MXPA05006676A - Compuestos de indazol y composiciones farmaceuticas para inhibir proteinquinasas, y procedimientos para su uso. - Google Patents

Abstract

Se describen compuestos de indazol que modulan y/o inhiben las enfermedades oftalmicas y la actividad de ciertas proteinquinasas. Estos compuestos y composiciones farmaceuticas que los contienen son capaces de mediar la transduccion de la senal de tirosina quinasa y por lo tanto modular y/o inhibir la proliferacion celular no deseada. La invencion tambien se refiere al uso terapeutico o profilactico de las composiciones farmaceuticas que contienen dichos compuestos, y a procedimientos de tratamiento de enfermedades oftalmicas y cancer y otros estados de enfermedad asociados con angiogenesis y/o proliferacion celular no deseadas, tales como retinopatia diabetica, glaucoma neovascular, artritis reumatoide y psoriasis, mediante la administracion de cantidades eficaces de dichos compuestos.

Description

COMPUESTOS DE INDAZOL Y COMPOSICIONES FARMACÉUTICAS PARA INHIBIR P ROTE I QU IN AS AS , Y PROCEDIMIENTOS PARA SU USO CAMPO DE LA INVENCIÓN Esta invención se refiere a compuestos de indazol que median y/o inhiben enfermedades oftálmicas y la actividad de ciertas proteinquinasas, y a composiciones farmacéuticas que contienen dichos compuestos. La invención también se dirige al uso terapéutico o profiláctico de dichos compuestos y composiciones, y a procedimientos de tratamiento de enfermedades oftálmicas y cáncer así como otros estados de enfermedades asociados con angiogénesis y/o proliferación celular no deseada, mediante la administración de cantidades eficaces de dichos compuestos. ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Varias enfermedades y afecciones del segmento del ojo ponen en peligro la visión. La degeneración macular relativa a la edad (abreviadamente en inglés ARMD o AMD), neovascularización coroidal (abreviadamente en inglés CNV), retinopatías (por ejemplo, retinopatía diabética, vitreorretinopatía, retinopatía de premadurez), retinitis (por ejemplo, retinitis por citomegalovirus (abreviadamente en inglés CMV)), uveitis, edema macular y glaucoma son varios ejemplos. La degeneración macular relativa a la edad (abreviadamente en inglés ARMD o AMD) es la causa principal de ceguera en los ancianos. La ARMD ataca el centro de visión y lo hace borroso, haciendo la lectura, conducción y otras tareas detalladas difíciles o imposibles. Aproximadamente 200.000 nuevos casos de ARMD se producen cada año sólo en los Estados Unidos. Estimaciones actuales revelan que aproximadamente el cuarenta por ciento de la población mayor de 75 años de edad, y aproximadamente el veinte por ciento de la población mayor de 60, sufren algún grado de degeneración macular. ARMD "húmeda" es el tipo de ARMD que más a menudo ocasiona ceguera. En ARMD húmeda, los vasos sanguíneos coroidales formados nuevamente (neovascularización coroidal (abreviadamente en inglés CNV)) pierden fluido y producen daño progresivo a la retina. En el caso particular de CNV en ARMD, se están desarrollando actualmente dos procedimientos principales de tratamiento, (a) fotocoagulación y (b) el uso de inhibidores de angiogénesis. Sin embargo, la fotocoagulación puede ser perjudicial para la retina y es impracticable cuando la CNV está en la proximidad de la fóvea. Además, la fotocoagulación a menudo da como resultado CNV recurrente con el tiempo. Se está ensayando también la administración oral de compuestos anti-angiogénicos como un tratamiento sistémico para ARMD. Sin embargo, debido a las restricciones metabólicas específicas de los fármacos, la administración sistémica proporciona habitualmente niveles de fármacos subterapéuticos al ojo. Por lo tanto, para conseguir concentraciones eficaces de fármacos infraoculares, se requiere bien una dosis inaceptablemente alta o dosis repetitivas convencionales. También se han desarrollado diversos implantes para administrar compuestos anti-angiogénicos localmente en el ojo. Los ejemplos de dichos implantes se describen en la patentes de Estados Unidos N° 5.824.072 de Wong, la patente de Estados Unidos N° 5.476.511 de Gwon y col., y la patente de Estados Unidos N° 5.773.019 de Ashton y col., cada una de las cuales se incorpora en esta memoria descriptiva en su totalidad como referencia para todos los propósitos. Enfermedades neovasculares del ojo Como se ha indicado anteriormente, la presente invención también proporciona procedimientos para tratar enfermedades neovasculares del ojo, que incluyen por ejemplo, neovascularización córnea, glaucoma neovascular, retinopatía diabética proliferativa, fibroblasia retrolental y degeneración macular. En resumen, la neovascularización corneal como resultado de lesión al segmento anterior es una causa significativa de descenso de agudeza visual y de ceguera, y un factor de riesgo importante para el rechazo de aloinjertos de córnea. Como han descrito Burger y col., Lab, Inves. 48: 169 - 180, 1983, incorporada en esta memoria descriptiva en su totalidad como referencia para todos los propósitos, la angiogénesis de córnea incluye tres fases: un período latente prevascular, neovascularización activa y maduración y regresión vascular. La identidad y mecanismo de diversos factores angiogénicos, que incluyen elementos de la respuesta inflamatoria, tales como leucocitos, plaquetas, citoquinas y eicosanoides, o constituyentes de plasma no identificados todavía tienen que revelarse.

Actualmente no existe terapia clínicamente satisfactoria para la inhibición de neovascularlzación o regresión de córnea de nuevos vasos córneos existentes. Los corticosteroides tópicos parecen tener alguna utilidad clínica, presumiblemente limitando la inflamación del estroma. De este modo, en un aspecto de la presente invención se proporcionan procedimientos para tratar enfermedades neovasculares del ojo tal como neovascularización de córnea (incluyendo neovascularización de injerto córneo), que comprende la etapa de administrar a un paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición anti-angiogénica (como se ha descrito anteriormente) a la córnea, de forma que se inhibe la formación de vasos sanguíneos. En resumen, la córnea es un tejido que normalmente carece de vasos sanguíneos. Sin embargo, en ciertas afecciones patológicas los capilares pueden extenderse en el interior de la córnea desde el plexo vascular pericorneal del limbo. Cuando la córnea se llega a vascularizar, también se nubla, dando como resultado un descenso en la agudeza visual del paciente. La pérdida visual puede llegar a ser completa si la córnea se hace opaca completamente. Los vasos sanguíneos se pueden introducir en la córnea en una diversidad de patrones y profundidades, dependiendo del procedimiento que provoca la neovascularización. Estos patrones se han definido tradicional mente por oftalmólogos en los siguientes tipos: pannus (queratitis superficial crónica) tracomatoso, pannus leproso, pannus filctenulosuo pannus degenerativo y pannus glaucomatoso. El estroma corneal también puede estar invadido por ramas de la arteria ciliar anterior (denominada vascularización intersticial) que produce diversas lesiones clínicas distintas: bucles terminales, un patrón "de tipo cepillo", una forma de umbela, una forma de red, arcadas intersticiales (de vasos episclerales) y vasos irregulares aberrantes. Una amplia diversidad de trastornos pueden dar como resultado neovascularización corneal, incluyendo, por ejemplo, infecciones corneales (por ejemplo, tracoma, queratitis por herpes simple, leismaniasis y oncocerciasis), procesos ¡nmunológicos (por ejemplo, rechazo de transplantes y síndrome de Stevens - Johnson), quemaduras por álcalis, trauma, inflamación (de cualquier causa), estados de deficiencia tóxica y nutricional y como una complicación en el uso de lentes de contacto. Aunque la causa de neovascularización corneal puede variar, la respuesta de la córnea a la lesión y el posterior crecimiento hacia dentro vascular es similar independientemente de la causa. En resumen, la localización de la lesión parece ser de importancia ya que solamente aquellas lesiones situadas en una distancia crítica del limbo provocará una respuesta angiogénica. Esto es probablemente debido al hecho de que los factores angiogénicos responsables de provocar la invasión vascular se crean en el sitio de la lesión, y deben difundirse en el sitio de los vasos sanguíneos más próximo (el limbo) con el fin de ejercer su efecto. Más allá de una cierta distancia del limbo, esto no debería ser posible y no se induciría crecimiento del endotelio límbico en la córnea. Probablemente varios factores angiogénicos están implicados en este proceso, muchos de los cuales son productos de la respuesta inflamatoria. De hecho, la neovascularización de la córnea parece producirse solamente en asociación con un infiltrado celular inflamatorio, y el grado de angiogénesis es proporcional al grado de la reacción inflamatoria. Además el edema corneal facilita el crecimiento hacia dentro de los vasos sanguíneos mediante el aflojamiento del marco del estroma corneal y proporcionando una ruta de "resistencia mínima" a través de la cual los capilares pueden crecer. Después de la reacción inicial inflamatoria, el crecimiento capilar en la córnea procede de la misma manera que se produce en otros tejidos. Las células endoteliales de los capilares límbicos y vénulas normalmente inactivas se estimulan para dividirse y migrar. Las células endoteliales se proyectan hacia fuera de sus vasos de origen, digieren la membrana basal circundante y el tejido a través del cual viajarán y migran hacia la fuente del estímulo angiogénico. Los brotes ciegos terminales adquieren un lumen y después se anastomosan juntos para formar bucles capilares. El resultado final es el establecimiento de un plexo vascular en el interior del estroma corneal. Los factores y composiciones anti-angiogénicas de la presente invención son útiles ya que bloquean los efectos estimuladores de los promotores de angiogénesis, reduciendo la división celular endotelial, disminuyendo la migración celular endotelial y dañando la actividad de las enzimas proteolíticas secretadas por el endotelio. SUMARIO DE LA INVENCIÓN Dentro de las realizaciones particularmente preferidas de la invención, se puede preparar un factor anti-angiogénico para administración tópica en solución salina (combinado con cualquiera de los agentes conservantes y antimicrobianos usados comúnmente en preparaciones oculares), y administrarse en forma de gotas oculares. La solución o suspensión del factor anti-angiogénico se puede preparar en estado puro y administrarse varias veces al día. Como alternativa, las composiciones anti-angiogénicas, preparadas como se ha descrito anteriormente, también se pueden administrar directamente a la córnea. En las realizaciones preferidas, la composición anti-angiogénica se prepara con un polímero mucoadhesivo que se une a la córnea. En realizaciones adicionales, los factores anti-angiogénicos o composiciones anti-angiogénicas se pueden utilizar como un auxiliar a la terapia de esteroides convencional. La terapia tópica también puede ser útil profilácticamente en lesiones corneales que se sabe que tienen una alta probabilidad de inducir una respuesta angiogénica (tal como quemaduras químicas). En estos casos el tratamiento, probablemente en combinación con esteroides, se puede emplear inmediatamente para ayudar a prevenir complicaciones posteriores. En otras realizaciones, las composiciones anti-angiogénicas descritas anteriormente se pueden inyectar directamente en el estroma corneal por un oftalmólogo bajo dirección microscópica. El sitio preferido de inyección puede variar con la morfología de la lesión particular, pero el objetivo de la administración sería situar la composición en el frente delantero de la vasculatura (es decir, intercalado entre los vasos sanguíneos y la córnea normal). En la mayoría de los casos esto implicaría inyección córnea perilímbica para "proteger" la córnea del avance de los vasos sanguíneos. Este procedimiento también se puede utilizar brevemente después de una lesión corneal con el fin de evitar profilácticamente la neovascularización corneal. En esta situación el material se puede inyectar en la córnea perilímbica intercalado entre la lesión corneal y su alimentación sanguínea límbica potencial no deseada. Dichos procedimientos también se pueden utilizar de una manera similar para evitar la invasión capilar de córneas transplantadas. En una forma de liberación sostenida las inyecciones podrían ser solamente necesarias 2 - 3 veces al año. También se podría añadir asteroide a la solución de inyección para reducir la inflamación que se produce de la propia inyección. En otro aspecto de la presente invención, se proporcionan procedimientos para tratar glaucoma neovascular, que comprende la etapa de administrar a un paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición anti-angiogénica al ojo, de manera que se inhiba la formación de los vasos sanguíneos. En resumen, el glaucoma neovascular es una afección patológica en la que se desarrollan nuevos capilares en el iris del ojo. Habitual mente la angiogénesis se origina de los vasos localizados en el margen de la pupila y progresa a través de la raíz del iris y en la malla trabecular. Los fibroblastos y otros elementos tisulares conectivos se asocian al desarrollo capilar y se desarrolla una membrana fibrovascular que se extiende a través de la superficie anterior del iris. Eventualmente este tejido alcanza el ángulo de la cámara anterior donde forma sinequias. Estas sinequias a su vez se unen, se cicatrizan y se contraen para cerrar por último el ángulo de la cámara anterior. La formación de cicatriz evita el drenaje adecuado de humor acuoso a través del ángulo y en la malla trabecular, dando como resultado un incremento de la presión infraocular que puede dar como resultado ceguera. El glaucoma neovascular generalmente se produce como una complicación de enfermedades en las que es predominante la isquemia retinal. En particular, aproximadamente un tercio de los pacientes con este trastorno tienen retinopatía diabética y 28% tienen oclusión de las venas centrales de la retina. Otras causas incluyen desprendimiento de retina crónico, glaucoma de fase terminal, enfermedad obstructiva de la arteria carótida, fibropiasia retrolental, anemia de células falciformes, tumores infraoculares y fístulas cavernosas carótidas. En sus fases tempranas, el glaucoma neovascular se puede diagnosticar mediante biomicroscopía de hendidura de alta magnificación, donde descubre capilares pequeños, dilatados y desorganizados (que pierden fluoresceína) en la superficie del iris. La gonioscopía posterior demuestra obliteración progresiva del ángulo de la cámara anterior mediante bandas fibrovasculares. Mientras que el ángulo de la cámara anterior todavía está abierto, las terapias conservadoras pueden ser de ayuda. Sin embargo, una vez que se cierra el ángulo se requiere intervención quirúrgica con el fin de aliviar la presión. Por lo tanto, en una realización de la invención se pueden administrar tópicamente factores anti-angiogénicos (bien solos o en una composición anti-angiogénica, como se ha descrito anteriormente) al ojo con el fin de tratar formas tempranas de glaucoma neovascular. En otras realizaciones de la invención, las composiciones anti-angiogénicas se pueden implantar mediante inyección de la composición en la región del ángulo de la cámara anterior. Esto proporciona un incremento localizado sostenido de factor anti-angiogénico y evita el crecimiento de los vasos sanguíneos en el área. Las composiciones anti-angiogénicas implantadas o inyectadas que se sitúan entre los capilares delanteros del iris y el ángulo de la cámara anterior pueden "defender" el ángulo de abertura de la neovascularización. Ya que los capilares no crecerán en un radio significativo de la composición anti-angiogénica, se podría mantener la abertura del ángulo.

En otras realizaciones, las composiciones anti-angiogénicas se pueden también situar en cualquier lugar de manera que el factor anti-angiogénico se libere continuamente en el humor acuoso. Esto incrementaría la concentración del factor anti-angiogénico en el humor, que a su vez baña la superficie del iris y sus capilares anormales, por lo tanto proporcionando otro mecanismo mediante el que distribuye la medicación. Estas modalidades terapéuticas también pueden ser útiles profilácticamente y en combinación con tratamientos existentes. En otro aspecto de la presente invención, se proporcionan procedimientos para tratar retinopatía proliferativa diabética, que comprende la etapa de administrar a un paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición anti-angiogénica a los ojos, de manera que se inhiba la formación de los vasos sanguíneos. En resumen, la patología de retinopatía diabética se cree que es similar a la descrita anteriormente para glaucoma neovascular. En particular, la retinopatía diabética antecedente se cree que se convierte en retinopatía diabética proliferativa bajo la influencia de hipoxia retinal. En general, el tejido neovascular brota del nervio óptico (habitualmente en 10 mm del borde), y desde la superficie de la retina en regiones donde la perfusión del tejido es escasa. Inicialmente los capilares crecen entre la membrana limitante interna de la retina y la superficie posterior del vitreo. Eventualmente, los vasos crecen en el vitreo y a través de la membrana limitante interna. A medida que el vitreo se contrae, la tracción se aplica a los vasos, dando a menudo como resultado cortes en los vasos y cegando el vitreo debido a la hemorragia. La tracción fibrosa de la cicatrización en la retina puede también producir desprendimiento de la retina. La terapia convencional de elección es fotocoagulación panretinal para disminuir el tejido retlnal, y por lo tanto diminuir las demandas de oxígeno retinal. Aunque inicialmente eficaz, existe una gran tasa de recaída con nuevas lesiones que se forman en otras partes de la retina. Las complicaciones de esta terapia incluyen una disminución de la visión periférica de hasta 50% de los pacientes, abrasiones mecánicas de la córnea, formación de cataratas inducidas por láser, glaucoma agudo y estimulación de crecimiento neovascular subrretinal (que puede dar como resultado pérdida de visión). Como resultado, este procedimiento se realiza solamente cuando están presentes varios factores de riesgo, y la relación riesgo - beneficio está claramente a favor de la intervención. Por lo tanto, en las realizaciones particularmente preferidas de la invención, la retinopatía diabética proliferativa se puede tratar mediante inyección de un (os) factor (es) anti-angiogénico (s) (o composición anti -angiogénica) en el humor acuoso o el vitreo, con el fin de incrementar la concentración local del factor anti-angiogénico en la retina. Preferiblemente, este tratamiento se debería iniciar antes de la adquisición de enfermedad grave que requiere fotocoagulación. En otras realizaciones de la invención, las arterias que alimentan las lesiones neovasculares se pueden embolizar (utilizando composiciones anti-angiogénlcas, como se ha descrito anteriormente). En otro aspecto de la presente invención, se proporcionan procedimientos para tratar fibroblasia retrolental, que comprende la etapa de administrar a un paciente una cantidad terapéuicamente eficaz de un factor anti-angiogénico (o composición anti-angiogénica) al ojo, de manera que se inhiba la formación de vasos sanguíneos. En resumen, la fibroblasia retrolental es una afección que se produce en niños prematuros que reciben terapia de oxígeno. La vasculatura retinal periférica, particularmente en el lado temporal, no se llega a formar totalmente hasta el final de la vida fetal. Oxígeno excesivo (incluso niveles que estarían fisiológicamente en orden) y la formación de radicales libres de oxígeno se cree que son importantes produciendo daño en los vasos sanguíneos de la retina inmadura. Estos vasos se estrechan y después se llegan a destruir estructuralmente con la exposición al oxígeno. Como resultado, la retina periférica falla de vascularizar y se produce isquemia retinal. En respuesta a la isquemia se induce neovascularización en la unión de la retina normal e isquémica. En el 75% de los casos estos vasos entran en regresión espontáneamente. Sin embargo, en el 25% restante existe un crecimiento capilar continuado, contracción del componente fibrovascular y tracción tanto en los vasos como en la retina. Esto da como resultado hemorragia en el vitreo y/o desprendimiento de retina que puede conducir a ceguera. El glaucoma neovascular por cierre angular es también una complicación de esta afección. Ya que es a menudo imposible determinar qué casos se resolverán espontáneamente y cuales se transformarán en graves, tratamiento convencional (es decir, cirugía) se comienza generalmente solamente en pacientes con una enfermedad establecida y una patología bien desarrollada. Este planteamiento "esperar y ver" excluye la intervención temprana y permite el progreso de la enfermedad en el 25% que sigue un curso complicado. Por lo tanto, en una realización de la invención, la administración tópica de factores anti-angiogénicos (o composiciones anti-angiogénicas, como se ha descrito anteriormente) se puede llevar a cabo en niños que tienen un alto riesgo de desarrollar esta afección en un intento de cortar la incidencia de progresión de fibroplasia retrolental. En otras realizaciones, se pueden utilizar inyecciones intravítreas y/o implantes infraoculares de una composición anti-angiogénica. Dichos procedimientos se prefieren particularmente en casos de una enfermedad establecida, con el fin de reducir la necesidad de cirugía. Proteinquinasas Las proteinquinasas son una familia de enzimas que cataliza la fosforilación del grupo hidroxilo de restos específicos de tirosina, serina o treonina en proteínas. Típicamente, dicha fosforilación perturba drásticamente la función de la proteína, y de esta manera las proteinquinasas son fundamentales en la regulación de una amplia diversidad de procesos celulares, que incluyen metabolismo, proliferación celular, diferenciación celular y supervivencia celular. De las muchas funciones celulares diferentes en las que se sabe que se requiere la actividad de las proteinquinasas, algunos procesos representan dianas atractivas para intervención terapéutica para ciertos estados de enfermedad. Dos ejemplos son angiogénesis y control de ciclo celular, en los que las proteinquinasas juegan un papel fundamental; estos procedimientos son esenciales para el desarrollo de tumores sólidos así como de otras enfermedades. La angiogénesis es el mecanismo mediante el cual se forman nuevos capilares a partir de vasos existentes. Cuando se requiera, el sistema vascular tiene el potencial de generar nuevas mallas capilares con el fin de mantener la función adecuada de tejidos y órganos. Sin embargo, en el adulto, la angiogénesis está claramente limitada, produciéndose solamente en el proceso de cicatrización de heridas y neovascularización del endometrio durante la menstruación. Véase erenmies y col., Cell Growth & Differentiation, 8, 3 - 10 (1997), incorporado en esta memoria descriptiva como referencia en su totalidad para todos los propósitos. Por otra parte, la angiogénesis no deseada es una marca de varias enfermedades, tales como retinopatías, psoriasis, artritis reumatoide, degeneración macular relativa a la edad (abreviadamente AMD) y cáncer (tumores sólidos). Folkman, Nature Med., 1 , 27 - 31 (1995), incorporada en esta memoria descriptiva como referencia en su totalidad para todos los propósitos. Se ha mostrado que las proteinquinasas que están implicadas en el proceso angiogénico incluyen tres miembros de la familia de tirosina quinasa de receptores de factor de crecimiento: VEGF-R2 (receptor del factor de crecimiento endotelial vascular 2, también conocido como KDR (receptor del dominio de inserción de quinasa) y como FLK- ); FGF-R (receptor del factor de crecimiento de fibroblastos); y TEK (también conocido como Tie-2). VEGF-R2, que se expresa solamente en las células endoteliales, se une al potente factor de crecimiento angiogénico VEGF y media la transducción de la señal posterior a través de la activación de su actividad intracelular quinasa. De este modo, se espera que la Inhibición directa de la actividad quinasa de VEGF-R2 dará como resultado la reducción de angiogénesis incluso en presencia de VEGF exógeno (véase Strawn y col., Cáncer Research, 56, 3540 - 3545 (1996)), como se ha mostrado con mutantes de VEGF-R2 que no median en la transducción de la señal. Millauer y col., Cáncer Research, 56, 1615 - 1620 (1996). Además, VEGF-R2 parece que no tiene ninguna función en el adulto más allá de la mediación de la actividad angiogénica de VEGF. Por lo tanto, se esperaría que un inhibidor selectivo de la actividad quinasa de VEGF-R2 exhibiera poca toxicidad. De manera similar, FGF-R se une a los factores de crecimiento angiogénicos aFGF y bFGF y media posteriormente la transducción de la señal intracelular. Recientemente, se ha sugerido que los factores de crecimiento tales como bFGF pueden jugar un papel crítico en la inducción de angiogénesis en tumores sólidos que han alcanzado un cierto tamaño. Yoshiji y col., Cáncer Research, 57, 3924 - 3928 (1997). Sin embargo, a diferencia de VEGF-R2, FGF-R se expresa en numerosos tipos de células diferentes por todo el cuerpo y puede o puede no jugar papeles importantes en otros procedimientos fisiológicos normales en el adulto. Sin embargo, la administración sistémica de un inhibidor de molécula pequeña de la actividad quinasa de FGF-R se ha indicado que bloquea la angiogénesis inducida por bFGF en ratones sin toxicidad aparente. ohammad y col., EMBO Journal, 7, 5996 - 5904 (1998).

TEK (también conocido como Tie-2) es otra tirosina quinasa receptora expresada solamente en células endoteliales que se ha mostrado que juega un papel en angiogénesis. La unión del factor angiopoyetina-1 da como resultado autofosforilación del dominio quinasa de TEK y da como resultado un proceso de transducción de la señal que parece mediar la interacción de las células endoteliales con células de soporte periendotelial, facilitando por lo tanto la maduración de vasos sanguíneos formados nuevamente. Por otra parte, el factor angiopoyetina-2 parece antagonizar la acción de angiopoyetina-1 sobre TEK e interrumpe la angiogénesis. Maisonpierre y col., Science, 277, 55 - 60 Como resultado de los desarrollos descritos anteriormente, se ha propuesto tratar la angiogénesis mediante el uso de compuestos que inhiben la actividad quinasa de VEGF-R2, FGF-R, y/o TEK. Por ejemplo, la publicación internacional WIPO N° WO 97/34876 describe ciertos derivados de cinolina que son inhibidores de VEGF-R2, que se pueden usar para el tratamiento de estados de enfermedad asociados con angiogénesis anormal y/o permeabilidad vascular aumentada tal como cáncer, diabetes, psoriasis, artritis reumatoide, sarcoma de Kaposi, hemangioma, nefropatías agudas y crónicas, ateroma, retinosis arterial, enfermedades autoinmunes, inflamación aguda y enfermedades oculares con proliferación de vasos retínales. La fosforilasaquinasa activa la glucógenofosforilasa, incrementando de esta manera la rotura de glucógeno y la liberación de la glucosa hepática. La producción de glucosa hepática se desrregula en la diabetes tipo 2, y es la causa primaria de hiperglucemia por ayuno, que da como resultado muchas de las complicaciones secundarias que aquejan a estos pacientes. De este modo, la reducción de liberación de glucosa del hígado reduciría los niveles elevados de glucosa en plasma. Por lo tanto, los inhibidores de fosforilasaquinasa deberían disminuir la actividad de la fosforilasa y la glicogenólisis, reduciendo de esta manera la hiperglucemia en pacientes. Otra respuesta fisiológica a VEGF es hiperpermeabilidad vascular, que se ha propuesto que juega un papel en las fases tempranas de la angiogénesis. En tejidos isquémicos, tales como los que se producen en el cerebro de víctimas de accidentes vasculares, la hipoxia dispara la expresión de VEGF, conduciendo a un aumento en la permeabilidad vascular y por último a edema en los tejidos circundantes. En un modelo de rata de accidente vascular, van Bruggen y col., J. Clinical Invest, 104 1613 - 20 (1999) han mostrado que la administración de un anticuerpo monoclonal a VEGF reduce el volumen de infarto. De este modo, se anticipa que los inhibidores de VEGFR son útiles para el tratamiento de accidentes vasculares. Además de su papel en angiogénesis, las proteinquinasas también juegan un papel crucial en el control del ciclo celular. La proliferación celular no controlada es la insignia de cáncer. La proliferación celular en respuesta a diversos estímulos se manifiesta por una desregulación del ciclo de división celular, el proceso mediante el cual las células se dividen y multiplican. Las células tumorales típicamente han dañado los genes que directa o indirectamente regulan la progresión a lo largo del ciclo de división celular. Las quinasas dependientes de ciclina (abreviadamente en inglés CDK) son serina-treonina proteinquinasas que juegan papeles críticos en la regulación de las transiciones entre fases diferentes del ciclo celular. Véase, por ejemplo, los artículos recopilados en Science, 274, 1643 - 1677 (1996). Los complejos de CDK se forman mediante la asociación de una subunidad reguladora de ciclina (por ejemplo, A, B1 , B2, D1 , D2, D3 y E) y una subunidad de quinasa catalítica (por ejemplo, cdc2, (CDK1), CDK2, CDK4, CDK5 y CDK6). Como el nombre da a entender, las CDK muestran una dependencia absoluta de la subunidad de ciclina con el fin de fosforilar sus sustratos diana y diferentes pares de quinasa/ciclina funcionan para regular la progresión a lo largo de las fases específicas del ciclo celular. La CDK4 complejada a las ciclinas D es la que juega una parte crítica en la iniciación del ciclo de división celular a partir de una fase de reposo o latente a una en la que las células llegan a comprometerse en la división celular. Esta progresión se somete a una diversidad de mecanismos reguladores de crecimiento, tanto negativos como positivos. Las aberraciones en este sistema de control, particularmente las que afectan a la función de CDK4 se han implicado en el progreso de las células hasta el estado altamente proliferativo característico de las malignidades, particularmente melanomas familiares, carcinomas esofágicos y cánceres pancreáticos. Véase, por ejemplo, Kamb, Trends in Genetics, 11 , 136 - 140 (1995); Kamb y col., Science, 264, 436 - 440 (1994). Múltiples publicaciones describen una diversidad de compuestos químicos útiles contra una diversidad de dianas terapéuticas. Por ejemplo, las publicaciones internacionales WIPO números WO 99/23077 y WO 99/23076 describen compuestos que contienen indazol que tienen actividad inhibitoria de fosfodiesterasa de tipo IV producida por un reemplazamiento bioisóstero de indazol por catecol. La patente de Estados Unidos N° 5.760.028 describe heterociclos que incluyen ácido 3-[1-[3-(imidazolin-2-ilamino)propil]indazol-5-ilcarbonilamino]-2-(benciloxicarbonilamino)propión¡co, que es útil como antagonista de la a $ integrina y receptores relativos de proteínas adhesivas de superficie celular. La publicación internacional WIPO N° WO 98/09961 describe ciertos derivados de indazol y su uso como inhibidores de fosfodiesterasa (abreviadamente en inglés (PDE) de tipo IV o la producción de factor de necrosis tumoral (abreviadamente en inglés TNF) en un mamífero. Las recientes adiciones a la biblioteca virtual de compuestos conocidos incluyen los descritos como que son agentes terapéuticos antiproliferativos que inhiben las CDK. Por ejemplo, la patente de Estados Unidos N° 5.621.082 de Xiong y col., describe ácido nucleico que codifica un inhibidor de CDK6, y la publicación de patente europea N° 0 666 270 A2 describe péptidos y miméticos de péptidos que actúan como inhibidores de CDK1 y CDK2. La publicación internacional WIPO N° WO 97/16447 describe ciertos análogos de cromonas que son inhibidores de las quinasas dependientes de ciclina, en particular de complejos CDK/ciclina tales como CDK4/ciclina D1 , que se pueden usar para inhibir proliferación celular excesiva o anormal, y por lo tanto para tratar cáncer. La publicación internacional WIPO N° WO 99/21845 describe derivados de 4-aminotiazol que son útiles como inhibidores de CDK. Cada una de las patentes y/o solicitud enumeradas anteriormente se incorpora en esta memoria descriptiva como referencia en su totalidad para todos los propósitos. Sin embargo, todavía existe una necesidad de compuestos de moléculas pequeña que se pueden sintetizar fácilmente y son eficaces en la inhibición de una o más CDK o complejos CDK/ciclina. Debido a que la CDK4 puede servir como un activador general de división celular en la mayoría de las células, y los complejos de CDK4 y ciclinas de tipo D gobiernan la fase temprana G-i del ciclo celular, existe necesidad de inhibidores eficaces de CDK4 y complejos de ciclinas de tipo D de los mismos, para tratar uno o más tipos de tumores. También, los papeles fundamentales de ciclina E/CDK2 y ciclina B/CDK1 quinasas en la fase G-i/S y transiciones G2/M, respectivamente, ofrecen unas dianas adicionales para intervención terapéutica en la supresión de la progresión del ciclo celular desrregulada en cáncer. Otra proteinquinasa, CHK1 , juega un papel importante como punto de control en la progresión del ciclo celular. Los puntos de control son sistemas de control que coordinan progresión del ciclo celular influenciando la formación, activación y posterior inactivación de las quinasas dependientes de ciclina. Los puntos de control evitan la progresión del ciclo celular en momentos inadecuados, mantienen el balance metabólico de las células mientras que la célula se detiene, y en algunos casos pueden inducir apoptosis (muerte celular programada) cuando no se han reunido los requerimientos de los puntos de control. Véase, por ejemplo, O'Connor, Cáncer Surveys, 29, 151 - 182 ( 997); Nurse, Cell, 91 , 865 - 867 (1997); Hartwell y col., Science, 266, 1821 - 1828 (1994); Hartwell y col., Science, 246, 629 - 634 (1989). Una serie de puntos de control controla la integridad del genoma y, tras detectar daños en el DNA, estos "puntos de control de lesión de DNA" bloquean la progresión del ciclo celular en las fases Gi y G2, y retrasan la progresión a través de la fase S. O'Connor, Cáncer Surveys, 29, 151 - 182 (1997); Hartwell y col., Science, 266, 1821 - 1828 (1994). Esta acción permite los procesos de reparación de DNA que completan sus tareas antes de la replicación del genoma y tiene lugar la posterior separación de este material genético en células nuevas hijas. Sustancialmente, el gen más comúnmente mutado en cáncer humano, el gen supresor del tumor p53, produce una proteína de punto de control de daño en el DNA que bloquea la progresión del ciclo celular en la fase Gi y/o induce apoptosis (muerte celular programada) que sigue al daño en el DNA. Hartwell y col., Science, 266, 1821 - 1828 (1994). Se ha mostrado también que el supresor del tumor p53 fortalece la acción de un punto de control de daño en el DNA en la fase Gz del ciclo celular. Véase, por ejemplo, Bunz y col., Science, 28, 1497 - 1501 (1998); Winters y col., Oncogene, 17, 673 - 684 (1998); Thompson, Oncogene, 15, 3025 - 3035 (1997).

