PT2496583E - Derivados de dioxa-biciclo[3.2.1]octano-2,3,4-triol - Google Patents

Description

DESCRIÇÃO "DERIVADOS DE DIOXA-BICICLO[3.2.1]OCTANO-2,3,4-TRIOL"

CAMPO DA INVENÇÃO

Esta invenção refere-se a derivados de dioxa-biciclo[3.2.1]octano-2,3,4-triol, a composições farmacêuticas e às utilizações destes como inibidores do co-transportador de sódio-glucose (SGLT).

ANTECEDENTES A obesidade é um problema de saúde significativo devido às suas graves complicações médicas que incluem comorbidades tais como hipertensão, resistência à insulina, diabetes, doença arterial coronária e insuficiência cardiaca (coletivamente referidos como Sindrome Metabólica). A obesidade e suas comorbidades relacionadas continuam a causar problemas de saúde crescentes no mundo desenvolvido e começam a afetar o mundo em desenvolvimento. As consequências negativas para a saúde da obesidade tornam-na a segunda maior causa de morte evitável nos Estados Unidos e conferem um efeito económico e psicossocial significativo na sociedade. Veja-se, McGinnis M, Foege WH., "Actual Causes of Death in the United States," JAMA, 270, 2207-12 (1993). Existe uma necessidade de identificar e desenvolver novas medicações que tratem e/ou previnam a obesidade e as suas comorbidades associadas, em particular a diabetes tipo II (tipo 2).

Mais recentemente, inibidores do co-transportador de sódio-glucose (SGLT), particularmente inibidores SGLT2, mostraram bloquear a reabsorção de glucose a partir do filtrado renal no glomérulo, induzindo, desse modo, a excreção de glucose na urina. Como o excesso de glucose é excretado, há uma diminuição no nivel de glucose sanguíneo, diminuição do armazenamento hepático de glucose, diminuição da secreção de insulina e, subsequentemente, diminuição da conversão de carboidratos a gordura e, em última análise, redução da gordura acumulada. A inibição seletiva de SGLT2 espera-se normalizar a glucose plasmática através do aumento da excreção de glucose. Conseguentemente, inibidores SGLT2 proporcionam um meio atrativo para a melhoria das condições diabéticas sem aumentar o peso corporal ou o risco de hipoglicemia. Veja-se, Isaji, M., Current Opinion Investigational Drugs, 8(4), 285-292 (2007) . Para uma revisão geral sobre o SGLT como um alvo terapêutico, veja-se também Asano, T., et al., Drugs of the Future, 29(5), 461-466 (2004).

Exemplos representativos de glicosideos que mostraram ser úteis para o tratamento de DMNID e obesidade podem ser encontrados nas seguintes divulgações: Patentes U.S. N.os: 6.515.117; 6.414.126; 7.101.856; 7.169.761; e 7.202,350; Publicações U.S. N.os: US 2002/0111315; US 2002/0137903; US 2004/0138439; US 2005/0233988; US 2006/0025349; US 2006/0035841; e US 2006/0632722; e Publicações PCT N.os: WO 01/027128; WO 02/044192; WO 02/088157; WO 03/099836; WO 04/087727; WO 05/021566; WO 05/085267; WO 06/008038; WO 06/002912; WO 06/062224; WO 07/000445; WO 07/093610; e WO 08/002824 .

Determinados glicosideos são genotóxicos e atingem o material genético de uma célula de tal forma que podem ser potencialmente mutagénicos ou cancerígenos. Os materiais genotóxicos podem ser detetados utilizando ensaios padrão tais como o Ensaio dos Micronúcleos de Células de Mamífero In Vitro (MNvit), Projeto de Diretriz de Ensaio (Projeto de TG) 487 (2007) da Organização para a Cooperação e Desenvolvimento Económico (OECD); Ensaio de Aberrações Cromossómicas de Mamíferos In Vitro, TG 473 (1997) da OECD; Ensaio de Mutação Reversa Bacteriana, TG 471 (1997) da OECD; Ensaio dos Micronúcleos em Eritrócitos de Mamifero, TG 474 (1997) da OECD; ou semelhantes. Consequentemente, continua a existir uma necessidade de um tratamento terapêutico mais

eficaz e seguro e/ou prevenção da obesidade e das suas comorbidades associadas, em particular, diabetes tipo 2 e distúrbios relacionados.

SUMÁRIO

Um aspeto desta invenção inclui compostos de Fórmula (A) ou Fórmula (B)

em que R é -OH ou, quando R1 é -0-C (0)-alquilo (C1-C4) ou -0-C(0)-arilo, R é o mesmo que R1 ou -OH; R1 é -OH, F, Cl, -0-C(0)-alquilo(C1-C4) , -0-C(0)-arilo, - 0-C(0)-0-alquilo(C1-C4) ou -0-C(0)-0-arilo; e R2 é -OH, -0-(C4-C4) alquilo ou -O-CH2-CH2-O-R2a;

com a condição de que quando R é -OH e R1 é -OH, R2 é -OH ou -O-CH2-CH2-O-R2a; R2a é H, -C (0)-alquilo (C4-C4) , -C (0) -arilo, -C (0)-0-alquilo(C1-C4) ou -C(0)-0-arilo; e sais farmaceuticamente aceitáveis destes.

Um outro aspeto desta invenção é uma composição farmacêutica que compreende (1) um composto desta invenção, e (2) um excipiente, diluente ou veiculo farmaceuticamente aceitável. Preferivelmente, a composição compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto desta invenção. A composição pode também conter pelo menos um agente farmacêutico adicional. Os agentes preferidos incluem agentes anti-obesidade e/ou agentes anti-diabéticos.

Também é descrito um método para o tratamento de uma doença, distúrbio ou condição modulados por inibição de SGLT2 em animais que prevê incluir a etapa de administração a um animal (preferivelmente, um ser humano) em necessidade de tal tratamento de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto desta invenção (ou uma composição farmacêutica deste). Doenças, condições, e/ou distúrbios modulados por inibição de SGLT2 incluem, por exemplo, diabetes tipo II, nefropatia diabética, síndrome de resistência à insulina, hiperglicemia, hiperinsulinemia, hiperlipidemia, tolerância à glucose diminuída, obesidade (incluindo controlo do peso ou manutenção do peso), hipertensão, e redução do nível de glucose sanguíneo.

Os compostos desta invenção podem ser administrados em combinação com outros agentes farmacêuticos (em particular, agentes anti-obesidade e anti-diabéticos descritos aqui abaixo) . A terapia de combinação pode ser administrada como (a) uma composição farmacêutica única, a qual compreende um composto desta invenção, pelo menos um agente farmacêutico adicional aqui descrito e um excipiente, diluente, ou veículo farmaceuticamente aceitável; ou (b) duas composições farmacêuticas separadas que compreendem (i) uma primeira composição compreendendo um composto desta invenção e um excipiente, diluente, ou veículo farmaceuticamente aceitável, e (ii) uma segunda composição compreendendo pelo menos um agente farmacêutico adicional aqui descrito e um excipiente, diluente, ou veículo farmaceuticamente aceitável. As composições farmacêuticas podem ser administradas simultaneamente ou sequencialmente e em qualquer ordem. É para ser entendido que tanto o sumário anterior como a descrição detalhada seguinte são apenas exemplificativos e explicativos e não são restritivos da invenção, tal como reivindicado.

DESCRIÇÃO DETALHADA

Esta invenção pode ser entendida mais facilmente por referência à seguinte descrição pormenorizada de formas de realização exemplificativas da invenção e aos exemplos nelas incluídas.

Antes que os compostos, composições e métodos sejam divulgados e descritos, deve ser entendido que esta invenção não está limitada a métodos de sintese específicos de obtê-la que podem, como é óbvio, variar. É também para ser entendido que a terminologia utilizada aqui tem o propósito de descrever apenas formas de realização particulares e não pretende ser limitativa. 0 plural e singular deveriam ser tratados como intercambiáveis, além da indicação de número.

Como aqui utilizado, o termo "alquilo" refere-se a um radical hidrocarboneto da fórmula geral CnH2n+i · 0 radical alcano pode ser linear ou ramificado. Por exemplo, o termo "alquilo(Ci-Cê)" refere-se a um grupo alifático linear ou ramificado, monovalente, contendo 1 a 6 átomos de carbono (por exemplo, metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, n-butilo, i-butilo, s-butilo, t-butilo, n-pentilo, 1-metilbutilo, 2-metilbutilo, 3-metilbutilo, neopentilo, 3,3-dimetilpropilo, hexilo, 2-metilpentilo, e semelhantes. À semelhança, a porção alquilo (isto é, fração alquilo) de um grupo alcoxi tem a mesma definição acima. Quando indicado como sendo "opcionalmente substituído", o radical alcano ou fração alquilo podem ser não substituídos ou substituídos com um ou mais substituintes (em geral, um a três substituintes, salvo no caso de substituintes de halogénio, tais como percloro ou perfluoroalquilos) independentemente selecionados a partir do grupo de substituintes listados. "Arilo" refere-se a um anel aromático, tal como benzeno, fenilo, ou naftaleno. A frase "quantidade terapeuticamente eficaz" significa uma quantidade de um composto desta invenção que (i) trata a doença, condição ou distúrbio particular, (ii) atenua, melhora, ou elimina um ou mais sintomas da doença, condição, ou distúrbio particular, ou (iii) previne ou retarda o aparecimento de um ou mais sintomas da doença, condição ou distúrbio particular aqui descritos. 0 termo "animal" refere-se a seres humanos (sexo masculino e feminino), animais de companhia (por exemplo, cães, gatos e cavalos), animais de pecuária, animais de zoo, animais marinhos, aves e outras espécies animais semelhantes. "Animais ediveis" refere-se a animais de pecuária tais como vacas, porcos, ovelhas e aves de capoeira. A frase "farmaceuticamente aceitável" indica que a substância ou composição deve ser compatível quimicamente e/ou toxicologicamente com os outros ingredientes que compreendem uma formulação, e/ou com o mamifero a ser tratado com a mesma.

Os termos "tratando", "tratar" ou "tratamento" abrangem tanto um tratamento preventivo, isto é, profilático, como um paliativo.

