JP5474354B2 - 医薬化合物 - Google Patents

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Description

発明の背景
技術分野
本発明はアシルアミノ−ピラゾリルベンゾイミダゾールおよびウレイド−ピラゾリル−ベンゾイミダゾールならびにそれらの類似体、特に化合物１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素およびその塩および結晶形態の新規な治療における使用に関する。
背景技術
化合物１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素遊離塩基およびその種々の塩は、我々が２００５年１２月３０日に出願した、ＵＳＳＮ６０／６４０，４７５およびＧＢ０４２８５５２．４から優先権を主張する、国際特許出願に、サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫキナーゼ）、オーロラキナーゼおよびグリコーゲンシンターゼキナーゼ−３（ＧＳＫ３）の阻害剤として開示されている。
プロテインキナーゼは、細胞内における様々なシグナル伝達過程の制御に関与する構造的に関連する酵素の大きなファミリーを形成している（ハーディー（Ｈａｒｄｉｅ，Ｇ．）およびハンクス（Ｈａｎｋｓ，Ｓ．）、１９９５年、タンパク質キナーゼファクトブックＩおよびＩＩ（Ｔｈｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｋｉｎａｓｅ Ｆａｃｔｓ Ｂｏｏｋ、Ｉ ａｎｄ ＩＩ）アカデミックプレス（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ）、サンディエゴ、カリフォルニア）。前記キナーゼは、それらがリン酸化する基質により、各ファミリーに分類される（例えば、タンパク質‐チロシン、タンパク質‐セリン／スレオニン、脂質など）。これらキナーゼファミリーの各々に通常対応する配列モチーフが特定されてきた（例えば、ハンクス（Ｈａｎｋｓ，Ｓ．Ｋ．）、ハンター（Ｈｕｎｔｅｒ，Ｔ．）、米国実験生物学協会誌（ＦＡＳＥＢ Ｊ．）、９：５７６−５９６、１９９５年；ナイトン（Ｋｎｉｇｈｔｏｎ）ら、サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）、２５３：４０７−４１４、１９９１年；ハイルズ（Ｈｉｌｅｓ）ら、セル（Cell）、７０：４１９−４２９、１９９２年；クンツ（Ｋｕｎｚ）ら、セル（Ｃｅｌｌ）、７３：５８５−５９６、１９９３年；ガルシア−ブストス（Ｇａｒｃｉａ−Ｂｕｓｔｏｓ）ら、欧州分子生物学機構誌（ＥＭＢＯ Ｊ．）、１３：２３５２−２３６１、１９９４年）。
プロテインキナーゼはそれらの調節メカニズムにより特徴付けられる。これらのメカニズムには、例えば自己リン酸化、他のキナーゼによるリン酸基転移、タンパク質‐タンパク質相互作用、タンパク質‐脂質相互作用、およびタンパク質‐ポリヌクレオチド相互作用がある。個々のプロテインキナーゼは２以上のメカニズムにより調節されることもある。
キナーゼは、リン酸基を標的タンパク質へ付加することにより、増殖、分化、アポトーシス、運動、転写、翻訳、および他のシグナル伝達作用に限定されないが、それらを含めた多くの異なる細胞過程を調節している。これらのリン酸化現象は、標的タンパク質の生物学的機能を調整または調節しうる分子オン／オフスイッチとして作用する。標的タンパク質のリン酸化は、様々な細胞外シグナル（ホルモン、神経伝達物質、増殖、および分化因子など）、細胞周期現象、環境ストレス、または栄養ストレスなどに反応して生じる。適切なプロテインキナーゼは、例えば代謝酵素、調節タンパク質、受容体、細胞骨格タンパク質、イオンチャンネルまたはイオンポンプ、または転写因子を（直接的または間接的に）活性化または不活性化するために、シグナル伝達経路において機能する。タンパク質リン酸化の制御の欠陥に起因する制御されないシグナルは、例えば炎症、癌、アレルギー／喘息、免疫系の疾患および症状、中枢神経系の疾患および症状、および血管新生を含む、多くの疾患に関与している。
サイクリン依存性キナーゼ
真核細胞***のプロセスは、Ｇ１、Ｓ、Ｇ２およびＭと呼ばれる一連の連続する段階に大きく分割できる。細胞周期の種々の段階の正しい進行は、サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）として知られているタンパク質ファミリーおよびサイクリンと呼ばれるそれらの同系統タンパク質パートナーの多様なセットの空間的そして時間的調節に決定的に依存していることが示されている。ｃｄｋは、配列依存的に種々のポリペプチドのリン酸化において基質としてＡＴＰを利用することができるｃｄｃ２（ｃｄｋ１としても知られている）相同セリン−スレオニンキナーゼタンパク質である。サイクリンは、特定のｃｄｋパートナータンパク質への結合およびそれに対する選択性の規定に使用される“サイクリンボックス”と呼ばれる約１００のアミノ酸を含む相同領域によって特徴付けられるタンパク質ファミリーである。
細胞周期全体を通じて種々のｃｄｋおよびサイクリンの発現レベル、分解率および活性化レベルが調整されることで、ｃｄｋが酵素的に活性化されている一連のｃｄｋ／サイクリン複合体の周期的な形成がもたらされる。これらの複合体の形成により、個々の細胞周期チェックポイントの通過が制御され、それにより細胞***のプロセスが継続し得る。既定の細胞周期チェックポイントで必須の生化学的基準を満たさない、すなわち、必要とするｃｄｋ／サイクリン複合体を形成できないと、細胞周期の停止および／または細胞アポトーシスがもたらされることがある。癌において現れるような異常な細胞増殖は、多くの場合、正しい細胞周期制御の欠如に起因し得る。従って、ｃｄｋ酵素活性の阻害により、異常に***する細胞が、それらの***の停止および／または死滅を生じ得る手段が提供される。ｃｄｋおよびｃｄｋ複合体の多様性ならびに細胞周期を媒介するそれらの重要な役割により、定義された生化学的根拠に基づいて選択される広範囲の可能性のある治療標的が提供される。
細胞周期のＧ１期からＳ期への進行は、Ｄ型およびＥ型サイクリンのメンバーとの結合を介して、主としてｃｄｋ２、ｃｄｋ３、ｃｄｋ４およびｃｄｋ６により調節される。Ｄ型サイクリンは、Ｇ１制限点を超えて通過するのに役立つと思われ、ここで、ｃｄｋ２／サイクリンＥ複合体がＧ１期からＳ期への移行に重要である。続くＳ期を経た進行およびＧ２期への進入には、ｃｄｋ２／サイクリンＡ複合体が必要であると思われる。有糸***と、それを引き起こすＧ２期からＭ期への移行はどちらも、ｃｄｋ１とＡ型サイクリンとの複合体およびｃｄｋ１とＢ型サイクリンとの複合体により調製される。
Ｇ１期において、網膜芽細胞腫タンパク質（Ｒｂ）およびｐ１３０のような関連するポケットタンパク質は、ｃｄｋ（２、４、および６）／サイクリン複合体の基質である。Ｇ１からの進行は、１つには、ｃｄｋ（４／６）／サイクリン−Ｄ複合体によるＲｂおよびｐ１３０の過剰リン酸化、従って不活性化、により促進される。Ｒｂおよびｐ１３０の過剰リン酸化により、Ｅ２Ｆなどの転写因子の放出が起こり、従ってＧ１からの進行さらにはＳ期への進入のために必要なサイクリンＥ遺伝子などの遺伝子の発現が起こる。サイクリンＥの発現により、Ｒｂのさらなるリン酸化を介してＥ２Ｆレベルを増幅または維持するｃｄｋ２／サイクリンＥ複合体の形成が促進される。また、このｃｄｋ２／サイクリンＥ複合体は、ヒストン生合成に関与するＮＰＡＴなどの、ＤＮＡ複製に必要な他のタンパク質もリン酸化する。また、Ｇ１の進行およびＧ１／Ｓ移行は、ｃｄｋ２／サイクリンＥ経路につながるマイトジェンによって刺激されたＭｙｃ経路を介しても調節される。また、ｃｄｋ２は、ｐ２１レベルのｐ５３調節を介して、ｐ５３が媒介するＤＮＡ損傷応答経路にも接続される。ｐ２１は、ＣＤＫ２／サイクリンＥのタンパク質阻害剤であり、従って、Ｇ１／Ｓ移行を遮断または遅延させることができる。従って、ｃｄｋ２／サイクリンＥ複合体は、Ｒｂ、Ｍｙｃおよびｐ５３経路からの生化学的刺激がある程度統合される点を表す可能性がある。従って、ｃｄｋ２および／またはｃｄｋ２／サイクリンＥ複合体は、異常に***する細胞において細胞周期を停止させる、または細胞周期の制御を回復させるように設計される治療の良い標的となる。
細胞周期におけるｃｄｋ３の厳密な役割は明らかになっていない。同系統サイクリンパートナーはまだ同定されていないが、ドミナントネガティブ型のｃｄｋ３がＧ１における細胞を遅延させ、このことは、ｃｄｋ３がＧ１／Ｓ移行を調節する役割を有することを示唆している。
ほとんどのＣＤＫが細胞周期の調節に関与しているが、ｃｄｋファミリーの特定のメンバーが、他の生化学的過程に関与している証拠がある。これは、正確な神経発生に必要であり、かつ、Ｔａｕ、ＮＵＤＥ−１、シナプシン１、ＤＡＲＰＰ３２およびＭｕｎｃ１８／シンタキシン１Ａ複合体などのいくつかの神経タンパク質のリン酸化にも関与するＣＤＫ５によって例示される。神経のｃｄｋ５は、通常、ｐ３５／ｐ３９タンパク質への結合により活性化される。しかしながら、ｃｄｋ５活性は、ｐ３５の短縮型であるｐ２５の結合により脱調節され得る。ｐ３５からｐ２５への変換および続いてのｃｄｋ５活性の脱調節は、虚血、興奮毒性およびベータ−アミロイドペプチドにより誘導することができる。その結果、ｐ２５は、アルツハイマー病などの神経変性疾患の病因に関与しており、従って、これらの疾病に対する治療標的として注目される。
ｃｄｋ７は、ｃｄｃ２ＣＡＫ活性を有し、かつ、サイクリンＨに結合する核タンパク質である。ｃｄｋ７は、ＲＮＡポリメラーゼＩＩＣ末端ドメイン（ＣＴＤ）活性を有するＴＦＩＩＨ転写複合体の成分として同定されている。これは、Ｔａｔが媒介する生化学経路を介したＨＩＶ−１転写の調節に関与する。ｃｄｋ８はサイクリンＣと結合し、ＲＮＡポリメラーゼＩＩのＣＴＤのリン酸化に関連付けられている。同様に、ｃｄｋ９／サイクリン−Ｔ１複合体（Ｐ−ＴＥＦｂ複合体）は、ＲＮＡポリメラーゼＩＩの伸張制御に関連付けられている。また、ＰＴＥＦ−ｂは、サイクリンＴ１との相互作用を介したウイルス性トランス活性化因子ＴａｔによるＨＩＶ−１ゲノムの転写の活性化に必要とされる。従って、ｃｄｋ７、ｃｄｋ８、ｃｄｋ９およびＰ−ＴＥＦｂ複合体は、抗ウイルス治療の可能性のある標的となる。
分子レベルで、ｃｄｋ／サイクリン複合体活性の媒介には、一連の促進的および阻害的リン酸化または脱リン酸化の事象が必要である。ｃｄｋのリン酸化は、ｃｄｋ活性化キナーゼ群（ＣＡＫ）および／またはｗｅｅ１、Ｍｙｔ１およびＭｉｋ１などのキナーゼによって行われる。脱リン酸化は、ｃｄｃ２５（ａおよびｃ）、ｐｐ２ａまたはＫＡＰなどのホスファターゼによって行われる。
ｃｄｋ／サイクリン複合体活性は、さらに、Ｋｉｐ／ＣｉｐファミリーまたはＩＮＫファミリーという、内因性の細胞タンパク性阻害剤の２つのファミリーにより調節され得る。ＩＮＫタンパク質は、ｃｄｋ４およびｃｄｋ６と特異的に結合する。ｐ１６ｉｎｋ４（ＭＴＳ１としても知られている）は多数の原発性癌において変異または欠失している腫瘍抑制遺伝子の可能性がある。Ｋｉｐ／Ｃｉｐファミリーは、ｐ２１Ｃｉｐ１，Ｗａｆ１、ｐ２７Ｋｉｐ１およびｐ５７ｋｉｐ２などのタンパク質を含む。上記したように、ｐ２１はｐ５３により誘導され、ｃｄｋ２／サイクリン（Ｅ／Ａ）複合体およびｃｄｋ４／サイクリン（Ｄ１／Ｄ２／Ｄ３）複合体を不活性化することができる。乳癌、結腸癌および前立腺癌においては、典型的に低レベルのｐ２７発現が観察されている。逆に、固形癌におけるサイクリンＥの過剰発現は、患者の予後の悪さと相関性があることが示されている。サイクリンＤ１の過剰発現は、食道癌、乳癌、扁平上皮癌および非小細胞性肺癌と関連する。
増殖細胞において細胞周期を統括および駆動する上でのｃｄｋおよびそれらの関連タンパク質の中枢的役割については上記で概要を述べた。ｃｄｋが重要な役割を果たす生化学的経路のいくつかについても記載してきた。従って、全般的なＣＤＫまたは特定のｃｄｋを標的とした治療薬を用いた、癌などの増殖性疾患の治療に向けた単剤療法の開発は、極めて望ましい可能性がある。ｃｄｋ阻害剤は、とりわけウイルス感染、自己免疫疾患および神経変性疾患などの他の症状を治療するのにも使用できると考えられる。また、ｃｄｋを標的とした治療も、既存の治療薬または新しい治療薬との併用療法に用いた場合に、上記の疾病の治療において臨床的利益をもたらし得る。ｃｄｋを標的とする抗癌療法は、ＤＮＡと直接相互作用せず、従って、二次腫瘍の発生の危険性を軽減するはずであることから、現行の多くの抗腫瘍剤に優る利点を持つ可能性がある。
びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）
細胞周期の進行はサイクリン、サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）、および負の細胞周期調節因子であるＣＤＫ阻害剤（ＣＤＫｉ）の作用の組合せによって調節される。ｐ２７ＫＩＰ１は細胞周期調節の鍵となるＣＤＫｉであり、Ｇ１／Ｓ移行にはその分解が必要とされる。増殖中のリンパ球ではｐ２７ＫＩＰ１の発現が欠如しているにもかかわらず、いくつかの侵攻性Ｂ細胞リンパ腫は、変則的なｐ２７ＫＩＰ１染色を示すことが報告されている。この種のリンパ腫では異常に高いｐ２７ＫＩＰ１発現が見られた。これらの知見の臨床的意義の分析から、単変量解析と多変量解析の双方で、この種の腫瘍における高レベルのｐ２７ＫＩＰ１発現が予後の悪さのマーカーとなることが示された。これらの結果は、有害な臨床的有意性のびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）において異常なｐ２７ＫＩＰ１発現があることを示し、このことはこの変則的なｐ２７ＫＩＰ１タンパク質が他の細胞周期調節因子タンパク質との相互作用を介して非機能性となり得ることを示唆している（ブリティッシュジャーナルオブキャンサー（Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ、１９９９年７月、８０（９）：１４２７−３４）。ｐ２７ＫＩＰ１はびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫で異常な発現を示し、有害臨床転帰と関連する（サエス（Ｓａｅｚ Ａ）、サンチェス（Ｓａｎｃｈｅｚ Ｅ）、サンチェス−ベアト（Ｓａｎｃｈｅｚ−Ｂｅａｔｏ Ｍ）、クルス（Ｃｒｕｚ ＭＡ）、チャコン（Ｃｈａｃｏｎ Ｉ）、ムニョス（Ｍｕｎｏｚ Ｅ）、カマチョ（Ｃａｍａｃｈｏ ＦＩ）、マルチネス−モンテロ（Ｍａｒｔｉｎｅｚ−Ｍｏｎｔｅｒｏ ＪＣ）、モリエホ（Ｍｏｌｌｅｊｏ Ｍ）、ガルシア（Ｇａｒｃｉａ ＪＦ）、ピリス（Ｐｉｒｉｓ ＭＡ）、病理学科（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ）、バージンデラサルド病院（Ｖｉｒｇｅｎ ｄｅ ｌａ Ｓａｌｕｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ）、トレド、スペイン）。
慢性リンパ性白血病
Ｂ細胞慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）は西半球で最も多い白血病であり、毎年およそ１０，０００の新たな症例が診断されている（パーカー（Ｐａｒｋｅｒ ＳＬ）、トン（Ｔｏｎｇ Ｔ）、ボールデン（Ｂｏｌｄｅｎ Ｓ）、ウィンゴ（Ｗｉｎｇｏ ＰＡ）：癌統計学（Ｃａｎｃｅｒ ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ）、１９９７年ＣＡキャンサージャーナルフォークリニシャンズ（Ｃａ． Ｃａｎｃｅｒ． Ｊ。 Ｃｌｉｎ．）、４７：５、１９９７年)。他の形態の白血病に比べ、ＣＬＬの予後は全体的に良好であり、最も進行した病期の患者でも平均生存期間は３年である。
従来用いられているアルキル化剤に基づく療法に比べ、症候性ＣＬＬ患者に対する初期療法としてフルダラビンを付加するとより高い完全奏功率（３％に対して２７％）と無増悪生存期間（１７ヶ月に対して３３ヶ月）をもたらした。治療後に完全臨床奏功を得ることはＣＬＬにおける生存率を向上させる第一段階であるが、大多数の患者は完全寛解が得られないか、またはフルダラビンに応答することができない。さらに、フルダラビンで治療した総てのＣＬＬ患者がやがて再発に至り、その単剤としての役割は全く緩和剤的なものとなる（ライ（Ｒａｉ ＫＲ）、ピーターソン（Ｐｅｔｅｒｓｏｎ Ｂ）、イリアス（Ｅｌｉａｓ Ｌ）、シェパード（Ｓｈｅｐｈｅｒｄ Ｌ）、ハインズ（Ｈｉｎｅｓ Ｊ）、ネルソン（Ｎｅｌｓｏｎ Ｄ）、チェソン（Ｃｈｅｓｏｎ Ｂ）、コリッツ（Ｋｏｌｉｔｚ Ｊ）、シファー（Ｓｃｈｉｆｆｅｒ ＣＡ）：過去に未治療の慢性リンパ球性白血病を有する患者に対するフルダラビンおよびクロラムブチルの無作為比較（Ａ ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｆｌｕｄａｒａｂｉｎｅ ａｎｄ ｃｈｌｏｒａｍｂｕｃｉｌ ｆｏｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｐｒｅｖｉｏｕｓｌｙ ｕｎｔｒｅａｔｅｄ ｃｈｒｏｎｉｃ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｕｃ ｌｅｕｋｅｍｉａ）、Ａ ＣＡＬＧＢ ＳＷＯＧ、ＣＴＧ／ＮＣＩ−ＣおよびＥＣＯＧのグループ間研究、ブラッド（ＢＬＯＯＤ）８８：１４１ａ、１９９６年（アブストラクト５５２、付録１）。従って、この疾病の治療法にさらなる進展が実現されるとすれば、フルダラビンの細胞傷害性を相補し、内在性のＣＬＬ薬剤耐性因子によって誘導される耐性を無効にする新規作用機序を有する新薬剤を同定することが必要である。
最も包括的に研究されている、ＣＬＬ患者の不十分な治療応答と生存率の悪さの一様な推定因子は、点変異または染色体１７ｐ１３の欠失を特徴とするような異常なｐ５３機能である。実際、異常なｐ５３機能を有するＣＬＬ患者に関する複数の単一施設症例シリーズにおいてアルキル化剤またはプリン類似体のいずれかによる療法に対する応答は実証されたことがない。ＣＬＬにおけるｐ５３変異に関連する薬剤耐性を克服する能力を有する治療薬を導入することは、この疾病の治療に大きな進展をもたらす可能性がある。
サイクリン依存性キナーゼの阻害剤であるフラボピリドールおよびＣＹＣ２０２は、インビトロにおいてＢ細胞慢性リンパ性白血病（Ｂ−ＣＬＬ）由来の悪性細胞のアポトーシスを誘導する。
フラボピリドールへの暴露はカスパーゼ３活性の刺激、ならびにＢ−ＣＬＬにおいて過剰発現される、細胞周期の負の調節因子ｐ２７（ｋｉｐ１）のカスパーゼ依存性切断をもたらす（ブラッド（Ｂｌｏｏｄ）、１９９８年１１月１５；９２（１０）：３８０４−１６、ｂｃｌ−２調節または機能性ｐ５３依存の所見を呈せずフラボピリドールはカスパーゼ−３の活性化を通して慢性リンパ球性白血病細胞のアポトーシスを誘発する（Ｆｌａｖｏｐｉｒｉｄｏｌ ｉｎｄｕｃｅｓ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎ ｃｈｒｏｎｉｃ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｃｅｌｌｓ ｖｉａ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｃａｓｐａｓｅ−３ ｗｉｔｈｏｕｔ ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｏｆ ｂｃｌ−２ ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｒ ｄｅｐｅｎｄｅｎｃｅ ｏｎ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｐ５３）、バード（Ｂｙｒｄ ＪＣ）、シン（Ｓｈｉｎｎ Ｃ）、ワセレンコ（Ｗａｓｅｌｅｎｋｏ ＪＫ）、フュックｓｕ（Ｆｕｃｈｓ ＥＪ）、レーマン（Ｌｅｈｍａｎ ＴＡ）、ニューエン（Ｎｇｕｙｅｎ ＰＬ）、フリン（Ｆｌｉｎｎ ＩＷ）、ディール（Ｄｉｅｈｌ ＬＦ）、ソースビル（Ｓａｕｓｖｉｌｌｅ Ｅ）、グレバー（Ｇｒｅｖｅｒ ＭＲ））。
オーロラキナーゼ
比較的最近、細胞周期のＧ２期とＭ期に関与し、有糸***の重要な調節因子である、オーロラキナーゼとして知られるセリン／スレオニンキナーゼの新しいファミリーが発見された。
オーロラキナーゼの正確な役割はまだ解明されていないが、それらは有糸***のチェックポイントの制御、染色体ダイナミクスおよび細胞質***に役割を果たしている（アダムス（Ａｄａｍｓ）ら、細胞生物学の潮流（Ｔｒｅｎｄｓ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．）、１１：４９−５４、２００１年)。オーロラキナーゼは***間期の細胞の中心体、二極紡錘体の***極、および***装置の中央体に存在する。
これまでに哺乳類でオーロラキナーゼファミリーの３つのメンバーが発見されている（二グ（Ｅ．Ａ．Ｎｉｇｇ）、ナショナルレビューオブモルキュラーセルバイオロジー（Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．）、２：２１−３２、２００１年）。それらは、
オーロラＡ（文献ではオーロラ２とも呼ばれている）；
オーロラＢ（文献ではオーロラ１とも呼ばれている）；および
オーロラＣ（文献ではオーロラ３とも呼ばれている）。
オーロラキナーゼは相同性の高い触媒ドメインを有するが、そのＮ末端部分で著しく異なる(カタヤマ（Ｋａｔａｙａｍａ Ｈ）、ブリンクリー（Ｂｒｉｎｋｌｅｙ ＷＲ）、セン（Ｓｅｎ Ｓ）；オーロラキナーゼ：細胞形質転換および腫瘍形成における役割（Ｔｈｅ Ａｕｒｏｒａ ｋｉｎａｓｅｓ：ｒｏｌｅ ｉｎ ｃｅｌｌ ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｅｓｉｓ）、癌転移レビュー（Ｃａｎｃｅｒ Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ Ｒｅｖ．）、２００３年１２月、２２（４）：４５１−６４)。
オーロラキナーゼＡおよびＢの基質は、キネシン様モータータンパク質、紡錘体装置タンパク質、ヒストンＨ３タンパク質、動原体タンパク質および腫瘍抑制タンパク質ｐ５３を含むものと同定されている。
オーロラＡキナーゼは紡錘体の形成に関与し、それらが紡錘体関連タンパク質をリン酸化するＧ２期初期に中心体に局在すると考えられている（プライジェント（Ｐｒｉｇｅｎｔ）ら、セル（Ｃｅｌｌ）、１１４：５３１−５３５、２００３年)。ヒロタ（Ｈｉｒｏｔａ）ら、（セル（Ｃｅｌｌ）、１１４：５８５−５９８、２００３年)により、オーロラＡタンパク質キナーゼを枯渇させた細胞は有糸***に進入することができないことが見出された。さらに、様々な種におけるオーロラＡ遺伝子の変異または破壊は、中心体の分離および成熟の欠陥、紡錘体異常ならびに染色体分離の欠陥を含む、有糸***異常をもたらすことが見出されている（アダムス（Ａｄａｍｓ）、２００１年）。
オーロラキナーゼは、一般に、胸腺および精巣のような***細胞の割合の高い組織を除く、大部分の正常組織において低レベルで発現される。しかしながら、多くのヒト癌において高レベルのオーロラキナーゼが見出されている（ギート（Ｇｉｅｔ）ら、ジャーナルオブセルサイエンス（Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｓｃｉ．）１１２：３５９１−３６１、１９９９年およびカタヤマ（Ｋａｔａｙａｍａ）、２００３年）。さらに、オーロラＡキナーゼは、多くのヒト癌で増幅されることがしばしば見出されている染色体２０ｑ１３領域にもマッピングされている。
このように、例えば、ヒト乳癌、卵巣癌、および膵臓癌において有意なオーロラＡの過剰発現が検出されている（シュウ（Ｚｈｏｕ）ら、ネイチャージェネティクス（Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．）、２０：１８９−１９３、１９９８年、タナカ（Ｔａｎａｋａ）ら、癌研究（Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ.）、５９：２０４１−２０４４、（１９９９）およびハン（Ｈａｎ）ら、癌研究（Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ.）、６２：２８９０−２８９６、２００２年、参照）。
さらに、イソラ（Ｉｓｏｌａ）、アメリカンジャーナルオブパソロジー（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ）１４７、９０５−９１１、１９９５年は、オーロラＡ遺伝子座（２０ｑ１３）の増幅がリンパ節転移陰性乳癌を有する患者の予後不良と相関していることを報告している。
ヒト膀胱癌ではオーロラ−Ａの増幅および／または過剰発現が観察され、異数性および侵攻性の臨床特性にはオーロラ−Ａの増幅が関連している（セン（Ｓｅｎ）ら、米国国立癌研究所誌（Ｊ． Ｎａｔｌ． Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ．）９４：１３２０−１３２９、２００２年、参照）。
オーロラ−Ａの高い発現は結腸直腸癌（ビショフ（Ｂｉｓｃｈｏｆｆ）ら、欧州分子生物学機構誌（ＥＭＢＯ Ｊ．）、１７：３０５２−３０６５、１９９８年、およびタカハシ（Ｔａｋａｈａｓｈｉ）ら、日本癌学会誌（Ｊｐｎ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．）、９１：１００７−１０１４、２０００、参照）、卵巣癌（グリツコ（Ｇｒｉｔｓｋｏ）ら、臨床癌研究（Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．）、９：１４２０−１４２６、２００３年、参照）、および胃癌(サカクラ（Ｓａｋａｋｕｒａ）ら、ブリティッシュジャーナルオブキャンサー（Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ）、８４：８２４−８３１、２００１年）の５０％を超えるもので検出されている。
タナカ（Ｔａｎａｋａ）ら（癌研究（Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）５９：２０４１−２０４４、１９９９年）は、浸潤性乳管腺癌の９４％でオーロラＡの過剰発現の証拠を見出した。
また、腎臓癌、子宮頸癌、神経芽腫、黒色腫、リンパ腫、膵臓癌および前立腺癌細胞株でも、高レベルのオーロラＡキナーゼが見出されている（ビショフ（Ｂｉｓｃｈｏｆｆ）ら１９９８年、欧州分子生物学機構誌（ＥＭＢＯ Ｊ．）、１７：３０５２−３０６５、１９９８年；キムラ（Ｋｉｍｕｒａ）、ジャーナルオブバイオロジカルケミストリー（Ｊ。Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．）、２７４：７３３４−７３４０、１９９９年；シュウ（Ｚｈｏｕ）ら、ネイチャージェネティクス（Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、２０：１８９−１９３、１９９８年；リ（Ｌｉ）ら、臨床癌研究（Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．）、９（３）：９９１−７、２００３年）。
オーロラ−Ｂは白血病細胞をはじめとする複数のヒト腫瘍細胞株で発現が高い（カタヤマ（Ｋａｔａｙａｍａ）ら、ジーン（Ｇｅｎｅ）２４４：１−７）。原発性結腸直腸癌では、この酵素のレベルはデュークステージ（Ｄｕｋｅ’ｓ Ｓｔａｇｅ）の臨床病期の関数として増加する（カタヤマ（Ｋａｔａｙａｍａ）ら、国立癌研究所誌（Ｊ．Ｎａｔｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ．）、９１：１１６０−１１６２、１９９９）。
オーロラ−３（オーロラ−Ｃ）は正常組織の生殖細胞に限定される傾向があるが、いくつかの腫瘍細胞株において高レベルのこのキナーゼが検出された（キムラ（Ｋｉｍｕｒａ）ら、ジャーナルオブバイオロジカルケミストリー（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２７４：７３３４−７３４０、１９９９年、参照）。結腸直腸癌の約５０％でオーロラ−３が過剰発現することが、タカハシ（Ｔａｋａｈａｓｈｉ）ら、日本癌学会誌（Ｊｐｎ． Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．）、９１：１００７−１０１４、２００１、参照）により文献で報告されている。
増殖性疾患におけるオーロラキナーゼの役割に関する他の報告は、ビショフ（Ｂｉｓｃｈｏｆｆ）ら、細胞生物学の潮流（Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ）９：４５４−４５９、１９９９年；ギート（Ｇｉｅｔ）ら、ジャーナルオブセルサイエンス（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｅｌｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ）、１１２：３５９１−３６０１、１９９９年）およびデュテルトル（Ｄｕｔｅｒｔｒｅ）ら、オンコジーン（Ｏｎｃｏｇｅｎｅ）、２１：６１７５−６１８３、２００２年に見出すことができる。
ロイス（Ｒｏｙｃｅ）らは、原発性乳癌の約４分の１でオーロラ２遺伝子（ＳＴＫ１５またはＢＴＡＫとしても知られている）の発現が示されることを報告している（ロイス（Ｒｏｙｃｅ ＭＥ）、シャ（Ｘｉａ Ｗ）、サヒン（Ｓａｈｉｎ ＡＡ）、カタヤマ（Ｋａｔａｙａｍａ Ｈ）、ジョンストン（Ｊｏｈｎｓｔｏｎ ＤＡ）、ホルトバージ（Ｈｏｒｔｏｂａｇｙｉ Ｇ）、セン（Ｓｅｎ Ｓ）、フン（Ｈｕｎｇ ＭＣ）；原発性乳癌におけるＳＴＫ１５／オーロラ−Ａ発現は核階級と関連し、予後とは無関係である（ＳＴＫ１５／Ａｕｒｏｒａ−Ａ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｐｒｉｍａｒｙ ｂｒｅａｓｔ ｔｕｍｏｕｒｓ ｉｓ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｎｕｃｌｅａｒ ｇｒａｄｅ ｂｕｔ ｎｏｔ ｗｉｔｈ ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ）；キャンサー（Ｃａｎｃｅｒ）、２００４年１月、１；１００（１）：１２−９）。
子宮内膜癌（ＥＣ）は少なくとも２つのタイプの癌を含んでいる。類内膜癌（ＥＥＣ）はエストロゲン依存性腫瘍であり、多くの場合正倍数性であり、予後も良好である。非類内膜癌（ＮＥＥＣ；漿液性型および明細胞型）はエストロゲン非依存性で、多くの場合異数性であり、臨床上は侵攻性である。また、オーロラはＮＥＥＣの５５．５％では増幅されているが、ＥＥＣでは増幅されていないことも判明した（Ｐ≦０．００１）(モレノ−ブエノ（Ｍｏｒｅｎｏ−Ｂｕｅｎｏ Ｇ）、サンチェス−エステベス（Ｓａｎｃｈｅｚ−Ｅｓｔｅｖｅｚ Ｃ）、カッシャ（Ｃａｓｓｉａ Ｒ）、ロドリゲス−ペラレス（Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ−Ｐｅｒａｌｅｓ Ｓ）、ディアス−ウリアルテ（Ｄｉａｚ−Ｕｒｉａｒｔｅ Ｒ）、ドミンゲス（Ｄｏｍｉｎｇｕｅｚ Ｏ）、ハーディション（Ｈａｒｄｉｓｓｏｎ Ｄ）、アンデュジャー（Ａｎｄｕｊａｒ Ｍ）、プラット（Ｐｒａｔ Ｊ）、マティアス−ギウ（Ｍａｔｉａｓ−Ｇｕｉｕ Ｘ）、シグドサ（Ｃｉｇｕｄｏｓａ ＪＣ）、パラシオス（Ｐａｌａｃｉｏｓ Ｊ）、癌研究（Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ.）２００３年９月、１５；６３（１８）：５６９７−７０２)。
ライハルト（Ｒｅｉｃｈａｒｄｔ）ら(オンコロジーリポート（Ｏｎｃｏｌ Ｒｅｐ．）、２００３年、９〜１０月、１０（５）：１２７５−９)は、グリオーマにおけるオーロラ増幅を調べるためのＰＣＲによる定量的ＤＮＡ分析により、ＷＨＯ病期の異なる１６の腫瘍のうち５つ（３１％）（１つがグレードＩＩ、１つがグレードＩＩＩ、３つがグレードＩＶ）が、オーロラ２遺伝子のＤＮＡ増幅を示したことを明らかにした。オーロラ２遺伝子の増幅は、腫瘍形成の遺伝的経路に役割を果たす、ヒトグリオーマにおけるランダムでない遺伝子変化である可能性があるとの仮説が立てられた。
また、ハマダ（Ｈａｍａｄａ）ら(ブリティッシュジャーナルオブへマトロジー（Ｂｒ．Ｊ．Ｈａｅｍａｔｏｌ．）、２００３年５月、１２１（３）：４３９−４７)による結果は、オーロラ２が非ホジキンリンパ腫の疾病活性だけでなく、非ホジキンリンパ腫の腫瘍形成を示すために有効な候補であることも示唆している。この遺伝子の機能を制限することから起こる腫瘍細胞増殖の遅延は非ホジキンリンパ腫の治療アプローチとなり得る。
グリツコ（Ｇｒｉｔｓｋｏ）ら（臨床癌研究（Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、２００３年４月、９（４）：１４２０−６）による研究では、原発性卵巣癌を有する９２名の患者においてオーロラＡのキナーゼ活性およびタンパク質レベルが調べられた。インビトロキナーゼ分析では、４４症例（４８％）で高いオーロラＡキナーゼ活性が明らかになった。５２検体（５７％）で高いオーロラＡタンパク質レベルが検出された。オーロラＡの高いタンパク質レベルはキナーゼ活性の上昇とよく相関していた。
リ（Ｌｉ）ら(臨床癌研究（Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．）、２００３年３月、９（３）：９９１−７）によって得られた結果は、膵臓腫瘍および膵臓癌細胞株でオーロラＡ遺伝子が過剰発現されることを示し、オーロラＡの過剰発現が膵臓癌形成に役割を果たし得ることを示唆している。
同様に、オーロラＡ遺伝子の増幅およびそれがコードする有糸***キナーゼの、関連する発現の増加が、ヒト膀胱癌の異数性および侵攻性の臨床特性と関連していることが示された(国立癌研究所誌（Ｊ．Ｎａｔｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ．）、２００２年９月、４；９４（１７）：１３２０−９)。
いくつかのグループによる研究（デュテルトル（Ｄｕｔｅｒｔｒｅ Ｓ）、プライジェント（Ｐｒｉｇｅｎｔ Ｃ）、オーロラ−Ａ過剰発現は動原体と微小管との接合チェックポイントの無効化をもたらす（Ａｕｒｏｒａ−Ａ ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｅａｄｓ ｔｏ oｖｅｒｒｉｄｅ ｏｆ ｔｈｅ ｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｅ−ｋｉｎｅｔｏｃｈｏｒｅ ａｔｔａｃｈｍｅｎｔ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ）、モルキュラーインターベンション（Ｍｏｌ．Ｉｎｔｅｒｖ．）２００３年５月、３（３）：１２７−３０およびアナンド（Ａｎａｎｄ Ｓ）、ペンリン−ロウ（Ｐｅｎｒｈｙｎ−Ｌｏｗｅ Ｓ）、ベンキタラマン（Ｖｅｎｋｉｔａｒａｍａｎ ＡＲ．）、オーロラ−Ａ増幅は、紡錘体形成チェック ポイントを無効化し、タキソールに対する抵抗性を誘発する（Ａｕｒｏｒａ−Ａ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｖｅｒｒｉｄｅｓ ｔｈｅ ｍｉｔｏｔｉｃ ｓｐｉｎｄｌｅ ａｓｓｅｍｂｌｙ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ， ｉｎｄｕｃｉｎｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ Ｔａｘｏｌ）、キャンサーセル（Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ）、２００３年１月、３（１）：５１−６２)は、オーロラキナーゼ活性の過剰発現がいくつかの現行癌治療に対する耐性に関連していることを示唆している。例えば、マウス胚線維芽細胞におけるオーロラＡの過剰発現はタキサン誘導体の細胞毒性に対するこれらの細胞の感受性を低下させ得る。従って、オーロラキナーゼ阻害剤は、既存の治療に耐性を発達させた患者において特に使用が見出せる。
これまでに行われた研究に基づけば、オーロラキナーゼ、特にオーロラキナーゼＡおよびオーロラキナーゼＢ、の阻害が腫瘍成長を停止させる有効な手段を実証すると考えられる。
ハリントン（Ｈａｒｒｉｎｇｔｏｎ）ら（ＮａｔＭｅｄ誌（Ｎａｔ Ｍｅｄ.）２００４年５月；１０（３）：２６２−７）は、オーロラキナーゼの阻害剤が腫瘍増殖を抑制し、インビボで腫瘍退縮を誘導することを実証した。この研究では、オーロラキナーゼ阻害剤は癌細胞の増殖を遮断し、また、白血病細胞株、結腸直腸細胞株および***細胞株を含む様々な癌細胞株において細胞死を誘導した。さらに、オーロラキナーゼ阻害剤は白血病細胞での細胞死の誘導による白血病の治療の可能性を示した。ＶＸ−６８０は治療難治性の原発性急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）細胞を患者から強力に破壊した（アンドリューズ（Ａｎｄｒｅｗｓ）、オンコジーン（Ｏｎｃｏｇｅｎｅ）、２００５、２４、５００５−５０１５）。
最近の報告ではオーロラキナーゼＡおよびオーロラキナーゼＢがヒト白血病細胞で過剰表現されること、低分子オーロラキナーゼ阻害剤が、インビトロで原発性急性骨髄性細胞の増殖に対して活性があることが示されている(ハリントン（Ｈａｒｒｉｎｇｔｏｎ）ら、２００４)。さらに、急性前骨髄球性白血病においてｔ(１５：１７)転座(ＰＭＬ３)によって破壊されるＰＭＬ遺伝子産物が、オーロラＡと相互作用しそのキナーゼ活性を抑えることが最近報告されている。ＰＭＬが腫瘍抑制因子であり、その破壊は白血病に限定されず、リンパ腫およびいくつかの固形腫瘍においても一般的あり得るというさらなる証拠が出現している(シュ（Ｘｕ）ら、モルキュラーセル（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｅｌｌ）１７：７２１−７３２、２００５)。
オーロラ阻害剤に特に影響されやすい癌としては、乳癌、膀胱癌、結腸直腸癌、膵臓癌、卵巣癌、非ホジキンリンパ腫、グリオーマおよび非類内膜性子宮内膜癌が挙げられる。オーロラ阻害剤に特に影響されやすい白血病としては、急性骨髄性白血病(ＡＭＬ)、慢性骨髄性白血病(ＣＭＬ)、Ｂ細胞リンパ腫(マントル細胞)および急性リンパ芽球性白血病(ＡＬＬ)が挙げられる。その他、白血病は急性前骨髄球性白血病を含む。
オーロラキナーゼＡの過剰発現は髄芽細胞腫、小脳の極めて悪性の未分化神経外胚葉性腫瘍、の患者において予後不良の独立予測因子であると見なされている（ネベン（Ｎｅｂｅｎ）ら、癌研究（Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）、６４： ３１０３−３１１１（２００４）。
グリコーゲンシンターゼキナーゼ
グリコーゲンシンターゼキナーゼ−３（ＧＳＫ３）は、ヒトにおいて普遍的に発現する２つのアイソフォーム（ＧＳＫ３アルファとＧＳＫ３ベータ）として生じるセリン−スレオニンキナーゼである。ＧＳＫ３は胚発生、タンパク質合成、細胞増殖、細胞分化、微小管動力学、細胞運動および細胞アポトーシスに役割を有するとされている。このようなＧＳＫ３は糖尿病、癌、アルツハイマー病、卒中、癲癇、運動神経性疾患および／または頭部外傷などの病態の進行に関与する。系統的にＧＳＫ３はサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）に最も近い。
ＧＳＫ３により認識されるコンセンサスペプチド基質配列は（Ｓｅｒ／Ｔｈｒ）−Ｘ−Ｘ−Ｘ−（ｐＳｅｒ／ｐＴｈｒ）であり、ここで、Ｘは任意のアミノ酸であり（（ｎ＋１）、（ｎ＋２）、（ｎ＋３）の位置）、ｐＳｅｒおよびｐＴｈｒはそれぞれホスホ−セリンおよびホスホ−スレオニンである（ｎ＋４）。ＧＳＫ３は（ｎ）の位置の最初のセリン、またはスレオニン、をリン酸化する。（ｎ＋４）の位置のホスホ−セリン、またはホスホ−スレオニンは、基質ターンオーバーを最大にするためＧＳＫ３をプライミングするのに必要であると思われる。ＧＳＫ３アルファのＳｅｒ２１におけるリン酸化、またはＧＳＫ３ベータのＳｅｒ９におけるリン酸化は、ＧＳＫ３の阻害をもたらす。変異誘発およびペプチド競合研究は、ＧＳＫ３のリン酸化されたＮ末端が、自己阻害機構を介してホスホ−ペプチド基質（Ｓ／ＴＸＸＸｐＳ／ｐＴ）と競合し得るというモデルを導いた。また、ＧＳＫ３アルファおよびＧＳＫベータがそれぞれチロシン２７９およびチロシン２１６のリン酸化により敏感に調節され得るということを示唆するデータもある。これらの残基のＰｈｅへの変異により、インビボキナーゼ活性の低下が起こった。ＧＳＫ３ベータのＸ線結晶構造はＧＳＫ３の活性化および調節のあらゆる局面に光を当てる助けとなっている。
ＧＳＫ３は哺乳類インスリン応答経路の一部をなし、グリコーゲンシンターゼをリン酸化することで、これを不活性化することができる。ＧＳＫ３の阻害によるグリコーゲンシンターゼ活性のアップレギュレーションおよびそれによるグリコーゲン合成はＩＩ型すなわち、身体の組織がインスリン刺激に耐性となる状態であるインスリン非依存性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）に対処する、可能性ある手段であると考えられてきた。肝組織、脂肪組織または筋肉組織における細胞のインスリン応答は、細胞外インスリン受容体に結合するインスリンにより誘発される。これがリン酸化をもたらし、次に、インスリン受容体基質（ＩＲＳ）タンパク質の原形質膜への動員が起こる。これらのＩＲＳタンパク質がさらにリン酸化されれば、原形質膜へのホスホイノシチド−３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）の動員が始まり、そこでは、第二のメッセンジャーであるホスファチジルイノシチル３，４，５−３リン酸（ＰＩＰ３）の放出が可能である。これは３−ホスホイノシチド依存性タンパク質キナーゼ１（ＰＤＫ１）とタンパク質キナーゼＢ（ＰＫＢまたはＡｋｔ）の膜への共局在を助け、そこでＰＤＫ１はＰＫＢを活性化する。ＰＫＢはリン酸化され、その結果Ｓｅｒ９またはｓｅｒ２１のリン酸化によりそれぞれＧＳＫ３アルファおよび／またはＧＳＫベータを阻害することができる。このＧＳＫ３の阻害は、次に、グリコーゲンシンターゼ活性のアップレギュレーションを誘発する。従って、ＧＳＫ３を阻害することができる治療薬は、インスリン刺激に対して見られるものと同様の細胞応答を誘導し得る可能性がある。ＧＳＫ３のさらなるインビボ基質として、真核生物タンパク質合成開始因子２Ｂ（ｅＩＦ２Ｂ）がある。ｅＩＦ２Ｂはリン酸化によって不活性化され、従って、タンパク質の生合成を抑制することができる。従って、例えば、“ラパマイシンの哺乳類標的”タンパク質（ｍＴＯＲ）の不活性化によるＧＳＫ３の阻害はタンパク質生合成をアップレギュレートすることができる。最後に、マイトジェン活性化タンパク質キナーゼ活性化タンパク質キナーゼ１（ＭＡＰＫＡＰ−Ｋ１またはＲＳＫ）などのキナーゼによるＧＳＫ３のリン酸化を経るマイトジェン活性化タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ）経路を介したＧＳＫ３活性の調節の証拠がいくつかある。これらのデータは、ＧＳＫ３活性が有糸***促進刺激、インスリン刺激および／またはアミノ酸刺激によって調整され得ることを示唆する。
また、ＧＳＫ３ベータが脊椎動物Ｗｎｔシグナル伝達経路の重要な成分であることも示されている。この生化学経路は、正常な胚発生に重要であり、正常組織における細胞増殖を調節することが示されている。ＧＳＫ３はＷｎｔ刺激に応答して阻害されるようになる。これにより、アキシン、腺腫様多発結腸ポリープ（ＡＰＣ）遺伝子産物およびベータ−カテニンなどのＧＳＫ３基質の脱リン酸化をもたらし得る。Ｗｎｔ経路の調節の異常は多くの癌に関連している。ＡＰＣおよび／またはベータ−カテニンの変異は結腸直腸癌および他の腫瘍に共通している。また、ベータ−カテニンは細胞接着に重要であることも示されている。従って、ＧＳＫ３もまたある程度細胞接着過程を調整し得る。すでに記載した生化学経路とは別に、サイクリン−Ｄ１のリン酸化を介した細胞***の調節、ｃ−Ｊｕｎ、ＣＣＡＡＴ／エンハンサー結合タンパク質アルファ（Ｃ／ＥＢＰアルファ）、ｃ−Ｍｙｃなどの転写因子および／または活性化Ｔ細胞の核因子（ＮＦＡＴｃ）、熱ショック因子−１（ＨＳＦ−１）およびｃ−ＡＭＰ応答エレメント結合タンパク質（ＣＲＥＢ）などの他の基質のリン酸化にＧＳＫ３を関連づけるデータもある。また、ＧＳＫ３は、組織特異的ではあるが、細胞アポトーシスの調節にも役割を果たしていると思われる。プロアポトーシス機構を介した細胞アポトーシスの調整におけるＧＳＫ３の役割は、神経アポトーシスが起こり得る医学的状態に特に関連がある可能性がある。これらの例としては、頭部外傷、卒中、癲癇、アルツハイマー病、および運動神経性疾患、進行性の核上麻痺、皮質基底核変性症、およびピック病がある。インビトロにおいては、ＧＳＫ３は微小管関連タンパク質Ｔａｕを過剰リン酸化することができることが示されている。Ｔａｕの過剰リン酸化は微小管との正常な結合を破壊し、細胞内Ｔａｕ線維の形成ももたらす可能性がある。これらの線維の進行的な蓄積は、最終的に神経の機能不全および変性をもたらすと考えられている。従って、ＧＳＫ３の阻害によるＴａｕリン酸化の阻害は、神経変性作用を制限し、かつ／または防ぐ手段となり得る。
ｃ−Ａｂｌ
ＢＣＲにコードされる配列を短縮されたｃ−ａｂｌ遺伝子へ融合させる染色体転座事象はＣ−ａｂｌのチロシンキナーゼ活性を大幅に増加させ、慢性骨髄性白血病(ＣＭＬ)患者全体の95%で変換因子となる。この転座は染色体９と２２の間に生じ、細胞遺伝学的方法によって識別することができる改変染色体２２（フィラデルファア（Ｐｈ＋）染色体）になる。ＢＣＲとＡｂ１の遺伝子配列の融合はＢｃｒ−Ａｂｌ遺伝子産物のオリゴマー化、トランス- 自己リン酸化および活性化をもたらす。遺伝子融合の結果として、ｃ−ａｂｌタンパク質の自己阻害ドメインも削除される。ｃ−ａｂｌの細胞内局在性も遺伝子融合の結果として影響をうける。Ｂｃｒ−Ａｂｌの発癌効果は複雑ではあるが、Ｒａｓ、ＥｒｋおよびＪｕｎ経路の活性化を通じてＧ１期からＳ期移行への誘導に関連していると考えられる。Ｂｃｒ−Ａｂｌは、さらにＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ経路を通じて細胞生存に影響を及ぼす。Ｂｃｒ−Ａｂｌの発癌効果は動物モデルで実証されおり、それはＢｃｒ−Ａｂｌタンパク質がマウス中でＣＭＬの症状を確立できることを示す。
ＣＭＬは死に至る病であり、それには、慢性期、加速期および急性転化期、という３つの段階を進む。ＣＭＬは、初期段階においては、最終分化した好中球の増殖によって特徴付けられる。疾病が進行するにつれて、過剰数の骨髄性前駆細胞またはリンパ前駆細胞が生産される。前記疾病のこの慢性期は急性転化期に進行する前に何年も続く場合があり、多数のさらなる遺伝子変異に特徴付けられる。ＣＭＬは主に成人に起こり、病気が明らかになった後５年の平均生存期間がある。ＣＭＬは初期段階では、Ｃ−ａｂｌのＡＴＰ競合的阻害剤、イマチニブ（グリベック）、によって結果よく治療されている。第１相臨床試験に於いてこの薬では９５％の寛解率が実証された。イマチニブへの持続的反応が慢性期のＣＭＬ患者で観察されている。しかしながら、急性転化期での寛解は２〜６か月続くだけである。残念ながら、ＣＭＬ患者におけるイマチニブへの獲得耐性の発生は年間１５％程と推測される。
ＢＣＲ−ＡＢＬ中のキナーゼドメイン変異は、症例の５０％〜９０％で起こり、イマチニブに対する獲得耐性の最も一般的なメカニズムを示している。直接あるいは間接的にイマチニブ結合に影響する、ｃ−ａｂｌキナーゼドメインでの点変異の発生がイマチニブ耐性の最も一般的な原因である。２５を超える明確なＡｂ１キナーゼドメイン変異がイマチニブ治療を受けるＣＭＬ患者中で確認され、それらがイマチニブに対する臨床上の耐性に関与する（ヘマトロジーシャー（Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ Ｓｈａｈ）２００５年、（１）：１８３）。これらの変異にはイマチニブに対する様々な程度の感受性がある。イマチニブは不活性型構造もしくは閉じた構造のＡＢＬキナーゼドメインへ結合すること、また結合時にタンパク質への様々な構造変化を誘導することが示されている。直接イマチニブとの接触に関係するアミノ酸位置である程度の耐性関連変異が生じる一方で、大多数はキナーゼドメインがイマチニブが結合する特定の構造をとることを妨げると考えられる。研究では、いくつかの変異は弱い耐性しかもたらさず、結果として、いくつかの症例で反応性を取り戻すための投与量増加が予測される。第二世代ＢＣＲ−ＡＢＬ阻害剤（例えば、ＢＭＳ３５４８２５、ＡＭＮ−１０７）の同時投与が多くのイマチニブ耐性ｃ−ａｂｌ変異体を有効に阻害することが示されている。しかしながら、臨床では最もイマチニブに耐性のｃ−ａｂｌ変異体、すなわちＴ３１５Ｉ、に対して効果が示される薬剤はない。
フィラデルフィア染色体も急性リンパ芽球性白血病(ＡＬＬ)という形態で見出される。このＡＬＬという形態はＣＭＬと同じ染色体および分子のメカニズムによるものである可能性が高いようである。
ＦＭＳ様チロシンキナーゼ３（ＦＬＴ３）
ＦＬＴ３(ＦＭＳ様チロシンキナーゼ３の短縮)は、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、コロニー刺激因子１(ＣＳＦ１)およびＫＩＴリガンド（ＫＬ）の受容体と構造上関連のあるクラスＩＩＩ受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）である。ＦＬＴ３は、キナーゼ挿入物と呼ばれる特定の親水性挿入物によって２つに分割される細胞内チロシンキナーゼドメインを含んでいる。
ＦＬＴ３およびその特異的リガンドであるＦＬＴ３−リガンド（ＦＬ）は造血前駆細胞の調節に役割を果たし、多能性前駆細胞、骨髄性前駆細胞およびＢリンパ前駆細胞に対応するＣＤ３４陽性骨髄細胞を含む造血細胞や単球細胞に発現される。
ＦＬＴ３の活性化変異は急性骨髄性白血病で観察される最も頻繁に観察される変異の１つである。最も頻繁に起こる変異は線変異（ＬＭ）あるいは遺伝子内タンデム重複（ＩＴＤ）と呼ばれ、重複配列、もしくはエキソン１１に属し時にはイントロン１１およびエキソン１２を含む挿入物からなる。
ＦＬＴ３遺伝子における遺伝子内タンデム重複および／又は挿入ならびに希に欠失は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）全体の２０〜２５％および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）の５〜１０％、そして急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）のいくらかの症例と関連がある。
ＦＬＴ３タンパク質の変異は、負の調節ドメインの破壊によりチロシンキナーゼ活性の構成的活性化を引き起こす。この活性化はｒａｆ−ＭＥＫ−ＥＲＫ経路を含むいくつかの増殖因子依存性経路の刺激を生じ、また白血病細胞の増殖および生存の一因となる。したがって、ＦＬＴ３のキナーゼ活性の抑制は、ＦＬＴ３活性に依存する上述されたような疾病の有効な治療法になる。
３−フォスフォイノシチド依存性プロテインキナーゼ−１（ＰＤＫ１）
３−フォスフォイノシチド依存性プロテインキナーゼ−１（ＰＤＫ１）は、プロテインキナーゼのＡＧＣサブファミリーに属する多くのキナーゼの活性を調節する重要な役割を果たす(アレジ（Ａｌｅｓｓｉ，Ｄ．）ら、バイオケミカルソサエティートランザクションズ（Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓ）、２９、ｐ．１−１４、２００１)。これらはプロテインキナーゼＢ（ＰＫＢ／ＡＫＴ）、ｐ７０リボソームＳ６キナーゼ（Ｓ６Ｋ）(アブルッチ（Ａｖｒｕｃｈ，Ｊ。）ら、Ｐｒｏｇ．Ｍｏ１．Ｓｕｂｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．、２００１、ｐ．１１５−１５４、２００１年)およびｐ９０リボソームＳ６キナーゼ（フロディン（Ｆｒｏｄｉｎ，Ｍ．）ら、欧州分子生物学機構誌（ＥＭＢＯ Ｊ．）、１９、ｐ．２９２４−２９３４、２０００年)を含む。血清およびグルココルチコイド調節キナーゼ（ＳＧＫ）のキナーゼ活性はＰＤＫ−１によってリン酸化され活性化することができる。他に可能性のある基質としては、プロテインキナーゼＣ、ｃＡＭＰ依存性プロテインキナーゼ（ＰＫＡ）、ＰＲＫ１およびプロテインキナーゼＧが挙げられる。
ＰＤＫ１が媒介するシグナル伝達は、インシュリンおよび増殖因子ならびに細胞外マトリックスへの細胞の付着(インテグリンシグナル伝達)の結果として活性化される。一旦活性化されると、これらの酵素は、細胞生存、成長、増殖およびグルコース調節などの過程を制御する重要な役割を果たす重要な調節タンパク質をリン酸化することにより、多くの種々の細胞的事象を媒介する（ローラー（Ｌａｗｌｏｒ，Ｍ．Ａ．）ら、ジャーナルオブセルサイエンス（Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｓｃｉ.）、１１４、２９０３−２９１０、２００１年)、（ローラー（Ｌａｗｌｏｒ，Ｍ．Ａ．）ら、欧州分子生物学機構誌（ＥＭＢＯ Ｊ．）、２１、ｐ．３７２８−３７３８、２００２年)。したがって、ＰＤＫ１阻害剤は、糖尿病と癌などの疾病の新しい治療法を提供する可能性がある。
ＰＤＫ１はＮ末端触媒ドメインおよびＣ末端プレクストリン相同（ＰＨ）ドメインを有する５５６個のアミノ酸からなるタンパク質であり、それらの活性化ループにおいてこれらキナーゼをリン酸化することによってその基質を活性化する（ベラム（Ｂｅｌｈａｍ，Ｃ．）ら、カレントバイオロジー（Ｃｕｒｒ．Ｂｉｏｌ．）、９、ｐＲ９３−９６、１９９９）。前立腺癌やＮＳＣＬを含む多くのヒト癌は、ＰＴＥＮの変異あるい特定の主要な調節タンパク質の過剰発現のような多くの個別の遺伝的事象に起因する上昇したＰＤＫ１シグナル伝達経路機能を示す（グラフ（Ｇｒａｆｆ，Ｊ。Ｒ.）、エキスパートオピニオンオンセラピューティックターゲット（Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｔａｒｇｅｔｓ、６、ｐ．１０３−１３、２００２年）、（ブロナード（Ｂｒｏｇｎａｒｄ、Ｊ．）ら、癌研究（Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ.）、６１、３９８６−９７ページ、２００１）。癌を治療する可能性のある機序としてのＰＤＫ１の阻害は、ＰＤＫ１に対するアンチセンスオリゴヌクレオチドによるＰＴＥＮ陰性ヒト癌細胞株（ＩＪ８７ＭＧ）のトランスフェクションによって証明された。その結果として起こるＰＤＫ１タンパク質レベルの減少は、細胞増殖と生存の減少につながった（フリン（Ｆｌｙｎｎ,Ｐ．）ら、カレントバイオロジー（Ｃｕｒｒ．Ｂｉｏｌ．）、１０、ｐ．１４３９−４２、２０００年）。したがって、ＰＤＫ１の阻害は、癌治療のため、魅力的な標的になるかもしれない。
刺激をうけていない細胞では、大部分が不活性型で存在するＰＫＢ／ＡＫＴは、ＰＤＫ１が媒介するＰＫＢ／ＡＫＴのリン酸化によりＰＫＢ／ＡＫＴは触媒的に活性型に変わる。これはＡＫＴ２のスレオニン３０９およびＡＫＴ１のスレオニン３０８でのＡＫＴの活性化ループドメインのリン酸化によって生じる。ＡＫＴは、正常な刺激されていない細胞では低い基礎レベルの活性化を示すが、ＡＫＴはしばしば腫瘍細胞中で構成的に活性化されている。これは、様々な異なるシグナル伝達分子のアップレギュレーション、あるいはＰ１−３キナーゼ、増殖因子受容体(例えば，ＥＧＦＲファミリーメンバー)、Ｒａｓ、ＳｒｃおよびＢＣＲ−ＡＢＬの活性化のようなＡＫＴの活性化を促進可能な癌細胞で一般に見つけられる発癌性変異の存在を通じて生じる。腫瘍抑制因子ＰＴＥＮの欠損は癌細胞のＡＫＴ活性を大幅に増加させる別の手段である（ベッソン（Ｂｅｓｓｏｎ，Ａ．）ら、ヨーロピアンジャーナルオブバイオケミストリー（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ.）、１９９９年、第２６３巻、第３号、ｐｐ．６０５−６１１）。ＰＴＥＮ変異あるいはＰＴＥＮタンパク質のダウンレギュレーションは多くの腫瘍や癌細胞株で見られる。ＰＴＥＮは、ホスファチジルイノシトール３，４，５−トリスホスファートやホスファチジリノシトール３，４−ビスホスファートなどのＰ１−３キナーゼ産物からＤ−３リン酸塩を取り除くホスファターゼである（マイヤーズ（Ｍｙｅｒｓ，Ｍ．Ｐ．）ら、米国科学アカデミー紀要（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．）、米国、１９９８年、第９５巻、第２３号、ｐ．１３５１３−１３５１８；スタンボリック（Ｓｔａｍｂｏｌｉｃ，Ｖ．）ら、セル（Ｃｅｌｌ）、１９９８年、９５号、p．２９−３９)。したがって、ＰＴＥＮの欠損はＰ１−３キナーゼ産物を増加しＡＫＴの構成的活性化を促進する効果がある。高度にアップレギュレートされたＡＫＴレベルの癌は、ＰＤＫ−１／ＡＫＴ経路阻害剤の効果に特に感受性が高い。
したがってＰＤＫ１は、成長、増殖および生存を含む様々な細胞機能を調節するＰＩ３Ｋシグナル経路の重要なメディエータである。それゆえ、ＰＤＫ１阻害剤が非常に広範囲のヒト癌の成長に影響があると予想されるなど、この経路の阻害が癌進行に必要な多くの決定的な条件に影響し得る。
血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦＲ）
慢性増殖性疾患はしばしば顕著な血管新生を伴い、この血管新生が炎症状態および／または増殖状態を維持するかまたは血管の侵襲性増殖を介して組織破壊を招く（フォークマン（Ｆｏｌｋｍａｎ）、１９９７年、ＥＸＳ、第７９巻、ｐ．１−８１；フォークマン（Ｆｏｌｋｍａｎ）、１９９５年、ネイチャーメディシン（Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）、第１巻、ｐ．２７−３１；フォークマン（Ｆｏｌｋｍａｎ）およびシン（Ｓｈｉｎｇ）、１９９２年、ジャーナルオブバイオケミストリー（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．）、第２６７巻、ｐ．１０９３１）。
血管新生は一般に、新しい血管もしくは置換された血管の発生または新血管新生を記載するのに用いられる。これは、胚における血管系の確立に必要かつ生理的な正常過程である。血管新生は、***、月経および創傷治癒の部位を除くと、一般に、ほとんどの正常な成人組織においては起こらない。しかし、多くの疾患は持続的かつ無制御な血管新生により特徴付けられる。例えば、関節炎では新しい毛細血管が関節に浸入しそして軟骨を破壊する（コルビル−ナッシュ（Ｃｏｌｖｉｌｌｅ−Ｎａｓｈ）およびスコット（Ｓｃｏｔｔ）、１９９２年、リウマチ性疾患年報（Ａｎｎ．Ｒｈｕｍ．Ｄｉｓ．）、第５１巻、ｐ．９１９）。糖尿病（および多くの種々の眼疾患）では、新しい血管が黄斑または網膜または他の眼構造に浸入して、失明を起こしうる（ブルックス（Ｂｒｏｏｋｓ）ら、１９９４年、セル（Ｃｅｌｌ）、第７９巻、ｐ．１１５７）。アテローム性動脈硬化症の過程は血管新生につながる（カーロン（Ｋａｈｌｏｎ）ら、１９９２年、カナディアンジャーナルオブカーディオロジー（Ｃａｎ．Ｊ．Ｃａｒｄｉｏｌ．）第８巻、ｐ．６０）。腫瘍増殖と転移は血管新生依存性であることがわかっている（フォークマン（Ｆｏｌｋｍａｎ）、１９９２年、キャンサーバイオロジー（Ｃａｎｃｅｒ Ｂｉｏｌ．）、第３巻、ｐ．６５；デネカンプ（Ｄｅｎｅｋａｍｐ）、１９９３年、ブリティッシュジャーナルオブラジオロジー（Ｂｒ．Ｊ．Ｒａｄ．）、第６６巻、ｐ．１８１；フィドラー（Ｆｉｄｌｅｒ）およびエリス（Ｅｌｌｉｓ）、１９９４年、セル（Ｃｅｌｌ）、第７９巻、ｐ．１８５）。
主な疾患における血管新生の関与は、血管新生の阻害剤を同定しかつ開発する研究に関連して認識されてきた。これらの阻害剤の分類は、一般に、血管新生カスケードにおける個々の標的、例えば、血管新生シグナルによる内皮細胞の活性化；分解酵素の合成と放出；内皮細胞の遊走；内皮細胞の増殖；および毛細血管の形成など、に対応して行われている。このように、血管新生は多くの段階に起こり、これらの様々な段階における血管新生の妨害に作用する化合物を発見しかつ開発する試みが進められている。
様々な文献が色々な機構で作用する血管新生の阻害剤を教示しており、これらは、癌および転移（オライリー（Ｏ’Ｒｅｉｌｌｙ）ら、１９９４年、セル（Ｃｅｌｌ）、第７９巻、ｐ．３１５；イングバー（Ｉｎｇｂｅｒ）ら、１９９０年、ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ）、第３４８巻、ｐ．５５５）、眼疾患（フリードランダー（Ｆｒｉｅｄｌａｎｄｅｒ）ら、１９９５年、サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）、第２７０巻、ｐ．１５００）、関節炎（ピーコック（Ｐｅａｃｏｃｋ）ら、１９９２年、ジャーナルオブエクスペリメンタルメディシン（Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．）、第１７５巻、ｐ．１１３５；（ピーコック（Ｐｅａｃｏｃｋ）ら、１９９５年、セルラーイミュノロジー（Ｃｅｌｌ．Ｉｍｍｕｎ．）、第１６０巻、ｐ．１７８）および血管腫（タラボレッティ（Ｔａｒａｂｏｌｅｔｔｉ）ら、１９９５年、米国国立癌研究所誌（Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ．）、第８７巻、ｐ．２９３）などの疾患に対して有益である。
受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）は細胞の細胞膜を超える生化学的シグナルの伝達に重要である。これらの膜貫通分子は、特徴として、細胞内チロシンキナーゼドメインへ細胞膜内セグメントを介して結合した細胞外リガンド結合ドメインから成る。リガンドの受容体との結合は、受容体に結びついたチロシンキナーゼ活性を刺激して、受容体および他の細胞内タンパク質の両方のチロシン残基のリン酸化を導いて様々な細胞応答を引き起こす。今日まで、アミノ酸配列相同性により規定された少なくとも１９種の個別のＲＴＫサブファミリーが同定されている。
ポリペプチドの血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）は、内皮細胞に対してインビトロで***促進性がありかつインビボで血管新生応答を刺激する。ＶＥＧＦはまた、不適当な血管新生にも関係している（ピネド（Ｐｉｎｅｄｏ，Ｈ．Ｍ．）ら、２０００年、オンコロジスト（Ｏｎｃｏｌｏｇｉｓｔ）、第５巻（９０００１）、ｐ．１−２）。ＶＥＧＦＲはタンパク質チロシンキナーゼ（ＰＴＫ）である。ＰＴＫは細胞増殖、生存および分化の調節に関わるタンパク質の特定のチロシン残基のリン酸化を触媒する（ウィルクス（Ｗｉｌｋｓ，Ａ．Ｆ．）、１９９０年、増殖因子研究の進歩（Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）、第２巻、ｐ．９７−１１１；コートニッジ（Ｃｏｕｒｔｎｅｉｄｇｅ，Ｓ．Ａ．）、１９９３年、ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＳｕｐｐｌｅｍｅｎｔ誌（Ｄｅｖ．Ｓｕｐｐ．ｌ）、ｐ．５７−６４；クーパー（Ｃｏｏｐｅｒ，Ｊ．Ａ．）、１９９４年、セミナーズインセルバイオロジー（Ｓｅｍｉｎ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．）、第５（６）巻、ｐ．３７７−３８７；ポールソン（Ｐａｕｌｓｏｎ，Ｒ．Ｆ．）、１９９５年，セミナーズインイミュノロジー（Ｓｅｍｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．）、第７（４）巻、ｐ．２６７−２７７；チャン（Ｃｈａｎ，Ａ．Ｃ．）、１９９６年、カレントオピニオンインイミュノロジー（Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．）、第８（３）巻、ｐ．３９４−４０１）。
ＶＥＧＦに対する３種のＰＴＫ受容体が同定されている：すなわちＶＥＧＦＲ−１（Ｆ１ｔ−１）、ＶＥＧＦＲ−２（Ｆ１ｋ−１またはＫＤＲ）、およびＶＥＧＦＲ−３（Ｆ１ｔ−４）。これらの受容体は血管新生に関わりかつシグナル伝達に参加する（ムストネン（Ｍｕｓｔｏｎｅｎ,Ｔ．）ら、１９９５年、ジャーナルオブセルバイオロジー（Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．）、第１２９巻、ｐ．８９５−８９８）。
特に興味深いのは、主に内皮細胞に発現される膜貫通受容体ＰＴＫである、ＶＥＧＦＲ−２である。ＶＥＧＦによるＶＥＧＦＲ−２の活性化は、腫瘍血管新生を開始するシグナル伝達経路の重要なステップである。ＶＥＧＦ発現は腫瘍細胞にとって構成的であってもよいしかつある特定の刺激に応答してアップレギュレートされたものであってもよい。かかる刺激の１つは低酸素であり、その場合、ＶＥＧＦ発現は腫瘍および付随する宿主組織の両方でアップレギュレートされる。ＶＥＧＦリガンドはＶＥＧＦＲ−２の細胞外ＶＥＧＦ結合部位との結合によりＶＥＧＦＲ−２を活性化する。この結合はＶＥＧＦＲの受容体二量体化およびＶＥＧＦＲ−２の細胞内キナーゼドメインにおけるチロシン残基の自己リン酸化を起こす。キナーゼドメインはリン酸をＡＴＰからチロシン残基へ転移する作用をし、そしてＶＥＧＦＲ−２の下流のシグナル伝達タンパク質のための結合部位を提供して、最終的に血管新生の開始に導く（マクマホン（ＭｃＭａｈｏｎ，Ｇ．）、２０００年、オンコロジスト（Ｏｎｃｏｌｏｇｉｓｔ、第５（９０００１）巻、ｐ．３−１０）。
ＶＥＧＦＲ−２のキナーゼドメイン結合部位における阻害はチロシン残基のリン酸化を妨害して血管新生の開始を中断させる。
血管新生は、血管新生因子と呼ばれる様々なサイトカインが媒介する新しい血管の形成の生理的過程である。固形腫瘍における血管新生の考えられる病態生理的役割は３０年間以上にわたって広く研究されているが、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）や他の悪性血液学的疾患における血管新生の増加は、より最近になってから認知されてきた。増加した血管新生レベルは、ＣＬＬの患者の骨髄およびリンパ節の両方で様々な実験的方法を使い実証されている。この疾病の病態生理における血管新生の役割は今後に十分な解明を待つが、実験データによっていくつかの血管新生因子が疾患進行に役割を果たすことを示唆されている。血管新生の生物学的マーカーもＣＬＬの予後に関連があることが示された。これは、ＶＥＧＦＲ阻害剤もＣＬＬなどの白血病の患者に有益である可能性を示している。
ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）
ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）は、４つの公知の哺乳類ファミリー、すなわちＪＡＫ１、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３およびＴＹＫ２から成り、細胞内チロシンキナーゼである。ＪＡＫ−ＳＴＡＴ経路は特定の膜結合受容体によって活性化される。サイトカインおよび増殖因子の結合に際して、ＪＡＫは受容体の細胞内ドメインに動員され、シグナル伝達物質および転写活性化因子（ＳＴＡＴ）を含む細胞質タンパク質をリン酸化する。特異的なサイトカイン受容体はＪＡＫタンパク質とＳＴＡＴタンパク質との個別のペアを動員し活性化する。ＳＴＡＴはリン酸化時に二量体化し、核移行後に直接的に転写を活性化する。
ＪＡＫ２はエリスロポイエチン（ＥＰＯ）によって活性化される主要なチロシンキナーゼで、最終的な赤血球形成にとって不可欠である（パルガナス（Ｐａｒｇａｎａｓ）ら、セル（Ｃｅｌｌ）、１９９８年、９３（３）３８５−９５)。
ＪＡＫ２活性の脱調節をもたらす点変異などのメカニズムによるＪＡＫ−ＳＴＡＴ経路の構成的活性化は、リガンド非依存性の生存および過感受性をもたらすことが示されており、いくつかの白血病細胞タイプで観察されている（ラバイン（Ｌｅｖｉｎｅ）ら、２００５年；イェリネック（Ｊｅｌｉｎｅｋ）、２００５年；スタルク（Ｓｔａｅｒｋ）ら、２００５年）。
チロシンキナーゼＪＡＫ２における活性化変異は、真性赤血球増加症、本態性血小板血症および骨髄様化生を伴う骨髄線維症中で観察されている（ラバイン（Ｌｅｖｉｎｅ）ら、キャンサーセル（Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ）、２００５年、７、３８７−９７）。ＪＡＫ２変異の１８４９Ｇ＞Ｔは急性白血病においては希であるが、ＣＭＭＬ、フィラデルフィア染色体陰性ＣＭＬおよび巨核球性白血病で見られる（イェリネック（Ｊｅｌｉｎｅｋ）、ブラッド（Ｂｌｏｏｄ）２００５年、１０６：３３７０−３）。慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）には次の２つのタイプがある:ＣＭＭＬと呼ばれる成人型、および若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）あるいは若年型慢性骨髄性白血病（ＪＣＭＬ）と呼ばれる小児白血病型である。ＣＭＭＬ白血病には骨髄性白血病の特徴が見られる。ＣＭＭＬは過去に骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）の一種として分類、言及されることがあった。ＣＭＭＬは、“典型的な”慢性骨髄性白血病より急速に進行し、急性骨髄単球性白血病として知られている急性白血病の一種より緩やかに進行する。若年性骨髄単球性白血病は成人型ＣＭＭＬといくつかの点で異なる。骨髄増殖性障害（ＭＰＤ；（真性多血症、本態性血小板増加症、特発性骨髄線維症)患者の多く（＞５０％）は、ＪＡＫ２のＪＨ２キナーゼ様ドメインにドミナント機能獲得型Ｖ６１７Ｆ変異を有する。大多数の真性赤血球増加症（ＰＶ）患者は、構成的シグナル伝達をもたらす、ＪＡＫ２のキナーゼ様ドメイン中の特有の体細胞変異（Ｖ６１７Ｆ）を有する（スタルク（Ｓｔａｅｒｋ）ら、ジャーナルオブバイオロジカルケミストリー（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ）、１０．１０７４／ｊｂｃ．Ｃ５００３５８２００）。この変異は、キナーゼ活性の脱調節、そして構成的チロシンリン酸化活性をもたらす。別の研究ではＶ６１７Ｆ変異の発生率は、真性多血症では６５〜９７％、本態性血小板増加症患者では４１〜５７％、そして特発性骨髄線維症患者では２３〜９５％である。ＭＰＤにおける変異は、ほとんどの患者でヘテロ接合で起こり、マイナーな集団においてのみホモ接合的である。有糸***組み換えは恐らく９ｐのＬＯＨおよびヘテロ接合性からホモ接合性への変化の両方を引き起こす。同一の変異は、Ｐｈ陰性異型ＣＭＬの約２０％、ＣＭＭＬの１０％以上、巨核球性ＡＭＬ（ＡＭＬ Ｍ７）患者の約１５％、および若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）の１／５の患者でも見られた。Ｖ６１７Ｆ変異は、もっぱら骨髄性の造血性悪性腫瘍で生じるようである。
真性多血症（ＰＶ）、本態性血小板増加症（ＥＴ）および骨髄様化生を合併する骨髄線維症（ＭＭＭ）を含む古典的なＢＣＲ／ＡＢＬ陰性ＭＰＤにおける、ＪＡＫ２の新規な体細胞点変異（コドン６１７でのバリンのフェニルアラニンへの置換をもたらすエキソン１２のヌクレオチド１８４９におけるＧ−ＣからＴ−Ａへのトランスバージョン；ＪＡＫ２Ｖ６１７Ｆ）が記載されている（ブラッド（Ｂｌｏｏｄ）、２００５年１１月１５日、第１０６巻、第１０号、ｐ．３３３５−３３３６）。ＪＡＫ２Ｖ６１７Ｆの比較的高い発生率（ＰＶでは６５％〜９７％、ＥＴでは２３％〜５７％、そしてＭＭＭでは３５％〜５７％）を報告した相次ぐ初期の研究に続き、はるかに低い変異頻度（３％〜３３％）ではあったが、後の研究では異型ＭＰＤの範囲そして骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）で同一の変異の発生が示された。これら後の研究の１つでは、ＪＡＫ２Ｖ６１７ＦならびにＢＣＲ／ＡＢＬおよびＦＩＰ１Ｌ１−ＰＤＧＦＲＡを含む他の癌形成性キナーゼ変異は、相互排反事象であることが示された。
チェックポイントキナーゼ１（Ｃｈｋ１）およびチェックポイントキナーゼ２（Ｃｈｋ２）
チェックポイントキナーゼ1（Ｃｈｋ１）およびチェックポイントキナーゼ２（Ｃｈｋ２）は、Ｇ２Ｍ境界のＤＮＡ損傷チェックポイントに関与する互いに無関係なセリン／スレオニンキナーゼである(オコネル（Ｍ．Ｊ．Ｏ’Ｃｏｎｎｅｌｌ）ら、欧州分子生物学機構誌（ＥＭＢＯ Ｊ．）、１９９７年、１６、５４５−５５４)。Ｃｈｋ１は必須のＤＮＡ損傷および複製のチェックポイントキナーゼである。Ｃｈｋ１は、ＤＮＡの損傷処理中に誘発される一本鎖ＤＮＡおよび他のＤＮＡ傷害(および複製ストレス)の形成に応答して、毛細血管拡張性失調症変異およびＲａｄ３関連キナーゼ（ＡＴＲ）によってリン酸化される。このリン酸化はＧ２期の細胞を停止するＣｈｋ１の能力と相関する（ウォルワース（Ｗａｌｗｏｒｔｈ）およびバーナーズ（Ｂｅｒｎａｒｄｓ）１９９６年）。Ｃｈｋ１は、Ｃｄｃ２５ホスファターゼをリン酸化し、サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）上の２つの不活性化ホスファートの除去を阻害し(ゼン（Ｚｅｎｇ）ら、ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ）、１９９８、３９５、５０７−５１０)、細胞周期停止を引き起こす。ｐ５３依存性の細胞周期停止および細胞死を引き起こす臨床において利用可能なＤＮＡ損傷剤のｐ５３腫瘍細胞に対する有効性は少ないかもしれない。Ｃｈｋ１活性もｐ５３陰性癌で阻害する場合、ＤＮＡの損傷に応答して停止し、ＤＮＡを修復する能力はすべて失われ、有系***に破滅をもたらしＤＮＡ損傷剤の効果を増強する（コニアラス（Ｋｏｎｉａｒａｓ）ら、オンコジーン（Ｏｎｃｏｇｅｎｅ）２００１年、２０（５１）：７４５３−６３）。
したがって、トポイソメラーゼ阻害剤、アルキル化薬、代謝拮抗物質、ＤＮＡ結合剤、シスプラチン、シクロホスファミド、ドキソルビシン、イリノテカン、フルダラビンマイトマイシンＣなどのＤＮＡ標的剤および放射線療法とＣＨＫ１／２の阻害とを組み合わせることは、現行の化学療法を回避する癌細胞により使用されるいくつかのメカニズムを克服できることで有益であると考えられる。
Ｃｈｋ２は同様に、二本鎖切断および毛細血管拡張性失調症変異キナーゼ（ＡＴＭ）を介して、ＤＮＡ損傷チェックポイントに重要な役割を果たす。したがって、Ｃｈｋ２阻害も、いくつかの化学療法剤から正常な感受性の組織を防御することができる。Ｃｈｋ１とＣｈｋ２を標的とすることは、臨床において利用可能なＤＮＡ損傷剤の治療濃度域を著しく増加させる可能性がある。
ＦＧＦＲ
タンパク質チロシンキナーゼ（ＰＴＫ）受容体の線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）ファミリーは、有糸***誘発、創傷治癒、細胞分化および血管新生を含む一連の種々の生理的機能、および発生を調節する。正常および悪性両方の成長ならびに増殖は、ＦＧＦ（オートクリンそしてパラクリンとしても作用する細胞外のシグナル伝達分子）の局所濃度の変化に影響される。オートクリンＦＧＦシグナル伝達は、ステロイドホルモン依存性癌のホルモン非依存状態への進行に特に重要である(パワーズ（Ｐｏｗｅｒｓ）ら、エンドクリン関連癌（Ｅｎｄｏｃｒ．Ｒｅｌａｔ．Ｃａｎｃｅｒ）、７、１６５−１９７、２０００年)。
ＦＧＦとそれらの受容体はいくつかの組織および細胞株で高レベルで発現し、過剰発現は悪性表現型の一因となると考えられる。更に、多くの癌遺伝子は増殖因子受容体をコードする遺伝子のホモログである。また、ヒト膵臓癌でのＦＧＦ依存性シグナル伝達の異常活性化を引き起こす可能性がある（オザワ（Ｏｚａｗａ）ら、催奇性発癌性変異（Ｔｅｒａｔｏｇ． Ｃａｒｃｉｎｏｇ． Ｍｕｔａｇｅｎ．）、２１、２７−４４、２００１年)。２つの原型のメンバーは、酸性線維芽細胞増殖因子（ａＦＧＦまたはＦＧＦ１）および塩基性線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦまたはＦＧＦ２）である。また、現在まで、少なくとも２０の異なるＦＧＦファミリーメンバーが確認されている。ＦＧＦに対する細胞の反応は、１〜４（ＦＧＦＲ１〜ＦＧＦＲ４）と番号付けされた、４つのタイプの高親和性膜貫通型タンパク質チロシンキナーゼ線維芽細胞増殖因子受容体を介して伝達される。リガンド結合に際して、受容体は二量体化し、最終的に核転写因子エフェクターを調節する細胞内シグナルを伝達するために細胞質の特異的なチロシン残基を自己リン酸化もしくはトランスリン酸化する。
ＦＧＦＲ１は多くの腫瘍の型で活性化されるので、ＦＧＦＲ１経路の破壊は、内皮細胞増殖に加えて、腫瘍細胞増殖に影響するはずである。腫瘍に関連する血管系中のＦＧＦＲ１の過剰発現および活性化は、腫瘍血管新生におけるこれらの分子の役割を示唆している。
線維芽細胞増殖因子受容体２は、酸性線維芽細胞増殖因子および／または塩基性線維芽細胞増殖因子に、そしてケラチノサイト増殖因子リガンドに対して、高親和性を有している。線維芽細胞増殖因子受容体２はまた、骨芽細胞の増殖および分化中にＦＧＦの強力な骨形成作用を伝播する。複雑な機能的変化をもたらす線維芽細胞増殖因子受容体２の変異は、頭蓋縫合の異常骨化(頭蓋骨癒合症)を誘発することが示され、これは膜性骨形成におけるＦＧＦＲシグナル伝達の主要な役割を示唆している。例えば、早期の頭蓋縫合骨化で特徴付けられるアペール（ＡＰ）症候群では、ほとんどの症例は、機能獲得型線維芽細胞増殖因子受容体２を引き起こす点変異と関連がある（ルモニエ（Ｌｅｍｏｎｎｉｅｒ）ら、ジャーナルオブボーンアンドミネラルリサーチ（Ｊ．Ｂｏｎｅ Ｍｉｎｅｒ．Ｒｅｓ．）、１６、８３２−８４５、（２００１）)。
アペール症候群、クルーゾン症候群、ジャクソン-ワイス症候群、ベーレ−スティーブンソン脳回状頭皮症候群およびパイフェル症候群を含むヒトの骨格発生でのいくつかの重篤な異常は、線維芽細胞増殖因子受容体２での変異の出現に関連性がある。パイフェル症候群（ＰＳ）の、すべてでないにしても、ほとんどの症例も、線維芽細胞増殖因子受容体２遺伝子のデノボ変異によって引き起こされ（マイヤーズ（Ｍｅｙｅｒｓ）ら、アメリカンジャーナルオブヒューマンジェネティクス（Ａｍ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．）、５８、４９１−４９８、１９９６年;（プロンプ（Ｐｌｏｍｐ）ら、アメリカンジャーナルオブメディカルジェネティクス（Ａｍ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｇｅｎｅｔ．）、７５、２４５−２５１、１９９８年)、また、線維芽細胞増殖因子受容体２中の変異がリガンド特異性を決定する基本的なルールの１つを犯すことが最近示された。すなわち、線維芽細胞増殖因子受容体の２つの変異によるスプライシング型（ＦＧＦＲ２ｃおよびＦＧＦＲ２ｂ）が、異型のＦＧＦリガンドに結合しそして活性化される能力を獲得した。このリガンド特異性の損失は異常なシグナル伝達をもたらすとともに、これらの疾病症候群の重篤な表現型が線維芽細胞増殖因子受容体２の異所性のリガンド依存性活性化に起因することを示唆する（ユー（Ｙｕ）ら、米国科学アカデミー紀要（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．）、米国、９７、１４５３６−１４５４１、２０００)。
染色体転座あるいは点変異のようなＦＧＦＲ３受容体チロシンキナーゼの遺伝的な異常は、異所的に発現するか脱調節された構成的に活性のあるＦＧＦＲ３受容体に帰着する。そのような異常は、多発性骨髄腫の一部や、膀胱癌、肝細胞癌、口腔扁平細胞癌および子宮頚癌に関連している（パワーズ（ＰＯＷＥＲＳ，Ｃ．Ｊ．）ら、エンドクリン関連癌（Ｅｎｄｏｃｒ．Ｒｅｌ．Ｃａｎｃｅｒ）、７、１６５、２０００年)；チウ（Ｑｉｕ，Ｗ．）ら、ワールドジャーナルオブガストロエンテロロジー（Ｗｏｒｌｄ Ｊｏｕｒｎａｌ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ）、１１（３４）、２００５年)。従って、ＦＧＦＲ３阻害剤は、多発性骨髄腫、膀胱癌および子宮頚癌の治療に役立つ。
それゆえ、ＦＧＦＲを阻害する化合物は、特に血管新生の阻害により、新生物および腫瘍の増殖を阻害するあるいはアポトーシスを誘導する手段の提供に有益である。したがって、前記化合物は、癌のような増殖性疾患の治療または予防に役立つことが証明される。特に、受容体チロシンキナーゼの活性化変異体あるいは受容体チロシンキナーゼのアップレギュレーションを伴う腫瘍は、前記阻害剤に特に感受性がある可能性がある。本明細書で検討されている特異的なのＲＴＫのアイソフォームのうちのいずれかの活性化変異体を有する患者にも、ＲＴＫ阻害剤を使用した治療が特に有益である可能性がある。
ＦＧＦＲ４の過剰発現は、前立腺癌と甲状腺癌の両方の予後不良に関連付けられている（エザット（Ｅｚｚａｔ，Ｓ．）ら、ジャーナルオブクリニカルインベスティゲーション（Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ）、１０９、１、２００２年；ワン（Ｗａｎｇ）ら、臨床癌研究（Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）、１０、２００４年)。さらに、生殖細胞系列多型（Ｇｌｙ３８８Ａｒｇ）は、肺癌、乳癌、結腸癌および前立腺癌の罹患率増加に関連している（ワン（Ｗａｎｇ）ら、臨床癌研究（Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）、１０、２００４年)。
最近の研究は、古典的小葉癌（ＣＬＣ）においてＦＧＦＲ１発現と癌形成性の関連性を示している。ＣＬＣは、乳癌全体の１０〜１５％を占めており、一般に、エストロゲン受容体の発現を保持する一方でｐ５３およびＨｅｒ２の発現を欠く。８ｐ１２〜ｐ１１．２の遺伝子増幅はＣＬＣ症例の〜５０％で実証され、これはＦＧＦＲ１の発現増加に関連することが示された。ＦＧＦＲ１に対するｓｉＲＮＡ、すなわち受容体の低分子阻害剤、の予備的研究は、この増幅を有する細胞株がこのシグナル伝達経路の阻害に特に感受性があること示した（レイス−フィルホ（Ｒｅｉｓ−Ｆｉｌｈｏ）ら、臨床癌研究（Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．）、２００６年、１２（２２）：６６５２−６６６２）。
線維化病態は、線維組織の異常蓄積もしくは過剰蓄積に起因する主要な医学的問題である。これは自然創傷治癒だけではなく、肝硬変、糸球体腎炎、肺線維症、全身性線維症、関節リウマチを含む、多くの疾病で生じる。病理学的な線維症のメカニズムは完全には理解されていないが、線維芽細胞の増殖および細胞外マトリックスタンパク質（コラーゲンとフィブロネクチンを含む）の沈着に関係する様々なサイトカイン(腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）および形質転換増殖因子ベータ（ＴＧＦベータ）を含む）の作用に起因すると思われる。これは組織構造と組織機能および後の病状の変化をもたらす。
