TW200418837A - Combination administration of an indolinone with a chemotherapeutic agent for cell proliferation disorders - Google Patents

Description

200418837 玖、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於藉著投予啕哚啉酮化合物與其他化學治療 劑來治療細胞增殖性病症如癌症的方法。式丨之㈤哚啉酮化 合物與其他化學治療劑的組合，在治療某些類型之癌症患 者上’提供了增強的效果。 【先前技術】 乳癌是—型在***組織中之細胞’不受控制地***和生 長的癌症。大約8〇%的乳癌案例，起源於乳腺管，而大約 20%則是起因於小葉。當來自小葉或管的異常細胞逃脫進 :周圍組織内日寺，發生侵入性乳癌。雖然，該名詞不—定 意指在***以外之任何地方發現的轉移。當大多數侵入性 癌症逋常是可治療的時，如當該腫瘤是相對上較小的，或 尚未擴散至淋巴結時，此時將其視為，，早期' 當,病況較嚴 重且不可能成功治療時，如當該腫瘤非常大或已經擴散 至其他為官（像肝臟、肺臟和骨骼）時，將其視為"晚期”。 /異常細胞在小葉或乳管内部生長，但沒有該細胞已經 政佈至周圍組織或以外的症狀時，將該病況稱為原位癌。 原位癌：兩個主要類型：管性原位癌和小葉性原位癌Γ 礼腺官正常是中空的，使液體得以通過它們。在管性原 位癌（DCIS)中，極類似侵入性癌細胞的過量細胞在管内生 長。DCIS並不是侵入性癌症，但它與增加乳癌風險有關， 並將其視為癌前病況，最後有可能發展成侵入性癌症。 像礼官-樣’***組織的小葉在其内部具有開放的空

O:\89\89336.DOC -6- 200418837 間。^大量的異常細胞在小葉 ^ 王焚了將5亥病況稱為小 茱性原位癌（lcIS)。LCIS並不是侵人m ^它不是直 接的癌症前驅物，即在小葉内發現的異常細胞以後不；能 轉變為癌症。然而，LCIS是侵人性癌症的風險因子。 利用手術、輻射療法及/或佐劑全身性療法的組合，治療 惟患第1或2期乳癌的婦女，佐劑全身性療法是在手術和輻 射以外給予的治療，以便排除可能已經擴散至其他地方的 腫瘤。有兩種類型，化學療法和荷爾蒙療法。 化學療法通常使用超過30種不同的藥物。這些藥物中最 有效的，被稱為第一線藥物，是阿黴素（dox〇rubicin)、表柔 比星（epirubicin)、胺曱碟呤、環磷醯胺、5-氟尿，唆、多 舍他昔（docetaxel)和紫杉醇（paclitaxel)。雖然這些個別的藥 物已經靠自己分別顯示出一些效力，但申請者的研究已經 顯示混合不同的藥物，更進一步增加其殺死癌細胞的能 力。關於佐劑療法，一些目前可利用的化學療法之組合為： 1. 環磷醯胺與阿黴素（亞德里亞黴素）的組合。 2. 環磷醯胺、胺曱碟呤和5 -氟尿嘧啶的組合。 3. CAF(FAC)，環磷醯胺、阿黴素（亞德里亞黴素）和5-氟 尿,σ定的組合。 4.環磷醯胺、阿黴素（亞德里亞徽素）和紫杉醇（紫杉醇）的 組合。 5·環磷醯胺、阿黴素（亞德里亞黴素）和剋癌易（多舍他昔） 的組合。 结腸癌涉及異常或惡性細胞在結腸或直腸之概裏内生

O:\89\89336.DOC 200418837 長。大部分的結腸癌起因於非_惡性的生長，稱為腺瘤。在 一些案例中，腺瘤有可能增加尺寸，並在細胞内經歷一連 串的、交化，結果使其變成功能、結構和形狀異常的。通常 將，、稱為惡性或癌症。目前對於結腸癌的治療，涉及手術 移除腫瘤、輻射療法和化學療法。給予結腸癌的化學療法， 通g由兩種藥物攝生法的變化所組成，氟m 和 左旋咪唑（leVamisole)，以及5-FU和甲醯四氫葉酸鈣 (leucovorin) 〇 小細胞肺癌（SCLC)可與其他種類肺癌區別（在發現時業 已出現轉移），並成為每年大約11〇,〇〇〇個癌症診斷的主因。 在1982年，在小細胞肺癌細胞株中首先觀察到部分染色體3 的刪除。像其他癌症一樣，在各種控制細胞生長和***之 分子（致癌基因和腫瘤-抑制基因）中觀察到突變，但沒有一 在傳統上使用三種治 個突變可能產生腫瘤生長的結果 療·手術、輻射療法和化學療法。雖然沒有單一化學療法 攝生法被視為是標準的，但已經顯示活性的那些包括口服 依托泊#(et〇P〇slde)、依托泊苷/順氣氨始（cisplatin)、環磷 醯胺/阿黴素/長春新鹼（CAV)、洛莫司汀（lomustme)/胺甲碟 呤，和拓撲太肯（topotecan)，及其組合。 非小細胞肺癌（NSCLC)是一群包括鱗狀細胞癌，亦稱為 表皮樣癌、腺癌、腺鱗狀癌、大細胞癌和未分化癌的肺癌。 腎細胞癌（亦稱為腎臟的癌症或腎腺癌）為其中在腎臟某 些組織中發現癌（惡性）細胞的疾病。 胃腸道基質腫瘤（GIST)是一型通常從在胃腸道壁中之 O:\89\89336.DOC -8 - 200418837 胞開始的腫瘤。它可以是良性或惡性的。 甲狀腺癌涉及甲狀腺的惡性腫瘤。 肉痛包括月絡、軟骨、脂肪、肌肉、血管或其他結缔咬 支持組織的任何癌症。 神經内分泌腫瘤意指從其中生長出腫瘤的細胞類型，而 不是腫瘤所在之處。神經内分泌細胞產生荷爾蒙或調節蛋 白質，故這些細胞的腫瘤通常具有與其所產生之特定荷爾 蒙有關的症狀。 大體而言’在許多案例中，已知的化學治療劑無法撲滅 癌症’因為癌症獲得對該製劑的抵抗力。申請者已經判定 可以比目前標準更低的劑量，投予式I之化合物與其他的化 學治療劑’同時仍提供有利的效力，也許還降低該化學治 療劑對患者的毒性。 【發明内容】 本發明的一個具體實施例係關於治療癌症的方法，包括 對需要其之患者投予有效含量的式I化合物；

X

O:\89\89336 DOC -9- 200418837 其中， R分別為氫、羥基、烷基、芳基、環烷基、雜芳基、烷氧 基、雜環基或胺基；

Ri分別為烷基、鹵素、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、環 烷基、雜環基、羥基、-C(〇)-R8、_NR9RlNR9C(〇）_Ri2 或-C(〇)NR9R10 ; R2分別為烷基、芳基、雜芳基、_c(〇）_Rs或s〇2R"，其中 R”為烷基、芳基、雜芳基、NR9Rig或烷氧基；

Rs分別為氫、烷基、芳基、鹵烷基、環烷基、雜芳基、 雜環基、-C(0)-R84(CHR)rRu ; X為〇或s ; j為〇或1 ; p為0、1、2或 3; q為0、1或2 ; r為〇、ι、2或 3; R8為經基、烧基、芳基、雜芳基、烧氧基、環烧基或 環基； 1和1()分別為氫、烷基、芳基、胺烷基、雜芳基、環 基和雜環基，或R9和起形成環，其中該環原子 選自C、N、Ο和S所組成之群；

Rn為羥基、胺基、經單取代之胺基、經二取代之胺基 烧基、芳基、雜芳基、燒氧基、環院基或雜環基； 為烧基、方基、雜芳基、、p畜装 丞烷虱基、％烷基或雜環基 且

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Z為經基、-〇-烷基或_Nr3R 4其中R3和I分別為氫、ρ 基、芳基、雜芳基、環烷基或雜 ， 70 形成環，其中該環原子係選自CFr M ^ ㈡、N、〇和S所組成之群， 或 0。

R3 R4

5 ，9為<::或1^，11分別為0、 其中Υ分別為ch2 2 3或4，且m為0、1、2或3; 或其在藥學上可接受之鹽、k ^ 水合物或媒合物，連同至少 一個化學治療劑，選自微管千误 、曰诚s干擾劑、拓樸異構酶抑制劑、 烧基化製劑、料酸合成酶抑制劑、不可逆類固醇類^ 酶(⑽脱㈣失活劑、抗-代謝產物、心拮抗劑、口票^ 抗劍、核糖核谷酸還原酶抑制 、^ P制M和激酶抑制劑所組成之 群。在λ¥0 02/066463和美 g 皇％| 。 關寻利弟6,573,293號中描述了式j 化合物及其製備，將其揭示内容 ⑺谷以引用的方式併入本文中。

在另一個具體貫施例中 r么A R丨為函l，最好是F或Cl，且p 為1。 p 在另一個具體實施例中，2為, ^ ^ ^ 丹〒和R4為低碳 數烷基，或形成嗎啉環。 在另一個具體貫施例中，z為：

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其中丫為0112，η為2，m為0，且R3和R4形成嗎啉環。 在另一個具體實施例中，R2為曱基且q為2，其中該曱基 結合在3和5位置處。 在另一個具體實施例中，式I化合物係選自；

OH 〇

和 所組成之群，及其在藥學上可接受之鹽類、媒合物和水合 物。 在另一個具體實施例中，式I化合物係選自： O:\89\89336 DOC -12- 200418837

所組成之群，及其在藥學上可接受之鹽類、媒合物和水合 物。 在另一個具體實施例中，該化合物為

0\89\89336.DOC -13- 200418837 或其在藥學上可接受之鹽類、媒合物和水合物。 在該具體實施例之較佳的觀點中，該鹽為蘋果酸鹽，最 好是L-蘋果酸鹽。

在任何前述具體實施例的較佳觀點中，至少一個化學治 療劑係選自紫杉醇、多舍他昔、長春花驗、長春新驗、長 春地辛（vindesine)、依立替康（irinotecan)、阿黴素、表柔比 星、甲S&四氫葉酸妈、依托泊甞、替尼泊答（teniposide)、 伊達比星（idarubicine)、吉西他濱（gemcitabine)、道諾紅菌 素、卡始（carboplatin)、順氯氨鈾、奥沙利始（oxaliplatin)、 苯丁酸氮芥、***酸氮芥、環磷醯胺、異環磷醯胺 (ifosfamide)、替莫 σ坐胺（temozolomide)、p塞替旅（thiotepa)、 絲裂黴素C、白消安（busulfan)、卡莫司汀（carmustine)、洛 莫司汀（lomustine)、5 -氟尿°密°定、卡培他濱（capecitabine)、 阿諾新（AR〇MASIN)tm(依曼適達（exemestane))、胺曱碟 呤、三甲曲沙（trimetrexate)、敦尿°密σ定、氟脫氧尿哺σ定 (fluorodeoxyuridine)、氮胞嘗、魏基嗓呤、硫代鳥σ票吟、喷 司他丁（pentostatin)、阿糖胞 # (cytarabine)、敦達拉濱 (fludarabme)、羥基脲、阿維司汀（AVASTIN)tm(貝維希單抗 (bevacizumab))、西妥昔單抗（cetuximab)、易瑞沙 (IRESSA)tm、吉非替尼（gefitmib)和給你活（GLEEVEC)tm (伊馬替尼（imatinib))所組成之群。 在另一個具體實施例中，至少兩個額外的化學治療劑與 式I化合物併用。 在另一個具體實施例中，至少三個額外的化學治療劑與 O:\89\S9336 DOC -14- 200418837 式14匕合物併用。 在本I明之具體實施例中，本發明之方法可與式I化合物 予額外的製劑。該額外製劑本身不是化學治療劑， 但具有治療效果，如保健食品（nutraceudcal)，其可改善來 自傳統化學療法的副作用（像是惡病質）。 【實施方式] 式I化合物可用來治療罹患癌症的患者。特定而言，它們 可用來/σ療癌症患者，因為本發明之式〗化合物的活性是作 為受體路胺酸激酶（RTK)抑制劑。特定而言，式Hb合物為 IT矛FLT3，以及VEGF和POGF之受體的抑制劑。式I化合 物阻斷直接在腫瘤細胞中表現的RTKs，以及在内皮或基質 細胞中表現的RTKs兩者，其引導它們抑制腫瘤生長的能 力。 企圖與式I之吲哚啉化合物一起投予的化學治療劑，包括 但不限於微管干擾劑、拓樸異構酶抑制劑、烷基化製劑、 胸苷酸合成酶抑制劑、不可逆類固醇類芳香酶失活劑、抗_ 代謝產物、嘧啶拮抗劑、嘌呤拮抗劑、核糖核苷酸還原酶 抑制劑和激酶抑制劑。 人微管干擾劑是引起微管形成混亂、瓦解有絲***和DNA ^成的那些製劑，並包括紫杉烷，例如紫杉烷和多舍他昔； 長春花生物鹼，如長春花鹼、長春新鹼和長春地辛。 拓樸異構酶抑制劑藉著使DNA瓦解而產生作用，包括兩 型，拓樸異構酶I和拓樸異構酶„抑制劑。拓樸異構酶〗抑制 劑包括，但不限於依立替康(CPT_U)。拓樸異構剌抑制劑 0 \89\89336 D〇c -15- 200418837 包括，例如阿黴素和表柔比星。其他可用在本發明中的拓 樸異構酶抑制劍，& u/ '再丨市包括但不限於依托泊苷、替尼泊苷、伊 達比星和道諾紅菌素。 烷基化衣釗措者損害DNA而產生作用，像是苯丁酸氮 芬、***酸氮芬、環碟酿胺、異環鱗醒胺、替莫唾胺、 ❹喊m素c、白消安、卡莫司>'丁（ B C N U)和洛莫司 ’丁（CCNU) ’已經顯示是有用的化學治療劑。烧基化製劑亦 ，b卡#和順氯氨始’已經顯示它們是有用的化 予〜療d ’即使它們不是院化劑，但藉著與而A共價結合 而產生作用。 、 〇 匈甘fee 口成酶抑制劑，其藉著代謝成假的d财和⑽a鹼 基而干擾轉錄，包括例如5胃氟尿嘧啶和卡培他濱。 ^可逆類固醇類芳香酶失活劑，其係作為芳香酶酵素的 假受質，包括但不限於阿諾新®。 已經發現抗-代謝產物，如葉酸拮抗劑、胺甲碟呤和三甲 乂（艾琳i合（Alimta))是有用的化學治療劑。 =、’二發現噹啶拮抗劑，如氟尿嘧啶、氟脫氧尿嘧啶和氮 胞誓是有用的化學治療劑。 ㈤t經發現嘌呤拮抗劑是有用的化學治療劑，並包括巯基 硫代鳥嘌呤和噴司他丁之類的製劑。經糖修改之類 i勿亦可作為有用的化學治療劑，包括阿糖胞苷和氟達拉 添已、、'二發現核糖核苷酸還原酶抑制劑是有用的化學治療 J，並包括羥基脲之類的製劑。

OA89\89336.DOC -16- OOJ / 除了上文提及的傳統化學治療劑之 其他激酶抑制劑，如阿維司汁τΜ ，式1化合物亦可與 抗、易瑞沙、吉非替尼）和給你活、布單夫抗）、、,西妥昔單 在本發明較佳的具體實施例中，广曰尼)<开用。 額外化學治療劑«杉醇，更佳的2化合物—起投予的 在本發明較佳的具體實施例中，與多—舍他昔。 額外化學治療劑是拓樸異構酶抑制劑'(杈予的 酶1或拓樸異構酶II抑制劑，更佳的H ^的是括樸異構 佳的是阿徵素或表柔比星，及其::爾徽素，而再更 在本發明較佳的具體實施例中，與 額外化學治療劑是胸誓酸合成酶抑制"° 土起投予的 ㈣5,或卡培他濱，更佳的是佳的是5_氟尿 2本發明較佳的具體實施例中，對於 起投予的額外化學治療劑是燒基化製劑，較佳的 疋川貞氣氣始。 在本發明較佳的具體實施例中，與式！化合物-起投予的 額：化學治療劑是不可逆類固醇類芳香酶 新1^(依曼適達）。 在本發明較佳的具體實施例中，投予需要這類組合療法 之患者的式I化合物，係選自： 5-(5-氟-2-氧基-1>2•二氫_亞抓弘基甲基”，4_二甲基 -1H-吨略-3_缓酸（2_二乙胺基_乙基酿胺； 5H2-氧基-1>2-二氫_亞啊_3_基甲基）_2 4_ ⑽♦各-3-羧酸（2士各口定小基·乙基）_酿胺；，—土

O:\89\89336 DOC -17- 200418837 5-(5-氟-2-氧基-1，2-二氫-亞啕哚-3-基甲基）·2,扣二甲基 -1Η-ρ比咯-3-羧酸（2-嗎琳-4-基-乙基）-醯胺； (S)-5-(5-氟-2-氧基-l，2-二氫-亞啕哚-3-基甲基>2,4-二曱 基-1Η-吡咯-3-羧酸（2-羥基-3-嗎啉-4-基-丙基）_醯胺； (R)-5-(5 -氟-2-氧基-1，2-二氫亞ρ弓丨嗓-3-基曱基）_2,4 -二甲 基-1Η-吡咯-3-羧酸（2-羥基-3-嗎啉基-丙基）_醯胺； 5-(5-氟-2-氧基-1,2-二氫-亞钏哚-3-基甲基）·2,4-二甲基 -1Η_吡咯-3-羧酸（2_羥基-3-嗎琳基-丙基）-醯胺； 5-(5 -氯-2 -氧基-1，2-二氫-亞W嗓-3-基甲基）-2,4-二甲基 -1Η - ρ比略-3 -魏酸（2 -經基-3 -嗎淋-4 -基-丙基）-酿胺； 5-(5 -氟-2 -氧基-1，2-二氫-亞ρ弓丨嗓-3-基甲基）-2,4-二曱基 -lH-p比略-3-魏酸（2-乙胺基-乙基）-酸胺；和 3-[3，5-二曱基-4-(4 -嗎琳-4 -基-六氫叶匕°定-1 -幾基）_ 1 Η-外匕 嘻-2-亞甲基]-5 -氟-1，3-二氫卜朵-2-酮所組成之群。 為了清楚地陳述在本發明方法中有用的式I化合物，提供 下列的定義。 烧基意指飽和的脂肪族碳氫化合物基團，包括具有1 至20個碳原子的直鏈和支鏈基團（只要在本文中陳述數目 範圍，例如"1-20’’時，就意指一群，在此情況下該烷基可含 有1個碳原子、2個碳原子、3個碳原子等等，最多包括2〇個 石反原子）。將含有1至4個碳原子的烷基基團稱為低碳數烷基 基團。當該低碳數烷基基團缺乏取代基時，其意指未經取 代的低碳數烷基基團。更佳的是，該烷基為具有1至丨(H固碳 原子之中間尺寸的烷基，例如甲基 '乙基、丙基、2_丙基、

