TW200902010A

TW200902010A - Anthranilamide inhibitors of aurora kinase

Info

Publication number: TW200902010A
Application number: TW097102587A
Authority: TW
Inventors: Jeffrey Michael Axten; Deborah L Bryan; David Harold Drewry; Thomas H Faitg; Timothy Francis Gallagher; Neil W Johnson; Jiri Kasparec; Jeffrey M Ralph; Domingos J Silva
Original assignee: Smithkline Beecham Corp
Priority date: 2007-01-26
Filing date: 2008-01-24
Publication date: 2009-01-16
Also published as: JP5337712B2; EP2121637A1; AU2008207809B2; PE20081636A1; CA2676257A1; JP2010516780A; AU2008207809A1; CL2008000197A1; US20100016318A1; AR065015A1; US7625903B2; US7884098B2; US20080182852A1; EP2121637A4; WO2008092049A1

Description

200902010 九、發明說明：【發明所屬之技術領域】本發明係關於鄰胺苯曱醯胺化合物、組成物及其藥 .劑，與使用其治療之方法。這些鄰胺苯曱醯胺化合物用於 5 治療關於Aurora激酶活性之疾病。【先前技術】蛋白質激酶在蛋白質中經由轉移ATP-Mg2+之γ-磷酸根催化羥基胺基酸側鏈之磷酸化作用，以形成絲胺酸、蘇胺 ίο 酸或酪胺酸之單磷酸酯。研究已顯示蛋白質激酶為許多細胞功能之關鍵調控劑，包括信號傳導、轉錄調節、細胞活 , 動性及細胞***。許多致癌基因亦已顯示編碼蛋白質激酶，令人聯想到激酶可能在腫瘤發生中扮演一定角色。根據其磷酸化之胺基酸殘基，酵素之蛋白質激酶家族 15 典型分為二類主要次家族：蛋白質酪胺酸激酶及蛋白質絲胺酸/蘇胺酸激酶。異常的蛋白質絲胺酸/蘇胺酸激酶活性已涉及或被懷疑牽連數種疾病病理，例如類風濕性關節炎、牛皮癬、敗血性休克、骨質喪失、癌症及其他增殖性疾病。酿胺酸激酶在細胞調節上扮演相同重要的角色，這些激酶 20 包括對於例如生長因子及荷爾蒙之分子的數種受體，包括表皮生長因子受體、胰島素受體及血小板生長因子受體。研究指出，許多酪胺酸激酶為跨膜蛋白質，其具有受體域位於細胞外侧而其激酶域在内側。因此，對於藥物設計而言，二種激酶次家族及其信號傳導路徑為重要的標的。 5 200902010 自從其在1997年發現以來，絲胺酸/蘇胺酸激酶之哺乳動物Aurora家族已密切地與腫瘤形成連結。三種已知的哺乳動物家族成員，Aurora-A(“2”）、Β(“Γ，)及C(“3”)為負責染 • 色體分離、有絲***紡綞體功能及細胞質***的高度同源 5 蛋白質，在細胞週期之G2及有絲***期期間具有表現及活性尖峰的Aurora ’在休眠細胞中表現很低或無法探測到。在哺乳動物細胞中’用於Aurora A及B激酶之被建議的基質包括組織蛋白H3、CENP-A、肌凝蛋白Π調控輕鏈、蛋白質磷酸酶、TPX2、INCENP、p53及存活素（survivin)，其 1〇中許多為細胞***所必須。

Aurora激酶已被發表在廣泛的人類腫瘤中過度表現， . Aurora-A的提高表現已在結腸直腸、卵巢及胰臟癌症及在、侵襲性乳管腺癌中偵測到。高程度之Aurora-A亦已被發表於腎臟、子宮頸、神經母細胞瘤、黑色素瘤、淋巴瘤、胰 15 臟及***腫瘤細胞株。Aurora-A之擴大/過度表現已在人類膀胱癌中被注意到，且Aurora-A之擴大與非整倍體 (aneuploidy)及侵略性的臨床行為有關。此外，如(基因座（locus)(20ql 3)之擴大與具有淋巴結陰性乳癌之病患預後不佳有關。此外，對偶基因變異（在胺基酸位置31之異白 2〇胺酸)被報導為一種低外顯腫瘤易感基因，且較***酸-31 變異表現出更大的轉移潛在性，並且與進展性及轉移性疾病增加風險有關。如同Aurora A，Aurora-B在多樣的人類腫瘤細胞株中亦被高度表現，包括白血病細胞。Aurora-B 之程度增加在最初的直腸結腸癌症中，作為杜克氏(Duke) 6 200902010 期之功能。Aurora-C(正常下僅於生殖細胞中發現)在最初的直腸結腸癌及在包括子宮頸腺癌及乳癌細胞之多種腫瘤細胞株中過度表現亦有高百分比。 ' 文獻中發表活體外Aumra _活性抑·將中止有絲 5 ***引起細胞循環缺陷及最後的細胞死亡的假說。因此，活體内Aurora激酶抑制劑應使腫瘤生長緩慢並誘導退化。例如，Hauf等人描述一種Aur〇ra B抑制劑黑斯巴丁 (Hesperadin)，其引起在染色體分離之缺陷並阻斷細胞質分裂，因此，導致多倍體[Hauf, S et aL JCB 161(2), 281_294 10 (2〇〇3)]。Ditchfield等人已描述Aurora A及B之相等的抑制劑(ZM447439)，其引起染色體列隊、$色體分離及細胞 • 質***之缺陷[Ditchfleld，c. et al., JCB 16 1(2), 267-280 (2003) ]。此外，該作者表示，增殖的細胞（但不是細胞週期中止之細胞）對於抑制劑敏感。在小鼠及大鼠異種移植 15 模式中有效的Aurora A及B抑制劑之效力近來被發表 [Harrington, E.A. et al., Nature Medicine 10(3), 262-267 (2004) ]。這些結果証實，Aurora激酶之抑制對於例如癌症之增殖性疾病可提供一種治療的窗口（詳見Nature，cancer Reviews, Vol. 4, p927-936, Dec. 2004, f〇r a review by N. 20 Keen and S Taylor, which outlines the therapeutic potential of

Aurora kinase inhibition for the treatment of cancer) ° 有鑒於技術領域中之教示，對於激酶活性抑制劑之發現有所需求’特別是，抑制Aurora激酶活性之化合物。 7 200902010 【發明内容】發明摘述在第一層面，本發明係關於一種下式I所示之化合物：

(I) 5 或其醫藥可接受性鹽類，其中各 Ri 各自為 H、_(CH2)nN(R5)2、_〇_(CH2)pN(R5)2、 C(0)N(R5)2、（CH2)nS02(NH)qR6、COOH、CrC6-炫基、CrC6- ’ 燒氧基、CF3、鹵素、或CN ; • 但，至少一 Ri 為-(CH2)n-N(R5)2、-0-(CH2)pN(R5)2、 i〇 C(0)N(R5)2、（CH2)nS02(NH)qR6、或 COOH ; n 為〇、卜2或3;p為2或3，q為0或l;r為卜2或 3 ; s 為 0、1 或 2 ; V； R2為Η、鹵素；CrC3-烷基、CrC3-烷氧基、CN、硝基、或 CF3 ; 15 各R3各自為Η、雜環烷基、環烷基、苯基、嗎啉基_ch2ch2- 苯基或CrC6-烷基，可選擇性經羥基、胺基、Cl_c6_ 燒》基胺基、二Ci-C6-烧基胺基、三氟曱基、四氫α夫喃基、°比啶基、或咪唑基取代；或各R3 —起與其所連接之氮形成一 5-或6-員環基，可選擇性經羥基、Ci-CV烷基、羥基-CVC3-烷基、嗎啉基、 8 20 200902010 -c(o)ch3、二-crc2-烷基胺基、或-c(o)nh2取代。 R4 為鹵素、CrC3-烷基、或CrC3-烷氧基；各R5各自為CrC6-烷基、或-C(0)CH3，或一起與其所連接 -之氮形成一 5-或6-員環基，可選擇性經羥基、CrC6-.5 烷基、羥基-crc3-烷基、嗎啉基、-c(o)ch3、二-crc2- 烷基胺基，或-c(o)nh2取代，且 R6 為 Q-CV烷基、（R7)x-苯基-(C(0))r、或(R8)z-雜芳基 -(C(0))y-，其中 X 為 0、1、2 或 3;z 為 0、1 或 2;y 為0或1 ; ίο R7 為鹵素、q-CV烷基或CrC3-烷氧基；及 R8為鹵素、CrC3-烷基或CrC3-烷氧基。 . 本發明亦關於一種組成物，其包含a)式I化合物或其醫藥可接受性鹽類，及b)至少一種醫藥可接受性賦形劑。在其他層面，本發明亦關於一種治療癌症之方法，其 15 包含投與所需病患式I化合物，或其醫藥可接受性鹽類。本發明亦關於一種治療癌症之方法，其包含投與所需病患有效量之組成物，該組成物包含a)式I化合物或其醫藥可接受性鹽類，及b)至少一種醫藥可接受性賦形劑。 20 發明之詳細說明在一層面，本發明係關於一種下式所示之化合物： 9 200902010

(I) 其中R1、R2、R3、R4、r及s如前述定義。關於本文所使用’鹵素表示氟、氣或溴。CrC6-烷基表示直鏈或分支烷基，包括曱基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基、正戊基及正己基。適當的CrC6-烷基胺基實例包括甲基胺基、乙基胺基、正丙基胺基、及異丙基胺基；類似地，CrC6-二炼基胺基之實例包括二曱基胺基、二乙基胺基、甲基乙基胺基、二-正丙基胺基、及二異丙基胺基。 10 15

關於片段-(CH2)n-N(R5)2、c(0)N(R5)2 及-0-(CH2)pN (R5)2，各R5—起與其所連接之氮形成一 5_或6_員環基，可選擇性經羥基、crC6-烷基、羥基_CrCr烷基、嗎啉基、 -C(〇)CH3、二-Crc2-烷基胺基，或_c(〇)NH2取代。含氮孓及員被基之適當實例包括，但不限於，吼咯啶基 '。比咯基、旅咬基、Μ基、酮基基、及嗎琳基。 crc3-烧氧基表示甲氧基、乙氧基、正丙氧基及正-里

關於本文所使用，雜王s b ± ^ A _ ^ 隹衣烷基表示可包含Ο、N或S榦原子或其之組合之5-及6 g '、一 "夂6_貝％基。適當之雜環烷基為1>3_ —氧戊基、四氮咬喃其句基、吡咯啶基、吡咯啶酮基、哌啶 10 20 200902010 基、哌畊基、_基哌畊基、及嗎啉基。本文所使用之環烧基表示環丙基、及嗎琳基。環己基。環丁基、環戊基或在另一層面，化合物係以下式la表示：

R4 R3 其中R為Cl、F、或CH3 ,且R4為f或Η。在另一層面，化合物係以式Ia表示，其中一 Rl為 -(CH2)n-N(R6)2，且其他、甲基或曱氧基。在另一層面，R2為CH3或F;各以各自為h、ch3、異丙基、或羥基乙基；且各R5 一起與其相連接之氮原子形成吡咯啶基、吡咯啶酮基、哌啶基、哌畊基、酮基哌畊基、甲基哌畊基、或嗎啉基環。在另一層面，η為〇 ; R2為CH3，且各R3各自為CH3 或異丙基。在另一層面，本發明為一種式Z化合物，或其醫藥可接受性鹽類，邊化合物係選自下列所組成之群組： 2-{[5-氟-2-({3-[2-(4-嗎啉基）乙基]苯基}胺基)_4_嘧啶基]胺基}-#-(2-經基乙基)苯曱酿胺； (3及)-1-({2-[(5-氟-2-{[3-(4-甲基-1-哌畊基）苯基]胺 200902010 基}_ 4 - σ定基)胺基]苯基}裁基)_ 3 - π比u各燒醇. (3外HC甲基_2_({3_[2_⑷嗎琳基）乙基]苯基基)-4-密啶基]胺基}笨基)幾基]_3_吼咯燒醇； 5 10 15 20 2-[(2-{[4-({[2-(乙基胺基）乙基]石黃酿基》甲基基}-5-氟-4-嘧啶基)胺基]-尽(1_甲基乙基）苯甲醯二；土基]-#-(1-甲基乙基）苯曱醯胺； r其Γ[(5食2_{[4_({[2_(甲基續酿基）乙基]胺基}曱基)苯基] 月女基}-4-嘧啶基)胺基曱基乙基）笨曱醯胺.及甲基乙基m(5·甲基_2他(4_甲基_2’_酮基切井基)本基]胺基}-4-嘧咬基)胺基]苯甲酿胺。 ^本文巾所❹之賴可接受性意指在有效的醫學判 =圍下，該些等量之合理的效以風險比之化合物、物質、、=物及㈣形式，適祕與人缺動物組織接觸而益過 ^性、刺激«他問題或併發症。熟悉技術者將可察知 ^1)化合物之醫藥可接受性難可被製備，這些醫藥可接又(生鹽類在化合物最終分離及純化期間可於活體外製備，或以個別以其游離酸或雜驗形式之純化化合物與個別適萏之驗或酸反應。在某些具體貫施例中，式⑴化合物可含酸性官能基，因此，經由以適當鹼處理能形成醫藥可接受性鹼加成鹽。此類鹼之實例包括a)鈉、鉀、鋰、鈣、鎂、鋁及辞之氫氧化物、碳酸鹽及重碳酸鹽；及b)一級' 二級及三級胺，包括脂族胺、芳族胺、脂族二胺、及羥基烷基胺，例如曱胺、 12 200902010 乙胺、2-羥基乙胺、二乙胺、三乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、及環己胺。在某些具體實施例中，式（I)化合物可含有鹼性官能 -基，因此，經由以適當酸處理能形成醫藥可接受性酸加成 5 鹽。適當之酸包括醫藥可接受性無機酸及有機酸。代表性之醫藥可接受性酸包括氯化氫、溴化氫、硝酸、硫酸、磺酸、磷酸、乙酸、羥基乙酸、苯基乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、馬來酸、丙烯酸、反丁烯二酸、蘋果酸、丙二酸、酒石酸、檸檬酸、水揚酸、苯曱酸、單寧酸、曱酸、硬脂酸、 10 乳酸、抗壞血酸、對曱苯石黃酸、油酸、及月桂酸。於本文中所使用之“式(I)化合物’’一詞意指一或多種式 . (I)化合物，該式（I)化合物可以固體或液體形式存在。在固體狀態下，其可以結晶或非結晶形式或其之混合物存在。熟悉技術者將可察知，醫藥可接受性溶劑化物之結晶化合 15 物，其溶劑分子在結晶時被納入晶格内。溶劑化物可包含非水性溶劑，例如，但不限於，乙醇、異丙醇、DMSO、乙酸、乙醇胺、及乙酸乙酯，或其可包含水做為納入晶格内之溶劑者。水做為納入晶格内之溶劑的溶劑化物一般稱為 “水合物”，水合物包括化學當量水合物及含可變量之水的組 20 成物，本發明包括所有此類溶劑化物。流程式（I)化合物可經由以下流程1略述之方法便利地製備。式(II)及式(III)化合物為商業上可獲得，或可使用技術 13 200902010 上習知技術合成。式(Η)及式(ΠΙ)化合物可在回流下或微波爐條件下反應，獲得中間產物(IV)。加成反應一般使用例如正丁醇或異丙醇之極性、質子溶劑進行’當化合物(π)包括需保護之官能基（例如羥基或胺基）時’有利地使用適當之保護基。然後式(IV)化合物可與為商業上可獲得或可使用技術上習知技術合成之苯胺(V)反應’獲得化合物式(VI)° —般於例如（但不限於）氫氯酸或三氟乙酸之酸存在下’ 在例如（但不限於）異丙醇、正丁醇、1，4_二畤烧、乙醇或 Ν,Ν-二曱基曱醯胺之適當溶劑中，於回流溫度或微波爐設備中於高溫（約1〇0至約180°c)進行反應。流程1