Os termos "modulado" ou "modular", ou "modulam(a)", como aqui utilizados, a menos que indicado em contrário, referem-se à inibição do transportador de sódio-glucose (em particular, SGLT2) com compostos desta invenção, prevenindo, deste modo, parcial ou totalmente o transporte de glucose através do transportador. 0 termo "compostos desta invenção" (a menos que especificamente identificado em contrário) refere-se a compostos de Fórmula (A) , Fórmula (B) e a todos os estereoisómeros puros e misturados (incluindo diastereoisómeros e enantiómeros), tautómeros e compostos marcados isotopicamente. Os hidratos e solvatos dos compostos desta invenção são considerados composições desta invenção, em que o composto está em associação com água ou solvente, respetivamente. Os compostos também podem existir em um ou mais estados cristalinos, isto é, como co-cristais, polimorfos, ou podem existir como sólidos amorfos. Todas estas formas são abrangidas pela invenção e pelas reivindicações.

Numa forma de realização, o composto é um composto de Fórmula (A).

Numa outra forma de realização, R1 é -OH.

Numa forma de realização adicional, R2 é -OH.

Ainda numa outra forma de realização, R2 é -O-CH2CH2OH.

Os compostos desta invenção contêm centros assimétricos ou quirais, e, portanto, existem em diferentes formas estereoisoméricas. A menos que especificado em contrário, pretende-se que todas as formas estereoisoméricas dos compostos desta invenção, bem como as misturas destes, incluindo misturas racémicas, formem parte desta invenção. Em adição, isómeros qeométricos e posicionais são também descritos. Por exemplo, se um composto desta invenção incorpora uma ligação dupla ou um anel fusionado, ambas as formas cis e trans, bem como misturas, estão englobadas dentro do âmbito da invenção.

As misturas diastereoméricas podem ser separadas nos seus diastereómeros individuais com base nas suas diferenças físico-químicas por métodos bem conhecidos por aqueles peritos na especialidade, tais como por cromatografia e/ou cristalização fracionada, destilação, sublimação. Os enantiómeros podem ser separados por conversão da mistura enantiomérica numa mistura diastereomérica por reação com um composto oticamente ativo apropriado (por exemplo, um auxiliar quiral tal como um álcool quiral ou cloreto de ácido de Mosher), separando os diastereómeros e convertendo (por exemplo, hidrolisando) os diastereómeros individuais nos enantiómeros puros correspondentes. Além disso, alguns dos compostos desta invenção podem ser atropisómeros (por exemplo, biarilos substituídos) e são considerados como parte desta invenção. Os enantiómeros podem também ser separados por utilização de uma coluna de HPLC quiral (cromatografia líquida de alta eficiência). É também possível que os intermediários e compostos desta invenção possam existir em diferentes formas tautoméricas, e todas estas formas estão englobadas dentro do âmbito da invenção. 0 termo "tautómero" ou "forma tautomérica" refere-se a isómeros estruturais de diferentes energias que são interconversíveis através de uma barreira de baixa energia. Por exemplo, tautómeros de protões (também conhecidos como tautómeros prototrópicos) incluem interconversões através de migração de um protão, tal como ceto-enol e isomerizações de imina-enamina. Um exemplo específico de um tautómero de protões, é a fração imidazol onde o protão pode migrar entre os dois nitrogénios do anel. Tautómeros de valência incluem interconversões por reorganização de alguns dos eletrões de ligação. 0 equilíbrio entre a forma fechada e aberta de alguns intermediários (e/ou misturas de intermediários) é uma reminiscência do processo de mutarrotação envolvendo aldoses, conhecido por aqueles peritos na especialidade.

Esta invenção também abrange compostos marcados isotopicamente, os quais são idênticos àqueles aqui anunciados, exceto no facto de que um ou mais átomos são substituídos por um átomo que tem uma massa atómica ou número de massa diferente da massa atómica ou número de massa habitualmente encontrados na natureza. Os exemplos de isótopos que podem ser incorporados nos compostos da invenção incluem isótopos de hidrogénio, carbono, nitrogénio, oxigénio, fósforo, enxofre, flúor, iodo, e cloro, tais como 2H, 3H, nC, 13C, 14C, 13N, 15N, 150, 170, 180, 31P, 32P, 35S, 18F, 123I,125I e 36C1, respetivamente.

Determinados compostos marcados isotopicamente desta invenção (por exemplo, aqueles marcados com 3H e 14C) são úteis em ensaios de distribuição do composto e/ou do tecido de substrato. Os isótopos tritiados (isto é, 3H) e de carbono-14 (isto é, 14C) são particularmente preferidos pela sua facilidade de preparação e detetabilidade. Além disso, a substituição com isótopos mais pesados, tais como deutério (isto é, 2H), pode originar determinadas vantagens terapêuticas resultantes de maior estabilidade metabólica (por exemplo, aumento da semivida in vivo ou requisitos de dosagem reduzidos) e, portanto, podem ser preferidos em algumas circunstâncias. Isótopos emissores de positrões como 150, 13N, 310 e 18F são úteis para estudos por tomografia de emissão de positrões (PET) para examinar a ocupação do substrato. Os compostos marcados isotopicamente desta invenção podem ser geralmente preparados seguindo procedimentos substancialmente análogos àqueles divulgados nos Esquemas e/ou nos Exemplos aqui abaixo, substituindo um reagente isotopicamente marcado por um reagente não isotopicamente marcado.

Alguns dos compostos desta invenção podem formar sais com catiões ou aniões farmaceuticamente aceitáveis. Todos estes sais estão dentro do âmbito desta invenção e podem ser preparados por métodos convencionais tais como por combinação das entidades ácidas e básicas, normalmente num rácio estequiométrico, tanto num meio aquoso como não aquoso ou parcialmente aquoso, conforme apropriado. Os sais são recuperados por filtração, por precipitação com um não solvente seguida por filtração, por evaporação do solvente, ou, no caso de soluções aquosas, por liofilização, conforme apropriado. Os compostos são obtidos na forma cristalina de acordo com procedimentos conhecidos na técnica, tais como por dissolução num solvente (s) apropriado(s) tais como etanol, hexanos ou misturas de água/etanol. "Sais farmaceuticamente aceitáveis" pretende referir-se a quaisquer "sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis" ou "sais de adição de base farmaceuticamente aceitáveis", dependendo da estrutura real do composto. "Sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis" pretende aplicar-se a qualquer sal de adição de ácido orgânico ou inorgânico não tóxico dos compostos desta invenção ou qualquer dos seus intermediários. Os ácidos inorgânicos ilustrativos que formam sais adequados incluem ácido clorídrico, bromidrico, sulfúrico, e fosfórico e sais metálicos ácidos, tais como o monohidrogeno ortofosfato de sódio e hidrogenossulfato de potássio. Os ácidos orgânicos ilustrativos que formam sais adequados incluem os ácidos mono-, di-, e tricarboxilicos. Ilustrativos de tais ácidos são, por exemplo, ácido acético, glicólico, láctico, pirúvico, malónico, glutárico succinico, fumárico, málico, tartárico, citrico, ascórbico, maleico, hidroximaleico, benzóico, hidroxibenzóico, fenilacético, cinâmico, salicilico, 2-fenoxibenzóico, p-toluenossulfónico, e ácidos sulfónicos tais como ácido metanossulfónico e ácido 2-hidroxietanossulfónico. Tais sais podem existir quer numa forma hidratada como substancialmente anidra. Em geral, os sais de adição de ácido destes compostos são solúveis em água e em vários solventes orgânicos hidrofilicos. "Sais de adição básicos farmaceuticamente aceitáveis" pretende aplicar-se a quaisquer sais de adição básicos orgânicos ou inorgânicos não tóxicos dos compostos desta invenção, ou qualquer dos seus intermediários. Bases ilustrativas que formam sais adequados incluem hidróxidos de metais alcalinos ou metais alcalino-terrosos tais como hidróxidos de sódio, potássio, cálcio, magnésio, ou bário; amónia, e aminas orgânicas alifáticas, aliciclicas, ou aromáticas tais como metilamina, dimetilamina, trimetilamina, e picolina.

Os compostos da presente invenção podem ser sintetizados por vias sintéticas que incluem processos análogos àqueles conhecidos nas técnicas quimicas, particularmente à luz da descrição aqui contida. Os materiais de partida estão geralmente disponíveis de fontes comerciais tais como Aldrich Chemicals (Milwaukee, WI) ou são prontamente preparados usando métodos bem conhecidos para aqueles peritos na especialidade (por exemplo, preparados por métodos geralmente descritos em Louis F. Fieser e Mary Fieser, Reagents for Organic Syntheses, v. 1-19, Wiley, Nova York (1967-1999 ed.), ou Beilsteins Handbuch der organischen Chemie, 4, Aufl. ed. Springer-Verlag, Berlim, incluindo suplementos (também disponível através da base de dados online de Beilstein).

Para fins ilustrativos, os esguemas de reação representados abaixo proporcionam potenciais vias para a síntese dos compostos da presente invenção, bem como de intermediários chave. Para uma descrição mais detalhada das etapas de reação individuais, veja-se a secção de Exemplos abaixo. Aqueles peritos na especialidade apreciarão que outras vias de síntese podem ser utilizadas para sintetizar os compostos inventivos. Embora os materiais de partida e reagentes específicos sejam representados nos esquemas e discutidos abaixo, outros materiais de partida e reagentes podem ser facilmente substituídos para proporcionar uma variedade de derivados e/ou condições de reação. Em adição, muitos dos compostos preparados pelos métodos descritos abaixo podem ser ainda modificados à luz desta divulgação utilizando química convencional bem conhecida daqueles peritos na especialidade.

Na preparação dos compostos da presente invenção, a proteção de funcionalidade remota de intermediários pode ser necessária. A necessidade de tal proteção variará dependendo da natureza da funcionalidade remota e das condições dos métodos de preparação. Um "grupo de proteção de hidroxi" refere-se a um substituinte de um grupo hidroxi que bloqueia ou protege a funcionalidade hidroxi. Os grupos de proteção de hidroxi (O-Pg) adequados incluem, por exemplo, alilo, acetilo (Ac), sililo (como trimetilsililo (TMS) ou tert-butildimetilsililo (TBS)), benzilo (Bn), para-metoxibenzilo (PMB), tritilo (Tr), para-bromobenzoil, para-nitrobenzoil, benzoil (Bz), trietilsililo (TES), triisopropilsililo (TIPS) , benziloximetilo (BOM), p- metoxibenziloximetilo (PMBM), [(3,4-dimetoxibenzil)oxi]metilo (DMBM), metoximetilo (MOM), 2-metoxietoximetilo (MEM), metiltiometilo (MTM), 2-(trimetilsilil)etoximetilo (SEM), e semelhantes (benzilideno para proteção de 1,3-dióis). A necessidade de tal proteção é prontamente determinada por um perito na especialidade. Para uma descrição geral de grupos de proteção e suas utilizações, veja-se T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, Nova York, 1991. 0 Esquema 1 descreve os procedimentos gerais que um poderia utilizar para proporcionar os compostos da presente invenção.