多くの前臨床試験は、肺線維症の前臨床モデルで線維芽細胞増殖因子のアップレギュレーションを実証した（イノウエ（Ｉｎｏｕｅ）ら、１９９７＆２００２；バリオス（Ｂａｒｒｉｏｓ）ら、１９９７年))。ＴＧＦベータ１およびＰＤＧＦが繊維形成過程に関係することが報告され （アタマス（Ａｔａｍａｓ）およびホワイト（Ｗｈｉｔｅ）による総説、２００３年)、さらなる出版済み研究は、ＦＧＦの上昇および結果としての線維芽細胞増殖の増加は高レベルのＴＧＦベータ１に対する応答であることを示唆している(カリル（Ｋｈａｌｉｌ）ら、２００５年)。線維症状態に対するこの経路の治療上の関連性の可能性は、特発性肺線維症（ＩＰＦ）に対するピルフェニドンの報告された臨床効果によって示唆されている（アラタ（Ａｒａｔａ）ら、２００５年)。
特発性肺線維症(特発性間質性肺炎とも呼ばれる)は肺瘢痕性の進行性疾患である。徐々に、肺嚢が線維症の組織に置換され、厚くなり、組織の血流への酸素運搬能力は不可逆に失われる。この疾患の症状は息切れ、慢性の空咳、疲労、胸痛、および急速な体重減少をもたらす食欲不振を含む。この疾患は５年後の死亡率がおよそ５０％とという非常に重篤なものである。
ＲＥＴ
ＲＥＴ癌原遺伝子は、末梢神経系および中枢神経系ならびに腎臓を含む様々な組織の発生中に発現される受容体チロシンキナーゼをコードする。ＲＥＴマウスにおける異常は、ＲＥＴが、後腸への腸ニューロンの移動および神経支配、ならびに腎臓発生中で尿管芽上皮の増殖および分岐に非常に重要であることを示唆する(ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ）３６７、３８０−３８３、１９９４年)。
ＲＥＴ受容体チロシンキナーゼにおける変異は、様々な疾病での表現型不均一性の古典的な例を提供する。ＲＥＴの機能獲得型変異はヒト癌に関連し、特に遺伝性および非遺伝性の甲状腺癌を引き起こす。ＲＥＴのチロシンキナーゼドメインを非相同遺伝子パートナーに並列する遺伝子再配置は、散発性甲状腺乳頭癌（ＰＴＣ）で見られる。これら再配置はキメラのＲＥＴ／ＰＴＣ癌遺伝子を生成する。生殖細胞系癌では、ＲＥＴの点変異は、多発性内分泌腺腫２型（ＭＥＮ２Ａおよび２Ｂ）および家族性甲状腺髄様癌（ＦＭＴＣ）の原因である。ＭＥＮ２変異およびＰＴＣ遺伝子再配置のいづれも、ＲＥＴの内因性のチロシンキナーゼ活性を促進し、最終的に、ＲＥＴの下流の標的を活性化する。
したがって、ＲＥＴの体細胞遺伝子再配置は甲状腺乳頭癌（ＰＴＣ）でみられ、生殖細胞系点変異は多発性内分泌腺腫（ＭＥＮ）２Ａ型および２Ｂならびに家族性甲状腺髄様癌（ＦＭＴＣ）でみられる。一方、機能欠損型変異は、腸神経系の先天性奇形である、ヒルシュスプルング病の成長の原因であるアサイナオヤ(Ｎａｏｙａ Ａｓａｉ)ら、パソロジーインターナショナル（Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）、第５６巻、ｐ．１６４、２００６年４月）。
Ｅｐｈ
受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）の最大のサブファミリーであるＥｐｈファミリー、およびそのリガンド（エフリン）は生理的および病理的な血管過程に重要な役割を果たす。Ｅｐｈ（受容体）とエフリン（リガンド）はいづれもＡサブファミリーとＢサブファミリーの２群に分類される（Ｅｐｈ命名委員会（Ｅｐｈ Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ、１９９７）。エフリンリガンドのＥｐｈ受容体への結合は細胞間相互作用に依存する。最近になり、エフリンとＥｐｈの相互作用は、双方向シグナル伝達を介して機能することが示されている。Ｅｐｈ受容体に結合するエフリンは、Ｅｐｈ受容体の細胞質ドメインの特異的なチロシン残基でリン酸化を開始する。Ｅｐｈ受容体結合に応答して、エフリンリガンドもまた、チロシンリン酸化、いわゆる“逆”シグナル伝達を受ける（ホランド（Ｈｏｌｌａｎｄ，Ｓ．Ｊ．）ら、ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ）、３８３、７２２−７２５、１９９６年；ブルックナー（Ｂｒｕｃｋｎｅｒ）ら、サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）２７５：１６４０−１６４３、１９９７年)。
ＥｐｈＲＴＫおよびそれらのエフリンリガンドは胚の血管発生に重要な役割を果たす。特異的なＥｐｈ受容体とリガンド（エフリン−Ｂ２を含む）を破壊すると、血管再構築、組織化および出芽に欠陥が生じ、その結果、胚の死をもたらす（ワン（Ｗａｎｇ，Ｈ．Ｕ．）ら、セル（Ｃｅｌｌ）、９３：７４１−７５３、１９９８年；アダムス（Ａｄａｍｓ，Ｒ．Ｈ．）ら、遺伝子と発生（Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖ．）、１３、２９５−３０６、１９９９；ゲール（Ｇａｌｅ）およびヤンコプーロス（Ｙａｎｃｏｐｏｕｌｏｓ）、遺伝子と発生（Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖ．）、１３、１０５５−１０６６、１９９９年；ヘルブリング（Ｈｅｌｂｌｉｎｇ，Ｐ．Ｍ．）ら、発生（Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ）、１２７、２６９−２７８、２０００年)。Ｅｐｈ／エフリン系の協調発現は胚の血管構造の表現型を決定する、すなわちエフリン−Ｂ２は動脈の内皮細胞（ＥＣ）に存在し、ＥｐｈＢ４は静脈のＥＣに存在するゲール（Ｇａｌｅ）およびヤンコプーロス（Ｙａｎｃｏｐｏｕｌｏｓ）、遺伝子と発生（Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖ．）、１３、１０５５−１０６６、１９９９、；シン（Ｓｈｉｎ，Ｄ．）ら、発生生物学（Ｄｅｖ．Ｂｉｏｌ．）、２３０、１３９−１５０、２００１年）。最近になって、特異的なＥｐｈとエフリンが腫瘍増殖および血管新生に関連づけられている。
Ｅｐｈおよびエフリンは、多くのヒト腫瘍で過剰発現することが分かっている。特に、小細胞肺癌（タン（Ｔａｎｇ，Ｘ．Ｘ．）ら、臨床癌研究（Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．）、５、455-460 (1999))、ヒト神経芽腫（タン（Ｔａｎｇ，Ｘ．Ｘ．）ら、臨床癌研究（Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．）、５，１４９１−１４９６、１９９９年）および結腸直腸癌（リュー（Ｌｉｕ，Ｗ．）ら、ブリティッシュジャーナルオブキャンサー（Ｂｒｉｔ．Ｊ．Ｃａｎｃ．）、９０、１６２０−１６２６、２００４)でＥｐｈＢ２の役割が確認されており、ＥｐｈＢ２をはじめＥｐｈおよびエフリンのより高い発現は、より侵攻性が高くより転移性が高い腫瘍と相関することが分かっている（ナカモト（Ｎａｋａｍｏｔｏ，Ｍ．）およびベルゲマン（Ｂｅｒｇｅｍａｎｎ，Ａ．Ｄ．）、Ｍｉｃｒｏｓｃ．Ｒｅｓ．Ｔｅｃｈ．、５９、５８−６７、２００２）。
結果として、ＥｐｈＢ２の阻害は血管新生、特に、過剰発現が見られる特定の腫瘍での血管新生を妨げる。
上述のように、様々な文献が色々な機構で作用する血管新生の阻害剤を教示しており、これらは、癌および転移（オライリー（Ｏ’Ｒｅｉｌｌｙ）ら、セル（Ｃｅｌｌ）、第７９巻、３１５、１９９４年；イングバー（Ｉｎｇｂｅｒ）ら、ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ）、３４８、５５５、１９９０年）、眼疾患（フリードランダー（Ｆｒｉｅｄｌａｎｄｅｒ）ら、サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）、２７０、１５００、１９９５年）、関節炎（ピーコック（Ｐｅａｃｏｃｋ）ら、ジャーナルオブエクスペリメンタルメディシン（Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．）、１７５、１１３５、１９９２年；（ピーコック（Ｐｅａｃｏｃｋ）ら、セルラーイミュノロジー（Ｃｅｌｌ．Ｉｍｍｕｎ．）、１６０、１７８、１９９５年）および血管腫（タラボレッティ（Ｔａｒａｂｏｌｅｔｔｉ）ら、１９９５年、米国国立癌研究所誌（Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ．）、第８７巻、ｐ．２９３などの疾患に有益である。
ＳＲＣ
Ｓｒｃファミリーのキナーゼ（ＳＦＫ）は９つのメンバーを含み、その中の３つ（Ｓｒｃ、Ｆｙｎ、Ｙｅｓ）は普遍的に発現している。Ｓｒｃ自体はヒト悪性腫瘍の病因と関連付けられている。ｃ−Ｓｒｃの活性化変異体は、培養においてヒト細胞を形質転換することができ、Ｓｒｃタンパク質発現および／または活性は上皮癌で増加する。結腸癌では、隣接する正常粘膜と比較してＳｒｃ活性の常習的な上昇がある。更に、Ｓｒｃの活性化は、原発性腫瘍と比較して、転移癌でしばしば上昇しており、これはこのタンパク質が浸潤と転移に役割を担っている可能性があることを示唆する。さらに、Ｓｒｃの発現は疾患進行と強く関連している。同様に、Ｓｒｃの発現および活性化は、正常組織と比較して、乳癌、膵臓癌、食道癌、卵巣癌、肺癌、頭頸部癌および胃癌においても上昇している。
ＥＧＦＲおよびＰＤＧＦＲ
悪性腫瘍は脱制御された細胞増殖よるものである。細胞増殖は、増殖促進因子および増殖抑制因子間の微妙なバランスによって制御される。正常組織では、これらの因子の産生および活性が、分化した細胞の制御され、調節された様式での増殖をもたらし、それは臓器の正常な全体性や機能を維持する。悪性細胞はこの制御を逃れ、生来のバランスが(様々なメカニズムを介して)乱され、調節されないで異常な細胞増殖が生じる。増殖を促す１つのドライバーは表皮増殖因子（ＥＧＦ）であり、ＥＧＦの受容体（ＥＧＦＲ）は、肺癌、乳癌、前立腺癌、結腸癌、卵巣癌、頭頸部癌を含む、多くのヒト固形腫瘍の発生および進行に関連付けられている。ＥＧＦＲは４つの受容体、すなわちＥＧＦＲ（ＨＥＲｌおよびＥｒｂｌ）、ＥｒｂＢ２（ＨＥＲ２／ｎｅｕ）、ＥｒｂＢ３（ＨＥＲ３）ならびにＥｒｂＢ４（ＨＥＲ４）、からなるファミリーのメンバーである。これらの受容体は細胞膜に存在する巨大タンパク質であり、それぞれ特異的な外部リガンド結合ドメイン、膜貫通ドメイン、およびチロシンキナーゼ酵素活性がある内部ドメインを有する。ＥＧＦがＥＧＦＲに結合すると、チロシンキナーゼを活性化し、細胞を増殖させ***させる反応を引き起こす。ＥＧＦＲは多くのタイプの癌細胞の表面で異常に高いレベルで見られ、前記癌細胞はＥＧＦの存在下で過度に***する可能性がある。ＥＧＦＲ活性の阻害はしたがって癌の治療における化学療法研究の標的となっている。そのような阻害は、例えば、抗体の使用、またはその後のチロシンキナーゼ活性の阻害、によって細胞表面上の標的ＥＧＦＲに対する直接的な干渉によって果たすことができる。
ＥＧＦＲチロシンキナーゼ活性を標的とする薬剤の例はチロシンキナーゼ阻害剤のゲフィチニブおよびエルロチニブを含む。４−（３−クロロ−４−フルオロアニリノ）−７−メトキシ−６−（３−モルフォリノプロポキシ）キナゾリンという化学名を有するゲフィチニブは非小細胞肺癌の治療に使用され、また乳癌と結腸直腸癌のようなＥＧＦ受容体を過剰発現する他の固形腫瘍向け開発中である。Ｎ−（３−エチニル−フェニル）−６，７−ビス（２−メトキシエトキシ）−４−キナゾリンという化学名を有するエルロチニブも非小細胞肺癌の治療に使用されており、また膵臓癌のような様々な他の固形腫瘍の治療のために開発中である。
腫瘍発生に重要な他の増殖因子は、細胞表面チロシンキナーゼ受容体（ＰＤＧＦＲ）によってシグナル伝達し、成長、増殖および分化を含む様々な細胞機能を刺激するペプチド増殖因子のファミリーを含む血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）である。ＰＤＧＦ発現はグリア芽腫および前立腺癌を含む多くの異なった固形腫瘍で実証されている。４−［（４−メチル−１−ピペラジニル）メチル］−Ｎ−［４−メチル−３−［［４−（３−ピリジニル）−２−イルピリジニル］アミノ］−フェニル］ベンズアミドメタンスルフォネートという化学名を有するチロシンキナーゼ阻害剤イマチニブメシレートは、Ｂｃｒ−Ａｂｌ癌タンパク質および細胞表面チロシンキナーゼ受容体ｃ−Ｋｉｔの活性を遮断し、それ自身、慢性骨髄性白血病と胃腸間質性腫瘍の治療のために承認されている。イマチニブメシレートはまたＰＤＧＦＲキナーゼの強力な阻害剤で、慢性骨髄単球性白血病と多形性グリア芽腫においてＰＤＧＦＲ中での活性化変異の証拠に基づいて、慢性骨髄単球性白血病と多形性グリア芽腫の治療のために現在査定されている。さらに４−（４−（３−（４−クロロ−３（トリフルオロメチル）フェニル）ウレイド）フェノキシ）−Ｎ２−メチルピリジン−２−カルボキサミドという化学名を有するソラフェニブ（ＢＡＹ４３−９００６）は細胞増殖を阻害するためにＲａｆシグナル伝達経路および腫瘍血管新生を阻害するためにＶＥＧＦＲ／ＰＤＧＦＲシグナル伝達カスケードの両方を標的にする。ソラフェニブは、肝臓癌と腎臓癌を含む多くの癌の治療のために研究されている。
高好酸球症候群のようなＰＤＧＦＲの活性化に依存する症状がある。ＰＤＧＦＲ活性化は、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）を含む他の悪性腫瘍とも関連性がある。別の疾患、***性皮膚線維肉腫、浸潤性皮膚腫瘍では、ＰＤＧＦ−Ｂリガンドをコードする遺伝子が関与する相互転座は、キメラリガンドの構成的分泌および受容体活性化をもたらす。公知のＰＤＧＦＲ阻害剤であるイマチニブ、はこれら３つ疾病すべてに対して活性がある。
デュポン（ＤｕＰｏｎｔ）のＷＯ０２／３４７２１には、サイクリン依存性キナーゼの阻害剤としてのある種のインデノ［１，２−ｃ］ピラゾール−４−オンが開示されている。
ブリストルマイヤーズスクイブ（ＢｒｉｓｔｏｌＭｙｅｒｓＳｑｕｉｂｂ）のＷＯ０１／８１３４８には、サイクリン依存性キナーゼ阻害剤としての５−チオ−、スルフィニル−およびスルホニルピラゾロ［３，４−ｂ］−ピリジンの使用が記載されている。
またブリストルマイヤーズスクイブ（ＢｒｉｓｔｏｌＭｙｅｒｓＳｑｕｉｂｂ）のＷＯ００／６２７７８には、ある種のタンパク質チロシンキナーゼ阻害剤が開示されている。
サイクラセル（Ｃｙｃｌａｃｅｌ）のＷＯ０１／７２７４５Ａ１には、２−置換４−ヘテロアリール−ピリミジンおよびそれらの製造方法、それらを含有する医薬組成物、ならびにサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）の阻害剤としての前記化合物の使用、そして癌、白血病、乾癬などの増殖性疾患の治療における前記化合物の使用が記載されている。
アゴーロン（Ａｇｏｕｒｏｎ）のＷＯ９９／２１８４５には、ＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４、およびＣＤＫ６などのサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）を阻害するための４−アミノチアゾール誘導体が記載されている。この発明はまた、そのような化合物を含有する医薬組成物の治療的使用または予防的使用、ならびにそのような化合物の有効量を投与することによる悪性腫瘍および他の疾患の治療方法をも対象としている。
アゴーロン（Ａｇｏｕｒｏｎ）のＷＯ０１／５３２７４には、窒素含有へテロ環基に結合したアミド置換ベンゼン環を含みうる特定の種類の化合物をＣＤＫキナーゼ阻害剤として開示している。
ＷＯ０１／９８２９０（ファーマコピアアンドアップジョン（Ｐｈａｒｍａｃｉａ＆Ｕｐｊｏｈｎ））には、タンパク質キナーゼ阻害剤としての、ある種の３−アミノカルボニル−２−カルボキサミドチオフェン誘導体が開示されている。これらの化合物は複数のタンパク質キナーゼ活性を有すると記載されている。
アゴーロン（Ａｇｏｕｒｏｎ）のＷＯ０１／５３２６８およびＷＯ０１／０２３６９には、サイクリン依存性キナーゼまたはチロシンキナーゼなどのタンパク質キナーゼの阻害により細胞増殖を媒介または阻害する化合物が開示されている。これらＡｇｏｕｒｏｎの化合物は、直接的またはＣＨ＝ＣＨもしくはＣＨ＝Ｎ基を介してインダゾール環の３位と結合したアリールまたはヘテロアリール環を有する。
ＷＯ００／３９１０８およびＷＯ０２／００６５１（いずれもデュポンファーマシューティカルズ（ＤｕＰｏｎｔＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）は、トリプシン様セリンプロテアーゼ酵素、特に第Ｘａ因子およびトロンビンの阻害剤である広範な種の複素環式化合物を記載している。これらの化合物は抗凝固薬として、または血栓塞栓性疾患の予防に有用であるとされている。
また、第Ｘａ因子に対して活性を有する複素環式化合物がＵＳ２００２／００９１１１６（シュウ（Ｚｈｕ）ら）、ＷＯ０１／１９７８およびＷＯ０１／６４６４２にそれぞれ開示されている。
ＷＯ０３／０３５０６５（アベンティス（Ａｖｅｎｔｉｓ））は、タンパク質キナーゼ阻害剤として広範な種のベンゾイミダゾール誘導体を開示しているが、ＣＤＫキナーゼまたはＧＳＫキナーゼに対する活性に関しては開示していない。
ＷＯ９７／３６５８５およびＵＳ５，８７４，４５２（いずれもメルク（Ｍｅｒｃｋ））は、ファルネシルトランスフェラーゼの阻害剤である二ヘテロアリール化合物を開示している。
ＷＯ０３／０６６６２９（ベルテックス（Ｖｅｒｔｅｘ））は、ＧＳＫ−３阻害剤としてのベンズイミダゾリルピラゾールアミンを開示している。
ＷＯ９７／１２６１５（ワーナーランバート（ＷａｒｎｅｒＬａｍｂｅｒｔ））は、１５−リポキシゲナーゼ阻害剤としてのベンゾイミダゾールを開示している。
ＷＯ２００４／５４５１５（スミスクラインビーチャム（ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅＢｅｅｃｈａｍＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）)は、トロンボポイエチン模倣薬としてある種のベンゾイミダゾールを開示している。
ＷＯ２００４／４１２７７（メルク（Ｍｅｒｃｋ））は、アンドロゲン受容体モジュレーターとしてある種のアミノ-ベンゾイミダゾールを開示している。
ＷＯ２００５／０２８６２４（プレクシコン（Ｐｌｅｘｘｉｋｏｎ））は、プロテインキナーゼに対する活性を有する化合物の分子足場を開示している。
発明の概要
第一の態様では、本発明は、下記のものの予防または治療用薬剤の製造のための化合物の使用を提供する：
Ａ．ＢＣＲ−ａｂｌ、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＥＧＦＲ、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ(例えば、ＪＡＫ２もしくはＪＡＫ３)、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ(例えば、Ｃｈｋ１もしくはＣｈｋ２)、ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２もしくはＥｐｈＢ４)またはＳｒｃ(例えば、ｃＳｒｃ)であるキナーゼが媒介する病態または症状；あるいは
Ｂ．癌細胞が：
（ａ）スレオニンゲートキーパー変異；または
（ｂ）薬剤耐性ゲートキーパー変異；または
（ｃ）イマチニブ耐性変異；または
（ｄ）ニロチニブ耐性変異；または
（ｅ）ダサチニブ耐性変異；または
（ｆ）ＫＩＴにおけるＴ６７０Ｉ変異；または
（ｇ）ＰＤＧＦＲにおけるＴ６７４Ｉ変異；または
（ｈ）ＥＧＦＲにおけるＴ７９０Ｍ変異；または
（ｉ）ａｂｌにおけるＴ３１５Ｉ変異；
である薬剤耐性キナーゼ変異を含む癌；あるいは
Ｃ．ＢＣＲａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦ、ＥＧＦ受容体またはＥｒｂＢ２の変異型である変異分子標的を発現する癌；あるいは
Ｄ．他の抗癌剤と結合または相互作用するが式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物と結合または相互作用をしないタンパク質の領域に変異を有するキナーゼ、例えばｃ−ａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦＲベータおよびＰＤＧＦＲアルファを含むＰＤＧＦＲならびに，ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢｌ）、ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２）、ＥｒｂＢ３およびＥｒｂＢ４などのＥｒｂＢフェミリーのメンバー、ならびにＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＡ１０、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ５、ＥｐｈＢ６などのエフリン受容体ファミリーのメンバー、ｃ−Ｓｒｃ、ならびにＴＹＫ２などのＪＡＫファミリーのキナーゼから選ばれる変異キナーゼ、が媒介する疾病で；
前記化合物は、
Ｉ．式（Ｉ）の化合物：
Figure 0005474354
 〔式中、
Ｘ´は、ＣＲ５´またはＮであり；
Ａ´は、結合または−（ＣＨ２）ｍ−（Ｂ´）ｎ−であり；
Ｂ´は、Ｃ＝Ｏ、ＮＲｇ（Ｃ＝Ｏ）またはＯ（Ｃ＝Ｏ）であり、ここで、Ｒｇは、水素、またはヒドロキシもしくはＣ１−４アルコキシで置換されていてもよいＣ１−４ヒドロカルビルであり；
ｍは、０、１または２であり；
ｎは、０または１であり；
Ｒ０´は、水素であるか、または存在する場合にはＮＲｇと一緒になって−（ＣＨ２）ｐ−基、ここでｐは２〜４である、を形成し；
Ｒ１´は、水素、３〜１２環員を有する炭素環式基もしくは複素環式基、または置換されていてもよいＣ１−８ヒドロカルビル基であり；
Ｒ２´は、水素、ハロゲン、メトキシ、またはハロゲン、ヒドロキシルもしくはメトキシで置換されていてもよいＣ１−４ヒドロカルビル基であり；
Ｒ３´およびＲ４´は、これらが結合している炭素原子と一緒になって、このうち３個までがＮ、ＯおよびＳから選ばれるヘテロ原子であり得る５〜７環員を有する、置換されていてもよい縮合炭素環式環または複素環式環を形成し；
Ｒ５´は、水素、Ｒ２´基またはＲ１０´基であり、ここで、Ｒ１０´は、ハロゲン、ヒドロキシ、トリフルオロメチル、シアノ、ニトロ、カルボキシ、アミノ、モノ−またはジ−Ｃ１−４ヒドロカルビルアミノ、３〜１２環員を有する炭素環式基および複素環式基、Ｒａ−Ｒｂ基であり、ここで、Ｒａは、結合、Ｏ、ＣＯ、Ｘ１Ｃ（Ｘ２）、Ｃ（Ｘ２）Ｘ１、Ｘ１Ｃ（Ｘ２）Ｘ１、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲｃ、ＳＯ２ＮＲｃまたはＮＲｃＳＯ２であり；Ｒｂは、水素、３〜１２環員を有する炭素環式基および複素環式基、ならびにヒドロキシ、オキソ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、カルボキシ、アミノ、モノ−またはジ−Ｃ１−４ヒドロカルビルアミノ、３〜１２環員を有する炭素環式基および複素環式基から選ばれる１以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−８ヒドロカルビル基から選ばれ、前記Ｃ１−８ヒドロカルビル基の１以上の炭素原子はＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲｃ、Ｘ１Ｃ（Ｘ２）、Ｃ（Ｘ２）Ｘ１またはＸ１Ｃ（Ｘ２）Ｘ１で置き換えられていてもよく；
Ｒｃは、水素およびＣ１−４ヒドロカルビルから選ばれ；
Ｘ１は、Ｏ、ＳまたはＮＲｃであり、Ｘ２は＝Ｏ、＝Ｓまたは＝ＮＲｃである〕
またはその塩、溶媒和物、互変異性体もしくはＮ−オキシドであるか、あるいは
ＩＩ．前記化合物は式（Ｉ´）で表される化合物:
Figure 0005474354
 〔式中、
ＭはＤ１基およびＤ２基:
Figure 0005474354
 から選ばれ、そして：
（Ａ）ＭはＤ１基の場合：
ＸはＯ、ＮＨおよびＮＣＨ３から選ばれ；
Ａは結合およびＮＲ２から選ばれ、Ｒ２は水素またはメチルであり;
Ｅは、結合、ＣＨ２、ＣＨ（ＣＮ）およびＣ（ＣＨ３）２から選ばれ;
Ｒ１は下記のものから選ばれる：
（ｉ）ヒドロキシ、フッ素、アミノ、メチルアミノ、メチルまたはエチルにより置換されていてもよい３〜５個の環員を有するシクロアルキル基;
（ｉｉ）Ｏ、Ｎ、ＳおよびＳＯ２から選ばれる１もしくは２のヘテロ原子環員を有する４〜６個の環員を有する飽和複素環基（前記複素環基はＣ１−４アルキル、アミノまたはヒドロキシで置換されていてもよいが、非置換４−モルホリニル、非置換テトラヒドロピラン−４−イル、非置換２−ピロリジニル、および非置換そして１−置換ピペリジン−４−イルを除く）；
（ｉｉｉ）下記式で表される２，５−置換フェニル基：
Figure 0005474354
 （式中、（ａ）ＸがＮＨあるいはＮ−ＣＨ３の場合、Ｒ３は塩素およびシアノから選ばれ、（ｂ）ＸがＯの場合、Ｒ３はＣＮである）；
（ｉｖ）ＣＲ６Ｒ７Ｒ８で表される基（Ｒ６及びＲ７はそれぞれ水素およびメチルから選ばれ、Ｒ８は、水素、メチル、Ｃ１−４アルキルスルホニルメチル、ヒドロキシメチルおよびシアノから選ばれる）；
（ｖ）メチル、エチル、メトキシおよびエトキシから選ばれる１あるいは２個の置換基に置換されてもよいピリダジン−４−イル基；
（ｖｉ）置換基がメチル、エチル、アミノ、フッ素、塩素、アミノおよびメチルアミノから選ばれる、置換イミダゾチアゾール基；
（ｖｉｉ）置換されていてもよい１，３−ジヒドロ−イソインドール−２−イルあるいは置換されていてもよい２，３−ジヒドロ−インドール−１−イル基（各々の場合の置換基はハロゲン、シアノ、アミノ、Ｃ１−４モノ−またはジアルキルアミノ、ＣＯＮＨ２またはＣＯＮＨ−Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルキルおよびＣ１−４アルコキシから選ばれ、前記Ｃ１−４アルキルおよびＣ１−４アルコキシ基は、ヒドロキシ、メトキシまたはアミノで置換されていてもよい）；
（ｖｉｉｉ）ヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、アミノ、Ｃ１−４モノ−およびジアルキルアミノ、ＣＯＮＨ２またはＣＯＮＨ−Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルキルならびにＣ１−４アルコキシから選ばれる１または２個の置換基により置換されていてもよい３−ピリジル（前記Ｃ１−４アルキルならびにＣ１−４アルコキシ基は、ヒドロキシ、メトキシまたはアミノで置換されていてもよいが、２−オキソ−１，２−ジヒドロ−ピリジン−３−カルボン酸［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−（ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−アミドおよび２，６−ジメトキシ−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−ニコチンアミドを除く）；
（ｉｘ）ハロゲン、シアノ、アミノ、Ｃ１−４モノ−またはジアルキルアミノ、ＣＯＮＨ２またはＣＯＮＨ−Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルキルおよびＣ１−４アルコキシから選ばれる１または２個の置換基により置換されていてもよいチオモルホリンあるいはそのＳ−オキシドまたはＳ，Ｓ−ジオキシド（前記Ｃ１−４アルキルおよびＣ１−４アルコキシ基は、ヒドロキシ、メトキシまたはアミノで置換されていてもよい）；
また、Ｅ−ＡがＮＲ２の場合、Ｒ１はさらに下記から選ばれる：
（ｘ）２−フルオロフェニル、３−フルオロフェニル、４−フルオロフェニル、２，４−ジフルオロフェニル、３，４−ジフルオロフェニル、２，５−ジフルオロフェニル、３，５−ジフルオロフェニル、２，４，６−トリフルオロフェニル、２−メトキシフェニル、５−クロロ−２−メトキシフェニル、シクロヘキシル、非置換４−テトラヒドロピラニル、およびｔｅｒｔ−ブチル；
（ｘｉ）ＮＲ１０Ｒ１１で表される基（Ｒ１０およびＲ１１はそれぞれＣ１−４アルキルあるいはＲ１０およびＲ１１は結合してＮＲ１０Ｒ１１がＯ、Ｎ、ＳおよびＳＯ２から選ばれる第２のヘテロ原子環員を含んでいてもよい４〜６個の環員を有する飽和複素環基を形成し、前記複素環基がＣ１−４アルキル、アミノまたはヒドロキシで置換されていてもよい）；
（ｘｉｉ）ヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、アミノ、Ｃ１−４モノ−およびジアルキルアミノ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨ−Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルキルならびにＣ１−４アルコキシから選ばれる１または２個の置換基により置換されていてもよいピリドン（前記Ｃ１−４アルキルならびにＣ１−４アルコキシ基は、ヒドロキシ、メトキシまたはアミノで置換されていてもよい）；
Ｅ−ＡがＣ（ＣＨ３）２ＮＲ２あるいはＣＨ２−ＮＲ２の場合、Ｒ１はさらに下記から選ばれる：
（ｘｉｉｉ）非置換２−フリルおよび２，６−ジフルオロフェニル；また
Ｅ−ＡがＣ（ＣＨ３）２ＮＲ２の場合、Ｒ１はさらに下記から選ばれる：
（ｘｉｖ）非置換フェニル；また
ＥがＣＨ２の場合、Ｒ１はさらに下記から選ばれる：
（ｘｖ）非置換テトラヒドロピラン−４−イル；そして
（Ｂ）ＭがＤ２基である場合：
Ａは結合またはＮＲ２基から選ばれ、Ｒ２は水素またはメチルであり;
Ｅは結合、ＣＨ２、ＣＨ（ＣＮ）およびＣ（ＣＨ３）２から選ばれ；
Ｒ１は下記から選ばれる：
（ｘｖｉ）下記式で表される２−置換３−フリル基：
Figure 0005474354
 （式中、Ｒ４およびＲ５同一または異なって水素およびＣ１−４アルキルから選ばれる、あるいはＲ４およびＲ５は結合しておりＮＲ４Ｒ５がＯ、ＮＨ、ＮＭｅ、ＳまたはＳＯ２から選ばれる第２のヘテロ原子を有してもよい５または６員の飽和複素環基を形成し、前記飽和５または６員複素環基はヒドロキシ、フッ素、アミノ、メチルアミノ、メチルまたはエチルにより置換されていてもよい）；
（ｘｖｉｉ）下記式で表される５−置換２−フリル基：
Figure 0005474354
 （式中、Ｒ４およびＲ５同一または異なって水素およびＣ１−４アルキルから選ばれる、あるいはＲ４およびＲ５は結合しておりＮＲ４Ｒ５がＯ、ＮＨ、ＮＭｅ、ＳまたはＳＯ２から選ばれる第２のヘテロ原子を有してもよい５または６員の飽和複素環基を形成し、前記飽和５または６員複素環基はヒドロキシ、フッ素、アミノ、メチルアミノ、メチルまたはエチルにより置換されていてもよい、ただし、前記化合物が５−ピペリジン−１−イルメチル−フラン−２−カルボン酸［３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−アミドではない）;
（ｘｖｉｉｉ）下記式で表される基：
Figure 0005474354
 （式中、Ｒ９は水素、メチル、エチルまたはイソプロピルであり；Ｇは、ＣＨ、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２またはＮＨであり、前記基はＣ１−４ヒドロカルビル、ヒドロキシ、Ｃ１−４ヒドロカルビルオキシ、フッ素、アミノ、モノ−およびジ−Ｃ１−４アルキルアミノから選ばれる１、２または３個の置換基により置換されていてもよく、前記Ｃ１−４ヒドロカルビルおよびＣ１−４ヒドロカルビルオキシ基はそれぞれ、ヒドロキシ、フッ素、アミノ、モノ−またはジ−Ｃ１−４アルキルアミノで置換されていてもよい）；そして
（ｘｉｘ）下記式で表される３，５−二置換フェニル基：
Figure 0005474354
 （式中、ＸはＯ、ＮＨおよびＮＣＨ３から選ばれる）；ならびに
（Ｃ）ＭがＤ１基の場合：
ＸはＯであり；ＡはＮＲ２であり、ここでＲ２は水素である；Ｅは結合であり；Ｒ１は２，６−ジフルオロフェニルであり；したがって、式（Ｉ）の化合物は下記から選ばれた酸と形成された塩から選ばれる酸付加塩である：酢酸、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸（例えば、Ｌ−アスコルビン酸）、アスパラギン酸（例えば、Ｌ−アスパラギン酸）、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、ショウノウ酸(例えば、（＋）ショウノウ酸）、カプリン酸、カプリル酸、炭酸、クエン酸、シクラミン酸、ドデカン酸、ドデシル硫酸、エタン−１，２−二スルホン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチジン酸、グルコヘプトン酸、Ｄ−グルコン酸、グルクロン酸（例えば、Ｄ−グルクロン酸）、グルタミン酸（例えば、Ｌ−グルタミン酸）、アルファ−オキソグルタル酸、グリコール酸、馬尿酸、塩酸、イセチオン酸、イソ酪酸、乳酸（例えば（+）−Ｌ−乳酸および（±）−ＤＬ乳酸）、ラクトビオン酸、ラウリルスルホン酸、マレイン酸、リンゴ酸、（−）−Ｌ−リンゴ酸、マロン酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、ナフタレンスルホン酸（例えば、ナフタレン−２−スルホン酸、ナフタレン−１，５−二スルホン酸、ニコチン酸、オレイン酸、オロチン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、リン酸、プロピオン酸、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸(例えば、（＋）−Ｌ−酒石酸）、チオシアン酸、トルエンスルホン酸(例えば、ｐ−トルエンスルホン酸）、吉草酸およびキナホイック酸〕
またはその塩、溶媒和物、互変異性体もしくはＮ−オキシドである。
式（Ｉ）の化合物は、我々の先の出願ＰＣＴ／ＧＢ２００４／００２８２４（ＷＯ２００５／００２５５２）で開示された式（Ｉ）の化合物に相当する。これら文献の内容は参照によりに本書に援用される。式（Ｉ´）中の基Ｘ´、Ａ´、Ｂ´、Ｒ０´、Ｒ１´、Ｒ２´、Ｒ３´、Ｒ４´およびＲ５´はＰＣＴ／ＧＢ２００４／００２８２４の式（Ｉ）中の基Ｘ、Ａ、Ｂ、Ｒ０、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５に相当する。
式(Ｉ)の具体的な化合物は、ＰＣＴ／ＧＢ２００４／００２８２４（ＷＯ ２００５／００２５５２）に定義されている式（Ｉ）のサブグループ、実施態様および実施例の化合物である。
式（Ｉ´）の化合物は、我々の国際特許出願番号ＰＣＴ／ＧＢ２００５／００５０９７（ＷＯ ２００６／０７０１９５）に開示された式（Ｉ´）の化合物に相当する。この文献の内容は参照によりに本書に援用される。
式(Ｉ´)の具体的な化合物は、ＰＣＴ／ＧＢ２００５／００５０９７（ＷＯ ２００６／０７０１９５）に定義されている式（Ｉ）のサブグループ、実施態様および実施例の化合物である。
さらなる態様では、本発明は以下のものを提供する:
ＢＣＲ−ａｂｌ、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＥＧＦＲ、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ(例えば、ＪＡＫ２またはＪＡＫ３)、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ(例えば、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２)、ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)あるいはＳｒｃ(例えば、ｃＳｒｃ)であるキナーゼが媒介する病態または症状の予防または治療用薬剤の製造のための、本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
ＢＣＲ−ａｂｌ、ＶＥＧＦＲ、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ１、ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)あるいはＳｒｃであるキナーゼが媒介する病態または症状の予防または治療用薬剤の製造のための、本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
ＢＣＲ−ａｂｌに起因する悪性腫瘍の病態または症状の治療または予防用薬剤の製造のための、本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
ＢＣＲ−ａｂｌに起因する悪性腫瘍の病態または症状の治療または予防用薬剤の製造のための、本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用であって、前記悪性腫瘍がフィラデルフィア染色体陽性の悪性腫瘍、例えば、フィラデルフィア染色体陽性ＣＭＬおよびフィラデルフィア染色体陽性ＡＬＬなどのフィラデルフィア染色体陽性白血病ならびに骨髄増殖性症候群から選ばれる。
ＶＥＧＦＲが媒介する病態または症状の治療または予防用薬剤の製造のための、本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
ＶＥＧＦＲが媒介する病態または症状の治療または予防用薬剤の製造のための、本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用であって、前記病態または症状は加齢黄斑変性症（例えば、湿潤型加齢黄斑変性症）；虚血性増殖性網膜症（例えば、未熟児網膜症（ＲＯＰ）および糖尿病性網膜症）；および血管腫から選ばれる病態および症状などの眼疾患または症状である。
Ｆｌｔ３、ＪＡＫ、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２であるキナーゼが媒介する病態または症状の治療または予防用薬剤の製造のための、本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
Ｆｌｔ３、ＪＡＫ、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２であるキナーゼが媒介する病態または症状の治療または予防用薬剤の製造のための、本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用であって、前記病態または症状が真性多血症、本態性血小板増加症、特発性骨髄線維症、若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、巨核球性白血病、巨核球性ＡＭＬ（ＡＭＬ Ｍ７）、フィラデルフィア染色体陰性ＣＭＬおよびイマチニブ耐性ＣＭＬから選ばれる１つまたは複数の疾病または症状（どのような組み合わせでもよい）である。
Ｆｌｔ３、ＪＡＫ、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２であるキナーゼが媒介する病態または症状の治療または予防用薬剤の製造のための、本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用であって、前記病態または症状が真性多血症、本態性血小板増加症および骨髄様化生（ＭＭＭ）を伴う骨髄線維症を含む特発性骨髄線維症のような骨髄増殖性障害（ＭＰＤ）から選ばれる。
ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)あるいはｃＳｒｃであるキナーゼが媒介する病態または症状の治療または予防用薬剤の製造のための、本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)あるいはｃＳｒｃであるキナーゼが媒介する病態または症状の治療または予防用薬剤の製造のための、本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用であって、前記病態または症状が甲状腺乳頭癌、多発性内分泌腺腫（ＭＥＮ）２Ａ型および２Ｂ型、家族性甲状腺髄様癌（ＦＭＴＣ）、ヒルシュスプルング病、アペール（ＡＰ）症候群、クルーゾン症候群、ジャクソン−ワイス症候群、ベーレ−スティーブンソン脳回状頭皮症候群、パイフェル症候群（ＰＳ）、多発性骨髄腫、頭頸部癌および上皮癌から（どのような組み合わせでもよく）選ばれる。
ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)あるいはｃＳｒｃであるキナーゼが媒介する病態または症状の治療または予防用薬剤の製造のための、本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用であって、前記病態または症状がアペール（ＡＰ）症候群、クルーゾン症候群、ジャクソン―ワイスの症候群、ベーレ―スティーブンソン脳回状頭皮症候群およびパイフェル症候群（ＰＳ）などのヒトの骨格発生異常から選ばれる。
ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)あるいはｃＳｒｃであるキナーゼが媒介する病態または症状の治療または予防用薬剤の製造のための、本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用であって、前記病態または症状が甲状腺乳頭癌、家族性甲状腺髄様癌（ＦＭＴＣ）、多発性内分泌腺腫（ＭＥＮ）２Ａ型および２Ｂ型などの甲状腺癌から選ばれる。
癌細胞が：
（ａ）スレオニンゲートキーパー変異；または
（ｂ）薬剤耐性ゲートキーパー変異；または
（ｃ）イマチニブ耐性変異；または
（ｄ）ニロチニブ耐性変異；または
（ｅ）ダサチニブ耐性変異；または
（ｆ）ＫＩＴにおけるＴ６７０Ｉ変異；または
（ｇ）ＰＤＧＦＲにおけるＴ６７４Ｉ変異；または
（ｈ）ＥＧＦＲにおけるＴ７９０Ｍ変異；または
（ｉ）ａｂｌにおけるＴ３１５Ｉ変異、
である薬剤耐性キナーゼ変異を含む癌の治療または予防用薬剤の製造のための、本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
癌細胞が：
（ａ）スレオニンゲートキーパー変異；または
（ｂ）薬剤耐性ゲートキーパー変異；または
（ｃ）Ｔ３１５Ｉイマチニブ耐性変異；または
（ｄ）ＫＩＴにおけるＴ６７０Ｉ変異；または
（ｅ）ＰＤＧＦＲにおけるＴ６７４Ｉ変異；または
（ｆ）ＥＧＦＲにおけるＴ７９０Ｍ変異、
である薬剤耐性キナーゼ変異を含む癌の治療または予防用薬剤の製造のための、本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
癌細胞が：
（ａ）スレオニンゲートキーパー変異；または
（ｂ）薬剤耐性ゲートキーパー変異；または
（ｃ）Ｔ３１５Ｉイマチニブ耐性変異；または
（ｄ）ＫＩＴにおけるＴ６７０Ｉ変異；または
（ｅ）ＰＤＧＦＲにおけるＴ６７４Ｉ変異、
である薬剤耐性キナーゼ変異を含む癌の治療または予防用薬剤の製造のための、本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
癌細胞が：
（ａ）スレオニンゲートキーパー変異；または
（ｂ）薬剤耐性ゲートキーパー変異；または
（ｃ）イマチニブ耐性変異；または
（ｄ）ニロチニブ耐性変異；または
（ｅ）ダサチニブ耐性変異；または
（ｆ）ＫＩＴにおけるＴ６７０Ｉ変異；または
（ｇ）ＰＤＧＦＲにおけるＴ６７４Ｉ変異；または
（ｈ）ＥＧＦＲにおけるＴ７９０Ｍ変異；または
（ｉ）ａｂｌにおけるＴ３１５Ｉ変異、
である薬剤耐性キナーゼ変異を含む癌の治療または予防用薬剤の製造のための、本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用であって、前記薬剤は、胃腸間質性腫瘍（ＧＩＳＴ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、高好酸球症候群および***性皮膚線維肉腫の１つまたは複数（どのような組み合わせでもよい)の治療または予防用である。
癌細胞が：
（ｃ）イマチニブ耐性変異；または
（ｄ）ニロチニブ耐性の変異；または
（ｅ）ダサチニブ耐性の変異、
である薬剤耐性キナーゼ変異を含む癌の治療または予防用薬剤の製造のための、本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用であって、前記薬剤は、ニロチニブ耐性、ダサチニブ耐性またはイマチニブ耐性ＣＭＬの治療または予防用である。
ＢＣＲａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦ、ＥＧＦ受容体またはＥｒｂＢ２の変異型である変異分子標的を発現する癌の治療または予防用薬剤の製造のための、本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
他の抗癌剤と結合または相互作用するが式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物と結合または相互作用をしないタンパク質の領域に変異を有するキナーゼ、例えばｃ−ａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦＲベータおよびＰＤＧＦＲアルファを含むＰＤＧＦＲならびに，ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢｌ）、ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２）、ＥｒｂＢ３およびＥｒｂＢ４などのＥｒｂＢフェミリーのメンバー，ならびにＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＡ１０、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ５、ＥｐｈＢ６などのエフリン受容体ファミリーのメンバー、ｃ−Ｓｒｃ、ならびにＴＹＫ２などのＪＡＫファミリーのキナーゼから選ばれる変異キナーゼ、が媒介する疾病の治療または予防用薬剤の製造のための、本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
下記から選択される疾病および症状の１つまたは複数（どのような組み合わせでもよい）の予防または治療用薬剤の製造のための請求項１〜１０６のいずれか一項の中で定義された化合物の使用：
眼疾患あるいは症状（加齢黄斑変性症［例えば、湿潤型加齢黄斑変性症］；虚血性増殖性網膜症［例えば、未熟児網膜症（ＲＯＰ）および糖尿病性網膜症］；および血管腫）；骨髄増殖性障害（ＭＰＤ）（真性多血症、本態性血小板増加症および骨髄様化生（ＭＭＭ）を伴う骨髄線維症を含む特発性骨髄線維症など)；若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）；慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）;巨核球性白血病（巨核球性ＡＭＬ（ＡＭＬ Ｍ７）を含む）；フィラデルフィア染色体陰性ＣＭＬ；イマチニブ耐性ＣＭＬ；ニロチニブ耐性ＣＭＬ；ダサチニブ耐性ＣＭＬ；胃腸間質性腫瘍（ＧＩＳＴ）；多形性グリア芽腫、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）などのグリア芽腫；高好酸球症候群；***性皮膚線維肉腫；フィラデルフィア染色体陽性悪性腫瘍（例えば、フィラデルフィア染色体陽性ＣＭＬおよびフィラデルフィア染色体陽性ＡＬＬなどのフィラデルフィア染色体陽性白血病)；骨髄増殖性症候群；多発性骨髄腫、上皮癌、頭頸部癌、ヒトの骨格発生異常（アペール（ＡＰ）症候群、クルーゾン症候群、ジャクソン−ワイス症候群、ベーレ−スティーブンソン脳回状頭皮症候群、パイフェル症候群（ＰＳ）など）、甲状腺癌（甲状腺乳頭癌、家族性甲状腺髄様癌（ＦＭＴＣ）、多発性内分泌腺腫（ＭＥＮ）２Ａ型および２Ｂ型など)；およびヒルシュスプルング病。
下記から選択される疾病および症状の１つまたは複数（どのような組み合わせでもよい）の予防または治療用薬剤の製造のための本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用：
眼疾患あるいは症状（加齢黄斑変性症［例えば、湿潤型加齢黄斑変性症］；虚血性増殖性網膜症［例えば、未熟児網膜症（ＲＯＰ）および糖尿病性網膜症］；および血管腫）；骨髄増殖性障害（ＭＰＤ）（真性多血症、本態性血小板増加症および骨髄様化生（ＭＭＭ）を伴う骨髄線維症を含む特発性骨髄線維症など)；若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）；慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）；巨核球性白血病（巨核球性ＡＭＬ（ＡＭＬ Ｍ７）を含む）；フィラデルフィア染色体陰性ＣＭＬ；イマチニブ耐性ＣＭＬ；胃腸間質性腫瘍（ＧＩＳＴ）；多形性グリア芽腫、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）などのグリア芽腫；高好酸球症候群；***性皮膚線維肉腫；フィラデルフィア染色体陽性悪性腫瘍（例えば、フィラデルフィア染色体陽性ＣＭＬおよびフィラデルフィア染色体陽性ＡＬＬなどのフィラデルフィア染色体陽性白血病)；骨髄増殖性症候群；多発性骨髄腫、上皮癌、頭頸部癌、ヒトの骨格発生異常（アペール（ＡＰ）症候群、クルーゾン症候群、ジャクソン−ワイス症候群、ベーレ−スティーブンソン脳回状頭皮症候群、パイフェル症候群（ＰＳ）など）、甲状腺癌（甲状腺乳頭癌、家族性甲状腺髄様癌（ＦＭＴＣ）、多発性内分泌腺腫（ＭＥＮ）２Ａ型および２Ｂ型など)；およびヒルシュスプルング病。
加齢黄斑変性症（例えば、湿潤型加齢黄斑変性症）；虚血性増殖性網膜症（例えば、未熟児網膜症（ＲＯＰ）および糖尿病性網膜症）；および血管腫などの眼疾患あるいは症状の１つまたは複数（どのような組み合わせでもよい）の予防または治療用薬剤の製造のための本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
真性多血症、本態性血小板増加症および骨髄様化生（ＭＭＭ）を伴う骨髄線維症を含む特発性骨髄線維症などの骨髄増殖性障害（ＭＰＤ）；若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）；慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）；巨核球性ＡＭＬ（ＡＭＬ Ｍ７）を含む巨核球性白血病；フィラデルフィア染色体陰性ＣＭＬ；およびイマチニブ耐性ＣＭＬから選ばれる１つまたは複数（どのような組み合わせでもよい）の疾病または症状の予防または治療用薬剤の製造のための本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
ＢＣＲ−ａｂｌ、特にフィラデルフィア染色体陽性悪性腫瘍、例えば、フィラデルフィア染色体陽性ＣＭＬおよびフィラデルフィア染色体陽性ＡＬＬなどのフィラデルフィア染色体陽性白血病によりもたらされた悪性腫瘍の治療または予防用薬剤の製造のための本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
骨髄増殖性症候群の治療または予防用薬剤の製造のための本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
アペール（ＡＰ）症候群、クルーゾン症候群、ジャクソン−ワイス症候群、ベーレ−スティーブンソン脳回状頭皮症候群およびパイフェル症候群（ＰＳ）などのヒトの骨格発生異常、甲状腺乳頭癌、家族性甲状腺髄様癌（ＦＭＴＣ）、多発性内分泌腺腫（ＭＥＮ）２Ａ型および２Ｂ型などの甲状腺癌ならびにヒルシュスプルング病から選ばれる１つまたは複数（どのような組み合わせでもよい）の疾病または症状の治療または予防用薬剤の製造のための本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
胃腸間質性腫瘍（ＧＩＳＴ）；多形性グリア芽腫、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）などのグリア芽腫；高好酸球症候群；および***性皮膚線維肉腫から選ばれる病態または症状の治療または予防用薬剤の製造のための本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
イマチニブ耐性ＣＭＬ、ニロチニブ耐性ＣＭＬおよびダサチニブ耐性ＣＭＬから選ばれる病態または症状の治療または予防用薬剤の製造のための本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
イマチニブ耐性ＣＭＬの治療または予防用薬剤の製造のための本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
骨髄様化生（ＭＭＭ）を伴う骨髄線維症の治療または予防用薬剤の製造のための本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
下記ものの予防または治療方法：
Ａ．ＢＣＲ−ａｂｌ、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＥＧＦＲ、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ(例えば、ＪＡＫ２もしくはＪＡＫ３)、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ(例えば、Ｃｈｋ１もしくはＣｈｋ２)、ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２もしくはＥｐｈＢ４)またはＳｒｃ(例えば、ｃＳｒｃ)であるキナーゼが媒介する病態または症状；あるいは
Ｂ．癌細胞が：
（ａ）スレオニンゲートキーパー変異；または
（ｂ）薬剤耐性ゲートキーパー変異；または
（ｃ）イマチニブ耐性変異；または
（ｄ）ニロチニブ耐性変異；または
（ｅ）ダサチニブ耐性変異；または
（ｆ）ＫＩＴにおけるＴ６７０Ｉ変異；または
（ｇ）ＰＤＧＦＲにおけるＴ６７４Ｉ変異；または
（ｈ）ＥＧＦＲにおけるＴ７９０Ｍ変異；または
（ｉ）ａｂｌにおけるＴ３１５Ｉ変異、
である薬剤耐性キナーゼ変異を含む癌；あるいは
Ｃ．ＢＣＲ−ａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦ、ＥＧＦ受容体またはＥｒｂＢ２の変異型である変異分子標的を発現する癌；あるいは
Ｄ．他の抗癌剤と結合または相互作用するが式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物と結合または相互作用をしないタンパク質の領域に変異を有するキナーゼ、例えばｃ−ａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦＲベータおよびＰＤＧＦＲアルファを含むＰＤＧＦＲならびに，ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢｌ）、ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２）、ＥｒｂＢ３およびＥｒｂＢ４などのＥｒｂＢフェミリーのメンバー、ならびにＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＡ１０、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ５、ＥｐｈＢ６などのエフリン受容体ファミリーのメンバー、ｃ−Ｓｒｃ、ならびにＴＹＫ２などのＪＡＫファミリーのキナーゼから選ばれる変異キナーゼ、が媒介する疾病であって、
前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
ＢＣＲ−ａｂｌ、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＥＧＦＲ、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ(例えば、ＪＡＫ２またはＪＡＫ３)、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ(例えば、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２)、ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)あるいはＳｒｃ(例えば、ｃＳｒｃ)であるキナーゼが媒介する病態または症状の予防または治療方法であって、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
ＢＣＲ−ａｂｌ、ＶＥＧＦＲ、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ１、Ｃｈｋ２、ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)あるいはｃＳｒｃであるキナーゼが媒介する病態または症状の予防または治療方法であって、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
ＢＣＲ−ａｂｌに起因する悪性腫瘍の病態または症状の予防または治療方法であって、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
ＢＣＲ−ａｂｌに起因する悪性腫瘍の病態または症状の予防または治療方法であって、前記悪性腫瘍がフィラデルフィア染色体陽性の悪性腫瘍、例えば、フィラデルフィア染色体陽性ＣＭＬおよびフィラデルフィア染色体陽性ＡＬＬなどのフィラデルフィア染色体陽性白血病ならびに骨髄増殖性症候群であり、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
ＶＥＧＦＲが媒介する病態または症状の予防または治療方法であって、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
ＶＥＧＦＲが媒介する病態または症状の予防または治療方法であって、前記病態または症状は加齢黄斑変性症（例えば、湿潤型加齢黄斑変性症）；虚血性増殖性網膜症（例えば、未熟児網膜症（ＲＯＰ）および糖尿病性網膜症）；および血管腫から選ばれる病態および症状などの眼疾患または症状であり、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
Ｆｌｔ３、ＪＡＫ、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２であるキナーゼが媒介する病態または症状の予防または治療方法であって、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
Ｆｌｔ３、ＪＡＫ、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２であるキナーゼが媒介する病態または症状の予防または治療方法であって、前記病態または症状は真性多血症、本態性血小板増加症、特発性骨髄線維症、若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、巨核球性白血病、巨核球性ＡＭＬ（ＡＭＬ Ｍ７）、フィラデルフィア染色体陰性ＣＭＬおよびイマチニブ耐性ＣＭＬから選ばれる１つまたは複数の疾病または症状（どのような組み合わせでもよい）であって、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
Ｆｌｔ３、ＪＡＫ、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２であるキナーゼが媒介する病態または症状の予防または治療方法であって、前記病態または症状が真性多血症、本態性血小板増加症および骨髄様化生（ＭＭＭ）を伴う骨髄線維症を含む特発性骨髄線維症のような骨髄増殖性障害（ＭＰＤ）から選ばれ、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)あるいはｃＳｒｃであるキナーゼが媒介する病態または症状の予防または治療方法であって、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)あるいはｃＳｒｃであるキナーゼが媒介する病態または症状の予防または治療方法であって、前記病態または症状が甲状腺乳頭癌、多発性内分泌腺腫（ＭＥＮ）２Ａ型および２Ｂ型、家族性甲状腺髄様癌（ＦＭＴＣ）、ヒルシュスプルング病、アペール（ＡＰ）症候群、クルーゾン症候群、ジャクソン−ワイス症候群、ベーレ−スティーブンソン脳回状頭皮症候群、パイフェル症候群（ＰＳ）、多発性骨髄腫、頭頸部癌および上皮癌から選ばれ（どのような組み合わせでもよい）、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)あるいはｃＳｒｃであるキナーゼが媒介する病態または症状の予防または治療方法であって、前記病態または症状がアペール（ＡＰ）症候群、クルーゾン症候群、ジャクソン―ワイスの症候群、ベーレ―スティーブンソン脳回状頭皮症候群およびパイフェル症候群（ＰＳ）などのヒトの骨格発生異常から選ばれ、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)あるいはｃＳｒｃであるキナーゼが媒介する病態または症状の予防または治療方法であって、前記病態または症状が甲状腺乳頭癌、家族性甲状腺髄様癌（ＦＭＴＣ）、多発性内分泌腺腫（ＭＥＮ）２Ａ型および２Ｂ型などの甲状腺癌から選ばれ、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
癌細胞が：
（ａ）スレオニンゲートキーパー変異；または
（ｂ）薬剤耐性ゲートキーパー変異；または
（ｃ）イマチニブ耐性変異；または
（ｄ）ニロチニブ耐性変異；または
（ｅ）ダサチニブ耐性変異；または
（ｆ）ＫＩＴにおけるＴ６７０Ｉ変異；または
（ｇ）ＰＤＧＦＲにおけるＴ６７４Ｉ変異；または
（ｈ）ＥＧＦＲにおけるＴ７９０Ｍ変異；または
（ｉ）ａｂｌにおけるＴ３１５Ｉ変異、
である薬剤耐性キナーゼ変異を含む癌の予防または治療方法であって、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
癌細胞が：
（ａ）スレオニンゲートキーパー変異；または
（ｂ）薬剤耐性ゲートキーパー変異；または
（ｃ）Ｔ３１５Ｉイマチニブ耐性変異；または
（ｄ）ＫＩＴにおけるＴ６７０Ｉ変異；または
（ｅ）ＰＤＧＦＲにおけるＴ６７４Ｉ変異；または
（ｆ）ＥＧＦＲにおけるＴ７９０Ｍ変異、
である薬剤耐性キナーゼ変異を含む癌の予防または治療方法であって、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
癌細胞が：
（ａ）スレオニンゲートキーパー変異；または
（ｂ）薬剤耐性ゲートキーパー変異；または
（ｃ）Ｔ３１５Ｉイマチニブ耐性変異；または
（ｄ）ＫＩＴにおけるＴ６７０Ｉ変異；または
（ｅ）ＰＤＧＦＲにおけるＴ６７４Ｉ変異、
である薬剤耐性キナーゼ変異を含む癌の予防または治療方法であって、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
癌細胞が：
（ａ）スレオニンゲートキーパー変異；または
（ｂ）薬剤耐性ゲートキーパー変異；または
（ｃ）イマチニブ耐性変異；または
（ｄ）ニロチニブ耐性変異；または
（ｅ）ダサチニブ耐性変異；または
（ｆ）ＫＩＴにおけるＴ６７０Ｉ変異；または
（ｇ）ＰＤＧＦＲにおけるＴ６７４Ｉ変異；または
（ｈ）ＥＧＦＲにおけるＴ７９０Ｍ変異；または
（ｉ）ａｂｌにおけるＴ３１５Ｉ変異、
である薬剤耐性キナーゼ変異を含む癌の予防または治療方法であって、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含み、前記薬剤は、胃腸間質性腫瘍（ＧＩＳＴ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、高好酸球症候群および***性皮膚線維肉腫の１つまたは複数（どのような組み合わせでもよい)の治療または予防用である。
癌細胞が：
（ｃ）イマチニブ耐性変異；または
（ｄ）ニロチニブ耐性の変異；または
（ｅ）ダサチニブ耐性の変異、
である薬剤耐性キナーゼ変異を含む癌の予防または治療方法であって、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含み、前記薬剤は、ニロチニブ耐性、ダサチニブ耐性またはイマチニブ耐性ＣＭＬの治療または予防用である。
ＢＣＲ−ａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦ、ＥＧＦ受容体またはＥｒｂＢ２の変異型である変異分子標的を発現する癌の予防または治療方法であって、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
他の抗癌剤と結合または相互作用するが式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物と結合または相互作用をしないタンパク質の領域に変異を有するキナーゼ、例えばｃ−ａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦＲベータおよびＰＤＧＦＲアルファを含むＰＤＧＦＲならびに，ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢｌ）、ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２）、ＥｒｂＢ３およびＥｒｂＢ４などのＥｒｂＢフェミリーのメンバー、ならびにＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＡ１０、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ５、ＥｐｈＢ６などのエフリン受容体ファミリーのメンバー、ｃ−Ｓｒｃ、ならびにＴＹＫ２などのＪＡＫファミリーのキナーゼから選ばれる変異キナーゼ、が媒介する疾病の予防または治療方法であって、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
下記から選択される疾病および症状の１つまたは複数（どのような組み合わせでもよい）の予防または治療方法であって、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む：
眼疾患あるいは症状（加齢黄斑変性症［例えば、湿潤型加齢黄斑変性症］；虚血性増殖性網膜症［例えば、未熟児網膜症（ＲＯＰ）および糖尿病性網膜症］；および血管腫）；骨髄増殖性障害（ＭＰＤ）（真性多血症、本態性血小板増加症および骨髄様化生（ＭＭＭ）を伴う骨髄線維症を含む特発性骨髄線維症など)；若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）；慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）;巨核球性白血病（巨核球性ＡＭＬ（ＡＭＬ Ｍ７）を含む）；フィラデルフィア染色体陰性ＣＭＬ；イマチニブ耐性ＣＭＬ；ニロチニブ耐性ＣＭＬ；ダサチニブ耐性ＣＭＬ；胃腸間質性腫瘍（ＧＩＳＴ）；多形性グリア芽腫、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）などのグリア芽腫；高好酸球症候群；***性皮膚線維肉腫；フィラデルフィア染色体陽性悪性腫瘍（例えば、フィラデルフィア染色体陽性ＣＭＬおよびフィラデルフィア染色体陽性ＡＬＬなどのフィラデルフィア染色体陽性白血病)；骨髄増殖性症候群；多発性骨髄腫、上皮癌、頭頸部癌、ヒトの骨格発生異常（アペール（ＡＰ）症候群、クルーゾン症候群、ジャクソン−ワイス症候群、ベーレ−スティーブンソン脳回状頭皮症候群、パイフェル症候群（ＰＳ）など）、甲状腺癌（甲状腺乳頭癌、家族性甲状腺髄様癌（ＦＭＴＣ）、多発性内分泌腺腫（ＭＥＮ）２Ａ型および２Ｂ型など)；およびヒルシュスプルング病。
下記から選択される疾病および症状の１つまたは複数（どのような組み合わせでもよい）の予防または治療方法であって、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む：
眼疾患あるいは症状（加齢黄斑変性症［例えば、湿潤型加齢黄斑変性症］；虚血性増殖性網膜症［例えば、未熟児網膜症（ＲＯＰ）および糖尿病性網膜症］；および血管腫）；骨髄増殖性障害（ＭＰＤ）（真性多血症、本態性血小板増加症および骨髄様化生（ＭＭＭ）を伴う骨髄線維症を含む特発性骨髄線維症など)；若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）；慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）；巨核球性白血病（巨核球性ＡＭＬ（ＡＭＬ Ｍ７）を含む）；フィラデルフィア染色体陰性ＣＭＬ；イマチニブ耐性ＣＭＬ；胃腸間質性腫瘍（ＧＩＳＴ）；多形性グリア芽腫、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）などのグリア芽腫；高好酸球症候群；***性皮膚線維肉腫；フィラデルフィア染色体陽性悪性腫瘍（例えば、フィラデルフィア染色体陽性ＣＭＬおよびフィラデルフィア染色体陽性ＡＬＬなどのフィラデルフィア染色体陽性白血病)；骨髄増殖性症候群；多発性骨髄腫、上皮癌、頭頸部癌、ヒトの骨格発生異常（アペール（ＡＰ）症候群、クルーゾン症候群、ジャクソン−ワイス症候群、ベーレ−スティーブンソン脳回状頭皮症候群、パイフェル症候群（ＰＳ）など）、甲状腺癌（甲状腺乳頭癌、家族性甲状腺髄様癌（ＦＭＴＣ）、多発性内分泌腺腫（ＭＥＮ）２Ａ型および２Ｂ型など)；およびヒルシュスプルング病。
加齢黄斑変性症（例えば、湿潤型加齢黄斑変性症）；虚血性増殖性網膜症（例えば、未熟児網膜症（ＲＯＰ）および糖尿病性網膜症）；および血管腫などの眼疾患あるいは症状の１つまたは複数（どのような組み合わせでもよい）の予防または治療方法であって、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
真性多血症、本態性血小板増加症および骨髄様化生（ＭＭＭ）を伴う骨髄線維症を含む特発性骨髄線維症などの骨髄増殖性障害（ＭＰＤ）；若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）；慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）；巨核球性ＡＭＬ（ＡＭＬ Ｍ７）を含む巨核球性白血病；フィラデルフィア染色体陰性ＣＭＬ；およびイマチニブ耐性ＣＭＬから選ばれる１つまたは複数（どのような組み合わせでもよい）の疾病または症状の予防または治療方法であって、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
フィラデルフィア染色体陽性悪性腫瘍、例えば、フィラデルフィア染色体陽性ＣＭＬおよびフィラデルフィア染色体陽性ＡＬＬなどのフィラデルフィア染色体陽性白血病によりもたらされた悪性腫瘍の予防または治療方法であって、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
骨髄増殖性症候群の予防または治療方法であって、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
アペール（ＡＰ）症候群、クルーゾン症候群、ジャクソン−ワイス症候群、ベーレ−スティーブンソン脳回状頭皮症候群およびパイフェル症候群（ＰＳ）などのヒトの骨格発生異常、甲状腺乳頭癌、家族性甲状腺髄様癌（ＦＭＴＣ）、多発性内分泌腺腫（ＭＥＮ）２Ａ型および２Ｂ型などの甲状腺癌ならびにヒルシュスプルング病から選ばれる１つまたは複数（どのような組み合わせでもよい）の疾病または症状の予防または治療方法であって、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
胃腸間質性腫瘍（ＧＩＳＴ）；多形性グリア芽腫、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）などのグリア芽腫；高好酸球症候群；および***性皮膚線維肉腫から選ばれる病態または症状の予防または治療方法であって、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
イマチニブ耐性ＣＭＬ、ニロチニブ耐性ＣＭＬおよびダサチニブ耐性ＣＭＬから選ばれる病態または症状の予防または治療方法であって、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
イマチニブ耐性ＣＭＬの予防または治療方法であって、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
骨髄様化生（ＭＭＭ）を伴う骨髄線維症の予防または治療方法であって、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
下記のものの予防または治療で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態：
Ａ．ＢＣＲ−ａｂｌ、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＥＧＦＲ、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ(例えば、ＪＡＫ２もしくはＪＡＫ３)、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ(例えば、Ｃｈｋ１もしくはＣｈｋ２)、ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２もしくはＥｐｈＢ４)またはＳｒｃ(例えば、ｃＳｒｃ)であるキナーゼが媒介する病態または症状；あるいは
Ｂ．癌細胞が：
（ａ）スレオニンゲートキーパー変異；または
（ｂ）薬剤耐性ゲートキーパー変異；または
（ｃ）イマチニブ耐性変異；または
（ｄ）ニロチニブ耐性変異；または
（ｅ）ダサチニブ耐性変異；または
（ｆ）ＫＩＴにおけるＴ６７０Ｉ変異；または
（ｇ）ＰＤＧＦＲにおけるＴ６７４Ｉ変異；または
（ｈ）ＥＧＦＲにおけるＴ７９０Ｍ変異；または
（ｉ）ａｂｌにおけるＴ３１５Ｉ変異、
である薬剤耐性キナーゼ変異を含む癌；あるいは
Ｃ．ＢＣＲ−ａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦ、ＥＧＦ受容体またはＥｒｂＢ２の変異型である変異分子標的を発現する癌；あるいは
Ｄ．他の抗癌剤と結合または相互作用するが式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物と結合または相互作用をしないタンパク質の領域に変異を有するキナーゼ、例えばｃ−ａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦＲベータおよびＰＤＧＦＲアルファを含むＰＤＧＦＲならびに，ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢｌ）、ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２）、ＥｒｂＢ３およびＥｒｂＢ４などのＥｒｂＢフェミリーのメンバー、ならびにＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＡ１０、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ５、ＥｐｈＢ６などのエフリン受容体ファミリーのメンバー、ｃ−Ｓｒｃ、ならびにＴＹＫ２などのＪＡＫファミリーのキナーゼから選ばれる変異キナーゼ、が媒介する疾病。
ＢＣＲ−ａｂｌ、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＥＧＦＲ、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ(例えば、ＪＡＫ２またはＪＡＫ３)、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ(例えば、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２)、ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)あるいはＳｒｃ(例えば、ｃＳｒｃ)であるキナーゼが媒介する病態または症状の予防または治療で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態。
ＢＣＲ−ａｂｌ、ＶＥＧＦＲ、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ１、Ｃｈｋ２、ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)あるいはｃＳｒｃであるキナーゼが媒介する病態または症状の予防または治療で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態。
ＢＣＲ−ａｂｌに起因する悪性腫瘍の病態または症状の治療または予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態。
ＢＣＲ−ａｂｌに起因する悪性腫瘍の病態または症状の治療または予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態であって、前記悪性腫瘍はフィラデルフィア染色体陽性の悪性腫瘍、例えば、フィラデルフィア染色体陽性ＣＭＬおよびフィラデルフィア染色体陽性ＡＬＬなどのフィラデルフィア染色体陽性白血病ならびに骨髄増殖性症候群である。
ＶＥＧＦＲが媒介する病態または症状の治療または予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態。
ＶＥＧＦＲが媒介する病態または症状の治療または予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態であって、前記病態または症状は加齢黄斑変性症（例えば、湿潤型加齢黄斑変性症）；虚血性増殖性網膜症（例えば、未熟児網膜症（ＲＯＰ）および糖尿病性網膜症）；および血管腫から選ばれる病態および症状などの眼疾患または症状である。
Ｆｌｔ３、ＪＡＫ、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２であるキナーゼが媒介する病態または症状の治療または予防で用薬剤の製造のための本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態。
Ｆｌｔ３、ＪＡＫ、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２であるキナーゼが媒介する病態または症状の治療または予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態であって、前記病態または症状が真性多血症、本態性血小板増加症、特発性骨髄線維症、若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、巨核球性白血病、巨核球性ＡＭＬ（ＡＭＬ Ｍ７）、フィラデルフィア染色体陰性ＣＭＬおよびイマチニブ耐性ＣＭＬから選ばれる１つまたは複数の疾病または症状（どのような組み合わせでもよい）である。
Ｆｌｔ３、ＪＡＫ、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２であるキナーゼが媒介する病態または症状の治療または予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態であって、前記病態または症状は真性多血症、本態性血小板増加症および骨髄様化生（ＭＭＭ）を伴う骨髄線維症を含む特発性骨髄線維症のような骨髄増殖性障害（ＭＰＤ）から選ばれる。
ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)あるいはｃＳｒｃであるキナーゼが媒介する病態または症状の治療または予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態。
ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)あるいはｃＳｒｃであるキナーゼが媒介する病態または症状の治療または予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態であって、前記病態または症状が甲状腺乳頭癌、多発性内分泌腺腫（ＭＥＮ）２Ａ型および２Ｂ型、家族性甲状腺髄様癌（ＦＭＴＣ）、ヒルシュスプルング病、アペール（ＡＰ）症候群、クルーゾン症候群、ジャクソン−ワイス症候群、ベーレ−スティーブンソン脳回状頭皮症候群、パイフェル症候群（ＰＳ）、多発性骨髄腫、頭頸部癌および上皮癌から選ばれる（どのような組み合わせでもよい）。
ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)あるいはｃＳｒｃであるキナーゼが媒介する病態または症状の治療または予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態であって、前記病態または症状が甲状腺乳頭癌、家族性甲状腺髄様癌（ＦＭＴＣ）、多発性内分泌腺腫（ＭＥＮ）２Ａ型および２Ｂ型などの甲状腺癌から選ばれる。
癌細胞が：
（ａ）スレオニンゲートキーパー変異；または
（ｂ）薬剤耐性ゲートキーパー変異；または
（ｃ）イマチニブ耐性変異；または
（ｄ）ニロチニブ耐性変異；または
（ｅ）ダサチニブ耐性変異；または
（ｆ）ＫＩＴにおけるＴ６７０Ｉ変異；または
（ｇ）ＰＤＧＦＲにおけるＴ６７４Ｉ変異；または
（ｈ）ＥＧＦＲにおけるＴ７９０Ｍ変異；または
（ｉ）ａｂｌにおけるＴ３１５Ｉ変異、
である薬剤耐性キナーゼ変異を含む癌の治療または予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態。
癌細胞が：
（ａ）スレオニンゲートキーパー変異；または
（ｂ）薬剤耐性ゲートキーパー変異；または
（ｃ）Ｔ３１５Ｉイマチニブ耐性変異；または
（ｄ）ＫＩＴにおけるＴ６７０Ｉ変異；または
（ｅ）ＰＤＧＦＲにおけるＴ６７４Ｉ変異；または
（ｆ）ＥＧＦＲにおけるＴ７９０Ｍ変異、
である薬剤耐性キナーゼ変異を含む癌の治療または予防用薬剤の製造のための本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態。
癌細胞が：
（ａ）スレオニンゲートキーパー変異；または
（ｂ）薬剤耐性ゲートキーパー変異；または
（ｃ）Ｔ３１５Ｉイマチニブ耐性変異；または
（ｄ）ＫＩＴにおけるＴ６７０Ｉ変異；または
（ｅ）ＰＤＧＦＲにおけるＴ６７４Ｉ変異、
である薬剤耐性キナーゼ変異を含む癌の治療または予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態。
癌細胞が：
（ａ）スレオニンゲートキーパー変異；または
（ｂ）薬剤耐性ゲートキーパー変異；または
（ｃ）イマチニブ耐性変異；または
（ｄ）ニロチニブ耐性変異；または
（ｅ）ダサチニブ耐性変異；または
