CN114163437A

CN114163437A - 经取代的吡唑并[1,5-a]吡啶化合物作为ret激酶抑制剂

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Publication number: CN114163437A
Application number: CN202111317929.3A
Authority: CN
Inventors: S.W.安德鲁斯; S.阿罗诺; J.F.布莱克; B.J.布兰德休伯; A.库克; J.哈斯; Y.蒋; G.R.科拉科夫斯基; E.A.麦克法丁; M.L.麦肯尼; O.T.麦克努尔蒂; A.T.梅特卡夫; D.A.莫雷诺; T.P.唐; L.任
Original assignee: Array Biopharma Inc
Current assignee: Array Biopharma Inc
Priority date: 2016-10-10
Filing date: 2017-10-10
Publication date: 2022-03-11
Also published as: DOP2019000090A; LT3523301T; IL277576A; JOP20190076A1; SI3523301T1; US20180134702A1; BR112019007144B8; MX2019004205A; JP7311654B2; US20190183886A1; EP3523301A1; JP6776446B2; PT3523301T; TW201825488A; KR20190076976A; TWI704148B; US10555944B2; IL265916A; ZA202004040B; HUE051424T2

Abstract

本申请涉及经取代的吡唑并[1,5‑A]吡啶化合物作为RET激酶抑制剂。具体地，本文提供式I的化合物：

和其立体异构体和药学上可接受的盐或溶剂合物，其中A、B、X¹、X²、X³、X⁴、环D和E具有在说明书中给出的含义，其是RET激酶的抑制剂且适用于治疗和预防可用RET激酶抑制剂治疗的疾病，包含RET相关疾病和病症。

Description

经取代的吡唑并[1，5-A]吡啶化合物作为RET激酶抑制剂

本申请是申请日为2017年10月10日，申请号为201780076390.2，名称为 “经取代的吡唑并[1，5-A]吡啶化合物作为RET激酶抑制剂”的发明专利申请的分案申请。

相关申请的交叉引用

本申请要求以下美国临时申请序列号的优先权：2017年9月29日提交的9 月62/566,093、2017年9月6日提交的62/554,817、2017年4月27日提交的 62/491,164、2017年1月18日提交的62/447,850和2016年10月10日提交的 62/406,252，其中的每一个以全文引用的方式并入本文中。

背景技术

本公开涉及在转染(RET)激酶抑制期间呈现出重排的新型化合物、包括所述化合物的药物组合物、制备所述化合物的方法和所述化合物在治疗中的用途。更具体地说其涉及经取代的吡唑并[1，5-a]吡啶化合物，其适用于治疗和预防可用RET激酶抑制剂治疗的疾病，包含RET相关疾病和病症。

RET是属于酪氨酸激酶超家族的单次跨膜受体，其是几种组织和细胞类型的正常发育、成熟和维持所必需的(Mulligan，L.M.，《自然癌症综述》(Nature Reviews Cancer)，2014，14，173-186)。RET激酶的胞外部分含有四个参与配体结合的钙依赖性钙粘素样重复和一正常折叠RET胞外结构域所必需的近膜 (juxtamembrane)富含半胱氨酸的区域，而受体的细胞质部分包含两个酪氨酸激酶亚结构域。

RET信号传导是通过神经胶质细胞系衍生的神经营养因子(GDNF)家族配体(GFL)的一组可溶蛋白质的结合来介导，所述神经营养因子还包含 neurturin(NTRN)、artemin(ARTN)和persephin(PSPN)(Arighi)等，《细胞激素与生长因子综述》(Cytokine GrowthFactor Rev.)，2005，16，441-67)。不

在配体-辅助受体复合物结合后，胞内酪氨酸残基上的RET二聚化和自磷酸化募集衔接子和信号传导蛋白以刺激多个下游路径。与这些停靠位点结合的衔接蛋白导致Ras-MAPK和PI3K-Akt/mTOR信号传导途径的活化或导致募集泛素连接酶的CBL家族，所述CBL家族在RET介导的功能的RET下调中起作用。

已在不同癌症和胃肠道病症，如肠易激综合征(irritable bowel syndrome；IBS)中证实了异常RET表达和/或活性。

发明内容

现已发现，经取代的吡唑并[1，5-a]吡啶化合物是RET激酶的抑制剂，且适用于治疗疾病，如增殖性疾病，包含癌症。

因此，本文提供一种式I的化合物：

或其药学上可接受的盐或溶剂合物，其中A、B、X¹、X²、X³、X⁴和环D 如本文所定义。

本文还提供一种药物组合物，其包括式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，呈与药学上可接受的稀释剂或载体的混杂物形式。

本文还提供一种活体外或活体内抑制细胞增殖的方法，所述方法包括使细胞与有效量的如本文所定义的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物接触。

本文还提供一种治疗需要这类治疗的患者的RET相关疾病或病症的方法，所述方法包括向所述患者施用治疗有效量的如本文所定义的式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。

本文还提供一种治疗需要这类治疗的患者的癌症和/或抑制与特定癌症相关联的癌转移的方法，所述方法包括向所述患者施用治疗有效量的如本文所定义的式I的化合物或或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。

本文还提供一种治疗需要这类治疗的患者的肠易激综合征(irritable bowelsyndrome；IBS)和/或与IBS相关联的疼痛的方法，所述方法包括向所述患者施用治疗有效量的如本文所定义的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。

还提供一种向癌症患者提供支持性护理的方法，其包含预防或最小化与治疗(包含化学治疗)相关的胃肠道病症(如腹泻)，所述方法包括向所述患者施用治疗有效量的如本文所定义的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。

本文还提供一种如本文所定义的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物，其用于疗法中。

本文还提供一种如本文所定义的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物，其用于治疗癌症和/或抑制与特定癌症相关的癌转移中。

本文还提供一种如本文所定义的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物，其用于治疗肠易激综合征(irritable bowel syndrome；IBS) 或与IBS相关的疼痛中。

还提供一种如本文所定义的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物，其用于向癌症患者提供支持性护理，包含预防或最小化与治疗(包含化学治疗)相关的胃肠道病症(如腹泻)。

本文还提供一种式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，其用于抑制RET激酶活性。

本文还提供一种如本文所定义的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物，其用于治疗RET相关疾病或病症。

本文还提供一种如本文所定义的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的用途，其用于制造用于治疗癌症和/或抑制与特定癌症相关的癌转移的药物中。

本文还提供一种如本文所定义的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的用途，其用于制造用于治疗肠易激综合征(irritable bowel syndrome；IBS) 或与IBS相关的疼痛的药物。

本文还提供一种如本文所定义的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物的用途，其用于制造用于向癌症患者提供支持性护理，包含预防或最小化与治疗(包含化学治疗)相关的胃肠道病症(如腹泻)的药物。

本文还提供一种如本文所定义的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的用途，其用于制造用于抑制RET激酶活性的药物。

本文还提供一种如本文所定义的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的用途，其用于制造用于治疗RET相关疾病或病症的药物。

本文还提供一种用于治疗有需要的患者的癌症的方法，所述方法包括：(a) 确定所述癌症是否与RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平的调节异常相关联(例如，RET相关癌症)；和(b)如果确定所述癌症是与RET 基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平的调节异常相关联(例如， RET相关癌症)，那么向所述患者施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。

本文还提供一种用于治疗有需要的患者的癌症(例如，RET相关癌症，如具有一个或多个RET抑制剂抗性的突变的RET相关癌症)的药物组合，其包括：(a)式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，(b)额外治疗剂，和 (c)任选的至少一种药学上可接受的载体，其中所述式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物和所述额外治疗被配制成单独组合物或剂量，以同时、单独或依序用于治疗癌症，其中式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的量和额外治疗剂的量一起有效治疗癌症。本文还提供一种药物组合物，其包括这种组合。本文还提供一种这种组合的用途，其用于制备用于治疗癌症的药物。本文还提供一种商业包装或产品，其包括这种组合，呈用于同时、单独或依序使用的组合制剂；和一种治疗有需要的患者的癌症的方法。

本文还提供一种逆转或预防对抗癌药物的获得性抗性的方法，其包括向处于发展或具有对抗癌药物的获得性抗性风险下的患者，施用治疗有效量的式I 化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，向患者施用一定剂量的抗癌药物(例如，基本上在向所述患者施用一定剂量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物同时)。

本文还提供一种延迟和/或预防个体中发展对抗癌药物的癌症抗性的方法，其包括在施用有效量的抗癌药物之前、期间或之后，向所述个体施用有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。

本文还提供一种治疗患有癌症、具有对抗癌药物发展抗性的增加可能性的个体的方法，其包括在施用(b)有效量的抗癌药物之前、期间或之后，向所述个体施用(a)有效量的式I化合物。

还提供治疗患有RET相关癌症的个体的方法，所述个体具有增加癌症对第一RET抑制剂的抗性的一个或多个RET抑制剂抗性突变(例如，在氨基酸位置804处的取代，例如V804M、V804L或V804E，和/或在表3和4中列出的一个或多个RET抑制剂抗性突变)，所述方法包括在施用另一抗癌药物(例如第二RET激酶抑制剂)之前、期间或之后，施用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。

还提供治疗患有RET相关癌症的个体的方法，其包含在施用另一种抗癌药物(例如，第一RET激酶抑制剂)之前、期间或之后，施用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。

本文还提供一种用于治疗有需要的患者的肠易激综合征(irritable bowelsyndrome；IBS)的方法，所述方法包括：(a)确定所述IBS是否与RET基因、 RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平的调节异常相关联；和(b)如果确定所述IBS与RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平的调节异常相关联，那么向所述患者施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。

本文还提供一种用于治疗有需要的患者的肠易激综合征(irritable bowelsyndrome；IBS)的药物组合，其包括施用(a)通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，(b)额外治疗剂，和(c)任选的至少一种药学上可接受的载体，以同时、单独或依序用于治疗IBS，其中式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的量和额外治疗剂的量一起有效治疗IBS。本文还提供一种药物组合物，其包括这种组合。本文还提供一种这种组合的用途，其用于制备用于治疗IBS的药物。本文还提供一种商业包装或产品，其包括这种组合，呈用于同时、单独或依序使用的组合制剂；和一种治疗有需要的患者的IBS的方法。

本文还提供一种用于制备式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的方法。

本文还提供一种通过制备如本文所定义的化合物的方法获得的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。

除非另外定义，否则本文所用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的含义相同的含义。本文中描述了用于本发明的方法和材料；还可使用所属领域中已知的其它合适的方法和材料。材料、方法和实例仅具有说明性且并不意图是限制性的。本文所提及的所有公开案、专利申请、专利、序列、数据库条目和其它参考文献以全文引用的方式并入。在矛盾的情况下，将以本说明书，包含定义为准。

从以下详细描述和结构式以及从权利要求书中，本发明的其它特征和优势将显而易见。

具体实施方式

本文提供一种式I的化合物：

和其药学上可接受的盐和溶剂合物，其中：

X¹、X²、X³和X⁴独立地是CH、CF、CCH₃或N，其中X¹、X²、X³和X⁴中的零个、一个或两个是N；

A是H、CN、Cl、CH₃-、CH₃CH₂-、环丙基、-CH₂CN或-CH(CN)CH₃；

B是

(a)氢，

(b)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基，

(c)羟基C2-C6烷基-，其中所述烷基部分任选地被1-3个氟或C3-C6亚环烷基环取代，

(d)二羟基C3-C6烷基-，其中所述烷基部分任选地被C3-C6亚环烷基环取代，

(e)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-，

(f)(R¹R²N)C1-C6烷基-，其中所述烷基部分任选地被OH取代，且其中 R¹和R²独立地是H或C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)；

(g)hetAr¹C1-C3烷基-，其中hetAr¹是具有1-3个独立地选自N、O和S 的环杂原子的5-6元杂芳基环，且任选地被一个或多个独立选择的C1-C6烷基取代基取代；

(h)(C3-C6环烷基)C1-C3烷基-，其中所述环烷基任选地被OH取代，

(i)(hetCyc^a)C1-C3烷基-，

(j)hetCyc^a-，

(k)C3-C6环烷基-，其中所述环烷基任选地被OH取代，

(1)(C1-C4烷基)C(＝O)O-C1-C6烷基-，其中C1-C4烷基和C1-C6烷基部分中的每一个任选且独立地被1-3个氟取代，或

(m)(R¹R²N)C(＝O)C1-C6烷基-，其中R¹和R²独立地是H或C1-C6烷基 (任选被1-3个氟取代)；

hetCyc^a-是4-6元杂环，其具有1-2个独立地选自N和O的环杂原子，且任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：OH、C1-C6烷基(任选被 1-3个氟取代)、羟基C1-C6烷基-、C1-C6烷氧基、(C1-C6烷基)C(＝O)-、(C1-C6 烷氧基)C1-C6烷基-和氟，或其中hetCyc^a被氧代基取代；

环D是(i)饱和4-7元杂环，其具有两个环氮原子，(ii)饱和7-8元桥连杂环，其具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子，(iii)饱和7-11 元杂螺环，其具有两个环氮原子，或(iv)饱和9-10元双环稠合杂环，其具有两个环氮原子，其中每个所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、任选被1-3个氟取代的C1-C3烷基、或任选被1-3个氟取代的C1-C3烷氧基，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基；

E是

(a)氢，

(b)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基，

(c)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-，

(d)(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选地被1-3个氟或被R^gR^hN- 取代基取代，其中R^g和R^h独立地是H或C1-C6烷基，

(e)任选被1-3个氟取代的(羟基C2-C6烷基)C(＝O)-，

(f)(C1-C6烷氧基)C(＝O)-，

(g)(C3-C6环烷基)C(＝O)-，其中所述环烷基任选地被独立地选自C1-C6 烷基、C1-C6烷氧基、OH和(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-的一个或多个取代基取代，或所述环烷基被具有1-3个独立地选自N和O的环杂原子的5-6元杂芳基环取代，

(h)Ar¹Cl-C6烷基-，

(i)Ar¹(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选地被OH、羟基C1-C6 烷基-、C1-C6烷氧基、R^mRⁿN-或R^mRⁿN-CH₂-取代，其中各R^m和Rⁿ独立地是 H或C1-C6烷基，

(j)hetAr²C1-C6烷基-，其中所述烷基部分任选地被1-3个氟取代，

(k)hetAr²(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选地被OH、羟基C1-C6 烷基-或C1-C6烷氧基取代，

(1)hetAr²C(＝O)-，

(m)hetCyc¹C(＝O)-，

(n)hetCyc¹C1-C6烷基-，

(o)R³R⁴NC(＝O)-，

(p)Ar¹N(R³)C(＝O)-，

(q)hetAr²N(R³)C(＝O)-，

(r)(C1-C6烷基)SO₂-，其中所述烷基部分任选地被1-3个氟取代，

(s)Ar¹SO₂-，

(t)hetAr²SO₂-，

(u)N-(C1-C6烷基)吡啶酮基，

(v)Ar¹C(＝O)-；

(w)Ar¹O-C(＝O)-，

(x)(C3-C6环烷基)(C1-C6烷基)C(＝O)-，

(y)(C3-C6环烷基)(C1-C6烷基)SO₂-，其中所述烷基部分任选地被1-3个氟取代，

(z)Ar¹(C1-C6烷基)SO₂-，

(aa)hetCyc¹-O-C(＝O)-，

(bb)hetCyc¹CH₂C(＝O)-，

(cc)hetAr²，或

(dd)C3-C6环烷基；

Ar¹是任选地被一个或多个取代基取代的苯基，所述取代基独立地选自由以下组成的组：卤素；CN；C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)；C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)；R^eR^fN-，其中R^e和R^f独立地是H或C1-C6烷基； (R^pR^qN)C1-C6烷氧基-，其中R^p和R^q独立地是H或C1-C6烷基；和(hetAr^a)C1-C6 烷基-，其中hetAr^a是具有1-2个环氮原子的5-6元杂芳基环，或Ar¹是与具有 1-2个独立地选自N和O的环杂原子的5-6元杂环稠合的苯环；

hetAr²是具有1-3个独立地选自N、O和S的环杂原子的5-6元杂芳基环或具有1-3个环氮原子的9-10元双环杂芳基环，其中hetAr²任选地被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自由以下组成的组：卤素；CN；C1-C6烷基 (任选被1-3个氟取代)；C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)；(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-(任选被1-3个氟取代)；R^eR^fN-，其中R^e和R^f独立地是H或 C1-C6烷基；OH；(C1-C6烷氧基)C1-C6烷氧基-和C3-C6环烷基；

hetCyc¹是具有1-2个独立地选自N、O和S的环杂原子的4-6元饱和杂环，其中所述杂环任选地被一个或多个独立地选自C1-C6烷氧基和卤素的取代基取代；

R³是H或C1-C6烷基；和

R⁴是C1-C6烷基。

对于本文中使用的复杂化学名称，取代基在其所连接的基团之前被命名。举例来说，甲氧基乙基包括具有甲氧基取代基的乙基主链。

术语“卤素”意指-F(在本文中有时被称作“氟(fluoro/fluoros)”)、-Cl、 -Br和-I。

如本文所用的术语“C1-C3烷基”、“C1-C6烷基”、“C2-C6烷基”和“C3-C6 烷基”是指分别具有一个到三个、一个到六个、两个到六个或三个到六个碳原子的饱和的直链或分支链一价烃基。实例包含(但不限于)甲基、乙基、1-丙基、异丙基、1-丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、2-甲基-2-丙基、戊基、新戊基和己基。

如本文所用的术语“C1-C6烷氧基”是指具有一到六个碳原子的饱和直链或分支链一价烷氧基，其中键(radical)是在氧原子上。实例包含甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基和叔丁氧基。

如本文所用，术语“(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-”和“(C1-C6烷氧基)C2-C6 烷基-”是指分别具有一到六个碳原子或两个到六个碳原子的饱和直链或分支链一价基团，其中一个碳原子被如本文所定义的(C1-C6烷氧基)基团取代。实例包含甲氧基甲基(CH₃OCH₂-)和甲氧基乙基(CH₃OCH₂CH₂-)。

如本文所用的术语“羟基C1-C6烷基-”和“羟基C2-C6烷基-”分别是指具有一个到六个或两个到六个碳原子的饱和直链或分支链一价烷基，其中一个碳原子被羟基取代。

如本文所用的术语“二羟基C3-C6烷基-”是指具有三个到六个碳原子的饱和直链或分支链一价烷基，其中两个碳原子被羟基取代。

如本文所用的术语“(R¹R²N)C1-C6烷基-”和“(R¹R²N)C2-C6烷基-”分别是指如本文所定义的C1-C6烷基或C2-C6基团，其中一个碳原子被R¹R²N-基团取代，其中R¹和R²如本文所定义。

如本文所用的术语“hetAr¹C1-C6烷基-”是指如本文所定义的C1-C6烷基，其中一个碳原子被hetAr¹基团取代，其中hetAr¹如本文所定义。

如本文所用的术语“C3-C6环烷基”是指环丙基、环丁基、环戊基或环己基。

如本文所用的术语“(C3-C6环烷基)C1-C3烷基-”和“(C3-C6环烷基)C1-C6 烷基-”分别是指如本文所定义的C1-C3烷基或C1-C6基团，其中一个碳原子被如本文所定义的C3-C6环烷基环取代。

如本文所用的术语“C3-C6亚环烷基环”是指具有三到六个碳的二价碳环。后缀“亚基(ylidine)”是指衍生自通过从同一个碳原子上去除两个氢原子的饱和烃的二价基团

如本文所用的术语“(hetCyc^a)C1-C3烷基-”是指如本文所定义的C1-C3烷基，其中一个碳原子被hetCyc^a基团取代，其中hetCyc^a如本文所定义。

如本文所用的术语“Ar¹C1-C6烷基-”是指如本文所定义的C1-C6烷基，其中一个碳原子被Ar¹基团取代，其中Ar¹如本文所定义。

如本文所用的术语“hetAr²C1-C6烷基-”是指如本文所定义的C1-C6烷基，其中一个碳原子被hetAr²基团取代，其中hetAr²如本文所定义。

如本文所用的术语“hetCyc¹C1-C6烷基-”是指如本文所定义的C1-C6烷基，其中一个碳原子被hetCyc¹基团取代，其中hetCyc¹如本文所定义。

如本文所用的术语“N-(C1-C6烷基)吡啶酮基”是指吡啶-2(1H)-酮环，其中环氮原子被C1-C6烷基取代基取代，且其中键可以是除带有氧代基的碳以外的任何环碳原子。实例包含以下结构：

如本文所用的术语“杂螺环”是指具有通过碳原子进行螺环连接而连接的两个环的基团，其中每个环具有4到6个环原子(其中一个环碳原子对于两个环是共同的)，且其中两个环原子是氮原子。

如本文所用的术语“氧代”或“氧代基”意指与碳原子双键键合的氧，即＝O。举例来说，在一个实施例中，当提及环D时，具有两个环氮原子的饱和6 元杂环可以是例如被氧代基取代的哌嗪基环(例如，哌嗪酮基环)，其可以由以下结构表示：

如本文所用的术语“化合物”意指包含所描绘结构的所有立体异构体、几何异构体、互变异构体和同位素。除非另外规定，否则本文中通过名称或结构鉴定为一种特定互变异构形式的化合物意图包含其它互变异构形式。

如本文所用的术语“互变异构体”是指其结构在原子排列上明显不同但以容易和快速平衡存在的化合物，且应理解，本文提供的化合物可描绘为不同的互变异构体，且当化合物具有互变异构形式时，所有互变异构形式都在本发明的范围内，且化合物的命名不排除任何互变异构体。示范性互变异构化包含(但不限于)酮-烯醇、酰胺-酰亚胺、内酰胺-内酰亚胺、烯胺-亚胺和烯胺-(不同的)烯胺互变异构化。酚-酮互变异构化的具体实例是吡啶-2-醇和吡啶-2(1H)- 酮互变异构体的相互转化，例如：

应了解，本文提供的某些化合物可含有一个或多个不对称中心，且因此可以以异构体混合物(如外消旋混合物)或对映异构纯形式制备和分离。

在式I的某些实施例中，X¹、X²、X³和X⁴独立地是CH、CF或CCH₃。在某些实施例中，X¹、X²、X³和X⁴中的每一个是CH。

在式I的某些实施例中，X¹、X²、X³和X⁴独立地是CH、CF或CCH₃或N，其中X¹、X²、X³和X⁴中的一个是N，且其余部分独立地是CH、CF或CCH₃。在式I的某些实施例中，X¹是N，且X²、X³和X⁴独立地是CH或CF。在某些实施例中，X¹是N，且X²、X³和X⁴是CH。在某些实施例中，X¹是N，X²是 CF，且X³和X⁴是CH。

在式I的某些实施例中，X¹、X²、X³和X⁴独立地是CH、CF或CCH₃或N，其中X¹、X²、X³和X⁴中的两个是N。在式I的某些实施例中，X¹和X³是N，且X²和X⁴独立地是CH、CF或CCH₃。在一个实施例中，X¹和X³是N，且 X²和X⁴是CH。在式I的某些实施例中，X¹和X²是N，且X¹和X⁴独立地是 CH或CF。在式I的某些实施例中，X¹和X²是N，且X¹和X⁴是CH。

在式I的某些实施例中，A是H。

在式I的某些实施例中，A是Cl。

在式I的某些实施例中，A是CN。

在式I的某些实施例中，A是CH₃-。

在式I的某些实施例中，A是CH₃CH₂-。

在式I的某些实施例中，A是环丙基。

在式I的某些实施例中，A是-CH₂CN。

在式I的某些实施例中，A是-CH(CN)CH₃。

在式I的某些实施例中，B是氢。

在式I的某些实施例中，B是任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基。非限制性实例包含甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基、2-甲基丁基、2-乙基丁基、 2，2-二甲基丙基、二氟甲基、2，2-二氟乙基和2，2，2-三氟乙基。

在式I的某些实施例中，B是羟基C2-C6烷基-，其中烷基部分任选地被1-3 个氟或C3-C6亚环烷基环取代。在式I的某些实施例中，B是羟基C2-C6烷基 -，其中烷基部分未经取代。非限制性实例包含以下结构：

在式I的某些实施例中，B是二羟基C3-C6烷基-，其中烷基部分任选地被 C3-C6亚环烷基环取代。在式I的某些实施例中，B是二羟基C3-C6烷基-。非限制性实例包含2，3-二羟基丙基。

在式I的某些实施例中，B是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6 烷基-。在式I的某些实施例中，B是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C2-C6 烷基-。非限制性实例包含以下结构：

在式I的某些实施例中，B是(R¹R²N)C1-C6烷基-，其中所述烷基部分任选地被OH取代，且R¹和R²独立地是H或C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)。在式I的某些实施例中，B是(R¹R²N)C1-C6烷基-，其中所述烷基部分任选地被 OH取代，且R¹和R²独立地是H或C2-C6烷基(任选被1-3个氟取代)。在式 I的某些实施例中，B是(R¹R²N)C1-C6烷基-，其中所述烷基部分任选地被OH 取代，且R¹和R²独立地选自C1-C6烷基取代基。当B是(R¹R²N)C1-C6烷基- 时，非限制性实例包含以下结构

在式I的某些实施例中，B是hetAr¹C1-C3烷基-，其中hetAr¹是具有1-3 个独立地选自N、O和S的环杂原子的5-6元杂芳基环，且任选地被一个或多个独立选择的C1-C6烷基取代基取代。在某些实施例中，hetAr¹是具有1-3个独立地选自N和O的环杂原子的5-6元杂芳基环，且任选地被C1-C6烷基取代。 hetAr¹C1-C3烷基-的非限制性实例包含以下结构：

在式I的某些实施例中，B是(C3-C6环烷基)C1-C3烷基-，其中所述环烷基任选地被OH取代。非限制性实例包含以下结构：

在式I的某些实施例中，B是(hetCyc^a)C1-C3烷基-，其中hetCyc^a是具有 1-2个独立地选自N和O的环杂原子的4-6元杂环，且任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：OH、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、羟基 C1-C6烷基-、C1-C6烷氧基、(C1-C6烷基)C(＝O)-、(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基 -和氟，或其中hetCyc^a被氧代基取代。非限制性实例包含以下结构：

在式I的某些实施例中，B是hetCyc^a，其中hetCyc^a是具有1-2个独立地选自N和O的环杂原子的4-6元杂环，且任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：OH、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、羟基C1-C6烷基-、C1-C6 烷氧基、(C1-C6烷基)C(＝O)-、(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-和氟，或其中hetCyc^a被氧代基取代。在某些实施例中，hetCyc^a任选地被OH或C1-C6烷基(任选被 1-3个氟取代)取代。非限制性实例包含以下结构：

在式I的某些实施例中，B是C3-C6环烷基-，其中所述环烷基任选地被 OH取代。非限制性实例是以下结构：

在式I的某些实施例中，B是任选被1-3个氟取代的(C1-C4烷基)C(＝O)O-C1-C6烷基-。非限制性实例是以下结构：

在式I的某些实施例中，B是(R¹R²N)C(＝O)C1-C6烷基-，其中R¹和R²独立地是H或C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)。非限制性实例包含以下结构：

在式I的一个实施例中，环D是：(i)具有两个环氮原子的饱和4-7元杂环，(ii)具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-8元桥连杂环，(iii)具有两个环氮原子的饱和7-11元杂螺环，或(iv)具有两个环氮原子的饱和9-10元双环稠合杂环，其中所述环中的每一个任选地被以下取代：(a) 一个到四个独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或 C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)的基团，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基。

如本文中所用，当提及环D时，短语“具有两个环氮原子”意指环D的两个环氮原子是式I中显示的两个环氮原子，其中环氮原子中的一个键合包括X¹、 X²、X³和X⁴的环，且另一个环氮原子与E基团键合。

在一个实施例中，环D是：(i)具有两个环氮原子的饱和4-7元杂环，(ii) 具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-8元桥连杂环，(iii) 具有两个环氮原子的饱和7-11元杂螺环，或(iv)具有两个环氮原子的饱和9-10 元双环稠合杂环，其中所述环中的每一个未经取代。

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和4-7元杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)的基团， (b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基。如本文中所用，当环D是饱和单环 4-7元杂环时，短语“具有两个环氮原子”意指，所述环氮原子是式I的环D 中显示的两个氮原子，即环D可以由以下结构表示：

其中波浪线指示与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E 基团的连接点，其中环D任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、任选被1-3个氟取代的C1-C3烷基，或任选被1-3个氟取代的 C1-C3烷氧基，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基。在一个实施例中，环 D是具有两个环氮原子的未经取代的饱和6元杂环。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和6元杂环，其中所述环被氧代基取代。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和6元杂环，其中所述环被C3-C6亚环烷基环取代。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和6元杂环，其中所述环被C3-C6亚环丙基环取代。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和6元杂环，其中所述环被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和6元杂环，其中所述环被任选地被1-3个氟取代的C1-C3烷基取代。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7元杂环，其中所述环未经取代。

在一个实施例中，当环D是具有两个环氮原子的饱和6-7元杂环时，式I 的环D和E部分，即

可以由以下结构表示：

其中波浪线指示与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，其中环D任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6 亚环烷基环，或(c)氧代基。在一个实施例中，环D未经取代。在一个实施例中，环D被氧代基取代。在一个实施例中，环D被C3-C6亚环丙基环取代。在一个实施例中，环D被氧代基取代。在一个实施例中，环D被一个到四个独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基 (其任选地被1-3个氟取代)的基团取代。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和6元杂环，其中所述环被一个到四个任选地被1-3个氟取代的 C1-C3烷基取代。在一个实施例中，环D未经取代，或环D被一个到四个独立选择的C1-C3烷基(其中的每一个任选地被1-个氟取代)取代，或环D被C3-C6 亚环丙基环取代，或环D被氧代基取代。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7元杂环，其中所述环未经取代。饱和6和7元杂环D环的实例包含以下结构：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和4-7元杂环，其中环D 任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)， (b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E如对于式I所定义。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和6-7元杂环。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和6元杂环。在一个实施例中，环D未经取代。在一个实施例中，环D被氧代基取代。在一个实施例中，环D被亚环丙基环取代。在一个实施例中，环D被一个或两个C1-C3烷基，例如一个或两个甲基取代。

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和4-7元杂环，其中环D 任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)； (b)C3-C6亚环烷基环；或(c)氧代基，且E是(a)氢；(c)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-；(d)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-；(e)任选被1-3个氟取代的(羟基C2-C6烷基)C(＝O)-；(f)(C1-C6 烷氧基)C(＝O)-；(g)(C3-C6环烷基)C(＝O)-，其中所述环烷基任选地被(C1-C6 烷氧基)C1-C6烷基-或具有1-3个独立地选自N和O的环杂原子的5-6元杂芳基环取代；(h)Ar¹C1-C6烷基-；(i)Ar¹(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选地被OH、羟基C1-C6烷基-或C1-C6烷氧基取代；(j)hetAr²C1-C6烷基-，其中烷基部分任选地被1-3个氟取代；(k)hetAr²(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选地被OH、羟基C1-C6烷基-或C1-C6烷氧基取代；(1) hetAr²C(＝O)-；(m)hetCyc¹C(＝O)-；(n)hetCyc¹C1-C6烷基-；(o)R³R⁴NC(＝O)-；或(cc)hetAr²，其中Ar¹、hetAr²、hetCyc¹、R³和R⁴是如对于式I所定义。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和6-7元杂环。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和6元杂环。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7元杂环。在一个实施例中，环D是饱和6-7元杂环，其中环 D未经取代。在一个实施例中，环D是饱和6元环。在一个实施例中，环D被氧代基取代。在一个实施例中，环D被亚环丙基环取代。在一个实施例中，环 D被一个或两个C1-C3烷基，例如一个或两个甲基取代。

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和4-7元杂环，其中环D 任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)， (b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是氢。在一个实施例中，环D 是具有两个环氮原子的饱和6元杂环。在一个实施例中，环D未经取代。非限制性实例是以下结构：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和4-7元杂环，其中环D 任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)， (b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是任选被1-3个氟取代的(C1-C6 烷氧基)C1-C6烷基-。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和6元杂环。在一个实施例中，环D未经取代。非限制性实例是以下结构：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和4-7元杂环，其中环D 任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)， (b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是任选地被1-3个氟取代的(C1-C6 烷基)C(＝O)-。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和6元杂环。在一个实施例中，环D未经取代。非限制性实例是以下结构：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和4-7元杂环，其中环D 任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)， (b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是任选地被1-3个氟取代的(羟基C2-C6烷基)C(＝O)-。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和6 元杂环。在一个实施例中，环D未经取代。非限制性实例是以下结构：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和4-7元杂环，其中环D 任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)， (b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是(C1-C6烷氧基)C(＝O)-。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和6元杂环。在一个实施例中，环 D未经取代。非限制性实例是以下结构：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和4-7元杂环，其中环D 任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)， (b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是(C3-C6环烷基)C(＝O)-，其中所述环烷基任选地被(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-或具有1-3个独立地选自N和 O的环杂原子的5-6元杂芳基环(例如吡啶基)取代。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和6元杂环。在一个实施例中，环D未经取代。非限制性实例包含以下结构：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和4-7元杂环，其中环D 任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选被1-3个氟取代)，(b) C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是Ar¹C1-C6烷基-，其中Ar¹如对于式I所定义。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和6元杂环。在一个实施例中，环D未经取代。在一个实施例中，环D被氧代基取代。在一个实施例中，Ar¹未经取代。非限制性实例包含以下结构：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和4-7元杂环，其中环D 任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(任选被1-3个氟取代)，(b) C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是Ar¹(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选地被OH、羟基C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、R^mRⁿN-或 R^mRⁿN-CH₂-取代，其中每一个R^m和Rⁿ独立地是H或C1-C6烷基，且Ar¹如对于式I所定义。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和6元杂环。在一个实施例中，环D未经取代。在一个实施例中，Ar¹未经取代或被一个或多个卤素取代。非限制性实例包含以下结构：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和4-7元杂环，其中环D 任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(任选被1-3个氟取代)，(b) C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是hetAr²C1-C6烷基-，其中烷基部分任选地被1-3个氟取代，且其中hetAr²如对于式I所定义。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和6-7元杂环。在一个实施例中，环D未经取代。在一个实施例中，环D被亚环丙基环取代。在一个实施例中，hetAr²是具有1-2 个环氮原子的5-6元杂环。在一个实施例中，hetAr²任选地被独立地选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代：卤素、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代) 和C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)。在一个实施例中，hetAr²是具有1-2 个环氮原子的6元杂芳基环，且任选地被独立地选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代：卤素、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)和C1-C6烷氧基 (任选被1-3个氟取代)。非限制性实例包含以下结构：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和4-7元杂环，其中环D 任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(任选被1-3个氟取代)，(b) C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是hetAr²(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选地被OH、羟基C1-C6烷基或C1-C6烷氧基取代，且其中 hetAr²如对于式I所定义。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和 6元杂环。在一个实施例中，环D未经取代。在一个实施例中，hetAr²(C1-C6 烷基)C(＝O)-的烷基部分未经取代。在一个实施例中，hetAr²是具有1-2个环氮原子的5-6元杂环。在一个实施例中，hetAr²任选地被独立地选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代：卤素、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)和C1-C6 烷氧基(任选被1-3个氟取代)。在一个实施例中，hetAr²是具有1-2个环氮原子的6元环，且任选地被一个或多个卤素取代。非限制性实例包含以下结构：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和4-7元杂环，其中环D 任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)， (b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是hetAr²C(＝O)-，其中hetAr²如对于式I所定义。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和6-7元杂环，其中环D未经取代。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7元杂环，其中环D未经取代。在一个实施例中，hetAr²是具有1-2个环氮原子的5-6元杂环。在一个实施例中，hetAr²任选地被独立地选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代：卤素、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)和C1-C6 烷氧基(任选被1-3个氟取代)。在一个实施例中，hetAr²是具有1-2个环氮原子的6元环，且任选地被C1-C6烷氧基取代。非限制性实例包含以下结构：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和4-7元杂环，其中环D 任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)， (b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是hetCyc¹C(＝O)-，其中hetCyc¹如对于式I所定义。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和6元杂环。在一个实施例中，环D未经取代。在一个实施例中，hetCyc¹是具有一环氮原子的4-6元饱和杂环，其中所述杂环任选地被一个或多个独立选择的C1-C6 烷氧基取代基取代。非限制性实例包含以下结构：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和4-7元杂环，其中环D 任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)， (b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是hetCyc¹C1-C6烷基-，其中hetCyc¹如对于式I所定义。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和6元杂环。在一个实施例中，环D未经取代。在一个实施例中，hetCyc¹是具有一环氧原子的4-6元饱和杂环。在一个实施例中，hetCyc¹未经取代。非限制性实例包含以下结构：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和4-7元杂环，其中环D 任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)， (b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是R³R⁴NC(＝O)-，其中R³和R⁴如对于式I所定义。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和6元杂环。在一个实施例中，所述环D未经取代。非限制性实例包含以下结构：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和4-7元杂环，其中环D 任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)， (b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是hetAr²，其中hetAr²如对于式 I所定义。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和6元杂环，其中环D未经取代。在一个实施例中，hetAr²是具有1-2个环氮原子的5-6元杂环。在一个实施例中，hetAr²任选地被独立地选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代：卤素、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)和C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)。在一个实施例中，hetAr²是具有1-2个环氮原子的6元环，且任选地被C1-C6烷氧基取代。非限制性实例包含以下结构：

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-8元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基。如本文中所用，当环D是饱和7-8元桥连杂环时，短语“具有两个环氮原子”意指，所述环氮原子是式I的环D中显示的两个氮原子，其中一个环氮原子键合包括X¹、X²、X³和X⁴的环，且另一个环氮原子与如式I中所示的 E基团键合。当环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环时，非限制性实例包含以下结构：

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，其中环D任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基。在一个实施例中，环D未经取代。

在一个实施例中，当环D是具有2-3个独立地选自N和O的环杂原子的饱和7-9元桥连杂环时，式I的环D和E部分，即

可由以下非限制性结构表示：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7元桥连杂环，其由以下结构表示：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-8元桥连杂环，其中环D任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E如对于式I所定义。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-8 元桥连杂环。在一个实施例中，环D未经取代。

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E选自由以下组成的群组：(a)氢；(b)C1-C6烷基；(c)(C1-C6 烷氧基)C1-C6烷基-；(d)(C1-C6烷基)C(＝O)-；(e)(羟基C2-C6烷基)C(＝O)-； (f)(C1-C6烷氧基)C(＝O)-；(g)(C3-C6环烷基)C(＝O)-；(h)Ar¹C1-C6烷基-； (i)Ar¹(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选地被OH、羟基C1-C6烷基或C1-C6烷氧基取代；(j)hetAr²C1-C6烷基-，其中烷基部分任选地被1-3个氟取代；(k)hetAr²(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选地被OH、羟基C1-C6烷基-或C1-C6烷氧基取代；(1)hetAr²C(＝O)-；(m)hetCyc¹C(＝O)-； (o)R³R⁴NC(＝O)-；(p)Ar¹R³NC(＝O)-；(q)hetAr²N(R³)C(＝O)-；(r)(C1-C6 烷基)SO₂-；(t)hetAr²SO₂-。(u)N-(C1-C6烷基)吡啶酮基；(v)Ar¹C(＝O)-；(w) Ar¹O-C(＝O)-；(x)(C3-C6环烷基)CH₂C(＝O)-；(y)(C3-C6环烷基)(C1-C6烷基)SO₂-；(z)Ar¹(C1-C6烷基)SO₂-；(aa)hetCyc¹-O-C(＝O)-；(bb) hetCyc¹-CH₂-C(＝O)-；和(cc)hetAr²，其中Ar¹、hetAr²、R³和hetCyc¹如对于式I所定义。在一个实施例中，环D是选自以下结构

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点。

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-8元桥连杂环，其由以下结构表示：

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，且E选自由以下组成的群组：(a)氢；(b)C1-C6烷基；(c) (C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-；(d)(C1-C6烷基)C(＝O)-；(e)(羟基C2-C6烷基)C(＝O)-；(f)(C1-C6烷氧基)C(＝O)-；(g)(C3-C6环烷基)C(＝O)-；(h)Ar¹Cl-C6 烷基-；(i)Ar¹(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选地被OH、羟基C1-C6 烷基或C1-C6烷氧基取代；(j)hetAr²C1-C6烷基-，其中烷基部分任选地被1-3 个氟取代；(k)hetAr²(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选地被OH、羟基C1-C6烷基-或C1-C6烷氧基取代；(l)hetAr²C(＝O)-；(m)hetCyc¹C(＝O)-； (o)R³R⁴NC(＝O)-；(p)Ar¹N(R³)C(＝O)-；(q)hetAr²N(R³)C(＝O)-；(r)(C1-C6 烷基)SO₂-；(t)hetAr²SO₂-；(u)N-(C1-C6烷基)吡啶酮基；(v)Ar¹C(＝O)-；(w) Ar¹O-C(＝O)-；(x)(C3-C6环烷基)CH2C(＝O)-；(y)(C3-C6环烷基)(C1-C6烷基)SO₂-；(z)Ar¹(C1-C6烷基)SO₂-；(aa)hetCyc¹-O-C(＝O)-；(bb) hetCyc¹-CH₂-C(＝O)-；和(cc)hetAr²，其中Ar¹、hetAr²、R³和hetCyc¹如对于式I所定义。在一个实施例中，所述环D未经取代。

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是H。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-8元桥连杂环。在一个实施例中，环D由以下结构表示：

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点。在一个实施例中，环D未经取代。非限制性实例包含以下结构：

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-8元桥连杂环。在一个实施例中，环D由以下结构表示：

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-8元桥连杂环。在一个实施例中，环D由以下结构表示：

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选地被1-3个氟取代或被R^gR^hN-取代基取代，其中R^g和R^h独立地是H或C1-C6烷基。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-8元桥连杂环。在一个实施例中，环 D由以下结构表示：

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是任选被1-3个氟取代的(羟基C2-C6烷基)C(＝O)-。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-8元桥连杂环。在一个实施例中，环 D由以下结构表示：

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是(C1-C6烷氧基)C(＝O)-。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-8元桥连杂环。在一个实施例中，环D由以下结构表示：

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是(C3-C6环烷基)C(＝O)-，其中所述环烷基任选地被独立地选自 C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、OH和(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-的一个或多个取代基取代，或所述环烷基被具有1-3个独立地选自N和O的环杂原子的5-6元杂芳基环取代。在一个实施例中，E是(C3-C6环烷基)C(＝O)-，其中所述环烷基任选地被独立地选自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、OH和(C1-C6烷氧基)C1-C6 烷基-的一个或多个取代基取代。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-8元桥连杂环。在一个实施例中，环D由以下结构表示：

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是Ar¹C1-C6烷基-，其中Ar¹如对于式I所定义。在一个实施例中，E是Ar¹C1-C6烷基-，其中Ar¹是任选地被独立地选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代的苯基：卤素；C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)；C1-C6 烷氧基(任选被1-3个氟取代)；(R^pR^qN)C1-C6烷氧基-，其中R^p和R^q独立地是H或C1-C6烷基；和(hetAr^a)C1-C6烷基-，其中hetAr^a是具有1-2个环氮原子的5-6元杂芳基环。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-8 元桥连杂环。在一个实施例中，环D由以下结构表示：

在式I的一个实施例中，环D一具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是Ar¹(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选地被OH、羟基C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、R^mRⁿN-或R^mRⁿN-CH2-取代，其中每一个R^m和R^a独立地是H或C1-C6烷基，且Ar¹如对于式I所定义。在一个实施例中，Ar¹是未经取代或经一个或多个卤素取代的苯基。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-8元桥连杂环。在一个实施例中，环D由以下结构表示：

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是hetAr²C1-C6烷基-，其中所述烷基部分任选地被1-3个氟取代，且hetAr²如对于式I所定义。在一个实施例中，hetAr²是具有1-3个独立地选自 N、O和S的环杂原子的5-6元杂芳基环，或是具有1-3个环氮原子的9-10元双环杂芳基环，其中hetAr²任选地被独立地选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代：卤素、CN、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)、OH、C3-C6环烷基和R^eR^fN-，其中R^e和R^f独立地是H 或C1-C6烷基。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-8元桥连杂环。在一个实施例中，环D由以下结构表示：

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是hetAr2(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选地被OH、羟基C1-C6烷基-或C1-C6烷氧基取代，且hetAr²如对于式I所定义。在一个实施例中，烷基部分未经取代。在一个实施例中，hetAr²是具有1-2个环氮原子的5-6元杂芳基环，且任选地被一个或多个卤素取代。在一个实施例中，环D未经取代。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-8元桥连杂环。在一个实施例中，环D由以下结构表示：

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点。在一个实施例中，环D未经取代。非限制性实例是以下结构：

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是hetAr²C(＝O)-，其中hetAr²如对于式I所定义。在一个实施例中，hetAr²是具有1-2个环氮原子的6元杂芳基环，且任选地被独立地选自卤素、 C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)和(C1-C6烷氧基)C1-C6烷氧基-的一个或多个取代基取代。在一个实施例中，环D由以下结构表示：

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-8元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是hetCyc¹C(＝O)-，其中hetCyc¹如对于式I所定义。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-8元桥连杂环。在一个实施例中，环 D由以下结构表示：

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是R³R⁴NC(＝O)-，其中R³是H或C1-C6烷基，且R⁴是C1-C6烷基。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-8元桥连杂环。在一个实施例中，环D由以下结构表示：

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是Ar¹N(R³)C(＝O)-，其中Ar¹和R³如对于式I所定义。在一个实施例中，Ar¹未经取代或经C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)取代。在一个实施例中，环D未经取代。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和 7-8元桥连杂环。在一个实施例中，环D由以下结构表示：

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是hetAr²N(R³)C(＝O)-，其中hetAr²和R³如对于式I所定义。在一个实施例中，hetAr²未经取代或经C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)取代。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-8元桥连杂环。在一个实施例中，环D由以下结构表示：

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是(C1-C6烷基)SO₂-，其中烷基部分任选地被1-3个氟取代。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-8元桥连杂环。在一个实施例中，环D未经取代。在一个实施例中，环D由以下结构表示：

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是hetAr²SO₂-，其中hetAr²如对于式I所定义。在一个实施例中， hetAr²未经取代或经C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)取代。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-8元桥连杂环。在一个实施例中，环 D由以下结构表示：

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是N-(C1-C6烷基)吡啶酮基。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-8元桥连杂环。在一个实施例中，环D由以下结构表示：

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是Ar¹C(＝O)-，其中Ar¹如对于式I所定义。在一个实施例中，Ar¹是任选地被独立地选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代的苯基：卤素、 C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)和C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)，或Ar¹是与具有两个环氧原子的5-6元杂环稠合的苯环。在一个实施例中，环D 是具有两个环氮原子的饱和7-8元桥连杂环。在一个实施例中，环D由以下结构表示：

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是Ar¹O-C(＝O)-，其中Ar¹如对于式I所定义。在一个实施例中， Ar¹未经取代。在一个实施例中，环D未经取代。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-8元桥连杂环。在一个实施例中，环D由以下结构表示：

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点。非限制性实例包含以下结构：

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是(C3-C6环烷基)CH₂C(＝O)-，其中烷基部分任选地被1-3个氟取代。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-8元桥连杂环。在一个实施例中，环D由以下结构表示：

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是(C3-C6环烷基)(C1-C3烷基)SO₂-，其中烷基部分任选地被1-3 个氟取代。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-8元桥连杂环。在一个实施例中，环D由以下结构表示：

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是Ar¹(C1-C6烷基)SO₂-，其中Ar¹如对于式I所定义。在一个实施例中，Ar¹未经取代。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-8 元桥连杂环。在一个实施例中，环D由以下结构表示

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是hetCyc¹-O-C(＝O)-，其中hetCyc¹如对于式I所定义。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-8元桥连杂环。在一个实施例中，环D由以下结构表示：

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是hetCyc¹-CH₂-C(＝O)-，其中hetCyc¹如对于式I所定义。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-8元桥连杂环。在一个实施例中，环D由以下结构表示：

在式I的一个实施例中，环D是具有两个环氮原子且任选地具有第三个氧环杂原子的饱和7-9元桥连杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代) 或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c) 氧代基，且E是hetAr²，其中hetAr²如对于式I所定义。在一个实施例中，hetAr²是具有1-2个环氮原子的6元环，且任选地被C1-C6烷氧基取代。在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-8元桥连杂环。在一个实施例中，环 D由以下结构表示：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-11元杂螺环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3 烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)， (b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基。如本文中所用，当环D是饱和7-11 元杂螺环时，短语“具有两个环氮原子”意指，所述环氮原子是式I的环D中显示的两个氮原子，其中一个环氮原子键合包括X¹、X²、X³和X⁴的环，且另一个环氮原子与如式I中所示的E基团键合。当环D是具有两个环氮原子的饱和7-11元杂螺环时，非限制性实例包含以下结构：

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，其中所述环中的每一个任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3 烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基。在一个实施例中，环D未经取代。

在一个实施例中，当环D是具有两个环氮原子的饱和7-11元杂螺环时，式 I的环D和E部分，即

可由以下非限制性结构表示：

其中波浪线指示环D与含有X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，其中所述环中的每一个任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、 C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，和E如对于式I所定义。在一个实施例中，环D未经取代。

在一个实施例中，环D由以下结构表示：

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，其中任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基。在一个实施例中，所述环D未经取代。

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-11元杂螺环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3 烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)， (b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E选自由以下组成的组：(a)氢； (b)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基；(d)(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选地被1-3个氟或被R^gR^hN-取代基取代，其中R^g和R^h独立地是H或 C1-C6烷基；(f)(C1-C6烷氧基)C(＝O)-；(1)hetAr²C(＝O)-；(o)R³R⁴NC(＝O)-；(s)Ar¹SO₂-；(t)hetAr²SO₂-；(v)Ar¹C(＝O)-；(cc)hetAr²；和(dd)C3-C6 环烷基，其中hetAr²、Ar¹、R³和R⁴如对于式I所定义。在一个实施例中，所述环D未经取代。

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和9元杂螺环，其由以下结构表示：

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E选自由以下组成的组：(a)氢，(d)(C1-C6烷氧基)C(＝O)-和(o)R³R⁴NC(＝O)-。在一个实施例中，所述环D未经取代

在一个实施例中，在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-11 元杂螺环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是氢。在一个实施例中，所述环D由以下结构表示：

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点。在一个实施例中，所述环D未经取代。非限制性实例包含以下结构：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-11元杂螺环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3 烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)， (b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是(b)任选被1-3个氟取代的 C1-C6烷基。在一个实施例中，所述环D由以下结构表示：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-11元杂螺环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3 烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)， (b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选地被1-3个氟或被R^gR^hN-取代基取代，其中R^g和R^h独立地是 H或C1-C6烷基。在一个实施例中，所述环D由以下结构表示：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-11元杂螺环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3 烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)， (b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是(C1-C6烷氧基)C(＝O)-。在一个实施例中，所述环D由以下结构表示：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-11元杂螺环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3 烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)， (b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是hetAr²C(＝O)-，其中hetAr²如对于式I所定义。在一个实施例中，hetAr²是具有1-2个环氮原子的5-6元杂环。在一个实施例中，hetAr²任选地被独立地选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代：卤素、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)和C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)。在一个实施例中，hetAr²是具有1-2个环氮原子的6元环，且任选地被C1-C6烷氧基取代。在一个实施例中，环D未经取代。在一个实施例中，环D由以下结构表示：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-11元杂螺环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3 烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)， (b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是R³R⁴NC(＝O)-，其中R³和R⁴如对于式I所定义。在一个实施例中，R³是H，且R⁴是C1-C6烷基。在一个实施例中，所述环D由以下结构表示：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-11元杂螺环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3 烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)， (b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是Ar¹SO₂-，其中Ar¹如对于式I 所定义。在一个实施例中，Ar¹是任选地被独立地选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代的苯基：卤素、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)和C1-C6 烷氧基(任选被1-3个氟取代)。在一个实施例中，所述环D未经取代。在一个实施例中，所述环D由以下结构表示

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-11元杂螺环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3 烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)， (b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是hetAr²SO₂-，其中hetAr²如对于式I所定义。在一个实施例中，hetAr²是具有1-2个环氮原子的5-6元杂环。在一个实施例中，hetAr²任选地被独立地选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代：卤素、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)和C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)。在一个实施例中，hetAr²是具有1-2个环氮原子的6元环，且任选地被C1-C6烷氧基取代。在一个实施例中，所述环D未经取代。在一个实施例中，所述环D由以下结构表示：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-11元杂螺环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3 烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)， (b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是Ar¹C(＝O)-，其中Ar¹如对于式I所定义。在一个实施例中，Ar¹是任选地被独立地选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代苯基：卤素、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)和C1-C6 烷氧基(任选被1-3个氟取代)。在一个实施例中，所述环D未经取代。在一个实施例中，所述环D由以下结构表示：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-11元杂螺环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3 烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)， (b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是hetAr²，其中hetAr²如对于式 I所定义。在一个实施例中，hetAr²是具有1-2个环氮原子的5-6元杂环。在一个实施例中，hetAr²任选地被独立地选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代：卤素、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)和C1-C6烷氧基(任选被1-3 个氟取代)。在一个实施例中，hetAr²是具有1-2个环氮原子的6元环，且任选地被C1-C6烷氧基取代。在一个实施例中，所述环D未经取代。在一个实施例中，所述环D由以下结构表示：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和7-11元杂螺环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3 烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)， (b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是C3-C6环烷基。在一个实施例中，所述环D未经取代。在一个实施例中，所述环D由以下结构表示：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和9-10元双环稠合杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、 C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基。如本文中所用，当环D是饱和9-10元双环稠合杂环时，短语“具有两个环氮原子”意指，所述环氮原子是式I的环D中显示的两个氮原子，其中一个环氮原子键合包括X¹、X²、X³和X⁴的环，且另一个环氮原子与如式I中所示的E基团键合。稠环包含5，5、 5，6、6，5和6,6稠环***。在一个实施例中，所述环D由以下结构表示：

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、任选被1-3个氟取代的C1-C3烷基，或任选被1-3个氟取代的C1-C3烷氧基，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基。在一个实施例中，所述环D未经取代。

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和9-10元双环稠合杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、任选地被1-3个氟取代的C1-C3烷基，或任选地被1-3个氟取代的C1-C3烷氧基，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E如对于式I所定义。

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和9-10元双环稠合杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、任选地被1-3个氟取代的C1-C3烷基，或任选地被1-3个氟取代的C1-C3烷氧基，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是氢或(C1-C6烷氧基)C(＝O)-。在一个实施例中，环D由以下结构表示：

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点。在一个实施例中，环D未经取代。

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和9-10元双环稠合杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、任选地被1-3个氟取代的C1-C3烷基，或任选地被1-3个氟取代的C1-C3烷氧基，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是氢。在一个实施例中，环 D由以下结构表示：

在一个实施例中，环D是具有两个环氮原子的饱和9-10元双环稠合杂环，其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、任选地被1-3个氟取代的C1-C3烷基，或任选地被1-3个氟取代的C1-C3烷氧基，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基，且E是(C1-C6烷氧基)C(＝O)-。

在一个实施例中，环D由以下结构表示：

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点。在一个实施例中，所述环D未经取代。非限制性实例是以下结构：

在一个实施例中，式I包含式I-A化合物，其中：

X¹、X²、X³和X⁴独立地是CH、CF或N，其中X¹、X²、X³和X⁴中的零个、一个或两个是N；

A是H、CN、Cl、CH₃-、CH₃CH2-、环丙基、-CH2CN或-CH(CN)CH₃；

B是

(a)氢，

(b)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基，

(e)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-，

(h)(C3-C6环烷基)C1-C3烷基-，其中所述环烷基任选地被OH取代，

(i)(hetCyc^a)C1-C3烷基-，

(j)hetCyc^a-，

(k)C3-C6环烷基-，其中所述环烷基任选地被OH取代，

(l)(C1-C4烷基)C(＝O)O-C1-C6烷基-，其中C1-C4烷基和C1-C6烷基部分中的每一个任选且独立地被1-3个氟取代，或

环D是

其中波浪线指示与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E 基团的连接点，其中环D任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、任选被1-3个氟取代的C1-C3烷基，或任选被1-3个氟取代的 C1-C3烷氧基，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基；

E是

(a)氢，

(c)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-，

(e)任选被1-3个氟取代的(羟基C2-C6烷基)C(＝O)-，

(f)(C1-C6烷氧基)C(＝O)-，

(h)Ar¹C1-C6烷基-，

(i)Ar¹(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选地被OH、羟基C1-C6 烷基-、C1-C6烷氧基、R^mRⁿN-或R^mRⁿN-CH2-取代，其中各R^m和Rⁿ独立地是 H或C1-C6烷基，

(j)hetAr²C1-C6烷基-，其中所述烷基部分任选地被1-3个氟取代，

(l)hetAr²C(＝O)-，

(m)hetCyc¹C(＝O)-，

(n)hetCyc¹C1-C6烷基-，

(o)R³R⁴NC(＝O)-，或

(cc)hetAr²；

hetCyc¹是具有1-2个独立地选自N、O和S的环杂原子的4-6元饱和杂环，其中所述杂环任选地被一个或多个独立地选自C1-C6烷氧基和卤素的取代基取代；和

R⁴是C1-C6烷基。

在式I-A的一个实施例中，环D未经取代。

在式I-A的一个实施例中，X¹是N；X²、X³和X⁴是CH。

在式I-A的一个实施例中，A是CN。

在式I-A的一个实施例中，环D未经取代；X¹是N；X²、X³和X⁴是CH；且A是CN。

在式I-A的一个实施例中，B是任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基。

在式I-A的一个实施例中，B是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6 烷基-，或羟基C2-C6烷基-，其中所述烷基部分任选地被C3-C6亚环烷基环取代。

在式I-A的一个实施例中，B是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6 烷基-。在式I-A的一个实施例中，B是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C2-C6烷基-。

在式I-A的一个实施例中，B是羟基C2-C6烷基-，其中烷基部分任选地被 C3-C6亚环烷基环取代。在一个实施例中，烷基部分未经取代。

在式I-A的一个实施例中，环D未经取代；X¹是N；X²、X³和X⁴是CH；A是CN；且B是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-，或羟基 C2-C6烷基-，其中烷基部分任选地被C3-C6亚环烷基环取代。

在式I-A的一个实施例中，环D未经取代；X¹是N；X²、X³和X⁴是CH； A是CN；且B是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-。在一个实施例中，B是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C2-C6烷基-。

在式I-A的一个实施例中，环D未经取代；X¹是N；X²、X³和X⁴是CH； A是CN；且B是羟基C2-C6烷基-，其中烷基部分任选地被C3-C6亚环烷基环取代。在一个实施例中，B基团的烷基部分未经取代。

在式I-A的一个实施例中，E是Ar¹C1-C6烷基-；hetAr²C1-C6烷基-，其中烷基部分任选地被1-3个氟取代；或Ar¹(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中Ar¹和hetAr²如对于式I-A所定义。

在式I-A的一个实施例中，E是Ar¹C1-C6烷基-；hetAr²C1-C6烷基-，其中烷基部分任选地被1-3个氟取代；或Ar¹(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中Ar¹是未经取代的苯基，且hetAr²是具有1-2个环氮原子的5-6元杂环且任选地被独立地选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代：卤素、C1-C6烷基(任选被1-3 个氟取代)和C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)。在式I-A的一个实施例中， hetAr²是具有1-2个环氮原子的6元杂环，且任选地被独立地选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代：卤素、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)和C1-C6 烷氧基(任选被1-3个氟取代)。

在式I-A的一个实施例中，环D未经取代；X¹是N；X²、X³和X⁴是CH； A是CN；B是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-，或羟基C2-C6 烷基-，其中烷基部分任选地被C3-C6亚环烷基环取代；且E是Ar¹C1-C6烷基 -、hetAr²C1-C6烷基-(其中烷基部分任选地被1-3个氟取代)或Ar¹(C1-C6烷基)C(＝O)-(其中Ar¹和hetAr²如对于式I-A所定义)。

在式I-A的一个实施例中，环D未经取代；X¹是N；X²、X³和X⁴是CH；A是CN；B是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-；且E是 Ar¹C1-C6烷基-、hetAr²C1-C6烷基-(其中烷基部分任选地被1-3个氟取代)或 Ar¹(C1-C6烷基)C(＝O)-(其中Ar¹和hetAr²如对于式I-A所定义)。

在式I-A的一个实施例中，环D未经取代；X¹是N；X²、X³和X⁴是CH； A是CN；B是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-；且E是 Ar¹C1-C6烷基-，其中Ar¹如对于式I-A所定义。

在式I-A的一个实施例中，环D未经取代；X¹是N；X²、X³和X⁴是CH； A是CN；B是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-；且E是 hetAr²C1-C6烷基-，其中烷基部分任选地被1-3个氟取代，且hetAr²如对于式 I-A所定义。

在式I-A的一个实施例中，环D未经取代；X¹是N；X²、X³和X⁴是CH； A是CN；B是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-；或E是 Ar¹(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选地被OH、羟基C1-C6烷基-或 C1-C6烷氧基取代，且Ar¹如对于式I-A所定义。

在式I-A的一个实施例中，环D未经取代；X¹是N；X²、X³和X⁴是CH； A是CN；B是羟基C2-C6烷基-，其中烷基部分任选地被C3-C6亚环烷基环取代；且E是Ar¹C1-C6烷基-、hetAr²C1-C6烷基-(其中烷基部分任选地被1-3 个氟取代)或Ar¹(C1-C6烷基)C(＝O)-(其中Ar¹和hetAr²如对于式I-A所定义)。在一个实施例中，B基团的烷基部分未经取代。

在式I-A的一个实施例中，环D未经取代；X¹是N；X²、X³和X⁴是CH； A是CN；B是羟基C2-C6烷基-，其中烷基部分任选地被C3-C6亚环烷基环取代；且E是Ar¹C1-C6烷基-，其中Ar¹如对于式I-A所定义。在一个实施例中， B基团的烷基部分未经取代。

在式I-A的一个实施例中，环D未经取代；X¹是N；X²、X³和X⁴是CH； A是CN；B是羟基C2-C6烷基-，其中烷基部分任选地被C3-C6亚环烷基环取代；且E是hetAr²C1-C6烷基-，其中烷基部分任选地被1-3个氟取代，且hetAr²如对于式I-A所定义。在一个实施例中，B基团的烷基部分未经取代。

在式I-A的一个实施例中，环D未经取代；X¹是N；X²、X³和X⁴是CH； A是CN；B是羟基C2-C6烷基-，其中烷基部分任选地被C3-C6亚环烷基环取代；且E是Ar¹(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选地被OH、羟基C1-C6 烷基-或C1-C6烷氧基取代，且Ar¹如对于式I-A所定义。在一个实施例中，Ar¹是未经取代的苯基。在一个实施例中，B是羟基C2-C6烷基-，其中烷基部分未经取代。

在式I-A的一个实施例中，环D未经取代；X²是N；X¹、X³和X⁴是CH； A是CN；B是任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基、任选被1-3个氟取代的(C1-C6 烷氧基)C1-C6烷基-或(hetCyc^a)C1-C3烷基-；且E是Ar¹C1-C6烷基-或Ar¹(C1-C6 烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选地被OH、羟基C1-C6烷基-或C1-C6烷氧基取代，且hetCyc^a和Ar¹如对于式I-A所定义。

在式I-A的一个实施例中，环D未经取代；X²是N；X¹、X³和X⁴是CH； A是CN；B是任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基；且E是Ar¹(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选地被OH、羟基C1-C6烷基-或C1-C6烷氧基取代，且 Ar¹如对于式I-A所定义。

在式I-A的一个实施例中，环D未经取代；X²是N；X¹、X³和X⁴是CH； A是CN；B是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-；且E是 Ar¹C1-C6烷基-，其中Ar¹如对于式I-A所定义。

在式I-A的一个实施例中，环D未经取代；X²是N；X¹、X³和X⁴是CH； A是CN；B是(hetCyc^a)C1-C3烷基-；且E是Ar¹C1-C6烷基-，且hetCyc^a和Ar¹如对于式I-A所定义。

在一个实施例中，式I包含式I-B化合物，其中：

A是H、CN、Cl、CH₃-、CH₃CH₂-、环丙基、-CH₂CN或-CH(CN)CH₃；

B是

(a)氢，

(b)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基，

(e)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-，

(h)(C3-C6环烷基)C1-C3烷基-，其中所述环烷基任选地被OH取代，

(i)(hetCyc^a)C1-C3烷基-，

(j)hetCyc^a-，

(k)C3-C6环烷基-，其中所述环烷基任选地被OH取代，

hetCyc^a-是4-6元杂环，其具有1-2个独立地选自N和O的环杂原子，且任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：OH、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、羟基C1-C6烷基-、C1-C6烷氧基、(C1-C6烷基)C(＝O)-、(C1-C6 烷氧基)C1-C6烷基-和氟，或其中hetCyc^a被氧代基取代；

环D是

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，其中环D任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基；

E是

(a)氢，

(b)C1-C6烷基，

(c)(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-，

(d)(C1-C6烷基)C(＝O)-，

(e)(羟基C2-C6烷基)C(＝O)-，

(f)(C1-C6烷氧基)C(＝O)-，

(g)(C3-C6环烷基)C(＝O)-，

(h)Ar¹C1-C6烷基-，

(j)hetAr²C1-C6烷基-，其中所述烷基部分任选地被1-3个氟取代，

(1)hetAr²C(＝O)-，

(m)hetCyc¹C(＝O)-，

(o)R³R⁴NC(＝O)-，

(p)Ar¹R³NC(＝O)-，

(q)hetAr²N(R³)C(＝O)-，

(r)(C1-C6烷基)SO₂-，其中所述烷基部分任选地被1-3个氟取代，

(t)hetAr²SO₂-，

(u)N-(C1-C6烷基)吡啶酮基，

(v)Ar¹C(＝O)-，

(w)Ar¹O-C(＝O)-，

(x)(C3-C6环烷基)CH₂C(＝O)-，

(y)(C3-C6环烷基)(C1-C6烷基)SO₂-，

(z)Ar¹(C1-C6烷基)SO₂-，

(aa)hetCyc¹-O-C(＝O)-，

(bb)hetCyc¹-CH₂-C(＝O)-，或

(cc)hetAr²；

R³是H或C1-C6烷基；和

R⁴是C1-C6烷基。

在式I-B的一个实施例中，X¹是N；X²、X³和X⁴是CH。

在式I-B的一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

在式I-B的一个实施例中，A是CN。

在式I-B的一个实施例中，环D是

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，其中环D任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基。

在式I-B的一个实施例中，环D是

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，其中环D未经取代。

在式I-B的一个实施例中，B是：任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基；任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-；羟基C2-C6烷基，其中烷基部分任选地被C3-C6亚环烷基环取代；hetAr¹C1-C3烷基-；或(hetCyc^a)C1-C3 烷基-；其中hetAr¹和hetCyc^a如对于式I-B所定义。

在式I-B的一个实施例中，B是任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基。在式 I-B的一个实施例中，B是C1-C6烷基。

在式I-B的一个实施例中，B是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6 烷基-，或羟基C2-C6烷基-，其中所述烷基部分任选地被C3-C6亚环烷基环取代。

在式I-B的一个实施例中，B是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6 烷基-。在式I-B的一个实施例中，B是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C2-C6烷基-。

在式I-B的一个实施例中，B是羟基C2-C6烷基-，其中烷基部分任选地被 C3-C6亚环烷基环取代。在一个实施例中，B基团的烷基部分未经取代。

在式I-B的一个实施例中，B是hetAr¹C1-C3烷基-，其中hetAr¹如对于式 I-B所定义。

在式I-B的一个实施例中，B是(hetCyc^a)C1-C3烷基-；其中hetCyc^a如对于式I-B所定义。

在式I-B的一个实施例中，X¹是N；X²、X³和X⁴是CH，或X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH；A是CN；且B是任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基。在式 I-B的一个实施例中，B是C1-C6烷基。

在式I-B的一个实施例中，X¹是N；X²、X³和X⁴是CH，或X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH；A是CN；且B是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6 烷基-，或羟基C2-C6烷基-，其中烷基部分任选地被C3-C6亚环烷基环取代。在一个实施例中，X¹是N；X²、X³和X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是 N；且X²和X⁴是CH。

在式I-B的一个实施例中，X¹是N；X²、X³和X⁴是CH，或X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH；A是CN；且B是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6 烷基-。在一个实施例中，X¹是N；X²、X³和X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

在式I-B的一个实施例中，X¹是N；X²、X³和X⁴是CH，或X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH；A是CN；且B是羟基C2-C6烷基-，其中烷基部分任选地被C3-C6亚环烷基环取代。在一个实施例中，B基团的烷基部分未经取代。在一个实施例中，X¹是N；X²、X³和X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

在式I-B的一个实施例中，X¹是N；X²、X³和X⁴是CH，或X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH；A是CN；且B是hetAr¹C1-C3烷基-，其中hetAr¹如对于式 I-B所定义。在一个实施例中，X¹是N；X²、X³和X⁴是CH。在一个实施例中， X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH

在式I-B的一个实施例中，X¹是N；X²、X³和X⁴是CH，或X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH；A是CN；且B是(hetCyc^a)C1-C3烷基-；其中hetCyc^a如对于式I-B所定义。在一个实施例中，X¹是N；X²、X³和X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

在式I-B的一个实施例中，X¹是N；X²、X³和X⁴是CH，或X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH；A是CN；B是任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基；且环D 是

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，其中环D任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基。在式I-B 的一个实施例中，所述环D未经取代。在一个实施例中，X¹是N；X²、X³和 X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

在式I-B的一个实施例中，X¹是N；X²、X³和X⁴是CH，或X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH；A是CN；且B是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6 烷基-，或羟基C2-C6烷基-，其中烷基部分任选地被C3-C6亚环烷基环取代；且环D是

在式I-B的一个实施例中，X¹是N；X²、X³和X⁴是CH，或X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH；A是CN；B是羟基C2-C6烷基-，其中烷基部分任选地被 C3-C6亚环烷基环取代；且环D是

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，其中环D未经取代。在一个实施例中，X¹是N；且X²、X³和 X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

在式I-B的一个实施例中，X¹是N，且X²、X³和X⁴是CH；或X¹和X³是N，且X²和X⁴是CH；A是CN；B是hetAr¹C1-C3烷基-，其中hetAr¹如对于式I-B所定义；且环D是

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，其中环D任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基。在式I-B 的一个实施例中，环D未经取代。在一个实施例中，X¹是N；且X²、X³和X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

在式I-B的一个实施例中，X¹是N，且X²、X³和X⁴是CH；或X¹和X³是N，且X²和X⁴是CH；A是CN；B是(hetCyc^a)C1-C3烷基-；其中hetCyc^a如对于式I-B所定义；且环D是

在式I-B的一个实施例中，E是hetAr²C1-C6烷基，其中烷基部分任选地被 1-3个氟取代，hetAr²C(＝O)-，Ar¹R³NC(＝O)-，或(C1-C6烷基)SO₂-，其中hetAr²、 Ar¹和R³如对于式I-B所定义。在一个实施例中，hetAr²是具有1-2个独立地选自N和O的环杂原子的5-6元杂芳基环，且任选地被独立地选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代：卤素、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)和C1-C6 烷氧基(任选被1-3个氟取代)。

在式I-B的一个实施例中，X¹是N；X²、X³和X⁴是CH，或X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH；A是CN；B是任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基；环D是

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，其中环D任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基；且E是 hetAr²C1-C6烷基，其中烷基部分任选地被1-3个氟取代，hetAr²C(＝O)-， Ar¹R³NC(＝O)-或(C1-C6烷基)SO₂-，其中hetAr²、Ar¹和R³如对于式I-B所定义。在式I-B的一个实施例中，所述环D未经取代。在一个实施例中，X¹是N；X²、 X³和X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，其中环D任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基；且E是 hetAr²C1-C6烷基，其中烷基部分任选地被1-3个氟取代。在式I-B的一个实施例中，所述环D未经取代。在一个实施例中，X¹是N；X²、X³和X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

在式I-B的一个实施例中，X1是N；X²、X³和X⁴是CH，或X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH；A是CN；B是任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基；环D是

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，其中环D任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基；且E是 hetAr²C(＝O)-，其中hetAr²如对于式I-B所定义。在式I-B的一个实施例中，所述环D未经取代。在一个实施例中，X¹是N；X²、X³和X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，其中环D任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基；且E是Ar¹R³NC(＝O)-，其中Ar¹如对于式I-B所定义。在式I-B的一个实施例中，所述环D未经取代。在一个实施例中，X¹是N；X²、X³和X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，其中环D任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基；且E是(C1-C6 烷基)SO₂-。在式I-B的一个实施例中，所述环D未经取代。在一个实施例中， X¹是N；X²、X³和X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是 CH。

在式I-B的一个实施例中，X¹是N，且X²、X³和X⁴是CH；或X¹和X³是N，且X²和X⁴是CH；A是CN；B是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-，或羟基C2-C6烷基-，其中烷基部分任选地被C3-C6亚环烷基环取代；环D是

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，其中环D任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基；且E是hetAr²C1-C6烷基，其中烷基部分任选地被1-3个氟取代，hetAr²C(＝O)-， Ar¹R³NC(＝O)-或(C1-C6烷基)SO₂-，其中hetAr²、Ar¹和R³如对于式I-B所定义。在一个实施例中，环D未经取代。在一个实施例中，X¹是N；且X²、X³和X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

在式I-B的一个实施例中，X¹是N，且X²、X³和X⁴是CH；或X¹和X³是N，且X²和X⁴是CH；A是CN；B是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-；环D是

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，其中环D任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基；且E是 hetAr²C1-C6烷基，其中烷基部分任选地被1-3个氟取代，hetAr²C(＝O)-， Ar¹R³NC(＝O)-或(C1-C6烷基)SO₂-，其中hetAr²、Ar¹和R³如对于式I-B所定义。在一个实施例中，所述环D未经取代。在一个实施例中，X¹是N；且X²、X³和X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

在式I-B的一个实施例中，X¹是N，且X²、X³和X⁴是CH；或X¹和X³是N，且X²和X⁴是CH；A是CN；B是羟基C2-C6烷基-，其中烷基部分任选地被C3-C6亚环烷基环取代；环D是

在式I-B的一个实施例中，X¹是N，且X²、X³和X⁴是CH；或X¹和X³是N，且X²和X⁴是CH；A是CN；B是hetAr¹C1-C3烷基-，其中hetAr¹如对于式I-B所定义；环D是

在式I-B的一个实施例中，X¹是N，且X²、X³和X⁴是CH；或X¹和X³是N，且X²和X⁴是CH；A是CN；B是(hetCyc^a)C1-C3烷基-，其中hetCyc^a如对于式I-B所定义；环D是

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，其中环D任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基；且E是 hetAr²C1-C6烷基，其中烷基部分任选地被1-3个氟取代，且hetAr²如对于式I-B 所定义。在一个实施例中，所述环D未经取代。在一个实施例中，hetAr²是具有1-2个独立地选自N和O的环杂原子的5-6元杂芳基环，且任选地被独立地选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代：卤素、C1-C6烷基(任选被1-3 个氟取代)和C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)。在一个实施例中，X¹是N；且X²、X³和X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，其中环D任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基；且E是 hetAr²C(＝O)-，其中hetAr²如对于式I-B所定义。在一个实施例中，所述环D 未经取代。在一个实施例中，hetAr²是具有1-2个独立地选自N和O的环杂原子的5-6元杂芳基环，且任选地被独立地选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代：卤素、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)和C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)。在一个实施例中，X¹是N；且X²、X³和X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，其中环D任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基；且E是 Ar¹R³NC(＝O)-，其中Ar¹和R³如对于式I-B所定义。在一个实施例中，环D未经取代。在一个实施例中，X¹是N；且X²、X³和X⁴是CH。在一个实施例中， X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，其中环D任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基；且E是(C1-C6 烷基)SO₂-。在一个实施例中，所述环D未经取代。在一个实施例中，X¹是N；且X²、X³和X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，其中环D任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基；且E是(C1-C6 烷基)SO₂-。在一个实施例中，环D未经取代。在一个实施例中，X¹是N；且 X²、X³和X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

在式I-B的一个实施例中，X¹是N，且X²、X³和X⁴是CH；或X¹和X³是N，且X²和X⁴是CH；A是CN；B是羟基C2-C6烷基-；环D是

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点；且E是hetAr²C1-C6烷基，其中烷基部分任选地被1-3个氟取代；或hetAr²C(＝O)，其中hetAr²任选地被独立地选自由卤素和C1-C6烷氧基 (任选被1-3个氟取代)组成的组的一个或多个取代基取代，且hetAr²如对于式 I-B所定义。在一个实施例中，X¹是N；且X²、X³和X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点；且E是hetAr²C1-C6烷基，其中烷基部分任选地被1-3个氟取代，其中hetAr²任选地被独立地选自由卤素和C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)组成的组的一个或多个取代基取代，且hetAr²如对于式I-B所定义。在一个实施例中，X¹是N；且X²、X³和X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点；且E是hetAr²C(＝O)，其中hetAr²任选地被独立地选自由卤素和C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)组成的组的一个或多个取代基取代，且hetAr²如对于式I-B所定义。在一个实施例中，X¹是N；且X²、X³和X⁴是 CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点；且E是Ar¹N(R³)C(＝O)，且Ar¹和R³如对于式I-B所定义。在一个实施例中，X¹是N；且X²、X³和X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点；且E是hetAr²C1-C6烷基-，其中烷基部分任选地被1-3个氟取代；或hetAr²C(＝O)-，且hetAr²如对于式I-B所定义。在一个实施例中，X¹是 N；且X²、X³和X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点；且E是hetAr²C1-C6烷基-，其中烷基部分任选地被1-3个氟取代，且hetAr²如对于式I-B所定义。在一个实施例中，X¹是N；且X²、X³和 X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点；且E是hetAr²C(＝O)-，且hetAr²如对于式I-B所定义。在一个实施例中，X¹是N；且X²、X³和X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，其中环D任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基；且E是 hetAr²C1-C6烷基，其中烷基部分任选地被1-3个氟取代，且hetAr²如对于式I-B 所定义。在一个实施例中，环D未经取代。在一个实施例中，hetAr²是具有1-2个独立地选自N和O的环杂原子的5-6元杂芳基环，且任选地被独立地选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代：卤素、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)和C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)。在一个实施例中，X¹是N；且X²、X³和X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，其中环D任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基；且E是 hetAr²C(＝O)-，其中hetAr²如对于式I-B所定义。在一个实施例中，环D未经取代。在一个实施例中，hetAr²是具有1-2个独立地选自N和O的环杂原子的 5-6元杂芳基环，且任选地被独立地选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代：卤素、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)和C1-C6烷氧基(任选被1-3 个氟取代)。在一个实施例中，X¹是N；且X²、X³和X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，其中环D任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、C1-C3烷基(其任选地被1-3个氟取代)或C1-C3烷氧基(其任选地被1-3个氟取代)，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基；且E是hetAr²C(＝O)-，其中hetAr²如对于式I-B所定义。在一个实施例中，环D未经取代。在一个实施例中，hetAr²是具有1-2个独立地选自N和O的环杂原子的 5-6元杂芳基环，且任选地被独立地选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代：卤素、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)和C1-C6烷氧基(任选被1-3 个氟取代)。在一个实施例中，X¹是N；且X²、X³和X⁴是CH。在一个实施例中，X¹和X³是N；且X²和X⁴是CH。

在一个实施例中，式I包含式I-C化合物，其中：

X¹、X²、X³和X⁴独立地是CH、CF或N，其中X¹、X²、X³和X4中的零个、一个或两个是N；

A是H、CN、Cl、CH₃-、CH₃CH₂-、环丙基、-CH₂CN或-CH(CN)CH₃；

B是

(a)氢，

(b)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基，

(c)羟基C2-C6烷基-，其中所述烷基部分任选地被C3-C6亚环烷基环取代，

(e)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-，

(f)(R¹R²N)C1-C6烷基-，其中R¹和R²独立地是H或C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)；

(h)(C3-C6环烷基)C1-C3烷基-，

(i)(hetCyc^a)C1-C3烷基-，或

(j)hetCyc^a；

hetCyc^a是具有1-2个独立地选自N和O的环杂原子的4-6元杂环，且任选地被OH、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)或羟基C1-C6烷基-取代；

环D是

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点；

E是

(a)氢，

(b)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基，

(f)(C1-C6烷氧基)C(＝O)，

(l)hetAr²C(＝O)-，

(o)R³R⁴NC(＝O)-，

(s)Ar¹SO₂-，

(t)hetAr²SO₂-，

(v)Ar¹C(＝O)-，

(cc)hetAr²，或

(dd)C3-C6环烷基；

R³是H或C1-C6烷基；和

R⁴是C1-C6烷基。

在式I-C的一个实施例中，X¹是N；X²、X³和X⁴是CH。

在式I-C的一个实施例中，A是CN。

在式I-C的一个实施例中，X¹是N；X²、X³和X⁴是CH；且A是CN。

在式I-C的一个实施例中，B是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6 烷基-，或羟基C2-C6烷基-，其中所述烷基部分任选地被C3-C6亚环烷基环取代。

在式I-C的一个实施例中，B是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6 烷基-。在式I-C的一个实施例中，B是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C2-C6烷基-。

在式I-C的一个实施例中，B是羟基C2-C6烷基-，其中烷基部分任选地被 C3-C6亚环烷基环取代。在一个实施例中，B基团的烷基部分未经取代。

在式I-C的一个实施例中，X¹是N；X²、X³和X⁴是CH；A是CN；且B 是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基。

在式I-C的一个实施例中，X²是N；X¹、X³和X⁴是CH；A是CN；B是羟基C2-C6烷基-，其中烷基部分任选地被C3-C6亚环烷基环取代；且E是(C1-C6 烷氧基)C(＝O)-。

在式I-C的一个实施例中，X¹是N；X²、X³和X⁴是CH；A是CN；且B 是羟基C2-C6烷基-，其中烷基部分任选地被C3-C6亚环烷基环取代。在一个实施例中，B基团的烷基部分未经取代。

式I化合物包含其药学上可接受的盐。另外，式I化合物还包含这类化合物的其它盐，其不一定是药学上可接受的盐，且可以用作用于制备和/或纯化式 I化合物和/或用于分离式I化合物的对映异构体的中间物。式I化合物的药学上可接受的盐的非限制性实例包含单盐酸盐、二盐酸盐、三氟乙酸盐和二三氟乙酸盐。在一个实施例中，式I化合物包含三氟乙酸盐和二盐酸盐。

还应理解，式I化合物或其盐可以以溶剂合物的形式分离，且因此任何这类溶剂合物都包含在本发明的范围内。举例来说，式I化合物和其盐可以非溶剂化形式以及与药学上可接受的溶剂(如水、乙醇等)的溶剂化形式存在。

在一个实施例中，式I化合物包含实例1-561的化合物和其立体异构体和药学上可接受的盐和溶剂合物。在一个实施例中，实例1-561的化合物是呈游离碱形式。在一个实施例中，实例1-561的化合物是二盐酸盐和三氟乙酸盐。

术语“药学上可接受的”指示所述化合物或其盐或组合物在化学和/或毒理学上与包括制剂的其它成分和/或用其治疗的患者相容。

本文提供的化合物还可以在构成这类化合物的一个或多个原子上含有非天然比例的原子同位素。即，特别是当提及关于根据式I的化合物时，原子包括天然存在或合成产生的所述原子的所有同位素和同位素混合物，具有天然丰度或同位素富集形式。举例来说，当提及氢时，应理解为是指¹H、²H、³H或其混合物；当提及碳时，应理解为是指¹¹C、¹²C、¹³C、¹⁴C或其混合物；当提及氮时，应理解为是指¹³N、¹⁴N、¹⁵N或其混合物；当提及氧时，应理解为是指 ¹⁴O、¹⁵O、¹⁶O、¹⁷O、¹⁸O或其混合物；且当提及氟时，应理解为是指¹⁸F、¹⁹F 或其混合物。因此，本文提供的化合物还包括具有一种或多种原子的一种或多种同位素的化合物和其混合物，包含放射性化合物，其中一种或多种非放射性原子已被其放射性富集同位素中的一种取代。放射性标记的化合物适用作治疗剂，例如癌症治疗剂、研究试剂(例如测定试剂)和诊断剂(例如活体内成像剂)。本文提供的化合物的所有同位素变异体不论是否具放射性都意图涵盖在本发明的范围内。

出于说明性目的，方案1-6显示了用于制备本文提供的化合物的一般方法以及关键中间物。关于个别反应步骤的较详细描述，参见以下实例章节。所属领域的技术人员应了解，可以使用其它合成途径来合成本发明化合物。尽管在方案中描述了特定的起始物质和试剂且在下面进行论述，但可以容易地替换其它起始物质和试剂以得到各种衍生物和/或反应条件。另外，通过下文所描述的方法制备的许多化合物可以根据本公开使用所属领域的技术人员熟知的常规化学反应来进行进一步修饰。

方案1显示合成化合物12的通用方案，其中A是CN，且B、X¹、X²、X³、 X⁴、环D和E如对于式I所定义。

通过用O-(均三甲苯磺酰基)羟胺处理市售的3-溴-5-甲氧基吡啶(化合物1) 得到化合物2。O-均三甲苯磺酰基羟胺可如以下中所描述来制备：Mendiola，J. 等人《有机工艺研究开发》(Org.Process Res.Dev.)2009，13(2)，263-267。化合物2可以与丙炔酸乙酯反应，得到化合物3A和3B的混合物，其通常分别以约 2∶1到9∶1的比率获得。化合物3A和3B的混合物可在高温下用48％HBr处理，然后再结晶或色谱纯化，以分离作为次要异构体的化合物4A和作为主要异构体的化合物4B。在分离之后，可以用POCl₃处理化合物4A，得到化合物5。可以使用NH₂OH将甲酰基转化为肟基，得到化合物6。可以使用乙酸酐将肟基转化为腈基，得到化合物7。通过用三氯化铝处理化合物7，可以将化合物7的甲氧基转化为羟基，得到化合物8。

为了制备其中B是氢的化合物12，化合物12可通过以下来制备：使用适当钯催化的交叉偶联反应条件，例如Suzuki偶联反应条件(例如，钯催化剂和任选地配体，在无机碱存在的情况下，例如含Pd(PPh₃)₄和Na₂CO₃的二恶烷，在高温下)，将化合物8与对应硼酸酯化合物10(其中环D、X¹、X²、X³和X⁴如对于式I所定义；P¹是氨基保护基；Z是-B(OR^x)(OR^y)，且R^z和R^y是H或(1-6C) 烷基，或R^x和R^y与其所连接的原子一起形成任选被1-4个选自(C1-C3烷基)的取代基取代的5-6元环)偶联，得到化合物11a。化合物11a的环D上的保护基P¹可以在标准条件下去除(例如，可以通过将化合物11a处理至酸性条件，例如HCl，来去除Boc基团)，得到其中B是氢且E是氢的化合物12。或者，去保护的环D可以进行官能化(即，与适当试剂反应或用适当试剂处理)，以在下文所描述的标准条件下引入E基团，得到其中B是氢且E如对于式I所定义(除E不是氢以外)的化合物12。

或者，为了制备其中B如对于式I所定义(除氢以外)的化合物12，化合物11a可以在Mitsunobu反应条件(例如PPh₃和偶氮二甲酸二异丙酯)下与试剂反应，得到化合物11，所述试剂如：任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基-OH；羟基C2-C6烷基-OH；二羟基C3-C6烷基-OH；任选被1-3个氟取代的(C1-C6 烷氧基)C1-C6烷基-X；(R¹R²N)C1-C6烷基-OH，其中R¹和R²如对于式I所定义；hetAr¹C1-C3烷基-OH；(C3-C6环烷基)C1-C3烷基-OH；(hetCyc^a)C1-C3烷基-OH；或hetCyc^a-OH，其中hetAr¹和hetCyc^a如对于式I所定义，且其中所述试剂中的每一个任选被保护基取代随后可由如上文所描述的化合物11，随后去除B上的保护基(如果存在)来制备化合物12。

作为用于制备其中B如对于式I所定义(除氢以外)的化合物12的替代方法，化合物9可通过以下来制备：使化合物8与试剂在适当碱(例如碱金属碳酸盐，如碳酸钾)存在的情况下反应，所述试剂如：任选被1-3个氟取代的C1-C6 烷基-X；羟基C2-C6烷基-X；二羟基C3-C6烷基-X；任选被1-3个氟取代的(C1-C6 烷氧基)C1-C6烷基-X；(R¹R²N)C1-C6烷基-X，其中R¹和R²如对于式I所定义； hetAr¹C1-C3烷基-X；(C3-C6环烷基)C1-C3烷基-X；(hetCyc^a)C1-C3烷基-X；或hetCyc^a-X，其中hetAr¹和hetCyc^a如对于式I所定义且X是离去原子或离去基团(如卤素或三氟甲磺酸根)，其中所述试剂中的每一个任选地被保护基(例如，如果B基团具有一个或两个额外的羟基，则是叔丁基二甲基硅烷基)取代。举例来说，当B是任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基时，化合物9可以通过以下来制备：使化合物8与C1-C6烷基-X反应，其中所述烷基任选被1-3个氟取代且X是卤素(如Br或Cl)或离去基团(如三氟甲磺酸根)。随后可以通过以下来制备化合物11：使用适当的钯催化的交叉偶联反应条件，例如Suzuki偶联反应条件(例如，钯催化剂和任选的配体，在无机碱存在的情况下，例如含 Pd(PPh₃)₄和Na₂CO₃的二恶烷，在高温下)，将化合物9与对应硼酸酯化合物10 偶联。随后可由如上文所描述的化合物11，随后去除B上的保护基(如果存在) 来制备化合物12。

方案2显示合成化合物12的另一种通用方案，其中A是CN，B、X¹、X²、 X³、X⁴、环D和E如对于式I所定义。

可使用适当钯催化的交叉偶联反应条件，例如Suzuki偶联反应条件(例如，钯催化剂和任选地配体，在无机碱存在的情况下，例如含Pd(PPh₃)₄和Na₂CO₃的二恶烷，在高温下)，将化合物9(例如如方案1中所描述来制备的)(其中B 如对于式I所定义)与对应硼酸酯13(其中X¹、X²、X³和X⁴如对于式I所定义；L²是离去基团，如三氟甲磺酸根或卤素；Z是-B(OR^x)(OR^y)，且R^z和R^y是H或(1-6C)烷基，或R^x和R^y与其所连接的原子一起形成任选被1-4个选自 (C1-C3烷基)的取代基取代的5-6元环)偶联，得到化合物14。化合物16可以通过以下来制备：在适当S_NAr条件下(例如任选地在碱(如K₂CO₃)存在的情况下且在高温下)，使化合物14与化合物15偶联，其中环D如对于式I所定义，且P¹是氨基保护基。

