gamble Company Compositions and methods comprising serine protease variants
RU2718648C2 (ru) 2011-05-05 2020-04-10 ДАНИСКО ЮЭс ИНК. Композиции и способы, включающие варианты сериновой протеазы
US20140141471A1 (en) 2011-05-19 2014-05-22 Novozymes, Inc. Methods for Enhancing the Degradation of Cellulosic Material with Chitin Binding Proteins
US8993286B2 (en) 2011-05-19 2015-03-31 Novozymes, Inc. Methods for enhancing the degradation of cellulosic material with chitin binding proteins
EP2527448A1 (en) 2011-05-23 2012-11-28 Novozymes A/S Simultaneous site-specific integrations of multiple gene-copies in filamentous fungi
EP2527432A1 (en) 2011-05-23 2012-11-28 Novozymes A/S Bi-directional cytosine deaminase-encoding selection marker
JP6126086B2 (ja) 2011-06-24 2017-05-10 ノボザイムス アクティーゼルスカブ プロテアーゼ活性を有するポリペプチドおよびこれをコードするポリヌクレオチド
IN2014CN00597A (ja) 2011-06-30 2015-04-03 Novozymes As
IN2014CN00650A (ja) 2011-06-30 2015-04-03 Novozymes As
WO2013006756A2 (en) 2011-07-06 2013-01-10 Novozymes A/S Alpha amylase variants and polynucleotides encoding same
GB201112091D0 (en) 2011-07-14 2011-08-31 Gt Biolog Ltd Bacterial strains isolated from pigs
WO2013010783A1 (en) 2011-07-15 2013-01-24 Novozymes A/S Lipase variants and polynucleotides encoding same
EP2734633B1 (en) 2011-07-22 2019-05-01 Novozymes North America, Inc. Processes for pretreating cellulosic material and improving hydrolysis thereof
BR112014002401B1 (pt) 2011-08-04 2021-08-03 Novozymes A/S Célula hospedeira transgênica de fungo filamentoso, métodos para produzir um polipeptídeo e uma proteína, e, construto de ácido nucleico ou um vetor de expressão
CA2838758A1 (en) 2011-08-04 2013-02-07 Novozymes A/S Polypeptides having endoglucanase activity and polynucleotides encoding same
WO2013021064A1 (en) 2011-08-10 2013-02-14 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity and polynucleotides encoding same
EP2742130B1 (en) 2011-08-10 2017-11-01 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity and polynucleotides encoding same
CN103827297B (zh) 2011-08-10 2018-06-22 诺维信公司 具有过氧化酶活性的多肽及编码该多肽的多核苷酸
WO2013021059A1 (en) 2011-08-10 2013-02-14 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity and polynucleotides encoding same
WO2013021065A1 (en) 2011-08-10 2013-02-14 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity and polynucleotides encoding same
WO2013021062A1 (en) 2011-08-10 2013-02-14 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity and polynucleotides encoding same
US9487761B2 (en) 2011-08-10 2016-11-08 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity and polynucleotides encoding same
WO2013024021A1 (en) 2011-08-15 2013-02-21 Novozymes A/S Polypeptides having cellulase activity and polynucleotides encoding same
EP2744904B1 (en) 2011-08-19 2016-04-13 Novozymes, Inc. Recombinant microorganisms for production c4-dicarboxylic acids
ES2641039T3 (es) 2011-08-19 2017-11-07 Novozymes A/S Polipéptidos con actividad de proteasa
CN103890169A (zh) 2011-08-24 2014-06-25 诺维信股份有限公司 烟曲霉纤维素分解酶组合物及其用途
CN103890180A (zh) 2011-08-24 2014-06-25 诺维信股份有限公司 在丝状真菌宿主细胞中产生多种重组多肽的方法
WO2013028915A2 (en) 2011-08-24 2013-02-28 Novozymes, Inc. Methods for obtaining positive transformants of a filamentous fungal host cell
CN103890165A (zh) 2011-08-24 2014-06-25 诺维信股份有限公司 纤维素分解酶组合物及其用途
CA2846690A1 (en) 2011-08-26 2013-03-07 Novozymes A/S Polypeptides having glucoamylase activity and polynucleotides encoding same
EA201490568A1 (ru) 2011-09-06 2014-06-30 Новозимс А/С Варианты глюкоамилазы и кодирующие их полинуклеотиды
CA2847236A1 (en) 2011-09-09 2013-03-14 Novozymes A/S Polypeptides having alpha-amylase activity and polynucleotides encoding same
EP2755675B1 (en) 2011-09-12 2018-06-06 Amunix Operating Inc. Glucagon-like peptide-2 compositions and methods of making and using same
US9670510B2 (en) 2011-09-13 2017-06-06 Novozymes A/S Methods of hydrolyzing and fermenting cellulosic material
WO2013043910A1 (en) 2011-09-20 2013-03-28 Novozymes A/S Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
EP2751266B1 (en) 2011-09-22 2017-03-29 Novozymes A/S Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same
IN2014CN03187A (ja) 2011-09-30 2015-07-03 Novozymes Inc
EP2751131B1 (en) 2011-09-30 2017-03-22 Novozymes A/S Polypeptides having alpha-amylase activity and polynucleotides encoding same
WO2013089889A2 (en) 2011-09-30 2013-06-20 Novozymes, Inc. Chimeric polypeptides having beta-glucosidase activity and polynucleotides encoding same
CN104204197A (zh) 2011-10-04 2014-12-10 美国佛罗里达大学研究基金会公司 具有d-乳酸脱氢酶活性的甘油脱氢酶变体及其用途
GB201117313D0 (en) 2011-10-07 2011-11-16 Gt Biolog Ltd Bacterium for use in medicine
WO2013053801A1 (en) 2011-10-11 2013-04-18 Novozymes A/S Glucoamylase variants and polynucleotides encoding same
WO2013057143A2 (en) 2011-10-17 2013-04-25 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
KR102046075B1 (ko) 2011-10-17 2019-11-18 노보자임스 에이/에스 알파-아밀라아제 변이체 및 이를 암호화하는 폴리뉴클레오티드
EP4345161A3 (en) 2011-10-28 2024-06-12 Danisco Us Inc Variant maltohexaose-forming alpha-amylase variants
CA2851855A1 (en) 2011-10-31 2013-05-10 Bp Corporation North America Inc. Use of plant promoters in filamentous fungi
WO2013067028A1 (en) 2011-10-31 2013-05-10 Bp Corporation North America Inc. Use of mammalian promoters in filamentous fungi
WO2013064075A1 (en) 2011-10-31 2013-05-10 Novozymes, Inc. Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
EP3409769A1 (en) 2011-11-18 2018-12-05 Novozymes A/S Polypeptides having beta-glucosidase activity, beta-xylosidase activity, or beta-glucosidase and beta-xylosidase activity and polynucleotides encoding same
CN109112118A (zh) 2011-11-21 2019-01-01 诺维信股份有限公司 Gh61多肽变体以及编码所述变体的多核苷酸
EP3342860A1 (en) 2011-11-22 2018-07-04 Novozymes, Inc. Polypeptides having beta-xylosidase activity and polynucleotides encoding same
ES2631605T3 (es) 2011-11-25 2017-09-01 Novozymes A/S Polipéptidos con actividad de lisozima y polinucleótidos que codifican los mismos
WO2013079015A1 (en) 2011-12-01 2013-06-06 Novozymes, Inc. Polypeptides having beta-xylosidase activity and polynucleotides encoding same
WO2013079531A2 (en) 2011-12-02 2013-06-06 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity and polynucleotides encoding same
US9404093B2 (en) 2011-12-02 2016-08-02 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity and polynucleotides encoding same
DK2791330T3 (da) 2011-12-16 2017-11-06 Novozymes Inc Polypeptider med laccaseaktivitet og polynukleotider, som koder for dem
WO2013091547A1 (en) 2011-12-19 2013-06-27 Novozymes, Inc. Polypeptides having catalase activity and polynucleotides encoding same
BR112014015228B1 (pt) 2011-12-20 2022-07-05 Novozymes, Inc. Variante de celobiohidrolase genitora, processos para degradação ou conversão de um material celulósico, para produção de um produto de fermentação, e de fermentação de um material celulósico, formulação de caldo inteiro ou composição de cultura celular, e, célula hospedeira microbiana transgênica
EP2794867A1 (en) 2011-12-22 2014-10-29 Danisco US Inc. Variant alpha-amylases and methods of use, thereof
EP2798062B1 (en) 2011-12-28 2018-02-21 Novozymes A/S Polypeptides having protease activity
US8993248B2 (en) 2011-12-31 2015-03-31 Abbott Laboratories Truncated human vitamin D binding protein and mutation and fusion thereof and related materials and methods of use
WO2013110766A1 (en) 2012-01-26 2013-08-01 Novozymes A/S Use of polypeptides having protease activity in animal feed and detergents
JP2015512613A (ja) 2012-02-03 2015-04-30 ノボザイムス アクティーゼルスカブ リパーゼ変異体およびこれをコードするポリヌクレオチド
EP2623586B1 (en) 2012-02-03 2017-08-16 The Procter & Gamble Company Compositions and methods for surface treatment with lipases
WO2013117705A1 (en) 2012-02-09 2013-08-15 Var2 Pharmaceuticals Aps Targeting of chondroitin sulfate glycans
US10421798B2 (en) 2012-02-15 2019-09-24 Bioverativ Therapeutics Inc. Factor VIII compositions and methods of making and using same
SI2822577T1 (sl) 2012-02-15 2019-07-31 Bioverativ Therapeutics Inc. Rekombinantni proteini faktorja VIII
WO2013123871A1 (en) 2012-02-20 2013-08-29 Novozymes A/S Polypeptides having endoglucanase activity and polynucleotides encoding same
EP2834353B1 (en) 2012-04-02 2017-07-19 Novozymes A/S Lipase variants and polynucleotides encoding same
WO2013160248A2 (en) 2012-04-23 2013-10-31 Novozymes A/S Polypeptides having alpha-glucuronidase activity and polynucleotides encoding same
CN104245930A (zh) 2012-04-23 2014-12-24 诺维信公司 具有葡萄糖醛酸酯酶活性的多肽以及编码其的多核苷酸
DK3279320T3 (da) 2012-04-27 2020-03-16 Novozymes Inc GH61-polypeptidvarianter og polynukleotider, som koder for dem
US9163263B2 (en) 2012-05-02 2015-10-20 The Goodyear Tire & Rubber Company Identification of isoprene synthase variants with improved properties for the production of isoprene
EP2847308B1 (en) 2012-05-07 2017-07-12 Novozymes A/S Polypeptides having xanthan degrading activity and polynucleotides encoding same
BR112014027275A2 (pt) 2012-05-11 2017-08-08 Danisco Us Inc uso de alfa-amilase de aspergillus clavatus para sacarificação
CN104364371B (zh) 2012-05-31 2018-10-23 诺维信公司 具有有机磷水解酶活性的多肽
US9487767B2 (en) 2012-05-31 2016-11-08 Novozymes A/S of Krogshoejvej 36 Selection in fungi
JP2015520191A (ja) 2012-06-05 2015-07-16 ザ ボード オブ トラスティーズ オブ ザ レランド スタンフォード ジュニア ユニバーシティー Ｎｃａｍペプチド模倣体を用いた精神障害またはその症状を治療するための方法
ES2909509T3 (es) 2012-06-08 2022-05-06 Danisco Us Inc Variante de alfa-amilasas con mayor actividad en polímeros de almidón
WO2013189878A1 (en) 2012-06-19 2013-12-27 Dsm Ip Assets B.V. Promoters for expressing a gene in a cell
BR112014031882A2 (pt) 2012-06-20 2017-08-01 Novozymes As uso de um polipeptídeo isolado, polipeptídeo, composição, polinucleotídeo isolado, construto de ácido nucleico ou vetor de expressão, célula hospedeira de expressão recombinante, métodos para produção de um polipeptídeo, para melhoria do valor nutricional de uma ração animal, e para o tratamento de proteínas, uso de pelo menos um polipeptídeo, aditivo de ração animal, ração animal, e, composição detergente
US10246692B2 (en) 2012-07-12 2019-04-02 Novozymes A/S Polypeptides having lipase activity and polynucleotides encoding same
US10035986B2 (en) 2012-07-19 2018-07-31 Dsm Ip Assets B.V. AgsE-deficient strain
WO2014028434A2 (en) 2012-08-16 2014-02-20 Danisco Us Inc. Method of using alpha-amylase from aspergillus clavatus and pullulanase for saccharification
PL2885407T3 (pl) 2012-08-16 2018-09-28 Bangladesh Jute Research Institute Enzymy rozkładające pektynę z macrophomina phaseolina oraz ich zastosowania
PL3553172T3 (pl) 2012-08-16 2023-03-27 Novozymes A/S Sposób obróbki wyrobu włókienniczego z użyciem endoglukanazy
CN104870640A (zh) 2012-08-16 2015-08-26 孟加拉朱特研究所 来自菜豆壳球孢菌的纤维素和/或半纤维素降解酶及其用途
US9828595B2 (en) 2012-08-17 2017-11-28 Novozymes A/S Thermostable asparaginase variants and polynucleotides encoding same
EP2885409A1 (en) 2012-08-17 2015-06-24 Novozymes A/S Methods for co-silencing expression of genes in filamentous fungal strains and uses thereof
MX2015002099A (es) 2012-08-22 2015-05-11 Dupont Nutrition Biosci Aps Variantes que tienen actividad glucoamilasa.