I 2,3,4-Tri-O-benzil-D-glucopiranósido de alilo (I-a, onde Pg1 é um grupo benzilo) pode ser preparado por procedimentos descritos por Shinya Hanashima, et al., em Bioorganic & Medicinal Chemistry, 9, 367 (2001); Patricia A. Gent et al. em Journal of the Chemical Society, Perkin 1, 1835 (1974); Hans Peter Wessel no Journal of Carbohydrate Chemistry, 7, 263, (1988); ou Yoko Yuasa, et al., em Organic Process Research & Development, 8, 405-407 (2004) . Na etapa 1 do Esquema 1, o grupo hidroximetileno pode ser introduzido no glicosideo por meio de uma oxidação de Swern seguida por tratamento com formaldeido na presença de um hidróxido de metal alcalino (por exemplo, hidróxido de sódio). Isto é referido como uma reação de aldol-Cannizzaro. A oxidação de Swern é descrita por Kanji Omura e Daniel Swern em Tetrahedron, 34, 1651 (1978). Pode também ser usadas modificações deste processo conhecidas por aqueles peritos na especialidade. Por exemplo, outros oxidantes, como ácido 2-iodoxibenzóico estabilizado descrito por Ozanne, A. et al. em Organic Letters, 5, 2903 (2003), bem como outros oxidantes conhecidos por aqueles peritos na especialidade também podem ser utilizados. A sequência de aldol-Cannizzaro foi descrita por Robert Schaffer no Journal of The American Chemical Society, 81, 5452 (1959) e Amigues, EJ, et al., em Tetrahedron, 63,10042 (2007) .

Na etapa 2 do Esquema 1, grupos de proteção (Pg2) podem ser adicionados por tratamento do intermediário (I-b) com os reagentes e procedimentos apropriados para o grupo de proteção particular desejado. Por exemplo, grupos p-metoxibenzilo (PMB) podem ser introduzidos por tratamento do intermediário (I-b) com brometo de p-metoxibenzilo ou cloreto de p-metoxibenzilo na presença de hidreto de sódio, hidreto de potássio, tert-butóxido de potássio num solvente como tetrahidrofurano, 1,2-dimetoxietano ou N,N-dimetilformamida (DMF). Condições envolvendo parametoxibenziltricloroacetimidato na presença de uma quantidade catalítica de ácido (por exemplo, ácido trifluorometanossulfónico, ácido metanossulfónico, ou ácido canforsulfónico) num solvente tal como diclorometano, heptano ou hexanos, também podem ser usadas. Grupos benzilo (Bn) podem ser introduzidos por tratamento do intermediário (I-b) com brometo de benzilo ou cloreto de benzilo na presença de hidreto de sódio, hidreto de potássio, tert-butóxido de potássio num solvente como tetrahidrofurano, 1,2-dimetoxietano ou Ν,Ν-dimetilformamida. Condições envolvendo benziltricloroacetimidato na presença de uma quantidade catalítica de ácido (por exemplo, ácido trifluorometanossulfónico, ácido metanossulfónico, ou ácido canforsulfónico) num solvente tal como diclorometano, heptano ou hexanos, também podem ser usadas.

Na etapa 3 do Esquema 1, o grupo de proteção alilo é removido (por exemplo, por tratamento com cloreto de paládio em metanol; um co-solvente, como diclorometano, também pode ser utilizado; outras condições conhecidas por aqueles peritos na especialidade poderiam também ser utilizadas, veja-se T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, Nova York, 1991) para formar o lactol (I-d).

Na etapa 4 do Esquema 1, a oxidação do grupo hidroxilo não protegido a um grupo oxo (por exemplo, oxidação de Swern) forma, então, a lactona (I-e).

Na etapa 5 do Esquema 1, a lactona (I-e) reage com cloridrato de N, O-dimetilhidroxilamina para formar a correspondente amida de Weinreb, que pode existir em equilíbrio numa forma fechada/aberta. (I-f/I-g) . A "amida de Weinreb" (I-a) pode ser feita utilizando procedimentos bem conhecidos para aqueles peritos na especialidade. Veja-se, Nahm, S. e S.M. Weinreb, Tetrahedron Letters, 22 (39), 3815-1818 (1981). Por exemplo, o intermediário (I-f/I-g) pode ser preparado a partir de cloridrato de N,O-dimetilhidroxilamina comercialmente disponível e um agente de ativação (por exemplo, trimetilaluminio).

Na etapa 6 do Esquema 1, o grupo arilbenzilo (Ar, em que R5 é OEt, OTBS, ou qualquer precursor adequadamente protegido para o R2 reivindicado) é introduzido utilizando o reagente organometálico desejado (por exemplo, o composto de organolítio (ArLi) ou composto de organomagnésio (ArMgX)) em tetrahidrofurano (THF) a uma temperatura variando de cerca de -78 °C a cerca de 20 °C, seguido por hidrólise (após repouso em condições próticas) para o lactol correspondente (I-i) que pode estar em equilíbrio com a cetona correspondente (I-h). O motivo cetal em ponte encontrado em (A) e (B) pode ser preparado por remoção dos grupos de proteção (Pg2) , utilizando os reagentes apropriados para os grupos de proteção empregues. Por exemplo, os grupos de proteção PMB podem ser removidos por tratamento com ácido trifluoroacético na presença de anisol e diclorometano (DCM) a cerca de 0 °C até cerca de 23 °C (temperatura ambiente). Os grupos de proteção remanescentes (Pg1) pode, em seguida, ser removidos utilizando a química apropriada para os grupos de proteção particulares. Por exemplo, grupos de proteção de benzilo podem ser removidos por tratamento com ácido fórmico na presença de paládio (negro de Pd) num solvente prótico (por exemplo, etanol/THF) em torno da temperatura ambiente para produzir compostos (Sl-A) e (Sl— B). Dependendo de R5, os compostos assim obtidos podem, então, ser facilmente funcionalizados noutros compostos de estruturas (A) e (B) da presente invenção utilizando sequências de manipulação de grupos de proteção e funcionais bem conhecidas, conhecidos por aqueles peritos na especialidade. Consulte a secção de exemplos para mais detalhes.

Os compostos ou intermediários da presente invenção podem ser preparados como co-cristais utilizando qualquer método adequado. Um esquema representativo para a preparação de tais co-cristais é descrito no Esquema 2.

No Esquema 2, em que Me é metilo e Et é etilo, na etapa 1, 1-(5-bromo-2-clorobenzil)-4-etoxibenzeno é dissolvido em 3:1, tolueno:tetrahidrofurano, seguido por arrefecimento da solução resultante até < -70 °C. A esta solução é adicionado hexil-litio enquanto se mantém a reação a d 65 °C, seguido por agitação durante 1 hora. (3R,4S,5R,6R)-3,4,5-tris(trimetilsililoxi)-6- ((trimetilsililoxi)metil)-tetrahidropiran-2-ona (ΙΙ-a) é dissolvido em tolueno e a solução resultante arrefecida até -15 °C. Esta solução é então adicionada à solução de aril-litio a -70 °C, seguido por agitação durante 1 hora. Uma solução de ácido metanossulfónico em metanol é, em seguida, adicionada, seguido por aquecimento até à temperatura ambiente e agitação durante 16 a 24 horas. A reação considera-se concluída quando o nivel de α-anómero é ã 3%. A reação é, em seguida, basificada através da adição de solução de hidróxido de sódio aquoso a 5 M. Os sais resultantes são separados por filtração, seguido por concentração da solução do produto bruto. 2-Metiltetrahidrofurano é adicionado como um co-solvente e a fase orgânica é extraida duas vezes com água. A fase orgânica é em seguida concentrada a 4 volumes em tolueno. Este concentrado é, depois, adicionado a uma solução 5:1 de heptano:tolueno, provocando a formação de um precipitado. Os sólidos são recolhidos e secos sob vácuo para dar um sólido.

Na etapa 2 do Esquema 2, a (ΙΙ-b) em cloreto de metileno é adicionado imidazol seguido por arrefecimento até 0 °C e, em seguida, adição de cloreto de trimetilsililo para dar o produto persililado. A reação é aquecida até à temperatura ambiente e extinta pela adição de água, e a fase orgânica é lavada com água. Esta solução de cloreto de metileno em bruto de (II-c) é seca sobre sulfato de sódio e, em seguida, tomada em bruto na etapa seguinte.

Na etapa 3 do Esquema 2, a solução em bruto de (II-c) em cloreto de metileno é concentrada a baixo volume e, em seguida, o solvente é trocado para metanol. A solução em metanol de (II-c) é arrefecida até 0 °C, em seguida, 1 mol% de carbonato de potássio é adicionado como uma solução em metanol, seguido por agitação durante 5 horas. A reação é depois extinta por adição de 1 mol% de ácido acético em metanol, seguido por aquecimento até à temperatura ambiente, troca de solvente para acetato de etilo, e, em seguida, filtração da pequena quantidade de sólidos inorgânicos. A solução em bruto de acetato de etilo de (II— d) é tomada diretamente na etapa seguinte.

Na etapa 4 do Esquema 2, a solução em bruto de (Il-d) é concentrada a pequeno volume, depois diluida com cloreto de metileno e dimetilsulfóxido. Trietilamina é adicionada, seguido por arrefecimento até 10 °C e, em seguida, complexo trióxido de enxofre-piridina é adicionado em 3 porções como um sólido em intervalos de 10 minutos. A reação é agitada durante umas 3 horas adicionais a 10 °C antes de se extinguir com água e aquecer até à temperatura ambiente. As fases são separadas, seguido por lavagem da camada de cloreto de metileno com cloreto de amónio aquoso. A solução em bruto de cloreto de metileno de (ΙΙ-e) é tomada diretamente na etapa seguinte.