（ｆ）ＫＩＴにおけるＴ６７０Ｉ変異；または
（ｇ）ＰＤＧＦＲにおけるＴ６７４Ｉ変異；または
（ｈ）ＥＧＦＲにおけるＴ７９０Ｍ変異；または
（ｉ）ａｂｌにおけるＴ３１５Ｉ変異、
である薬剤耐性キナーゼ変異を含む癌の治療または予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態であって、前記癌は胃腸間質性腫瘍（ＧＩＳＴ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、高好酸球症候群および***性皮膚線維肉腫の１つまたは複数（どのような組み合わせでもよい)である。
癌細胞が：
（ｃ）イマチニブ耐性変異；または
（ｄ）ニロチニブ耐性の変異；または
（ｅ）ダサチニブ耐性の変異、
である薬剤耐性キナーゼ変異を含む癌の治療または予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態であって、前記癌はニロチニブ耐性、ダサチニブ耐性またはイマチニブ耐性ＣＭＬである。
ＢＣＲａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦ、ＥＧＦ受容体またはＥｒｂＢ２の変異型である変異分子標的を発現する癌の治療または予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態。
他の抗癌剤と結合または相互作用するが式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物と結合または相互作用をしないタンパク質の領域に変異を有するキナーゼ、例えばｃ−ａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦＲベータおよびＰＤＧＦＲアルファを含むＰＤＧＦＲならびに，ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢｌ）、ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２）、ＥｒｂＢ３およびＥｒｂＢ４などのＥｒｂＢフェミリーのメンバー、ならびにＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＡ１０、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ５、ＥｐｈＢ６などのエフリン受容体ファミリーのメンバー、ｃ−Ｓｒｃ、ならびにＴＹＫ２などのＪＡＫファミリーのキナーゼから選ばれる変異キナーゼ、が媒介する疾病の治療または予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態。
下記から選択される疾病および症状の１つまたは複数（どのような組み合わせでもよい）の予防または治療用薬剤の製造のための請求項１〜１０６のいずれか一項の中で定義された化合物：
眼疾患あるいは症状（加齢黄斑変性症［例えば、湿潤型加齢黄斑変性症］；虚血性増殖性網膜症［例えば、未熟児網膜症（ＲＯＰ）および糖尿病性網膜症］；および血管腫）；骨髄増殖性障害（ＭＰＤ）（真性多血症、本態性血小板増加症および骨髄様化生（ＭＭＭ）を伴う骨髄線維症を含む特発性骨髄線維症など)；若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）；慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）;巨核球性白血病（巨核球性ＡＭＬ（ＡＭＬ Ｍ７）を含む）；フィラデルフィア染色体陰性ＣＭＬ；イマチニブ耐性ＣＭＬ；ニロチニブ耐性ＣＭＬ；ダサチニブ耐性ＣＭＬ；胃腸間質性腫瘍（ＧＩＳＴ）；多形性グリア芽腫、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）などのグリア芽腫；高好酸球症候群；***性皮膚線維肉腫；フィラデルフィア染色体陽性悪性腫瘍（例えば、フィラデルフィア染色体陽性ＣＭＬおよびフィラデルフィア染色体陽性ＡＬＬなどのフィラデルフィア染色体陽性白血病)；骨髄増殖性症候群；多発性骨髄腫、上皮癌、頭頸部癌、ヒトの骨格発生異常（アペール（ＡＰ）症候群、クルーゾン症候群、ジャクソン−ワイス症候群、ベーレ−スティーブンソン脳回状頭皮症候群、パイフェル症候群（ＰＳ）など）、甲状腺癌（甲状腺乳頭癌、家族性甲状腺髄様癌（ＦＭＴＣ）、多発性内分泌腺腫（ＭＥＮ）２Ａ型および２Ｂ型など)；およびヒルシュスプルング病。
下記から選択される疾病および症状の１つまたは複数（どのような組み合わせでもよい）の治療または予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態：
眼疾患あるいは症状（加齢黄斑変性症［例えば、湿潤型加齢黄斑変性症］；虚血性増殖性網膜症［例えば、未熟児網膜症（ＲＯＰ）および糖尿病性網膜症］；および血管腫）；骨髄増殖性障害（ＭＰＤ）（真性多血症、本態性血小板増加症および骨髄様化生（ＭＭＭ）を伴う骨髄線維症を含む特発性骨髄線維症など)；若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）；慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）；巨核球性白血病（巨核球性ＡＭＬ（ＡＭＬ Ｍ７）を含む）；フィラデルフィア染色体陰性ＣＭＬ；イマチニブ耐性ＣＭＬ；胃腸間質性腫瘍（ＧＩＳＴ）；多形性グリア芽腫、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）などのグリア芽腫；高好酸球症候群；***性皮膚線維肉腫；フィラデルフィア染色体陽性悪性腫瘍（例えば、フィラデルフィア染色体陽性ＣＭＬおよびフィラデルフィア染色体陽性ＡＬＬなどのフィラデルフィア染色体陽性白血病)；骨髄増殖性症候群；多発性骨髄腫、上皮癌、頭頸部癌、ヒトの骨格発生異常（アペール（ＡＰ）症候群、クルーゾン症候群、ジャクソン−ワイス症候群、ベーレ−スティーブンソン脳回状頭皮症候群、パイフェル症候群（ＰＳ）など）、甲状腺癌（甲状腺乳頭癌、家族性甲状腺髄様癌（ＦＭＴＣ）、多発性内分泌腺腫（ＭＥＮ）２Ａ型および２Ｂ型など)；およびヒルシュスプルング病。
加齢黄斑変性症（例えば、湿潤型加齢黄斑変性症）；虚血性増殖性網膜症（例えば、未熟児網膜症（ＲＯＰ）および糖尿病性網膜症）；および血管腫などの眼疾患あるいは症状の１つまたは複数（どのような組み合わせでもよい）の治療または予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態。
真性多血症、本態性血小板増加症および骨髄様化生（ＭＭＭ）を伴う骨髄線維症を含む特発性骨髄線維症などの骨髄増殖性障害（ＭＰＤ）；若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）；慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）；巨核球性ＡＭＬ（ＡＭＬ Ｍ７）を含む巨核球性白血病；フィラデルフィア染色体陰性ＣＭＬ；およびイマチニブ耐性ＣＭＬから選ばれる１つまたは複数（どのような組み合わせでもよい）の疾病または症状の治療または予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態。
ＢＣＲ−ａｂｌに起因する悪性腫瘍、特にフィラデルフィア染色体陽性の悪性腫瘍、例えば、フィラデルフィア染色体陽性ＣＭＬおよびフィラデルフィア染色体陽性ＡＬＬなどのフィラデルフィア染色体陽性白血病の治療または予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態。
骨髄増殖性症候群の予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態。
多発性骨髄腫、頭頸部癌、上皮癌、ヒトの骨格発生異常、例えばアペール（ＡＰ）症候群、クルーゾン症候群、ジャクソン−ワイス症候群、ベーレ−スティーブンソン脳回状頭皮症候群およびパイフェル症候群（ＰＳ）、甲状腺癌、例えば甲状腺乳頭癌、家族性甲状腺髄様癌（ＦＭＴＣ）、多発性内分泌腺腫（ＭＥＮ）２Ａ型および２Ｂ型、ヒルシュスプルング病から選ばれる１つまたは複数（どのような組み合わせでもよい）の疾病または症状の治療または予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態。
胃腸間質性腫瘍（ＧＩＳＴ）；多形性グリア芽腫、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）などのグリア芽腫；高好酸球症候群；および***性皮膚線維肉腫から選ばれる病態または症状の治療または予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態。
イマチニブ耐性ＣＭＬ、ニロチニブ耐性ＣＭＬおよびダサチニブ耐性ＣＭＬから選ばれる病態または症状の治療または予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態。
イマチニブ耐性ＣＭＬの治療または予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態。
骨髄様化生（ＭＭＭ）を伴う骨髄線維症の治療または予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態。
ＢＣＲ−ａｂｌ、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＥＧＦＲ、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ(例えば、ＪＡＫ２またはＪＡＫ３)、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ(例えば、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２)、ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)あるいはＳｒｃ(例えば、ｃＳｒｃ)であるキナーゼが媒介する病態または症状の診断および治療方法であって、前記方法は（ｉ）患者が罹患している、または罹患している可能性のある疾病または症状が前記キナーゼに対して活性を有する化合物による治療に感受性があるものかどうかを判定すべく患者をスクリーニングすること、および（ｉｉ）患者の疾病または症状がそのような感受性を有することが示された場合に、その後、患者に本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
スクリーニングされ、ＢＣＲ−ａｂｌ、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＥＧＦＲ、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ(例えば、ＪＡＫ２またはＪＡＫ３)、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ(例えば、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２)、ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)あるいはＳｒｃ(例えば、ｃＳｒｃ)であるキナーゼに対して活性を有する化合物による治療に感受性のある疾病または症状に罹患している、または罹患するリスクがあると判定された患者における病態または症状の治療または予防用薬剤の製造のための本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
スクリーニングされ、ＢＣＲ−ａｂｌ、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＥＧＦＲ、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ(例えば、ＪＡＫ２またはＪＡＫ３)、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ(例えば、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２)、ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)あるいはＳｒｃ(例えば、ｃＳｒｃ)であるキナーゼに対して活性を有する化合物による治療に感受性のある疾病または症状に罹患している、または罹患するリスクがあると判定された患者における病態または症状の治療または予防に用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態。
癌細胞が：
（ａ）スレオニンゲートキーパー変異；または
（ｂ）薬剤耐性ゲートキーパー変異；または
（ｃ）イマチニブ耐性変異；または
（ｄ）ニロチニブ耐性変異；または
（ｅ）ダサチニブ耐性変異；または
（ｆ）ＫＩＴにおけるＴ６７０Ｉ変異；または
（ｇ）ＰＤＧＦＲにおけるＴ６７４Ｉ変異；または
（ｈ）ＥＧＦＲにおけるＴ７９０Ｍ変異；または
（ｉ）ａｂｌにおけるＴ３１５Ｉ変異、
である薬剤耐性キナーゼ変異を含む癌の診断および治療方法であって、前記方法が（ｉ）患者が罹患している、または罹患している可能性のある癌がその癌細胞が前記薬剤耐性キナーゼ変異を含んでいるかどうかを判定すべく患者をスクリーニングすること、および（ｉｉ）その癌細胞が前記薬剤耐性キナーゼ変異を含んでいることが示された場合に、その後、患者に本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
スクリーニングされ、癌細胞が薬剤耐性キナーゼ変異を含む癌に罹患している、または罹患するリスクがあると判定された患者における病態または症状の治療または予防用薬剤の製造のための本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用であって、前記薬剤耐性キナーゼ変異が：
（ａ）スレオニンゲートキーパー変異；または
（ｂ）薬剤耐性ゲートキーパー変異；または
（ｃ）イマチニブ耐性変異；または
（ｄ）ニロチニブ耐性変異；または
（ｅ）ダサチニブ耐性変異；または
（ｆ）ＫＩＴにおけるＴ６７０Ｉ変異；または
（ｇ）ＰＤＧＦＲにおけるＴ６７４Ｉ変異；または
（ｈ）ＥＧＦＲにおけるＴ７９０Ｍ変異；または
（ｉ）ａｂｌにおけるＴ３１５Ｉ変異である。
スクリーニングされ、癌細胞が薬剤耐性キナーゼ変異を含む癌に罹患している、または罹患するリスクがあると判定された患者における癌の治療または予防に使用される本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態であって、前記薬剤耐性キナーゼ変異が：
（ａ）スレオニンゲートキーパー変異；または
（ｂ）薬剤耐性ゲートキーパー変異；または
（ｃ）イマチニブ耐性変異；または
（ｄ）ニロチニブ耐性変異；または
（ｅ）ダサチニブ耐性変異；または
（ｆ）ＫＩＴにおけるＴ６７０Ｉ変異；または
（ｇ）ＰＤＧＦＲにおけるＴ６７４Ｉ変異；または
（ｈ）ＥＧＦＲにおけるＴ７９０Ｍ変異；または
（ｉ）ａｂｌにおけるＴ３１５Ｉ変異である。
ＢＣＲａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦ、ＥＧＦ受容体またはＥｒｂＢ２の変異型である変異分子標的を発現する癌の予防および治療方法であって、前記方法は（ｉ）患者が罹患している、または罹患している可能性のある癌が前記変異分子標的を発現する癌であるかどうかを判定すべく患者をスクリーニングすること、および（ｉｉ）前記癌細胞が前記変異分子標的を発現することが示された場合に、その後、患者に本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
スクリーニングされ、ＢＣＲａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦ、ＥＧＦ受容体またはＥｒｂＢ２の変異型である変異分子標的を発現する癌に罹患している、または罹患するリスクがあると判定された患者における癌の治療または予防用薬剤の製造のための本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
スクリーニングされ、ＢＣＲａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦ、ＥＧＦ受容体またはＥｒｂＢ２の変異型である変異分子標的を発現する癌に罹患している、または罹患するリスクがあると判定された患者における癌の治療または予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態。
本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を用いて、ＢＣＲ−ａｂｌ、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＥＧＦＲ、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ(例えば、ＪＡＫ２またはＪＡＫ３)、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ(例えば、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２)、ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)あるいはＳｒｃ(例えば、ｃＳｒｃ)から選ばれるキナーゼの活性を調整（例えば、阻害）することによって細胞過程（例えば、細胞***）を調整する方法。
ＢＣＲ−ａｂｌ、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＥＧＦＲ、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ(例えば、ＪＡＫ２またはＪＡＫ３)、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ(例えば、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２)、ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)あるいはＳｒｃ(例えば、ｃＳｒｃ)から選ばれるキナーゼの調整剤（例えば、阻害剤）として用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態。
ＢＣＲ−ａｂｌ、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＥＧＦＲ、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ(例えば、ＪＡＫ２またはＪＡＫ３)、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ(例えば、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２)、ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)あるいはＳｒｃ(例えば、ｃＳｒｃ)から選ばれるキナーゼの活性の調整（例えば、阻害）用薬剤の製造のための本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
他の抗癌剤と結合または相互作用するが式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物と結合または相互作用をしないタンパク質の領域に変異を有するキナーゼ、例えばｃ−ａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦＲベータおよびＰＤＧＦＲアルファを含むＰＤＧＦＲならびに，ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢｌ）、ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２）、ＥｒｂＢ３およびＥｒｂＢ４などのＥｒｂＢフェミリーのメンバー、ならびにＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＡ１０、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ５、ＥｐｈＢ６などのエフリン受容体ファミリーのメンバー、ｃ−Ｓｒｃ、ならびにＴＹＫ２などのＪＡＫファミリーのキナーゼから選ばれる変異キナーゼ、が媒介する疾病の診断および治療方法であって、前記方法が（ｉ）患者が罹患している、または罹患している可能性のある疾病または症状が他の抗癌剤と結合または相互作用するが式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物と結合または相互作用をしないタンパク質の領域に変異を有するキナーゼが媒介するものかどうかを判定すべく患者をスクリーニングすること、および（ｉｉ）前記疾病または症状が本明細書で定義されたものであると示された場合に、その後、患者に本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
他の抗癌剤と結合または相互作用するが式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物と結合または相互作用をしないタンパク質の領域に変異を有するキナーゼ、例えばｃ−ａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦＲベータおよびＰＤＧＦＲアルファを含むＰＤＧＦＲならびに，ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢｌ）、ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２）、ＥｒｂＢ３およびＥｒｂＢ４などのＥｒｂＢフェミリーのメンバー、ならびにＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＡ１０、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ５、ＥｐｈＢ６などのエフリン受容体ファミリーのメンバー、ｃ−Ｓｒｃ、ならびにＴＹＫ２などのＪＡＫファミリーのキナーゼから選ばれる変異キナーゼ、が媒介する疾病の治療または予防用薬剤の製造のための本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
他の抗癌剤と結合または相互作用するが式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物と結合または相互作用をしないタンパク質の領域に変異を有するキナーゼ、例えばｃ−ａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦＲベータおよびＰＤＧＦＲアルファを含むＰＤＧＦＲならびに，ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢｌ）、ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２）、ＥｒｂＢ３およびＥｒｂＢ４などのＥｒｂＢフェミリーのメンバー、ならびにＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＡ１０、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ５、ＥｐｈＢ６などのエフリン受容体ファミリーのメンバー、ｃ−Ｓｒｃ、ならびにＴＹＫ２などのＪＡＫファミリーのキナーゼから選ばれる変異キナーゼ、が媒介する疾病の治療または予防で用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態。
ニロチニブ耐性、ダサチニブ耐性またはイマチニブ耐性ＣＭＬの治療または予防に用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
ニロチニブ耐性、ダサチニブ耐性またはイマチニブ耐性ＣＭＬの治療または予防用薬剤の製造のための本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
ニロチニブ耐性、ダサチニブ耐性またはイマチニブ耐性ＣＭＬの予防または治療方法であって、前記方法はそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
本明細書で定義されている疾病の予防または治療用薬剤の製造のための本明細書で定義されている１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素あるいはその塩または結晶形態の使用。
本明細書で定義されている病状または症状の予防方法であって、前記方法は予防を必要とする患者に有効な量の本明細書で定義されている１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素あるいはその塩または結晶形態を投与することを含む。
本明細書で定義されている病状または症状の予防または治療に用いる本明細書で定義されている１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素あるいはその塩または結晶形態。
本明細書で定義されている病態または症状の罹患率の減少または低減用薬剤の製造のための本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態の使用。
本明細書で定義されている病態または症状の罹患率の減少または低減方法であって、前記方法は患者（例えば、それを必要とする患者）に（例えば、治療上有効な量で）本明細書で定義されている式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態を投与することを含む。
本明細書で定義されている病態または症状の罹患率の減少または低減に用いる式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物あるいはそのサブグループ、個々の種、塩または結晶形態。
加えて、本発明はまた、加齢黄斑変性症、特に湿潤型加齢黄斑変性症、および血管腫などの眼疾患ならびにフィラデルフィア染色体陽性ＡＬＬの治療における式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物の使用を提供する。
また、真性多血症、本態性血小板増加症；特発性骨髄線維症；若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）；慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）;巨核球性ＡＭＬ（ＡＭＬ Ｍ７）を含む巨核球性白血病；フィラデルフィア染色体陰性ＣＭＬ；イマチニブ耐性ＣＭＬ；胃腸間質性腫瘍（ＧＩＳＴ）、高好酸球症候群または***性皮膚線維肉腫の治療法を提供し、前記方法ではそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書およびＰＣＴ／ＧＢ２００４／００２８２４（ＷＯ２００５／００２５５２）で定義されている式（Ｉ）の化合物もしくは式（Ｉ´）の化合物を投与する。
また、加齢黄斑変性症、特に湿潤型加齢黄斑変性症、および血管腫、などの眼疾患ならびにフィラデルフィア染色体陽性ＡＬＬの治療法を提供し、前記方法ではそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書およびＰＣＴ／ＧＢ２００４／００２８２４（ＷＯ２００５／００２５５２）で定義されている式（Ｉ）の化合物もしくは式（Ｉ´）の化合物を投与する。
本発明は、加齢黄斑変性症、特に湿潤型加齢黄斑変性症、未熟児網膜症（ＲＯＰ）および糖尿病性網膜症などの虚血性増殖性網膜症ならびに血管腫、などの眼疾患の治療用薬剤の製造のための式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物の使用を提供する。
また、加齢黄斑変性症、特に湿潤型加齢黄斑変性症、未熟児網膜症（ＲＯＰ）および糖尿病性網膜症などの虚血性増殖性網膜症ならびに血管腫、などの眼疾患の治療法を提供し、前記方法ではそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書およびＰＣＴ／ＧＢ２００４／００２８２４（ＷＯ２００５／００２５５２）で定義されている式（Ｉ）の化合物もしくは式（Ｉ´）の化合物を投与する。
本発明は、フィラデルフィア染色体陽性ＡＬＬの治療用薬剤の製造のための式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物の使用を提供する。
また、フィラデルフィア染色体陽性ＡＬＬの治療法を提供し、前記方法ではそのような治療を必要とする患者に有効な量の本明細書およびＰＣＴ／ＧＢ２００４／００２８２４（ＷＯ２００５／００２５５２）で定義されている式（Ｉ）の化合物もしくは式（Ｉ´）の化合物を投与する。
さらなる態様では、本発明は以下のものを提供する:
多発性骨髄腫、上皮癌、頭頸部癌、ならびにアペール（ＡＰ）症候群、クルーゾン症候群、ジャクソン−ワイス症候群、ベーレ−スティーブンソン脳回状頭皮症候群およびパイフェル症候群（ＰＳ）などのヒトの骨格発生異常、ならびに甲状腺乳頭癌、家族性甲状腺髄様癌（ＦＭＴＣ）、多発性内分泌腺腫（ＭＥＮ）２Ａ型および２Ｂ型などの甲状腺癌、ならびにヒルシュスプルング病の治療に用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物ならびにそのサブグループおよび例。
多発性骨髄腫、上皮癌、頭頸部癌、ならびにアペール（ＡＰ）症候群、クルーゾン症候群、ジャクソン−ワイス症候群、ベーレ−スティーブンソン脳回状頭皮症候群およびパイフェル症候群（ＰＳ）などのヒトの骨格発生異常、ならびに甲状腺乳頭癌、家族性甲状腺髄様癌（ＦＭＴＣ）、多発性内分泌腺腫（ＭＥＮ）２Ａ型および２Ｂ型などの甲状腺癌、ならびにヒルシュスプルング病の治療用薬剤の製造のための本明細書で定義されている式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物ならびにそのサブグループおよび例の使用。
多発性骨髄腫、上皮癌、頭頸部癌、ならびにアペール（ＡＰ）症候群、クルーゾン症候群、ジャクソン−ワイス症候群、ベーレ−スティーブンソン脳回状頭皮症候群およびパイフェル症候群（ＰＳ）などのヒトの骨格発生異常、ならびに甲状腺乳頭癌、家族性甲状腺髄様癌（ＦＭＴＣ）、多発性内分泌腺腫（ＭＥＮ）２Ａ型および２Ｂ型などの甲状腺癌、ならびにヒルシュスプルング病の治療方法であり、前記方法はそのような治療を必要とする患者に本明細書で定義されている式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物ならびにそのサブグループおよび例を投与することを含む。
一般的な好ましい選択肢および定義
本明細書では、キナーゼの活性に対して使用される“調節”なる語は、プロテインキナーゼの生物学的活性レベルの変化を明確にすることを目的とする。したがって、調節は、関連するプロテインキナーゼ活性の上昇または減少をもたらす生理的変化を包含する。後者の場合、調節は“阻害”とも表現される。前記調節は、直接あるいは間接的に発生し、どのようなメカニズムおよび、例えば遺伝子発現(例えば、転写、翻訳および/または翻訳後修飾を含む)の段階やキナーゼ活性レベルに直接あるいは間接的に作用する調節要素をコードする遺伝子の発現の段階を含むどのような生理的段階で起こってもよい。したがって、調節はキナーゼの上昇/抑制された発現もしくは過剰なまたは不十分な発現を意味してもよく、それには転写効果による遺伝子増幅(すなわち、多重遺伝子コピー)および/または上昇したもしくは減少した発現や、（（非）活性化を含む）変異によるプロテインキナーゼの過剰な（もしくは低下した）活性および(非）活性化が含まれる。従って、“調節された”、“調節している”および“調節する”なる語は適宜解釈されるべきである。
本明細書では、例えば、本明細書に記載されているようなキナーゼに関して(そして、例えば、様々な生理的な過程、疾病、状態、症状、処置、治療あるいは診療に対して)使用される“媒介される”なる語は、制限的に作用することを意味し、それによりその用語が使用される様々な過程、疾病、状態、症状、治療および診療で、前記キナーゼが生物学的役割を果たすものである。その用語が疾病、状態あるいは症状に対して使用される場合、キナーゼが奏する生物学的役割は直接的あるいは間接的であってもよく、また、その疾病、状態あるいは症状(あるいはその病因または進行)の発現に必要および/または十分な程度である。したがって、キナーゼ活性(特に、異常なキナーゼ活性レベル、例えばキナーゼ過剰発現)は、必ずしも疾病、状態あるいは症状の近因である必要はなく、むしろ、キナーゼが媒介する疾病、状態または症状は、多要因的な病因や複雑な進展を有するものを含み、その中で問題となっているキナーゼは部分的にのみ関係している、と理解される。その用語が治療、予防あるいは診療に対して使用される場合、キナーゼが奏する役割は直接的あるいは間接的であってもよく、また、治療、予防の作用あるいは診療の成果に必要および/または十分な程度である。したがって、キナーゼが媒介する病態または症状は、ある特定の抗癌剤あるいは治療に対する耐性の発生を含む。
本発明の化合物への言及は、式（Ｉ）および/または式（Ｉ´）もしくは式（Ｉ０）の化合物ならびに／あるいはそれらの塩（例えば、乳酸塩もしくはクエン酸塩）を含む。
癌などの病態または症状の予防または治療への言及は、癌の発生率を軽減するもしくは軽減することをその言葉の範囲に含む。
式（Ｉ）の化合物
次の一般的な好ましい選択肢および定義が、特に断りのない限り、式（Ｉ）のＲ１〜Ｒ１０部分の各々、ならびにそれらの種々のサブグループ、部分定義、例および実施態様に当てはまる。本明細書では、Ｒ基の数字の後の上付文字は、そのＲ基がその数字のみにより示されるＲ基のサブグループを表す。従って、例えば、Ｒ１ａ、Ｒ１ｂおよびＲ１ｃは総てＲ１のサブグループであり、同様に、Ｒ９ａおよびＲ９ｂはＲ９のサブグループである。従って、特に断りのない限り、例えばＲ１に関して示された一般的な好ましい選択肢、定義および例はそのサブグループＲ１ａ、Ｒ１ｂ、Ｒ１ｃなどにも当てはまり、他のＲ基も同様である。
本明細書において式（Ｉ）に対する言及はいずれも、特に断りのない限り、式（ＩＩ）〜（ＶＩＩＩ）および式（Ｉ）の範囲内の化合物の他のサブグループについての言及であるとも見なされる。
本明細書においてオーロラキナーゼのアップレギュレーションとは、遺伝子増幅（すなわち、多重遺伝子コピー）をはじめとするオーロラキナーゼの発現の上昇または過剰発現、ならびに転写効果による発現の増加、ならびに変異による活性化をはじめとするオーロラキナーゼの過剰活性および活性化を含むものと定義される。
本明細書において“炭素環式”基および“複素環式”基とは、特に断りのない限り、芳香族環系と非芳香族環系の双方を含む。従って、例えば、“炭素環式基および複素環式基”とは、その範囲内に、芳香族、非芳香族、不飽和、部分飽和および完全飽和炭素環系および複素環系を含む。一般に、このような基は単環式または二環式であってよく、例えば、３〜１２環員、より一般的には５〜１０環員を含み得る。単環式基の例としては、３、４、５、６、７および８環員、より一般的には３〜７、好ましくは５または６環員を含む基がある。二環式基の例としては、８、９、１０、１１および１２環員、より一般的には９または１０環員を含むものがある。
炭素環式基または複素環式基は５〜１２環員、より一般的には５〜１０環員を有するアリールまたはヘテロアリール基であり得る。本明細書において“アリール”とは、芳香族性を有する炭素環式基を意味し、本明細書において“ヘテロアリール”とは、芳香族性を有する複素環式基を表す。“アリール”および“ヘテロアリール”とは１以上の環が非芳香族であるが、少なくとも１つの環が芳香族である、多環式（例えば、二環式）環系を包含する。このような多環式系では、基は芳香環によって結合されてもよいし、または非芳香環によって結合されてもよい。アリール基またはヘテロアリール基は、単環式基または二環式基であってよく、非置換型であっても、１以上の置換基、例えば、本明細書で定義される１以上の基Ｒ１０で置換されていてもよい。
“非芳香族基”とは、芳香性を持たない不飽和環系、部分飽和および完全飽和炭素環式環系および複素環式環系を包含する。“不飽和”および“部分飽和”とは、環構造が１を超える価数の結合を共有する原子を含む環を意味し、すなわち、その環は少なくとも１つの多重結合、例えば、Ｃ＝Ｃ、Ｃ≡ＣまたはＮ＝Ｃ結合を含む。“完全飽和”とは、環原子間に多重結合がない環を意味する。飽和炭素環式基としては、以下で定義するようなシクロアルキル基が挙げられる。部分飽和炭素環式基としては、以下で定義するようなシクロアルケニル基、例えば、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロヘプテニルおよびシクロオクテニルが挙げられる。
ヘテロアリール基の例としては、５〜１２環員、より一般的には５〜１０環員を含む単環式基および二環式基が挙げられる。ヘテロアリール基は、例えば、５員または６員単環式環であるか、または縮合５員環および６員環または２つの縮合６員環から、または２つの縮合５員環から形成された二環式構造であり得る。各環は、典型的には窒素、硫黄および酸素から選ばれる約４個までの異種原子を含んでいてもよい。典型的には、ヘテロアリール環は４個までのヘテロ原子を含んでいてよいが、さらに典型的には３個までのヘテロ原子、より一般的には２個までのヘテロ原子、例えば、１個のヘテロ原子を含む。一つの実施態様によれば、ヘテロアリール環は、少なくとも１個の環窒素原子を含む。ヘテロアリール環の窒素原子は、イミダゾールまたはピリジンの場合のように塩基性であってもよいし、あるいはインドールまたはピロール窒素の場合のように実質的に非塩基性であってもよい。一般に、環のアミノ基置換基を含むヘテロアリール基に存在する塩基性窒素原子数は５個未満である。
５員ヘテロアリール基の例としては、限定されるものではないが、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、フラザン、オキサゾール、オキサジアゾール、オキサトリアゾール、イソキサゾール、チアゾール、イソチアゾール、ピラゾール、トリアゾールおよびテトラゾール基が挙げられる。
６員ヘテロアリール基の例としては、限定されるものではないが、ピリジン、ピラジン、ピリダジン、ピリミジンおよびトリアジンが挙げられる。
二環式ヘテロアリール基としては、例えば、次のものから選ばれる基であり得る。
ａ）１、２または３環ヘテロ原子を含む５員または６員環と縮合したベンゼン環；
ｂ）１、２または３環ヘテロ原子を含む５員または６員環と縮合したピリジン環；
ｃ）１または２環ヘテロ原子を含む５員または６員環と縮合したピリミジン環；
ｄ）１、２または３環ヘテロ原子を含む５員または６員環と縮合したピロール環；
ｅ）１または２環ヘテロ原子を含む５員または６員環と縮合したピラゾール環；
ｆ）１または２環ヘテロ原子を含む５員または６員環と縮合したイミダゾール環；
ｇ）１または２環ヘテロ原子を含む５員または６員環と縮合したオキサゾール環；
ｈ）１または２環ヘテロ原子を含む５員または６員環と縮合したイソキサゾール環；
ｉ）１または２環ヘテロ原子を含む５員または６員環と縮合したチアゾール環；
ｊ）１または２環ヘテロ原子を含む５員または６員環と縮合したイソチアゾール環；
ｋ）１、２または３環ヘテロ原子を含む５員または６員環と縮合したチオフェン環；
ｌ）１、２または３環ヘテロ原子を含む５員または６員環と縮合したフラン環；
ｍ）１または２環ヘテロ原子を含む５員または６員環と縮合したオキサゾール環；
ｎ）１または２環ヘテロ原子を含む５員または６員環と縮合したイソキサゾール環；
ｏ）１、２または３環ヘテロ原子を含む５員または６員環と縮合したシクロヘキシル環；および
ｐ）１、２または３環ヘテロ原子を含む５員または６員環と縮合したシクロペンチル環。
他の５員環と縮合した５員環を含む二環式ヘテロアリール基の特定の例としては、限定されるものではないが、イミダゾチアゾール（例えば、イミダゾ［２，１−ｂ］チアゾール）およびイミダゾイミダゾール（例えば、イミダゾ［１，２−ａ］イミダゾール）が挙げられる。
５員環と縮合した６員環を含む二環式ヘテロアリール基の特定の例としては、限定されるものではないが、ベンズフラン、ベンズチオフェン、ベンゾイミダゾール、ベンズオキサゾール、イソベンズオキサゾール、ベンズイソキサゾール、ベンズチアゾール、ベンズイソチアゾール、イソベンゾフラン、インドール、イソインドール、インドリジン、インドリン、イソインドリン、プリン（例えば、アデニン、グアニン）、インダゾール、ピラゾロピリミジン（例えば、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン）、トリアゾロピリミジン（例えば、［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン）、ベンゾジオキソールおよびピラゾロピリジン（例えば、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン）基が挙げられる。
２つの縮合６員環を含む二環式ヘテロアリール基の特定の例としては、限定されるものではないが、キノリン、イソキノリン、クロマン、チオクロマン、クロメン、イソクロメン、クロマン、イソクロマン、ベンゾジオキサン、キノリジン、ベンズオキサジン、ベンゾジアジン、ピリドピリジン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、フタラジン、ナフチリジンおよびプテリジン基が挙げられる。
芳香環と非芳香環を含む多環式アリール基およびヘテロアリール基の例としては、テトラヒドロナフタレン、テトラヒドロイソキノリン、テトラヒドロキノリン、ジヒドロベンズチエン、ジヒドロベンズフラン、２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキシン、ベンゾ［１，３］ジオキソール、４，５，６，７−テトラヒドロベンゾフラン、インドリンおよびインダン基が挙げられる。
炭素環式アリール基の例としては、フェニル、ナフチル、インデニル、およびテトラヒドロナフチル基が挙げられる。
非芳香族複素環式基の例としては、３〜１２環員を有する、より一般的には５〜１０環員を有する基がある。このような基は例えば単環式または二環式であってよく、通常は窒素、酸素および硫黄から選ばれる１〜５個のヘテロ原子環員（より通常は１、２、３または４個のヘテロ原子環員）を典型的に有する。これらの複素環式基は例えば、環状エーテル部分（例えば、テトラヒドロフランおよびジオキサンの場合）、環状チオエーテル部分（例えば、テトラヒドロチオフェンおよびジチアンの場合）、環状アミン部分（例えば、ピロリジンの場合）、環状アミド部分（例えば、ピロリドンの場合）、環状チオアミド、環状チオエステル、環状尿素（例えば、イミダゾリジン−２−オンの場合）、環状エステル部分（例えば、ブチロラクトンの場合）、環状スルホン（例えば、スルホランおよびスルホレン）、環状スルホキシド、環状スルホンアミドおよびその組合せ（例えば、チオモルホリン）を含み得る。
特定の例としては、モルホリン、ピペリジン（例えば、１−ピペリジニル、２−ピペリジニル、３−ピペリジニルおよび４−ピペリジニル）、ピペリドン、ピロリジン（例えば、１−ピロリジニル、２−ピロリジニルおよび３−ピロリジニル）、ピロリドン、アゼチジン、ピラン（２Ｈ−ピランまたは４Ｈ−ピラン）、ジヒドロチオフェン、ジヒドロピラン、ジヒドロフラン、ジヒドロチアゾール、テトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェン、ジオキサン、テトラヒドロピラン（例えば、４−テトラヒドロピラニル）、イミダゾリン、イミダゾリジノン、オキサゾリン、チアゾリン、２−ピラゾリン、ピラゾリジン、ピペラゾン、ピペラジン、およびＮ−メチルピペラジンなどのＮ−アルキルピペラジンが挙げられる。一般に、好ましい非芳香族複素環式基としては、ピペリジン、ピロリジン、アゼチジン、モルホリン、ピペラジンおよびＮ−アルキルピペラジンなどの飽和基が挙げられる。
非芳香族炭素環式基の例としては、シクロヘキシルおよびシクロペンチルなどのシクロアルカン基、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロヘプテニルおよびシクロオクテニルなどのシクロアルケニル基、ならびにシクロヘキサジエニル、シクロオクタテトラエン、テトラヒドロナフテニルおよびデカリニルが挙げられる。
本明細書において炭素環式基および複素環式基に関して、この炭素環式環または複素環式環は、特に断りのない限り、非置換型であるか、またはハロゲン、ヒドロキシ、トリフルオロメチル、シアノ、ニトロ、カルボキシ、アミノ、モノ−またはジ−Ｃ１−４ヒドロカルビルアミノ、３〜１２環員を有する炭素環式基および複素環式基、Ｒａ−Ｒｂ基（ここで、Ｒａは、結合、Ｏ、ＣＯ、Ｘ１Ｃ（Ｘ２）、Ｃ（Ｘ２）Ｘ１、Ｘ１Ｃ（Ｘ２）Ｘ１、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲｃ、ＳＯ２ＮＲｃまたはＮＲｃＳＯ２であり；Ｒｂは、水素、３〜１２環員を有する炭素環式基および複素環式基、ならびにヒドロキシ、オキソ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、カルボキシ、アミノ、モノ−またはジ−Ｃ１−４ヒドロカルビルアミノ、３〜１２環員を有する炭素環式基および複素環式基から選ばれる１以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−８ヒドロカルビル基から選ばれ、このＣ１−８ヒドロカルビル基の１以上の炭素原子はＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲｃ、Ｘ１Ｃ（Ｘ２）、Ｃ（Ｘ２）Ｘ１またはＸ１Ｃ（Ｘ２）Ｘ１で置き換えられていてもよい）から選ばれる１以上の置換基Ｒ１０で置換されているか、あるいは、２個の隣接する基Ｒ１０は、これらが結合している炭素原子またはヘテロ原子と一緒になって５員ヘテロアリール環または５員もしくは６員非芳香族炭素環式環または複素環式環を形成していてもよく、ここで、前記ヘテロアリール基および複素環式基はＮ、ＯおよびＳから選ばれる３個までのヘテロ原子環員を含み；
Ｒｃは水素およびＣ１−４ヒドロカルビルから選ばれ；
Ｘ１はＯ、ＳまたはＮＲｃであり、Ｘ２は＝Ｏ、＝Ｓまたは＝ＮＲｃである。
置換基Ｒ１０が炭素環式基または複素環式基を含んでなるか、または含む場合、前記炭素環式基または複素環式基は非置換型であってもよいし、またはそれ自体、１以上のさらなる置換基Ｒ１０で置換されていてもよい。式（Ｉ）の化合物の１つのサブグループでは、このようなさらなる置換基Ｒ１０は炭素環式基または複素環式基を含んでよく、これらは典型的にはそれ自体さらに置換されていない。式（Ｉ）の化合物のもう１つのサブグループでは、前記さらなる置換基は炭素環式基または複素環式基を含まないが、Ｒ１０の定義において上記で挙げた基から選ばれる。
これらの置換基Ｒ１０は、２０個以下の非水素原子、例えば、１５個以下の非水素原子、例えば、１２個、または１１個、または１０個、または９個、または８個、または７個、または６個、または５個以下の非水素原子を含むように選ぶことができる。
これらの炭素環式基および複素環式基が隣接する環原子上に１対の置換基を有する場合、その２個の置換基は環式基を形成するように結合していてもよい。例えば、環の隣接する炭素原子上の隣接する１対の置換基は１以上のヘテロ原子および置換されていてもよいアルキレン基を介して結合し、縮合オキサ−、ジオキサ−、アザ−、ジアザ−またはオキサ−アザ−シクロアルキル基を形成していてもよい。このような結合置換基の例としては、
Figure 0005474354
 が挙げられる。
ハロゲン置換基の例としては、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素が挙げられる。フッ素および塩素は特に好ましい。
上記式（Ｉ）で表され、また、以下で使用される化合物の定義において、“ヒドロカルビル”とは、特に断りのない限り、総てが炭素の骨格を有する脂肪族基、脂環式基および芳香族基を含む包括的な用語である。本明細書で定義されるような特定の場合では、炭素骨格を形成している１以上の炭素原子は特定の原子または原子群で置き換えられていてもよい。ヒドロカルビル基の例としては、アルキル、シクロアルキル、シクロアルケニル、炭素環式アリール、アルケニル、アルキニル、シクロアルキルアルキル、シクロアルケニルアルキル、ならびに炭素環式アラルキル、アラルケニルおよびアラルキニル基が挙げられる。このような基は、非置換型であっても、または記載のように、本明細書で定義される１以上の置換基で置換されていてもよい。以下で示す例および好ましい選択肢は、特に断りのない限り、式（Ｉ）の化合物についての種々の置換基の定義において言及される、ヒドロカルビル置換基またはヒドロカルビル含有置換基の各々に当てはまる。
好ましい非芳香族ヒドロカルビル基はアルキルおよびシクロアルキル基などの飽和基である。
一般に、例えば、ヒドロカルビル基は、特に断りのない限り、８個までの炭素原子を有することができる。１〜８個の炭素原子を有するヒドロカルビル基のサブセット内で、特定の例としては、Ｃ１−４ヒドロカルビル基（例えば、Ｃ１−３ヒドロカルビル基またはＣ１−２ヒドロカルビル基）のようなＣ１−６ヒドロカルビル基があり、具体例は、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７およびＣ８ヒドロカルビル基から選ばれるいずれかの個々の値または値の組合せである。
“アルキル”なる語は、直鎖および分岐鎖の双方のアルキル基を含む。アルキル基の例としては、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、２−ペンチル、３−ペンチル、２−メチルブチル、３−メチルブチルおよびｎ−ヘキシルおよびその異性体が挙げられる。１〜８個の炭素原子を有するアルキル基のサブセット内で、特定の例としては、Ｃ１−４アルキル基（例えば、Ｃ１−３アルキル基またはＣ１−２アルキル基）のようなＣ１−６アルキル基が挙げられる。
シクロアルキル基の例としては、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロヘキサンおよびシクロヘプタンから得られるものがある。シクロアルキル基のサブセット内で、シクロアルキル基は、３〜８個までの炭素原子を有し、特定の例としては、Ｃ３−６シクロアルキル基が挙げられる。
アルケニル基の例としては、限定されるものではないが、エテニル（ビニル）、１−プロペニル、２−プロペニル（アリル）、イソプロペニル、ブテニル、ブタ−１，４−ジエニル、ペンテニルおよびヘキセニルが挙げられる。アルケニル基のサブセット内で、アルケニル基は２〜８個の炭素原子を有し、特定の例としては、Ｃ２−４アルケニル基のようなＣ２−６アルケニル基が挙げられる。
シクロアルケニル基の例としては、限定されるものではないが、シクロプロペニル、シクロブテニル、シクロペンテニル、シクロペンタジエニルおよびシクロヘキセニルが挙げられる。シクロアルケニル基のサブセット内で、シクロアルケニル基は、３〜８個の炭素原子を有し、特定の例としては、Ｃ３−６シクロアルケニル基が挙げられる。
アルキニル基の例としては、限定されるものではないが、エチニルおよび２−プロピニル（プロパルギル）基が挙げられる。アルキニル基のサブセット内で、アルキニル基は２〜８個の炭素原子を有し、特定の例としては、Ｃ２−４アルキニル基のようなＣ２−６アルキニル基が挙げられる。
炭素環式アリール基の例としては、置換および非置換フェニルが挙げられる。
シクロアルキルアルキル基、シクロアルケニルアルキル基、炭素環式アラルキル基、アラルケニル基およびアラルキニル基の例としては、フェネチル、ベンジル、スチリル、フェニルエチニル、シクロヘキシルメチル、シクロペンチルメチル、シクロブチルメチル、シクロプロピルメチル基およびシクロペンテニルメチル基が挙げられる。
ヒドロカルビル基は、存在し、記載されている場合には、ヒドロキシ、オキソ、アルコキシ、カルボキシ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、アミノ、モノ−またはジ−Ｃ１−４ヒドロカルビルアミノならびに３〜１２（典型的には３〜１０、より通常は５〜１０）の環員を有する単環もしくは二環炭素環式基および複素環式基から選ばれる１以上の置換基で置換されていてもよい。好ましい置換基としては、フッ素などのハロゲンが挙げられる。従って、例えば、置換ヒドロカルビル基は、ジフルオロメチルまたはトリフルオロメチルなどの部分フッ素化または過フッ素化基であり得る。一つの実施態様では、好ましい置換基としては、３〜７環員、より一般的には３、４、５または６環員を有する単環炭素環式基および複素環式基が挙げられる。
記載のように、ヒドロカルビル基の１以上の炭素原子が、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲｃ、Ｘ１Ｃ（Ｘ２）、Ｃ（Ｘ２）Ｘ１またはＸ１Ｃ（Ｘ２）Ｘ１（式中、Ｘ１およびＸ２は、上記で定義した通りであり、ただし、ヒドロカルビル基の少なくとも１個の炭素原子は残っている）で置き換えられていてもよい。例えば、ヒドロカルビル基の１個、２個、３個または４個の炭素原子は、列挙した原子または基のうちの１つで置き換えられていてもよく、置き換わる原子または基は、同一であっても、異なっていてもよい。一般に、置き換えられる直鎖または骨格の炭素原子の数は、それらに取って代わる基の直鎖または骨格原子の数に相当する。ヒドロカルビル基の１以上の炭素原子が上記で定義した置換原子または基で置き換えられている基の例としては、エーテルおよびチオエーテル（ＯまたはＳで置換されたＣ）、アミド、エステル、チオアミドおよびチオエステル（Ｘ１Ｃ（Ｘ２）またはＣ（Ｘ２）Ｘ１で置換されたＣ−Ｃ）、スルホンおよびスルホキシド（ＳＯまたはＳＯ２で置換されたＣ）、アミン（ＮＲｃで置換されたＣ）、および尿素、カーボネート、およびカルバメート（Ｘ１Ｃ（Ｘ２）Ｘ１で置換されたＣ−Ｃ−Ｃ）が挙げられる。
アミノ基が２個のヒドロカルビル置換基を有する場合、これらは、これらが結合している窒素原子と一緒に、かつ、場合によって窒素、硫黄または酸素などの別のヘテロ原子と一緒に、結合して４〜７環員の環構造を形成してもよい。
本明細書において定義“Ｒａ−Ｒｂ”には、炭素環部分または複素環部分に存在する置換基に関してか、または式（Ｉ）の化合物上の他の位置に存在する他の置換基に関して、とりわけ、Ｒａが、結合、Ｏ、ＣＯ、ＯＣ（Ｏ）、ＳＣ（Ｏ）、ＮＲｃＣ（Ｏ）、ＯＣ（Ｓ）、ＳＣ（Ｓ）、ＮＲｃＣ（Ｓ）、ＯＣ（ＮＲｃ）、ＳＣ（ＮＲｃ）、ＮＲｃＣ（ＮＲｃ）、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）Ｓ、Ｃ（Ｏ）ＮＲｃ、Ｃ（Ｓ）Ｏ、Ｃ（Ｓ）Ｓ、Ｃ（Ｓ）ＮＲｃ、Ｃ（ＮＲｃ）Ｏ、Ｃ（ＮＲｃ）Ｓ、Ｃ（ＮＲｃ）ＮＲｃ、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＳＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＲｃＣ（Ｏ）Ｏ、ＯＣ（Ｓ）Ｏ、ＳＣ（Ｓ）Ｏ、ＮＲｃＣ（Ｓ）Ｏ、ＯＣ（ＮＲｃ）Ｏ、ＳＣ（ＮＲｃ）Ｏ、ＮＲｃＣ（ＮＲｃ）Ｏ、ＯＣ（Ｏ）Ｓ、ＳＣ（Ｏ）Ｓ、ＮＲｃＣ（Ｏ）Ｓ、ＯＣ（Ｓ）Ｓ、ＳＣ（Ｓ）Ｓ、ＮＲｃＣ（Ｓ）Ｓ、ＯＣ（ＮＲｃ）Ｓ、ＳＣ（ＮＲｃ）Ｓ、ＮＲｃＣ（ＮＲｃ）Ｓ、ＯＣ（Ｏ）ＮＲｃ、ＳＣ（Ｏ）ＮＲｃ、ＮＲｃＣ（Ｏ）ＮＲｃ、ＯＣ（Ｓ）ＮＲｃ、ＳＣ（Ｓ）ＮＲｃ、ＮＲｃＣ（Ｓ）ＮＲｃ、ＯＣ（ＮＲｃ）ＮＲｃ、ＳＣ（ＮＲｃ）ＮＲｃ、ＮＲｃＣ（ＮＲｃＮＲｃ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲｃ、ＳＯ２ＮＲｃおよびＮＲｃＳＯ２、ここでＲｃは上記で定義した通りである、から選ばれる化合物が含まれる。
部分Ｒｂは、水素であってもよいし、あるいは３〜１２（典型的には３〜１０、より通常は５〜１０）環員を有する炭素環式基および複素環式基、ならびに上記で定義されたように、置換されていてもよいＣ１−８ヒドロカルビル基から選ばれる基であってもよい。ヒドロカルビル、炭素環式基および複素環式基の例は上記で示した通りである。
ＲａがＯであり、ＲｂがＣ１−８ヒドロカルビル基である場合、ＲａおよびＲｂは一緒になってヒドロカルビルオキシ基を形成する。好ましいヒドロカルビルオキシ基としては、アルコキシ（例えば、Ｃ１−６アルコキシ、より一般的にはエトキシおよびメトキシ、特にメトキシなどのＣ１−４アルコキシ）、シクロアルコキシ（例えば、シクロプロピルオキシ、シクロブチルオキシ、シクロペンチルオキシおよびシクロヘキシルオキシなどのＣ３−６シクロアルコキシ）およびシクロアルキルアルコキシ（例えば、シクロプロピルメトキシなどのＣ３−６シクロアルキル−Ｃ１−２アルコキシ）などの飽和ヒドロカルビルオキシが挙げられる。
これらのヒドロカルビルオキシ基は、本明細書で定義した種々の置換基で置換されていてもよい。例えば、アルコキシ基は、ハロゲン（例えば、ジフルオロメトキシおよびトリフルオロメトキシの場合）、ヒドロキシ（例えば、ヒドロキシエトキシの場合）、Ｃ１−２アルコキシ（例えば、メトキシエトキシの場合）、ヒドロキシ−Ｃ１−２アルキル（ヒドロキシエトキシエトキシの場合）または環式基（例えば、上記で定義したシクロアルキル基または非芳香族複素環式基）で置換されていてもよい。置換基として非芳香族複素環式基を有するアルコキシ基の例は、その複素環式基がモルホリン、ピペリジン、ピロリジン、ピペラジン、Ｃ１−４アルキル−ピペラジン、Ｃ３−７−シクロアルキル−ピペラジン、テトラヒドロピランまたはテトラヒドロフランなどの飽和環状アミンであり、そのアルコキシ基がＣ１−４アルコキシ基、より典型的にはメトキシ、エトキシまたはｎ−プロポキシなどのＣ１−３アルコキシ基であるものがある。
ピロリジン、ピペリジン、モルホリンおよびピペラジンなどの単環式基で置換されたアルコキシ基、ならびにＮ−ベンジル、Ｎ−Ｃ１−４アシルおよびＮ−Ｃ１−４アルコキシカルボニルなどのそのＮ−置換誘導体。特定の例としては、ピロリジノエトキシ、ピペリジノエトキシおよびピペラジノエトキシが挙げられる。
Ｒａが結合であり、ＲｂがＣ１−８ヒドロカルビル基である場合、ヒドロカルビル基Ｒａ−Ｒｂの例は上記で定義した通りである。ヒドロカルビル基はシクロアルキルおよびアルキルなどの飽和基であってもよく、このような基の特定の例としては、メチル、エチルおよびシクロプロピルが挙げられる。ヒドロカルビル（例えば、アルキル）基は上記で定義した種々の基および原子で置換されていてもよい。置換アルキル基の例としては、フッ素および塩素などの１以上のハロゲン原子で置換されたアルキル基（特定の例としては、ブロモエチル、クロロエチルおよびトリフルオロメチルが挙げられる）、またはヒドロキシで置換されたアルキル基（例えば、ヒドロキシメチルおよびヒドロキシエチル）、Ｃ１−８アシルオキシで置換されたアルキル基（例えば、アセトキシメチルおよびベンジルオキシメチル）、アミノおよびモノ−およびジアルキルアミノで置換されたアルキル基（例えば、アミノエチル、メチルアミノエチル、ジメチルアミノメチル、ジメチルアミノエチルおよびｔｅｒｔ−ブチルアミノメチル）、アルコキシで置換されたアルキル基（例えば、メトキシエチルの場合のメトキシなどのＣ１−２アルコキシ）、ならびに上記で定義したシクロアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基および非芳香族複素環式基などの環式基で置換されたアルキル基が挙げられる。
環式基で置換されたアルキル基の特定の例としては、その環式基が、モルホリン、ピペリジン、ピロリジン、ピペラジン、Ｃ１−４−アルキル−ピペラジン、Ｃ３−７−シクロアルキル−ピペラジン、テトラヒドロピランまたはテトラヒドロフランなどの飽和環状アミンであり、そのアルキル基がＣ１−４アルキル基、より典型的にはメチル、エチルまたはｎ−プロピルなどのＣ１−３アルキル基であるものがある。環式基で置換されたアルキル基の具体例としては、ピロリジノメチル、ピロリジノプロピル、モルホリノメチル、モルホリノエチル、モルホリノプロピル、ピペリジニルメチル、ピペラジノメチルおよび上記で定義したそのＮ−置換形態が挙げられる。
アリール基およびヘテロアリール基で置換されたアルキル基の特定の例としては、ベンジルおよびピリジルメチル基が挙げられる。
ＲａがＳＯ２ＮＲｃであるとき、Ｒｂは例えば水素または置換されていてもよいＣ１−８ヒドロカルビル基、または炭素環式基もしくは複素環式基であってよい。ＲａがＳＯ２ＮＲｃである場合のＲａ−Ｒｂの例としては、アミノスルホニル、Ｃ１−４アルキルアミノスルホニルおよびジ−Ｃ１−４アルキルアミノスルホニル基、およびピペリジン、モルホリン、ピロリジン、またはＮ−置換されていてもよいピペラジン（Ｎ−メチルピペラジンなど）といった環状アミノ基から形成されたスルホンアミドが挙げられる。
Ｒａ−Ｒｂ基の例としては、ＲａがＳＯ２である場合、アルキルスルホニル、ヘテロアリールスルホニルおよびアリールスルホニル基、特に単環式アリールおよびヘテロアリールスルホニル基が挙げられる。特定の例としては、メチルスルホニル、フェニルスルホニルおよびトルエンスルホニルが挙げられる。
ＲａがＮＲｃである場合、Ｒｂは例えば、水素または置換されていてもよいＣ１−８ヒドロカルビル基、または炭素環式基または複素環式基であってよい。ＲａがＮＲｃである場合のＲａ−Ｒｂ基の例としては、アミノ、Ｃ１−４アルキルアミノ（例えば、メチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）、ジ−Ｃ１−４アルキルアミノ（例えば、ジメチルアミノおよびジエチルアミノ）ならびにシクロアルキルアミノ（例えば、シクロプロピルアミノ、シクロペンチルアミノおよびシクロヘキシルアミノ）が挙げられる。
特定のおよび好ましい式（Ｉ）の化合物
式（Ｉ）において、ＸはＣＲ５またはＮであってよい。特定の一つの実施態様では、ＸはＮである。もう１つの特定の実施態様では、ＸはＣＨである。好ましくは、ＸはＮである。
Ｒ０は水素であるか、または存在する場合、Ｒｇと一緒になって架橋基−（ＣＨ２）ｐ−、ここでｐは２〜４、より一般的には２〜３、例えば２である、を形成していてもよい。好ましくは、Ｒ０は水素である。
Ｒ０とＲｇ基が架橋基−（ＣＨ２）ｐ−を形成する場合、−（ＣＨ２）ｍ−（Ｂ）ｎ−ＮＲ０−部分は次のように表すことができる。
Figure 0005474354
Ａが結合または−（ＣＨ２）ｍ−（Ｂ）ｎ−基、ここでｎは０である、である場合、ＸはＮまたはＣＲ５、ここでＲ５は水素またはＲ１０基である、である。より好ましくは、ＸはＮである。
Ａが結合または−（ＣＨ２）ｍ−（Ｂ）ｎ−基、ここでｎは１である、である場合、ＸはＮまたはＣＲ５、ここでＲ５は水素またはＲ２基である、であるのが好ましい。より好ましくは、ＸはＮである。
Ｒ５が水素以外であり、より具体的には、ｎが１である場合、Ｒ５は好ましくは、１４個以下の原子を含む小さな置換基、例えば、Ｃ１−４アルキルまたはＣ３−６シクロアルキル基、例えば、メチル、エチル、プロピルおよびブチル、またはシクロプロピルおよびシクロブチルである。
Ａは結合または−（ＣＨ２）ｍ−（Ｂ）ｎ−、ここでＢはＣ＝Ｏ、ＮＲｇ（Ｃ＝Ｏ）またはＯ（Ｃ＝Ｏ）であり、ｍは０、１または２でありｎは０または１である、である。本発明の化合物の１つの好ましい群では、ｍは０または１であり、ｎは１であり、ＢはＣ＝ＯまたはＮＲｇ（Ｃ＝Ｏ）、好ましくは、Ｃ＝Ｏである。より好ましくは、ｍは０であり、ｎは１であり、ＢはＣ＝Ｏである。現在のところ、ＢがＮＲｇ（Ｃ＝Ｏ）である場合、Ｒｇが水素であるのが好ましい。
ピラゾール環の４位に結合されたＲ１−Ａ−ＮＨ部分はアミンＲ１−（ＣＨ２）ｍ−ＮＨ、アミドＲ１−（ＣＨ２）ｍ−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ、尿素Ｒ１−（ＣＨ２）ｍ−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨまたはカルバメートＲ１−（ＣＨ２）ｍ−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨの形態をとり得ると考えられ、各場合において、ｍは０、１または２、好ましくは０または１、最も好ましくは０である。
Ｒ１は水素、３〜１２環員を有する炭素環式基もしくは複素環式基、または置換されていてもよい、上記で定義したＣ１−８ヒドロカルビル基である。炭素環式基および複素環式基、ならびに置換されていてもよいヒドロカルビル基の例は上記で示した通りである。
例えば、Ｒ１は３〜１０環員を有する単環式基または二環式基であってよい。
Ｒ１が単環式基である場合、典型的にはそれは３〜７環員、より通常は３〜６環員、例えば、３、４、５または６環員を有する。
単環式基Ｒ１がアリール基である場合、それは６環員を有し、非置換または置換フェニル環である。
単環式基Ｒ１が非芳香族炭素環式基である場合、それは３〜７環員、より通常は３〜６環員、例えば、３、または４、または５、または６環員を有し得る。この非芳香族炭素環式基は飽和型であっても部分不飽和型であってもよいが、好ましくは飽和型であり、すなわち、Ｒ１はシクロアルキル基である。
単環式基Ｒ１がヘテロアリール基である場合、それは５員環または６環員を有する。５員環および６環員を有するヘテロアリール基の例は上記に示されており、特定の例を下記に示す。
化合物の１つのサブグループでは、ヘテロアリール基は５環員を有する。
化合物のもう１つのサブグループでは、ヘテロアリール基は６環員を有する。
単環式ヘテロアリール基Ｒ１は典型的にはＮ、ＯおよびＳから選ばれる４個までの環ヘテロ原子、より典型的には３個までの環ヘテロ原子、例えば１個、または２個、または３個の環ヘテロ原子を有する。
Ｒ１は非芳香族単環式複素環式基である場合、それは上記または下記に列挙されるいずれか１つの基であり得る。このような基は典型的には４〜７環員、より好ましくは５員環または６環員を有する。非芳香族単環式複素環式基は一般に、Ｎ、ＳおよびＯから選ばれる３個までの環ヘテロ原子、より典型的には１個または２個の環ヘテロ原子を含む。この複素環式基は飽和型であっても部分不飽和型であってもよいが、飽和型が好ましい。非芳香族単環式複素環式基の特定の例としては、上記“一般的な好ましい選択肢および定義”の部分で定義した、そして下記の表および例で示される特定の例および好ましい例がある。
Ｒ１が二環式基である場合、それは典型的には８〜１０環員、例えば、８環員、または９環員、または１０環員を有する。この二環式基はアリール基またはヘテロアリール基であってよく、このような基の例としては、他の５員環と縮合した５員環；６員環と縮合した５員環；他の６員環と縮合した６員環を含んでなる基が挙げられる。このようなカテゴリーの各々の基の例は上記“一般的な好ましい選択肢および定義”の部分で示されている。
二環式アリール基またはヘテロアリール基は２個の芳香族環もしくは不飽和環、または１個の芳香族と１個の非芳香族（例えば、部分飽和）環を含んでいてもよい。
二環式ヘテロアリール基は典型的にはＮ、ＳおよびＯから選ばれる４個までのヘテロ原子環員を含む。従って、例えば、それらは１個、または２個、または３個、または４個のヘテロ原子環員を含み得る。
単環式および二環式複素環式基Ｒ１において、ヘテロ原子環員の組合せの例としては、Ｎ；ＮＮ；ＮＮＮ；ＮＮＮＮ；ＮＯ；ＮＮＯ；ＮＳ、ＮＮＳ、Ｏ、Ｓ、ＯＯ、およびＳＳが挙げられる。
Ｒ１の特定の例としては、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジニル（例えば、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−３−イル）、フラニル（例えば、２−フラニルおよび３−フラニル）、インドリル（例えば、３−インドリル、４−インドリルおよび７−インドリル）、オキサゾリル、チアゾリル（例えば、チアゾール−２−イルおよびチアゾール−５−イル）、イソキサゾリル（例えば、イソキサゾール−３−イルおよびイソキサゾール−４−イル）、ピロリル（例えば、３−ピロリル）、ピリジル（例えば、２−ピリジル）、キノリニル（例えば、キノリン−８−イル）、２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキシン（例えば、２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキシン−５−イル）、ベンゾ［１，３］ジオキソール（例えば、ベンゾ［１，３］ジオキソール−４−イル）、２，３−ジヒドロベンゾフラニル（例えば、２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）、イミダゾリルおよびチオフェニル（例えば、３−チオフェニル）から選ばれる置換されていてもよい、または非置換のヘテロアリール基が挙げられる。
Ｒ１の他の例としては、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン、イソベンゾフラン、［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン、テトラゾリル、テトラヒドロイソキノリニル（例えば、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−７−イル）、ピリミジニル、ピラゾリル、トリアゾリル、４，５，６，７−テトラヒドロ−ベンゾ［ｄ］イソキサゾール、フタラジン、２Ｈ−フタラジン−１−オン、ベンズオキサゾール、シンノリン、キノキサリン、ナフタレン、ベンゾ［ｃ］イソキサゾール、イミダゾ［２，１−ｂ］チアゾール、ピリドン、テトラヒドロキノリニル（例えば、１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−６−イル）、および４，５，６，７−テトラヒドロ−ベンゾフラン基から選ばれる置換または非置換ヘテロアリール基が挙げられる。
好ましいＲ１ヘテロアリール基としては、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジニル、フラニル、２，３−ジヒドロベンゾフラニル、チオフェニル、インドリル、チアゾリル、イソキサゾリルおよび２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキシン基が挙げられる。
好ましいアリール基Ｒ１は置換されていてもよいフェニル基である。
非芳香族基Ｒ１の例としては、単環式シクロアルキルおよびアザシクロアルキル基、例えば、シクロヘキシル、シクロペンチルおよびピペリジニル、特にシクロヘキシルおよび４−ピペリジニル基などが挙げられる。非芳香族基Ｒ１の他の例としては、テトラヒドロピラニルなどの単環式オキサシクロアルキル基、およびモルホリノ（例えば、２−モルホリノおよび４−モルホリノ）などのアザ−オキサシクロアルキル基が挙げられる。
好ましい置換および非置換Ｃ１−８ヒドロカルビル基としては、トリフルオロメチルおよび第三級ブチル基が挙げられる。
好ましいＲ１基の１つのサブセットとしては、フェニル、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジニルおよび２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキシン基が挙げられる。
好ましいＲ１基のもう１つのサブセットとしては、非置換および置換フェニル、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジニル、２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキシン、インドール−４−イル、２，３−ジヒドロベンゾフラニル、ｔｅｒｔ−ブチル、フラニル、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−３−イル、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル、オキサゾリル、イソキサゾリル、ベンゾオキサゾール−２−イル、２Ｈ−テトラゾール−５−イル、ピラジン−２−イル、ピラゾリル、ベンジル、アルファ，アルファ−ジメチルベンジル、アルファ−アミノベンジル、アルファ−メチルアミノベンジル、４，５，６，７−テトラヒドロ−ベンゾ［ｄ］イソキサゾール−３−イル、２Ｈ−フタラジン−１−オン−４−イル、ベンゾキサゾール−７−イル、キナゾリニル、２−ナフチル、シクロプロピル、ベンゾ［ｃ］イソキサゾール−３−イル、４−ピペリジニル、５−チアゾリル、２−ピリジル、３−ピリジル、３−ピロリル、イソキサゾリル、イミダゾ［２，１−ｂ］チアゾリル、４−ピリミジニル、シクロヘキシル、テトラヒドロピラン−４−イル、テトラヒドロキノリニル、４，５，６，７−テトラヒドロ−ベンゾフラニルおよびモルホリニル基が挙げられる。
Ｒ１基は非置換または置換炭素環式基または複素環式基であってよく、その１以上の置換基は上記で定義したＲ１０基から選ぶことができる。一つの実施態様では、Ｒ１上の置換基は、ハロゲン、ヒドロキシ、トリフルオロメチル、シアノ、ニトロ、カルボキシ、５または６環員と、Ｏ、ＮおよびＳから選ばれる２個までのヘテロ原子とを有する複素環式基、Ｒａ−Ｒｂ基からなるＲ10a基から選ぶことができ、ここでＲａは結合、Ｏ、ＣＯ、Ｘ３Ｃ（Ｘ４）、Ｃ（Ｘ４）Ｘ３、Ｘ３Ｃ（Ｘ４）Ｘ３、Ｓ、ＳＯ、またはＳＯ２であり、Ｒｂは水素、５または６環員と、Ｏ、ＮおよびＳから選ばれる２個までのヘテロ原子とを有する複素環式基、ならびにヒドロキシ、オキソ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、カルボキシ、アミノ、モノ−またはジ−Ｃ１−４ヒドロカルビルアミノ、５または６環員と、Ｏ、ＮおよびＳから選ばれる２個までのヘテロ原子とを有する炭素環式基および複素環式基から選ばれる１以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−８ヒドロカルビル基からから選ばれ、このＣ１−８ヒドロカルビル基の１以上の炭素原子はＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、Ｘ３Ｃ（Ｘ４）、Ｃ（Ｘ４）Ｘ３またはＸ３Ｃ（Ｘ４）Ｘ３で置き換えられていてもよく、Ｘ３はＯまたはＳであり、Ｘ４は＝Ｏまたは＝Ｓである。
さらなる実施態様では、Ｒ１上の置換基は、ハロゲン、ヒドロキシ、トリフルオロメチル、シアノ、ニトロ、カルボキシ、Ｒａ−Ｒｂ基からなるＲ１０ｂ基から選ぶことができ、ここでＲａは結合、Ｏ、ＣＯ、Ｘ３Ｃ（Ｘ４）、Ｃ（Ｘ４）Ｘ３、Ｘ３Ｃ（Ｘ４）Ｘ３、Ｓ、ＳＯ、またはＳＯ２であり、Ｒｂは水素、およびヒドロキシ、オキソ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、カルボキシから選ばれる１以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−８ヒドロカルビル基から選ばれ、このＣ１−８ヒドロカルビル基の１以上の炭素原子はＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、Ｘ３Ｃ（Ｘ４）、Ｃ（Ｘ４）Ｘ３またはＸ３Ｃ（Ｘ４）Ｘ３で置き換えられていてもよく、Ｘ３はＯまたはＳであり、Ｘ４は＝Ｏまたは＝Ｓである。
他の実施態様では、Ｒ１上の置換基は、ハロゲン、ヒドロキシ、トリフルオロメチル、Ｒａ−Ｒｂ基から選ぶことができ、ここでＲａは、結合またはＯであり、Ｒｂは、水素、ならびにヒドロキシルおよびハロゲンから選ばれる１以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−４ヒドロカルビル基から選ばれる。
Ｒ１基（例えば、アリールまたはヘテロアリール基Ｒ１）上に存在し得る置換基の１つのサブセットとしては、フッ素、塩素、メトキシ、メチル、オキサゾリル、モルホリノ、トリフルオロメチル、ブロモメチル、クロロエチル、ピロリジノ、ピロリジニルエトキシ、ピロリジニルメチル、ジフルオロメトキシおよびモルホリノメチルが挙げられる。
Ｒ１基上に存在し得る置換基のもう１つのサブセットとしては、フッ素、塩素、メトキシ、エトキシ、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、アミノ、オキサゾリル、モルホリノ、トリフルオロメチル、ブロモメチル、クロロエチル、ピロリジノ、ピロリジニルエトキシ、ピロリジニルメチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、モルホリノ、Ｎ−メチルピペラジノ、ピペラジン、ピペリジノ、ピロリジノ、およびモルホリノメチルが挙げられる。
このＲ１部分は１以上の置換基で置換されていてもよい。従って、例えば、１または２または３または４個の置換基、より典型的には１、２または３個の置換基が存在し得る。一つの実施態様では、Ｒ１が６員環（例えば、フェニル環などの炭素環式環）である場合、単一の置換基が存在してもよく、これはその環の２位、３位および４位のうちいずれか１つに存在し得る。他の実施態様では、２個または３個の置換基が存在してよく、これらはその環の２位、３位、４位または６位に存在し得る。例として、フェニル基Ｒ１は２，６−二置換、２，３−二置換、２，４−二置換、２，５−二置換、２，３，６−三置換または２，４，６−三置換であってもよい。
一つの実施態様では、フェニル基Ｒ１は、フッ素、塩素およびＲａ−Ｒｂ、ここでＲａはＯであり、ＲｂはＣ１−４アルキルである、から選ばれる置換基、（フッ素が特定の置換基である）で、２位と６位に二置換されていてもよい。
化合物の１つのサブグループでは、Ｒ１基はＯ、ＮおよびＳから選択される１または２個の環ヘテロ原子を含む５員ヘテロアリール基である。特定のヘテロアリール基としては、フラン、チオフェン、ピロール、オキサゾール、イソキサゾールおよびチアゾール基が挙げられる。これらのヘテロアリール基は非置換型であっても、上記で定義した１以上の置換基で置換されていてもよい。
５員ヘテロアリール基の１つの好ましい群は、置換されていてもよいイソキサゾールおよびチアゾール基からなる。
化合物のもう１つのサブグループでは、Ｒ１はピラゾロピリジン基、例えば、３−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジニル基などのピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン基である。
Ｒ１基の特定の例としては、ＰＣＴ／ＧＢ２００４／００２８２４（ＷＯ２００５／００２５５２）の３７〜４６ページの表１に示されている基Ａ１〜Ａ１８３（例えば、Ａ１〜Ａ６０）が挙げられる。
本発明の化合物の１つの好ましいサブセットとしては、Ｒ１がＡ１〜Ａ３４から選ばれる基であるサブセットである。
本発明の化合物のもう１つの好ましいサブセットとしては、Ｒ１がＡ１〜Ａ２４、Ａ２６〜Ａ３４、Ａ３８〜Ａ４６、Ａ４８〜Ａ５７、Ａ５９〜Ａ６４、Ａ６６〜Ａ１１４、Ａ１１６〜Ａ１６５、Ａ１６７〜Ａ１６８およびＡ１７０〜Ａ１８３から選ばれるサブセットである。
Ｒ１基の１つの特に好ましいサブセットは、２，６−ジフルオロフェニル、２−クロロ−６−フルオロフェニル、２−フルオロ−６−メトキシフェニル、２，６−ジクロフェニル、２，４，６−トリフルオロフェニル、２−クロロ−６−メチル、２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキシン−５−イルおよびピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−３−イルを含む。このサブセットから選ばれるＲ１基を含む化合物は特に優れたｃｄｋ阻害活性を有する。
Ｒ１基のもう１つの特に好ましいサブセットは、２，６−ジフルオロフェニル、２−メトキシフェニル、２，６−ジフルオロ−４−メトキシフェニル、２−フルオロ−６−メトキシフェニル、２−フルオロ−５−メトキシフェニル、２，６−ジメトキシフェニル、２，４−ジメトキシフェニル、２−クロロ−６−フルオロフェニル、２，６−ジクロロフェニル、２，４，６−トリフルオロフェニル、２−クロロ−６−メチル、２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキシン−５−イルおよびピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−３−イルを含む。
ｃｄｋキナーゼの阻害に関して、現在最も好ましい１つのＲ１基は２，６−ジフルオロフェニルである。
Ｒ２は水素、ハロゲン、メトキシ、またはハロゲン、ヒドロキシルまたはメトキシで置換されていてもよいＣ１−４ヒドロカルビル基である。好ましくは、Ｒ２は水素、塩素またはメチルであり、最も好ましくは、Ｒ２は水素である。
式（Ｉ）の化合物において、Ｒ３およびＲ４は、これらが結合している炭素原子と一緒になって、その３個までがＮ、ＯおよびＳから選ばれるヘテロ原子であり得る５〜７環員を有する縮合複素環式基または炭素環式基を形成している。この縮合炭素環式環または複素環式環は上記で定義した０〜４個のＲ１０基で置換されていてもよい。この縮合複素環式基または炭素環式基は芳香族であっても非芳香族であってもよいが、芳香族であるのが好ましい。
１つの好ましい化合物群では、Ｒ３およびＲ４は、これらが結合している炭素原子と一緒になって５〜７環員を有する縮合炭素環式基を形成している。
縮合５員および６員炭素環式基または複素環式基が特に好ましい。縮合複素環式環の例としては、チアゾロ、イソチアゾロ、オキサゾロ、イソキサゾロ、ピロロ、ピリド、チエノ、フラノ、ピリミド、ピラゾロ、ピラジノ、テトラヒドロアゼピノン、およびイミダゾロ縮合環などの５員環および６員環が挙げられる。この縮合複素環式基は６員環基から選択されるのが好ましく、１つの特に好ましい基はピリド基である。
縮合炭素環式環の例は、ベンゾ、ジヒドロまたはテトラヒドロ−ベンゾおよびシクロペンタ−縮合環などの５員環および６員環を含む。６員環が好ましい。１つの特に好ましい基はベンゾ基である。
５員環とＲ３およびＲ４により形成される環系の特定の例として、以下に示される環系（ｉ）〜（ｉｖ）がある。環系（ｉ）が一般に好ましい。
Figure 0005474354
この縮合炭素環式基または複素環式基は、上記で定義した１以上の基Ｒ１０で置換されていてもよい。
