NL1029799C2 - Enantiomeer zuivere aminoheteroarylverbindingen als proteïnekinaseremmers. - Google Patents

Enantiomeer zuivere aminoheteroarylverbindingen als proteïnekinaseremmers. Download PDF

Info

Publication number
NL1029799C2
NL1029799C2 NL1029799A NL1029799A NL1029799C2 NL 1029799 C2 NL1029799 C2 NL 1029799C2 NL 1029799 A NL1029799 A NL 1029799A NL 1029799 A NL1029799 A NL 1029799A NL 1029799 C2 NL1029799 C2 NL 1029799C2
Authority
NL
Netherlands
Prior art keywords
mmol
dichloro
ethoxy
aryl
added
Prior art date
Application number
NL1029799A
Other languages
English (en)
Other versions
NL1029799A1 (nl
Inventor
Mitchell David Nambu
Mason Alan Pairish
Jingrong Jean Cui
Lei Jia
Hong Shen
Michelle Bich Tran-Dube
Pei-Pei Kung
Lee Andrew Funk
Jerry Jialun Meng
Original Assignee
Pfizer
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=35967909&utm_source=***_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=NL1029799(C2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Pfizer filed Critical Pfizer
Publication of NL1029799A1 publication Critical patent/NL1029799A1/nl
Application granted granted Critical
Publication of NL1029799C2 publication Critical patent/NL1029799C2/nl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/14—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D241/18—Oxygen or sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4418—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof having a carbocyclic group directly attached to the heterocyclic ring, e.g. cyproheptadine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A61K31/497—Non-condensed pyrazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/73—Unsubstituted amino or imino radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/76—Nitrogen atoms to which a second hetero atom is attached
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/14—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D241/20—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings

Description

5 10
ΕΝΑΝΤΙOMEER ZUIVERE AMINOHETEROARYLVERBINDINGEN ALS PROTE-iNEKINASEREMMERS
Terrein van de uitvinding 15 De uitvinding betreft in het algemeen nieuwe chemi sche verbindingen en werkwijzen. Meer in het bijzonder voorziet de onderhavige uitvinding in enantiomeer zuivere aminoheteroarylverbindingen, met name aminopyridinen en aminopyrazinen, met proteïnetyrosinekinaseactiviteit, en 20 werkwijzen voor het synthetiseren en gebruiken van dergelijke verbindingen. Voorkeursverbindingen zijn c-MET-remmers die nuttig zijn voor de behandeling van abnormale . celgroei, zoals kankers.
25 Achtergrond
Van de hepatocytgroeifactor (HGF) en (c-MET of HGFR)-receptortyrosinekinase (RTK) is in vele menselijke kankers aangetoond dat deze betrokken zijn bij de oncogenese, progressie van de tumor met een toegenomen mortaliteit van de 30 cel en invasie, alsmede bij de metastase (zie bijv. Ma, P.C., Maulik, G., Christensen, J. & Salgia, R. (2003b), Cancer Metastasis Rev, 22, 309-25; Maulik, G., Shrikhande,
A., Kijima, T., Ma, P.C., Morrison, P.T. & Salgia, R. (2002b), Cytokine Growth Factor Rev, 13, 41-59). c-MET
35 (HGFR) kan worden geactiveerd door overexpressie of mutaties in diverse menselijke kankers, waaronder kleincellige longkanker (small cell lang cancer, SCLC) (Ma, P.C., Kiji- 1029799“ 2 ma, T., Maulik, G., Fox, E.A., Sattler, M., Griffin, J.D., Johnson, B.E. & Salgia, R. (2003a). Cancer Res., 63, 6272-6281).
c-MET is een receptortyrosinekinase waarvoor wordt 5 gecodeerd door het Met-proto-oncogen en dat de biologische .effecten van de hepatocytgroeifactor (HGF) transduceèrt; deze wordt ook scatter factor (SF) genoemd; Jiang et al., Crit. Rev. Oncol. Hematol., 29: 209-248 (1999). c-Met en HGF worden in talrijke weefsels tot expressie gebracht, 10 hoewel hun expressie zich doorgaans voornamelijk beperkt tot respectievelijk cellen van epitheliale en mesenchymale oorsprong. c-MET en HGF zijn noodzakelijk voor de normale ontwikkeling van zoogdieren en men heeft aangetoond dat deze van belang zijn voor de celmigratie, celproliferatie 15 en overleving, morfogene differentiatie en organisatie van de driedimensionale buisvormige structuren (bijv. cellen in nierbuisjes, vorming van klieren, enz.). Behalve de effecten ervan op epitheelcellen is van HGF/SF ook beweerd dat het een angiogene factor is, en dat signalering door 20 c-MET in endotheelcellen vele van de cellulaire responsen kan veroorzaken die noodzakelijk zijn voor angiogenese (proliferatie, motiliteit, invasie).
Van de c-MET-receptor is aangetoond dat deze tot expressie wordt gebracht in een aantal menselijke kankers. 25 Van c-MET en het ligand ervan, HGF, is tevens aangetoond dat deze eveneens samen in verhoogde niveaus tot expressie worden gebracht in een aantal menselijke kankers (in het bijzonder in sarcomen). Omdat de receptor en het ligand doorgaans door verschillende celtypen tot expressie worden 30 gebracht, wordt de signalering door c-MET echter doorgaans gereguleerd door interacties van tumor-stroma (tumor-gastheer). Bovendien zijn in een subreeks van menselijke kankers uitbreiding van het . c-MET-gen, mutatie en herschikking waargenomen. Families met mutaties in de kiem-35 lijn die c-MET-kinase activeren zijn vatbaar voor meervoudige niertumoren, alsmede tumoren in andere weefsels. Talrijke studies hebben d§ expressie van c-MET en/of HGF/SF
1029799' 3 in verband gebracht met progressie van de ziekte bij verschillende typen kanker (waaronder die van long, colon, borst, prostaat, lever, pancreas, hersenen, nier, ovaria, maag, huid en botweefsel). Bovendien is aangetoond dat de 5 overexpressie van c-MET of HGF een correlatie kent met de slechte prognose en de gevolgen van de ziekte bij een aantal belangrijke menselijke kankers, waaronder die van long, lever, maag en borst. c-MET is tevens rechtstreeks in verband gebracht met kankers zonder succesvol behandel-10 regime, zoals pancreaskanker, glioom en hepatocellulair-carcinoom.
Voorbeelden van c-MET (HGFR)-remmers, hun synthese en gebruik kunnen worden aangetroffen in Amerikaanse octrooiaanvrage serieno. 10/786.610, met de titel "Aminoheteroa-. 15 ryl Compounds as Protein Kinase Inhibitors", ingediend op 26 februari 2004, en de overeenkomstige internationale octrooiaanvrage PCT/US2004/005495 met dezelfde titel, die ook is ingediend op 26 februari 2004, waarvan de beschrijvingen hierin zijn opgenomen door referentie in hun ge-20 heel.
Het zou wenselijk zijn om te beschikken over nieuwe c-MET (HGFR)-remmers en werkwijzen voor het gebruik van dergelijke remmers voor de behandeling van abnormale cel-groei, zoals kanker.
25
Samenvatting
In een uitvoeringsvorm voorziet de onderhavige uitvinding in een enantiomeer zuivere verbinding met de formule 1 30 R1 f ch3 Yï^sxyx'''R2 ..r 1 I 1 fV^y NH2
F
1029799* 4 waarin: Y is N of CR12/ R1 wordt gekozen uit waterstof, halogeen, Ce-i2 aryl, vijf-twaalftallige heteroaryl, C3-12 cycloalkyl, drie-5 twaalftallige heteroalicyclische groep, -0(CR6R7) „R4, -C (0) R4, -C (0) OR4, -CN, -N02, “S (O) mR4, -S02NR4R5, -C(0)NR4R5, -NR4C(0)R5, -C(=NR6)NR4Rs, Ci-8 alkyl, C2-8 alke- nyl en C2_8 alkynyl, en elke waterstof in R1 eventueel gesubstitueerd is door één of meer R3-groepen, 10 R2 is waterstof, halogeen, Ci_i2 alkyl, C2_i2 alkenyl, C2-12 alkynyl, C3-X2 cycloalkyl, C6-i2 aryl, drie-twaalf-tallige heteroalicyclische groep, vijf-twaalftallige heteroaryl, -s(O)mR4, -so2nr4r5, -s(0)2or4, -no2, -nr4r5, - (CR6R7)„OR4, -CN, -C(0)R4, -0C(0)R4, -0(CR6R7)„R4, 15 -NR4C(0)R5, - (CR6R7)„C(0)0R4, - (CR6R7) „NCR4R5, -C (=NR6) NR4R5, -NR4C (0)NR5R6, -NR4S(0)pR5 of -C(0)NR4R5, en elke waterstof in R2 eventueel gesubstitueerd is door R®, elke R3 onafhankelijk is halogeen, C1-12 alkyl, C2-12-alkenyl, C2-i2 alkynyl, C3-i2 cycloalkyl, C6-i2 aryl, drie-20 twaalf-tallige heteroalicyclische groep, vijf-twaalf tallige heteroaryl, -S(0)mR4, -S02NR4R5, -S(0)20R4, -N02, -NR4R5, - (CR6R7)nOR4, -CN, -C(0)R4, -0C(0)R4, -0 (CR6R7) nR\ ; -NR4C(0)R5, - (CR6R7)nC(0)0R4, - (CR6R7) „OR4, - (CR6R7) „C (0) NR4R5, -(CR6R7)nNCR4R5, -C(»NR6)NR4R5, -NR4C(0)NR5R6, -NR4S(0)pR5 of τ 25 -C (0) NR4R5, en elke waterstof in R3 eventueel gesubstitu eerd is door R8, en de R3-groepen aan naast elkaar gelegen atomen kunnen worden gecombineerd, zodat een C6-12 aryl, vijf-twaalftallige heteroaryl, C3_i2 cycloalkyl of drie- twaalftallige heteroalicyclische groep wordt gevormd, 30 elke R4, R5, R6 en R7 onafhankelijk is waterstof, halo geen, C1-12 alkyl, C2-12 alkenyl, C2-12 alkynyl, C3-12 cycloalkyl, C6-i2 arylf drie-twaalftallige heteroalicyclische groep, vijf-twaalftallige heteroaryl, of elke twee van R4, R5, R6 en R7 die aan hetzelfde stikstofatoom gebonden zijn, 35 tezamen met de stikstof waaraan deze gebonden zijn, worden gecombineerd, zodat een drie-twaalftallige heteroalicyclische groep of vijf-twaalftallige heteroarylgroep wordt ge- 1029799 5 vormd die eventueel 1 tot 3 bijkomende heteroatomen bevat die worden gekozen uit N, 0 en S, of elke twee van R4, R5, R6 en R7 die aan hetzelfde koolstofatoom gebonden zijn, kunnen worden gecombineerd, zodat een C3-12 cycloalkyl, C6-12 5 aryl, drie-twaalftallige heteroalicyclische groep of vijf-twaalftallige heteroarylgroep wordt gevormd, en elke waterstof in R4, R5, R6 en R7 eventueel gesubstitueerd is door R8, elke R8 is onafhankelijk halogeen, Οχ.12 alkyl, C2-i2-10 alkenyl, C2-12 alkynyl, C3_i2 cycloalkyl, C6-i2 aryl, drie-twaalftallige heteroalicyclische groep, vijf-twaalftallige heteroaryl, -NH2, -CN, -OH, -O-C1-12 alkyl, -O- (CH2) 11C3-12 cycloalkyl, -0-(CH2) nC6-i2 aryl, -O- (CH2)n (drie-twaalftallige heteroalicyclische groep) of -O- (CH2) n(vijf-twaalftallige 15 heteroaryl), en elke waterstof in R8 eventueel gesubstitueerd is door Ru, elke R9 en R10 onafhankelijk is waterstof, halogeen, C1-12 alkyl, C3-12 cycloalkyl, Cg-i2 aryl, drie-twaalftallige heteroalicyclische groep, vijf-twaalftallige heteroaryl, 20 -S (O) mR4, -S02NR4R5, -S(0)2OR4, -N02, -NR4R5, - (CR6R7)nOR4, -CN, -C(0)R4, -OC (O) R4, -NR4C(0)R5, - (CR6R7)nC (O)OR4, - (CR6R7)nNCR4R5, -NR4C (O) NR5R6, -NR4S(0)pR5 of -C(0)NR4R5, waarbij R9 of R10 kan worden gecombineerd met een ringatoom van A of een substituent van A, zodat een C3.
•9 25 12 cycloalkyl, drie-twaalftallige heteroalicyclische groep, C6-i2 aryl of vijf-twaalftallige heteroarylring wordt gevormd die gecondenseerd is aan A, en elke waterstof in R9 4 en R10 eventueel gesubstitueerd is door R3, elke Ru onafhankelijk is halogeen, C1-12 alkyl, C1-12-30 alkoxy, C3-12 cycloalkyl, C6_i2 aryl, drie-twaalftallige heteroalicyclische groep, vijf-twaalftallige heteroaryl, -0-C1-12 alkyl, -0- (CH2) nC3-i2 cycloalkyl, -O- (CH2)nC6-i2 aryl, -0-(CH2) n (drie-twaalftallige heteroalicyclische groep), -0-(CH2)n(vijf-twaalftallige heteroaryl) of -CN, en elke wa-35 terstof in R11 eventueel gesubstitueerd is door halogeen, 1029799- 6 -OH, -CN, -Ci-12 alkyl die gedeeltelijk of volledig gehalo-geneerd kan zijn, -O-.C1-12 alkyl die gedeeltelijk of volledig gehalogeneerd kan zijn, -CO, -S0 of -SO2, R12 is waterstof, halogeen, C1-12 alkyl, C2-12 alkenyl, 5 C2-12 alkynyl, C3-12 cycloalkyl, C6-12 aryl, drie-twaalf- tallige heteroalicyclische groep, vijf-twaalftallige hete-roaryl, -S{0)mR4, -SO2NRV, -S(0)2OR4, -N02, -NR4R5, - (CR6R7)n0R4, -CN, -C (0) R4, -0C (0) R4, -0 (CR6R7)nR4, -NR4C(0)R5, - (CR6R7)nC (0)0R4, - (CR6R7) nNCR4R5, -C (=NR6) NR4R5, 10 -NR4C(0)NR5R6, -NR4S(0)pR5 of -C(0)NR4R5, en elke waterstof in R12 eventueel gesubstitueerd is door R3, elke R13 onafhankelijk is halogeen, C1-12 alkyl, ¢2-12-alkenyl, C2-12 alkynyl, C3-12 cycloalkyl, C6-12 aryl, drie-twaalf-tallige heteroalicyclische groep, vijf-twaalf-15 tallige heteroaryl, -S(0)mR4, -S02NR4R5, -S(0)20R4, -NO2, -NR4R5, - (CR6R7)nOR4, -CN, -C(0)R4, -0C(0)R4, -0 (CR6R7) nR4, -NR4C (0) R5, - (CR6R7) nC (0) OR4, - (CR6R7) n0R4, - (CR6R7) nC (0) NR4R5, - (CR6R7)nNCR4R5, -C (=NR6) NR4R5, -NR4C(0)NR5R6, -NR4S(0)pR5 -C(0)NR4R5, - (CR6R7) n (drie-twaalf- 20 tallige heteroalicyclische groep), - (CR6R7) n (C3-12 cycloalkyl), - (CR6R7) „ (C6-i2 aryl), - (CR6R7)n (vijf-twaalftallige heteroaryl), - (CR6R7) nC (0) NR4R5 of - (CR6R7) nC (O) R4, waarbij de R13-groepen aan naast elkaar gelegen atomen kunnen wor- ! i
den gecombineerd, zodat een C6-12 aryl, vijf-twaalftallige I
-T 1 25 heteroaryl, C3-12 cycloalkyl of drie-twaalftallige heteroalicyclische groep wordt gevormd, en elke waterstof in R13 eventueel gesubstitueerd is door R3, elke m onafhankelijk 0, 1 of 2 is, elke n onafhankelijk 0, 1, 2, 3 of 4 is, 30 elke p onafhankelijk 1 of 2 is, of een farmaceutisch aanvaardbaar zout, hydraat of solvaat daarvan.
Volgens een bijzonder aspect van deze uitvoeringsvorm is R2 waterstof.
35 Volgens een ander bijzonder aspect van deze uitvoe ringsvorm is Y N.
1029799- 7
Volgens een ander bijzonder aspect van deze uitvoeringsvorm is Y N en is R2 waterstof.
Volgens een ander bijzonder aspect van deze uitvoeringsvorm is Y CR12.
5 Volgens een ander bijzonder aspect ' van deze uitvoe ringsvorm is Y CR12 en is R12 H.
Volgens een ander bijzonder aspect van deze uitvoeringsvorm, en in combinatie met een ander bijzonder aspect dat daarmee niet onverenigbaar is, is R1 een furan-, thio-10 feen-, pyrrool-, pyrroline-, pyrrolidine-, dioxolaan-, oxazool-, thiazool-, imidazool-, imidazoline-, imidazoli-dine-, pyrazool-, pyrazoline-, pyrazolidine-, isoxazool-, isothiazool-, oxadiazool-, triazool-, thiadiazool-, pyran-, pyridine-, piperidine-, dioxaan-, morfoline-, dithiaan-, 15 thiomorfoline-, pyridazine-, pyrimidine-, pyrazine-, pipe-razine-, triazine-, trithiaan- of fenylgroep, en is elke waterstof in R1 eventueel gesubstitueerd door één of meer R3-groepen.
Volgens een ander bijzonder aspect van deze uitvoe-20 ringsvorm, en in combinatie met een ander bijzonder aspect dat daarmee niet onverenigbaar is, is R1 een heteroaryl-groep met gecondenseerde ringen, en is elke waterstof in R1 eventueel gesubstitueerd door één of meer R3-groepen.
Volgens een ander bijzonder aspect van deze uitvoe-25 ringsvorm, en in combinatie met een ander aspect dat daarmee niet onverenigbaar is, is R1 waterstof.
Volgens een ander bijzonder aspect van deze uitvoeringsvorm, en in combinatie met een ander bijzonder aspect dat daarmee niet onverenigbaar is, is R1 een halogeen.
30 In een andere uitvoeringsvorm voorziet de onderhavige uitvinding in een enantiomeer zuivere verbinding met de formule, la 35 1029799" 8 R1
Cl CH3 Y^N
II 1 - (Υύ NH2
F
10 waarin: Y is N of CH, R1 is een furan-, thiofeen-, pyrrool-, pyrroline-, pyrrolidine-, dioxolaan-, oxazool-, thiazool-, imidazool-, imidazoline-, imidazolidine-, pyrazool-, pyrazoline-, py-15 razolidine-, isoxazool-, isothiazool-, oxadiazool-, tria-zool-, thiadiazool-, pyran-, pyridine-, piperidine-, diox-aan-, morfoline-, dithiaan-, thiomorfoline-, pyridazine-, pyrimidine-, pyrazine-, piperazine-, triazine-, trithiaan-, azetidine- of fenylgroep, en elke waterstof in R1 even-20 tueel gesubstitueerd is door R3, elke R3 onafhankelijk is halogeen, Ci_i2 alkyl, C2-12-alkenyl, C2-12 alkynyl, C3-12 cycloalkyl, C6-i2 aryl, drie-twaalftallige heteroalicyclische groep, vijf-twaalf-tallige heteroaryl, -S(0)mR4, -S02NR4R5, -S(0)2OR4, 25 -NO2, -NR4R5, - (CR6R7)nOR4, -CN, -C(0)R4, -0C(0)R4, -0(CR6R7)nR4, -NR4C(0)R5, - (CR6R7)nC(0)0R4, - (CR6R7)nOR4, - (CR6R7)nC.(0)NR4R5, -(CR6R7)nNCR4R5, -C (=NR6) NR4R5, -NR4C (0)NRsR6, -NR4S(0)pR5 of -C(0)NR4R5, en elke waterstof in R3 eventueel gesubstitueerd is door R8, en de R3-groepen 30 aan naast elkaar gelegen atomen kunnen worden gecombineerd, zodat een C6-i2 aryl, vijf-twaalftallige heteroaryl, C3-12 cycloalkyl of drie-twaalftallige heteroalicyclische groep wordt gevormd, elke R4, R5, R6 en R7 onafhankelijk is waterstof, halo-35 geen, €1-12 alkyl, C2-i2 alkenyl, C2-12 alkynyl, C3-12 cycloalkyl, C6-12 aryl, drie-twaalftallige heteroalicyclische groep, vijf-twaalftallige heteroaryl, of elke twee van R4, 1029799' 9 R5, R6 en R7 die aan hetzelfde stikstofatoom gebonden zijn, tezamen met de stikstof waaraan deze gebonden zijn, worden gecombineerd, zodat een drie-twaalftallige heteroalicycli-sche groep of vijf-twaalftallige heteroarylgroep wordt ge-5 vormd die eventueel 1 tot 3 bijkomende heteroatomen bevat . j die worden gekozen uit N, 0 en S, of elke twee van R4, R5, R6 en R7 die aan hetzelfde koolstofatoom gebonden zijn, kunnen worden gecombineerd, zodat een C3_i2 cycloalkyl, Ce-12 aryl, drie-twaalftallige heteroalicyclische groep of vijf-10 twaalftallige heteroarylgroep wordt gevormd, en elke waterstof in R4, R5, R6 en R7 eventueel gesubstitueerd is door R8, elke R® onafhankelijk is halogeen, Ci_i2 alkyl, C2-i2-alkenyl, C2-12 alkynyl, C3-12 cycloalkyl, C6-i2 aryl, drie-15 twaalftallige heteroalicyclische groep, vijf-twaalf-tallige heteroaryl, -NH2, -CN, -OH, -0-Ci_a2 alkyl, -O- (CH2)nC3-i2 cycloalkyl, -O- (CH2)nC6-i2 aryl, -0-(CH2)n-(drie-twaalftallige heteroalicyclische groep) of -0-(CH2)n-(vijf-twaalftallige heteroaryl), en elke waterstof in R8 20 eventueel gesubstitueerd is door Ru, elke R9 en R10 onafhankelijk is waterstof, halogeen, Ci-i2 alkyl, C3-12 cycloalkyl, C6-i2 aryl, drie-twaalftallige heteroalicyclische groep, vijf-twaalftallige heteroaryl, -S (O) mR4, -S02NR4R5, -S(0)20R4, -no2, -NR4R5, 25 - (CR6R7)nOR4, -CN, -C(0)R4, -0C(0)R4, -NR4C(0)R5, - (CR6R7)nC(0)0R\ - (CR6R7) nNCR4R5, -NR4C (O) NRSR6, -NR4S (0)pR5 of -C(0)NR4R5, waarbij R9 of R10 kan worden gecombineerd met, een ringatoom van A of een substituent van A, zodat een C3-12 cycloalkyl, drie-twaalftallige heteroalicyclische groep, 30 C6-12 aryl of vijf-twaalftallige heteroarylring wordt ge vormd die gecondenseerd is aan A, en elke waterstof in R9 en R10 eventueel gesubstitueerd is door R3, elke R11 onafhankelijk is halogeen, Ci-i2 alkyl, Ci-i2-alkoxy, C3_i2 cycloalkyl, C6-i2 aryl, drie-twaalftallige he-35 : teroalicyclische groep, vijf-twaalftallige heteroaryl, -0-C1-12 alkyl, -0-(CH2)nC3-i2 cycloalkyl, -O-(CH2)nC6-i2 aryl, - O- (CH2) n{drie-twaalftallige heteroalicyclische groep), -O- 1029799- 10 (CH2) η (vijf-twaalftallige heteroaryl) of -CN, en elke waterstof in R11 eventueel gesubstitueerd is door halogeen, -OH, -CN, -C1-12 alkyl die gedeeltelijk of volledig gehalo-geneerd kan zijn, -O-C1-12 alkyl die gedeeltelijk of volle-5 dig gehalogeneerd kan zijn, -CO, -SO of -SO2, elke R13 onafhankelijk is halogeen, C1-12 alkyl, C2-12-alkenyl, C2-12 alkynyl, C3-12 cycloalkyl, C6-12 aryl, drie-twaalftallige heteroalicyclische groep, vijf-twaalftallige heteroaryl, -S(0)mR4, -S02NR4R5, -S(0)20R4, 10 -NO2, -NR4R5, - (CR6R7)nOR4, -CN, -C(0)R4, -0C(0)R4, -0(CR6R7)nR4, -NR4C(0)R5, - (CR6R7)nC(0)0R4, - (CR6R7) nOR4, - (CR6R7)nC (0)NR4Rs, - (CR6R7)nNCR4R5, -C (=NR6) NR4RS, -NR4C(0)NR5R6, -NR4S(0)pR5, -C(0)NR4R5, -(CR6R7)„-(drie-twaalftallige heteroalicyclische groep), - (CR6R7) n (C3_ 15 12 cycloalkyl), - (CR6R7) n (C6-12 aryl) , - (CR6R7) n (vij f-twaalf tallige heteroaryl), - (CR6R7) nC (O) NR4R5 of - (CR6R7) nC (O) R4, waarbij de R13-groepen aan naast elkaar gelegen atomen kunnen worden gecombineerd, zodat een Ce-i2aryl, vijf-twaalftallige heteroaryl, C3_i2cycloalkyl of drie-20 twaalftallige heteroalicyclische groep wordt gevormd, en elke waterstof in R13 eventueel gesubstitueerd is door R3, elke m onafhankelijk 0, 1 of 2 is, elke n onafhankelijk 0, 1, 2, 3 of 4 is, j elke p onafhankelijk 1 of 2 is, 25 of een farmaceutisch aanvaardbaar zout, hydraat of solvaat daarvan.
Volgens een andere uitvoeringsvorm voorziet de onder- t havige uitvinding in een enantiomeer zuivere verbinding die wordt gekozen uit de groep die bestaat uit 30 (1) 5-broom-3-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]- pyrazine-2-ylamine, 5-jood-3-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-pyridine-2-ylamine, 5-broom-3-.[ (R) - (2,6-dichloor-3-fluorfenyl) ethoxy]pyri-35 dine-2-ylamine, 4-{5-amino-6-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-pyrazine-2-ylJbenzoëzuur, 1029799* 11 (5) 4-{5-amino-6-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)- ethoxy]pyrazine-2-yl}fenyl)piperazine-l-ylmethanon, 4-(4-{5-amino-6-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)-ethoxy]pyrazine-2-ylJbenzoyl)piperazine-l-carbonzure tert-5 butylester, 3-[(IR)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-[4-(pipera-zine-l-ylcarbonyl)fenyl]pyridine-2-amine, j (4-{6-amino-5-[(IR)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]- pyridine-3-yl}-N-[2-(dimethylamino)ethyl]-N-methylbenz-10 amide, (4-{6-amino-5-[(lR)-l-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)-ethoxy]pyridine-3-yl}fenyl)methanol, (10)(4-{6-amino-5-[(lR)-l-{2,6-dichloor-3-fluorfenyl)-ethoxy]pyridine-3-yl]-N-[3-(dimethylamino)propyl]-N-15 methylbenzamide, tert-butyl-4-{4-{6-amino-5-[(lR)-l_(2,6-dichloor-3-fluor-fenyl)ethoxy]pyridine-3-ylJbenzoyl)piperazine-l-carboxy-laat, 3-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-[1—(1— 20 methylpiperidine-4-yl)-lH-pyrazool-4-yl]pyridine-2-ylamine, 1-[4-(4-{6-amino-5-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)-ethoxy]pyridine-3-yl}pyrazool-l-yl)piperidine-l-yl]-2-hydroxyethanon, ^ 25 3-[.(R)-1- (2,6-dichloor-3-fluorfenyl) ethoxy] -5- (1-piperi- dine-4-yl-lH-pyrazool-4-yl)pyridine-2-ylamine, (15) 3-[(R)-l-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-(l-piperidine-4-yl-lH-pyrazool-4-yl)pyridine-2-ylamihe7 3-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-(1-piperi-30 dine-4-yl-lH-pyrazool-4-yl)pyrazine-2-ylamine, 3-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-(lH-pyra-zool-4-yl)pyrazine-2-ylamine, 1-[4-(4-{5-amino-6-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)-ethoxy]pyrazine-2-yl}pyrazool-l-yl)piperidine-l-yl]-2-35 hydroxyethanon, *1029799- 12 3-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-[1-time thyl-piperidine-4-yl)-lH-pyrazool-4-yl]pyrazine-2-ylamine, (20) 1-[4-(4-{5-amino-6-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluor- 5 fenyl)ethoxy]pyrazine-2-yl}pyrazool-l-yl)piperidine-l-yl]- ·· 2-dimethylammoethanon, (21) 3-[(R)-1-(2-chloor-3,6-difluorfenyl)ethoxy]-5-(1-piperi-dine-4-yl-lH-pyrazool-4-yl)pyridine-2-ylamine, of een farmaceutisch aanvaardbaar zout, solvaat of hydraat 10 daarvan.
In een andere uitvoeringsvorm voorziet de onderhavige uitvinding in een farmaceutisch preparaat dat één van de verbindingen van de onderhavige uitvinding en een farmaceutisch aanvaardbare drager omvat. Voorbeelden van derge-15 lijke preparaten worden hierna beschreven.
Voorkeursverbindingen van de onderhavige uitvinding omvatten die met een remmende activiteit op c-MET zoals gedefinieerd door één of meer van de IC50, Ki of het per- ^ centage remming (%). Een deskundige kan dadelijk vaststel-20 len of een verbinding een dergelijke activiteit bezit door de juiste assay uit te voeren, en beschrijvingen van dergelijke assays worden hierin gegeven in het gedeelte met de voorbeelden. In een uitvoeringsvorm hebben bijzondere voorkeursverbindingen een Ki-waarde voor c-MET van minder 25 dan 5 μΜ, of minder dan 2 μΜ, of minder dan 1 μΜ, of minder dan 500 nM, of minder dan 200 nM, of minder dan 100 nM. In een andere uitvoeringsvorm hebben bijzondere voor- ( keursverbindingen een remmende activiteit op c-MET van 1 . μΜ, of van ten minste 10 %, of van ten minste 20 %, of van 30 ten minste 30 %, of van ten minste 40 %, of van ten minste 50 %, of van ten minste 60 %, of van ten minste 70 %, of van ten minste 80 %, of van ten minste 90 %. Werkwijzen voor het meten van de activiteit van c-MET/HGFR worden hierin beschreven in de voorbeelden.
35 In een andere uitvoeringsvorm voorziet de onderhavige uitvinding in een werkwijze voor het behandelen van abnormale celgroei bij een zoogdier, met inbegrip van een men- 1029799" 13 selijke persoon, waarbij de werkwijze het toedienen aan het zoogdier van één van de farmaceutische preparaten van de onderhavige uitvinding omvat.
In een specifieke uitvoeringsvorm van één van de in-5 ventieve werkwijzen die hierin worden beschreven, is de abnormale celgroei kanker, waaronder, maar niet beperkt tot, longkanker, botkanker, pancreaskanker, huidkanker, kanker van hoofd of hals, cutaan of intraoculair melanoom, baarmoederkanker, ovariumkanker, rectale kanker, kanker 10 van de anaalstreek, maagkanker, colonkanker, borstkanker, baarmoederkanker, carcinoom van de eileiders, carcinoom van het endometrium, carcinoom van de baarmoederhals, carcinoom van de vagina, carcinoom van de vulva, ziekte van Hodgkin, kanker van de slokdarm, kanker van de dunne darm, 15 kanker van het endocriene systeem, kanker van de schildklier, kanker van de bijschildklier, kanker van de bijnier, sarcoom van zacht weefsel, kanker van de urethra, kanker van de penis, prostaatkanker, chronische of acute leukemie, lymfocytische lymfomen, blaaskanker/ kanker van 20 nier of ureter, niercelcarcinoom, carcinoom van het nier-bekken, neoplasmen van het centrale zenuwstelsel (CZS), primair CZS-lymfoom, tumoren van het ruggenmerg, hersen-stamglioom, adenoom van de hypofyse, of een combinatie van één of meer van de voorgaande kankers. In een andere uit-25 voeringsvorm van de werkwijze is de abnormale celgroei een goedaardige proliferatieve ziekte, waaronder, maar niet beperkt tot, psoriasis, goedaardige hypertrofie van de ( prostaat of restenose.
In een andere uitvoeringsvorm voorziet de onderhavige i 30 uitvinding in een werkwijze voor het behandelen van een door HGFR veroorzaakte stoornis bij een zoogdier, met inbegrip van een menselijke persoon, welke werkwijze het toedienen aan het zoogdier van één van de farmaceutische preparaten van de onderhavige uitvinding omvat.
35 1029799' 14
In andere specifieke uitvoeringsvormen van één van de hierin beschreven inventieve werkwijzen omvat de werkwijze bovendien het toedienen aan het zoogdier van een hoeveelheid van één of meer stoffen die worden gekozen uit anti-5 tumormiddelen, anti-angiogenetische middëlen, remmers van de signaaltransductie en antiproliferatieve middelen, welke hoeveelheden tezamen effectief zijn in het behandelen van de abnormale celgroei. Dergelijke stoffen omvatten die welke worden beschreven in PCT publicatie no. WO 00/38715, 10 WO 00/38716, WO 00/38717, WO 00/38718, WO 00/38719, WO 00/38730, WO 00/38665, WO 00/37107 en WO 00/38786, waarvan de beschrijvingen hierin zijn opgenomen door referentie in . hun geheel.
Voorbeelden van anti-tumormiddelen omvatten mitose-15 remmers, bijvoorbeeld derivaten van Vinca-alkaloïden, zoals vinblastine, vinorelbine, vindescine en vincristine; colchinen, zoals allochochine, halichondrine, N-benzoyl-trimethylmethylether-colchicinezuur, dolastatine 10, maystansine, rhizoxine, taxanen zoals taxol (paclitaxel), 20 docetaxel (Taxotere), 2'-N-13-(dimethyl-amino)propyl]- glutamaat (taxolderivaat), thiocolchicine, trityl- cysteïne, teniposide, methotrexaat, azathioprine, fluoru-racil, cytocinearabinoside, 21,2'-difluordesoxycytidine (gemcitabine), adriamycine en mitamycine. Alkyleringsmid-25 delen, zijn bijvoorbeeld cis-platine, carboplatine, oxi-platine, iproplatine, ethylester van N-acetyl-DL-sarcosyl-L-leucine (Asaley of Asalex), 1,4-cyclohexadieen-l,4- ( dicarbaminezure 2,5-bis(1-azaridinyl)-3,6-dioxodiethyl-ester (diaziquone), 1,4-bis(methaansulfonyloxy)butaan (bi- 30 sulfan of leucosulfan), chloorzotocine, clomeson, cyano-morfolinodoxorubicine, cyclodison, dianhydroglactitol, fluordopan, hepsulfam, mitomycine C, hycantheonemitomycine C, mitozolamide, 1-(2-chloorethyl)-4-(3-chloorpropyl)-piperazinedihydrochloride, piperazinedion, pipobroman, 35 porfiromycine, spirohydantoïnemosterd, teroxiron, tetrap-latine, thiotepa, triethyleenmelamine, uracil-stikstof-mosterd, bis(3-mesyloxypropyl)aminehydrochloride, mitomy- 1029799* 15 cine, nitrosoureumverbindingen, zoals cyclohexylchloor-ethylnitrosoureum, methylcyclohexylchloorethylnitrosoure-um, 1-(2-chloorethyl)-3-(2,6-dioxo-3-piperidyl)-1-nitro-soureum, bis(2-chloorethyl)nitrosoureum, procarbazine, da-5 carbazine, van stikstofmosterd afgeleide verbindingen, zoals mechloorethamine, cyclofosfamide, ifosamide, melfalan, chloorambucil, estramustine-natriumfosfaat, streptozoline en temozolamide; anti-metabolieten van DNA, zoals 5-fluoruracil, cytosinearabinoside, hydroxyureum, 2—[(3— 10 hydroxy-2-pyridinyl)methyleen]hydrazinecarbothioamide, desoxyfluoruridine, 5-hydroxy-2-formylpyridinethiosemicar-bazon, alfa-2'-desoxy-6-thioguanosine, afidicolineglyci-naat, 5-azadesoxycytidine, bèta-thioguaninedesoxyriboside, cyclocytidine, guanazool, inosineglycodialdehyd, macbecine 15 II, pyrazoolimidazool, cladribine, pentostatine, thiogua-nine, mercaptopurine, bleomycine, 2-chloordesoxyadenosine; remmers van de thyraidylaatsynthase, zoals raltitrexed en pemetrexed- dinatrium, clofarabine, floxuridine en fludar-abine; anti-metabolieten van DNA/RNA, bijvoorbeeld L-20 alanosine, 5-azacytidine, acivicine, aminopterine en derivaten daarvan, zoals N-[2-chloor-5-[[(2,4-diamino-5-methyl-6-chinazolinyl)methyl]amino]benzoyl]-L-asparagine-zuur, N-[4-[[(2,4-diamino-5-ethyl-6-chinazolinyl)methyl]-amino]benzoyl]-L-asparaginezuur, N-[2-chloor-4-[[(2,4-dia-25 minopteridinyl)methyl]amino]benzoyl]-L-asparaginezuur, oplosbaar Baker's antifol, dichloorallyllawson, brequinar, ftoraf, dihydro-5-azacytidine, methotrexaat, N-(fosfono- ( acetyl)-L-asparaginezure tetranatriumzout, pyrazofuran, trimetrexaat, plicamycine, actinomycine D, cryptofycine, 30 en analoga zoals cryptofycine-52 of, bijvoorbeeld, een van de voorkeurs-anti-metabolieten die worden beschreven in Europese octrooiaanvrage no. 239362, zoals N—(5—[N—(3,4— dihydro-2-methyl-4-oxochinazoline-6-ylmethyl)-N-methyl-amino]-2-thenoyl)-L-glutaminezuur; remmers van de groei-35 factor; remmers van de celcyclus; intercalerende antibiotica, bijvoorbeeld adriamycine en bleomycine; eiwitten, bijvoorbeeld interferon, en anti-hormonen, bijvoorbeeld 1029799- 16 anti-estrogenen zoals Nolvadex™ (tamoxifen) of, bijvoorbeeld, anti-androgenen zoals Casodex™ (4'-cyano-3-(4-fluorfenylsulfonyl)-2-hydroxy-2-methyl-3'-(trifluorme-thyl)propionanilide). Een dergelijke gezamenlijke behande-5 ling kan worden gerealiseerd bij wijze vaih de gelijktijdige, opeenvolgende of aparte dosering van de afzonderlijke bestanddelen van de behandeling.
Anti-angiogenetische middelen omvatten MMP-2 (matrix-metalloproteïnase 2) remmers, MMP-9 (matrix-metallopro-10 teïnase 9) remmers en COX-II (cyclooxygenase II)-remmers. Voorbeelden van nuttige COX-II-remmers omvatten CELÈBREX™ (alecoxib), valdecoxib en rofecoxib. Voorbeelden van nuttige matrixmetalloproteïnaseremmers worden beschreven in WO 96/33172 (gepubliceerd op 24 oktober 1996), WO 96/27583 15 (gepubliceerd op 7 maart 1996), Europese octrooiaanvrage no. 97304971.1 (ingediend op 8 juli 1997), Europese octrooiaanvrage no. 99308617.2 (ingediend op 29 oktober 1999), WO 98/07697 (gepubliceerd op 26 februaru 1998), WO 98/03516 (gepubliceerd op 29 januari 1998), WO 98/34918 20 (gepubliceerd op 13. augustus 1998), WO 98/34915 (gepubliceerd op 13 augustus 1998), WO 98/33768 (gepubliceerd op 6 augustus 1998), WO 98/30566 (gepubliceerd op 16 juli 1998), Europese octrooipublicatie 606.046 (gepubliceerd op 13 juli 1994), Europese octrooipublicatie 931.788 (gepu-25 bliceerd op 28 juli 1999), WO 90/05719 (gepubliceerd op 31 mei 1990) , WO 99/52910 (gepubliceerd op 21 oktober 1999), WO 99/52889 (gepubliceerd op 21 oktober 1999), WO 99/29667 (gepubliceerd op 17 juni 1999), PCT Internationale octrooiaanvrage no. PCT/IB98/01113 (ingediend op 21 juli 30 1998), Europese octrooiaanvrage no. 99302232.1 (ingediend op 25 maart 1999), Britse octrooiaanvrage no. 9912961.1 (ingediend op 3 juli 1999), Amerikaanse voorlopige octrooiaanvrage no. 60/148.464 (ingediend op 12 augustus .1999), Amerikaans octrooischrift 5.863.949 (gepubliceerd 35 op 26 januari 1999), Amerikaans octrooischrift 5.861.510 (gepubliceerd op 19 januari 1999) en Europese octrooipublicatie 780.386 (gepubliceerd op 25 juni 1997), die hier- 1029799“ 17 in alle worden opgenomen door referentie in hun geheel. Voorkeursremmers van MMP-2 en MMP-9 zijn die welke geen of weinig remmende activiteit op MMP-1 bezitten. Liever zijn het die welke MMP-2 en/of MMP-9 selectief remmen ten op-5 zichte van andere matrixmetalloproteïnasen (dus MMP-1, MMP-3, MMP-4, MMP-5, MMP-6, MMP-7, MMP-8, MMP-10, MMP-11, MMP-12 en MMP-13).
Voorbeelden van MMP-remmers omvatten AG-3340, RO 32-3555, RS 13-0830, en de volgende verbindingen: 10 (1) 3-[[4-(4-fluorfenoxy)benzeensulfonyl]-(1-hydroxy- carbamoylcyclopentyl)amino]propionzuur, (2) . 3-exo-3-[4-(4 — fluorfenoxy)benzeensulfonylamino]-8-oxa-bicyclo[3,2,1]octaan-3-carbonzuurhydroxyamide, (3) (2R,3R)-1-[4-(2-chloor-4-fluorbenzyloxy)benzeen-15 sulfonyl]-3-hydroxy-3-methylpiperidine-2-carbonzuur- hydroxyamide, (4) 4-[4-(4-fluorfenoxy)benzeensulfonylamino]tetra-hydropyran-4-carbonzuurhydroxyamide, (5) 3-[[4-(4-fluorfenoxy)benzeensulfonyl]-(1-hydroxy-20 carbamoylcyclobutyl)amino]propionzuur, (6) 4-[4-(4-chloorfenoxy)benzeensulfonylamino]tetrahydro-pyran-4-carbonzuurhydroxyamide, (7) 3-[4-(4-chloorfenoxy)benzeensulfonylamino]tetrahydro-pyran-3-carbonzuurhydroxyamide, 25 (8) (2R,3R)-1-[4-(4-fluor-2-methylbenzyloxy)benzeensulfo nyl] -3-hydroxy-3-methylpiperidine-2-carbonzuurhydroxy-amide, 4 (9) 3-[[4-(4-fluorfenoxy)benzeensulfonyl]-(1-hydroxycar- bamoyl-l-methylethyl)amino]propionzuur, 30 (10) 3-[[4-(4-fluorfenoxy)benzeensulfonyl]-(4-hydroxycar- bamoyltetrahydropyran-4-yl)amino]propionzuur, (11) 3-exo-3-[4-(4-chloorfenoxy)benzeensulfonylamino]-8-oxabicyclo[3.2.1]octaan-3-carbonzuurhydroxyamide, (12) 3-endo-3-[4-(4-fluorfenoxy)benzeensulfonylamino]-8-35 oxabicyclo[3.2.1]octaan-3-carbonzuurhydroxyamide, (13) 3-[4-(4-fluorfenoxy)benzeensulfonylamino]tetrahydro-furan-3-carbonzuurhydroxyamide, 1029799- 18 en farmaceutisch aanvaardbare zouten, solvaten en hydraten daarvan.
Voorbeelden van remmers van de signaaltransductie omvatten middelen die EG FR (epidermale groeifactorreceptor)-5 responsen kunnen remmen, zoals EGFR-antilichamen, EGF-! antilichamen en middelen die EGFR-remmers zijn; VEGF (vas culaire endotheliale groeifactor)remmers en remmers van de erbB2-receptor, zoals organische moleculen of antilichamen die zich binden aan de erbB2-receptor, bijvoorbeeld HER-i 10 CEPTIN™ (Genentech, Ine. uit South San Francisco, Califor- i ‘ nië, VS).
EGFR-remmers worden bijvoorbeeld beschreven in WO 95/19970 (gepubliceerd op 27 juli 1995), WO 98/14451 (ge-publiveerd op 9 april 1998), WO 98/02434 (gepubliceerd op 15 22 januari 1998) en Amerikaans octrooischrift 5.747.498 (gepubliceerd op 5 mei 1998) . Middelen die EGFR remmen, omvatten, maar zijn niet beperkt tot, de monoklonale antilichamen C225 en anti-EGFR 22Mab (ImClone Systems Incorpo-rated uit New York, New York, VS), de verbindingen ZD-1839 20 (AstraZeneca), BIBX-1382 (Boehringer Ingelheim), MDX-447 (Medarex Ine. uit Annandale, New Jersey, VS) en OLX-103 (Merck & Co. uit Whitehouse Station, New Jersey, VS), VRCTC-310 (Ventech Research) en EGF-fusietoxine (Seragen Ine, uit Hopkinton, Massachusetts, VS).
25 VEGF-remmers, bijvoorbeeld SU-5416 en SU-6668 (Sugen
Ine. uit South San Francisco, Californië, VS), kunnen ook worden gecombineerd of tezamen met het preparaat worden toegediend. VEGF-remmers worden bijvoorbeeld beschreven in WO 99/24440 (gepubliceerd op 20 mei 1999), PCT Internatio-30 nale octrooiaanvrage PCT/IB99/00797 (ingediend op 3 mei .1999), WO 95/21613 (gepubliceerd op 17 augustus 1995), WO 99/61422 (gepubliceerd op 2 december 1999), Amerikaans oc-trooischrift 5.834.504 (gepubliceerd op 10 november 1998), WO 98/50356 (gepubliceerd op 12 november 1998), Amerikaans 35 octrooischrift 5.883.113 (gepubliceerd op 16 maart 1999), Amerikaans octrooischrift 5.886.020 (gepubliceerd op 23 maart 1999), Amerikaans octrooischrift 5.792.783 (gepubli- 1029799- 19 ceerd op 11 augustus 1998), WO 99/10349 (gepubliceerd op 4 maart 1999), WO 97/32856 (gepubliceerd op 12 september 1997), WO 97/22596 (gepubliceerd op 26 juni 1997), WO 98/54093 (gepubliceerd op 3 december 1998), WO 98/02438 5 (gepubliceerd op 22 januari 1998), WO 99/16755 (gepubliceerd op 8 april 1999) en WO 98/02437 (gepubliceerd op 22 januari 1998), die hierin alle worden opgenomen door referentie in hun geheel. Andere voorbeelden van enkele specifieke VEGF-remmers zijn IM862 (Cytran Ine. uit Kirkland, 10 Washington, VS), anti-VEGF monoklonaal antilichaam bevaci-zumab (Genentech, Ine. uit South San Francisco, Califor-nië, VS) en angiozym, een synthetisch ribozym van Ribozyme (Boulder, Colorado, VS) en Chiron (Emeryville, Californië, VS) .
15 Remmers van de erbB2-receptor, zoals GW-282974 (Glaxo
Wellcome plc) en de monoklonale antilichamen AR-209 (Aronex Pharmaceuticals Ine. uit The Woodlands, Texas, VS) en 2B-1 (Chiron) kunnen in combinatie met het preparaat worden toegediend. Dergelijke erbB2-remmers omvatten die 20 welke worden beschreven in WO 98/02434 (gepubliceerd op 22 januari 1998), WO 99/35146 (gepubliceerd op 15 juli 1999), WO 99/35132 (gepubliceerd op 15 juli 1999), WO 98/02437 (gepubliceerd op 22 januari 1998), WO 97/13760 (gepubliceerd op .17 april .1997), WO 95/19970 (gepubliceerd op 27 25 juli 1995), Amerikaans octrooischrift 5,587.458 (gepubliceerd op 24 december 1996) en Amerikaans octrooischrift 5.877.305 (gepubliceerd op 2 maart 1999), waarvan elk hierin is opgenomen door referentie in zijn geheel. Remmers van de erbB2-receptor die nuttig zijn in de onderha-30 vige uitvinding, worden eveneens beschreven in Amerikaanse voorlopige octrooiaanvrage no. 60/117.341, ingediend op 27 januari 1999, en in Amerikaanse voorlopige octrooiaanvrage no. 60/117.346, ingediend op 27 januari 1999, die hierin beide worden opgenomen door referentie in hun geheel.
35 Andere proliferatieve middelen die kunnen worden ge bruikt, omvatten remmers van het enzym farnesylproteïne-transferase en remmers van het receptortyrosinekinase PDG- 1029799- ί 20
Fr, met inbegrip van de verbinding die worden besproken en waarop aanspraak wordt gemaakt in de volgende Amerikaanse octrooiaanvragen: 09/221946 (ingediend op 28 december 1998); 09/454058 (ingediend op 2 december 1999); 09/501163 5 (ingediend op 9 februari 2000); 09/539930 (ingediend op 31 maart 2000); 09/202796 (ingediend op 22 mei 1997); 09/384339 (ingediend op 26 augustus 1999) en 09/383755 (ingediend op 26 augustus 1999), en de verbindingen die worden beschreven en waarop aanspraak wordt gemaakt in de 10 volgende Amerikaanse voorlopige octrooiaanvragen: 60/168207 (ingediend op 30 november 1999); 60/170119 (ingediend op 10 december 1999); 60/177718 (ingediend op 21 januari 2000); 60/168217 (ingediend op 30 november 1999) en 60/200834 (ingediend op 1 mei 2000) . Elk van de voor-15 gaande octrooiaanvragen en voorlopige octrooiaanvragen is hierin opgenomen door verwijzing in haar geheel.
De preparaten van de onderhavige uitvinding kunnen ook worden gebruikt met andere middelen die nuttig zijn bij het behandelen van abnormale celgroei of kanker, waar-20 onder, maar niet beperkt tot, middelen die in staat zijn tot het verhogen van de immuunresponsen tegen tumoren, zoals CTLA4 (cytotoxisch lymfocytantigeen 4)antilichamen, en andere middelen die CTLA4 kunnen blokkeren, en anti-proliferatieve middelen zoals andere farnesylproteïne-25 transferaseremmers. Specifieke CTLA4-antilichamen die in de onderhavige uitvinding kunnen worden gebruikt, omvatten die welke worden beschreven in Amerikaanse voorlopige oc- < trooiaanvrage 60/113.647 (ingediend op 23 december 1998), die hierin is opgenomen door referentie in haar geheel. ‘ 30
Definities
Tenzij anderszins vermeld hebben de volgende uitdrukkingen die worden gebruikt in de beschrijving en de conclusies de betekenissen die hierna worden gegeven. De in 35 dit gedeelte gedefinieerde variabelen, zoals R, X, n en dergelijke, zijn slechts voor referentie in dit gedeelte, en hebben niet dezelfde betekenis aangezien deze kunnen 1029799- 21 worden gebruikt buiten dit gedeelte met de definities. Bovendien kunnen vele van de hierin gedefinieerde groepen eventueel zijn gesubstitueerd. De opsomming in dit gedeelte met de definities van typische substituenten dient tot 5 voorbeeld en is niet bedoeld als beperking van de elders in deze beschrijving en conclusies gedefinieerde substituenten.
"Alkyl" betekent een verzadigde alifatische koolwa-terstofgroep, waaronder groepen met rechte en vertakte ke-10 ten van 1 tot 20 koolstofatomen, bij voorkeur van 1 tot 12 koolstofatomen, en liever van 1 tot 8 koolstofatomen, of 1 tot 6 koolstofatomen, 1 tot 4 koolstofatomen. "Lagere alkyl" heeft specifiek betrekking op een alkylgroep met 1 tot 4 koolstofatomen. Voorbeelden van alkylgroepen omvat-15 ten methyl, ethyl, propyl, 2-propyl, n-butyl, iso-butyl, tert-butyl, pentyl en dergelijke. Alkyl kan zowel gesubstitueerd als ongesubstitueerd zijn. Typische substituent-groepen omvatten cycloalkyl, aryl, heteroaryl, heteroali-cyclische groep, hydroxy, alkoxy, aryloxy, mercapto, 20 alkylthio, arylthio, cyano, halogeen, carbonyl,. thiocarbo-nyl, O-carbamyl, N-carbamyl, O-thiocarbamyl, N-thiocarbamyl, C-amido, N-amido, C-carboxy, O-carboxy, ni-tro, silyl, amino en -NRxRy, waarin R* en Ry onafhankelijk worden gekozen uit de groep die bestaat uit waterstof, 25 alkyl, cycloalkyl, aryl, carbonyl, acetyl, sulfonyl, trif-luormethaansulfonyl en, gecombineerd, een vijf- of zestal-lige heteroalicyclische ring.
"Cycloalkyl" betekent een drie- tot achttallige mono-cyclische ring die geheel uit koolstof bestaat, of een ge-30 condenseerde bicyclische ring die bestaat uit een vijftallige ring die geheel uit koolstof bestaat en een zestalli-ge ring die geheel uit koolstof bestaat, of bestaat uit een zestallige ring die geheel uit koolstof be-staat/zestallige ring die geheel uit koolstof bestaat, of 35 een multicyclische gecondenseerde ring (een "gecondenseerd" ringsysteem betekent dat elke ring in het systeem een naast elkaar gelegen paar van koolstofatomen deelt met 1029799- 22 elke andere ring in het systeem) , waarbij één of meer van de ringen één of meer dubbele bindingen kunnen bevatten, maar geen van de ringen een volledig geconjugeerd pi-elektronensysteem heeft. Voorbeelden, zonder beperking, 5 van cycloalkylgroepen zijn cyclopropaan, cyclobutaan, cy-clopentaan, cyclopenteen, cyclohexaan, cyclohexadieen, adamantaan, cycloheptaan, cycloheptatrieen en dergelijke. Een cycloalkylgroep kan zowel gesubstitueerd als ongesubstitueerd zijn. Typische substituentgroepen omvatten 10 alkyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyclische groep, hy-droxy, alkoxy, aryloxy, mercapto, alkylthio, arylthiö, cy-ano, halogeen, carbonyl, thiocarbonyl, C-carboxy, 0-carboxy, O-carbamyl, N-carbamyl, C-amido, N-amido, nitro, amino en -NRxRy, waarin R* en Ry als hierboven gedetineerd 15 zijn. Illustratieve voorbeelden van cycloalkyl zijn afkomstig uit, maar niet beperkt tot, de volgende: O.,O:O. O.ib
oo. o>o. O O.CO
1029799? 23 "Alkenyl" betekent een alkylgroep als hierin gedefinieerd, die bestaat uit ten minste twee koolstofatomen en ten minste een dubbele koolstof-koolstofbinding. Typische voorbeelden omvatten, maar zijn niet beperkt tot, ethenyl, 5 1-propenyl, 2-propenyl, 1-, 2- of 3-butenyl, en dergelijke.
"Alkynyl" betekent een alkylgroep als hierin gedefinieerd, die bestaat uit ten minste twee koolstofatomen en ten minste een drievoudige koolstof-koolstofbinding. Typi-10 sche voorbeelden omvatten, maar zijn niet beperkt tot, ethynyl, 1-propynyl, 2-propynyl, 1-, 2-, of 3-butynyl, en dergelijke.
"Aryl" betekent monocyclische of polycyclische groepen met gecondenseerde ringen die geheel uit koolstof be-15 staan van .6 tot 12 koolstofatomen en een volledig geconjugeerd pi-elektronensysteem. Voorbeelden, zonder beperking, van arylgroepen zijn fenyl, naftalenyl en antracenyl. De arylgroep kan zowel gesubstitueerd als ongesubstitueerd zijn. Typische substituenten omvatten halogeen, trihalo-20 geenmethyl, alkyl, hydroxy, alkoxy, aryloxy, mercapto, alkylthio, arylthio, cyano, nitro, carbonyl, thiocarbonyl, C-carboxy, O-carboxy, O-carbamyl, N-carbamyl, O-thiocarbamyl, N-thiocarbamyl, C-amido, N-amido, sulfinyl, sulfonyl, amino en -NRxRy, waarin Rx en Ry als hierboven 25 gedefinieerd zijn.
"Heteroaryl" betekent een monocyclische groep of een groep met gecondenseerde ringen van 5 tot 12 ringatomen t die een, twee, drie of vier ringheteroatomen bevatten die worden gekozen uit N, O en S, waarbij de resterende ringa-30 tomen C zijn, en, bovendien, een volledig geconjugeerd pi-elektronensysteem hebben. Voorbeelden, zonder beperking, van ongesubstitueerde heteroarylgroepen zijn pyrrool, fu-ran, thiofeen, imidazool, oxazool, thiazool, pyrazool, py-ridine, pyrimidine, chinoline, isochinoline, purine, 35 tetrazool, triazine en carbazool. De heteroarylgroep kan zowel gesubstitueerd als ongesubstitueerd zijn. Typische substituenten omvatten alkyl, cycloalkyl, halogeen, triha- 1029799- 24 logeenmethyl, hydroxy, alkoxy, aryloxy, mercapto, alkyl-thio, arylthio, cyano, nitro, carbonyl, thiocarbonyl, sul-fonamido, C-carboxy, O-carboxy, sulfnyl, sulfonyl, 0-carbamyl, N-carbamyl, 0-thiocarbamyl, N-thiocarbamyl, C-5 amido, N-amido, amino en -NR*Ry, waarin Rx'en Ry -als hierboven gedefineerd zijn.
Een farmaceutisch aanvaardbare heteroaryl is er een die voldoende stabiel is om aan een verbinding van de onderhavige uitvinding te worden gebonden, in een farmaceu-10 tisch preparaat te worden geformuleerd en vervolgens aan een patiënt die daaraan behoefte heeft te worden toegediend.
i 1029799- 25.
Voorbeelden van typische monocyclische heteroarylgroepen omvatten, maar zijn niet beperkt tot:
5 Η Η H
N O .S. .N.
Ö O ö {J i-ï pynrool iuran .thiofeen pyrazool imidazool (pyrrolyl) (furanyl) (thiofenyl), (pyrazolyl) (imidazoiyl) 10 Ö : ,Ö - Ö .0 . 1} t isoxazool oxazool isothiazool thiazolyl 1,2,3-triazool (isoxazolyl) (oxazolyl) (isothiazolyl) (thiazolyTj (1,2,3-triazolyl) « Λ <Y i°j Ciï N-N '—N N—' 1,3,4-triazool 1-oxa-2,3-diazool 1-oxa-2,4-diazool 1-oxa-2,5-diazool (1,3,4-triazolyl) (1-oxa-2,3-diazolyl) (1-oxa-2,4-diazolyl) (1-oxa-2,5-diazolyl) 20 VV ö Ö Ö N—N ^—N N—' '— 1-oxa-3,4-diazool 1-thia-2,3-diazool 1-thia-2,4-diazool 1-thia-2,5-diazoo! (1-oxa-3,4-diazolyl) (1-thia-2,3-diazotyl)! (1-thia-2,4-diazolyl) (1-thia-2,5-diazolyl)'
I .25 Λ Λ) Cl. A
N-N N-*N
1-thia-3,4-diazool tetrazool · pyridine pyridazine pyrimidine (1-thia-3,4-diazolyl (tetrazolyl) (pyridinyl) (pyridazinyl) (pyrimidinyl)
» Q
pyrazine (pyrazinyl) 3-5
Voorbeelden van geschikte gecondenseerde heteroarylgroepen omvatten, maar zijn niet beperkt tot: *029799, 26
00 CO CO GO CO
H ü · u benzofuran benzothiofeen ... . ..... ...
(benzofuranyl) t (ben.othiofen^ rr\ (ΡΐΛ 03 l33 O n^n benzotriazool pyrrolo[2,3-b]pyridine pyrrolo[2,3-c]pyridine pyrrolo[3,2-c]pyridine.. (benzotriazolyl) (pyrrolo[2,3-b)pyridinyl) (py rrol o[2,3-c]py rid i nyl) (pyrrolo[3,2-c)pyridinyl) CO CO CO Cö
Η N Η Η N
pyrrolo[3,2*b]pyridine imidazo(4,5*b)pyridine imidazo[4,5-c]pyri dine pyrazolo[4,3-d]pyridine (pyrrolo[3,2-b]pyridinyI) (imidazo^.S^pyridinyl) (imidazo[4,5-c]pyridinyl) (pyrazolo[4,3-d]pyidinyl) 05 05 05 00- pyrazoloI4,3-c]pyridine pyrazolo[3,4-c]pyridine pyra20to[3,4-b]pyridine eoindool (pyra2o)oI4,3-c)pyidinyl) (pyrazolo[3,4-c]pyidinyl) (pyrazolo[3,4-b]pyidiny!) (isoindolyl) 00 CO CO CO 00 '
ήΗ ^ H · J
indazool purine indolizine imidazo[1,2-a]pyridine imidazo[1,5-a]pyridine (indazolyl) (purinyl) (indolininyl) (imidazo[1,2-a]pyridinyi) (imidazo[1,5-a]pyridinyl) co ςο co pyrazolo[1,5-a]pyridine pyrro!o[1,2-b]pyridazir>e imidazo[1,2-c)pyrimidine (pyrazolo[1,5-a]pyridinyl) (pyrrolo[1-2,b]pyridazinyl) (imidazo[1,2*c]pyrirnidinyl) 10297993 27 OQ CO CO 00 ^ chinoline isochinoline cinnoline chinazoline (chinolinyl) (isochinolinyl) (cinnolinyl) (azachinazoiine) ‘
N , v ^ ^ N N
chïnoxaline flaalazine .1,6-naftyridine 1,7-naftyridine 1 (chinoxalinyl) (ftalazinyl)1) ((1.6-naftyridinyl) (1,7-naftyridinyl)i
N N N
1,8-naftyridine 1,5-naftyridine 2,6-naftyndine 2,7-naftyridine (1,8-naftyridiny/) (1,5-naftyridinyl) ' (2,6-naftyndinyl) (2,7-naftyridinyI)
CO 00 nCO
pyrido[3,2-d]pyrimidine pyrido[4,3-d]pyrimidine pyrido[3,4-d]pyrimidine (pyrido[3,2-dïpyrimidinyl) (pyrido[4,3-d]pyrimidinyl) (pyrido[3,4-d]pyrimidinyl) CO co co pyrido[2,3-d]pyrimidine pyridoI2,3-b]pyrazine pyrido[3,4-b]pyrazine (pyrido[2,3-d]pyrimidinyl) (pyrido[2,3-b]pyrazinyl) (pyridoI3,4-b]pyrazinyl) ” ccf CO co
N N N N N
pyrimido[5,4-d]pyrimidine pyrazino(2,3-b]pyrazine pyrimido[4,5-d]pyrimidine , (py ri mi d o[5,4-d]py ri midi nyl) (pyrazino[2,3-b]pyrazinyl) (pyrimido[4,5-d]pyrimidinyl) 30 I ' : 1029799- 28 "Heteroalicyclische ring" of "heteroring" betekent een monocyclische groep of een groep met gecondenseerde ringen met in de ring(en) 3 tot 12 ringatomen, waarbij een of .twee ringatomen heteroatomen zijn die worden gekozen 5 uit N, 0 en S(0)n (waarin n 0, 1 of 2 is) en de· resterende ringatomen C zijn. De ringen kunnen ook één of meer dubbele bindingen hebben. De ringen hebben echter geen volledig geconjugeerd pi-elektronensysteem. Voorbeelden van geschikte verzadigde heteroalicyclische groepen omvatten, 10 maar zijn niet beperkt tot: 1 1029799- · 29 Δ Δ Α.. Ö* ·□ ϋΚ Ö oxiraan thiaraan a2iridine oxetaan thiataan azetidine letrahydrofuran 5 (oxiranyl) (thiaranyl)· (aziridinyl) . (oxetanyl)l (thiatanyl)l . (azetidinyl) (tatrahydrofuranyl) ö ö Ö Ö ' itetrahydrothiofeen pyrrolidine tetrahydropyran telrahydrothiopyran 10 ((tetrahydrothiofenyl)1 (pyrrolidinyl) (tetrahydropyranyl) (tetrahydrothiopyranyl) Ö 0 0 ö o
piperidine -1,4-dioxaan 1,4-oxathiaan morfoline 1,4-dithiaan (piperidinyl) '(1,4-dioxanyl) (1,4-oxathianyl) (morfolinyl) (1,4-dithianyl) I
ö ö O o ö 20 H- piperazine 1,4-azathiaan oxepaan thiepaan azepaan (piperazinyl) (1,4-azathianyl) (oxepanyl) (thiepanyl) (azepanyl) O · O Ö Ö '—O -=¾ ^—S '—N _Jh- s
25 — H
1.4- dioxepaan 1,4-oxathiepaan 1,4-oxaazepaan 1,4-dithiepaan (1,4-dioxepanyl) (1,4-oxathiepanyl)) (1,4-oxaazepanyl) (1,4-drthiepanyl) O Ö
'—N ·—N
30 Η H
1.4- thieazepaan 1,4-diazepaan {1,4-thieazepanyl) (1,4-diazepanyl) 35 Voorbeelden van geschiktej gedeeltelijk onverzadigde heteroalicyclische groepen omvatten, maar zijn niet beperkt tot: i 1029799- 30 O O Ö . 3,4-dihydro-2H-pyran 5,6-dihydro-2H-pyran . . 2H-pyran 5 (3,4-dihydro-2H-pyranyl) (5,6-dihydro-2H-pyranyl) (2H-pyranyï) Ö Ü /' 10 1,2,3,4-tetrahydropyridine 1,2,5,6-tetrahydropyridine (1,2,3,4-tetrahydropyridinyl) (1,2,5,6-tetrahydropyridinyl)
De heterocyclogroep is eventueel gesubstitueerd met 15 één of meer substituenten die onafhankelijk worden gekozen uit halogeen, lagere alkyl, met lagere alkyl gesubstitueerde carboxy, ester-hydroxy of mono- of dialkylamino.
"Hydroxy" betekent een -OH-groep.
"Alkoxy" betekent zowel een -O-(alkyl) als een -0-20 (ongesubstitueerde cycloalkyl)groep. Typische voorbeelden omvatten, maar zijn niet beperkt tot, methoxy, ethoxy, propoxy, butoxy, cyclopropyloxy, cyclobutyloxy, cyclopen-tyloxy, cyclohexyloxy en dergelijke.
"Halogeenalkoxy” betekent een -O-(halogeenalkyl)-25 groep. Typische voorbeelden omvatten, maar zijn niet beperkt tot, trifluormethoxy, tribroommethoxy en dergelijke.
"Aryloxy" betekent een. -0-aryl- of een -O-hetero-arylgroep, als hierin gedefinieerd. Typische voorbeelden omvatten, maar zijn niet beperkt tot, fenoxy, pyridinyl-30 oxy, furanyloxy, thienyloxy, pyrimidinyloxy, pyrazinyloxy· en dergelijke, en derivaten daarvan.
"Mercapto" betekent een -SH-groep.
"Alkylthio” betekent een -S-(alkyl)- of een -S-. (ongesubstitueerde cycloalkyl)groep. Typische voorbeelden 35 omvatten, maar zijn niet beperkt tot, methylthio, ethyl-thio, propylthio, butylthio, cyclopropylthio, cyclobutyl-. thio, cyclopentylthio, cyclohexylthio en dergelijke.
10297994 31 "Arylthio" betekent een -S-aryl- of een -S-hetero-arylgroep, als hierin gedefinieerd. Typische voorbeelden omvatten, maar zijn niet beperkt tot, fenylthio, pyridi-nylthio, furanylthio, thienylthio, pyrimidinylthio en der-5 gelijke, en derivaten daarvan.
"Acyl" of "carbonyl" betekent een -C(0)R"-groep, waarin R" wordt gekozen uit de groep die bestaat uit waterstof, lagere alkyl, trihalogeenmethyl, ongesubstitueerde cycloalkyl, aryl die eventueel gesubstitueerd is met 10 één of meer, maar bij voorkeur met een, twee of drie sub-stituenten, die worden gekozen uit de groep die bestaat uit lagere alkyl, trihalogeenmethyl, lagere alkoxy, halogeen en -NRxRy-groepen, heteroaryl (gebonden door een ring-koolstof) die eventueel gesubstitueerd is met één of meer, 15 maar bij voorkeur met een, twee of drie substituenten, die worden gekozen uit de groep die bestaat uit lagere alkyl, trihalogeenalkyl, lagere alkoxy, halogeen en -NRxRy-groepen en heteroalicyclische groep (gebonden door een ringkool-stof) die eventueel gesubstitueerd is met een of meer, 20 maar bij voorkeur met een, twee of drie substituenten, die worden gekozen uit de groep die bestaat uit lagere alkyl, trihalogeenalkyl, lagere alkoxy, halogeen en -NRxRy-groepen. Typische acylgroepen omvatten, maar zijn niet beperkt tot, acetyl, trifluoracetyl, benzoyl en dergelijke.
25 "Aldehyd" betekent een acylgroep waarin R" waterstof is.
"Thioacyl" of "thiocarbonyl" betekent een -C(S)R"-groep, waarin R" als hierboven gedefinieerd is.
Een "thiocarbonyl"-groep betekent een -C(S)R"-groep, waarin R" als hierboven gedefinieerd is.
30 Een "C-carboxy"-groep betekent een -C(0)OR"-groep, waarin R" als hierboven gedefinieerd is.
Een "0-carboxy"-groep betekent een -0C(0)R"-groep, waarin R" als hierboven gedefinieerd is.
.· "Ester" betekent een -C (O) 0R"-groep, waarin R" als 35 hierin gedefinieerd is, met als uitzondering, dat R" geen waterstof kan zijn.
Een "acetyl"-grcep betekent een -C (0) CK3-groep.
1029799- 32
Een nhalogeen"-groep betekent fluor, chloor, broom of jood, en bij voorkeur fluor of chloor.
Een "trihalogeenmethyl"-groep betekent een methyl-groep met drie halogeensubstituenten, zoals een trifluor-5 methylgroep.
"Cyano" betekent een -C^N-groep.
Een "sulfinyl"-groep betekent een -S(0)R"-groep waarin, behalve als hierboven gedefinieerd is, R" ook een hy-droxygroep kan zijn.
10 Een "sulfonyl"-groep betekent een -S (0) 2R"-groep, waarin, behalve als hierboven gedefinieerd is, R" ook een hydroxygroep kan zijn.
"S-sulfonamido" betekent een -S(0) 2NRxRy-groep, waarin Rx en Ry als hierboven gedefinieerd zijn.
15 "N-sulfonamido" betekent een -NRXS (O) 2Ry-groep, waarin
Rx en Ry als hierboven gedefinieerd zijn.
"0-carbamyl" betekent een -0C (0) NRxRy-groep, waarin Rx en Ry als hierboven gedefinieerd zijn.
"N-carbamyl" betekent een Ry0C (0) NRx-groep, waarin Rx 20 en Ry als hierboven gedefinieerd zijn.
"0-thiocarbamyl" betekent een -0C (S) NRxRy-groep, waarin Rx en Ry als hierboven gedefinieerd zijn.
"N-thiocarbamyl" betekent een Ry0C(S)NRx-groep, waarin Rx en Ry als hierboven gedefinieerd zijn.
25 "Amino" betekent een NRxRy-groep, waarin Rx en Ry beide waterstof zijn.
"C-amido" betekent een -C (0) NRxRy-groep, waarin Rx en Ry als hierboven gedefinieerd zijn.
"N-amido" betekent een RXC (0) NRy-groep, waarin Rx en Ry 30 als hierboven gedefinieerd zijn.
"Nitro" betekent een -N02-groep.
"Halogeen" betekent een alkyl, en bij voorkeur een lagere alkyl, die gesubstitueerd is met een of meer van dezelfde of verschillende halogeenatomen, bijv. -CH2C1, - 35 CF3, -CH2CF3, -CH2CCI3 en dergelijke.
"Hydroxyalkyl" betekent een alkyl, en bij voorkeur een lagere alkyl, die gesubstitueerd is met een, twee of 1029799- 33 drie hydroxygroepen, bijv. hydroxymethyl, 1- of 2-hydroxy-ethyl, 1,2-, 1,3- of 2,3-dihydroxypropyl en dergelijke.
"Aralkyl betekent een alkyl, en bij voorkeur een lagere alkyl, die gesubstitueerd is met een arylgroep als 5 hierboven gedefinieerd, bijv. -CH2fenyl, -'(CH2) 2fenyl, - (CH2) 3fenyl, CH3CH(CH3)CH2fenyl en dergelijke, en derivaten daarvan.
Een "heteroalkyl"-groep betekent alkyl, en bij voorkeur lagere alkyl, die gesubstitueerd is met een heteroa-10 rylgroep, bijv. -CH2pyridinyl, - (CH2) 2pyrimidinyl, - (CH2) 3imidazolyl en dergelijke, en derivaten daarvan.
"Monoalkylamino" betekent een groep -NHR, waarin R een alkyl- of een ongesubstitueerde cycloalkylgroep is, bijv. methylamino, (1-methylethyl)amino, .cyclohexylamino 15 en dergelijke.
"Dialkylamino" betekent een groep -NRR, waarin elke R onafhankelijk een alkyl- of een ongesubstitueerde cycloalkylgroep is, bijv. dimethylamino, diethylamino, (1-methylethyl)ethylamino, cyclohexylmethylamino, cyclopen-20 tylmethylamino en dergelijke.
"Eventueel" betekent dat de vervolgens beschreven gebeurtenis of omstandigheid niet behoeft te gebeuren, en dat de beschrijving gevallen omvat waarin de gebeurtenis of de omstandigheid optreedt, en gevallen waarin deze niet 25 optreedt. "Heteroringgroep die eventueel gesubstitueerd is met een alkylgroep" betekent bijvoorbeeld dat de alkyl. niet aanwezig behoeft te zijn, en de beschrijving omvat 4 situaties waarin de heteroringgroep gesubstitueerd is met een alkylgroep, en situaties waarin de heteroringgroep 30 niet gesubstitueerd is met de alkylgroep.
Een "farmaceutisch preparaat" betekent een mengsel van één of meer van de verbindingen die hierin worden beschreven, of fysiologisch/farmaceutisch aanvaardbare zouten, solvaten, hydraten of prodrugs daarvan, met andere 35 chemische bestanddelen, zoals fysiologisch/farmaceutisch aanvaardbare dragers en excipiënten. Het doel van een far- 1029799- 34 maceutisch preparaat is het vergemakkelijken van de toediening van een verbinding aan een organisme.
Zoals hierin gebruikt betekent een "fysiolo-gisch/farmaceutisch aanvaardbare drager" een. drager of 5 verdunningsmiddel die resp. dat geen irritatie van betekenis bij een organisme veroorzaakt en de biologische activiteit en eigenschappen van de toegediende verbinding niet teniet doet.
Een "farmaceutisch aanvaardbare excipiënt" betekent 10 een inerte stof die aan een farmaceutisch preparaat wordt toegevoegd om de toediening van een verbinding verder te vergemakkelijken. Voorbeelden, zonder beperking/ van exci-piënten omvatten calciumcarbonaat, calciumfosfaat, diverse suikers en typen zetmeel, cellulosederivaten, gelatine, 15 plantaardige oliën en polyethyleenglycolen.
Zoals hierin gebruikt betekent de uitdrukking "farmaceutisch aanvaardbaar zout" die zouten die de biologische doeltreffendheid en eigenschappen van de oorspronkelijke verbinding behouden. Dergelijke zouten omvatten: 20 (i) zuuradditiezouten, die kunnen worden verkregen door reactie van de vrije base van de oorspronkelijke verbinding met anorganische zuren zoals waterstofchloride, waterstofbromide, salpeterzuur, fosforzuur, zwavelzuur en perchloorzuur en dergelijke, of met organische zuren zoals 25 azijnzuur, oxaalzuur, (D)- of (L)- appelzuur, maleïnezuur, methaansulfonzuur, ethaansulfonzuur, p-tolueensulfonzuur, salicylzuur, wijnsteenzuur, citroenzuur, barnsteenzuur of malonzuur en dergelijke of (2) zouten die worden gevormd wanneer een proton van 30 een zuur dat in de oorspronkelijke verbinding aanwezig is wordt vervangen door een metaalion, bijv. een alkalime-taalion, of een aardalkalimetaalion, of een aluminiumion, of coördineert met een organische base zoals ethanolamine, diethanolamine, triethanolamine, tromethamine, N-methyl-35 glucamine en dergelijke.
1029799- 35 "PK" betekent receptorproteïnetyrosinekinase (RTK's), non-receptor of "cellulaire" tyrosinekinasen (CTK's) en serine-threoninekinasen (STK's).
"Modulering" of "moduleren" betekent de wijziging van 5 de katalytische activiteit van RTK's, CTK's en STK's. In het bijzonder betekent modulering de activering van de katalytische activiteit van RTK's, CTK's en STK's, en bij voorkeur de activering of remming van de katalytische activiteit van RTK's, CTK's en STK's, hetgeen afhankelijk is 10 van de concentraties van de verbinding of het zout waaraan het RTK, CTK of STK wordt blootgesteld, of, liever, de remming van de katalytische activiteit van RTK's, CTK's en STK's.
"Katalytische activiteit" betekent de snelheid van de 15 fosforylering van tyrosine onder invloed, al of niet rechtstreeks, van RTK’s en/of CTK's, of de fosforylering van serine en threonine onder invloed, al of niet rechtstreeks, van STK's.
"In contact brengen" betekent het samenbrengen van 20 een verbinding van de onderhavige uitvinding en een doel-PK op een zodanige wijze dat de verbinding de katalytische activiteit van het PK kan beïnvloeden, hetzij rechtstreeks, dus door interageren met het kinase zelve, of niet rechtstreeks, dus door interageren met een ander mo-25 lecuul waarvan de katalytische activiteit van het kinase afhankelijk is. Een dergelijk "in contact brengen" kan "in vitro" worden gerealiseerd, dus in een reageerbuis, een petrischaal en dergelijke. In een reageerbuis kan het in contact brengen slechts een verbinding en een PK die van 30 belang is behelzen, of volledige cellen betreffen. De cellen. kunnen ook worden onderhouden of gekweekt in celkweek-schalen en in die omgeving met een verbinding in contact worden gebracht. In dit verband kan het vermogen van een bepaalde verbinding tot het beïnvloeden van een stoornis 35 die verband houdt met PK, dus de IC50 van de verbinding, die hierna wordt gedefinieerd, worden bepaald voordat het gebruik van de verbindingen in vivo met meer complexe le- 1029799·; 36 vende organismen wordt ondernomen. Voor cellen buiten het organisme bestaan verscheidene werkwijzen, en deze zijn voor de deskundigen bekend, om de PK's in contact te brengen met de verbindingen, waaronder, maar niet beperkt tot, 5 rechtstreekse micro-injectie in cellen en talrijke trans-membraantechnieken die gebruikmaken van een drager.
"In vitro" heeft betrekking op procedures die worden uitgevoerd in een kunstmatig milieu, zoals bijv. zonder beperking, in een reageerbuis of een kweekmedium.
10. "In vivo" heeft betrekking op procedures die in een levend organisme worden uitgevoerd, zoals, zonder beperking, een muis, rat of konijn.
"Stoornis die verband houdt met PK", "door PK veroorzaakte stoornis" en "abnormale PK-activiteit" hebben alle 15 betrekking op een aandoening die wordt gekenmerkt door een ongepaste, dus een onder- of, vaker, overactiviteit van PK. Het desbetreffende PK kan een RTK, een CTK of een STK zijn. De ongepaste katalytische activiteit kan voortvloeien uit zowel: (1) PK-expressie in cellen die doorgaans 20 geen PK's tot expressie brengen, (2) een toegenomen PK-expressie die tot een ongewenste celproliferatie, differentiatie en/of -groei leidt of (3) een verminderde PK-expressie die tot ongewenste verminderingen van de celproliferatie, -differentiatie en/of -groei leidt. Een 25. overactiviteit van een PK heeft betrekking op zowel de versterking van het gen dat codeert voor een bepaalde PK of de productie van een niveau van de PK-activiteit dat kan correleren met een stoornis met betrekking tót de celproliferatie, -differentiatie en/of -groei (dat betekent 30 dat terwijl het niveau van het PK stijgt, de ernst van één of meer van de symptomen van de.celstoornis ook toeneemt). Een onderactiviteit is, uiteraard, het omgekeerde, waarbij de ernst van één of meer symptomen van een celstoornis . toeneemt terwijl het niveau van de PK-activiteit afneemt.
35 "Behandelen" en "behandeling" hebben betrekking op een werkwijze voor het verlichten of tenietdoen van een . door PK veroorzaakte celstoornis en/of de daarmee gepaard 1029799- 37 gaande symptomen. In het bijzonder met betrekking tot kanker betekenen deze uitdrukkingen zonder meer dat de levensverwachting van een persoon die aan een kanker lijdt zal worden verlengd of dat één of meer van de symptomen 5 van de ziekte verminderd zullen worden.
"Organisme" heeft betrekking op elke levende entiteit die uit ten minste een cel bestaat. Een levend organisme kan uit niet meer bestaan dan bijvoorbeeld een enkele eu-kariotische cel, of ingewikkeld zijn als een zoogdier, met 10 inbegrip van een menselijke persoon, "Therapeutisch effectieve hoeveelheid" betekent die hoeveelheid van de verbinding die wordt toegediend die één of meer van de symptomen van de stoornis die wordt behandeld in enige mate zal verlichten. Met betrekking tot de 15 behandeling van kanker heeft een therapeutisch effectieve hoeveelheid betrekking op die hoeveelheid die ten minste . één van de volgende effecten heeft: (1) verminderen van de afmeting van de tumor, (2) remmen (dat wil zeggen, in enige mate vertragen, 20 en bij voorkeur stoppen) van de metastase van de tumor, (3) in enige mate remmen (dat wil zeggen in enige mate vertragen, en bij voorkeur stoppen) van de tumorgroei en 25 (4) in enige mate verlichten (of bij voorkeur doen verdwijnen) van één of meer symptomen die verband houden met de kanker.
j "Controleren" betekent het waarnemen of detecteren van het effect van het in contact brengen van een verbin-30 ding met een cel die een bepaalde PK tot expressie brengt.