Dada la naturaleza fundamental de la ruta del supresor del tumor p53 en un cáncer humano, se ha buscado activamente las intervenciones terapéuticas que exploten vulnerabilidades en cáncer deficiente en p53. Una vulnerabilidad emergente se sitúa en la operación del punto de control de G2 en las células cancerosas deficientes en p53. Las células cancerosas, debido a que carecen del control de los puntos de control de Gi, son particularmente vulnerables a la abolición de la última barrera restante que las protege de los efectos anticancerígenos de los agentes dañinos para el DNA: el punto de control de G2. El punto de control de G2 se regula mediante un sistema de control que se ha conservado a partir de levaduras a humanos. Es importante en este sistema conservado una quinasa, CHK1 , que transduce señales del complejo sensorial de daño en el DNA para inhibir la activación de la ciclina B/Cdc2 quinasa, que promueve la entrada mitótica. Véase, por ejemplo, Peng y col., Science, 277, 1501 - 1505 (1997); Sánchez y col., Science, 277, 1497 - 1501 (1997). La inactivación de CHK1 se ha mostrado que elimina la detección de G2 inducida por daños en el DNA causada bien por agentes anticancerígenos como por daño en el DNA endógeno, así como da como resultado la muerte preferencial de las células resultantes deficientes en puntos de control. Véase, por ejemplo, Nurse, Cell, 91 , 865 - 867 (1997); Weinert, Science, 277, 1450 - 1451 (1997); Walworth y col., Nature, 363, 368 - 371 (1993); y Al-Khodairy y col., Molec. BioL Cell, 5, 147 - 160 (1994). La manipulación selectiva del control del punto de control en las células cancerosas podría proporcionar una utilización amplia en regímenes de quimioterapia y radioterapia de cáncer y puede, además, ofrecer una señal común de "inestabilidad genómica" de cáncer humano que se va a explotar como base selectiva para la destrucción de células cancerosas. Numerosos factores sitúan CHK1 como una diana fundamental en el control de los puntos de control de los daños en el DNA. La explicación de los inhibidores de esta y las quinasas funcionalmente relacionadas tales como Cds1/CHK2, una quinasa recientemente descubierta para cooperar con CHK1 en la regulación de la progresión de la fase S (véase Zeng y col., Nature, 395, 507 - 510 (1998); Matsuoka, Science, 282, 1893 - 1897 (1998)), podría proporcionar valiosas entidades terapéuticas nuevas para el tratamiento de cáncer. El receptor de ¡ntegrina que se une a ECM inicia señales intracelulares mediadas por FAK (quinasa de adhesión focal) que están implicadas en la motilidad celular, proliferación celular y supervivencia. En cánceres humanos, la sobreexpresión de FAK está implicada en la tumorogénesis y potencial metástasis potencial a través de su papel en las rutas de señalización mediadas por integrina. Las tirosinaquinasas pueden ser del tipo receptor (que tiene dominios extracelulares, de transmembrana e intracelulares) o de tipo no receptor (que son totalmente intracelular). Al menos una de las proteínas tirosinaquinasas de tipo no receptor, llamada, LCK, se cree que media la transducción en células T de una señal de la interacción de una proteína de la superficie celular (Cd4) con un anticuerpo anti-Cd4 reticulado. Una descripción más detallada de las tirosinaquinasas de tipo no receptor se proporciona en Bolen, Oncogene, 8, 2025 - 2031 (1993), que se incorpora en esta memoria descriptiva como referencia en su totalidad para todos los propósitos. Además de las proteinquinasas identificadas anteriormente, se han considerado muchas otras proteinquinasas para ser dianas terapéuticas y numerosas publicaciones describen inhibidores de la actividad quinasa, como se informa en las siguientes: patente de Estados Unidos N° 6.534.524, expedida el 18 de marzo de 2003, patente de estados Unidos N° 6.531.491 , expedida el 11 de marzo de 2003, publicación de ia solicitud de patente internacional PCT N° WO 00/38665 (publicada el 6 de julio de 2001), publicación de la solicitud de patente internacional PCT N° WO 97/49688 (publicada el 31 de diciembre de 1997), publicación de la solicitud de patente internacional PCT N° WO 98/23613 (publicada el 4 de junio de 1998), patente de Estados Unidos N° 6.071.935, expedida el 6 de junio de 2000, publicación de la solicitud de patente internacional PCT N° WO 96/30347 (publicada el 3 de octubre de 1996), publicación de la solicitud de patente internacional PCT N° WO 96/40142 (publicada el 19 de diciembre de 1996), publicación de la solicitud de patente internacional PCT N° WO 97/13771 (publicada ei 17 de abril de 1997), publicación de la solicitud de patente internacional PCT N° WO 95/23141 (publicada el 31 de agosto de 1995), publicación de la solicitud de patente internacional PCT N° WO 03/006059 (publicada el 23 de enero de 2003), publicación de la solicitud de patente internacional PCT N° WO 03/035047 (publicada el 1 de mayo de 2003), publicación de la solicitud de patente internacional PCT N° WO 02/064170 (publicada el 22 de agosto de 2002), publicación de la solicitud de patente internacional PCT N° WO 02/41882 (publicada el 30 de mayo de 2002), publicación de la solicitud de patente internacional PCT N° WO 02/30453 (publicada el 18 de abril de 2002), publicación de la solicitud de patente internacional PCT N° WO 01/85796 (publicada el 15 de noviembre de 2001), publicación de la solicitud de patente internacional PCT N° WO 01/74360 (publicada el 11 de octubre de 2001), publicación de la solicitud de patente internacional PCT N° WO 01/74296 (publicada el 11 de octubre de 2001 ), publicación de la solicitud de patente internacional PCT N° WO 01/70268 (publicada el 27 de septiembre de 2001 ), publicación de la solicitud de la patente europea EP N° 1086705 (publicada el 28 de marzo de 2001) y publicación de la solicitud de la patente internacional PCT N° WO 98/51344 (publicada el 19 de noviembre de 1998). Las patentes y solicitudes anteriores se incorporan cada una de ellas en esta memoria descriptiva como referencia en su totalidad para todos los propósitos. Sin embargo, todavía existe una necesidad de inhibidores eficaces de proteinquinasas. Además, como entienden los expertos en la técnica, es deseable que los inhibidores de quinasa posean tanto alta afinidad para la quinasa como las quinasas diana así como una alta selectividad frente a otras proteinquinasas. De este modo, un objetivo de la invención es descubrir agentes potentes para el tratamiento de enfermedades oftálmicas, tales como degeneración macular relativa a la edad (abreviadamente en inglés ARMD), neovascularización coroidal (abreviadamente en inglés CNV), retinopatías (por ejemplo, retinopatía diabética, vitreorretinopatía, retinopatía de carácter prematuro), retinitis, (por ejemplo, retinitis por citomegalovirus (abreviadamente en inglés CMV)), uveitis, edema macular y glaucoma. Otro objetivo de la presente invención es descubrir potentes inhibidores de proteinquinasas. Otro objetivo de la presente invención es descubrir inhibidores eficaces de quinasas que tienen una afinidad fuerte y selectiva para una o más quinasas particulares.

Estos y otros objetivos de la invención, que serán aparentes de la siguiente descripción, se han llevado a cabo mediante el descubrimiento de los compuestos de indazol, fármacos farmacéuticamente aceptables, metabolitos farmacéuticamente activos y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos . (dichos compuestos, profármacos, metabolitos y sales se denominan colectivamente "agentes") descritos más adelante, que modulan y/o inhiben la actividad de proteinquinasas. Las composiciones farmacéuticas que contienen dichos agentes son útiles en el tratamiento de enfermedades mediadas por la actividad quinasa, tal como cáncer, así como otros estados de enfermedades asociados con angiogénesis no deseada y/o proliferación celular, tal como retinopatía diabética, glaucoma neovascular, artritis reumatoide y soriasis. Además, los agentes tienen propiedades ventajosas relativas a la modulación y/o inhibición de la actividad quinasa asociada con VEGF-R, FGF-R, complejos de CDK, CHK1, LCK, TEK, FAK, y/o fosforilasaquinasa. En un aspecto general, la invención se refiere a compuestos que tienen las siguientes estructuras: ?? ?? ?? ?? La invención también se refiere a un procedimiento de modulación y/o inhibición de la actividad quinasa de VEGF-R, FGF-R, un complejo de CDK, CHK1 , LCK, TEK, FAK y/o fosforilasaquinasa mediante la administración de un compuesto de fórmula I, II, III o IV, o un profármaco farmacéuticamente aceptable, metabolito farmacéuticamente activo, o sal farmacéuticamente aceptable de los mismos. Los compuestos preferidos de la presente invención que tienen actividad quinasa selectiva - es decir, poseen actividad significativa contra una o más quinasas específicas mientras que poseen actividad inferior o mínima contra una o más quinasas diferentes. En una realización preferida de la invención, los compuestos de la presente invención son los de fórmula I que poseen sustancialmente mayor potencia contra la tirosinaquinasa del receptor VEGF que contra la tirosinaquinasa del receptor FGR R1. La invención también se refiere a procedimientos de modulación de la actividad de tirosinaquinasa del receptor VEGF sin modular significativamente actividad de la tirosinaquinosa del receptor FGF. Los compuestos de la invención se pueden usar ventajosamente en combinación con otros agentes terapéuticos conocidos. Por ejemplo, los compuestos de fórmula I, II, III o IV que poseen actividad antiangiogénica se puede coadministrar con agentes quimioterapéuticos citotóxicos, como taxol, taxotere, vinblastina, cisplatino, doxorrubicina, adrimicina y similares, para producir un efecto antitumoral potenciado. La potenciación aditiva o sinérgica del efecto terapéutico se puede también obtener mediante la coadministración de los compuestos de fórmula I, II, III o IV que poseen actividad antiangiogénica con otros agentes antiangiogénicos, tales como combretastatina A-4, endostatina, priniomastat, celecoxib, rofocoxib, EMD 121974, IM862, anticuerpos monocionales anti-VEGF, y anticuerpos monoclonales anti-KDR. Las combinaciones adicionales se ejemplifican en los documentos WO 0038716, WO 00387171 , WO 0038715, WO 0038730, WO 0038718, WO 0038665, WO 0037107, WO 0038786, WO 0038719, todos presentados simultáneamente el 22 de diciembre de 1999, incorporados en esta memoria descriptiva como referencia en su totalidad para todos los propósitos. La invención también se refiere a composiciones farmacéuticas, comprendiendo cada una de ellas una cantidad eficaz de un agente seleccionado entre los compuestos de fórmula I y sales farmacéuticamente aceptables, metabolitos farmacéuticamente activos y profármacos farmacéuticamente aceptables de los mismos, y un excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable para dicho agente. La invención además proporciona procedimientos de tratamiento de enfermedades/afecciones oftálmicas y cáncer así como otros estados de enfermedades asociadas con angiogénesis y/o proliferación celular no deseadas, que comprende la administración de cantidades eficaces de dicho agente a un paciente en necesidad de dicho tratamiento. Los compuestos de la invención de fórmula I, II, III o IV son útiles para tratar enfermedades oftálmicas y mediar la actividad de las proteinquinasas. Más particularmente, los compuestos son útiles como agentes antiangiogénicos y como agentes para modular y/o inhibir la actividad de proteinquinasas, proporcionando de esta manera tratamientos para enfermedades oftálmicas y cáncer u otras enfermedades asociadas con proliferación celular mediadas por proteinquinasas.

El término "alquilo" como se utiliza en esta memoria descriptiva se refiere a grupos alquilo de cadena lineal y ramificada que tienen entre uno y doce átomos de carbono. Los grupos ejemplares alquilo incluyen metilo (abreviadamente Me), etilo (abreviadamente Et), n-propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec-butilo, tere-butilo (abreviadamente t-Bu), pentilo, isopentilo, terc-pentilo, hexilo, isohexilo y similares. El término "alquilo inferior" designa un alquilo que tiene entre 1 y 8 átomos de carbono (un alquilo (Ci - C8)). Los alquilos sustituidos adecuados incluyen, fluorometilo, difluorometilo, trifluorometilo, 2-fluoroetilo, 3-fluoropropilo, hidroximetilo, 2-hidroxietilo, 3-hidroxipropilo y similares. El término "alquilideno" se refiere a un radical divalente que tiene entre uno y doce átomos de carbono. Los grupos alquilideno ilustrativos incluyen CH2, CHCH3, (CH3)2 y similares. El término"alquenilo" se refiere a grupos alquenilo de cadena lineal y ramificada que tienen entre dos y doce átomos de carbono. Los grupos alquenilo ilustrativos incluyen prop-2-enilo, but-2-enilo, but-3-enilo, 2-metilprop-2-enilo, hex-2-enilo y similares. El término "alquinilo" se refiere a grupos alquinilo de cadena lineal o ramificada que tienen entre dos y doce átomos de carbono. El término"cicloalquilo" se refiere a carbociclos saturados o parcialmente insaturados que tienen entre tres y doce átomos de carbono, que incluyen estructuras cicloaiquilo bicíclicas y tricíclicas. Los cicloalquilos adecuados incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo y similares.

Un grupo "heterocicloalquilo" tiene la intención de significar un radical monocíclico saturado o parcialmente insaturado que contiene átomos de carbono, preferiblemente 4 ó 5 átomos de carbono en el anillo y al menos un heteroátomo seleccionado entre nitrógeno, oxígeno y azufre. Los términos "arilo" y "heteroarilo" se refieren a estructuras de anillo aromático o insaturado monocíclico y policíclico, con "arilo" refiriéndose a los que son carbociclos y "heteroarilo" refiriéndose a los que son heterociclos. Los ejemplos de estructuras de anillos aromáticos incluyen fenilo, naftilo, 1,2,3,4-tetrahidronaftilo, furilo, tienilo, pirrolilo, piridinilo, pirazolilo, imidazolilo, pirazinilo, piridazinilo, 1,2,3-triazinilo, 1 ,2,4-oxadiazolilo, 1 ,3,4-oxadiazolilo, 1-H-tetrazol-5-ilo, indolilo, quinolinilo, benzofuranilo, benzotiofenilo (tianaftenilo) y similares. Dichos restos se pueden sustituir opcionalmente mediante una estructura de anillo condensado o puente, por ejemplo OCH2-0. El término "alcoxi" tiene la intención de significar el radical -O-alquilo. Los ejemplos ilustrativos incluyen metoxi, etoxi, propoxi y similares. El término "ariloxi" representa -O-arilo, en el que arilo se ha definido anteriormente. El término "cicloalcoxilo" representa -O-cicloalquilo, en el que cicloalquilo se ha definido anteriormente. El término "halógeno" representa cloro, flúor, bromo o yodo. El término "halo" representa cloro, fluoro, bromo o yodo. En general, los diversos restos o grupos funcionales para variables en las fórmulas se pueden sustituir opcionalmente por uno o más sustituyentes adecuados. Los sustituyentes ejemplares incluyen un halógeno (F, Cl, Br o I), alquilo inferior, -OH, -NO2, -CN, -C02H, -O-alquiloinferior, -arilo, -aril-alquilo inferior, -C02CH3, -CONH2, -OCH2CONH2> -NH2, -S02NH2, haloalquilo (por ejemplo, -CF3, -CH2CF3), -O-haloalquilo (por ejemplo, -OCF3, -OCHF2) y similares. Los términos "comprendiendo" e "incluyendo" se usan en un sentido abierto, no limitante. Se entiende que aunque un compuesto de fórmula I puede mostrar el fenómeno de tautomería, los dibujos de las fórmulas dentro de esta memoria descriptiva describen expresamente solamente una de las posibles formas tautómeras. Por lo tanto se entiende que en la invención las fórmulas se intenta que representen cualquier forma tautómera del compuesto descrito y no se limita meramente a una forma tautómera específica descrita por los dibujos de las fórmulas. Algunos de los compuestos de la invención pueden existir en forma de estereoisómeros únicos (es decir, esencialmente exentos de otros estereoisómeros), racematos, y/o mezclas de enantiomeros y/o diastereoisómeros. Todos estos estereoisómeros únicos, racematos y mezclas de los mismos se pretende que estén dentro del alcance de la presente invención. Preferiblemente, los compuestos de la invención que son óptimamente activos se usan en forma ópticamente pura. Como generalmente entienden los expertos en la técnica, un compuesto ópticamente puro que tiene un centro quiral es uno que consiste esencialmente en uno de los dos posibles enantiomeros (es decir, es enantioméricamente puro) y un compuesto ópticamente puro que tiene más de un centro quiral es uno que es tanto diastereoméricamente puro como enantioméricamente puro. Preferiblemente, los compuestos de la presente invención se usan en una forma que es al menos 90% ópticamente pura, es decir, una forma que contiene al menos 90% de un sólo isómero (80% de exceso enatiomérico (abreviadamente "e. e" o exceso diastereomérico (abreviadamente en inglés "d. e.")), más preferiblemente al menos 95% (90% de e. e. o d. e.), incluso más preferiblemente al menos 97,5% (95% de e. e. o d. e.), y más preferiblemente al menos 99% (98% de e. e. o d. e.). Adicionalmente, las fórmulas tienen la intención de cubrir tanto formas solvatadas como no solvatadas de las estructuras identificadas. Por ejemplo, la fórmula I incluye compuestos de la estructura indicada en formas tanto hidratadas como no hidratadas. Otros ejemplos de solvatos incluyen las estructuras en combinación con isopropanol, etanol, metanol, DMSO, acetato de etilo, ácido acético o etanolamina. Además de los compuestos de la fórmula I, II, III y IV, la invención incluye profármacos farmacéuticamente aceptables, metabolitos farmacéuticamente activos y sales farmacéuticamente aceptables de dichos compuestos. "Un profármaco farmacéuticamente aceptable" es un compuesto que se puede convertir en condiciones fisiológicas o mediante solvólisis en el compuesto especificado o en una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto. "Un metabolito farmacéuticamente activo" tiene la intención de significar un producto farmacológicamente activo producido mediante metabolismo en el cuerpo de un compuesto especificado o sal de los mismos. Los metabolitos de un compuesto se pueden identificar usando técnicas habituales conocidas en la técnica y sus actividades determinadas usando ensayos tales como los descritos en esta memoria descriptiva. Los profármacos y metabolitos activos de un compuesto se pueden identificar usando técnicas habituales conocidas en la técnica. Véase, por ejemplo, Bertolini, G. y col., J. Med. Chem., 40, 2011 - 2016 (1997); Shan, D. y col., J. Pharm. Sc , 86 (7), 765 - 767; Bagshawe K., Drug Dev. Res., 34, 220 -230 (1995); Bodor, N., Advances in Drug Res., 13, 224 - 331 (1984); Bundgaard, H., Design of Prodrugs (Elsevier Press 1985); y Larsen, I. K., Design and Application of Prodrugs, Drug design and Development (Krogsgaard - Larsen y col., eds., Harwood Academic Publishers, 1991 ). Una "sal farmacéuticamente aceptable" tiene la intención de significar una sal que retiene la eficacia biológica de los ácidos y bases libres del compuesto especificado y que no es biológicamente o de otra manera no deseable. Un compuesto de la invención puede poseer un grupo funcional suficientemente ácido, suficientemente básico o ambos, y por consiguiente reaccionar con cualquiera de un número de bases inorgánicas u orgánicas, y ácidos inorgánicos y orgánicos para formar una sal farmacéuticamente aceptable. Las sales farmacéuticamente aceptables ejemplares incluyen las sales preparadas mediante la reacción de los compuestos de la presente invención con un ácido mineral u orgánico o una base inorgánica, tales como las sales que incluyen sulfatas, pirosulfatos, bisulfatos, sulfitos, bisulfitos, fosfatos, fosfatos monoácidos, fosfatos diácidos, metafosfatos, pirofosfatos, cloruros, bromuros, yoduros, acetatos^ propionatos, decanoatos, caprilatos, acrilatos, formiatos, isobutiratos, caproatos, heptanoatos, propiolatos, oxalatos, malonatos, succinatos, suberatos, sebacatos, fumaratos, maleatos, butino-1 ,4-dioatos, hexino-1 ,6-dioatos, benzoatos, clorobenzoatos, metilbenzoatos, dinitrobenzoatos, hidroxibenzoatos, metoxibenzoatos, ftalatos, sultanatos, xilenosulfonatos, fenilacetatos, fenilpropionatos, fenilbutiratos, citratos, lactatos, y-hidroxibutiratos, glicolatos, tartratos, metanosulfonatos, propanosulfonatos, naftaleno-1-sulfonatos, naftaleno-2-sulfonatos y mandelatos. Si el compuesto de la invención es una base, la sal farmacéuticamente aceptable deseada se puede preparar mediante cualquiera de los procedimientos disponibles en la técnica, por ejemplo, tratamiento de la base libre con un ácido inorgánico, tal como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico y similares, o con un ácido orgánico, tal como ácido acético, ácido maleico, ácido succínico, ácido mandélico, ácido fumárico, ácido malónico, ácido pirúvico, ácido oxálico, ácido glicólico, ácido salicílico, un ácido piranosidilo, tal como ácido glucurónico o ácido galacturónico, un ácido alfa-hidroxi, tal como ácido cítrico o ácido tartárico, un aminoácido, tal como ácido aspártico o ácido glutámico, un ácido aromático, tal como ácido benzoico o ácido cinámico, un ácido sulfónico, tal como ácido p-toluenosulfónico o ácido etanosulfónico o similares. Si el compuesto de la invención es un ácido, la sal farmacéuticamente aceptable deseada se puede preparar mediante cualquier procedimiento adecuado, por ejemplo, tratamiento del ácido libre con una base inorgánica u orgánica, tal como una amina (primaria, secundaria o terciaria), un hidróxido de metal alcalino o hidróxido de metal alcalinotérreo, o similares. Los ejemplos ilustrativos de las sales adecuadas incluyen sales orgánicas derivadas de aminoácidos, tales como glicina y arginina, amoníaco, aminas primarias, secundarias y terciarias, y aminas cíclicas, tales como piperidina, morfolina y piperazina, y sales inorgánicas derivadas de sodio, calcio, potasio, magnesio, manganeso, hierro, cobre, cinc, aluminio y litio. En el caso en que los agentes sean sólidos, los expertos en la técnica entienden que los compuestos y sales de la invención pueden existir en diferentes formas cristalinas o polimórficas, todas los cuales se pretende que estén dentro del alcance de la presente invención y fórmulas especificadas. Las cantidades terapéuticamente eficaces de los agentes de la invención se pueden usar para tratar enfermedades mediadas por modulación o regulación de proteinquinasas. Una "cantidad eficaz" tiene la intención de significar la cantidad de un agente que, cuando se administra a un mamífero en necesidad de dicho tratamiento, es suficiente para efectuar el tratamiento de una enfermedad mediada por la actividad de una o más proteinquinasas, tales como tirosinaquinasas. De este modo, por ejemplo, una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula I, sal, metabolito activo o profármaco del mismo es una cantidad suficiente para modular, regular o inhibir la actividad de una o más proteinquinasas de manera que un estado de enfermedad que se media mediante esa actividad se reduce o se alivia. La cantidad de un agente dado que corresponderá a dicha cantidad variará dependiendo de factores tales como el compuesto particular, estado de la enfermedad y su gravedad, la identidad (por ejemplo, peso) del mamífero en necesidad de tratamiento, pero puede independientemente determinarse rutinariamente por un experto en la técnica. "Tratamiento" tiene la intención de significar al menos la mitigación de una afección de la enfermedad en un mamífero, tal como un ser humano, que está afectado, al menos en parte, por la actividad de una o más proteinquinasas, tal como tirosinaquinasas e incluye: la prevención de que la afección de la enfermedad se produzca en un mamífero, particularmente cuando se encuentra que el mamífero está predispuesto para tener la afección de la enfermedad pero todavía no se ha diagnosticado que la tiene; modulando y/o inhibiendo la afección de la enfermedad; y/o aliviando el estado de la enfermedad. Los agentes de la invención se pueden preparar usando las vías de reacción y esquemas de síntesis como se describen más adelante, empleando técnicas disponibles en la técnica usando los materiales de partida que están fácilmente disponibles. En un procedimiento general de síntesis, los compuestos de fórmula I se prparan según el siguiente esquema de reacción: 6-Nitroindazol (compuesto V) se trata con yodo y base, por ejemplo, NaOH, en una mezcla acuosa/orgánica, preferiblemente con dioxano. La mezcla se acidifica y el producto se aisla mediante filtración. Al 3-yodo-6-nitroindazol resultante en diclorometano - KOH acuoso al 50% a 0°C se añade un reactivo del grupo protector (abreviadamente "Pg") (en el que X = halo), preferiblemente cloruro de trimetilsililetoximetilo (abreviadamente en inglés SEM-CI), y un catalizador de transferencia de fases, por ejemplo, bromuro de tetrabutilamonio (abreviadamente TBABr). Después de 1 - 4 horas, las dos fases se diluyen, se separan los productos orgánicos, se secan con sulfato sódico, se filtran y se concentran. El producto bruto se purifica mediante cromatografía en gel de sílice para proporcionar compuestos de fórmula VI. El tratamiento de los compuestos de fórmula VI en un disolvente orgánico adecuado con un reactivo R1-organometálico, preferiblemente un ácido R1-borónico, en presencia de una base acuosa, por ejemplo, carbonato sódico y un catalizador adecuado, preferiblemente Pd(PPh3)4 proporciona, después de un tratamiento extractivo y cromatografía en gel de sílice, los compuestos de fórmula VII. El sustituyente R1 se puede intercambiar en compuestos de fórmula VII o intermedios posteriores durante este esquema mediante escisión oxidante (por ejemplo, ozonólisis) seguido de adiciones a la funcionalidad aldehido resultante con transformaciones de Wittig o de condensación (tipificados en el ejemplo 42 (a-e)). El tratamiento de los compuestos de fórmula VII con un agente reductor, preferiblemente SnC-k, proporciona después de tratamiento acuoso convencional y purificación, compuestos de fórmula VIII. Para la serie de derivados en los que Y = NH o N-alquilo inferior, los compuestos de fórmula VIII se pueden tratar con cloruros, bromuros, yoduros o triflatos de arilo o heteroarilo en presencia de una base, preferiblemente Cs2C03, y un catalizador, preferiblemente Pd-BINAP, (y donde Y = N-alquilo inferior, con una etapa posterior de alquilación) para proporcionar compuestos de fórmula X. Para producir otros enlaces Y, se añade nitrito sódico a los compuestos de fórmula VIII en condiciones acidas acuosas frías habituales seguido de la adición de yoduro potásico y calentamiento suave. El tratamiento y purificación habitual produce compuestos de yodo de fórmula IX. El tratamiento de los compuestos de fórmula IX con un reactivo organometálico, por ejemplo butillitio, promueve intercambio de halógeno litio. Después este intermedio reacciona con un electrófilo R2, por ejemplo, un carbonilo o triflato, mediante la posible mediación de metales adicionales y catalizadores, preferiblemente cloruro de cinc y Pd(PPh3)4 para proporcionar los compuestos de fórmula X. Alternativamente, los compuestos de fórmula IX se pueden tratar con un reactivo organometálico tal como ácido organobórico en presencia de un catalizador, por ejemplo, Pd(PPh3)4. en una atmósfera de monóxido de carbono para proporcionar los compuestos de fórmula X. Alternativamente, para derivados donde Y = NH o S, los compuestos de fórmula IX se pueden tratar con aminas adecuadas o tioles en presencia de una base, preferiblemente CS2CO3 o K3P04 y un catalizador, preferiblemente Pd-BINAP o Pd-(bis-ciclohexil)b¡fenilfosfina para proporcionar los compuestos de fórmula X. Después se pueden emplear intercambios de grupos funcionales, tales como oxidaciones, reducciones, alquilaciones, acilaciones, condensaciones y desprotecciones para derivatizar posteriormente estas series proporcionando los compuestos finales de fórmula I. Los compuestos de la invención de fórmula I se pueden también preparar según el procedimiento general mostrado en el siguiente esquema: 6-yodoindazol (XI) se trata con yodo y base, por ejemplo, NaOH, en una mezcla acuosa/orgánica, preferiblemente con dioxano. La mezcla se acidifica y el producto XII se aisla mediante filtración. Al 3,6-diyodoindazol resultante en diclorometano - KOH acuoso al 50% a 0°C se añade un reactivo del grupo protector, preferiblemente SEM-CI, y un catalizador de transferencia de fases, por ejemplo, TBABr. Se diluyen las dos fases, se separan los productos orgánicos, se secan con sulfato sódico, se filtran y se concentran. El producto bruto se purifica mediante cromatografía en gel de sílice para proporcionar compuestos de fórmula XIII. El tratamiento de los compuestos de fórmula XIII en un disolvente orgánico adecuado con un reactivo R2-organometálico adecuado, por ejemplo, R2-ZnCI, o un reactivo de boro de R2-boro y un catalizador adecuado, preferiblemente Pd(PPh3)4 proporciona, después de un tratamiento extractivo y cromatografía en gel de sílice, los compuestos de fórmula XIV. El tratamiento de los compuestos de fórmula XIV en un disolvente orgánico adecuado con un reactivo R1 -organometálico adecuado (por ejemplo, reactivo de boro de R1-boro o R1-ZnCI) en presencia de una base acuosa, carbonato sódico y un catalizador adecuado, preferiblemente Pd(PPh3)4 proporciona, después de un tratamiento extractivo y cromatografía en gel de sílice, los compuestos de fórmula XV. Después se pueden emplear intercambios de grupos funcionales convencionales, tales como oxidaciones, reducciones, alquilaciones, acilaciones, condensaciones y desprotecciones para derivatizar esta serie proporcionando los compuestos finales de fórmula I.

Alternativamente, los compuestos de fórmula I en los que R2 es un Y-Ar sustituido o no sustituido, en el que Y es O o S se pueden preparar según el esquema general siguiente: XVI catalizador, calor o OOQ modificaciones Una solución agitada en acetona de 3-clorociclohex-2-enona (XV), H- 2, y carbonato potásico anhidro se calienta a reflujo durante 15 - 24 horas, se enfría y se filtra. Concentrando y cromatografiando el filtrado sobre gel de sílice se proporciona 3-R2-ciclohex-2-enona (XVI). Las cetonas de fórmula XVI se pueden hacer reaccionar con una base adecuada (M-B), preferiblemente bis(trimetilsilil)amiduro de litio y se hacen reaccionar con R1-CO-X (donde X = halógeno), que después de tratamiento ácido habitual y purificación proporciona compuestos de fórmula XVII. Este producto, en AcOH/EtOH, combinado con monohidrato de hidracina, se calienta a una temperatura adecuada durante un período de tiempo adecuado, preferiblemente 60 - 80°C durante 2 - 4 horas. Después de enfriar, la mezcla se vierte en solución saturada de bicarbonato sódico, se extrae con un disolvente orgánico, se concentra y se purifica sobre gel de sílice para proporcionar compuestos de fórmula XVIII. Los compuestos de fórmula XVIII se pueden oxidar usando una diversidad de procedimientos conocidos para proporcionar los compuestos de fórmula I.