O:\89\89336.DOC -18- 200418837 正-丁基、異-丁基、第三-丁基、戊基及其類似物。最好是 該低碳數烷基具有1至4個碳原子，例如甲基、乙基、丙基、 2-丙基、正-丁基、異-丁基、第三-丁基及其類似物。烷基 基團可以是經取代或未經取代的。當被取代時，取代基最 好是一或多個，較佳的是1至3個，更佳的是1或2個取代基， 分別選自卣素、羥基、未經取代之低碳數烷氧基、芳基（可 視需要以一或多個基團，最好是1、2或3個基團取代，分別 為鹵素、羥基、未經取代之低碳數烷基或未經取代之低碳 數烷氧基）、芳氧基（可視需要以一或多個基團，最好是丨、2 或3個基團取代，分別為齒素、羥基、未經取代之低碳數烷 基或未經取代之低碳數烷氧基）、6_員雜芳基（在環中具有從 1至3個氮原子，環中的碳可視需要以一或多個基團，最好 是1、2或3個基團取代，分別為鹵素、羥基、未經取代之低 碳數烷基或未經取代之低碳數烷氧基）、員雜芳基（具有從 1至3個逵自氮、氧和硫所組成之群的雜原子，在該基團中 的碳和氮原子可視需要以一或多個基團，最好是丨、2或3個 基團取代，分別為鹵素 搜基、未經取代之低碳數烷基或 未經取代之低碳數烷氧基）、5_或6_員雜環基團（具有從1至3 個選自氮、氧和硫所組成之群的雜原子，在該基團中的碳 和氮（若出現）原子可視需要以一或多個基團，最好是丨、2 或3個基團取代，分別為函素、輕基、未經取代之低^數烧 基或未經取代之低碳龍氧基）、（未經取代之低碳數燒）硫 基' 芳硫基（可視需要以一或多個基團，最好是丨、2或3個 基團取代’分別為μ m經取代之低碳數烧基或 O:\89\89336.DOC -19- 200418837 未經取代之低碳數烷氧基）、氰基、醯基、硫醯基、〇_胺甲 醯基、N-胺甲醯基、〇-胺（硫甲醯）基、N—胺（硫甲醯）基、c· 醯胺基、N-醯胺基、硝基、N-磺醯胺基、s-磺醯胺基、 RS(O)-、RS(0)2-、-C(〇）OR、RC(〇）〇-和 _皿131114所組成之 群’其中Ri3和分別選自氫、未經取代之低碳數烷基、三 鹵甲基、環烧基、雜環基和芳基（可視需要以一或多個基 團，最好是1、2或3個基團取代，分別為齒素、羥基、未經 取代之低碳數烷基或未經取代之低碳數烷氧基）所組成之 群。 最好是以1或2個取代基來取代烷基，該取代基係選自羥 基、5-或6-員雜環基團（具有從丨至3個選自氮、氧和硫所組 成之群的雜原子’在該基團中的碳和氮（若出現）原子可視需 要以一或多個基團’最好是1、2或3個基團取代，分別為鹵 素、說基、未經取代之低碳數烧基或未經取代之低碳數烧 氧基）、5-員雜芳基（具有從1至3個選自氮、氧和硫所組成之 群的雜原子，在該基團中的碳和氮原子可視需要以一或多 個基團，最好是1、2或3個基團取代，分別為鹵素、羥基、 未經取代之低碳數烷基或未經取代之低碳數烷氧基）、6_員 雜芳基（在裱中具有從1至3個氮原子，在該環中的碳可視需 要以一或多個基團，最好是丨、2或3個基團取代，分別為鹵 素纟工基未經取代之低碳數烧基或未經取代之低碳數烧 氧基）或-NR^I^4所組成之群，其中Ri3和Ru分別選自氫和 烷基所組成之群。再更佳的是，以1或2個取代基來取代烷 基，其分別為羥基、二甲胺基、乙胺基、二乙胺基、二丙

O:\89\89336.DOC -20- 200418837 胺基”比口各。定基、六氫^定基、嗎琳基、六氣十井某、4 2碳數烧基六氫基、咪哇基”比咬基、塔_基、 嘧啶基、噚唑基、三畊基及其類似物。 ㈣基”意指3至8員均為碳的單環，均為碳的5_員/6_員 巩6-員/6_員稠合雙環’或多環稠合的環("稠合”環系統意指 在=系統中的每個環與系統中其他的環彼此共享一對相鄰 ^碳原子）基團，其中-或多個環可含有—或多個雙鍵，但 ’又有任何環具有完全共I厄的7Γ-電子系統。 、環烧基之實例，但不限於環丙烧、環丁烧、環戊烧、環 戊烯、壞己烧、環己二烯、金剛⑥、環庚烧、環庚三稀及 其類似物。環烧基基團可以是經取代或未經取代的。當被 取代時，取代基最好是一或多個，較佳的是_個取代基， 分別選自未經取代之低碳數烷基、三由烷基、鹵素、羥基、 未經取代之低碳數烷氧基、芳基（可視需要以一或多個，最 好疋1或2個基團取代’分別為鹵素、經基、未經取代之低 碳數烷基或未經取代之低碳數烷氧基）、芳氧基（可視需要以 一或多個，最好是1或2個基團取代，分別為鹵素、羥基、 未經取代之低碳數烷基或未經取代之低碳數烷氧基）、卜員 雜芳基（在環中具有從丨至3個氮原子，環中的碳可視需要以 一或多個，最好是1或2個基團取代，分別為鹵素、羥基、 未經取代之低奴數烷基或未經取代之低碳數烷氧基）、5 _員 錶芳基（具有從1至3個選自氮、氧和硫所組成之群的雜原 子在°亥基團中的碳和氮原子可視需要以一或多個，最好 是1或2個基團取代，分別為_素、經基、未經取代之低碳

O:\89\89336 DOC •21 - 200418837 數烷基或未經取代之低碳數烷氧基）、5-或6-員雜環基團（具 有從1至3個選自氮、氧和硫所組成之群的雜原子，在該基 團中的碳和氮（若出現）原子可視需要以一或多個，最好是1 或2個基團取代，分別為鹵素、經基、未經取代之低碳數烧 基或未經取代之低碳數烧氧基）、疏基、（未經取代之低碳數 烧）硫基、芳硫基（可視需要以一或多個，最好是1或2個基團 取代’分別為i素、羥基、未經取代之低碳數烷基或未經 取代之低碳數烷氧基）、氰基、醯基、硫醯基、胺曱醯基、 N-胺曱酸基、〇-胺（硫曱㈤基、N —胺（硫曱⑹基、胺基、 N- Si&胺基、硝基、績驢胺基、S-續醒胺基、R§(〇）_、 RS(o)2-、—C(0)0R、狀⑼〜和丨“‘所組成之群，如同 上文之定義。 ”烯基”意指如同在本文中定義之低碳數烷基，包括至少 兩個碳原子和至少一個碳-碳雙鍵。代表性的實例包括，但 不限於乙烯基、1-丙烯基、2_丙烯基、2_或3-丁烯基及 其類似物。 ”炔基”意指如同在本文中定義之低碳數烷基，包括至少 兩個碳原子和至少一個碳_碳三鍵。代表性的實例包括，但 不限於乙快基、卜丙块基、2丙块基、卜2_或3•丁块基及 其類似物。 ”芳基”意指均為碳的單環或稠合環之多環（即該環丘享相 鄰一對碳原子）基團，具有1至12個碳原子，並具有完全共 =二電子純。芳基之實例為，但不限於苯基、審基和 恩土。方基基團可以是經取代或未經取代的。當被取代時，

O:\89\89336.DOC -22- 200418837 取代基最好是一或多個，較佳的是丨、2或3個，更佳的是i 或2個取代基，分別選自未經取代之低碳數烷基、三齒烷 基、_素、羥基、未經取代之低碳數烷氧基、巯基、（未經 取代之低碳數烷）硫基、氰基、醯基、硫醯基、〇_胺曱醯基、 N-胺甲醯基、〇-胺（硫甲醯）基、N-胺（硫曱醯）基、c-醯胺基、 N-醯胺基、硝基、N-磺醯胺基、磺醯胺基、Rs(〇)… -C(0)0R、RC(0)0_和-NRi3Rm所組成之群，其中 如同上文之定義。較佳的是，芳基可視需要以丨或2 個取代基取代，該取代基分別選自鹵素、未經取代之低碳 數烷基、三鹵烷基、羥基、巯基、氰基、N_醯胺基、單或 一燒胺基、竣基或N-續酿胺基。 *隹芳基意指具有5至1 2個環原子之單環或稠合環（即該 環共享相鄰一對原子）基團，其含有1 ' 2或3個選自N、〇或 s之環雜原子，剩下的環原子是c，此外亦具有完全共軛的 包子系統。未經取代之雜芳基的實例為，但不限於ρ比洛、 呋喃、嘧吩、咪唑、呤唑、嘧唑、吡唑、吡啶、嘧啶、喳 琳、異邊啉、嘌呤和咔唑。雜芳基基團可以是經取代或未 經取代的。當被取代時，取代基最好是一或多個，較佳的 是1、2或3個’更佳的是1或2個取代基，分別選自未經取代 之低碳數烷基、三i烷基、鹵素、羥基、未經取代之低碳 數烷氧基、巯基、（未經取代之低碳數烷）硫基、氰基、醯基、 硫醯基、〇-胺曱醯基、N_胺甲醯基、胺（硫甲醯）基、N_ 胺（硫曱酸）基、C屬胺基、N_醯胺基、硝基、N_磺醯胺基、 S-石黃酿胺基、RS(〇)，、RS(〇)2-、_C(〇)〇R、

O:\89\89336.DOC -23- 418837 NRl3Rl4所組成之群，其中Rn和Rm如同上文之定義。較佳 、是 4芳基可視需要以1或2個取代基取代，該取代基分 別述自函素、未經取代之低碳數烷基、三齒烷基、羥基、 观基、氰基、N-醯胺基、單或二烷胺基、羧基或…磺醯 基。 雜環基π意指單環或稠合環基團，在環中具有5至9個環 原子，其中1或2個環原子是選自Ν、〇或3(〇)11(其中η為從〇 至2之整數）的雜原子，剩下的環原子是C。該環亦可具有一 或多個雙鍵。然而，該環並沒有完全共軛的電子系統。 木經取代之雜環基的實例為，但不限於吡咯啶基、六氳吡 σ定基、六氫吡畊基、嗎啉基、硫代碼啉基、高六氫吡畊基 及其顯似物。雜ί衣基壞可以是經取代或未經取代的。當被 取代時，取代基最好是一或多個，較佳的是1、2或3個，更 佳的是1或2個取代基，分別選自未經取代之低碳數烷基、 三鹵烷基、il素、羥基、未經取代之低碳數烷氧基、巯基、 (未經取代之低碳數烷）硫基、氰基、醯基、硫醯基、〇-胺 曱醯基、N-胺甲醯基、〇-胺（硫甲醯）基、N-胺（硫曱醯）基、 C-醯胺基、N-醯胺基、硝基、N-磺醯胺基、S-磺醯胺基、 RS(0)-、RS(0)2-、-C(0)〇R、RC(0)0-和-NR13R14所組成之 群，其中Rl 3和Rl4如同上文之定義。較佳的是，雜環基可視 需要以1或2個取代基取代，該取代基分別選自鹵素、未經 取代之低碳數烧基、三鹵烧基、經基、魏基、氰基、N -驢 胺基、單或二烷胺基、羧基或N-磺醯胺基。 ”羥基π意指-0H基團。 O:\89\89336.DOC -24 - 200418837 ’’烷氧基’’意指_〇-(未經取代之烷基）和-〇-(未經取代之琴 烷基）基團兩者。代表性的實例包括，但不限於例如甲氧 基乙氧基、丙氧基、丁氧基、環丙氧基、環丁氧基、場 戊氧基、環己氧基及其類似物。 ”芳氧基’’意指_〇-芳基和雜芳基基團兩者，如同再本文 中之定義。代表性的實例包括，但不限於苯氧基、吡啶氧 基、呋喃氧基、嘍吩氧基、嘧啶氧基、吡畊氧基及其類似 物，及其衍生物。 π巯基’’意指-SH基團。 烷硫基意指-S-(未經取代之烷基）和_S-(未經取代之環 烷基）基團兩者。代表性的實例包括，但不限於例如甲硫 基、乙硫基、丙硫基、丁硫基、環丙硫基、環丁硫基、環 戊硫基、環己硫基及其類似物。 π芳硫基”意指-S-芳基和-S-雜芳基基團兩者，如同再本文 中疋義的。代表性的實例包括，但不限於苯硫基' 吡啶硫 基、吱喃硫基、嘍吩硫基、嘧啶硫基及其類似物，及其衍 生物。 ’’酿基’’意指-C(〇）-R”基團，其中&"係選自氫、未經取代 之低碳數烷基、三鹵烷基、未經取代之環烷基、芳基（可視 需要以一或多個，較佳的是1、2或3個取代基取代，該取代 基係選自未經取代之低碳數烷基、三齒甲基、未經取代之 低碳數烧氧基、鹵素和_NRnRl4所組成之群，其中Rh和Ri4 如同上文之定義（經由環碳結合X可視需要以一或多個，較 佳的疋1、2或3個取代基取代，該取代基係選自未經取代之 O:\89\S9336 DOC -25- 200418837 低石反數烷基、三i烷基、未經取代之低碳數烷氧基、鹵素 和-NR^R!4基團所組成之群））、以及雜環基（經由環碳結 合）（可視需要以一或多個，較佳的是丨、2或3個取代基取代， 該取代基係選自未經取代之低碳數烷基、三_烷基、未經 取代之低碳數烷氧基、鹵素*-NRuRi4基團所組成之群）所 組成之群。代表性之醯基基團的實例包括，但不限於乙醯 基一氣乙基、苯曱g藍基及其類似物。 ”酸π意指其中R”為氫的醯基基團。 硫基’’意指-C(s)-R”基團，其中R”如同在本文中之定 義。 f•酯’’意指-C(0)0-R"基團，其中除了 R”不可以是氫之外， 11”如同在本文中之定義。 π乙醯基”基團意指-C(0)CH3基團。 π鹵素”基團意指氟、氯、溴或碘，最好是氟或氯。 ’’三鹵甲基’，基團意指-CX3,其中X為如同在本文中定義之 鹵素基團。 ”亞曱二氧基”意指-OCH2〇-基團，其中兩個氧原子與相鄰 的碳原子結合。 ”伸乙二氧基”基團意指-〇CH2CH2〇…其中兩個氧原子與 相鄰的碳原子結合。 ’’8-石黃醯胺基’’意指4(〇）#11131114基團，其中1113和1114如同 在本文中之定義。 ，’N-石黃驢胺基”意指-NRl3S(0)2R基團，其中和R如同在 本文中之定義。 0 \89\89336 DOC -26- 200418837 〇-胺甲酸基”基團意指-OqC^NR^Ri4基團，其中尺

Ri4如同在本文中之定義。 f’N-胺甲醒基”意指r〇c(〇）NRi4_基團，其中汉和汉1 本文中之定義。 π〇-胺（硫甲醯）基”意指_〇C(S)NRl3Rl4基團，其中 如同在本文中之定義。 3和 〖如同在 ^13和 u如 ΠΝ-胺（硫曱醯）基，，意指R〇C(S)NRl4-基團，其中反和尺 同在本文中之定義。 14如同在 ’’胺基’’意指_NR13R14基團，其中R13和r14兩者皆為气 f’c-醯胺基”意指-C(0)NRl3Rl4基團，其中Ri々r 本文中之定義。 同在本 ΠΝ-醯胺基”意指RC(0)nr14-基團，其中r和Rm如 文中之定義。 π硝基π意指-N02基團。 π鹵烧基π意指未經取代之烧基，最好是如上文定義之未 經取代的低碳數烷基，其被一或多個相同或不同的_素原 子取代，例如-CH2cn、-CF3、-CH2CF3、-CH2CC13及其類似 物0 ’’方烧基”意指未經取代之烧基，最好是如同上文定義之 未經取代的低碳數烧基，其被如同上文定義之芳基基團取 代，例如-CH2苯基、-(CH2)2苯基、-(Ch2)3苯基、 CH3CH(CH3)CH2苯基及其類似物，及其衍生物。 ，，雜芳烷基，，基團意指未經取代之烷基，最好是如同上文 定義之未經取代的低碳數烷基，其被雜芳基基團取代’例 O:\89\89336 DOC -27- 200418837 如-CH2t定基、彻2)十定基、.(卿十坐基及其類似 物，及其衍生物。 ”單烷胺基”意指基團-NHR”，其中R，為如同上文定義之未 經取代之烷基或未經取代之環烷基基團，例如甲胺基、G 甲乙基）胺基、環己胺基及其類似物。 ”二烷胺基”意指基團-NR’Rf，其中R，分別為如同上文定義 之未經取代之烷基或未經取代之環烷基基團，例如二甲胺 基 '二乙胺基、（1_甲乙基）_乙胺基、環己基甲胺基、環戊 基甲胺基及其類似物。 ”鼠烷基”意指未經取代之烷基，最好是如同上文定義之 未經取代的低碳㈣基，其被⑷個氰基基團取代。 」，任意的"或，，可視需要”意指後續描述的事件或情況不一 疋發生’且該敘述包括發生和未發生該事件或情況的案 例。例如’”可視f要以烧基基團取代雜環基團,,意指該烧 基基團可能但不一定屮珣，B 、 5亥敘述包括其中以烷基取代 雜環基的狀況，以及其中並未 禾以烷基取代雜環基的狀況。 ”醫藥組合物’’竟指一式容話+ ^ 〆種在本文中描述之化合物，或 其在生理學/藥學上可接香 又之風頌或前藥，與其他化學成 I如在生理學/藥學上可接受之载劑和賦形劑的綱^ …合物的目的是有助於將化合物投予生物。 母=:物亦可作為前藥。，，前藥”意指在活體内轉變為 — 有用的，因為在一些情況下， 匕們比母藥物更容易投予。 “田V 卞例如，它們藉著口服而可被生 物利用，但母藥物則否。前藥 "、可月b在醫藥組合物中，具

O:\89\89336.DOC -28- 200418837 有勝過母樂物的改良溶么 ^ 則樂的賞例為，但不限於以 ## , ^ , σ物（刚樂”），有助於越過細胞膜 傳达，在那裡水溶性對於 夕勒疋有吾的，但當豆 被代謝水解成羧酸，有活 有益的。 ^心，在那裡水溶性便是 前藥更進一步的實例，可 疋短的多肽，例如但不限於 2 -1 0個胺基酸的多肽，經狄 〜^胺基與本發明化合物之竣 基結合’其中在活體内蔣与夕 、 、夕肽水解或代謝，釋放出活性 分子。式⑴化合物的前孳亦力士政 杲丌在本發明的範圍内。 此外，亦期待在生物，如人 一 如人一體内，將藉著酵素代謝式 (I)化合物，產生可調節蛋白曾 文曰貝/放酉母活性的代謝產物。這類 代謝產物亦在本發明的範圍内。 當在本文中使用”在生理學/藥風 子/桌學上可接受之載劑，，時，意 指 不會對生物引起明顯刺 貝利激且不廢除所投予之化合物的 生物活性及特性的載劑或稀釋劑。 ”在藥學上可接受之賦形劑”意指加在醫藥組合物中的惰 性物貝’其進-步促進化合物的投藥。賦形劑的實例包括， 但不限於碳酸各種糖類和各㈣㈣粉、纖 維素衍生物、明膠、植物油和聚乙二醇。 當在本文中使用”在藥學上可接受之鹽”時，意指保留母 化合物之生物學效力和特性的那些鹽類。這類鹽類包括： (1)酸加成鹽，其藉著使母化合物之自由鹼與無機酸，如 氫氯酸、氫溴酸、硝酸、磷酸、硫酸和過氣酸及其類似物 反應，或與有機酸，如醋酸、草酸、（D)或（L)蘋果酸、順丁 O:\89\89336.DOC -29- 200418837 烯二酸、甲烧石頁酸、乙烷石黃酸、對-甲苯石黃酸、水揚酸、酒 石酸、檸檬酸、琥珀酸或丙二酸及其類似物反應而獲得， 較佳的是氫氣酸或（L)-蘋果酸，如5-(5-氟-2-氧基-1，2-二氫 亞⑹哚-3-基甲基）-2,4-二甲基吡咯-3-羧酸（2-二乙胺基 -乙基）-S藍胺的L-蘋果酸鹽；或 (2)當出現在母化合物中的酸性質子被金屬離子，如鹼金屬 離子、驗土金屬離子或銨離子置換；或與有機鹼，如乙醇胺、 二乙醇胺、三乙醇胺、三甲醇氨基甲烷（tr〇niethamine)、N-甲基葡糖胺及其類似物配位時所形成的鹽類。 π方法’’意指達到特定任務的方式、手段、技術和程序， 包括但不限於熟諳化學、藥學、生物學、生化和醫藥技藝 者已熱知的那些方式、手段、技術和程序，或可從已知的 方式、手段、技術和程序中迅速發展出的那些。 ’’在活體内’’意指在活生物中進行該程序，如老鼠、大鼠 或兔子，但不限於此。 治療"、π治療"和，’治療”意指減輕或廢除可藉著投予式⑴ 化合物與其他化學治療劑來治療之癌症的方法。”治療，，一 詞單純地意指將增加受癌症影響之個體的生命期望，或將 減少該疾病的一或多個症狀。 癌症”意指任何形式的癌症，特別是結腸癌、 > 」、細胞肺 癌和乳癌，包括其所有形式。 ’’患者’’意指任何活的實體，包括至少一個細胞。 Λ, 〉古的生 可以像例如單一的真核生物細胞一樣簡單，或像勺 類的哺乳動物一樣複雜。 ^人 〇:'89\89336.D〇c -30- 200418837 π在治療上有效的含量’’意指欲投予之化合物（式i及額外 的化學治療劑）的量，將預防、減輕、改善或緩和欲治療之 病症的一或多個症狀，至某種程度。在提及癌症的治療時， 在治療上有效的含量意指具有下列效果的量： (1) 降低腫瘤的尺寸； (2) 抑制腫瘤轉移（即減緩至某種程度，最好是使其停止）； (3) 抑制腫瘤生長至某種程度（即減緩至某種程度，最好是 使其停止）； (4) 降低胚細胞計數，並/或 (5) 緩和（或最好是排除）與癌症有關之一或多個症狀至某 種程度。 投藥和醫藥組合物 提出申請的方法，涉及將式I化合物或其在藥學上可接受 之鹽與額外的化學治療劑一起，投予人類患者。或者，可 將式I化合物與額外的化學治療劑一起，以醫藥組合物之形 式投予，其中將前述的物質與適當的載劑或賦形劑混合。 調配和投予藥物的技術，可在，，Remingt〇n，s