Na etapa 5 do Esquema 2, a solução em bruto de (ΙΙ-e) é concentrada a baixo volume e, em seguida, o solvente é trocado para etanol. Trinta equivalentes de formaldeido aquoso são adicionados seguido por aquecimento até 55 °C. Uma solução aquosa de 2 equivalentes de fosfato de potássio, tribásica é adicionada seguido por agitação durante 24 horas a 55 °C. A temperatura de reação é então aumentada para 7 0 °C durante umas 12 horas adicionais. A reação é arrefecida até à temperatura ambiente, diluida com éter metilico de tert-butilo e salmoura. As fases são separadas, seguido por troca de solvente da fase orgânica para acetato de etilo. A fase de acetato de etilo é lavada com salmoura e concentrada a baixo volume. O concentrado em bruto é, em seguida, purificado por cromatografia rápida em silica gel eluindo com metanol a 5%, tolueno a 95%. Frações contendo o produto são combinadas e concentradas a baixo volume. O metanol é adicionado, seguido por agitação até que a precipitação ocorre. A suspensão é arrefecida e os sólidos são recolhidos e enxaguados com heptano seguido por secagem. O produto (II-f) é isolado como um sólido.

Na etapa 6 do Esquema 2, o composto (II—f) é dissolvido em 5 volumes de cloreto de metileno, seguido pela adição de 1 mol% de ácido tósico SiliaBond® e agitação durante 18 horas à temperatura ambiente. O catalisador ácido é separado por filtração e a solução de cloreto de

metileno (II-g) é tomada diretamente na etapa seguinte do procedimento de co-cristalização.

Na etapa 7 do Esguema 2, a solução de cloreto de metileno de (II-g) é concentrada e, em seguida, o solvente é trocado para 2-propanol. Água é adicionada, seguido por aguecimento até 55 °C. Uma solução aguosa de ácido L- piroglutâmico é adicionada, seguido por arrefecimento da solução resultante até à temperatura ambiente. A solução é então semeada e granulada durante 18 horas. Após arrefecimento, os sólidos são recolhidos e enxaguados com heptano, seguido por secagem. 0 produto (ΙΙ-h) é isolado como um sólido.

Uma via de sintese alternativa para compostos (Sl-A) é representada no Esguema 3 e descrita abaixo.

Esquema 3 A sintese de (IlI-a), onde R3 é um alguilo ou alguilo substituído com flúor (exceto para o carbono adjacente ao átomo de oxigénio) , pode ser preparada de um modo semelhante ao descrito na etapa 1 do Esquema 2. Na etapa 1 do Esquema 3, o grupo hidroxilo primário é protegido seletivamente com um grupo de proteção apropriado. Por exemplo, um grupo tritilo (Pg3 = Tr) pode ser introduzido por tratamento do intermediário (IlI-a) com clorotrifenilmetano na presença de uma base como piridina, num solvente como tolueno, tetrahidrofurano ou diclorometano, a uma temperatura variando de cerca de 0 graus Celsius a cerca da temperatura ambiente. Exemplos adicionais de tais grupos de proteção e condições experimentais são conhecidos por aqueles peritos na especialidade e podem ser encontrados em T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley &amp; Sons, Nova York, 1991.

Na etapa 2 do Esquema 3, o grupo hidroxilo secundário pode ser protegido pelos grupos de proteção apropriados. Por exemplo, grupos benzilo (Pg4 é Bn) podem ser introduzidos por tratamento do intermediário (ΙΙΙ-b) com brometo de benzilo ou cloreto de benzilo na presença de hidreto de sódio, hidreto de potássio, tert-butóxido de potássio num dissolvente como tetrahidrofurano, 1,2-dimetoxietano ou N,N-dimetilformamida a uma temperatura variando de cerca de 0 graus Celsius a cerca de 80 graus Celsius. Grupos acetilo ou benzoil (Pg4 = Ac ou Bz) podem ser introduzidos por tratamento do intermediário (IlI-b) com cloreto de acetilo, brometo de acetilo ou anidrido acético ou cloreto de benzoil ou anidrido benzóico, na presença de uma base como trietilamina, N,N-diisopropiletilamina ou 4-(dimetilamino)piridina, num solvente como tetrahidrofurano, 1,2-dimetoxietano ou diclorometano, a uma temperatura variando de cerca de 0 graus Celsius a cerca de 80 graus Celsius.

Na etapa 3 do Esquema 3, o grupo hidroxilo primário é desprotegido para levar ao intermediário (ΙΙΙ-d). Quando

Pg3 é Tr, o intermediário (III-c) é tratado na presença de um ácido como ácido para-toluenossulfónico, num solvente alcoólico como metanol, a uma temperatura variando de cerca de -20 graus Celsius até cerca da temperatura ambiente para proporcionar o intermediário (ΙΙΙ-d). Co-solventes como clorofórmio podem ser usados.

Na etapa 4 do Esguema 3, um grupo hidroximetileno é introduzido através de um processo semelhante ao já descrito no Esquema 1 (etapa 1) e Esquema 2 (etapas 4 e 5). Outras fontes de formaldeido, como paraformaldeido, num solvente como etanol, a uma temperatura variando de cerca da temperatura ambiente até cerca de 70 graus Celsius na presença de um alcóxido de metal alcalino podem também ser utilizadas nesta etapa. Quando Pg4 é Bn, esta etapa proporciona o intermediário (IlI-e) e quando Pg4 é Ac ou Bz, esta etapa proporciona o intermediário (IlI-f).

Na etapa 5 do Esquema 3, o intermediário (IlI-e) é tratado com um ácido como ácido trifluoroacético, ou uma resina ácida, num solvente como diclorometano, a uma temperatura variando de cerca de -10 graus Celsius até cerca da temperatura ambiente para produzir o intermediário (in-g) ·

Na etapa 6 do Esquema 3, os grupos de proteção remanescentes (Pg4) podem, em seguida, ser removidos utilizando a quimica apropriada para os grupos de proteção particulares. Por exemplo, grupos de proteção benzilo podem ser removidos por tratamento com ácido fórmico na presença de paládio (Pd preto) num solvente prótico (por exemplo, etanol/THF) em torno da temperatura ambiente para produzir um composto (Sl-A).

Na etapa 7 do Esquema 3, o intermediário (ΙΙΙ-f) é tratado com um ácido como ácido trifluoroacético, ou uma resina ácida, num solvente como diclorometano, a uma temperatura variando de cerca de -10 graus Celsius até cerca da temperatura ambiente para produzir um produto (Sl-

A) .

Dependendo de R5, os compostos assim obtidos podem, então, ser facilmente funcionalizados noutros compostos da presente invenção de estrutura (A) utilizando sequências de manipulação de grupos de proteção e funcionais bem conhecidas, conhecidos por aqueles peritos na especialidade. Consulte a secção de exemplos para mais detalhes.

Um outro esquema alternativo para a sintese de um produto (Sl-A) é representado no Esquema 4 e descrito abaixo.

Na etapa 1 do Esquema 4, o intermediário (IlI-a) é tratado com o cloreto de arilsulfonilo apropriado, R4SO2CI, ou anidrido arilsulfónico, R4S (0) 2OS (0) 2R4, (em que R4 é um grupo arilo opcionalmente substituído, tal como encontrado nos cloretos de arilsulfonilo, cloreto de 4-metil-benzenossulfonilo, cloreto de 4-nitro-benzenossulfonilo, cloreto de 4-fluoro-benzenossulfonilo, cloreto de 2,6-dicloro-benzenossulfonilo, cloreto de 4-fluoro-2-metil-benzenossulfonilo, e cloreto de 2,4,6-tricloro-benzenossulfonilo, e no anidrido arilsulfónico, anidrido p-toluenossulfónico) em presença de uma base como piridina, trietilamina, N, N-diisopropiletilamina, num solvente como tetrahidrofurano, 2-metiltetrahidrofurana, a uma temperatura variando de cerca de -20 graus Celsius até cerca da temperatura ambiente. Alguns ácidos de Lewis como brometo de zinco(II), podem ser utilizados como aditivos.

Na etapa 2 do Esquema 4, o intermediário (IV-a) é submetido a uma oxidação tipo Kornblum (veja-se, Kornblum, N., et al. , Journal of The American Chemical Society, 81, 4113 (1959)) para produzir o aldeido correspondente, o qual pode existir em equilíbrio com a forma hidrato e/ou hemiacetal correspondente. Por exemplo, o intermediário (IV-a) é tratado na presença de uma base como piridina, 2,6-lutidina, 2,4,6-colidina, N,N-diisopropiletilamina, 4-(dimetilamino)piridina, num solvente como dimetilsulfóxido, a uma temperatura variando de cerca da temperatura ambiente até cerca de 150 graus Celsius. O intermediário de aldeido produzido é, em seguida, submetido às condições aldol/Cannizzaro descritas para a etapa 1 (Esquema 1) e etapa 5 (Esquema 2) para produzir o intermediário (IV-b).

Na etapa 3 do Esquema 4, o intermediário (IV-b) é tratado com um ácido como ácido trifluoroacético, ou uma resina ácida, num solvente como diclorometano, a uma temperatura variando de cerca de -10 graus Celsius até cerca da temperatura ambiente para produzir (Sl-A). Dependendo de R5, os compostos assim obtidos podem, então, ser facilmente funcionalizados noutros compostos reivindicados de estrutura (A) da presente invenção, utilizando sequências de manipulação de grupos de proteção e funcionais bem conhecidas, conhecidos por aqueles peritos na especialidade. Consulte a secção de exemplos para mais detalhes.

Também se pode aceder aos compostos (A) e (B) da presente invenção através do processo descrito no Esquema 5.

Na etapa 1 do Esquema 5, a qual proporciona o intermediário (V-i), a etapa de adição de um organometal é levada a cabo de uma forma semelhante à descrita no Esquema 1, etapa 6, utilizando o reagente organometálico derivado de (V-a) , onde Pg5 é um grupo de proteção adequado para o grupo hidroxilo. Por exemplo, Pgs pode ser um grupo tert-butildimetilsililo (TBS) (veja-se o documento US 2007/0054867 para a preparação de, por exemplo, {4—[(5— bromo-2-cloro-fenil)-metil]-fenoxi}-tert-butil- dimetilsilano).

Na etapa 2 do Esquema 5, quando Pg2 = PMB, o intermediário (V-i) é tratado com um ácido como ácido trifluoroacético, ácido metanossulfónico ou uma resina ácida, na presença de anisol num solvente como diclorometano, a uma temperatura variando de cerca de -10 graus Celsius até cerca da temperatura ambiente para produzir o intermediário (V-j).

Na etapa 3 do Esquema 5, os grupos de proteção (Pg5) e (Pg1) podem ser removidos para proporcionar (V-k). Tipicamente, (Pgs) é TBS e Pg1 é Bn. Nesta circunstância, os grupos de proteção são removidos por tratamento sequencial de (V-j) com 1) fluoreto de tetrabutilamónio num solvente como tetrahidrofurano ou 2-metiltetrahidrofurano, a uma temperatura variando de 0 graus Celsius a cerca de 40 graus Celsius e 2) tratamento com ácido fórmico na presença de paládio (Pd preto) num solvente prótico (por exemplo, etanol/THF) em torno da temperatura ambiente. Nesta sequência, a ordem das 2 reações é intercambiável.

