CN112533602A - Axl激酶抑制剂及其用途 - Google Patents
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Abstract
结构(I)的化合物的酒石酸盐，其结晶形式及其用于治疗实体肿瘤(例如晚期实体肿瘤)或造血***癌症的治疗应用。本文还提供了合成所述酒石酸盐及其结晶形式的方法。
Description
交叉引用
本申请根据35U.S.C.§119(e)要求2019年3月4日提交的美国临时申请U.S.S.N.62/813,705、2018年12月12日提交的美国临时申请U.S.S.N.62/778,856、2018年11月14日提交的美国临时申请U.S.S.N.62/767,475、2018年11月13日提交的美国临时申请U.S.S.N.62/760,882、2018年7月16日提交的美国临时申请U.S.S.N.62/698,638、2018年7月9日提交的美国临时申请U.S.S.N.62/695,609、2018年6月21日提交的美国临时申请U.S.S.N.62/688,161、2018年5月31日提交的美国临时申请U.S.S.N.62/678,980、2018年4月26日提交的美国临时申请U.S.S.N.62/663,146和2018年4月5日提交的美国临时申请U.S.S.N.62/653,394的优先权，所述申请各自的整个内容通过引用并入本文。
背景技术
AXL是TAM家族的细胞表面受体酪氨酸激酶。AXL受体结合生长因子如维生素K-依赖蛋白的生长停滞特异性基因6(GAS6)，并将信号从细胞外基质传导至细胞质。据报道，AXL是先天免疫应答的抑制剂，并且可能在与细胞生长和发育相关的多个细胞过程中发挥作用。
发现AXL参与肿瘤生长的各个方面，包括癌细胞增殖、侵袭性和迁移以及干性、血管生成和免疫调节。因此，AXL成为有希望的癌症治疗靶标。
发明概述
在一个方面，本公开提供了结构(I)的化合物的酒石酸盐：
在一些实施方案中，本文公开的酒石酸盐可以具有约1:1至约2:1的酒石酸与结构(I)的化合物的摩尔比。例如，所述酒石酸盐可以具有约2:1的酒石酸与结构(I)的化合物的摩尔比。本文公开的任何酒石酸盐可以是L-(+)-酒石酸的盐。
在另一个方面，本公开提供了本文公开的任何酒石酸盐的结晶形式。在一些实施方案中，所述结晶形式是结晶形式A，具有约2:1的酒石酸与结构(I)的化合物的摩尔比。在一些实例中，形式A可以是基本上纯的形式。在一些实施方案中，所述结晶形式包括形式A。在一些实施方案中，所述结晶形式基本上由形式A组成。
本文公开的任何结晶形式可以特征在于x-射线粉末衍射(XRPD)图案，其包括单位为2-θ的11.2±0.2、17.1±0.2和19.9±0.2处的峰。任选地，所述结晶形式可以进一步包括单位为2-θ的15.4±0.2处的峰。可替代地或另外，所述结晶形式可以进一步包括单位为2-θ的7.0±0.2处的峰。在一些实例中，如本文所公开的结晶形式可以特征在于包含三个或更多个峰的XRPD图案，所述峰以2-θ为单位，选自7.0±0.2、11.2±0.2、15.4±0.2、16.3±0.2、17.1±0.2、19.9±0.2、21.6±0.2和25.5±0.2。在其他实例中，所述XRPD图案可以包含4、5、6、7或8个峰，其以2-θ为单位，选自7.0±0.2、11.2±0.2、15.4±0.2、16.3±0.2、17.1±0.2、19.9±0.2、21.6±0.2和25.5±0.2。在一个具体实例中，所述XRPD图案与图61中显示的XRPD图案基本上相同。
可替代地或另外，本文公开的任何结晶形式可以特征在于包含单位为℃的约185.0-194.0的吸热峰的差示扫描量热法(DSC)热图。在一些实施方案中，所述吸热峰具有约186.3℃的起始温度。在一些实施方案中，如本文所公开的结晶形式可以特征在于包含单位为℃的约107.8、约152.1和约189.1的吸热峰的DSC热图。在一个具体实例中，所述结晶形式可以具有与图64中显示的热图基本上相同的DSC热图。
此外，本文公开的任何结晶形式可以特征在于在160℃下显示约1.8％的重量损失的热重分析(TGA)热图。例如，所述TGA热图与图64中显示的热图基本上相同。
本文公开的任何结晶形式可以具有至少99％的初始纯度和在60±5％的相对湿度下在约25℃±2℃下储存最长达约15天后至少99％的后续纯度。在一些实施方案中，所述结晶形式可以具有至少99％的初始纯度和在75±5％的相对湿度下在约40℃±2℃下储存最长达约15天后至少99％的后续纯度。
还在本公开的范围内的是包含本文公开的任何酒石酸盐或本文也公开的任何结晶形式的组合物。在一些实施方案中，所述组合物包含基本上纯形式的形式A。在一些实施方案中，所述组合物包含至少90重量％形式A。在一些实施方案中，所述组合物基本上由结晶形式A组成。
本文公开的任何组合物可以是药物组合物，并且进一步包含药学上可接受的载体或稀释剂。在一些实施方案中，所述药物组合物可以进一步包含一种或多种额外的治疗剂，例如，激素治疗剂、化学治疗剂、免疫治疗剂、细胞生长因子或抑制细胞生长因子受体作用的药剂。本文公开的任何药物组合物可以被配制用于口服施用。例如，所述药物组合物可以被配制为胶囊或片剂。
此外，本公开提供了包含本文公开的任何药物组合物的单位剂量。所述单位剂量可以包含约1-100mg的酒石酸盐。在一些实施方案中，本文公开的单位剂量可以包含约1mg、4mg、16mg、25mg、50mg、75mg或100mg的酒石酸盐。在一些实施方案中，所述单位剂量可以被配制在明胶硬胶囊中用于口服施用。
在另一个方面，本公开提供了治疗癌症的方法，所述方法包括向有此需要的受试者(例如，人)施用治疗有效量的本文公开的任何酒石酸盐、本文公开的任何结晶形式、包含此的任何药物组合物或本文也公开的任何单位剂量。
在一些实施方案中，本文公开的方法包括向所述受试者施用治疗有效量的酒石酸盐，所述酒石酸盐具有约2:1的酒石酸与结构(I)的化合物的摩尔比。在一些实例中，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的结晶形式A，其可以是基本上纯的形式。
在一个进一步方面，本文提供了治疗受试者中的癌症的方法，其包括向所述受试者施用结构(I)的化合物：
或其药学上可接受的盐或结晶形式。所述化合物或其药学上可接受的盐或结晶形式可以以约1.5mg/m2至约65mg/m2的剂量或以约20mg至约100mg的剂量每天一次口服施用于所述受试者。所述受试者可以具有如本文所公开的任何肿瘤(例如，晚期实体肿瘤)或造血***癌症。在一些实施方案中，所述受试者可能已经经历一种或多种先前的癌症疗法，例如，本文公开的那些。
在一些实施方案中，结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐或结晶形式可以约1.0、约1.5、约3.0、约6.0、约9.0、约12.0、约16.0、约21.0、约28.0、约37.0、约49.0或约65.0mg/m2的剂量口服施用。例如，结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐或结晶形式可以作为单一抗癌剂以约25mg、约33mg、约45mg、约50mg、约58mg、约75mg或约100mg的每日剂量施用于所述受试者。在具体实例中，将结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐或结晶形式与第二抗癌剂同时口服施用于所述受试者，且结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐或结晶形式的每日剂量为约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、约75mg、约80mg、约85mg、约90mg、约95mg或约100mg。
在本文公开的任何方法中，所述癌症可以是实体肿瘤或血液学癌症。示例性实体肿瘤包括，但不限于，骨、消化器官、生殖器官、头、颈、肺、心脏、皮肤、神经***、内分泌***、神经内分泌***、泌尿***、软组织或脑的肿瘤。示例性造血***癌症包括，但不限于，多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征(MDS)、急性髓性白血病(AML)、急性成淋巴细胞性白血病(ALL)、急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)、套细胞淋巴瘤、弥漫性大B-细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤或非霍奇金氏淋巴瘤。
在一些实施方案中，所述癌症是晚期实体肿瘤和/或在接受一种或多种先前的癌症疗法后已显示疾病进展。例如，所述实体肿瘤可以是抗性的、重现的、难治的或复发的实体肿瘤。在一些实例中，一种或多种先前的癌症疗法包括激素治疗剂、化学治疗剂(例如，烷化剂、基于铂的药剂、抗代谢物、抗癌抗生素或植物来源的抗癌剂)、免疫治疗剂或细胞表面受体抑制剂。示例性化学治疗剂包括，但不限于，卡铂、顺铂、米铂、奈达铂和奥沙利铂。
在一些实施方案中，所述受试者已经经历一种或多种先前的癌症疗法，其包括免疫疗法、化学疗法或其组合。
在一些实施方案中，所述受试者具有实体肿瘤，其可以是非小细胞肺癌(NSCLC)、结肠直肠癌(CRC)、卵巢癌、黑色素瘤、乳腺癌、神经内分泌癌、***癌、胆管癌、子宫癌和胰腺癌。
在一些实施方案中，所述受试者在接受免疫疗法后可能具有至少稳定的疾病。例如，所述受试者可以已经接受最多达两个周期的免疫疗法。
在一些实施方案中，所述受试者可能具有EGFR+NSCLC。在一些实例中，所述受试者在接受一种或多种包含一种或多种酪氨酸激酶抑制剂(TKI)(其可以包括包含EGFR TKI)的化学疗法后可能已表明疾病进展。在一些实例中，所述受试者在采用最多两线TKI后可以具有至少稳定的疾病。
在一些实施方案中，所述受试者可能具有BRAF-、KRAS-或NRAS-突变的结肠直肠癌(CRC)。
在一些实施方案中，所述受试者可能具有持续性或复发性卵巢癌。例如，所述受试者可能具有对基于铂的药剂的难治性或抗性，或已经经历先前的疗法，或两者兼而有之。在一些实例中，所述基于铂的药剂是卡铂、顺铂、米铂、奈达铂或奥沙利铂。
在一些实施方案中，所述受试者可以具有BRAF-突变的黑色素瘤。在一些实例中，所述受试者在免疫疗法、包含一种或多种BRAF/MEK抑制剂的化学疗法或其组合后可以具有进展的疾病。
在一些实施方案中，所述受试者可以具有对免疫疗法的抗性，且其中所述方法进一步包括对所述受试者进行相同的免疫疗法。在一些实例中，所述免疫疗法包含抗PD-1或抗PD-L1药剂。
在本文公开的任何方法(例如，治疗EGFR+NSCLC的方法)中，所述受试者可以具有对包含TKI的化学疗法的抗性。这种方法可以进一步包括对所述受试者进行相同的化学疗法。
在本文公开的任何方法中，所述受试者未采用等同于15mg/天的强的松的量的类固醇。可替代地或另外，所述方法可以进一步包括向所述受试者施用伴随的类固醇。在一些实施方案中，所述受试者可以至少在第一次给药所述酒石酸盐前一个月内不接受抗癌疗法，至少在第一次给药所述酒石酸盐前7天内不接受CYP2C19代谢物和/或H2-受体拮抗剂。
在本文公开的任何方法中，可以向所述受试者以约1.0、1.5、3.0、6.0、9.0、12.0、16.0、21.0、28.0、37.0、49.0或65.0mg/m2的酒石酸盐的每日剂量口服施用所述酒石酸盐、其结晶形式或包含此的药物组合物。在一些实例中，可以向所述受试者以约20-100mg、任选地约25-75mg、例如约50mg的酒石酸盐的每日剂量口服施用所述酒石酸盐、其结晶形式或药物组合物。
本文公开的任何方法可以包括一个或多个治疗周期，其各自由约28天组成，且其中在每个治疗周期中，将所述酒石酸盐、其结晶形式或药物组合物每天施用于所述受试者21天，随后为7天的停药期。
在其他实施方案中，待通过本文公开的任何方法治疗的受试者可以具有血液学癌症，其可以是慢性淋巴细胞性白血病(CLL)或小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)。在一些实施方案中，所述受试者已经经历一种或多种针对CLL或SLL的先前疗法。在一些实施方案中，所述受试者可能无法耐受先前疗法，或在先前疗法后具有进展的疾病。在一些实例中，所述先前疗法可以包括B-细胞受体拮抗剂、BCL-2拮抗剂或其组合。在其他实施方案中，所述受试者不可以通过另一癌症疗法同时治疗。在一些实例中，可以向所述受试者以约20-100mg、任选地约25mg-100mg、例如约25mg、约33mg、约45mg、约50mg、约58mg、约75mg或约100mg的酒石酸盐的每日剂量口服施用所述酒石酸盐、其结晶形式或药物组合物。
在一些实例中，用于治疗造血***癌症的方法可以进一步包括向所述受试者施用BTK抑制剂，其可以是依鲁替尼、acalabrutinib、zanubrutinib和LOXO-305。在一个具体实例中，所述BTK抑制剂可以是依鲁替尼。在一些实例中，对所述受试者进行先前的BTK抑制剂的治疗，并且在BTK抑制剂治疗后已经进展。在一些实例中，可以向所述受试者以约20mg-100mg(例如，约25-75mg)、例如约20mg、约25mg、约33mg、约45mg、约50mg、约58mg、约75mg或约100mg的酒石酸盐的每日剂量施用所述酒石酸盐、其结晶形式或包含此的药物组合物。
在一些实施方案中，本文公开的任何方法可以包括一个或多个治疗周期，其各自由约28天组成，且其中在每个周期中，向所述受试者每天一次口服施用所述酒石酸盐、其结晶形式或包含此的药物组合物，持续28天。
本文公开的任何方法可以进一步包括：(a)针对肿瘤溶解综合征(TLS)监测所述受试者；(b)向所述受试者施用抗生素、抗病毒剂、抗真菌剂或其组合，或者其组合。
在一些实施方案中，相对于可溶性AXL、GAS6或间充质转录因子的参考水平，所述受试者可以具有升高水平的可溶性AXL、AXL表达和/或磷酸化、生长停滞特异性6(GAS6)、间充质转录因子或其组合。在一些实例中，所述方法在施用步骤前可以进一步包括，在施用步骤之前，将所述受试者鉴定为相对于可溶性AXL、GAS6或间充质转录因子的参考水平具有升高水平的可溶性AXL、AXL表达和/或磷酸化、生长停滞特异性6(GAS6)、间充质转录因子或其组合。在一些实例中，所述鉴定步骤可以通过如下进行：获得候选受试者的外周血样品或骨髓样品，和测量所述外周血样品或骨髓样品中的可溶性AXL的水平、GAS6的水平、间充质转录因子的水平或其组合。
本文公开的任何方法在施用步骤后可以进一步包括，针对腹泻、恶心、呕吐、味觉障碍、贫血和血小板减少症的一种或多种症状检查受试者。另外，所述方法可以进一步包括，如果检测到一种或多种症状，则降低所述酒石酸盐的每日剂量或终止所述治疗。
在一些实施方案中，本文公开的方法可以进一步包括将有效量的一种或多种治疗剂施用于所述受试者。所述一种或多种治疗剂可以包括一种或多种酪氨酸激酶抑制剂。在一些实例中，所述一种或多种酪氨酸激酶抑制剂可以包括EGFR抑制剂。在其他实例中，所述一种或多种治疗剂可以包括免疫检查点抑制剂，例如PD-1或PD-L1抑制剂。PD-1抑制剂的实例包括，但不限于，派姆单抗、纳武单抗或其组合。PD-L1抑制剂的实例包括，但不限于，阿特珠单抗、阿维单抗、德瓦鲁单抗或其组合。可替代地或另外，所述一种或多种治疗剂可以包括CDK抑制剂，例如，CDK9抑制剂(在一些情况下，其可以是阿伏昔布)，或其药学上可接受的盐或前药。在一些实例中，所述CDK9抑制剂是阿伏昔布的前药，其可以具有以下结构(II')：
在一些实例中，所述一种或多种治疗剂包括基于铂的化学治疗剂。
待与结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，本文公开的任何酒石酸盐)组合使用的示例性额外治疗剂可以包括卡铂、吉西他滨、贝伐单抗、拓扑替康、卢卡帕尼、奥拉帕尼、尼拉帕尼、纳武单抗、派姆单抗、阿特珠单抗、阿维单抗、德瓦鲁单抗、伊匹单抗或其组合。
在又另一个方面，本公开提供了一种方法，其包括向有此需要的受试者施用有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐：
其中所述癌症选自EGFR+非小细胞肺癌；BRAF-、KRAS-或NRAS-突变的结肠直肠癌；持续性或复发性卵巢癌；BRAF-突变的黑色素瘤、炎性乳腺癌和三阴性乳腺癌。在一些实施方案中，所述受试者在接受一种或多种先前的癌症疗法后可能已显示疾病进展。例如，所述癌症是抗性的、难治的、重现的或复发的癌症。在一些实施方案中，所述一种或多种先前的癌症疗法包括激素治疗剂、化学治疗剂、免疫治疗剂或细胞表面受体抑制剂。
此外，本公开提供了治疗癌症的方法，所述方法包括向有此需要的受试者施用有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐：
其中所述受试者具有晚期实体癌症或造血***癌症，其中所述受试者在化学疗法、免疫疗法或其组合后显示疾病进展。待通过该方法治疗的受试者可以具有如本文所公开的任何实体肿瘤或造血***癌症。在一些实施方案中，所述化学疗法或免疫疗法可以包括激素治疗剂、化学治疗剂、免疫治疗剂或细胞表面受体抑制剂，诸如本文公开的那些。在一些实施方案中，所述受试者具有对免疫疗法的抗性，且其中所述方法进一步包括对所述受试者进行相同的免疫疗法。在一些实施方案中，所述受试者具有对包含TKI的化学疗法的抗性，且其中所述方法进一步包括对所述受试者进行相同的化学疗法。
此外，本文提供了用于制备结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐的方法：
所述方法可以包括使具有以下结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
X'是离去基团；
Y是卤素；
Z是卤素或–NR1(R2)；且
R1和R2各自独立地是氢或C1-C8烷基，与N-甲基哌嗪或其盐反应，以获得具有以下结构的化合物：
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，所述方法可以进一步包括以下步骤：
使具有以下结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
Y是卤素；
Z是卤素或–NR1(R2)；且
R1和R2各自独立地是氢或C1-C8烷基，与活化剂反应，以获得具有以下结构的化合物：
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，所述活化剂包含磺酰氯官能团。在一些实施方案中，X'是卤素或磺酸酯(例如，氯)。可替代地或另外，所述活化剂是亚硫酰氯。
在一些实施方案中，所述方法可以进一步包括以下步骤：
使具有以下结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
Y是卤素；
Z是卤素或–NR1(R2)；且
R1和R2各自独立地是氢或C1-C8烷基，
与还原剂反应，以获得具有以下结构的化合物：
在一些实例中，所述还原剂是氢化锂铝、乙硼烷、硼氢化钠、硼烷或其组合。在一个具体实例中，所述还原剂是硼烷。
本文公开的任何方法可以进一步包括：使具有以下结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中
X是离去基团；
Y是卤素；
Z是卤素或–NR1(R2)；且
R1和R2各自独立地是氢或C1-C8烷基，
与具有以下结构的化合物反应：
其中P是H或保护基团，以获得具有以下结构的化合物：
在一些实施方案中，X可以是卤素或磺酸酯(例如，氯)。可替代地或另外，P可以是H；Y可以是氯；Z可以是–NR1(R2)；R1可以是C1-C8烷基(例如，甲基)；和/或R2可以是C1-C8烷基(例如，甲基)。
在又另一个方面，本公开提供了用于制备结构(I)的化合物的酒石酸盐的方法：
在一些实施方案中，步骤(a)的溶剂可以包含比率为约2.5:1(w/w)的苯甲醚和乙醇，和/或具有约70℃的温度。在一些实例中，步骤(b)中的(L)-酒石酸与步骤(a)中的结构(I)的化合物的摩尔比为约2:1，和/或其中经约1小时的过程将酒石酸的溶液添加至第一溶液。在本文公开的任何方法中，将所述第二溶液冷却至约20℃和/或搅拌约5小时。
还在本公开的范围内的是具有以下结构(III)的化合物：
或其药学上可接受的盐、立体异构体或互变异构体，其中：
Y是卤素；
Z是卤素或–NR1(R2)；
R1和R2各自独立地是氢或C1-C8烷基；
R3是卤素或ORa；
R4是氢或氧代；且
Ra是氢或C1-C8烷基。
在一些实施方案中，Y可以是氯；Z可以是–NR1(R2)，其中在一些情况下，R1和R2可以是C1-C8烷基(例如，甲基)；和/或R3可以是ORa，其中在一些情况下，Ra可以是H。在一些实例中，R3可以是卤素(例如，氯)。在一些实例中，R4可以是氢。在其他实例中，R4可以是氧代。
在一些实施方案中，所述化合物可以具有以下结构之一：
此外，本公开提供了具有以下结构(I)的化合物：
或其立体异构体、药学上可接受的盐、互变异构体或前药，
其中：
A代表6元芳族环或6元碳环；
R1a和R1b各自独立地是H、C1-C6烷基或-OH；
R2和R3各自独立地是H、C1-C6烷基或卤素；
R4是H、C1-C6烷基或-OH；
R5a和R5b各自独立地是H、C1-C6烷基或卤素；
R6a、R6b、R6c和R6d各自独立地不存在或者是-O-；
R7是H、C1-C6烷基、-OH或不存在；
R8不存在或具有以下结构：
R9不存在或者是烯基，条件是存在R8或R9中的至少一个；
R10是H或C1-C6烷基；且
满足所有化学价；
条件是如果R1a和R1b均为甲基，则：
a.R6a、R6b、R6c、R6d和R9中的至少一个是–O-；
b.R7是C1-C6烷基、-OH或不存在；和/或
c.R10是H。
在一些实施方案中，所述化合物可以是以下之一：
其药学上可接受的盐。
此外，本公开提供了药物组合物，其包含本文公开的任何化合物或其立体异构体、药学上可接受的盐、互变异构体或前药以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
还在本公开的范围内的是治疗受试者中的癌症的方法，所述方法包括施用有效量的本文公开的任何化合物或如本文还公开的其立体异构体、药学上可接受的盐、互变异构体或前药或药物组合物。
此外，本文提供了用于确定受试者的代谢概况的方法，所述方法包括：使受试者的细胞的群体与治疗剂接触；和确定作为本文公开的任何化合物的第一代谢物的浓度。在一些实施方案中，所述治疗剂可以是具有以下结构(VI)的化合物：
或其药学上可接受的盐或结晶形式。在一些实施方案中，所述癌症是黑色素瘤(例如，转移性黑色素瘤)、乳腺癌(例如，炎性乳腺癌和/或三阴性乳腺癌)或脑肿瘤(例如，多形性成胶质细胞瘤(GBM))。在一些实施方案中，所述受试者在用免疫疗法治疗后显示疾病进展、重现或复发。
本文公开的方法可以进一步包括将免疫治疗剂施用于所述受试者。在一些实施方案中，所述免疫疗法是检查点抑制剂或CTLA-4抑制剂。例如，所述免疫治疗剂是派姆单抗。在一些实施方案中，所述方法可以在本文公开的一种或多种条件下进行。
本发明的一个或多个实施方案的细节在下面的描述中阐明。本发明的其他特征或优点将从以下附图和几个实施方案的详述以及所附权利要求中变得明显。
附图说明
在图中，相同的参考数字标识相似的要素。图中的要素的尺寸和相对位置不一定按比例绘制，并且这些要素中的一些被放大和定位以改进图的易读性。此外，所绘制的要素的特定形状并非旨在传达关于特定要素的实际形状的任何信息，并且仅为了便于在图中标识而选择。
图1举例说明比较结构(I)的化合物的盐形式的PK结果。
图2显示当作为游离碱和作为酒石酸盐施用时结构(I)的化合物的平均血浆浓度。
图3提供了CDK抑制剂和AXL激酶抑制剂的组合在DOHH2细胞中的细胞活力数据。
图4是CDK抑制剂和AXL激酶抑制剂的组合在HCT-116细胞中的额外细胞活力。
图5显示在施用AXL激酶抑制剂后肿瘤内的活性DC的数量增加。
图6A显示在小鼠中的4T-1乳腺癌同基因移植物中用AXL激酶抑制剂和PD-L1抗体治疗后的肿瘤体积，且图6B显示在小鼠中的4T-1乳腺癌同基因移植物中用AXL激酶抑制剂和PD-L1抗体治疗后的体重。
图7显示在小鼠乳腺癌模型中在有或没有放射疗法的情况下用AXL激酶抑制剂和PD1抗体治疗后的肿瘤体积。
图8显示在小鼠黑色素瘤模型中在有或没有放射疗法的情况下用AXL激酶抑制剂和PD1抗体治疗后的肿瘤体积。
图9显示在小鼠结肠直肠癌模型中用AXL激酶抑制剂和PD1抗体治疗后的肿瘤体积。
图10显示在小鼠肺癌模型中用AXL激酶抑制剂和PD1抗体治疗后的肿瘤体积。
图11显示结构(I)的化合物在乳腺癌的同基因小鼠模型中的活性。图11A显示所研究动物的肿瘤体积，且图11B显示所研究动物的体重。
图12显示在EGFR突变的肺癌模型中用AXL激酶抑制剂和EGFR抑制剂治疗后的肿瘤体积。
图13显示在EGFR突变的肺癌模型中用AXL激酶抑制剂和两种不同的EGFR抑制剂治疗后的肿瘤体积。
图14显示pAXL和总AXL的蛋白表达水平。
图15A和图15B显示用结构(I)的化合物处理后的EMT标志物表达的变化。
图16A和图16B显示用结构(I)的化合物处理对Panc-1或Aspc-1细胞的迁移的影响。
图17A和图17B显示与埃罗替尼组合的结构(I)的化合物在肺癌的体内异种移植模型中的治疗效果。
图18A和图18B显示与埃罗替尼组合的结构(I)的化合物在肺癌的体内异种移植模型中的治疗效果。
图18C和图18D显示结构(I)的化合物和H1650 NSCLC细胞系中的EGFRi活性。将H1650细胞在所示药物存在的情况下孵育72小时，其后根据制造商方案使用CellTiter-Glo试剂评价细胞活力。用以下单一试剂(IC50)处理的H1650细胞：结构(I)的化合物(35.9nM)、埃罗替尼(9.9M)或奥斯替尼(2.2M)(图18C)。H1650细胞用结构(I)的化合物和埃罗替尼的组合处理(图18D)。
图18E和图18F显示结构(I)的化合物和埃罗替尼在H1650异种移植模型中的组合活性。携带H1650异种移植物肿瘤的小鼠每天通过经口灌胃用结构(I)的化合物(40mg/kg)、埃罗替尼(20mpk)或组合治疗。每周两次评价肿瘤体积和体重。
图18G和图18H显示结构(I)的化合物和奥斯替尼在H1650异种移植模型中的组合活性。携带H1650异种移植物肿瘤的小鼠每天通过经口灌胃用结构(I)的化合物(40mg/kg)、奥斯替尼(20mpk)或组合治疗。每周两次评价肿瘤体积和体重。
图19A和图19B显示询问结构(I)的化合物处理在佛波酯(PMA)处理的THP-1细胞中的效果(巨噬细胞诱导)的胞葬作用(efferocytosis)测定。
图20显示用结构(I)的化合物处理的细胞中的RA的CYP26A1mRNA水平。
图21A和图21B显示MV4-11细胞中的CYP26A1 mRNA表达。
图22A和图22B显示AXL与RA输入相关基因Stra6免疫共沉淀。
图23显示pAXL和总AXL的蛋白水平。
图24显示结构(I)的化合物抑制CYP26A1的基础表达。
图25显示经24小时的CYP26A1表达的变化。
图26显示R428处理的细胞中的CYP26A1表达。
图27显示CYP26A1表达和细胞内RA水平的变化。
图28显示结构(I)的化合物影响参与RA合成和代谢的多种基因的表达。
图29显示对RA和结构(I)的化合物应答的基因的选择列表。
图30A和图30B显示(图30A)MV4-11和(图30B)A549细胞中的CYP26A1 mRNA表达。
图31显示用RA处理的A549细胞中的CYP26A1蛋白表达。
图32显示用结构(I)的化合物低剂量处理的情况下经72小时的CYP26A1表达的变化。
图33显示对于用R428处理的MV4-11细胞经24小时的CYP26A1表达的变化。
图34A-34D显示(图34A/34B)MV4-11和(图34C/34D)A549异种移植物研究。
图35是显示治疗之前和之后体内CYP26A1表达的变化的照片。
图36是显示用结构(I)的化合物治疗的小鼠的肿瘤中的CYP26相对于未治疗的小鼠随时间的倍数变化的图表。
图37是显示用结构(I)的化合物治疗的小鼠的肝脏中的CYP26相对于未治疗的小鼠随时间的倍数变化的图表。
图38-40显示在以下时间的GAS6(图38)；以及GAS6和AXL(图39和40)的血清水平：周期1/给药前第1天("C1D1 PRE")，以及给药后2和24小时(分别为("C1D1 2"和"C1D124")，以及周期1/给药前第8天("C1D8 PRE")。
图41显示在患者来源的结肠直肠癌的异种移植模型中，在用结构(I)的化合物治疗的第二十天(给药后四小时收集)的AXL和GAS6的血浆水平。
图42显示在患者来源的结肠直肠癌的异种移植模型中，用结构(I)的化合物治疗的第20天的上皮-至-间充质转化标志物的mRNA表达水平。
图43显示在患者来源的结肠直肠癌的异种移植模型中，用结构(I)的化合物治疗的第27天(最后一次给药后一周)的上皮-至-间充质转化标志物的mRNA表达水平。
图44显示在患者来源的结肠直肠癌的异种移植模型中，用结构(I)的化合物治疗的第20天(上小图)和第27天(最后一次给药后一周，下小图)的活化的树突细胞的标志物(CD86和CD11c)的mRNA表达水平。
图45A显示来自具有疾病进展(PD)vs.稳定疾病(SD)的患者的血清中的基线AXL水平。
图45B显示来自具有疾病进展(PD)vs.稳定疾病(SD)的患者的血清中的基线AXL水平。
图46A显示来自具有PD vs.SD的患者的血清中的基线GAS6水平。
图46B显示来自具有PD vs.SD的患者的血清中的基线GAS6水平。
图47A-47C显示调节性T-细胞对结构(I)的化合物的敏感性。
图48显示在用媒介物或25毫克(mg)/千克(kg)的结构(I)的化合物处理的样品中发现的总肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)。
图49显示来自用媒介物或25mg/kg的结构(I)的化合物处理的4T1模型的样品中发现的树突细胞。
图50显示来自用媒介物或25mg/kg的结构(I)的化合物处理的4T1模型的样品中发现的巨噬细胞。
图51显示来自用媒介物或25mg/kg的结构(I)的化合物处理的4T1模型的样品中发现的嗜中性粒细胞。
图52显示来自用媒介物或25mg/kg的结构(I)的化合物处理的4T1模型的样品中发现的自然杀伤(NK)细胞。
图53显示来自用媒介物或25mg/kg的结构(I)的化合物处理的4T1模型的样品中发现的调节性T细胞(Treg)。
图54显示来自用媒介物或25mg/kg的结构(I)的化合物处理的4T1模型的样品中发现的耗尽的CD8 T细胞。
图55显示结构(I)的化合物与抗PD-1在4T1模型中的组合效果。
图56A和图56B显示结构(I)的化合物与PD-1的组合在CD8+T耗竭小鼠中的抗肿瘤作用。
图57显示结构(I)的化合物对脾脏中的免疫细胞(描绘为第16天的脾脏中的总细胞)的影响。
图58A和58B显示结构(I)的化合物对肿瘤中的免疫细胞(描绘为第11天的细胞/mg肿瘤)的影响。
图59显示结构(I)的化合物对肿瘤中的细胞因子和趋化因子的基因表达的影响。
图60显示用结构(I)的化合物治疗后肿瘤中的细胞因子和趋化因子的调节的时间进程。
图61A举例说明从结晶形式A的XRPD分析获得的x-射线衍射图。
图61B举例说明结晶形式A的1HNMR光谱。
图61C举例说明结晶形式A’的1HNMR光谱。
图62A举例说明从结晶形式B的XRPD分析获得的x-射线衍射图。
图62B举例说明结晶形式B的1HNMR光谱。
图63A举例说明从多晶型形式D的XRPD分析获得的x-射线衍射图。
图63B举例说明结晶形式D的1HNMR光谱。
图64显示对于结晶形式A获得的TGA和DSC图。
图65显示形式B(上)和形式A(下)之间的比较。
图66显示对用结构(I)的化合物处理的ES-2细胞的细胞活力的影响。
图67显示各种浓度的结构(I)的化合物对几种化学疗法-抗性的卵巢癌细胞系的结果(右上小图和左上小图)，以及结构(I)的化合物、卡博替尼和福列替尼(Foretinib)对铂抗性的Kuramochi细胞系中的卵巢肿瘤细胞的细胞活力的比较测试的结果(下小图)。
图68比较结构(I)的化合物和卡博替尼对铂抗性的Kuramochi细胞系中的磷酸化-AXL(Y702)水平的影响。
图69显示在用各种浓度的结构(I)的化合物处理后两小时通过mRNA表达分析定量的上皮至间充质(EMT)标志物的结果。
图70显示在用各种浓度的结构(I)的化合物处理后24小时通过mRNA表达分析定量的上皮至间充质(EMT)标志物的结果。
图71显示用各种浓度的结构(I)的化合物处理后对于EMT标志物Snail和Slug测量的蛋白表达水平。
图72显示结构(I)的化合物和BMS-777607对划痕测定中的卵巢肿瘤细胞的迁移的影响。
图73显示治疗后的小鼠的周长和每个治疗组中的小鼠的代表性照片，如实施例33中所述。
图74显示治疗后的小鼠的体重的图，如实施例33中所述。
图75显示用结构(I)的化合物治疗ES-2异种移植小鼠后测量的一组趋化因子和细胞因子的结果。
图76显示用结构(I)的化合物治疗后从腹水测定的EMT标志物的mRNA表达水平。
图77显示用25mg/kg或50mg/kg的结构(I)的化合物治疗后的血液中的可溶性AXL、GAS6和PD-L1水平，如实施例33中所述。
图78显示治疗后血液中的小鼠vs.人AXL、GAS6和PD-L1的相对水平，如实施例33中所述。
图79显示对于如实施例37中所述治疗的小鼠，用结构(I)的化合物vs.媒介物对照(左上)治疗的小鼠的代表性照片，治疗的小鼠的体重，治疗的小鼠的腹围，回收的腹水的体积和存活百分比。
图80显示与对照组相比，注射ES-2细胞的小鼠的微管蛋白、总AXL和在Y702位点磷酸化的AXL以及相对AXL磷酸化的western印迹的结果，如实施例37中所述。
图81显示对于如实施例39中所述治疗的小鼠，荷瘤和非荷瘤小鼠的腹围和体重。
图82显示在实施例39中所述的研究中治疗的小鼠的腹水体积和代表性照片，其中左侧显示非荷瘤小鼠，且右侧显示荷瘤小鼠。
图83显示用各种剂量的结构(I)的化合物处理细胞的结果，如实施例40中所述。
图84显示植入后5-25天的A2780cis异种移植小鼠的周长，如实施例40中所述。
图85显示植入后5-25天的A2780cis异种移植小鼠的体重，如实施例40中所述。
图86显示治疗后第25天研究中的小鼠的代表性照片，如实施例40中所述。
图87显示A2780cis异种移植小鼠的肿瘤中的基因表达水平，如实施例40中所述。
图88显示用结构(I)的化合物治疗后，Snail和β-肌动蛋白的蛋白表达水平通过western印迹分析测量为负载对照，如实施例40中所述。
图89显示血清中的人Axl表达，如实施例40中所述。
图90-92显示来自用化合物VI给药连续21天的受试者在第1天和第21天的化合物IV血浆浓度的代表性数据。
图93提供用化合物VI给药连续21天的第1天和第21天收集并显示为曲线下面积(AUC)值的化合物VI和活性代谢物数据。
图94显示形式B的XRPD峰特征。
图95显示形式B的TGA/DSC曲线。
图96显示形式D的XRPD峰特征。
图97显示形式D的TGA/DSC曲线。
图98A显示结晶形式A、B和C的XRPD衍射图之间的比较。
图98B显示结晶形式D、E、F、G、H和I的XRPD衍射图之间的比较。
图99A-99I显示结晶形式A至I的热行为(DSC/TGA图)。
图100显示概述结构(I)的化合物如何经历向多种种类的代谢转化的总体方案。
图101A-101E显示代谢物M2、M3、M4、M6和M7的1H(质子)NMR谱。
图102A-102B显示两个不同群组中21天后活性代谢物的相对量。
图103A-103D显示结构(I)的化合物的合成中的中间体的1H(质子)NMR谱。
图104A-104B举例说明结构(I)的化合物独立于KRAS突变状态抑制结肠直肠癌(CRC)细胞系的细胞生长。图104A显示选择的CRC细胞系的KRAS突变状态。图104B显示在用结构(I)的化合物处理72小时后的CRC细胞活力测定和经由CellTiter-Glo评价。结构(I)的化合物表明独立于KRAS突变状态的功效，其中IC50在4.5nM和123nM之间。
图105A-105B显示结构(I)的化合物抑制间充质标志物，而不调节上皮标志物。HCT-116细胞用指定浓度的AXL抑制剂：R428、RXDX-106和结构(I)的化合物处理24小时。图105A显示经由RT-qPCR定量的mRNA表达水平。图105B显示经由western印迹分析蛋白表达水平。500nM结构(I)的化合物将Snail表达抑制7.6倍(m-RNA)和4.9倍(蛋白)。
图106A-106C显示结构(I)的化合物在KRAS突变型HCT-116异种移植模型中抑制肿瘤生长。无胸腺裸小鼠在后侧腹中注射1000万个细胞，并分层成10只小鼠的群组。将化合物配制于H20中的5％(w/v)TPGS和1％(v/v)PS80中，并通过经口灌胃施用。每周两次测量肿瘤体积(图106A)和体重(图106B)。肿瘤内GAS6表达经由RT-qPCR定量。40mg/kg的结构(I)的化合物群组达到69％TGI，而无不良事件(图106C)。
图107A-107B显示结构(I)的化合物在KRAS突变型PDX CRC模型中抑制肿瘤生长。Balb/c裸小鼠用2-3mm的原发性人CRC肿瘤的片段植入，且然后分成10只小鼠的群组。将结构(I)的化合物配制于H20中的5％(w/v)TPGS和1％(v/v)PS80中，并通过经口灌胃施用。每周两次测量肿瘤体积(图107A)和体重(图107B)。40mg/kg的结构(I)的化合物群组达到44％TGI，而无不良事件。
图108A-108E显示在KRAS突变型PDX CRC模型中，结构(I)的化合物抑制sAXL/sGAS6浓度，同时下调Wnt/β-联蛋白调节的基因Axin2/CCND1。经由ELISA在血清中定量sAXL(图108A)和sGAS6(图108B)。经由RT-qPCR定量肿瘤内GAS6(图108C)、Axin2(图108D)和CCND1(图108E)。对处理27天的小鼠进行分析(除了Axin2；21天)。sAXL和sGAS6的抑制表明EMT的逆转。结构(I)的化合物介导的Wnt/β-联蛋白相关基因的下调进一步支持先前报道的AXL在β-联蛋白稳定中的作用。
图109显示KRAS突变型PDX CRC模型中的sAXL/sGAS6和肿瘤体积之间的正相关性将它们鉴定为疾病进展的潜在生物标志物。经由ELISA在每只小鼠的血清中定量可溶性浓度，随后进行线性回归分析。各种相关性的统计显著性：sAXL和肿瘤体积(P<0.005)；以及sGAS6和肿瘤体积(P<0.0005)。
图110A-110B显示结构(I)的化合物处理的NSCLC细胞中的EMT标志物表达。H1650(图110A)和A549细胞(图110B)用浓度最高达2μM的结构(I)的化合物处理2小时，其后使用标准qPCR技术评价snail和slug基因表达。
图111A-111B显示AXL抑制剂处理的H1650和A549细胞中的EMT标志物蛋白表达。H1650细胞用0.1、0.5或1.0μM的结构(I)的化合物或R428处理24小时，其后收获细胞，并使用标准的western免疫印迹技术评价E-钙粘蛋白和Snail蛋白表达(图111A)。A549细胞用0.1、0.5或1.0μM的结构(I)的化合物或R428处理24小时，其后收获细胞，并使用标准的western免疫印迹技术评价E-钙粘蛋白和Snail蛋白表达(图111B)。
图112显示结构(I)的化合物治疗的H1650异种移植小鼠中的slug mRNA表达。携带H1650异种移植肿瘤的小鼠用结构(I)的化合物(40mg/kg)经口灌胃治疗，其后在给药后的不同时间点收获肿瘤。通过标准qPCR技术评价Slug和E-钙粘蛋白mRNA表达。
图113显示结构(I)的化合物治疗的H1650异种移植小鼠中的snail蛋白表达。携带H1650异种移植肿瘤的小鼠用结构(I)的化合物(40mg/kg)经口灌胃治疗，其后在给药后的不同时间点收获肿瘤。通过标准免疫印迹技术评价Slug和E-钙粘蛋白蛋白表达。
图114显示4T1模型中的结构(I)的化合物的药代动力学概况。用60mpk的结构(I)的化合物的酒石酸盐p.o.治疗携带4T1的小鼠。在指定的时间点收集肿瘤和血液。
图115显示结构(I)的化合物对血清中的细胞因子的影响。Balb/c小鼠用4T1细胞原位移植。移植后7天，施用结构(I)的化合物(60mg/kg,p.o.,Q.D.)。在第12天最后一次给药后2、6和24小时收集全血。用Milliplex测定法测量血清中的细胞因子。正常指示健康的无肿瘤小鼠。n＝6(媒介物：n＝5，正常：n＝3)。误差条指示SD。N.D指示“无数据”。
图116显示形式A′、A、B、C和D的吸湿等温线。
图117显示在吸湿等温线之前和之后之间的形式A和形式D的XRPD图案的比较。
图118显示形式A和形式B的拉曼光谱及其PCA数据。
具体实施方式
A.定义
在以下描述中，阐述了某些具体细节，以提供对本发明各个实施方案的透彻理解。然而，本领域技术人员将理解，本发明可以在没有这些细节的情况下实施。
除非上下文另有要求，否则在本说明书和权利要求书中，词语“包含(comprise)”及其变体，诸如，“包含(comprises)”和“包含(comprising)”应被解释为开放的、包含性的含义(即，“包括，但不限于”)。
整个本说明书中提及“一个实施方案(one embodiment)”或“一个实施方案(anembodiment)”是指在本发明的至少一个实施方案中包括结合该实施方案描述的具体特性、结构或特征。因此，在整个本说明书中的各处出现的短语“在一个实施方案中(in oneembodiment)”或“在一个实施方案中(in an embodiment)”不一定都指同一实施方案。此外，该具体特性、结构或特征可以在一个或多个实施方案中以任何合适的方式组合。
除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域技术人员通常理解的含义相同的含义。如本说明书和权利要求书中所使用，单数形式“一个/种(a)”、“一个/种(an)”和“该/所述(the)”包括复数形式，除非上下文另有明确规定。
“氧代”是指＝O取代基。
“烷基”是指仅由碳和氢原子组成的直链或支链的烃链，其为饱和或不饱和的(即含有一个或多个双键和/或三键)，具有1至12个碳原子(C1-C12烷基)，优选1至8个碳原子(C1-C8烷基)或1至6个碳原子(C1-C6烷基)，并通过单键与分子的其余部分连接，例如甲基、乙基、正丙基、1-甲基乙基(异丙基)、正丁基、正戊基、1,1-二甲基乙基(叔丁基)、3-甲基己基、2-甲基己基、乙烯基、丙-1-烯基、丁-1-烯基、戊-1-烯基、戊-1,4-二烯基、乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基等。烷基包括烯基(一个或多个碳-碳双键)和炔基(一个或多个碳-碳三键，诸如乙炔基等)。除非说明书中另有明确规定，否则烷基可被任选地取代。
“卤代”或“卤素”是指溴、氯、氟或碘。
如本文所用的术语“取代的”是指至少一个氢原子被与非氢原子的键取代，所述非氢原子诸如但不限于：卤素原子、诸如F、Cl、Br和I；基团、诸如羟基、烷氧基和酯基中的氧原子；基团、诸如硫醇基、硫代烷基、砜基、磺酰基和亚砜基中的硫原子；基团、诸如胺、酰胺、烷基胺、二烷基胺、芳胺、烷基芳胺、二芳胺、N-氧化物、酰亚胺和烯胺中的氮原子；基团、诸如三烷基甲硅烷基、二烷基芳基甲硅烷基、烷基二芳基甲硅烷基和三芳基甲硅烷基中的硅原子；和各种其他基团中的其他杂原子。“取代”还意指一个或多个氢原子被与氧代、羰基、羧基和酯基中的杂原子(诸如氧)；和基团、诸如亚胺、肟、腙和腈中的氮的更高级键(例如双键或三键)替代。例如，在一些实施方案中，“取代的”意指一个或多个氢原子被-NRgRh、-NRgC(＝O)Rh、-NRgC(＝O)NRgRh、-NRgC(＝O)ORh、-NRgSO2Rh、-OC(＝O)NRgRh、-ORg、-SRg、-SORg、-SO2Rg、-OSO2Rg、-SO2ORg、＝NSO2Rg和-SO2NRgRh替代。“取代的”还意指一个或多个氢原子被-C(＝O)Rg、-C(＝O)ORg、-C(＝O)NRgRh、-CH2SO2Rg、-CH2SO2NRgRh替代。在上文中，Rg和Rh是相同或不同的，并且独立地为氢、烷基、烷氧基、烷基胺基、硫代烷基、芳基、芳烷基、环烷基、环烷基烷基、卤代烷基、杂环基、N-杂环基、杂环基烷基、杂芳基、N-杂芳基和/或杂芳基烷基。“取代的”进一步是指一个或多个氢原子被与胺基、氰基、羟基、亚氨基、硝基、氧代、硫代、卤素、烷基、烷氧基、烷基胺基、硫代烷基、芳基、芳烷基、环烷基、环烷基烷基、卤代烷基、杂环基、N-杂环基、杂环基烷基、杂芳基、N-杂芳基和/或杂芳基烷基的键替代。另外，前述取代基各自也可以任选地被上述取代基中的一个或多个取代。
术语“有效量”或“治疗有效量”是指本文所述的化合物(例如，结构(I)的化合物或结构(I)的药学上可接受的盐，诸如酒石酸盐)足以实现预期应用(包括但不限于疾病治疗)的量，如下所定义。治疗有效量可以根据预期的治疗应用(体内)或所治疗的受试者和疾病状况(例如，受试者的重量和年龄、疾病状况的严重程度、施用方式等)而变化，这可以由本领域普通技术人员容易地确定。该术语还适用于将在靶标细胞中诱导特定应答(例如，血小板粘附和/或细胞迁移的降低)的剂量。具体剂量将根据所选择的特定化合物、待遵循的给药方案、是否与其他化合物组合施用、施用时间、待施用其的组织以及待携带其的物理递送***而不同。
“癌症”，包括“肿瘤”，是指不受控制的细胞生长和/或异常增加的细胞存活和/或细胞凋亡的抑制，其干扰身体器官和***的正常发挥功能。“癌症”(例如肿瘤)包括实体和非实体癌症。具有癌症或肿瘤的受试者具有存在于受试者的身体中的客观可测量数量的癌细胞。“癌症”包括良性和恶性癌症(例如，分别为良性和恶性肿瘤)，以及休眠肿瘤或微转移。
对特定治疗“抗性”的癌症是指在施用疗法后持续少于6个月表明持续疾病或完全缓解的癌症。在一些实施方案中，具有对特定治疗抗性的癌症的受试者没有显示对该疗法的统计学显著的客观应答。如果受试者具有正常的CA-125水平(例如低于46U/mL)和正常的CT扫描，则该受试者被视为处于“完全缓解”。在一些实施方案中，如果癌症在接受疗法的同时或在最后一次施用疗法后六个月内进展，则该癌症对特定治疗抗性。
复发性癌症是指出现在其被根除或消失的部位的癌症。如果受试者在最后一次接受治疗后六个月内已复发，如果癌症已经进展(例如，通过成像证实)，则治疗抗性癌症(例如，铂抗性)是“复发的”。例如，如果受试者在最后一次接受基于铂的化学疗法后6个月内已复发，则铂抗性的癌症是复发的。
如本文所用，关于具有AML的受试者的术语“难治的”具有其在本领域中的普通含义，并且可以指在治疗后(例如，在治疗后一周内、两周内、四周内或两个月内)在其骨髓中具有残余白血病细胞的受试者。
如果癌症存在或无限长期处于同一状态，则该癌症是“持续性的”。
如本文所用，术语“复发”具有其在本领域中的通常含义，并且可以指在由于治疗完全缓解(例如，初始完全缓解)的时段后AML或AML的体征和症状的返回。在一些实施方案中，复发可以指完全缓解后疾病的复发，其可以由医师在临床评价后确定。
如果癌症在最后一次施用疗法后6至12个月进展，则癌症对疗法“部分敏感”(例如，部分铂敏感)。
如果癌症在最后一次施用疗法后超过12个月进展，则癌症对治疗“敏感”(例如，铂敏感)。“转移”是指癌症从其原发部位扩散至身体中的其他部位。“转移”是从其原始位置迁移并接种重要器官的癌症，其最终可以通过受影响器官的功能恶化而导致受试者的死亡。转移是一个依次过程，其中癌细胞可以从原发性肿瘤脱离，渗透至***和血管中，通过血液循环，并在身体中别处的正常组织中的远端中心中生长(转移)。在新的位置，细胞建立血液供应，并且可以生长以形成威胁生命的物质。转移可以是局部的或远端的。肿瘤细胞内的刺激和抑制分子途径两者均调节该行为，并且肿瘤细胞和新部位的宿主细胞之间的相互作用也是重要的。
具有至少“稳定疾病”的受试者是指根据iRECIST对疗法具有稳定疾病、部分应答或完全应答的受试者。
如本文所用，“治疗(treatment)”或“治疗(treating)”是指用于获得关于疾病、病症或医学状况的有益或期望结果(包括但不限于治疗益处和/或预防益处)的方法。治疗益处意指消除或改善所治疗的潜在疾病。此外，通过消除或改善与潜在病症相关的一种或多种生理症状、使得在受试者中观察到改善(尽管受试者仍可能患有潜在病症)，实现治疗益处。在某些实施方案中，对于预防益处，将组合物施用于处于发展特定疾病的风险中的受试者，或报告疾病的一种或多种生理症状的受试者，即使可能尚未进行该疾病的诊断。
如本文所用，术语“治疗周期”具有其在本领域中的普通含义，并且可以指以定期时间表重复的一个或多个过程治疗，包括休息时间。
“治疗效果”，当在本文中使用该术语时，涵盖如上所述的治疗益处和/或预防益处。预防效果包括延迟或消除疾病或病况的出现，延迟或消除疾病或病况的症状的开始，减缓、停止或逆转疾病或状况的进展或其任何组合。
如本文所用的术语“共同施用”、“与…组合施用”及其语法等同物涵盖向动物(包括人)施用两种或更多种药物，使得药物和/或其代谢物两者均同时存在于受试者中。共同施用包括在分开的组合物中同时施用、在不同时间在分开的组合物中施用或在两种药剂均存在的组合物中施用。
“药学上可接受的盐”包括酸和碱加成盐两者。
“药学上可接受的酸加成盐”是指保留游离碱的生物有效性和特性的那些盐，其不是生物上或其他方面不期望的，并且与以下形成：无机酸，诸如但不限于盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等，和有机酸，诸如但不限于乙酸、2,2-二氯乙酸、己二酸、海藻酸、抗坏血酸、天冬氨酸、苯磺酸、苯甲酸、4-乙酰胺基苯甲酸、樟脑酸、樟脑-10-磺酸、癸酸、己酸、辛酸、碳酸、肉桂酸、柠檬酸、环拉酸、十二烷基磺酸、乙烷-1,2-二磺酸、乙磺酸、2-羟基乙磺酸、甲酸、富马酸、半乳酸、龙胆酸、葡萄庚酸、葡萄糖酸、葡醛酸、谷氨酸、戊二酸、2-氧代-戊二酸、甘油磷酸、乙醇酸、马尿酸、异丁酸、乳酸、乳糖醛酸、月桂酸、马来酸、苹果酸、丙二酸、扁桃酸、甲磺酸、粘酸、萘-1,5-二磺酸、萘-2-磺酸、1-羟基-2-萘甲酸、烟酸、油酸、乳清酸、草酸、棕榈酸、扑酸、丙酸、焦谷氨酸、丙酮酸、水杨酸、4-氨基水杨酸、癸二酸、硬脂酸、琥珀酸、酒石酸(例如L-(+)-酒石酸)、硫氰酸、对甲苯磺酸、三氟乙酸、十一碳烯酸等。
“药学上可接受的碱加成盐”是指保留游离酸的生物有效性和特性的那些盐，其不是生物上或其他方面不期望的。这些盐由向游离酸添加无机碱或有机碱来制备。衍生自无机碱的盐包括，但不限于，钠、钾、锂、铵、钙、镁、铁、锌、铜、锰、铝盐等。优选的无机盐是铵盐、钠盐、钾盐、钙盐和镁盐。衍生自有机碱的盐包括，但不限于，伯胺、仲胺和叔胺的盐、取代胺(包括天然存在的取代胺)、环胺和碱性离子交换树脂，诸如氨、异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、二乙醇胺、乙醇胺、deanol、2-二甲基氨基乙醇、2-二乙基氨基乙醇、二环己胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、海巴胺、胆碱、甜菜碱、二甲基乙醇胺、苄星、乙二胺、氨基葡萄糖、可可碱、三乙醇胺、氨丁三醇、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、多胺树脂等。特别优选的有机碱是异丙胺、二乙胺、乙醇胺、三甲胺、二环己胺、胆碱和咖啡因。
在一些实施方案中，药学上可接受的盐包括季铵盐，诸如季胺烷基卤盐(例如，甲基溴化物)。
“抗癌剂”、“抗肿瘤剂”或“化学治疗剂”是指用于***病况的任何药剂。一类抗癌药包括化学治疗剂。“化学疗法”意指通过各种方法(包括静脉内、口服、肌内、腹膜内、膀胱内、皮下、经皮、经颊或吸入或以栓剂的形式)向癌症患者施用一种或多种化学治疗药物和/或其他药剂。
“受试者”是指动物，诸如哺乳动物，例如人。本文所述的方法可用于人治疗剂和兽医应用中。在一些实施方案中，所述受试者是哺乳动物，且在一些实施方案中，所述受试者是人。
“哺乳动物”包括人和家养动物、诸如实验动物和家庭宠物(例如，猫、狗、猪、牛、绵羊、山羊、马、兔)以及非家养动物、诸如野生动物等。
“放射疗法”意指使用专业人员已知的常规方法和组合物将受试者暴露于放射发射体，诸如发射α-颗粒的放射性核素(例如，锕和钍放射性核素)、低线性能量转移(LET)放射发射体(即，β发射体)、转换电子发射体(例如，锶-89和钐-153-EDTMP)或高能放射物，包括但不限于x-射线、γ射线和中子。
“前药”意指可以在生理条件下或通过溶剂分解转化为本文所述的生物活性盐(例如，结构(I)的酒石酸盐)的化合物。因此，术语“前药”是指药学上可接受的生物活性化合物的前体。在一些方面，前药当施用于受试者时无活性，但在体内例如通过水解转化为活性化合物。前药化合物经常提供在哺乳动物生物体中的溶解性、组织相容性或延迟释放的优点(参见，例如，Bundgard,H.,Design of Prodrugs(1985),pp.7-9,21-24(Elsevier,Amsterdam)。前药的讨论提供于Higuchi,T.,等人,"Pro-drugs as Novel DeliverySystems,"A.C.S.Symposium Series,Vol.14,和Bioreversible Carriers in DrugDesign,编Edward B.Roche,American Pharmaceutical Association and PergamonPress,1987，其两者均通过引用全文并入本文。术语“前药”也意在包括任何共价键合的载体，当将这种前药施用于哺乳动物受试者时，所述载体在体内释放活性化合物。如本文所述的活性化合物的前药通常通过如下来制备：修饰活性化合物中存在的官能团，其方式使得该修饰在常规操作或体内被切割成母体活性化合物。前药包括其中羟基、氨基或巯基与任何基团键合的化合物，当将活性化合物的前药施用于哺乳动物受试者时，所述基团分别裂解以形成游离羟基、游离氨基或游离巯基。前药的实例包括但不限于活性化合物中的羟基官能团的乙酸酯、甲酸酯和苯甲酸酯衍生物，或胺官能团的乙酰胺、甲酰胺和苯甲酰胺衍生物等。
术语“体内”是指在受试者体内发生的事件。
当与被提供以描述特定的固体形式、例如特定的温度或温度范围，诸如例如描述熔化、脱水、去溶剂化或玻璃转化；质量变化，诸如例如作为温度或湿度的函数的质量变化；溶剂或水含量，例如在质量或百分比的方面；或峰位置，诸如例如通过IR或拉曼光谱或XRPD的分析中的数值或值范围结合使用时，“约”和“近似”表明该数值或值范围可能偏离本领域普通技术人员认为合理的范围，同时仍描述特定的固态形式。具体地，术语“约”和“近似”当在该上下文中使用时，表明数值或值范围可以变化所述数值或值范围的20％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.9％、0.8％、0.7％、0.6％、0.5％、0.4％、0.3％、0.2％、0.1％或0.01％，同时仍描述特定组成或固态形式。
如本文所用的“基本上相同”是指测量的物理特征，其在值和数据迹线上是相当的，所述值和数据迹线在变异范围内的峰位置和幅度或强度上是相当的，所述变异通常与用于获取迹线或物理特征的仪器的样品定位或处理或身份相关，或者是由于实验室环境或分析仪器内部或之间通常遇到的其他变异或波动。
如本文所用的“实质上纯的”是指本文所述的化合物的固态形式含有小于约3重量％或小于约2重量％的总杂质，或更优选小于约1重量％的水，和/或小于约0.5重量％的杂质，诸如分解或合成的副产物或残余的有机溶剂。
如本文所用的“基本上纯的”是指本文所述的化合物的一种形式，其中该形式的杂质或相关物质的总和小于1％，优选小于0.75％，更优选小于0.5％，并且残余溶剂和水小于1重量％，优选小于0.75重量％，更优选小于0.5重量％，且仍更优选小于0.25重量％。
本文的术语“结晶形式”和相关术语是指给定物质的各种结晶状态，包括但不限于多晶型物、溶剂化物、水合物、混合溶剂化物、共晶体和其他分子复合物。结晶形式也可以是，但不一定是给定物质的各种结晶状态的混合物，诸如假多晶型或多晶型形式的组合，一种或多种多晶型形式与一种或多种假多晶物的组合，或此类形式与物质的无定形或非固态形式的组合。典型的组合是两种或多种多晶型或假多晶型形式的组合，诸如多晶型形式与假多晶型形式的混合物或多晶型或假多晶型形式与无定形材料的混合物。通常，结晶形式通常通过其XRPD图案相互区分。具有不同晶体形态、但基本上相同的XRPD图案的固态形式被认为是不同的结晶形式，因为不同的形态可以表现出与物理形状相关的不同特性。与物理形状相关的特性包括溶解速率、稳定性、吸湿性、机械特性(诸如硬度、抗张强度、相容性(制片))以及与处理相关的那些(例如，流动、过滤、共混)以及本文针对不同多晶型物描述的其他物理或药物特性。
本文公开的本发明的实施方案还意在涵盖通过使一个或多个原子被具有不同原子量或质量数的原子替代而被同位素标记的结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(即，结构(I)的化合物的药学上可接受的盐的“同位素形式”)。可以并入公开的化合物中的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟、氯和碘的同位素，诸如分别为2H、3H、11C、13C、14C、13N、15N、15O、17O、18O、31P、32P、35S、18F、36Cl、123I和125I。这些放射性标记的化合物可用于通过表征例如作用的部位或模式，或与药理学重要作用部位的结合亲和力来帮助确定或测量化合物的有效性。某些同位素标记的结构(I)的化合物的药学上可接受的盐，例如并入放射性同位素的那些，可用于药物和/或基质组织分布研究。鉴于其容易并入和容易检测的方式，放射性同位素氚(即3H)和碳-14(即14C)对于该目的特别有用。
用较重的同位素、诸如氘(即，2H)取代可以提供由更高的代谢稳定性、例如增加的体内半衰期或降低的剂量要求导致的某些治疗优势，且因此在一些情况下是优选的。
用正电子发射同位素(诸如11C、18F、15O和13N)的取代可用于正电子发射断层扫描术(PET)研究中，用于检查基质受体占用情况。同位素标记的结构(I)的化合物的盐通常可以通过本领域技术人员已知的常规技术或通过类似于下述实施例中所述的方法的那些，使用适当的同位素标记的试剂代替先前采用的未标记的试剂，进行制备。
应理解，在本说明书中，所述式的取代基和/或变量的组合仅当此类贡献产生稳定的化合物时才是允许的。“稳定的化合物”和“稳定的结构”意指足够稳健以从反应混合物分离至有用的纯度并配制成有效的治疗剂后幸存的化合物。
“任选的”或“任选地”意指随后描述的情况事件可能发生或可能不发生，并且该描述包括其中所述事件或情况发生的情况和其不发生的情况。例如，“任选地取代的芳基”意指芳基可以被取代或可以不被取代，并且说明书包括取代的芳基和没有取代的芳基两者。
“药物组合物”是指本发明的化合物和本领域普遍接受的用于向哺乳动物(例如人)递送生物活性的化合物的介质的制剂。这种介质包括其所有药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
“药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂”包括但不限于由美国食品和药物管理局批准对于人或家养动物中使用可接受的任何助剂、载体、赋形剂、助流剂、甜味剂、稀释剂、防腐剂、染料/着色剂、增香剂、表面活性剂、湿润剂、分散剂、助悬剂、稳定剂、等渗剂、溶剂或乳化剂。
“两性离子形式”是指化合物的一种形式(例如结构(II'))，其中至少一个官能团具有正电荷，一个官能团具有负电荷，并且整个分子的净电荷为零。例如，磷酸基(-PO3H2)可以以阴离子形式(例如，-PO3H-)存在，并且同一分子内的氮原子可以以质子化(阳离子形式)存在。
“互变异构体”是指从分子的一个原子至同一分子的另一个原子的质子转移。因此，实施方案包括公开的化合物的互变异构体。
“单位剂量”是包含预定量的活性成分的药物组合物的离散量。活性成分的量通常等于将施用于受试者的活性成分的剂量和/或这种剂量的适当分数，诸如这种剂量的一半或三分之一。
本文使用的化学命名方案和结构图是使用ACD/Name 9.07版软件程序和/或ChemDraw Ultra Version 11.0.1版软件命名程序(CambridgeSoft)的I.U.P.A.C.命名***的修改形式。对于本文采用的复杂化学名称，取代基通常在其所附接的基团之前命名。例如，环丙基乙基包含具有环丙基取代基的乙基主链。除下文所述之外，所有键都在本文的化学结构图中标识，除了在一些碳原子上的所有键，其被假设与足够的氢原子键合以完成价态。
B.结构(I)的化合物的酒石酸盐
在一个方面，本公开提供了结构(I)的化合物的酒石酸盐：
在某些实施方案中，所述酒石酸盐是L-(+)-酒石酸的盐。在某些具体实施方案中，结构(I)的化合物的酒石酸盐是结晶或部分结晶固体。
提供了结构(I)的化合物的其他盐形式。所述盐可以是药学上可接受的盐。结构(I)的化合物的药学上可接受的盐可以由以下结构代表：
其中B-是用于成盐的酸的共轭碱。在某些实施方案中，所述药学上可接受的盐是磷酸盐。在某些实施方案中，所述药学上可接受的盐是苹果酸盐。在某些实施方案中，所述药学上可接受的盐是琥珀酸盐。在某些实施方案中，所述药学上可接受的盐是苯磺酸盐。
筛选了结构(I)的化合物的几种盐，如实施例1中所述。所述酒石酸盐表现出有利的药代动力学特性，诸如生物利用度，如实施例2和3中所述。
1.化学计量和结晶形式
在一些实施方案中，酒石酸与结构(I)的化合物的摩尔比范围为约4:1至约1:4，约3.5:1至约1:3.5，约3.2:1至约1:3.2，约3:1至约1:3，约2.7:1至约1:2.7，约2.5:1至约1:2.5，约2.2:1至约1:2.2，约2:1至约1:2.2，约1.8:1至约1:2.2，约1.5:1至约1:2.2，约1.2:1至约1:2.2，约1.1:1至约1:2.2，约0.8:1至约1:2.2，约0.5:1至约1:2.2，约0.2:1至约1:2.2，约0.1:1至约1:2.2，或约2:1至约1:2.5。