Pharmacological Sciences\ Mack Publishing Co.? Easton, PA.5 最新版中找到。 ’ 當在本文中使用，，投予”或”投藥”時，意指為了治療癌症， 將式（I)化合物或其在藥學上可接受之鹽及額外之化學治療 Μ，或本發明之含有式⑴化合物及額外的化學治療劑，或 _在薬子上可接叉之鹽的醫藥組合物遞送至生物。關於額 外的化學治療劑，#藥的劑量和模式涉及標準草案，其為

O:\89\89336 DOC -31 - 200418837 熟諳此藝者已了解和熟練的。 適當的投藥途徑可包括，但不限於口服、經直腸、、爽黏 膜或經腸投藥，或肌肉内、皮下、髓内、鞘内、直接腦室 内、靜脈内、玻璃體内（mtravitreal)、腹腔内、鼻内或眼内 >主射。較佳的投藥路徑是口服和非經腸的。 或者，亦可以局部而非全身性之方式投予化合物，例如 將化合物直接經由注射至固體腫瘤内，通常以儲積或持續 釋放之調配物。 、 此外亦了投予在私準藥物遞送系統中的藥物，例如在 以腫瘤-專一之抗體塗覆的微脂粒中。將使該微脂粒瞄準腫 瘤，並由該腫瘤選擇性地攝入。 在此項技藝中已熟知的方法，例如藉著傳統的混合、溶 解:粒化、糖衣鍵製造、研磨、乳化、包膠、埋入^冷^ 乾燥之製程，可製造本發明之醫藥組合物。 可以傳統的方式，使用一或多個在生理學上可接受之載 劑，包括有助於將活性化合物加工成可在藥學上使用之制 備物的賦形劑和輔助劑，來調配根據本發明使用的醫藥組 合物。適當的調配物係依據所選擇的投藥途徑。 β關於注射’可將本發明之化合物調配成含:溶液，最好 是在生理學上可相容的緩衝溶液，如漢克氏（歸s,)液、林 格式液或生理鹽水緩衝溶液。至於經黏膜投藥，在調配物 甲使用適合待透過之阻礙的滲透劑。這類渗透劑通常為此 項技藝中已知的。 關於口服投藥’可藉著將活性化合物與此項技藝中已熟

O:\89\89336.DOC -32· 知的在藥學上可接受之载劑混合， 劑使本發明化合物得以、ώ °周配化δ物。這類載 物Η破調製成錠劑、藥丸、菱形華片、 糖衣錠、膠囊、液體、凝膠 夂办未片 似物，可由患者口服攝取。可你Ώ 心汙液及其類 用固體賦形劑製造荜學製 備物，可視需要磨碎所得入 予衣 I伃的此合物，若需要並在加入苴 適當的輔助劑之後，加Τ顆#沾、日人 /、他 仿、、枝卜^ 一顆粒的混合物，獲得錠劑或糖衣 . 用的賦形劑為填料，如糖類，包括 乳糖、蔗糖、甘露糖醇 < 山刹 、… 知及山木糖醇，纖維素製備物，如玉 米殿粉、小麥殿粉、稻半资办 卡焱粉和馬鈐薯澱粉，及其他材料， 如明膠、黃箸膠、甲基纖維素、經丙基〒基_纖維素1甲 基纖維素納及/或聚乙烯+各朗（ρνρ)。若需要，可加入 崩解劑，如交聯的聚乙烯峨,各貌綱、填脂或藻酸。亦可使 用諸如藻酸鈉之類的鹽。 以適當的塗料供給糖衣錠。為了該目的，可使用濃縮的 糖溶液，其可視需要含有***樹膠、滑石、聚乙烯吡咯 烷酮、卡波姆（carb〇pol)凝膠、聚乙二醇及/或二氧化鈦、漆 溶液和適當的有機溶劑或溶劑混合物。為了辨識或作為活 1·生化合物劑量之不同組合的特徵，可將染料或色素加至錠 劑或糖衣錠塗料中。 可0服使用的醫藥組合物包括以明膠製造的推，合膠 囊，以及以明膠和增塑劑，如甘油或山梨糖醇製造的軟密 封膠囊。推-合膠囊可含有與填料，如乳糖、粘合劑，如澱 及/或/閑/骨劑’如滑石或硬脂酸鎮混合的活性成分，並 可視需要還含有穩定劑。在軟膠囊中，可將活性化合物溶

O:\89\89336.DOC -33- 200418837 解或懸洋於適當的液體中，如脂肪油、液體石蠟或液體聚 乙_醇。亦可在這些調配物中加入穩定劑。 亦可使用的醫藥組合物包括硬明膠膠囊。作為非限制性 的實例’在膠囊口服藥物產物調配物中的化合物1，可以是 5 0和200毫克劑量的強度。藉著裝入不同尺寸的硬明膠膠囊 中，3號尺寸為5〇毫克之膠囊，而〇號尺寸為2⑻毫克之膠 囊，以相同的顆粒製造兩種劑量強度。判定組合療法的草 案完全在臨床醫師的常規技術中，並可藉著特殊的疾病狀 心和心者的狀怨，以及患者所接受的化學療法攝生法來判 定。 可將膠囊包裝在標色玻璃或塑膠瓶中，使活性化合物避 見光必/頁將έ有活性化合物膠囊調配物的容器儲存在 經過控制的室溫下（15_3〇。〇)。 調配膠囊和藥冑，例如在吸人器或吹人器中使用的明膠， 使其含有化合物的粉末狀混合物和適當的粉末狀基劑，如 乳糖或澱粉。 關於藉著吸入投藥’以氣溶膠噴霧的形式，使用加壓包 裝或霧化器和適當的推進劑，例如但不限於二氯二氟曱 烷、三氯氟甲烷、二氯四·氟乙烷或二氧化碳，便利地遞送 根據本發明使用的化合物。在加壓氣溶膠㈣財，可藉 著提供活門，遞送經過劑量的含量，來控制劑量單位。； 亦可調配化合物以供非經腸投藥 * # ^ ^ 又杲例如，糟著儲積注射 或連續輸液。可以單位劑量之形式提 、促1/W王射用的調配物， 例如在安瓿或在多-劑量的容器中， Τ 亚f有附加的防腐劑。 O:\89\89336 DOC -34- 200418837 、、且口物可採用諸如在含油或含水媒劑中之懸浮劑、溶液或 ^ 顯的死"式，並可含有調配材料，如懸浮劑、穩定劑 及/或分散劑。 、可仏非&腸投藥用的醫藥組合物，包括水溶性形式，如 活性化合物之鹽類，但不限於此的含水溶液。此外，亦可 在親月曰f生媒劑中製備活性化合物的懸浮液。適當之親脂性 媒劑包括脂肪油類，如芝麻油、合成的脂肪酸醋，如油酸 乙❹三酸甘油醋’或如微脂粒之類的材料。含水的注射 用懸洋液可含有增加懸浮液之黏性的物質，如缓甲基纖維 素鈉山梨糖醇或葡聚酶。懸浮液亦可視需要含有適當的 穩定劑及/或增加化合物之料度㈣劑，容 縮的溶液。 辰 #:者活&成刀可以疋在使用之前，以適當媒劑，如無 囷的、無熱原的水重建的散劑形式。 亦y吏用例如傳統的栓劑基劑，如可可脂或其他的三酸 灌腸f m周配成經直腸的組合物，如栓劑或保留 除了則述的調配物之外，亦可將化合物調配成儲積梦備 。可精者植入（例如皮下或肌肉内）或藉著肌肉内注射\ 予這類長期作用的調配物。亦可為了該 明化合物與聚合缝水性㈣（例如 將μ 藥學上可接受的油)，與離子交換樹脂—=例二’與在 配成微溶的衍生物，如微溶 或濟其調 J^ 但不限於此。 適合本發明之厭水性化合物 執釗的非限制性實

O:\89\89336.DOC -35 - 200418837 例’為包括苯甲醇、無極性之界面活性劑、可與水混溶的 有機聚合物和液相的共溶劑系統，如VPD共溶系統。vpd 是3%重量/體積之苯甲醇、8%重量/體積之無極性界面活性 制多乙氧基鱗8 0和6 5 %重量/體積之聚乙二醇的溶液，以絕 對乙醇調整體積。VPD共溶劑系統（VPD:D5W)由以5%右旋 糖（在水溶液中）稀釋1:丨的VPD組成。該共溶劑系統完全溶 解厭水性化合物，且在全身性投藥時，本身產生低毒性。 畐然’可改變這類共溶劑系統的比例，不破壞其溶解性和 毒性特徵。此外’可改變共溶劑組份的身分··例如可使用 其他低-毒性無極性界面活性劑，代替聚乙氧基醚8〇，可改 麦來乙二醇的溶離份尺寸，其他生物可相容的聚合物可代 替聚乙二醇，例如聚乙烯吡咯烷酮，而其他的糖類或多醣 可取代右旋糖。 或者，可使用其他適合厭水性醫藥化合物的遞送系統。 微脂粒和乳劑是適合厭水性藥物之遞送系統已為人所熟知 的實例。此外，亦可使用某些有機溶劑，如二曱亞颯，雖 然代價通常是較大的毒性。 此外’亦可使用持續-釋放的系統來遞送化合物，如含有 治療劑之固體厭水性聚合物的半通透基質。已經建立各種 持績-釋放的基質，並為熟諳此藝者已熟知的。持續_釋放的 膠囊可依據其化學性質，持續釋放化合物數週，至1〇〇天以 上。依據治療劑的化學特性和生物學穩定性，可使用使蛋 白質穩定的其他策略。 在本文中的醫藥組合物，亦可包括適當的固體或凝膠相 O:\89\89336.DOC -36- 200418837 載劑或賦形劑。這類載,式 + 山 J或賦形鈉的貫例，包括但不限於 石反酸鈣、磷酸鈣、各種糖 犬負羸如頬、纖維素衍生物、明 膠和聚合物，如聚乙二醇。 终多式I化合物可以在生璺 仕生理子上可接文之鹽類的形式提 供’其中該化合物可形册 ^ 开^成π正或負電的物種。其中化合物 形成帶正電部分之鹽類的每 现頒的貝例，包括但不限於四級銨，如 鹽酸鹽、硫酸鹽、碳酸趟 ^ 礼酉义鹽、酒石酸鹽、蘋果酸鹽、 順丁烯二酸鹽、璩珀酸鴎， 、 夂里其中四級釦基團的氮原子是所 選出之本發明化合物的_ # 的虱原子，其已經與適當的酸反應。 其中本發明化合物形成帶 取V員私織物種的鹽類，包括但不限 於猎著使在該化合物中之_基團與適當之驗（例如氯氧 化鈉(Na〇H)、氫氧化鉀(Κ〇Η)、氫氧化鈣(Ca(0H)2)等等) 反應而形成的鈉、鉀、鈣和鎮鹽。 適合在本發明中使用的醫藥組合物，包括其中以足以達 到想要目的，例如治：藤、度、广虫土 3 廢G症心者的Ϊ納入活性成分的化合 物。 〇 更特定而言，”在治療上有效的含量，，意指有效㈣、$ 輕或改善癌症的症狀，或延長待治療之個體的存活的化合 物用量。 一在治療上有效之含量的判定，完全在熟諳此藝者的能力 範圍内，尤其是借助在本文中提供的詳細揭示内容。 關於在本發明方法中使用的任何化合物，_開始可從细 胞培養測定中建立在治療上有效的含量或劑量。此時=可 為了供動物模式使用來訂定劑量，以便獲得循環^度範

O:\89\89336.DOC -37- 200418837 酸、、_之 養時判定之1C5G(即達成縣受體路胺 f之鱗酸化作用的_半_最大抑制作用的受試化合物 二。然後可使用這類資訊，更精確地判定在人類中有用 可藉著標準藥學程序’在細胞培養或實驗動物中判定在 ^文中描述之化合物的毒性和治療效力，例如藉著判定主 題化合物的IC50和LD50，其中LD5〇是達到致死之一半-最 大抑制作用的化合物濃度。可使用從這些細胞培養測定: 動物研究中獲得的數據’訂定用於人類的劑量範圍。可依 據所使用之劑量形式和所使用的投藥途徑，來改變劑量。 可由+個別的醫師針對患者的情況，來選擇精確的調配物、 投藥路徑和劑量。（參見，例如Fmgl等人，1975，在 "Pharmacological Basis of Therapeutics'- - 可個別地调整給藥量和間隔’提供足以維持激酶調節效 果之活性物種的血毁含量。將這些血漿含量稱為最小有效 濃度（MECs)。每個化合物的MEC將是不同的，但可從在活 體外的數據建立’例如’可使用在本文中描述的測定，探 =達成激酶之50-90%抑制所需的濃度。達成mec所需之劑 量’將視個別的特徵和投藥路徑而定。可使用肌㈣定或 生物測定來判定血漿濃度。 亦可使用MEC值判定給藥間隔。應使用使血漿含量維持 在MEC以上10-90%的時間，較佳的是在3〇_9〇%之間，而最 佳的是在50-90%之間的攝生法，投予化合物。 目月〕式⑴化5物之在治療上有效的含量，範圍可從大

O:\89\89336 DOC -38 - 200418837 約25毫克/平古i 毫克/平方=]15°。毫克/平方米每天；較佳的是侧 、，、天。再更佳的是50毫克/平方米/天到400毫克/ 母天。以製造者的建蟻為某礎 礎#在治療上有效之含量的 名頁外化學治療添| > 縻J杈予患者。然而，兩種製劑混合，可 投予較低劑量之額外的化學治療劑。

，局部投藥或選擇攝取的案例中，藥物的有效局部濃度 可能與血聚濃产I M 度無關，亚可使用此項技藝中已知的其他程 序來判定正確的給藥量和間隔。 投予組合物的量，當'然將視待治療之個體、受苦的嚴重 性、投藥的方式1處方之醫師的判斷等等而定。 企圖與其他癌症療法、骨髓移植和荷爾蒙療法一起使用 本發明之方法。 最後，亦企圖進一步將本發明與例如抗血管生成劑一起 使用，像是但不限於環氧化酶抑制劑，如希樂葆（celecoxib)。 一般的合成程序 可使用下列的一般方法學製備本發明之化合物。 在溶劑（1-2毫升/毫莫耳羥啕哚）中，混合經適當取代的 2-羥吲哚（1當量）、適當取代的醛（1·2當量）和鹼（〇1當量）， 然後加熱該混合物大約2至大約12小時。在冷卻之後，過濾 所形成的沉澱物，以冷的乙醇或***沖洗，並真空乾燥， 得到固體產物。若沒有沉澱物形成，則濃縮該反應混合物， 並以二氣甲烷/***濕磨該殘餘物，藉著過濾收集所得的固 體，然後脫水。可視需要進一步藉著層析法純化產物。 該鹼可以是有機或無機鹼。若使用有機鹼，它最好是氮 O:\89\89336.DOC -39- 200418837 鹼。有機氮鹼的實例包括，但不限於二異丙胺、三甲胺 三乙胺、苯胺、吡啶、1,8-二氮雜雙環[5.4.1]十一碳稀 吡咯啶和六氫吡啶。 無機鹼的實例為，但不限於氨、鹼金屬或鹼土金屬氣氧 化物、磷酸鹽、碳酸鹽、碳酸氫鹽、硫酸氫鹽和醯胺。鹼 金屬包括鋰、鈉和鉀，而鹼土金屬包括鈣、鎂和鎖。 在本發明目前較佳的具體實施例中，當該溶劑為質子溶 劑，如水或醇時，該鹼為鹼金屬或鹼土金屬無機鹼，最好 是鹼金屬或鹼土金屬氫氧化物。 對熟諳此藝者而言’以已知的有機合成之_般原則和在 本文中之才曷兩者為基礎，。那―個驗最適合預期之反 應將是明顯的。 在其中進行反應的溶劑可以是質子或非質子溶劑，它最 好是質子溶劑。”質子溶劑1具有與氧或氮原子共價結合 之氫原子的溶劑，這使得氫原子成為可感知之酸性的，並 因此能夠經由氫鍵與溶質,，分享,，。質子溶劑的實例包括， 但不限於水和醇類。 ”非質子溶劑”可以是極性或無·極性的，但在任一案例 中’不含酸性的氮，开 八 、，口此不能與溶質形成氫鍵。盔極性 之非質子溶劑的實例為，但不限於戊烧、己烧、苯、‘甲苯、 烧和四氣化碳。極性非質子溶劑的實例為氯仿、四 虱吱喃、二甲亞礙和二甲基甲酿胺。 在本發明目前較佳的 劑，最妊曰Ηγ 〃體““列十’該溶劑為質子溶 d 取好疋水或醇，如乙醇。

O:\89\89336.DOC -40- 200418837 在超過室溫的溫度下進行反應。該溫度通常是從大約3〇 °C到大約1 50 C ’較佳的是大約80°C到大約1 〇〇。<3，最佳的 是大約75 °C到大約85 °C，其約為乙醇的沸點。，，大約，，意指 在指定溫度之10 C内，較佳的是在指定溫度之5 内，最好 是在指定溫度之2。(3内的溫度範圍。因此，例如，，大約7 5。〔，， 意指75°C 土 10°C，較佳的是75X： 士 5°C，而最佳的是75。〇士2 °C。 2-羥吲哚和醛，可使用在化學技藝中已熟知的技術輕易 地合成。熟諳此藝者將知曉其他可用來形成本發明之化合 物的合成路徑，並提供下列的來舉例說明之，並非企圖加 以限制。 可根據下列的方法，並按照在例如美國專利第 號、wo 01/60814、w〇00/08202、美國專利公開案第 2003/0069298 號、WO 03/016305、2003年 2月 14 日申請之美 國專利申請案第10/367,008號、2002年2月15日申請之美國 專利第6,642,232號和美國專利申請案第1〇/〇76，14〇號中的 描述，製備本發明之化合物，全部以引用的方式併入本文 中〇 在2003年9月10曰申請之美國專利申請案第祕从刪號 中描述了較佳的調配物，將其揭示内容以引用的方式併入 本文中。 合成的方法學 在-10 °c下 方法A · p比洛類的甲酸化作用 將p〇ci3(i.i當幻逐滴加至二甲基甲醯胺

0 \89\89336.DOC -41 - 200418837 田畺）中，接著加入溶解於二曱基甲酶胺中之適當咐σ各的溶 液中。在攪拌2小時之後，以HA稀釋該反應混合物，並以 10 ΝΚΟΗ鹼化至ρΗ Π。藉著過濾收集所形成的沉澱物，以 Η2〇沖洗，並在真空烘箱中脫水，得到想要的醛。 方法Β :吡咯羧酸酯的皂化作用 迴流在EtOH中之吡咯羧酸酯和Κ〇Η(2_4當量）的混合 物，直到藉著薄層層析法（丁LC)指出反應完成為止。利用1 ν HC1將已冷卻之反應混合物酸化至pH 3。藉著過濾收集所形 成的 >儿澱物，以H2〇沖洗，並在真空烘箱中脫水，得到想要 的叶b略緩酸。 方法C :醯胺化作用 將1 -乙基-3-(3-二曱胺基-丙基）碳化二酿亞胺（1.2當量）、 1-¾基苯并***（1.2當量）和三乙胺（2當量）加至溶解於二甲 基曱酸胺中之吡咯羧酸經過攪拌的溶液中（0·3Μ)。加入適 當的胺（1當量），並攪拌該反應直到藉著TLC指出完成為 止。然後在該反應混合物中加入乙酸乙酯，並以飽和的 NaHC〇3和鹽水（帶有額*卜的鹽）沖洗該溶液，覆以無水的 MgSCU脫水，並濃縮，得到想要的醯胺。 方法D :醛與含有羧酸之羥吲哚的縮合作用 在90-100°C下授拌在乙醇（〇·4 M)中之羥4丨嗓（1當量）、工 §里之Sir和1 - 當置之六氮p比σ定（或p比略σ定）的混合物，直到 藉著TLC指出反應完成為止。然後濃縮該混合物，並以 HC1酸化殘餘物。以HsO和EtOH沖洗所形成的沉澱物，然後 在真空烘箱中脫水，得到產物。 O:\89\89336.DOC -42- 200418837 方法E ·酸與不含羧酸取代基之羥吲哚的縮合作用 在90-100 C下攪拌在乙醇（〇4 M)中之羥吲哚（丨當量）、1 ¥ i之盤和1 j ▲里之六氫批咬（或峨洛咬）的混合物，直到 藉著TLC指出反應完成為止。將該混合物冷卻至室溫，並 藉著真空過濾集合所形成的固體，以乙醇沖洗並脫水，得 到產物。若在冷卻反應混合物時沒有形成沉澱物，則濃縮 該混合物，並藉著管柱層析法純化。 提供下列的貫例解釋本發明。然而，請了解本發明不限 於在廷些實例中詳細說明的特定條件或細節。在專利說明 曰中，任何及所有提及之公開獲得的文獻，明確地以引用 的方式併入本文中。 合成實例 實例1 (3Z)-3-{[3,5-二曱基_4-(嗎啉_4_基）六氫吡啶小基羰 基]-1Η-吡咯_2_基亞甲基}-5-氟-1,3-二氫-2H-吲哚-2-酮（化 合物9)的合成