Na etapa 4 do Esquema 5, o intermediário (V-k) pode, por exemplo, ser tratado com um agente alquilante de escolha, sob condições clássicas para alquilar seletivamente o grupo fenol. Além disso, os compostos assim obtidos podem, então, ser facilmente funcionalizados noutros compostos reivindicados de estrutura (A) e (B) da presente invenção utilizando sequências de manipulação de grupos de proteção e funcionais bem conhecidas, conhecidos por aqueles peritos na especialidade. Consulte a secção de exemplos para mais detalhes.

Um perito na especialidade entenderia também que a quimica descrita acima nos Esquemas 1 a 5 representa diferentes formas de aceder ao intermediário (V-k).

Os compostos desta invenção são úteis para o tratamento de doenças, condições e/ou distúrbios modulados pela inibição dos transportadores de sódio-glucose (em particular, SGLT2); portanto, uma outra forma de realização desta invenção é uma composição farmacêutica compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto desta invenção e um excipiente, diluente ou veiculo farmaceuticamente aceitável. Os compostos desta invenção (incluindo as composições e processos utilizados na mesma) podem também ser usados no fabrico de um medicamento para as aplicações terapêuticas aqui descritas.

Uma formulação tipica é preparada misturando um composto desta invenção e um veiculo, diluente ou excipiente. Os veiculos, diluentes e excipientes adequados são bem conhecidos para aqueles peritos na especialidade e incluem materiais tais como carboidratos, ceras, polímeros solúveis em áqua e/ou dilatáveis, materiais hidrofilicos ou hidrofóbicos, gelatina, óleos, solventes, água e semelhantes. 0 veiculo, diluente ou excipiente particular utilizado dependerá dos meios e propósitos para os quais o composto desta invenção está a ser solicitado. Os solventes são geralmente selecionados baseados em solventes reconhecidos por peritos na especialidade como seguros (GRAS) para serem administrados a um mamifero. Em geral, os solventes seguros são solventes aquosos não tóxicos tais como água e outros solventes não tóxicos que são solúveis ou misciveis em água. Os solventes aquosos adequados incluem água, etanol, propilenoglicol, polietilenoglicóis (por exemplo, PEG400, PEG300), etc. e misturas destes. As formulações podem também incluir um ou mais tampões, agentes de estabilização, tensioativos, agentes humectantes, agentes lubrificantes, emulsionantes, agentes de suspensão, conservantes, antioxidantes, agentes opacificantes, deslizantes, auxiliares de processamento, corantes, edulcorantes, agentes perfumantes, agentes aromatizantes e outros aditivos conhecidos para proporcionar uma apresentação elegante do fármaco (isto é, um composto desta invenção ou composição farmacêutica do mesmo) ou auxiliar no fabrico do produto farmacêutico (isto é, medicamento).

As formulações podem ser preparadas utilizando procedimentos de dissolução e mistura convencionais. Por exemplo, a substância farmacêutica a granel (isto é, o composto desta invenção ou a forma estabilizada do composto (por exemplo, complexo com um derivado de ciclodextrina ou outro agente de complexação conhecido)) é dissolvida num solvente adequado na presença de um ou mais dos excipientes descritos acima. 0 composto desta invenção é tipicamente formulado em formas de dosagem farmacêuticas para proporcionar uma dosagem facilmente controlável do fármaco e para dar ao paciente um produto elegante e facilmente manuseável.

As composições farmacêuticas incluem também solvatos e hidratos dos compostos desta invenção. 0 termo "solvato" refere-se a um complexo molecular desta invenção (incluindo sais farmaceuticamente aceitáveis da mesma) com uma ou mais moléculas de solvente. Tais moléculas de solvente são aquelas correntemente utilizadas na especialidade farmacêutica, que são conhecidas por serem inócuas para o recetor, por exemplo, água, etanol, etilenoglicol, e semelhantes. 0 termo "hidrato" refere-se ao complexo onde a molécula de solvente é água. Os solvatos e/ou hidratos preferivelmente existem sob a forma cristalina. Outros solventes podem ser usados como solvatos intermédios na preparação de solvatos mais desejáveis, tais como metanol, éter metil-t-butilico, acetato de etilo, acetato de metilo, (S)-propilenoglicol, (R)-propilenoglicol, 1,4-butinediol, e semelhantes. As formas cristalinas podem também existir como complexos com outras pequenas moléculas inócuas, tais como L-fenilalanina, L-prolina, ácido L-piroglutâmico e semelhantes, como co-cristais ou solvatos ou hidratos do material co-cristalino. Os solvatos, hidratos e compostos co-cristalinos podem ser preparados usando procedimentos descritos na Publicação PCT N.° WO 08/002824, aqui incorporada por referência, ou outros procedimentos bem conhecidos daqueles peritos na especialidade. A composição (ou formulação) farmacêutica para aplicação pode ser embalada numa variedade de formas, dependendo do método usado para administrar o fármaco. Geralmente, um artigo para distribuição inclui um recipiente que tem nele depositada a formulação farmacêutica numa forma apropriada. Os recipientes adequados são bem conhecidos para aqueles peritos na especialidade e incluem materiais tais como frascos (plástico e vidro), saquetas, ampolas, sacos de plástico, cilindros metálicos, e semelhantes. 0 recipiente pode também incluir uma montagem à prova de adulteração para impedir o acesso indiscreto ao conteúdo da embalagem. Em adição, o recipiente tem nele depositado um rótulo que descreve os conteúdos do recipiente. 0 rótulo também pode incluir advertências apropriadas.

Adicionalmente, é descrito um método de tratamento de doenças, condições e/ou distúrbios modulados pela inibição dos transportadores de sódio-glucose num animal que inclui a administração a um animal em necessidade de tal tratamento de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto desta invenção ou uma composição farmacêutica compreendendo uma quantidade eficaz de um composto desta invenção e um excipiente, diluente ou veiculo farmaceuticamente aceitável. 0 método é particularmente útil para o tratamento de doenças, condições e/ou distúrbios que beneficiam da inibição de SGLT2.

Um aspeto desta invenção é o tratamento de obesidade e distúrbios relacionados com a obesidade (por exemplo, excesso de peso, ganho de peso, ou manutenção do peso). A obesidade e excesso de peso são geralmente definidos pelo indice de massa corporal (IMC), que está correlacionado com a gordura corporal total e estima o risco relativo de doença. 0 IMC é calculado pelo peso em quilogramas dividido pelo quadrado da altura em metros (kg/m2) . 0 excesso de peso é tipicamente definido como um IMC de 25-29,9 kg/m2, e a obesidade é tipicamente definida como um IMC de 30 kg/m2. Veja-se, por exemplo, National Heart, Lung, and Blood Institute, Clinicai Guidelines on the Identification, Evaluation, and Treatment of Overweight and Obesity in Adults, The Evidence Report, Washington, DC: U.S. Department of Health and Human Services, NIH publicação n.° 98-4083 (1998). É também descrito o tratamento ou atraso da progressão ou aparecimento de diabetes ou distúrbios relacionados com a diabetes incluindo diabetes tipo 1 (diabetes mellitus insulino-dependente, também referido como "DMID") e Tipo 2 (diabetes mellitus não insulino-dependente, também referido como "DMNID"), tolerância à glicose diminuída, cicatrização retardada, hiperinsulinemia, niveis sanguíneos de ácidos gordos elevados, hiperlipidemia, hipertrigliceridemia, Sindrome X, niveis de lipoproteinas de alta densidade aumentados, resistência à insulina, hiperglicemia, e complicações diabéticas (tais como a aterosclerose, doença cardiaca coronária, acidente vascular cerebral, doença vascular periférica, nefropatia, hipertensão, neuropatia, e retinopatia). É também descrito o tratamento de comorbidades da obesidade, tal como sindrome metabólica. A sindrome metabólica inclui doenças, condições ou distúrbios tais como dislipidemia, hipertensão, resistência à insulina, diabetes (por exemplo, diabetes tipo 2), a doença coronária e insuficiência cardiaca. Para informação mais detalhada sobre Sindrome Metabólica veja-se, por exemplo, Zimmet, P.Z., et al., "The Metabolic Syndrome: Perhaps an Etiologic Mystery but Far From a Myth - Where Does the International Diabetes Federation Stand?," Diabetes &amp; Endocrinology, 7(2), (2005); e Alberti, K.G., et al., "The Metabolic Syndrome - A New Worldwide Definition," Lancet, 366, 1059-62 (2005) .

Preferivelmente, a administração dos compostos desta invenção proporciona uma redução estatisticamente significativa (p < 0,05) em pelo menos um fator de risco de doença cardiovascular, tal como redução de leptina plasmática, proteina C reativa (CRP) e/ou colesterol, em comparação com um veiculo controlo não contendo fármaco. A administração dos compostos desta invenção pode também proporcionar a redução estatisticamente significativa (p < 0,05) nos niveis glucose séricos.

Para um ser humano adulto normal com um peso corporal de cerca de 100 kg, uma dosagem no intervalo de cerca de 0,001 mg a cerca de 10 mg por quilograma de peso corporal é tipicamente suficiente, preferivelmente de cerca de 0,01 mg/kg a cerca de 5,0 mg/kg, mais preferivelmente de cerca de 0,01 mg/kg a cerca de 1 mg/kg. No entanto, alguma variabilidade no intervalo de dosagem geral pode ser necessária, dependendo da idade e peso do sujeito a ser tratado, da via de administração pretendida, do composto particular a ser administrado e semelhantes. A determinação dos intervalos de dosagem e dosagens ótimas para um paciente particular está bem dentro da capacidade de um perito na especialidade tendo o beneficio da presente descrição. É também de notar que os compostos desta invenção podem ser utilizados em formulações de libertação sustentada, libertação controlada e formulações de libertação retardada, formas as quais são também bem conhecidas para um perito na especialidade.

Os compostos desta invenção também podem ser utilizados em conjunção com outros agentes farmacêuticos para o tratamento das doenças, condições e/ou distúrbios aqui descritos. Portanto, métodos de tratamento que incluem a administração dos compostos desta invenção em combinação com outros agentes farmacêuticos são também descritos. Os agentes farmacêuticos adequados que podem ser utilizados em combinação com os compostos desta invenção incluem agentes anti-obesidade (incluindo supressores do apetite), agentes anti-diabéticos, agentes anti-hiperglicémicos, agentes de redução de lipidos, agentes anti-inflamatórios e agentes anti-hipertensivos.

