EA013678B1 - Энантиомерно чистые аминогетероарильные соединения в качестве ингибиторов протеинкиназы - Google Patents

Энантиомерно чистые аминогетероарильные соединения в качестве ингибиторов протеинкиназы Download PDF

Info

Publication number
EA013678B1
EA013678B1 EA200700352A EA200700352A EA013678B1 EA 013678 B1 EA013678 B1 EA 013678B1 EA 200700352 A EA200700352 A EA 200700352A EA 200700352 A EA200700352 A EA 200700352A EA 013678 B1 EA013678 B1 EA 013678B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
mmol
dichloro
ethoxy
fluorophenyl
added
Prior art date
Application number
EA200700352A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200700352A1 (ru
Inventor
Цзинжун Джин Цуй
Ли Эндрю Фанк
Лэй Цзя
Пэй-Пэй Кунг
Джерри Цзялунь Мэн
Митчелл Дэвид Намбу
Мейсон Алан Пэйриш
Хун Шэнь
Мишелль Бич Трэн-Дюбе
Original Assignee
Пфайзер Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=35967909&utm_source=***_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA013678(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Пфайзер Инк. filed Critical Пфайзер Инк.
Publication of EA200700352A1 publication Critical patent/EA200700352A1/ru
Publication of EA013678B1 publication Critical patent/EA013678B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/14—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D241/18—Oxygen or sulfur atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4418—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof having a carbocyclic group directly attached to the heterocyclic ring, e.g. cyproheptadine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A61K31/497—Non-condensed pyrazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/73—Unsubstituted amino or imino radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/76—Nitrogen atoms to which a second hetero atom is attached
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/14—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D241/20—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings

Abstract

Предусматриваются энантиомерно чистые соединения формулы 1а также способы их синтеза и применение. Предпочтительные соединения представляют собой сильнодействующие ингибиторы с-Met протеинкиназы и являются пригодными для лечения расстройств аномального роста клеток, таких как рак.