US20150203793A1 (en) 2012-08-22 2015-07-23 Novozymes A/S Metalloprotease from Exiguobacterium
MX357022B (es) 2012-08-22 2018-06-25 Novozymes As Metaloproteasas de alicyclobacillus sp.
ES2694765T3 (es) 2012-09-05 2018-12-27 Novozymes A/S Polipéptidos con actividad de proteasa
US20140073022A1 (en) 2012-09-10 2014-03-13 Wisconsin Alumni Research Foundation Production of polyhydroxyalkanoates with a defined composition from an unrelated carbon source
CN104640990B (zh) 2012-09-19 2017-12-26 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 使用必需基因作为标记并任选地将其再循环的细胞修饰方法
US20150210991A1 (en) 2012-09-19 2015-07-30 Novozymes, Inc. Methods For Enhancing The Degradation Or Conversion Of Cellulosic Material
DK2903412T3 (da) 2012-10-08 2019-12-16 Novozymes As Polypeptider med cellulolyseforbedrende aktivitet og polynukleotider, som koder for dem
EP2906689B1 (en) 2012-10-12 2018-12-12 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity
US9458435B2 (en) 2012-10-12 2016-10-04 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity
US9719072B2 (en) 2012-10-12 2017-08-01 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity
US9499801B2 (en) 2012-10-12 2016-11-22 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity
US9453207B2 (en) 2012-10-12 2016-09-27 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity
CN104704116B (zh) 2012-10-12 2018-09-28 诺维信公司 具有过氧合酶活性的多肽
CN104704115B (zh) 2012-10-12 2018-11-02 诺维信公司 具有过氧合酶活性的多肽
CN104704118A (zh) 2012-10-15 2015-06-10 诺和诺德保健Ag（股份有限公司） 凝血因子vii多肽
WO2014063097A1 (en) 2012-10-19 2014-04-24 Danisco Us Inc. Stabilization of biomimetic membranes
WO2014066141A2 (en) 2012-10-24 2014-05-01 Novozymes A/S Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
CN104812896A (zh) 2012-10-31 2015-07-29 丹尼斯科美国公司 来自粗糙脉孢菌的β-葡糖苷酶
JP2015533293A (ja) 2012-10-31 2015-11-24 ダニスコ・ユーエス・インク 組成物及び使用方法
KR20150079676A (ko) 2012-10-31 2015-07-08 다니스코 유에스 인크. 마그나포르테 그리세아로부터의 베타-글루코시다제
JP6858487B2 (ja) 2012-11-05 2021-04-14 ダニスコ・ユーエス・インク サーモリシンプロテアーゼ変異体を含む組成物及び方法
WO2014076232A2 (en) 2012-11-19 2014-05-22 Novozymes A/S Isopropanol production by recombinant hosts using an hmg-coa intermediate
US20180112203A1 (en) 2012-11-20 2018-04-26 Danisco Us Inc. Amylase with maltogenic properties
WO2014085419A1 (en) 2012-11-29 2014-06-05 The Texas A&M University System Engineering the production of a conformational variant of occidiofungin that has enhanced inhibitory activity against fungal species
WO2014086659A2 (en) 2012-12-06 2014-06-12 Ahmedabad Textile Industry's Research Association Method for enzymatical preparation of textiles
DK2929022T3 (en) 2012-12-07 2017-02-13 Danisco Us Inc COMPOSITIONS AND METHODS OF USE
US9879245B2 (en) 2012-12-07 2018-01-30 Danisco Us Inc. Polypeptides having beta-mannanase activity and methods of use
CN104837993A (zh) 2012-12-07 2015-08-12 诺维信公司 用于在丝状真菌中产生位点特异性突变的方法
BR112015013399B1 (pt) 2012-12-11 2023-02-14 Novozymes A/S Uso de polipeptídeo tendo atividade de fosfolipase c e método para redução do conteúdo de componentes contendo fósforo em um óleo comestível
AU2013358981A1 (en) 2012-12-14 2015-06-04 Novozymes A/S Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
WO2014093125A1 (en) 2012-12-14 2014-06-19 Danisco Us Inc. Method of using alpha-amylase from aspergillus fumigatus and isoamylase for saccharification
DK2935574T3 (da) 2012-12-17 2020-02-03 Novozymes As Alfaamylaser og polynukleotider, som koder for dem
US20150344858A1 (en) 2012-12-19 2015-12-03 Danisco Us Inc. Novel mannanase, compositions and methods of use thereof
US20150337280A1 (en) 2012-12-19 2015-11-26 Novozymes A/S Polypeptides Having Cellulolytic Enhancing Activity And Polynucleotides Encoding Same
US20160010128A1 (en) 2012-12-20 2016-01-14 Danisco Us Inc. Method of using alpha-amylase from aspergillus terreus and pullulanase for saccharification
WO2014099525A1 (en) 2012-12-21 2014-06-26 Danisco Us Inc. Paenibacillus curdlanolyticus amylase, and methods of use, thereof
CN104869841A (zh) 2012-12-21 2015-08-26 诺维信公司 具有蛋白酶活性的多肽和编码它的多核苷酸
DK3354728T3 (da) 2012-12-21 2020-07-27 Danisco Us Inc Alpha-amylase-varianter
BR112015014624A2 (pt) 2012-12-24 2017-10-10 Novozymes As polipeptídeo isolado, composição, polinucleotídeo isolado, construto de ácido nucleico ou vetor de expressão, célula hospedeira recombinante, e, método para tratamento de têxtil
US9902946B2 (en) 2013-01-03 2018-02-27 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
HRP20220917T1 (hr) 2013-02-04 2022-10-28 Dsm Ip Assets B.V. Polipeptid koji razgrađuje ugljikohidrate i njegova upotreba
US9441215B2 (en) 2013-02-06 2016-09-13 Novozymes A/S Polypeptides having protease activity
US10221406B2 (en) 2013-03-08 2019-03-05 Novozymes, Inc. Cellobiohydrolase variants and polynucleotides encoding same
CA2903027A1 (en) 2013-03-11 2014-10-09 Danisco Us Inc. Alpha-amylase combinatorial variants
EA035489B1 (ru) 2013-03-15 2020-06-24 ДСМ АйПи АССЕТС Б.В. Применение термофильных нуклеаз для разрушения нуклеиновых кислот в клетках-хозяевах
WO2014145768A2 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Bp Corporation North America Inc. Use of non-fungal 5' utrs in filamentous fungi
CN105073985A (zh) 2013-03-21 2015-11-18 诺维信公司 具有磷脂酶a活性的多肽与对其进行编码的多核苷酸
WO2014147127A1 (en) 2013-03-21 2014-09-25 Novozymes A/S Polypeptides with lipase activity and polynucleotides encoding same
EP2981610A1 (en) 2013-04-05 2016-02-10 Université du Luxembourg Biotechnological production of itaconic acid
GB201306536D0 (en) 2013-04-10 2013-05-22 Gt Biolog Ltd Polypeptide and immune modulation
EP2986701B1 (en) 2013-04-18 2018-11-14 Novozymes A/S Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same
WO2014177541A2 (en) 2013-04-30 2014-11-06 Novozymes A/S Glucoamylase variants and polynucleotides encoding same
ES2835313T3 (es) 2013-04-30 2021-06-22 Novozymes As Variantes de glucoamilasa y polinucleótidos que las codifican
WO2014182990A1 (en) 2013-05-10 2014-11-13 Novozymes A/S Polypeptides having xylanase activity and polynucleotides encoding same
RU2712877C2 (ru) 2013-05-14 2020-01-31 Новозимс А/С Моющие композиции
WO2014183921A1 (en) 2013-05-17 2014-11-20 Novozymes A/S Polypeptides having alpha amylase activity
WO2014194117A2 (en) 2013-05-29 2014-12-04 Danisco Us Inc. Novel metalloproteases
EP3004314B1 (en) 2013-05-29 2018-06-20 Danisco US Inc. Novel metalloproteases
EP3260538B1 (en) 2013-05-29 2021-04-14 Danisco US Inc. Novel metalloproteases
JP2016526880A (ja) 2013-05-29 2016-09-08 ダニスコ・ユーエス・インク 新規メタロプロテアーゼ
CN105264058B (zh) 2013-06-06 2022-03-29 诺维信公司 α-淀粉酶变体以及对其进行编码的多核苷酸
WO2014200656A1 (en) 2013-06-13 2014-12-18 Danisco Us Inc. Alpha-amylase from streptomyces umbrinus
WO2014200658A1 (en) 2013-06-13 2014-12-18 Danisco Us Inc. Alpha-amylase from promicromonospora vindobonensis
WO2014200657A1 (en) 2013-06-13 2014-12-18 Danisco Us Inc. Alpha-amylase from streptomyces xiamenensis
US20160130571A1 (en) 2013-06-17 2016-05-12 Danisco Us Inc. Alpha-Amylase from Bacillaceae Family Member
WO2014202620A2 (en) 2013-06-19 2014-12-24 Dsm Ip Assets B.V. Rasamsonia gene and use thereof
WO2014202622A2 (en) 2013-06-19 2014-12-24 Dsm Ip Assets B.V. Rasamsonia gene and use thereof
WO2014202624A2 (en) 2013-06-19 2014-12-24 Dsm Ip Assets B.V. Rasamsonia gene and use thereof
WO2014202621A1 (en) 2013-06-20 2014-12-24 Dsm Ip Assets B.V. Carbohydrate degrading polypeptide and uses thereof
JP2016530349A (ja) 2013-07-03 2016-09-29 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピアＢａｓｆ Ｓｅ 自動食器洗浄のための配合物における、ポリエーテル化合物の存在下で酸基含有モノマーを重合することによって得ることができるゲル様ポリマー組成物の使用の方法
WO2015001017A2 (en) 2013-07-04 2015-01-08 Novozymes A/S Polypeptides having anti-redeposition effect and polynucleotides encoding same
