JP5368096B2 - 未分化型胃癌に対する抗腫瘍剤 - Google Patents

Description

本発明は、線維芽細胞増殖因子レセプター２（Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ２、以下、「ＦＧＦＲ２」と称する場合がある）のキナーゼ活性を阻害する活性を有する物質（以下、「ＦＧＦＲ２阻害物質」と称する場合がある）を含有する未分化型胃癌に対する治療剤、治療方法、前記治療剤の製造のためのＦＧＦＲ２阻害物質の使用および前記治療剤のためのＦＧＦＲ２阻害物質に関するものである。
また、本発明は、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含む生体に対して投与するための、ＦＧＦＲ２阻害物質を含有する医薬組成物、前記生体に対してＦＧＦＲ２阻害物質を有効量投与することを特徴とする疾患の治療方法、前記医薬組成物の製造のためのＦＧＦＲ２阻害物質の使用および
前記医薬組成物のためのＦＧＦＲ２阻害物質に関するものである。
さらに、本発明は、ＦＧＦＲ２阻害剤に関するものである。
また、本発明は、細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを指標として、患者に対するＦＧＦＲ２阻害物質の効果を予測する方法に関するものである。

胃癌は、癌による死亡原因の主要な癌種の一つである。胃癌は、病理組織学的に分化型胃癌（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）と未分化型胃癌（ｕｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）とに分類され、未分化型胃癌には、低分化腺癌（ｐｏｏｒｌｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ）、印環細胞癌（ｓｉｇｎｅｔ−ｒｉｎｇ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、粘液癌（ｍｕｃｉｎｏｕｓ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）などが含まれる。
未分化型胃癌では、癌細胞が拡散しやすく、また、線維化してスキルス胃癌（ｓｃｉｒｒｈｏｕｓ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）となりやすい。そして、未分化型胃癌は、特に若年層において観察され、浸潤性増殖および転移を起こし、予後不良となることが知られている（Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ．２（８），１３７３−１３８１，１９９６）。
ＦＧＦＲ２（Ｋ−ｓａｍともいう）は、びまん性胃癌（ｄｉｆｆｕｓｅ−ｔｙｐｅ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）、すなわち、未分化型胃癌において、増幅されており、癌の悪性化に関与していることが知られている（Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ．２（８），１３７３−１３８１，１９９６，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ．１２７，２０７−２１６，２００１）。そして、ＦＧＦＲ２遺伝子は、未分化型胃癌の３３％の患者において、増幅されており（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ．１２７，２０７−２１６，２００１）、ＦＧＦＲ２は、未分化型胃癌の約５０％の患者において、陽性であったことが報告されている（Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ．２（８），１３７３−１３８１，１９９６）。
ＦＧＦＲ２遺伝子は、ＮＩＨ３Ｔ３細胞を形質転換させることができ、形質転換した細胞は、ヌードマウスにおいて造腫瘍性を示したことが報告されている（Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ．５４，３２３７−３２４１，１９９４）。また、ＦＧＦＲ２のＣ末欠失体は、形質転換活性が強く、そして、未分化型胃癌細胞株に主に発現していることが報告されている（Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ．２（８），１３７３−１３８１，１９９６，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ．５４，３２３７−３２４１，１９９４）。例えば、７６９番目のチロシン以降を欠失したＦＧＦＲ２は、高い形質転換活性を有していることが報告されている（Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ．５４，３２３７−３２４１，１９９４）。
また、ＦＧＦＲ２遺伝子は、低分化型胃癌、特にスキルス胃癌において増幅されており、チロシン残基７８０，７８４，８１３を含むＣ末の欠失したＦＧＦＲ２タンパク質は、スキルス胃癌において、特に発現していることが報告されている（Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ．５９（２４），６０８０−６０８６，１９９９）。そして、活性化されたＦＧＦＲ２の増幅は、スキルス胃癌の腫瘍増殖に寄与していることが報告されている（Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ．５９（２４），６０８０−６０８６，１９９９）。
ＦＧＦＲ２阻害物質であるジフェニルアミン誘導体は、ヒトスキルス胃癌細胞株の細胞増殖を用量依存的に抑制し、ヒトスキルス胃癌細胞株皮下移植モデルにおいて、抗腫瘍効果を示したことが報告されている（Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ ａｎｄ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｌｅｔｔｅｒｓ．１４（４），８７５−８７９，２００４）。
また、ＦＧＦＲ２阻害物質である４−［（４−フルオロ−２−メチルインドール−５−イル）オキシ］−６−メトキシ−７−［３−（ピロリジン−１−イル）プロポキシ］キナゾリンは、Ｋ−ｓａｍを過剰発現している胃癌に対して有効であることが示唆されている（Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ．４７，８９０，２００６）。
このように、ＦＧＦＲ２阻害物質は、未分化型胃癌、好ましくは低分化腺癌、印環細胞癌、粘液癌およびスキルス胃癌に対して、増殖抑制作用および抗腫瘍効果を示すことが示唆されている。
ここで、血管新生阻害物質として、一般式（Ｉ）で表される化合物が知られている（国際公開第０２／３２８７２号パンフレット、国際公開第２００４／０８０４６２号パンフレットおよび国際公開第２００５／０６３７１３号パンフレット）。しかしながら、一般式（Ｉ）で表される化合物がＦＧＦＲ２阻害活性を有することについては一切報告されていない。

本発明は、このような状況に鑑みてなされたものであり、その解決しようとする課題は、未分化型胃癌に対する治療剤および治療方法を提供すること、ならびに、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含む生体に対してより有効に効果を発揮する医薬組成物および治療方法を提供することにある。
また、本発明の解決しようとする課題は、ＦＧＦＲ２阻害物質の効果を予測する方法を提供することにある。

本発明者らは、上記課題を解決するため、鋭意検討を重ねた結果、一般式（Ｉ）で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物がＦＧＦＲ２阻害活性を有することを見出した。そして、一般式（Ｉ）で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物は、未分化型胃癌に対して、より有効に効果を発揮することを見出した。また、一般式（Ｉ）で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物は、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含む生体に対して、より有効に効果を発揮することを見出した。さらに、一般式（Ｉ）で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物の効果は、細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを指標とすることにより予測することができることを見出した。
すなわち本発明は、以下に関する。
（１）一般式（Ｉ）で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物を含有する未分化型胃癌に対する治療剤。
（２）ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含む生体に対して投与するための、一般式（Ｉ）で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物を含有する医薬組成物。
（３）一般式（Ｉ）で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物を患者に有効量投与することを特徴とする、未分化型胃癌の治療方法。
（４）一般式（Ｉ）で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物を患者に有効量投与することを特徴とする、ＦＧＦＲ２の活性化阻害方法。
（５）ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含む生体に対して一般式（Ｉ）で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物を有効量投与することを特徴とする疾患の治療方法。
（６）未分化型胃癌に対する治療剤の製造のための一般式（Ｉ）で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物の使用。
（７）ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含む生体に対して投与するための医薬組成物の製造のための一般式（Ｉ）で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物の使用。
（８）未分化型胃癌に対する治療剤のための一般式（Ｉ）で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物。
（９）ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含む生体に対して投与するための医薬組成物のための一般式（Ｉ）で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物。
（１０）一般式（Ｉ）で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物を含有するＦＧＦＲ２阻害剤。
（１１）細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを指標として、患者が一般式（Ｉ）で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物に対して高感受性であるか否かを予測する方法。
（１２）細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを測定することを含む、一般式（Ｉ）で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物に対する細胞の感受性を分析する方法。
（１３）細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを測定することを含む、一般式（Ｉ）で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物に対して高感受性を示す細胞を選択する方法。
（１４）細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを測定することを含む、一般式（Ｉ）で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物に対して高感受性を示す患者を選択する方法。
（１５）細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを測定することにより、一般式（Ｉ）で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物に対する感受性を分析し、得られる結果により患者を分類する方法。
（１６）細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを測定し、得られる測定結果から、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを有する患者を選択することを含む、一般式（Ｉ）で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物の投与対象となる患者を選択する方法。
（１７）細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを測定することを含む、患者に対する一般式（Ｉ）で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物の治療効果を予測する方法。
（１８）患者の一般式（Ｉ）で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物に対する感受性の程度を予測するために、当該患者由来の細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを測定する方法。
前記一般式（Ｉ）で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物は、以下のとおりである。

［式（Ｉ）中、Ｒ^１は、式−Ｖ^１−Ｖ^２−Ｖ^３（式中、Ｖ^１は、置換基を有していてもよいＣ_１−６アルキレン基を意味する；Ｖ^２は、単結合、酸素原子、硫黄原子、カルボニル基、スルフィニル基、スルホニル基、式−ＣＯＮＲ^６−で表される基、式−ＳＯ_２ＮＲ^６−で表される基、式−ＮＲ^６ＳＯ_２−で表される基、式−ＮＲ^６ＣＯ−で表される基または式−ＮＲ^６−で表される基を意味する（式中、Ｒ^６は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ_１−６アルキル基または置換基を有していてもよいＣ_３−８シクロアルキル基を意味する。）；Ｖ^３は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ_１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ_２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ_３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ_６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｒ^２は、シアノ基、置換基を有していてもよいＣ_１−６アルコキシ基、カルボキシル基、置換基を有していてもよいＣ_２−７アルコキシカルボニル基または式−ＣＯＮＶ^ａ１１Ｖ^ａ１２（式中、Ｖ^ａ１１は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ_１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ_２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ_３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ_６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する；Ｖ^ａ１２は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ_１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ_２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ_３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ_６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、水酸基、置換基を有していてもよいＣ_１−６アルコキシ基または置換基を有していてもよいＣ_３−８シクロアルコキシ基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｙ^１は、式

（式中、Ｒ^７およびＲ^８は、それぞれ独立して水素原子、ハロゲン原子、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、置換基を有していてもよいＣ_１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ_３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ_１−６アルコキシ基、置換基を有していてもよいＣ_１−６アルキルチオ基、ホルミル基、置換基を有していてもよいＣ_２−７アシル基、置換基を有していてもよいＣ_２−７アルコキシカルボニル基または式−ＣＯＮＶ^ｄ１Ｖ^ｄ２（式中、Ｖ^ｄ１およびＶ^ｄ２は、それぞれ独立して水素原子または置換基を有していてもよいＣ_１−６アルキル基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｗ^１およびＷ^２は、それぞれ独立して置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する。）で表される基を意味する；
Ｒ^３およびＲ^４は、それぞれ独立して水素原子、置換基を有していてもよいＣ_１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ_２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ_３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ_２−７アシル基または置換基を有していてもよいＣ_２−７アルコキシカルボニル基を意味する；
Ｒ^５は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ_１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ_２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ_３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ_６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する］で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物。
また、本発明は、好ましくは以下に関する。
（１９）４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物を含有する未分化型胃癌に対する治療剤。
（２０）ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含む生体に対して投与するための、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物を含有する医薬組成物。
（２１）４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物を患者に有効量投与することを特徴とする、未分化型胃癌の治療方法。
（２２）４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物を患者に有効量投与することを特徴とする、ＦＧＦＲ２の活性化阻害方法。
（２３）ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含む生体に対して４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物を有効量投与することを特徴とする疾患の治療方法。
（２４）未分化型胃癌に対する治療剤の製造のための４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物の使用。
（２５）ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含む生体に対して投与するための医薬組成物の製造のための４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物の使用。
（２６）未分化型胃癌に対する治療剤のための４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物。
（２７）ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含む生体に対して投与するための医薬組成物のための４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物。
（２８）４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物を含有するＦＧＦＲ２阻害剤。
（２９）細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを指標として、患者が４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物に対して高感受性であるか否かを予測する方法。
（３０）細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを測定することを含む、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物に対する細胞の感受性を分析する方法。
（３１）細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを測定することを含む、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物に対して高感受性を示す細胞を選択する方法。
（３２）細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを測定することを含む、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物に対して高感受性を示す患者を選択する方法。
（３３）細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを測定することにより、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物に対する感受性を分析し、得られる結果により患者を分類する方法。
（３４）細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを測定し、得られる測定結果から、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを有する患者を選択することを含む、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物の投与対象となる患者を選択する方法。
（３５）細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを測定することを含む、患者に対する４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物の治療効果を予測する方法。
（３６）患者の４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物に対する感受性の程度を予測するために、当該患者由来の細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを測定する方法。
また、本発明は、以下に関する。
（３７）ＦＧＦＲ２阻害物質を含有する未分化型胃癌に対する治療剤。
（３８）ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含む生体に対して投与するためのＦＧＦＲ２阻害物質を含有する医薬組成物。
（３９）ＦＧＦＲ２阻害物質を患者に有効量投与することを特徴とする、未分化型胃癌の治療方法。
（４０）ＦＧＦＲ２阻害物質を患者に有効量投与することを特徴とする、ＦＧＦＲ２の活性化阻害方法。
（４１）ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含む生体に対してＦＧＦＲ２阻害物質を有効量投与することを特徴とする疾患の治療方法。
（４２）未分化型胃癌に対する治療剤の製造のためのＦＧＦＲ２阻害物質の使用。
（４３）ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含む生体に対して投与するための医薬組成物の製造のためのＦＧＦＲ２阻害物質の使用。
（４４）未分化型胃癌に対する治療剤のためのＦＧＦＲ２阻害物質。
（４５）ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含む生体に対して投与するための医薬組成物のためのＦＧＦＲ２阻害物質。
（４６）ＦＧＦＲ２阻害物質を含有するＦＧＦＲ２阻害剤。
（４７）細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを指標として、患者がＦＧＦＲ２阻害物質に対して高感受性であるか否かを予測する方法。
（４８）細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを測定することを含む、ＦＧＦＲ２阻害物質に対する細胞の感受性を分析する方法。
（４９）細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを測定することを含む、ＦＧＦＲ２阻害物質に対して高感受性を示す細胞を選択する方法。
（５０）細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを測定することを含む、ＦＧＦＲ２阻害物質に対して高感受性を示す患者を選択する方法。
（５１）細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを測定することにより、ＦＧＦＲ２阻害物質に対する感受性を分析し、得られる結果により患者を分類する方法。
（５２）細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを測定し、得られる測定結果から、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを有する患者を選択することを含む、ＦＧＦＲ２阻害物質の投与対象となる患者を選択する方法。
（５３）細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを測定することを含む、患者に対するＦＧＦＲ２阻害物質の治療効果を予測する方法。
（５４）患者のＦＧＦＲ２阻害物質に対する感受性の程度を予測するために、当該患者由来の細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを測定する方法。
前記ＦＧＦＲ２阻害物質は、上記一般式（Ｉ）で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物を挙げることができる。
また、前記ＦＧＦＲ２阻害物質は、
Ｎ−（３−トリフルオロメチル−４−クロロフェニル）−Ｎ’−（４−（２−メチルカルバモイルピリジン−４−イル）オキシフェニル）ウレア、
６−［２−（メチルカルバモイル）フェニルスルファニル］−３−Ｅ−［２−（ピリジン−２−イル）エテニル］インダゾール、
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボキシリックアシッド（２−ジエチルアミノエチル）アミド
および
Ｎ−｛２−クロロ−４−［（６，７−ジメトキシ−４−キノリル）オキシ］フェニル｝−Ｎ’−（５−メチル−３−イソキサゾリル）ウレア
からなる群から選択される少なくとも一つの化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物を挙げることができる。

本発明により、ＦＧＦＲ２阻害物質を含有する未分化型胃癌に対する治療剤、治療方法、前記治療剤の製造のためのＦＧＦＲ２阻害物質の使用および前記治療剤のためのＦＧＦＲ２阻害物質が提供される。
また、本発明により、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含む生体に対して投与するための、ＦＧＦＲ２阻害物質を含有する医薬組成物、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含む生体に対してＦＧＦＲ２阻害物質を有効量投与することを特徴とする疾患の治療方法、前記医薬組成物の製造のためのＦＧＦＲ２阻害物質の使用および前記医薬組成物のためのＦＧＦＲ２阻害物質が提供される。
さらに、本発明により、ＦＧＦＲ２阻害剤が提供される。
また、本発明により、ＦＧＦＲ２阻害物質の効果を予測する方法が提供される。
より詳細には、ＦＧＦＲ２阻害物質の効果は、細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを指標とすることにより予測することが可能となった。
本発明に係る予測方法により、患者に化合物を投与することなく、効果を予測することが可能となるため、当該化合物による効果をより期待できる患者を選択することができ、患者のＱＯＬに貢献することが可能となった。