在某些实施方案中，酒石酸与结构(I)的化合物的摩尔比为约1:1；例如，约0.8:1至约1.2:1。在某些实施方案中，所述摩尔比为0.8:1、0.9:1、1:1、1.1:1或1.2:1。在一个具体实施方案中，所述摩尔比为1:1。在另一个具体实施方案中，所述摩尔比为1.2:1。一个具体实施方案提供了具有以下结构(IIa)的酒石酸盐：
在某些实施方案中，结构(I)的化合物的酒石酸盐具有以下结构(IIb)、(IIc)、(IId)、(IIe)、(IIf)或(IIg)之一：
a.形式B
在某些实施方案中，具有约1:1的化学计量的酒石酸盐是结晶形式B的，并且特征在于X-射线粉末衍射(XRPD)、差示扫描量热法(DSC)和热重分析(TGA)中的一种或多种。在一个具体实施方案中，形式B具有1:1的酒石酸与结构(I)的化合物的摩尔比。在另一个具体实施方案中，形式B具有1.2:1的酒石酸与结构(I)的化合物的摩尔比。
在某些实施方案中，形式B的特征在于在约22℃的温度下包含两个或更多个峰的XRPD图案，所述峰以2-θ为单位，选自7.5±0.2、10.3±0.2、18.9±0.2和19.0±0.2。在某些实施方案中，形式B的XRPD图案包含2、3或4个峰，其选自7.5±0.2、10.3±0.2、18.9±0.2和19.0±0.2。在某些实施方案中，所述XRPD图案与图62的XRPD图案基本上相同。在某些实施方案中，所述XRPD图案包含选自图94中列出的峰的一个或多个(例如，1、2、3、4或5个)额外峰。
在某些实施方案中，形式B的特征在于包含单位为℃的约101.9处的吸热峰的DSC热图。在某些实施方案中，所述DSC热图包含单位为℃的约140.1处的吸热峰。在某些实施方案中，所述DSC热图包含单位为℃的约101.9和140.1处的吸热峰。在一个具体实施方案中，所述DSC热图与图95的DSC热图基本上相同。
在某些实施方案中，形式B的特征在于在160℃下显示约2.3％的重量损失的TGA热图。在一个具体实施方案中，所述TGA热图与图95中显示的热图基本上相同。
形式B的物理和化学特性描述于实施例26、表17中。形式B的毒物动力学和毒理学概况描述于实施例27中。
b.形式D
在某些实施方案中，具有约1:1的化学计量的酒石酸盐是结晶形式D的，并且特征在于XRPD、DSC和TGA中的一种或多种。在一个具体实施方案中，形式D具有1:1的酒石酸与结构(I)的化合物的摩尔比。
在某些实施方案中，形式D的特征在于在约22℃的温度下包含单位为2-θ的12.8±0.2和18.9±0.2处的峰的XRPD图案。在某些实施方案中，所述XRPD图案与图63的XRPD图案基本上相同。在某些实施方案中，所述XRPD图案包含选自图96中列出的峰的一个或多个(例如，1、2、3、4或5个)额外峰。
在某些实施方案中，形式D的特征在于单位为℃的约79.4处的吸热峰。在某些实施方案中，所述DSC热图包含单位为℃的约140.7处的吸热峰。在某些实施方案中，所述DSC热图包含单位为℃的约79.4和140.7处的吸热峰。所述DSC热图与图97的DSC热图基本上相同。
在某些实施方案中，形式D的特征在于在160℃下显示约2.0％的重量损失的TGA热图。在一个具体实施方案中，所述TGA热图与图97的DSC热图基本上相同。
在某些实施方案中，具有约1:1的化学计量的酒石酸盐包含形式D。在某些实施方案中，具有约1:1的化学计量的酒石酸盐基本上由形式D组成。在某些实施方案中，形式D是基本上纯的。
形式B的物理和化学特性描述于实施例26、表17中。形式B的毒物动力学和毒理学概况描述于实施例27中。
c.形式A’
在某些实施方案中，具有约1.5:1的化学计量的酒石酸盐是结晶形式A’的，并且特征在于XRPD、DSC和TGA中的一种或多种。在某些实施方案中，酒石酸与结构(I)的化合物的摩尔比为约1.5:1；例如，约1.4:1至约1.6:1。在某些实施方案中，所述摩尔比为1.4:1、1.5:1或1.6:1。在一个具体实施方案中，所述摩尔比为1.5:1。在某些实施方案中，结晶形式A’的特征在于包含约182.3℃处的吸热峰的DSC热图。在某些实施方案中，所述吸热峰具有约170.5℃的起始温度。
在某些实施方案中，具有约1.5:1的化学计量的酒石酸盐包含形式A’。在某些实施方案中，具有约1.5:1的化学计量的酒石酸盐基本上由形式A’组成。在某些实施方案中，形式A’是基本上纯的。
d.形式A
在某些实施方案中，具有约2:1的化学计量的酒石酸盐是结晶形式A的，并且特征在于XRPD、DSC和TGA中的一种或多种。在某些实施方案中，酒石酸与结构(I)的化合物的摩尔比范围为约2.2:1至约1.9:1。在一个具体实施方案中，所述摩尔比为2:1。
在某些实施方案中，形式A的特征在于在约22℃的温度下包含三个或更多个峰的XRPD图案，所述峰以2-θ为单位，选自7.0±0.2、11.2±0.2、15.4±0.2、16.3±0.2、17.1±0.2、19.9±0.2、21.6±0.2和25.5±0.2。在某些实施方案中，形式A的XRPD图案包含3、4、5、6、7或8个峰，其选自7.0±0.2、11.2±0.2、15.4±0.2、16.3±0.2、17.1±0.2、19.9±0.2、21.6±0.2和25.5±0.2。在某些实施方案中，所述XRPD图案与图61的XRPD图案基本上相同。在某些实施方案中，所述XRPD图案包含选自表1中列出的峰的一个或多个(例如，1、2、3、4或5个)额外峰。
表1.制表的来自形式A的X-射线粉末衍射图数据
在某些实施方案中，形式A的特征在于包含约185.0℃–194.0℃处的吸热峰值的DSC热图。在一些实施方案中，所述吸热峰值在范围为约186.0℃-193.0℃、约187.0℃-192.0℃或约188.0℃-191.0℃的温度处。在一些更具体实施方案中，所述吸热峰值在约189.1℃处。
在某些实施方案中，形式A的特征在于包含约148.0℃–155.0℃处的吸热峰值的DSC热图。在一些实施方案中，所述吸热峰值在范围为约150.0℃-154.0℃、约151.0℃-153.0℃或约151.5℃-152.5℃的温度处，如通过差示扫描量热图所测定。在一些更具体实施方案中，所述吸热峰值在约152.1℃处。
在某些实施方案中，形式A的特征在于包含在约185.0℃–194.0℃处和在约148.0℃–155.0℃处的吸热峰值的DSC热图。在一些实施方案中，所述吸热峰值在范围为约186.0℃-193.0℃、约187.0℃-192.0℃或约188.0℃-191.0℃和约150.0℃-154.0℃、约151.0℃–153.0℃或约151.5℃-约152.5℃的温度处。在一些更具体实施方案中，所述吸热峰值在约189.1℃处和在约152.1℃处。
在某些实施方案中，形式A的特征在于包含单位为℃的约107.8处的吸热峰的DSC热图。在某些实施方案中，所述DSC热图包含单位为℃的约152.1处的吸热峰。在某些实施方案中，所述DSC热图包含单位为℃的约189.1处的吸热峰。在某些实施方案中，所述DSC热图包含单位为℃的约107.8、约152.1和约189.1的吸热峰。在某些实施方案中，所述DSC热图与图64的DSC热图基本上相同。
在某些实施方案中，形式A的特征在于在160℃下显示约1.8％的重量损失的TGA热图。在某些实施方案中，所述TGA热图与图64的TGA热图基本上相同。
在某些实施方案中，具有约2:1的化学计量的酒石酸盐包含形式A。在某些实施方案中，具有约2:1的化学计量的酒石酸盐基本上由形式A组成。在某些实施方案中，形式A是基本上纯的。形式A的物理和化学特性描述于实施例26、表17中。形式A的毒物动力学和毒理学概况描述于实施例27中。
e.形式C、E、F、G、H和I
结构(I)的化合物的酒石酸盐以其他结晶形式存在，如表2中所概述。
表2.结构(I)的酒石酸盐的结晶形式
+++：在三种或更多种溶剂***中形成
++：在少量溶剂***中形成
+：在一种溶剂***中或仅在更高温度下形成
从多晶型物筛选研究中，通过XRPD图案指定10种晶体形式，即形式A(1∶2)、A’(1∶1.5)、B、C、D、E、F、G、H和I，由图98中所示。这些结晶形式的热行为(DSC/TGA图)显示于图99A-99I中。
根据实施例51的方法进行下述浆料过滤和溶剂筛选。
表3.形式A的浆料筛选
表4.形式A’的溶剂筛选
表5.形式A’的浆料筛选
表6.形式D的浆料筛选
在表4(上文)中显示的溶剂筛选中，通过形式A’与H2O和醇(诸如甲醇和2-丙醇)的混合物的重结晶形成形式C。在热分析图中观察到约10％的重量损失和宽吸热峰，如图99C中所示。这表明形式C可能是与醇的溶剂化物，并且根据温度的增加消除醇。
形式E仅在来自形式D的浆料筛选中在甲醇中在室温下形成，如表6中所示。在热分析图中观察到约4％的重量损失，如图99E中所示。
形式F在来自形式D的浆料筛选中在室温和50℃下在醇和H2O的混合物中形成，如表6中所示。在热分析图中观察到约6％-重量损失，如图99F中所示。
形式G在来自形式D的浆料筛选中在H2O中在室温和50℃下形成，如表6中所示。热分析图提供于图99G中。
形式H在来自形式D的浆料筛选中仅在甲醇-H2O(5:1)中在室温下形成，如表6中所示。热分析图提供于图99H中。
形式I在来自形式D的浆料筛选中仅在乙腈-H2O(10:1)中在50℃下形成，如表6中所示。热分析数据提供于99I中。
C.药物组合物
在另一个方面，本公开提供了药物组合物，其包含一种或多种本文所述的化合物，诸如结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)，或其结晶形式(例如，形式A)，或结构(IV)的化合物，或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体或赋形剂。如本文所用，“结构(I)的化合物”意指该化合物本身(即，游离碱)，或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐，诸如酒石酸盐，或其结晶形式(例如，形式A)，除非其另有说明。如本文所用，“结构(IV)的化合物”意指化合物本身或如本文所述的其实施方案，包括其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)。
在一些实施方案中，所述药物组合物被配制用于口服施用。例如，在一些实施方案中，所述药物组合物包含口服胶囊。在其他实施方案中，所述药物组合物被配制用于注射。在一些更具体实施方案中，所述载体或赋形剂选自纤维素、乳糖、羧甲基纤维素和硬脂酸镁。
在仍更多实施方案中，所述药物组合物包含结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)，或结构(IV)的化合物，和额外的治疗剂(例如，抗癌剂)。此类治疗剂的非限制性实例如下文所述(例如依鲁替尼或阿伏昔布)。
合适的施用途径包括但不限于口服、静脉内、直肠、气溶胶、胃肠外、眼、肺、经粘膜、经皮、***、耳、鼻和局部施用。另外，仅通过实例的方式，肠胃外递送包括肌内、皮下、静脉内、髓内注射，以及鞘内、直接心室内、腹膜内、淋巴内和鼻内注射。
在某些实施方案中，如本文所述的结构(I)的化合物或结构(IV)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)以局部而非全身的方式，例如经由直接注射至器官中，经常在贮库制剂或缓释制剂中，进行施用。在具体实施方案中，长效制剂通过植入(例如皮下或肌内)或通过肌内注射进行施用。此外，在其他实施方案中，所述药物在靶向的药物递送***中，例如在用器官特异性抗体包被的脂质体中，进行递送。在此类实施方案中，所述脂质体被靶向至器官并被器官选择性吸收。在还有其他实施方案中，如本文所述的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物以快速释放制剂的形式、延长释放制剂的形式或中间释放制剂的形式提供。在还有其他实施方案中，如本文所述的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物被局部施用。
根据某些实施方案的结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物在宽剂量范围内是有效的。例如，在成人的治疗中，每天0.01至1000mg、0.5至100mg、5至100mg、20至100mg、25至75mg、1至50mg和每天5至40mg的剂量是一些实施方案中使用的剂量的实例。示例性剂量是每天10至30mg。在各个实施方案中，所述剂量是每天3、6、9、12、16、21、28、32、42或50mg。确切的剂量将取决于施用途径、结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物的施用形式、待治疗的受试者、待治疗的受试者的体重以及主治医生的偏好和经验。
在某些实施方案中，结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)的剂量是每天约1-37mg/m2(例如，1-25mg/m2)或约1-75mg(例如，1-50mg)。
在某些实施方案中，结构(I)的化合物(例如，游离碱，或其药学上可接受的盐，诸如酒石酸盐)或结构(IV)的化合物的每日剂量可以是约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、约75mg、约80mg、约85mg、约90mg、约95mg或约100mg。
在一些实施方案中，结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物以单一剂量施用。通常，这种施用将通过注射(例如，静脉内注射)进行，以便快速引入药剂。然而，在适当的情况下使用其他途径。单一剂量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物也可用于治疗急性病况。
在一些实施方案中，结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物以多剂量给药。在一些实施方案中，每天约一次、两次、三次、四次、五次、六次或多于六次给药。在其他实施方案中，约每个月一次、每两周一次、每周一次或每隔一天一次给药。在另一个实施方案中，结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)，或结构(IV)的化合物，和另一种药剂(例如，依鲁替尼或阿伏昔布)每天约一次至每天约六次一起施用。在另一个实施方案中，结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物以及药剂的施用连续少于约7天。在又另一个实施方案中，施用继续超过约6、10、14、28天、2个月、6个月或1年。在一些情况下，实现连续给药，并且必要长地维持。
结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物的施用可以必要长地继续。在一些实施方案中，将结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物施用超过1、2、3、4、5、6、7、14或28天。在一些实施方案中，将结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物施用少于28、14、7、6、5、4、3、2或1天。在一些实施方案中，将结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物继续地长期施用，例如用于治疗慢性效应。在一些实施方案中，在28天周期的前21天，每天一次施用结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)，或结构(IV)的化合物。
在一些实施方案中，将结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐施用1、2、3、4、5、6或更多个周期。在一些实施方案中，在治疗周期中施用结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐，直至受试者呈现疾病进展或不再耐受治疗。在一些实施方案中，在治疗周期中施用结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐，直至受试者未呈现可检测的疾病。在一些实施方案中，继续地长期施用结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐，例如用于治疗慢性效应。
剂量和间隔可以单独调整，以提供足以维持期望的药理作用的活性物质的血浆水平。这些血浆水平被称为最低有效浓度(MECs)。实现MEC所必需的剂量将取决于个体特征和施用途径。HPLC测定或生物测定可用于测定血浆浓度。
剂量间隔也可以使用MEC值确定。在一些实施方案中，治疗方法包括持续10-90％的时间维持血浆水平高于MEC。在一些实施方案中，血浆水平维持在30-90％之间。在一些实施方案中，血浆水平维持在50-90％之间。例如，在某些实施方案中，治疗剂的有效量可以范围为每天近似2.5mg/m2至1500mg/m2。额外的说明性量范围为0.2-1000mg/qid、2-500mg/qid和20-250mg/qid。
在一些实施方案中，结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物以数剂量施用。本领域中已知，由于化合物药代动力学中的受试者间差异，给药方案的个体化对于最佳疗法是必要的。结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物的给药可以根据本公开内容通过常规实验发现。
在一些实施方案中，将结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物配制成药物组合物。在具体实施方案中，药物组合物以常规方式使用一种或多种生理上可接受的载体进行配制，所述载体包含有助于将活性化合物加工成可以药用的制剂的赋形剂和助剂。适当的制剂取决于所选择的施用途径。任何药学上可接受的技术、载体和赋形剂都可以合适地用于配制本文所述的药物组合物：Remington:TheScience and Practice of Pharmacy,第十九版(Easton,Pa.:Mack Publishing Company,1995)；Hoover,John E.,Remington’s Pharmaceutical Sciences,Mack Publishing Co.,Easton,Pennsylvania 1975；Liberman,H.A.和Lachman,L.,编者,Pharmaceutical DosageForms,Marcel Decker,New York,N.Y.,1980；和Pharmaceutical Dosage Forms and DrugDelivery Systems,第七版(Lippincott Williams&Wilkins 1999)。
在某些实施方案中，结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物作为药物组合物施用，其中结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物与其他活性成分混合，如在组合疗法中。本文涵盖下面部分和整个本公开中的组合疗法部分中所述的所有活性剂的组合。
如本文所用的药物组合物是指结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物与其他化学组分(诸如载体、稳定剂、稀释剂、分散剂、助悬剂、增稠剂和/或赋形剂)的混合物。在某些实施方案中，所述药物组合物有助于向受试者施用结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物。在一些实施方案中，实施本文提供的治疗或使用方法，将治疗有效量的本文提供的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物在药物组合物中施用于具有待治疗的疾病、病况或医学病况的哺乳动物。在具体实施方案中，所述哺乳动物是人。在某些实施方案中，治疗有效量根据疾病的严重程度、受试者的年龄和相对健康、所用化合物的功效和其他因素而变化。本文所述的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物单独使用或与作为混合物的组分的一种或多种治疗剂组合使用。
在一些实施方案中，所述哺乳动物(例如，人)大于18岁。在一些实施方案中，所述哺乳动物(例如，人)具有≥3个月的预期寿命，未怀孕或不能变得怀孕，具有可接受的肝功能(例如，胆红素≤1.5×正常上限，或<3.0×正常上限(对于接受免疫疗法的患者)，天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶和碱性磷酸酶≤2.5×正常上限)，具有可接受的肾功能(例如，计算的肌酸清除率≥30mL/分钟)，具有可接受的血液学状态(例如，粒细胞≥1500个细胞/mm3，血小板计数≥100,000个血小板/mm3或血红蛋白≥9g/dL)，在尿分析中没有临床显著的异常，具有可接受的凝血状态(例如，1.5×正常限值内的凝血时间或1.5×正常限值内的活化部分促凝血酶原激酶时间)，或其任何组合。
在一个实施方案中，将结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物中的一种或多种配制在水溶液中。在具体实施方案中，水溶液仅通过实例的方式选自生理上相容的缓冲液，诸如Hank氏溶液、Ringer氏溶液或生理盐水缓冲液。在其他实施方案中，将结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物配制用于经粘膜施用。在具体实施方案中，所述经粘膜制剂包括适合于待渗透的屏障的渗透剂。在还有其他实施方案中(其中本文所述的化合物被配制用于其他肠胃外注射)；合适的制剂包括水溶液或非水溶液。在具体实施方案中，此类溶液包括生理上相容的缓冲液和/或赋形剂。
在另一个实施方案中，本文所述的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物被配制用于口服施用。本文所述的化合物通过将活性化合物与例如药学上可接受的载体或赋形剂组合而配制。在各个实施方案中，本文所述的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物被配制成口服剂型，其包括(通过实例的方式)片剂、粉末、丸剂、糖衣丸、胶囊、液体、凝胶、糖浆剂、酏剂、浆料、混悬剂等。
在某些实施方案中，通过将一种或多种固体赋形剂与本文所述的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物混合，任选地研磨所得混合物，并在添加合适的辅料(如果期望)后加工颗粒的混合物，以获得片剂或糖衣丸芯，获得用于口服使用的药物制剂。合适的赋形剂尤其是填充剂，诸如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨醇；纤维素制剂，诸如：玉米淀粉、小麦淀粉、大米淀粉、马铃薯淀粉、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、微晶纤维素、羟丙甲基纤维素、羧甲基纤维素钠；或其他，诸如：聚乙烯吡咯烷酮(PVP或聚维酮)或磷酸钙。在具体实施方案中，任选地添加崩解剂。崩解剂包括，仅通过实例的方式，交联的交联羧甲基纤维素钠、聚乙烯吡咯烷酮、琼胶或海藻酸或其盐，诸如藻酸钠。
在一个实施方案中，剂型(诸如糖衣丸芯和片剂)被提供有一种或多种合适的包衣。在具体实施方案中，浓缩的糖溶液用于将剂型包衣。所述糖溶液任选地含有额外的组分，诸如仅通过实例的方式，***胶、滑石、聚乙烯基吡咯烷酮、卡波姆凝胶、聚乙二醇和/或二氧化钛、漆溶液(lacquer solutions)和合适的有机溶剂或溶剂混合物。还可以任选地将染料和/或颜料添加至包衣层中，用于鉴定目的。此外，染料和/或颜料任选地用于表征活性化合物剂量的不同组合。
在某些实施方案中，本文所述的治疗有效量的结构(I)得化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)化合物的被配制成其他口服剂型。口服剂型包括由明胶制成的压装胶囊，以及由明胶和增塑剂(诸如甘油或山梨醇)制成的软、密封胶囊。在具体实施方案中，压装胶囊含有与一种或多种填充剂混合的活性成分。仅通过实例的方式，填充剂包括乳糖、粘合剂(诸如淀粉)和/或润滑剂(诸如滑石或硬脂酸镁)以及任选稳定剂。在其他实施方案中，软胶囊含有溶解或悬浮在合适液体中的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)，或结构(IV)的化合物。仅通过实例的方式，合适的液体包括一种或多种脂肪油、液体石蜡或液体聚乙二醇。另外，任选地添加稳定剂。
在其他实施方案中，本文所述的治疗有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物被配制用于经颊或舌下施用。仅通过实例的方式，适用于经颊或舌下施用的制剂包括片剂、锭剂或凝胶。在还有其他实施方案中，本文所述的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物被配制用于肠胃外注射(parental injection)，包括适合于大剂量注射或连续输注的制剂。在具体实施方案中，用于注射的制剂以单位剂型(例如，在安瓿中)或在多剂量容器中呈现。任选地，向注射制剂中添加防腐剂。在还有其他实施方案中，药物组合物被配制成适合于肠胃外注射的形式，作为在油性或水性媒介物中的无菌混悬剂、溶液或乳剂。肠胃外注射制剂任选地含有配制药剂，诸如混悬剂、稳定剂和/或分散剂。在具体实施方案中，用于肠胃外施用的药物制剂包括水溶性形式的活性化合物的水溶液。在额外实施方案中，将结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物的混悬剂制备为适当的油性注射混悬剂。仅通过实例的方式，用于本文所述的药物组合物中的合适的亲脂性溶剂或媒介物包括脂肪油(诸如芝麻油)或合成脂肪酸酯(诸如油酸乙酯或甘油三酯)或脂质体。在某些具体实施方案中，水性注射混悬剂包含增加混悬剂的粘度的物质，诸如羧甲基纤维素钠、山梨醇或葡聚糖。任选地，所述混悬剂含有合适的稳定剂或增加化合物的溶解度以允许制备高浓度的溶液的药剂。或者，在其他实施方案中，活性成分呈粉末形式，用于在使用前与合适的媒介物(例如无菌无热原水)构建。
在还有其他实施方案中，结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物被局部施用。本文所述的化合物被配制成各种可局部施用的组合物，诸如溶液、混悬剂、洗液、凝胶、糊剂、药棒、香膏、霜剂或软膏剂。此类药物组合物任选地含有增溶剂、稳定剂、张力增强剂、缓冲剂和防腐剂。
在还有其他实施方案中，结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物被配制用于经皮施用。在具体实施方案中，经皮制剂采用经皮递送装置和经皮递送贴剂，并且可以是溶解和/或分散于聚合物或粘合剂中的亲脂性乳剂或缓冲水溶液。在各个实施方案中，此类贴剂被构建用于持续、脉动或根据需要递送药剂。在额外的实施方案中，结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物的经皮递送通过离子透入贴剂等实现。在某些实施方案中，经皮贴剂提供了结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物的受控递送。在具体实施方案中，通过使用速率控制膜或通过将结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物捕获在聚合物基质或凝胶中，减慢吸收速率。在替代实施方案中，吸收增强剂用于增加吸收。吸收增强剂或载体包括有助于通过皮肤的可吸收的药学上可接受的溶剂。例如，在一个实施方案中，经皮装置呈绷带的形式，其包括背衬部件；含有结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物的储库，任选地具有载体；任选地速率控制屏障，以经延长的时间段以受控且预定的速率将结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物递送至宿主的皮肤；以及将设备固定至皮肤的装置。
在其他实施方案中，结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物被配制用于通过吸入施用。适合于通过吸入施用的各种形式包括但不限于气溶胶、雾剂或粉末。使用合适的推进剂(例如，二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他合适的气体)将任何结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物的药物组合物以气溶胶喷雾呈递的形式从加压包装或雾化器中方便地递送。在具体实施方案中，通过提供阀来测定加压气溶胶的剂量单位以递送计量的量。在某些实施方案中，配制用于吸入器或吹入器中的(诸如仅通过实例的方式)明胶的胶囊和药筒，其含有结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物的粉末混合物，以及合适的粉末基质，诸如乳糖或淀粉。
在还有其他实施方案中，结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物被配制成直肠组合物，诸如灌肠剂、直肠凝胶、直肠泡沫、直肠气溶胶、栓剂、软糖栓或保留灌肠剂，其含有常规的栓剂基质，诸如可可油或其他甘油酯，以及合成聚合物，诸如聚乙烯吡咯烷酮、PEG等。在组合物的栓剂形式中，首先熔化低熔点蜡，诸如但不限于脂肪酸甘油酯、任选地与可可油组合的混合物。
在某些实施方案中，使用一种或多种生理上可接受的载体以任何常规方式制备药物组合物，所述载体包含有助于将活性化合物加工成可药用的制剂的赋形剂和助剂。适当的制剂取决于所选择的施用途径。任何药学上可接受的技术、载体和赋形剂任选地合适地使用。包含结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物的药物组合物以常规方式，诸如仅通过实例的方式，通过常规的混合、溶解、制粒、制糖、研磨、乳化、胶囊化、捕获或压缩工艺，进行制造。
此外，本文所述的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物涵盖未溶剂化的形式以及用药学上可接受的溶剂、诸如水、乙醇等溶剂化的形式。本文呈现的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物的溶剂化形式也被认为在本文公开。另外，所述药物组合物任选地包括其他药物或药剂、载体、助剂，诸如防腐剂、稳定剂、湿润剂或乳化剂、溶液促进剂、用于调节渗透压的盐、缓冲剂和/或其他治疗上有价值的物质。
用于制备包含本文所述的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物的组合物的方法包括配制结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物与一种或多种惰性的、药学上可接受的赋形剂或载体以形成固体、半固体或液体。固体组合物包括但不限于粉末、片剂、可分散颗粒、胶囊、扁囊剂和栓剂。液体组合物包括其中溶解结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物的溶液，包含化合物的乳液，或含有包含结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物的脂质体、胶束或纳米颗粒的溶液，如本文所公开。半固体组合物包括但不限于凝胶、混悬剂和霜剂。本文所述的药物组合物的形式包括液体溶液或混悬剂、适用于溶液或在使用前悬浮于液体中的固体形式，或作为乳剂。这些组合物还任选地含有少量无毒的辅助物质，诸如湿润剂或乳化剂、pH缓冲剂等等。
在一些实施方案中，包含结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物的药物组合物说明性地采用其中所述药剂存在于溶液、混悬剂或两者中的液体的形式。通常，当组合物作为溶液或混悬剂施用时，所述药剂的第一部分以溶液形式存在，且所述药剂的第二部分以颗粒形式存在，悬浮于液体基质中。在一些实施方案中，所述液体组合物包括凝胶制剂。在其他实施方案中，所述液体组合物是水性的。
在某些实施方案中，有用的水性混悬剂含有一种或多种聚合物作为助悬剂。有用的聚合物包括水溶性聚合物，诸如纤维素聚合物，例如羟丙基甲基纤维素，以及水不溶性聚合物，诸如交联的含羧基聚合物。本文所述的某些药物组合物包含粘膜粘着性聚合物，其选自例如羧甲基纤维素、卡波姆(丙烯酸聚合物)、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚丙烯酰胺、聚卡波非、丙烯酸/丙烯酸丁酯共聚物、藻酸钠和葡聚糖。
有用的药物组合物还任选地包括增溶剂，以帮助结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物的溶解。术语“增溶剂”通常包括导致形成所述药剂的胶束溶液或真实溶液的试剂。某些可接受的非离子表面活性剂(例如聚山梨醇酯80)可用作增溶剂，眼用可接受的二醇、聚乙二醇(例如聚乙二醇400)和二醇醚也可用作增溶剂。
此外，有用的药物组合物任选地包括一种或多种pH调节剂或缓冲剂，包括酸，诸如乙酸、硼酸、柠檬酸、乳酸、磷酸和盐酸；碱，诸如氢氧化钠、磷酸钠、硼酸钠、柠檬酸钠、乙酸钠、乳酸钠和三羟基甲基氨基甲烷；和缓冲剂，诸如柠檬酸盐/右旋糖、碳酸氢钠和氯化铵。以将组合物的pH维持在可接受的范围内的量包括此类酸、碱和缓冲剂。
此外，有用的组合物还任选地以使组合物的重量摩尔渗透压浓度达到可接受的范围内所需的量包括一种或多种盐。此类盐包括具有钠、钾或铵阳离子和氯、柠檬酸盐、抗坏血酸盐、硼酸盐、磷酸盐、碳酸氢盐、硫酸盐、硫代硫酸盐或亚硫酸氢盐阴离子的那些；合适的盐包括氯化钠、氯化钾、硫代硫酸钠、亚硫酸氢钠和硫酸铵。
其他有用的药物组合物任选地包括一种或多种防腐剂以抑制微生物活性。合适的防腐剂包括含汞物质，诸如merfen和硫柳汞；稳定的二氧化氯；和季铵化合物，诸如苯扎氯铵、鲸蜡基三甲基溴化铵和鲸蜡基氯化吡啶。
还有其他有用的组合物包括一种或多种表面活性剂以增强物理稳定性或用于其他目的。合适的非离子表面活性剂包括聚氧乙烯脂肪酸甘油酯和植物油，例如聚氧乙烯(60)氢化蓖麻油；和聚氧乙烯烷基醚和烷基苯基醚，例如辛苯聚醇10、辛苯聚醇40。
还有其他有用的组合物在需要的情况下包括一种或多种抗氧化剂以增强化学稳定性。仅通过实例的方式，合适的抗氧化剂包括抗坏血酸和焦亚硫酸钠。
在某些实施方案中，水性混悬组合物被包装在单剂量不可再重新盖紧的容器中。或者，使用多剂量可重新盖紧的容器中，在这种情况下，典型地在组合物中包括防腐剂。
在替代实施方案中，采用用于疏水性药物化合物的其他递送***。脂质体和乳剂是本文可用的递送媒介物或载体的实例。在某些实施方案中，也采用有机溶剂，诸如N-甲基吡咯烷酮。在额外实施方案中，本文所述的化合物使用持续释放***、诸如含有治疗剂的固体疏水聚合物的半渗透基质进行递送。本文可使用各种持续释放***。在一些实施方案中，持续释放胶囊将化合物释放几周直至超过100天。根据治疗剂的化学性质和生物稳定性，采用额外的蛋白稳定的策略。
在某些实施方案中，本文所述的制剂包含一种或多种抗氧化剂、金属螯合剂、含硫醇化合物和/或其他通用稳定剂。此类稳定剂的实例包括但不限于：(a)约0.5％至约2％w/v甘油，(b)约0.1％至约1％w/v甲硫氨酸，(c)约0.1％至约2％w/v单硫代甘油，(d)约1mM至约10mM EDTA，(e)约0.01％至约2％w/v抗坏血酸，(f)0.003％至约0.02％w/v聚山梨醇酯80，(g)约0.001％至约0.05％w/v聚山梨醇酯20，(h)精氨酸，(i)肝素，(j)硫酸葡聚糖，(k)环糊精，(l)戊聚糖多硫酸酯和其他类肝素，(m)二价阳离子，诸如镁和锌；或(n)其组合。
在一些实施方案中，所述药物组合物中提供的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物的浓度为小于100％、90％、80％、70％、60％、50％、40％、30％、20％、19％、18％、17％、16％、15％,14％、13％、12％、11％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％、0.4％、0.3％、0.2％、0.1％、0.09％、0.08％、0.07％、0.06％、0.05％、0.04％、0.03％、0.02％、0.01％、0.009％、0.008％、0.007％、0.006％、0.005％、0.004％、0.003％、0.002％、0.001％、0.0009％、0.0008％、0.0007％、0.0006％、0.0005％、0.0004％、0.0003％、0.0002％或0.0001％w/w、w/v或v/v。
在一些实施方案中，结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物的浓度在以下范围内：近似0.0001％至近似50％，近似0.001％至近似40％，近似0.01％至近似30％，近似0.02％至近似29％，近似0.03％至近似28％，近似0.04％至近似27％，近似0.05％至近似26％，近似0.06％至近似25％，近似0.07％至近似24％，近似0.08％至近似23％，近似0.09％至近似22％，近似0.1％至近似21％，近似0.2％至近似20％，近似0.3％至近似19％，近似0.4％至近似18％，近似0.5％至近似17％，近似0.6％至近似16％，近似0.7％至近似15％，近似0.8％至近似14％，近似0.9％至近似12％，近似1％至近似10％w/w、w/v或v/v。
在一些实施方案中，结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物的浓度在以下范围内：近似0.001％至近似10％，近似0.01％至近似5％，近似0.02％至近似4.5％，近似0.03％至近似4％，近似0.04％至近似3.5％，近似0.05％至近似3％，近似0.06％至近似2.5％，近似0.07％至近似2％，近似0.08％至近似1.5％，近似0.09％至近似1％，近似0.1％至近似0.9％w/w、w/v或v/v。
在一些实施方案中，结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或结构(IV)的化合物的量等于或小于10g、9.5g、9.0g、8.5g、8.0g、7.5g、7.0g、6.5g、6.0g、5.5g、5.0g、4.5g、4.0g、3.5g、3.0g、2.5g、2.0g、1.5g、1.0g、0.95g、0.9g、0.85g、0.8g、0.75g、0.7g、0.65g、0.6g、0.55g、0.5g、0.45g、0.4g、0.35g、0.3g、0.25g、0.2g、0.15g、0.1g、0.09g、0.08g、0.07g、0.06g、0.05g、0.04g、0.03g、0.02g、0.01g、0.009g、0.008g、0.007g、0.006g、0.005g、0.004g、0.003g、0.002g、0.001g、0.0009g、0.0008g、0.0007g、0.0006g、0.0005g、0.0004g、0.0003g、0.0002g或0.0001g。
包含如上所述的结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)的药物组合物可以包含如本文所述的结晶形式(例如，形式A)。本公开的多晶型物通常被配制成药物剂型，以提供容易可控的药物剂量，并给予受试者精美且人体工程学的产品。本公开的多晶型物的剂量方案将根据已知因素(诸如特定药剂的药效动力学特征及其施用的模式和途径；受体的物种、年龄、性别、健康、医疗状况和重量；症状的性质和程度；并发治疗的类型；治疗的频率；施用途径、受试者的肾脏和肝脏功能，和期望的效果)而变化。本公开的多晶型物可以单次每日剂量施用，或者总每日剂量可以以每天两次、三次或四次的分开剂量施用。
在一些实施方案中，所述药物组合物包含范围为约0.5wt.％至约5.0wt.％的浓度的多晶型物。在其他具体实施方案中，所述药物组合物包含范围为约1.8wt.％至约2.8wt.％的浓度的多晶型物。
在一些实施方案中，所述药物组合物包含范围为约10.0wt.％至约20.0wt.％的浓度的多晶型物。在其他具体实施方案中，所述药物组合物包含范围为约13.7wt.％至约15.7wt.％的浓度的多晶型物。
在一些实施方案中，所述药物组合物包含范围为约16.3wt.％至约36.3wt.％的浓度的多晶型物。在其他具体实施方案中，所述药物组合物包含范围为约21.3wt.％至约31.3wt.％的浓度的多晶型物。
在更具体实施方案中，所述药物组合物包含约2.35wt.％的多晶型物。在其他具体实施方案中，所述药物组合物包含约14.7wt.％的多晶型物。在还有其他具体实施方案中，所述药物组合物包含约26.3wt.％的多晶型物。
在一些更具体实施方案中，所述药物组合物包含约4毫克(mg)的多晶型物。在其他具体实施方案中，所述药物组合物包含约25mg的多晶型物。在一些实施方案中，所述药物组合物包含约100mg的多晶型物。
在一些实施方案中，所述赋形剂是乳糖(例如，乳糖一水合物)、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、硬脂酸镁或其组合。在更具体实施方案中，所述赋形剂包含乳糖一水合物。在一些实施方案中，所述赋形剂包含微晶纤维素。在一些实施方案中，所述赋形剂包含交联羧甲基纤维素钠。在一些实施方案中，所述赋形剂包含硬脂酸镁。在一些实施方案中，所述赋形剂包含微晶纤维素、乳糖一水合物、交联羧甲基纤维素钠和硬脂酸镁。
在前述实施方案中的一些中，所述药物组合物包含范围为约95.0wt.％至约99.5wt.％的浓度的赋形剂。在更具体实施方案中，所述药物组合物包含范围为约97.2wt.％至约98.2wt.％的浓度的赋形剂。在一些实施方案中，所述药物组合物包含约97.65wt.％的赋形剂。
在前述实施方案中的一些中，所述药物组合物包含范围为约80.0wt.％至约90.0wt.％的浓度的赋形剂。在更具体实施方案中，所述药物组合物包含范围为约84.3wt.％至约86.4wt.％的浓度的赋形剂。在一些实施方案中，所述药物组合物包含约85.3wt.％的赋形剂。
在前述实施方案中的一些中，所述药物组合物包含范围为约63.7wt.％至约88.7wt.％的浓度的赋形剂。在更具体实施方案中，所述药物组合物包含范围为约68.7wt.％至约83.7wt.％的浓度的赋形剂。在一些实施方案中，所述药物组合物包含约73.7wt.％的赋形剂。
根据某些实施方案的结构(I)的化合物的酒石酸盐的多晶型物在宽剂量范围内是有效的。例如，在成人的治疗中，每天0.01至1000mg、0.5至100mg、1至50mg和每天5至40mg的剂量是一些实施方案中使用的剂量的实例。示例性剂量是每天10至30mg。在各个实施方案中，所述剂量是每天3、6、9、12、16、21、28、32、42或50mg。确切的剂量将取决于施用途径、结构(I)的化合物的酒石酸盐的多晶型物的施用形式、待治疗的受试者、待治疗的受试者的体重以及主治医生的偏好和经验。
一些具体实施方案提供了包含如本文所述的药物组合物的单位剂量形式。在各个实施方案中，所述单位剂量形式被配制用于口服施用。在一些实施方案中，所述单位剂量形式是胶囊。在一些实施方案中，所述单位剂量形式是片剂。
在一些实施方案中，所述单位剂量形式包含范围为约0.5wt.％至约5.0wt.％的浓度的多晶型物。在其他具体实施方案中，所述单位剂量形式包含范围为约1.8wt.％至约2.8wt.％的浓度的多晶型物。
在一些实施方案中，所述单位剂量形式包含范围为约10.0wt.％至约20.0wt.％的浓度的多晶型物。在其他具体实施方案中，所述单位剂量形式包含范围为约13.7wt.％至约15.7wt.％的浓度的多晶型物。
在一些实施方案中，所述单位剂量形式包含范围为约16.3wt.％至约36.3wt.％的浓度的多晶型物。在其他具体实施方案中，所述单位剂量形式包含范围为约21.3wt.％至约31.3wt.％的浓度的多晶型物。
在更具体实施方案中，所述单位剂量形式包含约2.35wt.％的多晶型物。在其他具体实施方案中，所述单位剂量形式包含约14.7wt.％的多晶型物。在还有其他具体实施方案中，所述单位剂量形式包含约26.3wt.％的多晶型物。
在一些更具体实施方案中，所述单位剂量形式包含约4毫克(mg)的多晶型物。在其他具体实施方案中，所述单位剂量形式包含约25mg的多晶型物。在一些实施方案中，所述单位剂量形式包含约100mg的多晶型物。
在前述实施方案中的一些中，所述单位剂量形式包含范围为约95.0wt.％至约99.5wt.％的浓度的赋形剂。在更具体实施方案中，所述单位剂量形式包含范围为约97.2wt.％至约98.2wt.％的浓度的赋形剂。在其他实施方案中，所述单位剂量形式包含约97.65wt.％的赋形剂。
在前述实施方案中的一些中，所述单位剂量形式包含范围为约80.0wt.％至约90.0wt.％的浓度的赋形剂。在更具体实施方案中，所述单位剂量形式包含范围为约84.3wt.％至约86.4wt.％的浓度的赋形剂。在其他实施方案中，所述单位剂量形式包含约85.3wt.％的赋形剂。
在前述实施方案中的一些中，所述单位剂量形式包含范围为约63.7wt.％至约88.7wt.％的浓度的赋形剂。在更具体实施方案中，所述单位剂量形式包含范围为约68.7wt.％至约83.7wt.％的浓度的赋形剂。在其他实施方案中，所述单位剂量形式包含约73.7wt.％的赋形剂。
本公开的药物组合物或组合物可以呈如下单位剂量：对于约50-70kg的受试者，约1-1000mg活性成分，或约1-500mg或约1-250mg或约1-150mg或约0.5-100mg或约1-50mg的活性成分。化合物(例如多晶型物)、药物组合物或其组合的治疗有效剂量取决于受试者的物种、体重、年龄和个体状况、所治疗的病症或疾病或其严重程度。普通技术的医师、临床医生或兽医可以容易地确定预防、治疗或抑制病症或疾病的进展所需的每种活性成分的治疗有效量。
D.治疗用途和治疗方法
1.治疗癌症的方法
某些实施方案提供了用于治疗癌症的方法，所述方法包括向有此需要的受试者施用有效量的包含如本文所述的结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)的药物组合物。在一些实施方案中，所述方法包括向有此需要的受试者施用有效量的包含结构(I)的化合物的药物组合物。在一些不同的实施方案中，本文所述的方法包括向有此需要的受试者施用有效量的包含结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)的药物组合物。在一些更具体实施方案中，所述癌症是血液学癌症。在一些实施方案中，所述癌症是慢性淋巴细胞性白血病。
在一些具体实施方案中，提供了用于治疗癌症的方法，其中所述方法包括向有此需要的受试者施用结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或包含其的药物组合物。在一些更具体实施方案中，所述癌症是血液学癌症，且所述方法包括向所述受试者施用结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)。在一些实施方案中，所述癌症是慢性淋巴细胞性白血病。
在一些实施方案中，提供了用于治疗癌症的方法，其包括将有效量的任何前述药物组合物施用于有此需要的受试者，所述药物组合物包含结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐，例如结构(I)的化合物的酒石酸盐。在一些实施方案中，所述癌症由AXL激酶介导。在一些实施方案中，所述癌症是乳腺癌(例如，三阴性乳腺癌)、胰腺癌、肾癌、结肠癌、甲状腺癌、结肠直肠癌(例如，BRAF、KRAS或NRAS突变的结肠直肠癌)、卵巢癌、黑色素瘤(例如，BRAF-突变的黑色素瘤)或肺癌(例如，EGFR+非小细胞肺癌)。在某些实施方案中，所述癌症选自慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、乳腺癌和结肠癌。在具体实施方案中，所述癌症是晚期实体肿瘤、三阴性乳腺癌、EGFR+非小细胞肺癌、结肠直肠癌、复发性卵巢癌或BRAF-突变的黑色素瘤。
在一些实施方案中，所述癌症是晚期实体肿瘤(例如，尽管进行免疫疗法但已进展的晚期实体肿瘤)。在一些实施方案中，提供了用于治疗晚期实体肿瘤的方法，其包括施用有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)。在一些实施方案中，所述晚期实体肿瘤是晚期转移或进行性实体肿瘤。在一些实施方案中，尽管进行免疫疗法，但癌症(例如肿瘤)已进展。
一个实施方案提供了用于调节有此需要的受试者的肿瘤免疫应答的方法，其中所述方法包括将结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或包含其的药物组合物施用于有此需要的受试者，由此调节肿瘤免疫应答。在一些实施方案中，所述免疫应答增加。在一些实施方案中，所述肿瘤是实体肿瘤。在一些实施方案中，所述调节包括抑制TAM激酶活性。在一些实施方案中，所述调节包括增加活化的树突细胞和/或增加树突细胞对肿瘤的渗透。在一些实施方案中，所述调节包括减少中性粒细胞、调节性T-细胞或其组合。在一些实施方案中，所述调节包括降低肿瘤微环境中的免疫抑制性细胞因子(例如，IL-6、G-CSF)。在一些实施方案中，所述方法进一步包括施用治疗有效量的额外药剂，例如本文所述或本领域中已知的免疫检查点抑制剂。
一个实施方案提供了用于调节有此需要的受试者中的免疫应答的方法，其中所述方法包括将结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或包含其的药物组合物施用于有此需要的受试者。在一些实施方案中，调节免疫应答包括调节免疫细胞群(例如，肿瘤中的中性粒细胞、调节性T-细胞和树突细胞)。
一个实施方案提供了增强有此需要的受试者中的宿主免疫的方法，其中所述方法包括将结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或包含其的药物组合物施用于有此需要的受试者。
一个实施方案提供了用于抑制有此需要的受试者中的间充质表型的方法，其中所述方法包括结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或包含其的药物组合物施用于有此需要的受试者。抑制间充质表型可以包括逆转间充质表型。抑制(例如，逆转间充质表型)可用于例如治疗各种各样的与间充质表型相关的癌症，诸如转移性结肠直肠癌。间充质表型可以通过间充质标志物(诸如Snail和Slug)的表达来证明。在用于抑制间充质表型的方法的具体实施方案中，将结构(I)的化合物施用于具有转移性结肠直肠癌的受试者。在用于抑制间充质表型的方法的具体实施方案中，将结构(I)的化合物施用于具有非转移性结肠直肠癌的受试者，由此预防或降低结肠直肠癌的转移的可能性。
一个实施方案提供了在有此需要的受试者中产生适应于免疫应答的肿瘤微环境的方法，其中所述方法包括将结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或包含其的药物组合物施用于有此需要的受试者。在某些实施方案中，产生适应于免疫应答的肿瘤微环境包括降低免疫抑制细胞因子和趋化因子(诸如IL-6和G-CSF)的局部水平。在某些实施方案中，产生适应于免疫应答的肿瘤微环境包括增加肿瘤中的树突细胞(DC)的渗透和活化。
一个实施方案提供了用于治疗癌症的方法，其包括将有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)与免疫疗法组合施用。另一个实施方案提供了用于治疗癌症的方法，其包括将有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)与酪氨酸激酶抑制剂组合施用。
在实施方案中，所述癌症是乳腺癌。乳腺癌被分类为四个主要分子亚型：(A)鲁米那A，其为激素受体阳性的(***受体阳性和/或孕酮受体阳性)，人表皮生长因子受体2(HER2)阴性，且具有Ki-67(一种增殖的细胞标志物)的低表达；(B)鲁米那B，其为激素受体阳性的，可以是HER2阳性或阴性的，且具有Ki-67的高表达；(c)富含HER2，其为激素受体阴性和HER2阳性的；和(d)三阴性，其为激素受体阴性和HER2阴性的。
在一些实施方案中，所述乳腺癌是激素受体阳性的。激素受体阳性乳腺癌是指***受体和/或孕酮受体表达阳性的乳腺癌。在一些实施方案中，所述乳腺癌是鲁米那A或鲁米那B乳腺癌。在具体实施方案中，用于治疗激素受体阳性乳腺癌(例如鲁米那A或鲁米那B乳腺癌)的方法包括施用有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)和施用有效量的激素疗法。乳腺癌的激素疗法可以指减少***与***受体的结合和/或减少孕酮与孕酮受体的结合的疗法。在具体实施方案中，所述激素疗法包括他莫昔芬、托瑞米芬、福维司群或芳香化酶抑制剂。用于治疗激素受体阳性乳腺癌的芳香化酶抑制剂的实例包括阿那曲唑、依西美坦和来曲唑。
在一些实施方案中，所述乳腺癌是HER2阳性的。HER2阳性乳腺癌是对于HER2的表达测试阳性的乳腺癌，诸如鲁米那B或HER2富集的乳腺癌。在一些实施方案中，用于治疗HER2阳性乳腺癌的方法包括施用有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)和施用有效量的HER2抑制剂。在一些实施方案中，所述HER2抑制剂选自曲妥珠单抗、帕妥珠单抗、曲妥珠单抗emtansine(即TDM1)、拉帕替尼和诺拉替尼。在具体实施方案中，所述HER2抑制剂是曲妥珠单抗或曲妥珠单抗emtansine。
在一些实施方案中，所述乳腺癌是三阴性乳腺癌。三阴性乳腺癌是乳腺癌的侵袭性最高的分子亚型，并且对激素疗法方案或HER2抑制剂不应答。
乳腺癌也可以被分类为炎性乳腺癌或非炎性乳腺癌。炎性乳腺癌是一种罕见、高度侵袭性形式的乳腺癌，其基于临床呈现为***中的炎性样症状(包括红斑、水肿、触痛、发热和/或皮肤凹陷)而进行诊断。炎性乳腺癌可以呈现有任何分子亚型的乳腺癌(即，可以是激素受体阳性和/或HER2阳性的，或可以是三阴性的)。
在一些实施方案中，所述癌症是炎性乳腺癌。炎性乳腺癌可以是激素受体阳性和/或HER2阳性的，或三阴性的。在某些情况下，炎性乳腺癌可以对激素疗法和/或HER2抑制剂应答，这取决于分子亚型。鉴于炎性乳腺癌是高度侵袭性的，治疗经常包括与化学疗法和/或放射治疗组合的根治性***切除术。
在实施方案中，用于治疗乳腺癌(例如，三阴性乳腺癌或炎性乳腺癌)的方法包括向有此需要的受试者施用有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)和施用有效量的进一步的疗法。所述进一步的疗法可以是例如放射、外科手术(例如***切除术)或治疗剂(例如，化学治疗剂)。在具体实施方案中，所述进一步的疗法是以下中的至少一种：免疫检查点抑制剂、PARP抑制剂、WEE1抑制剂、EGFR靶向剂、CDK4/6抑制剂、PI3K抑制剂、TORC1/2抑制剂、蒽环类或紫杉烷。
在某些实施方案中，用于治疗乳腺癌(例如，三阴性乳腺癌或炎性乳腺癌)的方法包括向有此需要的受试者施用有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)和施用有效量的免疫检查点抑制剂。在具体实施方案中，所述免疫检查点抑制剂是PD-L1抑制剂、PD-1抑制剂、CTLA-4抑制剂、LAG-3抑制剂、Tim-3抑制剂或其组合。
在某些实施方案中，治疗乳腺癌(例如，三阴性乳腺癌或炎性乳腺癌)的方法包括向有此需要的受试者施用有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)和施用有效量的PARP抑制剂。在一些实施方案中，所述PARP抑制剂选自奥拉帕尼、尼拉帕尼、talazoparib和velaparib。在具体实施方案中，所述PARP抑制剂是奥拉帕尼。
在某些实施方案中，用于治疗乳腺癌(例如，三阴性乳腺癌或炎性乳腺癌)的方法包括向有此需要的受试者施用有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)和施用有效量的WEE1抑制剂。WEE1是一种调节细胞周期进展的核激酶，并且WEE1的抑制具有抗癌作用，并且可能使癌细胞对其他治疗(诸如顺铂或放射)敏感。在具体实施方案中，所述WEE1抑制剂包括AZD1775。
在某些实施方案中，用于治疗乳腺癌(例如，三阴性乳腺癌或炎性乳腺癌)的方法包括向有此需要的受试者施用有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)和施用有效量的EGFR靶向剂。在具体实施方案中，所述EGFR靶向剂是拉帕替尼、帕尼单抗、西妥昔单抗或埃罗替尼、吉非替尼或其组合。
在某些实施方案中，用于治疗乳腺癌(例如，三阴性乳腺癌或炎性乳腺癌)的方法包括向有此需要的受试者施用有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)和施用有效量的CDK4或CDK6抑制剂。在一些实施方案中，所述CDK4或CDK6抑制剂是帕博西尼、abemaciclib、瑞博西尼或其组合。在具体实施方案中，所述CDK4或CDK6抑制剂是帕博西尼。
在某些实施方案中，用于治疗乳腺癌(例如，三阴性乳腺癌或炎性乳腺癌)的方法包括向有此需要的受试者施用有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)和施用有效量的PI3K抑制剂。PI3K-AKT-mTOR途径通常在各种癌症中被活化，并且有助于癌细胞在增殖中存活。在一些实施方案中，所述PI3K抑制剂是AZD8186、GDC-0941、GDC-0980、idelalisib(CAL-101)、alpelisib(BYL719)、buparliib(BKM120)或其组合。在具体实施方案中，所述PI3K抑制剂是AZD8186。
在某些实施方案中，用于治疗乳腺癌(例如，三阴性乳腺癌或炎性乳腺癌)的方法包括向有此需要的受试者施用有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)和施用有效量的TORC1/2抑制剂。在一些实施方案中，所述TORC1/2抑制剂是AZD2014(vistusertib)、TAK228(INK128、MLN0128)或两者。
在某些实施方案中，用于治疗乳腺癌(例如，三阴性乳腺癌或炎性乳腺癌)的方法包括向有此需要的受试者施用有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)和施用有效量的蒽环类。“蒽环类”是指具有嵌入活性的一类化学化合物，并且包括道诺霉素、多柔比星、表柔比星、伊达比星、奈莫柔比星、匹克生琼、sabarubicin和戊柔比星。在具体实施方案中，所述蒽环类是多柔比星、道诺霉素或两者。
在某些实施方案中，用于治疗乳腺癌(例如，三阴性乳腺癌或炎性乳腺癌)的方法包括向有此需要的受试者施用有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)和施用有效量的紫杉烷。用于治疗癌症的紫杉烷是抑制微管形成的二萜分子。在一些实施方案中，所述紫杉烷包括紫杉醇、多西他赛或两者。
在一些实施方案中，所述癌症是胰腺癌。在一些实施方案中，所述癌症是肾癌。在一些实施方案中，所述癌症是结肠癌。在一些实施方案中，所述癌症是甲状腺癌。在一些实施方案中，所述癌症是肺癌。
在一些实施方案中，所述癌症是非小细胞肺癌。在某些实施方案中，用于治疗非小细胞肺癌(例如，EGRF+非小细胞肺癌)的方法包括施用有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)。在一些实施方案中，所述结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)与EGRF抑制剂、免疫疗法和/或酪氨酸激酶抑制剂(例如，CDK9抑制剂)组合施用。在一些实施方案中，所述非小细胞肺癌包括免疫疗法抗性肿瘤。在一些实施方案中，所述非小细胞肺癌(例如，EGRF+非小细胞肺癌)在施用≤2线酪氨酸激酶抑制剂(例如，口服酪氨酸激酶抑制剂)后已经进展。
在一些实施方案中，所述癌症是结肠直肠癌。在某些实施方案中，所述结肠直肠癌包括表达突变的BRAF、KRAS或NRAS的肿瘤。在某些实施方案中，用于治疗结肠直肠癌的方法包括组合施用有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)与EGFR抑制剂。在一些实施方案中，所述方法包括施用免疫检查点抑制剂(例如，PD-L1-、PD-1-、CTLA-4-、LAG-3-或Tim-3-靶向药物)。在一些具体实施方案中，所述结肠直肠癌是BRAF-、KRAS-或NRAS-突变的结肠直肠癌。在具体实施方案中，所述结肠直肠癌是KRAS-突变的结肠直肠癌。在一些实施方案中，在已经施用标准疗法后进行所述施用。