EP3019603A1 (en) 2013-07-09 2016-05-18 Novozymes A/S Polypeptides with lipase activity and polynucleotides encoding same
US9951323B2 (en) 2013-07-17 2018-04-24 Novozymes A/S Pullulanase chimeras and polynucleotides encoding same
US11981942B2 (en) 2013-07-23 2024-05-14 International N&H Denmark Aps Xylanases for solubilizing arabinoxylan-containing material
TW202003554A (zh) 2013-08-14 2020-01-16 美商百歐維拉提夫治療公司 因子ｖｉｉｉ－ｘｔｅｎ融合物及其用途
US10010094B2 (en) 2013-08-15 2018-07-03 Novozymes A/S Polypeptides having beta-1,3-galactanase activity and polynucleotides encoding same
EP3044313B1 (en) 2013-09-12 2019-11-06 Danisco US Inc. Compositions and methods comprising lg12-clade protease variants
WO2015050723A1 (en) 2013-10-03 2015-04-09 Danisco Us Inc. Alpha-amylases from exiguobacterium, and methods of use, thereof
WO2015050724A1 (en) 2013-10-03 2015-04-09 Danisco Us Inc. Alpha-amylases from a subset of exiguobacterium, and methods of use, thereof
WO2015059133A1 (en) 2013-10-22 2015-04-30 Novozymes A/S Cellobiose dehydrogenase variants and polynucleotides encoding same
US9926548B2 (en) 2013-10-25 2018-03-27 Novozymes A/S Nucleic acid constructs and host cells for producing neurospora endoglucanases
CN105722989B (zh) 2013-10-28 2020-12-18 丹尼斯科美国公司 发酵中的海藻糖酶
WO2015066667A1 (en) 2013-11-04 2015-05-07 Danisco Us Inc. Proteases in wheat processing
WO2015066669A1 (en) 2013-11-04 2015-05-07 Danisco Us Inc. Proteases in corn processing
BR112016010551A2 (pt) 2013-11-20 2017-12-05 Danisco Us Inc variantes de alfa-amilases tendo suscetibilidade reduzida à clivagem da protease e métodos de uso das mesmas
US20170166939A1 (en) 2013-11-26 2017-06-15 Novozymes A/S Enzyme Compositions and Uses Thereof
EP2876156A1 (en) 2013-11-26 2015-05-27 Commissariat A L'energie Atomique Et Aux Energies Alternatives New enzymes and method for preparing hydroxylated L-lysine or L-ornithine and analogs thereof
EP3074509B1 (en) 2013-11-29 2019-03-06 Novozymes A/S Peroxygenase variants
EP3077517B1 (en) 2013-12-02 2018-10-17 DSM IP Assets B.V. Ice structuring protein
CN105829530A (zh) 2013-12-04 2016-08-03 丹尼斯科美国公司 包含β-葡萄糖苷酶多肽的组合物及其使用方法
KR102268532B1 (ko) 2013-12-11 2021-06-24 노보자임스 에이/에스 큐티나아제 변이체 및 이를 암호화하는 폴리뉴클레오티드
DK3514230T3 (da) 2013-12-13 2021-11-15 Danisco Us Inc Serinproteaser af bacillus-arter
DK3553173T3 (da) 2013-12-13 2021-08-23 Danisco Us Inc Serinproteaser af bacillus gibsonii-clade
EP2886656A1 (en) 2013-12-18 2015-06-24 Commissariat A L'energie Atomique Et Aux Energies Alternatives New enzyme and method for preparing 4-hydroxyl benzyl alcohol and derivatives thereof
WO2015094809A1 (en) 2013-12-19 2015-06-25 Danisco Us Inc. Chimeric fungal alpha-amylases comprising carbohydrate binding module and the use thereof
EP3083936B1 (en) 2013-12-19 2018-07-04 Danisco US Inc. Use of hydrophobins to increase gas transfer in aerobic fermentation processes
WO2015094714A1 (en) 2013-12-19 2015-06-25 Danisco Us Inc. Proteases in grain processing
US10030239B2 (en) 2013-12-20 2018-07-24 Novozymes A/S Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same
HUE056192T2 (hu) 2014-01-22 2022-01-28 Novozymes As Pullulanázvariánsok és azokat kódoló polinukleotidok
US10208297B2 (en) 2014-01-22 2019-02-19 Novozymes A/S Polypeptides with lipase activity and polynucleotides encoding same for cleaning
GB201401648D0 (en) 2014-01-31 2014-03-19 Dupont Nutrition Biosci Aps Protein
EP3099792B1 (en) 2014-01-31 2018-10-17 Danisco US Inc. Methods for improving by-products from fermentation processes using xylanase
ES2813441T3 (es) 2014-02-13 2021-03-23 Danisco Us Inc Reducción de sacarosa y generación de fibra insoluble en zumos
CN106068077B (zh) 2014-03-05 2019-06-07 诺维信公司 用于改进农作物的收获后特性的组合物和方法
WO2015134773A1 (en) 2014-03-05 2015-09-11 Novozymes A/S Compositions and methods for functionalizing and linking materials
CN106062270A (zh) 2014-03-05 2016-10-26 诺维信公司 使用木葡聚糖内糖基转移酶改进非纤维素纺织材料的性质的组合物和方法
MX2016011413A (es) 2014-03-05 2017-02-28 Novozymes As Formulaciones que comprenden xiloglucano polimérico como portador para agentes agronómicamente beneficiosos.
CN106062271A (zh) 2014-03-05 2016-10-26 诺维信公司 用于改进具有木葡聚糖内糖基转移酶的纤维素纺织材料的性质的组合物和方法
CN111500552A (zh) 2014-03-12 2020-08-07 诺维信公司 具有脂肪酶活性的多肽和编码它们的多核苷酸
WO2015143360A2 (en) 2014-03-21 2015-09-24 Danisco Us Inc. Serine proteases of bacillus species
US20170015950A1 (en) 2014-04-01 2017-01-19 Novozymes A/S Polypeptides having alpha amylase activity
EP3129478B1 (en) 2014-04-10 2019-03-27 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
US9901706B2 (en) 2014-04-11 2018-02-27 Boston Scientific Scimed, Inc. Catheters and catheter shafts
JP6825911B2 (ja) 2014-04-11 2021-02-03 ノボザイムス アクティーゼルスカブ 洗剤組成物
EP3131921B1 (en) 2014-04-15 2020-06-10 Novozymes A/S Polypeptides with lipase activity and polynucleotides encoding same
EP3149178B1 (en) 2014-05-27 2020-07-15 Novozymes A/S Lipase variants and polynucleotides encoding same
CN106459937A (zh) 2014-05-27 2017-02-22 诺维信公司 用于产生脂肪酶的方法
EP3149028B1 (en) 2014-05-30 2021-09-15 Novozymes A/S Variants of gh family 11 xylanase and polynucleotides encoding same
WO2015187935A1 (en) 2014-06-06 2015-12-10 Novozymes A/S Enzyme compositions and uses thereof
DK3161133T3 (en) 2014-06-25 2019-03-25 Novozymes As Xylanase variants and polynucleotides encoding them
EP3183339A1 (en) 2014-08-20 2017-06-28 Novozymes A/S Xyloglucan endotransglycosylase variants and polynucleotides encoding same
WO2016037096A1 (en) 2014-09-05 2016-03-10 Novozymes A/S Carbohydrate binding module variants and polynucleotides encoding same
US20170211054A1 (en) 2014-09-30 2017-07-27 Dansico Us Inc. Compositions comprising beta mannanase and methods of use
US20170218351A1 (en) 2014-09-30 2017-08-03 Danisco Us Inc. Compositions comprising beta-mannanase and methods of use
EP3201331A1 (en) 2014-09-30 2017-08-09 Danisco US Inc. Compositions comprising beta mannanase and methods of use
US20170226494A1 (en) 2014-09-30 2017-08-10 Danisco Us Inc. Compositions comprising beta-mannanase and methods of use
EP3201334A1 (en) 2014-09-30 2017-08-09 Danisco US Inc. Compositions comprising beta-mannanase and methods of use
WO2016061438A1 (en) 2014-10-17 2016-04-21 Danisco Us Inc. Serine proteases of bacillus species
AR102419A1 (es) 2014-10-23 2017-03-01 Novozymes As Variantes de glucoamilasa y polinucleótidos que las codifican
US20170306360A1 (en) 2014-10-24 2017-10-26 Danisco Us Inc. Method for producing alcohol by use of a tripeptidyl peptidase
US20170325479A1 (en) 2014-10-24 2017-11-16 Dupont Nutrition Biosciences Aps Proline tolerant tripeptidyl peptidases and uses thereof
EP3212662B1 (en) 2014-10-27 2020-04-08 Danisco US Inc. Serine proteases
EP3212776B1 (en) 2014-10-27 2020-04-22 Danisco US Inc. Compositions and methods related to beta-glucosidase
DK3212781T3 (da) 2014-10-27 2019-12-16 Danisco Us Inc Serinproteaser
EP3550017B1 (en) 2014-10-27 2021-07-14 Danisco US Inc. Serine proteases
WO2016069557A1 (en) 2014-10-27 2016-05-06 Danisco Us Inc. Serine proteases of bacillus species
EP3212783B1 (en) 2014-10-27 2024-06-26 Danisco US Inc. Serine proteases
CN107075489A (zh) 2014-11-20 2017-08-18 诺维信公司 脂环酸芽孢杆菌变体以及编码它们的多核苷酸
EP3227438B1 (en) 2014-12-02 2024-03-27 Novozymes A/S Laccase variants and polynucleotides encoding same
EP4067485A3 (en) 2014-12-05 2023-01-04 Novozymes A/S Lipase variants and polynucleotides encoding same
WO2016096996A1 (en) 2014-12-16 2016-06-23 Novozymes A/S Polypeptides having n-acetyl glucosamine oxidase activity
WO2016100837A1 (en) 2014-12-18 2016-06-23 Danisco Us Inc Engineered multifunctional enzymes and methods of use
MX2017007127A (es) 2014-12-19 2017-08-18 Novozymes As Composiciones que comprenden polipeptidos que tienen actividad xilanasa y polipeptidos que tienen actividad arabinofuranosidasa.