Het waargenomen of gedetecteerde effect kan een verandering zijn van het fenotype van de cel, van de katalytische activiteit van een PK of . een wijziging in de interactie van een PK met een natuurlijke bindingspartner. Technieken 35 voor . het waarnemen of detecteren van dergelijke effecten zijn stand der techniek. Het effect wordt gekozen uit een verandering, of het ontbreken van een verandering, van het 1029799- 38 fenotype van de cel, een verandering, of het ontbreken van een verandering in de katalytische activiteit van het pro-teïnekinase, of een verandering, of het ontbreken van een verandering in de interactie van het proteïnekinase met 5 een natuurlijke bindingspartner volgens een laatste aspect van de onderhavige uitvinding.
"Fenotype van de cel" heeft.betrekking op de uiterlijke verschijning van een cel of weefsel of de biologische functie.van de cel of het weefsel. Voorbeelden, zon-10 der beperking, van een fenotype van de cel zijn celgroot-te, celgroei, celproliferatie, celdifferentiatie, overleving van de cel, apoptose, voedselopname en gebruik. Dergelijke fenotypische kenmerken worden gemeten door werkwijzen die stand der techniek zijn.
15 "Natuurlijke bindingspartner" heeft betrekking op een polypeptide dat zich aan een bepaalde PK in een cel bindt. Natuurlijke bindingspartners kunnen een rol spelen bij het voortplanten van een signaal in een signaaltransductiepro-ces waarop door een PK wordt ingegrepen. Een wijziging in 20 de interactie van de natuurlijke bindingspartner met het PK kan zichzelf uiten als een verhoogde of verlaagde concentratie van het complex van het PK/natuurlijke bindingspartner en, dientengevolge, in een waarneembare verandering in het vermogen van het PK tot het ingrijpen op de 25 signaaltransductie leiden.
Zoals hierin gebruikt betekenen de uitdrukkingen "optisch zuiver", "enantiomeer zuiver", "zuivere enantiomeer" en "optisch zuivere enantiomeer" een preparaat dat een enantiomeer van een verbinding bevat en waarin de tegenge-30 stelde enantiomeer van de verbinding nagenoeg ontbreekt. Een typische optisch zuivere verbinding omvat in een typisch geval meer dan ongeveer 80 gew.% van een enantiomeer van de verbinding en minder dan ongeveer 20 gew.% van de tegengestelde enantiomeer van de verbinding, en liever .35 meer dan ongeveer 90 gew.% van een enantiomeer van de verbinding en minder dan ongeveer 10 gew.% van de tegengestelde enantiomeer van de verbinding, en liever nog meer 1029799- 39 dan ongeveer 95 gew.% van een enantiomeer van de verbinding en minder dan ongeveer 5 gew.% van de tegengestelde enantiomeer van de verbinding, en liefst meer dan ongeveer 97 gew.% van een enantiomeer van de verbinding en minder 5 dan ongeveer 3 gew.% van de tegengestelde enantiomeer van de verbinding.
Uitvoerige beschrijving
Algemene schema's voor het synthetiseren van de verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen hierin wor-10 den aangetroffen in het gedeelte met de voorbeelden.
Sommige van de algemene procedures worden getoond ten aanzien van de synthese van verbindingen waarin de 1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxyrest de zuivere (R)-isomeer is, en sommige worden getoond ten aanzien van verbindingen 15 waarin de rest een racemisch mengsel is. Het zal echter duidelijk zijn dat de procedures hierin kunnen worden gebruikt voor het produceren van racemische verbindingen of enantiomeer zuivere (R)-isomeren door het overeenkomstige racemische of enantiomeer zuivere uitgangsmateriaal te 20 kiezen.
De hierin getoonde procedures kunnen worden gebruikt voor het produceren van een grote verscheidenheid van enantiomeer zuivere verbindingen door het juiste enantiomeer zuivere uitgangsmateriaal te kiezen. Behalve de hier-25 in getoonde verbindingen, voorziet de onderhavige uitvinding ook in enantiomeer zuivere verbindingen die overeenkomen met de. 3-[1-(2, 6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]- pyridine-2-ylamine- en 3-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)-ethoxy]-pyrazine-2-ylamineverbindingen die worden getoond 30 in Amerikaanse octrooiaanvrage serieno. 10/786.610 (PCT/US 2004/005495), en in een Amerikaanse octrooiaanvrage waarvan het serieno. nog dient te worden toegekend, docket no. PC/32546, ingediend op 26 augustus 2004, en met de titel . "Pyrazolo-Substituted Aminoheteroaryl Compounds as Protein 35 Kinase Inhibitors", en.in een Amerikaanse octrooiaanvrage waarvan het serie no. nog dient te worden toegekend, docket no. PC 32548, ingediend op 26 augustus 2004, en met de 10297995 40 titel "Aminoheteroaryl Compounds as Protein Kinase Inhibi-tors". De beschrijvingen van deze documenten worden hierin opgenomen door referentie in hun geheel.
Tenzij anderszins wordt aangegeven omvatten alle re-5 ferenties hierin naar de inventieve verbindingen de referenties van zouten, solvaten, hydraten en complexen daarvan, en van solvaten, hydraten en complexen van de zouten daarvan, met inbegrip van de polymorfen, stereo-isomeren en van een isotooplabel voorziene versies daarvan.
10 Farmaceutisch aanvaardbare zouten omvatten zuuraddi- tie- en basezouten (waaronder de dizouten). Geschikte zuuradditiezouten worden gevormd uit zuren die niet-toxische zouten vormen. Voorbeelden omvatten de acetaat-, aspartaat-, benzoaat-, besylaat-, bicarbonaat-/carbonaat-, 15 bisulfaat-/sulfaat-, boraat-, camsylaat-, citraat-, edi- sylaat-, esylaat-, formiaat-, fumaraat-, gluceptaat-, glu-conaat-, glucuronaat-, hexafluorfosfaat-, hibenzaat-, hy-drochloride-/chloride-, hydrobromide-/bromide-, hydrojodi-de-/jodide-, isethionaat-, lactaat-, malaat-, maleaat-, 20 malonaat-, mesylaat-, methylsulfaat-, naftylaat-, 2- napsylaat-, nicotinaat-, nitraat-, orotaat-, oxalaat-, palmitaat-, pamoaat-, fosfaat-/waterstoffosfaat-/diwater-stoffosfaat-, saccharaat-, stearaat-, succinaat-, tar-traat-, tosylaat- en trifluoracetaatzouten.
25 Geschikte basezouten worden gevormd uit basen die niet-toxische zouten vormen. Voorbeelden omvatten de aluminium-, arginine-, benzathine-, calcium-, choline-, diethylamine-, diolamine-, glycine-, lysine-, magnesium-, meglumine-, olamine-, kalium-, natrium-, tromethamine- en 30 zinkzouten.
Zie voor een overzicht van geschikte zouten: "Hand- book of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and
Use" door Stahl en Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Duitsland, 2002), waarvan de beschrijving hierin wordt opgeno-35 men door referentie in haar geheel.
Een farmaceutisch aanvaardbaar zout van de inventieve verbindingen kan dadelijk worden bereid door tezamen men- 1029799* 41 gen van oplossingen van de verbinding en het gewenste zuur of de gewenste base, naar gelang van hetgeen van toepassing is. Het zout kan uit de oplossing neerslaan en worden verzameld door affiltreren, of worden verkregen door af-5 damping van het oplosmiddel. De mate van'ionisatie in het zout kan uiteenlopen van volledig geïoniseerd tot nagenoeg niet geïoniseerd.
De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen in zowel ongesolvateerde als . gesolvateerde vorm bestaan. 10 De uitdrukking "solvaat" wordt hierin gebruikt ter omschrijving van een moleculair complex dat bestaat uit de verbinding van de onderhavige uitvinding en een stoëchio-metrische hoeveelheid van één of meer farmaceutisch aanvaardbare oplosmiddelmoleculen, bijvoorbeeld ethanol. De 15 uitdrukking "hydraat" wordt gebruikt wanneer het oplosmiddel water is. De farmaceutisch aanvaardbare solvaten volgens de onderhavige uitvinding omvatten hydraten en solvaten waarin het oplosmiddel waaruit wordt gekristalliseerd met een isotoop gesubstitueerd kan zijn, bijv. D2O, d6~ 20 aceton, dö-DMSO.
Ook vervat in de strekking van de onderhavige uitvinding zijn complexen zoals clathraten, insluitingscomplexen van geneesmiddel-gastheer waarin, in tegenstelling tot de voornoemde solvaten, het geneesmiddel en de gastheer aan-25 wezig zijn in stoechiometrische of niet-stoechiometrische hoeveelheden. Ook vervat zijn complexen van het geneesmiddel die twee of meer organische en/of anorganische bestanddelen bevatten, die in stoechiometrische of niet-stoechiometrische hoeveelheden aanwezig kunnen zijn. De 30 ontstane complexen kunnen geïoniseerd, gedeeltelijk geïoniseerd of niet-geïoniseerd zijn. Zie voor een overzicht van dergelijke complexen: J. Pharm. Sci., 64^ (8), 1269- 1288, door Haleblian (augustus 1975), waarvan de beschrijving hierin wordt opgenomen door referentie in haar ge-35 heel.
Ook vervat iri de strekking van de onderhavige uitvinding zijn polymorfen, prodrugs en isomeren (waaronder op 1029799- 42 tische, geometrische en tautomere isomeren) van de inventieve verbindingen.
Derivaten van de verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen zelf weinig of geen farmacologische activi-5 teit hebben, maar kunnen, wanneer deze aan een patiënt worden toegediend, worden omgezet in de inventieve verbindingen, bijvoorbeeld door hydrolytische splitsing. Dergelijke derivaten worden "prodrugs" genoemd. Verdere informatie omtrent het gebruik van prodrugs kan worden aange-10 troffen in "Pro-drugs as Novel Delivery Systems, vol. 14, ACS Symposium Series (T. Higuchi en W. Stella) en "Biore-versible Carriers in Drug Design", Pergamon Press, 1987 (red. E.B. Roche, American Pharmaceutical Association), waarvan de beschrijvingen hierin worden opgenomen door re-15 ferentie in hun geheel.
Prodrugs in overeenstemming met de onderhavige uitvinding kunnen bijvoorbeeld worden geproduceerd door vervangen van de juiste functies die in inventieve verbindingen aanwezig zijn door bepaalde resten die bij de deskun-20 digen in het vakgebied bekendstaan als "pro-resten"; deze worden bijvoorbeeld beschreven in "Design of Prodrugs" door H. Bundgaard (Elsevier, 1985), waarvan de beschrijving hierin wordt opgenomen door referentie in haar geheel.
25 Enkele voorbeeld van prodrugs in overeenstemming met de onderhavige uitvinding omvatten: (i) wanneer de verbinding een carbonzuurfunctie (- t COOH) bevat, een ester daarvan, bijvoorbeeld door vervanging van de waterstof door (Ci-Cg)alkyl, 30 (ii) wanneer de verbinding een alcoholfunctie (-OH) bevat, een ether daarvan, bijvoorbeeld door vervanging van de waterstof door (Cx-C6)alkanoyloxymethyl en (iii) wanneer de verbinding een primaire of secundaire aminofunctie (-NH2 of -NHR, waarin R Φ H) bevat, een 35 amide daarvan, bijvoorbeeld door vervanging van een of beide waterstoffen door (C1-C10) alkanoyl.
1029799- 43
Andere voorbeelden van vervangingsgroepen in overeenstemming met de voorgaande voorbeelden en voorbeelden van andere prodrugtypen kunnen worden aangetroffen in voornoemde referenties.
5 Ten slotte kunnnen bepaalde inventieve verbindingen zelf als prodrugs van andere inventieve verbindingen fungeren.
Verbindingen van de onderhavige uitvinding die één of meer asymmetrische koolstofatomen bevatten, kunnen als 10 twee of meer stereo-isomeren bestaan. Wanneer een verbinding van de onderhavige uitvinding een alkenyl- of alkeny-leengroep bevat, zijn geometrische cis~/trans (of Z/E)-isomeren mogelijk. Wanneer de verbinding bijvoorbeeld een keto- of oximgroep of een aromatische rest bevat, kan tau-15 tomere isomerie ("tautomerie") optreden. Een enkele verbinding kan meer dan een type isomerie vertonen.
Vervat in de strekking van de onderhavige uitvinding zijn alle stereo-isomeren, geometrische isomeren en tauto-mere vormen van de inventieve verbindingen, waaronder ver-20 bindingen die meer dan één type isomerie vertonen, en mengsels van één of meèr daarvan. Eveneens vervat zijn zuuradditie-, of basezouten waarin het tegenion optisch ac-. tief is, bijvoorbeeld D-lactaat of L-lysine, of racemisch is, bijvoorbeeld DL-tartraat of DL-arginine.
25 Cis-/trans-isomeren kunnen worden gescheiden door.
middel van gebruikelijke technieken die voor de. deskundigen bekend zijn, bijvoorbeeld chromatografie en gefractio-neerde kristallisatie.
Gebruikelijke technieken voor de bereiding/isolering 30 van afzonderlijke enantiomeren omvatten chirale synthese uit een geschikte optisch zuivere precursor of scheiding van het racemaat (of het racemaat van een zout of derivaat) met bijvoorbeeld chirale high pressure liquid chro-matography (HPLC).
35 Als alternatief kan het racemaat (of een racemische precursor) in reactie worden gebracht met een geschikte optisch actieve verbinding, bijvoorbeeld een alcohol, of 1029799- 44 in het geval waarin de verbinding een zure of basische rest bevat, een zuur of base zoals wijnsteenzuur of 1-fenylethylamine. Het ontstane diastereomere mengsel kan worden gescheiden door chromatografie en/of gefractioneer-5 de kristallisatie en één of beide diastéreo-isomeren kunnen worden omgezet in de overeenkomstige zuivere enantio-me(e)r(en) door middelen die voor een deskundige bekend zijn.
Chirale verbindingen van de onderhavige uitvinding 10 (en chirale precursors daarvan) kunnen in enantiomeer verrijkte vorm worden verkregen met chromatografie, in een typisch geval HPLC, over een asymmetrische kunsthars met een mobiele fase die bestaat uit een koolwaterstof, in een typisch geval heptaan of hexaan, die 0 tot 50 % isopropa-15 nol, in een typisch geval 2 tot 20 %, en 0 tot 5 % van een alkylamine, in een typisch geval 0,1.% diethylamine bevat. Concentratie van het eluaat levert het verrijkte mengsel op.
Stereo-isomere conglomeraten kunnen worden gescheiden 20 door middel van gebruikelijke technieken die voor de deskundigen bekend zijn; zie bijvoorbeeld "Stereochemistry of Organic Compounds” door E.L. Eliel (Wiley, New York, 1994), waarvan de beschrijving hierin wordt opgenomen door referentie in haar geheel.
25 De onderhavige uitvinding omvat ook van een isotoop- label voorziene verbindingen van de onderhavige uitvinding, waarin één of meer atomen vervangen zijn door een atoom met hetzelfde atoomgetal, maar met een atoommassa of massagetal die resp. dat verschilt van de atoommassa of 30 het massagetal die resp. dat doorgaans in de natuur wordt i aangetroffen. Voorbeelden van isotopen die geschikt zijn voor opneming in de verbindingen van de onderhavige uitvinding omvatten isotopen van waterstof, zoals ZH en 3H, koolstof, zoals UC, 13C en 14C, chloor, zoals 36Cl, fluor, 35. zoals 18F, jood, zoals 123I en 125I, stikstof, zoals 13N en 15N, zuurstof, zoals 150, 170 en 180, fosfor, zoals 32P, en zwavel, zoals 35S. Bepaalde van een isotooplabel voorziene 1029799¾ 45 verbindingen van de onderhavige uitvinding, bijvoorbeeld die waarin een radioactieve isotoop is opgenomen, zijn nuttig in studies naar de verdeling van geneesmiddel en/of substraat in de weefsels. De radioactieve isotopen triti-5 urn, 3H, en koolstof-14, 14C, zijn voor dit doel met name nuttig met het oog op het gemak waarmee deze worden opgenomen en de gemakkelijke detectiewijzen. Substitutie met zwaardere isotopen zoals deuterium, 2H, kan bepaalde therapeutische voordelen opleveren die voortvloeien uit een 10 grotere metabolische stabiliteit, bijvoorbeeld een langere in vivo halfwaardetijd of lagere doseereisen, en düs in bepaalde gevallen de voorkeur verdienen. Substitutie met isotopen die positronen uitzenden, zoals nC, 18F, 150 en 13N, kan nuttig zijn in Positron Emission Topography (PET) . 15 studies voor het onderzoeken van de bezetting van sub- straatreceptoren.
Van een isotooplabel voorziene verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen in het algemeen worden bereid door middel van gebruikelijke technieken die voor de 20 deskundigen bekend zijn, of door werkwijzen die analoog zijn aan die welke hierin worden beschreven, waarbij in plaats van het overigens gebruikte, niet van een label voorzien reagens, nu een van een isotooplabel voorzien reagens wordt gebruikt.
25 Farmaceutisch aanvaardbare solvaten in overeenstem ming met de onderhavige uitvinding omvatten die waarin het oplosmiddel waaruit wordt gekristalliseerd isotopisch gesubstitueerd kan zijn, bijv. D20, d6-aceton, d6-DMS0.
De verbindingen van de onderhavige uitvinding die 30 voor farmaceutisch gebruik bedoeld zijn, kunnen als kristallij ne of amorfe producten worden toegediend. Deze kunnen bijvoorbeeld als vaste massa's, poeders of films worden verkregen door middel van. werkwijzen als neerslaan, kristalliseren, vriesdrogen, sproeidrogen of drogen door 35 indamping. Voor dit doel kan worden gedroogd door middel van een magnetronoven of door radiogolven.
1029799- 46
De verbindingen kunnen alleen of in combinatie met één of meer andere verbindingen van de onderhavige uitvinding worden toegediend, of in combinatie met één of meer andere geneesmiddelen (of als een combinatie daarvan). In 5 het algemeen zullen deze worden toegedierïd als een preparaat in associatie met één of meer farmaceutisch aanvaardbare excipiënten. De uitdrukking "excipiënt" wordt hierin gebruikt ter omschrijving van een ander bestanddeel dan de verbinding(en) van de onderhavige uitvinding. De keuze van 10 de excipiënt zal in grote mate afhankelijk zijn van factoren als de besbetreffende wijze van toediening, het èffect van de excipiënt op de oplosbaarheid en de stabiliteit, en de aard van de doseervorm.
Farmaceutische preparaten die geschikt zijn voor de 15 afgifte van de verbindingen van de onderhavige uitvinding en werkwijzen voor hun bereiding zullen voor de deskundigen dadelijk voor de hand liggen. Dergelijke preparaten en werkwijzen voor hun bereiding kunnen bijvoorbeeld worden aangetroffen in "Remington's Pharmaceutical Sciences", 19e 20 editie (Mack Publishing Company, 1995), waarvan de beschrijving hierin wordt opgenomen door verwijzing in haar geheel.
Orale toediening 25 De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen oraal worden toegediend. Orale toediening kan inslikken betreffen, zodat de verbinding het maag-darmkanaal binnentreedt, of bucale of sublinguale toediening kan worden gebruikt, waardoor de verbinding de bloedstroom rechtstreeks 30 vanuit de mond binnentreedt.
Preparaten die geschikt zijn voor orale toediening omvatten vaste preparaten zoals tabletten, capsules die deeltjes bevatten, vloeistoffen of poeders, pastilles (waaronder met vloeistof gevulde), kauwgommen, multi- of 35 nano-deeltjes, gelen, oplossing van vaste stof, liposomen, films (waaronder muco-adhesieve), ovules, sprays en vloeibare preparaten.
1029799- 47
Vloeibare preparaten omvatten suspensies, oplossingen, siropen en elixirs. Dergelijke preparaten kunnen worden gebruikt als vulmiddelen in zachte of harde capsules en omvatten in een typisch geval een drager, bijvoorbeeld 5 water, ethanol, polyethyleenglycol, propyleenglycol, me-thylcellulose of een geschikte olie, en één of meer emul-gatoren en/of suspendeermiddelen.· Vloeibare preparaten kunnen ook worden bereid door hernieuwde samenstelling van een vaste stof, bijvoorbeeld uit een sachet.
10 De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen ook worden gebruikt in snel in oplossing gaande, snel desintegrerende doseervormen zoals die welke worden beschreven in Expert Opinion in Therapeutic Patents, 1_1 (6), 981-986, door Liang and Chen (2001), waarvan de beschrijving 15 hierin wordt opgenomen door referentie in haar geheel.
Voor doseervormen als tabletten, kan het geneesmiddel, afhankelijk van het gebruik, 1 tot 80 gew.% van de doseervörm, en in een meer typisch geval 5 tot 60 gew.% van de dpseervorm uitmaken. Behalve het geneesmiddel be-20 vatten tabletten in het algemeen een desintegreermiddel.
Voorbeelden van desintegreermiddelen omvatten natriumzet-meelglycolaat, natriumcarboxymethylcellulose, calciumcar-boxymethylcellulose, croscarmellosenatrium, crospovidon, polyvinylpyrrolidon, methylcellulose, microkristallijne 25 cellulose, met lagere alkyl gesubstitueerde hydroxypropyl- cellulose, zetmeel, pregegelatineerde zetmeel en natrium-alginaat. In het algemeen zal het desintegreermiddel 1 tot, 25 gew.% en bij voorkeur 5 tot 20 gew.% van de doseervorm uitmaken.
30 Bindmiddelen worden in het algemeen gebruikt om cohe- sieve eigenschappen aan een tabletpreparaat te verlenen. Geschikte bindmiddelen omvatten microkristallijne cellulose, gelatine, suikers, polyethyleenglycol, natuurlijke en synthetische gommen, polyvinylpyrrolidon, pregegelatineer-35 de zetmeel, hydroxypropylcellulose en hydroxypropylmethyl- cellulose. Tabletten kunnen ook verdunningsmiddelen bevatten, zoals lactose (monohydraat, gesproeidroogd monohy- 1029799*5 48 draat, watervrije en dergelijke), mannitol, xylitol, dex-trose, saccharose, sorbitol, microkristallijne cellulose, zetmeel en dibasische calciumfosfaatdihydraat.
Tabletten kunnen eventueel ook oppervlakteactieve 5 middelen omvatten, zoals natriumlaurylsulfaat en polysor-baat 80, en glijmiddelen zoals siliciumdioxide en talk. Wanneer deze aanwezig zijn, maken oppervlakteactieve middelen in een typisch geval hoeveelheden van 0,2 tot 5 gew.% van het tablet, en glijmiddelen in een typisch geval 10 0,2 tot 1 gew.% van het tablet uit.
Tabletten bevatten in het algemeen ook smeermiddelen zoals magnesiumstearaat, calciumstearaat, zinkstearaat, natriumstearylfumaraat en mengsels van magnesiumstearaat met natriumlaurylsulfaat. Smeermiddelen zijn in het alge-15 meen aanwezig in hoeveelheden van 0,25 tot 10 gew.% en bij voorkeur van 0,5 tot 3 gew.% van het tablet.
Andere gebruikelijke bestanddelen omvatten anti-oxidanten, kleurstoffen, geur- en smaakstoffen, conserveermiddelen én smaakmaskerénde middelen.
20 Voorbeelden van tabletten bevatten tot 80 gew.% ge neesmiddel, ongeveer 10 tot ongeveer 90 gew.% bindmiddel, ongeveer 0 tot ongeveer 85 gew.% verdunningsmiddel, ongeveer 2 tot ongeveer 10 gew.% desintegreermiddel en ongeveer 0,25 tot ongeveer 10 gew.% smeermiddel.
25 Tabletmengsels kunnen rechtstreeks of door middel van een roller worden samengeperst om te tabletten te vormen. Tabletmengsels of gedeelten van mengsels kunnen vooraf-, gaand aan het tabletteren als alternatief nat, droog of door smelten worden gegranuleerd, men kan deze doen smel-30 ten en weer stollen of deze kunnen worden geëxtrudeerd. Het eindpreparaat kan één of meer lagen omvatten en deze kunnen al of niet bekleed zijn, of het kan ingekapseld zijn.
De formulering van tabletten wordt in bijzonderheden 35 besproken in "Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Vol.
1”, door H.Lieberman an L. Lachman, Marcel Dekker, N.Y., N.Y., VS, 1980 (ISBN 0-8247-6918-X), waarvan de beschrij- 1029799- i 49 ving hierin wordt opgenomen door referentie in haar geheel .
Vaste preparaten voor orale toediening kunnen worden geformuleerd voor onmiddellijke en/of gemodificeerde af-5 gifte. Preparaten voor gemodificeerde afgifte omvatten die voor vertraagde, ononderbroken, gepulseerde, gecontrol-leerde, doelgerichte en geprogrammeerde afgifte.
Geschikte preparaten voor gemodificeerde afgifte worden beschreven in Amerikaans octrooischrift no. 6.106.864. 10 Bijzonderheden van andere geschikte afgiftetechnologieën, zoals hoogenergetische dispersies en osmotische of beklede deeltjes kunnen worden aangetroffen bij Verma et al., Pharmaceutical Technology On-line, 25(2), 1-14 (2001). Het gebruik van kauwgom ter verkrijging van een gecontroleerde 15 afgifte wordt beschreven in WO 00/35298. De beschrijvingen van deze referenties worden hierin opgenomen door referentie in hun geheel.
Parenterale toediening 20 De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen ook rechtstreeks worden toegediend in de bloedstroom, in een spier of in een inwendig orgaan. Geschikte parenterale | toedieningswijzen omvatten de intraveneuze, intra- arteriële, intraperitoneale, intrathecale, intraventricu-25 laire, intra-uretrale, intrasternale, intracraniële, in-tramusculaire en subcutane routes. Geschikte middelen voor parenterale toediening omvatten naald (waaronder micro-naald)injectoren, naaldvrije injectoren en infusietechnie-ken.
30 Parenterale preparaten zijn in typische gevallen wa terige oplossingen die excipiënten zoals zouten, koolhydraten en buffermiddelen (bij voorkeur tot een pH van 3 tot 9) kunnen bevatten, maar voor sommige toepassingen kunnen deze beter worden geformuleerd als een steriele 35 niet-waterige oplossing of als een gedroogde vorm die zal worden gebruikt met een g s s cVü 1c t v s hi c u Jl urn zoals steriel, pyrogeenvrij water.
1029799- 50
De bereiding van parenterale preparaten onder steriele omstandigheden, bijvoorbeeld door vriesdrogen, kan dadelijk worden gerealiseerd met farmaceutische standaardtechnieken die voor de deskundigen bekend zijn.
5 De oplosbaarheid van verbindingen van de onderhavige uitvinding die worden gebruikt bij de bereiding van parenterale oplossingen, kan worden verhoogd door het gebruik van geschikte formuleringstechnieken, zoals het opnemen van middelen die de oplosbaarheid verhogen.
10 Preparaten voor parenterale toediening kunnen worden geformuleerd voor onmiddellijke en/of gemodificeerde afgifte. Preparaten voor gemodificeerde afgifte omvatten die voor vertraagde, ononderbroken, gepulseerde, gecontroleerde, doelgerichte en geprogrammeerde afgifte. De verbindin-15 gen van de onderhavige uitvinding kunnen dus worden geformuleerd als een vaste stof, een halfvaste stof of een thixotrope vloeistof voortoediening als een geïmplanteerd depot dat voorziet in de gemodificeerde afgifte van de actieve verbinding. Voorbeelden van dergelijke preparaten 20 omvatten met geneesmiddel beklede stents en PGLA-micro-bollen.
Topicale toediening
De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen 25 . ook topicaal worden toegediend op de huid of slijmvliezen, dat wil zeggen dermaal of transdermaal. Typische preparaten voor dit doel omvatten gelen, hydrogelen, lotions, oplossingen, crèmes, zalven, stuifpoeders, smeersels, schuimen, films, huidpleisters, wafels, implantaten, sponzen, 30 vezels, verbanden en, micro-emulsies. Ook liposomen kunnen worden gebruikt. Typische dragers omvatten alcohol, water, minerale olie, vloeibare petrolatum, witte petrolatum, glycerine, polyethyleenglycol en propyleenglycol. Penetra-tieverhogers kunnen worden opgenomen; zie bijvoorbeeld J. 35 Pharm. Sci; 8J3 (10), 955-958, door Finnin en Morgan (oktober 1999). Andere wijzen van topicale toediening omvatten afgifte door elektroporatie, iontoforese, fonoforese, so- 1029799- 51 noforese en injectie met een micronaald of naaldvrije (bijv. Powderject™, Bioject™, enz.) injectie. De beschrijvingen van deze referenties worden hierin opgenomen door referentie in hun geheel.
5 Preparaten voor topicale toediening kunnen worden ge formuleerd voor onmiddellijke en/of gemodificeerde afgifte. Preparaten voor gemodificeerde afgifte omvatten die voor vertraagde, ononderbroken, gepulseerde, gecontroleerde, doelgerichte en geprogrammeerde afgifte.
10
Geïnhaleerde/intranasale toediening
De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen ook intranasaal of door inhalatie worden toegediend, in een typisch geval in de vorm van een droog poeder (hetzij 15 alleen, als een mengsel, bijvoorbeeld in een droog mengsel met lactose, hetzij als een mengsel dat is samengesteld uit deeltjes, bijvoorbeeld gemengd met fosfolipiden zoals fosfatidylcholine) uit een inhalator van droog poeder of als een aerosol-spray uit een onder druk staande houder, 20 pomp, spuit, vernevelaar (bij voorkeur een vernevelaar die voor het produceren van een fijne mist gebruikmaakt van een elektrohydrodynamica), met of zonder het gebruik van een geschikt drijfgas, zoals 1,1,1,2-tetrafluorethaan of 1,1,1,2,3,3,3-heptafluorpropaan. Voor intranasaal gebruik 25 . kan het poeder een bioadhesief middel bevatten, bijvoorbeeld chitosan of cyclodextrine.
De onder druk staande houder, pomp, spuit of verneve- t laar bevat een oplossing of suspensie van dè verbinding (en) van de onderhavige uitvinding die bijvoorbeeld 30 ethanol, waterige ethanol of een geschikt alternatief middel voor het dispergeren,solubiliseren of verlengen van de afgifte van het actieve bestanddeel, (een) drijfgas(sen) als oplosmiddel en een eventuele oppervlakteactieve stof, zoals sorbitantrioleaat, oliezuur of een oligomelkzuur, 35 bevat.
Voorafgaand aan het gebruik in een droog-poeder-, of suspensiepreparaat wordt het geneesmiddelproduct verkleind 1029799- i 52 tot een afmeting die geschikt is voor afgifte door inhalatie (in een typisch geval minder dan 5 micron) . Dit kan worden gerealiseerd door een geschikte werkwijze voor verkleinen, zoals malen met een schroef straal, malen met een 5 wervelbedstraal, bewerken met superkritische vloeistof, hetgeen nanodeeltjes vormt, homogenisatie onder hoge druk of sproeidrogen.
Capsules (die bijvoorbeeld uit gelatine of hydroxy-propylmethylcellulose zijn gemaakt), doordrukverpakkingen 10 en patronen voor gebruik in een inhalator of insufflator kunnen zodanig worden geformuleerd dat deze een poeder-mengsel van de verbinding van de onderhavige uitvinding, een geschikte poedergrondstof zoals lactose of zetmeel en een prestatiemodificator zoals 1-leucine, mannitol of mag-15 nesiumstearaat bevatten. De lactose kan in watervrije vorm of in de vorm van het monohydraat, en bij voorkeur in de laatstgenoemde zijn. Andere geschikte excipiënten omvatten dextran, glucose, maltose, sorbitol, xylitol, fructose, saccharose en trehalose.
20 Een geschikte oplossing, een preparaat voor het ge bruik in een vernevelaat die gebruikmaakt van elektrohy-drodynamica, waarbij een fijne mist wordt geproduceerd, kan 1 yg tot 20 mg van de verbinding van de onderhavige uitvinding per slag bevatten, en het slagvolume kan varië-25 ren van 1 μΐ tot 100 μΐ. Een typisch preparaat omvat een verbinding van de onderhavige uitvinding, propyleenglycol, steriel water, ethanol en natriumchloride. Alternatieve oplosmiddelen die in plaats van propyleenglycol kunnen worden gebruikt, omvatten glycerol en polyethyleenglycol.
30 Geschikte geur- en smaakstoffen, zoals menthol en le- vomenthol, of zoetstoffen, zoals saccharine of saccharine-natrium, kunnen worden toegevoegd aan preparaten van de onderhavige uitvinding die bedoeld zijn voor geïnhaleer-de/intranasale toediening.
35 Preparaten voor geïnhaleerde/intranasale toediening kunnen worden geformuleerd voor onmiddellijke en/of gemodificeerde afgifte met, bijvoorbeeld, poly(DL)melkzuur- 1029799- 53 coglycolzuur (PGLA). Preparaten voor gemodificeerde afgifte omvatten die voor vertraagde, ononderbroken, gepulseerde, gecontroleerde, doelgerichte en geprogrammeerde afgifte.
5 Bij droge-poederinhalatoren en aerosolen wordt de do- seereenheid bepaald door middel van een ventiel dat een afgemeten hoeveelheid afgeeft. Eenheden volgens de onderhavige uitvinding worden in een typisch geval zo ingesteld dat een afgemeten dosis of "puf" wordt afgegeven die de 10 gewenste hoeveelheid van de verbinding van de onderhavige uitvinding bevat. De totale dagelijkse dosis kan in een enkele dosis of, gebruikelijker, als verdeelde doses gedurende de dag worden toegediend.
15 Rectale/intravaginale toediening
De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen rectaal of vaginaal worden toegediend, bijvoorbeeld in de vorm van een suppositorium, pessarium of clysma. Cacaoboter is de traditionele grondstof voor een suppositorium, 20 maar desgewenst kunnen diverse alternatieven worden gebruikt .
Preparaten voor rectale/vaginale toediening kunnen worden geformuleerd voor onmiddellijke en/of gemodificeerde afgifte. Preparaten voor gemodificeerde afgifte omvat-25 ten die voor vertraagde, ononderbroken, gepulseerde, gecontroleerde, doelgerichte en geprogrammeerde afgifte.
<
Oculaire toediening
De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen 30 in een typisch geval ook rechtstreeks aan oog of oor worden toegediend in de vorm van druppels van een fijngemaakte suspensie of een oplossing in isotonische, op de juiste pH gebrachte, steriele zoutoplossing. Andere preparaten die geschikt zijn voor oculaire en orale toediening omvat-35 ten zalven, biologisch afbreekbare (bijv. absorbeerbare gelsponzen, collageen) en niet-biologisch afbreekbare · (bijv. siliconen) implantaten, wafels, lenzen en uit deel- 1029799¾ 54 tjes of blaasjes bestaande systemen, zoals niosomen of li-posomen. Een polymeer zoals verknoopt polyacrylzuur, poly-vinylalcohol, hyaluronzuur, een cellulosepolymeer, bijvoorbeeld hydroxypropylmethylcellulose, hydroxyethylcellu-5 lose of methylcellulose, of een heteropölysaccharidepoly-meer, bijvoorbeeld gelangom, kan worden opgenomen met een conserveermiddel, zoals benzalkoniumchloride. Dergelijke preparaten kunnen ook worden afgegeven door iontoforese.
Preparaten voor oculaire/aurale toediening kunnen 10 worden geformuleerd voor onmiddellijke en/of gemodificeerde afgifte. Preparaten voor gemodificeerde afgifte omvatten die voor vertraagde, ononderbroken, gepulseerde, gecontroleerde, doelgerichte of geprogrammeerde afgifte.
15 Andere technologieën
De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen worden gecombineerd met oplosbare macromoleculaire entiteiten, zoals cyclodextrine en geschikte derivaten daarvan of polymeren die polyethyleenglycol bevatten, ter verbete-20 ring van hun oplosbaarheid, oplossnelheid, smaakmaskering, biologische beschikbaarheid en/of stabiliteit voor het gebruik in één van de voornoemde wijzen van toediening.
Complexen van geneesmiddel-cyclodextrine blijken in het algemeen bijvoorbeeld nuttig voor de meeste doseervor-25 men en toedieningsroutes. Zowel inclusie- als niet-inclusiecomplexen kunnen worden gebruikt. Als een alternatief voor directe complexering met het geneesmiddel kan ( het cyclodextrine worden gebruikt als een hulpadditief, dus als een drager, verdunningsmiddel of solubiliseerder. 30 Voor deze doeleinden worden het vaakst alfa-, bèta- en gamma-cyclodextrinen worden gebruikt, waarvan voorbeelden kunnen worden aangetroffen in internationale octrooiaanvrage no. WO 91/11172, WO 94/02518 en WO 98/55148, waarvan de beschrijvingen hierin worden opgenomen door referentie 35 in hun geheel.
1029799- 55
Dosering
De hoeveelheid van de actieve verbinding die wordt toegediend, zal afhankelijk zijn van de patiënt die wordt behandeld, de ernst van de stoornis of aandoening, de 5 snelheid van de toediening, de aard van' de verbinding en het oordeel van de voorschrijvende arts. Een effectieve dosering ligt in een typisch geval, echter in het bereik van ongeveer 0,001 tot.ongeveer 100 mg per kg lichaamsgewicht per dag, en bij voorkeur van ongeveer 0,01 tot onge-10 veer 35 mg/kg/dag, in enkelvoudige of verdeelde doses. Voor een menselijke persoon van 70 kg zal dit overeenkomen met ongeveer 0,07 tot ongeveer 7000 mg/dag, en bij voorkeur van ongeveer 0,7 tot ongeveer 2500 mg/dag. In sommige gevallen zullen doseerniveaus beneden de ondergrens van 15 het voornoemde bereik meer dan toereikend zijn, terwijl in andere gevallen nog grotere doses kunnen worden gebruikt zonder enige schadelijke bijwerking te veroorzaken, waarbij dergelijke grotere doses in een typisch geval in verscheidene kleinere doses worden verdeeld voor toediening 20 gedurende de dag.
Kit-met-onderdelen
Voor zoverre het gewenst kan zijn om . een combinatie van actieve verbindingen toe te dienen, bijvoorbeeld met 25 als doel het behandelen van een bepaalde ziekte of aandoening, valt het binnen de strekking van de onderhavige uitvinding dat twee of meer farmaceutische preparaten, waar- ♦ van ten minste één een verbinding volgens de onderhavige uitvinding bevat, gemakkelijk kunnen worden gecombineerd .30 in de vorm van een kit die geschikt is voor gezamenlijke toediening van de preparaten. De kit van de onderhavige uitvinding omvat dus twee of meer aparte farmaceutische preparaten, waarvan ten minste een een verbinding van de onderhavige uitvinding bevat, en middelen voor het apart 35 houden van dergelijke preparaten, zoals een houder, een fles met onderverdeling of een onderverdeelde folieverpak-king. Een voorbeeld van een dergelijke kit is de bekende 1029799- ___ _ 56 doordrukverpakking die wordt gebruikt voor de verpakking van tabletten, capsules en dergelijke.
De kit van de onderhavige uitvinding is met name geschikt voor het toedienen van verschillende doseervormen, 5 bijvoorbeeld orale en parenterale, voor het toedienen van de aparte preparaten met verschillende tussenpozen van dosering, of voor het titreren van de aparte preparaten tegen elkaar. Om beter aan de voorschriften te kunnen voldoen bevat de kit in een typisch geval aanwijzingen voor 10 toediening en kan deze zijn voorzien van een zogenaamde geheugensteun.
Voorbeelden
In de volgende voorbeelden betekent "Et" ethyl, bete-15 kent "Ac" acetyl, betekent "Me" methyl, betekent "Ms" me-thaansulfonyl (CH3SO2) , betekent "iPr" isopropyl, betekent "HATU" 2-(7-aza-lH-benzotriazool-l-yl)-1,1,3,3-tetrame-thyluroniumhexafluorfosfaat, betekent "Ph" fenyl, betekent "Boe" tert-butoxycarbonyl, betekent "EtOAc" ethylacetaat, 20 betekent "HOAc" azijnzuur, betekent "NEt3" of "Et3N" triethylamine, betekent "THF" tetrahydrofuran, betekent "DIC" diisopropylcarbodiimide, betekent "HOBt" hydroxyben-zotriazool, betekent "MeOH" methanol, betekent "i-PrOAc" isopropylacetaat, betekent "KOAc" kaliumacetaat, betekent 25 "DMSO" dimethylsulfoxide, betekent "AcCl" acetylchloride, betekent "CDCI3" gedeutereerde chloroform, betekent "MTBE" methyl-t-butylether, betekent "DMF" dimethylformamide, betekent "AC2O" azijnzuuranhydride, betekent "MesSOl" trime-thylsulfoxoniumjodide, betekent "DMAP" 4-dimethylamino-30 pyridine, betekent "dppf" difenylfosfinoferroceen, betekent "DME" ethyleenglycoldimethylether, betekent "HOBT" 1-hydroxybenzotriazool, betekent "EDC" l-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide.
De. volgende voorbeelden worden gegeven als toelich-35 ting van de onderhavige uitvinding. Het zal echter duide- I
lijk zijn dat de 1 onderhavige uitvinding niet beperkt is 1029799- 57 tot de specifieke condities of bijzonderheden die in deze voorbeelden worden beschreven.
De reagentia kunnen worden gesynthetiseerd als hierin, wordt getoond, of zijn verkrijgbaar uit commerciële bron-5 nen (bijv. Aldrich, Milwaukee, WI, VS; Acros, Morris Plains, NJ, VS; Biosynth International, Naperville, IL, VS; Frontier Scientific, Logan, UT, VS; TCI America, Portland, OR, VS; Combi-Blocks, San Diego, CA, VS; Matrix Scientific, Columbia, SC, VS; Alfa Aesar, Ward Hill, MA, VA; 10 Apollo Scientific, V.K., enz.) of kunnen worden gesynthetiseerd door middel van procedures uit de stand der techniek.
De synthese van verscheidene specifieke reagentia wordt getoond in Amerikaanse octrooiaanvrage serieno. 15 10/786.610 met de titel "Aminoheteroaryl Compounds as Pro- tein Kinase Inhibitors", ingediend op 26 februari 2004, en de overeenkomstige internationale octrooiaanvrage PCT/US 2004/005495 met dezelfde titel, die ook is ingediend op 26 februari 2004. Andere reagentia kunnen worden gesyntheti-20 seerd door aanpassing van de procedures daarin, en een deskundige kan deze procedures voor het produceren van de gewenste verbindingen dadelijk aanpassen. Bovendien bevatten deze referenties algemene procedures en specifieke voorbeelden voor de bereiding van een groot aantal hetero-25 .arylaminoverbindingen, en een deskundige kan dergelijke procedures en voorbeelden voor de bereiding van de verbindingen van de onderhavige uitvinding dadelijk aanpassen.
i
De beschrijvingen van deze referenties worden hierin opgenomen door referentie in hun geheel.
30 Wanneer een algemene synthetische procedure, of een voorbeeld ervan wordt genoemd, kan een deskundige, als deze niet worden aangeduid, de gewenste reagentia toch bepalen door deze af te leiden uit de algemene of voorbeeld-procedures. Enkele van de algemene procedures worden gege-| 35 ven als voorbeelden voor het bereiden van specifieke ver bindingen. Een deskundige kan dergelijke procedures dadelijk aanpassen voor de synthese van andere verbindingen.
1029799- 58
Het zal duidelijk zijn dat de R-groepen die in de algemene procedures worden getoond, bedoeld zijn als algemeen en niet-beperkend, en niet overeenkomen met de definities van R-groepen elders in dit document. Elke dergelijke R-groep 5 stelt één of meer chemische resten voor die gelijk aan of verschillend van andere chemische resten kunnen zijn die ook door hetzelfde R-symbool worden voorgesteld. Een deskundige kan dadelijk de reeks van R-groepen onderkennen die geschikt zijn in de voorbeeldsynthesen. Bovendien is 10 de voorstelling van een ongesubstitueerde positie in structuren die worden getoond of genoemd in de algemene procedures slechts om redenen van gemak en sluit deze geen substitutie uit als elders hierin beschreven. Voor specifieke groepen die aanwezig kunnen zijn, hetzij als R-15 groepen in de algemene procedures, hetzij als eventuele substituenten die niet worden getoond, wordt verwezen naar de beschrijvingen in de rest van dit document, waaronder de conclusies, samenvatting en uitvoerige beschrijving.
Enkele van de algemene procedures worden getoond on-20 der verwijzing naar de synthese van verbindingen waarin de 1- (2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxyrest de zuivere (R) — isomeer is, en sommige worden getoond onder verwijzing naar verbindingen waarin de rest een racemisch mengsel is. Het zal duidelijk zijn dat de procedures hierin kunnen 25 worden gebruikt voor het produceren van racemische verbindingen of enantiomeer zuivere (R)-isomeren door het overeenkomstige racemische of enantiomeer zuivere uitgangsma- i teriaal te kiezen.
De hierin getoonde procedures kunnen worden gebruikt 30 voor het produceren van een grote verscheidenheid van enantiomeer zuivere verbindingen door de keuze van het juiste enantiomeer zuivere uitgangsmateriaal. Behalve de hierin getoonde verbindingen, voorziet de onderhavige uitvinding ook in enantiomeer zuivere verbindingen die over-35 eenkomen met de 3-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-pyridine-2-ylamine- en 3- [1-.(2,6-dichloor-3-fluorfenyl) -ethoxy]pyrazine-2-ylamineverbindingen die worden getoond 1029799- 59 in Amerikaanse octrooiaanvrage serieno. 10/786.610 (PCT/US 2004/005495); in Amerikaanse octrooiaanvrage waarvan het serie no. nog dient te worden toegekend, docket no. PC/32546, ingediend op 26 augustus 2004 en getiteld "Pyra-5 zolo-Substituted Aminoheteroaryl Compounds as Protein Ki-nase inhibitors", en in Amerikaanse octrooiaanvrage waar-van het serie no. nog dient te worden toegekend, docket no. PC 32548, ingediend op 26 augustus 2004 en getiteld "Aminoheteroaryl Compounds as Protein Kinase Inhibitors". 10 De beschrijvingen van deze documenten worden hierin opgenomen door referentie in hun geheel.
Gekozen uitgangsmaterialen 5-broom-3-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]- .
15 pyridine-2-ylamine (racemaat):
Br
Cl ch3
20 MrY
IfV nh2
F
1. 2,6-Dichloor-3-fluoracetofenon (15 g, 0,072 mol) 25 in THF (150 ml, 0,5M) werd met behulp van een ijsbad gedurende 10 min. geroerd bij 0°C. Lithiumaluminiumhydride (2,75 g, 0,072 mol) werd langzaam toegevoegd. Het reactie- i mengsel werd gedurende 3 uur geroerd bij omgevingstemperatuur. Het reactiemengsel werd gekoeld in een ijsbad, water 30 (3 ml) werd druppelsgewijs toegevoegd, waarna de langzame toevoeging van 15 % NaOH (3 ml) volgde. Het mengsel werd gedurende 30 min. geroerd bij omgevingstemperatuur. 15 % NaOH (9 ml) en MgS04 werden toegevoegd'en het mengsel werd gefiltreerd om de vaste stoffen te verwijderen. De vaste 35 stoffen werden gewassen met THF (50 ml) en het filtraat werd geconcentreerd, hetgeen 1-(2,6-dichloor-3-fluor- 10297993 60 fenyl) ethanol (14,8 g, 95 % opbrengst) als een gele olie gaf.
^H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,45 (d, 3H), 5,42 (m, 2H), 7,32 (m, 1H), 7,42 (m, 1H) .
5 2. Aan een geroerde oplossing van trifenylfosfine (8,2 g, 0,03 mol) en DEAD (13,65 ml van een 40 % oplossing in tolueen) in THF (200 ml) werd bij 0°C een oplossing van 1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethanol (4,55 g, 0,021 mol) 10 en 3-hydroxynitropyridine (3,35 g, 0,023 mol) in THF (200 ml toegevoegd. De ontstane heldere oranje oplossing werd gedurende 4 uur bij omgevingstemperatuur geroerd onder een stikstofatmosfeer, op welk moment alle uitgangsmaterialen waren verbruikt. Het oplosmiddel werd verwijderd en het 15 onzuivere materiaal droog opgebracht op silicagel, en geë-lueerd met ethylacetaat-hexanen (20:80), hetgeen 3-(2,6-dichloor-3-fluorbenzyloxy)-2-nitropyridine (6,21 g, 0,021 mol, 98 %) als een roze, vaste stof opleverde.
1H-NMR (CDC13, 300 MHz) δ 1,8-1,85 (d, 3H) , 6,0-6,15 (k, 20 1H), 7,0-7,1 (t, 1H), 7,2-7,21 (d, 1H), 7,25-7,5 (m, 2H), 8,0-8,05 (d, 1H) .
3. In een geroerd mengsel van AcOH (650 ml) en EtOH (500 ml) werden 3-(2,6-dichloor-3-fluorbenzyloxy)-2-nitropyridine (9,43 g, 0,028 mol) en ijzervlokken (15,7 g, 0,28 25 mol) gesuspendeerd. Men liet de oplossing door langzame verhitting koken onder terugvloeiing en gedurende 1 uur roeren. Men liet het reactiemengsel afkoelen tot kamertemperatuur en vervolgens werden diethylether (500 ml) en water (500 ml) toegevoegd. De oplossing werd zorgvuldig ge-30 neutraliseerd door de toevoeging van natriumcarbonaat. De gecombineerde organische extracten werden gewassen met verz. NaHC03 (2 x 100 ml), H20 (2 x 100 ml) en geconcentreerde zoutoplossing (1 x 100 ml), vervolgens gedroogd (Na2SO<) , gefiltreerd en drooggedampt onder vacuüm, hetgeen 35 3-(2,6-dichloor-3-fluorbenzyloxy)pyridine-2-ylamine (9,04 g, 0,027 mol, 99 %) als een lichtroze, vaste stof opleverde.
10297995 61 1H-NMR (CDCI3, 300 MHz) 5 1,8-1,85 (d, 3H) , 4,9-5,2 (brs, 2H) , 6,7-6,84 (k, 1H) , 7,0-7,1 (m, 1H) , 7,2-7,3 (m, 1H), 7,6-7,7 (m, 1H) .
5 4. Een geroerde oplossing van 3-(2,6-dichloor-3- fluorbenzyloxy)pyridine-2-ylamine (9,07 g, 0,03 mol) in acetonitril werd gekoeld tot 0°C met behulp van een ijs-bad. Aan deze oplossing werd N-broomsuccinimide (NBS) (5,33 g, 0,03 mol) portiegewijs toegevoegd. Het reactie-10 mengsel werd gedurende 15 min. geroerd bij 0°C. Het reac-tiemengsel werd drooggedampt onder vacuüm. De ontstane donkere olie werd opgelost, in .EtOAc (500 ml) en gezuiverd door chromatografie over silicagel. De oplosmiddelen werden vervolgens in vacuüm verwijderd, hetgeen 5-broom-3-15 (2,6-dichloor-3-fluorbenzyloxy)pyridine-2-ylamine (5,8 g.
0,015 mol, 51 %) als een witte, kristallijne, vaste stof opleverde.
1H-NMR (CDCI3, 300 MHz) 5 1,85-1,95 (d, 3H), 4,7-5,0 (brs, 2H), 5,9-6,01 (k, 1H), 6,8-6,95 (d, 1H), 7,01-7,2 (t, 1H), 20 7,4-7,45 (m, 1H) , 7,8-7,85 (d, 1H).
5-jood-3-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyri-dine-2-ylamine (racemaat): 25 l
Cl 9H3 1 1 nh2
30 F
Aan een oplossing van 3-[l-(2,6-dichloor-3-fluor-fenyl)ethoxyjpyridine-2-ylamine (10,0 g, 33,2 mmol) in acetonitril (600 ml) en azijnzuur (120 ml) werd N-35 joodsuccinimide (11,2 g, 49,8 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd gedurende 4 uur geroerd bij kamertemperatuur en de reactie afgebroken met een Na232Ö5~oplossing. Na indam- 1029799- 62 ping werd het residu verdeeld tussen ethylacetaat en water. De organische laag werd gewassen met 2N NaOH-oplossing, geconcentreerde zoutoplossing en gedroogd op Na2S04. Het onzuivere product werd gezuiverd over een kolom 5 met silicagel, hetgeen 5-jood-3-[l-(2,6-1-dichloor-3-fluor-fenyl)ethoxy]pyridine-2-ylamine (7,1 g, 50 % opbrengst) bezorgde.
MS: m/z =427 [M+l].
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm .1,74 (d, J=6,57 Hz, 3H) , 10 5,91-5,99 (m, 3H) , 6,82 (d, J=l,26 Hz, 1H), 7,46 (t, J=8,7 2 Hz, 1H) , 7,56 (dd, J=8,97, 4,93 Hz, 1H), 7,62 (d, J=1,52 Hz, 1H).
5-broom-3-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxyjpyra-15 zine-2-ylamine (racemaat):
Br C| ch3
20 || °J
NH?
F
1029799- 2,6-Dichloor-3-fluoracetofenon (15 g, 0,072 mol) 25 in THF (150 ml, 0,5M) werd gedurende 10 min. met behulp van een ijsbad geroerd bij 0°C. Lithiumaluminiumhydride (van Aldrich, 2,75 g, 0,072 mol) werd langzaam toegevoegd. Het reactiemengsel werd gedurende 3 uur geroerd bij omgevingstemperatuur. Het reactiemengsel werd gekoeld in een 30 ijsbad, water (3 ml) langzaam druppelsgewijs toegevoegd, hetgeen werd gevolgd door de langzame toevoeging van 15 % NaOH (3 ml) . Het mengsel werd gedurende 30 min. geroerd bij omgevingstemperatuur. 15 % NaOH (9 ml) en MgS04 werden toegevoegd en het mengsel werd gefiltreerd om de vaste 35 stoffen te verwijderen. De vaste stoffen werden gewassen met THF (50 ml) en het filtraat werd geconcentreerd, het- 63 geen 1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethanol (14,8 g, 95 % opbrengst) als een gele olie gaf.
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 1,45 (d, 3H) , 5,42 (m, 2H) , 7,32 (m, 1H). ' 5 2. 5-Broom-3-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-pyrazine-2-ylamine werd bereid door de onderstaande procedure 2 te volgen, uit 1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)-ethanol en 3,5-dibroompyrazine-2-ylamine.
10 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,74 (d, 3H) , 6,40 (m, 1H) , 6,52 (br s, 2H) , 7,30 (m, 1H), 7,48 (m, 1H), 7,56 (s, 1H); MS: m/z — 382 [M+l].
Enantiomeer zuivere uitgangsmaterialen 15 PLE is een enzym dat wordt geproduceerd door Roche en door Biocatalytics Ine. wordt verkocht als een onzuiver esterasepreparaat uit varkenslever, algemeen bekend als PLE-AS (aangeschaft bij Biocatalytics als ICR-123, en verkocht als een suspensie in ammoniumsulfaat) . Het enzym 20 wordt in het CAS-register geclassificeerd als een "carbon-zure esterhydrolase, CAS no. 9016-18-6". Het overeenkomstige enzym classificatieno. is EC 3.1.1.1. Van het enzym is bekend dat het een brede substraatspecificiteit kent voor wat betreft de hydrolyse van een omvangrijke reeks 25 esters. De lipaseactiviteit wordt bepaald met behulp van een werkwijze die gebaseerd is op hydrolyse van ethylbuty-raat in een pH-titrator. 1 LU (lipase-eenheid) is de hoeveelheid enzym die per minuut bij 22°C en een pH van 8,2 wordt vrijgemaakt uit 1 pl titreerbaar boterzuur. Het 30 hierin genoemde preparaat (PLE-AS, als een suspensie) wordt doorgaans verzonden als een ondoorzichtige, bruingroene vloeistof met een opgegeven activiteit van >45 LU/mg (eiwitgehalte ongeveer 40 mg/ml).
35 (IS)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethanol (IS)-l-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethanol, getoond als verbinding (S—1) in de onderstaande schema's, werd be- '1029799- 64 reid door een combinatie van enzymtische hydrolyse van ra-cemische 1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethylacetaat, veres-tering en chemische hydrolyse met inversie volgens schema B. Racemische 1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethylacetaat 5 (verbinding A2) werd bereid volgens schema A.
Schema A
o ï 10 CIO O OH Cl '''CHj |^SpV^CH3 F F Al F A2 15 1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethanol (Al): Natrium- boorhydride (90 mg, 2,4 mmol) werd toegevoegd aan een op-20 lossing van 2',6'-dichloor-3'-fluoracetofenon (Aldrich, catalogus # 52.294-5) (207 mg, 1 mmol) in 2 ml watervrije CH3OH. Het reactiemengsel werd gedurende 1 uur geroerd bij kamertemperatuur en vervolgens ingedampt, hetgeen een kleurloos olieresidu gaf. Het residu werd gezuiverd door 25 flash-chromatografie (elueren met 0-> 10 % EtOAc in hexa-nen) , hetgeen verbinding Al als een kleurloze olie (180 mg; 0,88 mmol; 86,5 % opbrengst) gaf.
MS (APCI)(M-H): 208; 1H-NMR. (400 MHz, chloroform-D) δ ppm 1,64 (d, J=6,82 Hz, 30 3H), 3,02 (d, J=9,85 Hz, 1H) , 6, 97-7,07 (m, 1H), 7,19-7,33 (m, 1H) .
1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethylacetaat (A2):
Azijnzuuranhydride (1,42 ml, 15 mmol) en pyridine (1,7 ml, 35 21 mmol) werden achtereenvolgens toegevoegd aan een oplos sing van verbinding Al (2,2 g, 10,5 mmol) in 20 ml CH2CI2. Het reactiemengsel werd gedurende 12 uur geroerd bij ka- 1,029799- 65 mertemperatuur en vervolgens ingedampt, hetgeen een geelachtig olieresidu gaf. Het residu werd gezuiverd door flash-chromatografie (elueren met 7->9 % EtOAc in hexanen), hetgeen verbinding A2 als een kleurloze olie (2,26 g; 9,0 5 mmol; 85,6 % opbrengst) gaf.
XH-NMR (400 MHz, chloroform-D) δ ppm 1,88 (d, J=6,82 Hz, 3H), 2,31 (s, 3H), 6,62 (k, J=6, 82 Hz, 1H), 7,25 (t, J=8,4 6 Hz, 1H), 7,49 (dd, J=8,84, 5, 05,Hz, 1H) .
10 Schema B
0 0
Cl OH i H3 Cl O XH3 I = F A2 F S-2 R-1 20 \//^) f rY>· i α α oh — X r-GX^ — CX* / xC v X” ; , l S-2 30
Aan een kolf met een mantel van 50 ml die was uitgerust met een pH-elektrode, een mechanische roerder en een 35 toevoersysteem voor base (1M NaOH) werden 1,2 ml 100 mM kaliumfosfaatbuffer met pH = 7,0 en 0,13 ml PLE-AS- suspensie toegevoegd. Vervolgens werd verbinding A2 (0,13 1029799- 66 g, 0,5 mmol, 1,00 eq.) druppelsgewijs toegevoegd en het ontstane mengsel gedurende 20 uur geroerd bij kamertemperatuur, waarbij de pH van het reactiemengsel constant op 7,0 werd gehouden met behulp van 1 M NaOH. Zowel de omzet-5 ting als de ee' s van het reactiemengse'1 werden gevolgd door middel van RP-HPLC, en er werd gestopt nadat 50 % van het uitgangsmateriaal was verbruikt (onder deze omstandigheden ongeveer 17 uur). Het mengsel werd vervolgens driemaal geëxtraheerd met 10 ml ethylacetaat om zowel de ester 10 als de alcohol als een mengsel van R-l en S-2 terug te winnen.
Methaansulfonylchloride (0,06 ml, 0,6 mmol) werd toegevoegd aan een oplossing van een mengsel van R-l en S-2 I
(0,48 mmol) in 4 ml pyridine onder een stikstofatmosfeer. J
15 Het reactiemengsel werd gedurende 3 uur geroerd bij kamertemperatuur en vervolgens ingedampt, waarbij een olie werd i verkregen. Aan het mengsel werd water (20 ml) toegevoegd, en vervolgens EtOAc (20 ml x 2) om de waterige oplossing te extraheren. De organische lagen werden gecombineerd, 20 gedroogd, gefiltreerd en ingedampt, hetgeen een mengsel van R-3 en S-2 gf. Dit mengsel werd zonder verdere zuivering in de volgende stap gebruikt.
1H-NMR (400 MHz, chloroform-D) δ ppm 1,66 (d, J=7,l Hz, 3H) , 1,84 (d, J-l, 1 Hz, 3H) , 2,09 (s, 3H) , 2,92 (s, 3H) , 25 6,39 (k, J-l, 0 Hz, 1H) , 6,46 (k, J=6,8 Hz, 1H),. 6,98-7,07 (m, 1H) , 7,07-7,17 (m, 1H) , 7,23-7,30 (m, 1H), 7,34 (dd, J=8,8, 4,80 Hz, 1H).
Kaliumacetaat (0,027 g, 0,26 mmol) werd Onder een stikstofatmosfeer toegevoegd aan een mengsel van R-3 en S-30 2 (0,48 mmol) in 4 ml DMF. Het reactiemengsel werd gedu rende .12 uur verhit tot 100°C. Aan het reactiemengsel werd . water (20 ml) toegevoegd, en er werd EtOAc (20 ml x 2) toegevoegd om de waterige oplossing te extraheren. De gecombineerde organische laag werd gedroogd, gefiltreerd en 35 ingedampt, hetgeen een olie van S-2 (72 mg, 61 % opbrengst • over twee stappen) gaf. Chiraliteit ee: 97,6 %.
Ü0297 99 67 ^H-NMR (400 MHz, chloroform-D) δ ppm 1,66 (d, J=7,l Hz, 3H) , 2,09 (s, 3H) , 6,39 (k, J=6,8 Hz, 1H) , 7,02 (t, J=8,5 Hz, 1H), 7,22-7,30 (m, 1H).
Natriummethoxide (19 mmol, 0,5 M in methanol) werd 5 bij 0°C onder een stikstofatmosfeer langzaam· toegevoegd , ! aan verbinding S-2 (4,64 g, 18,8 mmol). Het ontstane mengsel werd gedurende 4 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het oplosmiddel werd afgedampt en H20 (100 ml) toegevoegd. Het afgekoelde reactiemengsel werd geneutraliseerd met een 10 bufferoplossing van natriumacetaat-azijnzuur met pH = 7. Ethylacetaat (100 ml x 2) werd toegevoegd - om de waterige oplossing te extraheren. De gecombineerde organische lagen werden gedroogd op Na2S04, gefiltreerd en ingedampt, waarbij een witte, vaste stof (4,36 g, 94,9 % opbrengst) werd 15 verkregen.
SFC-MS: 97 % ee.
1H-NMR (400 MHz, chloroform-D) δ ppm 1,65 (d, J= 6,8 Hz, 3H), 5,58 (k, J=6,9 Hz, 1H), 6,96-7,10 (m, 1H), 7,22-7,36 (m, 1H) .
20 3-[(IR)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-2-nitro-pyridine 25 F-XpC^CH3 30 3-Hydroxy-2-nitropyridine (175 mg, 1,21 mmol) en tri-fenylfosfine (440 mg, 1,65 mmol) werden onder een stikstof atmosfeer achtereenvolgens toegevoegd aan een geroerde 35 oplossing van (IS)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethanol (229, 8 mg, 1,1 mmol) in THF (10 ml). Het reactiemengsel werd gedurende 1 uur op kamertemperatuur gehouden en ver- 1029793a 68 volgens werd bij 0°C diisopropylazodicarboxylaat (0,34 ml, 1,65 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd gedurende nog 12 j ί uur geroerd. Het reactiemengsel werd vervolgens ingedampt ' onder vacuüm, hetgeen een olie gaf. Het residu werd gezui- 5 verd door flash-chromatografie (waarbij Werd geëlueerd met 20—>25 % EtOAc in hexanen), hetgeen de titelverbinding als een witte, vaste stof (321,5 mg, 0,97 mmol; 88,3 % opbrengst) gaf.
MS (APCI) (M+H)+: 331.
10 SFC-MS: 99,5 % ee.
^H-NMR (400 MHz, chloroform-D) 6 ppm 1,85 (d, J=6,6 Hz, 3H) , 6,10 (k, J= 6,6 Hz, 1H) , 7,04-7,13 (m, 1H) , 7,21 (dd, ! J=8,5, 1,14 Hz, 1H), 7,30 (dd, J=9,0, 4,9 Hz, 1H) , 7,37 ! (dd, J= 8,6, 4,6 Hz, 1H) , 8,04 (dd, J=4,6, 1,3 Hz, 1H) .
15 3-[{IR)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyridi-ne-2-amine j 20 .f** ΡΛ^γΟΗ3 " °X> - H2N^N ; 25
Ijzer (365 mg) werd bij 0°C toegevoegd aan een geroerde oplossing van 3-[ (li?)-1-(2, 6-dichloor-3-fluor-fenyl)ethoxy]-2-nitropyridine (321 mg, 0,97 mmol) in een 30 mengsel van EtOH (2 ml) en 2M HC1 (0,2 ml). De ontstane oplossing werd gedurende 2 uur verhit tot 85°C. Celite (0,5 g) werd aan het afgekoelde reactiemengsel toegevoegd.
Dit mengsel werd gefiltreerd door een laag Celite en ingedampt, hetgeen de titelverbinding als een donkere olie 35 gaf.
MS (APCI)(M+H)+: 301.
(10297 99' 69 5-broom-3-[1(R)-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-pyridine-2-ylamine; Γ
Cl CH3 ΛΛο\ν (i A. nh2 y^cl
F
10
De enantiomeer zuivere R-isomeer werd bereid als hierboven beschreven voor het racemaat, maar met behulp van de hierboven beschreven enantiomeer zuivere uitgangs-15 materialen.
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,74 (d, 3H), 6,40 (m, 1H), 6,52 (br s, 2H), 7,30 (m, 1H), 7,48 (m, 1H), 7,56 (s, 1H); MS: m/z = 382 (M+l).
20 5-j ood-3-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]- pyridine-2-ylamine 25 VCI CH3 Λ (ΥΛ* ll JL nh2
F
30
Perjoodzuur (60 mg, 0,24 mmol), jood (130 mg, 0,5 mmol) en zwavelzuur (0,03 ml) werden achtereenvolgens toegevoegd aan een geroerde oplossing van 3-[(IR)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy)pyridine-2-amine (0,97 mmol) 35 . in een mengsel van azijnzuur (3 ml) en H20 (0,5 ml). ' De ontstane oplossing werd gedurende 5 uur verhit tot 80°C. Na af koelen van het reactiemengsei werd de reactie afge- 1029799¾ 70 broken met Na2S03 (80 mg) . Het reactiemengsel werd basisch gemaakt met verzadigde Na2C03 (2 x 100 ml) tot pH = 7. CH2CI2 (2 x 50 ml) werd toegevoegd voor het extraheren van de waterige oplossing. De gecombineerde organische lagen 5 werden gedroogd op Na2SC>4, vervolgens gefiltreerd en onder vacuüm geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door flash-chromatografie (waarbij werd geëlueerd met 35—>40 % EtOAc in hexanen), hetgeen de titelverbinding als een gele olie (254 mg; 0,6 mmol; 61,6 % opbrengst) gaf.
10 MS (APCI)(M+H)+: 426.
1H-NMR (400 MHz, chloroform-D) δ ppm 1,81 (d, J=6,8 Hz, 3H) , 4,86 (s, 2H) , 5,98 (k, J= 6,57 Hz, 1H) , 6,96 (d, J= 1,5 Hz, 1H), 7,08 (dd, J=9,0, 8,0 Hz, 1H) , 7,31 (dd, J=8,8, 4,8 Hz, 1H), 7,78 (d, *>1,8 Hz, 1H) .
15 5-broom-3-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-pyrazine-2-ylamine:
Br
20 I
Cl ch3 n·^ rWv· V-ci NH*
F
25
De titelverbinding werd bereid volgens procedure 2 uit (IS)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethanol.
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,53 (s, 1H) , 7,48 (m, 1H) , 30 7,39 (t, 1H), 6,48 (s, 2H), 6,41 (k, 1H), 1,74 (d, 3H); LCMS: 381 [M+l]. c-Met Ki: 0,796 μΜ.
Algemeen schema I voor de synthese van 5-aryl-3-35 (gesubstitueerde benzyloxy)pyridine-2-ylamine (6): 1029799- 71 5 · .. JBl rj^*| (f^l ΓΊ, X ^ Fe_-^ \V^VyN .
HO'y + f J l^J J,0 AcOH/MeOH NH2 , N0’ iT, FT 3 . rf . . « .
10 Br Aryl
NBSCH3CN jfS Pd(PPh3)2CI2DME^a2CO3^2O80°C
f/T νη2 arylboronzuuf nh2 R 5 R' 6 15
Algemene procedure 1 voor de synthese van 5-broom-3-(gesubstitueerde benzyloxy)pyridine-2-ylamine (5): 20 1. Bereiding van 3-(gesubstitueerde benzyloxy)-2- nitropyridine (3): Aan een geroerde oplossing van CS2CO3 (1,0 molequivalent) in DMF (0,2 M) die 3-hydroxy-4-nitropyridine (Aldrich, 1,0 molequivalent) bevat, wordt onder een ^-atmosfeer gesubstitueerde benzylbromide (1,0 25 molequivalent) toegevoegd. Het mengsel wordt gedurende 6 uur geroerd bij omgevingstemperatuur. Het reactiemengsel wordt vervolgens verdund met EtOAc en verdeeld met H20. De waterlaag wordt tweemaal geëxtraheerd met EtOAc. De organische lagen worden vervolgens gecombineerd, gewassen met 30 H20 en geconcentreerde zoutoplossing, gedroogd op Na2S04, gefiltreerd en drooggedampt onder vacuüm, hetgeen het 3-(gesubstitueerde benzyloxy)-2-nitropyridine (3) als eën vaste stof oplevert.
I · 35 2. Bereiding van het 3-(gesubstitueerde benzyloxy) pyridine-2-ylamine (4): Aan een geroerd mengsel van
AcOH en EtOH (1,3:1) worden 3-(gesubstitueerde ben ^yloxy- 1029799- 72 2-nitropyridine (1,0 molequivalent, 1M) en ijzervlokken (1,0 molequivalent) toegevoegd. Men verhit het reactie-mengsel langzaam tot terugvloeiing en laat gedurende 1 uur roeren. Men laat het reactiemengsel afkoelen tot kamertem-5 peratuur en vervolgens wordt gefiltreerd door een laag Celite. Het ontstane filtraat wordt geneutraliseerd met gec. NH«OH en vervolgens driemaal geëxtraheerd met EtOAc. De gecombineerde organische extracten worden gewassen met verzadigde NaHCOa, H2O en geconcentreerde zoutoplossing, 10 gedroogd op Na2S04, gefiltreerd en drooggedampt onder vacuüm, hetgeen het 3-(gesubstitueerde benzyloxy)-pyridine-2-ylamine (4) als een vaste stof oplevert.
3. Bereiding van het 5-broom-3-(gesubstitueerde ben-15 zyloxy)pyridine-2-ylamine (5): Een geroerde oplossing van het 3- (gesubstitueerde benzyloxy)pyridine-2-ylamine (4) (1,0 molequivalent) in acetonitril wordt met behulp van een ijsbad gekoeld tot 0°C. Aan deze oplossing wordt N-broomsuccinimide (Aldrich, 1,0 molequivalent) portiegewijs . 20 toegevoegd. Het reactiemengsel wordt gedurende 15 min. geroerd bij 0°C. Het reactiemengsel wordt drooggedampt onder vacuüm. De ontstane donkere olie wordt opgelost in EtOAc en verdeeld met H2O. De organische laag wordt vervolgens tweemaal gewassen met verzadigde NaHC03 en eenmaal met ge-25 concentreerde zoutoplossing. Geactiveerde houtskool wordt aan de organische laag toegevoegd en er wordt verwarmd tot terugvloeiing. Men laat de oplossing vervolgens afkoelen tot kamertemperatuur en er wordt gefiltreerd door een laag Celite. De organische laag wordt vervolgens onder vacuüm 30 ingedampt tot eenderde van het oorspronkelijke volume. De vaste stoffen worden vervolgens afgefiltreerd, hetgeen het 5-broom-3-(gesubstitueerde benzyloxy)pyridine-2-ylamine (5) als een vaste stof oplevert.
35 Algemeen schema II voor de synthese van 5-aryl-3-(gesubstitueerde benzyloxy)pyrazine-2-ylamine 1029799- 73
RcKPPhafeCii or Br DME/NajC0yH20 ΝΛ„.
terug- vloeiing 10
Algemene procedure 2 voor de synthese van 5-broom-3-(gesubstitueerde benzyloxy)pyrazine-2-ylamine.
15 f
1 1 R NaH/rHF, rYoV
Β^ΥΝ " koken NH2 9Π NH2 onder ^•u terug- f vloeiing .