一つの実施態様では、縮合炭素環式基または複素環式基上の置換基は、ハロゲン、ヒドロキシ、トリフルオロメチル、シアノ、ニトロ、カルボキシ、アミノ、３〜７環員（典型的には５または６環員）を有する単環の炭素環式基および複素環式基、Ｒａ−Ｒｂ基から選ぶことができ、ここでＲａは、結合、Ｏ、ＣＯ、Ｘ１Ｃ（Ｘ２）、Ｃ（Ｘ２）Ｘ１、Ｘ１Ｃ（Ｘ２）Ｘ１、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲｃ、ＳＯ２ＮＲｃまたはＮＲｃＳＯ２であり；Ｒｂは、水素、３〜７環員を有する炭素環式基または複素環式基、ならびにヒドロキシ、オキソ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、カルボキシ、アミノ、モノ−またはジ−Ｃ１−４ヒドロカルビルアミノ、３〜７環員を有する炭素環式基または複素環式基から選ばれる１以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−８ヒドロカルビル基から選ばれ、このＣ１−８ヒドロカルビル基の１以上の炭素原子はＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲｃ、Ｘ１Ｃ（Ｘ２）、Ｃ（Ｘ２）Ｘ１またはＸ１Ｃ（Ｘ２）Ｘ１で置き換えられていてもよく；Ｒｃ、Ｘ１およびＸ２は上記で定義した通りであるか、あるいは２つの隣接する基Ｒ１０は、これらが結合している炭素原子またはヘテロ原子と一緒になって５員ヘテロアリール環または５員もしくは６員非芳香族複素環式環を形成してもよく、前記ヘテロアリールおよび複素環式基はＮ、ＯおよびＳから選ばれる３個までのヘテロ原子環員を含む。
Ｒ３およびＲ４により形成される縮合炭素環式基または複素環式基上の好ましいＲ１０基としては、ハロゲン（例えば、フッ素および塩素）、Ｒａ−Ｒｂ基が挙げられ、ここでＲａは結合、Ｏ、ＣＯ、Ｃ（Ｘ２）Ｘ１であり、Ｒｂは水素、３〜７環員（好ましくは、５環員または６環員）を有する複素環式基、ならびにヒドロキシ、カルボキシ、アミノ、モノ−またはジ−Ｃ１−４ヒドロカルビルアミノ、３〜７環員（例えば、５環員または６環員）を有する複素環式基から選ばれる１以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−４ヒドロカルビル基（例えば、アルキルまたはシクロアルキル基などの飽和ヒドロカルビル基）から選択される。
特定の式（Ｉ）の化合物は、例えばＰＣＴ／ＧＢ２００４／００２８２４（ＷＯ２００５／００２５５２）中の式（ＩＩ）〜（ＩＸａ）の化合物およびそのいずれのサブグループ、ＰＣＴ／ＧＢ２００４／００２８２４（ＷＯ２００５／００２５５２）中で列挙された化合物、およびＰＣＴ／ＧＢ２００４／００２８２４（ＷＯ２００５／００２５５２）中の実施例部分で例示された化合物で定義されたものである。
好ましい式（Ｉ）の化合物は、１−（２，６−ジフルオロフェニル）−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素ならびにその塩、Ｎ−オキシド、互変異性体および溶媒和物、特にその塩である。
特定の式（Ｉ）の化合物は、下記に示したようなＷＯ２００５／００２２５２の実施例３〜３０５のものを含む。
ＮＨ部分（例えば、アミドおよび尿素ＮＨ基、ベンゾイミダゾールＮＨ基およびピラゾールＮＨ基）を含む以下に示される多くの化合物で、水素原子は明確に示されていない。しかしながら、そのような場合、水素原子が存在すると理解されてしかるべきである。例えば、多くの化合物で、ピラゾール環の１位の水素原子は明確に示されていない、つまりピラゾール環は次のように記される。
Figure 0005474354
そのような場合、水素原子は１位に存在すると理解されてしかるべきである、すなわち上記構造は次と同じである。
Figure 0005474354
Figure 0005474354
Figure 0005474354
Figure 0005474354
Figure 0005474354
Figure 0005474354
Figure 0005474354
Figure 0005474354
Figure 0005474354
Figure 0005474354
Figure 0005474354
Figure 0005474354
Figure 0005474354
Figure 0005474354
これらの化合物はＷＯ２００５／００２５５２の１０９〜２５７ページに記載されているように製造することができる。
本発明で使用する特定の式（Ｉ）の化合物はＷＯ２００５／００２５５２の式（ＩＩＩ）の化合物である。
Figure 0005474354
 〔式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ６〜Ｒ９は本明細書で定義した通りである。〕
本発明で使用する更なる化合物群はＷＯ２００５／００２５５２の式（Ｖａ）で表すことができる
Figure 0005474354
 〔式中、Ｒ６ａ〜Ｒ９ａ、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１６ならびにそのサブグループは、ＷＯ２００５／００２５５２で定義したとおりである〕。
本発明で使用する他の化合物群はＷＯ２００５／００２５５２の式（ＶＩＩ）および（ＶＩＩａ）で表すことができる。
Figure 0005474354
 〔式中、Ｒ１ｄは当該明細書で定義されたＲ１、Ｒ１ａ、Ｒ１ｂまたはＲ１ｃである。〕
式（Ｉ´）
式（Ｉ´）の化合物の一般的な好ましい選択肢および定義
次の一般的な好ましい選択肢および定義が、特に断りのない限り、式（Ｉ´）におけるＤ１、Ｄ２，Ａ、Ｅ、Ｘ、ＸａおよびＲ１〜Ｒ９部分の各々、ならびにそれらの種々のサブグループ、部分定義、例および実施態様に当てはまる。
本明細書において式（Ｉ´）に対する言及はいずれも、特に断りのない限り、式（ＩＩ´）〜（ＶＩＩＩ´）および式（Ｉ´）の範囲内の化合物の他のサブグループについての言及であるとも見なされる。
本明細書においてオーロラキナーゼのアップレギュレーションとは、遺伝子増幅（すなわち、多重遺伝子コピー）をはじめとするオーロラキナーゼの発現の上昇または過剰発現、ならびに転写効果による発現の増加、ならびに変異による活性化をはじめとするオーロラキナーゼの過剰活性および活性化を含むものと定義される。
“飽和”なる語は、環原子間に多重結合がない環を意味する。
本明細書では“ヒドロカルビル”なる語は、その語が単独で使われてあっても“ヒドロカルビルオキシ”のように複合語の一部分として使用されていても、総てが炭素の骨格を有する脂肪族基、脂環式基および芳香族基を含む包括的な用語である。ヒドロカルビル基の例は、アルキル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキルアルキル、シクロアルケニルアルキルを含む。特定のヒドロカルビル基はアルキルおよびシクロアルキル基などの飽和基である。
ヒドロカルビルオキシ基の例としてはアルコキシ、シクロアルコキシ、シクロアルケノキシ、アルケニロシキ、アルキニロキシ、シクロアルキルアルキルオキシ、シクロアルケニルアルキルオキシを含む。特定のヒドロカルビルオキシ基はアルコキシのような飽和基である。
本明細書で使用される接頭語“Ｃ１−ｎ”（ｎは整数）はその基における炭素原子数を表す。したがって、Ｃ１−４ヒドロカルビル基は１〜４個の炭素原子を有し、一方、Ｃ１−３ヒドロカルビルオキシ基は１〜３個の炭素原子を有している。
Ｃ１−４ヒドロカルビル基の例はＣ１−３ヒドロカルビル基またはＣ１−２ヒドロカルビル基が含まれ、その具体例としてはＣ１、Ｃ２、Ｃ３およびＣ４ヒドロカルビル基から選ばれる個々の値または組み合わせである。
“アルキル”なる語は、直鎖および分岐鎖の双方のアルキル基を含む。アルキル基の例としては、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチルおよびｔｅｒｔ−ブチル基である。
シクロアルキル基の例としては、シクロプロパン、シクロブタンおよびシクロペンタンから得られるものがある。
アルケニル基の例としては、エテニル（ビニル）、１−プロペニル、２−プロペニル（アリル）、イソプロペニル、ブテニル、およびブタ−１，４−ジエニル基である。
シクロアルケニル基の例としては、シクロプロペニルおよびシクロブテニルである。
アルキニル基の例としては、エチニルおよび２−プロピニル（プロパルギル）基である。
シクロアルキルアルキル基およびシクロアルケニルアルキル基の例としては、シクロプロピルメチル基を含む。
アルコキシ基の例は、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｉ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソブトキシおよびｔｅｒｔ−ブトキシである。
アルキル基がモノ-アルキルアミノ基またはジアルキルアミノ基の一部を形成する場合、アルキル基は上述したアルキル基の例のいずれであってもよい。特定のアルキルアミノ基およびジアルキルアミノ基はメチルアミノ、ジメチルアミノ、エチルアミノ、ジエチルアミノ、ｎ−プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、ブチルアミノ、イソブチルアミノおよびｉ−ブチルアミノ。特定のアルキル- およびジアルキルアミノ基はメチルアミノおよびジメチルアミノである。
本明細書で使用される“飽和複素環基”なる語は、隣接する環員の間に多重結合を含んでいない複素環基を意味する。飽和複素環基は、Ｏ、ＳおよびＮから選ばれる１または２個のヘテロ原子環員を含んでいてもよい。
状況によっては、複素環式基は例えば、環状エーテル部分（例えば、テトラヒドロフランおよびジオキサンの場合）、環状チオエーテル部分（例えば、テトラヒドロチオフェンおよびジチアンの場合）、環状アミン部分（例えば、ピロリジンの場合）、環状アミド部分（例えば、ピロリドンの場合）、環状チオアミド、環状チオエステル、環状尿素（例えば、イミダゾリジン−２−オンの場合）、環状エステル部分（例えば、ブチロラクトンの場合）、環状スルホン（例えば、スルホランおよびスルホレン）、環状スルホキシド、環状スルホンアミドおよびその組合せ（例えば、チオモルホリン）を含み得る。
飽和複素環基は、特に明記しない限り、典型的には単環式で通常４、５あるいは６環員を有する。
４環員を有する飽和複素環基の特定の例は、アゼチジン基である。
５環員を有する飽和複素環基の例としては、ピロリジン（例えば、１−ピロリジニル、２−ピロリジニルおよび３−ピロリジニル）、ピロリドン、テトラヒドロフラン、およびテトラヒドロチオフェン基が挙げられる。
６環員を有する飽和複素環基の例としては、モルホリン、チオモルホリン、チオモルホリンＳ−オキシド、チオモルホリンＳ，Ｓ−ジオキシド、ピペリジン（例えば、１−ピペリジニル、２−ピペリジニル、３−ピペリジニルおよび４−ピペリジニル）、ピペリドン、ジオキサン、テトラヒドロピラン（例えば、４−テトラヒドロピラニル）、ピペラゾン、ピペラジン、およびＮ−メチルピペラジンなどのＮ−アルキルピペラジン基が挙げられる。
式（Ｉ´）のサブグループ（Ａ）および（Ｂ）におけるＤ１、Ｄ２、Ａ、Ｅ，Ｒ １ 〜Ｒ ９ およびＸの特定の実施態様および好ましい選択肢
1つの一般的な実施態様では、ＭはＤｌ基である。
他の一般的な実施態様では、ＭはＤ２基である。
ＸはＯ、ＮＨおよびＮＣＨ３から選ばれる。１つの特定の実施態様では、ＸはＯである。
Ａは結合およびＮＲ２から選ばれ、Ｒ２は水素またはメチル基である。
一つの実施態様では、Ａは結合である。
他の実施態様では、ＡはＮＲ２であり、Ｒ２は水素またはメチル基である。
Ｅは、結合、ＣＨ２、ＣＨ（ＣＮ）およびＣ（ＣＨ３）２から選ばれる。
化合物の１つのサブグループでは、Ｅは結合である。
化合物のもう一つのサブグループでは、ＥはＣＨ２である。
化合物の他のサブグループでは、ＥはＣＨ（ＣＮ）である。
化合物のもう一つのサブグループでは、ＥはＣ（ＣＨ３）２である。
ＭがＤｌである場合、Ｒ１は基（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、（ｖ）、（ｖｉ）、（ｖｉｉ）、（ｖｉｉｉ）、（ｉｘ）、（ｘ）、（ｘｉ）、（ｘｉｉ）、（ｘｉｉｉ）、（ｘｉｖ）および（ｘｖ）から選ぶことができる。
基（ｉ）〜（ｘｖ）のそれぞれの基は、本発明の個々の実施態様を表わす。
実施態様（ｉ）では、Ｒ１は、ヒドロキシ、フッ素、アミノ、メチルアミノ、メチルまたはエチルで置換されていてもよい３〜５環員のシクロアルキル基である。
具体的なシクロアルキル基は、置換されていてもよいシクロプロピル基およびシクロブチル基であり、より典型的には置換されていてもよいシクロプロピル基である。好ましい実施態様では、Ｒ１は非置換シクロプロピル基である。
実施態様（ｉｉ）では、Ｒ１は、Ｏ、Ｎ、ＳおよびＳＯ２から選ばれる１または２個のヘテロ原子環員を含んでいる４〜６環員の飽和複素環基であり、前記複素環基はＣ１−４アルキル、アミノまたはヒドロキシ基で置換されていてもよい。しかし、非置換４−モルホリニル、非置換テトラヒドロピラン−４−イル、非置換２−ピロリジニル、ならびに非置換および１−置換ピペリジン−４−イルは除く。
飽和複素環基の例は上記“一般的な好ましい選択肢および定義”の部分に記載した通りである。
Ｏ、ＮおよびＳから選ばれた１個のヘテロ原子環員を有する五員環(非置換２−ピロリジニル基を除く)；および
Ｏ、ＮおよびＳから選ばれた２個のヘテロ原子環員を有する六員環(非置換４−モルホリニルを除く)。
飽和複素環基は置換されていても置換されていなくてもよい。一つの実施態様では、飽和複素環基は置換されていない。他の実施態様では、飽和複素環基は、１または２個のＣ１−４アルキル基、例えば、１または２個のメチル基で置換されている。
１つの特定の複素環基としては、置換されていてもよいテトラヒドロフラン基（例えば、テトラヒドロフラン−２−イルおよびテトラヒドロフラン−３−イル）であり、より好ましくは非置換テトラヒドロフラン基である。
実施態様（ｉｉｉ）では、Ｒ１は下記式で表される、２，５−置換フェニル基である：
Figure 0005474354
 〔式中、（ａ）ＸがＮＨまたはＮ−ＣＨ３である場合、Ｒ３は塩素とシアノ基から選ばれ；
（ｂ）ＸがＯの場合、Ｒ３はＣＮである〕。
実施態様（ｉｉｉ）の化合物の１つのサブグループでは、ＸはＮ−ＣＨ３であり、Ｒ３は塩素とシアノから選ばれる。
実施態様（ｉｉｉ）の化合物の他のサブグループでは、ＸはＯであり、Ｒ３はＣＮである。
実施態様（ｉｖ）では、Ｒ１は、ＣＲ６Ｒ７Ｒ８であり、ここでＲ６およびＲ７はそれぞれ水素およびメチルから選ばれ、Ｒ８は水素、メチル、Ｃ１−４アルキルスルホニルメチル、ヒドロキシメチルおよびシアノ基から選ばれる。
実施態様（ｉｖ）で、Ｒ１の特定の例はとしてはメチル、シアノメチル、ＨＯＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２−、および２−メチルスルホニルエチル基が挙げられる。
実施態様（ｉｖ）では、Ｒ１のさらに特定の例はとしてはメチルおよびイソプロピル基が挙げられる。
実施態様（ｖ）では、Ｒ１は、メチル、エチル、メトキシおよびエトキシ基から選ばれる１または２個の置換基により置換されていてもよいピリダジン−４−イル基である。ピリダジニル基はピリダジン−３−イルまたはピリダジン−４−イルであり、ピリダジン−４−イルが典型的である。特定の置換基はメトキシ基であり、例えば、ピリダジニル基は２個のメトキシ置換基を有してもよい。
実施態様（ｖｉ）では、Ｒ１は、置換基がメチル、エチル、アミノ、フッ素、塩素、アミノおよびメチルアミノから選ばれる、置換イミダゾチアゾール基である。特定の置換基はメチルである。
実施態様（ｖｉｉ）では、Ｒ１は、置換されていてもよい１，３−ジヒドロ−イソインドール−２−イルあるいは置換されていてもよい２，３−ジヒドロ−インドール−１−イル基であり、各々の場合の置換基はハロゲン、シアノ、アミノ、Ｃ１−４モノ−またはジアルキルアミノ、ＣＯＮＨ２またはＣＯＮＨ−Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルキルおよびＣ１−４アルコキシで、前記Ｃ１−４アルキルおよびＣ１−４アルコキシ基は、ヒドロキシ、メトキシまたはアミノで置換されていてもよい。
特定の置換基は、メチル、エチル、フッ素、塩素（好ましくはジヒドロインドールまたはジヒドロイソインドールのアリル環上にのみ）、ＣＯＮＨ２、アミノ、メチルアミノ、ジメチルアミノ、およびメトキシが挙げられる。
実施態様（ｖｉｉ）の化合物の１つのサブグループでは、ジヒドロイソインドールまたはジヒドロインドールは各々非置換である。
実施態様（ｖｉｉｉ）では、Ｒ１は、ヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、アミノ、Ｃ１−４モノ−およびジアルキルアミノ、ＣＯＮＨ２またはＣＯＮＨ−Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルキルならびにＣ１−４アルコキシから選ばれる１または２個の置換基により置換されていてもよい３−ピリジルである（前記Ｃ１−４アルキルならびにＣ１−４アルコキシ基は、ヒドロキシ、メトキシまたはアミノで置換されていてもよいが、２−オキソ−１，２−ジヒドロ−ピリジン−３−カルボン酸［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ− （ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−アミドおよび２，６−ジメトキシ−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−ニコチンアミドを除く）。
一つの実施態様では、Ｒ１は、ヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、アミノ、Ｃ１−４モノ−およびジアルキルアミノ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨ−Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルキルおよびＣ１−４アルコキシから選ばれる１あるいは２個の置換基で置換されていてもよい３−ピリジルであって、前記Ｃ１−４アルキル基およびＣ１−４アルコキシ基は、ヒドロキシ、メトキシまたはアミノで置換されていてもよく、Ｒ１が３−ピリジルの場合、ＸはＯであり、Ａは結合であり、Ｅは結合であり、ピリジルは、ハロゲン、シアノ、アミノ、Ｃ１−４モノ−およびジアルキルアミノ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨ−Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルキルおよびＣ１−４アルコキシから選ばれた1つあるいは2つの置換基を有し、前記Ｃ１−４アルキル基およびＣ１−４アルコキシ基は、ヒドロキシ、メトキシまたはアミノで置換されていてもよい。
特定の置換基は、メチル、エチル、フッ素、塩素、ＣＯＮＨ２、アミノ、メチルアミノ、ジメチルアミノおよびメトキシから選ばれる。さらに特定の置換基は、メチル、エチル、フッ素、塩素、ＣＯＮＨ２、アミノ、メチルアミノおよびジメチルアミノから選ばれる。
化合物の１つのサブグループでは、３−ピリジル基は非置換である。
実施態様（ｉｘ）では、Ｒ１は、ハロゲン、シアノ、アミノ、Ｃ１−４モノ−およびジアルキルアミノ、ＣＯＮＨ２またはＣＯＮＨ−Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルキルならびにＣ１−４アルコキシから選ばれる１または２個の置換基により置換されていてもよいチオモルホリンあるいはそのＳ−オキシドまたはＳ，Ｓ−ジオキシドであり、前記Ｃ１−４アルキルならびにＣ１−４アルコキシ基は、ヒドロキシ、メトキシまたはアミノで置換されていてもよい。
化合物の1つのサブグループでは、前記チオモルホリンあるいはそのＳ−オキシドまたはＳ，Ｓ−ジオキシドは非置換である。
実施態様（ｘ）では、Ｅ−ＡはＮＲ２でありＲ１は２−フルオロフェニル、３−フルオロフェニル、４−フルオロフェニル、２，４−ジフルオロフェニル、３，４−ジフルオロフェニル、２，５−ジフルオロフェニル、３，５−ジフルオロフェニル、２，４，６−トリフルオロフェニル、２−メトキシフェニル、５−クロロ−２−メトキシフェニル、シクロヘキシル、非置換４−テトラヒドロピラニル、およびｔｅｒｔ−ブチルである。
実施態様（ｘｉ）では、Ｅ−ＡはＮＲ２でありＲ１はＮＲ１０Ｒ１１で表される基で、Ｒ１０およびＲ１１はそれぞれＣ１−４アルキルあるいはＲ１０およびＲ１１は結合してＮＲ１０Ｒ１１がＯ、Ｎ、ＳおよびＳＯ２から選ばれる第２のヘテロ原子環員を含んでいてもよい４〜６個の環員を有する飽和複素環基を形成し、前記複素環基がＣ１−４アルキル、アミノまたはヒドロキシで置換されていてもよい。
この実施態様において、化合物の１つのサブグループは、Ｒ１０およびＲ１１がそれぞれＣ１−４アルキル、特にメチル、である化合物群である。
化合物の他のサブグループは、Ｒ１０およびＲ１１は結合してＮＲ１０Ｒ１１がＯ、Ｎ、ＳおよびＳＯ２から選ばれる第２のヘテロ原子環員を含んでいてもよい４〜６個の環員を有する飽和複素環基を形成し、前記複素環基がＣ１−４アルキル、アミノまたはヒドロキシで置換されていてもよい、化合物群である。前記飽和複素環基は、上記“一般的な好ましい選択肢および定義”の部分で記載された窒素含有飽和複素環基いずれかであり得るが、特定の飽和複素環基にはピロリジニル、モルホリニル、ピペラジニルおよびＮ−Ｃ１−４アルキル−ピペラジニル基が挙げられる。そのような基は典型的には非置換もしくは1または２個のメチル基により置換されており、１つの特定の実施態様では、非置換である。
実施態様（ｘｉｉ）では、Ｅ−ＡはＮＲ２でありＲ１はヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、アミノ、Ｃ１−４モノ−およびジアルキルアミノ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨ−Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルキルならびにＣ１−４アルコキシから選ばれる１または２個の置換基により置換されていてもよいピリドンであって、前記Ｃ１−４アルキルならびにＣ１−４アルコキシ基は、ヒドロキシ、メトキシまたはアミノで置換されていてもよい。
前記ピリドン基は、例えばメチルのようなアルキル基でＮ−置換されていてもよく、そうでなければ非置換である。
実施態様（ｘｉｉｉ）では、Ｅ−ＡはＣ（ＣＨ３）２ＮＲ２またはＣＨ２−ＮＲ２でありＲ１は非置換２−フリルおよび２，６−ジフルオロフェニルから選ばれる。
実施態様（ｘｉｖ）では、Ｅ−ＡはＣ（ＣＨ３）２ＮＲ２でありＲ１は非置換フェニルである。
実施態様（ｘｖ）では、ＥはＣＨ２でありＲ１は非置換テトラヒドロピラン−４−イルである。
ＭがＤ２である場合、Ｒ１はグループ（ｘｖｉ）、（ｘｖｉｉ）、（ｘｖｉｉｉ）および（ｘｉｘ）から選ぶことができる。
グループ（ｘｖｉ）〜（ｘｉｘ）の個々のグループは、本発明の別個の実施態様を表わす。
実施態様（ｘｖｉ）では、Ｒ１は下記式で表される２−置換３−フリル基である。
Figure 0005474354
 〔式中、Ｒ４およびＲ５同一または異なって水素およびＣ１−４アルキルから選ばれる、あるいはＲ４およびＲ５は結合しておりＮＲ４Ｒ５がＯ、ＮＨ、ＮＭｅ、ＳまたはＳＯ２から選ばれる第２のヘテロ原子を有してもよい５または６員の飽和複素環基を形成し、前記飽和５または６員複素環基はヒドロキシ、フッ素、アミノ、メチルアミノ、メチルまたはエチルにより置換されていてもよい。〕
一つの実施態様では、Ｒ１は下記式で表される２−置換３−フリル基である。
Figure 0005474354
 〔式中、Ｒ４およびＲ５同一または異なって水素およびＣ１−４アルキルから選ばれる、あるいはＲ４およびＲ５は結合しておりＮＲ４Ｒ５がＯ、ＮＨ、ＮＭｅ、ＳまたはＳＯ２から選ばれる第２のヘテロ原子を有してもよい５または６員の飽和複素環基を形成し、前記飽和５または６員複素環基はヒドロキシ、フッ素、アミノ、メチルアミノ、メチルまたはエチルにより置換されていてもよいが、Ａが結合でＥが結合である場合、Ｒ４およびＲ５は結合しておらずＮＲ４Ｒ５は非置換ピペリジンを形成する。〕
特定の飽和複素環基は“一般的な好ましい選択肢および定義”の部分で上記に記載した通りであり、特定の飽和複素環基にはピロリジニル、モルホリニル、ピペラジニルおよびＮ−Ｃ１−４アルキル−ピペラジニル基が挙げられる。そのような基は典型的には非置換あるいは１または２個のメチル基で置換されており、１つの特定の実施態様では、非置換である。
Ｒ４およびＲ５が水素およびＣ１−４アルキルから選ばれる化合物の特定の例は、メチルアミノおよびジメチルアミノ基が挙げられ、より典型的にはジメチルアミノ基である。
実施態様（ｘｖｉｉ）では、Ｒ１は下記式で表される５−置換２−フリル基である。
Figure 0005474354
 〔式中、Ｒ４およびＲ５同一または異なって水素およびＣ１−４アルキルから選ばれる、あるいはＲ４およびＲ５は結合しておりＮＲ４Ｒ５がＯ、ＮＨ、ＮＭｅ、ＳまたはＳＯ２から選ばれる第２のヘテロ原子を有してもよい５または６員の飽和複素環基を形成し、前記飽和５または６員複素環基はヒドロキシ、フッ素、アミノ、メチルアミノ、メチルまたはエチルにより置換されていてもよい、ただし、前記化合物は５−ピペリジン−１−イルメチル−フラン−２−カルボン酸［３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−アミドではない。〕
特定の飽和複素環基は“一般的な好ましい選択肢および定義”の部分で上記に記載した通りであり、特定の飽和複素環基にはピロリジニル、モルホリニル、ピペラジニルおよびＮ−Ｃ１−４アルキル−ピペラジニル基が挙げられる。そのような基は典型的には非置換あるいは１または２個のメチル基で置換されており、１つの特定の実施態様では、非置換である。
実施態様（ｘｖｉｉｉ）では、Ｒ１は下記式で表される基である。
Figure 0005474354
 〔式中、Ｒ９は水素、メチル、エチルまたはイソプロピルであり；Ｇは、ＣＨ、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２またはＮＨであり、前記基はＣ１−４ヒドロカルビル、ヒドロキシ、Ｃ１−４ヒドロカルビルオキシ、フッ素、アミノ、モノ−またはジ−Ｃ１−４アルキルアミノから選ばれる１、２または３個の置換基により置換されていてもよく、前記Ｃ１−４ヒドロカルビルおよびＣ１−４ヒドロカルビルオキシ基はそれぞれ、ヒドロキシ、フッ素、アミノ、モノ−またはジ−Ｃ１−４アルキルアミノで置換されていてもよい。〕
実施態様（ｘｉｘ）における化合物の１つのサブグループでは、ＧはＯとＣＨから選ばれる。
実施態様（ｘｖｉｉｉ）では、Ｒ１は典型的には非置換であるか、１または２個のメチル基により置換されており、より典型的には非置換である。
実施態様（ｘｉｘ）では、Ｒ１は下記式で表される３，５−二置換フェニル基である。
Figure 0005474354
 〔式中、ＸａはＸと同様にＯ、ＮＨおよびＮＣＨ３から選ばれる〕
好ましくは、ＸａはＮ−ＣＨ３である。
Ｒ１−Ａ−部分の特定の例は表Ｘに示されており、星印はＲ１−Ｅ−Ａ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−基におけるカルボニル基Ｃ＝Ｏへの結合地点を表す。
Figure 0005474354
Figure 0005474354
Figure 0005474354
表Ｘにおいて、好ましいＲ１−Ｅ−Ａ−基としては、Ａ１、Ａ４、Ａ１０、Ａ１１、Ａ１３、Ａ２０、Ａ２２、Ａ２３、Ａ２４、Ａ２９、Ａ３０、Ａ３１、Ａ３２、Ａ３８、Ａ４２、Ａ４３、Ａ４４、Ａ４６、Ａ４７、Ａ４９、Ａ５４およびＡ５６が挙げられる。
他の実施態様では、Ｒ１−Ｅ−ＡはＡ５７、Ａ５８またはＡ５９である。
Ｒ１−Ｅ−Ａ−の好ましいサブセットとしては、Ａ１、Ａ４、Ａ２０、Ａ２４、Ａ３０、Ａ４４、Ａ４６およびＡ５４が挙げられる。このサブセットでは、１つの特定のＲ１−Ａ−基はＡ２４である。
本発明の新規な治療上の使用のための化合物の1つのサブグループは、式（ＩＩ´）で表わされる：
Figure 0005474354
 〔式中、Ｒ１、Ｅ、ＡおよびＸは本明細書で定義した通りである〕。
式（ＩＩ´）の範囲内で、化合物の一つサブセットはＸがＯであるサブセットである。
式（ＩＩ´）の化合物の1つのサブグループは、式（ＩＩＩ´）により表わすことができる：
Figure 0005474354
式（ＩＩＩ´）の範囲内で、化合物の１つのサブセットはＥが結合であるサブセットである。
式（ＩＩＩ´）の範囲内の化合物の他のサブセットはＥがＣＨ２またはＣ（ＣＨ３）２であるサブセットである。
式（ＩＩＩ´）の範囲内の１つの特に好ましい実施態様では、Ｅは結合であり、Ｒ２はＨ、そしてＲ１は本明細書で定義されるようなシクロアルキル基（ｉ）である。一つの実施態様では、シクロアルキル基はシクロプロピルまたはシクロブチルになり得る。より好ましくは、Ｒ１はシクロプロピル基である。
誤解を避けるため記述すると、Ｒ１基の一般なおよび特定の好ましい選択肢、実施態様および例のそれぞれは、Ｒ２および／またはＲ３および／またはＲ４および／またはＲ５および／またはＲ６および／またはＲ７および／またはＲ８および／またはＲ９および／またはＲ１０および／またはＲ１１および／またはＤ１および／またはＤ２および／またはＡおよび／またはＥおよび／またはＸおよび／またはＸａの一般的なおよび特定の好ましい選択肢、実施態様および例ならびに本明細書で定義されるようなそれらのサブグループと組み合わされてもよいと理解するるべきであって、そのような組み合わせはすべて本明細書に包含される。
式（Ｉ）の化合物を構成する様々な官能基および置換基は、典型的には式（Ｉ）の化合物の分子量が１０００を超えないように選択される。より通常は、化合物の分子量は７５０未満、例えば７００未満、６５０未満、６００未満、または５５０未満である。より好ましくは、分子量は５２５未満、例えば、５００以下である。
式（Ｉ´）のサブグループ（Ｃ）の化合物
本発明の新規な治療上の使用のための式（Ｉ）の化合物の1つのサブグループ(すなわち式（Ｉ）のサブグループ（Ｃ））で、ＭはＤ１基であり；ＸはＯであり；
ＡはＮＲ２であり、ここでＲ２は水素；Ｅは結合であり；Ｒ１は２，６−ジフルオロフェニルである）では、前記化合物は酸の特定のグループから形成された酸付加塩である。
従って、一つの実施態様では、本発明は、本発明の新規な治療に使用する、下記の群から選ばれる酸から形成される１−（２，６−ジフルオロフェニル）−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の酸付加塩を提供する：酢酸、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸（例えば、Ｌ−アスコルビン酸）、アスパラギン酸（例えば、Ｌ−アスパラギン酸）、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、ショウノウ酸(例えば、（＋）ショウノウ酸）、カプリン酸、カプリル酸、炭酸、クエン酸、シクラミン酸、ドデカン酸、ドデシル硫酸、エタン−１，２−二スルホン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチジン酸、グルコヘプトン酸、Ｄ−グルコン酸、グルクロン酸（例えば、Ｄ−グルクロン酸）、グルタミン酸（例えば、Ｌ−グルタミン酸）、アルファ−オキソグルタル酸、グリコール酸、馬尿酸、塩酸、イセチオン酸、イソ酪酸、乳酸（例えば（+）−Ｌ−乳酸および（±）−ＤＬ乳酸（＋））、ラクトビオン酸、ラウリルスルホン酸、マレイン酸、リンゴ酸、（−）−Ｌ−リンゴ酸、マロン酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、ナフタレンスルホン酸（例えば、ナフタレン−２−スルホン酸）、ナフタレン−１，５−二スルホン酸、ニコチン酸、オレイン酸、オロチン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、リン酸、プロピオン酸、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸(例えば、（＋）−Ｌ−酒石酸）、チオシアン酸、トルエンスルホン酸(例えば、ｐ−トルエンスルホン酸）、吉草酸およびキナホイック酸。
一つの実施態様では、前記酸付加塩は下記の群から選ばれる酸から形成される：アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸（例えば、Ｌ−アスコルビン酸）、アスパラギン酸（例えば、Ｌ−アスパラギン酸）、安息香酸、ショウノウ酸(例えば、（＋）ショウノウ酸）、カプリン酸、カプリル酸、炭酸、シクラミン酸、ドデカン酸、ドデシル硫酸、エタン−１，２−二スルホン酸、ガラクタル酸、ゲンチジン酸、グルコヘプトン酸、Ｄ−グルコン酸、グルタミン酸（例えば、Ｌ−グルタミン酸）、アルファ−オキソグルタル酸、グリコール酸、馬尿酸、イソ酪酸、ラウリルスルホン酸、ムチン酸、ナフタレン−１，５−二スルホン酸、ニコチン酸、オレイン酸、オロチン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、セバシン酸、ステアリン酸、酒石酸(例えば、（＋）−Ｌ−酒石酸）、チオシアン酸およびキナホイック酸。
一つの実施態様では、前記酸付加塩は下記の群から選ばれる酸から形成される：酢酸、アジピン酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、クエン酸、ＤＬ−乳酸、フマル酸、グルコン酸、グルクロン酸、馬尿酸、塩酸、グルタミン酸、ＤＬ−リンゴ酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸（メシル酸塩）、エタンスルホン酸（エシル酸塩）、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、および酒石酸。
更なる実施態様では、前記酸付加塩は下記の群から選ばれる酸から形成される：アジピン酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、グルコン酸、馬尿酸、グルタミン酸、セバシン酸、ステアリン酸および酒石酸。
他の特定の実施態様では、前記化合物は塩酸と形成される酸付加塩である。
本発明の新規な治療上の使用のための好ましい塩は所定の液体担体(例えば水)での溶解度が前記液体担体の２５ｍｇ／ｍｌより大きく、より典型的には５０ｍｇ／ｍｌより大きく、好ましくは１００ｍｇ／ｍｌより大きい塩である。そのような塩は、液体の形、例えば注射または点滴、での投与に特に有利である。
溶解度が２５ｍｇ／ｍｌより大きい本発明の塩としては、Ｄ−グルクロン酸塩、メシル酸塩、エシル酸塩およびＤＬ−乳酸塩が挙げられる。それら最後の３つの塩の溶解度が１００ｍｇ／ｍｌを越える。
従って、１つの特定の実施態様では、本発明の新規な治療上の使用のための１−（２，６−ジフルオロフェニル）−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素のメシル酸塩が提供される。
他の特定の実施態様では、本発明の新規な治療上の使用のための１−（２，６−ジフルオロフェニル）−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素のエシル酸（エタンスルホン酸）塩が提供される。
更なるの特定の実施態様では、本発明の新規な治療上の使用のための１−（２，６−ジフルオロフェニル）−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素のＤＬ乳酸塩が提供される。一つの実施態様では、前記乳酸塩はＬ−乳酸塩である。
本発明の式（Ｉ）のサブグループ（Ｃ）の化合物（すなわち酸付加塩）が由来する遊離塩基または親化合物は式（ＩＡ）で表される。
Figure 0005474354
本発明の特定の化合物は下記の実施例において示された通りである。
本発明の新規な治療上の使用のための１つの好ましい化合物は、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素ならびに塩(例えば、乳酸塩、クエン酸塩あるいはその混合物)、溶媒和物および互変異性体である。
一つの実施態様では、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の塩は、酢酸塩、メシル酸、エタンスルホン酸塩、ＤＬ−乳酸塩、アジピン酸塩、Ｄ−グルクロン酸塩、Ｄ−グルコン酸塩あるいは塩酸塩であってもよい。
本発明の他の態様
本発明の他の態様では、下記のものが提供される:
真性多血症、本態性血小板増加症または特発性骨髄線維症の治療に用いる、本明細書およびＰＣＴ／ＧＢ２００４／００２８２４（ＷＯ２００５／００２５５２）で定義されるような式（Ｉ）または（ＩＩ´）（式中Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、ＡおよびＸは、ＰＣＴ／ＧＢ２００４／００２８２４（ＷＯ２００５／００２５５２）で定義された通りである）の化合物ならびにそのサブグループ、実施態様および例ならびにその塩(例えば、酢酸塩、メシル酸塩、エタンスルホン酸塩、ＤＬ−乳酸塩、アジピン酸塩、Ｄ−グルクロン酸塩、Ｄ−グルコン酸塩または塩酸塩)。
若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）または慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）の治療に用いる、本明細書およびＰＣＴ／ＧＢ２００４／００２８２４（ＷＯ２００５／００２５５２）で定義されるような式（Ｉ）または（Ｉ´）（式中Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、ＡおよびＸは、ＰＣＴ／ＧＢ２００４／００２８２４（ＷＯ２００５／００２５５２）で定義された通りである）の化合物ならびにそのサブグループ、実施態様および例ならびにその塩(例えば、酢酸塩、メシル酸塩、エタンスルホン酸塩、ＤＬ−乳酸塩、アジピン酸塩、Ｄ−グルクロン酸塩、Ｄ−グルコン酸塩または塩酸塩)。
巨核球性ＡＭＬ（ＡＭＬ Ｍ７）あるいはフィラデルフィア染色体陰性またはイマチニブ耐性ＣＭＬを含む巨核球性白血病の治療に用いる、本明細書およびＰＣＴ／ＧＢ２００４／００２８２４（ＷＯ２００５／００２５５２）で定義されるような式（Ｉ）または（Ｉ´）（式中Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、ＡおよびＸは、ＰＣＴ／ＧＢ２００４／００２８２４（ＷＯ２００５／００２５５２）で定義された通りである）の化合物ならびにそのサブグループ、実施態様および例ならびにその塩(例えば、酢酸塩、メシル酸塩、エタンスルホン酸塩、ＤＬ−乳酸塩、アジピン酸塩、Ｄ−グルクロン酸塩、Ｄ−グルコン酸塩または塩酸塩)。
胃腸間質性腫瘍（ＧＩＳＴ）、高好酸球症候群または***性皮膚線維肉腫の治療に用いる、本明細書およびＰＣＴ／ＧＢ２００４／００２８２４（ＷＯ２００５／００２５５２）で定義されるような式（Ｉ）または（Ｉ´）（式中Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、ＡおよびＸは、ＰＣＴ／ＧＢ２００４／００２８２４（ＷＯ２００５／００２５５２）で定義された通りである）の化合物ならびにそのサブグループ、実施態様および例ならびにその塩(例えば、酢酸塩、メシル酸塩、エタンスルホン酸塩、ＤＬ−乳酸塩、アジピン酸塩、Ｄ−グルクロン酸塩、Ｄ−グルコン酸塩または塩酸塩)。
式（Ｉ ０ ）の化合物ならびにその塩および結晶形態
上記の式（Ｉ）および（Ｉ´）の両方の範囲に含まれる特に好ましい化合物は、化合物１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素ならびにその塩、互変異性体および結晶形態である。
本発明はとりわけ、本明細書に定義された新規な使用のための、化合物１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩およびクエン酸塩ならびにその結晶形態を提供する。
本発明はまた、本発明の使用のための、前記化合物、その乳酸塩および結晶形態を製造するための新規なプロセスの生成物ならびにそのプロセスで用いる新規な中間体を提供する。
本発明はさらに、前記化合物およびその塩の治療上の使用ならびに１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の類似体の治療上の使用を提供する。
さらに特定には、本発明は本明細書に記載される新規な使用のための、乳酸塩、クエン酸塩およびその混合物から選ばれる１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の塩を提供する。
前記塩が由来する１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の遊離塩基 は式（Ｉ０）で表される。
Figure 0005474354
式（Ｉ０）の化合物は本明細書ではその化学名１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素として言及されるか、あるいは、便宜上、化合物（Ｉ０）または式（Ｉ０）の化合物として言及される。これらの同義語はそれぞれ、上記式（Ｉ０）で表される化合物を指し、化学名１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素を有する。
化合物１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素遊離塩基およびその乳酸塩またはクエン酸塩、混合物に対する言及はそれらの範囲内にすべての溶媒和物、互変異性体および同位体ならびに文脈が許す場合は、Ｎ−オキシド、他のイオン型およびプロドラッグを含む。したがって、式（Ｉ）で表される代わりの互変異性体１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素への言及は化合物（Ｉ）に言及すると理解すべきである。
式（Ｉ ０ ）の化合物の乳酸塩、クエン酸、混合物および結晶
便宜上、Ｌ−乳酸およびクエン酸から形成される塩は、本明細書では、それぞれＬ−乳酸塩およびクエン酸塩と呼ぶ。
１つの特定の実施態様では、塩はＬ−乳酸塩またはＤ−乳酸塩であり、好ましくはＬ−乳酸塩である。
他の実施態様では、塩はクエン酸から形成される塩である。
より具体的には、塩はＬ−乳酸塩およびクエン酸塩の混合物である。
固体の状態では、本発明の乳酸塩またはクエン酸塩は（特にＬ−乳酸塩）は結晶またはアモルファスあるいはその混合物であってもよい。
一つの実施態様では、乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）またはクエン酸塩はアモルファスである。
アモルファス固体では、結晶形態で通常存在する３次元構造は存在せず、アモルファス形態での分子のお互いに関連する位置は実質的にランダムである。例えばハンコック（Hancock）ら、J. Pharm. Sci (1997), 86, 1参照。
他の実施態様では、乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）またはクエン酸塩は実質的に結晶性である、すなわち、これら塩は５０％〜１００％結晶性、より具体的には、これら塩は少なくとも５０％結晶性、または少なくとも６０％結晶性、または少なくとも７０％結晶性、または少なくとも８０％結晶性、または少なくとも９０％結晶性、または少なくとも９５％結晶性、または少なくとも９８％結晶性、または少なくとも９９％結晶性、または少なくとも９９．５％結晶性、または少なくとも９９．９％結晶性、例えば１００％結晶性であってもよい。
さらなるの実施態様では、乳酸塩またはクエン酸塩は、５０％〜１００％結晶性の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）またはクエン酸塩から成る群から選ばれる、例えば少なくとも５０％結晶性、少なくとも６０％結晶性、少なくとも７０％結晶性、少なくとも８０％結晶性、少なくとも９０％結晶性、少なくとも９５％結晶性、少なくとも９８％結晶性、少なくとも９９％結晶性、少なくとも９９．５％結晶性、少なくとも９９．９％結晶性、例えば１００％結晶性である。
より好ましくは乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）またはクエン酸塩は、９５％〜１００％結晶性のものであってもよい（あるいは９５％〜１００％結晶性のものから成る群から選ばれてもよい)、例えば少なくとも９８％結晶性、または少なくとも９９％結晶性、または少なくとも９９．５％結晶性、または少なくとも９９．６％結晶性か、または少なくとも９９．７％結晶性、または少なくとも９９．８％結晶性、または少なくとも９９．９％結晶性、例えば１００％結晶性である。
実質的に結晶性の塩の一例はＬ−乳酸で形成された結晶塩である。
実質的に結晶性の塩の他の例はクエン酸で形成された結晶塩である。
本発明の塩は、固体の状態で、溶媒和されていても（例えば、水和）、あるいは溶媒和されていなくてもよい（例えば、無水）。
一つの実施態様では、塩は溶媒和されていない(例えば、無水)。
溶媒和されていない塩のさらなる例は、本明細書に定義されるような乳酸（特に、Ｌ−乳酸）で生成された結晶塩である。
一つの実施態様では、式（Ｉ）の塩の結晶形態は、Ｌ−乳酸塩およびクエン酸塩（特に、Ｌ−乳酸塩）から選ばれる。
本明細書で使用される“無水”なる語は塩（例えば、塩の結晶）のまわり、またはその中に、いくらかの水分が存在する可能性を排除しない。例えば、塩（例えば、塩結晶）の表面に存在するいくらかの水分、あるいは塩（例えば、結晶）の塊の中に少量の水分、が存在してもよい。典型的には、無水形態は、化合物の分子１個当たり水分子を０．４個未満の含んでおり、より好ましくは化合物の分子１個当たり水分子を０．１個未満、例えば、水の分子を０個、含んでいる。
他の実施態様では、乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）またはクエン酸塩は溶媒和されている。塩が水和されている場合、塩は例えば、結晶水の分子を３個まで、より通常は水の分子を２個まで、例えば水の分子１個のまたは水の分子２個、を含むことができる。存在する水の分子の数が１未満すなわち非整数である非化学量論的水和物が形成されてもよい。例えば、１未満の水の分子が存在する場合、例えば、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、あるいは０．９個の水の分子が化合物の分子１個当たり存在していてもよい。
他の溶媒和物としてはエタノラートやイソプロパノラートのようなアルコラートが挙げられる。
一つの実施態様では、乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）は、例えば水および／またはエタノールで溶媒和される。
本発明の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）またはクエン酸塩は、Pharmaceutical Salts; Properties, Selection, and Use, ハインリヒスタール（P. Heinrich Stahl）（編者）, カミールワーマスCamille G. Wermuth (編者), ISBN: 3-90639-026-8,ハードカバー, 388ページ, August 2002に記載されている方法ような従来の化学的方法により親化合物１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素から合成することができる。
一般的に、そのような塩は水、有機溶媒、またはそれら2つの混合物の中で適当な酸と親化合物１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素を反応させることにより製造することができる。一般的に、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノールまたはアセトニトリルのような非水性媒体が使用される。
他の態様では、本発明は１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）またはクエン酸塩を製造する方法を提供し、前記方法は溶媒（典型的には有機溶媒）または混合溶媒中で１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素遊離塩基の溶液を形成すること、および酸で前記溶液を処理して塩の沈澱物を形成することを含む。
酸は、遊離塩基が溶解している溶媒と混和性がある溶媒に溶液として加えられてもよい。遊離塩基がまずに溶解される溶媒はその塩が不溶性のものであってもよい。また、遊離塩基がまず溶解される溶液は塩が少なくとも部分的に溶解されるものであってもよく、塩がそれほど可溶でない異なる溶媒が、塩が溶液から沈殿するように、続いて加えられる。
塩を形成する別の方法では、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素は揮発性酸および必要に応じて共溶媒を含む溶媒に溶解し、それにより揮発性酸との塩の溶液を形成し、得られた溶液を濃縮あるいは蒸発させて塩を単離する。
他の態様では、本発明は本明細書で定義するような１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）またはクエン酸塩を製造する方法を提供し、前記方法は式（Ｉ）で表される化合物：
Figure 0005474354
 を有機溶媒中で本明細書に定義されるような有機または無機酸で処理し、このようにして形成された塩を必要に応じて単離することを含む。
乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）またはクエン酸塩は典型的には有機溶媒から形成されると共に沈殿し、したがって溶液から固体の分離、例えば、濾過、により単離することができる。
本発明の１つの塩形態は、当業者に公知の方法により遊離塩基および必要に応じて他の塩形態に変換することができる。例えば、遊離塩基はアミン固定相（例えば、ストラタ（Ｓｔｒａｔａ）−ＮＨ２カラム）を有するカラムに塩溶液を通すことにより形成することができる。あるいは、塩の水溶液を重炭酸ナトリウムで処理し、塩を分解し、遊離塩基を沈殿させることができる。その後、遊離塩基は、上述あるいは本明細書の他の箇所に記載された方法の１つにより酸と組み合わせてもよい。
乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）またはクエン酸塩は対応する遊離塩基と比較して多くの長所を有する。例えば、塩は、遊離塩基と比較して下記の１またはそれ以上の利点を享受する：
溶解度が大きい、特に水溶液中で向上した溶解度があり、したがって静脈内投与（例えば、点滴）により適している；
溶液のｐＨの制御を可能にし、したがって、静脈内投与により適している；
より安定性が高い、例えば熱安定性（例えば、向上したシェルフライフ）;
製造に関して利点がある；
より優れた物理化学的特徴がある;
向上した抗癌活性があり得る；そして
向上した治療係数を持ち得る。
本発明の結晶性乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）は下記の理由で特に有利である：
吸湿性がある
無水性であり水和物を形成しない
単一の多形相である。
結晶性である
保管安定性がある
明確なた融点を有し、DSC実験で形態変化をきたさない
水に対して優れた溶解性を有し、緩衝系でより優れた溶解性を付与する。
本明細書で使用される“安定”または“安定性”なる語は化学的安定性と固体状態（物理的）安定性を含む。“化学的安定性”なる語は、化合物が単離された形で保存できることを意味するか、あるいは化合物が、例えば、本明細書に記載される薬学的に許容される担体、希釈剤あるいはアジュバントとともに混合物として提供される製剤の形態で、通常の貯蔵条件下で、ほとんどもしくは全く化学的に劣化または分解しないことを意味する。“固体状態安定性”は、化合物が単離された形で保存できることを意味するか、あるいは化合物が、例えば、本明細書に記載される薬学的に許容される担体、希釈剤あるいはアジュバントとともに混合物として提供される固体製剤の形態で、通常の貯蔵条件下で、ほとんどもしくは全く固体変換(例えば、水和、失水、溶媒和物化、脱溶媒和物化、結晶化、再結晶化または固体相転移)しないことを意味する。
液体(例えば、水性)医薬組成物の製造に用いる好ましい塩は、任意の液体担体(例えば、水または緩衝系)での溶解度が１ｍｇ／ｍｌより大きい、典型的には液体担体（例えば、水）に対して５ｍｇ／ｍｌより大きい、より典型的には１５ｍｇ／ｍｌより大きい、さらにより典型的には２０ｍｇ／ｍｌより大きい、そして好ましくは２５ｍｇ／ｍｌより大きい本発明の塩（すなわち、本明細書に定義されるような乳酸塩、クエン酸塩、またはその混合物）である。
他の態様では、本明細書で定義されるような新規な使用のための、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）、クエン酸塩またはこれら塩の混合物を、例えば液体キャリア（例えば、水または緩衝系)に対して１ｍｇ／ｍｌより大きい、典型的には５ｍｇ／ｍｌより大きい、より典型的には１５ｍｇ／ｍｌより大きい、より典型的には２０ｍｇ／ｍｌより大きい、および好ましくは２５ｍｇ／ｍｌより大きい濃度で、含有する水溶液を含む医薬組成物が提供される。
好ましい実施態様では、前記医薬組成物は、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩を、液体キャリア（例えば、水）に対して１ｍｇ／ｍｌより大きい、典型的には５ｍｇ／ｍｌより大きい、より典型的には１５ｍｇ／ｍｌより大きい、典型的には２０ｍｇ／ｍｌより大きい、および好ましくは２５ｍｇ／ｍｌより大きい濃度で、含有する水溶液を含む。
他の態様では、本明細書で定義されるような新規な使用のための、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）、クエン酸塩またはこれら塩の混合物の水溶液を提供し、前記水溶液のｐＨは２〜６、例えば２〜５、そしてさらに詳細には４〜６、例えば４〜５である。
上記に定義された水溶液では、塩は本明細書に記載されたいずれの塩でもよいが、１つの好ましい実施態様ではＬ−乳酸塩である。１つの好ましい実施態様では、塩はＬ−乳酸塩およびクエン酸塩の混合物である。
本発明はまた、本明細書で定義されるような新規な使用のための、１以上の対イオンおよび必要に応じてさらに１以上の対イオンとの、プロトン化された形態の１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の水溶液を提供する。一つの実施態様では、対イオンのうちの１つは乳酸塩とクエン酸塩から選ばれる。他の実施態様では、対イオンのうちの１つはクエン酸塩などの本明細書に記載されているような製剤用緩衝剤に由来する。さらなる実施態様では、塩化物イオン(例えば、食塩水からの)のような１以上のさらなる対イオンが存在していてもよい。
したがって、本発明は、本明細書で定義されるような新規な使用のための、Ｌ−乳酸塩およびクエン酸塩から選ばれる１以上の対イオンおよび必要に応じてさらに１以上の塩化物イオンのような対イオンとの、プロトン化された形態の１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の水溶液を提供する。
１つを超える対イオンがある場合は、プロトン化された形態の１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の水溶液は対イオンの混合物、例えばＬ−乳酸塩およびクエン酸塩対イオンの混合物、ならびに必要に応じて１以上の対イオン例えば塩化物イオンを含んでいてもよい。
したがって、本発明は、本明細書で定義されるような新規な使用のための、Ｌ−乳酸塩およびクエン酸塩から選ばれる１以上の対イオンおよび必要に応じてさらに１以上の塩化物イオンのような対イオン、ならびにそれらの混合物との、プロトン化された形態の１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の水溶液を提供する。
本発明はまた、本明細書で定義されるような新規な使用のための、１以上の対イオンとのプロトン化された形態の１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素と必要に応じて等浸透圧の製剤を達成するための希釈のための１つ以上のＩＶ賦形剤との水溶液を提供する。一つの実施態様では、対イオンの１つはＬ−乳酸塩およびクエン酸塩から選ばれる。他の実施態様では、対イオンのうちの１つはクエン酸塩などの本明細書に記載されているような製剤用緩衝剤に由来する。さらなる実施態様では、１つ以上のヘキソース糖、例えばデキストロース（Ｄ−グルコース）のような米国薬局方および英国医学会薬学会共同編集処方集で詳述されるようなＩＶ賦形剤が存在していてもよい。したがって、本発明は、Ｌ−乳酸塩およびクエン酸塩から選ばれる１以上の対イオンとのプロトン化された形態の１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素と必要に応じて１つ以上のデキストロースなどのＩＶ賦形剤との水溶液を提供する。１つを超える対イオンがある場合は、プロトン化された形態の１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の水溶液は対イオンの混合物、例えばＬ−乳酸塩とクエン酸塩の対イオンの混合物、ならびに必要に応じてさらに１以上のデキストロースなどのＩＶ賦形剤を含んでいてもよい。したがって、本発明は、Ｌ−乳酸塩およびクエン酸塩から選ばれる１以上の対イオンとのプロトン化された形態の１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素と必要に応じてさらに１以上のデキストロースなどのＩＶ賦形剤との水溶液を提供する。
水溶液はとりわけクエン酸塩イオン(例えば、クエン酸塩緩衝剤)の溶液中の乳酸塩を溶解することにより、あるいは乳酸塩イオンの溶液中のクエン酸塩を溶解することにより形成することができる。乳酸塩イオンおよびクエン酸イオンは溶液中に乳酸塩：クエン酸塩比で１０：１以下、例えば１０：１〜１：１０に、より好ましくは８：１未満、または７：１未満、または６：１未満、または５：１未満、または４：１未満、または３：１未満、または２：１未満、または１：１未満、より具体的には１：１〜１：１０までで存在していてもよい。一つの実施態様では、乳酸塩イオンおよびクエン酸イオンは溶液中に乳酸塩：クエン酸塩比で１：１〜１：１０、例えば１：１〜１：８、または１：１〜１：７、または１：１〜１：６、または１：１〜１：５、例えば、ほぼ１：４．４で存在する。
塩の水溶液は緩衝化されていても緩衝化されていなくてもよく、一つの実施態様では緩衝化される。
他の態様では、本明細書で定義されるような新規な使用のための、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩またはクエン酸塩またはこれら塩の混合物を含有する凍結乾燥された製剤を含む医薬組成物が提供され、前記製剤のｐＨは２〜６、例えば２〜５、より具体的には４〜６、例えば４〜５である。
上記に定義された凍結乾燥された製剤の１つの好ましい実施態様では、塩はＬ−乳酸塩である。
本発明はまた、本明細書で定義されるような新規な使用のための、１以上の対イオンとの、プロトン化された形態の１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の凍結乾燥された製剤を提供する。他の実施態様では、対イオンのうちの１つはクエン酸塩などの本明細書に記載されているような製剤用緩衝剤に由来する。
したがって、本発明は、本明細書で定義されるような本発明の新規な使用のための、Ｌ−乳酸塩およびクエン酸塩から選ばれる１以上の対イオンとの、プロトン化された形態の１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の凍結乾燥された製剤を提供する。１つを超える対イオンがある場合は、プロトン化された形態の１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の水溶液は対イオンの混合物、例えばＬ−乳酸塩およびクエン酸塩対イオンの混合物、を含んでいてもよい。
したがって、本発明は、本明細書で定義されるような本発明の新規な使用のための、Ｌ−乳酸塩、クエン酸塩およびその混合物から選ばれる１以上の対イオンとの、プロトン化された形態の１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の凍結乾燥された製剤を提供する。
上記に定義された凍結乾燥された製剤の１つの好ましい実施態様では、塩はＬ−乳酸塩であり、緩衝塩はクエン酸塩である。
一つの実施態様では、乳酸塩イオンおよびクエン酸イオンは凍結乾燥された製剤に乳酸塩：クエン酸塩比で１０：１以下、例えば１０：１〜１：１０に、より好ましくは８：１未満、または７：１未満、または６：１未満、または５：１未満、または４：１未満、または３：１未満、または２：１未満、または１：１未満、より具体的には１：１〜１：１０、例えば１：１〜１：８、または１：１〜１：７、または１：１〜１：６、または１：１〜１：５、例えば、ほぼ１：４．４で存在する。
塩の凍結乾燥された製剤は緩衝化されていても緩衝化されていなくてもよく、一つの実施態様では緩衝化される。
乳酸で形成された塩という状況では、好ましい緩衝剤は、クエン酸から形成され、ＮａＯＨまたはＨＣｌで適正なｐＨへ調整された緩衝剤で、例えば溶液のｐＨはほぼ４．５である。このｐＨでそしてクエン酸塩緩衝剤中では、遊離塩基はそれぞれにおいて約８０ｍｇ／ｍｌの溶解度を有する。
その後、凍結乾燥された製剤は、食塩水またはデキストロース(好ましくはデキストロース)のようなＩＶ賦形剤を含有している無菌水溶液へ再構成される。
本発明の塩は、典型的には薬学上許容される塩であり、薬学上許容される塩の例は、ベルジュ（Ｂｅｒｇｅ）ら、1977,“薬学的許容塩（Pharmaceutically Acceptable Salts）”薬学ジャーナル（Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．）、第６６巻、p．１−１９で検討されている。しかしながら、医薬上許容されない塩も中間体として製造してもよく、これをその後薬学上許容される塩に変換することができる。このような医薬上許容されない塩の形態もまた本発明の一部をなす。
化合物１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素はまた、Ｎ−オキシドを形成してもよい。Ｎ−オキシドは、過酸化水素または過酸（例えば、ペルオキシカルボン酸）のような酸化剤で対応のアミンを処理することにより形成できる（例えば、機能化学特論（Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、ジェリーマーチ（Ｊｅｒｒｙ Ｍａｒｃｈ）、第4版、ワイリーインターサイエンス（Ｗｉｌｅｙ Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ）、ページ、参照）。より具体的には、Ｎ−オキシドは、デディー（Ｌ．Ｗ．Ｄｅａｄｙ）（Ｓｙｎ．Ｃｏｍｍ．、１９７７年、７、５０９−５１４）の方法により製造することができ、この方法では、アミン化合物を、例えば、ジクロロメタンのような不活性溶媒中、ｍ−クロロペルオキシ安息香酸（ＭＣＰＢＡ）と反応させる。
本発明の乳酸塩およびクエン酸塩が由来する、化合物１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素は多数の異なる幾何異性型および互変異性型で存在することができ、本明細書中での前記化合物への言及はこのような形態の総てを含むものである。
より具体的には、本発明の１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩およびクエン酸塩において、ベンゾイミダゾール基は以下の２つの互変異性型ＡおよびＢのいずれをとってもよい。便宜上、一般式（Ｉ）はＡ型を示すが、この式には４つすべての互変異性体型を含むものとみなされる。
Figure 0005474354
さらに、１−シクロプロピル−３−［３−（６−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の文脈では、すなわち別の互変異性体への言及は、明らかに、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素と同一の化合物の乳酸またはクエン酸塩への言及である。
ピラゾール環もまた互変異性を示すことがあり、下記の２つの互変異性型ＣおよびＤで存在し得る。
Figure 0005474354
さらに、尿素のシスとトランス配座も可能である。
Figure 0005474354
１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩またはクエン酸塩（例えば、Ｌ−乳酸塩）ならびに本発明の塩への言及はまた、1個以上の同位体置換を含んだ変異型を含み、特定の元素への言及はその範囲内に元素のすべての同位体を含む。例えば、水素への言及はその範囲内に１Ｈ、２Ｈ（Ｄ）および３Ｈ（Ｔ）を含む。同様に、炭素と酸素への言及はそれらの範囲内にそれぞれ１２Ｃ、１３Ｃおよび１４Ｃならびに１６Ｏおよび１８Ｏを含む。
同位体は放射性であってもよいし非放射性であってもよい。本発明の一つの実施態様では、前記化合物は放射性同位体を含んでいない。そのような化合物は治療上の使用に好ましい。他の実施態様では、しかしながら、前記化合物は１個以上の放射性同位体を含んでもよい。そのような放射性同位体を含んでいる化合物は、診断の場合に役立つ。
また本発明の１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素および塩への言及には、任意のそれらの多形相、溶媒和物（例えば、水和物）、または錯体（例えば、シクロデキストリンなどの化合物との包接錯体または包接化合物、または金属との錯体）を包含する。
１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の結晶構造
上述したように、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩またはクエン酸は、アモルファスでも実質的に結晶性でもよい。１つの特定の実施態様では、乳酸塩またはクエン酸塩は実質的に結晶性である。“実質的に結晶性”なる語は上記に定義した意味を有する。特に、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素は実質的に結晶性である。
本明細書に記載された結晶ならびに本明細書に定義されるような結晶構造および本発明の新規な使用のへの採用は、発明のさらなる態様を構成する。
１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）が実質的に結晶性の場合、他の結晶形態は僅かに、好ましくは、無視できる量で存在していてもよいが、単一の結晶形態が支配的であってよい。
結晶形態の１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素は約５重量％以下の他の結晶形態の１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素を含んでおり、特に約１重量％以下の他の結晶形態のもの含んでいる。
好ましい実施態様では、本発明は、実質的に結晶性の１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の塩（例えば、本明細書で定義されるような乳酸塩（特にＬ−乳酸塩))を提供し、前記塩は単一の結晶形態を含み他のどのような結晶形態も５重量％以下でのみ含まれる。
好ましくは、単一の結晶形態には、他の結晶形態が４重量％未満、３重量％未満、または２重量％未満伴われ、特に他の結晶形態は約１重量%以下で伴われる。より好ましくは、単一の結晶形態には、他の結晶形態が０．９重量％未満、０．８重量％未満、０．７重量％未満、０．６重量%未満、０．５重量％未満、０．４重量％未満、０．３重量％未満、０．２重量％未満、０．１重量％未満、０．０５重量％未満、または０．０１重量％未満、例えば０重量％未満、伴われる。
結晶およびその結晶構造は単結晶Ｘ線結晶学、粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）、示差走査熱量測定法（ＤＳＣ）および赤外線分光法、例えば、フーリエ変換赤外線分光法（ＦＴＩＲ）を含む多くの手法を使い特徴づけることができる。様々な湿度条件下での結晶の性質は重量蒸気収着法によって、またＸＲＰＤによって分析することができる。
化合物の結晶構造の測定はＸ線結晶学的方法により行なうことができ、本明細書や結晶学の基礎（Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌｓ ｏf Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒａｐｈｙ）、ジャコバッツォ（Ｃ．Ｇｉａｃｏｖａｚｚｏ）、モナコ（Ｈ．Ｌ．Ｍｏｎａｃｏ）、ビテルボ（Ｄ．Ｖｉｔｅｒｂｏ）、スコルダリ（Ｆ．Ｓｃｏｒｄａｒｉ）、ジリ（Ｇ．Ｇｉｌｌｉ）、ザノッティ（Ｇ．Ｚａｎｏｔｔｉ）およびキャッティ（Ｍ．Ｃａｔｔｉ）、（国際結晶学連合（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｕｎｉｏｎ ｏｆ Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒａｐｈｙ）/オックスフォード大学出版（Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ）、１９９２ ＩＳＢＮ ０−１９−８５５５７８−４ （ｐ／ｂ）、０−１９−８５５７９−２ （ｈ／ｂ）)に記載されたような従来の方法によって行なうことができる。この手法は、単結晶のＸ線回折の分析および解釈を伴う。
１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩および二水和物遊離塩基の結晶構造はＸ線結晶学的手法によって測定された（下記の実施例５および７参照）。
表１および表３は１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の結晶の座標データを示し、該データは結晶学的情報ファイル（Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒａｐｈｉｃ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ Ｆｉｌｅ）形式である（ホール（Ｈａｌｌ）、アレン（ＡＬＬｅｎ）およびブラウン（Ｂｒｏｗｎ）、Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔ．、１９９１年、Ａ４７、６５５−６８５；ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｉｕｃｒ．ａｃ．ｕｋ／ｉｕｃｒ−ｔｏｐ／ｃｉｆ／ｈｏｍｅ．ｈｔｍｌ参照）。ＰＤＢファイル形式（例えば、ＥＢＩ巨大分子構造データベース（ＥＢＩ Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ Ｄａｔａｂａｓｅ）（ヒンクストン、英国)に整合性を有する形式）のような他のファイル形式も当業者に使用され、また好まれる。しかしながら、表の座標を示したり操作するための異なったファイル形式の使用は本発明の範囲内であることが明からである。表中のカッコ内の数値は偏差（ｓ．ｕ．、標準不確かさ）を表わす。乳酸塩の結晶構造は図４および図５に示す。
一つの実施態様では、本発明は、本明細書に定義されるような本発明の新規な使用のための、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）を提供し、前記乳酸塩は結晶性であり本明細書の表３の座標に定義されるような結晶構造を有する。
他の実施態様では、本発明は、本明細書に定義されるような本発明の新規な使用のための、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）を提供し、前記乳酸塩は結晶性であり本明細書の図４および５の座標に定義されるような結晶構造を有する。
他の実施態様では、本発明は、本明細書に定義されるような本発明の新規な使用のための、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）を提供し、前記乳酸塩は結晶性であり、斜方晶系空間群Ｐ２１２１２１（＃１９）に属し９７（２）Ｋで、ａ＝９．９４（１０）、ｂ＝１５．０３（１０）、ｃ＝１６．１８（１０）Å、アルファ＝ベータ＝γ＝９０°の結晶格子パラメーターを有する。
他の実施態様では、本発明は、本明細書に定義されるような本発明の新規な使用のための、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）を提供し、前記乳酸塩は結晶性であり、室温で、ａ＝１０．０８（１０）、ｂ＝１５．２２（１０）、ｃ＝１６．２２（１０）Å、アルファ＝ベータ＝γ＝９０°の結晶格子パラメーターを有する。
したがって、他の実施態様では、本発明は、本明細書に定義されるような本発明の新規な使用のための、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）を提供し、前記乳酸塩は結晶性であり：
（ａ）図４および図５に示されるような結晶構造有する；かつ／または
（ｂ）本明細書の表３の座標により定義されるような結晶構造を有する；かつ／または
（ｃ）９７（２）Ｋで、ａ＝９．９４（１０）、ｂ＝１５．０３（１０）、ｃ＝１６．１８（１０）Å、アルファ＝ベータ＝γ＝９０°の結晶格子パラメーターを有する；かつ／または
（ｄ）室温で、ａ＝１０．０８（１０）、ｂ＝１５．２２（１０）、ｃ＝１６．２２（１０）Å、アルファ＝ベータ＝γ＝９０°の結晶格子パラメーターを有する；かつ／または
（ｅ）斜方晶系空間群Ｐ２１２１２１（＃１９）に属する結晶構造を有する。
実質的に結晶性の塩には、例えば、塩を再結晶させるかそうでなければ精製するために使用される有機溶媒あるいは水などの他の溶剤が実質的に残存していないことが好ましい。
一つの実施態様では、式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）、特に１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩、の結晶には残存溶媒（例えば、水または有機溶媒）が１０重量％未満、例えば５％未満の残存溶媒、が含まれている結晶である。
一つの実施態様では、結晶性の塩（例えば、乳酸塩、特にＬ−乳酸塩）は無水であり、“無水”なる語は上記に定義した意味を有する。
他の実施態様では、結晶性の１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩には、有機溶媒、例えばエタノール、が約０〜５重量％の範囲で、例えば約２重量％のエタノールが、残存する。
粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）固体法により分析することができる。ＸＲＰＤは、本明細書に記載されたような（実施例６および実施例８参照）また粉末Ｘ線回折入門（Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｏ Ｘ−ｒａｙ Ｐｏｗｄｅｒ Ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ）、（ロンジェンキンス（Ｒｏｎ Ｊｅｎｋｉｎｓ）およびロバートスナイダー（Ｒｏｂｅｒｔ Ｌ．Ｓｎｙｄｅｒ）（ジョンワイリー＆サンズ、ニューヨーク、１９９６年)に記載されたような従来の方法にしたがって行なうことができる。ＸＲＰＤ回折図中で明確なピーク（ランダムなバックグラウンドノイズとは対照的に）の存在は、化合物が結晶化度を有していることを示す。
また、化合物の結晶構造は、化合物の粉末Ｘ線図形は、Ｘ線回折スペクトルまたは図形の回折角（２θ）および／または面間隔（ｄ）パラメーターで特性決定した。これらは、ブラッグの式、ｎλ＝２ｄＳｉｎθ(式中、ｎ＝ｌ；λ＝使用される放射線またはカソードの波長；ｄ＝面間隔；ならびにθ＝回折角)、により関連づけられる。本明細書では、面間隔、回折角および全体的な図形は、データの特徴により、粉末Ｘ線回折における結晶の識別のために重要である。結晶成長の方向、粒径および測定条件によって相対強度は変わりうるので、相対強度は厳密に解釈されるべきでない。さらに、回折角は通常２θ＋０．２°の範囲内で一致する角度を意味する。ピークは主要ピークを意味し、上述した以外の回折角の中間よりも大きくないピークを含む。
１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩および遊離塩基の両方はＸＲＰＤで特性決定した。それぞれの場合、粉末Ｘ線回折パターンは、回折角（２θ）、面間隔（ｄ）および／または相対強度によって表される。表２、表３および表４は、遊離塩基、乳酸塩および二水和物遊離塩基形態の１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の回折角値に相当するＸ線回折スペクトルの面間隔（ｄ）値を示す。
したがって、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素は本質的に図３、図６、図７もしくは図８および／または表２、表４もしくは表５に示されるような粉末Ｘ線回折パターンを有する。
本発明は、したがって、本明細書に定義されるような本発明の新規な使用のための、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の塩（例えば、乳酸塩、特にＬ−乳酸塩）の結晶を提供し、前記結晶は実質的に図３、図６、図７または図８に示されるような粉末Ｘ線回折パターンを有する。好ましくは、本発明の化合物は、図３、図６、図７あるいは図８および/または表２および/または表４および/または表５で示される粉末Ｘ線回折パターンのものと同様の回折角でピークを示す化合物であり、また任意に同様の相対強度を有する。
本発明はさらに、本明細書に定義されるような本発明の新規な使用のための、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）の結晶を提供し、前記結晶は本質的に図６に示されるような粉末Ｘ線回折パターンを有する。従って、他の実施態様では、本発明は、本明細書に定義されるような本発明の新規な使用のための、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の実質的に結晶性の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）を提供し、前記塩は図６で示される粉末Ｘ線回折パターンのものと同様の回折角でピークを示す。好ましくは、ピークは図６に示されたピークと同様の相対強度を有する。したがって、本発明は、本明細書に定義されるような本発明の新規な使用のための、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の実質的に結晶性の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）を提供し、前記塩は実質的に図６で示されるような粉末Ｘ線回折パターンを有する。
前記乳酸塩の粉末Ｘ線回折パターンは、回折角（２θ）および面間隔（ｄ）、そして好ましくは表４に示される強度でのピークの存在によって特性決定してもよい。
したがって、本発明は、本明細書に定義されるような本発明の新規な使用のための、シクロプロピル−３−［３−（６−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）を提供し、前記塩は表４の回折角(２θ±１．０°、例えば±０．２°、特に０．１°)に特徴的ピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを示す。
また、本発明は、本明細書に定義されるような本発明の新規な使用のための、シクロプロピル−３−［３−（６−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）の結晶を提供し、前記結晶は１７．５０、１８．３０、１９．３０、１９．６０および２１．８５±１．０°、例えば±０．２°、特に±０．１°、の回折角２θに主要なピークを示す。
したがって、一つの実施態様では、本発明は、本明細書に定義されるような本発明の新規な使用のための、シクロプロピル−３−［３−（６−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）の結晶形態を提供し、前記結晶形態は、１２．４０、１５．２０、１５．６０、１７．５０、１８．３０、１８．５０、１９．３０、１９．６０、２１．８５および２７．３０±０．１°の２θでのＸ線回折パターンにおけるピークによって特徴付けられる。
シクロプロピル−３−［３−（６−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）の結晶はまた、特徴的粉末Ｘ線回折パターンは格子面間の間隔、表４のｄ（Å）、により表わされるという点で特徴付けられる。
さらなる実施態様では、本発明は、本明細書に定義されるような本発明の新規な使用のための、シクロプロピル−３−［３−（６−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）の結晶を提供し、前記結晶はその特徴的ピークが５．０６、４．８５、４．６０、４．５３および４．０７、より具体的には、７．１３、５．８３、５．６８、５．０６、４．８５、４．７９、４．６０、４．５３、４．０７および３．２６Åの粉末Ｘ線回折の格子面間隔（ｄ）として現われる、粉末Ｘ線回折パターンを有する。
したがって、他の実施態様では、本発明は、本明細書に定義されるような本発明の新規な使用のための、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の実質的に結晶性の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）を提供し、前記塩は１７．５０、１８．３０、１９．３０、１９．６０および２１．８５°、より具体的には１２．４０、１５．２０、１５．６０、１７．５０、１８．３０、１８．５０、１９．３０、１９．６０、２１．８５、２７．３０°、の回折角（２θ）、ならびに５．０６、４．８５、４．６０、４．５３および４．０７、より具体的には７．１３、５．８３、５．６８、５．０６、４．８５、４．７９、４．６０、４．５３、４．０７および３．２６Åの面間隔（ｄ）における、主要なピークの存在を特徴とする粉末Ｘ線回折パターンを有する。
その他の実施態様では、本発明は、本明細書に定義されるような本発明の新規な使用のための、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の実質的に結晶性のＬ−乳酸塩を提供し、前記乳酸塩は、回折角（２θ）および面間隔（ｄ）、そして好ましくは表４に示される強度、でのピークの存在によって特徴付けられる粉末Ｘ線回折パターンを有する。
本発明の結晶性の塩はまた示差走査熱量測定法（ＤＳＣ）によって特徴づけることができる。
前記乳酸塩はＤＳＣにより分析され、１９０℃で始まりを示し、１９４〜１９７℃でピークを示す。
従って、他の態様では、本発明は、本明細書に定義されるような本発明の新規な使用のための、その乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）を提供し、前記塩は無水で、ＤＳＣにかけられた場合１９０℃で始まりを示しかつ／または１９４〜１９７℃で吸熱ピークを示す。