Un procedimiento alternativo para sintetizar los compuestos de la presente invención es el siguiente: Mediante el cual las condiciones de las etapas a) hasta i) son las siguientes: a) NaN02, Br2, HBr, 0°C - -5°C, rendimiento de 48%; b) Pd(OAc)2, Pd(o-tolil)3, diisopropiletilamina (abreviadamente en inglés DIEA), DMF, H20, desgasifigado, microondas, 110°C, 1 hora; 68% de rendimiento; c) Hierro en polvo, NH OH acuoso saturado, EtOH, 45°C, 72% de rendimiento; d) 2-bromobenzoato de metilo, R-BINAP, Pd2(dba)3, Cs2C03, tolueno, desgasificado, 110°C durante una noche; 74% de rendimiento; e) KOH, MeOH:THF:H20 (3:1 :1) 70°C, 2 - 3 horas; cuantitativo; f) Amina protegida, HATU, NEt3, DMF, temperatura ambiente durante 2 horas; 80% de rendimiento; g) TsOH (12% de TsOH en AcOH), EtOH (10% acuoso); 44% de rendimiento; h) Tributüvinilestaño, Pd(PPh3), 2,6-di-t-butil-4-metilfenol, tolueno, desgasificado, 105°C, 31% de rendimiento; i) Pd(OAc)2, Pd(o-tolil)3, DIEA, DMF, desgasificado, 100°C; aproximadamente 70% de rendimiento. Otros compuestos de fórmula I se pueden preparar de manera análoga a los procedimientos generales descritos anteriormente o los procedimientos detallados descritos en los ejemplos de esta memoria descriptiva. La afinidad de los compuestos de la invención por un receptor se puede potenciar proporcionando múltiples copias del ligando en proximidad cercana, preferiblemente usando un andamiaje proporcionado por un resto de vehículo. Se ha mostrado que la provisión de tales compuestos de valencia múltiple con un espacio óptimo entre los restos mejora notablemente la unión a un receptor. Véase, por ejemplo, Lee y col., Biochem, 23, 4255 (1984). El espacio y la multivalencia se pueden controlar mediante la selección de un resto de vehículo adecuado o unidades de engarce. Dichos restos incluyen soportes moleculares que contienen una multiplicidad de grupos funcionales que se pueden hacer reaccionar con grupos funcionales asociados a los compuestos de la invención. Ciertamente, se pueden usar una diversidad de vehículos, incluyendo proteínas tales como BSA o HSA, una multiplicidad de péptidos incluyendo, por ejemplo, pentapéptidos, decapéptidos, pentadecapéptidos y similares. Los péptidos o proteínas pueden contener el número deseado de restos de aminoácidos que tienen grupos amino libres en sus cadenas laterales; sin embargo, otros grupos funcionales, tales como grupos sulfhidrilo o grupos hidroxilo, también se pueden usar para obtener enlaces estables. Se desean compuestos que regulan, modulan o inhiben de forma potente la actividad proteinquinasa asociada a receptores VEGF, FGF, complejos de CDK, TEK, CHK1 , LCK, FAK y fosforilasaquinasa entre otros, y que inhiben angiogénesis y/o proliferación celular y es una realización preferida de la presente invención. La presente invención se refiere además a procedimientos de modulación o inhibición de la actividad de proteinquinasa, por ejemplo, en tejido de mamíferos, mediante la administración de un agente de la invención. La actividad de los compuestos de la invención como moduladores de la actividad de proteinquinasa, tales como la actividad de quinasas, se puede medir mediante cualquiera de los procedimientos disponibles por los expertos en la técnica incluyendo los ensayos in vivo y/o in vitro. Entre los ejemplos de ensayos adecuados para las mediciones de actividad se incluyen los descritos en Parast C. y col., Biochemistry, 37 16788 -16801 (1998); Jeffrey y col., Nature, 376, 313 - 320 (1995); la publicación internacional WIPO WO 97/34876; y la publicación internacional WIPO WO 96/14843. Estas propiedades se pueden valorar, por ejemplo, usando uno o más de los procedimientos de ensayo biológico establecidos en los ejemplos más adelante. Los agentes activos de la invención se pueden formular en composiciones farmacéuticas como se describe más adelante. Las composiciones farmacéuticas de esta invención comprenden una cantidad eficaz moduladora, reguladora o inhibidora de un compuesto de fórmula I, II, III o IV y un vehículo o diluyente inerte farmacéuticamente aceptable. En una realización de las composiciones farmacéuticas, se proporcionan niveles eficaces de los agentes de la invención de manera que se proporcionan beneficios terapéuticos que implican modulación de proteinquinasas. Por "niveles eficaces" se entiende niveles en los que los efectos de proteinquinasas están, por lo menos, regulados. Estas composiciones se preparan en forma de dosificación unitaria adecuada para el modo de administración, por ejemplo, administración oral o parenteral. Un agente de la invención se administra en forma de dosificación convencional preparada mediante la combinación de una cantidad terapéuticamente eficaz de un agente (por ejemplo, un compuesto de fórmula I) como ingrediente activo con vehículos o diluyentes farmacéuticos adecuados según procedimientos convencionales. Estos procedimientos pueden incluir mezcla, granulación y compresión o disolución de los ingredientes de manera adecuada a la preparación deseada. El vehículo farmacéutico empleado puede ser sólido o líquido. Los ejemplos de vehículos sólidos son lactosa, sacarosa, talco, gelatina, agar, pectina, goma arábiga, estearato de magnesio, ácido esteárico y similares. Los ejemplos de vehículos líquidos son jarabe, aceite de cacahuete, aceite de oliva, agua y similares. De manera similar, el vehículo o diluyente puede incluir material de retardo o de liberación con el tiempo conocido en la técnica, tales como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo solos o con una cera, etilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, metacrilato de metilo y similares. Se pueden emplear una diversidad de formas farmacéuticas. De ese modo, si se usa un vehículo sólido, la preparación se puede comprimir, situar en una cápsula dura de gelatina en forma de polvo o gránulo o en forma de un trocisco o gragea. La cantidad de vehículo sólido puede variar, pero generalmente estará entre aproximadamente 25 mg y aproximadamente 1 g. Si se usa un vehículo líquido, la preparación estará en forma de jarabe, emulsión, gotas, cápsula blanda de gelatina, solución o suspensión inyectable estéril en una ampolla o vial o suspensión líquida no acuosa. Para obtener una dosis hidrosoluble estable, se disuelve una sal farmacéuticamente aceptable de un agente de la invención en una solución acuosa de un ácido orgánico o inorgánico, tal como una solución 0,3 de ácido succínico o ácido cítrico. Si no está disponible una forma de sal soluble, el agente se puede disolver en un codisolvente adecuado o combinaciones de codisolventes. Los ejemplos de codisolventes adecuados incluyen, pero no se limitan a, alcohol, propilenglicol, polietilenglicol 300, polisorbato 80, glicerina y similares en concentraciones que varían entre 0 - 60% del volumen total. En una realización ejemplar, un compuesto de fórmula I se disuelve en DMSO y se diluye con agua. La composición también puede estar en la forma de una solución de una forma de sal del ingrediente activo en un vehículo acuoso adecuado tal como agua o solución salina isotónica o solución de dextrosa. Se apreciará que las dosificaciones reales de los agentes usados en las composiciones de esta invención variarán según el complejo particular que se esté usando, la composición particular formulada, el modo de administración y el sitio en particular, huésped y enfermedad que se está tratando. Las dosificaciones óptimas para un conjunto dado- de afecciones se puede averiguar por los expertos en la técnica usando ensayos de determinación de dosificaciones convencionales en vista de los datos experimentales para un agente. Para la administración oral, una dosis diaria ejemplar generalmente empleada está entre aproximadamente 0,001 y aproximadamente 1000 mg/kg de peso corporal, más preferiblemente entre aproximadamente 0,001 y aproximadamente 50 mg/kg de peso corporal, con cursos de tratamiento repetidos a intervalos adecuados. La administración de profármacos se dosifica típicamente a niveles de peso que son químicamente equivalentes a los niveles en peso de la forma totalmente activa. Las composiciones de la invención se pueden fabricar de modos generalmente conocidos para preparar composiciones farmacéuticas, por ejemplo, usando técnicas convencionales tales como mezcla, disolución, granulación, preparación de grageas, producción de pasta o polvo fino, emulsificación, encapsulación, envolvimiento o liofilización. Las composiciones farmacéuticas se pueden formular de una manera convencional usando uno o más vehículos fisiológicamente aceptables, que se pueden seleccionar de excipientes y auxiliares que facilitan la elaboración de los compuestos activos en preparaciones que se pueden usar farmacéuticamente. La formulación adecuada depende de la vía de administración elegida. Para inyección, los agentes de la invención se pueden formular en soluciones acuosas, preferiblemente en tampones compatibles fisiológicamente tales como solución de Hanks, solución de Ringer o tampón de solución salina fisiológica. Para la administración transmucosal, se usan en la formulación los penetrantes adecuados de la barrera a permear. Dichos penetrantes se conocen generalmente bien en la técnica. Para la administración oral, los compuestos se pueden formular fácilmente combinando los compuestos activos con vehículos farmacéuticamente aceptables conocidos en la técnica. Dichos vehículos permiten que los compuestos de la invención se formulen en forma de comprimidos, pildoras, gragea, cápsulas, líquidos, geles, jarabes, pastas, suspensiones y similares, para la ingestión oral por un paciente a tratar. Las preparaciones farmacéuticas para uso oral se pueden obtener usando un excipiente sólido en mezcla con el ingrediente activo (agente), triturando opcionalmente la mezcla resultante y tratando la mezcla de granulos después de añadir los productos auxiliares adecuados, si se desea, para obtener comprimidos o núcleos de grageas. Los excipientes adecuados incluyen: cargas tales como azúcares, incluyendo lactosa, sacarosa, manitol o sorbitol; y preparaciones de celulosa, por ejemplo, almidón de maíz, almidón de trigo, almidón de arroz, almidón de patata, gelatina, goma, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio o polivinilpirrolidona (abreviadamente PVP). Si se desea, se pueden añadir agentes disgregantes, tales como polivinilpirrolidona reticuiada, agar, o ácido algínico o una sal de los mismos tal como alginato sódico. Los núcleos de grageas se proporcionan con revestimientos adecuados. Para este propósito, se pueden usar soluciones concentradas de azúcar, que pueden contener opcionalmente goma arábiga, polivinilpirrolidona, gel de carbopol, polietilenglicol y/o dióxido de titanio, soluciones de laca y disolventes orgánicos o mezclas de disolventes adecuadas. Se pueden añadir materias colorantes o pigmentos a los comprimidos o revestimientos de grageas para identificación o caracterización de las diferentes combinaciones de los agentes activos. Las preparaciones farmacéuticas que se pueden usar oralmente incluyen cápsulas de ajuste por presión hechas de gelatina, así como cápsulas selladas blandas hechas de gelatina y un plastificante, tal como glicerol o sorbitol. Las cápsulas de ajuste por presión pueden contener los ingredientes activos en mezcla con cargas, tales como lactosa, aglutinantes tales como almidones, y/o lubricantes tales como talco o estearato de magnesio, y opcionalmente, estabilizantes. En cápsulas blandas, los ingredientes activos se pueden disolver o suspender en líquidos adecuados, tales como aceites grasos, parafina líquida o polietilenglicoles líquidos. Además, se pueden añadir estabilizantes. Todas las formulaciones para administración oral deben estar en dosificaciones adecuadas para dicha administración. Para administración bucal, las composiciones pueden tomar la forma de comprimidos o grageas formuladas de una manera convencional. Para la administración intranasal o por inhalación, los compuestos para uso según la presente invención se distribuyen convenientemente en forma de una presentación de pulverizador en aerosol de envases presurizados o un nebulizador, con el uso de un propulsor adecuado, por ejemplo, diclorodifluorometano, triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano, dióxido de carbono u otros gases adecuados. En el caso de un aerosol presurizado la unidad de dosificación se puede determinar proporcionando una válvula para distribuir una cantidad medida. Las cápsulas y cartuchos de gelatina para uso en un inhalador o insuflador y similares se pueden formular conteniendo una mezcla en polvo del compuesto y una base de polvo adecuada tal como lactosa o almidón. Los compuestos se pueden formular para administración parenteral por inyección, por ejemplo, inyección de bolo o infusión continua. Las formulaciones para inyección se pueden presentar en forma de dosificación unitaria, por ejemplo, en ampollas o recipientes de dosis múltiples, con un conservante añadido. Las composiciones pueden tomar formas tales como, suspensiones, soluciones o emulsiones en vehículos oleosos o acuosos, y pueden contener agentes de formulación tales como agentes de suspensión, estabilizantes y/o dispersantes. Las formulaciones farmacéuticas para administración parenteral incluyen soluciones acuosas de los compuestos activos en forma hidrosoluble. Adicionalmente, las suspensiones de los agentes activos se pueden preparar en forma de suspensiones de inyecciones oleosas adecuadas. Los disolventes o vehículos lipófilos adecuados incluyen aceites grasos tales como aceite de sésamo, o ésteres de ácidos grasos sintéticos, tales como oleato de etilo, o triglicéridos o liposomas. Las suspensiones para inyecciones acuosas pueden contener sustancias que incrementan la viscosidad de la suspensión, tales como carboximetilcelulosa de sodio, sorbitol o dextrano. Opcionalmente, la suspensión también puede contener estabilizantes o agentes adecuados que incrementan la solubilidad de los compuestos para permitir la preparación de soluciones altamente concentradas. Para la administración ocular, un compuesto de fórmula I, II, III o IV se distribuye en un vehículo oftálmico farmacéuticamente aceptable de manera que el compuesto se mantiene en contacto con la superficie ocular durante un periodo de tiempo suficiente para permitir que el compuesto penetre la córnea y/o esclerótica y las regiones internas del ojo, incluyendo, por ejemplo, la cámara anterior, cámara posterior, cuerpo vitreo, humor acuoso, humor vitreo, córnea, iris/cuerpo ciliar, lente, coroide/retina y esclerótica. El vehículo oftálmico farmacéuticamente aceptable puede ser una pomada, aceite vegetal, o material de encapsulación. Un compuesto de la invención puede también inyectarse directamente en el humor vitreo o en el humor acuoso. Además, también se puede administrar un compuesto mediante procedimientos aceptables bien conocidos, tales como inyecciones subtenon y/o subconjuntivales. Como se conoce bien en la técnica oftálmica, la mácula se compone principalmente de conos retínales y es la región de máxima agudeza visual en la retina. Una cápsula de Tenon o membrana de Tenon se dispone en la esclerótica. Una conjuntiva 36 cubre un área corta del globo del del ojo hasta posterior (la conjuntiva bulbar) y se pliega hacia arriba (la vía sin salida superior) o hacia abajo (la vía sin salida inferior) para cubrir las áreas internas del párpado superior y párpado inferior, respectivamente. La conjuntiva se dispone en la parte superior de la cápsula de Tenon. La esclerótica y cápsula de Tenon definen la superficie exterior del globo del ojo. Para tratamiento de ARMD, CNV, retinopatías, retinitis, uveitis, edema macular cistoide (abreviadamente en inglés CME), glaucoma, y otras enfermedades o afecciones del segmento posterior del ojo, es preferible disponer de un depósito de una cantidad específica de un agente activo oftálmico y farmacéuticamente aceptable directamente en la superficie exterior de la esclerótica y debajo de la cápsula de Tenon. Además, en los casos de ARMD y CME es más preferible disponer del depósito directamente sobre la superficie exterior de la esclerótica, debajo de la cápsula de Tenon, y generalmente encima de la mácula. En un estudio que usa conejos Nueva Zelanda blancos, un depósito de fármaco de 4,9(11 )-pregnadien-17.alfa., 21-diol-3,20-diona-21 -acetato, un esferoide angiostático disponible de Steraloids, Inc. de Wilton, New Hampshire, se dispuso directamente en la superficie externa de la esclerótica, debajo de la cápsula de Tenon y ligeramente posterior al ecuador de los ojos del conejo. Dicho depósito de fármaco daba como resultado una concentración del esteroide angiostático, promediada en la retina entera y medida el día después de la inyección, aproximadamente diez veces mayor que una concentración similar distribuida mediante un depósito localizado debajo de la conjuntiva pero encima de la cápsula de Tenon de los ojos del conejo. Dado el hecho de que la cápsula de Tenon de un conejo Nueva Zelanda blanco es muy fina, estos resultados beneficiosos son altamente inesperados. Es importante destacar que la cápsula de Tenon del ojo humano es también muy fina. 4,9(11 )Pregnadien-17.alfa.,21-diol-3,20-diona-21-acetato, y el compuesto relativo 4,9(11)-Pregnadien-17-alfa 21-diol-3,20-diona se describen más completamente en las patentes de Estados Unidos N° 5.770.592 y 5.679.666, que se incorporan en esta memoria descriptiva en su totalidad como referencia. Alternativamente, el ingrediente activo puede estar en forma de polvo para constitución con un vehículo adecuado, por ejemplo, agua estéril exenta de pirógenos, antes de uso. Los compuestos también se pueden formular en composiciones rectales tales como supositorios o enemas de retención, por ejemplo, que contienen bases de supositorios convencionales tales como manteca de cacao u otros glicéridos. Además de las formulaciones descritas anteriormente, los compuestos también se pueden formular como una preparación de liberación retardada. Estas formulaciones de acción prolongada se pueden administrar mediante inyección intramuscular de implantación (por ejemplo, subcutánea o ¡ntramuscularmente) o mediante la inyección subtenon o intravitreal anteriormente mencionadas. En realizaciones particularmente preferidas de la invención, los compuestos se pueden preparar para administración tópica en solución salina (combinados con cualquiera de los conservantes y agentes antimicrobianos comúnmente usados en preparaciones oculares) y administrarse en forma de gotas para los ojos. La solución o suspensión del factor anti-angiogénico se puede preparar en su forma pura y administrarse varias veces al día. Alternativamente, las composiciones anti-angiogénicas, preparadas como se ha descrito anteriormente, se pueden también administrar directamente a la córnea. En realizaciones preferidas, la composición se prepara con un polímero mucoadhesivo que se une a la córnea. De este modo, por ejemplo, los compuestos se pueden formular con materiales poliméricos o hidrófobos adecuados (por ejemplo, en forma de una emulsión en un aceite aceptable) o resinas de intercambio iónico, o en forma de derivados escasamente solubles, por ejemplo, en forma de una sal escasamente soluble. En realizaciones posteriores, los factores anti-angiogénicos o composiciones anti-angiogénicas se pueden utilizar como adjuntos a la terapia esferoide convencional. Un vehículo farmacéutico para los compuestos hidrófobos es un sistema codisolvente que comprende alcohol bencílico, un tensioactivo no polar, un polímero orgánico miscible en agua y una fase acuosa. El sistema codisolvente puede ser un sistema codisolvente de VPD. VPD es una solución al 3% p/v de alcohol bencílico, 8% p/v del tensioactivo no polar polisorbato 80, y 65% p v de polietilenglicol 300, preparada hasta un volumen en etanol absoluto. El sistema codisolvente VPD (VPD:5W) contiene VPD diluida 1:1 con un 5% de dextrosa en solución acuosa. Este sistema codisolvente disuelve compuestos hidrófobos bien, y él mismo produce baja toxicidad tras la administración sistémica. Naturalmente, las proporciones de un sistema codisolvente se pueden variar considerablemente sin destruir su solubilidad y características tóxicas. Además, la identidad de los componentes codisolventes se pueden variar: por ejemplo, otros tensioactivos no polares de baja toxicidad se pueden usar en lugar de polisorbato 80; el tamaño de la fracción de polietilenglicol se puede variar; otros polímeros biocompatibles pueden reemplazar al polietilenglicol, por ejemplo, polivinilpirrolidona; y otros azúcares o polisacáridos pueden sustituir a la dextrosa. Alternativamente, se pueden emplear otros sistemas de administración para compuestos farmacéuticos hidrófobos. Los liposomas y emulsiones son ejemplos conocidos de vehículos o excipientes de distribución para fármacos hidrófobos. También se pueden emplear ciertos disolventes orgánicos tales como dimetilsulfóxido, aunque usualmente con el coste de una mayor toxicidad. Adicionalmente, los compuestos se pueden distribuir usando un sistema de liberación sostenida, tales como matrices semipermeables de polímeros hidrófobos sólidos que contienen el agente terapéutico. Se han establecido diversos materiales de liberación sostenida y son conocidos por los expertos en la técnica. Las cápsulas de liberación sostenida pueden, dependiendo de su naturaleza química, liberar los compuestos durante unas pocas semanas hasta más de 100 días. Dependiendo de la naturaleza química y de la estabilidad biológica del reactivo terapéutico, se pueden emplear estrategias adicionales para la estabilización de proteínas. Las composiciones farmacéuticas también pueden comprender vehículos o excipientes de fase sólida o de gel adecuados. Los ejemplos de dichos vehículos o excipientes incluyen carbonato cálcico, fosfato cálcico, azúcares, almidones, derivados de celulosa, gelatina y polímeros tales como polietilenglicoles. Algunos de los compuestos de la invención se pueden proporcionar en forma de sales con contraiones farmacéuticamente compatibles. Las sales farmacéuticamente compatibles se pueden formar con muchos ácidos, incluyendo, clorhídrico, sulfúrico, acético, láctico, tartárico, mélico, succínico, etc. Las sales tienden a ser más solubles en disolventes acuosos u otros protónicos que son las formas de base libres correspondientes. La preparación de los compuestos preferidos de la presente invención se describe en detalle en los siguientes ejemplos, pero el técnico reconocerá que las reacciones químicas descritas se pueden adaptar fácilmente para preparar numerosos otros inhibidores de proteinquinasas de la invención. Por ejemplo, la síntesis de compuestos no ejemplificados según la invención se puede realizar exitosamente mediante modificaciones evidentes para los expertos en la técnica, por ejemplo, mediante la protección adecuada de grupos que interfieren, mediante el cambio a otros reactivos adecuados conocidos en la técnica, o mediante modificaciones rutinarias de las condiciones de reacción. Alternativamente, se reconocerán otras reacciones descritas en esta memoria descriptiva o conocidas en la técnica que tienen aplicabilidad para la preparación de otros compuestos de la invención. DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Y REALIZACIONES PREFERIDAS EJEMPLOS En los ejemplos descritos más adelante, salvo que se indique otra cosa todas las temperaturas se exponen en grados Celsius y todas las partes y porcentajes están en peso. Los reactivos se compraron en proveedores comerciales tales como Aldrich Chemical Company o Lancaster Synthesis Ltd. y se usaron sin posterior purificación salvo que se indique otra cosa. Tetrahidrofurano (abreviadamente THF), N,N-dimet¡lformamida (abreviadamente DMF), diclorometano, tolueno y dioxano se compraron en Aldrich en botellas cerradas herméticamente y seguras y se usaron tal como se recibieron. Todos los disolventes se purificaron usando procedimientos habituales fácilmente conocidos por los expertos en la técnica, salvo que se indique otra cosa. Las reacciones expuestas más adelante se hicieron generalmente en una presión positiva de argón o nitrógeno o con tubo de secado, a temperatura ambiente (salvo que se indique otra cosa), en disolventes anhidros, y los matraces de reacción se cerraron con septum de caucho para la introducción de sustratos y reactivos mediante una jeringa. Los artículos de vidrio se secaron horno y/o se secó por calor. La cromatografía analítica en capa fina (abreviadamente en inglés TLC) se realizó sobre placas de gel de sílice sobre vidrio 60 F 254 Analtech (0,25 mm) y se eluyeron con las relaciones de disolventes adecuados (v/v) y se indican cuando es apropiado. Las reacciones se ensayaron mediante TLC y se terminaron según se juzgaba por el consumo del material de partida. La visualización de las placas de TLC se hizo con un reactivo de pulverización de p-anisaldehído o reactivo de ácido fosfomolíbdíco (Aldrich Chemical 20% en peso en etanol) y se activaron con calor. Los tratamientos se realizaron típicamente duplicando el volumen de la reacción con el disolvente de reacción o disolvente de extracción y después lavando con las soluciones acuosas indicadas usando 25% en volumen del volumen de extracción salvo que se indique otra cosa. Las soluciones de productos se secaron con Na2S04 anhidro antes de la filtración y la evaporación de los disolventes a presión reducida en un rotavapor y se describieron como disolventes retirados a vacío. La cromatografía ultrarrápida en columna (Still y col., J. Org. Chem., 43, 2923 (1978)) se realizó usando gel de sílice ultrarrápida de calidad Baker (47 - 61 µ??) y gel de sílice: la relación de material bruto de aproximadamente 20:1 a 60 habituales fácilmente conocidos por los expertos en la técnica, salvo que se indique otra cosa. Las reacciones expuestas más adelante se hicieron generalmente en una presión positiva de argón o nitrógeno o con tubo de secado, a temperatura ambiente (salvo que se indique otra cosa), en disolventes anhidros, y los matraces de reacción se cerraron con septum de caucho para la introducción de sustratos y reactivos mediante una jeringa. Los artículos de vidrio se secaron horno y/o se secó por calor. La cromatografía analítica en capa fina (abreviadamente en inglés TLC) se realizó sobre placas de gel de sílice sobre vidrio 60 F 254 Analtech (0,25 mm) y se eluyeron con las relaciones de disolventes adecuados (v/v) y se indican cuando es apropiado. Las reacciones se ensayaron mediante TLC y se terminaron según se juzgaba por el consumo del material de partida. La visualización de las placas de TLC se hizo con un reactivo de pulverización de p-anisaldehído o reactivo de ácido fosfomolíbdico (Aldrich Chemical 20% en peso en etanol) y se activaron con calor. Los tratamientos se realizaron típicamente duplicando el volumen de la reacción con el disolvente de reacción o disolvente de extracción y después lavando con las soluciones acuosas indicadas usando 25% en volumen del volumen de extracción salvo que se indique otra cosa. Las soluciones de productos se secaron con Na2S04 anhidro antes de la filtración y la evaporación de los disolventes a presión reducida en un rotavapor y se describieron como disolventes retirados a vacío. La cromatografía ultrarrápida en columna (Still y col., J. Org. Chem., 43, 2923 (1978)) se realizó usando gel de sílice ultrarrápida de calidad Baker (47 - 61 pm) y gel de sílice: la relación de material bruto de aproximadamente 20:1 a 61 50:1 salvo que se Indique otra cosa. La hidrogenolisis se realizó a la presión indicada en los ejemplos o a presión ambiente. Los espectros de 1H - RMN se registraron en un instrumento Bruker que funcionaba a 300 MHz y los espectros de 13C - RMN se registraron funcionando a 75 MHz. Los espectros de RMN se obtuvieron como soluciones de CDCI3 (indicados en ppm), usando cloroformo como patrón de referencia (7,25 ppm y 77,00 ppm) o CD3OD (3,4 y 4,8 ppm y 49,3 ppm), o internamente tetrametilsilano (0,00 ppm) cuando fuera adecuado. Otros disolventes de RMN se usaron según fuera necesario. Cuando se describe la multiplicidad de picos, se usan las siguientes abreviaturas: s (singlete), d (doblete), t (triplete), m (multiplete), a (ancho), dd (doblete de dobletes), dt (doblete de tripletes). Las constantes de acoplamiento, cuando se proporcionan, se indican en Hercios (Hz). Los espectros de infrarrojos (abreviadamente IR) se registraron en un espectrómetro Perkin Elmer FT - IR en forma de aceites puros, en forma de gránulos de KBr, o en forma de soluciones de CDCI3, y cuando se proporcionan se indican en números de onda (cm" ) Los espectros de masas se obtuvieron usando LSIMS o electropulverización. Todos los puntos de fusión (abreviadamente p. f.) están sin corregir. Ejemplo 1 (a) Ester dimetílico del ácido 2-(4-cloro-2-nitro-fenil)-malóníco 62 A una suspensión agitada de NaH (36,0 g, 1500 mmol) en NMP (1 ,0 I) se añadió dimetilmalonato (137,4 mi, 1200 mmol) gota a gota. La reacción se enfrió lo necesario para mantener la temperatura interna por debajo de 30 grados Celsius. Después de que cesará el desprendimiento de gas, se añadió 2,4-dicloronitrobenceno (192 g., 1000 mmol) a la reacción. Se calentó cuidadosamente a 65 grados Celsius hasta que la reacción se completó según se determinó mediante HPLC. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, y después se vertió sobre 500 mi de hielo mezclados con 150 mi de HCI concentrado. El pH de la fase acuosa se ajustó a neutral usando NaOH 1N. Los sólidos se eliminaron mediante filtrado a través de un filtro grueso sinterizado, y se aclararon con agua (3L). Los sólidos amarillos se dejaron secar durante una noche. El rendimiento fue de 261 ,5 gr, 91%. Ejemplo 1(b) Ester metílico del ácido (4-cloro-2-nitro-fenil)-acético Una disolución de éster dimetílico del ácido 2-(4-cloro-2-nitro-fenil)-malónico (195g, 679,4 mmol) en agua (100 mi) y NMP (1000 mi) se calentaron hasta el reflujo durante 3,5 horas. El disolvente se eliminó mediante evaporación con rotavapor para dar un aceite. El aceite se disolvió en acetato de etilo, y después se lavó con agua (5 x 300 mi). La fase acuosa se extrajo entonces con acetato de etilo (4 x 300 mi). El extracto orgánico se lavó con agua. Las fases orgánicas se combinaron y secaron sobre MgS04. Después de la eliminación de los sólidos por filtración, el disolvente se evaporó para 63 producir el producto deseado como un sólido marrón-anaranjado (160,0 g, 95%). Ejemplo 1(c) Ester metílico del ácido (2-acetilamino-4-cloro-fenil)-acético Un matraz lleno de argón se cargó con áster metílico del ácido (4-cloro-2-nitro-fenil)-acético (40 g, 175 mmol), Pd/C 10% (2,5 g), anhídrido acético (64 mi, 677 mmol), agua (9 mi) y ácido acético (150 mi). Al matraz se le inyectó hidrógeno a 30 PSI (206.850 kPa) mediante un sistema de vacío, y se agitó vigorosamente. Después de dos horas, se añadió más Pd/C al 10% (2 g), y se completó la reacción después de un total de 4 horas de tiempo de reacción. El Pd/C al 10% se eliminó por filtración, y el disolvente se eliminó con rotavapor. Ejemplo 1(d) Ester metílico del ácido 6-cloro-1H-indazol-3-carboxílico A una disolución de éster metílico del ácido (2-acetilamino-4-cloro-fenil)-acético (32,0 g, 133 mmol) en ácido acético (200 mi) agitado a 90 grados Celsius se añadió nitrito de ferc-butilo (20,5 mi, 172,3 mmol) durante una hora. La reacción se vertió en agua (1,4 I) y los sólidos se recuperaron por filtración. El precipitado amarillo se disolvió en acetato de etilo, después se lavó con NaCI 64 saturado. La fase orgánica se secó sobre MgS04, se filtró, y se concentró para dar un sólido. Los sólidos se trituraron con hexanos y se filtraron para proporcionar el material deseado (21,63 g, 77%). Ejemplo 1 (e) Ester metílico del ácido 6-cloro-1 -(tetrahidro-piran-2-il)-1 -H-indazol-3-carboxílico A una suspensión del éster metílico del ácido 6-cloro- H-indazol-3-carboxílico (8,3 g, 39,5 mmol) en MeCN (200 mi) se añadió 3,4-dihidro-2H-pirano (5,4 mi, 59,3 mmol) y ácido p-toluenosulfónico (237 mg, 1 ,25 mmol). Después de dejar a la reacción agitándose durante 10 minutos, el NaHC03 saturado (1 mi) se añadió y el disolvente se eliminó con rotavapor hasta un volumen de 100 mi. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua (50 mi) y después con NaCI saturado (50 mi). La fase orgánica se secó entonces sobre Na2S04. Después de que los sólidos se eliminaran por filtración, la fase orgánica se concentró hasta un aceite con rotavapor. El producto se precipitó a partir del aceite usando hexanos para producir el producto deseado (7,667 g, 66% de rendimiento). Ejemplo 1 (f) Ester metílico del ácido 6-(2-metoxicarbonil-fenilamino)-1 -(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-3 -carboxílico 65 A una solución del éster metílico de 6-cloro-1-1 H-indazol-3-carboxílico (2,94 g, 10,0 mmoles) en ,2-dimetoxietano (30ml) se le añadió K3P04 (5,32 g, 25,0 mmoles), tris(dibencilidenoacetona)dipaladio (459 mg, 0,05 mmol), 2-(diciclohexilfosfino)bifenilo (701 mg, 2,0 mmol), y antranilato de metilo (2,59 mi, 20,0 mmol). La solución se inundó con argón a vacío tres veces antes de ser calentada a 80° Celsius durante 18 horas. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y los sólidos se retiraron por filtración. Después de lavar los sólidos conacetato de etilo, el disolvente se eliminó con rotavapor. El aceite residual se purificó por cromatografía (150g gel de sílice, AcOEt/Hex del 10-30%) para dar 1,23 g (51%) del producto deseado. Ejemplo 1(g) ácido 6-(2-metoxicarbonil-fenilamino)-1-(tetrahidro-pirano-2-il)-1 H-indazol-3-carboxílico A una disolución de éster metílico del ácido 6-(2-metoxicarbonil-fenilamino)-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1H-indazol-3-carboxílico (2,05 g, 5 mmol) en 66 metanol (18 mi) y tetrahidrofurano (8 mi), se añadió una disolución de hidróxido de sodio (0,30 g, 7,5 mmol) en agua (2,7 mi). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas y después se neutralizó con HCI 1 N a un pH de . La mezcla se diluyó con acetato de etilo (25 ml) y agua (25 ml). Después de separarse las fases, la fase acuosa se lavó con CH2CI2 (3 x 25 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con NaCI saturado (100 ml) y después se secaron sobre Na2S04. Los sólidos se filtraron y el líquido se concentró a un aceite. El producto se criatalizó con acetato de etilo y hexanos para producir el producto deseado (1,616 g, 82%). Ejemplo 1 (h) éster metílico del ácido 2-[3-metilcarbamo¡l-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1H-indazolil-6-amino]-benzoico A una disolución de ácido 6-(2-metoxicarbonil-fenilamino)-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-3-carboxílico (0,50 g, 1 ,27 mmol) en DMF se añadió trietilamina (0,42 ml, 3,04 mmol), metilamina (1 ,9 ml, 3,81 mmol), y HATU (0,578 g, 1 ,52 mmol). La reacción se agitó durante tres horas y después se concentró mediante rotavapor. El aceite bruto se cromatografió (50 g de gel de sílice, 25-50% de acetato de etilo/hexanos) para producir el producto deseado (214 mg, 42%). Ejemplo Ácido 2-[3-metilcarbamoil-1-(tetrahidro-2-piranil)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzoico 67 A una disolución de éster metílico del ácido 2-[3-metilcarbamoil-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzoico (0,20 g, 0,49 mmol) en metanol (1 ,4 mi) y tetrahidrofurano (0,6 mi) se le añadió una disolución de hidróxido de sodio (59 mg, 1 ,47 mmol) en agua (0,3 mi). La reacción se calentó a 60 grados Celsius durante 1 hora y se enfrió entonces a temperatura ambiente. El pH se ajustó con HCI 2 N a un pH de 2. Se añadieron acetato de etilo (30 mi) y agua (30 mi) y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 mi) y las fases orgánicas se combinaron. Después de lavar con agua (15 mi), la fase orgánica se secó sobre Na2S04. Los sólidos se filtraron y se retiraron, y la fase orgánica se evaporó para producir un sólido amarillo (193 mg, 100%). Ejemplo 1(j) Metilamida del ácido 6-(2-prop-2-inilcarbamoil-fenilamino)-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1H-indazol-3-carboxílico A una disolución de ácido 2-[3-metilcarbamoil-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzoico ( 50 mg, 0,381 mmol) en DMF (3,6 mi) se le añadió propargilamina (0,052 mi, 0,761 mmol), TEA (0,264 mi, 1 ,90 mmol) y HATU (217 mg, 0,571 mmol). La reacción se agitó durante 4 horas, y entonces se 68 diluyó con acetato de etilo (30 mi) y agua (30 mi). Las fases se separaron, y la acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 20 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con NaCI saturado (15 mi) y entonces se secaron sobre Na2S04. Los sólidos se eliminaron mediante filtración, y el líquido se concentró mediante rotavapor hasta un aceite amarillo (164 mg, 100%). Ejemplo 1(k) Metilamida del ácido 6-(2-propinil-2-inilcarbamoilfenilam¡no)-1 H-indazol-3-carboxílico.