化合物16的环D环上的保护基P¹可在标准条件下去除(例如可通过将化合物1处理至酸性条件，例如HCl，来去除Boc基团)，得到化合物12，其中E 是H。或者，去保护环D可进行官能化(即，与适当试剂反应或用适当试剂处理)，以在如下文所描述的标准条件下引入E基团，得到化合物12，其中E如对于式I所定义，除E不是H以外。

方案3显示合成化合物21的通用方案，其中A是H，且B、X¹、X²、X³、 X⁴、环D和E如对于式I所定义。

化合物18可通过以下来制备：使用适当钯催化的交叉偶联反应条件，例如 Suzuki偶联反应条件(例如钯催化剂和任选地配体，在无机碱存在的情况下，例如含Pd(PPh₃)₄和Na₂CO₃的二恶烷，在高温下)，将化合物4A(例如如方案 1中所描述来制备的)与对应硼酸酯化合物10(其中环D、X¹、X²、X³和X⁴如对于式I所定义；P¹是氨基保护基；Z是-B(OR^x)(OR^y)，且R^z和R^y是H或(1-6C) 烷基，或R^x和R^y与其所连接的原子一起形成任选被1-4个选自(C1-C3烷基)的取代基取代的5-6元环)偶联。可以通过用三氯化铝处理化合物18来制备化合物19。

为了制备化合物21(其中B如对于式I所定义(除氢以外))，化合物20 可通过以下来制备：使化合物19与试剂反应，所述试剂如：任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基-X；羟基C2-C6烷基-X；二羟基C3-C6烷基-X；任选被1-3 个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-X；(R¹R²N)C1-C6烷基-X，其中R¹和 R²如对于式I所定义；hetAr¹C1-C3烷基-X；(C3-C6环烷基)C1-C3烷基-X； (hetCyc^a)C1-C3烷基-X或hetCyc^a-X，其中hetAr¹和hetCyc^a如对于式I所定义且X是离去原子或离去基团(如卤素或三氟甲磺酸根)，其中所述试剂中的每一个任选地被保护基(例如如果B基团具有一个或两个额外羟基，那么是叔丁基二甲基硅烷基)取代。举例来说，当B是任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基时，化合物可以通过以下来制备：使化合物19与C1-C6烷基-X反应，其中所述烷基任选被1-3个氟取代且X是卤素(如Br或Cl)或离去基团(如三氟甲磺酸根)。化合物20的环D环上的保护基P¹可在标准条件下去除(例如可通过将化合物20处理至酸性条件，例如HCl，来去除Boc基团)，得到化合物21，其中E是H。或者，化合物21的去保护环D可进行官能化(即，与适当试剂反应或用适当试剂处理)，以在如下文所描述的标准条件下引入E基团，得到化合物21，其中E如对于式I所定义，除E不是H以外。

或者，为了制备其中B如对于式I所定义(除氢以外)的化合物21，化合物19可以在Mitsunobu反应条件(例如PPh₃和偶氮二甲酸二异丙酯)下与试剂反应，得到化合物20，所述试剂如：任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基-OH；羟基C2-C6烷基-OH；二羟基C3-C6烷基-OH；任选被1-3个氟取代的(C1-C6 烷氧基)C1-C6烷基-X；(R¹R²N)C1-C6烷基-OH，其中R¹和R²如对于式I所定义；hetAr¹C1-C3烷基-OH；(C3-C6环烷基)C1-C3烷基-OH；(hetCyc^a)C1-C3烷基-OH；或hetCyc^a-OH，其中hetAr¹和hetCyc^a如对于式I所定义，其中所述试剂中的每一个任选被保护基取代。随后可由如上文所描述的化合物20，随后去除B上的保护基(如果存在)来制备化合物21。

当基团B是氢时，化合物21可以根据本文所描述的去保护和任选的官能化步骤，由化合物19制备。

方案4显示合成化合物21的替代性通用方案，其中A是H，且B、X¹、 X²、X³、X⁴、环D和E如对于式I所定义。

化合物22可以通过用三氯化铝处理化合物4A(例如如方案1中所描述制备的)来制备。

为了制备化合物21(其中B是氢)，化合物19可通过以下来制备：使用适当钯催化的交叉偶联反应条件，例如Suzuki偶联反应条件(例如，钯催化剂和任选地配体，在无机碱存在的情况下，例如含Pd(PPh₃)₄和Na₂CO₃的二恶烷，在高温下)，将化合物22与对应硼酸酯化合物10(其中环D、X¹、X²、X³和 X⁴如对于式I所定义；P¹是氨基保护基；Z是-B(OR^x)(OR^y)，且R^z和R^y是H 或(1-6C)烷基，或R^x和R^y与其所连接的原子一起形成任选被1-4个选自(C1-C3烷基)的取代基取代的5-6元环)偶联。化合物21可以根据方案3所描述的方法由化合物19制备。

或者，为了制备化合物21(其中B如对于式I所定义(除氢以外))，化合物23可通过以下来制备：使化合物22与试剂反应，所述试剂如：任选被1-3 个氟取代的C1-C6烷基-X；羟基C2-C6烷基-X；二羟基C3-C6烷基-X；任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-X；(R¹R²N)C1-C6烷基-X，其中 R¹和R²如对于式I所定义；hetAr¹C1-C3烷基-X；(C3-C6环烷基)C1-C3烷基-X； (hetCyc^a)C1-C3烷基-X或hetCyc^a-X，其中hetAr¹和hetCyc^a如对于式I所定义且X是离去原子或离去基团(如卤素或三氟甲磺酸根)，其中所述试剂中的每一个任选地被保护基(例如如果B基团具有一个或两个额外羟基，那么是叔丁基二甲基硅烷基)取代。举例来说，当B是任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基时，化合物23可以通过以下来制备：使化合物22与C1-C6烷基-X反应，其中所述烷基任选被1-3个氟取代且X是卤素(如Br或Cl)或离去基团(如三氟甲磺酸根)。可通过使化合物23与如方案3中所描述的化合物10偶联来制备化合物20。化合物21可以根据方案3所描述的方法由化合物20制备。

或者，为了制备其中B如对于式I所定义(除氢以外)的化合物21，化合物19可以在Mitsunobu反应条件(例如PPh₃和偶氮二甲酸二异丙酯)下与试剂反应，得到化合物20，所述试剂如：任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基-OH；羟基C2-C6烷基-OH；二羟基C3-C6烷基-OH；任选被1-3个氟取代的(C1-C6 烷氧基)C1-C6烷基-X；(R¹R²N)C1-C6烷基-OH，其中R¹和R²如对于式I所定义；hetAr¹C1-C3烷基-OH；(C3-C6环烷基)C1-C3烷基-OH；(hetCyc^a)C1-C3烷基-OH；或hetCyc^a-OH，其中hetAr¹和hetCyc^a如对于式I所定义，其中所述试剂中的每一个任选被保护基取代。随后可由如方案3所描述的化合物20，随后去除B上的保护基(如果存在)来制备化合物21。

方案5显示合成化合物21的替代性通用方案，其中A是H，且B、X¹、 X²、X³、X⁴、环D和E如对于式I所定义。

为了制备化合物21(其中B如对于式I所定义(除氢以外))，化合物23 可通过以下来制备：使化合物22与试剂反应，所述试剂如：任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基-X；羟基C2-C6烷基-X；二羟基C3-C6烷基-X；任选被1-3 个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-X；(R¹R²N)C1-C6烷基-X，其中R¹和 R²如对于式I所定义；hetAr¹C1-C3烷基-X；(C3-C6环烷基)C1-C3烷基-X；(hetCyc^a)C1-C3烷基-X或hetCyc^a-X，其中hetAr¹和hetCyc^a如对于式I所定义且X是离去原子或离去基团(如卤素或三氟甲磺酸根)，其中所述试剂中的每一个任选地被保护基(例如如果B基团具有一个或两个额外羟基，那么是叔丁基二甲基硅烷基)取代。举例来说，当B是任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基时，化合物可以通过以下来制备：使化合物22与C1-C6烷基-X反应，其中所述烷基任选被1-3个氟取代且X是卤素(如Br或Cl)或离去基团(如三氟甲磺酸根)。

化合物24可通过以下来制备：使用适当钯催化的交叉偶联反应条件，例如 Suzuki偶联反应条件(例如钯催化剂和任选地配体，在无机碱存在的情况下，例如含Pd(PPh₃)₄和Na₂CO₃的二恶烷，在高温下)，使化合物23与硼酸酯13(其中X¹、X²、X³和X⁴如对于式I所定义；L²是离去基团，如三氟甲磺酸根或卤素；Z是-B(OR^x)(OR^y)，且R^z和R^y是H或(1-6C)烷基，或R^x和R^y与其所连接的原子一起形成任选被1-4个选自(C1-C3烷基)的取代基取代的5-6元环)反应。

为了制备化合物21(其中B是氢)，可通过使化合物22直接与如上文所描述的化合物13反应来制备化合物24。

化合物20可通过以下来制备：在适当S_NAr条件下(例如，任选地在碱(如 K₂CO₃)存在的情况下和在高温下)，使化合物24与化合物15(其中P¹是氨基保护基)偶联。

化合物21可以根据方案3所描述的方法由化合物20制备。

方案6显示合成化合物31的通用方案，其中A是Cl，且B、X¹、X²、X³、 X⁴、环D和E如对于式I所定义。

化合物25可以通过用三氯化铝处理化合物4A(例如如方案1中所描述制备的)来制备。

可以通过用三氯化铝处理化合物25来制备化合物26。

为了制备化合物31(其中B如对于式I所定义(除氢以外))，化合物27 可通过以下来制备：使化合物26与试剂反应，所述试剂如：任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基-X；羟基C2-C6烷基-X；二羟基C3-C6烷基-X；任选被1-3 个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-X；(R¹R²N)C1-C6烷基-X，其中R¹和 R²如对于式I所定义；hetAr¹C1-C3烷基-X；(C3-C6环烷基)C1-C3烷基-X； (hetCyc^a)C1-C3烷基-X或hetCyc^a-X，其中hetAr¹和hetCyc^a如对于式I所定义且X是离去原子或离去基团(如卤素或三氟甲磺酸根)，其中所述试剂中的每一个任选地被保护基(例如如果B基团具有一个或两个额外羟基，那么是叔丁基二甲基硅烷基)取代。举例来说，当B是任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基时，化合物可以通过以下来制备：使化合物26与C1-C6烷基-X反应，其中所述烷基任选被1-3个氟取代且X是卤素(如Br或Cl)或离去基团(如三氟甲磺酸根)。

化合物28(其中基团B是甲基)、29(其中基团B是氢)和30(其中基团 B不是氢)可通过以下来制备：使用适当钯催化的交叉偶联反应条件，例如 Suzuki偶联反应条件(例如钯催化剂和任选地配体，在无机碱存在的情况下，例如含Pd(PPh₃)₄和Na₂CO₃的二恶烷，在高温下)，使化合物25、26和27分别与对应硼酸酯化合物10(其中环D、X¹、X²、X³和X⁴如对于式I所定义；P¹是氨基保护基；Z是-B(OR^x)(OR^y)，且R^z和R^y是H或(1-6C)烷基，或R^x和R^y与其所连接的原子一起形成任选被1-4个选自(C1-C3烷基)的取代基取代的5-6 元环)偶联。

化合物29或30的环D上的保护基P¹可以在标准条件下去除(例如，可以通过将化合物29或30处理至酸性条件，例如HCl，来去除Boc基团)，得到其中E是氢的化合物31。或者，去保护的环D可进行官能化(即，与适当试剂反应或用适当试剂处理)，以在如下文所描述的标准条件下纳入E基团，得到化合物31，其中E如对于式I所定义，除E不是H以外。

使用所属领域的技术人员熟知的标准化学方法，方案1-6中描述的化合物 12、21和31的环D可以进行官能化(即，与适当试剂反应或用适当试剂处理)，以纳入E基团，其中E是除氢之外的对于式I所定义的任一种E基团。如本文所用，术语“官能化”是指方法步骤，其中将式12、21或31化合物(其中E 是氢)与适当试剂反应或用适当试剂处理，得到式12、21或31化合物(其中 E如对于式I所定义，除氢以外)。

举例来说，式I化合物(其中E是：任选被一个到三个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-；任选被一个到三个氟取代的(羟基C2-C6烷基)C(＝O)-；(C1-C6烷氧基)C(＝O)-；(C3-C6环烷基)C(＝O)-(其中所述环烷基任选地被(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基或具有1-3个独立地选自N和O的环杂原子的5-6元杂芳基环取代)；Ar¹(C1-C6烷基)C(＝O)-(其中烷基部分任选地被OH、羟基C1-C6烷基- 或C1-C6烷氧基取代)；hetAr²(C1-C6烷基)C(＝O)-(其中烷基部分任选地被OH、羟基C1-C6烷基或C1-C6烷氧基取代)；或hetCyc¹(C1-C6烷基)C(＝O)-)，可通过以下来获得：使用常规酰胺键形成条件，将具有去保护的环D的化合物12(即，其中E是氢的化合物12)用对应羧酸处理，例如将对应羧酸用活化剂(例如HATU)处理，随后在适当溶剂(如DMA)中，在碱(例如胺碱，如DIEA) 存在的情况下，添加具有去保护的环D(即，其中E是H)的化合物12，得到官能化化合物12(即，在此情况下，其中E是以下的化合物12：任选被一个到三个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-；任选被一个到三个氟取代的(羟基C2-C6 烷基)C(＝O)-；(C1-C6烷氧基)C(＝O)-；(C3-C6环烷基)C(＝O)-(其中所述环烷基任选地被(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-或具有1-3个独立地选自N和O的环杂原子的5-6元杂芳基环取代)；Ar¹(C1-C6烷基)C(＝O)-(其中烷基部分任选地被 OH、羟基C1-C6烷基-或C1-C6烷氧基取代)；hetAr²(C1-C6烷基)C(＝O)-(其中烷基部分任选地被OH、羟基C1-C6烷基-或C1-C6烷氧基取代)；或 hetCyc¹(C1-C6烷基)C(＝O)-)。对化合物21和31可使用相同的化学方法，以制备官能化化合物21和31(即，在此情况下，分别地其中E是以下的化合物21 和31：任选被一个到三个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-；任选被一个到三个氟取代的(羟基C2-C6烷基)C(＝O)-；(C1-C6烷氧基)C(＝O)-；(C3-C6环烷基)C(＝O)- (其中所述环烷基任选地被(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-或具有1-3个独立地选自 N和O的环杂原子的5-6元杂芳基环取代)；Ar¹(C1-C6烷基)C(＝O)-(其中烷基部分任选地被OH、羟基C1-C6烷基-或C1-C6烷氧基取代)；hetAr²(C1-C6烷基)C(＝O)-(其中烷基部分任选地被OH、羟基C1-C6烷基-或(C1-C6)烷氧基取代)；或hetCyc¹(C1-C6烷基)C(＝O)-)。

作为另一实例，式I化合物(其中E是hetCyc¹C(＝O)-或R³R⁴NC(＝O)-)可通过以下来制备：首先在DIEA存在的情况下且在溶剂(如DCM)中，用三光气活化化合物12的环D的去保护的环氮(即，其中E是H)，随后添加具有式 hetCyc¹-H或R³R⁴NH(其中hetCyc¹-H是具有1-2个独立地选自N、O和S的环杂原子的饱和4-6元杂环，其中所述环具有至少一个环N原子，且“-H”指示氢是在环氮原子上，其中所述杂环任选地被一个或多个独立选择的C1-C6烷氧基取代基取代)的胺试剂，得到官能化化合物12(即，在此情况下，其中E 是hetCyc¹C(＝O)-或R³R⁴NC(＝O)-的化合物12)。对化合物21和31可使用相同的化学方法，以制备官能化化合物21和31(即，在此情况下，分别地其中E 是hetCyc¹C(＝O)-或R³R⁴NC(＝O)-的化合物21和31)。

作为另一实例，式I化合物(其中E是：任选被一个到三个氟取代的C1-C6 烷基；任选被1-3氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-；Ar¹C1-C6烷基-； hetAr²C1-C6烷基-，其中烷基部分任选地被1-3个氟取代；或hetCyc¹C1-C6烷基-)可通过以下来制备：在碱(如DIEA)存在的情况下，在溶剂中，在环境温度或高温下，将去保护的化合物12(即，其中E是H)用对应试剂处理，所述对应试剂具有任选被一个到三个氟取代的式C1-C6烷基-X、任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-X、Ar¹C1-C6烷基-X、hetAr²C1-C6烷基-X 或hetCyc¹C1-C6烷基-X(其中X是Br或Cl)，得到官能化化合物12(即，在此情况下，其中E是以下的化合物12：任选被一个到三个氟取代的C1-C6烷基；任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基；Ar¹C1-C6烷基-；hetAr²C1-C6 烷基-，其中烷基部分任选地被1-3个氟取代；或hetCyc¹C1-C6烷基-)。对化合物21和31可使用相同的化学方法，以制备官能化化合物21和31(即，在此情况下，在此情况下，分别地其中E是以下的化合物21和31：任选被一个到三个氟取代的C1-C6烷基；任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-； Ar¹C1-C6烷基-；hetAr²C1-C6烷基-，其中烷基部分任选地被1-3个氟取代；或 hetCyc¹C1-C6烷基-)。

作为另一实例，式I化合物(其中E是：任选被一个到三个氟取代的C1-C6 烷基；任选被1-3氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-；Ar¹C1-C6烷基-； hetAr²C1-C6烷基-，其中烷基部分任选地被1-3个氟取代；或hetCyc¹C1-C6烷基-)可通过以下来制备：在还原剂(例如NaBH(AcO)₃)存在的情况下，将去保护的化合物12(即，其中E是H)用对应醛处理，所述对应醛例如任选被一个到三个氟取代的(C1-C5烷基(C＝O)H；任选被一个到三个氟取代的(C1-C6烷氧基)(C1-C5烷基)C(＝O)H；Ar¹(C1-C5烷基)C(＝O)H；hetAr²(C1-C5烷基)C(＝O)H；或hetCyc¹(C1-C5烷基)-C(＝O)H，得到官能化化合物12(即，在此情况下，其中E是以下的化合物12：任选被一个到三个氟取代的C1-C6烷基；任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基；Ar¹C1-C6烷基-；hetAr²C1-C6 烷基-，其中烷基部分任选地被1-3个氟取代；或hetCyc¹C1-C6烷基-)。对化合物21和31可使用相同的化学方法，以制备官能化化合物21和31(即，在此情况下，在此情况下，分别地其中E是以下的化合物21和31：任选被一个到三个氟取代的C1-C6烷基；任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-； Ar¹C1-C6烷基-；hetAr²C1-C6烷基-，其中烷基部分任选地被1-3个氟取代；或 hetCyc¹C1-C6烷基-)。

因此，本文还提供一种用于制备如本文所定义的式I化合物或其药学上可接受的盐的方法，其包括：

(a)对于式I化合物，其中E是H，A是CN、-CH2CN或-CH(CN)CH₃，且B、X¹、X²、X³、X⁴和环D如对于式I所定义，在钯催化剂和任选地配体存在的情况下，且在碱存在的情况下，将具有下式的对应化合物9

其中B如对于式I所定义，与以下式10的对应硼酸酯偶联

其中P¹是氨基保护基，Z是-B(OR^x)(OR^y)，其中R^x和R^y是H或C1-C6烷基，或R^x和R^y与其所连接的原子一起形成任选被1-4个选自C1-C3烷基的取代基取代的5-6元环，且X¹、X²、X³和X⁴如对于式I所定义，随后去除保护基；或

(b)对于式I化合物，其中A、B、X¹、X²、X³、X⁴、环D和E如对于式 I所定义，不同之处在于E不是氢，将下式的对应化合物官能化

其中A、环D、B、X¹、X²、X³和X⁴如对于式I所定义，且E1是氢；或

(c)对于式I化合物，其中A是CN，且环D、B、X¹、X²、X³、X⁴和E 如对于式I所定义，使式14的对应化合物

其中B、X¹、X²、X³和X⁴如对于式I所定义，且L²是离去基团或原子，与以下式15的化合物反应

其中P¹是氨基保护基，随后去除保护基P¹和任选地将环D官能化；或

(d)对于式I化合物，其中E是H，A是CN，且B、X¹、X²、X³、X4和环D如对于式I所定义，将式14化合物

其中L²是离去基团或原子，且B、X¹、X²、X³和X⁴如对于式I所定义，与式15的化合物偶联

其中P¹是氨基保护基，随后去除保护基P¹；或

(e)对于式I化合物，其中A是H，B是H，且X¹、X²、X³、X⁴、环D和 E如对于式I所定义，将式18化合物用三氯化铝处理

其中P¹是氨基保护基，且X¹、X²、X³、X⁴、环D如对于式I所定义，得到化合物19

其中环D、X¹、X²、X³和X⁴如对于式I所定义，且P¹是氨基保护基；

随后去除保护基P¹和任选地将环D官能化；或

(f)对于式I化合物，其中A是H，B是任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基、羟基C2-C6烷基、二羟基C3-C6烷基、任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、(R¹R²N)C1-C6烷基、(hetAr¹)C1-C3烷基、(C3-C6环烷基)C1-C3 烷基、(hetCyc^a)C1-C3烷基或hetCyc^a，其中R¹、R²、hetAr¹、hetCyc^a、X¹、X²、 X³、X⁴、环D和E如对于式I所定义，

(i)用三氯化铝处理式18化合物

其中P¹是氨基保护基，且X¹、X²、X³、X⁴和环D如对于式I所定义，得到化合物19

其中环D如对于式I所定义，P¹是氨基保护基，且X¹、X²、X³和X⁴如对于式I所定义；

(ii)在存在碱的情况下，使化合物19与以下反应：C1-C6烷基-X，其任选被1-3个氟取代；羟基C2-C6烷基-X，其中所述烷基部分任选地被C3-C6亚环烷基环取代；二羟基C3-C6烷基-X；(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-X，其任选被 1-3个氟取代；(R¹R²N)C1-C6烷基-X；(hetAr¹)C1-C3烷基-X；(C3-C6环烷基)C1-C3烷基-X；(hetCyc^a)C1-C3烷基-X；或hetCyc^a-X，其中R¹、R²、hetAr¹和hetCyc^a如对于式I所定义，且X是离去原子或基团，如卤素或三氟甲磺酸根，得到化合物20

其中环D如对于式I的D所定义，P¹是氨基保护基，X¹、X²、X³和X⁴如对于式I所定义，且B是任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基、羟基C2-C6烷基、二羟基C3-C6烷基、任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、 (R¹R²N)C1-C6烷基、(hetAr¹)C1-C3烷基、(C3-C6环烷基)C1-C3烷基、 (hetCyc^a)C1-C3烷基或hetCyc^a，其中R¹、R²、hetAr¹、hetCyc^a如对于式I所定义，随后去除保护基P¹和任选地将环D官能化；或

(g)对于式I化合物，其中A是H或Cl，B是H，且X¹、X²、X³、X⁴、环D和E如对于式I所定义，将下式化合物用式10的对应硼酸酯处理

其中A是H或Cl，

其中环D、X¹、X²、X³和X⁴如对于式I所定义；P¹是氨基保护基；Z是 -B(OR^x)(OR^y)，且R^z和R^y是H或(1-6C)烷基，或R^x和R^y与其所连接的原子一起形成任选被1-4个选自C1-C3烷基的取代基取代的5-6元环，得到式19化合物

其中环D、X¹、X²、X³和X⁴如对于式I所定义，P¹是氨基保护基，且A 是H或Cl，随后去除保护基P¹和任选地将环D官能化；或

(h)对于式I化合物，其中A是H或Cl，且B、X¹、X²、X³、X⁴、环D 和E如对于式I所定义，在钯催化剂和任选地配体存在的情况下，且在碱存在的情况下，将下式的化合物

其中A是H或Cl，且B如对于式I所定义，与式10的对应硼酸酯偶联

其中环D、X¹、X²、X³和X⁴如对于式I所定义；P¹是氨基保护基；Z是-B(OR^x)(OR^y)，且R^z和R^y是H或(1-6C)烷基，或R^x和R^y与其所连接的原子一起形成任选被1-4个选自C1-C3烷基的取代基取代的5-6元环，得到下式的化合物

其中环D、X¹、X²、X³、X⁴和B如对于式I所定义；A是H或Cl；且P¹是氨基保护基，随后去除保护基P¹和任选地将环D官能化；

(i)对于式I化合物，其中A是H，且B、X¹、X²、X³、X⁴、环D和E如对于式I所定义，将式24化合物

其中L²是离去基团，且B、X¹、X²、X³和X⁴如对于式I所定义，与式15 的化合物偶联

其中P¹是氨基保护基，且环D如对于式I所定义，得到式20化合物

其中P¹是氨基保护基，且环D、X¹、X²、X³、X⁴和B如对于式I所定义，随后去除保护基P¹和任选地将环D官能化；且

去除任何额外保护基团(如果存在)，且任选地形成其药学上可接受的盐。

如本文所用的术语“氨基保护基”是指通常用于封闭或保护氨基而对化合物上的其它官能团进行反应的基团的衍生物。用于本文所描述的任何方法中的合适保护基的实例包含氨基甲酸酯、酰胺、烷基和芳基、亚胺，以及许多N- 杂原子衍生物，所述保护基可被除去以再生所需的胺基。氨基保护基的非限制性实例是乙酰基、三氟乙酰基、叔丁氧基羰基(“Boc”)、苯甲氧羰基(“CBz”) 和9-芴基亚甲氧基羰基(“Fmoc”)。这些基团和其它保护基的其它实例见于以下中：T.W.Greene等人，《有机合成中的格林氏保护基》(Greene′sProtective Groups in Organic Synthesis).New York：Wiley Interscience，2006。

羟基可用任何适宜的羟基保护基来保护，例如如以下中所描述的羟基保护基：T.W.Greene等人，《有机合成中的格林氏保护基》(Greene′s Protective Groups inOrganic Synthesis).New York：Wiley Interscience，2006。实例包含苯甲基、三苯甲基、硅烷基醚等。

在以上方法中的任一种中描述的化合物中的氮原子，可用适宜的氮保护基来保护，例如如以下中所描述的氮保护基：Greene和Wuts编，“《有机合成中的保护基》(Protecting Groups in Organic Synthesis)”，第2版.New York；John Wiley&Sons，Inc.，1991。氮保护基的实例包含酰基和烷氧羰基，如叔丁氧基羰基(BOC)、苯氧基羰基和[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基(SEM)。

测试化合物充当RET抑制剂的能力可通过实例A中所描述的测定法来显示。IC₅₀值显示于表5中。

在一些实施例中，本文提供的化合物呈现强效和选择性的RET抑制。举例来说，本文提供的化合物呈现针对野生型RET的纳摩尔效能且选择RET突变体，包含KIF5B-RET融合体和V804M网守突变体，对相关激酶具有极小的活性。

在一些实施例中，式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物选择性地靶向RET激酶。举例来说，式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物可优于另一激酶或非激酶靶标而选择性地靶向RET激酶。

在一些实施例中，式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物呈现对RET 激酶的选择性比另一激酶高至少30倍。举例来说，式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物呈现对于RET激酶比另一激酶高至少40倍的选择性、至少 50倍的选择性、至少60倍的选择性、至少70倍的选择性、至少80倍的选择性、至少90倍的选择性、至少100倍的选择性、至少200倍的选择性、至少 300倍的选择性、至少400倍的选择性、至少500倍的选择性、至少600倍的选择性、至少700倍的选择性、至少800倍的选择性、至少900倍的选择性或至少1000倍的选择性。在一些实施例中，在细胞测定法(例如，如本文提供的细胞测定法)中测量对于RET激酶优于另一激酶的选择性。

在一些实施例中，本文提供的化合物可呈现对于RET激酶优于KDR激酶 (例如VEGFR2)的选择性。在一些实施例中，观测到对于RET激酶优于KDR 激酶的选择性而不丧失网守突变体效能。在一些实施例中，相较于抑制 KIF5B-RET，比KDR激酶的选择性高至少10倍(例如，至少40倍的选择性、至少50倍的选择性、至少60倍的选择性、至少70倍的选择性、至少80倍的选择性、至少90倍的选择性、至少100倍的选择性、至少150倍的选择性、至少200倍的选择性、至少250倍的选择性、至少300倍的选择性、至少350倍的选择性或至少400倍的选择性)(即化合物针对KIF5B-RET比KDR更强效)。在一些实施例中，对于RET激酶的选择性比KDR激酶的高约30倍。在一些实施例中，对于RET激酶的选择性比KDR激酶的高至少100倍。在一些实施例中，对于RET激酶的选择性比KDR激酶的高至少150倍。在一些实施例中，对于RET激酶的选择性比KDR激酶的高至少400倍。不受任何理论限制，强效KDR激酶抑制被认为是靶向RET的多激酶抑制剂(multikinase inhibitor； MKI)中的共同特征，且可能是观测到这类化合物的剂量限制性毒性的根源。

在一些实施例中，V804M的抑制与对于野生型RET所观测到的相似。举例来说，V804M的抑制在野生型RET的抑制的约2倍(例如，约5倍、约7 倍、约10倍)内(即化合物对野生型RET和V804M具有相似的效力)。在一些实施例中，在酶测定法(例如，如本文所提供的酶测定法)中测量对于野生型或V804M RET激酶优于另一激酶的选择性。在一些实施例中，本文提供的化合物对RET突变细胞呈现出选择性细胞毒性。

在一些实施例中，本文提供的化合物呈现出大脑和/或中枢神经***(centralnervous system；CNS)渗透性。这类化合物能够穿过血脑屏障且抑制大脑和/ 或其它CNS结构中的RET激酶。在一些实施例中，本文提供的化合物能够以治疗有效量穿过血脑屏障。举例来说，治疗患有癌症(例如RET相关癌症，如 RET相关脑癌或CNS癌)的患者，可包含向患者施用(例如，口服施用)化合物。在一些这类实施例中，本文提供的化合物适用于治疗原发性脑瘤或转移性脑瘤。

在一些实施例中，式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物呈现出以下中的一个或多个：高GI吸收、低清除率和低的药物-药物相互作用可能。

式I化合物适用于治疗可用RET激酶抑制剂治疗的疾病和病症，如RET 相关疾病和病症，例如增殖性病症(如癌症，包含血液癌和实体肿瘤)和胃肠道病症(如IBS)。

如本文所用，术语“治疗(treat/treatment)”是指治疗性或姑息性措施。有益或期望的临床结果包含(但不限于)完全或部分缓解与疾病或病症或病状相关的症状、减轻疾病程度、稳定(即，不恶化)疾病状态、延迟或减缓疾病进展、改善或缓和疾病状态(例如，疾病的一种或多种症状)和缓解(无论是部分的还是完全的)，无论是可检测的还是不可检测的。“治疗”还可以指存活期相较于未接受治疗时的预期存活期延长。

如本文所用，术语“个体(subject/individual)”或“患者”可互换地使用，是指任何动物，包含哺乳动物，如小鼠、大鼠、其它啮齿动物、兔、狗、猫、猪、牛、羊、马、灵长类动物和人类。在一些实施例中，患者是人类。在一些实施例中，个体已经历和/或呈现出待治疗和/或预防的疾病或病症的至少一种症状。在一些实施例中，个体已被鉴定或诊断为患有RET基因、RET蛋白或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常的癌症(RET相关癌症)(例如，如使用经管理机构批准的，例如FDA批准的测定法或试剂盒测定)。在一些实施例中，个体患有RET基因、RET蛋白或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常为阳性的肿瘤(例如，如使用管理机构批准的测定法或试剂盒测定)。个体可以是患有RET基因、RET蛋白或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常为阳性的肿瘤的个体(例如，使用管理机构批准，例如FDA批准的测定法或试剂盒鉴定为阳性)。个体可以是其肿瘤具有RET基因、RET蛋白或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常的个体(例如，其中肿瘤同样使用管理机构批准，例如FDA批准的试剂盒或测定法来鉴定)。在一些实施例中，怀疑个体患有RET 相关癌症。在一些实施例中，个体具有以下临床记录，其指示个体患有RET基因、RET蛋白或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常的肿瘤(且任选地临床记录指示所述个体应该用本文所提供的组合物中的任一种来治疗)。在一些实施例中，患者是儿科患者。

如本文所用的术语“儿科患者”是指在诊断或治疗时未满21岁的患者。术语“儿科”可进一步分为各种亚群，包含：新生儿(从出生到生命的第一个月)；婴儿(1个月到两岁)；儿童(两岁到12岁)；和青少年(12岁到21岁(直到但不包含二十二岁生日))。BerhmanRE，Kliegman R，Arvin AM，Nelson WE.《纳尔逊儿科学教科书》(Nelson Textbook ofPediatrics)，第15版.Philadelphia：W.B. Saunders Company，1996；Rudolph AM等人.《鲁道夫儿科学》(Rudolph′s Pediatrics)，第21版.New York：McGraw-Hill，2002；和AveryMD，First LR.《儿科医学》(Pediatric Medicine)，第2版.Baltimore：Williams&Wilkins；1994。在一些实施例中，儿科患者是从出生到生命的首个28天、29天龄到小于两岁、从两岁到小于12岁，或12岁到21岁(直到但不包含二十二岁生日)。在一些实施例中，儿科患者是从出生到生命的首个28天、29天龄到小于1岁、一月龄到小于四月龄、三月龄到小于七月龄、六月龄到小于1岁、1岁到小于2岁、 2岁到小于3岁、2岁到小于七岁、3岁到小于5岁、5岁到小于10岁、6岁到小于13岁、10岁到小于15岁或15岁到小于22岁。

在某些实施例中，式I化合物适用于预防如本文所定义的疾病和病症(例如，自身免疫疾病、发炎性疾病和癌症)。如本文所用的术语“预防”意指完全或部分地预防如本文所描述的疾病或病状或其症状的发作、复发或扩散。

如本文所用的术语“RET相关疾病或病症”是指与RET基因、RET激酶 (本文中也称为RET激酶蛋白)或其中的任一个(例如一个或多个)的表达或活性或水平调节异常相关联或具有所述调节异常的疾病或病症(例如，本文所描述的RET基因、RET激酶、RET激酶结构域或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常中的任一种类型)。RET相关疾病或病症的非限制性实例包含例如癌症和胃肠道病症，如肠易激综合征(irritable bowelsyndrome；IBS)。

如本文所用的术语“RET相关癌症”是指与RET基因、RET激酶(本文也称为RET激酶蛋白)或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常相关或具有所述调节异常的癌症。本文描述RET相关癌症的非限制性实例。

短语“RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平的调节异常”是指基因突变(例如，导致表达融合蛋白的RET基因易位，导致表达相较于野生型RET蛋白包含至少一个氨基酸的缺失的RET蛋白的RET基因中的缺失，导致表达具有一个或多个点突变的RET蛋白的RET基因中的突变，或导致RET蛋白相较于野生型RET蛋白具有RET蛋白中的至少一个氨基酸的缺失的RET mRNA的替代性剪接版本)，或导致由在细胞中过表达RET基因(其导致细胞中的RET蛋白的激酶结构域(例如RET蛋白的组成性活性激酶结构域) 的活性病原性增加)引起的过表达RET蛋白或自分泌活性的RET基因扩增。作为另一实例，RET基因、RET蛋白或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，可以是编码RET蛋白的RET基因中的突变，其编码组成性或相较于由不包含所述突变的RET基因编码的蛋白质具有增加的活性的RET蛋白。举例来说，RET基因、RET蛋白或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，可能是基因或染色体易位的结果，所述基因或染色体易位导致表达融合蛋白，所述融合蛋白含有第一部分RET，其包含功能性激酶结构域；和第二部分伴侣蛋白(即，不是RET)。在一些实例中，RET基因、RET蛋白或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，可以是一个RET基因与另一个非RET基因的基因易位的结果。融合蛋白的非限制性实例描述于表1中。RET激酶蛋白点突变 /***/缺失的非限制性实例描述于表2中。RET激酶蛋白突变(例如，点突变) 的其它实例是RET抑制剂抗性突变。RET抑制剂抗性突变的非限制性实例描述于表3和4中。

术语“野生型(wildtype/wild-type)”描述在未患RET相关疾病(例如RET 相关癌症)(且任选地也无发展RET相关疾病的增加的风险和/或未怀疑患有 RET相关疾病)的个体中发现的核酸(例如，RET基因或RET mRNA)或蛋白质(例如，RET蛋白)，或在来自未患RET相关疾病(例如RET相关癌症)(且任选地也无发展RET相关疾病的增加的风险和/或未怀疑患有RET相关疾病) 的个体的细胞或组织中发现的核酸或蛋白质。

术语“管理机构”是指批准国家药物试剂的医学使用的国家机构。举例来说，管理机构的非限制性实例是美国食品和药物管理局(Food and Drug Administration；FDA)。

本文提供一种治疗需要这类治疗的患者的癌症(例如RET相关癌症)的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。举例来说，本文提供用于治疗需要这类治疗的患者的RET相关癌症的方法，所述方法包括：a)检测来自所述患者的样本中的 RET基因、RET蛋白或其中的任一个的表达或活性或水平的调节异常；和b) 施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，RET基因、RET蛋白或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常包含一种或多种融合蛋白。RET基因融合蛋白的非限制性实例描述于表1中。在一些实施例中，融合蛋白是KIF5B-RET。在一些实施例中，RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常包含一个或多个RET激酶蛋白点突变/***。RET激酶蛋白点突变/***/缺失的非限制性实例描述于表2中。在一些实施例中，RET激酶蛋白点突变/***/缺失是选自由以下组成的组： M918T、M918V、C634W、V804L和V804M。在一些实施例中，式I化合物是选自：i)实例编号1-20；ii)实例编号21-40；iii)实例编号41-60；iv)实例编号61-80；v)实例编号81-100；vi)实例编号101-120；vii)实例编号121-140； viii)实例编号141-160；ix)实例编号161-180；x)实例编号181-200；xi)实例编号201-220；xii)实例编号221-240；xiii)实例编号241-260；xiv)实例编号261-280；xv)实例编号281-300；xvi)实例编号301-320；xvii)实例编号 321-340；xviii)实例编号341-360；xix)实例编号361-380；xx)实例编号381-400； xxi)实例编号401-420；xxii)实例编号421-440；xxiii)实例编号441-460；xxiii) 实例编号461-480；xxiv)实例编号481-500；xxv)实例编号501-520；xxvi) 实例编号521-540；or xxvii)实例编号541-561，或其药学上可接受的盐或溶剂合物。

在本文所描述的任一方法或用途的一些实施例中，癌症(例如，RET相关癌症)是血液癌。在本文所描述的任一方法或用途的一些实施例中，癌症(例如，RET相关癌症)是实体肿瘤。在本文所描述的任一方法或用途的一些实施例中，癌症(例如RET相关癌症)是肺癌(例如，小细胞肺癌或非小细胞肺癌)、甲状腺癌(例如***状甲状腺癌、甲状腺髓样癌、分化型甲状腺癌、复发性甲状腺癌或难治性分化型甲状腺癌)、甲状腺腺瘤、内分泌腺肿瘤、肺腺癌、细支气管肺细胞癌、多发性内分泌瘤形成2A或2B型(分别地MEN2A或MEN2B)、嗜铬细胞瘤、甲状旁腺增生、乳癌(breast cancer)、乳腺癌(mammary cancer)、乳腺癌瘤(mammary carcinoma)、乳腺赘瘤、结肠直肠癌(例如转移性结肠直肠癌)、***状肾细胞癌、胃肠粘膜神经节细胞瘤、发炎性成肌纤维细胞瘤或宫颈癌。在本文所描述的任一方法或用途的一些实施例中，癌症(例如RET相关癌症)是选自以下的组：急性成淋巴细胞性白血病(acute lymphoblastic leukemia； ALL)、急性骨髓性白血病(acute myeloidleukemia；AML)、青少年癌症、肾上腺皮质癌、***癌、阑尾癌、星形细胞瘤、非典型畸胎样/横纹肌样肿瘤、基底细胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脑干神经胶质瘤、脑瘤、乳癌、支气管肿瘤、伯基特淋巴瘤(Burkitt lymphoma)、类癌瘤、不明原发性癌、心脏肿瘤、 ***、儿童癌症、脊索瘤、慢性淋巴细胞性白血病(chronic lymphocytic leukemia；CLL)、慢性骨髓性白血病(chronic myelogenous leukemia；CML)、慢性骨髓增生性赘瘤、局部赘瘤(neoplasmsby site)、肿瘤、结肠癌、结肠直肠癌、颅咽管瘤、皮肤T细胞淋巴瘤、胆管癌、乳腺管原位癌、胚胎肿瘤、子宫内膜癌、室管膜瘤、食道癌、嗅神经母细胞瘤、尤文氏肉瘤(Ewingsarcoma)、颅外生殖细胞瘤、性腺外生殖细胞肿瘤、肝外胆管癌、眼癌、输卵管癌、骨纤维组织细胞瘤、胆囊癌、胃癌胃肠道类癌肿瘤、胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromaltumors；GIST)、生殖细胞瘤、妊娠滋养细胞疾病、神经胶质瘤、毛细胞肿瘤、毛细胞白血病、头颈癌、胸赘瘤、头颈赘瘤、CNS肿瘤、原发性CNS 肿瘤、心脏癌、肝细胞癌、组织细胞增多病、霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin′s lymphoma)、下咽癌、眼内黑素瘤、胰岛细胞瘤、胰脏神经内分泌肿瘤、卡波西肉瘤(Kaposi sarcoma)、肾癌、兰格汉氏细胞组织细胞增多病(Langerhanscell histiocytosis)、喉癌、白血病、唇癌和口腔癌、肝癌、肺癌、淋巴瘤、巨球蛋白血症、骨恶性纤维组织细胞瘤、骨癌、黑素瘤、梅克尔细胞癌(Merkel cell carcinoma)、间皮瘤、转移性鳞状细胞癌颈癌、中线癌、口腔癌、多多发性内分泌瘤形成综合征、多发性骨髓瘤、蕈样真菌病、骨髓发育不良综合征、骨髓发育不良/骨髓增生性赘瘤、局部赘瘤、赘瘤、骨髓性白血病、骨髓白血病、多发性骨髓瘤、骨髓增生性肿瘤、鼻腔和鼻窦癌、鼻咽癌、神经母细胞瘤、非霍奇金淋巴瘤、非小细胞肺癌、肺赘瘤(lung neoplasm)、肺癌(pulmonarycancer)、肺赘瘤(pulmonary neoplasms)、呼吸道肿瘤、支气管癌、支气管赘瘤、口癌(oralcancer)、口腔癌(oral cavity cancer)、唇癌、口咽癌、骨肉瘤、卵巢癌、胰脏癌、***状瘤病、副神经节瘤、鼻窦和鼻腔癌、甲状旁腺癌、***癌、咽癌、嗜铬细胞瘤、垂体癌、浆细胞赘瘤、胸膜肺母细胞瘤、妊娠和***癌、原发性中枢神经***淋巴瘤、原发性腹膜癌、***癌、直肠癌、结肠癌、结肠赘瘤、肾细胞癌、视网膜母细胞瘤、横纹肌肉瘤、唾液腺癌、肉瘤、塞扎里综合征(Sezary syndrome)、皮肤癌、小细胞肺癌、小肠癌、软组织肉瘤、鳞状细胞癌、鳞状颈癌、胃癌、T细胞淋巴瘤、睾丸癌、喉癌、胸腺瘤和胸腺癌、甲状腺癌、肾盂和输尿管移行细胞癌、不明原发性癌、尿道癌、子宫癌、子宫肉瘤、***癌、外阴癌和韦尔姆斯氏瘤(Wilms′tumor)。

在一些实施例中，血液癌(例如，是RET相关癌症的血液癌)选自由以下组成的组：白血病、淋巴瘤(非霍奇金淋巴瘤)、霍奇金氏病(也称为霍奇金氏淋巴瘤)和骨髓瘤，例如，急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia； ALL)、急性骨髓性白血病(acutemyeloid leukemia；AML)、急性前髓细胞性白血病(acute promyelocytic leukemia；APL)、慢性淋巴细胞性白血病(chronic lymphocytic leukemia；CLL)、慢性骨髓白血病(chronic myeloid leukemia；CML)、慢性骨髓单核细胞性白血病(chronicmyelomonocytic leukemia；CMML)、慢性嗜中性白血病(chronic neutrophilicleukemia；CNL)、急性未分化型白血病(acute undifferentiated leukemia；AUL)、间变性大细胞淋巴瘤(anaplastic large-cell lymphoma；ALCL)、前淋巴细胞性白血病(prolymphocytic leukemia；PML)、幼年型单核细胞白血病(juvenile myelomonocycticleukemia；JMML)、成人T 细胞ALL、AML伴三系脊髓发育不良(AML/TMDS)、混合系白血病(mixed lineage leukemia；MLL)、骨髓发育不良综合征(myelodysplastic syndromes；MDSs)、骨髓增生性病症(myeloproliferative disorder；MPD)和多发性骨髓瘤 (multiplemyeloma；MM)。血液癌的其它实例包含骨髓增生性病症 (myeloproliferative disorder；MPD)，如真性红细胞增多症(polycythemia vera； PV)、原发性血小板减少症(essentialthrombocytopenia；ET)和特发性原发性骨髓纤维化(idiopathic primarymyelofibrosis；IMF/IPF/PMF)。在一个实施例中，血液癌(例如，是RET相关癌症的血液癌)是AML或CMML。

在一些实施例中，癌症(例如，RET相关癌症)是实体肿瘤。实体肿瘤(例如，是RET相关癌症的实体肿瘤)的实例包含例如甲状腺癌(例如，***状甲状腺癌、甲状腺髓样癌)、肺癌(例如，肺腺癌、小细胞肺癌)、胰脏癌、胰脏导管癌、乳癌、结肠癌、结肠直肠癌、***癌、肾细胞癌、头颈部肿瘤、神经母细胞瘤和黑素瘤。参见例如《自然癌症综述》(NatureReviews Cancer)，2014， 14，173-186。

在一些实施例中，癌症是选自由以下组成的组：肺癌、***状甲状腺癌、甲状腺髓样癌、分化型甲状腺癌、复发性甲状腺癌、难治性分化型甲状腺癌、多发性内分泌瘤形成2A或2B型(分别地MEN2A或MEN2B)、嗜铬细胞瘤、甲状旁腺增生、乳癌、结肠直肠癌、***状肾细胞癌、胃肠粘膜神经节细胞瘤和***。

在一些实施例中，患者是人类。

式I化合物和其药学上可接受的盐和溶剂合物也适用于治疗RET相关癌症。

因此，本文还提供一种用于治疗诊断患有或鉴定为患有RET相关癌症(例如，本文公开的任一示范性RET相关癌症)的患者的方法，其包括向患者施用治疗有效量的如本文所定义的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。

RET激酶、RET基因或其中的任一个(例如一个或多个)的表达或活性或水平调节异常可促进肿瘤发生。举例来说，RET激酶、RET基因或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，可以是RET激酶、RET基因或RET激酶结构域的易位、过表达、活化、扩增或突变。易位可包含涉及RET激酶结构域的易位，突变可包含涉及RET配体结合位点的突变，且扩增可以是RET基因的扩增。其它调节异常可包含RET mRNA剪接变体和RET自分泌/旁分泌信号传导，其也可促进肿瘤发生。

在一些实施例中，RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，包含过表达野生型RET激酶(例如，导致自分泌活化)。在一些实施例中，RET基因、RET激酶蛋白或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，包含染色体区段的过表达、活化、扩增或突变，所述染色体区段包括RET 基因或其部分，包含例如激酶结构域部分，或能够呈现激酶活性的部分。

在一些实施例中，RET基因、RET激酶蛋白或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，包含引起RET基因融合的一个或多个染色体易位或倒位。在一些实施例中，RET基因、RET激酶蛋白或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常是基因易位的结果，其中所表达的蛋白质是含有来自非RET伴侣蛋白的残基的融合蛋白，且包含至少一个功能性RET激酶结构域。

RET融合蛋白的非限制性实例显示于表1中。

表1.示范性RET融合伴侣和癌症

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在一些实施例中，RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，包含RET激酶中的一个或多个缺失(例如，在位置4处的氨基酸的缺失)、***或点突变。在一些实施例中，RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，包含从RET激酶缺失一个或多个残基，导致RET激酶结构域的组成性活性。

在一些实施例中，RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，包含RET基因中的至少一个点突变，其导致产生相较于野生型 RET激酶具有一个或多个氨基酸取代、***或缺失的RET激酶(参见例如在表 2中列出的点突变)。

表2.活化RET激酶蛋白点突变/***/缺失

¹美国专利申请公开案第2014/0272951号。

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²⁷Lee等人，《肿瘤靶标》(Oncotarget)，8(4)：6579-6588，doi：10.18632/oncotarget.14172，2017。

²⁸Zhang等人，《实验室研究》(Laboratory Investigation)，(2017年2月)第97卷，增刊 1，第209A页.摘要编号：840，会议信息：第106届美国与加拿大病理学科学院年度会议， USCAP 2017。美国德克萨斯州圣安东尼奥市.

²⁹Borecka等人，《欧洲癌症杂志》(European Journal of Cancer)，(2016年7月)第61卷，第1期，第S26页，摘要编号：162，会议信息：第24届欧洲癌症研究协会两年一度的大会， EACR 2016。英国曼彻斯特。

³⁰Corsello等人，《内分泌综述》(Endocrine Reviews)，(2014年6月)第35卷，第3期，增刊S，第SUN-0322页，会议信息：第96届内分泌协会年度会议与展会，美国伊利诺伊州芝加哥，2014年6月21-24日。

³¹Gazizova等人，《内分泌综述》(Endocrine Reviews)，(2014年6月)第35卷，第3期，增刊S，第SAT-0304页，会议信息：第96届内分泌协会年度会议与展会，美国伊利诺伊州芝加哥，2014年6月21-24日。

³²Sromek等人，《内分泌病理学》(Endocr Pathol.)，doi：10.1007/s12022-017-9487-2，2017。

在一些实施例中，RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，包含RET基因中的至少一个点突变，其导致产生相较于野生型 RET激酶具有一个或多个氨基酸取代、***或缺失的RET激酶(参见例如在表 2a中列出的点突变)。

表2a示范性激活RET激酶蛋白点突变/***/缺失

在一些实施例中，RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，包含RET mRNA中的剪接变异，其导致表达以下蛋白质，所述蛋白质是缺失至少一个残基(相较于野生型RET激酶)的RET的可选的剪接变异体，导致RET激酶结构域的组成性活性。

如本文所定义的“RET激酶抑制剂”包含呈现RET抑制活性的任何化合物。在一些实施例中，RET激酶抑制剂对RET激酶具有选择性。示范性RET激酶抑制剂可呈现针对RET激酶的抑制活性(IC₅₀)，所述抑制活性小于约1000nM、小于约500nM、小于约200nM、小于约100nM、小于约50nM、小于约25nM、小于约10nM或小于约1nM，如本文所描述的测定法所测量。在一些实施例中， RET激酶抑制剂可呈现针对RET激酶的抑制活性(IC₅₀)，所述抑制活性小于约25nM、小于约10nM、小于约5nM或小于约1nM，如本文所提供的测定法所测量。

如本文所用，“第一RET激酶抑制剂”或“第一RET抑制剂”是如本文所定义的RET激酶抑制剂，但其不包含如本文所定义的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。如本文所用，“第二RET激酶抑制剂”或“第二RET抑制剂”是如本文所定义的RET激酶抑制剂，但其不包含如本文所定义的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。当第一和第二RET抑制剂都存在于本文提供的方法中时，第一和第二RET激酶抑制剂是不同的。

在一些实施例中，RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，包含RET基因中的至少一个点突变，其导致产生具有一个或多个 RET基因中的氨基酸取代或***或缺失(其导致产生相较于野生型RET激酶插入或去除一个或多个氨基酸的RET激酶)的RET激酶。在一些情况下，相较于野生型RET激酶或不包含相同突变的RET激酶，所得RET激酶对一种或多种第一RET激酶抑制剂对其磷酸转移酶活性的抑制更具抗性。任选地，这类突变不会降低具有RET激酶的癌细胞或肿瘤对用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物治疗的敏感性(例如，相较于不包含特定RET抑制剂抗性突变的癌细胞或肿瘤)。在这类实施例中，当在存在第一RET激酶抑制剂的情况下时，相较于在存在相同第一RET激酶抑制剂的情况下不具有相同突变的野生型 RET激酶或RET激酶，RET抑制剂抗性突变可导致RET激酶具有增加的V_max、针对ATP降低的K_m和针对第一RET激酶抑制剂增加的K_D。

在其它实施例中，RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，包含RET基因中的至少一个点突变，其导致产生相较于野生型 RET激酶具有一个或多个氨基酸取代，且相较于不包含相同突变的野生型RET 激酶或RET激酶对于式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物抗性增加的 RET激酶。在这类实施例中，相较于在存在相同式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的情况下不具有相同突变的野生型RET激酶或RET激酶，在存在式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的情况下，RET抑制剂抗性突变可导致RET激酶具有以下中的一个或多个：增加的V_max、降低的K_m和降低的K_D。

RET抑制剂抗性突变的实例可例如包含RET激酶的三级结构中ATP结合位点内和附近的点突变、***或缺失，其包含(但不限于)网守残基、P-环残基、DFG基序内或附近的残基和ATP裂隙溶剂前沿氨基酸残基。这些类型的突变的其它实例包含可能影响酶活性和/或药物结合的残基的变化，所述残基包含但不限于活化环中的残基、活化环附近或与活化环相互作用的残基、有助于活性或无活性酶构象的残基，变化包含进行C-螺旋和C-螺旋中的环中的突变、缺失和***。可改变(且是RET抑制剂抗性突变)的特定残基或残基区包含(但不限于)基于人类野生型RET蛋白序列(例如SEQ ID NO：1)，表3中所列出的那些。RET抑制剂抗性突变位置的其它实例显示于表4中。这些残基的变化可包含单个或多个氨基酸变化、在序列内或侧翼的***和在序列内或侧翼的缺失。

成熟人RET蛋白(SEQ ID NO：1)的示范性序列

在一些实施例中，式I化合物和药学上可接受的盐和溶剂合物，通过结合现有药物治疗(例如其它RET激酶抑制剂；例如第一和/或第二RET激酶抑制剂)或作为现有药物治疗的后续疗法给药，适用于治疗患有具有RET抑制剂抗性突变(例如，其导致对第一RET抑制剂的抗性增加，例如在氨基酸位置804 处的取代，例如V804M、V804L或V804E，和/或在表3和4中列出的一个或多个RET抑制剂抗性突变)的癌症的患者。本文中描述示范性第一和第二RET 激酶抑制剂。在一些实施例中，第一或第二RET激酶抑制剂可选自由以下组成的组：卡博替尼(cabozantinib)、凡德他尼(vandetanib)、阿莱替尼(alectinib)、索拉非尼(sorafenib)、乐伐替尼(lenvatinib)、普纳替尼(ponatinib)、多韦替尼(dovitinib)、舒尼替尼(sunitinib)、弗雷替尼(foretinib)、BLU667和BLU6864。

在一些实施例中，式I化合物或其药学上可接受的盐和溶剂合物适用于治疗已经鉴定为具有一个或多个RET抑制剂抗性突变(其导致对第一或第二RET 抑制剂的抗性增加，例如，在氨基酸位置804处的取代，例如V804M、V804L 或V804E)的癌症。RET抑制剂抗性突变的非限制性实例列于表3和4中。

表3.RET抑制剂抗性突变

示范性RET抗性突变
	氨基酸位置732(例如，E732K)<sup>7</sup>
氨基酸位置788(例如，I788N)<sup>8</sup>
	氨基酸位置804(例如，V804M<sup>1，2</sup>、V804L<sup>1，2</sup>、V804E<sup>6</sup>)
氨基酸位置804/805(例如，V804M/E805K)<sup>3</sup>
	氨基酸位置806(例如，Y806C<sup>4，6</sup>、Y806E<sup>4</sup>、Y806S<sup>6</sup>、Y806H<sup>6</sup>、Y806N<sup>6</sup>)
氨基酸位置810(例如，G810A<sup>5</sup>、G810R<sup>6</sup>、G810S<sup>6</sup>)
	氨基酸位置865(例如，L865V<sup>6</sup>)
氨基酸位置870(例如，L870F<sup>6</sup>)

¹Yoon等人，《药物化学杂志》(J.Med.Chem.)59(1)：358-73，2016。

²美国专利第8,629,135号。

³Cranston等人，《癌症研究》(CancerRes.)66(20)：10179-87，2006。

⁴Carlomagno等人，《内分泌相关癌症》(EndocrRel.Cancer)16(1)：233-41，2009。

⁵Huang等人，《分子癌症治疗学》(Mol.Cancer Ther.)，2016年8月5日.pii：molcanther.0258.2016。[印刷前的电子版]。

⁶PCT专利申请公开案第WO 2016/127074号。

⁷Nadezda等人，夏季大学生研究方案(Summer Undergraduate ResearchPrograms；SURP)学生摘要》(Summer Undergraduate Research Programs(SURP)StudentAbstracts)，俄克拉何马大学健康科学中心(University of Oklahoma Health SciencesCenter)，2016。

⁸Plenker等人，《科学转化医学》(Sci.Transl.Med.)，9(394)，doi：10.1126/scitranslmed.aah6144， 2017。

表4.RET抑制剂抗性突变的其它示范性氨基酸位置

RET的致癌作用首先描述于***状甲状腺癌(papillary thyroid carcinoma；PTC)中(Grieco等人，《细胞》(Cell)，1990，60，557-63)，所述***状甲状腺癌起源于滤泡性甲状腺细胞且是最常见的甲状腺恶性病。大致20-30％的PTC 具有体细胞染色体重排(易位或倒位)，将启动子和组成型表达的无关基因的 5′部分与RET酪氨酸激酶结构域连接(Greco等人，《核医学与分子成像季刊》 (Q.J.Nucl.Med.Mol.Imaging)，2009，53，440-54)，因此驱动其在甲状腺细胞中的异位表达。通过这类重排产生的融合蛋白被称为“RET/PTC”蛋白。举例来说，RET/PTC 1是CCDD6和RET之间的融合体，其常见于***状甲状腺癌。类似地，RET/PTC3和RET/PTC4都是***状甲状腺癌中常见的ELE1与RET 的融合体，尽管产生RET/PTC3和RET/PTC4的融合事件产生不同分子量的不同蛋白质(参见例如Fugazzola等人，《致癌基因》(Oncogene)，13(5)：1093-7， 1996)。与PTC相关的一些RET融合体不被称为“RET/PTC”，而相反被称为融合蛋白本身。举例来说，RET与ELKS和PCM1两者之间的融合体见于PTC 中，但融合蛋白被称为ELKS-RET和PCM1-RET(参见例如Romei和Elisei，《前沿内分泌学(洛桑)》(Front.Endocrinol.(Lausanne))，3：54，doi： 10.3389/fendo.2012.00054，2012)。已经在转基因小鼠中确认了RET-PTC重排在 PTC发病机理中的作用(Santoro等人，《致癌基因》(Oncogene)，1996，12， 1821-6)。迄今为止，已经鉴定了来自PTC和其它癌症类型的多种融合伴侣，全部都提供诱导配体非依赖性RET二聚化和组成性激酶活性的蛋白质/蛋白质相互作用结构域(参见例如表1)。近年来，已经在约2％的肺腺癌患者中鉴定了染色体10(RET基因映射的地方)中10.6Mb的臂间倒位，产生嵌合基因KIF5B-RET的不同变体(Ju等人，《基因组研究》(Genome Res.)，2012，22， 436-45；Kohno等人，2012，《自然·医学》(Nature Med.)，18，375-7；Takeuchi 等人，《自然·医学》(NatureMed.)，2012，18，378-81；Lipson等人，2012，《自然·医学》(Nature Med.)，18，382-4)。高度表达融合转录物，且所有所得嵌合蛋白均含有介导均二聚的KIF5B的卷曲螺旋(coiled-coil)区的N端部分，和整个RET激酶结构域。RET阳性患者中没有一个具有其它已知致癌改变(如 EGFR或K-Ras突变、ALK易位)，支持KIF5B-RET融合可能是肺腺癌的驱动突变的可能性。已通过将融合基因转染到培养的细胞系中，确认了KIF5B-RET 的致癌潜力：与用RET-PTC融合蛋白观察到的相似，KIF5B-RET被组成性磷酸化且诱导NIH-3T3转化和IL-3非依赖性的BA-F3细胞的生长。然而，在肺腺癌患者中已经鉴定出其它RET融合蛋白，如CCDC6-RET融合蛋白，已发现其在人肺腺癌细胞系LC-2/ad的增殖中起关键作用(《胸科肿瘤学杂志》(Journal of Thoracic Oncology)，2012，7(12)：1872-1876)。已显示RET抑制剂适用于治疗涉及RET重排的肺癌(Drilon，A.E.等人《临床肿瘤学杂志》(J Clin Oncol)33， 2015(增刊；摘要8007))。还在患有结肠直肠癌的患者中鉴定出RET融合蛋白(Song Eun-Kee等人《国际癌症杂志》(International Journal of Cancer)，2015， 136：1967-1975)。

除RET序列的重排外，RET原癌基因的功能点突变的获得也驱动致癌事件，如甲状腺髓样癌(medullary thyroid carcinoma；MTC)所示，其起源于滤泡旁降血钙素产生细胞(de Groot等人，《内分泌综述》(Endocrine Rev.)，2006， 27，535-60；Wells和Santoro，《临床癌症研究》(Clin.Cancer Res.)，2009，15， 7119-7122)。约25％的MTC与多发性内分泌瘤形成2型(MEN2)相关，所述多发性内分泌瘤形成2型是一组由RET的生殖系活化点突变引起的影响神经内分泌器官的遗传性癌症综合征。在MEN2亚型(MEN2A、MEN2B和家族性 MTC/FMTC)中，RET基因突变具有强力的表型-基因型相关性，定义了疾病的不同MTC攻击性和临床表现。在MEN2A综合征中，突变涉及位于富含半胱氨酸的胞外区域的六个半胱氨酸残基(主要是C634)中的一个，导致配体非依赖性均二聚和组成性RET活化。患者在年轻时(5-25岁发病)发展MTC，且也可发展嗜铬细胞瘤(50％)和甲状旁腺功能亢进。MEN2B主要由M918T突变引起，所述突变位于激酶结构域中。这种突变组成性地活化其单体状态的 RET且通过激酶改变底物识别。MEN2B综合征的特征是早发型(＜1年)和极具侵袭性的MTC、嗜铬细胞瘤(50％的患者)和神经节细胞瘤。在FMTC中，唯一的疾病表现是MTC，通常发生在成年时。跨越整个RET基因，已经检测到许多不同的突变。其余75％的MTC病例是散发性的，且其中约50％具有RET 体细胞突变：最常见的突变是M918T，如在MEN2B中一样，其与最具攻击性的表型相关。RET的体细胞点突变也已在其它肿瘤中描述，如结肠直肠癌(Wood 等人，《科学》(Science)，2007，318，1108-13)和小细胞肺癌(《日本癌症研究杂志》(Jpn.J.CancerRes.)，1995，86，1127-30)。

已经发现RET信号传导组分在原发性***肿瘤中表达且在***肿瘤细胞系中在功能上与***受体-cc途径相互作用(Boulay等人，《癌症研究》(Cancer Res.)2008，68，3743-51；Plaza-Menacho等人，《致癌基因》(Oncogene)，2010， 29，4648-57)，而RET表达和通过GDNF家族配体的活化可能在不同类型癌细胞的神经周围侵袭中起重要作用(Ito等人，《手术》(Surgery)，2005，138，788-94； Gil等人，《美国国立癌症研究所杂志》(J.Natl.Cancer Inst.)，2010，102，107-18； Iwahashi等人，《癌症》(Cancer)，2002，94，167-74)。

RET也在30-70％的侵袭性乳癌中表达，其中在***受体阳性肿瘤中表达相对更频繁(Plaza-Menacho，I.等人，《致癌基因》(Oncogene)，2010，29， 4648-4657；Esseghir，S.等人，《癌症研究》(Cancer Res.)，2007，67，11732-11741； Morandi，A.等人，《癌症研究》(Cancer Res.)，2013，73，3783-3795；Gattelli，A.，《EMBO分子医学》(EMBO Mol.Med.)，2013，5，1335-1350)。

已经在由结肠直肠癌建立的PDX子集(患者来源的异种移植物)中报道了 RET重排的鉴定。尽管结肠直肠癌患者中这类事件的频率仍有待确定，但这些数据表明RET在这种适应症中起靶标作用(Gozgit等人，《2014年AACR年度会议》(AACR Annual Meeting2014))。研究已表明，RET启动子在结肠直肠癌中频繁地被甲基化，且预测会降低RET表达的杂合错义突变在5-10％的病例中被鉴定出，这表明RET在散发性结肠癌中可能具有肿瘤抑制因子的一些特征 (Luo，Y等人，《致癌基因》(Oncogene)，2013，32，2037-2047；Sjoblom，T.等人，《科学》(Science)，2006，268-274；《癌症基因组图谱网络》(Cancer Genome AtlasNetwork)，《自然》(Nature)，2012，487，330-337)。

现在显示越来越多的肿瘤类型表达大量水平的野生型RET激酶，这可能对肿瘤进展和扩散有影响。RET在50-65％的胰脏导管癌中表达，且在转移性和较高级别的肿瘤中表达更频繁(Ito，Y等人，《手术》(Surgery)，2005，138，788-794；Zeng，Q.等人，《国际医学研究》(Int.Med.Res.)2008，36，656-664)。

在造血谱系的赘瘤中，RET在具有单核细胞分化的急性骨髓性白血病 (acutemyeloid leukemia；AML)中以及在CMML中表达(Gattei，V.等人，《血液》(Blood)，1997，89，2925-2937；Gattei，V.等人，《血液学年鉴》(Ann.Hematol)， 1998，77，207-210；Camos，M.，《癌症研究》(CancerRes.)2006，66，6947-6954)。近期研究已在患有慢性骨髓单核细胞性白血病(chronic myelomonocytic leukemia；CMML)的患者中鉴定出涉及RET的罕见染色体重排。CMML常常与几种酪氨酸激酶的重排相关，其导致嵌合胞质肿瘤蛋白的表达，所述嵌合胞质肿瘤蛋白导致RAS途径的活化(Kohlmann，A.等人，《临床肿瘤杂志》(J.Clin.Oncol.)2010，28，2858-2865)。在RET的情况下，将RET与BCR(BCR-RET) 或与成纤维细胞生长因子受体1致癌基因伴侣(FGFR1OP-RET)连接的基因融合体，在早期造血祖细胞中转化，且可能通过引发RET介导的RAS信号传导，而可以将这些细胞转向单核细胞途径成熟(Ballerini，P等人，《白血病》 (Leukemia)，2012，26，2384-2389)。

也已显示RET表达在几种其它肿瘤类型中发生，包含***癌、小细胞肺癌、黑素瘤、肾细胞癌和头颈部肿瘤(Narita，N.等人，《致癌基因》(Oncogene)， 2009，28，3058-3068；Mulligan，L.，M.等人，《基因染色体癌症》(Genes Chromosomes Cancer)，1998，21，326-332；Flavin，R.等人，《泌尿肿瘤学》(Urol. Oncol.)，2012，30，900-905；Dawson，D.M.，《美国国立癌症研究所杂志》(JNatl Cancer Inst)，1998，90，519-523)。

在神经母细胞瘤中，RET表达和通过GFL活化在肿瘤细胞分化中起作用，可能与其它神经营养因子受体协同下调N-Myc，所述N-Myc的表达是不良预后的标志(Hofstra，R.M.，W.等人，《人类遗传学》(Hum.Genet.)1996，97，362-364； Petersen，S.和Bogenmann，E.，《致癌基因》(Oncogene)，2004，23，213-225； Brodeur，G.M.，《自然参考癌症》(NatureRef.Cancer)，2003，3，203-216)。

已知与RET交叉反应的多靶标抑制剂(Borrello，M.G.等人，《关于治疗靶标的专家观点》(Expert Opin.Ther.Targets)，2013，17(4)，403-419；国际专利申请第WO 2014/141187号、第WO 2014/184069号和第WO 2015/079251号)。

因此，本文提供了用于治疗诊断患有(或鉴定为患有)癌症的患者的方法，其包含向患者施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。本文还提供用于治疗鉴定或诊断为患有RET相关癌症的患者的方法，其包含向患者施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。在一些实施例中，通过使用经管理机构批准的，例如FDA批准的用于确认患者或来自患者的活检样本中RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常的测试或测定法，或通过执行本文所描述的测定法的任一个非限制性实例，鉴定或诊断患有RET相关癌症的患者。在一些实施例中，测试或测定法作为试剂盒提供。在一些实施例中，癌症是RET相关癌症。举例来说，RET相关癌症可以是包含一种或多种RET抑制剂抗性突变的癌症。

还提供用于治疗有需要的患者的癌症的方法，所述方法包括：(a)确定患者的癌症是否是RET相关癌症；和(b)如果确定癌症是RET相关癌症，那么向患者施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。这些方法的一些实施例进一步包含向个体施用另一抗癌剂(例如，第二RET抑制剂、式I的第二化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，或免疫疗法)。在一些实施例中，个体先前用第一RET抑制剂治疗或先前用另一抗癌治疗(例如肿瘤切除或放疗)治疗。在一些实施例中，通过使用经管理机构批准的，例如FDA批准的用于确认患者或来自患者的活检样本中RET基因、 RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常的测试或测定法，或通过执行本文所描述的测定法的任一个非限制性实例，确定患者患有RET相关癌症。在一些实施例中，测试或测定法作为试剂盒提供。在一些实施例中，癌症是RET相关癌症。举例来说，RET相关癌症可以是包含一种或多种RET抑制剂抗性突变的癌症。

还提供治疗患者的方法，其包含对从患者获得的样本进行测定以确定患者是否具有RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，和向测定具有RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常的患者施用(例如，特异性或选择性地施用)治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。这些方法的一些实施例进一步包含向个体施用另一抗癌剂(例如，第二RET抑制剂、式I的第二化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，或免疫疗法)。在这些方法的一些实施例中，个体先前用第一RET抑制剂治疗或先前用另一抗癌治疗(例如肿瘤切除或放疗) 治疗。在一些实施例中，患者是怀疑患有RET相关癌症的患者、患有RET相关癌症的一种或多种症状的患者，或具有发展RET相关癌症的高风险的患者。在一些实施例中，测定利用下一代测序、焦磷酸测序、免疫组织化学或***FISH 分析。在一些实施例中，测定是管理机构批准的测定，例如FDA批准的试剂盒。本文描述可用于这些方法中的其它非限制性测定。其它测定也是所属领域中已知的。在一些实施例中，RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，包含一种或多种RET抑制剂抗性突变。

还提供一种式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物，其通过对从患者获得的样本进行测定(例如活体外测定)步骤，以确定患者是否具有RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，而用于治疗鉴定或诊断为患有RET相关癌症的患者的RET相关癌症，其中存在 RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，确定患者患有RET相关癌症。还提供一种式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的用途，其用于制造药物，所述药物用于通过对从患者获得的样本进行测定步骤，以确定患者是否具有RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，而治疗鉴定或诊断为患有RET相关癌症的患者的RET相关癌症，其中存在RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，确定患者患有RET相关癌症。本文所描述的任一方法或用途的一些实施例，进一步包含在患者的临床记录(例如，计算机可读媒体)中记录通过进行测定，患者被确定具有RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，应当对其施用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。在一些实施例中，测定利用下一代测序、焦磷酸测序、免疫组织化学或***FISH分析。在一些实施例中，测定是管理机构批准的测定，例如FDA批准的试剂盒。在一些实施例中，RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，包含一种或多种RET抑制剂抗性突变。

还提供一种式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，其用于治疗有需要的患者或鉴定或诊断为患有RET相关癌症的患者的癌症。还提供一种式I 化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的用途，其用于制造用于治疗鉴定或诊断为患有RET相关癌症的患者的癌症的药物。在一些实施例中，癌症是RET 相关癌症，例如，具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的RET相关癌症。在一些实施例中，通过使用经管理机构批准的，例如FDA批准的用于确认患者或来自样本的活检样本中RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，将患者鉴定或诊断为患有RET相关癌症。如本文所提供的，RET 相关癌症包含本文所描述和所属领域中已知的那些癌症。

在本文所描述的任一方法或用途的一些实施例中，患者已被鉴定或诊断为患有具有RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常的癌症。在本文所描述的任一方法或用途的一些实施例中，患者患有RET基因、 RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常呈阳性的肿瘤。在本文所描述的任一方法或用途的一些实施例中，患者可以是患有RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常呈阳性的肿瘤的患者。在本文所描述的任一方法或用途的一些实施例中，患者可以是其肿瘤具有RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常的患者。在本文所描述的任一方法或用途的一些实施例中，怀疑患者患有RET相关癌症(例如，具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的癌症)。在一些实施例中，本文提供用于治疗需要这类治疗的患者的RET相关癌症的方法，所述方法包括：a)检测来自所述患者的样本中的RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平的调节异常；和b)施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，RET基因、RET蛋白或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常包含一种或多种融合蛋白。RET基因融合蛋白的非限制性实例描述于表1中。在一些实施例中，融合蛋白是KIF5B-RET。在一些实施例中，RET 基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常包含一个或多个 RET激酶蛋白点突变/***/缺失。RET激酶蛋白点突变/***/缺失的非限制性实例描述于表2中。在一些实施例中，RET激酶蛋白点突变/***/缺失是选自由以下组成的组：M918T、M918V、C634W、V804L和V804M。在一些实施例中，RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，包含一种或多种RET抑制剂抗性突变。RET抑制剂抗性突变的非限制性实例描述于表3和4中。在一些实施例中，RET抑制剂抗性突变是V804M。在一些实施例中，使用经管理机构批准的，例如FDA批准的测定或试剂盒，来测定具有RET 基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常的癌症。在一些实施例中，RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常呈阳性的肿瘤，是一种或多种RET抑制剂抗性突变呈阳性的肿瘤。在一些实施例中，使用经管理机构批准的，例如FDA批准的测定或试剂盒，来测定具有 RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常的肿瘤。

在本文所描述的任一方法或用途的一些实施例中，患者具有临床记录，其指示患者具有RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常的肿瘤(例如，具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的肿瘤)。在一些实施例中，临床记录指示，患者应该用本文提供的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或组合物中的一种或多种治疗。在一些实施例中，具有RET基因、 RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常的癌症，是具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的癌症。在一些实施例中，使用经管理机构批准的，例如FDA批准的测定或试剂盒，来测定具有RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常的癌症。在一些实施例中，RET基因、RET 激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常呈阳性的肿瘤，是一种或多种RET抑制剂抗性突变呈阳性的肿瘤。在一些实施例中，使用经管理机构批准的，例如FDA批准的测定或试剂盒，来测定具有RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常的肿瘤。

还提供了治疗患者的方法，其包含向患者施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，所述患者具有指示患者具有RET基因、RET 激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常的临床记录。还提供一种式 I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的用途，其用于制造用于治疗患者的 RET相关癌症的药物，所述患者具有指示患者具有RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常的临床记录。这些方法和用途的一些实施例可进一步包含：对从患者获得的样本进行测定步骤，以确定患者是否具有RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，和将信息记录在患者的临床文件中(例如，计算机可读媒体)中，所述患者已被鉴定为具有RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常。在一些实施例中，测定是活体外测定。举例来说，利用下一代测序、免疫组织化学或***FISH分析的测定。在一些实施例中，测定是管理机构批准的，例如 FDA批准的试剂盒。在一些实施例中，RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，包含一种或多种RET抑制剂抗性突变。

本文还提供一种治疗个体的方法。方法包含对从个体获得的样本进行测定，以确定个体是否具有RET基因、RET蛋白或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常。方法还包含向测定具有RET基因、RET蛋白或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常的个体，施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，RET基因、RET蛋白或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，是导致表达RET融合蛋白(例如本文所描述的 RET融合蛋白中的任一种)的基因或染色体易位。在一些实施例中，RET融合体可选自KIF5B-RET融合体和CCDC6-RET融合体。在一些实施例中，RET 基因、RET激酶蛋白或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，是RET基因中的一个或多个点突变(例如，本文所描述的RET点突变中的一个或多个中的任一个)。RET基因中的一个或多个点突变可以导致例如翻译具有以下氨基酸取代中的一个或多个的RET蛋白：M918T、M918V、C634W、V804L和V804M。在一些实施例中，RET基因、RET激酶蛋白或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，是一种或多种RET抑制剂抗性突变(例如，本文所描述的一种或多种RET抑制剂抗性突变的任何组合)。这些方法的一些实施例进一步包含向个体施用另一抗癌剂(例如，第二RET抑制剂、式I的第二化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，或免疫疗法)。

在一些实施例中，本文提供的化合物呈现出大脑和/或中枢神经***(centralnervous system；CNS)渗透性。这类化合物能够穿过血脑屏障且抑制大脑和/ 或其它CNS结构中的RET激酶。在一些实施例中，本文提供的化合物能够以治疗有效量穿过血脑屏障。举例来说，治疗患有癌症(例如RET相关癌症，如 RET相关脑或CNS癌症)的患者，可包含向患者施用(例如，口服施用)化合物。在一些这类实施例中，本文提供的化合物适用于治疗原发性脑瘤或转移性脑瘤。举例来说，化合物可用于治疗以下中的一种或多种：神经胶质瘤，如神经胶母细胞瘤(也称为多形性胶质母细胞瘤)、星形细胞瘤、寡突神经胶质细胞瘤、室管膜瘤和混合胶质瘤；脑膜瘤；髓母细胞瘤；神经节神经胶质瘤；神经鞘瘤(schwannomas/neurilemmomas)和颅咽管瘤(参见例如，D.N.等人《神经病理学学报》(Acta Neuropathol)131(6)，803-820(2016年6月)中列出的肿瘤)。在一些实施例中，脑瘤是原发性脑瘤。在一些实施例中，患者先前已经用另一抗癌剂，例如另一RET抑制剂(例如，不是通式I化合物的化合物)或多激酶抑制剂治疗。在一些实施例中，脑瘤是转移性脑瘤。在一些实施例中，患者先前已经用另一抗癌剂，例如另一RET抑制剂(例如，不是通式I化合物的化合物)或多激酶抑制剂治疗。

还提供为鉴定或诊断为患有RET相关癌症的患者选择治疗的方法(例如，活体外方法)。一些实施例可进一步包含向鉴定或诊断为患有RET相关癌症的患者施用所选择的治疗。举例来说，所选择的治疗可包含施用治疗有效量的式 I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。一些实施例可进一步包含以下步骤：对从患者获得的样本进行测定以确定患者是否具有RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，和鉴定和诊断患者确定具有RET 基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常的患者为患有 RET相关癌症。在一些实施例中，癌症是具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的RET相关癌症。在一些实施例中，通过使用经管理机构批准的，例如FDA 批准的用于确认患者或来自患者的活检样本中RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，将患者鉴定或诊断为患有RET相关癌症。在一些实施例中，RET相关癌症是本文所描述或所属领域中已知的癌症。在一些实施例中，测定是活体外测定。举例来说，利用下一代测序、免疫组织化学或***FISH分析的测定。在一些实施例中，测定是管理机构批准的，例如FDA 批准的试剂盒。

本文还提供为患者选择治疗的方法，其中所述方法包含以下步骤：对从患者获得的样本进行测定以确定患者是否具有RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常(例如，一种或多种RET抑制剂抗性突变)，和鉴定或诊断确定具有RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常的患者为患有RET相关癌症。一些实施例进一步包含向鉴定或诊断为患有RET相关癌症的患者施用所选择的治疗。举例来说，所选择的治疗可包含向鉴定或诊断为患有RET相关癌症的患者施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，测定是活体外测定。举例来说，利用下一代测序、免疫组织化学或***FISH分析的测定。在一些实施例中，测定是管理机构批准的，例如FDA批准的试剂盒。

还提供选择患者进行治疗的方法，其中所述方法包含选择、鉴定或诊断患有RET相关癌症的患者，和选择患者进行治疗，包含施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，鉴定或诊断患者为患有RET相关癌症，可包含以下步骤：对从患者获得的样本进行测定以确定患者是否具有RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，和鉴定或诊断确定具有RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常的患者为患有RET相关癌症。在一些实施例中，选择治疗的方法可用作临床研究的一部分，所述临床研究包含对RET相关癌症施用各种治疗。在一些实施例中，RET相关癌症是具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的癌症。在一些实施例中，测定是活体外测定。举例来说，利用下一代测序、免疫组织化学或***FISH分析的测定。在一些实施例中，测定是管理机构批准的，例如FDA批准的试剂盒。在一些实施例中，RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，包含一种或多种RET抑制剂抗性突变。

在本文所描述的任一方法或用途的一些实施例中，使用来自患者的样本，用于确定患者是否具有RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常的测定，可包含例如下一代测序、免疫组织化学、荧光显微术、分裂FISH分析、DNA印迹法、蛋白质印迹法、FACS分析、RNA印迹法和基于PCR的扩增(例如，RT-PCR和定量实时RT-PCR)。如在所属领域中是众所周知的，通常例如用至少一种标记的核酸探针或至少一种标记的抗体或其抗原结合片段进行测定。测定可利用所属领域中已知的其它检测方法来检测RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平的调节异常(参见例如本文引用的参考文献)。在一些实施例中，RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，包含一种或多种RET抑制剂抗性突变。在一些实施例中，样本是来自患者的生物样本或活检样本(例如，石蜡包埋的活检样本)。在一些实施例中，患者是怀疑患有RET相关癌症的患者、患有RET相关癌症的一种或多种症状的患者、和/或具有发展RET相关癌症的增加的风险的患者)

在医学肿瘤学领域中，实践中通常使用不同形式的治疗的组合来治疗每个患有癌症的患者。在医学肿瘤学中，除本文提供的组合物以外，这类联合治疗或疗法的其它组分可以是例如手术、放疗和化疗剂，如激酶抑制剂、信号转导抑制剂和/或单克隆抗体。因此，式I化合物也可用作癌症治疗的佐剂，即，其可与一种或多种另外的疗法或治疗剂，例如通过相同或不同的机制起作用的化疗剂组合使用。

在本文所描述的任一方法的一些实施例中，式I化合物(或其药学上可接受的盐或溶剂合物)是与治疗有效量的至少一种选自一种或多种额外疗法或治疗(例如化学治疗)剂的额外治疗剂组合施用。

额外治疗剂的非限制性实例包含：其它RET靶向治疗剂(即第一或第二 RET激酶抑制剂)、受体酪氨酸激酶靶向治疗剂、信号转导途径抑制剂、检查点抑制剂，细胞凋亡途径的调节剂(例如，obataclax)；细胞毒性化学治疗、血管生成靶向疗法、免疫靶向药剂(包含免疫疗法)和放疗。

在一些实施例中，其它RET靶向治疗剂是呈现RET抑制活性的多激酶抑制剂。在一些实施例中，其它RET靶向治疗抑制剂对RET激酶具有选择性。示范性RET激酶抑制剂可呈现针对RET激酶的抑制活性(IC₅₀)，所述抑制活性小于约1000nM、小于约500nM、小于约200nM、小于约100nM、小于约 50nM、小于约25nM、小于约10nM或小于约1nM，如本文所描述的测定法所测量。在一些实施例中，RET激酶抑制剂可呈现针对RET激酶的抑制活性 (IC₅₀)，所述抑制活性小于约25nM、小于约10nM、小于约5nM或小于约1nM，如本文所提供的测定法所测量。

RET靶向治疗剂的非限制性实例包含阿莱替尼(alectinib)、阿帕替尼(apatinib)、卡博替尼(cabozantinib)(XL-184)、多韦替尼(dovitinib)、乐伐替尼(lenvatinib)、莫替沙尼(motesanib)、尼达尼布(nintedanib)、普纳替尼 (ponatinib)、瑞格非尼(regorafenib)、西他伐替尼(sitravatinib)(MGCD516)、舒尼替尼(sunitinib)、索拉非尼(sorafenib)、凡塔蓝尼(vatalanib)、凡德他尼 (vandetanib)、AUY-922(5-(2，4-二羟基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-[4-(吗啉基甲基)苯基]异恶唑-3-甲酰胺)、BLU6864、BLU-667、DCC-2157、GSK3179106、 NVP-AST487(1-[4-[(4-乙基哌嗪-1-基)甲基]-3-(三氟甲基)苯基]-3-[4-[6-(甲氨基) 嘧啶-4-基]氧基苯基]脲)、PZ-1、RPI-1(1，3-二氢-5,6-二甲氧基-3-[(4-羟苯基)亚甲基]-H-吲吲哚-2-酮)、RXDX-105(1-(3-((6，7-二甲氧基喹唑啉-4-基)氧基)苯基)-3-(5-(1，1，1-三氟-2-甲基丙-2-基)异恶唑-3-基)脲)、SPP86(1-异丙基-3-(苯基乙炔基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺)和TGi01209(N-(1，1-二甲基乙基)-3-[[5- 甲基-2-[[4-(4-甲基-1-哌嗪基)苯基]氨基]-4-嘧啶基]氨基]-苯磺酰胺)。

其它RET激酶抑制剂的其它实例包含美国专利第9,150,517号和第 9,149,464号以及国际公开号WO 2014075035中所描述的那些，其全部均以引用的方式并入本文中。举例来说，在一些实施例中，其它RET抑制剂是式I化合物：

其中R₁是C₆-C₂₄烷基或聚乙二醇；或其药学上可接受的盐形式。在一些实施例中，其它RET抑制剂是4-{5-[双-(氯乙基)-氨基]-1-甲基-1H-苯并咪唑-2-基} 丁酸十二烷基酯。

其它RET激酶抑制剂的其它实例包含在国际公开案第WO 2016127074号中所描述的那些，其以引用的方式并入本文中。举例来说，在一些实施例中，其它RET抑制剂是式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其中：

其中环A和B各自独立地选自芳基、杂芳基、环烷基和杂环基；

每一L¹和L²独立地选自键、-(C1-C6亚烷基)-、-(C2-C6亚烯基)-、-(C2-C6 亚炔基)-、-(C1-C6卤代亚烷基)-、-(C1-C6亚杂烷基)-、-C(O)-、-O-、-S-、-S(O)、 -S(O)₂-、-N(R¹)-、-O-(C1-C6亚烷基)-、-(C1-C6亚烷基)-O-、-N(R¹)-C(O)-、 -C(O)N(R¹)-、-(C1-C6亚烷基)-N(R¹)-、-N(R¹)-(C1-C6亚烷基)-、 -N(R¹)-C(O)-(C1-C6亚烷基)-、-(C1-C6亚烷基)-N(R¹)-C(O)-、-C(O)-N(R¹)-(C1-C6 亚烷基)-、-(C1-C6亚烷基)-C(O)-N(R¹)-、-N(R¹)-S(O)₂-、-S(O)₂-N(R¹)-、 -N(R¹)-S(O)₂-(C1-C6亚烷基)-和-S(O)₂-N(R¹)-(C1-C6亚烷基)-；其中每一亚烷基、亚烯基、亚炔基、卤代亚烷基和亚杂烷基独立地被0-5次出现的R′取代；

每一R^A和R^B独立地选自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、卤基、C1-C6卤烷基、C1-C6羟烷基、C1-C6杂烷基和-N(R¹)(R¹)；其中每一烷基、烷氧基、卤烷基、羟烷基和羟烷基独立地被0-5次出现的Ra取代；

每一R^C和R^D独立地选自C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C6 烷氧基、卤基、C1-C6杂烷基、C1-C6卤烷基、C1-C6卤烷氧基、C1-C6羟烷基、环烷基、芳基、杂芳基、芳氧基、芳烷基、杂环基、杂环基烷基、硝基、氰基、-C(O)R¹、-OC(O)R¹、-C(O)OR¹、-(C1-C6亚烷基)-C(O)R¹、-SR¹、-S(O)₂R¹、 -S(O)₂-N(R¹)(R¹)、-(C1-C6亚烷基)-S(O)₂R¹、-(C1-C6亚烷基)-S(O)₂-N(R¹)(R¹)、 -N(R¹)(R¹)-C(O)-N(R¹)(R¹)-N(R¹)-C(O)R¹、-N(R¹)-C(O)OR¹、-(C1-C6亚烷基)-N(R¹)-C(O)R¹、-N(R¹)S(O)₂R¹和-P(O)(R¹)(R¹)其中其中烷基、烯基、炔基、烷氧基、杂烷基、卤烷基、卤烷氧基、羟烷基、环烷基、芳基、杂芳基、芳氧基、芳烷基、杂环基和杂环基烷基中的每一个独立地被0-5次出现的Ra取代；或2个R^C或2个R^D与其所连接的碳原子一起形成独立地被0-5次出现的Ra取代的环烷基或杂环基环；

每一R¹独立地选自氢、羟基、卤基、硫醇、C1-C6烷基、C1-C6硫代烷基、 C1-C6烷氧基、C1-C6卤烷基、C1-C6羟烷基、C1-C6杂烷基、环烷基、环烷基烷基、杂芳烷基、杂环基和杂环基烷基，其中烷基、硫代烷基、烷氧基、卤烷基、羟烷基、杂烷基、环烷基、环烷基烷基、杂芳烷基、杂环基和杂环基烷基中的每一个独立地被0-5次出现的R^b取代，或2个R¹与其所连接的原子一起形成独立地被0-5次出现的R^b取代的环烷基或杂环基环；

每一R^a和R^b独立地是C1-C6烷基、卤基、羟基、C1-C6卤烷基、C1-C6 杂烷基、C1-C6羟烷基、C1-C6烷氧基、环烷基、杂环基或氰基，其中烷基、卤烷基、杂烷基、羟烷基、烷氧基、环烷基和杂环基中的每一个独立地被0-5 次出现的R′取代；