ϋι:在6〇分鐘内，將雙（2-溴乙基）醚（Aldnch，tech. 〇/〇’〇.962毫升，7.65毫莫耳）逐滴加至加熱至5〇它之4_胺基 -1-芊基六氫吡啶（Aldnch，153毫升，7 5毫莫耳）、K2C〇3

O:\89\89336.DOC -43- 200418837 (2.28克，16.5毫莫耳）和DMF(15毫升）經過攪拌的混合物。 在80°C下攪拌6小時之後，丁lc(9〇:1〇:1氯仿/MeOH/含水的 濃ΝΗβΗ)指出形成新的點。繼續加熱，在2小時内藉著以 氮蒸氣吹，使溶劑蒸發。粗製的物質是相對上較純的，但 接文相對上較短的石夕膠管柱（1 %至6%梯度的9:1 MeOH/在 氯仿中之含水NHUOH)。蒸發純的溶離份，得到大約l 7克蠟 樣固體狀之二胺4-(嗎啉-4-基）-1-芊基六氫吡啶。 1h NMR(400兆赫茲，d6-DMS〇y 7 31(m，4H)，7 26(m， 1H)，3.72(t，J=4.7赫茲，4H)，3.49(s，2H)，2.94(br d，J=5.9赫 兹，2H)，2.54(t，J=4.7赫兹，4H)，2.19(tt，J=11.5, 3.9赫兹， 1H)，1.96(td，J=11.7，2·2赫兹，2H)，1.78(br d，J=12.5赫兹， 2H)，1.55(m，2H)。 藉著使用氮氣球沖刷（約20秒）至容器内，並通過 油擴散器出去，將在氮氣下2Pd(〇H)2(2〇%在碳上（<5〇%濕 的），390毫克，25重量％)、甲醇（50毫升）和< 17 M HC1(3 當量，約10.6毫升-包括稍後看到沉澱物時加入的水）經過攪 拌的混合物交換成1大氣壓的氫氣壓。在2〇分鐘後，將在氫 氣下的反應混合物加熱至5(rc，並在3〇分鐘内逐滴加入在 甲醇（8¾升）中之4_(嗎啉基）-i-芊基六氫吡啶（ι·56克，6〇 笔莫耳）。在10小時之後，TLC指出所有起始的胺均耗盡， 成較具極性的點（具有茚三酮活性的然後通過矽藻土過濾 泫反應混合物，並蒸發，產生灰白色固體狀之嗎啉-心 基）六氫吡啶二鹽酸鹽。使用過量的鹼性樹脂（>16克， B10-Rad Lab〇ratones，AG 1〇(8, 2〇_5〇網孔，氫氧化物形 O:\89\89336.DOC -44 - 200418837 式，甲醇沖洗2次）和胺鹽酸鹽的甲醇混合物，使該物質接 受游離鹽基化（free-basing)。在與樹脂一起旋轉30分鐘之 後’慢慢地倒出甲醇溶液，並蒸發，產生932毫克蠟樣結晶 固體狀的4-(嗎啉-4-基）六氫吡啶自由鹼。 iHNMRGOO兆赫茲，d6-DMS〇）33.53(brs，4H)，3.30(vbr s，1H( + H2〇）)，2.92(br d，J=11.7赫茲，1H)，2.41(s，4H)， 2.35(模糊的 t，J=11.7赫茲，2H)，2.12(br t，1H)，1.65(br d， J=11.7赫兹，2H)，1.18(br q，J=10.9赫茲，2H); LCMS-APCI m/z 1 7 1 [M+1 ]+。 企-D :將按照在PCT公開案第〇 1/608 14號中之描述製備 的（3Z)-3-(3,5-二甲基-4-羧基- lH-p比洛-2-基亞甲基）-5 -氟 -1，3_ 二氫-2H-4 丨嗓-2-酮（120 毫克，〇·4〇 毫莫耳）和 BOP(221 毫克，0.50¾莫耳）懸浮於DMF (5毫升）中，在室溫下好好檀 拌，並加入三乙胺（1 34微升，〇·96毫莫耳）。在10-15分鐘之 後，將4-(嗎4-4-基）六氫定（85毫克，〇.5〇毫莫耳）一次全 部加至該均質的反應混合物中。攪拌該反應混合物48小時 (可能早很多完成），然後移到含有氯仿-異丙醇（5/1)和5%含 水LiC1的漏斗中。分離雲霧狀_橘色的有機相，以額外的 含水LiCl (2X)、1 Μ含水的NaOH (3X)、飽和含水的NaCl (IX) /中洗，然後脫水（Na〗S〇4)並蒸發，產生粗產物（96 · 3 %純度； 藉著HNMR查出HMPA)。然後藉著被動通過極短的矽膠管 柱（3厘米）進一步純化粗產物（5至15%梯度的在中之 MeOH) ’移除些微移動較快的3E_異構體。蒸發純的溶離 份，並從飽和的EtOAc溶液中再結晶過夜，以以…⑼弘⑹ O:\89\89336.DOC -45- 200418837 稀釋之，然後冷卻至〇°C。慢慢倒出母液，在完全真空之後’ 產生橘色結晶狀的想要產物（153毫克，85%)。 jNMRGOO兆赫茲，d6-DMS〇）5 13.60(s，1H)，10.87(s， 1H)，7.72(dd，J二9.4，2.7赫茲，1H)，7.68(s，1H)，6.91(td， J二9.3, 2.6赫茲，1H)，6_82(dd，J=8.6, 4.7赫茲，1H)，3.54(app br t，J二4.3赫茲，4H)，3·31(2χ s', 3H + 3H)，2.43(br s，4H)， 2.36(m，1H)，2.25(br m，6H)，1.79(br s，2H)，1.22(br s，2H); LCMS m/z 453 [M+l]+ 〇 按照在實例1中的描述處理，但以（3Z)-3-(3,5-二曱基-4-羧基-1H-吡咯-2-基亞甲基）-l，3-二氫-2H-啕哚-2-酮取代 (3Z)-3-(3,5-二甲基-4-羧基-lH^比咯-2-基亞曱基）-5-氟-1，3-二氫-2H-吲哚-2-酮，得到（3Z)-3-{[3,5-二曱基-4-(嗎啉-4-基）六氫吡啶-1-基羰基]-1H-吡咯-2-基亞甲基卜l，3-二氫 -2H-吲哚-2-酮。1HNMR(400 兆赫茲，d6-DMSO)5 13.55(s， 1H)，l〇.87(s，1H)，7.74(d，J=7.6赫兹，1H)，7.59(s，1H)， 7.11(t，J=7.6赫茲，1H)，6.97(t，J二7.6赫茲，1H)，6.86(d， J = 7.4赫茲，ih)，3.54(app br t，J = 4,3赫茲，4H)，3.31(2x s， 3H + 3H)，2.43(bi* s，4H)，2.35(m，1H)，2.28(br m，6H)， 1.79(br s，2H)，1.22(br s，2H); LCMS m/z 435 [M+l]+。 按照在實例1中的描述處理，但以（3Z)_3_(3,5_二曱基_4_ 羧基-1H-吡咯-2-基亞甲基）_5_氣.i，％二氫哚_2_酮取 代（3 Z)-3-(3，5-一曱基_4-羧基-iH-p比口各-2-基亞甲基）-5 -氟 1，3-一氫-2H-啕哚_2-酮，得到（3Z)-3-{[3,5-二甲基冰（嗎啉 -4-基）六氫吡啶_丨_基羰基卜丨丨吡咯冬基亞甲基}_5_氯_丨，3_

O:\89\89336 DOC -46- 200418837 二氫 _2H-W 哚-2-酮。 hNMRGOO兆赫茲，d6-DMS〇）5 13.56(s，1H)，l〇.97(s， 1H)，7.95(d，J=2.0赫茲，ih)，7.74(s，1H)，7.11(dd，J=8.2, 2·0 赫茲，1H)，6.85(d，J=8.2赫茲，1H)，3.54(app br t，J二〜4赫兹， 4H)，3.31(2x s，3H+3H)，2.43(br s，4H)，2.37(m，1H)，2.25(br m，6H)，1.79(bi* s，2H)，1.23(br s，2H); LCMS m/z 470 [M+l]+。 按照在實例1中的描述處理，但以市售的4-( 1 -p比σ各σ定基）__ 六氫吡啶取代4-(嗎啉-4-基）-六氫吡啶，得到（3Ζ)-3-丨[3,5-二甲基-4-[4-(吡咯啶-1-基）六氫吡啶-1-基羰基]-ΐΗ-吡咯-2-基]亞甲基}-5-氟-1，3-二氫-2Η-叫卜朵-2-酮。 iHNMRGOO兆赫茲，d6-DMS〇）S Ε/Ζ異構體混合物；LCMS m/z 437 [M+l]+。 可根據美國專利公開案第2003/0130280號的程序進行以 上實例的合成，將其全部以引用的方式併入本文中。 實例2 (3Z)-3-{[3,5-二甲基-4-(嗎4木-4-基）氮雜環丁烧基幾 基]-111-外匕口各-2-基亞甲基}-5 -氟-1，3-二氫- 2H-。引嗓-2-酮的 合成 步,.IL:將丨―氮雜雙環[1丄0] 丁烷的溶液，根據在 Tetrahedron Letters 40 (1999) 3 761-64中描述的已知程序從 2,3-二溴丙胺氫溴酸鹽（58.8毫莫耳）來製備，慢慢地加至在〇 1下、在無水的未-變性之乙醇（250毫升）中之嗎啉（i5.7毫 升；180毫莫耳）和硫酸（3.3克的96%溶液）的溶液中。在水、，谷 O:\89\89336.DOC -47- 200418837 上攪拌該反應混合物30分鐘，然後在室溫下攪拌8小時。加 入氫氧化舞（5.5克）和100毫升水，並攪拌所獲得的淤漿1小 日守’然後通過石夕藻土塾過渡。濃縮濾液，並在降低的壓力 (2〇耄米汞柱）下蒸顧，移除水和過量的嗎琳。使用Kugelrohr I置’在向度真空下再度-蒸鶴該蒸鶴殘餘物，獲得產量3 3 〇/〇 之純的4-(氮雜環丁烷-3-基）嗎啉（2.759克），為無色油狀液 體。 C-NMR(CDC13，1 〇〇 兆赫兹）：66.7 1 (2C)，59·37( 1 C) 51·46(2〇, 49.95(2C)。iEKCDCV 400 兆赫茲）：3.727(t，j=44 赫兹，4H)，3.619(t，J=8赫兹，2H)，3.566(t，J=8赫茲，2H)， 3.227(m，J=7赫兹，1H)，2.895(br s，1H)，2.329(br s，4H)。 龙Al:將（3Z)-3-({[3,5-二曱基-4-羧基]-1H-峨咯一2-基} 亞甲基）-5-氟-1,3-二氫-2H-吲哚-2-酮的1-(8-氮雜苯并*** 基）-酯（0.5毫莫耳，210毫克）[藉著在DMF(5毫升）中之亨尼 格鹼（3·0毫升，〇·525毫升）的存在下，以hatij^^^(57〇毫 克，I·5毫莫耳）激活（3Z)-3_(3,3-二甲基-4-羧基-1-H-吡咯-2 — 基亞甲基）-5-氟]，3-二氫-2H-吲哚-2-酮（480毫克，1.6毫莫 耳）來製備，並藉著以氯仿（5毫升）使其沉澱，以純的形式分 離，亚在高度真空下脫水，產量92%(579毫克）]懸浮於無水 dma(i.〇^升）中。一次加入在無水^^八中之氮雜環丁烷 3基）_嗎啉（142·5毫克，1毫莫耳）的溶液，並在室溫下攪拌 :斤付的溶液20分鐘。在室溫下蒸發該反應混合物，使用油 幫浦，以6毫升甲醇加二乙胺的混合物（20··1 ;體積/體積）稀 釋黏稠的殘餘物，以機械方式播種，並放在冰箱（听⑴

O:\89\89336.DOC -48- 200418837 小時。過濾沉澱物（以冰冷的甲醇簡單地沖洗），並在高度真 空下脫水’付到想要的產物。產量71.5%(152宅克的橘色固 體）。 LC/MS: +APCI: M+l=425; -APCI: M-l=423。 19F-NMR(d-DMS〇，376·5 兆赫茲）M22.94(m，IF)。 iHCd-DMSO，400 兆赫茲）：i3.651(s，1H)，10.907(s，1H)， 7.754(dd，J = 9.4 赫茲，j=2.4 赫茲，1H)，7.700(s，ih)， 6.935(dt，J —8.2赫兹，J = 2.4赫兹，1H)，6.841(dd，J=8.6赫兹， J = 3.9赫茲；1H)，3.963(br s，2H)，3.793(br s，2H)，3.581(br t， J=4.3赫茲，4H)，3·133(ιη，1H)，2.367(s，3H)，2.340(s，3H)， 2.295(br s，4H) ° 按照在實例2中的描述處理，但以（3Z)-3-(3,5-:曱基·4-魏基-1H-吡咯-2-基亞曱基卜弘氯-丨，％二氫-2H_蚓哚酮取 代（3Z)-3-(3,5-二曱基-4-羧基-1H-说咯-2-基亞甲基）-5-氟 -1，3-二氫-2H-H丨哚-2-酮，得到橘色固體狀之（3Z>3_{[3,5_ 二甲基-4-(嗎琳-4-基）氮雜環丁烷小基幾基]-1]9；-吡咯基 亞甲基氣-1，3-二鼠-2H-K丨p朵-2-嗣。 LC/MS: +APCI: M+l=441; -APCI: M-l=440, 441。

Wd-DMSO，400 兆赫茲）：13.607(s，1H)，11〇〇6(s，m)， 7.976(d，] = 2·0赫兹，1H)，7.756(s，1H)，7.136(dd，卜8.2赫兹， 卜2·0赫兹，1H)，6.869(d，J=8.2赫兹，1H)，3.964(br s，2H)， 3.793(br s，2H)，3.582(br t，J=4.3赫兹，4H)，3.134(m，1H)， 2.369(s，3H)，2.347(s，3H)，2.296(br s，4H)。 才女A?、在貫例2中的描述處理，但以4_(氮雜環丁烧基）_ O:\89\89336.DOC -49- 200418837 順-3,5-二甲基嗎琳（以類似製備4-(氮雜環丁烷_3_基）_嗎琳 的程序製備，但使用順-3,5-二甲基嗎啉（2〇·7克；18〇毫莫耳） 代替嗎琳）取代4-(虱雜環丁烧-3-基）嗎琳，得到橘色固體狀 之（3Ζ)-3-{[3,5-二曱基-4-(2,5-二曱基嗎啉·4_基）氮雜環丁 烷-1-基羰基]-1Η-吡咯-2-基亞甲基^:氟—丨，％二氫-211_吲 嗓-2-酮。 LC/MS: +APCI: M+l=453; -APCI: μ·1=451 〇 F-NMR(d-DMSO，376.5 兆赫兹）:-122.94(m，IF)。

Wd-DMSO，400 兆赫茲）：13.651(s，iH)，10.907(s，1H)， 7.758(dd，J = 9.4 赫茲，J = 2.3 赫茲，ih)，7.7〇〇(s，1H) 6.935(dt，J = 8.6赫茲，J=2.7赫茲，1H)，6_842(dd，J=8.2赫茲， J=4,3赫茲，1H)，3.961(br s5 2H)，3.790(br s，2H)，3.546(br m，2H)，3.092(m，1H)，2.690(br s，2H)，2.364(s，3H)， 2.338(s，3H)，1.492(br m，2H)，1.038(br s，6H)。 按照在實例2中的描述處理，但以（3z)-3-(3,5-二甲基-4-敌基- lH-p比σ各-2-基亞曱基）-5 -氣-1，3 -二氫- 丨嗓- _取 代（3Ζ)-3-(3,5-二甲基-4-竣基-1Η-Ρ比洛-2-基亞曱基）-5-氟 -1，3-二氫-2H-啕哚-2-酮，並以4-(氮雜環丁烷-3-基）-順_3,5-二曱基嗎啉取代4-(氮雜環丁烷-3-基）嗎啉，得到橘色固體 狀之（3Z)-3-{[3,5-一曱基-4-(3,5_二甲基嗎琳-4-基）氮雜環 丁烧-卜基幾基]-lHw比洛-2-基亞曱基卜5-氯-1，3-二氫-2H-⑸嗓-2-酮。 LC/MS: +APCI: M+1-469, 470; -APCI: M-l=468? 469 〇 ip^d-DMSO，400 兆赫茲）：i3.606(s，1H)，ll.〇〇8(s，1H)， O:\89\89336.DOC -50- 200418837 7.979(d，J—2.0赫兹，1H)，7.758(s，1H)，7.138(dd，J=8.2赫兹， J = 2.0赫茲，1H)，6.870(d，J = 8.2赫茲，1H)，3.964(br s，2H)， 3.790(br s，2H)，3.547(br m，2H)，3.095(m，ih)5 2.691(br s， 2H)，2.366(s，3H)，2.345(s，3H)，1.494(br m，2H)，l.〇39(br s， 6H) 〇 按知在上文貫例1中的描述處理’但以根據下文製備的 2-(R)-p比嘻咬-1-基甲基P比洛σ定取代4-(嗎琳-4-基）_六氫外匕 °疋’ &供（3Ζ)-3-{[3,5-二甲基- 2R-(p比洛°定-1-基甲基卜比洛。定 -1-基羰基]-1H-吡咯-2-基亞甲基}-5 -氯-1，3-二氫口朵 -2 -酉同。 2(R)-p比略淀-1-基甲基p比哈变的合成 兔驛1 ··將三乙胺（1.5毫升）和吡咯啶（1·〇毫升，12〇毫莫 耳）加至在DMF (20毫升）中之（+)-苄氧羰基_D_脯胺酸（i 5 克，6.0毫莫耳）、EDC (2·3克，12·0毫莫耳）和H0Bt (8〇〇毫 克，1 2.9毫莫耳）的溶液中。在室溫下攪拌丨8小時，加入 NaHC〇3,以CH2CL2萃取（三次）。分離有機層，並覆以Na2S〇4 脫水。移除溶劑並藉著矽膠管柱層析法純化殘餘物 (EtOAc)，得到白色固體狀之(芊氧羰基>吡咯基] 吡咯啶（94%)。 iHNMRGOO兆赫茲，CDC13，所有的旋轉構體）δ 1.57-1.66(m5 1H)，1.71-2.02(m，5H)，2·04-2·19(ιη，2H)， 3.26-3.43(m, 3H)5 3.44-3.78(m? 3H)? 4.41(dd5 J=4.5, 7.6# 兹，0·5Η)，4.52(dd，J = 3.7，7.6赫茲，0.5H)，4.99(d，J=12.1 赫 茲，0·5Η)，5.05(d，J=12.5 赫茲，0·5Η)，5.13(d，J=12.1 赫茲， -51 -