Description

Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится, в целом, к новым химическим соединениям и способам. Более конкретно настоящее изобретение предусматривает энантиомерно чистые аминогетероарильные соединения, в частности аминопиридины и аминопиразины, обладающие активностью протеинтирозинкиназы, и способы синтеза и применение таких соединений. Предпочтительные соединения представляют собой ингибиторы с-Ме!, пригодные для лечения аномального роста клеток, такого как рак.
Уровень техники
Тирозинкиназный рецептор (КТК) фактора роста гепатоцитов (НОР) (с-Ме! или НОРК), как показано, при многих раковых заболеваниях человека вовлекается в онкогенез, развитие опухоли с повышенной клеточной подвижностью и инвазией, а также в метастазирование (см., например, Ма, Р.С, Маийк, О., Сйпк!епкеп, 1. & 8а1д1а, К. (2003Ь). Сапсег Ме!ак!ак1к Кеч, 22, 309-25; Маийк, О., 8йпкйаибе, Α., Κίфша, Т., Ма, Р.С., Моткоп, Р.Т. & 8а1д1а, К. (2002Ь). Су!окше Сго\\111 Рас!ог Кеч, 13, 41-59). с-МЕТ (НОРК) может быть активирован посредством сверхэкспрессии или мутаций при различных раковых заболеваниях человека, включая мелкоклеточный рак легких (8СЬС) (Ма, Р.С, Ктрта, Т., Маийк, О., Рох, Е.А., 8а!!1ет, М., Спйш, Ι.Ό., 1ойпкоп, В.Е. & 8а1д1а, К. (2003а). Сапсег Кек, 63, 6272-6281).
с-МЕТ представляет собой тирозинкиназу рецептора, которая кодируется протоонкогеном Ме! и передает биологические воздействия фактора роста гепатоцитов (НОР), который упоминается также как рассеивающий фактор (8Р). Балд е! а1., Стй. Кеч. Опсо1. Нета!о1. 29: 209-248 (1999). с-МЕТ и НОР экспрессируются в многочисленных тканях, хотя их экспрессия обычно ограничивается в основном клетками эпителиального и мезенхимального происхождения соответственно. с-МЕТ и НОР необходимы для нормального развития млекопитающих и, как показано, являются важными при клеточной миграции, клеточной пролиферации и выживании, морфогенной дифференциации и организации трехмерных трубчатых структур (например, почечных трубчатых клеток, при формировании желез и т.п.). В дополнение к их воздействиям на эпителиальные клетки, НОР/8Р, как сообщается, представляют собой ангиогенный фактор, и сигнализация с помощью с-МЕТ в эндотелиальных клетках может индуцировать многие из клеточных реакций, необходимых для ангиогенеза (пролиферация, подвижность, инвазия).
с-МЕТ рецептор, как показано, экспрессируется при ряде раковых заболеваний человека. с-Ме! и его лиганд, НОР, также, как показано, совместно экспрессируются на повышенных уровнях при многих раковых заболевания человека (в частности, при саркомах). Однако поскольку рецептор и лиганд обычно экспрессируются различными типами клеток, сигнализация с помощью с-МЕТ чаще всего регулируется посредством взаимодействий опухоль-строма (опухоль-хозяин). Кроме того, амплификация, мутация и перегруппировка гена с-МЕТ наблюдаются в подмножестве раковых заболеваний человека. Семьи с мутациями по линии одного из родителей, которые активируют с-МЕТ киназу, склонны к множеству почечных опухолей, а также к опухолям в других тканях. Многочисленные исследования коррелируют экспрессию с-МЕТ и/или НОР/8Р с состоянием развития заболевания различных типов рака (включая рак легких, толстой кишки, груди, простаты, печени, поджелудочной железы, мозга, почек, яичников, желудка, кожи и костей). Кроме того, сверхэкспрессия с-МЕТ или НОР, как показано, коррелирует с плохим прогнозом и исходом заболевания при ряде основных раковых заболеваний человека, включая рак легких, печени, желудка и груди. с-МЕТ также непосредственно участвует в раковых заболеваниях без успешного режима лечения, таких как рак поджелудочной железы, глиома и гепатоцеллюлярная карцинома.
Примеры ингибиторов с-МЕТ (НОРК), их синтеза и применения можно найти в заявке на патент США, серийный № 10/786610, озаглавленной Атшойе!етоату1 Сотроипбк ак Рто!еш Кшаке 1пй1Ьйотк, зарегистрированной 26 февраля 2004 г., и в соответствующей заявке на международный патент РСТ/И8 2004/005495 с таким же заглавием, зарегистрированной 26 февраля 2004 г., описания которых включены здесь в качестве ссылок во всей их полноте.
Было бы желательным получение новых ингибиторов с-МЕТ (НОРК) и способов применения таких ингибиторов для лечения аномального роста клеток, такого как рак.
Сущность изобретения
В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение предусматривает энантиомерно чистое соединение формулы 1
- 1 013678 где Υ представляет собой N или СВ12;
В1 выбран из водорода, галогена, С6-12арила, 5-12-членного гетероарила, С3_12циклоалкила, 3-12членной гетероалициклической группы, -О(СВ6В7)ПВ4, -С(О)В4, -С(О)ОВ4, -СН -НО2, -8(О)тВ4, -8Ο2ΝΒ4Β5, -С(О)НВ4В5, -НВ4С(О)В5, -С(=НВ6)НВ4В5, С1-8алкила, С2-8алкенила и С2-8алкинила; и каждый из атомов водорода в В1 необязательно замещен одной или несколькими группами В3;
В2 представляет собой водород, галоген, С1-12алкил, С2-12алкенил, С2-12алкинил, С3-12циклоалкил, С612арил, 3-12-членную гетероалициклическую группу, 5-12-членный гетероарил, -8(О)тВ4, -8О2НВ4В5, -8(О)2ОВ4, -НО2. -НВ4В'. -(СВ6В7)ПОВ4, -СН, -С(О)В4, -ОС(О)В4, -О(СВ6В7)ПВ4, -Н1В4С(О)В5, -(СВ6В7)ПС(О)ОВ4, -(СВ6В7)пНСВ4В5, -С( НВОНВ^В', -НВ4С(О)НВ5В6, -НВ 45(О). В5 или -С(О)НВ4В5, и каждый из атомов водорода в В2 необязательно замещен В8;
каждый из В3 независимо представляет собой галоген, С1-12алкил, С2-12алкенил, С2-12алкинил, С3-12 циклоалкил, С6-12арил, 3-12-членную гетероалициклическую группу, 5-12-членный гетероарил,
-8(О)тВ4, -80033 333 -8(О)2ОВ4, -НО·, -НВ4В5, -(СВ6В7)ПОВ4, -СН, -С(О)В4, -ОС(О)В4, -О(СВ6В7)ПВ4, -НВ4С(О)В5, -(СВ6В7)пС(О)ОВ4, -(СВ6В7)ПОВ4, -(СВ6В7)пС(О)НВ4В5, -(СВ6В7)пНСВ4В5, -С( НЗВОНЗВЗВЗ -НВ4С(О)НВ5В6, -НВ48(О)рВ5 или -С(О)НВ4В5, каждый из атомов водорода в В3 необязательно замещен В8, и группы В3 на соседних атомах могут объединяться с образованием С6-12арила, 5-12-членного гетероарила, С3-12циклоалкила или 3-12-членной гетероалициклической группы;
каждый из В4, В5, В6 и В7 независимо представляет собой водород, галоген, С1-12алкил, С2-12алкенил, С2-12алкинил, С3-12циклоалкил, С6-12арил, 3-12-членную гетероалициклическую группу, 5-12-членный гетероарил; или любые два из В4, В5, В6 и В7, связанные с одним и тем же атомом азота, могут вместе с азотом, с которым они связаны, объединяться с образованием 3-12-членной гетероалициклической группы или 5-12-членной гетероарильной группы, необязательно содержащей 1-3 дополнительных гетероатома, выбранных из Ν, О и 8; или любые два из В4, В5, В6 и В7, связанные с одним и тем же атомом углерода, могут объединяться с образованием С3-12циклоалкила, С6-12арила, 3-12-членной гетероалициклической группы или 5-12-членной гетероарильной группы; и каждый из атомов водорода в В4, В5, В6 и В7 необязательно замещен В8;
каждый из В8 независимо представляет собой галоген, С1-12алкил, С2-12алкенил, С2-12алкинил, С3-12 циклоалкил, С6-12арил, 3-12-членную гетероалициклическую группу, 5-12-членный гетероарил, -ΝΗ2, -СН, -ОН, -О-С1-12алкил, -О-(СН2)пС3-12циклоалкил, -О-(СН2)пС6-12арил, -О-(СН2)п(3-12-членную гетероалициклическую группу) или -О-(СН2)п(5-12-членный гетероарил); и каждый из атомов водорода в В8 необязательно замещен В11;
каждый из В9 и В10 независимо представляет собой водород, галоген, С1-12алкил, С3-12циклоалкил, С6-12арил, 3-12-членную гетероалициклическую группу, 5-12-членный гетероарил, -8(О)тВ4, -8О2НВ4В5, -8(О)2ОВ4, -НО2, -НВ4В5, -(СВ6В7)пОВ4, -СН, -С(О)В4, -ОС(О)В4, -НВ4С(О)В5, -(СВ6В7)пС(О)ОВ4, -(СВ6В7)пНСВ4В5, -НВ4С(О)НВ5В6, -Н1В48(О)пВ5 или -С(О)Н1В4В5; В9 или В10 могут объединяться с кольцевым атомом А или заместителем А с образованием С3-12циклоалкильного, 3-12-членного гетероалициклического, С6-12арильного или 5-12-членного гетероарильного кольца, конденсированного с А; и каждый из атомов водорода в В9 и В10 необязательно замещен В3;
каждый из В11 независимо представляет собой галоген, С1-12алкил, С1-12алкокси, С3-12циклоалкил, С6-12арил, 3-12-членную гетероалициклическую группу, 5-12-членный гетероарил, -О-С1-12алкил, -О(СН2)пС3-12циклоалкил, -О-(СН2)пС6-12арил, -О-(СН2)п(3-12-членную гетероалициклическую группу), -О(СН2)п(5-12-членный гетероарил) или -СН, и каждый из атомов водорода в В11 необязательно замещен галогеном, -ОН, -СН, -С1-12алкилом, который может быть частично или полностью галогенированным, -О-С1-12алкилом, который может быть частично или полностью галогенированным, -СО, -8О или -8О2;
В12 представляет собой водород, галоген, С1-12алкил, С2-12алкенил, С2-12алкинил, С3-12циклоалкил, С6-12арил, 3-12-членную гетероалициклическую группу, 5-12-членный гетероарил, -8(О)тВ4, -8О2НВ4В5, -8(О)2ОВ4, -НО2, -НВ4В5, -(СВ6В7)пОВ4, -СН, -С(О)В4, -ОС(О)В4, -О(СВ6В7)пВ4, -НВ4С(О)В5, -(СВ6В7)пС(О)ОВ4, -(СВ6В7)пНСВ4В5, -С(=НВ6)НВ4В5, -НВ4С(О)НВ5В6, -НВ48(О)рВ5 или -С(О)НВ4В5, и каждый из атомов водорода в В12 необязательно замещен В3;
каждый из В13 независимо представляет собой галоген, С1-12алкил, С2-12алкенил, С2-12алкинил, С3-12 циклоалкил, С6-12арил, 3-12-членную гетероалициклическую группу, 5-12-членный гетероарил, -8(О)тВ4, ОООЗВЗВЗ -8(О)2ОВ4, -НО2, -НВв5, -(СВ6В7)пОВ4, -СН, -С(О)В4, -ОС(О)В4, -О(СВ6В7)пВ4, -НВ4С(О)В5, -(СВ6В7)пС(О)ОВ4, -(СВ6В7)пОВ4, -(СВ6В7)пС(О)НВ4В5, -(СВ6В7)пНСВ4В5, -С(=НВ6)НВ4В5,
-НВ4С(О)НВ5В6, -НВ48(О)рВ5, -С(О)НВ4В5, -(СВ6В7)п(3-12-членную гетероалициклическую группу), -(СВ6В7)п(С3-12циклоалкил), -(СВ6В7)п(С6-12арил), -(СВ6В7)п(5-12-членный гетероарил),
-(СВ6В7)пС(О)НВ4В5 или -(СВ6В7)пС(О)В4, группы В13 на соседних атомах могут объединяться с образованием С6-12арила, 5-12-членного гетероарила, С3-12циклоалкила или 3-12-членной гетероалициклической группы, и каждый из атомов водорода в В13 необязательно замещен В3;
каждый из т независимо представляет собой 0, 1 или 2;
каждый из п независимо представляет собой 0, 1, 2, 3 или 4;
каждый из р независимо представляет собой 1 или 2;
или его фармацевтически приемлемую соль, гидрат или сольват.
- 2 013678
В конкретном аспекте этого варианта осуществления К2 представляет собой водород.
В другом конкретном аспекте этого варианта осуществления Υ представляет собой N.
В другом конкретном аспекте этого варианта осуществления Υ представляет собой Ν, и К2 представляет собой водород.
В другом конкретном аспекте этого варианта осуществления Υ представляет собой СК12.
В другом конкретном аспекте этого варианта осуществления Υ представляет собой СК12, и К12 представляет собой Н.
В другом конкретном аспекте этого варианта осуществления и в сочетании с любым другим конкретным аспектом, не являющимся несовместимым, К1 представляет собой фурановую, тиофеновую, пиррольную, пирролиновую, пирролидиновую, диоксолановую, оксазольную, тиазольную, имидазольную, имидазолиновую, имидазолидиновую, пиразольную, пиразолиновую, пиразолидиновую, изоксазольную, изотиазольную, оксадиазольную, триазольную, тиадиазольную, пирановую, пиридиновую, пиперидиновую, диоксановую, морфолиновую, дитиановую, тиоморфолиновую, пиридазиновую, пиримидиновую, пиразиновую, пиперазиновую, триазиновую, тритиановую или фенильную группу, и каждый из атомов водорода в К1 необязательно замещен одной или несколькими группами К3.
В другом конкретном аспекте этого варианта осуществления и в сочетании с любым другим конкретным аспектом, не являющимся несовместимым, К1 представляет собой гетероарильную группу с конденсированным кольцом, и каждый из атомов водорода в К1 необязательно замещен одной или несколькими группами К3.
В другом конкретном аспекте этого варианта осуществления и в сочетании с любым другим конкретным аспектом, не являющимся несовместимым, К1 представляет собой водород.
В другом конкретном аспекте этого варианта осуществления и в сочетании с любым другим конкретным аспектом, не являющимся несовместимым, К1 представляет собой галоген.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение предусматривает энантиомерно чистое соединение формулы 1а
где Υ представляет собой N или СН;
К1 представляет собой фурановую, тиофеновую, пиррольную, пирролиновую, пирролидиновую, диоксолановую, оксазольную, тиазольную, имидазольную, имидазолиновую, имидазолидиновую, пиразольную, пиразолиновую, пиразолидиновую, изоксазольную, изотиазольную, оксадиазольную, триазольную, тиадиазольную, пирановую, пиридиновую, пиперидиновую, диоксановую, морфолиновую, дитиановую, тиоморфолиновую, пиридазиновую, пиримидиновую, пиразиновую, пиперазиновую, триазиновую, тритиановую, азитидиновую или фенильную группу; и каждый из атомов водорода в К1 необязательно замещен К3;
каждый из К3 независимо представляет собой галоген, С1-12алкил, С2-12алкенил, С2-12алкинил, С3-12 циклоалкил, С6-12арил, 3-12-членную гетероалициклическую группу, 5-12-членный гетероарил, -8(О)тК4, -8Ο2NК4К5, -8(О)2ОК4, -ΝΟ2, -ΝΗΊΥ. -(СК6К7)ПОК4, <Ν, -С(О)К4, -ОС(О)К4, -О(СК6К7)ПК4, -\1СС(О)1С. -(СК6К7)ПС(О)ОК4, -(СК6К7)ПОК4, -(СК6К7)пС(О)МК4К5, -(СК6К7)^СК4К5, -С(=NК6)NК4К5, -ΝΕ^^ΝΉ5^, -№48(О)рК5 или -С(О^К4К5, каждый из атомов водорода в К3 необязательно замещен К8, и группы К3 на соседних атомах могут объединяться с образованием С6-12арила, 5-12-членного гетероарила, С3-12циклоалкила или 3-12-членной гетероалициклической группы;
каждый из К4, К5, К6 и К7 независимо представляет собой водород, галоген, С1-12алкил, С2-12алкенил, С2-12алкинил, С3-12циклоалкил, С6-12арил, 3-12-членную гетероалициклическую группу, 5-12-членный гетероарил; или любые два из К4, К5, К6 и К7, связанные с одним и тем же атомом азота, могут вместе с азотом, с которым они связаны, объединяться с образованием 3-12-членной гетероалициклической группы или 5-12-членной гетероарильной группы, необязательно содержащей 1-3 дополнительных гетероатома, выбранных из Ν, О и 8; или любые два из К4, К5, К6 и К7, связанные с одним и тем же атомом углерода, могут объединяться с образованием С3-12циклоалкильной, С6-12арильной, 3-12-членной гетероалициклической группы или 5-12-членной гетероарильной группы; и каждый из атомов водорода в К4, К5, К6 и К7 необязательно замещен К8;
каждый из К8 независимо представляет собой галоген, С1-12алкил, С2-12алкенил, С2-12алкинил, С3-12 циклоалкил, С6-12арил, 3-12-членную гетероалициклическую группу, 5-12-членный гетероарил, -ΝΗ2, -СН -ОН, -О-С1-12алкил, -О-(СН2)пС3-12циклоалкил, -О-(СН2)пС6-12арил, -О-(СН2)п(3-12-членную гетероа
- 3 013678 лициклическую группу) или -О-(СН2)п(5-12-членный гетероарил); и каждый из атомов водорода в В8 необязательно замещен В11;
каждый из В9 и В10 независимо представляет собой водород, галоген, С1-12алкил, С3-12циклоалкил, С6-12арил, 3-12-членную гетероалициклическую группу, 5-12-членный гетероарил, -8(О)тВ4, -8Ο2ΝΒ4Β5, -8(О)2ОВ4, -ΝΟ2, -ИВ4В5, -(СВ6В7)пОВ4, -ΟΝ, -С(О)В4, -ОС(О)В4, -ΝΚΓ(Ο)Κ'. -(СВ6В7)пС(О)ОВ4, -(СВ'^В^^СВ'В5, -МВ4С(О)МВ5В6, -ЛВ48(О)рВ5 или -С(О)\Ю'; В9 или В10 могут объединяться с кольцевым атомом А или заместителем А с образованием С3-12циклоалкильного, 3-12-членного гетероалициклического, С6-12арильного или 5-12-членного гетероарильного кольца, конденсированного с А; и каждый из атомов водорода в В9 и В10 необязательно замещен В3;
каждый из В11 независимо представляет собой галоген, Ц^алкил, С142алкокси, С3-12циклоалкил, С6-12арил, 3-12-членную гетероалициклическую группу, 5-12-членный гетероарил, -О-С1-12алкил, -О(СН2)пС3-12циклоалкил, -О-(СН2)пС6-12арил, -О-(СН2)п(3-12-членную гетероалициклическую группу), -О(СН2)п(5-12-членный гетероарил) или -СН и каждый из атомов водорода в В11 необязательно замещен галогеном, -ОН, -СН -С1-12алкилом, который может быть частично или полностью галогенированным, -О-С1-12алкилом, который может быть частично или полностью галогенированным, -СО, -8О или -8О2;
каждый из В13 независимо представляет собой галоген, С1-12алкил, С2-12алкенил, С2-12алкинил, С3-12циклоалкил, С6-12арил, 3-12-членную гетероалициклическую группу, 5-12-членный гетероарил, -8(О)тВ4, -8О21МВ4В5, -8(О)2ОВ4, -\О;. -ЛВ4В5, -(СВ6В7)пОВ4, -СН -С(О)В4, -ОС(О)В4, -О(СВ6В7)пВ4, -\КГ(О)К'. -(СВ6В7)пС(О)ОВ4, -(СВ6В7)пОВ4, -(СВ^ШОЖ'В5, -(СВ'^В^^СВ'В5, -С( \К6)\Ю'. -NΒ4С(Ο)NΒ5Β6, -ЛВ48(О)рВ5, -С(Ο)NΒ4Β5, -(СВ6В7)п(3-12-членную гетероалициклическую группу), -(СВ6В7)п(С3-12циклоалкил), -(СВ6В7)п(С6-12арил), -(СВ6В7)п(5-12-членный гетероарил),
-(СВбВ7)пС(О)НВ4В5 или -(СВ6В7)пС(О)В4, группы В13 на соседних атомах могут объединяться с образованием С6-12арильной, 5-12-членной гетероарильной, С3-12циклоалкильной или 3-12-членной гетероалициклической группы, и каждый из атомов водорода в В13 необязательно замещен В3;
каждый из т независимо представляет собой 0, 1 или 2;
каждый из п независимо представляет собой 0, 1, 2, 3 или 4;
каждый из р независимо представляет собой 1 или 2;
или его фармацевтически приемлемую соль, гидрат или сольват.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение предусматривает энантиомерно чистое соединение, выбранное из группы, состоящей из
5-бром-3-[(В)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2-иламина;
5-йод-3-[(В)1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-2-иламина;
5-бром-3-[1(В)-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-2-иламина; 4-{5-амино-6-[(В)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2-ил}бензойной кислоты; (4-{5-амино-6-[(В)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2-ил}фенил)пиперазин-1-илметанона; трет-бутилового эфира 4-(4-{5-амино-6-[(В)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2-ил}бензоил)пиперазин-1-карбоновой кислоты;
3- [(1В)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-[4-(пиперазин-1-илкарбонил)фенил]пиридин-2-амина;
4- {6-амино-5-[(1В)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}-№[2-(диметиламино)этил]Ν-метилбензамида;
(4-{6-амино-5-[(1В)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}фенил)метанола; 4-{6-амино-5-[(1В)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}-Ы-[3-(диметиламино)пропил |-Ν -метилбензамида;
трет-бутил 4-(4-{6-амино-5-[(1В)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}бензоил)пиперазин-1-карбоксилата;
3-[(В)-1-(2,6-дихлор-3 -фторфенил)этокси] -5-[1 -(1-метилпиперидин-4-ил)-1Н-пиразол-4-ил]пиридин-2-иламина;
1-[4-(4-{6-амино-5-[(В)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}пиразол-1-ил)пиперидин1-ил]-2-гидроксиэтанона;
3-[(В)-1-(2,6-дихлор-3 -фторфенил)этокси]-5-( 1 -пиперидин-4-ил-1Н-пиразол-4-ил)пиридин-2иламина;
3-[(В)-1-(2,6-дихлор-3 -фторфенил)этокси]-5-( 1 -пиперидин-4-ил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2иламина;
3-[(В)-1-(2,6-дихлор-3 -фторфенил)этокси]-5-(1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-иламина;
1-[4-(4-{5-амино-6-[(В)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2-ил}пиразол-1-ил)пиперидин-
1- ил]-2-гидроксиэтанона;
3-[(В)-1-(2,6-дихлор-3 -фторфенил)этокси] -5-[1 -(1-метилпиперидин-4-ил)-1Н-пиразол-4-ил]пиразин-
2- иламина;
1-[4-(4-{5-амино-6-[(В)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2-ил}пиразол-1-ил)пиперидин1-ил]-2-диметиламиноэтанона;
3-[(В)-1-(2-хлор-3,6-дифторфенил)этокси]-5-( 1 -пиперидин-4-ил-1Н-пиразол-4-ил)пиридин-2иламина;
- 4 013678 или их фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение предусматривает фармацевтическую композицию, содержащую любое из соединений по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый носитель. Примеры таких композиций описываются ниже.
Предпочтительные соединения по настоящему изобретению включают соединения, которые обладают ингибиторной активностью по отношению к с-МЕТ, как определено любым одним или несколькими параметрами из 1С50, Κι или процента ингибирования (%1). Специалист в данной области легко определит, обладает ли соединение такой активностью, путем осуществления соответствующего анализа, и описания таких анализов показаны в разделе примеры. В одном из вариантов осуществления особенно предпочтительные соединения имеют Κι с-МЕТ менее чем 5 мкМ, или менее чем 2 мкМ, или менее чем 1 мкМ, или менее чем 500 нМ, или менее чем 200 нМ, или менее чем 100 нМ. В другом варианте осуществления особенно предпочтительные соединения обладают ингибированием с-МЕТ при 1 мкМ по меньшей мере 10%, или по меньшей мере 20%, или по меньшей мере 30%, или по меньшей мере 40%, или по меньшей мере 50%, или по меньшей мере 60%, или по меньшей мере 70%, или по меньшей мере 80%, или по меньшей мере 90%. Способы измерения активности с-МЕТ/НСЕВ описаны в примерах.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение предусматривает способ лечения аномального роста клеток у млекопитающих, в том числе человека, включающий введение млекопитающему любой из фармацевтических композиций по настоящему изобретению.
В конкретном варианте осуществления любого из способов по настоящему изобретению, описанных здесь, аномальный рост клеток представляет собой рак, включая, но не ограничиваясь ими, рак легких, рак костей, рак поджелудочной железы, рак кожи, рак головы или шеи, кожную или интраокулярную меланому, рак матки, рак яичников, рак прямой кишки, рак анальной области, рак желудка, рак толстой кишки, рак груди, рак матки, карциному фаллопиевых труб, карциному эндометрия, карциному шейки матки, карциному вагины, карциному вульвы, болезнь Ходжкина, рак пищевода, рак тонкого кишечника, рак эндокринной системы, рак щитовидной железы, рак паращитовидной железы, рак надпочечников, саркому мягких тканей, рак уретры, рак пениса, рак простаты, хроническую или острую лейкемию, лимфоцитные лимфомы, рак мочевого пузыря, рак почек или мочеточников, карциному почечных клеток, карциному почечных лоханок, новообразования центральной нервной системы (СЫ8), первичную лимфому СЫ8, опухоли спинного хребта, глиому ствола мозга, аденому слизистых или сочетание одного или нескольких из указанных выше раковых заболеваний. В другом варианте осуществления указанного способа указанный аномальный рост клеток представляет собой злокачественное пролиферативное заболевание, включая, но не ограничиваясь ими, псориаз, злокачественную гипертрофию простаты или рестеноз.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение предусматривает способ лечения расстройства, опосредуемого НСЕВ, у млекопитающего, в том числе человека, включающий введение млекопитающему любой из фармацевтических композиций по настоящему изобретению.
В дополнительных конкретных вариантах осуществления любого из способов по настоящему изобретению, описанных здесь, способ дополнительно включает введение млекопитающему некоторого количества одного или нескольких веществ, выбранных из противоопухолевых агентов, агентов против ангиогенеза, ингибиторов передачи сигналов и антипролиферативных агентов, причем эти количества вместе являются эффективными при лечении указанного аномального роста клеток. Такие вещества включают те, которые описываются в РСТ публикациях заявок на международный патент №№ νθ 00/38715, νθ 00/38716, νθ 00/38717, νθ 00/38718, νθ 00/38719, νθ 00/38730, νθ 00/38665, νθ 00/37107 и νθ 00/38786, описания которых включены здесь в качестве ссылок во всей их полноте.
Примеры противоопухолевых агентов включают ингибиторы митоза, например производные винкаалкалоидов, такие как винбластин, винорелбин, виндесцин и винкристин; колхины аллохохин, галихондрин, Ν-бензоилтриметилметиловый эфир колхициновой кислоты, доластатин 10, майстанзин, ризоксин, таксаны, такие как таксол (паклитаксель), доцетаксель (таксотер), 2'-№[3-(диметиламино)пропил]глутарамат (производное таксола), тиоколхицин, тритилцистеин, тенипозид, метотрексат, азатиоприн, фторурацил, цитоцин арабинозид, 2'2'-дифтордезоксицитидин (гемцитабин), адриамицин и митамицин. Алкилирующие агенты, например цисплатин, карбоплатин, оксиплатин, ипроплатин, этиловый эфир Ν-ацетил-ОЕ-саркозил-Ь-лейцина (азалей или азалекс), 1,4-циклогексадиен-1,4-дикарбаминовую кислоту, 2,5-бис(1-азиридинил)-3,6-диоксодиэтиловый эфир (диазиквон), 1,4-бис(метансулвфонилокси)бутан (бисульфан или лейкосульфан) хлорозотоцин, кломезон, цианоморфолинодоксорубицин, циклодизон, диангидрогалактитол, фтордопан, гепсульфам, митомицин С, гикантеонмитомицин С, митозоламид, 1-(2-хлорэтил)-4-(3-хлорпропил)пиперазина дигидрохлорид, пиперазиндион, пипоброман, порфиромицин, спирогидантоиновая горчица, тероксирон, тетраплатин, тиотепа, триэтиленмеламин, урацилазотная горчица, бис(3-мезилоксипропил)амина гидрохлорид, митомицин, нитрозомочевинные агенты, такие как циклогексилхлорэтилнитрозомочевина, метилциклогексилхлорэтилнитрозомочевина, 1-(2хлорэтил)-3 -(2,6-диоксо-3 -пиперидил)-1-нитрозомочевина, бис(2-хлорэтил)нитрозомочевина, прокарбазин, дакарбазин, соединения, родственные азотной горчице, такие как мехлорэтамин, циклофосфамид, ифосамид, мелфалан, хлорамбуцил, эстрамустина фосфат натрия, стрептозоин и темозоламид. Антиме
- 5 013678 таболиты ДНК, например 5-фторурацил, цитозинарабинозид, гидроксимочевина, 2-[(3-гидрокси-2пиринодинил)метилен]гидразинкарботиоамид, дезоксифторуридин, 5-гидрокси-2-формилпиридин тиосемикарбазон, альфа-2'-дезокси-6-тиогуанозин, афидиколин глицинат, 5-азадезоксицитидин, бетатиогуанин дезоксирибозид, циклоцитидин, гуаназол, инозин гликодиальдегид, макбецин II, пиразолимидазол, кладрибин, пентостатин, тиогуанин, меркаптопурин, блеомицин, 2-хлордезоксиаденозин, ингибиторы тимидилатсинтазы, такие как ралтитрексед и пеметрексед динатрий, клофарабин, флоксуридин и флударабин. Антиметаболиты ДНК/РНК, например Ь-аланозин, 5-азацитидин, ацивицин, аминоптерин и их производные, такие как Ы-[2-хлор-5-[[(2,4-диамино-5-метил-6-хиназолинил)метил]амино]бензоил]-Ьаспарагиновая кислота, Ы-[4-[[(2,4-диамино-5-этил-6-хиназолинил)метил]амино]бензоил]-Ь-аспарагиновая кислота, Ы-[2-хлор-4-[[(2,4-диаминоптеридинил)метил]амино]бензоил]-Ь-аспарагиновая кислота, растворимый антифол Бейкера, дихлораллил лавсон, бреквинар, фтораф, дигидро-5-азацитидин, метотрексат, тетранатриевая соль Ы-(фосфоноацетил)-Ь-аспарагиновой кислоты, пиразофуран, триметрексат, пликамицин, актиномицин Ό, криптофицин, и аналоги, такие как криптофицин-52, или, например, один из предпочтительных антиметаболитов, описанных в заявке на европейский патент № 239362, такой как Н-(5-[Н-(3,4-дигидро-2-метил-4-оксохиназолин-6-илметил)-Ы-метиламино]-2-теноил)-Ь-глутаминовая кислота; ингибиторы факторов роста; ингибиторы клеточного цикла; интеркалирующие антибиотики, например адриамицин и блеомицин; белки, например интерферон; и антигормоны, например антиэстрогены, такие как Ыо1уабех™ (тамоксифен) или, например, антиандрогены, такие как Сакобех™ (4'-циано3-(4-фторфенилсульфонил)-2-гидрокси-2-метил-3'-(трифторметил)пропионанилид). Такое совместное лечение может достигаться одновременным, последовательным или отдельным дозированием индивидуальных компонентов лечения.
Агенты против ангиогенеза включают ингибиторы ММР-2 (матриксной металлопротеиназы 2), ингибиторы ММР-9 (матриксной металлопротеиназы 9) и ингибиторы СОХ-11 (циклооксигеназы II). Примеры подходящих для использования ингибиторов СОХ-П включают СЕЬЕВВЕХ™ (алекоксиб), вальдекоксиб и рофекоксиб. Примеры подходящих для использования ингибиторов матриксной металлопротеиназы описаны в заявках на международный патент \УО 96/33172 (опубликованной 24 октября 1996 г.), \УО 96/27583 (опубликованной 7 марта 1996 г.), в заявке на европейский патент № 97304971.1 (зарегистрированной 8 июля 1997 г.), заявке на европейский патент № 99308617,2 (зарегистрированной 29 октября 1999 г.), в заявках на международный патент XVО 98/07697 (опубликованной 26 февраля 1998 г.), XVО 98/03516 (опубликованной 29 января 1998 г.), ^О 98/34918 (опубликованной 13 августа 1998 г.), XVО 98/34915 (опубликованной 13 августа 1998 г.), ^О 98/33768 (опубликованной 6 августа 1998 г.), ^О 98/30566 (опубликованной 16 июля 1998 г.), в публикации европейского патента 606046 (опубликованного 13 июля 1994 г.), в публикации европейского патента 931788 (опубликованного 28 июля 1999 г.), в заявках на международный патент ^О 90/05719 (опубликованной 31 мая 1990 г.), ^О 99/52910 (опубликованной 21 октября 1999 г.), ^О 99/52889 (опубликованной 21 октября 1999 г.), ^О 99/29667 (опубликованной 17 июня 1999 г.), РСТ заявке на международный патент № РСТЛВ 98/01113 (зарегистрированной 21 июля 1998 г.), в заявке на европейский патент № 99302232.1 (зарегистрированной 25 марта 1999 г.), заявке на патент Великобритании номер 9912961.1 (зарегистрированной 3 июня 1999 г.), во временной заявке на патент Соединенных Штатов № 60/148464 (зарегистрированной 12 августа 1999 г.), в патенте Соединенных Штатов Америки 5863949 (выданном 26 января 1999 г.), в патенте Соединенных Штатов Америки 5861510 (выданном 19 января 1999 г.) и в публикации европейского патента 780386 (опубликованного 25 июня 1997 г.), все они включены здесь в качестве ссылок во всей их полноте. Предпочтительные ингибиторы ММР-2 и ММР-9 представляют собой такие, которые не обладают активностью ингибирования ММР-1 или имеют небольшую активность. Более предпочтительными являются те, которые селективно ингибируют ММР-2 и/или ММР-9 по отношению к другим матриксным металлопротеиназам (то есть ММР-1, ММР-3, ММР-4, ММР-5, ММР-6, ММР-7, ММР-8, ММР-10, ММР11, ММР-12 и ММР-13).
Примеры ингибиторов ММР включают АС-3340, ВО 32-3555, В8 13-0830 и следующие соединения:
3-[[4-(4-фторфенокси)бензолсульфонил]-(1-гидроксикарбамоилциклопентил)амино]пропионовую кислоту;
гидроксиамид 3 -экзо-3 -[4-(4-фторфенокси)бензолсульфониламино]-8-оксабицикло [3.2.1] октан-3 карбоновой кислоты;
гидроксиамид (2В,3В)-1 -[4-(2-хлор-4-фторбензилокси)бензолсульфонил]-3 -гидрокси-3 -метилпиперидин-2-карбоновой кислоты;
гидроксиамид 4-[4-(4-фторфенокси)бензолсульфониламино]тетрагидропиран-4-карбоновой кислоты;
3- [[4-(4-фторфенокси)бензолсульфонил]-(1 -гидроксикарбамоилциклобутил)амино] пропионовую кислоту;
гидроксиамид 4-[4-(4-хлорфенокси)бензолсульфониламино]тетрагидропиран-4-карбоновой кислоты; гидроксиамид 3-[4-(4-хлорфенокси)бензолсульфониламино]тетрагидропиран-3-карбоновой кислоты; гидроксиамид (2В,3В)- 1-[4-(4-фтор-2-метилбензилокси)бензолсульфонил]-3 -гидрокси-3 -метилпипе
- 6 013678 ридин-2-карбоновой кислоты;
3- [[4-(4-фторфенокси)бензолсульфонил]-(1 -гидроксикарбамоил-1 -метилэтил)амино]пропионовую кислоту;
3-[[4-(4-фторфенокси)бензолсульфонил]-(4-гидроксикарбамоилтетрагидропиран-4-ил)амино]пропионовую кислоту;
гидроксиамид 3-экзо-3-[4-(4-хлорфенокси)бензолсульфониламино]-8-оксабицикло[3.2.1]октан-3карбоновой кислоты;
гидроксиамид 3 -эндо-3 -[4-(4-фторфенокси)бензолсульфониламино]-8-оксабицикло [3.2.1] октан-3 карбоновой кислоты и гидроксиамид 3-[4-(4-фторфенокси)бензолсульфониламино]тетрагидрофуран-3-карбоновой кислоты; и их фармацевтически приемлемые соли, сольваты и гидраты.
Примеры ингибиторов передачи сигналов включают агенты, которые могут ингибировать реакции ЕОРК (рецептор эпидермального фактора роста), такие как антитела ЕОРК, антитела ЕОР, и молекулы, которые являются ингибиторами ЕОРК; ингибиторы УЕОР (эндотелиального фактора роста сосудов); и ингибиторы рецептора егЬВ2, такие как органические молекулы или антитела, которые могут связываться с рецептором егЬВ2, например НЕКСЕРТГЫ™ (Оепеп!есй, 1пс. оГ 8ои1Р 8ап Ргапаксо, СаШогша, И8А).
Ингибиторы ЕОРК описаны, например, в заявках на международный патент \УО 95/19970 (опубликованной 27 июля 1995 г.), \УО 98/14451 (опубликованной 9 апреля 1998 г.), \УО 98/02434 (опубликованной 22 января 1998 г.) и в патенте Соединенных Штатов Америки 5747498 (выданном 5 мая 1998 г.). ЕОРК-ингибирующие агенты включают, но не ограничиваются ими, моноклональные антитела С225 и анти-ЕОРК 22МаЬ (1тС1опе 8ук!етк 1псогрога!еб оГ №\ν Уогк, Ыете Уогк, И8А), соединения ΖΌ-1839 (Акй^епеса), ΒΙΒΧ-1382 (ВоеРгтдег ШдеШет), МИХ-447 (Мебагех 1пс. оГ Аппапбак, №\ν кгкеу, И8А) и ОЬХ-103 (Мегск & Со. оГ ^ЬйеРоике 8!а!юп, Ыете .Тегкеу, И8А), УКСТС-310 (Уеп1есН КекеагсР) и токсин слияния ЕОР (8егадеп 1пс. оГ Норкш!оп, МаккасРикейк).
Ингибиторы УЕОР, например 8И-5416 и 8И-6668 (8идеп 1пс. оГ 8ои!Р 8ап Ргапаксо, СаШогша, И8А), также могут быть объединены или введены совместно с композицией. Ингибиторы УЕОР описаны, например, в заявке на международный патент XVО 99/24440 (опубликованной 20 мая 1999 г.), РСТ заявке на международный патент РСТ/ΙΒ 99/00797 (зарегистрированной 3 мая 1999 г.), в заявках на международный патент ^О 95/21613 (опубликованной 17 августа 1995 г.), ^О 99/61422 (опубликованной 2 декабря 1999 г.), в патенте Соединенных Штатов Америки 5834504 (выданном 10 ноября 1998 г.), в заявке на международный патент ^О 98/50356 (опубликованной 12 ноября 1998 г.), в патенте Соединенных Штатов Америки 5883113 (выданном 16 марта 1999 г.), в патенте Соединенных Штатов Америки 5886020 (выданном 23 марта 1999 г.), в патенте Соединенных Штатов Америки 5792783 (выданном 11 августа 1998 г.), в заявках на международный патент XV О 99/10349 (опубликованной 4 марта 1999 г.), XV О 97/32856 (опубликованной 12 сентября 1997 г.), XVО 97/22596 (опубликованной 26 июня 1997 г.), ^О 98/54093 (опубликованной 3 декабря 1998 г.), ^О 98/02438 (опубликованной 22 января 1998 г.), ^О 99/16755 (опубликованной 8 апреля 1999 г.) и ^О 98/02437 (опубликованной 22 января 1998 г.), все они включены здесь в качестве ссылок во всей их полноте. Другие примеры некоторых специфичных ингибиторов УЕОР представляют собой 1М862 (Су!гап 1пс. оГ К|гк1апб, ^акЫпд!оп, И8А); анти-УЕОР моноклональное антитело бевацизумаб (Оелел!есР, 1пс. оГ 8ои1Р 8ап Ргапаксо, СаШогша); и ангиозим, синтетический рибозим от К|Ьохуте (Вои1бег, Со1огабо) и СЫгоп (ЕтегууШе, СакГогша).
Ингибиторы рецептора егЬВ2, такие как О^-282974 (О1ахо ^е11соте р1с), и моноклональные антитела АК-209 (Агопех РРагтасеийса1к 1пс. оГ ТРе ^ооб1апбк, Техак, И8А) и 2В-1 (СЫгоп), могут быть введены в сочетании с композицией. Такие ингибиторы егЬВ2 включают те, которые описаны в заявках на международный патент XVО 98/02434 (опубликованной 22 января 1998 г.), XVО 99/35146 (опубликованной 15 июля 1999 г.), ^О 99/35132 (опубликованной 15 июля 1999 г.), ^О 98/02437 (опубликованной 22 января 1998 г.), ^О 97/13760 (опубликованной 17 апреля 1997 г.), ^О 95/19970 (опубликованной 27 июля 1995 г.), в патенте Соединенных Штатов Америки 5587458 (выданном 24 декабря 1996 г.) и в патенте Соединенных Штатов Америки 5877305 (выданном 2 марта 1999 г.), каждый из которых включен здесь в качестве ссылки во всей ее полноте. Ингибиторы рецептора ЕгЬВ2, подходящие для использования в настоящем изобретении, также описаны во временной заявке на патент Соединенных Штатов Америки № 60/117341, зарегистрированной 27 января 1999 г., и в во временной заявке на патент Соединенных Штатов Америки № 60/117346, зарегистрированной 27 января 1999 г., обе они включены здесь в качестве ссылок во всей их полноте.
Другие антипролиферативные агенты, которые могут быть использованы, включают ингибиторы фермента фарнезилпротеинтрансферазы и ингибиторы тирозинкиназы рецептора РИОРг, включая соединения, описанные и заявленные в следующих заявках на патент Соединенных Штатов Америки: 09/221946 (зарегистрированной 28 декабря 1998 г.); 09/454058 (зарегистрированной 2 декабря 1999 г.); 09/501163 (зарегистрированной 9 февраля 2000 г.); 09/539930 (зарегистрированной 31 марта 2000 г.); 09/202796 (зарегистрированной 22 мая 1997 г.); 09/384339 (зарегистрированной 26 августа 1999 г.) и 09/383755 (зарегистрированной 26 августа 1999 г.); и соединения, описанные и заявленные в следующих временных заявках на патент Соединенных Штатов Америки: 60/168207 (зарегистрированной 30 ноября
- 7 013678
1999 г.); 60/170119 (зарегистрированной 10 декабря 1999 г.); 60/177718 (зарегистрированной 21 января
2000 г.); 60/168217 (зарегистрированной 30 ноября 1999 г.) и 60/200834 (зарегистрированной 1 мая 2000 г.). Каждая из указанных выше заявок на патент и временных заявок на патент включены здесь в качестве ссылки во всей ее полноте.
Композиции по настоящему изобретению также могут быть использованы вместе с другими агентами, пригодными для лечения аномального роста клеток или рака, включая, но не ограничиваясь ими, агенты, способные повышать противоопухолевые иммунные реакции, такие как антитела СТЬА4 (антиген цитотоксичных лимфоцитов 4), и другие агенты, способные блокировать СТЬА4; и антипролиферативные агенты, такие как другие ингибиторы фарнезилпротеинтрансферазы. Специфичные антитела СТЬА4, которые могут быть использованы в настоящем изобретении, включают те, которые описаны во временной заявке на патент Соединенных Штатов Америки 60/113647 (зарегистрированной 23 декабря 1998 г.), которая включена здесь в качестве ссылки во всей ее полноте.
Определения.
Если не утверждается иного, следующие далее термины, используемые в описании и формуле изобретения, имеют значения, обсуждаемые ниже. Переменные, определяемые в настоящем разделе, такие как К, X, п и т.п., предназначены для упоминания только в данном разделе и не рассматриваются как имеющие такое же значение, которое может использоваться вне настоящего раздела определений. Кроме того, многие группы, определенные здесь, могут быть необязательно замещены. Перечисление в настоящем разделе определений типичных заместителей является примерным и не предназначено для ограничения заместителей, определенных где-либо еще в настоящем описании и формуле изобретения.
Алкил относится к насыщенному алифатическому углеводородному радикалу, включающему группы с прямой цепью и разветвленной цепью из 1-20 атомов углерода, предпочтительно из 1-12 атомов углерода, более предпочтительно 1-8 атомов углерода или 1-6 атомов углерода или 1-4 атомов углерода. Низший алкил относится конкретно к алкильной группе с 1-4 атомами углерода. Примеры алкильных групп включают метил, этил, пропил, 2-пропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил, пентил и т.п. Алкил может быть замещенным или незамещенным. Типичные группы заместителей включают циклоалкил, арил, гетероарил, гетероалициклическую группу, гидрокси, алкокси, арилокси, меркапто, алкилтио, арилтио, циано, галоген, карбонил, тиокарбонил, О-карбамил, Ν-карбамил, О-тиокарбамил, Νтиокарбамил, С-амидо, Ν-амидо, С-карбокси, О-карбокси, нитро, силил, амино и -NКxКу, где Кх и Ку независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, алкила, циклоалкила, арила, карбонила, ацетила, сульфонила, трифторметансульфонила и объединены в пяти- или шестичленное гетероалициклическое кольцо.
Циклоалкил относится к 3-8-членному углеродному моноциклическому кольцу, углеродному 5членному/6-членному или 6-членному/6-членному конденсированному бициклическому кольцу или к полициклической конденсированной группе (конденсированная кольцевая система означает, что каждое кольцо в системе делит соседнюю пару атомов углерода с любым другим кольцом в системе), где одно или несколько колец могут содержать одну или несколько двойных связей, но ни одно из колец не имеет полностью сопряженной системы π-электронов. Примерами, без ограничения, циклоалкильных групп являются циклопропан, циклобутан, циклопентан, циклопентен, циклогексан, циклогексадиен, адамантан, циклогептан, циклогептатриен и т.п. Циклоалкильная группа может быть замещенной или незамещенной. Типичные группы заместителя включают алкил, арил, гетероарил, гетероалицикл, гидрокси, алкокси, арилокси, меркапто, алкилтио, арилтио, циано, галоген, карбонил, тиокарбонил, Скарбокси, О-карбокси, О-карбамил, Ν-карбамил, С-амидо, Ν-амидо, нитро, амино и -Ν№ с Кх и Ку, определенными выше. Иллюстративные примеры циклоалкила получают, но не ограничиваются ими, из следующих групп:
Алкенил относится к алкильной группе, как определено в данном описании, состоящей по меньшей мере из двух атомов углерода и по меньшей мере одной двойной связи углерод-углерод. Типичные примеры включают, но не ограничиваются ими, этенил, 1-пропенил, 2-пропенил, 1-, 2- или 3-бутенил и т.п.
Алкинил относится к алкильной группе, как определено в данном описании, состоящей по меньшей мере из двух атомов углерода и по меньшей мере одной тройной связи углерод-углерод. Типичные примеры включают, но не ограничиваются ими, этинил, 1-пропинил, 2-пропинил, 1-, 2- или 3-бутинил и т.п.
- 8 013678
Арил относится к углеродным моноциклическим группам или полициклическим группам с конденсированными кольцами из 6-12 атомов углерода, имеющим полностью сопряженную систему πэлектронов. Примерами, без ограничения, арильных групп являются фенил, нафталенил и антраценил. Арильная группа может быть замещенной или незамещенной. Типичные заместители включают галоген, тригалогенметил, алкил, гидрокси, алкокси, арилокси, меркапто, алкилтио, арилтио, циано, нитро, карбонил, тиокарбонил, С-карбокси, О-карбокси, О-карбамил, Ν-карбамил, О-тиокарбамил, Ν-тиокарбамил, С-амидо, Ν-амидо, сульфинил, сульфонил, амино и -ΝΚΧΚΥ с Кх и Ку, определенными выше.
Гетероарил относится к моноциклической группе или группе с конденсированными кольцами из 5-12 кольцевых атомов, содержащей один, два, три или четыре кольцевых гетероатома, выбранных из Ν, О и 8, остальные кольцевые атомы представляют собой С, и, в дополнение к этому, имеющей полностью сопряженную систему π-электронов. Примерами, без ограничения, незамещенных гетероарильных групп являются пиррол, фуран, тиофен, имидазол, оксазол, тиазол, пиразол, пиридин, пиримидин, хинолин, изохинолин, пурин, тетразол, триазин и карбазол. Гетероарильная группа может быть замещенной или незамещенной. Типичные заместители включают алкил, циклоалкил, галоген, тригалогенметил, гидрокси, алкокси, арилокси, меркапто, алкилтио, арилтио, циано, нитро, карбонил, тиокарбонил, сульфонамидо, С-карбокси, О-карбокси, сульфинил, сульфонил, О-карбамил, Ν-карбамил, О-тиокарбамил, Νтиокарбамил, С-амидо, Ν-амидо, амино и -ПКхКу с Кх и Ку, определенными выше.
Фармацевтически приемлемый гетероарил представляет собой такой, который является достаточно стабильным для присоединения к соединению по настоящему изобретению, приготовления в виде фармацевтической композиции и последующего введения пациенту, нуждающемуся в нем.
Примеры типичных моноциклических гетероарильных групп включают, но не ограничиваются ими
Н
пиррол (пирролил)
(фуранил) тиофен (шофенил)
(пирмолнл) имидазол (имидазолил)
изоксазол (изоксазолил) оксазол (оксазолил) изотиазол (изотиазолил) тиазол (щазолил)
(1,2,3-тиа зол ил)
А
Ν-Ν 1,3,4-триазол (1,3,4-триазолил)
О*
1-окса-2,3-диааол (1-окса-2,3-диазолил)
1-о кса-2,4-диазол (1-окса-2Адиазолил)
1-окса-2,5-диазол (1-0 кса-2,5-диазол ил)
А
Ν-Ν
1-о кс а-3,4-диазол (1-окса-3,4-диазолил) й
1-тиа-2^-диазол (1-тиа-2,3-диазолил)
(1-тиа-2,4-диазотош)
V/ 1-тма-2,5-диазол (1-тиа-2Ддиазолил)
Ν-Ν
Л ί №
Ν-Ν
1нма-3,4*диазол (1 -тиа -3,4-диазолил) твтрззол (твтразолил)
(пиридинил)
(пиридазинил)
(пиримидинил)
пиразин (пиразинип)
Примеры подходящих конденсированных кольцевых гетероарильных групп включают, но не ограничиваются ими
- 9 013678
бензотаофан (беизотиофенил) бензимидазол (бензимидазолил)
(изохииолинитп
1,6-нафтаридин (1,6-нафтаридинил)
1,7-нафтиридин (1,7-нафтиридинил) фталазин (фгалазииил) бензофуран (бензофуранил)
(ааахиназолин)
хиноксалин (хиноксалииил)
ТДнафтмридин (1,5-нафтиридинил)
2,Фнафп< ридин (2,6жафгиридинил)
2,7-нафтиридик (2,7-нафтиридинил)
1,8-нафтиридин (4,8-нафтиридинил)
пиридо[3,4-<1]пиримидин пиридо[4,3ч1]пиримидии (лиридо[4,3-с1)лиримидинил) (пиридо[3,4чГ]пиримидинил) пиридо Р,2ч1]пиримидин (пиридо[3,2-с1]пиримидииил)
пиридо[2,3-Ь]пиразин (пиридо[2,3-Ь]пиразинил)
пиридо[3,44з]пиразин (пиридор,4-Ь]пиразинил)
пиримидо|5,*-4]пиримидии (пиримидо[5,4ч1]пиримидинил) пиразиио{2ДЬ]1ирааин пиримидо[4,5ч1]пиримидин (пиразино[2Д-Ь]пиразииил) (пиримидо[4,М]лиримидинил)
Термин гетероалициклическая или гетероцикл относится к моноциклической группе или группе с конденсированными кольцами, имеющей в кольце (кольцах) от 3 до 12 кольцевых атомов, в которой один или два кольцевых атома являются гетероатомами, выбранными из Ν, О и 8(О)П (где η равно 0, 1 или 2), а остальные кольцевые атомы представляют собой С. Кольца могут также иметь одну или не сколько двойных связей. Однако кольца не должны иметь полностью сопряженную систему πэлектронов. Примеры подходящих насыщенных гетероалициклических групп включают, но не ограни чиваются ими
- 10 013678
О тетрагидрофуран (тетрагидрофуранил)
оксиран (онсираиил) тиаран (тнараиил) азиридин (азирндиния) о
оксетак (отстают)
Е?
азетидин (адетидикил)
тетрашдротиофен (тетрагидротиофенил) пирролидин (гнрролидинмл) ΰ
твдтан (гиатанил)
(теграгидропираиил) тетрагидротиопиран (тетра гид ротиопиранил)
(пилерцдиннл)
1,Фдиоксан (1,4-дио«санил)
1, (1,4-оксатианил)
морфолин (морфолиннл)
1,4-дитиан (1,4-днтнанил)
Н
пиперазин (пипе разя нил}
1,4-ааапгаи (1,4-ааатнанил)
оксепаи (оксепанил)
тиепан {гиепа1тл|
1,4-диоиселан (1,4-днонсепанил)
1,4-дитнепан (1,Щдитиспанил)
1,
ОАтндезвпаннл)
1,*юксатиопан (1,4-оксатиепанил)
1,4-днгиемн (1,Фдиазепанил)
Примеры подходящих частично ненасыщенных гетероалициклических групп включают, но не ограничиваются ими
3,*-дигидро-2Н*пиран (3,4-дигидро-2Н-лиранил)
1,2,3,4-тетрагидропиридин (1,2,3,4-тетрагидропиридинил)
2Н-пиран (2Н-пиранил)
5,6-дигидро-2Н-пираи (5,6-дигидро-2Н-пиранил)
ΐ,
0Д5,6-тетрап1др0Пиридинил)
Группа гетероцикла необязательно замещена одним или двумя заместителями, независимо выбранными из галогена, низшего алкила, низшего алкила, замещенного карбоксигруппой, сложноэфирной гидроксигруппой или моно- или диалкиламиногруппой.
Гидрокси относится к группе -ОН.
Алкокси относится как к -О-(алкильной), так и к -О-(незамещенной циклоалкильной) группе. Типичные примеры включают, но не ограничиваются ими, метокси, этокси, пропокси, бутокси, циклопропилокси, циклобутилокси, циклопентилокси, циклогексилокси и т.п.
Галогеналкокси относится к -О-(галогеналкильной) группе. Типичные примеры включают, но не ограничиваются ими, трифторметокси, трибромметокси и т.п.
Арилокси относится к -О-арильной или -О-гетероарильной группе, как определено в данном описании. Типичные примеры включают, но не ограничиваются ими, фенокси, пиридинилокси, фуранилок си, тиенилокси, пиримидинилокси, пиразинилокси и т.п. и их производные.
Меркапто относится к группе -8Н.
Алкилтио относится к -8-(алкильной) или -8-(незамещенной циклоалкильной) группе. Типичные примеры включают, но не ограничиваются ими, метилтио, этилтио, пропилтио, бутилтио, циклопропил- 11 013678 тио, циклобутилтио, циклопентилтио, циклогексилтио и т.п.
Арилтио относится к -8-арильной или -8-гетероарильной группе, как определено в данном описании. Типичные примеры включают, но не ограничиваются ими, фенилтио, пиридинилтио, фуранилтио, тиенилтио, пиримидинилтио и т.п. и их производные.
Ацил или карбонил относится к группе -С(О)Я, где Я выбран из группы, состоящей из водорода, низшего алкила, тригалогенметила, незамещенного циклоалкила, арила, необязательно замещенного одним или несколькими, предпочтительно одним, двумя или тремя, заместителями, выбранными из группы, состоящей из низшего алкила, тригалогенметила, низшего алкокси, галогена и группы -ΝΚΧΚ.Υ, гетероарила (связанного через кольцевой атом углерода), необязательно замещенного одним или несколькими, предпочтительно одним, двумя или тремя, заместителями, выбранными из группы, состоящей из низшего алкила, тригалогеналкила, низшего алкокси, галогена и группы -ΝΚΧΚΥ, и гетероалицикла (связанного через кольцевой атом углерода), необязательно замещенного одним или несколькими, предпочтительно одним, двумя или тремя, заместителями, выбранными из группы, состоящей из низшего алкила, тригалогеналкила, низшего алкокси, галогена и группы -ΝΚΧΚΥ. Типичные ацильные группы включают, но не ограничиваются ими, ацетил, трифторацетил, бензоил и т.п.
Альдегид относится к ацильной группе, в которой Я представляет собой водород.
Тиоацил или тиокарбонил относится к группе -С(8)Я с Я, определенным выше. Тиокарбонильная группа относится к группе -С(8)Я с Я, определенным выше. С-Карбоксигруппа относится к группе -С(О)ОЯ с Я, определенным выше. О-Карбоксигруппа относится к группе -ОС(О)Я с Я, определенным выше.
Сложноэфирная относится к группе -С(О)ОЯ с Я, как определено в данном описании, за исключением того, что Я не может быть водородом.
Ацетильная группа относится к группе -С(О)СН3.
Галогеновая группа относится к фтору, хлору, брому или йоду, предпочтительно фтору или хлору.
Тригалогенметильная группа относится к метильной группе, имеющей три галогеновых заместителя, таких как трифторметильная группа.
Циано относится к группе -С=К
Сульфинильная группа относится к группе -8(О)Я, где, в дополнение к определенному выше, Я может также быть гидроксигруппой.
Сульфонильная группа относится к группе -8(О)2Я, где, в дополнение к определенному выше, Я может также быть гидроксигруппой.
8-Сульфонамидо относится к группе -8(О)2ЯЯХЯУ с Ях и Яу, определенными выше.
Ν-Сульфонамидо относится к группе -ЯЯХ8(О)2ЯУ с Ях и Яу, определенными выше. О-Карбамильная группа относится к группе -ОС(О)ЯЯХЯУ с Ях и Яу, определенными выше. Ν-Карбамил относится к группе ЯУОС(О)ЯЯХ- с Ях и Яу, определенными выше.
О-Тиокарбамил относится к группе -ОС(8^ЯХЯУ с Ях и ЯУ, определенными выше. Ν-Тиокарбамил относится к группе ЯУОС(8)ЯЯХ- с ЯУ и Ях, определенными выше.
Амино относится к группе -ЯЯХЯУ, где Ях и ЯУ оба представляют собой водород.
С-Амидо относится к группе -С(О)ЯЯХЯУ с Ях и ЯУ, определенными выше.
Ν-Амидо относится к группе ЯХС(О)ЯЯУ- с Ях и Я¥, определенными выше.
Нитро относится к группе -ЫО2.
Галогеналкил означает алкил, предпочтительно низший алкил, который замещен одним или несколькими одинаковыми или различными атомами галогена, например -СН2С1, -СТ3, -СН2СТ3, -СН2СС13 и т.п.
Гидроксиалкил означает алкил, предпочтительно низший алкил, который замещен одним, двумя или тремя гидроксигруппами; например гидроксиметил, 1- или 2-гидроксиэтил, 1,2-, 1,3- или 2,3дигидроксипропил и т. п.
Аралкил означает алкил, предпочтительно низший алкил, который замещен арильной группой, как определено выше; например -СН2фенил, -(СН2)2фенил, -(СН2)3фенил, СН3СН(СН3)СН2фенил и т.п. и их производные.
Гетероаралкильная группа означает алкил, предпочтительно низший алкил, который замещен гетероарильной группой; например -СН2пиридинил, -(СН2)2пиримидинил, -(СН2)3имидазолил и т.п. и их производные.
Моноалкиламино означает радикал -№НЯ, где Я представляет собой алкильную или незамещенную циклоалкильную группу; например метиламино, (1-метилэтил)амино, циклогексиламино и т.п.
Диалкиламино означает радикал -№ЯЯ, где каждый из Я независимо представляет собой алкильную или незамещенную циклоалкильную группу; диметиламино, диэтиламино, (1-метилэтил)этиламино, циклогексилметиламино, циклопентилметиламино и т.п.
Необязательный или необязательно означает, что описываемое впоследствии событие или обстоятельство может, но не должно обязательно осуществляться, и что описание включает случаи, где событие или обстоятельство осуществляется, и случаи, в которых этого не происходит. Например, гетероциклическая группа, необязательно замещенная алкильной группой, означает, что алкил может, но не должен обязательно присутствовать, и что описание включает ситуации, когда гетероциклическая группа
- 12 013678 замещена алкильной группой, и ситуации, когда гетероциклическая группа не замещена алкильной группой.
Фармацевтическая композиция относится к смеси одного или нескольких соединений, описанных здесь, или их физиологически/фармацевтически приемлемых солей, сольватов, гидратов или пролекарств, с другими химическими компонентами, такими как физиологически/фармацевтически приемлемые носители и эксципиенты. Целью фармацевтической композиции является облегчение введения соединения в организм.
Как здесь используется, физиологически/фармацевтически приемлемый носитель относится к носителю или разбавителю, который не вызывает значительного раздражения для организма и не ухудшает биологической активности и свойств введенного соединения.
Фармацевтически приемлемый эксципиент относится к инертному веществу, добавляемому к фармацевтической композиции для дополнительного облегчения введения соединения. Примеры, без ограничения, эксципиентов включают карбонат кальция, фосфат кальция, различные сахара и типы крахмала, производные целлюлозы, желатин, растительные масла и полиэтиленгликоли.
Как здесь используется, термин фармацевтически приемлемая соль относится к таким солям, которые сохраняют биологическую эффективность и свойства исходного соединения. Такие соли включают:
(ί) аддитивные соли кислот, которые могут быть получены взаимодействием свободного основания исходного соединения с неорганическими кислотами, такими как хлористо-водородная кислота, бромисто-водородная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота, серная кислота и перхлорная кислота и т.п., или с органическими кислотами, такими как уксусная кислота, щавелевая кислота, (Ό) или (Ь) яблочная кислота, малеиновая кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, птолуолсульфоновая кислота, салициловая кислота, винная кислота, лимонная кислота, янтарная кислота или малоновая кислота и т.п.; или (2) соли, образованные, когда протон кислоты, присутствующий в исходном соединении, либо заменяется ионом металла, например ионом щелочного металла, ионом щелочно-земельного металла или ионом алюминия; либо координируется с органическим основанием, таким как этаноламин, диэтаноламин, триэтаноламин, трометамин, Н-метилглюкамин и т.п.
РК относится к рецепторной протеинтирозинкиназе (ВТК), нерецепторной или клеточной тирозинкиназе (СТК) и серинтреонинкиназам (8ТК).
Модуляция или модулирующий относится к изменению каталитической активности ВТК, СТК и 8ТК. В частности, модулирующий относится к активированию каталитической активности ВТК, СТК и 8ТК, предпочтительно к активированию или ингибированию каталитической активности ВТК, СТК и 8ТК, в зависимости от концентрации соединения или соли, для которых ВТК, СТК или 8ТК экспонируются, или более предпочтительно к ингибированию каталитической активности ВТК, СТК и 8ТК.
Каталитическая активность относится к скорости фосфорилирования тирозина под воздействием, непосредственно или опосредованно, ВТК и/или СТК, или фосфорилирования серина и треонина под воздействием, непосредственно или опосредованно, 8ТК.
Контактирование относится к приведению в контакт соединения по настоящему изобретению и целевой РК таким образом, что соединение может воздействовать на каталитическую активность РК либо непосредственно, то есть путем взаимодействия с самой киназой, либо опосредованно, то есть путем взаимодействия с другой молекулой, от которой зависит каталитическая активность киназы. Такое контактирование может осуществляться ίπ νίίΓΟ, то есть в пробирке, чашке Петри или т.п. Контактирование в пробирке может включать в себя только соединение и РК, представляющую интерес, или может включать в себя целые клетки. Клетки можно также поддерживать или выращивать в чашках для культур клеток и приводить в контакт с соединением в этой окружающей среде. В этом контексте способность конкретного соединения воздействовать на расстройства, связанные с РК, то есть 1С50 соединения, определенная ниже, можно определять до попытки использования соединений ш νίνο с более сложными живыми организмами. Для клеток вне организма существует множество способов, и они хорошо известны специалистам в данной области, контактирования РК с соединениями, включая, но не ограничиваясь ими, непосредственную микроинъекцию в клетку и многочисленные методики трансмембранных носителей.