每一R′是C1-C6烷基、C1-C6杂烷基、卤基、羟基、C1-C6卤烷基、C1-C6 羟烷基、环烷基或氰基；或2个R′与其所连接的原子一起形成环烷基或杂环基环；

m是0、1、2或3；

n是0、1或2；且

p和q各自独立地是0、1、2、3或4。举例来说，RET抑制剂可选自由以下组成的组：

或其药学上可接受的盐。

在一些实施例中，RET抑制剂选自由以下组成的组：ABT-348(N-[4-[4- 氨基-7-[1-(2-羟乙基)-1H-吡唑-4-基]噻吩并[3，2-c]吡啶-3-基]苯基]N′-(3-氟苯基) 脲)；AD-57，其具有以下结构：

[1]；AD-80(1-(4-(4-氨基-1-异丙基-1H-吡唑并\[3，4-d]嘧啶-3-基)苯基)-3-(2- 氟-5-(三氟甲基)苯基)脲)；ALW-II-41-27(N-(5-((4-((4-乙基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)氨基甲酰基)-2-甲基苯基)-5-(噻吩-2-基)烟酰胺)；阿姆瓦替尼(Amuvatinib)(MP470)(N-(苯并\[d]\[1，3]二氧杂环戊烯-5-基甲基)-4-(苯并呋喃 \[3，2-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-硫代碳酰胺)；BPR1J373(5-苯噻唑-2-基胺-嘧啶的衍生物)；CLM3；达马莫德(doramapimod)(BIRB-796)(1-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-(2-吗啉基乙氧基)萘-1-基)脲)；DS-5010；法米替尼 (famitinib)(5-\[2-(二乙氨基)乙基]-2-\[(Z)-(5-氟-2-氧代-1H-吲哚-3-亚基)甲基]-3- 甲基-6,7-二氢-1H-吡咯并\[3，2-C]吡啶-4-酮)；非德替尼(fedratinib)(SAR 302503， TG101348)(N-(叔丁基)-3-((5-甲基-2-((4-(2-(吡咯烷-1-基)乙氧基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)苯磺酰胺)；GSK3179106；GSK3352589；HG-6-63-01((E)-3-(2-(4- 氯-1H-吡咯并\[2，3-b]吡啶-5-基)乙烯基)-N-(4-((4-乙基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)-4-甲基苯甲酰胺)；NVP-BBT594(5-((6-乙酰氨基嘧啶-4-基)氧基)-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)吲哚啉-1-甲酰胺)；PP2(4- 氨基-5-(4-氯苯基)-7-(二甲基乙基)吡唑并\[3，4-d]嘧啶)；PP242(2-(4-氨基-1-异丙基-1H-吡唑并\[3，4-d]嘧啶-3-基)-1H-吲哚-5-醇)；奎扎替尼(quizartinib) (AC220)(1-(5-(叔丁基)异恶唑-3-基)-3-(4-(7-(2-吗啉基乙氧基)苯并[d]咪唑并 \[2，1-b]噻唑-2-基)苯基)脲)；司马沙尼(semaxanib)(SU5416，VEGFR2激酶抑制剂III)((Z)-3-((3，5-二甲基-1H-吡咯-2-基)亚甲基)吲哚啉-2-酮)；SU4984(3-\[4-(1-甲酰基哌嗪-4-基)苯亚甲基]-2-吲哚啉酮)；醉茄素A(Withaferin A) ((4β，5β，6β，22R)-4,27-二羟基-5，6：22，26-二环氧基麦角甾-2，24-二烯-1，26-二酮)； XL-999((Z)-5-((1-乙基哌啶-4-基)氨基)-3-((3-氟苯基)(5-甲基-1H-咪唑-2-基)亚甲基)吲哚啉-2-酮)；XMD15-44(N-(4-((4-乙基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)-4-甲基-3-(吡啶-3-基乙炔基)苯甲酰胺)；Y078-DM1(由与细胞毒性剂美登素的衍生物连接的RET抗体(Y078)构成的抗体药物缀合物)；和Y078-DM1(由与细胞毒性剂美登素的衍生物连接的RET抗体(Y078)构成的抗体药物缀合物)。

RET抑制剂的其它实例包含：N-(2-氟-5-三氟甲基苯基)-N′-{4′-[(2″-苯甲酰胺基)吡啶-4″-基氨基]苯基}脲；1-异丙基-3-(苯基乙炔基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶 -4-胺；3-((6，7-二甲氧基喹唑啉-4-基)氨基)-4-氟-2-甲苯酚；N-(5-(叔丁基)异恶唑 -3-基)-2-(4-(咪唑并[1，2-a]吡啶-6-基)苯基)乙酰胺；N-(5-(叔丁基)异恶唑-3- 基)-2-(3-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-6-基氧基)苯基)乙酰胺；2-氨基-6-{[2-(4-氯苯基)-2- 氧代乙基]磺酰基}-4-(3-噻吩基)吡啶-3，5-二甲腈；和3-芳基脲基苯亚甲基-吲哚啉-2-酮。

然而其它治疗剂包含RET抑制剂，如例如在以下中所描述的那些：美国专利第7,504,509号；第8,299,057号；第8,399,442号；第8,067,434号；第8,937,071 号；第9,006,256号；和第9,035,063号；美国公开案第2014/0121239号；第 20160176865号；第2011/0053934号；第2011/0301157号；第2010/0324065号；第2009/0227556号；第2009/0130229号；第2009/0099167号；第2005/0209195 号；国际公开案第WO 2016/037578号；第WO 2016/038519号；第WO 2016/038552号；第WO 2014/184069号；第WO 2014/072220号；第WO 2012/053606号；第WO 2009/017838号；第WO 2008/031551号；第WO 2007/136103号；第WO 2007/087245号；第WO 2007/057399号；第WO 2005/051366号；第WO 2005/062795号；和第WO2005/044835号；和《药物化学杂志》(J.Med.Chem.)2012，55(10)，4872-4876，其全部均以全文引用的方式并入本文中。

受体酪氨酸激酶(例如Trk)靶向治疗剂的非限制性实例包含阿法替尼(afatinib)、卡博替尼(cabozantinib)、西妥昔单抗(cetuximab)、克卓替尼(crizotinib)、达拉菲尼(dabrafenib)、恩曲替尼(entrectinib)、埃罗替尼(erlotinib)、吉非替尼(gefitinib)、伊马替尼(imatinib)、拉帕替尼(lapatinib)、来他替尼(lestaurtinib)、尼罗替尼(nilotinib)、帕唑帕尼(pazopanib)、帕尼单抗(panitumumab)、帕妥珠单抗(pertuzumab)、舒尼替尼(sunitinib)、曲妥珠单抗(trastuzumab)、L-((3S，4R)-4-(3-氟苯基-l-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-基)-3-(4- 甲基-3-(2-甲基嘧啶-5-基)-l-苯基-lH-吡唑-5-基)脲、AG 879、AR-772、AR-786、 AR-256、AR-618、AZ-23、AZ623、DS-6051、

GNF-5837、GTx-186、 GW 441756、LOXO-101、MGCD516、PLX7486、RXDX101、TPX-0005和 TSR-011。额外Trk靶向治疗剂包含在以下中所描述的那些：美国专利第 8,450,322号；第8,513,263号；第8,933,084号；第8,791,123号；第8,946,226 号；第8,450,322号；第8,299,057号；和第8,912,194号；美国公开案第 2016/0137654号；第2015/0166564号；第2015/0051222号；第2015/0283132 号；和第2015/0306086号；国际公开案第WO 2010/033941号；第WO 2010/048314号；第WO 2016/077841号；第WO 2011/146336号；第WO 2011/006074号；第WO 2010/033941号；第WO 2012/158413号；第WO 2014078454号；第WO 2014078417号；第WO 2014078408号；第WO 2014078378 号；第WO2014078372号；第WO 2014078331号；第WO 2014078328号；第 WO 2014078325号；第WO2014078323号；第WO 2014078322号；第WO 2015175788号；第WO 2009/013126号；第WO2013/174876号；第WO 2015/124697号；第WO 2010/058006号；第WO 2015/017533号；第WO2015/112806号；第WO 2013/183578号；和第WO 2013/074518号，其全部均以全文引用的方式并入本文中。

Trk抑制剂的其它实例可见于以下中：美国专利第8,637,516号、国际公开案第WO2012/034091号、美国专利第9,102,671号、国际公开案第WO 2012/116217号、美国公开案第2010/0297115号、国际公开案第WO 2009/053442 号、美国专利第8,642,035号、国际公开案第WO 2009092049号、美国专利第 8,691,221号、国际公开案第WO2006131952号，其所有均以全文引用的方式并入本文中。示范性Trk抑制剂包含：GNF-4256，描述于《癌症化学疗法与药理学》(Cancer Chemother.Pharmacol.)75(1)：131-141，2015；和GNF-5837 (N-[3-[[2，3-二氢-2-氧代-3-(1H-吡咯-2-基亚甲基)-1H-吲哚-6-基]氨基]-4-甲基苯基]-N′-[2-氟-5-(三氟甲基)苯基]-脲)，描述于《ACS医学与化学快报》(ACS Med.Chem.Lett.)3(2)：140-145，2012其中的每一个以全文引用的方式并入本文中。

Trk抑制剂的其它实例包含在以下中所公开的那些：美国公开案第 2010/0152219号、美国专利第8,114,989号和国际公开案第WO 2006/123113号，其全部均以全文引用的方式并入本文中。示范性Trk抑制剂包含：AZ623，描述于《癌症》(Cancer)117(6)：1321-1391，2011中；AZD6918，描述于《癌症生物学与治疗》(Cancer Biol.Ther.)16(3)：477-483，2015中；AZ64，描述于《癌症化学疗法与药理学》(Cancer Chemother.Pharmacol.)70：477-486，2012中； AZ-23((S)-5-氯-N2-(1-(5-氟吡啶-2-基)乙基)-N4-(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶 -2，4-二胺)，描述于《分子癌症治疗》(Mol.Cancer Ther.)8：1818-1827，2009中；和AZD7451；其中的每一个以全文引用的方式并入。

Trk抑制剂可包含以下中描述的那些：美国专利第7,615,383号；第7,384,632 号；第6,153,189号；第6,027,927号；第6,025,166号；第5,910,574号；第5,877,016 号；和第5,844,092号，其中的每一个以全文引用的方式并入。

Trk抑制剂的其它实例包含：CEP-751，描述于《国际癌症杂志》(Int.J. Cancer)72：672-679，1997中；CT327，描述于《性病皮肤学报》(Acta Derm.Venereol.)95：542-548，2015中；描述于国际公开案第WO 2012/034095号中的化合物；描述于美国专利第8,673,347号和国际公开案第WO 2007/022999 号中的化合物；描述于美国专利第8,338,417号中的化合物；描述于国际公开案第WO 2016/027754号中的化合物；描述于美国专利第9,242,977号中的化合物；描述于美国公开案第2016/0000783号中的化合物；舒尼替尼(N-(2-二乙氨乙基)-5-[(Z)-(5-氟-2-氧代-1H-吲哚-3-亚基)甲基]-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-甲酰胺)，如《公共科学图书馆·综合》(PLoS One)9：e95628，2014中所描述；描述于国际公开案第WO 2011/133637号中的化合物；描述于美国专利第8,637,256号中的化合物；描述于《关于治疗专利的专家观点》(Expert.Opin.Ther.Pat.) 24(7)：731-744，2014中的化合物；描述于《关于治疗专利的专家观点》(Expert Opin.Ther.Pat.)19(3)：305-319，2009中的化合物；经咪唑并吡啶取代的(R)-2- 苯基吡咯烷，例如GNF-8625，(R)-1-(6-(6-(2-(3-氟苯基)吡咯烷-1-基)咪唑并 [1，2-b]哒嗪-3-基)-[2，4′-联吡啶]-2′-基)哌啶-4-醇，如《ACS医学化学快报》(ACS Med.Chem.Lett.)6(5)：562-567，2015中所描述；GTx-186等，如《公共科学图书馆·综合》(PLoS One)8(12)：e83380，2013中所描述； K252a((9S-(9α，10β，12α))-2,3，9，10，11，12-六氢-10-羟基-10-(甲氧羰基)-9-甲基 -9，12-环氧基-1H-二吲哚并[1，2，3-fg：3′，2′，1′-kl]吡咯并[3，4-i][1，6]苯并二氮杂芳辛 -1-酮)，如《分子与细胞生物化学》(Mol.Cell Biochem.)339(1-2)：201-213，2010 中所描述；4-氨基吡唑基嘧啶，例如AZ-23(((S)-5-氯-N2-(1-(5-氟吡啶-2-基)乙基)-N4-(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺))，如《药物化学杂志》(J.Med. Chem.)51(15)：4672-4684，2008中所描述；PHA-739358(达鲁舍替(danusertib))，如《分子癌症治疗》(Mol.Cancer Ther.)6：3158，2007中所描述；

(5，6，7，13- 四氢-13-甲基-5-氧代-12H-吲哚并[2，3-a]吡咯并[3，4-c]咔唑-12-丙腈)，如《神经化学杂志》(J.Neurochem.)72：919-924，1999中所描述；GW441756((3Z)-3-[(1- 甲基吲哚-3-基)亚甲基]-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-2-酮)，如《IJ4E》115：117，2010 中所描述；米西西尼(milciclib)(PHA-848125AC)，描述于《肿瘤发生杂志》 (J.Carcinog.)12：22，2013中；AG-879((2E)-3-[3，5-双(1，1-二甲基乙基)-4-羟苯基]-2-氰基-2-丙烯硫代酰胺)；阿曲替尼(altiratinib)(N-(4-((2-(环丙烷甲酰胺基)吡啶-4-基)氧基)-2，5-二氟苯基)-N-(4-氟苯基)环丙烷-1，1-二甲酰胺)；卡博替尼(cabozantinib)(N-(4-((6，7-二甲氧基喹啉-4-基)氧基)苯基)-N′-(4-氟苯基)环丙烷-1，1-二甲酰胺)；来他替尼(lestaurtinib)((5S，6S，8R)-6-羟基-6-(羟甲基)-5-甲基-7，8，14，15-四氢-5H-16-氧杂-4b，8a，14-三氮杂-5，8-亚甲基二苯并[b，h]环辛[jkl] 环戊[e]-as-吲哒生-13(6H)-酮)；多瓦替尼(dovatinib)(4-氨基-5-氟-3-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-苯并咪唑-2-基]喹啉-2(1H)-酮单2-羟基丙酸酯水合物)；西他伐替尼(sitravatinib)(N-(3-氟-4-((2-(5-(((2-甲氧基乙基)氨基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基)氧基)苯基)-N-(4-氟苯基)环丙烷-1，1-二甲酰胺)； ONO-5390556；瑞格非尼(regorafenib)(4-[4-({[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]氨基甲酰基}氨基)-3-氟苯氧基]-N-甲基吡啶-2-甲酰胺水合物)；和VSR-902A；以上所有参考文献均以全文引用的方式并入本文中。

Trk抑制剂充当TrkA、TrkB和/或Trk C抑制剂的能力可以使用美国专利第 8,513,263号中实例A和B中描述的测定法来进行测试，所述专利以引用的方式并入本文中。

在一些实施例中，信号转导途径抑制剂包含Ras-Raf-MEK-ERK途径抑制剂(例如贝美替尼(binimetinib)、司美替尼(selumetinib)、恩可非尼(encorafinib)、索拉非尼(sorafenib)、曲美替尼(trametinib)和维罗非尼(vemurafenib))、 PI3K-Akt-mTOR-S6K途径抑制剂(例如，依维莫司(everolimus)、雷帕霉素 (rapamycin)、哌立福辛(perifosine)、坦罗莫司(temsirolimus))和其它激酶抑制剂，如巴瑞替尼(baricitinib)、布加替尼(brigatinib)、卡玛替尼(capmatinib)、达鲁舍替(danusertib)、依鲁替尼(ibrutinib)、米西西尼(milciclib)、槲皮素 (quercetin)、瑞格非尼(regorafenib)、鲁索替尼(ruxolitinib)、司马沙尼 (semaxanib)、AP32788、BLU285、BLU554、INCB39110、INCB40093、INCB50465、INCB52793、INCB54828、MGCD265、NMS-088、NMS-1286937、 PF 477736((R)-氨基-N-[5，6-二氢-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-氧代-1H吡咯并 [4，3，2-ef][2，3]苯并二氮呯-8-基]-环己烷乙酰胺)、PLX3397、PLX7486、PLX8394、 PLX9486、PRN1008、PRN1371、RXDX103、RXDX106、RXDX108、和TG101209 (N-叔丁基-3-(5-甲基-2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺基)嘧啶-4-基氨基)苯磺酰胺)。

检查点抑制剂的非限制性实例包含伊匹单抗(ipilimumab)、曲美单抗(tremelimumab)、纳武单抗(nivolumab)、匹立珠单抗(pidilizumab)、 MPDL3208A、MEDI4736、MSB0010718C、BMS-936559、BMS-956559、 BMS-935559(MDX-1105)、AMP-224和帕博利珠单抗(pembrolizumab)。

在一些实施例中，细胞毒性化学治疗剂是选自三氧化二砷、博莱霉素(bleomycin)、卡巴他赛(cabazitaxel)、卡培他滨(capecitabine)、卡铂 (carboplatin)、顺铂(cisplatin)、环磷酰胺(cyclophosphamide)、阿糖胞苷 (cytarabine)、达卡巴嗪(dacarbazine)、道诺霉素(daunorubicin)、多烯紫杉醇 (docetaxel)、小红莓(doxorubicin)、依托泊苷(etoposide)、氟尿嘧啶 (fluorouracil)、吉西他滨(gemcitabine)、伊立替康(irinotecan)、洛莫司汀 (lomustine)、甲氨蝶呤(methotrexate)、丝裂霉素C(mitomycin C)、奥沙利铂 (oxaliplatin)、太平洋紫杉醇(paclitaxel)、培美曲塞(pemetrexed)、替莫唑胺 (temozolomide)和长春新碱(vincristine)。

血管生成靶向疗法的非限制性实例包含阿柏西普(aflibercept)和贝伐单抗(bevacizumab)。

术语“免疫疗法”是指调节免疫***的药剂。在一些实施例中，免疫疗法可增加免疫***调节剂的表达和/或活性。在一些实施例中，免疫疗法可降低免疫***调节剂的表达和/或活性。在一些实施例中，免疫疗法可以募集和/或增强免疫细胞的活性。

在一些实施例中，免疫疗法是细胞免疫疗法(例如，过继性T细胞疗法、树突状细胞疗法、自然杀伤细胞疗法)。在一些实施例中，细胞免疫疗法是西普亮塞-T(APC8015；Provenge^TM；Plosker(2011)《药物》(Drugs)71(1)：101-108)。在一些实施例中，细胞免疫疗法包含表达嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor；CAR)的细胞。在一些实施例中，细胞免疫疗法是CAR-T细胞疗法。在一些实施例中，CAR-T细胞疗法是tisagenlecleucel(Kymriah TM)。

在一些实施例中，免疫疗法是抗体疗法(例如，单克隆抗体、缀合抗体)。在一些实施例中，抗体疗法是贝伐单抗(bevacizumab)(Mvasti^TM、

)、曲妥珠单抗(trastuzumab)

阿维鲁单抗(avelumab)

利妥昔单抗(rituximab)(MabThera^TM、

)、依决洛单抗(edrecolomab) (Panorex)、达拉图单抗(daratumuab)

奥拉单抗(olaratumab) (Lartruvo^TM)、奥法木单抗(ofatumumab)

阿仑单抗(alemtuzumab)

西妥昔单抗(cetuximab)

奥戈伏单抗(oregovomab)、帕博利珠单抗(pembrolizumab)

地鲁西单抗(dinutiximab)

奥必珠单抗(obinutuzumab)

曲美单抗(tremelimumab) (CP-675,206)、雷莫芦单抗(ramucirumab)

乌布里图昔单抗 (ublituximab)(TG-1101)、帕尼单抗(panitumumab)

埃罗妥珠单抗(elotuzumab)(Empliciti^TM)、阿维鲁单抗(avelumab)

耐昔妥珠单抗(necitumumab)(Portrazza^TM)、次妥珠单抗(cirmtuzumab)(UC-961)、异贝莫单抗(ibritumomab)

依莎西单抗(isatuximab)(SAR650984)、尼妥珠单抗(nimotuzumab)、夫苏木单抗(fresolimumab)(GC1008)、利瑞鲁单抗(lirilumab)(INN)、莫木丽珠单抗(mogamulizumab)

费拉妥珠单抗(ficlatuzumab)(AV-299)、地诺单抗(denosumab)

加尼图单抗(ganitumab)、乌瑞鲁单抗(urelumab)、匹立珠单抗(pidilizumab) 或阿玛西单抗(amatuximab)。

在一些实施例中，免疫疗法是抗体-药物缀合物。在一些实施例中，抗体- 药物缀合物是吉妥单抗(gemtuzumab)奥唑米星(ozogamicin)(Mylotarg^TM)、伊珠单抗(inotuzumab)奥唑米星(ozogamicin)

本妥昔单抗 (brentuximab)维多汀(vedotin)

阿多-曲妥珠单抗(ado-trastuzumab) 恩他新(emtansine)(TDM-1；

)、米妥昔单抗(mirvetuximab)索维坦星(soravtansine)(IMGN853)或安图单抗(anetumab)瑞维坦星(ravtansine)

在一些实施例中，免疫疗法包含布林莫单抗(blinatumomab)(AMG103；

)或米哚妥林(midostaurin)(Rydapt)。

在一些实施例中，免疫疗法包含毒素。在一些实施例中，免疫疗法是地尼白介素(denileukin diftitox)

在一些实施例中，细胞免疫疗法是细胞因子疗法。在一些实施例中，细胞因子疗法是白介素2(IL-2)疗法、干扰素α(IFNα)疗法、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)疗法、白介素12(IL-12)疗法、白介素15(IL-15)疗法、白介素7(IL-7)疗法或***α(EPO)疗法。在一些实施例中，IL-2疗法是阿地介白素(aldesleukin)

在一些实施例中，IFNα疗法是

在一些实施例中，G-CSF疗法是非格司亭(filgrastim)

在一些实施例中，免疫疗法是免疫检查点抑制剂。在一些实施例中，免疫疗法包含一种或多种免疫检查点抑制剂。在一些实施例中，免疫检查点抑制剂是CTLA-4抑制剂、PD-1抑制剂或PD-L1抑制剂。在一些实施例中，CTLA-4 抑制剂是伊匹单抗

或曲美单抗(CP-675,206)。在一些实施例中， PD-1抑制剂是帕博利珠单抗

或纳武单抗

在一些实施例中，PD-L1抑制剂是阿特珠单抗

阿维鲁单抗

或度伐单抗(Imfinzi^TM)。

在一些实施例中，免疫疗法是基于mRNA的免疫疗法。在一些实施例中，基于mRNA的免疫疗法是CV9104(参见例如Rausch等人(2014)《人类疫苗免疫疗法》(Human VaccinImmunother)10(11)：3146-52；和Kubler等人(2015) 《免疫疗法癌症杂志》(J.ImmunotherCancer)3：26)。

在一些实施例中，免疫疗法是卡介苗(Calmette-Guerin)(BCG)疗法。

在一些实施例中，免疫疗法是溶瘤病毒疗法。在一些实施例中，溶瘤病毒疗法是塔力莫拉帕普韦(talimogene alherparepvec)(T-VEC；

)。

在一些实施例中，免疫疗法是癌症疫苗。在一些实施例中，癌症疫苗是人 ***瘤病毒(human papillomavirus；HPV)疫苗。在一些实施例中，HPV疫苗是

或

在一些实施例中，癌症疫苗是B型肝炎病毒(HBV)疫苗。在一些实施例中，HBV疫苗是

或GI-13020

在一些实施例中，癌症疫苗是

或

在一些实施例中，癌症疫苗是

GVAX、ADXS11-001、ALVAC-CEA、

CimaVax-EGF、lapuleucel-T(APC8024；Neuvenge^TM)、GRNVAC1、GRNVAC2、 GRN-1201、hepcortespenlisimut-L(Hepko-V5)、

SCIB1、BMT CTN 1401、PrCa VBIR、PANVAC、

DPX-Survivac或viagenpumatucel-L (HS-110)。

在一些实施例中，免疫疗法是肽疫苗。在一些实施例中，肽疫苗是耐利派姆-S(nelipepimut-S)(E75)(NeuVax^TM)、IMA901或SurVaxM(SVN53-67)。在一些实施例中，癌症疫苗是免疫原性个性化新抗原疫苗(参见例如Ott等人 (2017)《自然》(Nature)547：217-221：Sahin等人(2017)自然》(Nature) 547：222-226)。在一些实施例中，癌症疫苗是RGSH4K或NEO-PV-01。在一些实施例中，癌症疫苗是基于DNA的疫苗。在一些实施例中，基于DNA的疫苗是***珠蛋白-A DNA疫苗(参见例如Kim等人(2016)《肿瘤免疫学》(OncoImmunology)5(2)：e1069940)。

在一些实施例中，免疫靶向药剂是选自阿地介白素、干扰素α-2b、伊匹单抗、拉立珠单抗、纳武单抗、强的松(prednisone)和西普亮塞-T。

放疗的非限制性实例包含放射性碘疗法、外束放疗和镭223疗法。

额外激酶抑制剂包含在例如以下中所描述的那些：美国专利第7,514,446 号、第7,863,289号、第8,026,247号、第8,501,756号、第8,552,002号、第8,815,901 号、第8,912,204号、第9,260,437号、第9,273,051号；美国公开案第US 2015/0018336号；国际公开案第WO 2007/002325号、第WO 2007/002433号、第WO 2008/080001号、第WO 2008/079906号、第WO 2008/079903号、第 WO 2008/079909号、第WO 2008/080015号、第WO 2009/007748号、第WO 2009/012283号、第WO 2009/143018号、第WO 2009/143024号、第WO WO 2009/014637号、第2009/152083号、第WO 2010/111527号、第WO 2012/109075 号、第WO 2014/194127号、第WO 2015/112806号、第WO 2007/110344号、第WO 2009/071480号、第WO 2009/118411号、第WO 2010/031816号、第 WO 2010/145998号、第WO 2011/092120号、第WO 2012/101032号、第WO 2012/139930号、第WO 2012/143248号、第WO 2012/152763号、第WO 2013/014039号、第WO 2013/102059号、第WO 2013/050448号、第WO 2013/050446号、第WO 2014/019908号、第WO 2014/072220号、第WO 2014/184069号和第WO 2016/075224号，其全部均以全文引用的方式并入本文中。

激酶抑制剂的其它实例包含在例如以下中所描述的那些：WO 2016/081450、WO2016/022569、WO 2016/011141、WO 2016/011144、WO 2016/011147、WO 2015/191667、WO2012/101029、WO 2012/113774、WO 2015/191666、WO 2015/161277、WO 2015/161274、WO2015/108992、WO 2015/061572、WO 2015/058129、WO 2015/057873、WO 2015/017528、 WO/2015/017533、WO 2014/160521和WO 2014/011900，其中的每一个以全文引用的方式并入本文中。

因此，本文还提供一种治疗癌症的方法，其包括向有需要的患者施用药物组合以治疗癌症，所述药物组合包括：(a)式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，(b)额外治疗剂，和(c)任选的至少一种药学上可接受的载体，以同时、单独或依序用于治疗癌症，其中式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物和额外治疗剂的量一起有效治疗癌症。

在一些实施例中，额外治疗剂包含上文所列的任一种疗法或治疗剂，其是癌症中的护理标准，其中所述癌症具有RET基因、RET蛋白或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常。

这些额外治疗剂可以与一种或多种剂量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物、或其药物组合物，作为同一或单独剂型的一部分，根据所属领域的技术人员已知的标准药物实践，通过相同或不同的施用途径和/或相同或不同的施用方案来施用。

本文还提供：(i)一种用于治疗有需要的患者的癌症的药物组合，其包括 (a)式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，(b)至少一种额外治疗剂 (例如，本文所描述或所属领域中已知的任何示范性额外治疗剂)，和(c)任选的至少一种药学上可接受的载体，以同时、单独或依序用于治疗癌症，其中式 I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的量和额外治疗剂的量一起有效治疗癌症；(ii)一种药物组合物，其包括这种组合；(iii)一种这种组合的用途，其用于制备用于治疗癌症的药物；和(iv)一种商业包装或产品，其包括呈组合制剂的这种组合以同时、单独或依序使用；和一种治疗有需要的患者的癌症的方法。在一个实施例中，患者是人类。在一些实施例中，癌症是RET相关癌症。举例来说，具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的RET相关癌症。

如本文所用，术语“药物组合”是指由超过一种活性成分的混合或组合产生的药物疗法，且包含活性成分的固定和非固定组合两者。术语“固定组合” 意指式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物和至少一种额外治疗剂(例如，化疗剂)，两个呈单一组合物或剂量的形式同时向患者施用。术语“非固定组合”意指，式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物和至少一种额外治疗剂(例如，化疗剂)被配制为单独的组合物或剂量，使得其可以同时、并行或依次以可变的间隔时间限制向有需要的患者施用，其中这种施用在患者体内提供有效水平的两种或更多种化合物。这些也适用于混合物疗法(cocktailtherapies)，例如施用三种或更多种活性成分

因此，本文还提供一种治疗癌症的方法，其包括向有需要的患者施用药物组合以治疗癌症，所述药物组合包括：(a)式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，(b)额外治疗剂，和(c)任选的至少一种药学上可接受的载体，以同时、单独或依序用于治疗癌症，其中式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物和额外治疗剂的量一起有效治疗癌症。在一个实施例中，式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物和额外治疗剂以单独剂量形式同时施用。在一个实施例中，式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物和额外治疗剂，以单独剂量形式，以联合治疗有效量，例如以每天一次或间歇剂量，按任何次序依序施用。在一个实施例中，式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物和额外治疗剂，以组合剂量形式同时施用。在一些实施例中，癌症是RET相关癌症。举例来说，具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的RET相关癌症。

本文还提供一种治疗需要这类治疗的患者中由RET介导的疾病或病症的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。在一些实施例中，由RET介导的疾病或病症是 RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常。举例来说， RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常，包含一种或多种RET抑制剂抗性突变。由RET介导的疾病或病症可包含与RET的表达或活性直接或间接相关的任何疾病、病症或病状，包含过表达和/或异常的活性水平。在一个实施例中，疾病是癌症(例如，RET相关癌症)。在一个实施例中，癌症是本文所描述的癌症或RET相关癌症中的任一个。

尽管肿瘤发生的遗传基础可能因不同的癌症类型而不同，但癌转移所需的细胞和分子机制似乎对所有实体肿瘤类型都相似。在转移级联期间，癌细胞失去生长抑制反应，经历粘附性改变且产生可降解胞外基质组分的酶。这导致肿瘤细胞从原始肿瘤脱离，通过新形成的血管浸润入循环中，将肿瘤细胞迁移和外渗到其可形成集落的有利远位置处。已经鉴定出许多基因是癌转移的启动子或抑制子。举例来说，神经胶质细胞衍生的神经营养因子(GDNF)和其RET 受体酪氨酸激酶的过表达已与癌症增殖和癌转移相关。参见例如Zeng，Q.等人《国际医学研究杂志》(J.Int.Med.Res.)(2008)36(4)：656-64。

因此，本文还提供用于抑制、预防、帮助预防或减少有需要的患者的癌症的癌转移症状的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。这类方法可用于治疗本文所描述的一种或多种癌症。参见例如美国公开案第2013/0029925号；国际公开案第 WO 2014/083567号；和美国专利第8,568,998号。在一些实施例中，癌症是RET 相关癌症。在一些实施例中，式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物与额外疗法或另一治疗剂(包含化疗剂，如激酶抑制剂)组合使用。举例来说，第一或第二RET激酶抑制剂。

术语“癌转移”是所属领域已知的术语，且意指在远离个体或患者的原发性肿瘤的位点处形成另外的肿瘤(例如，实体肿瘤)，其中所述另外的肿瘤包含与原发性肿瘤相同或类似的癌细胞。

还提供降低患有RET相关癌症的患者中发生癌转移或另外癌转移的风险的方法，所述方法包含：选择、鉴定或诊断患者为患有RET相关癌症，和向所选择、鉴定或诊断为患有RET相关癌症的患者施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。还提供降低患有RET相关癌症的患者中发生癌转移或另外癌转移的风险的方法，其包含向患有RET相关癌症的患者施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂。可以将患有RET相关癌症的患者发生癌转移或另外癌转移的风险降低与治疗前患者发生癌转移或另外癌转移的风险相比较，或与未接受治疗或已接受不同治疗的患有类似或相同RET相关癌症的患者或患者群体相比较。在一些实施例中，RET相关癌症是具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的RET相关癌症。

短语“发生癌转移的风险”是指患有原发性肿瘤的个体或患者在一段时间内在远离个体或患者的原发性肿瘤的位点处发展另外的肿瘤(例如，实体肿瘤) 的风险，其中所述另外的肿瘤包含与原发性肿瘤相同或类似的癌细胞。本文中描述用于降低患有癌症的个体或患者中发生癌转移的风险的方法。

短语“发生另外癌转移的风险”是指患有原发性肿瘤和在远离原发性肿瘤的位点处有一个或多个另外的肿瘤(其中所述一个或多个另外的肿瘤包含与癌细胞相同或类似的癌细胞)的个体或患者，将远离原发性肿瘤发展一个或多个其它肿瘤，其中所述其它肿瘤包含与原发性肿瘤相同或类似的癌细胞。本文中描述降低发生另外癌转移的风险的方法。

在一些实施例中，肿瘤中存在一种或多种RET抑制剂抗性突变，导致肿瘤对用第一RET抑制剂的治疗更具抗性。下文描述当RET抑制剂抗性突变导致肿瘤对用第一RET抑制剂的治疗更具抗性时适用的方法。举例来说，本文提供治疗患有癌症的个体的方法，其包含：鉴定具有癌细胞的个体，所述癌细胞具有一种或多种RET抑制剂抗性突变；和向所鉴定的个体施用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物与第一RET抑制剂组合施用。还提供治疗被鉴定为具有癌细胞的个体的方法，所述癌细胞具有一种或多种RET抑制剂抗性突变，所述方法包含向个体施用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物与第一RET抑制剂组合施用。在一些实施例中，一种或多种RET抑制剂抗性突变赋予癌细胞或肿瘤对于用第一 RET抑制剂的治疗增加的抗性。在一些实施例中，一种或多种RET抑制剂抗性突变包含表3和4中列出的一种或多种RET抑制剂抗性突变。举例来说，一种或多种RET抑制剂抗性突变可包含在氨基酸位置804处的取代，例如V804M、 V804L或V804E。

举例来说，本文提供用于治疗需要这类治疗的个体的RET相关癌症的方法，所述方法包括：(a)检测来自个体的样本中RET基因、RET蛋白或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常；和(b)向个体施用治疗有效量的第一 RET抑制剂，其中第一RET抑制剂选自由以下组成的组：卡博替尼 (cabozantinib)、凡德他尼(vandetanib)、阿莱替尼(alectinib)、索拉非尼 (sorafenib)、乐伐替尼(lenvatinib)、普纳替尼(ponatinib)、多韦替尼(dovitinib)、舒尼替尼(sunitinib)、弗雷替尼(foretinib)、BLU667和BLU6864。在一些实施例中，所述方法进一步包括(在(b)之后)(c)确定从个体获得的样本中的癌细胞是否具有至少一种RET抑制剂抗性突变；和(d)如果个体具有带有至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么以单药疗法或结合另一抗癌剂，向个体施用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物；或(e)如果个体具有不带有RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么向个体施用另外剂量的步骤(b) 的第一RET抑制剂。在一些实施例中，本文提供用于治疗需要这类治疗的个体的RET相关癌症的方法，所述方法包括：(a)检测来自个体的样本中RET基因、RET蛋白或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常；和(b)向个体施用治疗有效量的第一RET抑制剂，其中第一RET抑制剂选自由以下组成的组：卡博替尼(cabozantinib)、凡德他尼(vandetanib)、阿莱替尼(alectinib)、索拉非尼(sorafenib)、乐伐替尼(lenvatinib)、普纳替尼(ponatinib)、多韦替尼(dovitinib)、舒尼替尼(sunitinib)、弗雷替尼(foretinib)、BLU667和BLU6864。在一些实施例中，所述方法进一步包括(在(b)之后)(c)确定从个体获得的样本中的癌细胞是否具有至少一种RET抑制剂抗性突变；和(d)如果个体具有带有至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么以单药疗法或结合另一抗癌剂，向个体施用选自以下的式I化合物：i)实例编号1-20、ii)实例编号21-40、 iii)实例编号41-60、iv)实例编号61-80、v)实例编号81-100、vi)实例编号 101-120、vii)实例编号121-140、viii)实例编号141-160、ix)实例编号161-180、 x)实例编号181-200、xi)实例编号201-220、xii)实例编号221-240、xiii)实例编号241-260、xiv)实例编号261-280、xv)实例编号281-300、xvi)实例编号301-320、xvii)实例编号321-340、xviii)实例编号341-360、xix)实例编号 361-380、xx)实例编号381-400、xxi)实例编号401-420、xxii)实例编号421-440、 xxiii)实例编号441-460、xxiii)实例编号461-480、xxiv)实例编号481-500、xxv)实例编号501-520、xxvi)实例编号521-540或xxvii)实例编号541-561，或其其药学上可接受的盐或溶剂合物；或(e)如果个体具有不带有RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么向个体施用额外剂量的步骤(b)的第一RET抑制剂。在一些实施例中，本文提供用于治疗需要这类治疗的个体的RET相关癌症的方法，所述方法包括：(a)检测来自个体的样本中表1的一种或多种融合蛋白和/或表2的一种或多种RET激酶蛋白点突变/***/缺失；和(b)向个体施用治疗有效量的第一RET抑制剂，其中第一RET抑制剂选自由以下组成的组：卡博替尼、凡德他尼、阿莱替尼、索拉非尼、乐伐替尼、普纳替尼、多韦替尼、舒尼替尼、弗雷替尼、BLU667和BLU6864。在一些实施例中，所述方法进一步包括(在(b)之后)(c)确定从个体获得的样本中的癌细胞是否具有至少一种表3或4中的RET抑制剂抗性突变；和(d)如果个体具有带有至少一种RET 抑制剂抗性突变的癌细胞，那么以单药疗法或结合另一抗癌剂，向个体施用选自以下的式I化合物：i)实例编号1-20、ii)实例编号21-40、iii)实例编号41-60、 iv)实例编号61-80、v)实例编号81-100、vi)实例编号101-120、vii)实例编号121-140、viii)实例编号141-160、ix)实例编号161-180、x)实例编号181-200、 xi)实例编号201-220、xii)实例编号221-240、xiii)实例编号241-260、xiv) 实例编号261-280、xv)实例编号281-300、xvi)实例编号301-320、xvii)实例编号321-340、xviii)实例编号341-360、xix)实例编号361-380、xx)实例编号381-400、xxi)实例编号401-420、xxii)实例编号421-440、xxiii)实例编号 441-460、xxiii)实例编号461-480、xxiv)实例编号481-500、xxv)实例编号 501-520、xxvi)实例编号521-540或xxvii)实例编号541-561，或其药学上可接受的盐或溶剂合物；或(e)如果个体具有不带有RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么向个体施用额外剂量的步骤(b)的第一RET抑制剂。在一些实施例中，本文提供用于治疗需要这类治疗的个体的RET相关癌症的方法，所述方法包括(a)检测来自个体的样本中的融合蛋KIF5B-RET；和(b)向个体施用治疗有效量的第一RET抑制剂，其中所述第一RET抑制剂选自由以下组成的组：卡博替尼、凡德他尼、阿莱替尼、索拉非尼、乐伐替尼、普纳替尼、多韦替尼、舒尼替尼、弗雷替尼、BLU667和BLU6864。在一些实施例中，所述方法进一步包括(在(b)之后)(c)确定从个体获得的样本中的癌细胞是否具有RET抑制剂抗性突变V804M；和(d)如果个体具有带有至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么以单药疗法或结合另一抗癌剂，向个体施用选自由选自以下的式I化合物组成的组的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物：i)实例编号1-20、ii)实例编号21-40、iii)实例编号41-60、iv)实例编号61-80、v)实例编号81-100、vi)实例编号101-120、vii)实例编号121-140、 viii)实例编号141-160、ix)实例编号161-180、x)实例编号181-200、xi)实例编号201-220、xii)实例编号221-240、xiii)实例编号241-260、xiv)实例编号261-280、xv)实例编号281-300、xvi)实例编号301-320、xvii)实例编号 321-340、xviii)实例编号341-360、xix)实例编号361-380、xx)实例编号381-400、 xxi)实例编号401-420、xxii)实例编号421-440、xxiii)实例编号441-460、xxiii) 实例编号461-480、xxiv)实例编号481-500、xxv)实例编号501-520、xxvi)实例编号521-540或xxvii)实例编号541-561；或(e)如果个体具有不带有RET 抑制剂抗性突变的癌细胞，那么向个体施用额外剂量的步骤(b)的第一RET 抑制剂。

作为另一实例，本文提供用于治疗需要这类治疗的个体的RET相关癌症的方法，所述方法包括：(a)检测来自所述个体的样本中的RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平的调节异常；和(b)向个体施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，所述方法进一步包括(在(b)之后)(c)确定从个体获得的样本中的癌细胞是否具有至少一种RET抑制剂抗性突变；和(d)如果个体具有带有至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么以单药疗法或结合另一抗癌剂，向个体施用第二RET 抑制剂，其中第二RET抑制剂选自由以下组成的组：卡博替尼、凡德他尼、阿莱替尼、索拉非尼、乐伐替尼、普纳替尼、多韦替尼、舒尼替尼、弗雷替尼、 BLU667和BLU6864；或(e)如果个体具有不带有RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么向个体施用额外剂量的步骤(b)的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，本文提供用于治疗需要这类治疗的个体的RET 相关癌症的方法，所述方法包括：(a)检测来自个体的样本中的RET基因、RET 激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常；和(b)向个体施用治疗有效量的选自以下的式I化合物：i)实例编号1-20、ii)实例编号21-40、iii)实例编号41-60、iv)实例编号61-80、v)实例编号81-100、vi)实例编号101-120、 vii)实例编号121-140、viii)实例编号141-160、ix)实例编号161-180、x)实例编号181-200、xi)实例编号201-220、xii)实例编号221-240、xiii)实例编号241-260、xiv)实例编号261-280、xv)实例编号281-300、xvi)实例编号301-320、 xvii)实例编号321-340、xviii)实例编号341-360、xix)实例编号361-380、xx) 实例编号381-400、xxi)实例编号401-420、xxii)实例编号421-440、xxiii)实例编号441-460、xxiii)实例编号461-480、xxiv)实例编号481-500、xxv)实例编号501-520、xxvi)实例编号521-540或xxvii)实例编号541-561，或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，所述方法进一步包括(在(b) 之后)(c)确定从个体获得的样本中的癌细胞是否具有至少一种RET抑制剂抗性突变；和(d)如果个体具有带有至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么以单药疗法或结合另一抗癌剂，向个体施用第二RET抑制剂，其中第二 RET抑制剂选自由以下组成的组：卡博替尼、凡德他尼、阿莱替尼、索拉非尼、乐伐替尼、普纳替尼、多韦替尼、舒尼替尼、弗雷替尼、BLU667和BLU6864；或(e)如果个体具有不带有RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么向个体施用额外剂量的步骤(b)的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，本文提供用于治疗需要这类治疗的个体的RET相关癌症的方法，所述方法包括：(a)检测来自个体的样本中的表1的一种或多种融合蛋白和/或表 2的一种或多种RET激酶蛋白点突变/***/缺失；和(b)向个体施用治疗有效量的选自以下的式I化合物：i)实例编号1-20、ii)实例编号21-40、iii)实例编号41-60、iv)实例编号61-80、v)实例编号81-100、vi)实例编号101-120、 vii)实例编号121-140、viii)实例编号141-160、ix)实例编号161-180、x)实例编号181-200、xi)实例编号201-220、xii)实例编号221-240、xiii)实例编号241-260、xiv)实例编号261-280、xv)实例编号281-300、xvi)实例编号301-320、 xvii)实例编号321-340、xviii)实例编号341-360、xix)实例编号361-380、xx) 实例编号381-400、xxi)实例编号401-420、xxii)实例编号421-440、xxiii)实例编号441-460、xxiii)实例编号461-480、xxiv)实例编号481-500、xxv)实例编号501-520、xxvi)实例编号521-540或xxvii)实例编号541-561，或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，所述方法进一步包括(在(b) 之后)(c)确定从个体获得的样本中的癌细胞是否具有至少一种表3或4中的 RET抑制剂抗性突变；和(d)如果个体具有带有至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么以单药疗法或结合另一抗癌剂，向个体施用第二RET抑制剂，其中第二RET抑制剂选自由以下组成的组：卡博替尼、凡德他尼、阿莱替尼、索拉非尼、乐伐替尼、普纳替尼、多韦替尼、舒尼替尼、弗雷替尼、BLU667 和BLU6864；或(e)如果个体具有不带有RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么向个体施用额外剂量的步骤(b)的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，本文提供用于治疗需要这类治疗的个体的RET相关癌症的方法，所述方法包括(a)检测来自个体的样本中的融合蛋白KIF5B-RET；和(b)向个体施用治疗有效量的选自以下的式I化合物：i)实例编号1-20、ii) 实例编号21-40、iii)实例编号41-60、iv)实例编号61-80、v)实例编号81-100、vi)实例编号101-120、vii)实例编号121-140、viii)实例编号141-160、ix) 实例编号161-180、x)实例编号181-200、xi)实例编号201-220、xii)实例编号221-240、xiii)实例编号241-260、xiv)实例编号261-280、xv)实例编号 281-300、xvi)实例编号301-320、xvii)实例编号321-340、xviii)实例编号341-360、 xix)实例编号361-380、xx)实例编号381-400、xxi)实例编号401-420、xxii) 实例编号421-440、xxiii)实例编号441-460、xxiii)实例编号461-480、xxiv) 实例编号481-500、xxv)实例编号501-520、xxvi)实例编号521-540或xxvii) 实例编号541-561，或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，所述方法进一步包括(在(b)之后)(c)确定从个体获得的样本中的癌细胞是否具有RET抑制剂抗性突变V804M；和(d)如果个体具有带有至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么以单药疗法或结合另一抗癌剂，向个体施用第二 RET抑制剂，其中第二RET抑制剂选自由以下组成的组：卡博替尼、凡德他尼、阿莱替尼、索拉非尼、乐伐替尼、普纳替尼、多韦替尼、舒尼替尼、弗雷替尼、 BLU667和BLU6864；或(e)如果个体具有不带有RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么向个体施用额外剂量的步骤(b)的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。

另外，本文提供用于治疗需要这类治疗的个体的RET相关癌症的方法，所述方法包括：(a)检测来自所述个体的样本中的RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平的调节异常；和(b)向个体施用治疗有效量的式I 化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，所述方法进一步包括(在(b)之后)(c)确定从个体获得的样本中的癌细胞是否具有至少一种 RET抑制剂抗性突变；和(d)如果个体具有带有至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么以单药疗法或结合另一抗癌剂(例如第二RET抑制剂、式I的第二化合物或其药学上可接受的盐、或免疫疗法)或抗癌疗法(例如手术或放疗)，向个体施用额外剂量的步骤(b)的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，本文提供用于治疗需要这类治疗的个体的RET 相关癌症的方法，所述方法包括：(a)检测来自个体的样本中的RET基因、RET 激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常；和(b)向个体施用治疗有效量的选自以下的式I化合物：i)实例编号1-20、ii)实例编号21-40、iii)实例编号41-60、iv)实例编号61-80、v)实例编号81-100、vi)实例编号101-120、 vii)实例编号121-140、viii)实例编号141-160、ix)实例编号161-180、x)实例编号181-200、xi)实例编号201-220、xii)实例编号221-240、xiii)实例编号241-260、xiv)实例编号261-280、xv)实例编号281-300、xvi)实例编号301-320、 xvii)实例编号321-340、xviii)实例编号341-360、xix)实例编号361-380、xx) 实例编号381-400、xxi)实例编号401-420、xxii)实例编号421-440、xxiii)实例编号441-460、xxiii)实例编号461-480、xxiv)实例编号481-500、xxv)实例编号501-520、xxvi)实例编号521-540或xxvii)实例编号541-561，或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，所述方法进一步包括(在(b) 之后)(c)确定从个体获得的样本中的癌细胞是否具有至少一种RET抑制剂抗性突变；和(d)如果个体具有带有至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么以单药疗法或结合另一抗癌剂(例如第二RET抑制剂、式I的第二化合物或其药学上可接受的盐、或免疫疗法)或抗癌疗法(例如手术或放疗)，向个体施用额外剂量的步骤(b)的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，本文提供用于治疗需要这类治疗的个体的RET相关癌症的方法，所述方法包括：(a)检测来自个体的样本中的表1的一种或多种融合蛋白和/或表2的一种或多种RET激酶蛋白点突变/***/缺失；和(b)向个体施用治疗有效量的选自由选自以下的式I化合物组成的组的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物：i)实例编号1-20、ii)实例编号21-40、iii)实例编号 41-60、iv)实例编号61-80、v)实例编号81-100、vi)实例编号101-120、vii) 实例编号121-140、viii)实例编号141-160、ix)实例编号161-180、x)实例编号181-200、xi)实例编号201-220、xii)实例编号221-240、xiii)实例编号241-260、 xiv)实例编号261-280、xv)实例编号281-300、xvi)实例编号301-320、xvii) 实例编号321-340、xviii)实例编号341-360、xix)实例编号361-380、xx)实例编号381-400、xxi)实例编号401-420、xxii)实例编号421-440、xxiii)实例编号441-460、xxiii)实例编号461-480、xxiv)实例编号481-500、xxv)实例编号501-520、xxvi)实例编号521-540或xxvii)实例编号541-561，或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，所述方法进一步包括(在(b)之后)(c)确定从个体获得的样本中的癌细胞是否具有至少一种表3或4中的RET 抑制剂抗性突变；和(d)如果个体具有带有至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么以单药疗法或结合另一抗癌剂(例如第二RET抑制剂、式I的第二化合物或其药学上可接受的盐、或免疫疗法)或抗癌疗法(例如手术或放疗)，向个体施用额外剂量的步骤(b)的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，在步骤(d)中施用选自由以下组成的组的第二RET抑制剂：卡博替尼、凡德他尼、阿莱替尼、索拉非尼、乐伐替尼、普纳替尼、多韦替尼、舒尼替尼、弗雷替尼、BLU667和BLU6864。在一些实施例中，本文提供用于治疗需要这类治疗的个体的RET相关癌症的方法，所述方法包括(a) 检测来自个体的样本中的融合蛋白KIF5B-RET；和(b)向个体施用治疗有效量的选自以下的式I化合物：i)实例编号1-20、ii)实例编号21-40、iii)实例编号41-60、iv)实例编号61-80、v)实例编号81-100、vi)实例编号101-120、 vii)实例编号121-140、viii)实例编号141-160、ix)实例编号161-180、x)实例编号181-200、xi)实例编号201-220、xii)实例编号221-240、xiii)实例编号241-260、xiv)实例编号261-280、xv)实例编号281-300、xvi)实例编号301-320、 xvii)实例编号321-340、xviii)实例编号341-360、xix)实例编号361-380、xx)实例编号381-400、xxi)实例编号401-420、xxii)实例编号421-440、xxiii)实例编号441-460、xxiii)实例编号461-480、xxiv)实例编号481-500、xxv)实例编号501-520、xxvi)实例编号521-540或xxvii)实例编号541-561，或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，所述方法进一步包括(在(b) 之后)(c)确定从个体获得的样本中的癌细胞是否具有RET抑制剂抗性突变 V804M；和(d)如果个体具有带有至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么以单药疗法或结合另一抗癌剂(例如第二RET抑制剂、式I的第二化合物或其药学上可接受的盐、或免疫疗法)或抗癌疗法(例如手术或放疗)，向个体施用额外剂量的步骤(b)的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，步骤(d)中施用选自由以下组成的组的第二RET抑制剂：卡博替尼、凡德他尼、阿莱替尼、索拉非尼、乐伐替尼、普纳替尼、多韦替尼、舒尼替尼、弗雷替尼、BLU667和BLU6864。

还提供为患有癌症的个体选择治疗的方法，所述方法包含：鉴定具有癌细胞的个体，所述癌细胞具有一种或多种RET抑制剂抗性突变；和选择包含施用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗。在一些实施例中，一种或多种RET抑制剂抗性突变赋予癌细胞或肿瘤对于用第一RET抑制剂的治疗增加的抗性。在一些实施例中，式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物与第一RET抑制剂组合施用。还提供为患有癌症的个体选择治疗的方法，所述方法包含：为鉴定为具有带一种或多种RET抑制剂抗性突变的癌细胞的个体，选择包含施用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗。还提供选择患有癌症的个体以进行治疗的方法，所述治疗不包含第一RET抑制剂作为单药疗法，所述方法包含：鉴定具有癌细胞的个体，所述癌细胞具有一种或多种 RET抑制剂抗性突变；和选择所鉴定的个体以进行包含式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗。还提供选择患有癌症的个体以进行治疗的方法，所述治疗不包含第一RET抑制剂单药疗法，所述方法包含：选择鉴定为具有带一种或多种RET抑制剂抗性突变的癌细胞的个体，以进行包含施用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗。在一些实施例中，一种或多种RET 抑制剂抗性突变包含表3和4中列出的一种或多种RET抑制剂抗性突变。在一些实施例中，一种或多种RET抑制剂抗性突变可包含在氨基酸位置804处的取代，例如V804M、V804L或V804E。

还提供确定患有癌症(例如，RET相关癌症)的个体将对用第一RET抑制剂作为单药疗法的治疗具有阳性反应的可能性的方法，所述方法包含：确定从个体获得的样本中的癌细胞是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变；和确定具有带一种或多种RET抑制剂抗性突变的癌细胞的个体对用第一RET抑制剂作为单药疗法的治疗具有阳性反应的可能性降低(即，具有阴性反应的可能性增加)。还提供确定患有癌症(例如，RET相关癌症)的个体将对用第一RET 抑制剂作为单药疗法的治疗具有阳性反应的可能性的方法，所述方法包含：确定从个体获得的样本中的癌细胞是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变；和确定不具有带一种或多种RET抑制剂抗性突变的癌细胞的个体，相较于具有带一种或多种RET抑制剂抗性突变的癌细胞的个体，对用第一RET抑制剂作为单药疗法的治疗具有阳性反应的可能性增加。还提供预测用第一RET抑制剂作为单药疗法的治疗在患有癌症的个体中的功效的方法，所述方法包含：确定从个体获得的样本中的癌细胞是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变；和确定用第一RET抑制剂作为单药疗法的治疗在具有癌细胞的个体中不太可能有效，在从个体获得的样本中，所述癌细胞具有一种或多种RET抑制剂抗性突变。还提供预测用第一RET抑制剂作为单药疗法的治疗在患有癌症的个体中的功效的方法，所述方法包含：确定用第一RET抑制剂作为单药疗法的治疗在从具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的个体获得的样本中具有癌细胞的个体中不太可能有效。在一些实施例中，一种或多种RET抑制剂抗性突变赋予癌细胞或肿瘤对于用第一RET抑制剂的治疗增加的抗性。在一些实施例中，一种或多种 RET抑制剂抗性突变包含表3和4中列出的一种或多种RET抑制剂抗性突变。举例来说，一种或多种RET抑制剂抗性突变可包含在氨基酸位置804处的取代，例如V804M、V804L或V804E。

还提供治疗患有癌症的个体的方法，所述方法包含：(a)向个体施用一个或多个剂量的第一RET抑制剂一段时间；(b)在(a)之后，确定从个体获得的样本中的癌细胞是否具有至少一种RET抑制剂抗性突变；和(c)如果个体患有具有带至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么以单药疗法或结合另一抗癌剂，向个体施用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物；或(d) 如果个体具有不带RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么向个体施用额外剂量的步骤(a)的第一RET抑制剂。在一些实施例中，当向个体施用额外剂量的步骤(a)的第一RET抑制剂时，还可向个体施用另一抗癌剂(例如，第二RET 抑制剂或式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物、或免疫疗法)。在一些实施例中，额外抗癌剂是所属领域中已知的任何抗癌剂。举例来说，额外抗癌剂是另一RET抑制剂(例如，第二RET抑制剂)。在一些实施例中，额外抗癌剂是免疫疗法。在步骤(c)的一些实施例中，另一RET抑制剂可以是步骤(a) 中施用的第一RET抑制剂。在一些实施例中，一种或多种RET抑制剂抗性突变赋予癌细胞或肿瘤对于用第一RET抑制剂的治疗增加的抗性。在一些实施例中，一种或多种RET抑制剂抗性突变包含表3和4中列出的一种或多种RET 抑制剂抗性突变。举例来说，一种或多种RET抑制剂抗性突变可包含在氨基酸位置804处的取代，例如V804M、V804L或V804E。

还提供治疗患有癌症的个体的方法，所述方法包含：(a)向个体施用一个或多个剂量的第一RET抑制剂一段时间；(b)在(a)之后，确定从个体获得的样本中的癌细胞是否具有至少一种RET抑制剂抗性突变；和(c)如果个体具有带至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么为个体选择第二RET抑制剂作为单药疗法或结合另一抗癌剂；或(d)如果个体具有不带RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么为个体选择额外剂量的步骤(a)的第一RET抑制剂。在一些实施例中，当向个体施用额外剂量的步骤(a)的第一RET抑制剂时，还可向个体施用另一抗癌剂。在一些实施例中，一种或多种RET抑制剂抗性突变赋予癌细胞或肿瘤对于用第一RET抑制剂的治疗增加的抗性。在一些实施例中，一种或多种RET抑制剂抗性突变包含表3和4中列出的一种或多种RET 抑制剂抗性突变。举例来说，一种或多种RET抑制剂抗性突变可包含在氨基酸位置804处的取代，例如V804M、V804L或V804E。在一些实施例中，额外抗癌剂是所属领域中已知的任何抗癌剂。举例来说，额外抗癌剂是另一RET抑制剂(例如，式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物)。在一些实施例中，额外抗癌剂是免疫疗法。

还提供治疗患有癌症(例如RET相关癌症)的个体的方法，所述方法包含： (a)确定从患有癌症和先前施用一个或多个剂量的第一RET抑制剂的个体获得的样本中的癌细胞，是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变；和(b)如果个体具有带至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么以单药疗法或结合另一抗癌剂，向个体施用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物；或(c) 如果个体具有不带RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么向个体施用额外剂量的先前施用的第一RET抑制剂。在一些实施例中，当向个体施用额外剂量的先前向所述个体施用的第一RET抑制剂时，还可向个体施用另一抗癌剂(例如，式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物、或免疫疗法)。在一些实施例中，一种或多种RET抑制剂抗性突变赋予癌细胞或肿瘤对于用第一RET抑制剂的治疗增加的抗性。在一些实施例中，一种或多种RET抑制剂抗性突变包含表3 和4中列出的一种或多种RET抑制剂抗性突变。举例来说，一种或多种RET 抑制剂抗性突变可包含在氨基酸位置804处的取代，例如V804M、V804L或 V804E。在一些实施例中，额外抗癌剂是所属领域中已知的任何抗癌剂。举例来说，额外抗癌剂是另一RET抑制剂(例如，第二RET抑制剂)。在一些实施例中，额外抗癌剂是免疫疗法。在步骤(b)的一些实施例中，另一RET抑制剂可以是步骤(a)中施用的第一RET抑制剂。

还提供治疗患有癌症的个体的方法，所述方法包含：(a)确定从患有癌症和先前施用一个或多个剂量的第一RET抑制剂的个体获得的样本中的癌细胞是否具有至少一种RET抑制剂抗性突变；和(b)如果个体具有带至少一种RET 抑制剂抗性突变的癌细胞，那么以单药疗法或结合另一抗癌剂，向个体施用第二RET抑制剂；或(c)如果个体具有不带RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么向个体施用额外剂量的先前施用的第一RET抑制剂。在一些实施例中，当向个体施用额外剂量的先前施用于个体的第一RET抑制剂时，还可向个体施用另一抗癌剂。在一些实施例中，一种或多种RET抑制剂抗性突变赋予癌细胞或肿瘤对于用第一RET抑制剂的治疗增加的抗性。在一些实施例中，一种或多种 RET抑制剂抗性突变包含表3和4中列出的一种或多种RET抑制剂抗性突变。举例来说，一种或多种RET抑制剂抗性突变可包含在氨基酸位置804处的取代，例如V804M、V804L或V804E。在一些实施例中，额外抗癌剂是所属领域中已知的任何抗癌剂。举例来说，额外抗癌剂是另一RET抑制剂(例如，式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物)。在一些实施例中，额外抗癌剂是免疫疗法。在(b)的一些实施例中，另一RET抑制剂可以是步骤(a)中施用的第一 RET抑制剂。

还提供为患有癌症的个体选择治疗的方法，所述方法包含：(a)向个体施用一个或多个剂量的第一RET抑制剂一段时间；(b)在(a)之后，确定从个体获得的样本中的癌细胞是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变；和(c) 如果个体具有带至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么以单药疗法或结合另一抗癌剂，向个体施用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物；或 (d)如果个体具有不带RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么向个体施用额外剂量的步骤(a)的第一RET抑制剂。在一些实施例中，当为个体选择额外剂量的步骤(a)的第一RET抑制剂时，所述方法可进一步包含为个体选择另一种抗癌剂的剂量。在一些实施例中，一种或多种RET抑制剂抗性突变赋予癌细胞或肿瘤对于用第一RET抑制剂的治疗增加的抗性。在一些实施例中，一种或多种RET抑制剂抗性突变包含表3和4中列出的一种或多种RET抑制剂抗性突变。举例来说，一种或多种RET抑制剂抗性突变可包含在氨基酸位置804处的取代，例如V804M、V804L或V804E。在一些实施例中，额外抗癌剂是所属领域中已知的任何抗癌剂。举例来说，额外抗癌剂是另一RET抑制剂(例如，第二RET抑制剂)。在一些实施例中，额外抗癌剂是免疫疗法。在步骤(c)的一些实施例中，另一RET抑制剂可以是步骤(a)中施用的第一RET抑制剂。

还提供为患有癌症的个体选择治疗的方法，所述方法包含：(a)向个体施用一个或多个剂量的第一RET抑制剂一段时间；(b)在(a)之后，确定从个体获得的样本中的癌细胞是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变；和(c) 如果个体具有带至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么为个体选择第二 RET抑制剂作为单药疗法或结合另一抗癌剂；或(d)如果个体具有不带RET 抑制剂抗性突变的癌细胞，那么为个体选择额外剂量的步骤(a)的第一RET 抑制剂。在一些实施例中，当为个体选择额外剂量的步骤(a)的第一RET抑制剂时，所述方法可进一步包含为个体选择另一种抗癌剂的剂量。在一些实施例中，一种或多种RET抑制剂抗性突变赋予癌细胞或肿瘤对于用第一RET抑制剂的治疗增加的抗性。在一些实施例中，一种或多种RET抑制剂抗性突变包含表3和4中列出的一种或多种RET抑制剂抗性突变。举例来说，一种或多种 RET抑制剂抗性突变可包含在氨基酸位置804处的取代，例如V804M、V804L 或V804E。在一些实施例中，额外抗癌剂是所属领域中已知的任何抗癌剂。举例来说，额外抗癌剂是另一RET抑制剂(例如，式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物)。在一些实施例中，额外抗癌剂是免疫疗法。在一些实施例中，另一RET可以是步骤(a)中施用的第一RET抑制剂。

还提供为患有癌症的个体选择治疗的方法，所述方法包含：(a)确定从患有癌症和先前施用一个或多个剂量的第一RET抑制剂的个体获得的样本中的癌细胞，是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变；(b)如果个体具有带至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么为个体选择式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单药疗法或结合另一抗癌剂；或(c)如果个体具有不带RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么选择额外剂量的先前施用于个体的第一 RET抑制剂。在一些实施例中，当为个体选择额外剂量的先前施用于个体的第一RET抑制剂时，所述方法可进一步包含为个体选择另一抗癌剂(例如，式I 化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物)的剂量。在一些实施例中，一种或多种RET抑制剂抗性突变赋予癌细胞或肿瘤对于用第一RET抑制剂的治疗增加的抗性。在一些实施例中，一种或多种RET抑制剂抗性突变包含表3和4中列出的一种或多种RET抑制剂抗性突变。举例来说，一种或多种RET抑制剂抗性突变可包含在氨基酸位置804处的取代，例如V804M、V804L或V804E。在一些实施例中，额外抗癌剂是所属领域中已知的任何抗癌剂。举例来说，额外抗癌剂是另一RET抑制剂(例如，第二RET抑制剂)。在一些实施例中，额外抗癌剂是免疫疗法。在步骤(c)的一些实施例中，另一RET抑制剂可以是步骤(a)中施用的第一RET抑制剂。

还提供为患有癌症的个体选择治疗的方法，所述方法包含：(a)确定从患有癌症和先前施用一个或多个剂量的第一RET抑制剂的个体获得的样本中的癌细胞是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变；(b)如果个体具有带至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么为个体选择第二RET抑制剂作为单药疗法或结合另一抗癌剂；或(c)如果个体具有不带RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么选择额外剂量的先前施用于个体的第一RET抑制剂。在一些实施例中，当为个体选择额外剂量的先前施用于个体的第一RET抑制剂时，所述方法可进一步包含为个体选择另一抗癌剂(例如，式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物、或免疫疗法)的剂量。在一些实施例中，一种或多种RET抑制剂抗性突变赋予癌细胞或肿瘤对于用第一RET抑制剂的治疗增加的抗性。在一些实施例中，一种或多种RET抑制剂抗性突变包含表3和4中列出的一种或多种RET抑制剂抗性突变。举例来说，一种或多种RET抑制剂抗性突变可包含在氨基酸位置804处的取代，例如V804M、V804L或V804E。在一些实施例中，额外抗癌剂是所属领域中已知的任何抗癌剂。举例来说，额外抗癌剂是另一RET抑制剂(例如，式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物)。在一些实施例中，额外抗癌剂是免疫疗法。在一些实施例中，另一RET可以是步骤(a)中施用的第一RET抑制剂。

还提供确定个体发展对第一RET抑制剂具有一定抗性的癌症的风险的方法，所述方法包含：确定从个体获得的样本中的细胞是否具有一种或多种RET 抑制剂抗性突变；和鉴定具有带一种或多种RET抑制剂抗性突变的细胞的个体为具有增加的发展对第一RET抑制剂具有一定抗性的癌症的可能性。还提供确定个体发展对第一RET抑制剂具有一定抗性的癌症的风险的方法，所述方法包含：鉴定具有带一种或多种RET抑制剂抗性突变的细胞的个体为具有增加的发展对第一RET抑制剂具有一定抗性的癌症的可能性。还提供确定对第一RET 抑制剂具有一定抗性的癌症的存在的方法，所述方法包含：确定从个体获得的样本中的癌细胞是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变；和确定具有带一种或多种RET抑制剂抗性突变的癌细胞的个体患有对第一RET抑制剂具有一定抗性的癌症。还提供确定在个体中对第一RET抑制剂具有一定抗性的癌症的存在的方法，所述方法包含：确定具有带一种或多种RET抑制剂抗性突变的癌细胞的个体患有对第一RET抑制剂具有一定抗性的癌症。在一些实施例中，一种或多种RET抑制剂抗性突变赋予癌细胞或肿瘤对于用第一RET抑制剂的治疗增加的抗性。在一些实施例中，一种或多种RET抑制剂抗性突变包含表3和4 中列出的一种或多种RET抑制剂抗性突变。举例来说，一种或多种RET抑制剂抗性突变可包含在氨基酸位置804处的取代，例如V804M、V804L或V804E。

在本文所描述任一方法的一些实施例中，赋予癌细胞或肿瘤对用第一RET 抑制剂的治疗增加的抗性的RET抑制剂抗性突变，可以是表3或4中列出的任一种RET抑制剂抗性突变(例如，在氨基酸位置804处的取代，例如V804M、 V804L或V804E)。

在一些实施例中，肿瘤中一种或多种RET抑制剂抗性突变的存在使得肿瘤对用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗更具抗性。下文描述当RET抑制剂抗性突变导致肿瘤对用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗更具抗性时适用的方法。举例来说，本文提供治疗患有癌症的个体的方法，其包含：鉴定具有癌细胞的个体，所述癌细胞具有一种或多种RET抑制剂抗性突变；和以单药疗法，向所鉴定的个体施用不包含式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗(例如，第二RET激酶抑制剂)。还提供治疗鉴定为具有带一种或多种RET抑制剂抗性突变的癌细胞的个体的方法，所述方法包含以单药疗法，向个体施用不包含式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗(例如，第二RET激酶抑制剂)。在一些实施例中，所述一种或多种RET抑制剂抗性突变赋予癌细胞或肿瘤对用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗增加的抗性。

还提供为患有癌症的个体选择治疗的方法，所述方法包含：鉴定具有癌细胞的个体，所述癌细胞具有一种或多种RET抑制剂抗性突变；和为所鉴定的个体，选择不包含式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单药疗法的治疗(例如，第二RET激酶抑制剂)。还提供为患有癌症的个体选择治疗的方法，所述方法包含：为鉴定为具有带一种或多种RET抑制剂抗性突变的个体，选择不包含式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单药疗法的治疗 (例如，第二RET激酶抑制剂)。还提供选择患有癌症的个体以进行治疗的方法，所述治疗不包含式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单药疗法(例如，第二RET激酶抑制剂)，所述方法包含：鉴定具有带一种或多种RET抑制剂抗性突变的癌细胞的个体；和选择所鉴定的个体以进行不包含式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单药疗法的治疗(例如，第二RET激酶抑制剂)。还提供选择患有癌症的个体以进行治疗的方法，所述治疗不包含式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单药疗法(例如，第二RET激酶抑制剂)，所述方法包含：选择鉴定为具有带一种或多种RET抑制剂抗性突变的癌细胞的个体，以进行不包含式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单药疗法的治疗。在一些实施例中，所述一种或多种RET抑制剂抗性突变赋予癌细胞或肿瘤对用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗增加的抗性。

还提供确定患有癌症的个体将对用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单药疗法的治疗具有阳性反应的可能性的方法，所述方法包含：确定从个体获得的样本中的癌细胞是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变；和确定具有带一种或多种RET抑制剂抗性突变的癌细胞的个体对用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单药疗法的治疗具有阳性反应的可能性降低。还提供确定患有癌症的个体将对用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单药疗法的治疗具有阳性反应的可能性的方法，所述方法包含：确定具有带一种或多种RET抑制剂抗性突变的癌细胞的个体，对用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单药疗法的治疗具有阳性反应的可能性降低。还提供预测用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单药疗法的治疗在患有癌症的个体中的功效的方法，所述方法包含：确定从个体获得的样本中的癌细胞是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变；和确定用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单药疗法的治疗，在具有癌细胞的个体中不大可能有效，在从个体获得的样本中，所述癌细胞具有一种或多种RET 抑制剂抗性突变。还提供预测用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单药疗法的治疗在患有癌症的个体中的功效的方法，所述方法包含：确定用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单药疗法的治疗，在具有癌细胞的个体中不大可能有效，在从个体获得的样本中，所述癌细胞具有一种或多种RET抑制剂抗性突变。在一些实施例中，所述一种或多种RET抑制剂抗性突变赋予癌细胞或肿瘤对用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗增加的抗性。

还提供治疗患有癌症的个体的方法，所述方法包含：(a)向个体施用一个或多个剂量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物一段时间；(b)在 (a)之后，确定从个体获得的样本中的癌细胞是否具有至少一种RET抑制剂抗性突变；和(c)以单药疗法或结合另一抗癌剂，向具有带至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞的个体，施用第二RET抑制剂或式I的第二化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物；或(d)向具有不带RET抑制剂抗性突变的癌细胞的个体，施用额外剂量的步骤(a)的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，当向个体施用额外剂量的步骤(a)的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物时，还可向个体施用另一抗癌剂或式I的第二化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，所述一种或多种 RET抑制剂抗性突变赋予癌细胞或肿瘤对用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗增加的抗性。在一些实施例中，额外抗癌剂是所属领域中已知的任何抗癌剂。举例来说，额外抗癌剂是另一RET抑制剂(例如，第二RET 抑制剂)。在一些实施例中，额外抗癌剂是免疫疗法。在一些实施例中，另一 RET可以是步骤(a)中施用的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。

还提供治疗患有癌症的个体的方法，所述方法包含：(a)确定从患有癌症和先前施用一个或多个剂量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的个体获得的样本中的癌细胞，是否具有至少一种RET抑制剂抗性突变；和(b) 以单药疗法或结合另一抗癌剂，向具有带至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞的个体，施用第二RET抑制剂或式I的第二化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物；或(c)向具有不带RET抑制剂抗性突变的癌细胞的个体，施用额外剂量的先前施用于个体的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，当向个体施用额外剂量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物时，还可向个体施用另一抗癌剂。在一些实施例中，所述一种或多种 RET抑制剂抗性突变赋予癌细胞或肿瘤对用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗增加的抗性。在一些实施例中，额外抗癌剂是所属领域中已知的任何抗癌剂。举例来说，额外抗癌剂是另一RET抑制剂(例如，第二RET 抑制剂)。在一些实施例中，额外抗癌剂是免疫疗法。在一些实施例中，另一 RET可以是步骤(a)中施用的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。

还提供为患有癌症的个体选择治疗的方法，所述方法包含：(a)向个体施用一个或多个剂量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物一段时间； (b)在(a)之后，确定从个体获得的样本中的癌细胞是否具有至少一种RET 抑制剂抗性突变；和(c)如果个体具有带至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么为个体选择第二RET抑制剂或式I的第二化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单药疗法或结合另一抗癌剂；或(d)如果个体具有不带 RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么为个体选择额外剂量的步骤(a)的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，当为个体选择额外剂量的步骤(a)的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物时，所述方法还可包含另外选择另一抗癌剂。在一些实施例中，所述一种或多种RET抑制剂抗性突变赋予癌细胞或肿瘤对用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗增加的抗性。在一些实施例中，额外抗癌剂是所属领域中已知的任何抗癌剂。举例来说，额外抗癌剂是另一RET抑制剂(例如，第二RET抑制剂)。在一些实施例中，额外抗癌剂是免疫疗法。在一些实施例中，另一RET可以是步骤(a)中施用的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。

还提供为患有癌症的个体选择治疗的方法，所述方法包含：(a)确定从患有癌症和先前施用一个或多个剂量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的个体获得的样本中的癌细胞，是否具有至少一种RET抑制剂抗性突变； (b)如果个体具有带至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么为个体选择第二RET抑制剂或式I的第二化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单药疗法或结合另一抗癌剂；或(c)如果个体具有不带RET抑制剂抗性突变的癌细胞，那么为个体选择额外剂量的先前施用于个体的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，当为个体选择额外剂量的步骤(a)的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物时，所述方法还可包含另外选择另一抗癌剂。在一些实施例中，所述一种或多种RET抑制剂抗性突变赋予癌细胞或肿瘤对用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗增加的抗性。在一些实施例中，额外抗癌剂是所属领域中已知的任何抗癌剂。举例来说，额外抗癌剂是另一RET抑制剂(例如，第二RET抑制剂)。在一些实施例中，额外抗癌剂是免疫疗法。在一些实施例中，另一RET可以是步骤(a)中施用的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。

还提供确定个体发展对式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物具有一定抗性的癌症的风险的方法，其包含：确定从个体获得的样本中的细胞是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变；和如果个体具有带一种或多种RET抑制剂抗性突变的细胞，鉴定所述个体为具有增加的发展对式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物具有一定抗性的癌症的可能性。还提供确定个体发展对式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物具有一定抗性的癌症的风险的方法，所述方法包含：鉴定具有带一种或多种RET抑制剂抗性突变的细胞的个体，为具有增加的发展对式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物具有一定抗性的癌症的可能性。还提供确定对式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物具有一定抗性的癌症的存在的方法，其包含：确定从个体获得的样本中的癌细胞是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变；和确定具有带一种或多种 RET抑制剂抗性突变的癌细胞的个体，患有对式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物具有一定抗性的癌症。还提供确定在个体中对式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物具有一定抗性的癌症的存在的方法，其包含：确定具有带一种或多种RET抑制剂的癌细胞的个体，患有对式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物具有一定抗性的癌症。在一些实施例中，所述一种或多种RET抑制剂抗性突变赋予癌细胞或肿瘤对用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗增加的抗性。

在本文所描述任一方法的一些实施例中，赋予癌细胞或肿瘤对用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗增加的抗性的RET抑制剂抗性突变，可以是表3或4中列出的任一种RET抑制剂抗性突变。

可以使用所属领域中已知的方法来测定确定癌细胞或肿瘤对RET抑制剂 (例如，本文所描述或所属领域中已知的任一种RET抑制剂)的抗性水平的方法。举例来说，可通过测定RET抑制剂(例如，本文所描述或所属领域中已知的任一种RET抑制剂)对癌细胞的存活力的IC₅₀来评定癌细胞对RET抑制剂的抗性水平。在其它实例中，可通过在RET抑制剂(例如，本文所描述的任一种RET抑制剂)存在的情况下测定癌细胞的生长速率来评定癌细胞对RET抑制剂的抗性水平。在其它实例中，可通过在用RET抑制剂(例如，本文所描述的任一种RET抑制剂)治疗期间测定个体中一个或多个肿瘤随着时间推移的质量或大小来评定肿瘤对RET抑制剂的抗性水平。在其它实例中，癌细胞或肿瘤对RET抑制剂的抗性水平可通过测定RET激酶的活性来间接评定，所述RET 激酶包含RET抑制剂抗性突变中的一个或多个(即，表达于个体中的相同癌细胞或肿瘤中的相同RET激酶)。具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的癌细胞或肿瘤对RET抑制剂的抗性水平，是相对于不具有RET抑制剂抗性突变的癌细胞或肿瘤(例如，不具有相同RET抑制剂抗性突变的癌细胞或肿瘤、不具有任何RET抑制剂抗性突变的癌细胞或肿瘤、或表达野生型RET蛋白的癌细胞或肿瘤)中的抗性水平。举例来说，所测定的具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的癌细胞或肿瘤的抗性水平可以，比不具有RET抑制剂抗性突变的癌细胞或肿瘤(例如不具有相同RET抑制剂抗性突变的癌细胞或肿瘤、不具有任何 RET抑制剂抗性突变的癌细胞或肿瘤、或表达野生型RET蛋白的癌细胞或肿瘤)中的抗性水平，高约1％、高约2％、高约3％、高约4％、高约5％、高约 6％、高约7％、高约8％、高约9％、高约10％、高约11％、高约12％、高约13％、高约14％、高约15％、高约20％、高约25％、高约30％、高约35％、高约40％、高约45％、高约50％、高约60％、高约70％、高约80％、高约90％、高约100％、高约110％、高约120％、高约130％、高约140％、高约150％、高约160％、高约170％、高约180％、高约190％、高约200％、高约210％、高约220％、高约 230％、高约240％、高约250％、高约260％、高约270％、高约280％、高约290％或高约300％。

认为RET在皮肤和肠道中传入伤害感受器的发育和存活中起重要作用。 RET激酶基因敲除小鼠缺乏肠神经元且具有其它神经***异常，表明功能性 RET激酶蛋白产物在发育过程中是必需的(Taraviras，S.等人，《发育》 (Development)，1999，126：2785-2797)。此外，患有由于缺乏正常结肠衰弱而特征为结肠堵塞的赫希施普龙氏病(Hirschsprung′sdisease)的患者群体研究，家族性和散发性功能丧失RET突变的比例较高(Butler TjadenN.等人，《转化研究》(Transl.Res.)，2013，162：1-15)。肠易激综合征(IBS)是一种常见疾病，影响发达国家中10-20％的个体，且其特征是排便习惯异常、腹胀和内脏超敏反应(Camilleri，M.，《新英格兰医学杂志》(N.Engl.J.Med.)，2012，367： 1626-1635)。虽然IBS的病因不明，但认为其是由大脑和胃肠道之间的病症或微生物群落紊乱或炎症增加引起的。所产生的胃肠道变化影响正常的肠道输送，导致腹泻或便秘。此外，在许多IBS患者中，外周神经***的致敏导致内脏超敏反应或异常疼痛(Keszthelyi，D.，《欧洲疼痛杂志》(Eur.J.Pain)，2012，16： 1444-1454)。参见例如美国公开案第2015/0099762号。

因此，本文提供用于治疗诊断患有(或鉴定为患有)肠易激综合征(IBS) 的患者的方法，所述肠易激综合征包含：以腹泻主导性、便秘主导性或交错的大便模式；功能性腹胀；功能性便秘；功能性腹泻；未指明的功能性肠病症；功能性腹痛综合征；慢性特发性便秘；功能性食道病症；功能性胃十二指肠病症；功能性***直肠疼痛和发炎性肠病，所述方法包含向患者施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。

本文还提供用于治疗鉴定或诊断为患有RET相关的肠易激综合征(IBS) 的患者(例如，通过使用管理机构批准的，例如FDA批准的用于鉴定患者或来自患者的活检样本中的RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常的试剂盒来鉴定或诊断为患有RET相关的肠易激综合征(IBS)的患者)的方法，所述方法包含向患者施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。

本文还提供用于治疗与IBS相关的疼痛的方法，其包含向患者施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，式I 化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物与适用于治疗IBS的一种或多种症状的另一治疗剂组合施用。

还提供用于治疗有需要的患者的肠易激综合征(IBS)的方法，所述方法包括：(a)确定患者的肠易激综合征(IBS)是否是RET相关的IBS(例如，使用管理机构批准的，例如FDA批准的用于鉴定患者或来自患者的活检样本中的 RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平调节异常的试剂盒，或通过执行本文所描述的测定的任何非限制性实例)；和(b)如果确定IBS是 RET相关的IBS，那么向患者施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。

在一些实施例中，本发明化合物适用于与通过相同或不同作用机制起作用的有效治疗肠易激综合征的一种或多种额外治疗剂或疗法组合来治疗肠易激综合征(IBS)。所述至少一种额外治疗剂可以与式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，作为相同或单独剂型的一部分，根据所属领域的技术人员已知的标准药物实践，通过相同或不同的施用途径，和相同或不同的施用方案来一起施用。

用于治疗肠易激综合征(IBS)的额外治疗剂的非限制性实例包含益生菌、纤维补充物(例如车前子、甲基纤维素)、止泻药(例如洛哌丁胺(loperamide))、胆酸结合剂(例如消胆胺(cholestyramine)、考来替泼(colestipol)、考来维仑 (colesevelam))、抗胆碱药和镇痉药(例如天仙子胺、双环胺)、抗抑郁药(例如三环抗抑郁剂，如丙咪嗪或去甲替林(notriptyline)；或选择性血清素再吸收抑制剂(serotonin reuptake inhibitor；SSRI)，如氟西汀(fluoxetine)或帕罗西汀(paroxetine))、抗生素(例如利福昔明(rifaximin))、阿洛司琼(alosetron) 和鲁比前列酮(lubiprostone)。

因此，本文还提供用于治疗肠易激综合征(IBS)的方法，其包括向有需要的患者施用用于治疗IBS的药物组合，所述药物组合包括(a)式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，(b)额外治疗剂，和(c)任选的至少一种药学上可接受的载体，以同时、单独或依序用于治疗IBS，其中式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物和额外治疗剂的量一起有效治疗IBS。在一个实施例中，式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物和额外治疗剂以单独剂量形式同时施用。在一个实施例中，式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物和额外治疗剂，以单独剂量形式，以联合治疗有效量，例如以每天一次或间歇剂量，按任何次序依序施用。在一个实施例中，式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物和额外治疗剂，以组合剂量形式同时施用。

本文还提供：(i)一种用于治疗有需要的患者的肠易激综合征的药物组合，其包括(a)式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，(b)至少一种额外治疗剂(例如，本文所描述的用于治疗肠易激综合征或所属领域中已知的任一种示范性额外治疗剂)，和(c)任选的至少一种药学上可接受的载体，以同时、单独或依序用于治疗肠易激综合征，其中式I化合物的量或其药学上可接受的盐或溶剂合物的量和额外治疗剂的量一起有效治疗肠易激综合征；(ii)药物组合物，其包含这种组合；(iii)这种组合的用途，其用于制备用于治疗肠易激综合征的药物；和(iv)商业包装或产品，其包括这种组合作为组合制剂以同时、单独或依序使用；和一种治疗有需要的患者的肠易激综合征的方法。在一个实施例中，患者是人类。

如本文所用，术语“药物组合”是指由超过一种活性成分的混合或组合产生的药物疗法，且包含活性成分的固定和非固定组合两者。术语“固定组合” 意指式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物和至少一种额外治疗剂(例如，有效治疗肠易激综合征的药剂)，呈单一组合物或剂量的形式同时向患者施用。术语“非固定组合”意指式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物和至少一种额外治疗剂(例如，有效治疗肠易激综合征的药剂)被配制为单独的组合物或剂量，使得其可以同时、并行或依次以可变的间隔时间限制向有需要的患者施用，其中这种施用在患者体内提供有效水平的两种或更多种化合物。在一个实施例中，将式I化合物和额外治疗剂配制为单独的单位剂型，其中单独的剂型适合于依序或同时施用。这些也适用于混合物疗法，例如施用三种或更多种活性成分。

在一些实施例中，本文提供的化合物可用作经历癌症治疗的患者的支持性护理的药剂。举例来说，式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物可用于减少与用一种或多种癌症疗法治疗相关的一种或多种症状(例如腹泻或便秘并发症和/或腹痛)。参见例如，美国公开案第2015/0099762号和Hoffman，J.M.等人《胃肠病学》(Gastroenterology)(2012)142：844-854。因此，本文提供的化合物或其药学上可接受的盐或组合物可以向患者施用，以解决与癌症治疗相关的一种或多种并发症(例如，胃肠道并发症，如腹泻、便秘或腹痛)。

在一些实施例中，治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，可以向正进行癌症治疗的患者(例如，经历与癌症治疗相关的不良事件的患者，如免疫-相关的不良事件，或胃肠道并发症，包含腹泻、便秘和腹痛) 施用。举例来说，本文提供的化合物或其药学上可接受的盐可用于治疗与施用检查点抑制剂相关的结肠炎或IBS；参见例如Postow，M.A.等人《临床肿瘤学杂志》(Journal of Clinical Oncology)(2015)33：1974-1982。在一些这类实施例中，本文提供的化合物或其药学上可接受的盐可被配制成呈现低生物可用性和/或靶向递送于胃肠道中。参见例如美国专利第6,531，152号。

还提供一种抑制细胞中的RET激酶活性的方法，包括使细胞与式I化合物接触。在一个实施例中，接触是在活体外。在一个实施例中，接触是在活体内。在一个实施例中，接触是在活体内，其中所述方法包括向具有带RET激酶活性的细胞的个体施用有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，细胞是癌细胞。在一个实施例中，癌细胞是如本文所描述的任何癌症。在一些实施例中，癌细胞是RET相关癌细胞。在一些实施例中，细胞是胃肠道细胞。

还提供一种抑制哺乳动物细胞中的RET激酶活性的方法，包括使细胞与式I化合物接触。在一个实施例中，接触是在活体外。在一个实施例中，接触是在活体内。在一个实施例中，接触是在活体内，其中所述方法包括向具有带RET 激酶活性的细胞的哺乳动物施用有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，哺乳动物细胞是哺乳动物癌细胞。在一个实施例中，哺乳动物癌细胞是如本文所描述的任何癌症。在一些实施例中，哺乳动物癌细胞是RET相关癌细胞。在一些实施例中，哺乳动物细胞是胃肠道细胞。

如本文所用，术语“接触”是指在活体外***或活体内***中将指定部分结合在一起。举例来说，将RET激酶与本文提供的化合物“接触”包含向具有 RET激酶的个体或患者(如人类)施用本文提供的化合物，以及例如将本文提供的化合物引入到具有含有RET激酶的细胞或纯化制剂的样本中。

本文还提供一种活体外或活体内抑制细胞增殖的方法，所述方法包括使细胞与有效量的如本文所定义的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物接触

短语“有效量”是指当向需要这类治疗的患者施用时，化合物的量足以(i) 治疗RET激酶相关疾病或病症，(ii)减弱、改善或消除特定疾病、病状或病症的一种或多种症状，或(iii)延迟本文所描述的特定疾病、病状或病症的一种或多种症状的发作。与这种量对应的式I化合物的量将视各种因素而变化，所述因素如特定化合物、疾病状况和其严重程度、需要治疗的患者的特性(例如体重)，但是尽管如此，可由所属领域的技术人员常规地确定。

当用作药物时，式I化合物可呈药物组合物形式施用。这些组合物可以以药物领域熟知的方式来制备，且可以通过各种途径施用，这取决于是需要局部还是全身治疗，以及取决于待治疗的区域。施用可以是局部(包含经皮、表皮、眼部和施用到粘膜，包含鼻内、经***和直肠传递)、肺(例如通过吸入或吹入粉剂或气雾剂，包含过喷雾器；气管内或鼻内)、经口或肠胃外的。口服施用可包含配制成每天一次或每天两次(BID)施用的剂型。肠胃外施用包含静脉内、动脉内、皮下、腹膜内或肌肉内注射或输注；或颅内施用，例如鞘内或脑室内施用。可以以单次剂量形式，或可以例如通过连续灌注泵进行肠胃外施用。用于局部施用的药物组合物和调配物可包含透皮贴剂、软膏、洗剂、乳膏、凝胶、滴剂、栓剂、喷雾剂、液体和粉剂。常规的药物载体、水溶液、粉末或油性基质、增稠剂等可能是必需的或所希望的

本文还提供药物组合物，其含有与一种或多种药学上可接受的载体(赋形剂)组合的作为活性成分的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施例中，组合物适合于局部施用。在制备本文所提供的组合物中，活性成分通常与赋形剂混合，由赋形剂稀释或封入呈例如胶囊、药囊、纸或其它容器形式的这种载体内。当赋形剂用作稀释剂时，其可以是固体、半固体或液体材料，充当活性成分的媒剂、载体或介质。因此，组合物可以呈以下形式：锭剂、丸剂、粉剂、糖锭、药囊、扁胶剂、酏剂、悬浮液、乳液、溶液、糖浆、气雾剂(呈固体形式或于液体介质中)、含有例如高达10重量％的活性化合物的软膏、软和硬明胶胶囊、栓剂、无菌可注射溶液和无菌封装粉剂。在一个实施例中，组合物被配制成用于口服施用。在一个实施例中，组合物被配制成锭剂或胶囊。