在一些实施方案中，所述癌症是卵巢癌。在一些实施方案中，用于治疗卵巢癌的方法包括施用有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)。在一些实施方案中，所述卵巢癌是持续性或复发性的。在一些具体实施方案中，所述卵巢癌是铂难治性/抗性的。在一些实施方案中，用于治疗卵巢癌的方法进一步包括施用铂化合物。在一些实施方案中，在施用任何数量的先前疗法后进行所述施用。
在一些实施方案中，所述癌症是黑色素瘤(例如，BRAF-突变的黑色素瘤)。在某些实施方案中，用于治疗黑色素瘤(例如，BRAF-突变的黑色素瘤)的方法包括施用有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)。在一些实施方案中，所述方法进一步包括组合施用结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)与免疫疗法或BRAF和MEK抑制剂。在一些实施方案中，所述黑色素瘤(例如，BRAF-突变的黑色素瘤)对免疫疗法或BRAF/MEK抑制剂的组合没有应答。
一个具体实施方案提供了治疗疾病的方法，所述方法包括向有此需要的受试者施用有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或包含结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)的药物组合物，其中所述疾病选自晚期实体肿瘤、EGFR+非小细胞肺癌、结肠直肠癌、复发性卵巢癌和BRAF-突变的黑色素瘤。
在另一个实施方案中，本公开提供了用于抑制肿瘤转移的方法，所述方法包括向有此需要的受试者施用有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或包含结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，结构(I)的化合物的酒石酸盐)和药学上可接受载体的药物组合物。
一个实施方案提供了治疗疾病的方法，所述方法包括向有此需要的受试者施用有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或包含结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)的药物组合物，其中所述疾病是结肠直肠癌，例如结肠直肠癌。在一些实施方案中，所述结肠直肠癌对EGFR-靶向疗法是抗性的。
可以用结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)治疗的血液恶性肿瘤包括但不限于白血病和淋巴瘤。例如，本发明公开的化合物和组合物可用于治疗疾病，诸如急性成淋巴细胞性白血病(ALL)、急性髓性白血病(AML)、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)、慢性髓性白血病(CML)、急性单核细胞性白血病(AMoL)和/或其他白血病。在其他实施方案中，结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)可用于治疗淋巴瘤，诸如所有亚型的霍奇金氏淋巴瘤或非霍奇金氏淋巴瘤。在具体实施方案中，本发明公开的化合物和组合物可用于治疗CLL和/或SLL。在一些具体实施方案中，本发明公开的化合物和组合物可用于治疗CLL。在一些具体实施方案中，本发明公开的化合物和组合物可用于治疗SLL。
各种各样的癌症，包括实体肿瘤和白血病(例如，急性髓性白血病和慢性淋巴细胞性白血病)适用于本文公开的方法。可以在各个实施方案中治疗的癌症类型，包括但不限于：乳腺、***和结肠的腺癌；所有形式的支气管肺癌；髓样癌；黑色素瘤；肝癌；神经母细胞瘤；***状瘤；胺前体摄取与脱羧细胞瘤(apudoma)；迷芽瘤；鳃原瘤；恶性类癌综合征；类癌心脏病；和癌(例如，Walker癌、基底细胞癌、基底鳞状细胞癌、Brown-Pearce癌、导管癌、Ehrlich肿瘤、Krebs 2、默克尔细胞癌、粘液癌、非小细胞肺癌、燕麦细胞癌、***状癌、硬癌、细支气管癌、支气管源性癌、鳞状细胞癌和移行细胞癌)；组织细胞病症；白血病；恶性组织细胞增多症；霍奇金氏病；小免疫增殖性癌；浆细胞瘤；网状内皮组织增生；黑色素瘤；软骨母细胞瘤；软骨瘤；纤维瘤；软骨肉瘤；纤维肉瘤；巨细胞肿瘤；组织细胞瘤；脂肪瘤；脂肪肉瘤；间皮瘤；粘液瘤；粘液肉瘤；骨瘤；骨肉瘤；脊索瘤；颅咽管瘤；无性细胞瘤；错构瘤；间质瘤；中肾瘤；肌肉瘤；成釉细胞瘤；牙骨质瘤；牙瘤；畸胎瘤；胸腺瘤；滋养细胞肿瘤；腺瘤；胆管瘤；胆脂瘤；圆柱瘤；囊腺癌(cystadenocarcinoma)；囊腺瘤(cystadenoma)；颗粒细胞肿瘤；两性母细胞瘤(gynandroblastoma)；肝癌；汗腺瘤；胰岛细胞肿瘤；莱氏细胞肿瘤；***状瘤；塞尔托利氏细胞肿瘤；泡膜细胞肿瘤；平滑肌瘤；平滑肌肉瘤；成肌细胞瘤；肌瘤；肌肉瘤；横纹肌瘤；横纹肌肉瘤；室管膜瘤；神经节瘤；神经胶质瘤；成神经管细胞瘤；脑膜瘤；神经鞘瘤；神经母细胞瘤；神经上皮瘤；神经纤维瘤；神经瘤；副神经节瘤；非嗜铬性副神经节瘤；血管角化瘤；伴有嗜酸细胞增多的血管淋巴样增生；硬化性血管瘤；血管瘤病；血管球瘤；血管内皮瘤；血管瘤；血管外皮细胞瘤；血管肉瘤；***瘤；***肌瘤；***肉瘤；松果体瘤；癌肉瘤；软骨肉瘤；叶状囊肉瘤；血管肉瘤；平滑肌肉瘤；白血病肉瘤；脂肪肉瘤；***肉瘤；肌肉瘤；粘液肉瘤；卵巢癌；横纹肌肉瘤；肉瘤；赘生物；神经纤维瘤病；和宫颈发育不良。
在又一个进一步方面，所述癌症选自脑、泌尿生殖道、内分泌***、胃肠道、血液、直肠、肾、淋巴***、胃和皮肤的癌症。
在一些实施方案中，所述癌症选自青少年癌症、儿童肾上腺皮质癌、AIDS-相关的癌症(例如，淋巴瘤和卡波济氏肉瘤)、***癌、附件癌(appendix cancer)、星形细胞瘤、非典型畸样癌、基底细胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脑干神经胶质瘤、脑肿瘤、乳腺癌、支气管肿瘤、伯吉特淋巴瘤、类癌、非典型畸样癌、胚胎性肿瘤、生殖细胞肿瘤、原发性淋巴瘤、青少年癌症、子***、儿童癌症、脊索瘤、心脏肿瘤、慢性骨髓增生性病症、结肠癌、结肠直肠癌(例如，对EGFR-靶向疗法抗性的结肠直肠癌)、颅咽管瘤、皮肤T-细胞淋巴瘤、肝外导管原位癌(DCIS)、胚胎性肿瘤、CNS癌、子宫内膜癌、室管膜瘤、食道癌、感觉神经母细胞瘤、尤因肉瘤、颅外生殖细胞肿瘤、性腺外生殖细胞肿瘤、眼癌、骨纤维组织细胞瘤、胆囊癌、胃癌、胃肠间质肿瘤(GIST)、胃肠类癌、生殖细胞肿瘤、妊娠滋养细胞肿瘤、毛细胞白血病、头颈癌、心脏病、肝癌、下咽癌、眼内黑色素瘤、胰岛细胞肿瘤、胰腺神经内分泌肿瘤、肾癌、喉癌、唇和口腔癌、肝癌、原位小叶癌(LCIS)、肺癌、淋巴瘤、伴有隐匿性原发性中线道癌的转移性鳞状颈癌、口腔癌、多种内分泌肿瘤综合征、多发性骨髓瘤/浆细胞肿瘤、蕈样真菌病、骨髓增生异常综合征、骨髓增生异常/骨髓增生性肿瘤，诸如骨髓纤维化、多发性骨髓瘤、默克尔细胞癌、恶性间皮瘤、骨的恶性纤维组织细胞瘤和骨肉瘤、鼻腔和副鼻窦癌、鼻咽癌、神经母细胞瘤、口腔癌、唇和口腔癌、口咽癌、卵巢癌、胰腺癌、***状瘤病、副神经节瘤、副鼻窦和鼻腔癌、甲状旁腺癌、***癌、咽部癌、胸膜肺母细胞瘤、原发性中枢神经***(CNS)淋巴瘤、***癌、直肠癌、移行细胞癌、视网膜母细胞瘤、横纹肌肉瘤、唾液腺癌、皮肤癌、胃(胃)癌、小细胞肺癌、小肠癌、软组织肉瘤、T-细胞淋巴瘤、睾丸癌、喉癌、胸腺瘤和胸腺癌、甲状腺癌、肾盂和输尿管的移行细胞癌、滋养细胞肿瘤、儿童异常癌症、尿道癌、子宫肉瘤、***癌、外阴癌、病毒诱导的癌症、听神经瘤、神经胶质瘤、脑膜瘤、垂体瘤、神经鞘瘤、CNS淋巴瘤、原始神经外胚层肿瘤、颅咽管瘤、脊索瘤、髓母细胞瘤、脑神经母细胞瘤、中枢神经细胞瘤、松果体细胞瘤、松果体母细胞瘤、非典型畸胎样横纹肌样肿瘤、软骨瘤、脉络丛癌、脉络丛***状瘤、颅咽管瘤、胚胎发育不良神经上皮肿瘤、神经节细胞瘤、生殖细胞瘤、血管母细胞瘤、血管外皮细胞瘤、转移性脑肿瘤细胞和神经胶质瘤(例如，多形性胶质母细胞瘤、室管膜瘤、星形细胞瘤、少突神经胶质瘤、少突星形细胞瘤、少年毛细胞型星形细胞瘤、室管膜下巨细胞星形细胞瘤、神经节神经胶质瘤、室管膜下瘤、多形性黄色瘤形星形细胞瘤、间变性星形细胞瘤、多形胶质母细胞瘤、脑干神经胶质瘤、少突神经胶质瘤、室管膜瘤、少突星形细胞瘤、小脑星形细胞瘤、促结缔织增生的婴儿星形细胞瘤、室管膜下巨细胞星形细胞瘤、弥漫性星形细胞瘤、混合神经胶质瘤、视神经胶质瘤、脑胶质瘤病、副神经节细胞瘤或神经节细胞瘤细胞)。
本发明的实施方案还包括治疗哺乳动物中的过度增殖性疾病的方法，其包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)。在一些实施方案中，所述方法涉及治疗非癌性过度增殖性疾病，诸如皮肤的良性增生(例如，银屑病)、再狭窄或***(例如，良性***肥大(BPH))。在一些实施方案中，所述方法涉及结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)用于治疗纤维化(包括但不限于肺纤维化(例如，特发性肺纤维化)和肝纤维化)的用途。
在一些实施方案中，本发明提供了通过使细胞与足以抑制AXL激酶的活性的量的结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)接触来抑制所述细胞中的激酶活性的方法。在一些实施方案中，本发明提供了通过使组织与足以抑制所述组织中的AXL激酶的活性的量的结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)接触来抑制所述组织中的AXL激酶活性的方法。在一些实施方案中，本发明提供了通过使生物体与足以抑制所述生物体中的AXL激酶的活性的量的结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)接触来抑制所述生物体中的AXL激酶活性的方法。在一些实施方案中，本发明提供了通过使动物与足以抑制所述动物中的AXL激酶的活性的量的结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)接触来抑制所述动物中的AXL激酶活性的方法。在一些实施方案中，本发明提供了通过使哺乳动物与足以抑制所述哺乳动物中的AXL激酶的活性的量的结构(I)的化合物的药学上可接受的盐或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)接触来抑制所述哺乳动物中的AXL激酶活性的方法。在一些实施方案中，本发明提供了通过使人与足以抑制所述人中的AXL激酶的活性的量的结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)接触来抑制所述人中的AXL激酶活性的方法。在其他实施方案中，本发明提供了治疗需要这种治疗的受试者中的由AXL激酶活性介导的疾病的方法。
在一些具体实施方案中，本公开提供了通过向有需要的受试者施用AXL激酶抑制剂(诸如结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐))来治疗慢性淋巴细胞性白血病(CLL)的方法。在一些实施方案中，本公开的方法治疗CLL和小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)。在一些实施方案中，所述受试者先前已经针对CLL进行治疗，但仍展示可检测的轻小残留疾病(MRD)的症状。因此，一个实施方案提供了用于治疗受试者中的CLL的方法，其包括向所述受试者施用有效量的AXL激酶抑制剂，其中受试者已接受针对CLL的先前治疗方案，且所述受试者在先前治疗方案后是难治的，所述受试者在对先前治疗方案应答后复发CLL，或所述受试者具有可检测的最小残留疾病(MRD)。
根据修订的IWCLL指南，如果外周血(循环)淋巴细胞计数正常、通过体检不存在明显的***病(例如，***直径>1.5cm)、肝脏尺寸正常且脾脏尺寸<13cm、不存在体质症状、血小板计数大于或等于100,000/μL、血红蛋白大于或等于11.0g/dL(未输血且无***)和正常细胞骨髓(无CLL细胞、无B-淋巴小结)，则被诊断为具有CLL的受试者被认为“完全缓解”。如果外周血(循环)淋巴细胞计数从基线下降≥50％、***从基线下降≥50％、肝脏和脾脏尺寸从基线下降≥50％、血小板计数大于或等于100,000/μL或从基线增加≥50％、血红蛋白大于或等于11.0g/dL或从基线增加≥50％、但骨髓中仍存在CLL细胞或B-淋巴小结，则诊断为具有CLL的受试者符合“部分缓解”的标准。对于“部分缓解”，需要符合前三个参数中的至少一个参数，并且需要满足后三个参数中的一个参数。术语“复发”是指先前已经达到上述CR或PR的标准六个或更多个月的患者中的疾病进展。在具体实施方案中，所述受试者在先前治疗方案后是难治的。在具体实施方案中，所述受试者在对先前治疗方案应答后复发CLL。在具体实施方案中，所述受试者具有可检测的最小残留疾病(MRD)。
在一些实施方案中，所述受试者先前已经针对CLL和/或SLL进行治疗。在一些实施方案中，所述受试者不耐受先前治疗方案。如本文所用，“不耐受”意指受试者不能或不愿意耐受有效量的治疗剂的不利影响。
可检测的MRD是指受试者在外周血或骨髓的样品中每10，000个白细胞具有至少1个CLL细胞的疾病状态。百分比MRD是指外周血或骨髓样品中的CLL细胞相对于白细胞的百分比。例如，每10,000个白细胞中具有1个CLL细胞的受试者被分类为具有0.01％MRD。可以使用本领域中已知的技术，例如免疫表型分析(例如，流式细胞术)或基于分子的测定(例如聚合酶链式反应和下一代测序)，从外周血和/或骨髓测定MRD，如JAMA Oncology,March2018,Volume 4,Number 3,P.394-400,and Blood,March 2018,blood-2017-09-806398(其在此通过引用并入)中所讨论。
可用于治疗CLL和/或SLL(诸如具有可检测的MRD的CLL)的示例性AXL激酶抑制剂和本发明的其他实施方案是本领域中已知的，例如如WO 2012/135800和WO 2008/128072(其全部公开内容在此通过引用以其整体并入本文)中所公开。示例性的AXL激酶抑制剂包括具有以下结构(I')的化合物：
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物或多晶型物，其中
L1选自O和NR5，其中R5选自氢和C1-C6烷基；
L2选自CH2和NCH3，条件是当Y是N时，L2是CH2；
Y选自CH和N；
Z选自O、NR6和CH2，其中R6选自氢和CH3；
R1a和R1b各自独立地选自氢、卤素、OH、CN、SO2CH3、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、C1-C6多卤代烷氧基、C1-C6卤代烷基、C1-C6多卤代烷基、C1-C6氰基烷基和NH(C＝O)R7，R7选自氢和C1-C6烷基；
R2选自氢、C1-C6烷基、SO2R8和(C＝O)R8，其中R8选自氢、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C3-C6杂环烷基和NR10R11，其中：a)R10选自氢、C1-C6烷基和C3-C6环烷基；且R11，当存在时，选自氢和C1-C6烷基；或b)R10和R11共价键合，且与中间体氮一起，包含任选地取代的3-7元杂环烷基环；
R3选自氢、卤素、OH、CN、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C6多烷基、C3-C6环烷基、C3-C6卤代烷基、C3-C6多卤代烷基和C3-C6杂环烷基；
R4选自氢、卤素、Ar1、C1-C6烷基、C3-C6环烷基和C3-C6杂环烷基，其中Ar1或者是被0-3个独立地选自以下的取代基取代的苯基：氰基、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基氧基、C1-C6卤代烷基,和C1-C6多卤代烷基、C1-C6氰基烷基、SO2R12、C1-C3烷基、C1-C3烷胺和C1-C3二烷基氨基；或者Ar1是被0-3个独立地选自以下的取代基取代的单环杂芳基：卤素、氰基、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基氧基、C1-C6卤代烷基,和C1-C6多卤代烷基、C1-C6氰基烷基、SO2R12、C1-C3烷基、C1-C3烷胺和C1-C3二烷基氨基，其中R12选自C1-C6烷基和C3-C6环烷基；且
n是0或1。
结构(I')的化合物的取代基如WO 2012/135800中所定义。
在一些实施方案中，示例性的AXL激酶抑制剂选自以下物质或其药学上可接受的盐：
在某些更具体实施方案中，所述AXL激酶抑制剂是结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在某些实施方案中，所述AXL激酶抑制剂是如本文所公开的结构(I)的化合物的酒石酸盐。
在前述的某些实施方案中，所述先前治疗方案包括用B-细胞受体信号传导拮抗剂(例如，布鲁顿氏酪氨酸激酶(BTK)、SYK或PI3K抑制剂)或Bcl-2抑制剂或两者进行治疗。在其他实施方案中，所述受试者无资格用B-细胞受体信号传导拮抗剂或Bcl-2抑制剂或两者进行治疗。在不同的实施方案中，所述受试者不耐受用B-细胞受体信号传导拮抗剂或Bcl-2抑制剂或两者的治疗。
在某些实施方案中，所述B-细胞受体信号传导拮抗剂是BTK抑制剂。在先前治疗方案的某些实施方案中可以包括的示例性BTK抑制剂包括本领域中已知的那些，诸如PCT公开号：WO 2014/052365；WO 2015/048689；WO 2015/002894；WO 2014/168975；WO 2014/159745；WO 2014/130693；WO 2014/078578；WO 2014/018567；WO 2013/184572；WO 2013/173518；WO 2013/116382；WO 2013/102059；WO 2013/059738；WO 2013/010136；WO 2011/153514；WO 2011/046964；WO 2010/009342；WO 2008/121742；WO 2008/054827；WO 2008/039218；WO 2007/087068；和美国公开号：2015/0018336；2014/0336206；2014/0243355；2014/0212485；2014/0194446/2014/0187564；2014/0135347；2014/0128414；2014/0187565；2014/0171453；2014/0163027；2014/01663046；2014/0142126；2014/0142123；2014/0128413；2014/0079690；2014/0080844；2014/0057907；2014/0039168；2013/0338172；2013/0310402；2013/0273030；2013/0197014；2013/0035334；2013/0012525；2012/0283277；2012/0283276；2012/0277254；2012/0252821；2010/0331350中描述的那些，其全部公开内容在此通过引用以其整体并入。
在一些实施方案中，所述BTK抑制剂是ONO-4059、AVL-292、SNS-062、CNX-774、CGI-1746、RN486或ACP-196，所述化合物是本领域中已知。在一些具体实施方案中，所述BTK抑制剂是依鲁替尼。
在某些实施方案中，所述B-细胞受体信号传导拮抗剂是SYK抑制剂或PI3Kγ/δ抑制剂。在一些实施方案中，所述SYK抑制剂是fostamatinib、entospletinib、cerdulatinib或TAK-659。在一些实施方案中，所述PI3Kγ/δ抑制剂是艾代拉里斯、duvelisib、TGR-1202或ACP-319/AMG-319。
在先前治疗方案的某些实施方案中可以包括的BCL-2抑制剂包括本领域中已知的那些。例如，在前述实施方案中的一些中，所述Bcl-2抑制剂是Venetoclax(即，ABT-199)。在一些其他实施方案中，所述Bcl-2抑制剂是反义寡核苷酸药物(例如，oblimersen)、BH3模拟物(例如，ABT-737、ABT-737-d8或navitoclax/ABT-263或ABT-263-d8)、新型非肽抑制剂(例如，TW-37)、泛-BCL-2抑制剂(例如，Sabutoclax、Obatoclax)、Bcl-2xl/BH3结构域相互作用抑制剂(例如，BH3I-1)、BCL-xl抑制剂(例如，A-1331852或A-1155463)、BCL-2的非肽配体(例如，HA14-1)、Bax活化剂(例如，BAM7)、小分子BCL-2/BH4结构域拮抗剂(例如，BDA-366)、类黄酮(例如，甘草查尔酮A)。在某些具体实施方案中，所述BCL-2抑制剂是FX1、AT-101、A-1210477、藤黄酸、UMI-77、棉子酚、(-)-表焙儿茶素没食子酸酯、EM20-25、尼洛替尼或尼洛替尼-d3、YC137、AG 1024、3-溴代丙酮酸、氟伐他汀、荜拔酰胺、2,3-DCPE、2-甲氧基-抗霉素A3或Marinopyrrole A(即，Maritoclax)。
在各个不同的实施方案中，所述受试者具有大于0.01％MRD，如通过对来自受试者的外周血或骨髓样品进行免疫表型分析(例如，流式细胞术)或基于分子的分析(例如聚合酶链式反应和下一代测序)所测定。在一些实施方案中，受试者具有大于0.1％的MRD，如通过对来自受试者的外周血或骨髓样品进行免疫表型分析或基于分子的分析所测定。在不同的实施方案中，所述受试者具有大于1.0％的MRD，如通过对来自受试者的外周血或骨髓样品进行免疫表型分析或基于分子的分析所测定。在还有更多的实施方案中，所述受试者具有0.01％至1.0％的MRD，如通过对来自受试者的外周血或骨髓样品进行免疫表型分析或基于分子的分析所测定。
在一些实施方案中，MRD基于外周血中的％MRD确定。在其他实施方案中，MRD基于骨髓中的％MRD确定。
用于用可检测的MRD治疗CLL的方法可以进一步包括测定来自受试者的外周血或骨髓样品中的CLL细胞和白细胞的数量。测定步骤可以根据如本领域中已知和如上文所述的体外方法进行。或者，该确定基于对获得自上述体外方法的数据的审查。
所述方法还可以进一步包括如果每10,000个白细胞的CLL细胞的数量大于1，则将患者分类为具有MRD，或者如果每10,000个白细胞中的CLL细胞的数量为1至100，则将患者分类为具有MRD。
2.生物标志物
在各个实施方案中，本公开的方法包括确定一种或多种标志物的表达水平、组织浓度或存在。在一些实施方案中，所述标志物包括以下中的一种或多种：Snail、Slug、AXL(例如，AXL、磷酸化AXL、磷酸化/总AXL、可溶性AXL等)、AKT(例如，磷酸化/总AKT)、MMP、mTOR、PI3K、p38、JAK、STAT、SOCS1、SOCS3、PTEN、ERK、H2AX、CCNE、β-联蛋白、P-糖蛋白1、GAS6、视黄酸、蛋白S、sMerTK、白介素(IL)1β、IL2r/CD25、IL2、IL4、IL5、IL6、IL8、IL10、IL12、IL13、IL17、TNF-α、IFNγ、CSF2、CSF3、CCL2、sPD-L1/PD-L1、sPD-1/PD-1、sPD-L1/sPD-1、sCD163/CD163、E-钙粘蛋白、N-钙粘蛋白、Twist、FLT3、CDH1、CDH2、ZEB1、ADH1A、APOA2、ALDH1A2、CD38、CYP26A1、CYP26B1、DHRS3、DLX5、LGR1、FOXA1、HNP1B、HSD17B2、ISL1、LHX1、PPARG、RARA、RARB、RBP4、RXRG、SHH、STRA6、TGM2和UCPI。在一些实施方案中，本公开的方法可以包括确定ADH1A、APOA2、ALDH1A2、CD38、CYP26A1、CYP26B1、DHRS3、DLX5、LGR1、FOXA1、HNP1B、HSD17B2、ISL1、LHX1、PPARG、RARA、RARB、RBP4、RXRG、SHH、STRA6、TGM2和UCPI中的一种或多种的表达水平、组织浓度或存在。在具体实施方案中，一种或多种标志物包括AXL和/或GAS6。在一些实施方案中，一种或多种标志物包括AXL。在具体实施方案中，一种或多种标志物包括可溶性AXL。在一些实施方案中，一种或多种标志物包括GAS6。在一些实施方案中，一种或多种标志物包括可溶性GAS6。
在一些实施方案中，本公开的方法可以包括确定活化细胞(例如，树突细胞，诸如CD86和CD11c)的标志物的表达。在一些实施方案中，本公开的方法可以包括确定对CLL的检测特异性的标志物(包括CD5、CD19、CD20、CD23、CD38、CD43、CD45、CD79b、CD81、κ轻链、λ轻链和血清β2-微球蛋白)的表达。在一些实施方案中，本公开的方法可以包括确定与CLL相关的基因(包括del(17p)、TP53和IGV)中的突变。在一些实施方案中，在任何合适的组织样品中测量标志物水平。例如，可以在受试者的血液制品(例如，血浆、血清、外周血单核细胞、作为无细胞DNA(cfDNA)循环的肿瘤DNA种类、循环肿瘤细胞、循环肿瘤DNA(ctDNA)、循环miRNA等)中的一种或多种中测量标志物水平。在具体实施方案中，所述样品是全血样品、血清样品或血浆样品。在具体实施方案中，所述样品是全血样品。在其他实施方案中，所述样品是血清样品。在其他实施方案中，所述样品是血浆样品。
标志物的表达水平、组织浓度或存在可以使用任何合适的技术，诸如酶联免疫测定(ELISA)、质谱(MS)、实时定量PCR(RT-qPCR)、流式细胞术、核酸(即，DNA、RNA等)测序、氨基酸(即，肽、蛋白等)测序、分子细胞遗传学荧光原位杂交(FISH)等，进行测量。
在各个实施方案中，本文所述的标志物中的一种或多种可以被上调。“上调”或“上调的”是指蛋白的存在的增加和/或其基因的表达的增加。在各个实施方案中，一种或多种标志物可以被下调。“下调”或“下调的”是指蛋白的存在的减少和/或其基因的表达的减少。此外，蛋白的功能可以通过相关的活性测定进行测定。示例性活性测定包括结合测定，酶活性测定，包括例如蛋白酶测定、激酶测定、磷酸酶测定、还原酶测定等。
标志物的上调或下调可以通过将值与相关参考水平进行比较来评价。例如，一种或多种标志物的量可以指示为值，该值可以例如通过所进行的测定测量样品中的标志物的水平而得出。在广义上，该值可以是定性的或定量的。在检测是定性的情况下，所述***和方法提供对所测定的样品中是否存在标志物的读取或评估，例如评价。在还有其他实施方案中，所述***和方法提供了对所测定的样品中是否存在标志物的定量检测，即对所测定的样品中的标志物的实际量或相对丰度的评估或评价。在此类实施方案中，所述定量检测可以是绝对的，或者，如果该方法是检测样品中的两种或更多种不同的标志物的方法，则可以是相对的。因此，当在定量样品中的标志物的上下文中使用时，术语“定量”可以指绝对定量或相对定量。绝对定量可以通过如下完成：包括一种或多种对照标志物的已知浓度和用已知对照标志物参考、例如归一化检测的标志物的水平(例如通过生成标准曲线)。相对定量可以通过如下完成：比较标志物和对照(例如，GAPDH或肌动蛋白)之间的检测水平或量，以提供标志物例如相对于对照的相对定量。或者，相对定量可以通过如下完成：比较两种或更多种不同标志物之间的检测水平或量，以提供两种或更多种标志物各自例如相对于彼此的相对定量。
在一些实施方案中，用于鉴定通过本文公开的任何方法治疗的合适患者的生物标志物可以是可溶性AXL、GAS6或间充质转录因子。所述标志物中的一种或多种的水平相对于参考水平升高的患者可以被鉴定为适合于本文公开的治疗。参考水平可以是对照样品中的对应生物标志物的水平，其可以使用用于测量候选患者的样品中的生物标志物的相同方法进行测量。所述对照可以是(或可能源自)一个或多个正常受试者。如本文所用的正常受试者是指明显健康且未显示如本文所公开的靶标癌症的体征或症状的受试者。因此，对照受试者的群体可以是正常受试者的群体。或者，对照样品可以是(或可以源自)对一种或多种先前癌症疗法(例如本文所述的那些)无应答的具有靶标癌症的一个或多个受试者。在一些实施方案中，所述对照样品可以是(或可以源自)针对对抗癌疗法(例如，本文公开的那些)的应答性进行评价的受试者。
在具体实例中，所述生物标志物是可溶性AXL。参考水平可以是指示疾病预测和/或对本文公开的治疗方案的适合性的可溶性AXL的血清浓度的截止值。在一些实例中，可溶性AXL的截止值可以小于41,000pg/ml，这可能指示疾病进展的高风险。在其他实例中，所述截止值可以大于约42,000pg/ml，这可以指示疾病稳定的可能性。所述截止值可用于鉴定具有特定预后特征的患者用于治疗。
可以使用本领域中已知的任何方法在蛋白或核酸水平上测定标志物(即，标志物水平)的测量值。在某些实施方案中，所述测量包括测量mRNA水平或蛋白水平。在具体实施方案中，所述测量包括测量mRNA水平。
在一些实施方案中，标志物通过如下检测：将样品与试剂(例如，抗体或核酸引物)接触，生成试剂和标志物的复合物，和检测复合物。根据已知技术，诸如被动结合，抗体可以与适合于诊断测定的固体支持物缀合。根据已知技术，诸如流式细胞术，包括多色流式细胞术，抗体可以与用于诊断测定的细胞表面抗原缀合。根据已知技术，抗体或核酸引物可以与可检测的标记物或基团(诸如放射性标记物、酶标记物和荧光标记物)缀合。
合适的免疫测定的实例包括免疫印迹、免疫沉淀、免疫荧光、化学发光、电化学发光(ECL)和ELISA。标志物的上调或下调也可以通过使用以下检测：例如，cDNA阵列、克隆杂交、差异展示、差异筛选、FRET检测、液体微阵列、PCR、RT-PCR、Sanger测序、质量平行(下一代)测定、分子信标、微电子阵列、寡核苷酸阵列、多核苷酸阵列、基因表达的系列分析(SAGE)和/或消减杂交。
抗AXL抗体的实例包括AF154(可得自R&D
)和MM0098-2N33(可得自
)。抗GAS6抗体的实例包括A-9(可得自SANTA CRUZ
)和AF986(可得自R&D
)。基于AXL(NCBI Gene ID:558)或GAS6(NCBI GeneID:2621)的基因序列，可以使用已知技术设计核酸引物。
可以在治疗前从受试者收集的样品中测定标志物水平。在此类实施方案中，标志物水平可用于预测对特定治疗的应答性。在一些实施方案中，受试者的标志物水平可用于选择适当的治疗方案。在一些实施方案中，水平可以至少部分用于确定施用于受试者的治疗。在一些实施方案中，在第一个治疗周期的第1天，给药前，收集治疗前样品。在一些实施方案中，可以在施用第一剂治疗方案前一个月、三周、两周、一周、六天、五天、四天、三天、两天或一天收集治疗前样品。
在实施方案中，所述样品是全血样品、血清样品或血浆样品。在某些实施方案中，所述表达水平是mRNA水平或蛋白水平。在具体实施方案中，所述表达水平是mRNA水平。
在一些实施方案中，可以在向受试者施用一定剂量的治疗后收集样品。在具体实施方案中，在第一个治疗周期的第1天、给药前、给药后2小时、给药后6小时和给药后24小时收集样品。在另一个具体实施方案中，也在第一个治疗周期的第8天，给药前，收集样品。在另一个具体实施方案中，也在第二个治疗周期的第1天，给药前，收集样品。在进一步具体实施方案中，也在任何额外(例如第三、第四、第五等)的治疗周期的第1天，给药前，收集样品。在另一个具体实施方案中，还在完成处理后收集样品。
可以从在治疗前从受试者收集的样品测量预定的标志物水平。在此类实施方案中，所述标志物水平可用于告知治疗方案的选择和/或预测对特定治疗的应答性。在一些实施方案中，所述标志物水平可以至少部分用于确定用于受试者的治疗方案。
因此，本公开的实施方案包括用于为有此需要的受试者选择治疗方案的方法，所述方法包括：获得源自所述受试者的治疗前样品；测量所述样品中的标志物；将所述标志物水平与阈值标志物水平进行比较；和基于其选择治疗方案。
本申请的实施方案包括用于为有此需要的受试者选择治疗方案的方法，所述方法包括：获得源自所述受试者的治疗前样品；测量所述样品中的标志物水平；将所述标志物水平与阈值标志物水平进行比较；和基于所述比较选择包含有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐的治疗方案。
本申请的进一步实施方案包括用于为有此需要的受试者选择治疗方案的方法，所述方法包括：获得源自所述受试者的治疗前样品；测量所述样品中的标志物的标志物水平；和如果所述标志物水平高于阈值标志物水平，则选择包含有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐的治疗方案。
本公开的具体实施方案包括用于为有此需要的受试者选择治疗方案的方法，所述方法包括：获得源自所述受试者的治疗前样品；测量所述样品中的标志物(包括AXL或GAS6蛋白)；将所述标志物的标志物水平与阈值标志物水平进行比较；和基于所述比较选择治疗方案。在某些实施方案中，所述治疗方案包括施用包含结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)的药物组合物。
进一步实施方案包括基于标志物的预定水平将治疗方案施用于受试者。因此，本公开的实施方案包括用于治疗受试者中的癌症的方法，所述方法包括：将有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐施用于具有高于阈值标志物水平的预定标志物水平的受试者。
本公开的进一步实施方案包括用于治疗受试者中的癌症的方法，所述方法包括：将有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐施用于具有预定水平的标志物(包括AXL或GAS6蛋白)的受试者，其中所述预定水平高于阈值标志物水平。
在一些实施方案中，所述阈值标志物水平与疾病结果相关。此外，所述阈值标志物水平可以从根据疾病结果分组的群体确定。在一些实施方案中，所述群体针对癌症进行治疗。在某些实施方案中，所述癌症是实体肿瘤。在实施方案中，所述癌症是血液学癌症。在具体实施方案中，所述群体针对与所述受试者相同类型的疾病(例如，相同类型的癌症)进行治疗。
在实施方案中，所述群体具有与受试者相同类型的疾病(例如，相同类型的癌症)。在具体实施方案中，所述群体具有与受试者相同类型的癌症。
在前述实施方案中的一些中，在用结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐治疗后，所述群体具有疾病进展。疾病进展可以指在开始治疗后严重程度已经恶化的疾病。因此，在具体实施方案中，所述阈值标志物水平与疾病进展结果相关。
在一些实施方案中，在用结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐治疗后，所述群体无进展(例如，稳定疾病)。无进展可以指在治疗的过程期间已经改善(例如，缓解)的疾病或未进展的疾病(例如，肿瘤未显著生长或尺寸减小；和/或癌症分期没有增加或减少)。在具体实施方案中，无进展是稳定疾病。稳定疾病可以指在治疗的过程期间未改善、但未进展的疾病。因此，在其他实施方案中，所述阈值标志物水平与无进展相关。
在一些实施方案中，所述群体是包含约2、约5、约10、约25、约50、约75或约100个受试者的组。在一些实施方案中，所述群体是包含约200、约300、约500、约1,000、约1,500、约2,000、约3,000、约5,000或约10,000个受试者的组。在一些实施方案中，所述群体是包含少于约10,000个受试者的组。在其他实施方案中，所述群体是包含大于约10,000个受试者的组。
在某些实施方案中，所述受试者的标志物水平高于与疾病进展相关的阈值标志物水平。在实施方案中，所述受试者的标志物水平高于或等于与无进展相关的阈值标志物水平。
在实施方案中，AXL蛋白的阈值标志物水平是约35,000皮克/毫升(pg/mL)。在一些实施方案中，AXL蛋白的阈值标志物水平是约36,000pg/mL。在一些实施方案中，AXL蛋白的阈值标志物水平是约37,000pg/mL。在一些实施方案中，AXL蛋白的阈值标志物水平是约37,500pg/mL。在一些实施方案中，AXL蛋白的阈值标志物水平是约38,000pg/mL。在一些实施方案中，AXL蛋白的阈值标志物水平是约38,500pg/mL。在一些实施方案中，AXL蛋白的阈值标志物水平是约39,000pg/mL。在一些实施方案中，AXL蛋白的阈值标志物水平是约39,500pg/mL。在一些实施方案中，AXL蛋白的阈值标志物水平是约40,000pg/mL。在一些实施方案中，AXL蛋白的阈值标志物水平是约40,500pg/mL。在一些实施方案中，AXL蛋白的阈值标志物水平是约41,000pg/mL。在一些实施方案中，AXL蛋白的阈值标志物水平是约41,500pg/mL。在一些实施方案中，AXL蛋白的阈值标志物水平是约42,000pg/mL。在具体实施方案中，AXL蛋白的阈值标志物水平是约43,000pg/mL。在一些实施方案中，AXL蛋白的阈值标志物水平是约44,000pg/mL。在某些实施方案中，AXL蛋白的阈值标志物水平是约45,000pg/mL。在一些实施方案中，AXL蛋白的阈值标志物水平是约46,000pg/mL。在一些实施方案中，AXL蛋白的阈值标志物水平是约47,000pg/mL。
在一些实施方案中，GAS6蛋白的阈值标志物水平是约8,000pg/mL。在一些实施方案中，GAS6蛋白的阈值标志物水平是约9,000pg/mL。在一些实施方案中，GAS6蛋白的阈值标志物水平是约10,000pg/mL。在具体实施方案中，GAS6蛋白的阈值标志物水平是约10,500pg/mL。在一些实施方案中，GAS6蛋白的阈值标志物水平是约11,000pg/mL。在具体实施方案中，GAS6蛋白的阈值标志物水平是约11,500pg/mL。在一些实施方案中，GAS6蛋白的阈值标志物水平是约12,000pg/mL。在某些实施方案中，GAS6蛋白的阈值标志物水平是约12,500pg/mL。在具体实施方案中，GAS6蛋白的阈值标志物水平是约13,000pg/mL。在一些实施方案中，GAS6蛋白的阈值标志物水平是约13,500pg/mL。在一些实施方案中，GAS6蛋白的阈值标志物水平是约14,000pg/mL。在某些实施方案中，GAS6蛋白的阈值标志物水平是约14,500pg/mL。在具体实施方案中，GAS6蛋白的阈值标志物水平是约15,000pg/mL。在具体实施方案中，GAS6蛋白的阈值标志物水平是约15,500pg/mL。在具体实施方案中，GAS6蛋白的阈值标志物水平是约16,000pg/mL。在某些实施方案中，GAS6蛋白的阈值标志物水平是约16,500pg/mL。
因此，本公开的实施方案包括为受试者中的癌症选择治疗方案的方法，所述方法包括：获得源自所述受试者的治疗前样品；测量所述样品中的标志物(包括AXL或GAS6)的水平；和选择包含有效量的AXL抑制剂的治疗方案，条件是：(A)AXL蛋白的水平是至少约35,000皮克/毫升(pg/mL)；(B)GAS6蛋白的水平是至少约8,000pg/mL；或(C)两者兼而有之。
因此，本公开的实施方案包括为受试者中的癌症选择治疗方案的方法，所述方法包括：获得源自所述受试者的治疗前样品；测量所述样品中的标志物(包括AXL或GAS6)的水平；和选择包含有效量的AXL抑制剂的治疗方案，条件是：(A)AXL蛋白的水平是至少约45,000皮克/毫升(pg/mL)；(B)GAS6蛋白的水平是至少约13,500pg/mL；或(C)两者兼而有之。
本公开的具体实施方案包括为受试者中的癌症选择治疗方案的方法，所述方法包括：获得源自所述受试者的治疗前样品；测量所述样品中的标志物(包括AXL或GAS6)的水平；和选择包含有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐的治疗方案，条件是：
(A)AXL蛋白以至少约45,000pg/mL的水平存在；(B)GAS6蛋白以至少约13,500pg/mL的水平存在；或(C)两者兼而有之。
在实施方案中，受试者的标志物水平是预定的。
因此，本公开的实施方案包括用于治疗受试者中的癌症的方法，所述方法包括：将有效量的AXL抑制剂施用于具有预定水平的标志物(包括AXL或GAS6)的受试者，其中：(A)AXL蛋白的预定水平是至少45,000pg/mL；(B)GAS6蛋白的预定水平是至少13,500pg/mL；或(C)两者兼而有之。
本公开的进一步实施方案包括用于治疗受试者中的癌症的方法，所述方法包括：将有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐施用于具有预定水平的标志物(包括AXL或GAS6)的受试者：
其中：(A)AXL蛋白的预定水平是至少35,000pg/mL；(B)GAS6蛋白的预定水平是至少8,000pg/mL；或(C)两者兼而有之。
在本公开的又进一步实施方案中包括用于治疗受试者中的癌症的方法，所述方法包括：将有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐施用于具有预定水平的标志物(包括AXL或GAS6)的受试者：
其中：(A)AXL蛋白的预定水平是至少45,000pg/mL；(B)GAS6蛋白的预定水平是至少13,500pg/mL；或(C)两者兼而有之。
3.组合疗法
在又另一个实施方案中，向有此需要的受试者组合施用AXL激酶抑制剂(诸如结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐))与B-细胞受体信号传导拮抗剂(例如，布鲁顿氏酪氨酸激酶(BTK)抑制剂，诸如依鲁替尼)。因此，本公开的方法包括用于治疗癌症的方法，其包括向有此需要的受试者施用有效量的AXL激酶抑制剂和布鲁顿氏酪氨酸激酶(BTK)抑制剂。所述施用可以在所述B-细胞受体信号传导拮抗剂(例如，BTK抑制剂)的施用之前、同时或之后进行。
在一些实施方案中，共同施用所述AXL激酶抑制剂和BTK抑制剂。在其他实施方案中，所述AXL激酶抑制剂在所述BTK抑制剂之后施用。在仍然不同的实施方案中，所述AXL激酶抑制剂在所述BTK抑制剂之前施用。
在各个实施方案中，所述BTK抑制剂是依鲁替尼。在一些具体实施方案中，所述癌症是慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)或两者。在一些实施方案中，所述受试者已经接受针对CLL、SLL或两者的先前的治疗方案。在一些实施方案中，所述受试者在先前的治疗方案后是难治的，所述受试者在对先前的治疗方案应答后具有复发的CLL、SLL或两者，或所述受试者具有可检测的最小残余疾病(MRD)。
在某些实施方案中，所述受试者对用B-细胞受体信号传导拮抗剂(例如，BTK抑制剂)治疗不敏感，不符合用B-细胞受体信号传导拮抗剂(例如，BTK抑制剂)治疗的条件，或已经在用B-细胞受体信号传导拮抗剂(例如，BTK抑制剂)治疗后复发。在一个具体实施方案中，向有此需要的受试者组合施用结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)与BTK抑制剂(诸如依鲁替尼)，用于治疗白血病(例如，CLL、SLL或两者)。
在另一个实施方案中，向有此需要的受试者组合施用AXL激酶抑制剂(诸如结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐))与Bcl-2抑制剂(诸如，venetoclax)。所述施用可以在所述Bcl-2抑制剂的施用之前、同时或之后进行。在某些实施方案中，所述受试者对用Bcl-2抑制剂治疗不敏感，不符合用Bcl-2抑制剂治疗的条件，或已经在用Bcl-2抑制剂治疗后复发。在一个具体实施方案中，向有此需要的受试者组合施用结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)与Bcl-2抑制剂(诸如，venetoclax)，用于治疗白血病(例如，CLL、SLL或两者)。
在又另一个实施方案中，向有此需要的受试者组合施用AXL激酶抑制剂(诸如结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐))与免疫检查点抑制剂(例如，PD-1抑制剂(诸如派姆单抗或纳武单抗)、PD-L1抑制剂(诸如阿特珠单抗、阿维单抗或德瓦鲁单抗)、CTLA-4抑制剂、LAG-3抑制剂或Tim-3抑制剂)。因此，本公开的方法包括用于治疗癌症的方法，其包括向有此需要的受试者施用有效量的AXL激酶抑制剂和免疫检查点抑制剂。所述AXL激酶抑制剂的施用可以在免疫检查点抑制剂(例如，PD-1抑制剂(诸如派姆单抗或纳武单抗)、PD-L1抑制剂(诸如阿特珠单抗、阿维单抗或德瓦鲁单抗)、CTLA-4抑制剂、LAG-3抑制剂或Tim-3抑制剂)的施用之前、同时或之后进行。
在一些实施方案中，共同施用所述AXL激酶抑制剂和免疫检查点抑制剂。在其他实施方案中，所述AXL激酶抑制剂在所述免疫检查点抑制剂之后施用。在仍然不同的实施方案中，所述AXL激酶抑制剂在所述免疫检查点抑制剂之前施用。
在各个实施方案中，所述免疫检查点抑制剂是PD-1抑制剂。在具体实施方案中，所述PD-1抑制剂是派姆单抗、纳武单抗或其组合。在具体实施方案中，所述PD-1抑制剂是派姆单抗。在具体实施方案中，所述PD-1抑制剂是纳武单抗。在一些其他实施方案中，所述PD-1抑制剂是CBT-501(CBT Pharmaceuticals)，CBT-502(CBT Pharmaceuticals)，JS001(Junshi Biosciences)，IBI308(Innovent Biologics)，SHR-1210(Hengrui Medicine)，BGB-A317(Beigene)，BAT-I306(Bio-Thera Solutions)，GLS-010(GloriaPharmaceuticals；WuXi Biologics)，AK103，AK104，AK105(Akesio Biopharma；HangzhouHansi Biologics；Hanzhong Biologics)，LZM009(Livzon)，HLX-10(Henlius Biotech)或CS1003(CStone Pharmaceuticals)。在一些实施方案中，所述PD-1抑制剂是单克隆抗体(例如，由Genor Biopharma制造，并且截至本申请日时处于临床试验的I期；由ShenzhouGongcheng制造并且截至本申请日时在申请临床试验；由Lunan Hope Pharmaceuticals制造，并且截至本申请日时在申请临床试验)。
在一些实施方案中，所述免疫检查点抑制剂是PD-L1抑制剂。在一些此类实施方案中，所述PD-L1抑制剂是阿特珠单抗、阿维单抗、德瓦鲁单抗或其组合。在具体实施方案中，所述PD-L1抑制剂是阿特珠单抗。在具体实施方案中，所述PD-L1抑制剂是阿维单抗。在具体实施方案中，所述PD-L1抑制剂是德瓦鲁单抗。在某些实施方案中，所述PD-L1抑制剂是KN035(Alphamab；3DMed)，CS1001(CStone Pharmaceuticals)，SHR-1316(HengruiMedicine)，TQB2450(Chiatai Tianqing)，STI-A1014(Zhaoke Pharm；Lee's Pharm)，BGB-A333(Beigene)，MSB2311(Mabspace Biosciences)或HLX-20(Henlius Biotech)。在一些实施方案中，所述PD-L1抑制剂是单克隆抗体(例如，由Hisun Pharm制造截至本申请日时在申请临床试验)。
在一些实施方案中，所述免疫检查点抑制剂是CTLA-4抑制剂。在某些实施方案中，所述CTLA-4抑制剂为伊匹单抗。在其他实施方案中，CTLA-4抑制剂是tremelimumab。
在实施方案中，向有此需要的受试者组合施用AXL激酶抑制剂(诸如结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐))与溴结构域抑制剂、组蛋白脱乙酰酶(HDAC)或两者。
溴结构域抑制剂抑制至少一种溴结构域蛋白，诸如Brd2、Brd3、Brd4和/或BrdT，例如Brd4。在这些实施方案中的一些中，所述溴结构域域抑制剂是JQ-1(Nature 2010 Dec23；468(7327):1067-73)，BI2536(ACS Chem.Biol.2014 May 16；9(5):1160-71；Boehringer Ingelheim)，TG101209(ACS Chem.Biol.2014 May 16；9(5):1160-71)，OTX015(Mol.Cancer Ther.November 201312；C244；Oncoethix)，IBET762(J Med Chem.2013 Oct10；56(19):7498-500；GlaxoSmithKline)，IBET151(Bioorg.Med.Chem.Lett.2012 Apr 15；22(8):2968-72；GlaxoSmithKline)，PFI-1(J.Med.Chem.2012 Nov 26；55(22):9831-7；Cancer Res.2013 Jun 1；73(11):3336-46；Structural Genomics Consortium)或CPI-0610(Constellation Pharmaceuticals)。在一些实施方案中，所述溴结构域域抑制剂是TG101209、BI2536、OTX015、C244、IBET762、IBET151或PFI-1。
HDAC抑制剂抑制至少一种HDAC蛋白。基于与酵母HDAC蛋白的同源性，HDAC蛋白可以被分组，其中I类由HDAC1、HDAC2、HDAC3和HDAC 8构成；IIa类由HDAC4、HDAC5、HDAC7和HDAC 9构成；IIb类由HDAC6和HDAC10构成；且IV类由HDAC11构成。在这些实施方案中的一些中，所述HDAC抑制剂是曲古司他汀A、伏立诺他(Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.1998 Mar 17；95(6):3003-7)、givinostat、abexinostat(Mol.Cancer Ther.2006 May；5(5):1309-17)、贝利司他(Mol.Cancer Ther.2003 Aug；2(8):721-8)、帕比司他(Clin.Cancer Res.2006Aug 1；12(15):4628-35)、resminostat(Clin.Cancer Res.2013 Oct 1；19(19):5494-504)、quisinostat(Clin.Cancer Res.2013 Aug 1；19(15):4262-72)、缩酚肽(Blood.2001Nov 1；98(9):2865-8)、恩替诺特(Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.1999 Apr 13；96(8):4592-7)、mocetinostat(Bioorg.Med.Chem.Lett.2008 Feb 1；18(3):1067-71)或丙戊酸(EMBOJ.2001Dec 17；20(24):6969-78)。例如，在一些实施方案中，所述HDAC抑制剂是帕比司他、伏立诺他、MS275、贝利司他或LBH589。在一些实施方案中，所述HDAC抑制剂是帕比司他或SAHA。
在一些实施方案中，本公开的方法进一步包括向所述受试者施用放射疗法。
在前述实施方案中的一些中，所述方法用于治疗肝癌、难治性癌症(例如，非小细胞肺癌)、肺癌、食道癌、霍奇金氏淋巴瘤、NK/T-细胞淋巴瘤或黑色素瘤。在一些具体实施方案中，所述方法用于治疗食管鳞状细胞癌、胃癌、肺癌、鼻咽癌、膀胱癌、软组织肉瘤、弥漫性大B-细胞淋巴瘤、头颈鳞状细胞癌、肾癌、尿路上皮癌、卵巢癌、子宫癌或胰腺癌。
其他实施方案提供了组合疗法的方法，其中将已知调节其他途径或相同途径的其他组分或甚至重叠的靶标酶的集合的药剂与结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)组合使用。在一个方面，这种疗法包括但不限于组合结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)与化学治疗剂、治疗性抗体和放射治疗，以提供协同或加性的治疗效果。
许多化学治疗剂目前是本领域中已知的，并且可以与结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)组合使用。在一些实施方案中，所述化学治疗剂选自有丝***抑制剂、烷化剂、抗代谢物、嵌入抗生素、生长因子抑制剂、细胞周期抑制剂、酶、拓扑异构酶抑制剂、生物应答调节剂、抗激素、血管生成抑制剂和抗雄激素。
可以与结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)组合使用的治疗剂的非限制性实例是化学治疗剂、细胞毒性剂和非肽小分子，诸如
(甲磺酸伊马替尼)、
(硼替佐米)、Casodex(比卡鲁胺)、
(吉非替尼)和亚德里亚霉素以及多种化学治疗剂。化学治疗剂的非限制性实例包括烷化剂，诸如噻替派和环磷酰胺
烷基磺酸酯，诸如白消安、英丙舒凡和哌泊舒凡；氮杂环丙烷，诸如benzodopa、卡波醌、meturedopa和uredopa；乙烯亚胺和methylamelamine，包括六甲蜜胺、曲他胺(triethylenemelamine)、三亚乙基磷酰胺、三亚乙基硫代磷酰胺和trimethylolomelamine；氮芥，诸如苯丁酸氮芥、萘氮芥、氯磷酰胺、雌莫司汀、异环磷酰胺、二氯甲基二乙胺(mechlorethamine)、盐酸甲氧氮芥(mechlorethamineoxide hydrochloride)、美法仑、新恩比兴、phenesterine、泼尼氮芥、曲洛磷胺、乌拉莫司汀；硝基脲类，诸如卡莫司汀、氯唑托星、福替莫司汀、洛莫司汀、宁莫司汀、拉莫司汀；抗生素类，诸如阿克拉霉素、放线霉素、奥特拉姆霉素、氮杂丝氨酸、博莱霉素、cactinomycin、加利车霉素、carabicin、洋红霉素、carzinophilin、
色霉素、放线菌素D、道诺霉素、地托比星、6-重氮-5-氧代-L-正亮氨酸、多柔比星、表柔比星、依索比星、伊达比星、麻西罗霉素、丝裂霉素、麦考酚酸、诺加霉素、橄榄霉素、培洛霉素、potfiromycin、嘌呤霉素、quelamycin、罗多比星、链霉黑素、链脲菌素、杀结核菌素、乌苯美司、净司他丁、佐柔比星；抗代谢物，诸如甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，诸如denopterin、甲氨蝶呤、蝶罗呤、曲美沙特；嘌呤类似物，诸如氟达拉滨、6-巯基嘌呤、硫咪嘌呤、硫鸟嘌呤；嘧啶类似物，诸如安西他滨、氮杂胞苷、6-氮杂尿苷、卡莫氟、阿糖胞苷、二脱氧尿苷、去氧氟尿苷、依诺他滨、氟尿苷，雄激素，诸如卡鲁睾酮、屈他雄酮丙酸酯、硫雄甾醇、mepitiostane、睾内酯；抗肾上腺素，诸如氨基格鲁米特、米托坦、曲洛司坦；叶酸补充剂，诸如亚叶酸；乙酰葡醛酯；醛磷酰胺糖苷；氨基乙酰丙酸；安吖啶；bestrabucil；比生群；edatraxate；defofamine；地美可辛；亚丝醌；elfomithine；依利醋铵；依托格鲁；硝酸镓；羟基脲；香菇多糖；氯尼达明；米托胍腙；米托蒽醌；莫哌达醇；nitracrine；喷司他丁；phenamet；吡柔比星；鬼臼酸；2-乙基酰肼；丙卡巴嗪；PSK.RTM；雷佐生；西佐喃；锗螺胺；细交链孢菌酮酸；三乙烯亚胺苯醌；2,2',2”-三氯三乙胺；乌拉坦；长春地辛；达卡巴嗪；甘露莫司汀；二溴甘露醇；二溴卫矛醇；哌泊溴烷；gacytosine；***糖苷(“Ara-C”)；环磷酰胺；噻替派；紫杉烷类，例如紫杉醇(TAXOLTM,Bristol-Myers Squibb Oncology,Princeton,N.J.)和多西他赛(TAXOTERETM,Rhone-Poulenc Rorer,Antony,France)；视黄酸；esperamicins；卡培他滨；以及上述任一种的药学上可接受的盐、酸或衍生物。
作为合适的化学治疗性细胞调节剂还包括用于调节或抑制对肿瘤的激素作用的抗激素剂，诸如抗***，包括例如他莫昔芬(NolvadexTM)、雷洛昔芬、抑制芳香化酶的4(5)-咪唑类、4-羟基他莫昔芬、曲奥昔芬、keoxifene、LY 117018、奥那司酮和托瑞米芬(Fareston)；以及抗雄激素，诸如氟他胺、尼鲁他胺、比卡鲁胺、亮丙瑞林和戈舍瑞林；苯丁酸氮芥；吉西他滨；6-硫代鸟嘌呤；巯基嘌呤；甲氨蝶呤；铂类似物，诸如顺铂和卡铂；长春碱；铂；依托泊苷(VP-16)；异环磷酰胺；丝裂霉素C；米托蒽醌；长春新碱；长春瑞滨；诺维本；novantrone；替尼泊苷；道诺霉素；氨基蝶呤；希罗达；伊班膦酸盐；喜树碱-11(CPT-11)；拓扑异构酶抑制剂RFS2000；二氟甲基鸟氨酸(DMFO)。如果期望，结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)或其药物组合物可以与以下组合使用：通常开处方的抗癌药，诸如
ABVD,AVICINE、阿巴伏单抗、吖啶羧酰胺、Adecatumumab、17-N-烯丙基氨基-17-去甲氧基格尔德霉素、Alpharadin、阿伏昔布、3-氨基吡啶-2-羧乙醛硫半脲、氨萘非特、蒽二酮、抗CD22免疫毒素、抗肿瘤药、抗肿瘤生成草药、Apaziquone、阿替莫德、咪唑硫嘌呤、贝洛替康、苯达莫司汀、BIBW 2992、比立考达、Brostallicin、苔藓抑素、丁硫氨酸亚砜胺、CBV(化学疗法)、花萼海绵诱癌素(Calyculin)、细胞周期非特异性抗肿瘤剂、二氯乙酸、圆皮海绵内酯、依沙芦星、依诺他滨、埃坡霉素、艾日布林、依维莫司、依喜替康、依昔舒林、弥罗松酚、呋咯地辛、磷雌酚、ICE化学疗法方案、IT-101、伊美克、咪喹莫特、吲哚并咔唑、伊洛福芬、Laniquidar、拉洛他赛、来那度胺、硫坎酮、勒托替康、马磷酰胺、米托唑胺、萘福昔定、奈达铂、奥拉帕尼、奥他赛、PAC-1、Pawpaw、匹克生琼、蛋白酶体抑制剂、蝴蝶霉素、瑞喹莫德、鲁比替康、SN-38、Salinosporamide A、Sapacitabine、Stanford V、苦马豆素、他拉泊芬、Tariquidar、Tegafur-尿嘧啶、Temodar、Tesetaxel、Triplatin tetranitrate、三(2-氯乙基)胺、曲沙他滨、乌拉莫司汀、Vadimezan、长春氟宁、ZD6126或Zosuquidar。
在一个实施方案中，向有此需要的受试者组合施用结构(I)的化合物与CDK9抑制剂(诸如阿伏昔布)组合。在一个相关实施方案中，向有此需要的受试者组合施用结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)与CDK9抑制剂(诸如阿伏昔布)。所述施用可以在所述CDK9抑制剂的施用之前、同时或之后进行。在一个具体实施方案中，向有此需要的受试者组合施用结构(I)的化合物与CDK9抑制剂(诸如阿伏昔布)组合，用于治疗胰腺癌。在一个相关的具体实施方案中，向有此需要的受试者组合施用结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)与CDK9抑制剂(诸如阿伏昔布)，用于治疗胰腺癌。在前述实施方案中的一些中，所述盐是酒石酸盐。在前述实施方案中的一些中，所述CDK9抑制剂是阿伏昔布。在一些实施方案中，所述盐是酒石酸盐，且所述CDK9抑制剂是阿伏昔布。
在某些其他实施方案中，提供了用于治疗癌症的方法，所述方法包括向有此需要的受试者施用有效量的AXL激酶抑制剂和CDK抑制剂。所述AXL激酶抑制剂和CDK抑制剂可以是本领域中已知的任何AXL激酶或CDK抑制剂。
在某些实施方案中，所述AXL激酶抑制剂是结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐。例如，在一些具体实施方案中，所述AXL激酶抑制剂是如本文所公开的结构(I)的化合物的酒石酸盐。
在实施方案中，所述CDK抑制剂是CDK2、CDK4、CDK6、CDK7、CDK8、CDK9、CDK10和/或CDK11抑制剂。在一些实施方案中，所述CDK抑制剂是CDK7、CDK9或两者。在一些实施方案中，所述CDK抑制剂是dinaciclib(ACS Med.Chem.Lett.2010 May 17；1(5):204-8；Mol.CancerTher.2010 Aug；9(8):2344-53；Merck,Sharp and Dohme)，AT7519(J.Med.Chem.2008 Aug28；51(16):4986-99；Astex Pharmaceutical)或帕博西尼(J.Med.Chem.2005 Apr 7；48(7):2388-406；Pfizer)。在某些实施方案中，所述CDK抑制剂是CDK9抑制剂，诸如阿伏昔布。所述阿伏昔布可以作为游离碱、作为药学上可接受的盐或作为前药施用。在某些实施方案中，所述CDK9抑制剂是阿伏昔布。在其他实施方案中，所述CDK9抑制剂是阿伏昔布的药学上可接受的盐。在其他实施方案中，所述CDK9抑制剂是阿伏昔布的前药。阿伏昔布的前药包括WO 2016/187316(其全部公开内容在此通过引用以其整体并入)中公开的前药。例如，在一些实施方案中，阿伏昔布的前药具有以下结构(II)：
或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：R1、R2或R3之一是–P(＝O)(OH)2，且R1、R2和R3中的另外两个各自是H。
在某些具体实施方案中，阿伏昔布的前药具有以下结构：
或其药学上可接受的盐或两性离子形式。
在一些实施方案中，共同施用所述AXL激酶抑制剂和CDK抑制剂。在其他实施方案中，所述AXL激酶抑制剂在所述CDK抑制剂之后施用。在仍然不同的实施方案中，所述AXL激酶抑制剂在所述CDK抑制剂之前施用。
各种不同的癌症可以用AXL激酶抑制剂和CDK抑制剂的组合来治疗。在一些实施方案中，所述癌症是血液学癌症或实体肿瘤，例如本文公开的或本领域中已知的任何血液学癌症或实体肿瘤。