ＤＳＣに関連して本明細書で使用される“始まり”なる語は、ＤＳＣ走査における吸熱ピークの開始を表し、そのピークは最大の出熱点である。
したがって、本発明のその他の態様は、図６、図７または図８で示される粉末Ｘ線回折パターンのものと同様の回折角でピークを示しかつ熱分析（ＤＳＣ）による始まりが１９０℃を示しかつ／または１９４〜１９７℃のピーク近傍に分解を伴う吸熱ピークを示す１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩（特に、Ｌ−乳酸塩）の新規の使用に関する。
高湿度状況での本発明の塩の性質は、例えば実施例4に記載されているような、標準的な重量蒸気収着（ＧＶＳ）法、によって分析することができる。
前記乳酸塩は、高相対湿度状況で安定した無水結晶形態で存在することができ、そのような状況下で結晶構造に変化が起こらない。
本発明の塩はさらに赤外線分光法、例えばＦＴＩＲ、によって特徴づけることができる。
乳酸塩の赤外線スペクトル(ＫＢｒディスク法)は、３２２９、２９７２および１６６０ｃｍ−１に特徴的ピークを有する。
従って、その他の実施態様では、本発明は、本明細書に定義されるような本発明の新規な使用のための、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の（好ましくは実質的に結晶性の）乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）を提供し、前記塩は、ＫＢｒディスク法を用いて分析された場合、３２２９、２９７２および１６６０ｃｍ−１に特徴的ピークを有する赤外線スペクトルを示す。
本発明の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）は上記の段落から明らかなように多くの異なった物理化学パラメーターによって特徴づけることができる。従って、好ましい実施態様では、本発明は、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素のＬ−乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）を提供し、前記塩は結晶性であり、下記の任意の１以上（どのような組み合わせでもよい）またはすべてパラメーターによって特徴付けられる。すなわち、前記塩は：
（ａ）図４および図５に示されるような結晶構造有する；かつ／または
（ｂ）本明細書の表３の座標により定義されるような結晶構造を有する；かつ／または
（ｃ）９７（２）Ｋで、ａ＝９．９４（１０）、ｂ＝１５．０３（１０）、ｃ＝１６．１８（１０）Å、アルファ＝ベータ＝γ＝９０°の結晶格子パラメーターを有する；かつ／または
（ｄ）室温で、ａ＝１０．０８（１０）、ｂ＝１５．２２（１０）、ｃ＝１６．２２（１０）Å、アルファ＝ベータ＝γ＝９０°の結晶格子パラメーターを有する；かつ／または
（ｅ）斜方晶系空間群Ｐ２１２１２１（＃１９）に属する結晶構造を有する；かつ／または
（ｆ）１７．５０、１８．３０、１９．３０、１９．６０および２１．８５°、より具体的には１２．４０、１５．２０、１５．６０、１７．５０、１８．３０、１８．５０、１９．３０、１９．６０、２１．８５および２７．３０°、の回折角（２θ）、ならびに５．０６、４．８５、４．６０、４．５３および４．０７、より具体的には７．１３、５．８３、５．６８、５．０６、４．８５、４．７９、４．６０、４．５３，４．０７および３．２６Åの面間隔（ｄ）における、主要なピークの存在を特徴とする粉末Ｘ線回折パターンを有する；かつ／または
（ｇ）図６または表４のピークと同様の相対強度を有していてもよい、図６または表４で示される粉末Ｘ線回折パターンのものと同様の回折角でピークを示す；かつ／または
（ｈ）実質的に図６のような粉末Ｘ線回折パターンを有する；かつ／または
（ｉ）無水で、ＤＳＣにかけられた場合１９０℃で始まりを示す、かつ／または１９４〜１９７℃で吸熱ピークを示す；かつ／または
（ｊ）ＫＢｒディスク法を用いて分析された場合、３２２９、２９７２および１６６０ｃｍ−１に特徴的ピークを有する赤外線スペクトルを示す。
１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の尿素遊離塩基の結晶構造
１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の遊離塩基はアモルファスもしくは実質的に結晶性であってもよい。１つの特定の実施態様では、遊離塩基は実質的に結晶性である、“実質的に結晶性”なる語は上記に定義した意味を有する。一つの実施態様では、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の遊離塩基は二水和物結晶形態で存在する。
本明細書に記載される結晶の新規な使用および結晶構造は本発明のさらなる態様を構成する。
１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の二水和物遊離塩基の結晶構造はＸ線結晶学的手法によって測定された。
一つの実施態様では、本発明は、本明細書に定義されるような本発明の新規な使用のための、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の二水和物遊離塩基を提供し、前記二水和物遊離塩基は結晶性であり（ｉ）本明細書の表２の座標に定義されるような結晶構造を有する、かつ／または（ｉｉ）二水和物遊離塩基中、結晶は単斜晶系空間群Ｐ２１／ｎ（＃１４）に属しａ＝７．６６（１０）、ｂ＝１５．１８（１０）、ｃ＝１７．７１（１０）Å、ベータ＝９８．５３（２）°、アルファ＝γ＝９０°の結晶格子パラメーターを有する。
１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の遊離塩基形態はＸＲＰＤで特性決定し、その結果、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の遊離塩基形態は実質的に図３、図６、図７または図８および/または実施例７０および７２の表３、表５または表６に示されたような粉末Ｘ線回折パターンを有する。
したがって、一つの実施態様では、本発明は、本明細書に定義されるような本発明の新規な使用のための、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素遊離塩基の結晶を提供し、前記結晶は図３、図６、図７あるいは図８および/または表３および/または表５および/または表６で示される粉末Ｘ線回折パターンのものと同様の回折角でピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを示し、前記ピークは同じ相対強度を有していてもよい。
したがって、本発明は、本明細書に定義されるような本発明の新規な使用のための、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素遊離塩基の結晶を提供し、前記結晶は表２の回折角(２θ±１．０°、例えば±０．２°、特に±０．１°)に特徴的ピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを示す。
さらなる実施態様では、本発明は、本明細書に定義されるような本発明の新規な使用のための、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素遊離塩基の結晶を提供し、前記結晶はその特徴的ピークが表２の格子面間隔（ｄ）として現われる粉末Ｘ線回折パターンを有する。
１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の遊離塩基は、図３および／または表２で示される粉末Ｘ線回折パターンのものと同様の回折角でピークを示し、さらに熱分析（ＤＳＣ）によれば１９３℃近傍に分解を伴う発熱ピークを示す。
生物学的活性
式（Ｉ０）の化合物の乳酸塩またはクエン酸塩はオーロラキナーゼの阻害剤である。例えば、前記乳酸塩またはクエン酸塩はオーロラＡおよび／またはオーロラＢを阻害する。
本発明の化合物の乳酸塩またはクエン酸塩はまたサイクリン依存性キナーゼに対する活性を有する。例えば、前記乳酸塩またはクエン酸塩はＣＤＫ２、ＣＤＫ４、ＣＤＫ５、ＣＤＫ６およびＣＤＫ９キナーゼ、特にＣＤＫ２、に対する活性を有する。
本発明の化合物の乳酸塩またはクエン酸塩はまたグリコーゲンシンターゼキナーゼ−３（ＧＳＫ−３）に対しても活性を有する。
ＣＤＫおよびオーロラキナーゼおよびグリコーゲンシンターゼキナーゼを調整または阻害するこれら塩の活性の結果として、異常に***する細胞の細胞周期を停止させる、またはその制御を回復させる手段を提供するのに有用である。よって、本明細書で定義される新規な使用に加えて、前記化合物は癌などの増殖性疾患の治療または予防に有用であるものと考えられる。本発明の化合物は、ウイルス感染、ＩＩ型またはインスリン非依存性糖尿病、自己免疫疾患、頭部損傷、卒中、癲癇、アルツハイマー病などの神経変性疾患、運動神経性疾患、進行性の核上麻痺、皮質基底核変性症およびピック病、例えば、自己免疫疾患および神経変性疾患などの症状の治療に有用である。
本発明の化合物の硫酸塩またはクエン酸塩が有用である病態および症状の１つのサブグループは、ウイルス感染、自己免疫疾患および神経変性疾患からなる。
ＣＤＫは、細胞周期、アポトーシス、転写、分化およびＣＮＳ機能の調節に役割を果たす。従って、ＣＤＫ阻害剤は、増殖、アポトーシスまたは分化に障害がある、癌などの疾病の治療に有用であり得る。特に、ＲＢ＋ｖｅおよびＰＢ−ｖｅ腫瘍は、特にＣＤＫ阻害剤に感受性であり得る。
阻害可能な癌の例としては、限定されるものではないが、癌腫、例えば、膀胱癌、乳癌、結腸癌（例えば、直腸腺癌および直腸腺腫などの結腸直腸癌）、腎臓癌、表皮癌、肝臓癌、肺癌、例えば、腺癌、小細胞性肺癌および非小細胞性肺癌、食道癌、胆嚢癌、卵巣癌、膵臓癌、例えば、外分泌膵臓癌、胃癌、子宮頚癌、甲状腺癌、前立腺癌または皮膚癌、例えば、扁平上皮癌；リンパ系の造血系腫瘍、例えば、白血病、急性リンパ性白血病、Ｂ細胞リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、ヘアリーセルリンパ腫またはバーケットリンパ腫；骨髄系の造血系腫瘍、例えば、急性および慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群または前骨髄球性白血病；甲状腺瀘胞癌；間葉由来の腫瘍、例えば、線維肉腫または横紋筋肉種；中枢または末梢神経系の腫瘍、例えば、星状細胞腫、神経芽細胞腫、グリオーマまたは神経鞘腫；黒色腫；精上皮腫；奇形癌；骨肉種；色素性乾皮症；角化棘細胞種；甲状腺濾胞癌；またはカポジ肉腫が挙げられる。さらに、リンパ系の造血系腫瘍には小リンパ球性リンパ腫を含むことができる。
前記癌は、任意の１つ以上のサイクリン依存性キナーゼの阻害に感受性のある癌であってもよい。
特定の癌がサイクリン依存性キナーゼあるいはオーロラキナーゼによる阻害に感受性のあるものかどうかは、以下の実施例で示すような細胞増殖アッセイにより、または“診断法”と題した節で示されるような方法により判定することができる。
ＣＤＫはまた、アポトーシス、増殖、分化および転写においても役割を果たすことが知られており、従って、ＣＤＫ阻害剤は、癌以外の以下の疾病の治療にも有用でありうる：ウイルス感染、例えば、ヘルペスウィルス、ポックスウィルス、エプスタイン−バーウィルス、シンドビスウィルス、アデノウィルス、ＨＩＶ、ＨＰＶ、ＨＣＶおよびＨＣＭＶ；ＨＩＶ感染個体におけるＡＩＤＳ発現の予防；慢性炎症性疾患、例えば、全身性紅斑性狼瘡、自己免疫媒介糸球体腎炎、慢性関節リウマチ、乾癬、炎症性腸疾患および自己免疫性糖尿病；心血管系疾患、例えば、心肥大、再狭窄、アテローム性動脈硬化症；神経変性疾患、例えば、アルツハイマー病、ＡＩＤＳ関連痴呆、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、色素性網膜炎、脊髄性筋萎縮および小脳変性症；糸球体腎炎；骨髄異形成症候群、虚血傷害関連心筋梗塞、卒中および再灌流障害、不整脈、アテローム性動脈硬化症、毒素誘発またはアルコール関連肝疾患、血液疾患、例えば、慢性貧血および再生不良性貧血；筋骨格系の変性疾患、例えば、骨粗鬆症および関節炎、アスピリン感受性鼻副鼻腔炎、嚢胞性線維症、多発性硬化症、腎疾患および癌性疼痛。
また、いくつかのサイクリン依存性キナーゼ阻害剤は、他の抗癌剤と組み合わせて使用できることが分かった。例えば、サイクリン依存性キナーゼ阻害剤フラボピリドールの細胞傷害活性が、併用療法において他の抗癌剤とともに使用されてきた。
従って、異常細胞増殖を含む疾病または症状を治療するための本発明の医薬組成物、使用または方法において、一つの実施態様では、異常細胞増殖を含む疾病または状態は癌である。
癌の１つの群としては、ヒト乳癌（例えば、原発性乳癌、リンパ節転移陰性乳癌、浸潤性乳管癌、非類内膜性乳癌）、およびマントル細胞リンパ腫を含む。その他、他の癌として結腸直腸癌および子宮内膜癌がある。
もう１つの癌のサブセットとしては、乳癌、卵巣癌、結腸癌、前立腺癌、食道癌、扁平上皮癌および非小細胞肺癌を含む。
オーロラキナーゼに対して活性を有する化合物の乳酸塩またはクエン酸塩の場合、本発明のオーロラキナーゼ阻害化合物が有用であると考えられる癌の特定の例としては：
ヒト乳癌（例えば、原発性乳癌、リンパ節転移陰性乳癌、浸潤性乳管癌、非類内膜性乳癌）；
卵巣癌（例えば、原発性卵巣癌）；
膵臓癌；
ヒト膀胱癌；
結腸直腸癌（例えば、原発性結腸直腸癌）；
胃癌；
腎臓癌；
子宮頸癌；
神経芽腫；
黒色腫；
リンパ腫；
前立腺癌；
白血病；
非類内膜性子宮内膜癌；
グリオーマ；および
非ホジキンリンパ腫が挙げられる。
オーロラ阻害剤に特に反応性の高い癌としては、乳癌、膀胱癌、結腸直腸癌、膵臓癌、卵巣癌、非ホジキンリンパ腫、グリオーマおよび非類内膜性子宮内膜癌が挙げられる。
オーロラ阻害剤に特に反応性の高い癌の特定のサブセットは、乳癌、卵巣癌、結腸癌、肝臓癌、胃癌および前立腺癌から成る。
オーロラ阻害剤が特に適用可能な癌の他のサブセットは血液の癌、特に白血病、である。したがって、さらなる実施態様では、式（Ｉ）の化合物の乳酸塩またはクエン酸塩は血液の癌、特に白血病、を治療するために使用される。特定の白血病は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、Ｂ細胞リンパ腫（マントル細胞）および急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ、急性リンパ性白血病としても知られる）から選ばれる。一つの実施態様では、白血病は、再発性もしくは難治性急性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、急性リンパ性白血病および慢性骨髄性白血病から選ばれる。他の白血病は急性前骨髄球性白血病を含む。
癌の１つグループは、ヒト乳癌（例えば、原発性乳癌、リンパ節転移陰性乳癌、浸潤性乳管癌、非類内膜性乳癌）、およびマントル細胞リンパ腫を含む。その他、他の癌として結腸直腸癌および子宮内膜癌がある。
癌のもう１つのサブセットは、リンパ系の造血系腫瘍、例えば、白血病、慢性リンパ性白血病、マントル細胞リンパ腫およびＢ細胞リンパ腫（びまん性大Ｂ細胞リンパ腫）を含む。
ある特定の癌として慢性リンパ性白血病である。
もう１つの特定の癌としてマントル細胞リンパ腫がある。
他の特定の癌としてびまん性大Ｂ細胞リンパ腫がある。
オーロラキナーゼ阻害活性を有する本発明の化合物は、高レベルのオーロラキナーゼの存在が伴う、または高レベルのオーロラキナーゼの存在を特徴とするタイプの癌、例えば、これに関して本願の導入の節で挙げられている癌の治療または予防に特に有用である。そのような癌は髄芽細胞腫を含む。
式（Ｉ）の化合物の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩）またはクエン酸塩ＶＥＧＦＲ活性の阻害剤である。さらに、前記乳酸塩またはクエン酸塩はＥｐＨおよびＦＧＦＲ活性の阻害剤でもある。それゆえ、前記乳酸塩またはクエン酸塩は、特に血管新生の阻害により、組織異常増殖を防ぐもしくは組織異常増殖に細胞死を誘発する手段の提供に有用である。したがって、前記化合物は、癌のような増殖性疾患を治療または予防するのに役立つこと実証することが予想される。特に、ＶＥＧＦＲの活性化変異体あるいはＶＥＧＦＲのアップレギュレーションを伴う腫瘍および高レベルの血清乳酸脱水素酵素を有する患者は、前記阻害剤に特に感受性がある可能性がある。本明細書で検討されているような特定のＶＥＧＦＲのアイソフォームのうちのいずれの活性化変異体を有する患者にも、ＶＥＧＦＲ阻害剤を使用した治療が特に有益である可能性がある。例えば、クローン前駆細胞がＶＥＧＦＲを発現する可能性がある急性白血病細胞でのＶＥＧＦＲの過剰発現である。また、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２もしくはＦＧＦＲ３のようなＦＧＦＲのアイソフォームのうちのいずれの活性化変異体、アップレギュレーションまたは過剰発現を伴う特定の腫瘍は、本発明の化合物に特に感受性がある可能性があり、そのような特定の腫瘍を有する本明細書で検討されるような患者にも本発明の化合物を使用した治療が有益である可能性がある。前記治療が、上述されたような、受容体チロシンキナーゼの変異型に関係するかもしくは対象とすることが好ましい。
Ｆｌｔ３、ＪＡＫ、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ１およびＣｈｋ２阻害活性を有する本発明の化合物の乳酸塩またはクエン酸塩は、次の疾病および白血病の治療および予防に特に有用である：
真性多血症；
本態性血小板増加症；
特発性骨髄線維症；
若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）；
慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）；
巨核球性ＡＭＬ（ＡＭＬ Ｍ７）；
巨核球性白血病；
フィラデルフィア染色体陰性ＣＭＬ；
慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）；
イマチニブ耐性ＣＭＬ；
急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）；
骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）；および
急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）。
したがって、さらなる実施態様では、式（Ｉ）の化合物の乳酸塩またはクエン酸塩は次の疾病を治療するために使用される：真性多血症；本態性血小板増加症；特発性骨髄線維症；若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）；慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）；巨核球ＡＭＬ（ＡＭＬ Ｍ７）；巨核球性白血病；フィラデルフィア染色体陰性ＣＭＬ；またはイマチニブ耐性ＣＭＬ。
さらなる実施態様では、式（Ｉ）の化合物の乳酸塩またはクエン酸塩は真性多血症、本態性血小板増加症、および骨髄様化生（ＭＭＭ）を伴う骨髄線維症を含む特発性骨髄線維症のような骨髄増殖性障害（ＭＰＤ）を治療するために使用される。
さらに、本発明の化合物は悪性腫瘍がＢＣＲ−ａｂｌに起因する疾病、特にフィラデルフィア染色体陽性、の治療に使用できる。さらなる実施態様では、式（Ｉ）の化合物の乳酸塩またはクエン酸塩は骨髄増殖性症候群ならびにフィラデルフィア染色体陽性ＣＭＬおよびフィラデルフィア染色体陽性ＡＬＬのようなフィラデルフィア染色体陽性白血病を治療するために使用される。特に、式（Ｉ）の化合物の乳酸塩またはクエン酸塩はフィラデルフィア染色体陽性ＡＬＬを治療するために使用される。
ＶＥＧＦＲ阻害活性を有する本発明の化合物の乳酸塩またはクエン酸塩は、加齢黄斑変性症、特に湿潤型加齢黄斑変性症、未熟児網膜症（ＲＯＰ）および糖尿病性網膜症のような虚血性増殖性網膜症ならびに血管腫などの眼疾患の治療または予防に特に有用である。したがって、さらなる実施態様では、式（Ｉ）の化合物の乳酸塩またはクエン酸塩は加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）、特に湿潤型加齢黄斑変性症、未熟児網膜症（ＲＯＰ）および糖尿病性網膜症のような虚血性増殖性網膜症ならびに血管腫などの眼疾患の治療に使用される。前記治療が、上述されたような、キナーゼの変異型に関係するかもしくは対象とすることが好ましい。
サイクリン依存性キナーゼ、オーロラキナーゼ、グリコーゲンシンターゼキナーゼ−３、ＶＥＧＦＲ、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ１およびＣｈｋ２の阻害剤としての本発明の化合物の乳酸塩またはクエン酸塩の活性は下記実施例において記載されたアッセイを使用して測定することができ、ある化合物が示す活性のレベルは、ＩＣ５０値として決定することができる。
ＦＧＦＲ３のようなＦＧＦＲ、Ｒｅｔ、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４のようなＥｐｈあるいはｃＳｒｃ阻害活性を有する本発明の化合物の乳酸塩またはクエン酸塩は、次の疾病の治療および予防に特に有用である：
甲状腺乳頭癌
多発性内分泌腺腫（ＭＥＮ）２Ａ型および２Ｂ型
家族性甲状腺髄様癌（ＦＭＴＣ）
ヒルシュスプルング病
アペール（ＡＰ）症候群
クルーゾン症候群
ジャクソン-ワイス症候群
ベーレ−スティーブンソン脳回状頭皮症候群
パイフェル症候群（ＰＳ）
多発性骨髄腫
頭頸部癌
上皮癌
したがって、さらなる実施態様では、式（Ｉ）の化合物の乳酸塩またはクエン酸塩は多発性骨髄腫、上皮癌、頭頸部癌、アペール（ＡＰ）症候群、クルーゾン症候群、ジャクソン−ワイス症候群、ベーレ−スティーブンソン脳回状頭皮症候群およびパイフェル症候群（ＰＳ）などのヒトの骨格発生異常、甲状腺乳頭癌、家族性甲状腺髄様癌（ＦＭＴＣ）、多発性内分泌腺腫（ＭＥＮ）２Ａ型および２Ｂ型などの甲状腺癌ならびにヒルシュスプルング病の治療に使用される。
前記化合物がＦＧＦＲに対する活性を有する場合、特定の癌は、多発性骨髄腫、膀胱癌、肝細胞性癌、口腔扁平細胞癌、頚部癌、前立腺癌、甲状腺癌、肺癌、乳癌および結腸癌が挙げられる。ＦＧＦＲ１のようなＦＧＦＲ阻害活性を有する本発明の化合物は、乳癌、特に古典的小葉癌（ＣＬＣ）、の治療または予防に特に有用である。ＦＧＦＲ２またはＦＧＦＲ３のようなＦＧＦＲ阻害活性を有する本発明の化合物は、骨疾患の治療または予防に特に有用である。
更に、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２またはＦＧＦＲ３のようなＦＧＦＲ阻害活性を有する本発明の化合物は、進行性線維症が症状である病状の治療または予防に特に有用である。本発明の化合物が治療に有用かもしれない線維性の疾患は、例えば肝硬変、糸球体腎炎、肺線維症、全身性線維症、関節リウマチ、そして自然創傷治癒過程、における線維組織の異常もしくは過剰蓄積示す疾病が挙げられる。特に、本発明の化合物はまた、肺線維症、特に特発性肺線維症、の治療にも有用である。
本発明の化合物がＰＤＧＦＲを阻害するので、本発明の化合物は、多形性グリア芽腫のようなグリア芽腫、前立腺癌、胃腸間質性腫瘍、肝臓癌、腎臓癌、慢性骨髄性白血病、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、そして高好酸球症候群、希な増殖性血液疾患（ｒａｒｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ ｈｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌ ｄｉｓｏｒｄｅｒ）、***性皮膚線維肉腫、および浸透性皮膚腫瘍を含む多くの腫瘍や白血病タイプの治療に有用である。
ＦＧＦＲ３のようなＦＧＦＲ、Ｒｅｔ、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４のようなＥｐｈあるいはｃＳｒｃの阻害剤としての本発明の化合物の乳酸塩またはクエン酸塩の活性は下記実施例において記載されたアッセイを使用して測定することができ、前記化合物が示す活性のレベルは、ＩＣ５０値として決定することができる。
さらなる態様では、本発明は以下のものを提供する：
ＶＥＧＦＲ、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２が媒介する病態または症状の予防または治療方法であって、前記方法はそれが必要な被検者に治療上有効な量の式（Ｉ０）の化合物の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩)またはクエン酸を投与することを含む。
ＶＥＧＦＲ、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２が媒介する病態または症状の予防または治療に用いる式（Ｉ０）の化合物の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩)またはクエン酸。
ＶＥＧＦＲ、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２が媒介する病態または症状の予防または治療用薬剤の製造のための式（Ｉ０）の化合物の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩)またはクエン酸の使用。
ＦＧＦＲ３などのＦＧＦＲ、Ｒｅｔ、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４などのＥｐｈ、あるいはｃＳｒｃが媒介する病態または症状の予防または治療方法であって、前記方法はそれが必要な被検者に治療上有効な量の式（Ｉ０）の化合物の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩)またはクエン酸を投与することを含む。
ＦＧＦＲ３などのＦＧＦＲ、Ｒｅｔ、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４などのＥｐｈ、あるいはｃＳｒｃが媒介する病態または症状の予防または治療に用いる式（Ｉ０）の化合物の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩)またはクエン酸。
ＦＧＦＲ３などのＦＧＦＲ、Ｒｅｔ、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４などのＥｐｈ、あるいはｃＳｒｃが媒介する病態または症状の予防または治療用薬剤の製造のための式（Ｉ０）の化合物の乳酸塩（特にＬ−乳酸塩)またはクエン酸の使用。
変異キナーゼ
キナーゼ阻害剤で治療されている患者集団で発生する薬剤耐性キナーゼ変異は、治療で使用される特定の阻害剤に結合するか相互に作用するタンパク質の領域で、部分的に起こり得る。そのような変異は問題のキナーゼに結合阻害する阻害剤の能力を縮小させる。これは、阻害剤と相互に作用するか、標的への前記阻害剤の結合をサポートにするために重要なアミノ酸残基のうちのどれにおいても起こり得る。変異したアミノ酸残基との相互作用を必要とせずに、標的キナーゼに結合する他の阻害剤は、前記変異に影響されなくことなく前記酵素の有効な阻害剤であり続けると考えられる（カーター（Carter）ら、PNAS, 2005, 102, 31, 11011-110116）。
薬剤耐性変異の１つの好発部位はいわゆるゲートキーパー残基である。この特定の残基は、いくつかのキナーゼ阻害剤とそれらのそれぞれの標的の相互作用のための重要な部位を構成する。例えば、イマチニブ(グリベック)は、ａｂｌキナーゼドメインのゲートキーパー残基であるスレオニン３１５と部分的に結合する。Ｔ３１５Ｉ変異は、イマチニブで治療を受けるＣＭＬ患者で発生する薬物耐性の主形態のうちの１つである、また急性リンパ芽球性白血病の患者でも観察される。したがって、有効な標的阻害のためのＴ３１５との相互作用を必要としないＢＣＲ−ａｂｌ阻害剤は、依然Ｔ３１５Ｉイマチニブ耐性変異の有効な阻害剤である。
イマチニブは、ａｂｌ活性を妨害することに加えて、受容体ｃ−ｋｉｔおよびＰＤＧＦ−Ｒのチロシンキナーゼ活性を阻害する。したがって、前記薬剤は、胃腸の腫瘍および高好酸球症候群に用いられており、これらはそれぞれｃ−ｋｉｔおよびＰＤＧＦＲの活性化に依存性の疾病である。ＰＤＧＦ−Ｒ活性化は、異なった分子の状況下でイマチニブに応答する他の悪性腫瘍に関与している。これら他の悪性腫瘍は、悪性腫瘍は慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）を含む。他の疾患では、***性皮膚線維肉腫、浸透性皮膚腫瘍、ＰＤＧＦ−Ｂリガンドをコードする遺伝子を伴う相互転座は、キメラリガンドの構成性分泌および受容体の活性化をもたらす。グリベックはこれら３つ疾病すべてに対して活性がある。
ＣＭＬで観察されるＴ３１５Ｉ耐性の疾病に加えて、類似のゲートキーパー変異による耐性はｃ−ｋｉｔおよびＰＤＧＦｒの両方でイマチニブで治療される患者において観察される。したがって、ＫＩＴにおけるＴ６７０Ｉ変異およびＰＤＧＦＲにおけるＴ６７４Ｉ変異は、ＢＣＲ−ａｂｌにおけるＴ３１５１変異とホモログであり、３つの変異はすべてＢＭＳ−３５４８２５（ダサチニブ）およびＡＭＮ−１０７（ニロチニブ）を含む臨床ステージのＡＴＰ拮抗キナーゼ阻害剤に対する耐性を与える。この変異は患者におけるｓｒｃ／Ａｂｌ阻害剤に対する耐性の主要なメカニズムを示しているように見え、この変異の臨床上の重要性は相当に大きくなる可能性がある。現在スレオニンゲートキーパー変異を伴う患者へのキナーゼを標的にした有効な治療法はない。
さらに、ＥＧＦＲにおけるＴ７９０Ｍ変異はＢＣＲ−ａｂｌにおけるＴ３１５Ｉ変異に相同し、この変異はまた臨床ステージのＡＴＰ拮抗キナーゼ阻害剤に対する耐性を与える可能性がある。したがって、他の臨床ステージのＡＴＰ拮抗キナーゼ阻害剤としては、ＥＧＦＲ阻害剤イレッサ(ゲフィチニブ)、タルセバ(エルロチニブ)、ＳＵ−１１２４８(スニチニブマレエート、ステント)、ＰＤＧＦｒおよびｃ−ｋｉｔ阻害剤、およびソラフェニブのような他のＰＤＧＦＲ阻害剤が挙げられる。
オーロラキナーゼはキナーゼ活性部位のゲートキーパー領域にスレオニンを含んでいない。したがって、本発明のものを含む多くのオーロラキナーゼ阻害剤は、キナーゼ活性の阻害を支持するのにこの相互作用に依存しない。従って、ａｂｌ、ｋｉｔ、ＰＤＧＦＲまたは他のキナーゼに対する交差反応性を有するオーロラキナーゼ阻害剤は、薬剤耐性ゲートキーパー変異、特にスレオニンゲートキーパー変異、同じく野生型変異体にも抑制的であり、ゲートキーパー−領域での変異により発生する耐性の疾病対して有効である。
したがって、本発明の化合物は、ＢＣＲａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦ、ＥＧＦ受容体、ＥｒｂＢ２のような変異した分子標的を示す癌に関して特に用途がある。そのような変異を伴う腫瘍の診断は当業者に公知の手法ならびにＲＴＰＣＲおよびＦＩＳＨのような本明細書に記載された手法を使って行なうことができる。
したがって、オーロラキナーゼは、ゲートキーパースレオニン有するキナーゼではないので、オーロラ阻害剤は、タンパク質のその領域における変異のために既存の治療法に耐性がある適応症の治療に有用である。そのような適応症としては、胃腸間質性腫瘍（ＧＩＳＴ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、高好酸球症候群、希な増殖性血液学的疾患および***性皮膚線維肉腫(浸透性皮膚腫瘍)が挙げられる。
本発明の一態様は、他の抗癌剤と結合または相互作用するが式（Ｉ）の化合物とは結合または相互作用しないタンパク質の領域に変異を含んでいるキナーゼの阻害のための、式（Ｉ）、式（Ｉ´）または式（Ｉ０）の化合物あるいはそのサブグループまたは例の使用である。
本発明のさらなる態様は、他の抗癌剤と結合または相互作用するが式（Ｉ）、式（Ｉ´）または式（Ｉ０）の化合物とは結合または相互作用しないタンパク質の領域に変異を含んでいるキナーゼが媒介する疾病を、式（Ｉ）、式（Ｉ´）または式（Ｉ０）の化合物あるいはそのサブグループまたは例で治療する方法である。
阻害対象である特定のキナーゼとしては、ｃ−ａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦＲベータおよびＰＤＧＦＲアルファを含むＰＤＧＦＲならびにＥＧＦＲ（ＥｒｂＢｌ）、ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２）ならびにＥｒｂＢ３およびＥｒｂＢ４などのＥｒｂＢフェミリーのメンバーが挙げられ、特に、ｃ−ａｂｌ、ｃ−ｋｉｔおよびＰＤＧＦＲである。
さらなるキナーゼとしては、ＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＡ１０、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ５、ＥｐｈＢ６などのエフリン受容体ファミリーのメンバー、ｃ−Ｓｒｃ、ならびにＴＹＫ２などのＪＡＫファミリーのキナーゼが挙げられる。
他の抗癌剤としては、グリベック、ＢＭＳ−３５４８２５、ＡＭＮ−１０７、ＳＵ−１１２４８(スニチニブマレエート、ステント)、ソラフェニブ（ＢＡＹ４３−９００６）、イレッサ(ゲフィチニブ)およびタルセバ(エルロチニブ)などのＡＴＰ拮抗キナーゼ阻害剤、特にグリベック、ＢＭＳ−３５４８２５（ダサチニブ）、およびＡＭＮ−１０７（ニロチニブ）が挙げられる。さらなるキナーゼ阻害剤はデービース（Davies）ら、Biochem. J. 2000, 351, 95-105；およびマキネス（McInnes C）、フィッシャー（Fischer P.M.）、Curr. Pharm. Des. 2005 11:14 (1845-1863)で検討されている。
他の抗癌剤と結合または相互作用する特定の領域としては、キナーゼ活性部位、ＡＴＰ結合部位およびゲートキーパー領域が挙げられ、特にablにおけるT315、ＫＴＴにおけるＴ６７０、ＰＤＧＦＲにおけるT674およびＥＧＦＲにおけるT790を含むスレオニンゲートキーパー残基である。ＡＴＰ結合ポケットを含むキナーゼ活性部位の特定の領域はブルペッティ（Vulpetti A.）、ボソッティ（Bosotti R.）、Farmaco 2004 59:10 (759-765)；ナイト（Knight）ら、Chemistry & Biology, 12, 621-637；およびチェリー（Cherry M.）、ウィリアムス（Williams D.H.）Curr. Med. Chem. 2004 11:6 (663-673)で検討されている。
本発明のさらなる態様は、スレオニンゲートキーパー残基（すなわちａｂｌにおけるＴ３１５、Ｔ６７０におけるＫＩＴ、ＰＤＧＦＲにおけるＴ６７４）に変異を含むｃ−ａｂｌ、ｃ−ｋｉｔおよびＰＤＧＦＲの阻害のための式Ｉの化合物の使用に関する。
したがって、本発明のさらなる実施態様では、式（Ｉ）、式（Ｉ´）または式（Ｉ０）の化合物の乳酸塩またはクエン酸塩あるいはそのサブグループまたは例は、胃腸間質性腫瘍（ＧＩＳＴ）、多形性グリア芽腫のようなグリア芽腫、高好酸球症候群または***性皮膚線維肉腫を治療するために使用される。
上記の段落に従って、さらなる態様では、本発明は下記のものを提供する：
癌細胞が：
（ａ）スレオニンゲートキーパー変異；または
（ｂ）薬剤耐性ゲートキーパー変異；または
（ｃ）Ｔ３１５Ｉイマチニブ耐性変異；または
（ｄ）ＫＩＴにおけるＴ６７０Ｉ変異；または
（ｅ）ＰＤＧＦＲにおけるＴ６７４Ｉ変異、
である薬剤耐性キナーゼ変異を含む癌の治療に用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）の化合物（例えば、その乳酸塩またはクエン酸塩形態）。
ＢＣＲａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦ、ＥＧＦ受容体またはＥｒｂＢ２の変異型である変異分子標的を発現する癌の治療に用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）の化合物（例えば、その乳酸塩またはクエン酸塩形態）。
胃腸間質性腫瘍（ＧＩＳＴ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、高好酸球症候群および***性皮膚線維肉腫の治療に用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）の化合物（例えば、その乳酸塩またはクエン酸塩形態）。
他の抗癌剤と結合または相互作用するが式（Ｉ）のすべての化合物、式（Ｉ）の１つの化合物、と結合または相互作用をしないタンパク質の領域に変異を有するキナーゼ、例えばｃ−ａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦＲベータおよびＰＤＧＦＲアルファを含むＰＤＧＦＲならびに，ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢｌ）、ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２）、ＥｒｂＢ３およびＥｒｂＢ４などのＥｒｂＢフェミリーのメンバー、特に、ｃ−ａｂｌ、ｃ−ｋｉｔおよびＰＤＧＦＲ、ＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＡ１０、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ５、ＥｐｈＢ６などのエフリン受容体ファミリーのメンバー、ｃ−Ｓｒｃ、ならびにＴＹＫ２などのＪＡＫファミリーのキナーゼから選ばれる変異キナーゼ、が媒介する疾病の治療に用いる本明細書で定義されている式（Ｉ）の化合物（例えば、その乳酸塩またはクエン酸塩形態）。
癌細胞が：
（ａ）スレオニンゲートキーパー変異；または
（ｂ）薬剤耐性ゲートキーパー変異；または
（ｃ）Ｔ３１５Ｉイマチニブ耐性変異；または
（ｄ）ＫＩＴにおけるＴ６７０Ｉ変異；または
（ｅ）ＰＤＧＦＲにおけるＴ６７４Ｉ変異、
である薬剤耐性キナーゼ変異を含む癌の治療用薬剤の製造のための本明細書で定義されている式（Ｉ）の化合物（例えば、その乳酸塩またはクエン酸塩形態）。
ＢＣＲａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦ、ＥＧＦ受容体またはＥｒｂＢ２の変異型である変異分子標的を発現する癌の治療用薬剤の製造のための本明細書で定義されている式（Ｉ）の化合物（例えば、その乳酸塩またはクエン酸塩形態）の使用。
胃腸間質性腫瘍（ＧＩＳＴ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、高好酸球症候群および***性皮膚線維肉腫の治療用薬剤の製造のための本明細書で定義されている式（Ｉ）の化合物（例えば、その乳酸塩またはクエン酸塩形態）の使用。
他の抗癌剤と結合または相互作用するが式（Ｉ）のすべての化合物、式（Ｉ）の１つの化合物、と結合または相互作用をしないタンパク質の領域に変異を有するキナーゼ、例えばｃ−ａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦＲベータおよびＰＤＧＦＲアルファを含むＰＤＧＦＲならびに，ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢｌ）、ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２）、ＥｒｂＢ３およびＥｒｂＢ４などのＥｒｂＢフェミリーのメンバー、特に、ｃ−ａｂｌ、ｃ−ｋｉｔおよびＰＤＧＦＲ、ＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＡ１０、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ５、ＥｐｈＢ６などのエフリン受容体ファミリーのメンバー、ｃ−Ｓｒｃ、ならびにＴＹＫ２などのＪＡＫファミリーのキナーゼから選ばれる変異キナーゼ、が媒介する疾病の治療用薬剤の製造のための本明細書で定義されている式（Ｉ）の化合物（例えば、その乳酸塩またはクエン酸塩形態）の使用。
癌細胞が：
（ａ）スレオニンゲートキーパー変異；または
（ｂ）薬剤耐性ゲートキーパー変異；または
（ｃ）Ｔ３１５Ｉイマチニブ耐性変異；または
（ｄ）ＫＩＴにおけるＴ６７０Ｉ変異；または
（ｅ）ＰＤＧＦＲにおけるＴ６７４Ｉ変異、
である薬剤耐性キナーゼ変異を含む癌に罹患している患者を治療する方法であって、前記方法は本明細書で定義されている式（Ｉ）の化合物（例えば、その乳酸塩またはクエン酸塩形態）を患者に投与することを含む。
ＢＣＲａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦ、ＥＧＦ受容体またはＥｒｂＢ２の変異型である変異分子標的を発現する癌の治療方法であって、前記方法は本明細書で定義されている式（Ｉ）の化合物（例えば、その乳酸塩またはクエン酸塩形態）を治療が必要な患者に投与することを含む。
胃腸間質性腫瘍（ＧＩＳＴ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、高好酸球症候群および***性皮膚線維肉腫の治療方法であって、前記方法は本明細書で定義されている式（Ｉ）の化合物（例えば、その乳酸塩またはクエン酸塩形態）を治療が必要な患者に投与することを含む。
他の抗癌剤と結合または相互作用するが式（Ｉ）のすべての化合物、式（Ｉ）の１つの化合物、と結合または相互作用をしないタンパク質の領域に変異を有するキナーゼ、例えばｃ−ａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦＲベータおよびＰＤＧＦＲアルファを含むＰＤＧＦＲならびに，ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢｌ）、ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２）、ＥｒｂＢ３およびＥｒｂＢ４などのＥｒｂＢフェミリーのメンバー、特に、ｃ−ａｂｌ、ｃ−ｋｉｔおよびＰＤＧＦＲ、ＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＡ１０、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ５、ＥｐｈＢ６などのエフリン受容体ファミリーのメンバー、ｃ−Ｓｒｃ、ならびにＴＹＫ２などのＪＡＫファミリーのキナーゼから選ばれる変異キナーゼ、が媒介する疾病の治療方法であって、前記方法は本明細書で定義されている式（Ｉ）の化合物（例えば、その乳酸塩またはクエン酸塩形態）を治療が必要な患者に投与することを含む。
さらなる態様では、本発明は、若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）または慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）の治療で用いる１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素あるいはその塩（例えば、Ｌ−乳酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、メシル酸塩、エタンスルホン酸塩、ＤＬ−乳酸塩、アジピン酸塩、Ｄ−グロクロン酸塩、Ｄ−グルコン酸塩または塩酸塩、溶媒和物、互変異性体またはＮ−オキシドを提供する。
本発明はさらに、真性多血症、本態性血小板増加症あるいは特発性骨髄線維症の治療に用いる１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素あるいはその塩（例えば、Ｌ−乳酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、メシル酸塩、エタンスルホン酸塩、ＤＬ−乳酸塩、アジピン酸塩、Ｄ−グロクロン酸塩、Ｄ−グルコン酸塩または塩酸塩、溶媒和物、互変異性体またはＮ−オキシドを提供する。
本発明はさらに、巨核球性ＡＭＬ（ＡＭＬ Ｍ７）を含む巨核球性白血病あるいはフィラデルフィア染色体陰性ＣＭＬまたはイマチニブ耐性ＣＭＬの治療の治療に用いる１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素あるいはその塩（例えば、Ｌ−乳酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、メシル酸塩、エタンスルホン酸塩、ＤＬ−乳酸塩、アジピン酸塩、Ｄ−グロクロン酸塩、Ｄ−グルコン酸塩または塩酸塩、溶媒和物、互変異性体またはＮ−オキシドを提供する。
真性多血症；本態性血小板増加症；特発性骨髄線維症；若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）；慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）；巨核球性ＡＭＬ（ＡＭＬ Ｍ７）を含む巨核球性白血病；フィラデルフィア染色体陰性ＣＭＬまたはイマチニブ耐性のＣＭＬの治療において、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の遊離塩基を使用してもよく、より好ましくは、塩を使用してもよい。前記塩は、我々の先の出願であるＵＳＳＮ６０／６４０，４７５およびＧＢ０４２８５５２．４に開示された酢酸塩、メシル酸塩、エタンスルホン酸塩、ＤＬ−乳酸塩、アジピン酸塩、Ｄ−グロクロン酸塩、Ｄ−グルコン酸塩または塩酸塩であってもよい、あるいは、前記塩は本明細書に開示された塩、例えば乳酸塩またはクエン酸、のうちの１つであってもよい。
また、真性多血症；本態性血小板増加症；特発性骨髄線維症；若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）；慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）；巨核球性ＡＭＬ（ＡＭＬ Ｍ７）を含む巨核球性白血病；フィラデルフィア染色体陰性ＣＭＬまたはイマチニブ耐性のＣＭＬの治療法が提供され、前記治療法はそのような治療を必要とする患者に１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素またはその塩に投与することによる。
本発明はまた、ニロチニブ耐性ＣＭＬまたはダサチニブ耐性ＣＭＬの治療に用いる本発明の化合物を提供する。
１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素（式（Ｉ ０ ）の化合物）の利点
式（Ｉ０）の化合物は従来の化合物に比べて多くの利点を有する。例えば、式（Ｉ０）の化合物は、Ｊａｋ２、Ｔ３１５ＩａｂｌおよびＶＥＧＦＲキナーゼ（表Ａを参照）などの癌の増殖および維持に関わるキナーゼを含む種々のキナーゼに対するその活性がより強力かつ選択的であり、特にオーロラキナーゼＡおよびオーロラキナーゼＢに対して増強した選択性および効能を示す。前記化合物が標的とする他のキナーゼの多くは腫瘍形成性のシグナル伝達経路にあり、それらキナーゼは前記化合物の抗腫瘍作用(ＰＤＫ１、Ｆｌｔ３、ＶＥＧＦＲ２)に積極的に寄与する可能性を有している。さらに、ＪＡＫ２およびｃ−ａｂｌＴ３１５Ｉ変異体に対する効能は、グリベック耐性ＣＭＬおよび真性多血症を含む白血病や骨髄増殖性疾患に関して潜在的に興味深いものである。
表Ａ：インビトロでのキナーゼの阻害
Figure 0005474354
さらに、前記化合物が標的とする他のキナーゼは、特に血管新生を阻害または抑制し甲状腺癌（表Ｂ）の治療に関して興味深いものであリ得る。
表Ｂ：インビトロでの他のキナーゼの阻害
Figure 0005474354
また、式（Ｉ０）の化合物はＰ４５０酵素（表Ｃ）に対して異なる感受性を有している点で従来の化合物に対して有利である。
表Ｃ：インビトロでの発現シトクロムＰ４５０アイソフォームの阻害
Figure 0005474354
さらに、本発明の化合物はまた、薬物代謝と薬物速度論的特性に関して向上を示す点で従来の化合物に比べて有利である。特に、本発明の化合物は減少した血漿タンパク結合を示す。実施例２４、６２、６３および６４の化合物の血漿タンパクへの結合は、ラットの血漿では６１％、マウスの血漿では８２％の範囲であり、試験された種類のすべてにわたって同じように中程度であった。これは、遊離薬物が治療効果を発揮するために遊離薬物を適切な作用部位に到達させるため、より多くの遊離薬物を体循環中に確保しておくことの利点を示している可能性がある。腫瘍中で薬理作用を発揮ために増加された遊離分画は、向上した有効性をもたらす可能性があり、それにより投与される量の低減を可能する。
式（Ｉ０）の化合物はまた、増殖（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ）およびクローン（ｃｌｏｎｏｇｅｎｉｃ）アッセイにおいて向上した細胞活性を示し(例えば実施例１６および実施例１７に記載のアッセイ)、それにより広範囲の固形腫瘍および白血病細胞株（表Ｄ）に対する向上した抗癌活性を示す。
表Ｄ：腫瘍細胞集落形成に対する妨害作用
Figure 0005474354
 *：＋は、野生型ｐ５３の発現を示す；−は、ｐ５３の発現が無かったかｐ５３が機能性でなかったことを示す。
式（Ｉ０）の化合物は減少した毒性を有し、したがってより大きな治療濃度域を有する。初代ヒト***上皮細胞を使用したインビトロ研究では、正常細胞の処理後、腫瘍細胞と比較して、より少数の細胞が多核になるか、あるいは処理後により少数の細胞が死に、その代わりに一旦処理を止めれば、細胞周期に再び入る前に可逆的にＧ２／Ｍ停止を受けることが示された。データは、化合物処理が正常細胞と比較して腫瘍細胞に対して異なった効果があることを示す。チェックポイント不全腫瘍細胞では、オーロラキナーゼ阻害を介した、有糸***の破壊、細胞質***の阻害および紡錘体チェックポイントの迂回により、化合物処理が多核細胞化を引き起こす。この多核細胞化が細胞死にもたらすようである。対照的に、化合物処理された正常なチェックポイントコンピテント細胞では、２４時間の化合物処理後に、より少数の細胞が多核になるか、あるいはより少数の細胞が死ぬ、その代わりに、より多くの割合の細胞が、一旦化合物が取り除かれれば可逆的にＧ２／Ｍ停止を受け、再び細胞周期に入る。これらの効果の違いは、正常細胞はもし正確な染色体分離が起こらない場合、細胞周期を停止させるため、有系***後のｐ５３依存性チェックポイントなどの、チェックポイントが機能しているという事実を反映している可能性がある。腫瘍細胞では、これらのチェックポイントは不在であり、有糸***が進み多核細胞化が起こることを可能にする。
更に、式（Ｉ０）の化合物の塩形態は、水溶液において向上した溶解度を示し、よりよい物理化学的特性（例えば、より低いｌｏｇＤ)を示す。
式（Ｉ´）の化合物の製造方法
式(I´´)の化合物は当業者に公知の合成法に従って製造することができる。
例えば、式(I´´)の化合物、式中Ａは結合（すなわちＡとカルボニル基がアミド結合を形成）、は標準的なアミド形成条件下で式（Ｘ）の化合物：
Figure 0005474354
 およびカルボン酸Ｒ１Ｅ−ＣＯ２Ｈまたはその反応性誘導体との反応により製造することができる。
前記カルボン酸とアミン（Ｘ）のカップリング反応は、ペプチド結合の形成に一般に用いられるタイプの試薬の存在下で行うことができる。このような試薬の例としては、１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）（シーハン（Sheehan）ら、J. Amer. Chem Soc. 1955, 77, 1067)、１−エチル−３−（３´−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド（ＥＤＣ）（シーハン（Sheehan）ら、J. Org. Chem., 1961, 26, 2525)、ウロニウム系カップリング剤、例えば、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ´，Ｎ´−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）（カルピノ（L. A. Carpino）、J. Amer. Chem. Soc., 1993, 115, 4397)、およびホスホニウム系カップリング剤、例えば、１−ベンゾ−トリアゾリルオキシトリス（ピロリジノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ）（カストロ（Castro）ら、Tetrahedron Letters, 1990, 31, 205）が挙げられる。カルボジイミド系カップリング剤は、１−ヒドロキシアザベンゾトリアゾール（ＨＯＡｔ）または１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）（コーニック（Konig）ら、Chem. Ber., 103, 708, 2024-2034）と併用するのが有利である。好ましいカップリング試薬としては、ＥＤＣおよびＤＣＣとＨＯＡｔまたはＨＯＢｔとの組合せが挙げられる。
カップリング反応は、典型的にはアセトニトリル、ジオキサン、ジメチルスルホキシド、ジクロロメタン、ジメチルホルムアミドまたはＮ−メチルピロリジンなどの非水性非プロトン性溶媒中、または１以上の混和性補助溶媒を伴ってもよい水性溶媒中で行われる。反応は、室温、または反応物の反応性が小さい場合には適当な高温で行うことができる（例えば、スルホンアミド基のような電子求引基を有する電子不足のアニリンの場合）。反応は、非干渉塩基、例えば、トリエチルアミンまたはＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンなどの第三級アミン、の存在下で行ってもよい。
別法として、カルボン酸の反応性誘導体、例えば無水物または酸塩化物を用いてもよい。無水物などの反応性誘導体との反応は典型的には、ピリジンなどの塩基の存在下、室温でそのアミンと無水物を撹拌することによって達成される。
式（Ｘ）のアミンは、標準的な条件下で対応する式（ＸＩ）のニトロ−化合物を還元することにより製造できる。この還元は、例えば、室温にて、エタノールまたはジメチルホルムアミドなどの極性溶媒中、パラジウム炭素などの触媒の存在下での触媒的水素化により行うことができる。
Figure 0005474354
式（ＸＩ）のニトロ−化合物は、式（ＸＩＩ）：
Figure 0005474354
 のニトロ−ピラゾールカルボン酸を４−モルホリン−４−イルメチル−ベンゼン−ｌ，２−ジアミン（ＭがＤｌである化合物を形成)または４，５−ジメトキシ−ベンゼン−１，２−ジアミン(ＭがＤ２である化合物を形成)と反応させることにより製造することができる。
このジアミンとカルボン酸（ＸＩＩ）との反応は、これまでに記載したアミドカップリング条件下、上記のようなＨＯＢｔの存在下、ＤＣＣまたはＥＤＣなどの試薬の存在下で行うことができ、中間体オルト−アミノフェニルアミド（図示せず）が得られ、次にこれを環化してベンゾイミダゾール環を形成させる。最終の環化工程は典型的には、酢酸の存在下、還流下で加熱することにより行うことができる。
ＭがＤ１である式（Ｘ）の化合物の製造を示す例示的な反応スキームはスキーム１に記されている。
Figure 0005474354
スキーム１の各ステップの典型的な条件は下記の実施例部分に記載されている。
ＭがＤ２である化合物は、類似の方法で製造することができるが、スキーム１のジアミン（ＸＶＩ）に代わり４，５−ジメトキシ−ベンゼン−ｌ，２−ジアミンを使用する。
式中Ａは結合である式（Ｉ´）の化合物の他の合成方法では、４−モルホリン−４−イルメチル−ベンゼン−ｌ，２−ジアミンおよび４，５−ジメトキシ−ベンゼン−１，２−ジアミンはまた、式中Ａが結合である式（ＸＶＩＩ）のカルボン酸と反応させることができ、式（Ｉ´）の化合物が得られる。
Figure 0005474354
カルボン酸（ＸＶＩＩ）とジアミンとの反応はニトロ化合物（ＸＩ）の製造に関して上述した反応と類似の条件で行なうことができる。式（ＸＶＩＩ）のカルボン酸は、スキーム２に示される一連の反応により製造することができる。
スキーム２に示されるように、置換または非置換４−ニトロ−３−ピラゾールカルボン酸（ＸＶＩＩＩ）は塩化チオニルとの反応によりエステル化して酸塩化物中間体を得ることができ、その後、エタノールと反応させて式（ＸＩＸ）のエチルエステルを形成することができる。あるいは、このエステル化は、酸性触媒、その一例としては塩化チオニル、の存在下でアルコールとカルボン酸を反応させることにより行うこともできる。この反応は典型的には、室温で、溶媒としてエステル化アルコール（例えば、エタノール）を用いて行われる。アミン（ＸＸ）を、上記のものと同様または類似のアミド形成条件下で、適当なカルボン酸Ｒ１−Ｅ−ＣＯ２Ｈとカップリングしてアミド（ＸＸＩ）を得る。次に、このアミド（ＸＸＩ）のエステル基を、典型的には室温で、メタノールなどの極性水和性溶媒中、水酸化ナトリウムなどのアルカリ金属水酸化物を用い、加水分解することができる。
Figure 0005474354
ＡがＮＲ２である式（Ｉ´）の化合物は、尿素の合成のための標準的な方法を用いて製造することができる。例えば、このような化合物は、式（Ｘ）のアミノピラゾール化合物を、ＤＭＦなどの極性溶媒中、式Ｒ１−Ｅ−Ｎ＝Ｃ＝Ｏで表される適宜置換されたイソシアネートと反応させることにより製造することができる。この反応は室温で都合よく行なわれる。
また、式（Ｉ´）の尿素はカルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）の存在下で式Ｒ１−Ｅ−ＮＨ２で表されるアミンと式（Ｘ）のアミンとを反応させることにより製造することができる。前記反応は、典型的には約１５０℃の温度まで熱し（例えば、マイクロ波ヒーターを使用して）ＴＨＦなどの極性溶媒中で行なわれる。
ＣＤＩを使用する代わりに、尿素を形成する２つのアミンのカップリングは、室温でジクロロメタンなどの溶剤中、トリエチルアミンなどの非干渉塩基の存在下で、トリホスゲン((トリクロロメチル）カーボネート）を使用することで達成することができる。
ＣＤＩに代わるさらなる選択肢として、トリホスゲンの代わりにホスゲンを使用してもよい。
上記の反応の多くのものでは、分子の望まない位置で反応が起こらないように１以上の基を保護する必要のある場合がある。保護基の例ならびに官能基を保護および脱保護する方法は、有機合成における保護基（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）（グリーン（Ｔ．Ｇｒｅｅｎ）およびワッツ（Ｗｕｔｓ）；第３版、ジョンワイリー＆サンズ、１９９９年）に見出すことができる。ヒドロキシ基は、例えば、エーテル（−ＯＲ）またはエステル（−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ）、例えば、ｔ−ブチルエーテル；ベンジル、ベンズヒドリル（ジフェニルメチル）またはトリチル（トリフェニルメチル）エーテル；トリメチルシリルまたはｔ−ブチルジメチルシリルエーテル；またはアセチルエステル（−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ３、−ＯＡｃ）、として保護することができる。アルデヒドまたはケトン基は、例えば、第一級アルコールとの反応により、カルボニル基（＞Ｃ＝Ｏ）がジエーテル（＞Ｃ（ＯＲ）２）に変換される、それぞれ、アセタール（Ｒ−ＣＨ（ＯＲ）２）またはケタール（Ｒ２Ｃ（ＯＲ）２）、として保護することができる。アルデヒド基またはケトン基は、酸の存在下で、過剰の水を用いて加水分解により容易に再生される。アミン基は、例えば、アミド（−ＮＲＣＯ−Ｒ）またはウレタン（−ＮＲＣＯ−ＯＲ）、例えば、メチルアミド（−ＮＨＣＯ−ＣＨ３）；ベンジルオキシアミド（−ＮＨＣＯ−ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、−ＮＨ−Ｃｂｚ）として；ｔ−ブトキシアミド（−ＮＨＣＯ−ＯＣ（ＣＨ３）３、−ＮＨ−Ｂｏｃ）；２−ビフェニル−２−プロポキシアミド（−ＮＨＣＯ−ＯＣ（ＣＨ３）２Ｃ６Ｈ４Ｃ６Ｈ５、−ＮＨ−Ｂｐｏｃ）として、９−フルオレニルメトキシアミド（−ＮＨ−Ｆｍｏｃ）として、６−ニトロベラトリルオキシアミド（−ＮＨ−Ｎｖｏｃ）として、２−トリメチルシリルエチルオキシアミド（−ＮＨ−Ｔｅｏｃ）として、２，２，２−トリクロロエチルオキシアミド（−ＮＨ−Ｔｒｏｃ）として、アリルオキシアミド（−ＮＨ−ＡＬＬｏｃ）として、または２（−フェニルスルホニル）エチルオキシアミド（−ＮＨ−Ｐｓｅｃ）、として保護することができる。アミン、例えば、環状アミンおよび複素環式Ｎ−Ｈ基のための他の保護基としては、トルエンスルホニル（トシル）およびメタンスルホニル（メシル）基ならびにベンジル基、例えば、パラ−メトキシベンジル（ＰＭＢ）基が挙げられる。カルボン酸基は、エステル、例えば、Ｃ１−７アルキルエステル（例えば、メチルエステル；ｔ−ブチルエステル）；Ｃ１−７ハロアルキルエステル（例えば、Ｃ１−７トリハロアルキルエステル）；トリＣ１−７アルキルシリル−Ｃ１−７アルキルエステル；またはＣ５−２０アリール−Ｃ１−７アルキルエステル（例えば、ベンジルエステル；ニトロベンジルエステル）；またはアミド、例えば、メチルアミド、として保護することができる。チオール基は、例えば、チオエーテル（−ＳＲ）、例えば、ベンジルチオエーテル；アセタミドメチルエーテル（−Ｓ−ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ３）、として保護することができる。
式（Ｉ´）のサブグループ（Ｃ）を構成する酸付加塩は、親化合物１−（２，６−ジフルオロフェニル）−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の合成中に形成することができる、あるいは親化合物の遊離塩基の所望の塩への変換により形成することができる、あるいは親化合物の１つの塩を親化合物の他の所望の塩へ変換することにより形成することができる。親化合物１−（２，６−ジフルオロフェニル）−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素（式（ＩＡ）の化合物）は下記のスキーム３に示された方法により製造することができる。
スキーム３に示されるように、市販されている化合物である３，４−ジニトロカルボン酸（ＸＩＩＩ）はモルホリド（ＸＸＩ）に変換される。アミドの形成は標準的な方法を使用して、酸（ＸＩＩ）を酸クロリドのような活性誘導体に変換することにより達成することができる。例えば、酸クロリドは、塩化チオニルの還流温度で過剰の塩化チオニルとともに熱し次に過剰の塩化チオニルをトルエンとの共沸により除去することにより形成することができる。
モルホリド（ＸＸＩ）は、三フッ化ホウ素と組み合わせた水素化ホウ素ナトリウムなどの適当な還元剤との処理によりジニトロベンジルモルホリン（ＸＸＩＩＩ）に還元することができる。還元反応は、典型的には低温、例えば０〜５℃の温度で、テトラヒドロフランのような無水溶媒中で行なわれる。ジニトロベンジルモルホリン（ＸＸＩＩＩ）はその後、標準条件下、例えば室温でエタノールのような極性溶媒中パラジウム炭素のような触媒の存在下で接触水素化により、ジアミノベンジルモルホリン（ＸＸＩＶ）に還元できる。
ジアミノベンジルモルホリン（ＸＸＩＶ）をその後、市販の４−ニトロピラゾール−３−カルボン酸と反応させ、ニトロピラゾリル-ベンゾイミダゾール（ＸＸＶ）を形成する。ニトロピラゾリル-ベンゾイミダゾール（ＸＸＶ）の形成は、まず、芳香族アミン基とアミド結合形成を促進することができるＯ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ´，Ｎ´−テトラメチルウロニウムテトラフルオロ硼酸塩（ＴＢＴＵ）のようなペプチド結合試薬を使用して、カルボン酸とジアミノベンジル化合物（ＸＸＩＶ）間にアミド結合を形成することにより達成されてもよい。中間体アミド（図示せず）はそれから、過剰の氷酢酸中で、例えば約６５℃の温度で熱することによりニトロ−ピラゾリル−ベンゾイミダゾール（ＸＸＶ）に環化される。
ニトロピラゾリル-ベンゾイミダゾール（ＸＸＶ）は標準条件下で対応するアミン（ＸＸＶＩ）に還元することができる。還元は、例えばパラジウム炭素のような触媒の存在下でエタノールまたはジメチルホルムアミドのような極性溶媒中、室温で接触水素化により達成されてもよい。アミン（ＸＸＶＩ）は次に尿素合成の標準的な方法を使用して、例えばＴＨＦのような極性溶媒中、室温あるいはそれ以下、例えば０−５℃の温度で、アミン（ＸＸＶＩ）を２，６−ジフルオロフェニル−イソシアネートと反応させることによって、尿素（ＩＡ）に変換することができる。
尿素（ＩＡ）の遊離塩基形態は本発明の酸付加塩を製造するために使用することができる。
Figure 0005474354
本発明の塩は、医薬用塩：特性、選択および使用（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ Ｕｓｅ）、ハインリヒスタール（Ｐ．Ｈｅｉｎｒｉｃｈ Ｓｔａｈｌ）（編者）、カミールワーマス（Ｃａｍｉｌｌｅ Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ）（編者）、ＩＳＢＮ：３−９０６３９−０２６−８、ハードカバー、ｐ．３８８、２００２年８月、に記載の方法などの従来の方法により遊離塩基から製造することができる。例えば、前記塩は、遊離塩基を水もしくは有機溶媒または両者の混合物中（一般的には、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、またはアセトニトリルなどの非水性媒体を用いる）、適当な酸と反応させることにより製造することができる。
他の態様では、本発明は、溶媒（典型的には有機溶媒）または混合溶媒中で１−（２，６−ジフルオロフェニル）−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素遊離塩基の溶液を形成し、酸で前記溶液を処理して酸付加塩の沈澱物を形成することを含む方法により、本明細書で定義されるような本発明の新規な使用のための、１−（２，６−ジフルオロフェニル）−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の酸付加塩を提供する。
酸は、典型的には、遊離塩基が溶解している溶媒と混和性がある溶媒に溶液として加えられる。
遊離塩基がまずに溶解される溶媒はその塩が不溶性のものであってもよい。また、遊離塩基がまず溶解される溶液は塩が少なくとも部分的に溶解されるものであってもよく、酸付加塩がそれほど可溶でない異なる溶媒が、塩が溶液から沈殿するように、続いて加えられる。
例えば、本発明の塩の一製造方法では、遊離塩基は第1の溶媒（酢酸エチルあるいは酢酸エチルとメタノールのようなアルコールの混合物であってもよい)、そして第２の溶媒（ジエチルエーテルまたはダイオキシンのようなエーテルであってもよい）での塩酸のような酸の溶液（例えば、濃縮もしくは飽和溶液）がその後、酸付加塩の沈澱物が形成されるように、加えられ、その後、沈澱物を、例えば濾過により、採取する。
１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の製造方法
我々の先の出願ＷＯ２００５／００２５５２の実施例および上記スキーム１および３において、［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−アミドは下記を含むの一連の工程によって製造することができると開示されている：
（ｉ）４−モルホリン−４−イルメチル−ベンゼン−１，２−ジアミンと４−ニトロ−ｌＨ−ピラゾール−３−カルボン酸とを１−エチル−３−（３´−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド（ＥＤＣ）および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）の存在下でＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中で反応させ、５−モルホリン−４−イルメチル−２−（４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ｌＨ−ベンゾイミダゾールを得る工程；および
（ｉｉ）水素雰囲気下パラジウム炭素で処理することによりニトロ基を還元する工程；
あるいは
（ｉ）４−アミノ−１Ｈ−ピラゾール−３カルボン酸エステルと適当なカルボン酸とを１−エチル−３−（３´−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド（ＥＤＣ）および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）の存在下でＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中で反応させる、または適当な酸クロリドとトリエチルアミンの存在下で反応させて、４−アミド−ｌＨ−ピラゾールを形成する工程；および
（ｉｉ）４−モルホリン−４−イルメチル−ベンゼン−１，２−ジアミンと適当な４−アミド−１Ｈ−ピラゾールカルボン酸とを１−エチル−３−（３´−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド（ＥＤＣ）および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）の存在下でジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中で反応させ、［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−アミドを得る工程。
ニトロ-ピラゾール化合物とジアミンとを反応させ次にニトロ基をアミンに還元する、もしくはアミド-ピラゾールとジアミンとを反応させる代わりに、アミノピラゾールのアミノ基が適切に保護されていれば、アミノ-ピラゾールをジアミンと反応させてもよいことが現在見出されている。反応生成物はその後ベンゾイミダゾールを形成するために環化することができる。さらに、アミン保護基の除去およびベンゾイミダゾールへの環化は一つの工程で行なうことができることが見出されている。
従って、式（ＸＸＶＩＩ）または（ＸＸＶＩＩＩ）の化合物あるいはその塩の製造方法は以下の工程を有する:
Figure 0005474354
 （ｉ）式中ＰＧはアミン保護基である式（ＸＸＩＸ）の化合物と:
Figure 0005474354
 （ｉｉ）式（ＸＸＸＩ）の化合物とを:
Figure 0005474354
 有機溶媒中ＥＤＣおよびＨＯＢｔなどのカップリング剤の存在下で反応させる工程（式（ＸＸＶＩＩＩ）は（ＸＸＶＩＩ）の位置異性体をである）。
アミン保護基ＰＧは、上記の方法中で適用される条件下でアミン基を保護するのに用いるために公知のどのような保護基であってもよい、例えば前記のGreenらの文献を参照。従って、例えば、窒素は、アミド（ＮＣＯ−Ｒ）またはウレタン（ＮＣＯ−ＯＲ）として、例えば、メチルアミド（ＮＣＯ−ＣＨ３）；ベンジルオキシアミド（ＮＣＯ−ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、−ＮＨ−Ｃｂｚ）として；ｔｅｒｔ−ブトキシアミド（−ＮＨＣＯ−ＯＣ（ＣＨ３）３、Ｎ−Ｂｏｃ）として；２−ビフェニル−２−プロポキシアミド（ＮＣＯ−ＯＣ（ＣＨ３）２Ｃ６Ｈ４Ｃ６Ｈ５、Ｎ−Ｂｐｏｃ）として、９−フルオレニルメトキシアミド（Ｎ−Ｆｍｏｃ）として、６−ニトロベラトリルオキシアミド（Ｎ−Ｎｖｏｃ）として、２−トリメチルシリルエチルオキシアミド（Ｎ−Ｔｅｏｃ）として、２，２，２−トリクロロエチルオキシアミド（Ｎ−Ｔｒｏｃ）として、アリルオキシアミド（Ｎ−Ａｌｌｏｃ）として、または２（−フェニルスルホニル）エチルオキシアミド（Ｎ−Ｐｓｅｃ）として保護することができる。アミンのための他の保護基としては、パラ−メトキシベンジル（ＰＭＢ）基などのベンジル基が挙げられる。好ましいアミン保護基はウレタン（ＮＣＯ−ＯＲ）、例えば、ベンジルオキシアミド（ＮＣＯ−ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、−ＮＨ−Ｃｂｚ）；ｔｅｒｔ−ブトキシアミド（−ＮＨＣＯ−ＯＣ（ＣＨ３）３、Ｎ−Ｂｏｃ）；またはアリルオキシアミド（Ｎ−Ａｌｌｏｃ）である。一つの実施態様では、保護基ＰＧは、酸性条件下で除去されてもよいアミン保護基である保護基ＡＰＧである。そのような基としては、ウレタンが挙げられる。特に好ましいウレタン保護基は酸性条件下で除去されてもよいｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルである。
一つの実施態様では、保護基ＰＧはその後式（ＸＸＶＩＩ）または（ＸＸＶＩＩＩ）の化合物から除去され、保護基ＡＰＧと置換され、式（ＸＸＶＩＩａ）または（ＸＸＶＩＩＩａ）の化合物が形成される。
式（ＸＸＩＸ）の特に好ましい化合物の１つは、下記の式（ＸＸＸＩＩ）の化合物である。
Figure 0005474354
本発明はさらに、式（ＸＸＸＩＩ）の中間体自体を提供する。
本発明はまた、式（ＸＸＶＩＩ）および（ＸＸＶＩＩＩ）の中間体自体を提供する、例えば、下記の新規な式（ＸＸＶＩＩａ）および（ＸＸＶＩＩＩａ）の化学中間体である。したがって、本発明は４−アミノ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸（２−アミノ−４−モルホリン−４−イルメチル−フェニル)−アミドおよび４−アミノ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸（２−アミノ−５−モルホリン−４−イルメチル−フェニル)−アミドならびにそれらの保護された形態を新規な化学中間体として提供する。特に好ましい新規な式（ＸＸＶＩＩ）の化学中間体の１つは、［３−(２−アミノ−４−モルホリン−４−イルメチル−フェニルカルバモイル)−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルである。特に好ましい新規な式（ＸＸＶＩＩＩ）の化学中間体の１つは、［３−(２−アミノ−５−モルホリン−４−イルメチル−フェニルカルバモイル)−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルである。
保護基ＰＧがｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル基である場合、前記方法からの全収率は８５％を越える。更に、前記方法は、比較的単純で安価な試薬および溶媒を利用する点で有利であり、また生成物の精製の容易さに関しても有利である。
他の態様では、本発明は、本明細書で定義されるような新規な使用のための、下記の工程を有する方法によって製造された（３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イルアミンまたはその塩を提供する：
（ｉ）式（ＸＸＶＩＩａ）または（ＸＸＩＩＩａ）の化合物を
Figure 0005474354
 溶媒中において酸で、必要に応じて加熱と共に、処理する工程；および
（ｉｉ）反応物を中和する工程。
アミン保護基ＡＰＧは、式（ＸＸＶＩＩ）または（ＸＸＶＩＩＩ）の化合物に関して上記に定義されるようなアミン基を保護するのに用いるために公知のどのような保護基であってもよい、そして前記アミン保護基は上記方法で適用される条件下で除去可能である。
工程（ｉ）では、酸との反応は加熱、例えば８０〜１００℃の範囲の温度、を伴って行なってもよい。工程（ｉ）が行なわれる溶媒はアルコール溶媒であり、例えばそれはエタノールであってもよい。
工程（ｉ）では、保護基は酸で処理することにより除去できるＢｏｃ基のようなものが好適である。前記酸は、環化反応のためカルボニル基を活性化させるために中間体のプロトン化に適当であるように選択される。適当な酸としては、硫酸、メタンスルホン酸あるいは塩酸などの強酸が挙げられ、１つの特定の酸は塩酸である。
例えば出発物質（ＸＩＩＩａ）の消失で判断される、工程（ｉ）における反応の完了に続いて、反応物を中和できる。
工程（ｉｉ）では、非干渉塩基が使用される。当該文脈では“非干渉塩基”なる語は、生成される化合物と反応しない炭酸ナトリウムのような塩基を意味する。工程（ｉｉ）は、典型的には室温で行なわれる。
工程（ｉｉ）では、反応物は、例えば反応物が中和剤で飽和するまで、そしてｐＨ８．５で中和される。
工程（ｉｉ）に続き、化合物は１，１´−カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）などのカルボニル化試薬またはホスゲン均等物と反応させることができ、次に、シクロプロピルアミンで処理できる。
ホスゲン均等物としてはトリホスゲンまたはホスゲンが挙げられる。
好ましいカルボニル化試薬は１，１´−カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）である。
また、尿素は、溶媒、例えばＴＨＦ、中でピリジンのような塩基の存在下でアミノピラゾールをクロロギ酸フェニルと反応させ環状尿素を得て、次にシクロプロピルアミンで処理することにより製造することができる、もしくはアミノピラゾールを（ＵＳ４，３１３，７５５およびＵＳ４，２９９，７７８に記載されているように）シクロプロパンカルボキシル酸アジドのクルチウス転位から製造することができるシクロプロピルイソシアネートと反応させることにより製造することができる。
したがって、さらなる態様では、本明細書で定義されるような新規な使用のための、下記の工程を有する方法によって製造された１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素またはその塩が提供される：
（ｉ）式（ＸＸＶＩＩａ）の化合物を、必要に応じて加熱と共に、溶媒中において酸で処理する工程；
（ｉｉ）反応物を中和する工程;
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）の生成物とカルボニル化試薬とを反応させる工程;
（ｉｖ）工程（ｉｉｉ）の生成物をシクロプロピルアミンと反応させる工程。
工程（ｉｉｉ）は、典型的には還流下、例えばまで約１００℃までの温度、さらに典型的には７０〜７５℃まで、で行なわれる。工程（ｉｉｉ）で、反応はテトラヒドロフランのような極性の非プロトン性溶媒中で行なわれてもよい。カルボニル化試薬は１，１´−カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）のような化合物あるいはトリホスゲンまたはホスゲンのようなホスゲン均等物。好ましいカルボニル化試薬は１，１´−カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）である。
工程（ｉｖ）は典型的には、例えば約１００℃までの温度に加熱して行なわれる。
工程（ｉｖ）に続いて、純度を高めるたり結晶形態を得るために、生成物は（例えば、２−プロパノールまたはエタノールを溶媒として使用して）塩変換または再結晶されてもよい。
上記工程（ｉｉｉ）は式（ＸＸＸＩＩＩ）の中間体化合物および／またはその位置異性体（ＸＸＸＩＩＩａ）を発生させる。
Figure 0005474354
必要であれば単離することができる式（ＸＸＸＩＩＩ）および（ＸＸＸＩＩＩａ）の中間体は、その後シクロプロピルアミンと反応させて式（ＸＸＸ）の化合物を得る。
従って、本明細書で定義されるような式（ＸＸＸ）の化合物の製造方法は、式（ＸＸＸＩＩＩ）または（ＸＸＸＩＩＩａ）の化合物とシクロプロピルアミンとを反応させ、その後、必要であれば式（ＸＸＸ）の化合物の酸付加塩を形成することを含む。前記反応は、典型的にはＮ−メチルピロリドンのような極性の非プロトン性溶媒中で、好ましくは８０℃を越える温度、より典型的には９０℃を超える温度、例えば９５℃〜１０５℃、のような高温で行なわれる。
前述の方法はまた、本明細書に定義されるような式（Ｉ）の他の化合物、ここで式（Ｉ）における部分ＡはＮＨである、およびそのサブグループを製造するために使用されてもよい。
従って、本明細書に定義されるような式（Ｉ）の化合物、ここで式（Ｉ）における部分ＡはＮＨである、の製造方法は（ｉ）式（ＸＸＸＩＩＩ）の化合物および／またはその位置異性体（ＸＸＸＩＩＩａ）、あるいは（ｉｉ）式（ＸＸＸＩＶ）の化合物および／またはその位置異性体（ＸＸＸＩＶａ）を:
Figure 0005474354
 式Ｒ１−Ｅ−ＮＨ２の化合物と、好ましくはＮ−メチルピロリドンのような極性の非プロトン性溶媒中で、好ましくは８０℃を越える温度、より典型的には９０℃を超える温度、例えば９５℃〜１０５℃のような高温で、反応させ、そしてその後必要に応じて式（Ｉ）の化合物の酸付加塩を形成することを含む。
本発明はさらに、式（ＸＸＸＩＩＩ）、（ＸＸＸＩＩＩａ）、（ＸＸＸＩＶ）および（ＸＸＸＩＶａ）の化学中間体を提供する。
さらなる実施態様では、上記の（３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イルアミンまたはその塩の製造方法あるいは１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素またはその塩の製造方法における式（ＸＸＶＩＩａ）の化合物は下記の工程を含む方法によって製造することができる：
（ｉ）ＰＧが酸で除去可能なアミン保護基すなわちＡＰＧである式（ＸＸＩＸ）の化合物と；
（ｉｉ）ＥＤＣおよびＨＯＢｔのようなカップリング剤の存在下、有機溶媒中で式（ＸＸＸＩ）の化合物とを反応させる工程。
精製方法
前記化合物は当業者に公知の多くの方法によって単離および精製することができ、このような方法の例としては、カラムクロマトグラフィー（例えば、フラッシュクロマトグラフィー）およびＨＰＬＣなどのクロマトグラフィー技術が挙げられる。分取ＬＣ−ＭＳは、本明細書に記載の化合物などの小有機分子の精製に用いる標準的かつ有効な方法である。液体クロマトグラフィー（ＬＣ）および質量分析（ＭＳ）の方法は、粗物質のよりよい分離とＭＳによるサンプルの検出の向上を得るために可変である。分取勾配ＬＣ法の至適化には、カラム、揮発性溶離剤および改質剤、ならびに勾配の変更を含む。分取ＬＣ−ＭＳ法を至適化し、その後それらを化合物の精製に用いるための方法は当技術分野で公知のものである。このような方法は、ローゼントレター（Ｒｏｓｅｎｔｒｅｔｅｒ Ｕ）、フーバー（Ｈｕｂｅｒ Ｕ．）；分取ＬＣ／ＭＳにおける至適部分採取（Ｏｐｔｉｍａｌ ｆｒａｃｉｏｎ ｃｏｌｌｅｃｔｉｎｇ ｉｎ ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅ ＬＣ／ＭＳ）；ジャーナルオブコンビナトリアルケミストリー（Ｊ．Ｃｏｍｂ．Ｃｈｅｍ．）；２００４年；６（２）、１５９−６４およびリースター（Ｌｅｉｓｔｅｒ Ｗ）、ストラウス（Ｓｔｒａｕｓｓ Ｋ）、ビスノスキ（Ｗｉｓｎｏｓｋｉ Ｄ）、ジャオ（Ｚｈａｏ Ｚ）、リンズリー（Ｌｉｎｄｓｌｅｙ Ｃ．）、化合物ライブラリの予備精製および解析的分析のためのカスタムハイスループット分取液体クロマトグラフィー/質量分析計プラットフォームの開発（Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａ ｃｕｓｔｏｍ ｈｉｇｈ−ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ／ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ ｐｌａｔｆｏｒｍ ｆｏｒ ｔｈｅ ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｎａｌｙｔｉｃａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｌｉｂｒａｒｉｅｓ）；ジャーナルオブコンビナトリアルケミストリー（Ｊ．Ｃｏｍｂ．Ｃｈｅｍ．）；２００３年；５（３）；３２２−９に記載されている。