包括式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的组合物可以配制成单位剂型，每一剂量含有约5到约1，000mg(1g)，更通常约100mg到约500mg 的活性成分。术语“单位剂型”是指适用作人类个体和其它患者的整体剂量的物理离散单位，每一单位含有计算结合合适的药物赋形剂产生所需治疗效果的预定量的活性物质(即，本文提供的式I化合物)。

在一些实施例中，本文提供的组合物含有约5mg到约50mg的活性成分。所属领域的普通技术人员应了解，这体现了含有约5mg到约10mg、约10mg 到约15mg、约15mg到约20mg、约20mg到约25mg、约25mg到约30mg、约30mg到约35mg、约35mg到约40mg、约40mg到约45mg或约45mg 到约50mg的活性成分的化合物或组合物。

在一些实施例中，本文提供的组合物含有约50mg到约500mg的活性成分。所属领域的普通技术人员应了解，这体现了含有约50mg到约100mg、约100mg 到约150mg、约150mg到约200mg、约200mg到约250mg、约250mg到约 300mg、约350mg到约400mg或约450mg到约500mg的活性成分的化合物或组合物。

在一些实施例中，本文提供的组合物含有约500mg到约1,000mg的活性成分。所属领域的普通技术人员应了解，这体现了含有约500mg到约550mg、约550mg到约600mg、约600mg到约650mg、约650mg到约700mg、约 700mg到约750mg、约750mg到约800mg、约800mg到约850mg、约850mg 到约900mg、约900mg到约950mg或约950mg到约1,000mg的活性成分的化合物或组合物。

活性化合物可在宽剂量范围内有效，且通常以药学有效量施用。然而，应理解，实际施用的化合物的量通常将由医生根据相关情况确定，所述情况包含待治疗的病状、所选择的施用途径、所施用的实际化合物、个体患者的年龄、体重和反应、患者症状的严重程度等。

在一些实施例中，本文提供的化合物可以约1mg/kg到约100mg/kg的量施用。在一些实施例中，本文提供的化合物可以约1mg/kg到约20mg/kg、约 5mg/kg到约50mg/kg、约10mg/kg到约40mg/kg、约15mg/kg到约45mg/kg、约20mg/kg到约60mg/kg或约40mg/kg到约70mg/kg的量施用。举例来说，约5mg/kg、约10mg/kg、约15mg/kg、约20mg/kg、约25mg/kg、约30mg/kg、约35mg/kg、约40mg/kg、约45mg/kg、约50mg/kg、约55mg/kg、约60mg/kg、约65mg/kg、约70mg/kg、约75mg/kg、约80mg/kg、约85mg/kg、约90mg/kg、约95mg/kg或约100mg/kg。在一些实施例中，这类施用可以是每天一次或每天两次(BID)施用。

本文提供药物试剂盒，其例如适用用于治疗RET相关疾病或病症，如癌症或肠易激综合征(IBS)，其包含一个或多个容器，所述容器含有包括治疗有效量的本文提供的化合物的药物组合物。若须要，这类试剂盒可进一步包含各种常规药物试剂盒组分中的一种或多种，例如具有一种或多种药学上可接受的载体的容器、额外容器等，这对于所属领域的技术人员来说是显而易见的。试剂盒中还可以包含作为***物或标签的说明书，指示待施用的组分的量、施用指南和/或将组分混合的指南。

所属领域的技术人员应认识到，使用合适的、已知的和普遍接受的细胞和/ 或动物模型的活体内和活体外试验均可预测测试化合物治疗或预防给定病症的能力。

所属领域的技术人员将进一步认识到，可以根据临床和医学领域中熟知的方法来完成人体临床试验，所述人体临床试验包含在健康患者和/或罹患给定病症的患者中的首次人体、剂量范围和功效试验。

实例

以下实例示出本发明。

生物学实例

实例A

RET酶测定

使用CisBio的

KinEASE^TM-TK测定技术来筛选式I化合物抑制野生型和V804M突变型RET激酶的能力。简单来说，将来自Eurofins的N端 GST标记的重组人类RET细胞质结构域(氨基酸658-末端)(0.25nM RET；目录号14-570M)或来自Millipore的N末端GST标记的重组人类V804M突变体RET细胞质结构域(氨基酸658-末端)(0.25nM酶；目录号14-760)，与250 nM TK-底物生物素(CisBio，目录号62TK0PEC的一部分)和1mM ATP以及测试化合物一起，在由25mM HEPES pH 7.4、10mM MgCl₂、0.01％Triton X-100 和2％DMSO组成的8μL体积的缓冲液中温育。通常在DMSO中以三倍连续稀释制备化合物，且将其添加到测定中以得到适当的最终浓度。在于22℃下30 分钟温育之后，通过添加8μL淬灭溶液来淬灭反应，所述淬灭溶液是含有31.25 nM Sa-XL665和1X TK-ab-穴状化合物的HTRF检测缓冲液(全部均来自 CisBio，目录号62TK0PEC的一部分)。在于22℃下温育1小时之后，使用PerkinElmer EnVision多模读板仪，通过HTRF双波长检测来测定反应程度，且使用比率发射因子计算对照百分比(percent of control；POC)。使用无测试化合物来测定100POC，且使用预淬灭的对照反应来测定0POC。将POC值拟合于 4参数对数曲线，且IC₅₀定义为POC等于所拟合曲线的50时抑制剂的浓度。表5中提供在这个测定中所测试化合物的IC₅₀值。

实例B

RET细胞测定

在表达Kif5b-RET融合蛋白的HEK-293细胞中测定抑制RET激酶的化合物的细胞效能。简单来说，在测定前一天，将表达Kif5b-RET融合蛋白的 HEK-293细胞以50K个细胞/孔涂铺在聚D-赖氨酸涂覆的96孔板中。将细胞与测试化合物在DMEM(Dulbecco改良的Eagle培养基)中，在最终DMSO浓度为0.5％下，温育1小时。通常在DMSO中以三倍连续稀释制备化合物，且将其添加到测定中以得到适当的最终浓度。1小时后，去除培养基，细胞用3.8％甲醛固定20min，用PBS洗涤，且用100％甲醇渗透10min。随后将平板用 PBS-0.05％Tween20洗涤，且用LI-COR封闭溶液(LI-COR，目录号927-40000) 封闭1小时。平板用PBS-0.05％Tween20洗涤，随后与抗磷酸-RET(Tyr1062) (Santa Cruz，目录号sc-20252-R)抗体和抗GAPDH(Millipore，目录号MAB374) 抗体一起温育2小时。平板用PBS-0.05％Tween20洗涤，且与抗兔680(Molecular Probes，目录号A21109)和抗小鼠800(LI-COR，目录号926-32210)第二抗体一起温育1小时。将所有抗体稀释在含有0.05％Tween的LI-COR封闭溶液中。平板用PBS-0.05％Tween20洗涤，向每个孔中添加100μL PBS，且在LI-COR Aerius荧读板仪上读取平板。将磷酸-RET信号标准化为GAPDH信号。使用无测试化合物测定100POC(对照百分比)，且使用1μM对照抑制剂测定0POC。将POC值拟合于4参数对数曲线。IC₅₀值是曲线越过50POC时的点。表5中提供在这个测定中所测试化合物的IC₅₀值。

实例C

RET G810R突变体测定

使用CisBio的HTRF激酶-TK测定技术来测定抑制G810R突变体RET激酶的化合物的效能。测定含有在Array Biopharma，Inc.生产的G810R突变体RET (1nM酶-p1982，批次号160713。将激酶与250nM的TK-底物生物素(CISBIO，目录号62TK0PEC的一部分)和1mM ATP与测试化合物一起，在由25mM HEPES、pH 7.4、10mM MgCl₂、0.01％Triton X-100和2％DMSO组成的8μL 体积的缓冲液中温育。化合物通常制备为于DMSO中的三倍连续稀释液，且将其添加到测定中以得到适当的最终浓度。在于22℃下温育60min之后，通过添加8μL淬灭溶液来淬灭反应，所述淬灭溶液是含有31.25nM Sa-XL665和1x TK-Ab-穴状化合物的HTRF检测缓冲液(全部均来自CisBio，目录号62TK0PEC 的一部分)。在于22℃下温育1h之后，使用PerkinElmer EnVision多模读板仪，通过HTRF双波长检测来测定反应程度，且使用比率发射因子计算对照百分比 (POC)。使用无测试化合物来测定一百POC，且使用预淬灭的对照反应来测定 0POC。将4参数对数曲线拟合于POC值随化合物浓度变化的函数，且IC₅₀值是最佳拟合曲线越过50POC时的点。

表5.在实例A、B和C的测定中测试的化合物的IC₅₀

N/A＝不可得

合成实例

合成中间物的合成

中间物P1

4-溴-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

A部分：O-(均三甲苯磺酰基)羟胺的制备

步骤1：(均三甲苯磺酰基)氧基氨基甲酸叔丁酯的制备。向0℃的2，4，6-三甲苯-1-磺酰氯(10.0g，45.72mmol)和羟基氨基甲酸叔丁酯(6.088g，45.72 mmol)于MTBE(100mL)中的溶液中，在搅拌同时逐滴添加TEA(14.46mL， 48.01mmol)。在0℃下搅拌所得悬浮液另外30min，且随后升温到环境温度。反应物随后用水(100mL)稀释，用1N HCl_(aq)调整到pH4。有机层经脱水 (Na₂SO₄)，过滤且浓缩，得到标题化合物，最初为淡黄色油状物，其在高真空下干燥隔夜变成白色固体(12.89g，89％产率)。¹H NMR(CDCl₃)δ7.66(br s，1H)， 6.98(s，2H)，2.67(s，6H)，2.32(s，3H)，1.31(s，9H)。

步骤2：O-(均三甲苯磺酰基)羟胺的制备。在25min内，在0℃下向TFA (117mL，1521mmol)缓慢添加(均三甲苯磺酰基)氧基氨基甲酸叔丁酯(39.0g， 124mmol)。在0℃下搅拌反应混合物1.5h，且随后通过依序添加碎冰和水来淬灭。在环境温度下剧烈搅拌所得浓稠悬浮液5min。在不允许滤饼进行干燥的情况下，通过小心的真空过滤收集固体，随后用水(4L)冲洗直到滤液达到pH 6 (注意：在环境温度下无水化合物存在***风险)。将湿滤饼溶解于DCM(150 mL)中，且将所得的两相溶液分开。将DCM层用MgSO₄脱水30min，且随后过滤并用DCM(420mL)冲洗，得到呈于DCM中的0.22M溶液的标题化合物

B部分：4-溴-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备

步骤1：1-氨基-3-溴-5-甲氧基吡啶-1-鎓2，4，6-三甲基苯磺酸盐的制备。向冷却到0℃的O-(均三甲苯磺酰基)羟胺(A部分，26.6g，117mmol)于DCM (570mL)中的溶液中，逐份添加3-溴-5-甲氧基吡啶(22.1g，117mmol)。在 0℃下搅拌反应混合物1h，随后用另外的3-溴-5-甲氧基吡啶(250mg，1.39 mmol)处理，且在0℃下再搅拌2h。将反应混合物用Et₂O(600mL)稀释，在0℃下搅拌10min，且随后真空过滤，用Et₂O(3×250mL)冲洗。在体积减少约1/3时，滤液产生另外的沉淀物，所述另外的沉淀物通过过滤来收集。真空干燥两个滤饼，得到标题化合物(39.3g，83％产率)。¹H NMR(CDCl₃)δ9.25 (br s，1H)，8.99(m，1H)，8.74(m，1H)，7.46(m，1H)，6.83(s，2H)，3.92(s，3H)，2.65 (s，6H)，2.22(s，3H)。

步骤2：6-溴-4-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲酸乙酯和4-溴-6-甲氧基吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲酸乙酯的制备。在环境温度下，向1-氨基-3-溴-5-甲氧基吡啶 -1-鎓2，4,6-三甲基苯磺酸盐(33.24g，82.42mmol)于DMF(82mL)中的磁力搅拌的白色悬浮液中，添加TEA(22.98mL，164.8mmol)，随后逐滴添加丙炔酸乙酯(16.71mL，164.8mmol)。在剧烈搅拌2d后，通过逐份添加到快速搅拌的冰水(820mL)中来缓慢淬灭反应。在环境温度下搅拌混合物10min，且随后真空过滤。所收集的固体用水冲洗且风干，得到呈橙色固体状的标题化合物，异构体比率为约4∶1(通过¹H NMR)，其中6-Br异构体为主异构体(21 g)。将湿润固体异构体混合物(约75％w/w)直接用于步骤3而无需进一步纯化。MS(apci)m/z＝298.9，300.9(M+H)。通过¹H NMR(CDCl₃)δ3.98(6-Br异构体)与3.83(4-Br异构体)中的MeO化学位移，来测定区位异构比率。

步骤3：6-溴-4-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶(P1)和4-溴-6-甲氧基吡唑并[1，5-a] 吡啶的制备。在搅拌同时，向48％HBr(114mL)中，添加来自步骤2的6-溴 -4-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲酸乙酯和4-溴-4-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲酸乙酯的异构体混合物(15g，50.1mmol)，随后在80℃下加热90min，随后在环境温度下搅拌隔夜。将所得悬浮液真空过滤且用水冲洗。将水性滤液和滤饼独立地进行处理。将滤饼溶解于MTBE中且真空过滤以去除不可溶杂质。将 MTBE滤液用无水Na₂SO₄脱水，过滤且真空浓缩，得到呈米色固体状的6-溴-4- 甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶(约98∶2的6-/4-Br；5.08g)。MS(apci)m/z＝226.9， 228.9(M+H)。¹H NMR(CDCl₃)δ8.26(m，1H)，7.82(d，1H)，6.61(m，1H)，6.43(m， 1H)，3.94(s，3H)。独立地将初始水性反应混合物滤液用EtOAc(2×500mL)萃取。将经合并的有机萃取物脱水(Na₂SO₄)，过滤且在真空中浓缩。将粗残余物溶解于DCM(50mL)中，且随后过滤以去除不可溶固体。真空浓缩DCM滤液，随后进行二氧化硅色谱(0到50％EtOAc/己烷)，得到第二批呈白色固体状的6-溴-4-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶(中间物P1)(上部R_f斑点，2.06g)，以及也呈白色固体的次要异构体标题化合物4-溴-6-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶(中间物P2)(下部R_f斑点，1.32g)。MS(apci)m/z＝226.9，228.9(M+H)。¹H NMR (CDCl₃)δ8.02(m，1H)，7.85(d，1H)，7.17(d，1H)，6.55(m，1H)，3.80(s，3H)。

步骤4：4-溴-6-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲醛的制备：将4-溴-6-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶(5.0g，22mmol)于DMF(220mL)中的溶液冷却到0℃，且随后用POCl₃(6.2mL，66mmol)缓慢处理。使反应物升温到环境温度，且搅拌隔夜。将反应混合物冷却到0℃，用水(220mL)淬灭，且用6M NaOH_(aq)碱化到pH 9-10。搅拌反应混合物1h，且随后真空过滤。依序用水(3×50mL) 和MTBE(3×50mL)冲洗固体。将收集的固体悬浮于DCM(500mL)中，且在超声浴中搅拌30min，且随后真空过滤。保留滤液，而将滤饼溶解于水(300 mL)中且用DCM萃取。将有机萃取物与保留的DCM滤液合并，且用无水 Na₂SO₄脱水，随后过滤且真空浓缩，得到标题化合物(4.84g，86％产率)。MS (apci)，m/z＝256.9(M+H)。

步骤5：4-溴-6-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲醛肟的制备。在环境温度下，向4-溴-6-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲醛(4.84g，19.0mmol)于EtOH(253mL) 中的悬浮液中，添加水(127mL)和盐酸羟胺(1.98g，28.5mmol)。在50℃ 下搅拌隔夜后，将反应混合物冷却到环境温度且真空浓缩。将残余物悬浮于水 (150mL)中，且随后用饱和NaHCO_3(aq)(30mL)缓慢淬灭。在环境温度下搅拌1小时后，将悬浮液真空过滤，且依序用H₂O(500mL)和MTBE(100mL) 冲洗滤饼，得到呈2∶1 E/Z混合物的标题化合物(5.13g，定量产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。MS(apci)m/z＝271.9(M+H)。

步骤6：4-溴-6-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。在140℃下，搅拌 4-溴-6-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲醛肟(4.95g，18.33mmol)于乙酸酐(172.9 mL，1833mmol)中的E/Z混合物25h，且随后冷却到环境温度。将所得悬浮液在冰浴中进一步冷却15min，且随后真空过滤，且依序用水(200mL)和 MTBE(300mL)冲洗，得到标题化合物(3.74g，81％产率)。¹H NMR(d⁶-DMSO) δ8.70(s，1H)，8.60(s，1H)，7.78(s，1H)，3.83(s，3H)。

步骤7：4-溴-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备：将4-溴-6-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(50.0g，198.4mmol)于DCE(500mL)中的浆液，用 AlCl₃(79.34g，595.1mmol)处理。在冷却到室温之前，在N_2(g)氛围下，于 76℃下搅拌所得混合物19h。使用THF(1750mL)作为冲洗溶剂，将反应混合物倒入硫酸钠十水合物(10eq，639g)于THF(1000mL)中的机械搅拌悬浮液中。在环境温度下搅拌隔夜后，过滤所得悬浮液，且用另外的THF(2×250 mL)冲洗固体。将滤液真空浓缩，且将所得固体在高真空下干燥3天，得到标题化合物(46.18g，98％产率)，其纯度足以供后续使用。¹H NMR(d⁶-DMSO)δ 10.48(s，1H)，8.58(s，1H)，8.38(d，1H)，7.64(3，1H)。

中间物P2

6-甲氧基-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐

步骤1：4-(5-(3-氰基-6-甲氧基吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1- 甲酸叔丁酯的制备。4-溴-6-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P1，B部分的步骤6；425mg，1.69mmol)于二恶烷(33.7mL)中的搅拌溶液，用4-(5-(4，4，5，5- 四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(985mg，2.53mmol)和2MK₂CO_3(aq))(1.69mL，3.37mmol)处理。用N_2(g)吹扫5min 后，混合物用X-phos(161mg，0.337mmol)和Pd₂(dba)₃(77.2mg，0.0843mmol) 处理，且再次用N_2(g)吹扫另外5min。在80℃下搅拌所得反应混合物隔夜，随后冷却到环境温度且用水稀释。用EtOAc萃取双相混合物，且经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(0-50％ 20％MeOH/DCM/EtOAc作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，以干净地得到标题化合物(842mg，定量产率)。

步骤2：6-甲氧基-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶--3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐的制备。4-(5-(3-氰基-6-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(842mg，1.94mmol)于20％MeOH/DCM(20mL)中的溶液，用含5 到6N HCl的iPrOH(5mL，1.94mmol)处理。在环境温度下搅拌6h后，真空过滤悬浮液。滤饼用水洗涤，干净地得到呈盐酸盐形式的标题化合物(459mg， 71％产率)。

中间物P3

4-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯

对4-溴-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P1；1.20g，5.04mmol) 和4-(5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(2.36g，6.05mmol)于2M Na₂CO_3(aq)(2.63mL，5.25mmol)和二恶烷 (2mL)中的混合物，用N_2(g)鼓泡5min。混合物用Pd(PPh₃)₄(121mg，0.105mmol) 处理，且用N_2(g)鼓泡另外5min。在80℃下，在N_2(g)氛围下，搅拌所得混合物16h。将混合物冷却到环境温度，且用水(100mL)处理。用DCM萃取所得双相混合物。经合并的有机萃取物用无水MgSO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱(5-90％ACN/水作为梯度洗脱液)来纯化残余物。将纯化但黄色的残余物溶解于DCM中，且随后用活性炭处理。将炭混合物通过

过滤，在真空浓缩滤液之前，用另外的DCM冲洗，干净地得到标题化合物(1.55 g，73％产率)。MS(apci)m/z＝421.1(M+H)。

中间物P4

3-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环\ [3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯

在压力容器中，4-溴-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P1；181mg，0.761mmol)于二恶烷(7.61mL)中的溶液，用(6-(6-(叔丁氧基羰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)硼酸(中间物R4；243mg，0.761mmol)、 Pd(PPh₃)₄(44.0mg，0.0381mmol)和2M Na₂CO_3(aq)(381μL，0.761mmol) 处理。对所得混合物用Ar_(g)鼓泡，随后密封容器，且在80℃下搅拌混合物隔夜。随后将反应混合物用水稀释，且用EtOAc萃取。经合并的有机萃取物用水和盐水洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤，且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法 (25-100％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(72mg，22％产率)。MS(apci)m/z＝433.2(M+H)。

中间物P5

4-溴-6-乙氧基吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-溴-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P1；4.0g，16.80mmol)于 DMA(100mL)中的溶液，用K₂CO_3(s)(7.0g，51mmol)和碘乙烷(2.0mL， 25mmol)处理，且随后在60℃下搅拌3小时。将反应混合物冷却到环境温度，且随后用1∶1的NH₄OH/水淬灭。过滤所得悬浮液，且分离固体，得到标题化合物(4.35g，97％产率)，其纯度足以供后续使用。

中间物6

6-乙氧基-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在压力容器中，4-溴-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P5；500 mg，1.88mmol)于二恶烷(9.40mL)中的溶液，依序用2-氟-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(629mg，2.82mmol)、Pd(PPh₃)₄(217mg， 0.188mmol)和2M Na₂CO_3(aq)(4.70mL，9.40)处理。对所得混合物用Ar_(g)鼓泡，且随后密封容器。在90℃下搅拌混合物8h，且随后在环境温度下隔夜。反应混合物用水稀释，且用EtOAc萃取。经合并的有机萃取物用水和盐水洗涤，用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(25-100％EtOAc/ 己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(500mg，94％产率)。MS(apci)m/z＝283.1(M+H)。

中间物P7

4-(6-(3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并\[1，5-a] 吡啶-3-甲腈二盐酸盐

使用两种方法(方法A和方法B，如下文所示)来制备这种中间物。

方法A：

步骤1：3-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯的制备。在80℃下，搅拌6-乙氧基-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P6；347mg，1.23mmol)、3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(365.6mg，1.844mmol)和K₂CO_3(s)(1.699g， 12.29mmol)于DMSO(6.15mL)中的混合物3天。将反应混合物冷却到环境温度，随后用水稀释且用DCM萃取。经合并的有机萃取物用盐水洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(50-100％EtOAc/ 己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(434.5mg，77％产率)。MS(apci)m/z＝461.2(M+H)。

步骤2：4-(6-(3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并\ [1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐的制备。3-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(44mg，0.096mmol) 于DCM(2mL)中的溶液，用含4N HCl的二恶烷(2mL)处理。在引入另外的含4N HCl的二恶烷(2mL)之前，在环境温度下搅拌所得混合物2h。在环境温度下另外搅拌1小时之后，真空浓缩反应混合物，干净地得到标题化合物 (34mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝361.1(M+H)。

方法B：

步骤1：3-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯的制备。在压力容器中，4-溴-6-乙氧基吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P5；38mg，0.14mmol)于二恶烷(1.4mL)中的溶液，依序用(6-(6-(叔丁氧基羰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)硼酸 (中间物R4；50mg，0.16mmol)、Pd(PPh₃)₄(8.2mg，0.007mmol)和2M Na₂CO_3(aq) (0.7mL，0.14mmol)处理。对所得混合物用Ar_(g)鼓泡，随后密封容器。在90 ℃下搅拌混合物8h，且随后在环境温度下隔夜。反应混合物用水稀释，且用 EtOAc萃取。经合并的有机萃取物用水和盐水洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(25-100％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液) 来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(44mg，67％产率)。MS(apci)m/z＝ 461.2(M+H)。

步骤2：4-(6-(3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并\ [1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐的制备。与上述方法A的步骤2相同。

中间物P8

6-(2，2-二氟乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐

步骤1：4-(5-(3-氰基-6-(2，2-二氟乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2- 基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯2，2，2-三氟乙酸盐的制备。在50℃下，搅拌4-(5-(3-氰基-6- 羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P3；88mg， 0.21mmol)、2-溴-1，1-二氟乙烷(36.4mg，0.251mmol)和K₂CO_3(s)(86.78mg， 0.6279mmol)于DMF(2.09mL)中的混合物24h。随后，引入另外的2-溴-1，1- 二氟乙烷(36.40mg，0.2512mmol)，且在50℃下另外搅拌所得混合物6h。在冷却到环境温度之后，反应混合物用水稀释且用EtOAc萃取。经合并的有机萃取物用盐水洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到呈2，2，2-三氟乙酸盐的标题化合物(30mg，26％产率)。MS(apci)m/z＝485.2 (M+H)。

步骤2：6-(2，2-三氧乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐的制备。4-(5-(3-氰基-6-(2，2-二氟乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基) 吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯2，2，2-三氟乙酸盐(30mg，0.0619mmol)于DCM (1mL)中的溶液，用含4M HCl的二恶烷(1mL，4.00mmol)逐滴处理。在环境温度下搅拌所得混合物隔夜，且随后引入另外的含4M HCl的二恶烷(1 mL，4.00mmol)。通过LCMS来监测反应完成，且在完成后进行真空浓缩，与 Et₂O(3×10mL)共沸，得到呈二盐酸盐的标题化合物(23.8mg，定量产率)。 MS(apci)m/z＝385.1(M+H)。

中间物P9

4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2，2，2-三氟乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3- 甲腈二盐酸盐

步骤1：4-(5-(3-氰基-6-(2，2，2-三氟乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶- 2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备。4-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶 -2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P3；100mg，0.238mmol)于DMF(1.19mL) 中的溶液，用DIEA(124.6μL，0.7135mmol)和三氟甲烷磺酸2，2，2-三氟乙酯(51.40μL，0.3567mmol)处理。在用水淬灭之前，在环境温度下搅拌所得混合物4h。将反应混合物分配在EtOAc、水与盐水之间。所得有机萃取物用盐水洗涤，随后用无水MgSO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(0-20％ MeOH/DCM作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(30mg， 25％产率)。MS(apci)m/z＝503.2(M+H)。

步骤2：4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2，2，2-三氟乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐的制备。4-(5-(3-氰基-6-(2，2，2-三氟乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(30mg，0.060mmol)于DCM(1mL)中的溶液，用含4M HCl的二恶烷(1mL，4.00mmol)逐滴处理。在环境温度下搅拌所得混合物隔夜，且随后引入另外的含4M HCl的二恶烷(1mL，4.00mmol)。通过LCMS来监测反应完成，且在完成后进行真空浓缩，与Et₂O(3×10mL) 共沸，得到呈二盐酸盐的标题化合物(24mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝403.1 (M+H)。

中间物P10

4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-丙氧基吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：4-(5-(3-氰基-6-丙氧基吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1- 甲酸叔丁酯的制备。4-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P3；101.3mg，0.2409mmol)和K₂CO_3(s)(66.59mg，0.4818 mmol)于DMF(1.21mL)中的搅拌混合物，用1-溴丙烷(24.1μL，0.265mmol) 缓慢处理。在80℃下搅拌所得混合物3h。在冷却到环境温度之后，反应混合物用EtOAc稀释，随后用水和盐水洗涤。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(0-6％MeOH/DCM作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(100mg，90％产率)。MS(apci) m/z＝463.2(M+H)。

步骤2：4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基-6-丙氧基吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。4-(5-(3-氰基-6-丙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.216mmol)于DCM(1.08mL)中的溶液，用TFA(1.08mL，0.2162 mmol)处理，且在环境温度下搅拌3h。反应混合物用EtOAc稀释，且用饱和 Na₂CO_3(aq)和盐水洗涤。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，干净地得到标题化合物(78mg，100％产率)。MS(apci)m/z＝363.2(M+H)。

使用与合成中间物P10所描述类似的方法，来制备和纯化表AA中的所有中间物化合物和其Boc保护的哌嗪前体。在每一种情况下，1-溴丙烷被适当的卤代烷置换，且使用适当的梯度洗脱液来进行每种氨基甲酸叔丁酯前体的色谱纯化。通过LCMS监测反应完成，且相应地调整反应持续时间。

表AA

中间物P16

6-羟基-4-(6-(4-(吡啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶- 3-甲腈

在压力容器中，对4-溴-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P1；100 mg，0.420mmol)和1-(吡啶-2-基甲基)-4-(5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(中间物R9；192mg，0.504mmol)于二恶烷(4mL) 和2M Na₂CO_3(aq)(1.05mL，2.10mmol)中的混合物，用N_2(g)鼓泡5min。混合物用Pd(PPh₃)₄(48.5mg，0.0420mmol)处理，且用N_2(g)鼓泡另外5min。密封容器，且在80℃下搅拌混合物15h。将混合物冷却到环境温度，随后用水(5 mL)稀释，且用2M HCl_(aq)(0.9mL)处理。用DCM萃取所得双相混合物。经合并的有机萃取物用无水MgSO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱(5-90％ACN/水作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到标题化合物(34mg， 20％产率)。MS(apci)m/z＝412.1(M+H)。

中间物P17

6-(2-吗啉基乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：4-(5-(3-氰基-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2- 基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备。PPh₃(444mg，1.69mmol)于1∶1 DCM∶THF(10.0 mL)中的冷(0℃)溶液，用DIAD(333μL，1.69mmol)处理，且在0℃下搅拌15min。所得0℃混合物，用含4-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基) 吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P3；356mg，0.847mmol)和2-吗啉代乙-1-醇(207μL，1.69mmol)于1∶1 DCM：THF(20.0mL)中的溶液处理。在室温下搅拌隔夜后，真空浓缩反应混合物，且通过硅胶色谱(5-30％ MeOH/EtOAc作为梯度洗脱液)来纯化，得到标题化合物(303mg，67％产率)。 MS(apci)m/z＝534.2(M+H)。

步骤2：6-(2-吗啉基乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备4-(5-(3-氰基-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(303mg，0.568mmol)于DCM(4.0mL)中的溶液，用TFA(2.0mL)处理。在环境温度下搅拌所得混合物30min，随后通过C18 反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，得到呈TFA盐的标题化合物。将盐分配在4∶1 DCM∶iPrOH与饱和NaHCO_3(aq)之间。分离经合并的有机萃取物，用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，干净地得到标题化合物(100mg，41％产率)。MS(apci)m/z＝434.1(M+H)。

中间物P18

6-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5- a]吡啶-3-甲腈

步骤1：4-(5-(3-氰基-6-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4- 基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备。PPh₃(233.9mg，0.8919mmol)于 1∶1 DCM∶THF(6.0mL)中的冷(0℃)溶液，用DIAD(175.6μL，0.8919mmol) 处理，且在0℃下搅拌15min。所得0℃混合物，用4-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并 [1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P3；250.0mg，0.5946 mmol)和1-(N-羟乙基)-4-甲基哌嗪(102.9mg，0.7135mmol)于1∶1 DCM∶THF (12.0mL)中的溶液处理。在室温下搅拌隔夜后，真空浓缩反应混合物，且通过硅胶色谱(1-30％DCM-MeOH+2％NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化，得到标题化合物，其紧接着用于步骤2。MS(apci)m/z＝547.2(M+H)。

步骤2：6-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\ [1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。在环境温度下，搅拌4-(5-(3-氰基-6-(2-(4-甲基哌嗪 -1-基)乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯于1∶1 DCM∶TFA(6.0mL)中的溶液15min，随后真空浓缩。通过C18反相色谱(5-95％水-ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到呈TFA盐的标题化合物。将TFA盐分配在4∶1 DCM∶iPrOH与饱和NaHCO_3(aq)之间。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(146.4mg，55％产率)。MS(apci)m/z＝447.2(M+H)。

中间物P19

6-(恶唑-2-基甲氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：4-(5-(3-氰基-6-(恶唑-2-基甲氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2- 基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备。4-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶 -2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P3；77.5mg，0.184mmol)和K₂CO_3(s)(50.9 mg，0.369mmol)于DMF(1.84mL)中的室温混合物，用2-(氯甲基)恶唑(43.3 μL，0.369mmol)处理。在80℃下搅拌所得混合物1小时，且随后添加另外的 2-(氯甲基)恶唑(10μL，0.0852mmol)。在80℃下搅拌3天后，将反应混合物冷却到环境温度。混合物用EtOAc稀释，且用水和盐水洗涤。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(10-90％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(44mg， 48％产率)。MS(apci)m/z＝501.8(M+H)。

步骤2：6-(恶唑-2-基甲氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。4-(5-(3-氰基-6-(恶唑-2-基甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶 -2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(44mg，0.088mmol)于DCM(880μL)中的溶液，用TFA(880μL，0.088mmol)处理，随后在环境温度下搅拌1小时。所得混合物用DCM稀释，且用饱和Na₂CO_3(aq)中和。用DCM萃取双相混合物。经合并的有机萃取物用饱和NaHCO_3(aq)和盐水洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，干净地得到标题化合物(30mg，85％产率)。MS(apci)m/z＝401.8 (M+H)。

中间物P20

6-((3-甲基-1，2，4-恶二唑-5-基)甲氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：4-(5-(3-氰基-6-((3-甲基-1，2，4-恶二唑-5-基)甲氧基)吡唑并\[1，5-a] 吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备。4-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P3；83mg，0.120mmol)和 K₂CO_3(s)(54.6mg，0.395mmol)于DMF(1.97mL)中的室温混合物，用5-(氯甲基)-3-甲基-1，2，4-恶二唑(40.5μL，0.395mmol)处理，且在80℃下搅拌3.5h。将所得混合物冷却到环境温度，用EtOAc稀释，且用水和盐水洗涤。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法 (10-90％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(70.9mg，70％产率)。MS(apci)m/z＝516.8(M+H)。

步骤2：6-((3-甲基-1，2，4-恶二唑-5-基)甲氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基) 吡唑并\[1，5-a吡啶-3-甲腈的制备。4-(5-(3-氰基-6-((3-甲基-1，2，4-恶二唑-5-基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(70.9mg，0.137mmol) 于DCM(1.37mL)中的溶液，用TFA(1.37mL，0.137mmol)处理，随后在环境温度下搅拌1小时。所得混合物用DCM稀释，且用饱和Na₂CO_3(aq)中和。用DCM萃取双相混合物。经合并的有机萃取物用饱和NaHCO_3(aq)和盐水洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，干净地得到标题化合物(21mg， 37％产率)。MS(apci)m/z＝416.8(M+H)。

中间物P21

4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(吡啶-3-基甲氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：4-(5-(3-氰基-6-(吡啶-3-基甲氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2- 基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备。4-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶 -2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P3；0.1002g，0.2383mmol)和吡啶-3-基甲醇(25.45μL，0.2621mmol)于THF(1.19mL)中的混合物，用PPh₃(125.0mg， 0.4766mmol)处理。在引入DIAD(92.67μL，0.4766mmol)之前，对所得混合物用Ar_(g)鼓泡3min。在用Ar_(g)另外鼓泡1min之后，在环境温度下搅拌反应混合物1小时。混合物用水稀释，且用DCM萃取。经合并的有机萃取物依序用水和盐水萃取，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(1-6％MeOH/DCM作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到标题化合物(107mg，88％产率)。MS(apci)m/z＝412.2[(M-Boc)+H]。

步骤2：4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(吡啶-3-基甲氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。4-(5-(3-氰基-6-(吡啶-3-基甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶 -2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(107mg，0.209mmol)于DCM(1.05mL)中的溶液，用TFA(48.3μL，0.627mmol)处理，随后在环境温度下搅拌30min。所得混合物用DCM稀释，且用饱和Na₂CO_3(aq)中和。双相混合物用饱和NaHCO_3(aq)稀释，且用DCM萃取。经合并的有机萃取物用水和盐水洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，干净地得到标题化合物(86mg，100％产率)。MS(apci) m/z＝412.2(M+H)。

中间物P22

6-(2-(1H-咪唑-1-基)乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：4-(5-(6-(2-(1H-咪唑-1-基)乙氧基)-3-氰基吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基) 吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备。4-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4- 基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P3；0.1002g，0.2383mmol)和2-(1H- 咪唑-1-基)乙-1-醇(23.04μL，0.2383mmol)于THF(1.19mL)中的混合物，用PPh₃(78.13mg，0.2979mmol)处理。在引入DIAD(57.92μL，0.2979mmol) 之前，对所得混合物用Ar_(g)鼓泡3min。在用Ar_(g)另外鼓泡2min之后，在环境温度下搅拌反应混合物15h。反应混合物，用额外2-(1H-咪唑-1-基)乙-1-醇 (23.04μL，0.2383mmol)、PPh₃(62.50mg，0.2383mmol)和DIAD(46.34μL， 0.2383mmol)处理，且在环境温度下搅拌4h。混合物用水稀释，且用DCM萃取。经合并的有机萃取物用水和盐水洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(1-9％MeOH/DCM作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到标题化合物(24mg，20％产率)。MS(apci)m/z＝515.2 (M+H)。

步骤2：6-(2-(1H-咪唑-1-基)乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1， 5-a]吡啶-3-甲腈的制备。4-(5-(6-(2-(1H-咪唑-1-基)乙氧基)-3-氰基吡唑并 [1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(24mg，0.0466mmol)于DCM (933μL)中的溶液，用TFA(933μL，0.0466mmol)处理，随后在环境温度下搅拌1小时。所得混合物用DCM稀释，且用Na₂CO_3(aq)逐滴处理，直到停止从溶液释放气体为止。双相混合物用饱和NaHCO_3(aq)稀释，且用DCM萃取。经合并的有机萃取物用盐水洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，干净地得到标题化合物(19.4mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝415.2(M+H)。

中间物P23

6-(2-羟基乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐

步骤1：4-(5-(6-(2-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)乙氧基)-3-氰基吡唑并\[1，5- a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备。在50℃下，搅拌4-(5-(3- 氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P3； 250mg，0.595mmol)、(2-溴乙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(128μL，0.743mmol) 和K₂CO_3(s)(247mg，1.78mmol)于DMF(2.97mL)中的混合物1天。在冷却到环境温度之后，直接通过二氧化硅色谱法(0-100％EtOAc/己烷梯度洗脱液) 来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(30mg，26％产率)。MS(apci)m/z ＝579.8(M+H)。

步骤2：6-(2-羟基乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶- 3-甲腈盐酸盐的制备。4-(5-(6-(2-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)乙氧基)-3-氰基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(325mg，0.562mmol)于DCM (2.81mL)中的溶液，用含4M HCl的二恶烷(2.81mL，11.2mmol)逐滴处理。在环境温度下搅拌所得混合物1小时。真空浓缩所得白色沉淀，得到呈盐酸盐的标题化合物(225mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝364.9(M+H)

中间物P24

6-羟基-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\ [1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐

对4-溴-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P1；100mg，0.420mmol)、 1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-4-(5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(中间物R10；207mg，0.504mmol)、Pd(PPh₃)₄(19.4mg，0.0168 mmol)、2MNa₂CO_3(aq)(630μL，1.26mmol)和1，4-二恶烷(2.80mL)的混合物，用N_2(g)鼓泡，随后在85℃下在N_2(g)氛围下搅拌隔夜。将混合物冷却到环境温度，通过针筒过滤器过滤，且直接通过C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％ TFA作为梯度洗脱液)来纯化，得到呈2，2，2-三氟乙酸盐的标题化合物(145mg， 62％产率)。MS(apci)m/z＝442.2(M+H)。

中间物P25

4-溴-6-(2-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在50℃下，搅拌(2-溴乙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(451μL，2.10mmol)、 4-溴-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P1；500mg，2.10mmol)和K₂CO_3(s) (871mg，6.30mmol)于DMF(10.5mL)中的混合物1天。在冷却到环境温度之后，反应混合物用EtOAc稀释，且用水和盐水洗涤。所得有机萃取物直接通过二氧化硅色谱法(0-100％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化，干净地得到标题化合物(420mg，49％产率)。

中间物P26

6-(2-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)乙氧基)-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并\[1，5- a]吡啶-3-甲腈

在压力容器中，4-溴-6-(2-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P25；420mg，1.06mmol)于二恶烷(10.6mL)中的溶液，依序用2-氟-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(355mg， 1.59mmol)、Pd(PPh₃)₄(61.2mg，0.530mmol)和2M Na₂CO_3(aq)(2.65mL， 5.30)处理。对所得混合物用Ar_(g)鼓泡，且密封容器。在90℃下搅拌混合物8h，且随后在环境温度下隔夜。反应混合物用水稀释，且用EtOAc萃取。经合并的有机萃取物用水(10mL)和盐水(10mL)洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用0-15％MeOH/DCM作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，得到不纯的标题化合物。将不纯的材料再次进行二氧化硅色谱法(0-50％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)，干净地得到标题化合物(351 mg，80％产率)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆-)δ：8.81(d，1H，J＝2.0Hz)，8.61(s， 1H)，8.48(d，1H，J＝2.7Hz)，8.25(td，1H，J＝7.8，2.7Hz)，7.47(d，1H，J＝1.9Hz)， 7.38(dd，1H，J＝7.8，2.3Hz)，4.21(t，2H，J＝＝4.3Hz)，3.97(t，2H，J＝4.7Hz)，0.86(s， 9H)，0.08(s，6H)。

中间物P27

4-(6-(3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡-3-甲腈二盐酸盐

步骤1：3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡唑-4-基)吡啶-2- 基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯的制备。在110℃下，搅拌6-(2-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)乙氧基)-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈 (中间物P26；110mg，0.267mmol)、3，6-二氮杂-双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯 (159mg，0.800mmol)于DMSO(2.5mL)中的混合物1小时。在冷却到环境温度之后，混合物用水稀释，且过滤所得悬浮液。分离固体且通过硅胶色谱法 (0-20％MeOH/DCM作为梯度洗脱液)来纯化，干净地得到标题化合物(22mg， 17％产率)，其用于步骤2。MS(apci)m/z＝591.2(M+H)。

步骤2：4-(6-(3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐的制备。3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基乙氧基)吡唑并 [1，5-a]吡啶啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(22mg，0.046mmol)于DCM(2mL)中的溶液，用含4N HCl的二恶烷(3mL，0.046 mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物隔夜，随后真空浓缩，得到呈二盐酸盐的标题化合物(17mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝377.2(M+H)。

中间物P28

(R)-6-(2-羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)比啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3- 甲腈盐酸盐

(R)-4-(5-(3-氰基-6-(2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪 -1-甲酸叔丁酯(实例116；68.3mg，0.143mmol)于DCM(714μL)中的溶液，用TFA(110μL，1.43mmol)处理。在真空浓缩混合物之前，在环境温度下搅拌所得混合物1天，得到标题化合物的TFA盐。TFA盐通过将盐溶解于含6N HCl的iPrOH中而转化为HCl盐，随后真空浓缩混合物，干净地得到呈盐酸盐的标题化合物(59.2mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝379.2(M+H)。

中间物P29

(R)-6-(2-羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3- 甲腈

(R)-4-(5-(3-氰基-6-(2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪 -1-甲酸叔丁酯(实例116；40mg，0.084mmol)于DCM(418μL)中的溶液，用TFA(64μL，0.84mmol)处理，随后在环境温度下搅拌1天。将所得混合物分配在DCM\与2M K₂CO_3(aq)之间。用DCM反萃取水相。真空浓缩经合并的有机萃取物，干净地得到标题化合物(7.2mg，23％产率)。MS(apci)m/z＝379.2 (M+H)。

中间物P30

4-(6-(3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((R)-2-羟基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐

步骤1：3-(5-(3-氰基-6-((R)-2-羟基丙氧基)吡唑并\[1，，5-a]吡啶-4-基)吡啶- 2-基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯的制备。3-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(中间物P4；40mg，0.0925mmol)于DMF(462μL)中的悬浮液，用K₂CO_3(s)(328.7 mg，2.378mmol)处理，且在环境温度下搅拌15min。所得混合物用(R)-2-甲基环氧乙烷(32.4μL，0.462mmol)于DMF(462μL)中的溶液处理。在引入额外(R)-2-甲基环氧乙烷(130μL，1.85mmol)之前，在环境温度下搅拌反应混合物4h，随后在50℃下搅拌隔夜。在50℃下搅拌所得混合物隔夜，且冷却到环境温度。直接通过硅胶色谱法(0-100％乙酸乙酯/己烷作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(16mg，28％产率)。MS(apci)m/z＝ 491.2(M+H)。

步骤2：4-(6-(3，6-二氮杂双环\[3.1.1]-庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((R)-2-羟基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸的制备。3-(5-(3-氰基-6-((R)-2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯 (步骤1；16mg，0.0254mmol)于DCM(2mL)中的溶液，用含4N HCl的二恶烷(2mL)处理。在环境温度下搅拌所得混合物1小时，且随后真空浓缩，得到呈二盐酸盐的标题化合物(11.8mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝391.2 (M+H)。

中间物P31

(S)-6-(2-羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3- 甲腈盐酸盐

步骤1：(S)-4-(5-(3-氰基-6-(2-羟基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶- 2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备。4-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶 -2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P3；200mg，0.476mmol)于DMF(2.38mL) 中的悬浮液，用K₂CO_3(s)(329mg，2.38mmol)处理，且在环境温度下搅拌15 min。所得混合物用(S)-2-甲基环氧乙烷(138mg，2.38mmol)于DMF(1mL) 中的溶液处理。在50℃下搅拌反应混合物1天，随后直接通过二氧化硅色谱法 (0-100％DCM/己烷，随后20％DCM/MeOH作为洗脱液)来纯化，干净地得到标题化合物(176mg，77％)。MS(apci)m/z＝478.9(M+H)。

步骤2：(S)-6-(2-羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐的制备。在环境温度下，搅拌(S)-4-(5-(3-氰基-6-(2-羟基丙氧基) 吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(步骤1)于1∶1 DCM∶TFA (2mL)中的溶液30min。真空浓缩反应混合物，且残余物用含6N HCl的iPrOH (2mL)处理。在环境温度下搅拌所得混合物1小时，且随后真空浓缩，得到标题化合物(153mg，100％产率)。MS(apci)m/z＝378.9(M+H)。

中间物P32

(S)-6-(2-羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3- 甲腈

在环境温度下，搅拌(S)-4-(5-(3-氰基-6-(2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4- 基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物31，步骤1；17mg，0.036mmol)和 TFA(27μL，0.36mmol)于DCM(178μL)中的溶液隔夜。将反应混合物分配在DCM与2M K₂CO_3(aq)之间。用DCM反萃取水相。真空浓缩经合并的有机萃取物，得到标题化合物(13mg，97％产率)。MS(apci)m/z＝379.1(M+H)。

中间物P33

4-(6-(3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((S)-2-羟基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐

步骤1：3-(5-(3-氰基-6-((S)-2-羟基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶- 2-基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯的制备。3-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(中间物P4；40mg，0.093mmol)于DMF(462μL)中的悬浮液，用K₂CO_3(s)(63.9mg， 0.462mmol)处理，且在环境温度下搅拌15min。所得混合物用(S)-2-甲基环氧乙烷(32.4μL，0.462mmol)于DMF(462μL)中的溶液处理。在引入额外(S)-2- 甲基环氧乙烷(97.2μL，1.39mmol)之前，在环境温度下搅拌反应混合物4h，随后在50℃下搅拌隔夜。在50℃下搅拌反应混合物隔夜，且随后冷却到环境温度。将所得混合物分配在EtOAc与水之间，且用EtOAc萃取。经合并的有机萃取物用盐水洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。直接通过二氧化硅色谱法(0-100％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到标题化合物(15mg，28％产率)。MS(apci)m/z＝491.2(M+H)。

步骤2：4-(6-(，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((S)-2-羟基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐的制备。3-(5-(3-氰基-6-((S)-2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯 (步骤1；15mg，0.026mmol)于DCM(3mL)中的溶液，用含4N HCl的二恶烷(3mL)处理，且在环境温度下搅拌隔夜。真空浓缩反应混合物，得到标题化合物(12mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝391.2(M+H)。

中间物P34

(R)-6-(2-羟丁氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐

步骤1：(R)-4-(5-(3-氰基-6-(2-羟丁氧基)吡唑\[1，5-a]唑啶-4-基)吡啶-2-基) 哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备。4-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2- 基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P3；200mg，0.476mmol)于DMF(2.38mL) 中的溶液，用K₂CO_3(s)(329.0mg，2.38mmol)处理，且在环境温度下搅拌15min。所得混合物用(R)-2-乙基环氧乙烷(171mg，2.38mmol)于DMF(1mL)中的溶液缓慢处理。在50℃下搅拌反应混合物1天，随后直接通过二氧化硅色谱法 (使用0-100％DCM/己烷逐步梯度，随后20％DCM/MeOH作为洗脱液)来纯化，干净地得到标题化合物(190mg，81.4％)。MS(apci)m/z＝492.9(M+H)。

步骤2：(R)-6-(2-羟丁氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡并\[1，5-a]啶-3- 甲腈盐酸盐的制备。在环境温度下，搅拌4-(5-(3-氰基-6-(2-羟丁氧基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸(R)-叔丁酯于1∶1 DCM∶TFA(3mL)中的溶液30min。真空浓缩混合物。将残余物溶解于含6N HCl的iPrOH(3mL) 中，随后立即真空浓缩，得到呈盐酸盐的标题化合物(166mg，100％产率)。 MS(apci)m/z＝392.9(M+H)。

中间物P35

(R)-6-(2-羟丁氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(5-(3-氰基-6-(2-羟丁氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸 (R)-叔丁酯(中间物P34，步骤1；52.5mg，0.107mmol)于DCM(1.07mL) 中的溶液，用TFA(1.07mL，0.107mmol)处理，随后在环境温度下搅拌5天。反应混合物用EtOAc稀释，且用饱和Na₂CO_3(aq)和盐水洗涤。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(41.9mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝392.9(M+H)。

中间物P36

(S)-6-(2-羟丁氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐

步骤1：(S)-4-(5-(3-氰基-6-(2-羟丁氧基)吡唑\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基) 哌嗪-1-甲丁酸叔丁酯的制备。4-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P3；200mg，0.476mmol)于DMF(2.38mL) 中的溶液，用K₂CO_3(s)(329.0mg，2.38mmol)处理，且在环境温度下搅拌15min。所得混合物用(S)-2-乙基环氧乙烷(171mg，2.38mmol)于DMF(1mL)中的溶液缓慢处理。在50℃下搅拌1天后，直接通过二氧化硅色谱法(0-100％DCM/ 己烷，随后20％DCM/MeOH作为洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(175mg，75％产率)。MS(apci)m/z＝492.8(M+H)。

步骤2：(S)-6-(2-羟丁氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐的制备。在环境温度下，搅拌(S)-4-(5-(3-氰基-6-(2-羟丁氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯于1∶1 DCM∶TFA(3mL)中的溶液30min。真空浓缩混合物。将残余物溶解于含6N HCl的iPrOH(3mL)中，且随后立即真空浓缩，得到呈盐酸盐的标题化合物(153mg，100％产率)。MS (apci)m/z＝392.8(M+H)。

中间物P37

(S)-6-(2-羟丁氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

(S)-4-(5-(3-氰基-6-(2-羟丁氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1- 甲酸叔丁酯(中间物P36，步骤1；86mg，0.17mmol)于DCM(1.2mL)中的溶液，用TFA(1.2mL，0.17mmol)处理，随后在环境温度下搅拌5天。反应混合物用EtOAc稀释，且用饱和Na₂CO_3(aq)和盐水洗涤。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(30mg，44％产率)。 MS(apci)m/z＝392.9(M+H)。

中间物P38

6-(((2S*，3R*)-3-羟基丁-2-基)氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\ [1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐

步骤1：4-(5-(3-氰基-6-(((2S*，3R*)-3-羟基丁-2-基)氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备。4-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P3；200mg，0.476mmol)于DMF(1mL)中的悬浮液，用K₂CO_3(s)(329mg，2.38mmol)处理，且在环境温度下搅拌15min。所得混合物用(2R*，3R*)-2，3-二甲基环氧乙烷(171mg，2.38 mmol)于DMF(1mL)中的溶液处理。在环境温度下搅拌反应混合物2天，且随后直接通过二氧化硅色谱法(使用0-100％DCM/己烷逐步梯度，随后20％ DCM/MeOH作为洗脱液)来纯化，干净地得到标题化合物(223mg，95.6％)。 MS(apci)m/z＝492.8(M+H)。

步骤2：6-(((2S*，3R*)-3-羟基丁-2-基)氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐的制备。在环境温度下，搅拌4-(5-(3-氰基 -6-(((2S，3R)-3-羟基丁-2-基)氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯于1∶1 DCM∶TFA(3mL)中的溶液30min。真空浓缩反应混合物。残余物用含6N HCl的iPrOH(3mL)处理，随后立即真空浓缩，得到呈盐酸盐的标题化合物(195mg，100％产率)。MS(apci)m/z＝392.9(M+H)。

中间物P39

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[15-a]吡啶- 3-甲腈盐酸盐

在环境温度下，搅拌4-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(实例152；234mg，0.476mmol)于1∶1 DCM∶TFA(3mL)中的溶液30min。真空浓缩反应混合物。残余物用含6N HCl 的iPrOH(3mL)处理，且随后立即真空浓缩，得到呈盐酸盐的标题化合物(187 mg，92％产率)。MS(apci)m/z＝393.2(M+H)。

中间物P40

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶- 3-甲腈

4-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(实例152；17mg，0.035mmol)于DCM(173μL)中的溶液，用TFA(27μL，0.35mmol)处理，随后在环境温度下搅拌1天。将反应混合物分配在DCM(10mL)与2MK₂CO_3(aq)(5mL)之间。用DCM萃取水相。将有机萃取物合并，且真空浓缩，得到标题化合物(14mg，定量产率)。 MS(apci)m/z＝393.2(M+H)。

中间物P41

4-溴-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在压力容器中，4-溴-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P1；10.0g，42.0mmol)和K₂CO_3(s)(17.4g，126mmol)于DMF(50mL)中的混合物，用2，2-二甲基环氧乙烷(36.9mL，420mmol)处理。在密封容器之后，在60 ℃下搅拌反应混合物12h，随后在85℃下搅拌12h。使混合物冷却到环境温度。将室温混合物倒入水(400mL)中，随后在环境温度下搅拌1小时。真空过滤所得悬浮液，且用水冲洗滤饼。收集固体，且真空干燥，干净地得到标题化合物(11g，84％产率)。

中间物P42

4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-溴-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P41；10.0g，32.2mmol)、2-氟-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(10.8 g，48.4mmol)和Pd(PPh₃)₄(1.12g，0.967mmol)于二恶烷(200mL)中的混合物，用2M Na₂CO_3(aq)(64.5mL，129mmol)处理。对所得混合物用Ar_(g)鼓泡，随后在85℃下在N_2(g)氛围下搅拌12h。在冷却到环境温度之后，将所得混合物倒入冷水(1.5L)中。通过添加10％柠檬酸将混合物的pH调整到约pH 6。在环境温度下搅拌1小时之后，真空过滤所得悬浮液。收集固体，且真空干燥，干净地得到标题化合物(10g，95％产率)。

中间物P43

4-(6-(3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐

步骤1：3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯的制备。在90℃下，搅拌4-(6- 氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P42； 1.70g，8.55mmol)、3，6-二氮杂-双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(1.70g，8.55 mmol)和K₂CO_3(s)(7.88g，57.0mmol)于DMSO(7mL)中的混合物12h。所得浓稠浆液用额外DMSO(2mL)稀释，且在90℃下搅拌12h。将混合物冷却到环境温度，且用水(100mL)稀释。水性混合物用DCM洗涤。经合并的有机萃取物用无水MgSO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过硅胶色谱法(30-80％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液***)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物 (2.87g，100％产率)。MS(apci)m/z＝505.2(M+H)。

步骤2：4-(6-(3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐的制备。3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(参见步骤1；3.05g，6.04mmol)于DCM(20mL)中的溶液，用含4N HCl的二恶烷(15.1mL，60.4mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物12h，且随后真空浓缩。在真空浓缩之前，粗残余物用DCM和甲苯稀释，且随后超声处理，得到呈二盐酸盐的标题化合物(2.44g，定量产率)。MS(apci)m/z＝405.2 (M+H)。

中间物P44

4-(6-(3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(中间物P43，步骤2；2.0g，4.2 mmol)于DCM(42mL)中的溶液，用1N NaOH_(aq)洗涤。用DCM反萃取经合并的水性萃取物。随后将所有有机萃取物合并，用盐水洗涤，随后通过PS 玻璃料，且真空浓缩，得到标题化合物(244mg)。由于大量所需产物保留在水性萃取物中，所以将合并的水性萃取物进行一系列萃取，首先使用含20％iPrOH 的DCM(3×50mL)。随后水性萃取物用NaCl处理，且与含20％iPrOH的DCM(200mL)一起搅拌3h。分离水性萃取物，且用MeOH(500mL)稀释。过滤所得悬浮液，且合并来自萃取序列的所有有机萃取物，且真空浓缩，得到总回收1.75g的混杂无机盐的标题化合物。混杂材料用DCM湿磨，且过滤，且真空浓缩滤液，干净地得到标题化合物(1.26g，74％产率)。MS(apci)m/z＝405.2 (M+H)。

中间物P45

4-(6-(3，8-二氮杂双环\[3.2.1]辛-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐

步骤1：3-(5-(-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，8-二氮杂双环\[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯的制备。对4-溴-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P41；45mg，0.145mmol)、(6-(8-(叔丁氧基羰基)-3，8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)吡啶-3-基)硼酸(中间物R11；53.2 mg，0.160mmol)和Pd(PPh₃)₄(16.8mg，0.0145mmol)于2M Na₂CO_3(aq)(363 μL，0.725mmol)和二恶烷(725μL)中的混合物，用N_2(g)鼓泡，随后在100℃ 下在N_2(g)氛围下搅拌3h。将混合物冷却到环境温度且真空浓缩，得到直接用于下一步骤中的粗标题化合物(64mg)。MS(apci)m/z＝519.2(M+H)。

步骤2：4-(6-(3，8-二氮杂双环\[3.2.1]辛-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐的制备。在环境温度下，搅拌3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(64mg，0.12mmol)于1∶1 DCM∶TFA(1mL)中的溶液15min，且随后真空浓缩。通过C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA 作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到呈TFA盐的标题化合物。TFA盐用含6N HCl的iPrOH(2mL)处理，随后立即真空浓缩，得到呈盐酸盐的标题化合物(24mg，43％总产率)。MS(apci)m/z＝419.2(M+H)。

中间物P48

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2- 基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在压力容器中，对4-溴-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P41；2.0g，6.4mmol)、双(频哪醇)二硼(2.5g，9.7mmol)、 PdCl₂(dppf)·CH₂Cl₂(0.53g，0.64mmol)和KOAc(1.9g，19mmol)于二恶烷 (15mL)中的混合物，用Ar_(g)鼓泡10min。密封容器，且在90℃下搅拌混合物隔夜。在冷却到室温之后，反应混合物用EtOAc(100mL)稀释。过滤所得悬浮液，且用EtOAc洗涤滤饼。真空浓缩滤液，且通过二氧化硅色谱法(25％EtOAc/己烷作为洗脱液)来纯化残余物，得到标题化合物(2.2g，91％产率)。 ¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ：8.19(s，1H)，8.17(d，J＝2.3Hz，1H)，7.66(d，J＝ 2.3Hz，1H)，3.80(s，2H)，1.41(s，12H)，1.35(s，6H)。

中间物P49

4-(4-(3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)苯基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：3-(4-(-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡-4-基)苯基)- 3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯的制备。在压力容器中，对6-(2- 羟基-2-甲基丙氧基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P48；0.100g，0.280mmol)、3-(4-溴苯基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(中间物R14；98.9mg，0.280mmol)、X-Phos (26.7mg，0.0560mmol)和Pd₂(dba)₃(12.8mg，0.0140mmol)于二恶烷(1.0mL) 中的混合物，用Ar_(g)鼓泡1min。混合物用2MK₃PO_4(aq)(420μL，0.840mmol) 处理，且随后在密封容器之前，用Ar_(g)鼓泡另外3min。在85℃下搅拌所得反应混合物隔夜。在冷却到环境温度之后，直接通过二氧化硅色谱法(10％丙酮 /DCM作为洗脱液)来纯化反应混合物，得到标题化合物(86mg，43％产率)。 MS(apci)m/z＝404.2(des-Boc M+H)。

步骤2：4-(4-(3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)苯基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。3-(4-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)苯基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(86mg，0.17 mmol)于DCM(0.5mL)中的溶液，用TFA(26μL，3.4mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物2h，随后真空浓缩。将残余物悬浮于1M NaOH_(aq) (pH 14)中。所得水性混合物用NaCl_(s)盐析，且用CHCl₃萃取。经合并的有机萃取物用无水MgSO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(62mg，90％产率)。MS(apci)m/z＝404.2(M+H)。

中间物P50

4-(5-(3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡嗪-2-基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯的制备。在压力容器中，对6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P48；0.100g，0.280mmol)、3-(5-氯吡嗪-2-基)-3，6- 二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(中间物R15；91.4mg，0.294mmol)、X Phos(26.7mg，0.0560mmol)和Pd₂(dba)₃(12.8mg，0.0140mmol)于二恶烷 (1.0mL)中的混合物，用Ar_(g)鼓泡1min。混合物用2M K₃PO_4(aq)(420μL， 0.840mmol)处理，且随后在密封容器之前，用Ar_(g)鼓泡另外3min。在85℃ 下搅拌所得反应混合物隔夜。在冷却到环境温度之后，直接通过二氧化硅色谱法(20％丙酮/DCM作为洗脱液)来纯化反应混合物，得到标题化合物(62mg， 37％产率)。

步骤2：4-(5-(3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡嗪-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(68mg，0.13mmol)于DCM(0.5mL)中的溶液，用TFA(21μL，2.7mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物2h，随后真空浓缩混合物。将残余物悬浮于 1M NaOH_(aq)(pH 14)中。所得水性混合物用NaCl_(s)盐析，且用DCM萃取。经合并的有机萃取物用无水MgSO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物 (39mg，64％产率)。MS(apci)m/z＝406.2(M+H)。

中间物P51

6-(3-羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐

步骤1：4-(5-(6-(3-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)丙氧基)-3-氰基吡唑并\[1，5- a]吡-4-基吡-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备。在50℃下，搅拌4-(5-(3- 氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P3； 250mg，0.595mmol)、(3-溴丙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(136μL，0.743mmol) 和K₂CO_3(s)(247mg，1.78mmol)于DMF(2.97mL)中的溶液1天。在冷却到环境温度之后，直接通过二氧化硅色谱法(0-100％EtOAc/己烷)来纯化混合物，干净地得到标题化合物(334mg，95％产率)。MS(apci)m/z＝593.8(M+H)。

步骤2：6-(3-羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶- 3-甲腈盐酸盐的制备。

4-(5-(6-(3-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)丙氧基)-3-氰基吡唑并[1，5-a]吡啶-4- 基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(334mg，0.563mmol)于DCM(2.82mL) 中的溶液，用含4N HCl的二恶烷(2.82mL，11.3mmol)处理，且随后在环境温度下搅拌1小时。浓缩所得悬浮液，得到呈盐酸盐的标题化合物(234mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝378.9(M+H)。

中间物P52

(S)-6-(2，3-二羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐

步骤1：(R)-4-(5-(3-氰基-6-((2，2-二甲基-1，3-二氧环戊-4-基)甲氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备。在100℃下，搅拌4-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P3；150mg，0.357mmol)、(S)-4-(氯甲基)-2，2-二甲基-1，3-二氧杂环戊烷(53.4μL，0.392mmol)和Cs₂CO_3(s)(389mg，1.20mmol)于DMF(3.57mL)中的混合物隔夜。在冷却到环境温度之后，混合物用水稀释且用EtOAc萃取。经合并的有机萃取物用盐水洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(30-100％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，得到标题化合物(71mg，37％产率)。MS(apci)m/z＝535.3(M+H)。

步骤2：(S)-6-(2，3-二羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5- a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐的制备。(R)-4-(5-(3-氰基-6-((2，2-二甲基-1，3-二氧环戊-4-基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(71mg，0.106 mmol)于DCM(2mL)中的溶液，用含4N HCl的二恶烷(3mL)处理，且随后在环境温度下搅拌2h。真空浓缩所得混合物，得到呈盐酸盐的标题化合物 (41.9mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝395.2(M+H)。

中间物P53

(R)-6-(2，3-二羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐

步骤1：(S)-4-(5-(3-氰基-6-((2，2-二甲基-1，3-二氧环戊-4-基)甲氧基)吡唑并\[1，5-a]吡-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备。在100℃下，搅拌4-(5-(3- 氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(130mg，0.309mmol)、(R)-4-(氯甲基)-2,2-二甲基-1，3-二氧杂环戊烷(46.6μL，0.340 mmol)和Cs₂CO_3(s)(337mg，1.04mmol)于DMF(3.09mL)中的混合物隔夜。在冷却到环境温度之后，混合物用水稀释且用EtOAc萃取。经合并的有机萃取物用盐水洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(30-100％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，得到标题化合物(40mg，24％产率)。MS(apci)m/z＝535.3(M+H)。

步骤2：(R)-6-(2，3-二羟基丙基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a] 吡啶-3-甲腈二盐酸盐的制备。(S)-4-(5-(3-氰基-6-((2，2-二甲基-1，3-二氧环戊-4- 基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(步骤1；40 mg，0.075mmol)于DCM(1mL)中的溶液，用含4N HCl的二恶烷(2mL) 处理，且随后在环境温度下搅拌6h。真空浓缩所得混合物，得到呈盐酸盐的标题化合物(30mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝395.2(M+H)。

中间物P54

6-(((3S，4S)-4-羟基四氢呋喃-3-基)氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐

步骤1：4-(5-(3-氰基-6-(((3S，4S)-4-羟基四氢呋喃-3-基)氧基)吡唑并\[1，5- a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备。4-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并 [1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P3；115mg，0.274mmol) 于DMF(1.37mL)中的悬浮液，用K₂CO_3(s)(189mg，1.37mmol)处理，随后在添加呈于DMF(1mL)中的溶液的(1R，5S)-3，6-二氧杂二环[3.1.0]己烷(118 mg，1.37mmol)之前，在环境温度下搅拌15min。在50℃下搅拌所得混合物 1天，随后直接通过二氧化硅色谱(0-100％DCM/己烷，随后20％DCM/MeOH 作为洗脱液)来纯化，得到标题化合物。MS(apci)m/z＝508.8(M+H)。

步骤2：6-(((3S，4S)-4-羟基四氢呋喃-3-基)氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3- 基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐的制备。在环境温度下，搅拌4-(5-(3-氰基 -6-(((3S，4S)-4-羟基四氢呋喃-3-基)氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪 -1-甲酸叔丁酯于1∶1 DCM∶TFA(2mL)中的溶液30min，随后真空浓缩。将残余物溶解于含6NHCl的iPrOH(2mL)中，且随后真空浓缩，得到呈盐酸盐的标题化合物(83mg，69％总产率)。MS(apci)m/z＝406.8(M+H)。

中间物P55

6-(2-甲氧基乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：4-(5-(3-氰基-6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2- 基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备。PPh₃(377.9mg，1.441mmol)于1∶1 DCM∶THF(10 mL)中的冷(0℃)溶液，用DIAD(283.7μL，1.441mmol)处理，且在0℃ 下搅拌15min。所得0℃混合物用4-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基) 吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P3；403.9mg，0.9606mmol)和2-甲氧基乙醇(90.90μL，1.153mmol)的1∶1 DCM∶THF(20.0mL)溶液处理。在室温下搅拌反应混合物30min，随后真空浓缩，且通过二氧化硅(50-100％己烷 -EtOAc作为梯度洗脱液)来纯化，得到立即用于步骤2的标题化合物。MS(apci) m/z＝547.2(M+H)。

步骤2：6-(2-甲氧基乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。在环境温度下，搅拌4-(5-(3-氰基-6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯于1∶1 DCM∶TFA(10mL)中的溶液15min，随后真空浓缩。通过C18反相色谱(5-95％水-ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到呈TFA盐的标题化合物。将TFA盐分配在4∶1 DCM∶iPrOH与饱和NaHCO_3(aq)之间。所得有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(196.1mg，54％产率)。MS(apci)m/z＝ 479.2(M+H)。

中间物P56

(S)-6-(2-甲氧基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶- 3-甲腈二盐酸盐

步骤1：(S)-4-(5-(3-腈基-6-(2-甲氧基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备。PPh₃(210mg，0.799mmol)于1∶1 DCM∶THF (4mL)中的冷(0℃)溶液，用DIAD(155μL，0.799mmol)处理，且在0 ℃下搅拌15min。所得0℃混合物用(S)-2-甲氧基丙-1-醇(72.0mg，0.799mmol) 和4-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P3；168mg，0.400mmol)的1∶1 DCM∶THF(4.0mL)悬浮液处理。在室温下搅拌所得混合物17h，且随后真空浓缩。通过二氧化硅(0-100％丙酮-己烷作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到标题化合物(242mg，定量产率)。MS(apci) m/z＝493.2(M+H)。

步骤2：(S)-6-(2-甲氧基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a] 吡啶-3-甲腈二盐酸盐的制备。(S)-4-(5-(3-氰基-6-(2-甲氧基丙氧基)吡唑并[1，5-a] 吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(197mg，0.400mmol)于DCM(2mL) 中的溶液，用含5-6M HCl的iPrOH(4mL，20.0mmol)处理，且在环境温度下搅拌1小时。真空浓缩混合物，与Et₂O(5mL)一起共沸，干净地得到呈二盐酸盐的标题化合物(233mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝393.2(M+H)。

中间物P57

6-溴-4-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

向1-氨基-3-溴-5-甲氧基吡啶-1-鎓2，4，6-三甲基苯磺酸盐(中间物P1，B部分，步骤1，400g，0.99mol)于乙腈(3.2L)中的溶液中，添加2-氯丙烯腈 (130g，1.49mol)。在逐滴添加DBU(559g，3.67mol)之前，在冰-水浴中冷却反应物到约0℃。在升温到室温且搅拌16h之后，将反应混合物倒入水(9.6 L)中且过滤。将经分离的湿润固体溶解于DCM中，且去除水相。有机层通过二氧化硅垫(800g)过滤，且用DCM洗涤。减压浓缩有机滤液，得到粗产物，所述粗产物用MTBE(450mL)湿磨，过滤且真空干燥，得到呈灰白色粉末状的标题化合物(75g，30％产率)。¹H NMR(CDCl₃)δ8.32(m，1H)，8.12(s，1H)， 6.74(m，1H)，4.03(s，3H)。

中间物P58

4-溴-6-((1r，3r)-3-羟基环丁氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在惰性氛围(N_2(g))下，在环境温度下，搅拌4-溴-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P1；0.250g，1.05mmol)和K₂CO_3(s)(0.435g，3.15mmol) 于DMF(1mL)中的混合物10min。混合物用4-甲基苯磺酸(1s，3s)-3-羟基环丁酯(中间物R18；0.254g，1.05mmol)处理。密封反应容器，且在50℃下搅拌混合物2d，随后在65℃下搅拌2d。在冷却到环境温度之后，将反应混合物倒入1∶1盐水/水(50mL)中，用MTBE(20mL)稀释，且剧烈地搅拌20min。真空过滤双相悬浮液，收集固体，且用EtOAc(2×50mL)萃取滤液。经合并的有机萃取物用无水MgSO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。将来自滤液的残余物与来自滤过物的固体合并，且通过二氧化硅色谱法(使用1∶1 EtOAc∶己烷作为洗脱液)来纯化，干净地得到标题化合物(100mg，26％产率)。¹H NMR(400MHz， CDCl₃)δ8.18(s，1H)，7.90(d，1H)，7.39(d，1H)，4.82(m，1H)，4.65(m，1H)，4.97 (m，4H)。

中间物P59

(R)-4-溴-6-(2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-溴-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P1；500mg，2.10mmol)于 DMF(4mL)中的混合物，依序用K₂CO_3(s)(1.451g，10.5mmol)和(R)-2-甲基环氧乙烷(2.21mL，31.5mmol)处理。在密封容器中，在50℃下，搅拌反应混合物3d。在冷却到环境温度之后，直接通过C18反相色谱(使用5-90％ ACN∶水作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(365mg， 59％产率)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.21(s，1H)，8.14(d，1H)，7.49(d，1H)， 4.25(m，1H)，3.96(dd，1H)，3.86(dd，1H)，1.33(d，3H)。

中间物P60

(S)-4-溴-6-(2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-溴-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P1；500mg，2.10mmol)于 DMF(4mL)中的混合物，依序用K₂CO_3(s)(1451g，10.5mmol)和(S)-2-甲基环氧乙烷(1830mg，31.5mmol)处理。在密封容器中，在50℃下，搅拌反应混合物3d。在冷却到环境温度之后，反应混合物用水(50mL)稀释且用DCM (2×50mL)萃取。经合并的有机萃取物用盐水(50mL)洗涤。所得乳液通过粗糙玻璃料过滤，且将双相滤液分开。有机萃取物再次用盐水(50mL)洗涤，随后用无水MgSO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用0-90％ EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(357mg， 57％产率)。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ8.21(s，1H)，8.14(d，1H)，7.49(d，1H)， 4.25(m，1H)，3.96(dd，1H)，3.86(dd，1H)，1.33(d，3H)。

中间物P61

4-溴-6-((1-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环丙基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

三苯膦(885.9mg，3.378mmol)于1∶1 THF∶DCM(10mL)中的冷(0℃) 溶液，用DIAD(665.0μL，3.378mmol)处理，随后在0℃下搅拌15min。所得混合物用4-溴-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P1；536.0mg，2.252 mmol)和(1-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环丙基)甲醇(中间物R19；546.8mg， 2.702mmol)于1∶1 THF∶DCM(10mL)中的溶液处理。在环境温度下搅拌1h 之后，真空浓缩反应混合物。通过二氧化硅色谱法(使用5-75％己烷-EtOAc作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(404.2mg，42％产率)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.19(s，1H)，8.08-8.07(d，1H)，7.49-7.48(d，1H)，3.95(s，2H)，0.94-0.89(m，2H)，0.85(s，9H)，0.76-0.73(m，2H)，0.14(s，6H)。

中间物P62

1-((4-溴-3-氯吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)-2-甲基丙-2-醇

步骤1：4-溴-3-氯-6-甲氧基吡唑并\[1，5-a]吡啶的制备。4-溴-6-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶(中间物P1，B部分，步骤3；15g，66mmol)于DCM(100mL) 中的悬浮液，用NCS(8.821g，66.06mmol)处理，且超声处理混合物5min。在环境温度下搅拌所得混合物隔夜之后，引入额外NCS(1.25g)。额外搅拌反应混合物6h，随后用Et₂O(100mL)稀释，在环境温度下搅拌10min且超声处理2min。真空过滤所得悬浮液，用Et₂O(2×100mL)冲洗固体。滤液用额外Et₂O(100mL)稀释，随后超声处理且真空过滤。将来自两种滤过物的固体合并，得到标题化合物(18.69g，定量产率)。MS(apci)m/z＝260.9，263.0(M+H)。

步骤2：4-溴-3-氯吡唑并\[1，5-a]吡啶-6-醇的制备。在N_2(g)氛围下，将(4-溴 -3-氯-6-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶(7.59g，29.0mmol)悬浮于DCE(290mL) 中，随后用AlCl₃(11.6g，87.1mmol)缓慢处理(5min)。在76℃下搅拌所得混合物隔夜。在冷却到环境温度之后，反应混合物用DMA(75mL)稀释，引起轻微放热。真空去除DCE，且残余材料用水(125mL)稀释。在0℃下搅拌水性悬浮液30min，随后冷真空过滤。固体用冷(0℃)水(50mL)冲洗，且真空干燥，得到标题化合物(7.00g，98％产率)。将粗物质溶解于无水DMA(150 mL)中，且通过二氧化硅塞过滤，用额外无水DMA(7×50mL)冲洗塞。滤液(300mL)的一部分用于步骤3。MS(apci)m/z＝246.9，248.9(M+H)。

步骤3：1-((4-溴-3-氯吡唑并\[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)-2-甲基丙-2-醇的制备。4-溴-3-氯吡唑并[1，5-a]吡啶-6-醇于DMA(300mL，17.0mmol)中的0.06M溶液，用K₂CO_3(s)(23.5g，170mmol)和2,2-二甲基环氧乙烷(7.45mL，84.9mmol) 处理。在55℃下搅拌反应混合物3h之后，引入额外2，2-二甲基环氧乙烷(7.45 mL，84.9mmol)。在引入第二等分试样的K₂CO_3(s)(10g，72.3mmol)和额外 2，2-二甲基环氧乙烷(7.45mL，84.9mmol)之前，在55℃下搅拌迟缓反应物隔夜。在85℃下搅拌反应物2h，以致力于使反应完成。在冷却到环境温度之后，通过添加1∶1饱和NH₄Cl_(aq)∶水(200mL)来淬灭反应混合物。用EtOAc(5x) 洗涤已淬灭的反应混合物，且经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。残余物用水(100mL)湿磨，且通过真空过滤收集固体，干净地得到标题化合物(2.62g，34％产率)。MS(apci)m/z＝319.0，321.0(M+H)。

中间物P63

4-(6-氟吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：6-溴-4-羟基吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。在惰性氛围(N_2(g)) 下，在40℃下，搅拌6-溴-4-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P57；200 g，873mmol)于DMA(2494mL)中的溶液，且用2M NaOH_(aq)(105mL， 1746mmol)逐滴(3滴/秒)处理，随后用水(5mL；以冲洗加料漏斗)逐滴处理。逐滴添加(3滴/秒)十二烷基硫醇(418mL，1746mmol)。在40℃下搅拌所得反应混合物2h。在冷却到环境温度之后，将反应混合物倒入冷(～10℃)水(8L)中，且通过添加10％柠檬酸水溶液将pH调整到～5。在环境温度下搅拌已淬灭反应混合物4h，随后在环境温度下静置12h，以允许形成更多沉淀。随后在真空过滤用水(1.5L)冲洗之前，在环境温度下搅拌混合物1h。真空干燥滤饼2h，随后用庚烷(2L)湿磨，过滤且真空干燥，得到标题化合物(181 g，87％产率)。¹H NMR(400MHz，d⁶-DMSO)δ11.81(br s，1H)，8.82(d，1H)，8.55 (s，1H)，6.87(d，1H)。

步骤2：三氟甲烷磺酸6-溴-3-氰基吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基酯的制备。在惰性氛围(N_2(g))下，6-溴-4-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(步骤1；100g，420.1 mmol)于DMA(2100mL)中的冷(4℃)悬浮液，用DIEA(146.7mL，840.2 mmol)缓慢处理(10min)。***液(2℃)用1，1，1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基) 磺酰基)甲磺酰胺(157.6g，441.1mmol)于DMA(80mL)中的溶液逐滴处理 (3滴/秒)。在低温(0-13℃)下搅拌反应混合物4h。将反应混合物缓慢倒入(15 min)冰水(8L)中。在环境温度下搅拌已淬灭反应混合物1h。所得悬浮液通过布料滤纸真空过滤，用刮刀压紧滤饼且用冷水(3L)冲洗。真空干燥所得滤饼3d，得到标题化合物(148.5g，96％产率)。¹H NMR(400MHz，d⁶-DMSO)δ 9.60(d，1H)，8.85(s，1H)，8.22(d，1H)。

步骤3：6-溴-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑\[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。对三氟甲烷磺酸6-溴-3-氰基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基酯(步骤2；98.5g，253mmol)和 2-氟-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(56.4g，253mmol) 于二恶烷(2L)中的冷(0℃)混合物，用Ar_(g)鼓泡5min。冷混合物用 PdCl₂(dppf)·CH₂Cl₂(8.26g，10.1mmol)处理，且再次用Ar_(g)鼓泡5min。同时在0℃下搅拌所得混合物，在惰性氛围(N_2(g))下，向混合物中添加KOAc(49.6 g，506mmol)于水(500mL)中的溶液。在N_2(g)正压力下，在环境温度下，机械搅拌混合物隔夜。将反应混合物倒入水(7L)中，且在环境温度下搅拌5 h。过滤所得悬浮液，且用MTBE(1L)冲洗。真空干燥所得滤饼，得到标题化合物(75g，94％产率)。¹H NMR(400MHz，d⁶-DMSO)δ9.49(d，1H)，8.73(s， 1H)，8.50(m，1H)，8.27(m，1H)，7.86(d，1H)，7.40(m，1H)。

步骤4：4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2- 基)吡唑并\[1，5-a吡啶-3-甲腈的制备。对6-溴-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶 -3-甲腈(步骤3；55.1g，174mmol)、双(频哪醇)二硼(46.3g，182mmol)和KOAc(51.2g，521mmol)于DMSO(430mL)中的悬浮液，用Ar_(g)鼓泡10min。反应混合物用PdCl₂(dppf)·CH₂Cl₂(1.42g，1.74mmol)处理，且用Ar_(g)鼓泡额外10min。在70℃下，在N_2(g)正压力下，机械搅拌所得混合物16h。在冷却到环境温度之后，反应混合物用1∶1 EtOAc∶水(4.0L)稀释，且搅拌1h。过滤所得悬浮液。固体依序用水(500mL)和EtOAc(500mL)冲洗，且将双相滤液分开。暂时保留有机层，同时用EtOAc(2×1L)萃取水层。合并有机萃取物，用水(2×1L)和盐水(500mL)洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，且过滤。滤液用Si-硫醇树脂(2g；以清除残余Pd)处理，且在环境温度下搅拌16h。过滤悬浮液，且用EtOAc冲洗树脂，且真空浓缩滤液。粗材料经受二氧化硅色谱法(使用5-60％己烷-丙酮作为梯度洗脱液)。将含有所期望化合物的级分合并，且真空浓缩，得到半纯材料。通过在60℃下将一部分材料(12.3g)溶解于丙酮(120mL)中，来将半纯材料分批再结晶。热溶液用己烷(120mL)处理，随后在放置于-18℃冷冻柜2h之前，使其冷却到环境温度。真空过滤冷悬浮液，用环境温度己烷冲洗纯固体。对于其余粗材料重复这个再结晶过程，使得干净分离标题化合物(46.2g73％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.99-8.98(d， 1H)，8.77(s，1H)，8.49-8.48(m，1H)，8.27-8.22(m，1H)，7.57-7.56(d，1H)， 7.38-7.35(m，1H)，1.34(s，12H)。

步骤5：4-(6-氟吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(步骤4；22.96g，57.06mmol)于THF(315mL，0.2M)中的冷(0 ℃)溶液，用2M NaOH_(aq)(142.6mL，285.3mmol)处理，随后逐滴添加35wt％ H₂O_2(aq)(29.97mL，342.3mmol)。在于0℃下用3M Na₂S₂O_3(aq)(114.1mL，342.3 mmol)淬灭之前，在0℃下搅拌所得混合物3h。在将混合物分配在MTBE(1 L)与水(200mL)之间之前，在环境温度下搅拌已淬灭混合物16h。搅拌双相混合物15min，且随后过滤，用额外水冲洗。分开所得双相滤液，且来自滤液的有机萃取物用0.1M NaOH_(aq)(200mL)洗涤。将水性萃取物合并，用MTBE (500mL)洗涤，随后使用固体柠檬酸酸化到pH～5。所得水性悬浮液用额外水 (250mL)稀释，搅拌30min，且随后过滤。用水冲洗固体，且真空干燥，得到标题化合物(11.3g，66％产率)。MS(APCI Neg)，m/z＝253.0(M-H)。

中间物P64

4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-氟吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P63；200mg，0.787mmol)于DMA(6mL)中的溶液，依序用Cs₂CO_3(s)(769mg，2.36mmol) 和1-(2-氯乙基)吡咯烷-2-酮(139mg，0.944mmol)处理。在密封容器中，在 100℃下，搅拌反应混合物隔夜。在冷却到环境温度之后，将所得混合物分配在水与DCM之间，随后用DCM(3x)萃取。经合并的有机萃取物用盐水(1x) 洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用0-10％MeOH/DCM+0.1％NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，得到标题化合物(115mg，34％产率)。MS(apci)，m/z＝366.1(M+H)。

中间物P65

4-(6-氟吡啶-3-基)-6-((1r，3r)-3-羟基环丁氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

对4-溴-6-((1r，3r)-3-羟基环丁氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P58；0.100g，0.325mmol)、2-氟-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(629mg，2.82mmol)和Pd(PPh₃)₄(217mg，0.188mmol)于二恶烷(1mL) 中的混合物，用Ar_(g)鼓泡1min，随后用2M K₂CO_3(aq)(0.470mL，0.974mmol) 处理。在密封反应容器之前，对所得混合物用Ar_(g)鼓泡3min。在90℃下搅拌混合物3d。在冷却到环境温度之后，直接通过二氧化硅色谱法(使用40％ EtOAc/己烷作为洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(96mg， 91％产率)。MS(apci)m/z＝325.1(M+H)。

中间物P66

(R)-4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在压力管中，(R)-4-溴-6-(2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P59；365mg，1.23mmol)于二恶烷(6mL)中的溶液，用2-氟-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(330mg，1.48mmol)和2M Na₂CO_3(aq) (1849μL，3.70mmol)处理，随后用N_2(g)鼓泡5min。在密封容器之前，所得混合物用Pd(PPh₃)₄(35.6mg，0.0308mmol)处理，随后再次用N_2(g)鼓泡5min。在80℃下搅拌反应混合物22h。在冷却到环境温度之后，混合物用水(25mL) 稀释，且搅拌1h。真空过滤所得悬浮液，且收集固体，干净地得到标题化合物(229mg，60％产率)。MS(apci)m/z＝313.1(M+H)。

中间物P67

(S)-4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在压力管中，(S)-4-溴-6-(2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P60；357mg，1.21mmol)于二恶烷(6mL)中的溶液，用2-氟-5-(4，4,5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(323mg，1.45mmol)和2M Na₂CO_3(aq) (1808μL，3.62mmol)处理，且用N_2(g)鼓泡5min。在密封容器之前，所得混合物用Pd(PPh₃)₄(34.8mg，0.0301mmol)处理，随后再次用N_2(g)鼓泡5min。在80℃下搅拌反应混合物22h。在冷却到环境温度之后，反混合物用水(25mL) 稀释，且搅拌1h。真空过滤所得悬浮液，且收集固体，干净地得到标题化合物(191mg，51％产率)。MS(apci)m/z＝313.1(M+H)。

中间物P68

6-((1-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环丙基)甲氧基)-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-溴-6-((1-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环丙基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P61；404.2mg，0.9569mmol)于4∶1二恶烷∶水(10mL)中的溶液，用2-氟-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(234.8mg， 1.053mmol)、Pd(PPh₃)₄(110.6mg，0.09569mmol)和K₂CO_3(s)(396.8mg，2.871 mmol)处理。在密封反应容器之前，对所得混合物用Ar_(g)鼓泡。在90℃下搅拌混合物16h。在冷却到环境温度之后，反应混合物用4∶1 DCM∶iPrOH稀释，用水(1×)洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤，且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用5-75％己烷-EtOAc作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(292.6mg，70％产率)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.40-8.39 (m，1H)，8.21(s，1H)，8.18-8.17(d，1H)，8.04-8.00(m，1H)，7.20-7.19(d，1H)， 7.14-7.11(m，1H)，4.01(s，2H)，0.95-0.92(m，2H)，0.85(s，9H)，0.80-0.75(m，2H)， 0.14(s，6H)。

中间物P69

1-((3-氯-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)-2-甲基丙-2-醇

在压力容器中，1-((4-溴-3-氯吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)-2-甲基丙-2-醇(中间物P61；1.44g，4.51mmol)、2-氟-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(1.51g，6.76mmol)和Pd(PPh₃)₄(260mg，0.225mmol)于二恶烷(50mL)中的混合物，用2M Na₂CO_3(aq)(15mL，27mmol)处理。在密封容器之前，对所得混合物用N_2(g)鼓泡10min。在90℃下搅拌反应混合物隔夜。在冷却到环境温度之后，所得混合物用水(75mL)稀释，且用MTBE(3×75 mL)萃取。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用0-100％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，得到标题化合物(370mg，25％产率)。MS(apci)m/z＝336.1(M+H)。

中间物P70A：4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈和中间物P70B：4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐

步骤1.3-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯的制备。4-(6-氟吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P63；1.256g，4.941mmol)和3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6- 甲酸叔丁酯(1.371g，6.917mmol)于DMSO(6mL)中的溶液，用DIEA(1.721 mL，9.881mmol)处理。密封反应容器，且在60℃下搅拌混合物24h。引入额外3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(0.586g)，且在60℃下搅拌反应混合物72h。在冷却到环境温度之后，将反应混合物倒入水(60mL)中，且真空过滤所得悬浮液。收集固体，随后将其溶解于EtOAc中，用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。分开地，用4∶1 DCM∶iPrOH(4x)反萃取水性滤液，且真空浓缩经合并的有机萃取物。来自滤过物的粗残余物和固体均通过二氧化硅色谱法(使用0-95％DCM：丙酮作为梯度洗脱液)来纯化，得到标题化合物 (1.0g，49％产率)。MS(apci)，m/z＝433.2(M+H)。

步骤2：4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1，5-a] 吡啶-3-甲腈和4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐的制备。将3-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(1.0g，2.40mmol)的溶液溶解于1∶1 TFA∶DCM(5mL)中，用DCM(5mL)稀释，且在环境温度下搅拌45min。真空浓缩所得混合物，且将残余物分配在4∶1 DCM∶iPrOH与饱和NaHCO_3(aq)之间。双相混合物用4∶1 DCM∶iPrOH(3×)萃取，且经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到中间物P70A：4-(6-(3，6- 二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(322.9 mg，40％产率)。MS(apci)，m/z＝333.1(M+H)。分开地，真空浓缩NaHCO_3(aq)萃取物，且将残余物溶解于4∶1 DCM∶iPrOH中。真空过滤悬浮液，且滤液用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。将残余物溶解于MeOH中，且用浓HCl(10 mL)处理。在用MeOH(10mL)和MTBE(40mL)稀释之前，过滤悬浮液，且真空浓缩以去除MeOH。超声处理所得悬浮液几分钟，随后过滤。固体用 MTBE冲洗且真空干燥，得到中间物P70B：4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3- 基)吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(450.7mg，46％产率)。MS(apci)，m/z＝333.2(M+H)。