在一些具体实施方案中，所述癌症是血液学癌症，诸如多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征(MDS)、急性髓性白血病(AML)、急性成淋巴细胞性白血病(ALL)、急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、套细胞淋巴瘤、弥漫性大B-细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤或非霍奇金氏淋巴瘤。在一些具体实施方案中，所述血液学癌症是CLL、SLL或两者。在一些具体实施方案中，所述血液学癌症是CLL。在一些具体实施方案中，所述血液学癌症是SLL。
在一些其他具体实施方案中，通过AXL激酶抑制剂和CDK抑制剂的组合治疗的癌症是实体肿瘤，诸如胰腺癌、结肠癌或肺癌。
实施方案进一步涉及向有此需要的受试者组合施用结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)与本文提供的BTK抑制剂(例如，依鲁替尼)或CDK9抑制剂(例如，阿伏昔布)的方法，其与放射疗法组合用于在哺乳动物中抑制异常细胞生长或治疗过度增殖性病症。用于施用放射疗法的技术是本领域中已知的，并且这些技术可用于本文所述的组合疗法中。在该组合疗法中，结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如结构(I)的化合物的酒石酸盐)的施用可以如本文所述确定。
在一个实施方案中，向有此需要的受试者组合施用结构(I)的化合物与ATR抑制剂(诸如AZD6738或VX-970)。在一个相关实施方案中，向有此需要的受试者组合施用结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)与ATR抑制剂(诸如AZD6738或VX-970)。所述施用可以在所述ATR抑制剂的施用之前、同时或之后进行。在一个具体实施方案中，向有此需要的受试者组合施用结构(I)的化合物与ATR抑制剂(诸如AZD6738或VX-970)，用于治疗非小细胞肺癌。在一个相关的具体实施方案中，向有此需要的受试者组合施用结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)与ATR抑制剂(诸如AZD6738或VX-970)，用于治疗非小细胞肺癌。在前述实施方案中的一些中，所述盐是酒石酸盐。在前述实施方案中的一些中，所述ATR抑制剂是AZD6738。在前述实施方案中的一些中，所述ATR抑制剂是VX-970。在一些实施方案中，所述盐是酒石酸盐，且所述ATR抑制剂是AZD6738。在一些实施方案中，所述盐是酒石酸盐，且所述ATR抑制剂是VX-970。在前述实施方案中的一些中，所述ATR抑制剂是AZD6738和VX-970的组合。
在前述实施方案中的一些中，所述非小细胞肺癌包括TCGA肺腺癌、一种或多种LUAD肿瘤、TCGA肺鳞状细胞癌、一种或多种LUSC肿瘤、一种或多种MDACC PROSPECT肿瘤、一种或多种MDACC BATTLE1肿瘤、一种或多种BATTLE2肿瘤或其组合。在一些实施方案中，所述非小细胞肺癌包括TCGA LUAD肿瘤，例如，富含ALK易位的肿瘤。在一些实施方案中，所述非小细胞肺癌包括TCGA LUAD肿瘤，例如包含一个或多个EGFR突变的肿瘤。
在一个实施方案中，向有此需要的受试者施用结构(I)的化合物，由此使所述受试者对ATR抑制剂、诸如AZD6738或VX-970的施用敏感。在一个相关实施方案中，向有此需要的受试者施用结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)，由此使所述受试者对ATR抑制剂、诸如AZD6738或VX-970的施用敏感。在一个具体实施方案中，向有此需要的受试者施用结构(I)的化合物，由此使所述受试者对ATR抑制剂、诸如AZD6738或VX-970的施用敏感，用于治疗非小细胞肺癌。在一个相关的具体实施方案中，向有此需要的受试者施用结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)，由此使所述受试者对ATR抑制剂、诸如AZD6738或VX-970的施用敏感，用于治疗非小细胞肺癌。在前述实施方案中的一些中，所述盐是酒石酸盐。在前述实施方案中的一些中，所述ATR抑制剂是AZD6738。在前述实施方案中的一些中，所述ATR抑制剂是VX-970。在一些实施方案中，所述盐是酒石酸盐，且所述ATR抑制剂是AZD6738。在一些实施方案中，所述盐是酒石酸盐，且所述ATR抑制剂是VX-970。在前述实施方案中的一些中，所述ATR抑制剂是AZD6738和VX-970的组合。
在一些实施方案中，放射疗法可以与结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)组合施用。示例性放射疗法包括外射束疗法、内放射疗法、植入放射、立体定向放射外科手术、全身放射疗法、放射疗法和永久性或临时性间质近距放射疗法。如本文所用的术语“近距放射疗法”是指通过在肿瘤或其他增生性组织疾病部位处或附近***身体的空间受限放射性材料递送的放射疗法。该术语意欲但不限于包括暴露于放射性同位素(例如At211、I131、I125、Y90、Re186、Re188、Sm153、Bi212、P32和Lu的放射性同位素)。用作本发明的细胞调节剂的合适辐射源包括固体和液体两者。通过非限制性实例的方式，所述辐射源可以是放射性核素，诸如作为固体源的I125、I131、Yb169、Ir192，作为固体源的I125，或发射光子、β粒子、γ辐射或其他治疗射线的其他放射性核素。放射性材料也可以是由放射性核素的任何溶液(例如，I125或I131的溶液)制成的液体，或者可以使用含有固体放射性核素(诸如Au198、Y90)的小颗粒的合适液体的浆料来生产放射性液体。此外，放射性核素可以包含在凝胶或放射性微球中。
不受任何理论的限制，结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)可以使异常细胞对用放射治疗更敏感，用于杀死和/或抑制此类细胞的生长的目的。因此，一些实施方案包括使哺乳动物异常细胞对用放射治疗敏感的方法，所述方法包括向哺乳动物施用一定量的结构(I)化合物或结构(I)化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)，所述量有效地使异常细胞对用放射治疗敏感。该方法中的结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)的量可以根据用于确定本文所述的此类化合物和盐的有效量的方式来确定。
结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)也可以与一定量的一种或多种选自以下的物质组合使用：抗血管生成剂、信号转导抑制剂、抗增殖剂、糖酵解抑制剂或自噬抑制剂。
抗血管生成剂包括，例如，MMP-2(基质金属蛋白酶-2)抑制剂、雷帕霉素、替西罗莫司(CCI-779)、依维莫司(RAD001)、索拉非尼、舒尼替尼和贝伐单抗。有用的COX-II抑制剂的实例包括CELEBREXTM(alecoxib)、valdecoxib和rofecoxib。有用的基质金属蛋白酶抑制剂的实例描述于WO 96/33172(1996年10月24日公开)，WO 96/27583(1996年3月7日公开)，欧洲专利申请号97304971.1(1997年7月8日提交)，欧洲专利申请号99308617.2(1999年10月29日提交)，WO 98/07697(1998年2月26日公开)，WO 98/03516(1998年1月29日公开)，WO98/34918(1998年8月13日公开)，WO 98/34915(1998年8月13日公开)，WO 98/33768(1998年8月6日公开)，WO 98/30566(1998年7月16日公开)，欧洲专利公开606,046(1994年7月13日公开)，欧洲专利公开931,788(1999年7月28日公开)，WO 90/05719(1990年5月31日公开)，WO 99/52910(1999年10月21日公开)，WO 99/52889(1999年10月21日公开)，WO 99/29667(1999年6月17日公开)，PCT国际申请号PCT/IB98/01113(1998年7月21日提交)，欧洲专利申请号9930 2232.1(1999年3月25日提交)，英国专利申请号9912961.1(1999年6月3日提交)，美国临时申请号60/148,464(1999年8月12日申请)，美国专利5863、949(1999年1月26日授予)，美国专利5861,510(1999年1月19日授予)和欧洲专利公开780,386(1997年6月25日公开)，其全部通过引用以其整体并入本文。MMP-2和MMP-9抑制剂的实施方案包括具有很少或没有抑制MMP-1的活性的那些。其他实施方案包括相对于其他基质金属蛋白酶(即，MAP-1、MMP-3、MMP-4、MMP-5、MMP-6、MMP-7、MMP-8、MMP-10、MMP-ll、MMP-12和MMP-13)选择性抑制MMP-2和/或AMP-9的那些。在一些实施方案中有用的MMP抑制剂的一些具体实例是AG-3340、RO 32-3555和RS 13-0830。
自噬抑制剂包括但不限于氯喹、3-甲基腺嘌呤、羟基氯喹(PlaquenilTM)、巴弗洛霉素A1、5-氨基-4-咪唑甲酰胺核糖苷(AICAR)、冈田酸、抑制2形式A或1型的蛋白磷酸酶的自噬抑制性藻类毒素、cAMP的类似物以及提高cAMP水平的药物，诸如腺苷、LY204002、N6-巯基嘌呤核糖苷和长春碱。另外，也可以使用抑制蛋白(包括但不限于ATG5(其牵涉于自噬))的表达的反义或siRNA。
在其他实施方案中，在与结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)的组合疗法的方法中有用的药剂包括但不限于:埃罗替尼、阿法替尼、易瑞沙、GDC0941、MLN1117、BYL719(Alpelisib)、BKM120(Buparlisib)、CYT387、GLPG0634、巴瑞替尼、来他替尼、momelotinib、Pacritinib、鲁索替尼、TG101348、克唑替尼、foretinib、onartuzumab、NVP-AEW541、达沙替尼、帕纳替尼、塞卡替尼、波舒替尼、曲美替尼、司美替尼、考比替尼、PD0325901、RO5126766、阿昔替尼、贝伐珠单抗、博斯图替尼、西妥昔单抗、克唑替尼、福马他替尼、吉非替尼、伊马替尼、拉帕替尼、雷瓦替尼、依鲁替尼、尼罗替尼、帕尼单抗、帕唑帕尼、哌加他尼、兰尼单抗、鲁索替尼、索拉非尼、舒尼替尼、SU6656、曲妥珠单抗、托法替尼、凡德他尼、维莫非尼、伊立替康、紫杉醇、多西他赛、雷帕霉素或MLN0128。
在实施方案中，结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)与表皮生长因子受体酪氨酸激酶(EGFR)抑制剂组合施用。EGFR抑制药的实例包括埃罗替尼、奥斯替尼、西妥昔单抗、吉非替尼、necitumumab、拉帕替尼、诺拉替尼、帕尼单抗、凡德他尼和necitumumab。结构(I)的化合物和EGFR抑制剂的组合可用于例如治疗与EGFR调节异常相关的癌症，诸如非小细胞肺癌(NSCLC)、胰腺癌、乳腺癌和结肠癌。例如，由于活化外显子18、19、20或21中的突变，EGFR可能被异常调节。如实施例9、10和19中所示，结构(I)的化合物和EGFR抑制剂的组合在EGFR-突变的癌症的临床前模型中显示协同作用。在具体实施方案中，所述EGFR抑制剂是埃罗替尼或奥西替尼。在具体实施方案中，结构(I)的化合物和EGFR抑制剂的组合用于治疗EGFR-突变的NSCLC。在具体实施方案中，结构(I)的化合物和EGFR抑制剂的组合用于治疗EGFR抑制剂抗性的癌症，并且结构(I)的化合物使癌症对EGFR抑制剂敏感。
在某些实施方案中，结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)与埃罗替尼组合施用。在一些实施方案中，这种组合用于治疗胰腺癌。在其他实施方案中，这种组合用于治疗肺癌。在进一步实施方案中，所述肺癌是非小细胞肺癌。
在某些实施方案中，结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)与osmertinib组合施用。在一些实施方案中，这种组合用于治疗肺癌。在进一步实施方案中，所述肺癌具有EGFR突变。
当用于组合疗法中时，结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)与第二药剂同时或分开施用。该组合施用可以包括以相同剂型同时施用两种药剂，以分开的剂型同时施用，和分开施用。也就是说，结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)和任何上述药剂(例如，依鲁替尼或阿伏昔布)可以以相同的剂型一起配制并同时施用。或者，结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)和任何上述药剂(例如，依鲁替尼或阿伏昔布)可以同时施用，其中两种药剂存在于分开的制剂中。在另一个替代方案中，可以施用结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)，随后立即施用任何上述药剂，反之亦然。在分开施用方案的一些实施方案中，结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)和任何上述药剂分开几分钟或分开几小时或分开几天施用。
在本公开的实施方案中使用的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)也可以在施用一种或多种其他治疗剂的同时、之前或之后进行施用。例如，可以施用结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)，并且在足够的时间段后施用第二治疗剂。在此类实施方案中，施用结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)和第二治疗剂之间的时间段可以被称为“治疗中断”。在一些实施方案中，这种治疗中断范围为约12小时至约48小时。在一些实施方案中，这种治疗中断范围为约18至约40小时。在一些实施方案中，这种治疗中断范围为约18至约36小时。在一些实施方案中，这种治疗中断范围为约24至约48小时。本领域普通技术人员可以基于普通技术和知识得出适当的给药时间表。
在实施方案中，依次施用结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)和第二治疗剂。在一些实施方案中，在施用结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)和施用第二治疗剂之间存在治疗中断。在更具体实施方案中，所述治疗中断是至少约24至约48小时。在具体实施方案中，所述治疗中断是约48小时。在一些实施方案中，所述治疗中断是至少约120小时。
4.卵巢癌的治疗
在实施方案中，本公开的方法可用于治疗受试者中的癌症。此类治疗癌症的方法(例如，(i)阻止癌症的发展；(ii)引起癌症的消退；或(iii)减轻由癌症导致的症状)包括施用如本文所述的结构(I)化合物的酒石酸盐。在实施方案中，所述癌症是卵巢透明细胞癌。
此外，在各个实施方案中，本公开的方法可用于治疗受试者中由癌症引起的腹水。因此，本文公开的治疗方法的实施方案包括治疗有此需要的受试者中的腹水，所述方法包括：施用结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)，其中所述腹水由癌症引起。在一些实施方案中，所述癌症是卵巢癌。
在实施方案中，所述癌症对治疗敏感。在实施方案中，所述癌症对治疗部分敏感。在一些实施方案中，就治疗而言，所述癌症是难治的。在一些实施方案中，所述癌症是复发性的。在实施方案中，所述癌症对治疗是抗性的。在实施方案中，所述癌症是治疗抗性的卵巢癌。
在一些实施方案中，所述治疗抗性的卵巢癌是复发性的治疗抗性的卵巢癌。在一些实施方案中，所述卵巢癌是药物抗性的卵巢癌。在实施方案中，所述卵巢癌对选自以下的药物是抗性的：激素治疗剂、化学治疗剂、免疫治疗剂或细胞生长因子和抑制其受体作用的药剂。
在各个实施方案中，所述药物是激素治疗剂。激素治疗剂的实例包括福司特罗、己烯雌酚、氯烯雌醚、醋酸甲羟孕酮、醋酸甲地孕酮、醋酸氯地孕酮、醋酸环丙孕酮、达那唑、地诺孕素、asoprisnil、烯丙雌醇、孕三烯酮、诺美孕酮、tadenan、美帕曲星、雷洛昔芬、奥美洛昔芬、左美洛昔芬、抗***(例如，柠檬酸他莫昔芬、柠檬酸托瑞米芬等)、丸剂制剂、美雄烷、睾丸内酯、氨基格鲁米特、LH-RH衍生物(LH-RH激动剂(例如，醋酸戈舍瑞林、布舍瑞林、亮丙瑞林等)，LH-RH拮抗剂)、屈洛昔芬、环硫雄醇、乙炔***磺酸酯、芳香化酶抑制剂(例如，盐酸法倔唑、阿那曲唑、来曲唑、依西美坦、伏洛唑、福尔马坦等)、抗雄激素(例如，氟他胺、比卡鲁胺、尼鲁米特等)、基于肾上腺皮质激素的试剂(例如，***、***龙、倍他米松、去炎松等)、雄激素合成抑制剂(例如，阿比特龙等)、类视黄醇和延缓类视黄醇的代谢的药剂(例如，利阿唑等)等。
在各个实施方案中，所述药物是化学治疗剂。在各个实施方案中，所述化学治疗剂是烷化剂、抗代谢物、抗癌抗生素或植物来源的抗癌剂。在具体实施方案中，所述化学治疗剂是烷化剂。所述烷化剂的实例包括氮芥、氮芥N-氧化物盐酸盐、苯丁酸氮芥、环磷酰胺、异环磷酰胺、噻替派、卡波醌、英丙舒凡甲苯磺酸盐、白消安、盐酸尼莫司汀、二溴甘露醇、美法仑、达卡巴嗪、雷莫司汀、雌莫司汀磷酸钠、三亚乙基蜜胺、卡莫司汀、罗氮芥、链脲佐星、哌泊溴烷、依托格鲁、卡铂、顺铂、米铂、奈达铂、奥沙利铂、奥曲明、氨莫司汀、盐酸二溴螺氯铵、福莫司汀、泼尼莫司汀、嘌嘧替派、ribomustin、替莫唑胺、Treosulfan、三磷酰胺、净司他丁斯酯、阿多来新、cystemustine、比折来新及其DDS制剂。在具体实施方案中，所述烷化剂选自卡铂、顺铂、米铂、奈达铂和奥沙利铂。在某些实施方案中，所述烷化剂是顺铂。
在实施方案中，所述化学治疗剂是抗代谢物。所述抗代谢物的实例包括巯基嘌呤、6-巯基嘌呤核苷、硫代肌苷、甲氨蝶呤、培美曲塞、依诺他滨、阿糖胞苷、阿糖胞苷ocfosphate、盐酸安西他滨、基于5-FU的试剂(例如，氟尿嘧啶、替加氟、UFT、去氧氟尿苷、卡莫氟、加洛他滨、艾替福、卡培他滨等)、氨基喋呤、奈扎拉滨、亚叶酸钙、Tabloid、butocin、亚叶酸钙、左亚叶酸钙、克拉屈滨、艾替福、氟达拉滨、吉西他滨、羟基尿素、喷司他丁、吡曲克辛、idoxuridine、米托胍腙、tiazofurin、氨莫司汀、苯达莫司汀及其DDS制剂等。
在实施方案中，所述化学治疗剂是抗癌抗生素。抗癌抗生素的实例包括放线霉素D、放线霉素C、丝裂霉素C、色霉素A3、盐酸博莱霉素、硫酸博莱霉素、硫酸培洛霉素、盐酸道诺霉素、盐酸多柔比星、盐酸阿克拉比星、盐酸吡柔比星、盐酸表柔比星、新制癌菌素、光神霉素、肉瘤霉素、carzinophilin、米托坦、盐酸佐柔比星、盐酸米托蒽醌、盐酸伊达比星及其DDS制剂等。
在实施方案中，所述化学治疗剂是植物来源的抗癌剂。所述植物来源的抗癌剂的实例包括依托泊苷、依托泊苷磷酸盐、长春碱硫酸盐、长春新碱硫酸盐、长春地辛硫酸盐、替尼泊苷、紫杉醇、多西他赛、DJ-927、长春瑞滨、伊立替康、托泊替康及其DDS制剂等。化学治疗剂还包括索布佐生。
在各个实施方案中，所述药物是免疫治疗剂。所述免疫治疗剂的实例包括毕西巴尼、krestin、裂褶菌素、香菇多糖、乌苯美司、干扰素、白介素、巨噬细胞集落刺激因子、粒细胞集落刺激因子、***、淋巴毒素、BCG疫苗、短棒状杆菌、左旋咪唑、多糖K、丙考达唑、抗CTLA4抗体、PD-1抗体和Toll样受体激动剂(例如，TLR7激动剂、TLR8激动剂、TLR9激动剂等)。
在各个实施方案中，所述药物是细胞生长因子。细胞生长因子可以是任何物质，只要该物质促进细胞生长。通常，其包括这样的因子，其为具有20,000或更低的分子量的肽，并且通过与受体结合在低浓度下表现出效果。具体地，表皮生长因子(EGF)或具有基本上相同活性的物质(例如，TGF-α等)、胰岛素或具有基本上相同活性的物质(例如，胰岛素、***(IGF)-1、IGF-2等)、成纤维细胞生长因子(FGF)或具有基本上相同活性的物质(例如，酸性FGF、碱性FGF、角化细胞生长因子(KGK)、FGF-10等)以及其他细胞生长因子(例如，集落刺激因子(CSF)、***(EPO)、白介素-2(IL-2)、神经生长因子(NGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、转化生长因子β(TGF-β)、肝细胞生长因子(HGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、调蛋白、血管生成素等)。
在各个实施方案中，所治疗的受试者先前已经用卵巢癌抗性的治疗进行治疗。在实施方案中，就所述治疗而言，所述卵巢癌是难治的。
在实施方案中，所治疗的受试者先前已经例如用第一线疗法治疗。在一些实施方案中，受试者的癌症对第一线疗法(例如，手术切除、基于铂的疗法等)是抗性的。在一些实施方案中，所述第一线疗法是基于铂的疗法。在某些实施方案中，所述基于铂的疗法包括向所述受试者施用顺铂。在各个实施方案中，就所述第一线疗法而言，所述癌症是难治的。
在各个实施方案中，有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)可以减少肿瘤细胞的数量，减少转移的数量，减少肿瘤体积，诱导肿瘤细胞的凋亡，诱导肿瘤细胞死亡，诱导肿瘤细胞中的放射敏感性，抑制肿瘤细胞附近的血管生成，抑制癌细胞增殖，抑制肿瘤生长，预防转移，减少转移的数量，增加预期寿命，延长受试者的寿命，减少癌症相关的疼痛，和/或减少治疗后癌症的复发或再现。
在实施方案中，有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)可以减缓或逆转重量增加，减少腹部的肿胀，减少呼吸困难，消除通过穿刺或类似程序减少腹水体积的需要或减少通过穿刺或类似程序减少腹水体积的频率，增加食欲，减少腹痛，减少腹胀，减少恶心，减少呕吐和/或减少治疗后的胃灼热。
在一些实施方案中，向受试者施用结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)导致完全缓解。在一些实施方案中，向受试者施用结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)导致最小残留疾病(MRD；残留肿瘤的沉积物<1cm)。在一些实施方案中，向受试者施用结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)不会导致残留疾病(NRD；没有可检测的残留沉积物)。在一些实施方案中，向受试者施用结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)导致总体残留疾病(GRD；残留肿瘤的沉积物>1cm)，但与早期测量值相比，总体肿瘤体积统计学显著性减少。在具体实施方案中，相对于未治疗的多个受试者，向多个受试者施用结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)导致无进展存活、完全缓解率、无事件存活和/或总体存活中的一项或多项的增加。在实施方案中，向受试者施用结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)导致逆转上皮-至-间充质转化(EMT)。
结构(I)的化合物可以呈游离酸或游离碱形式，或呈药学上可接受的盐形式。在本文公开的治疗方法的实施方案中，包括施用结构(I)的化合物的酒石酸盐(例如，二酒石酸盐)。在一些实施方案中，所述酒石酸盐是二酒石酸盐。在一些实施方案中，结构(I)的化合物作为前药存在。
5.用于治疗实体癌症的额外方法
本文提供了治疗受试者中的实体肿瘤的方法，其中所述实体肿瘤在免疫疗法后已经进展。在某些实施方案中，所述肿瘤在免疫疗法后在达到至少稳定疾病(即SD、PR或CR)的最佳记录应答后已经进展。在某些实施方案中，所述肿瘤在至少2个周期(例如，8周)的免疫疗法后在达到至少稳定疾病(即SD、PR或CR)的最佳记录应答后已经进展。在某些实施方案中，所述方法包括向所述受试者施用结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)。在某些实施方案中，所述方法包括向所述受试者施用结构(I)的化合物的形式A。在某些实施方案中，所述受试者继续用其先前的免疫疗法与结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)组合治疗。
本文还提供了治疗受试者中的EGFR+非小细胞肺癌(NSCLC)的方法。在某些实施方案中，所述受试者在TKI治疗后已经表明进展。在某些实施方案中，所述受试者在≤2线的口服TKI后在至少稳定的疾病(即SD、PR或CR)的最佳记录应答后已经表明进展。在某些实施方案中，所述受试者继续用其TKI方案与结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)组合治疗。在某些实施方案中，所述方法包括向所述受试者施用结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐)。在某些实施方案中，所述方法包括向所述受试者施用结构(I)化合物的形式A。
本文还提供了治疗受试者中BRAF-、KRAS-或NRAS-突变的结肠直肠癌(CRC)的方法。在某些实施方案中，所述受试者是对其没有剩余标准疗法的患者。在某些实施方案中，所述方法包括向所述受试者施用结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐)。在某些实施方案中，所述方法包括向所述受试者施用结构(I)的化合物的形式A。
本文还提供了治疗受试者中的持续性和/或复发性卵巢癌的方法。在某些实施方案中，所述癌症是铂难治的和/或铂抗性的。在某些实施方案中，所述癌症是铂难治的和/或铂抗性的，且已经向所述受试者施用任何多线的先前疗法。在某些实施方案中，所述方法包括向所述受试者施用结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐)。在某些实施方案中，所述方法包括向所述受试者施用结构(I)的化合物的形式A。
本文还提供了治疗受试者中的BRAF-突变的黑色素瘤的方法。在某些实施方案中，所述受试者已经在免疫疗法后已经进展。在某些实施方案中，所述受试者在组合BRAF/MEK抑制剂后已经进展。在某些实施方案中，所述方法包括向所述受试者施用结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐)。在某些实施方案中，所述方法包括向所述受试者施用结构(I)的化合物的形式A。
以下实施方案是关于本文提供的任何治疗方法。在某些实施方案中，结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)口服施用。在某些实施方案中，结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)每天一次口服施用。在某些实施方案中，结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)每天一次口服施用，持续21天，随后停药7天(即，28天周期)。在某些实施方案中，重复28天周期。在某些实施方案中，在每个新的治疗周期开始时重新计算结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)的剂量，以反映在前一周期期间可能发生的体表面积(BSA)的变化。在某些实施方案中，仅当与基线相比体重增加或减少≥10％时，才调整剂量。在某些实施方案中，在没有疾病进展或不可接受的毒性的情况下，每个周期重复给药。在某些实施方案中，在过夜禁食后的早上，在摄入任何食物或其他药物前至少1小时，用最高达200mL或7液体盎司的水服用结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)。
在某些实施方案中，结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)每天以1mg/m2至65mg/m2(包括端值)的剂量施用。在某些实施方案中，结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)每天以约1.5mg/m2、3.0mg/m2、6.0mg/m2、9.0mg/m2、12.0mg/m2、16.0mg/m2、21.0mg/m2、28.0mg/m2、37.0mg/m2、49.0mg/m2或65.0mg/m2的剂量施用。在某些实施方案中，结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)每天以大于65.0mg/m2的剂量施用。
在某些实施方案中，结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)以1.5mg/m2的起始剂量施用。在某些实施方案中，在28天剂量周期中，持续28天中的21天，以1.5mg/m2的起始剂量施用结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)。在某些实施方案中，结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)的剂量在剂量周期之间增加。在某些实施方案中，结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)的剂量在周期之间增加30-100％。
在某些实施方案中，使用标准3+3设计，在3个受试者群组中，持续28天中的21天，以1.5mg/m2的起始剂量施用结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)。例如，在某些实施方案中，一旦每个群体中的第一个受试者已经完成14天的给药且无DLT，则第二个和第三个受试者以相同的剂量同时登记。在某些实施方案中，一旦登记的最后一个受试者已经完成第28天而未观察到DLT，且尚未研究下一更高的结构(I)的化合物的剂量水平，就根据表20中提供的剂量水平，在新的3个受试者群组中遵循修改的Fibonacci剂量递增方案增加剂量。
在某些实施方案中，如果在给定剂量水平下在3个受试者中的1个中观察到DLT，则在该剂量水平下登记和治疗最多达3个额外的受试者。在某些实施方案中，当将最多达3个额外的受试者添加至给定剂量水平时，如果那6个受试者中仅1个经历DLT，则该剂量增加至下一剂量水平。在某些实施方案中，如果3-6个受试者中的≥2个在一定剂量水平下经历DLT，则该剂量降低至先前(较低)的剂量水平，并且将在该剂量水平下登记3个额外的受试者。在某些实施方案中，如果6个受试者中的任一个中的0个或1个经历DLT，但已经研究下一更高的剂量水平，则当前剂量被宣布为MTD。在某些实施方案中，MTD被定义为在第1周期期间≤6个受试者中的≤1个经历DLT的剂量，其中下一更高的剂量在第1周期期间有3-6个受试者中的至少2个经历DLT。
在某些实施方案中，结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)作为平坦剂量(即，代替根据BSA)施用。在某些实施方案中，所述平坦剂量是MTD。
在某些实施方案中，结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐，例如，形式A)的剂量是每天约1-37mg/m2(例如，1-25mg/m2)或约1-75mg(例如，1-50mg)。
在某些实施方案中，结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)作为硬明胶胶囊中的粉末以口服形式提供。在某些实施方案中，以1-mg、4-mg、16-mg、25-mg或100mg强度配制结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)胶囊。在某些实施方案中，结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)被包装至具有聚酯线圈作为顶部空间填充剂的圆形高密度聚乙烯瓶中。在某些实施方案中，然后对瓶进行热密封，装上儿童安全帽，并置于低密度聚乙烯袋中作为二次包装。
6.用于治疗CLL/SLL的额外方法
本文提供了治疗受试者中的慢性淋巴细胞性白血病(CLL)和/或小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)的方法。在某些实施方案中，所述受试者对B-细胞受体拮抗剂和/或BCL-2拮抗剂不耐受，或者在B-细胞受体拮抗剂和/或BCL-2拮抗剂后已经显示疾病进展。在某些实施方案中，所述受试者对CLL/SLL的其他研究性治疗不耐受，或者在CLL/SLL的其他研究性治疗后已经显示疾病进展。在某些实施方案中，所述受试者在依鲁替尼后已经显示疾病的进展。在某些实施方案中，所述方法包括向所述受试者施用结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)。在某些实施方案中，所述方法包括向所述受试者施用结构(I)的化合物的形式A。
以下实施方案是关于本文提供的任何治疗方法。在某些实施方案中，口服施用结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)。在某些实施方案中，每天一次口服施用结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)。在某些实施方案中，对于28天周期，每天一次口服施用结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)。在某些实施方案中，持续一个或多个28天周期重复给药(例如，在无疾病进展或不可接受的毒性)。在某些实施方案中，在过夜禁食后的早上，在摄入任何食物或其他药物前至少1小时，用最高达200mL或7液体盎司的水服用结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)。在某些实施方案中，依鲁替尼与结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)组合每日一次口服施用。
在某些实施方案中，每天以20mg至100mg(包括端值)的平坦剂量施用结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)。在某些实施方案中，每天以约20、25、33、45、50、58、75或100mg的平坦剂量施用结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)。在某些实施方案中，每天以大于100mg的平坦剂量施用结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)。
在某些实施方案中，结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)作为单一疗法施用。在某些实施方案中，结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)作为单一疗法以25mg平坦剂量施用。在某些实施方案中，每天一次以25mg平坦剂量口服施用结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)，持续28天。在某些实施方案中，一次或多次重复28天周期。在某些实施方案中，所述受试者在28天周期中以相同的给予剂量继续接受结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)，直至其经历不可接受的毒性或明确的疾病进展。在某些实施方案中，结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)的剂量在循环之间增加。在某些实施方案中，剂量在周期之间增加约25-36％。在某些实施方案中，基于表22中的剂量递增水平增加剂量。
在某些实施方案中，结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)与依鲁替尼组合施用。在某些实施方案中，结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)每天以20mg平坦剂量与依鲁替尼组合施用。在某些实施方案中，结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)每天一次以20mg平坦剂量与依鲁替尼组合口服施用，持续28天。在某些实施方案中，依鲁替尼以其在临开始用结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)治疗前接受的相同剂量施用。在某些实施方案中，在开始用结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)治疗后，所述受试者继续使用依鲁替尼和结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)的组合至少3个月。在某些实施方案中，在该时间之后，受试者继续使用组合疗法或停止依鲁替尼并继续使用结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)单一疗法。在某些实施方案中，停止并重新开始依鲁替尼施用。在某些实施方案中，受试者在28天周期中以相同剂量继续接受结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)，直至其经历不可接受的毒性或明确的疾病进展。在某些实施方案中，一次或多次重复28天周期。在某些实施方案中，所述受试者在28天周期中以相同的给予剂量继续接受结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)，直至其经历不可接受的毒性或明确的疾病进展。
在某些实施方案中，结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)的剂量在28天周期之间增加。在某些实施方案中，所述剂量在周期之间增加约25-36％。在某些实施方案中，基于表22中的剂量递增水平增加剂量。
在某些实施方案中，如上所述，结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)的剂量在循环之间增加。在某些实施方案中，结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)的剂量递增遵循标准的3+3设计，其中依次的3个受试者的群组用递增较高剂量的结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)治疗，直至观察到DLT和确定MTD。在某些实施方案中，一旦登记一定剂量水平的第一个受试者，如果初始受试者未经历DLT或任何不可接受的毒性，则第二个和第三个受试者在3周之后被登记。
在某些实施方案中，如果群组中的3个受试者中的1个经历DLT，则以该剂量水平治疗最多达3个额外的受试者。在某些实施方案中，如果在向最后一个受试者首次给药后28天内，在扩展的3-6个受试者群组中未观察到额外的DLT，则在3个受试者的新群组中，递增剂量增加。在某些实施方案中，如果给定剂量水平的3至6个受试者中的2个或更多个在第一个周期期间经历DLT，则超过MTD，且将以先前较低剂量水平治疗最多达6个受试者。在某些实施方案中，如果6个受试者中的0个或1个在该先前较低剂量水平经历DLT，则该剂量被宣布为MTD。MTD被定义为在第1周期期间6个受试者中的≤1个经历DLT的剂量，其中下一更高的剂量在第1周期期间有3-6个受试者中的至少2个经历DLT。在某些实施方案中，一旦鉴定MTD或初步推荐的2期剂量(RP2D)，则在每个受试者组中登记最多达六个受试者的扩展群组。在某些实施方案中，所述MTD是RP2D。
在某些实施方案中，结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)在RP2D每天一次口服施用，持续28天。在某些实施方案中，用结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)的给药可以继续，直至受试者经历不可接受的毒性或明确的疾病进展。
在某些实施方案中，结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)在RP2D每天一次与依鲁替尼组合口服施用，持续28天。在某些实施方案中，向所述受试者以其在临开始用结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)治疗前接受的相同剂量施用依鲁替尼。
在某些实施方案中，结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐，例如，形式A)的剂量为每天约1-37mg/m2(例如，1-25mg/m2)或约1-75mg(例如，1-50mg)。在某些实施方案中，与依鲁替尼组合的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐，例如，形式A)的剂量为每天约1-37mg/m2(例如，1-25mg/m2)或约1-75mg(例如，1-50mg)。
在某些实施方案中，结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)作为硬明胶胶囊中的粉末以口服形式提供。在某些实施方案中，以1-mg、4-mg、16-mg、25-mg和100mg强度配制结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)胶囊。在某些实施方案中，结构(I)的化合物(例如，酒石酸盐，例如，形式A)被包装至具有聚酯线圈作为顶部空间填充剂的圆形高密度聚乙烯瓶中。在某些实施方案中，然后对瓶进行热密封，装上儿童安全帽，并置于低密度聚乙烯袋中作为二次包装。
7.结构(I)的化合物(例如，游离碱或其药学上可接受的盐，诸如酒石酸盐，例如，形式A)的额外治疗用途包括单独或与一种或多种检查点抑制剂(例如，PD-1、PD-L1或CTLA-4的检查点抑制剂)组合治疗黑色素瘤(例如，BRAF-黑色素瘤和/或转移性黑色素瘤)。任何此类检查点抑制剂都可以与结构(I)的化合物共同用于黑色素瘤治疗。在一些实施方案中，所述检查点抑制剂可以是PD-1抑制剂，诸如派姆单抗。如本文所公开的任何治疗条件(例如，剂量、给药时间表、施用途径等)可用于如本文所公开的黑色素瘤治疗中。
8.结构(I)的化合物(例如，游离碱或其药学上可接受的盐，诸如酒石酸盐，例如，形式A)的额外治疗用途还包括单独或与一种或多种检查点抑制剂(例如，PD-1、PD-L1或CTLA-4的检查点抑制剂)组合治疗脑肿瘤(例如，GBM)。任何此类检查点抑制剂都可以与结构(I)的化合物共同用于黑色素瘤治疗。在一些实施方案中，所述检查点抑制剂可以是PD-1抑制剂，诸如派姆单抗。如本文所公开的任何治疗条件(例如，剂量、给药时间表、施用途径等)可用于如本文所公开的黑色素瘤治疗中。
E.合成方法
1.结构(I)的化合物的酒石酸盐的合成
本领域技术人员将理解，用于制备本文所述的化合物(包括结构(I)的化合物的盐)的方法和反应可以根据标准技术进行修改，以包括替代试剂和/或反应条件。例如，具有卤代取代基(即，F、Cl、Br、I)的反应中间体可以可替代地采用磺酸盐。示例性的磺酸盐也称为“假卤化物”，其包括但不限于对甲苯磺酸盐(OTs)、甲磺酸盐(OMs)或全氟烷基磺酸盐(例如三氟甲磺酸盐)。
还原剂包括氢化锂铝、新生(原子)氢、不含或含合适催化剂的氢，例如Lindlar催化剂、钠或锌汞齐(Na(Hg)或Zn(Hg))、钠-铅合金(Na+Pb)、乙硼烷、硼氢化钠、硼烷四氢呋喃、基于铁的还原剂(例如硫酸铁(II))、基于锡的还原剂(例如氯化锡(II))、二氧化硫、亚硫酸盐化合物、连二硫酸盐(例如Na2S2O6)、硫代硫酸盐(例如Na2S2O3)、肼、二异丁基氢化铝、草酸、甲酸、抗坏血酸、还原糖、亚磷酸盐、次磷酸盐、二硫苏糖醇(DTT)、三-2-羧乙基膦盐酸盐(TCEP)。
因此，一个实施方案(下文为“步骤A”)提供了用于制备结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，其酒石酸盐)的方法：
所述方法包括使具有以下结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中
X是离去基团；
Y是卤素；
Z是卤素或–NR1(R2)；且
R1和R2各自独立地是氢或C1-C8烷基，
与具有以下结构的化合物反应：
其中P是H或保护基团，以获得具有以下结构的化合物：
在一些实施方案中，X是卤素或磺酸酯。在一些具体实施方案中，X是氟、氯、溴或碘。在一些更具体实施方案中，X是氯。
在前述实施方案中的一些中，P是H。在某些实施方案中，P形成甲酯、苄酯、叔丁酯、甲硅烷酯、原酸酯或噁唑啉。
另一个实施方案(下文为“步骤B”)提供了用于制备结构(I)的化合物的方法：
或其药学上可接受的盐(例如，其酒石酸盐)，所述方法包括使具有以下结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
Y是卤素；
Z是卤素或–NR1(R2)；且
R1和R2各自独立地是氢或C1-C8烷基，
与还原剂反应，以获得具有以下结构的化合物：
在一些实施方案中，所述还原剂是氢化锂铝、乙硼烷、硼氢化钠、硼烷或其组合。在一些更具体实施方案中，所述还原剂是硼烷。
又另一个实施方案(下文为“步骤C”)提供了用于制备结构(I)的化合物的方法：
或其药学上可接受的盐(例如，其酒石酸盐)，所述方法包括使具有以下结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
Y是卤素；
Z是卤素或–NR1(R2)；且
R1和R2各自独立地是氢或C1-C8烷基，
与活化剂反应，以获得具有以下结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
X'是离去基团。
在一些实施方案中，所述活化剂包含磺酰氯官能团。例如，在某些实施方案中，所述活化化合物是亚硫酰氯。
又另一个实施方案(下文为“步骤D”)提供了用于制备结构(I)的化合物的方法：
或其药学上可接受的盐(例如，其酒石酸盐)，所述方法包括使具有以下结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
X'是离去基团；
Y是卤素；
Z是卤素或–NR1(R2)；且
R1和R2各自独立地是氢或C1-C8烷基，
与N-甲基哌嗪或其盐反应，以获得具有以下结构的化合物：
或其药学上可接受的盐。
在前述实施方案中的一些中，X'是卤素或磺酸酯。在一些实施方案中，X'是氟、氯、溴或碘。在某些实施方案中，X'是氯。
在一些实施方案中，Y是氟、氯、溴或碘。例如，在一些具体实施方案中，Y是氯。
在一些具体实施方案中，Z是–NR1(R2)。在一些更具体实施方案中，R1是C1-C8烷基。在其他相关实施方案中，R2是C1-C8烷基。在更具体实施方案中，R1是甲基、乙基、丙基或异丙基。例如，在某些实施方案中，R1是甲基。类似地，在一些实施方案中，R2是甲基、乙基、丙基或异丙基。例如，在某些实施方案中，R2是甲基。
另一个实施方案(下文为“步骤E”)提供了用于制备结构(I)的化合物的酒石酸盐的方法：
所述方法包括混合结构(I)的化合物与酒石酸。
在一些实施方案中，所述方法包括将酒石酸添加至结构(I)的化合物。例如，在某些实施方案中，所述方法包括将L-(+)-酒石酸添加至结构(I)的化合物。在某些实施方案中，将所述酒石酸以约1:1至约2:1(例如1:1或2:1)的比率添加至结构(I)的化合物。在某些实施方案中，所述酒石酸盐的特征在于具有如上所述的化学计量。
某些实施方案提供了用于制备结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，其酒石酸盐)的方法，其包括步骤A和B，步骤A、B和C，步骤A、B、C和D，步骤A、B、C、D和E，步骤B和C，步骤B、C和D，步骤B、C、D和E，步骤C和D，步骤C、D和E，或步骤D和E。在某些实施方案中，所述方法包括步骤A和C，步骤A、C,和D，步骤A、C、D和E，步骤A、B和D，步骤A、B、D和E，步骤A、B、C和E，步骤B和D，步骤B、D和E，步骤A和C，步骤A和D，步骤A和E，步骤B和E，或步骤C和E。
本领域技术人员还将理解，在用于制备本文所述的化合物的方法中，中间体化合物的官能团可能需要被合适的保护基团保护。此类官能团包括但不限于羟基、氨基、巯基和羧酸。羟基的合适的保护基团包括三烷基甲硅烷基或二芳基烷基甲硅烷基(例如叔丁基二甲基甲硅烷基、叔丁基二苯基甲硅烷基或三甲基甲硅烷基)、四氢吡喃基、苄基等。氨基、脒基和胍基的合适保护基团包括叔丁氧基羰基、苄基氧基羰基等。巯基的合适保护基团包括-C(O)-R"(其中R"是烷基、芳基或芳基烷基)、对甲氧基苄基、三苯甲基等。羧酸的合适保护基团包括烷基、芳基或芳基烷基酯。保护基团根据本领域技术人员已知且如本文所述的标准技术任选地添加或移除。保护基团的使用详细描述于Green,T.W.和P.G.M.Wutz,Protective Groups in Organic Synthesis(1999),3rd Ed.,Wiley。如本领域技术人员将理解，保护基团也可以是聚合物树脂，诸如Wang树脂、Rink树脂或2-氯三苯甲基氯化物树脂。
本领域技术人员还将理解，尽管本发明的化合物的此类受保护衍生物可能不具有如此药理学活性，但它们可被施用于哺乳动物，且其后在体内代谢以形成药理学活性的本发明的化合物。因此，此类衍生物可以被称为“前药”。所有本文公开的化合物的前药都被包括在本发明的实施方案的范围内。
以下一般反应方案举例说明形成结构(I)的化合物的酒石酸盐的示例性方法：
应理解，本领域技术人员可以能够通过类似的方法或通过组合本领域技术人员已知的其他方法制备这些盐。还应理解，本领域技术人员能够通过使用合适的起始组分和根据需要修改合成参数，以如下所述的类似方式制备下面未具体举例说明的结构(I)化合物的其他盐。通常，起始组分可以获得自来源、诸如Sigma Aldrich、Lancaster Synthesis,Inc.、Maybridge,Matrix Scientific、TCI和Fluorochem USA等或根据本领域技术人员已知的来源合成(参见，例如，Advanced Organic Chemistry:Reactions,Mechanisms,andStructure,第5版(Wiley,December 2000))或如本发明中所述制备。
使用本领域中已知的技术，例如通过x-射线粉末衍射(XRPD)、动态蒸气吸附(DVS)、热重分析(TGA)、差示扫描量热法(DSC)、质谱和/或1H NMR，分析化合物和盐。下文将更详细地描述合成程序。
2.结晶形式的合成
结构(I)的化合物的酒石酸盐及其多晶型物(例如，形式A)的实施方案可以根据以下一般反应方案制备，其中X的每次出现都是卤化物或假卤化物(例如，三氟甲磺酸盐、全氟丁烷磺酸盐、甲磺酸盐、甲苯磺酸盐等)。可用于制备结构(I)的化合物的酒石酸盐的某些中间体可以根据WO 2012/135800(其通过引用以其整体并入本文)中所述的方法制备。如一般反应方案中所示，结构A1的化合物可以购自商业或根据本领域普通技术人员熟悉的方法(包括实施例(参见，例如，实施例6)中提供的那些)制备。A1与胺试剂A'(其根据已知方法制备或购自商业来源)的反应得到A2。然后，苯基硝基化合物A2可以被转化为苯胺A3，所述苯胺A3与A4偶联，以得到含有嘧啶的产物A5。含有嘧啶的A5然后与苯胺化合物A6偶联，以得到A7。A7然后可以在必要时被还原(例如，使用BH3·THF)并被活化(例如，使用亚硫酰氯、Comins氏试剂)以得到化合物A8(即，结构(I))。然后纯化化合物A8，并且在适当的条件下(例如，在两个再浆化纯化步骤后加热冷却)，通过添加适当的酸(例如，酒石酸)将其转化为期望的多晶型物/盐。
一般反应方案
应当注意，一般反应方案仅描绘用于制备结构(I)的化合物的酒石酸盐的示例性方法，并且其他方法是可用的，包括用于使用不同试剂和/或不同中间体等制备结构(I)的化合物的酒石酸盐的方法。
其他具体实施方案提供了用于由结构(I)的化合物制备多晶型物的方法。例如，一个实施方案提供了用于制备多晶型物的方法，所述方法包括：
a)纯化具有以下结构(I)的化合物的游离碱：
由此分离包含少于约30mol％三乙胺的纯化的游离碱；
b)溶解纯化的游离碱以形成包含纯化的游离碱的重结晶溶液；和
c)用酒石酸处理重结晶溶液，由此形成多晶型物。
在一些实施方案中，所述纯化的游离碱包含少于约25mol％三乙胺、少于约20mol％三乙胺、少于约15mol％三乙胺、少于约10mol％三乙胺、少于约5mol％三乙胺、少于约4mol％三乙胺、少于约3mol％三乙胺、少于约2mol％三乙胺、少于约1mol％三乙胺或少于约0.5mol％三乙胺。
在一些具体实施方案中，所述酒石酸是L-(+)-酒石酸。
在一些具体实施方案中，相对于游离碱，以范围为约2.5:1至约0.75:1的摩尔比添加酒石酸。在更具体实施方案中，相对于游离碱，以范围为约2.3:1至约0.9:1的摩尔比添加酒石酸。在更具体实施方案中，相对于游离碱，以范围为约2.2:1至约1.5:1的摩尔比添加酒石酸。在某些实施方案中，相对于游离碱，以约2:1的摩尔比添加酒石酸。
在一些实施方案中，所述纯化包括第一次纯化，其包括使游离碱与第一溶剂接触，由此形成第一悬浮液。在一些实施方案中，所述第一溶剂是有机溶剂。在一些实施方案中，所述第一溶剂是醇(例如，甲醇、乙醇、异丙醇、正丙醇、丁醇等)。在一些具体实施方案中，所述第一溶剂是乙醇。
在某些实施方案中，所述第一纯化进一步包括在至少约50℃的温度下加热第一悬浮液。在一些更具体实施方案中，所述第一纯化进一步包括在至少约65℃的温度下加热第一悬浮液。在一些更具体实施方案中，所述第一纯化进一步包括在至少约45℃、55℃、57℃、60℃、62℃、67℃、70℃、72℃或75℃的温度下加热第一悬浮液。
在一些实施方案中，所述第一次纯化进一步包括除去第一溶剂，由此形成固体产物。
在一些实施方案中，所述方法进一步包括第二次纯化，其包括使固体产物与纯化混合物接触，由此形成第二悬浮液。在一些实施方案中，所述纯化混合物包含第二溶剂、第三溶剂和纯化试剂。在一些更具体实施方案中，所述第二溶剂是有机溶剂。在一些实施方案中，所述第二溶剂是醇。在一些实施方案中，所述第二溶剂是乙醇。在某些实施方案中，所述第三溶剂是有机溶剂。在更具体实施方案中，所述第三溶剂是氯仿。在某些实施方案中，所述纯化试剂是活性炭。
在一些更具体实施方案中，所述重结晶溶液进一步包含重结晶溶剂。在更具体实施方案中，所述重结晶溶剂包括有机溶剂。在一些实施方案中，所述重结晶溶剂包含醇。在一些实施方案中，所述重结晶溶剂包括乙醇。在一些实施方案中，所述重结晶溶剂进一步包含苯甲醚。
在某些实施方案中，所述溶解进一步包括在至少约50℃的温度下加热重结晶溶液。在更具体实施方案中，在至少约60℃的温度下进行加热。在仍更具体实施方案中，在至少约65℃的温度下进行加热。在仍更具体实施方案中，在至少约55℃、57℃、62℃、67℃、70℃、72℃或75℃的温度下进行加热。
在一些实施方案中，所述方法进一步包括在低于约25℃(例如，低于约20℃、15℃、10℃或0℃)的温度下冷却重结晶溶液。在一些更具体实施方案中，所述方法进一步包括在低于约20℃的温度下冷却重结晶溶液。在一些更具体实施方案中，所述方法进一步包括将多晶型物分离为固体(例如，结晶固体)。
在更具体实施方案中，所述结晶形式的酒石酸与结构(I)的化合物的比率范围为约2.25:1至约1.75:1。在一些实施方案中，所述结晶形式的酒石酸与结构(I)的化合物的比率范围为约2.1:1至约1.9:1。在一些实施方案中，所述多晶型物的酒石酸与结构(I)的化合物的比率为约2:1。在某些实施方案中，所述多晶型物是L-(+)-酒石酸盐。某些实施方案提供了根据前述实施方案中任一项的方法制备的多晶型物。
3.中间体
在另一个方面，本公开提供了结构(III)的化合物：
或其药学上可接受的盐或互变异构体，其中：
Y是卤素；
Z是卤素或–NR1(R2)；
R1和R2各自独立地是氢或C1-C8烷基；
R3是卤素或ORa；
R4是氢或氧代；且
Ra是氢或C1-C8烷基。
在一些实施方案中，Y是氯。
在一些实施方案中，Z是–NR1(R2)。在一些具体实施方案中，R1是C1-C8烷基。在一些具体实施方案中，R2是C1-C8烷基。在一些实施方案中，R1和R2是C1-C8烷基。例如，在一些实施方案中，R1是甲基。在另一个实施方案中，R2是甲基。在又另一个实施方案中，R1和R2是甲基。
在一些相关实施方案中，R3是ORa。在一些实施方案中，Ra是H。在某些实施方案中，Ra是甲基、乙基或异丙基。在一些实施方案中，R3是卤素。在一些实施方案中，R3是氯。
在一些实施方案中，R4是氢。在一些其他实施方案中，R4是氧代。
在某些具体实施方案中，所述化合物具有以下结构之一：
F.代谢物
1.化合物
结构(I)的化合物经历向多种物质的代谢转化。参见，例如，图100。此类化合物的各个实施方案作为结构(IV)提供，下面详述。还提供了其制备方法。一些实施方案包括至少可用于制备结构(IV)的化合物的化合物中间体，其全部被认为是本公开的一部分。一个实施方案提供了具有以下结构(IV)的化合物：
或其立体异构体、药学上可接受的盐、互变异构体或前药。
其中：
A代表6元芳族环或6元碳环；
R1a和R1b各自独立地是H、C1-C6烷基或-OH；
R2和R3各自独立地是H、C1-C6烷基或卤素；
R4是H、C1-C6烷基或-OH；
R5a和R5b各自独立地是H、C1-C6烷基或卤素；
R6a、R6b、R6c和R6d各自独立地不存在或者是–O-；
R7是H、C1-C6烷基、-OH或不存在；
R8不存在或具有以下结构：
R9不存在或者是烯基，条件是存在R8或R9中的至少一个；
R10是H或C1-C6烷基；且
满足所有化学价；
条件是如果R1a和R1b均为甲基，则：
a.R6a、R6b、R6c、R6d和R9中的至少一个是–O-；
b.R7是C1-C6烷基、-OH或不存在；和/或
c.R10是H。
在一些实施方案中，所述化合物具有以下结构(V)或(VI)之一：
在一些更具体实施方案中，所述化合物具有以下结构(IIa)或(IIIa)之一：
在更具体实施方案中，R1a或R1b中的至少一个是H。在一些实施方案中，R1a或R1b中的至少一个是C1-C6烷基。在更具体实施方案中，R1a或R1b中的至少一个是甲基。
在其他实施方案中，R1a和R1b均为H。在还有其他实施方案中，R1a和R1b均为C1-C6烷基，例如，R1a和R1b均为甲基。
在某些实施方案中，R2是H。在相关实施方案中，R3是H。在其他实施方案中，R4是H。在另一个实施方案中，R4不存在。
在一些实施方案中，R5a是卤素，例如，F、Cl、Br或I。在一些实施方案中，R5a是Cl。在某些相关实施方案中，R5b是H。
在其他具体实施方案中，R6a、R6b、R6c和R6d中的至少一个是–O-，例如，R6a是–O-，R6b是–O-，R6c是–O-或R6d是–O-。在一些实施方案中，R6d是–O-。
在其他具体实施方案中，R7是H。在另一个实施方案中，R7不存在。
在某些实施方案中，R10是H。在另一个实施方案中，R10是C1-C6烷基，例如，R10是甲基、乙基或丙基。在一些实施方案中，R10是甲基。
在一些具体实施方案中，R8具有以下结构之一：
在一个具体实施方案中，R8具有以下结构：
在一个具体实施方案中，R8具有以下结构：
在一个具体实施方案中，R8具有以下结构：
在一个实施方案中，R9不存在。
在结构(IV)的另一个实施方案中，所述化合物具有以下结构(VII)或(VIII)之一：
在结构(IV)的又另一个实施方案中，所述化合物具有以下结构(VIIIa)、(VIIIb)或(VIIIc)之一：
另一个实施方案提供了具有以下结构的化合物：
或其立体异构体、药学上可接受的盐、互变异构体或前药。
一个不同的实施方案提供了具有以下结构的化合物：
或其立体异构体、药学上可接受的盐、互变异构体或前药。
又另一个实施方案提供了具有以下结构的化合物：
或其立体异构体、药学上可接受的盐、互变异构体或前药。
一个额外实施方案提供了具有以下结构的化合物：
或其立体异构体、药学上可接受的盐、互变异构体或前药。
又另一个实施方案提供了具有以下结构的化合物：
或其立体异构体、药学上可接受的盐、互变异构体或前药。
在结构(IV)的化合物的某些实施方案中，使用本领域中已知的化学技术(例如，柱纯化、蒸馏、重结晶等)分离化合物。因此，在某些实施方案中，分离结构(IV)的化合物。在一些实施方案中，纯化结构(IV)的化合物。在一些实施方案中，分离和纯化结构(IV)的化合物。
一些实施方案提供了基本上由结构(IV)的化合物组成的组合物，即基本上不含对组合物具有不利影响的杂质的组合物，因为其涉及使用体外测定法测定的激酶活性的抑制。
在一些实施方案中，所述化合物选自表7及其药学上可接受的盐。
表7.示例性的结构(IV)的化合物
表7A概述代表性的结构(IV)的代谢物的AXL抑制和AUC数据。
表7A.代谢物日期
此外，前述实施方案包括作为药学上可接受的盐、例如酸加成盐或碱加成盐的结构(IV)的化合物。在更具体实施方案中，所述酸加成盐是盐酸盐、富马酸盐或酒石酸盐。在某些实施方案中，所述酸加成盐是酒石酸盐。