図１は、ヒト未分化型胃癌細胞株培養下におけるＦＧＦＲ２の活性化（リン酸化を指標）に対する４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドの効果を示したものである。（Ａ）ＫＡＴＯ−ＩＩＩ，（Ｂ）ＳＮＵ−１６，（Ｃ）ＨＳＣ−３９
図２は、ヒト未分化型胃癌細胞株ＨＳＣ−３９培養下におけるアポトーシス（ＰＡＲＰまたはｃａｓｐａｓｅ−３の断片化を指標）に対する４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドの効果を示したものである。
図３は、ヒト未分化型胃癌細胞株皮下移植モデルにおける４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドの抗腫瘍効果を示したものである。（Ａ）ＫＡＴＯ−ＩＩＩ，（Ｂ）ＳＮＵ−１６，（Ｃ）ＨＳＣ−３９
図４は、ヒト未分化型胃癌細胞株皮下移植モデルにおける腫瘍組織内のＦＧＦＲ２の活性化（リン酸化を指標）に対する４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドの効果を示したものである。（Ａ）ＳＮＵ−１６，（Ｂ）ＨＳＣ−３９

以下に本発明の実施の形態について説明する。以下の実施の形態は、本発明を説明するための例示であり、本発明をこの実施の形態にのみ限定する趣旨ではない。本発明は、その要旨を逸脱しない限り、さまざまな形態で実施をすることができる。
なお、本明細書において引用した全ての刊行物、例えば、先行技術文献および公開公報、特許公報その他の特許文献は、その全体が本明細書において参照として組み込まれる。本明細書は、本願優先権主張の基礎をなる特願２００６−２３０８１６号明細書の内容を包含する。
１．本発明の医薬組成物、治療剤および治療方法
（１）ＦＧＦＲ２
本発明において、ＦＧＦＲ２とは、配列番号：２（ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号：ＮＰ＿０７５２５９）で表されるアミノ酸配列のうち第２２番目から第８２２番目のアミノ酸配列と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含むポリペプチドを含むものである。また、配列番号：２で表されるアミノ酸配列を含むポリペプチドは、例えば、配列番号：１（ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号：ＮＭ＿０２２９７０の６４８番目から３１１６番目の塩基配列）で表される塩基配列を含むポリヌクレオチドによってコードされる。なお、配列番号：２で表されるアミノ酸配列からなるポリペプチドは、通常、プロセッシングを受けて成熟体（配列番号：２で表されるアミノ酸配列のうち第２２番目から第８２２番目のアミノ酸配列）となる。
配列番号：２で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２２番目のアミノ酸配列）と実質的に同一のアミノ酸配列を有するポリペプチドとしては、例えば、下記（ａ）〜（ｄ）からなる群より選択されるものが挙げられる：
（ａ）配列番号：２で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２２番目のアミノ酸配列）を含むポリペプチド、
（ｂ）配列番号：２で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２２番目のアミノ酸配列）において、１または複数個（例えば、１個または数個）のアミノ酸が、欠失、置換もしくは付加され、またはそれらの組合せにより変異されたアミノ酸配列を含み、かつ、ＦＧＦＲ２と実質的に同じ活性を有するポリペプチド、
（ｃ）配列番号：１で表される塩基配列に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチドとストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチドであって、ＦＧＦＲ２と実質的に同じ活性を有するポリペプチド、
（ｄ）配列番号：２で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２２番目のアミノ酸配列）に対して９０％以上、好ましくは約９５％以上、より好ましくは約９８％以上の同一性（相同性という場合もある）を有するアミノ酸配列からなるポリペプチドであって、ＦＧＦＲ２と実質的に同じ活性を有するポリペプチド。
ここで、「ＦＧＦＲ２と実質的に同じ活性を有する」とは、リガンド（例えば、ＦＧＦなど）が結合したときに引き起こされる細胞内シグナルの少なくとも一つが、配列番号：２に記載のアミノ酸配列（第２２番目から第８２２番目のアミノ酸配列）からなるタンパク質によるシグナルの一つと同一であり、かつ、当該細胞内シグナルの活性化の程度が配列番号：２に記載のアミノ酸配列（第２２番目から第８２２番目のアミノ酸配列）からなるタンパク質と比較して同程度であることを示す。また、「同程度」とは、例えば、リガンド（例えば、ＦＧＦなど）が結合したときに引き起こされる細胞内シグナルの活性化の程度が、配列番号：２で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２２番目のアミノ酸配列）からなるタンパク質が有する細胞内シグナルの活性化の程度の１０％以上、好ましくは３０％以上有する場合をいい、このとき実質的に同じ活性を有するということができる。リガンドが結合したときに引き起こされる細胞内シグナルとしては、例えば、ＦＧＦＲ２のリン酸化、ＦＧＦＲ２リン酸化に起因するＲａｆ、ＭＥＫ、ＥＲＫ１およびＥＲＫ２のリン酸化、ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｉｎｏｓｉｔｏｌ ３ ｋｉｎａｓｅのリン酸化、Ａｋｔのリン酸化、ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ Ｃ−_Ｙのリン酸化、ｉｎｏｓｉｔｏｌ １，４，５−ｔｒｉｓｐｈｏｓｐｈａｔｅ（ＩＰ３）の増加、ｄｉａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌ（ＤＡＧ）の増加などが挙げられる。
リガンドが結合したときに引き起こされる細胞内シグナルの活性の測定方法は、免疫沈降法、ウエスタンブロットなどの慣用の方法にしたがって測定することができる。
配列番号：２で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２２番目のアミノ酸配列）において、１または複数個（例えば、１個または数個）のアミノ酸が、欠失、置換もしくは付加され、またはそれらの組合せにより変異されたアミノ酸配列としては、例えば、
（ｉ）配列番号：２で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２２番目のアミノ酸配列）中の１〜９個（例えば、１〜５個、好ましくは１〜３個、より好ましくは１〜２個、さらに好ましくは１個）のアミノ酸が欠失したアミノ酸配列、
（ｉｉ）配列番号：２で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２２番目のアミノ酸配列）に１〜９個（例えば、１〜５個、好ましくは１〜３個、より好ましくは１〜２個、さらに好ましくは１個）のアミノ酸が付加したアミノ酸配列、
（ｉｉｉ）配列番号：２で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２２番目のアミノ酸配列）中の１〜９個（例えば、１〜５個、好ましくは１〜３個、より好ましくは１〜２個、さらに好ましくは１個）のアミノ酸が他のアミノ酸で置換されたアミノ酸配列、
（ｉｖ）上記（ｉ）〜（ｉｉｉ）の組合せにより変異されたアミノ酸配列、
などが挙げられる。
ここで、アミノ酸の「欠失」は、配列中のアミノ酸残基の一つ以上が欠失した変異を意味し、欠失には、アミノ酸配列の端からアミノ酸残基が欠失したものおよびアミノ酸配列の途中のアミノ酸残基が欠失したものが含まれる。
ここで、アミノ酸の「付加」は、配列中にアミノ酸残基の一つ以上が付加された変異を意味し、付加には、アミノ酸配列の端にアミノ酸残基が付加されたものおよびアミノ酸配列の途中にアミノ酸残基を付加されたものが含まれる。なお途中に付加されたものは、「挿入」ということもできる。
ここで、アミノ酸の「置換」は、配列中のアミノ酸残基の一つ以上が、異なる種類のアミノ酸残基に変えられた変異を意味する。このような置換によりＦＧＦＲ２のアミノ酸配列を改変する場合、タンパク質の機能を保持するためには、保存的な置換を行うことが好ましい。保存的な置換とは、置換前のアミノ酸と似た性質のアミノ酸をコードするように配列を変化させることである。アミノ酸の性質は、例えば、非極性アミノ酸（Ａｌａ，Ｉｌｅ，Ｌｅｕ，Ｍｅｔ，Ｐｈｅ，Ｐｒｏ，Ｔｒｐ，Ｖａｌ）、非荷電性アミノ酸（Ａｓｎ，Ｃｙｓ，Ｇｌｎ，Ｇｌｙ，Ｓｅｒ，Ｔｈｒ，Ｔｙｒ）、酸性アミノ酸（Ａｓｐ，Ｇｌｕ）、塩基性アミノ酸（Ａｒｇ，Ｈｉｓ，Ｌｙｓ）、中性アミノ酸（Ａｌａ，Ａｓｎ，Ｃｙｓ，Ｇｌｎ，Ｇｌｙ，Ｉｌｅ，Ｌｅｕ，Ｍｅｔ，Ｐｈｅ，Ｐｒｏ，Ｓｅｒ，Ｔｈｒ，Ｔｒｐ，Ｔｙｒ，Ｖａｌ）、脂肪族アミノ酸（Ａｌａ，Ｇｌｙ）、分枝アミノ酸（Ｉｌｅ，Ｌｅｕ，Ｖａｌ）、ヒドロキシアミノ酸（Ｓｅｒ，Ｔｈｒ）、アミド型アミノ酸（Ｇｌｎ，Ａｓｎ）、含硫アミノ酸（Ｃｙｓ，Ｍｅｔ）、芳香族アミノ酸（Ｈｉｓ，Ｐｈｅ，Ｔｒｐ，Ｔｙｒ）、複素環式アミノ酸（Ｈｉｓ，Ｔｒｐ）、イミノ酸（Ｐｒｏ，４Ｈｙｐ）等に分類することができる。
従って、例えば、非極性アミノ酸同士、あるいは非荷電性アミノ酸同士で置換させることが好ましい。中でも、Ａｌａ、Ｖａｌ、ＬｅｕおよびＩｌｅの間、ＳｅｒおよびＴｈｒの間、ＡｓｐおよびＧｌｕの間、ＡｓｎおよびＧｌｎの間、ＬｙｓおよびＡｒｇの間、ＰｈｅおよびＴｙｒの間の置換は、タンパク質の性質を保持する置換として好ましい。変異されるアミノ酸の数および部位は特に制限されない。
配列番号：２で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２２番目のアミノ酸配列）と実質的に同一のアミノ酸配列を有するポリペプチドとしては、上述のように、配列番号：１で表される塩基配列に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチドとストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチドであって、ＦＧＦＲ２と実質的に同じ活性を有するポリペプチドが挙げられる。
本明細書において、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドとは、具体的には、ＦＡＳＴＡ、ＢＬＡＳＴ、Ｓｍｉｔｈ−Ｗａｔｅｒｍａｎ〔Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍ．，１６４，７６５（１９８８）〕などの相同性検索ソフトウェアにより、デフォルト（初期設定）のパラメーターを用いて計算したときに、例えば配列番号：１で表される塩基配列と少なくとも９０％以上、好ましくは９５％以上、より好ましくは９７％以上、さらに好ましくは９８％以上、さらにより好ましくは９９％以上の同一性を有する塩基配列を含むポリヌクレオチドが挙げられる。またここで、ストリンジェントな条件としては、例えば、「２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、５０℃」、「２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、４２℃」、「１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、３７℃」、よりストリンジェントな条件としては、例えば「２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、６５℃」、「０．５×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、４２℃」、「０．２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、６５℃」等の条件を挙げることができる。
ハイブリダイゼーションは、公知の方法に従って行うことができる。また、市販のライブラリーを使用する場合、添付の使用説明書に記載の方法に従って行うことができる。
配列番号：１で表される塩基配列に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチドとストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドとしては、例えば、配列番号：１で表される塩基配列と９０％以上、好ましくは９５％以上、より好ましくは９８％以上の同一性を有する塩基配列を含むポリヌクレオチドが挙げられる。
配列番号：１で表される塩基配列に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチドとストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドとしては、例えば、配列番号：１で表される塩基配列において１個または複数個（例えば１個または数個）の核酸に欠失、置換または付加等の変異が生じた塩基配列が挙げられる。
配列番号：１で表される塩基配列に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチドとストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドとしては、例えば、
（ｉ）配列番号：１で表される塩基配列中の１〜９個（例えば、１〜５個、好ましくは１〜３個、より好ましくは１〜２個、さらに好ましくは１個）の核酸が欠失した塩基配列、
（ｉｉ）配列番号：１で表される塩基配列に１〜９個（例えば、１〜５個、好ましくは１〜３個、より好ましくは１〜２個、さらに好ましくは１個）の核酸が付加した塩基配列、
（ｉｉｉ）配列番号：１で表される塩基配列中の１〜９個（例えば、１〜５個、好ましくは１〜３個、より好ましくは１〜２個、さらに好ましくは１個）の核酸が他の核酸で置換された塩基配列、
（ｉｖ）上記（ｉ）〜（ｉｉｉ）の組合せにより変異された塩基配列
などが挙げられる。
本発明において、ＦＧＦＲ２とは、また配列番号：４（ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号：ＮＰ＿０００１３２）で表されるアミノ酸配列のうち第２２番目から第８２１番目のアミノ酸配列と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含むポリペプチドを含むものである。また、配列番号：４で表されるアミノ酸配列を含むポリペプチドは、例えば、配列番号：３（ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号：ＮＭ＿０００１４１の６４８番目から３１１３番目の塩基配列）で表される塩基配列を含むポリヌクレオチドによってコードされる。なお、配列番号：４で表されるアミノ酸配列からなるポリペプチドは、通常、プロセッシングを受けて成熟体（配列番号：４で表されるアミノ酸配列のうち第２２番目から第８２１番目のアミノ酸配列）となる。
配列番号：４で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２１番目のアミノ酸配列）と実質的に同一のアミノ酸配列を有するポリペプチドとしては、例えば、下記（ａ）〜（ｄ）からなる群より選択されるものが挙げられる：
（ａ）配列番号：４で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２１番目のアミノ酸配列）を含むポリペプチド、
（ｂ）配列番号：４で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２１番目のアミノ酸配列）において、１または複数個（例えば、１個または数個）のアミノ酸が、欠失、置換もしくは付加され、またはそれらの組合せにより変異されたアミノ酸配列を含み、かつ、ＦＧＦＲ２と実質的に同じ活性を有するポリペプチド、
（ｃ）配列番号：３で表される塩基配列に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチドとストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチドであって、ＦＧＦＲ２と実質的に同じ活性を有するポリペプチド、
（ｄ）配列番号：４で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２１番目のアミノ酸配列）に対して９０％以上、好ましくは約９５％以上、より好ましくは約９８％以上の同一性（相同性という場合もある）を有するアミノ酸配列からなるポリペプチドであって、ＦＧＦＲ２と実質的に同じ活性を有するポリペプチド。
ここで、「ＦＧＦＲ２と実質的に同じ活性を有する」とは、リガンド（例えば、ＦＧＦなど）が結合したときに引き起こされる細胞内シグナルの少なくとも一つが、配列番号：４に記載のアミノ酸配列（第２２番目から第８２１番目のアミノ酸配列）からなるタンパク質によるシグナルの一つと同一であり、かつ、当該細胞内シグナルの活性化の程度が配列番号：４に記載のアミノ酸配列（第２２番目から第８２１番目のアミノ酸配列）からなるタンパク質と比較して同程度であることを示す。また、「同程度」とは、例えば、リガンド（例えば、ＦＧＦなど）が結合したときに引き起こされる細胞内シグナルの活性化の程度が、配列番号：４で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２１番目のアミノ酸配列）からなるタンパク質が有する細胞内シグナルの活性化の程度の１０％以上、好ましくは３０％以上有する場合をいい、このとき実質的に同じ活性を有するということができる。リガンドが結合したときに引き起こされる細胞内シグナルとしては、例えば、ＦＧＦＲ２のリン酸化、ＦＧＦＲ２リン酸化に起因するＲａｆ、ＭＥＫ、ＥＲＫ１およびＥＲＫ２のリン酸化、ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｉｎｏｓｉｔｏｌ ３ ｋｉｎａｓｅのリン酸化、Ａｋｔのリン酸化、ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ Ｃ−_Ｙのリン酸化、ｉｎｏｓｉｔｏｌ １，４，５−ｔｒｉｓｐｈｏｓｐｈａｔｅ（ＩＰ３）の増加、ｄｉａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌ（ＤＡＧ）の増加などが挙げられる。
リガンドが結合したときに引き起こされる細胞内シグナルの活性の測定方法は、免疫沈降法、ウエスタンブロットなどの慣用の方法にしたがって測定することができる。
配列番号：４で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２１番目のアミノ酸配列）において、１または複数個（例えば、１個または数個）のアミノ酸が、欠失、置換もしくは付加され、またはそれらの組合せにより変異されたアミノ酸配列としては、例えば、
（ｉ）配列番号：４で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２１番目のアミノ酸配列）中の１〜９個（例えば、１〜５個、好ましくは１〜３個、より好ましくは１〜２個、さらに好ましくは１個）のアミノ酸が欠失したアミノ酸配列、
（ｉｉ）配列番号：４で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２１番目のアミノ酸配列）に１〜９個（例えば、１〜５個、好ましくは１〜３個、より好ましくは１〜２個、さらに好ましくは１個）のアミノ酸が付加したアミノ酸配列、
（ｉｉｉ）配列番号：４で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２１番目のアミノ酸配列）中の１〜９個（例えば、１〜５個、好ましくは１〜３個、より好ましくは１〜２個、さらに好ましくは１個）のアミノ酸が他のアミノ酸で置換されたアミノ酸配列、
（ｉｖ）上記（ｉ）〜（ｉｉｉ）の組合せにより変異されたアミノ酸配列、
などが挙げられる。
ここで、アミノ酸の「欠失」は、配列中のアミノ酸残基の一つ以上が欠失した変異を意味し、欠失には、アミノ酸配列の端からアミノ酸残基が欠失したものおよびアミノ酸配列の途中のアミノ酸残基が欠失したものが含まれる。
ここで、アミノ酸の「付加」は、配列中にアミノ酸残基の一つ以上が付加された変異を意味し、付加には、アミノ酸配列の端にアミノ酸残基が付加されたものおよびアミノ酸配列の途中にアミノ酸残基を付加されたものが含まれる。なお途中に付加されたものは、「挿入」ということもできる。
ここで、アミノ酸の「置換」は、配列中のアミノ酸残基の一つ以上が、異なる種類のアミノ酸残基に変えられた変異を意味する。このような置換によりＦＧＦＲ２のアミノ酸配列を改変する場合、タンパク質の機能を保持するためには、保存的な置換を行うことが好ましい。保存的な置換とは、置換前のアミノ酸と似た性質のアミノ酸をコードするように配列を変化させることである。アミノ酸の性質は、例えば、非極性アミノ酸（Ａｌａ，Ｉｌｅ，Ｌｅｕ，Ｍｅｔ，Ｐｈｅ，Ｐｒｏ，Ｔｒｐ，Ｖａｌ）、非荷電性アミノ酸（Ａｓｎ，Ｃｙｓ，Ｇｌｎ，Ｇｌｙ，Ｓｅｒ，Ｔｈｒ，Ｔｙｒ）、酸性アミノ酸（Ａｓｐ，Ｇｌｕ）、塩基性アミノ酸（Ａｒｇ，Ｈｉｓ，Ｌｙｓ）、中性アミノ酸（Ａｌａ，Ａｓｎ，Ｃｙｓ，Ｇｌｎ，Ｇｌｙ，Ｉｌｅ，Ｌｅｕ，Ｍｅｔ，Ｐｈｅ，Ｐｒｏ，Ｓｅｒ，Ｔｈｒ，Ｔｒｐ，Ｔｙｒ，Ｖａｌ）、脂肪族アミノ酸（Ａｌａ，Ｇｌｙ）、分枝アミノ酸（Ｉｌｅ，Ｌｅｕ，Ｖａｌ）、ヒドロキシアミノ酸（Ｓｅｒ，Ｔｈｒ）、アミド型アミノ酸（Ｇｌｎ，Ａｓｎ）、含硫アミノ酸（Ｃｙｓ，Ｍｅｔ）、芳香族アミノ酸（Ｈｉｓ，Ｐｈｅ，Ｔｒｐ，Ｔｙｒ）、複素環式アミノ酸（Ｈｉｓ，Ｔｒｐ）、イミノ酸（Ｐｒｏ，４Ｈｙｐ）等に分類することができる。
従って、例えば、非極性アミノ酸同士、あるいは非荷電性アミノ酸同士で置換させることが好ましい。中でも、Ａｌａ、Ｖａｌ、ＬｅｕおよびＩｌｅの間、ＳｅｒおよびＴｈｒの間、ＡｓｐおよびＧｌｕの間、ＡｓｎおよびＧｌｎの間、ＬｙｓおよびＡｒｇの間、ＰｈｅおよびＴｙｒの間の置換は、タンパク質の性質を保持する置換として好ましい。変異されるアミノ酸の数および部位は特に制限されない。
配列番号：４で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２１番目のアミノ酸配列）と実質的に同一のアミノ酸配列を有するポリペプチドとしては、上述のように、配列番号：３で表される塩基配列に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチドとストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチドであって、ＦＧＦＲ２と実質的に同じ活性を有するポリペプチドが挙げられる。
本明細書において、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドとは、具体的には、ＦＡＳＴＡ、ＢＬＡＳＴ、Ｓｍｉｔｈ−Ｗａｔｅｒｍａｎ〔Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍ．，１６４，７６５（１９８８）〕などの相同性検索ソフトウェアにより、デフォルト（初期設定）のパラメーターを用いて計算したときに、例えば配列番号：１で表される塩基配列と少なくとも９０％以上、好ましくは９５％以上、より好ましくは９７％以上、さらに好ましくは９８％以上、さらにより好ましくは９９％以上の同一性を有する塩基配列を含むポリヌクレオチドが挙げられる。またここで、ストリンジェントな条件としては、例えば、「２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、５０℃」、「２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、４２℃」、「１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、３７℃」、よりストリンジェントな条件としては、例えば「２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、６５℃」、「０．５×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、４２℃」、「０．２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、６５℃」等の条件を挙げることができる。
ハイブリダイゼーションは、公知の方法に従って行うことができる。また、市販のライブラリーを使用する場合、添付の使用説明書に記載の方法に従って行うことができる。
配列番号：３で表される塩基配列に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチドとストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドとしては、例えば、配列番号：３で表される塩基配列と９０％以上、好ましくは９５％以上、より好ましくは９８％以上の同一性を有する塩基配列を含むポリヌクレオチドが挙げられる。
配列番号：３で表される塩基配列に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチドとストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドとしては、例えば、配列番号：３で表される塩基配列において１個または複数個（例えば１個または数個）の核酸に欠失、置換または付加等の変異が生じた塩基配列が挙げられる。
配列番号：３で表される塩基配列に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチドとストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドとしては、例えば、
（ｉ）配列番号：３で表される塩基配列中の１〜９個（例えば、１〜５個、好ましくは１〜３個、より好ましくは１〜２個、さらに好ましくは１個）の核酸が欠失した塩基配列、
（ｉｉ）配列番号：３で表される塩基配列に１〜９個（例えば、１〜５個、好ましくは１〜３個、より好ましくは１〜２個、さらに好ましくは１個）の核酸が付加した塩基配列、
（ｉｉｉ）配列番号：３で表される塩基配列中の１〜９個（例えば、１〜５個、好ましくは１〜３個、より好ましくは１〜２個、さらに好ましくは１個）の核酸が他の核酸で置換された塩基配列、
（ｉｖ）上記（ｉ）〜（ｉｉｉ）の組合せにより変異された塩基配列
などが挙げられる。