1п νίίτο относится к методикам, осуществляемым в искусственной окружающей среде, такой, например, как, без ограничения, пробирка или культуральная среда.
1п νίνο относится к методикам, осуществляемым в живом организме, таком как, без ограничения, мышь, крыса или кролик.
Расстройство, связанное с РК, расстройство, обусловленное РК и аномальная активность РК все относятся к состоянию, отличающемуся неправильной, то есть меньшей или, чаще, большей каталитической активностью РК, где конкретная РК может представлять собой ВТК, СТК или 8ТК. Неправильная каталитическая активность может возникать в результате либо: (1) экспрессии РК в клетках, которые обычно не экспрессируют РК, (2) повышенной экспрессии РК, приводящей к нежелательной пролиферации, дифференциации и/или росту клеток, либо (3) уменьшения экспрессии РК, приводящей к нежелательным сокращениям пролиферации, дифференциации и/или роста клеток. Сверхактивность РК
- 13 013678 относится либо к амплификации кодирования гена конкретной РК, либо к продуцированию уровня активности РК, который может коррелировать с расстройством, связанным с пролиферацией, дифференциацией и/или ростом клеток (то есть когда уровень РК увеличивается, тяжесть одного или нескольких симптомов клеточного расстройства увеличивается). Недостаточная активность является, разумеется, обратной, когда тяжесть одного или нескольких симптомов клеточного расстройства увеличивается, когда уровень активности РК уменьшается.
Лечить, лечебный и лечение относится к способу ослабления или устранения опосредуемого РК клеточного расстройства и/или связанных с ним симптомов. По отношению конкретно к раку, эти термины просто означают, что вероятность выживания индивидуума, подверженного раку, увеличится, или что один или несколько симптомов заболевания уменьшатся.
Организм относится к любому живому существу, состоящему по меньшей мере из одной клетки. Живой организм может быть настолько простым, например, как отдельная эукариотическая клетка, или настолько сложным, как млекопитающее, включая человеческое существо.
Терапевтически эффективное количество относится к такому количеству вводимого соединения, которое будет облегчать до некоторой степени один или несколько симптомов расстройства, подлежащего лечению. По отношению к лечению рака терапевтически эффективное количество относится к такому количеству, которое обладает по меньшей мере одним из следующих воздействий:
(1) уменьшает размер опухоли;
(2) ингибирует (то есть замедляет до некоторой степени, предпочтительно останавливает) метастазирование опухоли;
(3) ингибирует до некоторой степени (то есть замедляет до некоторой степени, предпочтительно останавливает) рост опухоли и (4) облегчает до некоторой степени (или предпочтительно устраняет) один или несколько симптомов, связанных с раком.
Мониторинг означает наблюдение или детектирование эффекта контактирования соединения с клеткой, экспрессирующей конкретную РК. Наблюдаемое или детектируемое воздействие может представлять собой изменение клеточного фенотипа, каталитической активности РК или изменение взаимодействия РК с природным партнером по связыванию. Методики наблюдения или детектирования таких воздействий хорошо известны в данной области. Воздействие выбирают из изменения или отсутствия изменения клеточного фенотипа, изменения или отсутствия изменения каталитической активности указанной протеинкиназы, или изменения или отсутствия изменения взаимодействия указанной протеинкиназы с природным партнером по связыванию в конечном аспекте настоящего изобретения.
Клеточный фенотип относится к внешнему виду клетки или ткани или к биологической функции клетки или ткани. Примерами, без ограничения, клеточного фенотипа являются размер клеток, рост клеток, пролиферация клеток, дифференциация клеток, выживаемость клеток, апоптоз и потребление и использование питательных веществ. Такие фенотипические характеристики измеряют с помощью методик, хорошо известных в данной области.
Природный партнер по связыванию относится к полипептиду, который связывается с конкретной РК в клетке. Природные партнеры по связыванию могут играть роль в распространении сигнала, опосредуемом РК, в процессе передачи сигнала. Изменение взаимодействия природного партнера по связыванию с РК может проявляться само по себе как повышенная или пониженная концентрация комплекса РК/природный партнер по связыванию и, в результате, в наблюдаемом изменении способности РК к опосредованию передачи сигнала.
Как используется в данном описании, термины оптически чистый, энантиомерно чистый, чистый энантиомер и оптически чистый энантиомер означают композицию, которая содержит один энантиомер соединения и, по существу, не содержит противоположный энантиомер соединения. Типичное оптически чистое соединение содержит более чем примерно 80 мас.% одного энантиомера соединения и менее чем примерно 20 мас.% противоположного энантиомера соединения, более предпочтительно более чем примерно 90 мас.% одного энантиомера соединения и менее чем примерно 10 мас.% противоположного энантиомера соединения, еще более предпочтительно более чем примерно 95 мас.% одного энантиомера соединения и менее чем примерно 5 мас.% противоположного энантиомера соединения и наиболее предпочтительно более чем примерно 97 мас.% одного энантиомера соединения и менее чем примерно 3 мас.% противоположного энантиомера соединения.
Подробное описание
Общие схемы синтеза соединений по настоящему изобретению можно найти в разделе Примеры.
Некоторые из общих методик показаны в связи с синтезом соединений, где остаток 1-(2,6-дихлор-3фторфенил)этокси представляет собой чистый (К)-изомер, а некоторые показаны в связи с соединениями, где указанный остаток представляет собой рацемическую смесь. Необходимо понять, что методики могут быть использованы здесь для получения рацемических соединений или энантиомерно чистых (К)-изомеров путем выбора соответствующего рацемического или энантиомерно чистого исходного вещества.
Методики, показанные здесь, могут быть использованы для получения разнообразных энантиомерно чистых соединений путем выбора соответствующего энантиомерно чистого исходного вещества. В
- 14 013678 дополнение к соединениям, показанным здесь, настоящее изобретение также предусматривает энантиомерно чистые соединения, соответствующие соединениям 3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-2-иламина и 3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2-иламина, показанным в заявке на патент США, серийный № 10/786610 (РСТ/ϋδ 2004/005495); в заявке на патент США, серийный № которой должен быть присвоен, дело номер РС 32546, зарегистрированной 26 августа 2004 г. и озаглавленной, Руга/о1о-8иЬкШи1еб Ат1пойе1егоату1 Сотроипбк ак Рго1еш Кшаке 1п1иЬйогк; и в заявке на патент США, серийный № которой должен быть присвоен, дело номер РС 32548, зарегистрированной 26 августа 2004 г. и озаглавленной Ат1пойе1егоагу1 Сотроипбк ак Рго1еш Кшаке 1п1иЬбогк. Описания этих документов включены здесь в качестве ссылок во всей их полноте.
Если не указано иного, в данном описании все ссылки на соединения по настоящему изобретению включают ссылки на их соли, сольваты, гидраты и комплексы и на их сольваты, гидраты и комплексы их солей, включая их полиморфы, стереоизомеры и изотопно-меченые версии.
Фармацевтически приемлемые соли включают аддитивные соли кислот и оснований (включая дисоли).
Соответствующие аддитивные соли кислоты получают из кислот, которые образуют нетоксичные соли. Примеры включают ацетатные, аспартатные, бензоатные, бесплатные, бикарбонатные/карбонатные, бисульфатные/сульфатные, боратные, камсилатные, цитратные, эдизилатные, эзилатные, формиатные, фумаратные, глюцептатные, глюконатные, глюкуронатные, гексафторфосфатные, гибензатные, гидрохлоридные/хлоридные, гидробромидные/бромидные, гидройодидные/йодидные, изетионатные, лактатные, малатные, малеатные, малонатные, мезилатные, метилсульфатные, нафтилатные, 2-напсилатные, никотинатные, нитратные, оротатные, оксалатные, пальмитатные, памоатные, фосфатные/гидрофосфатные/дигидрофосфатные, сахаратные, стеаратные, сукцинатные, тартратные, тозилатные и трифторацетатные соли.
Соответствующие соли оснований получают из оснований, которые образуют нетоксичные соли. Примеры включают соли алюминия, аргинина, бензатина, кальция, холина, диэтиламина, диоламина, глицина, лизина, магния, меглумина, оламина, калия, натрия, трометамина и цинка.
Обзор соответствующих солей см. в НапбЬоок о£ Рйаттасеибса1 8а11к: Ргорейтек, 8е1есбоп, апб Ике Ьу 81а111 апб \Уетш111 (\УПеу-УС’Н. ХУетйепп. Сеттапу, 2002), описание которой включено здесь в качестве ссылки во всей ее полноте.
Фармацевтически приемлемая соль соединений по настоящему изобретению может быть легко получена смешиванием вместе растворов соединения и желаемой кислоты или основания, по желанию. Соль можно осаждать из раствора и собирать фильтрованием или можно извлекать выпариванием растворителя. Степень ионизации соли может изменяться от полной ионизации до почти неионизованной соли.
Соединения по настоящему изобретению могут существовать как в несольватированных, так и в сольватированных формах. Термин сольват используют здесь для описания молекулярного комплекса, содержащего соединение по настоящему изобретению и одну или несколько фармацевтически приемлемых молекул растворителя, например этанола. Термин гидрат используется, когда растворитель представляет собой воду. Фармацевтически приемлемые сольваты в соответствии с настоящим изобретением включают гидраты и сольваты, в которых растворитель для кристаллизации может быть изотопно замещенным, например представлять собой Ό2Θ, б6-ацетон, б6-ДМСО.
Также включенными в объем настоящего изобретения являются комплексы, такие как клатраты, комплексы включения лекарственное средство-хозяин, где в противоположность указанным выше сольватам лекарственное средство и хозяин присутствуют в стехиометрических или нестехиометрических количествах. Также включенными являются комплексы лекарственного средства, содержащие два или более органических и/или неорганических компонентов, которые могут находиться в стехиометрических или нестехиометрических количествах. Полученные комплексы могут быть ионизированными, частично ионизированными или неионизированными. Обзор таких комплексов см. в 1 Рйатт 8с1, 64(8), 1269-1288 Ьу На1еЬ11ап (август 1975 г.), описание которой полностью включено здесь в качестве ссылки во всей ее полноте.
Также в объем настоящего изобретения входят полиморфы, пролекарства и изомеры (включая оптические, геометрические и таутомерные изомеры) соединений по настоящему изобретению.
Производные соединений по настоящему изобретению, которые сами по себе могут иметь низкую фармакологическую активность или не иметь вообще никакой активности, при введении пациенту могут быть преобразованы в соединения по настоящему изобретению, например, путем гидролитического расщепления. Такие производные упоминаются как пролекарства. Дополнительную информацию по применению пролекарств можно найти в Рто-Отидк ак Ыоуе1 ПеНуету 8ук1етк, уо1. 14, АС8 8утрокшт 8епек (Т. ШдисЫ апб 81е11а) и Вюгеуегк1Ь1е Сатегк ш Эгид Пеыдп, Регдатоп Ргекк, 1987 (еб. Е В Воске, Атепсап Рйаттасеибса1 Аккошабоп), описания которых включены здесь в качестве ссылок во всей их полноте.
Пролекарства в соответствии с настоящим изобретением могут, например, быть получены заменой соответствующих функциональных групп, присутствующих в соединениях по настоящему изобретению,
- 15 013678 определенными остатками, известными специалистам в данной области как проостатки, как описано, например, в Бебдп о£ Ргобгидз Ьу Н. Випбдаагб (Е1ксу1сг. 1985), описание которой полностью включено здесь в качестве ссылки во всей ее полноте.
Некоторые примеры пролекарств в соответствии с настоящим изобретением включают такие:
(ί) где соединение содержит функциональную группу карбоновой кислоты (-СООН), замену ее сложным эфиром, например замену водорода (С1-С8)алкилом;
(ίί) где соединение содержит функциональную группу спирта (-ОН), замену ее простым эфиром, например замену водорода (С1-С6)алканоилоксиметилом; и (ш) где соединение содержит первичную или вторичную функциональную аминогруппу (-ΝΗ2 или -ЛНВ, где В+Н), замену ее соответствующим амидом, например замену одного или обоих атомов водорода (С1-С10)алканоилом.
Дополнительные примеры заменяемых групп в соответствии с приведенными выше примерами и примеры других типов пролекарств можно найти в указанных выше ссылках.
Наконец, определенные соединения по настоящему изобретению могут сами по себе действовать в качестве пролекарств других соединений по настоящему изобретению.
Соединения по настоящему изобретению, содержащие один или несколько асимметричных атомов углерода, могут существовать в виде двух или более стереоизомеров. Когда соединение по настоящему изобретению содержит алкенильную или алкениленовую группу, возможны геометрические цис/транс (или Ζ/Е) изомеры. Когда соединение содержит, например, кетогруппу, или оксимную группу, или ароматический остаток, может возникать таутомерная изомерия (таутомерия). Одно соединение может демонстрировать более одного типа изомерии.
Включенными в объем настоящего изобретения являются все стереоизомеры, геометрические изомеры и таутомерные формы соединений по настоящему изобретению, включая соединения, демонстрирующие более одного типа изомерии, и смеси с одним или несколькими из них. Также включенными являются аддитивные соли кислот или оснований, где противоион является оптически активным, например Б-лактат или Ь-лизин, или рацемическим, например БЬ-тартрат или БЬ-аргинин.
цис/транс-Изомеры можно разделять с помощью обычных методик, хорошо известных специалистам в данной области, например хроматографией и фракционной кристаллизацией.
Обычные методики получения/выделения индивидуальных энантиомеров включают хиральный синтез из соответствующего оптически чистого предшественника или расщепление рацемата (или рацемата соли, или производного) с использованием, например, хиральной высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).
Альтернативно, рацемат (или рацемический предшественник) может взаимодействовать с соответствующим оптически активным соединением, например спиртом, или в случае, когда соединение содержит кислотный или основной остаток, с кислотой или основанием, таким как винная кислота или 1фенилэтиламин. Полученную диастереомерную смесь можно разделять хроматографией и/или фракционной кристаллизацией, и один или оба диастереоизомера преобразовать в соответствующий чистый энантиомер (энантиомеры) средствами, хорошо известными специалисту в данной области.
Хиральные соединения по настоящему изобретению (и их хиральные предшественники) могут быть получены в энантиомерно-обогащенной форме с использованием хроматографии, как правило, ВЭЖХ, на асимметричной смоле с подвижной фазой, состоящей из углеводорода, как правило, гептана или гексана, содержащей от 0 до 50% изопропанола, обычно от 2 до 20%, и от 0 до 5% алкиламина, как правило, 0,1% диэтиламина. Концентрирование элюата дает обогащенную смесь.
Стереоизомерные конгломераты можно разделять с помощью обычных методик, известных специалистам в данной области; см., например, 8!егеосйет181гу о£ Огдашс Сотроипбк Ьу Е.Ь. Е11е1 (^11еу, Уогк, 1994), описание которой включено здесь в качестве ссылки во всей ее полноте.
Настоящее изобретение также включает изотопно-меченные соединения по настоящему изобретению, где один или несколько атомов заменены атомом, имеющим такой же атомный номер, но атомную массу или массовое число, отличное от атомной массы или массового числа, обычно встречающегося в природе. Примеры изотопов, пригодных для включения в соединения по настоящему изобретению, включают изотопы водорода, такие как 2Н и 3Н, углерода, такие как 11 С, 13С и 14С, хлора, такие как 36С1, фтора, такие как Е, йода, такие как I и I, азота, такие как Ν и Ν, кислорода, такие как О, О и 18 32 35
О, фосфора, такие как Р, и серы, такие как 8. Определенные изотопно-меченые соединения по настоящему изобретению, например, содержащие радиоактивный изотоп, являются полезными при исследованиях распределения лекарственного средства и/или субстрата в тканях. Радиоактивные изотопы тритий, 3Н, и углерод-14, 14С, являются особенно пригодными для этой цели, учитывая их простоту включения и простые средства детектирования. Замещение более тяжелыми изотопами, такими как дейтерий, 2Н, может давать определенные терапевтические преимущества, возникающие благодаря большей метаболической стабильности, например, увеличенное время полужизни ш у1уо или уменьшенные требования к дозировке, и, следовательно, могут быть предпочтительными в некоторых обстоятельствах. Замещение изотопами, испускающими позитроны, такими как ПС, 18Е, 15О и 13Ν, могут быть полезными при исследованиях Розйгоп Ет188юп Тородгарйу (РЕТ) для изучения расположения рецепторов субстрата.
- 16 013678
Изотопно-меченные соединения по настоящему изобретению, как правило, могут быть получены с помощью обычных методик, известных специалистам в данной области, или с помощью способов, аналогичных тем, которые здесь описаны, с использованием соответствующего изотопно-меченого реагента вместо немеченного реагента, используемого в иных случаях.
Фармацевтически приемлемые сольваты в соответствии с настоящим изобретением включают такие, в которых растворитель кристаллизации может быть изотопно-замещенным, например Э2О, б6ацетон, б6-ДМСО.
Соединения по настоящему изобретению, предназначенные для фармацевтического применения, можно вводить в виде кристаллических или аморфных продуктов, или их смесей. Они могут быть получены, например, в виде твердых слоев, порошков или пленок такими способами, как преципитация, кристаллизация, сушка вымораживанием, сушка распылением, или сушка выпариванием. Для этой цели может использоваться микроволновая или радиочастотная сушка.
Соединения можно вводить отдельно или в сочетании с одним или несколькими другими соединениями по настоящему изобретению, или в сочетании с одним или несколькими другими лекарственными средствами (или в виде любого их сочетания). Как правило, их будут вводить в виде препарата в ассоциации с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми эксципиентами. Термин эксципиент используют здесь для описания любого ингредиента, отличного от соединения (соединений) по настоящему изобретению. Выбор эксципиента будет в большой степени зависеть от таких факторов, как конкретный способ введения, влияние эксципиента на растворимость и стабильность и природа лекарственной формы.
Фармацевтические композиции, подходящие для доставки соединений по настоящему изобретению, и способы их получения будут легко понятны специалистам в данной области. Такие композиции и способы их получения могут быть найдены, например, в ВеттдЮи'к Рйагтасеибса1 Заеисек, Ι91Η Еб1ίίοη (Маск РиБШЫид Сотрапу, 1995), описание которого включено здесь в качестве ссылки во всей его полноте.
Пероральное введение.
Соединения по настоящему изобретению можно вводить перорально. Пероральное введение может включать глотание, так что соединение поступает в желудочно-кишечный тракт, или же может быть использовано буккальное или сублингвальное введение, посредством которого соединение поступает в поток крови непосредственно из ротовой полости.
Препараты, подходящие для перорального введения, включают твердые препараты, такие как таблетки, капсулы, содержащие частицы, жидкости или порошки, лепешки (включая наполненные жидко стью), жевательную резинку, мульти- и наночастицы, гели, твердый раствор, липосомы, пленки (включая мукоадгезивные), суппозитории, спреи и жидкие препараты.
Жидкие препараты включают суспензии, растворы, сиропы и эликсиры. Такие препараты могут использоваться в качестве наполнителей в мягких или твердых капсулах и, как правило, содержат носитель, например воду, этанол, полиэтиленгликоль, пропиленгликоль, метилцеллюлозу или соответствующее масло, и один или несколько эмульгирующих агентов и/или суспендирующих агентов. Жидкие препараты могут быть также получены разбавлением твердого вещества, например из саше.
Соединения по настоящему изобретению могут быть также использованы в быстрорастворимых, быстродезинтегрируемых лекарственных формах, таких как те, которые описываются в Ехрей Оршюи ίη ТЬегареибс Ра1еп15. 11 (6), 981-986, Ыаид аиб Сйеи (2001), описание которой включено здесь в качестве ссылки во всей ее полноте.
Для таблеточных лекарственных форм, в зависимости от дозы, лекарственное средство может занимать от 1 до 80 мас.% от лекарственной формы, чаще от 5 до 60 мас.% от лекарственной формы. В дополнение к лекарственному средству таблетки обычно содержат дезинтегрант. Примеры дезинтегрантов включают натрий-крахмал гликолят, натрий-карбоксиметилцеллюлозу, кальций-карбоксиметилцеллюлозу, кроскармеллозу натрия, кросповидон, поливинилпирролидон, метилцеллюлозу, микрокристаллическую целлюлозу, низший алкилзамещенную гидроксипропилцеллюлозу, крахмал, предварительно желатинизированный крахмал и альгинат натрия. Как правило, дезинтегрант будет составлять от 1 до 25 мас.%, предпочтительно от 5 до 20 мас.% от лекарственной формы.
Связующие, как правило, используются для придания когезивных качеств таблеточному препарату. Подходящие для связующих включают микрокристаллическую целлюлозу, желатин, сахара, полиэтиленгликоль, природные и синтетические смолы поливинилпирролидон, предварительно желатинизированный крахмал, гидроксипропилцеллюлозу и гидроксипропилметилцеллюлозу.
Таблетки могут также содержать разбавители, такие как лактоза (моногидрат, высушенный распылением моногидрат, безводная и т.п.), маннит, ксилит, декстрозу, сахарозу, сорбит, микрокристаллическую целлюлозу, крахмал и дигидрат двухосновного фосфата кальция.
Таблетки также могут необязательно включать поверхностно-активные агенты, такие как лаурилсульфат натрия и полисорбат 80, и вещества, способствующие скольжению, такие как диоксид кремния и тальк. Когда они присутствуют, поверхностно-активные агенты, как правило, находятся в количествах от 0,2 до 5 мас.% таблетки, а вещества, способствующие скольжению, как правило, от 0,2 до 1 мас.% таб
- 17 013678 летки.
Таблетки обычно содержат также лубриканты, такие как стеарат магния, стеарат кальция, стеарат цинка, стеарилфумарат натрия и смеси стеарата магния с лаурилсульфатом натрия. Лубриканты обычно присутствуют в количествах от 0,25 до 10 мас.%, предпочтительно от 0,5 до 3 мас.% таблетки.
Другие обычные ингредиенты включают антиоксиданты, красящие вещества, ароматизирующие агенты, консерванты и агенты, маскирующие вкус.
Типичные таблетки содержат примерно до 80 мас.% лекарственного средства, примерно от 10 до примерно 90 мас.% связующего, примерно от 0 до примерно 85 мас.% разбавителя, примерно от 2 до примерно 10 мас.% дезинтегранта и примерно от 0,25 до примерно 10 мас.% лубриканта.
Таблеточные смеси можно штамповать непосредственно или посредством валков, с образованием таблеток. Таблеточные смеси или части смесей можно альтернативно гранулировать во влажном состоянии, в сухом состоянии или из расплава, отверждать из расплава или экструдировать перед таблетированием. Конечный препарат может содержать один или несколько слоев и может иметь или не иметь покрытия; или может быть инкапсулирован.
Приготовление таблеток подробно обсуждается в РЬагтасеибса1 Оокаде Рогтз: ТаЫсК Уо1. 1, Ьу Η. ЫеЬегтап апб Ь. ЬасЬтап, Магсе1 Оеккег, Ν.Υ., Ν.Υ., 1980 (Ι8ΒΝ 0-8247-6918-Х), описание которой полностью включено здесь в качестве ссылки во всей ее полноте.
Твердые препараты для перорального введения могут быть составлены с возможностью непосредственного и/или модифицированного высвобождения. Препараты с модифицированным высвобождением включают замедленное, длительное, импульсное, контролируемое, целевое и программируемое высвобождение.
Соответствующие препараты с модифицированным высвобождением описываются в патенте США № 6106864. Подробности других подходящих методик высвобождения, таких как высокоэнергетические дисперсии и осмотические и снабженные покрытием частицы, можно найти в Уегта е1 а1., РЬагтасеибса1 ТесЬпо1оду Оп-1те, 25(2), 1-14 (2001). Использование жевательной резинки для достижения контролируемого высвобождения описывается в заявке на международный патент XVО 00/35298. Описания этих рекомендаций включено здесь в качестве ссылок во всей их полноте.
Парентеральное введение.
Соединения по настоящему изобретению можно также вводить непосредственно в кровоток, в мышцу или во внутренний орган. Соответствующие средства для парентерального введения включают внутривенные, внутриартериальные, внутрибрюшинные, интратекальные, интравентрикулярные, внутриуретральные, надчревные, внутричерепные, внутримышечные и подкожные. Соответствующие устройства для парентерального введения включают игольные (включая микроиглы) инжекторы, инжекторы без игл и инфузионные методики.
Парентеральные препараты представляют собой, как правило, водные растворы, которые могут содержать эксципиенты, такие как соли, углеводы и буферные агенты (предпочтительно для рН от 3 до 9), но для некоторых применений они могут быть более удобно приготовлены в виде стерильного неводного раствора или в виде высушенной формы, которые должны использоваться в сочетании с соответствующим носителем, таким как стерильная, не содержащая пирогенов вода.
Получение парентеральных препаратов в стерильных условиях, например лиофилизацией, может быть легко осуществлено с использованием стандартных фармацевтических методик, хорошо известных специалистам в данной области.
Растворимость соединений по настоящему изобретению, используемых при получении парентеральных растворов, может быть увеличена использованием соответствующих методик приготовления, таких как включение агентов, повышающих растворимость.
Препараты для парентерального введения могут быть приготовлены с возможностью непосредственного и/или модифицированного высвобождения. Препараты с модифицированным высвобождением включают замедленное, длительное, импульсное, контролируемое, целевое и программируемое высвобождение. Таким образом, соединения по настоящему изобретению могут быть приготовлены в виде твердого продукта, полутвердого продукта или тиксотропной жидкости для введения в виде имплантированного депо, обеспечивающего модифицированное высвобождение активного соединения. Примеры таких препаратов включают покрытые лекарственными средствами стенты и микросферы РСЬЛ.
Местное введение.
Соединения по настоящему изобретению можно также вводить местно, на/в кожу или слизистую оболочку, то есть дермально или трансдермально. Типичные препараты для этой цели включают гели, гидрогели, лосьоны, растворы, кремы, мази, пудры, перевязочные средства, пены, пленки, накожные пластыри, пластинки, импланты, губки, волокна, повязки и микроэмульсии. Также могут использоваться липосомы. Типичные носители включают спирт, воду, минеральное масло, жидкий вазелин, белый вазелин, глицерин, полиэтиленгликоль и пропиленгликоль. Могут быть включены усилители проницаемости; см., например, 1 РЬагт 8с1, 88(10), 955-958 Ьу Ршпт апб Могдап (Ок1оЬег 1999). Другие средства для местного введения включают доставку путем электропорации, ионтофореза, фонофореза, сонофореза и инъекции с помощью микроигл или без игл (например, Ротебедес!™, В|о)ес1™ и т.п.). Описание этих ре
- 18 013678 комендаций включено здесь в качестве ссылок во всей их полноте.
Препараты для местного введения могут быть приготовлены с возможностью непосредственного и/или модифицированного высвобождения. Препараты с модифицированным высвобождением включают замедленное, длительное, импульсное, контролируемое, целевое и программируемое высвобождение.
Ингаляционное/интраназальное введение.
Соединения по настоящему изобретению могут быть также введены интраназально или путем ингаляции, как правило, в форме сухого порошка (либо самого по себе, в виде смеси, например в сухой смеси с лактозой, либо в виде частиц смешиваемого компонента, например смешиваемого с фосфолипидами, такими как фосфатидилхолин) из ингалятора для сухого порошка или в виде аэрозольного спрея, контейнера высокого давления, насоса, спрея, атомайзера (предпочтительно атомайзера, использующего электрогидродинамику для получения мелкодисперсного тумана) или небулайзера, с использованием соответствующего пропеллента, такого как 1,1,1,2-тетрафторпентан или 1,1,1,2,3,3,3-гептафторпропан, или без него. Для интраназального применения порошок может включать биоадгезивный агент, например хитозан или циклодекстрин.
Контейнер высокого давления, насос, спрей, атомайзер или небулайзер содержит раствор или суспензию соединения (соединений) по настоящему изобретению, включающий, например, этанол, водный раствор этанола или соответствующий альтернативный агент для диспергирования, солюбилизации или продления высвобождения активного вещества, пропеллент (пропелленты) в качестве растворителя и необязательное поверхностно-активное вещество, такое как триолеат сорбитана, олеиновая кислота или олигомолочная кислота.
Перед использованием в препарате в виде сухого порошка или суспензии продукт лекарственного средства доводят до микронных размеров, подходящих для доставки путем ингаляции (как правило, менее чем 5 мкм). Этого можно достичь любым соответствующим способом измельчения, таким как измельчение в спиральной струе, струйное измельчение в псевдоожиженном слое, обработка в сверхкритической жидкости с получением наночастиц, гомогенизация высокого давления или сушка распылением.
Капсулы (изготовленные, например, из желатина или НРМС), блистеры и картриджи для применения в ингаляторе или инсуфляторе могут быть приготовлены так, чтобы они содержали порошковую смесь соединения по настоящему изобретению, подходящую порошковую основу, такую как лактоза или крахмал, и модификатор характеристик, такой как 1-лейцин, маннит или стеарат магния. Лактоза может быть безводной или находиться в форме моногидрата, последнее - предпочтительно. Другие подходящие эксципиенты включают декстран, глюкозу, мальтозу, сорбит, ксилит, фруктозу, сахарозу и трегалозу.
Препарат в виде раствора для применения в атомайзере, использующем электрогидродинамику для получения тонкодисперсного тумана, может содержать от 1 до 20 мг соединения по настоящему изобретению на одно действие, и объем однократного действия может изменяться от 1 до 100 мкл. Типичный препарат содержит соединение по настоящему изобретению, пропиленгликоль, стерильную воду, этанол и хлорид натрия. Альтернативные растворители, которые могут использоваться вместо пропиленгликоля, включают глицерин и полиэтиленгликоль.
Соответствующие ароматизаторы, такие как ментол и левоментол, или подсластители, такие как сахарин или сахарин натрий, могут быть добавлены к этим препаратам по настоящему изобретению, предназначенным для ингаляционного/интраназального введения.
Препараты для ингаляционного/интраназального введения могут быть приготовлены с возможностью непосредственного и/или модифицированного высвобождения, с использованием, например, сополимера ЭЬ-молочной кислоты и гликолевой кислоты (РСЬА). Препараты с модифицированным высвобождением включают замедленное, длительное, импульсное, контролируемое, целевое и программируемое высвобождение.
В случае ингаляторов для сухого порошка и аэрозолей, единица дозы определяется посредством клапана, который доставляет отмеренное количество. Единицы в соответствии с настоящим изобретением, как правило, организуются для введения отмеренной дозы или пшика, содержащей желаемое количество соединения по настоящему изобретению. Общую ежедневную дозу можно вводить в разовой дозе или чаще, в виде разделенных доз в течение дня.
Ректальное/интравагинальное введение.
Соединения по настоящему изобретению могут быть введены ректально или вагинально, например, в форме суппозитория, пессария или клизмы. Масло какао представляет собой традиционную основу для суппозиториев, но различные альтернативы могут использоваться, если это необходимо.
Препараты для ректального/вагинального введения могут быть приготовлены с возможностью непосредственного и/или модифицированного высвобождения. Препараты с модифицированным высвобождением включают замедленное, длительное, импульсное, контролируемое, целевое и программируемое высвобождение.
Окулярное введение.
Соединения по настоящему изобретению могут быть также введены непосредственно в глаз или в ухо, как правило, в форме капель суспензии частиц микронных размеров или раствора в изотоническом, имеющем заданный рН, стерильном солевом растворе. Другие препараты, подходящие для окулярного и
- 19 013678 аурального введения, включают мази, биодеградируемые (например, губки из поглощаемого геля, коллаген) и недеградируемые биологически (например, силиконовые) импланты, пластинки, линзы и системы частиц или везикул, таких как ниосомы или липосомы. Полимер, такой как поперечно-сшитая полиакриловая кислота, поливиниловый спирт, гиалуроновая кислота, целлюлозный полимер, например гидроксипропилметилцеллюлоза, гидроксиэтилцеллюлоза или метилцеллюлоза, или гетерополисахаридный полимер, например гелановая камедь, может быть включен вместе с консервантом, таким как бензалконийхлорид. Такие препараты могут также доставляться путем ионтофореза.
Препараты для окулярного/аурального введения могут быть приготовлены с возможностью непосредственного и/или модифицированного высвобождения. Препараты с модифицированным высвобождением включают замедленное, длительное, импульсное, контролируемое, целевое или программируемое высвобождение.
Другие методики.
Соединения по настоящему изобретению могут быть объединены с растворимыми макромолекулярными веществами, такими как циклодекстрин и его соответствующие производные, или полимеры, содержащие полиэтиленгликоль, для улучшения их растворимости, скорости растворения, маскировки вкуса, биодоступности и/или стабильности для использования в любом из указанных выше способов введения.
Комплексы лекарственное средство-циклодекстрин, например, как обнаружено, в целом пригодны для большинства лекарственных форм и способов введения. Могут использоваться комплексы, как с включением, так и без включения. В качестве альтернативы непосредственному комплексообразованию с лекарственным средством, циклодекстрин может использоваться в качестве вспомогательной добавки, то есть в виде носителя, разбавителя или солюбилизатора. Чаще всего для этих целей используют альфа-, бета- и гамма-циклодекстрины, примеры которых можно найти в РСТ публикациях заявок на международный патент №№ XV О 91/11172, XVО 94/02518 и ХУО 98/55148, описания которых включено здесь в качестве ссылок во всей их полноте.
Дозировка.
Количество введенного активного соединения будет зависеть от субъекта, подлежащего лечению, тяжести расстройства или состояния, скорости введения, выведения соединения и ответственности предписывающего врача. Однако эффективная дозировка, как правило, находится в пределах примерно от 0,001 до примерно 100 мг на кг массы тела в день, предпочтительно примерно от 0,01 до примерно 35 мг/кг/день в разовой дозе или в разделенных дозах. Для 70-кг человека это составило бы количество примерно от 0,07 до примерно 7000 мг/день, предпочтительно примерно от 0,7 до примерно 2500 мг/день. В некоторых случаях уровни дозировки ниже нижнего предела указанного выше диапазона могут быть более чем адекватными, в то время как в других случаях могут использоваться еще большие дозы, не вызывая никакого вредного побочного воздействия, при этом такие большие дозы, как правило, разделяют на несколько меньших доз для введения в течение дня.
Наборы.
Поскольку может быть желательным введение комбинации активных соединений, например, для лечения конкретного заболевания или состояния, в объеме настоящего изобретения предусматривается, что две или более фармацевтических композиций, по меньшей мере одна из которых содержит соединение в соответствии с настоящим изобретением, могут быть удобно объединены в форме набора, пригодного для совместного введения композиций. Таким образом, набор по настоящему изобретению содержит две или более отдельных фармацевтических композиций, по меньшей мере одна из которых содержит соединение по настоящему изобретению, и средства для раздельного размещения таких композиций, такие как контейнер, бутылка с несколькими отделениями или пакет из фольги с несколькими отделениями. Примером такого набора является обычная блистерная упаковка, используемая для упаковки таблеток, капсул и т. п.
Набор по настоящему изобретению особенно подходит для введения различных лекарственных форм, например, для перорального и парентерального введения, для введения отдельных композиций с различными интервалами между дозировками или для титрования отдельных композиций по отношению друг к другу. Для удобства набор, как правило, содержит инструкции для введения и может снабжаться этикеткой для памяти.
Примеры
В следующих далее примерах Εΐ обозначает этил, Ас обозначает ацетил, Ме обозначает метил, Мк обозначает метансульфонил (СН38О2), 1Рг обозначает изопропил, НАТи обозначает гексафторфосфат 2-(7-аза-1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония, РЬ обозначает фенил, Вос обозначает трет-бутоксикарбонил, ЕЮАс обозначает этилацетат, НОАс обозначает уксусную кислоту, ΝΕΐ3 или Εΐ3Ν обозначает триэтиламин, ТГФ обозначает тетрагидрофуран, Э1С обозначает диизопропилкарбодиимид, НОВ! обозначает гидроксибензотриазол, МеОН обозначает метанол, 1РгОАс обозначает изопропилацетат, КОАс обозначает ацетат калия, ДМСО обозначает диметилсульфоксид, АсС1 обозначает ацетилхлорид, СЭС13 обозначает дейтерированный хлороформ, МТВЕ обозначает метил-трет-бутиловый эфир, ДМФА обозначает диметилформамид, Ас2О обо
- 20 013678 значает уксусный ангидрид, Ме38О1 обозначает йодид триметилсульфоксония, ΌΜΆΡ обозначает 4диметиламинопиридин, бррГ обозначает дифенилфосфиноферроцен, ΌΜΕ обозначает диметиловый эфир этиленгликоля, НОВТ обозначает 1-гидроксибензотриазол, ЕЭС обозначает 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид.
Следующие далее примеры приводятся для иллюстрации настоящего изобретения. Необходимо понять, однако, что настоящее изобретение не должно ограничиваться конкретными условиями или деталями, описанными в этих примерах.
Реагенты могут быть синтезированы, как здесь показано, или являются доступными из коммерческих источников (например, Λΐάποίι. Мй^аикее, ^1; Легок, Могпх ΡΙαίηχ. N1; Βίοχνηΐΐι 1и1етабоиа1, ΝαрегуШе, 1Ь; Ргоийег 8с1еибйс, Бодаи, ИТ; ТС1 Атейса, РогИаиб, ОН; СотЬ1-В1оскх, 8аи О1едо, СА; Майтх 8с1еиййс, Со1итЫа, 8С; Асгох, Мотх Р1ашх, N1; Айа Аехаг, \Уагб Н111, МА; Аро11о 8с1еиййс, ИК; и тому подобное), или могут быть синтезированы по методикам, известным в данной области.
Синтез нескольких конкретных реагентов показан в заявке на патент США, серийный № 10/786610, озаглавленной Атшойе1егоагу1 Сотроиибх ах Рго1еш Кшахе 1иЫЬйогх, зарегистрированной 26 февраля 2004 г., и в соответствующей заявке на международный патент РСТ/ϋδ 2004/005495 с таким же заглавием, зарегистрированной 26 февраля 2004 г. Другие реагенты могут быть синтезированы путем адаптации приведенных там методик, и специалист в данной области может легко адаптировать эти методики для получения желаемых соединений. Кроме того, эти ссылки содержат общие методики и конкретные примеры получения большого количества гетероариламиносоединений, и специалист в данной области может легко адаптировать такие методики и примеры для получения соединений по настоящему изобретению. Описания этих рекомендаций включено здесь в качестве ссылок во всей их полноте.
Когда упоминается общая или примерная методика синтеза, специалист в данной области может легко определить соответствующие реагенты, если они не указаны, исходя из общих или примерных методик. Некоторые из общих методик приводятся в качестве примеров получения конкретных соединений. Специалист в данной области может легко адаптировать такие методики к синтезу других соединений. Необходимо понять, что группы Н, показанные в общих методиках, как подразумевается, являются обобщенными и неограничивающими и не соответствуют определениям групп Н в других местах настоящего документа. Каждая такая группа Н представляет собой один или множество химических остатков, которые могут быть такими же или отличаться от других химических остатков, также представленных тем же символом Н. Специалист в данной области может легко определить диапазон групп Н, подходящих для примеров синтеза. Кроме того, представление незамещенного положения в структурах, показанных или упоминаемых в общих методиках, приводится для удобства и не означает замещения, как описано здесь в другом месте. Относительно конкретных групп, которые могут присутствовать либо как группы Н в общих методиках, либо как необязательные непоказанные заместители, это относится к описаниям в остальных частях настоящего документа, включая формулу изобретения, сущность изобретения и подробное описание.
Некоторые общие методики показаны со ссылками на синтез соединений, где остаток 1-(2,6дихлор-3-фторфенил)этокси представляет собой чистый (Н)-изомер, а некоторые показаны со ссылками на соединения, в которых указанный остаток представляет собой рацемическую смесь. Необходимо понять, что методики могут использоваться для получения рацемических соединений или энантиомерно чистых (Н)-изомеров путем выбора соответствующего рацемического или энантиомерно чистого исходного вещества.
Методики, показанные здесь, могут использоваться для получения большого разнообразия энантиомерно чистых соединений путем выбора соответствующего энантиомерно чистого исходного вещества. В дополнение к соединениям, показанным здесь, настоящее изобретение также предусматривает энантиомерно чистые соединения, соответствующие соединениям 3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси] пиридин-2-иламина и 3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2-иламина, показанным в заявке на патент США, серийный № 10/786610 (РСТ/ϋδ 2004/005495); в заявке на патент США, серийный № должен быть присвоен, номер дела РС 32546, зарегистрированной 26 августа 2004 г. и озаглавленной Ругахо1о-8иЬх111и1еб Агшиойе1егоагу1 Сотроиибх ах Рго1еш Кшахе 1п1иЬйогх; и в заявке на патент США, серийный № должен быть присвоен, номер дела РС 32548, зарегистрированной 26 августа 2004 г. и озаглавленной Атшойе1егоагу1 Сотроиибх ах Рго1еш Кшахе 1иЫЬйогх. Описания этих документов полностью включены здесь в качестве ссылок во всей их полноте.
Выбор исходных веществ.
5-Бром-3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-2-иламин (рацемат).
- 21 013678
1. 2,6-Дихлор-3-фторацетофенон (15 г, 0,072 моль) перемешивают в ТГФ (150 мл, 0,5М) при 0°С на ледяной бане в течение 10 мин. Медленно добавляют алюмогидрид лития (2,75 г, 0,072 моль). Реакционную смесь перемешивают при температуре окружающей среды в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждают на ледяной бане и добавляют по каплям воду (3 мл) с последующим добавлением 15% ЫаОН (3 мл) (медленно). Смесь перемешивают при температуре окружающей среды в течение 30 мин. Добавляют 15% №1ОН (9 мл), Мд8О4 и смесь фильтруют для удаления твердых продуктов. Твердые продукты промывают ТГФ (50 мл) и фильтрат концентрируют с получением 1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этанола (14,8 г, выход 95%) в виде желтого масла.
!Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 1,45 (д, 3Н), 5,42 (м, 2Н), 7,32 (м, 1Н), 7,42 (м, 1Н).
2. К перемешиваемому раствору трифенилфосфина (8,2 г, 0,03 моль) и ИЕАИ (13,65 мл 40% раствора в толуоле) в ТГФ (200 мл) при 0°С добавляют раствор 1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этанола (4,55 г, 0,021 моль) и 3-гидроксинитропиридина (3,35 г, 0,023 моль) в ТГФ (200 мл). Полученный яркооранжевый раствор перемешивают в атмосфере азота при температуре окружающей среды в течение 4 ч, при этом все исходные вещества реагируют. Растворитель удаляют и неочищенный продукт сухим загружают на силикагель и элюируют смесью этилацетат-гексан (20:80), получая 3-(2,6-дихлор-3фторбензилокси)-2-нитропиридин (6,21 г, 0,021 моль, 98%) в виде розового твердого продукта.
Ή-ЯМР (СИС13, 300 МГц) δ 1,8-1,85 (д, 3Н), 6,0-6,15 (кв, 1Н), 7,0-7,1 (т, 1Н), 7,2-7,21 (д, 1Н), 7,257,5 (м, 2Н), 8,0-8,05 (д, 1Н).
3. В перемешиваемой смеси АсОН (650 мл) и Е!ОН (500 мл) суспендируют 3-(2,6-дихлор-3фторбензилокси)-2-нитропиридин (9,43 г, 0,028 моль) и железную стружку (15,7 г, 0,28 моль). Реакционную смесь медленно кипятят с обратным холодильником и дают перемешиваться в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, затем добавляют диэтиловый эфир (500 мл) и воду (500 мл). Раствор осторожно нейтрализуют добавлением карбоната натрия. Объединенные органические экстракты промывают насыщенным раствором ЫаНСОз (2x100 мл), Н2О (2x100 мл) и насыщенным раствором соли (1x100 мл), затем сушат (Ыа28О4), фильтруют и концентрируют досуха в вакууме с получением 3-(2,6-дихлор-3-фторбензилокси)пиридин-2-иламина (9,04 г, 0,027 моль, 99%) в виде светлорозового твердого продукта.
!Н-ЯМР (СИС13, 300 МГц) δ 1,8-1,85 (д, 3Н), 4,9-5,2 (уш.с, 2Н), 6,7-6,84 (кв, 1Н), 7,0-7,1 (м, 1Н), 7,27,3 (м, 1Н), 7,6-7,7 (м, 1Н).
4. Перемешиваемый раствор 3-(2,6-дихлор-3-фторбензилокси)пиридин-2-иламина (9,07 г, 0,03 моль) в ацетонитриле охлаждают до 0°С на ледяной бане. К этому раствору добавляют порциями Νбромсукцинимид ^В8) (5,33 г, 0,03 моль). Реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 15 мин. Реакционную смесь концентрируют досуха в вакууме. Полученное темное масло растворяют в Е!ОАс (500 мл) и очищают хроматографией на силикагеле. Затем растворители удаляют в вакууме с получением 5-бром-3-(2,6-дихлор-3-фторбензилокси)пиридин-2-иламина (5,8 г, 0,015 моль, 51%) в виде белого твердого продукта.
Ή-ЯМР (СИС13, 300 МГц) δ 1,85-1,95 (д, 3Н), 4,7-5,0 (уш.с, 2Н), 5,9-6,01 (кв, 1Н), 6,8-6,95 (д, 1Н), 7,01-7,2 (т, 1Н), 7,4-7,45 (м, 1Н), 7,8-7,85 (д, 1Н).
5-Йод-3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-2-иламин (рацемат).
К раствору 3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-2-иламина (10,0 г, 33,2 ммоль) в ацетонитриле (600 мл) и уксусной кислоте (120 мл) добавляют Ν-йодсукцинимид (11,2 г, 49,8 ммоль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч и реакцию гасят раствором №ь82О5. После выпаривания остаток распределяют между этилацетатом и водой. Органический слой промывают 2Ν раствором №ОН, насыщенным раствором соли и сушат над №28О4. Неочищенный продукт очищают на колонке с силикагелем с получением 5-йод-3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-2-иламина (7,1 г, выход 50%). МС т/ζ 427 [М+1].
- 22 013678
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб) δ м.д. 1,74 (д, 1=6,57 Гц, 3Н), 5,91-5,99 (м, 3Н), 6,82 (д, 1=1,26 Гц, 1Н), 7,46 (т, 1=8,72 Гц, 1Н), 7,56 (дд, 1=8,97, 4,93 Гц, 1Н), 7,62 (д, 1=1,52 Гц, 1Н).
5-Бром-3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2-иламин (рацемат).
1. 2,6-Дихлор-3-фторацетофенон (15 г, 0,012 моль) перемешивают в ТГФ (150 мл, 0,5М) при 0°С на ледяной бане в течение 10 мин. Медленно добавляют алюмогидрид лития (от А1бг1сй. 2,75 г, 0,072 моль). Реакционную смесь перемешивают при температуре окружающей среды в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждают на ледяной бане и по каплям добавляют воду (3 мл) с последующим добавлением 15% ΝαΟΗ (3 мл) (медленно). Смесь перемешивают при температуре окружающей среды в течение 30 мин. Добавляют 15% ΝαΟΗ (9 мл), МдБО4 и смесь фильтруют для удаления твердых продуктов. Твердые продукты промывают ТГФ (50 мл) и фильтрат концентрируют с получением 1-(2,6-дихлор-3фторфенил)этанола (14,8 г, выход 95%) в виде желтого масла.
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 1,45 (д, 3Н), 5,42 (м, 2Н), 7,32 (м, 1Н), 7,42 (м, 1Н).
2. 5-Бром-3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2-иламин получают, следуя методике 2, ниже, из 1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этанола и 3,5-дибромпиразин-2-иламина.
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 1,74 (д, 3Н), 6,40 (м, 1Н), 6,52 (уш.с, 2Н), 7,30 (м, 1Н), 7,48 (м, 1Н), 7,56 (с, 1Н); МС т/ζ 382 (М+1).
Энантиомерно чистые исходные вещества.
РЬЕ представляет собой фермент, производимый Косйе и продаваемый через Вюса1а1у11ск 1пс. в виде неочищенного препарата эстеразы из печени свиньи, повсеместно известный как РЬЕ-АБ (покупают у Вюса1а1уйс5 как 1СК.-123, продается в виде суспензии в сульфате аммония). Фермент классифицируется в регистре САБ как гидролаза сложных эфиров карбоновых кислот, САБ №9016-18-6. Соответствующий номер в классификации ферментов представляет собой ЕС 3,1,1,1. Фермент, как известно, имеет широкую специфичность к субстрату, по отношению к гидролизу большого разнообразия сложных эфиров. Липазную активность определяют, используя способ на основе гидролиза этилбутирата в титраторе рН. 1 ЬИ (липазная единица) представляет собой количество фермента, которое высвобождает 1 мкмоль титруемой масляной кислоты в минуту при 22°С, рН 8,2. Препарат, о котором говорится здесь (РЬЕ-АБ, в виде суспензии), обычно доставляется в виде мутной коричнево-зеленой жидкости с заявленной активностью >45 ЬИ/мг (содержание белка примерно 40 мг/мл).
(1Б)-1-(2,6-Дихлор-3-фторфенил)этанол.
(1Б)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этанол, показанный как соединение (Б-1) на схемах ниже, получают сочетанием ферментативного гидролиза рацемического 1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этилацетата, этерификацией и химическим гидролизом с инверсией в соответствии со схемой В. Рацемический 1-(2,6дихлор-3-фторфенил)этилацетат (соединение А2) получают в соответствии со схемой А.
Схема А
1-(2,6-Дихлор-3 -фторфенил)этанол (А 1).
Боргидрид натрия (90 мг, 2,4 ммоль) добавляют к раствору 2',6'-дихлор-3'-фторацетофенона (А1бпсй каталожный № 52,294-5) (207 мг, 1 ммоль) в 2 мл безводного СН3ОН. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч, затем выпаривают с получением бесцветного масляного остатка. Остаток очищают флэш-хроматографией (элюируя 0^ 10% ЕЮАс в гексане) с получением соединения А1 в виде бесцветного масла (180 мг; 0,88 ммоль; выход 86,5%); МС (АРС1) (М-Н)- 208;
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-Ό) δ м.д. 1,64 (д, 1=6,82 Гц, 3Н), 3,02 (д, 1=9,85 Гц, 1Н), 6,97-7,07 (м, 1Н), 7,19-7,33 (м, 1Н).
1-(2,6-Дихлор-3 -фторфенил)этилацетат (А2).
Уксусный ангидрид (1,42 мл, 15 ммоль) и пиридин (1,7 мл, 21 ммоль) добавляют последовательно к раствору соединения А1 (2,2 г, 10,5 ммоль) в 20 мл СН2С12. Реакционную смесь перемешивают при ком
- 23 013678 натной температуре в течение 12 ч, а затем выпаривают с получением желтоватого масляного остатка. Остаток очищают флэш-хроматографией (элюируя 7^9% ЕЮАс в гексане) с получением соединения А2 в виде бесцветного масла (2,26 г; 9,0 ммоль; выход 85,6%);
1Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-Ό) δ м.д. 1,88 (д, 1=6,82 Гц, 3Н), 2,31 (с, 3Н), 6,62 (кв, 1=6,82 Гц, 1Н), 7,25 (т, 1=8,46 Гц, 1Н), 7,49 (дд, 1=8,84, 5,05 Гц, 1Н).
Схема В
А
В 50 мл колбу с кожухом, снабженную рН электродом, верхней мешалкой и линией добавления основания (1М ΝαΟΗ), добавляют 1,2 мл 100мМ калийфосфатного буфера, рН 7,0, и 0,13 мл суспензии РЬЕ А8. Затем по каплям добавляют соединение А2 (0,13 г, 0,5 ммоль, 1,00 зкв.) и полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 20 ч, поддерживая рН реакции постоянным при 7,0, с использованием 1М ΝαΟΗ. Как преобразование, так и ее (энантиомерный избыток) реакции отслеживают по ОФ-ВЭЖХ, и ее прекращают после того, как превращено 50% исходных веществ (приблизительно 17 ч при этих условиях). Затем смесь экстрагируют три раза 10 мл этилацетата для извлечения как сложного эфира, так и спирта, в виде смеси К-1 и 8-2.
Метансульфонилхлорид (0,06 мл, 0,6 ммоль) добавляют к раствору смеси К-1 и 8-2 (0,48 ммоль) в 4 мл пиридина в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч, затем выпаривают с получением масла. К смеси добавляют воду (20 мл), а затем добавляют ЕЮАс (20 мл х2) для экстрагирования водного раствора. Органические слои объединяют, сушат, фильтруют и выпаривают с получением смеси К-3 и 8-2. Эту смесь используют на следующей стадии реакции без дополнительной очистки.
'Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-Ό) δ м.д. 1,66 (д, 1=7,1 Гц, 3Н), 1,84 (д, 1=7,1 Гц, 3Н), 2,09 (с, 3Н), 2,92 (с, 3Н), 6,39 (кв, 1=7,0 Гц, 1Н), 6,46 (кв, 1=6,8 Гц, 1Н), 6,98-7,07 (м, 1Н), 7,07-7,17 (м, 1Н), 7,23-7,30 (м, 1Н), 7,34 (дд, 1=8,8, 4,80 Гц, 1Н).
Ацетат калия (0,027 г, 0,26 ммоль) добавляют к смеси К-3 и 8-2 (0,48 ммоль) в 4 мл ДМФА в атмосфере азота. Реакционную смесь нагревают до 100°С в течение 12 ч. К реакционной смеси добавляют воду (20 мл) и добавляют ЕЮАс (20 мл х2) для экстрагирования водного раствора. Объединенный органический слой сушат, фильтруют и выпаривают с получением масла 8-2 (72 мг, выход 61% в две стадии), ее хиральности: 97,6%.
'Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-Ό) δ м.д. 1,66 (д, 1=7,1 Гц, 3Н), 2,09 (с, 3Н), 6,39 (кв, 1=6,8 Гц, 1Н), 7,02 (т, 1=8,5 Гц, 1Н), 7,22-7,30 (м, 1Н).
Метоксид натрия (19 ммоль; 0,5М в метаноле) медленно добавляют к соединению 8-2 (4,64 г, 18,8 ммоль) в атмосфере азота при 0°С. Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч. Растворитель выпаривают и добавляют Н2О (100 мл). Охлажденную реакционную смесь нейтрализуют буферным раствором ацетата натрия-уксусной кислоты до рН 7. Этилацетат (100 мл х 2) добавляют для экстрагирования водного раствора. Объединенные органические слои сушат над Ыа28О4, фильтруют и выпаривают с получением белого твердого продукта (4,36 г, выход 94,9%);
8ГС-МС: 97% ее.
- 24 013678
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-Ό) δ м.д. 1,65 (д, 1=6,8 Гц, 3Н), 5,58 (кв, 1=6,9 Гц, 1Н), 6,96-7,10 (м, 1Н), 7,22-7,36 (м, 1Н).
3-[(1Я)-1 -(2,6-Дихлор-3-фторфенил)этокси]-2-нитропиридин.