2.方法
本文公开的某些方法用于为有此需要的受试者选择治疗方案。也就是说，本公开提供了用于选择治疗方案的方法以及治疗方法本身。此外，某些实施方案提供了基于代谢概况选择治疗方案和治疗方法的方法。其他实施方案提供了基于具有预定基因概况的受试者选择治疗方案和治疗受试者中的癌症的方法。
本文提供的实施方案包括基于受试者的基因概况为受试者选择治疗方案的方法。此类基因概况可以任何合适的方式(例如，微阵列、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)等)产生。
在一些实施方案中，所述基因概况包括编码细胞色素P450酶的基因中的多态性。术语“基因”不仅可以包括编码序列，而且可以包括调节区，诸如启动子、增强子和终止区。该术语可以进一步包括所有内含子和从mRNA转录物剪接的其他DNA序列，连同由替代剪接位点导致的变体。编码特定蛋白的基因序列可以是指导特定蛋白的表达的DNA或RNA。这些核酸序列可以是被转录为RNA或RNA序列的DNA链序列，所述RNA或RNA序列被翻译成特定蛋白。所述核酸序列包括全长核酸序列以及源自全长蛋白的非全长序列两者。
在一些实施方案中，特定蛋白是酶，例如细胞色素P450酶。细胞色素P450(CYP)酶是药物药代动力学和应答的变异性的主要来源。在一些实施方案中，所述细胞色素P450酶属于CYP1、CYP2或CYP3家族中。在实施方案中，所述细胞色素P450酶是CYP1A2、CYP2A6、CYP2C8、CYP2C9、CYP3A43、CYP3A5、CYP4A11、CYP4A22、CYP4B1、CYP4F2、CYP5A1、CYP11A1、CYP11B1、CYP11B2、CYP1A1、CYP1A2、CYP1B1、CYP2A6、CYP2A7、CYP2B6、CYP2C18、CYP2C19、CYP2C19、CYP2C9、CYP2D6、CYP2D6、CYP2E1、CYP2F1、CYP2J2、CYP2R1、CYP2S1、CYP2U1、CYP2W1、CYP3A4、CYP3A5、CYP3A7、CYP3A7、CYP4F11、CYP4F12、CYP4F22、CYP4F3、CYP4F8、CYP4V2、CYP4X1、CYP7A1、CYP7B1、CYP8B1或CYPF22。在一些实施方案中，所述细胞色素P450酶是CYP1A1、CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2A6、CYP3A5或CYP3A7。在一些实施方案中，所述细胞色素P450酶是CYP3A4、CYP2C9、CYP2C8、CYP2E1、CYP1A2、CYP2A6、CYP2D6、CYP2B6、CYP2C19、CYP3A5、CYP2J2、CYP1A1或CYP1B1。在一些实施方案中，所述细胞色素P450酶包括CYP2D6、CYP2C19、CYP2C9、CYP2B6、CYP3A5或CYP2A6。在一些实施方案中，所述细胞色素P450酶是CYP1A1、CYP1A2、CYP2C8、CYP2E1、CYP2J2或CYP3A4。在一些具体实施方案中，所述细胞色素P450酶是CYP2C19。在各个实施方案中，所述基因概况包括关于多种细胞色素P450酶的信息。在一些实施方案中，所述多态性是单核苷酸多态性。
在实施方案中，所述多态性导致：
i.细胞色素P450酶的表达水平与基线表达水平相差至少10％；和/或
ii.细胞色素P450酶的活性与基线活性相差至少10％。
表达水平可以使用任何合适的技术，例如酶联免疫测定(ELISA)、质谱(MS)、实时定量PCR(RT-qPCR)、流式细胞术、核酸(即DNA、RNA等)测序、氨基酸(即，肽、蛋白等)测序、分子细胞遗传学荧光原位杂交(FISH)等，进行测量。
基线水平可以源自群体。“群体”是具有相同指定特征的受试者或样品的任何分组。分组可以根据例如临床参数、临床评价、治疗方案、疾病状态、病况的严重程度等进行。
在一些实施方案中，所述群体是随机选择的。在一些实施方案中，所述群体是包含约2、约5、约10、约25、约50、约75或约100个受试者的组。在一些实施方案中，所述群体是包含约200、约300、约500、约1,000、约1,500、约2,000、约3,000、约5,000或约10,000个受试者的组。在一些实施方案中，所述群体是包含少于约10,000个受试者的组。在其他实施方案中，所述群体是包含大于约10,000个受试者的组。
在一些实施方案中，所述群体是没有癌症的组。在实施方案中，所述群体不具有血液学癌症。在一些实施方案中，所述群体不具有实体肿瘤癌症。在一些实施方案中，所述群体不具有肝癌。
在一些实施方案中，所述群体是具有癌症的组。在实施方案中，所述群体具有血液学癌症。在一些实施方案中，所述群体的确具有实体肿瘤癌症。在一些实施方案中，所述群体具有肝癌。在一些实施方案中，所述群体具有相同类型的癌症。
在前述实施方案中的一些中，所述群体对AXL激酶抑制剂无应答。在一些实施方案中，所述群体在用AXL激酶抑制剂治疗后是难治的。在一些实施方案中，所述群体无法耐受用AXL激酶抑制剂的治疗。在一些实施方案中，所述AXL激酶抑制剂是结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)。在一些实施方案中，所述AXL激酶抑制剂是结构(IV)的化合物或其药学上可接受的盐。
在各个实施方案中，细胞色素P450酶的表达水平高于基线表达水平。在实施方案中，细胞色素P450酶的表达水平比基线表达水平高至少约10％。在一些实施方案中，所述表达水平高至少约1％，高至少约2％，高至少约3％，高至少约4％，高至少约5％，高至少约7％，高至少约12％，高至少约15％，高至少约17％，高至少约20％，高至少约22％，高至少约25％，高至少约27％，高至少约30％，高至少约32％，高至少约35％，高至少约37％，高至少约40％，高至少约45％，高至少约50％，高至少约75％，或高至少约90％。在某些实施方案中，细胞色素P450酶被上调。“上调”或“上调的”是指蛋白存在的增加和/或其基因表达的增加。
在一些实施方案中，细胞色素P450酶的表达水平低于基线表达水平。在实施方案中，细胞色素P450酶的表达水平比基线表达水平低至少10％。在一些实施方案中，所述表达水平低至少约1％，低至少约2％，低至少约3％，低至少约4％，低至少约5％，低至少约10％，低至少约12％，低至少约15％，低至少约17％，低至少约20％，低至少约22％，低至少约25％，低至少约27％，低至少约30％，低至少约32％，低至少约35％，低至少约37％，低至少约40％，低至少约45％，低至少约50％，低至少约75％，或低至少约90％。在某些实施方案中，细胞色素P450酶被下调。“下调”或“下调的”是指蛋白存在的减少和/或其基因表达的减少。
可以使用本领域中已知的任何方法在蛋白或核酸水平上测定标志物的表达的测量值。在一些实施方案中，标志物通过如下检测：将样品与试剂(例如，抗体或核酸引物)接触，生成试剂和标志物的复合物，和检测复合物。根据已知技术，诸如被动结合，抗体可以与适合于诊断测定的固体支持物缀合。根据已知技术，诸如流式细胞术，包括多色流式细胞术，抗体可以与用于诊断测定的细胞表面抗原缀合。根据已知技术，抗体可以与可检测的标记物或基团(诸如放射性标记物、酶标记物和荧光标记物)缀合。
合适的免疫测定的实例包括免疫印迹、免疫沉淀、免疫荧光、化学发光、电化学发光(ECL)和ELISA。标志物的上调或下调也可以通过使用以下检测：例如，cDNA阵列、克隆杂交、差异展示、差异筛选、FRET检测、液体微阵列、PCR、RT-PCR、Sanger测序、质量平行(下一代)测定、分子信标、微电子阵列、寡核苷酸阵列、多核苷酸阵列、基因表达的系列分析(SAGE)和/或消减杂交。
可以在治疗前从受试者收集的样品中测定表达。在此类实施方案中，表达水平可用于预测对特定治疗的应答性。在一些实施方案中，表达水平可以至少部分用于确定施用于受试者的治疗。在一些实施方案中，可以在向受试者施用一定剂量的治疗后收集样品。在具体实施方案中，在第一个治疗周期的第1天、给药前、给药后2小时、给药后6小时和给药后24小时收集样品。在另一个具体实施方案中，也在第一个治疗周期的第8天，给药前，收集样品。在另一个具体实施方案中，也在第二个治疗周期的第1天，给药前，收集样品。在进一步具体实施方案中，也在任何额外(例如第三、第四、第五等)的治疗周期的第1天，给药前，收集样品。在另一个具体实施方案中，还在完成处理后收集样品。
上调或下调可以通过将值与相关参考水平进行比较来评价。例如，一种或多种标志物的量可以表示为值，其可以例如通过由所进行的测定测量样品中的标志物的水平而得出。在广义上，该值可以是定性的或定量的。在检测是定性的情况下，所述***和方法提供了所测定的样品中是否存在标志物的读取或评估，例如评价。在还有其他实施方案中，所述***和方法提供了所测定的样品中是否存在标志物的定量检测，即所测定的样品中的标志物的实际量或相对丰度的评估或评价。在此类实施方案中，所述定量检测可以是绝对的，或者，如果所述方法是检测样品中的两种或更多种不同标志物的方法，则可以是相对的。因此，当在定量样品中的标志物的上下文中使用时，术语“定量”可以指绝对定量或相对定量。绝对定量可以通过如下完成：包含已知浓度的一种或多种对照标志物，和将标志物的检测水平针对已知对照标志物参考，例如归一化(例如，通过生成标准曲线)。或者，相对定量可以通过如下完成：比较两种或更多种不同标志物之间的检测水平或量，以提供两种或更多种标志物各自的相对定量，例如相对于彼此。
在各个实施方案中，细胞色素P450酶的活性高于基线活性。蛋白的功能可以通过相关的活性测定进行测定。示例性活性测定包括结合测定、酶活性测定，包括例如蛋白酶测定、激酶测定、磷酸酶测定、还原酶测定等。
在一些实施方案中，一种或多种细胞色素P450酶的活性比基线活性高至少约10％。在一些实施方案中，所述活性高至少约1％，高至少约2％，高至少约3％，高至少约4％，高至少约5％，高至少约7％，高至少约12％，高至少约15％，高至少约17％，高至少约20％，高至少约22％，高至少约25％，高至少约27％，高至少约30％，高至少约32％，高至少约35％，高至少约37％，高至少约40％，高至少约45％，高至少约50％，高至少约75％，或高至少约90％。
在一些实施方案中，细胞色素P450酶的活性低于基线活性。在实施方案中，所述细胞色素P450酶的活性比基线活性低至少约10％。在一些实施方案中，所述活性低至少约1％，低至少约2％，低至少约3％，高至少约4％，高至少约5％，低至少约7％，低至少约12％，低至少约15％，低至少约17％，低至少约20％，低至少约22％，低至少约25％，低至少约27％，低至少约30％，低至少约32％，低至少约35％，低至少约37％，低至少约40％，低至少约45％，低至少约50％，低至少约75％，或低至少约90％。
因此，本公开的实施方案包括为有此需要的受试者选择治疗方案的方法，所述方法包括：接收受试者的基因概况，所述基因概况包括编码细胞色素P450酶的基因中的多态性；和基于所述基因概况选择治疗方案。在一些实施方案中，所述治疗方案包括施用有效量的治疗剂。在一些实施方案中，所述治疗方案包括停用治疗剂。
在实施方案中，所述治疗剂是AXL激酶抑制剂。在前述的一些实施方案中，所述治疗剂是结构(I)的化合物：
在相关实施方案中，所述治疗剂是以下结构(I)的酸加成盐。
在更具体实施方案中，所述盐是酒石酸盐。
在实施方案中，所述治疗剂是如上所述的结构(IV)的化合物或其前药或药学上可接受的盐。
本公开的实施方案进一步包括用于治疗受试者中的癌症的方法，所述方法包括：向具有预定基因概况的受试者施用有效量的治疗剂，所述基因概况包括编码细胞色素P450酶的基因中的多态性。在实施方案中，所述多态性导致：
i.细胞色素P450酶的表达水平与基线表达水平相差至少10％；和/或
ii.细胞色素P450酶的活性与基线活性相差至少10％。
在实施方案中，细胞色素P450酶的表达水平比基线表达水平高至少10％。在实施方案中，细胞色素P450酶的活性比基线活性高至少10％。在实施方案中，细胞色素P450酶的表达水平比基线表达水平低至少10％。在实施方案中，细胞色素P450酶的活性比基线活性低至少10％。在实施方案中，所述治疗剂是AXL激酶抑制剂。
在某些实施方案中，所述治疗剂是结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在实施方案中，所述治疗剂是结构(I)的化合物的药学上可接受的盐。在实施方案中，结构(I)的化合物的药学上可接受的盐是酒石酸盐。在实施方案中，所述治疗剂是结构(IV)的化合物，或其前药或药学上可接受的盐，或包含这种化合物的组合物，如上所述。
在实施方案中，治疗方案基于预定的基因概况从受试者停用第二治疗剂。在一些实施方案中，所述第二治疗剂是结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在实施方案中，结构(I)的化合物的药学上可接受的盐是酒石酸盐。在实施方案中，所述第二治疗剂是结构(IV)的化合物，或其前药或药学上可接受的盐，或包含这种化合物的组合物，如上所述。
在一些实施方案中，一种或多种细胞色素P450酶的表达水平比基线表达水平高至少约10％。在一些实施方案中，所述表达水平高至少约1％，高至少约2％，高至少约3％，高至少约4％，高至少约5％，高至少约7％，高至少约12％，高至少约15％，高至少约17％，高至少约20％，高至少约22％，高至少约25％，高至少约27％，高至少约30％，高至少约32％，高至少约35％，高至少约37％，高至少约40％，高至少约45％，高至少约50％，高至少约75％，或高至少约90％。
在一些实施方案中，一种或多种细胞色素P450酶的活性比基线浓度高至少约10％。在一些实施方案中，所述活性高至少约1％，高至少约2％，高至少约3％，高至少约4％，高至少约5％，高至少约7％，高至少约12％，高至少约15％，高至少约17％，高至少约20％，高至少约22％，高至少约25％，高至少约27％，高至少约30％，高至少约32％，高至少约35％，高至少约37％，高至少约40％，高至少约45％，高至少约50％，高至少约75％，或高至少约90％。
基线水平可以源自群体。“群体”是具有相同指定特征的受试者或样品的任何分组。分组可以根据例如临床参数、临床评价、治疗方案、疾病状态、病况的严重程度等进行。
在一些实施方案中，所述群体是随机选择的。在一些实施方案中，所述群体是包含约2、约5、约10、约25、约50、约75或约100个受试者的组。在一些实施方案中，所述群体是包含约200、约300、约500、约1,000、约1,500、约2,000、约3,000、约5,000或约10,000个受试者的组。在一些实施方案中，所述群体是包含少于约10,000个受试者的组。在其他实施方案中，所述群体是包含大于约10,000个受试者的组。
在一些实施方案中，所述群体是没有癌症的组。在实施方案中，所述群体不具有血液学癌症。在一些实施方案中，所述群体不具有实体肿瘤癌症。在一些实施方案中，所述群体不具有肝癌。
在一些实施方案中，所述群体是具有癌症的组。在实施方案中，所述群体具有血液学癌症。在一些实施方案中，所述群体的确具有实体肿瘤癌症。在一些实施方案中，所述群体具有肝癌。在一些实施方案中，所述群体具有相同类型的癌症。
在前述实施方案中的一些中，所述群体对AXL激酶抑制剂无应答。在一些实施方案中，所述群体在用AXL激酶抑制剂治疗后是难治的。在一些实施方案中，所述群体无法耐受用AXL激酶抑制剂的治疗。在一些实施方案中，所述AXL激酶抑制剂是结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)。在一些实施方案中，所述AXL激酶抑制剂是结构(IV)的化合物或其药学上可接受的盐。
其他实施方案提供了确定受试者的代谢概况的方法，所述方法包括：使受试者的细胞(例如，肝细胞)的群体与治疗剂接触；和确定第一代谢物的浓度，所述第一代谢物是前述实施方案中任一项的化合物或前述实施方案中任一项的药学上可接受的盐。
在更具体实施方案中，所述方法进一步包括测定第二代谢物的浓度。在一些实施方案中，所述方法进一步包括测定细胞(例如，肝细胞)的群体中的一种或多种细胞色素P450酶的表达水平。在其他实施方案中，所述方法进一步包括测定细胞(例如，肝细胞)的群体中的一种或多种细胞色素P450酶的活性。
在前述实施方案中的一些中，基于所述第一代谢物的浓度测定一种或多种细胞色素P450酶的表达水平或测定其活性。
在其他相关实施方案中，所述方法进一步包括将细胞(例如，肝细胞)的群体与治疗剂一起孵育。在一些实施方案中，所述孵育范围为约1.5至约2.5小时。例如，在一些实施方案中，所述孵育持续约2小时。在一些具体实施方案中，所述孵育范围为约0.5至约20小时、约0.25至约10小时、约0.15至约5小时、约0.5至约10小时、约0.5至约5小时、约0.5至约3小时、约0.25至约20小时、约0.25至约5小时、约0.25至约3小时、约0.15至约10小时或约0.15至约3小时。
在一些实施方案中，所述细胞的群体包含肝细胞，例如，人肝细胞。
在一些实施方案中，测定所述第一代谢物的浓度包括进行质谱测定(例如，MS、MS/MS、LC-MS、LC-MS/MS)。在更具体实施方案中，所述质谱测定包括碰撞诱导解离(CID)。在一些相关实施方案中，测定所述第一代谢物的浓度进一步包括进行液相色谱测定(LC)。
下面提供的实施例和制备例进一步举例说明和例举结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐，以及制备该盐的方法。应当理解，本发明的范围不以任何方式受限于以下实施例和制备例的范围。在以下实施例中，以及在整个说明书和权利要求书中，除非另有说明，否则具有单一立体中心的分子作为外消旋混合物存在。除非另有说明，否则具有两个或更多个立体中心的分子作为非对映异构体的外消旋混合物存在。单一对映异构体/非对映异构体可以通过本领域技术人员已知的方法获得。
G.实施例
无需进一步详细阐述，据信本领域技术人员可以基于上述描述在其最大程度上利用本发明。因此，以下具体实施方案仅被解释为说明性的，而非无论如何以任何方式限制本公开的其余部分。本文引用的所有出版物都出于目的通过引用并入或者是本文提及的主题。
以下提供的实施例和制备例进一步举例说明和例举结构(I)的化合物或结构(I)的化合物的药学上可接受的盐(例如，结构(I)的化合物的酒石酸盐)以及制备这种盐的方法。应当理解，本发明的范围不以任何方式受限于以下实施例和制备例的范围。在以下实施例中，以及在整个说明书和权利要求书中，除非另有说明，否则具有单一立体中心的分子作为外消旋混合物存在。除非另有说明，否则具有两个或更多个立体中心的分子作为非对映异构体的外消旋混合物存在。单一对映异构体/非对映异构体可以通过本领域技术人员已知的方法获得。
实施例1：盐筛选
向25μg结构(I)的化合物和1当量的期望酸中添加1mL溶剂。使用的溶剂是水和N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)。使用Crystal16设备进行盐过滤。该程序允许加热直至60℃，随后以每分钟0.1℃控制冷却至5℃。使用水和二氯甲烷作为溶剂起始两个系列的浆料实验。这些实验在20℃下搅拌3天。如果适用，将溶剂在真空烘箱中蒸发，以分离固体用于XRPD和进一步分析，如下所提供。
X-射线粉末衍射(XRPD)
X-射线粉末衍射研究使用呈Bragg-Brentano配置的Bruker AXS D2 PHASER(设备号1549)进行。使用30kV、10mA的铜阳极；样品台标准旋转；通过Kβ-过滤器(0.5％Ni)进行单色化。缝隙:固定发散缝隙1.0mm(＝0.61°)，主轴向Soller缝隙2.5°，次轴向Soller缝隙2.5°。检测器：线性检测器LYNXEYE，具有接收缝隙5°检测器开口。标准样品架((510)硅片中的0.1mm空腔)对背景信号的贡献最小。
测量条件：扫描范围5-45°2θ，样品旋转5rpm，0.5s/步，0.010°/步，3.0mm检测器缝隙；且所有测量条件都记录在仪器控制文件中。作为***适用性，每天测量刚玉样品A26-B26-S(NIST标准)。
用于数据收集的软件是Diffrac.Commander v3.3.35。使用Diffrac.Eva V3.0进行数据分析。没有对图案应用背景校正或平滑处理。使用Diffrac.Eva软件Cu-Kα2的贡献。
热重分析/差示扫描量热法(TGA/DSC)
使用具有34-位自动取样器的Mettler Toledo TGA/DSC1 STARe***(设备号1547)进行TGA/DSC研究。
使用铝坩埚(40μl；穿孔)制备样品。通常，将5-10mg的样品装入预先称重的铝坩埚中，并在30℃下保持5分钟，其后将其以10℃/分钟从30℃加热至300℃。在样品上维持40ml/min的氮气吹扫。作为***适用性检查，铟和锌用作参考。
用于数据收集和评估的软件是STARe Software v10.00 build 2480。不向热图应用校正。
差示扫描量热法(DSC)
使用Mettler Toledo DSC1 STARe***(设备号1564)进行DSC研究。
使用铝坩埚(40μl；穿孔)制备样品。通常，将1-8mg的样品装至预先称重的铝坩埚上，并在30℃下保持5分钟，其后将其以10℃/分钟从30℃加热至350℃，并再次保持在350℃。在样品上维持40ml/min的氮气吹扫。作为***适用性检查，铟和锌用作参考。
用于数据收集和评估的软件是STARe Software v10.00 build2480。不向热图应用校正。
显微镜检查
使用配备有AxioCamERc 5s的AxioVert 35M(设备号1612)进行显微镜检查研究。显微镜配备有四个镜头，所述镜头为Zeiss A-Plan 5x/0.12、Zeiss A-Plan 10x/0.25、LDA-Plan 20x/0.30和Achros TIGMAT 32x/0.40。数据收集和评估使用Carl Zeiss ZenAxioVision Blue Edition Lite 2011 v1.0.0.0软件进行。
将少量样品装载在物镜上并铺板，直至获得薄层。
动态蒸汽吸附(DVS)
使用Surface Measurement Systems Ltd.DVS-1 No Video(设备号2126)进行动态蒸汽吸附研究。将样品装入平衡盘中，通常为20-30mg，并在0％RH下平衡。在材料已经干燥后，RH以10％/步增加，每次增加持续1小时，结束于95％RH。吸附循环完成后，使用相同的方法干燥样品。用于数据收集的软件为DVSWin v3.01 No Video。使用DVS标准分析套件v6.3.0(标准)进行数据分析。
从这些实验中，获得总共16种独特的XRPD图案或形式。从以水为溶剂和用Crystal16控制冷却的盐筛选中，获得11种独特的形式，包括分别来自磷酸、酒石酸(即(+)-L-酒石酸)、反丁烯二酸、苹果酸(即(–)-L-苹果酸)、琥珀酸、乙烷-1,5-二磺酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、苯磺酸、乙磺酸和苯甲酸的盐形式。测试额外的酸，得到结构(I)的化合物的相应盐。这些额外的酸包括盐酸、硫酸、L-天冬氨酸、顺丁烯二酸、谷氨酸、柠檬酸、D-葡醛酸、乙醇酸、D-葡萄糖酸、L-抗坏血酸、己二酸、萘-1,5-二磺酸和萘-2-磺酸。
以NMP为溶剂和用Crystal16控制冷却的盐筛选确实产生一种独特的硫酸形式，产量低，并且无法获得足够的材料用于进一步分析。
以二氯甲烷为溶剂的浆料实验分别从顺丁烯二酸、苹果酸、琥珀酸和乙烷-1,5-二磺酸得到4种新的形式。从盐筛选分离固体用于XRPD分析，每种独特的新模式使用DSC-TGA、显微镜检查、FT-IR、1H NMR和HPLC进行分析。在该研究中，发现一些盐形式是不可再生的，而其他在DVS后显示降低的结晶度。
选择由磷酸、酒石酸、苹果酸、琥珀酸和苯磺酸形成的五种形式用于规模放大实验，最高达500mg，用于进一步分析。
在筛选结构(I)的化合物的多种盐形式之后，结构(I)的化合物的酒石酸盐被鉴定为用于医药用途的化合物的盐形式。令人惊讶地，PK研究显示，酒石酸盐的生物利用度提高，并且测量的物理化学特性显示酒石酸盐为具有期望的物理特性，包括良好的稳定性。参见以下实施例。
实施例2：盐形式的药代动力学测试
测试实施例1中描述的结构(I)的5种盐形式(即，由磷酸、酒石酸、苹果酸、琥珀酸和苯磺酸形成)，以确定其药代动力学(PK)概况。禁食的雄性Sprague-Dawley大鼠用每种盐形式以及游离碱形式的口服制剂。在给药后5分钟、0.25小时、0.5小时、1小时、2小时、4小时、8小时、12小时和24小时检测血浆浓度。PO给药后的平均血浆浓度在图1中举例说明。5种不同盐形式和游离碱的数据(平均值)包括在下表8中。
表8.结构(I)的化合物的5种代表性盐形式的PK数据比较。
如表8中的数据所示，所述酒石酸盐出乎意料地具有最佳的总体PK概况之一，具有最高的Cmax、0-24小时的最高AUC和第二高的生物利用度。因为从磷酸获得的盐显示不期望的稳定性特征，所以看起来式破碎机酒石酸盐作为原料药具有最佳的整体概况。
实施例3：药代动力学研究-游离碱v.酒石酸盐
向禁食的雄性Sprague-Dawley大鼠给药20％solutol中的游离碱和结构(I)的酒石酸盐形式。游离碱以5.0mg/mL(PO)配制，并通过经口灌胃(18.2mg/kg)给药。结构(I)的酒石酸盐以6.5mg/mL配制，以说明盐的酒石酸盐组分的添加重量，并通过经口灌胃(14.5mg/kg)给药。
在给药后0.25小时、0.5小时、1小时、2小时、4小时、8小时、12小时和24小时采集血浆样品，并参考先前确定的标准曲线通过LC-MS/MS分析结构(I)的浓度。药代动力学参数使用非房室方法用Phoenix WinNonlin 6.3(Pharsight,Mountain View CA)计算。
观察到所述酒石酸盐优于游离碱，具有比游离碱制剂更高的生物利用度峰(图2)。这些数据表明，结构(I)的酒石酸盐在体内可能比游离碱形式更有用。此外，酒石酸盐形式显示优异的Cmax和AUC参数(图2)，同时在相等剂量下维持与游离碱形式都等同的毒性概况。也就是说，结构(I)的酒石酸盐允许更高的药物血浆水平，而没有额外的毒性。酒石酸盐v.游离碱的药代动力学数据包括在下表9中(标称剂量为20mg/kg)。
表9.比较结构(I)的化合物的游离碱与酒石酸盐的PK数据。
| 游离碱 | 酒石酸盐 | |
| 剂量(PO,<sup>mg</sup>/<sub>kg</sub>) | 18.2 | 18.7 |
| C<sub>max</sub>(<sup>ng</sup>/mL) | 116 | 174 |
| T<sub>max</sub>(hours) | 0.833 | 0.667 |
| AUC<sub>0-24小时</sub>(<sup>ng·h</sup>/mL) | 458 | 581 |
| 生物利用度(％) | 26.9 | 42.9 |
实施例4：结构(I)的酒石酸盐的合成
在所示的反应条件下，将2-硝基苯磺酰氯与三乙胺和二甲胺在乙腈中合并，以得到N,N-二甲基-2-硝基苯磺酰胺，产率为82％。
在所示的反应条件下，将N,N-二甲基-2-硝基苯磺酰胺与锌和氯化铵在甲醇中合并，以得到2-氨基-N,N-二甲基苯磺酰胺，产率为99％。
在所示的反应条件下，将N,N-二甲基苯磺酰胺与2,4,5-三氯嘧啶和四丁基硫酸氢铵合并，以得到2-((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)-N,N-二甲基苯磺酰胺，产率为32％。1HNMR表征数据显示于图103A中。
在所示的反应条件下，将2-((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)-N,N-二甲基苯磺酰胺与4-氨基苯甲酸和四丁基硫酸氢铵合并，以得到4-((5-氯-4-((2-(N,N-二甲基氨磺酰)苯基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酸，产率为85％。1HNMR表征数据显示于图103B中。
在所示的反应条件下，将4-((5-氯-4-((2-(N,N-二甲基氨磺酰)苯基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酸与硼烷在四氢呋喃(1M)中合并，随后在所示的反应条件下用4M盐酸处理，以得到2-((5-氯-2-((4-(羟基甲基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)-N,N-二甲基苯磺酰胺，产率为80％。1HNMR表征数据显示于图103C中。
在所示的反应条件下，将2-((5-氯-2-((4-(羟基甲基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)-N,N-二甲基苯磺酰胺与亚硫酰氯在二氯甲烷中合并，以得到2-((5-氯-2-((4-(氯甲基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)-N,N-二甲基苯磺酰胺，产率为90％。1HNMR表征数据显示于图103D中。
在所示的反应条件下，将2-((5-氯-2-((4-(氯甲基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)-N,N-二甲基苯磺酰胺与碳酸钾和1-甲基哌嗪在乙腈中合并，以得到2-((5-氯-2-((4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)-N,N-二甲基苯磺酰胺(即结构(I)或化合物1)，产率为80％。
2-((5-氯-2-((4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)-N,N-二甲基苯磺酰胺(即结构(I)或化合物1)用酒石酸处理，以得到2-((5-氯-2-((4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)-N,N-二甲基苯磺酰胺单酒石酸盐。
实施例5：剂量和治疗结果的确定
各组多个患者(例如，3个)用结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)使用递增剂量治疗，直至确立最大耐受剂量(“MTD扩展安全群组”)。通常，在无剂量限制毒性(DLT)的情况下，使用修改的Fibonacci剂量递增方案增加剂量。
当确立MTD时，将剂量调整至MTD扩展安全群组中施用的平均剂量。可以用结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)治疗具有特定肿瘤类型的额外患者群组(例如，5个)，以证实施用于特定组的严重预处理的患者(例如，尽管进行免疫疗法但仍进展的肿瘤患者，在≤2线酪氨酸激酶抑制剂线后已进展的EGFR+NSCLC患者、无标准治疗剩余的BRAF-、KRAS-或NRAS-突变的结肠直肠癌患者、是或会是铂难治性/抗性的持续性/复发性卵巢癌患者和对免疫疗法或BRAF/MEK抑制剂的组合无应答的BRAF-突变的黑色素瘤患者)或与免疫疗法或酪氨酸激酶抑制剂组合给予的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)的安全性、探索生物标志物并评估其活性的潜在信号。
具体而言，当MTD被证实时，基于在MTD扩展安全群组中施用的平均剂量，在28天周期的第1-21天经口施用单一每日剂量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐(例如，酒石酸盐)。
治疗结果可以通过剂量限制毒性和治疗紧急不良事件进行评估。剂量限制毒性和治疗紧急不良事件可以包括3级或以上的发热性中性粒细胞减少症、连续7天或更多天的4级ANC、4级血小板减少症或3级血小板减少症(伴有临床显著的出血或需要血小板输注)、3级或4级非造血***不良事件(包括恶心、呕吐、腹泻和电解质平衡持续超过48小时，尽管进行最佳医疗管理)。
治疗结果也可以通过测量在给药前、第1天和第21天取自受试者的血液中的血浆浓度(通过非区室分析推导的药代动力学参数)进行评估。例如，可以在第1天给药后0.5、1、2、4、8、24小时和第21天给药后48小时收集血液。随时间计算的血浆浓度可用于确定从时间0至无限远、从时间0至最后测量的时间点的曲线下面积以及峰值血浆浓度。还评价肿瘤组织、PBMC、血浆和血清中的生物标志物(例如，使用Spearman等级相关统计)。在第1天第一次给药前以及给药后2小时、6小时和24小时以及第8天再次获得PBMC和血清。基线肿瘤评价也在28天周期(即第2周期及其后的偶数周期)后进行并重复。
实施例6：组合CDK抑制剂和AXL激酶抑制剂用于治疗癌症DOHH2细胞(B-细胞淋巴瘤细胞系)用单独的阿伏昔布或结构(I)的化合物的酒石酸盐(固定浓度为1或3nM)和浓度范围为1-1000nM的阿伏昔布的组合处理72小时，如图3中所示。将单一剂量浓度的结构(I)的化合物的酒石酸盐添加至各种阿伏昔布稀释物中。根据制造商方案，使用CellTiter-Glo评价活力。
如图4中所示，将HCT-116细胞(一种KRAS突变型结肠直肠癌细胞系)用单独的阿伏昔布或结构(I)的化合物的酒石酸盐(固定浓度为1或3nM)和浓度范围为0.01-100nM的阿伏昔布的组合处理72小时。将单一剂量浓度的结构(I)的化合物的酒石酸盐添加至各种阿伏昔布稀释物中。根据制造商方案，使用CellTiter-Glo评价活力。
图3和图4中的数据显示，CDK抑制剂(诸如阿伏昔布)与AXL激酶抑制剂(诸如结构(I)化合物的酒石酸盐)协同作用，以有效地降低癌细胞的细胞活力。
实施例7：在施用AXL激酶抑制剂后，肿瘤中的活性DC增加
用浓度为60mg/kg的结构(I)的化合物的酒石酸盐治疗小鼠。通过流式细胞术测定肿瘤，以使用CD86抗体和CD11c抗体测量活性DC的存在。图5显示，与阴性对照(媒介物)治疗相比，用AXL激酶抑制剂治疗后，肿瘤细胞中的活化的DC的百分比增加。
实施例8：组合AXL激酶抑制剂和PD1/PD-L1检查点抑制剂用于治疗癌症
用单独的结构(I)化合物的酒石酸盐(以60mg/kg)、单独的PD-L1抗体(200μg)或两者组合治疗小鼠。接种后测量肿瘤体积十五天。
图6A和6B显示用结构(I)的化合物的酒石酸盐治疗在小鼠中的4T1乳腺癌同基因移植物中的效果。(图6A)显示在以浓度为60mg/kg的结构(I)的化合物的酒石酸盐和/或抗PD-L1抗体(200μg/小鼠/剂量)治疗后的肿瘤体积。在该模型中，组合治疗似乎具有最大的抗肿瘤效果。(图6B)对于使用结构(I)的化合物的酒石酸盐的单一药剂和与抗PD-L1抗体的组合治疗，观察到相当的体重减轻。
结构(I)的化合物的酒石酸盐作为单一药剂实现67.1％的肿瘤生长抑制(％TGI)，而抗PD-L1在该模型中实现41.5％的％TGI。在16天治疗时间表中，该组合诱导87.3％的TGI。
％TGI是给定治疗组与媒介物对照组相比的肿瘤体积，即(1-(TV治疗/TV媒介物))*100。使用卡尺在两个维度上测量肿瘤体积，并且使用以下公式以mm3表示体积：V＝(Lx W x W)/2，其中V是肿瘤体积，L是肿瘤长度(最长肿瘤尺寸)，且W是肿瘤宽度(垂直于L的最长肿瘤尺寸)。
在第二组实验中，用单独的结构(I)的化合物的酒石酸盐(25mg/kg作为“低剂量”，和40mg/kg作为“高”剂量)、单独的抗PD-1抗体(10mg/kg)或两者组合治疗小鼠，有或没有12GY/动物的单一剂量放射疗法。持续几天测量肿瘤体积。图7显示组合治疗在乳腺癌(4T1)的小鼠同种异体移植模型中的效果。图8显示组合治疗在黑色素瘤(B16)的小鼠模型中的效果。图9显示组合治疗在结肠直肠癌(CT26)的小鼠模型中的效果。图10显示组合治疗在肺癌(Lewis肺)的小鼠模型中联的效果。
在第三项实验中，在乳腺癌的4T1同基因(同种异体移植物)小鼠模型中评价作为单一试剂的结构(I)的化合物的酒石酸盐以及与免疫检查点阻断(抗PD-1)和放射疗法(RT)的组合的体内活性。结构(I)的化合物的酒石酸盐以25mg/kg通过经口灌胃qd给药。抗PD-1抗体以10mg/kg(biw)腹膜内给药。向用辐射给药的小鼠给予12GY的单次剂量。图11A显示所研究动物的肿瘤体积，且图11B显示所研究动物的体重。
结构(I)的化合物的酒石酸盐作为单一试剂实现28.4％的肿瘤生长抑制(％TGI)，而抗PD-1和RT各自单独分别实现10.2％和43.7％的％TGI。然而，在18天治疗时间表中，所有三者的组合导致57.7％的％TGI。
还评价结构(I)的化合物的酒石酸盐在4T1模型中的药代动力学概况。图114显示结构(I)的化合物的酒石酸盐在4T1模型中的药代动力学概况。用60mpk的结构(I)的化合物的酒石酸盐p.o.治疗携带4T1的小鼠。在指定时间点收集肿瘤和血液。
还评价结构(I)的化合物的酒石酸盐对4T1模型中的血清中的细胞因子的影响(图115)。Balb/c小鼠用4T1细胞原位移植。移植后7天，施用结构(I)的化合物(60mg/kg，p.o.，Q.D.)。在第12天最后一次给药后2小时、6小时和24小时收集全血。用Milliplex测定法测量血清中的细胞因子。正常指示健康的无肿瘤小鼠。n＝6(媒介物：n＝5，正常：n＝3)。误差条指示SD。N.D指示“无数据”。
实施例9：组合AXL激酶抑制剂和EGFR抑制剂用于治疗癌症
使用H1650异种移植模型(其为EGFR突变的肺癌模型)，用单独的结构(I)的化合物的酒石酸盐(以12.5或25mg/kg)、单独的EGFR抑制剂(埃罗替尼)(75mg/kg)或两者组合治疗小鼠。持续几天测量肿瘤体积。图12显示结构(I)的化合物的酒石酸盐和EGFR抑制剂在EGFR突变的肺癌模型中具有协同效应。
使用H1650异种移植模型，用单独的结构(I)的化合物的酒石酸盐(40mg/kg)、单独的EGFR抑制剂(20mg/kg的埃罗替尼-HCl或10、20或40mg/kg的奥斯替尼)或结构(I)的化合物的酒石酸盐和EGFR抑制剂的组合处理小鼠。持续几天测量肿瘤体积。图13显示结构(I)的化合物的酒石酸盐和EGFR抑制剂的组合的效力。
实施例10：AXL抑制导致间充质表型的逆转，使肿瘤细胞向靶向药剂和免疫-肿瘤疗法敏感
间充质特性和上皮至间充质转化(EMT)促成许多肿瘤类型的发生和进展，并最终可以导致药物抗性和高度侵袭性疾病。发现结构(I)的化合物的酒石酸盐(一种有效的AXL抑制剂)导致许多癌症模型中的间充质表型的逆转。在用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理后，使用RT-qPCR观察mRNA表达的变化，并使用标准免疫印迹观察蛋白表达的变化，其与间充质表型的逆转一致(参见，例如，图14和15)。
图14显示pAXL和总AXL的蛋白水平。Panc-1细胞用0.1-1μM的结构(I)的化合物的酒石酸盐预处理1小时，然后通过凋亡细胞裂解物和GAS6的10分钟处理诱导AXL磷酸化。裂解物和GAS6处理导致AXL的磷酸化。结构(I)的化合物的酒石酸盐以剂量依赖的方式抑制AXL的磷酸化。
图15A和图15B显示用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理2小时后的EMT标志物表达的变化。用单一剂量的结构(I)的化合物的酒石酸盐处理细胞。2小时后经由RT-qPCR检测Snail(SNAI1)和Slug(SNAI2)水平。在(图15A)MV4-11和(图15B)A549细胞中观察到表达水平的浓度依赖性抑制。
在用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理后，癌细胞具有较低的运动性和不依赖于锚定的生长的减少，两者都是间充质细胞的特征(参见例如，图16A和图16B)。
图16A和图16B显示用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理对Panc-1或Aspc-1细胞的迁移的影响。(图16A)在划痕测定中评价用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理对Panc-1细胞的迁移的影响。将汇合细胞划痕，且然后用GAS6、0.5μM的结构(I)的化合物的酒石酸盐或R428处理24小时。用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理减少处理后的迁移。(图16B)在软琼脂测定中，用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理对Aspc-1细胞的不依赖于锚定的迁移能力的影响。在该测定中，用结构(I)的化合物处理再次减少迁移。
利用埃罗替尼抗性的非小细胞肺癌(NSCLC)的体内模型证明结构(I)的化合物的酒石酸盐在高度间充质模型中的单一药剂活性。此外，用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理能够使该高度难治的模型对埃罗替尼敏感(例如参见图17和18)。
图17A和图17B显示与埃罗替尼组合的结构(I)的化合物的酒石酸盐在肺癌的体内异种移植模型中的治疗效果。将A549细胞以1×107个细胞/鼠皮下注射入无胸腺裸小鼠的后侧腹。一旦肿瘤体积达到100mm3，将小鼠随机分为研究组。将小鼠用“两天给药，两天停药”的给药方案用结构(I)的化合物的酒石酸盐(75mg/kg)和/或埃罗替尼(25mg/kg)治疗。该给药水平和时间表在动物中被良好耐受(图17B)。组合治疗导致肿瘤体积的维持(图17A)，并且相对于作为单一药剂的任一药物的治疗是协同的。
图18A和18B显示与埃罗替尼组合的结构(I)的化合物的酒石酸盐在肺癌的体内异种移植模型中的治疗效果。将H1650细胞以1x107个细胞/鼠皮下注射入无胸腺裸小鼠的后侧腹。一旦肿瘤体积超过100mm3，将小鼠随机分为研究组。将小鼠用“三天给药，三天停药”的给药方案用浓度为12.5或25mg/kg的结构(I)的化合物的酒石酸盐和/或埃罗替尼(75mg/kg)治疗。该给药水平和时间表在动物中被良好耐受(图18B)。组合治疗导致肿瘤体积的显著退化(图18A)，并且相对于作为单一药剂的任一药物的治疗是协同的。
AXL的抑制可以抑制肿瘤相关的胞葬作用，导致对肿瘤的更强免疫原性应答。如图19A和图19B中所示，用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理损害AXL-介导的凋亡体的吞噬作用。进行询问结构(I)的化合物的酒石酸盐处理在佛波酯(PMA)处理的THP-1细胞中的效果(巨噬细胞诱导)的胞葬作用(efferocytosis)测定。(图19A)THP-1细胞用结构(I)的化合物的酒石酸盐和GAS6预处理，随后用荧光标记的凋亡裂解物(星形孢菌素处理的A549细胞裂解物)处理。孵育24小时后，进行流式细胞术以评价THP-1细胞吞噬凋亡体的能力。(图19B)在THP-1细胞中使用荧光显微镜检查进行类似实验。在共聚焦显微镜检查图像(OlympusFV1000)上使用ImageJ软件在粘附的THP-1细胞中计数荧光标记的凋亡体。
此外，在同基因三阴性乳腺癌小鼠模型中，结构(I)的化合物的酒石酸盐当与抗PD-L1药剂(一种免疫检查点抑制剂)组合时证明协同作用(参见例如，实施例8和图6A和图6B)。
有趣的是，在EMT的模型中评估结构(I)的化合物的酒石酸盐期间，检测到视黄酸(RA)代谢蛋白CYP26A1的表达的显著变化(参见例如图20-22)，表明AXL抑制导致RA代谢的变化。
图20显示用RA和结构(I)的化合物的酒石酸盐处理的细胞中的CYP26A1 mRNA水平。细胞用1μM视黄醇乙酸酯(RA)和/或0.5μM的结构(I)的化合物的酒石酸盐处理。用RA和结构(I)的化合物的酒石酸盐处理诱导CYP26A1的RA-依赖性表达。
图21A和21B显示MV4-11细胞中的CYP26A1 mRNA表达。(图21A)细胞用非靶向或AXL特异性siRNA处理。细胞随后用1μM视黄醇乙酸酯(RA)和结构(I)的化合物的酒石酸盐处理。用AXL siRNA处理诱导在所有样品中的CYP26A1表达的稳健增加，并且在RA处理的样品中诱导最强的增加。(图21B)AXL siRNA对蛋白敲除的免疫印迹证实。
图22A和22B显示AXL与RA输入相关基因Stra6免疫共沉淀。(图22A)从小细胞小图可见，AXL在细胞、诸如HCT116或Panc-1中高度表达。(图22B)使用HCT116细胞系，可见Stra6和AXL的免疫共沉淀。Stra6是RA的主要细胞输入子。
这些数据表明，AXL通过抑制RA信号传导诱导癌细胞中向间充质表型的转化，并且结构(I)的化合物的酒石酸盐可以快速逆转该表型，引起细胞回复至更分化的状态。因此，结构(I)的化合物的酒石酸盐具有单一药剂活性，以及与靶向抗癌药剂和免疫疗法的组合协同作用。
总之，结构(I)的化合物抑制凋亡细胞/GAS6-介导的AXL磷酸化的诱导；抑制间充质基因Snail和slug的表达；抑制胰腺癌细胞的迁移；结构(I)的化合物和埃罗替尼的组合是多种肺癌异种移植模型中的活性方案；结构(I)的化合物抑制AXL介导的凋亡体的内吞作用(胞葬作用)；结构(I)的化合物和抗PD-L1的组合是4T1乳腺癌同基因移植模型中的活性方案；并且结构(I)的化合物增加由RA介导的CYP26A1诱导。
实施例11：AXL激酶的抑制遏制视黄酸代谢
视黄酸(RA)(维生素A(视黄醇)的代谢物)已被用作具有急性早幼粒细胞性白血病(APL)的患者中的单一药剂治疗，其中大约90％的患者达到完全缓解。然而，缓解可能是短暂的，并且在治疗后几个月内出现抗性。
本实施例旨在确定AXL抑制作为恢复对RA治疗的敏感性的手段的作用。假设用AXL抑制剂(结构(I)的化合物)治疗会破坏RA代谢。
在用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理后，使用RT-PCR分析mRNA表达的变化，使用标准免疫印迹分析蛋白表达的变化，并使用竞争性ELISA分析内源性RA水平(参见例如图23)。图23显示pAXL和总AXL的蛋白水平。A549细胞用0.5μM的结构(I)的化合物的酒石酸盐预处理1小时，然后通过凋亡细胞裂解物和GAS6的30分钟处理诱导AXL磷酸化。裂解物和GAS6处理导致AXL的磷酸化。该结果表明，结构(I)的化合物抑制AXL的磷酸化。
RT-PCR用于测量用RA诱导并用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理的细胞中的CYP26的mRNA表达。处理后，使用标准western印迹技术在蛋白水平上评价CYP26表达的变化。使用竞争性ELISA技术测量内源性RA水平。为了在体内模型中确定结构(I)的酒石酸盐化合物对肿瘤生长的影响，在MV4-11异种移植小鼠模型中测试用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理。
在1μM RA处理后，在MV4-11白血病细胞中观察到CYP26的mRNA表达水平的稳健诱导，在治疗6小时后达到近4.3倍(图30A)。然而，用水平低至100nM的结构(I)的化合物的酒石酸盐处理细胞，在6小时时使RA-介导的MV4-11细胞中的CYP26 mRNA水平的诱导抑制88.9％(参见，例如，图3)。有趣的是，结构(I)的化合物的酒石酸盐的施用也在6小时时使CYP26的基础mRNA水平抑制94.1％(参见，例如，图24和25)。
在用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理后，神经嵴EMT中变化表明RA-依赖的基因表达(CYP26A1)。用单一剂量的结构(I)的化合物的酒石酸盐处理的MV4-11细胞表明，结构(I)的化合物的酒石酸盐以RA信号传导依赖的方式抑制EMT。
在额外细胞系(HL60、A549和H1650，参见，例如，图25和图30B)，以及用替代的AXL抑制剂R428，观察到CYP26A1表达的类似趋势，尽管仅在较高浓度下(参见，例如，图26和33)。
图24显示用单一剂量的结构(I)的化合物的酒石酸盐处理的(上小图)MV4-11和HL-60细胞(下小图)中的CYP26A1表达的变化。经由RT-qPCR在几个时间点测量CYP26A1mRNA水平。CYP26A1表达最初受到抑制，随后在约24小时开始，CYP26A1表达反弹增加。图25显示在A549细胞中观察到的相同效果。
图26显示R428处理的细胞中的CYP26A1表达。用单一剂量的R428处理MV4-11细胞。在24小时，经由RT-qPCR测量CYP26A1 mRNA水平。对于R428处理看到CYP26A1的诱导，尽管量级不如用结构(I)的化合物的酒石酸盐看到的量级大。
如图27中所示，分析CYP26A1表达和细胞内RA水平的变化。用单一剂量的结构(I)的化合物的酒石酸盐和视黄醇乙酸酯(RA)处理细胞，并在6小时时收获细胞。经由RT-qPCR测量CYP26A1水平，并且通过竞争性ELISA(mybiosource.com)测量RA的内源性水平。在通过用浓度为0.1μM的结构(I)的化合物的酒石酸盐处理来抑制CYP26 mRNA的情况下，RA水平被补救。
在超过24小时的时间点，且未用结构(I)的化合物的酒石酸盐再处理，CYP26表达超过诱导样品中观察到的水平。在用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理的细胞中，观察到RA水平在其中CYP26表达被抑制的时间点得到维持。结构(I)的化合物的酒石酸盐在多个剂量水平和治疗时间表下使肿瘤体积强烈抑制最多达100％(参见例如图34A-34D)。
图34A和图34B显示MV4-11异种移植研究；且图34C和图34D显示A549异种移植研究。用上述结构(I)的化合物的酒石酸盐的剂量和时间表在无胸腺裸小鼠中进行异种移植研究。老鼠被随意给予食物和水。显示的剂量不引起治疗的动物中的显著体重减轻。在所研究的两种肿瘤模型中均观察到显著的肿瘤生长抑制。
体内CYP26A1表达的变化显示于图35中。向携带皮下异种移植的MV4-11肿瘤的裸小鼠给予单一剂量的180mg/kg的结构(I)的化合物的酒石酸盐。治疗后6小时和24小时收获肿瘤。通过使用快速红色原(A)的标准IHC染色，在FFPE组织中显示肿瘤和肝脏中的CYP26蛋白表达。对于肿瘤(B)和肝脏(C)两者显示CYP26的mRNA水平。
将评价固定组织中的CYP26表达和血浆中的RA水平的分析，以确定结构(I)的化合物的酒石酸盐对CYP26和RA的生理水平的影响。
这些观察表明，结构(I)的化合物的酒石酸盐对AXL激酶的抑制遏制CYP26并破坏RA代谢。综上所述，这些数据表明，AXL可能充当解决介导RA抗性的细胞应答的合适的治疗靶标。
总之，结构(I)的化合物抑制凋亡细胞/GAS6介导的AXL磷酸化的诱导；结构(I)的化合物抑制间充质基因Snail和Slug的表达；结构(I)的化合物以RA依赖的方式表型模拟(phenocopy)视黄酸效应，包括在多种细胞系中诱导CYP26A1的表达；AXL抑制剂R428也诱导CYP26A1表达，尽管程度较低；结构(I)的化合物介导的CYP26A1水平的调节对应于改变的细胞内RA水平；结构(I)的化合物增加由RA介导的CYP26A1诱导；AXL siRNA还诱导CYP26A1增加；AXL与Stra6共沉淀，并且可能充当Stra6的负调节因子；且结构(I)的化合物是多种异种移植物肿瘤模型中的活性化合物。
实施例12：AXL激酶的抑制逆转白血病细胞中的间充质表型
在用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理后，使用RT-PCR询问mRNA表达的变化，使用标准免疫印迹测量蛋白表达，并且使用竞争性ELISA测量内源性RA水平(参见例如，图28和29)。
图28显示结构(I)的化合物的酒石酸盐影响参与RA合成和代谢的多种基因的表达。使用RT2 Profiler PCR阵列(Qiagen)来分析RA和/或0.1μM的结构(I)的化合物的酒石酸盐处理时的表达变化的概况。多种基因受到影响，包括CYP26A1(参与RA降解的主要CYP基因)。
图29显示对RA和结构(I)的化合物的酒石酸盐应答的基因的选择列表。
此外，在体内模型中评价结构(I)的化合物的酒石酸盐对肿瘤生长的影响，评价结构(I)的化合物的酒石酸盐在MV4-11异种移植小鼠模型中的效力(参见例如，图30)。
图30A和30B显示(图30A)MV4-11和(图30B)A549细胞中的CYP26A1 mRNA表达。细胞用1μM视黄醇乙酸酯(RA)和0.1μM或0.5μM的结构(I)的化合物的酒石酸盐处理6小时。用RA和结构(I)的化合物的酒石酸盐处理抑制RA诱导的CYP26的表达。
被检测为通过用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理而显著变化的基因之一是RA代谢蛋白CYP26A1(参见例如，图31和32)，表明AXL抑制的确导致RA代谢的变化。
图31显示A549细胞中的CYP26A1蛋白表达。细胞用1μM视黄醇乙酸酯(RA)和0.1μM或0.5μM的结构(I)的化合物的酒石酸盐处理24小时。用RA和结构(I)的化合物的酒石酸盐处理以剂量依赖的方式抑制CYP26A1的表达。
图32显示用结构(I)的化合物的酒石酸盐低剂量处理的情况下经72小时的CYP26A1表达的变化。在有/没有在0、24和48小时给予的多剂量的结构(I)的化合物的酒石酸盐的情况下，用视黄酸(RA)处理细胞。经由RT-PCR测量CYP26A1水平。CYP26A1表达由RA快速诱导，但在0.1μM和0.5μM均被结构(I)的化合物的酒石酸盐抑制。重复给药防止先前实验中看到的CYP26A1 mRNA的反弹表达。
在MV4-11白血病细胞中，在RA处理后，观察到CYP26 mRNA表达的强烈诱导，并且在用低至100nM的AXL抑制剂(结构(I)的化合物的酒石酸盐)处理中也观察到该效果。在额外的细胞系(HL60、A549和H1650，参见例如图24)中和用替代的AXL抑制剂R428(参见，例如，图33)中，还评价结构(I)的化合物的酒石酸盐的活性。图33显示对于用单一剂量的R428处理的MV4-11细胞经24小时的CYP26A1表达的变化。在24小时时，经由RTPCR测量CYP26A1 mRNA水平。CYP26A1表达最初受到抑制，随后在约24小时开始，出现CYP26A1表达的反弹增加。用R428看到的抑制不如结构(I)的化合物的酒石酸盐大。
用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理与增加的CYP26表达和降低的内源性RA水平相关。在体内，在多种剂量水平和治疗时间表下，结构(I)的化合物的酒石酸盐使异种移植物肿瘤体积强烈抑制最多达100％(参见，例如，图34A-34D)。固定组织中的CYP26表达与治疗后在异种移植物肿瘤中观察到的mRNA水平良好相关(参见，例如，图35-37)。
图35-37显示体内CYP26A1表达的变化。向携带皮下异种移植的MV4-11肿瘤的裸小鼠给予单一剂量的180mg/kg的结构(I)的化合物的酒石酸盐。治疗后6小时和24小时收获肿瘤。通过使用快速红色原的标准IHC染色，在FFPE组织中显示肿瘤和肝脏中的CYP26蛋白表达(图35)。对于肿瘤(图36)和肝脏(图37)两者显示CYP26的mRNA水平。
综上所述，这些观察表明，结构(I)的化合物的酒石酸盐对AXL激酶的抑制可以通过诱导CYP26表达而破坏RA代谢，并且RA代谢的这种破坏导致白血病细胞中的间充质表型的逆转。
总之，结构(I)的化合物改变参与RA合成、降解和信号传导的多种基因的基因表达；结构(I)的化合物有效地抑制视黄醇乙酸酯和视黄酸诱导的RA降解CYP蛋白CYP26在多种细胞系中的表达；结构(I)的化合物可以通过重复给药连续抑制CYP26表达；结构(I)的化合物介导的CYP26的减少对应于较高的细胞内RA水平；AXL-特异性抑制剂R428诱导类似的作用，尽管结构(I)的化合物在多种异种移植物肿瘤模型中作为活性化合物的功效较低；结构(I)的化合物可以与类视黄醇疗法(包括ATRA)协同作用。
实施例13：用AXL激酶抑制剂治疗的癌症的预测性和药效动力学生物标志物
如图38中所示，对于研究受试者A-G，在用结构(I)的化合物的酒石酸盐治疗期间和之后的各个时间点测量GAS6的血清水平。在以下时间测量GAS6的血清水平：周期1/给药前第1天("C1D1 PRE")，以及给药后2和24小时(分别为("C1D1 2"和"C1D1 24")，以及周期1/给药前第8天("C1D8 PRE")。如图40中可见，在研究受试者B、D、E和G中，在用结构(I)的化合物的酒石酸盐治疗期间和之后的各个时间点测量AXL和GAS6的血清水平。在以下时间测量AXL和GAS6的血清水平：周期1/给药前第1天("C1D1 PRE")，以及给药后2和24小时(分别为("C1D1 2"和"C1D1 24")，以及周期1/给药前第8天("C1D8PRE")。在图的右下方显示施用于每个受试者的剂量。
图37-40显示针对人患者原发性和继发性(转移)肿瘤样品的各种免疫组织化学染色的结果，以评价在疾病进展期间的各个时间点测量的上皮-至-间充质转化(EMT)标志物。图37显示来自乳腺癌患者X和Y的原发性(左侧)和继发性(右侧)肿瘤样品中的AXL的免疫染色。图38显示来自乳腺癌患者X和Y的原发性(左侧)和继发性(右侧)肿瘤样品中的E-钙粘蛋白的免疫染色。图39显示来自乳腺癌患者X和Y的原发性(左侧)和继发性(右侧)肿瘤样品中的N-钙粘蛋白的免疫染色。图40显示来自乳腺癌患者X和Y的原发性(左侧)和继发性(右侧)肿瘤样品中的磷酸化的AXL(“pAXL”)的免疫染色。
图41显示在患者来源的结肠直肠癌的异种移植模型中，在用结构(I)的化合物的酒石酸盐治疗的第二十天(给药后四小时收集)的AXL和GAS6的血浆水平。在施用浓度为80mg/kg的结构(I)的化合物的酒石酸盐后，血浆AXL和GAS6水平降低。
在患者来源的结肠直肠癌的异种移植模型中，在用结构(I)的化合物的酒石酸盐治疗的第20天(参见图42)和第27天(最后一次给药后一周，参见图43)测量上皮-至-间充质转化标志物的mRNA的表达水平。在第20天，在以80mg/kg的浓度施用结构(I)的化合物的酒石酸盐之后，Snail表达显著降低(p-值≤0.05，成对t-检验)。在第27天，在用40mg/kg或80mg/kg的结构(I)的化合物的酒石酸盐处理之后，GAS6表达显著增加(p-值≤0.05，成对t-检验)。
图44显示在患者来源的结肠直肠癌的异种移植模型中，用结构(I)的化合物酒石酸盐治疗的第20天(上小图)和第27天(最后一次给药后一周，下小图)的活化的树突细胞的标志物(CD86和CD11c)的mRNA表达水平差异。
实施例14：具有先前治疗的CLL的受试者中的结构(I)的化合物的酒石酸盐的I/II期研究
这是在具有先前治疗的CLL/SLL的受试者中口服施用的结构(I)的化合物的酒石酸盐的1/2期组合研究。在1期和2期两者中，研究参与者将被分配至两个定义的患者组之一：
·第1组(结构(I)的化合物的酒石酸盐单一疗法)：具有CLL/SLL的患者，其对B-细胞受体拮抗剂和/或BCL-2拮抗剂不耐受或在B-细胞受体拮抗剂和/或BCL-2拮抗剂后已进展
·第2组(结构(I)的化合物的酒石酸盐和依鲁替尼组合疗法)：具有CLL/SLL的患者，其在依鲁替尼后已进展，但治疗提供者认为继续依鲁替尼疗法符合患者的最大利益。
两组患者将同样地用结构(I)的化合物的酒石酸盐治疗，并将经历相同的研究评价。患者纳入标准包括≤2的东部肿瘤协作组(ECOG)表现状态。
1期
患者将被同时纳入第1组和第2组中的3至6个患者的群组中。第2组将开始于低于第1组起始剂量的一个剂量水平。在每个组中，结构(I)的化合物的酒石酸盐的剂量的递增将遵循标准3+3设计，其中三个患者的连续群组用递增更高剂量的结构(I)的化合物的酒石酸盐治疗，直至观察到剂量限制毒性(DLT)并确立最大耐受剂量(MTD)。在无DLT的情况下，将使用修改的Fibonacci剂量递增方案增加剂量。
一旦鉴定MTD或初步RP2D，将在每个患者组中登记最多达6个患者的扩展群组，以证实初步RP2D的安全性/适宜性，收集额外的生物标志物数据，并进一步探索效力。
预计将在每个患者组中登记最多达27个患者，总共最多达54个患者(结构(I)的化合物的酒石酸盐单一疗法和与依鲁替尼的组合疗法)。
基于关键生物标志物的调节和安全性概况和活性的临床信号，适当时可以探索结构(I)的化合物的酒石酸盐的额外剂量水平、时间表或疾病迹象。
单一疗法-第1组：结构(I)的化合物的酒石酸盐将基于本研究开始时在实体肿瘤研究的当前1期的剂量以平坦剂量施用。怀疑剂量将在33mg和45mg之间。研究药物将每天一次口服施用，持续28天(每个周期是28天；无停药期)。患者可以在28天周期中以第1周期期间相同的剂量继续接受结构(I)的化合物的酒石酸盐，直至他们经历不可接受的毒性或明确的疾病进展。不允许结构(I)的化合物的酒石酸盐的剂量在患者内增加。
组合疗法-第2组：结构(I)的化合物的酒石酸盐和依鲁替尼组合疗法：结构(I)的化合物的酒石酸盐的起始剂量将是比第1组起始剂量更低的一个剂量水平，每天一次口服施用，持续28天(每个周期是28天；无停药期)。患者还将接受依鲁替尼，剂量与他们在临研究登记前接受的剂量相同。在研究开始后，患者应当继续使用依鲁替尼和结构(I)的化合物的酒石酸盐的组合，持续至少3个月。
2期
在2期中，基于Simon 2阶段设计，将患者纳入第1组(结构(I)的化合物的酒石酸盐单一疗法)和第2组(结构(I)的化合物的酒石酸盐与依鲁替尼的组合疗法)。在第1阶段，最多达13个患者将被登记至每个患者组(总共26个患者)。如果每组中的这13个患者无应答，研究将停止。否则，第2阶段将开放，每组中登记14个额外患者，每组总共27个患者。如果在27个患者中观察到4例或更多例应答，则结论将是研究治疗值得进一步研究。
如果两个患者组均在第2阶段中登记，则预计第2阶段的总登记数将是54个患者。
单一疗法-第1组：结构(I)的化合物的酒石酸盐的起始剂量将是在1期期间确定的RP2D。结构(I)的化合物的酒石酸盐将每天一次以固定剂量口服施用，持续28天(每个周期为28天；无停药期)，其中允许重复循环，直至患者经历不可接受的毒性或明确的疾病进展。