分取ＬＣ−ＭＳにより化合物を精製するためのこのような系の１つを下記実験の節に記載するが、当業者ならば、記載のものに代わる系および方法が使用できることが分かるであろう。特に、本明細書に記載の逆相法の代わりに、順相分取ＬＣに基づく方法を用いてもよい。ほとんどの分取ＬＣ−ＭＳ系では逆相ＬＣと揮発性酸性改質剤を用いるが、これはこのアプローチが低分子の精製に極めて有効であり、これらの溶離剤が陽イオンエレクトロスプレー質量分析に適合しているからである。他のクロマトグラフィー溶液、上記の分析法で概略を示したような、例えば順相ＬＣ、あるいは緩衝移動相、塩基性改質剤などを代わりに用いて化合物を精製することもできる。
再結晶
１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩またはクエン酸塩の再結晶方法は、当業者に公知の方法により行なうことができる、例えば、ハインリヒスタール（Ｐ．Ｈｅｉｎｒｉｃｈ Ｓｔａｈｌ）（編者）、カミールワーマス（Ｃａｍｉｌｌｅ Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ）（編者）、ＩＳＢＮ：３−９０６３９−０２６−８、医薬用塩便覧：特性、選択および使用（Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄＵｓｅ、第８章, 出版者Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨを参照。有機反応から得られた生成物は、反応混合物から直接単離された時には、ほとんどが純粋ではない。もしも化合物（またはその塩）が固体の場合、適当な溶媒からの再結晶により精製および／または結晶化されてもよい。良再結晶溶媒は、精製される物質を高温で適度な量溶解するが低温ではその物質を少量しか溶解しないはずである。前記溶媒は、低温で不純物を容易に溶解してもよいし、全く溶解しなくてもよい。最後に溶媒は精製物から容易に除去されるはずである。これは通常、前記溶媒は比較的低沸点を有しており、当業者は特定の物質用の再結晶溶媒を認識していることを意味し、その情報がない場合は、いくつかの溶媒を試験すればよい。精製物の良好な収率を得るために、不純物をすべて溶解する最小量の高温溶媒が使用される。実際には、溶液が飽和しないように必要よりも３〜５％多くの溶媒が使用される。不純化合物が溶媒に不溶の不純物を含んでいる場合、前記不純物は濾過により除去され、その後、溶液が結晶化される。加えて、不純化合物が化合物に固有でない少量の有色物質を含んでいる場合、前記有色物質は、高温溶液へ少量の脱色炭を加え、濾過し、結晶化することより除去されてもよい。通常、結晶化は溶液を冷やすことで自然に起こる。そうでない場合は、結晶化は溶液を室温より低い温度に冷やしたり、純粋な物質の単結晶（種晶）を加えることにより誘発されてもよい。再結晶はまた貧溶媒の使用により行なわれてもよく、かつ／または貧溶媒の使用により収率を最大化してもよい。この場合、化合物は高温で適当な溶媒に溶解され、濾過され、次に結晶化を補助するために、所望の化合物が低い溶解度を示す追加の溶媒を加える。その後、結晶は典型的には、真空濾過を使用して単離され、洗浄され、次に例えばオーブン中であるいは脱水を介して乾燥される。
結晶化方法の他の例としては、例えばシールドチューブまたは気流中での蒸発工程を含む蒸気からの結晶化、ならびに溶融物からの結晶化が挙げられる（結晶化技術便覧（Ｃｒｙｓｔａｌｌｉｚａｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｈａｎｄｂｏｏｋ）、第２版、マースマン（Ａ．Ｍｅｒｓｍａｎｎ）による編集、２００１年)。
特に、式（Ｉ０）の化合物は、純度を高めるためや結晶形態を得るために、（例えば、溶媒として２−プロパノールまたはエタノールを使用して）再結晶されてもよい。
一般に、得られる結晶は、粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）または結晶Ｘ線回折のようなＸ線回折法により分析される。
したがって、さらなる実施態様では、本明細書で製造される化合物の乳酸塩は必要に応じて結晶形態、例えば、本明細書に定義されるような結晶形態、を得るために再結晶化される。
医薬製剤
化合物（例えば、式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物あるいは１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素あるいはその乳酸塩またはクエン酸塩のような塩すべて）は単独で投与することもできるが、本明細書の少なくとも１種類の有効化合物を１以上の薬学上許容される担体、アジュバント、賦形剤、希釈剤、増量剤、緩衝剤、安定剤、保存剤、滑沢剤または当業者に公知の他の物質、ならびに必要に応じて他の治療薬または予防薬、例えば、化学療法に伴ういくつかの副作用を減少または軽減する薬剤とともに含んでなる医薬組成物（例えば、製剤）として提供するのが好ましい。このような薬剤の特定の例としては、制吐薬、ならびに化学療法関連の好中球減少を予防する、または持続時間を軽減する薬剤、および赤血球または白血球、例えば、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、顆粒球マクロファージ−コロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、および顆粒球−コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）のレベル低下から起こる合併症を予防する薬剤が挙げられる。
従って、本発明はさらに、本明細書で定義されている本発明の新規な使用のための、上記で定義されている医薬組成物、ならびに上記で定義されている式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物あるいは１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素あるいはその乳酸塩またはクエン酸塩のような塩すべてを本明細書に記載されたようなの１以上の薬学上許容される担体、賦形剤、緩衝剤、アジュバント、安定剤、または他の物質とともに混合することを含む方法によって製造された医薬組成物を提供する。
本明細書において“薬学上許容される”とは、適切な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症なく、被験体（例えば、ヒト）の組織との接触に用いるのに好適であり、妥当な利益／リスク比で釣り合いがとれた化合物、物質、組成物および／または投与形を意味する。担体、賦形剤などの各々はまた、その製剤の他の成分と適合するという点で“許容される”ものでなければならない。
よって、さらなる態様では、本発明は、本明細書で定義されている本発明の新規な使用のための、本明細書で定義されている１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩またはクエン酸塩またはそれらの混合物を医薬組成物の形で提供する。
前記医薬組成物は、経口投与、非経口投与、局所投与、鼻腔内投与、点眼投与、点耳投与、直腸投与、膣内投与または経皮投与に好適ないずれの形態であってもよい。前記組成物が非経口投与を意図したものである場合、静脈内投与、筋肉内投与、腹腔内投与、皮下投与用に処方することもできるし、あるいは注射、注入または他の送達手段により標的臓器または組織に直接送達するために処方することもできる。送達はボーラス注射、短時間注入または長時間注入によるものとすることもでき、また、受動的送達であっても、または好適な注入ポンプの利用を介したものでもよい。
非経口投与に適した医薬製剤としては、酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤、および製剤を意図するレシピエントの血液と等張にする溶質を含有していてもよい水性および非水性無菌注射液；ならびに増粘剤を含有していてもよい水性および非水性無菌懸濁剤が挙げられる。これらの例はストリックリー（Ｒ．Ｇ．Ｓｔｒｉｃｋｌｙ）、経口および注射製剤における賦形剤の溶解（Ｓｏｌｕｂｉｌｉｚｉｎｇ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ ｉｎ ｏｒａｌ ａｎｄ ｉｎｊｅｃｔａｂｌｅ ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）、薬学研究（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）、第２１（２）巻、２００４年、ｐ．２０１−２３０に記載されている。さらに、前記医薬製剤は補助溶媒、有機溶媒混合物、シクロデキストリン複合体形成剤、乳化剤（エマルション製剤を発泡および安定化するため）、リポソーム形成のためのリポソーム成分、高分子ゲルを形成するためのゲル化可能なポリマー、凍結乾燥保護剤、ならびにとりわけ有効成分を可溶形態で安定化させるための薬剤、および製剤を意図するレシピエントの血液と等張にする薬剤の組合せを含んでもよい。これらの製剤は単回用量容器または複数用量容器、例えば、密閉アンプルおよびバイアルで提供することもできるし、使用直前に無菌液体担体、例えば、注射水を加えるだけのフリーズドライ（凍結乾燥）状態で保存することもできる。
イオン性の薬剤分子は、その薬剤のｐＫａが製剤のｐＨ値と十分に離れている場合には、ｐＨ調整により所望の濃度まで可溶化させることができる。許容される範囲は、静脈内投与および筋肉内投与ではｐＨ２〜１２であるが、皮下ではｐＨ２．７〜９．０である。溶液ｐＨは塩形態の薬剤、塩酸もしくは水酸化ナトリウムなどの強酸／塩基、緩衝剤溶液（限定されるものではないが、グリシン、クエン酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、ヒスチジン、リン酸塩、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（ＴＲＩＳ）、または炭酸塩が挙げられる）のいずれかにより制御される。
注射製剤では多くの場合、水溶液と水溶性有機溶媒／界面活性剤（すなわち、補助溶媒）の組合せが用いられる。注射製剤に用いられる水溶性有機溶媒および界面活性剤としては、限定されるものではないが、プロピレングリコール、エタノール、ポリエチレングリコール３００、ポリエチレングリコール４００、グリセリン、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、Ｎ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ；Ｐｈａｒｍａｓｏｌｖｅ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ソルトール（Ｓｏｌｕｔｏｌ）ＨＳ１５、クレモホールＥＬ、クレモホールＲＨ６０、およびポリソルベート８０が挙げられる。このような製剤は、必ずというわけではないが、通常、注射前に希釈される。
プロピレングリコール、ＰＥＧ３００、エタノール、クレモホールＥＬ、クレモホールＲＨ６０、およびポリソルベート８０は市販の注射製剤に用いられている、完全に水混和性の有機溶媒および界面活性剤であり、互いに併用が可能である。得られた有機注射製剤は通常、ＩＶボーラスまたはＩＶ注入前に少なくとも２倍希釈される。
あるいは、水に対する溶解度の上昇は、シクロデキストリンとの分子複合体形成によっても達成することができる。
リポソームは外側の脂質二重膜と内側の水性核からなる、閉じられた球状小胞であり、全体の直径が１００μｍ未満である。疎水性の程度によって、中程度の疎水性薬剤であれば、薬剤をリポソーム内に封入またはインターカレーションした場合に、リポソームにより可溶化させることができる。疎水性薬剤はまた、薬剤分子を脂質二重膜の一体部分とした場合にも、リポソームにより可溶化させることができ、この場合、この疎水性薬剤を脂質二重膜の脂質部分に溶解させる。典型的なリポソーム製剤はリン脂質を５〜２０ｍｇ／ｍｌで含む水、等張剤、ｐＨ５〜８の緩衝液、および必要に応じてコレステロールを含む。
前記製剤は単回用量容器または複数用量容器、例えば、密閉アンプルおよびバイアルで提供することもできるし、使用直前に無菌液体担体、例えば、注射水を加えるだけのフリーズドライ（凍結乾燥）状態で保存することもできる。
前記医薬製剤は、式（Ｉ）の化合物または１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素またはその乳酸塩またはクエン酸塩のようなすべての塩を凍結乾燥させることにより製造することができる。凍結乾燥とは、組成物をフリーズドライする手順をさす。よって、本明細書においてフリーズドライと凍結乾燥は同義語として用いられる。典型的な方法としては、化合物を可溶化させ、得られた製剤を明澄化し、濾過除菌し、凍結乾燥に適当な容器（例えば、バイアル）に無菌的に移すことである。バイアルの場合には、リオストッパー（ｌｙｏ−ｓｔｏｐｐｅｒ）で軽く栓をする。製剤は標準条件下で凍結するまで冷却し、凍結乾燥を行った後に密閉キャップをし、安定な凍結乾燥製剤を形成させることができる。この組成物は典型的には残留水分含量が低く、例えば、凍結乾燥物の重量の５重量％未満、例えば１重量％未満である。
前記凍結乾燥製剤は、他の賦形剤、例えば、増粘剤、分散剤、緩衝剤、酸化防止剤、保存剤、および張力調整剤を含み得る。典型的な緩衝剤としては、リン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩およびグリシンが挙げられる。酸化防止剤の例としては、アスコルビン酸、重亜硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、モノチオグリセロール、チオ尿素、ブチル化ヒドロキシトルエン、ブチル化ヒドロキシルアニソール、およびエチレンジアミン四酢酸塩が挙げられる。保存剤としては、安息香酸およびその塩、ソルビン酸およびその塩、パラ−ヒドロキシ安息香酸のアルキルエステル、フェノール、クロロブタノール、ベンジルアルコール、チメロサール、塩化ベンザルコニウムおよび塩化セチルピリジニウムが挙げられる。必要に応じて張力調整のために、これまでに挙げた緩衝剤ならびにデキストロースおよび塩化ナトリウムを使用することができる。
凍結乾燥技術では一般に、プロセスを容易にするため、かつ／または凍結乾燥塊に嵩および／または機械的強度をもたせるために増量剤を用いる。増量剤は、前記化合物またはその塩とともに凍結乾燥した際に物理的に安定な凍結乾燥塊を生じ、より好適な凍結乾燥プロセスとし、さらに、迅速かつ完全な再構成をもたらす、水溶性の高い固体粒子希釈剤を意味する。増量剤はまた、溶液を等張とするためにも利用することができる。
水溶性増量剤は、凍結乾燥に典型的に用いられる薬学上許容される不活性の固体材料のいずれのものであってもよい。このような増量剤としては、例えば、グルコース、マルトース、スクロース、およびラクトースなどの糖類；ソルビトールまたはマンニトールなどのポリアルコール；グリシンなどのアミノ酸；ポリビニルピロリジンなどのポリマー；およびデキストランなどの多糖類が挙げられる。
有効化合物の重量に対する増量剤の重量比は典型的には、約１〜約５、例えば、約１〜約３の範囲、例えば、約１〜２の範囲である。
あるいは、医薬製剤は、濃縮および適当なバイアルへの密封が可能な溶液の形態で提供することもできる。投与形の滅菌は、処方工程の適当な段階で、濾過によるか、またはバイアルとその内容物のオートクレーブ処理により行うことができる。供給された製剤は、例えば、適当な無菌注入パック中で希釈するなど、送達前にさらなる希釈または調製が必要な場合がある。
即時調合注射溶液および懸濁液は無菌粉末、顆粒および錠剤から調製することができる。
注射剤用の本発明の医薬組成物はまた、薬学的に許容される無菌の水性または非水性溶液、分散液、懸濁液および乳液、加えて使用直前に無菌注射溶液または分散液へ再構成される無菌粉末を含む。適当な水性および非水性の担体、希釈剤、溶媒あるいは賦形剤の例としては、水、エタノール、多価アルコール（グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）、カルボキシメチルセルロースおよびそれらの適当な混合物、植物油（オリーブオイルなど）、およびオレイン酸エチルのような注射可能な有機エステルが挙げられる。適切な流動性は、例えば、レシチンのような被覆剤の使用、分散液の場合は必要とされる粒径の維持、および界面活性剤の使用により維持することができる。
前記組成物はまた、防腐剤、湿潤剤、乳化剤および分散剤のようなアジュバントを含んでいてもよい。微生物の作用の予防は、様々な抗菌剤および抗黴剤、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸など、を含有することにより確保されてもよい。糖、塩化ナトリウムなどの等張剤を含有することも望ましい。注射可能な剤型での持続的吸収は、モノステアリン酸アルミニウムやゼラチンのような吸収を遅らせる薬剤の含有によりもたらされてもよい。
水性媒体中で安定でない、または水性媒体に溶解度が低い化合物の場合、前記化合物は有機溶媒中に濃縮物として処方することができる。濃縮物はその後、水系で低濃度に薄めることができ、投薬中の短期間は十分に安定でありうる。したがって、他の態様では、完全に１または２つ以上の有機溶媒からなる非水溶液を含有する医薬組成物が提供される、そして前記組成物はそのまま投与できるが、より一般には投与の前に適当なＩＶ賦形剤（生理食塩水、デキストロース；緩衝もしくは無緩衝で）で薄めることができる（Ｓｏｌｕｂｉｌｉｚｉｎｇ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ ｉｎ ｏｒａｌ ａｎｄ ｉｎｊｅｃｔａｂｌｅ ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）、薬学研究（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）、２１（２）、２００４年、ｐ．２０１−２３０）。溶媒と界面活性剤の例としては、プロピレングリコール、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００、エタノール、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、Ｎ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ、Ｐｈａｒｍａｓｏｌｖｅ）、グリセリン、クレモホールＥＬ、クレモホールＲＨ６０およびポリソルベートが挙げられる。特定の非水溶液は７０〜８０％のプロピレングリコールおよび２０〜３０％のエタノールからなる。１つの特定の非水溶液は７０％のプロピレングリコールおよび３０％のエタノールからなる。他のものは８０％のプロピレングリコールおよび２０％のエタノールである。普通は、これらの溶媒は組み合わせて使用され、通常ＩＶボーラスまたはＩＶインフュージョンの前に少なくとも２倍に薄められる。ボーラスＩＶ製剤用の典型的な量は、グリセリン、プロピレングリコール、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００が〜５０％、ならびにエタノールが〜２０％である。ＩＶインフュージョン製剤用の典型的な量はグリセリンが〜１５％、ＤＭＡが〜３％、ならびにプロピレングリコール、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００およびエタノールが〜１０％である。
本発明の好ましい一つの実施態様では、前記医薬組成物は、例えば注射またはインフュージョンによるＩＶ投与に適当な形態である。静脈内投与には、前記溶液はそのまま投与でき、また投与前に（０．９％生理食塩水または５％デキストロースのような薬学的に許容される賦形剤を含む）輸液バッグに注入することもできる。
もう１つの好ましい実施態様では、前記医薬組成物は皮下（ｓ．ｃ．）投与に好適な形態である。
経口投与に好適な医薬投与形としては、錠剤、カプセル剤、カプレット剤、丸剤、トローチ剤、シロップ剤、液剤、散剤、顆粒剤、エリキシル剤および懸濁剤、舌下錠、ウエハー剤またはパッチ剤ならびにバッカルパッチ剤が挙げられる。
式（Ｉ´）の化合物または１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素またはその乳酸塩またはクエン酸塩を含有する医薬組成物は、公知の技術に従って処方することができる。例えば、レミントンの薬学（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、マック出版社（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ）、イーストン、ペンシルベニア、米国、参照。
従って、錠剤組成物は、単位用量の有効化合物を、不活性希釈剤または担体、例えば、糖または糖アルコール、例えば、ラクトース、スクロース、ソルビトールまたはマンニトール；および／または非糖由来希釈剤、例えば、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム、炭酸カルシウムまたはセルロースもしくはその誘導体、例えば、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、およびデンプン、例えば、コーンスターチとともに含有することができる。また、錠剤は、標準的な成分、例えば、結合剤および造粒剤、例えば、ポリビニルピロリドン、崩壊剤（例えば、架橋カルボキシメチルセルロースなどの膨潤性架橋ポリマー）、滑沢剤（例えば、ステアリン酸塩）、保存剤（例えば、パラベン）、酸化防止剤（例えば、ＢＨＴ）、緩衝剤（例えば、リン酸緩衝液またはクエン酸緩衝液）、および発泡剤、例えば、クエン酸塩／重炭酸塩混合物を含有してもよい。このような賦形剤は公知であり、ここでは詳細に記載する必要はない。
カプセル製剤は、硬質ゼラチン種であっても軟質ゼラチン種であってもよく、固体、半固体または液体状の有効成分を含有することができる。ゼラチンカプセルは、動物ゼラチンまたはその合成もしくは植物由来の均等物から形成することができる。
固形投与形（例えば、錠剤、カプセル剤など）はコーティングを施しても施さなくともよいが、典型的には例えば、保護フィルムコーティング（例えば、ワックスまたはワニス）または放出制御コーティングを施す。前記コーティング（例えば、Ｅｕｄｒａｇｉｔ（商標）型ポリマー）は、胃腸管内の所望の位置で有効成分が放出されるように設計することができる。従って、コーティングは、胃腸管内の特定のｐＨ条件下で分解するように選択することができ、これにより選択的に胃または回腸もしくは十二指腸で化合物を放出する。
コーティングの代わりに、またはコーティングに加えて、放出制御剤、例えば、胃腸管において酸度またはアルカリ度が変化する条件下で化合物を選択的に放出するようにすることができる放出遅延剤、を含んでなる固相マトリックス中に薬剤を提供してもよい。あるいは、マトリックス材料または放出遅延コーティングは、投与形が胃腸管を通過するにつれて実質的に連続的に崩壊する崩壊性ポリマー（例えば、無水マレイン酸ポリマー）の形態をとることができる。さらなる別法としては、有効化合物を、化合物の放出の浸透圧制御をもたらす送達系に処方することもできる。浸透圧放出性ならびに他の遅延放出性または徐放性製剤は当業者に公知の方法に従って製造することができる。
前記医薬組成物は、有効成分を約１％から約９５％まで、好ましくは約２０％から約９０％、含む。発明による医薬品組成物は、例えばアンプル、バイアル、坐剤、糖衣錠、タブレットまたはカプセル形態のような単位用量形態であってもよい。
経口投与用医薬組成物は、有効成分と固体担体とを組み合わせ、所望であれば得られた混合物を粒状にし、所望または必要であれば適当な賦形剤の添加後、混合物を錠剤、糖衣錠コアまたはカプセルへ加工することにより得られる。また、前記経口投与用医薬組成物を、一定量の有効成分を拡散させたり放出させたりする可塑性の担体に組み入れることも可能である。
局所使用のための組成物としては、軟膏、クリーム、スプレー、パッチ、ゲル、液滴および挿入物（例えば、眼内挿入物）が挙げられる。このような組成物は、公知の方法に従って処方することができる。
非経口投与用の組成物は、典型的には無菌水性もしくは油性溶液または微細懸濁液として提供されるか、あるいは、注射用無菌水で即時構成できる微細無菌粉末の形態で提供してもよい。
直腸投与または膣内投与用の製剤の例としては、ペッサリーおよび坐剤が挙げられ、これらは、例えば、有効化合物を含有する付形成形材またはワックス材から形成することができる。
吸入投与用組成物は、吸入可能な粉末組成物または液状もしくは粉末スプレーの形態をとってもよく、粉末吸入装置またはエアゾールディスペンシング装置を用いた標準的な形態で投与することができる。このような装置は、公知のものである。吸入投与用の粉末製剤は、典型的には有効化合物を、ラクトースなどの不活性固体粉末希釈剤とともに含む。
前記医薬製剤は単一のパッケージ、通常はブリスターパック中、に全コースの治療薬を含んだ“患者パック”として患者に提供することができる。患者パックは、調剤師がバルク供給から患者分の医薬を分配する従来の処方箋調剤に優る利点があり、患者は患者パックに入っている、患者の処方箋調剤では見ることができない添付文書をいつでも見ることができる。添付文書を包含しておけば、患者が医師の指示を遵守する割合が改善されることが示されている。
式（Ｉ´）の化合物および１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素およびそのすべての塩は一般的には単位投与形態で提供され、それ自体、所望の生物活性レベルを与えるのに十分な化合物を典型的に含んでいる。例えば、経口投与を意図した製剤は０．１ミリグラム〜２グラムの有効成分、または１ナノグラム〜２ミリグラムの有効成分を含んでいてもよい。この範囲内での化合物の特定の部分範囲としては、０．１ミリグラム〜２グラムの有効成分（より通常は、１０ミリグラム〜１グラム、例えば、５０ミリグラム〜５００ミリグラム）、または１マイクログラム〜２０ミリグラム（例えば、１マイクログラム〜１０ミリグラム、例えば、０．１ミリグラム〜２ミリグラムの有効成分）である。
経口投与に関しては、単位投与形態は１ミリグラム〜２グラム、より典型的には、１０ミリグラム〜１グラム、例えば、５０ミリグラム〜１グラム、例えば、１００ミリグラム〜１グラムの有効化合物を含んでいてもよい。
有効化合物は、投与を必要とする患者（例えば、ヒトまたは動物患者）に、所望の治療効果を達成するのに十分な量で投与する。
治療方法
本明細書で定義されるような式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物あるいは１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素あるいはその乳酸塩またはクエン酸塩のような塩は、本明細書で定義されるような一連の病態または症状、例えば、無秩序なＪＡＫシグナル伝達、ａｂｌキナーゼおよびオーロラキナーゼが媒介する疾病および症状、の予防または治療に有用である。
式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物あるいは１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素あるいはその乳酸塩またはクエン酸塩のようなすべての塩は、一般に、このような投与を必要とする被験体、例えば、ヒトまたは動物患者、好ましくはヒト、に投与する。
式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物あるいは１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素あるいはその乳酸塩またはクエン酸塩のようなすべての塩は、典型的には、治療的または予防的に有用であって、かつ、一般的に無毒な量で投与される。しかしながら、一定の状況（例えば、生命をおびやかす疾病の場合）では、式（Ｉ）の化合物を投与するメリットは、有毒作用または副作用の欠点に優り、このような場合では、化合物を、ある程度の毒性が伴う量で投与することが望ましいと考えられる。
式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物あるいは１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素あるいはその乳酸塩またはクエン酸塩のようなすべての塩は有益な治療効果を維持するために長期にわたって投与してもよいし、あるいは短期間だけ投与してもよい。また、それらは拍動的に投与してもよいし、または連続的に投与してもよい。
前記化合物の典型的な一日量は、体重１キログラム当たり１００ピコグラム〜１００ミリグラム、より典型的には体重１キログラム当たり５ナノグラム〜２５ミリグラム、より通常は、体重１キログラム当たり１０ナノグラム〜１５ミリグラム（例えば、体重１キログラム当たり１０ナノグラム〜１０ミリグラム、より典型的には１キログラム当たり１マイクログラム〜１キログラム当たり２０ミリグラム、例えば、１ミリグラム〜１０ミリグラム）の範囲であり得るが、必要に応じてより高用量または低用量を投与してもよい。前記化合物は、例えば、日単位で、または２日おき、または３日おき、または４日おき、または５日おき、または６日おき、または７日おき、または１０日おき、または１４日おき、または２１日おき、または２８日おきに反復投与することができる。しかしながら、最終的には、投与する化合物の量および用いる組成物の種類は、治療する疾病または生理状態の性質と見合うものとし、医師の裁量による。
前記化合物の一日量の一例としては、本明細書で定義されるような式（Ｉ）の化合物、例えば、化合物Ｉの乳酸塩、を開始用量１ｍｇ／ｍ２／日〜１００ｍｇ／ｍ２／日、特に１ｍｇ／ｍ２／日〜１０ｍｇ／ｍ２／日、より具体的には３〜６ｍｇ／ｍ２／日（遊離塩基２．５〜５ｍｇ／ｍ２／日に相当）あるいは化合物Ｉの乳酸塩を有効用量２．５ｍｇ／ｍ２／日〜１．５ｇ／ｍ２／日／、特に２５ｍｇ／ｍ２／日〜６００ｍｇ／ｍ２／日、より具体的には２００〜５００ｍｇ／ｍ２／日、例えば、２５０ｍｇ／ｍ２／日、または４５〜２００ｍｇ／ｍ２／日、例えば、４５〜１５０ｍｇ／ｍ２／日もしくは５６〜１８５ｍｇ／ｍ２／日、（遊離塩基４５〜１５０ｍｇ／ｍ２／日に相当）で投与することを含むが、必要であればより高用量または低用量を投与してもよい。しかしながら、最終的には、投与する化合物の量および用いる組成物の種類は、治療する疾病または生理状態の性質と見合うものとし、医師の裁量による。
１つの特定の服薬スケジュールでは、患者は前記化合物またはその塩、例えば式（Ｉ）の化合物、の連続的ＩＶインフュージョンを２時間から１２０時間の間、例えば２〜９６時間、特に２４〜７２時間受け、治療は毎週〜３週間ごとなどの所望の間隔で繰り返される。
より具体的には、患者は前記化合物またはその塩の連続的ＩＶインフュージョンを２４時間毎日５日間にわたって受けその治療を毎週繰り返してもよい、あるいは２４時間にわたって受けその治療は毎週繰り返してもよい、あるいは４８時間にわたって受けその治療を２週間ごとに繰り返してもよい、あるいは７２時間にわたって受けその治療を３週間ごとに繰り返してもよい。
他の特定の服薬スケジュールでは、患者は、２時間にわたって１日１回毎週または２もしくは３週間ごとに、あるいは２時間にわたって毎週または２もしくは３週間に１度ＩＶボーラスとして前記化合物のインフュージョンを受ける。
頻繁な治療中止期間を設け毎週または２週間ごとに２４〜４８時間の連続的ＩＶインフュージョンを施すような投与計画を使用して１．５ｇ／ｍ２／ｄａｙのようなより高用量で投与されてもよい。より低用量での投与は、２〜３週間ごとに４８から７２時間の連続的ＩＶインフュージョンを施すようなより継続的な投薬(しかし、なお周期的な治療期間／治療中止期間を設けて)を含んだ投与計画を使用してなされる。
特に、式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物あるいは１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素あるいはその乳酸塩またはクエン酸塩のようなすべての塩は３週間ごとに２５０ｍｇ／ｍ２／ｄａｙで７２時間の連続的ＩＶインフュージョンにより患者に投与することができる。
他の実施態様では、式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物あるいは１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素あるいはその乳酸塩またはクエン酸塩のようなすべての塩は５日間の治療周期で患者に投与することができる。
しかしながら、最終的に、投与する化合物の量、選択される投与計画および用いる組成物の種類は、治療する疾病または生理状態の性質と見合うものとし、医師の裁量による。
本明細書で定義されるような式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物あるいは１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素あるいはその乳酸塩またはクエン酸塩のようなすべての塩は、単一の治療薬として投与することもでき、また特定の病態、例えば、上記で定義されている癌などの腫瘍性疾患、の治療用の１以上の他の化合物との併用療法において投与することもできる。本発明の化合物とともに投与または使用できる（同時、あるいは異なる時間間隔であっても）他の治療薬または治療法の例としては、限定されるものではないが、トポイソメラーゼ阻害剤、アルキル化剤、代謝拮抗薬、ＤＮＡ結合剤、微小管阻害剤（チューブリン標的剤）、特定の例としては、シスプラチン、シクロホスファミド、ドキソルビシン、イリノテカン、フルダラビン、５ＦＵ、タキサン、マイトマイシンＣ、ならびに放射線療法が挙げられる。一つの実施態様では、式（Ｉ´）の化合物あるいは１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素あるいはその乳酸塩またはクエン酸塩のようなすべての塩は、トポイソメラーゼ阻害剤、アルキル化剤、代謝拮抗薬、ＤＮＡ結合剤、特にシスプラチン、シクロホスファミド、ドキソルビシン、イリノテカン、フルダラビン、マイトマイシンＣなどのＤＮＡ標的剤ならびに放射線療法と組み合わせてもよい。
本明細書で定義されるような式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物あるいは１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素あるいはその乳酸塩またはクエン酸塩のようなすべての塩とともに投与または使用できる（同時、あるいは異なる時間間隔であっても）治療薬の他の例としては、モノクローナル抗体およびシグナル伝達阻害剤が挙げられる。
ＣＤＫまたはオーロラ阻害剤と他の療法を組み合わせた場合、２種類以上の治療を個々に異なる投与計画で、異なる経路によって投与してもよい。従って、例えば、化合物Ｉの塩形態は（例えば、乳酸塩またはクエン酸塩およびそれらの混合物）は非経口経路により溶液として投与してもよく、一方、他の治療薬を経口投与してもよい。
式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物あるいは１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素あるいはその乳酸塩またはクエン酸塩のようなすべての塩を１、２、３、４またはそれ以上の他の治療薬（好ましくは、１または２、より好ましくは１）との併用療法で投与する場合、これらの化合物は同時投与することができ（同じまたは異なる医薬製剤中で）、また逐次投与することもできる。逐次投与する場合、それらは短時間間隔で（例えば、５〜１０分）投与することもできるし、または長時間間隔で（例えば、１、２、３、４時間またはそれ以上おいて、または必要であればいっそう長時間おいて）投与することもでき、厳密な投与計画はその治療薬の特性に見合ったものとする。
式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物あるいは１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素あるいはその乳酸塩またはクエン酸塩のようなすべての塩はまた、放射線療法、光線力学療法、遺伝子療法などの非化学療的治療；外科術および食事制限と組み合わせて投与してもよい。
別の化学療法薬との併用療法で用いるため、式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物あるいは１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素あるいはその乳酸塩またはクエン酸塩と１、２、３、４またはそれ以上の他の治療薬を例えば２、３、４またはそれ以上の治療薬を含有する投与形態に一緒に処方することができる。別法として、個々の治療薬を個別に処方し、場合によってそれらの使用説明書を添えて、キットの形態で一緒に提供してもよい。
当業者であれば、通常の知識により、用いる投与計画および併用療法が分かるであろう。
診断方法
式（Ｉ）および（Ｉ´）の化合物、ならびに特に１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素ならびにその乳酸塩またはクエン酸塩などの塩および結晶形態の投与前に、患者が罹患している、または罹患している可能性のある疾病または症状が：
Ａ．ＢＣＲ−ａｂｌ、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＥＧＦＲ、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ(例えば、ＪＡＫ２もしくはＪＡＫ３)、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ(例えば、Ｃｈｋ１もしくはＣｈｋ２)、ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２もしくはＥｐｈＢ４)またはＳｒｃ(例えば、ｃＳｒｃ)であるキナーゼが媒介する病態または症状;あるいは
Ｂ．癌細胞が：
（ａ）スレオニンゲートキーパー変異；または
（ｂ）薬剤耐性ゲートキーパー変異；または
（ｃ）イマチニブ耐性変異；または
（ｄ）ニロチニブ耐性変異；または
（ｅ）ダサチニブ耐性変異；または
（ｆ）ＫＩＴにおけるＴ６７０Ｉ変異；または
（ｇ）ＰＤＧＦＲにおけるＴ６７４Ｉ変異；または
（ｈ）ＥＧＦＲにおけるＴ７９０Ｍ変異；または
（ｉ）ａｂｌにおけるＴ３１５Ｉ変異、
である薬剤耐性キナーゼ変異を含む癌；あるいは
Ｃ．ＢＣＲ−ａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦ、ＥＧＦ受容体またはＥｒｂＢ２の変異型である変異分子標的を発現する癌；あるいは
Ｄ．他の抗癌剤と結合または相互作用するが式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物と結合または相互作用をしないタンパク質の領域に変異を有するキナーゼ、例えばｃ−ａｂｌ、ｃ−ｋｉｔ、ＰＤＧＦＲベータおよびＰＤＧＦＲアルファを含むＰＤＧＦＲならびに，ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢｌ）、ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２）、ＥｒｂＢ３およびＥｒｂＢ４などのＥｒｂＢフェミリーのメンバー、ならびにＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ５、ＥｐｈＡ８、ＥｐｈＡ１０、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ３、ＥｐｈＢ５、ＥｐｈＢ６などのエフリン受容体ファミリーのメンバー、ｃ−Ｓｒｃ、ならびにＴＹＫ２などのＪＡＫファミリーのキナーゼから選ばれる変異キナーゼ、が媒介する疾病；ならびに
前記疾病または症状が式（Ｉ）または（Ｉ´）化合物による治療に感受性がある病態または症状かどうかを判定するために患者をスクリーニングすることができる。
特定の実施態様では、式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物の投与前に、患者が罹患している、または罹患している可能性のある疾病または症状が、ＢＣＲ−ａｂｌ、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＥＧＦＲ、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ(例えば、ＪＡＫ２またはＪＡＫ３)、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ(例えば、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２)、ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)、Ｓｒｃ(例えば、ｃＳｒｃ)あるいは本明細書で定義されたその変異型、ならびに特にＣ−ａｂｌおよびＪＡＫキナーゼ、に対して活性を有する化合物による治療に感受性があるものかどうかを判定するために患者をスクリーニングすることができる。
患者から採取した生体サンプルを分析し、その患者が罹患している、または罹患している可能性のある癌などの症状または疾病がキナーゼの過剰活性化または正常キナーゼ活性への経路の増感をもたらす遺伝的異常（例えば、上記したようなキナーゼの変異型を含む）または異常なタンパク質発現を特徴とするものかどうかを判定することができる。また、あるいは、加えて、患者から採取した生体サンプルを分析し、その患者が罹患している、または罹患している可能性のある癌などの症状または疾病が特定のキナーゼのアップレギュレーションを特徴とするもの、したがってそのキナーゼの阻害剤に特に感受性があるかどうかを判定することができる。アップレギュレーションなる語には、遺伝子増幅（すなわち、多重遺伝子コピー)および転写効果による発現の増加をはじめとする発現上昇または過剰発現、ならびに変異による活性化をはじめとする活性亢進および活性化が挙げられる。
ＢＣＲ−ａｂｌ、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＥＧＦＲ、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ(例えば、ＪＡＫ２またはＪＡＫ３)、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ(例えば、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２)、ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)、Ｓｒｃ(例えば、ｃＳｒｃ)キナーゼあるいは本明細書で定義されたその変異型の場合において、患者から採取した生体サンプルを分析し、その患者が罹患している、または罹患している可能性のある癌などの症状または疾病が、前記キナーゼのレベルもしくは活性のアップレギュレーションまたは正常なキナーゼ活性への経路の増感、あるいはキナーゼリガンドレベルもしくはキナーゼリガンド活性などのキナーゼシグナル伝達経路のアップレギュレーションまたはキナーゼ活性化の下流にある生化学経路のアップレギュレーションをもたらす遺伝的異常または異常なタンパク質発現を特徴とするものかどうかを判定することができる。
キナーゼシグナルの活性化または増感を引き起こすそのような異常の例としては、アポトーシス経路の欠損または阻害、受容体またはリガンドのアップレギュレーション、あるいは、ＰＴＫ変異体などの受容体またはリガンドの変異体の存在が挙げられる。
ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２またはＦＧＦＲ３の変異体あるいはＦＧＦＲ１のアップレギュレーション、特に過剰発現、あるいはＦＧＦＲ２またはＦＧＦＲ３の機能獲得型変異体、を伴う腫瘍は特にＦＧＦＲ阻害剤に感受性がある可能性がある。
例えば、ＦＧＦＲ２において機能獲得を引き起こす点変異は多くの症状で確認されている（レモニエ（Lemonnier）ら、J. Bone Miner. Res., 16, 832-845 (2001))。さらに、異所的に発現または脱調節されて構成的に活性のあるＦＧＦＲ3受容体をもたらす染色体転座または点変異のようなＦＧＦＲ３受容体チロシンキナーゼの遺伝的異常が確認されており、多発性骨髄腫、膀胱癌および子宮頚癌の一部に関連付けられている（パワーズ（Powers, CJ.）ら、Endocr. Rel. Cancer, 7, 165 (2000))。ＰＤＧＦ受容体の特定の変異Ｔ６７４Ｉはイマチニブで治療される患者において確認されている。
さらに、８ｐ１２〜ｐ１１．２の遺伝子増幅はＣＬＣ症例の〜５０％で実証され、これはＦＧＦＲ１の発現増加に関連することが示された。ＦＧＦＲ１に対するｓｉＲＮＡ、すなわち受容体の低分子阻害剤、の予備的研究は、この増幅を有する細胞株がこのシグナル伝達経路の阻害に特に感受性があること示した（レイス−フィルホ（Reis-Filho）ら、臨床癌研究（Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．）、 2006 12(22): 6652-6662。
また、患者から採取した生体サンプルは、特定のキナーゼ(例えば、ＢＣＲ−ａｂｌ、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＥＧＦＲ、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ(例えば、ＪＡＫ２またはＪＡＫ３)、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ(例えば、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２)、ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)あるいはＳｒｃ(例えば、ｃＳｒｃ)）の負の調節因子または抑制因子の欠損に関して分析することができる。本明細書では、“欠損”なる語は、調節因子もしくは抑制因子をコードする遺伝子の欠失、遺伝子の切断（例えば、変異による）、遺伝子の転写産物の切断、または転写産物の不活性化（例えば、点変異による）もしくは他の遺伝子産物による隔離を包含する。
よって、患者に対して、キナーゼの過剰発現、アップレギュレーションおよび活性化に特徴的なマーカーを検出するための診断試験を行うことができる。診断なる語はスクリーニングを包含する。本発明者らはマーカーに、例えば、特定のキナーゼの変異を同定するためのＤＮＡ組成の測定を含む、遺伝マーカーも含める。マーカーなる語はまた、上記タンパク質の酵素活性、酵素レベル、酵素状態（例えば、リン酸化の有無）およびｍＲＮＡレベルをはじめ、キナーゼの活性のアップレギュレーションに特徴的なマーカーを含む。アップレギュレーションなる語には、遺伝子増幅（すなわち、多重遺伝子コピー)および転写効果による発現の増加をはじめとする発現上昇または過剰発現、ならびに変異による活性化をはじめとする活性亢進および活性化が挙げられる。
診断試験は典型的には、腫瘍生検サンプル、血液サンプル（脱落した腫瘍細胞の単離および濃縮）、糞便生検、痰、染色体分析、胸膜液、腹水、頬内からの塗抹標本、生検または尿から選択される生体サンプルに対して行なわれる。
より具体的には、患者に対して、ＢＣＲ−ａｂｌ、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＥＧＦＲ、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ(例えば、ＪＡＫ２またはＪＡＫ３)、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ(例えば、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２)、ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)、Ｓｒｃ(例えば、ｃＳｒｃ)あるいは本明細書で定義されたその変異型、ならびに特にＣ−ａｂｌおよびＪＡＫキナーゼ、のアップレギュレーションに特徴的なマーカーを検出するための診断試験を行うことができる。診断なる語はスクリーニングを包含する。本発明者らはマーカーに、例えば、特定のキナーゼの変異を同定するためのＤＮＡ組成の測定を含む、遺伝マーカーも含める。マーカーなる語はまた、上記タンパク質の酵素活性、酵素レベル、酵素状態（例えば、リン酸化の有無）およびｍＲＮＡレベルをはじめ、キナーゼの活性のアップレギュレーションに特徴的なマーカーを含む。
タンパク質の変異およびアップレギュレーションの同定および分析の方法は当業者に公知である。スクリーニング方法としては、限定されるものではないが、逆転写酵素ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ−ＰＣＲ）または蛍光インサイツハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ）のようなインサイツハイブリダイゼーションなどの標準的な方法が挙げられる。
ＢＣＲ−ａｂｌ、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＥＧＦＲ、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ(例えば、ＪＡＫ２またはＪＡＫ３)、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ(例えば、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２)、ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)、Ｓｒｃ(例えば、ｃＳｒｃ)あるいは本明細書で定義されたその変異型、ならびに特にＣ−ａｂｌおよびＪＡＫキナーゼ、などのキナーゼに変異を有する個体の同定は、その患者が問題となっているキナーゼの阻害剤による治療に特に好適であることを意味し得る。腫瘍は、治療前にキナーゼ変異体の存在に関して優先的にスクリーニングすることができる。スクリーニング過程は典型的には、直接配列決定、オリゴヌクレオチドマイクロアレイ分析、または変異体特異的抗体を伴う、あるいは上述のＲＴ−ＰＣＲおよびＦＩＳＨ技術を用いる。
さらに、例えば、ＢＣＲ−ａｂｌ、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＥＧＦＲ、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ(例えば、ＪＡＫ２またはＪＡＫ３)、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ(例えば、Ｃｈｋ１またはＣｈｋ２)、ＦＧＦＲ(例えば、ＦＧＦＲ３)、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ(例えば、ＥｐｈＢ２またはＥｐｈＢ４)、Ｓｒｃ(例えば、ｃＳｒｃ)あるいは本明細書で定義されたその変異型、ならびに特にＣ−ａｂｌおよびＪＡＫキナーゼ、などのキナーゼの変異型は、例えば、ＰＣＲを用いた腫瘍生検の直接配列決定およびＰＣＲ産物を直接配列決定する方法により同定することができる。当業者であれば、前記タンパク質の過剰発現、活性化、または変異の検出に用いるそのような公知の技法が本発明の場合に適用可能であることを認識しているであろう。
ＲＴ−ＰＣＲによるスクリーニングでは、腫瘍におけるｍＲＮＡのレベルは、そのｍＲＮＡのｃＤＮＡコピーを作成した後、そのｃＤＮＡをＰＣＲにより増幅することにより評価する。ＰＣＲ増幅の方法、プライマーの選択、および増幅条件は当業者に公知である。核酸の操作およびＰＣＲは、例えば、オースベル（Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．M.）ら（編者）、分子生物学における現在のプロトコル（Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ）、２００４年、ジョンワイリー＆サンズ、またはイニス（Ｉｎｎｉｓ，Ｍ．Ａ．）ら（編者）、ＰＣＲプロトコル：方法および応用の手引き（ＰＣＲ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ：ａ ｇｕｉｄｅ ｔｏ ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ）、１９９０年、アカデミックプレス（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ）、サンディエゴ、に記載のような標準的な方法により行う。核酸技術に関する反応および操作はまた、サムブルック（Ｓａｍｂｒｏｏｋ）ら、２００１年、第３版、分子クローニング：実験マニュアル（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ： Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、コールドスプリングハーバーラボラトリー出版（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ）に記載されている。あるいは、ＲＴ−ＰＣＲ用の市販キット（例えば、ロシュモルキュラーバイオケミカルズ（Ｒｏｃｈｅ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ）、または米国特許第４，６６６，８２８号；第４，６８３，２０２号；第４，８０１，５３１号；第５，１９２，６５９号；第５，２７２，０５７号；第５，８８２，８６４号および同第６，２１８，５２９号に開示されている方法が使用でき、これらは参照によりに本書に援用される。
ｍＲＮＡの発現を評価するためのインサイツハイブリダイゼーション技術の例として、蛍光インサイツハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ）がある（アンゲラー（Ａｎｇｅｒｅｒ）、１９８７、Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ、１５２：６４９、参照）。
一般に、インサイツハイブリダイゼーションは以下の主要工程を含む：（１）分析する組織の固定；（２）標的核酸の接近性を高めるため、また、非特異的結合を軽減するためのサンプルのプレハイブリダイゼーション処理；（３）その核酸混合物と生体構造または組織中の核酸とのハイブリダイゼーション；（４）ハイブリダイゼーションにおいて結合しなかった核酸断片を除去するためのハイブリダイゼーション後の洗浄；および（５）ハイブリダイズした核酸断片の検出。このような用途に用いるプローブは典型的には、例えば、放射性同位元素または蛍光リポーターで標識される。好ましいプローブは、ストリンジェント条件下で標的核酸との特異的ハイブリダイゼーションを可能とするに十分な長さ、例えば、約５０、１００、または２００ヌクレオチド〜約１０００以上のヌクレオチドである。ＦＩＳＨを行うための標準的な方法は、オースベル（Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．）ら（編者）、分子生物学における現在のプロトコル（Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ）、２００４年、ジョンワイリー＆サンズ、およびバートレット（Ｊｏｈｎ Ｍ．Ｓ．Ｂａｒｔｌｅｔｔ）による、インサイツハイブリダイゼーションにおける蛍光：癌の分子診断、方法およびプロトコルにおける技術的概観（Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ Ｉｎ Ｓｉｔｕ Ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ：Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ Ｏｖｅｒｖｉｅｗ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ、Ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ、第２版；ＩＳＢＮ：１−５９２５９−７６０−２；２００４年３月、ｐ．０７７−０８８；シリーズ：分子医学における方法（Ｓｅｒｉｅｓ：Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）に記載されている。
あるいは、これらのｍＲＮＡから発現されたタンパク質産物を、腫瘍サンプルの免疫組織化学、マイクロタイタープレートを用いる固相イムノアッセイ、ウエスタンブロット、二次元ＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動、ＥＬＩＳＡ、フローサイトメトリーおよび特定のタンパク質を検出するための当技術分野で公知の他の方法により評価することができる。検出方法には、部位特異的抗体の使用が含まれる。当業者ならば、サイクリンＥのアップレギュレーション、またはｐ２１もしくはｐ２７の欠損の検出、またはＣＤＣ４変異体、オーロラアップレギュレーションおよびオーロラの変異を検出するためのこのような公知の技術はすべて本発明の場合に適用可能であることを認識しているであろう。
よって、これらの技術はいずれも、本発明の化合物による治療に特に好適な腫瘍を同定するために使用することができる。
本発明の一つの実施態様では、式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物あるいは１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素あるいはその乳酸塩またはクエン酸塩のようなすべての塩の投与前に、患者が罹患している、または罹患している可能性のある疾病または症状が、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ１およびＣｈｋ２に対して活性を有する化合物による治療に感受性があるものかどうかを判定するために患者をスクリーニングすることができる。これらの手法もまた、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ１およびＣｈｋ２キナーゼのアップレギュレーションあるいは変異体が原因の疾病または症状のスクリーニングのために使用できる。
他の一つの実施態様では、式（Ｉ）または（Ｉ´）の化合物あるいは１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素あるいはその乳酸塩またはクエン酸塩のようなすべての塩の投与前に、患者が罹患している、または罹患している可能性のある疾病または症状が、ＦＧＦＲ、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ、ｃＳｒｃ、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲキナーゼに対して活性を有する化合物による治療に感受性があるものかどうかを判定するために患者をスクリーニングすることができる。これらの手法もまた、Ｆｌｔ３、ＪＡＫ、Ｃ−ａｂｌ、ＰＤＫ１、Ｃｈｋ１およびＣｈｋ２キナーゼのアップレギュレーションあるいは変異体が原因の疾病または症状のスクリーニングのために使用できる。これらの手法もまた、ＧＦＲ、Ｒｅｔ、Ｅｐｈ、ｃＳｒｃ、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲキナーゼのアップレギュレーションあるいは変異体が原因の疾病または症状のスクリーニングのために使用できる。
これらの手法もまた、ＶＥＧＦＲキナーゼのアップレギュレーションまたは変異体が原因の疾病または症状のスクリーニングのために使用でき、それらの手法としては、限定されるものではないが、逆転写酵素ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ−ＰＣＲ）またはインサイツハイブリダイゼーションなどの標準的な方法が挙げられる。
ＶＥＧＦＲなどのタンパク質の異常なレベルは、標準的な酵素アッセイ、例えば、本明細書に記載されるアッセイを用いて測定することができる。活性化または過剰発現はまた、腫瘍サンプル、例えば腫瘍組織、において、ケミコンインターナショナル（Ｃｈｅｍｉｃｏｎ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）から入手可能のものなどのアッセイでチロシンキナーゼ活性を測定することにより検出することができる。対象とするチロシンキナーゼをサンプル溶解物から免疫沈降させ、その活性を測定する。
アイソフォームを含むＶＥＧＦＲの過剰発現または活性化の測定の別法としては、微細血管密度の測定を含む。これは例えば、オッレ（Ｏｒｒｅ）およびロジャース（Ｒｏｇｅｒｓ）(Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ、１９９９年、８４（２）、１０１−８)により記述されている方法を用いて測定することができる。アッセイ方法はまた、例えば、ＶＥＧＦＲの場合にはマーカーの使用を含み、これらのマーカーとしてはＣＤ３１、ＣＤ３４およびＣＤ１０５（ミネオ（Ｍｉｎｅｏ）ら、ジャーナルオブクリニカルパソロジー（Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐａｔｈｏｌ．），２００４、５７（６)、５９１−７)が挙げられる。
ＦＬＴ３の活性化変異は、急性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）および急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）のいくつかの症例で頻繁に認められる。ＦＬＴ３の活性化変異体を伴う癌患者には、ＦＬＴ３阻害剤に最も感受性のある変異の指標として線変異または遺伝子内タンデム重複変異の存在のスクリーニングをすることができる。
チロシンキナーゼＪＡＫ２における活性化変異は、真性赤血球増加症、本態性血小板血症および骨髄様化生を合併する骨髄線維症において観察されている。本明細書に記載の方法はこれらの変異を有する患者を同定するためにを使用することができる可能性がある。
ＢＣＲ−ａｂｌ、例えばＴ３１５Ｉ、の耐性変異体を発現する細胞を有する腫瘍のある患者は、本明細書に記載の方法を使用して同定することができる。
したがって、さらに、本明細書に記載の方法はＪＡＫ２の例えばＶ６１７Ｆの変異、ＦＬＴ３の活性化変異、Ｃ−ＡｂＩの例えばＴ３１５Ｉの変異体を診断するために使用することができる可能性がある。
さらなる実施態様では、本発明の化合物は、患者および／または腫瘍および／またはフィラデルフィア染色体陽性（Ｐｈ＋）白血病を治療するためにを使用することができる可能性がある。これは、染色体９と染色体２２の間に起こる転座であり、変化した染色体２２をもたらす。しばしばＢＣＲ−ａｂｌ転座と呼ばれる、前記転座は、細胞遺伝学的方法、例えば本明細書に記載の方法、特にＦＩＳＨ、を含む当業者に公知の方法、により識別することができ、発明の化合物を用いた治療に適した患者を同定するために使用できる。
本発明の化合物は、有糸***チェックポイント欠陥と直接関連するオーロラキナーゼの阻害剤であるので、本発明の化合物は、染色体の完全性の喪失、紡錘体欠陥または疾患進行の兆候として倍数性を示す白血病に罹患している患者の治療に特に適している可能性がある。
遺伝的不安定性は多くの白血病での共通の特徴であり、異数性をもたらす。中心体異常は最近、急性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、ホジキンリンパ腫に加えて非ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病および多発性骨髄腫を含むいくつかの異なる血液悪性腫瘍に関連して記述されている。多くの固形腫瘍と類似して、骨髄性悪性腫瘍、慢性リンパ球性白血病および少なくともいくつかのタイプの非ホジキンリンパ腫において、一方では中心体異常そして他方では核型異常と臨床での侵攻性の間に相関性があるようである。
複雑な染色体異常は、原発性骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）または急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）の患者の３０％以下で存在し、予後不良に関与する。複雑な核型の特定の変化を従来の細胞遺伝学だけで定義するのは難しい。骨髄サンプルに選択プローブを用いるスペクトル核型分析（ＳＫＹ）および蛍光インサイツハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ）が使用される場合、再発異常についてのより総合的な見解を得ることができる(Ｃａｎｃｅｒ Ｇｅｎｅｔ.Ｃｙｔｏｇｅｎｅｔ，２００６年、１６５（１）、５１−６３、（トロスト（Ｔｒｏｓｔ Ｄ）ら）。特定の切断点および欠失の詳細な分析は、既知の癌抑制遺伝子または癌遺伝子を有する特定の染色体バンドの再発性関与を示すことができる。ＳＫＹとＦＩＳＨを用いた同様の詳細な方法でのＭＤＳとＡＭＬの多くの症例の分析は、それらの遺伝的変化によって新規サブグループが同定できるかどうかを示す。臨床的指標との相関性は、これらの遺伝子サブグループの予後的意義を示す可能性がある。例えばＭＤＳでは、国際予後判定システムは、芽球の割合、核型、および血球減少の数を組み合わせ、ＭＤＳを患う患者の生存率および急性骨髄性白血病への進行の危険性を確実に予測する判定システムを作成する。より完全な臨床像および可能な限り正確な予後評価を提供するため、広く一般に受け入れるられているこの判定システムはＦＡＢまたは世界保健機関の形態学的基準としばしば組み合わされる（Ｓｅｍｉｎ Ｏｎｃｏｌ．２００５年８月；３２（４ Ｓｕｐｐｌ ５）：Ｓ３−１０、（ベネット）Ｂｅｎｎｅｔｔ)。
遺伝的不安定性は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）で共通の特徴である(ブラッド（Ｂｌｏｏｄ）、２００３、１０１（１）、２８９−９１、（ネベン（Ｎｅｂｅｎ）ら）、そして中心体異常が多くのヒト腫瘍での異数性の考えられる原因として記載されている。中心体異常がＡＭＬにおける細胞遺伝学的所見と相関するかどうか調査するため、一連のＡＭＬサンプルはぺリセントリンに対する中心体特異抗体を使用して試験された。分析したＡＭＬサンプルは、末梢血単核細胞と比較して、中心体の数と構造の異常を示した。正常な染色体数のＡＭＬサンプルと比較して、中心体の数と構造の異常の程度は、染色体数の変化を有するサンプルではより高かった。細胞遺伝学的に定義されたリスクグループにおける中心体異常の頻度を分析した時、相関性は中心体異常の程度との間で３つのリスクグループすべてでみられた。これらの結果は、中心体欠陥が染色体異常の獲得、そしてＡＭＬにおける予後、に寄与している可能性を示す。
このように、腫瘍または白血病が染色体異常に関連していたかどうかを決定するために、当業者に公知の多くの手法が使用できる。
したがって、本発明の一態様は、患者が染色体異常を示す疾病、特に癌、に罹患しているかどうか検出し、本発明の化合物で染色体異常を治療する方法である。
本発明はさらに、患者が染色体異常を示す白血病に罹患しているかどうかを診断し、本発明の化合物を投与する方法を提供する。
本発明のさらなる態様は、癌に罹患している、または罹患していると疑われる患者における癌の予防および治療（あるいは癌の発生率の軽減または減少）方法である。前記方法は（ｉ）患者が染色体異常を有しているかどうかを判定すべく患者に診断試験を行うこと、および（ｉｉ）患者が前記染色体異常を有することが示された場合に、その後、患者にオーロラキナーゼ阻害活性を有する本明細書で定義されている式（Ｉ）の化合物を投与することを含む。
他の実施態様では、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の乳酸塩またはクエン酸塩の投与前に、患者が罹患している、または罹患している可能性のある疾病または症状が、オーロラキナーゼおよび／またはサイクリン依存性キナーゼに対して活性を有する化合物による治療に感受性があるものかどうかを判定するために患者をスクリーニングすることができる。
例えば、患者から採取した生体サンプルを分析し、その患者が罹患している、または罹患している可能性のある癌などの症状または疾病がＣＤＫの過剰な活性化または正常なＣＤＫ活性への経路の増感をもたらす遺伝的異常または異常なタンパク質発現を特徴とするものかどうかを判定することができる。ＣＤＫ２シグナルの活性化または増感ををもたらすこのような異常の例としては、サイクリンＥのアップレギュレーション（ハーウェル（Ｈａｒｗｅｌｌ ＲＭ）、マル（Ｍｕｌｌ ＢＢ）、ポーター（Ｐｏｒｔｅｒ ＤＣ）、ケヨマルシ（Ｋｅｙｏｍａｒｓｉ Ｋ．）；Ｊ Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２００４年３月、２６；２７９（１３）：１２６９５−７０５）またはｐ２１もしくはｐ２７の欠損、またはＣＤＣ４変異体の存在（ラジャゴパラン（Ｒａｊａｇｏｐａｌａｎ Ｈ）、ジャレパリ（Ｊａｌｌｅｐａｌｌｉ ＰＶ）、ラゴ（Ｒａｇｏ Ｃ）、ベルクレスク（Ｖｅｌｃｕｌｅｓｃｕ ＶＥ）、キンズラー（Ｋｉｎｚｌｅｒ ＫＷ）、ボーゲルスタイン（Ｖｏｇｅｌｓｔｅｉｎ Ｂ）、レンガウアー（Ｌｅｎｇａｕｅｒ Ｃ．）；ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ）、２００４年３月、４；４２８（６９７８）：７７−８１）が挙げられる。ＣＤＣ４の変異体またはサイクリンＥのアップレギュレーション、特に過剰発現、またはｐ２１もしくはｐ２７の欠損を伴う腫瘍は、特にＣＤＫ阻害剤に対して感受性がある可能性がある。代わりに、あるいは、それに加えて、患者から採取した生体サンプルを分析し、その患者が罹患している、または罹患している可能性のある癌などの症状または疾病がオーロラキナーゼのアップレギュレーションを特徴とするもの、したがってオーロラ阻害剤に特に感受性がある可能性がある、かどうかを判定することができる。アップレギュレーションなる語はとしては、遺伝子増幅（すなわち、多重遺伝子コピー)および転写作用による発現の増強をはじめとする発現上昇または過剰発現、ならびに変異による活性化をはじめとする活性亢進および活性化が挙げられる。
よって、患者に対して、オーロラキナーゼ過剰発現、アップレギュレーションまたは活性化に特徴的なマーカーを検出するための診断試験を行うことができる、あるいは患者に対して、サイクリンＥのアップレギュレーション、またはｐ２１もしくはｐ２７の欠損、またはＣＤＣ４変異体の存在に特徴的なマーカーを検出するための診断試験を行うことができる。診断なる語は、スクリーニングも含む。本発明者らはマーカーに、例えば、オーロラまたはＣＤＣ４の変異を同定するためのＤＮＡ組成の指標をはじめとする遺伝マーカーも含める。マーカーとはまた、オーロラまたはサイクリンＥの酵素活性、酵素レベル、酵素状態（例えば、リン酸化の有無）およびｍＲＮＡレベルをはじめ、オーロラまたはサイクリンＥのアップレギュレーションに特徴的なマーカーを含む。サイクリンＥのアップレギュレーション、またはｐ２１もしくはｐ２７の欠損は、特にＣＤＫ阻害剤に対して感受性がある可能性がある。腫瘍は治療の前にサイクリンＥのアップレギュレーション、またはｐ２１もしくはｐ２７の欠損に関して優先的にスクリーニングすることができる。よって、患者に対して、サイクリンＥのアップレギュレーション、またはｐ２１もしくはｐ２７の欠損に特徴的なマーカーを検出するための診断試験を行うことができる。
診断試験は典型的には、腫瘍生検サンプル、血液サンプル（脱落した腫瘍細胞の単離および濃縮）、糞便生検、痰、染色体分析、胸膜液、腹水、または尿から選ばれる生体サンプルに対して行う。
ＳＴＫ遺伝子（オーロラキナーゼＡの遺伝子）のＩｌｅ３１変異体を有する部分集団の一部を形成している個体が、ある形態の癌に高い感受性を有する可能性があることが判明した（エワート−トーランド（Ｅｗａｒｔ−Ｔｏｌａｎｄ）ら、Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．２００３年８月；３４（４)：４０３−１２参照）。従って、このような癌を患っている個体にはオーロラキナーゼ阻害活性を有する化合物の投与が有益であると考えられる。従って、癌を患っている、または患っている疑いのある患者を、その患者がＩｌｅ３１変異体部分集団の一部を形成するかどうかを判定すべくスクリーニングすることができる。加えて、ラジャゴパラン（Ｒａｊａｇｏｐａｌａｎ）ら、（ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ）、２００４年３月４；４２８（６９７８）：７７−８１）は、ヒト結腸直腸癌および子宮内膜癌（スプルック（Ｓｐｒｕｃｋ）ら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ. ２００２年８月１５；６２（１６）：４５３５−９）に、ＣＤＣ４に存在する変異（Ｆｂｗ７またはアーキペラゴ（Ａｒｃｈｉｐｅｌａｇｏ）としても知られる）があることを見出した。ＣＤＣ４に変異を有する個体の同定は、その患者がＣＤＫ阻害剤による治療に特に好適であることを意味し得る。腫瘍は、治療前にＣＤＣ４変異体の存在に関して優先的にスクリーニングすることができる。このスクリーニング方法は典型的には、直接配列決定、オリゴヌクレオチドマイクロアレイ分析、または変異体特異的抗体を含む。
オーロラの活性化変異またはそのいずれかのアイソフォームを含むオーロラのアップレギュレーションを伴う腫瘍はオーロラ阻害剤に特に感受性がある。治療前にオーロラのアップレギュレーションに関して、またはＩｌｅ３１変異体を有するオーロラに関して、腫瘍を優先的にスクリーニングできる（エワート−トーランド（Ｅｗａｒｔ−Ｔｏｌａｎｄ）ら、Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ．２００３年８月；３４（４）：４０３−１２）。Ｅｗａｒｔ−Ｔｏｌａｎｄらは、ヒト結腸腫瘍において優先的に増幅され、異数性の程度と関連があるＳＴＫ１５の共通の遺伝変異体（アミノ酸置換Ｆ３１Ｉを生じる）を同定した。これらの結果は、ヒト癌感受性におけるＳＴＫ１５のＩｌｅ３１変異体に対する重要な役割と一致している。特に、オーロラＡにおけるこの多型性は、乳癌発症に関する遺伝的修飾因子であると示唆されている（ソン（Ｓｕｎ）、Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ，２００４、２５（１１）、２２２５−２２３０）。
オーロラＡ遺伝子は、多くの癌、例えば、乳癌、膀胱癌、結腸癌、卵巣癌、膵臓癌、でしばしば増幅されている染色体２０ｑ１３領域にマッピングされている。この遺伝子増幅を伴う腫瘍を有する患者は、オーロラキナーゼ阻害を標的とする治療に特に感受性が高い可能性がある。
タンパク質、例えばオーロラアイソフォーム、の変異およびアップレギュレーションならびに染色体２０ｑ１３の増幅の同定および分析の方法は当業者に公知である。スクリーニング方法としては、限定されるものではないが、逆転写酵素ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ−ＰＣＲ）またはインサイツハイブリダイゼーションなどの標準的な方法が挙げられる。
ＣＤＣ４の変異体、またはサイクリンＥのアップレギュレーション、特に過剰発現、あるいはｐ２１もしくはｐ２７の欠損を伴う腫瘍はＣＤＫ阻害剤に対して特に感受性がある可能性がある。腫瘍は治療前に、サイクリンＥのアップレギュレーション、特に過剰発現に関して（ハーウェル（Ｈａｒｗｅｌｌ ＲＭ）、マｒｕ（Ｍｕｌｌ ＢＢ）、ポーター（Ｐｏｒｔｅｒ ＤＣ）、ケヨマルシ（Ｋｅｙｏｍａｒｓｉ Ｋ．）、；Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２００４年３月２６；２７９（１３）；１２６９５−７０５）、またはｐ２１もしくはｐ２７の欠損、またはＣＤＣ４変異体に関して（ラジャゴパラン（Ｒａｊａｇｏｐａｌａｎ Ｈ）、ジャレパリ（Ｊａｌｌｅｐａｌｌｉ ＰＶ）、ラゴ（Ｒａｇｏ Ｃ）、ベルクレスク（Ｖｅｌｃｕｌｅｓｃｕ ＶＥ）、キンズラー（Ｋｉｎｚｌｅｒ ＫＷ）、ボーゲルスタイン（Ｖｏｇｅｌｓｔｅｉｎ Ｂ）、レンガウアー（Ｌｅｎｇａｕｅｒ Ｃ．）；ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ）、２００４年３月４；４２８（６９７８）：７７−８１）優先的にスクリーニングすることができる。
マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）を有する患者については、本明細書で概略を示した診断試験を用い、本発明の化合物による治療が適用できるかを選定することができる。ＭＣＬは、ＣＤ５およびＣＤ２０の共発現、侵攻性および難治性の臨床経過、および頻繁なｔ（１１；１４）（ｑ１３；ｑ３２）の転座を伴う小型〜中型のリンパ球の増殖を特徴とする非ホジキンリンパ腫の明瞭な臨床病理態である。マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）で観察されるサイクリンＤ１ｍＲＮＡの過剰発現が重要な診断マーカーとなる。ヤタベ（Ｙａｔａｂｅ）ら(Ｂｌｏｏｄ、２０００年４月１；９５（７）：２２５３−６１)は、ＭＣＬの標準的な判定基準の１つとしてサイクリンＤ１陽性を含めるべきこと、およびこの新たな判定基準に基づいてこの難病の革新的療法を探索すべきであることを提案している。ジョーンズ（Ｊｏｎｅｓ）ら(Ｊ．Ｍｏｌ．Ｄｉａｇｎ．２００４年５月；６（２）：８４−９)は、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）の診断の助けとなるよう、サイクリンＤ１（ＣＣＮＤ１）発現のリアルタイム定量的逆転写ＰＣＲアッセイを開発した。ホウ（Ｈｏｗｅ）ら（Ｃｌｉｎ Ｃｈｅｍ．２００４年１月；５０（１）：８０−７）は、リアルタイム定量的ＲＴ−ＰＣＲを用いてサイクリンＤ１ｍＲＮＡの発現を評価し、ＣＤ１９ｍＲＮＡに対して正規化したサイクリンＤ１ｍＲＮＡの定量的ＲＴ−ＰＣＲが血液、骨髄および組織におけるＭＣＬの診断に使用できることを見出した。あるいは、乳癌患者については、上記で概略を示した診断試験を用い、ＣＤＫ阻害剤による治療が適用できるかを選定することができる。腫瘍細胞は共通してサイクリンＥを過剰発現し、乳癌でもサイクリンＥが過剰発現することが示されている（ハーウェル（Ｈａｒｗｅｌｌ）ら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ、２０００、６０、４８１−４８９）。従って、乳癌は特に本明細書で提供されるＣＤＫ阻害剤で治療可能である。
本発明を、以下の実施例に記載される具体的実施態様を参照して説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
実施例においては次の略語が使用される。
ＡｃＯＨ 酢酸
ＢＯＣ ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
ＣＤＩ １，１−カルボニルジイミダゾール
ＤＭＡＷ９０ 溶媒混合物：ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、ＡｃＯＨ、Ｈ２Ｏ（９０：１８：３：２）
ＤＭＡＷ１２０ 溶媒混合物：ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、ＡｃＯＨ、Ｈ２Ｏ（１２０：１８：３：２）
ＤＭＡＷ２４０ 溶媒混合物：ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、ＡｃＯＨ、Ｈ２Ｏ（２４０：２０：３：２）
ＤＣＭ ジクロロメタン
ＤＭＦ ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ ジメチルスルホキシド
ＥＤＣ １−エチル−３−（３´−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド
Ｅｔ３Ｎ トリエチルアミン
ＥｔＯＡｃ 酢酸エチル
Ｅｔ２Ｏ ジエチルエーテル
ＨＯＡｔ １−ヒドロキシアザベンゾトリアゾール
ＨＯＢｔ １−ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＭｅＣＮ アセトニトリル
ＭｅＯＨ メタノール
ＳｉＯ２ シリカ
ＴＢＴＵ Ｎ，Ｎ，Ｎ´，Ｎ´−テトラメチル−Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）ウロニウムテトラフルオロボレート
ＴＨＦ テトラヒドロフラン
分析的ＬＣ−ＭＳシステムおよび方法の説明
実施例では、調製した化合物は、以下に示すシステムおよび作動条件を用いた液体クロマトグラフィーおよび質量分析により特性決定した。種々の同位体を含む原子が存在し、単一の質量が表示される場合には、その化合物についての質量はモノアイソトピック質量（すなわち、３５Ｃｌ；７９Ｂｒなど）である。下記のようにいくつかのシステムを用いたが、これらは、近似した作動条件で実施されるように装備および設定を行った。使用した作動条件はまた、下記に示す。
ウォーターズプラットフォーム（Ｗａｔｅｒｓ Ｐｌａｔｆｏｒｍ）ＬＣ−ＭＳシステム：
ＨＰＬＣシステム：ウォーターズ（Ｗａｔｅｒｓ）２７９５
質量分析検出器：マイクロマスプラットフォーム（Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ Ｐｌａｔｆｏｒｍ）ＬＣ
ＰＤＡ検出器：ウォーターズ（Ｗａｔｅｒｓ）２９９６ ＰＤＡ
酸性分析条件：
溶離剤Ａ：Ｈ２Ｏ（０．１％ギ酸）
溶離剤Ｂ：ＣＨ３ＣＮ（０．１％ギ酸）
勾配：３．５分で５〜９５％溶離剤Ｂ
流速：０．８ｍｌ／分
カラム：フェノメネックスシナジー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ）４μ Ｍａｘ−ＲＰ８０Ａ、２．０×５０ｍｍ