化合物(Π)可含額外之取代基’例如’如流程2所示，商業上可獲得或可使用技術上習知技術合成之苯并噚u井 (VII)可經由胺開環而形成苯甲醯胺(VIII) ’然後此苯甲醯胺可經由化合物(III)加成，產生式(IX)化合物。流程2 14 200902010

另一用於改質醯胺之方法顯示於流程3。胺基苯甲酸酯 (X)與嘧啶(III)反應而提供中間產物(XI)。然後可添加苯胺⑺ 以提供中間產物（XII)，此路徑可於最終步驟中合併醯胺類，獲得產物(VI)。流程3

(V〇生物學分析

Aurora A/TPX2 IMAP® 酿ί 活性分析 ίο 將本發明化合物於基質磷酸化作用分析中測試Aurora A/TPX2蛋白質激酶抑制活性。此分析測驗小分子有機化合物抑制胜肽基質絲胺酸磷酸化之能力，並於IMAP®技術 (Molecular Devices，Sunnyvale, California)螢光極化分析版 15 200902010 本中執行。該方法量測分離之酶將γ —磷酸鹽由ATP轉移至螢光素-標示合成胜肽（5FAM-GRTGRRNSI-NH2)之絲胺酸殘基上的催化能力。在微孔盤分析形式中，螢光素-標示胜肽於激酶反應中被石粦酸化。添加IMAP®結合系統（IMAP® 5 Binding System)阻止激酶反應，並特異性地結合磷酸化基質’磷酸化及隨後基質結合成株狀(結合劑)經由螢光極化偵測。基質磷酸化分析使用於桿狀病毒/Sf9 ( baculovirus/Sf9 ) 系統中表現之重組人類全長Aurora A激酶，iV-端His-Thr-ι〇親和標記物被接於Aurora A之2至403胺基酸的胺基終端。在表現之最後4小時期間添加5 nM岡田酸（okadaic acid)(實驗上確定增加Aurora A的酶活性），經由金屬螯合親和力層析將酶純化至約70%之純度。分析進行於384孔低體積黑色聚乙稀盤（Greuner 15 Bio-One，Longwood，FL)，將 5 微升 4 nM Aurora A 酶添加至含0.1微升測試化合物之100% DMSO的小孔中，並培養 30分鐘，之後添加5微升反應混合物，產生1〇微升之最終分析體積，其含有1 mM氯化鎮、2 μΜ ATP、1 μΜ胜肽基質、40 nM微管結合蛋白質ΤΡΧ2胜肽（M3)、1.5 mM 20 DTT、25 mM NaCl、0.15 毫克/毫升 BSA 及〇.〇 1% Tween-20之50 mM HEPES ’ pH 7.2。使反應於室溫進行12〇分鐘，並經由添加10微升1 : 500之含稀釋循序性結合試劑(Progressive Binding Reagent)(奈米微粒珠）之 Molecular

Devices專屬90%緩衝劑A與10%緩衝劑B以終止反應。 16 200902010 在 120 分鐘培養時間後，於 Analyst GT(Molecular Devices) ’ 以在485 nM激發、530 nM放射及使用505 nM二色透鏡之螢光極性模式讀取微孔盤。於平行及垂直方向接收資料，並經由儀器轉換成mp。對於劑量反應曲線，將資料標準化並以使用式100* (1 — (U —C2)/(C1 —C2))抑制百分比表示，其中U為未知值，Cl為高信號之平均數(0%抑制），而C2為低信號之平均數(100% 抑制）對照組孔洞。曲線擬合（Curve fitting )以下列方程式執行：y=A+((B-A)/(l+(l〇Ax/10AC)AD))，其中 A 為最小反應，B為最大反應，C為logl0(XC50)，且D為斜率。各化合物之結果記錄成pIC50值（為上述方程式中之-C)。

Aurora B/INCENP IMAP®酿活性分浙

本發明化合物亦在基質磷酸化分析中測試Aurora B/INCENP蛋白質激酶抑制活性。該基質鱗酸化分析使用於桿狀病毒/Sf9系統中表現之重組人類全長Aurora B激轉。表現後，培養基在純化前以50 nM岡田酸培養1小時。#-端His-親和標記物被接於Aurora B之胺基酸1至344的胺基終端，經表現的蛋白質以金屬螯合親和力層析純化。於含 50 mM Tris-HCl pH 7.5、0.1 mM EGTA、0.1% 2-氫硫乙醇、0.1 mM釩酸鉀、10 mM乙酸鎂、O.imM ATP之0.1毫克/毫升 GST-INCENP[826-919]，於 30〇C 將 5 μΜ Aurora B 活化30分鐘。活化後’然後將酶透析入酶儲存緩衝液，並於-7〇°C保存。 17 200902010 分析進行於384孔低體積黑色聚乙烯盤（Greuner Bio-One，Longwood, FL)，將 5 微升 4 nM Aurora B/INCENP 添加至含0.1微升測試化合物之100% DMSO的小孔中，並 • 培養30分鐘，之後添加5微升反應混合物，產生10微升 .5 之最終分析體積，其含有2mM氯化鎂、2.5 μΜΑΤΡ、1.25 μM胜肽基質（5FAM_GRTGRRNSI-NH2)、2mMDTT、25mM NaCl、0.15 毫克/毫升 BSA 及 0.01% Tween-20 之 50 mM HEPES，pH 7.5。使反應於室溫進行120分鐘，並經由添加 10微升1 : 500之含稀釋循序性結合試劑（Progressive 10 Binding Reagent)(奈米微粒珠）之 Molecular Devices 專屬 95%緩衝劑A與5%缓衝劑B以終止反應。在120分鐘培養時間後，於 Analyst GT (Molecular Devices)，以在 485 nM 激發、530 nM放射及使用505 nM二色透鏡之螢光極性模式讀取微孔盤。 15 如Aurora A分析中所述接收資料。【實施方式】下列實施例僅為說明之目的，並非意圖限制本發明之範圍，化合物使用ACD命名軟體（Advanced Chemistry 20 Development)命名。實施例中虛線代表連接位置，所有化合物對於Aurora A及B具有pIC50大於6.0。將PE Sciex API 150單四極柱式質譜儀（singie quadrupole mass spectrometer ； PE Sciex, Thornhill, Ontario,

Canada)與 CTC PAL 自動取樣機（LEAP Technologies, 18 200902010

Carrboro，NC)串連使用，HPLC 泵浦為 Shimacizu LC-lOADvp (Shimadzu Scientific Instruments, Columbia, MD)，操作於0.3毫升/分鐘及於3.2分鐘内由4.5%溶劑A 至90%溶劑B之線性梯度，維持0.4分鐘。移動相由容器A .5 中之 1〇〇%(H20 0.02% TFA)及容器 B 中之 100〇/〇(CH3CN 0.018% TFA)所組成，固定相為Aquasil(C18)，且管柱尺寸為1毫米X40毫米，檢測以214奈米UV、蒸發光散射儀 (ELSD)及MS進行。

或者是，使用具有LC/MS之Agilent 1100分析HPLC 10 系統’並於1毫升/分鐘之速率及5%溶劑A至100%溶劑B 之線性梯度操作2.2分鐘，並再維持〇.4分鐘。移動相由容器A中之1〇〇%(H20 0.02% TFA)及容器B中之 . iOOOMCHsCNO.OlSo/oTFA)所組成，固定相為具有3.5微米粒子尺寸之Zobax 5 (C8)’且管柱尺寸為2.1毫米χ50毫米， 15 檢測以214奈米UV、蒸發光散射儀(ELSD)及MS進行。 H-NMR(下文稱為“NMR”)光譜使用Bruker AVANCE 400 MHz儀器於400 MHz紀錄，以ACD Spect管理器版本 10用於製程。所指之多重數為：S=單峰，d=二重嶂：，t=三重峰，q=四重峰，m=多重峰，dd=雙二重峰，dt=雙三重峰 20 等，及br意指廣信號。關於預備性HPLC’將含產物之溶液注於具有75x30毫米YMC CombiPrep ODS-A管柱(5微米）之Gilson預備性層析系統上’在50毫升/分鐘之速率，以含(5% CH3CN (0.1% 甲酸)至95%CH3CN(0.1%曱酸)之h2〇(0.1%曱酸)之梯度1〇 19 200902010 分鐘，並再維持2分鐘；或者是，使用Agilent 11〇〇預備性層析系統（100 x 30亳米Geminici8管柱(5微米），於6〇毫升/分鐘之速率，以含（5% CH3CN(0.1%曱酸）至 95%CH3CN(0.1〇/〇曱酸)之h2〇(〇 1%甲酸)之梯度1〇分鐘再維持2分鐘。 ' 利用使用 SuperFiash Sepra Si 50 管柱之 Anal0gix IntelhFlash280系統進行預備性正相層析。中間產物1 U(2,5-二氣-4-嘧啶基)胺某1苯甲醢脸

將圓底燒瓶裝填2,4,5-三氣嘯。定(7克，38毫莫耳）、正-鄰胺苯甲醯胺(6.2克，45.8毫莫耳）、二異丙基_乙胺(8亳升， 45.8耄莫耳)及1〇〇毫升異丙醇。將燒瓶裝上回流冷凝器，且將反應加熱至回流並攪拌18小時，分離反應混合物中之白色固體。將反應冷卻至室溫，在真空下移除1/3體積，並將固體處除及以異丙醇清洗。乾燥後，確認白色固體(9 + 32毫莫耳，_)為2-[(2,5_二氣二二二克酸胺。MS : M(CuH8C12N4〇) = 283,12，（M+H)+=284 及 286。 20 20 200902010 實施例1 基甲基）茉某1胺基}-4-嘧啶某)胺某】笨曱醯脸

將2-[(2,5-二氣-4-嘧啶基)胺基]苯曱醯胺(2〇〇毫克，0 6 毫莫耳)及3-(1-。比咯啶基曱基)苯胺（134毫克，〇 75毫莫耳) 混合於具有5毫升異丙醇及2滴12N HC1之容器中，將容态饴封並於95 C授拌加熱18小時，將反應冷卻至室溫並將固體濾出且以異丙醇清洗，獲得178毫克(65%產率）無機固體之 HC1 鹽。MS : M(C22H23C1N60) = 422.92，（M+H) + =423 及 425。 f施例2-14 下列2_{[5-氣-2-(經取代苯基胺基)_4_嘧啶基]胺基卜苯甲@迪|女化合物根據實施例1之方法，由對應之2_[(2,5_二氣 -4-嘧啶基)胺基]-苯曱醯胺中間產物丨與對應之苯胺製備。

21 200902010 實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 實施例編號芳基(Aryl) Mass (Μ+Η)+ 2 〇 453,455 3 0 438,440 4 k 440,442 5 丫。 495,497 6 0L〇X 479,481 7 437,439 8 άχτ 451,453 9 〇2S、人0 Η 499, 501 10 、Φ S02 431,433 11 0Χτ 437,439 12 451,453 13 Oh 452, 454 22 200902010 中間產物2 2-「(2,5-二氯-4-嘧啶基)胺基1-#-曱基笨曱醯胺

14 468,470 ΌΗ 5 將圓底燒瓶裝填2,4,5-三氯嘧啶(2克，11.1毫莫耳）、 2-胺基-7V-曱基苯曱醯胺(2克，13.3毫莫耳）、二-異丙基-乙胺(2.3毫升，13.3毫莫耳)及40毫升異丙醇。將燒瓶裝上回流冷凝器，且將反應加熱至回流並攪拌18小時，分離反應混合物中之白色固體。將反應冷卻至室溫，且將固體濾出 ίο 並以異丙醇清洗。乾燥後，確認白色固體(3.16克，10.5毫莫耳，95%產率）為2-{(2,5-二氯-4-嘧啶基)胺基]-7V-甲基苯曱醯胺。MS : M(C12H10Cl2N4O)=297.14，（M+H) + =297 及 299。 15 實施例15-31 下列2-{[5-氣-2-(經取代苯基胺基)-4-σ密咬基]胺基}-iV- 23 200902010 甲基苯曱醯胺化合物大體上根據實施例1中所述之方法，由2 - [(2，5 -二氯-4 -嘧啶基)胺基]-iY-曱基苯曱醯胺（中間產物 2)及對應之苯胺製備。、ΝΗ

實施例編號芳基(Aryl) Mass (Μ+Η)+ 實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 15 、、irr> 437, 439 16 /_Λ W VVv〇 466, 468 17 - 452, 454 18 439, 441 19 / Ν\__/Ν 466, 468 20 b-^oo 522, 524 21 466, 468 22 Χ=/ OH 398, 400 23 χτο 467, 469 24 437, 439 25 480, 482 26 452, 454 27 0 / 446, 448 28 467, 469 24 200902010 29 467,469 30 ch3 465,467 31 482, 484 中間產物3 2 -胺基-iV-乙基笨甲酉菡胺

HN

.5 將圓底燒瓶裝填鄰羧苯胺甲酐（isatoic anhydride ; 5.0 克，0.030莫耳）、200毫升水、及5毫升曱醇，缓慢添加乙胺(2N於曱醇中，18·4毫升，0.036莫耳)至反應混合物。1 小時後，將反應混合物濃縮至20毫升。反應混合物以1Ν HC1酸化，並以EtOAc萃取。水層以6Ν NaOH鹼化，並以 ίο EtOAc萃取。EtOAc層於Na2S04上乾燥，過濾，並濃縮至乾燥’獲得2-胺基乙基苯曱醯胺(4.6克，91%) : Mass (M+H)+=165 ° 實施例32-34 下列2-{[5-氣_2_(經取代苯基胺基)-4-♦定基]胺基}善乙基本甲酿胺化合物大體上根據實施例1中所述之方法， 25 200902010 由2-[(2,5-二氯-4-嘧啶基)胺基]-TV-乙基苯曱醯胺（中間產物 3)及對應之苯胺製備。

實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 32 CK_N。。 481,483 33 、、、、〇PO 451,453 34 \、 ^n— 466, 468 將圓底燒瓶裝填鄰羧苯胺曱酐(5·0克，0,030莫耳)及 30毫升水。缓慢添加異丙基胺(4.64毫升，0.049莫耳）至反中間產物4 2-胺基甲基乙基）苯曱醯胺