O:\89\89336.DOC 200418837 0·5Η)，5.20(d，J=12.5赫茲，〇·5Η)，7.27-7.38(m，5H)。 步驟2 :在氫氣壓下，攪拌在甲醇（15毫升）中之 1-(R)-[N-(苄氧羰基）P比咯基]说咯啶（2.7克，8·9毫莫耳）和5% Pd_C催化劑（270毫克）的混合物20小時。通過矽藻土過濾該 反應混合物，並移除溶劑，產生有黏性油狀的2(Rl·脯胺醯 基吡咯啶（80%)，其可在下一個步驟中使用，不需進一步純 化。 iHNMRGOO 兆赫茲，d6-DMS〇）3 1.52-1.78(m， 5H)， 1.82-1.89(m，2H)，1.97-2.04(m, 1H)，2.63-2.71(m，1H)， 2.97-3.02(m， 1H)，3·22-3·35(χη，3H)，3.48-3.54(m， 1H)， 3.72(dd，J = 6.1，8.0赫茲，1H)。 步驟3 ：將2(R)-脯胺醯基吡咯啶（1.2克，7·1毫莫耳）溶解 於THF(10毫升）中。將該反應混合物冷卻至〇°c，並在〇。〇下 逐滴加入BH3，1M在THF中（10毫升，10毫莫耳）。迴流該反 應混合物1 6小時’ 3 M HC1 (4.7毫升）。加入2 M NaOH溶液， 直到達到pH 10為止。以5%在CH2C12中之MeOH萃取產物（三 次）。將有機層覆以NadCU脫水，並移除溶劑，提供微黃色 液體狀之標題化合物（73 %)，其可在下一個步驟中使用，不 需進一步純化。 HNMR(400 兆赫兹，d6-DMS〇）3 1.22-1.30(m，1H)， 1.55-1.69(m，6H)，1.71-1.79(m，1H)，2.26-2.30(m，1H)， 2.3 3-2.3 8(m5 1H)5 2.40-2.45 (m5 4H)5 2.65-2.7 l(m5 1H)? 2.78-2.84(m，1H)，3.02-3.09(m，1H)。 按照在上文貫例l中的描述處理，但以2-(s)_吡咯啶基 O:\89\89336.DOC -52- 200418837 曱基说洛咬（根據上述製備’但以苄氧羰基脯胺酸取代 (+ )-芊氧羰基-D-脯胺酸）取代4-(嗎啉-心基）_六氫叶卜定，提供 (3Z)-3- {[3 ?5- 一甲基- 2S-(叶匕口各°定-1_基曱基比口各口定-ΐ·基罗户 基]-1H-吡咯-2-基亞甲基}-5-氣-1，3-二氫-2H-吲哚-2-酉同。 實例3 : 5-[5 -氟-2-氧基-1，2-二氫-亞p弓丨嗓- (3Z)-基-曱基]_2,4-二甲美 -1H-吡咯-3-羧酸的合成 步魏1 •在冰浴中冷卻二甲基甲酸胺（25毫升，3當量）並加 以攪拌。在其中加入P0C13(1.1當量，10·8毫升）。在3〇分鐘 之後’將在DMF(2M，40毫升）中之3,5-二甲基-4-乙基§旨Ρ比 略（17.7克，105.8¾莫耳）的溶液加至該反應中，並繼續授 拌。在2小時之後，以水（250毫升）稀釋該反應，並以1N含 水NaOH鹼化至pH=ll。藉著過濾移除白色的固體，以水沖 洗，然後以己烷沖洗再脫水，得到黃褐色固體狀之5 -甲醯 基-2,4-二甲基-111-外!：嘻-3-鼓酸乙酯（19.75克，95%)。 iHNMR(360 兆赫茲，DMS〇-d6)3 12.11(br s，1H，NH)， 9.59(s，1H，CHO)，4.17(q，J=6.7赫兹，2H，OCH2CH3)， 2.44(s，3H，CH3)，2.40(s，3H，CH3)，1.26(d，J=6.7赫茲，3H， 〇CH2CH3)。 f驟2 •將5 -曱驢基-2,4-二甲基- Up比洛-3-魏酸乙酷（2 克，10毫莫耳）加至溶解於曱醇（3毫升）和水（1〇毫升）中之氫 氧化鉀（3克，5 3毫莫耳）的溶液中。迴流該混合物3小時，冷 卻至室溫，並以6 N鹽酸酸化至pH 3。藉著過濾收集固體， 以水沖洗，並在真空烘箱中脫水過夜，得到5_甲醯基-2，4- O:\89\89336 DOC -53- 200418837 二甲基-1H-吡咯-3-羧酸（ι·6克，93%)。 iNMROOO兆赫茲，DMSO-d6)5 12.09(s，br，2Η，ΝΗ & COOH)，9.59(s，1H，CHO)，2.44(s，3H，CH3)，2.40(s，3H， CH3)。 ϋ!:將氟款紅（8.2克，49·7毫莫耳）溶解於50毫升水 合肼中，並迴流1小時。然後將該反應混合物倒入冰水中。 然後過濾沉澱物，以水沖洗，並在真空烘箱下脫水，得到 5 -氟-2-經吲嗓（7.5克）。 免驟4 :在60°〇下攪拌在乙醇（3毫升）中之5-氟羥峋哚（100 毫克，0.66毫莫耳）、5-甲醯基-2,4-二甲基-1H-吡咯-3-羧酸 (1 3 3愛克’ 〇 · 7 9耄莫耳）和1 〇滴六氫p比σ定的反應混合物過 夜，並過濾。以1 Μ含水鹽酸溶液、水沖洗固體，並脫水， 得到黃色固體狀之5-(5-氟-2-氧基-1，2-二氫-亞⑼哚-3-基曱 基）-2,4-二甲基-1Η-吡咯-3-羧酸（201毫克，定量的）。MS m/z(相對強度，％) 299 ([M-l]+，1〇〇)。 實例4 : 5-(5 -氟-2-氧基- l，2-二氫-亞吲哚基-甲基）_2,4-二曱基 -1H^比嘻-3-羧酸（3-二乙胺基-2-羥基-丙基）_醯胺的合成 ±M±:在30°C下，將水（3·08克，〇·ι7莫耳）和二乙胺（106.2 毫升，10.3莫耳）加至2-氯曱基環氧乙烷（95克，ΐ·〇3莫耳） 中。然後在28-35°C下攪拌該反應混合物6小時，並冷卻至 20-25 C ’得到1-氯-3-二乙胺基-丙-2 -醇。 i屬2 :將在78毫升水中之氫氧化鈉（47·9克，1.2莫耳）的 溶液加至1-氯-3-二乙胺基·丙-2-醇中。在2〇-25°C下攪拌所 O:\89\89336.DOC -54- 200418837 得物1小時，以178毫升的水稀釋，並以醚萃取2次。利用固 體氫氧化鉀將混合的醚溶液脫水，並蒸發，得到丨3 5克粗產 物’藉著分級蒸餾純化’得到純的油狀之縮水甘油基二乙 胺（98克，76%)。 皇在10分鐘内，將縮水甘油基二乙胺（3.2克，24.8 毫莫耳）逐滴加至25%(重量/重量）氫氧化銨的冰***液（25 宅升’ 159毫莫耳）中。在0-5它下攪拌該反應混合物丨小時， 然後在室溫下攪拌14小時。蒸發所得的反應混合物，並蒸 鶴（84-90°C在500-600 mT下），產生1-胺基二乙胺基-丙1 醇（3.3 克，92%)。MS m/z 147([M+1]+)。 I驟4 :將1-胺基-3-二乙胺基-丙-2-醇（93·2毫克，0.64毫 莫耳）加至在1.0毫升DMF中之5 -甲酿基-2,4-二曱基-111-叶匕 咯-3-羧酸（1〇〇毫克，0.43毫莫耳）、EDC (122.7毫克，0.64 愛莫耳）和H〇Bt(86.5毫克’ 0.64毫莫耳）的溶液中。在室溫 下攪拌所得的反應溶液過夜，並蒸發。將殘餘物懸浮於丄〇 耄升水中，並過濾。以飽和的碳酸氫納和水沖洗該固體， 並在高真空烘箱中脫水，得到粗產物，在管柱層析法上純 化，以含有三乙胺之6%曱醇-二氯曱烷（2滴/100毫升6%曱醇 -二氯甲烷）洗脫，得到黃色固體狀之5-(5-氟-2-氧基-1，2-二 氫-亞p弓丨嗓-3-基甲基）-2,4-二曱基- lH-p比略-3-竣酸（3-二乙 胺基-2-經基-丙基）-酿胺（62毫克，34%)。

!ΗΝΜΙΙ(400 兆赫茲，DMSO-d6)3 13·70 (s，1H，ΝΗ-Γ)， 10.90 (s，1Η，ΝΗ·1)，7.76 (dd，J=2.38，9.33赫茲，1Η，Η-4)， 7·72 (s，1H，乙烯基-H)，7.60 (m，br，1H，CONHCH2CH O:\89\89336 DOC -55- 200418837 6.85((1(1，>4.55，8.99赫茲，1}^,11-6)，3.83(111，131'，111，〇田， 3.33(m，4H)，2.67(m，br，5H)，2.46(s，3H，CH3)5 2.44(s，3H， CH3)，1.04(m，br，6H，CH3x2)。MS m/z(相對強度，〇/0) 427([M+1]+，100) 〇 實例5 :

5-[5-氟1-2-氧基-1，2-二氫-亞4丨嗓-(32)-基-甲基]-2,4-二甲基 -lH-ρ比17各-3_魏酸（2-¾基-3-嗎淋-4-基-丙基）-酿胺（r)、（S) 和（R/S)(化合物4，5和6)的合成 步驟1 :在70°C下，攪拌在乙醇（50毫升）中之嗎啉（2.6毫 升，30毫莫耳）和表氯醇（2.35毫升，30毫莫耳）的混合物過 夜。在移除溶劑之後，以二氯曱烷（50毫升）稀釋該殘餘物。 藉著真空過濾收集澄清的固體沉澱物，得到1-氣-3-嗎啉-4-基-丙-2-醇（2.0 克，37%)。

赫茲，2H)，3.60(t，J=4.6 赫茲，2H)，3.75(m，4H，2xCH2)， 4.20(dd，J=5.2, 12赫茲，2H)，4.54(m，2H)，4.62(m，1H，CH)， 6.64(d，J=6.4赫茲，1H，OH)。MS(m/z) 180.2(M+1)。 步驟2 :在室溫下，以在曱醇中之NH3的溶液（25重量0/〇， 20¾升）處理1-氣-3-嗎淋-4-基-丙-2 -醇（2.0克，11毫莫耳）。 使氮氣在該反應混合物中起泡，移除氨。蒸發溶劑，得到 I -胺基-3-嗎淋-4-基-丙-2-酵的氣化氮鹽（2.0克，91%)。 ^NMI^DMSO-dOS 2.30(d，J = 6.0赫茲，2H)，2.36(m，4H， NCH2)，2.65(dd，J=8.4, 12.8赫茲，1H)，2.91(dd，J=3.6, 12·8 赫茲，1H)，3.52(m，4H，OCH2)，3.87(m，1H，CH)，5.32(s，1H， O:\89\89336.DOC -56- 200418837 〇H)，8.02(brs，3H，NH3 + )。MS(m/z) 161.1(M+1)。 # ”驟3 :將5-(5 -氣-2-氧基-1，2-二氫-亞4丨嗓-3-基-甲 基）_2,4_二甲基-1H-吡咯-3-羧酸（120毫克，0.4毫莫耳）與1_ 胺基-3-嗎4木-4-基-丙-2-醇（74毫克，0·48毫莫耳）縮合，沉殿 出5-[5-氟-2-氧基-1，二氫-亞⑼哚-(3Ζ)-基曱基]-2,4-二曱 基-1Η-吡咯-3-羧酸（2_羥基-3-嗎啉-4-基-丙基）-醯胺（65毫 克，36%)。蒸發母液至無水，並藉著閃爍層析法純化殘餘 物，得到額外的 2Ν(70 毫克，39%)。iHNMR^DMSO-te 2.28(m，1H)，2.32(m，1H)，2.40(m，4H)，2·40, 2.42(2xs，6H， 2xCH3)，3.15(s，1H)，3.31(m，1H)，3.55(m，4H)，3.78(m，1H)， 4.73(bi*s，1H，OH)，6.82(dd，J=4.5, 8.4赫茲，1H)，6.90(td， 2J=2.8, 3J=10.0赫茲，1H)，7.53(m，1H)，7.70(s，1H)，7.74(dd， J=2.0，9.6赫茲，1H)(芳香族和乙稀基），l〇.87(s，ih，CONH)， 13.66(s，1H，NH) 〇 LC-MS(m/z) 441.4(M-1) 〇 2-羥基-7-噚-4-氮鑌螺[3.5】壬烷氣的合成 α r^o 1)乙醇 2)丙 ig

OH 在裝設有熱電偶、氮氣入口和250毫升添加漏斗公升 3-頸圓底燒瓶中，裝入嗎啉（91·5克，91·5毫升，1〇5莫耳， 1·〇¥ i)# 100¾升乙醇。迅速搜拌該溶液，同時在大約 分釦内，仗添加漏斗加入表氣醇（1〇〇克，84·5毫升，1·⑽莫 耳，1_03吾里）。監視溫度，並在壺溫達到27。〇時，以冰水 O:\89\89336.DOC -57- 200418837 浴冷卻該反應。攪拌澄清的溶液18小時，藉著〇(：測定該反 應（在1毫升乙醇中稀釋5滴反應混合物，並以下列的執行參 數注射至15m DB-5毛細GC管柱上，注射器25〇。〇，檢測器 250°C，最初烘箱溫度28t：,以每分鐘…^加溫至25(Γ〇。 剩下低於3 °/。嗎琳表示反應完成。利用全室真空，在$ 〇它 下，在旋轉式汽化器上濃縮該反應，直到不能濃縮更多餾 出液為止。將所得的油儲存在室溫下24_48小時，或直到觀 察到大塊結晶為止（播種將加速該過程）。以25〇毫升丙酮稀 釋該淤漿，並過濾。在6(rc的真空烘箱中將固體脫水18_24 小時。提供84克的結晶狀產物。可濃縮母液，並重複結晶 過程，增加回收。^hnmrgoo兆赫茲，DMSO-d6)36.55(d， 1H)，4.64(m，1H)，4.53(m，2H)，4.18(m，2H)，3.74(m，4H)， 3.60(m，2H)，3.48(m，2H)。13C NMR(l〇〇兆赫兹，DMS〇-d6)3 70.9, 61.39, 61·〇4, 60.25, 58.54, 57.80。 1-胺基-3-(4-嗎啉基）-2-丙醇（消旋的）的合成 c厂 ζ"Ν〇-ΟΗ ΝΗ3ί Me〇H ^n^v^nh 〇 -^ 〇OX 2 在裝設有磁性攪拌棒的3公升丨-頸圓底燒瓶中，裝入羥 基-7-吟-4-氮鏽螺[3.5]壬烷氣（150克，835毫莫耳），接著裝 入23重量％在曱醇中之無水氨（212〇毫升）。塞住燒瓶，並在 20-23°C下攪拌所得的澄清溶液18小時。在上文的條件下進 行GC，顯示沒有剩下起始物質。移開塞子，並容許氨在該 O:\89\89336.DOC -58- 200418837 溶液中起泡30分鐘。然後將燒瓶移去進行旋轉蒸發，利用 45°C浴和全室真空，濃縮成白色固體。^NMRWOO兆赫茲， DMSO-d6)S 3.57(dd，2H)，3.3-3.5(m，6H)，2.59(m，2H)， 2.2-2.4(m，6H); 13C NMR(l〇〇兆赫茲，DMS〇-d6)3 70·8, 67.1，60·1，53.8, 48·1。 依據在實例3中描述的程序，但以按照下述製備之 2-(S)-l-胺基-3-嗎啉-4-基-丙-2-醇取代2-(RS)-l-胺基-3-嗎 啉-4-基-丙-2-醇，獲得想要的化合物5-[5-氟-2-氧基-1，2-二 氳-亞吲哚-(3Z)-基曱基]-2,4-二甲基-1H-吡咯-3-羧酸 (2-(S)-經基-3 -嗎琳-4-基-丙基）-酿胺。 1_胺基-3-(4-嗎啉基）_2_丙醇（非-消旋的）的合成

THF MeOH 在裝设有機械攪:拌、熱電偶和添加漏斗的1公升3 _頸圓底 燒瓶中’裝入嗎4(91.5克，91.5毫升，1.05莫耳，1.0當量） 和45毫升第三-丁醇。迅速地攪拌該溶液，同時在大約3〇分 4里内，從添加漏斗加入1^_表氯醇（1〇〇克，84.5毫升，1.〇8莫 耳，1.03當量）。監視溫度，並在壺溫達到””時，以冰水 浴冷卻該反應。攪拌澄清的溶液18小時。藉著測定該反 應（在1宅升乙醇中稀釋5滴反應混合物，並以下列的執行參 數注射至15m DB-5毛細GC管柱上，注射·25(Γ(：，檢測器 250°C，最初烘箱溫度28r，以每分鐘ι〇χ：加溫至25〇。〇。 剩下低於3%嗎啉表示反應完成。將該溶液冷卻至1〇它，並 O:\89\89336.DOC -59- 200418837 逐滴加入20重量。/。在THF中之第三-丁醇鉀的溶液（576克）， 保持溫度低於1 5 C。在1 〇-1 5°C下攪拌所得的白色淤漿2小 時，並藉著GC，使用上文的條件檢查。沒有觀察到任何的 氯醇。利用5(TC浴和全室真空，在旋轉式汽化器上濃縮該 混合物。以水（500毫升）和二氯曱烷稀釋所得的混合物。分 離相位，並以二氣甲烷（5〇〇毫升）沖洗液相。將混合的有機 層覆以硫酸鈉脫水，並濃縮成澄清、無色的油。提供145克， 97%產量的環氧化物。lHNMR(4〇〇兆赫兹，DMs〇_d^ 3.3(dd，4H)，3.1(m，1H)，2.6(dd，1H)，2.5(dd，1H)，2 4(m 4H)，2.2(dd，2H); % NMR〇〇〇兆赫兹，dms〇〇5 μ^ 60.1，53.1，48.9, 43.4。 將上文的粗製環氧化物裝入帶有磁性攪拌棒的3公升卜 頸圓底燒瓶中。加入在甲醇中的無水氨（24%重量/重量25 公升）。塞住燒瓶，並在室溫下攪拌該混合物24小時。在上 文的條件下進行GC，顯示沒有剩下起始物質。移開塞子， 並料氨在該溶液中起泡3G分鐘。然後將燒瓶移去進行旋 轉蒸發，利用45°C浴和全室真空，濃縮成澄清無色的油。 提供124克的產物。ihnmr(4〇〇兆赫兹，dms⑹以μ?⑽， 2H)，3.3-3.5(m，6H)，2.59(m，2H)，2 2 2 4(叫 6h); % NMRdOO兆赫兹，麵〇都，67i，⑷，μ』，级工。 1_胺基-3_(4-嗎啉基）_2_(s)_丙醇的合成 在裝設有機械攪拌、熱電偶和添加漏斗的丨公升弘頸圓底 燒瓶中一，裝入嗎啉（91·5克，91.5毫升，1.05莫耳，1〇當量） # 〇笔升甲醇。迅速地攪拌該溶液，同時在大約3〇分鐘

O:\89\89336.DOC -60- 200418837 内，從添加漏斗加入R-表氣醇（100克，84.5毫升，1.08莫耳， 1.03當量）。監視溫度，並在壺溫達到27°C時，以冰水浴冷 卻該反應。攪拌澄清的溶液1 8小時。藉著GC測定該反應（在 1毫升乙醇中稀釋5滴反應混合物，並以下列的執行參數注 射至15m DB-5毛細GC管柱上，注射器250°C，檢測器250 °C，最初烘箱溫度28°C，以每分鐘l〇°C加溫至250°C)。剩 下低於3%嗎啉表示反應完成。將該溶液冷卻至i〇°c，並逐 滴加入25重量。/〇在甲醇中之甲醇鈉的溶液（233克，1.08莫 耳，247毫升），保持溫度低於15°C。在10-15°C下授拌所得 的白色淤漿2小時，並藉著GC，使用上文的條件檢查。沒 有觀察到任何的氯醇。利用50°C浴和全室真空，在旋轉式 汽化器上濃縮該混合物。以水（500毫升）和二氣曱烷稀釋所 得的混合物。分離相位，並以二氯甲烷（500毫升）沖洗液相。 將混合的有機層覆以硫酸鈉脫水，並濃縮成澄清、無色的 油。提供145克，97%產量的1，2-環氧基-3-嗎啉-4-基丙烧。 1HNMR(400兆赫茲，DMS〇-d6)a 3.3(dd，4H)，3.1(m，ιΗ)，

2.6(dd，1H)，2.5(dd，1H)，2.4(m，4H)，2.2(dd，2H); 13C NMR(100 兆赫茲，DMS〇-d6)5 65.4,60.1，53.1，48.9,43 4。 將上文的粗製1，2-環氧基-3-嗎琳-4-基丙烷裝入帶有磁性 攪:拌棒的3公升1 -頸圓底燒瓶中。加入在甲醇中的無水氨 (24%重量/重量2.5公升），塞住燒瓶，並在室溫下攪拌該混 合物24小時。在上文的條件下進行GC，顯示沒有剩下起始 物質。移開塞子，並容許氨在該溶液中起泡3〇分鐘。然後 將燒瓶移去進行旋轉蒸發，利用45°C浴和全室真空，濃縮 O:\89\89336.DOC -61 - 200418837 成澄清無色的油。提供124克的1-胺基-3-(4-嗎啉基）-2-〇 丙醇。 lHNMR(400兆赫茲，DMSO-d6)53.57(dd，2H)，3.3-3.5(m， 6H), 2.59(m, 2H)，2.2-2.4(m，6H); 13C NMR(l〇〇 兆赫兹， DMSO-d6)3 70.8, 67.1，60.1，53.8, 48.1。