25 Aan een in ijs gekoelde oplossing van de gesubstitu eerde benzylalcohol (1,0 molequivalent) en watervrije te-trahydrofuran (0,14M) werd onder een stikstofatmosfeer na- , triumhydride (1,0 molequivalent) langzaam toegevoegd. Na 30 min. roeren werd 3,5-dibroompyrazine-2-ylamine (1,0 30 molequivalent) in tetrahydrofuran (0,56 M) door snel toedruppelen uit een druppeltrechter toegevoegd. Zodra de ' toevoeging was voltooid werd het ijsbad verwijderd en het reactiemengsel onder een stikstofatmosfeer gekookt onder terugvloeiing. De reactie werd gevolgd door middel van om-35 gekeerde fase-HPLC. Na 18 uur liet HPLC zien dat het grootste gedeelte van het uitgangsmateriaal, het 3,5-dibroompyrazine-2-ylamine, was verbruikt, en vervolgens 1029799- 74 liet men het reactiemengsel afkoelen tot kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd geconcentreerd, verdund met ethylacetaat en gewassen met geconcentreerde zoutoplossing. De organische laag werd gedroogd op watervrije mag-5. nesiumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd. Het onzuivere product werd gezuiverd met behulp van silicagel, waarbij werd geëlueerd met 1:1 = ethylacetaat/dichloormethaan, hetgeen het 5-broom-3-(gesubstitueerde benzyloxy)pyrazine- 2-ylamine als een witte, vaste stof in 60-90 % opbrengst 10 opleverde.
Algemene procedure 3 voor de synthese van 5-aryl-3-(gesubstitueerde benzyloxy)pyridine-2-ylamine en 5-aryl-3-(gesubstitueerde benzyloxy)pyrazine-2-ylamine.
15
Pd(PPh3)zCi2 Aryl ?r DME/Na2C03/H20 γΑ^
20 ΧΤ· 80°C
arylboronzuur 1/^ NH2
n .. R
Y:CHjsjcN
25
Een mengsel van 5-broom-3-(gesubstitueerde benzyl-oxy)pyridine-2-ylamine of 5-broom-3-(gesubstitueerde benzyloxy) pyrazine-2-ylamine (1 molequivalent), aryl-boron-zuur of arylboronzure ester (1,2 molequivalent), bis- 30 (trifenylfosfine)palladium(II)chloride (0,03 molequivalent) en natriumcarbonaat (3,0 molequivalent) in ethyleen-glycoldimethylether en water (10:0,5; 0,03M) wordt ontgast en driemaal doorgeblazen met stikstof, en vervolgens onder stikstof gedurende de nacht verhit onder terugvloeiing.
35 Men laat het reactiemengsel afkoelen tot omgevingstemperatuur en er wordt verdund met ethylacetaat.
1029799- 75
Het mengsel wordt gewassen met water, geconcentreerde ; zoutoplossing, gedroogd op Na2S04 en gezuiverd over een ko lom met silicagel, hetgeen het 5-aryl-3-(gesubstitueerde benzyloxy)pyridine-2-ylamine of het 5-aryl-3-(gesubstitu-5 eerde benzyloxy)pyrazine-2-ylamine oplevert.
Algemene procedure 4 voor de amideringsreactie van het 6-amino-5-(gesubstitueerde benzyloxy)pyridine-3-ylJbenzoë-zuur: 10 ^9 r*J?
. , U>W
l·5 . . \ HOBt/EDC T
+ HNR'R* --- (f-V
1 J. DMF 1 J,
•£T°X <T°X
20
Aan een oplossing van 6-amino-5-(gesubstitueerde benzyloxy) pyridine-3-yl]benzoëzuur (1 molequivalent), 1-hydroxybenzotriazoolhydraat (HOBT, 1,2 molequivalent) en 25 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimidehydrochloride (EDC, 1,2 molequivalent) in DMF (0,2 M) wordt het amine (1,2 molequivalent) toegevoegd. De reactieoplossing wordt 4 gedurende de nacht geroerd bij kamertemperatuur, vervolgens verdund met EtOAc en verdeeld met H20. De organische 30 laag wordt afgescheiden en de waterlaag geëxtraheerd met EtOAc. De organische lagen worden gecombineerd, gewassen met verzadigde NaHC03 en drooggedamot onder vacuüm. Het materiaal wordt gezuiverd met behulp van kolomchromatogra-fie (silicagel, 99:1 tot 95:5 = CH2Cl2/MeOH) . De fracties 35 die het product bevatten worden onder vacuüm geconcentreerd, hetgeen het amideproduct oplevert.
1029799- 76
Algemene procedure 5 voor de bereiding van het 3-(gesubstitueerde benzyloxy)-5- (3-dialkylaminomethyl-lii-indool-5-yl)pyridine-2-ylamine: 5
ΡΤΛ,Η + R-R-NH FOr,naMeh^ . . (Xr * X
fX
h·.. P^Th2 ! AICI3/CH2CI2 . f Jj \·^ nh2 !
R . ' . I
20 Aan een oplossing van benzotriazool (1,0 molequiva- lent) in dichloormethaan (0,2 M) wordt het amine (1,0 mol-equivalent) toegevoegd. Het reactiemengsel wordt gedurende 5 min. geroerd bij kamertemperatuur waarna formaldehyd (37 gew.%, 1,0 molequivalent) wordt toegevoegd. Het reactievat 25 wordt gesloten en er wordt gedurende 3 uur geroerd bij kamertemperatuur. Zodra TLC (10 % ethylacetaat: dichloormethaan) het verbruik van het uitgangsbenzotriazool laat , zien, wordt het reactiemengsel gedroogd met watervrije magnesiumsulfaat (10 g), gefiltreerd en in vacuüm gecon- 30 centreerd. Het onzuivere product wordt gezuiverd met een kolom met silicagel, waarbij wordt geëlueerd met 1:1 = ethylacetaat:dichloormethaan, hetgeen het gewenste product als een witte, vaste stof oplevert.
Aan een oplossing van het aminomethylbenzotriazool-35 tussenproduct (1,0 molequivalent) in dichloormethaan (0,43 M) worden aluminiumchloride (2f0 molequivalent) en vervolgens 3-(2,6-dichloorbenzyloxy)-5-(ltf-indool-5-yl)- 1029799- 77 pyridine-2-ylamine (1,1 molequivalent) toegevoegd. Het reactievat wordt gesloten en het reactiemengsel gedurende 3-4 uur onder roeren verwarmd tot 40°C. Het reactiemengsel wordt vervolgens van de verwarming genomen en men laat af-5 koelen tot kamertemperatuur. Het reactiemengsel wordt verdund met natriumhydroxide (0,2 M) en chloroform, er wordt opnieuw gesloten en vervolgens krachtig geroerd bij kamertemperatuur om het residu in de kolf op te lossen. De chloroform wordt uit de waterlaag geëxtraheerd, gedroogd 10 op watervrije natriumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd. Het onzuivere product wordt gezuiverd met een kolom met silicagel, waarbij eerst wordt geelueerd met 1:1 = ethyla-cetaatidichloormethaan, waarbij de minder polaire verontreinigingen worden geëlueerd, en het product vervolgens 15 geëlueerd met 90:9:1 = chloroform:methanol:ammoniumhydro-xide (opbrengsten 10-67 %).
Algemene procedure 6 voor de synthese van het 3-(gesubstitueerde benzyloxy)-5-fenylpyridine-2-ylamine met 20 behulp van 3-(3-methoxybenzyloxy)-5-fenylpyridine-2-yl-amine: O O 0 H2 NaH/chloortrityl ^ 30 TX%lO --
GO
1029799- 78
Aan een oplossing van 3-benzyloxy-5-fenylpyridine-2-ylamine (voorbeeld 1-87, 3, 27 g, 11,8 inmol) in methanol (30 ml) werd Pd(0H)2 (2,5 g, 2,37 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd driemaal ontgast en doorgeblazen met water-5 stof, en vervolgens onder de druk van een gasfles met waterstof gedurende 5 uur geroerd. Het reactiemengsel werd gefiltreerd door een laag Celite, gewassen met methanol en ingedampt. Na drogen onder hoogvacuüm werd 2-amino-5-fenylpyridine-3-ol verkregen (2,04 g, 93 % opbrengst).
10 MS: m/z = 187 [M+l].
Aan een oplossing van 2-amino-5-fenylpyridine-3-ol (2,04 g, 10,95 mmol) in THF (watervrije, 30 ml) werd NaH (1,31 g, 32,85 mmol) langzaam toegevoegd. Het mengsel werd gedurende 20 min. geroerd onder stikstof en vervolgens . 15 werd tritylchloride (3,66 g, 13,14 mmol) toegevoegd. Het reactiemengsel werd onder stikstof gedurende de nacht geroerd bij kamertemperatuur. Het oplosmiddel werd afgedampt en het residu opgelost in dichloormethaan, gewassen met water en gedroogd met Na2S04. Na filtratie en indampen werd 20 het onzuivere product gezuiverd over een kolom met silica-gel, waarbij werd geëlueerd met EtOAc-hexaan (1:10), hetgeen 5-fenyl-2-(tritylamino)pyridine-3-ol (1,09 g, 23 % opbrengst) bezorgde.
MS: m/z - 427 [M+l].
25 Aan een oplossing van 5-fenyl-2-(tritylamino)- pyridine-3-ol (100 mg, 0,24 mmol) in THF (3 ml) werd CS2CO3 (79 mg, 0,24 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd gedurende 20 min. geroerd bij kamertemperatuur en vervolgens werd 3-methoxybenzylbromide (0,037 ml, 0,26 mmol) toegevoegd. Het 30 reactiemengsel werd gedurende de nacht geroerd bij kamertemperatuur, verdund met dichloormethaan (5 ml) en gefiltreerd om de zouten te verwijderen. De oplosmiddelen werden afgedampt en het residu werd opgelost in 10 % triflu-orazijnzuur in dichloormethaan (2 ml) . Het reactiemengsel 35 werd gedurende 2 uur geroerd en ingedampt. Het residu werd opgelost in dichloormethaan, gewassen met verz. NaHC03 en gedroogd op Na2SC>4. Na filtratie en concentratie werd het 1029799- 79 onzuivere product gezuiverd over een kolom met silicagel, waarbij werd geëlueerd met methanol-dichloormethaan (gradiënt van 3 % tot 15 %), hetgeen 3-(3-methoxybenzyloxy)-5-fenylpyridine-2-ylamine als een witte, vaste stof (43,5 5 mg, 60 % opbrengst) bezorgde.
Algemene procedure 7 voor de synthese van het 3-(gesubstitueerde benzyloxy)-5-arylpyridine-2-ylamine met behulp van 5-[4-(2-morfoline-4-ylethoxy)fenyl)-3-(3-nitro-10 benzyloxy)pyridine-2-ylamine: is n rN° </
Jj!' * pr- ^== ^ o n HOAYN I«i U "Hi ' nh2 no2
Aan een oplossing van 2-amino-5-[4-(2-morfoline-4-yl-25 xy)fenyl]pyridine-3-ol (bereid volgens de procedures voor
2-amino-5-fenylpyridine-3-ol in voorbeeld 1-88 van Amerikaanse octrooiaanvrage serieno. 10/786.610 (PCT/US
4 2004/005495) (45, 5 mg, 0,14 mmol) in DM F (3 ml) werd bij 0°C NaH (60 % in olie) (5,6 mg, 0,14 mmol) toegevoegd, en 30 het mengsel werd gedurende 20 min. geroerd bij 0°C. Vervolgens werd l-broommethyl-3-nitrobenzeen toegevoegd en het mengsel gedurende 1 uur bij 0°C en gedurende 2 uur bij kamertemperatuur geroerd. Koude 1 N HC1 in water (0,1 ml) werd toegevoegd en het oplosmiddel verwijderd onder ver-35 minderde druk. Het residu werd gezuiverd met chromatogra-fie over silicagel (CH2Cl2:MeOH:NH4OH = 100:3:0,3), hetgeen 5—[4 —(2—morfoline—4—ylethoxy)fenyl]-3 ~(3—mtrobenzyloxy) — 1029799- pyridine-2-ylamine als een gele, vaste stof (44 mg, 68 %) gaf.
80
Algemene procedure 8 voor de synthese van {4-[6-amino-5 5-(gesubstitueerde benzyloxy)pyridine-3-yl]fenyl}-[(2i?)-2- pyrrolidine-l-ylmethylpyrrolidine-l-yl]methanon met behulp van {4-[6-amino-5-(4-fluor-2-trifluormethylbenzyloxy)- pyridine-3-yl] fenyl}-[ (22?)-2-pyrrolidine-l-ylmethylpyrro-lidine-l-yl]methanon: 10
Oy°H ^ 15 A X" Ö o yo pp0<VN ♦ U-- JL + i HPB^EDC Aj
V NH’ ο·Β·ο ryvY hÖ dmf I
-Γ—V ^ NHj jfV
. ^ cr°X i
Q Q
Hj/KB&PctfC V\
manna f w,MII»>^OP
4 ( 1029799- 81 1. 6-Amino-5-benzyloxy-nicotinezuur werd bereid vol gens procedure 3 uit 3-benzyloxy-5-broompyridine-2-ylamine en 4-(4,4,5, 5-tetramethyl[1,3,2]dioxaborolaan-2-yl)- benzoëzuur.
5 MS: m/z = 321 (M+l).
2. [4-(6-Amino-5-benzyloxypyridine-3-yl) fenyl] - [ (2R) - 2-pyrrolidine-l-ylmethylpyrrolidine-l-yl]methanon werd bereid door procedure 4 te volgen met 6-amino-5-benzyloxy- 10 nicotinezuur en (2R)-pyrrolidine-l-ylmethylpyrrolidine (bereid in voorbeeld 1-39 van Amerikaanse octrooiaanvrage serieno. 10/786.610 (PCT/ÜS 2004/005495)).
MS: m/z = 457 (M+l).
15 3. Aan een oplossing van [4-(6-amino-5-benzyloxy- pyridine-3-yl) fenyl]-[ (2J?)pyrrolidine-l-ylmethylpyrroli-dine-l-yl]methanon (2,28 g, 5,00 mmol) in methanol (25 ml) werd 10 % Pd/C (100 mg) toegevoegd. Het mengsel werd driemaal ontgast en doorgeblazen met waterstof, en vervolgens 20 gedurende de nacht geroerd onder de druk van een gasfles met waterstof. Het reactiemengsel werd gefiltreerd door een laag Celite, gewassen met methanol en ingedampt. Na drogen onder hoogvacuüm werd [4-(6-amino-5-hydroxy-pyridine-3-yl)fenyl]-[(2R)-2-pyrrolidine-l-ylmethyl-25 pyrrolidine-l-yl)methanon verkregen (1,74 g, 95 % opbrengst) .
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,79 (s, 1H) , 7,54 (m, 3H) , 7,46 (m, 2H) , 7,14 (s, 1H) , 5,68 (s, 2H) , 4,22 (m, 1H) , 3,45 (m, 2H) , 2,66 (m, 1H) , 2,52 (m, 4H) , 1,96 (m, 2H) , 30 1,84 (m, 3H), 1,64 (m, 4H) ; MS: m/z = 367 (M+l).
4. Aan een geroerde oplossing van [4-(6-amino-5- hydroxypyridine-3-yl)fenyl]-[(2R)-2-pyrrolidine-l-35 ylmethylpyrrolidine-l-yl]methanon (100 mg, 0,27 mmol) in watervrije DMF (15 ml) werd onder een N2-atmosfeer bij 0°C natriumhydride (60 % dispersie in minerale olie, 11 mg, 1029799- 82 0,49 mmol) toegevoegd. Men liet het mengsel gedurende 30 min. roeren bij 0°C. 1-(Broommethyl)-4-fluor-2-(trifluor- methyl)benzeen (0,046 ml, 0,27 mmol) werd toegevoegd. Het mengsel werd gedurende 2 uur geroerd bij kamertemperatuur.
5 Het reactiemengsel werd verdund met EtOAC en verdeeld met H2O. De waterlaag werd geëxtraheerd met EtOAc (2 x 25 ml) . De organische lagen werden gecombineerd, gewassen met H2O (1 x 15 ml), geconcentreerde zoutoplossing (1 x 15 ml), gedroogd op MgSO^, gefiltreerd, geconcentreerd en gezui-10 verd over een kolom met silicagel, hetgeen {4-[6-amino-5-(4-fluor-2-trifluormethylbenzyloxy)pyridine-3-yl]fenyl}-[(2R)-2-pyrrolidine-l-ylmethylpyrrolidine-l-yl]methanon als gebroken-witte kristallen opleverde.
.15 Algemene procedure 9 voor de synthese van 2-dialkyl-aminoethaansulfonzuur[6-amino-5-(gesubstitueerde benzyl-oxy)pyridine-3-yl]fenylamide met behulp van 2-diethyl-aminoethaansulfonzuur{4-[6-amino-5-(2-chloor-3,6-difluor-benzyloxy)pyridine-3-yl]fenyl}amide.
20 9 ς, ! ft 0 CH C. Hfo φ φ — i k
A 0 A A
9 *
Br Pd(PPh3)iClï ifS ^
F DME/Na-COj/K.O Y
yC nh* fVvT
F Y^C1
F
1029799- 83 1. Aan een oplossing van 4-(4,4,5,5-tetramethyl-[1,3,2]dioxoborolaan-2-yl)fenylamine (5 g, 22,8 mmol) in dichloormethaan (120 ml) werd N-methylmorfoline (7,5 ml, 68,4 mmol) toegevoegd. Dit mengsel werd onder een stik-5 stofatmosfeer gekoeld tot 0°C. 2-Chlóorethaansulfonyl-chloride (2,5 ml, 23,9 mmol) in dichloormethaan (60 ml) werd vervolgens druppelsgewijs onder roeren toegevoegd. Zodra de toevoeging was voltooid werd de kolf gedurende 1 uur bij 0°C en vervolgens bij kamertemperatuur geroerd 10 terwijl de reactie werd gevolgd door middel van TLC (1:1 = ethylacetaat:hexanen) en ninhydrine als kleurstof werd gebruikt. Na 4 uur roeren resteerde nog enige boronzure ester als uitgangsmateriaal en werd nog 0,2 equivalent (0,5 ml) 2-chloorethaansulfonylchloride in dichloormethaan (25 15 ml) druppelsgewijs toegevoegd bij kamertemperatuur. Na 1 uur liet TLC zien dat de boronzure ester was verbruikt en werd het gehele reactievolume verminderd tot de helft door middel van rotatieverdamping. De inhoud werd verdund met ethylacetaat (200 ml) , gewassen met 50 % zoutoplossing (2 20 x 100 ml), gedroogd op watervrije natriumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd. Het onzuivere product werd gezuiverd met behulp van silicagel (120 g) en elueren met 10 % ethylacetaat in dichloormethaan, hetgeen etheensulfonzuur-[4-(4,4,5,5-tetramethyl[1,3,2]dioxoboralaan-2-yl)fenyl]-25 amide als een witte, vaste stof (6,2 g, 20,2 mmol, 89 % opbrengst) opleverde.
XH-NMR (CDCI3, 300 MHz) δ 7,76 (d, J=8,4, 2H) , 7,12 (d, J=8,45, 2H) , 6,65 (s, 1H) , 6,55 (dd, J=9,77, 6, 7, 1H) , 6, 31 (d, J=16,54, 1H) , 5,96 (d, J^9,8, 1H), 1,33 (s, 12H). 30 2. Aan een oplossing van etheensulfonzuur[4-(4,4,5,5-tetramethyl[1,3,2]dioxoboralaan-2-yl)fenyl]amide (0,500 g, 1,6 mmol) in methanol (5 ml) werd diethylamine (0,707 g, 4,0 mmol) in methanol (5 ml) toegevoegd, en het reactie-35 mengsel werd geroerd bij kamertemperatuur. De reactie werd gevolgd door middel van TLC (1:1 = ethylacetaat: hexanen). Na 2 uur werd het reactiemengsei in vacuüm geconcentreerd 1029799- 84 en het residu verdeeld tussen ethylacetaat (50 ml) en water (50 ml) . De ethylacetaat werd vervolgens gewassen met 50 % zoutoplossing (1 x 50 ml), gedroogd op watervrije na-triumsulfaat, gefiltreerd en in vacuüm geconcentreerd. Het 5 onzuivere product werd gezuiverd met behulp van een kolom die was voorgepakt met 10 g silicagel, waarbij werd geëlu-eerd met 1:1 = ethylacetaat:dichloormethaan, hetgeen 2- diethylaminoethaansulfonzuur[4-(4,4,5,5-tetramethyl-[1,3,2]dioxoboralaan-2-yl)fenyl]amide als een witte, vaste 10 stof (0,346 g, 0,90 mmol, 56 %) bezorgde.
XH-NMR (CDC13, 300 MHz) δ 7,78 (d, J=6,65, 2H) , 7,15 (d, J=6,66, 2H), 3,20 (m, 2H), 3,0 (m, 2H) , 2,55 (k, J=7,15, 7,16, 4H), 1,34 (s, 12H), 1,05 (t, J=7,19, 6H).
15 3. 2-Diethylaminoethaansulfonzuur(4-[6-amino-5-(2- chloor-3,6-difluorbenzyloxy)pyridine-3-yl]fenyljamide werd bereid door de algemene koppelingsprocedure 3 van Suzuki te volgen met 5-broom-3-(2-chloor-3,6-difluorbenzyloxy)-pyridine-2-ylamine en 2-diethylaminoethaansulfonzuur[4- 20 (4,4,5,5-tetramethyl[1,3,2]dioxoborolaan-2-yl)fenyl]amide, dat werd bereid in deel 2, als een witte, vaste stof in 60 % opbrengst.
Algemene procedure 10: 25 1. 4-(4,4,5,5-Tetramethyl[1,3,2]dioxoborolaan-2-yl)- aniline (3 g, 0,013.mol) werd opgelost in dichloormethaan (350 ml) waaraan pyridine (1,02 g, 0,013 mol) en 4-nitrofenylchloorformiaat waren toegevoegd. Het reactie-mengsel werd gedurende 13 uur geroerd, waarna TLC-analyse 30 het verbruik van alle uitgangsmaterialen aantoonde. De oplossing werd gewassen met verzadigde NaHC03 (3 x 50 ml), water (3 x 50 ml) en geconcentreerde zoutoplossing (3 x 50 ml) . De organische laag werd gedroogd op NaaSO* en het oplosmiddel verwijderd, hetgeen een witte, kristallijne vas-35 te stof, [4-(4,4,5,5-tetramethyl[1,3,2]dioxoborolaan-2-yl-fenylcarbaminezure fenylester opleverde; 4,45 g, 91 %.
1029799- 85.
1H-NMR (CDC13, 300 MHz) 6 1,4 (s, 12H) , 7,1 (brs, 1H) , 7,3 (d, 2H), 7,5 (d, 2H), 7,8 (d, 2H) , 8,3 (d, 2H) .
5
0 LD
NH, Λ, VW
(S. Λ ö . hnr
K*? CH2Cl2/Reflux T R· O
o'bo n°2 ρΒ~?· hnAn-r 10 X fr
O Br T
hmAn.R' CI CH A. Cl CH3 Λ
Ar g; Pd<PPh3)«, AXpXfN
ij + ILAl^Th, Na®co3 V^a NH* ^f^ci NHa DME/H2O τ a
15 σΒ*ο F
2 . [4-(4,4,5,5-Tetramethyl[1,3,2]dioxoborolaan-2-yl)- 20 fenylcarbaminezure fenylester (500 mg, 1,3 .mmol) werd opgelost in watervrije dichloormethaan (0,5 ml) en triethylamine (0,187 ml, 1,3 mmol). Aan deze geroerde oplossing werd 1-methylpiperazine (of een ander amine) (0,144 ml, 1,3 mmol) toegevoegd. De oplossing werd onmid-25 dellijk geel en TLC-analyse liet het verbruik van alle uitgangsmateriaal zien. Het reactiemengsel werd gewassen met water (3 x 500 ml, verzadigde natriumbicarbonaat (2 x 200 ml) en gedroogd voorafgaand aan de verwijdering van de oplosmiddelen in vacuüm. De boronzure esters werden zonder 30 zuivering gebruikt.
3. Aan een mengsel van 2,1 ml DME en 2,8 ml 2N Na2CC>3 werden 100 mg van het bromide-tussenproduct, 1 equivalent boronzuur en 5 mol% Pd(PPh3)4 toegevoegd. Het reactiemengsel werd gedurende de nacht geroerd en verhit tot 80eC in 35 een flesje van ongeveer 3,7 ml. Het onzuivere mengsel werd gefiltreerd door Celite en geëxtraheerd met. EtOAc (2 x 100 ml). De gecombineerde extracten werden gewassen met N0HCO3 1029799- 86 (1 x 100 ml), gevolgd door water (1 x 100 ml en vervolgens verzadigde zoutoplossing (1 x 100 ml) . Het ontstane mengsel werd in vacuüm geconcentreerd. Het residu werd opgelost in hexaan en gezuiverd door kolomchromatografie.
5
Algemene procedure 11; 10 u (Yk , 0 XVQ _21_ ifV'0^ *
15. IL^La ch,cn/acoh El,WTHF
ΜΗ, H
1 Λ 111 v/.
25«tFA/CH.CL f I lil Λ. 1. Pyridne/CHjO, X
25%TFA/CH,Cla fS -- ? I
20 {Ί τ 2'NHHR’ ιΓτ"° τ' } 0 k : K^a nh,
F
25 1. Aan een oplossing van 3-[1-(2,6-dichloor-3-fluor-fenyl)ethoxy]pyridine-2-ylamine (10,0 g, 33,2 mmol) in f acetonitril (600 ml) .en azijnzuur (120 ml)' werd N-joodsuccinimide (11,2 g, 49,8 mmol) toegevoegd. Het meng- 30 sel werd gedurende 4 uur geroerd bij kamertemperatuur en de reactie afgebroken met Na2S20s-oplossing. Na indamping werd het residu verdeeld tussen ethylacetaat en water. De organische laag werd gewassen met 2N NaOH-oplossing, geconcentreerde zoutoplossing en gedroogd op Na2S04. Het on- 35. zuivere product werd gezuiverd over een kolom met silica-gel, hetgeen. 3-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-joodpyridine-2-ylamine (7,1 g, 50 % opbrengst) bezorgde.
1029799- 87 ! MS: m/z - 427 [M+l].
2. Aan een oplossing van 3-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-joodpyridine-2-ylamine (7,1 g, 16,6 5 mmol) en prop-2-ynylcarbaminezure tert-bütylester (3,1 g, 20,0 iranol) in THF (60 ml) en Et3N (60 ml) werden Cul (63 mg, 0,3 mmol) en Pd(PPh3)4 (384 mg, 0,3 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd onder stikstof geroerd en de reactie gevolgd door TLC tot deze was verlopen. Het mengsel werd ge- 10 extraheerd met EtOAc en gewassen met water. Het onzuivere product werd gezuiverd over een kolom met silicagel, waarbij werd geëlueerd met 20-40 % EtOAc in hexanen, hetgeen (3-{6-amino-5-[l-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyri-dine-3-yl}prop-2-ynyl)carbaminezure tert-butylester (2,2 15 g, 29 % opbrengst) bezorgde.
3. De oplossing van (3 —{6-amino-5-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyridine-3-yl)prop-2-ynyl)carbaminezure tert-butylester in 25 % TFA in dichloormethaan werd gedu- .
20 rende 2 uur geroerd, vervolgens gewassen met 2N NaOH, tweemaal met water, geconcentreerde zoutoplossing, en gedroogd op Na2S04. Na filtratie en indamping werd 5 — (3— aminoprop-l-ynyl)-3-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-pyridine-2-ylamine verkregen in 93 % opbrengst.
25 4. Aan een oplossing van 5-(3-aminoprop-l-ynyl)-3-[l-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyridine-2-ylamine (0,282 mmol, 1 eq.) en 4-nitrofenylchloorformiaat (1 eq) in watervrije dichloormethaan (10 ml) werd pyridine (1 30 eq.) toegevoegd. Het reactiemengsel werd onder stikstof gedurende 4 uur geroerd, en vervolgens werden het gekozen amine (1 eq.) en triethylamine (1 eq.) toegevoegd. Het mengsel werd gedurende 5 min. gekookt onder terugvloeiing en men liet afkoelen tot kamertemperatuur. Het reactie- 35 mengsel werd gewassen met water. De organische laag werd ingedampt en gezuiverd over een kolom met silicagel, waarbij werd geëlueerd met 0-20 % methanol in dichloormethaan 1029799- : £ 4 over kolommen die waren voorgepakt met silica. De uitein delijke opbrengsten varieerden tussen 24 % en 71 %.
88
Algemene procedure 12: 5 C™" r'V"'0 Λϊ~”“· i° { I 0 | 0 _2ίΑ_ΧΛοΛΧΛ0Χρ
U J J,,. I Acetonltrt) I
NH’ S^ci NH* ' NH*
F ' F F
15 1. Aan een oplossing van 5-(3-aminoprop-l-ynyl)-3-[1-(2, 6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyridine-2-ylamine (be- 20 reid in procedure 11) (400 mg, 1,1 mmol) in dichloorme- thaan (17 ml) werd chlooracetylchloride (153 mg, 1/4 mmol) toegevoegd. Het reactiemengsel werd geroerd bij kamertemperatuur en de reactie gevolgd door tic op het verlopen van de reactie. Na afloop werd het oplosmiddel afgedampt, 25 hetgeen het onzuivere product gaf.
2. Aan een oplossing van N-(3-{6-amino-5-[1-(2,6- i dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyridine-3-yl}prop-2-ynyl)-2-chlooraceetamide (1 eq.) in acetonitril (5 eq.) werd het 30 afzonderlijke amine (5 eq.) toegevoegd. Het . mengsel werd onder stikstof gedurende de nacht gekookt onder terug-vloeiing. Na afdamping van het oplosmiddel werd het residu gezuiverd over een kolom met silicagel, waarbij werd geë-lueerd met 1-10 % methanol in dichloormethaan, hetgeen het 35 product bezorgde in opbrengsten die varieerden tusswen 47 % en 97 %.
1Ό2 97 99- 89
Algemene procedure 13: | 5 °γ°>* ' °γΟν * °γ°>. fj (P>|
rWr -üg— ^ ,Λ X x^q X
U m. tCH. QT Sr E^j^r-y aowv^Jpl *jy» NH, NH, 10 Ms ο^,ο^ ΟγΟΗ ογΛ^,
OMAP -X X A. · ·· X
CH& Q . f- I NaH . O UOH O O
— ^ Ρύ\^οη _ HOBt/EDC
9t0 ril + ^ DMF CF» I f*H| ΜθΟΗ ?F, | f®H| DMF f, I Λ .
15 1. Aan een geroerde oplossing van 2-amino-3- benzyloxypyridine (42,0 g, 0,21 mol) in CH3CN (600 ml) 20 werd bij 0°C N-broomsuccinimide (37,1 g, 0,21 mol) in 30 min. toegevoegd. Het mengsel werd gedurende 0,5 uur ge- . roerd, waarna het reactiemengsel werd verdund met EtOAc (900 ml) en werd verdeeld met H20 (900 ml). De organische laag werd gewassen met geconcentreerde zoutoplossing en 25 gedroogd (Na2S04) , gefiltreerd en drooggedampt onder vacuüm, hetgeen 3-benzyloxy-5-broompyridine-2-ylamine (31,0 g, 0,11 mol, 53 %) opleverde.
XH-NMR (CDCI3, 300 MHz) δ 4,63-4,78 (brs,. 2H) , 5,04 (s, 2H), 7,0.7 (d, 1H, J, 1,8 Hz), 7,33-7,42 (m, 5H), 7,73 (d, 30. 1H, J, 1,8 Hz) .
2. Aan een geroerd mengsel van 3-benzyloxy-5- broompyridine-2-ylamine (31,0 g, 0,11 mol) in een mengsel van DME (600 ml) . en H20 (600 ml) werden 4- 35 carboxymethylboronzuur (29,9 g, 0,11 mol), Pd(PPh3)4 (6,4 g, 5,55 mmol) en Na2C03 (82,0 g, 0,78 mol) toegevoegd. Men liet het reactiemengsel onder langzame verhitting koken 1029799- 90 onder terugvloeiing en er werd gedurende 3 uur geroerd. Men liet het reactiemengsel afkoelen tot kamertemperatuur, vervolgens werd verdund met CH2CI2 (1,5 1) en verdund met H20 (700 ml). De organische laag werd gewassen met verza-5 digde NaHC03 (700 ml), gedroogd (Na2S04), gefiltreerd en in vacuüm geconcentreerd. Het onzuivere materiaal werd gezuiverd door kolomchromatografie (silicagel, 1:1 tot 4:1 = EtOAc:hexanen) en de fracties die product bevatten werden gecombineerd en in vacuüm geconcentreerd, hetgeen 4-(6-10 amino-5-benzyloxypyridine-3-yl)benzoëzure methylester (29,4 g, 0,086 mol, 79 %) opleverde.
aH-NMR (CDCI3, 300 MHz) δ 3,92 (s, 3H) , 4,82-4,94 (brs, 2H) , 5,15 (s, 2H), 7,22 (d, 1H, J, 1,8 Hz), 7,33-7, 42 (m, 5H), 7,54 (d, 2H, J, 8,6), 7,98 (d, 1H, J, 1,8 Hz), 8,06 15 (d, 2H, J, 8,6 Hz) .
3. Aan een geroerde oplossing van 4- (6-amino-5- benzyloxypyridine-3-yl)benzoëzure methylester (10,0 g, 0,03 mol) in Et0H:H20 (95:5, 600 ml) werd Pd/C (15,9 g, 20 0,015 mol) toegevoegd (het reactiemengsel werd onder vacu üm ontgast). Men liet de oplossing gedurende 22 uur roeren onder een ^-atmosfeer. De oplossing werd gefiltreerd door natte Celite en.de Celite werd gewassen met EtOH. Het fil-traat werd onder vacuüm geconcentreerd, hetgeen 4-(6-25 amino-5-hydroxypyridine-3-yl)benzoëzure methylester (2,3 g, 9,3 mmol, 31 %) opleverde.
XH-NMR (MeOD, 300 MHz) δ 3,90 (s, 3H) , 7,21 (d, 1H, J, 1,9', Hz), 7,62 (d, 2H, J, 8,5 Hz), 7,76 (d, 1H, J, 1,9 Hz), 8,04 (d, 2H, J, 8,5 Hz) .
30 4. Aan een geroerde oplossing van 4-(6-amino-5-hydroxypyridine-3-yl)benzoëzure methylester (2,3 g, 9,3 mmol) in CH2CI2 (180 ml) werden N,N-diisopropyl-ethylamine (3,2 ml, 0,019 mol), 4-methylbenzeensulfonyl-chloride 35 (2,66 g, 0,014 mol) en PS-DMAP (katalytische hoeveelheid) toegevoegd. Het reactiemengsel werd gedurende 6 uur geroerd bij omgevingstemperatuur en vervolgens gefiltreerd 1029799- 91 om de kunsthars te verwijderen. De kunsthars werd gewassen met CH2CI2 (3 x 20 ml) en de gecombineerde fracties werden gewassen met 10 % citroenzuur (100 ml), verzadigde NaCl (100 ml), gedroogd (Na2S04), gefiltreerd en in vacuüm ge-5 concentreerd. Het ontstane onzuivere materiaal werd gezuiverd door kolomchromatografie (silicagel, 100 % CH2CI2 tot 95:5 = CH2CI2:MeOH) , en de fracties die het gewenste product bevatten, werden gecombineerd en in vacuüm geconcentreerd, hetgeen 4-[6-amino-5-(tolueen-4-sulfonyl- 10 oxy)pyridine-3-yl]benzoëzure methylester (3,3 g, 8,2 mmol, 88 %) opleverde.
^H-NMR (CDCI3, 300 MHz) δ 2,47 (s, 3H) , 3,93 (s, 3H) , 4,81- 4,88 (brs, 2H), 7,36-7,44 (m, 5H) , .7,81 (d, 2H, J, 8,3 Hz), 8,05 (d, 2H, J, 8,4 Hz), 8,19-8,27 (brs, 1H).
15 5. Aan een geroerde oplossing van 1-(3-fluor-2-trifluormethylfenyl)ethanol (2,0 g, 9,6 mmol) in water-vrije DM F (500 ml) werd bij 0°C onder een N2-atmosfeer NaH (0,38 g, 9,6 mmol) toegevoegd. Men liet het reactiemengsel 20 gedurende 0,5 uur roeren. Een oplossing van 4-[6-amino-5-(tolueen-4-sulfonyloxy)pyridine-3-yl]benzoëzure methylester (3,8 g, 9,6 mmol) in watervrije DMF (30 ml) werd aan het reactiemengsel toegevoegd dat men langzaam op omgevingstemperatuur liet . komen, waarna het gedurende 21 uur 25 werd geroerd bij deze temperatuur. Het' reactiemengsel werd verdund met EtOAc (500 ml) en H20 (100 ml) . De organische laag werd afgescheiden en de waterlaag verder geëxtraheerd f met EtOAc (1 x 200 ml). De organische lagen werden gecombineerd en gewassen met geconcentreerde zoutoplossing (1 x 30 100 ml), gedroogd met Na2S04 en drooggedampt onder vacuüm.
Het onzuivere mengsel werd gezuiverd door kolomchromatografie (silicagel, 40:60 tot 70:30 = EtOAc:hexanen) , en de fracties die product bevatten, werden gecombineerd en in vacuüm geconcentreerd, hetgeen 4-{6-amino-5-[1-(3-fluor-2-35 trifluormethylfenyl)ethoxy]pyridine-3-yl)benzoëzure me-. thylester (1,4 g, 3,2 mmol, 34 %) opleverde.
10297995 92 1H-NMR (CDC13, 300 MHz) δ 1,73 (d, 3H, J, 6,2 Hz), 3,91 (s, 3H) , 4,87-4,64 (brs, 2H), 5,81 (k, 1H, J, 6,1, 6,3 Hz), 6,92 (d, 1H, J, 1,8 Hz), 7,38 (d, 2H, J, 8,5 H2), 7,46- 7,66 (m, 3H), 7,93 (d, 1H, J, 1,8 Hz), 8,02 (d, 2H, J, 8,5 5 Hz) .
6. Aan een geroerde oplossing van 4-{6-amino-5-[1-(3-fluor-2-trifluormethylfenyl)ethoxy]pyridine-3-yl)benzoë-zure methylester (1,4 g, 3,2 inmol) in warme IPA (72 ml) 10 werd LiOH (0,68 g, 16,2 mmol) in H2O (38 ml) toegevoegd. Het reactiemengsel werd gedurende 3,5 uur verhit onder te-rugvloeiing. Het reactiemengsel werd geneutraliseerd en verdund met EtOAc (200 ml) en na afkoelen geëxtraheerd. De organische laag werd gewassen met geconcentreerde zoutop-15 lossing (50 ml) , gedroogd op Na2S04 en onder vacuüm geconcentreerd, hetgeen 4-{6-amino-5-[1-(3-fluor-2-trifluor-methylfenyl)ethoxy]pyridine-3-yl)benzoëzuur (1,2 g, 2,8 mmol, 88 %) opleverde.
1H-NMR (MeOD, 300 MHz) δ 1,75 (d, 3H, J, 6,2 Hz), 4,88-4,93 20 (m, 1H), 7,01 (d, 1H, J, 1,8 Hz), 7,39 (d, 2H, J, 8,3 Hz), 7,52-7,67 (m, 3H) , 7,80 (d, 1H, J, 1,8 Hz), 7,97 (d, 2H, J, 8,3 Hz).
7. Bereiding van amideverbindingen: Een geroerde op- 25 lossing van 4-{6-amino-5-[1-(3-fluor-2-trifluormethyl- fenyl)ethoxy]pyridine-3-yl}benzoëzuur (50 mg, 0,12 mmol), EDC (27,0 mg, 0,13 mmol) en HOBt (18,0 mg, 0,13 mmol) in DMF (2 ml) werd in een flesje met een inhoud van ongeveer 3,7 ml gebracht dat NHR1R2 (0,12 mmol) bevatte. Het reac-30 tiemengsel werd gedurende 18 üur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd vervolgens verdund met CH2CI2 (3 ml) en verdeeld met H20. De organische laag werd afgescheiden, gewassen met verzadigde NaCl (1x2 ml) en verzadigde NaHC03 (1 x 2 ml) . De organische laag werd onder 35 vacuüm drooggedampt. Het materiaal werd gezuiverd met ko-lomchromatografie (silica'gel, 99:1 tot 95:5 = CH2Cl2/MeOH) .
1029799“ 93
De fracties die product bevatten, werden onder vacuüm geconcentreerd, hetgeen de amideverbindingen opleverde.
Algemene procedure 14: 5 H ^ 1 / S CsuCtyDMF J 9 I (Τη Pd(PPtg,ci2 ci .
-- O + rVvV —— ΛΛο V
0's'0 JL NH* T» NH’ M- , F . / .
i 5 1. Aan een mengsel van 1-(2-chloorethyl)pyrrolidine-hydrochloride (200 mg, 1.18 mmol) en 4-[4-(4,4,5,5-tetramethyl[1,3,2]dioxoborolaan-2-yl)fenyl]-lH-pyrazool 20 (229 mg, 1,19 mmol) in DMF (6 ml) werd CS2CO3 toegevoegd.
Het reactiemengsel werd gedurende de nacht geroerd bij kamertemperatuur. Vervolgens werd water (10 ml) aan het mengsel toegevoegd. Het product werd geëxtraheerd met EtOAc (3 x 10 ml) . De gecombineerde extracten werden ver-25 volgens gewassen met geconcentreerde zoutoplossing (5 x 10 ml) om de DMF te verwijderen, vervolgens werd gedroogd op Na2S04 en geconcentreerd (142 mg, 41 % opbrengst).
9 2. Aan een mengsel van 3-[1-(2,6-dichloor-3-fluor- 30 fenyl)ethoxy]-5-joodpyridine-2-ylamine (200 mg, 0,468 mmol), pinacolboronzure ester (1,2 eq.), Na2C03 (149 mg, 1,41 mmol) in water (1,25 ml) en dimethylethylglycol (3,75 ml, 0,1M) werd Pd(PPh3)2Cl2 (16 mg, 0,020 mmol) toegevoegd in een reactievat voor een magnetronoven. Het systeem werd 35 ontgast en doorgeblazen met stikstof. Het mengsel werd gedurende 15 min. bij 160°C geroerd in een magnetronappa-raat. Men liet het mengsel afkoeien tot kamertemperatuur, 1029799- 94 waarna de toevoeging van water (10 ml) volgde. Het product werd geëxtraheerd met EtOAc (3 x 20 ml), gedroogd op Na2SO< en geconcentreerd. Het onzuivere product werd gezuiverd door omgekeerde fase-HPLC met 0,1 % TFA in water en aceto-5 nitril.
Algemene procedure 15: 10 (f^) NBS (fl NaOH JL Ce rn ίΛ A*N -:-- --- f Ί _ Cs2C03 D I J, Q / ACN/AcOH 9, X R"Br -'VV"
λ-ΝΗ *-NH nu T I
(f O . NH2 NHj 15 1. Aan een oplossing van 3H-oxazolo[4,5-b]pyridine-2-20 on (13,6 g, 100 mmol) in acetonitril (600 ml) en azijnzuur (120 ml) werd N-broomsuccinamide (21,4 g, 120 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd gedurende 4 uur geroerd bij kamertemperatuur en de reactie afgebroken met NazSaOs-oplossing. Na indamping werd het residu verdeeld tussen ethylacetaat 25 en water. De organische laag werd gewassen met 2N NaOH-oplossing, geconcentreerde zoutoplossing en gedroogd op Na2SO«. Het onzuivere product werd gezuiverd over een kolom met silicagel, hetgeen 6-broom-3if-oxazolo [4,5-b]pyridine- 2-on (11,5 g, 55 % opbrengst) bezorgde.
30 2. 6-Broom-3H-oxazolo[4,5-b]pyridine-2-on (21,5 g, 100 mmol) werd gesuspendeerd in NaOH-oplossing (2N, 250 ml, 500 mmol). Het mengsel werd gedurende de nacht gekookt onder terugvloeiing en er werd een heldere oplossing verkregen. Na afkoelen tot kamertemperatuur werd de reactie-35 oplossing geneutraliseerd tot pH ~7. Er ontweek CO2 en er werd eveneens een neerslag waargenomen. Het product werd afgefiltreerd, gewassen met weter en gedroogd onder hoog- 1029799- vacuüm, hetgeen 2-amino-5-broompyridine-3-ol als een ge- broken-witte, vaste stof (17,8 g, 98 % opbrengst) bezorg de.
95 3. Aan een oplossing van 2-amino-5-broompyridine-3-ol 5 (358 mg, 1,89 mmol) in DMF (8 ml) werd CS2CO3 (620 mg, 1,89 j mmol) toegevoegd. Het mengsel werd gedurende 1 uur orider stikstof geroerd bij kamertemperatuur. Aan het reactie-mengsel werd de broomverbinding (0,9 eq.) in DMF (5 ml) langzaam toegevoegd. De reactieoplossing werd gedurende 5 10 uur geroerd onder stikstof en vervolgens werd verdeeld tussen water en ethylacetaat. De organische laag werd driemaal gewassen met geconcentreerde zoutoplossing en gedroogd op MgSOi. Het onzuivere product werd gezuiverd over een kolom met silicagel, waarbij werd geëlueerd met hex-15 aan-ethylacetaat (4:1), hetgeen het product in 70-80 % op-, brengst bezorgde.
Algemene procedure 16 met behulp van voorbeeld 1-488 van Amerikaanse octrooiaanvrage serieno. 10/786.610 20 (PCT/US2004/0054 95) : er cyo
^ rS p-f' PdClatUppOCH,^ PdCI2«ippf).CH2CI2 [fS
(X°\ Μ·»-» ιχ°Λ! ‘tTSS fX°T
, 4 30 1. Aan een oplossing van 3-benzyloxy-5-broompyridine- 2-ylamine (1 g, 3,58 mmol) in dimethylsulfoxide (7 ml) werden achtereenvolgens bis(pinacolato)diboraan (1,0 g, 35 3,94 mmol), kaliumacetaat (1,05 g, 10,7 mmol) en fl,l'- bis(difenylfosfino)ferroceen]dichloorpalladium(II)complex met dichloormethaan (1;1) (146 mg, 0,18 mmol) toegevoegd.
1029799- 96
Het mengsel werd gedurende 16 uur verhit op 80ÖC en vervolgens liet men af koelen tot kamertemperatuur. Het reac-tiemengsel werd verdund met ethylacetaat (50 ml) en gefiltreerd. Het filtraat werd gewassen met water (2x50 ml) en 5 gedroogd op magnesiumsulfaat. Concentratie in vacuüm leverde het onzuivere boronaat als een bruine, vaste stof (1,13 g, 97 %) op.
1H-NMR (CDCls) δ 1,32 (s, 12H) , 5,08 (s, 2H) , .5,44 (br s, 2H), 7,33-7,42 (m, 6H), 8,03 (s, 1H).
10 2. In een reactievat van 18 ml werden het onzuivere 3-benzyloxy-5-(4,4,5,5-tetramethyl[1,3,2]dioxoborolaan-2-yl)pyridine-2-ylamine (161 mg,. 0,49 mmol), dimethoxyethaan (3 ml) en 2-broompyridin.e (117 mg, 0,74 mmol) gebracht. 15 Aan deze oplossing werden [1,1'-bis(difenylfosfino)-ferroceen]dichloorpalladium(II)complex met dichloor- methaan (1:1) (20 mg, 0,05 mmol) en een 2 M oplossing van cesiumcarbonaat in water (0,75 ml, 1,5 mmol) toegevoegd. De reactor werd onder een stikstofatmosfeer gedurende 66 20 uur verwarmd tot 80°C en vervolgens liet men afkoelen tot kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd verdeeld tussen ethylacetaat (5 ml) en water (5 ml) . De organische laag werd gewassen met meer water (5 ml) en verdund met dime-thylformamide (5 ml). Aan een polymeer gebonden sulfonzuur 25 (0,5 g, 2,1 mmol) werd aan de organische oplossing toege voegd en het ontstane mengsel werd gedurende 2 uur voorzichtig geroerd. De kunsthars werd afgefiltreerd en gewassen met dimethylformamide, methanol en methyleènchloride (elk oplosmiddel (3 x 5 ml). Vervolgens liet men het poly-30 meer gedurende 1 uur reageren met 2 M ammoniak in methanol. De kunsthars werd afgefiltreerd en gewassen met meer 2 M ammoniak in methanol (2 x 5 ml), en de gecombineerde filtraten werden in vacuüm geconcentreerd. Zuivering van het onzuivere product door middel van flash-kolom-35 chromatografie leverde 52,2 mg van het product als een taankleurige, vaste stof (38 % opbrengst) op.
1029799-
Algemene procedure 17: 97
yy y-Y
V 11IJ< °X X
I c. ^ NajCOj α Γ1
Cl fHl --- F Z^xj* -:—-N^^Vvn +rx
FVv^oArN iT NHBoC Acel0n^water IJL /.HBOC
NHj ' *
,10 n'B
1. CSjCOJDMF/oxone Cl [n
-* f>JL^V
2. 4-N HCI/Dioxaan ^ 15 1. Aan de oplossing van 3-(2-chloor-3,6-difluor- benzyloxy)-5-(4,4,5,5-tetramethyl[1,3,2]dioxaborolaan-2-yl)pyridine-2-ylamine (procedure 16) (10,0 g, 24,3 mmol) in t-butylalcohol (50 ml) werd boc-anhydride (5,83 g, 26,7 20 mmol) toegevoegd en het reactiemengsel werd gedurende de nacht geroerd bij kamertemperatuur. Er werd meer boc-anhydride (2,25 g, 10,3 mmol) toegevoegd en het mengsel werd opnieuw gedurende de nacht geroerd. Het materiaal werd geconcentreerd tot een viskeuze zwarte olie en ge- 25 bruikt zoals deze was.
2. De onzuivere boronzure ester (theoretisch 24,3 mmol) in THF (150 ml) werd toegevoegd aan een oplossing van natriumbicarbonaat (16,3. g, 194 mmol) in water (150 ml) en aceton (23 ml). Het mengsel werd gekoeld tot 2°C en 30 oxone (13,5 g, 21,9 mmol) langzaam toegevoegd, waarbij de temperatuur beneden 8°C werd gehouden. Na voltooiing van de toevoeging werd het reactiemengsel gedurende 5 min. geroerd en de reactie vervolgens afgebroken met natriumbi-sulfiet (14,2 g) in water (28 ml). Ethylacetaat (200 ml) I 35 werd toegevoegd en de lagen werden gescheiden. De water- laag werd geneutraliseerd met 6N HC1 en geëxtraheerd met ethylacetaat (2 x 200 zpl) . De gecombineerde organische la- 1029799- 98 gen werden gewassen met water (250 ml) en geconcentreerde zoutoplossing (250 ml) , gedroogd (Na2S04) en geconcentreerd tot een onzuivere zwarte olie. Chromatografie over silica-gel (ethylacetaat/hexaan) gaf het product als een licht-5 bruin schuim (4,78 g, 49,0 %) . - 1H-NMR (CDC13) δ 1,48 (s, 9H) , 1,74 (d, 3H), 5,75 (k, 1H) , 6,61 (d, 1H), 6,89 (dt, 1H) , 6, 94-7,04 (m, 2H), 7,26 (d, 1H), 8,19 (bs, 1H).
MS: m/z = 401 (M+l)+.
10 3. Aan cesiumcarbonaat in een flesje met een inhoud van ongeveer 3,7 ml werden [3-(2-chloor-3,6-difluor-benzyloxy)-5-hydroxypyridine-2-yl]carbaminezure tert- butylester (100 mg, 0,25 mmol) in watervrije DMF (1 ml) en 15 vervolgens benzylbromide (89,2 μΐ, 0,75 mmol) toegevoegd.
Het flesje werd gesloten en gedurende de nacht geroerd bij 90°C. Het reactiemengsel werd gefiltreerd door een Chem-Elut-buis van 5 ml die van tevoren was bevochtigd met wa- j ter (3,5 ml), en er werd geëlueerd met 1:1 = ethylace-20 taat:methyleenchloride. Na gedeeltelijke concentratie werd.
4N HC1 in dioxaan (1—2 ml) toegevoegd en de oplossing geconcentreerd. Omgekeerde fase-chromatografie (water:aceto-nitril, 0,05 % TFA) en vervolgens vriesdrogen gaven het gewenste product als een gebroken-witte, amorfe, vaste 25 stof (25,3 mg, 20,0'%), en het bis-additieproduct als een taankleurige, amorfe, vaste stof (35,2 mg. 23,7 %).
Algemene procedure 18: 30 ^ Λ , Λ X,— y 1 . V ή Xs a .
A2 A1 35 ÜQ29799' 99
Natriumboorhydride (1,5 molequivalent) wordt toegevoegd aan een oplossing van het keton (3,89 mmol) in 10 ml ethanol onder een stikstofatmosfeer. Het ontstane mengsel wordt gedurende 12 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het 5 mengsel wordt vervolgens in een ijsbad geplaatst en de reactie afgebroken met verdunde HC1 in water. De ethanol wordt afgedampt en EtOAc toegevoegd om de waterige oplossing te extraheren. De EtOAc-laag wordt gedroogd op Na2S04.
De Na2S04 wordt afgefiltreerd en het filtraat ingedampt, 10 hetgeen een olieachtig residu geeft, de verbinding A5. Het residu wordt zonder verdere zuivering gebruikt.
3-Hydroxy-2-nitropyridine (1,1 molequivalent) en tri-fenylfosfine (1,5 molequivalent) worden toegevoegd aan een oplossing van de verbinding A5 (1,1 mmol in 10 ml THF. Het 15 reactiemengsel wordt vervolgens in een ijsbad geplaatst en diisopropylazodicarboxylaat (1,5 molequivalent) toege- j voegd. Het ijsbad wordt verwijderd en.het mengsel gedurende 12 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het oplosmiddel wordt afgedampt, hetgeen een geel olieachtig residu geeft.
20 Het residu wordt gezuiverd door chromatografie over sili-cagel (waarbij wordt geëlueerd met EtOAc in hexanen), hetgeen de verbinding Al geeft.
2M HC1 (0,2 ml) wordt toegevoegd aan een oplossing van de verbinding Al (0,97 mmol) in 2 ml ethanol. Het 25 mengsel wordt vervolgens in een ijsbad gebracht en Fe-poeder (365 mg) langzaam toegevoegd. Het reactiemengsel wordt gedurende 1 uur verhit tot 85°C en vervolgens laat . ( men afkoelen tot kamertemperatuur. Celite (0,5 g) wordt toegevoegd onder roeren en het ontstane mengsel gefil-30 treerd door een laag Celite en nagespoeld met ethanol. Het filtraat wordt ingedampt, hetgeen een bruin olieachtig residu geeft, de verbinding A2. Het residu wordt zonder verdere zuivering gebruikt.
Perjoodzuur (0,25 molequivalent), jood (0,5 molequi-35 valent, H20 (0,5 ml) en geconcentreerd zwavelzuur (0,03 ml) worden toegevoegd aan een oplossing van de verbinding A2 in 3 ml azijnzuur. Het reactiemengsel wordt gedurende 5 1029799- 100 uur verhit tot 85°C. Het reactiemengsel wordt vervolgens gekoeld in een ijsbad en verzadigde aq. Na2C03 toegevoegd tot een pH van 3-4. Ethylacetaat wordt toegevoegd om de waterige oplossing te extraheren. De EtOAc-laag wordt ge-5 droogd op Na2S04. De Na2S04 wordt afgefiltreerd en het fil-traat ingedampt, hetgeen een bruin, olieachtig residu geeft. Het residu wordt gezuiverd door chromatografie over silicagel (waarbij wordt geëlueerd met EtOAc en hexanen), hetgeen het gewenste product, de verbinding A3, geeft.
10
Algemene procedure 19:
15 R
NH2 RiQ^j'0j(iH2 A3 A4 20
Een boronzure ester of boronzuur (1,3 molequivalent) wordt toegevoegd aan de oplossing van een verbinding A3 (0,47 mmol) in 5 ml DME. Het mengsel wordt verscheidene 25 malen doorgeblazen met stikstof en vervolgens wordt dichloorbis(trifenylfosfino)palladium (II) (0,05 molequivalent) toegevoegd. Natriumcarbonaat (3 molequivalent) in i 1 ml H20 wordt aan het reactiemengsel toegevoègd en de ontstane oplossing gedurende 12 uur verhit tot 85°C. Aan 30 het reactiemengsel wordt water toegevoegd om de reactie af te breken. Vervolgens wordt EOAc toegevoegd om de waterige oplossing te extraheren. De EtOAc-laag wordt gedroogd op Na2S04. De Na2S04 wordt af gefiltreerd en het filtraat inge- ' dampt, hetgeen een donkerbruin, olieachtig residu geeft.
35 Het residu wordt gezuiverd door chromatografie over silicagel (waarbij wordt geëlueerd met CH3OH, CH2C12, EtOAc en 1029799- 101 hexanen), hetgeen het gewenste product, de verbinding A4, geeft.
Algemene procedure 20 5
R
COOH °YN'R
10 ó Φ |ipA h»tu _ lij!, V · -Sa "tT tv A6 A7 15
De verbinding A6 werd bereid met behulp van algemene procedure 19. (Ö-(7-Azabenzotriazool-l-yl)-N,N,N',N'- 20 tetramethyluroniumfosforpentafluoride (HATU) (1,1 mol-equivalent), diisopropylethylamine (5 molequivalent) en het amine (1,3 molequivalent) worden toegevoegd aan. een oplossing van de verbinding A6 (0,17 mmol) in 3 ml DMF onder een stikstofatmosfeer. Men laat het reactiemengsel ge- 25 durende 12 uur roeren bij kamertemperatuur. Aan het reactiemengsel wordt verzadigde NaHC03 toegevoegd om de reactie af te breken. Vervolgens wordt EtOAc toegevoegd om de ' waterige oplossing te extraheren. De EtOAc-laag wordt gedroogd op Na2S04. De Na2S04 wordt af gefiltreerd en het fil-, 30 traat ingedampt, hetgeen een bruin, olieachtig residu geeft. Het residu wordt gezuiverd door chromatografie over silicagel (waarbij wordt geëlueerd met EtOAc en hexanen), hetgeen het gewenste amideproduct, de verbinding A7, als een gele olie geeft.
35 1029799- 102
Algemene procedure 21: 5 R l
ifC" XR
ontscherrmingsstap jT
nH ΙίΊ ·
A7 M
Zuur (16 molequivalent of minder) wordt bij kamertem-15 peratuur toegevoegd aan de verbinding A7 (0,13 mmol). De ontstane oplossing wordt gedurende 12 uur geroerd bij kamertemperatuur, of verhit tot 60°C. Het reactiemengsel wordt ingedampt en het residu gezuiverd door chromatogra-fie over silicagel (waarbij wordt geëlueerd met CH3OH, 20 EtOAc en CH2C12) , hetgeen het gewenste amideproduct, de verbinding A8, als een geelachtige tot witte, vaste stof geeft.
Algemene procedure 22: 25 ^ CH0
NHa w Rli. J I
Boe Boe BwT'Boc 30 ' ... ah 1029799- 103
De verbinding A9 wordt bereid met behulp van algemene procedure 19. Di-tert-butyldicarbonaat (3 molequivalent) en 4-(dimethylamino)pyridine (0,14 molequivalent) worden toegevoegd aan een oplossing van de verbinding A9 (3 mmol) 5 in 20 ml DMF. Het reactiemengsel wordt 'gedurende 12 uur geroerd bij kamertemperatuur. Aan het reactiemengsel wordt water toegevoegd om de reactie af te breken. Vervolgens wordt.EtOAc toegevoegd om de waterige oplossing te extraheren. De EtOAc-laag wordt gedroogd op Na2S04. De Na2S04 10 wordt afgefiltreerd en het filtraat ingedampt, hetgeen een bruin-geel olieachtig residu geeft. Het residu wordt gezuiverd door chromatografie over silicagel (waarbij wordt geëlueerd met 25-)-30 % EtOAc in hexanen) , hetgeen het gewenste product, de verbinding AIO, als een geelachtige 15 olie (87,8 % opbrengst) geeft. Ozon wordt bij -78°C door een oplossing van de verbinding AIO in 50 ml CH2C12 geleid, en dimethylsulfide wordt toegevoegd om de reactie af te breken. Aan het reactiemengsel wordt verzadigde natrium-chloride toegevoegd en vervolgens EtOAc om de waterige op-20 lossing te extraheren. De gecombineerde EtOAc-laag wordt gedroogd op Na2S04. De Na2S04 wordt af gefiltreerd en het filtraat ingedampt, hetgeen een geel olieachtig residu geeft. Het residu wordt gezuiverd door chromatografie over silicagel (waarbij wordt geëlueerd met 35-»40 % EtOAc in 25 hexanen), hetgeen het gewenste product, de verbinding All, als een geelachtige olie (58,4 % opbrengst) geeft.
4
Algemene procedure 23: reductieve aminerinq 30
F F
CHO ^.N-n ^N-R
CH9 Ij r CH3 U'S ontscherming CHS IJ'S
^ BOC'V O B«-\oc U ^ 35 A11 A12 Al 3 (1029799- 104
Een aminehydrochloridezout (1,2 molequivalent) en na-triumacetaat (2 molequivalent ten opzichte van het aminehydrochloridezout) worden toegevoegd aan een oplossing van de verbinding All (0,45 mmol) in 4 ml CH3OH onder een 5 stikstofatmosfeer. Aan het reactiemengsel worden molzeven (0,5 g) toegevoegd en vervolgens wordt natriumcyanoboorhy-dride (2 molequivalent) toegevoegd. Het ontstane mengsel wordt onder een stifstofatmosfeer gedurende 12 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel wordt gefiltreerd 10 door een laag Celite, het filtraat ingedampt en gezuiverd door chromatografie over silicagel (waarbij wordt geëlu-eerd met CH3OH, EtOAc en CH2CI2), hetgeen het gewenste product, de verbinding A12, als een olie (52,6 % opbrengst) geeft. Aan de verbinding A12 (0,17 ml) wordt bij kamertem-15 peratuur zuur (16 molequivalent of minder) toegevoegd. De ontstane oplossing wordt gedurende 12 uur geroerd bij kamertemperatuur, of verhit tot 60°C. Het reactiemengsel wordt ingedampt en het residu gezuiverd door chromatografie over silicagel (waarbij wordt geëlueerd met CH3OH, 2 0 EtOAc en CH2C12), hetgeen het gewenste product, de verbinding A13, geeft.
Algemene procedure 24: 'Jï $
CHO Y~VN
9*3 fS ___ ?H3 fS CH. As o^yx 0^1 „0-vP-
Boc Boe . Boe'' 'Boe NHa
A11 A14 A1S
10297993 ί 105 O-Fenyldiaminen (1,2 molequivalent) en natriumbisul-fiet (2,1 molequivalent) worden toegevoegd aan een oplossing van de verbinding All (0,41 mmol) in 5 ml DMA. De ontstane oplossing wordt gedurende 12 uur verhit tot 5 110°C. Aan het reactiemengsel wordt water toegevoegd om de reactie af.te breken. Vervolgens wordt EtOAc toegevoegd om de waterige oplossing te extraheren. De EtOAc-laag wordt gedroogd op Na2S04. De Na2S04 wordt afgefiltreerd en het filtraat ingedampt, hetgeen een bruin-geel olieachtig re-10 sidu geeft. Het residu wordt gezuiverd door chromatografie over silicagel (waarbij wordt geëlueerd met EtOAc in hexa-nen) , hetgeen het gewenste product, de verbinding A14, geeft. Aan de verbinding A14 (0,16 mmol) wordt bij kamer temperatuur zuur (16 molequivalent of minder) toegevoegd.
15 De ontstane oplossing wordt gedurende 12 uur geroerd bij kamertemperatuur, of verhit tot 60°C. Het reactiemengsel wordt ingedampt en het residu gezuiverd door chromatografie over silicagel (waarbij wordt geëlueerd met CH3OH,
EtOAc en CH2C12) , hetgeen het gewenste amideproduct, de 20 verbinding A15, geeft.
Algemene procedure 25: 44-
Br Br ?h3 [fS 9Ha (!η CH3 Λ £V4Vn-—- —>yV4 L4 ^ NH* 4* Boc'N'Boc Boc^'Eioe A16 A17 44-
Iv
PHi |fS
. m2 A18 1029799- 106
Di-tert-butyldicarbonaat (3 molequivalent) en 4-(dimethylamino)pyridine (0,14 molequivalent) worden toegevoegd aan een oplossing van de verbinding A3b (2 inmol) in 10 ml DMF. Het reactiemengsel wordt gedurende 12 uur ge-5 roerd bij kamertemperatuur. Aan het rea:ctiemengsel wordt water toegevoegd om de reactie af te breken. Vervolgens wordt EtOAc toegevoegd om de waterige oplossing te extraheren. De EtOAc-laag wordt gedroogd tot Na2S04. De Na2S04 wordt afgefiltreerd en het filtraat ingedampt, hetgeen een 10 bruin-geel olieachtig residu (verbinding A16) geeft. Het residu wordt zonder verdere zuivering gebruikt.
Bis(pinacolato)diboor (1,2 molequivalent) en kaliumacetaat (3,4 molequivalent) worden toegevoegd aan een oplossing van de verbinding Al6 in 4 ml DMSO. Het mengsel 15 wordt verscheidene malen doorgeblazen met stikstof en vervolgens wordt dichloorbis(trifenylfosfino)palladium(II)-(0,05 molequivalent) toegevoegd. De ontstane oplossing wordt gedurende 12 uur verhit tot 80°C. Aan het reactiemengsel wordt water toegevoegd om de reactie af te breken. 20 Vervolgens wordt EtOAc toegevoegd om de waterige oplossing te extraheren. De EtOAc-laag wordt gedroogd op Na2S04. De Na2S04 wordt afgefiltreerd en het filtraat ingedampt, hetgeen een donkerbruin olieachtig residu geeft. Het residu wordt gezuiverd door chromatografie over silicagel (waar-25 bij wordt geëlueerd met 30 % EtOAc in hexanen), hetgeen het gewenste product, de verbinding A17 (76 % opbrengst), geeft. HC1 (5 molequivalent) wordt toegevoegd aan een op- i lossing van de verbinding A17 (0,43 mmol) in 4 ml CH2CI2.
Het ontstane mengsel wordt gedurende 12 uur verhit tot 30 50°C. Aan het reactiemengsel wordt verzadigde NaHC03 toe gevoegd om het reactiemengsel te neutraliseren. Vervolgens wordt EtOAc toegevoegd om de waterige oplossing te extraheren. De EtOAc-laag wordt gedroogd op Na2S04. De Na2S04 wordt afgefiltreerd en het filtraat ingedampt, hetgeen het 35 gewenste product (verbinding A18) als een gele, vaste stof (75 % opbrengst) geeft.
1029799-
Algemene procedure 26: 107 5 44- V n 1 CHa iP**) CH3 A CH3 Γ|^ r^yVV-‘„sTvVV^1- V Roc^N'Boe ^ “V.
10 A17 A19 A20 i -
De verbinding Al7 (1,3 .molequivalent) wordt toege voegd aan een oplossing van het arylhalogenide (0,36 mmol) 15 in 3 ml DME. Het mengsel wordt verscheidene malen doorgeblazen met stikstof en vervolgens wordt dichloorbis(tri-fenylfosfino)palladium(II) (0,05 molequivalent) toege voegd. Natriumcarbonaat (3 molequivalent) in 0,8 ml H20 wordt aan het reactiemengsel toegevoegd en de ontstane op-20 lossing gedurende 12 uur verhit tot 85°C. Aan het reactiemengsel wordt water toegevoegd om de reactie af te breken. Vervolgens wordt EtOAc toegevoegd om de waterige oplossing te extraheren. De EtOAc-laag wordt gedroogd op Na2S04. De Na2S04 wordt afgefiltreerd en het filtraat ingedampt, het-.25 geen een donkerbruin olieachtig residu geeft. Het residu wordt gezuiverd door chromatografie over silicagel (waarbij wordt geëlueerd met EtOAc in hexanen), hetgeen het gewenste product, de verbinding Al9 (74,4 % opbrengst), geeft. HC1 (5 molequivalent) wordt toegevoegd aan een op-30 lossing van de verbinding A19 (0,26 mmol) in 10 ml isopro-pylalcohol. Het ontstane mengsel wordt gedurende 12 uur verhit tot 50°C. Het oplosmiddel wordt afgedampt, hetgeen het gewenste product, de verbinding A20, geeft.
10297.99* 108
Algemene procedure 27: 5..
44-
V*'J
io "0^· A18 A21 15 De verbinding A18 (1,3 molequivalent) wordt toege voegd aan een oplossing van het arylhalogenide (0,21 mmol) in 3 ml DME. Het mengsel wordt verscheidene malen doorgeblazen met stikstof en vervolgens wordt dichloor-bis(trifenylfosfino)palladium(II) (0,05. molequivalent) 20 toegevoegd. Natriumcarbonaat (3 molequivalent) in 0,6 ml H20 wordt aan het reactiemengsel toegevoegd en de ontstane 'oplossing gedurende 12 uur verhit tot 85°C. Aan het reactiemengsel wordt water toegevoegd om de reactie af te breken. Vervolgens wordt EtOAc toegevoegd om de waterige op-25 lossing te extraheren. De EtOAc-laag wordt gedroogd op Na2S04. De Na2S04 wordt af gefiltreerd en het filtraat ingedampt, hetgeen een donkerbruin olieachtig residu geeft.Het residu wordt gezuiverd door chromatografie over silicagel . (waarbij wordt geëlueerd met CH30H, CH2C12, EtOAc en hexa-30 nen) , hetgeen het gewenste product, de verbinding A21, geeft.
1029799- 109
Algemene procedure 28: 5 '*, ^N-Ri 'Lr,
44- Λ X
8 V«3 O
^JkJÏ^N " 9^ ΙΪΊ
10 RfT— I ix^5*sPv'trvisi!'N
U NHa ο£_^Τ σ T
KJ . nh2 A17 ^ A22 X * I, Br, Cl 15 Een amine (1,5 mol equivalent) en K2CO3 (1,5 molequi- valent) worden toegevoegd aan een oplossing van een 4-halogeenbenzylhalogenide (1,0 molequivalent) in 2 ml tolueen. Het ontstane mengsel wordt behandeld met magnetron-straling in een Smith-synthesizer (150°C, 1 uur). Aan het 20 reactiemengsel wordt water toegevoegd om de reactie af te breken. Vervolgens wordt .EtOAc toegevoegd om de waterige oplossing te extraheren. De EtOAc-laag wordt gedroogd op Na2S04. De Na2S04 wordt af gefiltreerd en het filtraat ingedampt, hetgeen het gewenste product, de verbinding A23, 25 geeft. Het residu wordt zonder verdere zuivering gebruikt in procedure 11 voor het synthetiseren van de verbinding A22.
4
Algemene procedure 29: 30
I I A2S
,, 9^ (ΙΊ —_- CH, As p ^VVfN Jtü O rCj T, A18 A24 X = I. Br, Qj, 1029799- 110
Een amine (1,2 molequivalent) en diisopropylamine (5 molequivalent) worden toegevoegd aan een oplossing van 4-broombenzeensulfonylchloride (0,77 mmol) in 5 ml CHCI3 onder een stikstofatmosfeer. Het ontstane mengsel wordt ge-5 durende 4 uur geroerd bij kamertemperatuur. Aan het reac-tiemengsel wordt water toegevoegd om de reactie af te breken. Vervolgens wordt EtOAc toegevoegd om de waterige oplossing te extraheren. De EtOAc-laag wordt gedroogd op Na2S04. De Na2S04 wordt af gefiltreerd en het filtraat inge-10 dampt, hetgeen het gewenste product, de verbinding A25, geeft. Het residu wordt zonder verdere zuivering in procedure 11 gebruikt voor het synthetiseren van de verbinding A24.
15 Algemene procedure 30: Ή-.Α Γ 20 <V° KJ |ίη
PHa irS α T
\J nh2
A17 O W
A26 25
Een boronzure ester of boronzuur (1,2 molequivalent) 30 wordt toegevoegd aan een oplossing van l-chloor-4-joodbenzeen (0,84 mmol) in 10 ml DME onder een stikstofat-mosfeer. Het mengsel wordt verscheidene malen doorgeblazen met stikstof en vervolgens wordt dichloorbis(trifenyl-fosfino)palladium(II) (0,05 molequivalent) toegevoegd. Na-35 triumcarbonaat (3 molequivalent) in 1,8 ml H20 wordt aan het reactiemengsel toegevoegd en de ontstane oplossing gedurende 12 uur verhit tot 85°C. Aan het reactiemengsel T029799- 111 wordt water toegevoegd om de reactie af te breken. Vervolgens wordt EtOAc toegevoegd om de waterige oplossing te extraheren. De EtOAc-laag wordt gedroogd op Na2S04. De Na2S04 wordt afgefiltreerd en het filtraat ingedampt, het-5 geen een donkerbruin olieachtig residu geeft.: Het residu, wordt gezuiverd door chromatografie over silicagel (waarbij wordt geëlueerd met CH3OH, CH2CI2, EtOAc en hexanen) , hetgeen het gewenste product, de verbinding A27, geeft. De verbinding A27 wordt in procedure 11 gebruikt voor de syn-10 these van de verbinding A26.
Algemene procedure 31 voor chirale scheiding van racematen Het racemische monster wordt gezuiverd met behulp van preparatieve chromatografie met superkritische vloeistof, 15 SFC-MS. Voorbeelden van zuiveringscondities: ko- lom=Chiralpak AD-H, 250 x 21 mm, 5 micron, 100A-kolom (kolom # : ADH0CJ-C10O3); kolomtemperatuur: 35°C; mobiele fase: 35 % methanol (met 0,1 % isopropylamine) -gemodifi ceerde C02; preparatieve stroomsnelheid 52 ml/min.; isoba-20 rische druk van 120 bar.
Algemene procedure 32: met behulp van (4-{6-amino-5-[1- (3-trifluor-methylfenyl)ethoxy]pyridine-3-yl}fenyl)-(3,5-dimethyl-piperazine-l-yl)methanon 25 hs^ni°*-bu Hs^nh J CHï ch3 oJ^CH’
+ F»c NaH HacXL TFA
DMF X JL
' FSC^^ CH, iTS CHs fl"') "" NH* γν·0^Ν ^ NH* NHj in $itu 1029799*! 112
Aan een mengsel van 4-[4-6-amino-5-hydroxypyridine-3-yl)benzoyl]-2,6-dimethylpiperazine-l-carbonzure tert- butylester (100 mg, 0,23 mmol) en 1-(1-broomethyl)-3-trif luormethylbenzeen (64 mg, 0,25 mmol) in DMF (2 ml) 5 werd bij 0°C NaH (12 mg, 0,47 mmol) toegèvoegdi Het mengsel werd gedurende de nacht geroerd. LCMS liet zien dat de reactie was verlopen, en DMF en water werden verwijderd.
TFA (2 ml) werd aan het residu toegevoegd en er werd gedurende 3 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het TFA werd ! 10 verwijderd, waarna de toevoeging van methanol volgde. Het residu werd gezuiverd door prep-HPLC, hetgeen (4-{6-amino- 5-[1-(3-trifluormethylfenyl)ethoxy]pyridine-3-yl}fenyl)-(3,5-dimethylpiperazine-l-yl)methanon (30 mg, opbrengst .
25,7 %) bezorgde.
15
Algemene procedure 33: met behulp van (4-{6-amino-5-[1- (2-trifluor-methylfenyl)ethoxy]pyridine-3-yl}fenyl)-(3,5-dimethyl-piperazine-l-yl)-methanon 20 u C O H»c.
H,C o . Η3>-ν^0'·β“ -*-Ot-Bu Ν_/*“0Ηϊ 0VN^“. 3
otn^CHj °Y TFA T
Q ♦ 2NC,,c°,(aq) V -~ V
“ A &A
In sltu 30
Aan een mengsel van 4-[4-(6-amino-5-hydroxypyridine- 3-yl)benzoyl]-2,6-dimethylpiperazine-l-carbonzure tert- butylester (50 mg, 0,12 mmol) en 1-(1-broomethyl)-2-trifluormethylbenzeen (32 mg, 0,12 mmol) in DMF (2 mij 35 werden 2 M Cs2C03 (0,18 ml, 0,35 mmol) en vervolgens water (0,5 ml) toegevoegd, het mengsel werd gedurende de nacht j geroerd en vervolgens gedurende 8 uur verhit tot 70°C.
1029799- 113 LCMS liet zien dat de reactie was verlopen. De DMF en het water werden verwijderd. Aan het residu werd TFA (2 ml) toegevoegd en er werd gedurende 3 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het TFA werd verwijderd, waarna de toevoeging 5 van methanol volgde. Het residu werd geziiiverd door prep-HPLC, hetgeen (4-{6-amino-5-[1-(2-trifluormethylfenyl)-ethoxy] pyridine-3-yl.) fenyl) - (3, 5-dimethylpiperazine-l-yl) -methanon {20 mg, opbrengst 34,2 %) opleverde.
10 Algemene procedure 34: met behulp van {4-[6-amino-5-(2- methylbenzyloxy)pyridine-3-yl]fenyl}-(3,5-dimethylpiperazine-l-yl) methanon 15 _ h3c „ H’C- %Ot-BU ,
HjC o >"CH»
O °Y
1 °X^CH3 »· -4NHCI/Pi— Φ V + CH,CHiX c: Μ’ώ 20 ΗΟ^Η, Cr NH, . .
In ellu 25 Aan een mengsel van (2R,6S)-4-[4-(6-amino-5-hydroxy- pyridine-3-yl)benzoyl]-2,6-dimethylpiperazine-l-carbonzure tert-butylester (100 mg, 0,23 mmol) en l-broommethyl-2-methylbenzeen (47 mg, 0,25 mmol) in DMF (2 ml) werden 2 M CS2CO3 (0,35 ml, 0,7 mmol) en vervolgens water (0,5 ml) 30 toegevoegd. Het mengsel werd gedurende de nacht geroerd bij kamertemperatuur. LCMS liet zien dat de reactie was verlopen, de DMF werd verwijderd, waarna de toevoeging van 4 N HC1 in dioxaan (2 ml) volgde. Het reactiemengsel werd gedurende 3 uur geroerd bij kamertemperatuur. De vluchtige 35 stoffen werden verwijderd, waarna de toevoeging van methanol volgde. Deze oplossing werd gezuiverd door prep-HPLC, hetgeen {4-[6-amino-5-(2-methyibenzyioxy)pyridine-3-yij- 1029799- 114 fenyl}-(3,5-dimethylpiperazine-l-yl)methanon (47 mg, opbrengst 46,6 %) bezorgde.
Algemene procedure 35: met behulp van (6-amino-3-aza- 5 bicyclo [3.1.0] hex-3-yl) - (4-{ 6-amino-5-[l-'(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyridine-3-yl}fenyl)methanon 10 \ /, 1) Pd(dppf)2C.l2 o
V . 0*0 Cs2C03 X
Ο^Ν\ + y DME
““^nh ?[JL· jO| -
° X. NHj 2) HCI/Oioxaan F
15 ‘ FOci. NH*
Aan een mengsel van [3-(4-joodbenzoyl)-3-azabicyclo-20 [3.1,0]hex-6-yl]carbaminezure tert-butylester (100 mg, 0,234 mmol) en 3-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-(4,4,5,5-tetramethyl[1,3,2]dioxaborolaan-2-yl)pyridine-2-ylamine (100 mg, 0,234 mmol) in DME (2 ml) werden Pd(dppf)2CI2.CH2CI2 (10 mg, 0,012 mmol) en CS2CO3 (351 mg, 25 0,702 mmol) toegevoegd. Door het mengsel werd gedurende 10 min. stikstof geleid en vervolgens werd gedurende 30 min. behandeld in een magnetronoven van 150°C. Een controle met LCMS liet zien dat de reactie was verlopen.. Het onzuivere reactiemengsel werd verdund met ethylacetaat, en vervol-30 gens werd gewassen met water en geconcentreerde zoutoplossing. De oplossing werd gedroogd op MgS04. Zuivering door prep-HPLC leverde een vaste stof op.. De vaste stof werd gedurende 3 uur bij kamertemperatuur geroerd met 4 N HCl/dioxaan (3 ml) . Verwijdering van de vluchtige stoffen 35 leidde tot een residu dat werd gezuiverd door prep-HPLC, hetgeen (6-amino-3-azabicyclo[3.1.0]hex-3-yl)-(4-{6-amino- 1029799- 115 5-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyridine-3-yl}— fenylJmethanon (30 mg, opbrengst 26%) bezorgde.
Algemene procedure 36; met behulp van 5-[1-(2,6-dichloor-5 3-fluorfenyl)ethoxy]-6'-(2-morfoline-4-ylèthoxy>[3,3']- bipyridinyl-6-ylamine 10 ,Ο OH \
O X
? pHa DEAD. T
PPh, Cl 0Ha
15 T
Aan een mengsel van 6'-amino-5'-[1-(2,6-dichloor-3-20 fluorfenyl)ethoxy][3,3']bipyridinyl-6-ol (78 mg, 0,20 mmol), trifenylfosfine (63 mg, 0,24 mmol) en 2-morfoline- 4-ylethanol (0,026 ml, 0,22 mmol) werd DEAD (0,034 ml, 0,22 mmol) toegevoegd. Na roeren gedurende de nacht werden meer PPh3 (63 mg, 0,24 mmol) en meer DEAD (0,034 ml, 0,22 i 25 mmol) toegevoegd. Na verscheidene uren werd meer alcohol (0,026 ml, 0,22 mmol) toegevoegd. Na nog verscheidene uren werden meer PPh3 (63 mg, 0,24 mmol) en meer DEAD (0,034 ml, 0,22 mmol) toegevoegd. Na roeren gedurende de nacht werd het mengsel verdeeld tussen dichloormethaan en half-30 verzadigde zoutoplossing. De fasen werden gescheiden en de waterfase werd geëxtraheerd met dichloormethaan. De gecombineerde organische fasen werden gedroogd op Na2S0i en geconcentreerd door rotatieverdamping. Het residu werd gezuiverd door chromatografie over silicagel, waarbij werd 35 geëlueerd met een gradiënt van dichloormethaan en methanol, hetgeen 5-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-6'- 1029799- .116 (2-morfoline-4-ylethoxy) -[3,3']bipyridinyl-6-ylamine (53 mg, 53 %) opleverde.
Algemene procedure 37; met behulp van voorbeeld 1-650 van 5 Amerikaanse octrooiaanvrage serieno. 10/786.610 (PCT/US 2004/005495) 10 I BrZn C"
Cl CHj V-S 1 F .VSo ^
15 F
