JP2012510437A - 代謝型グルタミン酸受容体の調節因子としてのインドールおよびベンゾオキサジン誘導体 - Google Patents

Abstract

本発明は、代謝型グルタミン酸受容体サブタイプ２（「ｍＧｌｕＲ２」）の正のアロステリック調節因子であり、かつ代謝調節型受容体のサブタイプであるｍＧｌｕＲ２が関連するグルタミン酸機能障害および疾病に関係する神経学的および精神医学的な障害の治療または予防に有用な新規インドールおよびベンゾオキサジン誘導体に関する。また、本発明は、このような化合物を含む医薬組成物、該化合物および組成物を調製する工程、ならびにｍＧｌｕＲ２が関連する神経学的および精神医学的な障害および疾病の予防または治療における該化合物の使用をその目的とする。

Description

本発明は、代謝型グルタミン酸受容体サブタイプ２（「ｍＧｌｕＲ２」）の正のアロステリック調節因子であり、かつ代謝調節型受容体のｍＧｌｕＲ２サブタイプが関連するグルタミン酸機能障害および疾病に関係する神経学的および精神医学的な障害の治療または予防に有用な新規インドールおよびベンゾオキサジン誘導体に関する。また、本発明は、このような化合物を含む医薬組成物、該化合物および組成物を調製する工程、ならびにｍＧｌｕＲ２が関連する神経学的および精神医学的な障害および疾病の予防または治療における該化合物の使用をその目的とする。

グルタミン酸は、哺乳動物の中枢神経系における主要なアミノ酸神経伝達物質である。グルタミン酸は、例えば、学習と記憶，それだけでなく知覚，シナプス可塑性の発達，運動制御，呼吸，および心臓血管機能の調節など生理機能の多くで主要な役割を果たす。さらにまた、グルタミン酸は、グルタミン酸神経伝達の不均衡が存在する、様々な神経学的および精神医学的な疾病の中核をなす。

イオンチャネル型グルタミン酸受容体チャネル（ｉＧｌｕＲｓ）、ならびに速い興奮性伝達に関与するＮＭＤＡ受容体，ＡＭＰＡ受容体およびカイニン酸受容体の活性化を通して、グルタミン酸はシナプスの神経伝達を仲介する。

加えて、シナプス効力の微調整に寄与するという、より調節的な役割を有する代謝型グルタミン酸受容体（ｍＧｌｕＲｓ）を、グルタミン酸は活性化させる。

本明細書中でオルト立体的結合部位と呼ばれる、ｍＧｌｕＲの大きな細胞外アミノ末端ドメインにグルタミン酸が結合し、ｍＧｌｕＲを活性化させる。この結合によって、該受容体の立体構造変化が引き起こされ、その結果Ｇタンパク質および細胞内シグナル伝達経路が活性化される。

ｍＧｌｕＲ２サブタイプは、Ｇαｉタンパク質の活性化を介してアデニル酸シクラーゼと負の結合[negatively coupled]をし、その活性化はシナプスにおけるグルタミン酸放出の阻害を引き起こす。中枢神経系（ＣＮＳ）において、ｍＧｌｕＲ２受容体は主に、皮質，視床領域，副嗅球，海馬，扁桃体，尾状核被殻および側坐核のいたるところで豊富に存在する。

臨床試験において、ｍＧｌｕＲ２を活性化することは不安障害の治療に有効であることが示された。さらに、様々な動物モデルにおいても、ｍＧｌｕＲ２の活性化が有効であることが示された。これは、統合失調症，てんかん，中毒／薬物依存，パーキンソン病，痛み，睡眠障害およびハンチントン病の治療に対して新規な治療方法となる可能性を示した。

現在、ｍＧｌｕＲｓを標的とする市販の薬理学的ツールの多くは、ｍＧｌｕＲファミリーのメンバーのいくつかを活性化するオルト立体的リガンドであり、該リガンドはグルタミン酸の構造類似体である。

ｍＧｌｕＲに選択的に作用する化合物を開発する新しい手段は、高度に保存されたオルト立体的結合部位とは異なる部位に結合することによって該受容体を調節するというアロステリック機構を通して作用する化合物を同定することである。

ｍＧｌｕＲの正のアロステリック調節因子は、この魅力的な代替手段を提供する新規な薬理学的な実体として近年浮上してきた。様々な化合物が、ｍＧｌｕＲ２の正のアロステリック調節因子として記載されている。ＷＯ２００４／０９２１３５号（ＮＰＳ＆アストラ・ゼネカ社[NPS & Astra Zeneca]）、ＷＯ２００４／０１８３８６号、ＷＯ２００６／０１４９１８号およびＷＯ２００６／０１５１５８号（メルク社[Merck]）、ＷＯ２００１／５６９９０号（イーライ・リリー社[Eli Lilly]）ならびにＷＯ２００６／０３００３２号およびＷＯ２００７／１０４７８３号（アデックス社およびヤンセンファーマ社[Addex & Janssen Pharmaceutica]）には、ｍＧｌｕＲ２の正のアロステリック調節因子として、それぞれフェニルスルホンアミド、アセトフェノン、インダノン、ピリジルメチルスルホンアミドおよびピリジノン誘導体が記載されている。これら中で具体的に開示された化合物はいずれも、本発明の化合物と構造的な関連はない。

これら化合物は単独では該受容体を活性化しないことが証明されている。むしろ、グルタミン酸単独で最小の応答しか引き起こさないあるグルタミン酸濃度において、これら化合物は該受容体に最大の応答をもたらすことができる。ｍＧｌｕＲ２の正のアロステリック調節因子はオルト立体的部位に結合せずに、代わりに該受容体の七回膜貫通領域内にあるアロステリック部位に結合することが突然変異解析によって明確に証明された。

不安神経症モデルおよび精神病モデルにおいて、ｍＧｌｕＲ２の正のアロステリック調節因子で得られた効果がオルト立体的アゴニストで得られた効果と類似することが動物データから示唆されている。不安神経症モデルである、不安がより強まった驚愕においても、ストレスによる異常高熱においても、ｍＧｌｕＲ２のアロステリック調節因子は活性を有することが示された。さらに、統合失調症の聴覚による驚愕効果モデルである、ケタミンまたはアンフェタミンによる運動過多症においても、アンフェタミンによるプレパルス抑制崩壊においても、該化合物は逆活性を有することが示された（J. Pharmacol. Exp. T
her. 2006, 318, 173-185; Psychopharmacology 2005, 179, 271-283）。

代謝型グルタミン酸受容体サブタイプ２の選択的な正のアロステリック調節因子であるビフェニル−インダノン（ＢＩＮＡ）が、精神病の幻覚薬モデルを妨害することが近年の動物実験によりさらに明らかにされた。これは、統合失調症におけるグルタミン酸機能障害を治療するためにｍＧｌｕＲ２受容体を標的とする戦略をサポートする（Mol. Pharmacol.2007, 72, 477-484）。

正のアロステリック調節因子はグルタミン酸応答に対して相乗的に作用することができるが、例えばＬＹ３７９２６８またはＤＣＧ−ＩＶなどのオルト立体的ｍＧｌｕＲ２アゴニストによる応答も該因子によって強化されることが示された。これらのデータは、さらにもう１つの新規な治療方法によって、ｍＧｌｕＲ２が関与する上述の神経学的および精神医学的な疾病が治療されるという証拠を提供する。そして、該治療方法において、ｍＧｌｕＲ２のオルト立体的アゴニストとともにｍＧｌｕＲ２の正のアロステリック調節因子を組み合わせて使用することになる。

国際公開第２００４／０９２１３５号パンフレット 国際公開第２００４／０１８３８６号パンフレット 国際公開第２００６／０１４９１８号パンフレット 国際公開第２００６／０１５１５８号パンフレット 国際公開第２００１／５６９９０号パンフレット 国際公開第２００６／０３００３２号パンフレット 国際公開第２００７／１０４７８３号パンフレット

J. Pharmacol. Exp. Ther. 2006, 318, 173-185 Psychopharmacology 2005, 179, 271-283 Mol. Pharmacol. 2007, 72, 477-484

[発明の詳細な説明]
本発明は、代謝型グルタミン酸受容体２の調節因子活性を有する、式（Ｉ）を有する化合物もしくはその立体化学的異性体、またはその薬学的に許容し得る塩もしくは溶媒和物に関し、

ここで、
Ｒ^１は、Ｃ_１−６アルキル基；Ｃ_３−７シクロアルキル基；トリフルオロメチル基；トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエトキシ、Ｃ_３−７シクロアルキル、フェニル、または、ハロ、トリフルオロメチルもしくはトリフルオロメトキシで置換されたフェニルで置換されたＣ_１−３アルキル基；フェニル基；ハロ、トリフルオロメチルおよびトリフルオロメトキシからなる群より選ばれる１つまたは２つの置換基で置換されたフェニル基；あるいは４−テトラヒドロピラニル基であり、
Ｒ^２は、シアノ基、ハロ、トリフルオロメチル基、Ｃ_１−３アルキル基またはシクロプロピル基であり、
Ｒ^３は、水素；Ｃ_１−３アルキル基；Ｃ_３−７シクロアルキル、フェニル、または、ハロ、シアノ、Ｃ_１−３アルキル、Ｃ_１−３アルコキシおよびトリフルオロメチルからなる群より選択される１つもしくは２つの置換基で置換されたフェニルで置換されたＣ_１−３アルキル基；ピリジニル基、または、１つもしくは２つのＣ_１−３アルキルで置換されたピリジニル基；ヒドロキシＣ_２−４アルキル基；Ｃ_１−３アルキルオキシＣ_２−４アルキル基；４−テトラヒドロピラニル基；１−オキサ−スピロ［３，５］ノナ−７−イル基；２−オキサ−スピロ［３，５］ノナ−７−イル基；１−オキサ−スピロ［４，５］デカ−８−イル基；２−オキサ−スピロ［４，５］デカ−８−イル基；４−（ヒドロキシ）−シクロヘキサニル基；４−（ヒドロキシ）−４−（Ｃ_１−３アルキル）シクロヘキサニル基；４−（ヒドロキシ）−４−（Ｃ_３−７シクロアルキル）−シクロヘキサニル基；４−（Ｃ_１−３アルキルオキシ）シクロヘキサニル基；フェニル基；ピリジニル基；ピリジニルメチル基；あるいは、ハロ、Ｃ_１−３アルキル、Ｃ_１−３アルコキシおよびトリフルオロメチルからなる群より選択される１つもしくは２つの置換基で置換されたフェニル基、ピリジニル基またはピリジニルメチル基であり、
Ｒ^４は、水素またはハロであり、
Ａは、式
−ＣＨ＝ＣＨ− （ａ）または
−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ− （ｂ）
（ここで、１つまたは２つの水素原子は、Ｃ_１−３アルキルまたはポリハロＣ_１−３アルキルで置換されてもよい）
の基である。

本発明の一態様は、式（Ｉ）の化合物もしくはその立体化学的異性体またはその薬学的に許容し得る塩もしくは溶媒和物に関し、
ここで、
Ｒ^１は、Ｃ_１−６アルキル基；トリフルオロメチルまたはＣ_３−７シクロアルキルで置換されたＣ_１−３アルキル基であり、
Ｒ^２は、シアノ基またはハロであり、
Ｒ^３は、水素；Ｃ_１−３アルキル基；Ｃ_３−７シクロアルキルで置換されたＣ_１−３アルキル基；ヒドロキシＣ_２−４アルキル基；Ｃ_１−３アルキルオキシＣ_２−４アルキル；４−テトラヒドロピラニル基；４−（ヒドロキシ）−シクロヘキサニル基；または、４−（ヒドロキシ）−４−（Ｃ_１−３アルキル）シクロヘキサニル基であり、
Ｒ^４は、水素、クロロまたはフルオロであり、
Ａは、式
−ＣＨ＝ＣＨ− （ａ）または
−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ− （ｂ）
の基である。

本発明の一態様は、式（Ｉ）の化合物もしくはその立体化学的異性体またはその薬学的に許容し得る塩もしくは溶媒和物に関し、
ここで、
Ｒ^１は、トリフルオロメチルで置換されたＣ_１−３アルキル基であり、
Ｒ^２は、シアノ基またはクロロであり、
Ｒ^３は、水素；メチル；シクロプロピルで置換されたメチルイル基；２−ヒドロキシ−２，２−ジメチルエチル基；１−メチルエチルオキシエチル基；４−テトラヒドロピラニル基；４−（ヒドロキシ）−シクロヘキサニル基；または４−（ヒドロキシ）−４−（メチル）シクロヘキサニル基であり、
Ｒ^４は、水素またはクロロであり、
Ａは、式
−ＣＨ＝ＣＨ− （ａ）または
−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ− （ｂ）
の基である。

本発明の一態様は、式（Ｉ）の化合物もしくはその立体化学的異性体またはその薬学的に許容し得る塩もしくは溶媒和物に関し、
ここで、
Ｒ^１は、２，２，２−トリフルオロエチル基であり、
Ｒ^２は、シアノ基またはクロロであり、
Ａは、式 −ＣＨ＝ＣＨ− （ａ）の基である。

本発明の一態様は、式（Ｉ）の化合物もしくはその立体化学的異性体またはその薬学的に許容し得る塩もしくは溶媒和物に関し、
ここで、
Ｒ^１は、２，２，２−トリフルオロエチルであり、
Ｒ^２は、シアノ基またはクロロであり、
Ａは、式 −ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ− （ｂ）の基である。

本発明の典型的な化合物は、
８−クロロ−７−（７−クロロ−１Ｈ−インドール−５−イル）−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン；トランス−４−［５−［８−クロロ−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−７−イル］−１Ｈ−インドール−１−イル］シクロヘキサノール；トランス−７−［１−（４−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシル）−１Ｈ−インドール−５−イル］−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−カルボニトリル；４−［７−［８−クロロ−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−７−イル］−２，３−ジヒドロ−４Ｈ−１，４−ベンゾオキサジン−４−イル］シクロヘキサノール；トランス−４−［５−［８−クロロ−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−７−イル］−１Ｈ−インドール−１−イル］−１−メチルシクロヘキサノールである。

基または基の一部としてのＣ_１−３アルキル基という表記は、メチル基、エチル基、１−プロピル基および１−メチルエチル基などの、飽和の、直鎖状または分岐状の、１〜３個の炭素原子を有する炭化水素基を示す。

基または基の一部としてのＣ_１−６アルキル基という表記は、メチル基、エチル基、１−プロピル基、１−メチルエチル基、１−ブチル基、２−メチル−１−プロピル基、３−メチル−１−ブチル基、１−ペンチル基、１−ヘキシル基などの、飽和の、直鎖状または分岐状の、１〜６個の炭素原子を有する炭化水素基を示す。

基または基の一部としてのシクロＣ３−７アルキル基という表記は、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基およびシクロヘプチル基などの、飽和の、環式炭化水素基を示す。

ハロは、フルオロ、クロロ、ブロモまたはヨードであってもよく、フルオロまたはクロロが好ましい。

治療上の使用において、式（Ｉ）の化合物の塩は、その対イオンが薬学的に許容し得る塩である。また一方、薬学的に許容し得ない酸および塩基の塩も、例えば、薬学的に許容し得る化合物の調製または精製における用途を見出すことができる。薬学的に許容し得るものであろうとなかろうと、すべての塩は本発明の範囲に包含される。

薬学的に許容し得る塩は、式（Ｉ）の化合物が形成し得る、治療上活性を有する無毒性酸付加塩形態を含むよう定義される。塩は、適切な酸、（例えば、ハロゲン化水素酸、特に、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸およびリン酸などの無機酸；酢酸、ヒドロキシ酢酸、プロパン酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、シクラミン酸、サリチル酸、ｐ−アミノサリチル酸およびパモン酸などの有機酸）で、塩基性形態の式（Ｉ）の化合物を処理することによって得られる。

逆に言えば、該塩形態は、適切な塩基で処理することによって、遊離の塩基形態に変換することができる。

また、酸性プロトンを含む式（Ｉ）の化合物は、適切な有機塩基および無機塩基で処理することによって、それらの治療上活性を有する無毒性塩基性塩形態に変換してもよい。

適切な塩基性塩形態としては、例えば、そのアンモニウム塩、そのアルカリ金属およびアルカリ土類金属塩（特に、リチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウムおよびカルシウムの塩）、有機塩基の塩（例えば、ベンザチン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ヒドラバミンの塩）、およびアミノ酸の塩（例えば、アルギニンおよびリシン）が挙げられる。

逆に言えば、該塩形態は、適切な酸で処理することによって、遊離の酸形態に変換することができる。

溶媒和物という用語は、その上記塩と同様に、式（Ｉ）の化合物が形成することができる溶媒付加形態を包含する。このような溶媒付加形態の例として、水和物、アルコラートなどが挙げられる。

本明細書中に用いられる「立体化学的異性体」は、式（Ｉ）の化合物がとることができる、考えられるすべての異性体を定義する。特に言及または指摘しない限り、化合物の化学的な記号表示は、考えられるすべての立体化学的な異性体の混合物を意味し、該混合物は基本的な分子構造のすべてのジアステレオマーおよびエナンチオマーを含む。また、本発明は、式（Ｉ）の化合物およびその塩ならびに溶媒和物の個々の異性体それぞれを包含するものであり、他の異性体を実質的に含まない、すなわち含んでも１０％未満、好ましくは５％未満、特に２％未満、および最も好ましくは１％未満である。したがって、式（Ｉ）の化合物が例えば（Ｒ）として特定される場合、これは、該化合物が実質的に（Ｓ）異性体を含まないことを意味する。立体中心は、Ｒ−またはＳ−配置を有することができ；（部分的）飽和二価環式基上の置換基は、シス−配置またはトランス−配置のいずれかを有してもよい。

ＣＡＳ命名法の取り決めに従って、公知の絶対配置の２つの立体中心が化合物中に存在する場合、ＲまたはＳの記述子が（カーン−インゴルド−プレローグ配列則に基づいて）、もっとも小さい番号を付されたキラル中心、すなわち参照中心[reference center]に付与される。第二の立体中心の配置は相対的記述子である［Ｒ^*，Ｒ^*］または［Ｒ^*，Ｓ^*］を用いて示される。この場合、Ｒ^*は常に参照中心として特定され、［Ｒ^*，Ｒ^*］は同様のキラリティーを有する中心を示し、［Ｒ^*，Ｓ^*］は異なるキラリティーの中心を示す。例えば、化合物中のもっとも小さい番号を付されたキラル中心がＳ配置を有し、第二の中心がＲである場合、立体記述子はＳ−［Ｒ^*，Ｓ^*］として特定されることになる。「α」および「β」が用いられる場合：最も低い環番号を有する環構造[ring system]中の不斉炭素原子上の最優先置換基の位置は、任意に常に、環構造により決定される平均平面の「α」位にある。参照原子上の最優先置換基の位置に対して、環構造における他の不斉炭素原子上の最優先置換基（式（Ｉ）の化合物中の水素原子）の位置は、環構造により決定される平均平面の同じ側に該置換基がある場合、「α」と命名され、環構造により決定される平均平面の反対側に該置換基がある場合、「β」と命名される。