塩基性分析条件：
溶離剤Ａ：Ｈ２Ｏ（ＮＨ４ＯＨでｐＨ＝９．２に調整した１０ｍＭ ＮＨ４ＨＣＯ３バッファー）
溶離剤Ｂ：ＣＨ３ＣＮ
勾配：３．５分で０５〜９５％溶離剤Ｂ
流速：０．８ｍｌ／分
カラム：フェノメネックスルナ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ）Ｃ１８（２） ５μｍ ２．０×５０ｍｍ
極性分析条件：
溶離剤Ａ：Ｈ２Ｏ（０．１％ギ酸）
溶離剤Ｂ：ＣＨ３ＣＮ（０．１％ギ酸）
勾配：３分で００〜５０％溶離剤Ｂ
流速：０．８ｍｌ／分
カラム：フェノメネックスシナジー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ）４μ Ｍａｘ−ＲＰ８０Ａ、２．０×５０ｍｍ
親油性分析条件：
溶離剤Ａ：Ｈ２Ｏ（０．１％ギ酸）
溶離剤Ｂ：ＣＨ３ＣＮ（０．１％ギ酸）
勾配：３．５分で５５〜９５％溶離剤Ｂ
流速：０．８ｍｌ／分
カラム：フェノメネックスシナジー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ）４μ Ｍａｘ−ＲＰ８０Ａ、２．０×５０ｍｍ、
長時間酸性分析条件：
溶離剤Ａ：Ｈ２Ｏ（０．１％ギ酸）
溶離剤Ｂ：ＣＨ３ＣＮ（０．１％ギ酸）
勾配：１５分で０５〜５０％溶離剤Ｂ
流速：０．４ｍｌ／分
カラム：フェノメネックスシナジー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ）４μ Ｍａｘ−ＲＰ８０Ａ、２．０×１５０ｍｍ
長時間塩基性分析条件：
溶離剤Ａ：Ｈ２Ｏ（ＮＨ４ＯＨでｐＨ＝９．２に調整した１０ｍＭ ＮＨ４ＨＣＯ３バッファー）
溶離剤Ｂ：ＣＨ３ＣＮ
勾配：１５分で０５〜９５％溶離剤Ｂ
流速：０．８ｍｌ／分
カラム：フェノメネックスルナ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ）Ｃ１８（２） ５μｍ ２．０×５０ｍｍ
Ｐｌａｔｆｏｒｍ ＭＳ条件：
キャピラリー電圧：３．６ｋＶ（ＥＳネガティブでは３．４０ｋＶ）
コーン電圧：２５Ｖ
ソース温度：１２０℃
走査範囲：１００〜８００ａｍｕ
イオン化モード：エレクトロスプレーポジティブまたはエレクトロスプレーネガティブまたはエレクトロスプレーポジティブ＆ネガティブ
ウォーターズフラクションリンクス（Ｗａｔｅｒｓ Ｆｒａｃｔｉｏｎｌｙｎｘ）ＬＣ−ＭＳシステム：
ＨＰＬＣシステム：２７６７オートサンプラー−２５２５二元勾配ポンプ
質量分析検出器：ウォーターズ（Ｗａｔｅｒｓ）ＺＱ
ＰＤＡ検出器：ウォーターズ（Ｗａｔｅｒｓ）２９９６ ＰＤＡ
酸性分析条件：
溶離剤Ａ：Ｈ２Ｏ（０．１％ギ酸）
溶離剤Ｂ：ＣＨ３ＣＮ（０．１％ギ酸）
勾配：４分で５〜９５％溶離剤Ｂ
流速：２．０ｍｌ／分
カラム：フェノメネックスシナジー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ）４μ Ｍａｘ−ＲＰ８０Ａ、４．６×５０ｍｍ
極性分析条件：
溶離剤Ａ：Ｈ２Ｏ（０．１％ギ酸）
溶離剤Ｂ：ＣＨ３ＣＮ（０．１％ギ酸）
勾配：４分で００〜５０％溶離剤Ｂ
流速：２．０ｍｌ／分
カラム：フェノメネックスシナジー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ）４μ Ｍａｘ−ＲＰ８０Ａ、４．６×５０ｍｍ
親油性分析条件：
溶離剤Ａ：Ｈ２Ｏ（０．１％ギ酸）
溶離剤Ｂ：ＣＨ３ＣＮ（０．１％ギ酸）
勾配：４分で５５〜９５％溶離剤Ｂ
流速：２．０ｍｌ／分
カラム：フェノメネックスシナジー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ）４μ Ｍａｘ−ＲＰ８０Ａ、４．６×５０ｍｍ
Ｆｒａｃｔｉｏｎｌｙｎｘ ＭＳ条件：
キャピラリー電圧：３．５ｋＶ（ＥＳネガティブでは３．２ｋＶ）
コーン電圧：２５Ｖ（ＥＳネガティブでは３０Ｖ）
ソース温度：１２０℃
走査範囲：１００〜８００ａｍｕ
イオン化モード：エレクトロスプレーポジティブまたはエレクトロスプレーネガティブまたはエレクトロスプレーポジティブ＆ネガティブ
質量分析精製 ＬＣ−ＭＳシステム
分取ＬＣ−ＭＳは、本明細書に記載の化合物などの小有機分子の精製に用いられる標準的かつ有効な方法である。液体クロマトグラフィー（ＬＣ）および質量分析（ＭＳ）方法は、粗材料のより良い分離やＭＳによるサンプルの検出の向上を得るために変更することができる。分取勾配ＬＣ法の至適化には、カラム、揮発性溶離剤と改質剤、および勾配の変更が含まれる。分取ＬＣ−ＭＳ法を至適化した後、それを化合物の精製に用いるための方法は当技術分野で公知のものである。このような方法は、ローゼントレター（Ｒｏｓｅｎｔｒｅｔｅｒ Ｕ）、フーバー（Ｈｕｂｅｒ Ｕ．）；分取ＬＣ／ＭＳにおける至適部分採取（Ｏｐｔｉｍａｌ ｆｒａｃｉｏｎ ｃｏｌｌｅｃｔｉｎｇ ｉｎ ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅ ＬＣ／ＭＳ）；ジャーナルオブコンビナトリアルケミストリー（Ｊ．Ｃｏｍｂ．Ｃｈｅｍ．）；２００４年；６（２）、１５９−６４およびリースター（Ｌｅｉｓｔｅｒ Ｗ）、ストラウス（Ｓｔｒａｕｓｓ Ｋ）、ビスノスキ（Ｗｉｓｎｏｓｋｉ Ｄ）、ジャオ（Ｚｈａｏ Ｚ）、リンズリー（Ｌｉｎｄｓｌｅｙ Ｃ．）、化合物ライブラリの予備精製および解析的分析のためのカスタムハイスループット分取液体クロマトグラフィー/質量分析計プラットフォームの開発（Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａ ｃｕｓｔｏｍ ｈｉｇｈ−ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ／ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ ｐｌａｔｆｏｒｍ ｆｏｒ ｔｈｅ ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｎａｌｙｔｉｃａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｌｉｂｒａｒｉｅｓ）；ジャーナルオブコンビナトリアルケミストリー（Ｊ．Ｃｏｍｂ．Ｃｈｅｍ．）；２００３年；５（３）；３２２−９に記載されている。
分取ＬＣ−ＭＳによって化合物を精製するためのこのようなシステムの１つを以下に記載するが、当業者ならば、記載されているものとは別のシステムおよび方法も使用可能であることが分かるであろう。特に、ここに記載されている逆相分取ＬＣに基づく方法の代わりに順相法を用いてもよい。ほとんどの分取ＬＣ−ＭＳシステムでは逆相ＬＣと揮発性酸性改質剤を用いるが、これはこのアプローチが低分子の精製に極めて有効であるため、また、これらの溶離剤が陽イオンエレクトロスプレー質量分析に適合するためである。上記の分析法で概略を示したように、他のクロマトグラフィー溶液、例えば、順相ＬＣ、代わりに緩衝移動相、塩基性改質剤などを用いると、これらの化合物の精製のために代用することができる。
分取ＬＣ−ＭＳシステム：
ウォーターズフラクションリンクス（Ｗａｔｅｒｓ Ｆｒａｃｔｉｏｎｌｙｎｘ）システム：
ハードウエア：
２７６７デュアルループオートサンプラー／フラクションコレクター
２５２５分取ポンプ
カラム選択用としてＣＦＯ（カラム液体オーガナイザー（ｃｏｌｕｍｎ ｆｌｕｉｄｉｃ ｏｒｇａｎｉｓｅｒ））
メイクアップポンプとしてＲＭＡ（ウォーターズ試薬マネージャー（Ｗａｔｅｒｓ ｒｅａｇｅｎｔ ｍａｎａｇｅｒ））
ウォーターズ（Ｗａｔｅｒｓ）ＺＱ 質量分析計
ウォーターズ（Ｗａｔｅｒｓ）２９９６ フォトダイオードアレイ検出器
ウォーターズ（Ｗａｔｅｒｓ）ＺＱ 質量分析計
ソフトウェア：
マスリンクス（Ｍａｓｓｌｙｎｘ）４．０
ウォーターズ（Ｗａｔｅｒｓ）ＭＳ作動条件：
キャピラリー電圧：３．５ｋＶ（ＥＳネガティブでは３．２ｋＶ）
コーン電圧：２５Ｖ（ＥＳネガティブでは３０Ｖ）
イオン源温度：１２０℃
増倍管：５００Ｖ
走査範囲：１２５〜８００ａｍｕ
イオン化モード：エレクトロスプレーポジティブまたはエレクトロスプレーネガティブ
アジレント（Ａｇｉｌｅｎｔ）１１００ ＬＣ−ＭＳ分取システム：
ハードウエア：
オートサンプラー：１１００シリーズ“ｐｒｅｐＡＬＳ”
ポンプ：分取流勾配用として１１００シリーズ“ＰｒｅｐＰｕｍｐ”および分取流のポンピングモディファー用としての１１００シリーズ“ＱｕａｔＰｕｍｐ”
ＵＶ検出器：１１００シリーズ“ＭＷＤ”（多波長検出器）
ＭＳ検出器：１１００シリーズ“ＬＣ−ＭＳＤ ＶＬ”
フラクションコレクター：２דＰｒｅｐ−ＦＣ”
メイクアップポンプ：“ウォーターズ（Ｗａｔｅｒｓ）ＲＭＡ”
アジレントアクティブスプリッター（Ａｇｉｌｅｎｔ Ａｃｔｉｖｅ Ｓｐｌｉｔｔｅｒ）
ソフトウェア：
ケムステーション：ケム（Ｃｈｅｍ）３２
アジレント（Ａｇｉｌｅｎｔ）ＭＳ作動条件：
キャピラリー電圧：４０００Ｖ（ＥＳネガティブでは３５００Ｖ）
フラクション／増分：１５０／ｌ
乾燥ガス流：１３．０Ｌ／分
ガス温度：３５０℃
噴霧器圧：５０ｐｓｉｇ
走査範囲：１２５〜８００ａｍｕ
イオン化モード：エレクトロスプレーポジティブまたはエレクトロスプレーネガティブ
クロマトグラフィー条件：
カラム：
１．低ｐＨクロマトグラフィー：
フェノメネックスシナジー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｙ）ＭＡＸ−ＲＰ、１０μ、１００×２１．２ｍｍ
（より極性の高い化合物には、代用としてサーモハイパーシルキーストーン、ハイピュリティーアクアスター（Ｔｈｅｒｍｏ Ｈｙｐｅｒｓｉｌ−Ｋｅｙｓｔｏｎｅ ＨｙＰｕｒｉｔｙ Ａｑｕａｓｔａｒ）５μ、１００×２１．２ｍｍ）
２．高ｐＨクロマトグラフィー：
フェノメネックスルナ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ）Ｃ１８（２）、１０μ、１００×２１．２ｍｍ
（代用として、フェノメネックスジェミニ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｇｅｍｉｎｉ）５μ、１００×２１．２ｍｍ）
溶離剤：
１．低ｐＨクロマトグラフィー：
溶媒Ａ：Ｈ２Ｏ＋０．１％ギ酸、ｐＨ〜１．５
溶媒Ｂ：ＣＨ３ＣＮ＋０．１％ギ酸
２．高ｐＨクロマトグラフィー：
溶媒Ａ：Ｈ２Ｏ＋１０ｍＭ ＮＨ４ＨＣＯ３＋ＮＨ４ＯＨ、ｐＨ９．２
溶媒Ｂ：ＣＨ３ＣＮ
３．メイクアップ溶媒：
ＭｅＯＨ＋０．２％ギ酸（両クロマトグラフィータイプとも）
方法：
分析トレースに従い、最も適切な分取クロマトグラフィーのタイプを選択した。典型的な常法としては、化合物の構造に最も適したタイプのクロマトグラフィー（低ｐＨまたは高ｐＨ）を用いて分析的ＬＣ−ＭＳを行った。分析トレースが良好なクロマトグラフィーを示したところで、同じタイプの好適な分取法を選択した。低ｐＨおよび高ｐＨクロマトグラフィー法とも、典型的な実施条件は次の通りであった。
流速：２４ｍｌ／分
勾配：一般に、勾配は総て、初期段階は９５％Ａ＋５％Ｂで０．４分とした。次に、分析トレースに従い、良好な分離を達成するために３．６分勾配を選択した（例えば、初期保持化合物については５％〜５０％Ｂ、中期保持化合物については３５％〜８０％Ｂ、など）。
洗浄：勾配の終了時には１．２分の洗浄工程を行った。
再平衡：次の実施のためにシステムを準備するために、２．１分の再平衡工程を行った。
メイクアップ流速：１ｍｌ／分
溶媒：
化合物は総て通常、１００％ＭｅＯＨまたは１００％ＤＭＳＯに溶解した。
当業者であれば得られた情報から、分取ＬＣ−ＭＳにより、本明細書に記載の化合物を精製することができる。
各実施例の出発材料は特に断りのない限り市販のものである。
（実施例１）
５−シアノ−２−メトキシの−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−ベンズアミドの合成
１Ａ （３，４−ジニトロ−フェニル）−モルホリン−４−イル−メタノンの合成
Figure 0005474354
３，４−ジニトロ安息香酸（１０．０ｇ）と塩化チオニル（３０ｍｌ）との混合物を還流下２時間加熱し、周囲温度まで冷却し、過剰の塩化チオニルをトルエンとの共沸により除去した。残渣をＴＨＦ（１００ｍｌ）に溶解し、モルホリン（４．１ｍｌ）およびＥｔ３Ｎ（７．２ｍｌ）を０℃で同時に混合物に添加した。混合物を３時間撹拌し、水（１００ｍｌ）を添加し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機画分を塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、真空内で減量した。ＭｅＯＨからの残渣の再結晶により、（３．４−ジニトロ−フェニル）−モルホリン−４−イル−メタノン（８．２３ｇ）を黄色の固体として得た。（１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６)δ８．３（ｄ、１Ｈ） ８．３（ｓ、１Ｈ）、８．０（ｄ、１Ｈ）、３．７−３．５（ｍ、８Ｈ）。
１Ｂ （３，４−ジアミノ−フェニル）−モルホリン−４−イル−メタノンの合成
Figure 0005474354
ＭｅＯＨ（３０ｍｌ）中、（３，４−ジニトロ−フェニル）−モルホリン−４−イル−メタノン（１．０g）と１０％Ｐｄ／Ｃ（１５０ｍｇ）との混合物を、水素雰囲気下、周囲温度で、１０時間振とうし、その後、セライトプラグで濾過し、真空内で減量し、（３，４−ジアミノ−フェニル）−モルホリン−４−イル−メタノン（９００ｍｇ）を得た。（１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６)δ６．６（ｓ、１Ｈ）、６．５（ｓ、２Ｈ）、４．８（ｓ、１．５Ｈ）、４．６（ｓ、１．５Ｈ）、４．１（ｓ、１Ｈ）、３．６（ｍ、４Ｈ）および３．４（ｍ、４Ｈ））。
１Ｃ ４−モルホリン−４−イルメチル−ベンゼン−１，２−ジアミンの合成
Figure 0005474354
無水ＴＨＦ（５０ｍｌ）中の（３，４−ジニトロ−フェニル）−モルホリン−４−イル−メタノン（２．８４ｇ）の混合物に、ＮａＢＨ４（９５４ｍｇ）を添加し、次にＢＦ３・Ｅｔ２Ｏ（３．２ｍｌ）を滴下した。混合物を周囲温度で３時間撹拌し、次に、ＭｅＯＨの添加により急冷した。混合物を真空内で減量し、ＥｔＯＡｃと水で分液し、有機画分を塩水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、真空内で減量した。残渣を、ＥｔＯＡｃで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製し、４−（３，４−ジニトロ−ベンジル）−モルホリン（１．０８ｇ）を得た。ＭｅＯＨ（１０ｍｌ）中で４−（３，４−ジニトロ−ベンジル）−モルホリン（５５０ｍｇ）と１０％Ｐｄ／Ｃ（７５ｍｇ）との混合物を、水素雰囲気下、周囲温度で、４時間振とうし、その後、セライトプラグで濾過し、真空内で減量し、混合物の主成分として４−モルホリン−４−イルメチル−ベンゼン−１．２−ジアミン（４８３ｍｇ）を得た。
１Ｄ ５−モルホリン−４−イルメチル−２−（４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）１Ｈ−ベンゾイミダゾールの合成
Figure 0005474354
無水ＤＭＦ（２５ｍｌ）中の４−モルホリン−４−イルメチル−ベンゼン−ｌ，２−ジアミン（２．３０ｇ、１１．１ｍｍｏｌ）、４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸（１．５７ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（２．１３ｇ、１１．１ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１．５０ｇ、１１．１ｍｍｏｌ）の混合物を周囲温度で２４時間振とうした。混合物を真空内で減量し、粗残渣をＡｃＯＨ（４０ｍｌ）に溶解し、還流下で３時間加熱した。溶媒を真空内で除去し、残渣をＥｔＯＡｃにおいて０−２０％ＭｅＯＨで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、５−モルホリン−４−イルメチル−２−（４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）１Ｈ−ベンゾイミダゾールを黄色の固体として得た（１．０ｇ、６１％）。（ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ１．８３、［Ｍ＋Ｈ］＋３２９）
１Ｅ ３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イルアミンの合成
Figure 0005474354
ＤＭＦ（３０ｍｌ）中の５−モルホリン−４−イルメチル−２−４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ｌＨ−ベンゾイミダゾール（０．８２ｇ、２．５ｍｍｏｌ）の溶液に窒素雰囲気下でパラジウム炭素（１０％、０．０８ｇ）を添加した。混合物を水素雰囲気下で４時間振とうし、その後セライトで濾過し、ＭｅＯＨで洗浄した。濾液を真空濃縮し、３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イルアミンを茶色の固体として得た（５３０ｍｇ、７１％）。（ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ１．９４、［Ｍ＋Ｈ］＋２９９）
１Ｆ ５−シアノ−２−メトキシ-安息香酸の合成
Figure 0005474354
アセトン（５０ｍｌ）中の、メチル−２−ヒドロキシ−５−シアノベンゾエート（２．ｇ、５．６ｍｍｏｌ）とＫ２ＣＯ３（４．６８ｇ、１６．８ｍｍｏｌ）との混合物に、ヨウ化メチル（０．７ｍｌ、５．６ｍｍｏｌ）を添加した。反応物をその後６５℃で一晩加熱し、固体が生成し、これを熱いうちに濾過し、アセトンで洗浄して、５−シアノ−２−メトキシ−安息香酸メチルエステル（０．４５ｇ）を得た。粗生成物をＴＨＦ（５ｍｌ）で溶解し、次に水（５ｍｌ）中でＬｉＯＨ（０．１０８ｇ、０．２６ｍｍｏｌ）で処理し、室温で一晩撹拌した。反応物を２Ｍ ＨＣｌ酸性化し、ＥｔＯＡｃ（×２）で抽出した。有機画分を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、真空内で減量し、５−シアノ−２−メトキシ-安息香酸（０．２７７ｇ）を得た。（酸性ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ２．９２、［Ｍ＋Ｈ］＋１７８)。
１Ｇ ５−シアノ−２−メトキシ−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−ベンズアミドの合成(酸クロリド法)
Figure 0005474354
５−シアノ−２−メトキシ−安息香酸（実施例１Ｆ）（４０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５ｍｌ）に溶解し、塩化オキサリル（３４．４ｍｇ、０．２６４ｍｍｏｌ）をその後滴下し、続いてＤＭＦ（１滴）を滴下した。反応混合物を周囲温度で１時間撹拌し、真空内で減量し、その後トルエン（×２）を用いて再度蒸発した。ＴＨＦ（５ｍｌ）中の、３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イルアミン（１００ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）と５−シアノ−２−メトキシ−ベンゾイルクロリドとイソプロピルエチルアミン（１．８３μｌ、０．９ｍｍｏｌ）との混合物を０℃で撹拌し、その後２時間で室温まで暖めた。その後、反応混合物を真空濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、５−７％ＭｅＯＨ−ＤＣＭ）により精製し、５−シアノ−２−メトキシ−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−ベンズアミド（１２ｍｇ）を得た。(酸性ＬＣ／ＭＳ:Ｒｔ２．０２ｍｉｎ［Ｍ−Ｈ］＋４５８)。
（実施例２）
６−メチル−イミダゾール［２．１−ｂ］チアゾール−５−カルボン酸［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］アミドの合成
Figure 0005474354
６−メチル−イミダゾ［２．１−ｂ］チアゾール−５−カルボン酸（Ｂｉｏｎｅｔ）（６１ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）と３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イルアミン（１００ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）とＥＤＣ（７７ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）とＨＯＡｔ（５４ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）との混合物をＤＭＦ（３ｍｌ）中８０℃で１時間、そして周囲温度で２０時間撹拌した。混合物を真空内で減量し、残渣をＥｔＯＡｃと飽和ＮａＨＣＯとに分液した。有機画分を塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、真空内で減量した。残渣を分取ＬＣ／ＭＳにより精製し、６−メチル−イミダゾール［２．１−ｂ］チアゾール−５−カルボン酸［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］アミド（２９ｍｇ）を得た。(塩基性ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ２．５６［Ｍ＋Ｈ］＋４６３)
（実施例３）
２−シアノ−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダキソール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］アセトアミドの合成
Figure 0005474354
シアノ酢酸（２３ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）と３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イルアミン（７０％、１００ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）とＴＢＴＵ（８９ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）とＤＭＦ（２ｍｌ）との混合物を、２５℃で一晩撹拌した。その後、この混合物を真空内で蒸発した。ＤＣＭ−６％ＭｅＯＨ／ＤＣＭで溶出するフラッシュクロマトグラフィーは２−シアノ−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダキソール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］アセトアミドを黄色の固体（６５ｍｇ、７７％）として生成した。（ＬＣ／ＭＳ（酸性法／最終化合物)：Ｒｔ４．６１、［Ｍ＋Ｈ］＋３６６）
（実施例４）
２−シアノ−２−シクロプロピル−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−アセトアミド
４Ａ シアノ−シクロプロピル−酢酸の合成
Figure 0005474354
ＴＨＦ（１５ｍｌ）中のシアノ−シクロプロピル−酢酸エチルエステル（０．５ｇ、３．２６ｍｍｏｌ）溶液に１ＮＮａＯＨ（３．２６ｍｌ、３．２６ｍｍｏｌ）を添加した。２５℃で４時間攪拌後、反応混合物を真空内で蒸発し、水（２０ｍｌ）に再度溶解し、１ＮＨＣｌ溶液（３．２６ｍｌ）の添加により中和した。その後、この混合物をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍｌ）で抽出し、そして、合わせて乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）された有機物を真空内で蒸発し、不純なシアノ−シクロプロピル−酢酸を透明な油状物として得た。この物質をさらなる精製なしに実施例４Ｂの調製で使用した。
４Ｂ ２−シアノ−２−シクロプロピル−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−（ピラゾール−４−イル−アセトアミド
Figure 0005474354
実施例４Ａの生成物を、粗生成物をＤＣＭと飽和したＮａＨＣＯ３水溶液とで分液した以外は実施例３と同様の方法で３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イルアミンと反応させ、その後Ｅｔ２Ｏで粉状化して精製した。ＬＣ／ＭＳ（酸性法）Ｒｔ１．７９、［Ｍ＋Ｈ］＋４０６
（実施例５〜１４）
実施例１，２および３に記載の方法に従い、下表に示されている点を変更して、実施例５〜１４の化合物を調製した。
Figure 0005474354
Figure 0005474354
（実施例１５）
Ｎ−［３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−ｒａｃ−２−モルホリン カルボキサミド−トリフルオロアセテートの合成
１５Ａ ５，６−ジメトキシ−２−（４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−１Ｈ−ベンゾイミダゾールの合成
Figure 0005474354
ＤＭＦ（１００ｍｌ）中の、ＥＤＣ（４．８１ｇ，２５ｍｍｏｌ）とＨＯＢｔ（３．４０ｇ，２５ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（４．６７ｇ，４６ｍｍｏｌ）との溶液に、４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸（３．６３ｇ，２３．０９ｍｍｏｌ）および４，５−ジメトキシ−ベンゼン−１，２−ジアミン二塩酸塩（５．０６ｇ，２０．９９ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で一晩撹拌した。溶媒を真空除去し、得られた固体をＥｔＯＡｃ（５０ｍｌ）と飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍｌ）とで分液した。沈殿が生じ、濾別した。これを水、次いでジエチルエーテルで洗浄した後、メタノールおよびトルエンと共沸させ、４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸（２−アミノ−４，５−ジメトキシ−フェニル）−アミド（２．３５ｇ，３６％）を得た。４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸（２−アミノ−４，５−ジメトキシ−フェニル）−アミド（２．３５ｇ，７．６５ｍｍｏｌ）を酢酸（１５０ｍｌ）に溶解し、１４０℃で５時間還流した。この溶液を冷却し、溶媒を真空除去した。得られた固体をＥｔＯＡｃ（２５ｍｌ）と塩水（２５ｍｌ）とで分液した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空除去し、５，６−ジメトキシ−２−（４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール（２．０８ｇ，９４％）を得た。
１５Ｂ ３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イルアミンの合成
Figure 0005474354
エタノール（１５０ｍｌ）およびＤＭＦ（５０ｍｌ）中の５，６−ジメトキシ−２−（４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール（２．０８ｇ，７．２ｍｍｏｌ）および１０％パラジウム炭素（２００ｍｇ）の混合物を室温および室内圧で一晩水素化した。この反応混合物をセライト濾過し、溶媒を真空除去した。得られた固体をメタノールおよびトルエンと共沸させ、溶媒を真空除去した。この粗物質をＤＣＭ、ＭｅＯＨ、酢酸、水（１２０：１８：３：２）（ＤＭＡＷ１２０）、その後、ＤＣＭ、ＭｅＯＨ、酢酸、水（９０：１８：３：２）（ＤＭＡＷ９０）で溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーにて精製した。生成物画分を合わせ、溶媒を真空除去し、３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イルアミン（〜１ｇ、〜５３％）を得た。
１５Ｃ Ｎ−［３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−ｒａｃ−４−ＢＯＣ−２−モルホリン カルボキサミドの合成
Figure 0005474354
ＤＭＦ（２ｍｌ）中のＥＤＣ（１２５ｍｇ，０．５４ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（７４ｍｇ，０．５４ｍｍｏｌ）の溶液に、３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イルアミン（１１７ｍｇ，０．４５ｍｍｏｌ）（実施例１５Ｂ）および（ｒａｃ）−ＢＯＣ−カルボキシモルホリン（１２５ｍｇ，０．５４ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で一晩撹拌した。この混合物をＥｔＯＡｃと水とで分液した。有機層を飽和重炭酸ナトリウム水溶液および塩水で逐次洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ４）。溶液を真空内で蒸発乾固し、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し［ＳｉＯ２、勾配溶離：ＥｔＯＡｃ−ヘキサン（１：１）−ＥｔＯＡｃ−ＭｅＯＨ（８０：２０）］、Ｎ−［３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−ｒａｃ−４−ＢＯＣ−２−モルホリン カルボキサミド（６５ｍｇ）を無色の固体として得た。（ＬＣ／ＭＳ（酸性法）Ｒｔ２．６５ｍｉｎ、［Ｍ＋Ｈ］＋４７３）
１５Ｄ Ｎ−［３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−ｒａｃ−２−モルホリン カルボキサミド−トリフルオロ酢酸塩の合成
Figure 0005474354
Ｎ−［３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−ｒａｃ−４−ＢＯＣ−２−モルホリン カルボキサミド（６５ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）およびアニソール（６０μｌ、０．５６ｍｍｏｌ)を、トリフルオロ酢酸とジクロロメタンとの混合物（１：１；２ｍｌ）に溶解した。室温で３時間放置後、混合物を蒸発乾固し、Ｎ−［３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−ｒａｃ−２−モルホリン カルボキサミド−トリフルオロ酢酸塩（７３ｍｇ）を無色の固体として得た（ＬＣ／ＭＳ（酸性法）Ｒｔ１．４２ｍｉｎ、［Ｍ−Ｈ＋］−３７１）。
（実施例１６）
Ｎ−［３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−ｒａｃ−４ イソプロピル−２−モルホリン カルボキサミドの合成
Figure 0005474354
ＭｅＣＮ（１ｍｌ）中、Ｎ−［３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−ｒａｃ−２−モルホリン カルボキサミド−トリフルオロ酢酸塩（実施例１５Ｄ）（３４ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（２０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）に、２−ヨードプロパン(１７μｌ、０．１５ｍｍｏｌ)を添加した。混合物を、８０℃でほぼ４８時間撹拌し、その後は混合物が濃縮されていた。残渣をフラッシュクロマトグラフィーにより精製し［ＳｉＯ２、勾配溶離：ＤＣＭ：ＭｅＯＨ（９８：２）〜ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：濃縮ＮＨ３水溶液（９０：１０：１）］、Ｎ−［３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−ｒａｃ−４ イソプロピル−２−モルホリン カルボキサミドを無色のガム質として得た（ＬＣ／ＭＳ（塩基性法）Ｒｔ２．５２ｍｉｎ、［Ｍ＋Ｈ］＋４１５。
（実施例１７）
Ｎ−［３−（５，６−ジメトキシ−Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−ｒａｃ−１−メチル−ピペリジン ３−カルボキサミドの合成
Figure 0005474354
ＤＭＦ（１ｍｌ）中の３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イルアミン（６５ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）（実施例１５Ｂ）と（ｒａｃ）−１−メチル−ピペリジン−３−カルボン酸−塩酸塩（５０ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）とジイソプロピルエチルアミン（５０μｌ、０．２７ｍｍｏｌ）との溶液にＴＢＴＵ（９７ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温でほぼ１７時間撹拌し、その後１ＮＮａＯＨ水溶液（１ｍｌ）を添加し、もう１時間混合物を撹拌した。混合物はその後真空内で蒸発乾固され、残渣をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して（ＳｉＯ２、勾配溶離：ＤＣＭ：ＭｅＯＨ（９８：２）〜ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：濃縮ＮＨ３水溶液（７０：３０：３）の勾配溶離）、をＮ−［３−（５，６−ジメトキシ−Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−ｒａｃ−１−メチル−ピペリジン ３−カルボキサミド（２０ｍｇ）を無色のガム質として得た（ＬＣ／ＭＳ（塩基性法）Ｒｔ２．３５ｍｉｎ、（Ｍ＋Ｈ）＋３８５）。
（実施例１８）
３−クロロ−Ｎ−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル−5−（４−メチル−ピペリジン−１−イル）−ベンズアミドの合成
１８Ａ ３−クロロ−５−（４−メチル−ピペラジン−１−イル)−ベンゾニトリルの合成
Figure 0005474354
５−フルオロ−３−クロロ−ベンゾニトリル（１g、６．４ｍｍｏｌ）をＤＭＳＯ（２０ｍｌ）に溶解し、その後Ｋ２ＣＯ３（１．３ｇ、９．６ｍｍｏｌ）および１−メチルピペラジン（１．４ｍｌ、１２．８ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を８０℃で２０時間加熱した。ジエチルエーテルを粗生成物（１０ｍｌ）に添加し、１Ｎ ＨＣｌで酸性化した。沈澱物を粗反応混合物から濾別し、３−クロロ−５−（４−メチル−ピペラジン−１−イル)−ベンゾニトリル（１．４ｇ、収率９３％）を白色固形物として得た（ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ１．８３［Ｍ＋Ｈ］＋２３６、酸性法)。
１８Ｂ ３−クロロ−５−（４−メチル−ピペラジン−１−イル)−安息香酸の合成
Figure 0005474354
エタノール（１０ｍｌ）に溶解した３−クロロ−５−（４−メチル−ピペラジン−１−イル)−ベンゾニトリル（１．４ｇ、５．９ｍｍｏｌ）に２Ｍ ＮａＯＨ（２０ｍｌ）を添加し、反応混合物を還流下２０時間加熱した。混合物を真空内で減量し、粗生成物をｐＨ６まで１Ｎ ＨＣｌで酸性化し、ＥｔＯＡｃとＨ２Ｏで分液した。有機層を真空内で蒸発乾固し、０．７ｇの表題化合物を白色固形物として得た（ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ１．６７［Ｍ＋Ｈ］＋２５６、酸性法)。
１８Ｃ [３−クロロ−Ｎ−[３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル―５−（４−メチル−ピペリジン−１−イル）−ベンズアミドの合成
Figure 0005474354
化合物は、実施例１５Ｃと類似の方法で製造したが、１５Ｃにおける試薬としての（ｒａｃ）−ＢＯＣ−２−カルボキシモルホリンの代わりに３−クロロ−５−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−安息香酸（２００ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）を使用した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー［ＳｉＯ２、ＤＭＡＷ２４０−９０で溶出）により精製し、９２ｍｇ（収率２５％）の表題化合物を薄茶色の固形物として得た（ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ２．０７［Ｍ＋Ｈ］＋４９６、酸性法)。
（実施例１９−２１）
実施例１５に記載の方法に従い、下表に示されている点を変更して、実施例１９〜２１の化合物を調製した。
Figure 0005474354
（実施例２２）
５−クロロ−２−メトキシ−Ｎ−｛３−[５（４−メチルピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル]−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−ベンズアミドの合成
２２Ａ （３、４−ジニトロフェニル）−（４−メチルピペラジン−１−イル)−メタノンの合成
Figure 0005474354
３，４−ジニトロ安息香酸（５０g、０．２４ｍｏｌ）をＳＯＣｌ２（１６０ｍｌ）中還流下で６時間加熱した。この混合物をその後真空内で蒸発乾固した。生成物をＴＨＦに溶解し５℃まで冷却した。この溶液に、Ｎ−メチルピペラジン（２６．２ｍｌ、０．２４ｍｏｌ）とＥｔ３Ｎ（４２ｍｌ）とをＴＨＦ（５０ｍｌ）溶液として滴下した。一晩室温で撹拌した後、溶液を水（１．５Ｌ）に注ぎ、０．５時間ほぼ５℃で撹拌した。生成した固体沈澱物を採取、乾燥して、（３、４−ジニトロフェニル）−（４−メチルピペラジン−１−イル)−メタノン（４０ｇ）を黄色の固体として得た。
２２Ｂ １−（３、４−ジアミノベンジル）−４−メチルピペラジンの合成
Figure 0005474354
（３、４−ジニトロフェニル）−（４−メチルピペラジン−１−イル)−メタノン（１２．２ｇ、０．０４１ｍｏｌ）の冷却されたＴＨＦ溶液（５℃）に、温度を５℃未満に維持しながら、粉末ＮａＢＨ４を添加し、次に、ＢＦ３・ＯＥｔ２した滴下した。この混合物を２時間かけて室温にし、さらに２時間室温で撹拌した。ＭｅＯＨをその後慎重に混合物に添加し（沸騰を招くので）、撹拌を１０分間継続しその後混合物を濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃと飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で分液した。有機層を水および塩水で洗浄し、その後乾燥（ＭｇＳＯ４）した。溶液を真空内で蒸発させ、残渣をフラッシュクロマトグラフィー［ＳｉＯ２、勾配溶離：ＤＣＭ：ＭｅＯＨ（９８：２）〜ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：濃縮ＮＨ３水溶液（９０：１０：１）］により精製して、オレンジ色の結晶性固形物（３．７ｇ）を得た。ＭｅＯＨからの再結晶で１−（３、４−ジニトロベンジル）−４−メチルピペラジン（１ｇ）をオレンジ色の結晶性固形物として得た。
２２Ｃ １−（３、４−ジアミノベンジル）−４−メチルピペラジンの合成
Figure 0005474354
１−（３、４−ジニトロベンジル）−４−メチルピペラジン（１ｇ）をＤＭＦ：ＭｅＯＨ（１：１、２０ｍｌ）に溶解し、１０％Ｐｄ／Ｃ（５０ｍｇ）と共に水素雰囲気下で６時間撹拌した。この混合物をその後濾過そして蒸発し、暗色の固形物を得た。この固体をさらなる精製をせずに直ちに使用した。
２２Ｄ ５−クロロ−２−メトキシ−Ｎ−｛３−[５（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル]−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−ベンズアミドの合成
Figure 0005474354
４−（５−クロロ−２−メトキシベンゾイルアミノ）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸（１．１７ｇ）、粗ジアミン、１−（３，４−ジアミノベンジル）−４−メチルピペラジン（０．８７ｇ）およびＴＢＴＵ（１．５２ｇ）をＤＭＦ（１５ｍｌ）に溶解し、ほぼ１６時間撹拌した。この混合物をその後蒸発乾固し、暗色の固形物を得た。この暗色の固形物（１００ｍｇ）をＡｃＯＨ（４ｍｌ）に溶解し、混合物を８０℃で３時間加熱した。反応混合物を真空蒸発し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＤＭＡＷ１２０で溶出）で精製した。５−クロロ−２−メトキシ−Ｎ−｛３−[５（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル]−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−ベンズアミドを二酢酸塩（３５ｍｇ）として得た（ＬＣ／ＭＳ（酸性法／最終化合物)：Ｒｔ６．６３［Ｍ＋Ｈ］＋４８０)。
（実施例２３）
１−（２，６−ジフルオロ−ベンジル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の合成
Figure 0005474354
ＴＨＦ（２ｍｌ）中の３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イルアミン（実施例１Ｅ)（１００ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）とＣＤＩ（２１７ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ）との混合物に１５分間マイクロ波照射（１５０℃、１５０Ｗ）した。２，６−ジフルオロ-ベンジルアミン（３８４ｍｇ、２．６８ｍｍｏｌ）をその後添加し、反応混合物にさらに１５分間同一の条件で再び照射した。冷却後、不均質混合物をろ過し、濾液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＡｃＯＨ：Ｈ２Ｏ（２４０：２０：３：２）（ＤＭＡＷ２４０〜（１２０：１８：３：２）（ＤＭＡＷ１２０）の勾配溶出)で精製して、１−（２，６−ジフルオロ−ベンジル−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素（３０ｍｇ、１９％）を得た（酸性ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ１．８４［Ｍ＋Ｈ］＋４６８)。
（実施例２４〜３４）
実施例２３に記載の一般的方法に従い、下表に示されている点を変更して、実施例２４〜３４の化合物を調製した。
Figure 0005474354
Figure 0005474354
（実施例３５）
１−［３−（５モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−３−ピリジン３−イル−尿素の合成
Figure 0005474354
ＤＣＭ（３ｍｌ）中の３−アミノピリジン（３１．５ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）とＥｔ３Ｎ（０．１９５ｍｌ、１．３２ｍｍｏｌ）との混合物を０℃まで冷却し、次いでトリホスゲン（８５ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）で処理した。反応物を周囲温度で１時間撹拌し、その後、３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イルアミン（１００ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を添加し、反応が終了するまで周囲温度で撹拌した。混合物をＭｅＯＨ中で２Ｍ ＮａＯＨで３０分間処理し、次いで真空内で減量した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、２〜２０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）で精製し、そして、ＤＣＭ、続いてジエチルエーテルで粉状化して、１−［３−（５モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−３−ピリジン３−イル−尿素（２０ｍｇ）を得た(塩基性ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ２．２９［Ｍ＋Ｈ］＋４１９)。
（実施例３６）
チオモルホリン−４−カルボキシル酸［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル)−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−アミドの合成
Figure 0005474354
トルエン／ＤＣＭ（１：１）の混合物に溶解した３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル)−１Ｈ−ピラゾール−４−イルアミン（１００ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）の溶液にホスゲン（トルエン中２０％）（０．３ｍｌ）を０℃で添加した。反応物を周囲温度で１時間撹拌し、次いで過剰のホスゲンを窒素気流により吹き飛ばした。チオモルホリン（３５ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を周囲温度で１時間そして６０℃で１時間撹拌した。混合物をその後真空濃縮し、残渣を分取ＬＣ／ＭＳにより精製して、チオモルホリン−４−カルボキシル酸［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル)−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−アミドを得た（極性ＬＣ／ＭＳ、Ｒｔ２．５８［Ｍ＋Ｈ］＋４２８)。
（実施例３７）
１−（４−フルオロフェニル）−１−メチル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル)−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の合成
Figure 0005474354
表題化合物を製造するために使用した方法は実施例３５に関して記載した方法と同様であるが、３−アミノピリジンの代わりに４−フルオロ−Ｎ−メチルアニリンを用い、反応を５０℃で２時間行なった。粗生成物を、冷却した反応混合物から沈澱物として単離し、その後フラッシュカラムクロマトグラフィー[ＳｉＯ２、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＡｃＯＨ：水（２４０：２０：３：２）で溶出]により精製した。生じた生成物をジエチルエーテルを用いて粉状化して、１−（４−フルオロフェニル）−１−メチル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル)−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素（３ｍｇ）を無色の固形物として得た（酸性ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ２．１２［Ｍ＋Ｈ］＋４５０)。
（実施例３８−４３）
実施例３５および３７に記載の方法に従い、下表に示されている点を変更して、実施例３８〜４３の化合物を調製した。
Figure 0005474354
Figure 0005474354
（実施例４４）
１−（４−フルオロフェニル）−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル)−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の合成
Figure 0005474354
ＴＨＦ（２ｍｌ）中の３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル)−１Ｈ−ピラゾール−イルアミン（実施例１Ｅ）（１００ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）に、４−フルオロフェニルイソシアネートを添加し、この混合物を約１６時間室温で撹拌した。樹脂担持トリスアミン（８００ｍｇ、４ｍｍｏｌ／ｇ）を添加し、混合物をさらに４時間撹拌した。樹脂を濾過により除去し、濾液を１Ｎ ＫＯＨ（２ｍｌ、ＭｅＯＨ：ＴＨＦ;１：３）で処理し、溶液をほぼ１６時間撹拌した。混合物をその後ＥｔＯＡｃとＨ２Ｏとで分液した。水層をＥｔＯＡｃでさらに抽出し、その後合わせた有機画分を塩水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、蒸発乾固した。粗固形物をＤＣＭに溶解し、ヘキサンを用いて粉状化し、濾取して固形物を得た。この固形物をフラッシュカラムクロマトグラフィー［ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ−ＭｅＯＨ（９０：１０）］により精製して、１−（４−フルオロフェニル）−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル)−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素（３０ｍｇ、２０％）を黄色の固体として得た（ＬＣ／ＭＳ（酸性法）：Ｒｔ２．０１［Ｍ−Ｈ＋］−４３４)。
（実施例４５〜５６）
実施例４４に記載の方法に従い、下表に示されている点を変更して、実施例４５〜５６の化合物を調製した。
Figure 0005474354
Figure 0005474354
（実施例５７〜５９）
実施例２３に記載の方法に従い、下表に示されている点を変更して、実施例５７〜５９の化合物を調製した。
Figure 0005474354
（実施例６０）
１−（２，６−ジフルオロフェニル）−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素塩酸塩の合成
６０Ａ （３，４−ジニトロ−フェニル）−モルホリン−４−イル−メタノンの合成
Figure 0005474354
３，４−ジニトロ安息香酸（１ｍｏｌ当量）と塩化チオニル（９．２ｍｏｌ当量）との混合物を還流下６時間加熱し、周囲温度に冷却し、過剰の塩化チオニルをトルエンとの共沸により除去した。残渣をＴＨＦ（８ｖｏｌ）に溶解し、その後モルホリン（１．０ｍｏｌ当量）とＥｔ３Ｎ（１．１ｍｏｌ当量)とを同時に上記混合物に０〜５℃で添加した。混合物を１時間周囲温度で撹拌し、水（２５ｖｏｌ）中に注いだ。この混合物を３〜７℃まで冷却し、０．５時間放置し、その間に生成物が沈澱物として現われた。沈澱物を濾取し、水で洗浄し、乾燥して３，４−ジニトロ−フェニルモルホリン−４−イル−メタノン（７５％）を黄色の固体として得た。（１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．３（ｄ、１Ｈ）、８．３（ｓ、１Ｈ）、８．０（ｄ、１Ｈ）、３．７−３．５（ｍ、８Ｈ）。
６０Ｂ ４−（３，４−ジニトロ−ベンジル）−モルホリンの合成
Figure 0005474354
（３、４−ジニトロ−フェニル）モルホリン−４−イル−メタノン（１ｍｏｌ当量）の非水テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）（２５ｖｏｌ）混合物に０〜５℃で、ＮａＢＨ４（２ｍｏｌ当量）を添加し、続いてＢＦ３・Ｅｔ２Ｏ（１．０１ｍｏｌ当量）を、温度を０〜５℃に維持するように、滴下した。この混合物をその後周囲温度で３時間撹拌し、その後メタノールを添加して急冷した。混合物をその後真空内で減量し、酢酸エチルと飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で分液した。混合物を３０分間急速に撹拌した後、各層を分離した。有機層を水と塩水で連続的に洗浄した後、真空内で減量した。生成物をメタノールから結晶化して、４−（３，４−ジニトロ−ベンジル）−モルホリン（８５％）を得た（ＬＣ／ＭＳ（塩基性法)：Ｒｔ２．８０［Ｍ＋Ｈ］＋２６８)。
６０Ｃ ４−モルホリン−４−イルメチル−ベンゼン−１，２−ジアミンの合成
Figure 0005474354
容器を水素で充填しながら間、ＩＭＳ（３３ｖｏｌ）中の４−（３，４−ジニトロ−ベンジル）モルホリン（１ｍｏｌ当量）と５％Ｐｄ／Ｃ（０．０５ｗｔ当量)との混合物を０〜５℃で撹拌した。この混合物を、反応が完了するまで（＜２４時間）、撹拌しつつ１５〜２０℃まで慎重に暖めた。混合物を濾過し、濾液を蒸発乾固して、４−モルホリン−４−イルメチル−ベンゼン−１，２−ジアミン（９０％）を得た。この物質を次の工程で直ちに使用した。（ＬＣ／ＭＳ（塩基性法）：Ｒｔ１．６４、［Ｍ−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２）２Ｏ−］＋１２１）
６０Ｄ ５−モルホリン−４−イルメチル−２−（４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ｌＨ−ベンズイミダゾールの合成
Figure 0005474354
４−モルホリン−４−イルメチル−ベンゼン−１，２−ジアミン（１ｍｏｌ当量）および４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸（１ｍｏｌ当量）をジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（１０ｖｏｌ）に溶解した。Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ´，Ｎ´−テトラメチルウロニウムテトラフルオロ硼酸塩（ＴＢＴＵ）（１．２ｍｏｌ当量）を添加し、この混合物を周囲温度で２４時間撹拌した。この混合物を、溶媒がそれ以上蒸留するのが観察されなくなるまで、真空内で濃縮した。残渣をその後氷酢酸（１０ｖｏｌ）に溶解し６５℃で〜１２時間加熱した。混合物を真空濃縮し、その後、水（６ｖｏｌ）に７５℃で溶解した。その黒色の溶液を２時間０〜５℃まで冷却し、その間に固形物が生成した。その固形物を濾過により除去し、また水性の濾液を酢酸エチル（４ｖｏｌ）およびテトラヒドロフラン（２ｖｏｌ）で希釈した。固体ＮａＨＣＯ３を、さらなる沸騰が観察されなくなるまで、撹拌されている混合物にゆっくり添加した。ｐＨ６．８に到達した。この混合物をその後、析出が観察されるまで、撹拌した。混合物を０〜５℃で２時間放置後、固形物を濾取し、水（２ｖｏｌ）および酢酸エチル（２ｖｏｌ）で洗浄し、乾燥して、５−モルホリン−４−イルメチル−２−（４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ｌＨ−ベンズイミダゾール（４０％）を茶色の固体として得た（ＬＣ／ＭＳ（塩基性法)：Ｒｔ１．９３、［Ｍ−Ｈ＋］−３２７)。
６０Ｅ ３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾールーイルアミンの合成
Figure 0005474354
ＤＭＦ（３６ｖｏｌ）中の５−モルホリン−４−イルメチル−２−（４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）１Ｈ−ベンゾイミダゾール（１ｍｏｌ当量）に窒素雰囲気下で５％Ｐｄ／Ｃ（０．１ｗｔ当量）を添加した。反応槽を水素充填し、周囲温度で２４時間撹拌した。混合物をその後セライト濾過し、メタノールで洗浄した。濾液を真空濃縮して、３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾールーイルアミン（９０％）を茶色の固形物として得た（ＬＣ／ＭＳ（塩基性法)：Ｒｔ１．９４、［Ｍ−Ｈ＋］−２９７)。この生成物をそれ以上精製しないで使用した。
６０Ｆ １−（２，６−ジフルオロフェニル）−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素塩酸塩の合成
Figure 0005474354
ＴＨＦ（１０ｖｏｌ）中の３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−ｌＨ−ピラゾール−４−イルアミン（１ｍｏｌ当量）の混合物に０〜５℃で撹拌しながら２，６−ジフルオロフェニルイソシアネート（１．３ｍｏｌ当量）を添加した。この混合物を次に１６時間周囲温度で撹拌し、その後１Ｍ ＫＯＨ水溶液（４ｖｏｌ）で処理した。さらに２時間撹拌した後、混合物を真空濃縮し、酢酸エチルと飽和ＮａＨＣＯ３水溶液とで分液した。有機層を飽和塩水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、蒸発乾固し、次に残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー[ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨ（９８：２）〜（９０：１０）の勾配溶出]により精製して、１−（２，６−ジフルオロフェニル）−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素を得た。
６０Ｇ 遊離塩基の再結晶および特性決定
実施例６０Ｅに記載されたようなシリカクロマトグラフィーの後、生成物を最小量の高温の酢酸エチルに溶解し、濾過そして冷却した。遊離塩基はこのようにして微結晶固形物として得られた。
化合物１−（２，６−ジフルオロフェニル）−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素は以下の物理化学パラメーターを有する。
ｐＫａ値−３．４２、６．９２＆１０．９７
ｌｏｇＰ−３．２４
ｌｏｇＰｉｏｎ−０．３６
ｌｏｇＤ（ｐＨ＝６）２．２７
（ｐＨ＝６．５）２．６８
（ｐＨ＝７．４）３．１１
６０Ｈ 塩酸塩の形成
生成物を酢酸エチルに溶解し、ジエチルエーテル中で過剰の飽和ＨＣｌで処理した。得られた沈澱物を、濾取し、ジエチルエーテルで洗浄し、乾燥して、１−（２，６−ジフルオロフェニル）−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素塩酸塩（５９％）を無色の固形物として得た（ＬＣ／ＭＳ（酸性法）：Ｒｔ１．０８、［Ｍ＋Ｈ＋］＋４５４)。
塩化水素を他の酸(例えば、ＤＬ−乳酸、エタンスルホン酸およびメタンスルホン酸)と代え、必要に応じて溶媒の組成を変更することによって、１−（２，６−ジフルオロフェニル）−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の他の塩を製造することができる。
６０Ｊ 遊離塩基と塩酸塩の溶解度の比較
前記遊離塩基と塩酸塩の溶解度を測定し比較した。ｐＨ７．４での遊離塩基の溶解度（緩衝水溶液）は＜０．００１ｍｇ／ｍｌであることが分かり、一方ｐＨ７．１での塩酸塩の溶解度(緩衝水溶液での)は０．０９３ｍｇ／ｍｌであることが分かった。したがって、塩酸塩は遊離塩基に対して溶解度の点で有意な利点を有する。
（実施例６１）
１−（２，６−ジフルオロフェニル）−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の酸付加塩の溶解度の測定
得られる酸付加塩の溶解度を評価するために、遊離塩基形態の１−（２，６−ジフルオロフェニル）−Ｎ−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素を以下に示された手順により様々な酸と組み合わせた。
手順
遊離塩基（５９ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ)と水（０．５９ｍｌ）とを８ｍｌバイアルに添加した。適当な酸（１当量、０．１３ｍｍｏｌ)を前記バイアルに添加し、バイアルを周囲温度で１６時間振とうした。この後、バイアルを目視により観察した。均質の溶液が観察された場合、実験を終了し、このようにした形成された塩は１００ｍｇ／ｍｌより大きい溶解度を有すると結論付けた。
固形物が残った場合、さらに０．５９ｍｌの水を添加し、バイアルを４時間振とうした。この段階で均質の溶液が形成された場合、塩は５０ｍｇ／ｍｌより大きい溶解度を有すると結論付けた。
この時点で固形物が残った場合、さらに１．１８ｍｌの水を添加し、バイアルを周囲温度で振とうした。これで均質の溶液になった場合、溶解度は２５ｍｇ／ｍｌより大きいと結論付けた。なおも固形物が残った場合、塩の溶解度は２５ｍｇ／ｍｌ未満であると結論付けた。
塩溶液をストラタ（Ｓｔｒａｔａ）−ＮＨ２カラムに通して遊離塩基を再生成した。
実験結果を下記の表に示す。
Figure 0005474354
表中に示された結果に基づくと、メシル酸塩、エタンスルホン酸塩およびＤＬ−乳酸塩は、例えば非経口投与用の、水性液状組成物の製造に特に有用であると証明されたと結論付けることができる。
（実施例６２）
１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の遊離塩基および塩
実施例２４の化合物、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素は、下記の方法もしくはそれに類似の方法により遊離塩基もしくは酸付加塩の形態で単離することができる。
遊離塩基
シリカクロマトグラフィー（実施例２４参照）に続いて、実施例２４の生成物を最小量の高温のＭｅＯＨに溶解し、濾過、そして冷却した。〜１６時間後、生成物を無色の結晶性固形物として採取した。
塩酸塩（一般的手順)
シリカクロマトグラフィーに続いて、生成物（２．０５ｇ）をＭｅＯＨ：ＥｔＯＡｃ（１：１０、１００ｍｌ）に溶解し、ジオキサン（１．１ｍｏｌ当量）中で４Ｎ ＨＣｌで処理した。生じた沈澱物を濾取し乾燥して、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素塩酸塩（１．５ｇ）を得た。生成物を最小量のＭｅＯＨに溶解し、その後、曇りが数秒間持続するまでＥｔ２Ｏで粉状化した。一晩冷却した後、生成物は無色の結晶性固形物として採取された。
メシル酸塩
塩酸に代えてメタンスルホン酸を使用して、上述の一般的手順を用いて生成物を無色の結晶性固形物として採取した。
他の塩
他の所期の塩は、上述の一般的手順を用いて製造できると予想される。
（実施例６３）
１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の遊離塩基および塩の溶解度の測定
得られる酸付加塩の溶解度を評価するために、実施例２４の化合物、すなわち１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素を以下に示された手順により様々な酸と組み合わせた。
手順
実施例２４の化合物の遊離塩基（５０ｍｇ、０．１３１ｍｍｏｌ)と水（０．５ｍｌ）とを８ｍｌバイアルに添加した。適当な酸（１当量、０．１３１ｍｍｏｌ)を前記バイアルに添加し、バイアルを周囲温度で１４〜１６時間振とうした。この後、バイアルを目視により観察した。均質の溶液が観察された場合、実験を終了し、このようにした形成された塩は１００ｍｇ／ｍｌより大きい溶解度を有すると結論付けた。
固形物が残った場合、さらに０．５０ｍｌの水を添加し、バイアルを６時間振とうした。この段階で均質の溶液が形成された場合、塩は５０ｍｇ／ｍｌより大きい溶解度を有すると結論付けた。
この時点で固形物が残った場合、さらに１ｍｌの水を添加し、バイアルを周囲温度で振とうした。これで均質の溶液になった場合、溶解度は２５ｍｇ／ｍｌより大きいと結論付けた。なおも固形物が残った場合、塩の溶解度は２５ｍｇ／ｍｌ未満であると結論付けた。
塩溶液をストラタ（Ｓｔｒａｔａ）−ＮＨ２カラムに通して遊離塩基を再生成した。
実験結果を下記の表に示す。
Figure 0005474354
表中に示された結果に基づくと、酢酸塩、メシル酸塩、エタンスルホン酸塩、ＤＬ−乳酸塩、アジピン酸塩、Ｄ−グルクロン酸塩、Ｄ−グルコン酸塩および塩酸塩は、例えば非経口投与用の、水性液状組成物の製造に特に有用であると証明されたと結論付けることができる。
現在までに集められたデータから、本発明の化合物、特に１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の遊離塩基および塩(特に、Ｌ−乳酸塩)は従来の化合物に対して多くの利点を有することが明らかである。特に、そのような利点とは下記の１またはそれ以上を含む：
向上した水溶液に対する溶解度；
よりよい物理化学的特性、特により低いｌｏｇＤ；
Ｐ４５０酵素に対する感受性の差；
向上した薬物代謝および薬物速度論的特性；
向上した安定性、例えば、向上したシェルフライフおよび／または向上した熱安定性；
低減した必要用量；
治療標的、特にオーロラＡおよびＢ、に対する向上した効能；
増殖アッセイおよびクローンアッセイにおける向上した細胞活性；
向上した抗癌活性；および
向上した治療指数。
特に、前記化合物のＬ−乳酸塩形態は高温で良好な安定性、酸性緩衝系で十分な水溶解度を有し、そして明白な多形体または水和物形成のない非吸湿性であった。
（実施例６４）
１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素乳酸塩の調製
ＥｔＯＡｃ−ＭｅＯＨ中の１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素（０．７ｇ、１．８３ｍｍｏｌ）溶液に、Ｌ−乳酸（１６６ｍｇ、１．８５ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を周囲温度で撹拌し、その後真空内で減量した。この固形物を沸騰しているＥｔＯＨ（２０ｍＬ）から再結晶により精製し、乾燥後に、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素Ｌ−乳酸塩（０．４８ｇ）を得た。
（実施例６５）
１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素のＬ−乳酸塩の合成
１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素のＬ−乳酸塩は下記スキームに示される合成経路により調製されてもよい。
Figure 0005474354
ステージ１：（３，４−ジニトロ−フェニル）−モルホリン−４−イル−メタノンの合成
Figure 0005474354
ＴＨＦ（１００ｍＬ）中の３，４−ジニトロ安息香酸（１０ｇ、４７ｍｍｏｌ、１当量)とＤＭＦ（０．１ｍＬ）との溶液を、塩化チオニル（４．５ｍＬ、６２ｍｍｏｌ、１．３当量）で処理し、還流のため２．５時間加熱した。この混合物を氷中で冷却し、その後トリエチルアミン（１０ｍＬ、７１ｍｍｏｌ、１．１当量）を、内部温度を＜５℃に維持し、２０分間添加した。得られた粘性の黄色い懸濁液にモルホリン（６．２ｍＬ、７１ｍｍｏｌ、１．５当量）を、内部温度を＜１０℃に維持し、１５分間添加した。氷浴を除去し、混合物を還流温度まで暖めた。１５分後、さらなる分量のモルホリン（１ｍＬ、１１ｍｍｏｌ、０．２４当量)を添加し、混合物を一晩撹拌した。混合物を水（２５０ｍＬ）で希釈し、氷中で冷却した。ベージュ色の固形物を吸引濾過し、さらなる分量の冷水（２５ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥して、表題化合物（１２．７ｇ、９６％）を得た。
ステージ２：４−（３，４−ジニトロ−ベンジル）−モルホリンの合成
Figure 0005474354
水素化ホウ素ナトリウム（３．３６ｇ、８９ｍｍｏｌ、２．１当量）を粉砕し、窒素置換したフラスコに入れ、ＴＨＦ（１２０ｍＬ）中に懸濁した。〜０℃に冷却後、三弗化硼素エーテラート（１１．３ｍＬ、８９ｍｍｏｌ、２．１当量）を注射器を通して添加した。この反応はやや発熱性であり、ある程度の水素放出が認められた。４−（３，４−ジニトロベンゾイル）モルホリン（１１．９１ｇ、４２ｍｍｏｌ、１．０当量）をひとかたまりの分量で固形物として添加し、追加の分量のＴＨＦ（２０ｍＬ）で容器をすすいだ。氷浴を除去し、懸濁液を還流温度で３時間撹拌して、再び氷中で冷却した。メタノール（１００ｍＬ）を慎重（水素放出）に添加し、その後混合物を１時間還流した。この混合物を真空濃縮し、次に残渣を酢酸エチル（１００ｍＬ）と１：１飽和重炭酸ナトリウム溶液／水（１００ｍＬ）とで分液した。有機相を分離し、水（５０ｍＬ）および塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ４）。先の重炭酸塩洗浄液に酢酸エチル（５０ｍＬ）で２度目の抽出をし、この抽出物を次に１度目の抽出に使用したものと同じ水性の洗浄剤で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）、濃縮して、１０．９７ｇの粗製品を得た。メタノール（４５ｍＬ、１０ｍＬ洗浄）からの再結晶で表題化合物（９．３４ｇ、８３％）を得た。
ステージ３：４−モルホリン−４−イルメチル−ベンゼン−１．２−ジアミンの合成
Figure 0005474354
４−（３，４−ジニトロ−ベンジル）モルホリン（２１ｇ、１０１ｍｍｏｌ）をエタノール（０．９Ｌ）に懸濁し、容器を窒素パージした。１０％パラジウム炭素（１．０５ｇ）をエタノール（２５ｍＬ）に懸濁し、基質に添加した。この混合物をその後氷中で冷却し、雰囲気を水素置換した。混合物を１５〜２０℃まで暖め、また、水素添加を雰囲気圧２日間で継続した。容器を窒素パージし、その後、混合物をセライト濾過し、複数の分量に分けたエタノール（０．３Ｌ）ですすいだ。濃縮により表題化合物（１５．８ｇ、９７％）を得た。
ステージ４：４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸メチルエステルの合成
Figure 0005474354
デジタル温度計と撹拌機を装備した２ＯＬ反応容器に、４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸（１．１１７Ｋｇ、７．１１ｍｏｌ、１ｗｔ）およびメタノール（８．９５０Ｌ、８ｖｏｌ）を仕込んだ。この反応混合物を窒素下で撹拌し、０〜５０℃まで冷却し、塩化チオニル（０．５８１Ｌ、８．０ｍｏｌ、０．５２ｖｏｌ）を１８０分間添加し、得られた混合物を１８〜２２℃まで暖め、その温度で一晩撹拌し、その後、１Ｈ ＮＭＲ分析（ｄ６−ＤＭＳＯ）は反応完了を示した。反応混合物を減圧下４０〜４５℃で濃縮し、残渣をトルエンで処理し、減圧下４０〜４５℃で再濃縮（３×２．２５０Ｌ、３×２ｖｏｌ）して４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸メチルエステルをオフホワイト色の固形物として得た（１．２１０Ｋｇ、９９．５％ｔｈ）。
ステージ５：４−アミノ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸メチルエステルの合成
Figure 0005474354
デジタル温度計と撹拌機を装備した２０Ｌ反応容器に、窒素下でパラジウム炭素（１０％ウェットペースト、０．１７０Ｋｇ、０．１４ｗｔ）を仕込んだ。別の容器で、エタノール（１２．１０Ｌ、１０ｖｏｌ）中の４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸メチルエステル（１．２１０Ｋｇ、７．０７ｍｏｌ、１ｗｔ）のスラリーを３０〜３５℃まで暖め溶解し、この溶液を窒素下で触媒添加した。窒素-水素パージシーケンスに続いて、水素雰囲気を導入し、１Ｈ ＮＭＲ分析（ｄ６−ＤＭＳＯ）により反応完了（５〜１０時間）が認められるまで反応混合物を２８〜３０℃に維持した。パージサイクルに続いて、窒素下の反応混合物を濾過し、また、濾液を減圧下で濃縮して、４−アミノ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸メチルエステル（０．９８７Ｋｇ、９８．９％ｔｈ）を得た。
ステージ６：４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸の合成
Figure 0005474354
ジオキサン（５００ｍＬ）中の４−アミノ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸メチルエステル（５０．０ｇ、３５５ｍｍｏｌ）の混合物に２Ｍ ＮａＯＨ水溶液（２１３ｍＬ（４２６ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を５０℃まで加熱し、５時間撹拌した。この混合物に、ジオキサン洗浄（１００ｍＬ）を用いて（ＢＯＣ）２Ｏ（８１．４ｇ、３７３ｍｍｏｌ）を添加し、また、この混合物を５０℃でさらに５時間加熱し、その後周囲条件で１４時間撹拌した。ジオキサンを真空除去し、水（１Ｌ）を添加した。混合物は濃縮ＨＣｌ水溶液を使用してｐＨ〜２にし、生成した固形物を濾取し、フィルター上で乾燥した。その固形物をさらに真空オーブン中でトルエンとの共沸（×３）によって乾燥して、４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸（７０．０ｇ、８７％）をバイオレット色の固形物として得た。
ステージ７：［３−（２−アミノ−４−モルホリン−４−イルメチル−フェニルカルバモイル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの合成
Figure 0005474354
ＤＭＦ（１５０ｍＬ）中の、４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸（１０．０ｇ、４４．１ｍｍｏｌ）と、４−モルホリン−４−イルメチル−ベンゼン−ｌ，２ジアミン（１０．０ｇ、４８．５ｍｍｏｌ）と、ＥＤＣ（１０．１４ｇ、５２．９ｍｍｏｌ）と、ＨＯＢｔ（７．１５ｇ、５２．９ｍｍｏｌ）との混合物を、周囲温度で２０時間撹拌し、溶媒の大部分を真空除去した。残渣をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）と飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１５０ｍＬ）とで分液し、各層を分離し、有機画分を塩水で洗浄、ＭｇＳＯ４で乾燥、真空減量して、［３−（２−アミノ−４−モルホリン−４−イルメチル−フェニルカルバモイル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１７．６ｇ、９６％）を茶色の固形物として得た。ＬＣ／ＭＳ分析は、生成物がジアミドを〜１５％まで含んでいることを示す。これは１Ｈ ＮＭＲの中でおよそ５％程度のレベルとして示される。ジアミドは次のステップで開裂される。
ステージ８：３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イルアミンの合成
Figure 0005474354
［３−（２−アミノ−４−モルホリン−４−イルメチル−フェニルカルバモイル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１２．０ｇ、２８．８ｍｍｏｌ）と２Ｍ ＨＣｌ水溶液（５０ｍＬ）との混合物を８５℃で１４時間加熱し、その後、周囲温度に冷却した。混合物がｐＨ〜８．５になるまで固形Ｎａ２ＣＯ３を慎重に添加し溶液を飽和した。暗色の粘着性の液体が形成された。この混合物を静置し、溶媒をデカントした。残りの残渣に、ＥｔＯＨ（６０ｍＬ）を添加し、この混合物を還流下で１時間加熱し、熱時濾過し、ＥｔＯＨ（２×２０ｍＬ）で洗浄して、無機の残渣を除去した。濾液を真空減量し、ガラス状固形物を得、これをその後Ｅｔ２Ｏ（６０ｍＬ）中で１時間撹拌し、生成した紫色の粉末を濾取し、真空乾燥して３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イルアミン（６．８ｇ、８０％、〜９０％純度)を得た。
ステージ９：７−モルホリン−４−イルメチル−２，４−ジヒドロ−ｌ，２，４，５ａ，１０−ペンタアザ−シクロペンタ[ａ]フルオレン−５−オンの合成
Figure 0005474354
無水ＴＨＦ（５０ｍＬ）中の３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イルアミン（３．２ｇ、１０．７ｍｍｏｌ）の混合物に周囲温度で撹拌下、１，１´−カルボニルジイミダゾール（１．７８ｇ、１１ｍｍｏｌ)を添加した。混合物を、還流下１４時間加熱し、その後周囲温度まで冷却した。形成された固形物を濾取し、ＴＨＦ（２０ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥して７−モルホリン−４−イルメチル−２，４−ジヒドロ−ｌ，２，４，５ａ，１０−ペンタアザ−シクロペンタ[ａ]フルオレン−５−オン（２．３４ｇ、６７％）をピンク色の固形物として得た。
ステージ１０：１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の合成
Figure 0005474354
ＮＭＰ（６５ｍＬ）中の、７−モルホリン−４−イルメチル−２，４−ジヒドロ−ｌ，２，４，５ａ，１０−ペンタアザ−シクロペンタ[ａ]フルオレン−５−オン（１０．７ｇ、３２．９ｍｍｏｌ)の混合物にシクロプロピルアミン（６．９ｍＬ、９９ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を１００℃で５時間加熱した。ＬＣ／ＭＳ分析は〜７５％までの生成物への変換を示した、よって更なる分量のシクロプロピルアミン（２．３ｍＬ、３３ｍｍｏｌ)を添加し、混合物を１００℃で４時間加熱し、その後周囲温度まで冷却した。混合物を水（１００ｍＬ）で希釈しＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で抽出した。有機画分を飽和ＮＨ４Ｃｌ（２×５０ｍＬ）水溶液および塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、その後水性画分をＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で再抽出した。合わせた有機画分をＭｇＳＯ４で乾燥し、真空減量して、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素（９．１０ｇ）をオレンジ色のガラス状固形物として得た。
ステージ１１：１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素Ｌ−乳酸塩の合成
Figure 0005474354
ＥｔＯＡｃ−ｉＰｒＯＨ（１：１、９０ｍＬ）中の１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素（９．１０ｇ、２４ｍｍｏｌ)の溶液にＬ−乳酸（２．２５ｇ、２５ｍｍｏｌ)を添加した。この混合物を周囲温度２４時間撹拌し、その後真空内で減量した。残渣をトルエン（１００ｍＬ）およびＥｔ２Ｏ（１００ｍＬ）を使用して連続スラリー（ｃｏｎｓｅｃｕｔｉｖｅ ｓｌｕｒｒｉｅｓ）にし、生成する固形物を採取し乾燥した（８．０４ｇ）。
この固形物を沸騰するｉＰｒＯＨ（２００ｍＬ）から再結晶によりを精製し、乾燥後、１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素Ｌ−乳酸塩（５．７ｇ）をベージュ色の固形物として得た。
（実施例６６Ａ）
ステージ１：（３，４−ジニトロフェニル）−モルホリン−４−イル−メタノンの製造
Figure 0005474354
３，４−ジニトロ安息香酸（１．０００Ｋｇ、４．７１ｍｏｌ、１．０ｗｔ）、テトラヒドロフラン（１０．００Ｌ、１０．０ｖｏｌ）およびジメチルホルムアミド（０．０１０Ｌ、０．０１ｖｏｌ）を、窒素下でフラスコに仕込んだ。塩化チオニル（０．４５０Ｌ、６．１６ｍｏｌ、０．４５ｖｏｌ）を２０〜３０℃で添加し、反応混合物を６５〜７０℃まで加熱した。１Ｈ ＮＭＲ分析（ｄ６−ＤＭＳＯ）により反応が完了したことを判定した、典型的には３時間であった。反応混合物を０〜５℃に冷却しトリエチルアミン（１．２５Ｌ、８．９７ｍｏｌ、１．２５ｖｏｌ）を０〜１０℃で添加した。モルホリン（０．６２Ｌ、７．０７ｍｏｌ、０．６２ｖｏｌ）を０〜１０℃で反応混合物に仕込み、そのスラリーを３０分間０〜１０℃で撹拌した。１Ｈ ＮＭＲ分析（ｄ６−ＤＭＳＯ）により反応が完了したことを判定した。反応混合物を１５〜２０℃まで暖め、水（４．００Ｌ、４．０ｖｏｌ）を添加した。この混合物を次に、生成物を沈殿させるために、１５〜２５℃で水（２１．００Ｌ、２１．０ｖｏｌ）を含む４０Ｌフランジフラスコに仕込んだ。フラスコの内容物を０〜５℃に冷却し０〜５℃で１時間熟成し、固形物を濾取した。濾過ケーキを水（４×５．００Ｌおよび４×５．０ｖｏｌ）で洗浄し、最終洗浄液のｐＨはｐＨ７であるとわかった。ウェットなフィルターケーキを、トリエチルアミン塩酸塩の存在をみるため、１Ｈ ＮＭＲにより分析した。濾過ケーキを、ＫＦによる含水率が＜０．２％ｗ／ｗまで、真空下で４０〜４５℃で乾燥して、（３，４−ジニトロフェニル）−モルホリン−４−イル−メタノン（１．２８６Ｋｇ、９７．０％、ＫＦ０．０６９％ｗ／ｗ）を黄色の固形物として得た。
ステージ２：４−（３，４−ジニトロ−ベンジル）−モルホリンの製造
Figure 0005474354
（３，４−ジニトロフェニル）−モルホリン−４−イル−メタノン（０．７５０Ｋｇ、２．６７ｍｏｌ、１．０ｗｔ）およびテトラヒドロフラン（７．５０Ｌ、１０．０ｖｏｌ）を窒素下でフラスコに仕込み、０〜５℃まで冷却した。三弗化硼素エーテラート（０．７１３Ｌ、５．６３ｍｏｌ、０．９５ｖｏｌ）を０〜５℃で添加し、その懸濁液をこの温度で１５〜３０分間撹拌した。水素化硼素ナトリウム（０．２１２Ｋｇ、５．６０ｍｏｌ、０．２８２ｗｔ）を等しい分量で６つに分けて９０〜１２０分間に亘り添加した(最初の分量を添加した１０〜１５分後に遅延発熱が認められた)。一旦これが始まり反応混合物が再度冷却されてから、他の分量を、混合物が添加と添加の間で冷却されるように、１０〜１５分の間隔で添加した。反応混合物を０〜５℃で３０分間撹拌した。反応の完了を１Ｈ ＮＭＲ分析（ｄ６−ＤＭＳＯ）で判定した。メタノール（６．３０Ｌ、８．４ｖｏｌ）を０〜１０℃で滴下し反応混合物を急冷した(急速なガス発生、ある程度の発泡）。急冷した反応混合物を、０〜１０℃で２５〜３５分間撹拌し、その後、ガス発生が遅くなるまで２０〜３０℃に暖め２０〜３０℃で撹拌した(発熱、固形物の溶解時ガス/エーテル発生）。その混合物を１時間６５〜７０℃に熱し６５〜７０℃で撹拌した。混合物を３０〜４０℃に冷却し、真空下４０〜４５℃で濃縮して、４−（３，４−ジニトロ−ベンジル）−モルホリンの粗生成物（０．７０２Ｋｇ、９８．４％）を黄色/オレンジ色の固形物として得た。