3-Гидрокси-2-нитропиридин (175 мг, 1,21 ммоль) и трифенилфосфин (440 мг, 1,65 ммоль) добавляют последовательно к перемешиваемому раствору (18)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этанола (229,8 мг, 1,1 ммоль) в ТГФ (10 мл) в атмосфере азота. Реакционную смесь поддерживают при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем добавляют диизопропил азо-дикарбоксилат (0,34 мл, 1,65 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивают в течение дополнительных 12 ч. Реакционную смесь выпаривают в вакууме с получением масла. Остаток очищают флэш-хроматографией (элюируя 20^25% Е1ОАе в гексане) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого продукта (321,5 мг; 0,97 ммоль; выход 88,3%); МС (АРС1) (М+Н)+ 331; 8ЕС-МС: 99,5% ее.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-Ό) δ м.д. 1,85 (д, 1=6,6 Гц, 3Н), 6,10 (кв, 1=6,6 Гц, 1Н), 7,04-7,13 (м, 1Н), 7,21 (дд, 1=8,5, 1,14 Гц, 1Н), 7,30 (дд, 1=9,0, 4,9 Гц, 1Н), 7,37 (дд, 1=8,6, 4,6 Гц, 1Н), 8,04 (дд, 1=4,6, 1,3 Гц, 1Н).
3-[(1Я)-1 -(2,6-Дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-2-амин.
Железо (365 мг) добавляют к перемешиваемому раствору 3-[(1Я)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-2-нитропиридина (321 мг, 0,97 ммоль) в смеси Е1ОН (2 мл) и 2М НС1 (0,2 мл) при 0°С. Полученный раствор нагревают до 85°С в течение 2 ч. К охлажденной реакционной смеси добавляют целит (0,5 г). Эту смесь фильтруют через слой целита и выпаривают с получением указанного в заголовке соединения в виде темного масла. МС (АРС1) (М+Н)+ 301.
5-Бром-3-[1(Я)-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-2-иламин.
Энантиомерно чистый изомер Я получают, как описано выше для рацемата, но с использованием энантиомерно чистых исходных веществ, описанных выше.
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6), δ 1,74 (д, 3Н), 6,40 (м, 1Н), 6,52 (уш.с, 2Н), 7,30 (м, 1Н), 7,48 (м, 1Н), 7,56 (с, 1Н); МС т/ζ 382 (М+1).
5-Йод-3-[(Я)-1-(2,6-дихлор-3 -фторфенил)этокси]пиридин-2-иламин.
Периодную кислоту (60 мг, 0,24 ммоль), йод (130 мг, 0,5 ммоль) и серную кислоту (0,03 мл) добавляют последовательно к перемешиваемому раствору 3-[(1Я)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-2-амина (0,97 ммоль) в смеси уксусной кислоты (3 мл) и Н2О (0,5 мл). Полученный раствор нагревают до 80°С в течение 5 ч. Охлажденную реакционную смесь гасят Ν;·ι28Ο3, (80 мг) и подщелачивают насыщенным Να28Ο3 (2x100 мл) до рН 7. Добавляют СН2С12 (2x50 мл) для экстрагирования водного раствора. Объединенные органические слои сушат над Ν;·ι28Ο4. затем фильтруют и концентрируют в вакуу
- 25 013678 ме. Остаток очищают флэш-хроматографией (элюируя 35^40% ЕЮАс в гексане) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого масла (254 мг; 0,6 ммоль; выход 61,6%); МС (АРС!) (М+Н)+ 426.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-Ό) δ м.д. 1,81 (д, 1=6,8 Гц, 3Н), 4,86 (с, 2Н), 5,98 (кв, 1=6,57 Гц, 1Н), 6,96 (д, 1=1,5 Гц, 1Н), 7,08 (дд, 1=9,0, 8,0 Гц, 1Н), 7,31 (дд, 1=8,8, 4,8 Гц, 1Н), 7,78 (д, 1=1,8 Гц, 1Н).
5-Бром-3-[(В)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2-иламин.
Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой 2 из (18)-1-(2,6-дихлор-3фторфенил)этанола.
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-бе) δ 7,53 (с, 1Н), 7,48 (м, 1Н), 7,39 (т, 1Н), 6,48 (с, 2Н), 6,41 (кв, 1Н), 1,74 (д, 3Н);
ЖХ/МС: 381 [М+1]; с-Мет Κι: 0,796 мкМ.
Общая схема I для синтеза 5-арил-3-(замещенного-бензилокси)придин-2-иламина (6)
Общая методика 1 для синтеза 5-бром-3-(замещенного-бензилокси)пиридин-2-иламина (5).
1. Получение 3-(замещенного-бензилокси)-2-нитропиридина (3).
К перемешиваемому раствору С§2СО3 (1,0 мол. экв.)) в ДМФА (0,2М), в атмосфере Ν2, содержащему 3-гидрокси-4-нитропиридин (А1бпск 1,0 мол. экв.), добавляют замещенный бензилбромид (1,0 мол. экв.). Смесь перемешивают в течение 6 ч при температуре окружающей среды. Реакционную смесь затем разбавляют ЕЮАс и распределяют при помощи Н2О. Водный слой дважды экстрагируют ЕЮАс. Затем органические слои объединяют, промывают Н2О и насыщенным раствором соли, сушат над №28О4, фильтруют и концентрируют досуха в вакууме с получением 3-(замещенного-бензилокси)-2нитропиридина (3) в виде твердого продукта.
2. Получение 3-(замещенного-бензилокси)пиридин-2-иламина (4).
В перемешиваемой смеси АсОН и ЕЮН (1,3:1) суспендируют 3-(замещенный-бензилокси)-2нитропиридин (1,0 мол. экв., 1М) и железную стружку (1,0 мол. экв.). Реакционную смесь медленно нагревают с обратным холодильником и дают перемешиваться в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, затем фильтруют через тонкий слой целита. Полученный фильтрат нейтрализуют концентрированным ΝΗΉΗ, а затем три раза экстрагируют ЕЮАс. Объединенные органические экстракты промывают насыщенным NаΗСО3, Н2О и насыщенным раствором соли, сушат над №28О+ фильтруют и концентрируют досуха в вакууме с получением 3-(замещенногобензилокси)пиридин-2-иламина (4) в виде твердого продукта.
3. Получение 5-бром-3-(замещенного-бензилокси)пиридин-2-иламина (5).
Перемешиваемый раствор 3-(замещенного-бензилокси)пиридин-2-иламина (4) (1,0 мол. экв.) в ацетонитриле охлаждают до 0°С на ледяной бане. К этому раствору добавляют порциями Νбромсукцинимид (А1бпск 1,0 мол. экв.). Реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 15 мин. Реакционную смесь концентрируют досуха в вакууме. Полученное темное масло растворяют в ЕЮАс и распределяют при помощи Н2О. Органический слой затем дважды промывают насыщенным NаΗСО3 и один раз насыщенным раствором соли. К органическому слою добавляют активированный уголь и нагревают с обратным холодильником. Затем раствор охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через тонкий слой целита. Затем органический слой концентрируют досуха в вакууме до одной трети исходного объема. Затем твердые продукты отфильтровывают с получением 5-бром-3-(замещенногобензилокси)пиридин-2-иламина (5) в виде твердого продукта.
Общая схема II для синтеза 5-арил-3-(замещенного-бензилокси)пиразин-2-иламина
- 26 013678
Общая методика 2 для синтеза 5-бром-3-(замещенного-бензилокси)пиразин-2-иламина.
К охлажденному на льду раствору замещенного бензилового спирта (1,0 мол. экв.) и безводного тетрагидрофурана (0,14М) добавляют гидрид натрия (1,0 мол. экв.) (медленно) в атмосфере азота. После перемешивания в течение 30 мин добавляют 3,5-дибромпиразин-2-иламин (1,0 мол. экв.) в тетрагидрофуране (0,56М) через капельную воронку при большой скорости капельного добавления. После завершения добавления ледяную баню удаляют и реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в атмосфере азота и отслеживают по обращенно-фазовой ВЭЖХ. Через 18 ч ВЭЖХ показывает, что основная часть исходного 3,5-дибромпиразин-2-иламина прореагировала, и реакционной смеси дают охладиться до комнатной температуры. Реакционную смесь концентрируют, разбавляют этилацетатом и про мывают насыщенным раствором соли.
Органический слой сушат над безводным сульфатом магния и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают с использованием силикагеля, элюируя смесью этилацетат/дихлорметан 1:1, с получением 5-бром-3-(замещенного-бензилокси)пиразин-2-иламина в виде белого твердого продукта с выходом 60-90%.
Общая методика 3 для синтеза 5-арил-3-(замещенного-бензилокси)пиридин-2-иламина и 5-арил-3(замещенного-бензилокси)пиразин-2-иламина.
Смесь 5-бром-3-(замещенного-бензилокси)пиридин-2-иламина или 5-бром-3-(замещенногобензилокси)пиразин-2-иламина (1 мол. экв.), арилбороновой кислоты или ее сложного эфира (1,2 мол. экв.), хлорида бис(трифенилфосфин)палладия II (0,03 мол. экв.) и карбоната натрия (3,0 мол. экв.) в диметиловом эфире этиленгликоля и воде (10:0,5, 0,03М) дегазируют и три раза продувают азотом, а затем кипятят с обратным холодильником в атмосфере азота в течение ночи. Реакционную смесь охлаждают до температуры окружающей среды и разбавляют этилацетатом. Смесь промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат над На28О4 и очищают на колонке с силикагелем, получая 5-арил-3-(замещенныйбензилокси)пиридин-2-иламин или 5-арил-3-(замещенный-бензилокси)пиразин-2-иламин.
Общая методика 4 для реакции амидирования 6-амино-5-(замещенного-бензилокси)пиридин-3ил]бензойной кислоты.
К раствору 6-амино-5-(замещенной-бензилокси)пиридин-3-ил]бензойной кислоты (1 мол. экв.), гидрата 1-гидроксибензотриазола (НОВТ, 1,2 мол. экв.) и гидрохлорида 1-(3-диметиламинопропил)-3этилкарбодиимида (ЕЭС, 1,2 мол. экв.) в ДМФА (0,2М) добавляют амин (1,2 мол. экв.). Реакционный раствор перемешивают при комнатной температуре в течение ночи, затем разбавляют ЕЮАс и распределяют при помощи Н2О. Органические слои отделяют и водный слой экстрагируют ЕЮАс. Органические слои объединяют, промывают насыщенным НаНСОз и концентрируют досуха в вакууме. Продукт очищают, используя колоночную хроматографию (силикагель, от 99:1 до 95:5 СН2С12/МеОН). Фракции, со держащие продукт, концентрируют в вакууме с получением амидного продукта.
Общая методика 5 для получения 3-(замещенного-бензилокси)-5-(3-диалкиламинометил-1Н-индол5-ил)пиридин-2-иламина.
- 27 013678
К раствору бензотриазола (1,0 мол. экв.) в дихлорметане (0,2М) добавляют амин (1,0 мол. экв.). Реакционную смесь перемешивают в течение 5 мин при комнатной температуре, после чего добавляют формальдегид (37 мас.%, 1,0 мол. экв.) и реакционную смесь герметизируют и перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч. После того как ТСХ (10% этилацетат :дихлорметан) покажет, что исходный бензотриазол прореагировал, реакционную смесь сушат безводным сульфатом магния (10 г), фильтруют и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают на колонке с силикагелем, элюируя смесью этилацетат:дихлорметан 1:1, с получением желаемого продукта в виде белого твердого вещества.
К раствору промежуточного соединения аминометилбензотриазола (1,0 мол. экв.) в дихлорметане (0,43М) добавляют хлорид алюминия (2,0 мол. экв.), а затем 3-(2,6-дихлорбензилокси)-5-(1Н-индол-5ил)пиридин-2-иламин (1,1 мол. экв.). Реакционную смесь герметизируют и нагревают при перемешивании при 40°С в течение 3-4 ч. Прекращают нагрев реакционной смеси, затем дают ей охладиться до комнатной температуры. Реакционную смесь разбавляют гидроксидом натрия (0,2М) и хлороформом, повторно герметизируют в колбе и энергично перемешивают при комнатной температуре для растворения остатка. Хлороформ удаляют из водного слоя, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают на колонке с силикагелем, сначала элюируя смесью этилацетат:дихлорметан 1:1 для элюирования менее полярных примесей, а затем элюируя продукт смесью хлороформ:метанолгидроксид аммония 90:9:1. (Выходы 10-67%).
Общая методика 6 для синтеза 3-(замещенного-бензилокси)-5-фенилпиридин-2-иламина с использованием 3-(3-метоксибензилокси)-5-фенилпиридин-2-иламина.
К раствору 3-бензилокси-5-фенилпиридин-2-иламина (пример 1-87, 3,27 г, 11,8 ммоль) в метаноле (30 мл) добавляют Р6(ОН)2 (2,5 г, 2,37 ммоль). Смесь дегазируют и продувают водородом три раза, а затем перемешивают в атмосфере водорода из баллона в течение 5 ч. Реакционную смесь фильтруют через тонкий слой целита, промывают метанолом и конденсируют. После сушки в высоком вакууме получают 2-амино-5-фенилпиридин-3-ол (2,04 г, выход 93%). МС т/ζ 187 [М+1].
К раствору 2-амино-5-фенилпиридин-3-ола (2,04 г, 10,95 ммоль) в ТГФ (безводный, 30 мл) медленно добавляют ΝαΗ (1,31 г, 32,85 ммоль). Смесь перемешивают в атмосфере азота в течение 20 мин, а затем добавляют тритилхлорид (3,66 г, 13,14 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи в атмосфере азота. Растворитель выпаривают и остаток растворяют в дихлорметане, промывают водой и сушат над Να28Ο4. После фильтрования и конденсирования сырой продукт очищают на колонке с силикагелем, элюируя ЕЮЛс-гексаном (1:10), с получением 5-фенил-2(тритиламино)пиридин-3-ола (1,09 г, выход 23%). МС т/ζ 427 [М+1].
К раствору 5-фенил-2-(тритиламино)пиридин-3-ола (100 мг, 0,24 ммоль) в ТГФ (3 мл) добавляют С§2СО3 (79 мг, 0,24 ммоль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 20 мин, а затем добавляют 3-метоксибензилбромид (0,037 мл, 0,26 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при ком
- 28 013678 натной температуре в течение ночи, разбавляют дихлорметаном (5 мл) и фильтруют для удаления соли. Растворители выпаривают и остаток растворяют в 10% трифторуксусной кислоте в дихлорметане (2 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч и выпаривают. Остаток растворяют в дихлорметане, промывают насыщенным NаНСΟз и сушат над №ь8О31. После фильтрования и концентрирования сырой продукт очищают на колонке с силикагелем, элюируя смесью метанол-дихлорметан (градиент от 3 до 15%), с получением 3-(3-метоксибензилокси)-5-фенилпиридин-2-иламина в виде белого твердого продукта (43,5 мг, выход 60%).
Общая методика 7 для синтеза 3-(замещенного-бензилокси)-5-арилпиридин-2-иламина с использованием 5-[4-(2-морфолин-4-илэтокси)фенил]-3-(3-нитробензилокси)пиридин-2-иламина.
К раствору 2-амино-5-[4-(2-морфолин-4-илэтокси)фенил]пиридин-3-ола (полученного в соответствии с методиками для 2-амино-5-фенилпиридин-3-ола в примерах 1-88 заявки на патент США, серийный № 10/786610 (РСТ/и8 2004/005495), (45,5 мг, 0,14 ммоль) в ДМФА (3 мл) при 0°С добавляют ΝβΗ (60% в масле) (5,6 мг, 0,14 ммоль) и смесь перемешивают при 0°С в течение 20 мин. Затем добавляют 1бромметил-3-нитробензол и смесь перемешивают при 0°С в течение 1 ч и при комнатной температуре в течение 2 ч. Добавляют холодный 1Ν водный раствор НС1 (0,1 мл) и растворитель удаляют при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (СН2С12:МеОН:МН4ОН=100:3:0,3) с получением 5-[4-(2-морфолин-4-илэтокси)фенил]-3-(3-нитробензилокси)пиридин-2-иламина в виде желтого твердого продукта (44 мг, 68%).
Общая методика 8 для синтеза {4-[6-амино-5-(замещенного-бензилокси)пиридин-3-ил]фенил}[(2В)-2-пирролидин-1-илметилпирролидин-1-ил]метанона с использованием {4-[6-амино-5-(4-фтор-2трифторметилбензилокси)пиридин-3 -ил] фенил }-[(2В)-2-пирролидин-1 -илметилпирролидин-1 ил]метанона.
1. 6-Амино-5-бензилоксиникотиновую кислоту получают в соответствии с методикой 3 из 3бензилокси-5-бромпиридин-2-иламина и 4-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)бензойной кислоты. МС т/ζ 321 (М+1).
2. [4-(6-Амино-5-бензилоксипиридин-3-ил)фенил]-[(2В)-2-пирролидин-1-илметилпирролидин-1ил]метанон получают, следуя методике 4, с использованием 6-амино-5-бензилоксиникотиновой кислоты и (2В)-пирролидин-1-илметилпирролидина (полученного в примере 1-39 заявки на патент США, серийный № 10/786610 (РСТ/И8 2004/005495)). МС т/ζ 457 (М+1).
3. К раствору [4-(6-амино-5-бензилоксипиридин-3-ил)фенил]-[(2В)-пирролидин-1-илметилпирролидин-1-ил] метанона (2,28 г, 5,00 ммоль) в метаноле (25 мл) добавляют 10% Р6/С (100 мг). Смесь дегазируют и продувают водородом за три раза, а затем перемешивают в атмосфере водорода из баллона в течение ночи. Реакционную смесь фильтруют через тонкий слой целита, промывают метанолом и конденсируют. После сушки в высоком вакууме получают [4-(6-амино-5-гидроксипиридин-3-ил)фенил][(2В)-2-пирролидин-1-илметилпирролидин-1-ил]метанон (1,74 г, выход 95%).
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-66) δ 7,79 (с, 1Н), 7,54 (м, 3Н), 7,46 (м, 2Н), 7,14 (с, 1Н), 5,68 (с, 2Н), 4,22 (м, 1Н), 3,45 (м, 2Н), 2,66 (м, 1Н), 2,52 (м, 4Н), 1,96 (м, 2Н), 1,84 (м, 3Н), 1,64 (м, 4Н); МС т/ζ 367 (М+1).
- 29 013678
4. К перемешиваемому раствору [4-(6-амино-5-гидроксипиридин-3-ил)фенил]-[(2К)-2-пирролидин1-илметилпирролидин-1-ил] метанона (100 мг, 0,27 ммоль) в безводном ДМФА (15 мл), выдерживаемом в атмосфере Ν2 при 0°С, добавляют гидрид натрия (60% дисперсия в минеральном масле, 11 мг, 0,49 ммоль). Смеси дают перемешиваться при 0°С в течение 30 мин. Добавляют 1-(бромметил)-4-фтор-2(трифторметил)бензол (0,046 мл, 0,27 ммоль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляют ЕЮАс и распределяют при помощи Н2О. Водный слой экстрагируют ЕЮАс (2x25 мл). Органические слои объединяют, промывают Н2О (1x15 мл), насыщенным раствором соли (1x15 мл), сушат над Мд§О4, фильтруют, концентрируют и очищают на колонке с силикагелем, получая {4-[6-амино-5-(4-фтор-2-трифторметилбензилокси)пиридин-3-ил]фенил}-[(2К)-2-пирролидин-1илметилпирролидин-1-ил]метанон в виде серо-белых кристаллов.
Общая методика 9 для синтеза [6-амино-5-(замещенного-бензилокси)пиридин-3-ил]фениламида 2диалкиламиноэтансульфоновой кислоты с использованием {4-[6-амино-5-(2-хлор-3,6-дифторбензилокси)пиридин-3-ил]фенил}амида 2-диэтиламиноэтансульфоновой кислоты.
1. К раствору 4-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)фениламина (5 г, 22,8 ммоль) в дихлорметане (120 мл) добавляют Ν-метилморфолин (7,5 мл, 68,4 ммоль). Эту смесь охлаждают до 0°С в атмосфере азота. Затем добавляют по каплям 2-хлорэтансульфонилхлорид (2,5 мл, 23,9 ммоль) в дихлорметане (60 мл) при перемешивании. После завершения добавления перемешивают при 0°С в течение 1 ч, а затем при комнатной температуре, в то же время отслеживая по ТСХ (1:1, этилацетат:гексан) и окрашивая нингидрином. После 4 ч перемешивания некоторое количество исходного сложного эфира бороновой кислоты по-прежнему остается, и дополнительные 0,2 экв. (0,5 мл) 2-хлорэтансульфонилхлорида в дихлорметане (25 мл) добавляют по каплям при комнатной температуре. Через 1 ч сложный эфир бороновой кислоты расходуется, как показывает ТСХ, и общий объем реакционной смеси уменьшают до половины с помощью роторного испарителя. Содержимое разбавляют этилацетатом (200 мл), промывают 50% насыщенным раствором соли (2x100 мл), сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют в вакууме. Сырой продукт очищают с использованием силикагеля (120 г) и элюируя 10% этилацетатом, дихлорметаном, с получением [4-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)фенил]амида этенсульфоновой кислоты в виде белого твердого вещества (6,2 г, 20,2 ммоль, выход 89%).
’Н-ЯМР (СЭС13, 300 МГц) δ 7,76 (д, 1=8,4, 2Н), 7,12 (д, 1=8,45, 2Н), 6,65 (с, 1Н), 6,55 (дд, 1=9,77, 6,7, 1Н), 6,31 (д, 1=16,54, 1Н), 5,96 (д, 1=9,8, 1Н), 1,33 (с, 12Н).
2. К раствору [4-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)фенил]амида этенсульфоновой кислоты (0,500 г, 1,6 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляют диэтиламин (0,707 г, 4,0 ммоль) в метаноле (5 мл) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре и отслеживают по ТСХ (1:1 этилацетат:гексан). Через 2 ч реакционную смесь концентрируют в вакууме и остаток распределяют между этилацетатом (50 мл) и водой (50 мл). Затем этилацетат промывают 50% насыщенным раствором соли (1x50 мл), сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют в вакууме. Сырой продукт очищают с использованием предварительно набитой 10 г силикагеля колонки, элюируя смесью этилацетат:дихлорметан 1:1, с получением [4-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)фенил]амида 2диэтиламиноэтансульфоновой кислоты в виде белого твердого вещества (0,346 г, 0,90 ммоль, 56%).
'ίΐ-ЯМР (СЭС13, 300 МГц) δ 7,78 (д, 1=6,65, 2Н), 7,15 (д, 1=6,66, 2Н), 3,20 (м, 2Н), 3,0 (м, 2Н), 2,55 (кв, 1=7,15, 7,16 4Н), 1,34 (с, 12Н), 1,05 (т, 1=7,19, 6Н).
3. {4-[6-Амино-5-(2-хлор-3,6-дифторбензилокси)пиридин-3-ил]фенил}амид 2-диэтиламиноэтансульфоновой кислоты получают, следуя общей методике 3 сочетания Судзуки, из 5-бром-3-(2-хлор-3,6дифторбензилокси)пиридин-2-иламина и [4-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)фенил]амида 2-диэтиламиноэтансульфоновой кислоты, полученного в части 2, в виде белого твердого вещества с выходом 60%.
Общая методика 10.
1. 4-(4,4,5,5-Тетраметил-1,3,2-диоксаборалан-2-ил)анилин (3 г, 0,013 моль) растворяют в дихлорметане (350 мл), к которому добавляют пиридин (1,02 г, 0,013 моль) и 4-нитрофенилхлорформиат. Реакционную смесь перемешивают в течение 13 ч, пока анализ ТСХ не покажет расходование всех исходных
- 30 013678 веществ. Раствор промывают насыщенным NаНСО3 (3x50 мл), водой (3x50 мл) и насыщенным раствором соли (3x50 мл). Органический слой сушат над №28О4 и растворитель удаляют с получением белого кристаллического твердого продукта фенилового эфира [4-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2ил)фенил]карбаминовой кислоты, 4,45 г, 91%.
Ή-ЯМР (СОС13 300 МГц) δ 1,4 (с, 12Н), 7,1 (уш.с, 1Н), 7,3 (д, 2Н), 7,5 (д, 2Н), 7,8 (д, 2Н), 8,3 (д, 2Н).
2. Фениловый эфир [4-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)фенил]карбаминовой кислоты (500 мг, 1,3 ммоль) растворяют в безводном дихлорметане (0,5 мл) и триэтиламине (0,187 мл, 1,3 ммоль). К этому перемешиваемому раствору добавляют 1-метилпиперазин (или любой другой амин) (0,144 мл, 1,3 ммоль). Раствор немедленно становится желтым, и анализ ТСХ показывает расходование всего исходного вещества. Реакционную смесь промывают водой (3x500 мл), насыщенным раствором бикарбоната натрия (2x200 мл) и сушат перед удалением растворителей в вакууме. Сложные эфиры бороновой кислоты используют без очистки.
3. К смеси 2,1 мл ΌΜΕ и 2,8 мл 2Ν №ьСО3 добавляют 100 мг бромидного каркаса, 1 экв. бороновой кислоты, и 5 мол.% Рб(РРЬ3)4. Реакционную смесь перемешивают и нагревают при 80°С в течение ночи в двухдрахмовом флаконе. Сырую смесь фильтруют через цеолит и экстрагируют ЕЮАс (2x100 мл). Объединенные экстракты промывают NаНСО3 (1x100 мл), затем водой (1x100 мл), а затем насыщенным раствором соли (1x100 мл). Полученную смесь концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в гексане и очищают колоночной хроматографией.
Общая методика 11.
1. К раствору 3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-2-иламина (10,0 г, 33,2 ммоль) в ацетонитриле (600 мл) и уксусной кислоте (120 мл) добавляют Ν-йодсукцинимид (11,2 г, 49,8 ммоль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч и реакцию гасят раствором №282О5. После выпаривания остаток распределяют между этилацетатом и водой. Органический слой промывают 2Ν раствором №1ОН. насыщенным раствором соли и сушат над №128О4. Сырой продукт очищают на колонке с силикагелем, получая 3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-йодпиридин-2-иламин (7,1 г, 50% выход). МС т/ζ 427 [М+1].
2. К раствору 3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-йодпиридин-2-иламина (7,1 г, 16,6 ммоль) и трет-бутилового эфира проп-2-инилкарбаминовой кислоты (3,1 г, 20,0 ммоль) в ТГФ (60 мл) и Εΐ3Ν (60 мл) добавляют Си1 (63 мг, 0,3 ммоль) и Рб(РРЬ3)4 (384 мг, 0,3 ммоль). Смесь перемешивают в атмосфере азота и отслеживают по ТСХ до завершения реакции. Смесь экстрагируют ЕЮАс и промывают водой. Сырой продукт очищают на колонке с силикагелем, элюируя 20-40% ЕЮАс в гексане, с получением
- 31 013678 трет-бутилового эфира (3-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}проп-2инил)карбаминовой кислоты (2,2 г, выход 29%).
3. Раствор трет-бутилового эфира (3-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3ил}проп-2-инил)карбаминовой кислоты в 25% ТФУК в дихлорметане перемешивают в течение 2 ч, затем промывают 2Ν ΝαΟΗ, дважды водой, насыщенным раствором соли, сушат над №ь8О4. После фильтрования и выпаривания получают 5-(3-аминопроп-1-инил)-3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин2-иламин с выходом 93%.
4. К раствору 5-(3-аминопроп-1-инил)-3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-2-иламина (0,282 ммоль, 1 экв.) и 4-нитрофенилхлорформиата (1 экв.) в безводном дихлорметане (10 мл) добавляют пиридин (1 экв.). Реакционную смесь перемешивают в течение 4 ч в атмосфере азота, а затем добавляют выбранный амин (1 экв.) и триэтиламин (1 экв.). Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 5 мин и охлаждают до комнатной температуры. Реакционную смесь промывают водой. Органический слой выпаривают и очищают на колонке с силикагелем, элюируя 0-20% метанолом в дихлорметане на предварительно набитых силикагелем колонках. Конечные выходы изменяются в пределах между 24 и 71%.
1. К раствору 5-(3-аминопроп-1-инил)-3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-2-иламина (полученному по методике 11) (400 мг, 1,1 ммоль) в дихлорметане (17 мл) добавляют хлорацетилхлорид (153 мг, 1,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре, отслеживая по ТСХ завершение реакции. После завершения растворитель выпаривают с получением сырого продукта.
2. К раствору №(3-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}проп-2-инил)-2хлорацетамида (1 экв.) в ацетонитриле (5 экв.) добавляют индивидуальный амин (5 экв.). Смесь кипятят с обратным холодильником в атмосфере азота в течение ночи. После выпаривания растворителя остаток очищают на колонке с силикагелем, элюируя 1-10% метанолом в дихлорметане, с получением продукта с выходами, изменяющимися в пределах между 47-97%.
Общая методика 13.
1. К перемешиваемому раствору 2-амино-3-бензилоксипиридина (42,0 г, 0,21 моль) в 0Ή3,0’Ν (600 мл) при 0°С добавляют Ν-бромсукцинимид (37,1 г, 0,21 моль) в течение 30 мин. Смесь перемешивают в течение 0,5 ч, после чего реакционную смесь разбавляют ЕЮАс (900 мл) и распределяют при помощи Н2О (900 мл). Органический слой промывают насыщенным раствором соли и сушат (Να28Ο4), фильтруют и концентрируют досуха в вакууме с получением 3-бензилокси-5-бромпиридин-2-иламина (31,0 г, 0,11 моль, 53%).
Ή-ЯМР (СОС13, 300 МГц) δ 4,63-4,78 (уш.с, 2Н), 5,04 (с, 2Н), 7,07 (д, 1Н, 1=1,8 Гц), 7,33-7,42 (м, 5Н), 7,73 (д, 1Н, 1=1,8 Гц).
2. К перемешиваемой смеси 3-бензилокси-5-бромпиридин-2-иламина (31,0 г, 0,11 моль) в смеси ΌΜΕ (600 мл) и Н2О (600 мл) добавляют 4-карбоксиметилбороновую кислоту (29,9 г, 0,11 моль), Рб(РРй3)4 (6,4 г, 5,55 ммоль) и №ьСО3 (82,0 г, 0,78 моль). Реакционную смесь медленно нагревают с обратным холодильником и дают перемешиваться в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, затем разбавляют СН2С12 (1,5 л) и распределяют при помощи Н2О (700 мл). Орга
- 32 013678 нический слой промывают насыщенным ЫаНСО3 (700 мл), сушат (Яа28О4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Сырое вещество очищают колоночной хроматографией (силикагель, от 1:1 до 4:1 Е!ОАс:гексан) и фракции, содержащие продукт, объединяют и концентрируют в вакууме с получением метилового эфира 4-(6-амино-5-бензилоксипиридин-3-ил)бензойной кислоты (29,4 г, 0,086 моль, 79%).
!Н-ЯМР (СПС13, 300 МГц) δ 3,92 (с, 3Н), 4,82-4,94 (уш.с, 2Н), 5,15 (с, 2Н), 7,22 (д, 1Н, 1=1,8 Гц), 7,33-7,42 (м, 5Н), 7,54 (д, 2Н, ί=8,6), 7,98 (д, 1Н, 1=1,8 Гц), 8,06 (д, 2Н, 1=8,6 Гц).
3. К перемешиваемому раствору метилового эфира 4-(6-амино-5-бензилоксипиридин-3ил)бензойной кислоты (10,0 г, 0,03 моль) в смеси Е!ОН:Н2О (95:5, 600 мл) добавляют Рй/С (15,9 г, 0,015 моль) (реакционную смесь дегазируют в вакууме). Раствору дают перемешиваться в атмосфере Н2 в течение 22 ч. Раствор фильтруют через влажный целит и целит промывают ЕЮН. Фильтрат концентрируют в вакууме с получением метилового эфира 4-(6-амино-5-гидроксипиридин-3-ил)бензойной кислоты (2,3 г, 9,3 ммоль, 31%).
!Н-ЯМР (МеОЭ, 300 МГц) δ 3,90 (с, 3Н), 7,21 (д, 1Н, 1=1,9 Гц), 7,62 (д, 2Н, й=8,5 Гц), 7,76 (д, 1Н, 1=1,9 Гц), 8,04 (д, 2Н, й=8,5 Гц).
4. К перемешиваемому раствору метилового эфира 4-(6-амино-5-гидроксипиридин-3-ил)бензойной кислоты (2,3 г, 9,3 ммоль) в СН2С12 (180 мл) добавляют Ν,Ν-диизопропилэтиламин (3,2 мл, 0,019 моль), 4-метилбензолсульфонилхлорид (2,66 г, 0,014 моль) и Р8-ЭМАР (каталитическое количество). Реакционную смесь перемешивают при температуре окружающей среды в течение 6 ч, затем фильтруют для удаления смолы. Смолу промывают СН2С12 (3х20 мл) и объединенные фракции промывают 10% лимонной кислотой (100 мл), насыщенным №1С1 (100 мл), сушат (№ь8О4) и фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученное сырое вещество очищают колоночной хроматографией (силикагель, от 100% СН2С12 до 95:5 СН2С12:МеОН) и фракции, содержащие желаемый продукт, объединяют и концентрируют в вакууме с получением метилового эфира 4-[6-амино-5-(толуол-4-сульфонилокси)пиридин-3-ил]бензойной кислоты (3,3 г, 8,2 ммоль, 88%).
!Н-ЯМР (СПС13, 300 МГц) δ 2,47 (с, 3Н), 3,93 (с, 3Н), 4,81-4,88 (уш.с, 2Н), 7,36-7,44 (м, 5Н), 7,81 (д, 2Н, й=8,3 Гц), 8,05 (д, 2Н, 1=8,4 Гц), 8,19-8,27 (уш.с, 1Н).
5. К перемешиваемому раствору 1-(3-фтор-2-трифторметилфенил)этанола (2,0 г, 9,6 ммоль) в безводном ДМФА (500 мл) при 0°С в атмосфере Ν2 добавляют №1Н (0,38 г, 9,6 ммоль). Реакционной смеси дают перемешиваться в течение 0,5 ч. Раствор метилового эфира 4-[6-амино-5-(толуол-4сульфонилокси)пиридин-3-ил]бензойной кислоты (3,8 г, 9,6 ммоль) в безводном ДМФА (30 мл) добавляют к реакционной смеси, которой дают медленно дойти до температуры окружающей среды, и перемешивают в течение 21 ч при этой температуре. Реакционную смесь разбавляют ЕЮАс (500 мл) и Н2О (100 мл). Органический слой отделяют, а водный слой дополнительно экстрагируют ЕЮАс (1х200 мл). Органические слои объединяют и промывают насыщенным раствором соли (1х100 мл), сушат №ь8О4 и концентрируют досуха в вакууме. Сырую смесь очищают колоночной хроматографией (силикагель, от 40:60 до 70:30 ЕЮАс.тексан) и фракции, содержащие продукт, объединяют и концентрируют в вакууме с получением метилового эфира 4-{6-амино-5-[1-(3-фтор-2-трифторметилфенил)этокси]пиридин-3ил}бензойной кислоты (1,4 г, 3,2 ммоль, 34%).
!Н-ЯМР (СПС13, 300 МГц) δ 1,73 (д, 3Н, 1=6,2 Гц), 3,91 (с, 3Н), 4,87-4,64 (уш.с, 2Н), 5,81 (кв, 1Н, 1=6,1, 6,3 Гц), 6,92 (д, 1Н, 1=1,8 Гц), 7,38 (д, 2Н, й=8,5 Гц), 7,46-7,66 (м, 3Н), 7,93 (д, 1Н, 1=1,8 Гц), 8,02 (д, 2Н, й=8,5 Гц).
6. К перемешиваемому раствору метилового эфира 4-{6-амино-5-[1-(3-фтор-2трифторметилфенил)этокси]пиридин-3-ил}бензойной кислоты (1,4 г, 3,2 ммоль) в теплом 1РА (72 мл) добавляют Н2О (38 мл), содержащую ЬЮН (0,68 г, 16,2 ммоль). Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 3,5 ч. Реакционную смесь нейтрализуют и разбавляют ЕЮАс (200 мл) и экстрагируют при охлаждении. Органический слой промывают насыщенным раствором соли (50 мл), сушат над №ь8О4 и концентрируют в вакууме с получением 4-{6-амино-5-[1-(3-фтор-2трифторметилфенил)этокси]пиридин-3-ил}бензойной кислоты (1,2 г, 2,8 ммоль, 88%).
!Н-ЯМР (МеОЭ, 300 МГц) δ 1,75 (д, 3Н, 1=6,2 Гц), 4,88-4,93 (м, 1Н), 7,01 (д, 1Н, 1=1,8 Гц), 7,39 (д, 2Н, й=8,3 Гц), 7,52-7,67 (м, 3Н), 7,80 (д, 1Н, 1=1,8 Гц), 7,97 (д, 2Н, й=8,3 Гц).
7. Получение амидных соединений.
Перемешиваемый раствор 4-{6-амино-5-[1-(3-фтор-2-трифторметилфенил)этокси]пиридин-3ил}бензойной кислоты (50 мг, 0,12 ммоль), ЕЭС (27,0 мг, 0,13 ммоль) и НОВ! (18,0 мг, 0,13 ммоль) в ДМФА (2 мл) добавляют в двухдрахмовый флакон, содержащий ΝΉΚιΚ2 (0,12 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 ч. Затем реакционную смесь разбавляют СН2С12 (3 мл) и распределяют при помощи Н2О. Органический слой отделяют, промывают насыщенным №С1 (1х2 мл) и насыщенным ЫаНСО3 (1х2 мл). Органический слой концентрируют досуха в вакууме. Продукт очищают колоночной хроматографией (силикагель, от 99:1 до 95:5 СН2С12/МеОН). Фракции, содержащие продукт, концентрируют в вакууме с получением амидных соединений.
- 33 013678
Общая методика 14.
1. К смеси гидрохлорида 1-(2-хлорэтил)пирролидина (200 мг, 1,18 ммоль) и 4-[4-(4,4,5,5тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)фенил]-1Н-пиразола (229 мг, 1,19 ммоль) в ДМФА (6 мл) добавляют Ск2СО3. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Затем к смеси добавляют воду (10 мл). Продукт экстрагируют ЕЮАс (3x10 мл). Затем объединенные экстракты промывают насыщенным раствором соли (5x10 мл) для удаления ДМФА, затем сушат над №28О4 и концентрируют (142 мг, выход 41%).
2. К смеси 3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-йодпиридин-2-иламина (200 мг, 0,468 ммоль), эфира пинаколбороновой кислоты (1,2 экв.), №ьСО3 (149 мг, 1,41 ммоль) в воде (1,25 мл) и диметилэтилгликоля (3,75 мл, 0,1М) добавляют Рб(РРЬ3)2С12 (16 мг, 0,020 ммоль) в реакционной емкости для микроволновой печи. Систему дегазируют и продувают азотом. Смесь перемешивают при 160°С в микроволновом устройстве в течение 15 мин. Смесь охлаждают до комнатной температуры с последующим добавлением воды (10 мл). Продукт экстрагируют ЕЮАс (3x20 мл), сушат над Nа28Ο4 и концентрируют. Сырой продукт очищают обращенно-фазовой ВЭЖХ с 0,1% ТФУК в воде и ацетонитриле.
Общая методика 15.
1. К раствору 3Н-оксазоло[4,5-Ь]пиридин-2-она (13,6 г, 100 ммоль) в ацетонитриле (600 мл) и уксусной кислоте (120 мл) добавляют Ν-бромсукцинимид (21,4 г, 120 ммоль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч и гасят реакцию раствором №282О5. После выпаривания остаток распределяют между этилацетатом и водой. Органический слой промывают 2Ν раствором №ОН, насыщенным раствором соли и сушат над №ь8О4. Сырой продукт очищают на колонке с силикагелем, получая 6-бром-3Н-оксазоло[4,5-Ь]пиридин-2-он (11,5 г, выход 55%).
2. 6-Бром-3Н-оксазоло[4,5-Ь]пиридин-2-он (21,5 г, 100 ммоль) суспендируют в растворе №1ОН (2Ν, 250 мл, 500 ммоль).
Смесь кипятят с обратным холодильником в течение ночи и получают прозрачный раствор. После охлаждения до комнатной температуры реакционный раствор нейтрализуют до рН~7. Высвобождается значительное количество СО2, а также наблюдается выпадение осадка. Продукт фильтруют, промывают водой и сушат в высоком вакууме с получением 2-амино-5-бромпиридин-3-ола в виде не совсем белого твердого продукта (17,8 г, выход 98%).
3. К раствору 2-амино-5-бромпиридин-3-ола (358 мг, 1,89 ммоль) в ДМФА (8 мл) добавляют Ск2СО3 (620 мг, 1,89 ммоль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 1 ч. К реакционной смеси медленно добавляют соединение брома (0,9 экв.) в ДМФА (5 мл). Реакционный раствор перемешивают в атмосфере азота в течение 5 ч, а затем распределяют между водой и этилацетатом. Органический слой три раза промывают насыщенным раствором соли, сушат над Мд8О4. Сырой продукт очищают на колонке с силикагелем, элюируя смесью гексан-этилацетат (4:1), с получением продукта с выходом 70-80%.
Общая методика 16 с использованием примера 1-488 заявки на патент США, серийный № 10/786610 (РСТ/и8 2004/005495).
1. К раствору 3-бензилокси-5-бромпиридин-2-иламина (1 г, 3,58 ммоль) в диметилсульфоксиде (7 мл) добавляют последовательно бис(пинаколято)диборан (1,0 г, 3,94 ммоль), ацетат калия (1,05 г, 10,7 ммоль), комплекс [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцин]дихлорпалладия(11) с дихлорметаном (1:1) (146
- 34 013678 мг, 0,18 ммоль). Смесь нагревают при 80°С в течение 16 ч, а затем охлаждают до комнатной температуры. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом (50 мл) и фильтруют. Фильтрат промывают водой (2x50 мл) и сушат над сульфатом магния. Концентрирование в вакууме дает сырой боронат в виде коричневого твердого вещества (1,13 г, 97%).
Ή-ЯМР (СИС13) δ 1,32 (с, 12Н), 5,08 (с, 2Н), 5,44 (уш.с, 2Н), 7,33-7,42 (м, 6Н), 8,03 (с, 1Н).
2. В 18 мл реакционную емкость загружают сырой 3-бензилокси-5-(4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-иламин (161 мг, 0,49 ммоль), диметоксиэтан (3 мл) и 2бромпиридин (117 мг, 0,74 ммоль). К этому раствору добавляют комплекс [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцин]дихлорпалладия(11) с дихлорметаном (1:1) (20 мг, 0,05 ммоль) и 2М раствор карбоната цезия в воде (0,75 мл, 1,5 ммоль). Реактор нагревают при 80°С в течение 66 ч в атмосфере азота, затем охлаждают до комнатной температуры. Реакционную смесь распределяют между этилацетатом (5 мл) и водой (5 мл). Органический слой промывают дополнительной водой (5 мл) и разбавляют диметилформамидом (5 мл). Связанную с полимером сульфоновую кислоту (0,5 г, 2,1 ммоль) добавляют к органическому раствору и полученную смесь осторожно перемешивают в течение 2 ч. Смолу отфильтровывают и промывают диметилформамидом, метанолом и метиленхлоридом (3x5 мл каждого растворителя). Затем полимер подвергают взаимодействию с 2М аммиаком в метаноле в течение 1 ч. Смолу отфильтровывают, промывают дополнительным 2М аммиаком в метаноле (2x5 мл) и объединенные фильтраты концентрируют в вакууме. Очистка сырого продукта колоночной флэш-хроматографией дает 52,2 мг продукта в виде желтовато-коричневого твердого вещества (выход 38%).
Общая методика 17.
1. К раствору 3-(2-хлор-3,6-дифторбензилокси)-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2ил)пиридин-2-иламина (методика 16) (10,0 г, 24,3 ммоль) в трет-бутиловом спирте (50 мл) добавляют Ьос ангидрид (5,83 г, 26,7 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Добавляют дополнительный Ьос ангидрид (2,25 г, 10,3 ммоль) и реакционную смесь опять пере мешивают в течение ночи, концентрируют до вязкого черного масла и используют как есть.
2. Сырой сложный эфир бороновой кислоты (24,3 ммоль теоретически) в ТГФ (150 мл) добавляют к раствору бикарбоната натрия (16,3 г, 194 ммоль) в воде (150 мл) и ацетоне (23 мл). Смесь охлаждают до 2°С и медленно добавляют оксон (13,5 г, 21,9 ммоль), поддерживая температуру ниже 8°С. По завершении добавления реакционную смесь перемешивают в течение 5 мин, затем гасят бисульфитом натрия (14,2 г) в воде (28 мл). Добавляют этилацетат (200 мл) и слои разделяют. Водный слой нейтрализуют 6Ν НС1 и экстрагируют этилацетатом (2x200 мл). Объединенные органические слои промывают водой (250 мл) и насыщенным раствором соли (250 мл), сушат (№28О4) и концентрируют до сырого черного масла. Хроматография на силикагеле (этилацетат/гексан) дает продукт в виде светло-коричневой пены (4,78 г, 49,0%).
Ή-ЯМР (СИС13) δ 1,48 (с, 9Н), 1,74 (д, 3Н), 5,75 (кв, 1Н), 6,61 (д, 1Н), 76,89 (дт, 1Н), 6,94-7,04 (м, 2Н), 7,26 (д, 1Н), 8,19 (уш.с, 1Н). МС т/ζ 401 (М+Н)+.
3. К карбонату цезия в 2-драхмовом флаконе добавляют трет-бутиловый эфир [3-(2-хлор-3,6дифторбензилокси)-5-гидроксипиридин-2-ил]карбаминовой кислоты (100 мг, 0,25 ммоль) в безводном ДМФА (1 мл), а затем бензилбромид (89,2 мкл, 0,75 ммоль). Флакон герметизируют и перемешивают при 90°С в течение ночи. Реакционную смесь фильтруют через 5 мл трубку СРет-Е1и!, предварительно смоченную водой (3,5 мл), и элюируют смесью этилацетат:метиленхлорид 1:1. После частичного концентрирования добавляют 4Ν НС1 в диоксане (1-2 мл) и раствор концентрируют. Обращенно-фазовая хроматография (вода:ацетонитрил, 0,05% ТФУК) с последующей лиофилизацией дает желаемый продукт в виде не совсем белого аморфного твердого вещества (25,3 мг, 20,0%) и продукт повторного добавления в виде желтовато-коричневого аморфного твердого вещества (35,2 мг, 23,7%).
- 35 013678
Боргидрид натрия (1,5 мол. экв.) добавляют к раствору кетона (3,89 ммоль) в 10 мл этанола в атмосфере азота. Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 12 ч. Затем смесь помещают на ледяную баню и гасят разбавленным водным раствором НС1. Этанол выпаривают и добавляют ЕЮАс к экстракту водного раствора. Слой ЕЮАс сушат над №ь8О4. №ь8О4 отфильтровывают и фильтрат выпаривают с получением масляного остатка, соединения А5. Остаток используют без дополнительной очистки.
3-Гидрокси-2-нитропиридин (1,1 мол. экв.) и трифенилфосфин (1,5 мол. экв.) добавляют к раствору соединения А5 (1,1 ммоль) в 10 мл ТГФ. Затем реакционную смесь помещают на ледяную баню и добавляют диизопропилазодикарбоксилат (1,5 мол. экв.). Ледяную баню удаляют и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 12 ч. Растворитель выпаривают с получением желтого масляного остатка. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя ЕЮАс в гексане) с получением соединения А1.
2М НС1 (0,2 мл) добавляют к раствору соединения А1 (0,97 ммоль) в 2 мл этанола. Затем смесь помещают на ледяную баню и медленно добавляют порошок Ее (365 мг). Реакционную смесь нагревают до 85°С в течение 1 ч и охлаждают до комнатной температуры. Целит (0,5 г) добавляют при перемешивании и полученную смесь фильтруют через слой целита и промывают этанолом. Фильтрат выпаривают с получением коричневого масляного остатка, соединения А2. Остаток используют без дополнительной очистки.
Периодную кислоту (0,25 мол. экв.), йод (0,5 мол. экв.), Н2О (0,5 мл) и концентрированную серную кислоту (0,03 мл) добавляют к раствору соединения А2 в 3 мл уксусной кислоты. Реакционную смесь нагревают до 85°С в течение 5 ч. Затем реакционную смесь охлаждают на ледяной бане и подщелачивают насыщенным водным раствором №ьСО3 до рН 3-4. Добавляют этилацетат для экстрагирования водного раствора. Слой ЕЮАс сушат над №138О3. №138О3 отфильтровывают и фильтрат выпаривают с получением коричневого масляного остатка. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя ЕЮАс и гексаном) с получением желаемого продукта, соединения А3.
Общая методика 19.
Сложный эфир бороновой кислоты или бороновую кислоту (1,3 мол. экв.) добавляют к раствору соединения А3 (0,47 ммоль) в 5 мл ОМЕ. Смесь несколько раз продувают азотом, а затем добавляют дихлорбис(трифенилфосфино)палладий(11) (0,05 мол. экв.). К реакционной смеси добавляют карбонат натрия (3 мол. экв.) в 1 мл Н2О и полученный раствор нагревают до 85°С в течение 12 ч. К реакционной смеси добавляют воду для гашения реакции. Затем добавляют ЕЮАс для экстрагирования водного раствора. Слой ЕЮАс сушат над №138О3. №138О3 отфильтровывают и фильтрат выпаривают с получением темно-коричневого масляного остатка. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя СН3ОН, СН2С12, ЕЮАс и гексаном) с получением желаемого продукта соединения А4.
Общая методика 20.
Я I
Соединение А6 получают с использованием общей методики 19. О-(7-азабензотриазол-1-ил)Ν,Ν,Ν',Ν'-тетраметилуроний фосфорпентафторид (НАТи) (1,1 мол. экв.), диизопропилэтиламин (5 мол. экв.) и амин (1,3 мол. экв.) добавляют к раствору соединения А6 (0,17 ммоль) в 3 мл ДМФА в атмосфере азота. Реакционной смеси дают перемешиваться при комнатной температуре в течение 12 ч. К реакцион
- 36 013678 ной смеси добавляют насыщенный водный раствор NаНСΟз для гашения реакции. Затем добавляют ЕЮАс для экстрагирования водного раствора. Слой ЕЮАс сушат над №2БО4. №2БО4 отфильтровывают и фильтрат выпаривают с получением коричневого масляного остатка. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя ЕЮАс и гексаном) с получением желаемого амидного продукта, соединения А7 в виде желтого масла.
Общая методика 21.
Кислоту (16 мол. экв. или меньше) добавляют к соединению А7 (0,13 ммоль) при комнатной температуре. Полученный раствор перемешивают при комнатной температуре или нагревают до 60°С в течение 12 ч. Реакционную смесь выпаривают и остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя СН3ОН, ЕЮАс и СН2С12) с получением желаемого амидного продукта, соединения А8, в виде твердого вещества от желтоватого до белого цвета.
Общая методика 22.
Соединение А9 получают с использованием общей методики 19. ди-трет-Бутилдикарбонат (3 мол. экв.) и 4-(диметиламино)пиридин (0,14 мол. экв.) добавляют к раствору соединения А9 (3 ммоль) в 20 мл ДМФА. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 12 ч. К реакционной смеси добавляют воду для гашения реакции. Затем добавляют ЕЮАс для экстрагирования водного раствора. Слой ЕЮАс сушат над №ьБО4. №ьБО4 отфильтровывают и фильтрат выпаривают с получением коричневато-желтого масляного остатка. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя 25^30% ЕЮАс в гексане) с получением желаемого продукта, соединения А10, в виде желтоватого масла (выход 87,8%). Барботируют озон через раствор соединения А10 в 50 мл СН2С12 при -78°С и добавляют диметилсульфид для гашения реакции. Добавляют к реакционной смеси насыщенный раствор хлорида натрия и добавляют ЕЮАс для экстрагирования водного раствора. Объединенный слой ЕЮАс сушат над №ьБО4. №ьБО4 отфильтровывают и фильтрат выпаривают с получением желтого масляного остатка. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя 35^40% ЕЮАс в гексане) с получением желаемого продукта, соединения А11, в виде желтоватого масла (выход 58,4%).
Общая методика 23.
Восстановительное аминирование.
Гидрохлоридную соль амина (1,2 мол. экв.), ацетат натрия (2 мол. экв. по отношению к гидрохлоридной соли амина) добавляют к раствору соединения А11 (0,45 ммоль) в 4 мл СН3ОН в атмосфере азота. Молекулярное сито (0,5 г) добавляют к реакционной смеси, а затем добавляют цианоборгидрид натрия (2 мол. экв.). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 12 ч в атмосфере азота. Реакционную смесь фильтруют через слой целита и фильтрат выпаривают и очищают хроматографией на силикагеле (элюируя СН3ОН, ЕЮАс и СН2С12) с получением желаемого продукта, соединения А12, в виде масла (выход 52,6%). Кислоту (16 мол. экв. или меньше) добавляют к соединению А12 (0,17 ммоль) при комнатной температуре. Полученный раствор перемешивают при комнатной температуре или нагревают до 60°С в течение 12 ч. Реакционную смесь выпаривают и остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя СН3ОН, ЕЮАс и СН2С12) с получением желаемого продукта,
- 37 013678 соединения А13.
Общая методика 24.
А11 А14 А15
О-Фенилдиамины (1,2 мол. экв.) и бисульфит натрия (2,1 мол. экв.) добавляют к раствору соединения А11 (0,41 ммоль) в 5 мл ОМА. Полученный раствор нагревают до 110°С в течение 12 ч. К реакционной смеси добавляют воду для гашения реакции. Затем добавляют ЕЮАс для экстрагирования водного раствора. Слой ЕЮАс сушат над №28О4. №ь8О4 отфильтровывают и фильтрат выпаривают с получением коричневато-желтого масляного остатка. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя ЕЮАс в гексане) с получением желаемого продукта, соединения А14. Добавляют кислоту (16 мол. экв. или меньше) к соединению А14 (0,16 ммоль) при комнатной температуре. Полученный раствор перемешивают при комнатной температуре или нагревают до 60°С в течение 12 ч. Реакционную смесь выпаривают и остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя СН3ОН, ЕЮАс и СН2С12) с получением желаемого амидного продукта, соединения А15.
Общая методика 25.
ди-трет-Бутилдикарбонат (3 мол. экв.), 4-(диметиламино)пиридин (0,14 мол. экв.) добавляют к раствору соединения А3Ь (2 ммоль) в 10 мл ДМФА. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 12 ч. К реакционной смеси добавляют воду для гашения реакции. Затем добавляют ЕЮАс для экстрагирования водного раствора. Слой ЕЮАс сушат над №ь8О4. №ь8О4 отфильтровывают и фильтрат выпаривают с получением коричневато-желтого масляного остатка (соединения А16). Остаток используют без дополнительной очистки.
бис(Пинаколято)дибор (1,2 мол. экв.) и ацетат калия (3,4 мол. экв.) добавляют к раствору соединения А16 в 4 мл ДМСО. Смесь несколько раз продувают азотом, а затем добавляют дихлорбис(трифенилфосфино)палладий(П) (0,05 мол. экв.). Полученный раствор нагревают до 80°С в течение 12 ч. К реакционной смеси добавляют воду для гашения реакции. Затем добавляют ЕЮАс для экстрагирования водного раствора. Слой ЕЮАс сушат над №ь8О4. №ь8О4 отфильтровывают и фильтрат выпаривают с получением темно-коричневого масляного остатка. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя 30% ЕЮАс в гексане) с получением желаемого продукта, соединения А17 (выход 76%). Добавляют НС1 (5 мол. экв.) к раствору соединения А17 (0,43 ммоль) в 4 мл СН2С12. Полученную смесь нагревают до 50°С в течение 12 ч. Насыщенный водный раствор NаΗСО3 добавляют к реакционной смеси для нейтрализации реакции. Затем добавляют ЕЮАс для экстрагирования водного раствора. Слой ЕЮАс сушат над №28О4. №128О4 отфильтровывают и фильтрат выпаривают с получением желаемого продукта (соединения А18) в виде желтого твердого вещества (выход 75%).
- 38 013678
Общая методика 26.
Соединение А17 (1,3 мол. экв.) добавляют к раствору арилгалогенида (0,36 ммоль) в 3 мл ΌΜΕ. Смесь несколько раз продувают азотом, а затем добавляют дихлорбис(трифенилфосфино)палладий(11) (0,05 мол. экв.). Карбонат натрия (3 мол. экв.) в 0,8 мл Н2О добавляют к реакционной смеси и полученный раствор нагревают до 85°С в течение 12 ч. К реакционной смеси добавляют воду для гашения реакции. Затем добавляют ЕЮАс для экстрагирования водного раствора. Слой ЕЮАс сушат над Ыа28О4. Να28ϋ.·ι отфильтровывают и фильтрат выпаривают с получением темно-коричневого масляного остатка. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя ЕЮАс в гексане) с получением желаемого продукта, соединения А19 (74,4% выход). Добавляют НС1 (5 мол. экв.) к раствору соединения А19 (0,26 ммоль) в 10 мл изопропилового спирта. Полученную смесь нагревают до 50°С в течение 12 ч. Растворитель выпаривают с получением желаемого продукта, соединения А20.
Общая методика 27.
Соединение А18 (1,3 мол. экв.) добавляют к раствору арилгалогенида (0,21 ммоль) в 3 мл ΌΜΕ. Смесь несколько раз продувают азотом, а затем добавляют дихлорбис(трифенилфосфино)палладий(11) (0,05 мол. экв.). Карбонат натрия (3 мол. экв.) в 0,6 мл Н2О добавляют к реакционной смеси и полученный раствор нагревают до 85°С в течение 12 ч. К реакционной смеси добавляют воду для гашения реакции. Затем добавляют ЕЮАс для экстрагирования водного раствора. Слой ЕЮАс сушат над №28О4. Ν;·ι28ϋ4 отфильтровывают и фильтрат выпаривают с получением темно-коричневого масляного остатка. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя СН3ОН, СН2С12, ЕЮАс и гексаном) с получением желаемого продукта, соединения А21.
Общая методика 28.
Амин (1,5 мол. экв.) и К2СО3 (1,5 мол. экв.) добавляют к раствору 4-галогенбензилгалогенида (1,0 мол. экв.) в 2 мл толуола. Полученную смесь нагревают в микроволновой печи с использованием 8ιηί11ι>у ηΙΙιοίζ.οΓ (150°С, 1 ч). К реакционной смеси добавляют воду для гашения реакции. Затем добавляют ЕЮАс для экстрагирования водного раствора. Слой ЕЮАс сушат над №28О4. №ь8О4 отфильтровывают и фильтрат выпаривают с получением желаемого продукта, соединения А23. Остаток используют без дополнительной очистки для синтеза соединения А22 по методике 11.
- 39 013678
Общая методика 29.
Амин (1,2 мол. экв.) и диизопропиламин (5 мол. экв.) добавляют к раствору 4бромбензолсульфонилхлорида (0,77 ммоль) в 5 мл СНС13 в атмосфере азота. Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч. К реакционной смеси добавляют воду для гашения реакции. Затем добавляют ЕЮАс для экстрагирования водного раствора. Слой ЕЮАс сушат над №т8О4. №-ь8О4 отфильтровывают и фильтрат выпаривают с получением желаемого продукта, соединения А25. Остаток используют без дополнительной очистки для синтеза соединения А24 по методике 11.
Общая методика 30.
Сложный эфир бороновой кислоты или бороновую кислоту (1,2 мол. экв.) добавляют к раствору 1хлор-4-йодбензола (0,84 ммоль) в 10 мл (ЭМЕ) в атмосфере азота. Смесь несколько раз продувают азотом, а затем добавляют дихлорбис(трифенилфосфино)палладий(11) (0,05 мол. экв.). Карбонат натрия (3 мол. экв.) в 1,8 мл Н2О добавляют к реакционной смеси и полученный раствор нагревают до 85°С в течение 12 ч. К реакционной смеси добавляют воду для гашения реакции. Затем добавляют ЕЮАс для экстрагирования водного раствора. Слой ЕЮАс сушат над №т8О4. №т8О4 отфильтровывают и фильтрат выпаривают с получением темно-коричневого масляного остатка. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя СН3ОН, СН2С12, ЕЮАс и гексаном) с получением желаемого продукта, соединения А27. Соединение А27 используют для синтеза соединения А26 по методике 11.
Общая методика 31 для хирального разделения рацематов.
Рацемический образец очищают с использованием препаративной сверхкритической жидкостной хроматографии 8ЕС-М8. Примерные условия очистки: колонка - СЫга1рак АЭ-Н, 250x21 мм, 5 мкм, колонка 100А (Со1итп #:АЭН0С1-С1003); температура колонки 35°С; подвижная фаза 35% метанол (с 0,1% изопропиламина)-модифицированный СО2; препаративная скорость потока 52 мл/мин; изобарическое давление при 120 бар.
Общая методика 32 с использованием (4-{6-амино-5-[1-(3-трифторметилфенил)этокси]пиридин-3ил}фенил)-(3,5-диметилпиперазин-1-ил)метанона.
К смеси трет-бутилового эфира 4-[4-(6-амино-5-гидроксипиридин-3-ил)бензоил]-2,6-диметилпиперазин-1-карбоновой кислоты (100 мг, 0,23 ммоль) и 1-(1-бромэтил)-3-трифторметилбензола (64 мг, 0,25 ммоль) в ДМФА (2 мл) добавляют №1Н (12 мг, 0,47 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивают в течение ночи. ЖХ/МС показывает, что реакция завершилась. ДМФА и воду удаляют. К остатку добавляют ТФУК (2 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч. ТФУК удаляют с последующим добавлением метанола. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ с получением (4-{6-амино-5-[1-(3трифторметилфенил)этокси]пиридин-3-ил}фенил)-(3,5-диметилпилеразин-1-ил)метанона (30 мг, выход
- 40 013678
25,7%).
Общая методика 33 с использованием (4-{6-амино-5-[1-(2-трифторметилфенил)этокси]пиридин-3ил}фенил)-(3,5-диметилпиперазин-1-ил)метанона.
трет-бутилового
К смеси эфира 4-[4-(6-амино-5-гидроксипиридин-3-ил)бензоил]-2,6диметилпиперазин-1-карбоновой кислоты (50 мг, 0,12 ммоль) и 1-(1-бромэтил)-2-трифторметилбензола (32 мг, 0,12 ммоль) в ДМФА (2 мл) добавляют 2М С§2СО3 (0,18 мл, 0,35 ммоль), а затем воду (0,5 мл). Смесь перемешивают в течение ночи, затем нагревают при 70°С в течение 8 ч. ЖХ/МС показывает, что реакция завершилась. ДМФА и воду удаляют. К остатку добавляют ТФУК (2 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч. ТФУК удаляют с последующим добавлением метанола. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ с получением (4-{6-амино-5-[1-(2-трифторметилфенил)этокси]пиридин3-ил}фенил)-(3,5-диметилпиперазин-1-ил)метанона (20 мг, выход 34,2%).
Общая методика 34 с использованием {4-[6-амино-5-(2-метилбензилокси)пиридин-3-ил]фенил}(3,5-диметилпиперазин-1 -ил)метанона.
трет-бутилового
К смеси эфира (2В,68)-4-[4-(6-амино-5-гидроксипиридин-3-ил)бензоил]-2,6диметилпиперазин-1-карбоновой кислоты (100 мг, 0,23 ммоль) и 1-бромметил-2-метилбензола (47 мг, 0,25 ммоль) в ДМФА (2 мл) добавляют 2М С§2СО3 (0,35 мл, 0,7 ммоль), а затем воду (0,5 мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. ЖХ/МС показывает, что реакция завершилась. ДМФА удаляют с последующим добавлением 4Н НС1 в диоксане (2 мл) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч. Летучие продукты удаляют с последующим добавлением метанола. Этот раствор очищают препаративной ВЭЖХ с получением {4-[6-амино-5-(2-метилбензилокси)пиридин-3-ил]фенил}-(3,5-диметилпиперазин-1-ил)метанона (47 мг, выход 46,6%).
Общая методика 35 с использованием (6-амино-3-азабицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-(4-{6-амино-5-[1-(2,6дихлор-3-фторфенил)этокси] пиридин-3-ил} фенил)метанона.
I
1) РСЦ0РРЩС1,
К смеси трет-бутилового эфира [3-(4-йодбензоил)-3-азабицикло[3.1.0]гекс-6-ил]карбаминовой кислоты (100 мг, 0,234 ммоль) и 3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-иламина (100 мг, 0,234 ммоль) в ΌΜΕ (2 мл) добавляют Рй(брр1)2С12СН2С12 (10 мг, 0,012 ммоль) и С§2СО3 (351 мг, 0,702 ммоль). Смесь барботируют азотом в течение 10 мин, затем нагревают в микроволновой печи при 150°С в течение 30 мин. ЖХ/МС показывает, что реакция завершилась. Сырую реакционную смесь разбавляют этилацетатом с последующими промываниями водой и насыщенным раствором соли. Раствор сушат над Мд§О4. Очистка препаративной ВЭЖХ дает твердый продукт. Твердый продукт перемешивают со смесью 4Н НС1/диоксан (3 мл) в течение 3 ч при комнатной температуре. Удаление летучих продуктов приводит к получению остатка, который очищают препаративной ВЭЖХ с получением (6-амино-3-азабицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-(4-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}фенил)метанона (30 мг, выход 26%).
Общая методика 36 с использованием 5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-6'-(2-морфолин-4илэтокси)[3,3'] билиридинил-6-иламина.