この出願の構成において、元素[element]は、特に、式（Ｉ）の化合物に関して言及される場合は、天然に存在するものまたは合成して製造されたものであっても、自然に豊富にあるものまたは同位体が濃縮された形態であっても、この成分のすべての同位体および同位体混合物を包含する。式（Ｉ）の放射標識された化合物には、³Ｈ、¹¹Ｃ、¹⁸Ｆ、¹²²Ｉ、¹²³Ｉ、¹²⁵Ｉ、¹³¹Ｉ、⁷⁵Ｂｒ、⁷⁶Ｂｒ、⁷⁷Ｂｒおよび⁸²Ｂｒからなる群より選択される放射性同位体が含まれる。前記放射性同位体は、好ましくは³Ｈ、¹¹Ｃおよび¹⁸Ｆからなる群より選択される。

〔調製〕
本発明の化合物は通常、連続工程により調製することができ、各工程は当業者に公知である。特に、該化合物は、以下の合成方法に従って調製することができる。

式（Ｉ）の化合物は、当該分野で公知の分割手順に従って互いに分離することができる、エナンチオマーのラセミ混合物の形で合成してもよい。式（Ｉ）のラセミ化合物は、適切なキラル酸との反応によって、対応するジアステレオマー塩形態に変換することができる。該ジアステレオマー塩形態は、例えば、選択的結晶化または分別結晶化によってその後分離され、エナンチオマーはアルカリによって、そこから遊離される。式（Ｉ）の化合物のエナンチオマー形態を分離することの代わりの方法として、キラル固定相を用いた液体クロマトグラフィーが挙げられる。また、純粋な立体化学的異性体は、反応が立体特異的に起こるという条件で、適切な出発物質の、対応する純粋な立体化学的異性体に由来し得る。

Ａ．最終化合物の調製
実験手順１
式（Ｉ）の最終化合物は、反応スキ−ム（１）に従い、式（ＩＩ）の中間体化合物を式（ＩＩＩ）の化合物と反応させることで調製することができ、反応は、適切な反応不活性溶媒（例えば、１，４−ジオキサン）または不活性溶媒の混合物（例えば、１，４−ジオキサン／ＤＭＦ）中、適切な塩基（例えば、ＮａＨＣＯ_３水溶液またはＮａ_２ＣＯ_３水溶液）、Ｐｄ−錯体触媒（例えば、Ｐｄ（ＰＰｈ₃）₄）の存在下、熱的条件（例えば、マイクロ波照射下１５０℃で反応混合物を加熱する）下で、例えば１０分間行われる。反応スキーム（１）において、すべての変数は式（Ｉ）中で定義したとおりであり、ＷはＰｄを媒介したボロン酸またはボロンエステルとのカップリングに適切な基、例えば、ハロやトリフラートである。Ｒ^５およびＲ^６は、水素またはアルキルでもよく、または結合して、例えば、式−ＣＨ_２ＣＨ_２−、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２−または−Ｃ（ＣＨ_３）_２Ｃ（ＣＨ_３）_２−の２価の基を形成してもよい。

Ｂ．中間体の調製
実験手順２
式（ＩＩ）中、式（ＩＩ）（ここで、Ｗはハロである）の中間化合物は、式（ＩＶ）の中間化合物を適切なハロゲン化剤（例えば、オキシ塩化リン（Ｖ））と反応させることで調製することができ、反応は、適切な反応不活性溶媒（例えば、ＤＭＦ）下で、適度な高温（例えば、１１０℃）で、反応が完了する適切な期間（例えば、１時間）行われる。スキーム（２）において、すべての変数は式（Ｉ）中で定義したとおりであり、Ｗはハロである。

実験手順３
式（ＩＶ）の中間化合物は、反応スキ−ム（３）に従い、式（Ｖ）の中間化合物を式（ＶＩ）の中間化合物と反応させることで調製することができる。この反応は、適切な反応不活性溶媒（例えば、エタノール）下、熱的条件（例えば、マイクロ波を４５分間照射下、１６０℃で反応混合物を加熱する）下で行われる。スキーム（３）において、Ｒ^１およびＲ^２は式（Ｉ）中で定義したとおりであり、ｈａｌｏは、例えば、クロロまたはブロモである。

実験手順４
式（ＶＩ）の中間化合物は、式（ＶＩＩ）の中間化合物をアンモニア源（例えば、水酸化アンモニウム）と、熱的条件（例えば、反応混合物を加熱する（例えば、３時間還流する））下で反応させることにより調製することができる。スキーム（４）において、Ｒ^２は式（Ｉ）中で定義したとおりである。

実験手順５
式（ＶＩＩ）の中間化合物は、反応スキ−ム（５）に従い、式（ＶＩＩＩ）の中間化合物をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタールと反応させることで調製することができる。この反応は、適切な反応不活性溶媒（例えば、エタノール）下、熱的条件（例えば、反応混合物を加熱する（例えば、２時間還流する））下で行われる。スキーム（５）において、Ｒ^２は式（Ｉ）中で定義したとおりである。

式（ＶＩＩＩ）の中間化合物は、市販品（Ｒ^２＝ＣＮ、Ｃ.Ａ.Ｓ.５５１５−１６−２）であるか、または、以下の当業者に公知の反応方法で調製される。式（ＶＩＩＩ）（ここで、Ｒ^２はハロである）の中間化合物は、Chemische Berichte (1976), 109(8), 2908-13に記載されている方法に従って調製することができる。

実験手順６
式（ＩＩ）（ここで、Ｒ^２はハロである）の化合物（ここでは（ＩＩ−a）と名付ける）は、反応スキ−ム（６）に従い、式（ＩＸ）の中間化合物を式（Ｖ）の中間化合物と反応させることで調製することができる。この反応は、適切な反応不活性溶媒（例えば、エタノール）下、熱的条件（例えば、マイクロ波を５０分間照射下、１５０℃で反応混合物を加熱する）下で行われる。スキーム（６）において、Ｒ^１は式（Ｉ）中で定義したとおりであり、ｈａｌｏは、例えば、クロロ、ブロモまたはヨードであってもよく、Ｗは、式（ＩＩ）中で定義したとおりである。

実験手順７
式（ＩＸ）の中間化合物は、反応スキ−ム（７）に従い、式（Ｘ）の中間化合物を酸（例えば、トリフルオロ酢酸）と処理することで調製することができる。この反応は、適切な反応不活性溶媒（例えば、ＤＣＭ）下、室温下、反応が完了する適切な期間（例えば、２時間）行われる。スキーム（７）において、ｈａｌｏは、例えば、クロロ、ブロモまたはヨードであってもよく、Ｗは、式（ＩＩ）中で定義したとおりである。

実験手順８
式（Ｘ）の中間化合物は、反応スキ−ム（８）に従い、式（ＸＩ）の中間化合物を強塩基（例えば、ｎ−ブチルリチウム）と反応させ、さらに、ハロゲン化剤（例えばＮ−クロロスクシンイミド）と処理することで調製することができる。この反応は、適切な反応不活性溶媒（例えば、ＴＨＦ）下、低温（例えば、−７８℃）下、反応が完了する適切な期間（例えば、２時間）行われる。スキーム（８）において、ｈａｌｏは、例えば、クロロ、ブロモまたはヨードであってもよく、Ｗは、式（ＩＩ）中で定義したとおりである。

実験手順９
式（ＩＸ）（ここで、Ｗはヨウ素である）の中間化合物（ここでは（ＩＸ−ａ）と名付ける）は、反応スキーム（９）に従い、式（ＸＩＩ）の中間体を水酸化アンモニウムと反応させることで調製することができる。この反応は、熱的条件（例えば、反応混合物を加熱する（例えば、１３０℃で１２時間））下で行われる。

加えて、式（ＩＸ−ａ）の中間化合物は、反応スキーム（９）に従い、式（ＸＩＩ）の中間化合物をジフェニルメタンイミンと反応させ、続いてイミンの二重結合を開裂させることで調製することができ、反応は、適切な反応不活性溶媒（例えば、トルエン）中、適切な塩基（例えば、ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド）、金属担持触媒、特にパラジウム触媒（例えば、酢酸パラジウム（ＩＩ））、および適切な配位子（例えば、１，１’−［１，１’−ビナフタレン］−２，２’−ジイルビス［１，１−ジフェニル−ホスフィン］（ＢＩＮＡＰ））の存在下、反応が完了する適切な期間加熱する（例えば、密閉された管中で１００℃、１６時間）ことで行い、続いて、イミン中間体の二重結合を適切な酸（例えば、塩酸水溶液）で開裂させる。反応スキーム（９）において、ｈａｌｏは、クロロ、ブロモまたはヨードであってもよい。

実験手順１０
式（ＩＩＩ）の中間体は、反応スキーム（１０）に示すように、当該分野で公知の方法、式（ＸＩＩＩ）の中間体を適切なホウ素源（例えば、ビス(ピナコラト)ジボロン）と、パラジウム触媒（例えば、１，１’−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセンパラジウム(II)ジクロリド）の存在下、適切な反応不活性溶媒（例えば、ＤＣＭ）下で反応させることで調製することができる。この反応は、適切な塩（例えば、酢酸カリウム）の存在下、適度な高温（例えば、１１０℃）下、例えば、１６時間行ってもよい。

加えて、式（ＩＩＩ）の中間体は、式（ＸＩＩＩ）の中間体から、当該分野で公知の方法である、ハロゲン−金属交換およびそれに続く適切なホウ素源との反応により調製することができる。このタイプの反応は、例えば、式（ＸＩＩＩ）の中間体および有機リチウム化合物（例えば、ｎ−ブチルリチウム）を用いることによって行うことができる。この反応は、不活性溶媒（例えば、ＴＨＦ）中で、適度な低温（例えば、−４０℃）下で行われる。この反応では、続いて、適切なホウ素源（例えばトリメトキシボラン）と反応させる。

反応スキーム（１０）において、すべての変数は式（Ｉ）中で定義したとおりであり、Ｒ^５およびＲ^６は、水素またはアルキルでもよく、または結合して、例えば、式−ＣＨ_２ＣＨ_２−、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２−または−Ｃ（ＣＨ_３）_２Ｃ（ＣＨ_３）_２−の２価の基を形成してもよく、ｈａｌｏは、適切なハロゲン（例えば、ブロモ）であり、そして、他の全ての変数は式（Ｉ）中で定義したとおりである。

実験手順１１
式（ＸＩＩＩ）（ここで、Ｒ^３は式（Ｉ）中で定義したとおりであるが、水素ではない）の中間体（ここでは（ＸＩＩＩ−ａ）と名付ける）は、以下の当該分野で公知の方法、式（ＸＩＩＩ）（ここで、Ｒ^３は水素である）の中間体（ここでは（ＸＩＩＩ−ｂ）と名付ける）を式（ＸＩＶ）の中間化合物と、アルキル化条件下（例えば、適切な反応不活性溶媒（例えば、ＤＭＦ）中、塩基（例えば、Ｋ_２ＣＯ_３またはＮａＨ）の存在下）で反応させることで調製することができる。この反応は、適切な温度（通常、１５０℃）でのマイクロ波照射下、反応が完了する適切な期間行ってもよい。反応スキーム（１１）において、すべての変数は式（Ｉ）中で定義したとおりであり、Ｘは、アルキル化反応にとって適切な脱離基（例えば、ハロ、トシル、メシルであり、そしてハロは、クロロ、ブロモまたはヨードであってもよい）である。

実験手順１２
式（ＸＩＩＩ）（ここで、ハロはブロモまたはヨードである）の中間体は、以下の当該分野で公知の方法である、式（ＸＶ）の中間体を適切なハロゲン化剤と反応させることで調製することができる。この反応を反応スキーム（１２）に示す。この反応は、ハロゲン化剤（例えば、Ｎ−ブロモスクシンイミド、Ｎ−ヨードスクシンイミド）を用いて、室温から還流温度までの温度範囲で、反応不活性溶媒（例えば、ＤＭＦ、ＤＣＭ、ＣＨＣｌ_３または酢酸）中で行うことができる。通常、この反応混合物は、０〜１００℃の温度で、１５分〜４８時間攪拌される。反応スキーム（１１）において、すべての変数は式（Ｉ）中で定義したとおりであり、ハロは、クロロ、ブロモまたはヨードであってもよい。

実験手順１３
式（ＸＶ）（ここで、Ｒ^３は式（Ｉ）中で定義したとおりであるが、水素ではない）の中間体（ここでは（ＸＶ−ａ）と名付ける）は、当該分野で公知の方法、式（ＸＶ）（ここで、Ｒ^３は水素である）の中間体（ここでは（ＸＶ−ｂ）と名付ける）を式（ＸＩＶ）の中間化合物と、反応スキーム（１３）で説明するようなアルキル化条件下で反応させることで調製することができる。反応スキーム（１３）において、すべての変数は式（Ｉ）中で定義したとおりであり、Ｘは、アルキル化反応にとって適切な脱離基（例えば、ハロ、トシル、メシルであり、そしてハロは、クロロ、ブロモまたはヨードであってもよい）である。

実験手順１４
式（ＸＩＩＩ）（ここで、Ｒ^３は４−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキサン−１−イルである）の中間体（ここでは（ＸＩＩＩ−ｃ）と名付ける）は、当該分野で公知の方法、式（ＸＶＩ）の中間体を適切な有機金属アルキル源[organometallic alkyl source]（例えば、Ｒ^７−Ｍ、（ここでＭは、ハロゲン化マグネシウムまたはリチウムである））と反応させることで調製することができる。この反応を反応スキーム（１４）に示す。この反応は、不活性溶媒（例えば、ＴＨＦ、ジメチルエーテルまたは１，４−ジオキサン）中で行うことができる。通常、この混合物は、０〜１００℃の温度で、１〜４８時間攪拌される。反応スキーム（１４）において、すべての変数は式（Ｉ）中で定義したとおりであり、ハロは、クロロまたはブロモであってもよく、Ｒ^７は、Ｃ_１−３アルキルまたはＣ_３−７シクロアルキルである。

実験手順１５
式（ＸＩＩＩ）（ここで、Ｒ^３は４−ヒドロキシ−シクロヘキサン−１−イルである）の中間体（ここでは（ＸＩＩＩ−ｄ）と名付ける）は、式（ＸＶＩ）の中間体を当業者に公知である還元条件下で反応することで調製することができる。この反応を反応スキーム（１５）に示す。この反応は、適切な溶媒（例えば、メタノール）中、還元剤（例えば、水素化ホウ素ナトリム）の存在下で行うことができる。この反応は、適切な温度（通常、室温）で、反応が完了する適切な期間行ってもよい。反応スキーム（１５）において、すべての変数は式（Ｉ）中で定義したとおりであり、ハロは、クロロ、ブロモまたはヨードであってもよい。

実験手順１６
式（ＸＶＩ）の中間体は、式（ＸＶＩＩ）のアセタール中間体を、当業者に公知であるカルボニル官能基に対する適切な脱保護条件にさらすことで調製することができる。この反応を反応スキーム（１６）に示す。この反応は、酸（例えは、ｐ−トルエンスルホン酸）の存在下、適切な溶媒（例えば、アセトン）中で行うことができる。この反応は、適切な温度（通常、１００℃）でのマイクロ波照射下、反応が完了する適切な期間、都合よく行ってもよい。反応スキーム（１６）において、すべての変数は式（Ｉ）中で定義したとおりであり、ハロは、クロロ、ブロモまたはヨードであってもよい。

実験手順１７
式（ＸＶＩＩ）の中間体、および式（ＸＩＩＩ）（ここで、Ａは式−ＣＨ＝ＣＨ−の基であり、Ｒ^３は

であり、各ｎは１または２である）の中間体（ここでは（ＸＩＩＩ−ｆ）と名付ける）は、反応スキーム（１７）に従って、式（ＸＩＩＩ）（ここで、Ａは式−ＣＨ＝ＣＨ−の基であり、Ｒ^３はＨである）の中間体（ここでは（ＸＩＩＩ−ｅ）と名付ける）を、式Ｒ^３−Ｘ（式ＸＩＶ）（ここで、Ｒ^３は前記で定義したとおりである）の中間体（ここでは（ＸＩＶ−ａ）と名付ける）と反応させることで調製することができる。この反応は、当業者に公知のアルキル化条件下（例えば、塩基（例えば、適切な反応溶媒（例えば、ジメチルスルホキシド）中の水酸化カリウム）の存在下）で行うことができる。この反応は、適切な温度（通常、６０℃）で、反応が完了する適切な期間行ってもよい。反応スキーム（１７）において、すべての変数は式（Ｉ）中で定義したとおりであり、Ｘは、アルキル化にとって適切な脱離基（例えば、ハロ、トシル、メシルであり、そしてハロは、クロロ、ブロモまたはヨードであってもよい）である。

実験手順１８
式（ＸＩＩＩ）（ここで、Ａは式−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ−の基である）の中間体（ここでは（ＸＩＩＩ−ｇ）と名付ける）は、式（ＸＶＩＩＩ）のオルトアミノフェノール誘導体を、市販の１，２−ジブロモエタンと、アルキル化条件（例えば、この反応を塩基（例えば、適切な反応不活性溶媒（例えば、ＤＭＦ）中のＫ_２ＣＯ_３）の存在下で行う）下で反応させることで調製することができる。この反応は、適切な温度（通常、１８０℃）でのマイクロ波照射下で、反応が完了する適切な期間行ってもよい。反応スキーム（１８）において、すべての変数は式（Ｉ）中で定義したとおりであり、ハロは、クロロ、ブロモまたはヨードであってもよい。

実験手順２０
式（ＸＶＩＩＩ）の中間体は、反応スキーム（２０）に従って、式（ＸＩＸ）の中間体をＮ−ハロスクシンイミド（例えば、Ｎ−クロロ−（ＮＣＳ）、Ｎ−ブロモ−（ＮＢＳ）またはＮ−ヨードスクシンイミド（ＮＩＳ））と反応させることで調製することができる。この反応は、適切な反応不活性溶媒（例えば、ＤＭＦ、ＤＣＭまたは酢酸）中で行うことができる。この反応は、通常、室温で、１〜２４時間行われる。反応スキーム（２０）において、すべての変数は式（Ｉ）中で定義したとおりであり、ハロは、クロロ、ブロモまたはヨードであってもよい。

実験手順２１
式（ＸＩＸ）（ここで、Ｒ^３は

である）の中間体（ここでは（ＸＩＸ−ａ）と名付ける）は、式（ＸＩＸ）（Ｒ^３はＨである）の中間体（ここでは（ＸＩＸ−ｂ）と名付ける）を、式（ＸＸ）の環状ケトン誘導体と、当業者に公知である還元的アミノ化条件下で反応させることで調製することができる。この反応を反応スキーム（２１）に示す。この反応は、例えば、適切な反応不活性溶媒（例えば、ＤＣＥ）中のナトリウムトリアセトキシボロヒドリドの存在下で、適切な反応温度（通常、室温）で、反応が完了する適切な期間行ってもよい。反応スキーム（２１）において、すべての変数は式（Ｉ）中で定義したとおりであり、Ｑは定義したとおりである。