26 200902010 應混合物。產物自反應混合物中沉澱。1小時後，將反應混合物過濾並以水清洗，獲得4.12克(71%產率）之白色固體。中間產物5 2-「(2,5-二氩-4-嘧啶基)胺基1-ΛΑ-Π-甲基乙基）茉甲醯胺

將圓底燒瓶裝填2,4,5-三氯嘧啶(2.0克，6.8毫莫耳）、 2-5胺基-#-(1-曱基乙基)苯曱醯胺（1.2克，7.1毫莫耳）、二-. 異丙基-乙胺（1.4毫升，8.1毫莫耳)及30毫升異丙醇。將燒 1〇瓶裝上回流冷凝器，且將反應加熱至回流並攪拌18小時，白色固體出現於反應混合物中。將反應冷卻至0°C並過濾，固體以二***清洗，獲得2-[(2,5-二氯-4-嘧啶基)胺基] 曱基乙基）苯曱醯胺(2.0克，90%)。 15 實施例35 2-「(5-氯-2-(「3-〔4-曱基-1-哌畊基）笨基1胺基丨-4-嘧啶基）胺基甲基乙基）苯曱醯胺

27 200902010 將2_[(2,5-二氯_4_嘧啶基)胺基]#(1_甲基乙基)苯甲醯胺(200毫克，0.61毫莫耳)及3-(4-甲基_1_痕畊基)苯胺（Π7 毫克，0.61毫莫耳)混合於具有8毫升異丙醇及12NHC1(51 微升，0.61毫莫耳)之容器中。將容器密封並於95。〇攪拌加熱18小時，將反應冷卻至室溫並將固體濾除，及以二*** 清洗，獲得120毫克(40〇/〇)之灰白色固體之HC1鹽。Mass (M+H)+=480, 481, 482。實施例36-40 下列2-{[5-氣-2-(經取代苯基胺基)_4-哺咬基]胺基}_#_ 丙基苯曱醯胺化合物大體上根據實施例33中所述之方法，由2-[(2,5-一氯-4-。密咬基)胺基]-尽異丙基苯曱酸胺（中間產物5)及對應之笨胺製備。

實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 36 495, 497 37 、、d> 465,467 38 536, 538 39 480, 482 28 200902010

ch3 40 494,496 5 將圓底燒瓶裝填鄰羧苯胺曱酐(5.0克，0.030莫耳)及 40毫升水，缓慢添加乙醇胺(2 21毫升，〇〇36莫耳）至反應混合物。反應混合物以1NHC1酸化，並以EtOAc萃取。水層以6N NaOH驗化，並以Et〇Ac萃取。Et〇Ac層於价2：§〇4 上乾煉，過濾，並濃縮至乾燥，獲得2_胺基_#_(2_羥基乙基) 10 苯甲醯胺(3.86克，70%)。中間產物7 2-f(2,5-二氯-4-嘧变胺基m2肩篡Λ Η --*—

將圓底燒瓶裝填2,4,5-三氯嘧啶(1.3克’ 4·4毫莫耳）、 2-胺基-Λ「-(2-羥基乙基)苯曱醯胺(838毫克，4 65毫莫耳）、二-異丙基-乙胺(925微升，5.31毫莫耳)及15毫升異丙醇。 29 200902010 卑埏瓿裝上回流冷凝器，且將反應加熱至回流並攪拌ι8小 ^白色固體出現於反應混合物中。將反應冷卻至〇。〇旅過 1，固體以***清洗，獲得2_[(2,5_二氣如密咬基）胺暴]-沭(2-羥基乙基）苯曱醯胺（13克，89%)。胺某丨-4-嘧啶基^

^將2_[(2,5_二氣_4_嘧啶基)胺基]_尽(2_羥基乙基)苯甲醯 =(15〇亳克，0.45毫莫耳)及3-(4-甲基小哌畊基)苯胺(87 耄克0.45毫莫耳）混合於具有8毫升異丙醇及12nhci(38 微升，0.45亳莫耳)之容器中。將容器密封並於95它攪拌加熱18小％，將反應冷卻至室溫並將固體濾除，及以二*** >月洗’獲抑184毫克（76%)之灰白色固體之hci鹽。Mass (M+H)+=482, 484。實施例42-43 下列2-{[5-氯-2-(經取代苯基胺基)定基]胺基卜起基乙基本曱酸胺化合物大體上根據實施例41中所述之方 30 20 200902010 法，由2-[(2,5-二氯密啶基)胺基]-尽羥基乙基苯甲醯胺中間產物7及對應之苯胺製備。

N 、Aryl 實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 42 V~^N 〇 \/ 497, 499 43 、〇r〇 467, 469 中間產物8 2-脍甚U2.2.2-三氟〔羞）苯曱醯胺

將圓底燒瓶裝填鄰羧苯胺甲酐(5.0克，0.030莫耳）、15 毫升水及三乙胺(4.69毫升，0.033莫耳）。將(2,2,2_三氣乙基)胺鹽酸嚴(4.98克，0.036莫耳）緩慢添加至反應混合物中。16小時之後，將反應混合物濃縮至乾燥。粗^物二二氧化矽凝膠純化(EtOAc/己烧），產生標題化合物之白色固體 31 200902010 (3.42 克，51%) : Mass (M+H)+ =120,219。中間產物9 2-「(2,5-二氣-4-嘧啶基）胺基1-W2,2,2-三氟乙基）苯甲醯胺 cf3

中間產物9以中間產物7相似之方法製備。實施例44-46 10 下列2-{[5-氣-2-(經取代苯基胺基)-4-嘧啶基]胺基}-#-三氟乙基苯甲醯胺化合物大體上根據實施例41中所述之方法，由2-[(2,5-二氣-4-^σ定基)胺基]-7V"-二氣乙基苯曱酿胺中間產物9及對應之苯胺製備。

CI

實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 44 V χ==/ 0 \^f 535, 537 32 200902010 45 x〇r〇 505, 507 46 ' 〇-〇- 520, 522 中間產物ίο 2-胺基-TV-笨基笨甲酿脫

2-胺基苯基苯曱醯胺大體上根據Dabir^M. ; Salehi, P. ’ Mohammadi，Au A. ; Baghbanzadeh, Μ· ; Kozehgiry, Gh·，Journal of Chemical Research，(^), 570-572 ; 2QQ4 中所述製備。中間產物11 2-「(2,5-二氣-嘧咭篡）胺基1-：^-苯基苯甲醯胺

2-[(2,5-二氯-4-嘧啶基)胺基]-秌苯基苯甲醯胺大體上使用製備中間產物1所述之方法，由2-胺基苯基苯曱醯胺 15 及2,4,5-三氯嘧咬製備。1\^53(]^1+11)+=358,360. 33 200902010 實施例47-49 下列2-{[5-氯-2-(經取代苯基胺基)-4-嘧啶基]胺基}-#-乙基苯曱醯胺化合物大體上根據製備實施例1所述之方法’由2-[(2,5-二氣-4-^σ定基)胺基]-7V"-乙基苯曱酿胺中間產物1及對應之苯胺製備。

實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 47 NW° 529, 531 48 、、'〇Ύ> 499,501 49 、 \ \ / 514,516 中間產物12 1J-二甲基乙基(2-•[丨(2-胺基苯基）羰基1胺基丨乙基）甲基胺基 10 曱酸酯

34 200902010 將圓底燒瓶裝填鄰羧苯胺曱酐(2.0克，0.012莫耳)及 15毫升水，將1，1-二曱基乙基(2_胺基乙基）曱基胺基甲酸酯 (2.56克，0.014莫耳)缓慢添加至反應混合物，產物由反應混合物沉殿。16小時之後，過濾反應混合物濃並以水及己 5 统清洗’獲得3·1克（86%產率）之棕色固體：Mass (M+H)+=194, 294。中間產物13 i，L-_二甲基乙基二氣-4_嘧啶基）胺基1茉某}鞴 ίο 基）胺基1乙基丨曱基胺甚:甲酸酷

中間產物13以中間產物7相似方法製備。實施例50 15 2- {『5-氯-2-( {3-『2-i4-^AAl_乙基1茉基 > 胺基）-4-嘧啶某1胗基}多「2-(曱基胺某）乙某1苯甲碲炉

35 200902010 2-{[5-氯-2-({3-[2-(4-嗎啉基）乙基]苯基丨胺基)_4_嘧π定基]胺基}-Ν-{2-(曱基胺基）乙基]苯甲醯胺大體上根據製備實施例41所述之方法，由1，1-二甲基乙基二氯-4-嘧咬基）胺基]苯基}羰基）胺基]乙基}曱基胺基曱酸酯、中間產物13、及對應之苯胺製備。Mass (Μ+Η)+=51〇. 中間產物14 2-胺基二甲基茉甲醯胺將圓底燒瓶裝填2-硝基苯曱醯氯(5毫升，0.038毫莫耳) 及150毫升THF ’添加二乙胺(6毫升，0.045毫莫耳)後再添加二甲胺(23毫升，0.045毫莫耳）’並將反應於室溫授拌 1小時。反應以EtOAC稀釋並以水清洗，然後以鹽水清洗。有機層於MgS〇4上乾燥，過濾並濃縮，獲得黃色固體 (5.4g):將產物溶解於150毫升EtOH並添加10% Pd/C。將反應混合物置於50 psi %下’並在parr裝置中搖動。將容器再充填直至反應停止吸收H2 ’（〜3次再充填)並再搖動隔夜。將混合物經由塞里塑料(celite)過濾，獲得所欲產物。中間產物15 2-「(2,5_二氣-4-°密唆基)胺基ΐϋ二甲基笨曱酿脸

200902010 將圓底燒瓶襞填2,4,5-三氯嘧啶(i.o克，3·4毫莫耳）、 2-胺基二曱基苯曱醯胺(587毫克，3 5毫莫耳）、二-異丙基-乙胺(712微升’ 4.08毫莫耳)及15毫升異丙醇。將燒瓶裝上回流冷凝器，且將反應加熱至回流並擾拌18小時，分離反應混合物中之白色固體。將反應冷卻至〇。〇並過濾，固體以醚清洗，產生2-[(2,5-二氣-4-嘧啶基)胺基]-况尽二曱基苯曱醯胺(896亳克，94%): 實施例51 氣-2-({3-「U4-嗎啉基）乙基1茉某{胺1V4-嘧啶某1胺一曱基笨甲酸胺

2-[(2,5-二氯-4-嘧啶基)胺基]二曱基苯甲醯胺(300 毫克，0.96毫莫耳）、3_[2-(4-嗎啉基）乙基]苯胺（198毫克， 0.96毫莫耳)混合於具有1〇毫升異丙醇及TFA(74微升， 0.96毫莫耳)之容器中。將容器密封並於95。(：攪拌加熱18 小時’將反應混合物濃縮至乾燥。粗產物經由半預備HPLC 純化，產生標題化合物之白色固體(83毫克，18%) : Mass (M+H)+ 481, 483。 37 20 200902010 實施例52 {3t(4-嗎啉基）乙基1笨基}胺某）-4-嘧晗芊1押基}-Α^Ι3-「2-(4：；^§啉基）乙某1芏某！苯甲醯胺

〇0 5 將2—[(2,5_二氯-4-嘧啶基）胺基]-MTV-二甲基苯曱醯胺 (25〇毫克’ 0.8〇毫莫耳）、及3]2_(4-嗎啉基）乙基]苯胺（165 毫克’ 0.80毫莫耳)混合於具有10毫升異丙醇及12N HC1 • (67微升’ 0.8〇毫莫耳)之容器中。將容器密封並於95°C攪 . 拌加熱18小時，將反應混合物濃縮至乾燥，粗產物經由 ίο HPLC純化’產生標題化合物之白色固體（1〇毫克，6〇/〇):

Mass (M+H)+=642, 644. 實施例53-54 下列2-{[5-硝基-2-(經取代苯基胺基)-4-嘧啶基]胺基}-15 苯曱醯胺化合物大體上依製備實施例1所述之方法，由 2-[(2-氣-5-硝基_4_嘧啶基）胺基]苯曱醯胺及對應苯胺製備。以過渡或蒸發反應混合物而分離化合物，並經由預備 HPLC純化。 38 200902010

實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 53 \ \=/ ^-Ν 〇 \/ 464, 465 54 、、lXN〇 434, 435 實施例55-57 下列2-{[5-三氟曱基-2-(經取代苯基胺基)-4-嘧咬基]胺基}-苯曱醯胺化合物實質上依製備實施例1所述之方法，由 2-{[2-氯-5-(三氟曱基)-4-嘧啶基]胺基}苯曱醯胺及對應苯胺製備。以過濾或蒸發反應混合物而分離化合物，並經由預備HPLC純化。

39 200902010 實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 55 '、 X==A^_nw° 487,488 56 、、'、〇ro 457, 458 57 〇-〇- 472, 473 中間產物16 U甲氧基)-2-硫黑基痛噔獅

#在配備機械攪拌器之毫升三翻底燒瓶中，添加甲苯(100毫升)及金屬納(5 75克；0 25莫耳）。使用滴液漏斗，滴添f含曱氧基乙酸曱δ旨(25毫升；0.25莫耳)及甲酸士酉曰（20笔升’ 0.25莫耳)之混合物至系統中，使用外部水保持系統在添加期間低於航。將祕於室溫授拌16 / k ’然後將水相倒出’留下之膠狀固體以硫脲（19克；〇 25 莫耳)及乙醇(50亳升)處理。將系統加熱至回流4小時，並冷部至室溫。過濾收集淡粉紅色固體，並溶於125毫升水 200902010 中。溶液以濃HC1酸化(pH4-5)，過濾收集沉澱之固體，以水清洗，並於真空下乾燥，獲得中間產物16(22克；56%產率）。MS : (M+H)+= 159. 中間產物17 〇

〆〇將含5-(甲氧基)-2-硫酮基-2,3-二氫-4(111)-嘴淀_(21.5 克；0.137莫耳）、氯乙酸(21·5克；0.227莫耳)及水(585毫升)之混合物回流2小時’添加濃縮HC1 (85毫升），然後將混合物回流16小時。冷卻後，形成固體，並過濾收集，以水清洗並乾燥’產生所欲之產物（18 2克；94〇/。產率）。MS : (M+H)+ = 143 ° 中間產物18 氯-5-(曱氣某

將 5-(曱氧基)_2,4(l/f，3//)-嘧啶二酮（18 克；0.128 莫耳）、***(90毫升)及二曱基苯胺（18毫升)加熱至回流 2小時。將系統冷卻至室溫並小心倒入冰。過濾、分離所形之 20 200902010 成白色固體，以 . —醚(4x)萃取水性濾液無水硫酸鈉上乾燥。狀合併醚層，並於克；·產率n 中移除溶劑’產生中間產物聊 m及』所回收之起始物質）。紙：（_)+=179,