Os agentes anti-obesidade adeguados incluem antagonistas de canabinóide-1 (CB-1) (tais como rimonabant), inibidores da 11β-hidroxiesteróide desidrogenase-1 (Ιΐβ-HSD tipo 1), inibidor da estearoil-CoA desaturase-1 (SCD-1), agonistas de MCR-4, agonistas de colecistoguinina-A (CCK-A), inibidores da captação de monoamina (tais como sibutramina), agentes simpaticomiméticos, agonistas adrenérgicos β3, agonistas da dopamina (tais como bromocriptina), análogos da hormona de estimulação de melanócitos, agonistas de 5HT2c, antagonistas da hormona de concentração de melanina, leptina (a proteina OB) , análogos de leptina, agonistas de leptina, antagonista de galanina, inibidores de lipases (tais como tetrahidrolipstatina, isto é, orlistato), agentes anorexigenos (tais como um agonista de bombesina), antagonistas de neuropéptido Y (por exemplo, antagonistas de NPY Y5) , PYY3-36 (incluindo análogos deste) , agentes tiromiméticos, desidroepiandrosterona ou um análogo desta, agonistas ou antagonistas de glicocorticoides, antagonistas de orexina, agonistas do péptido semelhante a glucagão 1, fatores neutrofilicos ciliares (tais como Axokine™ disponível em Regeneron Pharmaceuticals, Inc., Tarrytown, NY e Procter &amp; Gamble Company, Cincinnati, OH) , inibidores da proteina agouti-relacionada humana (AGRP), antagonistas de grelina, antagonistas ou agonistas inversos de histamina 3, agonistas de neuromedina U, inibidores de MTP/ApoB (por exemplo, inibidores seletivos de MTP intestinal, tais como dirlotapida), antagonista opióide, antagonista de orexina, e semelhantes.

Os agentes anti-obesidade preferidos para utilização nos aspetos de combinação desta invenção incluem antagonistas de CB-1 (por exemplo, rimonabant, taranabant, surinabant, otenabant, SLV319 (CAS No. 464213-10-3) e AVE1625 (CAS No. 358970-97-5)), inibidores seletivos de MTP intestinal (por exemplo, dirlotapida, mitratapida e implitapida, R56918 (CAS No. 403987) e CAS No. 913541-47-6), agonistas de CCKa (por exemplo, N-benzil-2-[4-(1H-indol-3-ilmetil)-5-oxo-l-fenil-4,5-dihidro-2,3,6,10b-tetraaza-benzo[e]azulen-6-il]-N-isopropil-acetamida descrito na publicação PCT N.° WO 2005/116034 ou Publicação US N.° 2005-0267100 Al), agonistas de 5HT2c (por exemplo, lorcaserina), agonista de MCR4 (por exemplo, compostos descritos no documento US 6.818.658), inibidores de lipases (por exemplo, Cetilistato) , PYY3-36 (como agui utilizado, "PYY3-36" inclui análogos, tais como PYY3-36 peguilados, por exemplo, agueles descritos na Publicação US 2006/0178501), antagonistas opióides (por exemplo, naltrexona), oleoil-estrona (CAS No. 180003-17-2), obinepitida (TM30338), pramlintida (Symlin®), tesofensina (NS2330), leptina, liraglutida, bromocriptina, orlistato, exenatido (Byetta®), AOD-9604 (CAS No. 221231-10-3) e sibutramina. Preferivelmente, os compostos e terapias de combinação desta invenção são administrados em conjunção com exercício e uma dieta equilibrada.

Os agentes anti-diabéticos adequados incluem um inibidor da acetil-CoA carboxilase-2 (ACC-2), um inibidor da fosfodiesterase (PDE)-IO, um inibidor da diacilglicerol aciltransferase (DGAT) 1 ou 2, uma sulfonilureia (por exemplo, acetohexamida, clorpropamida, diabinese, glibenclamida, glipizida, gliburida, glimepirida, gliclazida, glipentida, gliquidona, glisolamida, tolazamida, e tolbutamida), uma meglitinida, um inibidor da α-amilase (por exemplo, tendamistato, trestatina e AL-3688), um inibidor da α-glucósido hidrolase (por exemplo, acarbose), inibidor da α-glucosidase (por exemplo, adiposina, camiglibose, emiglitato, miglitol, voglibose, pradimicina-Q, e salbostatina), um agonista de PPARy (por exemplo, balaglitazona, ciglitazona, darglitazona, englitazona, isaglitazona, pioglitazona, rosiglitazona e troglitazona) , um agonista de PPAR α/γ (por exemplo, CLX-0940, GW-1536, GW-1929, GW-2433, KRP-297, L-796449, LR-90, MK-0767 e SB-219994), a biguanida (por exemplo, metformina), um agonista do péptido semelhante a glucagão 1 (GLP-1) (por exemplo, exendina-3, exendina-4, e liraglutida), um inibidor da proteína tirosina fosfatase-lB (PTP-1 B) (por exemplo, trodusguemina, extrato de hirtiosal, e compostos divulgados por Zhang, S., et al., Drug Discovery Today, 12(9/10), 373-381 (2007)), inibidor de SIRT-1 (por exemplo, reservatrol), um inibidor da dipeptiil peptidase IV (DPP-IV) (por exemplo, sitagliptina, vildagliptina, alogliptina e saxagliptina), um secretagogo de insulina, um inibidor da oxidação de ácidos gordos, um antagonista A2, um inibidor de cinase c-jun amino-terminal (JNK), insulina, um mimético de insulina, um inibidor da glicogenofosforilase, um agonista do recetor VPAC2 e um ativador de glucocinase. Os agentes anti-diabéticos preferidos são metformina e inibidores da DPP-IV (por exemplo, sitagliptina, vildagliptina, alogliptina e saxagliptina).

Os agentes anti-inflamatórios adeguados incluem preventivos e tratamentos de infeções do trato genital/trato urinário. Os agentes exemplificativos incluem mirtilos-vermelhos (isto é, Vaccinium macrocarpon} e derivados de mirtilo-vermelho tais como sumo de mirtilo-vermelho, extratos de mirtilo-vermelho ou flavonóis de mirtilos-vermelhos. Os estratos de mirtilo-vermelho podem incluir um ou mais flavonóis (isto é, antocianinas e pró-antocianidinas) ou um composto de flavonol de mirtilo-vermelho purificado, incluindo miricetin-3-β-xilopiranósido, quercetin-3-p-glucósido, quercetin-3-α-arabinopiranósido, 3'-metoxiguercetin -3-a-xilopiranósido, quercetin-3-0- ( 6"-p-coumaroil)-β-galactósido, quercetina-3-0-(6"-benzoil)-β-galactósido, e/ou quercetin-3-α-arabinofuranósido.

As formas de realização desta invenção são ainda ilustradas pelos seguintes Exemplos. É para ser entendido, contudo, que as formas de realização da invenção não estão limitadas aos detalhes específicos destes Exemplos, uma vez que outras variações dos mesmes serão conhecidas ou evidentes, à luz da presente divulgação, para um perito na especialidade.

EXEMPLOS A menos que especificado em contrário, os materiais de partida estão, em geral, disponíveis a partir de fontes comerciais tais como Aldrich Chemicals Co. (Milwaukee, WI), Lancaster Synthesis, Inc. (Windham, NH) , Acros Organics (Fairlawn, NJ), Maybridge Chemical Company, Ltd. (Cornwall, Inglaterra), Tyger Scientific (Princeton, NJ), AstraZeneca Pharmaceuticals (Londres, Inglaterra), e Accela ChemBio (San Diego, CA).

Procedimentos experimentais gerais

Espectros de RMN foram registados num Varian Unity™ 400 (disponível a partir de Varian Inc., Paio Alto, CA) à temperatura ambiente a 400 MHz para protão. Os desvios químicos são expressos em partes por milhão (delta) em relação ao solvente residual como uma referência interna. As formas dos picos são indicadas como se segue: s, singleto; d, dupleto; dd, dupleto de dupletos; t, tripleto; q, quarteto; m, multipleto; sl ou s. 1., singleto largo; 2s, dois singletos; d. 1., dupleto largo. Os espectros de massa de ionização por eletropulverização (ES) foram obtidos num instrumento Waters™ ZMD (gás transportado: nitrogénio; solvente A: água/ácido fórmico a 0,01%, solvente B: acetonitrilo/ácido fórmico a 0,005%; disponível na partir de Waters Corp., Milford, MA ) . Os espectros de massa de alta resolução (HRMS) foram obtidos num Agilent™

Modelo 6210 ou 6220A de tempo de voo. Quando as intensidades de iões contendo cloro único ou bromo único são descritas, o rácio de intensidades esperado observado (aproximadamente 3:1 para iões contendo 35C1/37C1 e 1:1 para iões contendo 79Br/81Br contendo) e apenas a intensidade do ião de menor massa é dada. Em alguns casos, apenas picos de RMN de 7H representativos são dados. A cromatografia em coluna foi realizada quer com sílica gel Baker™ (40 microm; J.T. Baker, Phillipsburg, NJ) quer com sílica gel 50 (EM Sciences™, Gibbstown, NJ) em colunas de vidro ou em colunas Biotage™ Flash 40 (ISC, Inc., Shelton, CT) . A MPLC (cromatografia líquida de média pressão) foi realizada usando um sistema de purificação Biotage™ SP ou um Combiflash® Companion® de Teledyne™ Isco™; cartucho Biotage™ SNAP de sílica KPsil ou Redisep Rf (de Teledyne™ Isco™) sob pressão reduzida de nitrpgénio foram utilizados. A HPLC (cromatografia líquida de alta eficiência) foi realizada utilizando um Shimadzu™ 10A LC-UV ou Agilent™ 1100 de HPLC preparativa. Exceto se indicado em contrário, todas as reações foram executadas sob uma atmosfera inerte de gás nitrogénio usando solventes anidros. Também, exceto se indicado em contrário, todas as reações foram executadas à temperatura ambiente (~ 23 °C) . Ao realizar uma TLC (cromatografia de camada fina), Rf é definido como o rácio da distância percorrida pelo composto dividida pela distância percorrida pelo eluente. Rt (tempo de retenção) .