中间物P71

6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3- 甲腈(中间物P70B；322.9mg，0.9715mmol)于DCM(10mL)中的溶液，依序用6-甲氧基烟碱醛(137.1mg，1.943mmol)和2滴冰醋酸处理。在环境温度下搅拌混合物15min，随后用NaBH(AcO)₃(514.8mg，2.429mmol)处理。在引入额外6-甲氧基烟碱醛(34mg)和NaBH(AcO)₃(103mg)之前，在环境温度下搅拌所得混合物隔夜。在浓缩混合物之前，搅拌所得混合物，直到LCMS 指示消耗起始物质为止。残余物用4∶1 DCM∶iPrOH稀释，且用水(2×)萃取。用4∶1 DCM∶iPrOH(3×)反萃取经合并的水性萃取物。合并有机萃取物，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱(使用5-95％水 -ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到呈TFA盐的标题化合物。TFA盐用4∶1 DCM∶iPrOH稀释，且用饱和NaHCO_3(aq)萃取。水性萃取物用 4∶1 DCM∶iPrOH(3×)洗涤，随后经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，干净地得到标题化合物(27.4mg，6％产率)。MS(apci)m/z＝ 454.2(M+H)。

中间物P72

6-羟基-4-(6-(6-(6-甲氧基烟酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基) 吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3- 甲腈(中间物P70B；187.7mg，0.5647mmol)于DCM(11.3mL)中的溶液，用2-甲氧基-5-吡啶甲酸(86.48mg，0.5647mmol)、HATU(257.7mg，0.6776 mmol)和DIEA(393.5μL，2.259mmol)处理。在依序引入额外2-甲氧基-5- 吡啶甲酸(43.23mg，0.2824mmol)和DIEA(199μL，1.13mmol)之前，在环境温度下搅拌所得混合物16h。在环境温度下搅拌反应混合物隔夜。真空浓缩反应混合物。将残余物溶解于EtOAc中，且用饱和NH₄Cl_(aq)洗涤。直接通过二氧化硅色谱法(使用0-10％MeOH/DCM作为梯度洗脱液)来纯化有机萃取物，得到标题化合物(68.6mg，26％产率)。MS(apci)m/z＝468.2(M+H)。

中间物P73

6-乙氧基-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-乙氧基-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P6；255.7mg，0.9058mmol)于DMSO(3.6mL)中的溶液，用1-哌嗪甲酸叔丁酯(337.4mg， 1.812mmol)和DIEA(315.6μL，1.812mmol)处理，且随后在90℃下搅拌16 h。在冷却到环境温度之后，反应混合物用EtOAc稀释，且依序用水(3×)和盐水(1×)萃取。经合并的有机萃取物用盐水洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。将粗残余物溶解于1∶1 DCM∶TFA(5.0mL)中。在环境温度下搅拌30min之后，真空浓缩混合物。通过C18反相色谱(使用5-95％水-ACN +0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物。合并含有所期望化合物的级分，将其溶解于4∶1 DCM∶iPrOH中，且随后用饱和NaHCO_3(aq)萃取。有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，干净地得到标题化合物(261.9mg，83％产率)。MS(apci)m/z＝349.2(M+H)。

中间物P74

6-乙氧基-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)

4-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(实例29；413mg，0.921mmol)于DCM(8mL)中的溶液，用TFA(2mL) 处理。在环境温度下搅拌1h之后，真空浓缩混合物，干净地得到标题化合物 (定量产率)。MS(apci)m/z＝349.2(M+H)。

中间物P75

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶 -3-甲腈

6-乙氧基-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P6；347mg，1.23mmol)和3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(176.6mg，0.8908mmol) 于DMSO(0.8mL)中的混合物，用DIEA(221.7μL，1.273mmol)处理。在密封容器中，在60℃下，搅拌混合物3天。在冷却到环境温度之后，反应混合物用EtOAc稀释，且用水(3×)和盐水(1×)萃取。随后有机萃取物用无水 Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用0-100％EtOAc/ 己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到3-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯。将这种材料悬浮于DCM(1.0mL)中，且用1∶1 TFA∶DCM(0.25mL)处理。在环境温度下搅拌7h之后，真空浓缩反应混合物。将残余物溶解于4∶1 DCM∶iPrOH 中，且用饱和NaHCO_3(aq)萃取。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，干净地得到标题化合物(67.1mg，29％产率)。MS(apci)m/z＝ 361.2(M+H)。

中间物P76

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)

步骤1：3-(5-(3-氰基-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯的制备。3-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(中间物 P4；350mg，0.809mmol)于DMA(4046μL)中的溶液，依序用K₂CO_3(s)(336 mg，2.43mmol)和4-(2-氯乙基)吗啉(218μL，1.62mmol)处理。在密封容器中，在50℃下，搅拌反应混合物隔夜。将反应混合物冷却到环境温度，随后用水(10mL)稀释。真空过滤所得悬浮液，用水(2×10mL)，随后用Et₂O(2× 10mL)冲洗固体。真空干燥固体，得到标题化合物(380mg，86％产率)。MS(apci)m/z＝546.3(M+H)。

步骤2：4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-吗啉基乙氧基) 吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)的制备。3-(5-(3-氰基-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(步骤1；380mg，0.696mmol)于DCM(2mL)中的溶液，用TFA(2mL) 处理。在环境温度下搅拌所得混合物10min，且随后真空浓缩，干净地得到标题化合物(400mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝446.2(M+H)。

中间物P77

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)

步骤1：3-(5-(3-氰基-6-(2-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4- 基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯的制备。在60℃下，搅拌4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈 (中间物P64；115mg，0.315mmol)、3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯 (93.6mg，0.472mmol)和K₂CO_3(s)(218mg，1.57mmol)于DMSO(630μL) 中的混合物隔夜。在冷却到环境温度之后，将反应混合物分配在水与DCM之间，随后用DCM(5x)萃取。经合并的有机萃取物用盐水(1x)洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用0-100％EtOAc/ 己烷，随后0-10％MeOH/EtOAc作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，得到标题化合物(85mg，30％产率)。MS(apci)m/z＝544.3(M+H)。

步骤2：4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-(2-氧代吡咯烷 -1-基)乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)的制备。3-(5-(3-氰基-6-(2-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(步骤1；85mg，0.094mmol)于DCM(1mL) 中的溶液，用TFA(1mL)处理。在环境温度下搅拌所得混合物隔夜，且随后真空浓缩，干净地得到标题化合物(63mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝444.2 (M+H)。

中间物P78

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((1r，3r)-3-羟基环丁氧基) 吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：3-(5-(3-氰基-6-((1r,3r)-3-羟基环丁氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯的制备。在85℃下，搅拌4-(6-氟吡啶-3-基)-6-((1r，3r)-3-羟基环丁氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P65；50mg，0.15mmol)、3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(0.046g，0.23 mmol)和K₂CO_3(s)(0.11g，0.77mmol)于DMSO(0.25mL)中的混合物隔夜。将反应混合物冷却到环境温度，用水(1mL)稀释，且用DCM(3mL)萃取。通过二氧化硅色谱法(使用10％丙酮/DCM+0.05％NH₄OH作为梯度洗脱液) 来纯化有机萃取物，干净地得到标题化合物(56mg，61％产率)。MS(apci)m/z ＝503.2(M+H)。

步骤2：4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((1r，3r)-3-羟基环丁氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。3-(5-(3-氰基-6-((1r，3r)-3-羟基环丁氧基) 吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(步骤1；56mg，0.095mmol)于DCM(0.5mL)中的溶液，用TFA(0.11mL) 处理。在环境温度下搅拌所得混合物4h，且随后真空浓缩。通过添加1M NaOH，将残余物的pH调整到pH 14。水性混合物用固体NaCl盐析，随后用CHCl₃(2 ×20mL)萃取。经合并的有机萃取物用无水MgSO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，干净地得到标题化合物(55mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝403.2(M+H)。

中间物P79

3-(5-(3-氰基-6-((R)-2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6- 二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯

在80℃下，搅拌(R)-4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P66；100mg，0.320mmol)、3，6-二氮杂-双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(95.2mg，0.480mmol)和K₂CO_3(s)(443mg，3.20mmol)于DMSO (1601μL)中的混合物3d。将反应混合物冷却到环境温度，随后用水(10mL) 稀释，且用DCM(4×10mL)萃取。经合并的有机萃取物用盐水(10mL)洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用 50-100％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(97mg，62％产率)。MS(apci)m/z＝491.2(M+H)。

中间物P80

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((R)-2-羟基丙氧基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)。

3-(5-(3-氰基-6-((R)-2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6- 二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(中间物P79；97mg，0.20mmol)于DCM (2mL)中的溶液，用TFA(2mL)处理。在环境温度下搅拌所得混合物隔夜，且随后真空浓缩，得到标题化合物(122mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝391.15 (M+H)。

中间物P81

4-(6-(3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((R)-2-羟基丙氧基)吡唑并\[1，5-a吡啶-3-甲腈。3-(5-(3-氰基-6-((R)-2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(中间物P79；131mg，0.267mmol)于DCM(2mL)中的溶液，用TFA(2mL)处理。在环境温度下搅拌所得混合物隔夜，且随后真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用0-100％ (2％NH₄OH/20％MeOH/78％DCM)/己烷作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到标题化合物(75mg，72％产率)。MS(apci)m/z＝391.20(M+H)。

中间物P82

3-(5-(3-氰基-6-((S)-2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯

在80℃下，搅拌(S)-4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P67；100mg，0.320mmol)、3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(95.2mg，0.480mmol)和K₂CO_3(s)(443mg，3.20mmol)于DMSO (1601μL)中的混合物3d。将反应混合物冷却到环境温度，随后用水(10mL) 稀释，且用DCM(4×10mL)萃取。经合并的有机萃取物用盐水(10mL)洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用 50-100％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(92mg，59％产率)。MS(apci)m/z＝491.2(M+H)。

中间物P83

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((S)-2-羟基丙氧基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)

3-(5-(3-氰基-6-((S)-2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(中间物P82；92mg，0.188mmol)于DCM (1mL)中的溶液，用TFA(1mL)处理。在环境温度下搅拌所得混合物隔夜，且随后真空浓缩，得到标题化合物(116mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝391.20 (M+H)。

中间物P84

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((1-羟基环丙基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐

步骤1：3-(5-(3-氰基-6-((1-羟基环丙基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶 -2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯的制备。6-((1-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环丙基)甲氧基)-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P68；292.6mg，0.6672mmol)于DMSO(1.3mL)中的溶液，用3，6-二氮杂- 双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(158.7mg，0.8006mmol)和K₂CO_3(s)(922.0mg， 6.672mmol)处理，且在90℃下搅拌14d。将反应混合物冷却到环境温度，随后用水稀释且用EtOAc(2×)萃取。经合并的有机萃取物用水(3×)和盐水(1×) 洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤，且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用5-95％DCM-丙酮作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到紧接着用于步骤2的标题化合物。MS(apci)m/z＝503.2(M+H)。

步骤2：4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((1-羟基环丙基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐的制备。在环境温度下，搅拌3-(5-(3- 氰基-6-((1-羟基环丙基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(步骤1；采用0.6672mmol)于1∶1 DCM∶TFA(2mL) 中的溶液15min，且随后真空浓缩。将残余物溶解于含6M HCl的iPrOH(4448 μL，26.69mmol)中，超声处理几分钟，随后真空浓缩，干净地得到标题化合物(121mg，38％产率)。MS(apci)m/z＝403.2(M+H)。

中间物P85

(R)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(2-甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)

步骤1：(R)-4-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备。在80℃下，搅拌4-(6-氟吡啶-3- 基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P42；1.70g，8.55 mmol)、(R)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(123mg，0.613mmol)和K₂CO_3(s)(212 mg，1.53mmol)于DMSO(409μL)中的混合物5d。在冷却到环境温度之后，所得混合物用水(5mL)稀释且用DCM(4×5mL)萃取。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用0-100％ EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，得到标题化合物(10mg，6％产率)。MS(apci)m/z＝507.3(M+H)。

步骤2(R)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(2-甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)的制备。(R)-4-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(步骤 1；10mg，0.020mmol)于DCM(1mL)中的溶液，用TFA(0.5mL)处理。在环境温度下搅拌所得混合物2h，且随后真空浓缩，得到标题化合物(13mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝407.2(M+H)。

中间物P86

4-(6-(4，7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2,2-三氟乙酸盐)

步骤1：7-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4，7-二氮杂螺[2.5]辛烷-4-甲酸叔丁酯的制备。在80℃下，搅拌4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P42；50mg，0.15mmol)、4，7-二氮杂螺[2.5]辛烷-4-甲酸叔丁酯(65mg，0.31mmol)和K₂CO_3(s) (212mg，1.5mmol)于DMSO(766μL)中的混合物23h。在冷却到环境温度之后，所得混合物用水(10mL)稀释且用DCM(4×10mL)萃取。经合并的有机萃取物用盐水(10mL)洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用0-100％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，得到标题化合物(69mg，87％产率)。MS(apci)m/z＝519.2(M+H)。

步骤2：4-(6-(4，7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基) 吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)的制备。7-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2- 甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4，7-二氮杂螺[2.5]辛烷-4-甲酸叔丁酯(步骤1；69mg，0.13mmol)于DCM(2mL)中的溶液，用TFA(1mL) 处理。在环境温度下搅拌所得混合物隔夜，且随后真空浓缩，得到标题化合物 (86mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝419.2(M+H)。

中间物P87

4-(6-(3-氧杂-7，9-二氮杂双环[3.3.1]壬-7-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)

步骤1：7-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3-氧杂-7，9-二氮杂双环[3.3.1]壬烷-9-甲酸叔丁酯的制备。在90℃下，搅拌4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物 P42；100mg，0.306mmol)、3-氧杂-7，9-二氮杂双环[3.3.1]壬烷-9-甲酸叔丁酯(105 mg，0.460mmol)和K₂CO_3(s)(127mg，0.919mmol)于DMSO(409μL)中的混合物48h。在冷却到环境温度之后，所得混合物用水(10mL)稀释。过滤所得悬浮液，且收集固体，得到标题化合物(160mg，98％产率)。MS(apci) m/z＝535.3(M+H)。

步骤2：4-(6-(3-氧杂-7，9-二氮杂双环[3.3.1]壬-7-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2- 甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)的制备。7-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3-氧杂-7，9-二氮杂双环[3.3.1]壬烷-9-甲酸叔丁酯(步骤1；160mg，0.299mmol)于DCM(1mL) 中的溶液，用TFA(1mL)处理。在环境温度下搅拌所得混合物2h，且随后真空浓缩，得到标题化合物(198mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝435.3(M+H)。

中间物P88

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)-5-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)

步骤1：3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)-3-氟吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯的制备。对4-溴-6-(2-羟基 -2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P41；15mg，0.049mmol)、 (6-(6-(叔丁氧基羰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)-5-氟吡啶-3-基)硼酸(中间物R；20mg，0.059mmol)、K₂CO_3(s)(68mg，0.49mmol)和Pd(PPh₃)₄(5.7mg， 0.005mmol)于二恶烷(250μL)和水(200μL)中的混合物，用Ar_(g)吹扫。在85℃下搅拌所得混合物隔夜，随后直接通过二氧化硅色谱法(使用0-100％ EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化，干净地得到标题化合物(14mg，54％产率)。MS(apci)m/z＝467.15(M+H)。

步骤2：4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)-5-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)的制备。3-(5-(3-氰基 -6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)-3-氟吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(步骤1；14mg，0.027mmol)于DCM(1mL) 中的溶液，用TFA(1mL)处理。在环境温度下搅拌所得混合物1h，且随后真空浓缩，得到标题化合物(17mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝423.10(M+H)。

中间物P89

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)-5-甲基吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)

步骤1：4-(6-氟-5-甲基吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备

在压力容器中，4-溴-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P41；150mg，0.484mmol)于二恶烷(200mL)中的溶液，依序用2-氟 -3-甲基吡啶-5-硼酸(112mg，0.725mmol)和Pd(PPh₃)₄(55.9mg，0.0484mmol) 以及2M Na₂CO_3(aq)(1209μL，2.42mmol)处理。对所得混合物用Ar_(g)鼓泡，密封容器，且在90℃下搅拌混合物隔夜。在冷却到环境温度之后，将所得悬浮液分配在DCM(10mL)与水(10mL)之间，且用DCM(3×10mL)萃取。经合并的有机萃取物用水和盐水洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤，且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(0-100％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(60mg，36％产率)。MS(apci)m/z＝341.1 (M+H)。

步骤2：3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)-3-甲基吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯的制备。在80℃下，搅拌 4-(6-氟-5-甲基吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(步骤1；60mg，0.18mmol)、3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(70mg， 0.35mmol)和K₂CO_3(s)(244mg，1.8mmol)于DMSO(881μL)中的混合物 23h。将所得悬浮液分配在DCM(10mL)与水(10mL)之间，且用DCM(3 ×10mL)萃取。经合并的有机萃取物用水和盐水洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤，且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(0-100％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(8.4mg，9％产率)。MS(apci) m/z＝519.2(M+H)。

步骤3：4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)-5-甲基吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2- 甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)的制备。3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)-3-甲基吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(步骤2；8.4mg，0.016mmol)于DCM(1mL) 中的溶液，用TFA(1mL)处理。在环境温度下搅拌所得混合物1h，且随后真空浓缩，得到标题化合物(10mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝419.2(M+H)。

中间物P90

4-(5-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)

3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡嗪-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(中间物P50，步骤1；20mg，0.040 mmol)于DCM(1mL)中的溶液，用TFA(1mL)处理。在环境温度下搅拌所得混合物隔夜，且随后真空浓缩，得到标题化合物(25mg，定量产率)。MS (apci)m/z＝406.15(M+H)。

中间物P91

4-(2-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)嘧啶-5-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐

步骤1：3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)嘧啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯的制备。在引入2M K₂CO_3(aq) (420μL，0.840mmol)之前，在压力容器中，对4-溴-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基) 吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P41；68mg，0.22mmol)、3-(5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)嘧啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(中间物R21；88mg，0.22mmol)和Pd(PPh₃)₄(25mg，0.022mmol) 于二恶烷(730μL)中的混合物，用Ar_(g)鼓泡30秒。在密封容器之前，对所得混合物用Ar_(g)鼓泡额外2min。在80℃下搅拌反应混合物隔夜。在冷却到环境温度之后，直接通过二氧化硅色谱法(使用15％丙酮/DCM作为洗脱液)来纯化反应混合物，得到标题化合物(53mg，44％产率)。MS(apci)m/z＝450.2 (M+H)；406.2(des-Boc M)。

步骤2：4-(2-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)嘧啶-5-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐的制备。3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)嘧啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(步骤1；53mg，0.105mmol)于DCM(0.5mL)中的溶液，用含4M HCl 的二恶烷(524μL，2.10mmol)处理。所得悬浮液用MeOH(250μL)稀释，且在环境温度下搅拌溶液隔夜。真空浓缩反应混合物，得到标题化合物(54mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝406.2(M+H)。

中间物P92

1-((4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-3-氯吡唑并[1，5-a]吡啶 -6-基)氧基)-2-甲基丙-2-醇2，2，2-三氟乙酸盐

步骤1：3-(5-(3-氯-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2- 基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯的制备。在密封容器中，在90℃下，搅拌1-((3-氯-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)-2-甲基丙-2-醇(中间物P69；258mg，0.768mmol)、3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(229 mg，1.15mmol)和K₂CO_3(s)(425mg，3.07mmol)于DMSO(1.5mL)中的混合物隔夜。反应混合物用额外3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(40 mg)和K₂CO_3(s)(100mg)处理，且在105℃下搅拌隔夜。将反应混合物冷却到环境温度，随后用DCM/水稀释。双相混合物用DCM(3×)洗涤。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用0-100％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(330mg，84％产率)。MS(apci)m/z＝514.2(M+H)。

步骤2：1-((4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-3-氯吡唑并[1，5-a] 吡啶-6-基)氧基)-2-甲基丙-2-醇2，2，2-三氟乙酸盐的制备。3-(5-(3-氯-6-(2-羟基-2- 甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(步骤1；330mg，0.642mmol)于DCM(5mL)中的溶液，用TFA (1.5mL)处理。真空浓缩所得混合物，得到标题化合物(392mg，定量产率)。 MS(apci)m/z＝414.1(M+H)。

中间物P93

4-(6-(4-氨基-4-(羟甲基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3- 甲腈

步骤1：4-((叔丁氧基羰基)氨基)-1-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4- 基)吡啶-2-基)哌啶-4-甲酸甲酯的制备。向6-乙氧基-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P6，303.4mg，1.075mmol)于DMSO(21.50mL) 中的溶液中，添加4-N-Boc-氨基-哌啶-4-甲酸甲酯(416.5mg，1.612mmol)和碳酸钾(297.1mg，2.150mmol)。在110℃下搅拌反应混合物72h。反应混合物用水稀释，且用EtOAc萃取。经合并的有机萃取物用无水MgSO_4(s)脱水，且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(0-100％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，得到呈足够用于步骤2的纯度的标题化合物(76.7mg，13.7％产率)。 MS(apci)m/z＝521.2(M+H)。

步骤2：(1-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-(羟甲基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯的制备。向硼氢化锂(0.0120mL，0.365mmol) 于THF(0.912mL)中的溶液中，添加4-((叔丁氧基羰基)氨基)-1-(5-(3-氰基-6- 乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-甲酸甲酯(47.5mg，0.0912 mmol)。在rt下搅拌反应混合物2h。真空浓缩反应混合物，且残余物用EtOAc 稀释且用盐水洗涤。有机萃取物用无水MgSO_4(s)脱水，且真空浓缩，得到标题化合物(65.9mg)，其无需进一步纯化即用于下一步骤中。MS(apci)m/z＝493.2 (M+H)。

步骤3：4-(6-(4-氨基-4-(羟甲基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并\[1， 5-a]吡啶-3-甲腈的制备。(1-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶 -2-基)-4-(羟甲基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(65.9mg，0.134mmol)于DCM(1 mL)中的溶液，用TFA(0.2mL，2.68mmol)处理。在rt下搅拌反应混合物 30min，且随后真空浓缩。将残余物溶解于DCM中，且用饱和Na₂CO₃洗涤。水性级分用DCM萃取，且经合并的有机萃取物用无水MgSO_4(s)脱水，且真空浓缩，得到标题化合物(35.6mg，68％产率)。MS(apci)m/z＝393.2(M+H)。

中间物P94

6-乙氧基-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐

步骤1：4-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1- 甲酸叔丁酯的制备。4-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P3；500mg，1.19mmol)于DMF(3.96mL)中的溶液，依序用K₂CO_3(s)(329mg，2.38mmol)和碘乙烷(143μL，1.78mmol)处理，随后在环境温度下搅拌18h。将反应混合物缓慢倒入水(32mL)中。搅拌所得悬浮液15min。过滤浆液，用水(3×10mL)冲洗固体。在风干之后，收集固体，得到标题化合物(530mg，99％产率)。MS(apci)m/z＝449.2(M+H)。

步骤2：6-乙氧基-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐的制备。4-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(步骤1；530mg，1.18mmol)于MeOH(5.91mL)中的浆液，用含 5-6N HCl的iPrOH(4.73mL，23.6mmol)逐滴处理。在环境温度下搅拌所得混合物3h，且随后引入额外含5-6NHCl的iPrOH(4.73mL，23.6mmol)。在环境温度下搅拌额外24h之后，真空过滤反应混合物，依序用MeOH(3×1mL) 和MTBE(3×10mL)冲洗固体。真空干燥固体，且收集，得到标题化合物(445 mg，89％产率)。MS(apci)m/z＝349.2(M+H)。

中间物P95

4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

方法A.

步骤1：4-溴-6-(2-吗啉基乙氧基）吡唑并\[1，5-a]吡-3-甲腈的制备。4-溴-6- 羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P1，1000mg，4.201mmol)于DMA (21.005L)中的溶液，用碳酸钾(1742mg，12.60mmol)和4-(2-氯乙基)吗啉 (1.132mL，8.402mmol)处理。在50℃下搅拌反应混合物72h。在冷却到环境温度之后，用饱和NaCl_(aq)淬灭反应混合物。通过过滤来分离所得沉淀，得到呈足够用于步骤2的纯度的标题化合物(1475mg，4.200mmol，99％产率)。MS (apci)m/z＝351(M)。

步骤2：4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-吗啉基乙氧基)吡并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。4-溴-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(0.83g，1.394mmol) 于1，4-二恶烷(1000mL)中的溶液，用2-氟-5-(4，4,5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(373.2181mg，1.673mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(32.22577 mg，0.0279mmol)和碳酸钾水溶液(2.092mL，4.183mmol)处理。对反应混合物用氩气鼓泡，且在90℃下搅拌16h。在冷却到环境温度之后，反应混合物用MTBE稀释且用1N NaOH洗涤。水性级分用MTBE萃取，随后用4N HCl 调整到pH 4。添加饱和NaCl_(aq)，且用4∶1 DCM/IPA萃取水性混合物。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(0.341 g，0.928mmol，66.6％产率)。MS(apci)m/z＝368.1(M+H)。

方法B.

4-(6-氟吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P63；1.00g，3.93mmol)于DMA(8mL)中的悬浮液，依序用K₂CO₃(1.63g，11.8mmol) 和4-(2-氯乙基)吗啉(883mg，5.90mmol)处理。在55℃下搅拌所得混合物19 h。在冷却到环境温度之后，所得混合物用水(50mL)稀释且用DCM(3×30 mL)萃取。经合并的有机萃取物用盐水(3×50mL)洗涤，用无水MgSO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用5-100％丙酮/己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(870mg，60％产率)。 MS(apci)m/z＝368.1(M+H)。

中间物P96

4-(6-(1，7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)吡啶-3-基)-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐

7-(5-(3-氰基-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-1，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-1-甲酸叔丁酯(实例535；625mg，1.09mmol)于DCM(3mL) 中的溶液，用含5-6M HCl的iPrOH(3.05mL，15.3mmol)处理，且在环境温度下搅拌3h。所得混合物用MeOH(3mL)稀释，且在环境温度下搅拌1h。过滤所得悬浮液，用Et₂O(5×1mL)冲洗所分离固体。再过滤滤液，且合并所分离固体且在高真空下干燥，得到标题化合物(532.3mg，89％产率)。MS (apci)m/z＝474.2(M+H)。

中间物P97

4-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-1，4-二氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯

在密封压力管中，在95℃下，搅拌4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P42；300mg，0.919mmol)、1，4-二氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(552mg，2.76mmol)和TEA(1.03mL，7.35mmol)于 DMSO(1.8mL)中的混合物隔夜。在冷却到环境温度之后，反应混合物用DCM 稀释，且用饱和NH₄Cl_(aq)淬灭。在相分离之后，水性萃取物用额外DCM(3×) 洗涤。随后，经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用0-100％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(400mg，86％产率)。MS(apci)m/z＝507.3(M+H)。

中间物P98

4-(6-(1，4-二氮杂环庚-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)

4-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-1，4-二氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(中间物P97；400mg，0.790mmol)于 DCM(2.0mL)中的悬浮液，用TFA(1.29mL，15.8mmol)处理，且在环境温度下搅拌4h。真空浓缩所得混合物，得到标题化合物(501mg，100％产率)。 MS(apci)m/z＝407.2(M+H)。

中间物P99

6-乙氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在压力容器中，对4-溴-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P5；570 mg，2.14mmol)、双(频哪醇)二硼(5.44g，21.4mmol)、PdCl₂(dppf)·CH₂Cl₂(174 mg，0.214mmol)和KOAc(1.05g，10.7mmol)于二恶烷(21.4mL)中的混合物，用Ar_(g)鼓泡10min。密封容器，且在90℃下搅拌混合物隔夜。在冷却到环境温度之后，反应混合物用DCM稀释，且通过GF/F纸过滤。真空浓缩滤液。通过二氧化硅色谱法(使用0-10％MeOH/EtOAc，随后用0-100％己烷/EtOAc 作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物两次，得到呈足以供进一步使用的纯度的标题化合物(772mg，基于55％纯度约63％产率)。MS(apci)m/z＝314.1(M+H)。

中间物P100

4-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡嗪-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯

对6-乙氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1，5-a] 吡啶-3-甲腈(中间物P99；40mg，0.13)、4-(5-氯吡嗪-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯 (中间物R23；38mg，0.13mmol)、2M K₃PO_4(aq)(192μL，0.38mmol)、X-phos (12mg，0.026mmol)和Pd₂(dba)₃(5.8mg，0.0064mmol)于二恶烷(639μL) 中的混合物，用Ar_(g)鼓泡3min，且随后密封容器。在80℃下搅拌反应混合物隔夜。在冷却到环境温度之后，反应混合物用水稀释且用DCM萃取。经合并的有机萃取物依序用水(2×)和盐水(1×)洗涤，且随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用10-100％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(49mg，85％产率)。MS(apci) m/z＝450.2(M+H)。

中间物P101

6-乙氧基-4-(5-(哌嗪-1-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)

4-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡嗪-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P100；27mg，0.060mmol)于DCM(2.0mL)中的悬浮液，用TFA (2mL，26.1mmol)处理，且在环境温度下搅拌隔夜。真空浓缩所得混合物，得到标题化合物(35mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝350.2(M+H)。

中间物P102

3-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡嗪-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯

对6-乙氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1，5-a] 吡啶-3-甲腈(中间物P99；150mg，0.479mmol)、3-(5-氯吡嗪-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(中间物R15；149mg，0.479mmol)、2M K₃PO_4(aq)(718μL，1.44mmol)、X-phos(45.7mg，0.0958mmol)和Pd₂(dba)₃ (21.9mg，0.0239mmol)于二恶烷(2.40mL)中的混合物，用Ar_(g)鼓泡3min，且随后密封容器。在80℃下搅拌反应混合物隔夜。在冷却到环境温度之后，直接通过二氧化硅色谱法(使用0-100％EtOAc/己烷梯度洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(95mg，43％产率)。MS(apci)m/z＝478.2(M+H)。

中间物P103

4-(5-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶 -3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)

3-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡嗪-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(中间物P102；95mg，0.206mmol)于DCM(1.0mL) 中的悬浮液，用TFA(1mL，13.1mmol)处理，且在环境温度下搅拌1h。反应混合物用Et₂O(20mL)稀释。收集所得沉淀，且真空干燥，得到标题化合物(100mg，82.4％产率)。MS(apci)m/z＝362.1(M+H)。

中间物P104

(3-氰基-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)硼酸

在压力容器中，对4-溴-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P95；方法A，步骤1；200mg，0.336mmol)、双(频哪醇)二硼(1.446g， 5.694mmol)、PdCl₂(dppf)·CH₂Cl₂(46.4mg，0.0570mmol)和KOAc(167.7mg， 1.709mmol)于二恶烷(3.36mL)中的混合物，用Ar(g₎鼓泡10min。密封容器，且在90℃下搅拌混合物隔夜。在冷却到环境温度之后，反应混合物用DCM稀释，且通过GF/F纸过滤。真空浓缩滤液，且通过二氧化硅色谱法(使用分级梯度0-20％MeOH/DCM+2％NH₄OH，随后98％MeOH+2％NH₄OH作为梯度洗脱液***)来纯化残余物。将纯化残余物溶解于DCM(2mL)中，且用Et₂O (5mL)湿磨。过滤所得悬浮液，且分离固体，干净地得到标题化合物(60mg， 56％产率)。MS(apci)m/z＝317.1(M+H)。

中间物P105

3-(5-(3-氰基-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡嗪-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯

(3-氰基-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)硼酸(中间物P104；60mg，0.190mmol)、3-(5-氯吡嗪-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯 (中间物R15；61.9mg，0.199mmol)、X-phos(18.1mg，0.0380mmol)和Pd₂(dba)₃ (8.69mg，0.00949mmol)于二恶烷(949μL)中的混合物，用2M K₃PO_4(aq) (285μL，0.569mmol)处理。对所得混合物用Ar_(g)鼓泡，且随后密封容器。在 80℃下搅拌反应混合物隔夜。在冷却环境温度之后，反应混合物用EtOAc稀释，且通过GF/F纸过滤。真空浓缩滤液，且通过二氧化硅色谱法(使用10％ MeOH/DCM+0.1％NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到标题化合物(18mg，17％产率)。MS(apci)m/z＝547.3(M+H)。

中间物P106

4-(5-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2,2-三氟乙酸盐)

3-(5-(3-氰基-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡嗪-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(中间物P105；18mg，0.0329mmol)于DCM (1.0mL)中的悬浮液，用TFA(1mL，13.1mmol)处理，且在环境温度下搅拌30min。真空浓缩所得混合物。将所得残余物与Et₂O(3×5mL)一起共沸，得到标题化合物(22.2mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝447.2(M+H)。

中间物P107

(R)-2-(((4-溴-3-氰基吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯

2-(溴甲基)吗啉-4-甲酸(R)-叔丁酯(300mg，1.07mmol)和4-溴-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P1；255mg，1.07mmol)于DMA(2.14mL) 中的混合物，用Cs₂CO_3(s)(1.05g，3.21mmol)处理，随后在60℃下搅拌隔夜。在冷却到环境温度之后，混合物用DCM稀释，且依序用水(3×)和盐水(1×) 洗涤。真空浓缩有机萃取物，得到标题化合物(468mg，定量产率)。¹H NMR (CDCl₃)δ8.12(s，1H，)，7.43(d，1H)，7.24(s，1H)，7.24，3.90-4.05(m，4H)，3.70-3.89(m，2H)，3.42-3.55(m，2H)，1.39(s，12H)。

中间物P108

(S)-2-(((4-溴-3-氰基吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯

使用针对(R)-2-(((4-溴-3-氰基吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(中间物P107)的合成所描述类似的程序，用(S)-2-(溴甲基)吗啉-4- 甲酸叔丁酯替换2-(溴甲基)吗啉-4-甲酸(R)-叔丁酯，来制备标题化合物(468mg，定量产率)。¹HNMR(CDCl₃)δ8.12(s，1H，)，7.43(d，1H)，7.24(s，1H)3.90-4.05 (m，4H)，3.70-3.89(m，2H)，3.42-3.55(m，2H)，1.39(s，12H)。

中间物P109

(R)-2-(((3-氰基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯

在压力容器中，对(R)-2-(((4-溴-3-氰基吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(中间物P107；468mg，0.749mmol)、双(频哪醇)二硼(1.90 g，7.49mmol)、PdCl₂(dppf)·CH₂Cl₂(61.0mg，0.0749mmol)和KOAc(368mg， 3.75mmol)于二恶烷(7.49mL)中的混合物，用Ar_(g)鼓泡10min。密封容器，且在80℃下搅拌混合物隔夜。在冷却到环境温度之后，反应混合物用DCM稀释，且通过GF/F纸过滤。真空浓缩滤液，且残余物用戊烷湿磨。过滤戊烷悬浮液，且分离固体，得到标题化合物(200mg，80％产率)。¹HNMR(CDCl₃)δ8.21 (s，1H)，7.69(d，1H)，7.30(s，1H)，3.99-4.10(m，2H)，3.78-3.98(m，2H)，3.56-3.65 (m，2H)，1.49(s，9H)，1.43(s，12H)。

中间物P110

(S)-2-(((3-氰基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯

使用针对(R)-2-(((3-氰基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(中间物P109)的合成所描述类似的程序，用(S)-2-(((4-溴-3-氰基吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(中间物P108)替换(R)-2-(((4-溴-3-氰基吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(中间物P107)，来制备标题化合物(191mg，40％产率)。¹HNMR(CDCl₃)δ8.21(s，1H)，7.69(d，1H)，7.30(s，1H)，3.99-4.10(m， 2H)，3.78-3.98(m，2H)，3.56-3.65(m，2H)，1.49(s，9H)，1.43(s，12H)。

中间物P111

(2R)-2-(((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1] 庚-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯

(R)-2-(((3-氰基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(中间物P109；117mg，0.169 mmol)、3-(5-氯吡嗪-2-基)-6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1] 庚烷(中间物R25；56mg，0.17mmol)于二恶烷(844μL)中的混合物，用2 M K₃PO_4(aq)(253μL，0.506mmol)、X-phos(16mg，0.34mmol)和Pd₂(dba)₃ (20mg，0.084mmol)处理。对所得混合物用Ar_(g)鼓泡10min，且随后密封容器。在80℃下搅拌反应混合物隔夜。在冷却到环境温度之后，反应混合物用 DCM稀释，且依序用水(3×)和盐水(1×)洗涤。真空浓缩有机萃取物，且通过二氧化硅色谱法(使用0-100％的9∶1 DCM：MeOH的混合溶剂外加1％ NH₄OH/DCM作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到标题化合物(59.8 mg，54％产率)。MS(apci)m/z＝654.3(M+H)

中间物P112

(2S)-2-(((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1] 庚-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯

使用针对(2R)-2-(((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(中间物P111)的合成所描述类似的程序，用(S)-2-(((3-氰基-4-(4，4,5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(中间物P110)替换(R)-2-(((3-氰基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(中间物 P109)，来制备标题化合物(55.9mg，51％产率)。¹HNMR(CDCl₃)δ8.21(s，1H)， 7.69(d，1H)，7.30(s，1H)，3.99-4.10(m，2H)，3.78-3.98(m，2H)，3.56-3.65(m，2H)， 1.49(s，9H)，1.43(s，12H)。

中间物P113

3-(((4-溴-3-氰基吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)-3-氟氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

4-溴-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P1；591.9mg，2.486mmol) 于DMA(12.43mL)中的混合物，用K₂CO_3(s)(1.031g，7.459mmol)和3-(溴甲基)-3-氟氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.0g，3.7mmol)处理，随后在60℃下搅拌3h。在冷却到环境温度之后，混合物用盐水稀释，且过滤所得悬浮液。用水(5×)洗涤所分离固体。保留滤液，且将所分离固体溶解于DCM中。真空浓缩DCM溶液，得到标题化合物(553mg)。用4∶1 DCM∶iPrOH(4×)萃取滤液。经合并的有机萃取物用盐水(2×)洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤，且真空浓缩，得到额外标题化合物(500mg)。将来自滤过物和来自处理滤液的固体合并，且真空干燥，干净地得到标题化合物(1.033g，98％产率)。MS(apci) m/z＝423(M+H)。

中间物P114

3-(((3-氰基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1，5-a] 吡啶-6-基)氧基)甲基)-3-氟氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

在压力管中，3-(((4-溴-3-氰基吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)-3-氟氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(中间物P113；200mg，0.470mmol)于二恶烷(3.14mL) 中的溶液，用双(频哪醇)二硼(239mg，0.941mmol)和KOAc(138mg，1.41 mmol)处理。对所得混合物用Ar_(g)鼓泡5min，随后引入PdCl₂(dppf)·CH₂Cl₂ (38.3mg，0.0470mmol)。对所得混合物用Ar_(g)额外鼓泡5min，随后密封容器。在80℃下搅拌反应混合物隔夜，随后冷却到环境温度，且用戊烷稀释。戊烷混合物通过GF/F纸过滤，随后真空浓缩，得到与双(频哪醇)二硼呈1∶1比率的标题化合物(400mg，大约90％产率，基于50％纯度)。¹H NMR(CDCl₃)δ8.20(m， 3H)，7.66(d，1H)，4.15(m，6H)，1.44(s，9H)，1.40(s，12H)。

中间物P115

3-(((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3- 基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)-3-氟氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

3-(((3-氰基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1，5-a] 吡啶-6-基)氧基)甲基)-3-氟氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(中间物P114；75mg，0.16mmol)、3-(5-氯吡嗪-2-基)-6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1] 庚烷(中间物R25；70mg，0.11mmol)、X-phos(10mg，0.021mmol)和Pd₂(dba)₃ (4.8mg，0.0053mmol)于二恶烷(529μL)中的混合物，用2M K₃PO_4(aq)(159 μL，0.320mmol)处理。对所得混合物用Ar_(g)鼓泡10min，且随后密封反应容器。在80℃下搅拌混合物隔夜。在冷却到环境温度之后，反应混合物用DCM 稀释，且依序用水和盐水洗涤。有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用0-100％EtOAc/己烷，随后0-10％MeOH+0.1％NH₄OH/EtOAc作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物 (48mg，71％产率)。MS(apci)m/z＝642.3(M+H)。

中间物P116

3-(5-(3-氰基-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)嘧啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯

3-(5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)嘧啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(中间物R21；360mg，0.895mmol)和K₂CO_3(s) (618mg，4.47mmol)于二恶烷(8.95mL)和水(895μL)中的混合物，用4- 溴-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P79，步骤1；314mg， 0.895mmol)和Pd(PPh₃)₄(103mg，0.0895mmol)处理。在密封反应容器之前，对所得混合物用Ar(_g)鼓泡。在80℃下搅拌混合物16h。在冷却到环境温度之后，将反应混合物分配在4∶1 DCM∶iPrOH与盐水之间。在相分离之后，有机萃取物用额外盐水(2×)洗涤，且随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用0-100％EtOAc/己烷，随后0-20％MeOH/EtOAc作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(336mg，69％产率)。 MS(apci)m/z＝491.2(M-tBu)。

中间物P117

4-(2-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)嘧啶-5-基)-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈

3-(5-(3-氰基-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)嘧啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(中间物P116；336mg，0.615mmol)于DCM (2.05mL)中的悬浮液，用TFA(474μL，6.15mmol)处理，且在环境温度下搅拌5h。引入额外TFA(2mL，26.1mmol)，且在环境温度下搅拌反应混合物额外30min。用饱和NaHCO_3(aq)(30mL)中和所得混合物，且用4∶1 DCM∶iPrOH 萃取双相混合物。经合并的有机萃取物用盐水洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(236mg，86％产率)。MS(apci)m/z＝447.3 (M+H)。

中间物P118

3-氯-6-甲氧基-4-(4，4,5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶

对4-溴-3-氯-6-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶(中间物P62，步骤1；152mg，0.581mmol)、PdCl₂(dppf)·CH₂Cl₂(23.7mg，0.029mmol)、KOAc(285mg， 2.91mmol)和双(频哪醇)二硼(443mg，1.74mmol)于二恶烷(5.8mL)中的混合物，用Ar_(g)鼓泡。密封反应容器，且在90℃下搅拌混合物2h 15min。在冷却到环境温度之后，通过

过滤反应混合物。真空浓缩滤液，得到标题化合物(102mg，57％)。MS(apci)m/z＝309.1(M+H)。

中间物P119

1-(4-溴-6-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基)乙-1-醇

4-溴-6-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲醛(中间物P1，B部分，步骤4；128 mg，0.502mmol)于THF(5.02mL)中的冷(0℃)悬浮液，以逐滴方式，用 CH₃MgBr于Et₂O中的3M溶液(201μL，0.602mmol)处理。在添加CH₃MgBr 之后，使混合物温热到环境温度。在用饱和NH₄Cl_(aq)淬灭之前，在环境温度下搅拌所得混合物1h。真空浓缩双相混合物，以去除有机溶剂。过滤残余水性悬浮液，用水冲洗。收集固体且真空干燥，得到标题化合物(130mg，96％产率)。 MS(apci)m/z＝272.9(M+H)。

中间物P120

2-(4-溴-6-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基)丙腈

TMSCN(243μL，1.81mmol)于DCM(2mL)中的冷(0℃)溶液，依序用BF₃·Et₂O(172μL，1.36mmol)和含1-(4-溴-6-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3- 基)乙-1-醇(中间物P119；123mg，0.454mmol)的DCM(2mL)处理。使所得混合物缓慢升温到环境温度。在用饱和NaHCO_3(aq)淬灭之前，在环境温度下搅拌混合物额外2h。用DCM萃取所得双相混合物，且真空浓缩有机萃取物。通过二氧化硅色谱法(使用0-25％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，得到标题化合物(70mg，55％产率)。MS(apci)m/z＝282.0(M+H)。

中间物P121

(4-溴-6-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基)甲醇

4-溴-6-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲醛(中间物P1，B部分，步骤4；1.10 g，4.31mmol)于MeOH(21.6mL)和THF(21.6mL)中的悬浮液，用NaBH₄ (163mg，4.31mmol)处理，随后在环境温度下搅拌20h。引入额外NaBH₄(163 mg，4.31mmol)，且在环境温度下搅拌混合物额外2h。真空浓缩所得混合物，且将残余物悬浮于水(50mL)中。过滤所得水性悬浮液，用水冲洗。收集固体，且真空干燥，得到标题化合物(1.05g，95％产率)。MS(apci)m/z＝259.1(M+H)。

中间物P122

2-(4-溴-6-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基)乙腈

TMSCN(323μL，2.41mmol)于DCM(3mL)中的冷(0℃)溶液，依序用BF₃·Et₂O(229μL，1.81mmol)和(4-溴-6-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基) 甲醇(中间物P121；155mg，0.603mmol)处理。使所得混合物缓慢升温到环境温度。在用饱和NaHCO_3(aq)淬灭之前，在环境温度下搅拌混合物额外2h。用 DCM萃取所得双相混合物，且真空浓缩有机萃取物。通过二氧化硅色谱法(使用0-30％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，得到标题化合物(43 mg，27％产率)。MS(apci)m/z＝268.0(M+H)。

中间物R1

1-苯甲基-4-(5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-基) 哌嗪

1-(5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪盐酸盐(1.00g，3.07mmol)于DMF(5mL)中的溶液，用(溴甲基)苯(0438mL，3.69 mmol)和TEA(1.28mL，9.21mmol)处理。在环境温度下搅拌隔夜之后，混合物用水处理，且超声处理10min。过滤所得白色悬浮液，且固体用水和己烷洗涤，得到标题化合物(0.84g，72％产率)。MS(apci)m/z＝298.1(B(OH)₂M+H)。

中间物R2

(S)-(6-(4-(3-甲氧基吡咯啶-1-羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)硼酸

(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)硼酸(1.5g，7.25mmol)于DMA(36.2mL，7.25 mmol)中的溶液，用DIEA(5.05mL，29.0mmol)处理，且在环境温度下搅拌20min。混合物用氯甲酸4-硝基苯酯(2.92g，14.5mmol)处理，且在环境温度下搅拌隔夜。随后，混合物用DIEA(5mL，29.0mmol)和(S)-3-甲氧基吡咯烷(3.66g，36.2mmol)处理，且在环境温度下搅拌3天。反应混合物用水稀释，且用20％MeOH/DCM萃取。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱(0-40％ACN/H2O)来纯化粗残余物。随后，将所分离产物溶解于MeOH中，且负载到

SCX色谱柱上。色谱柱用MeOH(2色谱柱体积)冲洗，且随后用含4N NH₄OH的MeOH冲洗，干净地得到标题化合物(1.0g，41％产率)。MS(apci)m/z＝335.1(M+H)。

中间物R4

(6-(6-(叔丁氧基羰基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)硼酸

方法1：

步骤1：3-(5-溴吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯的制备。在90℃下，搅拌3，6-二氮杂-双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(1.046g，5.27 mmol)、5-溴-2-氟吡啶(919mg，5.22mmol)和K₂CO_3(s)(3.61g，26.1mmol) 于DMSO(5.22mL)中的悬浮液1天。在冷却到环境温度之后，将反应混合物分配在EtOAc与水之间。有机萃取物用额外水洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(0-50％己烷/EtOAc作为梯度洗脱液) 纯化粗残余物，得到标题化合物(1.80g，97％产率)。MS(apci)m/z＝354.0(M+1)， 356.1(M+2)。

步骤2：(6-(6-(叔丁氧基羰基)-3，6-二氮杂双环\[3.3.1]庚-3-基)吡啶-3-基)硼酸的制备。对3-(5-溴吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(1.80 g，5.08mmol)、双(频哪醇)二硼(3.87g，15.2mmol)、PdCl₂(dppf)·CH₂Cl₂(414 mg，0.508mmol)和KOAc(1.50g，15.2mmol)于二恶烷(5.75mL)中的混合物，用N_2(g)鼓泡，随后在80℃下搅拌3h。在冷却到室温之后，反应混合物用DCM稀释且用水洗涤。水性萃取物用DCM洗涤。将所有DCM萃取物合并，且用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。用己烷(200mL)和***(50mL)超声处理粗残余物5min，且过滤所得灰色悬浮液。所收集固体用MeOH湿磨，且过滤所得悬浮液，得到呈白色固体状的标题化合物(840mg，52％产率)。 MS(apci)m/z＝320.2(M+H)。

方法2：

(6-(6-(叔丁氧基羰基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)硼酸的制备。将3，6-二氮杂-双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(182mg，0.918mmol)、2-氟 -5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(819mg，3.67mmol)和 K₂CO_3(s)(634mg，4.59mmol)于DMSO(918μL)中的悬浮液，加热到90℃，随后用水(5mL)处理。在90℃下搅拌所得混合物1小时，随后冷却到环境温度且过滤，干净地得到标题化合物(1.0g，41％产率)。MS(apci)m/z＝320.1 (M+H)。

中间物R5

(1S，4S)-2-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-2，5-二氮杂双环\[2.2.1]庚烷二盐酸盐

步骤1：(1S，4S)-5-(6-甲氧基吡啶-3-基)-2，5-二氮杂双环\[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯的制备。(1S，4S)-(-)-2，5-二氮杂双环(2.2.1)庚烷-2-甲酸叔丁酯(500mg，2.52mmol)于DCE(12.6mL)中的溶液，依序用6-甲氧基烟碱醛(691.7mg， 5.044mmol)和NaBH(AcO)₃(1.60g，7.57mmol)处理。在环境温度下搅拌隔夜之后，真空浓缩反应混合物。通过二氧化硅色谱法(0-20％MeOH/DCM作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到标题化合物(725.4mg，90％产率)。 MS(apci)m/z＝320.2(M+H)。

步骤2：(1S，4S)-2-(6-甲氧基吡啶-3-基)-2，5-二氮杂双环\[2.2.1]庚烷二盐酸盐的制备。(1S，4S)-5-(6-甲氧基吡啶-3-基)-2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯(725.4mg，2.271mmol)于DCM(5mL)中的溶液，用含4N HCl的二恶烷(5mL)处理。在环境温度下搅拌所得混合物1小时，随后真空浓缩，与甲苯(3×3mL)一起共沸，得到呈二盐酸盐的标题化合物(663.6mg，90％产率)。 MS(apci)m/z＝220.2(M+H)。

中间物R6

3-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚烷二盐酸盐

步骤1：3-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯的制备。3，6-二氮杂-双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(250mg，1.26mmol) 于DCE(6.31mL)中的溶液，依序用6-甲氧基烟碱醛(346mg，2.52mmol) 和NaBH(AcO)₃(802mg，3.78mmol)处理。在环境温度下搅拌混合物5h。真空浓缩所得混合物，且通过二氧化硅色谱法(0-100％[4∶1 DCM：MeOH+2％ NH₄OH]/DCM作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到呈足够供随后使用的纯度的标题化合物(420mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝320.2(M+H)。

步骤2：3-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚烷二盐酸盐的制备。3-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯 (步骤1；420mg，1.31mmol)于DCM(2mL)中的溶液，用含4N HCl的二恶烷(4mL)处理。在环境温度下搅拌反应混合物隔夜。过滤所得沉淀，干净地得到呈二盐酸盐的标题(341mg，93％产率)。MS(apci)m/z＝220.2(M+H)。

中间物R7

3-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，8-二氮杂双环\[3.2.1]辛烷盐酸盐

步骤1：3-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，8-二氮杂双环\[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯的制备。3，8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(1.0g，4.71mmol)于 DCE(23.6mL)中的溶液，依序用6-甲氧基烟碱醛(711mg，5.18mmol)和 NaBH(AcO)₃(1.50g，7.07mmol)处理。在环境温度下搅拌混合物1天，随后添加额外6-甲氧基烟碱醛(711mg，5.18mmol)和NaBH(AcO)₃(1.50g，7.07 mmol)。在环境温度下搅拌1天之后，真空浓缩所得混合物。通过二氧化硅色谱法(0-100％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到呈足够随后使用的纯度的标题化合物(1.50g，96％产率)。MS(apci)m/z＝334.2(M+H)。

步骤2：3-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，8-二氮杂双环\[3.2.1]辛烷盐酸盐的制备。在环境温度下，搅拌3-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，8-二氮杂双环[3.2.1] 辛烷-8-甲酸叔丁酯(1.5g，4.50mmol)于含6N HCl的iPrOH(15mL)中的溶液隔夜。真空浓缩反应混合物，干净地得到呈盐酸盐的标题(1.15g，95％产率)。MS(apci)m/z＝234.1(M+H)。

中间物R9

1-(吡啶-2-基甲基)-4-(5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪

1-(5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(1.00g， 3.46mmol)于DMF(5mL)中的悬浮液，用吡啶甲醛(0.556g，5.19mmol)、 Me₄N(AcO)₃BH(1.82g，6.92mmol)和TEA(1.45mL，10.4mmol)处理。在用水淬灭之前，在环境温度下搅拌所得混合物隔夜。过滤已淬灭悬浮液，且所收集固体用水和己烷洗涤，得到标题化合物(500mg，38％产率)。MS(apci)m/z ＝299.1(B(OH)₂M+H)。

中间物R10

1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-4-(5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪

步骤1：97％纯的商业6-甲氧基烟碱醛的纯化。用加热枪加热97％商业6- 甲氧基烟碱醛(200g，1458.4mmol)于己烷(750mL)中的悬浮液，以溶解大部分固体。含有橙色固体的所得热溶液通过预热过滤漏斗过滤到预热烧瓶中。搅拌热滤液，且使其缓慢冷却到环境温度。使室温溶液在室温下静置2天。过滤所得悬浮液，且所收集固体用己烷洗涤，干净地得到标题化合物(163.93g， 82％回收率)。

步骤2：1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-4-(5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪的制备。1-(5-(4，4,5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(5g，17.3mmol)和6-甲氧基烟碱醛(2.85g，20.7mmol) 于DCE(85mL)中的混合物，用NaBH(AcO)₃(7.3g，35mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物2.5小时，随后真空浓缩到一半初始体积(约40mL)。所得混合物用EtOAc稀释，随后用饱和NaHCO_3(aq)和盐水洗涤。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(4.86mg，69％产率)。MS(apci)m/z＝411.2(M+H)。

中间物R11

(6-(8-(叔丁氧基羰基)-3，8-二氮杂双环\[3.2.1]辛-3-基)吡啶-3-基)硼酸

在90℃下，搅拌3，8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯盐酸盐(153mg，0.616mmol)、2-氟-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(125 mg，0.560mmol)和K₂CO_3(s)(387mg，2.80mmol)于DMSO(5mL)中的悬浮液1天，随后冷却到环境温度。过滤所得悬浮液，且收集固体，干净地得到标题化合物(55mg，30％产率)。MS(apci)m/z＝334.2(M+H)。

中间物R12

(1R，4R)-2-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-2，5-二氮杂双环\[2.2.1]庚烷双(2，2， 2-三氟乙酸盐)

步骤1：(1R，4R)-5-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-2，5-二氮杂双环\[2.2.1]庚烷- 2-甲酸叔丁酯的制备。(1R，4R)-2，5-二氮杂-双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯(250mg，1.26mmol)于DCE(6.31mL)中的溶液，依序用6-甲氧基烟碱醛(346mg， 2.52mmol)和NaBH(AcO)₃(802mg，3.78mmol)处理，随后在环境温度下搅拌隔夜。真空浓缩所得混合物，且通过二氧化硅色谱法(0-20％MeOH/DCM作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到标题化合物(20mg，5％产率)。 MS(apci)m/z＝320.2(M+H)。

步骤2：(1R，4R)-2-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-2，5-二氮杂双环\[2.2.1]庚烷双(2，2，2-三氟乙酸盐)的制备。(1R，4R)-5-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯(20mg，0.063mmol)于DCM(1mL)中的溶液，用TFA(0.5mL)处理。在环境温度下搅拌所得混合物2h，随后真空浓缩，得到呈双三氟乙酸盐的标题化合物(28mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝220.2 (M+H)。

中间物R14

3-(4-溴苯基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯

对1-溴-4-碘苯(0.500g，1.77mmol)、3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(0.491g，2.47mmol)、Cs₂CO_3(s)(1.15g，3.53mmol)、CuI(16.8mg， 0.0884mmol)和2-异丁酰基环己烷-1-酮(59.5mg，0.353mmol)于DMF(1.5 mL)中的混合物，用Ar(_g)鼓泡5min，随后在环境温度下搅拌4天。反应混合物用额外CuI(16.8mg，0.0884mmol)处理，随后用Ar_(g)鼓泡5min，且在35 ℃下搅拌1h。将混合物分配在盐水与MTBE之间。将有机层分离，且用额外盐水和饱和NH₄Cl_(aq)洗涤。合并水性萃取物且用MTBE反萃取。合并MTBE 萃取物，随后用无水MgSO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(DCM 作为洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(190mg，30％产率)。 MS(apci)m/z＝353.0(M+1)；355.1(M+2)，用Br模式。

中间物R15

3-(5-氯吡嗪-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯

在80℃下，搅拌3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(266mg，1.34 mmol)、2，5-二氯吡嗪(260mg，1.74mmol)和K₂CO_3(s)(927mg，6.71mmol) 于DMSO(1.5mL)中的混合物2h，随后在85℃下搅拌隔夜。在冷却到环境温度之后，混合物用水稀释，且剧烈搅拌，直到随之而来的放热消散为止。用 Et₂O萃取水性混合物，且过滤双相混合物并分离。用DCM萃取水相，且合并 Et₂O和DCM萃取物。经合并的有机萃取物用无水MgSO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(10％EtOAc/DCM+0.05％NH₄OH作为洗脱液) 来纯化残余物，干净地得到标题化合物(286mg，69％产率)。MS(apci)m/z＝ 311.0(M+1)；313.2(M+2)，用Cl模式。

中间物R16

(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基)(6-羟基吡啶-3-基)甲酮2，2，2-三氟乙酸盐

步骤1：6-(6-羟基烟酰基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚烷-3-甲酸叔丁酯的制备。在环境温度下，搅拌3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-甲酸叔丁酯(0.363g，1.83 mmol)、6-羟基烟酸(0.382g，2.75mmol)、N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(1.59ml， 9.15mmol)和HATU(0.766g，2.01mmol)于DMF(2mL)中的悬浮液隔夜。反应混合物用DCM和水稀释。过滤所得悬浮液，得到呈固体状的标题化合物 (250mg，43％产率)。

步骤2：(3，6-二氮杂环\[3.1.1]庚-6-基)(6-羟基吡啶-3-基)甲酮2，2，2-三氟乙酸盐的制备。6-(6-羟基烟酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-甲酸叔丁酯(步骤 1；250mg，0.783mmol)于DCM(7.83mL)中的溶液，用TFA(1.20mL) 处理。在环境温度下搅拌所得混合物2h，随后真空浓缩，得到呈定量产率的标题化合物。

中间物R17

(2R，6S)-1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-2，6-二甲基哌嗪双(2，2，2-三氟乙酸盐)

步骤1：(3S，5R)-3，5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备。(3S，5R)-3，5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(50mg，0.23mmol)于DCE(1.17mL)中的溶液，依序用6-甲氧基烟碱醛(64mg，0.47mmol)和NaBH(AcO)₃(148mg，0.70mmol) 处理，随后在环境温度下搅拌1h。真空浓缩所得混合物，且通过二氧化硅色谱法(使用梯度0-100％DCM/己烷，随后0-60％(2％NH₄OH/20％MeOH/78％DCM) /DCM作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到标题化合物(26mg，33％产率)。MS(apci)m/z＝336.2(M+H)。

步骤2：(2S，6R)-1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-2，6-二甲基哌嗪双(2，2，2-三氟乙酸盐)的制备。将(3S，5R)-4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(26mg，0.078mmol)的溶液溶解于1mL DCM中，且用TFA(1mL) 处理，随后在环境温度下搅拌2h。真空浓缩所得混合物，干净地得到标题化合物(36mg，33％产率)。MS(apci)m/z＝336.2(M+H)。

中间物R18

(1s，3s)-3-羟基环丁基4-甲基苯磺酸盐

将特戊酸(1s，3s)-3-(甲苯磺酰基氧基)环丁酯(3.5g，10.7mmol)于DCM(20 mL)中的溶液冷却到-78℃，随后用DIBAL-H(25wt％于甲苯中，12.6mL，18.8 mmol)缓慢处理。在-78℃下搅拌所得混合物1h。通过在-78℃下缓慢添加 Na₂SO₄·10H2O来淬灭混合物，且随后温热到环境温度。真空过滤所得悬浮液，且用少量MTBE洗涤固体。真空浓缩所得滤液，且通过二氧化硅色谱法(30％ EtOAc/己烷)来纯化残余物，得到标题化合物(1.54g，59％产率)。¹H-NMR(400 MHz，CDCl₃)δ7.78(d，2H)，7.34(d，2H)，4.37-4.44(m，1H)，3.86-3.94(m，1H)，2.66-2.73(m，2H)，2.45(s，3H)，2.08-2.15(m，2H)，1.78(d，1H)。

中间物R19

(1-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环丙基)甲醇

步骤1：1-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环丙烷-1-甲酸甲酯的制备。1-羟基 -1-环丙烷甲酸甲酯(2.03g，17.5mmol)于DMF(35mL)中的溶液，依序用咪唑(1.19g，17.5mmol)和叔丁基二甲基氯硅烷(2.77g，18.4mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物60h。反应混合物用水稀释，且用Et₂O(2×)萃取。有机萃取物用水(3×)和盐水(1×)洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(3.45g，86％产率)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃) δ3.71(s，3H)，1.33-1.30(m，2H)，1.08-1.05(m，2H)，0.87(s，9H)，0.14(s，6H)。

步骤2：((1-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环丙基)甲醇的制备。将1-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环丙烷-1-甲酸甲酯(步骤1；3.45g，15.0mmol)于THF (150mL)中的溶液冷却到0℃，随后用含25wt％DIBAL-H的甲苯(25.2mL， 37.4mmol)缓慢处理。在环境温度下搅拌所得混合物1h。将混合物冷却到0 ℃，且通过缓慢添加0.5M L(+)-酒石酸钠钾四水合物水溶液(Rochelle盐；50 mL)来淬灭。已淬灭混合物用Et₂O稀释，且在环境温度下搅拌15min。真空过滤所得悬浮液，且用少量Et₂O洗涤固体。滤液用水(1×)和盐水(1×)洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(1.71mg，56％产率)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ3.55-3.54(d，2H)，0.87(s，9H)，0.79-0.76(m， 2H)，0.60-0.57(m，2H)，0.12(s，6H)。

中间物R20

(6-(6-(叔丁氧基羰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)-5-氟吡啶-3-基)硼酸

在80℃下，搅拌(5，6-二氟吡啶-3-基)硼酸(20mg，0.13mmol)、3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(50mg，0.25mmol)和K₂CO_3(s)(174mg，1.3 mmol)于二恶烷(629μL)中的溶液3天。真空浓缩反应混合物，得到无需进一步纯化足够使用的纯度的标题化合物(20mg，定量产率)。MS(apci)m/z ＝338.1(M+H)。

中间物R21

3-(5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)嘧啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯

在环境温度下，搅拌2-氟-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)嘧啶(0.311g，1.39mmol)、3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(0.303g，1.53mmol)和DIEA(0.484mL，2.78mmol)于DMF(9.25mL)中的混合物隔夜。用EtOAc和水处理反应混合物。有机层用水和盐水洗涤，随后脱水 (Na₂SO₄)，过滤且浓缩。通过二氧化硅色谱法(10-90％EtOAc/己烷)来纯化残余物，得到标题化合物(68mg，12％产率)。

中间物R22

6-甲氧基烟酰氯盐酸盐

在80℃下，搅拌6-甲氧基烟酸(18mg，0.12mmol)于SOCl₂(1mL，0.12 mmol)中的悬浮液30min。在冷却到环境温度之后，真空浓缩溶液，得到粗标题化合物，其无需进一步纯化即直接用于下一步骤中。

中间物R23

4-(5-氯吡嗪-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯

2，5-二氯吡嗪(1.03g，6.91mmol)于DMSO(10mL)中的溶液，依序用K₂CO_3(s)(2.867g，20.74mmol)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.288g，6.914mmol) 处理，随后在75℃下搅拌隔夜。在冷却到环境温度之后，将混合物分配在EtOAc (10mL)与水(20mL)之间。在相分离之后，真空浓缩有机萃取物，得到标题化合物(1.928g，93％产率)。MS(apci)m/z＝199.1(M-Boc)。¹HNMR(CDCl₃) δ8.07(m，1H)，7.86(m，1H)，3.56(s，8H)，1.48(s，9H)。

中间物R24

3-(5-氯吡嗪-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷双(2，2，2-三氟乙酸盐)

3-(5-氯吡嗪-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(中间物R15；300mg，0.965mmol)于DCM(3.0mL)中的混合物，用TFA(3.0mL，39mmol) 处理，且在环境温度下搅拌1h。所得混合物用Et₂O(20mL)稀释。过滤所得悬浮液，且所分离固体在高真空下干燥，得到标题化合物(284mg，67％产率)。 MS(apci)m/z＝211.1(M+H)。

中间物R25

3-(5-氯吡嗪-2-基)-6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷

3-(5-氯吡嗪-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷双(2，2，2-三氟乙酸盐)(中间物 R24；284mg，0.647mmol)于DCM(6.47mL)中的溶液，用6-甲氧基烟碱醛 (266mg，1.94mmol)和NaBH(AcO)₃(686mg，3.24mmol)处理，随后在环境温度下搅拌1h。反应混合物用DCM稀释，且用饱和NH₄Cl_(aq)淬灭。在于PS 玻璃料中用DCM相分离之后，真空浓缩有机萃取物，得到呈定量产率的粗标题化合物，其无需进一步纯化即用于下一步骤中。MS(apci)m/z＝298.1(M-Cl)。

中间物R26

3-(5-溴吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷双(2，2,2-三氟乙酸盐)

3-(5-溴吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(中间物R4，步骤1，方法1；470mg，1.3mmol)于DCM(2.0mL)中的混合物，用TFA (2.0mL，26.1mmol)处理，且在环境温度下搅拌1h。真空浓缩所得混合物，得到标题化合物(478mg，75％产率)。MS(apci)m/z＝256.0(M+H)。

中间物R27

3-(5-溴吡啶-2-基)-6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷

3-(5-溴吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷双(2，2，2-三氟乙酸盐)(中间物 R26；478mg，1.3mmol)和6-甲氧基烟碱醛(267mg，1.95mmol)于DCM (10mL)中的混合物，用NaBH(AcO)₃(551mg，2.60mmol)处理。在引入TEA (544μL，3.90mmol)之前，在环境温度下搅拌所得混合物30min。在环境温度下搅拌反应混合物16h。用饱和NaHCO_3(aq)淬灭所得混合物，且随后用DCM 萃取双相混合物。真空浓缩有机萃取物，且通过二氧化硅色谱法(使用0-5％ MeOH/DCM作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到标题化合物(163mg， 33％产率)。MS(apci)m/z＝377.1(M+H)。

中间物R28

6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(4，4,5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷 -2-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷

对3-(5-溴吡啶-2-基)-6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷(中间物R27；150mg，0.400)、双(频哪醇)二硼(305mg，1.20mmol)、 PdCl₂(dppf)·CH₂Cl₂(32.6mg，0.0400mmol)和KOAc(118mg，1.20mmol) 于二恶烷(4.00mL)中的混合物，用Ar_(g)鼓泡，随后在80℃下搅拌隔夜。在冷却到环境温度之后，反应混合物用EtOAc稀释，随后过滤。真空浓缩滤液，且通过二氧化硅色谱法(使用50-100％己烷：EtOAc作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到标题化合物(118mg，70％产率)。MS(apci)m/z＝341.2(对应硼酸 M+H)。

合成实施例的制备

实例1

4-(6-(苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在压力容器中，将4-溴-6-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P1；0.25 g，1.05mmol)、1-苯甲基-4-(5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(中间物R1；0.478g，1.26mmol)和Pd(PPh₃)₄(0.121g，0.105mmol) 悬浮于2MNa₂CO_3(aq)(2.63mL，5.25mmol)和1，4-二恶烷(2mL)中。对所得混合物用N_2(g)鼓泡。密封容器，且在100℃下搅拌混合物5h。将反应混合物冷却到室温，且随后用水(10mL)处理。在PS玻璃料中，用几份DCM萃取所得双相混合物。真空浓缩经合并的有机萃取物，且随后通过C18反相色谱 (5-95％水-ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，得到呈TFA盐的标题化合物。将盐分配在4∶1 DCM∶iPrOH与饱和NaHCO_3(aq)之间。所得有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，干净地得到标题化合物(262.5mg，61％产率)。MS(apci)m/z＝411.2(M+H)。

实例2

4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-甲氧基吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈 2，2，2-三氟乙酸盐

6-甲氧基-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P2；25mg，0.075mmol)于DMA(750μL)中的溶液，用TEA(78μL， 0.45mmol)和(溴甲基)苯(18μL，0.15mmol)处理，且在环境温度下搅拌隔夜。混合物用水稀释，且用EtOAc萃取。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，得到标题化合物(11.9mg，37％产率)。MS(apci) m/z＝425.2(M+H)。

实例3

4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例 1；30mg，0.0731mmol)于DMF(500μL)中的溶液，依序用K₂CO_3(s)(20.2 mg，0.146mmol)和溴乙烷(10.9μL，0.146mmol)处理，且随后在50℃下搅拌16h。在冷却到环境温度之后，直接通过C18反相色谱(10-100％ACN/H2O 作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，得到标题化合物(11.0mg，34％产率)。 MS(apci)m/z＝439.2(M+H)。

使用针对实例3的合成所描述类似的方法，用适当卤代烷替换溴乙烷，来制备表A中的化合物。通过LCMS监测反应完成，且相应地调整反应持续时间。在使用适当梯度的C18反相色谱之后，干净地分离标题化合物中的每一个。其中注意(＊)，持久性有色杂质通过以下来去除，依序溶解于DCM中，用活性炭处理，通过

过滤和真空浓缩。

表A

实例12

4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例 1；32.3mg，0.0787mmol)于DMF(800μL)中的溶液，依序用K₂CO_3(s)(21.8 mg，0.157mmol)和2-溴乙基甲基醚(14.8μL，0.157mmol)处理，且随后在 50℃下搅拌16h。在冷却到环境温度之后，反应混合物用EtOAc稀释，且用水和盐水洗涤。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱(5-95％水-ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到呈TFA盐的标题化合物。将盐分配在4∶1 DCM∶iPrOH与饱和NaHCO_3(aq)之间。所得有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(19.3mg，52％产率)。MS(apci)m/z＝469.2(M+H)。

实例13

(R)-4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基丙氧基)吡唑并\[1，5-a] 吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐

(R)-6-(2-羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P28；6mg，0.0145mmol)于DCE(145μL)/MeOH(5滴) 中的溶液，依序用苯甲醛(3.07mg，0.0289mmol)和NaBH(AcO)₃(12.3mg， 0.0578mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物1小时，且随后直接通过 C18反相色谱(5-95％水-ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，干净地得到呈TFA盐的标题化合物(7.5mg，89％产率)。MS(apci)m/z＝468.9(M+H)。

实例14

6-(氮杂环丁-3-基氧基)-4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[15-a] 吡啶-3-甲腈

步骤1：3-((4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-3-氰基吡唑并\[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯的制备。4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例1；27.8mg，0.0678mmol)于DMF (1.4mL)中的溶液，用K₂CO_3(s)(468mg，0.339mmol)和1-Boc-3-碘氮杂环丁烷(38.3mg，0.135mmol)处理，且随后在80℃下搅拌16h。在冷却到环境温度之后，反应混合物用EtOAc稀释，且用水和盐水洗涤。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(0-30％ DCM-MeOH+2％NH₄OH作为梯度洗脱液)纯化，得到标题化合物，其直接用于步骤2。MS(apci)m/z＝566.2(M+H)。

步骤2：6-(氮杂环丁-3-基氧基)-4-6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\ [1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。在环境温度下，搅拌3-((4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基) 吡啶-3-基)-3-氰基吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯于1∶1 DCM∶TFA(2mL)中的溶液30min。真空浓缩混合物，且通过C18反相色谱 (5-95％水-ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，干净地得到呈TFA盐的标题化合物。将盐分配在4∶1 DCM∶iPrOH与饱和NaHCO_3(aq)之间。所得有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(16.9mg，54％产率)。MS(apci)m/z＝466.2(M+H)。

实例15

4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-((1-甲基氮杂环丁-3-基)氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-(氮杂环丁-3-基氧基)-4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例14；12.4mg，0.0266mmol)于甲酸(401.9μL)中的溶液，用甲醛(200.1μL，2.664mmol)处理。在引入额外甲醛(200.1μL，2.664mmol) 和甲酸(200μ)之前，在80℃下搅拌所得混合物16h。在80℃下搅拌混合物 60h。在冷却到室温之后，真空浓缩混合物，且随后通过C18反相色谱(5-95％ ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，得到呈TFA盐的标题化合物。将盐分配在4∶1 DCM∶iPrOH与饱和NaHCO_3(aq)之间。分离所得有机萃取物，用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(6.7mg，47％产率)。 MS(apci)m/z＝480.2(M+H)。

实例16

6-(氮杂环丁-3-基甲氧基)-4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1， 5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：3-(((4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-3-氰基吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯的制备。PPh₃(77mg，0.29mmol) 于1∶1 DCM∶THF(2.0mL)中的冷(0℃)溶液，用DIAD(58μL，0.29mmol) 处理，且在0℃下搅拌15min。所得0℃混合物用(4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶 -3-基)-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例1；60mg，0.15mmol)和1-Boc- 氮杂环丁烷-3-基甲醇(55mg，0.29mmol)于1∶1 DCM∶THF(4.0mL)中的溶液处理。在室温下搅拌隔夜之后，真空浓缩反应混合物，且通过C18反相色谱 (5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，得到呈TFA盐的标题化合物。将盐分配在4∶1 DCM∶iPrOH与饱和NaHCO_3(aq)之间。分离所得有机萃取物，用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(28mg，33％产率)。MS(apci)m/z＝580.2(M+H)。

步骤2：6-(氮杂环丁-3-基甲氧基)-4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。3-(((4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-3-氰基吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯于DCM(4mL)中的溶液，用TFA(2.0mL)处理。在环境温度下搅拌所得混合物30min，且随后直接通过C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，得到呈TFA盐的标题化合物。将盐分配在4∶1 DCM∶iPrOH与饱和NaHCO_3(aq)之间。分离所得有机萃取物，用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，干净地得到标题化合物(43mg，62％产率)。MS(apci)m/z＝480.2(M+H)。

实例17

4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-((1-甲基氮杂环丁-3-基)甲氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-(氮杂环丁-3-基甲氧基)-4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a] 吡啶-3-甲腈(实例16；22mg，0.046mmol)于甲酸(3.46μL)中的溶液，用甲醛(1.28μL，45.9mmol)处理。在80℃下搅拌所得混合物5天。在冷却到室温之后，真空浓缩混合物。将残余物分配在4∶1 DCM∶iPrOH与饱和NaHCO_3(aq)之间。合并所得有机萃取物，用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18 反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)，随后硅胶色谱(10-40％ MeOH/EtOAc作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(3mg， 13％产率)。MS(apci)m/z＝494.2(M+H)。

实例18

4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(氧杂环丁-3-基甲氧基)吡唑并\[1， 5-a]吡啶-3-甲腈

PPh₃(51mg，0.19mmol mmol)于1∶1 DCM∶THF(2.0mL)中的冷(0℃) 溶液，用DIAD(38μL，0.19mmol)处理，且在0℃下搅拌15min。所得0℃ 混合物用(4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈 (实例1；40mg，0.097mmol)和氧杂环丁-3-基甲醇(17mg，0.19mmol)于 1∶1 DCM：THF(3.0mL)中的溶液处理。在0℃下搅拌反应混合物1小时，随后在室温下搅拌1小时。直接通过C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化混合物，得到呈TFA盐的标题化合物。将盐分配在4∶1 DCM∶iPrOH与饱和NaHCO_3(aq)之间。合并所得有机萃取物，用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(28mg，60％产率)。MS(apci)m/z＝ 481.2(M+H)。

实例19

4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-(1-甲基氮杂环丁-3-基)乙氧基) 吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例18所描述类似的程序，用2-(1-甲基氮杂环丁-3-基)乙醇替换氧杂环丁-3-基甲醇，来制备标题化合物。在色谱纯化(10-30％MeOH/DCM作为梯度洗脱液)之后，干净地分离出标题化合物(16mg，32％产率)。MS(apci) m/z＝508.3(M+H)。

实例20

4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例 1；28.2mg，0.0687mmol)于DMF(0.8mL)中的溶液，用4-(2-氯乙基)吗啉盐酸盐(25.6mg，0.137mmol)和K₂CO_3(s)(47.5mg，0.344mmol)处理，随后在50℃下搅拌16h。在冷却到环境温度之后，反应混合物用水稀释且用EtOAc 萃取。经合并的有机萃取物用水和盐水洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤，且真空浓缩。通过C18反相色谱(5-95％水-ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液) 来纯化所得粗产物，干净地得到呈TFA盐的标题化合物。将盐分配在4∶1 DCM∶iPrOH与饱和NaHCO_3(aq)之间。合并所得有机萃取物，用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(19.9mg，55％产率)。MS(apci)m/z ＝524.2(M+H)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d⁶)δ：8.70-8.69(d，1H)，8.57(s，1H)， 8.32-8.31(d，1H)，7.78-7.75(dd，1H)，7.35-7.25(m，6H)，6.93-6.91(d，1H)， 4.23-4.20(t，2H)，3.60-3.56(m，8H)，3.53(s，2H)，2.74-2.71(t，2H)，2.50-2.47(m， 8H)。

实例21

4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙氧基)吡唑并\[1，5-a吡啶-3-甲腈

PPh₃(32.6mg，0.124mmol)于1：1 DCM：THF(1.0mL)中的冷(0℃) 溶液，用DIAD(24.5μL，0.124mmol)处理，且在0℃下搅拌15min。所得0 ℃混合物用(4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例1；34.0mg，0.0828mmol)和1-(N-羟乙基)-4-甲基哌嗪(14.3mg， 0.0994mmol)于1∶1 DCM∶THF(2.0mL)中的溶液处理。在室温下搅拌反应混合物16h，且随后真空浓缩。通过C18反相色谱(5-95％水-ACN+0.1％TFA 作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到呈TFA盐的标题化合物。通过分配在4∶1 DCM∶iPrOH与饱和NaHCO_3(aq)之间，将盐转化为游离碱。合并所得有机萃取物，用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(20.1mg， 45％产率)。MS(apci)m/z＝537.2(M+H)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d⁶)δ： 8.70-8.69(d，1H)，8.57(s，1H)，8.32-8.31(d，1H)，7.78-7.75(dd，1H)，7.52(s，1H)， 7.35-7.25(m，5H)，6.93-6.91(d，1H)，4.21-4.18(t，2H)，3.60-3.57(m，4H)，3.53(s， 2H)，3.18-3.13(q，2H)，2.73-2.70(t，2H)，2.50-2.47(m，8H)，2.13(s，3H)，1.32-1.28 (t，2H)。

实例22

4-(6-(4-苯甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-(二甲氨基)乙氧基)吡唑并\[1，5- a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例21所描述类似的程序，用N，N-二甲基乙醇胺替换1-(N-羟乙基)-4-甲基哌嗪，来制备标题化合物。在将盐转化为游离碱之后，通过二氧化硅色谱法(1-30％DCM-MeOH+2％NH₄OH作为梯度洗脱液)进行额外纯化，干净地分离出标题化合物(12.2mg，37％产率)。MS(apci)m/z＝482.2(M+H)。

实例23

4-(6-(4-(3-羟基-2-苯基丙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-甲氧基吡唑并\[1， 5-a]吡啶-3-甲腈

6-甲氧基-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P2；25mg，0.0748mmol)于DCM(1mL)中的溶液，用DIEA(78.1μL， 0.449mmol)、3-羟基-2-苯基丙酸(24.8mg，0.150mmol)和HATU(33mg， 0.086mmol)处理，随后在环境温度下搅拌隔夜。用EtOAc萃取所得混合物，且经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱(0-75％ACN/水作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(15.7mg，41％产率)。MS(apci)m/z＝483.2(M+H)。

实例24

4-(6-(4-(2-(5-氟吡啶-2-基)乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-甲氧基吡唑并\ [1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例23所描述类似的程序，用2-(5-氟吡啶-2-基)乙酸替换3-羟基 -2-苯基丙酸，和使用6当量的DIEA替代5当量，来制备和纯化标题化合物(17 mg，45％产率)。MS(apci)m/z＝472.2(M+H)。

实例25

(S)-6-甲氧基-4-(6-(4-(3-甲氧基吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-溴-6-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P1，B部分的步骤6；20mg，0.079mmol)于二恶烷(2.0mL)中的搅拌溶液，用(S)-(6-(4-(3-甲氧基吡咯烷 -1-羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)硼酸(中间物R2；40mg，0.12mmol)和2M K₂CO_3(aq)(79μL，0.16mmol)处理，且随后用N_2(g)吹扫5min。混合物用X-Phos (7.6mg，0.016mmol)和Pd₂(dba)₃(3.6mg，0.0040mmol)处理，随后再次用 N_2(g)吹扫5min。在80℃下搅拌所得脱气混合物隔夜。在冷却到环境温度之后，反应混合物用水稀释且用EtOAc萃取。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(0-50％，20％MeOH/DCM/EtOAc 作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(22mg，58％产率)。 MS(apci)m/z＝462.2(M+H)。

实例26

4-(5-(3-氰基-6-(二氟甲氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1- 甲酸叔丁酯

在密封容器之前，在压力容器中，将4-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶 -4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P3；150mg，0.357mmol)于ACN (2mL)和30wt％KOH_(aq)(1.78mL，0.357mmol)中的溶液冷却到-78℃，随后用2-氯-2，2-二氟-1-苯基乙酮(262.9μL，1.784mmol)处理。在1小时时段内，使反应混合物温热到环境温度，且随后在80℃下搅拌4h。在冷却到室温之后，所得混合物用水稀释且用DCM萃取。经合并的有机萃取物用盐水洗涤，且通过玻璃料过滤随之而来的乳液。在与乳液分离之后，有机萃取物用无水MgSO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(0-75％丙酮/己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗材料，干净地得到标题化合物(58mg，35％产率)。MS (apci)m/z＝471.1(M+H)。

实例27

6-(二氟甲氧基)-4-(6-(4-(吡啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1， 5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：6-(二氟甲氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3- 甲腈二盐酸盐的制备。4-(5-(3-氰基-6-(二氟甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(实例27，57mg，0.121mmol)于DCM(2mL)中的溶液，用含5-6M HCl的iPrOH(4mL，20.0mmol)处理，随后在环境温度下搅拌2h。真空浓缩反应混合物，干净地得到标题化合物(51.2mg，95％产率)。 MS(apci)m/z＝371.1(M+H)。

步骤2：6-(二氟甲氧基)-4-(6-(4-(吡啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。来自先前步骤的6-(二氟甲氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(15mg，0.034mmol)于DCE(1.3 mL)中的溶液，依序用吡啶甲醛(6.5μL，0.068mmol)和NaBH(AcO)₃(22mg， 0.10mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物17h，且随后用MeOH(0.5mL) 淬灭。直接通过二氧化硅色谱法(使用0-100％丙酮/己烷作为梯度洗脱液)来纯化已淬灭混合物，干净地得到标题化合物(14.0mg，90％产率)。MS(apci)m/z ＝462.1(M+H)。¹⁹F NMR(CDCl₃)δ-81.9(1F)，-82.1(1F)。

实例28

6-(二氟甲氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基) 吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例27所描述类似的程序，用6-甲氧基烟碱醛替换吡啶甲醛，来制备和纯化标题化合物(12.5mg，75％产率)。MS(apci)m/z＝492.2(M+H)。 ^]9F NMR(CDCl₃)δ-81.9(1F)，-82.1(1F)。

实例29

4-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯

4-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P3；400mg，0.951mmol)于DMF(10mL)中的混合物，依序用K₂CO_3(s) (263mg，1.90mmol)和溴乙烷(142μL，1.90mmol)处理，随后在50℃下搅拌19h。在冷却到环境温度之后，直接通过C18反相色谱(5-90％ACN/水作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(289mg，68％产率)。 MS(apci)m/z＝449.2(M+H)。

实例30

6-乙氧基-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐

4-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(实例29；148mg，0.330mmol)于DCM(2mL)中的溶液，用含5-6M HCl 的iPrOH(4mL，20.0mmol)逐滴处理，且随后在环境温度下搅拌5h。真空浓缩反应混合物，与Et₂O(3×10mL)一起共沸，干净地得到呈二盐酸盐的标题化合物(116mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝349.1(M+H)。

实例31

6-乙氧基-4-(6-(4-(2-(5-氟吡啶-2-基)乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\ [1，5-a]吡-3-甲腈

6-乙氧基-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(实例30；30mg，0.086mmol)于DCM(1mL)中的溶液，用DIEA(0.030mL， 0.17mmol)、2-(5-氟吡啶-2-基)乙酸(16mg，0.10mmol)和HATU(33mg， 0.086mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物隔夜，且随后真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(0-100％的20％MeOH/DCM+2％NH₄OH/DCM作为梯度洗脱液)来纯化残余物。合并含有标题化合物的级分，真空浓缩，且随后用EtOH (1.5mL)和水(1.5mL)湿磨。通过过滤收集所得白色沉淀，干净地得到标题化合物(3.2mg，8％产率)。MS(apci)m/z＝486.2(M+H)。¹H NMR(400MHz， DMSO-d₆)δ：8.38(t，1H，J＝1.6Hz)，8.31(d，1H，J＝2.0)，8.17(s，1H)，8.09(d，1H， J＝2.3Hz)，7.71(dd，1H，J＝6.3，2.7Hz)，7.37(dd，2H，J＝4.3，1.6Hz)，7.06(d，1H， J＝2.0)，6.73(d，1H，J＝8.6Hz)，4.07(q，2H，J＝7.0Hz)，3.95(s，2H)，3.78-3.74(m， 4H)，3.63-3.57(m，4H)，1.48(t，3H，J＝6.7Hz)。

实例32

6-乙氧基-4-(6-(4-(1-(吡啶-2-基)环丙烷-1-羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例31所描述类似的程序，用1-(吡啶-2-基)环丙烷甲酸替换2-(5- 氟吡啶-2-基)乙酸，来制备和纯化标题化合物(14.9mg，35％产率)。MS(apci) m/z＝494.2(M+H)。

实例33

(R)-6-乙氧基-4-(6-(4-(2-(4-氟苯基)-2-羟基乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基) 吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例31所描述类似的程序，用(R)-2-(4-氟苯基)-2-羟基乙酸替换 2-(5-氟吡啶-2-基)乙酸，来制备标题化合物。程序的额外变化包含增加所使用 DIEA的量(5当量)和减少反应持续时间到1小时。在二氧化硅色谱法(使用逐步梯度0-100％EtOAc/己烷，随后EtOAc+10％MeOH作为洗脱液)之后，干净地分离出标题化合物(17mg，62％产率)。MS(apci)m/z＝501.2(M+H)。

实例34

(R)-6-乙氧基-4-(6-(4-(2-甲氧基-2-苯乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\ [1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-乙氧基-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(实例30；30mg，0.086mmol)于DCM(1.72mL)中的溶液，用DIEA(60μL， 0.344mmol)、(R)-2-甲氧基-2-苯乙酸(17.2mg，0.103mmol)和HATU(39.3mg， 0.103mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物16h，且随后真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(0-20％MeOH/DCM作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到标题化合物(19.9mg，47％产率)。MS(apci)m/z＝497.2(M+H)。¹H NMR (400MHz，CDCl3)δ：8.27(d，1H，J＝2.0Hz)，8.23(s，1H)，8.21(d，1H，J＝2.0Hz)，7.74(dd，1H，J＝9.0，2.7Hz)，7.46-7.34(m，5H)，7.14(d，1H，J＝2.3Hz)，6.80(d，1H， J＝9.0)，5.12(s，1H)，4.10(q，2H，J＝7.0Hz)，3.88-3.52(m，6H)，3.50(s，3H)， 3.48-3.38(m，1H)，3.32-3.20(m，1H)，1.50(t，3H，J＝6.65Hz)。

实例35

6-乙氧基-4-(6-(4-(1-(甲氧基甲基)环丙烷-1-羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在环境温度下，搅拌6-乙氧基-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(实例30；10.8mg，0.0827mmol)、1-(甲氧基甲基)环丙烷甲酸(10.8mg，0.0827mmol)、DIEA(24.0μL，0.138mmol)和HATU(26.2mg， 0.0689mmol)于DCM(1mL)中的混合物隔夜，且随后真空浓缩。通过C18 反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到呈TFA盐的标题化合物。将盐分配在饱和NaHCO_3(aq)(2mL)与EtOAc (3mL)之间。用额外EtOAc洗涤水性萃取物。合并EtOAc萃取物且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(0-100％丙酮/DCM作为梯度洗脱液)来纯化所得粗产物，得到标题化合物(6.1mg，19％产率)。MS(apci)m/z＝461.2(M+H)。

实例36

(R)-6-乙氧基-4-(6-(4-(2-羟基-3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\ [1，5-a]吡-3-甲腈

使用针对实例35所描述类似的程序，用(R)-2-羟基-3-甲基丁酸替换1-(甲氧基甲基)环丙烷甲酸，和使用4当量的DIEA，分离出标题化合物(10.8mg，28％产率)。MS(apci)m/z＝448.9(M+H)。

实例37

(S)-6-乙氧基-4-(6-(4-(2-甲氧基-2-苯乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\ [1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐

6-乙氧基-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(实例30；30mg，0.0861mmol)于DCM(1.72mL)中的溶液，用(S)-2-甲氧基-2- 苯乙酸(17.2mg，0.103mmol)、HATU(39.3mg，0.103mmol)和DIEA(60.0 μL，0.344mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物16h，且随后真空浓缩。通过C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到标题化合物(13.9mg，32.5％产率)。MS(apci)m/z＝497.2(M+H)。

实例38

(S)-6-乙氧基-4-(6-(4-(2-羟基-3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\ [1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-乙氧基-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(实例30；10.8mg，0.0827mmol)于DCM(1.72mL)中的溶液，用(S)-2-羟基-3- 甲基丁酸(12.2mg，0.103mmol)、HATU(39.3mg，0.103mmol)和DIEA(60.0 μL，0.344mmol)处理，且在环境温度下搅拌16h，且随后真空浓缩。通过C18 反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到呈TFA盐的标题化合物。盐用饱和NaHCO_3(aq)中和，且用EtOAc(3mL) 萃取。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(13.6mg，35％产率)。MS(apci)m/z＝448.9(M+H)。