Se disueve la metilamida del ácido 6-(2-prop-2-inilcarbamoil-fenilamino)-1-(tetrahidropiran-2-il)- H-indazol-3-carboxílico (30 mg) en 1 ,5 mi de una mezcla 90:10:1 de CH2Cl2:TFA:trietil silano y se calienta a reflujo por 2 horas. Se diluye la disolución con tolueno (40 mi) y se concentra con rotavapor a un aceite. Se disuelve el aceite en DMF (1 mi) y se filtra usando un filtro de jeringuilla de 0,2 micrones. Se usa HPLC preparativa para aislar el compuesto deseado (12 mg, 50%). 1H NMR (CDCI3-d) ó 9.96 (1 H, s),8,28(1 H, d,J = 8,85 Hz), 7,47 (1 H, m), 7,34 (1 H, m), 7,22 (1H, m), 7,15 (1 H, dd, Ji=8,76 Hz, J2=1 ,79 Hz), 6,99 (1 H,m), 6,86 (1H, t, J=6,97 Hz), 6,31 (1H,m), 4,23 (2H,dd, J1 = 5,18 Hz, J2 = 2,54 Hz), 3,49 (3H, s), 2,29 (s, 1 H). Anal. Caled. Para C19H 7N502 -I .OMeOH-O.I TFA: C, 62,08; H, 5,44; N, 17,92. Encontrado: C, 61 ,78; H, 5,45; N, 18,4. 69 Ejemplo 2(a) [6-cloro-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-3-indazoliI]-metanol A una disolución del éster metílico del ácido 6-cloro-1H-indazol-3-carboxílico (2,94 g, 10,0 mmol) en CH2CI2 seco (50 mi) enfriado a -78 grados Celsius se añadió DIBAL-H (3,56 mi, 20 mmol) lentamente. Después de que la adición estuvo completa, se dejó calentar la reacción a temperatura ambiente, donde HPLC mostró que había un 10% de material inicial remanente. Se añadió después DIBAL-H extra (0,35 mi) y se agitó durante 10 minutos. La reacción se diluyó con acetato de etilo (1000 mi) y se lavó con HC1 N (2 x 100 mi). Además, se lavó con NaHC03 1 N (100 mi), y entonces con NaCI saturado (100 mi). La fase orgánica se secó sobre MgSO-v, se filtró y entonces se concentró a un sólido blanco (2,65 g, 99,5%). Ejemplo 2(b) 6-cloro-1-(tetrahidro-piran-2-ll)-1 H-indazol-3-carbaldehído Una disolución de [6-cloro-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1H-3-indazolil]-metanol (1 ,75 g, 6,58 mmol), IBX (2,76 g, 9,87 mmol) y DMSO (27 mi) se dejó agitando durante una noche. La reacción se diluyó en acetato de etilo y agua. Las fases se separaron, y la acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 100 mi). 70 Los extractos orgánicos se combinaron y lavaron con una disolución saturada de NaCI (100 mi). La fase orgánica se secó sobre MgS04, se filtró y después se concentró en un sólido. El sólido se disolvió en CH2CI2, y se filtró. La fase orgánica se evaporó para producir el producto deseado (1,707 g, 92%). Ejemplo 2(c) 1 -(6-cloro-1 H-3-inda2olil)-2-(5-etil-piridin-2-il)-etanol A una disolución agitada de 4-etil-2-metilpiridina (0,458 g, 3,79 mmol) en THF (4 mi) a -50 grados Celsius, se le añade lentamente una disolución de butillitio (1 ,5 mi, 2,5 M,.3,79 mmol) y se agita durante 10 minutos. A la reacción, se le añade lentamente una disolución de 6-cloro-1 H-indazol-3-carbaldehído (0,5 g, 1 ,89 mmol) en THF (4 mi). Después de agitar durante 10 munitos, la reacción se desactivó con ácido cítrico 1 N (10 mi). La mezcla se diluyó con acetato de etilo (50 mi), agua (20 mi), y una disolución saturada de NaCI (10 mi). Las fases se separaron, y la acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 5 mi). Los extractos orgánicos se combinaron y lavaron con una disolución saturada de NaCI (20 mi). Después de secar la fase orgánica sobre Na2S04, los sólidos se eliminaron por filtración y los líquidos se concentraron a un aceite mediante rotavapor. La cromatografía (40 g de gel de sílice, 60-100% de acetato de etilo/hexanos) produjo el producto deseado (142 mg, 32%) y recuperó 6-cloro-1 H-indazol-3-carbaldehído (348 mg). 71 Ejemplo 2(d) 6-cloro-3-[2-(5-etil-piridin-2-il)-v¡nil]-1 H-¡ndazol A una disolución agitada de 1-(6-cloro-1 H-3-indazolil)-2-(5-et¡l-2-piridinil)-etanol (232 mg, 0,60 mmol) en CH2CI2 se le añadió TEA (0,25 mi, 1 ,81 mmol) y cloruro de mesilo (0,070 mi, 0,90 mmol). La reacción se agitó durante 30 minutos, y después se añadió DBU (2 mi). La reacción se calentó a reflujo durante 18 horas, y entonces se desactivó con 40 mi de ácido cítrico 1 N. Las fases se separaron, y la acuosa se extrajo con 20 mi de CH2CI2. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2S04, se filtraron, y se concentraron con rotavapor. La purificación por cromatografía (12 g de gel de sílice, 50 -70% de acetato de etilo/hexanos) produjo el compuesto deseado (135 mg, 71 %). Ejemplo 2(e) Ester metílico del ácido 2-{3-[2-(5-etil-2-piridinil)-vinil]-1H-indazol-6-ilamino}-benzoico Se añadió 1 ,2-dimetoximetano (2 mi) a 6-cloro-3-[2-(5-etil-piridin-2-il)- 72 vinil]-1H-indazol (130 mg, 0,354 mmol), tris(dibencilidenacetona)dipaladio (16 mg, 0,018 mmol), -(diciclohexilfosfino)bifenilo (25 mg, 0,071 mmol), K3P04 (0,188 g, 0,885 mmol), y antranilato de metilo (0,092 ml, 0,71 mmol). Se hizo el vacío inyectando argón en la reacción (4x) y después se calentó a 80° C durante 19 horas. La reacción se diluyó con acetato de etilo (20 ml) y se filtró a través de un lecho de gel de sílice. Después de lavar con acetato de etilo (50 ml), el disolvente se eliminó mediante rotavapor. El aceite bruto se purificó por cromatografía (40 g de gel de sílice, 30-40% acetato de etilo/hexanos) para producir el producto deseado (54 mg, 32%). Ejemplo 2(f) Ácido 2^3-[2-(5-etil-piridin-2-¡l)-vin¡l]-1H-indazol-6-ilamino}-benzoico A una disolución de éster metílico del ácido 2-{3-[2-(5-etilpiridin-2-il)-vinil]-1 H-indazol-6-ilamino}-benzoico (50 mg, 0,104 mmol) en metanol (0,42 ml) y THF (0,10 ml) se añadió una disolución de hidróxido de sodio (12 mg, 0,311 mmol) en agua (0,05 ml). La disolución se calentó a 60 grados Celsius durante 3,5 horas y entonces se neutralizó con disolución saturada de NH4CI. La reacción se diluyó con agua (20 ml), y entonces se extrajo con acetato de etilo (2 x 20 ml). Los extractos combinados se secaron primero sobre Na2S04, y entonces los sólidos se eliminaron por filtración. El producto deseado (48,7 mg, 73 100%) se recuperó después de la evaporación con rotavapor para eliminar los disolventes. Ejemplo 2(g) 2-{3-[2-(5-etil-pirid¡n-2-¡l)-vin¡l]-1 H-indazol-6-ilamino}-N-prop-2-inil-benzamida Al ácido 2-{3-[2-(5-etil-piridin-2-il)-vinil]-1 H-indazol-6-ilamino}-benzoico (49 mg, 0,105 mmol) se le añadieron 2 mi de una mezcla 90:10:1 de CH2Cl2:TFA:TES. La reacción se agitó en condiciones de reflujo durante 1 hora, y entonces se diluyó con tolueno (20 mi). El disolvente se eliminó mediante rotavapor para producir un aceite espeso. El aceite se disolvió en DMF (1 mi) y a esta disolución se añadió TEA (0,072 mi, 0,52 mmol), propargilamina (0,014 mi, 0,208 mmol), y HATU (59 mg, 0,156 mmol). La reacción se agitó durante tres horas, y entonces se purificó mediante HPLC preparatoria para producir el producto deseado (29 mg, 66%). 1H NMR (CDCI3-d): d 9,83 (1 H, s), 8,63 (2H, s), 8,04 (2H, m), 7,68 (2H, s), 7,47 (1H, m), 7,32 (1 H, d, J = 1 ,51 Hz), 7,10 (1 H, dd, J1 = 8,67 Hz, J2 = 1 ,88 Hz), 6,93 (1H, m), 6,07 (2H, dd, J1 = 5,09 Hz, J2 = 2,26 Hz), 3,15 (1 H, t, J = 2,35 Hz), 2,97 (2H, s), 2,74 (1 H, s), 2,29 (1 H, s), 1 ,27 (3H, t, J = 7,44 Hz) Anal. Caled, para C26H23N5O-0,3 H20-1 ,2 TFA: C, 60,51 ; H, 4,43; N, 12,42. Se hallaron: C, 60,38; H, 4,73; N, 12,44. Ejemplo 2(h) N-cicloprop¡l-2- 3-[(E)-2-(4-meti!-piridin-2-il)-vinil]-1 H-indazol-6-ilamino}-benzamida 74 El compuesto título se preparó análogamente a 2-{3-[2-(5-etil-p¡ridin-2-il)-v¡n¡l]-1 H-indazol-6-¡lam¡no}-N-prop-2-¡n¡l-benzam¡da descrita anteriormente en este documento, sustituyendo 4-etil-2-metilpiridina por 2,4-dimetilpiridina en la etapa donde se preparó 1-(6-cloro-1 H-indazol-3-il)-2-(5-etil-piridin-2-iI)-etanol, y usando ciclopropilamina en lugar de propargilamina en la etapa final de la secuencia. H NMR (DMSO-d6): d 9,85 (1 H, s), 8,56 (2H, m), 8,20 (3H, m), 7,53 (5H, m), 7,35 (1 H, s), 7,2 (1H, d, J = 6,5 Hz), 7,0 (1H, s), 2,83 (1H, m), 0,70 (2H, m), 0,56 (2H, m). ESIMS ( +H+): 410,3. Ejemplo 3(a) N-metox¡-2-[3-((E)-2-piridin-2-¡l-vinil)-1 H-¡ndazol-6-¡lamino]-benzamida Una disolución de ácido 2-[3-(2-piridin-2-il-vin¡l)-1 H-indazol-6-¡lam¡no]-benzoico (50,0 mg, 0,084 mmol), clorhidrato de O-metilhidroxilamina (15 mg, 0,17 mmol), trietilamina (58 µ\, 0,42 mmol), disuelta en DMF (0,8 mi), se trató con HATU (48 mg, 0,13 mmol). La mezcla se agitó durante toda una noche, después se purificó mediante HPLC de fase inversa produciéndose 21 ,6 mg (67%) del compuesto título como un sólido amarillo. 1H NMR (DMSO-d6): d 9,23 75 (1 H, s), 8,71 (1 H, d, J = 2,2), 8,05 (4H, m), 7,51 (5H, m), 7,25 (1 H, s), 7,10 (1 H, d, J = 7,7 Hz), 6,91 (1 H, m), 5,98 (1 H, m), 4,31 (1 H, d, J = 14,3), 7,20 (1 H, d, J = 7,3), 4,42 (2H, d, J = 3,2). ESIMS (M+H+): 412,1 . Ejemplo 3(b) N-aliloxi-2-[3-((E)-2-pir¡din-2-H-v¡nil)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzamida Una disolución de ácido 2-[3-(2-piridin-2-il-vinil)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzoico (50,0 mg, 0,084 mmol), clorhidrato de O-alil-hidroxilamina (18.3 mg, 0,17 mmol), trietilamina (58 µ\, 0,42 mmol), disuelta en DMF (0,8 mi), se trató con HATU (48 mg, 0,13 mmol). La mezcla se agitó durante toda una noche, después se purificó mediante HPLC de fase inversa produciéndose 25,5 mg (74%) del compuesto título como un sólido amarillo. 1H NMR (DMSO-d6): d 9,28 (1 H, s), 8,67 (2H, d, J = 3,4), 8,05 (4H, m), 7,48 (5H, m), 7,23 (1 H, s), 7,04 (1 H, d, J = 7,6 Hz), 6,91 (1 H, m), 3,69 (3H, s). ESIMS (M+H+): 386,1. Ejemplo 3 (c) N-isopropoxi-2-[3-((E)-2-pir¡din-2-il-v¡n¡l)-1H-índazol-6-ilaminoj-benzamida Una disolución de ácido 2-[3-(2-piridin-2-il-vinil)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzoico (50,0 mg, 0,084 mmol), clorhidrato de O-isopropil-hidroxilamina (18,7 76 mg, 0,17 mmol), trietilamina (58 µ\, 0,42 mmol), disuelta en DMF (0,8 mi), se trató con HATU (48 mg, 0,13 mmol). La mezcla se agitó durante toda una noche, después se purificó mediante HPLC de fase inversa produciéndose 17,4 mg (50%) del compuesto título como un sólido amarillo. 1H NMR (DMSO-d6): d 9,23 , (1H, s), 8,69 (H, d, J = 2,1 ), 8,03 (4H, m), 7,50 (5H, m), 7,23 (1H, s), 7,04 (1 H, d, J = 6,7 Hz), 6,92 (1 H, m), 5,98 (1H, m), 4,13 (1 H, m), 1,29 (6H, d, J = 8,1). ESIMS (M+H+): 414,1. Ejemplo 3(d) N-ciclopropil-2-[3-((E)-2-piridin-2-il-vinil)-1 H-indazol-6-ilaminoj-benzamida Una disolución de ácido 2-[3-(2-pirid¡n-2-il-vinil)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzoico (50,0 mg, 0,084 mmol), ciclopropilamina (11,6 µ\, 0,17 mmol), trietilamina (58 µ\, 0,25 mmol), disuelta en DMF (0,8 mi), se trató con HATU (48 mg, 0,13 mmol). La mezcla se agitó durante toda una noche, después se purificó mediante HPLC de fase inversa produciéndose 11,7 mg (35%) del compuesto título como un sólido amarillo. 1H NMR (DMSO-d6): d 9,81 1 H, s), 8,68 (1H, d, J = 1 ,7), 8,51 (1H, s), 8,01 (4H, m), 7,50 (5H, m), 7,24 (1H, s), 7,03 (1H, d, J = 5,3), 6,89 (1 H, t, J=4,2), 2,84 (1H,m), 0,72 (2H, m), 0,56 (2H, m). ESIMS (M+H+): 396,1. Ejemplo 3(f) N'-(1 - 2-[3-((E)-2-piridin-2-il-vinil)-1 H-indazol-6-ilamino]-fenil}-metanoil)-hidrazida del ácido 1-metil-1H-p¡rrol-2-carboxíHco 77 Una disolución de ácido 2-[3-(2-piridin-2-il-vinil)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzoico (50,0 mg, 0,084 mmol), hidrazida del ácido 1-metil-1 H-pirrol-2-carboxilico (23,3 mg, 0,17 mmol), trietilamina (58 µ\, 0,42 mmol), disuelta en DMF (0,8 mi), se trató con HATU (48 mg, 0,13 mmol). La mezcla se agitó durante toda una noche, después se purificó mediante HPLC de fase inversa produciéndose 16,1 mg (40%) del compuesto título como un sólido amarillo. 1H NMR (DMSO-de): d 10,39 (1H, s), 10,00 (1H, s), 9,52 (1H, s), 8,67 (1H, d, J = 2,4), 8,07 (4H, m), 7,77 (1 H, d, J = 5,2), 7,51 (4H, m), 7,32 (1H, s), 7.09 ( H, d, J = 6,3), f),98 (3H, m), 6,13 (1H, m), 3,87 (3H, s). ESIMS (M+H+): 478,1. Ejemplo 3(g) N-benci[-2-[3-((E)-2-piridin-2-il-vinil)-1 H-¡ndazol-6-ilamino]-benzamiria Un¡_ disolución de ácido 2-[3-(2-piridin-2-il-v¡nil)- H-indazol-6-ilamino]-benzoico [50,0 mg, 0,084 mmol), bencilamina (18,2 µ\, 0,17 mmol), trietilamina (58 µ\, 0,42 mmol), disuelta en DMF (0,8 mi), se trató con HATU (48 mg, 0,13 mmol). La mezcla se agitó durante toda una noche, después se purificó mediante HPLC de fase inversa produciéndose 45,2 mg (76%) del compuesto titulo como una sal de TFA (1 ,5 H20, 2,1 TFA, peso molecular efectivo = 711 ,98). 1H NMR (DMSO- d6): d 9,86 (1 H, s), 9,14 (1 H, t, J = 5,4), 8,73 (1 H, d, J 78 = 4,8), 8,29 (4H, m), 7,56 (1H, d, J = 7,0), 7,74 (2H, m), 7,89 (2H, m), 7,31 (5H, m), 7,16 (1 H, d, J = 7,8), 6,93 (1H, t, J = 7,3), 4,46 (2H, d, J = 6,1 ). ESIMS (M+H+): 446,5. Ejemplo 3(h) N-(2-metoxi-bencil)-2-[3-((E)-2-piridin-2-il-vinil)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzamida Una disolución de ácido 2-[3-(2-piridin-2-il-vinil)-1H-indazol-6-ilamino]-benzoico (50,0 mg, 0,084 mmol), o-metoxibencilamina (21 ,8 µ\, 0,17 mmol), trietilamina (58 µ?, 0,42 mmol), disuelta en DMF (0,8 mi), se trató con HATU (48 mg, 0,13 mmol). La mezcla se agitó durante toda una noche, después se purificó mediante HPLC de fase inversa produciéndose 46 mg (81 %) del compuesto título como una sal de TFA (1,5 H20, 1 ,5 TFA, peso molecular efectivo = 673,59). 1H NMR (DMSO- d6): d 9,83 (1H, s), 9,03 (1H, t, J = 3,4), 8,70 (1H, d, J = 3,7), 8,08 (4H, m), 7,82 (1H, d, J = 7,4), 7,49 (4H, m), 7,21 (3H, m), 6,96 (4H, m), 4,48 (2H, d, J = 6,3). ESIMS (M+H+): 476,1. Ejemplo 3(¡) N-furan-2-ilmetil-2-[3-((E)-2-piridin-2-¡l-vinil)-1H-indazol-6-ylaminoj-benzamida Una disolución de ácido 2-[3-(2-piridin-2-il-vinil)-1H-indazol-6-ilamino]- 79 benzoico (50,0 mg, 0,084 mmol), C-furan-2-il-metilamina (19 µ\, 0,17 mmol), trietilamina (58 µ\, 0,42 mmol), disuelta en DMF (0,8 mi), se trató con HATU (48 mg, 0,13 mmol). La mezcla se agitó durante toda una noche, después se purificó mediante HPLC de fase inversa produciéndose 45 mg (85%) del compuesto título como una sal de TFA (1 ,5 H20, 1 ,5 TFA, peso molecular efectivo = 633,52). 1H NMR (DMSO- d6): d 9,82 (1 H, s), 9,05 (1 H, t, J = 2,6), 8,73 (1 H, d, J = 3,7), 8,13 (4H, m), 7,73 (1 H, d, J = 6,8), 7,57 (2H, m), 7,26 (1 H, s), 7,03 (1 H, d, J = 7,5), 6,40 (1 H, m), 6,28 (1 H, m), 4,48 (2H, d, J = 6,5). ESIMS (M+H+): 436,1 . Ejemplo 3(j) N-c¡clobutil-2-[3-((E)-2^¡ridin-2-il-vinil)-1H-¡ndazol-6-ilamino]-benzamida Una disolución de ácido 2-[3-(2-piridin-2-il-vinil)- H-indazol-6-ilamino]-benzoico (50,0 mg, 0,084 mmol), ciclobutilamina (18,2 µ\, 0,17 mmol), trietilamina (58 µ\, 0,42 mmol), disuelta en DMF (0,8 mi), se trató con HATU (48 mg, 0,13 mmol). La mezcla se agitó durante toda una noche, después se purificó mediante HPLC de fase inversa produciéndose 43,2 mg (92%) del compuesto título como una sal de TFA (1 ,5 H2O, 1 ,1 TFA, peso molecular efectivo = 561 ,92). H NMR (DMSO- de): d 9,78 (1 H, s), 8,72 (2H, m), 8,13 (4H, m), 7,70 ( H, d, J = 7,1 ), 7,58 (2H, m), 7,41 (2H, m), 7,27 (1 H, s), 6,89 (1 H, t, J = 4,2), 2,84 (1 H, m), 0,72 (2H, m), 0,56 (2H, m). ESIMS (M+H+): 396,1. Ejemplo 3(k) N-(2-metil-alil)-2-[3-((E)-2-p¡ridin-2-il-vinil)-1 H-indazol-6- 80 ilamino]-benzamida Una disolución de ácido 2-[3-(2-piridin-2-il-vinil)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzoico (50,0 mg, 0,084 mmol), 2-metil-alilamina (16,4 µ\, 0,17 mmol), trietilamina (58 µ\, 0,42 mmol), disuelta en DMF (0,8 mi), se trató con HATU (48 mg, 0,13 mmol). La mezcla se agitó durante toda una noche, después se purificó mediante HPLC de fase inversa produciéndose 45 mg (91 %) del compuesto título como una sal de TFA (1 ,6 H20, 1 ,3 TFA, peso molecular efectivo = 586,53). 1H NMR (DMSO- d6): 6 9,78 (1 H, s), 8,72 (2H, m), 8,13 (4H, m), 7,70 ( H, d, J = 7,1 ), 7,58 (2H, m), 7,41 (2H, m), 7,27 (1 H, s), 7,06 (1 H, d, J = 7,1 ), 6,91 (1 H, t, J = 7,5), 4,42 (1 H, m), 2,22 (2H, m), 2,08 (2H, m), 1 ,68 (2H, m). ESIMS (M+H+): 410,1. Ejemplo 3(l) 6-nitro-3-piridin-2-iletinil-1 -(2-trimetilsilanil-etoximetiI)-1H-indazol Una mezcla de 3-yodo-6-nitro-1-(2-trimetilsilanil-etoximetil)-1 H-indazol (838 mg, 2,0 mmol), 2-etinil-piridina (242 µ\, 2,4 mmol), y trietilamina (6,0 mi), se desgasificaron y se inundaron al vacío con atmósfera de argón, después se 81 trataron con Cul (8 mg, 0,042 mmol), y Pd(PPh3)2CI2 (16 mg, 0,023 mmol). La mezcla resultante se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente, al tiempo que HPLC indicó que todo el material de partida se había consumido. La mezcla se purificó mediante la eliminación de los volátiles a alto vacío, pasando después el residuo a través de un lecho de sílice eluido con acetato de etilo. El producto resultante se usó en el paso siguiente sin más purificación. ESIMS (M+H+): 395,1. Ejemplo 3(m) 3-piridina-2-iletinil-1 -(2-trimetilsilanil-etoximetil)-1 H-indazol-6-ilamina Una mezcla de 6-n¡tro-3-pir¡din-2-¡letin¡l-1-(2-trimetilsiIanil-etoximetil)-1 H-indazol (2 mmol), SnCI2 (1 ,37 g, 6,0 mmol), agua (0,5 mi), y MeOH (10 mi), se agitaron en un baño de aceite a 60 grados durante 30 minutos al tiempo que HPLC indicó la reducción completa. A la mezcla resultante se le quitó el metanol por destilación, se suspendió en acetato de etilo (50 mi) y se diluyó con 1 M de NaOH (18 mi). La emulsión resultante se extrajo con cuidado con acetato de etilo (10 x 25 mi). Los extractos orgánicos combinados se extrajeron con 1 M de Na2C03, salmuera, se secaron sobre MgSC , se concentraron y filtraron a través de un lecho de sílice eluídos con acetato de etilo. El rendimiento del producto bruto para las dos etapas fue de 701 mg, 96% de masa recobrada. ESIMS (M+H+): 365,1. Ejemplo 3(n) Metil éster del ácido 2-[3-piridina-2-iletinil-1-(2-trimetilsilanil- 82 etoximetil)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzo¡co Una mezcla de 3-piridin-2-¡let¡n¡l-1-(2-trimet¡lsilanil-etoximet¡l)-1 H-indazol-6-ilamina (560 mg, 1 ,54 mmol), 2-bromometilbenzoato (647,5 µ\, 4,61 mmol), bifenil-2-il-diciclohexil-fosfano (107,8 mg, 0,308 mmol), Pd2(dba)3 (70,5 mg, 0,0768 mmol), K3PO4 (816 mg, 3,844 mmol), y dimetoxietano (1 ,7 mi), fue inundada al vacío con atmósfera de nitrógeno, calentándose entonces en un baño de aceite a 70 grados Celsius durante 24 horas. La mezcla negra se diluyó con cloruro de metileno, y se filtró, concentró y cromatografió (20% a 40% acetato de etilo/hexanos). La producción de aceite amarillo/naranja fue de 260 mg, 35% de rendimiento para las tres etapas. Ejemplo 3(o) Ácido 2-[3-piridin-2-iletinil-1-(2-trimetilsilanil-etoximetil)-1H-indazol-6-ilamino]-benzo¡co Se añadió éster metílico del ácido 2-[3-piridin-2-iletin¡l-1-(2-trimetilsilanil-etoximetil)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzoico (253 mg, 0,517 mmol) a una solución de NaOH (62 mg, 1 ,55 mmol); se disolvió en THF (1 ,0 mi), MeOH (2,25 mi), y agua (0,5 mi). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 83 1 hora, al tiempo que la HPLC indica que todo el material de partida se ha consumido. La reacción se neutralizó con HCI 1 N, extraído con acetato de etilo, el cual se lavó entonces con salmuera y se secó con MgS04. Después de concentrar a vacío, se obtuvieron 249 mg de sólido amarillo (99% de masa recobrada). Este material se usó sin purificación adicional. ESIMS (M-H"): 483,0. Ejemplo 3(p) Ácido 2-[3-p¡r¡din-2-¡letinil-1H-indazol-6-ilamino]-benzoico Una disolución de ácido 2-[3-pirid¡n-2-iletinil-1-(2-trimetilsilanil-etoximetil)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzoíco (231 mg, 0,477), fluoruro de tetrabutilamonio 1M en THF (3,8 mi, 3,816 mmol), y etilendiamina (127 µ\, 1,908 mmol), se agitaron en un baño de aceite a 80 grados durante 6 horas. La reacción se desactivó con ácido acético (218 µ?, 3,816 mmol), diluido con agua, y extraído con acetato de etilo (10 x 50 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera y se secaron sobre MgS04. Después de concentrarse se formó un sólido que se trituró con CH2CI2, dando el producto en forma de polvo amarillo (124 mg, 73%). ESIMS (?-?-G): 353,0. Ejemplo 3(q) N-prop-2-inil-2-[3-((E)-2-p¡ridin-2-il-vinil)-1 H-indazol-6-ilaminoj-benzamida 84 Una disolución de ácido 2-(3-piridin-2-¡let¡nil-1 H-indazol-6-ilamino)-benzoico (41 mg, 0,1 17 mmol), propargilamina (24 µ\, 0,35 mmol), trietilamina (81 µ\, 0,58 mmol), disuelta en DMF (0,5 mi), se trató con HATU (89 mg, 0,233 mmol). La mezcla se agitó durante toda una noche, después se purificó mediante HPLC de fase inversa que produce 27 mg (59%) del compuesto título como un sólido amarillo. 1H NMR (DMSO- d6): d 9,78 (1H, s), 8,99 (1 H, m), 8,61 ( H, d, J = 2,1 ), 7,88 (1 H, s), 7,72 (3H, m), 7,43 (4H, m), 7,29 (1 H, s), 7,04 ( H, d, J = 7,3), 6,91 (1H, t, J = 5,2), 4,04 (2H, s), 3,04 ( H, s). ESIMS (M+H+): 392,1. Ejemplo 4(a): 2-bromo-4,6-dimetil-piridina Una disolución de HBr al 48% (acuosa) (Aldrich, 65 mi, 1 ,2 mol, 10 eq) se enfrió a -5°C y se trató con 4,6-dimetil-piridin-2-ilamina (Aldrich, 15,0 g, 0,12 mol. 1 ,0 eq). La mezcla de sal gruesa blanca se agitó con un agitador mecánico mientras se añadía bromo gota a gota (Aldrich, 19,7 mi, 0,38 mol, 3,1 eq). La mezcla roja resultante se trató con una disolución acuosa (32 mi H20) de NaN02 (Aldrich, 22,1 g, 0,32 mol, 2,6 eq) durante una hora. La temperatura se mantuvo por debajo de 5°C durante la adición de nitrito, y después se calentó gradualmente hasta 20°C durante 2 horas. La mezcla de reacción se ajustó a pH 14 con NaOH (acuoso), y se extrajo con MTBE. Los extractos orgánicos se lavaron con agua, salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El producto bruto (29 g de un aceite rojo) 85 se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (sílice, 350 g) y eluyó con acetato de etilo-ciclohexano al 2-7%, lo cual dio un aceite naranja (11,0 g, 48%). H NMR (DMSO- d6l 300 MHz) d 7,30 (1 H, s), 7,13 (1H,s), 2,39 (3H, s), 2,26 (3H, s). 13C NMR (DMSO- d6, 75 MHz) d 159,4, 151,3, 140,9, 125,7, 124,0, 23,7, 20,3. ESI m/z 86/188 (M + H)+. Ejemplo 4(b): 3-[2-(4,B-d¡met¡l-piridin-2-il)-v¡nil]-6-nitro-1 -(tetrahidro-piran-2-¡l)-1W-indazol Una suspensión de 2-bromo-4,6-dimetilpiridina (2,42 g, 3 mmol), 3-vinil-6-nitro-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1H-indazol (2,37 g, 8,67 mmol), acetato de paladio (0,145 g, 0,65 mmol), tri-orto-tolilfosfina (0,791 g, 2,6 mmol), y diisopropiletilamina (2,4 mi, 13,8 mmol) en DMF acuoso (85%, 34,5 mi) se desgasificó burbujeando con argón durante 5 minutos, seguido de sonicación durante 5 minutos antes de calentar en un horno de microondas (300 watios, 10% de potencia) a 1 0°C durante 40 minutos. Después de enfriar, la mezcla se añadió gota a gota en agua fría. El precipitado amarillo resultante se recogió por filtración. Los sólidos se disolvieron en acetato de etilo, se secaron (sulfato de sodio), y se concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó en gel de sílice utilizando un gradiente de 0 a 20% de acetato de etilo en una mezcla de cloroformo y hexanos (1 :1) como eluyente. Los productos resultantes de la cromatografía se trituraron con MTBE/hexanos para obtener un producto limpio en forma de sólido amarillo. Las aguas madres se repurificaron de una forma similar en gel de sílice, seguido de la trituración para obtener más producto 86 limpio con un rendimiento del 68%. H NMR (CDCI3): d 8,54 (1H, s), 8,15 (1H, d, J = 9,4 Hz), 8,08 (1H, dd, J = 9,04, 1 ,9 Hz), 7,87 (1H, d, J = 16,6 Hz), 7,55 ( H, d, J = 16,6 Hz), 7,14 (1H, s), 6,90 (1 H, s), 5,82 (1 H, dd, J = 9,0, 3,0 Hz), 4,08-4,01 (1H, m), 3,84-3,76 (1H, m), 2,56 (3H, s), 2,62-2,54 (1H, m), 2,34 (3H, s), 2,24-2,10 (2H, m), 1 ,88-1 ,68 (3H, m). Ejemplo 5: 3-[2-(4,6-dimet¡l-piridin-2-il)-vin¡l]-1 -(tetrahidro-p¡ran-2-il)-1 H-indazol-6-ilamina Una suspensión de 3-[2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-6-nitro-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1H-indazol (4,22 g, 11 ,16 mmol), hierro en polvo (2,71 g, 48,51 mmol) y NH4CI acuoso saturado (25 mi) en 25 mi de etanol se calentó a 45°C durante 18 horas. La reacción se enfrió y se filtró a través de papel de filtro lavando con metanol. Los disolventes se eliminaron bajo presión reducida y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2x). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgS04) y se concentraron bajo presión reducida para dar 4,02 g (cuantitativos) de un sólido de color herrumbre y se usaron sin purificación adicional. 1H NMR (DMSO- d6) d 7,79 (1 H, s), 7,74 (1H, d, J = 16,4 Hz), 7,35 (1 H, d, J = 16,4 Hz), 7,29 (1H, s), 6,96 ( H, s), 6,63 (2H, m), 5,57 (1H, dd, J = 2,4, 9,5 Hz), 5,44 (2H, s ancho), 3,88 (1 H, m), 3,67 (1H, m), 2,45 (3H, s), 2,37 (1H, m), 2,29 (3H, s), 1,99 (2H, m), 87 1 ,73 (1 H, m), 1 ,57 (2H, m). Ejemplo 6: Éster metílico del ácido 2-[3-[2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1H-indazol-6-ilamino]-benzoico Una suspensión agitada de 3-[2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1- (tetrahidro-piran-2-iI)-1 H-¡ndazol-6-ilam¡na (870 mg, 2,5 mmol), éster metílico del ácido 2-bromo-benzoico (0,44 mi, 3,12 mmol), R-BINAP (78 mg, 0,125 mmol), Pd2(dba)3 (29 mg, 0,03 mmol) y carbonato de cesio (1 ,22 g, 3,75 mmol) en tolueno (6 mi) se desgasificó y se calentó a 100°C durante 18 horas. La mezcla de reacción se enfrió, vertiéndose en NaHCÜ3 saturado y extrayéndose con acetato de etilo (2x). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSC ) y se concentraron bajo presión reducida. El residuo se sometió a cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 5-10% de acetato de etilo en CH2CI2 para dar 964 mg (80%) de una espuma amarilla. 1H NMR (DMSO- d6) d 9,49 (1 H, s), 8,13 (1 H, d, J = 8,7 Hz), 7,94 (1 H, dd, J = 1 ,5, 8,0 Hz), 7,85 (1 H, d, J = 16,4 Hz), 7,58 (1 H, d, J = 1 ,5, Hz), 7,48 (1 H, d, J = 16,4 Hz), 7,47 (1 H, m), 7,37 (1 H, d, J = 7,7 Hz), 7,34 (1 H, s), 7,19 (1 H, dd, J = 1 ,7, 8,7 Hz), 6,99 (1H, s), 6,89 (1 H, t, J = 8,1 Hz), 5,83 (1 H, d, J = 7,2 Hz), 3,88 (3H, s), 3,75 (1 H, m), 2,48 (3H, s), 2,41 (2H, m), 2,31 (3H, s), 2,02 (2H, m), 1 ,75 (1 H, m), 1 ,59 (2H, m). Anal. Caled, para 88 C29H30N4O3 ¦ 0,15 acetato de etilo: C, 71 ,71 ; H, 6,34; N, 11 ,30. Se encontró: C, 71 ,60; H, 6,14; N, 11 ,37. Ejemplo 7: Ácido 2-[3-[2-(4)6-dimet¡l^iridin-2-il)-vinil]-1 -(tetrahidro-piran-2-il)-1H-indazol-6-ilamino]-benzoico A una disolución agitada de éster metílico del ácido 2-[3-[2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzoico (1 ,98 g, 4,11 mmol) en THF: eOH (12 mi, 3:1 ) se añadió hidróxido de potasio (1 ,15 g, 20,5 mmol) disuelto en agua (3 mi). La reacción se calentó a 70°C durantre 2 horas, se enfrió, se concentró bajo presión reducida a aproximadamente 5 mi y se diluyó con más agua. La disolución se neutralizó con HCI 2N y el precipitado se recogió por filtración y se lavó con agua para dar 2,00 g (cuantitativos) de un sólido amarillo brillante. 1H NMR (DMSO- d6) ó 13,12 (1 H, s ancho), 9,82 (1 H, s), 8,13 (1 H, d, J = 8,7 Hz), 7,95 (1 H, dd, J = 1 ,5, 8,0 Hz), 7,89 (1 H, d, J = 16,4 Hz), 7,60 (1H, s), 7,50 (1 H, d, J = 16,4), 7,46 (1 H, d, J = 6,9), 7,37 (1 H, d, J = 7,7 Hz), 7,20 (1 H, d, J = 8,7 Hz), 7,06 (1 H, s), 6,86 (1 H, t, J = 6,9 Hz), 5,85 ( H, d, J = 7,3 Hz), 3,82 (2H, m), 2,50 (3H, s, oscurecido por la señal del dmso), 2,48 (2H, m), 2,34 (3H, s), 2,03 (2H, m), 1 ,76 (1 H, m), 1 ,59 (2H, m). Anal. Caled, para C28H28N4O3 ¦ 0,5 KOH: C, 67,72; H, 5,79; N, 1 ,28. Se encontró: C, 89 67,65; H, 5,88; N, 11 ,07. Ejemplo 8:p-Toluenosulfonato del ácido 2-{3-[2-(4,6-d¡metil-p¡ridin-2-il)- vinil]-1H-¡ndazol-6-iIam¡no}-benzoico Una mezcla de ácido 2-[3-[2-(4,6-d¡metil-p¡ridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro- piran-2-il)-1H-indazol-6-ilamino]-benzoico (2 mmol) y ácido p-tolueno sulfónico (10 mmol) en metanol acuoso (90%, 20 mi) se agitó a 70°C durante 18 horas. Después de enfriar, la suspensión amarilla espesa resultante se filtró, y los sólidos se lavaron con metanol para dar ácido 2-{3-[2-(4,6-dimet¡l-piridin-2-¡l)- vinil]-1H-indazol-6-ilamino}-benzoico como la sal tosilato a un rendimiento del 85% como un sólido amarillo pálido. H NMR (DMSO- d6) d 13,43 (1 H, s), 9,78 (1 H, s), 8,24-8,19 (2H, m), 8,09 (1 H, d, J = 9,04 Hz), 7,95 (1H, dd, J = 7,9, 1 ,1 Hz), 7,62-7,55 (2H, m), 7,49-7,38 (5H, m), 7,20 (1H, dd, J = 9,0, 1,9 Hz), 7,09 (2H, d, J = 8,3 Hz), 6,86 (1H, dt, J = 7,9, ,1 Hz), 2,67 (3H, s), 2,54 (3H, s), 2,27 (3H, s). Ejemplo 9: N-[4-(íerc-but¡l-d¡metil-silaniloxi)-but-2-inil]-2-[3-[2-(4,6-dimetil- p¡ridin-2H )-vin¡l]-1-(tetrahidro^iran-2-il)-1H-indazol-6-Hamino]-benzamida 90 Preparada de forma similar a la que se describe para el Ejemplo 33(a) etapa (v), en la solicitud de patente de los Estados Unidos con número de serie 09/609.335, presentada el 30 de junio de 2.000, incorporada en este documento mediante referencia en su totalidad para todos los propósitos, excepto por el uso de 4-(íerc-butil-dimetil-silaniloxi)-but-2-iniiamina y ácido 2-[3- [2-(4,6-dimet¡l^irid¡n-2-H)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-¡ndazol-6-i benzoico. 1H NMR (DMSO- d6) d 9,56 (1 H, s), 9,01 (1 H, t, J = 5,7 Hz), 8,06 (1 H, d, J = 8,7 Hz), 7,81 (1 H, d, J = 16,4 Hz), 7,66 (1 H, d, J = 7,5 Hz), 7,41 (4H, m), 7,32 ( H, s), 7,09 (1 H, dd, J = 1 ,8, 8,7 Hz), 6,98 (1 H, s), 6,89 (1 H, t, J = 8,0 Hz), 5,79 (1 H, dd, J = 2,4, 9,2 Hz), 4,28 (2H, s), 4,09 (2H, m), 3,86 (1H, m), 3,72 (1H, m), 2,46 (3H, s), 2,42 (1H, m), 2,30 (3H, s), 2,08 (2H, m), 1 ,74 (1 H, m), 1 ,57 (2H, m), 0,80 (9H, s), 0,03 (6H, s). Anal. Caled, para C38H47N5O3SÍ · 0,7 H20: C, 68,89; H, 7,36; N, 10,57. Se encontró: C, 68,99; H, 7,36; N, 10,21. Ejemplo 10: 2^3-[(E)-2-(4,6-dimetil^iridin-2-il)-vinil]-1H-indazol-6- ylamino}-N-(4-hidroxi-but-2-inil)-benzamida 91 Una disolución agitada de N-[4-(ferc-butil-dimetil-silani!ox¡)-but-2-inil]-2-[3-[2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-i benzamida (737 mg, 1 ,13 mmol) y ácido p-tolueno-sulfónico (8,2 mi, 12% en ácido acético) se calentó a 70°C durante 2 horas. La reacción se enfrió, y se vertió cuidadosamente en solución saturada de NaHC03 y se extrajo con acetato de etilo (2x). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (2x), se secaron (MgS04) y se concentraron bajo presión reducida. El residuo se sometió a cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice fluyendo con CH2CI2: acetato de etilo:MeOH (1 :1 :0,1) para dar 225 mg (44%) de un sólido blanco. H NMR (DMSO- d6) d 12,91 (1 H, s), 9,84 (s,1 H), 9,01 (1H, t, J = 5,3 Hz), 8,07 (1H, d, J = 8,7 Hz), 7,84 ( H, d, J = 16,4 Hz), 7,70 (1 H, d, J = 7,2 Hz), 7,43 (3H, m), 7,31 (1 H, s), 7,26 (1 H, s), 7,02 (1 H, dd, J = 1 ,6, 8,7 Hz), 6,97 (1 H, s), 6,89 (1 H, t, J = 6,7 Hz), 5,12 (1 H, t, J = 5,8 Hz), 4,10 (2H, d, J = 5,3 Hz), 4,07 (2H, d, J = 5,8 Hz), 2,47 (3H, s), 2,31 (3H, s). Anal. Caled, para Car^sN^ · 1 ,1 H20: C, 68,80; H, 5,82; N, 14,86. Se encontró: C, 68,72; H, 5,81 ; N, 14,65. Ejemplo 11 : 4-(íerc-butil-dimetil-silaniloxi)-but-2-inilamina 92 A una disolución enfriada con hielo y agitada del conocido 4-(ferc-butil-dimetil-silaniloxi)-but-2-in-1-ol (3,14 g, 15,7 mmol) en THF (50 mi) se añadió DBU (2,6 mi, 17,4 mmol) y DPPA (3,8 mi, 17,6 mmol). La disolución se calentó a temperatura ambiente y se agitó bajo una atmósfera inerte durante toda una noche. La reacción se vertió sobre NaHC03 saturado y las fases se separaron. La fase acuosa se reextrajo con acetato de etilo (2x) y las fases orgánicas combinadas se secaron (Na2S04), y se concentraron a vacío. La trifenilfosfina (4,61 g, 17,6 mmol) se añadió a esta azida bruta disuelta en THF (50 mi), seguida por la adición de H20 (0,44 mi). La disolución resultante se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente, se concentró bajo presión reducida, y el residuo fue puesto en suspensión en una mezcla 1:1 de Et20/éter de petróleo. Los sólidos se eliminaron y el filtrado se concentró y purificó mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice eluyendo con CH2CI2/MeOH (19:1) para dar un aceite ambarino. 1H NMR (CDCI3): d 4,19 (2H, t, J = 1 ,9 Hz), 3,33 (2H, t, J = 1 ,9 Hz), 0,79 (9H, s), 0,00 (6H, s). Ejemplo 12: 2-[3-[2-(4,6-d¡metil^irid¡n-2-il)-vin¡l]-1-(tetrah¡dro-p¡ran-2-il)-1H-indazol-6-ilamino]-N-prop-2-inil-benzamida Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 6 anteriormente en este documento, excepto en el uso de ácido 2-[3-[2-(4,6- 93 dimet¡l-pir¡d¡n-2-il)-v¡n¡l]-1-(tetrah¡dro-p¡ran-2-il)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzoi y propargilamina. 1H NMR (DMSO- d6) d 9,87 (1 H, s), 9,04 (1 H, t, J = 5,8 Hz), 8,08 (1 H, d, J = 8,7 Hz), 7,83 (1 H, d, J = 16,4 Hz), 7,69 (1 H, d, J = 7,5 Hz), 7,44 (4H, m), 7,34 (1 H, s), 7,12 (1 H, dd, J = 1 ,7, 8,7 Hz), 6,99 (1 H, s), 6,91 (1 H, t, J = 5,8 Hz), 5,81 (1 H, dd, J = 2,4, 9,2 Hz), 4,07 (2H, dd, J = 2,5, 5,7 Hz), 3,88 (1 H, m), 3,74 (1 H, m), 3,12 (1 H, t, J = 2,5 Hz), 2,48 (3H, s), 2,43 (1 H, s), 2,31 (3H, m), 2,01 (2H, m), 1 ,74 (1 H, m), 1 ,58 (2H, m). Anal. Caled, para C3iH3iN502 · 1 ,1 H20 ¦ 0,3 TBME: C, 70,73; H, 6,72; N, 12,69. Se encontró: C, 70,56; H, 6,45; N, 12,49. Ejemplo 13: N-(prop-2-¡nil)-2^3-[(E)-2-(2,4-d¡metil-pirid¡n-2-il)-vinil]-1H-indazol-6-ilamino}-benzamida Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 7 anteriormente en este documento, excepto en el uso de A-(3-ciclopropil-prop-2-inil)-2-[3-[2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-v¡nil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1H-inda ilamino]-benzamida en lugar de N-[4-(ferc-butil-dimetil-silaniloxi)-but-2-inil]-2-[3-[2-(4,6-dimetil-p¡ridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1H-indazol-6-ilamin benzamida. 1H NMR (DMSO- d6) d 12,90 (1H, s), 9,78 (1H, s), 9,01 (1 H, t, J = 5,3 Hz), 8,06 (1 H, d, J = 8,3 Hz), 7,84 (1 H, d, J = 16,2 Hz), 7,68 (1 H, dd, J = 7,9, 1 ,1 Hz), 7,45-7,36 (3H, m), 7,30 ( H, s), 7,25 (1 H, d, J = 1 ,5 Hz), 7,01 (1 H, dd, J = 8,7, 1 ,9 Hz), 6,96 (1 H, s), 6,88 (1 H, dt, J = 6,8, 1 ,9 Hz), 4,04 (2H, dd, J = 94 S,6, 2,6 Hz), 3,11 (1 H, t, J = 2,6 Hz), 2,46 (3H, s), 2,29 (3H, s). Ejemplo 14: 2-[3-[2-(4,6-d¡metil-pirldin-2-il)-vin¡l]-1-(tetrahidro-p¡ran-2-il)- 1H-¡ndazol-6-ilamino]-N-(2-metil-alil)-benzamida Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 6 anteriormente en este documento, excepto en el uso de ácido 2-[3-[2-(4,6-dimetil^irid¡n-2-il)-vin¡l]-1-(tetrahidro^ y 2-metilalilamina. H N R (DMSO- d6) d 9,87 (1 H, s), 8,82 (1 H, t, J = 5,8 Hz), 8,07 (1 H, d, J = 8,7 Hz), 7,82 (1 H, d, J = 16,4 Hz), 7,74 ( H, d, J = 7,3 Hz), 7,43 (4H, m), 7,33 (1H, s), 7,10 (1 H, d, J = 8,7 Hz), 6,99 (1H, s), 6,92 (1H, t, J = 7,8 Hz), 5,80 (1 H, dd, J = 2,2, 9,2 Hz), 4,83 (2H, d, J = 11 ,8 Hz), 3,83 (4H, m), 2,47 (3H, s), 2,44 (1 H, m), 2,31 (3H, s), 2,00 (2H, m), 1 ,75 (1 H, m), 1 ,73 (3H, s), 1 ,58 (2H, m). Anal. Caled, para CaaHssNí . ¦ 1 ,09 H20: C, 71 ,00; H, 6,92; N, 12,94. Se encontró: C, 71 ,40; H, 6,89; N, 12,54. Ejemplo 15: 2-[3-[2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1H-indazol-6-ilamino]-N-(2-metil-alil)-benzamida 95 Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 7 anteriormente en este documento, excepto en el uso de A/-(2-metil-alil)-2-[3-[2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1H-indazol-6-¡lamino]-benzamida en lugar de N-[4-(.erc-butil-dimetil-silaniloxi)-but-2-inil]-2-[3-[2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-pi an-2-il)-1H-indazol-6-ilamin benzamida. 1H NMR (DMSO- ds) d 12,89 (1H, s), 9,75 (1 H, s), 8,79 (1H, t, J = 5,6 Hz), 8,05 (1H, d, J = 8,7 Hz), 7,85 (1H, d, J = 16,2 Hz), 7,74 (1H, d, J = 7,9 Hz), 7,45-7,33 (4H, m), 7,23 (1H, d, J = 1,5 Hz), 7,00-6,97 (2H, m), 6,90 (1H, dt, J = 7,9, 1 ,1 Hz), 4,81 (2H, d, J = 11 ,3 Hz), 3,81 (2H, d, J = 5,6 Hz), 2,47 (3H, s), 2,30 (3H, s), 1,71 (3H, s). Esquema de Síntesis Alternativo PPI¾, HaO THF H2 Ejemplo 16(a): Cicloprop¡l-prop-2-in-1-ol HQ < A un matraz de fondo redondo que contiene 70 mi de THF anhidro 96 enfriado en un baño de hielo a -10°C se añadió 65,6 mi de una disolución BuLi 1 ,6M en hexanos (105 mmol). Se introdujo 5-cioro-pent-1-ino (5,13 g, 50 mmol) lentamente mientras se mantiene la temperatura a desde -10 hasta 0°C. La mezcla se agitó a 0°C durante 2 horas bajo argón. Se añadió paraformaldehído (3 g, 100 mmol) en forma sólida. La mezcla se calentó lentamente a temperatura ambiente y se agitó durante toda una noche bajo argón. Al día siguiente, se añadió agua y se añadieron aproximadamente 50 mi de HCI acuoso 1 N. La mezcla se extrajo con acetato de etilo y las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2S04, se filtraron y se concentraron. El producto bruto se purificó mediante una columna eluyendo con Et20 al 20% en hexanos para dar 3 g de 3-ciclopropil-prop-2-in-1-ol como un aceite (62% de rendimiento). 1H NMR (CDCI3): d 4,22 (dd, 2H, J = 6,04, 2,01 Hz), 1 ,46 (t, 1 H, J = 6,04 Hz), ,26 (m, H), 0,77 (m, 2H), 0,70 (m, 2H). Ejemplo 16(b): 3-ciclopropil-prop-2-inilazida Se disolvió 3-ciclopropil-prop-2-in-1-ol (3,28 g, 34,1 mmol) en 40 mi de tolueno, se añadió DPPA (11 , 26 g, 40,9 mmol), seguido de DBU (6,24 g, 40,9 mmol) mientras se mantiene la temperatura con un baño de agua. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una hora y se diluyó con 100 mi de hexano y 15 mi de CH2CI2. La mezcla se lavó con agua cuatro veces y una vez con salmuera, se secó sobre Na2S0 l se filtró y se concentró con rotavapor con baño de agua fría para eliminar la mayoría del disolvente orgánico dejando algo anteriormente en este documento, excepto en el uso de éster metílico del ácido 2-[3-[(E)-2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-ilamino]-nicotínico en lugar de éster metílico del ácido 2-[3-[2-(4,6-dimet¡l-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-¡lamino]-benzoico. H NMR (DMSO- d6) d 10,73 (1 H, s), 8,49 (1 H, d, J = 1 ,9 Hz), 8,45 (1 H, s), 8,31 (1 H, dd, J = 7,7, 1 ,8 Hz), 8,16-7,97 (3H, m), 7,70 (1 H, d, J = 16,4 Hz), 7,50 (1 H, d, J = 8,6Hz), 7,37 ( H, s), 6,96 (1 H, dd, J = 7,7, 4,8 Hz), 5,87 ( H, d, J = 8,4 Hz), 3,95-3,90 (1 H, m), 3,79-3,70 ( H, m), 2,63 (3H, s), 2,47 (3H, s), 2,07-1 ,99 (2H, m), 1 ,81-1 ,62 (3H, m). Ejemplo 23: 2-{3-[(E)-2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vin¡l]-1H-indazol-6-ilamino}-N-(4-hidroxi-but-2-inil)-nicotinamida Una mezcla bruta de N-(4-hidroxi-but-2-iniI)-2-[3-[2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1 -(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-ilamino]-nicotinamida y N-[4-{terc-butil-d¡metil-silan¡loxi)-but-2-inil]-2-[3-[2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1- (tetrahidro-piran-2-il)-1/- -indazol-6-ilamino]-nicotinamida se preparó a partir de ácido 2-[3-[(E)-2-(4,6-dimeti1-pindin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1H-indazol-6-ilamino]-nicotínico y 4-(íerc-butil-dimetil-silaniloxi)-but-2-inilamina de un modo similar al que se describe para el ejemplo 6 anteriormente en este documento, y subsiguientemente se convierte en 2-{3-[(E)-2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1 H-indazol-6-ilamino}-N-(4-hidroxi-but-2-inil)-nicotinamida de un modo similar al que se describe para el ejemplo 7 excepto en el uso de una mezcla de N-(4-hidroxi-but-2-inil)-2-[3-[2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1 -(tetrahidro-p¡ran-2-il)-1 H-¡ndazol-6-ilamino]-nicotinamida y N-[4-(ferc-butil-dimetil-sIIaniloxi)-but-2-inil]-2-[3-[2-(4,6-dimetH-piridin-2-il)-vin piran-2-il)-1 W-indazol-6-ilamino]-nicot¡namida en lugar de A/-[4-(ferc-butil-dimetil-silañiloxi)-but-2-inil]-2-[3-[2-(4,6-dimetil-pirid piran-2-il)-1W-indazol-6-ilamino]-benzamida. 