実験手順２２
式（Ｖ）の中間化合物は、式（ＸＸＩ)の中間化合物をハロゲン化剤（例えば、臭素）と、不活性溶媒（例えば１，４−ジオキサン）中、適度な低温（例えば、０℃）で、反応させることで調製することができる。反応スキーム（２２）において、すべての変数は式（Ｉ）中で定義したとおりである。

式（ＶＩＩＩ）、（ＸＩ）、（ＸＩＩ）、（ＸＩＩＩ−ｅ）、（ＸＩＶ）、（ＸＩＸ−ｂ）、（ＸＸ）および（ＸＸＩ）の中間体は、市販品であるかまたは当業者により調製される。

式（ＸＩＶ−ａ）（ここでＱは、−Ｏ−である）の中間体（ＣＡＳ［９７９８６−３４−０］）は、ＷＯ ２００７１４８６４８Ａ１に記載された合成方法に従って調製することができ、
中間体（ここで、Ｑは、

である）（ＣＡＳ［２３５１１−０５−９］）は、J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, 2002, 2251-2255に記載された合成方法に従って調製することができる。

〔薬理学〕
本発明で提供される化合物は、代謝型グルタミン酸受容体の正のアロステリック調節因子であり、特に、該化合物はｍＧｌｕＲ２の正のアロステリック調節因子である。本発明の化合物は、グルタミン酸の認識部位、すなわち、オルトステリックリガンド部位に結合するのではなく、代わりに該受容体の７回膜貫通領域中のアロステリック部位に結合すると思われる。グルタミン酸またはｍＧｌｕＲ２のアゴニストの存在下、本発明の化合物は、ｍＧｌｕＲ２応答を増強させる。本発明で提供される化合物は、グルタミン酸またはｍＧｌｕＲ２アゴニストに対する該受容体の応答を増強するその能力に基づいて、ｍＧｌｕＲ２でのそれらの効果を示すことが期待され、その結果、該受容体の応答を高める。よって、本発明は、薬剤として使用する本発明の化合物に関する。本発明は、また、ヒトを含む哺乳類における病気や疾患の治療や予防、特に治療、ｍＧｌｕＲ２のアロステリック調節因子、特にｍＧｌｕＲ２の正のアロステリック調節因子の神経調節作用により影響または促進されるヒトの治療や予防に使用する本発明の化合物または本発明の医薬組成物に関する。また、本発明は、ヒトを含む哺乳動物の疾患を治療または予防、特に治療するための薬剤の製造における本発明の化合物または本発明の医薬組成物の使用に関する。該治療または予防は、ｍＧｌｕＲ２のアロステリック調節因子（特に、ｍＧｌｕＲ２の正のアロステリック調節因子）の神経調節作用によって、影響を受けるかまたは促進される。

また、本発明は、ヒトを含む哺乳動物の疾患を治療または予防、特に治療するための薬剤の製造において使用する本発明の化合物または本発明の医薬組成物に関する。該治療または予防は、ｍＧｌｕＲ２のアロステリック調節因子（特に、ｍＧｌｕＲ２の正のアロステリック調節因子）の神経調節作用によって、影響を受けるかまたは促進される。本発明は、ヒトを含む哺乳動物の疾患を治療もしくは予防、特に治療するための本発明の化合物または本発明の医薬組成物に関する。該治療または予防は、ｍＧｌｕＲ２のアロステリック調節因子（特に、ｍＧｌｕＲ２の正のアロステリック調節因子）の神経調節作用によって、影響を受けるかまたは促進される。

また、本発明は、ヒトを含む哺乳動物のグルタミン酸機能不全を伴う様々な神経学的および精神医学的な障害を治療，予防，改善，抑制もしくはその危険性を緩和するための薬剤の製造における、本発明に記載の化合物または本発明に記載の医薬組成物の使用に関する。該治療または予防は、ｍＧｌｕＲ２の正のアロステリック調節因子の神経調節作用によって、影響を受けるかまたは促進される。

本発明が、例えば、哺乳動物の治療のための薬剤の製造における、本発明の化合物または組成物の使用に関して述べる場合、特定の司法権限の管轄域でのこのような使用は、例えば、このような治療を要する哺乳動物への、本発明の化合物または組成物の有効量の投与を含む、例えば、哺乳動物の治療法として理解される。

特に、グルタミン酸機能不全を伴う神経学的および精神医学的な障害としては、以下の疾患または疾病の１以上が挙げられる：例えば、心臓バイパス手術およびバイパス移植術に続く脳の欠損などのような急性の神経学的および精神医学的な障害、脳卒中、脳虚血、脊髄外傷、頭部外傷、周生期低酸素症、心停止、低血糖による神経損傷、認知症（エイズ誘発認知症を含む）、アルツハイマー病、ハンチントン舞踏病、筋萎縮性側索硬化症、眼性損傷、網膜症、認知障害、特発性および薬物性パーキンソン病、振戦を含む筋痙直に伴う筋肉の痙攣および障害、てんかん、痙攣、片頭痛（片頭痛による頭痛を含む）、尿失禁、薬物耐性、薬物離脱（例えば、アヘン剤、ニコチン、タバコ製品、アルコール、ベンゾジアゼピン、コカイン、鎮静剤、催眠薬などの薬物を含む）、精神病、統合失調症、不安神経症（全般性不安障害、パニック障害および強迫性障害を含む）、気分障害（鬱病、躁病、双極性障害を含む）、三叉神経痛、聴力障害、耳鳴、目の黄斑部変性、嘔吐、脳浮腫、痛み（急性および慢性状態、激痛、頑痛、神経障害性の痛み、および外傷後の痛みを含む）、遅発性ジスキネジア、睡眠障害（ナルコレプシを含む）、注意力欠陥／多動性障害，ならびに行動障害。

特に、このような疾患または疾病は、不安障害、精神異常、人格障害、物質関連障害、摂食障害、気分障害、片頭痛、てんかんもしくは痙攣性疾患、小児期障害、認知障害、神経変性、神経毒性および虚血からなる群より選択される中枢神経系障害[central nervous system disorder]である。

好ましくは、上記中枢神経系障害は、広場恐怖症、全般性不安障害（ＧＡＤ）、強迫性障害（ＯＣＤ）、パニック障害、心的外傷後ストレス障害（ＰＴＳＤ）、社会恐怖症および他の恐怖症からなる群より選択される不安障害である。

好ましくは、上記中枢神経系障害は、統合失調症、妄想性障害、統合失調性感情障害、統合失調症様障害および物質誘発性[substance-induced]精神病性障害からなる群から選択される精神病性障害である。

好ましくは、上記中枢神経系障害は、強迫性人格障害および統合失調性，統合失調症性障害からなる群から選択される人格障害である。

好ましくは、上記中枢神経系障害は、アルコール乱用、アルコール依存、アルコール離脱、アルコール離脱せん妄、アルコール誘発性精神病性障害、アンフェタミン依存、アンフェタミン離脱、コカイン依存、コカイン離脱、ニコチン依存、ニコチン離脱、オピオイド依存およびオピオイド離脱からなる群より選択される物質関連障害である。

好ましくは、上記中枢神経系障害は、神経性食欲不振症および神経性過食症からなる群より選択される摂食障害である。

好ましくは、上記中枢神経系障害は、双極性障害（Ｉ型およびＩＩ型）、気分循環性障害、鬱病、気分変調性障害、大鬱病性障害および物質誘発性気分障害からなる群より選択される気分障害である。

好ましくは、上記中枢神経系障害は、片頭痛である。

好ましくは、上記中枢神経系障害は、非痙攣性全般てんかん、痙攣性全般てんかん、小発作てんかん重積、大発作てんかん重積、意識障害を伴うまたは伴わない部分てんかん、乳児痙攣、持続性部分てんかん[epilepsy partialis continua]，および他の種類のてんかんからなる群より選択されるてんかんまたは痙攣性疾患である。

好ましくは、上記中枢神経系障害は、注意欠陥／多動性障害である。

好ましくは、上記中枢神経系障害は、せん妄、物質誘発性の持続的せん妄、認知症、ＨＩＶ疾病に起因する認知症、ハンチントン病に起因する認知症、パーキンソン病に起因する認知症、アルツハイマー型の認知症、物質誘発性の持続的認知症および軽度認識障害からなる群より選択される認知障害である。

上述した障害のうち、不安神経症、統合失調症、片頭痛、鬱病およびてんかんの治療が特に重要である。

現時点で、アメリカ精神医学会の精神疾患診断統計マニュアル（ＤＳＭ−ＩＶ）の第四版には、本願明細書中に記載の障害を同定するための診断用手段が掲載されている。当業者は、本願明細書中に記載の神経学的および精神医学的な障害のための他の命名法，疾病分類学，および分類体系が存在すること、ならびにこれらは医学的および科学的な発展とともに変化することを認識するであろう。

式（Ｉ）の化合物を含むｍＧｌｕＲ２のこの正のアロステリック調節因子は、グルタミン酸に対するｍＧｌｕＲ２の応答を高めるので、本発明の方法が内因性のグルタミン酸を利用することは好都合である。

式（Ｉ）の化合物を含むｍＧｌｕＲ２の正のアロステリック調節因子は、アゴニストに対するｍＧｌｕＲ２の応答を高めるので、本発明が、式（Ｉ）の化合物を含むｍＧｌｕＲ２の正のアロステリック調節因子の有効量をｍＧｌｕＲ２アゴニストと組み合わせて投与することにより、グルタミン酸機能不全を伴う神経学的および精神医学的な障害の治療まで拡張されるものと理解される。

本発明の化合物は、薬物を互いに組み合わせたものがいずれかの薬物単独よりも安全であるか、より有効である場合、式（Ｉ）の化合物またはその他の薬物が有効性を有する疾患または状態の治療、予防、制御、改善、またはリスク低減に、１種または複数種のその他の薬物と組み合わせて利用することができる。

〔医薬組成物〕
本発明は、薬学的に許容し得る担体または希釈剤および、活性成分として、本発明の化合物（特に、式（Ｉ）の化合物，薬学的に許容し得るその塩，その溶媒和物またはその立体化学的異性体）の治療上の有効量を含む医薬組成物にも関する。

１日当りの有効量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは約０．０５ｍｇ／ｋｇ体重〜約１ｍｇ／ｋｇ体重に及んでもよい。

本発明の化合物（特に、式（Ｉ）の化合物、薬学的に許容し得るその塩、その溶媒和物およびその立体化学的異性体）またはこれらの任意のサブグループもしくは組合せは、投与目的のための様々な剤型で処方され得る。適切な組成物として、通常、薬を全身的に投与するために用いるすべての組成物が挙げられる。

本発明の医薬組成物を調製するために、活性成分として特定の化合物（任意で塩形態）の有効量が、薬学的に許容し得る担体または希釈剤と密な混合物[intimate admixture]として組み合わされる。該担体または希釈剤は、投与に望ましい調製形態に応じて多種多様な形態を採ることができる。これらの医薬組成物は、特に経口投与、直腸性の投与、経皮投与、非経口的な注射による投与または吸入による投与にとって好適な、一体的な投与形態をとることが望ましい。例えば、経口投薬の形態で組成物を調製する際、例えば、懸濁液、シロップ、エリキシル剤、乳濁液および溶液などのような経口液体を調製する場合には、例えば、水、グリコール、油、アルコールなどのどのような通常の薬剤の媒体でも用いることができる；また粉末、丸薬、カプセルおよび錠剤の場合には、例えば、澱粉、糖、カオリン、希釈剤、潤滑油、結合剤、崩壊剤などのような固体担体などのどのような通常の薬剤の媒体でも用いることができる。投与が容易であるため、経口投与が好ましく、錠剤およびカプセルがもっとも有利な経口の投与量単位の形態である。この場合、固体薬剤担体が用いられることは言うまでもない。非経口投与組成物の場合、担体は、少なくとも大部分で、通常滅菌水を含むことになるが、例えば、溶解性を補助する他の成分を含んでいてもよい。例えば、その担体が食塩水，グルコース溶液または食塩水およびグルコース溶液の混合物を含む注射剤を調製してもよい。この場合、適切な液体担体、懸濁剤などを用いて注射剤を調製してもよい。また、使用の直前に液体形態の製剤に変換することを意図した固体形態の製剤も含まれる。経皮投与に適した組成物において、担体は必要に応じて浸透促進剤および／または適切な湿潤剤を含んでもよく、任意の性質を有する適切な添加剤（この添加剤は皮膚に著しい有害作用をもたらさない）と低い割合で必要に応じて組み合わされてもよい。該添加剤は、皮膚への投与を容易にするものであっても、および／または、所望する組成物の調製に有用なものであってもよい。これらの組成物は、経皮貼布、スポットオン[spot-on]、軟膏などの種々の方法で投与してもよい。

投与の容易さおよび投与量の均一性のために、上述した医薬組成物を単位投与量の形態で処方することは特に好都合である。本明細書中に用いられる「単位投与量の形態」とは、一体的な投与として適した、物質的に分離した単位をいい、各単位は、必要な薬剤担体とともに所望する治療効果を生じるよう計算された活性成分の予め決められた量を含んでいる。この単位投与量の形態の例は、錠剤（分割錠剤または被覆錠剤を含む。）、カプセル、丸薬、粉末パケット、ウェーハ、坐薬、注射剤または懸濁液など、およびそれらを複数に分割したものである。

当業者に周知であるように、投与の正確な用量および頻度は、使用する式（Ｉ）の特定の化合物、治療される特定の疾患、治療される疾患の重篤度、年齢、体重、性別、障害の範囲および特定の患者の全身的な身体状態ならびに個人が服用しているかもしれない他の薬物に左右される。さらにまた、このような１日分の有効量は、治療される対象の反応および／または本発明の化合物を処方する医師の評価次第で減らすことも増やすこともできることは明らかである。

投与様式に応じて、医薬組成物は、活性成分を０．０５〜９９重量％、好ましくは０．１〜７０重量％、より好ましくは０．１〜５０重量％の量で、薬学的に許容し得る担体を１〜９９．９５重量％、好ましくは３０〜９９．９重量％、より好ましくは５０〜９９．９重量％の量で含む。すべてのパーセンテージは該組成物の総重量に基づく。

既に述べたように、本発明は、式（Ｉ）の化合物または他の薬剤が有用であり得る疾病または疾患の治療，予防，抑制，改善，またはその危険性の低減における、本発明の化合物および１以上の他の薬剤を含む医薬組成物ならびに薬剤の製造における該組成物の使用にも関する。本発明は、本発明の化合物とｍＧｌｕＲ２のオルト立体的アゴニストとの組合せにも関する。本発明は、医薬として使用するこのような組合せにも関する。本発明は、（ａ）本発明の化合物，その薬学的に許容し得る塩またはその溶媒和物と、（ｂ）ｍＧｌｕＲ２のオルト立体的アゴニストとを含む、ヒトを含む哺乳動物の疾患の治療または予防における、同時の，単独の，または連続の使用のための複合調剤[combined preparation]としての製品にも関する。該治療または予防は、ｍＧｌｕＲ２のアロステリック調節因子、特にｍＧｌｕＲ２の正のアロステリック調節因子の神経調節作用によって、影響を受けるかまたは促進される。本発明は、前述の疾病または疾患の治療または予防に使用するためのｍＧｌｕＲ２のオルト立体的アゴニストとの組み合わせにも関する。このような組合せもしくは製品中の種々の薬物は、薬学的に許容し得る担体もしくは希釈剤とともに一度の調製で混合するか、または種々の薬物を、薬学的に許容し得る担体もしくは希釈剤とともに別個に調製して各々を混合しない状態においてもよい。

次に、本発明について実施例を示して詳細に説明するが、本発明はこれらによって限定されるものではない。

化学
本発明の化合物を調製するいくつかの方法を、以下の実施例において例示する。特に明記しない限り、すべての出発物質は商業用供給元から得られたものであり、さらなる精製をせずに使用した。

以下、「ＴＨＦ」は、テトラヒドロフランを意味し；「ＤＭＦ」は、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを意味し；「ＥｔＯＡｃ」は、酢酸エチルを意味し；「ＤＣＭ」は、ジクロロメタンを意味し；「ＤＭＥ」は、１，２−ジメトキシエタンを意味し；「ＤＣＥ」は、１，２−ジクロロエタンを意味し；「ＤＩＰＥ」は、ジイソプロピルエーテルを意味し；「ＤＭＳＯ」は、ジメチルスルホキシドを意味し；「ＤＢＵ」は、１，８−ジアザ−７−ビシクロ［５．４．０］ウンデセンを意味し；「ＭｅＯＨ」は、メタノールを意味し；「ｈ」は、時間を意味し；「ｓ」は、秒を意味し；「ｍｉｎ」は、分を意味し；「ｒ．ｔ．」は、室温を意味し；「Ｍ．Ｐ．」）は、融点を意味し；ＤＡＰＣｙは、トランス−（Ｃｙ_２ＮＨ）_２Ｐｄ（ＯＡｃ）_２）を意味する。

マイクロ波を用いた反応は、単一モード反応器：Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ（商標） Ｓｉｘｔｙ ＥＸＰマイクロ波反応器（バイオタージ ＡＢ社[Biotage AB]）で、または多重モード反応器：ＭｉｃｒｏＳＹＮＴＨ Ｌａｂｓｔａｔｉｏｎ（マイルストーン社[Milestone, Inc.]）で行った。

^１Ｈ ＮＭＲスペクトルを標準パルス系列（standard pulse sequence）を有するブルカー社[Bruker]のＤＰＸ−４００およびブルカー社のＡＶ―５００分光計に記録し、それぞれ４００ＭＨｚおよび５００ＭＨｚで行い、溶媒としてＣＤＣＬ_３およびＣ_６Ｄ_６を使用した。化学シフト（δ）を、内部標準として用いたテトラメチルシラン（ＴＭＳ）からのパーツパーミリオン（ｐｐｍ）低磁場で示す。

〔説明１〕
２−（１−エトキシ−エチリデン）−マロノニトリル（Ｄ１）

マロノニトリル（１７ｇ、２５７．５７ｍｍｏｌ）およびオルト酢酸トリエチル（４５．９５ｇ、２８３．２５ｍｍｏｌ）の混合物を、９５℃で１．５時間加熱した。次いで、この混合物を真空で蒸発させ、黄色の固体として化合物Ｄ１（３４ｇ、９９％）を得た。さらなる精製をせずに、この化合物を次の反応工程で用いた。