US20170362613A1 (en) 2014-12-19 2017-12-21 Novozymes A/S Recombinant Host Cells For The Production Of 3-Hydroxypropionic Acid
JP6271093B1 (ja) 2014-12-23 2018-01-31 フォーディー ファーマ リサーチ リミテッド４Ｄ Ｐｈａｒｍａ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｌｉｍｉｔｅｄ 免疫調節
HUE037476T2 (hu) 2014-12-23 2018-08-28 4D Pharma Res Ltd Pirin polipeptid és immunmodulálás
US11396665B2 (en) 2015-01-06 2022-07-26 Dsm Ip Assets B.V. CRISPR-CAS system for a filamentous fungal host cell
US20180028454A1 (en) 2015-02-04 2018-02-01 Abbvie Inc. Pharmaceutical compositions and methods of use thereof to treat pancreatic enzyme insufficiency
US10557127B2 (en) 2015-02-24 2020-02-11 Novozymes A/S Cellobiohydrolase variants and polynucleotides encoding same
WO2016138303A1 (en) 2015-02-27 2016-09-01 Novozymes A/S Mutant host cells for the production of 3-hydroxypropionic acid
DK3268482T3 (da) 2015-03-09 2020-03-09 Novozymes As Fremgangsmåder til indføring af en flerhed af ekspressionskonstruktioner i en eukaryot celle
US20180216090A1 (en) 2015-03-12 2018-08-02 Danisco Us Inc. Compositions and methods comprising lg12-clade protease variants
EP3280818A2 (en) 2015-04-07 2018-02-14 Novozymes A/S Methods for selecting enzymes having lipase activity
US20180073017A1 (en) 2015-04-07 2018-03-15 Novozymes A/S Methods for selecting enzymes having enhanced activity
WO2016183509A1 (en) 2015-05-13 2016-11-17 Danisco Us Inc. AprL-CLADE PROTEASE VARIANTS AND USES THEREOF
US9920102B2 (en) 2015-05-15 2018-03-20 Albert Einstein College Of Medicine, Inc. Fusion tags for protein expression
DK3298138T3 (da) 2015-05-22 2022-10-31 Dupont Nutrition Biosci Aps Acetolactatdecarboxylase
US10519520B2 (en) 2015-05-27 2019-12-31 Novozymes A/S Polypeptides having cellobiohydrolase activity and polynucleotides encoding same
NZ737305A (en) 2015-06-02 2021-07-30 Dsm Ip Assets Bv Use of ice structuring protein afp19 expressed in filamentous fungal strains for preparing food
WO2016201040A1 (en) 2015-06-09 2016-12-15 Danisco Us Inc. Water-triggered enzyme suspension
WO2016201069A1 (en) 2015-06-09 2016-12-15 Danisco Us Inc Low-density enzyme-containing particles
WO2016201044A1 (en) 2015-06-09 2016-12-15 Danisco Us Inc Osmotic burst encapsulates
CN108271354B (zh) 2015-06-15 2022-07-29 4D制药研究有限公司 包含细菌菌株的组合物
MA41060B1 (fr) 2015-06-15 2019-11-29 4D Pharma Res Ltd Compositions comprenant des souches bactériennes
CN107847529B (zh) 2015-06-15 2022-05-03 4D制药研究有限公司 包含细菌菌株的组合物
MA41010B1 (fr) 2015-06-15 2020-01-31 4D Pharma Res Ltd Compositions comprenant des souches bactériennes
BR112017026564B1 (pt) 2015-06-15 2022-05-03 4D Pharma Research Limited Células de bactéria, usos das mesmas, e composição
WO2016202739A1 (en) 2015-06-16 2016-12-22 Novozymes A/S Polypeptides with lipase activity and polynucleotides encoding same
US11499146B2 (en) 2015-06-17 2022-11-15 Danisco Us Inc. Bacillus gibsonii-clade serine proteases
EP3310910A1 (en) 2015-06-18 2018-04-25 Novozymes A/S Polypeptides having trehalase activity and the use thereof in process of producing fermentation products
MX2017016501A (es) 2015-06-26 2018-03-12 Dupont Nutrition Biosci Aps Aminopeptidasas para hidrolizados de proteinas.
WO2016207373A1 (en) 2015-06-26 2016-12-29 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity
CA2987164C (en) 2015-06-26 2023-09-19 Novozymes A/S Method for producing a coffee extract
CN107849548A (zh) 2015-06-26 2018-03-27 诺维信公司 生物整理***
CN107922930A (zh) 2015-07-01 2018-04-17 诺维信公司 减少气味的方法
WO2017001703A1 (en) 2015-07-02 2017-01-05 Novozymes A/S Methods of improving animal performance
MX2017016500A (es) 2015-07-02 2018-03-12 Novozymes As Composiciones de pienso para animales y uso de las mismas.
WO2017005816A1 (en) 2015-07-06 2017-01-12 Novozymes A/S Lipase variants and polynucleotides encoding same
JP6709591B2 (ja) 2015-07-16 2020-06-17 本田技研工業株式会社 タンパク質生産用システム及びタンパク質の製造方法
WO2017010107A1 (en) * 2015-07-16 2017-01-19 Honda Motor Co., Ltd. Base sequence for protein expression and method for producing protein using same
JP6709590B2 (ja) * 2015-07-16 2020-06-17 本田技研工業株式会社 タンパク質生産用システム及びタンパク質の製造方法
WO2017019491A1 (en) 2015-07-24 2017-02-02 Novozymes Inc. Polypeptides having beta-xylosidase activity and polynucleotides encoding same
US10577594B2 (en) 2015-07-24 2020-03-03 Novozymes, Inc. Polypeptides having arabinofuranosidase activity and polynucleotides encoding same
US10745680B2 (en) 2015-08-03 2020-08-18 Bioverativ Therapeutics Inc. Factor IX fusion proteins and methods of making and using same
WO2017035270A1 (en) 2015-08-24 2017-03-02 Novozymes A/S Beta-alanine aminotransferases for the production of 3-hydroxypropionic acid
EP3711773A1 (en) 2015-09-02 2020-09-23 DuPont Nutrition Biosciences ApS Glycoside hydrolases and their use in preventing and/or treating a pathogenic infection in an animal
EP3344761A1 (en) 2015-09-04 2018-07-11 Novozymes A/S Methods of inhibiting aa9 lytic polysaccharide monooxygenase catalyzed inactivation of enzyme compositions
CA2991114A1 (en) 2015-09-17 2017-03-23 Novozymes A/S Polypeptides having xanthan degrading activity and polynucleotides encoding same
CN108350044B (zh) 2015-09-22 2022-05-24 诺维信公司 具有纤维二糖水解酶活性的多肽以及对其进行编码的多核苷酸
MX2018002831A (es) 2015-10-07 2018-09-28 Novozymes As Polipeptidos.
WO2017064253A1 (en) 2015-10-14 2017-04-20 Novozymes A/S Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same
US10479981B2 (en) 2015-10-14 2019-11-19 Novozymes A/S DNase variants
WO2017070219A1 (en) 2015-10-20 2017-04-27 Novozymes A/S Lytic polysaccharide monooxygenase (lpmo) variants and polynucleotides encoding same
CN108138188A (zh) 2015-10-30 2018-06-08 诺维信公司 用于体外和体内表达的多核苷酸构建体
BR112018009050A8 (pt) 2015-11-05 2019-02-26 Danisco Us Inc mananases de paenibacillus e bacillus spp.