组合疗法-第2组：结构(I)的化合物的酒石酸盐的起始剂量是在1期期间确定的RP2D。患者还将接受依鲁替尼，剂量与他们在临研究登记前接受的剂量相同。结构(I)的化合物的酒石酸盐和依鲁替尼两者将以固定剂量每天一次口服施用，持续28天(每个周期为28天；无停药期)。
实施例15：作为疾病进展的预测因素的治疗前AXL和GAS6水平
正在进行1a/1b期人体中首次、开放标签、剂量递增、安全性、药代动力学和药效动力学研究，用于使用结构(I)的化合物的酒石酸盐治疗晚期实体肿瘤。该化合物在28天中的前21天每天一次施用。对于1a期(剂量递增)，三(3)个患者的连续群组用递增剂量治疗，直至确立MTD。在无剂量限制毒性的情况下，使用修改的Fibonacci剂量递增方案增加剂量。
在药物治疗前(基线)收集血液样品，并进行处理用于获得血清。使用Biotechne(R&D Systems)Ella平台微流体ELISA分析基线血清样品中的可溶性AXL和GAS6。受试者用1.5-28mg/m2的结构(I)的化合物的酒石酸盐连续治疗21天，随后为7天停止治疗。具有记录的疾病评价(疾病进展或稳定疾病)的受试者用于比较分析的基线水平。Wilcoxon秩和检验用于检验AXL和GAS6两者的替代假设(PD<SD)。
图45A和45B显示在研究期间从具有PD vs.SD的患者测量的sAXL蛋白的图表。图45A含有来自17个患者(9个PD患者和8个SD患者)的数据，且图45B含有来自额外2个PD患者和额外1个SD患者(总共20个患者)的数据。该结果表明，与治疗期间发展SD的患者相比，在用结构(I)的化合物的酒石酸盐治疗期间疾病进展的患者在治疗前具有显著降低水平的sAXL蛋白。图46A和46B显示在研究期间从具有PD vs.SD的患者测量的sGAS6蛋白的图表。图46A含有来自17个患者(9个PD患者和8个SD患者)的数据，且图45B含有来自额外2个PD患者和额外1个SD患者(总共20个患者)的数据。该结果表明，与在治疗期间发展稳定疾病的患者相比，在用结构(I)的化合物的酒石酸盐治疗期间疾病进展的患者在治疗前平均具有较低的sGAS6蛋白水平。总之，在表明SD vs PD的最佳应答的受试者中，可溶性AXL和GAS6两者均在基线处升高。
对于1b期扩展研究，五个组按照平坦的给药时间表进行登记。每组包括20个患者，并且将收集10份活检样品。研究组包括：(1)免疫疗法后进展(与免疫疗法组合)：(2)EGFR+非小细胞肺癌，在<2种酪氨酸激酶抑制剂(TKI)(与TKI抑制剂组合)后进展；(3)结肠直肠癌，BRAF/KRAS/NRAS突变的；(4)持续性/复发性卵巢癌(铂抗性/难治性)；和(5)黑色素瘤，BRAF-突变的。
实施例16：通过AXL激酶抑制剂调节免疫应答
为了评价AXL抑制对免疫抑制调节性T细胞(Treg)的影响，用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理诱导的Treg，并且测定处理后的细胞活力和细胞因子释放。根据制造商方案，使用CellXVivo人Treg细胞分化试剂盒(R&D Systems)从合并的外周血单核细胞(PBMC)样品诱导Treg分化，并使用针对FoxP3的qPCR证实分化(图47A)。然后用所示浓度的结构(I)的化合物的酒石酸盐处理iTreg(图47B)。iTregs在用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理的情况下表现出245nM的细胞活力EC50。使用Luminex测定平台，在用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理后评价多种Treg标志物(图47C)。观察到多种标志物在以最高达25μM的浓度治疗后增加。为了评价用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理对肿瘤免疫细胞浸润的影响，在4T1同基因乳腺癌模型肿瘤中测量代表多种免疫细胞类型的基因表达特征的存在。使用标准免疫组织化学和实时PCR技术在***固定的和新鲜的组织两者上评浸润性免疫细胞的标志物。图48-54中显示了在用媒介物或25mg/kg的结构(I)的化合物的酒石酸盐处理的样品中发现的免疫细胞类型的图形评价。图48显示总的肿瘤浸润的淋巴细胞(TIL)，图49显示树突细胞，图50显示巨噬细胞，图51显示中性粒细胞，图52显示自然杀伤(NK)细胞，图53显示调节性T细胞(Treg)，图54显示耗尽的CD8 T细胞。
在研究终止时收集肿瘤样品。尽管观察到总肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)的减少，但也观察到树突细胞浸润增加，同时免疫抑制Treg减少。这些结果表明，受结构(I)的化合物的酒石酸盐影响的免疫应答与肿瘤浸润效应CD4+和CD8+T细胞的百分比的剂量相关的增加以及对免疫检查点抑制剂的增强治疗应答相关。另外，用结构(I)的化合物治疗导致活化的树突细胞的增加以及免疫抑制性浸润中性粒细胞和调节性T-细胞的减少。综上所述，这些临床前数据支持结构(I)的化合物作为免疫调节剂的潜在治疗活性，所述免疫调节剂作为单一试剂且当与靶向免疫检查点的疗法组合时能够增强肿瘤免疫应答。
实施例17：结构(I)的化合物的抗肿瘤作用
结构(I)的化合物的酒石酸盐的抗肿瘤作用已在几种实体肿瘤的小鼠模型中进行测试。下表10概述单独或与其他疗法组合的结构(I)的化合物的酒石酸盐在几种小鼠异种移植模型中的％TGI。
表10.结构(I)的化合物的酒石酸盐在几种异种移植模型中的单一和组合活性
实施例18：结构(I)的化合物在同基因乳腺癌模型中的免疫肿瘤作用
在该研究中，将结构(I)的化合物的酒石酸盐与免疫检查点抑制剂(ICB)在ICB抗性的三阴性乳腺癌小鼠模型(4T1)中进行组合评估。在4T1同基因模型中，抗PD-1单一疗法未抑制肿瘤生长，表明该肿瘤对抗PD-1治疗抗性，如图55中所示。另一方面，与用结构(I)的化合物的酒石酸盐的单一疗法相比，结构(I)的化合物的酒石酸盐和抗PD-1的组合导致统计学显著性的肿瘤生长抑制(p<0.05)。组合效应受到潜在CD8+T细胞耗竭的影响(参见图56A和图56B)。
然而，进一步研究结构(I)的化合物的酒石酸盐对脾和肿瘤中的免疫细胞的影响，其显示，肿瘤生长抑制与脾中的髓源性抑制细胞(MDSC)的显著减少(参见图57)和肿瘤中的树突细胞(DC)的浸润和活化的增加(参见图58A和58B)相关。基因表达分析揭示，用结构(I)的化合物的酒石酸盐治疗体内降低多种免疫抑制细胞因子和趋化因子，包括IL-6和G-CSF(参见图59和图60)。这些结果表明，结构(I)的化合物调节免疫抑制性肿瘤微环境(TME)以在抗PD-1抗性的4T1肿瘤中使T细胞免疫重新振作。综上所述，在抗PD-1抗性的小鼠肿瘤模型中，结构(I)的化合物对AXL的抑制调节TME并增强ICB的作用。
实施例19：结构(I)的化合物在EGFR阳性非小细胞肺癌的临床前模型中是有活性的
据推测，用结构(I)的化合物的酒石酸盐治疗可以加强癌症和特别是EGFR突变型NSCLC中的EGFRi治疗。为了询问该假设，用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理细胞，并且用Celltiter-Glo测定法评价细胞活力，使用RT-qPCR测定mRNA表达的变化，并且使用标准免疫印迹测定蛋白表达变化。
图110A-110B显示结构(I)的化合物处理的NSCLC细胞中的EMT标志物表达。H1650(图110A)和A549细胞(图110B)用浓度最高达2μM的结构(I)的化合物的酒石酸盐处理2小时，其后使用标准qPCR技术评价snail和slug mRNA表达。
图111A-111B显示AXL抑制剂处理的H1650和A549细胞中的EMT标志物蛋白表达。H1650细胞用0.1、0.5或1.0μM的结构(I)的化合物的酒石酸盐或R428处理24小时，其后收获细胞，并使用标准的western免疫印迹技术评价E-钙粘蛋白和Snail蛋白表达(图111A)。A549细胞用0.1、0.5或1.0μM的结构(I)的化合物的酒石酸盐或R428处理24小时，其后收获细胞，并使用标准的western免疫印迹技术评价E-钙粘蛋白和Snail蛋白表达(图111B)。
在mRNA和蛋白测定中，观察到的变化与间充质表型的逆转一致。在治疗后，SlugmRNA表达被抑制多达3.8倍。然而，E-钙粘蛋白表达增加1.6倍。
为了在体内评价该组合，利用NSCLC的H1650异种移植模型。在EMT标志物的体内药效动力学评价中，在单一剂量的结构(I)的化合物的酒石酸盐(40mpk，在24小时)后，观察到Snail蛋白表达减少多达56％。图112显示结构(I)的化合物的酒石酸盐治疗的H1650异种移植小鼠中的slug mRNA表达。携带H1650异种移植肿瘤的小鼠用结构(I)的化合物的酒石酸盐(40mg/kg)经口灌胃治疗，其后在给药后的不同时间点收获肿瘤。通过标准qPCR技术评价Slug和E-钙粘蛋白mRNA表达。图113显示结构(I)的化合物治疗的H1650异种移植小鼠中的snail蛋白表达。携带H1650异种移植肿瘤的小鼠用结构(I)的化合物的酒石酸盐(40mg/kg)经口灌胃治疗，其后在给药后的不同时间点收获肿瘤。通过标准免疫印迹技术评价Slug和E-钙粘蛋白蛋白表达。
在H1650 NSCLC中的细胞活力测定中，结构(I)的化合物的酒石酸盐显示39nM的EC50，而奥斯替尼显示2.2M的EC50。图18C和图18D显示结构(I)的化合物的酒石酸盐和H1650NSCLC细胞系中的EGFRi活性。将H1650细胞在所示药物存在的情况下孵育72小时，其后根据制造商方案使用CellTiter-Glo试剂评价细胞活力。用以下单一试剂(IC50)处理的H1650细胞：结构(I)的化合物的酒石酸盐(35.9nM)、埃罗替尼(9.9M)或奥斯替尼(2.2M)(图18C)。H1650细胞也用结构(I)的化合物的酒石酸盐和埃罗替尼的组合处理(图18D)。
在评价体内治疗效力中，并且用结构(I)的化合物的酒石酸盐(40mpk，qd)治疗，在21天治疗方案的过程中，观察到60％肿瘤生长抑制(％TGI)。图18E和图18F还显示结构(I)的化合物的酒石酸盐和埃罗替尼在H1650异种移植模型中的组合活性。携带H1650异种移植物肿瘤的小鼠每天通过经口灌胃用结构(I)的化合物的酒石酸盐(40mg/kg)、埃罗替尼(20mpk)或组合治疗。每周两次评价肿瘤体积和体重。
对于奥斯替尼治疗(20mpk，qd)，观察到121％TGI。然而，对于组合，观察到140％TGI。图18G和图18H显示结构(I)的化合物的酒石酸盐和奥斯替尼在H1650异种移植模型中的组合活性。携带H1650异种移植物肿瘤的小鼠每天通过经口灌胃用结构(I)的化合物的酒石酸盐(40mg/kg)、奥斯替尼(20mpk)或组合治疗。每周两次评价肿瘤体积和体重。由于其能够逆转癌细胞的侵袭性间充质表型，结构(I)的化合物是一种有希望的药剂，其有可能具有单一试剂活性和与靶向抗癌剂的组合协同作用。
实施例20：结构(I)的化合物在不依赖于KRAS突变状态的结肠直肠癌的临床前模型中表明效力
评估结构(I)的化合物的酒石酸盐的针对结肠直肠癌(CRC)的活性。在CRC系的细胞活力测定中，用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理导致范围为4.5-123nM的IC50值。值得注意的是，用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理后的细胞生长抑制不依赖于KRAS突变状态；KRAS突变型HCT-116系是测试的最敏感的CRC细胞系。图104A显示选择的CRC细胞系的KRAS突变状态。图104B显示在用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理72小时后的CRC细胞活力测定和经由CellTiter-Glo评价。
间充质标志物(包括Snail)在500nM时在HCT-116细胞系中被抑制7.6倍(mRNA)和4.9倍(蛋白)。例如，图105A和图105B显示结构(I)的化合物的酒石酸盐抑制间充质标志物，而不调节上皮标志物。HCT-116细胞用指定浓度的AXL抑制剂：R428、RXDX-106和结构(I)的化合物的酒石酸盐处理24小时。图105A显示经由RT-qPCR定量的mRNA表达水平。图105B显示经由western印迹分析蛋白表达水平。500nM结构(I)的化合物的酒石酸盐将Snail表达抑制7.6倍(m-RNA)和4.9倍(蛋白)。
结构(I)的化合物的酒石酸盐的活性也使用两种KRAS突变型CRC模型(HCT-116和患者来源的异种移植物(PDX)模型)在体内进行评价。在HCT-116异种移植模型中，用结构(I)的化合物的酒石酸盐的单一药剂治疗，在40mg/kg的经口给药时间表下，实现69％肿瘤生长抑制(％TGI)。无胸腺裸小鼠在后侧腹中注射1000万个细胞，并分层成10只小鼠的群组。将化合物配制于H20中的5％(w/v)TPGS和1％(v/v)PS80中，并通过经口灌胃施用。每周两次测量肿瘤体积(图106A)和体重(图106B)。肿瘤内GAS6表达经由RT-qPCR定量。40mg/kg的结构(I)的化合物的酒石酸盐群组达到69％TGI，而无不良事件(图106C)。
在KRAS-突变型PDX模型中，当小鼠以40mg/kg给药时，结构(I)的化合物的酒石酸盐实现44％TGI。Balb/c裸小鼠用2-3mm的原发性人CRC肿瘤的片段植入，且然后分成10只小鼠的群组。将结构(I)的化合物的酒石酸盐配制于H20中的5％(w/v)TPGS和1％(v/v)PS80中，并通过经口灌胃施用。每周两次测量肿瘤体积(图107A)和体重(图107B)。40mg/kg的结构(I)的化合物的酒石酸盐群组达到44％TGI，而无不良事件。
对来自HCT-116和PDX模型的组织进行药效动力学分析。在两种CRC体内模型中，用结构(I)的化合物的酒石酸盐治疗后，组织中的AXL的配体GAS6显著上调，而在PDX模型中，血浆中的可溶性AXL和GAS6显著下调。此外，Axin2(一种Wnt/β联蛋白调节基因)在来自PDX模型的肿瘤组织中被结构(I)的化合物显著下调，表明Wnt/β联蛋白途径的抑制。这些数据支持AXL在促进CRC中的间充质表型中的潜在作用，并且显示结构(I)的化合物的酒石酸盐对AXL的抑制遏制间充质表型，并且无论KRAS突变状态如何，针对CRC细胞都是有效的。
图108A-108E显示在KRAS突变型PDX CRC模型中，结构(I)的化合物的酒石酸盐抑制sAXL/sGAS6浓度，同时下调Wnt/β-联蛋白调节的基因Axin2/CCND1。经由ELISA在血清中定量sAXL(图108A)和sGAS6(图108B)。经由RT-qPCR定量肿瘤内GAS6(图108C)、Axin2(图108D)和CCND1(图108E)。对处理27天的小鼠进行分析(除了Axin2；21天)。sAXL和sGAS6的抑制表明EMT的逆转。结构(I)的化合物介导的Wnt/β-联蛋白相关基因的下调进一步支持先前报道的AXL在β-联蛋白稳定中的作用。
图109显示KRAS突变型PDX CRC模型中的sAXL/sGAS6和肿瘤体积之间的正相关性将它们鉴定为疾病进展的潜在生物标志物。经由ELISA在每只小鼠的血清中定量可溶性浓度，随后进行线性回归分析。各种相关性的统计显著性：sAXL和肿瘤体积(P<0.005)；以及sGAS6和肿瘤体积(P<0.0005)。
实施例21：结构(I)的化合物对炎性乳腺癌的抗肿瘤作用
评估结构(I)的化合物的酒石酸盐在细胞培养物和异种移植模型中针对炎性乳腺癌的活性。
在炎性乳腺癌细胞系中评估结构(I)的化合物的酒石酸盐的活性。在一定范围的剂量评价细胞活力(例如，使用CellTiter Glo测定法)，并且测定IC50值。可以使用的炎性乳腺癌细胞系的实例包括SUM149、KPL-4和SUM190。
在炎性乳腺癌异种移植模型中评价结构(I)的化合物的酒石酸盐的作用。炎性乳腺癌异种移植模型的一个实例描述于Wang等人,2013 Cancer Research 73(21):6516-6525中。将SUM149细胞(2x106个细胞，具有50％materigel)注射至无胸腺的BALB/c nu/nu小鼠的乳脂垫中，并建立肿瘤。用结构(I)的化合物的酒石酸盐或媒介物对照治疗小鼠至少两周。在治疗的过程期间监测肿瘤体积和体重。
实施例22：结构(I)的化合物的酒石酸盐的多晶型物
本公开的多晶型物可以鉴于本文提供的新型方法、反应方案和实施例(例如，参见实施例23)以及合成有机化学领域中已知的合成方法或通过本领域技术人员所理解的对其的变异来制备。反应在适合于所采用的试剂和材料和适合于实现转化的溶剂或溶剂混合物中进行。有机合成领域中的技术人员应当理解，分子上存在的官能团应当与所提出的转化一致。这有时将需要判断以修改合成步骤的顺序或选择一种具体的工艺方案而非另一种，以便获得本公开的期望的化合物或多晶型物
起始材料通常可得自商业来源，诸如Sigma Aldrich或其他商业供应商，或如本公开中所述制备，或使用本领域技术人员众所周知的方法容易地制备(例如，通过以下中一般描述的方法制备：Louis F.Fieser和Mary Fieser,Reagents for Organic Synthesis,v.1-19,Wiley,New York(1967-1999编),Larock,R.C.,Comprehensive OrganicTransformations,第2版,Wiley-VCH Weinheim,Germany(1999),或Beilsteins Handbuchder organischen Chemie,4,Aufl.ed.Springer-Verlag,Berlin，包括增刊(也可经由Beilstein在线数据库得到))。
在结构(I)的化合物的多晶型物的制备中，中间体的远程官能团的保护可能是必要的。根据远程官能团的性质和制备方法的条件，这种保护的需求将不同。本领域技术人员容易确定这种保护的需求。对于保护团及其用途的一般描述，参见Greene,T.W.等人,Protecting Groups in Organic Synthesis,第4版,Wiley(2007)。
此外，本公开的多晶型物表现出有价值的药理学特性，这可以至少通过使用以下测试程序中的任何一种来证明。因此，在如下所述的生物化学测定中评价本公开的多晶型物。根据下列参数获取数据：
X-射线粉末衍射(XRPD)：
PANalytical XRPD仪器。将固体样品铺展在零-背景Si样品架上。下面在表11中列出所使用的XRPD参数：
表11.用于获取XRPD数据的设置
TGA和DSC：
使用来自TA Instruments的TA 5500TGA收集TGA数据，并使用来自TAInstruments的TA 2500DSC进行DSC。使用的详细参数列于下表12中。
表12.用于获取TGA和DSC数据的仪器设置
| 参数 | TGA | DSC |
| 方法 | 斜变 | 斜变 |
| 样品盘 | 铝，敞口 | 铝，卷曲 |
| 温度 | RT-期望的温度 | 25℃-期望的温度 |
| 加热速度 | 10℃/min | 10℃/min |
| 吹扫气体 | N<sub>2</sub> | N<sub>2</sub> |
HPLC：
利用Agilent 1260HPLC，并且用于纯度和溶解度测量的详细色谱条件列于下表13中。
表13.用于获取数据的HPLC设置
实施例23：结晶形式A的制备
化合物1A根据本领域中已知的方法获得，并且符合纯度规格，然而，1H-NMR分析显示，该材料包括约30％的三乙胺，其用于先前的合成步骤中。申请人发现热乙醇中的再浆化有效地除去三乙胺。再浆化步骤如下进行：
将1A和乙醇的混合物在70℃下加热2小时，且然后经5小时缓慢冷却至20℃。将浆料过滤并在真空下干燥，以提供纯化的1B。对该分离的晶体进行再加工程序以提供1C。
后处理程序包括将1C溶解于三氯甲烷和乙醇混合物中，并添加活性炭。将所得浆料在室温下搅拌1小时并过滤。洗涤过滤的固体，与滤液合并，并且通过蒸馏除去溶剂。然后添加乙醇，并且重复蒸馏以除去氯仿。蒸馏后，将所得浆料冷却并过滤，以得到纯化的1C。将获得的材料在70℃下用苯甲醚和乙醇的混合物溶解。然后向该溶液中添加酒石酸的乙醇溶液，且随后用形式A接种。将所得浆料冷却至20℃并过滤，用乙醇洗涤，干燥，以得到结构(I)的化合物的酒石酸盐的多晶型物。通过HPLC，期望产物的纯度被评价为99.5％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝9.56(s,1H),9.33(s,1H),8.58(s,J＝8.0Hz,1H),8.29(s,1H),7.83(dd,J＝8.0,1.6Hz,1H),7.71(td,J＝7.2,1.4Hz),7.57(d,J＝8.4Hz,2H),7.38(td,J＝7.2Hz,J＝1.0Hz),7.18(d,J＝8.4Hz,2H),4.19(s,4H),3.51(s,2H),2.86(bs,3H),2.65(s,6H),2.60-2.50(m,8H)
4.19和3.51ppm的质子信号对应于酒石酸。基于那些峰的积分，酒石酸与结构(I)的化合物的比率始终为2:1。
实施例23A：结晶形式A的制备
在70℃下，将2-((5-氯-2-((4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)-N,N-二甲基苯磺酰胺(5g,9.69mmol)溶解于苯甲醚(75g)和EtOH(30g)中。经1h向混合物中添加溶解于EtOH(30g)中的酒石酸(2.91g,19.38mmol)，然后向溶液中添加少量晶种*以引发沉淀。将混合物搅拌1h并经5h冷却至20℃。通过过滤收集固体，用EtOH洗涤并干燥，以得到作为白色固体的2-((5-氯-2-((4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)-N,N-二甲基苯磺酰胺二酒石酸盐(7.35g,9.01mmol)。
通过HPLC，期望产物的纯度被评价为99.5％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝9.56(s,1H),9.33(s,1H),8.58(s,J＝8.0Hz,1H),8.29(s,1H),7.83(dd,J＝8.0,1.6Hz,1H),7.71(td,J＝7.2,1.4Hz),7.57(d,J＝8.4Hz,2H),7.38(td,J＝7.2Hz,J＝1.0Hz),7.18(d,J＝8.4Hz,2H),4.19(s,4H),3.51(s,2H),2.86(bs,3H),2.65(s,6H),2.60-2.50(m,8H)
4.19和3.51ppm的质子信号对应于酒石酸。基于那些峰的积分，酒石酸与结构(I)的化合物的比率始终为2:1。
*注：形式A的晶种通过如下获得：在上面指定的条件下在苯甲醚/乙醇中合并2-((5-氯-2-((4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)-N,N-二甲基苯磺酰胺和酒石酸，随后使用一种或多种技术起始晶体形式，所述技术诸如(1)冷却溶液(例如，至室温，或在冰箱中)，或(2)浓缩溶液(例如，通过缓慢蒸发，或用旋转蒸发仪)，和/或对含有溶液的***内部划痕。以这种方式获得的晶体通过1HNMR和XRPD分析证实为形式A的。
实施例23B：结晶形式B的制备
向2-((5-氯-2-((4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)-N,N-二甲基苯磺酰胺单酒石酸盐(1.75kg,2.62mol)中添加5.25L EtOH和4.0L减压下蒸馏的溶剂。将此重复两次，直至通过Karl Fisher滴定法的水含量低于0.1％。然后添加52.5L乙醇，并且加热至回流。然后经2小时缓慢添加17.5L乙醇中的0.513kg L-(+)-酒石酸，并在70℃下接种。然后在70℃下保持搅拌12小时，且再次加热至80℃并保持2小时。经6小时将浆料冷却至20℃，且然后再保持搅拌12小时。过滤晶体，且然后用3.5L乙醇洗涤两次。在减压下干燥晶体，以得到1.8kg晶体。然后将1.6kg该材料用16.0L甲基叔丁基醚悬浮，并在30℃下添加0.30kg双(频哪酸)二硼。然后将混合物在40-45℃下加热12小时，且冷却至30℃并过滤。过滤的固体用8.2L甲基叔丁基醚洗涤并在真空下干燥，以得到2-((5-氯-2-((4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)-N,N-二甲基苯磺酰胺单酒石酸盐(1.38kg,2.07mol)。
实施例23C：结晶形式D的制备
将2-((5-氯-2-((4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)-N,N-二甲基苯磺酰胺(5g,9.69mmol)装入EtOH(119g)中，并将混合物加热至80℃。在相同温度下，经2h向混合物中添加溶解于EtOH(40g)中的酒石酸(1.45g,9.69mmol)，然后将混合物冷却至70℃，然后添加少量晶种*以引发沉淀。将混合物搅拌2h并经5h冷却至20℃。通过过滤收集固体，用EtOH洗涤并干燥，以得到作为白色固体的2-((5-氯-2-((4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)-N,N-二甲基苯磺酰胺单酒石酸盐(5.98g,8.98mmol)。
*注：形式D的晶种通过如下获得：在上面指定的条件下在苯甲醚/乙醇中合并2-((5-氯-2-((4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)-N,N-二甲基苯磺酰胺和酒石酸，随后使用一种或多种技术起始晶体形式，所述技术诸如(1)冷却溶液(例如，至室温，或在冰箱中)，或(2)浓缩溶液(例如，通过缓慢蒸发，或用旋转蒸发仪)，和/或对含有溶液的***内部划痕。以这种方式获得的晶体通过1HNMR和XRPD分析证实为形式D的。
实施例24：结构(I)的化合物的酒石酸盐的各种多晶型形式的表征
(i)稳定性和再现性
在不同储存条件下比较结构(I)的化合物的其他多晶型形式的相对稳定性。其他多晶型形式包括结构(I)的化合物的游离碱形式，形式B和形式D。形式B和形式D的XRPD衍射图分别显示于图62和63中。
发现形式A是二酒石酸盐形式，且其被鉴定为仅具有一种晶体形式(形式A)。为了比较，显示形式A(下方)和形式B(上方)的重叠的XPRD模式举例说明类似的模式，具有一些额外的峰。
(ii)稳定性概况
将不同形式的结构(I)的化合物(即，FB、形式A、形式B和形式D)各自储存在40℃和75％的相对湿度下。3周后，所有样品都显示良好的化学稳定性，而没有显著的HPLC纯度下降。对于形式B仅观察到形式变化。此外，如图65(其比较形式A和形式B)中所示，形式B似乎具有较弱的峰强度。较弱的峰强度可能归因于较低的结晶度。
(iii)物理和化学特性
下表概述对于FB和形式A、B和D观察到的表征和固态稳定性结果。制备样品，并且根据上面列出的程序和方法获得，除非另有指定。更多的程序、方法和结果在下面列于表14中。
表14.形式A、B、D和游离碱的物理化学特性评估的概述
*在24小时时收集溶解度
#在40℃/75％RH下
FC：形式变化
NA：没有获得固态结果，因为形成透明溶液
NA*：没有获得固态结果，因为获得油样品。
(a)动态蒸汽吸附(DVS)
DVS结果显示，在25℃下最高达80％的相对湿度，对于形式A、B和D的4.6～7.5％的范围内的吸水量，其中对于形式D观察到形式变化。也就是说，形式D变成与所有四种已知的晶体形式不一致的新形式，并且游离碱不吸湿(吸水量低于0.2％)，其中在测试结束时没有形式变化。
(b)动态溶解度
在37℃下，在生物相关缓冲液(FaSSIF、FeSSIF和SGF)中测量动态溶解度。与游离碱样品相比，在所有生物相关缓冲液中，对于形式A、B和D观察到显著更高的溶解度(>5mg/mL)。在SGF和FeSSIF中，对于所有三种形式观察到类似的溶解度观察，但形式D在FeSSIF中的溶解度低于其他形式A和B。
(c)pH溶解度
在37℃下，在pH 2、4、6、8和10缓冲液中测量pH溶解度。结果显示：i)对于每种样品，在pH 2中的溶解度高于在其他pH缓冲液中的溶解度，并且在更高的pH缓冲液中、特别是在碱性介质中的溶解度降低，其中对于形式A、B和D，残留固体的固体形式也在测试结束时发生变化；ii)形式A在pH 2、4和6缓冲液中显示比其他多晶型物更高的溶解度。
实施例25：结构(I)的化合物的酒石酸盐的毒物动力学和毒理学概况
开发结构(I)的酒石酸盐的形式A，以改进药物制剂的稳定性和重现性。对于多晶型形式B，已经遇到稳定性问题。为了确保新药物制剂具有可接受的毒物动力学和毒理学概况；在小鼠和大鼠中进行研究，比较三种制剂：
(1)多晶型形式A
(2)多晶型形式B
(3)多晶型形式D
在每项研究中，与结构(I)的化合物的游离碱(FB)形式进行比较。在大鼠中进行单一剂量研究，并且在小鼠中进行7天重复剂量研究。
单一剂量毒性研究
在该研究中，在雄性SD大鼠中评估单次口服给药后结构(I)的化合物的游离碱(FB)和酒石酸盐多晶型形式(形式A、B和D)的临床效果和药代动力学的比较。评估的FB剂量水平为20、50和150mg/kg。测试物品用1％Tween 80/5％TPGS/无菌注射用水(v/v/v)配制，并且研究设计如下表15中所示：
表15.研究设计，大鼠中的单一剂量毒性
1基于分别通过1.58、1.35和1.29的剂量倍增系数针对形式A、形式B和形式D的酒石酸含量进行校正，将剂量水平和给药溶液浓度计算为FB的当量。
研究中的终点由以下组成：死亡率检查、临床观察、体重测量和毒物动力学。在7天给药后观察期后，对动物进行安乐死、尸检并记录宏观观察。
在给药当天，<50mg/kg的媒介物和结构(I)的化合物治疗被良好耐受，除了施用形式B的一只中剂量动物，其被发现在给药后7.5小时死亡。相比之下，对于高剂量组，在给药当天经常观察到死亡。在给药后4.5小时开始观察到死亡，其中在150mg/kg FB和形式A、B和D组中，到恢复期结束时观察到100％的死亡率。在7天施用后观察期期间，在中剂量(50mg/kg)组中也注意到死亡或垂死，但在低剂量或媒介物组中则没有。死亡的发生率在不同治疗组中是相似的。
临床体征主要存在于在中和高剂量水平的大鼠中，其中只有少数大鼠展示在低剂量水平的临床观察。在高剂量组中注意到的临床观察包括被动、软便和腹泻、弓背姿势、立毛、“摸起来寒冷”、体重减轻、厌食和癫痫。对于用游离碱和形式A、B和D给药的中剂量动物，主要临床体征是厌食、消瘦和体重减轻。额外的临床体征包括软便、腹泻、弓背姿势、被动、立毛、“摸起来寒冷”和脏毛。在低剂量组中注意到的唯一临床体征是一些动物中的软便和体重减轻。在媒介物给药动物中未观察到临床体征。临床体征的性质和发生率在不同治疗组间是相似的。
在所有测试物品组间看到剂量相关的体重下降/体重增加。低剂量组中的动物在7天给药后观察期内体重增加，但速度低于媒介物对照，而在中和/或高剂量组中看到动物体重减轻。
在来自大剂量组的所有大鼠中，在尸检后的频繁发现是胃肠来源的，并且包括小肠中的浓黄色液体、充满未消化食物的胃、充满液体的盲肠和缺乏形成的粪便；在一只大鼠中，注意到脾和肝的苍白色以及胸腺的尺寸的缩小。对于中剂量组中的大鼠，较少观察到异常发现。发现类似于高剂量组中进行的胃肠观察。中剂量组大鼠中的几只的非胃肠发现包括肾的苍白色，脾和肝的苍白色，肾上腺增大，和几只大鼠的胸腺尺寸缩小。
用FB和形式A、B和D口服给药后，化合物的血浆浓度以剂量依赖性方式增加。相比之下，结构(I)的化合物的所有三种酒石酸盐多晶型形式展示相似的血浆浓度概况。对于FB和形式B，基于Cmax和AUC0-4小时，观察到对于血浆暴露于FB的剂量比例或接近剂量比例，而对于形式A和形式D观察到略高于剂量比例的血浆暴露。
总之，以50和150mg/kg的单一游离碱当量剂量水平口服施用FB和形式A、B和D，产生雄性大鼠中的剂量依赖性的不利影响，在高剂量下的死亡以及中和高剂量水平下类似且显著的临床发现，其特征在于厌食、消瘦、重量减轻、软便、腹泻、弓背姿势和脏毛。雄性大鼠通常良好耐受20mg/kg的剂量水平，具有较少的临床观察和体重增加的减少。用FB和形式A、B和D给药的大鼠中的尸检结果是相似的，但与中剂量组相比，高剂量组中更频繁，其中异常的胃肠发现是最常见的观察。一些较高剂量的动物还展示肝和脾的苍白色，肾上腺的增大，和胸腺尺寸的缩小。FB和游离碱当量的酒石酸盐多晶型形式A、B和D的施用导致类似的FB血浆概况。总体而言，在用形式A、B和D口服给药后，在大鼠中观察到类似的暴露和剂量相关的不利影响。
重复剂量毒性和毒物动力学
在该研究中，在CD-1小鼠中评估在20、50和80mg/kg的单次和7天重复口服游离碱当量剂量水平后结构(I)的化合物游离碱(FB)和三种酒石酸盐多晶型形式(包括形式A、B和D)的临床效果和药代动力学。测试物品用1％Tween 80/5％TPGS/无菌注射用水(v/v/v)配制，并且研究设计如下表16中所示：
表16.研究设计，小鼠中的重复剂量毒性
M＝雄性
a对照动物用媒介物给药7天
*第1天的PK(对于每个时间点(5个时间点)，在3M通过心脏穿刺进行终末采血)。
**7天重复给药后第7天的PK(对于每个时间点(5个时间点)，在3M通过心脏穿刺进行终末采血)。
研究期间的终点由以下组成：临床观察、体重和毒物动力学。对毒理学指定组中由于过度体重减轻而实施安乐死的动物进行安乐死、尸检，并记录宏观观察。
以低、中、高剂量水平施用单一剂量的媒介物和结构(I)的化合物(游离碱和多晶型形式)以及持续7天的低和中剂量水平的7个每天剂量被良好耐受。仅在高剂量水平下，形式D组中的一只小鼠死亡。最高剂量(80mg/kg)导致所有组中在7天观察期内平均体重的类似下降。在<50mg/kg/天的剂量，未看到对体重的影响。
在治疗的第6天或第7天开始，高剂量组中的小鼠中存在临床体征。注意到的临床体征包括被动、昏睡、立毛、苍白、呼吸困难、弓背姿势、上睑下垂、苍白、虚脱、摸起来寒冷和体重减轻。分别地，在用FB给药的小鼠的11/15(73％)、用形式A、形式B和形式D给药的10/15(67％)、10/15(67％)和15/15(100％)中，观察到临床体征。到第7天，严重的体重减轻(起始体重的>25％)导致分别用FB给药的小鼠的3/15(20％)和用形式A、形式B和形式D给药的小鼠的4/15(27％)、3/15(20％)和4/15(27％)的安乐死。
对于由于严重体重减轻而实施安乐死的动物进行的早期死亡尸检时的发现，主要是胃肠来源的。主要发现是小肠中存在黄色液体，以及在一些情况下，小肠的出血。在进行尸检的7只动物中观察到盲肠的扩张和液体的存在。其他器官发现包括，充满食物的胃的扩张以及胸腺尺寸的缩小。该发现通常在治疗组间平均分布。
相比之下，所有三种多晶型形式展示类似的毒物动力学概况。随着每种多晶型形式的剂量水平的增加，暴露增加。
综上所述，以20、50和80mg/kg的游离碱当量剂量单一剂量口服施用FB和形式A、B和D以及20和50mg/kg/天的7个每日剂量被良好耐受。持续七天的FB和形式A、形式B和形式D的每日施用在最高剂量下产生临床体征和严重的体重减轻，导致几只动物在给药的第6天或第7天过早死亡。死亡或由于严重体重减轻而实施安乐死的给药小鼠中的尸检发现主要局限于胃肠道；也注意到胸腺尺寸的减小。各种多晶型制剂的毒物动力学概况是相似的。总体而言，在用FB和形式A、B和D口服给药七天后，小鼠中在高剂量下观察到的效应的性质和发生率是相似的。
实施例26卵巢癌细胞系对结构(I)的化合物是敏感的
用一定范围剂量的结构(I)的化合物的酒石酸盐处理卵巢癌细胞系，并测定细胞活力。绘制每个剂量下的细胞活力，以产生剂量应答曲线并确定对于每种细胞系的IC50值。IC50值显示于表17中。
表17.IC50值
| 细胞系 | IC<sub>50</sub>活性 |
| Ovcar3 | ++ |
| Ovcar8 | ++ |
| Skov3 | + |
| OVTOKO | ++ |
| OVMANA | ++ |
| Kuramochi | ++ |
IC50活性：++＝<1μM；+＝1至10μM
实施例27：卵巢癌细胞系ES-2对结构(I)的化合物是敏感的
在结构(I)的化合物的酒石酸盐存在的情况下，测定ES-2细胞(其为透明细胞组织类型的卵巢癌细胞系)的活力。在一定范围剂量的结构(I)的化合物的酒石酸盐下测量细胞活力，以产生剂量应答曲线，其显示于图66中。如图66中所示，用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理ES-2细胞的IC50值是20nM。
实施例28：结构(I)的化合物在体外有效抑制化学疗法抗性的卵巢肿瘤细胞和透明细胞卵巢肿瘤细胞的生长
为了检查结构(I)的化合物的酒石酸盐是否具有针对化学疗法抗性的卵巢细胞系的效力，在各种卵巢细胞系中测量顺铂(CDDP)敏感性。PA-1、A2780、OVISE和OVTOKO显示CDDP敏感性(IC50＝<1uM)，而其他细胞系显示CDDP抗性(IC50>2.5uM)。结构(I)的化合物的酒石酸盐以低剂量杀死几种化学疗法抗性的卵巢癌细胞系(图67，左上和右上小图)。
此外，结构(I)的化合物的酒石酸盐在CDDP抗性的Kuramochi细胞系中比其他AXL-靶向化合物(卡博替尼，福列替尼)更有效地抑制卵巢肿瘤细胞的生长(图67，下小图)。Kuramochi细胞用各种剂量的结构(I)的化合物的酒石酸盐、卡博替尼和福列替尼处理96小时。随后，通过Alamar Blue测定法测定细胞活力，由此测定CDDP和结构(I)的化合物的酒石酸盐的IC50值。图表代表Kuramochi细胞对每种化合物的剂量应答。Kuramochi细胞用所示浓度的结构(I)的化合物的酒石酸盐或卡博替尼处理8小时，裂解并针对微管蛋白和在Y779或Y702位点处磷酸化的AXL进行western印迹。磷酸化-AXL(Y702)被结构(I)的化合物的酒石酸盐(100nM)以及卡博替尼(1μM)、c-Met、VEGFR2和AXL抑制剂降低(图68)。注意，通过用结构(I)的化合物处理，Y702位点处的AXL磷酸化的剂量依赖性损失，其最能代表AXL激酶活性。
实施例29：通过用结构(I)的化合物处理，卵巢癌细胞中的EMT标志物被抑制
在用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理后，通过mRNA表达分析(使用RT-qPCR)定量上皮至间充质(EMT)标志物。如图69中所示，在用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理后两小时，EMT标志物被较高剂量的结构(I)的化合物抑制。
然而，如图70中所示，在用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理后二十四小时，EMT标志物不再被抑制。如图71中所示，在用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理后，针对EMT标志物Snail和Slug测量蛋白表达水平，并且蛋白表达水平与mRNA表达水平一致。
实施例30：结构(I)的化合物有效地抑制卵巢肿瘤细胞的迁移。
图72显示AXL激酶抑制剂(结构(I)的化合物的酒石酸盐和BMS-777607)对划痕测定中的卵巢肿瘤细胞的迁移的影响。卵巢肿瘤细胞ES-2用各种剂量的结构(I)的化合物的酒石酸盐或另一种AXL抑制物BMS-777607预处理6小时，然后通过incucyte创口制造机(incucyte wound maker)划痕。划痕后18小时拍摄图片。结构(I)的化合物的酒石酸盐显示ES-2细胞(一种卵巢透明细胞癌细胞系)的迁移的强烈抑制，而另一种AXL抑制剂BMS-777607甚至在10μM下也不抑制迁移。
实施例31：结构(I)的化合物在小鼠卵巢癌异种移植模型中的体内效力
使用鼠ES-2腹膜内异种移植模型测量结构(I)的化合物的酒石酸盐的效力。小鼠用ES-2细胞腹膜内接种，且然后用以下治疗：媒介物(n＝6)、25mg/kg的结构(I)的化合物的酒石酸盐(n＝6)或50mg/kg的结构(I)的化合物的酒石酸盐(n＝5)。
治疗显著抑制腹水发展(腹水体积，媒介物：3.34mL，结构(I)的化合物的酒石酸盐：0.28mL；腹围，媒介物：7.96cm(第15天)，结构(I)的化合物的酒石酸盐：6.82cm(第15天)，p<0.05)。图73显示治疗后(植入后第五天至第十九天)的小鼠的周长以及植入后第20天的每个治疗组中的小鼠的代表性照片。图74显示植入后第五天至第十九天的治疗后的小鼠的体重的图。如图73和图74中可见，在ES-2腹膜内扩散模型中，结构(I)的化合物的酒石酸盐在25mg/kg和50mg/kg时显示效力。
实施例32：用结构(I)的化合物体内治疗后腹水中的细胞因子和趋化因子概况
在用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理ES-2异种移植小鼠后2小时、24小时和2周，测量一组趋化因子和细胞因子。图75显示Proteome Profiler Human Chemokine ArrayKit的成像结果(左小图)和细胞因子/趋化因子与媒介物对照相比的相对定量。如图75中可见，在用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理后，CXCL12和G-CSF降低。
实施例33：用结构(I)的化合物治疗后腹水中的EMT标志物
图76显示用结构(I)的化合物的酒石酸盐治疗后从腹水测定的EMT标志物的mRNA表达水平。从图76中可见，在治疗后，腹水中的EMT标志物未被抑制。事实上，例如，GAS6早在用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理后两小时增加。
实施例34：在用结构(I)的化合物体内治疗后，可溶性因子AXL、GAS6和PD-L1被抑制
图77显示用25mg/kg或50mg/kg的结构(I)的化合物的酒石酸盐治疗后的AXL、GAS6和PD-L1蛋白水平。通过ELISA测定法测量蛋白水平。
从图77中可见，在用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理后，AXL、GAS6和PD-L1被抑制。为了确定AXL、GAS6和PD-L1的受抑制水平是否是由于来自肿瘤细胞的这些因子的抑制，测量每种因子的小鼠表达水平vs.人表达水平。从图78中可见，AXL主要从ES-2细胞(人细胞)释放，而GAS6主要从非癌细胞(鼠细胞)释放。PD-L1从ES-2细胞和非癌细胞等同地释放。
实施例35：60mg/kg的剂量的结构(I)的化合物在小鼠卵巢癌异种移植模型中的体内效力
在ES-2卵巢透明细胞癌细胞系的腹膜内移植模型中测试60mg/kg的结构(I)的化合物的酒石酸盐的体内效力。由于肿瘤细胞对腹膜内膜的转移定植导致的血管通透性是卵巢癌患者中腹水发展的主要原因。该异种移植模型允许评估腹水的发展以及肿瘤细胞的腹膜和肠系膜扩展。
用荧光素酶表达载体pGL4.1(1x10^6个细胞)转染卵巢透明细胞癌ES-2细胞，将其腹膜内注射至BALB/cAnNCrj-nu/nu小鼠中。注射后5天，测量荧光素酶表达，其表明癌细胞在腹膜内生长。随后，将12只小鼠随机分为两组，用于媒介物和60mg/kg的结构(I)的化合物的酒石酸盐。在TPGS缓冲液的媒介物中制备结构(I)的化合物，并通过经口灌胃给予。药物根据‘5天给药，2天停药’时间表提供，持续2个周期。在第14天拍摄小鼠的代表性图像(图79，左上小图)。对于两个治疗组中的小鼠(60mg/kg的结构(I)的化合物的酒石酸盐，vs.媒介物对照)，体重显示于图79、右上小图中；腹围显示于图79、左下小图中；回收的腹水的体积显示于图79、中下小图中；且百分比存活率显示于图79、右下小图中(其另外包括用顺铂、“CDDP”以2.5mg/kg,iv,1/wk治疗的小鼠)。用结构(I)的化合物的酒石酸盐(60mg/kg,PO,qd)治疗显著抑制腹水发展(腹水体积，媒介物3.34mL，结构(I)的化合物的酒石酸盐-0.28mL，腹围，媒介物-6.48cm(第0天)至7.96cm(第15天)，结构(I)的化合物的酒石酸盐6.55cm(第0天)至6.82cm(第15天)，p<0.05)，且没有任何体重减轻。与载体或顺铂、“CDDP”相比，结构(I)的化合物也显著延长总体存活。
实施例36：60mg/kg的剂量的结构(I)的化合物在小鼠卵巢癌异种移植模型中的体内效力
如实施例10中所述，在用ES-2细胞注射后24小时，从腹部收集肿瘤细胞，然后裂解并针对微管蛋白、总AXL和在Y702位点处磷酸化的AXL进行western印迹(图80，左小图)。该图显示治疗组与媒介物治疗组相比的相对AXL磷酸化(图80，右小图)。如图80中所示，60mg/kg的剂量的结构(I)的化合物的酒石酸盐在24小时时降低从腹部收集的肿瘤细胞中的p-AXL(Y702)/AXL的比率。这些结果表明，结构(I)的化合物的酒石酸盐直接阻断转移的卵巢癌细胞的生长。
实施例37：OVCAR3肿瘤腹水模型开发
该研究中采用的卵巢癌诱导的腹水的OVCAR-3模型改编自以下参考文献：Hamilton等人.1984.Can Res.；Hu等人.2002.Am J Pathol。简而言之，向小鼠注射1x107个OVCAR3细胞/小鼠。一旦皮下肿瘤在注射部位处已开始发展，定期监测腹围。图81显示荷瘤小鼠vs.非荷瘤小鼠的腹围(左小图)和体重(右小图)。图82显示研究中治疗的小鼠的腹水体积和代表性照片，其中左侧显示非荷瘤小鼠，且右侧显示荷瘤小鼠。用OVCAR3细胞的腹膜内注射，小鼠表现出增加的腹围和增加的腹水体积。
实施例38：结构(I)的化合物在腹膜内异种移植模型中的体外细胞毒性和体内效力
在A2780cis细胞的增殖测定中测试体外细胞毒性。通过CellTiter-Glo测定法评估细胞活力。在处理后三天用各种剂量的结构(I)的化合物的酒石酸盐处理细胞的结果显示于图83中。
在A2780cis卵巢癌细胞系的腹膜内移植模型中，测试媒介物(n＝8)、15mg/kg(n＝8)和30mg/kg(n＝8)的结构(I)的化合物的酒石酸盐和CDDP 5mg/kg(n＝8)的体内效力。将卵巢癌A2780cis细胞(1x10^7/小鼠)腹膜内注射至小鼠中。植入后五天，除CDDP外的药物每天一次口服施用，并且CDDP每周一次腹膜内施用。图84显示植入后第5-25天的小鼠的周长，且图85显示其体重。图86显示治疗后第25天研究中的小鼠的代表性照片，媒介物治疗的小鼠在左侧，且用30mg/kg的结构(I)的化合物的酒石酸盐治疗的小鼠在右侧。
在最终施用结构(I)的化合物的酒石酸盐后4小时，对肿瘤进行裂解，并提取mRNA和蛋白。通过RT-qPCR分析肿瘤中的基因表达水平(n＝7-8)。通过GAPDH的表达归一化的CYP26A1、Snail、Slug、Twist、Axl、GAS6、CDH1、CDH2和ZEB1的表达显示于图87中。
如图88中所示，用结构(I)的化合物的酒石酸盐治疗后，Snail和β-肌动蛋白的蛋白表达水平通过western印迹分析测量为负载对照。每组合并样品(n＝7-8)。
在最终施用结构(I)的化合物的酒石酸盐后4小时收集血清。血清中的人Axl表达通过ELISA测定，如图89中所示。
实施例39：在OVCAR3肿瘤腹水模型中测试结构(I)的化合物的效力
在用OVCAR3细胞腹膜内接种后，用结构(I)的化合物的酒石酸盐(例如，n＝6)或媒介物对照(例如，n＝6)治疗小鼠，并测量每只小鼠的腹围和体重以测定结构(I)的化合物的酒石酸盐的效力。还从两个治疗组中的小鼠测量可溶性AXL、GAS6和PD-L1水平。
实施例40：化合物1的合成
化合物1通过使用上述条件使化合物1-A与1-B反应而合成。然后，使用所示的反应条件，使化合物1-C与化合物1-D反应，以得到产物1-E。然后，使用合适的酸性条件(例如，二氧杂环己烷中的TFA或HCl)除去胺保护基团。根据需要使用标准技术(例如，硅胶色谱或制备型-HPLC)进行纯化。
实施例41：化合物2的合成
化合物2通过使用上述条件使化合物2-A与2-B反应而合成。然后，化合物2-C与化合物2-D在所示的反应条件下反应，得到期望的产物(化合物2)。根据需要使用标准技术(例如，硅胶色谱或制备型-HPLC)进行纯化。
实施例42：化合物3的合成
化合物3通过使用上述条件使化合物3-A与3-B反应而合成。然后，使用所示的反应条件，使化合物3-C与化合物3-D反应，以得到产物3-E。然后，使用合适的酸性条件(例如，二氧杂环己烷中的TFA或HCl)除去胺保护基团，以得到化合物3。根据需要使用标准技术(例如，硅胶色谱或制备型-HPLC)进行纯化。
实施例43：化合物5的合成
化合物4-A用
(即过氧单硫酸氢钾)处理，并在酸性条件(例如，TFA)下脱保护。脱保护的产物4-B然后经由还原胺化与醛4-C偶联，以得到期望的产物4-D。然后将化合物4-D脱保护，以得到如上所示的化合物4-I。
平行地，使用上述条件，使化合物4-F与4-G反应。然后，使化合物4-H与如上所述制备的化合物4-I反应，以得到期望的产物化合物5。根据需要使用标准技术(例如，硅胶色谱或制备型-HPLC)进行纯化。
实施例44：化合物IV代谢物PK数据
从用结构(IV)的化合物给药的受试者获得的代表性实例呈现于图90-92中(16mg/m2)。数据显示结构(VI)的化合物和两种代谢物化合物(即，化合物2和3)的浓度。在给药的第一天(D1)和在第21天(D21)收集数据。
如图90中所示，在该受试者中，观察到化合物2和化合物3，其与结构(IV)的化合物的相对浓度水平分别为近似1:1和1:10。如图91中所示，在该受试者中，观察到化合物2和化合物3，其与结构(IV)的化合物的相对浓度水平分别为近似1:2和1:4。如图92中所示，在该受试者中，观察到化合物2和化合物3，其与结构(IV)的化合物的相对浓度水平分别为近似1:1和1:3。
此外，在Tmax累积和清除的方面，化合物2和化合物3的总体药代动力学概况与结构(VI)的化合物相似。
从初始时间点直至最后时间点的平均曲线下面积(AUC)显示于图93中。代谢物(化合物2和3)的AUC值比单独的化合物VI高2-3倍。到第21天，AUC值按比例较高(高近似4倍)。
实施例46：结构(I)的化合物在狗中的心血管安全性评价
本实施例报告了当向狗连续28天口服施用时结构(I)的化合物的酒石酸盐的潜在毒性和毒物动力学以及在14天无治疗恢复期后任何效果的进展或消退的研究。
在治疗前时段期间和给药的第27天在给药后约1.5小时；接近Tmax(2小时±30分钟)，对所有动物一次获得心电图(6肢引线)。针对指示心脏电异常的总体变化评价追踪。还评估心率(引线II)、节奏或传导异常。针对HR、节律、P波持续时间、QRS持续时间、PR间隔和QT持续时间评估每个ECG。在额平面引线中针对总体异常评估QRS复合物的形态。心电图由委员会认证的兽医心脏病专家进行评估。
在与ECG近似同时使用无创技术记录血压(BP)，并且其包括心率和收缩/舒张BP。
所有组的心率、PR间隔、P波持续时间和QRS持续时间都在正常限值内，并且在不同时间点在各组间没有显著差异。所有组和所有时间点的QT间隔都在正常限值内。高剂量组中的研究前HR与所有其他组相比显著更低，并且被视为偶然发现。在不同组中在不同时间点均未注意到心律失常。
实施例47：额外的临床前研究；结构(I)的化合物的安全药理学和动物毒性/药代动力学
体内药效动力学和生物标志物研究
为了确定生物标志物的体内移动，在来自用结构(I)的化合物的酒石酸盐处理的小鼠的肿瘤中测量CYP26A1水平。在化合物(180mg/kg)的单一口服剂量后6或24小时，从携带皮下异种移植的MV4-11肿瘤的无胸腺裸小鼠移取肿瘤组织。通过免疫组织化学(IHC)以及通过RT-qPCR评价来测量CYP26A1水平。结果显示，结构(I)的化合物在体内削弱AXL-相关的生物标志物。
安全药理学
进行多种测定法以评价结构(I)的化合物的酒石酸盐对hERG活性的潜在影响。
(i)对hERG通道功能的影响
使用PredictorTMhERG荧光偏振测定法(Invitrogen)评估与hERG通道的生物化学结合。结果显示，结构(I)的化合物的酒石酸盐是hERG活性的弱生物化学抑制剂，表现出大于1μM的IC50。另外，还进行3次分开的hERG膜片钳实验，2次使用HEK-293细胞，且1次使用CHO细胞。来自基于细胞的研究号191081的数据表明，1μM的结构(I)的化合物的酒石酸盐在转染的HEK-293细胞中使hERG活性抑制大于50％。然而，在HEK-293和CHO细胞两者中进行的2次其他膜片钳测定的数据与来自无细胞生物化学筛选的数据更一致，得出结论：在低于1μM的结构(I)的化合物的酒石酸盐时，hERG抑制不是显著的(>50％)。
(ii)受体组筛选
通过由Cerep提供的安全相关受体和酶的“安全性44组”筛选结构(I)的化合物的酒石酸盐。结构(I)的化合物当在以10μM测试的最高剂量筛选时仅抑制这些测定法中的15种。基于动物药代动力学数据、动物效力模型和毒理学数据，在动物中未达到10μM浓度，并且预期其在未来的人研究中没有达到。因此，在结构(I)的化合物的未来测试中，没有预期非靶标受体抑制导致严重的毒性问题。
(iii)狗中的心血管安全性评价
实施研究，以检查当连续28天向狗口服施用时结构(I)的化合物的酒石酸盐的潜在毒性和毒物动力学以及14天无治疗恢复期后任何效果的进展或消退。
在治疗前时段期间和给药的第27天在给药后近似1.5小时；接近到Cmax的时间(峰值时间)(Tmax)(2小时±30分钟)，对所有动物一次获得心电图(ECG)(6肢引线)。针对指示心脏电异常的总体变化评价追踪。还评估心率(引线II)、节奏或传导异常。针对HR、节律、P波持续时间、QRS持续时间、PR间隔和QT持续时间评估每个ECG。在额平面引线中针对总体异常评估QRS复合物的形态。ECG由委员会认证的兽医心脏病专家进行评估。
在与ECG近似同时使用无创技术记录血压(BP)，并且其包括心率和收缩/舒张BP。
所有组的HR、PR间隔、P波持续时间和QRS持续时间都在正常限值内，并且在不同时间点在各组间没有显著差异。所有组和所有时间点的QT间隔都在正常限值内。高剂量组中的研究前HR与所有其他组相比显著更低，并且被视为偶然发现。在不同组中在不同时间点均未注意到心律失常。
非临床吸收、分布、代谢和***研究
(i)药物转运体效应
使用Caco-2细胞的汇合单层，以基于96-孔的形式，在双向细胞渗透测定中测试结构(I)的化合物的酒石酸盐。非诺特罗、心得安和地高辛用作对照。结构(I)的化合物的酒石酸盐的流出比(平均表观渗透率[Papp]A:B/平均Papp B:A)被确定为1.49。尽管质量回收率较低，但该数据表明，结构(I)的化合物不是P-糖蛋白的底物，并且是中等渗透率的化合物。
(ii)CYP450效应
在NADPH存在的情况下，使用人肝微粒体针对人细胞色素P450(CYP)同工酶的抑制评估结构(I)的化合物的酒石酸盐。在选择用于测试的同工酶中，在10μM，结构(I)的化合物的酒石酸盐仅使同种型2C19的活性抑制超过50％。针对组中使用的所有CYP同工酶测定IC50值，并且与百分比抑制数据一致，在低于10μM(IC50 4.4μM)的浓度下，只有2C19被抑制。
(iii)肝微粒体稳定性研究
测定结构(I)的化合物的酒石酸盐在来自3种物种(人、大鼠和狗)的分离的微粒体存在的情况下的稳定性。参考标准曲线，通过液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测量结构(I)的化合物的酒石酸盐的浓度。结构(I)的化合物的酒石酸盐的t1/2范围为人中的4.3分钟至狗中的4.9分钟。
(iv)血清白蛋白结合
在基于透析板的测定中，使用人血浆测定结构(I)的化合物的酒石酸盐的化合物的血清白蛋白结合水平。通过参考标准曲线，通过LC-MS/MS测量结构(I)的化合物的酒石酸盐的游离分数，并且使用华法林作为对照。数据显示，结构(I)的化合物具有适度的人血清白蛋白结合(7％未结合)。蛋白结合药物的回收率(80.3％)表明结合是可逆的。
(v)结构(I)的化合物的pKa
通过使用紫外度量检测的滴定来测定结构(I)的化合物的酒石酸盐的pKa值。在水性缓冲液中且分别在2种共溶剂(80％甲醇和60％DMSO)存在的情况下测定pKa。最终的pKa值被计算为在不同溶剂条件下获得的3个值的平均值，除了pKa 3，对其不包括在DMSO中测定的pKa值。pKa1、pKa2和pKa3的最终pKa值分别为3.02、3.96和7.81。
(vi)结构(I)的化合物的pH依赖性溶解度
在以下介质中测定结构(I)的化合物的平衡溶解度：pH 3.5、4.5、5.5、6.5USP缓冲液、0.1N HCl、SGF、禁食状态模拟肠液和进食状态模拟肠液。如所预期，基于pKa测定，结构(I)的化合物的酒石酸盐在酸性介质中显示最大的溶解度。
动物毒理学和药代动力学
(i)具有单次和重复剂量PK的结构(I)的化合物在大鼠中的7天重复口服剂量范围-发现研究
在大鼠中进行具有单次和重复剂量药代动力学(PK)的结构(I)的化合物的酒石酸盐的7天重复口服剂量范围-发现研究。4只雄性大鼠和4只雌性大鼠的组每天一次通过经口灌胃接受溶解于1％Tween 80/5％D-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯(TPGS)/水(v/v/v)中的2、4或8mg/kg的结构(I)的化合物的酒石酸盐，连续7天，随后为7天观察期。
所有生成的数据、临床观察、体重、体重变化、食物消耗、临床病理学评估、总体尸检和器官重量的分析揭示，持续7天每天一次口服施用2和4mg/kg/天的结构(I)的化合物的酒石酸盐的剂量水平在雄性大鼠和雌性大鼠两者中均被良好耐受。血浆水平和暴露量(基于0至12小时的血浆浓度曲线下面积[AUC](AUC0-12)揭示，在以2和4mg/kg/天单次、3天和7天给药后随着剂量的线性增加，其中雌性中的暴露量高于雄性，且血浆水平在治疗期间没有变化。
在8mg/kg的剂量下，雄性大鼠良好耐受结构(I)的化合物的酒石酸盐的7天重复剂量，并且结构(I)的化合物的酒石酸盐的血浆浓度在治疗期间没有变化。相比之下，用8mg/kg/天的结构(I)的化合物的酒石酸盐口服治疗的雌性大鼠显示治疗相关的毒性，包括减少的食物消耗、体重减轻、苍白色、腹泻和黑便。在治疗结束时，最常见的血液学发现是与严重中性白细胞减少症相关的白血细胞的减少。在第8天垂死处死的雌性大鼠的总体尸检中的主要发现是脾脏增大、肾苍白色和骨髓以及腹部脂肪和肌肉质量的减少(恶病质)。在雌性大鼠中，8mg/kg的剂量的结构(I)的化合物的酒石酸盐的血浆浓度与雄性大鼠相比更高，并且在第7天比第3天高得多，指示剂量累积效应。
结构(I)的化合物的酒石酸盐的药代动力学研究揭示，在所有剂量和数天给药间的快速吸收，在雄性和雌性大鼠之间的Tmax值相似，范围为0.5-2.0小时。从时间0至最后浓度时的血浆AUC的量级(AUC0-T最后)展示性别差异，在雌性中与雄性相比高近似1.5-2倍，唯一的例外是给药7天后的高剂量雌性，其中AUC0-T最后高5.8倍。随着给药天数的增加，观察到的最大血浆浓度(Cmax)和AUC0-T最后略微下降，除了高剂量雌性，其中AUC0-T最后从第1天至第3天没有变化，并且从第3天至第7天增加近似2倍。在单次给药和给药3天后，对于雄性大鼠和雌性大鼠两者，AUC0-12在各剂量之间以线性方式增加。在给药的第七天，在雌性大鼠中，增加的剂量和AUC0-12之间的关系偏离线性，这是由于比高剂量AUC0-12的预期增加更高，表明存在结构(I)的化合物的剂量累积。
(ii)结构(I)的化合物在大鼠中的28天重复口服剂量毒性和毒物动力学研究
评估结构(I)的化合物的酒石酸盐当持续28天向大鼠每天口服施用时的潜在毒性和毒物动力学。10只雄性大鼠和10只雌性大鼠的组每天一次通过经口灌胃接受溶解于1％Tween 80/5％TPGS/水(v/v/v)中的0.5、2或4mg/kg/天的结构(I)的化合物的酒石酸盐，连续28天。对照组(10只雄性/10只雌性)仅用媒介物给药。在对照组中和在以2和4mg/kg/天给药的大鼠中，在额外的14天无治疗期期间，评估任何效果的进展或消退。
在对照组中，在28天给药期间或14天无治疗期间未记录到治疗相关的观察。高剂量组中的雄性大鼠的平均体重和平均体重增加在治疗结束时显著降低；然而，在该组的雌性中未观察到这一点。
血液学评估中的主要毒理相关性发现是高剂量组中的网织红细胞计数的轻微减少，这可能反映红细胞生成减少。该发现似乎是短暂的，因为高剂量恢复组中的网织红细胞计数与对照组相当。凝血、血清化学和尿分析评估没有揭示任何测试项目治疗相关的发现。
口服施用后，结构(I)的化合物被迅速吸收，其中在雄性和雌性两者中的大多数Tmax值在1-2小时之间。在给药的第1天、第15天和第28天没有观察到剂量累积的证据。雌性在所有剂量和所有给药日的Cmax值都高于雄性，但Tmax值没有差异，并且雌性中的较高的Cmax值与临床、临床病理学和解剖-组织病理学发现的差异无关。从2和4mg/kg的剂量组的现有数据确定的消除半衰期(t1/2(e))范围为2.3-8.9小时，并且在两种性别中均相似。结构(I)的化合物表现出大体积的分布，表明大组织分布。
在治疗结束和恢复期进行的总体尸检检查中，没有观察到毒性相关性的总体发现。在器官重量评估中唯一可能毒理学相关性的发现是，用测试项目给药的雄性大鼠中的甲状腺与甲状旁腺重量较低；然而，在甲状腺和甲状旁腺的组织病理学中没有异常发现。
高剂量组大鼠的组织病理学中发现的异常包括5只动物中的肠系膜***中的小的急性出血，以及3只对照和7只高剂量动物的胰腺中的局部炎性浸润物和/或局部小叶萎缩。这些发现不明确，并且无法确定它们是否与测试项目处理相关。尽管暴露于测试项目对高剂量组中的雄性大鼠的体重具有剂量相关的影响，并且与雄性和雌性中的红细胞生成的短暂轻微减少相关，但潜在的作用机制从组织病理学评估不是显而易见的。在高剂量和对照组中，在脾和骨髓组织中评估的造血作用是相似的。
基于生成的所有数据，包括临床观察、体重、食物消耗、检眼镜检查、临床病理学、毒物动力学、总体病理学和组织病理学，在大鼠中重复口服给药28天后的结构(I)的化合物的酒石酸盐的无观察不良反应水平(NOAEL)被确定为2mg/kg/天。