化合物Ｄ１は、市販のＣＡＳ（５４１７−８２−３）でもある。

〔説明２〕
２−（３−ジメチルアミノ−１−メトキシ−アリリデン）−マロノニトリル（Ｄ２）

混合物である、Ｄ１（３４ｇ、２５０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（３００ｍｌ）溶液に、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（４４．６８ｇ、３７５ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を２時間還流加熱した。次に、この混合物を室温まで冷却し、冷却中に暗赤色の固体が沈殿した。この固体をろ過して取り除き、冷メタノールで洗浄し、真空で乾燥させて、赤い固体として化合物Ｄ２（１６．２ｇ，３８％）を得た。
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：１７７；［ＭＨ^＋］：１７８；ＲＴ（ｍｉｎ）：２．２５
化合物Ｄ２は、市販のＣＡＳ（９５６８９−３８−６）でもある。

〔説明３〕
２−アミノ−４−メトキシ−ニコチノニトリル（Ｄ３）

混合物である、Ｄ２（１６ｇ，９０．３９ｍｍｏｌ）のＮＨ₄ＯＨ（１００ｍｌ，水中３０％）溶液を３時間還流加熱した。氷浴で冷却後、黄色の固体が沈殿した。この固体をろ過して取り除き、冷イソプロパノールで洗浄し、真空で乾燥させて、白色固体として化合物Ｄ３（１０ｇ、７６％）を得た。
ＬＣＭＳ:ＭＷ(ｔｈｅｏｒ):１４９;［ＭＨ^＋］:１５０;ＲＴ(ｍｉｎ):０．４１
化合物Ｄ３は、市販のＣＡＳ（９８６５１−７０−８）でもある。

〔説明４〕
２−ブロモ−４，４，４−トリフルオロ−ブチルアルデヒド（Ｄ４）

０℃に冷やした１，４−ジオキサン（５ｍｌ）と４，４，４−トリフルオロブチルアルデヒド（５ｇ、３９．６８ｍｍｏｌ）との混合物に、臭素（２．２４ｍｌ、４３．６５ｍｍｏｌ）を滴下した。この反応混合物を０℃で２時間撹拌した。得られた反応混合物を珪藻土のパッドでろ過し、ろ液をＮａＨＣＯ₃（飽和水溶液）で洗浄した。有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ₄）させ、真空で蒸発させて、化合物Ｄ４（６．２ｇ、７６％）を得た。さらなる精製をせずに、この化合物Ｄ４を次の反応工程で用いた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：９．４６（ｓ、１Ｈ）；４．４８（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ、１Ｈ）；３．２６−３．１３（ｍ、１Ｈ）；２．７４−２．６０（ｍ、１Ｈ）。

〔説明５〕
７−ヒドロキシ−３−（２，２，２−トリフルオロ−エチル）−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−カルボニトリル（Ｄ５）

混合物である、化合物Ｄ３（３．３１ｇ、２２．１９ｍｍｏｌ）およびＤ４（６．２ｇ、２１．８６ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１０ｍｌ）溶液を、１５０℃で４０分間マイクロ波加熱した。室温に冷却後、溶媒を真空中で蒸発させた。このように得られた残渣をＥｔ_２Ｏで処理し、固体が沈殿した。この固体を、ろ過して取り除き、ＥｔＯＡｃで洗浄し、真空で乾燥させて、化合物Ｄ５（１ｇ、１８％）を得た。
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：２４１；［ＭＨ^＋］：２４２；ＲＴ（ｍｉｎ）：１．０６

〔説明６〕
７−クロロ−３−（２，２，２−トリフルオロ−エチル）−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−カルボニトリル（Ｄ６）

化合物Ｄ５（１ｇ、４．１４８ｍｍｏｌ）および塩化酸化リン（Ｖ）（２ｍｌ）の混合物を、１３０℃で１５分間マイクロ波加熱した。室温に冷却後、溶媒を真空中で蒸発させた。次いで、この残渣ＨＣＯ₃（飽和水溶液）で処理し、ＤＣＭで抽出した。有機質層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ₄）させ、真空で蒸発させた。粗生成物を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液としてＥｔ_２Ｏ）で精製した。所望の画分を回収し、真空で蒸発させ、黄色の固体として化合物Ｄ６（０．６ｇ、５６％）を得た。
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：２５９；［ＭＨ^＋］：２６０；ＲＴ（ｍｉｎ）：２．６６（方法１１）

〔説明７〕
２，４−ジブロモ−ニコチノニトリル（Ｄ７）

市販の４−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−３−ピリジンカルボニトリル［Ｃ．Ａ．Ｓ．２１６４２−９８−８］（９５．４７ｇ、３３３ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（６７０ｍｌ）溶液に、オキシ臭化リン（Ｖ）（２５０ｇ、１６６ｍｍｏｌ）を分割して加えた。得られた懸濁液を６０℃で１６時間加熱した。室温まで冷却後、この反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水で洗浄した。有機層を分離し、ＮａＨＣＯ₃（飽和水溶液）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ₄）させて、真空で蒸発させた。得られた粗生成物をＤＩＰＥで粉末にし、白色固体として化合物Ｄ７（３４．５ｇ、７９％）を得た。
ＧＣＭＳ（ＥＩ）：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：２６２；［Ｍ−２Ｈ^＋］：２６０；ＲＴ（ｍｉｎ）：９．６７

〔説明８〕
２−アミノ−４−ブロモ−ニコチノニトリル（Ｄ８）

混合物である、化合物Ｄ７（３２ｇ、１２２．２ｍｍｏｌ）のＮＨ_４ＯＨ（２００ｍｌ、水中３０％）およびＴＨＦ（２００ｍｌ）溶液を、ＰＡＲＲ圧力容器中１００℃で１２時間加熱した。冷却後、ＥｔＯＡｃを加えた。有機層を分離し、塩水で洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）させて、真空で蒸発させた。このように得られた残渣をＤＣＭで粉末にし、その後、ろ過して取り除いた。ろ液を真空で蒸発させ、白色固体として化合物Ｄ８（６．５ｇ、２６．８％）を得た。
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：１９７；［ＭＨ^＋］：１９８；ＲＴ（ｍｉｎ）：１．１４（方法２）

〔説明９〕
７−ブロモ−３−（２，２，２−トリフルオロ−エチル）−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−カルボニトリル（Ｄ９）

混合物である、化合物Ｄ８（２ｇ、１０．１ｍｍｏｌ）およびＤ４（２．８９８ｇ、１４．１４ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１０ｍｌ）溶液を、１５０℃で４０分間マイクロ波加熱した。室温まで冷却後、溶媒を真空で蒸発させた。このように得られた残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、水で洗浄した。有機層を分離し、水で洗浄後、１ＭのＨＣｌ（水溶液）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ₄）させ、真空で蒸発させた。このように得られた粗生成物をジエチルエーテルで粉末にし、化合物Ｄ９（１．５ｇ、４８．８％）を得た。
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：３０３；［ＭＨ^＋］：３０４；ＲＴ（ｍｉｎ）：２．４８．方法１４

〔説明１０〕
２，３−ジクロロ−４−ヨード−ピリジン（Ｄ１０）

ｎ−ブチルリチウム（２７．６ｍｌ、６９ｍｍｏｌ、ヘキサン中２．５Ｍ）の、窒素雰囲気下で−７８℃に冷却した乾燥Ｅｔ_２Ｏ（１５０ｍｌ）溶液に、２，２，６，６−テトラメチルピペリジン（１1．６４ｍｌ、６９ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。得られた反応混合物を−７８℃で１０分間撹拌し、次に乾燥ＴＨＦ（７５ｍｌ）中の２，３−ジクロロピリジン（１０ｇ、６７．５７ｍｍｏｌ）の溶液を滴下した。この混合物を−７８℃で３０分間撹拌し、そして乾燥ＴＨＦ（７５ｍｌ）中のヨウ素（２５．３８ｇ、１００ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。この混合物を一晩かけて室温までゆっくり温め、その後、Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_３（飽和水溶液）でクエンチし、ＥｔＯＡｃで２回抽出した。混合した有機抽出液をＮａＨＣＯ_３（飽和水溶液）で洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）させ、そして真空で蒸発させた。粗残渣をヘプタンで沈殿させ、得られた沈殿をろ過して取り除き、オーブン中で乾燥させて薄いクリーム色の固体として化合物Ｄ１０（８．２１ｇ、４４％）を得た。
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：２７３；［ＭＨ^＋］：イオン化しない；ＲＴ（ｍｉｎ）：２．７３（方法１２）

〔説明１１〕
３−クロロ−４−ヨード−ピリジン−２−イルアミン（Ｄ１１）

化合物Ｄ１６（６ｇ、２１．９ｍｍｏｌ）とＮＨ_４ＯＨ（１２ｍｌ、１１Ｎ）水溶液中との混合物を１２９℃で１２時間加熱した。室温まで冷却後、ＤＣＭを加えた。有機層を分離し、塩水で洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）させて、真空で蒸発させた。このように得られた残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液として２％までのＤＣＭ／ＭｅＯＨ（ＮＨ_３））で精製した。所望の画分を回収し、真空で蒸発させて、白色固体として化合物Ｄ１１（２．８８ｇ、５２％）を得た。
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：２５４；［ＭＨ^＋］：２５５；ＲＴ（ｍｉｎ）：２．２２（方法１３）

〔説明１２〕
８−クロロ−７−ヨード−３−（２，２，２−トリフルオロ−エチル）−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（Ｄ１２）

混合物である、化合物Ｄ１１（０．５０７ｇ、１．９９２ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（７ｍｌ）溶液に、化合物Ｄ４（０．８１７ｇ、３．９８５ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を１５０℃で３０分間マイクロ波加熱した。この混合物を室温まで冷却し、溶媒を真空で蒸発させた。この残渣をＤＣＭに取り込んだ後、ＮａＨＣＯ_３（飽和水溶液）で洗浄した。有機層を分離し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）させ、そして溶媒を真空で蒸発させた。この残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液として６％までのＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ）で精製した。所望の画分を回収し、真空で蒸発させて、黄色の固体として化合物Ｄ１２（０．５ｇ、６９．６％）を得た。
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：３６０；［ＭＨ^＋］：３６１；ＲＴ（ｍｉｎ）：２．３１（方法８）

〔説明１３〕
（４−ブロモ−２−クロロフェニル）−（テトラヒドロピラン−４−イル）−アミン（Ｄ１３）

混合物である、４−ブロモ−２−クロロ−フェニルアミン（０．５ｇ、２．４２２ｍｍｏｌ）、テトラヒドロピラン−４−オン（１．３０８ｍｌ、１０．８９８ｍｍｏｌ）およびナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（２．３１ｇ、１０．８９８ｍｍｏｌ）のＤＣＥ（２０ｍｌ）溶液を、室温で１６時間撹拌した。この反応混合物をＮａＨＣＯ_３（飽和水溶液）で洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）させ、そして溶媒を真空で蒸発させた。この残渣を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液として４０％までのヘプタン／ＤＣＭ）で精製した。所望の画分を回収し、真空で蒸発させて、白色固体として化合物Ｄ１３（０．３８３ｇ、５２％）を得た。
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：２８９；［ＭＨ^＋］：２９０；ＲＴ（ｍｉｎ）：４．３９（方法１）。

〔説明１４〕
（４−ブロモ−２−クロロ−６−ヨード−フェニル）−（テトラヒドロピラン−４−イル）−アミン（Ｄ１４）

Ｄ１３（０．３８０ｇ、１．３０８ｍｍｏｌ）の、ＣＨＣｌ_３（２０ｍｌ）および酢酸（１０ｍｌ）溶液に、Ｎ−ヨードスクシンイミド（０．３２４ｍｇ、１．４３８ｍｍｏｌ）を加えた。得られた懸濁液を室温で３時間撹拌した。この反応混合物を、ＤＣＭで希釈し、Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_３（飽和水溶液）、ＮａＨＣＯ_３（飽和水溶液）および塩水によって、順次洗浄した。洗浄された有機層を乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）させ、そして溶媒を真空で蒸発した。この残渣を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液として５０％までのヘプタン／ＤＣＭ）で精製した。所望の画分を回収し、真空で蒸発させて、無色油状物として化合物Ｄ１４（０．１４５ｇ、２６．６％）を得た。

〔説明１５〕
（４−ブロモ−２−クロロ−６−トリメチルシラニルエチニル−フェニル）−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−アミン（Ｄ１５）

Ｄ１４（０．１４５ｇ、０．３４８ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_２Ｃｌ_２（１２．２１９ｍｇ、０．０１７４ｍｍｏｌ）およびＣｕＩ（３．３１５ｍｇ、０．０１７４ｍｍｏｌ）を、窒素雰囲気下で、オーブンで乾燥させたフラスコに入れた。乾燥したＥｔ_３Ｎ（１０ｍｌ）を加え、そして得られた懸濁液を０℃まで冷やし、撹拌した。トリメチルシリルアセチレン（０．０５４１ｍｌ、０．３８３ｍｍｏｌ）を滴下して加えた後、この混合物を窒素雰囲気下で一晩中室温で撹拌した。この反応混合物をＤＣＭで希釈し、塩水で洗浄し、そして乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）させた。溶媒を真空で蒸発させた。この残渣を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液として６０％までのヘプタン／ＤＣＭ）で精製した。所望の画分を回収し、真空で蒸発させて、無色油状物として化合物Ｄ１５（０．１１ｇ、８１．６％）を得た。
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：２８５；［ＭＨ^＋］：２８６；ＲＴ（ｍｉｎ）：４．２６（方法１１）

〔説明１６〕
５−ブロモ−７−クロロ−１−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−インドール（Ｄ１６）

混合物である、Ｄ１５（０．１１ｇ、０．２８４ｍｍｏｌ）およびＣｕＩ（０．１０８ｍｇ、０．５６９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍｌ）溶液を、１８０℃で１５分間マイクロ波加熱した。室温に冷却後、この反応をＤＣＭで希釈し、珪藻土のパッドでろ過した。ろ液を真空で蒸発させた。この残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離剤としてヘプタン）で精製した。所望の画分を回収し、真空で蒸発させて、化合物Ｄ１６（０．０７１ｇ、７９％）を得た。
ＧＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：３１３；［Ｍ^＋］：３１３；ＲＴ（ｍｉｎ）：１３．６（方法２１）

〔説明１７〕
７−クロロ−１−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドール（Ｄ１７）

ビス（ピナコラト）ジボロン（０．２７５ｇ、１．０８３ｍｍｏｌ）および酢酸カリウム（０．１９９ｇ、２．０３１ｍｍｏｌ）を、中間体Ｄ１６（０．０７１ｇ、０．２２６ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１０ｍｌ）およびＤＭＦ（４ｍｌ）溶液に加えた。この混合物に窒素気流をバブリングし、その後、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−フェロセン］−ジクロロパラジウム（ＩＩ）のＤＣＭとの錯体（１：１）（１４．９ｍｇ、０．０２０３ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を１５０℃で４０分間マイクロ波加熱した。所望の生成物へのほんの少しの変換をＬＣＭＳを用いて観測した。２回のさらなるマイクロ波照射が、所望の生成物への変換の完了に必要であり、１回目は１７０℃で５０分間、２回目は１７５℃で１時間であり、それぞれのさらなる照射のために、対応するさらなる量のビス（ピナコラト）ジボロン（１．６当量）、酢酸カリウム（３当量）、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−フェロセン］−ジクロロパラジウム（ＩＩ）のＤＣＭとの錯体（１：１）（０．０３当量）およびＤＭＦ（２ｍｌ）を用いた。室温に冷却後、反応混合物を珪藻土のパッドでろ過した。ろ液を真空で蒸発させた。この残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液：溶離液として５０％までのヘプタン／ＤＣＭ）で精製した。所望の画分を回収し、そして溶媒を真空で蒸発させ、無色油状物としてＤ１７（０．０７２ｇ、８８％）を得た。

〔説明１８〕
７−クロロ−５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドール（Ｄ１８）

ビス（ピナコラト）ジボロン（１．０５８ｇ、４．１６５ｍｍｏｌ）および酢酸カリウム（０．３８３ｇ、３．９０５ｍｍｏｌ）を、５−ブロモ−７−クロロ−１Ｈ−インドール［Ｃ．Ａ．Ｓ．１８０６２３−８９−６］（０．３ｇ、１．３０２ｍｍｏｌ）のジオキサン（１０ｍｌ）およびＤＭＦ（２ｍｌ）溶液に加えた。この混合物に窒素気流をバブリングし、その後、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−フェロセン］−ジクロロパラジウム（ＩＩ）のＤＣＭとの錯体（１：１）（４７．７５ｍｇ、０．０６５１ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を１５０℃で３０分間マイクロ波加熱した。所望の生成物へのほんの少しの変換をＬＣＭＳを用いて観測した。その後、この反応に、さらなる量の［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−フェロセン］−ジクロロパラジウム（ＩＩ）のＤＣＭとの錯体（１：１）（４８ｍｇ）を入れ、１５０℃で再びマイクロ波照射した。室温に冷却後、反応混合物を珪藻土でろ過した。ろ液を真空で蒸発させた。この残渣を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル：溶離液として１０％までのヘプタン／ＥｔＯＡｃ）で精製した。所望の画分を回収し、そして溶媒を真空で蒸発させ、白色固体としてＤ１８（０．０８ｇ、２２％）を得た。
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：２７７；［Ｍ−Ｈ^＋］：２７６；ＲＴ（ｍｉｎ）：４．６６（方法９）

〔説明１９〕
２−（１，４−ジオキサ−スピロ［４．５］デカ−８−イルアミノ）−フェノール（Ｄ１９）

混合物である、２−アミノフェノール（２ｇ、１８．３２７ｍｍｏｌ）、１，４−ジオキサ−スピロ［４．５］デカン−８−オン（３．７２１ｇ、２３．８２５ｍｍｏｌ）およびナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（５．８２６ｇ、２７．４９１ｍｍｏｌ）の、ＤＣＥ（２０ｍｌ）および酢酸（０．２ｍｌ）溶液を、室温で３時間撹拌した。この反応混合物をＤＣＭで希釈し、ＮａＨＣＯ_３（飽和水溶液）で洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）させ、そして溶媒を真空で蒸発させた。この固体残留物を、ジイソプロピルエーテルで粉末にし、白色固体としてＤ１９（３．７８ｇ）を得た。
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：３２７；［ＭＨ^＋］：３２８；ＲＴ（ｍｉｎ）：３．９２（方法９）

〔説明２０〕
２−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−フェノール（Ｄ２０）

混合物である、２−アミノフェノール（１ｇ、９．１６４ｍｍｏｌ）、テトラヒドロピラン−４−オン（１．０９９ｍｌ、１１．９１３ｍｍｏｌ）およびナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（０．７１ｇ、３．４２ｍｍｏｌ）のＤＣＥ（５０ｍｌ）溶液を、室温で１６時間撹拌した。この粗製混合物を、珪藻土でろ過し、ＤＣＭで洗浄し、そしてを液を真空で蒸発させることで、Ｄ２０（０．６９ｇ）を得た。さらなる精製をせずに、この化合物Ｄ２０を次の反応工程で用いた。
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：１９３；［ＭＨ^＋］：１９４；ＲＴ（ｍｉｎ）：２．１９（方法９）