EP4141113A1 (en) 2015-11-05 2023-03-01 Danisco US Inc Paenibacillus sp. mannanases
MA45287A (fr) 2015-11-20 2018-08-22 4D Pharma Res Ltd Compositions comprenant des souches bactériennes
GB201520497D0 (en) 2015-11-20 2016-01-06 4D Pharma Res Ltd Compositions comprising bacterial strains
GB201520631D0 (en) 2015-11-23 2016-01-06 4D Pharma Res Ltd Compositions comprising bacterial strains
GB201520638D0 (en) 2015-11-23 2016-01-06 4D Pharma Res Ltd Compositions comprising bacterial strains
CN108473974A (zh) 2015-11-24 2018-08-31 诺维信公司 具有蛋白酶活性的多肽以及编码其的多核苷酸
CN108431217B (zh) 2015-12-01 2022-06-21 诺维信公司 用于产生脂肪酶的方法
CA3006403A1 (en) 2015-12-02 2017-06-08 Institut National De La Recherche Agronomique New peptides having antimicrobial activity and new enzyme capable of converting l-configured residue in d-configured amino acid in a peptide
CA3088654C (en) 2015-12-07 2021-05-18 Zymergen Inc. Microbial strain improvement by a htp genomic engineering platform
CA3007635A1 (en) 2015-12-07 2017-06-15 Zymergen Inc. Promoters from corynebacterium glutamicum
US9988624B2 (en) 2015-12-07 2018-06-05 Zymergen Inc. Microbial strain improvement by a HTP genomic engineering platform
US11208649B2 (en) 2015-12-07 2021-12-28 Zymergen Inc. HTP genomic engineering platform
WO2017106676A1 (en) 2015-12-18 2017-06-22 Danisco Us Inc Polypeptides with endoglucanase activity and uses thereof
CN108603185B (zh) 2015-12-30 2022-05-17 诺维信公司 酶变体以及编码它们的多核苷酸
CN108884451A (zh) 2016-01-29 2018-11-23 诺维信公司 β-葡聚糖酶变体以及编码它们的多核苷酸
US11685911B2 (en) 2016-02-16 2023-06-27 Monaghan Mushroom S Group Fungal polypeptides having lysozyme activity
WO2017147294A1 (en) 2016-02-23 2017-08-31 Novozymes A/S Improved next-generation sequencing
WO2017151957A1 (en) 2016-03-02 2017-09-08 Novozymes A/S Cellobiohydrolase variants and polynucleotides encoding same
JP6441536B2 (ja) 2016-03-04 2018-12-19 フォーディー ファーマ ピーエルシー４Ｄ Ｐｈａｒｍａ Ｐｌｃ 細菌株を含む組成物
GB201612191D0 (en) 2016-07-13 2016-08-24 4D Pharma Plc Compositions comprising bacterial strains
DK3433358T3 (da) 2016-03-24 2022-09-26 Novozymes As Cellobiohydrolasevarianter og polynukleotider, der koder for dem
WO2017173324A2 (en) 2016-04-01 2017-10-05 Danisco Us Inc. Alpha-amylases, compositions & methods
WO2017173190A2 (en) 2016-04-01 2017-10-05 Danisco Us Inc. Alpha-amylases, compositions & methods
EP3440207A1 (en) 2016-04-07 2019-02-13 Novozymes A/S Methods for selecting enzymes having protease activity
WO2017182442A1 (en) 2016-04-19 2017-10-26 Novozymes A/S Rlma-inactivated filamentous fungal host cell
EP3448978B1 (en) 2016-04-29 2020-03-11 Novozymes A/S Detergent compositions and uses thereof
EP3452497B1 (en) 2016-05-03 2021-02-17 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding the same
CN109715791B (zh) 2016-05-03 2023-07-14 丹尼斯科美国公司 蛋白酶变体及其用途
US20190136218A1 (en) 2016-05-05 2019-05-09 Danisco Us Inc Protease variants and uses thereof
CN109312319B (zh) 2016-05-09 2023-05-16 诺维信公司 具有改善的性能的变体多肽及其用途
EP3246401A1 (en) 2016-05-20 2017-11-22 Commissariat À L'Énergie Atomique Et Aux Énergies Alternatives New fatty acid decarboxylase and its uses
EP3462904A1 (en) 2016-05-24 2019-04-10 Novozymes A/S Polypeptides having alpha-galactosidase activity and polynucleotides encoding same
WO2017202966A1 (en) 2016-05-24 2017-11-30 Novozymes A/S Polypeptides having alpha-galactosidase activity and polynucleotides encoding same
CN109196098A (zh) 2016-05-24 2019-01-11 诺维信公司 包含具有半乳聚糖酶活性的多肽和具有β-半乳糖苷酶活性的多肽的组合物
BR112018073890A2 (pt) 2016-05-24 2019-02-26 Novozymes As composição, grânulo, aditivo de ração para animal, ração para animal, formulação líquida, uso da composição, do grânulo, do aditivo de ração para animal ou da formulação líquida, polipeptídeo isolado, métodos para liberar galactose de material à base de planta, para melhorar um ou mais parâmetros de desempenho de um animal e para produzir o polipeptídeo, polinucleotídeo, construto de ácido nucleico ou vetor de expressão, e, célula hospedeira recombinante.
WO2017205535A1 (en) 2016-05-27 2017-11-30 Novozymes, Inc. Polypeptides having endoglucanase activity and polynucleotides encoding same
MX2018014768A (es) 2016-05-31 2019-03-06 Danisco Us Inc Variantes de proteasa y sus usos.
WO2017211803A1 (en) 2016-06-07 2017-12-14 Novozymes A/S Co-expression of heterologous polypeptides to increase yield
EP4151726A1 (en) 2016-06-17 2023-03-22 Danisco US Inc Protease variants and uses thereof
US10421951B2 (en) 2016-06-22 2019-09-24 Wisconsin Alumni Research Foundation Gene construct encoding mutant thioesterase, mutant thioesterase encoded thereby, transformed host cell containing the gene construct, and method of using them to produce medium-chain fatty acids
ES2807212T3 (es) 2016-06-30 2021-02-22 Fornia Biosolutions Inc Nuevas fitasas y usos de las mismas
KR102345898B1 (ko) 2016-06-30 2022-01-03 지머젠 인코포레이티드 글루코오스 투과 효소 라이브러리를 생성하는 방법 및 이의 용도
WO2018005225A1 (en) 2016-06-30 2018-01-04 Danisco Us Inc Aspartic proteases
US10544390B2 (en) 2016-06-30 2020-01-28 Zymergen Inc. Methods for generating a bacterial hemoglobin library and uses thereof
WO2018002261A1 (en) 2016-07-01 2018-01-04 Novozymes A/S Detergent compositions
CN109715794A (zh) 2016-07-05 2019-05-03 诺维信公司 果胶裂解酶变体以及编码它们的多核苷酸
WO2018009520A1 (en) 2016-07-06 2018-01-11 Novozymes A/S Improving a microorganism by crispr-inhibition
US20190256884A1 (en) 2016-07-07 2019-08-22 Novozymes A/S Methods of producing a fermentation product in trichoderma
WO2018007153A1 (en) 2016-07-08 2018-01-11 Novozymes A/S Polypeptides having xylanase activity and polynucleotides encoding same
WO2018007573A1 (en) 2016-07-08 2018-01-11 Novozymes A/S Detergent compositions with galactanase
PE20190564A1 (es) 2016-07-08 2019-04-22 Novozymes As Variantes de xilanasa y polinucleotidos que las codifican
JP6858850B2 (ja) 2016-07-13 2021-04-14 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニーＴｈｅ Ｐｒｏｃｔｅｒ ＆ Ｇａｍｂｌｅ Ｃｏｍｐａｎｙ バチルス・シビ（ＢＡＣＩＬＬＵＳ ＣＩＢＩ）ＤＮａｓｅ変異体及びその使用
TW201821093A (zh) 2016-07-13 2018-06-16 英商４Ｄ製藥有限公司 包含細菌菌株之組合物
EP4357453A2 (en) 2016-07-18 2024-04-24 Novozymes A/S Lipase variants, polynucleotides encoding same and the use thereof
US10927364B2 (en) 2016-07-20 2021-02-23 Novozymes A/S Heat-stable metagenomic carbonic anhydrases and their use
EP3487996B1 (en) 2016-07-21 2024-04-10 Novozymes A/S Serine protease variants and polynucleotides encoding same
CN109661465A (zh) 2016-07-21 2019-04-19 诺维信公司 丝氨酸蛋白酶变体以及对其进行编码的多核苷酸
DK3487873T3 (da) 2016-07-22 2021-05-25 Novozymes As Forbedret filamentøs svampevært
WO2018015444A1 (en) 2016-07-22 2018-01-25 Novozymes A/S Crispr-cas9 genome editing with multiple guide rnas in filamentous fungi
WO2018026868A1 (en) 2016-08-01 2018-02-08 Novozymes, Inc. Polypeptides having endoglucanase activity and polynucleotides encoding same
CN109563451A (zh) 2016-08-24 2019-04-02 汉高股份有限及两合公司 包含gh9内切葡聚糖酶变体i的洗涤剂组合物
EP3504331A1 (en) 2016-08-24 2019-07-03 Henkel AG & Co. KGaA Detergent compositions comprising xanthan lyase variants i
CN109863244B (zh) 2016-08-24 2023-06-06 诺维信公司 Gh9内切葡聚糖酶变体以及编码它们的多核苷酸
CA3032248A1 (en) 2016-08-24 2018-03-01 Novozymes A/S Xanthan lyase variants and polynucleotides encoding same
US20190225988A1 (en) 2016-09-15 2019-07-25 Novozymes A/S Genomic integration of DNA fragments in fungal host cells
WO2018050649A1 (en) 2016-09-16 2018-03-22 Dupont Nutrition Biosciences Aps Acetolactate decarboxylase variants having improved specific activity
CN109982576B (zh) 2016-09-23 2024-03-22 杜邦营养生物科学有限公司 低PH活性α-1,4/1,6-糖苷水解酶作为反刍动物的饲料添加剂用于增强淀粉消化的用途
WO2018077938A1 (en) 2016-10-25 2018-05-03 Novozymes A/S Detergent compositions
EP3535365A2 (en) 2016-11-07 2019-09-11 Danisco US Inc. Laundry detergent composition
CN110100011A (zh) 2016-11-21 2019-08-06 诺维信公司 Dna分子的酵母细胞提取物辅助构建
GB201621123D0 (en) 2016-12-12 2017-01-25 4D Pharma Plc Compositions comprising bacterial strains
US11946081B2 (en) 2016-12-21 2024-04-02 Danisco Us Inc. Bacillus gibsonii-clade serine proteases
WO2018118917A1 (en) 2016-12-21 2018-06-28 Danisco Us Inc. Protease variants and uses thereof
RU2771261C2 (ru) 2016-12-21 2022-04-29 ДюПон НЬЮТРИШН БАЙОСАЙЕНСИЗ АпС Способы применения термостабильных сериновых протеаз
JP7319920B2 (ja) 2017-01-04 2023-08-02 ノボザイムス アクティーゼルスカブ 過敏性腸症候群または炎症性腸疾患の処置での使用のための微生物リゾチーム
CN106754838B (zh) * 2017-01-20 2020-06-09 上海绿农饲料科技有限公司 一种提高黑曲霉产蛋白酶能力的方法
PL3357994T3 (pl) 2017-02-01 2024-03-25 The Procter & Gamble Company Kompozycje czyszczące zawierające warianty amylazy
EP3577219B1 (en) 2017-02-01 2023-08-23 Novozymes A/S Alpha-amylase variants
MX2019009551A (es) 2017-02-20 2020-01-30 Novozymes As Enzima lipolitica para usarse en horneado.