3-(2,6-Dichloor-3-fluorbenzyloxy)-5-thiazool-2-yl-20 pyridine-2-ylamine. Aan een magnetronbuis waarin een roer-staaf aanwezig was, werden het joodpyridyl-uitgangs-materiaal (300 mg, 0,702 mmol), tetrakis(trifenyl-fosfine)palladium(0) (40 mg, 5 mol %) en tetrahydrofuran (watervrije, 6 ml) gebracht. De kolf werd gesloten en er 25 werd gedurende 5 min. doorgeblazen met stikstof. 2-Thiazolylzinkbromide (0,5 M in THF, 1,4 mmol, 2,8 ml) werd vervolgens toegevoegd via een injectiespuit. Het flesje werd in de magnetronoven gedurende 10 min. verhit tot 120°C. TLC (1:1 = ethylacetaat:methyleenchloride) liet 30 zien dat een grote hoeveelheid uitgangsmateriaal resteerde. Er werd meer 2-thiazolylzinkbromide (0,5 M in THF, 500 pl) toegevoegd en het flesje werd gedurende 20 min. in de magnetronoven verhit tot 120°C. TLC (1:1 = ethylace taat :methyleenchloride) liet zien dat nog steeds een grote 35 hoeveelheid uitgangsmateriaal resteerde. Er werd meer 2-thiazolylzinkbromide (0,5 M in THF, 500 μΐ) toegevoegd en het flesje werd gedurende 40 min. in de magnetronoven ver- 1029799- 117 hit tot 120°C. TLC (1:1 ~ ethylacetaatrmethyleenchloride) liet zien dat nog steeds een grote hoeveelheid uitgangsmateriaal resteerde, maar ook dat het geheel zeer onordelijk was geworden. De inhoud van het flesje werd uitgegoten in 5 een verz. NH<Cl-oplossing (10 ml) en deze oplossing werd geëxtraheerd met ethylacetaat (2 x 30 ml). De gecombineerde ethylacetaatlagen werden gedroogd op Na2S04, gefiltreerd en in vacuüm geconcentreerd. Het onzuivere product werd op een voorgepakte kolom met 10 g silicagel gebracht, en 1:1 10 = ethylacetaat :methyleenchloride werd gebruikt om het ge wenste product (40 mg, 15 %) te elueren.
Algemene procedure 38: met behulp van voorbeeld 1-652 van
Amerikaanse octrooiaanvrage serieno. 10/786.610 (PCT/US 15 2004/005495) 20 . h-C -««ηΟ1 f ?H*ry wN f
„ |fV^lYN
•LA-c, NHj LAc
F. F
25 3-(1-(2,6-Dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy)-5-(1-methyl-lH-imidazool-2-yl)pyridine-2-ylamine: N-methylimidazool 30 (92 mg, 1,1 mmol) werd in een rondbodemkolf van 50 ml op gelost in tetrahydrofuran (watervrije, 4 ml). De kolf werd onder een stikstofatmosfeer gekoeld met een bad van droog-ijs/aceton. n-Butyllithium (2,5 M, 562 μΐ, 1,4 mmol) werd gedurende 5 min. in porties van 100 μΐ via een injectie-35 spuit toegevoegd. Het reactiemengsel werd gedurende 30 min. geroerd bij -70°C. Vaste zinkchloride (watervrije, 383 mg, 2,8 mmol) werd toegevoegd en het reactiemengsel 1029799- 118 .
gedurende 15 min. geroerd. Het ijsbad werd vervolgens verwijderd en men liet het reactiemengsel opwarmen tot kamertemperatuur. Zodra alle zinkchloride in oplossing was en het reactiemengsel op kamertemperatuur was gekomen, werd 5 het jood-tussenproduct (400 mg, 0,936 mmól) toegevoegd in tetrahydrofuran (watervrije, 4 ml), gevolgd door tetra-kis(trifenylfosfine)palladium(O) (108 mg, 10 mol %), en werd het reactiemengsel verhit onder terugvloeiing. De reactie werd gevolgd door middel van LC/MS tot alle jood- 10 uitgangsmateriaal was verbruikt. Men liet het reactiemeng-. sel af koelen en vervolgens werd verdund met een verz. NH4Cl-oplossing (20 ml). Deze oplossing werd geëxtraheerd met ethylacetaat (2 x 50 ml). De gecombineerde ethylace-taatlagen werden gedroogd op Na2S04, gefiltreerd en in va-.15 cuüm geconcentreerd. Het onzuivere product werd op een voorgepakte kolom met 10 g silicagel gebracht en 10 % methanol: ethylacetaat werd gebruikt om het gewenste product (25 mg, 7 %) te elueren.
20 Algemene procedure 39: met behulp van voorbeeld 1-657 van
Amerikaanse octrooiaanvrage serieno. 10/786.610 (PCT/US 2004/005495) 25
F
ΟγΟΗ. HCVM.OH /Υ°0Η [JÏÏJj' ήτ”
ΐ _ W*’ NH “β", W -NH
hX/ ° V^N-CH3
HzN N h2nant h2naist 30 35 Aan 6-amino-5-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]- nicotinonitril (400 mg, 1,23 mmol) in 70 ml droge methanol werd bij 0°C gedurende 3 min HCl-gas doorgeleid. Er werd 1029799' 119 gedurende de nacht geroerd bij 3°C. De vluchtige stoffen werden verwijderd en de vaste stoffen werden gewassen met diethylether, hetgeen het imidaat in kwantitatieve opbrengst opleverde. Aan 200 mg van het imidaat in 4 ml me-5 thanol werd bij 0°C 2N methylamine in THF (837 μΐ) toegevoegd. Men liet gedurende 1 uur roeren bij 0°C en vervolgens gedurende de nacht opwarmen tot kamertemperatuur. De vluchtige stoffen werden verwijderd en het residu werd ge-chromatografeerd met 10-40 % methanol/dichloormethaan, 10 hetgeen 70 mg product opleverde.
Algemene procedure 40: 15 “γνΛ,Η ηνο, NT H*so* MDF ci \
. DIPEA
20 BI B2 83 . \
Fe/HOAc UOH L JL Ti ^ X
MeOH X Ij I j MeOH .Y^YY™ 25 B4 bs 1. 6-Nitro-5-hydroxynicotinezuur (B2) : Aan een oplos-30 sing van 5-hydroxynicotinezuur (BI) (7,0 g, 50 mmol) in geconcentreerde H2SO4 werd 9 ml rokend salpeterzuur (90 %) (9 ml) toegevoegd. Het reactiemengsel werd in een afgesloten buis gedurende 4 dagen geroerd bij 55-60°C. Het mengsel werd vervolgens uitgegoten in ijs en de pH op 3 ge- 35 bracht met 50 % NaOH. MgS04 werd toegevoegd om het waterige mengsel te verzadigen, dat vervolgens werd geëxtraheerd met isopropyialcohol (4x45 ml) . Na verwijdering van is— 1029799- 120 opropylalcohol onder verminderde druk werd 5,93 g (64 % opbrengst) B2 verkregen als een gele, vaste stof.
MS (APCI), (M+H) +: 185.
1H-NMR (DMSO-de) δ 8,01 (d, 1H, Ar-H) , 8,41 (d, 1H, Ar-H) .
5 2. 2,6-Dichloorbenzyl-6-nitro-5-[(2,6-dichloorben- zyl)oxy]nicotinaat (B3): 6-Nitro-5-hydroxynicotinezuur (B2) (3,4 g, 18,5 mmol), 2,6-dichloorbenzylbromide (8,88 g, 37 mmol), DIPEA (5,5 g, 42,5 mmol) werden in een rond- 10 bodemkolf van 250 ml opgelost in DMF (25 ml). Het reactie- · mengsel werd gedurende 4,5 uur geroerd bij kamertemperatuur en vervolgens geconcentreerd onder verminderde druk.
Het ontstane mengsel werd uitgegoten in ijs en gefiltreerd. De verzamelde vaste stof werd gedroogd onder ver-15 minderde druk, hetgeen 4,25 g (46 % opbrengst) B3 gaf.
MS (APCI)(M+H)+: 503.
^-NMR (DMSO-de) δ 5,47 (s, 2H, ArCH20) , 5,71 (s, 2H,
ArCH20), 7,24-7,43 (m, 6H, Ar-H), 8,26 (d, 1H, Ar-H), 8,66 (d, 1H, Ar-H).
. 20 3. 2,6-Dichloorbenzyl-6-amino-5-[(2,6-dichloorben- zyl)oxy]nicotinaat (B4) : Een mengsel van 2,6-dichloor- benzyl-6-nitro-5-[(2,6-dichloorbenzyl)oxy]nicotinaat (B3) (5,5 g, 10,96 mmol), ijzerpoeder (0,92 g, 16,43 mmol), 25 ijsazijn (20 ml) en methanol (17 ml) werd gedurende 3 uur geroerd bij 85°C. Het reactiemengsel werd bijna droogge-dampt en ammoniumhydroxide (30 %) toegevoegd om het mengsel te neutraliseren. Er werd de minimale hoeveelheid DMF toegevoegd om het reactiemengsel op te lossen, dat werd 30 gezuiverd door flash-kolomchromatografie (loopmiddel:
EtOAc-EtOH = 9:1), hetgeen 4,5 g (87 %) B4 als een bleekgele, vaste stof gaf.
MS (APCI)(M+H)+: 473.
35 4. 6-Amino-5-[(2,6-dichloorbenzyl)oxy]nicotinezuur (B5) : Een mengsel van 2,6-dichloorbenzyl-6-amino-5-[(2,6-dichloorbenzyl)oxy]nicotinaat (B4) (3,5 g, 7,4 mmol), li- 1029799*5 121 thiumhydroxide (0,41 g, 17 mmol) , water (22 ml) en methanol (30 ml) werd gedurende 5 uur geroerd en verhit onder terugvloeiing tot 85°C. Het mengsel werd drooggedampt onder verminderde druk. Het ontstane residu werd opgelost in 5 water, geëxtraheerd met een mengsel van Et20/hexaan (1:1, 4x25 ml), geneutraliseerd met IN HC1 om een wit neerslag te vormen, dat werd afgefiltreerd en gedroogd onder verminderde druk, hetgeen 1,83 g (79 %) B5 als een witte, vaste stof bezorgde.
10 MS (APCI) (M+H)+: 313.
1H-NMR (DMSO-d6) δ 5,26 (s, 2H, ArCH20) , 6,37 (s, 2H, NH2) , 7,43-7,48 (t, 1H, Ar-H) , 7,54 (s, 2H, Ar-H) , 7,56 (s, 1H,
Ar-H), 8,18 (s, 1H, Ar-H).
15 i COOH CONR'R"
Q HATU, DMF, 1LJ
70 °C, 2 uur T
4- RK'IMH 01 20 1 1 m ' ** irV^o'V^1 rf° t NH2 NHa
F F
25
Aan een reeks van 400 μΐ van 0,2 M oplossingen van verschillende aminen in DMF in een plaat met 96 putjes werden 400 μΐ (0,2 M in DMF) 4-[6-amino-5-(2,6-dichooor-3-fluorbenzyloxy)pyridine-3-yl]benzoëzuur, 80 μΐ triethyla- 30 mine (1M in DMF) en 160 μΐ HATU (0,5 M in DMF) toegevoegd, en de reactiemengsels werden gedurende 2 uur geroerd bij 70°C. Het oplosmiddel werd verwijderd met behulp van het SpeedVac-apparaat en de onzuivere reactiemengsels werden opnieuw opgelost in DMSO en met behulp van een vloeistof- 35 hanteerder overgebracht in een plaat met 96 putjes van .1 ml, hetgeen een theoretische eindconcentratie van ~10 mM gaf. De reacties werden geanalyseerd en met behulp van 1029799- 122 LC/MS werd een positieve identificatie van het product gedaan. De moederoplossing werd verdund tot 50 nM en getest op het percentage remming van cMET bij 50 nM.
5 Algemene procedure 41: i ' ' - - .
! io
COOH HATU. DMF, CONRR
Cl fS nicl„kIU 70°C, 2 uur 9*
X^0JLn + RRNH __ rv^° T
\XC° \ -:V-a NH* / 15
Aan een reeks van 400 μΐ van 0,2 M oplossingen van verschillende aminen in DMF in een plaat met 96 putjes 20 werden 400 μΐ (0,2 M in DMF) 6-amino-5-[(2,6-dichloorbenzyl)-oxy]nicotinezuur, 80 μΐ triethylamine (1 M in DMF) en 160 μΐ HATU (0,5 M in DMF) toegevoegd, en de reactiemengsels werden gedurende 2 uur geroerd bij 70°C.
Het oplosmiddel werd verwijderd met behulp van het Speed-25 Vac-apparaat en de onzuivere reactiemengsels werden opnieuw opgelost in DMSO en met behulp van een vloeistofhan-teerder overgebracht in een plaat met 96 putjes van 1 ml, , hetgeen een theoretische eindconcentratie van ~10 mM gaf.
De reacties werden geanalyseerd en met behulp van LC/MS 30 werd een positieve identificatie van het product gedaan.
De moederoplossing werd verdund tot 1 mM en getest.
Algemene procedure 42 met behulp van 2-(4-{6-amino-5-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyridine-3-yl}pyrazool-35 1-yl)-N- (3-dimethylaminopropyl)isobutyramide 1029799- 123 Η3°ν7°Ha ι c g~\ u c Ph3 n-n^Y°>ch3 . _u | 5 . V HaC>0^ ( J I f f3 (O 1
I + Br ηρ XH3 CszCOa γ f/X^o'^sVN
. °(_y ° DMF, 90 °C o'By N^CI NHa 'TT -H- . I- wr P83 HC /CH3 10 3 >C/0CH3 3 >ΟθΗ /-•ΓΥ .
«fj O O
Pd(PPh3)aCI2 C1 ch3 |Aj| Ü0H , Cl ch3'A |
Na2C03, DME/H20 l[SV^O'^V'N MeOH:H20 j
1 c 87°C *L .^s*L NH2 L nh2 I
15 xi . ^·τχι / I 5J. , 4 5£ . . .
n-n>Vn^^'n-CH3 / ^ch3 ^ i A / H2fT γ ° / 20 ‘ ch3 -'· X / HOBT.EDC Cl ?H® I J / DMF |Γ^Τ/^°Χ|ΧΝ
XjAc, NH2 M
'F
25 Aan een oplossing van 4-(4,4,5,5-tetramethyl[1,3,2]- dioxaborolaan-2-yl)-lH-pyrazool (5 g, 25,77 mmol) en 2- broom-2-methylpropionzure methylester (12,6 g, 27,06 mmol) i in DMF (85 ml) werd CS2CO3 (12,6 g, 38,65 mmol) toegevoegd.
Het reactiemengsel werd gedurende de nacht tot 90°C verhit 30 in een oliebad. Men liet de reactieoplossing af koelen tot kamertemperatuur en deze werd verdeeld tussen water en ethylacetaat. De gecombineerde oplossing in ethylacetaat werd vijfmaal gewassen met water, gedroogd op NaaSO^ en geconcentreerd, hetgeen het product 2-methyl-2-[4-(4,4,5, 5-35 tetramethyl[1,3,2]dioxaborolaan-2-yl)pyra-zool-l-yl]pro-pionzure methylester (4,776 g, 63 % opbrengst) gaf.
*029799- I
124
Aan een oplossing van 3-[1-(2,6-dichloor-3-fluor-fenyl)ethoxy]-5-joodpyridine-2-ylamine (6,363 g, 14,901 mmol) en 2-methyl-2-[4-(4,4,5,5-tetramethyl[1,3,2]dioxa-borolaan-2-yl)pyrazool-l-yl]propionzure methylester' (4,6 5 g, 15,64 mmol) in DME (27 ml) werd een 'Oplossing van CsF (6,79 g, 44,7 mmol) in water (9,3 ml) toegevoegd. Het re-actiemengsel werd driemaal ontgast met N2, Pd(dppf)CH2C12 toegevoegd en het reactiemengsel driemaal ontgast met N2. Het reactiemengsel werd in de magnetronoven verhit tot 10 120°C (vervolgens werd Pd toegevoegd met tussenpozen van 30 min. tot de reactie was verlopen). Er werd water toege- . voegd en het reactiemengsel werd geëxtraheerd met EtOAc, gedroogd op Na2S04 en geconcentreerd, hetgeen 2-(4-(6-amino-5-[1-(2,6-dichloór-3-fluorfenyl)ethoxy]pyridine-3-15 yl}pyrazool-l-yl)-2-methylpropionzure methylester gaf. Het onzuivere product werd gezuiverd door kolomchromatografie over silicagel met een gradiënt van 25-50 % EtOAc/hexanen, hetgeen 2-(4-{6-amino-5-[1-(2,6-dichloor-3- fluorfenyl)ethoxy]-pyridine-3-yl}pyrazool-l-yl)-2-20 methylpropionzure methylester (1,46 g, 21 % opbrengst) met een Rf = 0,11 (50 % EtOAc/hexanen) bezorgde.
Aan een oplossing van de methylester (2,92 g, 6,25 mmol) in MeOH (31 ml) werd een oplossing van LiOH (450 mg, 18,76 mmol) in water (6,25 ml) toegevoegd. Het reactie-25 mengsel werd verhit tot 60°C tot LCMS de volledige hydro-lyse (ongeveer 45 min.) liet zien. De MeOH werd in vacuüm verwijderd en MeOH (2,5 ml) en water (1 ml) werden toegevoegd. De pH werd op 5 gebracht met IN HC1, waarna het product uitkristalliseerde. Het 2-(4 —{6-amino-5-[1-(2,6-30 . dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyridine-3-yl}pyrazool-l-yl)- 2-methylpropionzuurproduct werd verkregen na filtratie (2,825 g, kwant.).
Aan een oplossing van 2-(4-{6-amino-5-[1-(2,6- dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyridine-3-yl}pyrazool-l-yl)-35 2-methylpropionzuur (1,00 g, 2,20 mmol) in DMF (5,5 ml)' werden HOBT (300 mg, 2,20 mmol), EDC (633 mg, 3,30 mmol) en N,N-dimethylpropaan-l,3-diamine (225 mg, 2,20 mmol) 1029799- 125 toegevoegd. Het reactiemengsel werd gedurende de nacht geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd vervolgens gezuiverd door omgekeerde fase-C-18 prep-HPLC, waarbij werd geëlueerd met acetonitril/water met 0,1 % 5 azijnzuur, hetgeen 2-(4-{6-amino-5-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyridine-3-yl}pyrazool-l-yl)-N- (3-dimethylaminopropyl)isobutyramide (170 mg, 14 % opbrengst) opleverde.
10 Algemene Procedure 43: met behulp van 3-[1-(2,6-dichloor- 3-fluorfenyl)ethoxy]-5-(3-methylpyrazool-l-yl)pyridirie-2-ylamine 15 i ' rC-
f ΐώ "-v X
+ O _- α cHsfl LAci ^ NH Ιλ,γ 20 F ' FM, j
F
25 Aan een geroerde oplossing van 3-[1-(2,6-dichloor-3-
fluorfenyl)ethoxy]-5-joodpyridine-2-ylamine (100 mg, 0,23 mmol) en 3-methyl-lH-pyrazool (59 mg, 0,70 mmol) in DMSO
i (1 ml) werden K3PO4 (101 mg, 0,47 mmol), dodecaan (0,015 ml, 0,05 mmol), cyclohexaandiamine (0,009 ml, 0,07 mmol) 30 en koperjodide (Cul) (14 mg,, 0,07 mmol) .toegevoegd. Door de oplossing werd gedurende 5 min. stikstof geleid, vervolgens werd deze gedurende 2 uur met magnetronstraling bestraald tot een temperatuur van 150°C. LCMS liet zien dat de reactie was verlopen. Het mengsel werd gezuiverd .35 · door prep-HPLC, hetgeen 3-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)-ethoxy]-5-(3-methylpyrazool-l-yl)pyridine-2-yl-amine (30 mg), opbrengst 34,2 % opleverde.
1029799- j 126
Algemene procedure 44 ..44- o. .o 5 f R2
Cl . R1-4-0H
o R2 T J I H J
I rA* "’f™ m’ V
Y — .9 ^ >vU°V :/ 10 Br Br YAC, NH, ./ 2,5-Dibroompyridine (1 moleq.) werd opgelost in wa-15 tervrije tolueen (0,085 M) en gekoeld tot -78°C. n-BuLi (1,2 moleq.) werd in 5 min. langzaam toegevoegd en vervolgens werd het ontstane mengsel bij -78°C geroerd. Na 2 uur werd RiC0R2 (1,3 moleq.) toegevoegd en de oplossing opnieuw op 78°C gehouden. Na 1 uur werd verzadigde NH4C1 in water 20 toegevoegd en liet men de oplossing opwarmen tot kamertemperatuur. Het product werd geëxtraheerd met EtOAc (3x) en de organische extracten werden gecombineerd, gedroogd (Na2S04) , geconcentreerd en gezuiverd door kolomchromato-grafie (10 % EtÖAc/hexanen - 100 % EtOAc), hetgeen het on-25 zuivere product opleverde. Het werd rechtstreeks gebruikt in algemene procedure 27 en leverde 25 op.
Algemene procedure 45 30 ^ fl . ^ fl , ^
I I l) ZnlCMVP.lCydppOCH.CVDpp) v I L I I JL IL
ΛΛ0\" —-- fVoY .
ÜA N S^Ol N Vx N
F
35 1029799·! 127
Aan een oplossing van 3-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyridine-2-ylamine (1,8 g, 6,04 mmol), zinkcyanide, 98 % (2,07 g, 12,07 mmol) en 1,1'-bis- (difenylfosfino)ferroceen, 97 % (0,4 g, 0,712 mmol) in DMF 5 (48 ml) werd [1,11-bis(difenylfösfino)ferroceen]- .
dichloorpalladium(II)-complex met dichloormethaan (1:1) (0,25 g, 0,30 mmol) toegevoegd. Het reactiemengsel werd gedurende de nacht onder een stikstofatmosfeer verhit tot 150°C. Het reactiemengsel werd verdund met EtOAc (50 ml), .10 gewassen met 4:1:4 = verzadigde NH4Cl/28 % ΝΗ40Η/Η20 (2 x 28 ml) en gedroogd op Na2S04. Het onzuivere mengsel werd gezuiverd over een kolom met silicagél, waarbij werd geë-lueerd met een lineaire gradiënt van 25-50 % (EtOAc/hexa-! nen), hetgeen 2-[1-(2-aminopyridine-3-yloxy)ethyl]-3- j 15 chloor-4-dimethylaminobenzonitril als een gele, vaste stof (37 % opbrengst) en 2-[1-(2-aminopyridine-3-yloxy)ethyl]- 4-dimethylaminoisoftalonitril als een donkerbruine, vaste stof (33 % opbrengst) bezorgde.
20 Algemene procedure 46
O
25 BrSs^Ot-Bu
BrV^ww KOH. K2C03 V--!-J— Br^N^V0t-Bu
Bu4NBr é
DCM N
30
Aan een mengsel van 4-broomimidazool (995 mg, 6,77 mmol), kaliumhydroxide. (380 mg, 6,77 mmol), kaliumcarbo- 35 naat (936 mg, 6,77 mmol) en tetra-n-butylammoniumbromide (109 mg, 0,339 mmol) in dichloormethaan (7 ml) werd tert-butylbroomacetaat (0,50 ml, 3,4 mmol) toegevoegd. Na roe- .
1029799- 128 ren gedurende de nacht werd het reactiemengsel gefiltreerd. Het filtraat werd gedroogd op natriumsulfaat, gefiltreerd en geconcentreerd door rotatieverdamping. Het residu werd gezuiverd door chromatografie over silicagel 5 met behulp van elutie door een gradiënt " van dichloorme-thaan en ethylacetaat, hetgeen (4-broomimidazool-l-yl)azijnzure tert-butylester (696 mg, 79 %) bezorgde.
Algemene procedure 47 10
HaC
hVn 0 /N1 .
15 hci C/n h-ci 9 CH3 ^ j dioxaan O CHa 1^11 ’^ΧΛ. - "ö¥£“; 20
Een 4 M oplossing van waterstofchloride in dioxaan (0,22 ml, 0,89 mmol) werd toegevoegd aan een oplossing van 25 (4-{6-amino-5-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]- pyridine-3-yl}imidazool-l-yl)azijnzure tert-butylester (86 mg, 0,18 mmol) in dichloormethaan (2 ml) . Na 2 dagen roeren werd het reactiemengsel geconcentreerd door rotatieverdamping en het residu opgelost in de minimale hoeveel-30 heid methanol. Deze oplossing werd druppelsgewijs toegevoegd aan ether en men liet het ontstane mengsel gedurende de nacht staan. Het mengsel werd gefiltreerd, het neerslag gewassen met ether en gedroogd aan de lucht, hetgeen (4-{6-amino-5-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-pyridine-35 3-yl}pyrazool-l-yl)azijnzuur (83 mg, 93 %) gaf.
1029799- 129
Algemene procedure 48 5 «"Ο Γ'Ο
Ci^vO - f^Sï __C^C°3.__ Br~AN'^N'^1 N=^ DMF N®^ 1°
Een mengsel van 4-broomimidazool (217 mg, 1,48 mmol) en cesiumcarbonaat (875 mg, 2,69 mmol) in dimethylformami-de (5 ml) werd gedurende 30 min. geroerd. 4-(2- 15 ChloorethyDmorfolinehydrochloride (250 mg, 1,34 mmol) werd toegevoegd en het mengsel verhit tot 50°C. Na verhitten gedurende de nacht werd het reactiemengsel geconcentreerd door rotatieverdamping. Het residu werd gesuspendeerd in een mengsel van dichloormethaan en methanol en 20 afgefiltreerd. Het filtraat werd geconcentreerd door rotatieverdamping. Het residu werd gezuiverd door chromatogra-fie over silicagel met behulp van elutie door een gradiënt van dichloormethaan en methanol, hetgeen 4-(2-(4-broomimidazool-l-yl)ethyl]morfoline (148 mg, 42 %) ople- 25 verde.
Algemene procedure 49 30 N-O NIS K1.0.
v —s;—- "-J
35 Isoxazool (0,64 ml, 10 mmol) werd toegevoegd aan een oplossing van N-joodsuccinimide (2,3 g, 10 mmol) in tri- 1029799- 130 fluorazijnzuur (20 ml) . Na roeren gedurende de nacht werden water (50 ml), hexanen (50 ml) en natriumbisulfiet aan het reactiemengsel toegevoegd. De fasen werden gescheiden en de organische fase werd gedroogd op Na2S04, gefiltreerd 5 en geconcentreerd door rotatieverdamping, hetgeen 4-joodisoxazool (218 mg, 11 %) gaf.
Algemene procedure 50 10
Q
Q λ z f Λ ίι Π ί^*.Ν 15 y tfa y H y1 vW “ vw.·- VVW :
Boc'N'Boc nH2 sAq NHz 20
Trifluorazijnzuur (5 ml) werd toegevoegd aan een oplossing van 6'-broom-5-[l-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)-ethoxy][3,3']bipyridinyl-6-ylbis(tert-butoxycarbonyl)-25 amine (1,3 g, 2,0 mmol) in dichloormethaan (15 ml). Na 3.. uur werden gelijke porties water en verzadigde natriumbicarbonaat in water toegêvoegd. De fasen werden gescheiden en de waterfase werd geëxtraheerd met dichloormëthaan. De gecombineerde organische fasen werden gedroogd op Na2S04 en 30 geconcentreerd door rotatieverdamping, hetgeen 6'-broom-5-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy][3,3']bipyridinyl-6-ylamine (968 mg, 106 %) gaf.
Een buis werd gevuld met 6'-broom-5-[1-(2,6-dichloor- 3-fluorfenyl)ethoxy][3,3']bipyridinyl-6-ylamine (92 mg, 35 0,20 mmol), 4-pyrrolidine-l-ylpiperidine (0,62 g, 4,0 mmol) en N-methylpyrrolidinon (0,8 ml). De buis werd gesloten en het mengsel werd gedurende de nacht verhit tot 1029799- 131 80°C. Gedurende 5,5 uur werd de temperatuur verhoogd tot 100°C en vervolgens werd met verhitten gestopt. Het reac-tiemengsel werd verdeeld tussen ethylacetaat en water. De fasen werden gescheiden en de waterfase werd geëxtraheerd 5 met ethylacetaat. De gecombineerde organische fasen werden gedroogd op MgS04 en geconcentreerd door rotatieverdam-ping. Het residu werd gezuiverd door chromatografie over silicagel met behulp van elutie door een gradiënt van dichloormethaan en methanol en ammoniumhydroxide, hetgeen 10 5"-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-4-pyrrolidine-l- yl-3,4,5,6-tetrahydro-2H-[1,2',5',3”]terpyridine-6"-ylamine (53 mg, 50 %) opleverde.
Algemene procedure 51 15
jQh r~,NH
Br 0^^
j y „ I N
20 Sr NaH
Br DMS0 Br 25 Natriumhydride (56 mg, 2,3 mmol) werd toegevoegd aan een oplossing van piperidine-4-ol (214 mg, 2,11 mmol) in DMSO (8 ml). Na 30 min. roeren werd 2,5-dibroompyridine toegevoegd. Na gedurende 24 uur roeren werd natriumhydride (56 mg, 2,3 mmol) toegevoegd. Na nog 24 uur roeren werd 30 het reactiemengsel verdeeld tussen ethylacetaat en water. De fasen werden gescheiden en de waterfase werd geëxtraheerd met ethylacetaat. De gecombineerde organische fasen werden gedroogd op MgS04 en geconcentreerd door rotatie-verdamping. Het residu werd gezuiverd door chromatografie 35 over silicagel met behulp van elutie door een gradiënt van dichloormethaan/ methanol en ammoniumhydroxide, hetgeen 5- 1029799- 132 broom-2-(piperidine-4-yloxy)pyridine (316 mg, 58 %) opleverde.
Algemene Procedure 52 5
Br jp,N'B°C
10 An |f^N
DIPEA
Br NMP Br 15
Een buis werd gevuld met 2,5-dibroompyridine (0,24 g, 1,0 mmol), 4-aminopiperidine-l-carbonzure tert-butylester (0,22 g, 1,1 mmol), diisopropylethylamine (0,19 ml, 1,1 mmol) en N-methylpyrrolidinon (1,0 ml). De buis werd ge-20 sloten en het mengsel gedurende de nacht verhit tot 80°C. Men verhoogde de temperatuur tot 120°C en er werd gedurende de nacht verhit. Het reactiemengsel werd verdeeld tussen ethylacetaat en water. De fasen werden gescheiden en de waterfase werd geëxtraheerd met ethylacetaat. De gecom-25 bineerde organische fasen werden gedroogd op MgS04 en geconcentreerd door rotatieverdamping. Het residu werd gezuiverd door chromatografie over silicagel met behulp van elutie door een gradiënt van ethylacetaat en hexanen, hetgeen 4-(5-broompyridine-2-ylamino)piperidine-l-carbonzure 30 tert-butylester (36 mg, 10 %) opleverde.
Algemene procedure 53 35 1029799- 133 F CH3 5 l^CI 0 u0
Na0EI r tlC' o ν,Ν,Ο VvCH3 (<V*N^
JU Ot-Bu Cl k_N^O
Ot-Bu 10 4-(4-{6-Amino-5-[1-(2,6-dichloor-3-ethoxyfenyl)-ethoxy]pyridine-3-yl}benzoyl)piperazine-l-carbonzure tert-butylester: Aan 4 ml DMSO werden 0,124 ml ethanol en ver- 15 volgens 32 mg NaH toegevoegd. Na 30 min. roeren werd 250 mg 4-(4-{6-amino-5-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)-ethoxy]-pyridine-3-ylJbenzoyl)piperazine-l-carbonzure tertbutyl-ester toegevoegd en het reactiemengsel verwarmd tot 40°C. Na 3 uur werd het reactiemengsel gekoeld en uitgegoten in 20 water, hetgeen een neerslag vormde. Na neutralisatie tot pH = 6 werd 200 mg taankleurige, vaste stof geïsoleerd; 77 %.
Algemene procedure 54 25 OMe ' F . MeO^ OMe “ar ^ V0.
. ~ N N . . N N
(4-{6-Amino-5-[1-(2,6-dichloor-3-hydroxyfenyl)-ethoxyJpyridine-3-yl}fenyl)piperazine-l-yimethanon: 1029799' 35 134
Aan 140 mg 4-[4-(6-amino-5-{1-[2,6-dichloor-3-(2,4,6-tri-methoxybenzyloxy)fenyl]ethoxy}pyridine-3-yl)benzoyl]-piperazine-l-carbonzure tert-butylester (uit algemene procedure 53) werd 1 ml TFA toegevoegd. De oplossing werd on-5 middelijk roodachtig. 3 seconden later volgde de toevoeging van 100 pl triethylsilaan. De oplossing werd geel. Na 4 uur roeren werd 5 ml tolueen toegevoegd en het oplosmiddel in vacuüm verwijderd. Chromatograf ie met 10 .% Me-0H/CH2C12 tot 0,5 % tot 1 % NH4OH/9,5 tot 9 % MeOH/90 % 10 CH2CI2 leidde tot 55 mg witte, vaste stof; 62 % opbrengst..
Algemene procedure 55 “ .λ / <(f
Br Br 8a 8b ·’ · 20 o'"-'* ---NHi "θ' ·"* NH* χ»οπ.α 25 ¢.18 30 2-(4-broom-2-methoxyfenoxy)ethanol (8a): Kaliumcarbonaat (1,4 g, 10 mmol) werd toegevoegd aan een oplossing van. ethyleencarbonaat (1,8 g, 20 mmol) en 4-broom-2-methoxyfenol (1,05 g, 5 mmol) in 5 ml tolueen onder een inerte atmosfeer. Het reactiemengsel werd gedurende 12 uur 35 verhit tot 115°C. Water (50 ml) en ethylacetaat (2 x 100 ml) werden aan het reactiemengsel toegevoegd om te kunnen roeren. De organische lagen werden gecombineerd, gedroogd, 102.9799? 135 gefiltreerd en ingedampt, hetgeen een geel olieachtig residu gaf. Het residu werd gezuiverd door flash-chromatografie (elueren met 40-»45 % EtOAc in hexanen), hetgeen de verbinding 8a als een lichtbruin-gele olie (1 5 g; 4,13 mmol; 82,6 % opbrengst) gaf.
MS (APCI)(M+H)+: 246.
1H-NMR (400 MHz, chloroform-D) δ ppm 2,83 (t, J=6,3 Hz, 1H), 3,84 (s, 3H) , 3,89-4,01 (m, 2H) , 4,03-4,13 (m, 2H) , 6,78 (d, J=8,3 Hz, 1H), 6,99 (d, 1H), 7,02 (d, 1H).
.10 4-broom-l-(2-chloorethoxy)-2-methoxybenzeen (8b): Thionyl-chloride (0,3 ml) werd toegevoegd aan een oplossing van de verbinding 1 in 1 ml pyridine die in een ijsbad stond. Het reactiemengsel werd gedurende 10 min. in het ijsbad ge-15 roerd en vervolgens gedurende 2 uur verhit tot 100°C. Men liet het reactiemengsel afkoelen tot kamertemperatuur en er werd geneutraliseerd met verdunde HC1 (1 M). CH2CI2 (2 x 100 ml) werd toegevoegd om de waterige oplossing te extraheren. De gecombineerde organische lagen werden gedroogd 20 op Na2SC>4 en vervolgens onder vacuüm geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door flash-chromatografie (elueren met 10-»15 % EtOAc in hexanen), hetgeen de verbinding 8b als een kleurloze olie (485 mg; 1,84 mmol; 50,3 % opbrengst) gaf.
25 MS (APCI)(M+H)+: 264.
1H-NMR (400 MHz, chlorof orm-D) δ ppm 3,81 (t, J= 6,2 Hz, 2H), 3,85 (s, 3H) , 4,23 (t, J= 6,2 Hz, 2H), 6,78 (d, J±6,6
Hz, 1H).
30 Verbinding 9:
De verbindingen met de formule 9 kunnen worden gevormd door middel van de volgende voorbeeldprocedure: Verbinding A18 (1,3 molequivalent) wordt toegevoegd aan een oplossing van een arylhalogenide (0,51 mmol) in 7 ml DME.
35 Het mengsel wordt verscheidene malen doorgeblazen met stikstof en vervolgens wordt dichloorbis(trifenylfosfino)-palladium(II) (0,05 molequivalent) toegevoegd. Aan het re- '1029799- 136 actiemengsel wordt natriumcarbonaat (3 molequivalent) in 1,5 ml H2O toegevoegd en de ontstane oplossing gedurende 12 uur verhit tot 85°C. Aan het reactiemengsel wordt water (20 ml) toegevoegd om de reactie af te breken. Vervolgens 5 wordt EtOAc (50 ml x 2) toegevoegd om de waterige oplos sing te extraheren. De EtOAc-laag wordt gedroogd op Na2S04. De Na2S04 wordt afgefiltreerd en het filtraat ingedampt, hetgeen een donkerbruin, olieachtig residu geeft. Het residu wordt gezuiverd door chromatografie over silicagel 10 (waarbij wordt geëlueerd met CH3OH, CH2CI2, EtOAc en hexa- nen), hetgeen het gewenste product, de verbinding 9, geeft.
Verbinding 10: De verbindingen met de formule 10 kunnen 15 worden gevormd door de volgende voorbeeldprocedure: Een amine (7 molequivalent) wordt toegevoegd aan een oplossing van de verbinding 9 (0,17 mmol) in 3 ml 2-methoxyethanol. De ontstane oplossing wordt gedurende 12 uur verhit tot 85°C. Aan het reactiemengsel wordt water (20 ml) toege-.20 voegd om de reactie af te breken. Vervolgens wordt EtOAc (50 ml x 2) toegevoegd om de waterige oplossing te extraheren. De EtOAc-laag wordt gedroogd op Na2S04. De Na2S04 wordt afgefiltreerd en het filtraat ingedampt, hetgeen een lichtbruin, olieachtige residu geeft. Het residu wordt ge-25 zuiverd door chromatografie over silicagel (waarbij wordt geëlueerd met CH3OH, CH2CI2, EtOAc en hexanen), hetgeen het gewenste product, de verbinding 10, geeft.
*
Algemene procedure 56 30 35 1029799- 137
_„R
I ' ? I
\ / |An N^N N^N ·
7? V V : V
5 pvA ” * . f./S _. f’A
RfV^V Απ' 11 12 . A18
. X = Cl, OR q^R
N^N
10 V
CH3 . -AvVV" :
Sy* nh2 ' 13 15 I '
Verbinding 14: De verbindingen met de formule 14 kunnen worden gevormd door de volgende voorbeeldprocedure: Lithi-umhexamethyldisilazide (1,2 molequivalent; 1M in THF) wordt toegevoegd aan een oplossing van een alcohol (1 20 mmol) in 2 ml THF. Het mengsel wordt onder een stikstofat-mosfeer gedurende 30 min. geroerd bij kamertemperatuur en vervolgens wordt 5-broom-2-chloorpyrimidine (1 molequivalent) toegevoegd. De ontstane oplossing wordt gedurende 12 uur verhit tot 75°C. Aan het reactiemengsel wordt water 25 (20 ml) toegevoegd om de reactie af te breken. Vervolgens wordt EtOAc (50 ml x 2) toegevoegd om de waterige oplossing te extraheren. De EtOAc-laag wordt gedroogd op Na2S04. De Na2S04 wordt afgefiltreerd en het filtraat ingedampt, hetgeen een olieachtig residu geeft. Het residu wordt ge-30 zuiverd door chromatografie over silicagel (waarbij wordt geëlueerd met EtOAc in hexanen), hetgeen het gewenste product, de verbinding 14, geeft.
Verbinding 11: De verbinding A18 (1,3 molequivalent) wordt 35 toegevoegd aan een oplossing van 5-broom-2-chloorpyrimidine of de verbinding 14 . (1 mmol) in 24 ml DME. Het mengsel wordt verscheidene malen doorgeblazen met 1029799- 138 stikstof en vervolgens wordt dichloorbis(trifenylfosfino) -palladium(II) (0,05 molequivalent) toegevoegd. Natriumbicarbonaat (3 molequivalent) in 3 ml H2O wordt aan het re-actiemengsel' toegevoegd en de ontstane oplossing gedurende, 5 12 uur verhit tot 85°C. Aan het reactiemengsel wordt water (50 ml) toegevoegd om de reactie af te breken. Vervolgens wordt EtOAc (100 ml x 2) toegevoegd om de waterige oplossing te extraheren. De EtOAc-laag wordt gedroogd op Na2S04. De Na2S04 wordt afgefiltreerd en het filtraat ingedampt, 10 hetgeen een donkerbruin, olieachtig residu geeft. Het residu wordt gezuiverd door flash-chromatografie (elueren met 40-»55 % EtOAc in hexanen), hetgeen de verbinding 11 geeft.
.15 Verbinding 12: Een amine (2 molequivalent) wordt toegevoegd aan een oplossing van de verbinding 11 in 3 ml n-butanol. Het reactiemengsel wordt gedurende 30 min. in een magnetronoven bestraald tot een temperatuur van 120°C. Het ontstane mengsel wordt uitgegoten in een mengsel van H20 20 en EtOAc (100 ml; 1:1, vol./vol.). De organische laag wordt gedroogd, gefiltreerd en ingedampt, hetgeen een lichtbruin, olieachtige residu geeft. Het residu wordt gezuiverd door chromatografie over silicagel (waarbij wordt geëlueerd met CH30H, CH2C12, EtOAc en hexanen), hetgeen het 25 gewenste product, de verbinding 12, geeft.
Verbinding 13: Een zuur (16 molequivalent of minder) wordt bij kamertemperatuur toegevoegd aan de verbinding 12 (0,14 mmol) . De ontstane oplossing wordt gedurende 12 uur ge-30 roerd bij kamertemperatuur, of verhit tot 60°C. Het reactiemengsel wordt ingedampt en het residu gezuiverd door chromatografie over silicagel (waarbij wordt geëlueerd met CH3OH, EtOAc en CH2C12) , hetgeen het gewenste amideproduct, de verbinding 13, als een geelachtig tot witte vaste stof 35 geeft.
10297983 139
Algemene procedure 57 5 > hn'R . "f ”V-( ΐη π v y v y
I 15 Br I JL
?h3 Λ -— CH3 fpV -- ?H3 f| I
1B RfV-O-V / 10 Kj nh2 nh2 nh2 / A18 16 17
15 Verbinding 15: Natriumhydride (1,3 molequivalent) en RX
(1,1 molequivalent) worden toegevoegd aan een oplossing van 2-amino-5-broompyridine (0,84 mmol) in 3 ml DMF. Het reactiemengsel wordt gedurende 20 min. in een magnetron-oven bestraald tot een temperatuur van 100°C. Het ontstane 20 mengsel wordt uitgegoten in een mengsel van H2O en EtOAc (100 ml; 1:1, vol./vol.) . De organische laag wordt gedroogd, gefiltreerd en ingedampt, hetgeen een lichtbruin residu geeft. Het residu wordt gezuiverd door chromatogra-fie over silicagel (waarbij wordt geëlueerd met CH3OH, 25 CH2CI2, EtOAc en hexanen), hetgeen het gewenste product, de verbinding 15, geeft.
Verbinding 16: De verbinding A18 (1,3 molequivalént) wordt toegevoegd aan een oplossing van de verbinding 15 (0,25 30 mmol) in 5 ml DME. Het mengsel wordt verscheidene malen doorgeblazen met stikstof en vervolgens wordt dichloorbis-(trifenylfosfino)palladium(II) (0,05 molequivalent) toegevoegd. Natriumcarbonaat. (3 molequivalent) in 0,8 ml H20 wordt aan het reactiemengsel toegevoegd en de ontstane op-35 lossing gedurende 12 uur verhit tot 85°C. Aan het reactiemengsel wordt water (50 ml) toegevoegd om de reactie af te breken. Vervolgens wordt EtOAc (100 mi x 2) toegevoegd om 1029798- 140 de waterige oplossing te extraheren. De EtOAc-laag wordt gedroogd op Na2S04. De Na2S04 wordt af gefiltreerd en het filtraat ingedampt, hetgeen een donkerbruin, olieachtig residu geeft. Het residu wordt gezuiverd door flash-5 chromatografie (waarbij wordt geëluerd met ΟΗ2ΟΗ, CH2CI2, EtOAc en hexanen), hetgeen het gewenste product, de verbinding 16, geeft.
Verbinding 17: Een zuur (16 molequivalent of minder) wordt 10 bij kamertemperatuur toegevoegd aan de verbinding 16 (0,0114 mol). De ontstane oplossing wordt gedurende 12 uur geroerd bij kamertemperatuur of verhit tot 60°C. Het reac-tiemengsel wordt · ingedampt en het residu gezuiverd door chromatografie over silicagel (waarbij wordt geëlueerd met 15 CH3OH, EtOAc en CH2CI2) , hetgeen het gewenste amideproduct, de verbinding 17, als een geelachtige tot witte, vaste stof geeft.
Algemene procedure 58 20 9 o r~T0H -- AoMe __ ρ/ΌΗ Ο β .
BocN-J BocN-J BocN-J |—/"Ό 'CHa tl i_-£ BoeN—^
B\ HjC^flpXs N
A .♦ V__ H BocN— \ ,B_0, --► Br \_/ ; Η3°Π PCH» ; X CH, M CH, CH, ^7 H,C CH, JN6
Ψ n-h' CNBoc <^NH
vlw Ϋ ' t? " cf0·
^Aa NH= F ? 9Ha £) Cl CH3 A X-R Cl CH A
— iU
1.0297 99- 141 1-(t-Butoxycarbonyl)azetidine-3-carbonzuur (1-1)-(AXL016917, 1000 mg, 4,97 mmol) werd opgelost in MeOH (5 ml)/tolueen (20 ml) en vervolgens werd gekoeld tot 0°C. TMSCHNN )trimethylsilyldiazomethaan) (7,45 mmol) werd ver-5 volgens in 15 min. druppelsgewijs toegevóegd waarbij enige gasontwikkeling werd waargenomen. De heldere oplossing werd langzaam geel. De oplossing werd gedurende 10 min. geroerd bij 0°C en vervolgens liet men in 30 min. opwarmen tot kamertemperatuur. De oplossing werd vervolgens gecon-10 centreerd en de tolueen afgedampt, hetgeen 1,055 g 1-t-butyl-3-methylazetidine-l,3-dicarboxylaat (1-2) opleverde, dat rechtstreeks, zonder te zijn gezuiverd, in de volgende stap werd gebruikt (onzuivere opbrengst: 99 %).
l-tert-Butyl-3-methylazetidiner-l,3-dicarboxylaat 15 (1055 mg, 5,90 mmol) werd opgelost in THF (17 ml) en ver volgens gekoeld tot 0°C. MeOH (0,397 ml, 9,80 mmol) en LiBH4 (14,7 mmol) werden achtereenvolgens toegevoegd. Men liet het reactiemengsel in 3 uur opwarmen tot kamertemperatuur. Vervolgens werden 10 % kaliumnatriumtartraatte- 20 trahydraat (Rochelle-zout) (30 ml) en EtOAc (30 ml) toegevoegd en werd de oplossing gedurende 30 min. geroerd bij kamertemperatuur. De organische laag werd afgescheiden en vervolgens gedroogd (Na2S04) en geconcentreerd, hetgeen 674 mg t-butyl-3-(hydroxymethyl)azetidine-l-carboxylaat (1-3) 25 als een onzuiver product (heldere olie) opleverde. Het product werd zonder zuivering rechtstreeks in de volgende stap gebruikt.
t-Butyl-3-(hydroxymethyl)azetidine-l-carboxylaat (674 mg, 3,60 mmol) werd opgelost in CH2CI2 (13 ml, 0,25M) en 30 vervolgens werden bij 0°C EtsN (1,0 ml, 7,20 mmol), DMAP (44 mg, 0,360 mmol) en methaansulfonylchloride (0,31 ml, . 3,96 mmol) achtereenvolgens toegevoegd, waarbij de toevoe ging van MsCl langzaam werd gedaan. Men liet de oplossing in 1 uur opwarmen tot kt. Na 15 uur werd verzadigde NaHCÜ3 35 in water (50 ml) toegevoegd en vervolgens werd het product geëxtraheerd met CH2CI2 (2 x 50 1) . De gecombineerde organische extracten werden gewassen met geconcentreerde zout- 1029799- 142 oplossing (50 ml), gedroogd (Na2S04), geconcentreerd en gezuiverd door flash-chromatografie (Biotage Horizon - 10 % EtOAc/hexanen - 100 % EtOAc), hetgeen 962 mg (1-4) als een olie (kwantitatief) opleverde.
5 NaH (95 %, 96 mg, 3,99 mmol) werd bij kt onder N2 ge combineerd met DMF (10 ml). 4-Broompyrazool (533 mg, 3,63 mmol) werd vervolgens toegevoegd en het mengsel geroerd bij kt. Na 30 min. werd (1-4) toegevoegd en de oplossing verhit tot 95°C. Na 2 uur werd verzadigde NH4C1 in water 10 (50 ml) toegevoegd, en vervolgens EtOAc (50 ml). Het orga nische extract werd gedroogd (Na2S04) en geconcentreerd, en vervolgens liet men een dunne laag silicagel passeren met 50 % EtOAc/hexanen, hetgeen 846 mg onzuiver (1-5) opleverde dat rechtstreeks in de volgens stap werd gebruikt (on-15 zuivere opbrengst: 74%).
(1-5). (846 mg, 2,68 mmol), (1-6) (815 mg, 3,21 mmol), [1,1'-bis(difenylfosfino)ferroceen]dichloorpalladium (108 mg, 0,133 mmol) en KOAc (893 mg, 9,10 mmol) werden gecombineerd in DMSO (10 ml, gedurende 10 min. doorgeblazen met 20 N2), en vervolgens werd de oplossing verwarmd tot 80°C. Na 16 uur werd de oplossing gefiltreerd door Celite en vervolgens werden H20 (50 ml) en EtOAc (50 ml) toegevoegd. De organische fase werd geëxtraheerd en gedroogd (Na2S04), geconcentreerd en vervolgens liet men een laag silicagel 25 passeren met 50 % EtOAc/hexaan. De oplossing werd geconcentreerd, hetgeen 1,22 g onzuivere (1-7) opleverde dat rechtstreeks in de volgende stap werd gebruikt.
<
De boronzure ester (1-7) (4144 mg, 11,4 mmol), (1-8) (2890 mg, 7,60 mmol), dichloorbis(trifenylfosfino)- 30 palladium(II) (534 mg, 0,760 mmol), DME (40 ml, gedurende 30 min. . ontgast met N2) en IN Na2C03 (40 ml, gedurende 30 min ontgast met N2) werden gecombineerd en verhit tot 80 °C. Na 16 uur liet men het reactiemengsel af koelen tot kt en werd EtOAc (80 ml) toegevoegd. De oplossing werd ge-35 filtreerd door Celite en vervolgens werd water. (80 ml) toegevoegd. De organische laag werd afgescheiden, gedroogd (Na2S04) en geconcentreerd. Het product werd gezuiverd door *029799- 143 flash-chromatografie, hetgeen 1486 mg (1-9) als een taan-kleurige, vaste stof (36 %) opleverde.
1 Gram DOWEX 50WX2-400-ionenwisselaar werd bereid door dit te wassen met H2O (500 ml), 1:1 => HaO/MeOH, MeOH 5 (5 x 250 ml), CH2CI2 (500 ml) en hexanen (500 ml). De DOWEX
werd vervolgens gedurende 1 dag in een vacuümoven gedroogd bij 4 0°C. (1-9) werd opgelost in MeOH en vervolgens werd DOWEX (588 mg, 1, 096 mmöl) toegevoegd. De oplossing werd gedurende 2 uur geroerd bij kt. De oplossing werd vervol-10 gens gefiltreerd en de kunsthars gewassen met MeOH (3 x 200 ml) , en de wasvloeistof werd af gevoerd. De kunsthars werd vervolgens gewassen met 3,5M NHa/MeOH en verzameld. De oplossing werd vervolgens geconcentreerd, hetgeen 374 mg (1-10) als een gomachtige, vaste stof (78 %) opleverde. 15 Voor de vorming van de verbindingen met de formule (1-11) kan de volgende voorbeeldprocedure worden gevolgd. 1 Molequivalent van (1-10) wordt opgelost in DMF of CH2CI2 en vervolgens wordt de base (3 molequivalent) en/of het koppelingsreagens (1,5 molequivalent) toegevoegd. Aan de 20 oplossing wordt X-R (1,1 molequivalent) toegevoegd, waarin X bijvoorbeeld Cl, Br, I, OMs, COC1, CO, COOH, ethyleen of carbonaat is, en R een gewenste groep is zoals die welke worden getoond in de voorbeelden hierin, of gelijksoortige groepen. De ontstane oplossing wordt gedurende 4 uur ge-25 roerd bij kt. H2O en EtOAc worden toegevoegd en de organische fase wordt geëxtraheerd, gedroogd (Na2S04) en geconcentreerd. Het onzuivere product kan worden gezuiverd door preparatieve HPLC of andere werkwijzen uit de stand der techniek, hetgeen het product (1-11) oplevert.
1029799“ 144
Algemene procedure 59 OH
OH OH OMs \> Pd(OHVC ^ (Boc)2CVEt3N/Xs Λ 5 ' MeOH/H2 N EtOH ^ N / ^ . 55 psi H HC1 Boe 0½¾ Boe
(J I
2£(.52%) 2£(52%) 2d(9I%) \
:V
i hn—-, I ^6°0 ,"b—b'jt J I ?* 91¾ ιίη
N \ J—J /Ό O'K M F. 1 lI^N
10 - V^Br N—hT2=Z Μ 0 2=5 kj -:-►' V '^Sa NH*
Pdcdppf^cbjCij T
NaH/DMF/ * Br KOAcflDMSQ/80°C Λ M
H0°C 2=5(98%) PdOttJOPPhjJjQy j
M(97%) Na2C03/DME/85°C
15 " £“· rr : rT f
N-N 4MHC1 /—J
in Dioxane N—N λ jj .
Cl CH3 CHïdï / f CH3 Λ p f CH3 Λ / ^CQ ïh, F'vV^oV VrW / 20 JULCi fa *i'^CI / 2JS(63%) / 24i(85%) 2=12 3-Azetidinol (2-2): Een reactiemengsel van N- benzhydrylazetidine-3-ol. HCl-zout (2,16 g, 10,0 inmol) en 25 palladiumhydroxide (20 % Pd (droge base))-op-C (400 mg) in 50 ml MeOH werd gedurende 48 uur gehydrogeneerd bij 55 psi. Het reactiemengsel werd gefiltreerd door een laag ( Celite en goed gewassen met MeOH. Het filtraat werd bij kamertemperatuur onder vacuüm geconcentreerd in een water-30 bad. Het residu werd behandeld met ether (3 x 30 ml) en het oplosmiddel afgeschonken. De vaste stof werd gedroogd aan de lucht, hetgeen 571 mg van het HCl-zout van het product (2-2lL als een witte, vaste stof (52 % opbrengst) gaf. 1H-NMR (400MHz, DMSO-D6) 6ppm3,33 (s, 1H), 3,63-3,80 (m, 35 2H), 3,93-4,09 (m, 2H), 4,40-4,58 (m, 1H), 6,18 (d, J=6,32 Hz, 1H).
1029799- 145 5 · I 3-Hydroxyazetidine-l-carbonzure tert-butylester (3- 3) : Aan een koude (bad van 0°C) geroerde oplossing van verbinding (2-2) (57 0 mg, 5,20 mmol) in 10 ml EtOH werden 10 Et3N (1,8 ml, 13,0 mmol) en di-tert-butyldicarbonaat (1,702 g, 7,38 mmol) toegevoegd. Het ontstane mengsel, een heldere oplossing, werd gedurende de nacht geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd in vacuüm geconcentreerd. Het residu werd verdeeld tussen EtOAc (200 ml) 15 en 0,5N citroenzuuroplossing (30 ml), geconcentreerde zoutoplossing (30 ml). De organische laag werd gedroogd (Na2S04) en vervolgens onder vacuüm geconcentreerd, hetgeen 899 mg (2-3) als een heldere olie (52 %) gaf.
1H-NMR (400 MHz, chloroform-D) δ ppm 1,42 (s, 9H) , 3,78 20 (dd, J=9,47, 4,42 Hz, 2H), 4,13 (dd, J=9,35, 6,57 Hz, 2H) , 4,49-4,63 (m, 1H).
3-Methaansulfonyloxyazetidine-l-carbonzure tert- butylester (2-4) : Aan een oplossing van de verbinding (2- 3) (466 mg, 2,69 mmol) en Et3N (0,75 ml, 5,38 mmol) en 4-25 (dimethylamino)pyridine (33 mg, 0,269 mmol) in 10 ml CH2CI2 werd bij 0°C methaansulfonylchloride (0,25 ml, 3,23 mmol) toegevoegd. Het ontstane mengsel, een oplossing met een bruine kleur, werd gedurende de nacht geroerd bij 0°C tot kamertemperatuur. De reactie werd afgebroken met NaHCC>3 en 30 vervolgens werd verdeeld tussen CH2CI2 (200 ml) en verzadigde NaHC03-oplossing (50 ml). De organische laag werd gedroogd (Na2S04), vervolgens gefiltreerd door een laag si-licagel, geëlueerd met hexaan:EtOAc = 1:1, en het filtraat geconcentreerd onder vacuüm, hetgeen 614 mg (2-4) als een 35 gele olie (91 % opbrengst) gaf.
1029799- 146 1H-NMR (400 MHz, chloroform-D) δ ppm 1,43 (s, 9H), 3,05 (s, 3H) , 4,08 (dd, J=10,36, 4,29 Hz, 2H) , 4,26 (dd, J=10,36, 6,82 Hz, 2H), 5,11-5,26 (m, 1H).
1-(3-Azetidine-l-carbonzure tert-butylester)-4-broom-5 pyrazool (2-6): Een magnetronbuis van 5 ml werd' gevuld met verbinding (2-4) (304 mg, 1,21 mmol), 4-broompyrazool (2- 5) , 178 mg, 1,21 mmol) en NaH (60 % in minerale olie, 73 mg, 1,82 mmol) en 2 ml DMF. Het ontstane mengsel werd gedurende 30 min. in de magnetronoven verhit tot 110°C. Het 10 reactiemengsel werd verdeeld tussen EtOAc (200 ml) en verzadigde NaHC03~oplossing (2 x 50 ml) , geconcentreerde zoutoplossing (50 ml) . De organische laag werd gedroogd (Na2SC>4) en vervolgens onder vacuüm geconcentreerd, hetgeen 360 mg (2-6) als gele olie (98 %) opleverde.
15 ^H-NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ ppm 1,36-1,43 (m, 9H), 4,08 (s, 2H) , 4,18-4,31 (m, 2H) , 5,12-5,22 (m, 1H) , 7,67 (s, 1H) , 8,14 (s, 1H).
tert-Butyl-3-[4-(4,4,5,5-tetramethyl-l,3-dioxoboro-laan-2-yl)-lH-pyrazool-l-yl]azetidine-l-carboxylaat (2-8): 20 Een reactiemengsel van de verbinding (2-6) (225 mg, 0,74 mmol), bis(pinacolato)diboor (2-7, 227 mg, 0,89 mmol) en KOAc (247 mg, 2,52 mmol) in 3 ml DMSO werd gedurende 15 min. doorgeblazen met N2 en vervolgens werd Pd- CI2 (dppf)2CH2CI2 (30 mg, 2,52 mmol) toegevoegd. Het ontsta-25 ne mengsel werd gedurende de nacht onder N2 geroerd bij 80°C. Na afkoelen tot kamertemperatuur werd het mengsel gefiltreerd door een laag Celite en goed gewassen met ( EtOAc. Het filtraat werd geëxtraheerd met H20 (2 x 50 ml) en geconcentreerde zoutoplossing (50 ml) . De organische 30 laag werd gedroogd (Na2S04) en vervolgens onder vacuüm geconcentreerd. Het residu werd vervolgens gefiltreerd door een laag silicagel, waarbij werd geëlueerd met hex-aan:EtOAc = 3:2. Het filtraat werd onder vacuüm geconcentreerd, hetgeen 250 mg (2-8) als een heldere olie (97 % 35 opbrengst) gaf.
1029789- 147 1H-NMR (400 MHz, chloroform-D) δ ppm 1,18-1,27 (m, 9H) , 1,28-1,34 (m, 6H) , 1,41-1,49 (m, 6H) , 4,22-4,33 (m, 2H) , 4,36 (t, J=8,59 Hz, '2H), 4,98-5,13 (m, 1H), 7,83 (s, 2H). tert-Butyl-3-(4-{6-amino-5-[1-(2,6-dichloor-3-fluor-5 fenyl) ethoxy] pyridine-3-yl}-ltf-pyrazool-l'-yl) azetidine-1- carboxylaat (2-10): Een reactiemengsel van de verbinding (2-8) (459 mg, 1,31 .mmol) en 3-[1-(2,6-dichloor-3- fluorfenyl)ethoxy]-5-joodpyridine-2-amine (2-9) (374 mg, 0,88 mmol) in 13 ml ethyleenglycoldimethylether, water-10 vrije (DME) werd gedurende 15 min. doorgeblazen met N2, . vervolgens, werd Pd (II) (PPh3) 2CI2 (46 mg, 0,07 mmol) toegevoegd, en werd gedurende nog 15 min. doorgeblazèn met N2. Er werd een andere 1,0 N Na2C03-oplossing (3,9 ml, 3,9 mmol) toegevoegd na gedurende 15 min. doorblazen met N2. 15 Het ontstane mengsel werd gedurende de nacht onder N2 geroerd bij. 85°C. Het reactiemengsel werd gefiltreerd, door een laag Celite en goed gewassen met MeOH. Het filtraat werd onder vacuüm geconcentreerd. Het residu werd verdeeld tussen EtOAc (200 ml) en verzadigde NaHC03-oplossing (2 x 20 50 ml), geconcentreerde zoutoplossing (50 ml) . De organi sche laag werd gedroogd (Na2S04) en vervolgens onder vacuüm geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door middel van een Biotage-systeem (25 M, 100 % CH2CI2, 100 % CH2CI2 tot 90 % CH2Cl2 met 10 % MeOH)., waarbij de gewenste fractie 25 werd verzameld. Dit leverde. 421 mg (2-10) als een bruin-kleurige smeer (92 % opbrengst) op.
1H-NMR (400 MHz, chloroform-D) δ ppm 1,17-1,26 (m, 9H), .
1,80-1,87 (m, 3H) , 4,04-4,18 (m, 2H) , 4,20-4,33 (m, 2H), 4,34-4,41 (m, 1H) , 4,79 (s, 2H) , 5,02 (d, J= 7,58 Hz, 1H) , 30 7,04 (t, J=8,46 Hz, 1H), 7,33-7,41 (m, 1H), 7,44-7,52 (m, 1H), 7,53-7,58 (m, 1H), 7,59-7,65 (m, 1H) , '7,72-7,78 (m, 1H) ; LCMS, ber. voor C24H26CI2FN5O3 (M+H) : 523, gevonden: 523.
5-(l-Azetidine-3-yl-lH-pyrazool-4-yl)-3-[1-(2,6-35 dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyridine-2-amine (2-11) : Een reactiemengsel van de verbinding (2-10) (421 mg, 0,81 mmol) en 4,0 M HC1 in dioxaan (2,0 ml, 8,1 mmol) in 5 ml 1029799- 148 CH2CI2 werd gedurende 2,0 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd onder vacuüm geconcentreerd. Het residu werd behandeld met EtOAc. De neergeslagen vaste stof werd afgefiltreerd en goed gewassen met EtOAc en hex-5 aan, en vervolgens onder vacuüm gedroogd, hetgeen 275 mg (2-11) als het HCl-zout, een zandkleurige vaste stof (81 % opbrengst) gaf.
. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ ppm 1,79-1,89 (m, 3H), 3,56 (s, 1H), 4,35 (s, 4H) , 5,40 (s, 1H) , 6,23 (d, J= 6,57 Hz, 2H), 10 7,09 (s, 1H), 7,40-7,54 (m, 1H) , 7,59 (dd, J=8,84, 5,05
Hz, 1H), 7,73-7,83 (m, 1H) , 7,86 (s, 1H) , 8,12 (s, 1H) , 9,20 (s, 1H).
LCMS, ber. voor C19H18CI2FN5O (M+H) : 423; gevonden: 423.
De verbindingen met de formule (2-12) kunnen worden 15 bereid door middel van de volgende voorbeeldprocedure: Aan een reactiemengsel van de verbinding (2-11) (1,0 eq.) en
Et3N (2,0 eq.) in 2,0 ml DM F wordt bij kamertemperatuur een alkylbromide (1,1 eq.) toegevoegd. Het ontstane mengsel wordt gedurende de nacht bij kamertemperatuur geroerd 20 onder N2. Het reactiemengsel wordt verdeeld tussen EtOAc (200 ml) en verzadigde NaHC03-oplossing (2 x 50 ml), geconcentreerde zoutoplossing (50 ml). De organische laag wordt gedroogd (Na2S04) en vervolgens onder vacuüm gecon-. centreerd. Het residu.. wordt gezuiverd door middel van een 25 Dionex-systeem (5 tot 95 % MeCN:H20, 0,1 gew.% HOAc- buffer) . De gewenste fractie wordt verzameld, hetgeen (2j^ 12) opleverde.
Als alternatief kunnen de verbindingen met de formule (2-12) worden bereid door de volgende voorbeeldprocedure:.
. 30 Aan een reactieoplossing van een alkylamine (1,0 eq.) met iPr2EtN (diisopropylethylamine) (3,0 eq.) in 2,0 ml DMF wordt HATU (1,5 eq.) toegevoegd. Na gedurende 30 min. roeren wordt de verbinding (2-11) (1,0 eq. toegevoegd. Het ontstane mengsel wordt gedurende de nacht geroerd bij ka-35 mertemperatuur. Het reactiemengsel wordt verdeeld tussen EtOAc (200 ml) en verzadigde NaHC03-oplossing (2 x 50 ml) en geconcentreerde zoutoplossing (50 ml). De organische ί029799" 149 laag wordt gedroogd (Na2SO<) en onder vacuüm geconcen treerd. Het residu wordt gezuiverd door middel van een Di-onex-systeem (5 tot 95 % MeCN:H20, 0,1 gew.% HOAc) . Het gewenste product wordt verzameld, hetgeen (2-12) oplevert.
5
Algemene procedure 60: 10
Tlo OH
.^~o< n_n4^ ' tl ^ t i MCiS0' , „ I^-NBOC ^ >f 15 ΝΛ®Μ50 N.H/DMF/ ' 2d 9o°c 4Λ ^ 3-4 (89%)
I OH OH
20 FvWV" Y Y
C1 9* ?H3 (Tl 4M HCI/dioxaan 9' CH3 [ί'γΐ ———s»
Pd(n)(PPh3)2a2/ VY-^-ci NH2 NHa
Na2C03/DME/85°C
&É(68%) , 3-7 (63%) 25
' I
tert-Butyl-l-oxa-6-azaspiro[2.5]octaan-6-carboxylaat (3-2) : Een oplossing van dimethylsulfoxoniummethylide werd 30 onder N2 bereid uit NaH (60 % dispersie in minerale olie, 440 mg, 11,0 mmol) en trimethylsulfoxoniumjodide (2,421 g, 11.0 mmol) in 5 ml watervrije DMSO. Een andere oplossing van l-Boc-4-oxo-l-piperidinecarboxylaat (3-1, 1,993 g, 10.0 mmol) in 5 ml DMSO werd druppelsgewijs toegevoegd. 35 Het ontstane mengsel werd gedurende 6 uur geroerd bij 55°C. Het gekoelde reactiemengsel werd uitgegoten in.ijs-H20 en geëxtraheerd met EtOAc (2 x 200 ml) . De gecombi- 1029799- 150 neerde organische lagen werden gewassen met H2O (50 ml), 1 geconcentreerde zoutoplossing (50 ml), vervolgens gedroogd (Na2S04) en onder vacuüm geconcentreerd, hetgeen 1,4791 g (3-2) als een gele olie (69 % opbrengst) gaf.
5 1H-NMR (400 MHz, chloroform-D) 6 ppm 1,37-1,52 (m, 11H) , 1,71-1,84 (m, 2H), 2,63-2,72 (m, 2H) , 3,35-3,49 (m, 2H) , 3,62-3,78 (m, 2H).
tert-Butyl-4-hydroxy-4-{[4-(4,4,5,5-tetramethyl- 1,3,2-dioxaborolaan-2-yl)-lif-pyrazool-l-yl]methyl)piperi-10 dine-l-carboxylaat (3-4) : Een reactiemengsel van de verbinding (3-2) (214 mg, 1,0 mmol) en 4-(4,4,5,5-tetra- methyl-1,3,2-dioxaborolaan-2-yl)-lH-pyrazool (3-3, 194 mg, 1,0 mmol) en NaH (60 % dispersie in minerale olie, 60 mg, 1,5 mmol). in 3 ml DM F werd gedurende 3 uur geroerd bij 15 90°C. Het reactiemengsel werd verdeeld tussen EtOAc (200 ! ml) en verzadigde NaHC03-oplossing (50 ml) en geconcentreerde zoutoplossing (50 ml). De organische laag werd gedroogd (Na2S04) en onder vacuüm geconcentreerd, hetgeen 361 mg (3-4) als een gele smeer (89 % opbrengst) gaf.
20 1H-NMR (400 MHz, chloroform-D) δ ppm 1,21-1,34 (m, 12H), 1,39-1,50 (m, 9H), 1,56-1,78 (m, 4H), 3,14 (s, 2H), 3,72- 3,91 (m, J=32,34 Hz, 2H), 4,05 (s, 2H), 7,65 (s, 1H), 7,80 (s, 1H), 8,00 (s, 1H).
LCMS, ber. voor C20H34BN3O5 (M+H) : 408, gevonden: .408.
25 HPLC: zuiverheid = 85 %.
Tert-Butyl-4-[(4-(6-amino-5-[l-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyridine-3-yl)-lH-pyrazool-l-yl)methyl] - 4-hydroxypiperine-l-carboxylaat (3-6): Een reactiemengsel van de verbinding (3-4) (361 mg, 0,89 mmol) en 3-[1-(2,6- 30 dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-joodpyridine-2-amine (3-5) (378 mg, 0,89 mmol) in 9,0 ml ethyleenglycoldimethylether, watervrije (DME) werd gedurende 15 min. doorgeblazen met N2, vervolgens werd Pd(II) (PPh3)2CI2 (32 mg, 0,05 mmol) toegevoegd, en werd opnieuw gedurende 15 min. N2 doorge-35 blazen. Er werd een andere 1,0 N Na2C03-oplossing (3,9 ml, 3,9 mmol) toegevoegd nadat gedurende 15 min. was doorgeblazen met N2. Het ontstane mengsel werd gedurende de 4029799- 151 nacht onder N2 geroerd bij 85°C. Het reactiemengsel werd gefiltreerd door een laag Celite en goed gewassen met Me-OH. Het filtraat werd onder vacuüm geconcentreerd. Het residu werd verdeeld tussen EtOAc (200 ml) en verzadigde 5 NaHC03-oplossing (2 x 50 ml), geconcentreerde· zoutoplossing (50 ml). De organische laag werd gedroogd (NaaSOi) en vervolgens onder vacuüm geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door middel van een Dionex-systeem (25 tot 95 % MeCN:H20, 0,1 gew.% HOAc-buffer). De gewenste fractie werd 10 verzameld, hetgeen 147 mg (3-6) als een witte, vaste stof (28 % opbrengst) opleverde.
1H-NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ ppm 1,34-1,39 (m, 9H), 1,70- 1,77 (m, 2H), 1,79 (d, J=6,51 Hz, 3H) , 3,06 (d, J=12,63 Hz, 2H) , 3,62 (s, 2H) , 4,03 (s, 2H) , 4,79 (s, 1H) , 5,66 ; 15 (s, 2H), 6,08 (d, J= 6,82 Hz, 1H), 6,86 (d, J=l,52 Hz, 1H), 7,44 (t, J=8,72 Hz, 1H), 7,51-7,58 (m, 2H), 7,58-7,65. (m, 2H) , 7,73 (d, J~l,52 Hz, 1H), 7,78 (s, 1H) .
LCMS, ber. voor C27H32CI2FN5O4 (M+H): 581; gevonden: 581.
HPLC: zuiverheid 87 %.
20 4-[(4-{6-Amino-5-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)- ethoxy]pyridine-3-yl}-lH-pyrazool-l-yl)methyl]piperidine- 4-ol (3-7) : Een reactiemengsel van de verbinding (3-6) (145 mg, 0,25 mmol) met 4,0 M HCl in dioxaan (2,0 ml, 8,1 j mmol) in 5 ml CH2CI2 werd gedurende 2,0 uur geroerd bij ka- 25 mertemperatuur. Het reactiemengsel werd onder vacuüm geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door middel van een Dionex-systeem (5 tot 95 % MeCN:H20, 0,1 gew.% HOAc- buffer) . De gewenste fractie werd verzameld, hetgeen 76 mg (3-7) als een gele smeer (63 % opbrengst) opleverde.
30 1H-NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ ppm 1,41-1,55 (m, 2H) , 1,59- 1.71 (m, 2H), 1,81 (d, J=6,57 Hz, 3H), 2,88-3,00 (m, 2H), 3,02-3,14 (m, 2H) , 4,08 (s, 2H), 5,17 (s, 2H), 6,14-6,27 (m, J=6,57 Hz, 1H), 7,05 (s, 1H), 7,40-7,49 (m, J=8,72, 8.72 Hz, 1H), 7,51-7,60 (m, J=9,09, 4,80 Hz, 1H), 7,63 (s, 35 1H) , 7,76 (s, 1H) , 7,91 (s, 1H) , 8,51 (s, 1H) , 8,81 (s, 1H) .
LCMS, ber. voor C22H24CI2FN5O2 (M+H): 481; gevonden: 481.
1029799- 152
HpLC: zuiverheid = 98 %.
Analyse (C22H24Cl2FN502x2,2HOAcx2,3H20) : C, Η, N.
Algemene procedure 61: ' 5
__XKA X
, Λ , CHa (i)MeS02ci .Br - A~K
10 H Et3N/DMAP 43Π4«Λ Pd(dpp02Ch2Cl2
CH2C12 ^(74%) KOAc/DMSO/80°C
(2)NaH/DMF/ ±4(98%)
90°C
ψ ch, Λ Aj>
fvLyJ rt '°-> «--/Y
is Y ncH3 O m ,
Cl ru A, 2N NaOH I
hi · F f f’fj -- f ch3 A, ---- F'YY'0AfN ““ “CWftifccy 'V~~ci nhj IJL, nh,
Na2C03/DME/85°C
2o ««'. ; / / N-N \ / A ï N—R‘ /
RR’NH I
-I R
HATU/Et3N Cl CH3 rf^i 25 DMF fJ^i M-Cl NHj M <
Ethyl-2-[ (4-broom-ltf-pyrazool-l-yl)methyl] cyclopro-30 paancarboxylaat (4-3): Aan een reactieoplossing van ethyl- 2-(hydroxymethyl)cyclopropaancarboxylaat (4-1) (577 mg, 4,0 mmol) met Et3N (1,1 ml, 8,0 mmol) en DMAP (49 mg, 0,4 mmol) in 12 ml CH2C12 werd bij Ó°C methaansulfonylchloride (0,4 ml, 4,8 mmol) toegevoegd. Het ontstane mengsel, een 35 bruinkleurige suspensie, werd gedurende de nacht onder N2 geroerd tussen 0°C en kamertemperatuur. De reactie werd afgebroken met NaHCC>3 en vervolgens werd het reactiemeng- 1029799- 153 sel verdeeld tussen CH2CI2 (200 ml) en verzadigde NaHC03-oplossing (50 ml), geconcentreerde zoutoplossing (50 ml). De organische laag werd gedroogd (Na2SC>4) en vervolgens gefiltreerd door een laag silicagel, waarbij werd geëlueerd 5 met hexaan:EtOAc = 1:1. Het filtraat werd onder. vacuüm geconcentreerd, hetgeen 880 mg ethyl-2-{[(methylsulfonyl)-.oxy)methyl}cyclopropaancarboxylaat als een gele olie (99 % opbrengst) gaf.
1H-NMR (400 MHz, chloroform-D) δ ppm 0,91-1,02 (m, 1H), 10 1,26 (k, J=6,99 Hz, 3H), 1,29-1,36 (m, 1H), 1,63-1,74 (m, 1H), 1,79-1, 92 (m, 1H), 3,02 (s, 3H) ,' 3, 99-4,24 (m, 4H) .
Een reactiemengsel van ethyl-2-{[(methylsulfonyl)-oxy]methyl)cyclopropaancarboxylaat (880 mg, 4,0 mmol), 4-broompyrazool (4-2, 588 mg, 4,0 mmol) en NaH (60 % in mi-15 nerale olie, 240 mg, 6,0 mmol) en 3,0 ml DMF werd bereid. Het ontstane mengsel werd gedurende 4 uur onder N2 geroerd bij 90°C. Het reactiemengsel werd verdeeld tussen EtOAc (200 ml) en verzadigde NaHC03-oplossing (2 x 50 ml), geconcentreerde zoutoplossing (50 ml). De organische laag 20 werd gedroogd (Na2S04) en vervolgens onder vacuüm geconcentreerd, hetgeen 812 mg (4-3) als een gele olie (74 %) opleverde.
1H-NMR (400 MHz, chloroform-D) δ ppm 0,85 (dd, J=7,96, 3,16 Hz, 1H), 0, 88-0, 98 (m, 1H) , 1,18-1,29 (m, 3H), 1,56-1,71 25. (m, 1H),. 1,79-1,94 (m, 1H), 3,96-4,08 (m, 2H), 4,07-4,17 (m, 2H), 7,45 (d, J=3,79 Hz, 2H).
LCMS, ber. voor CioHi3BrN202 (M+H): 274; gevonden: 274.
HPLC: zuiverheid = 95 %.
Ethyl-2-{[4-(4,4,5,5-tetramethyl-l,3-dioxoborolaan-2-30 yl)-ltf-pyrazool-l-yl]methyl}cyclopropaancarboxylaat (4-4) : Een reactiemengsel van de verbinding (4-3) (812 mg, 2,97 mmol) en bis(pinacolato)diboor (906 mg, 3,57 mmol) en KOAc (991 mg, 10,10 mmol) in 10,0 ml DMSO werd gedurende 15 min. doorgeblazen met N2 en vervolgens werd Pd-35 Cl2 (dppf) 2CH2CI2 (122 mg, 0,15 mmol) toegevoegd. Het ont- . stane mengsel werd gedurende de nacht onder N2 geroerd bij 80 eC. Na af koelen tot kamertemperatuur werd het mengsel 1029799- 154 gefiltreerd door een laag Celite en goed gewassen met EtOAc. Het filtraat werd geëxtraheerd met H2O (2 x 50 ml) en geconcentreerde zoutoplossing (50 ml). De organische laag werd gedroogd (Na2S04) en vervolgens onder vacuüm ge-5 concentreerd. Het residu werd vervolgens gefiltreerd door een ' laag silicagel en geëlueerd met hexaan:EtOAc - 3:1.
Het filtraat werd onder vacuüm geconcentreerd, hetgeen 945 mg (4-4) als een gele olie (98 % opbrengst) gaf.
1H-NMR (400 MHz, chloroform-D) δ ppm 0,85 (dd, J=7,83, 3,03 10 Hz, 1H), 0, 90-0, 96 (m, 1H), 1,20-1,24 (m, 3H) , 1,29-1,34 (m, 12H), 1,62-1,71 (m, 1H), 1,84-1,97 (m, 1H), 3,96-4,07 (m, 1H), 4,06-4,14 (m, 2H) , 4,15-4,23 (m, J=14,27, 6,44
Hz, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,77 (s, 1H)..
Ethyl-2-[(4-{6-amino-5-[1-(2,6-dichloor-3-fluor-15 fenyl)ethoxy]pyridine-3-yl}-ltf-pyrazool-l-yl)methyl]cyclo- j i propaancarboxylaat (4-6) : Een reactiemengsel van de verbinding (4-4) (643 mg, 2,01 mmol) en 3-[1-(2,6-dichloor-3- fluorfenyl)ethoxy]-5-joodpyridine-2-amine (4-5) (572 mg, 1,34 mmol) in 20,0 ml ethyleenglycoldimethylether, water-20 vrije (DME) werd gedurende 15 min. doorgeblazen met N2, vervolgens werd Pd (II) (PPh3)2Cl2 (71 mg, 0,1 mmol) toegevoegd en gedurende nog 15 min. doorgeblazen met N2. Een andere 1,0 N Na2C03~oplossing (6,0 ml, 6,0 mmol) werd toegevoegd na gedurende 15 min. doorblazen met N2. Het ont-25 stane mengsel werd gedurende de nacht onder N2 geroerd bij 85 °C. Het reactiemengsel werd gefiltreerd door een laag Celite en goed gewassen met MeOH. Het filtraat werd onder vacuüm geconcentreerd. Het residu werd verdeeld tussen EtOAc (200 ml) en verzadigde NaHC03-oplossing (2 x 50 ml), 30 geconcentreerde zoutoplossing (50 ml). De organische laag werd gedroogd (Na2S04) en vervolgens onde vacuüm geconcen- j treerd. Het residu werd gezuiverd door middel van een Bio-tage-systeem (25 M, CH2C12 100 %, CH2C12 100 % tot 90 % CH2C12:10 % MeOH). De gewenste fractie werd verzameld, het-35 geen 600 mg (4-6) als een bruinkleurige smeer (91 % opbrengst) opleverde.
1029799- 155 1H-NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ ppm 0,96-1,10 (m, 2H), 1,15 (t, J=7,07 Hz, 2H) , 1,74 (s, 3H), 1,79 (d, J= 6,57 Hz, 3H) , 3,95-4,14 (m, 4H), 5,66 (s, 2H), 6,08 (d, J=6,57 Hz, 1H), 6,88 (s, 1H), 7,43 (t, J=8,72 Hz, 1H), 7,49-7,62 (m, 2H), 5 7,73 (s, 1H), 7,88 (s, 1H).
LCMS, ber. voor C23H23CI2FN4O3 (M+H) : 494; gevonden; 494 .
HPLC: zuiverheid = 95 %.
' 2-[(4-{6-Amino-5-[l-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)- ethoxy]pyridine-3-yl}-ΙΗ-pyrazool-l-yl)methyl]cyclo-10 propaancarbonzuur (4-7): Aan een reactieoplossing van ver-j binding (4-6) (377 mg, 0,76 mmol) in 5,0 ml MeOH werd on-
! der N2 bij kamertemperatuur een andere oplossing van 2,0 N
NaOH (1,5 ml, 3,00 mmol) toegevoegd. Het ontstane mengsel werd gedurende 3 uur geroerd bij 80°C. Het reactiemengsel 15 werd onder vacuüm geconcentreerd om het grootste gedeelte van de MeOH te verwijderen en aangezuurd door middel van 2 M HC1 tot pH = 4,0. Het mengsel werd geëxtraheerd met CH2CI2 (2 x 200 ml); de organische lagen werden gewassen met geconcentreerde zoutoplossing (50 ml, gedroogd (Na2S04) 20 en onder vacuüm geconcentreerd, hetgeen 324 mg (4-7) als een gele, vaste stof (92 % opbrengst) gaf.
1H-NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ ppm 0,92-1,04 (m, 2H) , 1,57- 1,72 (m, 2H) , 1,76-1,90 (m, 3H) , 3,98-4,18 (m, 2H) , 6,46 (s, 2H) , 6, 89-7,02 (m, .1H), 7,29-7,52 (m, 2H), 7,52-7,63 25 (m, 2H), 7,73 (d, J=l,52 Hz, 1H) , 7,94 (s, 1H) , 12,19 (s, 1H) .
LCMS, ber. voor C21H19CI2FN4O3 (M-H) : 463; gevonden: 463.
HPLC: zuiverheid = 87 %.
2-[(4-{6-Amino-5-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)-30 ethoxy] pyridine-3-yl}-ltf-pyrazool-l-yl) methyl ]-i7-methyl- cyclopropaancarboxamide (4-8) (R = Me, R'= H): Aan een reactieoplossing van (4-7) (1,0 eq.) met iPrEtN (2,0 eq.) in 1,0 ml DMF- werd HATU (1,5 eq.) toegevoegd. Na roeren gedurende 30 min. werd een alkylamine (1,1 eq.) toegevoegd. 35 Het ontstane mengsel werd gedurende, de nacht geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd verdeeld tussen EtOAc (200 ml) en verzadigde NaHCOs-oplossing (2 x 50 ml) 1029799" i 156 en geconcentreerde zoutoplossing (50 ml) . De organische laag werd gedroogd (Na2S04) en onder vacuüm geconcentreerd.
Van een monster werd de vrije base gemaakt door het te verdelen tussen EtOAc (200 ml) en verzadigde NaHC03~ 5 oplossing (50 ml) en geconcentreerde zoutoplossing (50 ml) . De organische laag werd gedroogd (Na2S04) en onder vacuüm geconcentreerd. Het residu werd behandeld met 1,0 ml H20 en gevriesdroogd, hetgeen (4-8) opleverde.
10 Algemene procedure 62: .
Br
Br I
Jl Cl CH3 res^Yi i rr3jn (Boc)2Q/DMAP + Pd(dppf)CI2
' (T'j^ DMF N(BoC)2 KOAcrtJMSO
. Υ>α nh2 I \ F \ H3c CHs H3Q ch3
HaC /-f~CH3 HaC / \ CH® o O °N/1) /00
B /-H
j HCI/Dioxaan | V / Pd^Ph^Cli 1jtó XCy. + v ^
NH* bT
F F
BOC
O O .
N-N N-N
Cl CH3 4M HCI/dioxaan CH3
(ixW^o^ÏVN . ch2ci2 "** N
! V^ci "Hz Y^ci NH2
F F
1029799- 157 t
Aan een oplossing van 5-broom-3-[ (i?)-1-(2,6-dichloor- 3-fluorfenyl)ethoxy]pyridine-2-ylamine (12,83 g, 33,76 mmol) in watervrije DMF (100 ml) werden di-tert-butyldicarbonaat (21,25 g, 97,35 mmol) en 4-dimethyl-5 aminopyridine (0,793 g, 6,49 mmol) toegevoegd, Het reac-tiemengsel werd onder stikstof gedurende 18 uur geroerd bij omgevingstemperatuur. Aan het mengsel werd verzadigde NaHC03~oplossing (300 ml) toegevoegd en er werd geëxtraheerd met EtOAc (3x250 ml) . De gecombineerde extracten 10 werden gewassen met water (5x100 ml), verz. NaHCC>3 en geconcentreerde zoutoplossing, en vervolgens gedroogd op Na2S04. Na filtratie, indamping en drogen onder hoogvacuüm werd het met een di-boc-groep beschermde 5-broom-3-[(E)-l-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyridine-2-ylamine ver-15 kregen als een gebroken-witte, schuimachtige vaste stof (19,59 g, 100 % opbrengst).
1H-NMR (DMSO-de, 400 MHz) δ 8,18 (d, 1H) , 7,83 (d, 1H) , 7,59 (dd, 1H), 7,48 (t, 1H) , 6,25 (k, 1H) , 1,75 (d, 3H), 1,39 (s, 9H), 1,19 (s, 9H).
20 Aan een oplossing van het met een di-bocgroep beschermde 5-broom-3-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)- ethoxy]pyridine-2-ylamine (19,58 g, 33,76 mmol) in DMSO (68 ml) werden kaliumacetaat (11,26 g, 114,78 mmol) en bis(pinacolato)diboor (10,29 g, 40,51 mmol) toegevoegd.