〔説明２１〕
５−ブロモ−２−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−フェノール（Ｄ２１）

中間体Ｄ２０（０．６６ｇ、３．４１５ｍｍｏｌ）およびＮ−ブロモスクシンイミド（０．６６９ｇ、３．７５７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍｌ）溶液を、室温で１時間撹拌した。その後、この反応混合物をＮａＨＣＯ_３（飽和水溶液）で洗浄した。有機層を分離し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）させ、そして溶媒を真空で蒸発させた。この粗生成物を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液としてＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ ８：２）で精製した。所望の画分を回収し、真空で蒸発させて、赤みがかった固体としてＤ２１（０．４３３ｇ、４６．６％）を得た。
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：２７１；［ＭＨ^＋］：２７２；ＲＴ（ｍｉｎ）：３．３３（方法９）

〔説明２２〕
５−ブロモ−２−（１，４−ジオキサ−スピロ［４．５］デカ−８−イルアミノ）−フェノール（Ｄ２２）

中間体Ｄ１９（１ｇ、４．０１１ｍｍｏｌ）およびＮ−ブロモスクシンイミド（０．７８５ｇ、４．４１２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１５ｍｌ）溶液を、室温で１時間撹拌した。その後、この反応混合物をＮａＨＣＯ_３（飽和水溶液）で洗浄した。有機層を分離し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）させ、そして溶媒を真空で蒸発させた。この粗生成物を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液としてＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ ８：２）で精製した。所望の画分を回収し、真空で蒸発させて、赤みがかった固体としてＤ２２（０．４３３ｇ、３２．８９％）を得た。
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：３２７；［ＭＨ^＋］：３２８；ＲＴ（ｍｉｎ）：２．８２（方法１５）

〔説明２３〕
７−ブロモ−４−（テトラヒドロピラン−４−イル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン（Ｄ２３）

混合物である、中間体Ｄ２１（０．４３３ｇ、１．５９１ｍｍｏｌ）、１，２−ジブロモエタン（０．４１１ｍｌ、４．７７３ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（１．０９９ｇ、７．９５５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍｌ）溶液を、１８０℃で１５分間マイクロ波加熱した。室温に冷却後、反応混合物を珪藻土でろ過した。ろ液を真空で蒸発させた。この粗製残渣を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液としてＤＣＭ）で精製した。所望の画分を回収し、真空で蒸発させ、結晶化させることで白色固体としてＤ２３（０．２６７ｇ、５６％）が得られる、無色油状物を得た。
Ｍ.Ｐ.:６６．２℃
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：２９７；［ＭＨ^＋］：２９８；ＲＴ（ｍｉｎ）：４．２４（方法９）

〔説明２４〕
７−ブロモ−４−（１，４−ジオキサ−スピロ［４．５］デカ−８−イル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン（Ｄ２４）

混合物である、中間体Ｄ２２（０．４３３ｇ、１．３１９ｍｍｏｌ）、１，２−ジブロモエタン（０．３４１ｍｌ、３．９５８ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（０．９１２ｇ、６．５９６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍｌ）溶液を、１８０℃で１５分間マイクロ波加熱した。室温に冷却後、この反応混合物を珪藻土でろ過した。ろ液を真空で蒸発させた。この粗製残渣を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液としてＤＣＭ）で精製した。所望の画分を回収し、真空で蒸発させて、結晶化させることでＤ２４（０．２７１ｇ、５８％）が得られる、無色油状物を得た。
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：３５３；［ＭＨ^＋］：３５４；ＲＴ（ｍｉｎ）：４．７１（方法９）

〔説明２５〕
４−（７−ブロモ−２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］オキサジン−４−イル）−シクロヘキサノン（Ｄ２５）

混合物である、中間体Ｄ２４（０．２５０ｇ、０．７０６ｍｍｏｌ）、ｐ−トルエンスルホン酸（１３．４２４ｍｇ、０．０７０６ｍｍｏｌ）のＨ_２Ｏ（５ｍｌ）およびアセトン（２．５ｍｌ）溶液を、１００℃で１５分間マイクロ波加熱した。室温に冷却した後、反応混合物をＤＣＭで希釈し、ＮａＨＣＯ_３（飽和水溶液）で洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）させ、そして真空で蒸発させた。この反応混合物を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液としてＤＣＭ）で精製した。所望の画分を回収し、真空で蒸発させて白色固体としてＤ２５（０．１７２ｇ、７８％）を得た。Ｍ.Ｐ.:１０１．８℃
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：３０９；［ＭＨ^＋］：３１０；ＲＴ（ｍｉｎ）：３．７７（方法１６）

〔説明２６〕
４−（７−ブロモ−２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］オキサジン−４−イル）−シクロヘキサノール（Ｄ２６）

混合物である、中間体Ｄ２５（１．３ｇ、４．１９１ｍｍｏｌ）および水素化ホウ素ナトリウム（０．４７６ｇ、１２．５７３ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１５ｍｌ）溶液を室温で３時間撹拌した。それから、得られた混合物をＮＨ_４Ｃｌ（飽和水溶液）で慎重にクエンチし、ＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）させ、そして真空で蒸発させた。この残渣を、ジイソプロピルエーテル／ジエチルエーテルの混合物で粉末にし、シス／トランス異性体の混合物（それぞれ３４％および６６％）としてＤ２６（１．０４５ｇ、６３％）を得た。
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：３１１；［ＭＨ^＋］：３１２；ＲＴ（ｍｉｎ）：２．８３（方法１５）

〔説明２７〕
４−［７−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］オキサジン−４−イル］−シクロヘキサノール（Ｄ２７）

ビス（ピナコラト）ジボロン（０．５５２ｇ、２．１７４ｍｍｏｌ）および酢酸カリウム（０．４９２ｇ、５．０１６ｍｍｏｌ）を、中間体Ｄ２６（シス／トランス混合物）（０．５２２ｇ、１．６７２ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（５ｍｌ）溶液に加えた。この混合物に窒素気流をバブリングし、その後、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−フェロセン］−ジクロロパラジウム（ＩＩ）のＤＣＭとの錯体（１：１）（０．０７３６ｇ、０．１ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を密閉された管中、９５℃で一晩中加熱した。室温に冷却後、反応混合物を珪藻土のパッドでろ過し、そしてそのパッドを１，４−ジオキサンでさらに洗浄した。混合したろ液を真空で蒸発させた。この粗製残渣を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液として５％までの勾配（gradient up to ５％）のＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ）で精製した。所望の画分を回収し、真空乾燥させることで、結晶化させることでシス／トランス異性体の混合物としてＤ２７（０．６ｇ、９９％）が得られる、無色の油状残渣を得た。ＬＣＭＳ（６７％のトランスおよび３３％シス）による。
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：３５９；［ＭＨ^＋］３６０；ＲＴ（ｍｉｎ）：２．７４（方法１７）

〔説明２８〕
４−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−７−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン（Ｄ２８）

ビス（ピナコラト）ジボロン（３１５．９５６ｍｇ、１．２４４ｍｍｏｌ ｍｍｏｌ）および酢酸カリウム（２６１．６５９ｍｇ、２．６６６ｍｍｏｌ）を、中間体Ｄ２３（２６５ｍｇ、０．８８９ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１２ｍｌ）溶液に加えた。この混合物に窒素気流をバブリングし、その後、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−フェロセン］−ジクロロパラジウム（ＩＩ）のＤＣＭとの錯体（１：１）（０．０７３６ｇ、０．１ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を密閉された管中、９５℃で一晩中加熱した。室温に冷却後、反応混合物を珪藻土のパッドでろ過した。ろ液を真空で蒸発させた。この粗製残渣を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液としてＤＣＭ）で精製した。所望の画分を回収し、そして溶媒を真空で蒸発させ、結晶化させることで白色固体としてＤ２８（０．６１ｇ、１９．８８％）が得られる、無色の油状残渣を得た。
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：３４５；［ＭＨ^＋］：３４６；ＲＴ（ｍｉｎ）：４．５２（方法９）

〔説明２９〕
５−ブロモ−１−（１，４−ジオキサ−スピロ［４．５］デカ−８−イル）−１Ｈ−インドール（Ｄ２９）

混合物である、５−ブロモインドール（８．４７２ｇ、４３．２１６ｍｍｏｌ）、トルエン−４−スルホン酸１，４−ジオキサ−スピロ［４．５］デカ−８−イルエステル（１３．５ｇ、４３．２１６ｍｍｏｌ）（Journal of the Chemical Society, Perkin Transactions 1 (2002), (20), 2251-2255に記載されている方法に従って調製した）および粉末状の水酸化カリウム（１３．２３９ｇ、２３５．９５８ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（３００ｍｌ）溶液を、８０℃で６時間撹拌した。その後、この混合物を室温に冷やし、氷水に注いだ。得られた水性混合物をＥｔ_２Ｏで抽出し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）させ、そして揮発性物質を真空で蒸発させた。この粗製残渣を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液としてＤＣＭ／ｈｅｐｔａｎｅ １：１）で精製した。所望の画分を回収し、真空で蒸発させ、白色固体としてＤ２９（２．８９７ｇ、１９．９３％）を得た。
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：３３５；［ＭＨ^＋］：３３６；ＲＴ（ｍｉｎ）：４．３８（方法１８）

〔説明３０〕
４−（５−ブロモ−１Ｈ−インドール−１−イル）−シクロヘキサノン（Ｄ３０）

混合物である、中間体Ｄ２９（２４ｇ、７１．３８ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸（０．６７９ｍｇ、３．５６９ｍｍｏｌ）の、水（７２ｍｌ）およびアセトン（１６８ｍｌ）溶液を、１００℃で１５分間マイクロ波加熱した。室温に冷却後、この反応混合物をＤＣＭで希釈し、ＮａＨＣＯ_３（飽和水溶液）で洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）させ、そして溶媒を真空で蒸発させた。この残渣をＥｔ_２Ｏ（１００ｍｌ）／アセトン（３０ｍｌ）の混合物で粉末にした。この固体をろ過して取り除き、そしてろ液を真空で蒸発させ、黄色の油状物としてＤ３０（１８．１３ｇ、７３％）を得た。
ＧＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：２９１；［Ｍ^＋］：２９１；ＲＴ（ｍｉｎ）：１４．５

〔説明３１〕
４−（５−ブロモ−１Ｈ−インドール−１−イル）−シクロヘキサノール（Ｄ３１）

０℃で攪拌しながら、水素化ホウ素ナトリウム（６２．１９８ｍｇ、１．６４４ｍｍｏｌ）を、混合物である、中間体Ｄ３０（２．０７４ｇ、７．０９８ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（５０ｍｌ）溶液に加えた。得られた反応混合物を、室温に温め、さらに１時間撹拌した。その後、この混合物を真空で濃縮し、そして残渣をＤＣＭに溶解させた。この溶液をＮＨ_４Ｃｌ（飽和水溶液）で洗浄した。この有機層を分離し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）させ、そして溶媒を真空で蒸発させた。この残渣を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液として０：１００から３０：７０までの勾配[gradient]のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）で精製した。所望の画分を回収し、そして溶媒を真空で蒸発させ、トランス−Ｄ３１（１．８０９ｇ、８６．６％）およびシス−Ｄ３１（０．１１０ｇ、５．２７％）を得た。
トランス−Ｄ３１
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：２９３；［ＭＨ^＋］：２９４；ＲＴ（ｍｉｎ）：３．８８（方法１９）
シス−Ｄ３１
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：２９３；［ＭＨ^＋］：２９４；ＲＴ（ｍｉｎ）：３．８８（方法１９）

〔説明 トランス−３２〕
トランス−４−［５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドール−１−イル］−シクロヘキサノール（トランス−Ｄ３２）

ビス（ピナコラト）ジボロン（０．８２９ｇ、３．２６３ｍｍｏｌ）および酢酸カリウム（０．３００ｇ、３．０５９ｍｍｏｌ）を、中間体トランス−Ｄ３１（０．３００ｇ、１．０２ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１２ｍｌ）およびＤＭＦ（２ｍｌ）溶液に加えた。この混合物に窒素気流をバブリングし、その後、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−フェロセン］−ジクロロパラジウム（ＩＩ）のＤＣＭとの錯体（１：１）（０．０３７４ｇ、０．０５１ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を１６０℃で１時間マイクロ波加熱した。室温に冷却後、反応混合物を珪藻土でろ過した。ろ液を真空で蒸発させた。この残渣を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液：１００：０から６０：４０までの勾配のＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ）で精製した。所望の画分を回収し、そして溶媒を真空で蒸発させ、トランス−Ｄ３２（０．２６０ｇ、７４．６％）を得た。
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：３４１；［ＭＨ^＋］：３４２；ＲＴ（ｍｉｎ）：４．７４（方法１０）

〔説明 シス−３２〕
シス−４−［５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドール−１−イル］−シクロヘキサノール（シス−Ｄ３２）

ビス（ピナコラト）ジボロン（０．２６５ｇ、１．０４２ｍｍｏｌ）および酢酸カリウム（０．２１９ｇ、２．２３３ｍｍｏｌ）を、中間体シス−Ｄ３１（０．２１９ｇ、０．７４４ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（４ｍｌ）溶液に加えた。この混合物に窒素気流をバブリングし、その後、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−フェロセン］−ジクロロパラジウム（ＩＩ）のＤＣＭとの錯体（１：１）（０．０３３ｇ、０．０４５ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を９５℃で２時間加熱した。室温に冷却後、反応混合物を珪藻土でろ過した。このろ液を真空で蒸発させた。この残渣を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液として１００：０から８０：２０までの勾配のヘプタン／ＥｔＯＡｃ）で精製した。所望の画分を回収し、そして溶媒を真空で蒸発させ、中間体シス−Ｄ３２（０．２１３ｇ、８３．８％）を得た。Ｍ.Ｐ.:１８７．７℃
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：３４１；［ＭＨ^＋］：３４２；ＲＴ（ｍｉｎ）：４．７４（方法３）

〔説明３３〕
４−（５−ブロモ−１Ｈ−インドール−１−イル）−１−メチル−シクロヘキサノール（Ｄ３３）

Ｎ_２雰囲気下で、メチルマグネシウムブロミド（１．４Ｍトルエン／ＴＨＦ溶液）（３．６６７ｍｌ、５．１３４ｍｍｏｌ）を、中間体Ｄ３０（０．５ｇ、１．７１１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍｌ）の***液（０℃で）に滴下した。得られた反応混合物を室温に温め、さらに４時間撹拌した。氷浴中で冷却後、この混合物をＮＨ_４Ｃｌ（飽和水溶液）で慎重にクエンチし、その後、ＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）させ、そして溶媒を真空で蒸発させた。この粗製残渣を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液として０−３０％のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）で精製した。所望の画分を回収し、そして溶媒を真空で蒸発させ、シス−Ｄ３３（０．０９６ｇ、１８．２％）およびトランス−Ｄ３３（０．１２ｇ、２２．７％）を得た。
Ｍ.Ｐ. シス−Ｄ３３：１１１℃
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：３０７；［ＭＨ^＋］：３０８；ＲＴ（ｍｉｎ）：４．０６（方法２０）
Ｍ.Ｐ. トランス−Ｄ３３：９５．９℃
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：３０７；［ＭＨ^＋］：３０８；ＲＴ（ｍｉｎ）：４．３０（方法１８）

〔説明 シス−３４〕
シス−１−メチル−４−［５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドール−１−イル］−シクロヘキサノール（シス−Ｄ３４）

ビス（ピナコラト）ジボロン（０．１１１ｇ、０．４３６ｍｍｏｌ）および酢酸カリウム（０．０９１７ｇ、０．９３４ｍｍｏｌ）を、中間体シス−Ｄ３３（０．０９６ｇ、０．３１１ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（４ｍｌ）溶液に加えた。この混合物に窒素気流をバブリングし、その後、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−フェロセン］−ジクロロパラジウム（ＩＩ）のＤＣＭとの錯体（１：１）（０．０１３７ｇ、０．０１８７ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を１００℃で１．５時間加熱した。室温に冷却後、反応混合物を珪藻土でろ過した。このろ液を真空で蒸発させた。この残渣を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液として１００：０から８０：２０までの勾配のヘプタン／ＥｔＯＡｃ）で精製した。所望の画分を回収し、そして溶媒を真空で蒸発させ、シス−Ｄ３４（０．０７４ｇ、６６．８７％）を得た。
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：３５５；［ＭＨ^＋］：３５６；ＲＴ（ｍｉｎ）：３．８６（方法６）

〔説明 トランス−３４〕
トランス−１−メチル−４−［５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドール−１−イル］−シクロヘキサノール（トランス−Ｄ３４）

ビス（ピナコラト）ジボロン（０．１３０ｇ、０．５１３ｍｍｏｌ）および酢酸カリウム（０．１０８ｇ、１．１ｍｍｏｌ）を、中間体トランス−Ｄ３３（０．１１３ｇ、０．３６７ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（４ｍｌ）溶液に加えた。この混合物に窒素気流をバブリングし、その後、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−フェロセン］−ジクロロパラジウム（ＩＩ）のＤＣＭとの錯体（１：１）（０．０１６１ｇ、０．０２２ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を１００℃で２．５時間加熱した。室温に冷却後、反応混合物を珪藻土でろ過した。このろ液を真空で蒸発させた。この残渣を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液として１００：０から８０：２０までの勾配のヘプタン／ＥｔＯＡｃ）で精製した。所望の画分を回収し、そして溶媒を真空で蒸発させ、トランス−Ｄ３４（０．０９６ｇ、７４％）を得た。
ＬＣＭＳ：ＭＷ（ｔｈｅｏｒ）：３５５；［ＭＨ^＋］：３５６；ＲＴ（ｍｉｎ）：３．９７（方法６）

〔説明３５〕
５−ブロモ−１−ピリミジン−２−イル−１Ｈ−インドール（Ｄ３５）

窒素気流を、混合物である５−ブロモインドール（２ｇ、１０．２０１ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１０ｍＬ）溶液にバブリングした。その後、Ｋ_２ＣＯ_３（４．２３ｇ、３０．６０４ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（０．０９７ｇ、０．５１ｍｍｏｌ）、Ｌ−プロリントリフルオロ酢酸塩[L-proline.trifluoric acetic acid]（０．２３４ｇ、１．０２ｍｍｏｌ）および２−ブロモピリミジン（１．６２２ｇ、１０．２０１ｍｍｏｌ）を加えた。得られた反応混合物を９０℃で４８時間密閉された管中で撹拌した。室温に冷却後、この反応混合物をＥｔＯＡｃおよび水で希釈し、珪藻土でろ過した。ろ液を真空で蒸発させた。この残渣を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液としてＤＣＭ）で精製した。所望の画分を回収し、真空で蒸発させ、Ｄ３５（２．６ｇ、９２％）を得た。

〔説明３６〕
１−ピリミジン−２−イル−５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドール（Ｄ３６）