EP3592429A1 (en) 2017-03-06 2020-01-15 DuPont Nutrition Biosciences ApS Novel fungal fucosidases and their use in preventing and/or treating a pathogenic infection in an animal
US20200063166A1 (en) 2017-03-13 2020-02-27 Dsm Ip Assets B.V. Zinc binuclear cluster transcriptional regulator-deficient strain
EP3583210B1 (en) 2017-03-15 2021-07-07 Danisco US Inc. Trypsin-like serine proteases and uses thereof
US20200015499A1 (en) 2017-03-15 2020-01-16 Dupont Nutrition Biosciences Aps Trypsin-like serine proteases and uses thereof
RU2019132448A (ru) 2017-03-15 2021-04-15 ДюПон НЬЮТРИШН БАЙОСАЙЕНСИЗ АпС Способы применения сериновой протеазы архей
WO2018167153A1 (en) 2017-03-17 2018-09-20 Novozymes A/S Improved filamentous fungal host cell
WO2018172155A1 (en) 2017-03-23 2018-09-27 Novozymes A/S Improved filamentous fungal host cells
CN107353327A (zh) * 2017-03-30 2017-11-17 南京百斯杰生物工程有限公司 植酸酶在黑曲霉中表达
EP3601550A1 (en) 2017-03-31 2020-02-05 Novozymes A/S Polypeptides having dnase activity
WO2018177936A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Novozymes A/S Polypeptides having dnase activity
US11149233B2 (en) 2017-03-31 2021-10-19 Novozymes A/S Polypeptides having RNase activity
CN110506048A (zh) 2017-04-03 2019-11-26 诺维信公司 回收方法
US20200109352A1 (en) 2017-04-04 2020-04-09 Novozymes A/S Polypeptide compositions and uses thereof
US11339355B2 (en) 2017-04-04 2022-05-24 Novozymes A/S Glycosyl hydrolases
US20200109354A1 (en) 2017-04-04 2020-04-09 Novozymes A/S Polypeptides
EP3619304A1 (en) 2017-05-05 2020-03-11 Novozymes A/S Compositions comprising lipase and sulfite
EP3401385A1 (en) 2017-05-08 2018-11-14 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising polypeptide comprising carbohydrate-binding domain
US11492605B2 (en) 2017-05-08 2022-11-08 Novozymes A/S Mannanase variants and polynucleotides encoding same
WO2018206535A1 (en) 2017-05-08 2018-11-15 Novozymes A/S Carbohydrate-binding domain and polynucleotides encoding the same
EP3622063A1 (en) 2017-05-08 2020-03-18 Novozymes A/S Mannanase variants and polynucleotides encoding same
CA3064171A1 (en) 2017-05-22 2018-11-29 4D Pharma Research Limited Compositions comprising bacterial strains
TW201907931A (zh) 2017-05-24 2019-03-01 英商4D製藥研究有限公司 包含細菌菌株之組合物
EP3635110A2 (en) 2017-06-06 2020-04-15 Zymergen, Inc. A high-throughput (htp) genomic engineering platform for improving saccharopolyspora spinosa
CN110719956A (zh) 2017-06-06 2020-01-21 齐默尔根公司 用于改良真菌菌株的高通量基因组工程改造平台
JP2020524494A (ja) 2017-06-06 2020-08-20 ザイマージェン インコーポレイテッド ハイスループットトランスポゾン変異誘発
DK3600364T3 (da) 2017-06-14 2020-08-31 4D Pharma Res Ltd Sammensætninger omfattende en bakteriestamme af slægten megasphaera og anvendelser deraf
HUE052319T2 (hu) 2017-06-14 2021-04-28 4D Pharma Res Ltd Baktériumtörzseket tartalmazó készítmények
US11499144B2 (en) 2017-06-22 2022-11-15 Novozymes A/S Xylanase variants and polynucleotides encoding same
EP4015524A1 (en) 2017-06-28 2022-06-22 Novozymes A/S Polypeptides having trehalase activity and polynucleotides encoding same
CA3067837A1 (en) 2017-06-30 2019-01-03 Danisco Us Inc Low-agglomeration, enzyme-containing particles
WO2019023222A1 (en) 2017-07-24 2019-01-31 Novozymes A/S GH5 AND GH30 IN WET MILLING
US10081800B1 (en) 2017-08-03 2018-09-25 Fornia Biosolutions, Inc. Lactonase enzymes and methods of using same
WO2019030165A1 (en) 2017-08-08 2019-02-14 Novozymes A/S POLYPEPTIDES HAVING TREHALASE ACTIVITY AND THEIR USE IN A PRODUCTION PROCESS OF FERMENTATION PRODUCTS
EP3673060A1 (en) 2017-08-24 2020-07-01 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising xanthan lyase variants ii
CN111344404A (zh) 2017-08-24 2020-06-26 诺维信公司 黄原胶裂解酶变体以及编码其的多核苷酸
EP3673056A1 (en) 2017-08-24 2020-07-01 Henkel AG & Co. KGaA Detergent compositions comprising gh9 endoglucanase variants ii
WO2019038058A1 (en) 2017-08-24 2019-02-28 Novozymes A/S GH9 ENDOGLUCANASE VARIANTS AND POLYNUCLEOTIDES ENCODING SUCH VARIANTS
BR112020003854A2 (pt) 2017-09-01 2020-09-08 Novozymes A/S aditivo de ração animal, formulação líquida, ração animal, métodos para melhoria de um ou mais parâmetros de desempenho de um animal, para preparação de uma ração animal, para o tratamento de proteínas, para aumento da digestibilidade e/ou solubilidade de proteína, para melhoria do valor nutricional de uma ração animal, para produção de um polipeptídeo, e, uso do aditivo de ração animal e da formulação líquida.
CN111050565A (zh) 2017-09-01 2020-04-21 诺维信公司 包含具有蛋白酶活性的多肽的动物饲料添加剂及其用途
WO2019046703A1 (en) 2017-09-01 2019-03-07 Novozymes A/S METHODS OF ENHANCING GENOME EDITION IN FUNGI
WO2019055940A1 (en) 2017-09-18 2019-03-21 Dupont Nutrition Biosciences Aps ENZYMES RIBOFLAVINASES AND THEIR USE FOR REMOVING AROMA DURING BREWING
WO2019067390A1 (en) 2017-09-27 2019-04-04 The Procter & Gamble Company DETERGENT COMPOSITIONS CONTAINING LIPASES
CN111356762A (zh) 2017-09-27 2020-06-30 诺维信公司 脂肪酶变体和包含此类脂肪酶变体的微囊组合物
US11746310B2 (en) 2017-10-02 2023-09-05 Novozymes A/S Polypeptides having mannanase activity and polynucleotides encoding same
CN111373036A (zh) 2017-10-02 2020-07-03 诺维信公司 具有甘露聚糖酶活性的多肽和编码它们的多核苷酸
JPWO2019069977A1 (ja) * 2017-10-03 2020-12-24 キッコーマン株式会社 アルカリホスファターゼの製造方法及びそれを用いて得られるアルカリホスファターゼ、並びにその製造のためのベクター及び形質転換体
WO2019081721A1 (en) 2017-10-27 2019-05-02 Novozymes A/S VARIANTS OF DNASE
PL3476936T3 (pl) 2017-10-27 2022-04-11 The Procter & Gamble Company Kompozycje detergentu zawierające odmiany polipeptydowe
DE102017125559A1 (de) 2017-11-01 2019-05-02 Henkel Ag & Co. Kgaa Reinigungszusammensetzungen, die dispersine ii enthalten
DE102017125560A1 (de) 2017-11-01 2019-05-02 Henkel Ag & Co. Kgaa Reinigungszusammensetzungen, die dispersine iii enthalten
DE102017125558A1 (de) 2017-11-01 2019-05-02 Henkel Ag & Co. Kgaa Reinigungszusammensetzungen, die dispersine i enthalten
US20200318086A1 (en) 2017-11-10 2020-10-08 Novozymes A/S Temperature-sensitive cas9 protein
WO2019099235A1 (en) 2017-11-14 2019-05-23 Danisco Us Inc Alpha-amylase, composition and method
WO2019096903A1 (en) 2017-11-20 2019-05-23 Novozymes A/S New galactanases (ec 3.2.1.89) for use in soy processing
EP3717643A1 (en) 2017-11-29 2020-10-07 Danisco US Inc. Subtilisin variants having improved stability
US11725197B2 (en) 2017-12-04 2023-08-15 Novozymes A/S Lipase variants and polynucleotides encoding same
PE20211298A1 (es) 2017-12-19 2021-07-20 Dupont Nutrition Biosci Aps Modificacion enzimatica mejorada de fosfolipidos en alimentos
WO2019121852A1 (en) 2017-12-20 2019-06-27 Societe Des Produits Nestle S.A. Process for the preparation of pickering emulsion forming particles by derivatization of cellulose-rich dietary fibers with enzymes and emulsions prepared
CA3086202A1 (en) 2017-12-21 2019-06-27 Danisco Us Inc. Enzyme-containing, hot-melt granules comprising a thermotolerant desiccant
US20210017544A1 (en) 2017-12-22 2021-01-21 Novozymes A/S Counter-Selection by Inhibition of Conditionally Essential Genes
WO2019154951A1 (en) 2018-02-08 2019-08-15 Novozymes A/S Lipases, lipase variants and compositions thereof
US20210071155A1 (en) 2018-02-08 2021-03-11 Novozymes A/S Lipase Variants and Compositions Thereof
CN111867388A (zh) 2018-02-08 2020-10-30 丹尼斯科美国公司 用于酶包封的耐热蜡基质颗粒
EP3530744A1 (en) 2018-02-23 2019-08-28 University of Limerick A polypeptide having xylanase and/or cellulase activity
CN112105740A (zh) 2018-02-23 2020-12-18 诺维信公司 真菌宿主中的长链非编码rna表达
DK3775222T3 (da) 2018-03-26 2024-02-19 Novozymes As Chaperoneproteiner fra svampe
EP3775190A1 (en) 2018-03-29 2021-02-17 Novozymes A/S Mannanase variants and polynucleotides encoding same
MX2020010526A (es) 2018-04-09 2021-01-08 Novozymes As Polipéptidos que tienen actividad alfa-amilasa ypolinucleótidos que los codifican.