1H NMR (DMSO- d6) d 12,99 (1 H, s), 11 ,21 (1 H, s), 9,26 (1 H, t, J = 5,3 Hz), 8,50 (1 H, d, J = 1 ,9 Hz), 8,41 (1 H, dd, J = 4,9, 1 ,9 Hz), 8,16 (1 H, dd, J = 8,3, 1 ,9 Hz), 8,04 (1 H, d, J = 9,0 Hz), 7,85 (1 H, d, J = 16,6 Hz), 7,42 (1 H, d, J = 16,6 Hz), 7,31 (1 H, s), 7,06 (1 H, dd, J = 8,7, 1 ,5 Hz), 6,96 (1 H, s), 6,93 (1 H, dd, J = 7,5, 4,9 Hz), 5,14 (1 H, t, J = 5,6 Hz), 4,16 (2H, d, J = 5,6 Hz), 4,08 (2H, d, J = 7,2 Hz), 2,46 (3H, s), 2,30 (3H, s). Ejemplo 24: p-toluenosulfonato del ácido 2-[3-[2-(4,6-d¡metil-piridin-2-il)-v¡nil]-1H-indazol-6-ilamino]-nicotínico Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 5 excepto en el uso de ácido 2-[3-[(E)-2-(4,6-d¡metil-p¡rid¡n-2-il)-vinil]-1-(tetrah¡dro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-ilamino]-nicotín¡co en lugar de ácido 2-[3-[2-(4,6- dimetil- piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1H-indazol-6-iIamino]-benzoico 1H NMR (DMSO- d6) d 13,49 (1H, s), 10,80 (1H, s), 8,63 (1H, d, J = 1,5 Hz), 8,49 (1H, dd, J = 4,8, 1,9 Hz), 8,31 (1H, dd, J = 7,7, 1,9 Hz), 8,24-8,19 (2H, m), 8,06 (1H, d, J = 8,8 Hz), 7,60-7,55 (2H, m), 7,46 (2H, d, J = 8,1 Hz), 7,22 (1H, dd, J = 8,8, 1,7 Hz), 7,09 (2H, d, J = 7,9 Hz), 6,95 (1H, dd, J = 7,7, 4,7 Hz), 2,66 (3H, s), 2,54 (3H, s), 2,27 (3H, s). Ejemplo 25: /V-(3-ciclopropil-prop-2-inil)-2-[3-[(e)-2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1A/-indazol-6-ilamino]-nicotinamida Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 6 anteriormente en este documento, excepto en el uso de p-toluenosulfonato del ácido 2-{3-[2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1/-/-indazol-6-¡lamino}-nicotínico y 3-ciclopropil-prop-2-inllamina. 1H NMR (DMSO- d6) d 13,01 (1H, s), 11,20 (1H, s), 9,19 (1H, ta), 8,51 (1H,s), 8,40 (1H, d, J = 4,9 Hz), 8,15 (1H, d, J = 7,5 Hz), 8,05 (1H, d, J = 8,7 Hz), 7,83 (1H, d, J = 16,4 Hz), 7,42 (1H, d, J = 16,4 Hz), 7,31 (1H, s), 7,05 (1H, d, J = 8,3 Hz), 6,96 (1H, s), 6,92 (1H, dd, J = 7,5, 4,9 Hz), 4,06 (2H, d, J = 4,14 Hz), 2,46 (3H, s), 2,29 (3H, s), 1,33-1,28 (1H, m), 0,77-0,72 (2H, m), 0,60-0,55 (2H, m). Ejemplo 26: 4-metil-2-vinil-piridina Una mezcla amarilla de 2-bromo-4-metil-piridina (Aldrich, 5,2 g, 30,5 mmol. 1 ,0 eq), 2,6-di-terc-butil-4-metil-fenol (Aldrich, 67 mg, 0,3 mmol., 1 % mol), tributil-vinil-stannano (Aldrich, 26,8 mi, 91 ,5 mmol., 3,0 eq) y tetrakis(trifenilfosfina) paladio (0) (Strem, 1 ,8 g, 1 ,5 mmol, 5% mol) en tolueno (100 mi) se desgasificó y se purgó con argón. Se obtuvo una disolución ambarina después de que la mezcla se calentara a 100°C. La mezcla de reacción se desactivó después de 18 horas por la adición de HCI 1 ,0 M. El extracto ácido se lavó con éter, se ajustó a pH 9 con bicarbonato sódico sólido, y se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. El producto bruto (3,7 g de un aceite marrón) se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (sílice) y se eluyó con acetato de etilo-diclorometano 0,5%, el cual dio un aceite transparente (1,9 g, 53%). H NMR (DMSO- d6, 300 MHz) d 8,39 (1 H, d, J = 4,9 Hz), 7,33 (1 H, s), 7,10 (1 H, dd, J = 5,0, 0,8 Hz), 6,77 (1 H, dd, J = 17,5, 10,8 Hz), 6,20 (1 H, dd, J = 17,5, 1 ,7 Hz), 5,44 (1 H, dd, J = 10,8, 1 ,8 Hz), 2,31 (3H, s). ESIMS m/z 120 (M + H)+. Ejemplo 27: 3-[2-(4-metil-piridin-2-M)-vinil]-6-nitro-1 -(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol 101 Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 6 anteriormente en este documento, excepto en el uso de p-toluensulfonato del ácido 2-[3-[2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1 H-indazoI-6-ilamino]-benzoico y éster 4-amino-but-2-inílico del ácido acético. 1H NMR (CD3CN): ó 11 ,00 (1 H, sa), 9,59 (1H, s), 7,99 (1 H, d, J = 8,6 Hz), 7,86 (1 H, d, J = 16,4 Hz), 7,58 (1 H, d, J = 7,8 Hz), 7,49-7,37 (4H, m), 7,32 (1 H, s), 7,21 (1 H, s), 7,06 (1 H, dd, J = 8,8, 1 ,8 Hz), 6,96 (1 H, s), 6,90 (1 H, t, J = 7,8 Hz), 4,63 (2H, s), 4,16 (2H, d, J = 5,6 Hz), 2,49 (3H, s), 2,32 (3H, s), 2,01 (3H, s). Ejemplo 21: Éster metílico del ácido 2-[3-[(E)-2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-viníl]-1 -(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-ilaminoJ- nicotínico Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 3 anteriormente en este documento, excepto en el uso de éster metílico del ácido 2-bromo-nicotínico en lugar del éster metílico del ácido 2-bromo-benzoico. H NMR (DMSO- d6) d 10,36 (1H, s), 8,50 (1 H, dd, J = 4,7, 1 ,9 Hz), 8,36 (1H, d, J = 1,4 Hz), 8,30 (1 H, dd, J = 7,8, 2,0 Hz), 8,08 (1 H, d, J = 8,8 Hz), 7,83 (1H, d, J = 16,4 Hz), 7,48 (1H, d, J = 7,5), 7,44 (1H, s), 7,33 (1H, s), 6,98-6,93 (2H, m), 5,80 (1 H, d, J = 7,0 Hz), 2,93 (3H, s), 3,93-3,90 (1 H, m), 3,80-3,75 (1H, m), 2,46 (3H, s), 2,30 (3H, s), 2,10-1 ,97 (2H, m), 1 ,89-1,60 (3H, m). Ejemplo 22: Ácido 2-[3-[(E)-2-(4J6-dimetil-piridln-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro- 102 piran-2-¡l)-1H-indazol-6-ilamino]-nicotínico Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 4 anteriormente en este documento, excepto en el uso de éster metílico del ácido 2-[3-[(E)-2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1/7-in ilamino]-nicotínico en lugar de éster metílico del ácido 2-[3-[2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1 -(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzoico. H NMR (DMSO- d6) d 10,73 (1H, s), 8,49 (1H, d, J = 1 ,9 Hz), 8,45 (1 H, s), 8,31 (1H, dd, J = 7,7, 1,8 Hz), 8,16-7,97 (3H, m), 7,70 (1H, d, J = 16,4 Hz), 7,50 (1 H, d, J = 8,6Hz), 7,37 (1 H, s), 6,96 (1 H, dd, J = 7,7, 4,8 Hz), 5,87 (1H, d, J = 8,4 Hz), 3,95-3,90 (1 H, m), 3,79-3,70 (1H, m), 2,63 (3H, s), 2,47 (3H, s), 2,07-1 ,99 (2H, m), 1 ,81-1 ,62 (3H, m). Ejemplo 23: 2-{3-[(E)-2-(4,6-d¡metil-piridin-2-il)-vinil]-1H-indazol-6-ilamino}-N-(4-h¡droxi-but-2-inil)-nicotinamida 103 Una mezcla bruta de N-(4-hidroxi-but-2-inil)-2-[3-[2-(4,6-dimetil-piridin-2-¡l)-vinil]-1 -(tetrah¡dro-p¡ran-2-¡l)-1 /-¡ndazol-6-¡lamino]-nicot¡namida y N-[4-(terc-butil-dimetil-s¡laniloxi)-but-2-¡nil]-2-[3-[2-(4,6-dimetil-p¡r¡d¡n-2-¡l)-v¡nil]-1- (tetrahidro-piran-2-il)-1H-indazol-6-ilamino]-n¡cotinamida se preparó a partir de ácido 2-[3-[(E)-2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1 -(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-ilamino]-nicotín¡co y 4-(íerc-butil-dimetil-s¡laniloxi)-but-2-inilamina de un modo similar al que se describe para el ejemplo 6 anteriormente en este documento, y subsiguientemente se convierte en 2-{3-[(E)-2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1 H-indazol-6-ilamino}-N-(4-hidroxi-but-2-inil)-n¡cotinamida de un modo similar al que se describe para el ejemplo 7 excepto en el uso de una mezcla de N-(4-hidroxi-but-2-inil)-2-[3-[2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-ilamino]-nicotinamida y /V-[4-(íerc-butil-d¡metil-s¡laniloxi)-but-2-inil]-2-[3-[2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1W-indazol-6-ilamino]-n¡cotinamida en lugar de A/-[4-(íerc-butil-dimetil-silanilox¡)-but-2-inil]-2-[3-[2-(4,6-dimetil-pir¡din-^ indazol-6-ilamino]-benzamida. H NMR (DMSO- d6) 6 12,99 (1 H, s), 11 ,21 (1 H, s), 9,26 (1 H, t, J = 5,3 Hz), 8,50 (1 H, d, J = 1 ,9 Hz), 8,41 (1 H, dd, J = 4,9, 1 ,9 Hz), 8,16 (1 H, dd, J = 8,3, 1 ,9 Hz), 8,04 (1 H, d, J = 9,0 Hz), 7,85 (1 H, d, J = 16,6 Hz), 7,42 (1 H, d, J = 16,6 Hz), 7,31 (1 H, s), 7,06 (1 H, dd, J = 8,7, 1 ,5 Hz), 6,96 (1 H, s), 6,93 (1 H, dd, J = 7,5, 4,9 Hz), 5,14 (1 H, t, J = 5,6 Hz), 4,16 (2H, d, J = 5,6 Hz), 4,08 (2H, d, J = 7,2 Hz), 2,46 (3H, s), 2,30 (3H, s). Ejemplo 24: p-toluenosulfonato del ácido 2-[3-[2-(4,6-dimetil-pirid¡n-2-il)-vinil]-1W-indazol-6-ilamino]-nicotínico 104 Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 5 excepto en el uso de ácido 2-[3-[(E)-2-(4,6-dimetil-piridin-2-¡l)-vinil]-1-(tetrahidro-p¡ran-2-il)-1H-indazol-6-ilamino]-nicotínico en lugar de ácido 2-[3-[2-(4,6- dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1H-indazol-6-ilamino]-benzoico. 1H NMR (DMSO- d6) ¿ 13,49 (1 H, s), 10,80 (1 H, s), 8,63 (1 H, d, J = 1 ,5 Hz), 8,49 ( H, dd, J = 4,8, 1,9 Hz), 8,31 (1H, dd, J = 7,7, 1 ,9 Hz), 8,24-8,19 (2H, m), 8,06 (1H, d, J = 8,8 Hz), 7,60-7,55 (2H, m), 7,46 (2H, d, J = 8,1 Hz), 7,22 (1H, dd, J = 8,8, 1 ,7 Hz), 7,09 (2H, d, J = 7,9 Hz), 6,95 (1 H, dd, J = 7,7, 4,7 Hz), 2,66 (3H, s), 2,54 (3H, s), 2,27 (3H, s). Ejemplo 25: W-(3-ciclopropil-prop-2-inil)-2-[3-[(e)-2-(4,6-dimetll-pir¡din-2-il)-vinil]-1H-indazol-6-ilam¡no]-nlcotinamida 105 Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 6 anteriormente en este documento, excepto en el uso de p-toluenosulfonato del ácido 2-{3-[2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1H-indazol-6-ilamino}-nicotínico y 3-ciclopropil-prop-2-inilamina. 1H NMR (DMSO- d6) d 13,01 (1 H, s), 11,20 (1H, s), 9,19 ( H, ta), 8,51 (1 H,s), 8,40 (1H, d, J = 4,9 Hz), 8,15 (1H, d, J = 7,5 Hz), 8,05 (1H, d, J = 8,7 Hz), 7,83 (1 H, d, J = 16,4 Hz), 7,42 (1H, d, J = 16,4 Hz), 7,31 (1H, s), 7,05 (1H, d, J = 8,3 Hz), 6,96 (1 H, s), 6,92 (1 H, dd, J = 7,5, 4,9 Hz), 4,06 (2H, d, J = 4,14 Hz), 2,46 (3H, s), 2,29 (3H, s), 1 ,33-1 ,28 (1H, m), 0,77-0,72 (2H, m), 0,60-0,55 (2H, m). Ejemplo 26: 4-metil-2-vinil-piridina Una mezcla amarilla de 2-bromo-4-metil-piridina (Aldrich, 5,2 g, 30,5 mmol. 1 ,0 eq), 2,6-di-terc-butil-4-metil-fenol (Aldrich, 67 mg, 0,3 mmol., 1% mol), tributil-vinil-stannano (Aldrich, 26,8 mi, 91 ,5 mmol., 3,0 eq) y tetrakis(trifenilfosfina) paladio (0) (Strem, 1,8 g, 1 ,5 mmol, 5% mol) en tolueno (100 mi) se desgasificó y se purgó con argón. Se obtuvo una disolución ambarina después de que la mezcla se calentara a 100°C. La mezcla de reacción se desactivó después de 18 horas por la adición de HCI 1 ,0 M. El extracto ácido se lavó con éter, se ajustó a pH 9 con bicarbonato sódico sólido, y se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron 106 bajo presión reducida. El producto bruto (3,7 g de un aceite marrón) se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (sílice) y se eluyó con acetato de etilo-diclorometano 0,5%, el cual dio un aceite transparente (1 ,9 g, 53%). H NMR (DMSO- d6, 300 MHz) 6 8,39 (1 H, d, J = 4,9 Hz), 7,33 ( H, s), 7,10 (1 H, dd, J = 5,0, 0,8 Hz), 6,77 (1 H, dd, J = 17,5, 10,8 Hz), 6,20 (1H, dd, J = 17,5, 1 ,7 Hz), 5,44 (1 H, dd, J = 10,8, 1 ,8 Hz), 2,31 (3H, s). ESIMS m/z 120 (M + H)+. Ejemplo 27: 3-[2-(4-metil-p¡r¡din-2-¡l)-vin¡l]-6-nitro-1 -(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol Una suspensión de 4-metil-2-vinil-p¡ridina (ejemplo 23) (1 ,9 g, 15,97 mmol), 6-Nitro-1-(tetrahidro-piran-2-il)-3-vinil- H-indazol (4,96 g, 13,3 mmol), Pd(OAc)2 (149 mg, 0,66 mmol), P(o-tolil)3, y DIEA (3,5 mi, 19,96 mmol) en DMF desgasificado (50 mi) se calentó bajo argón a 100°C durante 18 horas. La mezcla de reacción se enfrió y los sólidos se eliminaron por filtración lavando con acetato de etilo. El filtrado se diluyó con acetato de etilo y se lavó con salmuera (2x), se secó (MgS04) y se concentró bajo presión reducida. El residuo se cromatografió sobre gel de sílice fluyendo con hexanos: acetato de etilo (3:1) para dar 3,40 g (70%) de un sólido amarillo brillante. H NMR (CDCI3) d 8,56 (1 H, s), 8,50 (1 H, d, J = 5,0 Hz), 8,11 (2H, m), 7,89 (1 H, d, J = 16,3 Hz), 7,61 (1 H, s), 7,03 (1H, d, J = 4,3 Hz), 5,83 ( H, dd, J = 2,6, 9,0 Hz), 4,06 (1 H, m), 3,82 (1 H, m), 2,58 (1 H, m), 2,39 (3H, s), 2,18 (2H, 107 m), 1 ,78 (3H, m). Anal. Caled, para C2oH2oN403: C, 65,92; H, 5,53; N, 15,38. Se encontró: C, 65,80; H, 5,52; N, 15,15. Ejemplo 28: 3-[2-(4-met¡l-piridin-2-il)-vinil]-1 -(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-i!amina Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 2 anteriormente en este documento, excepto en el uso de [2-(4-metil-pir¡din-2-il)-vin¡l]-6-nitro-1-(tetrahidro-piran-2-¡l)-1 H-indazol (ejemplo 24) en lugar de 3-[2-(4,6-dimetil-pir¡d¡n-2-¡l)-vin¡l]-6-nitro-1-(tetrah¡dro-piran-2-¡l)-1 H-indazol. 1H NMR (DMSO- de) 6 8,43 (1H, d, J = 4,8 Hz), 7,79-7,73 (2H, m), 7,50 (1 H, s), 7,39 (1 H, d, J = 16,4 Hz), 7,09 (1 H, d, J = 4,8 Hz), 6,64-6,62 (2H, m), 5,57 (1 H, dd, J = 9,8, 2,5 Hz), 5,48 (2H, sa), 3,92-3,85 (1 H, m), 3,72-3,64 (1 H, m), 2,43-2,34 (1 H, m), 2,33 (3H, s), 2,07-2,00 (1 H, m), 1 ,96-1 ,90 (1 H, m), 1 ,79-1 ,66 (1 H, m), 1 ,60-1 ,53 (2H, m). Ejemplo 29: Ester metílico del ácido 2-[3-[2-(4-metíl-pir¡din-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1H-indazol-6-ilamino]-benzoico 108 Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 3 excepto en el uso de 3-[2-(4-metil-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-¡lamina en lugar de 3-[2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1 -(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-¡lamina. H NMR (DMSO- d6) d 9,48 (1H, s), 8,45 (1H, d, J = 4,9 Hz), 8,13 (1H, d, J = 8,7 Hz), 7,93 (1H, dd, J = 8,3, 1,9 Hz), 7,86 (1H, d, J = 16,2 Hz), 7,58 (1 H, d, J = 1 ,9 Hz), 7,54-7,44 (3H, m), 7,36 (1H, d, J = 7,5 Hz), 7,18 (1H, dd, J = 8,7, 1 ,9 Hz), 7,11 (1 H, d, J = 4,9 Hz), 6,87 (1 H, t, J = 8,3 Hz), 5,83 (1H, dd, J = 9,4, 2,3 Hz), 3,87 (3H, 1 H), 3,93-3,84 (1 H, m), 3,77-3,69 (1H, m), 2,46-2,37 (1H, m), 2,34 (3H, s), 2,10-1 ,94 (2H, m), 1,81-1 ,53 (3H, m). Ejemplo 30: Ácido 2-[3-[2-(4-metil-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrah¡dro-piran-2-il)-1H-indazol-6-ilamino]-benzoico Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 4 anteriormente en este documento, excepto por el uso de éster metílico del ácido 2-[3-[2-(4-metil-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-¡lamino]-benzoico en lugar de éster metílico del ácido 2-[3-[2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzoico (ejemplo 3). 1H NMR (DMSO- d6) d 13,17 (1H, s ancho), 9,83 (1H, s), 8,51 (1H, d, J = 5,2 Hz), 109 8,14 (1H, d, J = 8,7 Hz), 7,95 (1H, d, J = 16,4 Hz), 7,94 (1H, dd, J = 1,5, 8,0 Hz), 7,73 ( H, s), 7,60 (1H, d, J = 1,5 Hz), 7,59 (1H, s), 7,54 ( H, s), 7,46 (1H, m), 7,37 ( H, d, J = 7,6 Hz), 7,23 (2H, m), 6,86 (1H, t, J = 6,9 Hz), 5,87 (1H, d, J = 7,6 Hz), 3,90 (1H, m), 3,76 (1H, m), 2,45 (1H, m), 2,41 (3H, s), 2,03 (2H, m), 1,77 (1H,m), 1,59 (2H, m). Ejemplo 31 : 2.[3-[2.(4-metil-piridin-2-ll)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1H-indazol-6-ilamino]-N-prop-2-inil-benzamida Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 6 anteriormente en este documento, excepto en el uso de propargilamina y ácido 2-[3-[2-(4-metil-piridin-2-il)-v¡nil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1H-indazol-6-ilamino]-benzoico.1H NMR (DMSO- d6) d 9,87 (1H, s), 9,03 (1H, t, J = 5,5 Hz), 8,46 ( H, d, J= 4,9 Hz), 8,08 (1H,d,J = 8,7 Hz), 7,86 (1H, d, J = 16,4 Hz), 7,69 (1H, d, J = 7,3 Hz), 7,53 (1H, s), 7,44 (4H, m), 7,13 (2H, m), 6,91 (1H, t, J = 7,9 Hz), 5,81 ( H, dd, J = 2,2, 9,6 Hz), 4,07 (2H, dd, J = 2,5, 5,5 Hz), 3,89 (1H, m), 3,75 (1H, m), 3,12 (1H, t, J = 2,5 Hz), 2,42 ( H, m), 2,36 (3H, s), 2,00 (2H, m), 1,75 (1H, m), 1,58 (2H, m). Anal. Caled, para C30H29N5O2 ¦ 0,25 TBME: C, 73,07; H, 6,28; N, 13,64. Se encontró: C, 72,95; H, 6,30; N, 13,64. Ejemplo 32: 2-{3-[(E)-2-(4-metil-pir¡din-2-¡l)-v¡nil]-1H-indazol-6-¡lam¡no}-N- 110 prop-2-ini!-benzamida Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 7 anteriormente en este documento, excepto en el uso de 2-[3-[2-(4-metll-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-ilamino]-N-prop-2-inil-benzamida en lugar de N-[4-(íerc-butil-dimetil-silaniloxi)-but-2-inil]-2-[3-[2-(4,6-dimetil-pirid¡n-2-il)-v¡nil]-1-(tetrahidro-piran-2-¡l)-1 H-indazol-6-¡lamino]-benzamida. 1H NMR (DMSO- d6) d 12,93 (1 H, s), 9,79 (1 H, s), 9,02 (1 H, t, J = 5,4 Hz), 8,45 (1 H, d, J = 4,9 Hz), 8,08 (1 H, d, J = 8,7 Hz), 7,88 (1H, d, J = 16,4 Hz), 7,69 ( H, d, J = 7,7 Hz), 7,45 (4H, m), 7,27 (1 H, s), 7,10 (1 H, d, J = 4,9 Hz), 7,03 (1 H, d, J = 8,8 Hz), 6,90 (1 H, t, J = 7,9 Hz), 4,06 (2H, dd, J = 2,4, 5,4 Hz), 3,12 (1 H, t, J = 2,4 Hz), 2,35 (3H, s). Anal. Caled, para C-25H21N5O · 0,35 CH2CI2: C, 69,64; H, 5,00; N, 16,02. Se encontró: C, 69,65; H, 5,15; N, 15,80. Ejemplo 33: N-(2-metil-alil)-2-[3-[2-(4-metil-pirid¡n-2-il)-vinil]-1 -(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzamida 111 Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 6 ¦ anteriormente en este documento, excepto en el uso de 2-metil-alilamina y ácido 2-[3-[2-(4-metil-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrah¡dro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzoico. H NMR (DMSO- d6) d 9,86 (1 H, s), 8,81 (1 H, t, J = 5,5 Hz), 8,46 (1 H, d, J = 4,9 Hz), 8,07 (1 H, d, J = 8,9 Hz), 7,86 (1 H, d, J = 16,4 Hz), 7,75 (1H, d, J = 7,7 Hz), 7,54 (1 H, s), 7,50 (1H, d, J = 16,4 Hz), 7,43 (3H, m), 7,11 (2H, m), 6,92 (1 H, t, J = 8,1 Hz), 5,81 (1H, dd, J = 2,5, 9,8 Hz), 4,83 (2H, d, J = 11 ,5 Hz), 3,81 (4H, m), 2,41 (1 H, m), 2,35 (3H, s), 2,00 (2H, m), 1 ,76 (1 H, m), 1 ,73 (3H, s), 1 ,58 (2H, m). Anal. Caled, para C31H33N5O2 ¦ 0,80 TBME: C, 72,71; H, 7,43; N, 12,11. Se encontró: C, 72,43; H, 7,57; N, 12,02. Ejemplo 34: N-(2-met¡l-alil)-2-{[(E)-2-(4-metil-p¡rídin-2-il)-vinil]-1 H-¡ndazol-6-ilamino}-benzamida Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 7, excepto en que se usó N-(2-metil-alil)-2-[3-[2-(4-metil-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-¡lam¡no]-benzamida en lugar de N-[4-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-but-2-inil]-2-[3-[2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-pi 1 H-indazol-6-ilam¡no]-benzamida. 1H NMR (DMSO- efe) d 12,90 (1H, s), 9,76 112 (1 H, s), 8,80 (1 H, t, J = 5,5 Hz), 8,45 (1 H, d, J = 5,1 Hz), 8,07 (1 H, d, J = 8,9 Hz), 7,88 (1 H, d, J = 16,4 Hz), 7,75 (1 H, d, J = 7,9 Hz), 7,51 (1 H, s), 7,48 (1 H, d, J = 16,4 Hz), 7,43 (2H, m), 7,24 (1H, s), 7,10 (1 H, d, J = 4,9 Hz), 7,00 (1 H, dd, J = ,9, 8,9 Hz), 6,91 (1 H, t, J = 8,1 Hz), 4,82 (2H, d, J = 1 ,3 Hz), 3,83 (2H, d, J = 5,8 Hz), 2,35 (3H, s), 1 ,73 (3H, s). Anal. Caled, para C26H25N5O · 0,20 H20: C, 73,11 ; H, 5,99; N, 16,40. Se encontró: C, 73,13; H, 6,03; N, 16,13. Ejemplo 35: W-(3-ciclopropil^rop-2-inil)-2-[3-[2-(4-meti -piridin-2-il)-vinil]-1 -(tetrahidro-piran-2-il)-1H-indazol-6-ilamino]-benzamida Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 6 anteriormente en este documento, excepto en el uso de ácido 2-[3-[2-(4-metil-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzoico y 3-ciclopropil-prop-2-inilamina. 1H N R (DMSO- d6) d 9,88 (1 H, sa), 8,93 (1 H, ta), 8,46 (1 H, d, J = 4,9 Hz), 8,08 (1H, d, J = 8,7 Hz), 7,85 (1 H, d, J = 16,4 Hz), 7,69 (1 H, d, J = 7,6 Hz), 7,54-7,40 (5H, m), 7,14-7,11 (2H, m), 6,90 (1 H, t, J = 6,1 Hz), 5,81 (1 H, d, J = 7,5, Hz), 4,02 (2H, d, J = 3,6 Hz), 3,95-3,85 (1 H, m), 3,79-3,72 (1 H, m), 2,49-2,35 (1 H, m), 2,35 (3H, s), 2,15-2,01 (2H, m), 1 ,87-1 ,55 (3H, m), 1 ,30-1 ,25 (1 H, m), 0,77-0,70 (2H, m), 0,59-0,54 (2H, m). 113 Ejemplo 36: N-(3-cicloprop-2-inil)-2-{3-[(E)-2-(4-met¡l-pir¡din-2-¡l)-vinil]-1 H-indazol-6-ilamino}-benzamida Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 7 anteriormente en este documento, excepto en el uso de N-(3-cicloprop-2-inil)-2-[3-[(E)-2-(4-metil-pir¡din-2-il)-vin¡l]-1^ benzamida en lugar de N-[4-(terc-butil-d¡metil-silan¡loxi)-but-2-¡n¡l]-2-[3-[2-(4,6-dimetH-pirid¡n-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1H-indazol-6-Hamino]-benzamlda. 1H NMR (DMSO- d6) d 12,91 (1 H, s), 9,79 ( H, t), 8,91 (1 H, d, J = 5,6 Hz), 8,44 (1 H, d, J = 4,9 Hz), 8,06 (1 H, d, J = 8,7 Hz), 7,87 (1 H, d, J = 16,6 Hz), 7,67 (1H, dd, J = 7,9, 1 ,5 Hz), 7,50-7,35 (4H, m), 7,24 (1 H, d, J = 1 ,9 Hz), 7,09 (1 H, d, J = 4,9 Hz), 7,00 (1 H, dd, J = 8,7, 1 ,5 Hz), 6,88 (1 H, dt, J = 4,1 , 1 ,5 Hz), 4,00 (2H, dd, J = 5,3, 1 ,9 Hz), 2,34 (3H, s), 1 ,31-1 ,23 (1 H, m), 0,75-0,69 (2H, m), 0,56-0,52 (2H, m). Ejemplo 37: 2-{3-[2-(4-metil-piridin-2-il)-vinil]-1 H-indazol-6-ilamino}-N-piridin-2-ilmetil-benzamida 114 Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 6 y el ejemplo 7 anteriormente en este documento excepto en el uso de ácido 2-[3-[2-(4-metil-pir¡din-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1H-indazol-6-ilamino]-benzoico y C-piridin-2-il-metilamina. 1H NMR (D SO- d6, 300 MHz) d 12,91 (1 H, s), 9,77 ( H, s), 9,19 (1 H, t, J = 5,8 Hz), 8,50 (1 H, d, J = 4,1 Hz), 8,45 (1 H, d, J = 5,0 Hz), 8,06 (1 H, d, J = 8,8 Hz), 7,88 (1 H, d, J = 16,4 Hz), 7,82-7,70 (2H, m), 7,51-7,25 (7H, m), 7,10 (1 H, d, J = 4,6Hz), 6,98 (1 H, dd, J = 8,8, 1 ,8 Hz), 6,96-6,91 (1 H, m), 4,58 (2H, d, J = 5,9 Hz), 2,35 (3H, s). ESIMS m/z 461 (M + H)+. Anal. Caled, para C28H24N60 x 0,3 MTBE: C, 72,71 ; H, 5,77; N, 17,25. Se encontró: C, 72,38; H, 5,80; N, 16,88. Ejemplo 38: 2^3-[2-(4-metil-p¡ridín-2-¡l)-vinil]-1 H-indazol-6-ilamino}-N-piridin-4-i!metil-benzamida Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 6 y el ejemplo 7 anteriormente en este documento excepto en el uso de ácido 2-[3-[2- 115 (4-met¡l-p¡ridin-2-¡l)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-¡l)-1 H-¡ndazol-6-¡lamino]-benzoi y C-piridin-4-il-metilamiria. 1H NMR (DMSO- d6, 300 MHz) ó 12,90 (1 H, s), 9,73 (1 H, s), 9,21 (1 H, t, J = 5,9 Hz), 8,49-8,44 (3H, m), 8,06 (1H, d, J = 8,7 Hz), 7,88 ( H, d, J = 6,4 Hz), 7,81 (1 H, d, J = 7,5 Hz), 7,51-7,40 (4H, m), 7,31 (2H, d, J = 5,9 Hz), 7,24 (1H, s), 7,11 (1 H, d, J = 4,4 Hz), 7,00 (1 H, dd, J = 8,7, 1 ,7 Hz), 6,97-6,92 ( H, m), 4,50 (2H, d, J = 5,9 Hz), 2,35 (3H, s). ESIMS m/z 461 (M + H)+. Anal. Caled, para C28H24N60 x 0,4 H20 x 0,7 MTBE: C, 71 ,36; H, 6,45; N, 15,85. Se encontró: C, 71 ,27; H, 6,29; N, 15,53. Ejemplo 39: N-(6-metil^iridin-2-ilmetil)-2^3-[2-(4-metil^iridin-2-il)-vinil] 1 H-indazol-6-ilamino}-benzamida Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 6 y el ejemplo 7 anteriormente en este documento excepto en el uso de ácido 2-[3-[2-(4-metil-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrah¡dro-piran-2-il)-1/-/-¡ndazol-6-¡lamino]-benzo¡co y C-(6-metil-piridin-2-il)-metilamina. H NMR (DMSO- d6, 300 MHz) ó 12,92 (1 H, s), 9,76 (1H, s), 9,20 (1H, t, J = 5,8 Hz), 8,44 ( H, d, J = 4,9 Hz), 8,05 (1 H, d, J = 8,6 Hz), 7,86 (1H, d, J = 16,4 Hz), 7,81 (1 H, d, J = 7,7 Hz), 7,59 (1 H, t, J = 7,7 Hz), 7,49-7,37 (4H, m), 7,23 116 (1 H, s), 7,11-7,08 (3H, m), 6,99 (1 H, dd, J = 8,7, 1 ,6 Hz), 6,95-6,90 (1 H, m), 4,51 (2H, d, J = 5,9 Hz), 2,42 (3H,s), 2,33 (3H, s). ESIMS m/z 475 (M + H)+. Anal. Caled, para x 0,4 DCM: C, 68,98; H, 5,29; N, 16,39. Se encontró: C, 68,84; H, 5,42; N, 16,20. Ejemplo 40: /V-(2,5-d¡metil-2H-pirazol-3-¡lmet¡l)-2-[(E)-3-[2-(4-metil-pir¡din-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro^¡ran-2-il)-1H-indazol-6-ilamino]-benzamida Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 6 anteriormente en este documento, excepto en el uso de ácido 2-[3-[2-(4-metil-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrah¡dro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzoico y C-(2,5-dimetil-2H-pirazol-3-il)-metilamina. 1H NMR (DMSO- d6) 6 9,81 (1 H, s), 9,05 (1 H, ta), 8,46 (1 H, d, J = 8,7 Hz), 7,85 (1 H, d, J = 16,4 Hz), 7,71 ( H, d, J = 7,5 Hz), 7,54-7,40 (5H, m), 7,1 1-7,09 (2H, m), 6,91 (1 H, t, J = 6,9 Hz), 5,94 (1 H, s), 5,80 (1 H, d, J = 7,3 Hz), 4,45 (2H, d, J = 5,5 Hz), 3,93-3,85 (1 H, m), 3,78-3,69 (1 H, m), 3,73 (3H, s), 2,45-2,35 (1 H, m), 2,35 (3H, s), 2,07 (3H, s), 2,06- ,95 (2H , m), 1 ,85-1 ,53 (m, 3H). Ejemplo 41 : N-(2,5-dimet¡l-2H-pirazol-3-ilmet¡l)-2-{3-[(E)-2-(4-metll-pir¡din-2-il)-vinil]-1H-indazol-6-ilamino}-benzamida 117 Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 7 anteriormente en este documento, excepto en el uso de A/-(2,5-dimetil-2H-pirazol-3-ilmetil)-2-{3-[(E)-2-(4-metil-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1H-indazol-6-ilamino}-benzamida en lugar de N-[4-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-but-2-inil]-2-[3-[2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vini1]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1H-indazol-6-ilaminoj-benzamida. H NMR (DMSO- d6) d 12,90 (1 H, s), 9,70 (1H, s), 9,03 ( H, t, J = 6,0 Hz), 8,44 (1 H, d, J = 4,9 Hz), 8,06 (1 H, d, J = 9,0 Hz), 7,87 (1 H, d, J = 16,2 Hz), 7,70 (1H, d, J = 7,5 Hz), 7,50-7,38 (4H, m), 7,22 (1 H, s), 7,1 (1 H, d, J = 5,6 Hz), 6,99 (1 H, dd, J = 8,7, 1 ,5 Hz), 6,90 (1 H, dt, J = 7,9, 1 ,9 Hz), 5,91 (1H, s), 4,43 (2H, d, J = 5,6 Hz), 3,72 (3H, s), 2,34 (3H, s), 2,05 (3H, s). Ejemplo 42: 1-metil- H-benzoimidazol-2-carbaldehído oxima A una suspensión agitada de 1-metil-1 H-benzoimidazol-2-carbaldehído (980 mg, 6,61 mmol) en H20 (10 mi) se le añadió una solución de acetato de sodio (3,25 g, 39,68 mmol) y clorhidrato de hidroxilamina (1 ,38 g, 19,84 mmol) en 10 mi de H2O. La reacción se agitó a ta durante 2 horas y el precipitado espeso se recogió por filtración, se lavó con agua y se secó a vacío para dar 1 ,02 g (94%) de un sólido blanco. 1H NMR (DMSO- d6) d 12,06 (1 H, s), 8,28 (1 H, s), 7,65 (1 H, d, J = 7,5 Hz), 7,60 (1 H, d, J = 6,8 Hz), 7,32 (1 H, t, J = 7,2 118 Hz), 7,23 (1 H, t, J = 6,8 Hz), 4,00 (3H, s). Anal. Caled, para C9H9N30: C, 61 ,70; H, 5,18; N, 23,99. Se encontró: C, 61 ,80; H, 5,23; N, 23,98. Ejemplo 43: Diclorhidrato de C-(1-metil- H-benzoimidazol-2-il)-metilamina Una botella de presión Parr se cargó con 1-metil-1 H-benzoimidazol-2-carbaldehído oxima M (267 mg, 1 ,6 mmol), 10% paladio sobre carbono (75 mg) con ácido clorhídrico (2 gotas) y etanol (25 mi). La mezcla de reacción se sacudió bajo 45 PSI (310.275 kPa) de H2 durante 2 horas antes de que el catalizador se eliminara por filtración. El filtrado se concentró bajo presión reducida y el residuo se trituró con Et20 para dar 340 mg (90%) de un sólido blanco como la sal diclorhidrato y se usó sin purificación adicional. 1H NMR (DMSO- d6) 6 8,87 (2H, s ancho), 7,72 (2H, m), 7,38 (2H, m), 4,50 (2H, s), 3,89 (3H, s). Ejemplo 44: N 1-metil-1H-benzoimidazol-2-ilmetil)-2-[3-[2-(4-metil-piridín-2-il)-vin«l]-1 -(tetrahidro^iran-2-il)-1 H-indazol-6-ilarnino]-benzarnida 119 Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 6 anteriormente en este documento, excepto en el uso de clorhidrato de C-(1-metil-1 H-benzoimidazol-2-¡l)-metilamina N y ácido 2-[3-[2-(4-metii-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzoico. 1H NMR (DMSO-d6) d 9,82 (1 H, s), 9,20 (1 H, t, J = 5,3Hz), 8,46 (1 H, d, J = 4,9 Hz), 8,07 (1 H, d, J = 8,9 Hz), 7,85 (1 H, d, J = 16,4 Hz), 7,74 (1 H, d, J = 7,3 Hz), 7,58 (1 H, d, J = 7,2 Hz), 7,50 (6H, m), 7,19 (4H, m), 6,92 (1 H, t, J = 8,1 Hz), 5,78 (1 H, dd, J = 2,5, 9,5 Hz), 4,79 (2H, d, J = 5,5 Hz), 3,89 (1 H, m), 3,83 (3H, s), 3,71 (1H, m), 2,41 (1 H, m), 2,35 (3H, s), 2,00 (2H, m), 1 ,74 (1 H, m), 1 ,57 (2H, m). Anal. Caled, para C36H35N7O2 ¦ 0,65 hexanos: C, 73,31; H, 6,80; N, 15,00. Se encontró: C, 72,92; H, 6,90; N, 14,71. Ejemplo 45: N-(1 -metil-1 H-benzoimidazol-2-ilmetil)-2-{3-[(E)2-(4-meti ^iridín-2-il)-vinil]-1 H-indazol-6-ilamino}-benzamida Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 7 anteriormente en este documento, excepto en el uso de N-(1 -metil-1 H-benzoimidazol-2-ilmetil)-2-[3-[2-(4-metil-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzamida en lugar de N-[4-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-but-2-inil]-2-[3-[2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1r/- ¡ndazol-6-ilamino]-benzam¡da. H NMR (DMSO- d6) d 12,93 (1H, s), 9,73 (1 H, s), 9,19 (1 H, t, J = 5,3 Hz), 8,45 (1 H, d, J = 4,9 Hz), 8,06 (1 H, d, J = 8,5 Hz), 7,88 (1 H, d, J = 16,4 Hz), 7,74 (1 H, d, J = 7,9 Hz), 7,60-7,36 (6H, m), 7,29-7,14 120 (3H, m), 7,10 (1 H, d, J = 4,7 Hz), 7,04 (1 H, dd, J = 1 ,8, 8,9 Hz), 6,91 (1 H, t, J = 7,3 Hz), 4,79 (2H, d, J = 5,3 Hz), 3,83 (3H, s), 2,35 (3H, s). Anal. Caled, para C31H27N7O ¦ 1 ,80 H20 0,40 CH2CI2: C, 65,02; H, 5,46; N, 6,91. Se encontró: C, 64,97; H, 5,82; N, 7,09. Ejemplo 46: 1-metil-1H-¡m¡dazol-2-carbaldehído oxima Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 39 excepto en que se usó 1-metil-1H-imidazol-2-carbaldehído en vez de 1-metil-1 H-benzoimidazol-2-carbaldehído. H NMR (DMSO- d6) ¿ 11 ,50 (1 H, s), 8,05 (1 H, s), 7,28 (1 H, s), 6,95 (1 H, s), 3,80 (3H, s). Anal. Caled, para C5H7N3O: C, 47,99; H, 5,64; N, 33,58. Se encontró: C, 48,22; H, 5,58; N, 33,45. Ejemplo 47: Diclorhidrato de C-(1-metll-1H-ímidazol-2-il)-metilamína Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 40 excepto en que se usó 1-metil-1 H-imidazol-2-carbaldehído oxima en vez de 1-metil- H-benzoimidazol-2-carbaldehído oxima. 1H NMR (DMSO- d6) d 7,45 (1 H, s), 7,29 (1 H, s), 4,25 (2H, s), 3,79 (3H, s). Ejemplo 48: N-(1 -metil-1 H-ímidazol-2-ilmetil)-2-[3-[2-(4-metil-p¡ridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1H-indazol-6-ilamino]-benzamida 121 Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 6 anteriormente en este documento, excepto en el uso de clorhidrato de C-(1-metil-1 H-imidazol-2-il)-metilamina y ácido 2-[3-[2-(4-metil-p¡ridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzoico. H NMR (DMSO- d6) d 9,83 (1 H, s), 9,03 (1 H, t, J = 5,5), 8,45 (1 H, d, J = 4,7 Hz), 8,09 (1H, d, J = 8,5 Hz), 7,85 (1 H, d, J = 16,5 Hz), 8,67 (1H, d, J = 7,3 Hz), 7,53-7,39 (4H, m), 7,11 (3H, m), 6,90 (1 H, d, J = 6,9 Hz), 6,86 (1 H, s), 5,79 (1 H, d, J = 8,9 Hz), 5,75 (1H, s), 4,54 (1 H, d, J = 5,5 Hz), 3,85-3,70 (2H, m), 3,66 (3H, s), 2,35 (3H, s), 2,10 (2H, m), 1 ,70 (2H, m), 1 ,60 (3H, m). Anal. Caled, para C32H33N7O2 ¦ 0,8 CH2CI2: C, 63,99; H, 5,672; N, 15,93. Se encontró: C, 63,95; H, 5,72; N, 16,01. Ejemplo 49: N-(1 -metil-1 H-imidazol-2-ilmetil)-2-[3-[2-(4-metil-piridin-2-il)-vinil]- 1 H-indazol-6-ilamino]-benzamida Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 7 anteriormente en este documento, excepto en que N-(1 -metil-1 H-imidazol-2-ilmetil)-2-[3-[2-(4-metil-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-6- 122 ilamino]-benzamida se usó en lugar de N-[4-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-but-2- inil]-2-[3-[2-(4,6-dimetil-pmdin^ ilaminoj-benzamida. 1H NMR (DMSO- d6) 6 12,89 (1 H, s), 9,72 (1 H,s), 8,99 ( H,t,J=5,6 Hz)„ 8,44 (1H, d, J = 4,9 Hz), 8,05 ( H, d, J = 8,7 Hz), 7,86 (1 H, d, J = 16,4 Hz), 7,66 (1 H, d, J = 6,7 Hz), 7,49-7,36 (4H, m), 7,24 (1 H, m), 7,09 (2H, d, J = 8,1 Hz), 7,02 (1 H, d, J = 8,8 Hz), 6,88 (1 H, t, J = 6,9 Hz), 6,81 (1 H, s), 4,52 (2H, d, J = 5,5 Hz), 3,29 (3H, s), 2,34 (3H, s). Anal. Caled, para C27H25N7O ¦ 0,35 CH2CI2: C, 66,59; H, 5,25; N, 19,88. Se encontró: C, 66,48; H, 5,65; N, 19,56. Ejemplo 50: W-(4-hidrox¡-but-2-inil)-2-[3-[2-(4-metil^ir¡din-2-il)-vinil]-1- (tetrahidro-piran-2-il)-1H-indazol-6-ilamino]-benzamida Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 6, excepto en el uso de ácido 2-[3-[2-(4-metil-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-p¡ran-2-il)-1 H- indazol-6-ilam¡no]-benzoico y 4-(terc-but¡l-dimet¡l-silaniloxi)-but-2-inilamina. 1H NMR (CDCI3) d 9,48 (H, s), 8,46 (1 H, d, J = 5,3 Hz), 7,92 (1 H, d, J = 9,0 Hz), 7,83 (1 H, d, J = 16,2 Hz), 7,52 (1 H, d, J = 16,6 Hz), 7,46-7,41 (2H, m), 7,34- 7,31 (3H, m), 7,12 (1 H, dd, J = 8,7, 1 ,9 Hz), 6,99 (1 H, d, J = 4,9 Hz), 6,81 (1H, t, J = 6,8 Hz), 6,40 (1 H, t, J = 4,9 Hz), 5,62 (1H, dd, J = 9,4, 3,0 Hz), 4,28-4,23 123 (4H, m), 4,08-4,01 (1H, m), 3,76-3,67 (1H, m), 2,63-2,49 (1 H, m), 2,38 (3H, s), 2,22-2,06 (2H, m), 1 ,80-1 ,60 (3H, m). Ejemplo 51 : 2-{3-[(E)-2-(4-metil-piridin-2-il)-vinil]-1 H-indazol-6-ilamino}-N-(4-hidroxi-but-2-inil)-benzamida Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 7, excepto en el uso de una mezcla de A/-(4-hidroxi-but-2-inil)-2-[3-[2-(4-metil-pir¡din-2-il)-vinil]-1 -(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzamida y N-[4-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-but-2-¡nil]-2-[3-[2-(4-me 2-il)-1H-indazol-6-ilamino]-benzamida en lugar de N-[4-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-but-2-inil]-2-[3-[2-(4,6-dimetil-piridin-2-il)-vinil]-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1H-indazol-6-ilamino]-benzamida. H NMR (DMSO- d6) d 12,92 (1 H, s), 9,83 (1 H, s), 9,00 (1 H, t, J = 5,3 Hz), 8,44 (1H, d, J = 4,9 Hz), 8,06 (1 H, d, J = 9,0 Hz), 7,87 (1 H, d, J = 16,6 Hz), 7,68 (1H, d, J = 7,9 Hz), 7,50-7,38 (4H, m), 7,26 (1 H, s), 7,09 (1H, d, J = 5,3 Hz), 7,01 (1H, dd, J = 8,7, 1 ,5 Hz), 6,88 (1 H, dt, J = 6,8, 1 ,5 Hz), 5,11 (1 H, t, J = 3,0 Hz), 4,10-4,04 (4H, m), 2,34 (3H, s). Ejemplo 52: Ester metílico del ácido 2-[3-(pirrol-1-iliminometil)-1-(2-trimetilsilanil-etoximetil)- H-indazol-6-ilamino]-benzoico 124 Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 2 y el ejemplo 3 anteriormente en este documento excepto en que se empieza con 6-n¡tro-3-estiril-1-(2-trimet¡lsilanil-etoximetil)-1 H-indazol en vez de 6-yodo-3-estiril-1 -(2-trimetilsilanil-etoximetil)-1 H-indazol. Este material se recogió como una mezcla bruta de producto y éster metílico de ácido 2-amino-benzoico en la etapa siguiente. Ejemplo 53: Ácido 2-[3-(pirrol-1-iliminometil)-1-(2 rimet¡Isilanil-etoximetil)-1 H-¡ndazol-6-ilamino]-benzoico Aislado como un subproducto de la reacción de N-[4-(terc-butil-dimetil-silan¡loxi)-but-2-inil]-2-[3-(pirrol-1 -iliminometil)-1 -(2-trimetilsilanil-etoximetil)-1 H-¡ndazol-6-ilamino]-benzamida y TBAF usando un procedimiento similar al ejemplo 11 en el documento de los Estados Unidos con número de serie 125 09/609.335, presentado el 30 de junio de 2.000, incorporado por este medio en su totalidad para todos los propósitos. 1H NMR (DMSO- d6) d 13,19 (1H, s ancho), 10,00 (1H, s), 9,13 (1 H, s), 8,37 (1 H, d, J = 8,7 Hz), 8,06 (1H, d, J = 7,5 Hz), 7,75 (1 H, s), 7,64 (2H, t, J = 2,3 Hz), 7,54 (2H, m), 7,35 (1 H, dd, J = 1 ,9, 8,7 Hz), 6,99 (1 H, m), 6,33 (2H, t, J = 2.3 Hz), 5,89 (2H, s), 3,68 (2H, t, J = 8,1 Hz), 0,94 (2H, t, J = 8,1 Hz), 0,00 (9H, s). Ejemplo 54: N-(3-ciclopropil-prop-2-inil)-2-[3-(pirrol-1 -iliminometil)-1 -(2-trimetilsilanil-etoximetil)-1H-indazol-6-ilamino]-benzamida Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 6 anteriormente en este documento, excepto en el uso de ácido 2-[3-(pirrol-1 -iliminometil)-1-(2-trimetilsilan¡l-etoximetil)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzoico y 3-ciclopropil-prop-2-inilamina. 1H NMR (DMSO- d6) d 9,93 (1H, s), 8,99 (1H, s), 8,95 (1H, d, J = 5,6 Hz), 8,20 (1H, d, J = 8,9 Hz), 7,68 (1H, d, J = 8,1 Hz), 7,51 (4H, m), 7,37 (1H, t, J = 6,8 Hz), 7,14 (1 H, d, J = 9,0 Hz), 6,91 (1 H, t, J = 7,5 Hz), 6,21 (2H, t, J = 2,3 Hz), 5,74 (2H, s), 4,00 (2H, dd, J = 2,0, 5,6 Hz), 3,55 (2H, t, J = 7,9 Hz), 1 ,26 (1H, m), 0,82 (2H, t, J = 7,9 Hz), 0,72 (2H, m), 0,54 (2H, m), -0,12 (9H, s). Ejemplo 55: N-(3-ciclopropil-prop-2-inil)-2-[3-(pirrol-1-iliminomet¡l)-1H-indazol-6-ilamino]-benzamida 126 Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 1 1 en la solicitud de patente de los Estados Unidos con número de serie 09/609.335, archivado el 30 de junio de 2.000, incorporada como referencia en su totalidad para todos los propósitos, excepto en que N-(3-ciclopropil-prop-2-inil)-2-[3-(pirrol- -iliminometil)-1 -(2-trimetilsilanil-etoximetil)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzamida se usó en lugar de N-metil-N-{3-estiril-1-[(2-tr¡metil-silan¡l)-etox¡metil]-1 H-indazol-6-¡l}-benceno-1 ,3-diamina. 1H NMR (DMSO- d6) d 13,29 (1 H, s), 9,83 (1 H, s), 8,98 (1 H, s), 8,95 (1 H, t, J = 5,5 Hz), 8,19 (1H, d, J = 8,9 Hz), 7,68 (1 H, d, J = 7,5 Hz), 7,52 (2H, t, J = 2,3 Hz), 7,43 (2H, m), 7,29 (1 H, s), 7,07 (1 H, dd, J = 1 ,9, 8,7 Hz), 6,91 (1 H, t, J = 7,4 Hz), 6,21 (2H, t, J = 2.3 Hz), 4,01 (2H, dd, J = 1 ,7, 5,5 Hz), 1 ,27 (1 H, m), 0,73 (2H, m), 0,55 (2H, m). Anal. Caled, para C25H22N6O · 0,05 hexanos · 0,30 H20: C, 70,31 ; H, 5,43; N, 19,45. Se encontró: C, 70,63; H, 5,38; N, 19,18. Ejemplo 56: N-[4-(terc-butil-d¡metil-silaniloxi)-but-2-¡n¡l]-2-[3-(p¡rrol-1-i1iminomet¡l)-1-(2-trimet¡lsilanil^toximetil)-1H-indazol-6-¡lamino]-benzamida 127 Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 6 anteriormente en este documento, excepto en él uso de ácido 2-[3-(pirroI-1-iliminometil)-1-(2-tr¡metilsilanil-etoximetil)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzoico y 4-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-but-2-inilamina. 1H NMR (DMSO- d6) d 10,04 (1H, s), 9,16 (1 H, t, J = 5,3 Hz), 9,10 (1H, s), 8,31 (1 H, d, J = 8,7 Hz), 7,78 (1 H, d, J = 7,9 Hz), 7,67 (4H, m), 7,49 (1H, t, J = 8,5 Hz), 7,24 (1 H, dd, J =1 ,7, 8,7 Hz), 7,03 (1 H, t, J = 7,4 Hz), 6,33 (2H, t, J = 2.3 Hz), 5,85 (2H, s), 4,83 (2H, s), 4,19 (2H, d, J = 5,5 Hz), 3,66 (2H, t, J = 7,9 Hz), 0,94 (2H, m), 0,89 (9H, s), 0,13 (6H, s), 0,00 (9H, s). Ejemplo 57: N-(4-hidroxi-but-2-¡n¡l)-2-[3-(pirrol-1 -il¡minometil)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzamida Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 11 en la solicitud de patente de los Estados Unidos con número de serie 09/609.335, presentada el 30 de junio de 2.000, incorporada como referencia en su 128 totalidad para todos los propósitos, excepto en que N-[4-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-but-2-inil]-2-[3-(pirrol-1 -iliminometil)-1 -(2-trimetilsilanil-etoximetil)-1 H-indazoI-6-ilamino]-benzamida se usó en lugar de N-metil-N-{3-estiril-1-[2-trimetil-s¡lanil)-etoximetil]-1 H-indazol-6-il}-benceno-1 ,3-diamina. 