４−（３，４−ジニトロ−ベンジル）−モルホリン（２．８１５ｋｇ、１０．５３ｍｏｌ、１．０ｗｔ）とメタノール（１２．００Ｌ、４．３ｖｏｌ）とを窒素下でフラスコに仕込み、６５〜７０℃まで加熱した。前記温度を完全溶解まで維持した。混合物をその後には０〜５℃に冷却し、０〜５℃で１時間熟成した。固形物を濾過により単離した。濾過ケーキをメタノール（２×１．５０Ｌ、２×０．５ｖｏｌ）で洗浄し、真空下３５〜４５℃で乾燥して、４−（３，４−ジニトロ−ベンジル）−モルホリン（２．３５３Ｋｇ、ステージ２の投入量に基づいて８３．５％、ステージ１の物質の全投入量に基づいた総収率８２．５％)を黄色の固形物として得た。
ステージ３：４−モルホリン−４−イルメチル−ベンゼン−１．２−ジアミンの製造
Figure 0005474354
４−（３，４−ジニトロ−ベンジル）−モルホリン（０．８００Ｋｇ、２．９９ｍｏｌ、１．０ｗｔ）とエタノール（１１．２０Ｌ、１４．０ｖｏｌ）とを適切なフラスコに仕込み、１５〜２５℃で撹拌し、真空/窒素パージサイクルを３回実施した。１０％パラジウム炭素（１０％Ｐｄ／Ｃ、５０％ウェットペースト、０．０４０Ｋｇ、０．０５ｗｔ含水重量）をエタノール（０．８０Ｌ、１．０ｖｏｌ）中でスラリーにし、反応物に添加した。この混合物を１０〜２０℃まで冷却し真空/窒素パージサイクルを３回実施した。真空/水素パージサイクルを３回実施し、反応物を水素雰囲気下１０〜２０℃で撹拌した。反応完了を１Ｈ ＮＭＲ分析（ｄ６−ＤＭＳＯ）により判定した、典型的には１４〜２０時間であった。真空/窒素パージサイクルを３回実施し、反応混合物を窒素下でグラスマイクロファイバーペーパーで濾過した。濾過ケーキをエタノール（３×０．８０Ｌ、３×ｌ．０ｖｏｌ）で洗浄し、合わせた濾液と洗浄液を真空下３５〜４５℃で濃縮乾固して、４−モルホリン−４−イルメチル−ベンゼン−１．２−ジアミン（０．６１１Ｋｇ、９８．６％）を茶色の固形物として得た。
ステージ４：４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸メチルエステルの製造
Figure 0005474354
４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸（１．００ｋｇ、６．３７ｍｏｌ、ｌ．０ｗｔ）およびメタノール（８．００Ｌ、８．０ｖｏｌ）を機械式撹拌機、コンデンサーおよび温度計を装備したフランジフラスコに仕込んだ。その懸濁液を窒素下で０〜５℃まで冷却し、塩化チオニル（０．５２Ｌ、７．１２ｍｏｌ、０．５２ｖｏｌ）をこの温度で添加した。この混合物を１５〜２５℃に１６〜２４時間暖めた。反応完了を１Ｈ ＮＭＲ分析（ｄ６−ＤＭＳＯ）により判定した。混合物を真空下３５〜４５℃で濃縮した。トルエン（２．００Ｌ、２．０ｖｏｌ）を残渣に仕込み、真空下３５〜４５℃で除去した。トルエン（２．００Ｌ、２．０ｖｏｌ）を使用して共沸を２度繰り返して、４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸メチルエステル（１．０７１Ｋｇ、９８．３％）をオフホワイト色の白色の固形物として得た。
ステージ５：４−アミノ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸メチルエステルの製造
Figure 0005474354
４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸メチルエステル（１．０８４Ｋｇ、６．３３ｍｏｌ、１．０ｗｔ）とエタノール（１０．８４Ｌ、１０．０ｖｏｌ）との懸濁液を３０〜３５℃に加熱し、完全溶解が起こるまで、３０〜３５℃で維持した。１０％パラジウム炭素（１０％Ｐｄ／Ｃウェットペースト、０．１５２Ｋｇ、０．１４ｗｔ）を窒素下で別のフラスコに仕込み、真空/窒素パージサイクルを３回実施した。エタノールに溶解した４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸メチルエステルの溶液を前記触媒に仕込み、真空/窒素パージサイクルを３回実施した。真空/水素パージサイクルを３回実施し、反応物を水素雰囲気下に置いた。１Ｈ ＮＭＲ分析（ｄ６−ＤＭＳＯ）により完全に反応したと見なされるまで、反応混合物を２８〜３０℃で撹拌した。混合物を窒素下で濾過し、真空下３５〜４５℃で濃縮して、４−アミノ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸メチルエステル（０．８８３Ｋｇ、９８．９％）を紫色の固形物として得た。
ステージ６：４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸の製造
Figure 0005474354
４−アミノ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸メチルエステル（１．０２４Ｋｇ、７．１６ｍｏｌ、ｌ．０ｗｔ）とジオキサン（１０．２４Ｌ、１０．０ｖｏｌ）とを機械式撹拌機、コンデンサーおよび温度計を装備したフランジフラスコに仕込んだ。２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（４．３６Ｌ、８．７２ｍｏｌ、４．２６ｖｏｌ）を１５〜２５℃で仕込み、この混合物を４５〜５５℃まで加熱した。１Ｈ ＮＭＲ分析（ｄ６−ＤＭＳＯ）により判定して、反応完了まで温度を４５〜５５℃に維持した。ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボン酸塩(Ｂｏｃ無水物、１．６６７Ｋｇ、７．６４ｍｏｌ、１．６２８ｗｔ)を４５〜５５℃で添加し、混合物を５５〜６５分間撹拌した。１Ｈ ＮＭＲ分析（ｄ６−ＤＭＳＯ）は９％未反応中間体の存在を示した。追加のジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボン酸塩(Ｂｏｃ無水物、０．１４１Ｋｇ、０．６４ｍｏｌ、０．１４ｗｔ)を５５℃で添加し、混合物を５５〜６５分間撹拌した。反応完了は１Ｈ ＮＭＲ分析（ｄ６−ＤＭＳＯ）により判定した。ジオキサンを真空下３５〜４５℃で除去し、水（１７．６０Ｌ、２０．０ｖｏｌ）を残渣に添加した。ｐＨを２Ｍ塩酸水溶液（４．３０Ｌ、４．２０ｖｏｌ）でｐＨ２までに調整し、この混合物を濾過した。濾過ケーキを２０〜３０分間水（１０．００Ｌ、９．７ｖｏｌ）でスラリーにし、混合物を濾過した。濾過ケーキをヘプタン（４．１０Ｌ、４．０ｖｏｌ）で洗浄し、パッド上で１６〜２０時間乾燥した。固形物をトルエン（５×４．００Ｌおよび５×４．６ｖｏｌ）で共沸し、その後真空下３５〜４５℃で乾燥して、４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸（１．３８９Ｋｇ、８５．４％）を紫色の固形物として得た。
ステージ７：［３−（２−アミノ−４−モルホリン−４−イルメチル−フェニルカルバモイル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの製造
Figure 0005474354
４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸（０．７５０Ｋｇ、３．３０ｍｏｌ、１．０ｗｔ）と４−モルホリン−４イル−メチルベンゼン−１，２−ジアミン（０．７５２Ｋｇ、３．６３ｍｏｌ、１．０ｗｔ）とＮ，Ｎ´ジメチルホルムアミド（１１．２５Ｌ、１５．０ｖｏｌ）とを機械式撹拌機および温度計を装備したフランジフラスコに窒素下で仕込んだ。１−ヒドロキシエンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ、０．５４０Ｋｇ、３．９６ｍｏｌ、０．７２ｗｔ）を１５〜２５℃で添加した。Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ´−エチルカルボジイミド（ＥＤＣ、０．７５９Ｋｇ、３．９６ｍｏｌ、１．０１ｗｔ）を１５〜２５℃で添加し、混合物をこの温度で１６〜２４時間撹拌した。反応完了は１Ｈ ＮＭＲ分析により判定した。反応混合物を真空下３５〜４５℃で濃縮した。残渣を、酢酸エチル（７．５０Ｌ、ｌ０．０ｖｏｌ）と飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（８．０３Ｌ、１０．７ｖｏｌ）とで分液し、各層を分離した。有機相を塩水（３．７５Ｌ、５．０ｖｏｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウム（１．００Ｋｇ、１．３３ｗｔ）で乾燥し、濾過した。濾過ケーキを酢酸エチル（１．５０Ｌ、２．０ｖｏｌ）で洗浄した。合わせた濾液と洗浄液とを真空下３５〜４５℃で濃縮して、［３−（２−アミノ−４−モルホリン−４−イルメチル−フェニルカルバモイル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．２１７Ｋｇ、８８．６％）を暗褐色の固形物として得た。
ステージ８：３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イルアミンの製造
Figure 0005474354
［３−（２−アミノ−４−モルホリン−４−イルメチル−フェニルカルバモイル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．３５０Ｋｇ、３．２４ｍｏｌ、１．０ｗｔ）とエタノール（６．７５Ｌ、５．０ｖｏｌ）とを、機械式撹拌機、コンデンサーおよび温度計を装備したフランジフラスコに仕込んだ。濃縮塩酸水溶液（１．１０Ｌ、１３．２ｍｏｌ、０．８０ｖｏｌ）を窒素下で１５〜３０℃で添加し、内容物をその後７０〜８０℃まで加熱し、１６〜２４時間この温度に維持した。２つ目の分量の塩酸（０．１１Ｌ、１．３２ｍｏｌ、０．０８０ｖｏｌ）を７０〜８０℃で添加し、反応物をさらに４時間加熱した。反応完了はＨＰＬＣ分析により判定した。反応混合物を１０〜２０℃に冷却し、炭酸カリウム（１．３５５Ｋｇ、９．０８ｍｏｌ、１．０ｗｔ）をこの温度で分割して仕込んだ。懸濁液をガス発生がなくなるまで撹拌し、その後濾過した。濾過ケーキをエタノール（１．３５Ｌ、ｌ．０ｖｏｌ）で洗浄し、濾液を保持した。濾過ケーキをエタノール（４．００Ｌ、３．０ｖｏｌ）で１５〜２５℃で２０〜４０分間スラリーにし、この混合物を濾過した。濾過ケーキをエタノール（１．３５Ｌ、１．０ｖｏｌ）で洗浄し、合わせた濾液全体を真空下で３５〜４５℃で濃縮した。エタノール（４．００Ｌ、３．０ｖｏｌ）を残渣に仕込み、真空下３５〜４５℃で除去した。テトラヒドロフラン（５．９０Ｌ、４．４ｖｏｌ）を残渣に添加し、１０〜２０分間１５〜２５℃で撹拌した。得られた溶液を濾過し、濾過ケーキをテトラヒドロフラン（１．３５Ｌ、１．０ｖｏｌ）で洗浄した。また、合わせた濾液を真空下３５〜４５℃で濃縮した。テトラヒドロフラン（５．４０Ｌ、４．０ｖｏｌ）を濃縮物に仕込み、真空下で３５〜４５℃で除去した。テトラヒドロフラン（５．４０Ｌ、４．０ｖｏｌ）を濃縮物に仕込み、真空下で３５〜４５℃で除去して、所望の生成物３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イルアミン（０．９２４Ｋｇ、９５．５％、ＨＰＬＣ面積で８２．８４％)を紫色の発砲体として得た。
ステージ９：７−モルホリン−４−イルメチル−２，４−ジヒドロ−ｌ，２，４，５ａ，１０−ペンタアザ−シクロペンタ[ａ]フルオレン−５−オンの製造
Figure 0005474354
３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イルアミン（０．９９３Ｋｇ、３．３３ｍｏｌ、１．０ｗｔ）とテトラヒドロフラン（１４．０Ｌ、１５．０ｖｏｌ）とを機械式撹拌機、コンデンサーおよび温度計を装備したフランジフラスコに仕込んだ。内容物を窒素下１５〜２５℃で撹拌し、１，１´−カルボニルジイミダゾール（０．５９６Ｋｇ、３．６７ｍｏｌ、０．６０ｗｔ）を添加した。内容物をその後６０〜７０℃まで加熱し、この温度で１６〜２４時間撹拌した。反応完了はＴＬＣ分析により判定した。混合物を１５〜２０℃まで冷却そして濾過した。濾過ケーキをテトラヒドロフラン（４．００Ｌ、４．０ｖｏｌ）で洗浄し、１５〜３０分間乾燥した。固形物を真空下３５〜４５℃で乾燥し、７−モルホリン−４−イルメチル−２，４−ジヒドロ−ｌ，２，４，５ａ，１０−ペンタアザ−シクロペンタ[ａ]フルオレン−５−オン（０．８１０Ｋｇ、７５．０％ｔｈ、ＨＰＬＣ面積で９２．１９％)を紫色の固形物として得た。
ステージ１０：１−シクロプロピル−３−[３−（５‐モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ‐ピラゾール−４−イル]−尿素の製造
Figure 0005474354
７−モルホリン−４−イルメチル−２，４−ジヒドロ−ｌ，２，４，５ａ，１０−ペンタアザ−シクロペンタ[ａ]フルオレン−５−オン（０．７９７Ｋｇ、２．４６ｍｏｌ、１．０ｗｔ）と１‐メチル‐２‐ピロリジノン（２．４０Ｌ、３．０ｖｏｌ）とを機械式撹拌機、コンデンサーおよび温度計を装備したフランジフラスコに仕込んだ。シクロプロピルアミン（０．２７９Ｋｇ、４．８８ｍｏｌ、０．３５１ｗｔ）を窒素下１５〜３０℃で添加した。内容物を９５〜１０５℃に加熱し、この温度で１６〜２４時間撹拌した。反応完了を１Ｈ ＮＭＲ分析により決定した。反応混合液を１０〜２０℃に冷却し、酢酸エチル（８．００Ｌ、１０．０ｖｏｌ）および飽和塩化ナトリウム水溶液（２．５０Ｌ、３．０ｖｏｌ）を仕込み、この混合物を２〜５分間撹拌し、各層を分離した。有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液（５．００Ｌ、６．０ｖｏｌ）と２５〜３５分間撹拌し、混合物を濾過し、濾過ケーキを酢酸エチル（０．４０Ｌ、０．５ｖｏｌ）で洗浄した。濾過ケーキを保持し、濾液を分液漏斗へ移し、各層を分離した。この操作をさらに３回繰り返し、保持した固形物を有機相と合わせ、混合物を真空下３５〜４５℃で濃縮乾固した。濃縮物を４５〜５５℃でプロパン‐２‐オール（８．００Ｌ、１０．０ｖｏｌ）に溶解し、活性炭（０．０８０Ｋｇ、０．１ｗｔ）を仕込んだ。混合物を４５〜５５℃で３０〜４０分間攪拌し、次いで４５〜５５℃で熱時濾過し、濾過ケーキをプロパン‐２‐オール（０．４０Ｌ、０．５ｖｏｌ）で洗浄した。活性炭（０．０８０Ｌ、０．１ｗｔ）を合わせた濾液および洗浄液に仕込み、この混合物を４５〜５５℃で３０〜４０分間撹拌した。混合物を４５〜５５℃で熱時濾過し、濾過ケーキをプロパン‐２‐オール（０．４０Ｌ、０．５ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗液を真空下で３５〜４５℃で濃縮した。酢酸エチル（８．００Ｌ、１０．０ｖｏｌ）および水（２．２０Ｌ、３．０ｖｏｌ）を２５〜３５℃で濃縮物に仕込み、この混合物を１〜２分間撹拌した。各層を分離し、有機相を真空下３５〜４５℃で濃縮した。酢酸エチル（４．００Ｌ、５．０ｖｏｌ）を残渣に仕込み、真空下で３５〜４５℃で濃縮した。酢酸エチル（４．００Ｌ、５．０ｖｏｌ）を残渣に仕込み、混合物を２〜２０時間１５〜２５℃で撹拌した。混合物を０〜５℃に冷却して０〜５℃で９０〜１２０分間熟成し、その後、濾過した。濾過ケーキを酢酸エチル（０．８０Ｌ、１．０ｖｏｌ）で洗浄し、１５〜３０分間乾燥した。固形物を真空下で３５〜４５℃で乾燥して、１−シクロプロピル−３−[３−（５‐モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ‐ピラゾール−４−イル]−尿素（０．５３３Ｋｇ、５６．８％、ＨＰＬＣ面積で９３．２０％）を褐色の固形物としてを得た。
数バッチのステージ９の生成物をこのように処理した。各バッチにおける出発物質および生成物の量の詳細を表１Ａに示す。
表１Ａ−尿素形成工程の収率−ステージ１０
Figure 0005474354
ステージ１１：１−シクロプロピル−３−[３−（５‐モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ‐ピラゾール−４−イル]−尿素Ｌ−乳酸塩の製造
Figure 0005474354
１−シクロプロピル−３−[３−（５‐モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ‐ピラゾール−４−イル]−尿素（１．８５９Ｋｇ、４．８７２ｍｏｌ、１．０ｗｔ）とプロパン‐２‐オール（９．００Ｌ、５．０ｖｏｌ）と酢酸エチル（８．００Ｌ、４．５ｖｏｌ）とを機械式撹拌機および温度計を装備したフランジフラスコに仕込んだ。内容物を窒素下で撹拌し、Ｌ‐乳酸（０．５０４Ｋｇ、５．５９ｍｏｌ、０．２６９ｗｔ）を１５〜２５℃で添加し、次いで酢酸エチル（０．９０Ｌ、０．５ｖｏｌ）でラインリンスした。混合物を１５〜２５℃で１２０〜１４０分間撹拌した。固形物を濾過により単離し、濾過ケーキを酢酸エチル（２×２．００Ｌ、２×１．０ｖｏｌ）で洗浄し、２０〜４０分間乾燥した。濾過ケーキを７５〜８５℃でエタノール（３３．００Ｌ、１７．７ｖｏｌ）に溶解し、６５〜７０℃に冷却し、溶液をグラスマイクロファイバーペーパーで清澄化した。濾液を１５〜２５℃に冷却して１５〜２５℃で２〜３時間熟成した。結晶化した固形物を濾過により単離し、濾過ケーキをエタノール（２×１．００Ｌ、２×０．５ｖｏｌ）で洗浄し、少なくとも３０分間乾燥した。固形物を真空下で３５〜４５℃で乾燥して、１−シクロプロピル−３−[３−（５‐モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ‐ピラゾール−４−イル]−尿素Ｌ‐乳酸塩（１．３８６Ｋｇ、５８．７％ｔｈ、ＨＰＬＣ面積で９９．４７％）を暗いピンクの均一固形物として得た。
１Ｈ ＮＭＲデータ（４００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）δ８．０８（ｓ、１Ｈ、ピラゾール−ＣＨ）、７．６６（ｓ、１Ｈ、アリール−ＣＨ）、７．６０（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ、アリール−ＣＨ）、７．２９（ｄ、Ｊ＝８．５Ｈｚ、１Ｈ、アリール−ＣＨ）、４．１５（ｑ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、１Ｈ、乳酸塩−ＣＨ）、３．９６（ｓ、２Ｈ、ベンジル−ＣＨ２）、３．７９−３．７７（ｍ、４Ｈ、モルホリノ−（ＣＨ２）２）、２．８２−２．８０（ｍ、４Ｈ、モルホリノ−（ＣＨ２）２）、２．７４−２．６８（ｍ、１Ｈ、シクロプロピル−ＣＨ）、１．３８（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、３Ｈ、乳酸塩−ＣＨ３）、０．９８（ｂｒ ｓ、２Ｈ、シクロプロピル−ＣＨ２）、０．６８（ｂｒ ｓ、２Ｈ、シクロプロピル−ＣＨ２）。
乳酸塩の赤外スペクトル（ＫＢｒディスク法）は３２２９、２９７２および１６６０ｃｍ−１に特徴的ピークを含んでいた。
特定の理論に拘束されるものではないが、赤外ピークは下記のような塩の構造成分に基づくものであると考えられる。
ピーク： 原因：
３２２９ｃｍ−１ Ｎ‐Ｈ
２９７２ｃｍ−１ 脂肪族Ｃ‐Ｈ
１６６０ｃｍ−１ 尿素Ｃ＝Ｏ
（実施例６６Ｂ）
ステージ１：１−シクロプロピル−３−[３−（５‐モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ‐ピラゾール−４−イル]−尿素の製造
Figure 0005474354
７−モルホリン−４−イルメチル−２，４−ジヒドロ−１，２，４，５ａ，１０−ペンタアザ−シクロペンタ[ａ]フルオレン−５−オン（１．０ｗｔ、実施例６６Ａで概説されるように製造）およびｎ−ブタノール、ブチロニトリル、グリコールまたはトルエンのような溶媒（３．０ｖｏｌ）を機械式撹拌機、コンデンサーおよび温度計を装備したフランジフラスコに仕込んでもよい。シクロプロピルアミン（０．３５１ｗｔ）を１５〜３０℃のような温度で不活性雰囲気（例えば窒素）下で添加してもよい。内容物を４０〜１０５℃、特に４０〜８０℃、に加熱し、この温度で１６〜２４時間撹拌してもよい。反応完了は１Ｈ ＮＭＲ分析により決定することができる。反応混合物をその後１０〜２０℃に冷却してもい。生成物をその後実施例６６Ａで上記に概説されたような有機相−水相抽出法により単離することができる、または、反応混合物に貧溶媒、例えばｎ−ヘプタン、を添加するような、別の単離方法を使用してもよい。この方法は反応生成物を沈殿させることができ、次に濾過で単離することができる。固形物を次に真空下で３５〜４５℃で乾燥して、１−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]−尿素を得ることができる。このステージでは、固形物を適切な溶媒、好ましくはクラス２もしくはクラス３溶媒１、からの再結晶により精製することができる。さらに、再結晶に加えて、フラッシュカラムクロマトグラフィーあるいはシリカゲルまたは逆相シリカゲルプラグによる濾過のような別の精製方法を生成物の精製に使用してもよい。
１：クラス３およびクラス２溶媒は、QSC-Tables and List in Guidance for Industry Q3C Impurities: Residual Solvents (Nov 2003, CDER, CBER, FDA, ICH)に概説されたとおりであり、Guideline for Residual Solvents (1997, ICH)にさらに概説されたとおりである。
ステージ２：１−シクロプロピル−３−[３−（５‐モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]−尿素Ｌ−乳酸塩の製造
Figure 0005474354
クラス２またはクラス３溶媒、特にエタノール水溶液（５．０−１０．０ｖｏｌ）などのクラス３溶媒、中の１−シクロプロピル−３−[３−（５‐モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ‐ピラゾール−４−イル]−尿素（１．０ｗｔ）を機械式撹拌機および温度計を装備したフランジフラスコに仕込むことができる。内容物を窒素下で撹拌し、Ｌ‐乳酸（０．２６９ｗｔ）を１５〜２５℃で添加し、次いでエタノール水溶液（０．５ｖｏｌ）などの適切な溶媒でラインリンスすることができる。混合物を１５〜２５℃で１２０〜１４０分間撹拌できる。固形物を濾過により単離し、またはｎ−ブタノールなどの貧溶媒の添加を用いて溶液から塩を析出し、その後濾過により単離してもよい。濾過ケーキを適当な溶媒（２×１．０ｖｏｌ）で洗浄し、２０〜４０分間乾燥できる。濾過ケーキをその後クラス２またはクラス３の溶液、もしくはその混合物、特に４０〜１５０℃でクラス３溶媒（〜３〜６０ｖｏｌ）、に溶解し、４０〜７０℃に冷却し、溶液をグラスマイクロファイバーペーパーで清澄化できる。濾液を１５〜２５℃に冷却して１５〜２５℃で２〜３時間熟成することができる。結晶化した固形物を濾過により単離し、濾過ケーキを適切な溶媒（２×０．５〜２ｖｏｌ）で洗浄し、少なくとも３０分間乾燥できる。固形物を真空下で３５〜４５℃で乾燥して、１−シクロプロピル−３−[３−（５‐モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ‐ピラゾール−４−イル]−尿素Ｌ‐乳酸塩を得ることができる。さらに、再結晶に加えて、フラッシュカラムクロマトグラフィーあるいはシリカゲルまたは逆相シリカゲルプラグによる濾過のような別の精製方法を生成物の精製に使用してもよい。
（実施例６６Ｃ）
上記の実施例に加え、１−シクロプロピル−３−[３−（５‐モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ‐ピラゾール−４−イル]尿素Ｌ‐乳酸塩の製造は下記に概説された変更を加えた手順を用いて仕上げることができる。
ステージ１：１−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]−尿素の製造
Figure 0005474354
７−モルホリン−４−イルメチル−２，４−ジヒドロ−ｌ，２，４，５ａ，１０−ペンタアザ−シクロペンタ[ａ]フルオレン−５−オン（１．０ｗｔ、実施例６６Ａで上記に概説されるように製造）と１−メチル−２−ピロリジノン（３．０ｖｏｌ）とを機械式撹拌機、コンデンサーおよび温度計を装備した適切なサイズのフランジフラスコに仕込む。シクロプロピルアミン（０．３５１ｗｔ）を窒素下１５〜３０℃で添加する。内容物をその後９５〜１０５℃に加熱し、反応が１Ｈ ＮＭＲ分析により完了していると判定されるまでこの温度で撹拌する。完了したら、反応混合物を１６〜２５℃に冷却し、混合物を１６〜２５℃で維持しながら、撹拌された約１３％ｗ／ｗ塩化ナトリウム溶液（１１．５ｖｏｌ）にゆっくりと（ほぼ２〜３時間）添加する。沈澱物が形成する。反応混合物の移動は１６〜２５℃で１−メチル−２−ピロリジノン（０．５ｖｏｌ）でリンスすることにより完了する。沈殿した固形物を、濾取し、水（０．５ｖｏｌ）で洗浄し、取り扱いに適当であると見なされるまでフィルター上で乾燥する。固形物を酢酸エチル（５．０ｖｏｌ）および水（６．０ｖｏｌ）に懸濁し、１６〜２５℃で６０〜７０分間撹拌する。固形物を濾取し、連続して酢酸エチル（１．０ｖｏｌ）および混合ヘプタン（２×２．０ｋａｎ）で洗浄し、取り扱いに適当であると見なされるまでフィルター上で乾燥する。固形物を酢酸エチル（４．０ｖｏｌ）に懸濁し、１５〜２５℃で少なくとも６０分間撹拌する。固形物を濾取し、酢酸エチル（１．０ｖｏｌ）で洗浄し、フィルター上で乾燥して、粗製１−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]−尿素（６０〜８０％ｗ／ｗ）を暗褐色／赤色の固形物として得る。
粗製１−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]−尿素（１．０ｗｔ）を４５〜５５℃でプロパン−２−オール（１５ｖｏｌ）に溶解し、活性炭（ダルコ（ＤＡＲＣＯ）ＫＢ）（０．２ｗｔ）を仕込む。混合物を４５〜５５℃で６０〜７０分間撹拌し、その後４５〜５５℃で熱時濾過する。濾過ケーキをプロパノ−２−オール（２．５ｖｏｌ）で洗浄する。活性炭（ダルコ（ＤＡＲＣＯ）ＫＢ）（０．２ｗｔ）を合わせた濾液と洗浄液とに仕込み、混合物を４５〜５５℃で６０〜７０分間撹拌する。混合物を４５〜５５℃で熱時濾過し、濾過ケーキをプロパン−２−オール（２．５ｖｏｌ）で洗浄する。合わせた濾液と洗浄液とを真空下で３５〜４５℃で濃縮して、所望の生成物、１−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]−尿素、を茶色の発泡体として、６５〜１００％ｗ／ｗの収率で得る。
ステージ２：１−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]−尿素Ｌ‐乳酸塩の製造
実施例６６Ｃのステージ１（上記）の他の手法から生成された物質を使用して、実施例６６Ａのステージ１１（上記）でのような造塩手順を実施して、１−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]−尿素Ｌ‐乳酸塩をオフホワイト色の固形物として得ることができる。
（実施例６７）
１−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]−尿素の結晶遊離塩基および結晶塩形の合成
Ａ １−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]−尿素遊離塩基の製造
粗製１−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]−尿素遊離塩基の試料を実施例６０で概説してように製造し、まずシリカゲルカラムクロマトグラフィーによりＥｔＯＡｃ−ＭｅＯＨ（９８：２〜８０：２０）で溶出して精製した。次いで、得られた遊離塩基の試料を高温のメタノールから再結晶化し、１−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]−尿素遊離塩基の結晶物質を得た。
Ｂ １−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]−尿素遊離塩基二水和物の製造
粗製１−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]−尿素遊離塩基の試料をＴＨＦに溶解し、次いで真空内で最小容量（〜４ｖｏｌ）に濃縮した。溶液が混濁するまで溶液に水（２〜４ｖｏｌ）を滴下した。少量のＴＨＦを添加して溶液を再び清澄にし、混合物を一晩放置して結晶物質を得、これを風乾して、１−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]−尿素遊離塩基二水和物を得た。
Ｃ １−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]−尿素塩酸塩の製造
粗製１−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]−尿素遊離塩基の試料を最小量のＭｅＯＨに溶解し、次いでＥｔＯＡｃで希釈した。この溶液０℃に１．１当量のＨＣｌ（ジオキサン中４Ｍ溶液）をゆっくりと添加した。添加に続いて、固形物が溶液から析出し、これを濾取した。この固形物にＭｅＯＨを添加し、混合物を真空内で減少した。微量の残留ＭｅＯＨを除去するために、残渣を水から蒸発し、その後６０℃／０．１ｍｂａｒで乾燥して、塩酸塩を得た。
Ｄ １−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]−尿素エタンスルホン酸塩の製造
ＭｅＯＨ‐ＥｔＯＡｃ中の１−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]−尿素遊離塩基の溶液に１当量のエタンスルホン酸を添加した。この混合物を周囲温度で撹拌し、その後真空内で減少した。残渣をＭｅＯＨに溶解し、この溶液にＥｔ２Ｏを添加した。混合物を７２時間放置し、形成された固形物を濾取し、乾燥して、１−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]−尿素エタンスルホン酸塩を得た。
Ｅ １−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]−尿素メタンスルホン酸塩の製造
ＭｅＯＨ‐ＥｔＯＡｃ中の１−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]−尿素遊離塩基（３９４ｍｇ）の溶液に１当量のメタンスルホン酸（６７μＬ）を添加した。固形物が形成され、これを濾取し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。この固形物を最小量の高温のＭｅＯＨに溶解し、冷却し、その後Ｅｔ２Ｏで粉状化した。この固形物を７２時間放置し、次いで濾取し、ＭｅＯＨで洗浄して、１−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]−尿素メタンスルホン酸塩を得た。
（実施例６８）
１−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]−尿素遊離塩基および塩の特性決定
様々な形態の１−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]−尿素の特性決定を行った。特性決定のために選択した形態は、主に多形性および塩安定性の度合いを調査した研究から特定した。更なる特性決定に選択された塩はＬ‐乳酸塩、遊離塩基二水和物、エシル酸塩、遊離塩基および塩酸塩であった。
Ａ１ 示差走査熱量測定法（ＤＳＣ）：
サーモグラムは５０ポジションオートサンプラーを装備したＴＡインスツルメンツ（ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ）Ｑ１０００で収集した。エネルギーおよび温度の較正基準はインジウムとした。試料を１０℃／ｍｉｎの割合で１０℃から２５０℃に加熱した。３０ｍＬ／分の窒素パージを試料に対して維持した。２〜１０ｍｇの試料を（特に断らない限り）使用し、蓋にピンホールを付したアルミニウムパンに全試料を入れた。
Figure 0005474354
Ａ２ さらなる示差走査熱量測定法（ＤＳＣ）：
サーモグラムは、メトラートレド（Ｍｅｔｔｌｅｒ Ｔｏｌｅｄｏ）８２１ｅ示差走査熱量計で収集した。試料を１０℃／分の割合で４０℃から３００℃に加熱した。８０ｍｌ／分の窒素パージをサンプルに対して維持した。ほぼ５〜１０ｍｇの試料を使用し、適当な高圧パン(例えば、小型アルミニウムパン、中圧アルミニウムパンまたは高圧金メッキパン)に全試料を入れた。
Figure 0005474354
Ｂ 熱重量分析（ＴＧＡ）：
サーモグラムはＴＡインスツルメンツ（ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）Ｑ５００で収集した。試料を１０℃／分の割合で加熱した。１００ｍＬ／分の窒素パージを試料に対して維持した。典型的には５〜２０ｍｇの試料を風袋計測オープンアルミニウムパンへ入れた。
Figure 0005474354
Ｃ 偏光顕微鏡法
試料を、撮影用デジタルカメラを装備したライカ（Ｌｅｉｃａ）ＬＭ／ＤＭ顕微鏡で観察した。少量の試料をスライドガラス上の浸漬油に載せ、カバースリップガラスで覆った。個別の粒子をできるだけ離し、λ波プレートへ接続して５０〜５００×倍率および一部極交差下で検査した。
Figure 0005474354
Ｄ ＸＲＰＤ（粉末Ｘ線回折）
Ｄ５０００
ＣｕＫアルファ線（４０ｋＶ，４０ｍＡ）、θ‐θゴニオメーター、自動発散および受光スリット、グラファイト二次モノクロメーターおよびシンチレーションカウンターを用いるシーメンス（Ｓｉｅｍｅｎｓ）Ｄ５０００回折計でＸＲＰＤ検査を行った。０．０２°２θまたは０．００５°２θの工程サイズおよび１秒の工程時間を用いる連続走査モードで２°〜３０°２θの角度範囲にわたりデータを収集した。
試料を周囲条件下でランし、粉砕せずに受け取ったままの粉末を用いて平板試料として調製した。ほぼ２５〜５０ｍｇの試料を、研磨されたゼロバックグラウンド（５１０）シリコンウェーハー（ザ ジェムダグアウト（Ｔｈｅ Ｇｅｍ Ｄｕｇｏｕｔ、１６５２ プリンストンドライブ、ペンシルベニア州立大学、ペンシルベニア州１６８０３、米国）に切り込まれた直径１２ｍｍ、深さ０．５ｍｍのキャビティーに、静かに詰めた。全ＸＲＰＤ分析は、ディフラクプラスＸＲＣコマンダー（Ｄｉｆｆｒａｃ Ｐｌｕｓ ＸＲＤ Ｃｏｍｍａｎｄｅｒ）ソフトウェアｖ２．３．１を使用して行った。
ブルカー（Ｂｒｕｋｅｒ）ＡＸＳ Ｃ２ ＧＡＤＤＳ回折計（ＧＶＳから回収された試料に使用）
ＣｕＫアルファ線（４０ｋＶ，４０ｍＡ）、自動ＸＹＺステージ、自動試料ポジショニング用のレーザービデオ顕微鏡およびＨｉＳｔａｒ二次元面積検出器を用いたブルカー（Ｂｒｕｋｅｒ）ＡＸＳ Ｃ２ ＧＡＤＤＳ回折計で、試料の粉末Ｘ線回折パターンを取得した。Ｘ線光学機器は、０．３ｍｍのピンホールコリメーターと接続された単一Ｇoｂｅｌ多層ミラーからなる。
試料におけるビーム発散、すなわちＸ線ビームの有効サイズは、ほぼ４ｍｍであった。３．２〜２９．８°の有効２θ角度を呈する２０ｃｍの試料対検出器距離でθ‐θ連続走査モードを用いた。試料の典型的な露光時間は１２０秒である。
粉砕せずに受け取ったままの粉末を用いて平板試料として試料を調製した。平らな表面を得るために、ほぼ１〜２ｍｇの試料をスライドガラスに軽く押しつけた。
ＸＲＰＤトレースをＬ‐乳酸塩および遊離塩基について記録した。トレースは良好なシグナル対ノイズ比を示し、結晶物質を表わしている。
Ｅ 重量蒸気収着（ＧＶＳ）：
全試料を、ＣＦＲＳｏｒｐソフトウェアを実行するハイデン（Ｈｉｄｅｎ）ＩＧＡＳｏｒｐ水分収着アナライザーランニングでランした。試料サイズは約１０〜２５ｍｇであった。水分吸着／脱着等温処理を下記に概説するように行った。試料を室内湿度および室温（約４０％ＲＨ、２５℃）で出し入れし、その後（ブルカー（Ｂｒｕｋｅｒ）ＡＸＳ Ｃ２ ＧＡＤＤＳシステム使用）ＸＲＰＤにより分析した。
標準等温ランは４０％ＲＨで開始させる単一サイクルであった。
湿度は下記のように変化させた。
４０、５０、６０、７０、８０、９０
８５、７５、６５、５５、４５、３５、２５、１５、５、０
１０、２０、３０、４０
（ｉ）Ｌ‐乳酸塩
Ｌ‐乳酸塩のＧＶＳ等温処理では、試料が吸湿挙動を示さず、水和物を形成しないことを示している。ＧＶＳ実験後における試料のＸＲＰＤトレースは投入物質のものと一致し、相変化が実験中に生じなかったことを示している。
（ｉｉ）遊離塩基
実験中、試料重量は０％ＲＨ〜９５％ＲＨでほぼ９％異なる。これは試料が性質上吸湿性であることを示している。
（実施例６９）
Ｘ線回折による１−シクロプロピル−３−［３−（５‐モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素二水和物遊離塩基の測定
回折実験に用いられた結晶は無色で、寸法０．２×０．２×０．２ｍｍ３の不規則形状であった。その結晶は、液体−液体拡散実験において、ＴＨＦでエシル酸塩の水溶液の沈殿により得た。このような試料と遊離塩基から製造された同様の結晶形態（エタノールなどのアルコール、メチルエチルケトンのようなケトン、ＴＨＦおよびジオキサンのようなエーテル、などの一連の溶媒、と共に水を貧溶媒として使用して)との同等性は、両試料の粉末Ｘ線回折パターンの比較により確認した。結晶学的データは、リガク（Ｒｉｇａｋｕ）回転陽極ＲＵ３ＨＲからのＣｕＫアルファ線（λ＝１．５４１８Å）、オスミックブルー（Ｏｓｍｉｃ ｂｌｕｅ）共焦点光学機器、ＡＦＣ９ １／４χゴニオメーターおよびリガクジュピター（Ｒｉｇａｋｕ Ｊｕｐｉｔｅｒ）ＣＣＤ検出器を用いて、１０１（２）Ｋで収集した。画像は、６７ｍｍの検出器対結晶距離で、４回のωスキャン、２θ＝３０°で１スキャンそして２θ＝９０°で３スキャン、で収集した。データ収集をクリスタルクリア（ＣｒｙｓｔａｌＣｌｅａｒ）ソフトウェアにより調節し、画像をディートレック（Ｄｔｒｅｋ）により処理およびスケール調整した。吸収係数は中程度（μ＝０．８２ｍｍ−１）であったが、グルーおよび結晶ホルダー（マイクロマウント）吸収を補うために四次フーリエ吸収補正を用いてデータを補正した。結晶は結晶格子パラメーターａ＝７．６６（１０）、ｂ＝１５．１８（１０）、ｃ＝１７．７１（１０）Å、ベータ＝９８．５３（２）°、アルファ＝γ＝９０°の単斜晶系空間群Ｐ２１／ｎ（＃１４）に属することがわかった。括弧内の数は偏差（ｓ．ｕ．、標準不確かさ）を表わす。
結晶構造はＳＨＥＬＸＳ−９７で行われた直接法を用いて解析した。１１．５〜０．８９Å（３．８５＜θ＜６０．０１）の分解範囲における合計２８２２の特有の反射に関する強度データをＳＨＥＬＸＳ−９７により２７４の結晶学的パラメーターの精査に用いた。最終的な統計パラメーターは、ｗＲ２＝０．２４１６（全データ）、ＲＦ＝０．０８６６（Ｉ＞２σ（Ｉ）のデータ）および適合度Ｓ＝１．１４５であった。
１個の遊離塩基分子および２個の水分子が非対称ユニット中で見つかった。非対称ユニットの元素組成はＣ１９Ｈ２６Ｎ７Ｏ４で、結晶の計算上の密度は１．３６Ｍｇ／ｍ３である。水素原子は幾何学的見地で捉え、一方で、へテロ原子に結合した水素原子の位置はＦｏ‐Ｆｃ差マップの調査により確認した。水素原子の位置パラメーターおよび熱パラメーターは対応する非水素原子上にあるものとした。非水素原子の熱運動は異方性温度要因によりモデル化した（図１を参照）。
結晶構造には、１個の分子内（Ｎ２２−Ｈ・・・Ｎ１４ ２．８９８Å）と７個の分子間水素結合が含まれている（図２を参照）。１−シクロプロピル−３−［３−（５‐モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の分子は、２個のＨ結合：Ｎ７‐Ｈ・・・Ｏ２４ ２．７６１ÅおよびＮ２５‐Ｈ・・・Ｎ２ ３．３１０Åにより、により結晶学的なb軸に沿って鎖状に結合されている。２個の鎖からのベンゾイミダゾール部分は、３．５〜３．６Åの距離で重なりあっている。１−シクロプロピル−３−［３−（５‐モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素分子のネットワークは４個の水分子に占められたポケットを形成し、２個の分子と２個の分子が対称中心により相関している。３個のＨ結合が１−シクロプロピル−３−［３−（５‐モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素分子と水分子とを結合させ、１個のＨ結合が第１水分子（Ｏ１Ｗ１‐Ｈ・・・Ｎ１６ ２．８４５Å）に、そして残りの２個のＨ結合が第２の水分子（Ｎ１‐Ｈ・・・Ｏ１Ｗ２ ２．８７５ÅおよびＯ１Ｗ２‐Ｈ・・・Ｏ１９ ２．７４６Å）に結合している。水分子は、別の２個のＨ結合：Ｏ１Ｗ１‐Ｈ・・・Ｏ１Ｗ２ ２．８８４ÅおよびＯ１Ｗ２‐Ｈ・・・Ｏ１Ｗ１ ２．７７１Åを通じて相互作用している。
Ｘ線回折調査により作成された前記構造の熱振動楕円体の画像を図１に示し、パッキング図は図２にある。
１−シクロプロピル−３−［３−（５‐モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素遊離塩基二水和物の構造を築く原子の座標を表２に示す。括弧中の数は偏差（ｓ．ｕ、標準不確かさ)を表わす。
表２
Figure 0005474354
Figure 0005474354
（実施例７０）
１−シクロプロピル−３−［３−（５‐モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素遊離塩基のＸＲＰＤパターンの測定
Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）データ収集用の試料を大理石乳鉢で静かに粉砕し、結晶解析用キャピラリー（ハンプトンリサーチ（Ｈａｍｐｔｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）、石英またはガラスタイプ１０、０．４または０．７ｍｍ径）中へ入れた。回折パターンは、リガク（Ｒｉｇａｋｕ）回転陽極ＲＵ３ＨＲからのＣｕＫアルファ線（λ＝１．５４１８Å）、オスミックブルー（Ｏｓｍｉｃ ｂｌｕｅ）共焦点光学機器、１／４χゴニオメーターおよびリガク（Ｒｉｇａｋｕ）ＨＴＣイメージプレート検出器を使用して、室温で収集した。２５０ｍｍの検出器対結晶距離でψ軸を回転させながら、２Ｄ画像を収集した。データ収集はクリスタルクリア（ＣｒｙｓｔａｌＣｌｅａｒ）ソフトウェアにより調節し、２Ｄ画像はデータスクイーズ（Ｄａｔａｓｑｕｅｅｚｅ）により１Ｄプロット（２θ対強度）に変換した（０．０１°または０．０２°工程で２θ範囲３〜３０°にわたり方位角０＜χ＜３６０°で平均した強度）。自社のプログラムＡｓｔｅｘ ＸＲＰＤを１Ｄ ＸＲＰＤパターンの取扱いおよび視覚化に用いた。
ＸＲＰＤパターンとピークの相対強度は異なる結晶化バッチ間で変化せず、これは結晶形が一つしか存在しないことと一致している。
１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素遊離塩基のＦＢ１形態のＸＲＰＤパターンを図３に示し、主要なピークの詳細を表３に記す。
表３ 主要なピークの２θ、ｄ−間隔および相対強度。
Figure 0005474354
（実施例７１）
１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素乳酸塩の結晶構造の測定
単結晶形態の１−シクロプロピル−３−［３−（５‐モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素Ｌ‐乳酸塩が同定された。回折実験に用いられた結晶は、エタノールから蒸発により得られた寸法０．１×０．１×０．１ｍｍ３の無色のプリズムであった。結晶学的データは、リガク（Ｒｉｇａｋｕ）回転陽極ＲＵ３ＨＲからのＣｕＫアルファ線（λ＝１．５４１８Å）、オスミックブルー（Ｏｓｍｉｃ ｂｌｕｅ）共焦点光学機器、ＡＦＣ９ １／４χゴニオメーターおよびリガクジュピター（Ｒｉｇａｋｕ Ｊｕｐｉｔｅｒ）ＣＣＤ検出器を用いて、９７Ｋで収集した。画像は、６７ｍｍの検出器対結晶距離で、５回のωスキャン、２θ＝１５°で１スキャンそして２θ＝９０°で４スキャン、で収集した。データ収集をクリスタルクリア（ＣｒｙｓｔａｌＣｌｅａｒ）ソフトウェアにより調節し、画像をディートレック（Ｄｔｒｅｋ）により処理およびスケール調整した。吸収係数は中程度（μ＝０．７８ｍｍ−１）であったが、グルーおよび結晶ホルダー（マイクロマウント）吸収を補うために四次フーリエ吸収補正を用いてデータを補正した。結晶は結晶格子パラメーターａ＝９．９４（１０）、ｂ＝１５．０３（１０）、ｃ＝１６．１８（１０）Å、アルファ＝ベータ＝γ＝９０°の斜方晶系空間群Ｐ２１２１２１（＃１９）に属することがわかった。括弧内の数は偏差（ｓ．ｕ．、標準不確かさ）を表わす。結晶格子パラメーターと対称性をチェックするために、１回の短い室温でのスキャンを行った。対称性は９７（２）Ｋの場合と同様であり、結晶格子パラメーターが類似（室温ａ＝１０．０８、ｂ＝１５．２２、ｃ＝１６．２２Å）していることがわかった。
結晶構造はＳＨＥＬＸＳ−９７で行われた直接法を用いて解析した。結晶化実験で用いられたＬ−乳酸塩立体配置と一致する絶対立体配置を選択した。１１〜０．９Å（４．０１＜θ＜５８．９２）の分解範囲における合計３４１７の特有の反射に関する強度データをＳＨＥＬＸＳ−９７により３０８の結晶学的パラメーターの精査に用いた。最終的な統計パラメーターは、ｗＲ２＝０．２２７５（全データ）、ＲＦ＝０．０８１７（Ｉ＞２σ（Ｉ）のデータ）および適合度Ｓ＝１．０７６であった。
１個のプロトン化遊離塩基分子および１個のＬ‐乳酸アニオンが非対称ユニット中で見つかった。非対称ユニットの元素組成はＣ２２Ｈ２９Ｎ７Ｏ５で、結晶の計算上の密度は１．３０Ｍｇ／ｍ３である。水素原子は幾何学的見地で捉え、一方で、へテロ原子に結合した水素原子の位置はＦｏ‐Ｆｃ差マップの調査により確認した。水素原子の位置パラメーターおよび熱パラメーターは対応する非水素原子上にあるものとした。非水素原子の熱運動は異方性温度要因によりモデル化した（図４を参照）。
結晶構造には、１個の分子内（Ｎ２２−Ｈ・・・Ｎ１４ ２．８５２Å）と７個の分子間水素結合が含み、複雑な３Ｄネットワークを形成している（図５を参照）。１−シクロプロピル−３−［３−（５‐モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の分子は、２個の分子間Ｈ結合：Ｎ７‐Ｈ・・・Ｏ２４ ２．８００ÅおよびＮ２５‐Ｈ・・・Ｎ２ ３．００４Å、により結晶学的なｃ軸に沿って鎖状に結合されている。Ｌ−乳酸アニオンは、Ｈ結合：Ｏ３Ｌ‐Ｈ・・・Ｏ１Ｌ ２．６２６Åにより結晶学的ａ軸に沿い鎖状に結合されている。２個の二又Ｈ結合が１−シクロプロピル−３−［３−（５‐モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素カチオンとＬ‐乳酸アニオンとを結合させている。プロトン化モルホリン窒素原子は両カルボキシル酸素原子（Ｎ１６‐Ｈ・・・Ｏ１Ｌ ３．１２５ÅおよびＮ１６‐Ｈ・・・Ｏ２Ｌ ２．６２５Å）と相互作用し、一方ピラゾールＮ１窒素はＯ２ＬおよびＯ３Ｌ（Ｎ１‐Ｈ・・・Ｏ２Ｌ ２．８８２Å、Ｎ１‐Ｈ・・・Ｏ３Ｌ ２．７４０Å）に対するＨドナーである。
Ｘ線回折調査により作成された前記構造の熱振動楕円体の画像を図４に示し、パッキング図は図５にある。
１−シクロプロピル−３−［３−（５‐モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素乳酸塩の構造を築く原子の座標を表４に示す。括弧中の数は偏差（ｓ．ｕ、標準不確かさ)を表わす。
表４
Figure 0005474354
Figure 0005474354
Figure 0005474354
（実施例７２）
１−シクロプロピル−３−［３−（５‐モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２‐イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素塩の４０℃、７５％ＲＨ、での安定性
安定性試験用の試料ほぼ１５ｍｇを大理石乳鉢で静かに粉砕し、ペトリ皿に移し、薄い層にした。その後、過剰の未溶解ＮａＣｌを有する飽和ＮａＣｌ溶液を含有する密封容器に試料を入れた。次にこれを４０℃に保持したインキュベーターに入れ、４０℃および約７５％相対湿度（ＲＨ）の環境を作った。試料を一定の間隔で粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）により分析した。
Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）データ収集用の試料を、結晶解析用キャピラリー（ハンプトンリサーチ（Ｈａｍｐｔｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）、石英、径＝０．７ｍｍ）中へ入れた。回折パターンは、リガク（Ｒｉｇａｋｕ）回転陽極ＲＵ３ＨＲからのＣｕＫアルファ線（λ＝１．５４１８Å）、オスミックブルー（Ｏｓｍｉｃ ｂｌｕｅ）共焦点光学機器、１／４χゴニオメーターおよびリガク（Ｒｉｇａｋｕ）ＨＴＣイメージプレート検出器を使用して、室温で収集した。２５０ｍｍの検出器対結晶距離でψ軸を回転させながら、２Ｄ画像を収集した。データ収集はクリスタルクリア（ＣｒｙｓｔａｌＣｌｅａｒ）ソフトウェアにより調節し、２Ｄ画像はデータスクイーズ（Ｄａｔａｓｑｕｅｅｚｅ）により１Ｄプロット（２θ対強度）に変換した（０．０１°工程で２θ範囲３〜３０°にわたり方位角０＜χ＜３６０°で平均した強度）。自社のプログラム、アステックス（Ａｓｔｅｘ）ＸＲＰＤを１Ｄ ＸＲＰＤパターンの取扱いおよび視覚化に用いた。
乳酸塩、遊離塩基（ＦＢ１）および二水和物遊離塩基（ＦＢ２）のＸＲＰＤパターンは、４０℃および７５％ＲＨに暴露しても、１〜２月間にわたり変化しない。乳酸塩、遊離塩基（ＦＢ１）および二水和物遊離塩基（ＦＢ２）の出発および安定性試験試料のＸＲＰＤパターンを図６〜８に示す。
１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素遊離塩基のＬ−乳酸塩のＸＲＰＤパターンを図６に示し、主要なピークの詳細を表５に記す。
表５
Figure 0005474354
１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素遊離塩基の二水和物遊離塩基ＦＢ２形態のＸＲＰＤパターンを図８に示し、主要なピークの詳細を表６に記す。
表６
Figure 0005474354
生物活性
（実施例７３）
活性化ＣＤＫ２／サイクリンＡキナーゼ阻害活性アッセイ（ＩＣ ５０ ）の測定
本発明の化合物は下記プロトコールを用いてキナーゼ阻害活性について試験した。
活性化ＣＤＫ２／サイクリンＡ(ブラウン（Ｂｒｏｗｎ）ら、Ｎａｔ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．、１、p．４３８−４４３、１９９９年；ロウ（Ｌｏｗｅ，Ｅ．Ｄ．）ら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、４１、ｐ．１５６２５−１５６３４、２００２年)を、２．５倍濃度のアッセイバッファー（５０ｍＭ ＭＯＰＳ ｐＨ７．２、６２．５ｍＭ ベータ−グリセロホスフェート、１２．５ｍＭ ＥＤＴＡ、３７．５ｍＭ ＭｇＣｌ２、１１２．５ｍＭ ＡＴＰ、２．５ｍＭ ＤＴＴ、２．５ｍＭオルトバナジウム酸ナトリウム、０．２５ｍｇ／ｍｌウシ血清アルブミン）で１２５ｐＭに希釈し、１０μｌを、１０μｌのヒストン基質混合物（６０μｌのウシヒストンＨ１（アップステートバイオテクノロジー（Ｕｐｓｔａｔｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、５ｍｇ／ｍｌ）、９４０μｌ Ｈ２Ｏ、３５μＣｉγ３３Ｐ−ＡＴＰ）と混合し、ＤＭＳＯ中で種々の希釈率（２．５％まで）の試験化合物５μｌとともに９６ウェルプレートに添加する。反応を２〜４時間行った後、過剰量のオルトリン酸（２％で５μｌ）により停止させる。ヒストンＨ１に組み込まれていないγ３３Ｐ−ＡＴＰを、ミリポア（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）ＭＡＰＨフィルタープレートでリン酸化ヒストンＨ１から分離する。ＭＡＰＨプレートのウェルを、０．５％オルトリン酸で湿らせた後、反応物をミリポア（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）真空濾過装置でウェルから濾過する。濾過後、残留物を、２００μｌの０．５％オルトリン酸で２回洗浄する。フィルターが乾燥したところで、２０μｌのマイクロシント（Ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ）２０シンチラントを添加し、その後パッカードトップカウント（Ｐａｃｋａｒｄ Ｔｏｐｃｏｕｎｔ）で３０秒間カウントする。ＣＤＫ２活性の阻害率（％）を算出し、プロットして、ＣＤＫ２活性の５０％を阻害するのに必要な試験化合物の濃度（ＩＣ５０）を求める。
（実施例７４）
活性化ＣＤＫ１／サイクリンＢキナーゼ阻害活性アッセイ（ＩＣ ５０ ）の測定
ＣＤＫ１／サイクリンＢアッセイは、ＣＤＫ１／サイクリンＢ（アップステートディスカバリー（Ｕｐｓｔａｔｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ））を用い、この酵素を６．２５ｎＭに希釈すること以外は上記ＣＤＫ２／サイクリンＡと同じである。
（実施例７５）
オーロラＡキナーゼアッセイ
オーロラＡキナーゼ活性は、ＧＳＫ３由来のビオチン化ペプチドと共に解離促進ランタニド蛍光免疫検査法（ＤＥＬＦＩＡ）を使用して決定することができる。生じたリン酸化ペプチドの量は、λｅｘ＝３３７ｎｍ、λｅｍ＝６２０ｎｍで時間分解蛍光を使用して、リン特異的一次抗体およびユーロピウム標識抗ウサギＩｇＧ抗体により定量化する。
キナーゼ反応：
アッセイ反応液を、０．５ｎＭオーロラＡ（アップステートディスカバリー（Ｕｐｓｔａｔｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ））、３μＭビオチン−ＣＧＰＫＧＰＧＲＲＧＲＲＲＴＳＳＦＡＥＧ、１５μＭ ＡＴＰと、１０ｍＭ ＭＯＰＳ ｐＨ７．０、０．１ｍｇ／ｍＬ ＢＳＡ、０．００１％ Ｂｒｉｊ−３５、０．５％グリセロール、０．２ｍＭ ＥＤＴＡ、１０ｍＭ ＭｇＣｌ２、０．０１％ ベータ−メルカプトエタノールおよび２．５％ＤＭＳＯで希釈した様々な化合物希釈液とで、２５μＬの全反応容量で９６ウェルプレートに調製する。反応を室温で６０分間進行させ、その後、１００ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０５％サーファクト−アンプス（Ｓｕｒｆａｃｔ−Ａｍｐｓ）２０（ピアス（Ｐｉｅｒｃｅ））およびＴＢＳ中の１×ブロッカー（Ｂｌｏｃｋｅｒ（商標））ＢＳＡ（ピアス（Ｐｉｅｒｃｅ））を含有する反応停止緩衝液（ＳＴＯＰ ｂｕｆｆｅｒ）１００μＬで停止させる。
検出工程：
反応混合液をその後ニュートラビジン（Ｎｅｕｔｒａｖｉｄｉｎ）でコーティングされた９６ウェルプレート（ピアス（Ｐｉｅｒｃｅ））に移し、ビオチン化ペプチドを捕捉するために３０分間インキュベートする。１ウェル毎に２００μＬのＴＢＳＴ緩衝液で５回洗浄した後、抗リン酸化（Ｓｅｒ／Ｔｈｒ）−ＡＫＴ基質抗体（セルシグナリングテクノロジー（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ））とＥｕ−Ｎ１抗ウサギＩｇＧ（パーキンエルマー（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ））との混合物を全ウェルに加え、１時間放置する。さらなる洗浄工程後、デルフィアエンハンスメント溶液（ＤＥＬＦＩＡ Ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ）（パーキンエルマー（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ））を全ウェルに加える。５分間のインキュベート後、ウェルをフュージョン（Ｆｕｓｉｏｎ）プレートリーダーでカウントする。
（実施例７６）
オーロラＢキナーゼアッセイ
キナーゼ反応
アッセイ反応液を、５ｎＭオーロラＢ（プロキナーゼ（ＰｒｏＱｉｎａｓｅ））、３μＭビオチン−ＣＧＰＫＧＰＧＲＲＧＲＲＲＴＳＳＦＡＥＧ、１５μＭ ＡＴＰと、２５ｍＭ ＴＲＩＳ ｐＨ８．５、０．１ｍｇ／ｍＬ ＢＳＡ、０．０２５％ Ｓｕｒｆａｃｔ−Ａｍｐｓ２０、５ｍＭ ＭｇＣｌ２、１ｍＭ ＤＴＴおよび２．５％ＤＭＳＯで希釈した様々な化合物希釈液とで、２５μＬの全反応容量で９６ウェルプレートに調製する。反応を室温で９０分間進行させてから、その後、１００ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０５％サーファクト−アンプス（Ｓｕｒｆａｃｔ−Ａｍｐｓ）２０（ピアス（Ｐｉｅｒｃｅ））およびＴＢＳ中の１×ブロッカー（Ｂｌｏｃｋｅｒ（商標））ＢＳＡ（ピアス（Ｐｉｅｒｃｅ））を含有する反応停止緩衝液（ＳＴＯＰ ｂｕｆｆｅｒ）１００μＬで停止させる。
検出工程はオーロラＡに関して記載されたように行う。
（実施例７７）
ＧＳＫ３‐ベータキナーゼ阻害活性アッセイ
ＧＳＫ３‐ベータ（アップステートディスカバリー（Ｕｐｓｔａｔｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ））を２５ｍＭ ＭＯＰＳ ｐＨ７．００、２５ｍｇ／ｍＬ ＢＳＡ、０．００２５％ Ｂｒｉｊ−３５、１．２５％グリセロール、０．５ｍＭ ＥＤＴＡ、２５ｍＭ ＭｇＣｌ２、０．０２５％ ベータ−メルカプトエタノール、３７．５ｍＭ ＡＴＰで７．５ｎＭに希釈し、１０μＬを基質ミックス１０μＬと混合する。ＧＳＫ３−ベータ用の基質ミックスは３５μＣｉγ３３Ｐ‐ＡＴＰを含有する水１ｍＬ中の１２．５μＭリン酸化グリコーゲンシンターゼペプチド‐２（アップステートディスカバリー（Ｕｐｓｔａｔｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ））である。酵素および基質を、試験化合物の様々なＤＭＳＯ希釈液（２．５％まで）５μＬと一緒に９６ウェルプレートへ添加する。反応を３時間（ＧＳＫ３−ベータ）進行させてから、過剰のオルトリン酸（２％で５μＬ）で停止させる。濾過操作は上記の活性化ＣＤＫ２／サイクリンＡアッセイの通りである。
（実施例７８）
Ａ 他のキナーゼ阻害活性アッセイ
これらの酵素に対する阻害活性を（アップステートディスカバリー（Ｕｐｓｔａｔｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｌｔｄ））においてアッセイした。酵素は酵素用緩衝液（下記表で記載されている通り）で１０×最終濃度に調製した。次いで酵素を表に記載されているような様々な基質および３３Ｐ‐ＡＴＰ（〜５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ）と共にアッセイ用緩衝液中でインキュベートした。
反応をＭｇ／ＡＴＰの添加により開始した。反応を４０分間室温で進行させ、５μＬの３％リン酸溶液で停止した。１０μＬの反応液ミックスをフィラーマット（Ｆｉｌｔｅｒｍａｔ）ＡもしくはＰ３０フィラーマット（Ｆｉｌｔｅｒｍａｔ）のどちらかに移し、７５ｍＭリン酸で３回およびメタノールで１回洗浄し、その後シンチレーション計数のために乾燥させた。
化合物を全キナーゼに対して下記に詳述した濃度でデュプリケートで試験し、コントロールと比較した活性パーセントを計算した。阻害が高い場合は、ＩＣ５０を求めた。
Figure 0005474354
酵素用緩衝液は次のとおりであった。
Ａ：２０ｍＭ ＭＯＰＳ ｐＨ７．０、１ｍＭ ＥＤＴＡ、０．１％ベータ‐メルカプトエタノール、０．０１％ Ｂｒｉｊ−３５、５％グリセロール、１ｍｇ／ｍｌ ＢＳＡ
Ｂ：５０ｍＭ Ｔｒｉｓ ｐＨ７．５、０．０５％ ベータ‐メルカプトエタノール、１ｍｇ／ｍｌ ＢＳＡ
アッセイ用緩衝液は次のとおりであった。
Ａ：８ｍＭ ＭＯＰＳ ｐＨ７．０、０．２ｍＭ ＥＤＴＡ、１０ｍＭ 酢酸Ｍｇ
Ｂ：５０ｍＭ Ｔｒｉｓ ｐＨ７．５、０．１％ ベータ‐メルカプトエタノール、１０ｍＭ 酢酸Ｍｇ
Ｂ さらなるキナーゼ阻害活性アッセイ
これらの酵素に対する阻害活性を（アップステートディスカバリー（Ｕｐｓｔａｔｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｌｔｄ））においてアッセイした。酵素は酵素用緩衝液（下記表で記載されている通り）で１０×最終濃度に調製した。次いで酵素を表に記載されているような様々な基質および３３Ｐ‐ＡＴＰ（〜５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ）と共にアッセイ用緩衝液中でインキュベートした。
反応をＭｇ／ＡＴＰの添加により開始した。反応を４０分間室温で進行させ、５μＬの３％リン酸溶液で停止した。１０μＬの反応液ミックスをフィラーマット（Ｆｉｌｔｅｒｍａｔ）ＡもしくはＰ３０フィラーマット（Ｆｉｌｔｅｒｍａｔ）のどちらかに移し、７５ｍＭリン酸で３回およびメタノールで１回洗浄し、その後シンチレーション計数のために乾燥させた。
化合物を全キナーゼに対して下記に詳述した濃度でデュプリケートで試験し、コントロールと比較した活性パーセントを計算した。阻害が高い場合は、ＩＣ５０を求めた。
Figure 0005474354
酵素用緩衝液は次のとおりだった。
Ａ：２０ｍＭ ＭＯＰＳ ｐＨ７．０、１ｍＭ ＥＤＴＡ、０．１％ベータ‐メルカプトエタノール、０．０１％ Ｂｒｉｊ−３５、５％グリセロール、１ｍｇ／ｍｌ ＢＳＡ
アッセイ用緩衝液は次のとおりだった。
Ａ：８ｍＭ ＭＯＰＳ ｐＨ７．０、０．２ｍＭ ＥＤＴＡ、１０ｍＭ 酢酸Ｍｇ
Ｃ：８ｍＭ ＭＯＰＳ ｐＨ７、０．２ｍＭ ＥＤＴＡ、１０ｍＭＣｌ２、１０ｍＭ 酢酸Ｍｇ１０ｍＭ 酢酸Ｍｇ
Ｃ ＥＧＦＲおよびＰＤＧＦＲキナーゼ阻害活性アッセイ
ＥＧＦＲおよびＰＤＧＦＲ−ベータ酵素に対する阻害活性を測定した。酵素（Ｕｐｓｔａｔｅより）を、１×キナーゼアッセイ用緩衝液(下記に記載のように)中で、１０×最終濃度に調製した。酵素をその後、試験化合物、ビオチン化Ｆｌｔ３基質(ビオチン-ＤＮＥＹＦＹＶ)（セルシグナリングテクノロジー（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｃ）およびＡＴＰでインキュベートした。６０ｕｌ反応を、室温および９００ｒｐｍのプレート振盪機上で６０分間（ＥＧＦＲ)または２．５時間（ＰＤＧＦＲ−ベータ)進行させ、その後２０μｌのｐＨ８を有する５５ｍＭ ＥＤＴＡで反応を停止した。次に、２０μｌの５×検出ミックス（ｐＨ７．５の５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、０．５Ｍ ＫＦ、０．１％ＢＳＡ、１１．３４ｎＭ Ｅｕ−抗−ｐＹ（ＰＴ６６）（パーキンエルマー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ））、９４ｎＭ ＳＡ−ＸＬ６６５（シスバイオ（Ｃｉｓｂｉｏ））を各ウェルに添加し、プレートを密閉し、室温で１時間プレート振盪機上で９００ｒｐｍでインキュベートした。プレートをその後、ＴＲＦモードのパッカードフュージョン（Ｐａｃｋａｒｄ Ｆｕｓｉｏｎ）プレートリーダーで読み取った。
Figure 0005474354
キナーゼアッセイ用緩衝液は次のとおりだった。
Ａ：２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．５、１０ｍＭ ＭｎＣｌ２、０．１ｍｇ／ｍｌ ＢＳＡ、０．０１％ ＴｒｉｔｏｎＸ−１００、１ｍＭ ＤＴＴ、０．１ｍＭオルトバナジウム酸ナトリウム
Ｂ：２０ｍＭ ＭＯＰＳ ｐＨ７．０、１０ｍＭ ＭｎＣｌ２、０．０１％ ＴｒｉｔｏｎＸ−１００、１ｍＭ ＤＴＴ、０．１ｍＭオルトバナジウム酸ナトリウム
（実施例７９）
Ｐ４５０法
ＣＹＰ４５０ｓ １Ａ２、２Ｃ９、２Ｃｌ９、３Ａ４および２Ｄ６に対する化合物の有効性は、インビトロゲン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）（ペイズリー、英国）から入手可能なＰａｎ Ｖｅｒａ Ｖｉｖｉｄ Ｃｙｐ４５０スクリーニングキットを使用して測定した。ＣＹＰは、ＣＹＰ４５０およびＮＡＤＰＨレダクターゼを含有するバキュロゾームの形態で提供される。基質は蛍光性のＶｉｖｉｄ基質である。最終反応混合液は以下のとおりであった。
１Ａ２
１００ｍＭリン酸カリウム、ｐＨ８、１％メタノール、２μＭ １Ａ２ Ｂｌｕｅ ｖｉｖｉｄ基質、１００μＭ ＮＡＤＰ＋、４ｎＭ ＣＹＰ４５０ １Ａ２、２．６６ｍＭグルコース−６−リン酸、０．３２Ｕ／ｍＬグルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ。
２Ｃ９
５０ｍＭリン酸カリウム、ｐＨ８、１％メタノール、２μＭ Ｇｒｅｅｎ ｖｉｖｉｄ基質、１００μＭ ＮＡＤＰ＋、８ｎＭ ＣＹＰ４５０ ２Ｃ９、２．６６ｍＭグルコース−６−リン酸、０．３２Ｕ／ｍＬグルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ。
２Ｃ１９
５０ｍＭリン酸カリウム、ｐＨ８、１％メタノール、８μＭ Ｂｌｕｅ ｖｉｖｉｄ基質、１００μＭ ＮＡＤＰ＋、４ｎＭ ＣＹＰ４５０ ２Ｃ１９、２．６６ｍＭグルコース−６−リン酸、０．３２Ｕ／ｍＬグルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ。
３Ａ４
１００ｍＭリン酸カリウム、ｐＨ８、１％メタノール、１０μＭ ３Ａ４ Ｂｌｕｅ ｖｉｖｉｄ基質、１００μＭ ＮＡＤＰ＋、２．５ｎＭ ＣＹＰ４５０ ３Ａ４、２．６６ｍＭグルコース−６−リン酸、０．３２Ｕ／ｍＬグルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ。
２Ｄ６
１００ｍＭリン酸カリウム、ｐＨ８、１％メタノール、５μＭ ２Ｄ６ Ｂｌｕｅ ｖｉｖｉｄ基質、１００μＭ ＮＡＤＰ＋、５ｎＭ ＣＹＰ４５０ ２Ｄ６、２．６６ｍＭグルコース−６−リン酸、０．３２Ｕ／ｍＬグルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ。
蛍光をモルキュラーディバイススペクトロマックスジェミニ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ Ｓｐｅｃｔｒａｍａｘ Ｇｅｍｉｎｉ）リーダーにおいて３０秒間隔で２０分間モニターした。励起および発光波長は、１Ａ２、２Ｃ１９および３Ａ４の場合３９０ｎｍおよび４６０ｎｍ、２Ｄ６の場合３９０ｎｍおよび４８５ｎｍ、２Ｃ９の場合４８５ｎｍおよび５３０ｎｍであった。初速度をプログレス曲線から求めた。化合物をメタノールに溶解し、１０μＭの濃度でＣＹＰ４５０ｓに対して試験した。
（実施例８０）
抗増殖活性
多くの細胞株において細胞成長を阻害しうる化合物の能力を測定することにより、本発明の化合物の抗増殖活性を測定することができる。細胞成長の阻害はＡｌａｍａｒＢｌｕｅアッセイ（Ｎｏｃｉａｒｉ，Ｍ．Ｍ、Ｓｈａｌｅｖ,Ａ．、Ｂｅｎｉａｓ，Ｐ．、Ｒｕｓｓｏ，Ｃ．、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍｅｔｈｏｄｅｓ、１９９８年、２１３、１５７−１６７）を用いて測定される。前記方法はレザズリンをその蛍光産物レゾルフィンへ還元する生細胞の能力に基づいている。各増殖アッセイにおいては、細胞を９６ウェルプレートに入れ、１６時間培養してから、さらに７２時間阻害剤化合物を加える。インキュベーションの終了時に１０％（ｖ／ｖ）アラマーブルー（ＡｌａｍａｒＢｌｕｅ）を加え、さらに６時間インキュベートしてから、５３５ｎＭ ｅｘ／５９０ｎＭ ｅｍにより蛍光産物を調べる。非増殖細胞アッセイの場合には、細胞を９６時間集密状態で維持してから、さらに７２時間阻害剤化合物を加える。生細胞の数を前記のようにアラマーブルー（ＡｌａｍａｒＢｌｕｅ）アッセイで調べる。さらに、どのような形態学的変化であっても記録される。細胞株はＥＣＡＣＣ（ヨーロピアンコレクションオブセルカルチャー（Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅｓ））から入手することができる。
特に、本発明の化合物を、ヒト結腸癌癌由来のＨＣＴ−１１６細胞株（ＥＣＡＣＣ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ：９１０９１００５）に対して試験した。
このアッセイにより本発明の化合物は１μＭ未満のＩＣ５０値を有すること、さらに１００ｎＭの倍数性または多核化が観察される最低濃度を有することが分かった。
（実施例８１）
Ａ 一般的なコロニー形成アッセイプロトコール
付着性腫瘍細胞株に対する化合物の様々な治療処理の効果をクローンアッセイで評価した。
細胞を６または２４ウェル組織培養プレートに７５〜１００細胞／ｍＬ関連培地の濃度で接種し、１６時間リカバーした。
化合物またはビヒクルコントロール（ＤＭＳＯ）をデュプリケートウェルに添加し、０．１％の最終ＤＭＳＯ濃度とした。化合物添加後、至適個別コロニー計数のために１０〜１４日間コロニーを成長させた。コロニーを２ｍＬ カルノワ（Ｃａｒｎｏｙｓ）固定液（２５％酢酸，７５％メタノール）中で固定し、２ｍＬの０．４％ｗ／ｖクリスタルバイオレットで染色した。各ウェルのコロニー数をカウントした。単一の細胞から多くの細胞への増殖を示す(すなわち、細胞質***が成功した完全な細胞周期)、ほぼ５０個以上の細胞からなる多細胞コロニーのみスコアした。単一の多核(倍数)細胞はスコアしなかった。ＩＣ５０値は、プリズムグラフパッドソフトウェア（Ｐｒｉｓｍ Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を使用して、Ｓ字形用量応答（可変勾配）ＩＣ５０曲線により計算した。
Ｂ １−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素のコロニー形成アッセイプロトコール
Ａ２７８０、Ａ５４９、ＨＣＴ１１６、ＨＣＴ１１６Ｎ７、ＨＴ‐２９、ＭＣＦ７、ＭＩＡ−Ｐａ−Ｃａ−２、ＳＷ６２０細胞株に対する１−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の様々な治療処理の効果をクローンアッセイで評価した。
細胞を６または２４ウェル組織培養プレートに７５〜１００細胞／ｍＬ関連培地の濃度で接種し、１６時間リカバーした。
Figure 0005474354
１−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素またはビヒクルコントロール（ＤＭＳＯ）をデュプリケートウェルに添加し、０．１％の最終ＤＭＳＯ濃度とした。化合物添加後、至適個別コロニー計数のために１０〜１４日間コロニーを成長させた。コロニーを２ｍＬ カルノワ（Ｃａｒｎｏｙｓ）固定液（２５％酢酸，７５％メタノール）中で固定し、２ｍＬの０．４％ｗ／ｖクリスタルバイオレットで染色した。各ウェルのコロニー数をカウントした。単一の細胞から多くの細胞への増殖を示す(すなわち、細胞質***が成功した完全な細胞周期)、ほぼ５０個以上の細胞からなる多細胞コロニーのみスコアした。単一の多核(倍数)細胞はスコアしなかった。ＩＣ５０値は、プリズムグラフパッドソフトウェア（Ｐｒｉｓｍ Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を使用して、Ｓ字形用量応答（可変勾配）ＩＣ５０曲線により計算した。
腫瘍細胞コロニー形成に対する阻害作用
Figure 0005474354
* +は、野生型ｐ５３の発現を示す；−は、ｐ５３の発現が無かったかｐ５３が機能性でなかったことを示す。
（実施例８２）
赤白血病（ＨＥＤ）および慢性骨髄性白血病（Ｋ５６２）細胞におけるＪＡＫ２（例えば、Ｓｔａｔ５)およびＢｃｒ−Ａｂｌ（例えば、ＣＲＫＬ）の下流基質のリン酸化の阻害を測定するためのウェスタンブロットアッセイ
０．１％最終ＤＭＳＯ濃度での化合物処理に続いて、細胞を採取し、氷冷トリトン溶解バッファー中で溶解した。溶解物を遠心分離により除去し、上清をタンパク定量のために取り除いた。対応量のタンパク質溶解物にＳＤＳ試料緩衝液およびＤＴＴを添加し、５分間煮沸した。
試料をＳＤＳ−ＰＡＧＥにより分解し、ニトロセルロースフィルターにブロットし、５％脱脂乳または同等のブロッキング緩衝液でブロックし、特定の抗体と共に４℃でリン酸化および非リン酸化タンパク質に一晩インキュベートした。使用した二次抗体は、抗ウサギおよび抗ネズミＩｇＧ、ＨＲＰ結合抗体（セルシグナリングテクノロジー（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ））で、検出はＥＣＬＰＬＵＳ試薬（アマシャムバイオサイエンス（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ））を使用して達成した。他に使用した二次抗体は、ＩＲＤｙｅ(登録商標)結合抗体で、検出はオデッセイ赤外線イメージングシステム（Ｏｄｙｓｓｅｙ Ｉｎｆｒａｒｅｄ Ｉｍａｇｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍ）(ＬＩ−ＣＯＲバイオサイエンス（ＬＩ−ＣＯＲ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）)を使用して達成した。
このプロトコールを使用により、細胞が１−シクロプロピル−３−[３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素で処理される場合、赤白血病（ＨＥＬ）および慢性骨髄性白血病（Ｋ５６２）細胞ではそれぞれＪＡＫ２(例えば、Ｓｔａｔ５)およびＢｃｒ−Ａｂｌ（例えば、ＣＲＫＬ）の直接下流の基質のリン酸化が阻害されることが示された。
結果を下記の表に示す。
Figure 0005474354
医薬製剤
（実施例８３）
（ｉ）錠剤製剤
式（Ｉ）の化合物を含有する錠剤組成物は、化合物５０ｍｇと、希釈剤としてのラクトース（ＢＰ）１９７ｍｇと、滑沢剤としてのステアリン酸マグネシウム３ｍｇとを混合し、公知の方法で打錠することにより製造される。
（ｉｉ）カプセル製剤
カプセル製剤は、式（Ｉ）の化合物１００ｍｇとラクトース１００ｍｇを混合し、得られた混合物を標準的な不透明硬ゼラチンカプセルに充填することにより製造される。
（ｉｉｉ）注射用製剤Ｉ
注射投与用の非経口組成物は、式（Ｉ）の化合物（例えば、塩形態）を、１０％プロピレングリコールを含有する水に溶解し、有効化合物濃度１．５重量％とすることにより製造することができる。この溶液を次に濾過除菌し、アンプルに充填し、密閉される。
（ｉｖ）注射用製剤ＩＩ
注射用の非経口組成物は、式（Ｉ）の化合物（例えば、塩形態）（２ｍｇ／ｍＬ）およびマンニトール（５０ｍｇ／ｍＬ）を水に溶解し、溶液を濾過滅菌し、密封可能な１ｍＬバイアルまたはアンプルへ充填することにより製造される。
（ｖ）注射用製剤III
注射または注入によるｉｖ送達用の製剤は、水に式（Ｉ）の化合物（例えば、塩形態）を２０ｍｇ／ｍＬで溶解することにより製造できる。次いで、バイアルを密封し、オートクレーブ処理により滅菌する。
（ｖｉ）注射用製剤ＩＶ
注射または注入によるｉｖ送達用の製剤は、緩衝剤（例えば、０．２Ｍ酢酸ｐＨ４．６）を含有した水に式（Ｉ）の化合物（例えば、塩形態）を２０ｍｇ／ｍＬで溶解することにより製造できる。次いで、バイアルを密封し、オートクレーブ処理により滅菌する。
（ｖｉｉｉ）凍結乾燥製剤Ｉ
本明細書に定義されているような式（Ｉ）の処方化合物またはその塩のアリコートを５０ｍＬバイアルへ入れ、凍結乾燥する。凍結乾燥に際しては、−４５℃でワンステップ凍結プロトコールを用いて組成物を凍結する。温度をアニーリングのために−１０℃に上げ、次いで低下させて−４５℃で凍結し、次いでほぼ３４００分かけて＋２５℃で一次乾燥させ、もし温度が５０℃になれば、工程を増やして二次乾燥を行う。一次乾燥および二次乾燥中の圧力は８０ミリトルに設定する。
（ｖｉｉｉ）凍結乾燥製剤ＩＩ
本明細書に定義されているような式（Ｉ）の処方化合物またはその塩のアリコートを５０ｍＬバイアルへ入れ、凍結乾燥する。凍結乾燥に際しては、−４５℃でワンステップ凍結プロトコールを用いて組成物を凍結する。温度をアニーリングのために−１０℃に上げ、次いで低下させて−４５℃で凍結し、次いでほぼ３４００分かけて＋２５℃で一次乾燥させ、もし温度が５０℃になれば、工程を増やして二次乾燥を行う。一次乾燥および二次乾燥中の圧力は８０ミリトルに設定する。
（ｉｘ）ｉｖ投与用凍結乾燥製剤ＩＩＩ
水酸化ナトリウムまたは塩酸でｐＨ４．５に調整された０．０２Ｍクエン酸緩衝液に１２．８６ｍｇ／ｍＬの濃度で１−シクロプロピル‐３‐［３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル］−尿素Ｌ‐乳酸塩を溶解することにより、水性緩衝液を調製する。
濾過により粒子状物質を除去して緩衝液を容器（例えば、クラス１ガラスバイアル）へ充填し、次いでこれを（例えば、Ｆｌｏｒｏｔｅｃストッパーにより）部分的に密封する。化合物および製剤が十分に安定であれば、適切な時間１２１℃でオートクレーブ処理することにより製剤を滅菌する。製剤がオートクレーブ処理に安定でなければ、適切なフィルターを用いて滅菌し、無菌条件下で無菌バイアルへ充填してもよい。適切なサイクルを用いて溶液をフリーズドライする、例えば：
凍結−２時間かけて−４０℃に冷却し、−４０℃で３時間維持する。
一次乾燥−８時間かけて−４０℃から−３０℃に上げ、−３０℃で７時間保ち、
二次乾燥−４時間かけて＋３０℃に上げ、＋３０℃で８〜１０時間保つ。
フリーズドライサイクルの完了時に、バイアルを窒素で大気圧まで逆充填し、栓で塞ぎ、固定（例えば、アルミニウムクリンプで）する。静脈内投与の場合、フリーズドライされた固形物は０．９％塩水または５％デキストロースのような薬学上許容される賦形剤で再調製できる。溶液はそのまま投与しても、または投与前に注入バッグ（０．９％塩水または５％デキストロースのような薬学上許容される賦形剤を含有）へ注入してもよい。
（ｘ）皮下注射製剤
皮下投与用組成物は、式（Ｉ）の化合物を医薬級のコーン油と混合して濃度５ｍｇ／ｍｌとすることにより製造される。この組成物を滅菌し、適当な容器に充填する。
（ｘｉ）ｉｖ投与用凍結乾燥製剤ＩＶ
２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液または２Ｍ塩酸水溶液でｐＨ４．５に調整された無水クエン酸緩衝液に２０ｍｇ／ｍＬの濃度で１３ｍｇ／ｍｌの１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素Ｌ−乳酸塩を溶解することにより、水性緩衝液を調製する。
ｐＨ４．５のほぼ１００ｍＭ（例えば、１０４ｍＭ）クエン酸塩緩衝液中の５ｍｌの１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素Ｌ−乳酸塩の溶液（５２ｍｇの遊離塩基に相当する６５．９ｍｇのＬ−乳酸塩を含有）を、２０ｍｌタイプ１ガラスバイアルに充填し凍結乾燥する。この溶液を適切なサイクルを用いてフリーズドライする。例えば：
Figure 0005474354
フリーズドライサイクルの完了時に、バイアルを窒素で大気圧程度（例えば、９５％をわずかに下回る）まで逆充填し、栓で塞ぎ、固定（例えば、アルミニウムクリンプで）する。静脈内投与の場合、フリーズドライされた固形物は０．９％塩水または５％デキストロースのような薬学上許容される賦形剤で再調製できる。溶液はそのまま投与しても、または投与前に注入バッグ（０．９％塩水または５％デキストロースのような薬学上許容される賦形剤を含有）へ注入してもよい。
均等
上記の実施例は、本発明を説明する目的で記載したものであり、本発明の範囲を何ら限定するものではない。上記に記載し、また、実施例で示す本発明の特定の実施態様に対して、本発明の原理から逸脱することなく、多くの改変および変更をなし得ることは容易に明らかである。このような改変および変更は総て本願に含まれるものとする。
図１は、実施例６９に記載されているような１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の遊離塩基二水和物の熱振動楕円体図である。 図２は、実施例６９に記載されているような１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の遊離塩基二水和物のパッキング図を示す。 図３は、実施例７０に記載されているような１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の遊離塩基の粉末Ｘ線回折パターンを示す。 図４は、実施例７１に記載されているような１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素のＬ−乳酸塩の熱振動楕円体図である。 図５は、実施例７１に記載されているような１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素のＬ−乳酸塩のパッキング図である。 図６は、実施例７２に記載されているような１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素のＬ−乳酸塩の出発および安定性試験試料の粉末Ｘ線回折パターンを示す。 図７は、実施例７２に記載されているような１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の遊離塩基（ＦＢ１）の出発および安定性試験試料の粉末Ｘ線回折パターンを示す。 図８は、実施例７２に記載されているような１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素の遊離塩基二水和物（ＦＢ２）の出発および安定性試験試料の粉末Ｘ線回折パターンを示す。

Claims (3)

  1. ＪＡＫキナーゼが媒介する病態または症状の予防または治療用の薬剤であって、化合物１−シクロプロピル−３−［３−（５−モルホリン−４−イルメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−尿素もしくはその塩を含んでなり、かつ該病態または症状が、真性多血症、本態性血小板増加症、特発性骨髄線維症、骨髄様化生を伴う骨髄線維症、若年性骨髄単球性白血病、慢性骨髄単球性白血病、巨核球性白血病、巨核球性急性骨髄性白血病、フィラデルフィア染色体陰性慢性骨髄性白血病、およびイマチニブ耐性慢性骨髄性白血病からなる群から選択される、薬剤。
  2. 前記化合物が塩である、請求項１に記載の薬剤。
  3. 前記塩がＬ−乳酸塩である、請求項２に記載の薬剤。
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