ビス（ピナコラト）ジボロン（２ｇ、７．８８ｍｍｏｌ）および酢酸カリウム（１．９３３ｇ、１９．６９９ｍｍｏｌ）を、中間体Ｄ３５（１．８ｇ、６．５６６ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１３ｍｌ）溶液に加えた。この混合物に窒素気流をバブリングし、その後、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−フェロセン］−ジクロロパラジウム（ＩＩ）のＤＣＭとの錯体（１：１）（０．１４５ｇ、０．１９７ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を１００℃で１６時間加熱した。所望の生成物への一部のみの変換をＬＣＭＳを用いて観測した。その後、この反応槽に、さらなる量のテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．１４５ｇ）を入れ、１１０℃で４．５時間再び加熱した。室温に冷却後、この反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、珪藻土でろ過した。ろ液を真空で蒸発させた。この残渣を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液として１００：０から９０：１０までの勾配のヘプタン／ＥｔＯＡｃ）で精製した。所望の画分を回収し、真空で蒸発させ、Ｄ３６（２．１９ｇ、７３％）を得た。

［実施例１］
７−［７−クロロ−１−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−イル］−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−カルボニトリル（Ｅ１）

混合物である中間体Ｄ１７（０．０７ｇ、０．１９４ｍｍｏｌ）、中間体Ｄ９（０．１０７ｇ、０．１９４ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０１１ｇ、０．００９６８ｍｍｏｌ）および飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（５ｍｌ）の１，４−ジオキサン（５ｍｌ）溶液を、１５０℃で１０分間マイクロ波加熱した。室温に冷却後、この反応混合物を珪藻土でろ過し、ろ液をＤＣＭで希釈し、そして有機層を、最初水で、その後塩水で洗浄した。この有機画分を乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）させ、ろ過し、そして溶媒を真空で蒸発させた。この粗製残渣を，カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液として３０％までのＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ）で精製した。所望の画分を回収し、真空で蒸発させ、黄色のシロップとしてＥ１（９．１ｍｇ、９．６％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ ２．０３−２．１３（ｍ，２Ｈ）、２．１４−２．２０（ｍ，２Ｈ）、３．６４（ｔｄ，Ｊ＝１１．８，１．６Ｈｚ，２Ｈ）、３．８０（ｑ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，２Ｈ）、４．１７（ｄｄ，Ｊ＝１１．７，４．２Ｈｚ，２Ｈ）、５．５５（ｔｔ，Ｊ＝１１．６，４．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．６９（ｄ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，１Ｈ）、７．１５（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．３９（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．４７（ｄ，Ｊ＝１．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．７９（ｓ，１Ｈ）、７．９１（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ）、８．２２（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ）

［実施例２］
８−クロロ−７−（７−クロロ−１Ｈ−インドール−５−イル）−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−イミダゾ［１，２−ａ］−ピリジン（Ｅ２）

混合物である、中間体Ｄ１８（０．０９ｇ、０．３２４ｍｍｏｌ）、中間体Ｄ１２（０．１０６ｇ、０．２９５ｍｍｏｌ）、Ｋ_３ＰＯ_４（０．１８７ｇ、０．８８４ｍｍｏｌ）およびＤＡＰＣｙ（８．６２４ｍｇ、０．０１４７ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（２ｍｌ）溶液を、一晩中室温で撹拌した。この反応混合物を珪藻土でろ過し、そしてろ液を真空で蒸発させた。この粗製残渣を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液として５％までのＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ）で精製した。所望の画分を回収し、真空で蒸発させた。この残渣をヘプタンで粉末にすることで、ろ過して取り除き、そしてオーブン中で乾燥させることで白色固体としてＥ２（０．０７ｇ、６１．８％）が得られる、固体を得た。

Ｍ.Ｐ.分解した
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ ３．７８（ｑ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，１Ｈ）、６．６８（ｄｄ，Ｊ＝３．２，２．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．０１（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．３５（ｄｄ，Ｊ＝２．８，２．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．３９（ｄ，Ｊ＝１．４，Ｈｚ，１Ｈ）、７．７０−７．７３（ｍ，１Ｈ）、７．７４（ｓ，１Ｈ）、８．００（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ）、８．５７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）

［実施例３］
トランス−４−［５−［８−クロロ−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−７−イル］−１Ｈ−インドール−１−イル］−シクロヘキサノール（Ｅ３）

混合物である、中間体トランス−Ｄ３２（０．２５５ｇ、０．７４８ｍｍｏｌ）、中間体Ｄ１２（０．３５ｇ、０．６８ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０３９ｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）および飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（１．５ｍｌ）の１，４−ジオキサン（３ｍｌ）溶液を、１５０℃で１０分間マイクロ波加熱した。室温に冷却後、この反応混合物を珪藻土でろ過し、この珪藻土をさらにＥｔＯＡｃで洗浄し、そして混合したろ液を水および塩水で洗浄した。有機層を分離し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）させ、そして溶媒を真空で蒸発させた。この粗製残渣を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液として、１０％までのＤＣＭ／ＭｅＯＨ（ＮＨ_３）続いて、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ）で精製した。所望の画分を回収し、真空で蒸発させた。この残渣をジエチルエーテルで粉末にした。白色沈殿をろ過して取り除き、真空で乾燥させ、白色固体としてＥ３（０．１４ｇ、４６％）を得た。

Ｍ.Ｐ.１２９．４℃
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ １．５３−１．６８（ｍ，３Ｈ）、１．８０−１．９５（ｍ，２Ｈ）、２．２１（ｂｒ．ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，４Ｈ）、３．７８（ｑ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，２Ｈ）、３．７９−３．８９（ｍ，１Ｈ）、４．２５−４．３７（ｍ，１Ｈ）、６．６０（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．０４（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．２７（ｄ，１Ｈ）、７．４０（ｄｄ，Ｊ＝８．６，１．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．４８（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．７２（ｓ，１Ｈ）、７．８０（ｄ，Ｊ＝１．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ）

［実施例４］
トランス−４−［５−［８−クロロ−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−７−イル］−１Ｈ−インドール−１−イル］−１−メチル−シクロヘキサノール（Ｅ４）

混合物である、中間体トランス−Ｄ３４（０．２２１ｇ、０．３７３ｍｍｏｌ）、Ｄ１２（０．１１２ｇ、０．３１１ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０１８ｇ、０．０１５５ｍｍｏｌ）および飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（２ｍｌ）の１，４−ジオキサン（８ｍｌ）溶液を、１５０℃で１０分間マイクロ波加熱した。室温に冷却後、この反応混合物を珪藻土でろ過し、この珪藻土をさらにＥｔＯＡｃで洗浄し、そして混合されたろ液を水および塩水で洗浄した。有機画分を乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）させ、ろ過し、そして溶媒を真空で蒸発させた。この粗製残渣を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液として１５％までのＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ）で精製した。所望の画分を回収し、そして溶媒を真空で蒸発させた。残渣をＥｔ_２Ｏで粉末にした。白色沈殿をろ過して取り除き、真空で乾燥させることで、ＤＩＰＥで粉末にし、ろ過して取り除き、そしてオーブン中で乾燥させることで白色固体としてＥ４（０．７５ｇ、５２％）が得られる、残渣を得た。

Ｍ．Ｐ．１６２．２℃
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ １．１１（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）、１．３６（ｓ，３Ｈ）、１．６９（ｔｄ，Ｊ＝１３．９，３．９Ｈｚ，２Ｈ）、１．８３−１．９３（ｍ，２Ｈ）、１．９４−２．０４（ｍ，２Ｈ）、２．２５（ｑｄ，Ｊ＝１３．２，３．７Ｈｚ，２Ｈ）、３．７７（ｑ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，２Ｈ）、４．２６（ｔｔ，Ｊ＝１２．３，３．９Ｈｚ，１Ｈ）、６．５９（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．０４（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．３５（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．３９（ｄｄ，Ｊ＝８．８，１．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．４８（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．７１（ｓ，１Ｈ）、７．８０（ｄ，Ｊ＝１．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．９８（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ）

［実施例５］
４−［７−［８−クロロ−３−（２，２，２−トリフルオロ−エチル）−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−７−イル］−２，３−ジヒドロ−４Ｈ−１，４−ベンゾオキサジン−４−イル］−シクロヘキサノール（Ｅ５）

混合物である、中間体Ｄ２７（０．３ｇ、０．８３５ｍｍｏｌ）、Ｄ１２（０．３０１ｇ、０．８３５ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０４８２ｇ、０．０４１８ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ_３（飽和水溶液）（１．５ｍｌ）の１，４−ジオキサン（５ｍｌ）溶液を、１５０℃で１０分間、マイクロ波照射下で加熱した。室温に冷却後、この反応混合物を１５０℃でさらに１０分間マイクロ波加熱した。所望の生成物への一部のみの変換をＬＣＭＳを用いて観測した。その後、この反応槽に、さらなる量のテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０４８２ｇ）および飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（０．５ｍｌ）を入れ、マイクロ波照射下で、１５０℃で１０分間再び加熱した。室温に冷却後、この反応混合物を珪藻土でろ過し、この珪藻土をさらに１，４−ジオキサンで洗浄した。混合したろ液を真空で蒸発させた。この残渣を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液として５０％までのＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ）で精製した。所望の画分を回収し、溶媒を真空で蒸発させ、^１ＨＮＭＲで定まるジアステレオ異性体の混合物としてＥ５を得た。トランス／シス＝８８：１２（０．０９７ｇ、１０％）

（トランス−Ｅ５）^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ １．１１（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）、１．３８−１．７３（ｍ，４Ｈ）、１．９０（ｂｒ．ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，２Ｈ）、２．１３（ｂｒ．ｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，２Ｈ）、３．２９−３．３６（ｍ，２Ｈ）、３．６０−３．７３（ｍ，２Ｈ）、３．７４（ｑ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，２Ｈ）、４．２０−４．２９（ｍ，２Ｈ）、６．８０（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）、６．９５（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．０４（ｄ，Ｊ＝１．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．１０（ｂｒ．ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．６８（ｓ，１Ｈ）、７．９４（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ）

［実施例２５］
８−クロロ−７−（１−ピリミジン−２−イル−１Ｈ−インドール−５−イル）−３−（２，２，２−トリフルオロ−エチル）−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン

混合物である、中間体Ｄ３６（０．２６７ｇ、０．８３２ｍｍｏｌ）、Ｄ１２（０．２５ｇ、０．６９３ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０４０１ｇ、０．０３４７ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ_３（飽和水溶液）（１．７ｍｌ）の１，４−ジオキサン（６．８ｍｌ）溶液を、１５０℃で５分間加熱した。室温に冷却後、この反応混合物をＥｔＯＡｃおよび水で希釈し、珪藻土でろ過した。ろ液をＥｔＯＡｃで抽出し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）させ、そして真空で蒸発させた。この残渣を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル：溶出液として１５％までのＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ）で精製した。所望の画分を回収し、そして溶媒真空で蒸発させることで、残渣を得た。この残渣をＤＩＰＥで粉末にし、ろ過して取り除き、そしてオーブン中で乾燥させることでＥ２５（０．１３５ｇ、４６％）が得られる。

^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ ３．７８（ｑ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，２Ｈ）、６．７８（ｄ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，１Ｈ）、７．０６（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．１０（ｔ，Ｊ＝４．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．５１（ｄｄ，Ｊ＝８．６，１．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．７３（ｓ，１Ｈ）、７．８０（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ）、８．０１（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ）、８．３６（ｄ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，１Ｈ）、８．７４（ｄ，Ｊ＝４．６Ｈｚ，２Ｈ）、８．９３（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）
Ｍ.Ｐ.分解した

上記の実施例(Ex. No.)のうちの１つに従って調製された式（Ｉ）の化合物を表１に記載する。

物理化学的データ
ウォーターズ社[Waters]ＭＳ計測器（ＴＯＦ，ＺＱ，ＳＱＤ，Ｐｌａｔｆｏｒｍ）の基本手順
ＨＰＬＣ測定は、下記方法のそれぞれに規定されている脱気剤を有するポンプ（クォタナリまたはバイナリ）[quaternary or binary]、オートサンプラー、カラムオーブン、ダイオードアレイ検出器（ＤＡＤ）およびカラムを含む、アジレント・テクノロジー社[Agilent Technologies]のＨＰ１１００を用いて行った。カラムからのフローを分割し、ＭＳ分光計に流入させた。ＭＳ検出器を、エレクトロスプレーイオン化源[electrospray ionization source]またはＥＳＣＩ二重イオン化源[ESCI dual ionization source]（大気圧化学イオン化と併用したエレクトロスプレー）で構成した。窒素をネブライザーガスとして用いた。ソース温度を１４０℃に維持した。データ取得は、ＭａｓｓＬｙｎｘ−Ｏｐｅｎｌｙｎｘソフトウェアで行った。

アジレント社[Agilent]ＭＳ計測器（ＭＳＤ）の基本手順
ＨＰＬＣ測定は、下記方法のそれぞれに規定されている脱気剤を有するバイナリポンプ、オートサンプラー、カラムオーブン、ダイオードアレイ検出器（ＤＡＤ）およびカラムを含む、アジレント・テクノロジー社のＨＰ１１００を用いて行った。カラムからのフローを分割し、ＭＳ分光計に流入させた。ＭＳ検出器をＥＳＣＩ二重イオン化源（大気圧化学イオン化と併用したエレクトロスプレー）で構成した。窒素をネブライザーガスとして用いた。ソース温度を１００℃に維持した。データ取得は、Ｃｈｅｍｓａｔｉｏｎ−Ａｇｉｌｅｎｔ Ｄａｔａ Ｂｒｏｗｓｅｒソフトウェアで行った。

ウォーターズ社ＭＳ計測器（Ａｃｑｕｉｔｙ−ＳＱＤ）の基本手順
ＵＰＬＣ測定は、下記方法のそれぞれに規定されているサンプラーオーガナイザー[sampler organizer]，脱気剤を有するバイナリポンプ、４個のカラムのオーブン、ダイオードアレイ検出器（ＤＡＤ）およびカラムを含むウォーターズ社のＡｃｑｕｉｔｙシステムを用いて行った。カラムからのフローを分割せずに、ＭＳ分光計に流入させた。ＭＳ検出器をＥＳＣＩ二重イオン化源（大気圧化学イオン化と併用したエレクトロスプレー）で構成した。窒素をネブライザーガスとして用いた。ソース温度を１４０℃に維持した。データ取得は、ＭａｓｓＬｙｎｘ−Ｏｐｅｎｌｙｎｘソフトウェアで行った。

アジレント社ＧＣ／ＭＳＤ計測器の基本手順
ＧＣ測定は、下記方法のそれぞれに規定されている７６８３シリーズインジェクターおよびオートサンプラー、カラムオーブンならびにカラムを含む、５９７３Ｎ ＭＳＤ質量選択検出器（シングル四重極型、アジレント・テクノロジー社）と結合している６８９０シリーズガスクロマトグラフィー（アジレント・テクノロジー社）を用いて行った。ＭＳ検出器を、電子衝撃イオン化源[electronic impact ionization source]／化学イオン化源[chemical ionization source]（ＥＩ／ＣＩ）で構成した。ＥＩ低分解能質量スペクトルは、１４．２９のscans/sの速さで、５０から５５０までスキャンすることで得た。ソース温度は２３０℃に維持した。ヘリウムををネブライザーガスとして用いた。データ取得は、Ｃｈｅｍｓｔａｔｉｏｎ−Ｏｐｅｎ Ａｃｔｉｏｎソフトウェアで行った。

方法１
基本手順に加えて：逆相ＨＰＬＣを、６０℃で、６０℃での流速１ｍｌ／ｍｉｎで、アジレント社のＸＤＢ−Ｃ１８カートリッジ（１．８μｍ、２．１ｘ３０ｍｍ）で行った。用いた勾配条件：６．５分以内に９０％Ａ（０．５ｇ／ｌ酢酸アンモニウム溶液）、５％Ｂ（アセトニトリル）、５％Ｃ（メタノール）から５０％Ｂおよび５０％Ｃに、７分で１００％Ｂに、そして７．５〜９．０分で初期条件に平衡化した。注入量を２μｌとした。高分解能質量スペクトル（飛行時間、ＴＯＦ）は、０．３秒の滞留時間を用いて０．５秒以内に１００から７５０までスキャンすることで得た。キャピラリー・ニードル電圧[capillary needle voltage]は、正イオン化モードに対して２．５ｋＶとし、負イオン化モードに対して２．９ｋＶとした。コーン電圧は、正および負両方のイオン化モードに対して２０Ｖとした。ロイシン−エンケファリン[Leucine-Enkephaline]をロック・マス較正[lock mass calibration]に用いる標準物質とした。

方法２
基本手順に加えて：逆相ＨＰＬＣを、６０℃で、６０℃での流速１ｍｌ／ｍｉｎで、アジレント社のＸＤＢ−Ｃ１８カートリッジ（１．８μｍ、２．１ｘ３０ｍｍ）で行った。用いた勾配条件：６．５分以内に９０％Ａ（０．５ｇ／ｌ酢酸アンモニウム溶液）、５％Ｂ（アセトニトリル）、５％Ｃ（メタノール）から５０％Ｂおよび５０％Ｃに、７分で１００％Ｂに、そして７．５〜９．０分で初期条件に平衡化した。注入量を２μｌとした。高分解能質量スペクトル（飛行時間、ＴＯＦ）は、正イオン化モードのみで、０．１秒の滞留時間を用いて０．５秒以内に１００から７５０までスキャンすることで得た。キャピラリー・ニードル電圧は２．５ｋＶとし、コーン電圧は２０Ｖとした。ロイシン−エンケファリンをロック・マス較正に用いる標準物質とした。

方法３
基本手順に加えて：逆相ＨＰＬＣを、６０℃で、流速１ｍｌ／ｍｉｎで、ウォーターズ社のＳｕｎｆｉｒｅ−Ｃ１８カラム（２．５μｍ、２．１ｘ３０ｍｍ）で行った。用いた勾配条件：６．５分以内に９５％Ａ（０．５ｇ／ｌ酢酸アンモニウム溶液＋５％アセトニトリル）、２．５％Ｂ（アセトニトリル）、２．５％Ｃ（メタノール）から５０％Ｂ、５０％Ｃに、７．０分までその状態を保ち、そして７．３〜９．０分で初期条件に平衡化した。注入量を２μｌとした。高分解能質量スペクトル（飛行時間、ＴＯＦ）は、０．３秒の滞留時間を用いて０．５秒以内に１００から７５０までスキャンすることで得た。キャピラリー・ニードル電圧は、正イオン化モードに対して２．５ｋＶとし、負イオン化モードに対して２．９ｋＶとした。コーン電圧は、正および負両方のイオン化モードに対して２０Ｖとした。ロイシン−エンケファリンをロック・マス較正に用いる標準物質とした。