(iii)结构(I)的化合物在狗中的单次口服剂量和7天重复口服剂量毒性和药代动力学研究
在Beagle狗中，该研究通过单次口服剂量(部分A)确立剂量水平，并且重复口服给药7天后，测定溶解于1％Tween 80和5％维生素-E TPGS/水中的结构(I)的化合物的酒石酸盐的毒性和PK(部分B)。禁食过夜后，经由胃管以2mL/kg的剂量体积施用剂量。给药后近似1小时提供食物。
三组狗(每组由1只雄性和1只雌性组成)接受0.25、0.5或1mg/kg的剂量的单一的结构(I)的化合物(酒石酸盐)，并且观察14天(部分A)。在高剂量(1mg/kg)雄性狗中在给药后近似30分钟观察到流涎。在高剂量雌性狗中在给药后近似60分钟观察到呕吐。所有狗都完成治疗期，并且在安排的观察期后存活。在血液学和血清化学评估中没有看到其他毒理学相关性观察。
在研究的部分B中，3组狗(每组由2只雄性和2只雌性组成)连续7天以0.25、0.75或1.25mg/kg/天的剂量接受结构(I)的化合物的酒石酸盐，随后为7天观察期。由1只雄性和1只雌性组成的对照组仅接受媒介物。
所有狗都完成治疗和观察期，并且存活至安排的尸检。所有生成的数据(包括临床观察、体重、食物消耗、临床病理学、总体尸检和器官重量)的分析揭示，在用最高达1.25mg/kg/天的结构(I)的化合物的酒石酸盐口服治疗7天的狗中，没有测试物品治疗相关的显著毒性。在临床上，结构(I)的化合物的酒石酸盐在0.25mg/kg/天的初始剂量水平且直至1.25mg/kg/天引起呕吐。
结构(I)的化合物的酒石酸盐的药代动力学研究揭示，在所有剂量和数天给药间的快速吸收，其中雄狗和雌狗之间的Tmax值是类似的，范围为0.5-6.0小时。血浆AUC0-T最后的量级没有展示性别差异。口服t(1/2)e和平均停留时间(MRT)值在给药7天后稍微更长。AUC0-T最后在性别间且在单次给药和7天给药后随着剂量线性增加。在采用的剂量下，在重复给药7天后，Beagle狗中几乎没有结构(I)的化合物的剂量累积的证据。
(iv)结构(I)的化合物在狗中的七天、每日三次、重复口服剂量毒性和药代动力学研究
该研究评估结构(I)的化合物的酒石酸盐在狗中7天的每天3次、重复口服给药后的毒性和药代动力学。该研究在7天重复给药、每天一次重复剂量研究后进行，以支持结构(I)的化合物的酒石酸盐在狗中的MTD的测定。
为了在高剂量水平下实现充分的全身性暴露，2组2只雌性用3或6mg/kg/天(1或2mg/kg/剂量)的剂量水平用并入明胶胶囊中的结构(I)的化合物的酒石酸盐给药。
在3mg/kg/天剂量组中，两只狗在大部分给药日均具有呕吐，其中呕吐时间范围为给药后近似15分钟至2或6小时。从第3天或第7天至第14天观察到软便或腹泻。所述狗之一经7天治疗期具有1.1kg体重减轻，并且在7天恢复期期间开始重新增加体重，增加400g。另一只狗经7天和14天时段分别增加300和600克体重。
6mg/kg/天(2mg/kg/剂量×3天)剂量组中的两只狗在治疗期早期显示各种毒性体征。临床体征的严重程度增加，并且在每次后续剂量后，狗的健康状况恶化。临床症状主要由以下组成：呕吐、腹泻、消瘦、厌食、脱水、冷漠和体重减轻。由于健康恶化，该组中的2只狗仅在第4天一天两次给药，并且在第5天和第6天省略给药，但在第7天向狗给药用于PK评估。在治疗结束后，动物的状况继续恶化，并且其状况没有改善，尽管在第9天提供用液体疗法的支持。在第10天早上，一只狗被发现死亡，并且第二只狗在该同一天在垂死状况下被安乐死。
在第8天以6mg/kg/天给药的狗中的临床病理学结果显示，在所述狗之一中，白血细胞(WBC)、红血细胞(RBC)和中性粒细胞略微增加；血细胞比容和血红蛋白值增加；以及网织红细胞计数减少。在另一只狗中，WBC、RBC、中性粒细胞、单核细胞和嗜碱性粒细胞增加；血细胞比容和血红蛋白值增加；以及网织红细胞计数和血小板减少。在第8天以3mg/kg/天给药的狗中，所有血液学参数都在狗的正常范围内。第二只狗中，RBC计数略微增加；血细胞比容和血红蛋白值增加；并且网织红细胞计数，尽管在正常范围内，但与处理前计数相比减少。
在第14天，血液学结果在正常参考范围内，除了该组的狗之一中，网织红细胞计数略微增加。在以3mg/kg/天给药的狗中受影响的唯一血清化学参数是所述狗之一中的ALT升高(几乎是正常上限的两倍)和两只狗中的甘油三酯升高。
药代动力学分析揭示，如通过从时间0至无限的AUC(AUC0-inf)所测量的结构(I)的化合物的酒石酸盐的血浆暴露不是剂量成比例的，并且在第三次给药后的第7天与第1天相比更高，并且甚至对于6mg/kg/天剂量与3mg/kg/天剂量相比更是如此。尽管发生呕吐且以6mg/kg/天剂量的给药部分停止，但仍进行这些观察，表明在连续天数的给药后可能存在剂量-累积的趋势。Cmax值受影响最小，而Tmax值在6mg/kg/天剂量时更长。随着给药天数的增加，t(1/2)e和MRT值两者均略微更长，表明连续数天给药的结构(I)的化合物的清除机制的变化。
对未安排处死且在第10天发现死亡的狗进行尸检。在尸检中，在1只狗中观察到恶病质和暗黄色以及水样的下肠内容物。在另一只狗中，观察到恶病质、胃腺部的充血；出血性下肠和直肠；下肠内容物的深红黑色；以及肾的皮质和髓质中的充血。
在每天3次(3mg/kg/天)给药1mg/kg/剂量后，达到结构(I)的化合物的酒石酸盐的MTD，并且狗在停止治疗1周内恢复良好。
(v)结构(I)的化合物在Beagle狗中的28天重复口服剂量毒性研究，随后为14天恢复期
该研究检查当连续28天向狗口服施用时结构(I)的化合物的酒石酸盐的潜在毒性和毒物动力学。还评价14天无治疗恢复期后任何效果的进展或消退。两组狗(3只雄性/3只雌性)以以下剂量水平用明胶胶囊并入的结构(I)的化合物的酒石酸盐给药：0.1、0.5mg/kg/天，持续28天；并且另一组在最初14天以1mg/kg/天给药，随后对于治疗期的剩余14天以2mg/kg/天给药。在研究中包括狗的对照组，并用空明胶胶囊给药。
所有狗都完成28天治疗期，并存活，直至安排的尸检终止。高剂量组中在治疗期期间注意到的临床症状包括呕吐、流涎、腹泻和/或软便。呕吐影响高剂量组中的所有狗，并且在中剂量组中的一些狗中观察到。在1只雄性和1只雌性中观察到食物消耗减少；而在治疗的第3周和/或第4周期间以及在剂量从1mg/kg增加至2mg/kg后，在高剂量组中的5只雄性中的1只以及5只雌性中的2只中观察到重量减轻。在恢复期结束时未观察到这些体征。
在任何动物中在治疗结束时没有检眼镜检查发现。临床病理学数据(血液学、凝血、血清化学和尿分析)的评估没有揭示可明确归因于测试项目的任何发现。结构(I)的化合物导致血浆浓度的剂量依赖性增加。在以0.1mg/kg给药后，在一些血浆样品中定量结构(I)的化合物，然而，大多数血浆浓度低于定量下限(0.2ng/mL)。鉴于最低剂量下的低血浆水平，口服给药后结构(I)的化合物的血浆浓度的剂量比例性和线性不能很好地表征。然而，中和高剂量的比较表明，雄性狗和雌性狗中的血浆浓度近似以剂量成比例的方式增加。在中和高剂量两者下，结构(I)的化合物的所有给药前水平均低于定量限值，并且对于高剂量，所有给药天数的消除半衰期是相似的，表明缺乏剂量累积。毒物动力学数据的分析揭示由大体积分布引起的结构(I)的化合物在血浆中的高清除率，表明结构(I)的化合物的酒石酸盐在组织中良好分布。
在高剂量组中的一些动物中观察到的总体病理学发现包括3只动物的结肠和1只动物的盲肠中的出血，以及1只狗中的幽门中的充血和另一只狗中的直肠中的充血。出血可能是致命的，但可能表明最近对粘膜的损伤。在高和中剂量组中的恢复动物中未观察到总体发现。
对照组和测试项目组(两种性别)之间的绝对和相对器官重量无明显差异，除了少数偶然的显著差异：低剂量雄性中的甲状腺与甲状旁腺的平均重量较高，以及第4组雌性中的子宫尺寸的平均重量增加，这是由于具有子宫内膜肥大的生理黄体期。
可能具有毒理学意义的组织病理学发现包括胸腺和下胃肠道组织中的变化：
·治疗期结束时，在6只高剂量动物中的3只、6只中剂量动物中的3只、6只低剂量动物中的1只、和6只对照动物中的1只中发现胸腺萎缩。在恢复期结束时，在高和中剂量组两者中的4只狗中的2只中也注意到该发现。胸腺萎缩是对压力的生理应答，以及年幼狗中在性成熟发生左右的预期发现，因此这些发现被认为是非特异性的，并且与治疗相关的胃肠效应间接相关。
·在治疗期结束时，在1只中剂量狗、4只高剂量狗和对照组中的1只狗中观察到小肠中的最小或轻微程度的粘膜损伤和炎症。在恢复期结束时，1只对照狗、1只中剂量狗和2只高剂量狗具有类似的轻微残余变化。在14天恢复期结束时，与高剂量方案相关的小肠粘膜损伤被认为已恢复至背景水平。
·在治疗期结束时，在高剂量组中的四只动物中组织学观察到结肠粘膜中的最小或轻微程度的粘膜损伤和炎症。这些应答的特征在于少数腺体中的细胞碎片量增加，伴有斑片状中性粒细胞浸润物或固有层中的出血的焦点区域。一只对照动物对结肠腺的损伤也很小，而没有炎症或出血。在中剂量组的任何动物的大肠中没有观察到类似的发现。在一只高剂量狗中的康复期结束时，观察到结肠粘膜腺的最小消退。
临床观察、体重评价、食物消耗、眼科学、ECG、临床病理学、总体尸检和器官重量的评估没有揭示以0.1mg/kg/天给药的狗中的临床或毒理学相关性的任何发现。除呕吐外，在用结构(I)的化合物的酒石酸盐以0.5mg/kg/天给药的狗中未发现其他具有毒理学意义的不利发现。催吐效应是在用激酶抑制剂药物给药的狗中观察到的常见发现，并且可能部分归因于该物种对该类药物的敏感性较高。
持续14天以1mg/kg/天的剂量施用结构(I)的化合物的酒石酸盐，随后持续持续14天以2mg/kg/天的剂量施用结构(I)的化合物的酒石酸盐，大部分被该研究中使用的年幼雄性和雌性Beagle狗良好的耐受。呕吐是该剂量组中发生的最明显的不良作用，并且在剂量增加至2mg/kg后更明显。在治疗的第三周和/或第四周期间观察到其他临床体征，包括流涎、腹泻或软便以及体重增加减少。在停止治疗后，在恢复动物中没有观察到临床体征。组织病理学发现表明，潜在的毒性靶标器官是下消化道和胸腺。在治疗期结束后，在恢复动物中没有观察到临床体征或组织病理学发现，除了胸腺萎缩，其被认为是压力相关的非特异性应答，并且可能已经在治疗期期间发生。
实施例48：具有晚期实体肿瘤的患者中的1a/1b期剂量递增、安全性、药效动力学研究
该研究登记足够数量的患者，以在研究的1a期部分(近似40个患者)中且然后在1b期部分(在MTD和活检群组的扩展)的最多达100个额外患者中建立结构(I)的化合物的酒石酸盐的最大耐受剂量(MTD)。登记的患者在28天中的前21天接受每天一次施用的本文公开的研究药物。成功完成4周治疗周期而无明显治疗相关毒性或疾病进展的证据的患者继续接受用相同剂量和给药时间表的治疗。
该研究确定在具有晚期实体肿瘤的患者中在一定范围剂量内每4周前21天每天口服施用研究药物的MTD和DLT，建立口服施用的药代动力学，和/或通过客观的放射影像学评价观察患者的研究药物的抗肿瘤活性。例如，疗法的药效动力学包括评价肿瘤组织、外周血单核细胞(PBMC)、血浆和血清中的生物标志物，并通过如下确定(在MTD治疗的患者中)AXL去调节(deregulation)的体内标志物：评估具有容易接近的低风险肿瘤(如通过局部介入放射学所定义)的患者中的肿瘤活检，和/或使用免疫组织化学(IHC)、流式细胞术或其他分子方法评价免疫功能和/或应答。
研究药物
结构(I)的化合物是一种新型口服抑制剂，其靶向AXL激酶并逆转与晚期癌症相关的间充质表型。临床前研究已经显示，在体外和体内研究两者中，结构(I)的化合物作为针对各种肿瘤类型的单一药剂的有希望的抗肿瘤活性。在具有难治性实体肿瘤的患者中进行用结构(I)的化合物的这种首次人体中的1a/1b期研究。1a期研究被设计为鉴定最大耐受剂量(MTD)和鉴定结构(I)的化合物的安全性概况和推荐的2期剂量(RP2D)。一旦已经确立MTD，在1b期研究中在MTD登记5个额外的最多达20个患者的群组，其各自具有特定肿瘤类型(总共最多达100个额外患者)。当将结构(I)的化合物施用于特定组的深度预处理患者或与免疫疗法或酪氨酸激酶抑制剂(TKI)组合给予时，从这些额外群组各自中登记的患者收集的数据用于证实安全性、探索潜在的生物标志物和评估潜在的活性信号。结构(I)的化合物持续21天每天一次口服施用，随后为7天无药期。在一些情况下，如果患者继续显示益处且如果结构(I)的化合物被合理地良好耐受，则重复28天周期。
在该临床研究中研究两种原料药，结构(I)的化合物的单酒石酸盐和结构(I)的化合物的二酒石酸盐(形式A；“研究药物”)。已经选择来自对结构(I)的化合物原料药的额外开发工作(包括测试多种酒石酸盐多晶型形式的溶解度、稳定性、制备后的重现性和其他物理属性，以及毒理学和药代动力学(参见实施例23-27)，原料药的二酒石酸盐形式，即形式A)的结果，用于进一步的临床使用(“研究药物”)。与结构(I)的化合物的先前临床形式(形式B)中使用的原料药相比，测试的多晶型形式都表现出类似的溶解度、毒性和药代动力学特征。选择的结构(I)的化合物的二酒石酸盐形式基于与当前临床形式相比的再现性。
两种原料药形式的重要化学特性的概述呈现于表18中。
表18.临床原料药形式的命名和显著化学特征(形式B和形式A)
研究药物作为硬明胶胶囊(对于1-、4-、16-和25-mg剂量，尺寸#3胶囊；对于100-mg剂量，尺寸#0)中的粉末以口服形式提供，并根据当前良好生产规范(cGMP)制造，用于研究用途。
研究药物胶囊以1-mg、4-mg、16-mg、25-mg和100mg强度配制，并包装至具有聚酯线圈作为顶部空间填充剂的圆形高密度聚乙烯瓶中。然后对瓶进行热密封，装上儿童安全帽，并置于低密度聚乙烯袋中作为二次包装。
临床结果
来自使用结构(I)的化合物的形式B以前3个剂量水平治疗的9个患者的药代动力学数据表明，在第1周期期间，第21天的结构(I)的化合物的Cmax和AUC高于第1天，表明研究药物积累。另外，9个患者中的8个中，在第21天给药前可检测到结构(I)的化合物。为了进一步表征结构(I)的化合物的给药前水平，在第1周期的第8天和第15天；第2周期的第1天、第8天、第15天和第21天；和第3周期的第1天，在给药前收集额外的PK样品。
已收集数据以支持结构(I)的化合物的目标水平。目前，给药基于标准mg/m2方法。或者，可以使用平坦的给药。与BSA-依赖性给药相比，当采用平坦给药时，药物暴露中的患者间差异可能较小。平坦给药在MTD开始。平均剂量基于MTD扩展安全群组中施用的剂量进行计算。
临床前研究表明，骨髓、胃肠道和胸腺可能是潜在的毒性目标器官。在大鼠中，网织红细胞计数减少；然而，在狗中没有观察到这些发现。在狗中，在小肠和结肠粘膜中注意到最小至轻微的粘膜损伤以及炎症。在狗中也注意到胸腺萎缩。除呕吐外，在狗中未观察到其他严重的不利影响。临床前GLP毒理学研究表明，观察到的毒性在14天的恢复期后是可逆的，除了胸腺萎缩。
在该研究中，超过7个不同剂量群组的患者(参见，例如，下表19)已经用结构(I)的化合物的酒石酸盐(形式B)治疗。未报告剂量限制毒性。在一个患者中发生的美国国家癌症研究所不良事件通用术语标准(CTCAE)3级和4级事件各自包括贫血、低钙血症、低钾血症、低钠血症、胸腔积液、***、腹水、高钾血症、高血压、细菌性腹膜炎、坐骨神经痛和晕厥。这些事件无一被视为研究药物相关的。最常见的1级和2级不良事件(即，在≥3个患者中发生的那些，各自[13％])包括恶心、呕吐、疲劳、贫血、腹泻、低白蛋白血症、食欲下降、低镁血症、心动过速和血小板减少。在≥3个患者各自(13％)中发生且被判断为至少可能与结构(I)的化合物相关的1级和2级不良事件包括腹泻、恶心、呕吐、味觉障碍和血小板减少。研究中不存在被认为与研究药物相关的严重不良事件或死亡。
表19.研究中疾病稳定至少4个周期的患者
未报告剂量限制毒性(DLT)。在一个患者中发生的美国国家癌症研究所不良事件通用术语标准(CTCAE)3级和4级事件各自包括贫血、低钙血症、低钾血症、低钠血症、胸腔积液、***、腹水、高钾血症、高血压、细菌性腹膜炎、坐骨神经痛和晕厥。这些事件无一被视为研究药物相关的。最常见的1级和2级不良事件(即，在≥3个患者中发生的那些，各自[13％])包括恶心、呕吐、疲劳、贫血、腹泻、低白蛋白血症、食欲下降、低镁血症、心动过速和血小板减少。在≥3个患者各自(13％)中发生且被判断为至少可能与结构(I)的化合物相关的1级和2级不良事件包括腹泻、恶心、呕吐、味觉障碍和血小板减少。研究中不存在被认为与研究药物相关的严重不良事件或死亡。
研究设计
这是1a/1b期、开放标签、剂量递增、安全性、药代动力学和药效动力学研究。
(i)1a期-剂量递增
使用标准3+3设计，28天中的21天的起始药物剂量为1.5mg/m2。三(3)个患者的连续群组用递增的剂量治疗，直至确立MTD。在无剂量限制毒性的情况下，使用修改的Fibonacci剂量递增方案增加剂量。
如果患者经历DLT，则在该剂量水平下治疗最多达三个额外患者。如果在扩展的6个患者群组中未观察到额外的DLT，则在新的3个患者的群组中，剂量递增。如果在给定剂量水平的两个或更多个患者在第一个周期期间经历DLT，则已超过MTD，并且最多达总共六个患者将用先前较低剂量水平治疗。如果6个患者中的0个或1个在该先前较低剂量水平经历DLT，则该剂量被宣布为MTD。
(ii)1b期–在MTD和活检群组的扩展
一旦已确立MTD，在MTD登记5个额外的最多达20个患者的群组，其各自具有特定肿瘤类型(总共最多达100个额外患者)。从这些额外群组额外中登记的患者收集的数据用于证实安全性、探索潜在的生物标志物，和评估当药物被施用于特定组的深度预治疗患者或与免疫疗法或酪氨酸激酶抑制剂(TKI)组合给予时的潜在活性信号。这5个扩展群组各自中需要10个患者同意经历给药前和给药后的肿瘤活检。经历这些活检的所有患者构成‘活检群组’。
患者可以在28天周期内继续接受与第一周期期间相同剂量的研究药物，直至他们经历不可接受的毒性或明确的疾病进展。不允许患者中递增研究药物剂量。一旦已确立MTD，基于在MTD扩展安全群组中施用的剂量的平均值，给药将BSA-依赖性剂量变为平坦剂量。
患者群体
(i)1a期-剂量递增
具有组织学证实的实体肿瘤患者，其在接受标准/批准的化学疗法后已显示疾病进展或无治愈疗法。
(ii)1b期–在MTD和活检群组的扩展
鉴于AXL广泛分布于各种实体恶性肿瘤中的事实，该研究在MTD的剂量扩展阶段包括特定的患者肿瘤类型的五个群组，当研究药物作为单一药剂在大量预处理的患者组中施用或在具有免疫疗法抗性的肿瘤或EGFR+NSCLC的患者中的组合方案中施用时，进一步评价安全性并发现可能的效力信号。
a.具有肿瘤的患者，其在至少2个周期(8周)的免疫疗法后在实现至少稳定的疾病的最佳记录的应答(即，根据iRECIST记录的SD、PR或CR)后已进展，并被认为适合于这种类型的治疗。*
b.具有EGFR+非小细胞肺癌(NSCLC)的患者，其在≤2线口服TKI后在至少稳定的疾病的最佳记录的应答(即，根据RECIST v1.1记录的SD、PR或CR)后表明近期进展，且被认为适合于这种类型的治疗。*允许先前的化学疗法±免疫疗法，只要患者明确表明目前在EGFRTKI后进展。
c.具有BRAF-、KRAS-或NRAS-突变的结肠直肠癌(CRC)的患者，对其没有剩余标准疗法。
d.具有持续性/复发性卵巢癌的患者，其为铂难治的/抗性的，并且已经具有任何数量线的先前疗法。
e.具有BRAF-突变的黑色素瘤的患者，其在免疫疗法或组合BRAF/MEK抑制剂后已经进展。
*在这些扩展群组中登记的免疫疗法抗性肿瘤或EGFR+NSCLC的患者分别继续使用其先前的免疫疗法或TKI方案进行治疗，并添加研究药物。该理由基于临床前数据，所述临床前数据显示，在先前的免疫疗法或TKI后已经进展的患者中，该组合是优异的。
纳入标准：
为了有资格参与研究，患者必须满足以下所有纳入标准：
1.1a期研究中登记的患者必须：
a.具有晚期转移或进行性实体肿瘤的组织学证实的诊断。
b.对已知为其病况提供临床益处的确立疗法是难治的或不耐受的。
2.1b期研究中登记的患者必须符合以下肿瘤类型之一的标准：
a.具有肿瘤，其在至少2个周期(8周)的免疫疗法后在实现至少稳定的疾病的最佳记录的应答(即，根据iRECIST记录的SD、PR或CR)后已进展，并被认为适合于这种类型的治疗。
b.具有EGFR+NSCLC，并且在≤2线口服TKI后在至少稳定的疾病的最佳记录的应答(即，根据RECIST v1.1记录的SD、PR或CR)后表明近期进展，且被认为适合于这种类型的治疗。允许先前的化学疗法±免疫疗法，只要患者明确表明目前在EGFR TKI后进展。
c.具有BRAF-、KRAS-或NRAS-突变的CRC，对其没有剩余标准疗法。
d.具有持续性/复发性卵巢癌，其为铂难治的/抗性的，并且已经具有任何数量线的先前疗法。
e.具有BRAF-突变的黑色素瘤，其对免疫疗法或组合BRAF/MEK抑制剂无应答
3.具有一个或多个通过修改的RECIST v1.1或iRECIST概述的可测量或可评估的肿瘤
4.具有≤1的东部肿瘤协作组(ECOG)(世界卫生组织)表现
5.具有≥3个月的预期寿命
6.年龄≥18岁
7.具有阴性的怀孕测试(如果雌性具有生育能力)
8.具有可接受的肝功能:
a.胆红素≤1.5x正常上限(ULN)。接受免疫疗法的患者具有<3.0x ULN的胆红素水平。
b.天冬氨酸氨基转移酶(AST/SGOT)、丙氨酸氨基转移酶(ALT/SGPT)和碱性磷酸酶≤2.5x正常上限(ULN)。如果存在肝转移，则允许≤5x ULN。接受免疫疗法的患者应当具有<5.0x ULN的AST和ALT水平。
9.具有可接受的肾功能：
a.计算的肌酐清除率≥30mL/min
10.具有可接受的血液学状态:
a.粒细胞≥1500个细胞/mm3
b.血小板计数≥100,000(plt/mm3)
c.血红蛋白≥9g/dL
11.尿液分析没有临床显著异常
12.具有可接受的凝血状态：
a.在1.5x正常限值内的凝血酶原时间(PT)
b.在1.5x正常限值内的活化部分促凝血酶原激酶时间(aPTT)
13.不生育或同意使用适当的避孕方法。性活跃的患者及其伴侣在进入研究之前和参与研究的持续时间以及最后一次研究药物剂量后至少30天(参见部分4.6.3)必须使用有效的避孕方法(激素或屏障生育控制方法；或禁欲)。如果妇女在参与该研究期间怀孕或怀疑她怀孕，她应当立即告知其治疗医生。
14.在任何研究相关程序前，已经阅读并签署IRB批准的知情同意书。(如果对患者进行重新筛选用于参与研究，或方案修订改变进行中的患者的护理，则必须签署新的知情同意书。)
15.如通过局部介入放射学所确定(每个活检时间点需要3至5个核心样品)，如果安全且医学上可行，则五个扩展群组各自中登记的患者必须愿意考虑研究前和研究中的活检。
排除标准：
符合这些排除标准中的任一项的患者将被禁止参与该研究:
1.具有在第1天之前的过去6个月内的纽约心脏协会(NYHA)III或IV类，心脏病，心肌梗塞，不稳定的心律失常，或在第1天之前的14天内的心电图(ECG)上或心脏压力测试期间的缺血的证据。
2.具有男性中>450msec和女性中>470msec的校正的QT间隔(QTcF，Fridericia方法)
3.具有需要抗惊厥疗法的癫痫病症
4.在第1天之前2周内存在症状性中枢神经***转移疾病或需要局部疗法、诸如放射疗法、手术或增加类固醇剂量的疾病
5.具有严重的慢性阻塞性肺病并伴有低氧血症(定义为静息O2饱和度为≤88％呼吸室内空气)
6.在第1天之前2周内已经经历除诊断性手术以外的重大手术
7.具有活跃的、不受控制的细菌、病毒或真菌感染，需要全身性疗法
8.怀孕或正哺乳
9.在进入研究前28天或5个半生命周期内(以首先发生者为准)接受用放射疗法、手术、化学疗法或研究性疗法(对于亚硝基脲或丝裂霉素C为6周)
a.该排除标准不适用于在MTD的扩展群组中登记的具有EGFR+NSCLC或免疫疗法抗性肿瘤的患者。
10.不愿意或无法遵守本方案中要求的程序
11.已知被人免疫缺陷病毒(HIV)、乙型肝炎或丙型肝炎感染。目前不活跃的具有慢性肝炎史的患者符合资格
12.具有研究者和/或主办者认为可能损害方案目标的严重的非恶性疾病(例如，肾盂积水、肝衰竭或其他病况)
13.目前正在接受任何其他研究药物
14.已经表现出对类似的结构化合物、生物药剂或制剂的过敏反应
15.已经经历可能损害吸收或可能由于吸收不良而导致具有腹泻的短肠综合征的对胃肠道的重要手术
16.具有对磺胺类的严重不良反应(例如，超敏反应、过敏反应)史
17.安排接受免疫疗法或TKI方案加研究药物的患者目前不得使用高剂量类固醇(即，近似等于15mg/天的***的生理剂量)
研究评价(给药前)
筛选/基线时段(首次给药前14天内)
施用第一剂研究药物前14天内进行以下活动和评估：
·签署知情同意书
·收集并记录完整的病史，包括组织学证实的晚期转移或进行性实体肿瘤的诊断，以及疾病和疾病症状的所有其他量度，包括肿瘤负荷程度、影像学评价，即胸部、腹部、骨盆的计算机断层扫描；适当的肿瘤标志物(例如，PSA、CA19-9)。
·进行全面体检，包括身高(cm)和体重(kg)
·记录生命体征(温度、心率、收缩和舒张血压)
·评估东部肿瘤协作组(ECOG)表现状态(PS)
·进行12-引线心电图(ECG)，包括评价QTcF间隔
·收集血液用于评估实验室参数：
ο血液学：全血计数(CBC)，其具有差异和血小板计数
ο血清化学
ο凝血状态：凝血时间(PT)和活化部分促凝血酶原激酶时间(aPTT)
·收集尿液样品用于完全尿分析
·收集尿液或血清样品，用于对有生育能力的女性的β-人绒毛膜***(β-hCG)妊娠测试
·在活检群组中登记的那些患者中进行给药前肿瘤活检
ο“活检群组”包括在MTD的五个扩展群组中登记的、同意接受所需的给药前和给药后肿瘤活检的患者(在每个活检时间点需要3至5个核心样品)。
·记录过去14天内的所有伴随药物，包括所有处方药、非处方药和营养补充剂
第1循环的第一剂量前72小时内
在施用第一剂(在第1天)研究药物前72小时内的任何时间进行以下活动和评估:
·进行全面体检，包括重量(kg)和BSA的计算
·收集血液用于评估实验室参数：血液学和血清化学
·收集尿液或血清样品，用于对有生育能力的女性的β-hCG妊娠测试
·收集血液用于获得PBMC、血浆和血清，用于生物标志物评价
·获得存档的肿瘤组织
·记录所有伴随药物，包括所有处方药、非处方药和营养补充剂
审查所有纳入/排除标准，并确定患者是否已符合用于纳入研究的所有合格标准。获得医疗监测(或指定人士)批准以登记患者。
研究治疗
在每个新的治疗周期开始时重新计算研究药物(酒石酸盐)的剂量，以反映可能已经发生、但在治疗周期内对于所有治疗将保持不变的体表面积(BSA)的变化。如果计算的数量小于0.5，则基于胶囊中研究药物的量，将剂量四舍五入至最接近的可实现的剂量。如果计算的剂量≥0.5，则基于可用胶囊强度，将剂量四舍五入至下一可实现的水平。仅当与基线相比体重增加或减少≥10％时，才调整患者剂量。
一旦已经在扩展安全性群组中确立MTD，则研究药物(二酒石酸盐)将作为平坦剂量而非根据BSA进行施用。
研究药物每天一次口服施用，持续21天，随后为7天无药期(每个周期＝28天)。在无疾病进展或不可接受的毒性的情况下，可以每个周期重复给药。研究药物应当在过夜禁食后的早上，在摄入任何食物或其他药物前至少1小时，用最多达200mL或7液体盎司的水服用。
由于PK和PD取样将在前两个治疗周期期间进行，因此尽一切努力以确保从第1周期及时过渡至第2周期(即，周期之间无延长的延迟)。
该研究中的研究药物的安全性和有效性的评估在两期中进行：1a期：剂量递增和1b期：在MTD和活检群组的扩展
1a期(剂量递增)：三个患者群组
使用标准3+3设计，在3个患者群组中，28天中的21天的起始剂量为1.5mg/m2。一旦每个群组中的第一个患者已完成14天的给药且无DLT，则第二和第三个患者同时以相同的剂量被登记。一旦最后一个登记的患者已完成第28天而未观察到DLT且下一个更高的结构(I)的化合物剂量水平尚未被研究，则根据表20中提供的剂量水平，在新的3个患者群组中遵循修改的Fibonacci剂量递增方案增加剂量。
表20.剂量递增
a在研究的过程期间可能增加额外和/或中等剂量水平。
b剂量水平-1代表需要从起始剂量水平降低剂量的患者的治疗剂量。如果起始剂量水平最初与意外或不可接受的毒性相关，则其也将充当较低的剂量水平。
c如果临床上指示，则可以研究高于65mg/m2的剂量水平。
如果在给定剂量水平在3个患者中的1个中观察到DLT，则在该剂量水平下登记和治疗最多达3个额外的患者。当将最多达3个患者添加至给定剂量水平，如果那6个患者中仅1个经历DLT，则该剂量将增加至下一个剂量水平。如果在一定剂量水平在3-6个患者中的≥2个经历DLT，则该剂量将降低至先前(较低)的剂量水平，并且将在该剂量水平登记3个额外的患者。
如果任何6个患者中的0个或1个患者经历DLT，但已经研究下一个更高的剂量水平，则当前剂量被宣布为MTD，并且研究进展至1b期。MTD被定义为在第1周期期间6个患者中的≤1个经历DLT的剂量，而下一个更高的剂量为在第1周期期间3-6个患者中的至少2个经历DLT。
1b期：在MTD和活检群组的扩展
一旦已经确立MTD，则在1b期研究中登记和治疗具有下列各种疾病特征的5个额外群组(每组最多达20个患者，总共100个额外患者)。研究药物作为平坦剂量施用，而非根据BSA施用。从这些额外群组额外中登记的患者收集的数据用于证实安全性、探索潜在的生物标志物，和评估当研究药物被施用于特定组的深度预治疗患者或与免疫疗法或TKI组合给予时的潜在活性信号。这5个扩展群组各自中需要10个患者同意经历给药前和给药后的肿瘤活检。经历这些活检的所有患者构成‘活检群组’。在MTD登记和治疗的五个分开的扩展群组描述于在上文的患者群体部分中。
毒性管理和剂量修改
毒性管理
如主要研究者临床指示认为，不良事件可以用伴随药物进行治疗。所有伴随药物都记录在来源中和适当的CRF中。
强度中等至严重且被认为也许、可能或肯定与研究药物治疗相关的不良事件可能导致受影响的研究患者终止研究治疗。这种终止用主办者的医疗监测中心在最早的可能时间进行审查。在用主办者的医疗监测中心进行审查后，根据事件的性质和严重程度，研究患者可能永久退出研究。
剂量限制毒性(DLT)
DLT被定义为在第1周期内观察到的以下事件中的任一者，无论其归因如何，除非与潜在的疾病或外部原因(诸如疾病进展)明确且无可争议相关：
·3级或以上的发热性中性粒细胞减少症
·连续≥7天的4级绝对中性粒细胞计数(ANC)
·4级血小板减少症或3级血小板减少症，伴有临床显著的出血或需要血小板输注
·3级或4级非血液学AE(包括恶心、呕吐、腹泻和电解质失衡)，持续超过48小时，尽管进行最佳医疗管理
·给药由于治疗紧急不良事件或相关的严重实验室测试值而延迟≥2周。
剂量修改
研究药物的剂量在第1周期期间未降低。可以对于接受多个周期的研究药物的患者调整研究药物的剂量。基于观察到的前一周期期间发生的毒性，允许剂量降低一个剂量水平。对于先前由于毒性或延迟恢复而降低剂量的任何患者，不允许剂量再次递增。所有剂量修改都需要与医疗监测人员讨论和批准。
如果患者经历毒性，则所述患者可以继续接受如表21中所定义的研究药物。
表21.基于毒性的剂量调整的指南
*排除管理不佳的简要(基于研究者的判断)3级呕吐或腹泻。最初进行将剂量降低至测试的下一个较低剂量水平。如果在一个或多个周期期间在新的降低剂量水平出现进一步毒性，则不允许进一步降低，且患者应当停止研究。
需要经历DLT的患者停止参与研究，除非调查人员和医疗监测中心确定继续降低剂量符合患者的最大利益，并且仅在毒性恢复至2级或更高后。
对于由于无法恢复任何血液或非血液毒性而延迟治疗超过2周的患者，需要降低剂量，即使不符合DLT标准。延迟2周后仍无法治疗且最终恢复的患者的后续再治疗将在考虑个体患者的潜在利益/风险后确定。另外，对于毒性不符合DLT的标准的患者，允许降低剂量。
对于1b期研究中登记且接受组合疗法(即先前的免疫疗法或TKI方案加研究药物)的患者，其免疫疗法或TKI方案的修改遵循每种批准药物的完整处方信息。
伴随药物和疗法
先前疗法
进行即时治疗的患者可能已经经历一次或多次先前的疗法。
伴随疗法
伴随疗法是由患者采用的任何新的或现有的药物或疗法，包括：
·药物，包括但不限于处方药、非处方药、生育控制药丸/贴剂/激素装置和顺势疗法制剂
·非药物疗法，包括但不限于热/激光/辐射程序、维生素、草药/补充剂。
在筛选过程期间(预计首次给药研究药物前最长达14天)，关于所有伴随疗法、药物和程序的信息连同诊断或使用原因都记录在来源文件和适当的CRF中。
一旦患者接受第一剂研究药物，伴随治疗的记录就限于为了治疗不良事件(AE)而使用的任何新药物或现有药物的修改。这些疗法连同诊断或使用原因记录在来源文件和适当的CRF中。用于治疗不良事件的那些疗法应当与AE相关，并且也必须完成AE的记录。
允许的疗法
在研究过程中，根据研究者的判断允许使用对患者的健康和福祉必要且不干扰研究评价的伴随药物。这包括在主要研究者的指导下使用适当的药物用于治疗AE和/或并发疾病。所有此类疗法必须记录在来源中和适当的CRF上。
在第1周期期间不开始用造血集落刺激生长因子(诸如粒细胞集落刺激因子或粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子)进行治疗，除非患者已经经历DLT。在第一个疗法周期期间不会开始用红血球刺激剂进行治疗。如果患者已经服用稳定剂量的红血球刺激剂，其可以在第1周期及后续周期期间继续使用相同剂量的药剂。
接受免疫疗法加研究药物的患者可以根据研究者的判断接受类固醇用于治疗免疫应答AE。
禁止的疗法
所有患者排除伴随使用以下药物：
·首次研究药物施用前一个月内和研究治疗的周期期间的抗癌疗法(化学疗法、放射疗法、免疫疗法)。在1b期研究中登记的具有EGFR+NSCLC或免疫疗法抗性的肿瘤的患者继续分别用其先前的免疫疗法或TKI方案进行治疗，并添加研究药物。
·CYP2C19代谢物：应当密切监测在研究治疗前接受CYP2C19代谢物的患者。如果可能，研究者应当在首次给药前或至少在转换为替代、但不是CYP2C19代谢物的等同治疗前停止用CYP2C19底物治疗患者。如果患者必须继续使用CYP2C19代谢物，则应当谨慎进行用研究药物的治疗，并且在整个研究持续时间密切观察患者。
·患者不得服用H2-受体拮抗剂(诸如西咪替丁、雷尼替丁和法莫替丁)或任何质子泵抑制剂(诸如奥美拉唑、兰索拉唑、埃索美拉唑和潘托拉唑)。患者必须在开始治疗前7天内停止这些药物。
能育患者的生育控制要求
性活跃的患者及其伴侣必须在进入研究前和参与研究的持续时间和最后一剂研究药物后30天使用有效的避孕方法，且失败率较低。以下被认为是有效的避孕措施：(1)口服避孕药丸；(2)保险套加杀精剂；(3)隔膜加杀精剂；(4)禁欲；(5)患者或伴侣手术消毒；(6)绝经后超过2年的患者或伴侣；或(7)可注射或可植入的药剂/装置。
治疗评价
(i)第1周期
第1天(且如另有指明)：
·在第一次给药前记录生命体征(温度、心率、收缩和舒张血压)
·在第一次给药前获得基线体征和症状
·进行12-引线ECG，包括评价QTcF间隔：
对于1a期患者：包括临第一次给药前、给药后0.5小时、1小时、2小时(对于每个时间点，±10-分钟窗口)和4小时(±20-分钟窗口)的ECG时间点
对于1b期患者：对于免疫疗法抗性和EGFR+NSCLC群组中登记的前3个患者的ECG时间点，以包括临第一次给药前；给药后0.5小时、1小时、2小时(对于每个时间点，±10-分钟窗口)；和4小时(±20-分钟窗口)
所有其他1b期患者：仅在给药前进行12-引线ECG，包括QTcF间隔的评价
·根据部分7.4中的时间表，收集血液用于获得PBMC、血浆和血清，用于进行评价
·收集血液用于分析PK参数
在第1-21天每天
·指导患者在第1-21天每天口服研究药物
·指导患者在其给药日志中记录其服药的日期和时间
每周(第8天、第15天、第22天[±3天])
在第1周期期间，每周(或如另外指明)进行以下活动和评估：
·在第8天和第22天，根据部分7.4中的时间表，收集血液用于获得PBMC、血浆和血清，用于生物标志物评价
·进行简化的体检
·记录生命体征(温度、心率、收缩和舒张血压)
·收集血液用于评估实验室参数：血液学；血清化学
·在第8天、第15天和第21天，收集血液用于分析PK参数
·评价不良事件(AE)
·记录所有伴随药物，包括所有处方药、非处方药和营养补充剂
(ii)第2周期
在第1-21天每天
·指导患者在第1-21天每天口服研究药物
·指导患者在其给药日志中记录其服药的日期和时间
第1天
在第2周期的第1天进行以下活动和评估：
·进行全面体检，包括重量(kg)和BSA的计算
·评价ECOG PS
·收集尿液或血清样品，用于对有生育能力的女性的β-hCG妊娠测试
·在临给药前进行12-引线ECG，包括评价QTcF间隔
·收集血液用于获得PBMC、血浆和血清，用于生物标志物评价
·收集血液用于分析PK参数
每周(第1天、第8天、第15天、第22天[±3天])
在第2周期期间，每周进行以下活动和评估：
·简化的体检(第8天、第15天、第22天)
·记录生命体征(温度、心率、收缩和舒张血压)
·收集血液用于评估实验室参数：血液学；血清化学
·在第8天、第15天和第21天，根据部分7.3中的时间表，收集血液用于分析PK参数
·评价不良事件(AE)
·记录所有伴随药物，包括所有处方药、非处方药和营养补充剂第28天(-4天)：
·使用RECIST v1.1和iRECIST评价应答和肿瘤负荷，包括使用在基线时相同的方法评价适当的肿瘤标志物
·在活检群组中登记的患者中进行给药后肿瘤活检。理想地，应当从与给药前活检相同的一般位置(如果可行且安全)且从转移性病灶而非原发性肿瘤获得活检样品。在每个活检时间点需要三至五(3至5个)核心样品。
(iii)第≥3周期
患者可以在28天周期内以与第1周期期间相同的剂量继续接受研究药物，直至他们经历不可接受的毒性或明确的疾病进展。在进行下一个单数周期之前，必须评价和证实应答和肿瘤负担，以获得连续的应答/临床益处。
在第1-21天每天
·指导患者在第1-21天每天口服研究药物
·指导患者在其给药日志中记录其服药的日期和时间
第1天
在第3周期的第1天及所有后续治疗周期进行以下活动和评估：
·进行全面体检，包括重量(kg)和BSA的计算
·评价ECOG PS
·收集尿液或血清样品，用于对有生育能力的女性的β-hCG妊娠测试
·在临给药前进行12-引线ECG，包括评价QTcF间隔(仅第3周期)·收集血液用于获得PBMC、血浆和血清，用于生物标志物评价·收集血液用于分析PK参数(仅第3周期)
第1天和第15天(±3天)
在第3周期和所有后续治疗周期中，每两周进行以下活动和评估：
·简化的体检(第15天)
·记录生命体征(温度、心率、收缩和舒张血压)
·收集血液用于评估实验室参数：血液学；血清化学
·评价不良事件(AE)
·记录所有伴随药物，包括所有处方药、非处方药和营养补充剂
第28天(-4天)
在每个偶数周期(即第4周期、第6周期等)的第28天(-4天)进行以下活动和评估：使用RECIST v1.1和iRECIST评价应答和肿瘤负荷，包括使用在基线时相同的方法评价适当的肿瘤标志物。
评估的标准
安全性终点
通过评估体检、生命体征、实验室研究、主动和被动不良事件(包括DLT)以及所有死亡原因来评价口服研究药物的耐受性和毒性。
在MedDRA优选项的研究药物剂量水平和主要***器官类别水平内概述治疗紧急不良事件的发生率。对AE的子集(诸如(1)由医师判断与研究治疗相关的那些，以及(2)严重不良事件(SAE))进行类似概述。
其他常规安全性评价(例如，临床实验室参数和生命体征)通过研究药物剂量水平使用平均值、标准偏差、中值、与基线值的最小和最大变化进行概述。
效力终点
对于在1b期研究期间接受伴随免疫疗法的患者，使用应答的RECIST v1.1(参见，例如，Eisenhauer等人“New response evaluation criteria in solid tumours:revisedRECIST guideline(version 1.1)”Eur J Cancer 2009,45,228–247)定义或iRECIST指南(参见，例如，Seymour等人“RECIST working group.iRECIST:guidelines for responsecriteria for use in trials testing immunotherapeutics.”Lancet Oncol 2017,18,e143–e152)，注意到对研究药物治疗的任何客观应答。下文提供概述。
(i)实体肿瘤中的应答评估标准(RECIST),v1.1
应答标准–目标病灶的评估包括：
·完全应答(CR)：所有目标病灶的消失。任何病理性***(无论是目标还是非目标)的短轴必须缩小至<10mm。
·部分应答(PR)：以基线总和直径作为参考，目标病灶的直径总和至少减少30％。
·疾病进展(PD)：以研究中最小总和(如果这在研究中最小，则这包括基线总和)作为参考，目标病灶直径总和至少增加20％。除了20％的相对增加，该总和还必须表明绝对增加至少5mm。(注：一个或多个新病灶的出现也被视为进展)。
·稳定疾病(SD)：以研究中的最小总和直径作为参考，既没有足够的收缩以符合PR标准，也没有足够的增加以符合PD标准。
应答标准-非目标病灶的评估包括：
·完全应答(CR)：所有非目标病灶消失，和肿瘤标志物水平归一化。所有***的尺寸必须是非病理性的(<10mm短轴)。
·非CR/非PD：一个或多个非目标病灶的持续存在和/或肿瘤标志物水平维持高于正常限值。
·疾病进展(PD)：现有非目标病灶的明确进展*(注:一个或多个新病灶的出现也被视为进展)
尽管“非目标”病灶的明显进展仅为例外，但在此类情况下，应当以治疗医师的意见为准，且进展状态应当后来由审查小组(或研究主持人)证实。
(ii)实体肿瘤中使用免疫疗法的试验的应答评估标准(iRECIST)
在接受免疫疗法(即检查点抑制剂和其他免疫调节剂)的具有实体肿瘤的患者中可以出现称为‘假进展’的现象。在假进展的情况下，肿瘤体积可以由于免疫细胞浸润而非真实疾病进展而暂时增加。RECIST工作组的成员连同来自美国和欧洲的几家制药公司和监管机构的输入起草了iRECIST指南，用于评价这些患者中的肿瘤负荷的变化。尽管与传统的RECIST指南类似，但iRECIST要求额外的成像，其显示在初步证明疾病的肿瘤负荷增加后4-8周的连续肿瘤被视为进展(稳定的疾病不计为疾病进展)。
药代动力学终点
通过描述性统计(包括平均值、n、标准偏差、变异系数、最小值、最大值和中值)概述口服研究药物的血浆浓度。在分析研究样品前，记录测定灵敏度、特异性、线性和重现性。
将在第1周期的第1天和第21天，在登记入1a期研究的所有患者中以及登记入1b期研究中选择群组的那些中，测定口服研究药物和已知代谢物(如果有的话)的血浆PK分析以及剂量比例。
对于1a期研究中登记的所有患者遵循PK时间表。在1b期研究中，该PK取样时间表仅适用于在MTD的扩展群组中登记且接受研究药物与其先前的抗癌疗法的组合的具有EGFR+NSCLC或免疫疗法抗性的肿瘤的患者。
药效动力学终点
收集PBMC、血浆和血清，以评价研究药物对预测生物标志物(包括但不限于GAS6和AXL)的活性。
对5个1b期扩展群组(活检群组)各自中的10个患者中进行给药前肿瘤活检(在第一次给药前14天内)和给药后肿瘤活检(第2周期，第28[-4]天)，以评价研究药物对预测性生物标志物的活性。如果给药前活检不可能，反而经主办者批准，可以提交适当的存档组织(筛选的4周内收集的3至5份个别核心样品)。理想地，给药后活检应当从与给药前活检样品相同的一般位置(可行且安全)且从转移性肿瘤而非原发性肿瘤获得。在每个活检时间点需要三至五(3至5个)核心样品。使用各种技术检查肿瘤组织，以评价暴露于研究药物后潜在生物标志物的变化。尽管这些PD分析被认为具有探索性性质，但它们与药代动力学参数以及任何效力和安全性信号结合进行评估，以查看是否存在与潜在生物标志物的变化的任何相关性。
要求来自所有患者的存档的肿瘤组织(原发性和转移性部位，如果可用)以评价潜在的预测性生物标志物。
不良事件
不良事件(AE)被定义为与人类中使用药物相关的任何不想要的医疗事件，无论是否被视为药物相关的。因此，AE可能是与药物使用暂时相关的任何不利和意外的体征(包括异常实验室发现)、症状或疾病，无论是否与药物产品相关。)
疑似不良反应意指存在药物引起不良事件的合理可能性的任何不良事件。对于研究新药(IND)安全性报告的目的，‘合理可能性’意指有证据表明该药物和不良事件之间存在因果关系。
意外不良事件或意外疑似不良反应：如果不良事件或疑似不良反应未在当前研究者手册中列出或未以已经观察到的特异性或严重程度列出；或与一般研究计划(临床研究方案)中描述的风险信息不一致，则其视为意外的。
毒性根据NCI CTCAE，版本4.03进行评价。当无法得到NCI CTCAE级别时，研究者使用以下毒性分级：轻度、中度、严重、威胁生命或致命。
表21A.毒性的级别
不良事件(AE)与研究药物的关系应当定义如下：
| 无关： | AE明显与研究药剂无关 |
| 不太可能： | AE可怀疑地与研究药剂相关 |
| 可能： | AE可以与研究药剂相关 |
| 很可能： | AE可能与研究药剂相关 |
| 肯定： | AE明显与研究研究药剂相关 |
严重不良事件(SAE)被定义为表明存在重大危险、禁忌症、副作用或预防措施的任何经历。SAE包括：
·任何死亡，或
·任何威胁生命的事件(即，患者在事件发生时死于该事件的立即风险)，或
·持续、明显、严重或永久性残疾或需要干预以预防这种残疾的任何事件，或
·需要住院(inpatient hospitalization)或延长住院的任何事件，或
·任何先天性异常/出生缺陷，或
·可能危害患者或可能需要干预以预防上面列出的其他后果之一的任何医学明显的事件。
实施例49：研究具有先前治疗的慢性淋巴细胞性白血病(CLL)/小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)的患者中的安全性、药代动力学、药效动力学和临床活性的组合1/2期研究
结构(I)的化合物(如上文实施例48中所述)是一种新型口服抑制剂，其靶向AXL激酶并逆转与晚期癌症相关的间充质表型。所述化合物已经在直接取自患者的CLL B细胞中表现出深刻的单一药剂活性，即使患者具有高风险因素(即，17p/P53缺失)或在其他药物(即，依鲁替尼)后进展。设计该研究鉴定当向具有先前治疗的CLL的患者以28天周期每天一次口服施用28天时研究药物的最大耐受剂量(MTD)、安全性概况和推荐的2期剂量(RP2D)(如上文实施例48中所述)。在一些情况下，如果患者继续显示益处且如果研究药物被合理地良好耐受，则重复治疗周期。
口服形式的研究药物作为硬明胶胶囊(对于1-、4-、16-和25-mg剂量，尺寸#3；对于100-mg剂量，尺寸#0)中的粉末提供并根据当前良好生产规范(cGMP)制造，用于研究用途。
研究药物胶囊以1-mg、4-mg、16-mg、25-mg和100mg强度配制，并被包装至具有聚酯线圈作为顶部空间填充剂的圆形高密度聚乙烯瓶中。然后对瓶进行热密封，装上儿童安全帽，并置于低密度聚乙烯袋中作为二次包装。
依鲁替尼，一种批准的医药产品，由商业可得的来源提供。用于口服施用的依鲁替尼胶囊作为白色不透明胶囊提供，其含有140mg依鲁替尼作为活性成分。每个白色不透明胶囊以黑色墨汁用“ibr140mg”标记。
I期试验的目标包括：
·在以下患者组中表征研究药物当每天一次口服施用28天(每个周期是28天；无停药期)时的安全性和毒性概况：
-第1组(研究药物单一疗法)：对B-细胞受体拮抗剂、BCL-2拮抗剂或CLL/SLL的其他研究性治疗不耐受或在B-细胞受体拮抗剂、BCL-2拮抗剂或CLL/SLL的其他研究性治疗后已经具有疾病进展的具有CLL/SLL的那些
-第2组(研究药物和依鲁替尼组合疗法)：在依鲁替尼后已经进展、但治疗提供者认为继续依鲁替尼疗法符合患者的最大利益的具有CLL/SLL的那些
·确定研究药物当按照该时间表向定义的患者组口服施用时的RP2D
·根据2018年CLL国际研讨会(IWCLL)记载的指南，通过确定定义的患者组中的目标应答率([ORR]，即完全应答率[CR]加上部分应答率[PR])，观察患者的口服研究药物的抗白血病活性的任何证据
·评估口服研究药物在定义的患者组中的药代动力学(PK)
·通过在外周血样品和骨髓中评价分析物(包括但不限于可溶性AXL、AXL表达和磷酸化、生长停滞特异性6(GAS6)和间充质转录因子)，研究定义的患者组中的与口服研究药物的疾病和药效动力学(PD)相关的潜在生物标志物
II期试验的目标包括：
·根据由2018 IWCLL记载的指南，确定两个定义的患者组中的ORR
·确定应答的持续时间(DoR，即从肿瘤应答至疾病进展的时间)
·确定无进展存活期(PFS，即从第一次给药至目标肿瘤进展或死亡的时间)
·确定总体存活率(OS，即从第一次给药至死于任何原因的时间)
·通过在外周血样品和骨髓中评价分析物(包括但不限于可溶性AXL、AXL表达和磷酸化、生长停滞特异性6(GAS6)和间充质转录因子)，研究定义的患者组中的与口服研究药物的疾病和药效动力学(PD)相关的潜在生物标志物
治疗方案的理由
起始剂量基于对大鼠和狗的GLP毒理学研究的彻底审查，以及来自具有晚期转移或进行性实体肿瘤患者的I期研究的初步结果(参见实施例48)。在GLP毒理学研究中，结构(I)的化合物每天一次口服施用，持续28天。在大鼠中，所有发现都是可逆的或被认为临床上不显著的，并且NOAEL被确定为2mg/kg或12mg/m2。根据动物毒理学和安全性研究，结构(I)的化合物的起始剂量为1.5mg/m2/天。
鉴于在该实体肿瘤研究中获得的临床经验以及在前6个群组的任一者中没有观察到剂量限制毒性(DLT)，第1组(单一疗法)中的结构(I)的化合物的酒石酸盐的起始剂量为25-mg平坦剂量。起始剂量比当前1a期实体肿瘤研究(上文实施例48)低近似一个剂量水平。第2组患者(组合疗法)以低于第1组的一个剂量水平或20-mg平坦剂量开始，以确保安全性，尤其是对于依鲁替尼和结构(I)的化合物的酒石酸盐的组合。使用平坦剂量而非基于体型的剂量，尤其是对于口服施用的药物，是优选的，因为其有利于患者和医师使用药物，并减少所需的剂量强度数，改进了依从性。
由于结构(I)的化合物的酒石酸盐已经在实体肿瘤研究中迄今为止被良好耐受，单一疗法组中的25mg的起始剂量等同于700mg(25mg×28天，或实体肿瘤研究中当前剂量的80％)。组合组(即，结构(I)的化合物的酒石酸盐加依鲁替尼)中的起始剂量为20mg，其比单一疗法组中的25mg起始剂量进一步降低20％。来自实体肿瘤研究的安全性信息连同该研究中建议的较低起始剂量支持提出的连续28-天给药时间表。
患者群体
具有慢性淋巴细胞性白血病(CLL)和/或小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)的成人患者，其：
1.对B-细胞受体拮抗剂、BCL-2拮抗剂或CLL/SLL的其他研究性治疗不耐受，或者在B-细胞受体拮抗剂、BCL-2拮抗剂或CLL/SLL的其他研究性治疗后已经具有疾病进展(第1组；单一疗法)；或者
2.在依鲁替尼后具有疾病的进展，但治疗提供者认为继续依鲁替尼疗法符合患者的最大利益(第2组；与依鲁替尼的组合疗法)。
额外的纳入标准
为了符合参与资格，患者必须满足所有以下纳入标准：
1.年龄≥18岁
2.根据2018 IWCLL指南，对需要疗法的CLL/SLL具有确立的病理学证实的诊断
3.已经接受至少一次针对CLL/SLL的先前疗法，并且可以被分类于两个患者组之一中：
·第1组(单一疗法)：具有CLL/SLL的患者，其对B-细胞受体拮抗剂和/或BCL-2拮抗剂不耐受或在B-细胞受体拮抗剂和/或BCL-2拮抗剂后已经进展，或
·第2组(依鲁替尼组合疗法)：具有CLL/SLL的患者，其在依鲁替尼后具有疾病的进展，并且治疗提供者认为继续依鲁替尼疗法符合患者的最大利益
4.具有东部肿瘤协作组(ECOG)表现状态≤2
5.具有充分的血液功能：(a)中性粒细胞绝对计数(ANC)≥500/μL；(b)血小板计数≥30,000/μL；(c)血红蛋白≥8g/dL，在过去2周内未输血
6.具有充分的器官功能：(a)肌酐清除率≥30mL/min；(b)丙氨酸氨基转移酶(ALT)/天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平≤2.5×正常上限(ULN)；(c)总胆红素水平≤1.5×ULN(除非继发于Gilbert综合征、溶血或白血病)
7.具有可接受的凝血状态：活化部分促凝血酶原激酶(aPTT)和凝血时间(PT)≤1.5×ULN
8.具有阴性的怀孕测试(如果女性具有生育能力)
9.不生育或同意使用适当的避孕方法。性活跃的患者及其伴侣在进入研究之前和参与研究的持续时间以及最后一次研究药物剂量后至少30天必须使用有效的避孕方法(激素或屏障生育控制方法，或禁欲)。如果妇女在参与该研究的同时怀孕或怀疑她怀孕，她应当立即告知其治疗医生。
10.在任何研究相关程序前，已经阅读并签署机构审查委员会(IRB)-批准的知情同意书(ICF)。(如果对患者进行重新筛选用于参与研究，或方案修订改变进行中的患者的护理，则必须签署新的ICF。)
11.能够遵守整个研究的要求
排除标准
符合这些排除标准中的任一项的患者将被禁止参与该研究。
1.在≤3个月内已经经历先前的自体或同种异体干细胞移植，未从移植相关的毒性恢复，或需要移植物抗宿主免疫抑制疗法
2.已知涉及中枢神经***(CNS)
3.具有CLL的Richter氏转化
4.在预期第一次给药前2周内已经接受针对患者恶性肿瘤的治疗的任何单克隆抗体疗法
5.在该治疗的最后一次给药后少于5个半衰期内已经接受任何抗癌疗法，包括化学疗法、放射疗法或研究性抗癌药物。该排除标准不适用于需要继续使用依鲁替尼的患者。(注：服用依鲁替尼的同时白血细胞计数迅速上升的某些患者可能由于医疗原因而可以需要继续使用该药物。这些患者需要由医疗监测中心批准，并且根据方案进行治疗。)
6.在预期的第一次给药前7天内，已经接受>20mg/天的***和0.1mg/天的盐皮质激素
7.使用Fridericia氏校正公式，校正的QT间隔为>450msec(男性)和>470msec(女性)
8.具有肾脏、神经、精神、内分泌、代谢、免疫、肝脏或心血管疾病或研究者认为会不利影响他/她参与研究的任何其他医疗状况的显著病史
9.在研究的过程期间和持续最后一剂研究药物后至少30天，怀孕和/或哺乳，或拒绝使用适当的避孕药
10.在过去5年中，除了以下充分治疗以外，其他恶性肿瘤的病史：(a)皮肤的局部基底细胞或鳞状细胞癌；(b)子宫颈或***的原位癌；(c)***状、无创性膀胱癌；(d)临床上指明其观察的早期***癌；(e)目前完全缓解的其他1期或2期癌症；(f)已经完全缓解2年或手术治愈的任何其他癌症。对于可接受的先前癌症史的额外确定，可以联系医疗监测中心
11.具有已知的胃肠疾病(例如吸收不良综合征)、并发症(例如，吞咽困难)或可能使口服药物的消耗或吸收有问题的外科手术
12.在预期的首次给药前7天内具有不受控制的全身性感染(病毒、细菌或真菌)或发热和中性粒细胞减少症
13.具有持续2周或更多周的活跃和不受控制的自身免疫细胞减少症，包括自身免疫溶血性贫血或特发性血小板减少性紫癜(ITP)
14.已经接受用AXL抑制剂的先前疗法
15.已经对类似的结构化合物、生物药剂或制剂表现出过敏反应
16.不愿意或不能遵守该方案中要求的程序
17.具有对磺胺类的严重不良反应(例如，超敏反应、过敏反应)史
治疗时间表和给药
这是在具有先前治疗的CLL/SLL的患者中的口服研究药物的组合1/2期研究。在1期和2期两者中，研究参与者被分配值以下2组之一：
·第1组(研究药物单一疗法)：对B-细胞受体拮抗剂和/或BCL-2拮抗剂或其他研究性治疗不耐受或在B-细胞受体拮抗剂和/或BCL-2拮抗剂或其他研究性治疗后具有疾病进展的患者。
·第2组(研究药物和依鲁替尼组合疗法)：在依鲁替尼后具有疾病的进展的患者，并且治疗提供者认为继续依鲁替尼疗法符合患者的最大利益。
两组患者相同地用研究药物治疗，并且经历相同的研究评价。该研究可能花费最长达36个月，以登记最多达108个患者，在1期(n＝54)和2期(n＝54)两者中的每组(第1组和第2组)中最多达27个患者)。
每天一次口服施用研究药物，持续28天(每个周期位28天；无停药期)。在无疾病进展或不可接受的毒性的情况下，可以每个周期重复给药。研究药物应当在过夜禁食后的早上，在摄入任何食物或其他药物前至少1小时，用最多达200mL或7液体盎司的水服用。每天在近似同一时间每天一次口服施用依鲁替尼。用水将胶囊全部吞下。不要打开、打破或咀嚼胶囊。
1期
在3至6个患者的群组中的第1组和第2组中同时登记患者。第2组开始于低于第1组起始剂量的1个剂量水平。在每个组中，药酒药物剂量的递增遵循标准3+3设计，其中3个患者的连续群组用递增更高剂量的研究药物治疗，直至观察到DLT并确立MTD。一旦登记一定剂量水平的第一个患者，如果初始患者未经历DLT或任何不可接受的毒性，则第二个和第三个患者在3周之后被登记。
如果群组中的3个患者中的1个经历DLT，则以该剂量水平治疗最多达3个额外的患者。如果在向最后一个患者首次给药后28天内，在扩展的3-6个患者群组中未观察到额外的DLT，则在3个患者的新群组中，递增剂量。如果给定剂量水平的3-6个患者中的2个或更多个在第一个周期期间经历DLT，则超过MTD，且将以先前较低剂量水平治疗最多达总共6个患者。如果6个患者中的0个或1个在该先前较低剂量水平经历DLT，则该剂量被宣布为MTD。
MTD被定义为在第1周期期间6个受试者中的≤1个经历DLT的剂量，其中下一更高的剂量在第1周期期间有3-6个受试者中的至少2个经历DLT。一旦鉴定MTD或初步RP2D，则在每个患者组中登记最多达六个患者的扩展群组，以证实安全性/证实初步RP2D的适用性，收集额外的生物标志物数据，和进一步探索效力。每个患者组中可以登记最多达27个患者，在1期中总共最多达54个患者。
可以适当时基于关键生物标志物的调整、安全性概况和临床活性信号进行适当探索研究药物的额外的剂量水平、时间表或疾病迹象。
第1组(研究药物单一疗法)：第1组(单一疗法)中的研究药物的起始剂量为25-mg平坦剂量。每天一次口服施用研究药物，持续28天(每个周期为28天；无停药期)。患者可以在28天周期中以第1周期期间相同的剂量继续接受研究药物，直至他们经历不可接受的毒性或明确的疾病进展。不允许研究药物剂量在患者内递增。
第2组(与依鲁替尼组合的研究药物)：研究药物的起始剂量为20-mg平坦剂量。每天一次口服施用研究药物，持续28天(每个周期为28天；无停药期)。患者也以与他们在临研究登记前接受的相同剂量接受依鲁替尼。在研究开始后，患者继续使用依鲁替尼和研究药物的组合至少3个月。该时间之后，根据研究者的判断和监测医疗中心的咨询，患者继续使用组合疗法或停止依鲁替尼并继续使用研究药物单一疗法。所述患者在第1周期期间在28天周期中以相同的给予剂量继续接受研究药物，直至其经历不可接受的毒性或明确的疾病进展。
根据研究者的判断和监测医疗中心的咨询，依鲁替尼可以停止和重新起始；然而，患者可以接受用依鲁替尼的治疗的总时间为2年。
I期试验中的研究药物的递增剂量提供于下表22中：
表22.剂量递增
a可能在研究的过程期间增加额外和/或中等剂量水平。
b如果临床指示，可以研究高于100mg的剂量水平。
2期
在2期中，基于Simon 2期设计，在第1组和第2组中登记患者。在1期中，最多达13个患者被登记入每个患者组(总共26个患者)。如果每组中的这13个患者中的应答为0，则停止研究。否则，2期在每组中登记14个额外患者，每组总共27个患者。如果在27个患者中观察到4例或更多例应答，则结论是研究治疗值得进一步研究。当针对5％的无效假设应答率测试到20％的真实应答率(替代假设)时，该设计得到0.05的I型错误率和80％的功效。
第1组(研究药物单一疗法)：起始剂量为在1期期间确定的RP2D。每天一次口服施用研究药物，持续28天(每个周期为28天；无停药期)。可以继续用研究药物的给药，直至他们经历不可接受的毒性或明确的疾病进展。
第2组(与依鲁替尼组合的研究药物)：起始剂量为在1期期间确定的RP2D。每天一次口服施用研究药物，持续28天(每个周期为28天；无停药期)。患者也以与他们在临研究登记前接受的相同剂量接受依鲁替尼。
在研究开始后，患者应当继续使用依鲁替尼和研究药物的组合至少3个月。该时间之后，根据研究者的判断和监测医疗中心的咨询，患者继续使用组合疗法或停止依鲁替尼并继续使用研究药物单一疗法。所述患者可以在第1周期期间在28天周期中以相同的给予剂量继续接受研究药物，直至其经历不可接受的毒性或明确的疾病进展。
根据研究者的判断和监测医疗中心的咨询，依鲁替尼可以停止和重新起始；然而，患者可以接受用依鲁替尼的治疗的总时间为2年。
毒性管理和剂量修改
毒性管理
如主要研究者临床指示认为，AE可以用伴随药物进行治疗。所有伴随药物都必须记录在来源中和适当的电子病例报告表(eCRF)中。
对于NCI CTCAE毒性分级的强度中等至严重且被认为也许、可能或肯定与研究药物治疗相关的不良事件可能导致受影响的研究患者终止研究治疗。根据事件的性质和严重程度，患者可永久退出研究。
剂量限制毒性(DLT)
DLT被定义为在第1周期内观察到的以下事件中的任一者，无论其归因如何，除非与潜在的疾病或外部原因(诸如疾病进展；不考虑白血细胞计数或循环粒细胞的其他减少，因为白血细胞计数的减少是期望的治疗终点)明确且无可争议相关：
·任何≥3级非血液学毒性
·使用支持性护理的72小时内未解决至≤1级的任何3级AE
·任何AST和ALT升高≥5×ULN，伴随有血清胆红素水平>2×ULN
·在<72小时内未解决的任何≥3级电解质紊乱(例如，高钾血症、低磷血症、高尿酸血症)
·任何肌酐的≥3级升高
·任何5级毒性
·任何发热性中性粒细胞减少症的情况
研究药物剂量修改
研究药物的剂量在第1周期期间未降低。可以对于接受多个周期的研究药物的患者调整研究药物的剂量。基于观察到的前一周期期间发生的毒性，允许剂量降低一个剂量水平。对于先前由于毒性或延迟恢复而降低剂量的任何患者，不允许剂量再次递增。
如果患者经历毒性，该患者可以结合2018 IWCLL血液毒性分级量表中记载的指南如表23中所定义继续接受研究药物。
表23.基于毒性的剂量调整的指南
a排除管理不佳的简要(基于研究者的判断)3级呕吐或腹泻。
最初进行将剂量降低至测试的下一个较低剂量水平。如果在1个或多个周期期间在新的降低剂量水平出现进一步毒性，则不允许进一步降低，且患者停止研究。
需要经历DLT的患者停止参与研究，除非调查人员和医疗监测中心确定继续降低剂量符合患者的最大利益，并且仅在毒性恢复至2级或更高后。