本明細書において、アミノ酸配列について「同一性」（相同性という場合もある）とは、比較される配列間において、各々の配列を構成するアミノ酸残基の一致の程度の意味で用いられる。比較対照のアミノ酸配列に対する所定のアミノ酸配列の有する同一性を計算する場合には、ギャップの存在およびアミノ酸の性質が考慮される（Ｗｉｌｂｕｒ，Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８０：７２６−７３０（１９８３））。同一性の計算には、市販のソフトであるＢＬＡＳＴ（Ａｌｔｓｃｈｕｌ：Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３−４１０（１９９０））、ＦＡＳＴＡ（Ｐｅａｓｒｏｎ：Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ １８３：６３−６９（１９９０））等を用いることができる。
「同一性」の数値はいずれも、当業者に公知の相同性検索プログラムを用いて算出される数値であればよく、例えば全米バイオテクノロジー情報センター（ＮＣＢＩ）の相同性アルゴリズムＢＬＡＳＴ（Ｂａｓｉｃ ｌｏｃａｌ ａｌｉｇｎｍｅｎｔ ｓｅａｒｃｈ ｔｏｏｌ）ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ＢＬＡＳＴ／においてデフォルト（初期設定）のパラメーターを用いることにより、算出することができる。
本発明において、ＦＧＦＲ２は、後述の変異型ＦＧＦＲ２を含むものである。
（２）ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞
本発明において、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞とは、例えば、正常細胞に比べてＦＧＦＲ２が相当量発現している細胞を挙げることができる。また、本発明において、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞とは、例えば、正常細胞に比べてＦＧＦＲ２が１．５倍以上、好ましくは２倍以上、より好ましくは３倍以上、さらに好ましくは４倍以上発現している細胞を挙げることができる。ここで、本発明において、「正常細胞」は、例えば、癌（例えば、未分化型胃癌など）細胞以外の細胞を挙げることができる。
本発明において、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞は、好ましくは未分化型胃癌の細胞であり、より好ましくは低分化腺癌、印環細胞癌、粘液癌およびスキルス胃癌からなる群から選択される少なくとも一つの細胞である。
ＦＧＦＲ２の発現量は、例えば、細胞に発現するＦＧＦＲ２のタンパク質および／またはｍＲＮＡを測定することにより解析することができる。
タンパク質の測定は、例えば、免疫化学的方法（例えば、免疫組織化学的方法、免疫沈降法、ウエスタンブロット、フローサイトメトリー、ＥＬＩＳＡ、ＲＩＡなど）、質量分析による方法などがあげられ、好ましくは免疫化学的方法があげられ、特に好ましくはフローサイトメトリーがあげられる。これらの方法は、常法に従い行うことができる。
一方、ｍＲＮＡの測定は、例えば、ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション、ノーザンブロット解析、ＤＮＡマイクロアレイ、ＲＴ−ＰＣＲ、定量的ＲＴ−ＰＣＲなどの方法があげられ、好ましくはＲＴ−ＰＣＲまたは定量的ＲＴ−ＰＣＲがあげられる。これらの方法は、常法に従い行うことができる。
（３）変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞
本発明において、変異型ＦＧＦＲ２は、野生型のＦＧＦＲ２のアミノ酸配列、例えば、配列番号：２で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２２番目のアミノ酸配列）または配列番号：４で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２１番目のアミノ酸配列）のうち、一もしくは数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加され、またはそれらの組み合わせにより変異されたアミノ酸配列を含むポリペプチドを挙げることができる。また、変異型ＦＧＦＲ２は、好ましくは、野生型のＦＧＦＲ２のアミノ酸配列、例えば、配列番号：２で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２２番目のアミノ酸配列）または配列番号：４で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２１番目のアミノ酸配列）のうち、一もしくは数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加され、またはそれらの組み合わせにより変異されたアミノ酸配列を含むポリペプチドであって、ＦＧＦＲ２と実質的に同じ活性を有するポリペプチドを挙げることができる。本発明において、変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞としては、上記のポリペプチドを発現している細胞を挙げることができる。
変異型ＦＧＦＲ２は、例えば、配列番号：２で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２２番目のアミノ酸配列）または配列番号：４で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２１番目のアミノ酸配列）のうち、２６７番目のセリンが他のアミノ酸、好ましくはプロリンに置換されたアミノ酸配列で表される配列を含むポリペプチドを挙げることができる（Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ．６１，３５４１−３５４３，２００１．）。
また、変異型ＦＧＦＲ２は、野生型のＦＧＦＲ２のアミノ酸配列、例えば、配列番号：２で表されるアミノ酸配列のうち第２２番目から第８２２番目のアミノ酸配列、または配列番号：４で表されるアミノ酸配列のうち第２２番目から第８２１番目のアミノ酸配列において、Ｃ末側の数個のアミノ酸が欠失された変異部位を含むポリペプチドを挙げることができる。変異型ＦＧＦＲ２は、例えば、配列番号：２で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２２番目のアミノ酸配列）において少なくとも８１３番目のＴｙｒ（第２２番目から第８２２番目のアミノ酸配列では第７９２番目のＴｙｒ）、好ましくは少なくとも７８４番目のＴｙｒ（第２２番目から第８２２番目のアミノ酸配列では第７６３番目のＴｙｒ）、より好ましくは少なくとも７８０番目のＴｙｒ（第２２番目から第８２２番目のアミノ酸配列では第７５９番目のＴｙｒ）、さらに好ましくは少なくとも７７０番目のＴｙｒ（第２２番目から第８２２番目のアミノ酸配列では第７４９番目のＴｙｒ）以降のアミノ酸配列が欠失されたアミノ酸配列を含むポリペプチドを挙げることができる。また配列番号：４で表されるアミノ酸配列（第２２番目から第８２１番目のアミノ酸配列）において少なくとも８１２番目のＴｙｒ（第２２番目から第８２１番目のアミノ酸配列では第７９１番目のＴｙｒ）、好ましくは少なくとも７８３番目のＴｙｒ（第２２番目から第８２１番目のアミノ酸配列では第７６２番目のＴｙｒ）、より好ましくは少なくとも７７９番目のＴｙｒ（第２２番目から第８２１番目のアミノ酸配列では第７５８番目のＴｙｒ）、さらに好ましくは少なくとも７６９番目のＴｙｒ（第２２番目から第８２１番目のアミノ酸配列では第７４８番目のＴｙｒ）以降のアミノ酸配列が欠失されたアミノ酸配列を含むポリペプチドを挙げることができる。
また、変異型ＦＧＦＲ２は、活性化変異型ＦＧＦＲ２が好ましい。活性化変異型ＦＧＦＲ２とは、リガンド非依存的に自己リン酸化を引き起こし、細胞内シグナルを活性化する変異型ＦＧＦＲ２をいう。
ＦＧＦＲ２の変異の有無は、ＦＧＦＲ２の遺伝子配列またはＦＧＦＲ２の転写産物であるｍＲＮＡの配列を解析することにより調べることができる。配列の解析方法は、例えば、ジデオキシヌクレオチドチェーンターミネーション法（Ｓａｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．（１９７７）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７４：５４６３）などを挙げることができる。適当なＤＮＡシークエンサーを利用して配列を解析することも可能である。
また、ＦＧＦＲ２の変異の有無は、例えば、ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション、ノーザンブロット解析、ＤＮＡマイクロアレイ、ＲＴ−ＰＣＲ、ＳＳＣＰ−ＰＣＲ（Ｓｉｎｇｌｅ−Ｓｔｒａｎｄ Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ−ＰＣＲ）などの方法により解析することもできる。これらの方法は、常法に従い行うことができる。
また、ＦＧＦＲ２の変異の有無は、例えば、免疫化学的方法（例えば、免疫組織化学的方法、免疫沈降法、ウエスタンブロット、フローサイトメトリー、ＥＬＩＳＡ、ＲＩＡなど）により解析することもできる。これらの方法は、常法に従い行うことができる。
本発明において、変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞は、好ましくは未分化型胃癌の細胞であり、より好ましくは低分化腺癌、印環細胞癌、粘液癌およびスキルス胃癌からなる群から選択される少なくとも一つの細胞である。
（４）本発明のＦＧＦＲ２阻害物質
本明細書において、「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子を意味する。
「ハロゲン原子」の好適な例としては、フッ素原子、塩素原子をあげることができる。
本明細書において、「Ｃ_１−６アルキル基」とは、炭素数が１〜６個の直鎖状または分枝鎖状のアルキル基を意味し、具体例としては、メチル基、エチル基、１−プロピル基（ｎ−プロピル基）、２−プロピル基（ｉ−プロピル基）、２−メチル−１−プロピル基（ｉ−ブチル基）、２−メチル−２−プロピル基（ｔ−ブチル基）、１−ブチル基（ｎ−ブチル基）、２−ブチル基（ｓ−ブチル基）、１−ペンチル基、２−ペンチル基、３−ペンチル基、２−メチル−１−ブチル基、３−メチル−１−ブチル基、２−メチル−２−ブチル基、３−メチル−２−ブチル基、２，２−ジメチル−１−プロピル基、１−ヘキシル基、２−ヘキシル基、３−ヘキシル基、２−メチル−１−ペンチル基、３−メチル−１−ペンチル基、４−メチル−１−ペンチル基、２−メチル−２−ペンチル基、３−メチル−２−ペンチル基、４−メチル−２−ペンチル基、２−メチル−３−ペンチル基、３−メチル−３−ペンチル基、２，３−ジメチル−１−ブチル基、３，３−ジメチル−１−ブチル基、２，２−ジメチル−１−ブチル基、２−エチル−１−ブチル基、３，３−ジメチル−２−ブチル基、２，３−ジメチル−２−ブチル基などがあげられる。
「Ｃ_１−６アルキル基」の好適な例としては、メチル基、エチル基、１−プロピル基、２−プロピル基、２−メチル−１−プロピル基、２−メチル−２−プロピル基、１−ブチル基、２−ブチル基をあげることができる。
本明細書において、「Ｃ_１−６アルキレン基」とは、上記定義「Ｃ_１−６アルキル基」からさらに任意の水素原子を１個除いて誘導される二価の基を意味し、具体例としては、メチレン基、１，２−エチレン基、１，１−エチレン基、１，３−プロピレン基、テトラメチレン基、ペンタメチレン基、ヘキサメチレン基などがあげられる。
本明細書において、「Ｃ_２−６アルケニル基」とは、二重結合を１個有する、炭素数が２〜６個の直鎖状または分枝鎖状のアルケニル基を意味し、具体例としては、エテニル基（ビニル基）、１−プロペニル基、２−プロペニル基（アリル基）、１−ブテニル基、２−ブテニル基、３−ブテニル基、ペンテニル基、ヘキセニル基などがあげられる。
本明細書において、「Ｃ_２−６アルキニル基」とは、三重結合を１個有する、炭素数が２〜６個の直鎖状または分枝鎖状のアルキニル基を意味し、具体例としては、エチニル基、１−プロピニル基、２−プロピニル基、１−ブチニル基、２−ブチニル基、３−ブチニル基、ペンチニル基、ヘキシニル基などがあげられる。
本明細書において、「Ｃ_３−８シクロアルキル基」とは、炭素数が３〜８個の単環または二環の飽和脂肪族炭化水素基を意味し、具体例としては、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、シクロオクチル基、ビシクロ［２．１．０］ペンチル基、ビシクロ［３．１．０］ヘキシル基、ビシクロ［２．１．１］ヘキシル基、ビシクロ［４．１．０］ヘプチル基、ビシクロ［２．２．１］ヘプチル基（ノルボルニル基）、ビシクロ［３．３．０］オクチル基、ビシクロ［３．２．１］オクチル基、ビシクロ［２．２．２］オクチル基などがあげられる。
「Ｃ_３−８シクロアルキル基」の好適な例としては、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基をあげることができる。
本明細書において、「Ｃ_６−１０アリール基」とは、炭素数が６〜１０個の芳香族性の炭化水素環式基を意味し、具体例としては、フェニル基、１−ナフチル基、２−ナフチル基、インデニル基、アズレニル基などがあげられる。
「Ｃ_６−１０アリール基」の好適な例としては、フェニル基をあげることができる。
本明細書において、「ヘテロ原子」とは、窒素原子、酸素原子または硫黄原子を意味する。
本明細書において、「５〜１０員ヘテロアリール基」とは、環を構成する原子の数が５〜１０個であり、環を構成する原子中に１〜５個のヘテロ原子を含有する芳香族性の環式基を意味し、具体例としては、フリル基、チエニル基、ピロリル基、イミダゾリル基、トリアゾリル基、テトラゾリル基、チアゾリル基、ピラゾリル基、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、イソチアゾリル基、フラザニル基、チアジアゾリル基、オキサジアゾリル基、ピリジル基、ピラジニル基、ピリダジニル基、ピリミジニル基、トリアジニル基、プリニル基、プテリジニル基、キノリル基、イソキノリル基、ナフチリジニル基、キノキサリニル基、シンノリニル基、キナゾリニル基、フタラジニル基、イミダゾピリジル基、イミダゾチアゾリル基、イミダゾオキサゾリル基、ベンゾチアゾリル基、ベンゾオキサゾリル基、ベンズイミダゾリル基、インドリル基、イソインドリル基、インダゾリル基、ピロロピリジル基、チエノピリジル基、フロピリジル基、ベンゾチアジアゾリル基、ベンゾオキサジアゾリル基、ピリドピリミジニル基、ベンゾフリル基、ベンゾチエニル基、チエノフリル基などがあげられる。
「５〜１０員ヘテロアリール基」の好適な例としては、フリル基、チエニル基、ピロリル基、イミダゾリル基、チアゾリル基、ピラゾリル基、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、イソチアゾリル基、ピリジル基、ピリミジニル基をあげることができる。
本明細書において、「３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基」とは、
（ａ）環を構成する原子の数が３〜１０個であり、
（ｂ）環を構成する原子中に１〜２個のヘテロ原子を含有し、
（ｃ）環中に二重結合を１〜２個含んでいてもよく、
（ｄ）環中にカルボニル基、スルフィニル基またはスルホニル基を１〜３個含んでいてもよい、
（ｅ）単環式または二環式である非芳香族性の環式基を意味し、環を構成する原子中に窒素原子を含有する場合、窒素原子から結合手が出ていてもよい。
具体例としては、アジリジニル基、アゼチジニル基、ピロリジニル基、ピペリジニル基、アゼパニル基、アゾカニル基、ピペラジニル基、ジアゼパニル基、ジアゾカニル基、ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプチル基、モルホリニル基、チオモルホリニル基、１，１−ジオキソチオモルホリニル基、オキシラニル基、オキセタニル基、テトラヒドロフリル基、ジオキソラニル基、テトラヒドロピラニル基、ジオキサニル基、テトラヒドロチエニル基、テトラヒドロチオピラニル基、オキサゾリジニル基、チアゾリジニル基などがあげられる。
「３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基」の好適な例としては、アジリジニル基、アゼチジニル基、ピロリジニル基、ピペリジニル基、アゼパニル基、ピペラジニル基、ジアゼパニル基、モルホリニル基、チオモルホリニル基、１，１−ジオキソチオモルホリニル基、テトラヒドロフリル基、テトラヒドロピラニル基をあげることができる。
本明細書において、「Ｃ_１−６アルコキシ基」とは、上記定義「Ｃ_１−６アルキル基」の末端に酸素原子が結合した基であることを意味し、具体的としては、メトキシ基、エトキシ基、１−プロポキシ基（ｎ−プロポキシ基）、２−プロポキシ基（ｉ−プロポキシ基）、２−メチル−１−プロポキシ基（ｉ−ブトキシ基）、２−メチル−２−プロポキシ基（ｔ−ブトキシ基）、１−ブトキシ基（ｎ−ブトキシ基）、２−ブトキシ基（ｓ−ブトキシ基）、１−ペンチルオキシ基、２−ペンチルオキシ基、３−ペンチルオキシ基、２−メチル−１−ブトキシ基、３−メチル−１−ブトキシ基、２−メチル−２−ブトキシ基、３−メチル−２−ブトキシ基、２，２−ジメチル−１−プロポキシ基、１−ヘキシルオキシ基、２−ヘキシルオキシ基、３−ヘキシルオキシ基、２−メチル−１−ペンチルオキシ基、３−メチル−１−ペンチルオキシ基、４−メチル−１−ペンチルオキシ基、２−メチル−２−ペンチルオキシ基、３−メチル−２−ペンチルオキシ基、４−メチル−２−ペンチルオキシ基、２−メチル−３−ペンチルオキシ基、３−メチル−３−ペンチルオキシ基、２，３−ジメチル−１−ブトキシ基、３，３−ジメチル−１−ブトキシ基、２，２−ジメチル−１−ブトキシ基、２−エチル−１−ブトキシ基、３，３−ジメチル−２−ブトキシ基、２，３−ジメチル−２−ブトキシ基などがあげられる。
「Ｃ_１−６アルコキシ基」の好適な例としては、メトキシ基、エトキシ基、１−プロポキシ基、２−プロポキシ基、２−メチル−１−プロポキシ基、２−メチル−２−プロポキシ基、１−ブトキシ基、２−ブトキシ基をあげることができる。
本明細書において、「Ｃ_１−６アルキルチオ基」とは、上記定義「Ｃ_１−６アルキル基」の末端に硫黄原子が結合した基であることを意味し、具体例としては、メチルチオ基、エチルチオ基、１−プロピルチオ基（ｎ−プロピルチオ基）、２−プロピルチオ基（ｉ−プロピルチオ基）、２−メチル−１−プロピルチオ基（ｉ−ブチルチオ基）、２−メチル−２−プロピルチオ基（ｔ−ブチルチオ基）、１−ブチルチオ基（ｎ−ブチルチオ基）、２−ブチルチオ基（ｓ−ブチルチオ基）、１−ペンチルチオ基、２−ペンチルチオ基、３−ペンチルチオ基、２−メチル−１−ブチルチオ基、３−メチル−１−ブチルチオ基、２−メチル−２−ブチルチオ基、３−メチル−２−ブチルチオ基、２，２−ジメチル−１−プロピルチオ基、１−ヘキシルチオ基、２−ヘキシルチオ基、３−ヘキシルチオ基、２−メチル−１−ペンチルチオ基、３−メチル−１−ペンチルチオ基、４−メチル−１−ペンチルチオ基、２−メチル−２−ペンチルチオ基、３−メチル−２−ペンチルチオ基、４−メチル−２−ペンチルチオ基、２−メチル−３−ペンチルチオ基、３−メチル−３−ペンチルチオ基、２，３−ジメチル−１−ブチルチオ基、３，３−ジメチル−１−ブチルチオ基、２，２−ジメチル−１−ブチルチオ基、２−エチル−１−ブチルチオ基、３，３−ジメチル−２−ブチルチオ基、２，３−ジメチル−２−ブチルチオ基などがあげられる。
「Ｃ_１−６アルキルチオ基」の好適な例としては、メチルチオ基、エチルチオ基、１−プロピルチオ基（ｎ−プロピルチオ基）、２−プロピルチオ基（ｉ−プロピルチオ基）、２−メチル−１−プロピルチオ基（ｉ−ブチルチオ基）、２−メチル−２−プロピルチオ基（ｔ−ブチルチオ基）、１−ブチルチオ基（ｎ−ブチルチオ基）、２−ブチルチオ基（ｓ−ブチルチオ基）をあげることができる。
本明細書において、「Ｃ_３−８シクロアルコキシ基」とは、上記定義「Ｃ_３−８シクロアルキル基」の末端に酸素原子が結合した基であることを意味し、具体的としては、シクロプロポキシ基、シクロブトキシ基、シクロペンチルオキシ基、シクロヘキシルオキシ基、シクロヘプチルオキシ基、シクロオクチルオキシ基、ビシクロ［２．１．０］ペンチルオキシ基、ビシクロ［３．１．０］ヘキシルオキシ基、ビシクロ［２．１．１］ヘキシルオキシ基、ビシクロ［４．１．０］ヘプチルオキシ基、ビシクロ［２．２．１］ヘプチルオキシ基（ノルボルニルオキシ基）、ビシクロ［３．３．０］オクチルオキシ基、ビシクロ［３．２．１］オクチルオキシ基、ビシクロ［２．２．２］オクチルオキシ基などがあげられる。
「Ｃ_３−８シクロアルコキシ基」の好適な例としては、シクロプロポキシ基、シクロブトキシ基、シクロペンチルオキシ基をあげることができる。
本明細書において、「モノ−Ｃ_１−６アルキルアミノ基」とは、アミノ基中の１個の水素原子を、上記定義「Ｃ_１−６アルキル基」で置換した基を意味し、具体例としては、メチルアミノ基、エチルアミノ基、１−プロピルアミノ基（ｎ−プロピルアミノ基）、２−プロピルアミノ基（ｉ−プロピルアミノ基）、２−メチル−１−プロピルアミノ基（ｉ−ブチルアミノ基）、２−メチル−２−プロピルアミノ基（ｔ−ブチルアミノ基）、１−ブチルアミノ基（ｎ−ブチルアミノ基）、２−ブチルアミノ基（ｓ−ブチルアミノ基）、１−ペンチルアミノ基、２−ペンチルアミノ基、３−ペンチルアミノ基、２−メチル−１−ブチルアミノ基、３−メチル−１−ブチルアミノ基、２−メチル−２−ブチルアミノ基、３−メチル−２−ブチルアミノ基、２，２−ジメチル−１−プロピルアミノ基、１−ヘキシルアミノ基、２−ヘキシルアミノ基、３−ヘキシルアミノ基、２−メチル−１−ペンチルアミノ基、３−メチル−１−ペンチルアミノ基、４−メチル−１−ペンチルアミノ基、２−メチル−２−ペンチルアミノ基、３−メチル−２−ペンチルアミノ基、４−メチル−２−ペンチルアミノ基、２−メチル−３−ペンチルアミノ基、３−メチル−３−ペンチルアミノ基、２，３−ジメチル−１−ブチルアミノ基、３，３−ジメチル−１−ブチルアミノ基、２，２−ジメチル−１−ブチルアミノ基、２−エチル−１−ブチルアミノ基、３，３−ジメチル−２−ブチルアミノ基、２，３−ジメチル−２−ブチルアミノ基などがあげられる。
本明細書において、「ジ−Ｃ_１−６アルキルアミノ基」とは、アミノ基中の２個の水素原子を、それぞれ同一のまたは異なる、上記定義「Ｃ_１−６アルキル基」で置換した基を意味し、具体例としては、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ基、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ基、Ｎ，Ｎ−ジ−ｎ−プロピルアミノ基、Ｎ，Ｎ−ジ−ｉ−プロピルアミノ基、Ｎ，Ｎ−ジ−ｎ−ブチルアミノ基、Ｎ，Ｎ−ジ−ｉ−ブチルアミノ基、Ｎ，Ｎ−ジ−ｓ−ブチルアミノ基、Ｎ，Ｎ−ジ−ｔ−ブチルアミノ基、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−ｎ−プロピル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−ｉ−プロピル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−ｎ−ブチル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−ｉ−ブチル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−ｓ−ブチル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−ｔ−ブチル−Ｎ−メチルアミノ基などがあげられる。
本明細書において、「Ｃ_２−７アシル基」とは、上記定義の「Ｃ_１−６アルキル基」が結合したカルボニル基であることを意味し、具体例としては、例えば、アセチル基、プロピオニル基、イソプロピオニル基、ブチリル基、イソブチリル基、バレリル基、イソバレリル基、ピバロイル基などがあげられる。
本明細書において、「Ｃ_２−７アルコキシカルボニル基」とは、上記定義の「Ｃ_１−６アルコキシ基」が結合したカルボニル基であることを意味し、具体例としては、例えば、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、１−プロピルオキシカルボニル基、２−プロピルオキシカルボニル基、２−メチル−２−プロポキシカルボニル基などがあげられる。
本明細書において、「置換基を有していてもよい」とは、「置換可能な部位に、任意に組み合わせて１または複数個の置換基を有してもよい」ことを意味し、置換基の具体例としては、例えば、ハロゲン原子、水酸基、チオール基、ニトロ基、シアノ基、ホルミル基、カルボキシル基、アミノ基、シリル基、メタンスルホニル基、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_２−６アルケニル基、Ｃ_２−６アルキニル基、Ｃ_３−８シクロアルキル基、Ｃ_６−１０アリール基、５〜１０員ヘテロアリール基、３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、Ｃ_１−６アルコキシ基、Ｃ_１−６アルキルチオ基、Ｃ_３−８シクロアルコキシ基、モノ−Ｃ_１−６アルキルアミノ基、ジ−Ｃ_１−６アルキルアミノ基、Ｃ_２−７アシル基またはＣ_２−７アルコキシカルボニル基などをあげることができる。ただし、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_２−６アルケニル基、Ｃ_２−６アルキニル基、Ｃ_３−８シクロアルキル基、Ｃ_６−１０アリール基、５〜１０員ヘテロアリール基、３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、Ｃ_１−６アルコキシ基、Ｃ_１−６アルキルチオ基、Ｃ_３−８シクロアルコキシ基、モノ−Ｃ_１−６アルキルアミノ基、ジ−Ｃ_１−６アルキルアミノ基、Ｃ_２−７アシル基およびＣ_２−７アルコキシカルボニル基はそれぞれ独立して下記置換基群からなる群から選ばれる１〜３個の基を有していてもよい。
＜置換基群＞
ハロゲン原子、水酸基、チオール基、ニトロ基、シアノ基、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_３−８シクロアルキル基、Ｃ_２−６アルケニル基、Ｃ_２−６アルキニル基、Ｃ_６−１０アリール基、５〜１０員ヘテロアリール基、３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、Ｃ_１−６アルコキシ基およびＣ_１−６アルキルチオ基。
本発明において、ＦＧＦＲ２阻害物質は、例えば、
一般式（Ｉ）