使用针对实例38的合成所描述类似的方法，用适当羧酸替换(S)-2-羟基-3- 甲基丁酸，制备和纯化表B中的化合物，且将盐转化为游离碱(其中标记*的除外)。通过LCMS监测反应完成，且相应地调整反应持续时间。

表B

＊通过将TFA盐溶解于MeOH中且通过Agilent PL-HCO₃PM SPE过滤器过滤来获得游离碱

实例41

4-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并\[1，5-a]吡嗪-4-基)吡啶-2-基)-N-异丁基哌嗪- 1-甲酰胺

6-乙氧基-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(实例30；10.8mg，0.0827mmol)于无水DMA(1mL)中的溶液，用DIEA(45.1 μL，0.258mmol)处理，且在环境温度下搅拌0.5h。混合物用1-异氰酸基-2- 甲基丙烷(8.54mg，0.0861mmol)逐滴处理，且在用水淬灭之前，在室温下搅拌1小时。所得白色沉淀通过过滤收集，随后通过二氧化硅色谱法(0-100％丙酮/DCM作为梯度洗脱液)来纯化，干净地得到标题化合物(14.8mg，38％产率)。MS(apci)m/z＝447.9(M+H)。

实例42

6-乙氧基-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\ [1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-乙氧基-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例30；30mg，0.086mmol)于DCE(861μL)中的溶液，依序用6-甲氧基烟碱醛(24 mg，0.17mmol)和NaBH(AcO)₃(55mg，0.26mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物2h，且随后真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(0-100％丙酮/DCM 作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到标题(23mg，57％产率)。MS(apci) m/z＝469.8(M+H)。

使用针对实例42的合成所描述类似的方法，用适当醛替换6-甲氧基烟碱醛，来制备表C中的化合物。通过LCMS监测反应完成，且相应地调整反应持续时间。在使用适当梯度洗脱液的色谱纯化之后，干净地分离出每一种化合物。一些色谱条件使得分离出标题化合物的TFA盐。其中注意(＊)，使用Agilent PL-HCO₃MP SPE过滤器的额外中和是分离出无盐标题化合物所必需的。

表C

实例46

6-乙氧基-4-(6-(6-((R)-2-甲氧基-2-苯乙基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3- 基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶 -3-甲腈二盐酸盐(中间物P7；17.2mg，0.0477mmol)于DCM(954μL)中的溶液，用(R)-2-甲氧基-2-苯乙酸(9.52mg，0.0573mmol)、HATU(21.8mg， 0.0573mmol)和DIEA(33.3μL，0.191mmol)处理。在环境温度下搅拌隔夜之后，真空浓缩反应混合物。通过二氧化硅色谱法(0-20％MeOH/DCM作为梯度洗脱液)且随后C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液) 来纯化残余物，得到呈TFA盐的标题化合物。将盐冻干隔夜，得到标题化合物(16.1mg，66％产率)。MS(apci)m/z＝509.2(M+H)。

实例47

6-乙氧基-4-(6-(6-((R)-2-(4-氟苯基)-2-羟基乙酰基)-3，6-二氮杂双环\ [3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶 -3-甲腈二盐酸盐(中间物P7；17.2mg，0.0477mmol)于DCM(954μL)中的溶液，用(R)-2-(4-氟苯基)-2-羟基乙酸(9.74mg，0.0573mmol)、HATU(21.8 mg，0.0573mmol)和DIEA(33.3μL，0.191mmol)处理。在环境温度下搅拌反应混合物隔夜，且随后真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(0-20％MeOH/DCM 作为梯度洗脱液)且随后C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到呈TFA盐的标题化合物。将盐冻干隔夜，得到标题化合物(8.8mg，36％产率)。MS(apci)m/z＝513.2(M+H)。

实例48

6-乙氧基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚- 3-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶 -3-甲腈二盐酸盐(中间物P7；34mg，0.094mmol)于DCE(472μL)中的溶液，依序用6-甲氧基烟碱醛(26mg，0.19mmol)和NaBH(AcO)₃(60mg，0.28 mmol)处理。在环境温度下搅拌隔夜之后，直接通过二氧化硅色谱法(0-10％ MeOH/DCM作为梯度洗脱液)来纯化混合物，干净地得到标题化合物(10mg， 22％产率)。MS(apci)m/z＝482.2(M+H)。

使用针对实例48的合成所描述类似的方法，用适当醛替换6-甲氧基烟碱醛，来制备表D中的化合物。通过LCMS监测反应完成，且相应地调整反应持续时间。在使用适当梯度洗脱液的色谱纯化之后，干净地分离出每一种化合物。一些色谱条件使得分离出标题化合物的TFA盐。其中注意(＊)，使用Agilent PL-HCO₃MP SPE过滤器的额外中和是分离出无盐标题化合物所必需的。

表D

实例63

4-(6-(6-((5-氯-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基) 吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶 -3-甲腈二盐酸盐(中间物P7；30mg，0.0692mmol)于DCM(692μL)中的溶液，用DIEA(30.1μL，0.173mmol)处理。在室温下搅拌5min之后，反应混合物依序用5-氯-6-甲氧基烟碱醛(13.1mg，0.0762mmol)和NaBH(AcO)₃ (29.3mg，0.138mmol)处理。在环境温度下搅拌混合物隔夜。所得悬浮液用 DCM稀释，且随后用MeOH逐滴处理，直到形成均匀溶液为止。在真空浓缩已淬灭混合物之后，通过二氧化硅色谱法(首先己烷，随后0-10％MeOH/DCM +2％NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到标题化合物(19.8mg， 55％产率)。MS(apci)m/z＝516.2(M+H)。

实例64

6-乙氧基-4-(6-((1S，4S)-5-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-2，5-二氮杂双环\ [2.2.1]庚-2-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐

在80℃下，搅拌6-乙氧基-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P6；20mg，0.071mmol)、(1S，4S)-2-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷二盐酸盐(中间物R5；62mg，0.21mmol)和K₂CO_3(s)(49mg， 0.35mmol)于DMSO(709μL)中的混合物3天。在冷却到环境温度之后，反应混合物用MeOH稀释，过滤且通过C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA 作为梯度洗脱液)来纯化，得到呈TFA盐的标题化合物(32mg，76％产率)。 MS(apci)m/z＝482.2(M+H)。

实例65

6-乙氧基-4-(6-(3-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚- 6-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在110℃下，搅拌6-乙氧基-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P6；20mg，0.071mmol)、3-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环 [3.1.1]庚烷二盐酸盐(中间物R6；23mg，0.078mmol)和K₂CO_3(s)(49mg， 0.35mmol)于DMSO(709μL)中的混合物3h。引入额外3-((6-甲氧基吡啶-3- 基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷二盐酸盐(37mg，0.127mmol)，且在110 ℃下搅拌反应混合物隔夜。在冷却到环境温度之后，过滤反应混合物，且通过 C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，得到呈TFA盐的标题化合物。将TFA盐溶解于MeOH中，且通过Agilent PL-HCO3 MP SPE管过滤以中和，且真空浓缩滤液，得到标题化合物(10mg，29％产率)。 MS(apci)m/z＝482.2(M+H)。

实例66

6-乙氧基-4-(6-(3-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，8-二氮杂双环\[3.2.1]辛- 8-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐

在80℃下，搅拌6-乙氧基-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P6；20mg，0.071mmol)、3-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷盐酸盐(中间物R7；57mg，0.21mmol)和K₂CO_3(s)(49mg，0.35mmol) 于DMSO(709μL)中的混合物，且通过LCMS监测完成。将反应混合物冷却到环境温度，随后过滤，且通过C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，得到标题化合物(1.0mg，3％产率)。MS(apci)m/z＝ 496.3(M+H)。

实例67

(3aR，7aS)-6-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)八氢-1H-吡咯并\[2，3-c]吡啶-1-甲酸叔丁酯

6-乙氧基-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P6；60mg，0.213mmol)于DMSO(500μL)中的悬浮液，用(3aR，7aS)-八氢-1H-吡咯并[2，3-c] 吡啶-1-甲酸叔丁酯(96.2mg，0.425mmol)和K₂CO_3(s)(120mg，0.85mmol) 处理，且在90℃下搅拌10h。将所得混合物冷却到环境温度，且用1∶1的NH₄OH/ 水淬灭。用DCM萃取已淬灭混合物。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱(20-90％ACN/水作为梯度洗脱液) 来纯化残余物，得到标题化合物(77.1mg，74％产率)。MS(apci)m/z＝489.2(M+H)。

实例68

6-乙氧基-4-(6-((3aS，7aS)-八氢-6H-吡咯并\[2，3-c]吡啶-6-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈(TFA盐)

(3aR，7aS)-6-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)八氢-1H-吡咯并[2，3-c]吡啶-1-甲酸叔丁酯(实例67；77.1mg，0.158mmol)于DCM (500μL)中的溶液，用TFA(120.8L，1.58mmol)处理，且在环境温度下搅拌5h。反应混合物用MeOH(1mL)稀释，且通过C18反相色谱(5-95％ACN/ 水+0.01％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，得到标题化合物(51.4mg，84％产率)。MS(apci)m/z＝389.2(M+H)。

实例69

6-(2，2-二氟乙氧基)-4-(6-(4-(吡啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\ [1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-(2，2-二氟乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P8；23.8mg，0.0619mmol)于DCE(619μL)中的溶液，依序用吡啶甲醛(11.7μL，0.124mmol)和NaBH(AcO)₃(39.4mg，0.186mmol) 处理。在环境温度下搅拌所得混合物1小时，且随后真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(0-100％丙酮/DCM作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(15.0mg，51％产率)。MS(apci)m/z＝476.2(M+H)。

实例70

4-(6-(4-(吡啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2，2，2-三氟乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2，2，2-三氟乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P9；24mg，0.060mmol)于DCE(619μL)中的溶液，依序用吡啶甲醛(11.4μL，0.119mmol)和NaBH(AcO)₃(37.494mg，0.1789mmol) 处理。在环境温度下搅拌1小时之后，真空浓缩反应混合物。通过二氧化硅色谱法(0-100％丙酮/DCM作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(14.6mg，50％产率)。MS(apci)m/z＝494.2(M+H)。

实例71

6-丙氧基-4-(6-(4-(吡啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-丙氧基吡唑并[1，5-a]啶-3-甲腈(中间物 P10；26mg，0.072mmol)于DCE(717μL)中的溶液，依序用吡啶甲醛(6.9 μL，0.072mmol)和NaBH(AcO)₃(45.6mg，0.215mmol)处理。在环境温度下搅拌隔夜之后，直接通过二氧化硅色谱法(0-5％MeOH/DCM作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(23.5mg，72％产率)。MS(apci) m/z＝454.2(M+H)。

使用针对实例71的合成所描述类似的方法，用适当醛替换吡啶甲醛和/或用来自表AA的适当中间物处理中间物P10，来制备表E中的化合物。通过 LCMS监测反应完成，且相应地调整反应持续时间。在使用适当梯度洗脱液的色谱纯化之后，干净地分离出每一种化合物。一些色谱条件使得分离出标题化合物的TFA盐。其中注意(＊)，TFA盐的额外中和通过将盐溶解于DCM中来实现，随后用饱和NaHCO_3(aq)和盐水依序萃取溶液，经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，分离出标题化合物的游离碱。

表E

实例86

6-((3-甲基氧杂环丁-3-基)甲氧基)-4-(6-(4-(吡啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-羟基-4-(6-(4-(吡啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P16；17.3mg，0.0420mmol)于DMF(500μL)中的悬浮液，依序用K₂CO_3(s)(11.6mg，0.0841mmol)和3-(溴甲基)-3-甲基氧杂环丁烷(12μL， 0.0841mmol)处理。在50℃下搅拌所得混合物16h。将混合物冷却到环境温度，随后用ACN(0.3mL)稀释，过滤且用ACN冲洗。直接通过C18反相色谱(5-95％ ACN/水作为梯度洗脱液)来纯化滤液，得到标题化合物(2.1mg，10％产率)。 MS(apci)m/z＝496.2(M+H)。

实例87

4-(6-(4-(3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并\ [1，5-a吡啶-3-甲腈

6-(2-吗啉基乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P17；21.7mg，0.0501mmol)于DCM(1.1mL)中的溶液，依序用 DIEA(34.9μL，0.200mmol)和异戊酰氯(7.32μL，0.0601mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物16小时。真空浓缩混合物，且通过二氧化硅色谱法 (20：1 DCM/MeOH作为洗脱液)来纯化残余物，得到标题化合物(18mg，70％产率)。MS(apci)m/z＝518.2(M+H)。

实例88

(R)-4-(6-(4-(2-羟基-2-苯乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-吗啉基乙氧基) 吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-(2-吗啉基乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P17；22mg，0.051mmol)于DMF(4mL)中的溶液，用D-(-)-杏仁酸(11.6mg，0.0761mmol)、HATU(33mg，0.086mmol)和DIEA(88.4μL， 0.507mmol)处理。在环境温度下搅拌16h之后，混合物用EtOAc稀释，且用水萃取。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18 反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到呈 TFA盐的标题化合物。将盐分配在4∶1 DCM∶iPrOH与饱和NaHCO_3(aq)之间。合并所得有机萃取物，用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩作为梯度洗脱液)，得到标题化合物(25mg，87％产率)。MS(apci)m/z＝568.2(M+H)。

实例89

(R)-4-(6-(4-(2-羟基-3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例88所描述类似的程序，用(R)-2-羟基-3-甲基丁酸(1.2当量) 替换D-(-)-杏仁酸，且增加HATU(1.2当量)和DIEA(10当量)的量，来制备和纯化标题化合物(21mg，83％产率)。MS(apci)m/z＝534.2(M+H)。

实例90

6-(2-吗啉基乙氧基)-4-(6-(4-(嘧啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\ [1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-(2-吗啉基乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P17；16mg，0.037mmol)于DMF(2mL)中的溶液，依序用嘧啶-2- 甲醛(14.0mg，0.129mmol)、NaBH(AcO)₃(15.6mg，0.0738mmol)和乙酸 (22.2mg，0.369mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物3天。反应混合物用EtOAc和水萃取。随后经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)，且随后二氧化硅色谱法(使用逐步梯度20∶1 DCM/MeOH，随后10∶1 DCM/MeOH 作为洗脱液)来纯化残余物，得到标题化合物(9mg，46％产率)。MS(apci)m/z ＝526.2(M+H)。

实例91

4-(6-(4-(3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P18；24.5mg，0.0549mmol)于DCM(1.1mL)中的溶液，依序用DIEA(38.2μL，0.219mmol)和异戊酰氯(8.03μL，0.0658mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物16h。真空浓缩残余物，随后通过C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，得到呈TFA盐的标题化合物。将TFA盐分配在4∶1 DCM∶iPrOH与饱和NaHCO_3(aq)之间。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(18.9mg，65％产率)。MS(apci)m/z＝531.2(M+H)。

实例92

(R)-4-(6-(4-(2-羟基-2-苯乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-(4-甲基哌嗪-1- 基)乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P18；20.2mg，0.0452mmol)于DCM(1mL)中的溶液，用D-(-)-杏仁酸(8.26mg，0.0543mmol)、HATU(20.6mg，0.0543mmol)和 DIEA(23.6μL，0.136mmol)处理，且在环境温度下搅拌16h。真空浓缩混合物，且随后通过C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液) 来纯化，得到呈TFA盐的标题化合物。将TFA盐分配在4∶1 DCM∶iPrOH与饱和NaHCO_3(aq)之间。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(19.1mg，73％产率)。MS(apci)m/z＝581.2(M+H)。

实例93

(R)-4-(6-(4-(2-羟基-3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例92所描述类似的程序，用(R)-2-羟基-3-甲基丁酸替换D-(-)- 杏仁酸，来制备标题化合物(17.9mg，74％产率)。MS(apci)m/z＝547.2(M+H)。

实例94

6-(恶唑-2-基甲氧基)-4-(6-(4-(吡啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a吡啶-3-甲腈

6-(恶唑-2-基甲氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈 (中间物P19；15mg，0.037mmol)于DCE(74.7μL)中的溶液，依序用吡啶甲醛(4.29μL，0.0448mmol)和NaBH(AcO)₃(23.8mg，0.112mmol)处理。在环境温度下搅拌混合物隔夜，随后直接通过二氧化硅色谱法(0-5％ MeOH/DCM作为梯度洗脱液)来纯化，得到标题化合物(10mg，54％产率)。 MS(apci)m/z＝492.8(M+H)。

实例95

4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-((3-甲基-1，2， 4-恶二唑-5-基)甲氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-((3-甲基-1，2，4-恶二唑-5-基)甲氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P20；20mg，0.048mmol)于DCE(961μL)中的溶液，依序用6-甲氧基烟碱醛(7.9mg，0.058mmol)和NaBH(AcO)₃(30.5mg，0.144mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物隔夜，随后直接通过二氧化硅色谱法(0-5％MeOH/DCM作为梯度洗脱液)来纯化，得到标题化合物(16.8 mg，65％产率)。MS(apci)m/z＝537.8(M+H)。

实例96

4-(6-(4-(3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(吡啶-3-基甲氧基)吡唑并\ [1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(吡啶-3-基甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈 (中间物P21；43mg，0.105mmol)和3-甲基丁酰氯(15.4μL，0.125mmol) 于DCM(1.05mL)中的溶液，用TEA(14.6μL，0.105mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物2h。直接通过二氧化硅色谱法(1-5％MeOH/DCM作为梯度洗脱液)且再次通过C18反相色谱(60∶40 ACN/水+2％TFA作为梯度洗脱液)来纯化所得混合物，得到呈TFA盐的标题化合物。将TFA盐分配在DCM 与饱和NaHCO_3(aq)之间。经合并的有机萃取物用水和盐水洗涤，随后用无水 Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(5mg，10％产率)。MS(apci) m/z＝496.2(M+H)。

实例97

4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(吡啶-3-基甲氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(吡啶-3-基甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈 (中间物P21；43mg，0.105mmol)于DCE(1.05mL)中的溶液，依序用6- 甲氧基烟碱醛(17.2mg，0.125mmol)和NaBH(AcO)₃(66.5mg，0.314mmol) 处理。在环境温度下搅拌所得混合物1小时。直接通过二氧化硅色谱法(1-5％ MeOH/DCM作为梯度洗脱液)且随后通过C18反相色谱(60∶40 ACN/水+2％ TFA作为梯度洗脱液)来纯化所得混合物，得到呈TFA盐的标题化合物。将 TFA盐分配在DCM与饱和NaHCO_3(aq)之间。所得有机萃取物用水和盐水洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(10.4mg，19％产率)。MS(apci)m/z＝533.2(M+H)。

实例98

6-(2-(1H-咪唑-1-基)乙氧基)-4-(6-(4-(3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基) 吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-(2-(1H-咪唑-1-基)乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶 -3-甲腈(中间物P22；20mg，0.048mmol)和3-甲基丁酰氯(5.9μL，0.048mmol) 于DCM(483μL)中的溶液，用TEA(6.7μL，0.048mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物1.5h。真空浓缩混合物，且通过C18反相色谱(60：40ACN：水+2％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到呈TFA盐的标题化合物。将TFA盐分配在DCM与饱和NaHCO_3(aq)之间，且用DCM萃取双相混合物。经合并的有机萃取物用盐水洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，干净地得到标题化合物(10.4mg，43％产率)。MS(apci)m/z＝499.3(M+H)。

实例99

(R)-6-(2-羟基乙氧基)-4-(6-(4-(2-甲氧基-2-苯乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基) 吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐

在环境温度下，搅拌6-(2-羟基乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P23；20mg，0.050mmol)、(R)-2-甲氧基-2- 苯乙酸(9.12mg，0.0549mmol)、HATU(20.9mg，0.0549mmol)和DIEA(34.9 μL，0.200mmol)于DCM(249μL)中的溶液1小时。真空浓缩混合物，且随后通过C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，得到呈TFA盐的标题化合物(18mg，58％产率)。MS(apci)m/z＝513.2(M+H)。 ¹H NMR(400MHz，DMSO-d⁶)δ：8.38(d，1H，J＝2.0Hz)，8.26(s，1H)，8.22(d，1H，J＝2.3Hz)，7.68(dd，1H，J＝8.6，2.3Hz)，7.44-7.32(m，5H)，7.20(d，1H，J＝2.3Hz)， 6.82(d，1H，J＝9.0Hz)，5.20(s，1H)，4.12(t，2H，J＝4.3Hz)，3.89(t，2H，J＝4.3Hz)， 3.75-3.46(m，7H)，3.41(s，5H)，3.21-3.16(m，1H)。

使用针对实例99的合成所描述类似的方法，用适当羧酸替换(R)-2-甲氧基 -2-苯乙酸，来制备表F中的化合物。通过LCMS监测反应完成，且相应地调整反应持续时间。在使用适当梯度洗脱液的色谱纯化之后，干净地分离出每一种化合物。大部分色谱条件使得分离出标题化合物的2，2，2-三氟乙酸盐。

表F

实例105

4-(5-(3-氰基-6-(2-羟基乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-异丁基哌嗪-1-甲酰胺2，2，2-三氟乙酸盐

6-(2-羟基乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P23；11mg，0.027mmol)和DIEA(24.0μL，0.137mmol)于DMA (549μL)中的冷(0℃)溶液，用氯甲酸4-硝基苯酯(5.81mg，0.0288mmol) 处理。在0℃下搅拌混合物1小时之后，添加异丁胺(10.0mg，0.137mmol)。在引入额外异丁胺(10mg，0.137mmol)之前，在80℃下搅拌混合物1天。在80℃下额外搅拌混合物4h，冷却到环境温度，用MeOH稀释，且直接通过 C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，得到呈 TFA盐的标题化合物(10mg，63％产率)。MS(apci)m/z＝463.9(M+H)。

实例106

4-(6-(4-((5-氯吡啶-2-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐

在环境温度下，搅拌6-(2-羟基乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P23；11.6mg，0.0289mmol)、5-氯吡啶甲醛(8.19mg，0.0579mmol)和NaBH(AcO)₃(18.4mg，0.0868mmol)于DCE (579μL)中的溶液1天。所得反应混合物用MeOH稀释，通过微米过滤器过滤，且通过C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，得到呈2，2，2-三氟乙酸盐的标题化合物(16.9mg，97％产率)。MS(apci)m/z ＝490.1(M+H)。

使用针对实例106的合成所描述类似的方法，用适当醛替换5-氯吡啶甲醛，来制备表G中的化合物。通过LCMS监测反应完成，且相应地调整反应持续时间。在使用适当梯度洗脱液的色谱纯化之后，干净地分离出每一种化合物。大部分色谱条件使得分离出标题化合物的2，2，2-三氟乙酸盐。

表G

实例109

6-(2-羟基乙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3- 基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐

步骤1：6-(2-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)乙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶- 3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a吡啶-3-甲腈的制备。在50℃下，搅拌6-羟基-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a] 吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐(中间物P24；9.5mg，0.017mmol)、(2-溴乙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(5.1mg，0.022mmol)和K₂CO_3(s)(8.9mg，0.065mmol) 于DMF(108μL)中的混合物1天。在冷却到环境温度之后，直接通过二氧化硅色谱法(0-100％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，得到标题化合物(12mg，93％产率)。MS(apci)m/z＝600.8(M+H)。

步骤2：6-(2-羟基乙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐的制备。6-(2-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)乙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(12mg，0.020mmol)于THF(2mL)中的溶液，用 TBAF(100μL，0.10mmol)处理，在环境温度下搅拌3d。过滤所得悬浮液，且用MeOH洗涤固体。浓缩滤液，且通过C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％ TFA作为梯度洗脱液)来纯化，得到呈2，2，2-三氟乙酸盐的标题化合物(6.8mg， 57％产率)。MS(apci)m/z＝485.8(M+H)。

实例110

6-(2-羟基乙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环\ [3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P27；17mg，0.045mmol)于DCE(226μL) 中的溶液，依序用6-甲氧基烟碱醛(12mg，0.090mmol)和NaBH(AcO)₃(29 mg，0.14mmol)处理。在环境温度下搅拌3h之后，真空浓缩反应混合物，且通过二氧化硅色谱法(0-20％MeOH/DCM作为梯度洗脱液)来纯化，干净地得到标题化合物(2.7mg，12％产率)。MS(apci)m/z＝498.2(M+H)。¹HNMR(400 MHz，CD₃OD)δ：8.66(d，1H，J＝2.0Hz)，8.56(s，1H)，8.37(d，1H，J＝2.7Hz)，8.04(d，1H，J＝2.0Hz)，7.81(dd，1H，J＝9.0，2.7Hz)，7.65(dd，1H，J＝8.6，2.3Hz)，7.26 (d，1H，J＝2.3Hz)，6.76(d，1H，J＝9.0Hz)，6.73(d，1H，J＝8.6Hz)，4.93(t，1H，J＝5.5 Hz)，4.11(t，2H，J＝4.7Hz)，3.79(s，3H)，3.73(m，3H)，3.69(br s，1H)，3.64(d，2H， J＝5.9Hz)，3.51(br d，2H)，3.47(s，2H)，2.47(m，1H)，1.55(d，1H，J＝8.6Hz)。

使用针对实例110的合成所描述类似的方法，用适当醛替换6-甲氧基烟碱醛，来制备表H中的化合物。通过LCMS监测反应完成，且相应地调整反应持续时间。在使用适当梯度洗脱液的色谱纯化之后，干净地分离出每一种化合物。

表H

实例113

4-(6-(2，7-二氮杂螺\[3.5]壬-7-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基乙氧基)吡唑并\[1， 5-a]吡啶-3-甲腈

在微波容器中，6-(2-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)乙氧基)-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P26；150mg，0.364mmol)和2，7-二氮杂螺 [3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(247mg，1.09mmol)于DMSO(2.5mL)中的悬浮液，在125℃下经受微波照射1小时。将反应混合物分配于水与DCM之间且用DCM 萃取。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。将残余物溶解于DCM(2mL)中，且用含4N HCl的二恶烷(2mL)处理。在环境温度下搅拌隔夜之后，真空浓缩混合物。通过二氧化硅色谱法(0-100％[20％MeOH+2％NH₄OH]/DCM作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到标题化合物 (115mg，78％产率)。MS(apci)m/z＝405.2(M+H)。

实例114

7-(5-(3-氰基-6-(2-羟基乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-异丙基-2，7-二氮杂螺\[3.5]壬烷-2-甲酰胺

4-(6-(2，7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基乙氧基)吡唑并[1，5-a] 吡啶-3-甲腈(实例113；20mg，0.049mmol)于无水DMSO(246μL)中的溶液，依序用DIEA(26μL，0.15mmol)和2-异氰酸基丙烷(4.2mg，0.049mmol) 处理，且在环境温度下搅拌隔夜。直接通过二氧化硅色谱法(0-20％MeOH/DCM 作为梯度洗脱液)且随后C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物的TFA盐。将盐溶解于MeOH 中，通过Agilent PL-HCO3 MP SPE管过滤以中和，且真空浓缩滤液，干净地得到标题化合物(9.1mg，38％产率)。MS(apci)m/z＝490.2(M+H)。

实例115

7-(5-(3-氰基-6-(2-羟基乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2，7- 二氮杂螺\[3.5]壬烷-2-甲酸异丙酯

4-(6-(2，7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基乙氧基)吡唑并[1，5-a] 吡啶-3-甲腈(实例113；20mg，0.049mmol)于DCM(247μL)中的溶液，依序用DIEA(43.2μL，0.247mmol)和氯甲酸异丙酯(7.70μL，0.0544mmol) 处理，且在环境温度下搅拌隔夜。真空浓缩反应混合物，且通过二氧化硅色谱法(0-15％MeOH/DCM作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到标题化合物(6.7mg，28％产率)。MS(apci)m/z＝491.2(M+H)。

实例116

(R)-4-(5-(3-氰基-6-(2-羟基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯

4-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P3；200mg，0.476mmol)于DMF(5mL)中的溶液，依序用K₂CO_3(s) (328.7mg，2.378mmol)和(R)-2-甲基环氧乙烷(166.6μL，2.378mmol)处理。在40℃下搅拌22h之后，反应混合物用额外(R)-2-甲基环氧乙烷(166.6μL， 2.378mmol)处理，且将反应温度升到50℃。添加额外等分试样的(R)-2-甲基环氧乙烷(166.6μL，2.378mmol)，且在50℃下搅拌混合物3天。将所得混合物冷却到环境温度，随后直接通过C18反相色谱(5-90％ACN/水作为梯度洗脱液)来纯化，干净地得到标题化合物(121.5mg，53％产率)。MS(apci)m/z＝479.2 (M+H)。

实例117

(R)-4-(6-(4-(2-(5-氟吡啶-2-基)乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐

(R)-6-(2-羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P28；7.2mg，0.017mmol)、2-(5-氟吡啶-2-基)乙酸(4.04mg，0.0260mmol)和DIEA(15.2μL，0.0868mmol)于DCM(347μL)中的溶液，用HATU(7.26mg，0.0191mmol)处理，随后在环境温度下搅拌隔夜。二酰基化产物(MS(apci)m/z＝652)的形成需要用含K₂CO_3(s)(328.7mg，2.378mmol) 的MeOH处理混合物。在环境温度下搅拌所得混合物隔夜，随后过滤且通过C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，干净地得到呈2，2，2-三氟乙酸盐的标题化合物(10mg，92％产率)。MS(apci)m/z＝516.8(M+2)。

实例118

4-(6-(4-((R)-2-羟基-2-苯乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-((R)-2-羟基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

(R)-6-(2-羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P28；100mg，0.241mmol)、D-(-)-杏仁酸(45.8mg，0.301mmol) 和DIEA(210μL，1.21mmol)于DCM(1.21mL)中的溶液，用HATU(110 mg，0.289mmol)处理，随后在环境温度下搅拌隔夜。过滤反应混合物，且通过C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化滤液，得到呈TFA盐的标题化合物。将盐溶解于DCM和MeOH中，且通过二氧化硅色谱法(0-20％MeOH/DCM作为洗脱液)来纯化，干净地得到标题化合物(68 mg，45％产率)。MS(apci)m/z＝512.8(M+H)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃-)δ： 8.31(s，1H)，8.17(s，1H)，8.14(s，1H)，7.73(dd，1H，J＝9.0，2.0Hz)，7.39-7.32(m， 5H)，7.10(s，1H)，6.71(d，1H，J＝9.0Hz)，5.25(s，1H)，4.38(br m，2H)，4.23(m， 1H)，4.00-3.95(m，2H)，3.88-3.78(m，2H)，3.65-3.60(m，2H)，3.44-3.39(m，2H)， 1.31(d，3H，J＝6.2Hz)。

使用针对实例118的合成所描述类似的方法，用适当醛替换D-(-)-杏仁酸，和使用不同量的HATU(1.1-1.25当量)和DIEA(3.5-5当量)，来制备表I中的化合物。通过LCMS监测反应完成，且相应地调整反应持续时间。在使用适当梯度洗脱液的单一色谱纯化之后，干净地分离出每一种化合物。一些色谱条件使得分离出标题化合物的2，2，2-三氟乙酸盐。

表I

实例123

(R)-6-(2-羟基丙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶- 3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

(R)-6-(2-羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈 (中间物P29；15mg，0.040mmol)和6-甲氧基烟碱醛(10.9mg，0.0793mmol) 于DCE(396μL)中的溶液，用NaBH(AcO)₃(33.6mg，0.159mmol)处理，且在50℃下搅拌1天。将所得混合物冷却到环境温度，且直接通过二氧化硅色谱法(0-20％DCM/MeOH作为梯度洗脱液)来纯化。通过C18反相色谱(5-95％水-ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来进一步纯化所分离产物，干净地得到呈TFA盐的标题化合物。将TFA盐溶解于MeOH中，且用K₂CO_3(s)超声处理。过滤所得悬浮液，且真空浓缩，干净地得到标题化合物(6.5mg，33％产率)。 MS(apci)m/z＝500.2(M+H)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d⁶)δ：8.42(s，1H)，8.30 (br s，1H)，8.27(d，1H，J＝2.0Hz)，8.07(d，1H，J＝2.3Hz)，7.74(dd，1H，J＝8.3，2.3 Hz)，7.71(dd，1H，J＝8.2，2.0Hz)，7.25(d，1H，J＝2.0Hz)，6.91(d，1H，J＝9.0Hz)， 6.79(d，1H，J＝8.6Hz)，4.15-4.11(m，1H)，4.00(dd，1H，J＝9.0，5.4Hz)，3.92(dd， 1H，J＝9.4，7.4Hz)，3.89(s，3H)，3.64-3.62(m，4H)，3.53(s，2H)，2.58-2.56(m， 4H)，1.28(d，2H，J＝6.3Hz)。

实例124

(R)-6-(2-羟基丙氧基)-4-(6-(4-(吡啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

(R)-6-(2-羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈 (中间物P29；15mg，0.040mmol)于DCE(396μL)和MeOH(5滴)中的溶液，用吡啶甲醛(7.6μL，0.079mmol)和NaBH(AcO)₃(33.6mg，0.159mmol) 处理。在引入额外NaBH(AcO)₃(33.6mg，0.159mmol)之前，在50℃下，搅拌所得混合物隔夜。在50℃下额外搅拌所得混合物2h，随后冷却到环境温度。直接通过二氧化硅色谱法(0-20％DCM/MeOH作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(12mg，64％产率)。MS(apci)m/z＝470.2(M+H)。

实例125

(R)-4-(6-(4-((5-氯吡啶-2-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在环境温度下，搅拌(R)-6-(2-羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P28；11mg，0.027mmol)、5-氯吡啶甲醛 (7.5mg，0.053mmol)和NaBH(AcO)₃(17mg，0.080mmol)于DCE(530μL) 中的溶液1天。直接通过二氧化硅色谱法(使用逐步梯度0-100％EtOAc/己烷，随后10％MeOH/EtOAc作为洗脱液)来纯化所得混合物，干净地得到标题化合物(7mg，52％产率)。MS(apci)m/z＝504.2(M+H)。

实例126

(R)-6-(2-羟基丙氧基)-4-(6-(4-((5-甲氧基吡啶-2-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶- 3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例125所描述类似的程序，用5-甲氧基吡啶甲醛替换5-氯吡啶甲醛，来制备和纯化标题化合物(13mg，98％产率)。MS(apci)m/z＝500.2 (M+H)。

实例127

(R)-4-(5-(3-氰基-6-(2-羟基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)- N-异丁基哌嗪-1-甲酰胺2，2，2-三氟乙酸盐

(R)-6-(2-羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P28；15mg，0.0362mmol)和DIEA(31.6μL，0.181mmol) 于DMA(723μL)中的冷(0℃)溶液，用氯甲酸4-硝基苯酯(8.74mg，0.0434 mmol)处理。在0℃下搅拌混合物1小时之后，添加异丁胺(13.2mg，0.181 mmol)。在添加额外异丁胺(13mg，0.181mmol)之前，在80℃下搅拌所得混合物1天。在80℃下额外搅拌混合物4h。所得混合物用MeOH稀释，且直接通过C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，得到呈2，2，2-三氟乙酸盐的标题化合物(15.6mg，73％产率)。MS(apci)m/z＝477.9 (M+H)。

实例128

6-((R)-2-羟基丙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((R)-2-羟基丙氧基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P30；11.8mg，0.0276mmol)于DCE(396 μL)中的溶液，依序用6-甲氧基烟碱醛(7.58mg，0.0553mmol)和NaBH(AcO)₃ (17.6mg，0.0829mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物隔夜，且随后真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(0-20％MeOH/DCM作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到标题化合物(7mg，50％产率)。MS(apci)m/z＝512.2(M+H)。

实例129

4-(6-(4-((R)-2-羟基-2-苯乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-((S)-2-羟基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

(S)-6-(2-羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P31；13.8mg，0.0333mmol)、(R)-2-羟基-2-苯乙酸(5.31mg，0.0349mmol)、DIEA(20.3μL，0.116mmol)于DCM(333μL)中的溶液，用HATU(13.9mg，0.0366mmol)处理，随后在环境温度下搅拌1小时。将反应混合物直接负载到用己烷平衡的急骤柱上，且用0-100％DCM/己烷到0-20％MeOH/DCM梯度洗脱，干净地得到标题化合物(8mg，47％产率)。MS(apci)m/z ＝513.2(M+H)。

实例130

6-((S)-2-羟基丙氧基)-4-(6-(4-((R)-2-甲氧基-2-苯乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3- 基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例129所描述类似的程序，用(R)-2-甲氧基-2-苯乙酸替换(R)-2- 羟基-2-苯乙酸，来制备和纯化标题化合物(8mg，49％产率)。MS(apci)m/z＝ 527.2(M+H)。

实例131

(S)-4-(5-(3-氰基-6-(2-羟基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)- N-异丁基哌嗪-1-甲酰胺

(S)-6-(2-羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P31；15.6mg，0.0376mmol)和DIEA(32.8μL，0.188mmol) 于DMA(752μL)中的冷(0℃)溶液，用氯甲酸4-硝基苯酯(7.96mg，0.0395 mmol)处理。在0℃下搅拌混合物1小时之后，添加异丁胺(13.7mg，0.188 mmol)。在80℃下搅拌所得混合物1天，且随后添加额外异丁胺(13.7mg，0.188 mmol)。在80℃下搅拌混合物4h。所得混合物用MeOH稀释，且直接通过C18 反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化。通过二氧化硅色谱法(0-20％MeOH/DCM+1％NH₄OH作为梯度洗脱液)来进一步纯化所分离产物，得到标题化合物(4mg，22％产率)。MS(apci)m/z＝478.2(M+H)。

实例132

(S)-6-(2-羟基丙氧基)-4-(6-(4-(吡啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

(S)-6-(2-羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈 (中间物P32；20mg，0.053mmol)和吡啶甲醛(6.3μL，0.066mmol)于DMF (528.5μL)中的溶液，用NaBH(AcO)₃(22.4mg，0.106mmol)处理。在环境温度下搅拌1天之后，通过针筒过滤器过滤混合物，且随后真空浓缩。通过C18 反相色谱(5-95％水-ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到呈TFA盐的标题化合物。将TFA盐溶解于4∶1 DCM/MeOH(20mL)中，且用K₂CO_3(s)(10mL)处理，干净地得到标题化合物(17mg，69％产率)。MS (apci)m/z＝470.2(M+H)。

实例133

(S)-6-(2-羟基丙氧基)-4-(6-(4-((5-甲氧基吡啶-2-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶- 3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在环境温度下，搅拌(S)-6-(2-羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P31；11mg，0.027mmol)、5-甲氧基吡啶甲醛(7.3mg，0.053mmol)和NaBH(AcO)₃(17mg，0.080mmol)于DMF(530 μL)中的溶液1天。直接通过二氧化硅色谱法(使用逐步梯度0-100％EtOAc/ 己烷，随后10％MeOH/EtOAc作为洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(13mg，98％产率)。MS(apci)m/z＝500.2(M+H)。

实例134

(S)-4-(6-(4-((5-氯吡啶-2-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例133所描述类似的程序，用5-氯吡啶甲醛替换5-甲氧基吡啶甲醛，来制备和纯化标题化合物(8mg，60％产率)。MS(apci)m/z＝504.2(M+H)。

实例135

(S)-6-(2-羟基丙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶- 3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-羟基-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐(中间物P24；10mg，0.018mmol)和K₂CO_3(s) (16mg，0.11mmol)于DMF(227μL)中的溶液，用(S)-2-甲基环氧乙烷(13mg， 0.23mmol)处理。在50℃下搅拌所得混合物1天。将反应混合物直接负载到用己烷平衡的急骤柱上，且用0-100％DCM/己烷，随后0-20％MeOH/DCM洗脱，干净地得到标题化合物(5.5mg，49％产率)。MS(apci)m/z＝499.8(M+H)。

实例136

6-((S)-2-羟基丙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((S)-2-羟基丙氧基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P33；13.1mg，0.0261mmol)于DCE(130 μL)中的溶液，依序用6-甲氧基烟碱醛(7.15mg，0.0522mmol)和NaBH(AcO)₃ (16.6mg，0.0782mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物1小时，且随后真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(0-20％MeOH/DCM作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到标题化合物(7mg，53％产率)。MS(apci)m/z＝512.2(M+H)。

实例137

6-((R)-2-羟丁氧基)-4-(6-(4-((R)-2-甲氧基-2-苯乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3- 基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

(R)-6-(2-羟丁氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P34；11.4mg，0.0266mmol)、(R)-2-甲氧基-2-苯乙酸(4.64mg，0.0279mmol)和DIEA(16.2μL，0.0930mmol)于DCM(266μL，0.0266mmol) 中的溶液，用HATU(11.1mg，0.0292mmol)处理，且在环境温度下搅拌1 小时。将反应混合物直接负载到用己烷平衡的急骤柱上，且用0-100％DCM/己烷，且随后0-20％MeOH/DCM洗脱，干净地得到标题化合物(5.6mg，39％产率)。MS(apci)m/z＝541.2(M+H)。

实例138

(R)-4-(5-(3-氰基-6-(2-羟丁氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N- 异丁基哌嗪-1-甲酰胺

(R)-6-(2-羟丁氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P34；15.3mg，0.0357mmol)和DIEA(31.2μL，0.178mmol) 于DMA(713μL)中的冷(0℃)溶液，用氯甲酸4-硝基苯酯(7.55mg，0.0375 mmol)处理。在0℃下搅拌混合物1小时之后，添加异丁胺(13.0mg，0.178 mmol)。在80℃下搅拌所得混合物1天，且随后添加额外异丁胺(13mg，0.178 mmol)。在80℃下搅拌混合物4h，随后用MeOH稀释，且直接通过C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化。通过二氧化硅色谱法(0-20％DCM/MeOH+1％NH₄OH作为梯度洗脱液)来进一步纯化所分离产物，得到标题化合物(2.02mg，11％产率)。MS(apci)m/z＝492.2(M+H)。

实例139

(R)-6-(2-羟丁氧基)-4-(6-(4-(吡啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\ [1，5-a]吡啶-3-甲腈

(R)-6-(2-羟丁氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P35；15.3mg，0.0357mmol)和吡啶甲醛(3.38μL，0.0382mmol)于DCE (764μL)中的溶液，用NaBH(AcO)₃(8.1mg，0.0382mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物隔夜，且随后直接通过二氧化硅色谱法(0-5％MeOH/DCM 作为梯度洗脱液)来纯化，干净地得到标题化合物(4mg，22％产率)。MS(apci) m/z＝483.9(M+H)。

实例140

(R)-4-(6-(4-((5-氯吡啶-2-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟丁氧基) 吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在环境温度下，搅拌(R)-6-(2-羟丁氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P34；11mg，0.026mmol)、5-氯吡啶甲醛(7.3 mg，0.051mmol)和NaBH(AcO)₃(16mg，0.077mmol)于DCE(513μL)中的溶液1天。直接通过二氧化硅色谱法(使用逐步梯度0-100％EtOAc/己烷，随后10％MeOH/EtOAc作为洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(7mg，53％产率)。MS(apci)m/z＝518.2(M+H)。

实例141

(R)-6-(2-羟丁氧基)-4-(6-(4-((5-甲氧基吡啶-2-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3- 基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例140所描述类似的程序，用5-甲氧基吡啶甲醛替换5-氯吡啶甲醛，来制备和纯化标题化合物(8mg，61％产率)。MS(apci)m/z＝514.2(M+H)。

实例142

(R)-6-(2-羟丁氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3- 基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐

在50℃下，搅拌6-羟基-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3- 基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐(中间物P24；10mg，0.018 mmol)、(R)-(+)-1，2-环氧丁烷(1.63mg，0.0227mmol)和K₂CO_3(s)(9.39mg， 0.0680mmol)于DMF(113μL)中的混合物1天。过滤反应混合物，且直接通过C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，干净地得到呈2，2，2-三氟乙酸盐的标题化合物(14mg，99％产率)。MS(apci)m/z ＝513.8(M+H)。

实例143

4-(6-(4-((R)-2-羟基-2-苯乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-((S)-2-羟丁氧基) 吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

(S)-6-(2-羟丁氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P36；17.2mg，0.0401mmol)、(R)-2-羟基-2-苯乙酸(6.41mg， 0.0421mmol)、DIEA(24.5μL，0.140mmol)于DCM(401μL)中的溶液，用HATU(16.8mg，0.0441mmol)处理，且随后在环境温度下搅拌1小时。将反应混合物直接负载到用己烷平衡的急骤柱上，且用梯度0-100％DCM/己烷，且随后0-20％MeOH/DCM洗脱，干净地得到标题化合物(7.5mg，3369％产率)。 MS(apci)m/z＝527.2(M+H)。

实例144

6-((S)-2-羟丁氧基)-4-(6-(4-((R)-2-甲氧基-2-苯乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3- 基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例143所描述类似的程序，用(R)-2-甲氧基-2-苯乙酸替换(R)-2- 羟基-2-苯乙酸，来制备和纯化标题化合物(8mg，30％产率)。MS(apci)m/z＝ 541.2(M+H)。

实例145

(S)-4-(5-(3-氰基-6-(2-羟丁氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N- 异丁基哌嗪-1-甲酰胺

(S)-6-(2-羟丁氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P36；23mg，0.0536mmol)和DIEA(46.8μL，0.127mmol)于 DMA(1.072mL)中的冷(0℃)溶液，用氯甲酸4-硝基苯酯(11.3mg，0.0563 mmol)处理。在0℃下搅拌混合物1小时之后，添加异丁胺(19.6mg，0.268 mmol)。在80℃下搅拌所得混合物1天，且随后添加额外异丁胺(11mg，0.06 mmol)。在80℃下额外搅拌混合物4h，随后冷却到环境温度，用MeOH稀释，且直接通过C18反相色谱法(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化。通过二氧化硅色谱法(0-20％MeOH/DCM+0.1％NH₄OH作为梯度洗脱液) 来进一步纯化所分离产物，得到标题化合物(3mg，11％产率)。MS(apci)m/z ＝492.3(M+H)。

实例146

(S)-6-(2-羟丁氧基)-4-(6-(4-(吡啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\ [1，5-a]吡啶-3-甲腈

(S)-6-(2-羟丁氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P37；14mg，0.0357mmol)和吡啶甲醛(3.79μL，0.0428mmol)于DCE (713.5μL)中的搅拌溶液，用NaBH(AcO)₃(22.7mg，0.107mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物隔夜，且随后直接通过二氧化硅色谱法(0-5％ MeOH/DCM作为梯度洗脱液)来纯化，干净地得到标题化合物(5.4mg，31％产率)。MS(apci)m/z＝483.8(M+H)。

实例147

(S)-4-(6-(4-((5-氯吡啶-2-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟丁氧基) 吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在环境温度下，搅拌(S)-6-(2-羟丁氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P36；11mg，0.026mmol)、5-氯吡啶甲醛(7.3 mg，0.051mmol)和NaBH(AcO)₃(16mg，0.077mmol)于DCE(513μL)中盐酸盐的溶液1天。直接通过二氧化硅色谱法(使用逐步梯度0-100％EtOAc/ 己烷，随后10％MeOH/EtOAc作为洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(9mg，68％产率)。MS(apci)m/z＝518.2(M+H)。

实例148

(S)-6-(2-羟丁氧基)-4-(6-(4-((5-甲氧基吡啶-2-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3- 基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例147所描述类似的程序，用5-甲氧基吡啶甲醛替换5-氯吡啶甲醛，来制备和纯化标题化合物(6.5mg，49％产率)。MS(apci)m/z＝514.2 (M+H)。

实例149

(S)-6-(2-羟丁氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3- 基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

(S)-6-(2-羟丁氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P37；11mg，0.026mmol)于DCE(513μL)中的溶液，依序用6-甲氧基烟碱醛(5.87mg，0.0428mmol)和NaBH(AcO)₃(22.7mg，0.107mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物隔夜，且随后直接通过二氧化硅色谱法(0-5％ MeOH/DCM作为梯度洗脱液)来纯化，干净地得到标题化合物(8.3mg，45％产率)。MS(apci)m/z＝513.8(M+H)。

实例150

4-(6-(4-((R)-2-羟基-2-苯乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(((2S*，3R*)-3-羟基丁-2-基)氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-(((2S*，3R*)-3-羟基丁-2-基)氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a] 吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P38；25mg，0.0583mmol)、(R)-2-羟基-2-苯乙酸(9.31mg，0.0612mmol)和DIEA(35.6μL，0.204mmol)于DCM(583μL) 中的溶液，用HATU(24.4mg，0.0641mmol)处理，且随后在环境温度下搅拌 1小时。直接通过C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液) 来纯化反应混合物。通过二氧化硅色谱法(0-20％MeOH/DCM+0.1％NH4OH 作为梯度洗脱液)来进一步纯化所分离产物，干净地得到标题化合物(2mg， 7％产率)。MS(apci)m/z＝527.2(M+H)。

实例151

6-(((2S，3R)-3-羟基丁-2-基)氧基)-4-(6-(4-((R)-2-甲氧基-2-苯乙基)哌嗪- 1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例150所描述类似的程序，用(R)-2-甲氧基-2-苯乙酸替换(R)-2- 羟基-2-苯乙酸，来制备和纯化标题化合物(3mg，10％产率)。MS(apci)m/z＝ 541.2(M+H)。

实例152

4-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2- 基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯

4-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P3；200mg，0.476mmol)于DMF(5mL)中的悬浮液，依序用K₂CO_3(s) (329mg，2.38mmol)和2，2-二甲基环氧乙烷(171mg，2.38mmol)处理。在 40℃下搅拌隔夜之后，反应混合物用额外2，2-二甲基环氧乙烷(171mg，2.38 mmol)处理，且反应温度升温到50℃。在50℃下搅拌混合物24h，且随后添加另一等分试样的2，2-二甲基环氧乙烷(171mg，2.38mmol)。在50℃下搅拌所得混合物3天。将反应混合物冷却到环境温度，且直接直接通过C18反相色谱(5-90％ACN/水作为梯度洗脱液)来纯化，干净地得到标题化合物(89.6mg， 38％产率)。MS(apci)m/z＝493.3(M+H)。

实例153

(R)-4-(6-(4-(2-(4-氯苯基)-2-羟基乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

向DCM(0.7mL)中，依序添加6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基) 吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P39；30mg，0.0699mmol)、 (R)-2-(4-氯苯基)-2-羟基乙酸(13.1mg，0.0699mmol)、DIEA(61.1μL，0.350 mmol)和HATU(33.2mg，0.0874mmol)。在环境温度下搅拌所得悬浮液1小时。直接通过二氧化硅色谱法(使用逐步梯度0-100％EtOAc/己烷，随后10％ MeOH/EtOAc作为洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(28mg， 71％产率)。MS(apci)m/z＝561.2(M+H)。

使用针对实例153的合成所描述类似的方法，用适当甲酸替换(R)-2-(4-氯苯基)-2-羟基乙酸，和使用不同量的HATU(1.1-1.25当量)和DIEA(1-3.5当量)，来制备表J中的化合物。通过LCMS监测反应完成，且相应地调整反应持续时间。在使用适当梯度洗脱液的色谱纯化之后，干净地分离出标题化合物。

表J

实例157

4-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2- 基)-N-异丁基哌嗪-1-甲酰胺

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P39；15mg，0.035mmol)和DIEA(30.5μL，0.175mmol) 于DMA(699μL)中的冷(0℃)溶液，用氯甲酸4-硝基苯酯(7.40mg，0.0367 mmol)处理。在0℃下搅拌混合物1小时之后，添加异丁胺(7.40mg，0.0367 mmol)。在80℃下搅拌所得混合物1天，且随后添加额外异丁胺(8mg，0.04 mmol)。在80℃下搅拌混合物4h。混合物用MeOH稀释，且直接通过C18反相色谱法(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)且随后二氧化硅色谱法 (0-20％MeOH/DCM+1％NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化，得到标题化合物 (5.6mg，33％产率)。MS(apci)m/z＝492.3(M+H)。

实例158

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P40；15mg，0.038mmol)和6-甲氧基烟碱醛(10.5mg，0.0764mmol) 于DCE(382μL)中的溶液，用NaBH(AcO)₃(32.4mg，0.153mmol)处理，且在50℃下搅拌1天。将混合物冷却到环境温度，且随后直接通过二氧化硅色谱法(0-20％DCM/MeOH作为梯度洗脱液)来纯化。通过C18反相色谱(5-95％ ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来进一步纯化所分离的产物，干净地得到呈TFA盐的标题化合物。将TFA盐溶解于MeOH中，且用K₂CO_3(s)超声处理。过滤所得悬浮液，且真空浓缩滤液，干净地得到标题化合物(6.9mg，35％产率)。MS(apci)m/z＝514.3(M+H)。

实例159

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(4-(吡啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P40；20mg，0.051mmol)和吡啶甲醛(6.1μL，0.064mmol)于 DMF(510μL)中的溶液，用NaBH(AcO)₃(21.6mg，0.102mmol)处理，且在环境温度下搅拌1天。通过针筒过滤器过滤混合物，且随后真空浓缩。直接通过C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，得到呈TFA盐的标题化合物。将TFA盐溶解于4∶1 DCM/MeOH(10mL中，在超声波浴液中用K₂CO_3(s)处理。过滤所得悬浮液，且真空浓缩滤液，干净地得到标题化合物(11mg，45％产率)。MS(apci)m/z＝484.2(M+H)。

实例160

4-(6-(4-((5-氯吡啶-2-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在环境温度下，搅拌6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P39；11mg，0.026mmol)、5-氯吡啶甲醛(7.3mg，0.051mmol)、NaBH(AcO)₃(16mg，0.077mmol)于DCE(513 μL)中的溶液1天。直接通过二氧化硅色谱法(用逐步梯度0-100％EtOAc/己烷，随后10％MeOH/EtOAc来洗脱)来纯化混合物，干净地得到标题化合物(7 mg，53％产率)。MS(apci)m/z＝518.2(M+H)。

实例161

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(4-((5-甲氧基吡啶-2-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例160所描述类似的程序，用5-甲氧基吡啶甲醛替换5-氯吡啶甲醛，来制备和纯化标题化合物(8.89mg，68％产率)。MS(apci)m/z＝514.2 (M+H)。

实例162

4-(6-(6-(2-(5-氟吡啶-2-基)乙酰基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)吡啶- 3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P44；25mg，0.0618mmol)于DCM(1.24mL) 中的溶液，依序用2-(5-氟吡啶-2-基)乙酸(11.5mg，0.0742mmol)、HATU(28.2 mg，0.0742mmol)和DIEA(43.1μL，0.247mmol)处理，随后在环境温度下搅拌隔夜。直接通过二氧化硅色谱法(使用逐步梯度0-100％DCM/己烷，随后 0-60％[78％DCM/20％MeOH/2％NH₄OH]/DCM作为洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(2.94mg，9％产率)。MS(apci)m/z＝542.2(M+H)。

实例163

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；12.2mg，0.0277mmol)于DCE (513μL)中的溶液，依序用6-甲氧基烟碱醛(7.59mg，0.0553mmol)和 NaBH(AcO)₃(17.6mg，0.0830mmol)处理，随后在环境温度下搅拌隔夜。真空浓缩混合物，且通过二氧化硅色谱法(0-20％MeOH/DCM作为梯度洗脱液) 来纯化残余物，干净地得到标题化合物(13.59mg，93％产率)。MS(apci)m/z＝ 526.2(M+H)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ：8.64(d，1H，J＝2.3Hz)，8.55(s， 1H)，8.38(d，1H，J＝2.3Hz)，8.04(d，1H，J＝2.3Hz)，7.80(dd，1H，J＝8.6，2.3Hz)，7.64(dd，1H，J＝8.6，2.3Hz)，7.27(d，1H，J＝＝2.0Hz)，6.76(d，1H，J＝8.6Hz)，6.73(d，1H，J＝8.2Hz)，4.67(s，1H)，3.85(s，2H)，3.79(s，3H)，3.72(d，2H，J＝12.5Hz)，3.64 (d，2H，J＝5.9Hz)，3.51(br d，2H)，3.47(s，2H)，2.47(m，1H)，1.55(d，1H)，1.20(s， 6H)。

使用针对实例163的合成所描述类似的方法，用适当醛(1或2当量)替换6-甲氧基烟碱醛，来制备表K中的化合物。通过LCMS监测反应完成，且相应地调整反应持续时间。在使用适当梯度洗脱液的色谱纯化之后，干净地分离出标题化合物。

表K

实例173

4-(6-(6-((3-氟吡啶-2-基)甲基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；25.3mg，0.0530mmol)于DCM (1mL)中的溶液，依序用3-氟-2-甲酰吡啶(19.9mg，0.159mmol)、NaBH(AcO)₃ (33.7mg，0.159mmol)和AcOH(2滴)处理。在环境温度下搅拌60h之后，真空浓缩所得混合物。通过C18反相色谱(5-95％水-ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到呈TFA盐的标题化合物。将TFA盐分配在4∶1 DCM∶iPrOH与饱和NaHCO_3(aq)之间。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(18.2mg，67％产率)。MS(apci) m/z＝514.2(M+H)。

实例174

4 -(6-(6-((5-氯-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3- 基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；30mg，0.063mmol)于DCM(1 mL)中的溶液，用DIEA(27μL，0.16mmol)处理，且在环境温度下搅拌5min。所得混合物依序用5-氯-6-甲氧基烟碱醛(11mg，0.063mmol)和NaBH(AcO)₃ (27mg，0.13mmol)处理。在环境温度下搅拌12h之后，反应混合物用DCM 稀释，且用10％Na₂CO_3(aq)洗涤。经合并的有机萃取物用无水MgSO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(10％MeOH/DCM+1％NH₄OH作为洗脱液)来纯化残余物，干净地得到标题化合物(22mg，63％产率)。MS(apci)m/z ＝560.3(M+H)。

使用针对实例174的合成所描述类似的方法，用适当醛替换5-氯-6-甲氧基烟碱醛，来制备表L中的化合物。通过LCMS监测反应完成，且相应地调整反应持续时间。在使用适当梯度洗脱液的色谱纯化之后，干净地分离出标题化合物。其中注意(*)，省去水溶液处理，且直接对所溶解的反应混合物进行色谱纯化，以分离出标题化合物。

表L

实例178

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(8-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，8-二氮杂双环\[3.2.1]辛-3-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在环境温度下，搅拌4-(6-(3，8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P45；24mg，0.053 mmol)、6-甲氧基烟碱醛(36.17mg，0.2638mmol)和NaBH(AcO)₃(55.9mg， 0.264mmol)于DCE(264μL)中的混合物隔夜。将混合物分配在DCM与饱和NaHCO_3(aq)之间，且用DCM萃取。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(0-20％DCM/MeOH作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到标题化合物(19.76mg，69％产率)。MS(apci) m/z＝540.3(M+H)。

实例179

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(3-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，8-二氮杂双环\[3.2.1]辛-8-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐

在80℃下，搅拌4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P42；20mg，0.0613mmol)、3-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷盐酸盐(中间物R7；49.6mg，0.184mmol)和 K₂CO_3(s)(42.4mg，0.306mmol)于DMSO(613μL)中的混合物，直到完成 (如通过LCMS测定)为止。将反应混合物冷却到环境温度，且随后过滤。直接通过C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到呈2，2，2-三氟乙酸盐的标题化合物(28.14mg，85％产率)。MS(apci) m/z＝540.3(M+H)。

使用针对实例179的合成所描述类似的方法，用适当双环-哌嗪中间物(中间物R5、R6或R12)替换3-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，8-二氮杂双环[3.2.1] 辛烷盐酸盐(中间物R7)，且其中注意(*)，使用15当量的K₂CO_3(s)，来制备表M中的化合物。通过LCMS监测反应完成，且相应地调整反应持续时间。在使用适当梯度洗脱液的色谱纯化之后，干净地分离出标题化合物。一些色谱条件使得分离出标题化合物的2，2，2-三氟乙酸盐。

表M

实例183

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(4-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)苯基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在添加NaBH(AcO)₃(49.6mg，0.23mmol)之前，在环境温度下，搅拌 4-(5-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P49；63mg，0.16mmol)、6-甲氧基烟碱醛(27.8mg， 0.20mmol)和AcOH(1.8μL，0.031mmol)于DCM(1mL)中的混合物10min。在环境温度下搅拌所得混合物隔夜。直接通过二氧化硅色谱法(20％丙酮/DCM +0.05％NH₄OH作为洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(27 mg，31％产率)。MS(apci)m/z＝525.3(M+H)。

实例184

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例183所描述类似的程序，用4-(5-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P50) 替换4-(5-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P49)，来制备和纯化标题化合物(24mg，47％产率)。MS(apci)m/z＝527.2(M+H)。

实例185

(R)-6-(3-羟基丙氧基)-4-(6-(4-(2-甲氧基-2-苯乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基) 吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐

将6-(3-羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P51；21mg，0.051mmol)、(R)-2-甲氧基-2-苯乙酸(10.1mg， 0.061mmol)、HATU(23.1mg，0.061mmol)和DIEA(26.2μL，0.20mmol) 的溶液悬浮于DCM(253μL)中。在环境温度下搅拌所得悬浮液1小时。直接通过C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(22.2mg，69％产率)。MS(apci)m/z＝526.8 (M+H)。

使用针对实例185的合成所描述类似的方法，用适当羧酸替换(R)-2-甲氧基 -2-苯乙酸，来制备表Q中的化合物。通过LCMS监测反应完成，且相应地调整反应持续时间。在使用适当梯度洗脱液的色谱纯化之后，干净地分离出标题化合物。

表Q

＊在此实例中，使用1.1当量HATU和1.1当量D-(-)-杏仁酸

实例191

4-(5-(3-氰基-6-(3-羟基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-异丁基哌嗪-1-甲酰胺2，2，2-三氟乙酸盐

6-(3-羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P51；14mg，0.0337mmol)和DIEA(29.5μL，0.169mmol)于DMA(675μL)中的冷(0℃)溶液，用氯甲酸4-硝基苯酯(7.14mg，0.0354mmol) 处理。在0℃下搅拌混合物1小时之后，添加异丁胺(12.3mg，0.169mmol)。在添加额外异丁胺(12mg，0.17mmol)之前，在80℃下搅拌所得混合物1天。在80℃下搅拌混合物4h。所得混合物用MeOH稀释，且直接通过C18反相色谱法(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，得到标题化合物(12.8 mg，64％产率)。MS(apci)m/z＝477.9(M+H)。

实例192

4-(6-(4-((5-氯吡啶-2-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(3-羟基丙氧基)吡唑并\[15-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐

在环境温度下，搅拌6-(3-羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P51；12.1mg，0.0292mmol)、5-氯吡啶甲醛(8.26mg，0.0583mmol)和NaBH(AcO)₃(18.5mg，0.0875mmol)于DCE (583μL)中的混合物1天。直接通过C18反相色谱法(5-95％ACN/水+0.1％TFA 作为梯度洗脱液)来纯化混合物，得到标题化合物(17.1mg，95％产率)。MS (apci)m/z＝504.2(M+H)。

使用针对实例192的合成所描述类似的方法，用适当醛替换5-氯吡啶甲醛，来制备表R中的化合物。通过LCMS监测反应完成，且相应地调整反应持续时间。在使用适当梯度洗脱液的色谱纯化之后，干净地分离出标题化合物。

表R

实例195

6-(3-羟基丙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3- 基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：6-(3-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)丙氧基)-4-(6-(4-((6甲氧基吡啶-3- 基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a吡啶-3-甲腈的制备。在50℃下，搅拌6-羟基-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a] 吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐(中间物P24：28mg，0.0634mmol)、(3-溴丙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(14.5μL，0.0793mmol)和K₂CO_3(s)(26.3mg，0.190 mmol)于DMF(317μL)中的混合物1天。在冷却到环境温度之后，直接通过二氧化硅色谱法(0-100％EtOAc/己烷梯度洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(420mg，49％产率)。MS(apci)m/z＝614.9(M+H)。

步骤2：6-(3-羟基丙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。6-(3-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)丙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(35mg，0.0570mmol)于THF(1.14mL)中的溶液，用TBAF(114μL， 0.114mmol)处理，在60℃下搅拌1d。直接首先通过C18反相色谱(5-95％ACN/ 水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)，随后二氧化硅色谱法(0-20％DCM/MeOH作为梯度洗脱液)来纯化所得混合物，得到标题化合物(8.8mg，31％产率)。MS (apci)m/z＝499.8(M+H)。

实例196

(S)-6-(2，3-二羟基丙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基) 吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

(S)-6-(2，3-二羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3- 甲腈二盐酸盐(中间物P52；20mg，0.0507mmol)于DCE(507μL)中的混合物，依序用6-甲氧基-3-吡啶甲醛(6.95mg，0.0507mmol)和NaBH(AcO)₃ (32.2mg，0.152mmol)处理，且随后在环境温度下搅拌隔夜。直接通过二氧化硅色谱法(0-20％MeOH/DCM作为梯度洗脱液)来纯化混合物，得到标题化合物(11.4mg，44％产率)。MS(apci)m/z＝516.2(M+H)。

实例197

(S)-6-(2，3-二羟基丙氧基)-4-(6-(4-(吡啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基) 吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例196所描述类似的程序，用吡啶甲醛(2当量)替换6-甲氧基-3-吡啶甲醛，来制备和纯化标题化合物(1.2mg，5％产率)。MS(apci)m/z＝ 486.2(M+H)。

实例198

(R)-6-(2，3-二羟基丙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基) 吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例196所描述类似的程序，用(R)-6-(2，3-二羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P53)替换 (S)-6-(2，3-二羟基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P52)，和使用2当量的6-甲氧基-3-吡啶甲醛，来制备和纯化标题化合物(5.1mg，30％产率)。MS(apci)m/z＝516.2(M+H)。

实例199

6-((3-(羟甲基)氧杂环丁-3-基)甲氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基) 哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在90℃下，搅拌6-羟基-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3- 基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐(中间物P24：39mg，0.088 mmol)、[3-(溴甲基)氧杂环丁-3-基]甲醇(48.0mg，0.265mmol)和K₂CO_3(s)(61.0 mg，0.442mmol)于DMF(883μL)中的混合物1小时。在冷却到环境温度之后，直接通过二氧化硅色谱法(使用逐步梯度0-100％EtOAc/己烷，随后EtOAc +10％MeOH作为洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(21mg， 44％产率)。MS(apci)m/z＝542.3(M+H)。

实例200

6-(((3S，4S)-4-羟基四氢呋喃-3-基)氧基)-4-(6-(4-((R)-2-甲氧基-2-苯乙基) 哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-(((3S，4S)-4-羟基四氢呋喃-3-基)氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P54；19mg，0.043mmol)、(R)-2-甲氧基-2- 苯乙酸(7.49mg，0.0450mmol)和DIEA(26.2μL，0.150mmol)于DCM(429 μL)中的溶液，用HATU(17.9mg，0.0472mmol)处理。在环境温度下搅拌1 小时之后，直接通过C18反相色谱法(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)，且随后二氧化硅色谱法(0-20％DCM/MeOH/NH₄OH作为梯度洗脱液) 来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(3mg，13％产率)。MS(apci)m/z ＝555.2(M+H)。

实例201

4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(((2S，5R)-5- 甲基吗啉-2-基)甲氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐

步骤1：(2S，5R)-2-(((3-氰基-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基) 吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)-5-甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯的制备。在50℃下，搅拌6-羟基-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基) 吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈2,2，2-三氟乙酸盐(中间物P24；15mg，0.0340mmol)、 (2S，5R)-2-(羟甲基)-5-甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯(12.6mg，0.0408mmol)和K₂CO_3(s) (4.70mg，0.0340mmol)于DMF(1mL)中的混合物1天。在冷却到环境温度之后，将反应混合物直接负载到用己烷平衡的急骤柱上，且用梯度0-100％ DCM/己烷，随后0-20％MeOH/DCM洗脱，得到标题化合物(8mg，36％产率)。 MS(apci)m/z＝656.2(M+H)。

步骤2：4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(((2S， 5R)-5-甲基吗啉-2-基)甲氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐的制备。(2S，5R)-2-(((3-氰基-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基) 吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)-5-甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯(0.012 mmol)于DCM(611μL)中的溶液，用TFA(47μL，0.61mmol)处理。在环境温度下搅拌反应混合物10min，且随后真空浓缩。通过C18反相色谱 (5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到呈 2，2，2-三氟乙酸盐的标题化合物(3.3mg，40％产率)。MS(apci)m/z＝554.8 (M+H)。

实例202

4-(5-(3-氰基-6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯

4-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P3；400mg，0.951mmol)于DMF(8mL)中的溶液，依序用K₂CO_3(s) (4.70mg，0.0340mmol)和1-溴-2-甲氧基乙烷(264mg，1.90mmol)于DMF (2mL)中的溶液处理。在50℃下搅拌所得混合物19h。在冷却到环境温度之后，直接通过C18反相色谱(5-90％ACN/水作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，得到标题化合物(345mg，76％产率)。MS(apci)m/z＝479.2(M+H)。

实例203

6-(2-甲氧基乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐

4-(5-(3-氰基-6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1- 甲酸叔丁酯(实例202；343mg，0.717mmol)于DCM(2mL)中的溶液用含 5-6M HCl的iPrOH(4mL，20.0mmol)处理，且在环境温度下搅拌1小时。混合物用DCM和MeOH稀释，且真空浓缩，得到呈二盐酸盐的标题化合物(322 mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝379.2(M+H)。

实例204

6-(2-甲氧基乙氧基)-4-(6-(4-(3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\ [1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-(2-甲氧基乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P55；20.1mg，0.0531mmol)于DCM(1.0mL)中的溶液，依序用 DIEA(37.0μL，0.212mmol)和异戊酰氯(7.77μL，0.0637mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物16h。真空浓缩混合物，且通过C18反相色谱(5-95％水-ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到呈TFA盐的标题化合物。将TFA盐分配在4∶1 DCM∶iPrOH与饱和NaHCO_3(aq)之间。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(22.0mg，90％产率)。MS(apci)m/z＝463.2(M+H)。

实例205

(R)-4-(6-(4-(2-羟基-2-苯乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-甲氧基乙氧基) 吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-(2-甲氧基乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P54；20.8mg，0.0550mmol)于DCM(429μL)中的溶液，依序用D-(-)-杏仁酸(10mg，0.0660mmol)、HATU(25.1mg，0.0660mmol)和DIEA (38.3μL，0.220mmol)处理。在环境温度下搅拌16h之后，真空浓缩反应混合物。通过C18反相色谱(5-95％水-ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到呈TFA盐的标题化合物。将TFA盐分配在4∶1 DCM∶iPrOH与饱和NaHCO_3(aq)之间。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(18.6mg，66％产率)。MS(apci)m/z＝513.2(M+H)。¹H NMR (400MHz，DMSO-d⁶)δ：8.69-8.68(d，1H)，8.56(s，1H)，8.32-8.31(d，1H)， 7.78-7.76(dd，1H)，7.41-7.27(m，6H)，6.92-6.90(d，1H)，5.74-5.72(d，1H)， 5.48-5.46(d，1H)，4.42-4.22(m，2H)，3.70-3.68(m，2H)，3.65-3.20(m，11H)。

实例206

(R)-4-(6-(4-(2-羟基-3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例205所描述类似的程序，用(R)-2-羟基-3-甲基丁酸替换D-(-)- 杏仁酸，来制备和纯化标题化合物(21.1mg，81％产率)。MS(apci)m/z＝479.2 (M+H)。

实例207

(R)-4-(6-(4-(2-甲氧基-2-苯乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-(2-甲氧基乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(实例203；9.7mg，0.021mmol)于DCM(300μL)中的溶液，依序用(R)-2-甲氧基-2-苯乙酸(5.4mg，0.032mmol)、DIEA(15μL，0.086mmol) 和HATU(12mg，0.032mmol)处理。在环境温度下搅拌17h之后，直接通过二氧化硅色谱法(10-100％丙酮/己烷作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，得到不纯的标题化合物(15mg)。通过C18反相色谱法(5-95％水-ACN作为梯度洗脱液)来纯化这种材料，干净地得到标题化合物(7.0mg，62％产率)。MS(apci) m/z＝527.2(M+H)。

实例208

4-(5-(3-氰基-6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N- 异丁基哌嗪-1-甲酰胺

6-(2-甲氧基乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P54；24.7mg，0.0653mmol)于DMA(1.3mL)中的溶液，依序用 DIEA(114μL，0.653mmol)和氯甲酸4-硝基苯酯(15.8mg，0.0783mmol) 处理。在环境温度下搅拌混合物1小时之后，添加异丁胺(32.4μL，0.326mmol)。在80℃下搅拌所得混合物16h。在冷却到环境温度之后，所得混合物用EtOAc 稀释，且依次用水和盐水洗涤。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱(5-95％水-ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液) 来纯化残余物，得到呈TFA盐的标题化合物。将TFA盐分配在4∶1 DCM∶iPrOH 与饱和NaHCO_3(aq)之间。所得有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(10.2mg，33％产率)。MS(apci)m/z＝478.3(M+H)。

实例209

4-(6-(4-(2-异丙氧基乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐

6-(2-甲氧基乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P54；15mg，0.0396mmol)于DMF(400μL)中的溶液，依序用DIEA (27.7μL，0.159mmol)和2-(2-溴乙氧基)丙烷(20μL，0.119mmol)处理，且在50℃下搅拌3天。在冷却到环境温度之后，在通过C18反相色谱法(5-95％ ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)纯化之前，过滤反应混合物，用ACN(0.6 mL)冲洗，得到呈TFA盐的标题化合物(16.4mg，89％产率)。MS(apci)m/z＝ 465.2(M+H)。

实例210

6-(2-甲氧基乙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3- 基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

(6-(2-甲氧基乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P54；14.3mg，0.0378mmol)于DCE(400μL)中的溶液，依序用6- 甲氧基烟碱醛(10.4mg，0.0756mmol)和NaBH(AcO)₃(24mg，0.113mmol) 处理，且随后在环境温度下搅拌隔夜。混合物用水(5mL)稀释，且用DCM 萃取。经合并的有机萃取物用无水MgSO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。直接通过二氧化硅色谱法(0-100％丙酮/己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗产物，干净地得到标题化合物(15.6mg，83％产率)。MS(apci)m/z＝500.2(M+H)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：8.31(d，1H)，8.19(s，1H)，8.15(d，1H)，8.08(d，1H)，7.70(dd，1H)， 7.62(brd，1H)，7.15(d，1H)，6.75(m，2H)，4.18(m，2H)，3.95(s，3H)，3.80(m，2H)， 3.65(m，4H)，3.50(br s，2H)，3.47(s，3H)，2.56(m，4H)。

实例211

6-(2-甲氧基乙氧基)-4-(6-(4-(嘧啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\ [1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例210所描述类似的程序，用嘧啶-2-甲醛替换6-甲氧基烟碱醛，在处理中使用饱和NaHCO_3(aq)替代水，且在纯化中使用25-100％丙酮/己烷作为梯度洗脱液来制备和纯化标题化合物，干净地得到标题化合物(16.6mg，89％产率)。MS(apci)m/z＝471.2(M+H)。

实例212

6-(2-甲氧基乙氧基)-4-(6-(4-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3- 基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐

使用针对实例210所描述类似的程序，用四氢-2H-吡喃-4-甲醛替换6-甲氧基烟碱醛，在处理中使用1M Na₂CO_3(aq)替代水，且通过用5-95％ACN/水+0.1％ TFA作为梯度洗脱液的C18反相色谱法来纯化，来制备和纯化标题化合物，干净地得到呈2，2，2-三氟乙酸盐的标题化合物(17.9mg，89％产率)。MS(apci)m/z ＝477.2(M+H)。

实例213

6-(2-甲氧基乙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3- 基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

(6-(2-甲氧基乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(实例203；9.8mg，0.0217mmol)于DCE(300μL)中的溶液，依序用6-甲氧基吡啶甲醛(5.22μL，0.434mmol)和NaBH(AcO)₃(13.8mg，0.0651 mmol)处理，且随后在环境温度下搅拌16h。混合物用MeOH(0.5mL)淬灭，且直接通过二氧化硅色谱法(10-100％丙酮/己烷作为梯度洗脱液)来纯化，干净地得到标题化合物(10.2mg，94％产率)。MS(apci)m/z＝500.3(M+H)。

使用针对实例213的合成所描述类似的方法，用适当醛替换6-甲氧基烟碱醛，来制备表S中的化合物。通过LCMS监测反应完成，且相应地调整反应持续时间。在使用适当梯度洗脱液的色谱纯化之后，干净地分离出标题化合物。

表S

实例230

4-(5-(3-氰基-6-(2-异丙氧基乙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯2，2，2-三氟乙酸盐

4-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间物P3；200mg，0.476mmol)于DMF(5mL)中的溶液，依序用K₂CO_3(s) (131mg，0.951mmol)和2-(2-溴乙氧基)丙烷(16μL，0.951mmol)处理。在 50℃下搅拌所得混合物17h。在冷却到环境温度之后，通过

针筒过滤器过滤反应混合物，用ACN冲洗。直接通过C18反相色谱法(5-95ACN/水 +0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化滤液，得到呈2，2，2-三氟乙酸盐的标题化合物(75.5mg，26％产率)。MS(apci)m/z＝507.2(M+H)。

实例231

6-(2-异丙氧基乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3- 甲腈二盐酸盐

4-(5-(3-氰基-6-(2-异丙氧基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪 -1-甲酸叔丁酯2，2，2-三氟乙酸盐(实例230；74mg，0.119mmol)于DCM(2mL) 中的溶液，用含5-6M HCl的iPrOH(4mL，20.0mmol)处理，且在环境温度下搅拌1小时。真空浓缩混合物，与Et₂O(3×5mL)一起共沸，干净地得到呈二盐酸盐的标题化合物(54.7mg，96％产率)。MS(apci)m/z＝407.2(M+H)。

实例232

6-(2-异丙氧基乙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶- 3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-(2-异丙氧基乙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(实例231；11.5mg，0.0240mmol)于DCE(400μL)中的溶液，依序用6-甲氧基烟碱醛(6.58mg，0.0480mmol)和NaBH(AcO)₃(15.3mg，0.0720 mmol)处理。在环境温度下搅拌24h之后，引入额外6-甲氧基烟碱醛(5mg) 和NaBH(AcO)₃(10mg)。在环境温度下搅拌混合物39h，且随后用水稀释并用DCM萃取。经合并的有机萃取物用无水MgSO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。直接通过二氧化硅色谱法(25-100％丙酮/己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗产物，干净地得到标题化合物(9.6mg，76％产率)。MS(apci)m/z＝528.2(M+H)。

实例233

6-(2-异丙氧基乙氧基)-4-(6-(4-(嘧啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例232所描述类似的程序，用嘧啶-2-甲醛替换6-甲氧基烟碱醛，在处理中使用饱和NaHCO_3(aq)替代水，且在纯化中使用25-100％丙酮/己烷作为梯度洗脱液来制备和纯化标题化合物，干净地得到标题化合物(11.8mg，76％产率)。MS(apci)m/z＝499.2(M+H)。

实例234

6-(2-异丙氧基乙氧基)-4-(6-(4-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶- 3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例232所描述类似的程序，用四氢-2H-吡喃-4-甲醛替换6-甲氧基烟碱醛，在处理中使用饱和NaHCO_3(aq)替代水，且在纯化中使用25-100％丙酮/己烷作为梯度洗脱液来制备和纯化标题化合物，得到标题化合物(11.8mg， 75％产率)。MS(apci)m/z＝505.2(M+H)。

实例235

(R)-4-(5-(3-氰基-6-(2-甲氧基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基) 哌嗪-1-甲酸叔丁酯

在添加碘甲烷(47.04μL，0.752mmol)之前，(R)-4-(5-(3-氰基-6-(2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(实例116；120 mg，0.251mmol)于DMF(2.5mL)中的冷(0℃)溶液，用NaH_(s)(18.1mg， 0.752mmol)处理，且在0℃下搅拌25min。在环境温度下搅拌反应混合物90 min。所得混合物通过添加MeOH(0.5mL)来淬灭，且随后直接通过C18反相色谱法(5-90％ACN/水作为梯度洗脱液)来纯化，干净地得到标题化合物 (102.2mg，83％产率)。MS(apci)m/z＝493.3(M+H)。

实例236

(R)-6-(2-甲氧基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶- 3-甲腈二盐酸盐

(R)-4-(5-(3-氰基-6-(2-甲氧基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(实例235；74mg，0.119mmol)于DCM(2mL)中的溶液，用含5-6M HCl的iPrOH(4mL，20.0mmol)处理，且随后在环境温度下搅拌 2h。真空浓缩悬浮液，干净地得到呈二盐酸盐的标题化合物(86.7mg，91％产率)。MS(apci)m/z＝393.2(M+H)。

实例237

4-(6-(4-((R)-2-甲氧基-2-苯乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-((R)-2-甲氧基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

(R)-6-(2-甲氧基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(实例236；10.0mg，0.0215mmol)于DCM(300μL)中的溶液，依序用(R)-2-甲氧基-2-苯乙酸(5.36mg，0.0322mmol)、DIEA(15μL，0.086 mmol)和HATU(12.3mg，0.0322mmol)处理。在环境温度下搅拌17h之后，直接通过二氧化硅色谱法(10-100％丙酮/己烷作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(10.4mg，90％产率)。MS(apci)m/z＝541.2 (M+H)。

实例238

(R)-6-(2-甲氧基丙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

(R)-6-(2-甲氧基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(实例236；9.4mg，0.020mmol)于DCE(300μL)中的溶液，依序用6-甲氧基烟碱醛(5.5mg，0.040mmol)和NaBH(AcO)₃(13mg，0.061mmol) 处理，且随后在环境温度下搅拌16h。混合物用MeOH(500μL)淬灭，且直接通过二氧化硅色谱法(10-100％丙酮/己烷作为梯度洗脱液)来纯化，干净地得到标题化合物(9.3mg，90％产率)。MS(apci)m/z＝514.3(M+H)。

使用针对实例238的合成所描述类似的方法，用适当醛替换6-甲氧基烟碱醛，来制备表T中的化合物。通过LCMS监测反应完成，且相应地调整反应持续时间。在使用适当梯度洗脱液的色谱纯化之后，干净地分离出标题化合物。

表T

实例242

4-(6-(4-((R)-2-甲氧基-2-苯乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-((S)-2-甲氧基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

(S)-6-(2-甲氧基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P56；10.4mg，0.0223mmol)于DCM(300μL)中的溶液，依序用(R)-2-甲氧基-2-苯乙酸(5.57mg，0.0335mmol)、DIEA(15.6μL， 0.0894mmol)和HATU(12.7mg，0.0335mmol)处理。在环境温度下搅拌17 h之后，直接通过二氧化硅色谱法(10-100％丙酮/己烷作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，得到不纯的标题化合物。不纯的材料经受第二C18反相色谱法 (5-95％ACN/水作为梯度洗脱液)，干净地得到标题化合物(1.6mg，13％产率)。 MS(apci)m/z＝541.3(M+H)。

实例243

(S)-6-(2-甲氧基丙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

(S)-6-(2-甲氧基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P56；21mg，0.036mmol)于DCE(400μL)中的溶液，依序用6-甲氧基烟碱醛(9.9mg，0.072mmol)和NaBH(AcO)₃(23mg，0.11mmol) 处理，且随后在环境温度下搅拌18h。直接通过二氧化硅色谱法(0-100％丙酮 /己烷作为梯度洗脱液)来纯化混合物，干净地得到标题化合物(8.5mg，46％产率)。MS(apci)m/z＝514.2(M+H)。

实例244

(S)-6-(2-甲氧基丙氧基)-4-(6-(4-(吡啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例243所描述类似的程序，用吡啶甲醛替换6-甲氧基烟碱醛，来制备和纯化标题化合物，干净地得到标题化合物(8.2mg，47％产率)。MS (apci)m/z＝484.2(M+H)。

实例245

4-(5-(3-氰基-6-(2-甲氧基-2-甲基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2- 基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯

在引入碘甲烷(25.9μL，0.414mmol)之前，4-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(实例152；68 mg，0.138mmol)于DMF(1.4mL)中的冷(0℃)溶液，用NaH_(s)(9.94mg， 0.414mmol)处理，且在0℃下搅拌25min。在环境温度下搅拌反应混合物90 min。所得混合物通过添加MeOH(500μL)来淬灭，且随后直接通过C18反相色谱法(5-90％ACN/水作为梯度洗脱液)来纯化，干净地得到标题化合物(52.5 mg，75％产率)。MS(apci)m/z＝507.3(M+H)。

实例246

6-(2-甲氧基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐

4-(5-(3-氰基-6-(2-甲氧基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基) 哌嗪-1-甲酸叔丁酯(实例245；67mg，0.132mmol)于DCM(2mL)中的溶液，用含5-6M HCl的iPrOH(4mL，20.0mmol)处理，且随后在环境温度下搅拌2h。真空浓缩溶液，干净地得到呈二盐酸盐的标题化合物(63.5mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝407.2(M+H)。

实例247

(R)-6-(2-甲氧基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(4-(2-甲氧基-2-苯乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-(2-甲氧基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3- 甲腈二盐酸盐(实例246；10.4mg，0.0217mmol)于DCM(300μL)中的悬浮液，依序用(R)-2-甲氧基-2-苯乙酸(5.41mg，0.0325mmol)、DIEA(15.1μL， 0.0868mmol)和HATU(12.4mg，0.0325mmol)处理。在环境温度下搅拌17 h之后，直接通过二氧化硅色谱法(0-100％丙酮/己烷梯度洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(11.9mg，99％产率)。MS(apci)m/z＝555.3 (M+H)。

实例248

3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2- 基)-N-苯基-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚烷-6-甲酰胺2，2，2-三氟乙酸盐

在环境温度下，向4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基 -2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43，0.030g，0.063mmol)于DMA(0.75mL)中的悬浮液中，添加三乙胺(0.044mL，0.31mmol)，随后添加异氰酸基苯(9mg，0.075mmol)。在搅拌隔夜之后，将反应混合物分配在DCM和水之间。在相分离之后，水性层用DCM萃取。合并有机萃取物，经硫酸钠脱水，过滤且浓缩。使用Gilson制备型HPLC(5-95％ACN/水+ 0.1％TFA)来纯化粗材料，得到呈白色固体状的标题化合物(0.019g，48.0％产率)。¹H NMR(CDCl₃)δ8.41(m，1H)，8.20-8.22(m，2H)，8.00-8.03(m，1H)， 7.39-7.43(m，2H)，7.18-7.22(m，3H)，6.99-7.03(m，2H)，4.56(m，2H)，4.39-4.42 (m，2H)，3.86(s，2H)，3.69-3.75(m，2H)，2.80-2.84(m，1H)，1.60-1.62(m，1H)，1.38 (s，6H)。MS(apci)m/z＝524.2(M+H)。

实例249

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-(喹啉-6-基甲基)-3，6-二氮杂双环\ [3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在环境温度下，向4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基 -2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43，25mg，0.0524 mmol)于1，2-二氯乙烷(0.3mL)中的悬浮液中，添加喹啉-6-甲醛(8.23mg， 0.0524mmol)，随后添加三乙酰基硼氢化钠(33.3mg，0.157mmol)。在搅拌4 小时之后，通过硅胶色谱(使用0-100％DCM/己烷，且随后0-100％[20％MeOH +2％NH₄OH]/DCM作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，得到标题化合物(14.8 mg，51.8％产率)。¹H NMR(CD₃OD)δ8.76(m，1H)，8.33(m，1H)，8.27(d，1H)， 8.22-8.25(m，2H)，7.96-7.99(d，1H)，7.82(m，1H)，7.75-7.80(m，2H)，7.43-7.47(m， 4H)，7.24(d，1H)，6.77-6.80(d，1H)，3.83-3.92(m，8H)，3.59-3.64(d，2H)，2.71-2.78 (m，1H)，1.69-1.72(d，1H)，1.33(s，6H)。MS(apci)m/z＝546.3(M+H)。

实例250

4-(6-(6-(5-氟-6-甲氧基烟酰基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在环境温度下，向4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基 -2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43，25mg，0.05237mmol)于DCM(1mL)中的悬浮液中，添加5-氟-6-甲氧基烟酸(11.7mg，0.069 mmol)、HATU(23.9mg，0.063mmol)和DIEA(36μL，0.21mmol)。在搅拌两小时之后，真空浓缩反应混合物，且使用硅胶色谱(0-20％EtOAc/MeOH作为梯度洗脱液)来纯化，得到标题化合物(15.4mg，52.8％产率)。¹H NMR (CD₃OD)δ8.39-8.41(d，1H)，8.28-8.30(m，2H)，8.25-8.27(d，1H)，7.71-7.77(m， 2H)，7.25-7.27(d，1H)，6.73-6.76(d，1H)，4.86-4.95(br.m，1H)，4.66-4.75(br.m，1H)， 4.18-4.29(br.m，1H)，3.60-3.77(m，3H)，2.91-2.99(m，1H)，1.73-1.79(d，1H)，1.32 (s，6H)。MS(apci)m/z＝558.2(M+H)。

实例251

4-(6-(6-(仲丁基磺酰基)-3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2- 羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在环境温度下，向4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基 -2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43，0.0278g，0.0582mmol)于DCM(1.0mL)中的悬浮液中，添加三乙胺(0.032mL，0.233mmol)，随后添加仲丁基磺酰氯(10.0mg，0.064mmol)。在搅拌一小时之后，反应混合物用额外三乙胺(15.8μL，0.116mmol)和仲丁基磺酰氯(20.0mg，0.128mmol) 处理，且在环境温度下额外搅拌17h。在搅拌隔夜之后，真空浓缩反应混合物，且使用Gilson制备型HPLC(5-95％水/ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化。随后，合并所需级分，且将其分配在4∶1 DCM：IPA与饱和NaHCO₃水溶液之间。合并有机萃取物，且经硫酸钠脱水，过滤且浓缩，得到呈白色固体状的标题化合物(7.5mg，23.3％产率)。MS(apci)m/z＝525.2(M+H)。

实例252

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-(6-甲氧基烟酰基)-3，6-二氮杂双环\ [3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并\[1，5-a]吡啶-3-甲腈

向4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基) 吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43，0.6g，1.26mmol)于DCM(25 mL)中的悬浮液中，添加2-甲氧基-5-吡啶甲酸(0.231g，1.51mmol)、HATU (0.573g，1.51mmol)和DIEA(0.876mL，5.03mmol)。在环境温度下搅拌反应混合物隔夜，且随后添加额外DIEA(0.220mL，1.26mmol)。在环境温度下搅拌反应混合物隔夜。将反应混合物分配在DCM(40mL)与饱和氯化铵水溶液(40mL)之间。在相分离之后，用DCM(3×25mL)萃取水层。合并有机萃取物，经硫酸钠脱水，过滤且浓缩。使用硅胶色谱(使用0-10％EtOAc/MeOH 作为梯度洗脱液)来纯化粗材料。将所分离产物溶解于DCM(10mL)中，用活性炭处理，通过