CN112204137B (zh) 2018-04-19 2024-05-14 诺维信公司 稳定化的纤维素酶变体
WO2019201783A1 (en) 2018-04-19 2019-10-24 Novozymes A/S Stabilized cellulase variants
CN112166180A (zh) 2018-06-06 2021-01-01 齐默尔根公司 操纵涉及信号转导的基因以控制发酵和生产期间的真菌形态
WO2019245705A1 (en) 2018-06-19 2019-12-26 Danisco Us Inc Subtilisin variants
WO2019245704A1 (en) 2018-06-19 2019-12-26 Danisco Us Inc Subtilisin variants
WO2020002575A1 (en) 2018-06-28 2020-01-02 Novozymes A/S Polypeptides having pectin lyase activity and polynucleotides encoding same
CN112654703A (zh) 2018-07-06 2021-04-13 杜邦营养生物科学有限公司 用于基于谷类的动物饲料的含木聚糖酶饲料添加剂
US20210278406A1 (en) 2018-07-13 2021-09-09 Varct Diagnostic Aps Isolation of circulating cells of fetal origin using recombinant malaria protein var2csa
US20210315238A1 (en) 2018-07-31 2021-10-14 Dupont Nutrition Biosciences Aps Proline specific endopeptidases
WO2020025357A1 (en) 2018-08-02 2020-02-06 Novozymes A/S Preparation of combinatorial libraries of dna constructs using introns
EP3844255A1 (en) 2018-08-30 2021-07-07 Danisco US Inc. Enzyme-containing granules
CN112566502A (zh) 2018-08-31 2021-03-26 诺维信公司 具有蛋白酶活性的多肽以及编码它们的多核苷酸
EP3849337A1 (en) 2018-09-11 2021-07-21 DSM IP Assets B.V. Animal feed composition and use thereof
AU2019339615A1 (en) 2018-09-11 2021-03-04 Dsm Ip Assets B.V. Animal feed composition comprising muramidase and use thereof
US20210337828A1 (en) 2018-09-11 2021-11-04 Dsm Ip Assets B.V. Animal feed composition and use thereof
BR112021004501A2 (pt) 2018-09-11 2021-06-08 Dsm Ip Assets B.V. composição de ração animal e uso da mesma
AU2019338224A1 (en) 2018-09-11 2021-03-04 Dsm Ip Assets B.V. Animal feed composition and use thereof
WO2020068486A1 (en) 2018-09-27 2020-04-02 Danisco Us Inc Compositions for medical instrument cleaning
EP3861008A1 (en) 2018-10-03 2021-08-11 Novozymes A/S Polypeptides having alpha-mannan degrading activity and polynucleotides encoding same
EP3864136A1 (en) 2018-10-09 2021-08-18 Novozymes A/S Modified filamentous fungal host cell
WO2020092608A1 (en) 2018-10-31 2020-05-07 Novozymes A/S Genome editing by guided endonuclease and single-stranded oligonucleotide
WO2020099491A1 (en) 2018-11-14 2020-05-22 Novozymes A/S Oral care composition comprising a polypeptide having dnase activity
MX2021005825A (es) 2018-11-20 2021-08-05 Dupont Nutrition Biosci Aps Polipéptidos del clado de fitasa con alta temperatura de desnaturalización (tm) robustos modificados por ingeniería genética y fragmentos de los mismos.
WO2020112881A1 (en) 2018-11-28 2020-06-04 Novozymes A/S Modified filamentous fungal host cells
US20230028935A1 (en) 2018-11-28 2023-01-26 Danisco Us Inc Subtilisin variants having improved stability
CN113166211A (zh) 2018-11-28 2021-07-23 诺维信公司 改善的丝状真菌宿主细胞
US20220064228A1 (en) 2018-12-12 2022-03-03 Novozymes A/S Methods For Increasing The Productivity Of A Filamentous Fungal Cell In The Production Of A Polypeptide
EP3894551A1 (en) 2018-12-12 2021-10-20 Novozymes A/S Polypeptides having xylanase activity and polynucleotides encoding same
WO2020127198A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Novozymes A/S Tandem protein expression
CN113366103A (zh) 2018-12-21 2021-09-07 诺维信公司 具有肽聚糖降解活性的多肽以及编码其的多核苷酸
CN113646428A (zh) 2019-02-25 2021-11-12 杜邦营养生物科学有限公司 具有增加的n-末端氨基酸产率的蛋白质水解产物
WO2020173817A1 (en) 2019-02-28 2020-09-03 Novozymes A/S Calcite binding proteins
CN113490740A (zh) 2019-03-18 2021-10-08 诺维信公司 适合用于液化中的具有普鲁兰酶活性的多肽
US10995325B2 (en) 2019-03-21 2021-05-04 Fornia Biosolutions, Inc. Additional phytase variants and methods
JP2020162549A (ja) 2019-03-29 2020-10-08 味の素株式会社 制御装置、制御方法およびプログラムならびに有機化合物の製造方法
BR112021019809A2 (pt) 2019-04-03 2021-12-07 Novozymes As Polipeptídeos que têm atividade de beta-glucanase, polinucleotídeos que codificam os mesmos e seus usos em composições de limpeza e de detergentes
CN113874499A (zh) 2019-04-10 2021-12-31 诺维信公司 多肽变体
CN113795576A (zh) 2019-04-12 2021-12-14 诺维信公司 稳定化的糖苷水解酶变体
US20220275354A1 (en) 2019-05-15 2022-09-01 Novozymes A/S TEMPERATURE-SENSITIVE RNA- Guided Endonuclease
WO2020242858A1 (en) 2019-05-24 2020-12-03 Danisco Us Inc Subtilisin variants and methods of use
US20220306968A1 (en) 2019-06-06 2022-09-29 Danisco Us Inc Methods and compositions for cleaning
EP3983462A1 (en) 2019-06-14 2022-04-20 Basf Se Aqueous polymer dispersions suitable as opacifiers in liquid formulations
WO2020260223A1 (en) 2019-06-24 2020-12-30 Novozymes A/S Alpha-amylase variants
JP7326497B2 (ja) 2019-06-24 2023-08-15 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー アミラーゼバリアントを含む洗浄組成物
US20220298517A1 (en) 2019-06-25 2022-09-22 Novozymes A/S Counter-selection by inhibition of conditionally essential genes
WO2021001400A1 (en) 2019-07-02 2021-01-07 Novozymes A/S Lipase variants and compositions thereof
US20220267783A1 (en) 2019-07-25 2022-08-25 Novozymes A/S Filamentous fungal expression system
US20220251581A1 (en) 2019-07-26 2022-08-11 Novozymes A/S Modified filamentous fungal host cell
MX2022002834A (es) 2019-09-16 2022-04-06 Novozymes As Polipeptidos con actividad beta-glucanasa y polinucleotidos que los codifican.
WO2021064068A1 (en) 2019-10-03 2021-04-08 Novozymes A/S Polypeptides comprising at least two carbohydrate binding domains
US20220389458A1 (en) 2019-11-04 2022-12-08 Dsm Ip Assets B.V. Low volume transfection
WO2021102238A1 (en) 2019-11-20 2021-05-27 Dupont Nutrition Biosciences Aps Thermostable phytase variants
BR112022012105A2 (pt) 2019-12-19 2022-12-13 Novozymes As Variantes de xilanase e polinucleotídeos codificando as mesmas
EP4077699A1 (en) 2019-12-19 2022-10-26 Basf Se Increasing space-time-yield, carbon-conversion-efficiency and carbon substrate flexibility in the production of fine chemicals
CN115103602A (zh) 2019-12-19 2022-09-23 杜邦营养生物科学有限公司 日粮配制品
US20220411773A1 (en) 2019-12-20 2022-12-29 Novozymes A/S Polypeptides having proteolytic activity and use thereof
CN115135762A (zh) 2019-12-20 2022-09-30 巴斯夫欧洲公司 降低萜烯的毒性和增加微生物的生产潜力
US20230242960A1 (en) 2020-01-24 2023-08-03 Novozymes A/S Mutants of a filamentous fungal cell having increased productivity in the production of a polypeptide
WO2021152120A1 (en) 2020-01-31 2021-08-05 Novozymes A/S Mannanase variants and polynucleotides encoding same
JP2023511739A (ja) 2020-01-31 2023-03-22 ノボザイムス アクティーゼルスカブ マンナナーゼバリアント及びそれをコードするポリヌクレオチド
EP4103709A2 (en) 2020-02-10 2022-12-21 Novozymes A/S Polypeptides having alpha-amylase activity and polynucleotides encoding same
WO2021163011A2 (en) 2020-02-10 2021-08-19 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
WO2021163015A1 (en) 2020-02-10 2021-08-19 Novozymes A/S Process for producing ethanol from raw starch using alpha-amylase variants
WO2021170559A1 (en) 2020-02-26 2021-09-02 Novozymes A/S Polypeptide variants
WO2021173974A1 (en) 2020-02-28 2021-09-02 Dupont Nutrition Biosciences Aps Feed compositions
CN115427560A (zh) 2020-03-12 2022-12-02 诺维信公司 使用无催化活性rna指导的内切核酸酶的crispr-aid
EP3892708A1 (en) 2020-04-06 2021-10-13 Henkel AG & Co. KGaA Cleaning compositions comprising dispersin variants
WO2021204838A1 (en) 2020-04-08 2021-10-14 Novozymes A/S Carbohydrate binding module variants
EP4136459A1 (en) 2020-04-13 2023-02-22 Abbott Laboratories Methods, complexes and kits for detecting or determining an amount of a ss-coronavirus antibody in a sample
EP4139431A1 (en) 2020-04-21 2023-03-01 Novozymes A/S Cleaning compositions comprising polypeptides having fructan degrading activity
EP4153765A1 (en) 2020-05-20 2023-03-29 Wisconsin Alumni Research Foundation Cells and methods for producing methyl ketones
US11479779B2 (en) 2020-07-31 2022-10-25 Zymergen Inc. Systems and methods for high-throughput automated strain generation for non-sporulating fungi
KR20230042301A (ko) 2020-08-04 2023-03-28 애벗트 라보라토리이즈 샘플에서 sars-cov-2 단백질을 검출하기 위한 개선된 방법 및 키트
EP4199897A2 (en) 2020-08-24 2023-06-28 Novozymes A/S Oral care composition comprising a fructanase
US20230313165A1 (en) 2020-08-25 2023-10-05 Novozymes A/S Variants of a family 44 xyloglucanase
WO2022047149A1 (en) 2020-08-27 2022-03-03 Danisco Us Inc Enzymes and enzyme compositions for cleaning
WO2022043563A1 (en) 2020-08-28 2022-03-03 Novozymes A/S Polyester degrading protease variants
US20230404088A1 (en) 2020-09-21 2023-12-21 Dupont Nutrition Biosciences Aps Combination of nonmaltogenic exoamylase and glucoamylase for improving bread resilience and reducing amount of added sugars
WO2022078910A1 (en) 2020-10-13 2022-04-21 Novozymes A/S Glycosyltransferase variants for improved protein production