で表される化合物を挙げることができる。
（ｉ）Ｒ^１
Ｒ^１は、式−Ｖ^１−Ｖ^２−Ｖ^３（式中、Ｖ^１は、置換基を有していてもよいＣ_１−６アルキレン基を意味する；Ｖ^２は、単結合、酸素原子、硫黄原子、カルボニル基、スルフィニル基、スルホニル基、式−ＣＯＮＲ^６−で表される基、式−ＳＯ_２ＮＲ^６−で表される基、式−ＮＲ^６ＳＯ_２−で表される基、式−ＮＲ^６ＣＯ−で表される基または式−ＮＲ^６−で表される基を意味する（式中、Ｒ^６は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ_１−６アルキル基または置換基を有していてもよいＣ_３−８シクロアルキル基を意味する。）；Ｖ^３は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ_１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ_２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ_３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ_６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する。）で表される基を意味する。
Ｒ^１の好適な例としては、Ｃ_１−６アルキル基があげられる。ただし、この場合、Ｒ^１は、Ｃ_１−６アルキル基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、水酸基、Ｃ_１−６アルコキシ基、アミノ基、モノ−Ｃ_１−６アルキルアミノ基およびジ−Ｃ_１−６アルキルアミノ基から選ばれる置換基を有していてもよい。
Ｒ^１のより好適な例としては、メチル基または式