过滤且用DCM冲洗。真空浓缩滤液，得到标题产物。 (470mg，69.3％产率)¹H NMR(DMSO-d⁶)δ8.60-8.65(d，1H)，8.53(s，1H)， 8.49-8.51(m，1H)，8.28-8.31(d，1H)，7.91-7.95(m，1H)，7.73-7.78(m，1H)， 7.23-7.25(m，1H)，6.81-6.85(m，1H)，6.65-6.69(d，1H)，4.84-4.94(br.m，1H)，4.66 (s，1H)，4.51-4.63(br.m，1H)，4.04-4.20(br.m，1H)，3.88(s，3H)，3.83(s，2H)， 3.60-3.63(m，2H)，3.42-3.53(br.m，1H)，2.75-2.85(m，1H)，1.63-1.69(m，1H)，1.18 (s，6H)。MS(apci)m/z＝540.2(M+H)。

实例253

4-(6-(4-(D-亮氨酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：(R)-(1-(4-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)-4-甲基-1-氧代戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯的制备。6-乙氧基-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)(中间物P74；64 mg，0.184mmol)于DMF(4mL)中的溶液，依序用HATU(138mg，0.36mmol)、 (叔丁氧基羰基)-D-亮氨酸(42.5mg，0.184mmol)和DIEA(192μL，1.10mmol) 处理。在环境温度下搅拌反应混合物隔夜，且随后直接通过C18反相色谱法(使用5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化。收集含有所需产物的级分，用饱和NaHCO₃处理，且用含20％IPA的DCM萃取。有机物用MgSO₄脱水，过滤且浓缩，干净地得到标题化合物(39mg，38％产率)。MS(apci)m/z ＝562.3(M+H)。

步骤2：4-(6-(4-(D-亮氨酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并\[1，5-a] 吡啶-3-甲腈的制备。(R)-(1-(4-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶 -2-基)哌嗪-1-基)-4-甲基-1-氧代戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(步骤1；39mg，0.069 mmol)于DCM(4mL)中的溶液，用TFA(2mL)处理，且在环境温度下搅拌30min，随后真空浓缩。通过C18反相色谱(使用5-95％ACN/水+0.1％TFA 作为梯度洗脱液)来纯化残余物。收集含有所需产物的级分，用饱和NaHCO₃处理，且用含20％IPA的DCM萃取。有机层用MgSO₄脱水，过滤且浓缩，干净地得到标题化合物(25mg，78％产率)。MS(apci)m/z＝462.3(M+H)。

实例254

(R)-4-(6-(4-(2-氨基-2-(3-氯苯基)乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：((R)-(1-(3-氯苯基)-2-(4-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基) 吡啶-2-基)哌嗪-1-基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯的制备。6-乙氧基-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P73；261.9mg，0.7517mmol) 于DMF(7.5mL)中的溶液，用2(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(3-氯苯基)乙酸(429.6mg，1.503mmol)和HATU(571.6mg，1.503mmol)处理，随后在环境温度下搅拌2h。所得混合物用EtOAc稀释，随后用水(3×)和盐水(1×) 萃取。有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物，其无需进一步纯化即直接用于步骤2中(呈定量产率)。MS(apci)m/z＝616.3 (M+H)。

步骤2：(R)-4-(6-(4-(2-氨基-2-(3-氯苯基)乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。将粗(R)-(1-(3-氯苯基)-2-(4-(5-(3-氰基-6- 乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(步骤1；0.7517mmol)溶解于1∶1 DCM∶TFA(7.5mL)中，在环境温度下搅拌30min，且随后真空浓缩。通过C18反相色谱(使用5-90％水-ACN+0.1％ TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物。含有所期望化合物的级分用4∶1 DCM∶iPrOH稀释，且用饱和NaHCO_3(aq)萃取。有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。残余物需要通过二氧化硅色谱法(使用1-30％DCM-MeOH+ 2％NH₄OH作为梯度洗脱液)来进一步纯化，干净地得到标题化合物(110.4mg， 28％产率)。MS(apci)m/z＝516.2(M+H)。

实例255

4-(6-(4-(2-氨基-2-(4-氟苯基)乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：(2-(4-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1- 基)-1-(4-氟苯基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯的制备。6-乙氧基-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P73；53mg，0.15mmol)、 (R)-N-(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(4-氟苯基)乙酸(41mg，0.15mmol)和 HATU(174mg，0.46mmol)于DCM(761μL)中的混合物，用DIEA(106μL， 0.61mmol)处理。在环境温度下搅拌反应混合物隔夜，且随后过滤。真空浓缩滤液，且通过二氧化硅色谱法(使用0-10％DCM/MeOH作为梯度洗脱液)来纯化，得到标题化合物(在这些条件下出现外消旋化)(87mg，95％产率)。 MS(apci)m/z＝500.2(M+H)。

步骤2：4-(6-(4-(2-氨基-2-(4-氟苯基)乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。(2-(4-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4- 基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)-1-(4-氟苯基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(步骤1；87mg，0.15mmol)于DCM(1.45mL)中的溶液，用TFA(112μL)处理。在环境温度下搅拌所得混合物隔夜，且随后真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用 0-10％CHCl₃/MeOH作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物。合并含有所期望化合物的级分，且真空浓缩。残余物用DCM/己烷湿磨，随后真空浓缩，干净地得到呈定量产率的标题化合物。MS(apci)m/z＝500.2(M+H)。

实例256

4-(6-(4-(3-氨基-2-(4-氟苯基)丙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：(3-(4-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1- 基)-2-(4-氟苯基)-3-侧氧基丙基)氨基甲酸叔丁酯的制备。6-乙氧基-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P73；42mg，0.12mmol)、3-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-2-(4-氟苯基)丙酸(34mg，0.12mmol)和HATU(138mg， 0.36mmol)于DCM(603μL)中的混合物，用DIEA(42μL，0.24mmol)处理。在环境温度下搅拌反应混合物1h，且随后直接通过二氧化硅色谱法(使用 0-10％CHCl₃/MeOH+0-1％NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化。合并含有所期望化合物的级分，真空浓缩，且随后用己烷湿磨，干净地得到标题化合物(42mg， 57％产率)。MS(apci)m/z＝514.3(M-Boc)。

步骤2：4-(6-(4-(3-氨基-2-(4-氟苯基)丙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。(3-(4-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4- 基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)-2-(4-氟苯基)-3-侧氧基丙基)氨基甲酸叔丁酯(步骤1；42mg，0.068mmol)于DCM(684μL)中的溶液，用TFA(53μL)处理，且在环境温度下搅拌隔夜。直接通过二氧化硅色谱法(使用0-10％CHCl₃/MeOH+ 0-1％NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化所得混合物。合并含有所期望化合物的级分，真空浓缩，随后用己烷湿磨，干净地得到标题化合物(35，定量产率)。 MS(apci)m/z＝514.2(M+H)。

实例257

3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯

在90℃下，搅拌4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P42；1.70g，8.55mmol)、3，6-二氮杂-双环[3.1.1]庚烷-6- 甲酸叔丁酯(1.70g，8.55mmol)和K₂CO_3(s)(7.88g，57.0mmol)于DMSO (7mL)中的混合物12h。所得浓稠浆液用额外DMSO(2mL)稀释，且在90 ℃下搅拌12h。将混合物冷却到环境温度，且用水(100mL)稀释。水性混合物用DCM洗涤。经合并的有机萃取物用无水MgSO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过硅胶色谱法(30-80％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液***)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(2.87g，100％产率)。MS(apci)m/z＝505.2(M+H)。

实例258

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐

3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(实例257；3.05g，6.04mmol) 于DCM(20mL)中的溶液，用含4N HCl的二恶烷(15.1mL，60.4mmol) 处理。在环境温度下搅拌所得混合物12h，且随后真空浓缩。在真空浓缩之前，其用DCM和甲苯稀释，且随后超声处理，得到呈二盐酸盐的标题化合物(2.44 g，定量产率)。MS(apci)m/z＝405.2(M+H)。

实例259

4-(6-(6-(2-氨基-2-(4-氟苯基)乙酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：(2-(3-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基)-1-(4-氟苯基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯的制备。

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶 -3-甲腈(中间物P75；30mg，0.083mmol)、(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(4- 氟苯基)乙酸(22mg，0.083mmol)和HATU(95mg，0.25mmol)于DCM(416 μL)中的混合物，用DIEA(58μL，0.33mmol)处理，且在环境温度下搅拌1 h。真空浓缩反应混合物，用水稀释且真空过滤。将所收集固体溶解于DCM中，用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，干净地得到标题化合物(在这些条件下出现外消旋化)(15mg，29％产率)。MS(apci)m/z＝512.2(M+H)。

步骤2：4-(6-(6-(2-氨基-2-(4-氟苯基)乙酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基) 吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。(2-(3-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基)-1-(4-氟苯基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(步骤1；15mg，0.025mmol)于DCM(245μL) 中的溶液，用TFA(19μL)处理，且在环境温度下搅拌隔夜。直接通过二氧化硅色谱法(使用0-10％CHCl₃/MeOH+0-1％NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化所得混合物。合并含有所期望化合物的级分，且真空浓缩。残余物用DCM/己烷湿磨，随后真空浓缩，干净地得到标题化合物(2mg，16％产率)。MS(apci) m/z＝512.2(M+H)。

实例260

4-(6-(6-(3-氨基-2-(4-氟苯基)丙酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用实例259中所描述类似的两个步骤程序，用3-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(4-氟苯基)丙酸替换(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(4-氟苯基)乙酸，和在步骤1中使用较少DIEA(2当量)，来制备和纯化标题化合物。在最终步骤中用己烷湿磨，得到标题化合物(34mg，69％总产率)。MS(apci)m/z＝526.2(M+H)。

实例261

(R)-4-(6-(4-(2-(3-氯苯基)-2-(二甲氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

(R)-4-(6-(4-(2-氨基-2-(3-氯苯基)乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例254；56.8mg，0.110mmol)于1∶1 DCM∶MeOH (1.1mL)中的混合物，依序用甲醛(82.7μL，1.10mmol)和NaBH(AcO)₃(117 mg，0.550mmol)处理。在环境温度下搅拌隔夜之后，真空浓缩反应混合物。通过C18反相色谱(使用5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物。合并含有所期望化合物的级分，且用4∶1 DCM∶iPrOH和饱和NaHCO_3(aq)萃取。有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，干净地得到标题化合物(47.8mg，80％产率)。MS(apci)m/z＝544.3(M+H)。

使用针对实例261的合成所描述类似的方法，用表中列出的适当胺实例替换(R)-4-(6-(4-(2-氨基-2-(3-氯苯基)乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈，来制备表U中的化合物。通过LCMS来监测反应完成，同样相应地调整反应持续时间(和需要补充剂的量)。在使用适当梯度洗脱液的色谱纯化之后，分离出标题化合物。其中注意(＊)-，且当色谱条件并不引起分离出标题化合物的TFA盐时，省去用于实例261中在色谱纯化之后的二级碱性处理。

表U

*使用C18反相色谱法(5-95％ACN/水+0.1％TFA)，随后第二二氧化硅色谱法(2-5％ MeOH/DCM)，来完成纯化。

实例267

6-乙氧基-4-(6-(6-(6-羟基烟酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基) 吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在压力容器中，将6-乙氧基-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P6；0.266g，0.941mmol)、(3，6-二氮杂双环\[3.1.1]庚-6-基)(6-羟基吡啶-3-基)甲酮双(2，2，2-三氟乙酸盐)(中间物R；0.172g，0.385mmol)和TEA(2.19mL， 15.7mmol)的混合物，悬浮于DMSO(5mL)中。密封容器，且随后在90℃ 下搅拌反应混合物2h。引入额外TEA(2mL)，且在密封容器中，在100℃下，搅拌反应物5d。在冷却到环境温度之后，所得混合物用DCM稀释，且用饱和 NH₄Cl_(aq)淬灭。用DCM(3×)萃取已淬灭混合物。经合并的有机萃取物用无水 Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱法(使用5-95％ACN/水+ 0.1％TFA作为梯度洗脱液)，且再次通过二氧化硅色谱法(使用0-25％((9∶1 MeOH/NH₄OH)/DCM))作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(117mg，63％产率)。MS(apci)m/z＝482.2(M+H)。

实例268∶6-乙氧基-4-(6-(6-(6-丙氧基烟酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2,2-三氟乙酸盐；和实例269∶6-乙氧基-4-(6-(6-(6-氧代-1-丙基-1，6-二氢吡啶-3-羰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基) 吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐

6-乙氧基-4-(6-(6-(6-羟基烟酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基) 吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例267；8mg，0.017mmol)于DMSO(0.4mL) 中的溶液，用NaH(0.6mg，0.025mmol)处理，且在环境温度下搅拌20min。所得悬浮液用1-碘丙烷(17μL，0.17mmol)处理，且在85℃下搅拌隔夜。在冷却到环境温度之后，反应混合物用DCM稀释，且用饱和NH₄Cl_(aq)淬灭。双相混合物用DCM(3×)萃取。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱法(使用5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，独立地得到表示互变异构起始物质的偶联产物的标题化合物。实例268：6-乙氧基-4-(6-(6-(6-丙氧基烟酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1] 庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐(1.2mg，14％产率)。LCMS(apci)：Tr＝2.01min，m/z＝524.2(M+H)。实例269：6-乙氧基 -4-(6-(6-(6-氧代-1-丙基-1，6-二氢吡啶-3-羰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐(4.8mg，55％产率)。LCMS (apci)：Tr＝1.73min，m/z＝524.2(M+H)。

实例270

6-乙氧基-4-(6-(6-(6-(2-甲氧基乙氧基)烟碱酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3- 基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-乙氧基-4-(6-(6-(6-羟基烟酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基) 吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例267；18mg，0.037mmol)于DMSO(0.4mL) 中的溶液，用NaH(1.8mg，0.075mmol)处理，且在环境温度下搅拌20min。所得悬浮液用1-溴-2-甲氧基乙烷(40μL，0.037mmol)处理，且在85℃下搅拌隔夜。在冷却到环境温度之后，反应混合物用DCM稀释，且用饱和NH₄Cl_(aq)淬灭。双相混合物用DCM(3×)萃取。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅相色谱法(使用0-30％MeOH/EtOAc作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(2.5mg，12％产率)。 MS(apci)m/z＝540.2(M+H)。

实例271

6-乙氧基-4-(6-((3S，5R)-4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，5-二甲基哌嗪-1-基) 吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在80℃下，搅拌6-乙氧基-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P6；14.6mg，0.0518)和(2S，6R)-1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-2，6-二甲基哌嗪双(2，2，2-三氟乙酸盐)(中间物R17；36mg，0.078mmol)和K₂CO_3(s)(71.6 mg，0.518mmol)于DMSO(104μL)中的混合物隔夜。将反应混合物冷却到环境温度，随后直接通过C18反相色谱法(使用5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)，且再次通过二氧化硅色谱法(使用0-20％MeOH/DCM+2％ NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化，干净地得到标题化合物(5.45mg，21％产率)。 MS(apci)m/z＝498.3(M+H)。

实例272

4-(6-(4-(D-亮氨酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：(R)-(1-(4-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4- 基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)-4-甲基-1-氧代戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯的制备。6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双TFA盐(81mg，0.206mmol)于DCM(6mL)中的溶液，依序用(叔丁氧基羰基)-D- 亮氨酸(47.7mg，0.206mmol)、HATU(94.2mg，0.248mmol)和DIEA(216 μL，1.24mmol)处理，随后在环境温度下搅拌3h。直接通过C18反相色谱(使用5-95％水∶ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化所得混合物。收集含有所需产物的级分，用饱和NaHCO₃处理，且用含20％IPA的DCM萃取。有机物用MgSO₄脱水，过滤且浓缩，得到呈定量产率的标题化合物，其直接用于下一步骤中。MS(apci)m/z＝606.4(M+H)。

步骤2：4-(6-(4-(D-亮氨酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基) 吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。(R)-(1-(4-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基) 吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)-4-甲基-1-氧代戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(步骤1，采用125mg，0.21mmol)于DCM(4mL)中的溶液，用TFA (2mL)处理，且在环境温度下搅拌30min。在真空浓缩之后，通过C18反相色谱法(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物。收集含有所需产物的级分，用饱和NaHCO₃处理，且用含20％IPA的DCM萃取。有机物用MgSO₄脱水，过滤且浓缩，干净地得到标题化合物(34mg，33％产率，经过2个步骤)。MS(apci)m/z＝506.3(M+H)。

实例273

4-(6-(4-(二甲基-D-亮氨酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基) 吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(4-(D-亮氨酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈(34mg，0.067mmol)和甲醛(50.1μL 0.672mmol)于DCM (672μL)中的混合物，用NaBH(AcO)₃(71.3mg，0.336mmol)处理。在环境温度下搅拌隔夜之后，真空浓缩反应混合物。通过C18反相色谱(5-95％ACN/ 水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物。收集含有所需产物的级分，用饱和NaHCO₃处理，且用含20％IPA的DCM萃取。有机物用MgSO₄脱水，过滤且浓缩，干净地得到标题化合物(31mg，86％产率)。MS(apci)m/z＝534.3(M+H)。

实例274

(S)-4-(6-(4-(2-(氨甲基)-4-甲基戊酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：(S)-(2-(4-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4- 基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羰基)-4-甲基戊基)氨基甲酸叔丁酯的制备。6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P39；52mg，0.112mmol)于DMF(4mL)中的溶液，依序用HATU(51.0mg， 0.151mmol)、(S)-2-(((叔丁氧基羰基)氨基)甲基)-4-甲基戊酸(30.2mg，0.123 mmol)和DIEA(77.9μL，0.447)处理，随后在环境温度下搅拌隔夜。直接通过C18反相色谱(使用5-95％水∶ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化所得混合物。收集含有所需产物的级分，用饱和NaHCO₃处理，且用含20％IPA 的DCM萃取。有机物用MgSO₄脱水，过滤且浓缩，到标题化合物(51mg， 74％产率)。MS(apci)m/z＝620.4(M+H)。

步骤2：(S)-4-(6-(4-(2-(氨甲基)-4-甲基戊酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。(S)-(2-(4-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羰基)-4-甲基戊基)氨基甲酸叔丁酯(步骤1，51mg，0.082mmol)于DCM(4mL)中的溶液，用TFA(2mL)处理，且在环境温度下搅拌30min。在真空浓缩之后，通过 C18反相色谱法(使用5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物。收集含有所需产物的级分，用饱和NaHCO₃处理，且用含20％IPA 的DCM萃取。有机物用MgSO₄脱水，过滤且浓缩，干净地得到标题化合物(35 mg，82％产率)。MS(apci)m/z＝520.3(M+H)。

实例275

(S)-4-(6-(4-(2-((二甲氨基)甲基)-4-甲基戊酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

(S)-4-(6-(4-(2-(氨甲基)-4-甲基戊酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(33mg，0.0635mmol)和甲醛(47.3μL，0.635mmol)于DCM(635μL)中的混合物，用NaBH(AcO)₃(67.3mg，0.318 mmol)处理。在环境温度下搅拌3h之后，真空浓缩反应混合物。通过C18反相色谱(使用5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物。收集含有所需产物的级分，用饱和NaHCO₃处理，且用含20％IPA的DCM萃取。有机物用MgSO₄脱水，过滤且浓缩，干净地得到标题化合物(13mg，37％产率)。MS(apci)m/z＝548.3(M+H)。

实例276

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(4-(6-甲氧基烟酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P40；25mg，0.064mmol)于DCM(1.3mL)中的混合物，依序用2-甲氧基-5-吡啶甲酸(11.71mg，0.07644mmol)、HATU(29.07mg，0.07644 mmol)和DIEA(44.38μL，0.2548mmol)处理，随后在环境温度下搅拌5h。直接通过二氧化硅色谱法(使用40-100％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化所得混合物，得到半纯材料。半纯材料经受第二二氧化硅色谱法(使用0-100％ DCM/己烷，随后0-60％(2％NH₄OH/20％MeOH/78％DCM)/DCM作为梯度洗脱液)，干净地得到标题化合物(14.91mg，44％产率)。MS(apci)m/z＝528.2 (M+H)。

实例277

4-(6-(4-(2-氨基-2-(4-氟苯基)乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：(2-(4-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)-1-(4-氟苯基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯的制备。6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐 (中间物P39；50mg，0.12mmol)、(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(4-氟苯基)乙酸(31mg，0.12mmol)和HATU(133mg，0.35mmol)于DCM(583μL) 中的混合物，用DIEA(122μL，0.70mmol)处理。在环境温度下搅拌反应混合物1h。真空过滤所得悬浮液。直接通过C18反相色谱法(5-95％ACN/水+0.1％ TFA)来纯化滤液。合并含有所需产物的级分，用4∶1 DCM∶iPrOH稀释，用饱和NaHCO_3(aq)和盐水洗涤。随后有机层用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(61mg，81％产率)。MS(apci)m/z＝644.4(M+H)。

步骤2：4-(6-(4-(2-氨基-2-(4-氟苯基)乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基 -2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。(2-(4-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)-1-(4-氟苯基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(步骤1；61mg，0.095mmol)于DCM(948μL)中的溶液，用TFA(73μL)处理，且在环境温度下搅拌隔夜。直接通过C18反相色谱(使用5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物。合并含有所需产物的级分，随后分配在4∶1 DCM∶iPrOH与饱和NaHCO_3(aq)之间。有机萃取物用盐水洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。残余物用DCM/己烷湿磨，且随后真空浓缩，干净地得到标题化合物(3.4mg，7％产率)。MS(apci)m/z＝544.2(M+H)。

实例278

4-(6-(4-(2-(二甲氨基)-2-(4-氟苯基)乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基 -2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(4-(2-氨基-2-(4-氟苯基)乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例277；30mg，0.055mmol)于DCM(552 μL)中的混合物，依序用甲醛(16.4μL，0.221mmol)和NaBH(AcO)₃(58.5mg， 0.276mmol)处理。在环境温度下搅拌1h后，过滤反应混合物。真空浓缩所得滤液，且直接通过C18反相色谱法(使用5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物。合并含有所期望化合物的级分，随后分配在4∶1 DCM∶iPrOH与饱和NaHCO_3(aq)之间。有机萃取物用盐水洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。残余物用DCM/己烷湿磨，且随后真空浓缩，干净地得到标题化合物(13.7mg，43％产率)。MS(apci)m/z＝572.3(M+H)。

实例279

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(4-(异丁基磺酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈盐酸盐(中间物P39；24.1mg，0.0562mmol)于DCM(500μL)中的溶液，依序用TEA(38.1μL，0.281mmol)和异丁烷磺酰氯(8.07μL，0.0618mmol) 处理。在环境温度下搅拌所得混合物隔夜，且随后真空浓缩。通过C18反相色谱(使用5-95％水：ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物。合并含有所期望化合物的级分，且随后分配在4∶1 DCM∶iPrOH与饱和NaHCO_3(aq)之间。用4∶1 DCM∶iPrOH(2×)反萃取水性萃取物。经合并的有机萃取物用无水 Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，干净地得到标题化合物(14.3mg，50％产率)。 MS(apci)m/z＝513.2(M+H)。

实例280

4-(6-(6-((6-乙基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；20mg，0.042mmol)于DCM (0.5mL)中的混合物，依序用6-乙基烟碱醛(11.33mg，0.08379mmol)和 NaBH(AcO)₃(26.64mg，0.1257)处理。在环境温度下搅拌3h之后，直接通过二氧化硅色谱法(使用0-20％DCM/MeOH+2％NH₄OH作为梯度洗脱液) 来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(18.03mg，82％产率)。MS(apci) m/z＝524.2(M+H)。

使用针对实例280的制备所描述类似的方法，用适当醛替换6-乙基烟碱醛，和DCM/DCE作为反应溶剂，来制备表V中的化合物。通过LCMS来监测反应完成。同样，相应地调整反应持续时间和需要补充剂的量。其中注意(＊)，在添加NaBH(AcO)₃之后，添加几滴冰醋酸。在使用适当梯度洗脱液的色谱纯化之后，分离出标题化合物。当色谱条件引起分离出标题化合物的TFA盐时，色谱纯化后，碱性处理所述盐。碱性处理条件涉及将TFA盐分配在DCM或1∶1 DCM：MeOH与饱和NaHCO_3(aq)之间(且必要时，额外用水和/或盐水萃取)，随后分离有机萃取物，用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到呈游离碱形式的标题化合物。

表V

实例298

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基哒嗪-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(6-((6-氯哒嗪-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例293；56.2mg，0.106mmol)于MeOH(0.5mL)中的混合物，用30wt％NaOMe(98.3μL，0.529mmol) 处理。在60℃下搅拌所得混合物5h。在冷却到环境温度之后，真空浓缩反应混合物。直接通过二氧化硅色谱法(使用50-100％EtOAc/己烷，随后0-20％ MeOH/EtOAc作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到标题化合物(49.38 mg，89％产率)。MS(apci)m/z＝527.2(M+H)。

实例299

4-(6-(6-((2-(二甲氨基)噻唑-5-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶 -3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；52.8mg，0.111mmol)和2-(二甲氨基)噻唑-5-甲醛(86.38mg，0.5530mmol)于DCE(0.5mL)中的溶液，用NaBH(AcO)₃(140.6mg，0.6636mmol)处理。在环境温度下搅拌7h之后，反应混合物用DCM稀释，用水萃取，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用0-50％DCM/MeOH作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到标题化合物(54.2mg，90％产率)。MS(apci)m/z＝545.2(M+H)。

使用针对实例299的制备所描述类似的方法，用适当醛替换2-(二甲氨基) 噻唑-5-甲醛，来制备表W中的化合物。通过LCMS来监测反应完成。同样，相应地调整反应持续时间和需要补充剂的量。其中注意(＊)，省去在色谱法之前的水溶液处理。在使用适当梯度洗脱液的色谱纯化之后，分离出标题化合物。当色谱条件引起分离出标题化合物的TFA盐时，色谱纯化后，进行碱性处理。碱性处理条件涉及将TFA盐溶解于含有TEA的DCM(1mL)中，用水萃取，随后分离有机萃取物且真空浓缩，得到呈游离碱形式的标题化合物。

表W

实例312

4-(6-(6-((4-环丙基噻唑-2-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；52mg，0.109mmol)和4-环丙基-噻唑-2-甲醛(17.5μL，0.114mmol)于DCE(1.09mL)中的溶液，用 NaBH(AcO)₃(69.3mg，0.327mmol)处理。在环境温度下搅拌隔夜之后，反应混合物用DCE(1mL)稀释，且用额外4-环丙基-噻唑-2-甲醛(67μL，0.43mmol) 和NaBH(AcO)₃(69.3mg，0.327mmol)处理。在环境温度下额外搅拌混合物 1.5h，用水(20mL)稀释，且随后用DCM(2×10mL)萃取。经合并的有机萃取物用盐水(10mL)洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱(使用5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到呈TFA盐的标题化合物。TFA盐用饱和NaHCO_3(aq)稀释，随后用 DCM(2×10mL)萃取。经合并的有机萃取物用盐水(10mL)洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤，且真空浓缩，得到标题化合物(28.7mg，46％产率)。MS(apci)m/z＝542.3(M+H)。

实例313

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-((4-异丙基噻唑-2-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；52mg，0.109mmol)和4-异丙基-1，3-噻唑-2-甲醛(16.9μL，0.109mmol)于DCE(1.09mL)中的溶液，用 NaBH(AcO)₃(69.3mg，0.327mmol)处理。在环境温度下搅拌隔夜之后，反应混合物用DCE(1mL)稀释，且用额外4-环丙基-噻唑-2-甲醛(67μL，0.43mmol) 和NaBH(AcO)₃(69.3mg，0.327mmol)处理。在环境温度下额外搅拌反应混合物1.5h，用水(20mL)稀释，且随后用DCM(2×10mL)萃取。经合并的有机萃取物用盐水(10mL)洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱(使用5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液) 来纯化残余物，得到呈TFA盐的标题化合物。TFA盐用饱和NaHCO_3(aq)稀释，随后用DCM(2×10mL)萃取。经合并的有机萃取物用盐水(10mL)洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤，且真空浓缩，得到标题化合物(27.8mg，45％产率)。MS(apci)m/z＝544.3(M+H)。

实例314

4-(6-(6-((4-乙基噻唑-2-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；52mg，0.109mmol)和4-乙基 -2-噻唑甲醛(46.1μL，0.327mmol)于DCE(1.09mL)中的溶液，用NaBH(AcO)₃ (139mg，0.654mmol)处理。在环境温度下搅拌4h之后，真空浓缩反应混合物。通过C18反相色谱(使用5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到呈TFA盐的标题化合物。TFA盐用饱和NaHCO_3(aq)稀释，随后用DCM(2×10mL)萃取。经合并的有机萃取物用盐水(10mL)洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤，且真空浓缩，得到标题化合物(15.8mg，27％产率)。MS(apci)m/z＝530.3(M+H)。

实例315

4-(6-(6-(3，5-二氟-4-甲氧基苯甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；22mg，0.046mmol)于DCE(230 μL)中的溶液，依序用3，5-二氟-4-甲氧基苯甲醛(7.932mg，0.04608mmol) 和NaBH(AcO)₃(29.3mg，0.138mmol)处理。在环境温度下搅拌1h之后，直接通过二氧化硅色谱法(使用0-100％DCM/己烷，随后0-60％(2％NH₄OH/20％ MeOH/78％DCM)/DCM作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，得到标题化合物(13.9mg，54％产率)。MS(apci)m/z＝561.2(M+H)。

使用针对实例315的制备所描述类似的方法，用适当醛替换3，5-二氟-4-甲氧基苯甲醛，来制备表X中的化合物。通过LCMS来监测反应完成。同样，相应地调整反应持续时间和需要补充剂的量。在使用适当梯度洗脱液的色谱纯化之后，分离出标题化合物。当色谱条件引起分离出标题化合物的TFA盐时，在色谱法后，进行碱性处理。碱性处理条件涉及将TFA盐溶解于MeOH(1mL) 中，通过碱性树脂(Stratospheres MP-HCO₃，100mg)过滤，用MeOH冲洗，直到通过UV检测无产物为止，真空浓缩滤液，且随后将残余水与Et2O一起共沸，干净地得到呈游离碱形式的标题化合物。

表X

实例323

4-(6-(6-(3-氟-4-甲氧基苯甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在环境温度下，搅拌4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；32.2mg，0.0675mmol)于DCM(675μL)和DIEA(29.4μL，0.169mmol)中的悬浮液 5min，随后依序用3-氟-4-甲氧基苯甲醛(20.8mg，0.135mmol)和NaBH(AcO)₃ (42.9mg，0.202mmol)处理。在环境温度下搅拌隔夜之后，使反应混合物通过针筒过滤器(0.45μm)，用DCM冲洗，直到在DCM冲洗液中未检测到额外 UV活性物质为止。通过二氧化硅色谱法(使用0-100％DCM/己烷，随后0-100％ (2％NH₄OH/20％MeOH/78％DCM)/DCM作为梯度洗脱液作为梯度洗脱液) 来纯化合并的DCM冲洗液，得到标题化合物(22.3mg，61％产率)。MS(apci) m/z＝543.2(M+H)。

使用针对实例323的制备所描述类似的方法，用适当醛替换3-氟-4-甲氧基苯甲醛，来制备表Y中的化合物。通过LCMS监测反应完成，且同样相应地调整反应持续时间。在通过针筒过滤器过滤和使用适当梯度洗脱液的色谱纯化之后，分离出标题化合物。

表Y

实例330

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-((4-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在环境温度下，搅拌4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；30.1mg，0.0631mmol)和DIEA(27.5μL，0.158mmol)于DCM(631μL)中的悬浮液 5min。反应混合物依序用4-甲氧基吡啶甲醛(8.65mg，0.0631mmol)和 NaBH(AcO)₃(26.7mg，0.126mmol)处理。在环境温度下搅拌反应混合物3d。所得悬浮液用少量的DCM稀释，随后逐滴添加MeOH，直到混合物变得均匀为止。直接通过二氧化硅色谱法(使用0-100％DCM/己烷，随后0-100％(2％NH₄OH/20％MeOH/78％DCM)/DCM作为梯度洗脱液作为梯度洗脱液)来纯化DCM/MeOH溶液，得到标题化合物(27.2mg，82％产率)。MS(apci)m/z＝ 526.2(M+H)。

使用针对实例330的制备所描述类似的方法，用适当醛替换4-甲氧基吡啶甲醛，来制备和处理表Z中的化合物。通过LCMS监测反应完成，且同样相应地调整反应持续时间。标题化合物通过以下来分离出：直接色谱纯化，使用适当梯度洗脱液，或其中注意(＊)用适当洗脱液的色谱纯化在水溶液处理反应物之前，所述水溶液处理由以下组成：用DCM稀释，用饱和NaHCO_3(aq)萃取，有机萃取物用无水MgSO_4(s)脱水，过滤和真空浓缩。

表Z

实例340

4-(6-(6-((1-乙基-6-氧代-1，6-二氢吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚 -3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在环境温度下，搅拌4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；50mg，0.105mmol)于DCM(524μL)和TEA(43.8μL，0.314mmol)中的溶液5min。反应混合物依序用1-乙基-6-氧代-1，6-二氢吡啶-3-甲醛(23.7mg，0.157mmol)和 NaBH(AcO)₃(44.4mg，0.209mmol)处理。在环境温度下搅拌隔夜之后，引入额外1-乙基-6-氧代-1，6-二氢吡啶-3-甲醛和NaBH(AcO)₃。在环境温度下搅拌反应混合物隔夜。所得悬浮液用DCM(1mL)稀释，且用水(3×1mL)洗涤。合并的水性萃取物用DCM(1mL)萃取。经合并的有机萃取物用盐水洗涤，通过PS玻璃料，且真空浓缩，以去除大部分溶剂(大约1mL残留)。溶液用庚烷(1mL)稀释，形成悬浮液。真空过滤悬浮液，用额外庚烷(3×1mL) 冲洗。收集固体且风干，得到标题化合物(9.2mg，16％产率)。MS(apci)m/z＝ 540.3(M+H)。

使用针对实例340的制备所描述类似的方法，用适当醛替换1-乙基-6-氧代 -1，6-二氢吡啶-3-甲醛，来制备、处理和纯化表AA中的化合物。通过LCMS监测反应完成，且同样相应地调整反应持续时间。使用庚烷或MTBE作为冲洗溶剂，在过滤之后，干净地分离出标题化合物。

表AA

实例344

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-(2-异丙氧基乙基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；20mg，0.0419mmol)于DMSO (419μL)中的溶液，用2-(2-溴乙氧基)丙烷(21.0mg，0.126mmol)和TEA(28.4 μL，0.209mmol)处理。在50℃下搅拌所得混合物16h，随后在70℃下额外搅拌16h。在冷却到环境温度之后，直接通过二氧化硅色谱法(使用0-100％DCM/ 己烷，随后0-60％(2％NH₄OH/20％MeOH/78％DCM)/DCM作为梯度洗脱液) 来纯化反应混合物，得到标题化合物(6.1mg，28％产率)。MS(apci)m/z＝491.3 (M+H)。

实例345

4-(6-(6-(2，2-二氟乙基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基 -2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；31.3mg，0.0656mmol)于DMF (656μL)中的溶液，用DIEA(57.1μL，0.328mmol)处理，且在环境温度下搅拌15min。添加三氟甲烷磺酸2,2-二氟乙酯(70.2mg，0.328mmol)，且在环境温度下搅拌混合物1h。所得混合物用Et2O(40mL)稀释，且用水(3×10mL) 洗涤。有机萃取物用无水MgSO_4(s)脱水，通过

545垫真空过滤，且真空浓缩。将残余物溶解于少量DCM中，且随后逐滴添加MeOH，产生均匀溶液，所述溶液通过二氧化硅色谱法(使用0-100％DCM/己烷，随后0-100％(2％ NH₄OH/20％MeOH/78％DCM)/DCM作为梯度洗脱液作为梯度洗脱液)来纯化，得到标题化合物(9.1mg，30％产率)。MS(apci)m/z＝469.2(M+H)。

实例346

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-(2，2，2-三氟乙基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚 -3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例345所描述类似的程序、处理和纯化，用三氟甲磺酸2,2，2- 三氟乙酯替换三氟甲烷磺酸2，2-二氟乙酯，来制备标题化合物(17.6mg，51％产率)。MS(apci)m/z＝487.2(M+H)。

实例347

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-((3-(三氟甲基)-1，2，4-恶二唑-5-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在添加5-(氯甲基)-3-(三氟甲基)-1,2，4-恶二唑(64.9mg，0.348mmol)之前， 4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；33.2mg，0.0695mmol)于DMF(695 μL)中的溶液，用DIEA(60.6μL，0.348mmol)处理，随后在环境温度下搅拌15min。在环境温度下搅拌所得混合物1h之后，反应混合物用Et2O(40mL) 稀释，随后用水(3×10mL)萃取。有机萃取物用无水MgSO_4(s)脱水，通过

545垫真空过滤，且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用0-100％DCM/己烷，随后0-100％(2％NH₄OH/20％MeOH/78％DCM)/DCM作为梯度洗脱液作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到标题化合物(22.2mg，58％产率)。MS(apci) m/z＝555.2(M+H)。

实例348

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-((5-甲基-1，3，4-恶二唑-2-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；20mg，0.0419mmol)于DMSO (837.9μL)中的溶液，用Cs₂CO_3(s)(54.60mg，0.1676mmol)和2-(氯甲基)-5- 甲基-1，3，4-恶二唑(5.553mg，0.04189mmol)处理。在50℃下搅拌所得混合物 16h。在冷却到环境温度之后，将反应混合物分配在DCM(1mL)与水(5mL) 之间，且随后用DCM(3×5mL)萃取。经合并的有机萃取物用盐水(5mL) 洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用0-100％DCM/己烷，随后0-60％(2％NH₄OH/20％MeOH/78％DCM)/DCM 作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，得到标题化合物(10.06mg，46％产率)。 MS(apci)m/z＝501.2(M+H)。

实例349

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-(嘧啶-2-基甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚 -3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；40mg，0.084mmol)于DMF (170μL)中的溶液，用2-(氯甲基)嘧啶盐酸盐(0.015g，0.092mmol)和TEA (58μL，0.42mmol)处理。在50℃下搅拌所得混合物隔夜，随后在70℃下额外搅拌16h。在冷却到环境温度之后，将反应混合物倒入水(2mL)中，且剧烈搅拌。通过尼龙膜真空过滤所得悬浮液，用水(2mL)和Et₂O(2mL)冲洗固体。在水冲洗液已通过过滤器且已从固体顶部倾析出Et2O之后(大约5min) 之后，将固体溶解于EtOAc/MeOH中，且真空浓缩，得到标题化合物(30mg， 66％产率)。MS(apci)m/z＝497.2(M+H)。

实例350

4-(6-(6-((3-氟-5-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶 -3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；25.2mg，0.0528mmol)和甲烷磺酸(3-氟-5-甲氧基吡啶-2-基)甲酯(43.5mg，0.185mmol)于DMSO(500μL) 中的溶液，用DIEA(46.0μL，0.264mmol)处理。在70℃温度下搅拌所得混合物16h。在冷却到环境温度之后，直接通过C18反相色谱法(使用5-95％水 -ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物。合并含有所期望化合物的级分，用4∶1 DCM∶iPrOH稀释，且随后用饱和NaHCO_3(aq)萃取。有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，干净地得到标题化合物(9.5mg， 33％产率)。MS(apci)m/z＝544.3(M+H)。

实例351

4-(6-(6-((R)-1-(6-氯吡啶-3-基)-2，2，2-三氟乙基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3- 基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在-42℃(干冰/ACN冷却浴)下，搅拌(S)-1-(6-氯吡啶-3-基)-2，2，2-三氟乙-1-醇(43.2mg，0.204mmol)和二甲基吡啶(25.1μL，0.216mmol)于ACN(500 μL)中的混合物10min。冷混合物用Tf-O-Tf(35.3μL，0.210mmol)缓慢处理。在引入4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P44；50mg，0.124mmol)和DIEA(43.2 μL，0.358mmol)于DMA(500μL)中的溶液之前，在-42℃下搅拌所得混合物1h。在环境温度下搅拌18h之后，直接通过反相色谱法(5-95％ACN/水+0.1％ TFA作为梯度洗脱液)，随后第二二氧化硅色谱法(0-100％DCM/己烷，随后 0-60％(2％NH₄OH/20％MeOH/78％DCM)/DCM作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，得到标题化合物(22mg，30％产率)。MS(apci)m/z＝598.2(M+H)。

实例352

4-(6-(6-((S)-1-(6-氯吡啶-3-基)-2，2，2-三氟乙基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3- 基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例351所描述类似的程序，用(R)-1-(6-氯吡啶-3-基)-2，2，2-三氟乙-1-醇替换(S)-1-(6-氯吡啶-3-基)-2，2，2-三氟乙-1-醇，来制备、处理和纯化标题化合物(41mg，56％产率)。MS(apci)m/z＝598.2(M+H)。

实例353

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-((R)-2，2，2-三氟-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(6-((R)-1-(6-氯吡啶-3-基)-2，2，2-三氟乙基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3- 基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例351；50 mg，0.124mmol)于MeOH(500μL)中的溶液，用含30wt％NaOMe的MeOH (31.1μL，0.167mmol)处理，随后在70℃下搅拌隔夜。在冷却到环境温度之后，直接通过二氧化硅色谱法(使用0-100％DCM/己烷，随后0-60％(2％ NH₄OH/20％MeOH/78％DCM)/DCM作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，得到标题化合物(18mg，91％产率)。MS(apci)m/z＝594.2(M+H)。

实例354

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-((S)-2，2，2-三氟-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例353所描述类似的程序，用4-(6-(6-((S)-1-(6-氯吡啶-3- 基)-2，2，2-三氟乙基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例352)替换4-(6-(6-((R)-1-(6-氯吡啶-3- 基)-2，2，2-三氟乙基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈，来制备、处理和纯化标题化合物(7.42mg， 75％产率)。MS(apci)m/z＝594.25(M+H)。

实例355

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-异丁酰基-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；20mg，0.0419mmol)和DIEA (36.5μL，0.209mmol)于DCM(209μL)中的混合物，用异丁酰氯(4.91mg， 0.0461mmol)处理，且在环境温度下搅拌混合物2h。真空浓缩所得混合物，随后通过二氧化硅色谱法(使用50-100％EtOAc/己烷，随后0-20％MeOH/EtOAc 作为梯度洗脱液)来纯化，得到标题化合物(9.31mg，47％产率)。MS(apci)m/z ＝475.2(M+H)。

使用针对实例355的制备所描述类似的方法，用适当酰氯替换异丁酰氯，来制备和纯化表BB中的化合物。通过LCMS监测反应完成，且同样相应地调整反应持续时间。通过使用适当梯度洗脱液的色谱纯化，分离出标题化合物。

表BB

实例361：6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-(2，2,2-三氟乙酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈；和实例362：2，2，2-三氟乙酸1-((3-氰基-4-(6-(6-(2，2，2-三氟乙酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶 -3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)-2-甲基丙-2-基酯

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；50mg，0.105mmol)于DCM (524μL)中的混合物，用TEA(43.8μL，0.314mmol)处理。所得悬浮液在冰浴中冷却，随后用2，2,2-三氟乙酸酸酐(26.4mg，0.126mmol)处理。去除冷却浴，且在环境温度下搅拌反应混合物1.5h。直接通过C18反相色谱法 (5-90％ACN/水作为梯度洗脱液)来纯化所得混合物，独立地得到表示起始物质的单和二偶联产物的标题化合物：实例361：6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-(2，2，2-三氟乙酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈(18.3mg，35％产率)。MS(apci)m/z＝501.2(M+H)。实例 362：2，2，2-三氟乙酸1-((3-氰基-4-(6-(6-(2，2，2-三氟乙酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1] 庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)-2-甲基丙-2-基酯(26.8mg，42％产率)。MS(apci)m/z＝597.2(M+H)。

实例363

4-(6-(6-(5-氯-6-甲氧基烟酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；50mg，0.105mmol)于DCM (2mL)中的悬浮液，依序用5-氯-6-甲氧基烟酸(9.82mg，0.0524mmol)、HATU (23.9mg，0.0628mmol)和DIEA(36.5μL，0.209mmol)处理，在环境温度下搅拌4h。直接通过二氧化硅色谱法(使用50-100％EtOAc/己烷，随后0-20％ MeOH/EtOAc作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物 (18.3mg，61％产率)。MS(apci)m/z＝574.2(M+H)。

其中注意(＊)除外，使用针对实例363的制备所描述类似的方法，用适当甲酸(1.0-1.2当量)替换5-氯-6-甲氧基烟酸，来制备表CC中的化合物。通过 LCMS来监测反应完成。同样相应地调整反应持续时间和补充剂的添加。通过使用适当梯度洗脱液的色谱纯化，分离出标题化合物。

表CC

＊实例406采用3当量的HArU，且采用水溶液处理，所述处理涉及在色谱纯化之前，用饱和NH₄Cl_(aq)萃取反应混合物。

实例407

实例408

4-(6-(6-(D-亮氨酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2- 甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：((2R)-1-(3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4- 基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基)-4-甲基-1-氧代戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯的制备。4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；60mg，0.126mmol)于 DMF(4mL)中的溶液，依序用(叔丁氧基羰基)-D-亮氨酸(32.0mg，0.138mmol)、 HATU(57.3mg，0.151mmol)和DIEA(57.3μL，0.503mmol)处理，随后在环境温度下搅拌隔夜。直接通过二氧化硅色谱法(使用50-100％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化所得混合物，得到标题化合物(75mg，97％产率)。MS (apci)m/z＝618.4(M+H)。

步骤2：4-(6-(6-(D-亮氨酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2- 羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。((2R)-1-(3-(5-(3-氰基-6-(2- 羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚 -6-基)-4-甲基-1-氧代戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(步骤1，75mg，0.12mmol)于 DCM(4mL)中的溶液，用TFA(2mL，)处理，且在环境温度下搅拌30min。在真空浓缩之后，通过C18反相色谱法(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物。收集含有所需产物的级分，用饱和NaHCO₃处理，且用含20％IPA的DCM萃取。有机层用MgSO₄脱水，过滤且浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用5-10％MeOH/DCM作为梯度洗脱液)来进一步纯化材料，干净地得到标题化合物(44，70％产率)。MS(apci)m/z＝518.3(M+H)。

实例409

4-(6-(6-(二甲基-D-亮氨酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(6-(D-亮氨酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2- 甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例408；40mg，0.0773mmol)和甲醛(57.5μL，0.773mmol)于DCM(773μL)中的混合物，用NaBH(AcO)₃(81.9 mg，0.386mmol)处理。在环境温度下搅拌3h之后，真空浓缩反应混合物。通过C18反相色谱(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物。收集含有所需产物的级分，用饱和NaHCO₃处理，且用含20％IPA的DCM 萃取。有机物用MgSO₄脱水，过滤且浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用2-5％MeOH/DCM作为梯度洗脱液)来进一步纯化材料，干净地得到标题化合物(23 mg，55％产率)。MS(apci)m/z＝546.3(M+H)。

实例410

4-(6-(6-(2-氨基-2-(4-氟苯基)乙酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：((1R)-2-(3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4- 基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基)-1-(4-氟苯基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯的制备。4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；100mg，0.209mmol)、 (R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(4-氟苯基)乙酸(56.4mg，0.209mmol)和HATU (240mg，0.628mmol)于DMF(1.05mL)中的混合物，用DIEA(146μL， 0.838mmol)处理。在环境温度下搅拌反应混合物30min，且随后过滤。真空浓缩所得滤液，且通过二氧化硅色谱法(使用0-10％CHCl₃/MeOH+0-1％ NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到标题化合物(137.36mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝656.2(M+H)。

步骤2：4-(6-(6-((R)-2-氨基-2-(4-氟苯基)乙酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3- 基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。((1R)-2-(3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基)-1-(4-氟苯基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(步骤1；137.36mg，0.209mmol)于DCM(418μL)中的溶液，用TFA(161μL) 处理，且在环境温度下搅拌70min。在真空浓缩之后，首先通过二氧化硅色谱法(使用CHCl₃/MeOH+0-1％NH₄OH作为梯度洗脱液)，随后通过C18反相色谱法(5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)，随后再次通过二氧化硅色谱法(5-10％MeOH/DCM+1％NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(112.6mg，97％产率)。MS(apci)m/z＝556.2(M+H)。

实例411

4-(6-(6-(2-(二甲氨基)-2-(4-氟苯基)乙酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(6-(2-氨基-2-(4-氟苯基)乙酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例410；102mg，0.184mmol)于DCM(1.8mL)中的混合物，依序用甲醛(82.7μL，1.10mmol)和 NaBH(AcO)₃(195mg，0.918mmol)处理。在环境温度下搅拌2h之后，直接通过二氧化硅色谱法(使用0-10％CHCl₃/MeOH+0-1％NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，得到半纯标题化合物。将半纯材料悬浮于DCM中，用己烷湿磨，随后真空浓缩，干净地得到标题化合物(24.6mg，40％产率)。 MS(apci)m/z＝584.3(M+H)。

实例412

3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸(S)-四氢呋喃-3-基酯

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P44；50mg，0.12mmol)于DCM(618μL) 中的溶液，依序用氯甲酸(S)-四氢呋喃-3-基酯(20mg，0.14mmol)和TEA(17 μL，0.12mmol)处理。在环境温度下搅拌1h之后，通过C18反相色谱法(使用5-50％ACN/水作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物。合并含有所期望化合物的级分，且分配在4∶1 DCM∶iPrOH与饱和NaHCO_3(aq)之间。用4∶1 DCM∶iPrOH (2×)反萃取水性萃取物。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，干净地得到标题化合物(64mg，99％产率)。MS(apci)m/z＝519.3 (M+H)。

实例413

3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸(R)-四氢呋喃-3-基酯

使用针对实例412所描述类似的程序，用氯甲酸(R)-四氢呋喃-3-基酯替换氯甲酸(S)-四氢呋喃-3-基酯，来制备、处理和纯化标题化合物(64mg，99％产率)。MS(apci)m/z＝519.2(M+H)。

实例414

3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸四氢-2H-吡喃-4-基酯

使用针对实例412所描述类似的程序，用氯甲酸四氢-2H-吡喃-4-基酯替换氯甲酸(S)-四氢呋喃-3-基酯，来制备、处理和纯化标题化合物(60mg，90％产率)。MS(apci)m/z＝533.3(M+H)。

实例415

3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸异丁酯

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；20mg，0.0419mmol)于DCM (400μL)中的溶液，用TEA(29.2μL，0.12mmol)和氯甲酸异丁酯(17.2mg， 0.126mmol)处理。在环境温度下搅拌2h之后，将反应混合物分配在DCM与饱和NH₄Cl_(aq)之间。用DCM(3×)反萃取水性萃取物。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用0-25％ MeOH/EtOAc作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到标题化合物(15.4 mg，73％产率)。MS(apci)m/z＝505.3(M+H)。

实例416

3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸苯酯

使用针对实例415所描述类似的程序、处理和纯化，用氯甲酸苯酯(1当量)替换氯甲酸异丁酯(3当量)和用DIEA(10当量)替换TEA(5当量)，来制备标题化合物。此外，将反应持续时间延长到4h。在类似处理和二氧化硅色谱法(0-25％MeOH/EtOAc作为梯度洗脱液)之后，干净地分离出标题化合物(20mg，30％产率)。MS(apci)m/z＝525.2(M+H)。

实例417

3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N- 异丁基-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酰胺

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；32.6mg，0.0806mmol)于DMA (403μL)中的溶液，用DIEA(140μL，0.12mmol)和氯甲酸4-硝基苯(19.5 mg，0.0967mmol)酯处理。在环境温度下搅拌所得混合物1h，使得形成3-(5-(3- 氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸4-硝基苯酯。反应混合物用2-甲基丙-1-胺(40μL，0.40 mmol)处理，且在80℃下搅拌21h。在冷却到环境温度之后，反应混合物用水 (10mL)淬灭且用DCM(3×5mL)萃取。经合并的有机萃取物用水(3×10mL) 和盐水(10mL)洗涤。有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱(使用5-95％水-ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物。合并含有所期望化合物的级分，且用饱和NaHCO_3(aq)萃取。用DCM (3×5mL)反萃取水性萃取物。经合并的有机萃取物用盐水(10mL)洗涤，用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，干净地得到标题化合物(18.2mg，45％产率)。MS(apci)m/z＝504.3(M+H)。

使用针对实例417的制备所描述类似的方法，在脲偶联中用适当胺替换2- 甲基丙-1-胺，且用DMF替代DMA，来制备表DD中的化合物。通过LCMS 监测所有反应完成，且同样相应地调整反应时间。反应用饱和NH₄Cl_(aq)淬灭，随后进行与实例417中所描述类似的水溶液处理。使用二氧化硅色谱法(使用 0-25％MeOH/EtOAc作为梯度洗脱液)，省略之后的色谱水溶液处理，来分离出标题化合物。

表DD

实例421

3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酰胺2，2，2-三氟乙酸盐

三光气(18.6mg，0.0628mmol)于DCM(250μL)中的0℃溶液，用DIEA (72.4μL0.419mmol)和6-甲氧基吡啶-3-胺(9.75mg，0.0786mmol)处理。在 0℃下搅拌所得混合物1h。向所述冷(0℃)溶液中，添加4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；25mg，0.0524mmol)。在用水淬灭之前，在环境温度下搅拌所得混合物隔夜。在Biotage相分离柱中，用DCM(3×)萃取双相混合物。真空浓缩经合并的有机萃取物，且通过C18反相色谱法(使用5-95％水-ACN +0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(13.4 mg，46％产率)。MS(apci)m/z＝555.2(M+H)。

实例422

3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-(4-甲氧苯基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酰胺2，2，2-三氟乙酸盐。

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；30mg，0.0628mmol)于DMA (750μL)中的溶液，用TEA(43.8μL，0.314mmol)和1-异氰酸基-4-甲氧基苯(14.1g，0.0943mmol)处理。在50℃下搅拌2h之后，将反应混合物冷却到环境温度，用DCM稀释，且用水淬灭。用DCM(3×)反萃取水性萃取物，且合并有机萃取物，用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱法(使用5-95％水-ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到标题化合物(27mg，78％产率)。MS(apci)m/z＝554.2(M+H)。

实例423

4-(6-(6-(苯甲基磺酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基 -2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；26.0mg，0.0545mmol)于DCM (1.0mL)中的混合物，依序用TEA(29.6μL，0.218mmol)和苯基甲烷磺酰氯(11.4mg，0.0599mmol)处理。在环境温度下搅拌反应混合物1h之后，依序引入额外TEA(29.6μL，0.218mmol)和苯基甲烷磺酰氯(11.4mg，0.0599 mmol)。在环境温度下搅拌所得混合物16h，且随后真空浓缩。通过C18反相色谱(使用5-95％水-ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物。合并含有所期望化合物的级分，且分配在4∶1 DCM∶iPrOH与饱和NaHCO_3(aq)之间。用4∶1 DCM∶iPrOH(2×)反萃取水性萃取物。经合并的有机萃取物用无水 Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，干净地得到标题化合物(25.2mg，83％产率)。 MS(apci)m/z＝559.2(M+H)。

使用针对实例423的制备所描述类似的方法，用适当磺酰氯替换苯基甲烷磺酰氯，和其中注意(*)用DIEA替换TEA，来制备表EE中的化合物。通过 LCMS来监测所有反应完成。同样，相应地调整反应持续时间和需要补充剂的量。在使用适当梯度洗脱液的色谱纯化之后，分离出标题化合物。在制备中，色谱法之后，进行实例423中所描述的碱性处理，其中在梯度洗脱液条件中采用酸改性剂(例如，0.1％TFA)。

表EE

实例429

4-(6-(6-((环丙基甲基)磺酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-甲氧基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在环境温度下，向含60wt％NaH分散液的矿物油(1.36mg，0.218mmol) 于DMF(500μL)中的搅拌悬浮液中，添加4-(6-(6-((环丙基甲基)磺酰基)-3，6- 二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例425；8.9mg，0.0170mmol)。所得混合物用碘甲烷(1.17μL， 0.0187mmol)处理，且在环境温度下搅拌16h。所得混合物用EtOAc稀释，用水(3×)和盐水(1×)洗涤。有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，随后过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱(使用5-95％水-ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物。合并含有所期望化合物的级分，且随后分配在4∶1 DCM∶iPrOH与饱和NaHCO_3(aq)之间。用4∶1 DCM∶iPrOH(2×)反萃取水性萃取物。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(6.2mg，68％产率)。MS(apci)m/z＝537.2(M+H)。

实例430

4-(6-(6-(异丁基磺酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-甲氧基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例429所描述类似的程序，用6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-(异丁基磺酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例426)替换4-(6-(6-((环丙基甲基)磺酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈，来制备、处理和纯化标题化合物(6.6mg，35％产率)。MS(apci)m/z＝539.2 (M+H)。

实例431

6-(2-甲氧基乙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在90℃下，搅拌6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P71；30mg，0.066 mmol)、K₂CO_3(s)(11mg，0.079mmol)和1-溴-2-甲氧基乙烷(11mg，0.079mmol) 于DMF(400μL)中的混合物隔夜。在冷却到环境温度之后，反应混合物用 DCM稀释，且用水(3×)和盐水(1×)洗涤。有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱(使用5-95％水：ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，得到标题化合物的TFA盐。将TFA盐分配在DCM与饱和NaHCO_3(aq)之间。有机萃取物用盐水洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。残余物用DCM/己烷湿磨，干净地得到标题化合物(9.3 mg，46％产率)。MS(apci)m/z＝512.2(M+H)。

实例432

6-(2-(二甲氨基)乙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环 [3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P71；26.9mg，0.0593mmol)于DMA (119μL)中的溶液，依序用Cs₂CO_3(s)(77.3mg，0.237mmol)和(2-溴乙基)二甲胺(8.9mg，0.083mmol)处理，随后在60℃下搅拌隔夜。在冷却到环境温度之后，反应混合物用EtOAc稀释，用水(3×)和盐水(1×)洗涤。合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。粗残余物用60∶40 ACN/水+2％ TFA稀释，且通过C18反相色谱法(使用5-95％水：ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化所述溶液，得到标题化合物的TFA盐。将TFA盐溶解于MeOH (5mL)中，通过P1-HCO3树脂，且真空浓缩，干净地得到标题化合物(1.2mg， 4％产率)。MS(apci)m/z＝525.3(M+H)。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.37(d， 1H)，8.18(s，1H)，8.12(d，1H)，8.08(d，1H)，7.75(dd，1H)，7.60(dd，1H)，7.15(d， 1H)，6.89(d，1H)，6.64(d，1H)，4.09(t，2H)，3.89(s，3H)，3.77(m，4H)，3.55(m， 4H)，2.99(s，1H)，2.91(s，1H)，2.78(t，3H)，2.65(m，1H)，2.35(s，6H)，1.63(d， 1H)。

实例433

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-(((S)-吗啉-2-基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：(2S)-2-(((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环 [3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯的制备。6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P71；15.5mg，0.0342mmol) 于DMA(684μL)中的溶液，依序用Cs₂CO_3(s)(12.2mg，0.0376mmol)和2-(溴甲基)吗啉-4-甲酸(S)-叔丁酯(14.4mg，0.0513mmol)处理，在试剂之间用Ar_(g)鼓泡10min，且随后在胺添加之后再次鼓泡1min。在60℃下搅拌反应混合物隔夜。在冷却到环境温度之后，反应混合物用EtOAc(10mL)稀释，且用水 (10mL)洗涤。用EtOAc(2×5mL)反萃取水性洗涤液。经合并的有机萃取物用水(2×10mL)和盐水(10mL)洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤，且真空浓缩，得到标题化合物(22.3mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝653.4 (M+H)。

步骤2：4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(((S)-吗啉-2-基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。 (2S)-2-(((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3- 基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(步骤1； 22.3mg，0.0342mmol)于DCM(2.2mL)中的溶液，用TFA(2.63mL)处理，且在环境温度下搅拌20min。真空浓缩反应混合物，且通过C18反相色谱法(使用60-40％ACN/水+2％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物。合并含有所期望化合物的级分，且用饱和NaHCO_3(aq)(10mL)和DCM(2×10mL)萃取。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到标题化合物(4.9mg，26％产率)。MS(apci)m/z＝553.3(M+H)。

实例434

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-(((S)-4-甲基吗啉-2-基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈。4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(((S)-吗啉-2-基) 甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例433；10mg，0.0181mmol)于DCM(0.362 mL)中的溶液，依序用甲醛(6.80μL，0.0905mmol)和NaBH(AcO)₃(38.4mg， 0.181mmol)处理。在环境温度下搅拌24h之后，真空浓缩反应混合物。粗残余物用60-40％ACN/水+2％TFA稀释，且通过C18反相色谱法(使用5-95％水：ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化所述溶液，得到标题化合物的TFA 盐。将TFA盐溶解于MeOH中，且通过P1-HCO3树脂，得到标题化合物(4.1mg，40％产率)。MS(apci)m/z＝567.3(M+H)。

实例435

6-(((S)-5，5-二甲基吗啉-2-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：(2S)-2-(((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环 [3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)-5，5-二甲基吗啉-4- 甲酸叔丁酯的制备。6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P71；42mg，0.093 mmol)于DMF(464μL)中的溶液，依序用(S)-5，5-二甲基-2-(((甲磺酰基)氧基) 甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(30mg，0.093mmol)和Cs₂CO_3(s)(76mg，0.23mmol) 处理。在环境温度下搅拌反应混合物36h，随后在60℃下搅拌，直到通过LCMS 检测反应已达到60％完成为止。在冷却到环境温度之后，反应混合物用EtOAc 稀释且用水萃取。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用0-50％EtOAc/己烷作为洗脱液)来纯化粗残余物，得到标题化合物(6.5mg，10％产率)。MS m/z 681.3(M+H)

步骤2：6-(((S)-5，5-二甲基吗啉-2-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基) 甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。在环境温度下，搅拌(2S)-2-(((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)-5，5-二甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯(步骤1；6.5mg，0.0095mmol)于1∶1 TFA∶DCM(2mL) 中的溶液1h。反应混合物是：粗残余物用60-40％ACN/水+2％TFA稀释，且通过C18反相色谱法(使用5-95％水∶ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化所述溶液得到标题化合物的TFA盐。将TFA盐溶解于MeOH中，且通过 P1-HCO3树脂，得到标题化合物(4.1mg，74％产率)。MS(apci)m/z＝581.3 (M+H)。

实例436

4-(6-(6-(6-甲氧基烟酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)(中间物P76；40mg，0.090mmol)于 DCM(2.5mL)中的溶液，依序用6-甲氧基烟酸(16.5mg，0.108mmol)、HATU (41.0mg，0.108mmol)和DIEA(62.6μL，0.359mmol)处理。在环境温度下搅拌隔夜之后，引入额外DIEA(220μL，1.26mmol)，且在环境温度下搅拌反应物隔夜。将反应混合物分配在DCM(40mL)与饱和NH₄Cl_(aq)(40mL)之间。用DCM(3×25mL)反萃取水性萃取物。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用0-10％MeOH/EtOAc作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(19 mg，36％产率)。MS(apci)m/z＝581.3(M+H)。

实例437

4-(6-(6-((6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)(中间物P76；41mg，0.061mmol)和 6-甲氧基-5-甲基烟碱醛(21mg，0.14mmol)于DCM(2mL)中的溶液，用 NaBH(AcO)₃(39mg，0.18mmol)处理。在环境温度下搅拌5h之后，将反应混合物分配在水与DCM之间，随后用DCM(3×)萃取。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用0-20％ MeOH/DCM+0.2％NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，得到标题化合物(22mg，62％产率)。MS(apci)m/z＝581.3(M+H)。

实例438

4-(6-(6-((5-氯-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶 -3-基)-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)(中间物P76；50mg，0.074mmol)和 5-氯-6-甲氧基烟碱醛(31mg，0.18mmol)于DCM(3mL)中的溶液，用 NaBH(AcO)₃(57mg，0.27mmol)处理。在环境温度下搅拌反应混合物隔夜之后，引入额外NaBH(AcO)₃(38mg，0.18mmol)，且在环境温度下额外搅拌反应物5h。将反应混合物分配于水与DCM之间，随后用DCM(3×)萃取。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(0-20％MeOH/DCM+0.2％NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，得到标题化合物(7mg，16％产率)。MS(apci)m/z＝601.3(M+H)。

实例439

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P71；25.8mg，0.0569mmol)于DMA(113.8μL)中的溶液，依序用Cs₂CO_3(s)(74.14mg，0.2276mmol)和4-(2-氯乙基)吗啉(15.65μL，0.1138mmol)处理，随后在60℃下搅拌隔夜。在冷却到环境温度之后，反应混合物用EtOAc稀释，且依序用水(3×)和盐水(1×)萃取。经合并的有机萃取物用盐水洗涤，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。粗残余物用60-40％ACN/水+2％TFA稀释，且通过C18反相色谱法(使用5-95％水：ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化所述溶液，得到标题化合物的TFA 盐。将TFA盐溶解于MeOH中，且通过P1-HCO3树脂，得到标题化合物(8.8 mg，27％产率)。MS(apci)m/z＝567.3(M+H)。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.48 (d，1H)，8.34(m，2H)，8.09(d，1H)，7.83(dd，1H)，7.71(dd，1H)，7.28(d，1H)，6.88 (d，1H)，6.78(d，1H)，4.26(t，2H)，3.89(m，5H)，3.79(d，2H)，3.72(t，4H)，3.64(m， 4H)，2.87(t，2H)，2.70(m，1H)，2.62(t，4H)，1.69(d，1H)。

实例440

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-(2-(3-氧代哌嗪-1-基)乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：6-(2-氯乙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐的制备。6- 羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P71；75mg，0.165mmol)于DMF(1654 μL)中的溶液，依序用无水K₂CO_3(s)(112mg，0.827)和1-氯-2-碘乙烷(45.4 μL，0.496mmol)处理。在环境温度下搅拌反应混合物隔夜。所得混合物用EtOAc 稀释，且用水萃取，随后有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱(使用5-95％水∶ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，得到标题化合物(60mg，66％产率)。MS(apci)m/z＝516.2(M+H)。

步骤2：4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-(3-氧代哌嗪-1-基)乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。 6-(2-氯乙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3- 基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈2，2，2-三氟乙酸盐(步骤1；6.5mg，0.0095 mmol)于DMA(635μL)中的溶液，用2-氧代哌嗪(9.53mg，0.0952mmol) 处理，且在80℃下搅拌隔夜。引入额外2-氧代哌嗪(3.18mg)，且在80℃下搅拌混合物隔夜。直接通过C18反相色谱(使用5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，得到呈TFA盐的标题化合物。TFA盐经受二氧化硅色谱法(使用0-10％MeOH/DCM+0.1％NH₄OH作为梯度洗脱液)纯化，得到标题化合物(1.17mg，6％产率)。MS(apci)m/z＝580.4(M+H)。

实例441

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-((1-甲基哌啶-4-基)氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：4-((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1] 庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的制备。6- 羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P71；50mg，0.11mmol)于DMA(1103 μL)中的溶液，依序用Cs₂CO_3(s)(108mg，0.33mmol)和4-溴哌啶-1-甲酸叔丁酯(35mg，0.13mmol)处理，随后在60℃下搅拌48h。引入额外4-溴哌啶 -1-甲酸叔丁酯(29mg)，且在60℃下搅拌反应物3d。在冷却到环境温度之后，将反应混合物分配在DCM(10mL)与水(10mL)之间，且随后用DCM(5× 10mL)萃取。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用0-10％MeOH/EtOAc作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(21mg，27％产率)。MS(apci)m/z＝637.3(M+H)。

步骤2：4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。4-((3-氰基 -4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(步骤1；21mg，0.033mmol) 于DCM(1mL)中的溶液，用TFA(1mL)处理，且在环境温度下搅拌隔夜。真空浓缩反应混合物，且通过二氧化硅色谱法(使用0-10％MeOH/DCM+0.1％ NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到呈可用于下一步骤的纯度的标题化合物(20mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝537.2(M+H)。

步骤3：4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((1-甲基哌啶-4-基)氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。 4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(步骤2；20mg，0.033mmol) 于DCM(523μL)中的混合物，依序用甲醛(9.83μL，0.131mmol)和NaBH(AcO)₃ (55.4mg，0.262mmol)处理。在环境温度下搅拌4h之后，反应混合物用MeOH 稀释，随后过滤。直接通过二氧化硅色谱法(使用0-100％DCM/己烷，且随后 0-10％MeOH/DCM+0.1％NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化滤液，干净地得到标题化合物(2.5mg，17％产率)。MS(apci)m/z＝551.3(M+H)。

实例442

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-((1-甲基哌啶-4-基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：4-(((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯2，2，2-三氟乙酸盐的制备。6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P71；50mg，0.11mmol)于DMA(1103μL)中的溶液，依序用Cs₂CO_3(s)(108mg，0.33mmol) 和4-(溴甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(46mg，0.17mmol)处理，随后在80℃下搅拌隔夜。在冷却到环境温度之后，直接通过C18反相色谱(使用5-95％ACN/ 水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物 (49mg，58％产率。MS(apci)m/z＝651.4(M+H)。

步骤2：4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(哌啶-4-基甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐) 的制备。4-(((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚 -3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯2，2，2-三氟乙酸盐(步骤1；49mg，0.064mmol)于DCM(1mL)中的溶液，用TFA (1mL)处理，且在环境温度下搅拌隔夜。反应混合物用额外TFA(1mL)处理，且进行搅拌，直到LCMS指示起始物质完全消耗为止。真空浓缩反应混合物，且通过C18反相色谱(使用5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液) 来纯化残余物，得到标题化合物(30mg，70％产率)。MS(apci)m/z＝551.3 (M+H)。

步骤3：4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((1-甲基哌啶-4-基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。 4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-(哌啶-4-基甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)(步骤2； 15mg，0.0226mmol)于DCM(500μL)中的溶液，依序用甲醛(16.8μL，0.226 mmol)和NaBH(AcO)₃(23.9mg，0.113mmol)处理。在环境温度下搅拌隔夜之后，引入额外NaBH(AcO)₃(23.9mg，0.113mmol)，且在环境温度下搅拌反应混合物，直到LCMS指示起始物质完全消耗为止。直接通过二氧化硅色谱法 (使用0-10％MeOH/DCM+0.1％NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(1mg，8％产率)。MS(apci)m/z＝565.4(M+H)。

实例443

6-((1-(2-甲氧基乙基)哌啶-4-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈。 4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-(哌啶-4-基甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)(实例 442，步骤2；15mg，0.023mmol)于DMA(112.8μL)中的溶液，依序用碳酸钾(16mg，0.11mmol)和1-溴-2-甲氧基乙烷(4.6μL，0.045mmol)处理。在60℃下搅拌隔夜之后，将反应混合物冷却到环境温度，且随后直接通过C18 反相色谱法(使用5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，得到标题化合物的TFA盐。将TFA盐溶解于MeOH中，且通过P1-HCO3树脂，并真空浓缩，干净地得到标题化合物(6mg，43％产率)。MS(apci)m/z＝609.3(M+H)。

实例444

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-(2-(1-甲基哌啶-4-基)乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：4-(2-((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的制备。6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P71；47.5mg，0.105mmol) 于DMA(1047μL)中的溶液，依序用Cs₂CO_3(s)(102mg，0.314mmol)和4-(2- 溴乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(61.2mg，0.209mmol)处理，随后在80℃下搅拌隔夜。在冷却到环境温度之后，反应混合物用水(2mL)稀释。过滤所得悬浮液，且用水(10mL)和Et₂O(5mL)冲洗固体，随后真空干燥，干净地得到标题化合物(51.5mg，74％产率)。MS(apci)m/z＝665.4(M+H)。

步骤2：4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-(哌啶-4-基)乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)的制备。4-(2-((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(步骤1；51.5mg，0.0775mmol)于DCM(1mL)中的溶液，用TFA(1.5mL) 处理，且在环境温度下搅拌1h。真空浓缩反应混合物，得到标题化合物(61.4 mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝565.3(M+H)。

步骤3：4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-(1-甲基哌啶-4-基)乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。 4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-(2-(哌啶-4-基)乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)(步骤2；30.7mg，0.0387mmol)于DCM(1000μL)中的溶液，依序用甲醛(5.82 μL，0.0775mmol)和NaBH(AcO)₃(24.6mg，0.116mmol)处理。在环境温度下搅拌30min之后，直接通过二氧化硅色谱法(使用0-100％DCM/己烷，随后 0-10％MeOH/DCM+0.1％NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(1.61mg，7％产率)。MS(apci)m/z＝579.3(M+H)。

实例445

6-(2-(1-(2-甲氧基乙基)哌啶-4-基)乙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈。

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-(2-(哌啶-4-基)乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)(实例444，步骤2；31mg，0.039mmol)于DMA(196μL)中的混合物，依序用碳酸钾(27mg，0.20mmol)和1-溴-2-甲氧基乙烷(7.4μL，0.078mmol)处理。在60℃下搅拌所得混合物，直到LCMS指示起始物质完全消耗为止。将反应混合物冷却到环境温度，且直接通过C18反相色谱(使用5-95％ACN/水+ 0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，得到标题化合物的TFA盐。将TFA盐溶解于MeOH中，通过P1-HCO3树脂，且真空浓缩，干净地得到标题化合物(17.1 mg，70％产率)。MS(apci)m/z＝623.4(M+H)。

实例446

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-(2-(吡咯烷-1-基)乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P71；28mg，0.062mmol)于DMF (309μL)中的溶液，依序用K₂CO_3(s)(26mg，0.19mmol)和1-(2-氯乙基)吡咯烷(9.9mg，0.074mmol)处理，随后在60℃下搅拌隔夜。在冷却到环境温度之后，真空浓缩反应混合物。将粗残余物溶解于1mL的60∶40 ACN/水+2％TFA 中，且通过C18反相色谱法(使用5-95％ACN/H2O+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，得到标题化合物的TFA盐。将TFA盐溶解于MeOH(5mL)中，通过P1-HCO3树脂，且真空浓缩，干净地得到标题化合物(22mg，65％产率)。 MS(apci)m/z＝551.3(M+H)。

实例447

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-(2-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)(中间物P77；42mg，0.063mmol)于DCM(500μL)中的溶液，用6-甲氧基-3-吡啶甲醛(42.9mg，0.313 mmol)和NaBH(AcO)₃(133mg，0.625mmol)处理。在环境温度下搅拌反应混合物3h之后，真空浓缩反应混合物。通过C18反相色谱(使用5-95％ACN/ 水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，得到呈TFA盐的标题化合物。将TFA盐溶解于MeOH中，通过P1-HCO3树脂，且真空浓缩，干净地得到标题化合物(6.80mg，19％产率)。MS(apci)m/z＝565.3(M+H)。

实例448

6-(氮杂环丁-3-基甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：3-(((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯的制备。6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P71；75.8mg，0.167mmol) 于DMA(334μL)中的溶液，依序用Cs₂CO_3(s)(218mg，0.669mmol)和3- 溴甲基-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(62.7mg，0.251mmol)处理，随后在60℃ 下搅拌隔夜。在冷却到环境温度之后，真空浓缩反应混合物，随后通过二氧化硅色谱法(使用0-10％MeOH/DCM+0.1％NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化，干净地得到标题化合物(52.4mg，50％产率)。MS m/z＝623.4(M+H)

步骤2：6-(氮杂环丁-3-基甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。3-(((3-氰基 -4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(步骤1；52.4mg，0.0841mmol)于DCM(1mL)中的溶液，用TFA(1mL)处理，且在环境温度下搅拌1h。真空浓缩反应混合物，且将残余物溶解于1mL的60∶40 ACN/ 水+2％TFA中，且通过C18反相色谱法(使用5-95％ACN/H₂O+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，得到标题化合物的TFA盐。将TFA盐溶解于MeOH 中，通过P1-HCO3树脂，且真空浓缩，干净地得到标题化合物(43.2mg，98％产率)。MS(apci)m/z＝523.2(M+H)。

实例449

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-((1-甲基氮杂环丁-3-基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈。

6-(氮杂环丁-3-基甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例448，步骤2；20mg，0.038mmol)于DCM(0.38mL)中的溶液，依序用甲醛(14.4μL，0.191mmol) 和NaBH(AcO)₃(81.1mg，0.383mmol)处理。在环境温度下搅拌反应混合物，直到LCMS指示起始物质完全消耗为止。直接通过C18反相色谱(使用5-95％ ACN/H₂O+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化所得混合物，得到标题化合物的 TFA盐。将TFA盐溶解于MeOH中，通过P1-HCO3树脂，随后用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤，且真空浓缩，干净地得到标题化合物(4.1mg，20％产率)。MS(apci)m/z＝537.3(M+H)。

实例450

6-((1-乙酰基氮杂环丁烷-3-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：3-(((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯的制备。6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P71；50mg，0.11mmol) 于DMF(551μL)中的溶液，依序用K₂CO_3(s)(46mg，0.33mmol)和3-溴甲基-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(33mg，0.13mmol)处理，随后在60℃下搅拌隔夜。在冷却到环境温度之后，真空浓缩反应混合物。将残余物溶解于1mL 的60∶40 ACN/水+2％TFA中，且通过C18反相色谱法(使用5-95％ACN/H₂O+ 0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，得到标题化合物的TFA盐。将TFA盐溶解于MeOH中，通过P1-HCO3树脂，且真空浓缩，干净地得到标题化合物(41 mg，59％产率)。MS(apci)m/z＝623.3(M+H)。

步骤2：6-((1-乙酰基氮杂环丁烷-3-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基) 甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。将3-(((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(41 mg，0.066mmol)溶解于1∶1 TFA∶DCM(2mL)中，且在环境温度下搅拌1h。真空浓缩所述溶液。将残余物溶解于DCM(0.3mL)中，且用TEA(18.57μL， 0.1332mmol)处理，随后用乙酸酐(9.38μL，0.1mmol)处理。在环境温度下搅拌反应物48h，直到LCMS指示起始物质完全消耗为止。反应溶液用DCM (20mL)稀释，且用盐水(3×10mL)洗涤，且用无水MgSO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用10％MeOH/DCM+0.1％NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，得到标题化合物(13.4mg，36％产率)。MS(apci) m/z＝565.3(M+H)。

实例451

6-((3-氟氮杂环丁-3-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：3-(((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)-3-氟氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯的制备。6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P71；51.5mg，0.114mmol)于DMF(0.5mL)中的溶液，依序用Cs₂CO_3(s)(148mg，0.454mmol) 和3-(溴甲基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(45.7mg，0.170mmol)处理，随后在 60℃下搅拌，直到LCMS指示起始物质完全消耗为止。在冷却到环境温度之后，随后直接通过二氧化硅色谱法(10％MeOH/DCM+0.1％NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(81mg，定量产率)。MS m/z ＝641.3(M+H)

步骤2：6-((3-氟氮杂环丁-3-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。 3-(((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)-3-氟氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(步骤1；81mg，0.13mmol)于DCM(2mL)中的溶液，用TFA(2mL)处理，且在环境温度下搅拌1h。真空浓缩反应混合物，且通过C18反相色谱(使用 5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到标题化合物的 TFA盐。将TFA盐溶解于MeOH中，通过P1-HCO3树脂，且真空浓缩，干净地得到标题化合物(15mg，22％产率)。MS(apci)m/z＝541.3(M+H)。

实例452

6-((3-氟-1-甲基氮杂环丁-3-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈。

6-((3-氟氮杂环丁-3-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例451，步骤2；13mg，0.0240mmol)于DMA(0.2mL)中的溶液，依序用甲醛(9.03μL，0.120 mmol)和NaBH(AcO)₃(51mg，0.240mmol)处理。在60℃下搅拌反应混合物，直到LCMS指示起始物质完全消耗为止。真空浓缩反应混合物，且将残余物溶解于1mL的60∶40 ACN/水+2％TFA中，且通过C18反相色谱法(使用 5-95％ACN/H₂O+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，得到标题化合物的TFA 盐。将TFA盐溶解于MeOH(5mL)中，通过P1-HCO3树脂，随后真空浓缩，干净地得到标题化合物(6.4mg，48％产率)。MS(apci)m/z＝555.3(M+H)。

实例453

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-((3-甲基氮杂环丁-3-基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈。

步骤1：3-(((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)-3-甲基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯的制备。6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P71；50mg，0.110 mmol)于DMA(0.3mL)中的溶液，依序用Cs₂CO_3(s)(144mg，0.441mmol) 和3-(溴甲基)-3-甲基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(30.8μL，0.110mmol)处理，随后在60℃下搅拌隔夜。在冷却到环境温度之后，反应混合物用EtOAc稀释，用水(3×)和盐水(1×)洗涤。合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。将粗残余物溶解于1mL的60∶40 ACN/水+2％TFA中，且通过C18反相色谱法(使用5-95％ACN/H₂O+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，得到标题化合物的TFA盐。将TFA盐溶解于MeOH(5mL)中，通过P1-HCO3 树脂，随后真空浓缩，干净地得到标题化合物(38.9mg，55％产率)。MS m/z＝ 637.3(M+H)。

步骤2：4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((3-甲基氮杂环丁-3-基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。在环境温度下，搅拌3-(((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)-3-甲基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(步骤1；38.9mg，0.0611mmol)于1∶1 DCM∶TFA(mL) 中的溶液1h。将粗残余物溶解于1mL的60∶40 ACN/水+2％TFA中，且通过 C18反相色谱法(使用5-95％ACN/H₂O+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，得到标题化合物的TFA盐。将TFA盐溶解于MeOH(5mL)中，通过P1-HCO3 树脂，且随后真空浓缩，干净地得到标题化合物(9mg，41％产率)。MS(apci) m/z＝537.2(M+H)。

实例454

6-((1，3-二甲基氮杂环丁烷-3-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈。

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-((3-甲基氮杂环丁-3-基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例453，步骤2；16mg，0.0298mmol)于DMA(0.1mL)中的溶液，依序用甲醛(11.2μL， 0.149mmol)和NaBH(AcO)₃(63.2mg，0.298mmol)处理。在60℃下搅拌反应混合物隔夜。将反应混合物冷却到环境温度，且真空浓缩。通过C18反相色谱(使用5-95％ACN∶水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，得到标题化合物的TFA盐。将TFA盐溶解于MeOH中，通过P1-HCO3树脂，用无水 Na₂SO_4(s)脱水，过滤，且真空浓缩，干净地得到标题化合物(5.6mg，34％产率)。 MS(apci)m/z＝551.3(M+H)。

实例455

6-((1-(2-甲氧基乙基)-3-甲基氮杂环丁-3-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶 -3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈。

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-((3-甲基氮杂环丁-3-基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例453，步骤2；17.3mg，0.03224mmol)于DMA(0.15mL)中的混合物，依序用碳酸钾(22.28 mg，0.1612mmol)和1-溴-2-甲氧基乙烷(6.06μL，0.0645mmol)处理。在 70℃下搅拌所得混合物隔夜。将反应混合物冷却到环境温度，且直接通过C18 反相色谱(使用5-95％ACN∶水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化，得到标题化合物的TFA盐。将TFA盐溶解于MeOH中，通过P1-HCO3树脂，且真空浓缩，干净地得到标题化合物(10.26mg，54％产率)。MS(apci)m/z＝595.3 (M+H)。

实例456

6-((1-乙酰基-3-甲基氮杂环丁-3-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-((3-甲基氮杂环丁-3-基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例453，步骤2；31.7mg，0.0591mmol)于DCM()中的溶液，依序用TEA(16.47μL，0.1181 mmol)和乙酸酐(6.32μL，0.0886mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物，直到LCMS指示起始物质完全消耗为止。反应混合物用DCM(40mL)稀释，用盐水(3×20mL)洗涤，随后用无水MgSO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。将粗残余物溶解于DCM(2mL)中，随后使用二氧化硅色谱法(使用0-10％ MeOH/DCM+0.1％NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化，得到标题化合物(19mg， 56％产率)。MS(apci)m/z＝579.3(M+H)。

实例457

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-((3-甲基氧杂环丁-3-基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例432所描述类似的程序，用3-(溴甲基)-3-甲基氧杂环丁烷替换(2-溴乙基)二甲胺，来制备、处理和纯化标题化合物(6.2mg，20％产率)。 MS(apci)m/z＝538.3(M+H)。

实例458

4-(6-(6-(6-甲氧基烟酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((3-甲基氧杂环丁-3-基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-羟基-4-(6-(6-(6-甲氧基烟酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基) 吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P72；36mg，0.077mmol)于DCM(0.2mL) 中的溶液，依序用HATU(35.13mg，0.09240mmol)、3-(溴甲基)-3-甲基氧杂环丁烷(10.60μL，0.0924mmol)和DIEA(53.29μL，0.3080mmol)处理。在环境温度下搅拌反应混合物3d之后，添加K₂CO_3(s)(4当量)。在50℃下搅拌所得混合物隔夜。在冷却到环境温度之后，反应混合物直接通过二氧化硅相色谱法(使用0-20％DCM/MeOH作为梯度洗脱液)来纯化，随后用MTBE湿磨，得到标题化合物(1.13mg，3％产率)。MS(apci)m/z＝552.2(M+H)。

实例459

6-((1r，3r)-3-羟基环丁氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((1r，3r)-3-羟基环丁氧基) 吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P78；55mg，0.14mmol)于DCM(1.0mL) 中的溶液，依序用6-甲氧基烟碱醛(22mg，0.16mmol)和冰醋酸(1.6μL， 0.027mmol)处理，随后在用NaBH(AcO)₃(43mg，0.2mmol)处理之前，在环境温度下搅拌10min。在密封容器中，在环境温度下搅拌反应混合物2h。浓缩所得混合物，且通过C18反相色谱(5-95％水-ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到呈TFA酯的标题化合物。TFA酯用MeOH(1mL)稀释，且用K₂CO_3(s)(0.19g，1.4mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物隔夜，随后真空浓缩。用DCM(20mL)稀释残余物，且过滤所得悬浮液。真空浓缩滤液，且通过二氧化硅色谱法(使用25％丙酮/DCM+0.05％NH₄OH作为洗脱液)来纯化残余物，得到标题化合物(11mg，15％产率)。MS(apci)m/z＝ 524.2(M+H)。

实例460

6-(((1s，3s)-3-羟基环丁基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P71；25mg，0.0551mmol)于DMA (551μL)中的溶液，依序用Cs₂CO_3(s)(53.9mg，0.165mmol)和顺式(1s，3s)-3-(溴甲基)环丁-1-醇(10.9mg，0.0662mmol)处理，随后在100℃下搅拌隔夜。在冷却到环境温度之后，直接通过C18反相色谱(使用5-95％ACN/水+0.1％TFA 作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，得到标题化合物的TFA盐。将TFA盐溶解于MeOH(1mL)中，通过P1-HCO3树脂，且真空浓缩，干净地得到标题化合物(6.2mg，21％产率)。MS(apci)m/z＝538.3(M+H)。

实例461

6-(2-(氮杂环丁-3-基)乙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈)

步骤1：3-(2-((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)乙基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯的制备。6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P71；50mg，0.110mmol) 于DMA(0.55mL)中的溶液，依序用K₂CO_3(s)(61mg，0.44mmol)和3-(2- 碘乙基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(41mg，0.13mmol)处理，随后在60℃下搅拌隔夜。添加额外3-(2-碘乙基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(41mg，0.13mmol)，且在60℃下搅拌反应物，直到LCMS指示起始物质完全消耗为止。在冷却到环境温度之后，反应混合物用EtOAc稀释，且用水(3×)和盐水(1×)洗涤。合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱(使用5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(70mg，定量产率)。MS m/z＝637.4(M+H)。

步骤2：4 6-(2-(氮杂环丁-3-基)乙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。 3-(2-((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)乙基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(步骤 1；40.1mg，0.0630mmol)于DCM(2mL)中的溶液，用TFA(2mL)处理，且在环境温度下搅拌，直到LCMS指示起始物质完全消耗为止。真空浓缩反应混合物，得到标题化合物的TFA盐。通过二氧化硅色谱法(使用5-95％ DCM/MeOH+1％NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化TFA盐，干净地得到标题化合物(mg，9mg，36.2％产率)。MS(apci)m/z＝537.2(M+H)。

实例462

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-(2-(1-甲基氮杂环丁-3-基)乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈。

4 6-(2-(氮杂环丁-3-基)乙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐) (实例461，步骤2；34mg，0.0523mmol)于DMA(0.26mL)中的溶液，依序用甲醛(7.26μL，0.261mmol)和NaBH(AcO)₃(111mg，0.523mmol)处理。在60℃下搅拌反应混合物隔夜。将反应混合物冷却到环境温度，且真空浓缩。通过C18反相色谱(使用5-95％ACN∶水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，得到标题化合物的TFA盐。将TFA盐溶解于MeOH(5mL)中，通过P1-HCO3树脂，且真空浓缩，干净地得到标题化合物(5mg，17％产率)。 MS(apci)m/z＝551.4(M+H)。

实例463

2-((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3- 基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)乙酰胺

使用针对实例460所描述类似的程序，来制备标题化合物，不同之处在于在60℃下进行反应，用ACN替换DMA作为反应溶剂，使用4当量的Cs₂CO_3(s)， 2-溴乙酰胺(1.5当量)替换顺式(1s，3s)-3-(溴甲基)环丁-1-醇作为卤代烷，且省去纯化步骤。在完成后，将反应混合物冷却到环境温度。过滤反应混合物，且真空浓缩，干净地得到标题化合物(28mg，96％产率)。MS(apci)m/z＝511.2 (M+H)。

实例464

2-((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3- 基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)-N-甲基乙酰胺

6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P71；25mg，0.055mmol)于DMA (551μL)中的溶液，依序用Cs₂CO_3(s)(72mg，0.22mmol)、KI(9.2mg，0.055 mmol)和2-氯-N-甲基乙酰胺(8.9mg，0.083mmol)处理，随后在60℃下搅拌隔夜。在冷却到环境温度之后，真空浓缩反应混合物，且通过C18反相色谱法(使用5-95％ACN∶水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到标题化合物的TFA盐。将TFA盐溶解于MeOH(5mL)中，通过P1-HCO3树脂，且真空浓缩，干净地得到标题化合物(8.5mg，29％产率)。MS(apci)m/z＝525.2 (M+H)。