Materiais de partida

Geralmente, qualquer dos seguintes materiais de partida podem ser preparados usando os procedimentos descritos nos Esquemas 7 ou 8 da Publicação US N.° 2008/0132563, ou, alternativamente, nos Esquemas 2, 3 ou 8 da Publicação US N.° 2007/0259821. Mais especificamente, os seguintes materiais de partida usados nos seguintes Exemplos podem ser preparados utilizando os procedimentos descritos nas referências correspondentes ou comprados ao vendedor correspondente. 4-(5-Bromo-2-cloro-benzil)-fenol pode ser preparado pelos procedimentos descritos no Exemplo III do documento EP 1828216 BI. 4-Bromo-l-cloro-2-(4-etoxi-benzil)-benzeno e (5-bromo-2-clorofenil) (4-etoxifenil)-metanona podem ser comprados em Shanghai Haoyuan Chemexpress Co., Ltd., Shanghai, República Popular da China.

Os seguintes materiais de partida foram preprados como descrito abaixo. 4- (5-Bromo-2-cloro-benzil)-fenol. A uma solução de 4-bromo-l-cloro-2-(4-etoxi-benzil)-benzeno (5,0 g, 15,35 mmol) em diclorometano (20,0 ml) arrefecida até 0 graus Celsius sob azoto foi adicionado gota a gota ao longo de 30 minutos uma solução a 1 M de tribrometo de boro em diclorometano (17,0 ml, 17,0 mmol). Depois de a adição estar concluída, a reação foi deixada aquecer até à temperatura ambiente durante a noite (~ 16 horas). A reação foi arrefecida até 0 graus Celsius e extinta com uma solução aquosa de ácido clorídrico a 1 N. A mistura resultante foi agitada durante 30 minutos e extraida usando diclorometano. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraida duas vezes com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de magnésio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. A reação foi purificada por cromatografia rápida sobre silica gel usando a unidade de cromatografia automatizada ISCO (coluna de 120 g de silica gel) e eluindo com um gradiente de 0 a 100% de acetato de etilo em heptano. 3,53 g de produto desejado obtidos (77% de rendimento). ΧΗ RMN (400 MHz, METANOL-ch) delta ppm 3,94 (s, 2H) , 6,70 (d, J = 8, 6 Hz, 2H) , 6,98 (d, J = 8,4 Hz, 2H) , 7,23-7,34 (m, 3H) .

Procedimento alternativo: A uma solução de 4-bromo-l-cloro-2-(4-etoxi-benzil)-benzeno (10,0 g, 30,71 mmol) em diclorometano (40,0 ml) arrefecida até 0 graus Celsius sob azoto foi adicionado gota a gota ao longo de 30 minutos uma solução a 1 M de tricloreto de boro em diclorometano (34 ml, 34,0 mmol). Depois de a adição estar concluída, a reação foi deixada aquecer até à temperatura ambiente durante a noite (-16 horas) . A mistura de reação foi arrefecida até 0 graus Celsius e uma solução aquosa de ácido clorídrico a 1 N foi adicionada. A mistura resultante foi agitada durante 30 minutos e, em seguida, extraida usando diclorometano. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraida duas vezes com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de magnésio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. A TLC mostrou apenas 50% de conversão. O material em bruto foi redissolvido em diclorometano (40 ml), arrefecido até 0 graus Celsius, e uma solução a 1 M de tribrometo de boro em diclorometano (31 ml, 31 mmol) foi adicionada gota a gota. A mistura de reação foi deixada aquecer até à temperatura ambiente ao longo do fim de semana (~ 55 horas). A mistura de reação foi arrefecida até 0 graus Celsius e uma solução aquosa de ácido clorídrico a 1 N foi adicionada gota a gota. A mistura resultante foi agitada durante 30 minutos e, em seguida, extraida usando diclorometano. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraida duas vezes com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de magnésio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. A reação foi purificada por cromatografia rápida sobre silica gel usando a unidade de cromatografia automatizada ISCO (coluna de 120 g de silica gel) e eluindo com um gradiente de 0 a 100% de acetato de etilo em heptano. 9 g (98% de rendimento) do produto desejado obtidos como um sólido branco.

[4- (5-Bromo-2-cloro~benzil)-fenoxi]-tert-butil-dimetil-silano. A uma solução de 4-(5-bromo-2-cloro-benzil)-fenol (9,01 g, 30,28 mmol) dissolvida em Ν,Ν-dimetilformamida (100 ml) e arrefecida até 0 graus Celsius (banho de gelo) foi adicionado imidazol (4,53 g, 66,6 mmol) e 4-dimetilaminopiridina (370 mg, 3,03 mmol). tert-Butilclorodimetilsilano (6,85 g, 45,4 mmol) foi adicionado e o banho de gelo foi removido. A mistura de reação foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante a noite (-16 horas), água (400 ml) foi adicionada e a mistura resultante foi extraída com acetato de etilo (200 ml) . A camada aquosa foi extraída duas vezes adicionais com acetato de etilo (200 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (200 ml) , salmoura (200 ml) , secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O material em bruto foi purificado por cromatografia rápida sobre sílica gel usando a unidade de cromatografia automatizada ISCO (coluna de 120 g de sílica gel) e eluindo com um gradiente de 0 a 50% de acetato de etilo em heptano. 12,4 g (99% de rendimento) do produto obtidos como um óleo límpido. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) delta ppm 0,18 (s, 6H) , 0,97 (s, 9H) , 3,96 (s, 2H) , 6,77 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,01 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,17-7,30 (m, 3H) .

Preparação de Intermediários

Preparação de intermediário ( (2R,3R,4S,5R)-6-aliloxi-3,4,5-tris-benziloxi-tetrahidropiran-2-il)-metanol (I-la):

Uma suspensão de D-glucose (1,2 kg, 6,6 mol) , ácido trifluorometanossulfónico (12 ml) e álcool alílico (5 1) foi aguecida a 80 °C durante 3 dias. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente, os voláteis foram removidos a vácuo e o residuo foi dissolvido em N,N-dimetilformamida (8 1). Esta foi dividida em quatro reações iguais e a cada foi adicionado cloreto de tritilo (463 g, 1,67 mol) e trietilamina (231 ml, 1,67 mol). Uma exotermia ligeira foi observada durante a adição de trietilamina. A mistura de reação foi agitada durante 2 dias a 30 °C e, em seguida, cada reação dividiu-se ao meio, dando oito reações iguais. Para cada uma destas reações foi adicionado cloreto de benzilo (300 ml, 2, 60 mol), seguido pela adição em porções de hidreto de sódio (102,5 g, 2,60 mol) mantendo a temperatura de reação entre 40 e 50 °C. Após concluir-se a adição, as misturas de reação foram agitadas à temperatura ambiente durante 20 horas. Cada reação foi, em seguida, vertida em gelo/água (2 1) e extraida com acetato de etilo (2,5 1). As fases orgânicas de cada foram lavadas com salmoura/água saturada (1:1, 2 x 2 1), combinadas e secas sobre sulfato de magnésio (Rf do produto de 0,85 em 3:1, hexanos/acetato de etilo). Após filtração e evaporação, o residuo foi dissolvido numa mistura de diclorometano (16 1) e metanol (4 1). A mistura foi dividida em 5 porções iguais e a cada foi adicionado ácido sulfúrico (32 ml). As reações foram agitadas durante 3 horas, lavadas com solução de salmoura/hidróxido de sódio aquoso a 2 M (1:1, 2x21), combinadas e secas sobre sulfato de magnésio. Após filtração e concentração a vácuo, o residuo foi ainda purificado sobre silica gel, eluindo com 30% de acetato de etilo em tolueno para dar o composto intermediário (I-la) como uma mistura de anómeros (1,77 kg, 54% de rendimento a partir de D-glucose). Rf de 0,15 em 3:1, hexanos/acetato de etilo.

Preparação de intermediário ((3S,4S,5R)-6-aliloxi-3,4,5-tris-benziloxi-2-hidroximetil-tetrahidropiran-2-il)-metanol (I-lb):

Uma solução de dimetilsulf óxido (87 ml, 1,22 mol) em diclorometano (160 ml) foi adicionada gota a gota a uma solução de cloreto de oxalilo (64,7 ml, 0,76 mol) em diclorometano (2,5 1) a -78 °C. Depois de se concluir a adição, uma solução de intermediário (I-la) (287 g, 0,59 mol) em diclorometano (500 ml) foi adicionada gota a gota a -78 °C. Depois de se concluir a adição, a mistura de reação foi agitada durante 30 minutos e trietilamina (417 ml, 2, 9 mol) foi adicionada gota a gota. Depois de se concluir a adição, a mistura de reação foi deixada auto-aquecer-se até à temperatura ambiente. A reação foi, então, lavada com solução aquosa de ácido clorídrico a 1 M (2 1) e água (2 1), e, em seguida, seca sobre sulfato de magnésio. Este procedimento de reação foi repetido em seis reações equivalentes e, após secagem, estas foram combinadas e evaporadas para dar o aldeído como um óleo amarelo (1,71 kg) . Este óleo foi dissolvido em isopropanol (2,57 1) e dividido em sete reações iguais. A cada uma destas adicionou-se uma solução aquosa de formaldeído a 37% (0,79 1, 10 mol) , seguido pela adição gota a gota de uma solução de hidróxido de sódio (32 g, 0,8 mol) em água (130 ml) . Depois de se concluir a adição, a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 dias. A mistura de reação foi diluída com salmoura (2 1) e extraída com acetato de etilo (2 1) . A fase orgânica foi adicionalmente

lavada com solução de bicarbonato de sódio aquosa saturada (2 1), salmoura (2 1) e, em seguida, seca sobre sulfato de magnésio. As fases orgânicas das sete reações foram combinadas, evaporadas e o resíduo purificado sobre sílica gel (eluindo com 4 a 1 até 1 a 1 hexanos em acetato de etilo) para dar o composto intermediário (I-lb) como uma mistura de anómeros (980 g, 53% de rendimento ao longo das duas etapas). Rf de 0,57 e 0,60 em 1:1, hexanos/acetato de etilo. (3S,4S,5R)-6-aliloxi-3,4,5-tris-benziloxi-2,2-bis-(4-metoxi-benziloximetil)-tetrahidropirano (I-lc):