（式中、Ｒ^ａ３はメチル基を意味する；Ｒ^ａ１は水素原子または水酸基を意味する；Ｒ^ａ２は、メトキシ基、エトキシ基、１−ピロリジニル基、１−ピペリジニル基、４−モルホリニル基、ジメチルアミノ基またはジエチルアミノ基を意味する。）のいずれかで表される基があげられる。
Ｒ^１のさらに好適な例としては、メチル基または２−メトキシエチル基があげられる。
（ｉｉ）Ｒ^２
Ｒ^２は、シアノ基、置換基を有していてもよいＣ_１−６アルコキシ基、カルボキシル基、置換基を有していてもよいＣ_２−７アルコキシカルボニル基または式−ＣＯＮＶ^ａ１１Ｖ^ａ１２（式中、Ｖ^ａ１１は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ_１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ_２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ_３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ_６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する；Ｖ^ａ１２は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ_１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ_２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ_３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ_６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、水酸基、置換基を有していてもよいＣ_１−６アルコキシ基または置換基を有していてもよいＣ_３−８シクロアルコキシ基を意味する。）で表される基を意味する。
Ｒ^２の好適な例としては、シアノ基または式−ＣＯＮＶ^ａ１１Ｖ^ａ１２（式中、Ｖ^ａ１１およびＶ^ａ１２は、前記定義と同じ意味である。）で表される基があげられる。
Ｒ^２のより好適な例としては、シアノ基または式−ＣＯＮＨＶ^ａ１６（式中、Ｖ^ａ１６は、水素原子、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_３−８シクロアルキル基、Ｃ_１−６アルコキシ基またはＣ_３−８シクロアルコキシ基を意味する。ただし、Ｖ^ａ１６は、ハロゲン原子、シアノ基、水酸基およびＣ_１−６アルコキシ基から選ばれる置換基を有していてもよい。）で表される基があげられる。
Ｒ^２のさらに好適な例としては、式−ＣＯＮＨＶ^ａ１７（式中、Ｖ^ａ１７は、水素原子、Ｃ_１−６アルキル基またはＣ_１−６アルコキシ基を意味する。）で表される基があげられる。
Ｒ^２のもっとも好適な例としては、式−ＣＯＮＨＶ^ａ１８（式中、Ｖ^ａ１８は、水素原子、メチル基またはメトキシ基を意味する。）で表される基があげられる。
（ｉｉｉ）Ｙ^１
Ｙ^１は、式

（式中、Ｒ^７およびＲ^８は、それぞれ独立して水素原子、ハロゲン原子、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、置換基を有していてもよいＣ_１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ_３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ_１−６アルコキシ基、置換基を有していてもよいＣ_１−６アルキルチオ基、ホルミル基、置換基を有していてもよいＣ_２−７アシル基、置換基を有していてもよいＣ_２−７アルコキシカルボニル基または式−ＣＯＮＶ^ｄ１Ｖ^ｄ２（式中、Ｖ^ｄ１およびＶ^ｄ２は、それぞれ独立して水素原子または置換基を有していてもよいＣ_１−６アルキル基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｗ^１およびＷ^２は、それぞれ独立して置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を
意味する。）で表される基を意味する。
Ｙ^１の好適な例としては、式

（式中、Ｒ^７１は、水素原子またはハロゲン原子を意味する。）で表される基があげられる。
（ｉｖ）Ｒ^３およびＲ^４
Ｒ^３およびＲ^４は、それぞれ独立して水素原子、置換基を有していてもよいＣ_１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ_２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ_３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ_２−７アシル基または置換基を有していてもよいＣ_２−７アルコキシカルボニル基を意味する。
Ｒ^３およびＲ^４の好適な例としては、水素原子があげられる。
（ｖ）Ｒ^５
Ｒ^５は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ_１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ_２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ_３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ_６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する。
Ｒ^５の好適な例としては、水素原子、置換基を有していてもよいＣ_１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ_２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ_３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ_６−１０アリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族へテロ環式基があげられる。
Ｒ^５のより好適な例としては、水素原子、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_３−８シクロアルキル基またはＣ_６−１０アリール基（ただし、Ｒ^５は、ハロゲン原子およびメタンスルホニル基からなる群から選ばれる少なくとも一つの置換基を有していてもよい）があげられる。
Ｒ^５のさらに好適な例としては、メチル基、エチル基またはシクロプロピル基があげられる。
また、一般式（Ｉ）で表される化合物の好適な例としては、
Ｎ−（４−（６−シアノ−７−（２−メトキシエトキシ）−４−キノリル）オキシ−２−フルオロフェニル）−Ｎ’−（４−フルオロフェニル）ウレア、
Ｎ−（２−クロロ−４−（（６−シアノ−７−（（１−メチル−４−ピペリジル）メトキシ）−４−キノリル）オキシ）フェニル）−Ｎ’−シクロプロピルウレア、
Ｎ−（４−（（６−シアノ−７−（（（２Ｒ）−３−（ジエチルアミノ）−２−ヒドロキシプロピル）オキシ）−４−キノリル）オキシ）フェニル）−Ｎ’−（４−フルオロフェニル）ウレア、
Ｎ−（４−（（６−シアノ−７−（（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−（１−ピロリジノ）プロピル）オキシ）−４−キノリル）オキシ）フェニル）−Ｎ’−（４−フルオロフェニル）ウレア、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−（２−メトキシエトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−シクロプロピル−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−（２−メトキシエチル）−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−（２−フルオロエチル）−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メトキシ−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−エチル−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−フルオロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−（２−メトキシエトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−（２−ヒドロキシエトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−（（２Ｓ）−２，３−ジヒドロキシプロピル）オキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（メチルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（エチルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メトキシ−４−（３−クロロ−４−（（（エチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−（２−エトキシエトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
４−（４−（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノフェノキシ）−７−（２−メトキシエトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ−（２−フルオロ−４−（（６−カルバモイル−７−メトキシ−４−キノリル）オキシ）フェニル）−Ｎ’−シクロプロピルウレア、
Ｎ６−（２−ヒドロキシエチル）−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（１−プロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（ｃｉｓ−２−フルオロ−シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（２−メトキシエトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（エチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−（２−（４−モルホリノ）エトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（２−フルオロエチルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−（（２Ｒ）テトラヒドロ−２−フラニルメチル）−４−（３−クロロ−４−（（（メチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−フルオロ−４−（エチルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−（１−ピロリジノ）プロポキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（メチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（２Ｒ）−３−ジエチルアミノ−２−ヒドロキシプロポキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（エチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（２Ｒ）−３−ジエチルアミノ−２−ヒドロキシプロポキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（メチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−（１−ピロリジノ）プロポキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（エチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−（１−ピロリジノ）プロポキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（メチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（１−メチル−４−ピペリジル）メトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（エチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（１−メチル−４−ピペリジル）メトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ−（４−（６−シアノ−７−（２−メトキシエトキシ）−４−キノリル）オキシ−２−フルオロフェニル）−Ｎ’−シクロプロピルウレア、
Ｎ−（４−（６−シアノ−７−（３−（４−モルホリノ）プロポキシ）−４−キノリル）オキシフェニル）−Ｎ’−（３−（メチルスルホニル）フェニル）ウレア、
４−（４−（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−フルオロ−４−（（２−フルオロエチルアミノ）カルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−（２−エトキシエチル）−４−（３−クロロ−４−（（（メチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（４−（３−エチルウレイド）−３−フルオロ−フェノキシ）−７−メトキシキノリン−６−カルボキシリック アシッド （２−シアノエチル）アミド
および
Ｎ−（４−（６−（２−シアノエチル）カルバモイル−７−メトキシ−４−キノリル）オキシ−２−フルオロフェニル）−Ｎ’−シクロプロピルウレアを挙げることができる。
さらに、一般式（Ｉ）で表される化合物のより好適な例としては、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（エチルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メトキシ−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（メチルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド
および
Ｎ６−メトキシ−４−（３−クロロ−４−（（（エチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドを挙げることができる。
また、一般式（Ｉ）で表される化合物のさらに好適な例としては、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド（式（ＩＩ）参照）を挙げることができる。
ＦＧＦＲ２阻害物質の最も好適な例としては、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドのメタンスルホン酸塩を挙げることができる。

一般式（Ｉ）で表される化合物は、公知の方法で製造でき、例えば、国際公開第０２／３２８７２号パンフレット（ＷＯ０２／３２８７２）および国際公開第２００５／０６３７１３号パンフレット（ＷＯ２００５／０６３７１３）のいずれかに記載された方法によって製造することができる。
また、本発明において、ＦＧＦＲ２阻害物質は、例えば、
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボキシリック アシッド （２−ジエチルアミノエチル）アミド（以下、「ＳＵ１１２４８」ともいう。Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．，４６：１１１６−９，２００３．、ＷＯ０１／０６０８１４）（式（ＩＩＩ）参照）、

Ｎ−（３−トリフルオロメチル−４−クロロフェニル）−Ｎ’−（４−（２−メチルカルバモイルピリジン−４−イル）オキシフェニル）ウレア（以下、「ＢＡＹ ４３−９００６」および「ｓｏｒａｆｅｎｉｂ」ともいう。ＷＯ００／４２０１２）（式（ＩＶ）参照）、

６−［２−（メチルカルバモイル）フェニルスルファニル］−３−Ｅ−［２−（ピリジン−２−イル）エテニル］インダゾール（以下、「ＡＧ０１３７３６」ともいう。ＷＯ０１／００２３６９）（式（Ｖ）参照）、

Ｎ−｛２−クロロ−４−［（６，７−ジメトキシ−４−キノリル）オキシ］フェニル｝−Ｎ’−（５−メチル−３−イソキサゾリル）ウレア（以下、「ＫＲＮ９５１」ともいう。ＷＯ０２／０８８１１０）（式（ＶＩ）参照）、