实例465

2-((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3- 基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)-N，N-二甲基乙酰胺

使用针对实例432所描述类似的程序，用氯乙酰基二甲胺替换(2-溴乙基) 二甲胺，来制备、处理和纯化标题化合物(5.74mg，16％产率)。MS(apci)m/z ＝539.2(M+H)。

实例466

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-((1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例470所描述类似的程序，来制备和纯化标题化合物(11mg， 30％产率)，不同之处在于，使用4当量的Cs₂CO_3(s)，且5-(氯甲基)-1-甲基-1H- 咪唑(1.5当量)替换N-(2-氯乙基)-咪唑盐酸盐作为卤代烷。MS(apci)m/z＝548.2 (M+H)。

实例467

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-((1-甲基-1H-咪唑-4-基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P71；25mg，0.055mmol)于DMA (551μL)中的溶液，依序用Cs₂CO_3(s)(54mg，0.17mmol)和4-(氯甲基)-1-甲基-1H-咪唑(11mg，0.083mmol)处理，随后在100℃下搅拌隔夜。在冷却到环境温度之后，将反应混合物分配在DCM与水之间。通过二氧化硅色谱法(使用色谱柱0-10％MeOH+1％NH₄OH作为梯度洗脱液)，随后第二二氧化硅色谱法(使用0-100％EtOAc/己烷，随后0-10％MeOH/EtOAc作为梯度洗脱液)来纯化所得有机萃取物，干净地得到标题化合物(4mg，13％产率)。MS(apci)m/z ＝548.2(M+H)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.38(d，1H)，8.35(d，1H)，8.20(s， 1H)，8.10(d，1H)，7.77(dd，1H)，7.62(dd，1H)，7.48(d，1H)，7.18(d，1H)，7.03(d， 1H)，6.71(d，1H)，6.67(d，1H)，5.08(s，2H)，3.92(s，3H)，3.82，(m，4H)，3.69(s， 3H)，3.59(m，4H)，2.69(m，1H)，1.66(d，1H)。

实例468

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-(恶唑-2-基甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例460所描述类似的程序，来制备和纯化标题化合物(11mg， 30％产率)，不同之处在于，在环境温度下进行反应，DMF替换DMA作为反应溶剂，使用4当量的Cs₂CO_3(s)，2-氯甲基-恶唑(2.9当量)替换顺式(1s，3s)-3-(溴甲基)环丁-1-醇作为卤代烷，且在纯化中使用的梯度洗脱液是0-50％水/ACN+ 0.1％TFA。将TFA盐溶解于MeOH(5mL)中，通过P1-HCO3树脂，且真空浓缩，干净地得到标题化合物。MS(apci)m/z＝535.2(M+H)

实例469

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-((4-甲基恶唑-2-基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例460所描述类似的程序，来制备和纯化标题化合物(11mg， 30％产率)，不同之处在于，在环境温度下进行反应，DMF替换DMA作为反应溶剂，使用4当量的Cs₂CO_3(s)，2-(氯甲基)-4-甲基恶唑替换顺式(1s，3s)-3-(溴甲基)环丁-1-醇作为卤代烷，且在纯化中使用的梯度洗脱液是0-50％水/ACN+ 0.1％TFA。将TFA盐溶解于MeOH(5mL)中，通过P1-HCO3树脂，且真空浓缩，干净地得到标题化合物。MS(apci)m/z＝549.3(M+H)

实例470

6-(2-(1H-咪唑-1-基)乙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P71；30mg，0.066mmol)于DMA (132μL)中的溶液，依序用K₂CO_3(s)(9.1mg，0.066mmol)和N-(2-氯乙基)- 咪唑盐酸盐(13mg，0.079mmol)处理，随后在60℃下搅拌隔夜。在冷却到环境温度之后，反应混合物用EtOAc稀释，用水(3×)和盐水(1×)洗涤。有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱(使用60：40 MeCN/水+2％TFA作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，得到标题化合物的TFA 盐。将TFA盐溶解于MeOH(5mL)中，通过P1-HCO3树脂，且真空浓缩，干净地得到标题化合物(19mg，52％产率)。MS(apci)m/z＝548.3(M+H)。

实例471

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-(吡啶-3-基甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例446所描述类似的程序，来制备和纯化标题化合物(2.8mg， 9％产率)，不同之处在于，使用DMA替代DMF，使用4当量的Cs₂CO_3(s)，且 3-(碘甲基)吡啶氢碘酸盐(1.5当量)替换1-(2-氯乙基)吡咯烷作为卤代烷。MS (apci)m/z＝545.2(M+H)。

实例472

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-((1-甲基-1H-咪唑-2-基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例446所描述类似的程序，来制备和纯化标题化合物(2.8mg， 9％产率)，不同之处在于，使用DMA替代DMF，使用4当量的Cs₂CO_3(s)，且 2-(氯甲基)-1-甲基-1H-咪唑替换1-(2-氯乙基)吡咯烷作为卤代烷。MS(apci)m/z ＝548.3(M+H)。

实例473

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-((S)-3，3，3-三氟-2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P71；25mg，0.055mmol)于DMA (551.3μL)中的溶液，依序用Cs₂CO_3(s)(53.88mg，0.1654mmol)和(S)-(-)-3，3，3- 三氟-1，2-环氧丙烷(7.160μL，0.08269mmol)处理，随后在80℃下搅拌隔夜。引入额外(S)-(-)-3，3，3-三氟-1，2-环氧丙烷(2.38μL)，且在80℃下搅拌反应物隔夜。在冷却到环境温度之后，直接通过二氧化硅色谱法(使用0-100％EtOAc/ 己烷，随后0-10％MeOH/EtOAc作为梯度洗脱液)，随后再次通过C18反相色谱法(使用5-95％水-ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，得到标题化合物的TFA盐。将TFA盐溶解于MeOH(5mL)中，通过P1-HCO3 树脂，且真空浓缩，干净地得到标题化合物(1mg，3％产率)。MS(apci)m/z＝ 566.2(M+H)。

实例474

6-((R)-2-羟基丙氧基)-4-(6-(6-((5-甲氧基吡嗪-2-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((R)-2-羟基丙氧基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)(中间物P80；25mg，0.0404mmol)于 DCE(202μL)中的溶液，依序用5-甲氧基吡嗪-2-甲醛(11mg，0.081mmol)，随后用NaBH(AcO)₃(26mg，0.12mmol)处理。在环境温度下搅拌1h之后，直接通过二氧化硅色谱法(使用0-100％DCM/己烷，随后0-60％(2％ NH₄OH/20％MeOH/78％DCM)/DCM作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，得到标题化合物(10mg，48％产率)。MS(apci)m/z＝513.2(M+H)。

实例475

4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶 -3-基)-6-((R)-2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例474所描述类似的程序，在通过LCMS检测反应完成之后，且用5-氟-6-甲氧基烟碱醛替换5-甲氧基吡嗪-2-甲醛，来制备和纯化标题化合物 (1.36mg，6％产率)。MS(apci)m/z＝530.2(M+H)。

实例476

6-((R)-2-羟基丙氧基)-4-(6-(6-(6-甲氧基烟酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3- 基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((R)-2-羟基丙氧基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P81；75mg，0.19mmol)于DCM(3842μL)中的溶液，依序用2-甲氧基-5-吡啶甲酸(35.30mg，0.2305mmol)、HATU(87.65mg， 0.2305mmol)和DIEA(133.8μL，0.7684mmol)处理，在环境温度下搅拌2h。直接通过二氧化硅色谱法(使用50-100％EtOAc/己烷，随后0-20％MeOH/EtOAc 作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，得到标题化合物(47.92mg，47％产率)。 MS(apci)m/z＝526.2(M+H)。

实例477

6-((S)-2-羟基丙氧基)-4-(6-(6-((5-甲氧基吡嗪-2-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例474所描述类似的程序，在通过LCMS检测反应完成之后，用4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((S)-2-羟基丙氧基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)(中间物P83)替换4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((R)-2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双 (2，2，2-三氟乙酸盐)，来制备和纯化标题化合物(7.91mg，38％产率)。MS(apci) m/z＝513.2(M+H)。

实例478

4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶 -3-基)-6-((S)-2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例474所描述类似的程序，在LCMS检测反应完成之后，用5- 氟-6-甲氧基烟碱醛替换5-甲氧基吡嗪-2-甲醛，且用4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1] 庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((S)-2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)(中间物P83)替换4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-((R)-2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2,2-三氟乙酸盐)，来制备和纯化标题化合物(5.37mg，25％产率)。MS(apci)m/z＝530.2(M+H)。

实例479

4-(6-(6-((5-氯-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶 -3-基)-6-((S)-2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例474所描述类似的程序，在LCMS检测反应完成之后，用5- 氯-6-甲氧基烟碱醛替换5-甲氧基吡嗪-2-甲醛，且用4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1] 庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((S)-2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)(中间物P83)替换4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-((R)-2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)，来制备和纯化标题化合物(4.66mg，26％产率)。MS(apci)m/z＝546.2(M+H)。

实例480

4-(6-(6-((6-(二氟甲氧基)吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((S)-2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例474所描述类似的程序，在LCMS检测反应完成之后，用6-(二氟甲氧基)烟碱醛替换5-甲氧基吡嗪-2-甲醛，且用4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1] 庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((S)-2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)(中间物P83)替换4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3- 基)-6-((R)-2-羟基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)，来制备和纯化标题化合物(9.19mg，52％产率)。MS(apci)m/z＝548.2(M+H)。

实例481

6-((S)-2-羟基丙氧基)-4-(6-(6-(6-甲氧基烟酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3- 基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((S)-2-羟基丙氧基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2,2-三氟乙酸盐)(中间物P83；20mg，0.032mmol)于 DCM(646.4μL)中的溶液，依序用2-甲氧基-5-吡啶甲酸(5.942mg，0.03880 mmol)、HATU(14.75mg，0.03880mmol)和DIEA(22.53μL，0.1293mmol) 处理，在环境温度下搅拌2h。直接通过二氧化硅色谱法(使用梯度0-100％DCM/ 己烷，随后0-60％(2％NH₄OH/20％MeOH/78％DCM)/DCM作为梯度洗脱液) 来纯化反应混合物，得到标题化合物(13.85mg，81％产率)。MS(apci)m/z＝ 526.2(M+H)。

实例482

6-((R)-2，3-二羟基丙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例460所描述类似的程序，用(R)-4-氯甲基-2，2-二甲基-1，3-二氧杂环戊烷(1.2当量)替换顺式(1s，3s)-3-(溴甲基)环丁-1-醇，来制备和纯化标题化合物(5.74mg，16％产率)。MS(apci)m/z＝528.3(M+H)。

实例483

6-((R)-3-(二甲氨基)-2-羟基丙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6- 二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：((2R)-3-((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环 [3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)-2-羟丙基)氨基甲酸叔丁酯双(2，2，2-三氟乙酸盐)的制备。6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P71；50 mg，0.110mmol)于DMA(221μL)中的溶液，依序用K₂CO_3(s)(60.9mg，0.441 mmol)和(R)-1-(叔丁氧基羰基)-2，3-环氧乙胺(22.9μL，0.132mmol)处理，随后在60℃下搅拌16h。引入额外(R)-1-(叔丁氧基羰基)-2，3-环氧乙胺(9.54μL)，且在60℃下再搅拌反应物16h。在冷却到环境温度之后，反应混合物用EtOAc 稀释，用水(3×)洗涤且随后用盐水(1×)洗涤。有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱(使用5-95％水-ACN+0.1％TFA 作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(19.5mg，28％产率)。MS m/z＝627.3(M+H)

步骤2：6-((R)-3-氨基-2-羟基丙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6- 二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)的制备。((2R)-3-((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)-2-羟丙基)氨基甲酸叔丁酯(步骤1；16.2mg，0.0258mmol)于DCM(1mL)中的溶液，用TFA(1 mL)处理，且在环境温度下搅拌1h。真空浓缩反应混合物，得到呈定量产率的标题化合物。MS m/z＝527.3(M+H)。

步骤3：6-((R)-3-(二甲氨基)-2-羟基丙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶3-甲腈的制备。6-((R)-3-氨基-2-羟基丙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)(19.5mg，0.0258mmol)于DCM(258μL)中的混合物，依序用甲醛(19.2μL，0.258 mmol)和NaBH(AcO)₃(27.4mg，0.129mmol)处理。在环境温度下搅拌隔夜之后，反应混合物用EtOAc稀释，用水(3×)洗涤且随后用盐水(1×)洗涤。有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱(使用 5-95％水-ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(6.2mg，43％产率)。MS(apci)m/z＝555.3(M+H)。

实例484

6-((1-羟基环丙基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-((1-羟基环丙基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P84；50.7mg，0.107mmol)和6-甲氧基烟碱醛(137.1mg，1.943mmol)于DCM(1.0mL)中的溶液，依序用 NaBH(AcO)₃(514.8mg，2.429mmol)和3滴冰醋酸处理。在依序引入额外6- 甲氧基烟碱醛(29.3mg，0.213mmol)和NaBH(AcO)₃(45.2mg，0.213mmol) 之前，在环境温度下搅拌所得混合物16h。在环境温度下搅拌所得混合物20h。直接通过C18反相色谱(使用5-95％水-ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，得到呈TFA盐的标题化合物。TFA盐用4∶1 DCM∶iPrOH稀释，且用饱和NaHCO_3(aq)萃取。有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用1-30％DCM-MeOH+2％NH₄OH作为梯度洗脱液) 来再纯化残余物，干净地得到标题化合物(13.2mg，24％产率)。MS(apci)m/z ＝524.2(M+H)。

实例485

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(3-(6-甲氧基烟酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚 -6-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：6-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-甲酸叔丁酯的制备。在惰性氛围(N_2(g))下， 3，6-二氮杂-双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(49.3g，249mmol)于DMSO(200mL) 中的机械搅拌悬浮液，用4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P42；58g，178mmol)和DIEA(93.1mL，533mmol) 处理，在90℃下搅拌42h。在冷却到环境温度之后，将反应混合物倒入冰水(2 L)中。在添加庚烷(1L)之前，搅拌水性混合物15min。剧烈搅拌双相混合物2h。真空过滤所得双相悬浮液，且依序用水(3×200mL)和庚烷(3×200 mL)冲洗固体，得到产物混合物，所述产物混合物含有5-20％的标题化合物， 6-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-甲酸叔丁酯与区位异构物3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(中间物P43，步骤1)(92g，定量产率)。将区位异构混合物用于步骤2 中而无需分离(注意：在这些反应条件下，3，6-二氮杂-双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯可部分地异构化成区位异构物3，6-二氮杂-双环[3.1.1]庚烷-3-甲酸叔丁酯)。MS(apci)m/z＝505.3(M+H)。

步骤2：4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐的制备。在惰性氛围(N_2(g))下，6-(5-(3- 氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-甲酸叔丁酯和3-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(步骤1； 92g，182mmol)于DCM(456mL)中的区位异构混合物的0℃溶液，在15min 时段内，用TFA(281mL)逐滴处理。使所得混合物升温到环境温度。在环境温度下搅拌3h之后，真空浓缩反应混合物。在惰性氛围(N_2(g))下，所得油用 MeOH(600mL)稀释，且冷却到0℃。在15min时段内，所述冷(0℃)溶液用含5M HCl的丙醇(365mL，1823mmol)逐滴处理。在环境温度下搅拌30min 之后，真空过滤所得混合物，用MeOH(150mL)冲洗固体。在惰性氛围(N_2(g)) 下，将粗固体悬浮于4∶1 MTBE∶MeOH(500mL)中，冷却到0℃，随后再次用含5M HCl的丙醇(73mL，364.6mmol)处理。在环境温度下搅拌15min之后，过滤所得悬浮液，用4∶1 MTBE∶MeOH(200mL)冲洗固体。收集固体且真空干燥，得到产物混合物，所述产物混合物含有5-20％的标题化合物，4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐与其区位异构物4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43，步骤2)(80.2g，定量产率)。区位异构混合物用于步骤3中而无需分离。 MS(apci)m/z＝405.2(M+H)。

步骤3：6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(3-(6-甲氧基烟酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐与其区位异构物4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基 -2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(步骤2；2.16g，4.52mmol) 于DMSO(22.6mL)中的区位异构混合物的溶液，依序用6-甲氧基烟酸(0.831 g，5.43mmol)、DIEA(2.52mL，14.5mmol)和HATU(2.06g，5.43mmol) 处理。在环境温度下搅拌反应混合物1h。真空过滤所得悬浮液，且收集固体。从热EtOAc再结晶固体，冷却到环境温度隔夜。通过过滤收集结晶材料，且真空浓缩滤液。通过二氧化硅色谱法来纯化来自滤液的残余物。合并来自色谱纯化的残余物和通过过滤收集的固体，且将其溶解于ACN(12mL)中。在82℃ 下搅拌混合物，随后冷却到环境温度，用水(18mL)稀释，且在环境温度下搅拌2d。真空过滤所得悬浮液，得到产物混合物(1.63g，67％产率)，所述产物混合物含有5-20％的标题化合物，6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(3-(6-甲氧基烟酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈与区位异构物6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-(6-甲氧基烟酰基)-3，6-二氮杂双环 [3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈。在步骤4中分离区位异构混合物。

步骤4：6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(3-(6-甲氧基烟酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的分离。

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(3-(6-甲氧基烟酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚 -6-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈和6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-(6-甲氧基烟酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈(50mg，0.0927mmol)于60∶40 ACN∶水+2％TFA(1.2mL) 中的区位异构混合物的溶液，通过C18反相色谱法(使用25-75％ACN∶水+0.1％ TFA作为梯度洗脱液)来纯化，独立地得到6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(3-(6- 甲氧基烟酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的TFA盐。TFA盐用饱和NaHCO_3(aq)(10mL)稀释，且用DCM(2×10mL) 萃取。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，得到不含区位异构物的标题化合物(26.4mg，53％回收率)。MS(apci)m/z＝540.3(M+H)。

实例486

4-(6-(4-苯甲基-3-氧代哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在微波容器中，4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P42；25.0mg，0.0766mmol)和1-苯甲基-哌嗪-2-酮(58.2mg， 0.306mmol)于DMA(2mL)中的溶液，用TEA(52.0μl，0.383mmol)处理。密封反应容器，且反应混合物在150℃下经受微波照射14h。将反应混合物冷却到环境温度，随后用EtOAc稀释，用水(3×)和盐水(1×)洗涤，随后真空浓缩。通过C18反相色谱(使用5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液) 来纯化粗残余物，得到标题化合物的TFA盐。将TFA盐溶解于4∶1 DCM/iPrOH 中，且用饱和NaHCO_3(aq)萃取。有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，干净地得到标题化合物(14.3mg，38％产率)。MS(apci)m/z＝497.2 (M+H)。

实例487

(R)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

(R)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(2-甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)(中间物P85；13mg，0.0205mmol)于 DCE(512μL)中的溶液，依序用6-甲氧基烟碱醛(5.62mg，0.0410mmol) 和NaBH(AcO)₃(13.0mg，0.0615mmol)处理。在环境温度下搅拌反应混合物 1h之后，直接通过二氧化硅色谱法(使用0-100％DCM/己烷，随后0-60％(2％ NH₄OH/20％MeOH/78％DCM)/DCM作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，得到标题化合物(1.80mg，17％产率)。MS(apci)m/z＝528.3(M+H)。

实例488

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-4，7-二氮杂螺 [2.5]辛-7-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(4，7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)(中间物P86；20mg，0.031mmol)于 DCE(155μL)中的溶液，依序用6-甲氧基烟碱醛(8.5mg，0.062mmol)和 NaBH(AcO)₃(20mg，0.093mmol)处理。在环境温度下搅拌反应混合物1h 之后，直接通过二氧化硅色谱法(使用0-100％DCM己烷，随后0-60％(2％ NH₄OH/20％MeOH/78％DCM)/DCM作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，得到标题化合物(1.0mg，6％产率)。MS(apci)m/z＝540.3(M+H)。

实例489

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(9-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-氧杂-7，9-二氮杂双环[3.3.1]壬-7-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3-氧杂-7，9-二氮杂双环[3.3.1]壬-7-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)(中间物P87；28mg，0.042mmol)于DCM(1mL)中的溶液，依序用TEA(27μL，0.19mmol)、6-甲氧基烟碱醛(8.5mg，0.062mmol)和NaBH(AcO)₃(27mg，0.13mmol)处理。在环境温度下搅拌反应混合物12h之后，反应混合物用水稀释，且用DCM萃取。有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法 (使用10％MeOH/DCM+1％NH₄OH作为洗脱液)来纯化粗残余物，得到标题化合物(7.5mg，31％产率)。MS(apci)m/z＝556.3(M+H)。

实例490

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(9-(6-甲氧基烟酰基)-3-氧杂-7,9-二氮杂双环 [3.3.1]壬-7-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3-氧杂-7，9-二氮杂双环[3.3.1]壬-7-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)(中间物P87；28mg，0.042mmol)、6-甲氧基烟酸(15mg，0.097mmol)和HATU(27mg，0.071mmol) 于DMSO(600μL)中的混合物，用TEA(27μL，0.19mmol)处理。在环境温度下搅拌12h之后，将反应混合物倒入水(5mL)中，且在环境温度下搅拌 1h。过滤所得悬浮液，用水冲洗。收集固体，且通过二氧化硅色谱法(使用10％ MeOH/DCM+1％NH₄OH作为洗脱液)来纯化，干净地得到标题化合物(5mg，21％产率)。MS(apci)m/z＝570.2(M+H)。

实例491

4-(5-氟-6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶 -3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)-5-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2,2-三氟乙酸盐)(14mg，0.0215mmol)(中间物P88；28mg，0.064mmol)于DCE(108μL)中的溶液，依序用6-甲氧基烟碱醛(5.90mg，0.0430mmol)和NaBH(AcO)₃(13.7mg，0.0646mmol)处理。在环境温度下搅拌反应混合物1h之后，直接通过二氧化硅色谱法(使用0-100％ DCM/己烷，随后0-60％(2％NH₄OH/20％MeOH/78％DCM)/DCM作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，得到标题化合物(6.17mg，53％产率)。MS(apci) m/z＝544.2(M+H)。

实例492

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)-5-甲基吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)-5-甲基吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)(中间物P89；10mg，0.0155mmol)于DCE(77.3μL)中的溶液，依序用6-甲氧基烟碱醛(4.24mg，0.0309 mmol)和NaBH(AcO)₃(9.83mg，0.0464mmol)处理。在环境温度下搅拌1h 之后，直接通过二氧化硅色谱法(使用0-100％DCM己烷，随后0-60％(2％Nh4OH/20％MeOH/78％DCM)/DCM作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，得到标题化合物(3.41mg，41％产率)。MS(apci)m/z＝540.2(M+H)。

实例493

4-(5-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡嗪 -2-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(5-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)(中间物P90；25mg，0.0395mmol) 于DCE(197μL)中的溶液，依序用5-氟-6-甲氧基烟碱醛(12.2mg，0.0789mmol) 和NaBH(AcO)₃(25.1mg，0.118mmol)处理。在环境温度下搅拌1h之后，直接通过二氧化硅色谱法(使用0-100％DCM/己烷，随后0-60％(2％NH₄OH/20％ MeOH/78％DCM)/DCM作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，得到标题化合物(8.17mg，38％产率)。MS(apci)m/z＝545.2(M+H)。

实例494

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(5-(6-((5-甲氧基吡嗪-2-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例493所描述类似的程序，用5-甲氧基吡嗪-2-甲醛替换5-氟-6- 甲氧基烟碱醛，来制备和纯化标题化合物(2.1mg，10％产率)。MS(apci)m/z＝ 528.2(M+H)。

实例495

4-(5-(6-((6-(二氟甲氧基)吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对实例493所描述类似的程序，用6-(二氟甲氧基)烟碱醛替换5-氟 -6-甲氧基烟碱醛，来制备和纯化标题化合物(3.81mg，17％产率)MS(apci)m/z ＝563.2(M+H)。

实例496

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(4-(6-(6-甲氧基烟酰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚 -3-基)苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(4-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)苯基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P49；20mg，0.05mmol)于DCM(600μL)中的溶液，依序用6-甲氧基烟酸(8.350mg，0.05452mmol)、HATU(22.62mg， 0.05948mmol)和DIEA(34.54μL，0.1983mmol)处理。在环境温度下搅拌4h 之后，直接通过二氧化硅色谱法(使用50-100％EtOAc/己烷，随后0-20％ MeOH/EtOAc作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物 (20.48mg，77％产率)。MS(apci)m/z＝539.2(M+H)。

实例497

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(2-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)嘧啶-5-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(2-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)嘧啶-5-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P91；54mg，0.11mmol)于DCM(1 mL)中的溶液，依序用6-甲氧基烟碱醛(23mg，0.17mmol)、NaBH(AcO)₃ (120mg，0.56mmol)和DMA(500μL)处理。在环境温度下搅拌隔夜之后，直接通过二氧化硅色谱法(使用5％MeOH/DCM作为洗脱液)来纯化反应混合物，得到标题化合物(29mg，48％产率)。MS(apci)m/z＝527.2(M+H)。

实例498

1-((3-氯-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基) 吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)-2-甲基丙-2-醇

1-((4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-3-氯吡唑并[1，5-a]吡啶 -6-基)氧基)-2-甲基丙-2-醇2，2，2-三氟乙酸盐(中间物P92；50mg，0.098mmol) 于DMA(750μL)中的溶液，用TEA(150μL，0.098mmol)、6-甲氧基烟碱醛(40mg，0.29mmol)和NaBH(AcO)₃(62.1mg，0.293mmol)处理。在环境温度下搅拌3h之后，反应混合物用水淬灭，且用DCM(3×)萃取。经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用0-20％MeOH(2％NH₄OH)/DCM+作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，得到标题化合物(49.5mg，95％产率)。MS(apci)m/z＝535.2(M+H)。

实例499

1-((3-氯-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3- 基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)-2-甲基丙-2-醇

使用针对实例498所描述类似的程序，用5-氟-6-甲氧基烟碱醛替换6-甲氧基烟碱醛，来制备和纯化标题化合物(45mg，83％产率)。MS(apci)m/z＝553.2 (M+H)。

实例500

1-((3-氯-4-(6-(6-((6-(二氟甲氧基)吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚 -3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)-2-甲基丙-2-醇2，2,2-三氟乙酸盐

使用针对实例498所描述类似的程序，用6-(二氟甲氧基)烟碱醛替换6-甲氧基烟碱醛，使用过量TEA(6当量)，且将反应持续时间从3h延长到隔夜，来制备标题化合物。在C18反相色谱法(使用5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)之后，分离出标题化合物(17.2mg，44％产率)。MS(apci)m/z＝ 571.2(M+H)。

实例501

1-((3-氯-4-(6-(6-((6-乙氧基-5-氟吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3- 基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)-2-甲基丙-2-醇2,2，2-三氟乙酸盐

使用针对实例498所描述类似的程序，用6-乙氧基-5-氟烟碱醛替换6-甲氧基烟碱醛，使用过量TEA(6当量)，且将反应持续时间从3h延长到隔夜，来制备标题化合物。在C18反相色谱法(使用5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)之后，分离出标题化合物(13.5mg，33％产率)MS(apci)m/z＝567.2 (M+H)。

实例502

3-(5-(3-氯-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2- 基)-N-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酰胺2，2，2-三氟乙酸盐

三光气(16.6mg，0.0561mmol)于DCM(250μL)中的冷(0℃)溶液，用DIEA(64.6μL，0.374mmol)和6-甲氧基吡啶-3-胺(8.70mg，0.0701mmol) 处理。在0℃下搅拌所得混合物1h。向冷(0℃)三光气溶液中，添加1-((4-(6-(3，6- 二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-3-氯吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)-2-甲基丙-2-醇2，2，2-三氟乙酸盐(中间物P92；30mg，0.0467mmol)。在用水淬灭之前，在环境温度下搅拌所得混合物隔夜。在PS玻璃料中，用DCM(3×)萃取双相混合物。真空浓缩经合并的有机萃取物，且通过C18反相色谱法(使用 5-95％水-ACN+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(11.5mg，44％产率)。MS(apci)m/z＝564.2(M+H)。

实例503

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(2-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-2，7-二氮杂螺 [3.5]壬-7-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：2-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-2，7-二氮杂螺\[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯的制备。向2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯盐酸盐(100mg，0.381mmol) 于1，2-二氯乙烷(761μL)中的悬浮液中，添加6-甲氧基烟碱醛(104mg，0.761 mmol)随后添加三乙酰基硼氢化钠(242mg，1.14mmol)。在环境温度下搅拌隔夜之后，直接通过二氧化硅色谱法(30-100％EtOAc/己烷)来纯化反应物，得到标题化合物(100mg，76％产率)。LCMS m/z 348.2(M+H)。

步骤2：2-((6-甲氧基吡啶-3-基）甲基)-2，7-二氮杂螺\[3.5]壬烷双(2，2，2-三氟乙酸盐)的制备。向2-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(100mg，0.288mmol)于DCM(3mL)中的溶液中，添加TFA(3mL)。在rt下搅拌1h之后，真空浓缩反应物，得到呈定量产率的标题化合物，其直接用于下一步骤中。LCMS m/z 248.1(M+H)。

步骤3.6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(2-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的制备。2-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷双(2，2，2-三氟乙酸盐)(131.1mg，0.27 mmol)、4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P42；40mg，0.12mmol)和K₂CO₃(169mg，1.2mmol)于DMSO(613 μL)中的混合物，在80℃下搅拌隔夜。将反应混合物分配在DCM与水(各10 mL)之间。在相分离之后，用DCM(3×10mL)萃取水层。合并有机萃取物，且用盐水(10mL)洗涤，随后脱水(Na₂SO₄)，过滤且浓缩。通过二氧化硅色谱法(0-100％EtOAc/己烷，随后0-20％MeOH/EtOAc)来纯化残余物，得到呈固体状的标题产物(16mg，24％产率)。LCMS m/z：554.2(M+H)。

实例504

6-乙氧基-4-(6-(4-(6-甲氧基吡啶-3-基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

对6-乙氧基-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P94；50mg，0.12mmol)、5-溴-2-甲氧基吡啶(23.04μL，0.1780mmol)、 KOtBu(66.58mg，0.5934mmol)、Pd₂(dba)₃·CHCl₃(6.142mg，0.005934mmol) 和X-phos(11.31mg，0.02373mmol)于甲苯(1187μL)中的混合物，用N_2(g)鼓泡30秒。在密封反应容器之后，在100℃下搅拌反应混合物17h。将反应混合物冷却到环境温度，且分配在水(10mL)与DCM(10mL)之间。在相分离之后，水性萃取物用额外DCM(3×5mL)洗涤。经合并的DCM萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱(使用5-55％ACN/ 水作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(2.8mg，5％产率)。大量额外标题化合物保留在水性萃取物中。真空浓缩水性萃取物，且通过 C18反相色谱法(使用5-45％ACN/水作为梯度洗脱液)来纯化残余物，干净地得到额外标题化合物(6mg，11％产率)。合并从两次色谱纯化分离的标题化合物(9mg，16％产率)。MS(apci)m/z＝456.2(M+H)。

实例505

(1S，4S)-5-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯

在90℃下，搅拌6-乙氧基-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P6；100mg，0.354mmol)、(1S,4S)-2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯(84.3mg，0.425mmol)和DIEA(185μL，1.06mmol)于DMSO(886μL) 中的浆液23h。引入额外(1S，4S)-2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯(大约20mg，0.10mmol)，且在90℃下额外搅拌混合物3d。在冷却到环境温度之后，搅拌所得浆液2h。真空过滤浆液，依序用几滴DMSO和MTBE(3×1mL) 冲洗固体。将滤液缓慢倒入水(7mL)中，且在环境温度下搅拌悬浮液1h。真空过滤水性悬浮液，且用水(3×5mL)和庚烷(3×5mL)冲洗固体。将来自两种滤过物的所分离固体合并，干净地得到标题化合物(149.2mg，90％产率)。MS(apci)m/z＝461.2(M+H)。

实例506

4-(6-((1S，4S)-2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐

在环境温度下，(1S，4S)-5-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯(实例505；88.8mg，0.193mmol) 于MeOH(386μL)中的悬浮液，用浓(12M)HCl(321μL，3.86mmol)处理。在用额外MeOH(1mL)稀释之前，在环境温度下搅拌所得溶液17h。真空浓缩混合物，且将残余物悬浮于MTBE(2mL)和MeOH(0.5mL)中。涡旋所得浆液，且进行短暂超声处理，且随后真空过滤。用MTBE和EtOAc冲洗固体，且真空干燥，干净地得到标题化合物(64.2mg，77％产率)。MS(apci)m/z ＝361.2(M+H)。

实例507

6-乙氧基-4-(6-((1S，4S)-5-(6-甲氧基吡啶-3-基)-2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2- 基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

对4-(6-((1S，4S)-2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(实例506；25mg，0.058mmol)、5-溴-2-甲氧基吡啶(11.20μL，0.08654mmol)、KOtBu(22.66mg，0.2019mmol)、Pd₂(dba)₃·CHCl₃ (2.986mg，0.002885mmol)和X-phos(5.501mg，0.01154mmol)于甲苯(576.9 μL)中的混合物，用N_2(g)鼓泡30秒。在密封反应容器之后，在100℃下搅拌反应混合物2d。将反应混合物冷却到环境温度，随后直接通过C18反相色谱(使用5-65％ACN/水作为梯度洗脱液)来纯化，干净地得到标题化合物(12.5mg， 44％产率)。MS(apci)m/z＝468.2(M+H)。

实例508

6-乙氧基-4-(6-(1-甲苯磺酰基-1，6-二氮杂螺[2.5]辛-6-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在环境温度下，搅拌4-(6-(4-氨基-4-(羟甲基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P93；78.5mg，0.200mmol)、TsCl (114mg，0.600mmol)、DMAP(4.89mg，0.0400mmol)和TEA(139μL，1.00 mmol)于DCM(3mL)中的混合物1.5h。添加额外TsCl(38mg，0.20mmol)。在环境温度下额外搅拌15h之后，直接通过二氧化硅色谱法(使用0-50％EtOAc/ 己烷作为梯度洗脱液)来纯化混合物，得到标题化合物(55mg，52％产率)。 MS(apci)m/z＝529.2(M+H)。

实例509

6-乙氧基-4-(6-(1-(苯磺酰基)-1，6-二氮杂螺[2.5]辛-6-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(4-氨基-4-(羟甲基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3- 甲腈(中间物P93；40mg，0.10mmol)和TEA(57μL，0.41mmol)于DCM (2mL)中的悬浮液，依序用苯磺酰氯(32.52μL，0.2548mmol)和DMAP(1.245 mg，0.01019mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物22h。直接通过二氧化硅色谱法(使用0-70％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，得到标题化合物(26mg，50％产率)。MS(apci)m/z＝515.2(M+H)。

使用针对6-乙氧基-4-(6-(1-(苯磺酰基)-1，6-二氮杂螺[2.5]辛-6-基)吡啶-3-基) 吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例509)的合成所描述类似的方法，用适当磺酰氯替换苯磺酰氯，来制备表FF中的标题化合物。在实例510的制备中，省去 DMAP。通过LCMS来监测反应完成。在使用适当梯度洗脱液的色谱纯化之后，分离出标题化合物。

表FF

实例513

6-乙氧基-4-(6-(1-(4-氟苯甲酰基)-1，6-二氮杂螺[2.5]辛-6-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(4-氨基-4-(羟甲基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3- 甲腈(中间物P93；40mg，0.10mmol)和TEA(56.82μL，0.4077mmol)于 DCM(2mL)中的悬浮液，用4-氟苯甲酰氯(14.67μL，0.1223mmol)处理，且在环境温度下搅拌45min。混合物用MsCl(9.466μL，0.1223mmol)处理，在环境温度下搅拌1h，且随后用DBU(2滴)处理。在环境温度下，额外搅拌所得混合物15h，且随后在40℃下搅拌1.5h。在冷却到环境温度之后，真空浓缩反应混合物。通过二氧化硅色谱法(使用0-50％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到标题化合物(11mg，22％产率)。MS(apci)m/z＝497.1 (M+H)。

实例514

6-乙氧基-4-(6-(1-(4-甲氧苯甲酰基)-1，6-二氮杂螺[2.5]辛-6-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(4-氨基-4-(羟甲基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3- 甲腈(中间物P93；40mg，0.10mmol)和TEA(56.8μL，0.408mmol)于DCM (2mL)中的悬浮液，用4-甲氧苯甲酰氯(16.6μL，0.122mmol)处理，且在环境温度下搅拌45min。混合物用MsCl(9.47μL，0.122mmol)处理，在环境温度下搅拌2h，且随后用DBU(2滴)处理。在环境温度下，额外搅拌所得混合物15h，且随后在40℃下搅拌1.5h。在冷却到环境温度之后，真空浓缩反应混合物。通过二氧化硅色谱法(使用0-50％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到标题化合物(3mg，6％产率)。MS(apci)m/z＝509.2(M+H)。

实例515

6-乙氧基-4-(6-(1-(6-甲氧基烟酰基)-1，6-二氮杂螺[2.5]辛-6-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(4-氨基-4-(羟甲基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3- 甲腈(中间物P93；40mg，0.10mmol)和TEA(56.8μL，0.408mmol)于DCM (1mL)中的悬浮液，用6-甲氧基烟酰氯盐酸盐(中间物R22；21.0mg，0.122 mmol)于DCM(0.5mL)中的溶液处理，且在环境温度下搅拌45min。混合物用MsCl(9.46μL，0.122mmol)处理，在环境温度下搅拌30min，且随后用 DBU(61.6μL，0.408mmol)处理。在40℃下搅拌所得混合物2h。在冷却到环境温度之后，直接通过二氧化硅色谱法(使用0-50％EtOAc/己烷+2％TEA作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，得到标题化合物(12mg，23％产率)。MS (apci)m/z＝510.2(M+H)。

实例516

4-(6-(1-苯甲酰基-1，6-二氮杂螺[2.5]辛-6-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

步骤1：甲烷磺酸(4-苯甲酰胺基-1-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)甲酯的制备。4-(6-(4-氨基-4-(羟甲基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P93；40mg，0.10mmol)和TEA (56.8μL，0.408mmol)于DCM(2mL)中的悬浮液，用苯甲酰氯(14.2μL， 0.122mmol)处理，且在环境温度下搅拌30min。混合物用MsCl(9.47μL，0.122 mmol)处理，且在环境温度下搅拌1.5h。真空浓缩混合物。通过二氧化硅色谱法(使用0-100％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到标题化合物(28mg，48％产率)。MS(apci)m/z＝479.1(M+H)。

步骤2：4-(6-(1-苯甲酰基-1，6-二氮螺\[2.5]辛-6-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并\[1，5-a]吡唑-3-甲腈的制备。甲烷磺酸(4-苯甲酰胺基-1-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)甲酯(步骤1；28mg，0.049mmol) 于THF(1mL)中的溶液，用DBU(15μL，0.097mmol)处理。在环境温度下搅拌所得混合物15h，随后在50℃下搅拌1h。在冷却到环境温度之后，真空浓缩反应混合物。通过二氧化硅色谱法(使用0-50％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)来纯化残余物，得到标题化合物(22mg，94％产率)。MS(apci)m/z＝479.1 (M+H)。

实例517

2-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2，7-二氮杂螺[4.5] 癸烷-7-甲酸叔丁酯

在90℃下，搅拌6-乙氧基-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P6；108mg，0.383mmol)、2,7-二氮杂螺[4.5]癸烷-7-甲酸叔丁酯(110mg， 0.459mmol)和DIEA(200μL，1.15mmol)于DMSO(957μL)中的浆液23h。引入额外2，7-二氮杂螺[4.5]癸烷-7-甲酸叔丁酯(大约20mg，0.083mmol)。在 90℃下额外搅拌所得混合物3d。在冷却到环境温度之后，将反应混合物缓慢倒入水(8mL)中。在真空过滤之前，在环境温度下搅拌所得悬浮液2h。用水 (3×5mL)冲洗所分离固体，随后将其溶解于MTBE(25mL)中。MTBE溶液用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱(使用5-55％ACN/ 水作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(56mg，29％产率)。MS(apci)m/z＝503.25(M+H)。

实例518

4-(6-(2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐

2-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2，7-二氮杂螺[4.5] 癸烷-7-甲酸叔丁酯(实例517；54mg，0.11mmol)于DCM(1.1mL)中的溶液，用含5-6NHCl的iPrOH(430μL，2.1mmol)处理。在用MTBE(2mL) 稀释之前，在环境温度下搅拌反应混合物1h。真空过滤所得悬浮液，且收集固体，得到标题化合物(45mg，87％产率)。MS(apci)m/z＝403.2(M+H)。

实例519

6-乙氧基-4-(6-(7-(6-甲氧基吡啶-3-基)-2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基) 吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

对4-(6-(2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3- 甲腈二盐酸盐(实例518；25mg，0.053mmol)、5-溴-2-甲氧基吡啶(10.21μL，0.07888mmol)、KOtBu(29.50mg，0.2629mmol)、Pd₂(dba)₃·CHCl₃(2.722mg， 0.002629mmol)和X-phos(5.014mg，0.01052mmol)于甲苯(525.9μL)中的混合物，用N_2(g)鼓泡30秒。在于N_2(g)下密封反应容器之后，在100℃下搅拌反应混合物26h。在冷却到环境温度之后，真空浓缩反应混合物。通过C18反相色谱(使用5-50％ACN/水作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(14mg，50％产率)。MS(apci)m/z＝510.2(M+H)。

实例520

(S)-2-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2，7-二氮杂螺 [4.5]癸烷-7-甲酸叔丁酯

在90℃下，搅拌6-乙氧基-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P6；108mg，0.383mmol)、(S)-2，7-二氮杂螺[4.5]癸烷-7-甲酸叔丁酯(购自WuXiAppTec，110mg，0.459mmol)和DIEA(200μL，1.15mmol)于DMSO (957μL)中的浆液3h。引入额外(S)-2，7-二氮杂螺[4.5]癸烷-7-甲酸叔丁酯(18 mg，0.075mmol)。在90℃下额外搅拌所得混合物24h。在冷却到环境温度之后，将反应混合物缓慢倒入水(8mL)中。在环境温度下搅拌所得悬浮液15min，且随后真空过滤。用水(3×5mL)冲洗所分离固体，且在高真空下干燥隔夜，干净地得到标题化合物(166mg，84％产率)。MS(apci)m/z＝503.2(M+H)。

实例521

(R)-4-(6-(2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶 -3-甲腈二盐酸盐

方法A.在用EtOH(1mL)稀释之前，在环境温度下，搅拌(S)-2-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2，7-二氮杂螺[4.5]癸烷-7-甲酸叔丁酯(实例520；150mg，0.298mmol)于含5-6N HCl的iPrOH(1.19mL，5.97 mmol)中的溶液2h。搅拌所得悬浮液15min，且随后真空过滤。依序用EtOH (3×200μL)和Et₂O(3×1mL)冲洗所分离固体，且搁置一旁。滤液用MeOH 稀释，且真空浓缩。将固体残余物与来自滤过物的固体合并，且在高真空下干燥隔夜，干净地得到标题化合物(141mg，99％产率)。MS(apci)m/z＝403.2 (M+H)。

方法B.将外消旋4-(6-(2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(实例518；10mg，0.021mmol)分配在饱和 Na₂CO_3(aq)与CHCl₃之间。在相分离之后，将有机萃取物溶解于MeOH∶IPA∶DIEA (80∶20∶0.1)的混合溶剂中，随后经受SFC手性HPLC(ChiralTech IA；5到70％溶剂A/溶剂B；溶剂A＝MeOH∶IPA∶DIEA/80∶20∶0.1；溶剂B＝CO₂)。对含有这个手性分离的峰1的级分，进行分离、合并且真空浓缩，得到(R)-4-(6-(2，7- 二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(3.5mg， 83％产率)。MS(apci)m/z＝403.2(M+H)。手性是通过以下来指定：从峰1收集的材料，与根据制备(R)-4-(6-(2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈的方法A，制备的(R)-4-(6-(2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(3.5mg，83％产率)的手性HPLC比较。

实例522

(R)-2-(5-(3-氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2，7-二氮杂螺 [4.5]癸烷-7-甲酸叔丁酯

在90℃下，搅拌6-乙氧基-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P6；108mg，0.383mmol)、(R)-2，7-二氮杂螺[4.5]癸烷-7-甲酸叔丁酯(购自WuXiAppTec，110mg，0.459mmol)和DIEA(200μL，1.15mmol)于DMSO (957μL)中的浆液3h。引入额外((R)-2，7-二氮杂螺[4.5]癸烷-7-甲酸叔丁酯(18 mg，0.075mmol)。在90℃下额外搅拌所得混合物24h。在冷却到环境温度之后，将反应混合物缓慢倒入水(8mL)中。在真空过滤之前，在环境温度下搅拌所得悬浮液2h。用水(3×5mL)冲洗所分离固体，且在高真空下干燥隔夜，干净地得到标题化合物(180mg，93％产率)。MS(apci)m/z＝503.2(M+H)。

实例523

(S)-4-(6-(2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶 -3-甲腈二盐酸盐

方法A.在用EtOH(1mL)稀释之前，在环境温度下，搅拌(R)-2-(5-(3- 氰基-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2，7-二氮杂螺[4.5]癸烷-7-甲酸叔丁酯(实例522；160mg，0.318mmol)于含5-6N HCl的iPrOH(1.27mL， 6.37mmol)中的溶液2h。搅拌所得悬浮液15min，且随后真空过滤。依序用 EtOH(3×200μL)和Et₂O(3×1mL)冲洗所分离固体，且搁置一旁。滤液用MeOH稀释，且真空浓缩。将固体残余物与来自滤过物的固体合并，且在高真空下干燥隔夜，干净地得到标题化合物(141mg，93％产率)。MS(apci)m/z ＝403.2(M+H)。

方法B.将外消旋4-(6-(2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(实例518；10mg，0.021mmol)分配在饱和 Na₂CO_3(aq)与CHCl₃之间。在相分离之后，将有机萃取物溶解于MeOH∶IPA∶DIEA (80∶20∶0.1)的混合溶剂中，随后经受SFC手性HPLC(ChiralTech IA；5到70％溶剂A/溶剂B；溶剂A＝MeOH∶IPA∶DIEA/80∶20∶0.1；溶剂B＝CO₂)。对含有这个手性分离的峰2的级分，独立地进行分离、合并且真空浓缩，得到 (S)-4-(6-(2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(4mg，94％产率)。MS(apci)m/z＝403.2(M+H)。手性是通过以下来指定：根据制备(S)-4-(6-(2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a] 吡啶-3-甲腈的方法A制备的材料的手性HPLC比较。

实例524

(R)-4-(6-(7-乙酰基-2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

(S)-4-(6-(2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶 -3-甲腈二盐酸盐(实例523；5.7mg，0.012mmol)和乙酰氯(1.3μL，0.018mmol) 于DCM(60gL)中的混合物，用DIEA(6.3μL，0.036mmol)处理，且在环境温度下搅拌30min。混合物用DCM(1mL)稀释，随后依序用饱和NaHCO_3(aq) (1mL)和水(1mL)洗涤，通过PS玻璃料过滤，且真空浓缩，得到标题化合物(2.5mg，47％产率)。MS(apci)m/z＝445.2(M+H)。

实例525

(S)-4-(6-(7-乙酰基-2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

(R)-4-(6-(2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(实例521；5.3mg，0.011mmol)和乙酰氯(1.2μL，0.017mmol) 于DCM(56μL)中的混合物，用DIEA(5.8μL，0.033mmol)处理，且在环境温度下搅拌30min。混合物用DCM(1mL)稀释，随后依序用饱和NaHCO_3(aq) (1mL)和水(1mL)洗涤，通过PS玻璃料过滤，且真空浓缩，得到标题化合物(1.6mg，32％产率)。MS(apci)m/z＝445.2(M+H)。

实例526

(S)-4-(6-(7-环丙基-2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在引入NaBH₃CN(19.8mg，0.316mmol)之前，在环境温度下，搅拌 (S)-4-(6-(2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(实例523；25mg，0.0526mmol)、(1-乙氧基环丙氧基)三甲基硅烷(52.9μL，0.263mmol)、无水

分子筛和乙酸(63.2μL，1.05mmol)于 MeOH(526μL)中的混合物5min。在50℃下搅拌所得混合物27h，随后冷却到环境温度，且过滤。直接通过C18反相色谱法(5到50％ACN/水)来纯化滤液，得到标题化合物(9.7mg，42％产率)。MS(apci)m/z＝443.2(M+H)。

实例527

(R)-4-(6-(7-环丙基-2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

(R)-4-(6-(2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶 -3-甲腈二盐酸盐(实例521；10mg，0.025mmol)于DCM(1mL)中的溶液，依序用(1-乙氧基环丙氧基)三甲基硅烷(20μL，0.099mmol)和NaBH₃CN(3.1 mg，0.050mmol)处理。在环境温度下搅拌隔夜之后，反应混合物依序用乙酸 (14μL，0.25mmol)和Me₄N(AcO)₃BH(13mg，0.050mmol)处理。在依序引入额外(1-乙氧基环丙氧基)三甲基硅烷(20μL，0.099mmol)和NaBH₃CN(3.1 mg，0.050mmol)之前，搅拌反应混合物3d。在添加无水分子筛(20mg)之前，额外搅拌混合物2d时间。在环境温度下，搅拌混合物最后24h时间。过滤所得悬浮液，且用DCM(2×2mL)洗涤固体。在PS玻璃料中，DCM滤液用1N NaOH_(aq)(1mL)洗涤，随后真空浓缩。通过C18反相色谱(使用0-60％ ACN/水作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，得到标题化合物(1.3mg，12％产率)。MS(apci)m/z＝443.2(M+H)。

实例528

(R)-6-乙氧基-4-(6-(7-甲基-2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

(R)-4-(6-(2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶 -3-甲腈二盐酸盐(实例521；20mg，0.042mmol)和甲醛(37wt％于水中，31.52 μL，0.4207mmol)于DCM(210.3μL)中的混合物，用NaBH(AcO)₃(178.3mg， 0.8414mmol)处理，随后在环境温度下搅拌10min。将反应混合物分配在EtOAc (1mL)与2M NaOH_(aq)(1mL)之间。在相分离之后，真空浓缩有机萃取物。通过C18反相色谱(使用5-40％ACN/水作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(9.6mg，55％产率)。MS(apci)m/z＝417.2(M+H)。

实例529

(S)-6-乙氧基-4-(6-(7-甲基-2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

((S)-4-(6-(2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶 -3-甲腈二盐酸盐(实例523；15mg，0.032mmol)和甲醛(37wt％于水中；23.7 μL，0.316mmol)于DCM(158μL)中的混合物，用NaBH(AcO)₃(134mg， 0.631mmol)处理，随后在环境温度下搅拌10min。将反应混合物分配在EtOAc (1mL)与2M NaOH_(aq)(1mL)之间。在相分离之后，用额外EtOAc(1mL) 反萃取水相。合并有机萃取物，且真空浓缩。通过C18反相色谱(使用5-95％ ACN/水作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(13mg， 99％产率)。MS(apci)m/z＝417.25(M+H)。

实例530

(S)-6-乙氧基-4-(6-(7-乙基-2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

((S)-4-(6-(2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶 -3-甲腈二盐酸盐(实例523；15mg，0.032mmol)和乙醛(7.5mg，0.063mmol) 于DCM(158μL)中的混合物，用NaBH(AcO)₃(40mg，0.19mmol)处理，随后在环境温度下搅拌隔夜。将反应混合物分配在EtOAc(1mL)与2M NaOH_(aq)(1mL)之间。在相分离之后，用额外EtOAc(1mL)反萃取水相。合并有机萃取物，且真空浓缩。通过C18反相色谱(使用5-60％ACN/水作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(8.5mg，63％产率)。 MS(apci)m/z＝431.2(M+H)。

实例531

(S)-6-乙氧基-4-(6-(7-异丙基-2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

(S)-4-(6-(2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶 -3-甲腈二盐酸盐(实例523；15mg，0.032mmol)和2-碘丙烷(5.90mg，0.0347 mmol)于DCM(158μL)中的混合物，用DIEA(5.50μL，0.0316mmol)处理，随后密封反应容器。在50℃下搅拌反应混合物18h。引入额外2-碘丙烷(一滴)和DIEA(一滴)，再密封容器，且在50℃下额外搅拌混合物2h。在冷却到环境温度之后，直接通过C18反相色谱(使用5-95％ACN/水作为梯度洗脱液)来纯化混合物，得到标题化合物(10.3mg，73％产率)。MS(apci)m/z＝445.3 (M+H)。

实例532

(R)-6-乙氧基-4-(6-(7-异丙基-2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈甲酸盐

(R)-4-(6-(2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶 -3-甲腈二盐酸盐(实例521；15mg，0.032mmol)和2-碘丙烷(5.9mg，0.035 mmol)于DCM(158μL)中的混合物，用DIEA(16μL，0.035mmol)处理，随后密封反应容器。在环境温度下搅拌反应混合物18h。引入额外2-碘丙烷(一滴)和DIEA(一滴)，再密封容器，且在50℃下搅拌混合物2h。在冷却到环境温度之后，直接通过C18反相色谱法(使用5-40％ACN/水+0.1％甲酸作为梯度洗脱液)来纯化混合物，得到标题化合物(6.7mg，48％产率)。MS(apci)m/z ＝445.3(M+H)。

实例533

7-(5-(3-氰基-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-1，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-1-甲酸叔丁酯

4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(中间物P95；400mg，1.09mmol)于DMSO(2.5mL)中的悬浮液，用DIEA(570.5μL， 3.266mmol)和1，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-1-甲酸叔丁酯(345.0mg，1.524mmol) 处理，且随后在90℃下搅拌17h。在冷却到环境温度之后，所得悬浮液用水(10 mL)稀释，在环境温度下搅拌1h，且随后过滤。用水冲洗所分离固体，且在高真空下干燥隔夜，干净地得到标题化合物(650.6mg，定量产率)。MS(apci) m/z＝574.3(M+H)。

实例534

4-(6-(1-异丁酰基-1，7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)吡啶-3-基)-6-(2-吗啉基乙氧基) 吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(1，7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)吡啶-3-基)-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P96；25mg，0.046mmol)于DMA(500 μL)中的溶液，依序用DIEA(23.9μL，0.137mmol)、异丁酸(6.36μL，0.0686 mmol)和HATU(26.1mg，0.0686mmol)处理。在环境温度下搅拌反应混合物1h。所得悬浮液用水稀释，以溶解沉淀，且直接通过C18反相色谱法(使用5-95％ACN/水作为梯度洗脱液)来纯化所述溶液，得到标题化合物(10.4mg， 42％产率)。MS(apci)m/z＝544.3(M+H)。

实例535

(R)-4-(6-(4-(2-(3-氯苯基)-2-羟基乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-甲氧基 -2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-(2-甲氧基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3- 甲腈二盐酸盐(实例246；25mg，0.052mmol)和(R)-2-(3-氯苯基)-2-羟基乙酸(10mg，0.052mmol)于DCM(520μL)中的溶液，依序用DIEA(55μL，0.313 mmol)和HATU(22mg，0.057mmol)处理，随后在环境温度下搅拌16h。所得混合物用水(20mL)稀释，且用DCM(3×20mL)萃取。合并有机萃取物，且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用0-100％丙酮/己烷作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(27mg，42％产率)。MS(apci)m/z ＝575.2(M+H)。

实例536

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

对4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基) 吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈二盐酸盐(中间物P43；100mg，0.210mmol)、5-溴 -2-甲氧基吡啶(40.66μL，0.3142mmol)、KOtBu(117.5mg，1.047mmol)、 Pd₂(dba)₃·CHCl₃(10.84mg，0.01047mmol)和X-phos(19.97mg，0.04189mmol) 于甲苯(1047μL)中的混合物，用N_2(g)鼓泡30秒。在于N_2(g)下密封容器之后，在100℃下搅拌反应混合物90min。在冷却到环境温度之后，将反应混合物分配在DCM(10mL)与水(10mL)之间。在相分离之后，水性萃取物用额外DCM(3×5mL)洗涤。合并有机萃取物，用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过C18反相色谱法(使用5-55％ACN/水，且再次使用5-45％ACN/水作为梯度洗脱液)来纯化所得粗残余物，干净地得到标题化合物(4mg，4％产率)。MS(apci)m/z＝512.2(M+H)。

实例537

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(4-(6-甲氧基烟酰基)-1，4-二氮杂环庚-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在环境温度下，搅拌4-(6-(1，4-二氮杂环庚-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)(中间物P98；50mg，0.0788mmol)、DIEA(68.6μL，0.394mmol)、HATU(89.9mg，0.236mmol) 和6-甲氧基烟酸(36.2mg，0.236mmol)于DMF(500μL)中的混合物隔夜。反应混合物用额外DIEA(50μL，0.287mmol)、6-甲氧基烟酸(30mg，0.196 mmol)和HATU(50mg，0.131mmol)处理，且在环境温度下额外搅拌5h。

反应混合物用DCM稀释，且用饱和NH₄Cl_(aq)淬灭。在相分离之后，水性萃取物用额外DCM(3×)洗涤。随后，经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用0-20％MeOH[1％NH₄OH]/EtOAc 作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(42.7mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝542.3(M+H)。

实例538

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(4-甲基吡啶酰基-1，4-二氮杂环庚-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对(6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(4-(6-甲氧基烟酰基)-1，4-二氮杂环庚-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例537)所描述类似的程序，用皮考啉酸替换6-甲氧基烟酸，来制备标题化合物(37.5mg，93％产率)。MS (apci)m/z＝512.25(M+H)。

实例539

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-1，4-二氮杂环庚-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在环境温度下，搅拌4-(6-(1，4-二氮杂环庚-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)(中间物P98；50mg，0.0788mmol)、TEA(54.9μL，0.394mmol)、NaBH(AcO)₃(50.1mg，0.236mmol) 和6-甲氧基烟碱醛(32.4mg，0.236mmol)于DMF(500μL)中的混合物隔夜。反应混合物用DCM稀释，且用饱和NH₄Cl_(aq)淬灭。在相分离之后，水性萃取物用额外DCM(3×)洗涤。随后，经合并的有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用0-20％MeOH/EtOAc作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(33.8mg，81％产率)。MS(apci)m/z＝528.3(M+H)。

实例540

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(4-(吡啶-2-基甲基)-1，4-二氮杂环庚-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-1，4- 二氮杂环庚-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例539)所描述类似的程序，用吡啶甲醛替换6-甲氧基烟碱醛，来制备标题化合物(39mg，99％产率)。MS(apci)m/z＝498.3(M+H)。

实例541

4-(6-(4-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-1，4-二氮杂环庚-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(6-(1，4-二氮杂环庚-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)(中间物P98；50mg，0.0788mmol) 于DMA(500μL)中的溶液，用5-氟-6-甲氧基烟碱醛(36.7mg，0.237mmol)、 TEA(77μL，0.55mmol)和NaBH(AcO)₃(50mg，0.237mmol)处理，随后在环境温度下搅拌隔夜。反应混合物用额外TEA(77μL，0.55mmol)、 NaBH(AcO)₃(50mg，0.237mmol)和5-氟-6-甲氧基烟碱醛(36.7mg，0.237mmol) 处理，且随后在环境温度下搅拌，直到LCMS指示起始物质完全消耗为止。直接通过二氧化硅色谱法(使用0-25％EtOAc/MeOH作为梯度洗脱液)且再次通过C18反相色谱(使用5-95％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，得到呈TFA盐的不纯的标题化合物。用1M NaOH和盐水中和TFA 盐，且随后用EtOAc萃取。随后，有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩，干净地得到标题化合物(30mg，70％产率)。MS(apci)m/z＝546.2 (M+H)。

实例542

(R)-4-(5-(4-(2-(3-氯苯基)-2-羟基乙酰基)哌嗪-1-基)吡嗪-2-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

6-乙氧基-4-(5-(哌嗪-1-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)(中间物P101；35mg，0.061mmol)、(R)-(-)-3-氯代扁桃酸(14mg，0.073mmol)、HATU(25mg，0.067mmol)于DCM(606μL)中的混合物，用DIEA(32μL，0.18mmol)处理，随后在环境温度下搅拌隔夜。真空浓缩反应混合物。通过二氧化硅色谱法(使用0-100％EtOAc/己烷，随后0-10％ MeOH/EtOAc作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物，且合并含有所需产物的级分，且真空浓缩。残余物用MeOH湿磨。通过过滤收集所得沉淀，干净地得到标题化合物(6mg，19％产率)。MS(apci)m/z＝518.1(M+H)。

实例543

6-乙氧基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基) 吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(5-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶 -3-甲腈双(2，2，2-三氟乙酸盐)(中间物P103；20mg，0.034mmol)于DCM(679 μL)中的混合物，用6-甲氧基烟碱醛(14mg，0.10mmol)和NaBH(AcO)₃(36 mg，0.17mmol)处理，随后在环境温度下搅拌隔夜。直接通过二氧化硅色谱法(0-10％MeOH/DCM+0.1％NH₄OH)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(15mg，92％产率)。MS(apci)m/z＝483.2(M+H)。

实例544

6-乙氧基-4-(5-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚 -3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(5-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)-6-乙氧基吡唑并[1，5-a]吡啶 -3-甲腈双(2,2，2-三氟乙酸盐)(中间物P103；20mg，0.034mmol)于DCM(679 μL)中的混合物，用5-氟6-甲氧基烟碱醛(16mg，0.10mmol)和NaBH(AcO)₃ (36mg，0.17mmol)处理，随后在环境温度下搅拌隔夜。直接通过二氧化硅色谱法(使用0-10％MeOH/DCM+0.1％NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(14mg，82％产率)。MS(apci)m/z＝501.2(M+H)。

使用针对6-乙氧基-4-(5-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环 [3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例544)的合成所描述类似的方法，用适当醛替换5-氟-6-甲氧基烟碱醛，来制备表GG中的化合物。通过LCMS监测反应完成，同样相应地调整反应持续时间。在使用适当梯度洗脱液的色谱纯化之后，分离出标题化合物。

表GG

实例549

4-5-(6-((5-氯-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡嗪 -2-基)-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

4-(5-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并 [1，5-a]吡啶-3-甲腈双(2，2,2-三氟乙酸盐)(中间物P106；22.2mg，0.0329mmol) 于DCM(658.2μL)中的溶液，依序用5-氯-6-甲氧基烟碱醛(28.23mg，0.1646 mmol)和NaBH(AcO)₃(69.75mg，0.3291mmol)处理，随后在环境温度下搅拌隔夜。通过PVDF(0.45μm)盘式针筒过滤器过滤反应混合物。直接通过二氧化硅色谱法(使用0-100％DCM/己烷，随后0-10％MeOH/DCM+0.1％NH₄OH 作为梯度洗脱液)来纯化滤液。真空浓缩含有所需产物的级分，与Et2O一起共沸，干净地得到标题化合物(13.08mg，66％产率)。MS(apci)m/z＝602.2(M+H)。

实例550

4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2- 基)-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对4-(5-(6-((5-氯-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚 -3-基)吡嗪-2-基)-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例549)的合成所描述类似的程序，用6-甲氧基烟碱醛替换5-氯-6-甲氧基烟碱醛，且添加额外色谱纯化(使用硅胶柱且0-10％MeOH/EtOAc作为梯度洗脱液)，来制备标题化合物(2.07mg，7％产率)。MS(apci)m/z＝568.3(M+H)。

实例551

4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2- 基)-6-(((S)-吗啉-2-基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

(2S)-2-(((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1] 庚-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(中间物P112；55.9mg，0.0855mmol)于DCM(2.0mL)中的溶液，用TFA(1mL， 13.1mmol)处理，且在环境温度下搅拌2h。真空浓缩所得混合物，得到TFA 盐。通过二氧化硅色谱法(使用0-20％DCM/MeOH/2％NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化TFA盐残余物，且将其转化为游离碱，干净地得到标题化合物(19 mg，40％产率)。MS(apci)m/z＝554.3(M+H)。

实例552

4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2- 基)-6-(((R)-吗啉-2-基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基) 吡嗪-2-基)-6-(((S)-吗啉-2-基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例551)的合成所描述类似的程序，用(2R)-2-(((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(中间物P111)替换(2S)-2-(((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基) 甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(中间物P112)，来制备标题化合物(1.6mg，3％产率)。 MS(apci)m/z＝554.3(M+H)。

实例553

6-((3-氟氮杂环丁-3-基)甲氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

3-(((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3- 基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)-3-氟氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯 (中间物P115；48mg，0.075mmol)于DCM(1.0mL)中的溶液，用TFA(1 mL，13.1mmol)处理，且在环境温度下搅拌1h。所得混合物用DCM(10mL) 稀释，且通过用饱和NaHCO_3(aq)(10mL)萃取来中和。用额外DCM(3×)萃取双相混合物，且真空浓缩合并的DCM萃取物。残余物用DCM(1mL)和戊烷(5mL)湿磨。通过真空过滤收集所形成的沉淀，且在高真空下干燥，干净地得到标题化合物(20mg，49％产率)。MS(apci)m/z＝542.2(M+H)。

实例554

4-(2-(6-((5-氯-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)嘧啶-5-基)-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在环境温度下，搅拌5-氯-6-甲氧基烟碱醛(59.56mg，0.3471mmol)、 4-(2-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)嘧啶-5-基)-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a] 吡啶-3-甲腈(中间物P117；31mg，0.069mmol)和NaBH(AcO)₃(147.1mg， 0.6943mmol)于DCM(694.3μL)中的混合物隔夜。直接通过二氧化硅色谱法 (使用0-10％MeOH/EtOAc+0.1％NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(15.19mg，35％产率)。MS(apci)m/z＝602.3(M+H)。

实例555

4-(2-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)嘧啶-5- 基)-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

在环境温度下，搅拌6-甲氧基烟碱醛(47.6mg，0.347mmol)、4-(2-(3，6- 二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)嘧啶-5-基)-6-(2-吗啉基乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3- 甲腈(中间物P117；31mg，0.069mmol)和NaBH(AcO)₃(147mg，0.694mmol) 于DCM(694μL)中的混合物隔夜。直接通过二氧化硅色谱法(使用0-10％ MeOH/DCM+0.1％NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化反应混合物，干净地得到标题化合物(7.37mg，19％产率)。MS(apci)m/z＝568.3(M+H)。

实例556

3-(5-(3-氯-6-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)吡嗪-2-基)-6-((6-甲氧基吡啶-3- 基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷

3-氯-6-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶(中间物P98；75mg，0.24mmol)、3-(5-氯吡嗪-2-基)-6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷(中间物R25；108mg，0.16mmol)、 X-phos(15mg，0.032mmol)和Pd₂(dba)₃(7.4mg，0.0081mmol)于二恶烷(810 μL)中的混合物，用2M K₃PO_4(aq)(243μL，0.49mmol)处理。对混合物用 Ar_(g)鼓泡，且随后密封反应容器。在80℃下搅拌反应混合物隔夜。在冷却到环境温度之后，反应混合物用DCM稀释，且依序用水和盐水萃取。有机萃取物用无水Na₂SO_4(s)脱水，过滤且真空浓缩。通过二氧化硅色谱法(使用10％ MeOH/DCM+0.1％NH₄OH作为梯度洗脱液)来纯化粗残余物。真空浓缩含有所需产物的级分，且残余物用DCM(0.5mL)和戊烷(1mL)湿磨。通过过滤收集沉淀，且真空干燥，干净地得到标题化合物(10mg，13％产率)。MS(apci) m/z＝478.1(M+H)。

实例557

2-(6-甲氧基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3- 基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基)丙腈

在80℃下，搅拌2-(4-溴-6-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基)丙腈(中间物 P120；33mg，0.12mmol)、6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(4，4，5，5-四甲基 -1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷(中间物 R28；42mg，0.099mmol)、Pd(PPh₃)₄(11mg，0.0099mmol)和2M Na₂CO_3(aq) (250μL，0.50mmol)于二恶烷(1mL)中的混合物15h。真空浓缩反应混合物。通过C18反相色谱法(使用0-30％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液) 来纯化粗残余物，用饱和NaHCO₃(aq)将其转化为游离碱，用DCM萃取且浓缩，干净地得到标题化合物(33mg，67％产率)。MS(apci)m/z＝496.2(M+H)。

实例558

2-(6-甲氧基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3- 基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基)乙腈

在80℃下，搅拌2-(4-溴-6-甲氧基吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基)乙腈(中间物 P122；32mg，0.12mmol)、6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(4，4，5，5-四甲基 -1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷(中间物 R28；42mg，0.099mmol)、Pd(PPh₃)₄(11mg，0.0099mmol)和2M Na₂CO_3(aq) (250μL，0.50mmol)于二恶烷(1mL)中的混合物15h。真空浓缩反应混合物。通过C18反相色谱法(使用0-30％ACN/水+0.1％TFA作为梯度洗脱液) 来纯化粗残余物，用饱和NaHCO₃(aq)将其转化为游离碱，用DCM萃取且浓缩，干净地得到标题化合物(36mg，75％产率)。MS(apci)m/z＝482.2(M+H)。

使用针对6-乙氧基-4-(5-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环 [3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例544)的合成所描述类似的方法，用适当醛替换5-氟-6-甲氧基烟碱醛，来制备表HH中的化合物。

表HH

实例561

(R)-6-乙氧基-4-(6-(7-乙基-2,7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈

使用针对(R)-6-乙氧基-4-(6-(7-甲基-2，7-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(实例528)的合成所描述类似的方法，用乙醛替换甲醛，来制备所述化合物。通过反相色谱法(5到45％ACN/水+0.1％TFA)来纯化粗物质，随后用NaHCO₃(饱和)游离碱化，得到呈固体状的标题产物(3.9mg， 29％产率)。MS(apci)m/z＝431.3(M+H)。

缩写：

序列表

<110> 芯片生物制药公司（Array BioPharma, Inc.）

<120> 经取代的吡唑并[1,5-A]吡啶化合物作为RET激酶抑制剂

<130> 40449-0062WO1

<150> 62/406,252

<151> 2017-10-10

<150> 62/447,850

<151> 2017-01-18

<150> 62/491,164

<151> 2017-04-27

<150> 62/554,817

<151> 2017-09-06

<150> 62/566,093

<151> 2017-09-29

<160> 1

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 1114

<212> PRT

<213> 智人

<400> 1

Met Ala Lys Ala Thr Ser Gly Ala Ala Gly Leu Arg Leu Leu Leu Leu

1 5 10 15

Leu Leu Leu Pro Leu Leu Gly Lys Val Ala Leu Gly Leu Tyr Phe Ser

20 25 30

Arg Asp Ala Tyr Trp Glu Lys Leu Tyr Val Asp Gln Ala Ala Gly Thr

35 40 45

Pro Leu Leu Tyr Val His Ala Leu Arg Asp Ala Pro Glu Glu Val Pro

50 55 60

Ser Phe Arg Leu Gly Gln His Leu Tyr Gly Thr Tyr Arg Thr Arg Leu

65 70 75 80

His Glu Asn Asn Trp Ile Cys Ile Gln Glu Asp Thr Gly Leu Leu Tyr

85 90 95

Leu Asn Arg Ser Leu Asp His Ser Ser Trp Glu Lys Leu Ser Val Arg

100 105 110

Asn Arg Gly Phe Pro Leu Leu Thr Val Tyr Leu Lys Val Phe Leu Ser

115 120 125

Pro Thr Ser Leu Arg Glu Gly Glu Cys Gln Trp Pro Gly Cys Ala Arg

130 135 140

Val Tyr Phe Ser Phe Phe Asn Thr Ser Phe Pro Ala Cys Ser Ser Leu

145 150 155 160

Lys Pro Arg Glu Leu Cys Phe Pro Glu Thr Arg Pro Ser Phe Arg Ile

165 170 175

Arg Glu Asn Arg Pro Pro Gly Thr Phe His Gln Phe Arg Leu Leu Pro

180 185 190

Val Gln Phe Leu Cys Pro Asn Ile Ser Val Ala Tyr Arg Leu Leu Glu

195 200 205

Gly Glu Gly Leu Pro Phe Arg Cys Ala Pro Asp Ser Leu Glu Val Ser

210 215 220

Thr Arg Trp Ala Leu Asp Arg Glu Gln Arg Glu Lys Tyr Glu Leu Val

225 230 235 240

Ala Val Cys Thr Val His Ala Gly Ala Arg Glu Glu Val Val Met Val

245 250 255

Pro Phe Pro Val Thr Val Tyr Asp Glu Asp Asp Ser Ala Pro Thr Phe

260 265 270

Pro Ala Gly Val Asp Thr Ala Ser Ala Val Val Glu Phe Lys Arg Lys

275 280 285

Glu Asp Thr Val Val Ala Thr Leu Arg Val Phe Asp Ala Asp Val Val

290 295 300

Pro Ala Ser Gly Glu Leu Val Arg Arg Tyr Thr Ser Thr Leu Leu Pro

305 310 315 320

Gly Asp Thr Trp Ala Gln Gln Thr Phe Arg Val Glu His Trp Pro Asn

325 330 335

Glu Thr Ser Val Gln Ala Asn Gly Ser Phe Val Arg Ala Thr Val His

340 345 350

Asp Tyr Arg Leu Val Leu Asn Arg Asn Leu Ser Ile Ser Glu Asn Arg

355 360 365

Thr Met Gln Leu Ala Val Leu Val Asn Asp Ser Asp Phe Gln Gly Pro

370 375 380

Gly Ala Gly Val Leu Leu Leu His Phe Asn Val Ser Val Leu Pro Val

385 390 395 400

Ser Leu His Leu Pro Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Val Ser Arg Arg Ala

405 410 415

Arg Arg Phe Ala Gln Ile Gly Lys Val Cys Val Glu Asn Cys Gln Ala

420 425 430

Phe Ser Gly Ile Asn Val Gln Tyr Lys Leu His Ser Ser Gly Ala Asn

435 440 445

Cys Ser Thr Leu Gly Val Val Thr Ser Ala Glu Asp Thr Ser Gly Ile

450 455 460

Leu Phe Val Asn Asp Thr Lys Ala Leu Arg Arg Pro Lys Cys Ala Glu

465 470 475 480

Leu His Tyr Met Val Val Ala Thr Asp Gln Gln Thr Ser Arg Gln Ala

485 490 495

Gln Ala Gln Leu Leu Val Thr Val Glu Gly Ser Tyr Val Ala Glu Glu

500 505 510

Ala Gly Cys Pro Leu Ser Cys Ala Val Ser Lys Arg Arg Leu Glu Cys

515 520 525

Glu Glu Cys Gly Gly Leu Gly Ser Pro Thr Gly Arg Cys Glu Trp Arg

530 535 540

Gln Gly Asp Gly Lys Gly Ile Thr Arg Asn Phe Ser Thr Cys Ser Pro

545 550 555 560

Ser Thr Lys Thr Cys Pro Asp Gly His Cys Asp Val Val Glu Thr Gln

565 570 575

Asp Ile Asn Ile Cys Pro Gln Asp Cys Leu Arg Gly Ser Ile Val Gly

580 585 590

Gly His Glu Pro Gly Glu Pro Arg Gly Ile Lys Ala Gly Tyr Gly Thr

595 600 605

Cys Asn Cys Phe Pro Glu Glu Glu Lys Cys Phe Cys Glu Pro Glu Asp

610 615 620

Ile Gln Asp Pro Leu Cys Asp Glu Leu Cys Arg Thr Val Ile Ala Ala

625 630 635 640

Ala Val Leu Phe Ser Phe Ile Val Ser Val Leu Leu Ser Ala Phe Cys

645 650 655

Ile His Cys Tyr His Lys Phe Ala His Lys Pro Pro Ile Ser Ser Ala

660 665 670

Glu Met Thr Phe Arg Arg Pro Ala Gln Ala Phe Pro Val Ser Tyr Ser

675 680 685

Ser Ser Gly Ala Arg Arg Pro Ser Leu Asp Ser Met Glu Asn Gln Val

690 695 700

Ser Val Asp Ala Phe Lys Ile Leu Glu Asp Pro Lys Trp Glu Phe Pro

705 710 715 720

Arg Lys Asn Leu Val Leu Gly Lys Thr Leu Gly Glu Gly Glu Phe Gly

725 730 735

Lys Val Val Lys Ala Thr Ala Phe His Leu Lys Gly Arg Ala Gly Tyr

740 745 750

Thr Thr Val Ala Val Lys Met Leu Lys Glu Asn Ala Ser Pro Ser Glu

755 760 765

Leu Arg Asp Leu Leu Ser Glu Phe Asn Val Leu Lys Gln Val Asn His

770 775 780

Pro His Val Ile Lys Leu Tyr Gly Ala Cys Ser Gln Asp Gly Pro Leu

785 790 795 800

Leu Leu Ile Val Glu Tyr Ala Lys Tyr Gly Ser Leu Arg Gly Phe Leu

805 810 815

Arg Glu Ser Arg Lys Val Gly Pro Gly Tyr Leu Gly Ser Gly Gly Ser

820 825 830

Arg Asn Ser Ser Ser Leu Asp His Pro Asp Glu Arg Ala Leu Thr Met

835 840 845

Gly Asp Leu Ile Ser Phe Ala Trp Gln Ile Ser Gln Gly Met Gln Tyr

850 855 860

Leu Ala Glu Met Lys Leu Val His Arg Asp Leu Ala Ala Arg Asn Ile

865 870 875 880

Leu Val Ala Glu Gly Arg Lys Met Lys Ile Ser Asp Phe Gly Leu Ser

885 890 895

Arg Asp Val Tyr Glu Glu Asp Ser Tyr Val Lys Arg Ser Gln Gly Arg

900 905 910

Ile Pro Val Lys Trp Met Ala Ile Glu Ser Leu Phe Asp His Ile Tyr

915 920 925

Thr Thr Gln Ser Asp Val Trp Ser Phe Gly Val Leu Leu Trp Glu Ile

930 935 940

Val Thr Leu Gly Gly Asn Pro Tyr Pro Gly Ile Pro Pro Glu Arg Leu

945 950 955 960

Phe Asn Leu Leu Lys Thr Gly His Arg Met Glu Arg Pro Asp Asn Cys

965 970 975

Ser Glu Glu Met Tyr Arg Leu Met Leu Gln Cys Trp Lys Gln Glu Pro

980 985 990

Asp Lys Arg Pro Val Phe Ala Asp Ile Ser Lys Asp Leu Glu Lys Met

995 1000 1005

Met Val Lys Arg Arg Asp Tyr Leu Asp Leu Ala Ala Ser Thr Pro

1010 1015 1020

Ser Asp Ser Leu Ile Tyr Asp Asp Gly Leu Ser Glu Glu Glu Thr

1025 1030 1035

Pro Leu Val Asp Cys Asn Asn Ala Pro Leu Pro Arg Ala Leu Pro

1040 1045 1050

Ser Thr Trp Ile Glu Asn Lys Leu Tyr Gly Met Ser Asp Pro Asn

1055 1060 1065

Trp Pro Gly Glu Ser Pro Val Pro Leu Thr Arg Ala Asp Gly Thr

1070 1075 1080

Asn Thr Gly Phe Pro Arg Tyr Pro Asn Asp Ser Val Tyr Ala Asn

1085 1090 1095

Trp Met Leu Ser Pro Ser Ala Ala Lys Leu Met Asp Thr Phe Asp

1100 1105 1110

Ser

Claims

1.式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物在制备用于治疗RET相关癌症的药物中的用途：

其中：

X¹、X²、X³和X⁴独立地是CH或N，其中X¹、X²、X³和X⁴中的零个、一个或两个是N；

A是CN；

B是

(b)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基，

(e)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-，

(f)(R¹R²N)C1-C6烷基-，其中所述烷基部分任选地被OH取代，且其中R¹和R²独立地是H或C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)；

(g)hetAr¹C1-C3烷基-，其中hetAr¹是5-6元杂芳基环，其具有1-3个独立地选自N、O和S的环杂原子，且任选地被一个或多个独立选择的C1-C6烷基取代基取代；或

(i)(hetCyc^a)C1-C3烷基-；hetCyc^a-是4-6元杂环，其具有1-2个独立地选自N和O的环杂原子，且任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：OH、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、羟基C1-C6烷基-、C1-C6烷氧基、(C1-C6烷基)C(＝O)-、(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-和氟，或其中hetCyca被氧代基取代；

环D是(i)饱和4-7元杂环，其具有两个环氮原子，或(ii)饱和7-9元桥连杂环，其具有两个环氮原子且任选地具有第三个为氧的环杂原子，其中每个所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、任选被1-3个氟取代的C1-C3烷基、或任选被1-3个氟取代的C1-C3烷氧基，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基；

E是

(h)Ar¹C1-C6烷基-，

(j)hetAr²C1-C6烷基-，其中所述烷基部分任选地被1-3个氟取代，或

(1)hetAr²C(＝O)-，

Ar¹是任选地被一个或多个取代基取代的苯基，所述取代基独立地选自由以下组成的组：卤素；CN；C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)；C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)；R^eR^fN-，其中R^e和R^f独立地是H或C1-C6烷基；(R^pR^qN)C1-C6烷氧基-，其中R^p和R^q独立地是H或C1-C6烷基；和(hetAr^a)C1-C6烷基-，其中hetAr^a是5-6元杂芳基环，其具有1-2个环氮原子，或Ar¹是与具有1-2个独立地选自N和O的环杂原子的5-6元杂环稠合的苯环；和

hetAr²是具有1-3个独立地选自N、O和S的环杂原子的5-6元杂芳基环或具有1-3个环氮原子的9-10元双环杂芳基环，其中hetAr²任选地被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自由以下组成的组：卤素；CN；C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)；C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)；(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-(任选被1-3个氟取代)；R^eR^fN-，其中R^e和R^f独立地是H或C1-C6烷基；OH；(C1-C6烷氧基)C1-C6烷氧基-和C3-C6环烷基。

2.权利要求1所述的用途，其中环D是

其中波浪线指示环D与包括X¹、X²、X³和X⁴的环的连接点，且星号指示与E的连接点，且其中所述环任选地被以下取代：(a)一个到四个基团，其独立地选自卤素、OH、任选被1-3个氟取代的C1-C3烷基、或任选被1-3个氟取代的C1-C3烷氧基，(b)C3-C6亚环烷基环，或(c)氧代基。

3.权利要求2所述的用途，其中E是：

(h)Ar¹C1-C6烷基-，或

(j)hetAr²C1-C6烷基-其中所述烷基部分任选地被1-3个氟取代。

4.权利要求1所述的用途，其中环D是

5.权利要求4所述的用途，其中E是：

(j)hetAr²C1-C6烷基-其中所述烷基部分任选地被1-3个氟取代，

或

(1)hetAr²C(＝O)-。

6.权利要求3所述的用途，其中B是

(c)羟基C2-C6烷基-其中所述烷基部分任选地被C3-C6亚环烷基环取代，

(e)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-，或

(i)(hetCyc^a)C1-C3烷基-。

7.权利要求5所述的用途，其中B是

(b)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基，

(g)hetAr¹C1-C3烷基-，其中hetAr¹是具有1-3个独立地选自N、O和S的环杂原子的5-6元杂芳基环，且任选地被一个或多个独立选择的C1-C6烷基取代基取代；或

(i)(hetCyc^a)C1-C3烷基-。

8.权利要求1所述的用途，其中X¹是N，且X²、X³和X⁴是CH。

9.权利要求1所述的用途，其中所述式I化合物选自：

4-(6-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-吗啉代乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈；

6-(2-羟基乙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈；

(R)-6-(2-羟基丙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈；

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈；

6-(2-甲氧基乙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈；

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-(6-甲氧基烟酰)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈；

6-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈；

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-吗啉代乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈；

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-((l-甲基-1H-咪唑-4-基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈；和

6-乙氧基-4-(5-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈；

或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

10.权利要求1所述的用途，其中所述式I化合物是

4-(6-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-吗啉代乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

11.权利要求1所述的用途，其中所述式I化合物是

6-(2-羟基乙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

12.权利要求1所述的用途，其中所述式I化合物是

(R)-6-(2-羟基丙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

13.权利要求1所述的用途，其中所述式I化合物是

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

14.权利要求1所述的用途，其中所述式I化合物是

6-(2-甲氧基乙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

15.权利要求1所述的用途，其中所述式I化合物是

6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-(6-甲氧基烟酰)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

16.权利要求1所述的用途，其中所述式I化合物是

6-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

17.权利要求1所述的用途，其中所述式I化合物是

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-吗啉代乙氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

18.权利要求1所述的用途，其中所述式I化合物是

4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-((1-甲基-1H-咪唑-4-基)甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

19.权利要求1所述的用途，其中所述式I化合物是

6-乙氧基-4-(5-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

20.权利要求1所述的用途，其中所述癌症选自由以下组成的组：

急性淋巴细胞白血病(ALL)、急性髓性白血病(AML)、乳腺癌、***、结肠直肠癌、胃肠粘膜神经节瘤、胃癌、胃肠道间质瘤、神经胶质瘤、白血病、肺癌、淋巴瘤、多发性内分泌瘤形成2A或2B型(分别为MEN2A或MEN2B)、多发性骨髓瘤、非霍奇金淋巴瘤、非小细胞肺癌、卵巢癌、***状肾细胞癌、副神经节瘤、甲状旁腺增生、嗜铬细胞瘤和甲状腺癌。

21.权利要求20所述的用途，其中所述癌症是白血病。

22.权利要求1所述的用途，其中所述RET基因、RET激酶或其中的任一个的表达或活性或水平的调节异常导致RET融合蛋白的翻译或RET激酶的突变。

23.权利要求21所述的用途，其中所述RET融合蛋白选自由以下组成的组：

BCR-RET、CLIP1-RET、KIF5B-RET、CCDC6-RET、NCOA4-RET、TRIM33-RET、ERC1-RET、FGFR1OP-RET、RET-MBD1、RET-RAB61P2、RET-PRKAR1A、RET-TRIM24、RET-GOLGA5、HOOK3-RET、KTN1-RET、TRIM27-RET、AKAP13-RET、FKBP15-RET、SPECC1L-RET、TBL1XR1/RET、CEP55-RET、CUX1-RET、KIAA1468-RET、RFG8/RET、ACBD5-RET、PTC1ex9-RET、MYH13-RET、PIBF1-RET、KIAA1217-RET、MPRIP-RET、HRH4-RET、Ria-RET、RET-PTC4、FRMD4A-RET、SQSTM1-RET、AFAP1L2-RET、PPFIBP2-RET、EML4-RET、PARD3-RET、MYH10-RET、HTIF1/RET、AFAP1-RET、RASGEF1A-RET、TEL-RET、RUFY1-RET、UEVLD-RET、DLG5-RET、FOXP4-RET、TIF1G-RET、H4L-RET、OFLM4-RET和RRBP1-RET。

24.权利要求21所述的用途，其中所述突变是RET基因中的一个或多个点突变。

25.权利要求23所述的用途，其中所述RET基因中的一个或多个点突变导致包含在选自下组的氨基酸位置的氨基酸取代的RET蛋白的翻译：

32、34、40、56、64、67、114、145、292、321、330、338、360、393、423、446、510、511、513、515、525、531、532、533、550、591、593、595、600、602、603、606、609、611、616、618、619、620、623、624、630、631、632、634、635、636、640、641、648、649、664、665、666、675、686、689、691、694、700、706、713、732、736、748、750、765、766、768、769、770、771、777、778、781、788、790、791、804、805、806、810、818、819、823、826、833、836、841、843、844、848、852、865、870、873、876、881、883、884、886、891、897、898、900、901、904、905、907、908、911、912、918、919、921、922、930、961、972、981、982、1009、1015、1017、1041、1064和1096。

26.权利要求24所述的用途，其中所述一个或多个点突变导致包含选自下组的氨基酸取代的RET蛋白的翻译：

S32L、D34S、L40P、L56M、P64L、R67H、R114H、V145G、V292M、G321R、R330Q、T3381、R360W、F393L、G423R、G446R、A510V、E511K、G513D、C515S、C515W、R525W、C531R、G533C、G533S、G550E、V591I、G593E、E595D、E595A、R600Q、I602V、K603Q、K603E、Y606C、C609C、C609Y、C609S、C609G、C609R、C609F、C609W、C611R、C611S、C611G、C611Y、C611F、C611W、E616Q、C618S、C618Y、C618R、C618G、C618F、C618W、F619F、C620S、C620W、C620R、C620G、C620L、C620Y、C620F、E623K、D624N、C630A、C630R、C630S、C630Y、C630F、C630W、D631N、D631Y、D631A、D631G、D631V、D631E、E632K、E632G、C634W、C634Y、C634S、C634R、C634F、C634G、C634L、C634A、C634T、R635G、T636P、T636M、A640G、A641S、A641T、V648I、S649L、A664D、H665Q、K666E、K666M、K666N、K666R、T675T S686N、S689T、G691S、R694Q、M700L、V706M、V706A、E713K、E732K、G736R、G748C、A750P、S765P、P766S、P766M、E768Q、E768D、L769L、R770Q、D771N、N777S、V778I、Q781R、I788I、L790F、Y791F、Y791N、V804L、V804M、V804E、E805K、Y806E、Y806F、Y806S、Y806G、Y806C、Y806H、Y806N、Y806Y、G810R、G810S、G810A、E818K、S819I、G823E、Y826M、Y826S、R833C、S836S、P841L、P841P、E843D、R844W、R844Q、R844L、M848T、I852M、L865V、L870F、R873W、A876V、L881V、A883F、A883S、A883T、E884K、R886W、S891A、S891S、R897Q、D898V、Y900F、E901K、S904F、S904S、S904C、Y905F、K907E、K907M、R908K、G911D、R912P、R912Q、M918T、M918V、M918L、A919V、E921K、S922P、S922Y、T930M、F961L、R972G、Y981F、R982C、M1009V、Y1015F、D1017N、V1041G、M1064T和Y1096F。

27.权利要求1所述的用途，进一步包括向患者施用额外的疗法或治疗剂。

28.权利要求27所述的用途，其中所述额外的疗法或治疗剂选自由以下组成的组：放射疗法、细胞毒性化学疗法、激酶靶向疗法、细胞凋亡调节剂、信号转导抑制剂、免疫靶向疗法和血管生成靶向疗法。

29.权利要求27所述的用途，其中所述额外的疗法是第二RET抑制剂、免疫疗法或其组合。