1H NMR (DMSO- d6) d 13,30 (1 H, s), 9,87 (1 H, s), 9,04 (1 H, t, J = 5,3), 8,99 (1 H, s), 8, 9 (1 H, d, J = 8,5 Hz), 7,70 (1 H, d, J = 7,3 Hz), 7,46 (4H, s), 7,31 (1H, m), 7,08 (1 H, dd, J = 1 ,7, 8,7 Hz), 6,91 (1 H, t, J = 7,3 Hz), 6,21 (2H, t, J = 2.1 Hz), 5,14 (1 H, t, J = 5,8 Hz), 4,10 (2H, d, J = 5,5 Hz), 4,06 (2H, d, J = 5,8 Hz). Anal. Caled, para C23H20 6O2 ¦ 0,35 hexanos ¦ 0,20 H20: C, 67,45; H, 5,86; N, 18,81. Se encontró: C, 67,70; H, 5,73; N, 8,56. Ejemplo 58: 2,5-d¡metil-2H-p¡razol-3-carbonitrilo 2,5-dimetil-2H-pirazol-3-carbon¡trilo se preparó a partir de 1 ,3-dimetilpirazol-5-carboxilato de etilo de acuerdo con los procedimientos publicados para el 1-metil-pirazol-5-carbonitrilo por Castellanos, María y Montserrat, Llinas;JCS Perkins Trans I (1985) 1209-1215. 1H NMR (CDCI3) d 6,52 (1 H, s), 3,96 (3H, s), 2,27 (3H, s). Ejemplo 59: C-(2,5-dimetil-2H-pirazol-3-il)-metilamina Una suspensión de 2,5-dimetil-2H-pirazol-3-carbonitrilo (654 mg, 5,4 129 mmol) y 10% de paladio sobre carbono (200 mg) en etanol (15 mi) se sacudió en un aparato Parr de hidrogenación bajo 45 psi (310.275 kPa) de H2 durante 17 horas. La mezcla se filtró a través de celita y el filtrado se concentró bajo presión reducida para dar 608 mg de un aceite el cual se usó sin ninguna purificación adicional. 1H NMR (CDCI3) d 5,19 (1 H, s), 3,81 , 3,73 (2H, 2s), 3,75 (3H, s), 2,21 (3H, s). Ejemplo 60: /V-(2,5-dimetil-2H-pirazol-3-ilmetil)-2-[3-(pirrol-1 -fflminometil)-1-(2-trimetilsilanil-etoximetil)-1H-indazol-6-ilamino]-benzamida Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 6 anteriormente en este documento, excepto en el uso de ácido 2-[3-(pirrol-1-¡liminometil)-1-(2-trimetilsilanil-etoximetil)-1H-indazol-6-ilamino]-benzo¡co y C-(2,5-dimetH-2tf-pirazol-3-il)-met¡lamina. 1H NMR (CDCI3) d 9,56 (1H, s), 8,68 (1 H, s), 8,30 (1 H, d, J = 8,7 Hz), 7,49 (1 H, d, J = 8,3 Hz), 7,43 (1 H, dd, J = 7,9, 1 ,5 Hz), 7,36-7,31 (2H, m), 7,23 (2H, t, J = 2,6 Hz), 7,17 (1H, dd, J = 8,7, 1 ,9 Hz), 6,83 (1 H, t, J = 7,2 Hz), 6,32 (1 H, ta), 6,29 (2H, t, J = 2,3 Hz), 6,01 (1H, s), 5,67 (2H, s), 4,61 (2H, d, J = 5,6 Hz), 3,60 (3H, s), 3,58 (2H, t, J = 8,3 Hz), 2,22 (3H, s), 0,90 (2H, t, J = 8,7 Hz), 0,06 (9H, s). Ejemplo 61: W-(2,5 limetil-2W^irazol-3-¡lmetH)-2-[3-(pirrol-1-iliminometil)- 130 1 H-indazol-6-ilaminoJ-benzamida Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 1 1 en la solicitud de patente de los Estados Unidos con número de serie 09/609.335, presentada el 30 de junio de 2.000, incorporada como referencia en su totalidad para todos los propósitos, excepto en que A/-(2,5-dimetil-2H-pirazol-3-ilmetil)-2-[3-(pirrol-1 -iliminometil)-1 -(2-trimetilsilanil-etoximetil)-1 H-indazol-6-ilaminoj-benzamida se usó en lugar de N-metil-N-{3-estiril-1-[(2-trimetil-silanil)-etoximetil]-1 H-indazol-6-il}-benceno-1 ,3-diamina. 1H NMR (DMSO- d6) 6 13,27 (1 H, s), 9,72 (1 H, s), 9,05 (1 H, t, J = 5,3 Hz), 8,97 (1 H, s), 8,16 (1 H, dd, J = 8,7 Hz), 7,68 (1 H, dd, J = 8,3, 1 ,9 Hz), 7,50 (2H, t, J = 2,6 Hz), 7,46-7,38 (2H, m), 7,25 (1H, s), 7,05 (1H, dd, J = 8,7, 1 ,9 Hz), 6,91 ( H, t, J = 6,80 Hz), 6,20 (2H, t, J = 2,3 Hz), 5,91 (1 H, s), 4,43 (2H, d, J = 5,6 Hz), 3,71 (3H, s), 2,04 (3H, s). Ejemplo 62: Ácido 2-[3-(Pirrol-1-iliminometil)-1 H-indazol-6-ylamino]-benzoico 131 Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 11 en la solicitud de patente de los Estados Unidos con número de serie 09/609.335, presentada el 30 de junio de 2.000, incorporada como referencia en su totalidad para todos los propósitos, excepto en que se usa ácido 2-[3-(pirrol-1-iliminometil)-1-(2-tr¡metilsilanil-etoximetil)- H-indazol-6-ilamino]-benzoico en lugar de N-metil-N-{3-estiril-1-[(2-trimetil-silanil)-etoximetil]-1 H-indazol-6-il}-benceno-1 ,3-diamina. 1H NMR (DMSO- d6) d 13,12 (1H, s), 12,70 (1H, s), 8,94 (1 H, s), 8,10 (1H, d, J = 8,7 Hz), 7,91 (1 H, dd, J = 1 ,7, 7,7 Hz), 7,50 (2H, t, J = 2,3 Hz), 7,36 (1 H, d, J = 7,9 Hz), 7,27 (1 H, d, J = 1 ,5 Hz), 7,16 (1 H, t, J = 7,5 Hz), 6,94 (1 H, dd, J = 1 ,7, 8,7 Hz), 6,68 (1 H, t, J = 7,5 Hz), 6,19 (2H, t, J = 2,3 Hz). Ejemplo 63: N-prop-2-inil-2-[3-(pirrrol-1 -iliminometil)-1H-indazol-6-ilamino]-benzamida Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 6 anteriormente en este documento, excepto en el uso de ácido 2-[3-(pirrol-1-iliminometil)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzoico y propargilamina. 1H NMR (DMSO-d6) d 13,30 (1H, s), 9,82 (1 H, s), 9,04 (1H, t, J = 5,6 Hz), 8,98 (1H, s), 8,19 (1H, 132 d, J = 8,6 Hz), 7,69 (1 H, d, J = 7,9 Hz), 7,45 (4H, m), 7,31 (1 H, s), 7,08 (1 H, d, J = 8,6 Hz), 6,91 (1 H, t, J = 7,6 Hz), 6,21 (2H, s), 4,05 (2H, s), 3,13 (1 H, s). Anal. Caled, para C22Hi8N60 ¦ 0,40 H20 ¦ 0,05 hexanos: C, 67,97; H, 5,01 ; N, 21 ,33. Se encontró: C, 67,91 ; H, 4,78; N, 21 ,00. Ejemplo 64: N-(4-hidroxi-but-2-¡nil)-2-[3-(2^irid¡n-2-il-vinil)-1H-indazol-6-ilaminoj-benzamida Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 6 anteriormente en este documento, excepto en el uso de 2-[3-[2-(pir¡din-2-il-vinil]-1 H-indazol-6-ilamino]-benzoato de tetrabutilamonio y 4-amino-but-2-in-1-ol. 1H NMR (DMSO- d6) d 12,95 ( H, s), 9,84 (1 H, s), 9,02 (1 H, t. J = 5,6 Hz), 8,59 (1 H, d, J = 4,9 Hz), 8,08 (1 H, d, J = 8,7 Hz), 7,90 (1 H, d, J = 16,2 Hz), 7,80 (1 H, t, J = 7,2 Hz), 7,70-7,64 (2H, m), 7,51 (1 H, d, J = 16,2 Hz), 7,45-7,36 (2H, m), 7,27-7,24 (2H, m), 7,02 (1 H, d, J = 9,0 Hz), 6,88 (1 H, t, J = 7,2 Hz), 5,13 (1 H, t, J = 5,6 Hz), 4,10-4,04 (4H, m). Ejemplo 65: W-(2,5-dimetil-2W^irazol-3-¡lmetil)-2-[3-(2^iridin-2-il-vinll)-1 H-indazol-6-ilamino]-benzamida 133 Preparado de una forma similar a la descrita para el ejemplo 6 anteriormente en este documento, excepto en el uso de 2-[3-[2-pir¡din-2-il-vinil]-1 -/-indazol-6-ilamino]-benzoato de tetrabutilamonio y C-(2,5-dimetil-2H-pirazol-3-¡l)-metilamina. 1H NMR (DMSO- d6) d 12,93 (1 H, s), 9,70 (1H, s), 9,04 (1 H, ta), 8,58 (1 H, d, J = 4,0 Hz), 8,07 (1 H, d, J = 8,8 Hz), 7,88 (1H, d, J = 16,4 Hz), 7,79 (1H, t, J = 8,6 Hz), 7,71-7,64 (2H, m), 7,50 (1H, d, J = 16,4 Hz), 7,44-7,39 (2H, m), 7,28-7,23 (2H, m), 7,00 (1 H, d, J = 8,8 Hz), 6,90 (1H, t, J = 8,0 Hz), 5,91 (1H, s), 4,43 (2H, d, J = 5,5 Hz), 3,71 (3H, s), 2,04 (3H, s). Las actividades de los compuestos puestos como ejemplos descritos anteriormente en este documento pueden ensayarse usando los ensayos descritos más adelante en este documento. PRUEBA BIOLÓGICA: ENSAYOS ENZIMÁT1COS La estimulación de la proliferación celular mediante factores de crecimiento tales como VEFG, FGF y otros depende de su inducción de autofosforilación de cada una de sus respectivas tirosinaquinasas de los receptores. Por lo tanto, la capacidad de un inhibidor de proteinquinasa para bloquear la autofosforilación se puede medir mediante la inhibición de sustratos de péptidos. Para medir la actividad de inhibición de proteinquinasas de los compuestos, se fabricaron las siguientes construcciones. Construcción VEGF-R2 para ensayo. Esta construcción determina la capacidad de un compuesto de ensayo para inhibir la actividad tirosinaquinasa. 134 Una construcción (VEGF-R2A50) del dominio citosólico del receptor 2 del factor de crecimiento endotelial vascular humano (VEGF-R2) que carece de 50 restos centrales de los 68 restos del dominio de inserción de quinasa se expresó en un sistema de células de baculovirus/insecto. De los 1356 restos de VEGF-R2 de longitud completa, VEGF-R2A50 contiene los restos 806 - 939 y 990 -1171 , y también una mutación puntual (E990V) en el dominio de inserción de quinasa relativo a VEGF-R2 de tipo salvaje. La autofosforilación de la construcción purificada se realizó mediante la incubación de la enzima a una concentración de 4 µ? en presencia de ATP 3 mM y MgCI2 40 mM en HEPES 100 mM, pH 7,5, que contenía 5% de glicerol y DTT 5 mM, a 4°C durante 2 horas. Después de autofosforilación, se ha mostrado que esta construcción posee actividad catalítica esencialmente equivalente a la construcción del dominio quinasa autofosforilada de tipo salvaje. Véase Parast y col., Biochemistry, 37, 16788 - 16801 (1998). Construcción FGF-R1 para ensayo: El dominio quinasa intracelular de FGF-R1 se expresó usando el sistema de expresión del vector de baculovirus partiendo del resto de metionina 456 endógeno al de glutamato 766, según el sistema de numeración de restos de Mohammadi y col., Mol. Cell. Biol., 16, 977 - 989 (1996). Además, la construcción también tiene las siguientes 3 sustituciones de aminoácidos L457V, C488A y C584S. Construcción LCK para ensayo: La tirosina quinasa LCK se expresó en células de insecto como una supresión N-terminal comenzando en el resto aminoácido 223 hasta el final de la proteína en el resto 509, con las siguientes dos sustituciones de aminoácidos en el extremo N: P233M y C224D. Construcción CHK1 para ensayo: CHK1 humana de longitud completa 135 (abreviadamente FL-CHK1 ) marcada con His en el C terminal se expresó usando el sistema celular de baculovirus/insecto. Contiene 6 restos de histidina (6 x marca His) en el extremo C terminal de la CHK1 humana de 476 aminoácidos. La proteína se purificó mediante técnicas cromatográficas convencionales. Construcción CDK2/ciclina A para ensayo: La CDK2 se purificó usando metodología publicada (Rosenblatt y col., J. Mol. S/o/., 230, 1317 - 1319 (1993)) de células de insectos que se habían infectado con un vector de expresión de baculovirus. La ciclina A se purificó a partir de células de E. coli que expresan ciclina A recombinante de longitud completa, y se generó una construcción de ciclina A truncada mediante proteolisis limitada y purificada como se ha descrito previamente (Jeffrey y col., Nature, 376, 313 - 320 (1995)). Construcción CDK4/ciclina D para ensayo: un complejo de CDK4 humano y ciclina D3, o un complejo de ciclina D1 y una proteína de fusión de CDK4 humano y glutatión-S-transferasa (abreviadamente GST-CDK4), se purificó usando técnicas cromatográficas bioquímicas tradicionales a partir de células de insecto que se habían coinfectado con los correspondientes vectores de expresión de baculovirus. Construcción FAK para ensayo: El dominio catalítico de FAK humana (FAKcd409) se expresó usando el sistema de expresión del vector de baculovirus. El dominio de 280 aminoácidos expresado comprende los restos de la metionina 409 hasta el glutamato 689. Existe una sustitución de un aminoácido (P410T) relativo al número de acceso L136 6 de la secuencia publicada por Whithey, G. S. y col., DNA Cell Biol, 9, 823 - 30 (1993). La 136 proteína se purificó usando técnicas cromatográficas clásicas. Construcción TIE-2 (TEK) para ensayo: El dominio de tirosinaquinasa TIE-2 se expresó en células de insecto como una supresión en el N terminal comenzando desde el resto aminoácido 774 hasta el final de la proteína en el resto 1124. Esta construcción también lleva una mutación R774M, que sirve como el resto de metioniona iniciador de la traducción. Ensayo VEGF-R2 Ensayo espectrofotométrico acoplado (FLVK-P) La producción de ADP a partir de ATP que acompaña a la transferencia de fosforilo se acopló a la oxidación de NADH usando fosfoenolpiruvato (abreviadamente en inglés PEP) y un sistema que tiene piruvatoquinasa (abreviadamente en inglés PK) y lácticodeshidrogenasa (abreviadamente en inglés LDH). La oxidación de NADH se controló siguiendo la disminución de la absorbancia a 340 nm (e340 = 6,22 cm"1 mM'1) usando un espectrofotómetro Beckman DU 650. Las condiciones de ensayo para VEGF-R2A50 fosforilada (indicada como FLVK-P en las tablas más adelante) eran las siguientes: PEP 1 mM; NADH 250 µ?; 50 unidades de LDH/ml; 20 unidades de PK/ml; DTT 5 mM; poli(E4Yi) 5,1 mM; ATP 1 mM; y MgCI2 25 mM en HEPES 200 mM, pH 7,5. Las condiciones de ensayo para VEGF-R2A50 no fosforilada (indicada como FLVK en las tablas) eran las siguientes; PEP 1 mM; NADH 250 µ?; 50 unidades de LDH/ml; 20 unidades de PK/ml; DTT 5 mM; poIi(E4Yi) 20 mM; ATP 3 mM; y MgCI2 60 mM y MnCI2 2 mM en HEPES 200 mM, pH 7,5. Los ensayos se iniciaron con enzima 5 a 40 nM. Los valores de K¡ se determinaron midiendo la actividad enzimática en presencia de concentraciones variables de los 137 compuestos de ensayo. Los datos se analizaron usando software de cinética enzimática y Kaleidagraph. Ensayo de ELISA La formación de fosfogastrina se controló usando péptido (1 - 17) de gastrina biotinilada como sustrato. La fosfogastrina biotinilada se inmovilizó usando placas de microtitulación de 96 pocilios recubiertas con estreptavidina seguido de la detección usando anticuerpo anti-fosfotirosina conjugado a peroxidasa de rábano rusticano. La actividad de la peroxidasa de rábano rusticano se controló usando la sal de diamonio de 2,2'-azino-d¡-[3-etilbenzatiazolina sulfonato(6)] (abreviadamente en inglés ABTS). Las soluciones de ensayo típicas contenían: péptido de gastrina biotinilada 2 µ?; DTT 5 mM; ATP 20 µ?; MgCI2 26 mM; y MnCI2 2 mM en HEPES 200 mM, pH 7,5. El ensayo se inició con VEGF-R2A50 fosforilado 0,8 nM. La actividad de peroxidasa de rábano rusticano se ensayó usando ABTS 10 mM. La reacción de peroxidasa de rábano rusticano se inactivó mediante la adición de ácido (H2S04), seguido de la lectura de la absorbancia a 405 nm. Los valores de Ki se determinaron midiendo la actividad enzimática en presencia de concentraciones variables de los compuestos de ensayo. Los datos se analizaron usando software de cinética enzimática y Kaleidagraph. Ensayo de FGF-R El ensayo espectrofotométrico se llevó a cabo como se ha descrito anteriormente para VEGF-R2, excepto por los siguientes cambios en concentración: FGF-R = 50 nM, ATP = 2 mM y poli(E4Y1) = 15 mM. Ensayo de LCK El ensayo espectrofotométrico se llevó a cabo como se ha descrito 138 anteriormente para VEGF-R2, excepto por los siguientes cambios en concentración: LCK = 60 nM, MgCI2 = 0 mM, poli(E4Y1) = 20 mM. Ensayo de CHK1 La producción de ADP a partir de ATP que acompaña a la transferencia de fosforilo al péptido de sustrato sintético Syntide-2 (PLARTLSVAGLPGKK) se acopló a la oxidación de NADH usando fosfoenolpiruvato (abreviadamente en inglés PEP) mediante las acciones de piruvatoquinasa (abreviadamente en inglés PK) y lácticodeshidrogenasa (abreviadamente en inglés LDH). La oxidación de NADH se controló siguiendo la disminución de la absorbancia a 340 nm (e340 = 6,22 cm" mM"1) usando un espectrofotómetro HP8452. Las soluciones de reacción típicas contenían: PEP 4 mM; NADH 0,15 mM; 28 unidades de LDH/ml; 16 unidades de PK ml; DTT 3 mM; Syntide-2 0,125 mM; ATP 0,15 mM; MgCI2 25 mM en TRIS 50 mM, pH 7,5; y NaCI 400 mM. Los ensayos se iniciaron con FL-CHK1 10 nM. Los valores de K¡ se determinaron midiendo la actividad enzimática inicial en presencia de concentraciones variables de los compuestos de ensayo. Los datos se analizaron usando software de cinética enzimática y Kaleidagraph. Ensayos de CDK2/Ciclina A v CDK4/Ciclina D La actividad quinasa dependiente de ciclina se midió cuantificando la incorporación dependiente del tiempo, catalizada enzimáticamente de fosfato radiactivo de [32P]ATP en un fragmento recombinante de la proteína de retinoblastoma. Salvo que se indique otra cosa, los ensayos se realizaron en placas de 96 pocilios en un volumen total de 50 pl, en presencia de HEPES 10 mM (N-[2-hidroxietil]piperazina-N'[ácido 2-etanosulfónico]) (pH 7,4), MgC^ 10 mM, trifosfato de adenosina (abreviadamente en inglés ATP) 25 µ?, 1 mg/ml 139 de ovoalbúmina, 5 pg/ml de leupeptina, ditiotreitol 1 mM, yff-glicerofosfato 10 mM, vanadato sódico 0,1 mM, fluoruro sódico 1 mM, ácido etilenglicol-bis ?-aminoetiléter)-N,N,N'N'-tetraacético (abreviadamente en inglés EGTA) 2,5 mM, 2% (v/v) de dimetilsulfóxido y 0,03 - 0,2 pCi[32P]ATP. Del sustrato (0,3 - 0,5 pg) se purificó un fragmento de la proteína recombinante del retinoblastoma (abreviadamente Rb) (restos 386 - 928 de la proteína de retinoblastoma nativa; 62,3 kDa, que contiene la mayoría de los sitios de fosforilación encontrados en la proteína nativa de 106 kDa, así como un marcador de seis restos de histidina para facilitar la purificación). Las reacciones se iniciaron con CDK2 (complejo CDK2/ciclina A 50 nM) o CDK4 (complejo CDK4/ciclina D3 50 nM), se incubó a 30°C, y finalizó después de 20 minutos mediante la adición de ácido etilendiaminotetraacético (abreviadamente en inglés EDTA) 250 mM. Después el sustrato fosforilado se capturó sobre una membrana de nitrocelulosa usando un colector de filtración de 96 pocilios y la radiactividad no incorporada se retiró mediante lavado repetido con ácido fosfórico al 0,85%. La radiactividad se cuantificó exponiendo las membranas de nitrocelulosa secas a un formador de imágenes por fosforescencia. Los valores aparentes de K¡ se midieron ensayando la actividad enzimática en presencia de diferentes concentraciones de compuesto y restando la radiactividad de fondo medida en ausencia de enzima. Los parámetros cinéticos (kcat, Km para ATP) se midieron para cada enzima en las condiciones de ensayo habituales determinando la dependencia de las cantidades iniciales en la concentración de ATP. Los datos se ajustaron a una ecuación para inhibición competitiva usando Kaleidagraph (Software de Synergy), o se ajustaron a una ecuación para inhibición de unión estrecha competitiva usando el software KineTic (BioKin, Ltd.). Los valores medidos de 140 K¡ para inhibidores conocidos frente a CDK4 y CDK2 concordaban con los valores de CI5o publicados. La actividad específica de CDK4 era la misma si se complejaba a la ciclina D3 de longitud completa o a la construcción de ciclina D3 truncada; ambos complejos también producían valores muy similares de K¡ para inhibidores seleccionados. Ensayos de FAK FAK HTS utilizaba el ensayo de polarización por fluorescencia proporcionado por LJL Biosystems. La reacción de quinasa contenía: Hepes 100 mM, pH 7,5, MgCI2 10 mM;; DTT 1 mM, ATP 1 mM y poli Glu - Tyr 1 mg/ml (4:1). La reacción se inicia mediante la adición de FAKcd409 5 nM. La reacción se terminó mediante la adición de EDTA seguido de la adición de péptido marcado con flúor y anticuerpo anti-fosfotirosina, ambos proporcionados por LJL Biosystems. Los resultados de la inhibición se leen en un detector Analyst (LJL). Ensayos espectrofotométrico de TIE-2 La producción catalizada por quinasa de ADP a partir de ATP que acompaña la transferencia de fosforilo al copolímero aleatorio poli(Glu4Tyr) se acopló a la oxidación de NADH mediante las actividades de piruvatoquinasa (abreviadamente en inglés PK) y lactatodeshidrogenasa (abreviadamente LDH). La conversión de NADH a NAD+ se controló mediante la disminución en absorbancia a 340 nm (e = 6,22 cm"1 mM"1) usando un espectrofotómetro Beckman DU650. Las soluciones de reacción típicas contenían: fosfoenolpiruvato 1 mM; NADH 0,24 mM; MgCI2 40 mM, DTT 5 mM, 2,9 mg/ml de poli(Glu4Tyr), ATP 0,5 mM, 15 unidades/ml de PK, 15 unidades/ml de LDH en HEPES 100 mM, PH 7,5. Los ensayos se iniciaron con la adición de Tie-2 141 fosforilado 4 a 12 nM (aminoácidos 775 - 1122). El porcentaje de inhibición se determinó por triplicado a un nivel de inhibidor de 1 µ?. Ensayo de TIE-2 DELFIA La formación de fosfotirosina se controló usando el péptido p34cdc2 biotinilado (aminoácidos 6 - 20 = KVEKIGEGTYGVVYK) como sustrato. El péptido biotinilado se inmovilizó usando placas de microtitulación de 96 pocilios recubiertas con NeutrAvidin™ seguido de detección usando anticuerpo anti-fosfotirosina (PY20) conjugado a quelato de europio N1. Las soluciones de ensayo típicas contenían: péptido p34cdc2 biotinilado 1 µ?, ATP 150 µ?, MgCI2 5 mM; DTT 1 mM, 0,01% de BSA, 5% de glicerol, 2% de DMSO, HEPES 25 mM pH 7,5. El ensayó se inició en la placa de NeutrAvidin con dominio intracelular de TIE2 50 nM. La reacción de quinasa se terminó con EDTA 50 mM. Después las placas se lavaron, y se añadió anticuerpo de europio. Después de la incubación, se lavaron otra vez y se añadió solución de potenciación DELFIA™. Las placas se leyeron en posiciones patrones de resolución con el tiempo de Europio (ex 340 nm, em 615 nm, retardo 400 µ segundos, ventana 400 µ segundos). El porcentaje de inhibición se calculó con referencia a los pocilios intraplaca a los que se había añadido DMSO en lugar del compuesto en DMSO, restándose el fondo tanto del experimento como del control con referencia a un pocilio intraplaca al que se había añadido EDTA antes de la adición de enzima. Ensayo de proliferación de HUVEC Este ensayo determina la capacidad de un compuesto de ensayo de inhibir la proliferación estimulada por el factor de crecimiento de células endoteliales de la vena umbilical humana (abreviadamente en inglés "HUVEC"). 142 Las células HUVEC (3 - 4 pases, Clonetics, Corp) se descongelaron en medio de cultivo EGM2 (Clonetics Corp) en matraces T75. El medio EGM2 reciente se añadió a los matraces 24 horas después. Cuatro o cinco días más tarde, se expusieron las células a otro medio de cultivo (medio F12K suplementado con 10% de suero fetal bovino (abreviadamente en inglés FBS), 60 pg/ml de suplemento de crecimiento de células endoteliales (abreviadamente en inglés ECGS), y 0,1 mg/ml de heparina). Las células HUVEC en crecimiento exponencial se usaron en experimentos más tarde. Se sembraron entre diez y doce mil células de HUVEC en placas de 96 pocilios en 100 µ? de medio de cultivo enriquecido (descrito anteriormente). Se dejó que las células se unieran durante 24 horas en este medio. Después el medio se retiró mediante aspiración y se añadieron 105 µ? de medio de inanición (F12K + 1% de FBS) a cada pocilio. Después de 24 horas, se añadieron 15 µ? de agente de ensayo disuelto en 1% de DMSO en medio de inanición o este vehículo solo en cada pocilio de tratamiento; la concentración final en DMSO era de 0,1%. Una hora más tarde se añadieron a todos los pocilios 30 pl de VEGF (30 ng/ml) en medio de inanición excepto a los que contenían controles sin tratar; la concentración final de VEGF era 6 ng/ml. La proliferación celular se cuantificó 72 horas más tarde mediante reducción del colorante MTT, tiempo en el que las células se expusieron durante 4 horas a MTT (Promega Corp.). La reducción del colorante se detuvo mediante la adición de una solución de detención (Promega Corp.) y se determinó la absorbancia a ? de 595 en un espectrofotómetro lector de placas de 96 pocilios. Los valores de CI50 se calcularon mediante el ajuste de curva a la respuesta de A595 a diversas concentraciones del agente de ensayo; 143 típicamente, se emplearon siete concentraciones separadas semilogarítmicamente, con pocilios triplicados a cada concentración. Para el análisis de las placas de la biblioteca de los compuestos, se emplearon una o dos concentraciones (un pocilio por concentración), y se calculó el % de inhibición mediante la siguiente fórmula: % de inhibición = (control - ensayo) ÷ (control - inanición) donde control = A595 cuando VEGF está presente sin agente de ensayo ensayo = A595 cuando VEGF está presente con agente de ensayo inanición = A595 cuando VEGF y el agente de ensayo están ambos ausentes. Ensayo de PK en ratones Se analizó la farmacocinética (por ejemplo, absorción y eliminación) de fármacos en ratones usando el siguiente experimento. Los compuestos de ensayo se formularon en forma de una solución o suspensión en un vehículo 30:70 (PEG 400: H20 acidificada) o en forma de una suspensión en 0,5% de CMC. Ésta se administró oralmente (abreviadamente p. o.) e intraperitonealmente (abreviadamente i. p.) a dosis variables a dos grupos distintos (n = 4) de hembras de ratones B6. Las muestras de sangre se recogieron mediante un sangrado orbital en los instantes: 0 horas (antes de la dosis), 0,5 horas, 1 ,0 horas, 2,0 horas y 4,0 horas y 7,0 horas después de la dosis. Se obtuvo plasma de cada muestra mediante centrifugación a 2500 rpm durante 5 minutos. El compuesto de ensayo se extrajo del plasma mediante un procedimiento de precipitación de proteínas orgánicas. Para cada tiempo de sangrado se combinaron 50 µ? de plasma con 1 ,0 mi de acetonitrilo, se agitó en 144 un aparato vortex durante 2 minutos y después se centrifugó a 4000 rpm durante 15 minutos para precipitar la proteína y se extrajo el compuesto de ensayo. A continuación, el sobrenadante en acetonitrilo (el extracto que contenía el compuesto de ensayo) se vertió en tubos de ensayo nuevos y se evaporó en una placa caliente (25°C) en una corriente de gas N2. A cada tubo que contenía el extracto del compuesto de ensayo seco se añadieron 125 µ? de fase móvil (60:40, NH4H2P04 0,025 M + 2,5 ml/l de TEA:acetonitrilo). Se resuspendió el compuesto de ensayo en la fase móvil agitando en un aparato vortex y se retiró más proteína mediante centrifugación a 4000 rpm durante 5 minutos. Se vertió cada muestra en un vial de HPLC para el análisis del compuesto de ensayo en un HPLC de serie Hewlett Packard 1100 con detección UV. De cada muestra se inyectaron 95 µ? en una columna de 150 x 3,2 mm, C-18 de fase inversa Phenomenex-Prodigy y se eluyó con 45 - 50% de gradiente de acetonitrilo llevándolo a cabo durante 10 minutos. Las concentraciones en plasma del compuesto de ensayo (pg/ml) se determinaron mediante comparación con una curva patrón (área del pico frente concentración g/ml) usando concentraciones conocidas del compuesto de ensayo extraído de muestras de plasma de la manera descrita anteriormente. Junto con los patrones y no conocidos, tres grupos (n = 4) de controles de calidad (0,25 pg/ml, 1 ,5 pg/ml, y 7,5 pg/ml) se llevaron a cabo para asegurar la consistencia del análisis. La curva patrón tenía un valor de R2 > 0,99 y los controles de calidad estaban todos entre 10% de sus valores esperados. Las muestras de ensayo cuantificadas se representaron para la exposición visual usando un software de Kalidagraph y se determinaron sus parámetros farmacocinéticos usando el software WIN NONLIN. El ejemplo 1(a) proporcionó 145 los siguientes resultados: 0,69 (pK de ratones, AUC, ip, g-h/ml); 0,33 (pK de ratones, AUC, po, pg-h/ml). Ensayo de fosforilación de KDR ÍVEGFR2) en células PAE - KDR Este ensayo determina la capacidad de un compuesto de ensayo de inhibir la autofosforilación de KDR en células endoteliales (PAE)-KDR de aorta porcina. Las células de PAE que sobreexpresan KDR de tipo humano se usaron en este ensayo. Las células se cultivaron en medio F12 de Ham suplementado con 10% de suero fetal bovino (abreviadamente en inglés FBS) y 400 pg /mi de G418. Se sembraron treinta mil células en cada pocilio de una placa de 96 pocilios en 75 µ? de medio de crecimiento y se permitió que se adhirieran durante 6 horas a 37°C. Después las células se expusieron al medio de inanición (medio F12 de Ham suplementado con 0,1% de FBS) durante 16 horas. Después de concluir el período de inanición, se añadieron 10 µ? de agente de ensayo en 5% de DMSO en medio de inanición a los pocilios de ensayo y se añadieron 10 µ? del vehículo (5% de DMSO en medio de inanición) a los pocilios de control. La concentración final de DMSO en cada pocilio era 0,5%. Se incubaron las placas a 37°C durante 1 hora y después las células se estimularon con 500 ng/ml de VEGF (comercialmente disponible de R & D System) en presencia de Na3VO4 2 mM durante 8 minutos. Se lavaron las células una vez con Na3VO4 1 mM en HBSS y se lisaron añadiendo 50 µ? por pocilio de tampón de lisis. Después se añadieron cien µ? de tampón de dilución a cada pocilio y el lisado celular diluido se transfirió a una placa de 96 pocilios recubierta con cabra anti-conejo (comercialmente disponible de Pierce) que se recubrió previamente con anticuerpo conejo anti humano anti-flk- C-20 (comercialmente disponible de Santa Cruz). Se incubaron las placas a 146 temperatura ambiente durante 2 horas y se lavaron siete veces con 1% de Tween 20 en PBS. Se diluyó HRP-PY20 (comercialmente disponible de Santa Cruz) y se añadió a la placa para incubación durante 30 minutos. Después las placas se lavaron otra vez y se añadió sustrato de peroxidasa de TMB (comercialmente disponible de Kirkegaard & Perry) para una incubación de 10 minutos. Cien µ? de 0,09 N de H2S04 se añadieron a cada pocilio de las placas de 96 pocilios para detener la reacción. Se valoró el estado de fosforilación mediante lectura en espectrofotómetro a 450 nm. Los valores de Cl50 se calcularon mediante ajuste a una curva usando un análisis de cuatro parámetros. Ensayo de fosforilación de PAE-PDGFRff en células PAE - PDGFRB Este ensayo determina la capacidad de un compuesto de ensayo de inhibir la autofosforilación de PDGFR ? en células endoteliales (PAE)- PDGFR de aorta porcina. Las células de PAE que sobreexpresan PDGFR ? humano se usaron en este ensayo. Las células se cultivaron en medio F12 de Ham suplementado con 10% de suero fetal bovino (abreviadamente en inglés FBS) y 400 pg /mi de G418. Se sembraron veinte mil células en cada pocilio de una placa de 96 pocilios en 50 µ? de medio de crecimiento y se permitió que se adhirieran durante 6 horas a 37°C. Después las células se expusieron al medio de inanición (medio F12 de Ham suplementado con 0,1% de FBS) durante 16 horas. Después de concluir el período de inanición, se añadieron 10 µ? de agente de ensayo en 5% de DMSO en medio de inanición a los pocilios de ensayo y se añadieron 10 µ? del vehículo (5% de DMSO en medio de inanición) a los pocilios de control. La concentración final de DMSO en cada pocilio era 0,5%. Se incubaron las placas a 37°C durante 1 hora y después las células se 147 estimularon con 1 µ?/?t?? de PDGF-BB (R & D System) en presencia de Na3V04 2 mM durante 8 minutos. Se lavaron las células una vez con Na3V04 1 mM en HBSS y se lisaron añadiendo 50 pl por pocilio de tampón de lisis. Después se añadieron cien µ? de tampón de dilución a cada pocilio y el lisado celular diluido se transfirió a una placa de 96 pocilios recubierta con cabra anti-conejo (Pierce), que se recubrió previamente con anticuerpo conejo anti humano PDGFR ? (Santa Cruz). Se incubaron las placas a temperatura ambiente durante 2 horas y se lavaron siete veces con 1% de Tween 20 en PBS. Se diluyó HPR-PY20 (Santa Cruz) y se añadió a la placa para incubación durante 30 minutos. Después las placas se lavaron otra vez y se añadió sustrato de peroxidasa de T B (Kirkegaard & Perry) para una incubación de 10 minutos. Cien µ? de 0,09 N de H2S04 se añadieron a cada pocilio de las placas de 96 pocilios para detener la reacción. Se valoró el estado de fosforilación mediante lectura en espectrofotómetro a 450 nm. Los valores de CI50 se calcularon mediante ajuste a una curva usando un análisis de cuatro parámetros. Ensayo de microsomas de hígado humano (abreviadamente en inglés HLM) Se midió el metabolismo de los compuestos en microsomas de hígado humano mediante procedimientos de ensayo analítico por LC - MS como sigue. Primero, los microsomas de hígado humano (abreviadamente en inglés HLM) se descongelaron y se diluyeron hasta 5 mg/ml con tampón fosfato potásico 100 mM frío (KP04). Cantidades adecuadas de KP04, solución regeneradora de NADPH (que contenía B-NADP, glucosa-6-fosfato, glucosa-6-fosfatodeshidrogenasa y MgCfe) y HLM se preincubaron en tubos de vidrio de 13 x 100 mm a 37°C durante 10 minutos (tres tubos por compuesto de ensayo - triplicado). El compuesto de ensayo (5 µ? final) se añadió a cada tubo para 148 iniciar la reacción y se mezcló mediante agitación suave en un aparato vortex, seguido de incubación a 37°C. A t = 0, 2 h, se retiró una muestra de 250 µ? de cada tubo de incubación a tubos separados de vidrio de 12 x 75 mm que contenían 1 mi de acetonitrilo frío con reserpina 0,05 µ?. Se centrifugaron las muestras a 4000 rpm durante 20 minutos para precipitar proteínas y sal (Beckman Allegra 6KR, S/N ALK98D06, n° 634). Se transfirió el sobrenadante a tubos de vidrio nuevos de 12 x 75 mm y se evaporaron mediante un evaporador a vacío centrífugo Speed - Vac. Se reconstituyeron las muestras en 200 pl de 0,1% de ácido fórmico/acetonitrilo (90:10) y se agitó en un aparato vortex vigorosamente para disolver. Después las muestras se transfirieron a tubos de microcentrífuga de polipropileno separados y se centrifugó a 14000 x g durante 10 minutos (Fisher Micro 14, S/N M0017580). Para cada réplica (n° 1 - 3) en cada instante (0 y 2 h) se reunió una muestra alícuota de cada compuesto de ensayo en una sola inserción de vial de HPLC (un total de 6 muestras) para análisis de LC - MS, que se describe más adelante. Las muestras de compuesto reunidas se inyectaron en el sistema de LC - MS, compuesto de un HPLC de conjunto de diodos Hewlett - Packard HP 1100 y un espectrómetro de masas Micromass Quatro II triple cuádruple que funcionaba en modo de SIR de electropulverización positiva (programado para explorar específicamente para el ión molecular de cada compuesto de ensayo). Cada pico de compuesto de ensayo se integró en cada instante. Para cada compuesto, se promedió el área del pico en cada instante (n = 3), y el valor medio de este área del pico en 2 h se dividió por el valor medio del área del pico en el instante 0 horas para obtener el porcentaje del compuesto de ensayo a las 2 h. 149 Los resultados del ensayo de los compuestos usando diversos ensayos se resumen en la tabla más adelante, donde una anotación de "% @" indica el porcentaje de inhibición a la concentración establecida, los valores "*" representan K¡ (nM) o % de inhibición a una concentración de compuesto de 1 µ? para * o 50 nM para **, salvo que se indique otra cosa. "NE" indica una inhibición no significativa o no ensayada. Tabla 1 Continuación de tabla 1 150 Continuación de tabla 1 151 Ensayo in vivo de desarrollo vascular retínal en ratas neonatales . El desarrollo del vascular retinal en ratas se produce desde el día 1 postnatal hasta el día 14 postnatal (P1 - P1 ). Este procedimiento depende de la actividad de VEGF (J. Stone y col., J. Neurosa., 15, 4738 (1995). El trabajo anterior ha demostrado que VEGF actúa también como un factor de supervivencia de los vasos de la retina durante el desarrollo vascular temprano (Alón y col., Nat. Med., 1 , 1024 (1995)). Para valorar la capacidad de compuestos específicos para inhibir la actividad de VEGF in vivo, se formularon compuestos en un vehículo adecuado, habitualmente 50% de polietilenglicol, peso molecular medio de 400 daltons, y 50% de solución de sacarosa 300 mM en agua desionizada. Típicamente, dos microlitros (2 µ?) de la solución de fármaco se inyectó en el vitreo medio del ojo de crías de ratas el día postnatal 8 ó 9. Seis días después de la inyección intravítrea se sacrificaron los animales y se diseccionaron las retinas libres del tejido ocular restante. Después las retinas aisladas se sometieron a un protocolo de tinción histoquímica que tiñe las células endoteliales específicamente (Lutty y McLeod, Arch. Ophthalmol., 110, 267 (1992)), que revelan el grado de vascularización en la muestra del tejido. Después las retinas individuales se fijan en portaobjetos y se examinan para determinar el grado de vascularización. Los compuestos eficaces inhiben el desarrollo adicional de la vasculatura retinal e inducen una regresión de todos los vasos mayores en la retina. La cantidad de regresión vascular se usó para valorar la potencia relativa de los compuestos después de administración in vivo. La regresión vascular se gradúa en una escala subjetiva de uno a tres pluses, juzgándose un plus como aproximadamente 25 por ciento o menos de la regresión detectable, juzgándose que dos pluses son aproximadamente 25 -75% de regresión y tres pluses dan retinas con casi regresión total (aproximadamente 75% o mayor). Para análisis cuantitativo adicional de regresión, las imágenes de tinción de ADPasa, las retinas fijadas se capturaron con una cámara digital adjunta a un microscopio de disección. Después las imágenes retínales se importaron en un software de análisis de imágenes (Imagen Pro PLus 4.0, Media Cibernetics, 153 Silver Spring, MD). El software se empleó para determinar el porcentaje del área de la retina que contenía vasos teñidos. Este valor para el ojo experimental se comparaba con el medido para el vehículo inyectado, ojo contralateral del mismo animal. La reducción en el área vascular observada en el ojo que recibía el compuesto comparada con el ojo inyectado con vehículo se expresó después como el "porcentaje de regresión" para esa muestra. Los porcentajes de los valores de regresión se promediaron para grupos de 5 - 8 animales. En muestras en las que la observación mediante el microscopio indicaban una regresión casi total, un valor del porcentaje de regresión de 65 -70% se medía habitualmente. Esto se debía a los depósitos de colorante en el interior de los pliegues de retina, pliegues que se inducían por el vehículo usado para inyección del fármaco. El software de análisis de imágenes interpretaba estos pliegues que contenían colorante como vasos. No se hizo ningún intento para corregir estos pliegues ya que variaban de ojo a ojo. De este modo, se observará que el porcentaje de los valores de regresión indicados resultan de una medición conservadora que exactamente clasifica los compuestos por orden, pero subestima su potencia absoluta. Ensayo in vivo de desarrollo vascular retinal en modelo de ratas neonatales de retinopatía de premadurez Un segundo modelo de neovascularización retinal dependiente de VEGF se empleó para evaluar las actividades de esta serie de compuestos. En este modelo (Penn y col., Invest. Ophthalmol. Vis. Sci.,36, 2063 (1995)), crías de ratas (n = 16) con su madre se situaron en una cámara controlada por ordenador que regula la concentración de oxígeno. Los animales se expusieron 154 durante 24 horas a una concentración de 50% de oxígeno seguido de 24 horas a una concentración de 10% de oxígeno. Este ciclo alternante de hiperoxia seguido de hipoxia se repite 7 veces después del cual se sacan los animales al aire ambiente (P14). Los compuestos se administran mediante inyección intravitreal tras sacarlos al aire ambiente y los animales se sacrificaron 6 días después (P20). Las retinas aisladas, seguidamente se aislan, se tiñen, se fijan y se analizan como se ha detallado anteriormente en el modelo de desarrollo.