間產物1Q 基1胺某！芏甲醯脖

1Ό 將2,4-二氯_5·(曱氧基)哺啶(1.5克；8.43毫莫耳）、笨胺2-胺基苯曱醯胺（115克；8 43毫莫耳）、二乙基異丙基胺 (4亳升)及正丁醇(25毫升）回流16小時。冷卻至室溫後，產物結晶，過濾收集白色固體，以冷正丁醇及冷己烷清洗。固體在高真空下乾燥，產生中間產物19(11克；5〇%產率卜 MS : (M+H)+=279 及 281。 15 中間產物20 U「2氣-5-(甲氧基)-4-嘧啶某1胺基甲基-茉甲醯脸

42 200902010 2-{[2-氯-5-(曱氧基)-4-π密π定基]胺基}_#_甲基-苯甲醯胺 (1.5克；60%)大體上依製備中間產物19所述之方法，使用 2-胺基曱基-苯曱醯胺作為苯胺而製備。ms:(M+H)+=293 及 295。

• 2_{[2_氣-5-(曱氧基)_4·嘧啶基]胺基異丙基-苯曱醯 10 胺（1.4>克；52%)大體上依製備中間產物19所述之方法，使用2-胺基-iV-異丙基_苯曱酸胺作為苯胺而製備。ms : (m+h) + =321 及 323 〇實施例58 15

2 Μ (f 林基）乙篡11基i胺某V4-嘧咭基1胺基丨

〇 43 200902010 於τ:3Λ2-(4_嗎啦基）乙基]苯胺(103毫克；〇·5毫莫耳)溶 ^人（鼋升），並以1毫升1M HC1之***溶液處理。將 ^物授拌5分鐘，然後於真空令濃縮。殘餘物以2_{[2_ 氯_5-(甲氧基)-4_嘧啶基]胺基}苯甲醯胺(139毫克；〇 5毫莫耳)及異丙醇(4毫升)處理。懸浮液於小瓶中攪拌，密封並於 =〇C加熱24小時。冷卻後，過濾收集固體，以冷異丙醇清洗’並於真空中乾燥，產生所欲產物。MS: (M+H)+=449. 1〇實施例59-67大體上依製備實施例58所述之方法，由中間產物19-21及對應苯胺製備。中間產物19用於合成 2-{[5-甲氧基_2_(經取代苯基胺基)-4-嘧啶基]胺基}_苯甲醯胺。中間產物20用於合成2-{[5-曱氧基-2-(經取代苯基胺基)-4-嘧啶基]胺基丨^甲基-苯曱醯胺。中間產物21用於合 15 成2-{[5-曱氧基-2-(經取代苯基胺基)_4_嘧啶基胺基卜異丙基-苯甲醯胺。

實施例編號 R1 芳基(Aryl> Mass (M+H)+ 實施例編號 R1 芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 59 Η Q~nCn- 0— 464 60 Η 434 44 200902010 61 Η 448 62 Me 448 63 Me 462 64 iPr 、、 W VVv〇 491 65 iPr V 0— 506 66 iPr -ΌΌ-- 476 67 iPr ch3 490 實施例68-70 下列2-{[5 -氟-2-(經取代苯基胺基)-4-β密σ定基]胺基)-苯曱醯胺化合物大體上依製備實施例1所述之方法，由2-{[2-氯-5-氟-4-嘧啶基]胺基}苯曱醯胺及對應苯胺製備。反應混合物經由過濾或蒸發分離產物，以預備HPLC純化。

MM

Aryl 實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 68 422, 423 45 200902010 69 、ΌΛ} 407, 408 70 Ο^Νη0 437,438 實施例71-74 下列2-{[5-鼠-2-(經取代苯基胺基)-4-^σ定基]胺基]•-tV"-曱基苯曱醯胺化合物大體上依製備實施例1所述之方法， 5 由2-[(2-氯-5-氟-4-嘧啶基)胺基]曱基苯甲醯胺及對應苯胺製備。反應混合物經由過濾或蒸發分離產物，以預備 HPLC純化。

實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 71 、 436, 437 72 \、 χ=/ Ο \_/ 451,452 73 421,422 74 ch3 450,451 46 200902010

實施例7J 基1 胺某 ι_4-射基乙基）茉甲脸

…將2-[(2-氣_5-氟_4_嘧啶基)胺基]_l(1_f基乙基）苯曱醯胺(75毫克，〇 24毫莫耳)及預先形成之3_曱基_4_(4_曱基 10 上辰畊基）笨胺(49毫克，〇 24毫莫耳)Ηα鹽混合於具有3 笔升異丙醇之容器中，將容器密封並於10(TC攪拌加熱72 小日守將反應冷卻至室溫並移除溶劑。以逆相預備jjPLC 純化，獲得2δ毫克(24°/〇產率）棕色固體。將該固體溶於 THF(其含1當量之1M HC1)。添加醚，濾出所產生之白色固體，獲得 HC1 鹽。MS : M(C26H32FN70) = 477.58，（Μ+Η) + =478.2 及 479.2。 15 實施例76-79 下列2-{[5-氟-2-(經取代苯基胺基）-4-嘧啶基]胺基}-尽(1- f基乙基)苯甲驢胺化合物大體上依製備實施例1 所述之方法’由2·[(2-氯-5-氟-4-^密β定基)胺基]—V_(l-甲基乙基)苯甲醯胺及對應苯胺製備。反應混合物經由過濾或蒸發 2〇分離產物，以預備HPLC純化。 47 200902010

實施例編號芳基(Aryl) Mass (Μ+Η)+ 實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 76 \_/ 479,480 77 520,521 78 〇 \ 458,459 79 '、〇-〇- 464, 465 實施例80-86 下列2-{[5-鼠基-2-(經取代苯基胺基)-4-σ_σ定基]胺基)_ 5 苯曱醯胺化合物大體上依製備實施例1所述之方法，由 2- {[2-氣-5-氣基-4-鳴σ定基]胺基}苯曱酿胺及對應苯胺製備。反應混合物經由過濾或蒸發分離產物，以預備HPLC 純化。

48 200902010 實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 80 W VVv〇 444, 445 81 414,415 82 、 429, 430 83 ch3 - 443,444 84 *·'Ό^ν〇ν- 429, 430 85 、、、〇?〇 1 445, 446 86 /〇 k/N、 459, 460 實施例87-89 下列2-{[5-曱基-2-(經取代苯基胺基)-4-嘧啶基]胺基)-5 苯曱醯胺化合物大體上依製備實施例1所述之方法，由 2-{[2-氯-5-曱基-4-嘧啶基]胺基}苯曱醯胺及對應苯胺製備。反應混合物經由過濾或蒸發分離化合物，以預備HPLC 純化。

49 200902010 實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 87 N\_y° 433, 434 88 、、、〇^〇 403, 404 89 418,419 中間產物22 2-「(2-氣-5-曱基-4-嘧啶基）胺基1-JV-甲基笨甲醯胺

將容器充填2,4-二氯-5-曱基嘧啶(10克，61.3毫莫耳）、 2_胺基_AL曱基苯曱醯胺(9.2克，61.3毫莫耳）、二-異丙基-乙胺(21毫升，122毫莫耳)及50毫升正丁醇。將容器密封並於95°C攪拌加熱18小時，將反應冷卻至室溫，據此沉澱白色固體。濾出固體，以冷異丙醇清洗，在真空中移除三分之一體積的濾液，並將經濃縮之母液在產生額外之固體物質之前，如前述加熱及冷卻。乾燥後，總白色固體(9.04 克，32.8毫莫耳，53%產率)確認為2-[(2-氯-5-曱基-4-嘧啶 50 10 200902010 基)胺基]善甲基苯曱醯胺。MS : M(C13H13C1N40)=276.73， (M+H) + =277 及 278。實施例90 逆J基-2-「(5-甲羞^{「3_(4_甲1-1-哌畊基戌基1胺基}-4-痛啶基）胺基1装甲醢脸

將2-[(2-氯-5-甲基_4_嘧啶基）胺基]曱基苯甲醯胺 (200毫克，0.72毫莫耳)及3_(4_曱基哌畊基）苯胺（142毫克’ 0.72毫莫耳)混合於具有5毫升異丙醇及2滴12N HC1 之容器中，將容器密封並於95°c攪拌加熱18小時，將反應冷卻至室溫’並濾出固體，及以異丙醇清洗，獲得所欲產物之 HC1 鹽(206 毫克，66%產率）。MS : M(C24H29C1N70)= 431.54，fM+H) + =432 及 433。實施例91-97 下列2-{[5-甲基-2-(經取代苯基胺基)_4_嘧啶基]胺基}_ 本甲酸胺化合物大體上依製備實施例90所述之方法，由 2-{[2-氯-5-甲基-4-嘧啶基]胺基丨苯曱醯胺及對應苯胺製

備。反應混合物經由過濾或蒸發分離產物，以預備HPLC 純化。 51 200902010 Ο

\Ν Η

Aryl 實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 91 ch3 446 92 ''QrO 432 93 426 94 -O~n0° 419 95 k/N、 445 96 /0 k/N\ 462 97 0^.S;。 426 實施例98(方法I) #-(1-甲基乙基)-2-((5-甲基-2-「「3-(4-甲基-2-酮基-1-哌畊基) 笨基1胺基丨-4-嘧啶基)胺基1笨甲醯胺

52 200902010 △· 1 (3-¾^笨基)·4-甲基-2-痕〇并_夕率j備

^ 肖基苯胺(20_0克，145毫莫耳)與Et〇Ac(12〇毫升），20%重碳酸鉀水溶液(100亳升)混合於容器中，以形成雒 ::液’將其冷卻至代並攪拌。逐滴添加氣乙醯基氯⑴ 二毫莫耳)超過3〇分鐘。在此段時間之後，將反應 :ίΓΐ至室溫並另餅3G分鐘。移除水屬，之後將乙 60°C 3 d ’、435 4莫耳)添加至有機*。混合物加熱至 10 15 缺後冷>^，然後加水⑽亳升）’並將溶液再加熱至6(rC，細:劑並::::並:有機層以鹽水(3 X 60毫升)清洗。 _臺斗i 頁色固體與含3〇%腿心之己烷古4 見拌合併。過濾收集固體並以額外之溶劑（3 X 70 毛士 / 3〇/〇 Et〇AC之己燒）清洗。收集灰白色固體並於真空7中乾燥隔夜。此化合物確認為，(2_祕乙基)_，甲基 -#-(3-硝基苯基）甘胺醯胺，其不再進一步純化而用於下一步驟。（28.68 克’ 78%產率）1HNMR(4〇〇MHz DMS〇 d^ PP- 10.28(1 H, b, ,)8.69(1 H, t, 1=2.15 Hz) 8.01(1 H, dt, J-7.07, 1.01 Hz) 7.93 (1 H, dt, J-8.27, 1.17 Hz) 7.62 (1 H, t, J-B.21 Hz) 4.82 (1 H, br. s.) 3.53 (2H, br. s.) 3.33 (1 H, s) 3.24 (2 H, s) 2.55 (2 H, t, J=5.56 Hz) 2.34 (3 H, s). 53 20 200902010 將含二異丙基偶氮二羧酸酯（514毫莫耳，i 3 eq)之 EtOAc(20毫升）溶液添加至含妒_(2_羥基乙基甲美 _y_(3-硝基苯基)甘胺醯胺（1〇克，39·5毫莫耳)及三丁基ς (13宅升’ 51.4笔莫耳’ 1.3 eq.)之Et〇Ac(5〇毫升)超過6〇 .5 分鐘，再此期間内部反應溫度維持於25〇C至30°C之間。逐滴添加乙醇化HC1(2.0M溶液，2〇毫升），並將所產生之漿液冷卻至0°C並另攪拌1小時。過濾收集固體，以異丙醇清洗並於真空中、40°C乾燥18小時，獲得所欲之卜曱基-4_(3_ 硝基苯基)哌畊，其不再進一步純化而用於下一步驟。（8 43 10 克，79%產率）lHNMR(400 MHz, DMSO-d6)Sppm 11.90(1 H, br s) 8.28 (1 H, t, J=2.15 Hz) 8.20 (1 H, ddd, J=8.08, 2.27, I. 01 Hz) 7.85 (1 H, d, J=2.02 Hz) 7.84(1 H, d，J=2.02 Hz) 7.77 (1 H, t, J=8.08 Hz) 4.04 (3 H, br. s.) 3.66 (1 H, br. s.) ' 3.56 (1 H, br. s.) 2.92 (4 H, s). 15 將Pd/C(10%’420毫克）添加至含1-甲基-4-(3-硝基苯基) 哌畊(8.4克)之甲醇(500毫升)與水(20毫升)溶液。攪拌反應混合物並去除氮氣，並將容器於大氣壓力充填H2氣體，將反應進行隔夜，並於此段時間後在塞里塑料上過濾移除 Pd/C，並於真空中移除曱醇及水，獲得1-(3-胺某茉某V4-20 甲基-2-哌畊酮之普色固體(7.0S香.，95%產率V 1H NMR M00 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.07 (1 H, t, J=7.83 Hz) 6.48 -6.55 (2 H, m) 6.46 (1 H, d, J=1.01 Hz) 6.44 (1 H, s) 3.88 (4 H, s) 3.54 (2 H，hr. s.) 2.82 (3 H，s) 54 200902010 B. 2-f(2-氣-5-曱基-4-嘧啶基）胺基l-Wl-甲基乙基）茉甲醯 m

將容器裝填2,4-二氯-5-曱基嘧啶(5.0克，28毫莫耳）、」 2-胺基-#-(1-曱基乙基）苯甲醯胺(5.46克，34.3毫莫耳）、二 -異丙基-乙胺(7.0毫升，42毫莫耳)及2-(曱基氧基）乙醇(30 毫升），並密封，且於130°C攪拌加熱36小時。將反應冷卻至室溫，並逐滴添加50毫升水，產生乳狀白色溶液，將其 ' 加熱至l〇〇°C引發沉澱。冷卻溶液並過濾收集固體。所收集 ίο 之固體連續以水(2 X 50毫升)及己烷(3 X 50毫升）清洗，乾燥後，收集白色固體(6.56克，77%產率）並確認為2-[(2-氯 -5-曱基-4-嘧啶基)胺基]曱基乙基）苯曱醯胺。1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) 5ppm 11.51 (1 H, s) 8.56-8.63 (2 Η, m) 8.15 (1 Η, s) 7.81 (1 Η, dd, J=7.83, 1.52 Hz) 7.58 (1 Η, dd, 15 J=15.66, 1.52 Hz) 7.17 (1 H, dd, J=15.28, 1.14 Hz) 4.13 (1 H, dd, J=14.02, 6.69 Hz) 2.18(3 H, s) 1.18(6 H, d,J6.57 Hz). C. TV-Π-曱基乙基)-2-「(5-曱基-2-(Γ3-(4-曱基-2-酮基-1-哌畊基）笨基1胺基丨-4-嘧啶基）胺基1笨曱醯胺之製備 2〇將2-[(2-氯-5-曱基-4-嘧啶基）胺基]-#-(1-曱基乙基）苯 55 200902010 曱酿胺(103宅克，〇·337亳莫耳)及吵胺基苯基)_4_曱基_2_ 派4酮(68.8毫克’〇_335毫莫耳)於含12]^11(：1(〇.〇56毫升， 0.673笔莫耳)之異丙醇（10毫升）中，以95。〇攪拌隔夜。將反應冷卻至室溫並將固體濾出且以異丙醇清洗。使用逆相 HPLC以含〇‘1〇/0甲酸之5_3〇%乙猜洗提，將該固體層析，於合併之HPLC濾份親液作用後，獲得白色固體(43毫克， 27%)。MS · M(C26H31N7〇2) = 473.57，（M+H)+= 473.8。實施例98(方法ΙΓί及ΗΓΊ轉