HsNXO —---►

5-氟經卜朵 Et3N，THF 混合咪嗤醯胺（7.0克，313毫莫耳）、胺（15.〇克，64.6毫 莫耳）、5 -氟經4丨嗓（4.93克’ 32·6毫莫耳）、三乙胺（979克， 96.9毫莫耳）和THF(88毫升），並加熱至⑽艺。形成棕色的溶 液。在60°C下攪拌24小時，將黃色的淤漿冷卻至室溫，並 過濾。以80毫升THF沖洗濾餅，並在5(rc，在室真空下脫 水過仪。獲得標色的固體（23_2克）。在室溫下使該固體在350 毫升中形成於漿5小時，並過濾之。以1 〇〇毫升水沖洗濾餅， 並在50°C，在室真空下脫水過夜。獲得8·3ι克，化學產量 56%。 O:\89\89336.DOC -62- 200418837

ΝίΓν^Ν^ Ηδ ^°

在裝設有溫度計、冷凝器、磁性搜拌器和氮氣入口的0.25 公升燒瓶中，裝入4.92克5 -氟羥吲哚、7.〇克咪嗤醯胺、15.5 克（R) -1 -胺基- 3-(4-嗎p林基）-2-丙醇、9.78克三乙胺和88毫升 四氫浮喃。將該混合物加熱至6〇°C 1 6·5小時。將該反應冷 卻至周圍溫度並過濾。在乙腈中以11毫升/克，連續3次使 所得的固體形成淤漿，在真空中脫水，得到3.6克（25.25%)。 _1^，办1^1^13〇8，（：-18,5微米，（6:4)，乙腈：0.]^氣化 銨 ’ ΡΗΑ-571437=4·05 分鐘]。i^NMR^DMSO)』10·86(1Η， bs); 7.75(1H，d); 7·70(1Η，s); 7·50(1Η，m); 6.88(2H，m); 4·72(1Η，bs); 3·78(1Η，bs); 3·56(4Η，m); 3·32(6Η，m); 3·15(1Η，m); 2·43(8Η，bm)。 實例6 : 2,4_一甲基-5-|>氧基-1，2-二氩_亞吲哚-(3幻-基甲基卜1]^

將5-(2-氧基-1，2-二氫-亞吲哚基甲基）·2,4_二甲基_1]9[_ 吡咯-3-羧酸（113¾克，〇·4毫莫耳丨與^胺基嗎啉_4_基_丙 -2-醇（74毫克，0.48毫莫耳）縮合，沉澱出2,4_二甲基_5吖2_ O:\89\89336.DOC -63- 200418837 氧基-1，2-二氫-亞吲哚-(3Z)-基甲基]-1H-吡咯-3-羧酸（2-羥 基-3-嗎啉-4-基-丙基）-醯胺（77毫克，45.3%)。 iHNMRCDMSO-dJS 2.27(m，1H)，2.32(m，1H)，2.40(m， 4H)，2.40, 2.42(2xs，6H，2xCH3)，3.15(s，1H)，3.32(m，1H)， 3.55(m，4H)，3.77(m，1H)，4.74(d，J=4.8赫茲，1H，〇H)， 6.86(d，J = 7.6 赫兹，1H)，6.96(t，J=7.2 赫兹，1H)，7.1〇(t， J = 7.6赫茲，1H)，7.49(t，J=5.6赫茲，1H)，7.61(s，1H)，7.77(d， J=8.0赫茲，1H)(芳香族和乙烯基），i〇.88(s，1H，CONH)， 13.62(s，1H，NH)。LC-MS(m/z) 425.4(M+1)。 實例7 : 5-[5-氯-2-氧基-1，2-二氫-亞啕哚-(32)-基-曱基]-2,4-二甲基 -1H-p比洛-3-魏酸（2-經基-3-嗎淋-4-基-丙基）-醢胺（化合物7) 的合成 將5-(5 -氣-2-氧基-1，2-二氫-亞4丨嗓-3-基曱基）-2,4 -二甲 基-1H-吡咯-3-羧酸（126.6毫克，0.4毫莫耳）與1-胺基-3-嗎啉 -4-基-丙-2-醇（74毫克，0.48毫莫耳）縮合，沉澱出5-[5-氯-2- 氧基-1，2-二氫-亞吲哚-(3Z)-基曱基]-2,4-二甲基- 洛 -3-羧酸（2-羥基-3-嗎啉-4-基-丙基）-醯胺（1〇7毫克，58%)。 HNMR(DMS〇-d6)3 2.29(m，1H)，2.33(m，1H)，2.39(m 4H)，2·40, 2.42(2xs，6H，2xCH3)，3.15(s，1H)，3.37(m，1H)， 3.55(m，4H)，3.77(m，1H)，4.74(d，J=4.8赫茲，iH，〇H) 6.85(d，J=8.4赫茲，1H)，7.11(dd，J=2.0，8·〇赫兹，1H) 7.53(t，J=5.6 赫茲，1H)，7.75(s，1H)，7.97(d，j = 2.〇 赫兹 1H)(芳香族和乙烯基），l〇.99(s，1H，CONH)，13.6^S 1r O:\89\89336.DOC -64- 200418837 NH)。LC-MS(m/z) 457·4(Μ-1)。 實例8 : 5-[5-溴-2-氧基-1，2-二氫-亞吲哚-(3Ζ)-基曱基]-2,4-二曱基 -ΙΗ-叶匕洛-3-緩酸（2-經基-3-嗎琳-4-基-丙基）_酸胺的合成 將5-(5-溴-2-氧基-1，2-二氫-亞吲哚-3-基曱基）-2,4、二甲 基-ΙΗ-咐洛-3-羧酸（72_2毫克，0.2毫莫耳）與1-胺基_3，嗎琳 -4-基-丙-2-醇（38毫克，0.24毫莫耳）縮合，沉澱出5-[5-填 氧基-1，2-二氫-亞啕哚-(32)-基甲基]-2,4-二甲基-111^比略 -3-魏酸（2-經基-3-嗎淋-4-基-丙基）-酸胺（55毫克，55%)。 1HNMR(DMSO-d6)5 2.27(m5 1H)5 2.32(m5 1H), 2.39(m? 4H)，2.41，2.42(2xs，6H，2XCH3)，3.13(s，1H)，3.35(m，ifj) 3.55(m，4H)，3.77(m，1H)，4.74(d，J=4.4赫茲，1H，〇H)， 6.80(d，J=8.4赫兹，1H)，7.24(dd，J=2.0，8·0赫兹，1H)， 7.51(t，J—5.6 赫！么，1H)，7.76(s，1H)，8.09(d，J=2.0 赫茲， 1H)(芳香族和乙烯基），l〇.99(s，1H，CONH)，13.62(s，1H， NH) 〇 LC-MS(m/z) 503.4(M-1)。 實例9 : 2,4·二曱基-5-[2-氧基-1，2-二氫_亞啕哚-(3Z)_基-甲基 吡咯-3-羧酸（2-羥基-3-[l，2,3]***-丨-基-丙基）_醯胺的合成 步驟1 ··在室溫下攪拌在乙醇（5〇毫升）中之3-[1，2,3]*** (2,0克，29毫莫耳）、表氯醇（3·4毫升，43·5毫莫耳具 一異丙基乙胺(2.6¾升’ 15毫莫耳)的混合物過夜。在移除 溶劑之後，藉著閃爍層析法純化殘餘物（CH2CVch3〇h== 100/1-100/2-100/4)，得 ，、一 )付到丨-虱-3_(1，2,3)-***-2-基丙-2-醇 O:\89\89336.DOC -65- 200418837 (2.1 克，45%)。iHNMRCCDClJS 3.52(m，2H，OH和 CH2)， 3.60(dd，J = 5.2，11.2赫茲，1H)，4.36(m，1H，CH)，4.68(m， 2H)，7.67(s，2H)。MS(m/z) 162.1(M+1)和 1-氯-3-(l，2,3)-三 唑-1-基丙-2-醇（2.3 克，49%)。WNMRCCDChW 3.5 6(s，1H)， 3.57(s，1H)，4.35(m，1H)，4.53(dd，J=7.2，14赫茲，1H)， 4.67(dd，J=3.8，14赫茲，1H)，7.67(s，1H)，7.71(s，1H)。 MS(m/z) 162· 1(M+1) o 步驟2:在60C下’在密封壓力試管中，以在甲醇中之nh3 的溶液處理1-氣-3-(l，2,3)-***-1-基丙-2-醇（2.3克，13毫莫 耳）過夜。在冷卻至室溫之後，使氮氣在反應混合物中起 泡，移除氨。蒸發溶劑，得到1-胺基-3-(1，2,3)-***-1-基丙 -2-醇的鹽酸鹽（2.57克，1〇〇%)。 1HNMR(DMSO-d6)6 2.68(dd3 J=8.83 12.8 赫茲，1Η)， 2.97(dd，J=3.6，12·8赫兹，1H)，4.15(m，1H)，4.44(dd，J=6.4, 14赫兹，1H)，4.57(dd，J=4.6, 14赫兹，ih)，5.95(d，J=5.2赫 !么，1H，〇H)，7.77(s，1H)，8.01(brs，3H，NH3 + )，8.12(s，1H)。 MS(m/z) 143,1(M+1)。 步“ 3 ·將5-(2 -氧基-1，2-二氫-亞吲嗓基甲基）_2,4_二曱 基-m-吡咯-3-羧酸（113毫克，0.4毫莫耳）與1_胺基_3(1，2,3) 一唑-1-基-丙-2-醇（85¾克，0.48毫莫耳）縮合，沉澱出2,4_ 一曱基-5-[2-氧基-1，2-二氫-亞4哚_(3幻_基甲基]_111_11比咯 小羧酸（2_經基_3·[1，2,3]三。坐-1-基-丙基）-醯胺（70毫克， 41%) 〇 *HNMR(DMSO-d6)5 2.45, 2.48(2xs, 6H, 2xCH3), 3.35(m5 O:\89\89336.DOC -66 - 200418837 2H)，4.〇2(m，1H)，4.32(dd，卜7.6，14赫茲，；[h)，4.53(dd J —3.4，14赫茲，ih)，5.43(d，J = 5.6赫茲，ih，〇H)，6.9l(d >入6赫茲，111)，7.01〇，卜7.6赫茲，111)，7.15仏1=8.〇赫兹， 1H)，7.66(s，1H)，7.12(t，J二 5.6赫茲，1H)，7.74(s，1H)， 7.77(d，>7.6赫茲，1H)，8.11(s，1H)，l〇.93(s，m，C〇NH)， 13.68(s，1H，NH)。LC-MS(m/z) 405·4(Μ-1)。 實例10 : 5-[5 -氟-2-氧基-1，2-二氫-亞嗓_(3Z)«•基甲基]_2,4_二曱基 -1H-吡咯-3-羧酸（2_羥基_3_Π，2,3]***-丨_基_丙基）_醯胺的 合成 將5-(5 -氟-2-氧基-1，2-二氫-亞啕哚-3-基甲基）-2,4-二甲 基-1H-吡咯-3-羧酸（120毫克，0.4毫莫耳）與卜胺基-3(1，2,3) ***-1-基-丙-2-醇（85毫克，0·48毫莫耳）縮合，沉澱出5_[5_ 氟-2-氧基_1，2-二氫-亞吲哚-(3Ζ)-基甲基]_2,‘二曱基“仏 吡咯-3-羧酸（2-羥基-3-[1，2,3]***-1-基·丙基）_醯胺（1〇〇毫 克，62%)〇 HNMR(DMSO-d6)0 2.42, 2.44(2xs? 6H, 2xCH3)? 3.27(m, 2H)，3·98(χη，1H)，4.27(dd，J=7.6，14赫茲，1H)，4.50(dd， 卜3.4，13.6赫茲，111)，5.38((1，卜5.6赫茲，111，〇11)，6.82((1(1， J=4.4，8·4赫茲，1H)，6.91(td，2J=2.4，3J = 9.0赫茲，1H)， 7.70(m，3H)，7.75(dd，J=2.4, 9.2赫茲，1H)，8.11(s，1H)， l〇.93(s，1H，C〇NH)，13.73(s，1H，NH)。LC-MS(m/z) 423.4(M-1) 〇 實例11 : O:\89\89336.DOC 67- 200418837 5-[5-氣-2-氧基-1，2-二氫-亞啕哚-(3Z)-基-甲基]-2,4-二甲基 -1Η - p比口各-3 -竣酸（2 -經基-3- [1，2,3]二°坐-1 -基-丙基）-S盘胺的 合成

將5-(5 -氣-2-氧基-1，2-二氮-亞ρ弓丨ρ朵-3-基甲基）-2,4 -二曱 基-lH-p比咯-3-羧酸（126.6毫克，0.4毫莫耳）與1-胺基 -3(1，2,3)***-1-基-丙-2-醇（85毫克，0.48毫莫耳）縮合，沉 澱出5-[5-氣-2-氧基-1，2-二氬-亞吲哚-(3Ζ)-基甲基]-2,4-二 甲基-lH-p比咯-3-羧酸（2-羥基-3-[1，2,3]***-1-基-丙基）-醯 胺（48毫克，27%)。

1HNMR(DMSO-d6)5 2.42, 2.44(2xs, 6H5 2xCH3)5 3.27(m, 2H)，3.99(m，1H)，4.28(dd，J=7.8，14赫茲，1H)，4.51(dd， J二3.2，14赫茲，1H)，5.39(d，J二6.0赫茲，1H，OH)，6.85(d， 卜8.4赫茲，111)，7.12((1(1，卜2.0,8.2赫茲，111)，7.70(111，211)， 7.74(s，1H)，7.97(d，J=2.0赫茲，1H)，8.07(s，1H)，10.99(s， 1H，C〇NH)，13.65(s，1H，NH) 〇 LC-MS(m/z) 439·4(Μ-1)。 實例12 : 5-[5-溴-2-氧基-1，2-二氫-亞钏哚-(3Z)-基-甲基]-2,4-二甲基 -111^比咯-3-羧酸（2-羥基-3-[1，2,3]***-1-基-丙基）-醯胺的 合成 將5-(5-溴-2-氧基-1,2-二氫-亞吲哚-3-基甲基）-2,4-二曱 基-lH-p比咯-3-羧酸（144.4毫克，0.4毫莫耳）與1-胺基 -3(1,2,3)***-1-基-丙-2-醇（85毫克，0.48毫莫耳）縮合，沉 澱出5-[5-溴-2-氧基-1，2-二氫-亞W哚-(3Z)-基甲基]-2,4-二 甲基-ΙΗ-说咯-3-羧酸（2-羥基-3-[1，2,3]***-1-基-丙基）-醯 O:\89\89336 DOC -68- 200418837 胺（130毫克，67%)。 !ΗΝΜΙΙ(ΟΜ3〇-(16)δ 2.41，2.44(2xs，6H，2xCH3)，3.27(m， 211)，3.99(111，1«〇，4.28((1(1，】二7.6，14赫茲，111)，4.50((1(1， J—3.6，14赫狄，1H)，5.40(d，J=5.6赫兹，1H，〇H)，6.81(d, J二8.4赫茲，1H)，7.24(dd，J=2.0, 8.0赫茲，1H)，7.70(m，2H)， 7.77(s，1H)，8.07(s，1H)，8.10(d，J=1.6赫茲，1H)，11.0(s，1H， C〇NH)，13.64(s，1H，NH)。LC-MS(m/z) 485·4(Μ-1) 〇 實例13 : 5-[5 -就-2-氧基-1，2-二氫-亞嗓-3-基曱基]_2,4-二甲基-1H- 吡咯-3-羧酸（2-乙胺基-乙基）醯胺（化合物1)的合成 將5-氟-1，3-二氫4丨嗓-2-_(〇·54克，3.8毫莫耳）與5-甲酿 基-2,4-二曱基-1Η-吡咯-3-羧酸（2-二乙胺基乙基）醯胺縮 合，得到0,83克（55%)黃綠色固體狀之標題化合物。 ^ΝΜΙ^όΟ 兆赫茲，DMSO-d6)3 13.66(s， 1Η，ΝΗ)， 10.83(s，br，1H，NH)，7.73(dd，J=2.5 & 9.4赫茲，1H)，7.69(s， 1H，H-乙烯基），7.37(t，1H，CONHCH2CH2)，6.91(m，1H)， 6.81-6.85(m，1H)，3·27(χη，2H，CH2)，2.51(m，6H，3xCH2)， 2.43(s，3H，CH3)，2.41(s，3H，CH3)，〇.96(t，J = 6.9赫茲，6H， N(CH2CH3)2) 〇 MS-EI m/z 398[M + ] 〇 5-[5-氟-2-氧基-1，2-二氫-亞啕哚-3-基曱基]_2,4-二曱基-11^- p比p各-3 -敌酸（2 -乙胺基-乙基）g盛胺的另一種合成 將水合肼（55%，3000毫升）和5-氟靛紅（300克）加熱至1〇〇 。(：。在120分鐘内，分批（1〇〇克）加入額外的氟-毅紅（5〇〇 克），並加以攪拌。將該混合物加熱至11 〇°C，並攪拌4小時。 O:\89\89336.DOC -69- 200418837 將該混合物冷卻至室溫，並藉著真空過隸集固體，得到 粗衣的（2-胺基-5-氟_苯基）_乙酸醯肼（748克）。將醯肼懸浮 於水（700¾升中），並利用12 N鹽酸將該混合物的pH值調整 到邙113。在室溫下攪拌該混合物12小時。藉著真空過濾收 集固體，亚以水沖洗兩次。在真空下將產物脫水，得到棕 色粉末狀之5-氟-1，3-二氫丨哚酮（6〇〇克，73%產量）。 HNMR(二甲亞石風 _^6)δ 3 46(s，2H，CH2)，6 75, 6 95, 7 〇5(3 X m，3H，芳香族），1035(s，1H，NH)。ms m/z 152[M+1]。 劇烈地攪拌3,5-二曱基-1H-吡咯-2,4-二羧酸2-第三-丁酷 4-乙基酯（2600克）和乙醇（7800毫升），同時慢慢地加入丨〇 N 鹽酸（3 650毫升）。使溫度從25它增加至35。(：，並開始放出氣 體。將該混合物加溫至54°C，並攪拌之，再加熱1小時，此 時溫度為67°C。將該混合物冷卻至5°C，並慢慢地加入32公 升冰和水，並加以攪拌。藉著真空過濾收集固體，以水沖 洗三次。將固體風乾至恆重，得到粉紅色固體狀之2,4-二曱 基-1114比咯-3-羧酸乙酯（1418克，87%產量）。111屮^111(二曱 亞石風-d6)3 2.1〇, 2.35(2xs，2x3H，2xCH3)，4.13(q，2H，CH2)， 6.37(s，1H，CH)，l〇.85(s，1H，NH)。MS m/z 167[M+1] 〇 在冰浴中冷卻二曱基甲醯胺（322克）和二氣甲烷（3700毫 升）至4°C，並加入填醯氣（684克），並加以攪拌。在15分鐘 内’分批慢慢地加入固體2，4 -二甲基-1Η -批。各-3 -魏酸乙酉旨 (6 7 0克）。所達到的最大溫度為1 8 °C。將該混合物加熱至迴 流1小時，在冰浴中冷卻至10 °C，迅速地加入1 · 6公升的冰 水，並劇烈地攪拌。溫度增加至15 °C。加入10 N鹽酸（1.6 OA89\89336.DOC -70- 200418837 公升）並劇烈授拌。溫度增加至22°C。容許靜置該混合物30 分鐘’並容許分離層次。溫度達到最大值4〇ac。以在加入 期間内，容許溫度達到並維持在55°C之速率，以10 N氫氧 化钾（3 · 8公升）將液層調整到pH 12-1 3。在完全加入之後， 將該混合物冷卻至1 〇°C，並攪拌1小時。藉著真空過濾收集 固體，並以水沖洗四次，得到黃色固體狀之5 -甲醯基-2，4-二曱基-1H- p比咯-3-羧酸乙酯（778克，100%產量）。 iH-NMI^DMSO- d6)5 1.25(t，3H，CH3)，2.44，2.48(2xs， 2x3H，2xCH3)，4.16(q，2H，CH2)，9.59(s，1H，CHO)，12.15(br s，1H，NH)。MS m/z 195[M+1] 〇 攪拌並迴流5-曱醯基-2,4-二曱基-1H-吡咯-3-羧酸乙酯 (806克）、氫氧化鉀（548克）、水（2400毫升）和甲醇（3 〇〇毫升）2 小時，然後冷卻至8°C。以二氣曱烷萃取該混合物2次。以 1000毫升10 N鹽酸將液層調整到PH 4，保持溫度低於15。〇。 加入水有助於攪拌。藉著真空過濾收集固體，以水沖洗3 次，並在50 C真空下脫水，得到黃色固體狀之5 -甲酸基-2，4-二曱基-111-吡咯-3-羧酸（645 克，93.5%產量）。111,^111 (DMSO-d6)3 2.40，2.43(2xs，2x3H，2xCH3)，9.57(s，1H， CH〇），12.07(br s，2H，NH+C〇〇H)。MS m/z 168[M+1]。 在室溫下攪拌5-曱醯基-2,4-二曱基-1H-吡咯_3-魏酸 (1204克）和6020毫升的二甲基甲醯胺，同時加入ι_(弘二甲 基-胺丙基-3-乙基碳化二醢亞胺鹽酸鹽（2 〇71克）、經基笨并 ***（1460克）、三乙胺（20 16毫升）和二乙基乙二胺（1215毫 升）。在室溫下攪拌該混合物20小時。以3000毫升水、2〇〇〇 OA89\89336.DOC -71 - 200418837