- 41 013678
К смеси 6'-амино-5'-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-[3,3']бипиридинил-6-ола (78 мг, 0,20 ммоль), трифенилфосфина (63 мг, 0,24 ммоль) и 2-морфолин-4-илэтанола (0,026 мл, 0,22 ммоль) добавляют ΌΕΆΌ (0,034 мл, 0,22 ммоль). После перемешивания в течение ночи добавляют еще РР113, (63 мг, 0,24 ммоль) и еще ΌΕΆΌ (0,034 мл, 0,22 ммоль). Еще через несколько часов добавляют еще спирт (0,026 мл, 0,22 ммоль). Еще через несколько часов добавляют еще РР113 (63 мг, 0,24 ммоль) и еще ΌΕΆΌ (0,034 мл, 0,22 ммоль). После перемешивания в течение ночи смесь распределяют между дихлорметаном и полунасыщенным раствором соли. Фазы разделяют и водную фазу экстрагируют дихлорметаном. Объединенные органические фазы сушат над №138О4 и концентрируют с помощью роторного испарителя. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя градиентное элюирование дихлорметаном, метанолом, с получением 5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-6'-(2-морфолин-4-илэтокси)-[3,3']бипиридинил-6-иламина (53 мг, 53%).
Общая методика 37 с использованием примера 1-650 заявки на патент США, серийный № 10/786610 (РСТ/Р8 2004/005495).
3-(2,6-Дихлор-3-фторбензилокси)-5-тиазол-2-илпиридин-2-иламин.
В трубку для микроволнового нагрева, снабженную бруском мешалки, добавляют исходное соединение йодпиридила (300 мг, 0,702 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (40 мг, 5 мол.%) и тетрагидрофуран (безводный, 6 мл). Колбу закрывают и продувают азотом в течение 5 мин. Затем через шприц добавляют 2-тиазолилцинкбромид (0,5М в ТГФ, 1,4 ммоль, 2,8 мл). Колбу нагревают до 120°С в микроволновой печи в течение 10 мин. ТСХ (1:1 этилацетат:метиленхлорид) показывает большое количество остающегося исходного вещества. Добавляют дополнительный 2-тиазолилцинкбромид (0,5М в ТГФ, 500 мкл) и колбу нагревают до 120°С в микроволновой печи в течение 20 мин. ТСХ (1:1 этилацетат:метиленхлорид) показывает большое количество по-прежнему остающегося исходного вещества. Добавляют дополнительный 2-тиазолилцинкбромид (0,5М в ТГФ, 500 мкл) и колбу нагревают до 120°С в микроволновой печи в течение 60 мин. ТСХ (1:1 этилацетат :метиленхлорид) по-прежнему показывает большое количество остающегося исходного вещества, но также ставшего очень грязным. Содержимое колбы выливают в насыщенный раствор ΝΗ4Ο (10 мл) и этот раствор экстрагируют этилацетатом (2x30 мл). Объединенные этилацетатные слои сушат над №ь8О4. фильтруют и концентрируют в вакууме. Сырой продукт загружают на колонку, предварительно набитую 19 г силикагеля, и этилацетат:метиленхлорид 1:1 используют для элюирования желаемого продукта (40 мг, 15%).
Общая методика 38 с использованием примера 1-652 заявки на патент США, серийный № 10/786610 (РСТ/и8 2004/005495).
3-[1 -(2,6-Дихлор-3 -фторфенил)этокси]-5-(1 -метил-1Н-имидазол-2-ил)пиридин-2-иламин.
Ν-Метилимидазол (92 мг, 1,1 ммоль) растворяют в тетрагидрофуране (безводный, 4 мл) в 50 мл круглодонной колбе. Колбу охлаждают на бане со смесью сухой лед/ацетон в атмосфере азота. ΝБутиллитий (2,5М, 562 мкл, 1,4 ммоль) добавляют через шприц порциями по 100 мкл в течение 5 мин. Реакционную смесь перемешивают при -70°С в течение 30 мин. Добавляют твердый хлорид цинка (безводный, 383 мг, 2,8 ммоль) и реакционную смесь перемешивают в течение 15 мин. Затем ледяную баню удаляют и реакционной смеси дают нагреться до комнатной температуры. После того как весь хлорид цинка окажется в растворе, а реакционная смесь - при комнатной температуре, добавляют йодный каркас
- 42 013678 (400 мг, 0,936 ммоль) в тетрагидрофуране (безводный, 4 мл), а затем тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (108 мг, 10 мол.%) и реакционную смесь кипятят с обратным холодильником. Реакцию отслеживают по ЖХ/МС до тех пор, пока весь исходный йодный каркас не израсходуется. Реакционной смеси дают охладиться, а затем разбавляют насыщенным раствором ΝΗ.·|ί.Ί (20 мл). Этот раствор экстрагируют этилацетатом (2x50 мл). Объединенные этилацетатные слои сушат над №28О4, фильтруют и концентрируют в вакууме. Сырой продукт загружают на колонку, предварительно набитую 10 г силикагеля, и 10% метанол:этилацетат используют для элюирования желаемого продукта (25 мг, 7%).
Общая методика 39 с использованием примера 1-657 заявки на патент США, серийный № 10/786610 (РСТ/и8 2004/005495).
Р
В раствор 6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]никотинонитрила (400 мг, 1,23 ммоль) в 70 мл сухого метанола при 0°С барботируют газообразный НС1 в течение 3 мин. Перемешивают в течение ночи при 3°С. Удаляют летучие продукты и твердые вещества промывают диэтиловым эфиром с получением количественного выхода имидата. К 200 мг имидата в 4 мл метанола при 0°С добавляют 2Ν метиламин в ТГФ (837 мкл). Дают перемешиваться при 0°С в течение примерно 1 ч, затем дают нагреться до комнатной температуры в течение ночи. Летучие продукты удаляют и остаток хроматографируют со смесью 10-20% метанол/дихлорметан, получая 70 мг продукта.
Общая методика 40.
1. 6-Нитро-5-гидроксиникотиновая кислота (В2).
К раствору 5-гидроксиникотиновой кислоты (В1) (7,0 г, 50 ммоль) в концентрированной Н28О4 добавляют 9 мл дымящейся НNΟз (90%) (9 мл). Реакционную смесь перемешивают при 55-60°С в герметичной пробирке в течение четырех дней. Затем смесь выливают на лед и рН доводят до 3 с помощью 50% №1ОН. Добавляют Мд8О4 до насыщения водной смеси, которую затем экстрагируют изопропиловым спиртом (4х 45 мл). После удаления изопропилового спирта при пониженном давлении получают 5,93 г (выход 64%) соединения В2 в виде желтого твердого вещества. МС (АРС1), (М+Н)+ 185.
Ή-ЯМР (ДМСО-66) δ 8,01 (д, 1Н, Аг-Н), 8,41(д, 1Н, Аг-Н).
2.2,6-Дихлорбензил-6-нитро-5-[(2,6-дихлорбензил)окси]никотинат (В3).
6-Нитро-5-гидроксиникотиновую кислоту (В2) (3,4 г, 18,5 ммоль), 2,6-дихлорбензилбромид (8,88 г, 37 ммоль), Б1РЕА (5,5 г, 42,5 ммоль) растворяют в ДМФА (25 мл) в 250 мл круглодонной колбе и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4,5 ч, а затем концентрируют при пониженном давлении. Полученную смесь выливают на лед и фильтруют. Собранный твердый продукт сушат при пониженном давлении с получением 4,25 г (выход 46%) соединения В3. МС (АРС1) (М+Н)+ 503.
Ή-ЯМР (ДМСО-66) δ 5,47 (с, 2Н, АгСН2О), 5,71 (с, 2Н, АгСН2О), 7,24-7,43 (м, 6Н, Аг-Н), 8,26 (д, 1Н, Аг-Н), 8,66 (д, 1Н, Аг-Н).
3. 2,6-Дихлорбензил-6-амино-5-[(2,6-дихлорбензил)окси]никотинат (В4).
Смесь 2,6-дихлорбензил-6-нитро-5-[(2,6-дихлорбензил)окси]никотината (В3) (5,5 г, 10,96 ммоль), порошка железа (0,92 г, 16,43 ммоль), ледяной уксусной кислоты (20 мл) и метанола (17 мл) перемешивают при 85°С в течение 3 ч. Реакционную смесь концентрируют почти досуха и добавляют гидроксид аммония (30%) для нейтрализации смеси. Минимальное количество ДМФА добавляют для растворения реакционной смеси, которую очищают колоночной флэш-хроматографией (элюент: ЕЮАс-ЕЮН, 9:1), с получением 4,5 г (87%) соединения В4 в виде бледно-желтого твердого продукта. МС (АРС1) (М+Н)+ 473.
4. 6-Амино-5-[(2,6-дихлорбензил)окси]никотиновая кислота (В5).
- 43 013678
Смесь 2,6-дихлорбензил-6-амино-5-[(2,6-дихлорбензил)окси]никотината (В4) (3,5 г, 7,4 ммоль), гидроксида лития (0,41 г, 17 ммоль), воды (22 мл) и метанола (30 мл) перемешивают и нагревают с обратным холодильником при 85°С в течение 5 ч. Смесь концентрируют досуха при пониженном давлении. Полученный остаток растворяют в воде, экстрагируют смесью ЕьО/гексан (1:1,4x25 мл), нейтрализуют 1Ν НС1 с образованием белого осадка, который фильтруют и сушат при пониженном давлении с получением 1,83 г (79%) соединения В5 в виде белого твердого продукта. МС (АРС1) (М+Н)+ 313.
Ή-ЯМР (ДМСО-б6) δ 5,26 (с, 2Н, АгСН2О), 6,37 (с, 2Н, ΝΉ2), 7,43-7,48 (т, 1Н, Аг-Н), 7,54 (с, 2Н, АгН), 7,56 (с, 1Н, Аг-Н), 8,18 (с, 1Н, Аг-Н).
К ряду по 400 мкл 0,2М раствора различных аминов в ДМФА в 96-луночном планшете добавляют 400 мкл (0,2М в ДМФА) 4-[6-амино-5-(2,6-дихлор-3-фторбензилокси)пиридин-3-ил]бензойной кислоты, 80 мкл триэтиламина (1М в ДМФА) и 160 мкл НАТи (0,5М в ДМФА) и реакционную смесь перемешивают при 70°С в течение 2 ч. Растворитель удаляют с использованием устройства 8реебУас и сырые реакционные смеси повторно растворяют в ДМСО и переносят с использованием жидкостного пробоотборника в 1 мл 96-луночный планшет, с получением конечной теоретической концентрации ~10 мМ. Реакционные смеси анализируют и положительную идентификацию продукта осуществляют с использованием ЖХ/МС. Маточный исходный раствор разбавляют до 50 нМ и анализируют на процент ингибирования с-МЕТ при 50 нМ.
Общая методика 41.
К ряду по 400 мкл 0,2М раствора различных аминов в ДМФА в 96-луночном планшете добавляют 400 мкл (0,2М в ДМФА) 6-амино-5-[(2,6-дихлорбензил)окси]никотиновой кислоты, 80 мкл триэтиламина (1М в ДМФА) и 160 мкл НАТи (0,5М в ДМФА) и реакционные смеси перемешивают при 70°С в течение 2 ч. Растворитель удаляют с использованием устройства 8реебУас и сырые реакционные смеси повторно растворяют в ДМСО и переносят с использованием жидкостного пробоотборника в 1 мл 96-луночный планшет, с получением конечной теоретической концентрации ~10 мМ. Реакционные смеси анализируют и осуществляют положительную идентификацию продукта с использованием ЖХ/МС. Маточный исходный раствор разбавляют до 1 мкМ и анализируют.
Общая методика 42 с использованием 2-(4-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}пиразол-1 -ил)-Ы-(3 -диметиламинопропил)изобутирамида.
- 44 013678
К раствору 4-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола (5 г, 25,77 ммоль) и метилового эфира 2-бром-2-метилпропионовой кислоты (12,6 г, 27,06 ммоль) в ДМФА (85 мл) добавляют Ск2СО3 (12,6 г, 38,65 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 90°С на масляной бане в течение ночи. Реакционный раствор охлаждают до комнатной температуры и распределяют между водой и этилацетатом. Объединенный этилацетатный раствор промывают водой пять раз, сушат над №ьБО4 и концентрируют с получением продукта метилового эфира 2-метил-2-[4-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2ил)пиразол-1-ил] пропионовой кислоты (4,776 г, выход 63%).
К раствору 3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-йодпиридин-2-иламина (6,363 г, 14,901 ммоль) и метилового эфира 2-метил-2-[4-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)пиразол-1-ил]пропионовой кислоты (4,6 г, 15,64 ммоль) в ОМЕ (27 мл) добавляют раствор СкЕ (6,79 г, 44,7 ммоль) в воде (9,3 мл). Реакционную смесь дегазируют 3 раза Ν2. Добавляют Рб(бррГ)СН2С12 и реакционную смесь дегазируют 3 раза Ν2. Реакционную смесь нагревают до 120°С в микроволновой печи (впоследствии добавляют Рб с интервалами 30 мин до завершения реакции). Добавляют воду и реакционную смесь экстрагируют ЕЮАс, сушат над №ьБО4 и концентрируют с получением метилового эфира 2-(4-{6-амино-5-[1(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}пиразол-1-ил)-2-метилпропионовой кислоты. Сырой продукт очищают колоночной хроматографией на силикагеле с градиентом ЕЮАс/гексан, 25-50%, получая метиловый эфир 2-(4-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}пиразол-1-ил)-2метилпропионовой кислоты (1,46 г, выход 21%) с К£ 0,11 (50% ЕЮАс/гексан).
К раствору сложного метилового эфира (2,92 г, 6,25 ммоль) в МеОН (31 мл) добавляют раствор ЬЮН (450 мг, 18,76 ммоль) в воде (6,25 мл). Реакционную смесь нагревают до 60°С до тех пор, пока ЖХ/МС не покажет полного гидролиза (примерно 45 мин). МеОН удаляют в вакууме и добавляют МеОН (2,5 мл) и воду (1 мл). рН доводят до 5 при помощи 1Ν НС1, при этом продукт выпадает в осадок. Получают продукт 2-(4-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}пиразол-1-ил)-2метилпропионовой кислоты после фильтрования (2,825 г, количественно).
К раствору 2-(4-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}пиразол-1-ил)-2метилпропионовой кислоты (1,00 г, 2,20 ммоль) в ДМФА (5,5 мл) добавляют НОВТ (300 мг, 2,20 ммоль), ЕЭС (633 мг, 3,30 ммоль) и ^№диметилпропан-1,3-диамин (225 мг, 2,20 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакционную смесь очищают препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой С-18, элюируя смесью ацетонитрил/вода с 0,1% уксусной кислоты, с получением 2-(4-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}пиразол-1-ил)-№(3диметиламинопропил)изобутирамида (170 мг, выход 14%).
Общая методика 43 с использованием 3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-(3-метилпиразол-1ил)пиридин-2-иламина.
К перемешиваемому раствору 3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси)-5-йодпиридин-2-иламина (100 мг, 0,23 ммоль) и 3-метил-1Н-пиразола (59 мг, 0,70 ммоль) в ДМСО (1 мл) добавляют К3РО4 (101 мг, 0,47 ммоль), додекан (0,015 мл, 0,05 ммоль), циклогександиамин (0,009 мл, 0,07 ммоль) и йодид меди (Си1) (14 мг, 0,07 ммоль)). Раствор барботируют азотом в течение 5 мин, затем облучают микроволновым излучением при 150°С в течение 2 ч. ЖХ/МС показывает, что реакция завершилась. Смесь очищают препаративной ВЭЖХ с получением 3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-(3-метилпиразол-1ил)пиридин-2-иламина (30 мг), выход 34,2%.
Общая методика 44.
ОН
Вг
- 45 013678
2,5-Дибромпиридин (1 мол. экв.) растворяют в безводном толуоле (0,085М) и охлаждают до -78°С. Медленно добавляют Н-ВиЫ (1,2 мол. экв.) в течение 5 мин, а затем полученной смеси дают перемешиваться при -78°С. Через 2 ч добавляют К1СОК2 (1,3 мол. экв.) и раствор поддерживают при -78°С. Через 1 ч добавляют насыщенный водный раствор МН4С1 и раствор нагревают до комнатной температуры. Продукт экстрагируют ЕЮАс (3ж) и органические экстракты объединяют, сушат (№28О4), концентрируют и очищают колоночной хроматографией (10% ЕЮАс/гексан-100% ЕЮАс) с получением сырого продукта. Его используют непосредственно для получения соединения 25 по общей методике 27.
Общая методика 45.
К раствору 3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-2-иламина (1,8 г, 6,04 ммоль), цианида цинка, 98% (2,07 г, 12,07 ммоль) и 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцена, 97% (0,4 г, 0,712 ммоль) в ДМФА (48 мл) добавляют комплекс [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладия(11) с дихлорметаном (1:1) (0,25 г, 0,30 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 150°С в течение ночи в атмосфере азота. Реакционную смесь разбавляют ЕЮАс (50 мл), промывают смесью насыщенный ΝΉ4Ο/28%
МН4ОН/Н2О (2x28 мл), 4:1:4, сушат над №ь8О4. Сырую смесь очищают на колонке с силикагелем, элюируя линейным градиентом 25%-50% (ЕЮАс/гексан), с получением 2-[1-(2-аминопиридин-3илокси)этил]-3-хлор-4-диметиламинобензонитрила в виде желтого твердого продукта (выход 37%) и 2[1-(2-аминопиридин-3-илокси)этил]-4-диметиламиноизофталонитрила в виде темно-коричневого твердого продукта (выход 33%).
Общая методика 46.
О —Αοί-Βϋ
КОН, КаСОз
Βϋ4ΝΒΓ
СЮМ
К смеси 4-бромимидазола (995 мг, 6,77 ммоль), гидроксида калия (380 мг, 6,77 ммоль), карбоната калия (936 мг, 6,77 ммоль) и бромида тетра-н-бутиламмония (109 мг, 0,339 ммоль) в дихлорметане (7 мл) добавляют трет-бутилбромацетат (0,50 мл, 3,4 ммоль). После перемешивания в течение ночи реакционную смесь фильтруют. Фильтрат сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют с помощью роторного испарителя. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя градиентное элюирование дихлорметаном, этилацетатом, с получением трет-бутилового эфира (4-бромимидазол-1ил)уксусной кислоты (696 мг, 79%).
Общая методика 47.
4М Раствор хлористо-водородной кислоты в диоксане (0,22 мл, 0,89 ммоль) добавляют к раствору трет-бутилового эфира (4-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}имидазол-1-ил) уксусной кислоты (86 мг, 0,18 ммоль) в дихлорметане (2 мл). После перемешивания в течение двух дней реакционную смесь концентрируют с помощью роторного испарителя и остаток растворяют в минимальном количестве метанола. Этот раствор добавляют по каплям к простому эфиру и полученную смесь оставляют на ночь. Смесь фильтруют и осадок промывают простым эфиром и сушат на воздухе с получением (4-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}имидазол-1-ил)уксусной кислоты (83 мг, 93%).
- 46 013678
Общая методика 48.
н-α
СвгСОд
ДИФА
Смесь 4-бромимидазола (217 мг, 1,48 ммоль) и карбоната цезия (875 мг, 2,69 ммоль) в диметилформамиде (5 мл) перемешивают в течение 30 мин. Добавляют гидрохлорид 4-(2-хлорэтил)морфолина (250 мг, 1,34 ммоль) и смесь нагревают до 50°С. После нагревания в течение ночи реакционную смесь концентрируют с помощью роторного испарителя. Остаток суспендируют в смеси дихлорметана и метанола и фильтруют.
Фильтрат концентрируют с помощью роторного испарителя. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя градиентное элюирование дихлорметаном, метанолом, с получением 4-[2-(4бромимидазол-1-ил)этил]морфолина (148 мг, 42%).
Общая методика 49.
Изоксазол (0,64 мл, 10 ммоль) добавляют к раствору Ν-йодсукцинимида (2,3 г, 10 ммоль) в трифторуксусной кислоте (20 мл). После перемешивания в течение ночи в реакционную смесь добавляют воду (50 мл), гексан (50 мл) и бисульфит натрия. Фазы разделяют и органическую фазу сушат над №28О4, фильтруют и концентрируют с помощью роторного испарителя, получая 4-йодизоксазол (218 мг, 11%).
Общая методика 50.
Трифторуксусную кислоту (5 мл) добавляют к раствору 6'-бром-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил) этокси]-[3,3']бипиридинил-6-ил-бис(трет-бутоксикарбонил)амина (1,3 г, 2,0 ммоль) в дихлорметане (15 мл). Через 3 ч добавляют равные порции воды и насыщенного водного бикарбоната натрия. Фазы разделяют и водную фазу экстрагируют дихлорметаном. Объединенные органические фазы сушат над №ь8О4 и концентрируют с помощью роторного испарителя, получая 6'-бром-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил) этокси]-[3,3']бипиридинил-6-иламин (968 мг, 106%).
Пробирку загружают 6'-бром-5-[1-(2,6-дихлор-3'-фторфенил)этокси]-[3,3']бипиридинил-6-иламином (92 мг, 0,20 ммоль), 4-пирролидин-1-илпиперидином (0,62 г, 4,0 ммоль) и Ν-метилпирролидиноном (0,8 мл). Пробирку герметизируют и смесь нагревают при 80°С в течение ночи. Температуру повышают до 100°С в течение 5,5 ч, а затем нагревание прекращают. Реакционную смесь распределяют между этилацетатом и водой. Фазы разделяют и водную фазу экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат над Мд8О4 и концентрируют с помощью роторного испарителя. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя градиентное элюирование дихлорметаном, метанолом, гидроксидом аммония, с получением 5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-4-пирролидин-1-ил-3,4,5,6тетрагидро-2Н-[1,2',5',3]терпиридин-6-иламина (53 мг, 50%).
Гидрид натрия (56 мг, 2,3 ммоль) добавляют к раствору пиперидин-4-ола (214 мг, 2,11 ммоль) в
ДМСО (8 мл). После перемешивания в течение 30 мин добавляют 2,5-дибромпиридин. После перемеши- 47 013678 вания в течение 24 ч добавляют гидрид натрия (56 мг, 2,3 ммоль). После перемешивания в течение еще 24 ч реакционную смесь распределяют между этилацетатом и водой. Фазы разделяют и водную фазу экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат над Мд§О4 и концентрируют с помощью роторного испарителя. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя градиентное элюирование дихлорметаном, метанолом, гидроксидом аммония, с получением 5-бром-2-(пиперидин-4илокси)пиридина (316 мг, 58%).
Общая методика 52.
Пробирку загружают 2,5-дибромпиридином (0,24 г, 1,0 ммоль), трет-бутиловым эфиром 4аминопиперидин-1-карбоновой кислоты (0,22 г, 1,1 ммоль), диизопропилэтиламином (0,19 мл, 1,1 ммоль) и Ν-метилпирролидиноном (1,0 мл). Пробирку герметизируют и смесь нагревают при 80°С в течение ночи. Температуру повышают до 120°С и нагревают в течение ночи. Реакционную смесь распределяют между этилацетатом и водой. Фазы разделяют и водную фазу экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат над Мд§О4 и концентрируют с помощью роторного испарителя. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя градиентное элюирование этилацетатом и гексаном, с получением трет-бутилового эфира 4-(5-бромлиридин-2-иламино)пиперидин-1-карбоновой кислоты (36 мг, 10%).
Общая методика 53.
трет-Бутиловый эфир 4-(4-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-этоксифенил)этокси]пиридин-3-ил}бензоил) пиперазин-1-карбоновой кислоты.
К 4 мл ДМСО добавляют 0,124 мл этанола, а затем 32 мг ΝαΗ. После перемешивания в течение 30 мин добавляют 250 мг трет-бутилового эфира 4-(4-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}бензоил)пиперазин-1-карбоновой кислоты и реакционную смесь нагревают до 40°С. Через 3 ч реакционную смесь охлаждают и выливают в воду для осаждения. После нейтрализации до рН 6 выделяют 200 мг желтовато-коричневого твердого продукта, 77%.
Общая методика 54.
(4-{6-Амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-гидроксифенил)этокси]пиридин-3-ил}фенил)пиперазин-1илметанон.
К 140 мг трет-бутилового эфира 4-[4-(6-амино-5-{1-[2,6-дихлор-3-(2,4,6-триметоксибензилокси) фенил]этокси}пиридин-3-ил)бензоил]пиперазин-1-карбоновой кислоты (из общей методики 53) добавляют 1 мл ТФУК, раствор немедленно становится красноватым, после чего немедленно следует добавление 100 мкл триэтилсилана через 3 с. Раствор немедленно становится желтым. После перемешивания в течение 4 ч добавляют 5 мл толуола и растворитель удаляют в вакууме. Хроматография с помощью градиента от 10% МеОН/СН2С12 до 0,5%-1% МН4ОН/9,5-9% МеОН/90% СН2С12 приводит к получению 55 мг белого твердого продукта, выход 62%.
- 48 013678
Общая методика 55.
2-(4-Бром-2-метоксифенокси)этанол (8а).
Карбонат калия (1,4 г, 10 ммоль) добавляют к раствору этиленкарбоната (1,8 г, 20 ммоль) и 4-бром2-метоксифенола (1,05 г, 5 ммоль) в 5 мл толуола в инертной атмосфере. Реакционную смесь нагревают при 115°С в течение 12 ч. К реакционной смеси при перемешивании добавляют воду (50 мл) и этилацетат (2x100 мл). Органические слои объединяют, сушат, фильтруют и выпаривают с получением желтого масляного остатка. Остаток очищают флзш-хроматографией (элюируя 40^45% ЕЮАс в гексане) с получением соединения 8а в виде светлого коричнево-желтого масла (1 г; 4,13 ммоль; выход 82,6%); МС (АРС1) (М+Н)+ 246.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-Ό) δ м.д. 2,83 (т, 1=6,3 Гц, 1Н), 3,84 (с, 3Н), 3,89-4,01 (м, 2Н), 4,034,13 (м, 2Н), 6,78 (д, 1=8,3 Гц, 1Н), 6,99 (д, 1Н), 7,02 (д, 1Н).
4-Бром-1-(2-хлорэтокси)-2-метоксибензол (8Ь).
Тионилхлорид (0,3 мл) добавляют к раствору соединения 1 в 1 мл пиридина на ледяной бане. Реакционную смесь перемешивают на ледяной бане в течение 10 мин, затем нагревают до 100°С в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и нейтрализуют разбавленной НС1 (1М). Добавляют СН2С12 (2x100 мл) для экстрагирования водного раствора. Объединенные органические слои сушат над №28О4, затем концентрируют в вакууме. Остаток очищают флэш-хроматографией (элюируя 10^ 15% ЕЮАс в гексане) с получением соединения 8Ь в виде бесцветного масла (485 мг; 1,84 ммоль; выход 50,3%); МС (АРС1) (М+Н)+ 264.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-Ό) δ м.д. 3,81 (т, 1=6,2 Гц, 2Н), 3,85 (с, 3Н), 4,23 (т, 1=6,2 Гц, 2Н), 6,78 (д, 1=8,6 Гц, 1Н).
Соединение 9.
Соединения формулы 9 могут быть образованы с помощью следующей примерной методики: соединение А18 (1,3 мол. экв.) добавляют к раствору арилгалогенида (0,51 ммоль) в 7 мл ОМЕ. Смесь несколько раз продувают азотом, а затем добавляют дихлорбис(трифенилфосфино)палладий(11) (0,05 мол. экв.). Карбонат натрия (3 мол. экв.) в 1,5 мл Н2О добавляют к реакционной смеси и полученный раствор нагревают до 85°С в течение 12 ч. К реакционной смеси добавляют воду (20 мл) для гашения реакции. Затем добавляют ЕЮАс (50 мл ж2) для экстрагирования водного раствора. Слой ЕЮАс сушат над №28О4. №ь8О4 отфильтровывают и фильтрат выпаривают с получением темно-коричневого масляного остатка. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя СН3ОН, СН2С12, ЕЮАс и гексаном) с получением желаемого продукта, соединения 9.
Соединение 10.
Соединения формулы 10 могут быть образованы с помощью следующей примерной методики: амин (7 мол. экв.) добавляют к раствору соединения 9 (0,17 ммоль) в 3 мл 2-метоксиэтанола. Полученный раствор нагревают до 85°С в течение 12 ч. К реакционной смеси добавляют воду (20 мл) для гашений реакции. Затем добавляют ЕЮАс (50 мл ж2) для экстрагирования водного раствора. Слой ЕЮАс сушат над №ь8О4. №ь8О4 отфильтровывают и фильтрат выпаривают с получением светло-коричневого масляного остатка. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя СН3ОН, СН2С12, ЕЮАс и гексаном) с получением желаемого продукта, соединения 10.
- 49 013678
Общая методика 56.
Соединение 14.
Соединения формулы 14 могут быть образованы с помощью следующей примерной методики: гексаметилдисилазид лития (1,2 мол. экв.; 1М в ТГФ) добавляют к раствору спирта (1 ммоль) в 2 мл ТГФ. Смесь перемешивают при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 30 мин, а затем добавляют 5-бром-2-хлорпиримидин (1 мол. экв.). Полученный раствор нагревают до 75°С в течение 12 ч. К реакционной смеси добавляют воду (20 мл) для гашения реакции. Затем добавляют ЕЮАс (50 мл х2) для экстрагирования водного раствора. Слой ЕЮАс сушат над №ь8О4. №ь8О4 отфильтровывают и фильтрат выпаривают с получением масляного остатка. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя ЕЮАс в гексане) с получением желаемого продукта, соединения 14.
Соединение 11.
Соединение А18 (1,3 мол. экв.) добавляют к раствору 5-бром-2-хлорпиримидина или соединения 14 (1 ммоль) в 24 мл ΌΜΕ. Смесь продувают азотом несколько раз, а затем добавляют дихлорбис(трифенилфосфино)палладий(11) (0,05 мол. экв.). К реакционной смеси добавляют карбонат натрия (3 мол. экв.) в 3 мл Н2О и полученный раствор нагревают до 85°С течение 12 ч. К реакционной смеси добавляют воду (50 мл) для гашения реакции. Затем добавляют ЕЮАс (100 мл х2) для экстрагирования водного раствора. Слой ЕЮАс сушат над №ь8О4. №28О4 отфильтровывают и фильтрат выпаривают с получением темно-коричневого масляного остатка. Остаток очищают флэш-хроматографией (элюируя 4(Ш55% ЕЮАс в гексане) с получением соединения 11.
Соединение 12.
Амин (2 мол. экв.) добавляют к раствору соединения 11 в 3 мл н-бутанола. Реакционную смесь облучают в микроволновой печи при 120°С в течение 30 мин. Полученную смесь выливают в смесь Н2О и ЕЮАс (100 мл; об.:об.; 1:1). Органический слой сушат, фильтруют и выпаривают с получением светлокоричневого масляного остатка. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя СН3ОН, СН2С12, ЕЮАс и гексаном) с получением желаемого продукта, соединения 12.
Соединение 13.
Кислоту (16 мол. экв. или меньше) добавляют к соединению 12 (0,14 ммоль) при комнатной температуре. Полученный раствор перемешивают при комнатной температуре или нагревают до 60°С в течение 12 ч. Реакционную смесь выпаривают и остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя СН3ОН, ЕЮАс и СН2С12) с получением желаемого амидного продукта, соединения 13, в виде твердого вещества от желтоватого до белого цвета.
Общая методика 57.
- 50 013678
Соединение 15.
Гидрид натрия (1,3 мол. экв.) и КХ (1,1 мол. экв.) добавляют к раствору 2-амино-5-бромпиридина (0,84 ммоль) в 3 мл ДМФА. Реакционную смесь облучают в микроволновой печи при 100°С в течение 20 мин. Полученную смесь выливают в смесь Н2О и Е!ОАс (100 мл; об.:об.; 1:1). Органический слой сушат, фильтруют и выпаривают с получением светло-коричневого масляного остатка. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (злюируя СН3ОН, СН2С12, Е!ОАс и гексаном) с получением желаемого продукта, соединения 15.
Соединение 16.
Соединение А18 (1,3 мол. экв.) добавляют к раствору соединения 15 (0,25 ммоль) в 5 мл ИМЕ. Смесь несколько раз продувают азотом, а затем добавляют дихлорбис(трифенилфосфино)палладий(11) (0,05 мол. экв.). К реакционной смеси добавляют карбонат натрия (3 мол. экв.) в 0,8 мл Н2О и полученный раствор нагревают до 85°С в течение 12 ч. К реакционной смеси добавляют воду (50 мл) для гашения реакции. Затем добавляют Е!ОАс (100 мл ж2) для экстрагирования водного раствора. Слой Е!ОАс сушат над №28О4. №ь8О4 отфильтровывают и фильтрат выпаривают с получением темно-коричневого масляного остатка. Остаток очищают флэш-хроматографией (элюируя СН3ОН, СН2С12, Е!ОАс и гексаном) с получением желаемого продукта, соединения 16.
Соединение 17.
Кислоту (16 мол. экв. или меньше) добавляют к соединению 16 (0,114 ммоль) при комнатной температуре. Полученный раствор перемешивают при комнатной температуре или нагревают до 60°С в течение 12 ч. Реакционную смесь выпаривают и остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя СН3ОН, Е!ОАс и СН2С12) с получением желаемого амидного продукта, соединения 17, в виде твердого вещества от желтоватого до белого цвета.
Общая методика 58.
о θ /-он „Лон ----► ?-ОМе ----- ΓΊ ----►Π » Π ΒοοΝ—1 „ ГТ
ВосМ-* ВосМ-1 ΒοοΝ—1
Ы М
1-(трет-Бутоксикарбонил)азетидин-3-карбоновую кислоту (1-1) (АХЬ016917, 1000 мг, 4,97 ммоль) растворяют в смеси МеОН (5 мл)/толуол (20 мл), а затем охлаждают до 0°С. Затем добавляют по каплям ТМ8СНNN (триметилсилилдиазометан) (7,45 ммоль) в течение 15 мин, при этом наблюдается некоторое образование пузырьков. Раствор, сначала прозрачный, постепенно становитсй желтым. Раствор перемешивают в течение 10 мин при 0°С, а затем нагревают до комнатной температуры в течение 30 мин. Затем раствор концентрируют и откачивают для удаления толуола с получением 1,055 г 1-трет-бутил 3метилазетидин-1,3-дикарбоксилата (1-2), который используется непосредственно на следующей стадии без очистки (сырой выход 99%).
1-трет-Бутил 3-метилазетидин-1,3-дикарбоксилат (1055 мг, 4,90 ммоль) растворяют в ТГФ (17 мл), а затем охлаждают до 0°С. Добавляют последовательно МеОН (0,397 мл, 9,80 ммоль) и Ь1ВН4 (14,7 ммоль). Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры в течение 3 ч. Затем добавляют 10% водный раствор тетрагидрата тартрата калия-натрия (соль КосРе11е'к) (30 мл) и Е!ОАс (30 мл) и раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин. Органический слой отделяют, а затем сушат (№ь8О4) и концентрируют с получением 674 мг трет-бутил 3-(гидроксиметил)азетидин-1карбоксилата (1-3) в виде сырого продукта (прозрачного масла). Продукт используется непосредственно на следующей стадии без очистки.
трет-Бутил 3-(гидроксиметил)азетидин-1-карбоксилат (674 мг, 3,60 ммоль) растворяют в СН2С12 (13 мл, 0,25 М), а затем последовательно добавляют Βί3Ν (1,0 мл, 7,20 ммоль), ИМАР (44 мг, 0,360 ммоль) и метансульфонилхлорид (0,31 мл, 3,96 ммоль) при 0°С, при этом добавление МкС1 осуществляют медлен
- 51 013678 но. Раствор нагревают до комнатной температуры в течение 1 ч. Через 15 ч добавляют насыщенный водный NаНСΟ3 (50 мл), а затем продукт экстрагируют СН2С12 (2x50 мл) и объединенные органические экстракты промывают насыщенным раствором соли (50 мл), сушат (№28О4), концентрируют и очищают флэш-хроматографией (Вю!аде Нο^^ζοη-10%ЕЮАс/гексан-100% ЕЮАс) с получением 962 мг соединения (1-4) в виде масла (количественно).
№1Н (95%, 96 мг, 3,99 ммоль) объединяют в ДМФА (10 мл) в атмосфере Ν2 при комнатной температуре. Затем добавляют 4-бромпиразол (533 мг, 3,63 ммоль) и смесь перемешивают при комнатной температуре. Через 30 мин добавляют соединение (1-4) и раствор нагревают до 95°С. Через 2 ч добавляют насыщенный водный ΝΉ4Ο (50 мл), а затем ЕЮАс (50 мл). Органический экстракт сушат (№ь8О4) и концентрируют, а затем пропускают через тонкий слой силикагеля с помощью 50% ЕЮАс/гексана, получая 846 мг сырого соединения (1-5), которое используется непосредственно на следующей стадии (сырой выход 74%).
Соединение (1-5) (846 мг, 2,68 ммоль), (1-6) (815 мг, 3,21 ммоль), [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен)дихлорпалладий (108 мг, 0,133 ммоль) и КОАс (893 мг, 9,10 ммоль) объединяют в ДМСО (10 мл, продутый Ν2 в течение 10 мин), а затем раствор нагревают до 80°С. Через 16 ч раствор фильтруют через целит, а затем добавляют Н2О (50 мл) и ЕЮАс (50 мл). Органическую фазу экстрагируют и сушат (№28О4), концентрируют, а затем пропускают через слой силикагеля с помощью 50% ЕЮАс/гексана. Растворитель концентрируют с получением 1,22 г сырого соединения (1-7), используемого непосредственно на следующей стадии.
Сложный эфир бороновой кислоты (1-7) (4144 мг, 11,4 ммоль), соединение (1-8) (2890 мг, 7,60 ммоль), дихлорбис(трифенилфосфин)палладий(11) (534 мг, 0,760 ммоль), ОМЕ (40 мл, дегазированный в течение 30 мин Ν2) и 1Ν №ьСО3 (40 мл, дегазированный в течение 30 мин Ν2) объединяют и нагревают до 80°С. Через 16 ч реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и добавляют ЕЮАс (80 мл). Раствор фильтруют через целит, а затем добавляют воду (80 мл). Органический слой отделяют, сушат (№138О4) и концентрируют. Продукт очищают флэш-хроматографией с получением 1486 мг соединения (1-9) в виде желтовато-коричневого твердого продукта (36%).
г ионообменной смолы ЭОХУЕХ 50\ХХ2-400 получают путем промывки ее Н2О (500 мл), Н2О/МеОН, 1:1, МеОН (5x250 мл), СН2С12 (500 мл) и гексаном (500 мл). Затем ООХХЕХ сушат в вакуумной печи при 40°С в течение 1 дня. Соединение (1-9) растворяют в МеОН, а затем добавляют ЭОХХЕХ (588 мг, 1,096 ммоль). Раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. Затем раствор фильтруют и смолу промывают МеОН (3x200 мл), а промывочную жидкость выливают. Затем смолу промывают 3,5М №Н3/МеОН и собирают. Затем раствор концентрируют с получением 374 мг соединения (1-10) в виде твердой смолы (78%).
Для получения соединений формулы (1-11) можно следовать следующей примерной методике: 1 мол. экв. соединения (1-10) растворяют в ДМФА или СН2С12, а затем добавляют основание (3 мол. экв.) и/или реагент сочетания (1,5 мол. экв.). К раствору добавляют Х-Я (1,1 мол. экв.), где X представляет собой, например, С1, Вг, I, ОМ§ (металлоорганику), СОС1, СО, СООН, этилен или карбонат, и Я представляет собой желаемую группу, такую как та, которая показана здесь в примерах, или подобную группу. Полученный раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч. Добавляют Н2О и ЕЮАс и органическую фазу экстрагируют, сушат (Ца28О4) и концентрируют. Сырой продукт можно очистить препаративной ВЭЖХ или другими способами, хорошо известными в данной области, с получением продукта (1-11).
- 52 013678
ОМ5
Общая методика 59.
ЫйУДМФА/ НО°С
24(91«)
(Л) &
ЛК --радкррьзъсу
1Й(97%) ИагСОэЛЭМЕЯЙ:
2-11 (85%)
342 надо®)
3-Азетидинол (2-2).
Реакционную смесь НС1 соли №бензгидрилазетидин-3-ола (2,76 г, 10,0 ммоль) с гидроксидом палладия, 20% Р6 (сухое вещество) на С (400 мг) в 50 мл МеОН гидрируют при 55 фунт/кв.дюйм в течение 48 ч. Реакционную смесь фильтруют через слой целита и как следует промывают МеОН. Фильтрат концентрируют в вакууме на водяной бане при комнатной температуре. Остаток обрабатывают простым эфиром (3x30 мл) и растворитель декантируют. Твердый продукт сушат на воздухе с получением 571 мг НС1 соли соединения (2-2) в виде белого твердого вещества (52% выход).
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-Э6) δ м.д. 3,33 (с, 1Н), 3,63-3,80 (м, 2Н), 3,93-4,09 (м, 2Н), 4,40-4,58 (м, 1Н), 6,18 (д, 1=6,32 Гц, 1Н).
трет-Бутиловый эфир 3-гидроксиазетидин-1-карбоновой кислоты (3-3).
К холодному (баня при 0°С) перемешиваемому раствору соединения (2-2) (570 мг, 5,20 ммоль) в 10 мл Е1ОН добавляют ΕΐзN (1,8 мл, 13,0 ммоль) и ди-трет-бутилдикарбонат (1,702 г, 7,38 ммоль). Полученную смесь в прозрачном растворе перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрируют в вакууме. Остаток распределяют между ЕЮАс (200 мл) и 0,5Ν раствором лимонной кислоты (30 мл; насыщенный раствор соли (30 мл)). Органический слой сушат (№28О4), затем концентрируют в вакууме с получением 899 мг соединения (2-3) в виде прозрачного масла (52%).
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-Ό) δ м.д. 1,42 (с, 9Н), 3,78 (дд, 1=9,47, 4,42 Гц, 2Н), 4,13 (дд, 1=9,35, 6,57 Гц, 2Н), 4,49-4,63 (м, 1Н).
трет-Бутиловый эфир 3-метансульфонилоксиазетидин-1-карбоновой кислоты (2-4).
К раствору соединения (2-3) (466 мг; 2,69 ммоль) с ΕΐзN (0,75 мл; 5,38 ммоль) и 4-(диметиламино) пиридина (33 мг, 0,269 ммоль) в 10 мл СН2С12 при 0°С добавляют метансульфонилхлорид (0,25 мл 3,23 ммоль). Полученную смесь в растворе коричневого цвета перемешивают при 0°С до комнатной температуры в течение ночи. Реакционную смесь гасят NаНСОз, затем распределяют между СН2С12 (200 мл) и насыщенным раствором NаНСОз (50 мл). Органический слой сушат (№ь8О4). затем фильтруют через тонкий слой силикагеля, элюируют смесью гексан:ЕЮАс/1:1; фильтрат концентрируют в вакууме с получением 614 мг соединения (2-4) в виде желтого масла (выход 91%).
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-Ό) δ м.д. 1,43 (с, 9Н), 3,05 (с, 3Н), 4,08 (дд, 1=10,36, 4,29 Гц, 2Н), 4,26 (дд, 1=10,36, 6,82 Гц, 2Н), 5,11-5,26 (м, 1Н).
1-(трет-Бутиловый эфир 3-азетидин-1-карбоновой кислоты)-4-бромпиразол (2-6).
мл пробирку для микроволновой печи загружают соединением (2-4) (304 мг, 1,21 ммоль); 4бромпиразолом (2-5, 178 мг, 1,21 ммоль) и 60% №1Н в минеральном масле (73 мг, 1,82 ммоль.), с 2 мл ДМФА. Полученную смесь нагревают в микроволновой печи при 110°С в течение 30 мин. Реакционную смесь распределяют между ЕЮАс (200 мл) и насыщенным раствором NаНСОз (2x50 мл); насыщенным раствором соли (50 мл). Органический слой сушат (№28О4), затем концентрируют в вакууме с получени
- 53 013678 ем 360 мг соединения (2-6) в виде желтого масла (98%).
!Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-Э6) δ м.д. 1,36-1,43 (м, 9Н), 4,08 (с, 2Н), 4,18-4,31 (м, 2Н), 5,12-5,22 (м, 1Н), 7,67 (с, 1Н), 8,14 (с, 1Н).
трет-Бутил 3-[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразол-1-ил]азетидин-1-карбоксилат (2-8).
Реакционную смесь соединения (2-6) (225 мг, 0,74 ммоль) и бис(пинаколят) дибора (2-7, 227 мг, 0,89 ммоль) с КОАс (247 мг, 2,52 ммоль) в 3 мл ДМСО продувают Ν2 в течение 15 мин, затем добавляют Р6С12(6ррГ)2СН2С12 (30 мг, 2,52 ммоль). Полученную смесь перемешивают при 80°С в атмосфере Ν2 в течение ночи. После ее охлаждения до комнатной температуры смесь фильтруют через слой целита и как следует промывают ЕЮАс. Фильтрат экстрагируют Н2О (2x50 мл), насыщенным раствором соли (50 мл). Органический слой сушат (№28О4), затем концентрируют в вакууме. Затем остаток фильтруют через слой силикагеля, элюируют смесью гексан:ЕЮАс/3:2. Фильтрат концентрируют в вакууме с получением 250 мг соединения (2-8) в виде прозрачного масла (выход 97%).
!Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-Ό) δ м.д. 1,18-1,27 (м, 9Н), 1,28-1,34 (м, 6Н), 1,41-1,49 (м, 6Н), 4,224,33 (м, 2Н), 4,36 (т, 1=8,59 Гц, 2Н), 4,98-5,13 (м, 1Н), 7,83 (с, 2Н).
трет-Бутил 3-(4-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}-1Н-пиразол-1-ил) азетидин-1-карбоксилат (2-10).
Реакционную смесь соединения (2-8) (459 мг; 1,31 ммоль) и 3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]5-йодпиридин-2-амина (2-9) (374 мг; 0,88 ммоль) в 13 мл диметилового эфира этиленгликоля, безводного (ОМЕ), продувают Ν2 в течение 15 мин, затем добавляют Р6(П)(РРй3)2С12 (46 мг, 0,07 ммоль) и продолжают продувку Ν2 в течение еще 15 мин. Другой 1,0Ν раствор №2СО3 (3,9 мл; 3,9 ммоль) добавляют после продувки Ν2 в течение 15 мин. Полученную смесь перемешивают при 85°С в атмосфере Ν2 в течение ночи. Реакционную смесь фильтруют через слой целита и как следует промывают МеОН. Фильтрат концентрируют в вакууме. Остаток распределяют между ЕЮАс (200 мл) и насыщенным раствором NаНСΟ3 (2x50 мл); насыщенным раствором соли (50 мл). Органический слой сушат (№ь8О4). затем концентрируют в вакууме. Остаток очищают с помощью системы Вю1адс (25М, 100% СН2С12; от 100% СН2С12 до 90% СН2С12 с 10% МеОН) для сбора желаемой фракции с получением 421 мг соединения (2-10) в виде густого масла коричневого цвета (выход 92%).
!Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-Ό) δ м.д. 1,17-1,26 (м, 9Н), 1,80-1,87 (м, 3Н), 4,04-4,18 (м, 2Н), 4,204,33 (м, 2Н), 4,34-4,41 (м, 1Н), 4,79 (с, 2Н), 5,02 (д, 1=7,58 Гц, 1Н), 7,04 (т, 1=8,46 Гц, 1Н), 7,33-7,41 (м, 1Н), 7,44-7,52 (м, 1Н), 7,53-7,58 (м, 1Н), 7,59-7,65 (м, 1Н), 7,72-7,78 (м, 1Н). ЖХ/МС вычислено для С24Н26С12Р^О3 (М+Н) 523, найдено 523.
5-(1-Азетидин-3-ил-1Н-пиразол-4-ил)-3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-2-амин (2-11).
Реакционную смесь соединения (2-10) (421 мг; 0,81 ммоль) с 4,0М НС1 в диоксане (2,0 мл; 8,1 ммоль) в 5 мл СН2С12 перемешивают при комнатной температуре в течение 2,0 ч. Реакционную смесь концентрируют в вакууме. Остаток обрабатывают ЕЮАс. Выпавший в осадок твердый продукт отфильтровывают и как следует промывают ЕЮАс, гексаном, затем сушат в вакууме с получением 275 мг соединения (2-11) в виде твердой НС1 соли песочного цвета (выход 81%).
!Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-О6) δ м.д. 1,79-1,89 (м, 3Н), 3,56 (с, 1Н), 4,35 (с, 4Н), 5,40 (с, 1Н), 6,23 (д, 1=6,57 Гц, 2Н), 7,09 (с, 1Н), 7,40-7,54 (м, 1Н), 7,59 (дд, 1=8,84, 5,05 Гц, 1Н), 7,73-7,83 (м, 1Н), 7,86 (с, 1Н), 8,12 (с, 1Н), 9,20 (с, 1Н). ЖХ/МС вычислено для С19Н18С12Р^О (М+Н) 423, найдено 423.
Соединения формулы 2-12 могут быть получены с помощью следующей примерной методики: к реакционной смеси соединения (2-11) (1,0 экв.) с Е1^ (2,0 экв.) в 2,0 мл ДМФА при комнатной температуре добавляют алкилбромид (1,1 экв.). Полученную смесь перемешивают в атмосфере Ν2 при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь распределяют между ЕЮАс (200 мл) и насыщенным раствором NаНСΟ3 (2x50 мл); насыщенным раствором соли (50 мл). Органический слой сушат (№28О4), затем концентрируют в вакууме. Остаток очищают с помощью системы Όίοηβχ (от 5 до 95% МсС№Н;О с буфером 0,1% НОАс) для сбора желаемой фракции с получением соединения (2-12).
Альтернативно, соединения формулы 2-12 могут быть получены с помощью следующей примерной методики: к реакционному раствору алкиламина (1,0 экв.) с 1Рг2Е(№ (диизопропилэтиламин) (3,0 экв.) в 2,0 мл ДМФА добавляют НАТи (1,5 экв.). После перемешивания в течение 30 мин добавляют соединение (2-11) (1,0 экв.). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь распределяют между ЕЮАс (200 мл) и насыщенным раствором NаНСΟ3 (2x50 мл), и насыщенным раствором соли (50 мл). Органический слой сушат (№ь8О4) и концентрируют в вакууме. Остаток очищают с помощью системы Όίοηβχ (5-95% МсС№Н2О с 0,1% НОАс) для сбора желаемого продукта с получением соединения (2-12).
- 54 013678
Общая методика 60.
трет-Бутил 1-окса-6-азаспиро[2.5]октан-6-карбоксилат (3-2).
Раствор метилида диметилсульфоксония получают в атмосфере Ν2 из 60% дисперсии №1Н в минеральном масле (440 мг; 11,0 ммоль) и йодида триметилсульфоксония (2,421 г; 11,0 ммоль) в 5 мл безводного ДМСО. Другой раствор 1-Вос-4-оксо-1-пиперидинкарбоксилата (3-1, 1,993 г; 10,0 ммоль) в 5 мл ДМСО добавляют по каплям. Полученную смесь перемешивают при 55°С в течение 6 ч. Охлажденную реакционную смесь выливают в Н2О со льдом и экстрагируют ЕЮАс (2x200 мл). Объединенные органические слои промывают Н2О (50 мл), насыщенным раствором соли (50 мл), а затем сушат (№28О4), затем концентрируют в вакууме с получением 1,4791 г соединения (3-2) в виде желтого масла (69% выход).
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-Ό) δ м.д. 1,37-1,52 (м, 11Н), 1,71-1,84 (м, 2Н), 2,63-2,72 (м, 2Н), 3,353,49 (м, 2Н), 3,62-3,78 (м, 2Н).
трет-Бутил 4-гидрокси-4-{[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразол-1-ил]метил}пиперидин-1-карбоксилат (3 -4).
Реакционную смесь соединения (3-2) (214 мг; 1,0 ммоль) и 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола (3-3, 194 мг; 1,0 ммоль) с 60% дисперсией №1Н в минеральном масле (60 мг; 1,5 ммоль) в 3 мл ДМФА перемешивают при 90°С в течение 3 ч. Реакционную смесь распределяют между ЕЮАс (200 мл) и насыщенным раствором NаНСОз (50 мл) и насыщенным раствором соли (50 мл). Органический слой сушат (№ь8О4) и концентрируют в вакууме с получением 361 мг соединения (34) в виде желтого густого масла (выход 89%).
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-Ό) δ м.д. 1,21-1,34 (м, 12Н), 1,39-1,50 (м, 9Н), 1,56-1,78 (м, 4Н), 3,14 (с, 2Н), 3,72-3,91 (м, 1=32,34 Гц, 2Н), 4,05 (с, 2Н), 7,65 (с, 1Н), 7,80 (с, 1Н), 8,00 (с, 1Н). ЖХ/МС вычислено для С20Н34В^О5 (М+Н) 408, найдено 408, чистота-по ВЭЖХ 85%.
трет-Бутил 4-[(4-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}-1Н-пиразол-1ил)метил]-4-гидроксипиперидин-1-карбоксилат (3-6).
Реакционную смесь соединения (3-4) (361 мг; 0,89 ммоль) и 3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]5-йодпиридин-2-амина (3-5) (378 мг; 0,89 ммоль) в 9,0 мл диметилового эфира этиленгликоля, безводного (ЭМЕ), продувают Ν2 в течение 15 мин, затем добавляют Рб(П) (РРЬ3)2С12 (32 мг, 0,05 ммоль) и продолжают продувку Ν2 в течение еще 15 мин. Другой 1,0Ν раствор №ь8О3 (3,9 мл; 3,9 ммоль) добавляют после продувки Ν2 в течение 15 мин. Полученную смесь перемешивают при 85°С в атмосфере Ν2 в течение ночи. Реакционную смесь фильтруют через тонкий слой целита и как следует промывают МеОН. Фильтрат концентрируют в вакууме. Остаток распределяют между ЕЮАс (200 мл) и насыщенным рас твором NаНСО3 (2x50 мл); насыщенным раствором соли (50 мл). Органический слой сушат (№28О4), затем концентрируют в вакууме. Остаток очищают с помощью системы Эюиех (25-95% МеС№Н2О с 0,1% буфером НОАс) для сбора желаемой фракции с получением 147 мг соединения (3-6) в виде белого твердого продукта (выход 28%).
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-Э6) δ м.д. 1,34-1,39 (м, 9Н), 1,70-1,77 (м, 2Н), 1,79 (д, 1=6,57 Гц, 3Н), 3,06 (д, 1=12,63 Гц, 2Н), 3,62 (с, 2Н), 4,03 (с, 2Н), 4,79 (с, 1Н), 5,66 (с, 2Н), 6,08 (д, 1=6,82 Гц, 1Н), 6,86 (д, 1=1,52 Гц, 1Н), 7,44 (т, 1=8,72 Гц, 1Н), 7,51-7,58 (м, 2Н), 7,58-7,65 (м, 2Н), 7,73 (д, 1=1,52 Гц, 1Н), 7,78 (с, 1Н). ЖХ/МС вычислено для С27Н32С12Р^О4 (М+Н) 581, найдено 581, чистота по ВЭЖХ 87%.
4-[(4-{6-Амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}-1Н-пиразол-1-ил)метил]пиперидин-4-ол (3-7).
Реакционную смесь соединения (3-6) (145 мг; 0,25 ммоль) с 4,0М НС1 в диоксане (2,0 мл; 8,1 ммоль)
- 55 013678 в 5 мл СН2С12 перемешивают при комнатной температуре в течение 2,0 ч. Реакционную смесь концентрируют в вакууме. Остаток очищают с помощью системы Όίοηβχ (от 5 до 95% МсС№Н;О с 0,1% буфером НОАс) для сбора желаемой фракции с получением 76 мг соединения (3-7) в виде желтого густого масла (63% выход).
!Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-Э6) δ м.д. 1,41-1,55 (м, 2Н), 1,59-1,71 (м, 2Н), 1,81 (д, 1=6,57 Гц, 3Н), 2,88-3,00 (м, 2Н), 3,02-3,14 (м, 2Н), 4,08 (с, 2Н), 5,17 (с, 2Н), 6,14-6,27 (м, 1=6,57 Гц, 1Н), 7,05 (с, 1Н), 7,40-7,49 (м, 1=8,72, 8,72 Гц, 1Н), 7,51-7,60 (м, 1=9,09, 4,80 Гц, 1Н), 7,63 (с, 1Н), 7,76 (с, 1Н), 7,91 (с, 1Н), 8,51 (с, 1Н), 8,81 (с, 1Н). ЖХ/МС вычислено для С22Н24С12Е^О2 (М+Н) 481, найдено 481. Чистота по
ΚΚ'ΝΗ
ВЭЖХ 98%. Анал. (С22Н24С12Е^О2х2, 2НОАсх2, 3Н2О) С, Н, Ν. Общая методика 61.
2Ν КаОН
НагСО/ОМВ/ВЗ1^:
(ΙΪΜβδΟ^α &з№ОМАР СНА (2)ЫаН/ДМФА/
ΗΑΤυ/Εΐ,Ν иадргЪСЬгСЛг КОАс/ДМСО/8«Рс
Этил 2-[(4-бром-1Н-пиразол-1-ил)метил]циклопропанкарбоксилат (4-3).
К реакционному раствору этил 2-(гидроксиметил)циклопропанкарбоксилата (4-1) (577 мг; 4,0 ммоль) с Εΐ3Ν (1,1 мл; 8,0 ммоль) и ЭМАР (49 мг; 0,4 ммоль) в 12 мл СН2С12 при 0°С добавляют метансульфонилхлорид (0,4 мл; 4,8 ммоль). Полученную смесь суспензии коричневого цвета перемешивают при 0°С до комнатной температуры в атмосфере Ν2 в течение ночи. Реакционную смесь гасят NаНСО3, затем распределяют между СН2С12 (200 мл) и насыщенным раствором NаНСО3 (50 мл); насыщенным раствором соли (50 мл). Органический слой сушат (Ыа28О4), затем фильтруют через тонкий слой силикагеля, элюируют смесью гексан:Е1ОАс/1:1. Фильтрат концентрируют в вакууме с получением 880 мг этил 2{[(метилсульфонил)окси]метил}циклопропанкарбоксилата в виде желтого масла (выход 99%).
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-Ό) δ м.д. 0,91-1,02 (м, 1Н), 1,26 (кв, 1=6,99 Гц, 3Н), 1,29-1,36 (м, 1Н), 1,63-1,74 (м, 1Н), 1,79-1,92 (м, 1Н), 3,02 (с, 3Н), 3,99-4,24 (м, 4Н).
Готовят реакционную смесь этил 2-{[(метилсульфонил)окси]метил}циклопропанкарбоксилата (880 мг; 4,0 ммоль), 4-бромпиразола (4-2, 588 мг, 4,0 ммоль) и 60% №1Н в минеральном масле (240 мг, 6,0 ммоль) с 3,0 мл ДМФА. Полученную смесь перемешивают при 90°С в атмосфере Ν2 в течение 4 ч. Реакционную смесь распределяют между ЕЮАс (200 мл) и насыщенным раствором NаНСО3 (2x50 мл); насыщенным раствором соли (50 мл). Органический слой сушат (Ыа28О4), затем концентрируют в вакууме с получением 812 мг соединения (4-3) в виде желтого масла (74%).
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-Ό) δ м.д. 0,85 (дд, 1=7,96, 3,16 Гц, 1Н), 0,88-0,98 (м, 1Н), 1,18-1,29 (м, 3Н), 1,56-1,71 (м, 1Н), 1,79-1,94 (м, 1Н), 3,96-4,08 (м, 2Н), 4,07-4,17 (м, 2Н), 7,45 (д, 1=3,79 Гц, 2Н). ЖХ/МС вычислено для С|0Н|3Вг№О2 (М+Н) 274, найдено 274. Чистота по ВЭЖХ 95%.
Этил 2-{ [4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3-диоксоборолан-2-ил)-1Н-пиразол-1-ил]метил}циклопропанкарбоксилат (4-4).
Реакционную смесь соединения (4-3) (812 мг, 2,97 ммоль) и бис(пинаколят)дибора (906 мг, 3,57 ммоль) с КОАс (991 мг, 10,10 ммоль) в 10,0 мл ДМСО продувают Ν2 в течение 15 мин, затем добавляют
- 56 013678
РйС12(йрр1)2СН2С12 (122 мг, 0,15 ммоль). Полученную смесь перемешивают при 80°С в атмосфере Ν2 в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры смесь фильтруют через тонкий слой целита и как следует промывают ЕЮАс. Фильтрат экстрагируют Н2О (2х50 мл), насыщенным раствором соли (50 мл). Органический слой сушат (Ыа28О4), затем концентрируют в вакууме. Затем остаток фильтруют через тонкий слой силикагеля и элюируют смесью гексан:ЕЮАс/3:1. Фильтрат концентрируют в вакууме с получением 945 мг соединения (4-4) в виде желтого масла (выход 98%).
!Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-Ό) δ м.д. 0,85 (дд, 1=7,83, 3,03 Гц, 1Н), 0,90-0,96 (м, 1Н), 1,20-1,24 (м, 3Н), 1,29-1,34 (м, 12Н), 1,62-1,71 (м, 1Н), 1,84-1,97 (м, 1Н), 3,96-4,07 (м, 1Н), 4,06-4,14 (м, 2Н), 4,15-4,23 (м, 1=14,27, 6,44 Гц, 1Н), 7,73 (с, 1Н), 7,77 (с, 1Н).
Этил 2-[(4-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}-1Н-пиразол-1-ил)метил] циклопропанкарбоксилат (4-6).
Реакционную смесь соединения (4-4) (643 мг; 2,01 ммоль) и 3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-
5-йодпиридин-2-амина (4-5) (572 мг; 1,34 ммоль) в 20,0 мл диметилового эфира этиленгликоля, безводного (ОМЕ), продувают Ν2 в течение 15 мин, затем добавляют Рй(П)(РРй3)2С12 (71 мг, 0,1 ммоль) и продолжают продувку Ν2 в течение других 15 мин. Другой 1,0Ν раствор Ыа2СО3 (6,0 мл; 6,0 ммоль) добавляют после продувки Ν2 в течение 15 мин. Полученную смесь перемешивают при 85°С в атмосфере Ν2 в течение ночи. Реакционную смесь фильтруют через тонкий слой целита и как следует промывают МеОН. Фильтрат концентрируют в вакууме. Остаток распределяют между ЕЮАс (200 мл) и насыщенным раствором NаНСΟ3 (2х50 мл); насыщенным раствором соли (50 мл). Органический слой сушат Ща28О4), затем концентрируют в вакууме. Остаток очищают с помощью системы Вю1аде (25М СН2С12 100%; от СН2С12 100 до 90% СН2С12:10% МеОН) для сбора желаемой фракции с получением 600 мг соединения (46) в виде густого масла коричневого цвета (выход 91%).
!Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-О6) δ м.д. 0,96-1,10 (м, 2Н), 1,15 (т, 1=7,07 Гц, 2Н), 1,74 (с, 3Н), 1,79 (д, 1=6,57 Гц, 3Н), 3,95-4,14 (м, 4Н), 5,66 (с, 2Н), 6,08 (д, 1=6,57 Гц, 1Н), 6,88 (с, 1Н), 7,43 (т, 1=8,72 Гц, 1Н), 7,49-7,62 (м, 2Н), 7,73 (с, 1Н), 7,88 (с, 1Н). ЖХ/МС вычислено для С23Н23С12ЕЩО3 (М+Н) 494, найдено 494. Чистота по ВЭЖХ 95%.
2-[(4-{6-Амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}-1Н-пиразол-1-ил)метил]циклопропанкарбоновая кислота (4-7).
К реакционному раствору соединения (4-6) (377 мг, 0,76 ммоль) в 5,0 мл МеОН при комнатной температуре в атмосфере Ν2 добавляют другой раствор 2,0Ν №1ОН (2) (1,5 мл, 3,04 ммоль). Полученную смесь перемешивают при 80°С в течение 3 ч. Реакционную смесь концентрируют в вакууме для удаления большей части МеОН и подкисляют 2М НС1 до рН 4,0. Смесь экстрагируют СН2С12 (2х200 мл); органические слои промывают насыщенным раствором соли (50 мл) и сушат (№ь8О4) и концентрируют в вакууме с получением 324 мг соединения (4-7) в виде желтого твердого продукта (выход 92%).
!Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-О6) δ м.д. 0,92-1,04 (м, 2Н), 1,57-1,72 (м, 2Н), 1,76-1,90 (м, 3Н), 3,98-4,18 (м, 2Н), 6,46 (с, 2Н), 6,89-7,02 (м, 1Н), 7,29-7,52 (м, 2Н), 7,52-7,63 (м, 2Н), 7,73 (д, 1=1,52 Гц, 1Н), 7,94 (с, 1Н), 12,19 (с, 1Н). ЖХ/МС вычислено для С21Н19С12ЕЩО3 (М-Н) 463, найдено 463. Чистота по ВЭЖХ 87%.
2-[(4-{6-Амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}-1Н-пираэол-1-ил)метил]-Ыметилциклопропанкарбоксамид (4-8) (К=Ме, К'=Н).
К реакционному раствору (4-7) (1,0 экв.) с 1Рг2ЕШ (2,0 экв.) в 1,0 мл ДМФА добавляют НАТи (1,5 экв.). После перемешивания в течение 30 мин добавляют алкиламин (1,1 экв.). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь распределяют между ЕЮАс (200 мл) и насыщенным раствором NаНСΟ3 (2х50 мл) и насыщенным раствором соли (50 мл). Органический слой сушат (№ь8О4) и концентрируют в вакууме. Образец преобразуют в свободное основание с помощью распределения между ЕЮАс (200 мл) и насыщенным раствором NаНСΟ3 (50 мл) и насыщенным раствором соли (50 мл). Органический слой сушат (№ь8О4) и концентрируют в вакууме. Остаток обрабатывают 1,0 мл Н2О и лиофилизируют, получая соединение (4-8).
- 57 013678
Общая методика 62.
Вт
К раствору 5-бром-3-[(В)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-2-иламина (12,83 г, 33,76 ммоль) в безводном ДМФА (100 мл) добавляют ди-трет-бутилдикарбонат (21,25 г, 97,35 ммоль) и 4диметиламинопиридин (0,793 г, 6,49 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при температуре окружающей среды в течение 18 ч в атмосфере азота. К смеси добавляют насыщенный раствор НаНСО3 (300 мл) и экстрагируют ЕЮАс (3x250 мл). Объединенные экстракты промывают водой (5x100 мл), насыщенным НаНСО3 и насыщенным раствором соли, затем сушат над На28О4. После фильтрования, выпаривания и сушки в высоком вакууме получают ди-Ьос-защищенный 5-бром-3-[(В)-1-(2,6-дихлор-3фторфенил)этокси]пиридин-2-иламин в виде твердой серо-белой пены (19,59 г, 100% выход).
Ή-ЯМР (ДМСО-а6, 400 МГц) δ 8,18 (д, 1Н), 7,83 (д, 1Н), 7,59 (дд, 1Н), 7,48 (т, 1Н), 6,25 (кв, 1Н), 1,75 (д, 3Н), 1,39 (с, 9Н), 1,19 (с, 9Н).