La eficacia también se graduó como se describe para el modelo de desarrollo. Los compuestos ejemplares descritos anteriormente se pueden formular en composiciones farmacéuticas según los siguientes ejemplos generales.

Ejemplo 1 : Composición parenteral Para preparar una composición farmacéutica parenteral adecuada para administración mediante inyección, se disuelven en DMSO 100 mg de una sal hidrosoluble de un compuesto de fórmula I y después se mezcla con 10 mi de solución salina estéril al 0,9%. Se incorpora la mezcla en una forma de dosificación unitaria adecuada para administración mediante inyección. Ejemplo 2: Composición oral Para preparar una composición farmacéutica para distribución oral mediante inyección, se mezclan 100 mg de un compuesto de fórmula I con 750 mg de lactosa Se incorpora la mezcla en una forma de dosificación unitaria oral, tal como una cápsula dura de gelatina, que es adecuada para administración oral. Ejemplo 3: Composición infraocular Para preparar una composición farmacéutica de liberación sostenida para distribución infraocular, se suspende un compuesto de fórmula I en una 155 solución isotónica, neutra de ácido hialurónico (1 ,5% de conc.) en tampón fosfato (pH 7,4) para formar una suspensión al 1 %. Se entiende que la descripción anterior es ejemplar y de naturaleza aclaratoria, y tiene la intención de ilustrar la invención y sus realizaciones preferidas. A través de la experimentación habitual, el técnico reconocerá modificaciones y variaciones evidentes que se pueden realizar sin salirse del espíritu de la invención. De este modo, la invención tiene la intención de definirse no solamente por la memoria descriptiva anterior, sino mediante las siguientes reivindicaciones y sus equivalentes.