などを挙げることができる。
ＳＵ１１２４８、ＢＡＹ ４３−９００６、ＡＧ０１３７３６およびＫＲＮ９５１は、公知の方法で製造することができ、例えば、それぞれの文献に記載された方法で製造することができる。
本発明において、ＦＧＦＲ２阻害物質は、酸または塩基と薬理学的に許容される塩を形成する場合もある。本発明において、ＦＧＦＲ２阻害物質は、これらの薬理学的に許容される塩をも包含する。酸との塩としては、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩などの無機酸塩およびギ酸、酢酸、乳酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、クエン酸、酒石酸、ステアリン酸、安息香酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸などの有機酸塩などを挙げることができる。また、塩基との塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩などのアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、アルギニン、リジンなどの有機塩基塩、アンモニウム塩などを挙げることができる。
また、本発明において、ＦＧＦＲ２阻害物質は、これらの溶媒和物として存在する場合および光学異性体が存在する場合もある。本発明において、ＦＧＦＲ２阻害物質には、それらの溶媒和物および光学異性体が含まれる。溶媒和物は、例えば、水和物、非水和物などを挙げることができ、好ましくは水和物を挙げることができる。溶媒は、例えば、水、アルコール（例えば、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール）、ジメチルホルムアミドなどを挙げることができる。
さらに、本発明において、ＦＧＦＲ２阻害物質は、結晶でも無結晶でもよく、また、結晶多形が存在する場合には、それらのいずれかの結晶形の単一物であっても混合物であってもよい。
また、本発明において、ＦＧＦＲ２阻害物質は、ＦＧＦＲ２阻害物質が生体内で酸化、還元、加水分解、抱合などの代謝を受けた代謝物をも包含する。また、本発明において、ＦＧＦＲ２阻害物質は、生体内で酸化、還元、加水分解などの代謝を受けてＦＧＦＲ２阻害物質を生成する化合物をも包含する。
なお、本発明のＦＧＦＲ２阻害物質は、好ましくはＦＧＦＲ２のキナーゼ活性を阻害する活性（以下、「ＦＧＦＲ２阻害活性」とも称する場合がある）を有する物質である。本明細書において、「ＦＧＦＲ２のキナーゼ活性」はＦＧＦＲ２が自己または他のタンパク質のチロシン残基をリン酸化する活性を意味する。
ＦＧＦＲ２阻害物質の有するＦＧＦＲ２阻害活性の測定方法は、例えば、Ｃｅｌｌ ｆｒｅｅキナーゼアッセイ、ウエスタンブロット、細胞増殖アッセイ、生存アッセイなどがあげられる。細胞増殖アッセイは、例えば、トリチウムチミジン取り込み法、ＭＴＴ法、ＸＴＴ法（ｃｅｌｌ ｃｏｕｎｔｉｎｇ ｋｉｔ−８（同仁化学株式会社））、アラマーブルー法、ニュートラルレッド法、ＢｒｄＵ法、Ｋｉ６７染色法、ＰＣＮＡ染色法などがあげられる。生存アッセイは、例えば、ＴＵＮＮＥＬ染色法、Ｃａｓｐａｓｅ−３切断検出法、ＰＡＲＰ切断検出法などがあげられる。これらの方法は、常法に従い行うことができる（Ｂｌｏｏｄ．２００５，１０５，２９４１−２９４８．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ．２００５，４，７８７−７９８．）。
以下、ＦＧＦＲ２阻害活性の測定方法の一例について記載する。
ＦＧＦＲ２阻害活性は、Ｃｅｌｌ ｆｒｅｅキナーゼアッセイによって測定することができる。
ＦＧＦＲ２は、常法に従い遺伝子工学的手法により作製することができる。例えば、Ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍの方法により、昆虫細胞（Ｓｐｏｎｄｏｐｔｅａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ ９（Ｓｆ９））にヒトリコンビナントＧＳＴ融合タンパク質、ヒトリコンビナントヒスチジンタグ融合タンパク質などとして発現させることができる。また、発現させたリコンビナントタンパク質は、アフィニティークロマトグラフィー（例えば、ＧＳＨ−ａｇａｒｏｓｅ（シグマ社製）またはＮｉ−ＮＴＨ−ａｇａｒｏｓｅ（キアゲン社製）など）により精製することができる。タンパク質の純度および同定は、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、銀染色およびＦＧＦＲ２に対する特異的抗体を用いたウエスタンブロットにより確認することができる。
Ｃｅｌｌ ｆｒｅｅキナーゼアッセイは、以下の通りに行うことができる。
まず、プレート（例えば、９６ウエル、３８４ウエルなど）の各ウエルに、ＡＴＰ溶液、被検物質、ＦＧＦＲ２リコンビナントタンパク質５−１０ｍＵおよび０．１ｍｇ／ｍｌ Ｐｏｌｙ（Ｇｌｕ，Ｔｙｒ）_４：１を含む溶液２５μｌを加えることができる。混合溶液にＭｇＡＴＰを加えて反応を開始することができる。
この混合溶液２５μｌには、８ｍＭ ＭＯＰＳ（ｐＨ７．０）、０．２ｍＭ ＥＤＴＡ、２．５ｍＭ ＭｎＣｌ_２、１０ｍＭ ＭｇＡｃｅｔａｔｅなどを含ませることができる。このとき、ＡＴＰは、［γ^−３２Ｐ］−ＡＴＰ、［γ^−３３Ｐ］−ＡＴＰなどの放射性同位体で標識したＡＴＰを用いることができる。
反応液を、一定時間インキュベーションした後、３％ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ ａｃｉｄ ５μＬを添加することにより反応を停止させることができる。
各ウエルは、適宜洗浄操作を行うことができる。
ＡＴＰの取り込み量を測定することによりＦＧＦＲ２阻害活性を評価することができる。上記の放射性同位体標識ＡＴＰを用いた場合は、ＡＴＰの取り込み量は、プレート上に捕捉された放射活性をシンチレーションカウンターで測定することで評価することができる。また、反応液のうち一定量をフィルターにスポットし、スポット部分の放射活性をシンチレーションカウンターで測定することで評価することもできる。フィルターは適宜洗浄操作を行うことができる。
上記の方法により、化合物のＦＧＦＲ２阻害活性を評価することができる。
（５）医薬組成物、治療剤、治療方法
本発明の治療剤は、ＦＧＦＲ２阻害物質を含有するものであり、未分化型胃癌に対する治療剤である。本発明の治療剤は、好ましくはＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含む生体に対して使用される。
ここで、未分化型胃癌には、低分化腺癌、印環細胞癌、粘液癌が含まれる（胃癌取扱い規約（第１３版））。また、未分化型胃癌では癌細胞が拡散しやすく、線維化してスキルス胃癌（ｓｃｉｒｒｈｏｕｓ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）となりやすい。そのため、本発明の治療剤は、低分化腺癌、印環細胞癌、粘液癌およびスキルス胃癌からなる群から選択される少なくとも一つの胃癌に対して有効である。
本発明の治療剤は、哺乳動物（例、ヒト、ラット、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ネコ、イヌ、サルなど）に対して、投与することができる。
また、本発明の医薬組成物は、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含む生体に対して投与するための、ＦＧＦＲ２阻害物質を含有する医薬組成物である。
本発明の医薬組成物は、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含むことを特徴とする疾患に対する治療剤として使用することができる。前記疾患としては、例えば、未分化型胃癌などを挙げることができる。
本発明の医薬組成物は、生体、すなわち、哺乳動物（例、ヒト、ラット、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ネコ、イヌ、サルなど）に対して、投与することができる。本発明において、当該生体は、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞のいずれかを有していてもよいし、これらの全てを有していてもよい。
本発明において、治療剤には、予後改善剤および再発予防剤なども含まれる。癌に対する治療剤の場合は、治療剤には、抗腫瘍剤および癌転移抑制剤なども含まれる。
治療の効果は、レントゲン写真、ＣＴ等の所見や生検の病理組織診断により、または疾患マーカーの値により確認することができる。
本発明の治療剤または医薬組成物を使用する場合、ＦＧＦＲ２阻害物質の投与量は、症状の程度、患者の年齢、性別、体重、感受性差、投与方法、投与時期、投与間隔、医薬製剤の性質、調剤、種類、有効成分の種類等によって異なり、特に限定されないが、通常成人（体重６０Ｋｇ）１日あたり０．１〜１０００ｍｇ、好ましくは０．５〜１００ｍｇ、さらに好ましくは１〜３０ｍｇであり、これを通常１日１〜３回に分けて投与することができる。
本発明のＦＧＦＲ２阻害物質を有効成分として含む医薬組成物または治療剤は、そのまま用いることもできるが、通常、適当な添加剤を混和し製剤化したものを使用することもできる。
上記添加剤としては、一般に医薬に使用される、賦形剤、結合剤、滑沢剤、崩壊剤、着色剤、矯味矯臭剤、乳化剤、界面活性剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤、防腐剤、抗酸化剤、安定化剤、吸収促進剤等を挙げることができ、所望により、これらを適宜組み合わせて使用することもできる。以下に上記添加剤の例を挙げる。
賦形剤：乳糖、白糖、ブドウ糖、コーンスターチ、マンニトール、ソルビトール、デンプン、α化デンプン、デキストリン、結晶セルロース、軽質無水ケイ酸、ケイ酸アルミニウム、ケイ酸カルシウム、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、リン酸水素カルシウム
結合剤：例えばポリビニルアルコール、メチルセルロース、エチルセルロース、アラビアゴム、トラガント、ゼラチン、シェラック、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリビニルピロリドン、マクロゴール
滑沢剤：ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、フマル酸ステアリルナトリウム、タルク、ポリエチレングリコール、コロイドシリカ
崩壊剤：結晶セルロース、寒天、ゼラチン、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、クエン酸カルシウム、デキストリン、ペクチン、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチ、カルボキシメチルスターチナトリウム
着色剤：三二酸化鉄、黄色三二酸化鉄、カルミン、カラメル、β−カロチン、酸化チタン、タルク、リン酸リボフラビンナトリウム、黄色アルミニウムレーキ等、医薬品に添加することが許可されているもの
矯味矯臭剤：ココア末、ハッカ脳、芳香散、ハッカ油、竜脳、桂皮末
乳化剤または界面活性剤：ステアリルトリエタノールアミン、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルアミノプロピオン酸、レシチン、モノステアリン酸グリセリン、ショ糖脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル
溶解補助剤：ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、安息香酸ベンジル、エタノール、コレステロール、トリエタノールアミン、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、ポリソルベート８０、ニコチン酸アミド
懸濁化剤：前記界面活性剤のほか、例えばポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース等の親水性高分子
等張化剤：ブドウ糖、塩化ナトリウム、マンニトール、ソルビトール
緩衝剤：リン酸塩、酢酸塩、炭酸塩、クエン酸塩などの緩衝液
防腐剤：メチルパラベン、プロピルパラベン、クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェネチルアルコール、デヒドロ酢酸、ソルビン酸
抗酸化剤：硫酸塩、アスコルビン酸、α−トコフェロール
安定化剤：一般に医薬に使用されるもの
吸収促進剤：一般に医薬に使用されるもの
また、必要に応じて、ビタミン類、アミノ酸等の成分を配合してもよい。
また、上記製剤としては、錠剤、散剤、顆粒剤、細粒剤、カプセル剤、シロップ剤、トローチ剤、吸入剤等の経口剤；坐剤、軟膏剤、眼軟膏剤、テープ剤、点眼剤、点鼻剤、点耳剤、パップ剤、ローション剤等の外用剤または注射剤を挙げることができる。
上記経口剤は、上記添加剤を適宜組み合わせて製剤化することができる。なお、必要に応じてこれらの表面をコーティングしてもよい。
上記外用剤は、上記添加剤のうち、特に賦形剤、結合剤、矯味矯臭剤、乳化剤、界面活性剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、防腐剤、抗酸化剤、安定化剤または吸収促進剤を適宜組み合わせて製剤化することができる。
上記注射剤は、上記添加剤のうち、特に乳化剤、界面活性剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤、防腐剤、抗酸化剤、安定化剤または吸収促進剤を適宜組み合わせて製剤化することができる。注射剤は、点滴、筋注、皮下注、皮内注、静注などの方法で使用することができる。
本発明は、ＦＧＦＲ２阻害物質を患者に有効量投与することを特徴とする、未分化型胃癌に対する治療方法を含むものである。
また、本発明は、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含む生体に対してＦＧＦＲ２阻害物質を有効量投与することを特徴とする、疾患の治療方法をも含むものである。本発明において、上記疾患は、未分化型胃癌であることが好ましい。
本発明の治療方法において、ＦＧＦＲ２阻害物質の投与経路および投与方法は特に限定されないが、上記本発明の医薬組成物または治療剤の記載を参照することができる。
本発明は、未分化型胃癌に対する治療剤の製造のためのＦＧＦＲ２阻害物質の使用を含むものである。
また、本発明は、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含む生体に対して投与するための医薬組成物の製造のためのＦＧＦＲ２阻害物質の使用をも含むものである。本発明の使用において、上記医薬組成物は、未分化型胃癌に対する治療剤として有用である。
本発明は、未分化型胃癌に対する治療剤のためのＦＧＦＲ２阻害物質を含むものである。
また、本発明は、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含む生体に対して投与するための医薬組成物のためのＦＧＦＲ２阻害物質をも含むものである。本発明において、上記医薬組成物は、未分化型胃癌に対する治療剤として有用である。
さらに、本発明により、一般式（Ｉ）で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物を含有するＦＧＦＲ２阻害剤が提供される。ＦＧＦＲ２阻害剤は、ＦＧＦＲ２のキナーゼ活性を阻害する作用を有するものである。
一般式（Ｉ）で表される化合物は、上記のとおりであるが、好ましくは４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドである。より好ましくは、本発明により、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドのメタンスルホン酸塩を含有するＦＧＦＲ２阻害剤が提供される。
さらに、本発明により、
Ｎ−（３−トリフルオロメチル−４−クロロフェニル）−Ｎ’−（４−（２−メチルカルバモイルピリジン−４−イル）オキシフェニル）ウレア（ＢＡＹ ４３−９００６）、
６−［２−（メチルカルバモイル）フェニルスルファニル］−３−Ｅ−［２−（ピリジン−２−イル）エテニル］インダゾール（ＡＧ０１３７３６）、
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボキシリック アシッド （２−ジエチルアミノエチル）アミド（ＳＵ１１２４８）
および
Ｎ−｛２−クロロ−４−［（６，７−ジメトキシ−４−キノリル）オキシ］フェニル｝−Ｎ’−（５−メチル−３−イソキサゾリル）ウレア（ＫＲＮ９５１）
からなる群から選択される少なくとも一つの化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物を含有するＦＧＦＲ２阻害剤が提供される。
本発明のＦＧＦＲ２阻害剤の有するＦＧＦＲ２阻害活性は、前述のように測定することができる。
本発明のＦＧＦＲ２阻害剤は、化合物をそのまま用いることもできるし、前記の適当な添加剤を混和し、製剤化したものを使用することもできる。
ＦＧＦＲ２阻害剤の用法、用量は、上記の医薬組成物または治療剤の記載を参照することができる。
また、本発明には、ＦＧＦＲ２阻害剤の製造のための一般式（Ｉ）で表される化合物、ＳＵ１１２４８、ＢＡＹ ４３−９００６、ＡＧ０１３７３６およびＫＲＮ９５１からなる群から選択される少なくとも一つの化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物の使用も含まれる。
さらに、本発明には、ＦＧＦＲ２阻害剤のための一般式（Ｉ）で表される化合物、ＳＵ１１２４８、ＢＡＹ ４３−９００６、ＡＧ０１３７３６およびＫＲＮ９５１からなる群から選択される少なくとも一つの化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物も含まれる。
また、本発明は、一般式（Ｉ）で表される化合物、ＳＵ１１２４８、ＢＡＹ ４３−９００６、ＡＧ０１３７３６およびＫＲＮ９５１からなる群から選択される少なくとも一つの化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物による、ＦＧＦＲ２の阻害方法、好ましくはＦＧＦＲ２のキナーゼ活性の阻害方法も含まれる。本発明の方法において、当該化合物等の用法、用量は特に限定されないが、上記の医薬組成物または治療剤の記載を参照することができる。
２．感受性を予測する方法
本発明は、細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを指標として、患者が本発明のＦＧＦＲ２阻害物質に対して高感受性であるか否かを予測する方法を提供する。ＦＧＦＲ２阻害物質に対して感受性の高い患者は、当該物質による治療効果をより期待できる患者である。
本発明の方法において、患者は、好ましくは未分化型胃癌の患者であり、より好ましくは低分化腺癌、印環細胞癌、粘液癌およびスキルス胃癌からなる群から選択される少なくとも一つの患者である。
（１）細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを測定する工程
本工程において、細胞は、患者より取り出された細胞が好ましい。そして、細胞は、例えば、患者より外科的処置（例えば、バイオプシー、骨髄穿刺など）にて摘出することにより得ることができる。
細胞は、腫瘍細胞であることが好ましい。また、遺伝的な変異に起因する、未分化型胃癌では、細胞は、血液細胞を使用することが好ましい。
ここで、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞または変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞の意味は、「１．本発明の医薬組成物、治療剤および治療方法」で述べたとおりである。ＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無は、「１．本発明の医薬組成物、治療剤および治療方法」で記載した方法により測定することができる。
本工程では、ＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無のうち、いずれかを測定してもよいし、あるいは、これらの全てを測定してもよい。
（２）患者がＦＧＦＲ２阻害物質に対して高感受性であるか否かを予測する工程
本工程では、好ましくは（１）で測定した細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを指標として、患者がＦＧＦＲ２阻害物質に対して高感受性であるか否かを予測することができる。すなわち、測定した細胞において、ＦＧＦＲ２を過剰発現している場合および変異型ＦＧＦＲ２を発現している場合の少なくとも一つに該当するときは、患者がＦＧＦＲ２阻害物質に対して高感受性であると判断することができる。
本発明の別の態様として、（１）の測定結果を指標に用いて、ＦＧＦＲ２阻害物質に対する細胞の感受性を分析する方法をあげることができる。（１）の測定結果から、細胞が、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞の少なくとも一つに該当するときは、当該細胞は、これらのいずれにも該当しない細胞に比べてＦＧＦＲ２阻害物質に対する高い感受性を示すと判断することができる。
また、本発明の別の態様として、（１）の測定結果を指標に用いて、ＦＧＦＲ２阻害物質に対して高感受性を示す細胞または患者を選択する方法をあげることができる。（１）の測定結果から、細胞が、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞の少なくとも一つに該当するときは、上記の通り、当該細胞または当該細胞を有する患者はＦＧＦＲ２阻害物質に対する高感受性を示すと判断できる。したがって、このような細胞または患者を、ＦＧＦＲ２阻害物質に対する高感受性を示す細胞または患者として選択することができる。
また、本発明の別の態様として、（１）の測定結果を指標に用いて、ＦＧＦＲ２阻害物質に対する感受性を分析し、分析結果によって患者を分類する方法をあげることができる。すなわち、本発明の方法において、（１）の測定結果から、上記のようにＦＧＦＲ２阻害物質に対する感受性を分析し、この分析結果に基づいて、患者を分類することができる。例えば、患者を、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞の少なくとも一つを含むグループと、上記のいずれも含まないグループとに分類することができる。あるいは、患者を、ＦＧＦＲ２阻害物質に対して高感受性を示すグループと、それ以外のグループとに分類することができる。
また、本発明の別の態様として、（１）の測定結果から、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞から選択される少なくとも一つを有する患者を選択することを含む、ＦＧＦＲ２阻害物質の投与対象となる患者を選択する方法をあげることができる。ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞から選択される少なくとも一つを有する患者は、ＦＧＦＲ２阻害物質の投与対象となる。
また、本発明の別の態様として、（１）の測定結果から、患者に対するＦＧＦＲ２阻害物質の治療効果を予測する方法をあげることができる。本発明の方法において、（１）の測定の結果、細胞が、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞の少なくとも一つに該当するときは、ＦＧＦＲ２阻害物質に対して高い感受性を示すと判断できるため、当該細胞または当該細胞を有する患者における当該物質の治療効果は高いと予測することができる。
また、本発明には、患者のＦＧＦＲ２阻害物質に対する感受性の程度を予測するために、当該患者由来の細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを測定する方法が含まれる。当該測定方法は、上記（１）に示すとおりである。
ＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無のうち、いずれかをまたは両方を測定することにより、患者のＦＧＦＲ２阻害物質に対する感受性の程度を予測することが可能となる。
本工程において、ＦＧＦＲ２阻害物質は、前述のとおりであるが、好ましくは４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物である。
本発明に係る方法は、ＦＧＦＲ２阻害物質を患者に投与する前に、当該患者におけるＦＧＦＲ２阻害物質の有効性の程度を予測するのに用いることができる。そして、ＦＧＦＲ２阻害物質の有する効果をより期待できる患者を選択して、疾患の治療を行うことができる。したがって、本発明は、臨床上非常に有用である。
本発明は、本発明の方法に用いるための、ＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを測定するための検査用キットを提供する。本発明の検査用キットは、測定において使用される上記試薬を含むものである。本発明の検査用キットにより、患者がＦＧＦＲ２阻害物質に対して高感受性であるか否かを予測することができる。
また、本発明は、上記予測のための当該検査用キットの使用も含む。