К раствору ди-Ьос-защищенного 5-бром-3-[(В)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-2иламина (19,58 г, 33,76 ммоль) в ДМСО (68 мл) добавляют ацетат калия (11,26 г, 114,78 ммоль) и бис(пинаколято)дибор (10,29 г, 40,51 ммоль). Смесь дегазируют и продувают азотом три раза, затем добавляют РП(ПррГ)С12, СН2С12 (1,38 г, 1,69 ммоль). Реакционную смесь дегазируют и продувают азотом три раза, а затем перемешивают при 80°С на масляной бане в атмосфере азота в течение 12 ч. Реакционную смесь охлаждают до температуры окружающей среды, разбавляют этилацетатом (100 мл) и фильтруют через тонкий слой целита, который промывают этилацетатом. Объединенный этилацетатный раствор (700 мл) промывают водой (5x100 мл), насыщенным раствором соли (100 мл) и сушат над На28О4. После фильтрования и концентрирования остаток очищают на колонке с силикагелем, элюируя смесью ЕЮАс/гексан (0%-50%), с получением ди-Ьос-защищенного 3-[(В)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-5(4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-иламина в виде твердой пены (20,59 г, выход 97%).
Ή-ЯМР (ДМСО-а6, 400 МГц) δ 8,20 (д, 1Н), 7,70 (д, 1Н), 7,63 (дд, 1Н), 7,47 (т, 1Н), 6,20 (кв, 1Н), 1,73 (д, 3Н), 1,50-1,13 (м, 30Н).
К раствору ди-Ьос-защищенного 3-[(В)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-(4,4,5,5тетраметил[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-иламина (20,34 г, 32,42 ммоль) в СН2С12 (80 мл) добавляют раствор сухой НС1 в диоксане (4Н, 40,5 мл, 162 ммоль). Реакционный раствор перемешивают при 40°С на масляной бане в атмосфере азота в течение 12 ч. Реакционную смесь охлаждают до температуры окружающей среды, разбавляют ЕЮАс (400 мл), затем промывают осторожно, но быстро, насыщенным НаНСО3 до тех пор, пока водный слой не станет основным (рН>8). Органический слой промывают насыщенным раствором соли и сушат над На28О4. После фильтрования, выпаривания и сушки в высоком вакууме получают 3-[(В)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-(4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]-диоксаборолан2-ил)пиридин-2-иламин в виде твердой пены серо-белого цвета (13,48 г, выход 97%).
Ή-ЯМР (ДМСО-а6, 400 МГц) δ 8,01 (д, 1Н), 7,27 (дд, 1Н), 7,17 (д, 1Н), 7,03 (т, 1Н), 6,12 (кв, 1Н),
- 58 013678
5,08 (уш.с, 2Н), 1,81 (д, 3Н), 1,30 (с, 6Н), 1,28 (с, 6Н).
К перемешиваемому раствору 3-[(К)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-(4,4,5,5-тетраметил [1,3,2]диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-иламина (4,2711 г, 10,0 ммоль) и трет-бутилового эфира 4-(4бромпиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоновой кислоты (см. методику 11) (3,9628 г, 12,0 ммоль) в ЭМЕ (40 мл) добавляют раствор №ьСО3 (3,1787 г, 30,0 ммоль) в воде (10 мл). Раствор дегазируют и три раза продувают азотом. К раствору добавляют Рй(РРй3)2С12 (351 мг, 0,50 ммоль). Реакционный раствор дегазируют и опять три раза продувают азотом. Реакционный раствор перемешивают при 87°С на масляной бане в течение примерно 16 ч (или до тех пор, пока не израсходуется пинаконовый эфир бороновой кислоты), охлаждают до температуры окружающей среды и разбавляют ЕЮАс (200 мл). Реакционную смесь фильтруют через тонкий слой целита и промывают ЕЮАс. Раствор ЕЮАс промывают насыщенным раствором соли, сушат над Ыа28О4 и концентрируют. Сырой продукт очищают на колонке с силикагелем, элюируя с помощью системы ЕЮАс/гексан (от 0% ЕЮАс до 100% ЕЮАс), с получением третбутилового эфира 4-(4-{6-амино-5-[(К)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоновой кислоты (3,4167 г, выход 65%, чистота ~95%) с КТ 0,15 (50% ЕЮАс/гексан). МС т/е 550 (М+1)+.
К раствору трет-бутилового эфира 4-(4-{6-амино-5-[(К)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоновой кислоты (566,7 мг, 1,03 ммоль) в метаноле (5 мл) или дихлорметане (30 мл) добавляют 4Ν НС1/диоксан (15 мл). Раствор перемешивают примерно 1 ч или до тех пор, пока снятие защиты не будет завершено. Растворители выпаривают и остаток растворяют в метаноле и очищают препаративной ВЭЖХ на колонке с обращенной фазой С-18, элюируя линейным градиентом от 5 до 30% смеси ацетонитрил/вода с 0,1% уксусной кислоты. После лиофилизации получают ацетат 3 -[(К)-1 -(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-( 1-пиперидин-4-ил-1Н-пиразол-4-ил)пиридин-2иламина в виде белого твердого продукта (410 мг, выход 78%, чистота по ВЭЖХ 100%, 96,4% ее).
Ή-ЯМР (ДМСО-б6, 400 МГц) δ 7,84 (с, 1Н), 7,68 (д, 1Н), 7,50 (дд, 1Н), 7,46 (с, 1Н), 7,37 (т, 1Н), 6,83 (д, 1Н), 6,02 (кв, 1Н), 5,57 (уш.с, 2Н), 4,09 (м, 1Н), 2,98 (м, 2Н), 2,53 (м, 2Н), 1,88 (м, 2Н), 1,82 (с, 3Н), 1,73 (д, 3Н), 1,70 (м, 2Н). МС т/е 450 (М+1)+.
Общая методика 63.
ρ
К суспензии 3-[1 -(2,6-дихлор-3 -фторфенил)этокси]-5-(1 -пиперидин-4-ил-1Н-пиразол-4-ил)пиридин2-иламина в виде соли НС1 (методика 6) (150 мг, 0,288 ммоль) в СН2С12 (2 мл) добавляют ΝΒΐ3 (0,121 мл, 0,863 ммоль) и перемешивают в течение 30 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждают до 0°С и добавляют хлоркарбонилметиловый эфир уксусной кислоты и перемешивают в течение 1 ч при комнатной температуре. Реакцию отслеживают по ЖХ-МС и после завершения преобразования в желаемый продукт добавляют воду (2 мл). Реакционную смесь экстрагируют ЕЮАс (4x10 мл), сушат над №28О4 и концентрируют с получением количественного выхода 2-[4-(4-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}пиразол-1-ил)пиперидин-1-ил]-2-оксоэтилового эфира уксусной кислоты (164 мг, количественно).
К раствору 2-[4-(4-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}пиразол-1ил)пиперидин-1-ил]-2-оксоэтилового эфира уксусной кислоты (164 мг, 0,298 ммоль) в МеОН (4 мл) добавляют Ь1ОН (7 мг, 0,298 ммоль), растворенный в 1 мл воды. Реакционную смесь перемешивают в течение 30 мин при комнатной температуре, при этом ЖХ-МС показывает завершение преобразования в 1-[4(4-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}пиразол-1-ил)пиперидин-1-ил]-2гидроксиэтанон. Продукт очищают препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой С-18, элюируя смесью ацетонитрил/вода, имеющей 0,1% уксусную кислоту от 10 до 40%.
- 59 013678
Общая методика 64.
100 мл колбу с бруском мешалки сушат в печи и охлаждают в атмосфере сухого азота. Колба снабжена резиновой крышкой со шприцем. Колбу погружают в водяную баню со льдом в атмосфере азота и вводят 1,6 мл (1,6 ммоль) 1,0М раствора борана в ТГФ. Затем вводят 2-(4-{5-амино-6-[1-(2,6-дихлор-3фторфенил)этокси]пиразин-2-ил}пиразол-1-ил)-2-метилпропионовую кислоту (методика 5) (0,1 г, 0,221 ммоль) в безводном ТГФ (1,0 мл). Полученную смесь перемешивают при температуре окружающей среды в атмосфере азота в течение 5 ч и медленно добавляют 6Ν НС1 (1,1 мл), а затем вводят Н2О (1,1 мл) и МеОН (7,4 мл). Реакционную смесь перемешивают непрерывно в течение ночи. Большую часть растворителя выпаривают в вакууме, а затем 1Ν раствор №1ОН используют для доведения рН до 11. Добавляют воду и раствор экстрагируют ЕЮАс (3x30 мл) и сушат над №ь8О4. После фильтрования и концентрирования сырой продукт очищают обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ, элюируя смесью ацетонитрил/вода, содержащей 0,1% уксусную кислоту от 10 до 60%. После лиофилизации чистых фракций получают ацетат 2-(4-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3 -фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}пиразол-1 -ил)-2-метилпропан-1-ола в виде белого твердого продукта (21 мг, выход 22%).
Общая методика 65.
К перемешиваемому раствору трет-бутилового эфира 4-гидроксипиперидин-1-карбоновой кислоты (7,94 г, 39,45 ммоль) в СН2С12 (100 мл), охлажденному до 0°С, медленно добавляют ΝΒΐ3 (5,54 мл, 39,45 ммоль), а затем метансульфонилхлорид (3,06 мл, 39,45 ммоль) и БМАР (48 мг, 0,39 ммоль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. К смеси добавляют воду (30 мл). Экстрагирование СН2С12 (3x30 мл), а затем сушка (№ь8О4) и удаление растворителя в вакууме дают трет-бутиловый эфир 4-метансульфонилоксипиперидин-1-карбоновой кислоты в виде белого твердого продукта (11,00 г, выход >99%).
Ή-ЯМР (СБС13, 400 МГц) δ 4,89 (м, 1Н), 3,69 (м, 2Н), 3,31 (м, 2Н), 3,04 (с, 3Н), 1,95 (м, 2Н), 1,83 (м, 2Н), 1,46 (с, 9Н).
К перемешиваемому раствору 4-бромпиразола (10,44 г, 71,03 ммоль) в безводном ДМФА (96 мл), охлажденному до 0°С, медленно добавляют NаН (60% в минеральном масле) (3,13 г, 78,133 ммоль). Раствор перемешивают в течение 1 ч при 0°С. Добавляют медленно трет-бутиловый эфир 4метансульфонилоксипиперидин-1-карбоновой кислоты (19,82 г, 71,03 ммоль) и реакционную смесь нагревают до 100°С в течение ночи или до тех пор, пока ЯМР не покажет, что пиразол израсходован. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и добавляют воду (20 мл) с последующим экстрагированием ЕЮАс. Объединенные экстракты промывают насыщенным водным №С1 (4x20 мл), сушат №28О4 и концентрируют с получением трет-бутилового эфира 4-(4-бромпиразол-1-ил)пиперидин-1
- 60 013678 карбоновой кислоты в виде оранжевого масла. Масло очищают с использованием хроматографии на силикагеле, элюируя от 10% ЕЮАс/гексана до 25% ЕЮАс/гексана, с получением трет-бутилового эфира 4(4-бромпиразол-1-ил)пилеридин-1-карбоновой кислоты в виде белого твердого продукта (10,55 г, выход 45%) с В(=0,4 (25% ЕЮАс/гексан, с использованием йода для окрашивания).
Ή-ЯМР (СОС13, 400 МГц) δ 7,46 (с, 1Н), 7,43 (с, 1Н), 4,23 (м, 3Н), 2,88 (м, 2Н), 2,10 (м, 2Н), 1,88 (м, 2Н), 1,47 (с, 9Н).
К раствору трет-бутилового эфира 4-(4-бромпиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоновой кислоты (500 мг, 1,515 ммоль) в СН2С12 (3 мл) добавляют ТФУК (3 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре до тех пор, пока ЖХ/МС не покажет завершение реакции. Растворители удаляют в вакууме и остаток растворяют в МеОН (15 мл). Доводят рН раствора до 9 гидроксидной смолой с получением 4-(4-бромпиразол-1-ил)пиперидина.
К раствору 4-(4-бромпиразол-1-ил)пиперидина (375 мг, 1,63 ммоль) в ДМФА (3,26 мл) добавляют NΕΐ3 (230 мкл, 1,63 ммоль) и перемешивают в течение 5 мин. Добавляют метидйодид (МеД (1,63 мл, 1М МеI в ДМФА, свежеполученный) и реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Добавляют воду и раствор экстрагируют ЕЮАс (4x10 мл). Органический раствор промывают насыщенным раствором соли, сушат с помощью №28О4, концентрируют и сушат в вакууме с получением 4-(4-бромпиразол-1-ил)-1-метилпиперидина (251 мг, выход 63%).
Общая методика 66.
К раствору 3-[(В)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-(1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-иламина (295 мг, 0,80 ммоль) в безводном ДМФА (4 мл) добавляют NаΗ (60% в минеральном масле, 30,7 мг, 0,80 ммоль). Смесь перемешивают при температуре окружающей среды в атмосфере азота в течение 0,5 ч, а затем вводят трет-бутиловый эфир 4-метансульфонилоксипиперидин-1-карбоновой кислоты (223,5 мг, 0,80 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 90°С на масляной бане в течение 0,5 ч в атмосфере азота и охлаждают до температуры окружающей среды. Медленно добавляют воду к смеси, которую экстрагируют ЕЮАс, промывают насыщенным раствором соли и сушат над №28О4. Сырой продукт очищают на колонке с силикагелем с получением трет-бутилового эфира 4-(4-{5-амино-6-[(В)-1-(2,6-дихлор-3фторфенил)этокси]пиразин-2-ил}пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоновой кислоты в виде белого твердого продукта (265 мг, выход 59%).
К раствору трет-бутилового эфира 4-(4-{5-амино-6-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2ил}пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоновой кислоты (265 мг, 0,48 ммоль) в СН2С12 добавляют 4Ν НС1/диоксан (4 мл). Смесь перемешивают при температуре окружающей среды в течение 1 ч. После выпаривания остаток растворяют в метаноле (2,5 мл) и очищают препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой С-18, элюируя линейным градиентом 10-40% смеси ацетонитрил/вода, содержащей 0,1% уксусную кислоту. После лиофилизации получают ацетат 3-[(В)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-(1пиперидин-4-ил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-иламина в виде белого твердого продукта (125 мг, выход 51%).
Общая методика 67.
О-(7-Азабензотриазол-1-ил)-Ы,^№,№-тетраметилуроний фосфор пентафторид (НАТИ) (66 мг, 0,17 ммоль) добавляют к раствору 2-(4-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3- 61 013678 ил}пиразол-1-ил)пропионовой кислоты (69 мг, 0,16 ммоль), триэтиламина (0,024 мл, 0,17 ммоль) и 3диметиламинопропиламина (0,022 мл, 0,17 ммоль) в 1,6 мл ДМФА. После перемешивания в течение 3 ч реакционную смесь концентрируют с помощью роторного испарителя. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя градиентное элюирование дихлорметаном, метанолом, гидроксидом аммония, с получением 2-(4-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}пиразол-1-ил)-№ (3-диметиламинопропил)пропионамида (41 мг, 50%).
Общая методика 68.
Н3С Ν-Вос
НО
Н3с
Ν-Вос
Ν-ΝΗ
ТГФ
Ν-Ν
Диэтилазодикарбоксилат (0,48 мл, 3,1 ммоль) при 0°С добавляют к раствору трифенилфосфина (0,80 г, 3,1 ммоль) в ТГФ (20 мл). После перемешивания в течение 5 мин добавляют 4-бромпиразол (0,30 мг, 2,0 ммоль). После дополнительных 5 мин перемешивания добавляют трет-бутиловый эфир (2гидроксиэтил)метилкарбаминовой кислоты (0,45 г, 2,6 ммоль). Реакционной смеси дают нагреться до комнатной температуры и перемешивают в течение ночи. Реакционную смесь охлаждают до 0°С и фильтруют. Фильтрат концентрируют с помощью роторного испарителя. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя градиентное элюирование дихлорметаном, этилацетатом, с получением трет-бутилового эфира [2-(4-бромпиразол-1-ил)этил]метилкарбаминовой кислоты (541 мг, 87%).
Общая методика 69.
н3С
Вг
ДМФА
Вг
Гидрид натрия (0,12г, 4,9 ммоль) добавляют к раствору 4-бром-4Н-пиразола (0,60 г, 4,1 ммоль) в ДМФА (10 мл). После перемешивания в течение 10 мин добавляют раствор метилового эфира 2хлорпропионовой кислоты в ДМФА (4 мл). После перемешивания в течение 4 ч реакционную смесь распределяют между этилацетатом и водой. Фазы разделяют и водную фазу экстрагируют этилацетатом.
Объединенные органические фазы сушат над Мд8О4 и концентрируют с помощью роторного испарителя. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя градиентное элюирование этилацетатом и гексаном, с получением метилового эфира 2-(4-бромпиразол-1-ил)пропионовой кислоты (733 мг, 77%). Общая методика 70.
Ν—N он
Раствор ЫОН (34 мг, 1,4 ммоль) в воде (0,4 мл) добавляют к раствору метилового эфира 2-(4-{6амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}пиразол-1-ил)пропионовой кислоты (70 мг, 0,15 ммоль) в смеси ТГФ (1,5 мл) и МеОН (0,4 мл). После перемешивания в течение ночи реакционную смесь распределяют между дихлорметаном и полунасыщенным раствором соли. Добавляют небольшое количество этанола и доводят рН до 7 с помощью 1М НС1. Фазы разделяют и водную фазу экстрагируют дихлорметаном. Объединенные органические фазы сушат над №28О4, фильтруют и концентрируют с помощью роторного испарителя, получая 2-(4-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин3-ил}пиразол-1-ил)пропионовой кислоты (69 мг, 100%).
- 62 013678
Общая методика 71.
К перемешиваемому раствору метилового эфира 4-(3-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил) этокси]пиридин-3-ил}пиразол-1-ил)пирролиндин-2-карбоновой кислоты (105 мг, 0,21 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляют 2М СН3ХН2 в ТГФ (1,06 мл, 2,12 ммоль), смесь перемешивают и нагревают при 55°С в течение 18 ч, пока ЖХ/МС не покажет, что реакция завершилась. ТГФ удаляют, остаток очищают препаративной ВЭЖХ, оставляя метиламид 4-(4-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3ил}пиразол-1-ил)пирролиндин-2-карбоновой кислоты (30 мг), выход 28,6%.
трет-Бутил 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразол-1-карбоксилат (21-1). ди-трет-Бутилдикарбонат (7,2 мол. экв.), 4-(диметиламино)пиридин (0,84 мол. экв.) добавляют к раствору 4,4,5,5-тетраметил-2-(1Н-пиразол-4-ил)-1,3,2-диоксаборолана (6 ммоль) в 40 мл ДМФА. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 12 ч. Добавляют к реакционной смеси воду для гашения реакции. Затем добавляют ЕЮАс для экстрагирования водного раствора. Слой ЕЮАс сушат над №28О4. №ь8О4 отфильтровывают и фильтрат выпаривают с получением коричневожелтого масляного остатка в виде соединения 21-1 (1,32 г; 4,56 ммоль; 16%). Остаток используют на следующей стадии реакции без дополнительной очистки.
!Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-Ό) δ м.д. 1,32 (с, 12Н), 1,63 (с, 9Н), 7,91 (с, 1Н), 8,37 (с, 1Н).
Соединение 21-3 показано конкретным примером 3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-(1Нпиразол-4-ил)пиридин-2-амина (21-3 а).
Ν-ΝΗ
Соединение 21-1 (1,0 мол. экв.) добавляют к раствору соединения 21-2а (соединение 21-2, с заместителями К, с получением 2,6-дихлор-3-фторфенила) (1,92 ммоль) в 20 мл ОМЕ. Смесь перемешивают при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 30 мин, а затем добавляют дихлорбис(трифенилфосфино)палладий(11) (0,05 мол. экв.). Карбонат натрия (3 мол. экв.) в 4 мл Н2О добавляют к реакционной смеси и полученный раствор нагревают до 85°С в течение 12 ч. Альтернативные используемые основания представляют собой СкБ и Ск2СО3 с 1 или 2 экв. сложного эфира бороновой кислоты, и при комнатной температуре (СкБ) или 80°С (все). К реакционной смеси добавляют воду для гашения реакции. Затем добавляют ЕЮАс (150 мл ж2) для экстрагирования водного раствора. Слой ЕЮАс сушат над №ь8О4. №ь8О4 отфильтровывают и фильтрат вьшаривают с получением темно-коричневого масляного остатка. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя 0^ 10% МеОН в этилацетате) с получением желаемого продукта, соединения 21-3а (2,05 г, выход 53,6%).
- 63 013678
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-Ό) δ м.д. 1,60 (с, 1Н), 1,84 (д, 1=6,57 Гц, 3Н), 5,07 (с, 2Н), 6,06 (кв, 1=6,57 Гц, 1Н), 6,89 (д, 1=1,77 Гц, 1Н), 6,96-7,06 (м, 1Н), 7,22-7,33 (м, 1Н), 7,67 (с, 2Н), 7,80 (д, 1=1,52 Гц, 1Н).
Для получения соединений формулы 21-4 может использоваться следующая примерная методика: гидрид натрия (1,2 мол. экв.) добавляют к раствору соединения 21-3 (0,87 ммоль) в 10 мл ДМФА. Смесь перемешивают при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 30 мин, а затем добавляют соединение 21-6 (1 мол. экв.). Полученный раствор нагревают до 85-90°С в течение 12 ч. К реакционной смеси добавляют воду (20 мл) для гашения реакции. Затем добавляют ЕЮАс (50 мл ж2) для экстрагирования водного раствора. Слой ЕЮАс сушат над №28О4. №ь8О4 отфильтровывают и фильтрат выпаривают. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя ЕЮАс в гексане) с получением желаемого продукта, соединения 21-4 (выход 20-50%).
Общая методика 73.
22-3
11=Вг , С1 г СООН, СОС1, №, этиленкарбонат, альдегид
Соединения формулы 22-3 могут быть получены с помощью следующей примерной методики: соединение 22-2 (1,2 мол. экв.) добавляют к раствору соединения 22-1 (0,24 ммоль) и основания (3-5 мол. экв.) и/или реагента сочетания (1 мол. экв.) в 5 мл ДМФА. Смесь перемешивают в атмосфере азота в течение 12 ч. К реакционной смеси добавляют воду (20 мл) для гашения реакции. Затем добавляют ЕЮАс (50 мл ж2) для экстрагирования водного раствора. Слой ЕЮАс сушат над №28О4. №ь8О4 отфильтровывают и фильтрат выпаривают. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя СН3ОН, СН2С12, ЕЮАс и гексаном) с получением желаемого продукта, соединения 22-3.
Общая методика 74.
Следующая методика может использоваться для получения пиперидинпиразол-2аминопиридиновых производных.
трет-Бутил 4-(4-йод-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат (23-1а).
NаΗ (1,2 экв., 0,68 ммоль) добавляют порциями к перемешиваемому раствору 4-йодпиразола (0,57 ммоль) в ДМФА (2 л) при 4°С. Полученную смесь перемешивают в течение 1 ч при 4°С, а затем добав
- 64 013678 ляют соединение 23-4 (1,1 экв., 0,63 ммоль). Полученную смесь нагревают до 100°С в течение 12 ч. Реакцию гасят Н2О и экстрагируют несколько раз ЕЮАс. Объединенные органические слои сушат, фильтруют и концентрируют с получением оранжевого масла. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя 5% ЕЮАс в пентане) с получением соединения 23-1а в виде белого твердого продукта (140 г, 66%).
трет-Бутил-4-[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразол-1-ил]пиперидин-1карбоксилат (23-1Ь).
Бис(пинаколято)дибор (1,4 экв., 134 г, 0,52 моль) и ацетат калия (4 экв., 145 г, 1,48 моль) добавляют последовательно к раствору соединения 23-1а (140 г, 0,37 моль) в 1,5 л ДМСО. Смесь несколько раз продувают азотом, а затем добавляют дихлорбис(трифенилфосфино)палладий(11) (0,05 экв., 12,9 г, 0,018 моль). Полученную смесь нагревают при 80°С в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через слой целита и промывают ЕЮАс. Фильтрат промывают насыщенным Ναί'Ί (500 мл х2), сушат над Ыа2БО4, фильтруют и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя 5% ЕЮАс в гексане) с получением соединения 23-1Ь в виде белого твердого продукта (55 г, 40%).
Соединение 23-2 (1,0 мол. экв.) добавляют к раствору соединения 23-1Ь (1,3 мол. экв.) в 15 мл ОМЕ. Смесь несколько раз продувают азотом, а затем добавляют дихлорбис(трифенилфосфино)палладий(11) (0,05 мол. экв.). Карбонат цезия (3 мол. экв.) в 4 мл Н2О добавляют к реакционной смеси и полученный раствор нагревают до 85°С в течение 12 ч. К реакционной смеси добавляют воду (10 мл) для гашения реакции. Затем добавляют ЕЮАс (150 мл х2) для экстрагирования водного раствора. Слой ЕЮАс сушат над Ыа2БО4. Ыа2БО4 отфильтровывают и фильтрат выпаривают с получением темно-коричневого масляного остатка.
Остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя 75^ 100% ЕЮАс в гексане) с получением соединения 23-3а (выход 61%).
Гидрохлорид (19 экв., 12 ммоль) добавляют к раствору соединения 23-3а (0,63 ммоль) в МеОН (4 мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 12 ч. Растворитель выпаривают и добавляют Н2О (10 мл). Насыщенный ЫаНСО3 (водный раствор) добавляют для нейтрализации раствора до рН 7. Добавляют этилацетат (100 мл х 2) для экстрагирования водного раствора. Объединенный органический слой сушат над Ыа2БО4, фильтруют и выпаривают с получением соединения 23-5а в виде твердого остатка (0,6 ммоль, выход 95%).
Соединения формулы 23-7 могут быть получены в соответствии со следующей общей методикой: соединение 23-8 (1,2 мол. экв.) добавляют к раствору соединения 23-5а (0,24 ммоль) и основания (3-5 мол. экв.) и/или реагента сочетания (1 мол. экв.) в 5 мл ДМФА. Смесь перемешивают в атмосфере азота в течение 12 ч. К реакционной смеси добавляют воду (20 мл) для гашения реакции. Затем добавляют ЕЮАс (50 мл х2) для экстрагирования водного раствора. Слой ЕЮАс сушат над Ыа2БО4. Ыа2БО4 отфильтровывают и фильтрат выпаривают с получением масляного остатка. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя СН3ОН, СН2С12, ЕЮАс и гексаном) с получением желаемого продукта, соединения 23-7а.
Общая методика 75.
3-Метоксисоединения могут быть получены из соответствующих 3-фторсоединений посредством следующей общей методики: к 4 мл ДМСО добавляют 0,124 мл этанола, а затем 32 мг ЫаН. После перемешивания в течение 30 мин добавляют 250 мг соединения 24-1 и реакционную смесь нагревают до 40°С. Через 3 ч реакционную смесь охлаждают и выливают в воду для осаждения. После нейтрализации до рН 6 выделяют продукт 24-2.
- 65 013678
Общая методика 76.
К перемешиваемому раствору 3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-[1-(2,2-диметил-[1,3]диоксолан-4-илметил)-1Н-пиразол-4-ил]пиридин-2-иламина (150 мг, 0,31 ммоль) в ТГФ (3 мл) и Н2О (2 мл) добавляют ТФУК (2 мл) при 0°С, смесь перемешивают и нагревают до комнатной температуры, затем нагревают при 50°С в течение 5 ч, пока ЖХ/МС не покажет, что реакция завершилась. ТГФ удаляют, остаток очищают препаративной ВЭЖХ, оставляя 3-(4-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}пиразол-1-ил)пропан-1,2-диол (102 мг), выход 74,2%.
Общая методика 77.
н о №Н г 'й + θ' Вг
К перемешиваемому раствору 4-бром-1Н-пиразола в ДМФА при комнатной температуре добавляют гидрид натрия. Смесь перемешивают в течение 30 мин, добавляют [1,3]диоксолан-2-он, смесь перемешивают и медленно нагревают до комнатной температуры. Реакцию отслеживают по ТСХ. После осуществления реакции добавляют ЕЮАс, промывают насыщенным НаНСО3, водой и насыщенным раствором соли, сушат с помощью На28О4, фильтруют и концентрируют. Остаток очищают силикагелем, элюенты ЕЮАс и ЭСМ 10%, с получением 0,22 г 2-(4-бромпиразол-1-ил)этанола, выход 34%.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-Ό) δ м.д. 7,49 (с, 1Н), 7,46 (с, 1Н), 4,18-4,23 (м, 2Н), 3,93-3,98 (м, 2Н), 3,09 (с, 1Н).
Пример 1. 5 -Бром-3 -[(В)-1 -(2,6-дихлор-3 -фторфенил)этокси] пиразин-2-иламин.
Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой 2 из (18)-1-(2,6-дихлор-3фторфенил)этанола.
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-ае) δ 7,53 (с, 1Н), 7,48 (м, 1Н), 7,39 (т, 1Н), 6,48 (с, 2Н), 6,41 (кв, 1Н), 1,74 (д, 3Н); ЖХ/МС: 381 [М+1]; с-Μеί К1: 0,796 мкМ.
Пример 2. 4-{5-Амино-6-[(В)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2-ил}бензойная кислота.
Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой 3.
- 66 013678
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 8,16 (с, 1Н), 7,84 (д, 2Н), 7,77 (д, 2Н), 7,53 (м, 1Н), 7,37 (т, 1Н), 6,64 (с, 2Н), 6,53 (кв, 1Н), 1,78 (д, 3Н); ЖХ/МС: 422 [М+1]; с-\1е! Κι: 0,154 мкМ.
Пример 3. (4-{5-Амино-6-[(Я)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2-ил}фенил)пиперазин1-илметанон.
Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой 4.
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 8,11 (с, 1Н), 7,73 (д, 2Н), 7,53 (м, 1Н), 7,37 (т, 1Н), 7,31 (д, 2Н), 6,55 (м, 3Н), 3,51 (уш., 2Н), 3,32 (уш., 2Н), 2,67 (уш., 4Н), 1,77 (д, 3Н); ЖХ/МС: 490 [М+1]; с-\1е! Κι: 0,027 мкМ.
Пример 4. трет-Бутиловый эфир 4-(4-{5-амино-6-[(Я)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2ил}бензоил)пиперазин-1 -карбоновой кислоты.
Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой 16, а затем 20.
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 8,12 (с, 1Н), 7,72 (д, 2Н), 7,50 (м, 1Н), 7,33 (т, 3Н), 6,55 (м, 3Н), 3,51 (уш., 2Н), 3,39 (м, 3Н), 3,32 (уш., 3Н), 1,77 (д, 3Н), 1,40 (с, 9Н); ЖХ/МС: 590 [М+1]; с-\1е! Κι: 0,335 мкМ.
Пример 5. 3-[(1Я)-1-(2,6-Дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-[4-(пиперазин-1-илкарбонил)фенил]пиридин-2-амин.
Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой 20, а затем 21, в виде рацемической смеси с соответствующим 8-энантиомером примера 119, с последующим разделением хиральной хроматографией. Указанное в заголовке соединение также получают в виде энантиомерно чистого соединения, начиная с хирального исходного соединения.
- 67 013678
1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-Б6) δ м.д. 1,83 (д, 1=6,57 Гц, 3Н), 3,35 (с, 4Н), 3,69 (с, 4Н), 6,24 (кв,
1=6,57 Гц, 1Н), 6,91-7,08 (м, 2Н), 7,10 (д, 1=1,26 Гц, 1Н), 7,46 (т, 1=8,72 Гц, 1Н), 7,50 (с, 4Н), 7,58 (дд,
1=8,97, 4,93 Гц, 1Н), 7,91 (д, 1=1,77 Гц, 1Н), 9,35 (с, 2Н); ЖХ/МС: 490 [М+1]; с-Ме! Κι: 0,01 мкМ.
Пример 6. 4-{6-Амино-5-[(1В)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}-Н-[2-(диметиламино)этил]-И-метилбензамид.
Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой 20.
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-Б6) δ м.д. 1,80 (д, 1=6,82 Гц, 3Н), 1,97 (с, 3Н), 2,19 (с, 3Н), 2,30-2,42 (м, 1=1, 77 Гц, 2Н), 2,93 (с, 3Н), 3,22-3,29 (м, 1Н), 3,44-3,61 (м, 1Н), 5,95 (с, 2Н), 6,14 (кв, 1=6,57 Гц, 1Н), 6,98 (д, 1=1,01 Гц, 1Н), 7,30-7,39 (м, 2Н), 7,40-7,47 (м, 3Н), 7,51-7,62 (м, 1Н), 7,87 (д, 1=1, 77 Гц, 1Н); ЖХ/МС: 506 [М+1]; с-Ме! Κι: 0,01 мкМ.
Пример 7. (4-{6-Амино-5-[(1В)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}фенил)метанол.
Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой 27.
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-Б6) δ м.д. 1,84 (д, 1=6,57 Гц, 3Н), 4,49 (д, 1=5,81 Гц, 2Н), 5,20 (т, 1=5,81 Гц, 1Н), 6,25 (кв, 1=6,57 Гц, 1Н), 6,46-6,88 (м, 2Н), 7,04 (д, 1=1,52 Гц, 1Н), 7,34 (с, 4Н), 7,46 (т, 1=8,72 Гц, 1Н), 7,59 (дд, 1=8,97, 4,93 Гц, 1Н), 7,76 (д, 1=1,52 Гц, 1Н); ЖХ/МС: 408 [М+1]; с-Ме! Κι: 0,051 мкМ.
Пример 8. 4-{6-Амино-5-[(1В)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}-Н-[3-(диметил-
Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой 27.
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-Б6) δ м.д. 1,60-1,73 (м, 2Н), 1,80 (д, 1=6,57 Гц, 3Н), 1,94 (с, 3Н), 2,13 (с, 3Н), 2,20-2,29 (м, 2Н), 2,92 (с, 3Н), 3,36-3,50 (м, 2Н), 5,96 (с, 2Н), 6,14 (кв, 1=6,57 Гц, 1Н), 6,98 (с, 1Н), 7,37 (с, 2Н), 7,40-7,51 (м, 3Н), 7,55 (дд, 1=8,84, 4,80 Гц, 1Н), 7,86 (д, 1=1,77 Гц, 1Н); ЖХ/МС: 520 [М+1]; сМе! Κι: 0,01 мкМ.
Пример 9. трет-Бутил 4-(4-{6-амино-5-[(1В)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3ил}бензоил)пиперазин-1-карбоксилат.
- 68 013678
Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой 20.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-Ό) δ м.д. 1,4 6 (с, 9Н), 1,86 (д, 1=6,82 Гц, 3Н), 3,30-3,89 (м, 8Н), 4,90 (с, 2Н), 6,11 (кв, 1=6,57 Гц, 1Н), 6,98 {д, 1=1,52 Гц, 1Н), 7,01-7,10 (м, 1Н), 7,30 (дд, 1=8,97, 4,93 Гц, 1Н), 7,35-7,43 (м, 4Н), 7,88 (д, 1=1,77 Гц, 1Н); ЖХ/МС: 590 [М+1]; с-Ме! Κι: 0,03 мкМ.
Пример 10. 3-[(Я)-1-(2,6-Дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-[1-(1-метилпиперидин-4-ил)-1Н-пиразол-4ил]пиридин-2-иламин.
Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой 62, используя 3-[(Я)-1(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-мл)пиридин-2-иламин и 4-(4-бромпиразол-1-ил)-1-метилпиперидин (полученный в соответствии с общей методикой 11).
Ή-ЯМР (400МШ, СОС13) δ 7,65 (с, 1Н), 7,55 (с, 1Н), 7,50 (с, 1Н), 7,31 (м,1Н), 7,06 (м, 1Н), 6,87 (с,
1Н), 6,08 (м, 1Н), 5,50 (уш.с, 2Н), 4,18 (м, 1Н), 3,11 (м, 2Н), 2,40 (с, 3Н), 2,30 (м, 2Н), 2,20 (м, 4Н), 2,07 (с,
3Н), 1,86 (д, 1 8 Гц, 3Н); ЖХ/МС: 464 [М+1]; с-Ме! Κι: 0,01 мкМ.
Пример 11. 1-[4-(4-{6-Амино-5-[(Я)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}пиразол-1ил)пиперидин-1 -ил]-2-гидроксиэтанон.
Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой 63.
Ή-ЯМР (400МШ, СОС13) δ 7,72 (с, 1Н), 7,57 (с, 1Н), 7,47 (с, 1Н), 7,31 (м, 1Н), 7,06 (м, 1Н), 6,86 (с,
1Н), 6,08 (м, 1Н), 5,00 (уш.с, 2Н), 4,70 (м, 1Н), 4,36 (м, 1Н), 4,21 (с, 1Н), 3,70 (м, 1Н), 3,18 (м, 1Н), 3,00 (м,
1Н), 2,223 (м, 2Н), 2,01 (м, 2Н), 1,86 (д, 1 8 Гц, 3Н); ЖХ/МС: 508 [М+1]; с-Ме! Κι: 0,004 мкМ.
Пример 12. 3 -[(Я)-1 -(2,6-Дихлор-3 -фторфенил)этокси]-5-(1-пиперидин-4-ил-1Н-пиразол-4ил)пиридин-2-иламин.
- 69 013678
Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой 62, используя 3-[(В)-1(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-иламин и 4-(4-бромпиразол-1-ил)-1-циклолентилпиперидин (полученный в соответствии с общей методикой 11 с использованием бромциклопентана в качестве алкилирующего реагента).
Ή-ЯМР (4004111/, С1)С1О δ 7,73 (с, 1Н), 7,55 (с, 1Н), 7,48 (с, 1Н), 7,31 (м, 1Н), 7,07 (м, 1Н), 6,88 (с, 1Н), 6,08 (м, 1Н), 4,64 (м, 1Н), 2,04 (м, 2Н), 1,98 (м, 2Н), 1,86 (д, I 8 Гц, 3Н), 1,73 (м, 2Н); ЖХ/МС: 435 [М+1]; с-Ме! Κι: 0,02 мкМ.
Пример 13. 3 -[(В)-1 -(2,6-Дихлор-3 -фторфенил)этокси]-5-(1-пиперидин-4-ил-1Н-пиразол-4ил)пиридин-2-иламин.
Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой 62.
Ή-ЯМР (400МН/, С1)С1О δ 7,69 (с, 1Н), 7,56 (с, 1Н), 7,50 (с, 1Н), 7,32 (м, 1Н), 7,07 (м, 1Н), 6,87 (м, 1Н), 6,07 (м, 1Н), 5,25 (уш.с, 2Н), 4,30 (м, 1Н), 3,41 (м, 2Н), 2,96 (м, 2Н), 2,26 (м, 2Н), 2,12 (м, 2Н), 1,86 (д, I 8 Гц, 3Н); ЖХ/МС: 450 [М+1]; с-Ме! Κι: 0,003 мкМ.
Пример 14. 3-[(В)-1-(2,6-Дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-(1-пиперидин-4-ил-1Н-пиразол-4ил)пиразин-2-иламин.
Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой 66.
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 7,86 (с, 1Н), 7,76 (с, 1Н), 7,63 (м, 2Н), 7,54 (м, 1Н), 7,37 (т, 1Н), 6,46 (кв, 1Н), 6,15 (с, 1Н), 4,10 (м, 1Н), 3,01 (м, 2Н), 1,95 (м, 2Н), 1,85 (с, 2Н), 1,75 (д, 3Н), 1,67 (дд, 1Н); ЖХ/МС: 451 [М+1]; с-Ме! Κι: 0,010 мкМ.
- 70 013678
Пример 15. 3-[(К)-1 -(2,6-Дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-(1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-иламин.
Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой 3, используя 5-бром-3[(Я)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2-иламин и трет-бутиловый эфир 4-(4,4,5,5-тетраметил[1,3,2] диоксаборолан-2-ил)пиразол-1 -карбоновой кислоты.
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-66) δ 12,81 (с, 1Н), 7,79 (с, 1Н), 7,48 (м, 1Н), 7,36 (т, 1Н), 6,48 (кв, 1Н), 6,12 (с, 2Н), 1,75 (д, 3Н); ЖХ/МС: 368 [М+1]; с-МеГ Κι: 0,065 мкМ.
Пример 16. 1-[4-(4-{5-Амино-6-[(К)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2-ил}пиразол-1ил)пиперидин-1 -ил]-2-гидроксизтанон.
Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с методиками 62 и 63, используя 5бром-3-[(К)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2-иламин в качестве исходного вещества.
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-66) δ 7,91 (с, 1Н), 7,76 (с, 1Н), 7,64 (с, 1Н), 7,49 (м, 1Н), 7,36 (т, 1Н), 6,46 (кв, 1Н), 6,15 (с, 2Н), 4,57 (уш., 1Н), 4,40 (м, 2Н), 4,12 (уш., 2Н), 3,77 (м, 1Н), 3,35 (м, 2Н), 3,43 (м, 1Н), 3,16 (м, 2Н), 1,75 (д, 3Н); ЖХ/МС: 509 [М+1]; с-МеГ Κι: 0,015 мкМ.
Пример 17. 3-[(К)-1-(2,6-Дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-[1-(1-метилпиперидин-4-ил)-1Н-пиразол-4ил] пиразин-2-иламин.
Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой 62, используя 5-бром-3[(К)-1 -(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2-иламин и 4-(4-бромпиразол-1-ил)-1-метилпиперидин (полученный в соответствии с общей методикой 11).
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-66) δ 7,88 (с, 1Н), 7,7 6 (с, 1Н), 7,64 (с, 1Н), 7,49 (м, 1Н), 7,36 (т, 1Н), 6,46 (кв, 1Н), 6,15 (с, 2Н), 4,02 (м, 1Н), 2,84 (м, 2Н), 2,19 (с, 3Н), 2,00 (м, 4Н), 1,85 (м, 3Н), 1,75 (д, 3Н);
- 71 013678
ЖХ/МС: 465 [М+1]; с-Ме! Κι: 0,03 мкМ.
Пример 18. 1-[4-(4-{5-Амино-6-[(К)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2-ил}пиразол-1ил)пиперидин-1 -ил]-2-диметиламиноэтанон.
Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой 63, используя 3-[(К)-1(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-(1-пиперидин-4-ил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-иламин, который сочетают с диметиламиноуксусной кислотой в присутствии НОВ1/ЕОС/триэтиламина в ДМФА, как описано в методике 5, с использованием 5-бром-3-[(К)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2иламина в качестве исходного соединения.
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 7,90 (с, 1Н), 7,76 (с, 1Н), 7,65 (с, 1Н), 7,49 (м, 1Н), 7,36 (т, 1Н), 6,47 (кв, 1Н), 6,15 (с, 2Н), 4,39 (м, 1Н), 4,16 (м, 1Н), 3,16 (м, 2Н), 3,02 (м, 1Н), 2,75 (м, 1Н), 2,19 (с, 6Н), 2,01 (м, 2Н), 1,88 (с, 1Н), 1,75 (д, 3Н); ЖХ/МС: 536 [М+1]; с-Ме! Κι: 0,015 мкМ.
Пример 19. 3 -[(К)-1 -(2-Хлор-3,6-дифторфенил)этокси]-5-(1 -пиперидин-4-ил-1Н-пиразол-4ил)пиридин-2-иламин.
Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой 62, используя 5-бром-3[(К)-1-(2-хлор-3,6-лифторфенил)этокси]пиридин-2-иламин в качестве исходного вещества (в соответствии со способами синтеза 5-бром-3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-2-иламина из (8)-1-(2хлор-3,6-дифторфенил)этанола, полученного от 8упСЬет, 1пс.).
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 7,88 (с, 1Н), 7,70 (с, 1Н), 7,50 (с, 1Н), 7,38 (м, 1Н), 7,25 (м, 1Н), 6,99 (с, 1Н), 5,88 (м, 1Н), 5,48 (уш.с, 2Н), 4,08 (м, 1Н), 2,96 (м, 2Н), 2,53 (м, 1Н), 2,45 (м, 1Н), 1,89 (м, 1Н), 1,80 (м, 4Н), 1,67 (м, 4Н); ЖХ/МС: 434 [М+1]; с-Ме! Κι: 0,09 мкМ.
Биологические примеры
Будет понятно, что в любой данной серии соединений будет наблюдаться некоторый диапазон биологических активностей. В своих преимущественных в настоящее время аспектах настоящее изобретение относится к новым соединениям, способным модулировать, регулировать и/или ингибировать активность протеинкиназы. Следующие анализы могут быть использованы для выбора таких соединений, демонстрирующих оптимальный уровень желаемой активности.
Методики анализов.
Следующий анализ т νίΙΐΌ может быть использован для определения уровня активности и воздействия различных соединений по настоящему изобретению на одну или несколько из РК. Подобные анализы можно разрабатывать такими же путями для любых РК, используя методики, хорошо известные в данной области. Приводится ссылка на литературу (Тесйшкоуа-ЭоЬгоуа Ζ, 8агбапеШ АМ, Рара 8 РЕВ8
- 72 013678
Ьей. 1991 №ν 4; 292: 69-72).
Общая методика является следующей: соединения и реагенты для анализа киназы помещают в лунки для исследований. Анализ начинается добавлением фермента киназы. Ингибиторы ферментов уменьшают измеренную активность фермента.
При непрерывном спектрофотометрическом анализе связывания зависящее от времени продуцирование АИР киназой определяется анализом скорости расходования ΝΔΩΜ путем измерения уменьшения поглощения при 340 нм. По мере продукции АИР под действием РК, АИР преобразуется в АТР в реакции с фосфоенолпируватом и пируваткиназой. Пируват также продуцируется в этой реакции. Пируват впоследствии преобразуется в лактат путем взаимодействия с лактатдегидрогеназой, которая одновременно преобразует ΝΛΩΜ в ΝΛΩ. ΝΛΩΜ имеет измеримый коэффициент поглощения при 340 нм, в то время как NА^ не имеет.
Предпочтительный в настоящее время протокол для осуществления непрерывно связанных спектрофотометрических экспериментов для конкретных РК приводится ниже. Однако адаптация этого протокола для определения активности соединений против других КТК, а также СТК и 8ТК, находится в рамках знаний специалиста в данной области.
Непрерывный спектрофотометрический анализ связывания НСБК.
В этом анализе определяют активность тирозинкиназы НСБК на пептидном субстрате Ме1-2, пептиде, полученном из петли активации НСБК.
Вещества и реагенты.
1. Фермент НСБК от Ирк1а1е (Ме1, активный) Са1. # 14-526.
2. Пептид Ме1-2 (петля активации НСБК) Ас-АК^МΥ^КЕΥΥ§VНNК (ММ=1960). Растворяют в 200 мМ НЕРЕ8, рН 7,5, при исходных 10 мМ.
3. 1М РЕР (фосфоенолпируват) в 200 мМ НЕРЕ8, рН 7,5.
4. 100 мМ NА^Н (В-никотинамидадениндинуклеотид, восстановленная форма) в 200 мМ НЕРЕ8, рН 7,5.
5. 4М МдС12 (хлорид магния) в ббН2О.
6. 1М ИТТ (дитиотреитол) в 200 мМ НЕРЕ8, рН 7,5.
7. 15 Единиц/мл ИИН (лактатдегидрогеназа).
8. 15 Единиц/мл РК (пируваткиназа).
9. 5М №С1, растворенный в ббН2О.
10. Т\уееп-20 (для белка) 10% раствор.
11. 1М буфер НЕРЕ8: натриевая соль (№[2-гидроксиэтил]пиперазин-№[2-этансульфоновой кислоты]). Растворяют в ббН2О, доводят рН до 7,5, доводят объем до 1 л. Фильтр с 0,1 мкм.
12. Вода для ВЭЖХ; Вигбюк апб 1асккоп #365-4, 1x4 л (или эквивалент).
13. 100% ДМСО (8ЮМА).
14. Сок1аг # 3880 - черные прозрачные полупланшеты с плоским дном для определения К1 и % ингибирования.
15. Сок!аг # 3359 - 96-луночные полипропиленовые круглодонные планшеты для серийных разведений.
16. Сок1аг # 3635 - УФ-планшеты прозрачные с плоским дном для % ингибирования.
17. Штатив для клеток Весктап ИИ-650 \\7т1сго.
18. 4-Позиционная кювета для клеток Весктап.
Методика.
Получение буфера для разведения (ИВ) для фермента (для получения 30 мл).
1. Конечная концентрация ИВ составляет 2 мМ ИТТ, 25 мМ №1Ск 5 мМ МдС12, 0,01% Т\уееп-20 и 50 мМ буфера НЕРЕ8, рН 7,5.
2. Дополнение до 50 мМ НЕРЕ8 добавлением 1,5 мл 1М НЕРЕ8 в 28,1 мл ббН2О. Добавляют оставшуюся часть реагентов. В 50 мл конический флакон добавляют 60 мкл 1М ИТТ, 150 мкл 5М №1Ск 150 мкл 1М МдС12 и 30 мкл 10% Т\уееп-20 с получением общего объема 30 мл.
3. Встряхивают на Уойех в течение 5-10 с.
4. Отбирают аликвоту ИВ, 1 мл/пробирку, и помечают пробирки как ИВ НСБК.
5. Примечание: буфер для разведения может быть получен заранее и храниться.
6. Замораживают неиспользуемые аликвоты в микропробирках для центрифугирования в морозилке при -20°С.
Приготовление соединений.
1. В планшет для разведения соединения добавляют по 4 мкл 10 мМ исходного раствора в 1 колонку планшета и доводят объем до 100 мкл с помощью 100% ДМСО.
2. Устанавливают способ разведения Ргескюп 2000. Конечная концентрация из 200 мкМ соединения в 50% ДМСО, 100 мМ НЕРЕ8 (серийное разведение 1:2).
Приготовление связанного ферментативного буфера.
1. Конечная концентрация при анализе:
- 73 013678
Реагент (исходная концентрация) Конечная концентрация при анализе
а. РЕР (1Ν) 1мМ
Ь. КАЗН (ЮОмМ) 3 0 ОмкМ
с. МдС1г (4М) 20мМ
ά. отт (1м) 2мМ
е. АТР (500мМ) 30ОмкМ
ί. НЕРЕ5 200мМ (рН 7,5} ЮОмМ
д. Пируваткиназа (РК) 15 единиц/мл
Ь. Лактатдегидрогеназа (ЬОН) 15 единиц/мл
±. Пептид МеЕ-2 (ЮмМ) 0,500мМ
ί . НСЕК 50нМ
2. Для 10 мл реакционного буфера добавляют 10 мкл 1М РЕР, 33 мкл 100 мМ ΝΆΟΗ 50 мкл 4М МдС12, 20 мкл 1М ΌΤΤ, 6 мкл 500 мМ АТР и 500 мкл 10 мМ пептида Ме!-2 в 100 мМ буфера НЕРЕ8, рН 7,5, и встряхивают/перемешивают.
3. Добавляют ферменты связывания БОН и РК в реакционную смесь. Перемешивают, осторожно переворачивая.
Исследуемые образцы.
1. Настройки спектрофотометра:
1. длина волны поглощения (λ): 340 нм ίί. время инкубирования: 10 мин ϊϋ. время опыта: 10 мин ίν. температура: 37°С
2. Добавляют 85 мкл реакционной смеси СЕ в каждую лунку планшета для анализа.
3. Добавляют по 5 мкл разведенного соединения в лунку планшета для анализа.
4. Добавляют 5 мкл 50% ДМСО для отрицательного контроля в последнюю колонку планшета для анализа.
5. Перемешивают с помощью многоканальной пипетки или орбитального шейкера.
6. Предварительно инкубируют в течение 10 мин при 37°С.
7. Добавляют по 10 мкл 500 нМ НСЕК в каждую лунку планшета для анализа; конечная концентрация НСЕК составляет 50 нМ в общем конечном объеме 100 мкл.
8. Измеряют активность в течение 10 мин при λ=340 нм и 37°С.
Следующие анализы ίη νίίΓΟ можно использовать для определения уровня активности и воздействия различных соединений по настоящему изобретению в отношении одной или нескольких РК. Подобные анализы можно разрабатывать такими же путями для любой РК, используя методики, хорошо известные в данной области.
Несколько анализов, описанных здесь, осуществляют в формате ЕБ18А (твердофазный иммуноферментный анализ, вариант сэндвич) (Уо11ег, е! а1., 1980, Еп/уше-Бткей 1ттипокогЬей Аккау Мапиа1 оЕ СНшса1 1ттипо1оду, 2й ей., Коке апй Епейтап, Ат. 8ос. ОЕ МюгоЬю1о§у, №акЫпдЕоп, И.С., рр. 359371). Общая методика представляет собой следующее: соединение вводят в клетки, экспрессирующие исследуемую киназу, либо природным образом, либо рекомбинантно, в течение заданного периода времени, после которого, если исследуемая киназа представляет собой рецептор, добавляют лиганд, известный как активирующий рецептор. Клетки лизируют и лизат переносят в лунки планшета ЕБ18А, предварительно покрытые специфичным антителом, распознающим субстрат реакции ферментативного фосфорилирования. Не являющиеся субстратом компоненты лизата клеток отмывают и величину фосфорилирования на субстрате определяют с помощью антитела, специфично распознающего фосфотирозин, по сравнению с контрольными клетками, которые не контактируют с исследуемым соединением.
Предпочтительные в настоящее время протоколы для осуществления экспериментов ЕЫ8А для конкретных РК приводятся ниже. Однако адаптация этих протоколов для определения активности соединений по отношению к другим КТК, а также к СТК и 8ТК, находится в рамках знаний специалиста в данной области.
В других анализах, описываемых здесь, измеряют количество ДНК, производимое в ответ на активирование исследуемой киназы, которая является общей мерой пролиферативной реакции. Общая методика этого анализа представляет собой следующее: соединение вводят в клетки, экспрессирующие исследуемую киназу, либо природным образом, либо рекомбинантно, в течение заданного периода време
- 74 013678 ни, после которого, если исследуемая киназа представляет собой рецептор, добавляют лиганд, известный как активирующий рецептор. После инкубирования, по меньшей мере, в течение ночи добавляют реагент, маркирующий ДНК, такой как 5-бромдезоксиуридин (ВгбИ) или Н3-тимидин. Количество меченой ДНК определяют либо с помощью антитела анти-Вгби, либо путем измерения радиоактивности, и сравнивают с контрольными клетками, не контактирующими с исследуемым соединением.
Анализ трансфосфорилирования МЕТ.
Этот анализ используют для измерения уровней фосфотирозина на субстрате поли(глутаминовая кислота: тирозин, 4:1) как способ идентификации агонистов/антагонистов трансфосфорилирования субстрата Ме!.
Вещества и реагенты.
1. 96-Луночные планшеты ЕЫ8А Согшпд, Согшпд Са!а1од # 25805-96.
2. Поли(д1и-1уг), 4:1, 81дта, Са!. №: Р 0275.
3. РВ8, О1Ьсо Са!а1од # 450-1300ЕВ.
4. 50 мМ НЕРЕ8.
5. Блокирующий буфер: растворяют 25 г бычьего сывороточного альбумина, 81дта Са!. №. А-7888, в 500 мл РВ8, фильтруют через 4 мкм фильтр.
6. Очищенный слитый белок О8Т, содержащий домен Ме! киназы, 8иСЕН 1пс.
7. Буфер ТВ8Т.
8. 10% Водный раствор (МПНОне Н2О) ДМСО.
9. 10 мМ водный раствор (бН2О) аденозин-5'-трифосфата, 81дта Са!. № А-5394.
10. Буфер 2Х разведения киназы: на 100 мл, смешивают 10 мл 1М НЕРЕ8 при рН 7,5 с 0,4 мл 5% В8А/РВ8, 0,2 мл 0,1М ортованадата натрия и 1 мл 5М хлорида натрия в 88,4 мл бН2О.
11. 4Х Реакционная смесь АТР: на 10 мл, смешивают 0,4 мл 1М хлорида марганца и 0,02 мл 0,1М АТР в 9,56 мл бН2О.
12. Смесь 4Х для отрицательных контролей: на 10 мл, смешивают 0,4 мл 1М хлорида марганца в 9,6 мл бН2О.
13. 96-Луночные полипропиленовые планшеты с У-образным дном ΝυΝ^ АррРеб 8аепЦПс Са!а1од # 8-72092.
14. 500мМ НОТА.
15. Буфер для разведения антител: на 100 мл, смешивают 10 мл 5% В8А/РВ8, 0,5 мл 5% сухого молока Сатабоп® 1пк!ап! М11к в РВ8 и 0,1 мл 0,1М ортованадата натрия в 88,4 мл ТВ8Т.
16. Поликлональные антитела против фосфотирозина кролика, 8иСЕН 1пс.
17. Антикроличьи антитела козла, конъюгированные с пероксидазой хрена, Вюкоигсе, 1пс.
18. Раствор АВТ8: на 1 л, смешивают 19,21 г лимонной кислоты, 35,49 г №2НРО4 и 500 мг АВТ8 с достаточным для получения 1 л количеством бН2О.
19. АВТ8/Н2О2: смешивают 15 мл раствора АВ8Т с 2 мкл Н2О2 за пять минут до использования.
20. 0,2М НС1.
Методика.
1. Покрывают планшеты ЕЫ8А 2 мкг поли(О1и-Туг) в 100 мкл РВ8, выдерживают в течение ночи при 4°С.
2. Блокируют планшет с помощью 150 мкл 5% В8А/РВ8 в течение 60 мин.
3. Промывают планшет дважды РВ8, затем один раз 50 мМ буфером Нерек рН 7,4.
4. Добавляют 50 мкл разведенной киназы во все лунки. (Очищенную киназу разводят буфером для разведения киназы. Конечная концентрация должна быть равна 10 нг/лунку).
5. Добавляют 25 мкл исследуемого соединения (в 4% ДМСО) или один только ДМСО (4% в бН2О) для контролей на планшете.
6. Инкубируют смесь киназа/соединение в течение 15 мин.
7. Добавляют 25 мкл 40мМ МпС12 в лунки отрицательного контроля.
8. Добавляют 25 мкл смеси АТР/МпС12 во все остальные лунки (за исключением отрицательных контролей). Инкубируют в течение 5 мин.
9. Добавляют 25 мкл 500 мМ ЕИТА для прекращения реакции.
10. Промывают планшет 3x ТВ8Т.
11. Добавляют 100 мкл поликлональных анти-Р1уг кролика, разведенных 1:10000 в буфере для разведения антител, в каждую лунку. Инкубируют при встряхивании при комнатной температуре в течение 1 ч.
12. Промывают планшет 3x ТВ8Т.
13. Разводят конъюгированные анти-кроличьи антитела НКР Вюкоигсе 1:6000 в буфере для разведения антител. Добавляют 100 мкл на лунку и инкубируют при комнатной температуре, при встряхивании, в течение 1 ч.
14. Промывают планшет 1Х РВ8.
15. Добавляют 100 мкл раствора АВТ8/Н2О2 в каждую лунку.
- 75 013678
16. Если это необходимо, реакцию останавливают, добавляя 100 мкл 0,2М НС1 на лунку.
17. Считывают планшет на считывающем устройстве Оупа1еск МВ7000 ЕЫ8А с фильтром для исследования при 410 нМ и эталонным фильтром при 630 нМ.
Анализ встраивания ВгбИ.
В следующих далее анализах используют клетки, модифицированные с помощью генной инженерии и экспрессирующие заданный рецептор, а затем оценивают воздействие соединения, представляющего интерес, на активность индуцированного лигандом синтеза ДНК путем определения встраивания ВгбИ в ДНК.
Следующие вещества, реагенты и методики являются общими для каждого из следующих далее анализов встраивания ВгбИ. Отличия при конкретных анализах отмечаются.
Общие вещества и реагенты.
1. Соответствующий лиганд.
2. Соответствующие клетки, полученные с помощью генной инженерии.
3. Маркирующий реагент для ВгбИ: 10мМ, в РВ8, рН 7,4 (Воске Мо1еси1аг ВюскетюаН, 1п61апаро118, ΙΝ).
4. ИхЭепа!: фиксирующий раствор (Воске Мо1еси1аг ВюскеткаН, 1п61апаро118, ΙΝ).
5. Анти-Вгби-РОП: моноклональное антитело мыши, конъюгированное с пероксидазой (Скетюоп, Тетеси1а, СА).
6. Раствор субстрата ТМВ: тетраметилбензидин (ТМВ, готовый для использования, Воске Мо1еси1аг Вюскеткак, 1п61апаро1к, ΙΝ).
7. Промывочный раствор РВ8: 1Х РВ8, рН 7,4.
8. Альбумин, бычий (В8А), порошок фракции V (81дта Скетка1 Со., И8А).
Общая методика.
1. Клетки высевают в количестве 8000 клеток/лунку в 10% С8, 2мМ Οίπ в ОМЕМ, в 96-луночном планшете. Клетки инкубируют в течение ночи при 37°С в 5% СО2.
2. Через 24 ч клетки промывают РВ8, а затем отмывают от сыворотки в бессывороточной среде (0% С8 ЭМЕМ с 0,1% В8А) в течение 24 ч.
3. В день 3 соответствующий лиганд и исследуемое соединение добавляют к клеткам одновременно. В лунки с отрицательным контролем добавляют только бессывороточную ЭМЕМ с 0,1% В8А; в лунки с клетками положительного контроля добавляют лиганд, но не добавляют исследуемое соединение. Исследуемые соединения приготавливают в бессывороточной ОМЕМ с лигандом в 96-луночном планшете и осуществляют серийное разведение для 7 исследуемых концентраций.
4. Через 18 ч активации лиганда добавляют разведенный маркирующий реагент ВгбИ (1:100 в ОМЕМ, 0,1% В8А) и клетки инкубируют с ВгбИ (конечная концентрация равна 10 мкМ) в течение 1,5 ч.
5. После инкубирования с маркирующим реагентом среду удаляют декантированием и промоканием перевернутого планшета на бумажном полотенце. Добавляют раствор ИхЭепа! (50 мкл/лунку) и планшеты инкубируют при комнатной температуре в течение 45 мин на планшетном шейкере.
6. Раствор ИхЭепа! удаляют декантированием и промоканием перевернутого планшета на бумажном полотенце. Добавляют молоко (5% сухое молоко в РВ8, 200 мкл/лунку) в качестве блокирующего раствора и планшет инкубируют в течение 30 мин при комнатной температуре на планшетном шейкере.
7. Блокирующий раствор удаляют декантированием и лунки промывают один раз РВ8. Добавляют раствор анти-Вгби-РОЭ (1:200 разведение в РВ8, 1% В8А, 50 мкл/лунку) и планшет инкубируют в течение 90 мин при комнатной температуре на планшетном шейкере.
8. Конъюгат антитела удаляют декантированием и промывкой лунок 5 раз РВ8 и планшет сушат переворачиванием и промоканием на бумажном полотенце.
9. Добавляют раствор субстрата ТМВ (100 мкл/лунку) и инкубируют в течение 20 мин при комнатной температуре на планшетном шейкере до тех пор, пока проявление цвета не станет достаточным для фотометрического детектирования.
10. Коэффициент поглощения образцов измеряют при 410 нм (в двухволновом режиме, с фильтром, считывающим при 490 нм, в качестве эталонной длины волны) на устройстве для считывания планшетов Эупа1еск ЕЫ8А.
Анализ НСЕ-индуцированного встраивания ВгбИ.
Вещества и реагенты.
1. Рекомбинантный НСЕ человека (Са!. № 249-НС, Β&Ό 8у§!ет5, 1пс. И8А).
2. Клетки ВхРС-3 (АТСС СВЬ-1687).
Остальные вещества и реагенты такие, как указано выше.
Методика.
1. Клетки высевают в количестве 9000 клеток/лунку в ВРМ1 10% ЕВ8, в 96-луночном планшете. Клетки инкубируют в течение ночи при 37°С в 5% СО2.
2. Через 24 ч клетки промывают РВ8, а затем отмывают от сыворотки в 100 мкл бессывороточной среды (ВРМ1 с 0,1% В8А) в течение 24 ч.
3. В день 3 25 мкл, содержащие лиганд (приготовленный при 1 мкг/мл в ВРМ1 с 0,1% В8А; конеч- 76 013678 ная концентрация НСЕ равна 200 нг/мл), и исследуемые соединения добавляют к клеткам. В лунки отрицательных контролен добавляют 25 мкл бессывороточной КРМ1 только с 0,1% В8А; в лунки с клетками положительных контролей добавляют лиганд (НСЕ), но не добавляют исследуемое соединение. Исследуемые соединения приготавливают при 5-кратном превышении их конечной концентрации в бессывороточной КРМ1 с лигандом, в 96-луночном планшете, и осуществляют серийное разведение с получением 7 исследуемых концентраций. Как правило, самая высокая конечная концентрация исследуемого соединения равна 100 мкМ, и используют разведения 1:3 (то есть диапазон конечных концентраций исследуемого соединения составляет 0,137-100 мкМ).
4. Через 18 ч активации лиганда добавляют 12,5 мкл разведенного маркирующего реагента для ВгбИ (1:100 в КРМ1, 0,1 % В8А) в каждую лунку и клетки инкубируют с Вгби (конечная концентрация равна 10 мкМ) в течение 1 ч.
5. Аналогично общей методике.
6. Аналогично общей методике.
7. Блокирующий раствор удаляют декантированием и лунки промывают один раз РВ8. Добавляют раствор анти-Вгби-РОЭ (разведение 1:100 в РВ8, 1% В8А) (100 мкл/лунку) и планшет инкубируют в течение 90 мин при комнатной температуре на планшетном шейкере.
8. Аналогично общей методике.
9. Аналогично общей методике.
10. Аналогично общей методике.
Анализ клеточного аутофосфорилирования НСЕК.
В этом анализе используют клетки А549 (АТСС). Клетки высевают в ростовую среду (КРМ1+10% ЕВ8) в 96-луночные планшеты и культивируют в течение ночи при 37°С для прикрепления. Клетки подвергают воздействию истощенной среды (КРМ1+0,05% В8А). В планшеты добавляют разведенные ингибиторы и инкубируют при 37°С в течение 1 ч. Затем клетки стимулируют добавлением 40 нг/мл НСЕ в течение 15 мин. Клетки промывают один раз 1 мМ Ыа3УО4 в НВ88, а затем лизируют. Лизаты разбавляют 1 мМ Ыа3УО4 в НВ88 и переносят в 96-луночный планшет, покрытый антикроличьим антителом козла (Р1егсе), который предварительно покрывают антителом анти-НСЕК (2утеб ЬаЬога1опе5). Планшеты инкубируют в течение ночи при 4°С и промывают 1% Т\уееп 20 в РВ8 семь раз. НКР-РУ20 (8аШа Сгих) разводят и добавляют к планшетам в течение 30 мин инкубирования. Затем планшеты опять промывают и добавляют субстрат ТМВ пероксидазы (Кагкедаагб & Репу) и инкубируют в течение 10 мин. Затем реакцию прекращают добавлением 0,09Ν Н28О4. Планшеты измеряют при ОЭ-450 нм, используя спектрофотометр. Значения 1С50 вычисляют по полученной кривой с использованием четырехпараметрического анализа.
Соединения по настоящему изобретению измеряют на активность ингибирования НСЕК; данные показаны в каждом примере. Данные по Κι получают с использованием непрерывного спектрофотометрического анализа связывания НСЕК, и данные по 1С50 получают с использованием анализа клеточного аутофосфорилирования НСЕК, которые оба описаны выше.
Хотя настоящее изобретение иллюстрируется со ссылками на конкретные и предпочтительные варианты осуществления, специалисты в данной области заметят, что изменения и модификации могут быть проделаны посредством рутинных экспериментов и осуществления изобретения. Таким образом, настоящее изобретение, как предполагается, не ограничивается предыдущим описанием, но должно определяться прилагаемой формулой изобретения и ее эквивалентами.
Все ссылки, цитируемые здесь, включая любые приоритетные документы, тем самым включаются в качестве ссылок во всей их полноте.