25 Het mengsel werd driemaal ontgast en doorgeblazen met stikstof en vervolgens werd Pd(dppf )Cl2.CH2Cl2 (1,38 g, 1,69 mmol) toegevoegd. Het reactiemengsel werd driemaal ontgast en doorgebiazen met stikstof en vervolgens gedu rende 12 uur onder stikstof geroerd in een oliebad van 30 80°C. Men liet het reactiemengsel afkoelen tot omgevings temperatuur, het werd verdund met ethylacetaat (100 ml) en gefiltreerd door een laag Celite die werd gewassen . met ethylacetaat. De gecombineerde oplossing in ethylacetaat (700 ml) werd gewassen met water (5 x 100 ml), geconcen-35 treerde zoutoplossing (100 ml) en gedroogd op Na2S04· Na filtratie en concentratie werd het residu gezuiverd over een kolom met siiicagel, waarbij werd geëlueerd met 1029799- _ ___ 158
EtOAc/hexaan (0-50 %), hetgeen het met een di-bocgroep beschermde 3-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-(4,4,5,5-tetramethyl(1,3,2]dioxaborolaan-2-yl)pyridine-2-ylamine als een schuimachtige, vaste stof (20,59 g, 97 % 5 opbrengst) bezorgde.
1H-NMR (DMSO-de, 400 MHz) δ 8,20 (d, 1H) , 7,70 (d, ÏH), 7,63 (dd, 1H), 7,47 (t, 1H), 6,20 (k, 1H), 1,73 (d, 3H) , 1,50-1,13 (m, 30H).
. Aan een oplossing van het met een di-boc-groep be-10 schermde 3-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-(4,4,5,5-tetramethyl [1,3,2] dioxaborolaan-2-yl) pyridiiie-2-ylamine (20,34 g, 32,42 mmol) in CH2CI2 (80 ml) werd een oplossing van droge HC1 in dioxaan (4N, 40,5 ml, 162 mmol) toegevoegd. De reactieoplossing werd gedurende 12 uur on-15 der stikstof geroerd in een oliebad van 40°C. Men liet het reactiemengsel afkoelen tot omgevingstemperatuur, het werd verdund met EtOAc (400 ml) en vervolgens zorgvuldig, maar snel, gewassen met verzadigde NaHC03 tot de waterlaag basisch was (pH>8). De organische laag werd gewassen met ge-20 concentreerde zoutoplossing en gedroogd op NaaSO^. Na filtratie, afdamping en drogen onder hoogvacuüm werd 3-[(R)- 1-(2,6-dichloör-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-(4,4,5,5-tetra-methyl[1,3,2]dioxaborolaan-2-yl)pyridine-2-ylamine verkregen als een gebroken-witte, schuimachtige, vaste stof 25 (13,48 g, 97 % opbrengst).
^-NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ 8,01.(d, 1H) , 7,27 (dd, 1H) , 7,17 (d, 1H) , 7,03 (t, 1H), 6,12 (k, 1H) , 5,08 (bs, 2H) , 1,81 (d, 3H), 1,30 (s, 6H), 1,28 (s, 6H).
Aan een geroerde oplossing van 3-[(R)-1-(2,6-30 dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-(4,4,5,5-tetramethyl- [1,3,2]dioxaborolaan-2-yl)pyridine-2-ylamine (4,2711 g, 10,0 mmol) en 4-(4-broompyrazool-l-yl)piperidine-l-carbon-zure tert-butylester (zie procedure 11) (3,9628 g, 12,0 mmol) in DME (40 ml) werd een oplossing van Na2CC>3 (3,1787 35 g, 30,0 mmol) in water (10 ml) toegevoegd. De oplossing werd driemaal ontgast en doorgeblazen met stikstof. Aan de | oplossing werd Pd(PPh3)2Cl2 (351 mg, 0,50 mmol) toegevoegd.
1029799- 159
De reactieoplossing werd driemaal ontgast en doorgeblazen met stikstof. De reactieoplossing werd gedurende ongeveer 16 uur geroerd in een oliebad van 87°C (of tot de boraan-pinacolester was verbruikt), men liet afkoelen tot omge-5 vingstemperatuur en er werd verdund met EtOAc (200 ml) . Het reactiemengsel werd gefiltreerd door een laag Celite en gewassen met EtOAc. De oplossing in EtOAc werd gewassen met geconcentreerde zoutoplossing, gedroogd op Na2S04 en geconcentreerd. Het onzuivere product werd gezuiverd over 10 een kolom met silicagel, waarbij werd geëlueerd met een systeem van EtOAc/hexaan (0 % EtOAc tot 100 % EtOAc), hetgeen 4-(4—{6-amino-5-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)-ethoxy]pyridine-3-yl}pyrazool-l-yl)piperidine-l-carbonzure tert-butylester (3,4167 g, 65 % opbrengst, -95 % zuiver-15 heid) met een Rf-waarde van 0,15 (50 % EtOAc/hexanen) opleverde.
MS: m/e = 550 (M+l)+.
Aan een oplossing van 4-(4 — {6-amino-5-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyljethoxy]pyridine-3-yl}pyrazool-l-20 yl)piperidine-l-carbonzure tert-butylester (566,7 mg, 1,03 mmol) in methanol (5 ml) of dichloormethaan (30 ml) werd 4N HCl/dioxaan (15 ml) toegevoegd. De oplossing werd gedurende 1 uur geroerd, of tot de onts.cherming was verlopen. De oplosmiddelen werden afgedampt en het residu werd opge-25 lost in methanol en gezuiverd over een preparatieve omgekeerde fase-C-18-HPLC-kolom, waarbij werd geëlueerd met acetonitril/water met 0,1 % azijnzuur, van 5 tot 30 % met i.
een lineaire gradiënt. Na vriesdrogen werd 3-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-(l-piperidine-4-yl-lH-30 pyrazool-4-yl)pyridine-2-ylamineacetaat verkregen als een witte, vaste stof (410 mg, 78 % opbrengst, HPLC: zuiverheid = 100 %, 96,4 % ee).
aH-NMR (DMSO-de, 400 MHz) δ 7,84 (s, 1H) , 7,68 (d, 1H) , 7,50 (dd, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,37 (t, 1H), 6,83 (d, 1H), 35 6,02 (k, 1H), 5,57 (bs, 2H) , 4,09 (m, 1H), 2,98 (m, 2H), 2,53 (m, 2H), 1,88 (m, 2H) , 1,82 (s, 3H) , 1,73 (d, 3H), 1.10 (m I·"/ / · 1029799- 160 ! MS: m/e = 450 (M+l)+.
Algemene procedure 63: 5 9\ ,OAc n rf /~\~/ V°"
np ~P C
10 JT JI^OAC ] UOH O
C! CH3 Λ _2!__ ci CHa MeOH: HjO (4:1) I , NEtj.CHzCtz IliyN ?' ?H3 / V- - 9C^ <&% i
F
15
Aan een suspensie van 3-[1-(2,6-dichloor-3-fluor-fenyl)ethoxy]-5-(l-piperidine-4-yl-lH-pyrazool-4-yl)-20 pyridine-2-ylamine. HCl-zout (procedure 6) (150 mg, 0,288 inmol) in CH2CI2 (2 ml) werd NEt3 (0,121 ml, 0,863 mmol) toegevoegd, en er werd gedurende 30 min. geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd gekoeld tot 0°C en azijnzure chloorcarbonylmethylester werd toegevoegd, waar-25 na gedurende 1 uur werd geroerd bij kamertemperatuur. De reactie werd gevolgd door middel van LC-MS en na volledige omzetting in het gewenste product werd water (2 ml) toege- voegd. Het reactiemengsel werd geëxtraheerd met EtOAc (4 x 10 ml), gedroogd op Na2S04 en geconcentreerd, hetgeen een 30 kwantitatieve opbrengst van azijnzure 2-[4-(4-{6-amino-5-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyridine-3-yl}pyra-zool-l-yl)piperidine-l-yl]-2-oxoethylester (164 mg, kwantitatief) gaf.
Aan een oplossing van azijnzure 2-[4-(4-{6-amino-5-35 [1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyridine-3-yl}pyra- zool-l-yl)piperidine-l-yl]-2-oxoethylestèr (164 mg, 0,298. mmol) in MeOH (4 ml) werd LiOH (7 mg, 0, 298 mmol), opge- 1029799“ 161 lost in 1 ml water, toegevoegd. Het reactiemengsel werd gedurende 30 min. geroerd bij kamertemperatuur, waarna LC-MS de volledige omzetting in 1-[4-(4-{6-amino-5-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyridine-3-ylJpyrazool-l-5 yl)piperidine-l-yl]-2-hydroxyethanon liet zien. Het product werd gezuiverd over een preparatieve omgekeerde fase -C-18-HPLC-kolom, waarbij werd geëlueerd met acetoni-tril/water met 0,1 % azijnzuur, van 10 tot 40 %.
10 Algemene procedure 64: M r . PHs 15 Γ;5™"0" O N—N v
Cl CH3 I
Tl J*. 1J, . ,1. BH3/THF bij 0°C c CH3
ί I 0 X. 2. aq.6.0NHCI/H2O/MeOH
y^d NHa fc. 11 ° T
20 T NHs
F
25 Een kolf van 100 ml met een roerboom werd gedroogd in een oven en men liet af koelen in een droge stikstof atmosfeer. De kolf werd uitgerust met een rubberdop voor een « injectiespuit. De kolf werd onder stikstof ondergedompeld in een ijs-waterbad, en 1,6 ml (1,6 mmol) 1,0 M oplossing 30 van boraan in THF werd toegevoegd. Vervolgens werd 2— (4-ί 5—amino—6—[ 1—(2, 6—dichloor—3—f luorf enyl) ethoxy ] pyra zine— 2-yl}pyrazool-l-yl)-2-methylpropionzuur (procedure 5) (0,1 g, 0,221 mmol) in watervrije THF (1,0 ml) toegevoegd. Het ontstane mengsel werd onder stikstof gedurende 5 uur ge- 35 roerd bij omgevingstemperatuur en 6 N HC1 (1,1 ml) werd langzaam toegevoegd, en vervolgens werden nog H2O (1,1 ml) en MeOH (7,4 ml) toegevoegd. Het reactiemengsel werd gedu- 1029799- 162 rende de nacht voortdurend geroerd. Het grootste gedeelte van de oplosmiddelen werd in vacuüm afgedampt en vervolgens werd een 1 N NaOH-oplossing gebruikt om de pH op 11 te brengen. Water werd toegevoegd en de oplossing werd ge-5 extraheerd met EtOAc (3 x 30 ml) en gedroogd op Na2SC>4. Na filtratie en concentratie werd het onzuivere product gezuiverd met een preparatieve omgekeerde fase-HPLC-kolom, waarbij werd geëlueerd met acetonitril/water die 0,1 % azijnzuur bevatte, van 10 % tot 60 %. Na vriesdrogen van 10 de zuivere fracties werd 2-(4-{6-amino-5-[1-(2,6-dichloor- 3-fluorfenyl)ethoxy]pyridine-3-yl}pyrazool-l-yl)-2-methyl-propaan-l-olacetaat verkregen als een witte, vaste stof (21 mg, 22 % opbrengst).
15 Algemene procedure 65: N—N _
20 tjoc . · Boo h \ , ^Boc I
l MsCI,NEt3 j, Ν3Η / N\ q„ I , Ö Y ch2ch2 dmf n_/ OH OMs '
25 T
Br ' /~N /CH3 p o ί·
1:1 TFA/GHgCI2 n—N Mei, Et3N
(f ’ N-N
30 DMF n\
Br 35
Aan een geroerde oplossing van 4-hydroxypiperidine-l-carbonzure tert-butylester (7,94 g, 39,45 mmol) in CH2C12 1029799“ 163 (100 ml), die was gekoeld tot 0°C, werden langzaam NEt3 (5,54 ml, 39,45 mmol) en vervolgens methaansulfonylchlori-de (3,06 ml, 39,45 mmol) en DMAP (48 mg, 0,39 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd gedurende de nacht geroerd bij ka-5 mertemperatuur. Aan het mengsel werd water (30 ml) toegevoegd. Extractie met CH2CI2 (3 x 30 ml) en vervolgens drogen (Na2S04) en verwijdering van het oplosmiddel in vacuüm leverden 4-methaansulfonyloxypiperidine-l-carbonzure tert-butylester als een witte, vaste stof (11,00 g, >99 % op-10 brengst) op.
XH-NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 4,89 (m, 1H) , 3,69 (m, 2H), 3,31 (m, 2H) , 3,04 (s, 3H) ,. 1,95 (m, 2H) , 1,83 (m, 2H), 1,46 (s, 9H).
Aan een geroerde oplossing van 4-broompyrazool (10,44 15 g, 71,03 mmol) in watervrije DMF (96 ml), die was gekoeld tot 0°C, werd langzaan NaH (60 %. in minerale olie) (3,13 g, 78,133 mmol) toegevoegd.. De oplossing werd gedurende 1 uur geroerd bij 0eC. 4-Methaansulfonyloxypiperidine-1-carbon-zure tert-butylester (19,82 g, 71,03 mmol) werd 20 langzaam toegevoegd en het reactiemengsel werd gedurende de nacht verhit tot 100°C of tot NMR het verbruik van het pyrazool had aangetoond. Men liet het reactiemengsel afkoelen tot kamertemperatuur, water werd toegevoegd (20 ml), waarna extractie met EtOAc volgde. De gecombineerde 25 extracten werden gewassen met verzadigde NaCl in water (4 x 20 ml), gedroogd met Na2S04 en geconcentreerd, hetgeen 4-(4-broompyrazool-l-yl)piperidine-l-carbonzure tert- butylester als een oranje olie opleverde. De olie werd gezuiverd met behulp van chromatografie over silicagel, 30 waarbij werd geëlueerd met 10 % EtOAc/hexanen tot 25 %
EtOAc.hexanen, hetgeen 4-(4-broompyrazool-l-yl)piperidine- l-carbonzure tert-butylester als een witte, vaste stof (10,55 g, 45 % opbrengst) met een Rf = 0,4 (25 %
EtOAc/hexanen, waarbij werd gekleurd met jood) bezorgde.
35 XH-NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 7,46 (s, 1H) , 7,43 (s, 1H), 4,23 (m, 3H) , 2,88 (m, 2H) , 2,10. (m, 2H) , 1,88 (m, 2H) , 1,47 (s, 9H) .
1029799- 164
Aan een oplossing van 4-(4-broompyrazool-l-yl)piperi-dine-l-carbonzure tert-butylester (500 mg, 1,515 inmol) in CH2C12 (3 ml) werd TFA (3 ml) toegevoegd. Het reactiemeng-sel werd geroerd bij kamertemperatuur tot LCMS het verlo-5 pen van de reactie aangaf. De oplosmiddelen werden in vacuüm verwijderd en het residu werd opgelost in MeOH (15 ml) . De pH van de oplossing werd op 9 gebracht met hy-droxidekunsthars, hetgeen 4-(4-broompyrazool-l-yl)piperi-dine opleverde.
10 Aan een oplossing van 4-(4-broompyrazool-l-yljpiperi- dine (375 mg, 1,63 mmol) in DMF (3,26 ml) werd NEti (230 μΐ, 1,63 mmol) toegevoegd en er werd gedurende 5 min. geroerd. Methyl jodide (Mei) (1,63 ml, 1M Mei in DMF, vers bereid) werd toegevoegd en het reactiemengsel gedurende de 15 nacht geroerd bij kamertemperatuur. Water werd toegevoegd en de oplossing geëxtraheerd met EtOAc (4 x 10 ml). De organische oplossing werd gewassen met geconcentreerde zoutoplossing, gedroogd met Na2S04, geconcentreerd en in vacuüm gedroogd, hetgeen 4-(4-broompyrazool-l-yl)-1-methylpiperi- 20 dine (251 mg, 63 % opbrengst) opleverde.
Algemene procedure 66: 25 rr O & T r n-n m
Cl CH3 A NaH/DMF_ 4N HC' - 30 + ci ch3 V dioxaan ? fHs
ΛΑ, m L JLvy· fVA
I f 35 102 9 7 99-ï 165
Aan een oplossing van 3-[{R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-(lH-pyrazool-4-yl)pyrazine-2-ylamine (295 mg, 0,80 inmol) in watervrije DMF (4 ml) werd NaH (60 % in minerale olie, 30,7. mg, 0,80 mmol) toegevoegd. Het 5 mengsel werd onder stikstof gedurende 0,5 uur geroerd bij omgevingstemperatuur en vervolgens werd 4-methaan-sulfonyloxypiperidine-l-carbonzure tert-butylester (223,5 mg, 0,80 mmol) toegevoegd. Het reactiemengsel werd onder stikstof gedurende 0,5 uur verhit in een oliebad van 90°C 10 en vervolgens liet men afkoelen tot omgevingstemperatuur. Water werd langzaam aan het mengsel toegevoegd, dat werd geëxtraheerd met EtOAc, gewassen met geconcentreerde zoutoplossing en gedroogd op Na2S04. Het onzuivere product werd gezuiverd over een kolom met silicagel, hetgeen 4-(4-(5-15 amino-6-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyrazine- 2-yl}pyrazool-l-yl)piperidine-l-carbonzure tert-butylester als een witte, vaste stof (265 mg, 59 % opbrengst) bezorgde.
Aan een oplossing van 4-(4-{5-amino-6-[1-(2,6-20 dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyrazine-2-yl}pyrazool-l- yl)piperidine-l-carbonzure tert-butylester (265 mg, 0,48 mmol) in CH2C12 werd. 4N HCl/dioxaan (4 ml) toegevoegd. Het mengsel werd gedurende 1 uur geroerd bij. omgevingstemperatuur. Na afdamping werd het residu opgelost in ethanol 25 (2,5 ml) en gezuiverd over een preparatieve omgekeerde fa- se-C-18-HPLC-kolom, waarbij werd geëlueerd met acetoni-tril/water die 0,1 % azijnzuur bevatte, met een lineaire gradiënt van 10-40 %. Na vriesdrogen werd 3-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-(l-piperidine-4-yl-lH-30 pyrazool-4-yl)pyrazine-2-ylamineacetaat verkregen als een witte, vaste stof (125 mg, 51 % opbrengst).
1029799- 166
Algemene procedure 67: 5 h3c _,N-CH3
O-/ *3^ <W
>*CH3 .N-CHg /«CH3
N-N HM—/ N“N
T HATU, EtgN I
10 Cl CH3 DMF f* f*3 ff,
t£X
15 O- (7-Azabenzotriazool-l-yl)-Ν,Ν,Ν1,N'-tetramethyluroniumfosforpentafluoride (HATU) (66 mg, 0,17 mmol) werd toegevoegd aan een oplossing van 2-(4-{6-amino-, 20 5-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyridine-3- yl}pyrazool-l-yl)propionzuur (69 mg, 0,16 mmol), triethyl-amine (0,024 ml, 0,17 mmol) en 3-dimethylaminopropylamine· (0,022 ml, 0,17 mmol) in 1,6 ml DMF. Na 3 uur roeren werd het reactiemengsel geconcentreerd door rotatieverdamping. 25 Het residu werd gezuiverd door chromatografie over silica-gel met behulp van elutie door een gradiënt van dichloor-methaan, methanol, ammoniumhydroxide, hetgeen 2-(4-(6-amino-5-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyridine-3-.yl}pyrazool-l-yl)-N-(3-dimethylaminopropyl)propionamide 30 (41 mg, 50 %) opleverde.
1029799-
Algemene procedure 68: 167 H3c N-Boc 5 (
; H3C
HO N-Boc T s? π
10 T
Br
Diethylazodicarboxylaat (0,48 ml, 3,1 mmol) werd bij 15 0°C toegevoegd aan een oplossing van trifenylfosfine (0,80 g, 3,1 mmol) in THF (20 ml). Na gedurende 5 min. roeren werd 4-broompyrazool (0,30 g, 2,0 mmol) toegevoegd. Na nog 5 min. roeren werd (2-hydroxyethyl)methylcarbaminezure tert-butylester (0,45 g, 2,6 mmol) toegevoegd. Men liet 20 het reactiemengsel opwarmen tot kamertemperatuur en het werd gedurende de nacht geroerd. Het reactiemengsel werd gekoeld tot 0°C en gefiltreerd. Het filtraat werd geconcentreerd door rotatieverdamping. Het residu werd gezuiverd door chromatografie over silicagel met behulp van 25 elutie door een gradiënt van dichloormethaan en ethylace-taat, hetgeen [2-(4-broompyrazool-l-yl)ethyl]methylcarba-minezure tert-butylester'(541 mg, 87 %) opleverde.
Algemene procedure 69: 30 H3c .0 N-NH . h 0=(.
Lj + αν\)Α NaH /^CH3
Y =u -“ N-N
Br CH3 DMF .
Br *029799 168 /
Natriumhydride (0,12 g, 4,9 mmol) werd toegevoegd aan een oplossing van 4-broom-4tf-pyrazool (0,60 g, 4,1 mmol) in DMF (10 ml) . Na gedurende 10 min. roeren werd een oplossing van 2-chloorpropionzure methylester in DMF (4 ml) 5 toegevoegd. Na 4 uur roeren werd het reactiemengsel verdeeld tussen ethylacetaat en water. De fasen werden gescheiden en de waterfase werd geëxtraheerd met ethylacetaat. De gecombineerde organische fasen werden gedroogd op MgSOi en geconcentreerd door rotatieverdamping. Het residu 10 werd gezuiverd door chromatografie over silicagel met behulp van elutie door een gradiënt van ethylacetaat en hexanen, hetgeen 2-(4-broompyrazool-l-yl)propionzure methylester (733 mg, 77 %) opleverde.
15 Algemene procedure 70: H3c
O OH
20 0a( 0=/ >*CHa >*ch3
N-N N-N
LiOH, HzO
Cl ?Ha M MeOH.THF Cl CH3 25 ftY^°V n
VvC| NH2 ‘kAci NH2 30 Een oplossing van LiOH (34 mg, 1,4 mmol) in water (0,4 ml) werd toegevoegd aan een oplossing van 2-(4-(6-amino-5-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy)pyridine-3-yl)pyrazool-l-yl)propionzure methylester (70 mg, 0,15 mmol) in een mengsel van THF (1,5 ml) en MeOH (0,4 ml). Na 35 roeren gedurende de nacht werd het reactiemengsel verdeeld tussen dichloormethaan en halfverzadigde zoutoplossing. Een kleine hoeveelheid ethanol werd toegevoegd en de pH op *029799- 169 7 gebracht met 1 M HC1. De fasen werden gescheiden en de waterfase werd geëxtraheerd met dichloormethaan. De gecombineerde organische fasen werden gedroogd op Na2S04, gefiltreerd en geconcentreerd door rotatieverdamping, hetgeen 5 2-(4-{6-amino-5-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]- pyridine-3-yl}pyrazool-l-yl)propionzuur (69 mg, 100 %) gaf.
Algemene procedure 71: 10 pH3 ch °V-0 n PH3 5 ar 15 N-N ^
Li N-N
y' ch3nh2
C^3C fn THF I
i LJvN Cl 9H3I» 20 . F..
Aan een geroerde oplossing van 4-(3-{6-amino-5-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyridine-3-yl}pyrazool-25 1-yl)pyrrolidine-2-carbonzure methylester (105 mg, 0,21 mmol) in THF (5 ml) werd 2 M CH3NH2 in THF (1,06 ml, 2,12 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd gedurende 18 uur ge- i roerd en verhit tot 55°C. Met LCMS werd vastgestêld dat de reactie was verlopen. De THF werd verwijderd en het residu 30 gezuiverd door middel van prep-HPLC, hetgeen 4-(4-(6- amino-5-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyridine-3-yl}pyrazool-l-yl)pyrrolidine-2-carbonzuurmethylamide (3Ó mg, opbrengst 28,6 %) verschafte.
1029799- ' -----
Algemene procedure 72: 170 n-n'800 T 210 N-NH ,ff
5 R 2111 (L j N-N
* o'bo y (j
CH3 lil 'XX" CH3 R'L X
W*V_- „^0V γ>Δ NH2 NHz r£^| °'|* 2V3 ^ NH2 / 21-4 /
10 X = Br, I
. L= Br, OMs < 15 tert-Butyl-4-(4,4,5,5-tetramethyl-l,3,2-dioxaboro-laan-2-yl)-ltf-pyrazool-l-carboxylaat (21-1): . . Di-tert-butyldicarbonaat (7,2 molequivalent) en 4-(dimethylamino)-pyridine (0,84 molequivalent) werden toegevoegd aan een 20 oplossing van 4,4,5,5-tetramethyl-2-(lH-pyrazool-4-yl)- 1,3,2-dioxoborolaan (6 mmol) in 40 ml DMF. Het reactie-mengsel werd gedurende 12 uur geroerd bij kamertemperatuur- Aan het reactiemengsel werd water toegevoegd om de reactie af te breken. Vervolgens werd EtOAc toegevoegd om 25 de waterige oplossing te extraheren. De EtOAc-laag werd gedroogd op Na2SC>4. De Na2S04 werd afgefiltreerd en het filtraat ingedampt, hetgeen een bruin-geel olieachtig residu gaf als de verbinding 21-1 (1,32 g; 4,56 mmol; 76 %). XH-NMR (400 MHz, chloroform-D) δ ppm 1,32 (s, 12H), 1,63 30 (s, 9H), 7,91 (s, 1H), 8,37 (s, 1H).
Het residu werd zonder verdere zuivering voor de volgende reactiestap gebruikt.
De verbinding 21-3, getoond met het specifieke voorbeeld van 3-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy)-5-(1H-35 pyra-zool-4-yl)pyridine-2-amine (21-3a): 1029799- 171
N-NH
c Cl CHs SS
11 JL ΝΗί
F
10 De verbinding 21-1 (1,0 molequivalent) werd toege- . voègd aan een oplossing van de verbinding 21-2a (verbinding ^1^2, niet zodanige R-substituenten dat 2,6-dichloor- 3-fluorfenyl werd verkregen) (1,92 mmol) in 20 ml DME.
Het mengsel werd onder een stikstofatmosfeer gedurende 30 15 min. geroerd bij kamertemperatuur en vervolgens werd dichloorbis(trifenylfosfino)palladium(II) (0,05 molequivalent) toegevoegd. Natriumcarbonaat (3 molequivalent) in 4 ml H2O werd aan het reactiemengsel toegevoegd en de ontstane oplossing gedurende 12 uur verhit tot 85°C. Alterna-20 tieve basen die werden gebruikt, waren CsF en CS2CO3, met 1 of 2 equivalenten boronzure ester, en bij kamertemperatuur (CsF) of bij 80°C (alle). Aan het reactiemengsel werd water toegevoegd om de reactie af te breken. Vervolgens werd EtOAc (150 ml x 2) toegevoegd om de waterige oplossing te 25 extraheren. De EtOAc-laag werd gedroogd op Na2S04. De Na2SC>4 werd afgefiltreerd en het filtraat ingedampt, hetgeen een donkerbruin olieachtig residu gaf. Het residu werd gezuiverd door chromatografie over silicagel (elueren met 0->10 % MeOH in ethylacetaat), hetgeen het gewenste 30 product, de verbinding 21-3a (2,05 g, 53,6 % opbrengst) gaf.
1H-NMR (400 MHz, chloroform-D) δ ppm 1,60 (s, 1H) , 1,84 (d, J= 6,57 Hz, 3H), 5,07 (s, 2H) , 6,06 (k, J= 6,57 Hz, 1H) , 6,89. (d, J=l, 77 Hz, 1H), 6, 96-7,06 (m, 1H), 7,22-7,33 (m, 35 1H), 7,67 (s, 2H) , 7,80 (d, J=l,52 Hz, 1H).
| Voor het maken van verbindingen met de formule 21-4 ! kan de volgende voorbeeldprocedure worden gebruikt: Natri- 1029799- 172 umhydride (1,2 molequivalent) wordt toegevoegd aan een oplossing van de verbinding 21-3 (0,87 mmol) in 10 ml DMF. Het mengsel wordt onder een stikstofatmosfeer gedurende 30 min. geroerd bij kamertemperatuur en vervolgens wordt de 5 verbinding 21-6 (1 molequivalent toegevoegd. De ontstane oplossing wordt gedurende 12 uur verhit tot 85-90°C. Aan het reactiemengsel wordt water (20 ml) toegevoegd om de reactie af te breken. Vervolgens wordt EtOAc (50 ml x 2) toegevoegd om de waterige oplossing te extraheren. De 10 EtOAc-laag wordt gedroogd op Na2S04. De Na2S04 wordt afge-i filtreerd en het filtraat ingedampt. Het residu wordt ge zuiverd door chromatografie over silicagel (waarbij wordt geëlueerd met EtOAc in hexanen), hetgeen het gewenste pro-• duet, de verbinding 21-4 (20-50 % opbrengst) geeft.
15
Algemene procedure 73: 20 Cf
R‘L jC
CH3 Al ^ , ?H3 [M
25 R
"θ' U % Ah, 22-1 4 30 L = Br, Cl, COOH, COC1, OMs, ethyleencarbonaat, aldehyd De verbindingen met de formule 22-3 kunnen worden bereid door middel van de volgende voorbeeldprocedure: De verbinding 22-2 (1,2 molequivalent) wordt toegevoegd aan 35 een oplossing van de verbinding 22-1 (0,24 mmol) en base (3-5 molequivalent) en/of koppelingsreagens (1 molequivalent) in 5 ml DMF. Het mengsel wordt gedurende 12 uur ge- 1029799- 173 roerd onder een stikstofatmosfeer. Aan het reactiemengsel wordt water (20 ml) toegevoegd om de reactie af te breken. Vervolgens wordt EtOAc (50 ml x 2) toegevoegd om de wate- . rige oplossing te extraheren. De EtOAc-laag wordt gedroogd 5 op Na2S04. De Na2SO<i wordt afgefiltreerd en het filtraat ingedampt. Het residu wordt gezuiverd door chromatografie over silicagel (waarbij wordt geëlueerd met CH3OH, CH2CI2, EtOAc en hexanen), hetgeen het gewenste product, de verin-ding 22-3 geeft.
10
Algemene procedure 74:
De volgende procedure kan worden gebruikt voor het bereiden van piperidine-pyrazool-2-aminopyridinederivaten.
l'-'-'N'800 ' ^ .Boe ,£r J3- v fV Y — 23-1 a 23^b fT8” r·».
n-n'^Y
x γ γ CH3 ||^| · CH3 Λ NH2 RU RfT ° Th2 232 222* 23-5a
X s Br, I
pN'R’ R"-L’ 'r _ _________... ·.
L’ = Br, Cl, COOH, COCI, OMs, ethyleencarbonaat, aldehyd
9¾ (fS
KS NH2 23-7a 1029799- 174 tert-Butyl-4-(4-jood-lff-pyrazool-l-yl)piperidine-1-carboxylaat (23-la)
NaH (1,2 eq., 0,68 mmol) werd bij 4°C portiegewijs toegevoegd aan een geroerde oplossing van 4-joodpyrazool 5 (0,57 mmol) in DM F (2 1). Het ontstane mengselwerd gedurende 1 uur bij 4°C geroerd en de verbinding 23-4 (1,1 eq., 0,63 mmol) vervolgens toegevoegd. Het ontstane mengsel werd gedurende 12 uur verhit tot 100°C. De reactie werd afgebroken met H20 en het reactiemengsel verscheidene 10 malen geëxtraheerd met EtOAc. De gecombineerde organische lagen werden gedroogd, gefiltreerd en geconcentreerd, hetgeen een oranje olie opleverde. Het residu werd gezuiverd door chromatografié over silicagel (waarbij werd geëlueerd met 5 % EtOAc in pentaan), hetgeen de verbinding 23-la als 15 een witte, vaste stof (140 g, 66 %) gaf.
tert-Butyl-4-[4-(4,4,5,5-tetramethyl-l,3,2-dioxaborolaan- 2-yl)-lfl-pyrazool-1-yljpiperidine-l-carboxylaat (23-lb)
Bis (pinacolato) diboor (1,4 eq. , 134 g, 0,52 mol) en 20 kaliumacetaat (4 eq., 145 g, 1,48 mol) werden achtereenvolgens toegevoegd aan een oplossing van de verbinding 23-la (140 g, 0,37 mol) in 1,5 1 DMSO. Het mengsel werd verscheidene malen doorgeblazen met stikstof, en dichloor-bis(trifenylfosfino)palladium(II) (0,05 eq., 12,9 g, 0,018 25 mol) vervolgens toegevoegd. Het ontstane mengsel werd gedurende 2 uur verhit tot 80°C. Men liet het reactiemengsel afkoelen tot kamertemperatuur, het werd gefiltreerd door een laag Celite en gewassen met EtOAc. Het filtraat werd gewassen met verzadigde NaCl (500 ml x 2), gedroogd op . 30 Na2S0i, gefiltreerd en geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door chromatografie over silicagel (waarbij werd geëlueerd met 5 % EtOAc in hexanen), hetgeen de verbinding 23-lb als een witte, vaste stof (55 g, 40 %) gaf.
De verbinding 23-2 (1,0 molequivalent) werd toege- 35 voegd aan een oplossing van de verbinding 23-lb (1,3 molequivalent) in 15 ml DME. Het mengsel werd verscheidene malen doorgeblazen met stikstof en dichloorbis(tri- 1029799- 175 fenylfosfino)palladium(II) (0,05 molequivalent) vervolgens toegevoegd. Aan het reactiemengsel werd cesium-carbonaat (3 molequivalent) in 4 ml H20 toegevoegd en de ontstane oplossing gedurende 12 uur verhit tot 85°C. Aan het reac-5 tiemengsel werd water (10 ml) toegevoegd om de-reactie af te breken. Vervolgens werd EtOAc (150 ml x 2) toegevoegd om de waterige oplossing te extraheren. De EtOAc-laag werd gedroogd op Na2S04. De Na2S04 werd afgefiltreerd en het filtraat ingedampt, hetgeen een donkerbruin, olieachtig 10 residu gaf. Het residu werd gezuiverd door chromatografie over silicagel (waarbij werd. geëlueerd met 75-»100 % EtOAc in hexanen), hetgeen de verbinding 23-3a (61 % opbrengst) gaf.
Waterstofchloride (19 eq., 12 mmol) werd toegevoegd 15 aan een oplossing van de verbinding 23-3a (0,63 mmol) in
MeOH (4 ml). Het mengsel werd gedurende 12 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het oplosmiddel werd afgedampt en H20 (10 ml) toegevoegd. Verzadigde NaHC03 (aq.) werd toegevoegd, om de oplossing te neutraliseren tot pH = 7. Ethylacetaat 20 (100 ml x 2) werd toegevoegd om de waterige oplossing te extraheren. De gecombineerde organische laag werd gedroogd op Na2S04, gefiltreerd en ingedampt, hetgeen de verbinding 23-5a als een vast residu (0,6 mmol, 95 % opbrengst) gaf.
De verbindingen met de formule 23-7 kunnen worden ge-25 vormd volgens de volgende algemene procedure: De verbin ding 23-8 (1,2 molequivalent) wordt toegevoegd aan een oplossing van de verbinding 23-5a (0,24 mmol) en base (3-5 molequivalent) en/of koppelingsreagens (1 molequivalent) in 5 ml DMF. Het mengsel wordt gedurende 12 uur geroerd 30 onder een stikstofatmosfeer. Aan het reactiemengsel wordt water (20 ml) toegevoegd om de reactie af te breken. Vervolgens wordt EtOAc (50 ml x 2) toegevoegd om de waterige oplossing te extraheren. De EtOAc-laag wordt gedroogd op Na2S04. De Na2S04 wordt af gefiltreerd en het filtraat inge-35 dampt, hetgeen een olieachtig residu geeft. Het residu wordt gezuiverd door chromatografie over silicagel (waar- 1029799- 176 bij wordt geëlueerd met CH3OH, CH2CI2, EtOAc en hexanen), hetgeen het gewenste product, de verbinding 23-7af geeft.
Algemene procedure 75: 5 N-NH „N-«'a
O-b yR
10 V ?H3fS, Na0Et h CO
AAci NHz NHz '. g±i ê±ê.
15 3-Methoxyverbindingen kunnen worden bereid uit de overeenkomstige 3-fluorverbindingen door middel van de volgende algemene procedure. Aan 4 ml DMSO wordt 0,124 ml ethanol toegevoegd, hetgeen wordt gevolgd door 32 mg NaH. 20 Na 30 min. roeren wordt 250 mg 24-1 toegevoegd en het re-actiemengsel verwarmd tot 40°C. Na 3 uur laat men het rea-tiemengsel afkoelen en wordt het uitgegoten in water, hetgeen een neerslag doet ontstaan. Na neutralisatie tot pH = 6 wordt het product 24-2 geïsoleerd.
25
Algemene procedure 76: 4 o P·»3
/ PH
30 v°H
rl Vn
TFA.HgO
? ?Hs Ai . ™F CH pC
35 yC°A.
1029799- 177
Aan een geroerde oplossing van 3-[1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-[1-(2,2-dimethyl[1,3]dioxolaan-4-ylmethyl)-lH-pyrazool-4-yl)pyridine-2-ylamine (150 mg, 0,31 mmol) in THF (3 ml) en H20 (2 ml) werd bij 0°C TFA (2 5 ml) toegevoegd. Het mengsel werd geroerd, men liet opwarmen tot kamertemperatuur en vervolgens werd gedurende 5 uur verhit tot 50°C. Met LCMS werd gecontroleerd dat de reactie was verlopen. De THF werd verwijderd en het residu gezuiverd door middel van prep-HPLC, hetgeen 3-(4-(6- 10 amino-5-[1-(2, 6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyridine-3-yl}pyrazool-l-yl)propaan-1,2-diol (102 mg, opbrengst 74,2 %) verschafte.
Algemene procedure 77: 15
O
Η O Ν3Η 1¾ + DMF ^
Br Br 20
Aan een geroerde oplossing van 4-broom-lH-pyrazool in DMF werd bij kamertemperatuur natriumhydride toegevoegd.
25 Het mengsel werd gedurende 30 min. geroerd, [1,3]dioxolaan-2-on toegevoegd, het mengsel geroerd, en vervolgens liet men langzaam opwarmen tot kamertempera- 4 tuur. De reactie werd gevolgd door middel van TLC. Nadat de reactie was gedaan, werd EtOAc toegevoegd, gewassen met 30 verzadigde NaHCC>3, water en geconcentreerde zoutoplossing, gedroogd met Na2S04, gefiltreerd en geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd oyer silicagel, met als loopmiddelen EtOAc en 10 % DCM, hetgeen 2-(4-broompyrazool-l-yl)ethanol (0,22 g, opbrengst 34 %) gaf.
35 1H-NMR (400 MHz, chloroform-D) δ ppm 7,49 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 4,18-4,23 (m, 2H), 3,93-3,98 (m, 2H), 3,09 (s, 1H).
1029799- 178
Voorbeeld 1: 5-Broom-3-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyra-zine-2-ylamine 5 Br Γ T N | | rr acoh
Vsii’V NH, 10 T '
De titelverbinding werd bereid volgens procedure 2 ! 15 uit (IS)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethanol.
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,53 (s, 1H) , 7,48 (m, 1H) , 7,39 (t, 1H), 6,48 (s, 2H), 6,41 (k, 1H), 1,74 (d, 3H).
LCMS: 381 [M+l]. c-Met:. Ki = 0,796 μΜ.
20
Voorbeeld 2: 4-{5-Amino-6-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-pyrazine-2-yl}benzoëzuur
25 °W0H
α ch, ljf:iiS|| 30 nh, . 35
De titelverbinding werd bereid volgens procedure 3.
1029799- 179 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,16 (s, 1H), 7,84 (d, 2H) , 7,77 (d, 2H) , 7,53 (m, 1H) , 7,37 (t,. 1H) , 6,64 (s, 2H) , 6,53 (k, 1H), 1,78 (d, 3H) .
LCMS: 422 [M+l].
5 c-Met: Ki = 0,154 μΜ.
Voorbeeld 3: (4-{5-Amino-6-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-pyrazine-2-yl}fenyl)piperazine-l-ylmethanon 10
Cr
15 O
JL AeOH
f P |^1 I JL NH, 20
De titelverbinding werd bereid volgens procedure 4. XH-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,11 (s, 1H) , 7,73 (d, 2H) , 25 7,53 (m, 1H) , 7,37 (t, 1H) , 7,31 (d, 2H) , 6,55 (m, 3H) , 3,51 (br, 2H) , 3,32 (br, 2H), 2,67 (br, 4H), 1,77 (d, 3H).
LCMS: 490 [M+l].
4 c-Met: Ki = 0,027 μΜ.
30 Voorbeeld 4: 4-(4-{5-Amino-6-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-pyrazine-2-yl}benzoyl)piperazine-l-carbonzure tert-butyl-ester 35 1029799-
~ -—--I
180 5 Ύ ^ ö 10
De titelverbinding werd bereid volgens procedure 16 en vervolgens procedure 20.
15 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 8,12 (s, 1H), 7,72 (d, 2H), 7,50 (m, 1H), 7,33 (t, 3H) , 6,55 (m, 3H) , 3,51 (b.r, 2H) , 3,39 (m, 3H), 3,32 (br, 3H), 1,77 (d, 3H), 1,40 (s, 9H) .
LCMS: 590 [M+l]. c-Met: Ki. = 0,335 μΜ.
20
Voorbeeld 5:' 3-[(IR)-1-(2,6-Dichloor-3-fluor£enyl)ethoxy]-5-[4-(pipera-zine-l-ylcarbonyl)fenyl]pyridine-2-amine 25
30 Y
1 Jl u 35 1029799- 181
De titelverbinding werd bereid volgens procedure 20 en vervolgens procedure 21, als een racemisch mengsel met de overeenkomstige S-enantiomeer van voorbeeld 119. Vervolgens werd gescheiden door chirale chromatografie. De 5 titelverbinding werd ook bereid als een e'nantiomeer zuivere verbinding door uit te gaan van het chirale uitgangsmateriaal.
1H-NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ ppm 1,83 (d, J=6, 57 Hz, 3H), 3,35 (s, 4H) , 3,69 (s, 4H) , 6,24 (k, J= 6,57 Hz, 1H) , 6,91-10 7,08 (m, 2H), 7,10 (d, J=l,26 Hz, 1H) , 7,46 (t, J=8,72 Hz, 1H), 7,50 (s, ,4H) , 7,58. (dd, J=8,97, 4,93 Hz, 1H) , 7,91 (d, J=1,77 Hz, 1H), 9,35 . (s, 2H).
LCMS: 490 [M+l]. c-Met: Ki =0,01 μΜ.
15
Voorbeeld 6: 4-{6-Amino-5-[(IR)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy)-pyridine-3-yl}-N-[2-(dimethylamino)ethyl]-N-methylbenz-amide 20 <?H, ..«SjW' 25 30 De titelverbinding werd. bereid volgens procedure 20.
1H-NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ ppm 1,80 (d, J=6,82 Hz, 3H), 1,97 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 2,30-2,42 (m, J=l,77 Hz, 2H), 2,93 (s, 3H), 3,22-3,29 (m, 1H), 3,44-3,61 (m, 1H) , 5,95 (s, 2H) , 6,14 (k, J=6,57 Hz, 1H) , 6,98 (d, J=l,01 Hz, 1H), 35 7,30-7,39 (m, 2H), 7,40-7,47 (m, 3H), 7,51-7,62 (m, 1H), 7,87 (d, J= 1,77 Hz, 1H). | LCMS: 506 [M+l].
1029799- 182 c-Met: Ki = 0,01 μΜ.
Voorbeeld 7: (4-{6-Amino-5-[(IR)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy)-5 pyridine-3-yl)fenyl)methanol L, _ / l 15
De titelverbinding werd bereid volgens procedure 27. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ ppm 1,84 (d, J=6,57 Hz, 3H.) , 4,49 (d, J=5,81 Hz, 2H), 5,20 (t, J=5,81 Hz, 1H), 6,25 (k, J=6,57 Hz, 1H), 6,46-6,88 (m, 2H), 7,04 (d, J=l,52 Hz, 20 1H) , 7,34 (s, 4H), 7,46 (t, J= 8,72 Hz, 1H) , 7,59 (dd, J=8,97, 4,93 Hz, 1H), 7,76 (d, J=l,52 Hz, 1H).
LCMS: 408 [M+l]. c-Met: Ki = 0,051 μΜ.
. 25 Voorbeeld 8 : 4-{6-Amino-5-[(IR)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-pyridine-3-yl}-N-[3-(dimethylamino)propyl]-N-methylbenz-amide 30 .35 1029799* 183
De titelverbinding werd bereid volgens procedure 27. 1 1H-NMR (400 MHz, DMS0-D6) δ ppm 1,60-1,73 (m, 2H), 1,80 (d, J= 6,57 Hz, 3H) , 1,94 (s, 3H), 2,13 (s, 3H) , 2,20-2,29 (m, 2H), 2,92 (s, 3H), 3,36-3,50 (m, 2H), 5,96 (s, 2H) , 6,14 5 (k, J= 6,57 Hz, 1H), 6,98 (s, 1H) , 7,37 (s, 2H) , 7,40-7,51 (m, 3H) , 7,55 (dd, J=8,84, 4,80 Hz, 1H) , 7,86 (d, J=l,77 Hz, 1H).
LCMS: 520 [M+l]. c-Met: Ki = 0,01 pM.
10
Voorbeeld 9: tert-Butyl-4-(4-{6-amino-5-[(IR)-1-(2, 6-dichloor-3-fluor-fenyl)ethoxy]pyridine-3-yl}benzoyl)piperazine-1-carboxylaat 15 fV .
20 o X jT*jfi NHj 25
De titelverbinding werd bereid volgens procedure 20.
XH-NMR (400 MHz, chloroform-D) δ ppm 1,46 (s, 9H), 1,86 (d, J=6,82 Hz, 3H) , 3,30-3,89 (m, 8H) , 4,90 (s, 2H) , 6,11 (k, 30 J=6,57 Hz, 1H), 6,98 (d, J=l,52 Hz, 1H),' 7,01-7,10 (m, 1H), 7,30 (dd, J=8, 97, 4,93 Hz, 1H), 7,35-7,43 (m, 4H) , 7,88 (d, J=l,77 Hz, 1H).
LCMS: 590 (M+l]. c-Met: Ki = 0,03 pM.
35 i .
*029799- 184
Voorbeeld 10: 3~ [ (R)-1- (2,6-Dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-[1-(1-methylpiperidine-4-yl)-lH-pyrazool-4-yl]pyridine-2-ylamine
P
N-N
10 a ch, [ J] NHs ' HOAe 15 *
De titelverbinding werd bereid volgens procedure 62 met behulp .van 3- [ (R) -1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl) -ethoxy]-5-(4,4,5,5-tetramethyl[1,3,2]dioxaborolaan-2-20 yl)pyridine-2-ylamine en 4-(4-broompyrazool-l-yl)-1- methylpiperidine (bereid volgens algemene procedure 11). 1H-NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,65 (s, 1H) , 7,55 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,31 (m, 1H), 7,06 (m, 1H) , 6,87 (s, 1H) , 6,08 (m, 1H), 5,50 (bs, 2H) , 4,18 (m, 1H), 3,11 (m, 2H) , 2,40 25 (s, 3H), 2,30 (m, 2H), 2,20 (m, 4H), 2,07 (s, 3H) , 1,86 (d, J 8 Hz, 3H) .
LCMS: 464 [M+l]. c-Met: Ki = 0,01 μΜ.
.30 Voorbeeld 11: 1-[4-(4-{6-Amino-5-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)-ethoxy]pyridine-3-yl}pyrazool-l-yl)piperidine-l-yl]-2-hydroxyethanon 35 1029799- 185 yy* P.
α ch, A
io nhj
De titelverbinding werd bereid volgens procedure 63. 1H-NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,72 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,47 15 (s, 1H) , 7,31 (m, 1H) , 7,06 (m, 1H) , 6,86 (s, 1H) , 6,08 (m, 1H), 5,00 (bs, 2H) , 4,70 (m, 1H) , 4,36 (m, 1H),. 4,21 (s, 1H), 3,70 (m, 1H), 3,18 (m, 1H) , 3,00 (m, 1H), 2,223 (m, 2H), 2,01 (m, 2H), 1,86 (d, J 8 Hz, 3H).
LCMS : .508 [M+l] .
20 c-Met: Ki = 0,004 μΜ.
Voorbeeld 12: 3-[(R)-1-(2,6-Dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-(1-piperi-dine-4-yl-lH-pyrazool-4-yl)pyridine-2-ylamine 25
P
JJ-—N
30 .
.PW
nh2 35 1029799" 186
De titelverbinding werd bereid volgens procedure 62 met behulp van 3-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)-ethoxy]-5-(4,4,5,5-tetramethyl[1,3,2]dioxaborolaan-2-yl)-pyridine-2-ylamine en 4-(4-broompyrazool-l-yl)-1-cyclo-5 pentylpiperidine (bereid volgens algemene procedure 11 met behulp van broomcyclopentaan als alkyleringsreagens).
1H-NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,73 (s, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,48 (s, 1H) , 7,31 (m, 1H) , 7,07 (m, 1H) , 6,88 (s, 1H) , 6,08 (m, 1H), 4,64 (m, 1H), 2,04 (m, 2H), 1,98 (m, 2H), 1,86 10 (d, J 8 Hz, 3H), 1,73 (m, 2H).
LCMS: 435 [M+l]. c-Met: Ki = 0,02 μΜ.
Voorbeeld 13: .
15 3-[(R)-1-(2,6-Dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-(1-piperi- dine-4-yl-lH-pyrazool-4-yl)pyridine-2-ylamine
/-NU
O
N-.
Cl CH3
1 JL
25 11 Jl u
De titelverbinding werd bereid volgens procedure 62.
30 1H-NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,69 (s, 1H) , 7,56 (s, 1H) , 7,50 (s, 1H), 7,32 (m, 1H), 7,07 (m, 1H) , 6,87 (m, 1H) , .6,07 (m, 1H), 5,25 (bs, 2H), 4,30 (m, 1H), 3,41 (m, 2H), 2,96 (m, 2H), 2,26 (m, 2H), 2,12 (m, 2H), 1,86 (d, J 8 Hz, 3H). LCMS: 450 [M+l], 35 c-Met: Ki = 0,003 μΜ.
1029799“ 187
Voorbeeld 14: 3-[(R)-1-(2,6-Dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-(1-piperi-dine-4-yl-lH-pyrazool-4-yl)pyrazine-2-ylamine
P
N-N
10 Cl CHs 1^^^ (^v 15
De titelverbinding werd bereid volgens procedure 66.
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,86 (s, 1H) , 7,76 (s, 1H) , 7,63 (m, 2H), 7,54 (m, 1H), 7,37 (t, 1H) , 6,46 (k, 1H), 6,15 (s, 1H) , 4,10 (m, 1H) , 3,01 (m, 2H) , 1,95 (m, 2H) , 20 1,85 (s, 2H), 1,75 (d, 3H), 1,67 (dd, 1H).
LCMS: 451 [M+l]. c-Met: Ki = 0,010 μΜ.
Voorbeeld 15: 25 3-[(R)-1-(2,6-Dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-(lH-pyra- zool-4-yl)pyrazine-2-ylamine 4
N—NH
30 ( NHj 35 i 1029799- 188
De titelverbinding werd bereid volgens procedure 3 met behulp van 5-broom-3-[ (.R)-1-(2, 6-dichloor-3-fluor-fenyl)ethoxy]pyrazine-2-ylamine en 4-(4,4,5,5-tetramethyl- [1,3,2]dioxaborolaan-2-yl)pyrazool-l-carbonzure tert- 5 butylester.
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,81 (s, 1H) , 7,79 (s, 1H) , 7,48 (m, 1H), 7,36 (t, 1H) , 6,48 (k, 1H) , 6,12 (s, 2H) , 1.75 (d, 3H) .
LCMS: 368 [M+l].
10 c-Met:.Ki = 0,065 μΜ.
Voorbeeld 16; 1-[4-(4-(5-Amino-6-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)-ethoxy]pyrazine-2-yl}pyrazool-l-yl)piperidine-l-yl]-2-15 hydroxyethanon ;yr 20
1 AcOH
ci r ö NH»
Γ I
De titelverbinding werd bereid volgens de procedures 30 62 en 63 met behulp van 5-broom-3-((R)-l-(2,6-dichloor-3- fluorfenyl)ethoxy]pyrazine-2-ylamine als het uitgangsmateriaal .
XH-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,91 (s, 1H) , 7,76 (s, 1H), .7,64 (s, 1H), 7,49 (m, 1H), 7,36 (t,· 1H) , 6,46 (k, 1H), 35 6,15 (s, 2H), 4,57 (br, 1H), 4,40 (m, 2H), 4,12 (br, 2H), 3,77 (m, 1H), 3,35 (m, 2H) , 3,43 (m, 1H) , 3,16 (m, 2H), 1.75 (d, 3H).
1029799- 189 LCMS: 509 [M+l]. c-Met: Ki = 0,015 μΜ.
Voorbeeld 17: 5 3-[(R)-1-(2,6-Dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-[1-(1- methylpiperidine-4-yl)-lH-pyrazool-4-yl]pyrazine-2-ylamine yïH,
P
won
De titelverbinding werd bereid volgens procedure 62 20 met behulp van 5-broom-3-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluor-fenyl)ethoxy]pyrazine-2-ylamine en 4-(4-broompyrazool-l-yl) -1-methylpiperidine (bereid volgens algemene procedure 11).
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,88 (s, 1H) , 7,76 (s, 1H:), ! 25 7,64 (s, 1H), 7,49 (m, 1H) , 7,36 (t, 1H) , 6,46 (k, 1H), 6,15 (s, 2H) , 4,02 (m, 1H) , 2,84 (m, 2H) , 2,19 (s, 3H), 2,00 (m, 4H), 1,85 (m, 3H), 1,75 (d, 3H).
i LCMS: 465 [M+l]. c-Met: Ki = 0,03 μΜ.
30
Voorbeeld 18: l-[4-(4-{5-Amino-6-[(R)-l-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)~ ethoxy]pyrazine-2-yl}pyrazool-l-yl)piperidine-l-yl]-2-dimethylaminoethanon 35 1029799- 190
H,C
yy-04
P
--N
'y ' AcOH
Cl 5H, - i
De titelverbinding werd bereid volgens procedure 63 met behulp van 3-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)-15 ethoxy]-5-(l-piperidine-4-yl-lH-pyrazool-4-yl)pyrazine-2-ylamine, dat werd gekoppeld met dimethylaminoazijnzuur in aanwezigheid van HOBt/EDC/triethylamine in DMF als beschreven in procedure 5 met behulp van 5-broom-3-[(R)-1-(2,6-dichloor-3~fluorfenyl)ethoxy]pyrazine-2-ylamine als 20 het uitgangsmateriaal.
^H-NMR (400 MHz, DMS0-d6) 5 7,90 (s, .1H), 7,76 (s, 1H) , .7,65 (s, 1H), 7,49 (m, 1H), 7,36 (t, 1H) , 6,47 (k, 1H) , 6,15 (s, 2H) , 4,39 (m, 1H) , 4,16 (m, 1H) , 3,16 (m, 2H) , 3,02 (m, 1H), 2,75 (m, 1H) , 2,19 (s, 6H) , 2,01 (m, 2H) , 25 1,88 (s, 1H), 1,75 (d, 3H).
LCMS: 536 [M+l]. c-Met: Ki.= 0,015 μΜ.
Voorbeeld 19: 30 3-[(R)-1-(2-Chloor-3,6-difluorfenyl)ethoxy]-5-(1-piperi- dine-4-yl-lH-pyrazool-4-yl)pyridine-2-ylamine 35 1029799- 191
P
F CHs p jj ; HOAc (Γ
10 I
De titelverbinding werd bereid volgens procedure 62 met behulp van 5-broom-3-[(i?)-l-(2-chloor-3,6-difluor-fenyl)ethoxy]pyridine-2-ylamine als uitgangsmateriaal 15 (volgens de werkwijzen voor de synthese van 5-broom-3-[l-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]pyridine-2-ylamine uit (S)-1-(2-chloor-3, 6-difluorfenyl)ethanol, dat werd verkregen van SynChem, Ine.)· 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,88 (s, 1H) , 7,70 (s, 1H) , 20 7,50 (s, 1H), 7,38 (m, 1H), 7,25 (m, 1H), 6,99 (s, 1H), 5,88 (m, 1H), 5,48 (bs, 2H), 4,08 (m, 1H), 2,96 (m, 2H), 2,53 (m, 1H), 2,45 (m, 1H) , 1,89 (m, 1H) , 1,80 (m, 4H) , 1,67 (m, 4H) .
LCMS: 434 [M+l].
25 c-Met: Ki =0,09 μΜ.
Biologische voorbeelden
Het zal duidelijk zijn dat in een bepaalde reeks van verbindingen een bereik van biologische activiteiten zal 30 worden waargenomen. Volgens haar huidige voorkeursaspecten betreft de onderhavige uitvinding nieuwe verbindingen die in staat zijn tot het moduleren, reguleren en/of remmen van de activiteit van proteïnekinase. De volgende assays kunnen worden gebruikt voor het kiezen van die verbindin-35 gen die de optimale mate van de gewenste activiteit laten zien.
1029799- 192
Assay-procedures
De volgende in vitro assay kan worden gebruikt om het niveau van de activiteit en het effect van de verschillende verbindingen van de onderhavige uitvinding op één of 5 meer'van de PK's te bepalen. Op vergelijkbare wijze kunnen voor een bepaalde PK gelijksoortige assays worden ontworpen, waarbij werkwijzen uit de stand der techniek worden gebruikt. Een literatuurreferentie is: (Techniko.va-
Dobrova, Z., Sardanelli, A.M., Papa, S., FEBS Lett., 1991, 10 4 november; 292: 69-72) .
De algemene procedure is als volgt. De verbindingen en de reagentia voor de kinase-assay worden in proefputjes gebracht. De assay wordt ingezet door de toevoeging van het kinase-enzym. Enzymremmers verlagen de gemeten activi-15 teit van het enzym.
In de continu gekoppelde spectrofotometrische assay wordt de tijdsafhankelijke productie van ADP door het ki-nase bepaald door analyse van de verbruikssnelheid van NADH door meting van de vermindering van de absorptie bij 20 340 nm. Aangezien het PK ADP produceert, wordt het opnieuw omgezet in ATP door reactie met fosfoenolpyruvaat en pyru-vaatkinase. In deze reactie wordt ook pyruvaat geproduceerd. Het pyruvaat wordt vervolgens omgezet in lactaat door reactie met lactaatdehydrogenase, dat gelijktijdig 25 NADH in NAD omzet. NADH heeft een meetbare absorptie bij 340 nm, terwijl NAD daarentegen deze niet heeft.
Het protocol dat tegenwoordig.de voorkeur geniet voor het uitvoeren van de continu gekoppelde spectrofotometrische experimenten voor specifieke PK's wordt hierna gege-30 ven. De aanpassing van dit protocol voor het bepalen van de activiteit van de verbindingen tegen andere RTK's, alsmede voor CTK's en STK's, valt echter binnen de vakkennis van de deskundigen.
35 Continu gekoppelde spectrofotometrische HGFR-assay 1029799- 193
Deze assay analyseert de tyrosinekinase-activiteit van HGFR op het Met-2-substraatpeptide, een peptide dat afkomstig is uit de activeringslus van het HGFR.
5 Materialen en reagentia: ί 1. HGFR-enzym van Upstate (Met, actief); Cat. # 14- 526 2. Met-2-peptide (activeringslus van HGFR) Ac-ARDMYDKEYYSVHNK (MW = 1960) . Los dit op in 200 10 mM HEPES met pH = 7,5 tot een 10 mM voorraadop- lossing.
3. · 1 M PEP (fosfo-enolpyruvaat)in 200 mM HEPES met pH = 7,5.
4. 100 mM NADH (β-nicotinamideadeninedinucleotide, 15 gereduceerde vorm) in 200 mM HEPES met pH = 7,5.
5. 4M MgCl2 (magnesiumchloride) in dubbel gedestilleerde H2O.
6. 1 M DTT (dithiothreïtol) in 200 mM HEPES met pH
= 7,5.
20 7. 15 Eenheden/ml LDH (melkzuurdehydrogenase) 8. 15 Eenheden/ml PK (Pyruvaatkinase)
9. 5M NaCl opgelost in dubbel gedestilleerde H2O
10. 10 % oplossing van Tween-20("Protein Grade").
11. 1 M HEPES-buffer: natriumzout van (N-[2-hydroxy- 25 ethyl]piperazine-N-[2-ethaansulfonzuur].
Los op in dubbel gedestilleerde H2O, breng pH op 7,5, vul volume aan tot 1 1. Filtreer door fil- 4 ter van 0,1 pm.
12. · Water van HPLC-kwaliteit; Burdick and Jackson .30 #365-4, 1x4 liter (of equivalent).
13. 100 % DMSO (SIGMA) 14. Costar # 3880 - zwarte platen met vlakke bodem en voor de helft helder oppervlak voor bepaling van Ki en % remming.
35 15. Costar # 3359 - polypropyleenplaten met 96 put- . jes, ronde boden), voor reeks verdunningen.
IO29799- i ____ 194 16. Costar # '3635 - heldere UV-platen met vlakke bodem voor % remming.
17. Beekman DU-650 met microcelhouders.
18. Beekman microcelcuvet met 4-posities.
5 -
Procedure:
Bereiding verdunningsbuffer (Dilution Buffer; DB) voor enzym (voor preparaat van 30 ml).
1. de eindconcentratie van DB is 2 mM DTT, 25 mM
10 NaCl, 5 mM MgCl2, 0,01 % Tween-20 en 50 mM HEPES- buffer met pH = 7,5.
2. Bereid 50 mM HEPES door toevoegen van 1,5 ml 1 M HEPES aan 28,1 ml dubbel gedestilleerde H20. Voeg de rest van de reagentia toe. Voeg in kegelvor- 15 mig.flesje van 50 ml 60 μΐ 1M DTT, 150 μΐ 5M NaCl, 150 μΐ 1M MgCl2 en 30 μΐ 10 % Tween-20 toe, hetgeen een totaal volume van 30 ml geeft.
3. Schud gedurende 5-10 seconden in vortex- apparaat.
20 4. Verdeel DB in volumina van 1 ml/buis en breng op buizen een label "DB HGFR" aan.
5. Opmerking: Dit kan tevoren worden bereid en bewaard.
6. Vries de niet gebruikte volumina bij -20°C in in 25 microcentrifugebuizen.
Preparaten van verbindingen 1. Voeg voor verdunningsplaat van verbinding 4 μΐ van 10 mM voorraadoplossing toe aan kolom 1 van 30 de plaat, en breng het volume op 100 μΐ met 100 % DMSO.
2. Gebruik de verdunningswerkwijze Precision 2000. Eindconcentratie van 200 μΜ verbinding in 50 % DMSO, 100 mM HEPES (reeksverdunning 1:2).
35 'Preparaat van gekoppeld enzyrnbuffer: 1. Eindconcentratie in assay: 1029799- .195
Reagens Eindconc. in (conc. in voorraadoplossing) assay
a. PEP (1 Μ) 1 mM
b. NADH (100 mM) 300 pM
5 c. MgCl2 (4 M) 20 mM
d. DTT (1 M) 2 mM
e. ATP (500 mM) 300 pM
f. HEPES 200 mM (pH=7,5) 100 mM
g. Pyruvaatkinase (PK) 15 eenheden/ml 10 h. Melkzuurdehydrogenase(LDH) 15 eenheden/ml
1. Met-2-peptide (10 mM) 0,500 mM
j . HGFR 50 nM
2. Voeg voor 10 ml reactiebuffer 10 pl 1M PEP, 33 15 pl 100 mM NADH, 50 pl 4M MgCl2, 20 pl 1M DTT, 6 pl 500 mM ATP en 500 pl 10 mM Met-2-peptide toe aan 100 mM HEPES-buffer met pH = 7,5 en schud/meng.
3. Voeg de koppelingsenzymen LDH en PK toe aan het 20 reactiemengsel. Meng door voorzichtig omzwenken.
Monsters 1. Instelling van spectrofotometer: I. Absorptiegolflengte (λ): 340 nm 25 ii. Incubatietijd: 10 min iii. Looptijd: 10 min.
iv. Temperatuur: 37°C.
4 2. Voeg 85 pl CE-reactiemengsel toe aan elk putje van de assay-plaat.
30 3. Voeg 5 pl verdunde verbinding toe aan een putje van de assay-plaat.
4. Voeg 5 pl 50 % DMSO voor negatieve controle toe in de laatste kolom van de assay-plaat.
5. Meng met meerkanaalspipetteerder of orbitaal- 35 schudder.
6. Incubeer van tevoren gedurende 10 min. bij 37°C.
1029799- 196 7. Voeg 10 μΐ 500 nM HGFR toe aan elk putje van de assay-plaat; de eindconcentratie van HGFR is 50 nM in een totaal eindvolume van 100 μΐ.
8. Meet de activiteit gedurende 10 min. bij λ = 340 5 nm en 37 °C.
De volgende in vitro assays kunnen worden gebruikt om het niveau van de activiteit en het effect van de verschillende verbindingen van de onderhavige uitvinding op 10 één of meer van de PK's te bepalen. Op vergelijkbare wijze kunnen voor een bepaalde PK gelijksoortige assays worden ontworpen waarbij werkwijzen uit de stand der techniek worden gebruikt.
Verscheidene van de hierin beschreven assays worden 15 uitgevoerd in een ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Sandwich Assay)-vorm (Voller et al., 1980, "Enzyme-Linked Immunosorbent Assay", Manual of Clinical Immunology, 2e editie, Rosé en Friedman, Am. Soc. of Microbiology, Washington, D.C., VS, blz. 359-371)..De algemene procedure is als 20 volgt: Een verbinding wordt ingebracht in de cellen die het proefkinase tot expressie brengen, hetzij op natuurlijke wijze, hetzij als recombinant, gedurende een bepaalde tijdsduur waarna, indien het proefkinase een receptor is, een ligand wordt toegevoegd waarvan bekend is dat het 25 de receptor activeert. De cellen worden gelyseerd en het lysaat wordt overgebracht in de putjes van een ELISA-plaat die tevoren is bekleed met een specifiek antilichaam dat i het substraat van de enzymatische fosforyleringsreactie herkent. Andere bestanddelen van het cellysaat dan het 30 substraat worden uitgewassen en de hoeveelheid fosforyle-ring op het substraat wordt gedetecteerd met een antilichaam dat fosfotyrosine specifiek herkent, waarbij men vergelijkt met controlecellen die niet in contact zijn gebracht met een proefverbinding.
35 De protocollen die tegenwoordig de voorkeur genieten voor het uitvoeren van de ELISA-experimenten voor specifieke PK's worden hierna gegeven. De aanpassing van deze 1029799- 197 protocollen voor het bepalen van de activiteit van de verbindingen tegen andere RTK's, alsmede voor CTK's en STK's, valt echter binnen de vakkennis van de deskundigen.
Andere hierin beschreven assays meten de hoeveelheid 5 DNA die wordt aangemaakt in respons op de activering van een proef kinase, hetgeen een algemene maat is voor een proliferatieve respons. De algemene procedure voor deze assay is als volgt. Een verbinding wordt ingebracht in de cellen die het proefkinase tot expressie brengen, hetzij 10 op natuurlijke wijze, hetzij als recombinant, gedurende een bepaalde tijdsduur, waarna, indien het proefkinase een receptor is, een ligand wordt toegevoegd waarvan bekend is dat het de receptor activeert. Na ten minste gedurende één ! nacht incubatie wordt een labelingsreagens voor het DNA, : 15 zoals 5-broomdesoxyuridine (BrdU) of 3H-thymidine, toegevoegd. De hoeveelheid gelabelde DNA wordt gedetecteerd met een anti-Brdü-antilichaam of door het meten van de radioactiviteit, en deze wordt vergeleken met controlecellen die niet in contact zijn geweest met een proefverbinding.
20 MET-transfosfory.leringsassay
Deze assay wordt gebruikt voor het meten van de. fos-fotyrosineniveaus aan een poly(glutaminezuur: tyrosine = 4:1)substraat als middel voor het identificeren van ago-25 nisten/antagonisten van met-transfosforylering van het substraat. . . .
i
Materialen en reagentia: 30 1. ELISA-platen met 96 putjes van Corning; Corning Catalogus # 25805-96. ; ’ 2. Poly (glu-tyr) , 4:1; Sigma, Cat. no. P 0275..
. 3. PBS, Gibco Catalogus.# 450-1300EB.
4. 50 mM HEPES
35 5. Blokkeerbuffer: Los 25 g runderserumalbumine, Sigma cat. no. A-7888, op in 500 ml PBS, filtreer door filter van 4 pm.
102.97 99- 198 6. Gezuiverd GST-fusie-eiwit dat het Met-kinasedomein bevat, SUGEN, Ine.
7. TBST-buffer.
8. 10 % DMSO in water (MilliQue H2Ó) .
59. 10 mM adenosine-5'-trifosfaat.in water (gedestilleer de H2O), Sigma cat, no, A-5394.
10. 2x kinaseverdunningsbuffer.' Meng voor 100 ml, 10 ml 1M HEPES met pH = 7,5 met 0,4 ml 5 % BSA/PBS, 0,2 ml 0,1 M natriumorthovanadaat en 1 ml 5M natriumchlöride in 88,4 ml 10 gedestilleerde H2O.
11. 4x ATP-reactiemengsel. Meng voor 10 ml, 0,4 mil 1 M mangaanchloride en 0,02 ml 0,1 Μ ATP in 9,56 ml gedestilleerde H2O.
12. 4x mengsel voor negatieve controle: meng voor 10 ml, 15 0,4 ml 1 M mangaanchloride in 9,6 ml gedestilleerde H2O.
13. NUNC-polypropyleenplaten met 96 putjes met V-bodem, Applied Scientific Catalog # S-72092.
14. 500 mM EDTA.
15. Verdunningsbuffer voor antilichaam: meng voor 100 ml, 20 10 mi 5 % BSA/PBS, 0,5 ml 5 % Carnation® Instant Milk in PBS en 0,1 ml 0,1 M natriumorthovanadaat in 88,4 ml TBST.
16. Konijnen-polyklonaal-antifosfotyrosine-antilichaam, SUGEN, Ine.
17. Geiten-anti-konijnen-mierikswörtelperoxidase-25 geconjugeerd-antilichaam, Biosource, Ine.
18. ABTS-oplossing: meng voor 1 1, 19,21 g citroenzuur, .
35, 49 g Na2HP04 en 500 mg ABTS met voldoende gedestilleerde H2O om 1 1 te kunnen maken.
19. ABTS/H202: meng 5 min. voor gebruik 15 ml ABST- 30 oplossing met 2 μΐ H2O2.
20. 0,2 M HCl.
Procedure: 1. Bekleed de ELISA-platen met 2 pg poly(Glu-Tyr) in 100 35 μΐ PBS, houd gedurende de nacht op 4°C.
2. Blokkeer de plaat gedurende 60 min. met 150 μΐ 5 % BSA/PBS..
1029799- 199 j 3. Was de plaat tweemaal met PBS, en vervolgens eenmaal met 50 mM HEPES-buffer met pH = 7,4.
4. Voeg 50 μΐ verdunde kinase toe aan alle putjes (de gezuiverde kinase wordt verdund met kinaseverdunningsbuf- 5 fer. De eindconcentratie dient 10 ng/putjè te zijn).
5. Voeg 25 μΐ van de proefverbinding (in 4 % DMSO) of alleen DMSO (4 % in gedestilleerde H2O) voor controles toe aan de plaat.
6. Incubeer het mengsel van kinase-verbinding gedurende 10 15 min.
7. Voeg 25 μΐ van 40 mM MnCl2 toe aan de putjes vóór negatieve controle.
8. Voeg 25 μΐ mengsel van ATP/MnCl2 toe aan alle andere putjes (behalve de negatieve controles). Incubeer geduren- 15 de 5 min.
9. Voeg 25 μΐ van 500 mM EDTA toe om de reactie te beëindigen.
10. Was de plaat 3x met TBST.
11. Voeg 100 μΐ konijnen-polyklonaal-anti-Ptyr, 1:10.000 20 verdund in antilichaamverdunningsbuffer, toe aan elk putje toe. Incubeer onder schudden gedurende 1 uur bij kamertemperatuur.
12. Was de plaat 3x met. TBST.
13. Verdun Biosource HRP-geconjugeerd-anti-konijnen-anti-25 lichaam 1:6000 in antilichaamverdunningsbuffer. Voeg 100 μΐ per putje toe en incubeer gedurende 1 uur onder schudden bij kamertemperatuur.
14. Was de plaat eenmaal met PBS.
15. Voeg .100. μΐ ABTS/H202-oplossing toe aan elk putje.
30 16. Beëindig indien noodzakelijk de ontwikkelingsreactie door de toevoeging van 100 μΐ van 0,2M HC1 per putje.
17.. Lees de plaat af met behulp van een ELISA-aflezer (Dynatech MR7000), met het proeffilter ingesteld op 410 nM en het referentiefilter ingesteld op 630 nM.
Assays voor de opname van BrdU
35 1029799- 200
De volgende assays maken gebruik van gemanipuleerde cellen voor het tot expressie brengen van een geselecteerde receptor en vervolgens evalueren van het effect van een verbinding die van belang is op de activiteit van de door 5 een ligand geïnduceerde DNA-synthese door het bepalen van de opname van BrdU in het DNA.
De volgende materialen, reagentia en procedure zijn algemeen voor elk van de volgende assays voor de opname van BrdU. Wijzigingen in de specifieke assays worden ver-10 meld.
Algemene materialen en reagentia: 1. Het geschikte ligand.
2. De geschikte gemanipuleerde cellen.
15 3. BrdU-labelreagens: 10 mM, in PBS, pH = 7,4 (Roche Mo- lecular Biochemicals, Indianapolis, IN, VS).
4. FixDenat: fixatie-oplossing (Roche Molecular Biochemicals Indianapolis, IN, VS).
5. Anti-BrdU-POD: muizen-monoklonaal-antilichaam dat ge-20 conjugeerd is met peroxidase (Chemicon, Temecula, CA, VS).
6. TMB-substraatoplossing: tetramethylbenzidine (TMB, gebruiksklaar, Roche Molecular Biochemicals, Indianapolis, In, VS).
7. PBS-wasoplossing: lx PBS, pH =7,4.
25 8. Runderalbumine (BSA), fractie V poeder (Sigma Chemi cal Co., VS).
4
Algemene procedure: 1. In een plaat met 96 putjes worden de cellen met 8000 30 cellen/putje toegevoegd aan 10 % CS, 2 mM Gin in DMEM. De cellen worden gedurende de nacht bij 37°C in 5 % CO2 geïn-cubeerd.
2. Na 24 uur worden dé cellen gewassen met PBS en vervolgens worden deze gedurende 24 uur in serumvrij medium.
35 (0 % CS DMEM met 0,1 % BSA) gehouden.
3. Op dag 3 worden het geschikte ligand en de proefver-binding gelijktijdig aan de cellen toegevoegd. De putjes 1029799- 201 voor negatieve controle ontvangen slechts serumvrije DMEM met 0,1 % BSA, de putjes voor positieve controle ontvangen het ligand, maar geen proefverbinding. De proefverbindingen worden bereid in serumvrije DMEM met ligand in een 5 plaat met 96 putjes, en ondergaan een reèksverdunning voor 7 proefconcentraties.
4. Na 18 uur activering van het ligand wordt verdund Br-DU-labelreagens (1:100 in DMEM, 0,1 % BSA) toegevoegd en worden de cellen gedurende 1,5 uur geïncubeerd met BrdU
10 (eindconcentratie is 10 pM).
5. Na incubatie met labelreagens wordt het medium verwijderd door afschenken en wordt de omgekeerde plaat op een papieren handdoek uitgeschud. Een FixDenat-oplossing wordt toegevoegd (50 pl/putje) en de platen worden gedu- 15 rende 45 minuten op een platenschudder geïncubeerd bij kamertemperatuur.
6. De FixDenat-oplossing wordt verwijderd door afschen ken en de omgekeerde plaat wordt op een papieren handdoek uitgeschud. Melk (5 % gedehydrateerde melk in PB S, 200 20 pl/putje) wordt toegevoegd als blokkeeroplossing en de plaat wordt gedurende 30 min. op een platenschudder geïncubeerd bij kamertemperatuur.
7. De blokkeeroplossing wordt verwijderd door afschenken en de putjes worden eenmaal gewassen met PBS. Anti-BrdU- 25 POD-oplossing wordt toegevoegd (1:200 verdunning in.PBS, 1 % BSA, 50 pl/putje) en de plaat wordt gedurende 90 min. op een platenschudder geïncubeerd bij kamertemperatuur.
8. Het antilichaamconjugaat wordt verwijderd door afschenken en de putjes worden 5x gespoeld met PBS, en de 30 plaat wordt gedroogd door omkeren en uitschudden op een papieren handdoek. .
9. TMS-substraatoplossing wordt toegevoegd (lOOpl/putje) en er wordt op een platenschudder gedurende 20 min. geïncubeerd bij kamertemperatuur tot de kleurontwikkeling vol- 35 doende is voor fotometrische detectie.
10. De absorptie van de monsters wordt gemeten bij 410 nm (er wordt afgelezen met een "dubbele golflengte" met een 1029799- 202 filter van 490 nm als referentie golflengte) met behulp van een ELISA-plaataflezer van Dynatech.
Assay voor de door HGF geïnduceerde opname van BrdU 5 Materialen en reagentia: 1. Recombinant humane HGF (Cat. no. 249-HG, R&D Systems, Ine., VS).
2. BxPC-3-cellen (ATCC CRL-1687).
De resterende materialen en reagentia zijn als hiervoor.
.10
Procedure: 1. In een plaat met 96 putjes worden 9000 cellen/putje overgebracht in RPMI met 10 % FBS. De cellen worden gedurende de nacht geïncubeerd bij 37°C en in 5 % CO2.
15 . 2. Na .24 uur worden de cellen gewassen met PBS en vervolgens gedurende .24 uur in 100 μΐ serumvrij medium (RPMI met 0,1 % BSA) gehouden.
3. Op dag 3 worden 25 μΐ oplossing die het ligand bevat (bereid in een concentratie van 1 pg/ml in RPMI met 0,1 % 20 BSA; de eindconcentratie van HGF is 200 ng/ml) en de proefverbindingen aan de putjes toegevoegd. De putjes voor de negatieve controle ontvangen slechts 25 μΐ serumvrije RPMI met 0,1 % BSA; de putjes voor de positieve controle ontvangen het ligand (HGF), maar geen proefverbinding. De 25 proefverbindingen worden in een plaat met 96 putjes bereid in 5x hun eindconcentratie in serumvrije RPMI met ligand, en deze ondergaan een reeksverdunning, hetgeen 7 proefcon- * centraties geeft. In een typisch geval is de hoogste eindconcentratie van de proefverbinding 100 μΜ en worden 1:3-30 verdunningen gebruikt (het uiteindelijke concentratiebe-reik van de proefverbinding is 0,137-100 μΜ).
4. Na 18 uur activering van het ligand wordt aan elk putje 12,5 μΐ verdund BrdU-labelreagens (1:100 in RPMI, .0,1 % BSA) toegevoegd en worden de cellen met Brdü (eind- 35 concentratie is 10 pm) gedurende 1 uur geïncubeerd.
5. Gelijk aan algemene procedure.
6. Gelijk aan algemene procedure.
1029799- 203 7. De blokkeeroplossing wordt verwijderd door .afschenken en de cellen worden eenmaal gewassen met PBS. Anti-BrdU-POD-oplossing (1:100 verdunning in PBS, 1 % BSA) wordt toegevoegd (100 μΐ/putje) en de plaat wordt op een platen- 5 schudder gedurende 90 min. geïncubeerd bij kamertemperatuur.
8. Gelijk aan algemene procedure.
9. Gelijk aan algemene procedure.
10. Gelijk aan algemene procedure.
10
Autofosforyleringsassay voor cellulaire HGFR
In deze assay werden A549-cellen (ATCC) gebruikt. In platen met 96 putjes werden de cellen in het groeimedium (RPMI + 10 % FBS) geënt en voor aanhechting gedurende de .15 nacht bij 37°C gekweekt. De cellen werden blootgesteld aan het uithongeringsmedium (RPMI + 0,05 % BSA). Aan de platen werden de verdunningen van de remmers toegevoegd en er werd gedurende 1 uur geïncubeerd bij 37°C. De cellen werden vervolgens gestimuleerd door toevoegen van 40 ng/ml . 20 HGF gedurende 15 min. De cellen werden eenmaal gewassen met 1 mM Na3V04 in HBSS en vervolgens gelyseerd. De lysaten werden verdund met 1 mM Na3V04 in HBSS en overgebracht naar een plaat met 96 putjes die waren bekleed met geiten-anti-.konijnen (Pierce); bovendien was deze voorbekleed met an-25 ti-HGFR-antilichaam (Zymed Laboratories). De platen werden gedurende de nacht geïncubeerd bij 4°C en zevenmaal gewassen met 1 % Tween-20 in PBS. HRP-PY20 (Santa Cruz) werd # verdund en voor een 30 min. durende incubatie aan de pla- . ten toegevoegd. De platen werden vervolgens opnieuw gewas-30 sen, TMB-peroxidasesubstraat (Kirkegaard & Perry) werd toegevoegd en er werd gedurende 10 min. geïncubeerd. De reactie werd vervolgens beëindigd door toevoegen van 0,09N H2SO4. De platen werden gemeten bij OD=450 nm met behulp van een spectrofotometer. De IC50-waarden werden berekend 35 uit een ' kromme waarvoor een analyse van vier parameters werd gebruikt.
1029799- 204
Van de verbindingen van de onderhavige uitvinding werd de remmende activiteit op HGFR gemeten; de gegevens worden in elk voorbeeld getoond. De Ki-gegevens werden verkregen met behulp van de continu gekoppelde spectrofo-5 . tometrische HGFR-assay en de ICso-gegevens werden verkregen met behulp van autofosforyleringsassay voor cellulaire HGFR, die beide hiervoor worden beschreven.
Hoewel de onderhavige uitvinding is toegelicht door referentie naar specifieke en voorkeursuitvoeringsvormen, 10 zal het de deskundigen duidelijk zijn dat er variaties en | modificaties kunnen worden gemaakt door routinematig' experimenteren en de praktijk van de onderhavige uitvinding.
De onderhavige uitvinding is dus niet beperkt door de voorgaande beschrijving, maar zal worden gedefinieerd door .
15 de aangehechte conclusies en hun equivalenten.
Alle hierin aangehaalde referenties, met inbegrip van alle voorrangsdocumenten, worden hierin opgenomen door referentie in hun geheel.
« 1029799-