方法４
基本手順に加えて：逆相ＨＰＬＣを、流速１ｍｌ／ｍｉｎで、６０℃で、ＭＳ検出器に分割させず、ウォーターズ社のＳｕｎｆｉｒｅ−Ｃ１８カラム（２．５μｍ、２．１ｘ３０ｍｍ）で行った。用いた勾配条件：６．５分で９５％Ａ（０．５ｇ／ｌ酢酸アンモニウム溶液＋５％アセトニトリル）、５％Ｂ（アセトニトリル／メタノール（１／１）の混合物）から１００％Ｂに、７．０分までその状態を保ち、そして７．３〜９．０分で初期条件に平衡化した。注入量を２μｌとした。低分解能質量スペクトル（四重極、ＳＱＤ）は、０．０８秒のインターチャネル遅延[inter-channel delay]を用いて０．１秒以内に１００から１０００までスキャンすることで得た。キャピラリー・ニードル電圧は、３ｋＶとした。コーン電圧は、正イオン化モードに対して２０Ｖとし、負イオン化モードに対して３０Ｖとした。

方法５
基本手順に加えて：逆相ＵＰＬＣを、流速０．８ｍｌ／ｍｉｎで、６０℃で、ＭＳ検出器に分割させず、ウォーターズ社のＢＥＨ−Ｃ１８カラム（１．７μｍ、２．１ｘ５０ｍｍ）で行った。用いた勾配条件：６．３分以内に９０％Ａ（０．５ｇ／ｌ酢酸アンモニウム溶液）、１０％Ｂ（アセトニトリル／メタノール（１／１）の混合物）から２０％Ａ、８０％Ｂに、６．８５分以内に１００％Ｂに、７．５０分までその状態を保ち、そして７．７５〜９．０分で初期条件に平衡化した。注入量を０．５μｌとした。低分解能質量スペクトル（四重極、ＳＱＤ）は、０．０８秒のインターチャネル遅延を用いて０．１秒以内に１００から１０００までスキャンすることで得た。キャピラリー・ニードル電圧は、３ｋＶとした。コーン電圧は、正イオン化モードに対して２０Ｖとし、負イオン化モードに対して３０Ｖとした。

方法６
基本手順に加えて：逆相ＵＰＬＣを、流速０．８ｍｌ／ｍｉｎで、６０℃で、ＭＳ検出器に分割させず、ウォーターズ社のＢＥＨ−Ｃ１８カラム（１．７μｍ、２．１ｘ５０ｍｍ）で行った。用いた勾配条件：４．９分以内に９５％Ａ（０．５ｇ／ｌ酢酸アンモニウム溶液＋５％アセトニトリル）、５％Ｂ（アセトニトリル／メタノール（１／１）の混合物）から２０％Ａ、８０％Ｂに、５．３分以内に１００％Ｂに、５．８分までその状態を保ち、そして６．０〜７．０分で初期条件に平衡化した。注入量を０．５μｌとした。低分解能質量スペクトル（四重極、ＳＱＤ）は、０．０８秒のインターチャネル遅延を用いて０．１秒以内に１００から１０００までスキャンすることで得た。キャピラリー・ニードル電圧は、３ｋＶとした。コーン電圧は、正イオン化モードに対して２０Ｖとし、負イオン化モードに対して３０Ｖとした。

方法７
基本手順に加えて：逆相ＨＰＬＣを、流速１．０ｍｌ／ｍｉｎで、６０℃で、ウォーターズ社のＳｕｎｆｉｒｅ−Ｃ１８カラム（２．５μｍ、２．１ｘ３０ｍｍ）で行った。用いた勾配条件：９０％Ａ（０．５ｇ／ｌ酢酸アンモニウム溶液）、１０％Ｂ（アセトニトリル／メタノール（１／１）の混合物）を０．２０分までその状態を保ち、３．５分以内に１００％Ｂに、３．６５分までその状態を保ち、そして３．８〜５．０分で初期条件に平衡化した。注入量を２μｌとした。低分解能質量スペクトル（四重極、ＭＳＤ）は、エレクトロスプレーモードで、０．９９秒以内に、０．３０の刻み幅[step size]および０．１０分のピーク幅で、１００から１０００までスキャンすることで得た。キャピラリー・ニードル電圧は、１．０ｋＶとし、フラグメンター電圧[fragmentor voltage]は、正および負両方のイオン化モードに対して７０Ｖとした。

方法８
基本手順に加えて：逆相ＵＰＬＣを、流速０．８ｍｌ／ｍｉｎで、６０℃で、ＭＳ検出器に分割させず、ウォーターズ社のＢＥＨ−Ｃ１８カラム（１．７μｍ、２．１ｘ５０ｍｍ）で行った。用いた勾配条件：９０％Ａ（０．５ｇ／ｌ酢酸アンモニウム溶液）、１０％Ｂ（アセトニトリル／メタノール（１／１）の混合物）を０．２０分までその状態を保ち、３．５分以内に２０％Ａ、８０％Ｂに、３．８分以内に１００％Ｂに、４．１５分までその状態を保ち、そして４．３〜５．０分で初期条件に平衡化した。注入量を０．５μｌとした。低分解能質量スペクトル（四重極、ＳＱＤ）は、０．０８秒のインターチャネル遅延を用いて０．１秒以内に１００から１０００までスキャンすることで得た。キャピラリー・ニードル電圧は、３ｋＶとした。コーン電圧は、正イオン化モードに対して２０Ｖとし、負イオン化モードに対して３０Ｖとした。

方法９
基本手順に加えて：逆相ＨＰＬＣを、流速０．８ｍｌ／ｍｉｎで、６０℃で、アジレント社のＸＤＢ−Ｃ１８カートリッジ（１．８μｍ、２．１ｘ３０ｍｍ）で行った。用いた勾配条件：６．０分以内に９０％Ａ（０．５ｇ／ｌ酢酸アンモニウム溶液）、１０％Ｂ（アセトニトリル／メタノール（１／１）の混合物）から１００％Ｂに、６．５分までその状態を保ち、そして７．０〜９．０分で初期条件に平衡化した。注入量を２μｌとした。低分解能質量スペクトル（四重極、ＳＱＤ）は、正イオン化モードで、０．０８秒のインターチャネル遅延を用いて０．１秒以内に１００から１０００までスキャンすることで得た。キャピラリー・ニードル電圧は、３ｋＶとした。コーン電圧は２０Ｖとし、正イオン化モードに対して５０Ｖとし、負イオン化モードに対して３０Ｖとした。

方法１０
基本手順に加えて：逆相ＨＰＬＣを、６０℃で、流速１．０ｍｌ／ｍｉｎで、ウォーターズ社のＳｕｎｆｉｒｅ−Ｃ１８カラム（２．５μｍ、２．１ｘ３０ｍｍ）で行った。用いた勾配条件：６．５分以内に９５％Ａ（０．５ｇ／ｌ酢酸アンモニウム溶液＋５％アセトニトリル）、２．５％Ｂ（アセトニトリル）、２．５％Ｃ（メタノール）から５０％Ｂ、５０％Ｃに、７．０分までその状態を保ち、そして７．３〜９．０分で初期条件に平衡化した。注入量を２μｌとした。高分解能質量スペクトル（飛行時間、ＴＯＦ）は、０．３秒の滞留時間を用いて０．５秒以内に１００から７５０までスキャンすることで得た。キャピラリー・ニードル電圧は、正イオン化モードに対して２．５ｋＶとし、負イオン化モードに対して２．９ｋＶとした。コーン電圧は、正および負両方のイオン化モードに対して２０Ｖとした。ロイシン−エンケファリンをロック・マス較正に用いる標準物質とした。

方法１１
基本手順に加えて：逆相ＨＰＬＣを、流速０．８ｍｌ／ｍｉｎで、６０℃で、アジレント社のＸＤＢ−Ｃ１８カートリッジ（１．８μｍ、２．１ｘ３０ｍｍ）で行った。用いた勾配条件：９０％Ａ（０．５ｇ／ｌ酢酸アンモニウム溶液）、１０％Ｂ（アセトニトリル／メタノール（１／１）の混合物）を０．２分までその状態を保ち、３．０分以内に１００％Ｂに、３．１５分までその状態を保ち、そして３．３〜５．０分で初期条件に平衡化した。注入量を２μｌとした。低分解能質量スペクトル（四重極、ＳＱＤ）は、０．０８秒のインターチャネル遅延を用いて０．１秒以内に１００から１０００までスキャンすることで得た。キャピラリー・ニードル電圧は、３ｋＶとした。コーン電圧は２０Ｖとし、正イオン化モードに対して５０Ｖとし、負イオン化モードに対して３０Ｖとした。

方法１２
基本手順に加えて：逆相ＨＰＬＣを、流速１．０ｍｌ／ｍｉｎで、６０℃で、アジレント社のＸＤＢ−Ｃ１８カートリッジ（１．８μｍ、２．１ｘ３０ｍｍ）で行った。用いた勾配条件：９０％Ａ（０．５ｇ／ｌ酢酸アンモニウム溶液）、１０％Ｂ（アセトニトリル／メタノール（１／１）の混合物）を０．２分までその状態を保ち、３．５分以内に１００％Ｂに、３．６５分までその状態を保ち、そして３．８〜５．０分で初期条件に平衡化した。注入量を２μｌとした。低分解能質量スペクトル（シングル四重極型、ＺＱ検出器）は、０．１秒の滞留時間を用いて０．５秒以内に１００から１０００までスキャンすることで得た。キャピラリー・ニードル電圧は、３ｋＶとした。コーン電圧は２０Ｖとし、正イオン化モードに対して５０Ｖとし、負イオン化モードに対して２０Ｖとした。

方法１３
基本手順に加えて：逆相ＨＰＬＣを、流速１．０ｍｌ／ｍｉｎで、６０℃で、アジレント社のＸＤＢ−Ｃ１８カートリッジ（１．８μｍ、２．１ｘ３０ｍｍ）で行った。用いた勾配条件：９０％Ａ（０．５ｇ／ｌ酢酸アンモニウム溶液）、１０％Ｂ（アセトニトリル／メタノール（１／１）の混合物）を０．２分までその状態を保ち、３．５分以内に１００％Ｂに、３．６５分までその状態を保ち、そして３．８〜５．０分で初期条件に平衡化した。注入量を２μｌとした。低分解能質量スペクトル（シングル四重極型、ＭＳＤ検出器）は、エレクトロスプレーモードで、０．９９秒以内に、０．３０の刻み幅および０．１０分のピーク幅で、１００から１０００までスキャンすることで得た。キャピラリー・ニードル電圧は、１．０ｋＶとし、フラグメンター電圧は、正および負両方のイオン化モードに対して７０Ｖとした。

方法１４
基本手順に加えて：逆相ＨＰＬＣを、流速１．０ｍｌ／ｍｉｎで、６０℃で、ウォーターズ社のＳｕｎｆｉｒｅ−Ｃ１８カラム（２．５μｍ、２．１ｘ３０ｍｍ）で行った。用いた勾配条件：９０％Ａ（０．５ｇ／ｌ酢酸アンモニウム溶液）、１０％Ｂ（アセトニトリル／メタノール（１／１）の混合物）を０．２分までその状態を保ち、３．５分以内に１００％Ｂに、３．６５分までその状態を保ち、そして３．８〜５．０分で初期条件に平衡化した。注入量を２μｌとした。低分解能質量スペクトル（シングル四重極型、ＭＳＤ）は、エレクトロスプレーモードで、０．９９秒以内に、０．３０の刻み幅および０．１０分のピーク幅で、１００から１０００までスキャンすることで得た。キャピラリー・ニードル電圧は、１．０ｋＶとし、フラグメンター電圧は、正および負両方のイオン化モードに対して７０Ｖとした。

方法１５
基本手順に加えて：逆相ＨＰＬＣを、流速１．０ｍｌ／ｍｉｎで、６０℃で、ＭＳ検出器に分割させず、ウォーターズ社のＳｕｎｆｉｒｅ−Ｃ１８カラム（２．５μｍ、２．１ｘ３０ｍｍ）で行った。用いた勾配条件：９５％Ａ（０．５ｇ／ｌ酢酸アンモニウム溶液＋０．５％アセトニトリル）、５％Ｂ（アセトニトリル／メタノール（１／１）の混合物）を０．２分までその状態を保ち、３．０分以内に１００％Ｂに、３．１５分までその状態を保ち、そして３．３０〜５．０分で初期条件に平衡化した。注入量を２μｌとした。低分解能質量スペクトル（シングル四重極型、ＳＱＤ検出器）は、０．０８秒のインターチャネル遅延を用いて０．１秒以内に１００から１０００までスキャンすることで得た。キャピラリー・ニードル電圧は、３ｋＶとし、コーン電圧は２０Ｖとし、正イオン化モードに対して５０Ｖとし、負イオン化モードに対して３０Ｖとした。

方法１６
基本手順に加えて：逆相ＨＰＬＣを、流速１ｍｌ／ｍｉｎで、６０℃で、アジレント社のＸＤＢ−Ｃ１８カートリッジ（１．８μｍ、２．１ｘ３０ｍｍ）で行った。用いた勾配条件：５．２分以内に９０％Ａ（０．５ｇ／ｌ酢酸アンモニウム溶液）、１０％Ｂ（アセトニトリル／メタノール（１／１）の混合物）から１００％Ｂに、５．６分までその状態を保ち、そして５．８〜７．０分で初期条件に平衡化した。注入量を２μｌとした。低分解能質量スペクトル（シングル四重極型、ＭＳＤ検出器）は、エレクトロスプレーモードで、０．９９秒以内に、０．３０の刻み幅および０．１０分のピーク幅で、１００から１０００までスキャンすることで得た。キャピラリー・ニードル電圧は、１．０ｋＶとし、フラグメンター電圧は、正および負両方のイオン化モードに対して７０Ｖとした。

方法１７
基本手順に加えて：逆相ＵＰＬＣを、流速０．８ｍｌ／ｍｉｎで、６０℃で、ＭＳ検出器に分割させず、ウォーターズ社のＢＥＨ−Ｃ１８カラム（１．７μｍ、２．１ｘ５０ｍｍ）で行った。用いた勾配条件：９５％Ａ（０．５ｇ／ｌ酢酸アンモニウム溶液＋５％アセトニトリル）、５％Ｂ（アセトニトリル／メタノール（１／１）の混合物）を０．２分までその状態を保ち、３．５分以内に２０％Ａ、８０％Ｂに、３．８分以内に１００％Ｂに、４．１５分までその状態を保ち、そして４．３〜５．０分で初期条件に平衡化した。注入量を０．５μｌとした。低分解能質量スペクトル（シングル四重極型、ＳＱＤ検出器）は、０．０８秒のインターチャネル遅延を用いて０．１秒以内に１００から１０００までスキャンすることで得た。キャピラリー・ニードル電圧は、３ｋＶとした。コーン電圧は、正イオン化モードに対して２０Ｖとし、負イオン化モードに対して３０Ｖとした。

方法１８
基本手順に加えて：逆相ＨＰＬＣを、流速０．８ｍｌ／ｍｉｎで、６０℃で、アジレント社のＸＤＢ−Ｃ１８カートリッジ（１．８μｍ、２．１ｘ３０ｍｍ）で行った。用いた勾配条件：５．０分以内に９５％Ａ（０．５ｇ／ｌ酢酸アンモニウム溶液＋５％アセトニトリル）、５％Ｂ（アセトニトリル／メタノール（１／１）の混合物）から１００％Ｂに、５．１５分までその状態を保ち、そして５．３〜７．０分で初期条件に平衡化した。注入量を２μｌとした。低分解能質量スペクトル（シングル四重極型、ＭＳＤ検出器）は、エレクトロスプレーモードで、０．９９秒以内に、０．３０の刻み幅および０．１０分のピーク幅で、１００から１０００までスキャンすることで得た。キャピラリー・ニードル電圧は、１．０ｋＶとし、フラグメンター電圧は、正および負両方のイオン化モードに対して７０Ｖとした。

方法１９
基本手順に加えて：逆相ＨＰＬＣを、流速０．８ｍｌ／ｍｉｎで、６０℃で、アジレント社のＸＤＢ−Ｃ１８カートリッジ（１．８μｍ、２．１ｘ３０ｍｍ）で行った。用いた勾配条件：５．０分以内に９０％Ａ（０．５ｇ／ｌ酢酸アンモニウム溶液）、５％Ｂ（アセトニトリル／メタノール（１／１）の混合物）から１００％Ｂに、５．４分までその状態を保ち、そして５．６〜７．０分で初期条件に平衡化した。注入量を２μｌとした。低分解能質量スペクトル（シングル四重極型、ＭＳＤ検出器）は、エレクトロスプレーモードで、０．９９秒以内に、０．３０の刻み幅および０．１０分のピーク幅で、１００から１０００までスキャンすることで得た。キャピラリー・ニードル電圧は、１．０ｋＶとし、フラグメンター電圧は、正および負両方のイオン化モードに対して７０Ｖとした。

方法２０
基本手順に加えて：逆相ＨＰＬＣを、流速１．０ｍｌ／ｍｉｎで、６０℃で、ウォーターズ社のＳｕｎｆｉｒｅ−Ｃ１８カラム（２．５μｍ、２．１ｘ３０ｍｍ）で行った。用いた勾配条件：５．０分以内に９５％Ａ（０．５ｇ／ｌ酢酸アンモニウム溶液＋５％アセトニトリル）、５％Ｂ（アセトニトリル／メタノール（１／１）の混合物）から１００％Ｂに、５．１５分までその状態を保ち、そして５．３〜７．０分で初期条件に平衡化した。注入量を２μｌとした。低分解能質量スペクトル（シングル四重極型、ＭＳＤ検出器）は、エレクトロスプレーモードで、０．９９秒以内に、０．３０の刻み幅および０．１０分のピーク幅で、１００から１０００までスキャンすることで得た。キャピラリー・ニードル電圧は、１．０ｋＶとし、フラグメンター電圧は、正および負両方のイオン化モードに対して７０Ｖとした。

方法２１
基本手順に加えて：ＧＣを、一定流速１．２ｍｌ／ｍｉｎで、アジレント・テクノロジー社のＪ＆Ｗ ＨＰ−５ＭＳカラム（０．２５μｍ、０．２５ｍｍ ｘ３０ｍ）で行った。用いた勾配条件：１５分の操作[run]のうちに、初期温度を５０℃とし、３分間保持し、その後、２５０℃まで１０分間、２０℃／ｍｉｎ ｒａｍｐを適用し、２５０℃で２分間保持した。Ｆｒｏｎｔ ｉｎｌｅｔ温度を２５０℃とした。注入量１μｌ、ＧＣ−ＭＳシステムに５０／１の割合で、スプリットインジェクションモード[split injection mode]を用いた。

融点
多くの化合物に対して、融点を、メトラー社[Mettler]のＦＰ６２装置のオープンキャピラリーチューブで測定した。融点は、３または１０℃／ｍｉｎの温度勾配で測定した。最大温度を３００℃とした。Ｍ．Ｐ．を、デジタル表示装置から読みとり、そして、Ｍ．Ｐ．は、通常この分析方法に関連する実験誤差を伴って得られる。