Claims (15)

156 Habiendo descrito la invención como antecede se declara como propiedad lo descrito en las siguientes REIVINDICACIONES Lo que se reivindica es: 1. Un compuesto, profármaco farmacéuticamente aceptable, metabolito farmacéuticamente activo, o sal farmacéuticamente aceptable, seleccionado del grupo constituido por

1 7 25 ?? ??? 160

2. Un compuesto representado por la fórmula o un profármaco farmacéuticamente aceptable, metabolito farmacéuticamente activo, o sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

3. Un procedimiento de uso de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto, profármaco farmacéuticamente aceptable, metabolito farmacéuticamente activo, o sal farmacéuticamente aceptable como se ha definido en la reivindicación 1 ó 2 para tratar degeneración macular relativa a la edad en un mamífero.

4. Un procedimiento de uso de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto, profármaco farmacéuticamente aceptable, metabolito farmacéuticamente activo, o sal farmacéuticamente aceptable como se ha definido en la reivindicación 1 ó 2 para tratar neovascularización coroidal en un mamífero. 161

5. Un procedimiento de uso de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto, profármaco farmacéuticamente aceptable, metabolito farmacéuticamente activo, o sal farmacéuticamente aceptable como se ha definido en la reivindicación 1 ó 2 para tratar retinopatía en un mamífero.

6. El procedimiento de la reivindicación 5 en el que la retinopatía comprende retinopatía diabética, vitreorretinopatía, o retinopatía de premadurez.

7. Un procedimiento de uso de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto, profármaco farmacéuticamente aceptable, metabolito farmacéuticamente activo, o sal farmacéuticamente aceptable como se ha definido en la reivindicación 1 ó 2 para tratar retinitis en un mamífero.

8. El procedimiento de la reivindicación 7 en el que la retinitis comprende retinitis por citomegalovirus.

9. Un procedimiento de uso de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto, profármaco farmacéuticamente aceptable, metabolito farmacéuticamente activo, o sal farmacéuticamente aceptable como se ha definido en la reivindicación 1 ó 2 para tratar edema macular en un mamífero.

10. Un procedimiento de uso de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto, profármaco farmacéuticamente aceptable, metabolito farmacéuticamente activo, o sal farmacéuticamente aceptable como se ha 162 definido en la reivindicación 1 ó 2 para tratar una enfermedad oftálmica en un mamífero.

1 1. Una composición farmacéutica que comprende: (a) una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto, profármaco farmacéuticamente aceptable, metabolito farmacéuticamente activo, o sal farmacéuticamente aceptable de las reivindicaciones 1 ó 2; y (b) un excipiente, diluyente o vehículo del mismo.

12. Un procedimiento de uso de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto, profármaco farmacéuticamente aceptable, metabolito farmacéuticamente activo, o sal farmacéuticamente aceptable como se ha definido en la reivindicación 1 ó 2 para tratar una afección de una enfermedad de mamífero mediada por actividad proteinquinasa.

13. Un procedimiento según la reivindicación 12, en el que la afección de enfermedad del mamífero se asocia con crecimiento tumoral, proliferación celular, o angiogénesis.

14. Un procedimiento de modulación de la actividad de un receptor de proteinquinasa, que comprende poner en contacto el receptor de quinasa con una cantidad eficaz de un compuesto, profármaco farmacéuticamente aceptable, metabolito farmacéuticamente activo, o sal farmacéuticamente aceptable como se ha definido en la reivindicación 1 ó 2. 163

15. Un procedimiento según la reivindicación 14, en el que el receptor de proteinquinasa es un receptor VEGF.