Claims (10)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Энантиомерно чистое соединение формулы 1 где Υ представляет собой Ν или СК12;
    К1 выбирают из водорода, галогена, С6-12арила, 5-12-членного гетероарила, С3-12циклоалкила, 3-12членной гетероалициклической группы, -О(Св6К7)иК4, -С(О)К4, -С(О)Ок4, -СК, -КО2, -8(О)тК4, -8О2КК4К5, -СТОЙКА. -КВ4С(О)К5, -Ο^ΝΕ^Ν^'Ή. С1-8алкила, С2-8алкенила и С2-8алкинила; и каждый из атомов водорода в К1 необязательно замещен одной или несколькими группами К3;
    - 77 013678
    Н2 представляет собой водород;
    каждый из Н3 независимо представляет собой галоген, С1-12алкил, С2-12алкенил, С2-12алкинил, С3-12 циклоалкил, С6-12арил, 3-12-членную гетероалициклическую группу, 5-12-членный гетероарил, -8(О)тН4, -8О21\1К4К5, -8(О)2ОК4, ^О2, -ΝΚ4Κ5, -(СК6К7)иОК4, -ΟΝ, -С(О)Н4, -ОС(О)Н4, -О(СК6К7)иК4, -№4С(О)Н5, -(СК6К7)иС(О)ОК4, -(СК6К7)иОК4, -(СК6К7)иС(О)МК4К5, -(СК6К7)1ЖК4К5, -С(=МК6)МК4К5,
    -ΝΚ^^ΝΚ5^3, -№,5(О)|Д; или -С(О^К4К5, каждый из атомов водорода в Н3 необязательно замещен Н8, и группы Н3 на соседних атомах могут объединяться с образованием С6-12арила, 5-12-членного гетероарила, С3-12циклоалкила или 3-12-членной гетероалициклической группы;
    каждый из Н4, Н5, Н6 и Н7 независимо представляет собой водород, галоген, С^^алкил, С2-12алкенил, С2-12алкинил, С3-12циклоалкил, С6-12арил, 3-12-членную гетероалициклическую группу, 5-12-членный гетероарил; или любые два из Н4, Н5, Н6 и Н7, связанные с одним и тем же атомом азота, могут вместе с азотом, с которым они связаны, объединяться с образованием 3-12-членной гетероалициклической или 512-членной гетероарильной группы, необязательно содержащей 1-3 дополнительных гетероатома, выбранных из Ν, О и δ; или любые два из Н4, Н5, Н6 и Н7, связанные с одним и тем же атомом углерода, могут объединяться с образованием С3-12циклоалкила, С6-12арила, 3-12-членной гетероалициклической группы или 5-12-членной гетероарильной группы; и каждый из атомов водорода в Н4, Н5, Н6 и Н7 необязательно замещен Н8;
    каждый из Н8 независимо представляет собой галоген, С1-12алкил, С2-12алкенил, С2-12алкинил, С3.12 циклоалкил, С6-12арил, 3-12-членную гетероалициклическую группу, 5-12-членный гетероарил, -ΝΉ2, -ϋΝ, -ОН, -О-С1-12алкил, -О-(СН2)иС3-12циклоалкил, -О-(СН2)иС6-12арил, -О-(СН2)и(3-12-членную гетероалициклическую группу) или -О-(СН2)и(5-12-членный гетероарил); и каждый из атомов водорода в Н8 необязательно замещен Н11;
    каждый из Н11 независимо представляет собой галоген, С^^алкил, С142алкокси, С3-12циклоалкил, С6-12арил, 3-12-членную гетероалициклическую группу, 5-12-членный гетероарил, -О-С1-12алкил, -О(СН2)иС3-12циклоалкил, -О-(СН2)иС6-12арил, -О-(СН2)и(3-12-членную гетероалициклическую группу), -О(СН2)и(5-12-членный гетероарил) или ΌΝ, и каждый из атомов водорода в Н11 необязательно замещен галогеном, -ОН, ΌΝ, -См^лкилом, который может быть частично или полностью галогенированным, -О-С1-12алкилом, который может быть частично или полностью галогенированным, -СО, -8О или -8О2;
    Н12 представляет собой водород;
    каждый из т независимо представляет собой 0, 1 или 2;
    каждый из и независимо представляет собой 0, 1, 2, 3 или 4;
    каждый из р независимо представляет собой 1 или 2;
    где указанный 5-12-членный гетероарил выбран из фурановой, тиофеновой, пиррольной, пирролиновой, пирролидиновой, диоксолановой, оксазольной, тиазольной, имидазольной, имидазолиновой, имидазолидиновой, пиразольной, пиразолиновой, пиразолидиновой, изоксазольной, изотиазольной, оксадиазольной, триазольной, тиадиазольной, пирановой, пиридиновой, пиперидиновой, диоксановой, морфолиновой, дитиановой, тиоморфолиновой, пиридазиновой, пиримидиновой, пиразиновой, пиперазиновой, триазиновой, тритиановой, азитидиновой или фенильной группы;
    или его фармацевтически приемлемая соль, гидрат или сольват.
  2. 2. Соединение по п.1, в котором Υ представляет собой Ν.
  3. 3. Соединение по п.1, в котором Υ представляет собой СН12.
  4. 4. Энантиомерно чистое соединение формулы 1а где Υ представляет собой Ν или СН;
    Н1 представляет собой 5-12-членный гетероарил, необязательно замещенный Н3;
    каждый из Н3 независимо представляет собой галоген, См2алкил, С2-!2алкенил, С2-!2алкинил, С3-!2 циклоалкил, С6-12арил, 3-12-членную гетероалициклическую группу, 5-12-членный гетероарил, -8(О)тН4, -8О2№4Н5, -8(О)2ОН4, ^О2, -Ν^Π5, -(СНН^ОН4, -СИ -С(О)Н4, -ОС(О)Н4, -ОССНН7)^4, -№й.4С(О)Н.5, -(СНН^ОДОН4, -(СНН^ОН4, -(СΚ6Κ7)ηС(О)NН4Κ5, -(СΚ6Κ7)ηNСΚ4Κ5, -С(=NН6)NН4Н5,
    -NН4С(О)NН5Κ6, -ΝΕ^Ό),,/ или -С^^^Н5, каждый из атомов водорода в Н3 необязательно замещен Н8, и группы Н3 на соседних атомах могут объединяться с образованием С6-12арила, 5-12-членного гетероарила, С3-12циклоалкила или 3-12-членной гетероалициклической группы;
    каждый из Н4, Н5, Н6 и Н7 независимо представляет собой водород, галоген, С^^алкил, С2-12алкенил, С2-12алкинил, С3-12циклоалкил, С6-12арил, 3-12-членную гетероалициклическую группу, 5-12-членный
    - 78 013678 гетероарил; или любые два из Я4, Я5, Я6 и Я7, связанные с одним и тем же атомом азота, могут вместе с азотом, с которым они связаны, объединяться с образованием 3-12-членной гетероалициклической группы или 5-12-членной гетероарильной группы, необязательно содержащей 1-3 дополнительных гетероатома, выбранных из Ν, О и Б; или любые два из Я4, Я5, Я6 и Я7, связанные с одним и тем же атомом углерода, могут объединяться с образованием С3-12циклоалкильной, С6-£2арильной, 3-12-членной гетероалициклической группы или 5-12-членной гетероарильной группы; и каждый из атомов водорода в Я4, Я5, Я6 и Я7 необязательно замещен Я8;
    каждый из Я независимо представляет собой галоген, Сы2алкил, С2-12алкенил, С2-12алкинил, С3.12 циклоалкил, С6-£2арил, 3-12-членную гетероалициклическую группу, 5-12-членный гетероарил, -ΝΉ2, -ΟΝ, -ОН, -О-С1-12алкил, -О-(СН2)пС3-12циклоалкил, -О-(СН2)пС6-£2арил, -О-(СН2)п(3-12-членную гетероалициклическую группу) или -О-(СН2)п(5-12-членный гетероарил); и каждый из атомов водорода в Я8 необязательно замещен Я11;
    каждый из Я11 независимо представляет собой галоген, С^^алкил, С1-!2алкокси, С3-12циклоалкил, С6-12арил, 3-12-членную гетероалициклическую группу, 5-12-членный гетероарил, -О-См2алкил, -О(СН2)пС3-12циклоалкил, -О-(СН2)пС6-£2арил, -О-(СН2)п(3-12-членную гетероалициклическую группу), -О(СН2)п(5-12-членный гетероарил) или -СИ, и каждый из атомов водорода в Я11 необязательно замещен галогеном, -ОН, -СИ, -Су^алкилом, который может быть частично или полностью галогенированным, -О-С1-12алкилом, который может быть частично или полностью галогенированным, -СО, -БО или -БО2;
    каждый из т независимо представляет собой 0, 1 или 2;
    каждый из п независимо представляет собой 0, 1, 2, 3 или 4;
    каждый из р независимо представляет собой 1 или 2;
    где указанный 5-12-членный гетероарил выбран из фурановой, тиофеновой, пиррольной, пирролиновой, пирролидиновой, диоксолановой, оксазольной, тиазольной, имидазольной, имидазолиновой, имидазолидиновой, пиразольной, пиразолиновой, пиразолидиновой, изоксазольной, изотиазольной, оксадиазольной, триазольной, тиадиазольной, пирановой, пиридиновой, пиперидиновой, диоксановой, морфолиновой, дитиановой, тиоморфолиновой, пиридазиновой, пиримидиновой, пиразиновой, пиперазиновой, триазиновой, тритиановой, азитидиновой или фенильной группы;
    или его фармацевтически приемлемая соль, гидрат или сольват.
  5. 5. Энантиомерно чистое соединение, выбранное из группы, состоящей из 5-бром-3-[(Я)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2-иламина; 5-йод-3-[(Я)-1 -(2,6-дихлор-3 -фторфенил)этокси]пиридин-2-иламина; 5-бром-3-[1(Я)-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-2-иламина; 4-{5-амино-6-[(Я)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2-ил}бензойной кислоты; (4-{5-амино-6-[(Я)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2-ил}фенил)пиперазин-1илметанона;
    трет-бутилового эфира 4-(4-{5-амино-6-[(Я)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2ил}бензоил)пиперазин-1-карбоновой кислоты;
    3- [(1Я)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-[4-(пиперазин-1-илкарбонил)фенил]пиридин-2-амина;
    4- {6-амино-5-[(1Я)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}-И-[2-(диметиламино)этил]Ν-метилбензамида;
    (4-{6-амино-5-[(1Я)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}фенил)метанола; 4-{6-амино-5-[(1Я)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}-И-[3-(диметиламино)пропил |-Ν -метилбензамида;
    трет-бутил 4-(4-{6-амино-5-[(1Я)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}бензоил)пиперазин-1-карбоксилата;
    3-[(Я)-1-(2,6-дихлор-3 -фторфенил)этокси] -5-[1 -(1-метилпиперидин-4-ил)-1Н-пиразол-4-ил]пиридин-2-иламина;
    1-[4-(4-{6-амино-5-[(Я)-1 -(2,6-дихлор-3 -фторфенил)этокси]пиридин-3-ил}пиразол-1 -ил)пиперидин1-ил]-2-гидроксиэтанона;
    3-[(Я)-1-(2,6-дихлор-3 -фторфенил)этокси]-5-( 1 -пиперидин-4-ил-1Н-пиразол-4-ил)пиридин-2иламина;
    3-[(Я)-1-(2,6-дихлор-3 -фторфенил)этокси]-5-( 1 -пиперидин-4-ил-1Н-пиразол-4-ил)пиридин-2иламина;
    3-[(Я)-1-(2,6-дихлор-3 -фторфенил)этокси]-5-( 1 -пиперидин-4-ил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2иламина;
    3-[(Я)-1-(2,6-дихлор-3 -фторфенил)этокси]-5-(1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-иламина;
    1-[4-(4-{5-амино-6-[(Я)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2-ил}пиразол-1-ил)пиперидин-
    1- ил]-2-гидроксиэтанона;
    3-[(Я)-1-(2,6-дихлор-3 -фторфенил)этокси] -5-[1 -(1-метилпиперидин-4-ил)-1Н-пиразол-4-ил]пиразин-
    2- иламина;
    1-[4-(4-{5-амино-6-[(Я)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиразин-2-ил}пиразол-1-ил)пиперидин1-ил]-2-диметиламиноэтанона;
    - 79 013678
    3-[(В)-1-(2-хлор-3,6-дифторфенил)этокси]-5-( 1 -пиперидин-4-ил-1Н-пиразол-4-ил)пиридин-2- иламина;
    или их фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата.
  6. 6. Применение соединения, соли, гидрата или сольвата по любому из пп.1-5 для получения лекарственного средства для лечения аномального роста клеток у млекопитающего.
  7. 7. Применение по п.6, в котором аномальный рост клеток представляет собой рак.
  8. 8. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение, соль, гидрат или сольват по любому из пп.1-5 и фармацевтически приемлемый носитель.
  9. 9. Соединение по п.4, включающее 3-[(В)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-(1-пиперидин-4-ил1Н-пиразол-4-ил]пиридин-2-иламин.
  10. 10. Фармацевтическая композиция по п.8, где указанное соединение представляет собой 3-[(В)-1(2,6-дихлор-3 -фторфенил)этокси]-5-(1 -пиперидин-4-ил-1Н-пиразол-4-ил)пиридин-2-иламин.
EA200700352A 2004-08-26 2005-08-15 Энантиомерно чистые аминогетероарильные соединения в качестве ингибиторов протеинкиназы EA013678B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US60508604P 2004-08-26 2004-08-26
PCT/IB2005/002837 WO2006021884A2 (en) 2004-08-26 2005-08-15 Enantiomerically pure aminoheteroaryl compounds as protein kinase inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200700352A1 EA200700352A1 (ru) 2007-08-31
EA013678B1 true EA013678B1 (ru) 2010-06-30