Α. ΛΜ>曱基乙基)_2-[(5-甲基_2-{[3-(4-甲基-2-酮基-1-哌畊基）苯基]胺基}-4-嘧啶基)胺基]苯甲醯胺亦如下述合成：在含2-[(2-氯-5-甲基-4-嘧啶基)胺基]_ΛΑ-(1_曱基乙基）苯甲醯胺 (16.6克’55毫莫耳)及1_(3_胺基苯基)_4-曱基_2-哌畊酮（14.5 克’ 60宅莫耳）鹽酸鹽之異丙醇(5〇〇毫升）溶液中’添加6Ν HC1(1毫升），反應在迴流下加熱η小時，然後以500毫升水處理，並以1M NaOH中和至pH〜9。有機物以二氯曱烷萃取(2x 300亳升），並合併萃取物，以鹽水清洗，並於MgS〇4 上乾燥。然後將溶液過濾並蒸發。產物以正相層析（二氣曱烷：曱醇2%至15%超過60分鐘）。蒸發溶劑之後，產物由乙腈結晶（18克，38亳莫耳，69%產率）。MS : 56 200902010 M(C26H31N7〇2)=473.57，（Μ+Η)+=473.8· lHNMR(400MHz, MeOD) δ ppm 1.24 (d, J=6.57 Hz, 6 H) 2.18 (s, 3 H) 2.42 (s, 3 H) 2.74 -2.85 (m, 2 H) 3.25 (s, 2 H) 3.58 -3.74 (m,2H)4.〇8-4.3〇(m, 1 H) 6.88 (dd, J=7.96, 1.14 Hz, 1 H) 5 7.07-7.17 (m, 1 H)7.31 (t, J=8.08 Hz, 1 H) 7.42 -7.54 (m, 2 H) 7.67 (dd, J=7.83, 1.26 Hz, 1 H) 7.71 (t, J=2.02 Hz, 1 H) 7.90 (s, 1 H) 8.51 -8.67 (m, 1 H). B. HC1鹽如下述製備： 10 在含#-(1-甲基乙基)-2-[(5-曱基-2-{{3-(4-曱基-2-酮基 -1-哌畊基）苯基]胺基卜4-嘧啶基）胺基]苯曱醯胺（7.2克， 15.2毫莫耳)之曱醇(200毫升）懸浮液中，添加HC1(2M溶液於二***中，7.6毫升，15.2毫莫耳）。30分鐘後，將溶液過濾以移除任何懸浮固體，並將濾液於真空中濃縮。將產 15 物之鹽酸鹽乾燥隔夜(7.7克，98%產率）。1H NMR (400 MHz， MeOD)5 ppm 1.25 (d, J=6.57 Hz, 6 H) 2.26 (s, 3 H) 2.86 (s, 3 H) 3.44 (t, J=5.31 Hz, 2 H) 3.84 (s, 2 H) 3.92 (t, J=5.56 Hz, 2 H) 4.15 -4.29 (m, 1 H) 7.25-7.34 (m, 2 H) 7.43-7.59 (m, 4 H) 7.73-7.80 (m, 2 H) 8.38 (d, J=7.83 Hz, 1 H) 8.44 (d, J=8.34 20 Hz, 1 H). 實施例99-10? 下列2-{[5-異丙基_2-(經取代苯基胺基)-4-嘧啶基]胺基}-苯曱酿胺化合物大體上使用製備實施例98所述之方法 57 200902010 I，由2-{[2-氯-5-異丙基-4-嘧啶基]胺基}苯曱醯胺及對應苯胺製備，反應混合物經由過濾或蒸發分離產物，以預備 HPLC純化。

實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 99 460 100 -o^° 453 101 /° 490 102 ch3 474 中間產物23 2-胺基-4,5-二氟笨甲醯胺 nh2

將圓底燒瓶裝填2-胺基-4,5-二氟苯曱酸(2克，11.7毫 ίο 莫耳)及50毫升四氫呋喃(THF)，將燒瓶冷卻至0°C，之後逐滴添加含20%光氣(6.11毫升，11.7毫莫耳）之曱苯溶液。將反應於〇°C攪拌15分鐘，之後添加過量化學計量之氫氧 58 200902010 化銨，然後將反應溫熱至室溫，攪拌18小時，然後以水清洗，並以乙酸乙酯萃取三次，合併有機層並在硫酸鈉上乾燥，然後濃縮。產物確定為2-胺基-4,5-二氟苯甲醯胺（1.24 克，7.2 毫莫耳，62%產率）。MS : M(C7H6F2N20)=172.13， (Μ+Η) + = 173·2· 中間產物24 2-胺基-4,5-二氟曱基茉甲醯胺

2-胺基-4,5-二氟-7V-甲基苯曱醯胺大體上使用製備中間產物23所述之方法製備，在此情況，使用曱基胺以形成醯胺。Mass (M+H)+=187. 中間產物25 2-胺基-6-氟-7V-曱基笨曱醯胺

將圓底燒瓶裝填5-氟-2//-3,1 -苯并畤畊-2,4(1丹)-二酮 (500毫克，2.8毫莫耳)及30毫升水，將反應攪拌15分鐘，然後添加曱胺。之後將反應攪拌2小時，然後以乙酸乙酯 59 200902010 萃取三次，合併有機層並在硫酸鈉上乾燥，然後濃縮。產物卻認為2-胺基-6-氟曱基苯甲醯胺(365毫克，2.4毫莫耳，86%產率）。MS : M(C8H9FN20)=168.17，（Μ+Η)+ = 169.3· 中間產物26 2-胺基-6-氟-ΛΚ1-曱基乙基）笨曱醯胺

2-胺基-6-氟-7V-(1-曱基乙基）苯曱醯胺大體上依製備中間產物25所述之方法，由5-氟-2if-3，l-苯并噚畊-2,4(li/)-ίο 二酮及異丙基胺製備。MS : (M+H)+= 197. 中間產物27 2-「(2,5-二氣-4-嘧啶基)胺基1-4,5-二氟苯甲醯胺

15 將圓底燒瓶裝填2,4,5-三氯嘧啶（1.17克，6.4毫莫耳）、 2-胺基-4,5-二氟苯曱醯胺（1.0克，5.8毫莫耳）、二-異丙基-乙胺(5.06毫升，29.0毫莫耳)及50毫升異丙醇。將燒瓶裝上回流冷凝器，且將反應加熱至回流並擾拌18小時，白色 60 200902010 固體出現於反應混合物中。將反應冷卻至室溫，在真空中移除三分之一體積，並將固體濾除且以異丙醇清洗。乾燥後，白色固體（1.45克，4.5毫莫耳，78%產率)確認為2-[(2,5-二氯-4-嘧啶基）胺基]-4,5-二氟苯曱醯胺。MS : M(CnH6Cl2F2N4O)=319.10 » (M+H) + =319.2. 中間產物28-31 下列2-[(2,5-二氯-4-嘧啶基）胺基]-氟苯甲醯胺化合物依中間產物27之方法，由對應之2-胺基氟苯甲醯胺及2,4,5-1〇三氯嘧啶製備。

實施例103-107 下列2-{[5-氯-2-(經取代苯基胺基）-4-σ密σ定基]胺 15 基}-4,5-二氟苯曱醯胺化合物大體上依製備實施例1所述之 61 200902010 方法’由對應之2-{(2,5-二氣-4-'1密11定基)胺基]-4,5-二氣-苯甲醯胺中間產物27及對應之苯胺製備。

實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 103 459 104 v_v 489 105 、 474 106 όατ 488 107 468 5 實施例108-116 下列2-{[5-氯-2-(經取代苯基胺基）-4-嘧啶基]胺基}-4,5-二氟甲基苯曱醯胺化合物大體上依製備實施例1 所述之方法，由對應之2-[(2,5-二氯-4-嘧啶基)胺基]-4,5-二氟曱基苯曱醯胺中間產物29及對應苯胺製備。 62 200902010

、NH

F F 實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 實施例編號芳基(Aryl) Mass (Μ+Η)+ 108 、、 503 109 〇-〇- 488 110 K'K Οίν_ 502 111 482 112 OCN〇 I 503 113 488 114 \ <Q^rO- /° 518 115 "'^5_νΟν_ 502 116 …-Q-nCM 516 實施例117-119 下列2-{[5-氯-2-(經取代苯基胺基）-4-嘧啶基]胺基}-6-5 氟苯曱醯胺化合物大體上依製備實施例1所述之方法，由對應之2-[(2,5-二氯-4-嘧啶基)胺基]-6-氟苯曱醯胺中間產物 63 200902010 28及對應苯胺製備。

實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 117 441 118 、 \=/ 471 119 、〇Όν~ —-----^ 456 眚施例120-127 下列2-{[5-氯-2-(經取代苯基胺基)-4-嘧啶基]胺基}_6_ 氟-iV-甲基苯甲醯胺化合物大體上依製備實施例1所述之方法，由對應之2-[(2,5-二氯-4-嘧啶基）胺基]各氟專甲基笨甲醯胺中間產物30及對應苯胺製備。 C!

64 200902010 實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 120 ^-Ν 0 \/ 485 121 \ 470 122 'b-b- 484 123 470 124 499 125 〇-〇- /° 500 126 ch3 484 127 …ΟΌ5 457 實施例128-134 5 下列2-{[5-氯-2-(經取代苯基胺基)-4-σ密σ定基]胺基]-6-氟-JV-異丙基苯甲醯胺化合物大體上依製備實施例1所述之方法，由對應之2-[(2,5-二氯-4-嘧啶基)胺基]-6-氟-ΛΑ-異丙基苯曱醯胺中間產物31及對應苯胺製備。

65 200902010 實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 128 〇-nwn~ 512 129 485 130 527 131 0~VN^N-\/ 526 132 498 133 0~Vvn_ 498 134 512 . 中間產物32 5 2-胺基-5-氟笨甲醯胺 NH,

Ο Η 將圓底燒瓶裝填含5-氟鄰胺苯曱酸(3克，19.34毫莫耳) 之四氫呋喃（64.5毫升），並於室溫逐滴添加20%含光氣（11.2 毫升，21.3毫莫耳)之曱苯溶液。混合物於室溫攪拌18小 ίο 時，然後冷卻至〇°C，在此時小心添加濃縮氫氧化銨(27.9 毫升，193毫莫耳），之後將混合物溫熱至室溫，然後攪拌1 小時。有機相以EtOAc稀釋，以磷酸氫二鈉及鹽水清洗，然後於硫酸鈉上乾燥，並濃縮而獲得白色固體(2.46克，82% 66 200902010 產率）。MS : M(C7H7FN2〇)=i54.14，（M+H-NH3)+= 138. 中間產物33 2-胺基-4-氣-TV·曱基笨曱酿脸

將微波爐小玻璃瓶裝填7_氟苯并呤__2,4(ih 二酮(750毫克，4.14毫莫耳)及甲基胺4〇%水溶液U98毫升，22.8毫莫耳，5.5 eq) ’將反應攪拌並於微波爐於11〇。= 加熱6分鐘。水溶液以二氣曱烷(3x)萃取，合併有機層並以 5% NaHC〇3溶液及鹽水清洗，於硫酸鈉上乾燥，然後濃縮而獲付淡貫色油狀物’其不再進一步純化而使用（々Μ毫克，62%產率）。MS : M(C8H9FN20)=168.17，= 及(M+H-NHMe)+ = 138· 中間產物34 2-「(2,5-二氯-4-嘧啶某）胺基1—5-氟苯甲^^ C!

F 2〇毫莫耳）、2_ 二-異丙基-乙胺將容器裝填2,4,5-三氣嘧啶(2_29毫升，胺基-5-二氟苯甲酸胺（154克，10亳莫耳）、 67 200902010 (7.43毫升，425毫莫耳)及33毫升異丙醇。將容器密封並於95°C攪拌加熱36小時，反應混合物中出現白色固體。將反應冷卻至室溫，並將固體濾除且以異丙醇清洗，之後以 Et20。乾燥後，白色固體(2.36克，78%產率）石霍認為2-[(2,5-二氯-4-嘧啶基）胺基]-5-氟苯甲醯胺。MS : M(CnH7Cl2FN4〇)=301.10 > (M+H)+-301,303,305. 中間產物35-37 下列2-[(2,5-二氯-4-嘧啶基）胺基]-氟苯甲醯胺化合物 1〇大體上依製備實施例1所述之方法，由對應之2-胺基氟苯甲醯胺及2,4,5-三氯嘧啶製備。

實施例135-137 68 200902010 下列2-{[5-氯-2-(芳基胺基)-4-嘧啶基]胺基}-4-氟-TV-甲基苯甲醯胺化合物大體上依製備實施例1所述之方法，由對應之2-[(2,5-二氯-4-嘧啶基）胺基]-4-氟-尽曱基苯甲醯胺中間產物36及對應之苯胺製備。

、NH 實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ ch3 135 484,485,486,487 136 '、 W Vnw° 465,487 137 484,486

實施例138-140 下列2-{[5-氯-2-(芳基胺基)-4-嘧啶基]胺基}-5-氟苯曱 ίο 醯胺化合物依實施例1之方法，由對應之2-[(2,5-二氯-4- 嘧啶基)胺基]-5-氟苯曱醯胺中間產物34及對應苯胺製備。 69 200902010 NH2

I

Aryl 實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 138 \〇ΓΝ〇 441,443 139 \_f 471,473 140 484,486 實施例141 5_>臭_2_「(5_亂_2-{「3_(l_p比洛口定基曱基)笨基1月安基}_4_口密口定基) 胺基1笨甲醯胺

5-溴-2-[(5-氯-2-{[3-(l-吼咯啶基曱基）苯基]胺基}-4-嘧啶基)胺基]苯甲醯胺大體上依製備實施例1所述之方法，經由將5 ->臭-2-[(2,5-二氣-4-^密σ定基)胺基]苯甲酸胺（中間產物 70 200902010 37)與3-吡咯啶基曱基苯胺接觸而製備。Mass (M+H)+ = 501,503,505 實施例142-144 下列2-{[5-氣-2-(芳基胺基)-4-嘧啶基]胺基}-4-氟苯甲醒胺化合物大體上依製備實施例1所述之方法，由對應之 2-[(2,5-二氯_4_嘧啶基)胺基]-4-氟苯甲醯胺（中間產物35)及對應苯胺製備。