以下に、具体的な例をもって本発明を示すが、本発明はこれに限られるものではない。
［実施例１］ＦＧＦＲ２阻害物質のＦＧＦＲ２のキナーゼ阻害活性の測定
被検物質のＦＧＦＲ２キナーゼ阻害活性は、Ｕｐｓｔａｔｅ社（英国）への委託試験として実施された。ＦＧＦＲ２キナーゼ阻害活性は、具体的には、下記のように測定した。
ＦＧＦＲ２リコンビナントタンパク質５−１０ｍＵ、８ｍＭ ＭＯＰＳ（ｐＨ７．０）、０．２ｍＭ ＥＤＴＡ、２．５ｍＭ ＭｎＣｌ_２、０．１ｍｇ／ｍｌ ｐｏｌｙ（Ｇｌｕ，Ｔｙｒ）４：１、１０ｍＭ ＭｇＡｃｅｔａｔｅ、５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ［γ^−３３Ｐ］−ＡＴＰ、被検物質を含む溶液２５μＬにＭｇＡＴＰを加えて反応を開始した。
被検物質には、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド（メタンスルホン酸塩）、１−（４−クロロアニリノ）−４−（４−ピリジルメチル）フタラジン（以下、「ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４」と称する場合がある）、ＳＵ１１２４８、ＢＡＹ ４３−９００６、ＡＧ０１３７３６またはＫＲＮ９５１を用いた。
なお、ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４は、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質として知られている化合物である。
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドは、国際公開第０２／３２８７２号パンフレット（ＷＯ０２／３２８７２）および国際公開第２００５／０６３７１３号パンフレット（ＷＯ２００５／０６３７１３）の記載に基づいて製造した。
また、ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４は、国際公開第９８／０３５９５８号パンフレットの記載に基づいて製造した。ＳＵ１１２４８は、国際公開第０１／０６０８１４号パンフレットの記載に基づいて製造した。ＢＡＹ ４３−９００６は、国際公開第００／４２０１２号パンフレットの記載に基づいて製造した。ＡＧ０１３７３６は、国際公開第０１／００２３６９号パンフレットの記載に基づいて製造した。ＫＲＮ９５１は、国際公開第０２／０８８１１０号パンフレットの記載に基づいて製造した。
室温で４０分間反応した後、３％ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ ａｃｉｄ ５μＬを加えて反応を停止した。反応液のうち１０μＬをＦｉｌｔｅｒｍａｔ Ａにスポットし、Ｆｉｌｔｅｒｍａｔ Ａを７５ｍＭ ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ ａｃｉｄで５回、エタノールで１回洗浄した後、乾燥させた。そのスポット部分の放射活性を測定した。
ＦＧＦＲ２キナーゼ活性を５０％阻害するのに必要な被検物質の濃度（ＩＣ_５０）は、各濃度における^３３Ｐ比放射活性を用いて算出した。
その際、ＦＧＦＲ２リコンビナントタンパク質を含まず基質Ｐｏｌｙ（Ｇｌｕ，Ｔｙｒ）４：１のみを入れた条件を０％値とし、被検物質を入れないでＦＧＦＲ２リコンビナントタンパク質と基質Ｐｏｌｙ（Ｇｌｕ，Ｔｙｒ）４：１を入れた場合の値をｌ００％値とした。
各濃度の被検物質存在下におけるキナーゼ活性は、それぞれの放射活性の値から０％値を差し引いた値が、１００％値から０％値を引いた値に対して何パーセントに相当するかを算出し、この比率（％）によりＦＧＦＲ２キナーゼ活性を５０％阻害するのに必要な被検物質の濃度（ＩＣ_５０）を算出した。
その結果、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドは、ＦＧＦＲ２キナーゼ阻害活性を有すること（ＩＣ_５０＜１０ｎＭ）が明らかとなった。また、ＳＵ１１２４８、ＢＡＹ ４３−９００６、ＡＧ０１３７３６、ＫＲＮ９５１は、ＦＧＦＲ２キナーゼ阻害活性を有すること（それぞれＩＣ_５０＝８３，１６８，１７，１２４ｎＭ）が明らかになった。ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４は、ＩＣ_５０＝５４２００ｎＭであった。
［実施例２］ヒト未分化型胃癌細胞株（ＫＡＴＯ−ＩＩＩ、ＨＳＣ−３９、ＳＮＵ−１６）におけるＦＧＦＲ２リン酸化に対するＦＧＦＲ２阻害物質の効果
１．細胞抽出液の調製
ヒト未分化型胃癌細胞株（ＫＡＴＯ−ＩＩＩ（ＡＴＣＣより購入）、ＳＮＵ−１６（ＡＴＣＣより購入）、ＨＳＣ−３９（免疫生物研究所より購入））を、１０％ＦＢＳ（ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ）を含むＲＰＭＩ１６４０培地（Ｓｉｇｍａ社より購入）に懸濁した。なお、ＫＡＴＯ−ＩＩＩ，ＳＮＵ−１６およびＨＳＣ−３９は、ＦＧＦＲ２ ｇｅｎｅ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎを起こしている細胞であり（Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ，７８，１１４３−１１５３，１９９８．）、ヒトスキルス胃癌細胞株としても知られている。各細胞懸濁液（５×１０^５個／ｍＬ）１０ｍＬを細胞培養用７５ｃｍ^２フラスコ（ＦＡＬＣＯＮ社より購入）に加え、５％ＣＯ_２インキュベーター中（３７℃）で一晩培養した。ただし、ＫＡＴＯ−ＩＩＩは、１％ＦＢＳを含むＲＭＰＩ１６４０培地に置換した。そこに、１％または１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０培地で希釈した被検物質４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド（メタンスルホン酸塩）１０ｍＬを加えて、５％ＣＯ_２インキュベーター中（３７℃）で１時間培養した。培養液を回収し、各フラスコをＰＢＳ ５ｍＬで洗浄し、回収した培養液と洗浄液を合わせたものを４℃、５分、１，０００ｒｐｍにて遠心した。沈殿に可溶化緩衝液（５０ｍＭ Ｈｅｐｅｓ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、１０％（ｖ／ｖ）グリセロール、１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００、１．５ｍＭ ＭｇＣｌ_２、１ｍＭ ＥＤＴＡ（ｐＨ８．０）、１００ｍＭ ＮａＦ、１ｍＭ ＰＭＳＦ、１０μｇ／ｍＬ Ａｐｒｏｔｉｎｉｎ、５０μｇ／ｍＬ Ｌｅｕｐｅｐｔｉｎ、１μｇ／ｍＬ Ｐｅｐｓｔａｔｉｎ Ａ、１ｍＭ Ｎａ_３ＶＯ_４）を１００μＬ加えて細胞を可溶化させた。この溶液を回収し、４℃、１５分、１５，０００ｒｐｍにて処理し、上清を細胞抽出液として１０００μｇ／１０００μＬ（ＫＡＴＯ−ＩＩＩ），８００μｇ／５００μＬ（ＳＮＵ−１６），１０００μｇ／５００μＬ（ＨＳＣ−３９）に調製した。
２．免疫沈降
前記細胞抽出液に抗ＦＧＦＲ２抗体（Ｓｉｇｍａ社より購入）１０μＬとｐｒｏｔｅｉｎ Ａ ａｇａｒｏｓｅ（Ｕｐｓｔａｔｅ社より購入）１００μＬを加え、４℃で一晩攪拌した。この溶液をリン酸緩衝液１ｍＬで３回洗浄し、ＳＤＳ ｂｕｆｆｅｒを加えた後に９４℃、５分処理を行なうことで、タンパク質を可溶化させ、それを細胞サンプル液として調製した。
３．電気泳動およびウェスタンブロッティング
前記細胞サンプル液１５μＬを４−２０％ｇｒａｄｉｅｎｔ ｐｏｌｙａｃｒｙｌａｍｉｄｅ ｇｅｌ（第一化学薬品株式会社より購入）で電気泳動を行なった。泳動後、常法に従い、ＰＶＤＦ膜（Ａｍｅｒｓｈａｍ ｐｈａｒｍａｃｉａ ｂｉｏｔｅｃｈ社より購入）にトランスファーした。そして、トランスファーしたメンブレンについて、一次抗体として抗ＦＧＦＲ２抗体または抗チロシンリン酸化抗体（４Ｇ１０，Ｕｐｓｔａｔｅ社より購入）を、二次抗体としてｈｏｒｓｅ ｒａｄｉｓｈ ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ標識抗ウサギＩｇＧ抗体（ａｎｔｉ−ｒａｂｂｉｔ ＩｇＧ，ＨＲＰ−ｌｉｎｋｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｙ（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ社より購入））またはｈｏｒｓｅ ｒａｄｉｓｈ ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ標識抗マウスＩｇＧ抗体（ａｎｔｉ−ｍｏｕｓｅ ＩｇＧ，ＨＲＰ−ｌｉｎｋｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｙ（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ社より購入））を用いてイムノブロットを行なった。メンブレンを洗浄後、Ｓｕｐｅｒ Ｓｉｇｎａｌ（ＰＩＥＲＣＥ社より購入）で発色させた。
その結果、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドは、いずれの細胞においても１μＭでほぼ完全にＦＧＦＲ２のリン酸化を阻害した（図１）。
［実施例３］ヒト未分化型胃癌細胞株（ＫＡＴＯ−ＩＩＩ、ＨＳＣ−３９、ＳＮＵ−１６）の細胞増殖に対するＦＧＦＲ２阻害物質の効果
ヒト未分化型胃癌細胞株（ＫＡＴＯ−ＩＩＩ（ＡＴＣＣより購入）、ＳＮＵ−１６（ＡＴＣＣより購入）、ＨＳＣ−３９（免疫生物研究所より購入））を、１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０培地（Ｓｉｇｍａ社より購入）に懸濁した。ただし、ＫＡＴＯ−ＩＩＩは、１％ＦＢＳを含むＲＭＰＩ１６４０培地に懸濁した。その細胞懸濁液（ＫＡＴＯ−ＩＩＩ，６×１０^４個／ｍＬ、ＳＮＵ−１６，ＨＳＣ−３９，２×１０^４個／ｍＬ）を細胞培養用９６ウェルプレート（ＮＵＮＣ社より購入）に０．１ｍＬ／ｗｅｌｌで加え、５％ＣＯ_２インキュベーター中（３７℃）で一晩培養した。培養後、各ウェルに１％または１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０培地で希釈した被検物質４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド（メタンスルホン酸塩）０．１ｍＬを加えて、更に５％ＣＯ_２インキュベーター中（３７℃）で３日間培養した。培養後、各ウェルにＣｅｌｌ Ｃｏｕｎｔｉｎｇ Ｋｉｔ−８（ＤＯＪＩＮＤＯ社より購入）２０μＬを加え、５％ＣＯ_２インキュベーター中（３７℃）で発色後、測定波長を４５０ｎｍ、対照波長を６６０ｎｍとして、各ウェルの吸光度をプレートリーダーＭＴＰ−５００（コロナ電気社製）を用いて測定した。被検物質を加えていないウェルの吸光度に対する被検物質を加えた各ウェルの吸光度の比率（％）を求め、この比率から細胞増殖を５０％阻害するのに必要な被検物質の濃度（ＩＣ_５０）を算出した。
その結果、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドは、ヒト未分化型胃癌細胞株（ＫＡＴＯ−ＩＩＩ，ＳＮＵ−１６，ＨＳＣ−３９）の増殖に対してそれぞれＩＣ_５０＝１４１，２５１，１５７ｎＭの阻害活性を有することが明らかとなった。
［実施例４］ヒト未分化型胃癌細胞株（ＨＳＣ−３９）のアポトーシスにおけるＦＧＦＲ２阻害物質の効果
１．細胞抽出液の調製
ヒト未分化型胃癌細胞株ＨＳＣ−３９（免疫生物研究所より購入）を、１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０培地（Ｓｉｇｍａ社より購入）に懸濁した。細胞懸濁液（４×１０^５個／ｍＬ）５ｍＬを細胞培養用７５ｃｍ^２フラスコ（ＦＡＬＣＯＮ社より購入）に加えた。そこに、１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０培地で希釈した被検物質４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド（メタンスルホン酸塩）を５ｍＬ加えて、５％ＣＯ_２インキュベーター中（３７℃）で１日間または３日間培養した。培養液を回収し、各フラスコをＰＢＳ５ｍＬで洗浄し、回収した培養液と洗浄液を合わせたものを４℃、５分、１，０００ｒｐｍにて遠心した。沈殿に可溶化緩衝液（５０ｍＭ Ｈｅｐｅｓ（ｐＨ７．４），１５０ｍＭ ＮａＣｌ，１０％（ｖ／ｖ）グリセロール、１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００，１．５ｍＭ ＭｇＣｌ_２，１ｍＭ ＥＤＴＡ（ｐＨ８．０），１００ｍＭ ＮａＦ，１ｍＭ ＰＭＳＦ，１０μｇ／ｍＬ Ａｐｒｏｔｉｎｉｎ，５０μｇ／ｍＬ Ｌｅｕｐｅｐｔｉｎ，１μｇ／ｍＬ Ｐｅｐｓｔａｔｉｎ Ａ，１ｍＭ Ｎａ_３ＶＯ_４）を１００μＬ加えて細胞を可溶化させた。この溶液を回収し、４℃、１５分、１５，０００ｒｐｍにて処理し、上清をＳＤＳ ｂｕｆｆｅｒを加えて２５μｇ／１５μＬに調製した後、９４℃、５分処理を行なうことで、タンパク質を可溶化させ、それを細胞サンプル液として調製した。
２．電気泳動およびウェスタンブロッティング
前記細胞サンプル液１５μＬを４−２０％ｇｒａｄｉｅｎｔ ｐｏｌｙａｃｒｙｌａｍｉｄｅ ｇｅｌ（第一化学薬品株式会社より購入）で電気泳動を行なった。泳動後、常法に従い、ＰＶＤＦ膜（Ａｍｅｒｓｈａｍ ｐｈａｒｍａｃｉａ ｂｉｏｔｅｃｈ社より購入）にトランスファーした。そして、トランスファーしたメンブレンについて、一次抗体として抗ＰＡＲＰ抗体（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ社より購入）または抗Ｃｌｅａｖｅｄ−ｃａｓｐａｓｅ−３抗体（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ社より購入）を、二次抗体としてｈｏｒｓｅ ｒａｄｉｓｈ ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ標識抗ウサギＩｇＧ抗体（ａｎｔｉ−ｒａｂｂｉｔ ＩｇＧ，ＨＲＰ−ｌｉｎｋｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｙ（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ社より購入））を用いてイムノブロットを行なった。ここで、ＰＡＲＰ（Ｐｏｌｙ−ＡＤＰ−Ｒｉｂｏｓｅ−Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ）は、アポトーシスの誘導時にｃａｓｐａｓｅにより断片化されることから、アポトーシスのマーカーとして知られているタンパク質である。また、ｃａｓｐａｓｅ−３も、アポトーシスの誘導時に断片化することが知られている。
メンブレンを洗浄後、Ｓｕｐｅｒ Ｓｉｇｎａｌ（ＰＩＥＲＣＥ社より購入）で発色させた。
その結果、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドは、１μＭでＣｌｅａｖｅｄ−ＰＡＲＰ，Ｃｌｅａｖｅｄ−ｃａｓｐａｓｅ−３が明確に検出された（図２）。よって、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドは、アポトーシスを誘導する作用を有することが示された。
［実施例５］ヒト未分化型胃癌細胞株（ＫＡＴＯ−ＩＩＩ、ＨＳＣ−３９、ＳＮＵ−１６）皮下移植モデルにおけるＦＧＦＲ２阻害物質の抗腫瘍効果
ヒト未分化型胃癌細胞株（ＫＡＴＯ−ＩＩＩ（ＡＴＣＣより購入）、ＳＮＵ−１６（ＡＴＣＣより購入）、ＨＳＣ−３９（免疫生物研究所より購入））を３７℃下、５％炭酸ガスインキュベーター内においてＲＰＭＩ１６４０（１０％ＦＢＳ含）で培養し、常法に従いトリプシン−ＥＤＴＡにより、細胞を回収した。細胞をリン酸緩衝液で懸濁し、５×１０^７ｃｅｌｌｓ／ｍＬ懸濁液を調製した。そして、得られた細胞懸濁液を０．１ｍＬずつヌードマウス（チャールズリバー社より購入）体側皮下に移植した。
移植後、腫瘍体積が約１００−２００ｍｍ^３になった時点から、注射用蒸留水（大塚製薬から購入）に溶解させた被検物質４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド（メタンスルホン酸塩）を１，３，１０，３０または１００ｍｇ／ｋｇ、１日１回、４週間のスケジュール（ＫＡＴＯ−ＩＩＩのみ３０または１００ｍｇ／ｋｇ、１日１回、２週間のスケジュール）で経口投与した。腫瘍長径および短径をデジマチックキャリパ（Ｍｉｔｓｕｔｏｙｏ）で測定し、以下の式で腫瘍体積を算出した。
腫瘍体積（ＴＶ）＝腫瘍長径（ｍｍ）×腫瘍短径^２（ｍｍ^２）／２
その結果、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドは、ヒト未分化型胃癌細胞株（ＫＡＴＯ−ＩＩＩ，ＳＮＵ−１６，ＨＳＣ−３９）皮下移植モデルにおいて、用量依存的に抗腫瘍効果を有することが明らかとなった（図３）。
［実施例６］ヒト未分化型胃癌細胞株（ＨＳＣ−３９、ＳＮＵ−１６）皮下移植モデルにおけるＦＧＦＲ２リン酸化に対するＦＧＦＲ２阻害物質の効果
１．腫瘍の作成及び腫瘍の可溶化
ヒト未分化型胃癌細胞株（ＳＮＵ−１６（ＡＴＣＣより購入）、ＨＳＣ−３９（免疫生物研究所より購入））を３７℃下、５％炭酸ガスインキュベーター内においてＲＰＭＩ１６４０（１０％ＦＢＳ含）で培養し、常法に従いトリプシン−ＥＤＴＡにより、細胞を回収した。細胞をリン酸緩衝液で懸濁し、５×１０^７ｃｅｌｌｓ／ｍＬ懸濁液を調製した。そして、得られた細胞懸濁液を０．１ｍＬずつヌードマウス（チャールズリバー社より購入）体側皮下に移植した。
移植後、腫瘍体積が約４００−８００ｍｍ^３になった時点において、注射用蒸留水（大塚製薬から購入）に溶解させた被検物質４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド（メタンスルホン酸塩）１０，３０または１００ｍｇ／ｋｇを経口投与した。投与後、２時間で腫瘍を摘出し、摘出した腫瘍へ可溶化緩衝液（５０ｍＭ Ｈｅｐｅｓ（ｐＨ７．４），１５０ｍＭ ＮａＣｌ，１０％（ｖ／ｖ）グリセロール、１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００，１．５ｍＭ ＭｇＣｌ_２，１ｍＭ ＥＤＴＡ（ｐＨ８．０），１００ｍＭ ＮａＦ，１ｍＭ ＰＭＳＦ，１０μｇ／ｍＬ Ａｐｒｏｔｉｎｉｎ，５０μｇ／ｍＬ Ｌｅｕｐｅｐｔｉｎ，１μｇ／ｍＬ Ｐｅｐｓｔａｔｉｎ Ａ，１ｍＭ Ｎａ_３ＶＯ_４）、２５ｍＭ β−ｇｌｙｃｅｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ，ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｃｏｃｋｔａｉｌ ＩＩ（ＳＩＧＭＡ））を加えてホモジナイズした。４℃、１５分、１５，０００ｒｐｍにて処理し、上清を腫瘍抽出液として１０００μｇ／５００μＬに調製した。
２．免疫沈降
前記腫瘍抽出液に抗ＦＧＦＲ２抗体（Ｓｉｇｍａ社より購入）１０μＬとｐｒｏｔｅｉｎ Ａ ａｇａｒｏｓｅ（Ｕｐｓｔａｔｅ社より購入）１００μＬを加え、４℃で一晩攪拌した。この溶液をリン酸緩衝液１ｍＬで３回洗浄し、ＳＤＳ ｂｕｆｆｅｒを加えた後に９４℃、５分処理を行なうことで、タンパク質を可溶化させ、それを腫瘍サンプル液として調製した。
３．電気泳動およびウェスタンブロッティング
前記腫瘍サンプル液１５μＬを４−２０％ｇｒａｄｉｅｎｔ ｐｏｌｙａｃｒｙｌａｍｉｄｅ ｇｅｌ（第一化学薬品株式会社より購入）で電気泳動を行なった。泳動後、常法に従い、ＰＶＤＦ膜（Ａｍｅｒｓｈａｍ ｐｈａｒｍａｃｉａ ｂｉｏｔｅｃｈ社より購入）にトランスファーした。そして、トランスファーしたメンブレンについて、一次抗体として抗ＦＧＦＲ２抗体または抗チロシンリン酸化抗体（４Ｇ１０，Ｕｐｓｔａｔｅ社より購入）を、二次抗体としてｈｏｒｓｅ ｒａｄｉｓｈ ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ標識抗ウサギＩｇＧ抗体（ａｎｔｉ−ｒａｂｂｉｔ ＩｇＧ，ＨＲＰ−ｌｉｎｋｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｙ（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ社より購入））またはｈｏｒｓｅ ｒａｄｉｓｈ ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ標識抗マウスＩｇＧ抗体（ａｎｔｉ−ｍｏｕｓｅ ＩｇＧ，ＨＲＰ−ｌｉｎｋｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｙ（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ社より購入））を用いてイムノブロットを行なった。メンブレンを洗浄後、Ｓｕｐｅｒ Ｓｉｇｎａｌ（ＰＩＥＲＣＥ社より購入）で発色させた。
その結果、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドは、ヒト未分化型胃癌細胞株（ＳＮＵ−１６，ＨＳＣ−３９）皮下移植モデルにおいて、抗腫瘍効果の認められた投与量でＦＧＦＲ２のリン酸化を阻害することが明らかとなった（図４）。
以上の結果から、本発明のＦＧＦＲ２阻害物質は、未分化型胃癌に対して、より有効な効果を期待できることが示された。
また、本発明のＦＧＦＲ２阻害物質は、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含む生体に対して、より有効な効果を期待できることが示された。
また、細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無からなる群から選択される少なくとも一つを測定し、測定した細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無のいずれか、またはこれらの組み合わせを指標とすることにより、患者に化合物を投与することなく、本発明の化合物の効果を予測することが可能となった。そのため、本発明に係る方法は、患者に化合物を投与することなく、当該化合物による効果をより期待できる患者を選択することができ、患者のＱＯＬに貢献することが可能となった。
［参考例］
ＦＧＦＲ２阻害物質の一つである４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドの製剤の製造法を以下に参考例として記載する。
（医薬組成物の製造）
（１）１ｍｇ錠
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド メタンスルホン酸塩の結晶（Ｃ）（以下、「結晶（Ｃ）」と称する場合がある。なお、結晶（Ｃ）は、ＷＯ２００５／０６３７１３の実施例７に記載の方法に従って製造したものである。）２４ｇと無水軽質ケイ酸（ゲル化防止剤、商品名ＡＥＲＯＳＩＬ（登録商標）２００、日本アエロジル株式会社）１９２ｇを２０Ｌスーパーミキサーで混合後、さらにＤ−マンニトール（賦形剤、東和化成工業株式会社）１２３６ｇ、結晶セルロース（賦形剤、商品名アビセルＰＨ１０１、旭化成工業株式会社）７２０ｇ、ヒドロキシプロピルセルロース（結合剤、商品名ＨＰＣ−Ｌ、日本曹達株式会社）７２ｇを加えて混合した。その後、無水エタノールを適量添加し結晶（Ｃ）を含有する造粒物を得た。この造粒物を棚式乾燥機（６０℃）で乾燥後、パワーミルを用いて整粒し、顆粒を得た。この顆粒とともに、クロスカルメロースナトリウム（崩壊剤、商品名Ａｃ−Ｄｉ−Ｓｏｌ、ＦＭＣ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｃ．）１２０ｇ、フマル酸ステアリルナトリウム（滑沢剤、ＪＲＳ Ｐｈａｒｍａ ＬＰ）３６ｇを２０Ｌタンブラーミキサーに入れて混合後、打錠機で製錠し、１錠あたり総質量１００ｍｇの錠剤を得た。さらに錠剤コーティング機で、コーティング液として１０％オパドライイエロー（ＯＰＡＤＲＹ ０３Ｆ４２０６９ ＹＥＬＬＯＷ、日本カラコン株式会社）水溶液を用いて、錠剤にコーティングし、１錠あたり総質量１０５ｍｇのコーティング錠を得た。
（２）１０ｍｇ錠
結晶（Ｃ）６０ｇと無水軽質ケイ酸（ゲル化防止剤、商品名ＡＥＲＯＳＩＬ（登録商標）２００、日本アエロジル株式会社）１９２ｇを２０Ｌスーパーミキサーで混合後、さらにＤ−マンニトール（賦形剤、東和化成工業株式会社）１２００ｇ、結晶セルロース（賦形剤、商品名アビセルＰＨ１０１、旭化成工業株式会社）７２０ｇ、ヒドロキシプロピルセルロース（結合剤、商品名ＨＰＣ−Ｌ、日本曹達株式会社）７２ｇを加えて混合した。その後、無水エタノールを適量添加し結晶（Ｃ）を含有する造粒物を得た。この造粒物を棚式乾燥機（６０℃）で乾燥後、パワーミルを用いて整粒し、顆粒を得た。この顆粒とともに、クロスカルメロースナトリウム（崩壊剤、商品名Ａｃ−Ｄｉ−Ｓｏｌ、ＦＭＣＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｃ．）１２０ｇ、フマル酸ステアリルナトリウム（滑沢剤、ＪＲＳ Ｐｈａｒｍａ ＬＰ）３６ｇを２０Ｌタンブラーミキサーに入れて混合後、打錠機で製錠し、１錠あたり総質量４００ｍｇの錠剤を得た。さらに錠剤コーティング機で、コーティング液として１０％オパドライイエロー（ＯＰＡＤＲＹ ０３Ｆ４２０６９ ＹＥＬＬＯＷ、日本カラコン株式会社）水溶液を用いて、錠剤にコーティングし、１錠あたり総質量４１１ｍｇのコーティング錠を得た。
（３）１００ｍｇ錠
結晶（Ｃ）３１．４ｇと無水軽質ケイ酸（ゲル化防止剤、商品名ＡＥＲＯＳＩＬ（登録商標）２００、日本アエロジル株式会社）４ｇを１Ｌスーパーミキサーで混合後、さらに、無水リン酸水素カルシウム（賦形剤、協和化学工業株式会社）４０．１ｇ、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース（結合剤、商品名Ｌ−ＨＰＣ（ＬＨ−２１）、信越化学工業株式会社）１０ｇ、ヒドロキシプロピルセルロース（結合剤、商品名ＨＰＣ−Ｌ、日本曹達株式会社）３ｇを加えて混合した。その後、無水エタノールを適量添加し結晶（Ｃ）を含有する造粒物を得た。この造粒物を棚式乾燥機（６０℃）で乾燥後、パワーミルを用いて整粒し、顆粒を得た。この顆粒とともに、クロスカルメロースナトリウム（崩壊剤、商品名Ａｃ−Ｄｉ−Ｓｏｌ、ＦＭＣ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｃ．）１０ｇ、フマル酸ステアリルナトリウム（滑沢剤、ＪＲＳ Ｐｈａｒｍａ ＬＰ）１．５ｇを混合後、打錠機で製錠し、１錠あたり総質量４００ｍｇの錠剤を得た。