毫升鹽水和3000毫升飽和的碳酸氫鈉溶液稀釋該混合物， 並以10 N氫氧化鈉將pH值調整到超過1〇。以5〇〇〇毫升每次 10%在二氯甲烷中之甲醇萃取該混合物2次，並混合萃取 物，覆以無水的硫酸鎂脫水，並旋轉蒸發至無水。以1 950 毫升甲苯稀釋該混合物，並再度旋轉蒸發至無水。以3:丨之 己烧：二***（4000毫升）濕磨殘餘物。藉著真空過濾收集固 體’以400毫升乙酸乙酯沖洗2次，並在34t：的真空下脫水 21小時’得到淡棕色固體狀之5_曱醯基-2,4_二甲基]小吡 咯-3-羧酸（2-二乙胺基-乙基）-醯胺（819克，43%產量）。 W-NMR(二甲亞砜-d6)5 0.96(t，6H，2xCH3)，2.31，2.38(2xs， 2xCH3)，2.51(m，6H，3xCH2)，3.28(m，2H，CH2)，7.34(m，1H， 驢胺 NH)，9.56(s，1H，CHO)，11.86(s，1H，吡咯NH)。MS m/z 266 [M+1 ]。

將5-甲醯基-2,4-二曱基-1H-吡咯-3-羧酸（2-二乙胺基乙 基：l·醯胺（809克）、5-氟-1，3-二氫哚-2-酮（438克）、乙醇 (8000毫升）和吡咯啶（13毫升）加熱至78°C 3小時。將該混合 物冷卻至室溫，並藉著真空過濾收集固體，並以乙醇沖洗。 在72°C下，將該固體與乙醇（5900毫升）一起攪拌30分鐘。將 該混合物冷卻至室溫。藉著真空過濾收集固體，以乙醇沖 洗，並在54°C真空下脫水130小時，得到橘色固體狀之5-[5-氟-2-氧基-l，2-二氫-亞吲哚_(3Z)_基甲基]-2,4-二曱基-1H-吡咯-3-羧酸（2-二乙胺基-乙基）-醯胺（1013克，88%產量）。 iH-NMR(二甲亞砜-d6)S 0.98(t，6H，2xCH3)，2.43, 2.44(2xs， 6H，2xCH3)，2.50(m，6H，3xCH2)，3.28(q，2H，CH2)，6.84, O:\89\89336 DOC -72- 200418837 6·92, 7·42, 7.71，7.50(5xm，5H，芳香族，乙烯基，CONH)， l〇.88(s，1H，c〇NH)，13.68(s，1H，吡咯NH)。MS m/z 397 [M+l]。 可根據美國專利公開案第2003/0069298號和WO 03/ 016305 的揭示内容，製備5-(5-氟-2-氧基-1，2-二氫亞吲哚-3-基甲 基）-2,4-二甲基比咯羧酸（2-二乙胺基-乙基）醯胺的 顏果酸鹽，將其揭示内容全部以引用的方式併入本文中。 按照在美國專利第6,573,293號中的描述，合成5-(5-溴-2-氧基-1，2-二氫-亞4哚_3_基甲基）-2,4-二甲基-1H-吡咯-3-羧 酸、5-(5 -氯-2-氧基-1，2-二氫-亞吲嗓-3-基曱基）-2,4-二甲基 -1H-吡咯-3-羧酸和5-(2-氧基-1，2-二氫-亞吲哚-3-基甲 基）-2,4-二曱基-1H-吡咯-3-羧酸，將其揭示内容全部以引用 的方式併入本文中。 實例14 : 5-(5 -氣-2-氧基-1，2 -二鼠-亞丨嗓-3-基曱基）-2，4-二曱基-1 η_ 叶匕略_ 3 -竣酸（2 - ρ比洛σ定-1 -基-乙基）-驢胺（化合物2) 將5 -氟-1，3-二氫-啕哚啉-2-酮與5 -甲醯基-2,4-二甲基 -1Η - ρ比洛-3 -竣酸（2 -说洛唆-1 -基-乙基）-酿胺縮合，產生標題 化合物。MS+ve APCI 397[Μ+1]。 實例15 : 5-(5-氟-2-氧基-1，2-二氫-亞吲嗓-(32)-基甲基）-2,4-二甲基 -1Η-吡咯-3-羧酸（2-乙胺基-乙基）-醯胺（化合物8) 將5 -甲醯基-2,4-二甲基-1Η·吡咯-3 -羧酸（2-乙胺基-乙 基）-醯胺（99克）、乙醇（400毫升）、5-氟-2-羥啕哚（32克）和吡

O:\89\89336.DOC -73- 200418837 略淀（1 · 5克）迴流3小時，並加以攪拌。將該混合物冷卻至室 溫，並藉著真空過濾收集固體。在60°c下，在乙醇中攪拌 該固體，冷卻至室溫，並藉著真空過濾收集。在真空下將 產物脫水，得到5-(5-氟-2-氧基二氫-亞啕哚-(3Z)-基甲 基）-2，心二甲基-1H-吡咯-3-羧酸（2_乙胺基-乙基）-醯胺（75 克，95%產量）。iH-NMR(二甲亞颯 _d6)5 l.〇3(t，3H，CH3)， 2.42，2.44(2xs，6H，2xCH3)5 2.56(q，2H，CH2)，2·70, 3.30(2xt，4H，2xCH2)，6.85, 6.92, 7.58, 7.72, 7.76(5xm，5H， 芳香族，乙烯基和 CONH)，l〇.9〇(br s，1H，CONH)， 1H，p比 ^NH)。MS m/z 369[M+1]。 實例16 : 5-(5-氟-2-氧基-1，2-二氫-亞吲哚-3-基曱基）_2,4-二曱基-1H-吡咯-3-羧酸（2-嗎啉-4-基-乙基）-醯胺（化合物3) 將5-氟-1，3-二氫-吲哚啉-2-酮與5-甲醯基-2,4-二甲基 -lH-ρ比洛-3-緩酸（2-嗎琳-1 -基-乙基）_胺縮合，產生標題化 合物。 生物學實例 適用於MX 1人類乳癌模式的方法 老鼠/畜牧··無限制提供雌性nu/nu老鼠（Harlan)，13週齡 (配對組合；第I天）飲水和照射過的標準嚅齒類飲食。在12_ 小日守7C的週期下’將老鼠飼養在靜態的顯微隔離箱 (microisolators)中。動物照顧和使用計晝，明確地遵從實驗 動物的照顧和使用準則（Guide for Care and Use Qf Laboratory Animals)中關於保定、畜牧、手術程序、餵飼和 O:\89\89336.DOC -74- 200418837 液體管理的建議，且獸醫照顧為AAALCA認可的。 腫瘤植入：將1立方毫米之 犬貝礼沿片段，皮下植 老乳的腹側。-開始每週監視腫瘤2次，然後每天監視， 土到腫瘤達到想要的尺寸，细〇〇毫克。當計算腫瘤重 置，而癌達到在62-180毫克之間的尺寸時’將老鼠配對组 合成各種治療組（每組的平均腫瘤重量範圍是從99_⑻毫 克）。使用下式來計算估計之腫瘤重量： 腫瘤重量（毫克）=W2X L除以2 其中按毫米計之Mx-1癌的寬度，且長度。 適用於MDA-MB-435人類乳癌模式的方法 將lxlO5個MDA-MB-435腫瘤細胞注射到雌性仙/仙老鼠 的左心室内（n= 10)。監視老鼠的駟舌十丄 兄宅乳的重喪失（>20%)和後肢麻 痺，作為骨髓移生的指標。 適用於NCI-H526-人類小細胞肺癌模式的方去 將IxlO5至lxl〇6個腫瘤、細胞注射到雕性⑽/加老鼠的後側 皮下區内（n=1G)。-週兩次藉著測徑器測量，監視腫瘤的 生長，持續2-4週。 適用於LSI 74t人類結腸癌模式的方法 將^〇5至WO6個腫瘤 '細胞注射到雄性nu/nu老鼠的後側 皮下區内(η=ιο)。-週兩次藉著測徑器測量，監視腫瘤的 生長，持續2-4週。 適用於HT-29人類結腸癌模式的方法 將lxl〇l lxl〇6個腫瘤細胞；主射到雖性nu/nu老鼠的後側 皮下區内（n=10)。一週兩次藉著測徑器測量，監視腫瘤的 O:\89\89336.DOC -75- 200418837 生長’持續2-4週。 實例1 :在MX-1人類乳癌皮下腫瘤的模式中，判定與多舍 他昔一起提高了化合物1的抗-腫瘤效力 本實例顯示在人類乳癌模式中，評估化合物1與多舍他昔 之組合治療對效力和毒性的影響。 在給藥之前，使腫瘤生長至大約100立方毫米之體積。表 1為使用該模式所獲得之數據的編輯（亦參見圖1-3)。 表1 處理 化合物 劑量(毫克/ 公斤y計畫 天 數 抑制％ P值* 天 數 抑制％ P值* 口服 CMC QD至結束 — — — — - — 靜脈内 生理鹽水 QWKx3 — ~ — — - — 口服 化合物1 40QD至結束 20 53 0.02 — — — 靜脈内 多舍他昔 5 QWKx3 16 0 NS — - — 靜脈内 多舍他昔 10QWKx3 16 60 0.005 — — — 靜脈内 多舍他昔 15QWKx3 16 95 <0.0001 — — — 口服/靜 脈内 化合物1/多 舍他昔 40 QD至結束/5 QWKx3 16 對化合物1 : 75 對多舍他昔：82 0.001 <0.0001 27 對化合物 1 ： 55 0.04 口服/靜 脈内 化合物1/多 舍他昔 40QD至結束 /10QWKx3 20 對化合物1:78 對多舍他昔：62 0.01 0.04 37 對多舍他 昔：77 0.005 口服/靜 脈内 化合物1/多 舍他昔 40QD至結束 /15QWKx3 57 對多舍他昔：82 0.008 — — — CMO羧甲基纖維素 QD =每天 QWK=每週一次 N/A=無法獲得；NS =不顯著 *以Student’s t-檢定來比較 在MX-1人類乳癌皮下腫瘤的模式中，當以40毫克/公斤/ 天口服遞送作為單一治療時，化合物1的治療在第20天時產 生5 2%抑制（p = 0.02)的結果。多舍他昔之治療產生劑量反應 O:\89\89336.DOC -76- 200418837 影響的結果，在給藥後16天，在5毫克/公斤下是無效的， 在10¾克/公斤下抑制60%(P=0 005)，而在15毫克/公斤下抑 ^^。/。（"·㈣…在咐心毫克/公斤治療级中完成多舍他 曰的投藥之後，腫瘤以類似媒劑對照組那些的斜率再度生 長。 每天給予化合物1，連同每週一次5毫克/公斤之多舍他昔 的組合3週，結果相對於無效的5毫克/公斤多舍他昔，並相 對於40毫克/公斤/天的化合物丨，明顯地增強了腫瘤生長的 抑制（第27天：55%抑制，ρ = 〇·〇4)。 每天給予化合物1，連同每週一次1〇毫克/公斤之多舍他 昔的組合3週，結果明顯地增強了腫瘤生長的抑制，勝過單 獨的多舍他昔（第20天：62%抑制，ρ=〇〇4 ;第37天：77% 抑制’ ρ-0.005)或單獨的化合物丨（第2〇天：78%抑制， Ρ = 0·01) 〇 維持模式：化合物1與每週一次15毫克/公斤之多舍他昔 的組合3週，結果在停止多舍他昔投藥之後，與在僅以多舍 他昔處理之老鼠中的腫瘤再度生長相比較，明顯地增強了 腫瘤生長的延遲（第57天：82%抑制，ρ = 〇. 〇〇8)。 在這些研究中，完全容忍化合物1與多舍他昔的組合。 貝例2 · MX-1乳癌效力研究（化合物1 &多舍他昔）的研究一 在MX-1人類乳癌皮下腫瘤模式中，判定化合物丨與多舍他 昔結合’增強抗-腫瘤效力 本實例評估化合物1與多舍他昔之組合治療在人類乳癌 模式中對效力和毒性的影響。在給藥之前，使腫瘤生長至 O:\89\89336.DOC -77- 200418837 大約100立方毫米的體積。表2為使用該模式所獲得之數據 的編輯（亦參見圖4)。 表2 處理 化合物 劑量(毫克/公斤)/計晝 天數 抑制％ P值* 口服/靜脈内 CMC 生理鹽水 QD至結束 qwkx3 N/A N/A N/A 口服 化合物1 40QD至結束 17 63 <0.0001 靜脈内 多舍他昔 5 QWK X 3 17 NS NS 靜脈内 多舍他昔 10QWKX3 14 36 NS 靜脈内 多舍他昔 15QWKx3 17 90 <0.0001 口服/靜脈内 化合物1/多 40QD至結束/5QWK 28 對化合物1 : 43 0.08(NS) 舍他昔 X 3 21 對多舍他昔：75 <0扁1 口服/靜脈内 化合物1/多 40 QD至結束/10 28 對化合物1 : 77 0.002 舍他昔 QWKx3 14 對多舍他昔：72 0.10(NS) 口服/靜脈内 化合物1/多 舍他昔 40 QD至結束/15 QWKx3 52 對多舍他昔&化 合物1 : 100 <0.0001 QD =每天 QWK>每週一次 N/A=無法獲得；NS =不顯著 *以Student’s t-檢定來比較 在MX-1人類乳癌皮下腫瘤模式中，當以40毫克/公斤/天 口服遞送作為單一治療時，化合物1的治療在第17天時產生 63%抑制（p<0.0001)的結果。多舍他昔之治療產生劑量反應 影響的結果，在給藥後17天，在5毫克/公斤下是無效的， 在10毫克/公斤下抑制36%(第14天），而在15毫克/公斤下抑 制90%(p<0.0001)。在15毫克/公斤治療組中完成多舍他昔的 投藥之後，腫瘤以類似媒劑對照組那些的斜率再度生長。 每天給予化合物1，連同每週一次5毫克/公斤之多舍他昔 的組合3週，結果相對於無效的5毫克/公斤多舍他昔，並相 對於40毫克/公斤/天的化合物1，明顯地增強了腫瘤生長的 O:\89\89336 DOC -78- 200418837 抑制（第28天·· 43%抑制，p = 0_08-傾向顯著性）。 每天給予化合物1，連同每週一次10毫克/公斤之多舍他 昔的組合3週，結果明顯地增強了腫瘤生長的抑制，勝過單 獨的^匕合物1(第28天·· 77%和p制，p = 0.002)。 維持模式：化合物1與每週一次15毫克/公斤之多舍他昔 的組合3週，結果與在僅以多舍他昔處理之老鼠中的腫瘤再 度生長相比較，產生明顯腫瘤退化的結果（第52天：100%抑 制，p<0.0001)。在這些研究中，完全容忍化合物1與多舍他 昔的組合。 實例3 : MX-1乳癌效力研究（化合物1 & 5-氟尿嘧啶）的研究 -在MX-1人類乳癌皮下腫瘤模式中，判定化合物1與5-氟尿 嘧啶（5-FU)結合，增強抗-腫瘤效力 本實例評估化合物1與5-FU之組合治療在人類乳癌模式 中對效力和毒性的影響。 在給藥之前，使腫瘤生長至大約1〇〇立方毫米的體積。表 3顯示以該模式所獲得之結果（參見圖5)。 表3 處理 化合物 劑量(毫克/ 公斤)/計晝 天數 抑制％ P值* 口服/靜脈内 CMC QD至結束 QWKx3 N/A N/A N/A 口服 化合物1 40QD至結束 15 57 0.01 靜脈内 5-FU 100 QWKx3 15 45 0.02 口服/靜脈内 化合物 1/5-FU 40QD至結束 /QWKx3 22 對化合物1 : 78對 5-FU : 76 0.006 0.01 QD =每天 QWK=每週一次 O:\89\89336.DOC -79- 200418837 N/A=無法獲得；NS =不顯著 *以Student’s t-檢定來比較 口服投予40毫克/公斤/天之化合物1與每週一次腹腔内投 予100毫克/公斤之化學治療藥物5-氟尿嘧啶（5-FU)的組合 治療3週，結果與分別投予每種製劑作為單一治療相比較， 明顯地抑制腫瘤的生長：與單獨的化合物1相比較，在第22 天為78%抑制（ρ = 0·006)，與單獨的5-FU相比較，在第22天 為76%抑制（ρ = 0.01)。在臨床上，口服投予5-FU作為卡培他 濱的前藥。 實例4 : MX-1乳癌效力研究（化合物1 &阿黴素鹽酸鹽）的研 究-在MX-1人類乳癌皮下腫瘤模式中，判定化合物1與阿黴 素鹽酸鹽結合，增強抗-腫瘤效力 本實例評估化合物1與阿黴素鹽酸鹽之組合治療在人類 乳癌模式中對效力和毒性的影響。 在給藥之前，使腫瘤生長至大約100立方毫米的體積。表 4顯示以該模式所獲得之結果（參見圖6)。 表4 處理 化合物 劑量(毫克/ 公斤)/計晝 天數 抑制％ P值* 口服 CMC QD至結束 N/A N/A N/A 口服 化合物1 40QD至結束 14 62 0.03 靜脈内 阿黴素鹽酸鹽 4 QOD X 3 14 48 0.07(NS) 口服/靜脈内 化合物1/阿黴 素鹽酸鹽 40QD至結束 /4 QOD X 3 31 對化合物1 : 60 對多舍他昔：81 0.01 0.001 QD =每天 Q〇D =每隔一天 N/A=無法獲得；NS =不顯著 O:\89\89336.DOC -80- 200418837 *以Student’s t·"檢定來比較 口服投予40毫克/公斤/天之化合物1與每隔一天一次腹腔 内投予4毫克/公斤之化學治療藥物阿黴素鹽酸鹽三個劑量 的組合治療，結果與分別投予每種製劑作為單一治療相比 車父’明顯地抑制Μ X1腫瘤的生長·與早獨的化合物1相比 幸父’在弟31天為60%抑制（ρ = 0·01)’與早獨的5-FU相比較， 在第31天為81%抑制（ρ=0.001)。

實例5 : NCI-H526小細胞肺癌效力研究（化合物1 &順氯氨 始） 使用標準技術，在補充有10%胎牛血清、2 mM穀胺醯胺、 1 mM丙酮酸納的 RPMI 1640 (Life Technologies Inc·， Gaithersburg，MD)中培養NCI-H526 SCLC細胞，並例行地維持 在37t和5%二氧化碳的增濕室中。

欲植入老鼠中的細胞，係獲自在指數生長期間的細胞培 養燒瓶，在植入之前，以無菌的鱗酸緩衝生理鹽水（PBS) 沖洗一次，計數，並再懸浮於PBS中至適當濃度。 所有的動物研究均在AAALAC中，國際認可的動物設施 中進行，並根據實驗動物研究協會（Laboratory Animal Research)(National Institutes of Health，Bethesda，MD)實驗 動物的照顧和使用準貝1J。使用購自Charles River Laboratories (Wilmington，ΜA)的9至12週齡雌性無胸腺nu/nu老鼠。 在第0天時，使老鼠在後側接受5xl06個NCI-H526細胞的 皮下注射。每天一次以化合物1 口服治療攜帶皮下腫瘤之無 胸腺老鼠（250-300立方毫米之腫瘤體積），至研究結束，前5 O:\89\89336.DOC -81 - 200418837 天每天一次腹腔内投予順氯氨鉑，或混合兩者。在0.9%生 理鹽水中製備順氯氨鉑。按照在表5中的指示，投予化合物 或其媒劑。在細胞植入之後第18天確立腫瘤在250-300立方 毫米之間，此時開始給藥。在治療期間，使用Vernier測徑 器，每週兩次測量腫瘤的生長。以產物的長度X寬度X高度 來計算腫瘤體積。針對所有的研究，使用二-尾的Student’s t 檢定計算p-值。表5顯示以該模式所獲得的結果（參見圖7)。 表5