實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 142 ch3 470,472 143 <Q~rO- /° 471,473 144 484, 486 中間產物@ 氯-4-嘧嘧某）胺基m2-羥基乙某）苯甲醯胺

71 200902010 將圓底燒瓶裝填2,4-二氣-5-氟喷咬(3.0克，0.018莫耳）、2-胺基-#-(2-羥基乙基）苯甲醯胺(3·3克，〇〇18莫耳）、二-異丙基乙胺(3.7毫升，0.021莫耳)及50毫升異丙醇。將燒瓶裝上回流冷凝器’且將反應加熱至回流並攪拌18小時，白色固體出現於反應混合物中。將反應冷卻至室溫，並將固體滤出且以異丙醇及醚清洗。乾燥後，白色固體(5 〇9 克’ 88%產率)確認為2-[(2-氯-5-|t-4-e密咬基)胺基]_尽(2_經基乙基）苯甲醯胺。實施例145 2-{「5-鼠-2-({3-「2-(4-嗎琳基）乙基1茉基丨胺某）密咬基1胺基}羥基乙基）茉甲醯胺

HCT

xrtr^ 〇 15 將2-{(2-氣-5-氟-4-續u定基）胺基]_尽(2_經基乙基）苯曱醯胺(500毫克’ 1.61毫莫耳)及3-(嗎啉基乙基）苯胺(352毫克，1.61毫莫耳)與30毫升異丙醇及12NHC1(134微升，1.60 毫莫耳）混合於試管中。將容器密封，並於90°C加熱攪拌18 小時。將反應冷卻至室溫，並將固體濾除，且以異丙醇及醚清洗’獲得550毫克(71%產率）白色固體之HC1鹽。LC/MS (M+H)+ 480, 481. 實施例146-153 72 20 200902010 下列2-{[5-氟-2-(芳基胺基)-4-嘧啶基]胺基}-Λ42-羥基乙基）苯甲醯胺化合物大體上依製備實施例145所述之方法，由對應之2-[(2-氯-5-氟-4-嘧啶基)胺基]-#-(2-羥基乙基) 苯甲醯胺（中間產物38)及對應苯胺製備。

5 f 實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 實施例編號芳基(Aryl) Mass (Μ+Η)+ 146 h3c 479, 480 147 、、、、QrO 465,466 148 494, 495 149 466, 467 150 、尸 496,497 151 494, 495 152 480,481 153 ~~)Ν— H3C 480,481 中間產物39 乙基2-「(2,5-二氣-4-嘧啶基)胺基1笨曱酸酯 73 200902010

將圓底燒瓶裝填2,4,5-三氯嘧啶(5毫升，43.6毫莫耳）、乙基2-胺基苯曱酸酯（7.6克，46.0毫莫耳）、二-異丙基-乙胺（8.3毫升’ 48.0毫莫耳）及乙醇(6〇毫升;）。將燒瓶裝上回 J 流冷凝器，且將反應加熱至回流並擾拌18小時，白色固體出現於反應混合物中。將反應冷卻至室溫，並將固體濾出且以乙醇（100毫升）、乙醇/己烷（1 : 1，200毫升)及己烷(200 毫升）清洗，產生白色固體之產物（10.2克，32.7毫莫耳，75% 產率）。MS : MCCnHuChNsOjyn.lS，（Μ+Η)+=312·0 及 1-0 314.0。中間產物40 氯-2-{『3-(4-甲基^1-。辰畊基)笨基1胺基卜4-啼胺基甲醢酯

乙基2-[(2,5-二氯-4-嘧啶基)胺基]苯甲酸酯（ι〇·2克 200902010 32.8毫莫耳)及3-(4-曱基-1-哌畊基)苯胺(6.6克，34.4毫莫耳)與乙醇(200毫升)及濃HC1(3.2毫升，38.4毫莫耳，12N) 混合於容器中。將容器密封，並於95°C加熱攪拌24小時。將反應冷卻至室溫並倒入水（1.3升）中，水層以乙酸乙酯（2 5 X 250毫升）萃取，並經緩慢添加6NNaOH中和至PH7。將沉澱之固體濾出並以水及***清洗，產生棕色產物（15.0 克，98%產率）。MS: M(C24H27ClN6〇2)=466.97 ’（M+H)=467.2 及 469.2. 10 中間產物41 -乙基2-{[~5-氣-2-({3-「2-(4-嗎淋基）乙基1笨基}胺某）_4-痛难基1胺某丨芏甲醢酯

CI

〇將乙基2-{(2,5-二氯-4-嘧啶基)胺基]笨曱酸酯（8.9克， 28·5毫莫耳)及3-{2-(4-嗎σ林基）乙基]苯胺(6.2克，30.0毫莫耳）與乙醇(200毫升)及濃HC1(2.75毫升，33.0毫莫耳，12Ν) 混合於容器中，將容器密封，並於95°C加熱攪拌24小時。將反應冷卻至室溫並過濾，固體以乙醇清洗，之後以己燒清洗’然後乾燥而產生8克產物’其含有殘留（〜1 〇〇/〇)之乙基2-[(2,5-二氣-4-嘧啶基)胺基]苯曱酸酯。將部份粗產物(6 75 200902010 克)分佈於乙酸乙酯（100毫升)與1NHC1(150毫升)之間，有機層以1NHC1萃取，並將合併之水層於冰浴中冷卻，並以逐滴添加50% NaOH而鹼化至PH 9-10，保持溫度低於 i〇°c。收集沉澱之固體，以水清洗並在真空中於p2〇5上乾煉’以提供乙基2-{[5_氯-2_({3_[2_(4-嗎琳基）乙基]苯基}胺基)-4-,啶基]胺基}苯曱酸酯之灰白色固體(4 7克）。MS : M(C25H28C1N503)=481.98，（M+H) + =482.2 及 484.2. 實施例154 2-『(乏二氯-2-丨「3-(4-曱基—-1-哌畊某）苯基胺某n嘧冷芊）奸基1-~^~|~(18)-2-輕某_1-曱基乙基1菜甲酿胺

將乙基2-{(5-氯-2-{[3-(4-曱基-i_派〇井基)苯基]胺基}_4_ 鳴咬基)胺基]苯曱酸酯（150毫克，0.32毫莫耳)及(2S)-2-胺基-1-丙醇(0.5毫升）混合於容器中，將其密封，並於95。〇加熱擾拌18小時。將反應冷卻至室溫並將固體遽除且以乙醇 /水（1 : 1比例）及***清洗’產生白色固體之產物（82毫克， 52%產率）。MS : M(C25H30ClN7O2)=496.01 ’（M+H) + =496.2 及 498.2. 76 20 200902010 實施例155-161 下列2-[(5-氯-2-{[3-(4-曱基-1-哌畊基)苯基]胺基}-4-嘧啶基）胺基]-A4經取代]苯曱醯胺化合物大體上依製備實施例154所述之方法，由乙基2-[(5-氯-2-{[3-(4-曱基-1-哌畊基）苯基]胺基}-4-嘧啶基）胺基]苯甲酸酯及對應之胺基醇製備0

實施例編號 R Mass (Μ+Η)+ 實施例編號 R Mass (M+H)+ 155 HO. ， NT 1 Η 496, 498 156 丫 Η〇、人 1 Η 524, 526 157 1 Η 158 Η 510,512 159 HO. 510,512 160 HOw 1 Η 496, 498 161 Η°Υ-Ν- 1 Η 496,498 77 200902010 實施例162-176 下列經取代2-{[5-氯-2-({3-[2-(4-嗎啉基）乙基]苯基}胺基)-4-嘧啶基]胺基}苯曱醯胺化合物大體上依製備實施例 154所述之方法，由乙基2-{[5-氯-2-({3-[2-(4-嗎啉基）乙基] 苯基}胺基)-4-嘧啶基]胺基}苯甲酸酯（中間產物41)及對應之胺基醇製備。

實施例編號 R Mass (Μ+Η)+ 實施例編號 R Mass (Μ+Η)+ 162 α. Η 507.2, 509.2 163 Η0^ν- \ Η 510.8,512.8 164 \ Η 510.8,512.8 165 Η 522.8, 524.8 166 Vo Η 537.2, 539.2 167 522.8, 524.8 168 536.8,538.8 169 y, ΗΟ^/'^Ν Η 552.8, 554.8 78 200902010 中間產物42 乙基2-|"(2-氯-5-氣-4-11密0定基)胺基1苯曱酸酉旨

170 十 1 Η 552.8, 554.8 171 人 1 Η 552.8, 554.8 172 Λ HO人， 1 Η 552.8, 554.8 173 η〇、Λν， * Η 538.8, 540,8 174 HO^C〆 I Η 538.8, 540.8 175 h〇JXn， 1 Η 536.8, 538.8 176 Η 539.2, 540.2, 541.2, 542.2 5 將圓底燒瓶裝填2,4-二氯-5-氟嘧啶(2.5克，15毫莫耳）、乙基2-胺基苯曱酸酯（4.9克，30毫莫耳）、#，#-二異丙基乙胺(5.2毫升，3.9克，30毫莫耳)及異丙醇(50毫升），將燒瓶裝上回流冷凝器，且將混合物加熱至回流並攪拌18 小時。將反應混合物冷卻至室溫後出現沉澱，收集固體並 10 以異丙醇少量清洗，然後以***大量清洗，產生標題化合 79 200902010 物之白色固體；產率1.8克（4i〇/0)。MS : M(C13H13ClFN3O2)=295.70 (Μ+Η) + =296·0 及 298.0. 中間產物43 .5 ^基2-「(5_氣-2_{f3-(4-曱基-1-^ρ井基基胺某卜4_ρ密—咬基) 胺基1笨曱酸酿_ 將乙基2-[(2-氣-5-氟-4-嘧啶基）胺基]苯甲酸酯（1 〇克’ 3.4晕莫耳）、3-(4-曱基-1-α底σ井基)苯胺(0.65克，3.4毫莫耳）、乙醇(45毫升)及6NHC1(1.5毫升，8.8毫莫耳)於反 10 應容器中攪拌加熱，將其密封，並於95°C加熱攪拌24小時。將反應混合物冷卻至室溫，倒入水中，以乙酸乙酯萃取，並經緩慢添加6NNaOH中和至pH 7。燒結玻璃漏斗上收集所產生之沉澱物，並以水及***清洗，產生標題化合物之掠色固體；產率 1.0 克(65%)。MS ·· M(C24H27FN6O2)=450.52 15 (M+H) + =451.2. 實施例177 (370-1-((2-((5-氟-2-(「3-(4^ 基七哌畊基）苯AM基！啶某)胺基1笨基}羰某ν3-°^&Ιί

將乙基2-{{5·氟-2-({3-[2-(4-嗎啉基）乙基]苯基}胺基）-4-嘧啶基]胺基}苯曱酸酯（0.25克，0.55毫莫耳）及 200902010 (R)-(+)-3-«比咯烷醇毫升，（1毫升）混合於試管中，將其密封，並於125°C加熱攪拌18小時。將反應冷卻至室溫，並添加乙酸乙酯至殘餘物中，產生淡灰色固體；產率0.15克 (55%)。自Me0H/H20中再結晶，產生標題化合物之棕色固體(25 毫克）。MS : M(C26H30FN702)=491.57 (M+H) + =492.2. 中間產物44 乙基氣-5-曱基-4-口密咬基）月安基1笨曱酉复酉旨〇

产〇众， 10 將2,4-二氣-5-曱基嘧啶(28.1克，4172毫莫耳）、乙基2- 胺基苯曱酸酯（26.7毫升，181毫莫耳）、二異丙基乙胺(33 毫升，190毫莫耳)及乙醇(200毫升）一起混合，然後均分並置於二個350毫升之壓力容器中。加蓋並加熱至130°C三日。冷卻至室溫，收集沉澱產物並以乙醇清洗，之後以己 15 烷清洗，然後乾燥，獲得4.5克(9%)乙基2-[(2-氯-5-曱基-4- 嘧啶基）胺基]苯曱酸酯之灰白色固體。MS : M(C14H14C1N302)=291.7，（Μ+Η)+ = 292·2 及 294.2. 中間產物45 2〇乙基2-Π5-曱基-2-(B-『2-(4-嗎啉基）乙基1笨基}胺基V4-嘧啶基1胺基丨笨甲酸酯 81 200902010 Ο 將乙基2-[(2-氯-4-嘧啶基-5-甲基）胺基]苯甲酸酯（200 毫克，0.69毫莫耳)及3-[2-(4-嗎啉基）乙基]苯胺（141毫克， 0.69毫莫耳)與異丙醇(5毫升)及6NHC1(0.2毫升，1.2毫莫耳）混合於容器中。將容器密封，並於9〇。〇加熱攪拌18小日^。將反應冷卻至室溫並蒸發。將殘餘物分佈於乙酸乙酯（1〇宅升)與碳酸氫鈉（10毫升)之間。有機層以鹽水清洗，於硫 10

酸鎂上乾燥’過濾、並蒸發，提供標題化合物之淡黃色固體 (300 毫克）。MS ·· M(C26H3iN5〇3)=461 56，（m+h)=462 2 實施例178

〇將乙基 2-{[5-曱基-2-mM i d « z U3-[2-(4-嗎啉基）乙基]苯基}胺基定基]胺基}苯甲酸則35毫克，〇29毫莫耳)及 (R)-(+)-3-。比°各烧醇（0.23 毫并，n9Q 宜 & 宅升，0.29氅莫耳)與二噚烷(1毫 82 15 200902010 升）混合於谷益中。將容器密封，並於時。將反應冷卻至室溫並蒸發，將殘餘物分佈毫升)與水(10毫升)之間。有機層以趟、乙酉文乙酉曰（10 乾燥，過餘蒸發。於硫酸鎮上使用正相HPLC以二氯甲燒/曱醇/氫氧化銨(9⑴〇: 0称U) M)之梯度純化殘餘物，產生游離驗之產物。溶於 MeOH，之後添加濃HC1(過量），並蒸發之二鹽酸鹽(標色固體，65毫克，45%產率）。_: M(C28H34N6O3)=502.62，（M+H) + =5〇3 2 實施例179 乙某设甚丨脸其^ 货P疋基1胺基丨本基）幾基1·3•吨 Π

ΗΟ<·. 15 將乙基2_{[5-曱基_2_({3_[2_(4_嗎乙基)-4寺定基]胺基}苯曱動旨（135亳克二“莫^ ⑻-(+)冬鱗°定醇㈣毫升仙亳莫耳)與）f燒α亳升）混合於容器中。將容器㈣，並於吹加熱勝18小時。將反應冷卻至室溫並紐，將_物分佈於乙酸㈣升)與水(1G毫升)之間。錢層㈣水清洗，於硫酸鎮 83 20 200902010 燥，過濾並蒸發。使用正相HPLC以二氣曱烷/曱醇/氫氧化銨（90 : 10 : 〇_9〇 : 10 : 1)之梯度純化殘餘物，產生游離鹼之產物。溶於MeOH，之後添加濃HC1(過量），並蒸發而獲得標題化合物之二鹽酸鹽(棕色固體’ 65毫克，45%產率）。 MS : M(C28H34N6〇3)=502.62，（M+H)+=503.2. 中間產物46 乙基2-「(5-艺盖-2_·[「3-(4-甲某-Ι-p辰ρ井基）策某1胺基密〇空基)胺基1笨甲