对于由于无法恢复任何血液或非血液毒性而延迟治疗超过2周的患者，需要降低剂量，即使不符合DLT标准。另外，对于毒性不符合DLT的标准的患者，允许降低剂量。讨论这些毒性以确定在下一个先前剂量水平继续接受结构(I)的化合物是否符合患者的最大利益。
依鲁替尼剂量修改
治疗医生应当遵循依鲁替尼疗法的包装插页。根据依鲁替尼标签：由于任何3级或以上非血液学毒性、伴有感染或发热的3级或以上的中性粒细胞减少症或4级血液学毒性，中断依鲁替尼疗法。一旦毒性的症状已经缓解至1级或基线(恢复)，则依鲁替尼疗法可在初始剂量重新开始。如果毒性再次发生，则将剂量减少一个胶囊(每天140mg)。根据需要，可以考虑第二次减少剂量140mg。如果这些毒性在两次剂量减少后持续或再次发生，则停止依鲁替尼。推荐的剂量修改描述于下表24中。
表24.依鲁替尼的推荐的剂量修改
如果依鲁替尼由于除了毒性以外的原因(例如无关的疾病)而中断，则必须在42天内重新开始第一次中断情况。后续研究药物中断持续超过42天，依鲁替尼应当永久中断。
伴随药物和疗法
进行本实施例中公开的治疗的患者可能具有相应癌症的先前疗法。
进行即时治疗的患者可具有一种或多种伴随疗法，其可以是患者采用的任何新的或现有的药物或疗法。实例包括：
·药物，包括但不限于处方药、非处方药、生育控制药丸/贴剂/激素装置和顺势疗法制剂
·非药物疗法，包括但不限于热/激光/辐射程序、维生素、草药/补充剂。
一旦患者接受第一剂研究药物，伴随治疗的记录就限于为了治疗AE而使用的任何新药物或现有药物的修改。这些疗法连同诊断或使用原因记录在来源文件和适当的eCRF中。用于治疗AE的那些疗法应当与AE相关，并且也必须完成AE的记录。
在研究过程中，允许使用对患者的健康和福祉必要且不干扰研究评价的伴随药物。这包括使用适当的药物用于治疗AE和/或并发疾病。
在第1周期期间可以不开始用造血集落刺激生长因子(诸如粒细胞集落刺激因子或粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子)进行治疗，除非患者已经经历DLT。在第一个疗法周期期间不会开始用红血球刺激剂进行治疗。如果患者已经服用稳定剂量的红血球刺激剂，其可以在第1周期及后续周期期间继续使用相同剂量的药剂。
支持性护理包括：
·在第1周期的第1天在基线(给药前)及在给药后6小时和24小时，通过收集血液和实时(STAT)审查TLS实验室参数(即，尿酸、钾、磷酸盐、钙和肌酐)，仔细监测处于肿瘤溶解综合征的高风险中的患者(即，具有任何***[LN]≥10cm或绝对淋巴细胞计数[ALC]≥25×109/L且任何LN≥5cm的患者)。
·应根据每种机构的标准化方案起始感染预防(即预防性抗生素、抗病毒和/或抗真菌疗法)
从伴随使用中排除以下药物：
·在最后一剂治疗的少于5个半衰期内的抗癌疗法(化学疗法、放射疗法、免疫疗法)。第2组(与依鲁替尼组合的研究药物)中登记的患者继续用该组合治疗至少3个月。依鲁替尼可以停止和重新起始；然而，患者可以接受用依鲁替尼的治疗的总时间为2年。
·CYP2C19代谢物：应当密切监测研究治疗前已知CYP2C19代谢物异常(即广泛或不佳)的患者。如果可能，应当在第一次给药前终止用CYP2C19底物治疗患者，或至少转变为不是CYP2C19基质(抑制剂或诱导剂)的替代、但等同的治疗。如果患者必须保持使用CYP2C19基质，则应当谨慎使用研究药物进行治疗，并且在整个研究的持续时间密切观察患者。
·第2组患者(即，与依鲁替尼组合的研究药物)应当避免同时施用强或中的CYP3A抑制剂(例如，卡马西平、利福平、苯妥英和圣约翰草)，因为这些物质可能增加依鲁替尼血浆浓度。
·第2组患者应当避免同时施用强CYP3A诱导剂，因为这些物质可能降低依鲁替尼浓度。
·患者不得服用H2-受体拮抗剂(诸如西咪替丁、雷尼替丁和法莫替丁)或任何质子泵抑制剂(诸如奥美拉唑、兰索拉唑、埃索美拉唑和潘托拉唑)。患者必须在开始治疗前7天内停止这些药物。
性活跃的患者及其伴侣必须在进入研究前和参与研究的持续时间和最后一剂研究药物后30天使用有效的避孕方法，且失败率较低。以下被认为是有效的避孕措施：(1)口服避孕药丸；(2)保险套加杀精剂；(3)隔膜加杀精剂；(4)禁欲；(5)患者或伴侣手术消毒；(6)绝经后超过2年的患者或伴侣；或(7)可注射或可植入的药剂/装置。
安全性和效力评估
给药前评价
以下程序和评估在签署ICF后施用第一剂研究药物前14天内进行，除非另有说明：
·收集并记录完整的病史，包括组织学证实的CLL/SLL的诊断。
实例包括：
-进行全面体检，包括身高(cm)和重量(kg)，并审查表明活跃疾病的以下全身症状
-在先前6个月内非故意重量减轻≥10％
-明显疲劳
-发热≥100.5°F或(38.0℃)持续≥2周且无感染的证据
-盗汗持续≥1个月，且无感染的证据
·记录生命体征(体温、呼吸、心率、血压)
·评价ECOG表现状态
·评估实验室参数，包括全血清化学、血液学(全血细胞计数[CBC]及差异和血小板计数)、凝血参数(PT和aPTT)、尿分析、血清免疫球蛋白、直接抗球蛋白和血清β2-微球蛋白
·进行12-引线ECG，包括评价纠正的QT间距(使用Fridericia氏校正公式)(QTcF)
·妊娠测试(针对有生育能力的女性的尿或血清β-人绒毛膜***妊娠测试)
·记录过去14天内的所有伴随药物，包括所有处方药、非处方药和营养补充剂
·根据2018 IWCLL指南评价基线疾病状态(在第1周期第1天的28天内)：
-对颈部、胸部、腹部和骨盆进行计算机断层(CT)扫描，用于评估***病、肝肿大和脾肿大；
-用匹配的外周血样品进行骨髓活检和抽吸
-应当获得以下(在第1周期第1天的28天内)：del(13q)、del(11q)、del(17p)、add(12)[外周血]的分子细胞遗传学(FISH)；用CpG(或机构标准)刺激[骨髓]进行核型分析；TP53突变分析[外周血]；和/或免疫球蛋白重链可变(IGHV)突变分析[外周血]
·正电子发射断层(PET)扫描以评估可能的Richter氏转化(在第一次给药的14天内)
在施用第一剂研究药物前3天(72小时)内的任何时间进行以下基线程序和评估(如果筛选检查在第一次给药前3天内，则无需在第1周期第1天重复)：
·全面体检，包括重量(kg)
·记录生命体征(体温、呼吸、心率、血压)
·评估实验室参数：全血清化学；血液学(具有差异和血小板计数的CBC)；妊娠测试(针对有生育能力的女性的尿或血清β-人绒毛膜***妊娠测试)
·记录所有伴随药物，包括所有处方药、非处方药和营养补充剂·审查所有纳入/排除标准，并确定患者是否符合纳入研究的所有合格性标准。获得医疗监测中心(或其指定人士)批准以登记患者。
治疗评价
(i)第1周期
第1天
·全面体检，包括重量(kg)
·在第一次给药前记录生命体征(温度、呼吸、心率、血压)
·在第一次给药前获得基线体征和症状
·评价ECOG表现状态
·评估实验室参数：全血清化学；血液学(具有差异和血小板计数的CBC)；在基线时(给药前)和给药后6小时和24小时(实时[STAT]审查)在处于TLS的高风险中的患者(即具有任何LN≥10cm或ALC≥25×109/L且任何LN≥5cm的患者)中进行TLS实验室评价；和/或妊娠测试(针对有生育能力的女性的尿或血清β-人绒毛膜***妊娠测试)
·在临第一次给药前进行12-引线ECG，包括评价QTcF
·仅在1期中收集血液用于分析PK参数
·收集血液用于探索性生物标志物评价
·评价AE
·记录所有伴随药物，包括所有处方药、非处方药和营养补充剂在第1天至第28天 每天
·指导患者在第1天至第28天每天口服研究药物和依鲁替尼(对于第2组患者)
·指导患者在其给药日志中记录其服药的日期和时间
每周(第8天、第15天和第22天[±3天])
在第1周期期间，每周(或如另外指明)进行以下活动和评估：
·进行简化的体检(针对AE或症状)
·记录生命体征(温度、呼吸、心率、血压)
·评估实验室参数：全血清化学；血液学(具有差异和血小板计数的CBC)
·在第8天，收集血液用于探索性生物标志物
·评价AE
·记录所有伴随药物，包括所有处方药、非处方药和营养补充剂
第28天
在第28天，仅根据1期中的部分7.3中的时间表，收集血液用于分析PK参数
(ii)第2周期
第1天
·全面体检，包括重量(kg)
·记录生命体征(温度、呼吸、心率、血压)
·评估实验室参数：全血清化学；血液学(具有差异和血小板计数的CBC)；妊娠测试(针对有生育能力的女性的尿或血清β-人绒毛膜***妊娠测试)
·评价ECOG表现状态
·在临给药前进行12-引线ECG，包括评价QTcF
·收集血液用于探索性生物标志物评价
·评价AE
·记录所有伴随药物，包括所有处方药、非处方药和营养补充剂
在第1天至第28天每天
·指导患者在第1天至第28天每天口服研究药物和依鲁替尼(对于第2组患者)
·指导患者在其给药日志中记录其服药的日期和时间
第15天[±3天]
·进行简化的体检(针对AE或症状)
·记录生命体征(温度、呼吸、心率、血压)
·评估实验室参数：全血清化学；血液学(具有差异和血小板计数的CBC)
·评价AE
·记录所有伴随药物，包括所有处方药、非处方药和营养补充剂
第28天(-4天)
·疾病评价–根据2018 IWCLL评价应答，包括审查指示活动疾病的以下全身症状：在先前6个月内无意重量减轻≥10％，明显疲劳；发热≥100.5°F或(38.0℃)持续≥2周且无感染的证据，和/或盗汗持续≥1个月且无感染的证据；和/或颈部、胸部、腹部和骨盆的CT扫描，评估***病、肝肿大和脾肿大
·如果临床和实验室结果指示可能的CR：收集骨髓并抽取匹配的外周血用于CBC和确定MRD(中央实验室评价)
(iii)第≥3周期
患者可以在28天周期内以与第1周期期间相同的剂量继续接受研究药物，直至他们经历不可接受的毒性或明确的疾病进展。
第1天
在第3周期的第1天及所有后续治疗周期进行以下活动和评估：
·全面体检，包括重量(kg)
·记录生命体征(温度、呼吸、心率、血压)
·评估实验室参数：全血清化学；血液学(具有差异和血小板计数的CBC)；和/或妊娠测试(针对有生育能力的女性的尿或血清β-人绒毛膜***妊娠测试)
·评价ECOG表现状态
·在临给药前进行12-引线ECG，包括评价QTcF
·收集血液用于分析PK参数
·收集血液用于探索性生物标志物
·评价AE
·记录所有伴随药物，包括所有处方药、非处方药和营养补充剂
在第1天至第28天每天
·指导患者在第1天至第28天每天口服研究药物和依鲁替尼(对于第3组患者)
·指导患者在其给药日志中记录其服药的日期和时间
第15天(±3天)
在第3周期和所有后续治疗周期中，进行以下活动和评估：
·进行简化的体检(针对AE或症状)
·记录生命体征(温度、呼吸、心率、血压)
·评估实验室参数：全血清化学；和/或血液学(具有差异和血小板计数的CBC)
·评价AE
·记录所有伴随药物，包括所有处方药、非处方药和营养补充剂
第28天(-4天)
在每个偶数周期(即第4周期、第6周期等)的第28天进行以下评估：
·疾病评价–根据2018 IWCLL评价应答，包括审查指示活动疾病的以下全身症状：在先前6个月内无意重量减轻≥10％，明显疲劳；发热≥100.5°F或(38.0℃)持续≥2周且无感染的证据，和/或盗汗持续≥1个月且无感染的证据；和/或颈部、胸部、腹部和骨盆的CT扫描，评估***病、肝肿大和脾肿大
·如果临床和实验室结果指示可能的CR：收集骨髓并抽取匹配的外周血用于CBC和确定MRD(中央实验室评价)
治疗结束评价
如果患者在任何时间停止研究治疗，则尽可能早且在最后一剂研究药物后14天内或决定停止研究治疗的14天内安排随访。如果患者撤回定期的安排的随访的决定，则该访问可能成为研究结束随访，而不是让患者返回进行额外的随访。
·进行全面体检，包括重量(kg)
·记录生命体征(温度、呼吸、心率、血压)
·评估实验室参数：全血清化学；血液学(具有差异和血小板计数的CBC)；和/或妊娠测试(针对有生育能力的女性的尿或血清β-人绒毛膜***妊娠测试)
·评价ECOG表现状态
·进行12-引线ECG，包括评价QTcF
·疾病评价–根据2018 IWCLL评价应答，包括审查指示活动疾病的以下全身症状：在先前6个月内无意重量减轻≥10％，明显疲劳；发热≥100.5°F或(38.0℃)持续≥2周且无感染的证据，和/或盗汗持续≥1个月且无感染的证据；和/或颈部、胸部、腹部和骨盆的CT扫描，评估***病、肝肿大和脾肿大
·如果临床和实验室结果指示可能的CR：收集骨髓并抽取匹配的外周血用于CBC和确定MRD(中央实验室评价)
·收集血液用于探索性生物标志物评价
·评价AE
·记录所有伴随药物，包括所有处方药、非处方药和营养补充剂
评估的标准
安全性终点
1期
从第一次给药时直至最后一次给药研究药物后30天，监测安全性。在1期期间，在第1周期后评估安全性终点。由研究者、主办者和CRO代表构成的剂量递增委员可获得接受研究药物的所有患者的完整安全性概况，以使得能够作出决定。
主要安全性终点是通过评估体检、生命体征、实验室参数、请求和未请求的AE(包括DLT)以及所有死亡原因(两个研究阶段中最后一次给药起最多达30天)来评价连续口服施用的研究药物的耐受性和毒性。在2期中，还在最后一次给药起60天评估所有死亡原因。
总体安全性概况的特征在于研究药物的类型、频率、严重程度、严重性、时机、持续时间以及其与AE和实验室异常的关系。
治疗中出现的AE(TEAE)，即具有第一次发作或在第一次给药研究药物后严重程度恶化的AE，将使用医学监管活动词典(MedDRA)v20.0或更高版本进行分类，并根据NCICTCAE v5.0进行分级。将报告所有DLT，并鉴定MTD和RP2D。
效力终点
2期
该研究的2期部分的主要效力终点是根据IWCLL指南2018(例如，参见Hallek等人“Guidelines for Diagnosis,Indications for Treatment,Response Assessment andSupportive Management of Chronic Lymphocytic Leukemia”(NCI-主办的慢性淋巴细胞性白血病国际研讨会指南的更新版)确定具有先前治疗的CLL/SLL的患者中的ORR(CR或PR率)。
次要效力终点包括：
·DoR，定义为从记录肿瘤应答到疾病进展的时间。
·PFS，定义为从研究登记到客观肿瘤进展或死亡的时间。
·OS，定义为从研究登记到由于任何原因死亡的时间。
效力评价在第2周期/第28天进行，且然后每个偶数周期(第4周期/第28天、第6周期/第28天等)进行。应答率在第1阶段和第2阶段根据Simon 2阶段设计进行计算。
DSMB是在该研究的2期部分期间来自该研究的监测关键结果。
根据2018 IWCLL指南，每2个周期评价疾病应答。
药代动力学终点
在第1周期中的第1天和第28天，在该研究的1期部分中登记的所有患者中进行口服研究药物的血浆PK分析。还可以评估研究药物的已知代谢物(如果有的话)。计算标准血浆PK参数，包括：Cmax、Tmax、从时间0至24小时的AUC(AUC0-24)、AUC0 inf、从时间0至时间t的AUC(AUCt)、半衰期(t1/2)和使用非房室方法的清除率(CL)。如果数据允许，在1期第1周期中估算剂量比例性和累积比率。应当在方案规定的日期抽取PK样品。
通过描述性统计(包括平均值、n、标准偏差、变异系数、最小值、最大值和中值)概述口服研究药物的血浆浓度。在该研究之前，已开发了一种验证的用于检测人血浆中的研究药物的生物分析方法，以确定测定敏感性、特异性、线性和可重复性。
药效动力学终点
如下在研究期间评估PD终点(包括生物标志物评估)：
·血液的潜在生物标志物，包括但不限于可溶性AXL、AXL表达和磷酸化、GAS6和间充质转录因子
样品的分析仅限于与研究药物的活性或潜在疾病的生物标志物相关的评估。
不良反应和剂量修改
不良事件(AE)被定义为与人类中使用药物相关的任何不想要的医疗事件，无论是否被视为药物相关的。因此，AE可能是与药物使用暂时相关的任何不利和意外的体征(包括异常实验室发现)、症状或疾病，无论是否与药物产品相关。
疑似的不良反应是有合理可能性由药物引起的任何AE。合理可能性意指有证据表明药物和AE之间的因果关系。
意外AE或意外疑似不良反应是本领域技术人员不知道、未以已观察到的特异性或严重程度列出或与方案中描述的风险信息不一致的AE或疑似不良反应。
毒性根据NCI CTCAE,v5.0进行评价。当无法得到NCI CTCAE级别时，可以使用以下毒性分级：轻度、中度、严重、威胁生命或致命。
表25.毒性的级别
a工具性每日生活活动(ADL)是指准备膳食、购买食品杂货或衣服、使用电话、理财等。
b自理ADL是指洗澡、穿衣服和脱衣服、自己进食、使用厕所、服药，而非卧床不起。
AE与研究药物的关系应当定义如下：
严重不良事件(SAE)被定义为表明重大危险、禁忌症、副作用或预防措施的任何剂量下的任何疑似不良反应，且导致以下结果：
·死亡；
·威胁生命的事件(即，患者在事件发生时死于该事件的立即风险)；
·持续、明显、严重或永久性残疾或需要干预以预防这种残疾的事件；
·需要住院(inpatient hospitalization)或延长住院的事件；
·先天性异常/出生缺陷；或
·可能危害患者或可能需要干预以预防上面列出的其他后果之一的医学明显的事件。
实施例50：用于合成M3(SULF-1)和M4(SULF-2)的途径
根据以下方案制备代谢物M3和M4。
SULF-1
SULF-2
实施例51：结晶形式的溶剂和浆料筛选
实验条件和从溶剂筛选和浆料筛选获取的简要结果列于表3-6中。可变的有机溶剂和与水的那些混合物被用作溶剂体系。从这些筛选研究，通过XRPD图案指定10种晶体形式，形式A′、A、B、C、D、E、F、G、H和I，如图98中所示。这些晶体的热行为(DSC/TGA图)也显示于图99A-99I中。形式A′、A、B、C和D的吸湿等温线提供于图116中。
形式A
如表4中所示进行溶剂筛选。形式A未转化，并且在没有H2O的几乎有机溶剂体系中重结晶。从初始研究表明的两种类型的化学计量晶体分别用于浆料筛选中，如表3和表5中所示。在筛选期间，将它们维持在除了H2O外的几乎溶剂体系中。这表明形式A是基本稳定且占优势的形式。在H2O中，形式A被转化为形式B，就像在溶剂筛选中观察到的那样。两种类型的形式A的热分析图显示于图99A中。对于这些批次观察到显著的重量减轻，其熔点高于预期的熔点。吸湿等温线显示，这些形式A是吸湿性的，如图116中所示，并且图117中所示的额外XRPD分析发现，形式A在水分吸收/解吸循环后得到维持。在稳定性研究期间未观察到显著的变化，如表26中所示。
表26.稳定性结果的概述
| 形式 | 初始 | 40℃ | 40℃/75％RH | 60℃ | 60℃/75％RH |
| A′ | 97.9％ | 98.1％ | 98.0％ | 97.8％ | 98.1％ |
| A | 99.3％ | 99.3％ | 99.3％ | 99.3％ | 99.3％ |
| D | 98.4％ | 98.2％ | 98.4％ | 98.2％ | 98.2％ |
最终鉴定两种类型的形式A的化学计量晶体，因为2批结构(I)的化合物的酒石酸盐的XRPD图案是相同的，但通过离子色谱进行的定量分析是不同的。这两种类型的化学计量晶体的游离碱和酒石酸的比率为1:1.5(形式A′)和1:2(形式A)。形式A的拉曼光谱是一致的，如图118中所示。
形式B
在溶剂和浆料筛选中，通过在H2O进行重结晶/悬浮，形式A被转化为形式B，如表4和表5中所示。形式B的XRPD图案与形式A的XRPD图案类似，但它似乎被另一种晶体形式污染，如图98中所示。观察到约4％的重量损失和从附着的水/溶剂得到的宽吸热峰，并且熔点超过130℃，如图99B中所示。吸湿等温线显示，形式B是吸湿性的，如图116中所示。通过离子色谱的定量分析表明，游离碱和酒石酸的化学计量比为1:1.2。代表性的拉曼光谱显示于图118中，但拉曼光谱根据材料的测量面积而变化。该结果强烈表明，形式B是形式A和另一种形式的混合物。
形式C
在溶剂筛选中，如表4中所示，通过用H2O和醇(诸如甲醇和2-丙醇)的混合物对形式A进行再结晶而形成形式C。在热分析图中观察到约10％的重量损失和宽吸热峰，如图99C中所示。这表明形式C可能是与醇的溶剂化物，并且根据温度的增加而消除醇。如图116中所示的吸湿等温线表明，形式C是吸湿性的。
形式D
形式D不是在溶剂筛选中从形式A形成的。浆料筛选中使用的形式D在乙醇和2-丙醇中未转化，但在其他溶剂中转化为各种形式，E、F、G、H和I，如表6中所示。该数据表明，形式D在制备过程中难以控制。在热分析图中观察到约3％的重量损失和由于附着的水/溶剂导致的宽吸热峰，如图99D中所示。图116中所示的吸湿等温线表明，形式D是吸湿性的。如图117中所示的额外XRPD分析发现，在吸湿/解吸循环后，形式D被转化为其他形式。在稳定性研究期间没有观察到显著变化，如表26中所示。游离碱和酒石酸的化学计量比为1:1。
形式E
在浆料筛选中，仅在甲醇中在室温下，从形式D形成形式E，如表6中所示。在热分析图中观察到约4％的重量损失，如图99E中所示。
形式F
在浆料筛选中，在室温和50℃下，在醇和H2O的混合物中，从形式D形成形式F，如表6中所示。在热分析图中观察到约6％的重量损失，如图99F中所示。
形式G
在浆料筛选中，在室温和50℃下，在H2O中，从形式D形成形式G，如表6中所示。热分析图提供于图99G中。由于样品数量不足，无法进行进一步研究。
形式H
在浆料筛选中，仅在甲醇-H2O(5:1)中在室温下，从形式D形成形式H，如表6中所示。热分析图提供于图99H中。
形式I
在浆料筛选中，仅在乙腈(acetnirnile)-H2O(10:1)中在50℃下，从形式D形成形式I，如表6中所示。热分析数据提供于图99I中。
结论
多晶型物筛选揭示，结构(I)的化合物的酒石酸盐具有涉及溶剂化物的九种晶体形式。其中，当在制备过程中良好控制其化学计量比时，在筛选中的优势和可接受的固体形式特性的方面，形式A可能是酒石酸盐的最合适的形式。
本说明书或所附申请数据表中提及的所有美国专利、美国专利申请公开、美国专利申请、外国专利、外国专利申请和非专利公开都在不与本说明书不一致的程度上通过引用并入本文。
从前述内容应理解，尽管本发明的具体实施方案在本文中出于举例说明的目的进行描述，但在不偏离本发明的精神和范围的情况下，可以进行各种修改。因此，除了通过所附权利要求之外，本发明不受限制。
其他实施方案
本说明书中公开的所有特征可以以任何组合进行组合。本说明书中公开的每个特征可以被用于相同、等同或类似目的的替代特征所替代。因此，除非另有明确说明，否则公开的每个特征仅是一个通用系列的相同或相似特征的实例。
根据以上描述，本领域技术人员可以容易地确定本发明的基本特征，并且在不脱离其精神和范围的情况下，可以进行本发明的各种改变和修改，以使其适应于各种用途和条件。因此，其他实施方案也在权利要求之内。
等同方案
尽管本文已经描述和举例说明几个创造性实施方案，但本领域普通技术人员将容易想到用于执行功能和/或获得本文描述的结果和/或一个或多个优点的各种其他方式和/或结构，并且此类变化和/或修改各自都被认为在本文描述的创造性实施方案的范围内。更通常，本领域技术人员将容易理解，本文描述的所有参数、尺寸、材料和配置都意为示例性的，并且实际参数、尺寸、材料和/或配置将取决于使用创造性教导的一种或多种具体应用。本领域技术人员将认识到或能够仅通过常规实验确定与本文所述的具体的创造性实施方案的许多等同方案。因此，应当理解，前述实施方案仅通过实例的方式呈现，并且在所附权利要求及其等同方案的范围内，创造性实施方案可以以不同于具体描述和要求的方式实施。本公开的创造性实施方案针对本文描述的每个单独的特征、***、物品、材料、试剂盒和/或方法。另外，两种或更多种此类特征、***、物品、材料、试剂盒和/或方法的任何组合，如果此类特征、***、物品、材料、试剂盒和/或方法不是相互不一致的，则包括在本公开的创造性范围内。
如本文所定义和使用的所有定义应被理解为优于字典定义、通过引用并入的文件中的定义和/或定义术语的普通含义。
本文公开的所有参考文献、专利和专利申请都关于各自引用的主题(其在一些情况下可以涵盖文件的整体)通过引用并入。
除非明确相反指明，如本文中的说明书和权利要求书中使用的不定冠词“一个/种(a)”和“一个/种(an)”应理解为意指“至少一个/种”。
如本文中的说明书和权利要求书中使用的短语“和/或”应理解为意指如此结合的要素中的“任一者或两者”，即在一些情况下结合存在且在其他情况下分离存在的要素。以“和/或”列出的多个要素应当以相同的方式解释，即如此结合的要素中的“一个或多个”。除了由“和/或”条款明确指明的要素以外，其他要素可以任选地存在，无论与明确指明的要素相关还是无关。因此，作为非限制性实例，提及“A和/或B”，当与开放式语言、诸如“包含”结合使用时，，在一个实施方案中仅可指A(任选地包括除了B以外的要素)；在另一个实施方案中，仅可指B(任选地包括除了A以外的要素)；在又另一个实施方案中，可指A和B两者(任选地包括其他要素)；等。
如本文中的说明书和权利要求书中使用，“或”应理解为具有与如上文定义的“和/或”相同的含义。例如，当将列表中的项目分开时，“或”或“和/或”应被解释为包括性的，即包括至少一个，但也包括许多要素或要素列表中的多于一个和任选地额外未列出的项目。只有明确相反指明的术语，诸如“仅之一”或“恰好之一”，或当在权利要求中使用时，“由…组成”将是指包括许多要素或要素列表中的恰好一个要素。通常，如本文所用的术语“或”仅应被解释为指示排他性的替代方案(即，“一个或另一个，但不是两者”)，条件是前置排他性的术语，诸如“任一”、“之一”、“仅之一”或“恰好一个”。“主要由…组成”，当在权利要求中使用时，应当具有其在专利法领域中使用的普通含义。
如本文中的说明书和权利要求书中使用，涉及一个或多个要素的列表的短语“至少一个”应理解为意指选自要素列表中的任何一个或多个要素的至少一个要素，但不一定包括要素列表内具体列出的每个和每一要素中的至少一个，并且不排除要素列表中的要素的任何组合。该定义还允许除了短语“至少一个”所指的要素列表内明确鉴定的要素之外，要素可以任选地存在，无论与明确鉴定的要素相关还是无关。因此，作为非限制性示例，“A和B中的至少一个”(或等同地，“A或B中的至少一个”，或等同地，“A和/或B中的至少一个”)在一个实施方案中可以指至少一个，任选地包括多于一个A，且不存在B(且任选地包括除了B以外的要素)；在另一个实施方案中，可以指至少一个，任选地包括多于一个B，且不存在A(并且任选地包括除了A以外的要素)；在又另一个实施方案中，可以指至少一个，任选地包括多于一个A，和至少一个，任选地包括多于一个B(并且任选地包括其他要素)；等等。
还应当理解，除非明确相反指明，否则在本文请求保护的包括多于一个步骤或动作的任何方法中，该方法的步骤或动作的顺序不一定限于阐述该方法的步骤或动作的顺序。
Claims (237)
1.结构(I)的化合物的酒石酸盐：
2.权利要求1的酒石酸盐，其具有约1:1至约2:1的酒石酸与结构(I)的化合物的摩尔比。
3.权利要求2的酒石酸盐，其具有约2:1的酒石酸与结构(I)的化合物的摩尔比。
4.权利要求1-3中任一项的酒石酸盐，其中所述酒石酸盐是L-(+)-酒石酸的盐。
5.权利要求1-4中任一项的酒石酸盐的结晶形式。
6.权利要求5的结晶形式，其为结晶形式A，具有约2:1的酒石酸与结构(I)的化合物的摩尔比。
7.权利要求6的结晶形式，其包含形式A。
8.权利要求7的结晶形式，其基本上由形式A组成。
9.权利要求8的结晶形式，其中形式A呈基本上纯的形式。
10.权利要求7-9中任一项的结晶形式，其特征在于x-射线粉末衍射(XRPD)图案，其包括单位为2-θ的11.2±0.2、17.1±0.2和19.9±0.2处的峰。
11.权利要求10的结晶形式，其进一步包含单位为2-θ的15.4±0.2处的峰。
12.权利要求11的结晶形式，其进一步包含单位为2-θ的7.0±0.2处的峰。
13.权利要求7-9中任一项的结晶形式，其特征在于包含三个或更多个峰的XRPD图案，所述峰以2-θ为单位，选自7.0±0.2、11.2±0.2、15.4±0.2、16.3±0.2、17.1±0.2、19.9±0.2、21.6±0.2和25.5±0.2。
14.权利要求13的结晶形式，其中所述XRPD图案包含4、5、6、7或8个峰，其以2-θ为单位，选自7.0±0.2、11.2±0.2、15.4±0.2、16.3±0.2、17.1±0.2、19.9±0.2、21.6±0.2和25.5±0.2。
15.权利要求14的结晶形式，其中所述XRPD图案与图61中显示的XRPD图案基本上相同。
16.权利要求7-15中任一项的结晶形式，其特征在于包含单位为℃的约185.0-194.0的吸热峰的差示扫描量热法(DSC)热图。
17.权利要求16的结晶形式，其中所述吸热峰具有约186.3℃的起始温度。
18.权利要求17的结晶形式，其特征在于包含单位为℃的约107.8、约152.1和约189.1的吸热峰的DSC热图。
19.权利要求18的结晶形式，其中所述DSC热图与图64中显示的热图基本上相同。
20.权利要求7-19中任一项的结晶形式，其特征在于在160℃下显示约1.8％的重量损失的热重分析(TGA)热图。
21.权利要求20的结晶形式，其中所述TGA热图与图64中显示的热图基本上相同。
22.权利要求7-21中任一项的结晶形式，其具有至少99％的初始纯度和在60±5％的相对湿度下在约25℃±2℃下储存最长达约15天后至少99％的后续纯度。
23.权利要求7-22中任一项的结晶形式，其具有至少99％的初始纯度和在75±5％的相对湿度下在约40℃±2℃下储存最长达约15天后至少99％的后续纯度。
24.组合物，其包含权利要求1-4中任一项的酒石酸盐或权利要求5-23中任一项的结晶形式。
25.权利要求24的组合物，其包含基本上纯的形式的形式A。
26.权利要求25的组合物，其包含至少90重量％形式A。
27.权利要求25或权利要求26的组合物，其基本上由结晶形式A组成。
28.权利要求24-27中任一项的组合物，其中所述组合物是药物组合物，且进一步包含药学上可接受的载体或稀释剂。
29.权利要求28的药物组合物，其进一步包含一种或多种额外的治疗剂。
30.权利要求29的药物组合物，其中所述一种或多种额外的治疗剂独立地选自激素治疗剂、化学治疗剂、免疫治疗剂、细胞生长因子和抑制细胞生长因子受体作用的药剂。
31.权利要求24-30中任一项的药物组合物，其中所述药物组合物被配制用于口服施用。
32.权利要求31的药物组合物，其中所述药物组合物被配制为胶囊或片剂。
33.包含权利要求24-32中任一项的药物组合物的单位剂量，其中单位剂量包含约1-100mg的酒石酸盐。
34.权利要求33的单位剂量，其包含约1mg、4mg、16mg、25mg、50mg、75mg或100mg的所述酒石酸盐。
35.权利要求33或34的单位剂量，其中所述单位剂量被配制在明胶硬胶囊中用于口服施用。
36.治疗癌症的方法，所述方法包括向有此需要的受试者施用治疗有效量的权利要求1-4中任一项的酒石酸盐、或权利要求5-23中任一项的结晶形式、或权利要求24-32中任一项的药物组合物、或权利要求33-35中任一项的单位剂量。
37.权利要求36的方法，其包括向所述受试者施用治疗有效量的酒石酸盐，所述酒石酸盐具有约2:1的酒石酸与结构(I)的化合物的摩尔比。
38.权利要求37的方法，其包括向所述受试者施用治疗有效量的所述结晶形式A。
39.权利要求38的方法，其中形式A呈基本上纯的形式。
40.权利要求36-39中任一项的方法，其中所述受试者是人。
41.权利要求36-40中任一项的方法，其中所述癌症是实体肿瘤或血液学癌症。
42.权利要求41的方法，其中所述实体肿瘤是骨、消化器官、生殖器官、头、颈、肺、心脏、皮肤、神经***、内分泌***、神经内分泌***、泌尿***、软组织或脑的肿瘤。
43.权利要求41的方法，其中所述造血***癌症是多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征(MDS)、急性髓性白血病(AML)、急性成淋巴细胞性白血病(ALL)、急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)、套细胞淋巴瘤、弥漫性大B-细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤或非霍奇金氏淋巴瘤。
44.权利要求41-43中任一项的方法，其中所述癌症是晚期实体肿瘤和/或在接受一种或多种先前的癌症疗法后已显示疾病进展。
45.权利要求41-44中任一项的方法，其中所述实体肿瘤是抗性的、重现的、难治的或复发的实体肿瘤。
46.权利要求44或权利要求45的方法，其中所述一种或多种先前的癌症疗法包括激素治疗剂、化学治疗剂、免疫治疗剂或细胞表面受体抑制剂。
47.权利要求46的方法，其中所述化学治疗剂是烷化剂、基于铂的药剂、抗代谢物、抗癌抗生素或植物来源的抗癌剂。
48.权利要求47的方法，其中所述化学治疗剂选自卡铂、顺铂、米铂、奈达铂和奥沙利铂。
49.权利要求44或权利要求45的方法，其中所述一种或多种先前的癌症疗法包括免疫疗法、化学疗法或其组合。
50.权利要求41-42和44-49中任一项的方法，其中所述实体肿瘤选自非小细胞肺癌(NSCLC)、结肠直肠癌(CRC)、卵巢癌、黑色素瘤、乳腺癌、神经内分泌癌、***癌、胆管癌、子宫癌和胰腺癌。
51.权利要求36-50中任一项的方法，其中所述受试者在接受免疫疗法后具有至少稳定的疾病。
52.权利要求51的方法，其中所述受试者已经接受最多达两个周期的免疫疗法。
53.权利要求36-52中任一项的方法，其中所述受试者具有EGFR+NSCLC。
54.权利要求53的方法，其中所述受试者在接受一种或多种包含一种或多种酪氨酸激酶抑制剂(TKI)的化学疗法后已表明疾病进展。
55.权利要求54的方法，其中所述一种或多种TKI包括EGFR TKI。
56.权利要求53-55中任一项的方法，其中所述受试者在采用最多两线TKI后具有至少稳定的疾病。
57.权利要求36-52中任一项的方法，其中所述受试者具有BRAF-、KRAS-或NRAS-突变的结肠直肠癌(CRC)。
58.权利要求36-52中任一项的方法，其中所述受试者具有持续性或复发性卵巢癌。
59.权利要求58的方法，其中所述受试者具有对基于铂的药剂的难治性或抗性，或已经经历先前的疗法，或两者兼而有之。
60.权利要求59的方法，其中所述基于铂的药剂是卡铂、顺铂、米铂、奈达铂或奥沙利铂。
61.权利要求36-52中任一项的方法，其中所述受试者具有BRAF-突变的黑色素瘤。
62.权利要求61的方法，其中所述受试者在免疫疗法、包含一种或多种BRAF/MEK抑制剂的化学疗法或其组合后具有进展的疾病。
63.权利要求36-62中任一项的方法，其中所述受试者具有对免疫疗法的抗性，且其中所述方法进一步包括对所述受试者进行相同的免疫疗法。
64.权利要求63的方法，其中所述免疫疗法包含抗PD-1或抗PD-L1药剂。
65.权利要求36-62中任一项的方法，其中所述受试者具有对包含TKI的化学疗法的抗性，且其中所述方法进一步包括对所述受试者进行相同的化学疗法。
66.权利要求65的方法，其中所述受试者未采用等同于15mg/天的强的松的量的类固醇。
67.权利要求65或权利要求66的方法，其中所述方法进一步包括向所述受试者施用伴随的类固醇。
68.权利要求36-67中任一项的方法，其中所述受试者至少在第一次给药所述酒石酸盐前一个月内不接受抗癌疗法，至少在第一次给药所述酒石酸盐前7天内不接受CYP2C19代谢物和/或H2-受体拮抗剂。
69.权利要求36-68中任一项的方法，其中向所述受试者以约1.0、1.5、3.0、6.0、9.0、12.0、16.0、21.0、28.0、37.0、49.0或65.0mg/m2的酒石酸盐的每日剂量口服施用所述酒石酸盐、其结晶形式或包含此的药物组合物。
70.权利要求36-68中任一项的方法，其中向所述受试者以约20-100mg、任选地约25-75mg的酒石酸盐的每日剂量口服施用所述酒石酸盐、所述其结晶形式或所述药物组合物。
71.权利要求70的方法，其中所述酒石酸盐的每日剂量是约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、约75mg、约80mg、约85mg、约90mg、约95mg或约100mg。
72.权利要求36-71中任一项的方法，其中所述方法包括一个或多个治疗周期，其各自由约28天组成，且其中在每个治疗周期中，将所述酒石酸盐、其结晶形式或药物组合物每天施用于所述受试者21天，随后为7天的停药期。
73.权利要求44或权利要求45的方法，其中所述血液学癌症是慢性淋巴细胞性白血病(CLL)或小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)。
74.权利要求73的方法，其中所述受试者已经经历一种或多种针对CLL或SLL的先前疗法。
75.权利要求73或权利要求74的方法，其中所述受试者无法耐受所述先前疗法，或在所述先前疗法后具有进展的疾病。
76.权利要求75的方法，其中所述先前疗法包括B-细胞受体拮抗剂、BCL-2拮抗剂或其组合。
77.权利要求73-76中任一项的方法，其中所述受试者未通过另一癌症疗法同时治疗。
78.权利要求73-77中任一项的方法，其中向所述受试者以约20-100mg、任选地约25-75mg的酒石酸盐的每日剂量口服施用所述酒石酸盐、所述其结晶形式或所述药物组合物。
79.权利要求78的方法，其中所述酒石酸盐的每日剂量是约25mg、约33mg、约45mg、约50mg、约58mg、约75mg或约100mg。
80.权利要求73-79中任一项的方法，其进一步包括向所述受试者施用BTK抑制剂。
81.权利要求80的方法，其中所述BTK抑制剂选自依鲁替尼、acalabrutinib、zanubrutinib和LOXO-305。
82.权利要求81的方法，其中所述BTK抑制剂是依鲁替尼。
83.权利要求80-82中任一项的方法，其中对所述受试者进行先前的BTK抑制剂的治疗，并且在所述BTK抑制剂治疗后已经进展。
84.权利要求80-83中任一项的方法，其中向所述受试者以约20-100mg的酒石酸盐的每日剂量施用所述酒石酸盐、其结晶形式或包含此的药物组合物。
85.权利要求84的方法，其中所述酒石酸盐的每日剂量是约20mg、约25mg、约33mg、约45mg、约50mg、约58mg、约75mg或约100mg。
86.权利要求73-85中任一项的方法，其进一步包括针对肿瘤溶解综合征(TLS)监测所述受试者。
87.权利要求73-86中任一项的方法，其进一步包括向所述受试者施用抗生素、抗病毒剂、抗真菌剂或其组合。
88.权利要求73-87中任一项的方法，其中所述方法包括一个或多个治疗周期，其各自由约28天组成，且其中在每个周期中，向所述受试者每天一次口服施用所述酒石酸盐、其结晶形式或包含此的药物组合物，持续28天。
89.权利要求36-88中任一项的方法，其中相对于可溶性AXL、GAS6或间充质转录因子的参考水平，所述受试者具有升高水平的可溶性AXL、AXL表达和/或磷酸化、生长停滞特异性6(GAS6)、间充质转录因子或其组合。
90.权利要求36-89的方法，其进一步包括，在施用步骤之前，将所述受试者鉴定为相对于可溶性AXL、GAS6或间充质转录因子的参考水平具有升高水平的可溶性AXL、AXL表达和/或磷酸化、生长停滞特异性6(GAS6)、间充质转录因子或其组合。
91.权利要求90的方法，其中所述鉴定步骤通过如下进行：获得候选受试者的外周血样品或骨髓样品，和测量所述外周血样品或骨髓样品中的可溶性AXL的水平、GAS6的水平、间充质转录因子的水平或其组合。
92.权利要求36-91中任一项的方法，其在施用步骤后进一步包括，针对腹泻、恶心、呕吐、味觉障碍、贫血和血小板减少症的一种或多种症状检查受试者。
93.权利要求92的方法，其进一步包括，如果检测到一种或多种症状，则降低所述酒石酸盐的每日剂量或终止所述治疗。
94.权利要求36-93中任一项的方法，其进一步包括将有效量的一种或多种治疗剂施用于所述受试者。
95.权利要求94的方法，其中所述一种或多种治疗剂包括一种或多种酪氨酸激酶抑制剂。
96.权利要求95的方法，其中所述一种或多种酪氨酸激酶抑制剂包括EGFR抑制剂。
97.权利要求95或权利要求96的方法，其中所述一种或多种治疗剂包括免疫检查点抑制剂。
98.权利要求97的方法，其中所述免疫检查点抑制剂是PD-1或PD-L1抑制剂。
99.权利要求98的方法，其中所述免疫检查点抑制剂是PD-1抑制剂，其为派姆单抗、纳武单抗或其组合。
100.权利要求98的方法，其中所述免疫检查点抑制剂是PD-L1抑制剂，其为阿特珠单抗、阿维单抗、德瓦鲁单抗或其组合。
101.权利要求95-100中任一项的方法，其中所述一种或多种治疗剂包括CDK抑制剂。
102.权利要求101的方法，其中所述CDK抑制剂是CDK9抑制剂。
103.权利要求102的方法，其中所述CDK9抑制剂是阿伏昔布或其药学上可接受的盐或前药。
104.权利要求103的方法，其中所述CDK9抑制剂是阿伏昔布的前药。
105.权利要求104的方法，其中所述前药具有以下结构(II')：
或其药学上可接受的盐或两性离子形式。
106.权利要求95-105中任一项的方法，其中所述一种或多种治疗剂包括基于铂的化学治疗剂。
107.权利要求95的方法，其中所述一种或多种治疗剂包括卡铂、吉西他滨、贝伐单抗、拓扑替康、卢卡帕尼、奥拉帕尼、尼拉帕尼、纳武单抗、派姆单抗、阿特珠单抗、阿维单抗、德瓦鲁单抗、伊匹单抗或其组合。
108.治疗受试者中的癌症的方法，其包括向所述受试者施用结构(I)的化合物：
或其药学上可接受的盐或结晶形式，其中：
所述化合物或其药学上可接受的盐或结晶形式以约1.5mg/m2至约65mg/m2的剂量或以约20mg至约100mg、任选地约25mg至约75mg的剂量每天一次口服施用于所述受试者。
109.权利要求108的方法，其中结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐或结晶形式以约1.0、约1.5、约3.0、约6.0、约9.0、约12.0、约16.0、约21.0、约28.0、约37.0、约49.0或约65.0mg/m2的剂量口服施用。
110.权利要求109的方法，其中结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐或结晶形式作为单一抗癌剂以约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、约75mg、约80mg、约85mg、约90mg、约95mg或约100mg的每日剂量施用于所述受试者。
111.权利要求108的方法，其中结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐或结晶形式与第二抗癌剂同时口服施用于所述受试者，且所述结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐或结晶形式的每日剂量为约20mg、约25mg、约33mg、约45mg、约50mg、约58mg、约75mg或约100mg。
112.权利要求108的方法，其中所述第二抗癌剂是BTK抑制剂。
113.权利要求112的方法，其中所述BTK抑制剂选自依鲁替尼、acalabrutinib、zanubrutinib和LOXO-305。
114.权利要求113的方法，其中所述BTK抑制剂是依鲁替尼。
115.权利要求112-114中任一项的方法，其中所述受试者接受先前的BTK抑制剂的治疗，并且在所述BTK抑制剂治疗后已经进展。
116.权利要求108-115中任一项的方法，其中所述受试者是具有实体肿瘤或造血***癌症的人患者。
117.权利要求116的方法，其中所述人患者具有晚期实体肿瘤。
118.权利要求116或权利要求117的方法，其中所述实体肿瘤是骨、消化器官、生殖器官、头、颈、肺、心脏、皮肤、神经***、内分泌***、神经内分泌***、泌尿***或软组织的肿瘤。
119.权利要求116的方法，其中所述造血***癌症是多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征(MDS)、急性髓性白血病(AML)、急性成淋巴细胞性白血病(ALL)、急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)、套细胞淋巴瘤、弥漫性大B-细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤或非霍奇金氏淋巴瘤。
120.权利要求116-119中任一项的方法，其中所述癌症是晚期实体肿瘤和/或在接受一种或多种先前的癌症疗法后已显示疾病进展。
121.权利要求116-120中任一项的方法，其中所述实体肿瘤是抗性的、重现的、难治的或复发的实体肿瘤。
122.权利要求120或权利要求121的方法，其中所述一种或多种先前的癌症疗法包括激素治疗剂、化学治疗剂、免疫治疗剂或细胞表面受体抑制剂。
123.权利要求122的方法，其中所述化学治疗剂是烷化剂、基于铂的药剂、抗代谢物、抗癌抗生素或植物来源的抗癌剂。
124.权利要求123的方法，其中所述化学治疗剂选自卡铂、顺铂、米铂、奈达铂和奥沙利铂。
125.权利要求123或权利要求124的方法，其中所述一种或多种先前的癌症疗法包括免疫疗法、化学疗法或其组合。
126.权利要求125的方法，其中所述实体肿瘤选自非小细胞肺癌(NSCLC)、结肠直肠癌(CRC)、卵巢癌、黑色素瘤、乳腺癌、神经内分泌癌、***癌、胆管癌、子宫癌和胰腺癌。
127.权利要求108-126中任一项的方法，其中所述受试者在接受免疫疗法后具有至少稳定的疾病。
128.权利要求127的方法，其中所述受试者已经接受最多达两个周期的免疫疗法。
129.权利要求108-128中任一项的方法，其中所述受试者具有EGFR+NSCLC。
130.权利要求129的方法，其中所述受试者在接受一种或多种包含一种或多种酪氨酸激酶抑制剂(TKI)的化学疗法后已表明疾病进展。
131.权利要求130的方法，其中所述一种或多种TKI包括EGFR TKI。
132.权利要求129-131中任一项的方法，其中所述受试者在采用最多两线TKI后具有至少稳定的疾病。
133.权利要求108-128中任一项的方法，其中所述受试者具有BRAF-、KRAS-或NRAS-突变的结肠直肠癌(CRC)。
134.权利要求108-133中任一项的方法，其中所述受试者具有持续性或复发性卵巢癌。
135.权利要求134的方法，其中所述受试者具有对基于铂的药剂的难治性或抗性，或已经经历先前的疗法，或两者兼而有之。
136.权利要求135的方法，其中所述基于铂的药剂是卡铂、顺铂、米铂、奈达铂或奥沙利铂。
137.权利要求108-128中任一项的方法，其中所述受试者具有BRAF-突变的黑色素瘤。
138.权利要求137的方法，其中所述受试者在免疫疗法、包含一种或多种BRAF/MEK抑制剂的化学疗法或其组合后具有进展的疾病。
139.权利要求108-138中任一项的方法，其中所述受试者具有对免疫疗法的抗性，且其中所述方法进一步包括对所述受试者进行相同的免疫疗法。
140.权利要求139的方法，其中所述免疫疗法包含抗PD-1或抗PD-L1药剂。
141.权利要求108-140中任一项的方法，其中所述受试者具有对包含TKI的化学疗法的抗性，且其中所述方法进一步包括对所述受试者进行相同的化学疗法。
142.权利要求141的方法，其中所述受试者未采用等同于15mg/天的强的松的量的类固醇。
143.权利要求141或权利要求142的方法，其中所述方法进一步包括向所述受试者施用伴随的类固醇。
144.权利要求108-143中任一项的方法，其中所述受试者至少在第一次给药所述酒石酸盐前一个月内不接受抗癌疗法，至少在第一次给药所述酒石酸盐前7天内不接受CYP2C19代谢物和/或H2-受体拮抗剂。
145.权利要求108-144中任一项的方法，其中所述方法包括一个或多个治疗周期，其各自由28天组成，且其中在每个周期中，将所述酒石酸盐、其结晶形式或包含此的药物组合物每天施用于所述受试者21天，随后为7天的停药期。
146.权利要求120或权利要求121的方法，其中所述血液学癌症是慢性淋巴细胞性白血病(CLL)或小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)。
147.权利要求146的方法，其中所述受试者已经经历一种或多种针对CLL或SLL的先前疗法。
148.权利要求146或权利要求147的方法，其中所述受试者无法耐受所述先前疗法，或在所述先前疗法后具有进展的疾病。
149.权利要求148的方法，其中所述先前疗法包括B-细胞受体拮抗剂、BCL-2拮抗剂或其组合。
150.权利要求146-149中任一项的方法，其中所述受试者未通过另一癌症疗法同时治疗。
151.权利要求146-150中任一项的方法，其进一步包括针对肿瘤溶解综合征(TLS)监测所述受试者。
152.权利要求146-151中任一项的方法，其进一步包括向所述受试者施用抗生素、抗病毒剂、抗真菌剂或其组合。
153.权利要求146-152中任一项的方法，其中所述方法包括一个或多个治疗周期，其各自由约28天组成，且其中在每个周期中，向所述受试者每天一次口服施用所述酒石酸盐、其结晶形式或包含此的药物组合物，持续28天。
154.权利要求108-153中任一项的方法，其中相对于可溶性AXL、GAS6或间充质转录因子的参考水平，所述受试者具有升高水平的可溶性AXL、AXL表达和/或磷酸化、生长停滞特异性6(GAS6)、间充质转录因子或其组合。
155.权利要求108-154中任一项的方法，其进一步包括，在施用步骤之前，将所述受试者鉴定为相对于可溶性AXL、GAS6或间充质转录因子的参考水平具有升高水平的可溶性AXL、AXL表达和/或磷酸化、生长停滞特异性6(GAS6)、间充质转录因子或其组合。
156.权利要求155的方法，其中所述鉴定步骤通过如下进行：获得候选受试者的外周血样品或骨髓样品，和测量所述外周血样品或骨髓样品中的可溶性AXL的水平、GAS6的水平、间充质转录因子的水平或其组合。
157.权利要求108-156中任一项的方法，其在施用步骤后进一步包括，针对腹泻、恶心、呕吐、味觉障碍、贫血和血小板减少症的一种或多种症状检查受试者。
158.权利要求157的方法，其进一步包括，如果检测到一种或多种症状，则降低所述酒石酸盐的每日剂量或终止所述治疗。
159.权利要求108-158中任一项的方法，其进一步包括将有效量的一种或多种治疗剂施用于所述受试者。
160.权利要求159的方法，其中所述一种或多种治疗剂包括一种或多种酪氨酸激酶抑制剂。
161.权利要求160的方法，其中所述一种或多种酪氨酸激酶抑制剂包括EGFR抑制剂。
162.权利要求159-161中任一项的方法，其中所述一种或多种治疗剂包括免疫检查点抑制剂。
163.权利要求162的方法，其中所述免疫检查点抑制剂是PD-1或PD-L1抑制剂。
164.权利要求163的方法，其中所述免疫检查点抑制剂是PD-1抑制剂，其为派姆单抗、纳武单抗或其组合。
165.权利要求163的方法，其中所述免疫检查点抑制剂是PD-L1抑制剂，其为阿特珠单抗、阿维单抗、德瓦鲁单抗或其组合。
166.权利要求159-165中任一项的方法，其中所述一种或多种治疗剂包括CDK抑制剂。
167.权利要求166的方法，其中所述CDK抑制剂是CDK9抑制剂。
168.权利要求167的方法，其中所述CDK9抑制剂是阿伏昔布或其药学上可接受的盐或前药。
169.权利要求168的方法，其中所述CDK9抑制剂是阿伏昔布的前药。
170.权利要求169的方法，其中所述前药具有以下结构(II')：
或其药学上可接受的盐或两性离子形式。
171.权利要求159-170中任一项的方法，其中所述一种或多种治疗剂包括基于铂的化学治疗剂。
172.权利要求159的方法，其中所述一种或多种治疗剂包括卡铂、吉西他滨、贝伐单抗、拓扑替康、卢卡帕尼、奥拉帕尼、尼拉帕尼、纳武单抗、派姆单抗、阿特珠单抗、阿维单抗、德瓦鲁单抗、伊匹单抗或其组合。
173.治疗癌症的方法，所述方法包括向有此需要的受试者施用有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐：
其中所述癌症选自EGFR+非小细胞肺癌；BRAF-、KRAS-或NRAS-突变的结肠直肠癌；持续性或复发性卵巢癌；BRAF-突变的黑色素瘤、炎性乳腺癌和三阴性乳腺癌。
174.权利要求173的方法，其中所述受试者在接受一种或多种先前的癌症疗法后已显示疾病进展。
175.权利要求173或权利要求174的方法，其中所述癌症是抗性的、难治的、重现的或复发的癌症。
176.权利要求174的方法，其中所述一种或多种先前的癌症疗法包括激素治疗剂、化学治疗剂、免疫治疗剂或细胞表面受体抑制剂。
177.治疗癌症的方法，所述方法包括向有此需要的受试者施用有效量的结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐：
其中所述受试者具有晚期实体癌症或造血***癌症，其中所述受试者在先前的化学疗法、免疫疗法或其组合后显示疾病进展。
178.权利要求177的方法，其中所述实体肿瘤是骨、消化器官、生殖器官、头、颈、肺、心脏、皮肤、神经***、内分泌***、神经内分泌***、泌尿***或软组织的肿瘤。
179.权利要求177的方法，其中所述造血***癌症是多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征(MDS)、急性髓性白血病(AML)、急性成淋巴细胞性白血病(ALL)、急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)、套细胞淋巴瘤、弥漫性大B-细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤或非霍奇金氏淋巴瘤。
180.权利要求177-179中任一项的方法，其中所述先前的化学疗法和/或癌症疗法包括激素治疗剂、化学治疗剂、免疫治疗剂或细胞表面受体抑制剂。
181.权利要求180的方法，其中所述化学治疗剂是烷化剂、基于铂的药剂、抗代谢物、抗癌抗生素或植物来源的抗癌剂。
182.权利要求181的方法，其中所述化学治疗剂选自卡铂、顺铂、米铂、奈达铂和奥沙利铂。
183.权利要求177-181中任一项的方法，其中所述受试者同时用所述化学疗法、所述免疫疗法或其组合治疗。
184.权利要求177-183中任一项的方法，其中所述受试者具有对免疫疗法的抗性，且其中所述方法进一步包括对所述受试者进行相同的免疫疗法。
185.权利要求177-183中任一项的方法，其中所述受试者具有对包含TKI的化学疗法的抗性，且其中所述方法进一步包括对所述受试者进行相同的化学疗法。
186.用于制备结构(I)的化合物或其药学上可接受的盐的方法：
所述方法包括使具有以下结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
X'是离去基团；
Y是卤素；
Z是卤素或–NR1(R2)；且
R1和R2各自独立地是氢或C1-C8烷基，
与N-甲基哌嗪或其盐反应，以获得具有以下结构的化合物：
或其药学上可接受的盐。
187.权利要求186的方法，其进一步包括以下步骤：
使具有以下结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
Y是卤素；
Z是卤素或–NR1(R2)；且
R1和R2各自独立地是氢或C1-C8烷基，
与活化剂反应，以获得具有以下结构的化合物：
或其药学上可接受的盐。
188.权利要求187的方法，其中所述活化剂包含磺酰氯官能团。
189.权利要求186-188中任一项的方法，其中X'是卤素或磺酸酯。
190.权利要求189的方法，其中X'是氯。
191.权利要求190的方法，其中所述活化剂是亚硫酰氯。
192.权利要求187的方法，其进一步包括以下步骤：
使具有以下结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
Y是卤素；
Z是卤素或–NR1(R2)；且
R1和R2各自独立地是氢或C1-C8烷基，
与还原剂反应，以获得具有以下结构的化合物：
193.权利要求192的方法，其中所述还原剂是氢化锂铝、乙硼烷、硼氢化钠、硼烷或其组合。
194.权利要求186-193中任一项的方法，其中所述还原剂是硼烷。
195.权利要求192的方法，其进一步包括：
使具有以下结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中
X是离去基团；
Y是卤素；
Z是卤素或–NR1(R2)；且
R1和R2各自独立地是氢或C1-C8烷基，
与具有以下结构的化合物反应：
其中P是H或保护基团，以获得具有以下结构的化合物：
196.权利要求195的方法，其中X是卤素或磺酸酯。
197.权利要求196的方法，其中X是氯。
198.权利要求195-197中任一项的方法，其中P是H。
199.权利要求186-198中任一项的方法，其中Y是氯。
200.权利要求186-199中任一项的方法，其中Z是–NR1(R2)。
201.权利要求186-200中任一项的方法，其中R1是C1-C8烷基。
202.权利要求201的方法，其中R1是甲基。
203.权利要求186-202中任一项的方法，其中R2是C1-C8烷基。
204.权利要求203的方法，其中R2是甲基。
205.用于制备结构(I)的化合物的酒石酸盐的方法：
所述方法包括混合结构(I)的化合物与酒石酸。
206.权利要求205的方法，其中所述酒石酸是L-(+)-酒石酸。
207.权利要求205或权利要求206的方法，其中所述酒石酸盐是结晶形式A的，且所述方法包括：
(a)将结构(I)的化合物溶解于包含苯甲醚和乙醇的溶剂中，以得到第一溶液；
(b)将(L)-酒石酸于乙醇中的溶液添加至第一溶液中，以得到第二溶液；和
(c)使结构(I)的酒石酸盐从所述第二溶液结晶。
208.权利要求207的方法，其中步骤(a)的溶剂包含比率为约2.5:1(w/w)的苯甲醚和乙醇，和/或具有约70℃的温度。
209.权利要求207或权利要求208的方法，其中步骤(b)中的(L)-酒石酸与步骤(a)中的结构(I)的化合物的摩尔比为约2:1，和/或其中经约1小时的过程将酒石酸的溶液添加至第一溶液。
210.权利要求207-209中任一项的方法，其中将所述第二溶液冷却至约20℃和/或搅拌约5小时。
211.具有以下结构(III)的化合物：
或其药学上可接受的盐、立体异构体或互变异构体，其中：
Y是卤素；
Z是卤素或–NR1(R2)；
R1和R2各自独立地是氢或C1-C8烷基；
R3是卤素或ORa；
R4是氢或氧代；且
Ra是氢或C1-C8烷基。
212.权利要求211的化合物，其中Y是氯。
213.权利要求211或权利要求212的化合物，其中Z是–NR1(R2)。
214.权利要求213的化合物，其中R1和R2是C1-C8烷基。
215.权利要求213的化合物，其中R1和R2是甲基。
216.权利要求211-215中任一项的化合物，其中R3是ORa。
217.权利要求216的化合物，其中Ra是H。
218.权利要求211-217中任一项的化合物，其中R3是卤素。
219.权利要求218的化合物，其中R3是氯。
220.权利要求211-219中任一项的化合物，其中R4是氢。
221.权利要求211-220中任一项的化合物，其中R4是氧代。
222.权利要求211-221中任一项的化合物，其中所述化合物具有以下结构之一：
223.具有以下结构(I)的化合物：
或其立体异构体、药学上可接受的盐、互变异构体或前药，
其中：
A代表6元芳族环或6元碳环；
R1a和R1b各自独立地是H、C1-C6烷基或-OH；
R2和R3各自独立地是H、C1-C6烷基或卤素；
R4是H、C1-C6烷基或-OH；
R5a和R5b各自独立地是H、C1-C6烷基或卤素；
R6a、R6b、R6c和R6d各自独立地不存在或者是–O-；
R7是H、C1-C6烷基、-OH或不存在；
R8不存在或具有以下结构：
R9不存在或者是烯基，条件是存在R8或R9中的至少一个；
R10是H或C1-C6烷基；且
满足所有化学价；
条件是如果R1a和R1b均为甲基，则：
a.R6a、R6b、R6c、R6d和R9中的至少一个是–O-；
b.R7是C1-C6烷基、-OH或不存在；和/或
c.R10是H。
224.权利要求223的化合物，其中所述化合物选自：
及其药学上可接受的盐。
225.药物组合物，其包含权利要求211-224中任一项的化合物或其立体异构体、药学上可接受的盐、互变异构体或前药以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
226.用于治疗受试者中的癌症的方法，所述方法包括施用有效量的权利要求211-224中任一项的化合物或根据权利要求223所述的其立体异构体、药学上可接受的盐、互变异构体或前药或药物组合物。
227.确定受试者的代谢概况的方法，所述方法包括：使受试者的细胞的群体与治疗剂接触；和确定作为权利要求211-224中任一项的化合物的第一代谢物的浓度。
228.权利要求227的方法，其中所述治疗剂是具有以下结构(VI)的化合物：
或其药学上可接受的盐或结晶形式。
229.权利要求36、108、177和226中任一项的方法，其中所述癌症是黑色素瘤、乳腺癌或脑肿瘤。
230.权利要求229的方法，其中所述黑色素瘤是转移性黑色素瘤。
231.权利要求230的方法，其中所述乳腺癌是炎性乳腺癌和/或三阴性乳腺癌。
232.权利要求229的方法，其中所述脑肿瘤是多形性成胶质细胞瘤(GBM)。
233.权利要求229-232中任一项的方法，其中所述受试者在用免疫疗法治疗后显示疾病进展、重现或复发。
234.权利要求229-233中任一项的方法，其进一步包括将免疫治疗剂施用于所述受试者。
235.权利要求234的方法，其中所述免疫疗法是检查点抑制剂或CTLA-4抑制剂。
236.权利要求234的方法，其中所述免疫治疗剂是派姆单抗。
237.权利要求173-185中任一项的方法，其中所述方法在权利要求69-72和78-107中任一项中所示的条件下进行。
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