編號/路徑 化合物 劑量 (毫克/公斤） 攝生法 腫瘤達到900立方毫 米的天數 P值1 2958/口服 化合物1 40 QD 41 0.0005 腹腔内 順氯氨鉑 1.5 QDx5 48 0.0009 口月艮/腹腔内 化合物1 40 QD 70 <0.0001 順氣氨在白 1.5 QDx5 <0.004 口服 媒劑 Ν/Α QD 30 NA

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Student’st>檢定，二-尾的 N / A =無法獲得 QD =每天 在KIT-陽性的NCI-H526 SCLC腫瘤異種移植模式中，每 天口服投予40毫克/公斤之化合物1，連同在前5天腹腔内投 予1.5毫克/公斤之順氣氨鉑，結果與化合物1之單獨治療相 比較，使腫瘤生長至900立方毫米延遲了 29天，且與順氣氨 I白之單獨治療相比較，延遲了 2 2天（分別為ρ < 0.0 0 01和 ρ = 0·004) 〇 實例6: MDA-MB-435乳癌效力研究（化合物1 &多舍他昔）-在MDA-MB-435正位的人類乳癌骨髓移生模式中，判定化 合物1與多舍他昔結合，增強抗-腫瘤效力 200418837 本實例評估化合物1與多舍他昔之組合治療在人類乳癌 模式中對效力和毒性的影響。藉著改善存活來表示效力， 其轉而藉著起因於腫瘤細胞之骨髓移生的後肢麻痒或體重 喪失（>20%)來表示。 將腫瘤細胞注射到雌性nu/nu老鼠的***脂肪墊内，並監 視老鼠的體重喪失（>20%)和後肢麻痒，作為腫瘤細胞之骨 趙移生的指標。

將腫瘤細胞注射至雌性nu/nu老鼠的左心室内，並監視老 鼠的體重喪失（〉20%)和後肢麻痒，作為腫瘤細胞之骨髓移 生的指標。

表6 處理 化合物 劑量(毫克 /公斤)/計晝 中間存活 統計分析的 天數 P值* 口服 CMC QD至結束 46 55 N/A 口服 化合物1 40QD至結束 52 55 0.03 腹腔内 多舍他昔 5QWKx3 52 55 0.3(NS) 口月艮/靜脈内 化合物1/ 多舍他昔 40QD至結束 /5 QWK X 3 60 55 0.017(對化合物1) 0.0006(對多舍他昔） QD =每天 QOD =母隔一天 N/A=無法獲得；NS =不顯著 *以Student’s t-檢定來比較 在MDA-MB-435正位的人類乳癌腫瘤模式中，化合物1之 治療，當以40毫克/公斤/天作為單一治療來遞送時，與僅有 媒劑之治療相比較，結果明顯地改善老鼠的存活（52對46 天，ρ = 0·03)。以5毫克/公斤/週作為單一治療，多舍他昔的 治療與媒劑治療之老鼠相比較，不能顯著改善存活（52對46 O:\89\89336 DOC -83- 200418837 天，ρ=0·3)。 40毫克/公斤/天之化合物1和5毫克/公斤/週之多舍他昔 的組合3週，與作為單一治療之化合物1 (中間存活60對52 天，p = 0.017)或多舍他昔（中間存活60對52天，p = 0.0006)相 比較，結果明顯地增強了存活。 實例7 : LS174t結腸癌效力研究（化合物1 & CPT-11)-在 LS 1 74t人類結腸癌皮下腫瘤模式中，判定化合物1與 CPT-11(依立替康）結合，增強抗-腫瘤效力 本實例評估化合物1與CPT-11 (依立替康）之組合治療在 人類結腸癌模式中對效力和毒性的影響。 在給藥之前，使腫瘤生長至大約100立方毫米的體積。表 7顯示以該模式所獲得之結果。 表7 處理 化合物 劑量(毫克/ 公斤)/計畫 天數 抑制％ P值* 口月良 CMC QD至結束 23 N/A N/A 腹腔内 D5W QWKx3 23 N/A N/A 口月艮/腹腔内 CMC/D5W QD至結束/QWKx3 23 N/A N/A 口服 化合物1 20QD至結束 23 34.9 0.19(NS) 口服 化合物1 40QD至結束 23 67.9 0.004 腹腔内 CPT-11 100 QWKx3 23 63.6 0.008 口月艮/靜脈内 化合物 1/CPT-11 20(5〇至結束/(^¥1：乂3 23 對媒劑：82.7 對化合物1 : 73.4 對CPT-11 : 50.9 0.0003 0.014 0.06(NS) 口服/靜脈内 化合物 1/CPT-11 40(^〇至結束/(5\\^乂3 23 對媒劑：88.7 對化合物1 : 64.6 對CPT-11 : 67.9 0.00002 0.07(NS) 0.02 QD =每天 QWK=每週一次 D5W=5%在水中之右旋糖 O:\89\89336.DOC -84- 200418837 N/A=無法獲得；NS =不顯著 *以Student’s t-檢定來比較 在LSI 74t人類結腸癌皮下腫瘤模式中，當以4〇毫克/公斤 /天遞运作為單一治療時，化合物丨之治療結果明顯地抑制 腫瘤的生長（在第23天為68%)。以20毫克/公斤天作為單一 治療，化合物1之治療在該模式中不產生明顯生長抑制的結 果。以100毫克/公斤/週作為單一治療3週，CPT_U(依立替 康）的治療結果亦明顯抑制腫瘤的生長（在第23天為64%)。 在研究期間内，以40毫克/公斤/天作為單一治療的化合物 1，明顯地抑制腫瘤生長，而以2〇毫克/公斤/天之化合物i 或100毫克/公斤/週之CPT-11治療腫瘤3週，其以比媒劑治療 對照組稍慢的速率生長。 20或40毫克/公斤/天之化合物1與1〇〇毫克/公斤/週之 CPT-11的組合3週，與在研究前3週内以化合物iscpm 作為單一治療相比較，結果增強了腫瘤生長的抑制。以別 毫克/公斤/天之次-最佳劑量的化合物i與i 〇〇毫克/公斤/週 之CPT-ii的組合3週，與僅有化合物1或(：1>1^11相比較，結 果增強了腫瘤生長的抑制（第23天：化合物1 : 74%抑制， p-0.014’且CPT-11為51%抑制；ρ=〇·〇6-傾向顯著性）。此外， 以40毫克/公斤/天之化合物1與1〇〇毫克/公斤/週之cpm 的組合3週，與僅有化合物1或〇1>1^11相比較，結果增強了 腫瘤生長的抑制（第23天··化合物1 : 65%抑制，ρ = 〇(Π ; CPT-11 ·· 68%抑制；ρ=〇·〇2)。在這些研究中，完全容忍化 合物1與C Ρ Τ-11的組合。 O:\89\89336.DOC -85- 200418837 實例8: HT-29結腸癌效力研究（化合物1 & CPT-l 1)-在ΗΤ-29 人類結腸癌皮下腫瘤模式中，判定化合物1與CPT-11 (依立 替康）結合，增強抗-腫瘤效力 本實例評估化合物1與CPT-11(依立替康）之組合治療在 額外的人類結腸癌模式中對效力和毒性的影響。 在給藥之前，使腫瘤生長至大約1〇〇立方毫米的體積。表 8顯示以該模式所獲得之結果。 表8 處理 化合物 劑量(毫克 /公斤)/計畫 天數 抑制％ P值* 口月艮 CMC QD至結束 38 N/A N/A 腹腔内 D5W QWKx3 38 N/A N/A 口月艮/腹腔内 CMC/D5 W QD至結束/QWKx3 38 N/A N/A 口服 化合物1 20DQ至結束 38 77.8 0.002 腹腔内 CPT-11 100 QWKx3 38 43.6 0.18(NS) 口服/靜脈内 化合物 20QD 至結束/QWKx3 38 對媒劑：87.4 0.001 1/CPT-11 對化合物1 : 42.4 0.04 對CPT-11 : 71.4 0.02 QD =每天 QWK=每週一次 D5W=5%在水中之右旋糖 N/A=無法獲得；NS =不顯著 *以Student’s t-檢定來比較 在HT-29人類結腸癌皮下腫瘤模式中，當以20毫克/公斤/ 天遞送作為單一治療時，化合物1之治療結果明顯地抑制腫 瘤的生長（在第38天為78%)。以100毫克/公斤/週作為單一治 療3週，CPT-11 (依立替康）的治療顯示有抑制腫瘤生長的傾 向，但生長抑制不明顯。在研究期間内，作為單一治療， O:\89\89336 DOC -86- 200418837 化合物1和CPT-11之户庥八别站一， 療刀㈣不出減緩腫瘤生長的整體 傾向。 20¾克/公斤/天之化合物1|%1〇〇毫克/公斤/週之咖1丨 Γ合’相對於作為單—治療之化合物K第似：42%抑 制，”叫或CPT-U(第38天：71%抑制’㈣卿結果明 顯地增強腫瘤生長的抑制。此外，在研究期間内，化合物1 與CPIM之組合與其單一 縻相比較，顯不出明顯生長抑制 和存活優勢的傾向。 2此藝者應了解可在本發明之方法和組合物中，進行 違月本！X明之精神或範圍的各種修改和改變。因此，本 發明企圖涵蓋在附錄之申請專利範圍内提供的本發明之修 改和改變，及其相等物。 ^ 【圖式簡單說明】 圖1為顯示以5毫克/公斤/天，投予化合物丨與多舍他昔之 組合的圖’結果與單一治療相比較，延遲腫瘤生長。 圖2為顯示以10毫克/公斤/天，投予化合物i與多舍他昔之 組合的圖’結果與單一治療相比較，延遲腫瘤生長。 圖3為顯示以15毫克/公斤/天，投予化合物i與多舍他昔之 組口的圖’結果與單—治療相比較，延遲腫瘤生長。 圖4為顯示以5、10和15毫克/公斤/天’投予化合物1盘多 舍他昔之組合的圖’結果與單一治療相比較，延遲腫瘤生 長。 圖5為顯示化合物1與5_1?1;之組合的圖，結果與單一治療 相比較，延遲腫瘤生長。 〜、

0 \89\89336 DOC -87- 200418837 圖6為顯示化合物丨與阿黴素 療相比較，延遲腫瘤生長。 圖7為顯示化合物1與順氯氨鉑 治療相比較，延遲腫瘤生長。 之組合的圖，結果與單一 治 之組合的圖，結果與單一 圖8為顯示以20毫克/公斤/天和4〇毫克/公斤/天，投予化 合物1與CPT-11之組合的圖，結果與單—治療相比較，延遲 腫瘤生長。 O:\89\89336.DOC 88-

Claims (1)

1. 200418837 拾、申請專利範圍： 1. 一種治療癌症的方法，包括對需要其之患者投予有效含 量的式I化合物：

   其中， R分別為氫、羥基、烷基、芳基、環烷基、雜芳基、 烷氧基、雜環基或胺基； Ri分別為烧基、i素、烧氧基、鹵烧基、i烧氧基、 環烷基、雜環基、羥基、-C(0)-R8、-NR9R1()、-NR9C(0)-R12 或-c(o)nr9r10 ; r2分別為烷基、芳基、雜芳基、-c(o)-r8*so2r"， 其中11”為烷基、芳基、雜芳基、NR9R10或烷氧基； R5分別為氫、烷基、芳基、鹵烷基、環烷基、雜芳基、 雜環基、-C(0)-R84(CHR)rRn ; X為Ο或S ; j為0或1 ; p為 0、1、2或 3 ; O:\89\89336.DOC 200418837 r為 〇、1、2或 3 ; R8為羥基、烷基、芳基 雜環基； “基、^基、環烧基或 。分別為氫、院基、芳基、胺烷基 烷基和雜環基，或r_Ri^n 土衣 ^ ^ 6 n x 嗖个攻衣，其中該環原 子係k自C、N、Ο和S所組成之群； Ri 1為經基、胺基、經單取代 p美、# 土 、、生—取代之胺基、 说基方基、齡基1氧基、環職或雜環基. Rl2為垸基、芳基、雜芳基、燒氧基、環燒基或：環基; 且 z為經f基或视3R4，其中R#R4分別為氮、 说基、方基、"基、環烧基杨環基，或R々r4可盘 N一起形成環，其中該環原子係選自CH2'N'0#〇S所組 成之群，或 —-N

   R3 R4

   其中γ分別為CH2、〇、N或s，Q為C或N，4別為0M、 2、3或 4，且m為〇、1、2或 3 ; 或其在藥學上可接受之鹽、水合物或媒合物，連同至 少-個化學治療劑，選自微管干擾劑、括樸異構酶抑制 劑、烧基化製劑、料酸合成酶抑制劑、不可逆類固醇 O:\89\89336.DOC * 2 - 類芳香酶失活劑、抗_代謝產物、嘧 ^ 劑、核糖杉Γ #航W σ几W、嘌吟拮抗 才Ζ甘S文還原酶抑制杳丨 群。 和激酶抑制劑所組成之

   3. 根據申請專利範圍第1項之方法 根據申請專利範圍第1項之方法 其中R1為鹵素且ρ為1。 ’其中R^F或C1，且？ 其中 •根據申請專利範圍第1項之方法，其中Z為-NR3R R3和R4為低碳數烷基或形成嗎啉環。 5.根據申請專利範圍第丨項之方法，其中z為··

   其中Y分別為CH2，η分別A 9 丄 引馮2，瓜為〇，且和&形成嗎 琳環。 ''' 6·根據申請專利範圍第i項 甘士 D炎田i 只〈万法，其中R2為甲基且q為 2’其中該曱基結合在3和5位置户。 7.根據申請專利範圍第1項之方法%中該式工化合物係選

   O:\89\89336.DOC 3- 200418837

   和

   所組成之群，及其在藥學上可接受之鹽類、媒合物和水 合物。 8.根據申請專利範圍第1項之方法，其中該式I化合物係選

   O:\89\89336.DOC -4 200418837

   所組成之群，及其在藥學上可接受之鹽類、媒合物和水 合物。 9.根據申請專利範圍第1項之方法，其中該式（I)化合物為：

   或其在藥學上可接受之鹽、媒合物或水合物。 O:\89\89336.DOC -5- ι〇·根據申請專利範圍第 11 ip it ^ ^ ^ 員之方法，其中該鹽為蘋果酸鹽。 u ·根據申請專利範圍筮 至10項中任一項之方法，其中該 至少一個化學治瘙添f A i s g 、選自紫杉醇、長春花生物鹼、拓 樸異構酶I抑制劑和如 拓樸異構酶II抑制劑所組成之群。 12·根據申請專利範 木丄貝之方法，其中該至少一個化學 治療劑係選自紫杉酸、夕人 ^ " 夕舌他昔、長春花驗、長春新驗、 長春地辛、依立替唐、 ^ 可後素、表柔比星、甲酸四氫葉 酸#5、依托泊荅、卷尸# ^ 替尼泊甘、伊達比星、吉西他濱、道 ，、菌素卡鉑、順氣氨鉑、奥沙利鉑' 苯丁酸氮芥、 ***酸氮介 '環碟醯胺、異環鱗醯胺、替莫唾胺”塞 替喊、絲裂黴素C、白消安、卡莫司汀、洛莫司汀、5- 氣尿心定、卡培他濱、依曼適達、胺甲碟吟、三甲曲沙、 I尿嘧啶、氟脫氧尿喷啶、氮胞苷、巯基嗓呤、硫代鳥 不％、喷司他丁、阿糖胞:y：、氟達拉濱、羥基脲、貝維 希單抗、西女昔單抗、吉非替尼和伊馬替尼所組成之群。 13.根據申請專利範圍第1項之方法，其中該癌症為乳癌、 小細胞肺癌、結腸癌、非-小細胞肺癌、腎細胞癌、胃腸 道基貝腫瘤、曱狀腺癌、肉瘤或神經内分泌腫瘤。 14·根據申請專利範圍第！項之方法，其中該癌症為非·小細 胞肺癌，且該至少一個化學治療劑為卡鉑和紫杉醇。 15·根據申請專利範圍第！項之方法，其中該癌症為非_小細 胞肺癌，且該至少一個化學治療劑為卡鉑、剋癌易、順 氣氨鉑、吉西他濱、5 -氟尿嘧啶、依立替康或曱醯四氫 葉酸ί弓。 O:\89\89336.DOC -6- 200418837 1 6.根據申請專利範圍第1項之方法，其中該癌症為結腸 癌，且該至少一個化學治療劑為5-氟尿嘧啶、奥沙利鉑 或甲醯四氫葉酸i弓。 1 7. —種治療癌症的方法，包括對需要其之患者投予有效含 量的選自： 5-(5-氟-2-氧基-1，2-二氫-亞吲哚-3-基曱基）-2,4-二甲 基-1Η - ρ比嘻-3 -竣酸（2 -二乙胺基·乙基）-酸胺，

   5-(5 -氟-2-氧基-1，2-二氫-亞Η卜朵-3-基甲基）-2,4 -二甲 基-1Η - 口比嘻-3 -竣酸（2 - ρ比嘻咬-1 -基-乙基）-驢胺， 5-(5-氟-2-氧基-1，2-二氫-亞4哚-3-基甲基）-2,4-二曱 基-1Η-吡咯-3-羧酸（2-嗎啉_4_基-乙基）-醯胺； (S)-5-(5-氟-2-氧基-1，2-二氫-亞吲哚-3-基曱基）-2,4-二曱基-1Η-吡咯-3-羧酸（2-羥基-3-嗎啉-4-基-丙基）-醯 胺；

   (R)-5-(5-氟-2-氧基-1，2-二氫-亞吲哚-3-基甲基）-2,4-二甲基-1Η-口比咯-3-羧酸（2-羥基-3-嗎啉-4-基-丙基）-醯 胺； 5-(5-氟-2-氧基-1,2-二氫-亞吲哚-3-基甲基）-2,4-二甲 基-1H—比咯-3-羧酸（2-羥基-3-嗎啉-4-基-丙基）-醯胺； 5-(5-氯-2-氧基-1，2-二氫-亞啕哚-3-基甲基）-2,4-二甲 基-lHw比咯-3-羧酸（2-羥基-3-嗎啉-4-基-丙基）-醯胺； 5-(5-氟-2-氧基-1，2-二氫-亞吲哚-3-基甲基）-2,4-二甲 基-lHw比咯-3-羧酸（2-乙胺基-乙基）-醯胺；和 O:\89\89336 DOC 3-[3,5-二甲基 _4·(4_嗎啉 _4_ 蛛2-亞甲基跡餘基）·1Η· 所組成之群的化合物， ’ 或其在藥學上可接受之鹽、水 少一種化與、Λ $ Μ % 匆或媒合物，連同至 種化予治療劑，選自微管 劑、、户I儿泰丨 拓樸異構酶抑制 “基化製劑、料酸合成 $苜：¾:夭心丄 I w N 不可1£類固醇 頒方香輙失活劑、抗-代謝產 % 添丨丨、姑地> ^ 山疋拮抗劑、嘌呤拮抗 "J核糖核苷酸還原酶抑制4 & 刊剐和激酶抑制劑所組成之 18. 19. 根據申請專利範圍第17項之方法，其中該至少一個化學 =__自紫杉醇'長春花生物驗、拓樸異構酶ι抑制 別和括樸異構酶^抑制劑所組成之群。 根據申請專利範圍扣項之方法，其中該至少—個化學 治療劑係選自紫杉醇、多舍他昔、長春花驗、長春新驗、 長春地辛、依立替康、阿黴素、表柔比星、甲醯四氫葉 酸鈣、依托泊苷、替尼泊-、伊達比星、吉西他濱、道 諾紅菌素、卡鉑、順氯氨鉑、奥沙利鉑、苯丁酸氮芥、 ***酸氮芥、環磷醯胺、異環磷醯胺、替莫唑胺、噻 替哌、絲裂黴素C、白消安、卡莫司汀、洛莫司汀、5-氟尿嘧啶、卡培他濱、依曼適達、胺甲碟呤、三甲曲沙、 氣尿。密啶、氟脫氧尿嘧啶、氮胞苷、巯基嘌呤、硫代鳥 σ票呤、噴司他丁、阿糖胞苷、氟達拉濱、羥基脲、貝維 希單抗、西妥昔單抗、吉非替尼和伊馬替尼所組成之群。 O:\89\89336 DOC -8- 200418837 20.根據申請專利範圍第17項之方法，其中該癌症為乳癌、 小細胞肺癌、結腸癌、非-小細胞肺癌、腎細胞癌、胃腸 道基質腫瘤、曱狀腺癌、肉瘤或神經内分泌腫瘤。 O:\89\89336.DOC -9-