Claims (15)

1. Enantiomeer zuivere verbinding met de formule 1 R1 15 ci ch3
20 I F waarin: Y is N of CR12, R1 wordt gekozen uit waterstof, halogeen, C6_12 aryl, 25 vij f-twaalf tallige heteroaryl, C3.12 cycloalkyl, drie-twaalftallige heteroalicyclische groep, -0 (CR6R7) nR4, -C (O) R4, -C (O) OR4, -CN, -N02, -S(0)raR4, -S02NR4Rs, -C(0)NR4R5, -NR4C(0)Rs, -C(=NR6)NR4Rs, alkyl, C2.8 alkenyl en C2.8 alkynyl, en elke waterstof in R1 eventueel gesubsti-30 tueerd is door één of meer R3-groepen, R2 is waterstof, halogeen, C1.12 alkyl, C2.12 alkenyl, C2.12 alkynyl, C3_12 cycloalkyl, C6.12 aryl, drie-twaalf-tallige heteroalicyclische groep, vijf-twaalftallige heteroaryl, -S(0)mR\ -S02NR4Rs, -s(o)2or4, -N02, -NR4Rs, 35 - (CR6R7)nOR4, -CN, -C(0)R4, -0C(0)R4, -O (CR6R7) nR4, -NR4C(0)Rs, - (CR6R7)nC(0)0R\ - (CR6R7) nNCR4Rs, -C (=NR6) NR4R5, 1029799 -NR4C(0)NR5Re, -NR4S(0)pR5 of -C(0)NR4R5, en elke waterstof in R2 eventueel gesubstitueerd is door R8, elke R3 onafhankelijk is halogeen, C3_12 alkyl, C2_12 al-kenyl, C2.12 alkynyl, C3_12 cycloalkyl, C6.12 aryl, drie-5 twaalf-tallige heteroalicyclische groep, vijf-twaalf tallige heteroaryl, -S(0)mR4, -S02NR4R5, -S(0)20R4, -N02, -NR4R5, - (CR€R7)nOR4, -CN, -C(0)R4, -0C(0)R4, -O (CR6R7) nR4, -NR4C(0)R5, - (CR6R7)nC(0)0R4, - (CR6R7) n0R4, - (CR6R7) nC (0) NR4R5, - (CR6R7)nNCR4R5, -C(=NR6)NR4R5, -NR4C (0) NR5R6, -NR4S(0)pR5 of
2. Verbinding volgens conclusie 1, waarin R2 waterstof is.
2. R6 en R7 die aan hetzelfde kool stof atoom gebonden zijn, ' kunnen worden gecombineerd, zodat een C3_12 cycloalkyl, C6_i2-aryl, drie-twaalftallige heteroalicyclische groep of vijf-twaalftallige heteroarylgroep wordt gevormd, en elke waterstof in R4, R5, R6 en R7 eventueel gesubstitueerd is 3. door R8, elke R8 onafhankelijk is halogeen, C3.12 alkyl, C2.12- alkenyl, C2_12 alkynyl, C3.12 cycloalkyl, C6_12 aryl, drie- twaalftallige heteroalicyclische groep, vijf-twaalftallige heteroaryl, -NH2, -CN, -OH, -0-Ci-i2 alkyl, -0- 35 (CH2)nC3.12cycloalkyl, -O- (CH2)nC6.12aryl, -O-(CH2)n(drie- twaalf tallige heteroalicyclische groep) of -O-(CH2)„(vijf- twaalftallige heteroaryl), en elke waterstof in R8 eventueel gesubstitueerd is door R11, elke R9 en R10 onafhankelijk is waterstof, halogeen, ^_12 alkyl, C3_12 cycloalkyl, C6.12 aryl, drie-twaalftallige 5 heteroalicyclische groep, vijf-twaalftallige heteroaryl, -S(0)mR\ -so2nr4r5, -s(o)2or\ -no2, -nr4r5, - (CR6R7)nOR4, -CN, -C(0)R\ -0C(0)R4, -NR4C(0)Rs, - (CR6R7)nC(0)0R4, - (CR6R7)nNCR4R5, -NR4C (O) NR5R6, -NR4S(0)pR5 of -C (0) NR4R5, waarbij R9 of R10 kan worden gecombineerd met 10 een ringatoom van A of een substituent van A, zodat een C3-i2 cycloalkyl, drie-twaalf tallige heteroalicyclische groep, C6_12 aryl of vij f-twaalftallige heteroaryl ring wordt gevormd die gecondenseerd is aan A, en elke waterstof in R9 en R10 eventueel gesubstitueerd is door R3, 15 elke Ru onafhankelijk is halogeen, C1.12 alkyl, ^_12- alkoxy, C3„12 cycloalkyl, C6_12 aryl, drie-twaalf tallige heteroalicyclische groep, vijf-twaalftallige heteroaryl, -0-^.12 alkyl, -0- (CH2)nC3.12 cycloalkyl, -0- (CH2)„C6.12 aryl, -O-(CH2) n (drie-twaalftallige heteroalicyclische groep), -0-2 0 (CH2) n (vij f-twaalf tallige heteroaryl) of -CN, en elke wa terstof in R11 eventueel gesubstitueerd is door halogeen, -OH, -CN, -C1.12 alkyl die gedeeltelijk of volledig gehalo-geneerd kan zijn, -0-^_12 alkyl die gedeeltelijk of volledig gehalogeneerd kan zijn, -CO, -S0 of -S02,
25 R12 is waterstof, halogeen, 03.12 alkyl ' ^-2-12 alkenyl, C2_12 alkynyl, C3.12 cycloalkyl, C6.12 aryl, drie-twaalftallige heteroalicyclische groep, vijf-twaalftallige hete-ί roaryl, -S(0)mR4, -S02NR4R5, -S(0)20R4, -N02, -NR4R5, - (CR6R7)n0R4, -CN, -C (0) R4, -0C(0)R4, -O (CR6R7) nR4,
30 -NR4C(0)Rs, - (CR6R7)nC(0)0R4, - (CR6R7) nNCR4R5, - C (=NR6) NR4R5, -NR4C(0)NRsR6, -NR4S(0)pR5 of -C(0)NR4Rs, en elke waterstof in R12 eventueel gesubstitueerd is door R3, elke R13 onafhankelijk is halogeen, Cx.12 alkyl, C2_12-alkenyl, C2.12 alkynyl, C3.12 cycloalkyl, C6.12 aryl, drie-35 twaalf-tallige heteroalicyclische groep, vijf-twaalf tallige heteroaryl, -S(0)mR4, -S02NR4Rs, -S(0)20R4, -N02, -NR4Rs, - (CReR7)nOR\ -CN, -C(0)R4, -0C(0)R4, -0(CR6R7)nR\ -NR4C(0)R5, - (CR6R7)nC(0)0R4, - (CR6R7) nOR4, - (CR6R7) nC (O) NR4RS, - (CR6R7) „ncr4r5, -c (=NR6) nr4r5, -NR4C(0)NRsR6, -NR4S(0)pR5 -C(0)NR4R5, - (CR6R7)n(drie-twaalf tallige heteroalicyclische groep), - (CR*R7) n (C3.12 cyclo-5 alkyl), - (CR6R7) n (C6_12 aryl) , - (CR6R7) n (vij f-twaalftallige heteroaryl) , - (CR6R7) nC (0) NR4R5 of - (CR6R7) „C (O) R4, waarbij de R13-groepen aan naast elkaar gelegen atomen kunnen worden gecombineerd, zodat een C6_l2 aryl, vij f-twaalftallige heteroaryl, C3.12 cycloalkyl of drie-twaalftallige heteroalicy- 10 clische groep wordt gevormd, en elke waterstof in R13 eventueel gesubstitueerd is door R3, elke m onafhankelijk 0, 1 of 2 is, elke n onafhankelijk 0, 1, 2, 3 of 4 is, elke p onafhankelijk 1 of 2 is, 15 of een farmaceutisch aanvaardbaar zout, hydraat of solvaat daarvan.
3. Verbinding volgens conclusie 1, waarin Y N is. I i 2 0
4. Verbinding volgens conclusie 1, waarin Y N is en R2 waterstof is.
5. Verbinding volgens conclusie 1, waarin Y CR12 is.
5 10
6. Verbinding volgens conclusie 1, waarin Y CR12 is en R12 H is.
7. Verbinding volgens conclusie 1, waarin R1 een fu- ran-, thiofeen-, pyrrool-, pyrroline-, pyrrolidine-, di- ! i oxolaan-, oxazool-, thiazool-, imidazool-, imidazoline-, imidazolidine-, pyrazool-, pyrazoline-, pyrazolidine-, isoxazool-, isothiazool-, oxadiazool-, triazool-, thiadia- 30 zool-, pyran-, pyridine-, piperidine-, dioxaan-, morfoli-ne-, dithiaan-, thiomorfoline-, pyridazine-, pyrimidine-, pyrazine-, piperazine-, triazine-, trithiaan-, azetidine-of fenylgroep is, en elke waterstof in R1 eventueel gesubstitueerd is door R3.
8. Verbinding volgens conclusie 1, waarin R1 een ze ven- tot twaalftallige heteroarylgroep met gecondenseerde ringen is, en elke waterstof in R1 eventueel gesubstitueerd is door één of meer R3-groepen.
9. Verbinding volgens conclusie 1, waarin R1 waterstof is.
10 I ?i ch3 F waarin: Y is N of CH,
20 R1 is een furan-, thiofeen-, pyrrool-, pyrroline-, pyrrolidine-, dioxolaan-, oxazool-, thiazool-, imidazool-, imidazoline-, imidazolidine-, pyrazool-, pyrazoline-, py-razolidine-, isoxazool-, isothiazool-, oxadiazool-, tria-zool-, thiadiazool-, pyran-, pyridine-, piperidine-, diox-25 aan-, morfoline-, dithiaan-, thiomorfoline-, pyridazine-, pyrimidine-, pyrazine-, piperazine-, triazine-, trithi-aan-, azetidine- of fenylgroep, en elke waterstof in R1 eventueel gesubstitueerd is door R3, elke R3 onafhankelijk is halogeen, C1.12 alkyl, C2_12 al-3 0 kenyl, C2_12 alkynyl, C3.12 cycloalkyl, C6_12 aryl, drie-twaalftallige heteroalicyclische groep, vijf-twaalf tallige heteroaryl, -S(0)mR4, -S02NR4R5, -S(0)20R4, -NOz, -NR4Rs, - (CR6R7)nOR4, -CN, -C(0)R4, -0C(0)R4, -0(CR6R7)nR4, -NR4C(0)Rs, - (CR6R7)nC(0)0R4, - (CR6R7)nOR4, 35 - (CR6R7)nC (0)NR4R5, - (CR6R7) nNCR4R5, -C (=NR6) NR4R5, -NR4C(0)NRsR6, -NR4S(0)pR5 of -C(0)NR4R5, en elke waterstof in R3 eventueel gesubstitueerd is door R8, en de R3-groepen aan naast elkaar gelegen atomen kunnen worden gecombineerd, zodat een Ce_12 aryl, vij f-twaalftallige heteroaryl, c3-i2 cycloalkyl of drie-twaalftallige heteroalicyclische groep wordt gevormd, 5 elke R4, R5, R6 en R7 onafhankelijk is waterstof, halo geen, Ci.ij alkyl, C2.12 alkenyl, C2.12 alkynyl, C3_12 cycloalkyl, C6.12 aryl, drie-twaalftallige heteroalicyclische groep, vijf-twaalftallige heteroaryl, of elke twee van R4, R5, R6 en R7 die aan hetzelfde stikstofatoom gebonden zijn, 10 tezamen met de stikstof waaraan deze gebonden zijn, worden gecombineerd, zodat een drie-twaalftallige heteroalicyclische groep of vijf-twaalf-tallige heteroarylgroep wordt gevormd die eventueel 1 tot 3 bijkomende heteroatomen bevat die worden gekozen uit N, O en S, of elke twee van R4, 15 R5, R6 en R7 die aan hetzelfde koolstof atoom gebonden zijn, kunnen worden gecombineerd, zodat een C3.12 cycloalkyl, C6_12 aryl, drie-twaalftallige heteroalicyclische groep of vijf-twaalftallige heteroarylgroep wordt gevormd, en elke waterstof in R4, Rs, R6 en R7 eventueel gesubstitueerd is door 2 0 R8, elke R8 onafhankelijk is halogeen, C3.12 alkyl, C2_12 alkenyl, C2_12 alkynyl, C3_12 cycloalkyl, Cs_12 aryl, drie-twaalftallige heteroalicyclische groep, vijf-twaalf-tallige heteroaryl, -NH2, -CN, -OH, -O-C^j alkyl, 25 -0- (CH2)nC3.12 cycloalkyl, -0-(CH2) nC6_12 aryl, -O- (CH2) n- (drie- twaalftallige heteroalicyclische groep) of -O-(CH2) n-(vi j f -twaalftallige heteroaryl) , en elke waterstof in R8 eventueel gesubstitueerd is door R11, elke R9 en R10 onafhankelijk is waterstof, halogeen, 30 03_12 alkyl, C3.12 cycloalkyl, C6.12 aryl, drie-twaalftallige heteroalicyclische groep, vijf-twaalftallige heteroaryl, -S (O) mR4, -S02NR4R5, -S(0)20R4, -no2, -NR4Rs, - (CR6R7)nOR\ -CN, -C (0) R4, -0C(0)R\ -NR4C(0)Rs, - (CR6R7)nC (0)0R4, - (CR6R7)nNCR4Rs, -NR4C(0)NR5R6, -NR4S(0)pR5 of
35 -C (0) NR4R5, waarbij R9 of R10 kan worden gecombineerd met een ringatoom van A of een substituent van A, zodat een C3_12 cycloalkyl, drie-twaalftallige heteroalicyclische groep, C6_12 aryl of vijf-twaalftallige heteroarylring wordt gevormd die gecondenseerd is aan A, en elke waterstof in R9 en R10 eventueel gesubstitueerd is door R3, elke R11 onafhankelijk is halogeen, ^_12 alkyl, ^.12 5 alkoxy, C3_12 cycloalkyl, C6.12 aryl, drie-twaalftallige he-teroalicyclische groep, vijf-twaalftallige heteroaryl, -0-Cj.ij alkyl, -O- (CHa)nC3.12 cycloalkyl, -O- (CH2)„C6.12 aryl, -O-(CH2)n(drie-twaalftallige heteroalicyclische groep), -0-(CH2)n(vijf-twaalftallige heteroaryl) of -CN, en elke wa-10 terstof in R11 eventueel gesubstitueerd is door halogeen, -OH, -CN, alkyl die gedeeltelijk of volledig gehalo- geneerd kan zijn, -0-^.12 alkyl die gedeeltelijk of volledig gehalogeneerd kan zijn, -CO, -S0 of -S02, 15 elke R13 onafhankelijk is halogeen, ^_12 alkyl, C2_12 alkenyl, C2.12 alkynyl, C3_12 cycloalkyl, C6.12 aryl, drie-twaalf tallige heteroalicyclische groep, vijf-twaalftallige heteroaryl, -S(0)mR4, -S02NR4Rs, -S(0)20R4, -N02, -NR4Rs, - (CR6R7)nOR4, -CN, - C (0) R4, -0C(0)R4, 20 -0 (CR6R7) nR4, -NR4C(0)Rs, - (CR6R7) nC (O) OR4, - (CR6R7) „OR4, - (CR6R7)nC (0)NR4R5, - (CR6R7)„NCR4R5, -C (=NR6) NR4Rs, -NR4C (0)NRsR6, -NR4S(0)pR5, -C(0)NR4Rs, - (CR6R7)n(drie-twaalf- tallige heteroalicyclische groep), - (CR6R7) n (C3.12 cycloalkyl), - (CR6R7) n (C6.12 aryl), - (CR6R7) n (vij f-twaalftallige 25 heteroaryl), - (CR6R7) nC (0) NR4R5 of - (CR6R7) nC (0) R4, waarbij de R13-groepen aan naast elkaar gelegen atomen kunnen worden gecombineerd, zodat een C6_12 aryl, vij f-twaalftallige heteroaryl, C3_12 cycloalkyl of drie-twaalf tallige heteroalicyclische groep wordt gevormd, en elke waterstof in R13 even-30 tueel gesubstitueerd is door R3, elke m onafhankelijk 0, 1 of 2 is, elke n onafhankelijk 0, 1, 2, 3 of 4 is, elke p onafhankelijk 1 of 2 is, of een farmaceutisch aanvaardbaar zout, hydraat of solvaat 35 daarvan.
10. Verbinding volgens conclusie 1, waarin R1 een ha logeen is.
10 -C (O)NR4R5, en elke waterstof in R3 eventueel gesubstitueerd is door R8, en de R3-groepen aan naast elkaar gelegen atomen kunnen worden gecombineerd, zodat een C6_12 aryl, vij f-twaalftallige heteroaryl, C3_12 cycloalkyl of drie-twaalftallige heteroalicyclische groep wordt gevormd, 15 elke R4, R5, Rs en R7 onafhankelijk is waterstof, halo geen, C3_12 alkyl, C2_12 alkenyl, C2.12 alkynyl, C3_12 cycloalkyl, C6.12 aryl, drie-twaalf tallige heteroalicyclische ! groep, vijf-twaalftallige heteroaryl, of elke twee van R4, j R5, R6 en R7 die aan hetzelfde stikstofatoom gebonden zijn, i 20 tezamen met de stikstof waaraan deze gebonden zijn, worden gecombineerd, zodat een drie-twaalftallige heteroalicyclische groep of vijf-twaalftallige heteroarylgroep wordt gevormd die eventueel 1 tot 3 bijkomende heteroatomen bevat die worden gekozen uit N, O en S, of elke twee van R4, Rs,
11. Enantiomeer zuivere verbinding met de formule la R1
12. Enantiomeer zuivere verbinding die wordt gekozen uit de groep die bestaat uit: Ί 5-broom-3 -[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-pyrazine-2-y1amine, 5-jood-3-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy] -pyridine-2-ylamine, 5 5-broom-3-[(R)-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]- pyridine-2-ylamine, 4-{5-amino-6-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)-ethoxy]pyrazine-2-yl}benzoëzuur, (5) 4-{5-amino-6-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)- 10 ethoxy]pyrazine-2-yl}fenyl)piperazine-l-ylmethanon, 4-(4-{5-amino-6-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)-ethoxy]pyrazine-2-yl}benzoyl)piperazine-1-carbonzure tert -butylester, 3-[(IR)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-[4-15 (piperazine-1-ylcarbonyl)fenyl]pyridine-2-amine, (4-{6-amino-5-[(IR)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)-ethoxy]pyridine-3-yl}-N-[2-(dimethylamino)ethyl]-N-methylbenzamide, (4-{6-amino-5-[(IR)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)-20 ethoxy]pyridine-3-yl}fenyl)methanol, (4-{6-amino-5-[(IR)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)-ethoxy]pyridine-3-yl}-N-[3-(dimethylamino)propyl]-N-methylbenzamide, tert-butyl-4-(4-{6-amino-5-[(IR)-1-(2,6-dichloor-3-2 5 fluorfenyl)ethoxy]pyridine-3-yl}benzoyl)piperazine-1 -carboxylaat, 3-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5- [1-(1-methylpiperidine-4-yl)-lH-pyrazool-4-yl]pyridine-2-yl-amine, 30 1-[4-(4-{6-amino-5-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluor fenyl )ethoxy]pyridine-3-yl}pyrazool-l-yl]piperidine-l-yl]- 2-hydroxyethanon, 3-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-(1-piperidine-4-yl-lH-pyrazool-4-yl)pyridine-2-ylamine, 35 (15) 3-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-(1- piperidine-4-yl-lH-pyrazool-4-yl)pyridine-2-ylamine, 3-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-(1-piperidine-4-yl-lH-pyrazool-4-yl)pyrazine-2-ylamine, 3-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-(1H-pyra zool-4-yl)pyrazine-2-ylamine, 5 1-[4-(4-{5-amino-6-[(R)-1- (2,6-dichloor-3-fluor- fenyl)ethoxy]pyrazine-2-yl}pyrazool-l-yl)piperidine-l-yl]- 2-hydroxyethanon, 3-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluorfenyl)ethoxy]-5-[1-(1-methylpiperidine-4-yl)-lH-pyrazool-4-yl]pyrazine-2-yl-10 amine, 1- [4-(4-{5-amino-6-[(R)-1-(2,6-dichloor-3-fluor-fenyl)ethoxy]pyrazine-2-yl}pyrazool-1-yl)piperidine-1-yl]- 2-dimethylaminoethanon, 3- [ (R)-1-(2-chloor-3,6-difluorfenyl)ethoxy]-5-(1-15 piperidine-4-yl-lH-pyrazool-4-yl)pyridine-2-ylamine, of een farmaceutisch aanvaardbaar zout, solvaat of hydraat daarvan.
13. Gebruik van een therapeutisch effectieve hoeveelheid van een verbinding, zout, hydraat of solvaat volgens 2 0 één van de conclusies 1-12 voor de bereiding van een geneesmiddel voor het behandelen van abnormale celgroei bij een zoogdier.
14. Gebruik volgens conclusie 13, waarbij de abnormale celgroei kanker is.
15. Farmaceutisch preparaat dat een verbinding, zout, hydraat of solvaat volgens één van de conclusies 1-12 en een farmaceutisch aanvaardbare drager omvat. 1029799
NL1029799A 2004-08-26 2005-08-25 Enantiomeer zuivere aminoheteroarylverbindingen als proteïnekinaseremmers. NL1029799C2 (nl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US60508604P 2004-08-26 2004-08-26
US60508604 2004-08-26