核磁気共鳴（ＮＭＲ）
１Ｈ ＮＭＲスペクトルを、標準パルス系列を有するブルカー社のＤＰＸ−４００、およびブルカー社のＡＶ−５００分光計に記録し、それぞれ４００ＭＨｚおよび５００ＭＨｚで行い、溶媒としてＣＤＣＬ_３およびＣ_６Ｄ_６を使用した。化学シフト（δ）を、内部標準として用いたテトラメチルシラン（ＴＭＳ）からのパーツパーミリオン（ｐｐｍ）低磁場で示す。

表２：いくつかの化合物の物理化学的データ（ｎｄ＝測定せず）

薬理学的実施例
本発明で提供される化合物は、ｍＧｌｕＲ２の正のアロステリック調節因子である。これら化合物は、グルタミン酸結合部位以外のアロステリック部位に結合することによって、グルタミン酸応答を促進すると思われる。式（Ｉ）の化合物が存在すると、グルタミン酸濃度に対するｍＧｌｕＲ２の応答が増強される。式（Ｉ）の化合物は、該受容体の機能を高める能力に基づいて、実質的にｍＧｌｕＲ２でのそれらの効果を有すると期待される。正のアロステリック調節因子の作用は、下記の［^３５Ｓ］ＧＴＰγＳ結合アッセイ法を用いたｍＧｌｕＲ２で試験される。この方法は、このような化合物、特に、表４に示されている式（Ｉ）の化合物の同定に好適である。

［^３５Ｓ］ＧＴＰγＳ結合アッセイ
［^３５Ｓ］ＧＴＰγＳ結合アッセイは、非加水分解性の形態であるＧＴＰ，［^３５Ｓ］ＧＴＰγＳ（γ線放射性^３５Ｓで標識されたグアノシン５’三リン酸）の取り込みを測定するというＧタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）機能の研究で用いられる機能性膜ベース[functionalmembrane-based]アッセイである。Ｇタンパク質αサブユニットは、グアノシン三リン酸（ＧＴＰ）によるグアノシン５’二リン酸（ＧＤＰ）の交換に触媒作用を及ぼし、アゴニストによってＧＰＣＲが活性化されると［^３５Ｓ］ＧＴＰγＳが取り込まれ、この交換サイクルを続けることための開裂ができなくなる（Harper (1998) Current Protocols in Pharmacology 2.6.1-10, John Wiley & Sons, Inc.）。放射性［^３５Ｓ］ＧＴＰγＳの取り込み量は、Ｇタンパク質活性の直接的尺度であり、このためアゴニスト活性を測定することができる。ｍＧｌｕＲ２受容体はＧαｉタンパク質に選択的に結合（この方法では選択的に結合）することを示すため、この方法は、組換え型細胞株および細胞組織の両方におけるｍＧｌｕＲ２受容体の受容体活性化の研究に広く用いられる（Schaffhauser et al 2003, Pinkerton et al, 2004, Mutel et al (1998) Journal of Neurochemistry. 71:2558-64; Schaffhauser et al (1998) Molecular Pharmacology 53:228-33）。ここで、我々は、ヒトｍＧｌｕＲ２受容体でトランスフェクションされた細胞からの膜を用いた［^３５Ｓ］ＧＴＰγＳ結合アッセイの使用を記載し、そして本発明の化合物の正のアロステリック調節（ＰＡＭ）特性を検出するために、Schaffhauser et al ((2003) Molecular Pharmacology 4:798-810)を引用した。

〔膜調製〕
ＣＨＯ細胞をコンフルエンスになる前まで培養し、ＰＢＳ（リン酸緩衝生理食塩水）で洗浄する前に５ｍＭ酪酸塩で２４時間刺激した後、ホモジナイズ用緩衝液（５０ｍＭトリス−ＨＣｌ緩衝液、ｐＨ７．４、４℃）中でこすりとって回収した。細胞溶解物を、ultra−turraxホモジナイザを用いて短時間（１５秒間）ホモジナイズした。ホモジネートを２３５００×ｇで１０分間遠心分離し、上清を捨てた。ペレットを、５ｍＭトリス−ＨＣｌ（ｐＨ７．４）中に再懸濁させ、再び遠心分離した（３００００×ｇ、２０分間、４℃）。最終ペレットを、５０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）に再懸濁させ、使用前に適切なアリコートに分割して−８０℃で保存した。タンパク質濃度は、ウシ血清アルブミンを基準としてブラッドフォード法（バイオラッド社[Bio-Rad]、ＵＳＡ）により測定した。

〔［^３５Ｓ］ＧＴＰγＳ結合アッセイ〕
ヒトｍＧｌｕＲ２を含む膜における試験化合物のｍＧｌｕＲ２の正のアロステリック調節活性の測定は、凍結した膜を用いて行った。凍結した膜を解凍し、短時間ホモジナイズした後、徐々に濃度を増加させた（０．３ｎＭから５０μＭまで）正のアロステリック調節因子を含むアッセイ用緩衝液（５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１００ｍＭ ＮａＣｌ、３ｍＭ ＭｇＣｌ_２、５０μＭ ＧＤＰ、１０μｇ／ｍｌ サポニン）および所定の最小濃度のグルタミン酸（ＰＡＭアッセイ）を添加または無添加中、９６−ウェルマイクロプレートでプレインキュベート（１５μｇ／１アッセイウェル、３０分、３０℃）した。ＰＡＭアッセイでは、膜をＥＣ_２５濃度、すなわち、最大のグルタミン酸反応の２５％を与える濃度あって、既報のデータ（Pin et al. (1999) Eur. J. Pharmacol. 375:277-294）に沿った濃度でグルタミン酸とプレインキュベートした。反応総量を２００μｌとするために［^３５Ｓ］ＧＴＰγＳ（０．１ｎＭ，ｆ．ｃ．）を添加した後、マイクロプレートを短時間振とうし、活性化によって［^３５Ｓ］ＧＴＰγＳを取り込ませるよう、さらにインキュベートした（３０分、３０℃）。９６−ウェルプレートセルハーベスター（Ｆｉｌｔｅｒｍａｔｅ、Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ、ＵＳＡ)を使用して、ガラス繊維ろ過プレート（Ｕｎｉｆｉｌｔｅｒ９６−ウェルＧＦ/ｂろ過プレート、パーキン−エルマー社[Perkin-Elmer]、Ｄｏｗｎｅｒｓ Ｇｒｏｖｅ、ＵＳＡ)マイクロプレートで急速に減圧ろ過して反応を停止させた。次いで３００μｌの氷冷洗浄用緩衝液（ｐＨ＝７．４、Ｎａ_２ＰＯ_４・２Ｈ_２Ｏ １０ｍＭおよびＮａＨ_２ＰＯ_４・Ｈ_２Ｏ １０ｍＭ）で３回洗浄した。その後、フィルターを風乾し、４０μｌの液体シンチレーション・カクテル（Ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ−Ｏ）を各ウェルに加え、膜に結合した［^３５Ｓ］ＧＴＰγＳを９６穴シンチレーション・プレートリーダー（Ｔｏｐ−Ｃｏｕｎｔ、パーキン−エルマー社、ＵＳＡ）で測定した。非特異的［^３５Ｓ］ＧＴＰγＳ結合は、冷却した１０μＭのＧＴＰの存在下で測定する。各曲線は、１１種の濃度で、データポイント１つ当り２個のサンプルを用いて少なくとも１回実施して得られたものである。

〔データ分析〕
正のアロステリック調節（ＰＡＭ）を測定するため添加したグルタミン酸ｍＧｌｕＲ２アゴニストのＥＣ_２５存在下で、本発明の代表的な化合物の濃度−応答曲線を、Ｐｒｉｓｍ ＧｒａｐｈＰａｄソフトウェア（グラフ・パッド社[Graph Pad Inc]、サンディエゴ、ＵＳＡ）を用いて作成した。曲線は、ＥＣ_５０値を決定することができる、４個のパラメータを有するロジスティック方程式（Ｙ＝Ｂｏｔｔｏｍ＋（Ｔｏｐ−Ｂｏｔｔｏｍ）／（１＋１０＾（ＬｏｇＥＣ_５０−Ｘ）^＊Ｈｉｌｌ Ｓｌｏｐｅ））にフィッティングさせた。ＥＣ_５０は、最大グルタミン酸応答の半分の反応を生じさせる化合物の濃度である。正のアロステリック調節因子がない場合のグルタミン酸応答から、正のアロステリック調節因子が完全に飽和した濃度で存在する場合の最大グルタミン酸反応を差し引くことによってＥＣ_５０を算出する。よって、最大効果の半分を生じる濃度がＥＣ_５０として算出される。

表３：本発明の化合物の薬理学的データ
正のアロステリック調節（ＧＴＰγＳ−ＰＡＭ）を測定するために、ｍＧｌｕＲ２アゴニストであるグルタミン酸が所定のＥＣ_２５濃度で存在する条件で、すべての化合物について試験した。示されている値は、少なくとも１回の実験から得られた、１１種の濃度応答曲線の重複値[duplicate value]の平均である。試験したすべての化合物のｐＥＣ_５０（−ｌｏｇＥＣ_５０）値が５．０より大きく、５．７８（弱い活性）から７．０７（極めて高い活性）までの値を示した。１回の実験におけるｐＥＣ_５０の測定値の誤差は、約０．３ｌｏｇ−ｕｎｉｔｓであると推定される。

組成物に係る実施例
これら実施例を通して用いた「活性成分」は、式（Ｉ）の最終化合物、その薬学的に許容し得る塩、溶媒和物およびその立体化学的異性体に関する。

本発明の製剤の処方に係る代表的な実施例を以下に示す：
１．錠剤
活性成分 ５〜５０ｍｇ
ジリン酸カルシウム[Di−calcium phosphate] ２０ｍｇ
ラクトース ３０ｍｇ
タルク １０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ５ｍｇ
ジャガイモ澱粉 ａｄ２００ｍｇ
この実施例において、活性成分は、本発明の化合物のいずれかと同じ量、特に任意の例示した化合物と同じ量で置換することができる。

２．懸濁液
各１ミリリットルに、１〜５ｍｇの活性成分１種、５０ｍｇのカルボキシメチルセルロースナトリウム、１ｍｇの安息香酸ナトリウム、５００ｍｇのソルビトールおよびａｄ１ｍｌの水が含まれるように、水性懸濁液を経口投与用に調製する。

３．注射剤
非経口組成物は、本発明の活性成分１．５重量％を１０体積％プロピレングリコール水溶液中で撹拌することにより調製する。

４．軟膏
活性成分 ５〜１０００ｍｇ
ステアリルアルコール ３ｇ
ラノリン ５ｇ
白色ワセリン １５ｇ
水 ａｄ１００ｇ
本実施例では、活性成分に代えて、同量の本発明の化合物、特に同量の例示化合物のいずれかを用いることができる。

合理的な改変は、本発明の範囲からの逸脱しないものとみなされる。このように記載された本発明が当業者によって様々な方法で改変できることは明らかであろう。

Claims (16)

1. 式（Ｉ）の化合物もしくはその立体化学的異性体またはその薬学的に許容し得る塩もしくは溶媒和物。
   

   

   ［ここで、
   Ｒ^１は、Ｃ_１−６アルキル基；
   Ｃ_３−７シクロアルキル基；
   トリフルオロメチル基；
   トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエトキシ、Ｃ_３−７シクロアルキル、フェニル、または、ハロ、トリフルオロメチルもしくはトリフルオロメトキシで置換されたフェニルで置換されたＣ_１−３アルキル基；
   フェニル基；
   ハロ、トリフルオロメチルおよびトリフルオロメトキシからなる群より選ばれる１つまたは２つの置換基で置換されたフェニル基；あるいは
   ４−テトラヒドロピラニル基であり、
   Ｒ^２は、シアノ基、ハロ、トリフルオロメチル基、Ｃ_１−３アルキル基またはシクロプロピル基であり、
   Ｒ^３は、水素；
   Ｃ_１−３アルキル基；
   Ｃ_３−７シクロアルキル、フェニル、または、ハロ、シアノ、Ｃ_１−３アルキル、Ｃ_１−３アルコキシおよびトリフルオロメチルからなる群より選択される１つもしくは２つの置換基で置換されたフェニルで置換されたＣ_１−３アルキル基；
   ピリジニル基、または、１つもしくは２つのＣ_１−３アルキルで置換されたピリジニル基；
   ヒドロキシＣ_２−４アルキル基；
   Ｃ_１−３アルキルオキシＣ_２−４アルキル基；
   ４−テトラヒドロピラニル基；
   １−オキサ−スピロ［３，５］ノナ−７−イル基；
   ２−オキサ−スピロ［３，５］ノナ−７−イル基；
   １−オキサ−スピロ［４，５］デカ−８−イル基；
   ２−オキサ−スピロ［４，５］デカ−８−イル基；
   ４−（ヒドロキシ）−シクロヘキサニル基；
   ４−（ヒドロキシ）−４−（Ｃ_１−３アルキル）シクロヘキサニル基；
   ４−（ヒドロキシ）−４−（Ｃ_３−７シクロアルキル）−シクロヘキサニル基；
   ４−（Ｃ_１−３アルキルオキシ）シクロヘキサニル基；
   フェニル基；
   ピリジニル基；
   ピリジニルメチル基；あるいは、
   ハロ、Ｃ_１−３アルキル、Ｃ_１−３アルコキシおよびトリフルオロメチルからなる群より選択される１つもしくは２つの置換基で置換されたフェニル基、ピリジニル基またはピリジニルメチル基であり、
   Ｒ^４は、水素またはハロであり、
   Ａは、式
   −ＣＨ＝ＣＨ− （ａ）または
   −ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ− （ｂ）
   （ここで、１つまたは２つの水素原子は、Ｃ_１−３アルキルまたはポリハロＣ_１−３アルキルで置換されてもよい）
   の基である。］
2. 請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容し得る塩もしくは溶媒和物。
   ［ここで、
   Ｒ^１は、Ｃ_１−６アルキル基；トリフルオロメチルまたはＣ_３−７シクロアルキルで置換されたＣ_１−３アルキル基であり、
   Ｒ^２は、シアノ基またはハロであり、
   Ｒ^３は、水素；Ｃ_１−３アルキル基；Ｃ_３−７シクロアルキルで置換されたＣ_１−３アルキル基；ヒドロキシＣ_２−４アルキル基；Ｃ_１−３アルキルオキシＣ_２−４アルキル；４−テトラヒドロピラニル基；４−（ヒドロキシ）−シクロヘキサニル基；または、４−（ヒドロキシ）−４−（Ｃ_１−３アルキル）シクロヘキサニル基であり、
   Ｒ^４は、水素、クロロまたはフルオロであり、
   Ａは、式
   −ＣＨ＝ＣＨ− （ａ）または
   −ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ− （ｂ）
   の基である。］
3. 請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容し得る塩もしくは溶媒和物。
   ［ここで、
   Ｒ^１は、トリフルオロメチルで置換されたＣ_１−３アルキル基であり、
   Ｒ^２は、シアノ基またはクロロであり、
   Ｒ^３は、水素；メチル；シクロプロピルで置換されたメチルイル基；２−ヒドロキシ−２，２−ジメチルエチル基；１−メチルエチルオキシエチル基；４−テトラヒドロピラニル基；４−（ヒドロキシ）−シクロヘキサニル基；または４−（ヒドロキシ）−４−（メチル）シクロヘキサニル基であり、
   Ｒ^４は、水素またはクロロであり、
   Ａは、式
   −ＣＨ＝ＣＨ− （ａ）または
   −ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ− （ｂ）
   の基である。］
4. 請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容し得る塩もしくは溶媒和物。
   ［ここで、
   Ｒ^１は、２，２，２−トリフルオロエチル基であり、
   Ｒ^２は、シアノ基またはクロロであり、
   Ａは、式 −ＣＨ＝ＣＨ− （ａ）の基である。］
5. 請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容し得る塩もしくは溶媒和物。
   [ここで、
   Ｒ^１は、２，２，２−トリフルオロエチルであり、
   Ｒ^２は、シアノ基またはクロロであり、
   Ａは、式 −ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ− （ｂ）の基である。］
6. 治療上の有効量の請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物と、薬学的に許容し得る担体とを含む医薬組成物。
7. 薬剤として使用される請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物。
8. 不安障害，精神異常，人格障害，物質関連障害，摂食障害，気分障害，片頭痛，てんかんまたは痙攣性疾患、小児期障害、認知障害、神経変性、神経毒性および虚血からなる群より選択される中枢神経系障害[central nervous system disorder]を治療または予防するために使用される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物または請求項６に記載の医薬組成物。
9. 上記中枢神経系障害が、広場恐怖症、全般性不安障害（ＧＡＤ）、強迫性障害（ＯＣＤ）、パニック障害、心的外傷後ストレス障害（ＰＴＳＤ）、社会恐怖症および他の恐怖症からなる群より選ばれる不安障害である、請求項８に記載の用途のための化合物。
10. 上記中枢神経系障害が、統合失調症、妄想性障害、統合失調性感情障害、統合失調症様障害、ならびに、強迫性人格障害、***病質人格障害および統合失調症性人格障害からなる群より選ばれる物質誘発性精神病性障害または人格障害、からなる群より選ばれる精神異常である、請求項８に記載の用途のための化合物。
11. 上記中枢神経系障害が、アルコール乱用、アルコール依存、アルコール離脱、アルコール離脱せん妄、アルコール誘発性精神病性障害、アンフェタミン依存、アンフェタミン離脱、コカイン依存、コカイン離脱、ニコチン依存、ニコチン離脱、オピオイド依存およびオピオイド離脱からなる群より選ばれる物質関連障害である、請求項８に記載の用途のための化合物。
12. 上記中枢神経系障害が、双極性障害（Ｉ型およびＩＩ型）、気分循環性障害、鬱病、気分変調性障害、大鬱病性障害および物質誘発性気分障害からなる群より選ばれる気分障害である、請求項８に記載の用途のための化合物。
13. 上記中枢神経系障害が、非痙攣性全般てんかん、痙攣性全般てんかん、小発作てんかん重積、大発作性てんかん重積、意識障害を伴うまたは伴わない部分てんかん、乳児痙攣、持続性部分てんかん[epilepsy partialis continua]，および他の種類のてんかんからなる群より選ばれるてんかんまたは痙攣性疾患である、請求項８に記載の用途のための化合物。
14. 上記小児期障害が、注意欠陥／多動性障害である、請求項８に記載の用途のための化合物。
15. 上記中枢神経系障害が、せん妄，物質誘発性の持続的せん妄，認知症，ＨＩＶ疾病に起因する認知症，ハンチントン病に起因する認知症，パーキンソン病に起因する認知症，アルツハイマー型の認知症，物質誘発性の持続的認知症および軽度認識障害からなる群から選択される認知障害である、請求項８に記載の用途のための化合物。
16. 患者の中枢神経系障害を治療または予防する方法であって、
    患者に必要な有効量の請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物または請求項６に記載の医薬組成物のを投与することを含み、
    上記中枢神経系障害が、不安障害、精神異常、人格障害、物質関連障害、摂食障害、気分障害、片頭痛、てんかんまたは痙攣性疾患、小児期障害、認知障害、神経変性、神経毒性および虚血からなる群より選択される、方法。