本発明により、ＦＧＦＲ２阻害物質を含有する未分化型胃癌に対する治療剤、治療方法、前記治療剤の製造のためのＦＧＦＲ２阻害物質の使用および前記治療剤のためのＦＧＦＲ２阻害物質が提供される。
また、本発明により、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含む生体に対して投与するための、ＦＧＦＲ２阻害物質を含有する医薬組成物、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含む生体に対してＦＧＦＲ２阻害物質を有効量投与することを特徴とする疾患の治療方法、前記医薬組成物の製造のためのＦＧＦＲ２阻害物質の使用および前記医薬組成物のためのＦＧＦＲ２阻害物質が提供される。
さらに、本発明により、ＦＧＦＲ２阻害剤が提供される。
また、本発明により、ＦＧＦＲ２阻害物質の効果を予測する方法が提供される。
より詳細には、ＦＧＦＲ２阻害物質の効果は、細胞中のＦＧＦＲ２の発現量およびＦＧＦＲ２の変異の有無のうち、少なくとも一つを指標とすることにより予測することが可能となった。
本発明に係る予測方法により、患者に化合物を投与することなく、効果を予測することが可能となるため、当該化合物による効果をより期待できる患者を選択することができ、患者のＱＯＬに貢献することが可能となった。
［配列表］

Claims (5)

1. ４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物を含有する未分化型胃癌に対する治療剤。
2. ４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドのメタンスルホン酸塩を含有する未分化型胃癌に対する治療剤。
3. 未分化型胃癌が、ＦＧＦＲ２を過剰発現している細胞および変異型ＦＧＦＲ２を発現している細胞からなる群から選択される少なくとも一つを含む未分化型胃癌である、請求項１または２に記載の治療剤。
4. 変異型ＦＧＦＲ２が、配列番号：２で表されるアミノ酸配列のうち第２２番目から第８２２番目のアミノ酸配列において、少なくとも８１３番目以降のアミノ酸配列、または配列番号：４で表されるアミノ酸配列のうち第２２番目から第８２１番目のアミノ酸配列において、少なくとも８１２番目以降のアミノ酸配列が欠失された変異部位を含むものである、請求項３に記載の治療剤。
5. 未分化型胃癌が、低分化腺癌、印環細胞癌、粘液癌およびスキルス胃癌からなる群から選択される少なくとも一つの胃癌である、請求項１または２に記載の治療剤。

Images