Publications (2)

Publication Number Publication Date
NL1029799A1 NL1029799A1 (nl) 2006-02-28
NL1029799C2 true NL1029799C2 (nl) 2006-10-17

Family

ID=35967909

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NL1029799A NL1029799C2 (nl) 2004-08-26 2005-08-25 Enantiomeer zuivere aminoheteroarylverbindingen als proteïnekinaseremmers.

Country Status (46)

Country Link
US (4) US7858643B2 (nl)
EP (1) EP1786785B9 (nl)
JP (1) JP4242911B2 (nl)
KR (1) KR100859891B1 (nl)
CN (1) CN101023064B (nl)
AP (1) AP2373A (nl)
AR (1) AR050788A1 (nl)
AT (1) ATE463486T1 (nl)
AU (1) AU2005276135B2 (nl)
BR (2) BRPI0513915A (nl)
CA (1) CA2578066C (nl)
CR (1) CR8860A (nl)
CY (2) CY1110044T1 (nl)
DE (1) DE602005020465D1 (nl)
DK (1) DK1786785T3 (nl)
EA (1) EA013678B1 (nl)
EC (1) ECSP077276A (nl)
ES (1) ES2341351T3 (nl)
FR (1) FR13C0015I2 (nl)
GE (1) GEP20104906B (nl)
GT (1) GT200500225A (nl)
HK (1) HK1105414A1 (nl)
HN (1) HN2005000476A (nl)
HR (1) HRP20100298T1 (nl)
IL (1) IL181384A (nl)
LU (1) LU92155I2 (nl)
MA (1) MA28828B1 (nl)
ME (1) ME01788B (nl)
MX (1) MX2007002312A (nl)
MY (1) MY145177A (nl)
NI (1) NI200700057A (nl)
NL (1) NL1029799C2 (nl)
NO (2) NO333231B1 (nl)
NZ (1) NZ552866A (nl)
PA (1) PA8643301A1 (nl)
PE (1) PE20060501A1 (nl)
PL (1) PL1786785T3 (nl)
PT (1) PT1786785E (nl)
RS (1) RS51362B (nl)
SI (1) SI1786785T1 (nl)
TN (1) TNSN07070A1 (nl)
TW (1) TWI358406B (nl)
UA (1) UA87153C2 (nl)
UY (1) UY29081A1 (nl)
WO (1) WO2006021884A2 (nl)
ZA (1) ZA200700127B (nl)

Families Citing this family (169)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GEP20084341B (en) * 2003-02-26 2008-03-25 Sugen Inc Aminoheteroaryl compounds as protein kinase inhibitors
MY150088A (en) 2003-05-19 2013-11-29 Irm Llc Immunosuppressant compounds and compositions
ATE463486T1 (de) * 2004-08-26 2010-04-15 Pfizer Enantiomerenreine aminoheteroaryl-verbindungen als proteinkinasehemmer
CN101018780B (zh) * 2004-08-26 2012-01-11 辉瑞大药厂 作为蛋白激酶抑制剂的吡唑取代的氨基杂芳基化合物
EP1959955B1 (en) * 2005-12-05 2010-11-17 Pfizer Products Inc. Method of treating abnormal cell growth
AU2006323025B2 (en) * 2005-12-05 2012-07-05 Pfizer Products Inc. Polymorphs of a c-Met/HGFR inhibitor
CN101479255B (zh) * 2006-03-22 2013-05-01 沃泰克斯药物股份有限公司 用于治疗增殖性病症的c-MET蛋白激酶抑制剂
US8168383B2 (en) 2006-04-14 2012-05-01 Cell Signaling Technology, Inc. Gene defects and mutant ALK kinase in human solid tumors
EP2447360A1 (en) 2006-04-14 2012-05-02 Cell Signaling Technology, Inc. Gene defects and mutant ALK kinase in human solid tumors
TW200817410A (en) * 2006-08-07 2008-04-16 Incyte Corp Triazolotriazines as kinase inhibitors
GB0621607D0 (en) * 2006-10-31 2006-12-06 Chroma Therapeutics Ltd Inhibitors of c-Met
JP5572388B2 (ja) 2006-11-22 2014-08-13 インサイト・コーポレイション キナーゼ阻害剤としてのイミダゾトリアジンおよびイミダゾピリミジン
US8455513B2 (en) 2007-01-10 2013-06-04 Aerie Pharmaceuticals, Inc. 6-aminoisoquinoline compounds
WO2008088881A1 (en) * 2007-01-19 2008-07-24 Xcovery, Inc. Kinase inhibitor compounds
JP5926487B2 (ja) 2007-04-13 2016-05-25 デイナ ファーバー キャンサー インスティチュート，インコーポレイテッド ＥｒｂＢ療法に耐性である癌を治療するための方法
WO2009036404A2 (en) 2007-09-13 2009-03-19 Codexis, Inc. Ketoreductase polypeptides for the reduction of acetophenones
EP2265270A1 (en) * 2008-02-04 2010-12-29 OSI Pharmaceuticals, Inc. 2-aminopyridine kinase inhibitors
AR070317A1 (es) * 2008-02-06 2010-03-31 Osi Pharm Inc Furo (3,2-c) piridina y tieno (3,2-c) piridinas
CN102015660A (zh) 2008-04-23 2011-04-13 协和发酵麒麟株式会社 2-氨基喹唑啉衍生物
MX2010012718A (es) 2008-05-21 2011-04-04 Incyte Corp Sales de 2-fluoro-n-metil-4-[7-(quinolin-6-il-metil)-imidazo[1,2-b ][1,2,4] triazin-2-il]benzamida y procesos relacionados con la preparacion de las mismas.
EP2143441A1 (en) * 2008-07-08 2010-01-13 Pierre Fabre Medicament Combination of a c-Met antagonist and an aminoheteroaryl compound for the treatment of cancer
US8450344B2 (en) 2008-07-25 2013-05-28 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Beta- and gamma-amino-isoquinoline amide compounds and substituted benzamide compounds
EP2356116A1 (en) 2008-11-20 2011-08-17 OSI Pharmaceuticals, Inc. Substituted pyrroloý2,3-b¨-pyridines and-pyrazines
JP2012512884A (ja) 2008-12-18 2012-06-07 ノバルティス アーゲー １−（４−｛１−［（ｅ）−４−シクロヘキシル−３−トリフルオロメチル−ベンジルオキシイミノ］−エチル｝−２−エチル−ベンジル）−アゼチジン−３−カルボン酸の新規の多形相
SI3354650T1 (sl) 2008-12-19 2022-06-30 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Spojine, uporabne kot zaviralci ATR kinaze
CA2929545C (en) 2009-05-01 2019-04-09 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Dual mechanism inhibitors for the treatment of disease
CA2764653C (en) * 2009-06-10 2018-01-02 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Tetracyclic compounds
DE102009056886A1 (de) 2009-12-03 2011-06-09 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft cMet-Inhibitoren zur Behandlung der Endometriose
ES2608329T3 (es) 2010-02-03 2017-04-07 Incyte Holdings Corporation Imidazo[1,2-b][1,2,4]triazinas como inhibidores de c-Met
WO2011138751A2 (en) 2010-05-04 2011-11-10 Pfizer Inc. Heterocyclic derivatives as alk inhibitors
EP2569286B1 (en) * 2010-05-12 2014-08-20 Vertex Pharmaceuticals Inc. Compounds useful as inhibitors of atr kinase
RU2012153675A (ru) 2010-05-12 2014-06-20 Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед Соединения, пригодные в качестве ингибиторов atr киназы
EP2569287B1 (en) 2010-05-12 2014-07-09 Vertex Pharmaceuticals Inc. Compounds useful as inhibitors of atr kinase
AR081039A1 (es) 2010-05-14 2012-05-30 Osi Pharmaceuticals Llc Inhibidores biciclicos fusionados de quinasa
WO2011143646A1 (en) 2010-05-14 2011-11-17 OSI Pharmaceuticals, LLC Fused bicyclic kinase inhibitors
WO2011145035A1 (en) 2010-05-17 2011-11-24 Indian Incozen Therapeutics Pvt. Ltd. Novel 3,5-disubstitued-3h-imidazo[4,5-b]pyridine and 3,5- disubstitued -3h-[1,2,3]triazolo[4,5-b] pyridine compounds as modulators of protein kinases
US20130315895A1 (en) 2010-07-01 2013-11-28 Takeda Pharmaceutical Company Limited COMBINATION OF A cMET INHIBITOR AND AN ANTIBODY TO HGF AND/OR cMET
EP2606886B1 (en) 2010-08-20 2020-01-08 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Composition comprising tetracyclic compound
WO2012042421A1 (en) 2010-09-29 2012-04-05 Pfizer Inc. Method of treating abnormal cell growth
CN102464667B (zh) * 2010-11-03 2014-06-04 中国科学院上海药物研究所 一类五元杂环并嘧啶类化合物及其制备方法和用途
RU2598849C2 (ru) * 2011-02-24 2016-09-27 Цзянсу Хэнсох Фармасьютикал Ко., Лтд. Содержащие фосфор соединения в качестве ингибиторов протеинкина3
WO2012119006A2 (en) * 2011-03-03 2012-09-07 Concert Pharmaceuticals, Inc. Derivatives of pyrazole-substituted amino-heteroaryl compounds
US9145390B2 (en) 2011-03-03 2015-09-29 Concert Pharmaceuticals, Inc. Derivatives of pyrazole-substituted amino-heteroaryl compounds
CN102718745A (zh) * 2011-03-30 2012-10-10 中国科学院上海药物研究所 新型胺基吡啶类化合物、其制备方法、包含此类化合物的药物组合物及其用途
US20140088114A1 (en) 2011-05-16 2014-03-27 OSI Pharmaceuticals ,LLC Fused bicyclic kinase inhibitors
CN102850328B (zh) * 2011-07-01 2014-12-24 苏州东南药业股份有限公司 吡啶类化合物、其制备方法、包含该化合物的药物组合物及其用途
RU2014102935A (ru) 2011-08-02 2015-09-10 Пфайзер Инк. Кризотиниб для применения в лечении рака
CN103842353A (zh) * 2011-09-21 2014-06-04 苏州韬略生物科技有限公司 作为激酶抑制剂的吡啶化合物
CN108685922A (zh) 2011-09-30 2018-10-23 沃泰克斯药物股份有限公司 用atr抑制剂治疗胰腺癌和非小细胞肺癌
IN2014KN00929A (nl) 2011-09-30 2015-08-21 Vertex Pharma
CN103204844A (zh) * 2012-01-17 2013-07-17 上海艾力斯医药科技有限公司 氨基杂芳基化合物及其制备方法与应用
JP2015505536A (ja) * 2012-01-20 2015-02-23 アクセラ インク． 疾患の処置のための置換された複素環化合物
EP2620140A1 (en) 2012-01-26 2013-07-31 ratiopharm GmbH Crizotinib containing compositions
ES2621220T3 (es) 2012-03-06 2017-07-03 Pfizer Inc. Derivados macrocíclicos para el tratamiento de enfermedades proliferativas
CA2865719C (en) 2012-03-30 2020-09-22 Rhizen Pharmaceuticals Sa Novel 3,5-disubstitued-3h-imidazo[4,5-b]pyridine and 3,5- disubstitued -3h-[1,2,3]triazolo[4,5-b] pyridine compounds as modulators of c-met protein kinases
PL2833973T3 (pl) 2012-04-05 2018-02-28 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Związki użyteczne jako inhibitory kinazy ATR i ich terapie skojarzone
CN103373986B (zh) * 2012-04-22 2016-10-05 东南大学 克里唑替尼前药及其制备方法与用途
CN103387535B (zh) * 2012-05-10 2016-06-01 广东东阳光药业有限公司 取代的炔基吡啶化合物及其使用方法和用途
CN103420987B (zh) * 2012-05-15 2015-11-25 上海医药工业研究院 吡啶衍生物及其制备方法
CN103420906B (zh) * 2012-05-21 2015-09-09 南京圣和药业股份有限公司 新型酪氨酸蛋白激酶抑制剂
WO2013181251A1 (en) 2012-05-29 2013-12-05 Ratiopharm Gmbh Crizotinib hydrochloride salt in crystalline
CN103509008A (zh) * 2012-06-22 2014-01-15 康瑟特制药公司 吡唑取代的氨基-杂芳基化合物的衍生物
WO2013192512A1 (en) * 2012-06-22 2013-12-27 Concert Pharmaceuticals, Inc. Derivatives of pyrazole-substituted amino-heteroaryl compounds
WO2014020467A2 (en) 2012-07-30 2014-02-06 Fresenius Kabi Oncology Ltd Process for the preparation of pyrazole substituted aminoheteroaryl compounds
US9446039B2 (en) 2012-08-27 2016-09-20 Cemm Forschungszentrum Für Molekulare Medizin Gmbh Aminoheteroaryl compounds as MTH1 inhibitors
EP2898329B1 (en) 2012-09-24 2017-05-17 Ventana Medical Systems, Inc. Method of identifying treatment responsive non-small cell lung cancer using anaplastic lymphoma kinase (alk) as a marker
CA3077553C (en) 2012-09-25 2022-08-02 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Ret inhibitor
DK2904406T3 (en) 2012-10-04 2018-06-18 Vertex Pharma METHOD OF DETERMINING THE ATR INHIBITION, INCREASED DNA DAMAGE
US20150299170A1 (en) * 2012-11-21 2015-10-22 Concert Pharmaceuticals, Inc. Fluoro-derivatives of pyrazole-substituted amino-heteroaryl compounds
CN104016979B (zh) * 2012-11-23 2017-05-03 广东东阳光药业有限公司 取代的环化合物及其使用方法和用途
WO2014089324A1 (en) * 2012-12-07 2014-06-12 Calitor Sciences, Llc Substituted cyclic compounds and methods of use
BR112015016395A2 (pt) 2013-01-18 2017-07-11 Hoffmann La Roche pirazóis 3-substituídos e uso como inibidores de dlk
WO2014115169A2 (en) * 2013-01-24 2014-07-31 Hetero Research Foundation Crizotinib solid dispersion
JP6200520B2 (ja) * 2013-02-02 2017-09-20 正大天晴薬業集団股▲ふん▼有限公司 置換２−アミノピリジンプロテインキナーゼ阻害剤
WO2014139391A1 (en) * 2013-03-11 2014-09-18 Teligene Ltd Substituted pyridine compounds as kinases inhibitors
EP3461484B9 (en) 2013-03-15 2021-06-09 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Dimesylate salts of 4-(3-amino-1-(isoquinolin-6-ylamino)-1-oxopropan-2-yl)benzyl, their combinations with prostaglandins and the use thereof in the treatment of ocular disorders
WO2014203177A1 (en) * 2013-06-18 2014-12-24 Shilpa Medicare Limited Amorphous (r) -3- [1- (2, 6-dichloro-3-fluorophenyl) methoxy] -5- [1- (piperidin-4- yl) -1h-pyrazol-4-yl] pyridin-2-amine
CN104650049B (zh) * 2013-08-28 2018-06-08 广东东阳光药业有限公司 取代的吡啶化合物及其使用方法和用途
WO2015034729A1 (en) * 2013-09-05 2015-03-12 Calitor Sciences, Llc Substituted pyridine compounds and methods of use
US20160214961A1 (en) * 2013-09-10 2016-07-28 Shilpa Medicare Limited Novel salts of crizotinib and their preparation
EP3046920B1 (en) * 2013-09-20 2021-08-04 BioMarin Pharmaceutical Inc. Glucosylceramide synthase inhibitors for the treatment of diseases
CN104513253A (zh) 2013-10-01 2015-04-15 南京波尔泰药业科技有限公司 用于治疗增殖性疾病的大环化合物
US20160280798A1 (en) 2013-11-06 2016-09-29 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health & Human Service Alk antibodies, conjugates, and chimeric antigen receptors, and their use
CN103755627B (zh) * 2014-01-09 2016-02-17 定陶县友帮化工有限公司 2-氨基-3-羟基-5-氯吡啶的合成方法
MX2016009896A (es) * 2014-01-29 2017-01-11 Neuropore Therapies Inc Heteroaril amidas como inhibidores de agregacion de proteina.
JP6247992B2 (ja) * 2014-04-17 2017-12-13 株式会社ダイセル ハロゲン化合物の製造方法
AU2015250574B2 (en) 2014-04-25 2020-07-16 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Preparation containing tetracyclic compound at high dose
CA2946268A1 (en) 2014-04-25 2015-10-29 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Crystal of tetracyclic compound
CN106536510B (zh) 2014-07-31 2019-04-26 正大天晴药业集团股份有限公司 吡啶取代的2-氨基吡啶类蛋白激酶抑制剂
TWI718102B (zh) 2014-08-08 2021-02-11 日商中外製藥股份有限公司 ４環性化合物的非晶質體
CN105348265A (zh) * 2014-08-19 2016-02-24 蔡苹 一种具有ALK和c-Met抑制活性的2,4-二取代杂环三氮唑类化合物的制备和应用
US10695426B2 (en) 2014-08-25 2020-06-30 Pfizer Inc. Combination of a PD-1 antagonist and an ALK inhibitor for treating cancer
CN105820113B (zh) * 2015-01-07 2018-04-20 爱技特科技（北京）有限公司 一种克唑替尼手性中间体的制备方法
US11077093B2 (en) 2015-01-16 2021-08-03 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Combination drug
CN104693184A (zh) * 2015-03-17 2015-06-10 安润医药科技（苏州）有限公司 克唑替尼的合成方法
EP3355926A4 (en) 2015-09-30 2019-08-21 Vertex Pharmaceuticals Inc. METHOD FOR THE TREATMENT OF CANCER WITH A COMBINATION OF DNA DAMAGING AGENTS AND ATR INHIBITORS
US20180282415A1 (en) 2015-09-30 2018-10-04 Merck Patent Gmbh Combination of a PD-1 Axis Binding Antagonist and an ALK Inhibitor for Treating ALK-Negative Cancer
US9643927B1 (en) 2015-11-17 2017-05-09 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Process for the preparation of kinase inhibitors and intermediates thereof
JP6832946B2 (ja) * 2015-11-17 2021-02-24 アエリエ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド キナーゼ阻害剤およびその中間体の調製方法
EP3458053B1 (en) 2016-05-20 2021-12-08 Biohaven Pharmaceutical Holding Company Ltd. Use of riluzole, riluzole prodrugs or riluzole analogs with immunotherapies to treat cancers
CN106083708A (zh) * 2016-06-30 2016-11-09 浙江大学 含2‑吡啶酮环侧链的2‑氨基吡啶衍生物及制备和应用
BR112019003945A2 (pt) 2016-08-31 2019-05-21 Aerie Pharmaceuticals, Inc. composições oftálmicas
RS62456B1 (sr) 2016-12-22 2021-11-30 Amgen Inc Derivati benzizotiazola, izotiazolo[3,4-b]piridina, hinazolina, ftalazina, pirido[2,3-d]piridazina i pirido[2,3-d]pirimidina kao kras g12c inhibitori za tretman raka pluća, pankreasa ili debelog creva
CN106831720B (zh) * 2017-01-21 2019-04-16 河北科技大学 双-4-(1h-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成方法及其应用
CN110506037A (zh) 2017-03-31 2019-11-26 爱瑞制药公司 芳基环丙基-氨基-异喹啉酰胺化合物
JOP20190272A1 (ar) 2017-05-22 2019-11-21 Amgen Inc مثبطات kras g12c وطرق لاستخدامها
US10180422B1 (en) 2017-08-22 2019-01-15 Scripps Health Methods of treating a neuroendocrine tumor
SG11202001499WA (en) 2017-09-08 2020-03-30 Amgen Inc Inhibitors of kras g12c and methods of using the same
JP6635999B2 (ja) * 2017-10-13 2020-01-29 株式会社ダイセル カリウム塩の製造方法、及びカリウム塩
CN108191833A (zh) * 2018-01-17 2018-06-22 浙江树人学院 克唑替尼衍生物及其制备方法和应用
CN110396087A (zh) * 2018-04-25 2019-11-01 珠海宇繁生物科技有限责任公司 Hpk1激酶抑制剂、制备方法及其应用
WO2019206049A1 (en) * 2018-04-25 2019-10-31 Zhuhai Yufan Biotechnologies Co., Ltd Hpk1 inhibitors, preparation method and application thereof
US11045484B2 (en) 2018-05-04 2021-06-29 Amgen Inc. KRAS G12C inhibitors and methods of using the same
EP3788038B1 (en) 2018-05-04 2023-10-11 Amgen Inc. Kras g12c inhibitors and methods of using the same
WO2019217691A1 (en) 2018-05-10 2019-11-14 Amgen Inc. Kras g12c inhibitors for the treatment of cancer
US11096939B2 (en) 2018-06-01 2021-08-24 Amgen Inc. KRAS G12C inhibitors and methods of using the same
EP3802537A1 (en) 2018-06-11 2021-04-14 Amgen Inc. Kras g12c inhibitors for treating cancer
MX2020012261A (es) 2018-06-12 2021-03-31 Amgen Inc Inhibidores de kras g12c que comprenden un anillo de piperazina y uso de estos en el tratamiento del cancer.
AR116113A1 (es) 2018-09-04 2021-03-31 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Método para fabricar un compuesto tetracíclico
AU2019337703B2 (en) 2018-09-14 2023-02-02 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Aryl cyclopropyl-amino-isoquinolinyl amide compounds
JP2020090482A (ja) 2018-11-16 2020-06-11 アムジエン・インコーポレーテツド Ｋｒａｓ ｇ１２ｃ阻害剤化合物の重要な中間体の改良合成法
CA3117222A1 (en) 2018-11-19 2020-05-28 Amgen Inc. Kras g12c inhibitors and methods of using the same
JP7377679B2 (ja) 2018-11-19 2023-11-10 アムジエン・インコーポレーテツド がん治療のためのｋｒａｓｇ１２ｃ阻害剤及び１種以上の薬学的に活性な追加の薬剤を含む併用療法
ES2953821T3 (es) 2018-12-20 2023-11-16 Amgen Inc Inhibidores de KIF18A
MA54546A (fr) 2018-12-20 2022-03-30 Amgen Inc Amides d'hétéroaryle utiles en tant qu'inhibiteurs de kif18a
PE20211475A1 (es) 2018-12-20 2021-08-05 Amgen Inc Inhibidores de kif18a
MA54547A (fr) 2018-12-20 2022-03-30 Amgen Inc Amides d'hétéroaryle utiles en tant qu'inhibiteurs de kif18a
BR112021011894A2 (pt) 2018-12-21 2021-09-08 Daiichi Sankyo Company, Limited Composição farmacêutica
JP2022522777A (ja) 2019-03-01 2022-04-20 レボリューション メディシンズ インコーポレイテッド 二環式ヘテロアリール化合物及びその使用
US20230096028A1 (en) 2019-03-01 2023-03-30 Revolution Medicines, Inc. Bicyclic heterocyclyl compounds and uses thereof
EP3738593A1 (en) 2019-05-14 2020-11-18 Amgen, Inc Dosing of kras inhibitor for treatment of cancers
EP3972973A1 (en) 2019-05-21 2022-03-30 Amgen Inc. Solid state forms
AU2020324963A1 (en) 2019-08-02 2022-02-24 Amgen Inc. KIF18A inhibitors
US20220372018A1 (en) 2019-08-02 2022-11-24 Amgen Inc. Kif18a inhibitors
CN114401953A (zh) 2019-08-02 2022-04-26 美国安进公司 Kif18a抑制剂
WO2021026098A1 (en) 2019-08-02 2021-02-11 Amgen Inc. Kif18a inhibitors
CN112552293A (zh) * 2019-09-25 2021-03-26 珠海宇繁生物科技有限责任公司 一种protac小分子化合物及其应用
WO2021081212A1 (en) 2019-10-24 2021-04-29 Amgen Inc. Pyridopyrimidine derivatives useful as kras g12c and kras g12d inhibitors in the treatment of cancer
IL292438A (en) 2019-10-28 2022-06-01 Merck Sharp & Dohme Small molecules that inhibit the g12c mutant of kras
US20230023023A1 (en) 2019-10-31 2023-01-26 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. 4-aminobut-2-enamide derivatives and salts thereof
EP4054719A1 (en) 2019-11-04 2022-09-14 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
CA3159559A1 (en) 2019-11-04 2021-05-14 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
TW202132314A (zh) 2019-11-04 2021-09-01 美商銳新醫藥公司 Ｒａｓ抑制劑
PE20230249A1 (es) 2019-11-08 2023-02-07 Revolution Medicines Inc Compuestos de heteroarilo biciclicos y usos de estos
AR120456A1 (es) 2019-11-14 2022-02-16 Amgen Inc Síntesis mejorada del compuesto inhibidor de g12c de kras
WO2021097212A1 (en) 2019-11-14 2021-05-20 Amgen Inc. Improved synthesis of kras g12c inhibitor compound
JP2023505100A (ja) 2019-11-27 2023-02-08 レボリューション メディシンズ インコーポレイテッド 共有ｒａｓ阻害剤及びその使用
WO2021106231A1 (en) 2019-11-29 2021-06-03 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. A compound having inhibitory activity against kras g12d mutation
BR112022010086A2 (pt) 2020-01-07 2022-09-06 Revolution Medicines Inc Dosagem do inibidor de shp2 e métodos de tratamento de câncer
WO2021196655A1 (zh) * 2020-04-03 2021-10-07 中国药科大学 含苯并咪唑结构的化合物及其制备方法与用途
US20230174518A1 (en) 2020-04-24 2023-06-08 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. Kras g12d protein inhibitors
US20230181536A1 (en) 2020-04-24 2023-06-15 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. Anticancer combination therapy with n-(1-acryloyl-azetidin-3-yl)-2-((1h-indazol-3-yl)amino)methyl)-1h-imidazole-5-carboxamide inhibitor of kras-g12c
CN115916194A (zh) 2020-06-18 2023-04-04 锐新医药公司 用于延迟、预防和治疗针对ras抑制剂的获得性抗性的方法
AU2021308045A1 (en) 2020-07-15 2023-02-23 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. Pyrimidine compound-containing combination to be used in tumor treatment
AU2021344830A1 (en) 2020-09-03 2023-04-06 Revolution Medicines, Inc. Use of SOS1 inhibitors to treat malignancies with SHP2 mutations
KR20230067635A (ko) 2020-09-15 2023-05-16 레볼루션 메디슨즈, 인크. 암의 치료에서 ras 억제제로서 인돌 유도체
CN114437058A (zh) * 2020-10-30 2022-05-06 珠海宇繁生物科技有限责任公司 氘代hpk1激酶抑制剂及其制备方法和应用
CN117396472A (zh) 2020-12-22 2024-01-12 上海齐鲁锐格医药研发有限公司 Sos1抑制剂及其用途
CR20230570A (es) 2021-05-05 2024-01-22 Revolution Medicines Inc Inhibidores de ras
WO2022235870A1 (en) 2021-05-05 2022-11-10 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors for the treatment of cancer
CN117500811A (zh) 2021-05-05 2024-02-02 锐新医药公司 共价ras抑制剂及其用途
EP4347041A1 (en) 2021-05-28 2024-04-10 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. Small molecule inhibitors of kras mutated proteins
AR127308A1 (es) 2021-10-08 2024-01-10 Revolution Medicines Inc Inhibidores ras
TW202340214A (zh) 2021-12-17 2023-10-16 美商健臻公司 做為shp2抑制劑之吡唑并吡𠯤化合物
EP4227307A1 (en) 2022-02-11 2023-08-16 Genzyme Corporation Pyrazolopyrazine compounds as shp2 inhibitors
WO2023172940A1 (en) 2022-03-08 2023-09-14 Revolution Medicines, Inc. Methods for treating immune refractory lung cancer
CN114767676B (zh) * 2022-04-22 2024-04-19 珠海宇繁生物科技有限责任公司 Hpk1激酶抑制剂在预防和/或治疗人的病原体感染中的应用
WO2023240263A1 (en) 2022-06-10 2023-12-14 Revolution Medicines, Inc. Macrocyclic ras inhibitors
WO2024081916A1 (en) 2022-10-14 2024-04-18 Black Diamond Therapeutics, Inc. Methods of treating cancers using isoquinoline or 6-aza-quinoline derivatives

Family Cites Families (80)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB129611A (en) 1919-04-15 1919-07-17 John Norman Riddell Hannam Improvements in Stropping or Sharpening Devices for Safety Razor Blades.
GB8827305D0 (en) 1988-11-23 1988-12-29 British Bio Technology Compounds
KR0166088B1 (ko) 1990-01-23 1999-01-15 . 수용해도가 증가된 시클로덱스트린 유도체 및 이의 용도
US5376645A (en) 1990-01-23 1994-12-27 University Of Kansas Derivatives of cyclodextrins exhibiting enhanced aqueous solubility and the use thereof
US5587458A (en) 1991-10-07 1996-12-24 Aronex Pharmaceuticals, Inc. Anti-erbB-2 antibodies, combinations thereof, and therapeutic and diagnostic uses thereof
AU675929B2 (en) 1992-02-06 1997-02-27 Curis, Inc. Biosynthetic binding protein for cancer marker
US6177401B1 (en) 1992-11-13 2001-01-23 Max-Planck-Gesellschaft Zur Forderung Der Wissenschaften Use of organic compounds for the inhibition of Flk-1 mediated vasculogenesis and angiogenesis
US5455258A (en) 1993-01-06 1995-10-03 Ciba-Geigy Corporation Arylsulfonamido-substituted hydroxamic acids
IL112248A0 (en) 1994-01-25 1995-03-30 Warner Lambert Co Tricyclic heteroaromatic compounds and pharmaceutical compositions containing them
US5863949A (en) 1995-03-08 1999-01-26 Pfizer Inc Arylsulfonylamino hydroxamic acid derivatives
CA2218503C (en) 1995-04-20 2001-07-24 Pfizer Inc. Arylsulfonyl hydroxamic acid derivatives
US5747498A (en) 1996-05-28 1998-05-05 Pfizer Inc. Alkynyl and azido-substituted 4-anilinoquinazolines
US5880141A (en) 1995-06-07 1999-03-09 Sugen, Inc. Benzylidene-Z-indoline compounds for the treatment of disease
GB9518953D0 (en) 1995-09-15 1995-11-15 Pfizer Ltd Pharmaceutical formulations
GB9520822D0 (en) 1995-10-11 1995-12-13 Wellcome Found Therapeutically active compounds
GB9624482D0 (en) 1995-12-18 1997-01-15 Zeneca Phaema S A Chemical compounds
ATE225343T1 (de) 1995-12-20 2002-10-15 Hoffmann La Roche Matrix-metalloprotease inhibitoren
JP4464466B2 (ja) 1996-03-05 2010-05-19 アストラゼネカ・ユーケイ・リミテッド ４―アニリノキナゾリン誘導体
JPH11512750A (ja) 1996-06-27 1999-11-02 ファイザー インク． ２―（２―オキソ―エチリデン）―イミダゾリジン―４―オンの誘導体およびファルネシル蛋白質トランスフェラーゼ阻害物質としてのそれらの使用法
EP0818442A3 (en) 1996-07-12 1998-12-30 Pfizer Inc. Cyclic sulphone derivatives as inhibitors of metalloproteinases and of the production of tumour necrosis factor
ES2186908T3 (es) 1996-07-13 2003-05-16 Glaxo Group Ltd Compuestos heterociciclos condensados como inhibidores de pproteina-tirosina-quinasas.
TR199900048T2 (xx) 1996-07-13 1999-04-21 Glaxo Group Limited Protein tirozin kinaz inhibit�rleri olarak bisiklik heteroaromatik bile�ikler
HRP970371A2 (en) 1996-07-13 1998-08-31 Kathryn Jane Smith Heterocyclic compounds
DE19628569A1 (de) 1996-07-16 1998-01-22 Bayer Ag Substituierte N-(5-Isothiazolyl)-thioamide
HUP9903014A3 (en) 1996-07-18 2000-08-28 Pfizer Phosphinate derivatives having matrix metalloprotease inhibitor effect and medicaments containing the same
US6153609A (en) 1996-08-23 2000-11-28 Pfizer Inc Arylsulfonylamino hydroxamic acid derivatives
ID18494A (id) 1996-10-02 1998-04-16 Novartis Ag Turunan pirazola leburan dan proses pembuatannya
WO2000035298A1 (en) 1996-11-27 2000-06-22 Wm. Wrigley Jr. Company Chewing gum containing medicament active agents
CA2277100C (en) 1997-01-06 2005-11-22 Pfizer Inc. Cyclic sulfone derivatives
TR199901849T2 (xx) 1997-02-03 2000-02-21 Pfizer Products Inc. Arils�lfonilamino hidroksamik asit t�revleri.
CA2279863A1 (en) 1997-02-07 1998-08-13 Pfizer Inc. N-hydroxy-beta-sulfonyl-propionamide derivatives and their use as inhibitors of matrix metalloproteinases
NZ336836A (en) 1997-02-11 2001-02-23 Pfizer Arylsulfonyl hydroxamic acid derivatives suitable for a broad range of medicinal treatments
CA2289102A1 (en) 1997-05-07 1998-11-12 Sugen, Inc. 2-indolinone derivatives as modulators of protein kinase activity
JP2002501532A (ja) 1997-05-30 2002-01-15 メルク エンド カンパニー インコーポレーテッド 新規血管形成阻害薬
GB9711643D0 (en) 1997-06-05 1997-07-30 Janssen Pharmaceutica Nv Glass thermoplastic systems
ATE263147T1 (de) * 1997-08-08 2004-04-15 Pfizer Prod Inc Derivate von aryloxyarylsulfonylamino hydroxyaminsäuren
ATE368665T1 (de) 1997-08-22 2007-08-15 Astrazeneca Ab Oxindolylchinazolinderivate als angiogenesehemmer
EP1017682A4 (en) 1997-09-26 2000-11-08 Merck & Co Inc NEW ANGIOGENESIS INHIBITORS
CN1280580A (zh) 1997-11-11 2001-01-17 辉瑞产品公司 用作抗癌药的噻吩并嘧啶和噻吩并吡啶衍生物
GB9725782D0 (en) 1997-12-05 1998-02-04 Pfizer Ltd Therapeutic agents
JPH11236333A (ja) 1997-12-30 1999-08-31 Pfizer Prod Inc 抗ガン剤として有用なイミダゾリン−４−オン誘導体
GB9800575D0 (en) 1998-01-12 1998-03-11 Glaxo Group Ltd Heterocyclic compounds
GB9800569D0 (en) 1998-01-12 1998-03-11 Glaxo Group Ltd Heterocyclic compounds
GB9801690D0 (en) 1998-01-27 1998-03-25 Pfizer Ltd Therapeutic agents
DK0952148T3 (da) 1998-04-10 2004-09-20 Pfizer Prod Inc Cyclobutylaryloxyarylsulfonylaminohydroxamsyrederivater
PA8469401A1 (es) 1998-04-10 2000-05-24 Pfizer Prod Inc Derivados biciclicos del acido hidroxamico
PA8469501A1 (es) 1998-04-10 2000-09-29 Pfizer Prod Inc Hidroxamidas del acido (4-arilsulfonilamino)-tetrahidropiran-4-carboxilico
HUP0103617A2 (hu) 1998-05-29 2002-02-28 Sugen, Inc. Protein kinázt gátló, pirrolilcsoporttal helyettesített 2-indolszármazékok, e vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények, valamint e vegyületek alkalmazása
UA60365C2 (uk) 1998-06-04 2003-10-15 Пфайзер Продактс Інк. Похідні ізотіазолу, спосіб їх одержання, фармацевтична композиція та спосіб лікування гіперпроліферативного захворювання у ссавця
JP3495706B2 (ja) 1998-08-27 2004-02-09 ファイザー・プロダクツ・インク 抗癌薬として有用なアルキニル置換キノリン−２−オン誘導体
WO2000012498A1 (en) 1998-08-27 2000-03-09 Pfizer Products Inc. Quinolin-2-one derivatives useful as anticancer agents
DK1004578T3 (da) 1998-11-05 2004-06-28 Pfizer Prod Inc 5-oxo-pyrrolidin-2-carboxylsyrehydroxamidderivater
EP1006113A1 (en) 1998-12-02 2000-06-07 Pfizer Products Inc. Derivatives of 2-(2-oxo-ethylidene)-imidazolidin-4-one and their use to inhibit abnormal cell growth
EP1140182A2 (en) 1998-12-23 2001-10-10 G.D. Searle & Co. Use of a matrix metalloproteinase inhibitor together with an antineoplastic agent, optionally also together with radiation, in the treatment of neoplasia
US6649645B1 (en) 1998-12-23 2003-11-18 Pharmacia Corporation Combination therapy of radiation and a COX-2 inhibitor for treatment of neoplasia
US6682736B1 (en) 1998-12-23 2004-01-27 Abgenix, Inc. Human monoclonal antibodies to CTLA-4
UA71945C2 (en) 1999-01-27 2005-01-17 Pfizer Prod Inc Substituted bicyclic derivatives being used as anticancer agents
JP3270834B2 (ja) 1999-01-27 2002-04-02 ファイザー・プロダクツ・インク 抗がん剤として有用なヘテロ芳香族二環式誘導体
EA200100766A1 (ru) 1999-02-11 2002-02-28 Пфайзер Продактс Инк. Хинолин-2-он замещенные гетероарильные производные, используемые в качестве противоопухолевых агентов
US6586447B1 (en) 1999-04-01 2003-07-01 Pfizer Inc 3,3-disubstituted-oxindole derivatives useful as anticancer agents
US6511993B1 (en) * 1999-06-03 2003-01-28 Kevin Neil Dack Metalloprotease inhibitors
EP1081137A1 (en) 1999-08-12 2001-03-07 Pfizer Products Inc. Selective inhibitors of aggrecanase in osteoarthritis treatment
PT1106612E (pt) 1999-11-30 2004-06-30 Pfizer Prod Inc Derivados de quinolina uteis para inibir a farnesil-proteina-transferase
UA75055C2 (uk) * 1999-11-30 2006-03-15 Пфайзер Продактс Інк. Похідні бензоімідазолу, що використовуються як антипроліферативний засіб, фармацевтична композиція на їх основі
HN2000000266A (es) 2000-01-21 2001-05-21 Pfizer Prod Inc Compuesto anticanceroso y metodo de separacion de enantiomeros util para sintetizar dicho compuesto.
CA2399358C (en) * 2000-02-15 2006-03-21 Sugen, Inc. Pyrrole substituted 2-indolinone protein kinase inhibitors
US6844357B2 (en) 2000-05-01 2005-01-18 Pfizer Inc. Substituted quinolin-2-one derivatives useful as antiproliferative agents
SE0102439D0 (sv) 2001-07-05 2001-07-05 Astrazeneca Ab New compounds
SE0102438D0 (sv) 2001-07-05 2001-07-05 Astrazeneca Ab New compounds
US20060063782A1 (en) 2002-07-03 2006-03-23 Murray Christopher W 3-Hetero arylmethoxy ! pyridines and their analogues as p38 map kinase inhibitors
SE0203754D0 (sv) 2002-12-17 2002-12-17 Astrazeneca Ab New compounds
SI2476667T1 (sl) * 2003-02-26 2014-10-30 Sugen, Inc. Aminoheteroarilne spojine kot inhibitorji protein-kinaze
GEP20084341B (en) * 2003-02-26 2008-03-25 Sugen Inc Aminoheteroaryl compounds as protein kinase inhibitors
WO2005002673A1 (en) 2003-07-03 2005-01-13 Astex Therapeutics Limited Raf kinase inhibitors
MX2007002247A (es) * 2004-08-26 2007-04-20 Pfizer Biotransformacion enantioselectiva para la preparacion de intermedios de inhibidores de la proteina tirosina quinasa.
ATE463486T1 (de) * 2004-08-26 2010-04-15 Pfizer Enantiomerenreine aminoheteroaryl-verbindungen als proteinkinasehemmer
CN101018780B (zh) * 2004-08-26 2012-01-11 辉瑞大药厂 作为蛋白激酶抑制剂的吡唑取代的氨基杂芳基化合物
JP2008510792A (ja) * 2004-08-26 2008-04-10 ファイザー・インク タンパク質チロシンキナーゼ阻害剤としてのアミノヘテロアリール化合物
AU2006323025B2 (en) * 2005-12-05 2012-07-05 Pfizer Products Inc. Polymorphs of a c-Met/HGFR inhibitor
EP1959955B1 (en) * 2005-12-05 2010-11-17 Pfizer Products Inc. Method of treating abnormal cell growth

Also Published As

Publication number Publication date
MY145177A (en) 2011-12-30
CY2013014I2 (el) 2015-08-05
GEP20104906B (en) 2010-02-25
US20120263706A1 (en) 2012-10-18
TNSN07070A1 (fr) 2008-06-02
BR122020017756B1 (pt) 2022-02-15
LU92155I9 (nl) 2019-01-04
ES2341351T3 (es) 2010-06-18
ECSP077276A (es) 2007-03-29
IL181384A (en) 2012-08-30
ATE463486T1 (de) 2010-04-15
NO20071290L (no) 2007-05-29
RS51362B (en) 2011-02-28
PT1786785E (pt) 2010-05-21
CY2013014I1 (el) 2015-08-05
CN101023064B (zh) 2011-02-16
AP2007003888A0 (en) 2007-02-28
GT200500225A (es) 2006-03-21
TWI358406B (en) 2012-02-21
JP2008510790A (ja) 2008-04-10
TW200621715A (en) 2006-07-01
AU2005276135B2 (en) 2011-04-28
US8785632B2 (en) 2014-07-22
US7858643B2 (en) 2010-12-28
ES2341351T9 (es) 2013-07-23
WO2006021884A2 (en) 2006-03-02
CR8860A (es) 2007-07-24
UY29081A1 (es) 2006-03-31
JP4242911B2 (ja) 2009-03-25
PA8643301A1 (es) 2006-07-03
ME01788B (me) 2011-02-28
WO2006021884A3 (en) 2006-06-22
CY1110044T1 (el) 2015-01-14
IL181384A0 (en) 2007-07-04
AR050788A1 (es) 2006-11-22
MA28828B1 (fr) 2007-08-01
FR13C0015I1 (nl) 2013-04-12
FR13C0015I2 (fr) 2013-08-16
NO333231B1 (no) 2013-04-15
KR100859891B1 (ko) 2008-09-23
NZ552866A (en) 2010-06-25
CA2578066C (en) 2011-10-11
AU2005276135A1 (en) 2006-03-02
NO2013008I1 (no) 2013-04-29
EP1786785A2 (en) 2007-05-23
PL1786785T3 (pl) 2010-08-31
NO2013008I2 (no) 2013-10-21
HRP20100298T1 (hr) 2010-06-30
CN101023064A (zh) 2007-08-22
BRPI0513915A (pt) 2008-05-20
HN2005000476A (es) 2009-12-07
MX2007002312A (es) 2007-04-16
CA2578066A1 (en) 2006-03-02
PE20060501A1 (es) 2006-06-28
UA87153C2 (ru) 2009-06-25
HK1105414A1 (en) 2008-02-15
NI200700057A (es) 2008-03-07
SI1786785T1 (sl) 2010-07-30
LU92155I2 (fr) 2013-04-22
CA2578066E (en) 2006-03-02
KR20070038562A (ko) 2007-04-10
US20100324061A1 (en) 2010-12-23
EA200700352A1 (ru) 2007-08-31
EP1786785B1 (en) 2010-04-07
US20140288086A1 (en) 2014-09-25
NL1029799A1 (nl) 2006-02-28
US20060046991A1 (en) 2006-03-02
AP2373A (en) 2012-03-07
EP1786785B9 (en) 2013-05-22
DK1786785T3 (da) 2010-05-31
ZA200700127B (en) 2008-08-27
DE602005020465D1 (de) 2010-05-20
EA013678B1 (ru) 2010-06-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NL1029799C2 (nl) Enantiomeer zuivere aminoheteroarylverbindingen als proteïnekinaseremmers.
EP1784396B1 (en) Pyrazole-substituted aminoheteroaryl compounds as protein kinase inhibitors
US20060178374A1 (en) Aminoheteroaryl compounds as protein kinase inhibitors
WO2005121125A1 (en) Ether-linked heteroaryl compounds

Legal Events

Date Code Title Description
AD1A A request for search or an international type search has been filed
RD2N Patents in respect of which a decision has been taken or a report has been made (novelty report)

Effective date: 20060616

PD2B A search report has been drawn up