將乙基2-[(2-氯-4-嘧啶基-5-曱基）胺基]苯曱酸酯（2〇〇毫克’ 0.69毫莫耳)及3-(4-曱基-1-哌畊基)苯胺（132毫克， 0.69毫莫耳)與異丙醇(2毫升)及6NHC1(0.2毫升，1.2毫莫耳)混合於容器中。將容器密封，並於90°C加熱攪拌18小 15 時。將反應冷卻至室溫並蒸發，將殘餘物分佈於乙酸乙酯（1〇毫升)與碳酸氫鈉（10毫升)之間。有機層以鹽水清洗，於硫酸鎂上乾燥’過濾並蒸發，提供乙基2-{[5-甲基-2-({3-[2-(；4-嗎琳基）乙基]本基}胺基)-4-。密。定基]胺基}苯曱酸g旨之淡黃色固體(280 毫克）；產率 MS ·· M(C25H30N6O2)=446.55，（M+H) 2〇 +=447.2. 84 200902010 實施例180

O' 將乙基2-[(5-甲基-2j[3_(4_ 10 基}-4-嘧啶基）胺基]苯曱酸§旨（丨％甲f-1-°辰畊基）苯基]胺 ⑻-(+)-3-吼咯烷醇(0.65毫升宅克，0.27毫莫耳）及中，將其密封，並於125¾加熱俨用作為溶劑）混合於容器至室溫並蒸發，將殘餘物分佈於18小時。將反應冷卻毫升)之間。有機層以鹽水清洗、，乙酯（1〇毫升)與水（10 蒸發。使用正相HPLC以：氯ψ於硫_上乾燥，過濾、並 "0 : 1〇 : ”之梯度純化殘餘物，產生標==上0色固體；產率 63 毫克(48%)。（MS : m(c27h33n7o2) 487.60 , (M+H) + =488.2. 15 實施例181 (3幻-1-Π2-ΙΪ5-甲某嘧啶基)胺基1茉某丨羰基 85 200902010

將乙基2-[(5-甲基_2_ {[3_(4_曱基小旅σ井基）苯基]胺基 -4-嘧啶基）胺基]苯甲酸酯（12〇毫克，〇27毫莫耳）及 0)-(+)-3-吡咯烷醇(0.65亳升，使用作為溶劑）混合於容器中，將其密封，並於125。(：加熱攪拌18小時。將反應冷卻至室溫並洛發’將殘餘物分佈於乙酸乙酯（1()毫升）與水（1〇 t升)之間。有機層以鹽水清洗，於硫酸鎂上乾燥，過濾並蒸發。使用正相HPLC以二氯曱烷/曱醇/氫氧化銨（9〇: 10: 0-90 : 10 : 1)之梯度純化殘餘物，產生標題化合物之灰白色固體；產率 98 毫克(75%)。MS : M(C27H33N7O2)=487.60， (M+H) + =488.2. 實施例182-183 下列2-{[5-氟-2-(經取代苯基胺基）_4-嘧啶基]胺基}-尽(1-曱基乙基）苯甲醯胺化合物大體上依實施例1所示之方法’由2-[(2-氣·5-氟-4-嘧啶基）胺基]善(1-曱基乙基) 苯曱醒胺及對應苯胺製備，經由過濾或蒸發反應混合物分離產物’並以預備性HPLC純化。 86 200902010

實施例184 5 -氟笨基 1 碚篡 .5 實施例編5虎芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 182 b ^ 492,493 183 \ o^P 0 492,493 幾基）苯基1-2,4-痛。定三月安

^0〇將乙基2- U5H( {3_[2各嗎淋基）乙基]苯基}胺基H-射基]胺基}笨曱酸g旨(2〇〇毫克，〇51毫莫耳)及硫基嗎淋(2毫升)於120 C加熱48小時。將反應混合物在真空下 /辰縮至乾爍，並將彳示題化合物於;g夕凝膠上以驟層析（使用含 0.1%三乙胺之乙酸乙酯）純化。MS : M(C27H31FN602S)= 522.2 » (M+H)+ = 523. 87 10 200902010 實施例185 ，1 -二氧化-4-石荒基嗎。林基）祿基"1笨基}-5-亂 -妒-丨3-「2-(4-嗎啉基）乙基1苯基丨-2,4-嘧啶二胺

5 將5-氟-妒-{3-[2-(4-嗎啉基）乙基]苯基}-#-[2-(4-硫基嗎啉基羰基）苯基]-2,4-嘧啶二胺（100毫克，0.19毫莫耳)溶於5毫升THF及5毫升甲醇中，並以含OXONE®試劑（15 當量）之5毫升水之溶液處理。系統於室溫攪拌48小時，然後過濾並濃縮至乾燥。殘餘物固定於矽凝膠上，並在矽凝 ίο 膠上，使用100% A至90% A-10%B之梯度以驟層析純化，其中“A”為氯仿，且“B”為10:90:1甲醇-氯仿-濃氫氧化銨水溶液）。分離標題化合物並定性。MS : M(C27H31FN604S)=554.2，（Μ+Η)+=555· 15 實施例186 2-·{Τ5 -氣-2-({3-「2-(4-嗎琳基）乙基1笨基}月安基)-4-口密口定基1胺基曱基硫基）乙基1苯甲醯胺 88 200902010

將乙基2-{[5-氟-2-({3-[2-(4-嗎啉基）乙基]苯基}胺基)-4-嘧啶基]胺基}苯曱酸酯(200毫克，0.51毫莫耳)及2-(曱基硫基）乙胺(2毫升)於120°C加熱48小時。將反應混合物 5 在真空下濃縮至乾燥，並將標題化合物於矽凝膠上以驟層析（使用含0.1%三乙胺之乙酸乙酯）純化。MS : M(C26H31FN602S) = 510.2，（M+H)+ = 511. • 實施例187及188 ίο 2-{「5-氟-2-q3-f2-(4-嗎啉基）乙基1茉基}胺基M-嘧啶基1胺基甲基亞磺醯基）乙基1苯甲醯胺 200902010 啉基）乙某1笨基}胺基)-4-嘧咬基1胳基^醯基）乙篡1苯甲醯眩

將2-{[S氟-2-({3-[2-(4-嗎啉基）乙基]苯基}胺基)_4_嘧，基]胺基丨赛/"2-(曱基硫基）乙基]苯曱醯胺(1〇〇毫克，〇2〇笔莫耳)溶於5亳升THF及5毫升甲醇中，並以含οχοΝΕ® a式劑（登记商標為DuP〇nt，15當量）之5毫升水之溶液處理。系統於室溫攪拌48小時，然後過濾並濃縮至乾燥。殘餘物固定於石夕凝膠上，使用1〇〇% A至9〇〇/0 A-10% B之梯度以矽凝膠層析純化，其中“A”為氯仿，且‘汜”為丨〇 : 9〇 : 1曱醇-氣仿-濃氫氧化銨水溶液）。分離標題化合物2-ΙΓ5-1. -2-({j.:.f2-(4-嗎淋基）乙某1笨基}胺基）·4_嘴η定某1胺基卜iV-「2-(曱基亞績醯基）乙基1笨甲醯胺（實施例丨87)及 2-{「5-氟-2-({3-「2-(4-嗎4木基）乙某1茉基}胺基)_4-。密咬基~|胺某}-7V~「2-(曱基石黃酿基）乙某1笨曱酿胺_，並定性。實施例 187MS : M(C26H31FN603S)=526.2，（M+H)+=527. 實施例 188 MS : M(C26H31FN604S)=542.2，（M+H)=543. 90 200902010 眚施例189-190 下列2-{[5-溴-2-(經取代苯基胺基χ嘧σ定基]胺基}善(1-甲基丙基)苯曱醯胺化合物大體上依製傷實施例【所述之方法，由2-[(5-溴-2-氯-4-嘧啶基)胺基]甲基丙基）苯曱醯胺及對應苯胺製備。經由過濾或蒸發反應混合物分離產物，並以預備性HPLC純化。 σ

實施例編號芳基(Aryl) Mass (M+H)+ 實施例編號芳基(Aryl) Mass fM+HH 189 553,555 190 Xu) 521,523 土間產物147 ΜΚ4-硝基装某）甲某1硇某}乙廳 ο2ν iXs 將β-氫硫基乙醇(3.3毫升’ 47·2毫莫耳)添加至含4_硝基笨曱基溴（10.0克，46.3毫莫耳）、K2C03(16.1克，116.5 毫莫耳）、KI(154毫克’ 0.9毫莫耳）、及18-冠-6(258毫克， 1.0毫莫耳)之丙酮（105毫升）懸浮物中，將混合物在Ν2下回流1.5小時’冷卻至室溫，經塞里塑料墊過濾，並於真空中 91 200902010 濃縮。將濾液倒入水(100毫升）中並以Et20(2 X 100毫升）萃取。萃取物以鹽水（150毫升）清洗，於Na2S04上乾燥，過濾並於真空中濃縮，獲得橘色油狀物（11.78克），其不再純化而使用於下一步驟。MS: MCCpHi 3〇38)=213.26，（M-OH) = 196.0. 中間產物148 2-(「(4-硝基笨基）甲基1磺醯基}乙醇

將含2-{[(4-硝基苯基）曱基]硫基}乙醇（中間產物147， . 11.78克，46.3毫莫耳，理論值)之CH2C12(200毫升）溶液添加至含m-氯苯曱酸(49.2克，213.8毫莫耳)之CH2C12 (500 毫升）溶液之容器中。混合物於室溫攪拌1.5小時v然後轉換至分液漏斗，並連續以Na2S03(2 X 500毫升）飽和水溶 ^ 液、NaHC03(2 X 500毫升)飽和水溶液、及水（1 x400毫升) 清洗。然後將有機相於Na2S04上乾燥，過濾，並真空中濃縮，獲得白色固體(7.77克），其不再純化而使用於下一步驟。MS : 1^((^1^1^058)=245.25，（M+Na)+=268.0. 20 中間產物149 胺基笨基）曱基1磺醯基}乙醇

OH 92 200902010 將含2-{{(4-確基笨基）曱基]磺醯基}乙醇（中間產物 148 ’ 7.64克’ 46.3亳莫耳理論上)及1〇 wt%pd/C(：788毫克) 之MeOH懸浮液在H2氣壓下於室溫攪拌2小時，然後經塞里塑料塾過濾、’據液於真空中濃縮，並將橘色殘餘物自 MeOH/E^O再結晶’獲得所欲產物之淡黃色結晶（3 65克， 17.0毫莫耳’37%’3步驟期間）。]^8:]^((：911131^〇33)215.27, (M+H)+=216.0. 中間產物150 l-gg-氟-2-「(4-{K2_Ij^^乙基)磺醯某1甲基}茉某）脸甚玄羞_}胺基)-#-(1-甲基乙某、苯甲醯胺

將含2-{(2-氯-5-氟-4-嘧啶基)胺基]善(1-曱基乙基）苯甲蕴胺（1.557克’ 5.04毫莫耳）、中間產物149(2-{[(4-胺基 15 苯基）甲基]磺醯基}乙醇，1.085克，5.04毫莫耳）、異丙醇(2〇毫升）、及6 M aq. HC1(0.1毫升)混合物於容器中擾拌，將其密封’並於110°C加熱攪拌21小時。將混合物冷卻，並以真空過濾收集沉澱物，獲得所欲產物之棕色固體(2 〇1克， 4·12 毫莫耳 ’ 82%)。MS : M(C23H26FN504S)=487.55，（M+H) + =488.2. 93 20 200902010 中間產物151 2-{|~2-({4-「（乙烯基苯基道基)_5_直^4“密啶纪胺基} -iV-( 1 -甲基乙基）笨·甲酿脸

J 將含中間產物150(2-({5-氟-2-[(4-{[(2-羥基乙基)磺醯基]曱基}苯基）胺基]-4“密。定基}胺基)善(1-甲基乙基）苯甲 &&胺’ 310毫克’ 0.64毫莫耳)之CH；2C12(6毫升）懸浮液在 N2下冷卻至0°C。添加三乙胺(0.35毫升，2.51亳莫耳），之後逐滴添加甲烧續醯基氣（100微升，1.29毫莫耳）。混合物 10 於〇 C Ν'2下授拌45分鐘。然後倒入水(2〇毫升）中，旅以 90/10 CHfh/IPA (2 X 2〇毫升）萃取。合併之萃取物以 NaHCC^l X 20毫升)飽合水溶液及鹽水(1 x 20毫升)清洗，於NajO4上乾燥，過濾，並於真空中濃縮，獲得所欲產物之黃色固體(330毫克，ca. 80%純度），其不再純化而使用於 15 下一步驟。MS : M(C23H24FN5〇3S)=469.54 ’（]VI+h)+ = 470.2· 實施例191 2-Κ2-{「4-({「2-(乙基胺基）乙基1磺醯基i甲&笨基1胺基^ 氟-4-嘧啶基)胺基mi-甲基乙基）茉甲醢 94 200902010

FtxNxrx^ Η 將乙基胺（1.8亳升，2.0M於Me〇H，3 6毫莫耳)及中間產物151(2-{[2-({4_[(乙烯基續酸基）曱基]苯基}胺基)_5· 氟-4♦定基]胺基}幕(1_甲基乙基)苯甲醯胺79毫克，〇 ΐ7 1耳)混合於容器中’並於室溫攪拌1小時，然後於真空中/辰縮至剩餘殘餘物。將殘餘物收取於具有數滴TFΑ之 MeOH，並以預備性逆相HpLC純化，獲得TFA鹽之標題化合物之白色固體(49毫克，〇.〇8毫莫耳，46%)。MS : M(C25H31FN603S)=514.62，（Μ+Η)+=515·2· 實施例192-197 151(乙烯 ’ I產物下列2-[(2-{[4-({|>(烧基胺基）乙基]石黃醯基} f基戌胺基氟-4-嘧啶基）胺基]善(1_曱基乙基）笨曱酿基] 物大體上依實施例191所示之方法，由中間產物〜似基砜)及適當胺製備。反應於MeOH或THF中進行以預備性逆相HPLC純化。

/Amine S； ^ 95 200902010 實施例編號胺(Amine) Mass (M+H)+ 實施例編號胺(Amine) Mass (M+H)+ 192 NEt2 543 193 NMe2 515 194 nh2 487 195 N-甲基哌啶基 570 196 嗎琳基 557 197 NHMe 501 實施例198 Κ(5-說-2-丨「4-(4-旅咬基）笨基1胺基^-4-鳴q定某）胺基甲基乙基）苯曱醯胺