AU2021360228A1 (en) 2020-10-15 2023-05-04 Dsm Ip Assets B.V. Methods of modulating gastrointestinal metabolites
JP2023547450A (ja) 2020-10-29 2023-11-10 ノボザイムス アクティーゼルスカブ リパーゼ変異体及びそのようなリパーゼ変異体を含む組成物
EP4237555A1 (en) 2020-11-02 2023-09-06 Novozymes A/S Glucoamylase variants and polynucleotides encoding same
EP4237430A1 (en) 2020-11-02 2023-09-06 Novozymes A/S Leader peptides and polynucleotides encoding the same
EP4026900A3 (en) 2020-12-17 2022-10-05 Fornia BioSolutions, Inc. Xylanase variants and methods
EP4023757A1 (en) 2020-12-29 2022-07-06 The Protein Brewery B.V. Methods for generating selection marker-free transformants of heterokaryotic organisms
WO2022147147A1 (en) 2020-12-30 2022-07-07 Abbott Laboratories Methods for determining sars-cov-2 antigen and anti-sars-cov-2 antibody in a sample
EP4284906A1 (en) 2021-01-29 2023-12-06 Danisco US Inc. Compositions for cleaning and methods related thereto
AR124921A1 (es) 2021-02-18 2023-05-17 Novozymes As Polipéptidos inactivos que contienen hemo
WO2022189521A1 (en) 2021-03-12 2022-09-15 Novozymes A/S Polypeptide variants
US20240060061A1 (en) 2021-03-15 2024-02-22 Novozymes A/S Dnase variants
WO2022197512A1 (en) 2021-03-15 2022-09-22 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions containing polypeptide variants
EP4060036A1 (en) 2021-03-15 2022-09-21 Novozymes A/S Polypeptide variants
WO2022194728A1 (en) 2021-03-16 2022-09-22 Dsm Ip Assets B.V. Animal feed composition and use thereof
EP4071763A1 (en) 2021-04-08 2022-10-12 DuPont Nutrition Biosciences ApS A method for measuring galactooligosaccharides
CN117355608A (zh) 2021-05-27 2024-01-05 诺维信公司 转录调节物和编码其的多核苷酸
CN118043454A (zh) 2021-06-18 2024-05-14 国际N&H丹麦有限公司 用于啤酒浑浊减少的蛋白酶
WO2022268885A1 (en) 2021-06-23 2022-12-29 Novozymes A/S Alpha-amylase polypeptides
CN117616120A (zh) 2021-06-30 2024-02-27 丹尼斯科美国公司 变体脂肪酶及其用途
WO2023288294A1 (en) 2021-07-16 2023-01-19 Novozymes A/S Compositions and methods for improving the rainfastness of proteins on plant surfaces
WO2023039270A2 (en) 2021-09-13 2023-03-16 Danisco Us Inc. Bioactive-containing granules
WO2023114939A2 (en) 2021-12-16 2023-06-22 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
WO2023114936A2 (en) 2021-12-16 2023-06-22 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
WO2023114932A2 (en) 2021-12-16 2023-06-22 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
WO2023152220A1 (en) 2022-02-10 2023-08-17 Novozymes A/S Improved expression of recombinant proteins
WO2023168234A1 (en) 2022-03-01 2023-09-07 Danisco Us Inc. Enzymes and enzyme compositions for cleaning
EP4242303A1 (en) 2022-03-08 2023-09-13 Novozymes A/S Fusion polypeptides with deamidase inhibitor and deamidase domains
WO2023170177A1 (en) 2022-03-08 2023-09-14 Novozymes A/S Fusion polypeptides with deamidase inhibitor and deamidase domains
WO2023194388A1 (en) 2022-04-07 2023-10-12 Novozymes A/S Fusion proteins and their use against eimeria
WO2023209070A1 (en) 2022-04-29 2023-11-02 Novozymes A/S Production of fatty acid alkyl esters
WO2023225459A2 (en) 2022-05-14 2023-11-23 Novozymes A/S Compositions and methods for preventing, treating, supressing and/or eliminating phytopathogenic infestations and infections
WO2023250301A1 (en) 2022-06-21 2023-12-28 Danisco Us Inc. Methods and compositions for cleaning comprising a polypeptide having thermolysin activity
WO2023247664A2 (en) 2022-06-24 2023-12-28 Novozymes A/S Lipase variants and compositions comprising such lipase variants
WO2024003143A1 (en) 2022-06-30 2024-01-04 Novozymes A/S Mutanases and oral care compositions comprising same
WO2024012912A1 (en) 2022-07-15 2024-01-18 Novozymes A/S Polypeptides having deamidase inhibitor activity
WO2024015974A1 (en) 2022-07-15 2024-01-18 Dupont Nutrition Biosciences Aps Improved enzymatic modification of phospholipids in food
WO2024050343A1 (en) 2022-09-02 2024-03-07 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods related thereto
WO2024050346A1 (en) 2022-09-02 2024-03-07 Danisco Us Inc. Detergent compositions and methods related thereto
WO2024050339A1 (en) 2022-09-02 2024-03-07 Danisco Us Inc. Mannanase variants and methods of use
WO2024056643A1 (en) 2022-09-15 2024-03-21 Novozymes A/S Fungal signal peptides
WO2024102698A1 (en) 2022-11-09 2024-05-16 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
WO2024118901A2 (en) 2022-11-30 2024-06-06 Novozymes A/S Carbonic anhydrase variants and polynucleotides encoding same
WO2024120767A1 (en) 2022-12-05 2024-06-13 Novozymes A/S Modified rna polymerase activities
WO2024121070A1 (en) 2022-12-05 2024-06-13 Novozymes A/S Protease variants and polynucleotides encoding same
WO2024124013A1 (en) 2022-12-09 2024-06-13 International N&H Denmark Aps Feed formulations comprising a phytase for dairy ruminant animals
EP4389865A1 (en) 2022-12-21 2024-06-26 Novozymes A/S Recombinant protease for cell detachment
EP4273249A3 (en) 2023-07-07 2024-05-22 Novozymes A/S Improved expression of recombinant proteins

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3650202T3 (de) * 1985-08-29 2004-06-03 Genencor International, Inc., South San Francisco Expression von heterologen Polypeptiden in filamentösen Pilzen, Verfahren zu deren Herstellung und Vektoren zu deren Herstellung.
CZ289014B6 (cs) * 1989-09-27 2001-10-17 Dsm N. V. Vyčiątěná a izolovaná sekvence DNA kódující fungální fytázu, konstrukt pro expresi, vektory a transformované hostitelské buňky a způsob produkce fytázy

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2010536334A (ja) * 2007-08-13 2010-12-02 ティーエムオー リニューアブルズ リミティド エタノール生産用好熱性微生物

Also Published As

Publication number Publication date
JPH0751067A (ja) 1995-02-28
FI871144A0 (fi) 1987-03-16
ES2061446T3 (es) 1994-12-16
JP3903165B2 (ja) 2007-04-11
FI108147B (fi) 2001-11-30
CA1341593C (en) 2009-04-21
EP0238023A3 (en) 1989-02-22
JPH0665316B2 (ja) 1994-08-24
FI112376B (fi) 2003-11-28
DE3752379D1 (de) 2004-12-16
EP0489718A1 (en) 1992-06-10
ATE282093T1 (de) 2004-11-15
EP1502952A2 (en) 2005-02-02
EP0238023B1 (en) 1993-12-22
JPS62272988A (ja) 1987-11-27
DK122686D0 (da) 1986-03-17
DE3788524T3 (de) 2003-04-24
DE3752379T2 (de) 2005-10-20
IE63169B1 (en) 1995-03-22
FI871144A (fi) 1987-09-18
JPH10276787A (ja) 1998-10-20
IE940343L (en) 1987-09-17
DE3788524T2 (de) 1994-05-11
IE870682L (en) 1987-09-17
EP1502952A3 (en) 2005-05-11
DE3788524D1 (de) 1994-02-03
FI20011797A (fi) 2001-09-12
ES2061446T5 (es) 2003-04-01
EP0238023A2 (en) 1987-09-23
EP0238023B2 (en) 2002-10-02
ATE98993T1 (de) 1994-01-15
JP2003153696A (ja) 2003-05-27
EP0489718B1 (en) 2004-11-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP3005618B2 (ja) アスペルギルス属酵母のプロモーター
US5863759A (en) Process for the production of protein products in aspergillus
US5766912A (en) Humicola lipase produced in aspergillus
US5874558A (en) Nucleic acid encoding a recombinant humicola sp. lipase
EP0305216B1 (en) Recombinant Humicola lipase and process for the production of recombinant humicola lipases
DK175460B1 (da) Fremgangsmåde til fremstilling af et pattedyrpolypeptid
DK2410048T3 (en) A process for the preparation of a compound of interest in a filamentous fungal cell
CN1526820B (zh) 用于在真菌细胞中表达基因的启动子
JP3343117B2 (ja) ヘムタンパク質を製造するための方法
WO1983004051A1 (en) Expression of preprothaumatin-like proteins in kluyveromyces yeasts
JP2007267752A (ja) ａｒｅＡ，ｐｅｐＣ及び／又はｐｅｐＥ遺伝子及びプロテアーゼ
EP0770139A1 (en) A FUNGUS WHEREIN THE areA GENE HAS BEEN MODIFIED AND AN areA GENE FROM ASPERGILLUS ORYZAE
CA2205411A1 (en) Lysophospholipase produced from aspergillus by recombinant methods
JP2866739B2 (ja) アスペルギルスエンドキシラナーゼ▲ｉｉ▼遺伝子に由来する発現／分泌調節領域を用い、形質転換したカビでタンパク質を産生して分泌させるための方法
NO302899B1 (no) Rekombinant DNA-molekyl, transformert vertscelle, anvendelse av rekombinant DNA-molekyl og hybridvektor, og pektinlyasene PLA, PLB, PLC, PLE eller PLF i ren form
JP2001025393A (ja) アスペルギルス発現システム
JP3330941B2 (ja) ヘム・タンパク質の製造方法
JP3113284B2 (ja) アスペルギルス・フェティダス発現系
JPH099968A (ja) 糸状菌のエンハンサーｄｎａ塩基配列およびその用途
JPH0797993B2 (ja) ポリペプチドの製造方法
DK169134B1 (da) Fremgangsmåde til ekspression af et proteinprodukt i aspergillus og fremgangsmåde til fremstilling af proteinprodukter i aspergillus oryzae
DK170118B1 (da) Promotor til anvendelse i aspergillus
JP2000125859A (ja) 新規な選択マーカー遺伝子ならびにリゾムコール・プシルスの形質転換系
JPH0538289A (ja) 蛋白質の製造法

Legal Events

Date Code Title Description
R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

EXPY Cancellation because of completion of term