Family

ID=35967909

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200700352A EA013678B1 (ru) 2004-08-26 2005-08-15 Энантиомерно чистые аминогетероарильные соединения в качестве ингибиторов протеинкиназы

Country Status (46)

Country Link
US (4) US7858643B2 (ru)
EP (1) EP1786785B9 (ru)
JP (1) JP4242911B2 (ru)
KR (1) KR100859891B1 (ru)
CN (1) CN101023064B (ru)
AP (1) AP2373A (ru)
AR (1) AR050788A1 (ru)
AT (1) ATE463486T1 (ru)
AU (1) AU2005276135B2 (ru)
BR (2) BR122020017756B1 (ru)
CA (1) CA2578066C (ru)
CR (1) CR8860A (ru)
CY (2) CY1110044T1 (ru)
DE (1) DE602005020465D1 (ru)
DK (1) DK1786785T3 (ru)
EA (1) EA013678B1 (ru)
EC (1) ECSP077276A (ru)
ES (1) ES2341351T3 (ru)
FR (1) FR13C0015I2 (ru)
GE (1) GEP20104906B (ru)
GT (1) GT200500225A (ru)
HK (1) HK1105414A1 (ru)
HN (1) HN2005000476A (ru)
HR (1) HRP20100298T1 (ru)
IL (1) IL181384A (ru)
LU (1) LU92155I2 (ru)
MA (1) MA28828B1 (ru)
ME (1) ME01788B (ru)
MX (1) MX2007002312A (ru)
MY (1) MY145177A (ru)
NI (1) NI200700057A (ru)
NL (1) NL1029799C2 (ru)
NO (2) NO333231B1 (ru)
NZ (1) NZ552866A (ru)
PA (1) PA8643301A1 (ru)
PE (1) PE20060501A1 (ru)
PL (1) PL1786785T3 (ru)
PT (1) PT1786785E (ru)
RS (1) RS51362B (ru)
SI (1) SI1786785T1 (ru)
TN (1) TNSN07070A1 (ru)
TW (1) TWI358406B (ru)
UA (1) UA87153C2 (ru)
UY (1) UY29081A1 (ru)
WO (1) WO2006021884A2 (ru)
ZA (1) ZA200700127B (ru)

Families Citing this family (168)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AP2114A (en) * 2003-02-26 2010-03-04 Sugen Inc Aminoheteroaryl compounds as protein kinase inhibitors
MY150088A (en) 2003-05-19 2013-11-29 Irm Llc Immunosuppressant compounds and compositions
EP1784396B8 (en) * 2004-08-26 2011-04-20 Pfizer Inc. Pyrazole-substituted aminoheteroaryl compounds as protein kinase inhibitors
DK1786785T3 (da) * 2004-08-26 2010-05-31 Pfizer Enantiomerisk rene aminoheteroaryl-forbindelser som proteinkinasehæmmere
KR101026676B1 (ko) * 2005-12-05 2011-04-04 화이자 프로덕츠 인코포레이티드 비정상 세포 성장의 치료 방법
AU2006323025B2 (en) * 2005-12-05 2012-07-05 Pfizer Products Inc. Polymorphs of a c-Met/HGFR inhibitor
JP2009533327A (ja) * 2006-03-22 2009-09-17 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 増殖性疾患を処置するためのｃ−ＭＥＴキナーゼ阻害剤
US8168383B2 (en) 2006-04-14 2012-05-01 Cell Signaling Technology, Inc. Gene defects and mutant ALK kinase in human solid tumors
EP2447360A1 (en) 2006-04-14 2012-05-02 Cell Signaling Technology, Inc. Gene defects and mutant ALK kinase in human solid tumors
CA2660836A1 (en) * 2006-08-07 2008-02-21 Incyte Corporation Triazolotriazines as kinase inhibitors
GB0621607D0 (en) * 2006-10-31 2006-12-06 Chroma Therapeutics Ltd Inhibitors of c-Met
MY188335A (en) 2006-11-22 2021-11-30 Incyte Holdings Corp Imidazotriazines and imidazopyrimidines as kinase inhibitors
US8455513B2 (en) 2007-01-10 2013-06-04 Aerie Pharmaceuticals, Inc. 6-aminoisoquinoline compounds
ES2531002T3 (es) * 2007-01-19 2015-03-09 Xcovery Inc Compuestos inhibidores de quinasa
WO2008127710A2 (en) * 2007-04-13 2008-10-23 Dana Farber Cancer Institute Methods for treating cancer resistant to erbb therapeutics
EP2198018B1 (en) 2007-09-13 2013-11-20 Codexis, Inc. Ketoreductase polypeptides for the reduction of acetophenones
WO2009099982A1 (en) * 2008-02-04 2009-08-13 Osi Pharmaceuticals, Inc. 2-aminopyridine kinase inhibitors
AR070317A1 (es) * 2008-02-06 2010-03-31 Osi Pharm Inc Furo (3,2-c) piridina y tieno (3,2-c) piridinas
WO2009131173A1 (ja) 2008-04-23 2009-10-29 協和発酵キリン株式会社 2-アミノキナゾリン誘導体
ES2643363T3 (es) * 2008-05-21 2017-11-22 Incyte Holdings Corporation Sales de 2-fluoro-N-metil-4-[7-(quinolin-6-il-metil)-imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-2-il]benzamida y procesos relacionados con la preparación de las mismas
EP2143441A1 (en) 2008-07-08 2010-01-13 Pierre Fabre Medicament Combination of a c-Met antagonist and an aminoheteroaryl compound for the treatment of cancer
US8450344B2 (en) 2008-07-25 2013-05-28 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Beta- and gamma-amino-isoquinoline amide compounds and substituted benzamide compounds
US8592448B2 (en) * 2008-11-20 2013-11-26 OSI Pharmaceuticals, LLC Substituted pyrrolo[2,3-b]-pyridines and -pyrazines
BRPI0922457A2 (pt) 2008-12-18 2015-12-15 Novartis Ag forma polimórfica de ácido 1-(4-{1-[(e)-4-ciclo-hexil-3-trifluormetil-benziloxi-imino]-etil)-2-etil-benzil)-azetidino-3-carboxílico"
CN102300862B (zh) 2008-12-19 2016-11-23 沃泰克斯药物股份有限公司 用作atr激酶抑制剂的化合物
EP3053913B1 (en) 2009-05-01 2018-03-07 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Dual mechanism inhibitors for the treatment of disease
PT2975024T (pt) 2009-06-10 2018-05-14 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Compostos tetracíclicos
DE102009056886A1 (de) 2009-12-03 2011-06-09 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft cMet-Inhibitoren zur Behandlung der Endometriose
JP5714030B2 (ja) 2010-02-03 2015-05-07 インサイト コーポレーションＩｎｃｙｔｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ Ｃ−Ｍｅｔ阻害剤としてのイミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン
CA2796967C (en) 2010-05-04 2015-12-01 Pfizer Inc. Heterocyclic derivatives as alk inhibitors
EP2569287B1 (en) 2010-05-12 2014-07-09 Vertex Pharmaceuticals Inc. Compounds useful as inhibitors of atr kinase
WO2011143426A1 (en) 2010-05-12 2011-11-17 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compounds useful as inhibitors of atr kinase
US9062008B2 (en) * 2010-05-12 2015-06-23 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compounds useful as inhibitors of ATR kinase
EP2569315A1 (en) 2010-05-14 2013-03-20 OSI Pharmaceuticals, LLC Fused bicyclic kinase inhibitors
AR081039A1 (es) 2010-05-14 2012-05-30 Osi Pharmaceuticals Llc Inhibidores biciclicos fusionados de quinasa
EP2571878B1 (en) 2010-05-17 2018-10-17 Incozen Therapeutics Pvt. Ltd. Novel 3,5-disubstitued-3h-imidazo[4,5-b]pyridine and 3,5- disubstitued -3h-[1,2,3]triazolo[4,5-b]pyridine compounds as modulators of protein kinases
EP2588107A1 (en) 2010-07-01 2013-05-08 Takeda Pharmaceutical Company Limited COMBINATION OF A cMET INHIBITOR AND AN ANTIBODY TO HGF AND/OR cMET
EP3698788A1 (en) 2010-08-20 2020-08-26 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Composition comprising tetracyclic compound
WO2012042421A1 (en) 2010-09-29 2012-04-05 Pfizer Inc. Method of treating abnormal cell growth
CN102464667B (zh) * 2010-11-03 2014-06-04 中国科学院上海药物研究所 一类五元杂环并嘧啶类化合物及其制备方法和用途
EP2678021A4 (en) * 2011-02-24 2015-07-01 Jiangsu Hansoh Pharmaceutical PHOSPHORUS COMPOUNDS AS A PROTEIN KINASE INHIBITOR
AU2012223281A1 (en) * 2011-03-03 2013-09-19 Concert Pharmaceuticals, Inc. Derivatives of pyrazole-substituted amino-heteroaryl compounds
US9145390B2 (en) 2011-03-03 2015-09-29 Concert Pharmaceuticals, Inc. Derivatives of pyrazole-substituted amino-heteroaryl compounds
CN102718745A (zh) * 2011-03-30 2012-10-10 中国科学院上海药物研究所 新型胺基吡啶类化合物、其制备方法、包含此类化合物的药物组合物及其用途
WO2012158658A1 (en) 2011-05-16 2012-11-22 OSI Pharmaceuticals, LLC Fused bicyclic kinase inhibitors
CN102850328B (zh) * 2011-07-01 2014-12-24 苏州东南药业股份有限公司 吡啶类化合物、其制备方法、包含该化合物的药物组合物及其用途
EP2739284A1 (en) 2011-08-02 2014-06-11 Pfizer Inc Crizotinib for use in the treatment of cancer
EP2758387A4 (en) * 2011-09-21 2015-03-11 Teligene Ltd Pyridine compounds as kinase inhibitors
CN106496173A (zh) 2011-09-30 2017-03-15 沃泰克斯药物股份有限公司 用于制备可用作atr激酶抑制剂的化合物的方法
RU2018108589A (ru) 2011-09-30 2019-02-25 Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед Лечение рака поджелудочной железы и немелкоклеточного рака легкого ингибиторами atr
CN103204844A (zh) * 2012-01-17 2013-07-17 上海艾力斯医药科技有限公司 氨基杂芳基化合物及其制备方法与应用
US9447078B2 (en) 2012-01-20 2016-09-20 Acucela Inc. Substituted heterocyclic compounds for disease treatment
EP2620140A1 (en) 2012-01-26 2013-07-31 ratiopharm GmbH Crizotinib containing compositions
EA026155B9 (ru) 2012-03-06 2017-06-30 Пфайзер Инк. Макроциклические производные для лечения пролиферативных заболеваний
AP3908A (en) 2012-03-30 2016-11-24 Rhizen Pharmaceuticals Sa Novel 3,5-disubstituted-3H-imidazo[4,5-B]pyridine and 3,5-disubstituted-3H-[1,2,3]triazolo [4,5-B] pyridine compounds as modulators of C-met protein kinases
PT2833973T (pt) 2012-04-05 2017-12-21 Vertex Pharma Compostos úteis como inibidores da cinase atr e terapias de combinação dos mesmos
CN106349222B (zh) * 2012-04-22 2019-03-05 东南大学 克里唑替尼前药及其制备方法与用途
CN103387535B (zh) * 2012-05-10 2016-06-01 广东东阳光药业有限公司 取代的炔基吡啶化合物及其使用方法和用途
CN103420987B (zh) * 2012-05-15 2015-11-25 上海医药工业研究院 吡啶衍生物及其制备方法
CN103420906B (zh) * 2012-05-21 2015-09-09 南京圣和药业股份有限公司 新型酪氨酸蛋白激酶抑制剂
WO2013181251A1 (en) 2012-05-29 2013-12-05 Ratiopharm Gmbh Crizotinib hydrochloride salt in crystalline
WO2013192512A1 (en) * 2012-06-22 2013-12-27 Concert Pharmaceuticals, Inc. Derivatives of pyrazole-substituted amino-heteroaryl compounds
CN103509008A (zh) * 2012-06-22 2014-01-15 康瑟特制药公司 吡唑取代的氨基-杂芳基化合物的衍生物
WO2014020467A2 (en) 2012-07-30 2014-02-06 Fresenius Kabi Oncology Ltd Process for the preparation of pyrazole substituted aminoheteroaryl compounds
CA2883985A1 (en) 2012-08-27 2014-03-06 Cemm-Forschungszentrum Fur Molekulare Medezin Gmbh Aminoheteroaryl compounds as mth1 inhibitors
AU2013318618B2 (en) 2012-09-24 2017-04-06 Ventana Medical Systems, Inc. Method of identifying treatment responsive non-small cell lung cancer using anaplastic lymphoma kinase (ALK) as a marker
CA3077553C (en) 2012-09-25 2022-08-02 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Ret inhibitor
DK2904406T3 (en) 2012-10-04 2018-06-18 Vertex Pharma METHOD OF DETERMINING THE ATR INHIBITION, INCREASED DNA DAMAGE
US20150299170A1 (en) * 2012-11-21 2015-10-22 Concert Pharmaceuticals, Inc. Fluoro-derivatives of pyrazole-substituted amino-heteroaryl compounds
CN104016979B (zh) * 2012-11-23 2017-05-03 广东东阳光药业有限公司 取代的环化合物及其使用方法和用途
WO2014089324A1 (en) * 2012-12-07 2014-06-12 Calitor Sciences, Llc Substituted cyclic compounds and methods of use
MX2015009270A (es) 2013-01-18 2015-10-30 Hoffmann La Roche Pirazoles sustituidos en posicion 3 y uso de los mismos como inhibidores de la cinasa cremallera de leucinas dual (dlk).
WO2014115169A2 (en) * 2013-01-24 2014-07-31 Hetero Research Foundation Crizotinib solid dispersion
PT2952510T (pt) * 2013-02-02 2019-04-16 Centaurus Biopharma Co Ltd Inibidor de proteína-cinase de 2-aminopiridina substituída
WO2014139391A1 (en) * 2013-03-11 2014-09-18 Teligene Ltd Substituted pyridine compounds as kinases inhibitors
EP2976080B1 (en) 2013-03-15 2019-12-25 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Conjugates of isoquinoline compounds and prostaglandins
WO2014203177A1 (en) * 2013-06-18 2014-12-24 Shilpa Medicare Limited Amorphous (r) -3- [1- (2, 6-dichloro-3-fluorophenyl) methoxy] -5- [1- (piperidin-4- yl) -1h-pyrazol-4-yl] pyridin-2-amine
CN104650049B (zh) * 2013-08-28 2018-06-08 广东东阳光药业有限公司 取代的吡啶化合物及其使用方法和用途
WO2015034729A1 (en) * 2013-09-05 2015-03-12 Calitor Sciences, Llc Substituted pyridine compounds and methods of use
WO2015036898A2 (en) * 2013-09-10 2015-03-19 Shilpa Medicare Limited Novel salts of crizotinib and their preparation
EP3912977A1 (en) * 2013-09-20 2021-11-24 BioMarin Pharmaceutical Inc. Glucosylceramide synthase inhibitors for the treatment of diseases
CN104513253A (zh) 2013-10-01 2015-04-15 南京波尔泰药业科技有限公司 用于治疗增殖性疾病的大环化合物
WO2015069922A2 (en) 2013-11-06 2015-05-14 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Alk antibodies, conjugates, and chimeric antigen receptors, and their use
CN103755627B (zh) * 2014-01-09 2016-02-17 定陶县友帮化工有限公司 2-氨基-3-羟基-5-氯吡啶的合成方法
UA118209C2 (uk) * 2014-01-29 2018-12-10 Неуропор Терапіс, Інк. Гетероариламіди як інгібітори агрегації білків
JP6247992B2 (ja) * 2014-04-17 2017-12-13 株式会社ダイセル ハロゲン化合物の製造方法
US9714229B2 (en) 2014-04-25 2017-07-25 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Crystal of tetracyclic compound
KR102412321B1 (ko) 2014-04-25 2022-06-22 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 4환성 화합물을 고용량 함유하는 제제
WO2016015676A1 (zh) 2014-07-31 2016-02-04 正大天晴药业集团股份有限公司 吡啶取代的2-氨基吡啶类蛋白激酶抑制剂
TWI765410B (zh) 2014-08-08 2022-05-21 日商中外製藥股份有限公司 ４環性化合物的非晶質體的用途
CN105348265A (zh) * 2014-08-19 2016-02-24 蔡苹 一种具有ALK和c-Met抑制活性的2,4-二取代杂环三氮唑类化合物的制备和应用
CA2955676A1 (en) 2014-08-25 2016-03-03 Pfizer Inc. Combination of a pd-1 antagonist and an alk inhibitor for treating cancer
CN105820113B (zh) * 2015-01-07 2018-04-20 爱技特科技（北京）有限公司 一种克唑替尼手性中间体的制备方法
EP3246047A4 (en) 2015-01-16 2018-08-22 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Combination drug
CN104693184A (zh) * 2015-03-17 2015-06-10 安润医药科技（苏州）有限公司 克唑替尼的合成方法
WO2017059357A1 (en) 2015-09-30 2017-04-06 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Method for treating cancer using a combination of dna damaging agents and atr inhibitors
CA3000386A1 (en) 2015-09-30 2017-04-06 Merck Patent Gmbh Combination of a pd-1 axis binding antagonist and an alk inhibitor for treating alk-negative cancer
KR102579582B1 (ko) * 2015-11-17 2023-09-15 에어리 파마슈티컬즈, 인코포레이티드 키나아제 억제제 및 이의 중간체의 제조 방법
US9643927B1 (en) 2015-11-17 2017-05-09 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Process for the preparation of kinase inhibitors and intermediates thereof
RS62935B1 (sr) 2016-05-20 2022-03-31 Biohaven Therapeutics Ltd Primena riluzola, prolekova riluzola ili analoga riluzola sa imunoterapijama za lečenje kancera
CN106083708A (zh) * 2016-06-30 2016-11-09 浙江大学 含2‑吡啶酮环侧链的2‑氨基吡啶衍生物及制备和应用
JP6907319B2 (ja) 2016-08-31 2021-07-21 アエリエ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 眼科用組成物
MA47107B1 (fr) 2016-12-22 2021-11-30 Amgen Inc Dérivés de benzisothiazole, isothiazolo[3,4-b]pyridine, quinazoline, phthalazine, pyrido[2,3-d]pyridazine et pyrido[2,3-d]pyrimidine en tant qu'inhibiteurs de kras g12c pour le traitement de cancer du poumon, du pancréas ou de l'intestin
CN106831720B (zh) * 2017-01-21 2019-04-16 河北科技大学 双-4-(1h-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成方法及其应用
JP2020515583A (ja) 2017-03-31 2020-05-28 アエリエ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド アリールシクロプロピル−アミノ−イソキノリニルアミド化合物
JOP20190272A1 (ar) 2017-05-22 2019-11-21 Amgen Inc مثبطات kras g12c وطرق لاستخدامها
US10180422B1 (en) 2017-08-22 2019-01-15 Scripps Health Methods of treating a neuroendocrine tumor
IL272512B (en) 2017-09-08 2022-07-01 Amgen Inc kras g12c inhibitors and methods of using them
JP6635999B2 (ja) * 2017-10-13 2020-01-29 株式会社ダイセル カリウム塩の製造方法、及びカリウム塩
CN108191833A (zh) * 2018-01-17 2018-06-22 浙江树人学院 克唑替尼衍生物及其制备方法和应用
WO2019206049A1 (en) * 2018-04-25 2019-10-31 Zhuhai Yufan Biotechnologies Co., Ltd Hpk1 inhibitors, preparation method and application thereof
CN110396087A (zh) * 2018-04-25 2019-11-01 珠海宇繁生物科技有限责任公司 Hpk1激酶抑制剂、制备方法及其应用
MX2020011582A (es) 2018-05-04 2020-11-24 Amgen Inc Inhibidores de kras g12c y metodos para su uso.
CA3098574A1 (en) 2018-05-04 2019-11-07 Amgen Inc. Kras g12c inhibitors and methods of using the same
US10988485B2 (en) 2018-05-10 2021-04-27 Amgen Inc. KRAS G12C inhibitors and methods of using the same
ES2938987T3 (es) 2018-06-01 2023-04-18 Amgen Inc Inhibidores de KRAS G12c y métodos de uso de los mismos
US20190375749A1 (en) 2018-06-11 2019-12-12 Amgen Inc. Kras g12c inhibitors and methods of using the same
US11285156B2 (en) 2018-06-12 2022-03-29 Amgen Inc. Substituted piperazines as KRAS G12C inhibitors
TWI825163B (zh) 2018-09-04 2023-12-11 日商中外製藥股份有限公司 四環性化合物的製造方法
WO2020056345A1 (en) 2018-09-14 2020-03-19 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Aryl cyclopropyl-amino-isoquinolinyl amide compounds
JP2020090482A (ja) 2018-11-16 2020-06-11 アムジエン・インコーポレーテツド Ｋｒａｓ ｇ１２ｃ阻害剤化合物の重要な中間体の改良合成法
JP7377679B2 (ja) 2018-11-19 2023-11-10 アムジエン・インコーポレーテツド がん治療のためのｋｒａｓｇ１２ｃ阻害剤及び１種以上の薬学的に活性な追加の薬剤を含む併用療法
WO2020106640A1 (en) 2018-11-19 2020-05-28 Amgen Inc. Kras g12c inhibitors and methods of using the same
WO2020132651A1 (en) 2018-12-20 2020-06-25 Amgen Inc. Kif18a inhibitors
EP3898592A1 (en) 2018-12-20 2021-10-27 Amgen Inc. Heteroaryl amides useful as kif18a inhibitors
MX2021007158A (es) 2018-12-20 2021-08-16 Amgen Inc Heteroarilamidas utiles como inhibidores de kif18a.
CA3123871A1 (en) 2018-12-20 2020-06-25 Amgen Inc. Kif18a inhibitors
TW202038957A (zh) 2018-12-21 2020-11-01 日商第一三共股份有限公司 抗體-藥物結合物與激酶抑制劑之組合
WO2020180768A1 (en) 2019-03-01 2020-09-10 Revolution Medicines, Inc. Bicyclic heteroaryl compounds and uses thereof
KR20210146288A (ko) 2019-03-01 2021-12-03 레볼루션 메디슨즈, 인크. 이환식 헤테로사이클릴 화합물 및 이의 용도
EP3738593A1 (en) 2019-05-14 2020-11-18 Amgen, Inc Dosing of kras inhibitor for treatment of cancers
BR112021023277A2 (pt) 2019-05-21 2022-01-04 Amgen Inc Formas em estado sólido
JP2022542394A (ja) 2019-08-02 2022-10-03 アムジエン・インコーポレーテツド Ｋｉｆ１８ａ阻害剤として有用なヘテロアリールアミド
AU2020325115A1 (en) 2019-08-02 2022-03-17 Amgen Inc. Pyridine derivatives as KIF18A inhibitors
CA3146693A1 (en) 2019-08-02 2021-02-11 Amgen Inc. Kif18a inhibitors
AU2020324406A1 (en) 2019-08-02 2022-03-17 Amgen Inc. KIF18A inhibitors
CN112552293A (zh) * 2019-09-25 2021-03-26 珠海宇繁生物科技有限责任公司 一种protac小分子化合物及其应用
MX2022004656A (es) 2019-10-24 2022-05-25 Amgen Inc Derivados de piridopirimidina utiles como inhibidores de kras g12c y kras g12d en el tratamiento del cancer.
WO2021086833A1 (en) 2019-10-28 2021-05-06 Merck Sharp & Dohme Corp. Small molecule inhibitors of kras g12c mutant
CN115551500A (zh) 2019-10-31 2022-12-30 大鹏药品工业株式会社 4-氨基丁-2-烯酰胺衍生物及其盐
CN114867735A (zh) 2019-11-04 2022-08-05 锐新医药公司 Ras抑制剂
TW202132315A (zh) 2019-11-04 2021-09-01 美商銳新醫藥公司 Ras 抑制劑
AU2020379734A1 (en) 2019-11-04 2022-05-05 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
CN114901662A (zh) 2019-11-08 2022-08-12 锐新医药公司 双环杂芳基化合物及其用途
AR120456A1 (es) 2019-11-14 2022-02-16 Amgen Inc Síntesis mejorada del compuesto inhibidor de g12c de kras
US20230192681A1 (en) 2019-11-14 2023-06-22 Amgen Inc. Improved synthesis of kras g12c inhibitor compound
CN114980976A (zh) 2019-11-27 2022-08-30 锐新医药公司 共价ras抑制剂及其用途
WO2021106231A1 (en) 2019-11-29 2021-06-03 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. A compound having inhibitory activity against kras g12d mutation
CA3163703A1 (en) 2020-01-07 2021-07-15 Steve Kelsey Shp2 inhibitor dosing and methods of treating cancer
WO2021196655A1 (zh) * 2020-04-03 2021-10-07 中国药科大学 含苯并咪唑结构的化合物及其制备方法与用途
WO2021215544A1 (en) 2020-04-24 2021-10-28 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. Kras g12d protein inhibitors
US20230181536A1 (en) 2020-04-24 2023-06-15 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. Anticancer combination therapy with n-(1-acryloyl-azetidin-3-yl)-2-((1h-indazol-3-yl)amino)methyl)-1h-imidazole-5-carboxamide inhibitor of kras-g12c
CN115916194A (zh) 2020-06-18 2023-04-04 锐新医药公司 用于延迟、预防和治疗针对ras抑制剂的获得性抗性的方法
JP7373664B2 (ja) 2020-07-15 2023-11-02 大鵬薬品工業株式会社 腫瘍の治療に使用されるピリミジン化合物を含む組み合わせ
CN116209438A (zh) 2020-09-03 2023-06-02 锐新医药公司 使用sos1抑制剂治疗具有shp2突变的恶性疾病
CN116457358A (zh) 2020-09-15 2023-07-18 锐新医药公司 作为ras抑制剂以治疗癌症的吲哚衍生物
CN114437058A (zh) * 2020-10-30 2022-05-06 珠海宇繁生物科技有限责任公司 氘代hpk1激酶抑制剂及其制备方法和应用
TW202241885A (zh) 2020-12-22 2022-11-01 大陸商上海齊魯銳格醫藥研發有限公司 Ｓｏｓ１抑制劑及其用途
WO2022235866A1 (en) 2021-05-05 2022-11-10 Revolution Medicines, Inc. Covalent ras inhibitors and uses thereof
IL308195A (en) 2021-05-05 2024-01-01 Revolution Medicines Inc RAS inhibitors for cancer treatment
TW202309052A (zh) 2021-05-05 2023-03-01 美商銳新醫藥公司 Ｒａｓ抑制劑
EP4347041A1 (en) 2021-05-28 2024-04-10 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. Small molecule inhibitors of kras mutated proteins
AR127308A1 (es) 2021-10-08 2024-01-10 Revolution Medicines Inc Inhibidores ras
WO2023114954A1 (en) 2021-12-17 2023-06-22 Genzyme Corporation Pyrazolopyrazine compounds as shp2 inhibitors
EP4227307A1 (en) 2022-02-11 2023-08-16 Genzyme Corporation Pyrazolopyrazine compounds as shp2 inhibitors
WO2023172940A1 (en) 2022-03-08 2023-09-14 Revolution Medicines, Inc. Methods for treating immune refractory lung cancer
TW202342022A (zh) * 2022-04-22 2023-11-01 大陸商珠海宇繁生物科技有限責任公司 Hpk1激酶抑制劑在預防和/或治療人的病原體感染中的應用
WO2023240263A1 (en) 2022-06-10 2023-12-14 Revolution Medicines, Inc. Macrocyclic ras inhibitors

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004076412A2 (en) * 2003-02-26 2004-09-10 Sugen, Inc. Aminoheteroaryl compounds as protein kinase inhibitors
WO2006021886A1 (en) * 2004-08-26 2006-03-02 Pfizer Inc. Aminoheteroaryl compounds as protein tyrosine kinase inhibitors

Family Cites Families (78)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB129611A (en) 1919-04-15 1919-07-17 John Norman Riddell Hannam Improvements in Stropping or Sharpening Devices for Safety Razor Blades.
GB8827305D0 (en) 1988-11-23 1988-12-29 British Bio Technology Compounds
US5376645A (en) 1990-01-23 1994-12-27 University Of Kansas Derivatives of cyclodextrins exhibiting enhanced aqueous solubility and the use thereof
KR0166088B1 (ko) 1990-01-23 1999-01-15 . 수용해도가 증가된 시클로덱스트린 유도체 및 이의 용도
US5587458A (en) * 1991-10-07 1996-12-24 Aronex Pharmaceuticals, Inc. Anti-erbB-2 antibodies, combinations thereof, and therapeutic and diagnostic uses thereof
EP0625200B1 (en) * 1992-02-06 2005-05-11 Chiron Corporation Biosynthetic binding protein for cancer marker
US6177401B1 (en) 1992-11-13 2001-01-23 Max-Planck-Gesellschaft Zur Forderung Der Wissenschaften Use of organic compounds for the inhibition of Flk-1 mediated vasculogenesis and angiogenesis
US5455258A (en) 1993-01-06 1995-10-03 Ciba-Geigy Corporation Arylsulfonamido-substituted hydroxamic acids
IL112248A0 (en) 1994-01-25 1995-03-30 Warner Lambert Co Tricyclic heteroaromatic compounds and pharmaceutical compositions containing them
US5863949A (en) * 1995-03-08 1999-01-26 Pfizer Inc Arylsulfonylamino hydroxamic acid derivatives
CA2218503C (en) 1995-04-20 2001-07-24 Pfizer Inc. Arylsulfonyl hydroxamic acid derivatives
US5747498A (en) * 1996-05-28 1998-05-05 Pfizer Inc. Alkynyl and azido-substituted 4-anilinoquinazolines
US5880141A (en) * 1995-06-07 1999-03-09 Sugen, Inc. Benzylidene-Z-indoline compounds for the treatment of disease
GB9518953D0 (en) 1995-09-15 1995-11-15 Pfizer Ltd Pharmaceutical formulations
GB9520822D0 (en) 1995-10-11 1995-12-13 Wellcome Found Therapeutically active compounds
GB9624482D0 (en) 1995-12-18 1997-01-15 Zeneca Phaema S A Chemical compounds
DK0780386T3 (da) 1995-12-20 2003-02-03 Hoffmann La Roche Matrixmetalloproteaseinhibitorer
PT885198E (pt) 1996-03-05 2002-06-28 Astrazeneca Ab Derivados de 4-anilinoquinazolina
US6071935A (en) 1996-06-27 2000-06-06 Pfizer Inc. Derivatives of 2-(2-oxo-ethylidene)-imidazolidin-4-one and their use as farnesyl protein transferase inhibitors
EP0818442A3 (en) 1996-07-12 1998-12-30 Pfizer Inc. Cyclic sulphone derivatives as inhibitors of metalloproteinases and of the production of tumour necrosis factor
HRP970371A2 (en) 1996-07-13 1998-08-31 Kathryn Jane Smith Heterocyclic compounds
AR007857A1 (es) 1996-07-13 1999-11-24 Glaxo Group Ltd Compuestos heterociclicos fusionados como inhibidores de proteina tirosina quinasa, sus metodos de preparacion, intermediarios uso en medicina ycomposiciones farmaceuticas que los contienen.
ID19430A (id) 1996-07-13 1998-07-09 Glaxo Group Ltd Senyawa senyawa heterosiklik
DE19628569A1 (de) 1996-07-16 1998-01-22 Bayer Ag Substituierte N-(5-Isothiazolyl)-thioamide
TR199900066T2 (xx) 1996-07-18 1999-04-21 Pfizer Inc. Matriks metalloproteazlar�n fosfinat bazl� inhibit�rleri
IL128189A0 (en) 1996-08-23 1999-11-30 Pfizer Arylsulfonylamino hydroxamic acid derivatives
ID18494A (id) 1996-10-02 1998-04-16 Novartis Ag Turunan pirazola leburan dan proses pembuatannya
WO2000035298A1 (en) 1996-11-27 2000-06-22 Wm. Wrigley Jr. Company Chewing gum containing medicament active agents
US6077864A (en) 1997-01-06 2000-06-20 Pfizer Inc. Cyclic sulfone derivatives
PL335027A1 (en) 1997-02-03 2000-03-27 Pfizer Prod Inc Derivatives of arylsulphonylamino hydroxamic acid
CA2279863A1 (en) 1997-02-07 1998-08-13 Pfizer Inc. N-hydroxy-beta-sulfonyl-propionamide derivatives and their use as inhibitors of matrix metalloproteinases
BR9807678A (pt) 1997-02-11 2000-02-15 Pfizer Derivados de ácidos arilsulfonil-hidroxâmicos
EP0984930B1 (en) 1997-05-07 2005-04-06 Sugen, Inc. 2-indolinone derivatives as modulators of protein kinase activity
WO1998054093A1 (en) 1997-05-30 1998-12-03 Merck & Co., Inc. Novel angiogenesis inhibitors
GB9711643D0 (en) 1997-06-05 1997-07-30 Janssen Pharmaceutica Nv Glass thermoplastic systems
KR100372138B1 (ko) * 1997-08-08 2003-02-14 화이자 프로덕츠 인코포레이티드 아릴옥시아릴설포닐아미노 하이드록삼산 유도체
AU8816298A (en) 1997-08-22 1999-03-16 Zeneca Limited Oxindolylquinazoline derivatives as angiogenesis inhibitors
WO1999016755A1 (en) 1997-09-26 1999-04-08 Merck & Co., Inc. Novel angiogenesis inhibitors
SK6652000A3 (en) 1997-11-11 2002-05-09 Pfizer Prod Inc Thienopyrimidine and thienopyridine derivatives useful as anticancer agents
GB9725782D0 (en) 1997-12-05 1998-02-04 Pfizer Ltd Therapeutic agents
JPH11236333A (ja) 1997-12-30 1999-08-31 Pfizer Prod Inc 抗ガン剤として有用なイミダゾリン−４−オン誘導体
GB9800575D0 (en) 1998-01-12 1998-03-11 Glaxo Group Ltd Heterocyclic compounds
GB9800569D0 (en) 1998-01-12 1998-03-11 Glaxo Group Ltd Heterocyclic compounds
GB9801690D0 (en) 1998-01-27 1998-03-25 Pfizer Ltd Therapeutic agents
ES2220004T3 (es) 1998-04-10 2004-12-01 Pfizer Products Inc. Derivados del acido ciclobutil-ariloxiarilsulfonilaminohidroxamico.
PA8469501A1 (es) 1998-04-10 2000-09-29 Pfizer Prod Inc Hidroxamidas del acido (4-arilsulfonilamino)-tetrahidropiran-4-carboxilico
PA8469401A1 (es) 1998-04-10 2000-05-24 Pfizer Prod Inc Derivados biciclicos del acido hidroxamico
IL139934A (en) 1998-05-29 2007-10-31 Sugen Inc History 2 - Indulinone converted to pyrrole and pharmaceutical preparations containing them
UA60365C2 (ru) 1998-06-04 2003-10-15 Пфайзер Продактс Інк. Производные изотиазола, способ их получения, фармацевтическая композиция и способ лечения гиперпролиферативного заболевания у млекопитающего
AP2001002079A0 (en) 1998-08-27 2001-03-31 Pfizer Prod Inc Alkynyl-substituted quinolin-2-one derivatives useful as anticancer agents.
JP3494409B2 (ja) 1998-08-27 2004-02-09 ファイザー・プロダクツ・インク 抗がん剤として有用なアルキニル置換キノリン−２−オン誘導体
PT1004578E (pt) 1998-11-05 2004-06-30 Pfizer Prod Inc Derivados hidroxamida do acido 5-oxo-pirrolidino-2-carboxilico
EP1006113A1 (en) 1998-12-02 2000-06-07 Pfizer Products Inc. Derivatives of 2-(2-oxo-ethylidene)-imidazolidin-4-one and their use to inhibit abnormal cell growth
WO2000038717A2 (en) 1998-12-23 2000-07-06 G.D. Searle & Co. Use of a matrix metalloproteinase inhibitor and radiation as a combined treatment of neoplasia
US6649645B1 (en) 1998-12-23 2003-11-18 Pharmacia Corporation Combination therapy of radiation and a COX-2 inhibitor for treatment of neoplasia
EE05627B1 (et) 1998-12-23 2013-02-15 Pfizer Inc. CTLA-4 vastased inimese monoklonaalsed antikehad
JP3270834B2 (ja) 1999-01-27 2002-04-02 ファイザー・プロダクツ・インク 抗がん剤として有用なヘテロ芳香族二環式誘導体
UA71945C2 (en) 1999-01-27 2005-01-17 Pfizer Prod Inc Substituted bicyclic derivatives being used as anticancer agents
WO2000047574A1 (en) 1999-02-11 2000-08-17 Pfizer Products Inc. Heteroaryl-substituted quinolin-2-one derivatives useful as anticancer agents
US6586447B1 (en) 1999-04-01 2003-07-01 Pfizer Inc 3,3-disubstituted-oxindole derivatives useful as anticancer agents
US6511993B1 (en) * 1999-06-03 2003-01-28 Kevin Neil Dack Metalloprotease inhibitors
EP1081137A1 (en) 1999-08-12 2001-03-07 Pfizer Products Inc. Selective inhibitors of aggrecanase in osteoarthritis treatment
UA75055C2 (ru) * 1999-11-30 2006-03-15 Пфайзер Продактс Інк. Производные бензоимидазола, которые применяются как антипролиферативное средство, фармацевтическая композиция на их основании
TR200400342T4 (tr) 1999-11-30 2004-03-22 Pfizer Products Inc. Farnezil protein transferazı önlemek için kinolin türevleri.
HN2000000266A (es) 2000-01-21 2001-05-21 Pfizer Prod Inc Compuesto anticanceroso y metodo de separacion de enantiomeros util para sintetizar dicho compuesto.
MY130363A (en) * 2000-02-15 2007-06-29 Sugen Inc "pyrrole substituted 2-indolinone protein kinase inhibitors"
US6844357B2 (en) 2000-05-01 2005-01-18 Pfizer Inc. Substituted quinolin-2-one derivatives useful as antiproliferative agents
SE0102438D0 (sv) * 2001-07-05 2001-07-05 Astrazeneca Ab New compounds
SE0102439D0 (sv) 2001-07-05 2001-07-05 Astrazeneca Ab New compounds
EP1545523A1 (en) * 2002-07-03 2005-06-29 Astex Technology Limited 3-&-grave;(HETERO) ARYLMETHOXY ! PYRIDINES AND THEIR ANALOGUES ASP38 MAP KINASE INHIBITORS
SE0203754D0 (sv) 2002-12-17 2002-12-17 Astrazeneca Ab New compounds
CN1777427A (zh) * 2003-02-26 2006-05-24 苏根公司 作为蛋白激酶抑制剂的氨基杂芳基化合物
WO2005002673A1 (en) 2003-07-03 2005-01-13 Astex Therapeutics Limited Raf kinase inhibitors
EP1784396B8 (en) * 2004-08-26 2011-04-20 Pfizer Inc. Pyrazole-substituted aminoheteroaryl compounds as protein kinase inhibitors
DK1786785T3 (da) * 2004-08-26 2010-05-31 Pfizer Enantiomerisk rene aminoheteroaryl-forbindelser som proteinkinasehæmmere
EP1791965A1 (en) * 2004-08-26 2007-06-06 Pfizer, Inc. Enantioselective biotransformation for preparation of protein tyrosine kinase inhibitor intermediates
KR101026676B1 (ko) * 2005-12-05 2011-04-04 화이자 프로덕츠 인코포레이티드 비정상 세포 성장의 치료 방법
AU2006323025B2 (en) * 2005-12-05 2012-07-05 Pfizer Products Inc. Polymorphs of a c-Met/HGFR inhibitor

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004076412A2 (en) * 2003-02-26 2004-09-10 Sugen, Inc. Aminoheteroaryl compounds as protein kinase inhibitors
WO2006021886A1 (en) * 2004-08-26 2006-03-02 Pfizer Inc. Aminoheteroaryl compounds as protein tyrosine kinase inhibitors

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
SAWYER T.K.: "Cancer metastasis therapeutic targets and drug discovery: Emerging small-molecule protein kinase inhibitors" EXPERT OPINION ON INVESTIGATIONAL DRUGS 2004 UNITED KINGDOM, vol. 13, no. 1, 2004, pages 1-19, XP009065998 ISSN: 1354-3784 *

Also Published As

Publication number Publication date
IL181384A (en) 2012-08-30
NO20071290L (no) 2007-05-29
MX2007002312A (es) 2007-04-16
ECSP077276A (es) 2007-03-29
CA2578066A1 (en) 2006-03-02
NO333231B1 (no) 2013-04-15
EA200700352A1 (ru) 2007-08-31
CY2013014I1 (el) 2015-08-05
MA28828B1 (fr) 2007-08-01
NL1029799C2 (nl) 2006-10-17
WO2006021884A3 (en) 2006-06-22
WO2006021884A2 (en) 2006-03-02
PT1786785E (pt) 2010-05-21
DK1786785T3 (da) 2010-05-31
PL1786785T3 (pl) 2010-08-31
SI1786785T1 (sl) 2010-07-30
US20100324061A1 (en) 2010-12-23
NL1029799A1 (nl) 2006-02-28
HRP20100298T1 (hr) 2010-06-30
TWI358406B (en) 2012-02-21
AP2373A (en) 2012-03-07
DE602005020465D1 (de) 2010-05-20
AU2005276135A1 (en) 2006-03-02
AU2005276135B2 (en) 2011-04-28
GT200500225A (es) 2006-03-21
PE20060501A1 (es) 2006-06-28
NO2013008I1 (no) 2013-04-29
EP1786785A2 (en) 2007-05-23
CY1110044T1 (el) 2015-01-14
TNSN07070A1 (fr) 2008-06-02
EP1786785B9 (en) 2013-05-22
CA2578066C (en) 2011-10-11
UA87153C2 (ru) 2009-06-25
PA8643301A1 (es) 2006-07-03
KR100859891B1 (ko) 2008-09-23
ATE463486T1 (de) 2010-04-15
FR13C0015I1 (ru) 2013-04-12
LU92155I9 (ru) 2019-01-04
CY2013014I2 (el) 2015-08-05
JP2008510790A (ja) 2008-04-10
CN101023064A (zh) 2007-08-22
LU92155I2 (fr) 2013-04-22
CA2578066E (en) 2006-03-02
ME01788B (me) 2011-02-28
US20120263706A1 (en) 2012-10-18
FR13C0015I2 (fr) 2013-08-16
NZ552866A (en) 2010-06-25
US20140288086A1 (en) 2014-09-25
CN101023064B (zh) 2011-02-16
US7858643B2 (en) 2010-12-28
KR20070038562A (ko) 2007-04-10
TW200621715A (en) 2006-07-01
US20060046991A1 (en) 2006-03-02
GEP20104906B (en) 2010-02-25
NO2013008I2 (no) 2013-10-21
JP4242911B2 (ja) 2009-03-25
BR122020017756B1 (pt) 2022-02-15
AP2007003888A0 (en) 2007-02-28
EP1786785B1 (en) 2010-04-07
ZA200700127B (en) 2008-08-27
MY145177A (en) 2011-12-30
BRPI0513915A (pt) 2008-05-20
US8785632B2 (en) 2014-07-22
AR050788A1 (es) 2006-11-22
HN2005000476A (es) 2009-12-07
IL181384A0 (en) 2007-07-04
CR8860A (es) 2007-07-24
NI200700057A (es) 2008-03-07
UY29081A1 (es) 2006-03-31
HK1105414A1 (en) 2008-02-15
ES2341351T3 (es) 2010-06-18
RS51362B (en) 2011-02-28
ES2341351T9 (es) 2013-07-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA013678B1 (ru) Энантиомерно чистые аминогетероарильные соединения в качестве ингибиторов протеинкиназы
JP4167295B2 (ja) プロテインキナーゼ阻害薬としてのピラゾール置換アミノへテロアリール化合物
JP2008510792A (ja) タンパク質チロシンキナーゼ阻害剤としてのアミノヘテロアリール化合物
WO2022262699A1 (zh) 取代的苯并咪唑类化合物及包含该化合物的组合物及其用途

Legal Events

Date Code Title Description
ND4A Extension of term of a eurasian patent
ND4A Extension of term of a eurasian patent
ND4A Extension of term of a eurasian patent
ND4A Extension of term of a eurasian patent