將含2-[(2-氯-5-氟-4-嘧啶基）胺基]甲基乙基）笨甲酿胺(312毫克，1.01毫莫耳）、4-(4-旅咬基）苯胺鹽酸鹽 (213 毫克 ’ 1.00 毫莫耳）、及 6 M aq_ HC1(0.09 毫升，〇,54 亳莫耳)之異丙醇(4毫升)混合物於容器中加熱，將其密封，並於100°C加熱15小時。冷卻至室溫後，將混合物過濾，並於真空中將濾液濃縮，將殘餘物收取至90/10/1 CHAh/MeOH/NI^OH，並再次過濾並於真空中濃縮，然後以驟層析純化’以 CH2C12 至 90/10/1 CH2Cl2/MeOH/NH4OH 梯度洗提。將產物溶於MeOH，其中添加含4MHC1之二今燒’並將混合物於真空中濃縮，獲得實施例198之鹽酸鹽白色固體(78 毫克，0.16 毫莫耳，Mo/ohMSiMCChl^FNeO) 96 200902010 =448.54，（M+H) + =449.2. f 施例 199-201 下列2-{(5-鹵-2-{[4-(4-哌啶基）苯基]胺基丨_4_嘧啶基) 胺基(烧基）苯甲酿胺化合物大體上依製備實施例198所述之方法’由對應2-[(2-氯-5-鹵-4-°密咬基）胺基](烧基) 苯甲醯胺及4-(4-π底唆基）苯胺鹽酸鹽製備。以驟層析經 CH2C12 至 90/10/1 CH2Cl2/MeOH/NH4OH 梯度洗提或逆相 HPLC進行純化。〇

實施例編说烷基(Alkyl) X Mass (M+H) 199 z-Pr F 449 200 z-Pr Me 445 201 ho(ch2)2 F 451 實施例202 乙基4-((5-顧.·4小2-(「(1甲基乙基)胺基1羰基丨策基)胺某1J °密啶基}胺某甲酸酯 97 200902010

在含2-[(2-氯-5-氟-4-嘧啶基）胺基]曱基乙基）苯曱醯胺（1.0克，3.25毫莫耳)之異丙醇(30毫升)溶液中，添加乙基4-胺基苯曱酸酯（0.59克，3.57毫莫耳，1.1 eq)，之後添加0.2毫升12NHC1。反應混合物密封於容器中，並於 95°C油浴加熱16小時。將反應冷卻至室溫，然後有白色固體沉澱。過濾收集白色固體並以冷異丙醇清洗(3 X 5毫升），獲得標題化合物（1.1克，77%產率）。MS : M(C23H23FN503) = 437.47，（M+H) + =438。 10 實施例203 曱基乙基）笨

在含^基4-({5-氟-4-[(2-{[(l曱基乙基)胺基]羰基}苯基) 月女基]2笛疋基}胺基）苯甲酸酯（id?克，3 毫莫耳）之 τ卿〇毫升）溶液中，於〇ΐ緩慢添加㈣邮观溶液，3〇 98 200902010 eq)溶液。添加完成後，將反應混合物緩慢溫熱至室溫並授拌16小時。反應混合物以15毫升1.0 M Rochelle氏溶液浮媳，水相以EtOAc (2 X 30毫升）萃取’並將合併之有機相以鹽水(3 X 30毫升）清洗，然後於NazSO4上乾燥。蒸發溶 5 劑而產生固體，其以己烧(3 X 30毫升）清洗’然後於真空中，獲得所欲產物（1.15，87%產率）。MS : M(C21H22FN502) =395.44 ’（M+H) + =396 實施例204 ίο 2-({5-乱-2-「(4-甲酸基笨基）胺基1-4-哺咬基}胺某[-甲某乙基）笨曱醯胺

將一 50-mL圓底燒瓶裝填2-{(5-氟-2-{[4-(羥基曱基）苯基]胺基}-4-嘧啶基）胺基]曱基乙基）苯曱醯胺(2〇〇毫 15 克，〇.5毫莫耳，1.0 eq)及二畤烷(20毫升）。將Mn02(；217 毫克，2.5毫莫耳’ 5.0 eq)緩慢添加至此溶液，至添加完成，將反應混合物於回流加熱16小時。反應混合物經由塞里塑料過濾並將溶劑蒸發，產生所欲產物（189毫克，48%產率），其經 HPLC 獲得 82%純度。MS : M(C21H2〇FN502) =393.42， 2〇 (M+H)+=394。此粗製物質不經進一步純化而使用於下一步 99 200902010 膏施例205 醯基）乙某]脸其 5 基}_4_嘧唆基)嚴^L^Q-曱基乙某）草甲酼萨女

將2-({5-氟-2-[(4-甲醯基苯基）胺基]_4_嘧啶基基)-ΛΗ1-甲基乙基)苯曱醯胺(8〇毫克，〇·2亳莫耳，j 〇 e 〇(甲基磺醯基）乙基]胺（1〇0毫克，〇 6毫莫耳，3 〇及 10 CH2C12(2.0毫升）添加至容器中，將其密封並於室溫攪拌μ 小時。蒸發移除溶劑剩餘殘餘物。添加含NaBCNH4(37毫克’ 0.6毫莫耳’ 3.0 eq)之CH2Cl2(2 〇毫升)至殘餘物，= 將反應混合物於室溫攪拌直至反應大體上完成，以確認’最終產物以預備性HPLC純化，使用水(0.1%甲酸）； 15 乙腈(0.1%曱酸)為移動相。分離所欲之化合物為灰白色固體 (20 毫克，20%產率）。MS: M(C24H29FN603S) = 500.60，(M+H) + = 501. 會施例206-210 下列實施例大體上使用製備實施例205所述之方法製 100 20 200902010 實施例編號 R Mass (M+H)+ 206 、，ΟΗ 439 — 207 ό·% 501 丨， ----- 208 ό· '·0 531 ___- 209 ,____-—1 、，〇〆 453 備。中間產物152 (5i〇-5-曱基-1-(3-硝基苯基M-(三氟乙醯基)-2-哌畊酮

101 200902010

Et〇AC之己烷攪拌。收集固體並以溶劑清洗(30% EtOAc之

▲、Ί) 7〇笔升x 3。收集灰白色固體並以HPLC及1H NMR 1馭。於高真空乾燥固體隔夜，其產生灰白色固體 # -[(1及)么羥基小甲基乙基]_#_(3_硝基苯基）甘胺醯胺 5 =.65 克，62%產率）。MS : ^1((^^^04)=253.26(^1+11) + 2 5 4. 在含N2-[(lr)_2-羥基小曱基乙基基苯基）甘月女醯胺(2.0克’7 9毫莫耳)及三丁基膦(2 7毫升，15 8毫莫耳）之EtOAcQ〗毫升)溶液中，緩慢添加含二第三丁基偶氮二 1〇，§夂酉曰（3.6克’ 15.8毫莫耳)之EtOAc溶液10毫升。内部咖度維持於25°C至30〇C之間。反應進行HPLC，粗製物質以石夕凝私管柱層析純化(2%至5% MeOH之CH2C12)。分離化合物（5及)-5_甲基-1-(3-硝基苯基）·2-哌畊酮固體（690毫克 ’ 37%產率）。MS : m(CiiHi3N3〇3)=235 24 (μ+η)+=236 15 在含(5及)-5-曱基-1-(3-石肖基苯基)-2-°辰σ井酮(640毫克， 2.72毫莫耳)及Hunig鹼(0.56毫升’ 3.26毫莫耳）之CH2C12 溶液中，於〇。〇添加三氟乙酸酐。然後將反應混合物溫熱至室溫1小時。反應混合物分佈於水與ch2ci2之間。然後有機相以鹽水清洗’並於MgS〇4上乾燥。蒸發溶劑至乾燥， 20 其所獲得之標題產物不再進一步純化而使用於下一步驟。 MS ： M(CnH13N3〇3)= 235.24 (M+H)+ = 236. 將化合物（5i?)-5-曱基-1-(3-硝基苯基）_4-(三氟乙醯基)-2-哌畊酮(860毫克，2·6毫莫耳)溶於具有8毫克(1〇%重之SM)之10% Pd/C的20毫升曱醇。反應混合物經氮氣除 102 200902010 氣，然後裝上H2氣球隔夜，反應進行HPLC，Pd/C經塞里塑料過濾移除，並於高真空蒸發溶劑，其獲得標題產物(692 毫克，88%產率）。MS : M(C13H12F3N304)=331.25，（M+H) + =332. 5 實施例210 2-{「5-氣-2-({3-「(5i?)-5-曱基-2-嗣基-1- °辰 p井基 1 装甚;} 基)-4-嘧啶基1胺基丨-ΛΓ-Π-曱某乙某甲醯胺

10 在含2-[(2-氣-5-敗-4-喷唆基）胺基]甲基乙基）苯曱醯胺（100毫克，0.32毫莫耳)及(5及)_1_(3_胺基苯基)_5_曱基-4-(三氟乙醯基)-2-娘畊酮（147毫克，0.48毫莫耳）懸浮溶液中，添加2滴12NHC1。然後將反應混合物密封並於95<3(：油浴加熱16小時。反應進行lc/MS，將反應蒸發至乾燥， 15 然後將殘餘物溶於含LiOH(l.〇M溶液0.64毫升)之THF(1〇宅升）’反應混合物於50 C加熱3小時，之後於高真空中蒸發溶劑至乾燥，並將殘餘物裝填於矽凝膠管柱’並以含2 〇至9.0% MeOH(具有0.1% NH4〇H)之洗提然後將油自熱EtOH再結晶，產生純標題化合物(84亳克，55%)。 20 MS ： M(C25H28FN7〇2) =477.54 (M+H) + =478. 103 200902010 實施例211-212 下列實施例大體上使用製備實施例210所述之方法製備。

實施例編號 Ar Mass(M+H) + 211 k^NH 478 212 ΛΑ k^NH 478 【圖式簡單說明】無 10 【主要元件符號說明】益 104

Claims

200902010 十、申請專利範圍： 1. 一種下式所代表之化合物，

或其醫藥可接受性鹽類，其中各 R1 各自為 H、-(CH2)nN(R5)2、-0-(CH2)PN(R5)2、 C(0)N(R5)2、（CH2)nS〇2(NH)qR6、c〇〇h、CrC6-烷基、CrC6-燒氣基、CF3、鹵素、或CN ; 值’至少一 R1 為 _(CH2)n-N(R5)2、-0-(CH2)pN(R5)2、 C(〇)N(r5)2、（CH2)nS〇2(NH)qR6、或 COOH ; 11 為Ο、1。或3;p為2或3，q為0或l;r為1、2或3; s為0、1或2 ; R 為H、鹵素；CVC3-烷基、CrC3-烷氧基、CN、硝基、或 CF3 ; 3 σ 各自為Η、雜環烷基、環烷基、苯基、嗎啉基-CH2CH2-笨基或C1-C6-烷基，可選擇性經羥基、胺基、CrC6-烷基胺基、二烷基胺基、三氟甲基、四氫呋喃基、 °比^定基、或咪唑基取代；或各R3 —起與其所連接之氮形成一 5-或6-員環基，可選擇性 _經基、CVc6-烷基、羥基-CrC3-烷基、嗎啉基、 'C(0)CH3、二-Crc2-烷基胺基、或-c(o)nh2取代； 105 200902010 R4為鹵素、CrC3-烧基、或CrCr烧氧基；各R5各自為CrCV烧基、或-C(0)CH3,或一起與其所連接之氮形成一 5-或6-員環基，可選擇性經羥基、crC6-烷基、羥基-CrC3-烧基、嗎啉基、-C(0)CH3、二-CrC2-烧基胺基，或_C(0)NH2取代，且 R 為 Cl-C6-烧基、（R7)x-苯基 _(c(0))y-、或(R8)z_ 雜芳基 -(c(〇))y-，其中 X為 0、1、2或 3;z為〇、1或 2;v 為〇或 1 ; r7為_素、crcr烷基或crc3-烷氧基；及 r8為_素、crc3-烧基或crc3-烧氧基。 2.如申睛專利範圍第1項之化合物，或其醫藥可接受性鹽類，其為下式所代表：

其中R2為a、F或CH3，且R4為F或Η。其中一 R1為_(CH2)n_N(R5)2，且其他基。 :明專利圍第2項之化合物，或其醫藥可接受性鹽類且其他R1為H、曱基、或曱氧或其醫藥可接受性鹽類， Η、CH3、異丙基、或輕基如申請專利範圍第 3項之化合物，或其中r2為CH3或F ;各R3各自為η 106 200902010 2基且連接之氮原子形一琳基環。I Μ基、酮基，井基、甲基_基、或嗎 5. Γ中請，圍第4項之化合物，或其醫藥可接受性鹽類， 6 二…私，且各R3各自為CH3或異丙基。圍第1項之化合物，或其醫藥可接受性鹽類，献合物係選自下顺組叙群組：氟WOK4-嗎琳基）乙基]苯基}胺基X 口密胺基}-^(2_羥基乙基）苯f醯胺；土] ⑽小({2-[(5-氟_2_{[3_⑷曱基卜辰_ 嘧啶基)胺基]苯基}羰基)_3_吡咯烷醇；」*基卜4_ (=Η(2_ί[5-甲基叫Η2_(4·嗎嘛基）乙基]笨基}胺基)-4-嘧啶基]胺基}苯基)羰基]_3_吡咯烷醇，· 15 2-㈣[4_({[2_(乙基胺基）乙基]續酿基}甲基）苯基]胺基}-5-氟如密啶基)胺基]#(1_甲基乙基)苯子酿胺； 2-[(5-氟-2-{[4-(4-哌啶基）苯基]胺基}冰嘧啶基基]-’(1-甲基乙基）苯曱醯胺； 2-[(5奮2-{[4-({[2·(甲基續酸基）乙基]胺基}甲基)苯基}-4-嘧啶基)胺基基乙基）苯甲醯胺；及 2〇 :·(1_甲基乙基)·2_[(5_甲基甲基-2,基小娘口井基）苯基]胺基}-4-嘧啶基)胺基]苯甲醯胺。 7·如申請專利範圍第1項之化合物，其為乙基 f基-2-{[3-(4-f基_2_酮基小料基）苯基]胺基}_4_喷唆胺基]苯P醯胺，或其醫藥可接受性鹽類。土 107 200902010 8. 如申請專利範圍第1項之化合物，其為iV-(l-曱基乙基)-2-[(5-曱基-2-{[3-(4-曱基-2-酮基-1-哌畊基）苯基]胺基}-4-嘧啶基) 胺基]苯甲醯胺。 9. 一種如申請專利範圍第6項之化合物之醫藥可接受性鹽。 5 10.—種組成物，其包含a)如申請專利範圍第1項之化合物或其醫藥可接受性鹽；及b)至少一種醫藥可接受性賦形劑。 11. 一種如申請專利範圍第1項之化合物或其醫藥可接受性鹽於製造治療癌症之藥劑的用途。臀泰12.—種有效量之如申請專利範圍第10項之組成物於製造治療 10 癌症之藥劑的用途。 108 200902010 七、指定代表圖： (一）本案指定代表圖為：無 (二）本代表圖之元件符號簡單說明：益八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：

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