O diol de partida ((3S, 4S, 5R)-6-aliloxi-3,4,5-tris-benziloxi-2-hidroximetil-tetrahidropiran-2-il)-metanol (I-lb: 10 g, 19,208 mmol) foi dissolvido em N,N- dimetilformamida (70 ml) e arrefecido até 0 °C. Hidreto de sódio (dispersão a 60% em óleo mineral, 1,69 g, 42,3 mmol) foi adicionado e a reação foi deixada a agitar a 0 °C durante 1 hora antes da adição de l-bromometil-4-metoxi-benzeno (5,96 ml, 40,3 mmol). A reação foi, em seguida, aquecida até 60 °C durante a noite. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente e a reação foi extinta com água e extraída com acetato de etilo (2 vezes). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, salmoura, secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. A reação foi, em seguida, cromatografiada sobre sílica gel (eluindo com um gradiente de 0 a 80% de acetato de etilo em heptano)

produzindo 7,55 g (52% de rendimento) de produto (I-lc). MS 778, 8 (M + NH4+; modo positivo) . (3R,4S,5S)-3,4,5-tris-benziloxi-6,6-bis-(4-metoxi-benziloximetil)-tetrahidropiran-2-ol (I-ld):

A uma solução de material de partida ( (3S,4S,5R)-6-aliloxi-3,4,5-tris-benziloxi-2,2-bis-(4-metoxi-benziloximetil)-tetrahidropiranp, (I-lc: 7,55 g, 9,92 mmol) em metanol (60 ml) e diclorometano (20 ml) à temperatura ambiente foi adicionado cloreto de paládio(II) (528 mg, 2,98 mmol) e a mistura resultante foi agitada a esta temperatura durante 4 horas. A TLC indicou a formação clara de um produto mais polar. A reação foi filtrada através de Celite® e concentrada sob pressão reduzida. O material bruto foi cromatografiado sobre silica gel, eluindo com um gradiente de 0 a 80% de acetato de etilo em heptano, produzindo 5, 6 g (78% de rendimento) de produto (I-ld) . MS 738,8 (M + NH4+; modo positivo). (3R,4S,5S)-3,4,5-tris-benziloxi-6,6-bis-(4-metoxi-benziloximetil)-tetrahidropiran-2-ona (I-le):

A uma solução de dicloreto de oxalilo (1,9 ml, 23 mmol) em diclorometano (65 ml) a -78 °C foi adicionada uma solução de dimetilsulfóxido (3,3 ml, 47 mmol) em diclorometano (5 ml) e a solução resultante foi agitada a esta temperatura durante 30 minutos. Uma solução de material de partida ( (3R, 4S,5S)-3,4,5-tris-benziloxi-6, 6-bis- (4-metoxibenziloximetil)-tetrahidropiran-2-ol, (I-ld, 5,6 g, 7,7 mmol) em diclorometano (15,0 ml) foi adicionada gota a gota e a mistura resultante foi agitada durante 30 minutos, permitindo que a temperatura aumente até -60 °C.

Trietilamina (9,7 ml, 69,5 mmol) foi adicionada gota a gota e a mistura deixada aquecer até 0 °C ao longo de 1 hora. A reação foi extinta por adição de solução de cloreto de amónio aquosa saturada e a fase orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por cromatografia rápida sobre sílica gel, eluindo com um gradiente de 0 a 60% de acetato de etilo em heptano para produzir o produto (I-le) (4 g, 72% de rendimento) . ΧΗ RMN (400 MHz, clorofórmio-d) delta ppm 3,24 (d, J = 10 Hz, 1H), 3,40-3,47 (m, 2H), 3,74 (s, 3H), 3,77 (s, 3H), 3,86 (d, J = 10 Hz, 1H) , 4,07 (d, J= 8,6 Hz, 1H) , 4,15 (d, J= 9,6 Hz, 1H) , 4,35-4,55 (m, 6H) , 4, 65-4,72 (m, 2H) , 4,82 (d, J = 11 Hz, 1H) , 4,87 (d, J= 11,2 Hz, 1H) , 5,10 (d, J = 11,1 Hz, 1H) , 6, 74-6, 79 (m, 2H) , 6,81-6,85 (m, 2H) , 7,11 (dd, J= 7,0, 2,5 Hz, 2H), 7,17-7,41 (m, 17H) .

Metoxi-metil-amida de ácido (2Rf3Sf4S)-2f3f4-tris-benziloxi-5-hidroxi-6- (4-metoxi-benziloxi)-5-(4-metoxi-benziloximetil) -hexanóico (I-lg) e/ou (3R,4S,5S)-3,4,5- tris-benziloxi-6,6-bis-(4-metoxi-benziloximetil)-2-(metoxi-metil-amino)-tetrahidropiran-2-ol (I-lf):

A uma solução de lactona ((3R,4S,5S)-3,4,5-tris-benziloxi-6,6-bis-(4-metoxi-benziloximetil)-tetrahidropiran-2-ona) (I-le: 10,4 g, 14,5 mmol) e cloridrato de N, O-dimetilhidroxilamina (1,77 g, 29,0 mmol) em diclorometano (100 ml) a 0 °C foi adicionada gota a gota uma solução a 2,0 M de trimetilalumínio em hexanos (14,5 ml, 29,0 mmol)e a solução resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 16 horas. A mistura de reação foi arrefecida até 0 °C e extinta pela adição lenta de solução de ácido clorídrico aquosa a 1 N. A mistura resultante foi deixada a agitar durante 1 dias. A fase orgânica foi separada e lavada com solução de ácido clorídrico aquosa a 1 N, seca sobre sulfato de sódio, filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por meio de cromatografia de pressão (gradiente de 5 a 40% de acetato de etilo em heptano) , produzindo 6,5 g (58%) de produto. ΧΗ RMA (400 MHz, clorofórmio-d) delta ppm 2,62 (s. 1., 1H) , 2,94 (s. 1., 3H) , 3,23 (s. 1., 3H) , 3,42 (d, J= 9,4

Hz, 1H), 3,50-3,60 (m, 3H), 3,75 (s, 3H), 3,77 (s, 3H), 4,03 (d, J = 6.9 Hz, 1H) , 4,20 (dd, J = 6,9, 3,3 Hz, 1H) , 4,31-4,44 (m, 5H) , 4,46-4,51 (m , 2H) , 4,53 (d, J = 12 Hz, 1H) ,

4,66 (d, J = 12 Hz, 1H) , 4,80 (d. 1., J= 11,5 Hz, 1H) , 4,87 (d, J= 11,4 Hz, 1H) , 6, 77-6, 83 (m, 4H) , 7,15-7,35 (m, 19H). ( [M+H+] 780,8, modo positivo; [M+HCCg-] 824,7, modo negativo). HRMS calculado para C46H54NO10 (M+H+) 780,3742, encontrado 780,3708. (4S,5S)-3,4,5-tris-benziloxi-2-[4-cloro-3- (4-etoxi-benzil)-fenilJ-6. 6-bis- (4-metoxi-benziloximetil)-tetrahidropiran-2- ol (I-li):

n-Butil-litio (1,0 ml, 2,5 M/hexanos, 3,25 equivalentes) foi adicionado gota a gota (1 gota cada 5 segundos) a uma solução desgaseifiçada de oxigénio (colocada num frasco de micro-ondas pré-seco Biotage™ de 10-20 ml vedado com a sua tampa e colocado sob uma corrente positiva de gás de nitrogénio) de 4-bromo-l-cloro-2-(4-etoxi-benzil)-benzeno (815 mg, 3,25 equivalentes) em tetrahidrofurano anidro (2,9 ml) a -78 °C e a solução resultante foi agitada a esta temperatura durante uma hora adicional. Uma solução de metoxi-metil.amida de ácido (2R,3S,4S)-2,3,4-tris-benziloxi-5-hidroxi-6-(4-metoxi-benziloxi)-5-(4-metoxi-benziloximetil)-hexanóico (I-lg) (600 mg) em tetrahidrofurano anidro (1,45 ml) foi, em seguida, adicionada gota a gota durante 1,3 horas usando uma bomba de seringa e a mistura resultante foi agitada a -78 °C durante 1 hora antes de ser deixada a aquecer até -25

°C ao longo de 14 horas (colocada num frasco de Dewar profundo coberto com papel alumínio para manter a temperatura fria; tamanho do frasco de Dewar: diâmetro exterior de 10 cm, diâmetro interno de 8 cm, altura de 9 cm) . Foi adicionado éter dietílico e a reação foi extinta por adição gota a gota de solução de ácido clorídrico aguosa a 1 Μ. A mistura bifásica resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 15 minutos. A fase orgânica foi separada, lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada. A cromatografia sobre sílica gel utilizando um gradiente de 10 a 40% de acetato de etilo em heptano deu o produto como uma mistura de isómeros (280 mg, 38% de rendimento) . HRMS calculado para CsgHgxOioCINa (M+Na+) 987,3845, encontrado 987,3840. {(2S, 3S) -2,3,4-tris-benziloxi-5-[4-cloro-3- (4-etoxi-benzil)-fenil]-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]oct-l-il}-metanol (I-lk):

A uma solução do intermediário I-li (1,46 g) em diclorometano (31 ml) foi adicionado anisol (900 microlitros, ~ 5 eguivalentes) seguido por 31 ml de uma solução de ácido trifluoroacético a 20% in diclorometano e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura foi concentrada e o bruto foi

cromatografiado sobre sílica gel utilizando um gradiente de 10 a 30% de acetato de etilo em heptano para dar o produto como uma mistura de isómeros (670 mg, 63% de rendimento) . HRMS calculado para C43H44O7CI (M+H+) 707,2770, encontrado 707,2765. (lS,2S,3S,4R,5S)-5-[4-Cloro-3-(4-etoxi-benzil)-fenil]-l-hidroximetil-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]octano-2,3,4-triol (IA)_e_(IS, 2S, 3S, 4S, 5S) -5- [4-cloro-3- (4-etoxi-benzil) - fenil]-1-hidroximetil-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]octano-2,3,4-triol (1B) :

A uma solução de { (2S,3S)-2,3,4-tris-benziloxi-5-[4-cloro-3-(4-etoxi-benzil)-fenil]-6,8-dioxa- biciclo [ 3.2.1]oct-l-il}-metanol (I-lk; 335 mg) em etanol/tetrahidrofurano (10 ml, 4/1 volumes) foi adicionado sucessivamente ácido fórmico (420 microlitros, 22 equivalentes) e negro de paládio (208 mg, 4 equivalentes) e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente. Depois de 1 hora, ácido fórmico adicional (420 microlitros, 22 equivalentes) e negro de paládio (208 mg, 4 equivalentes) foram adicionados e a mistura foi deixada a agitar durante uma hora adicional à temperatura ambiente. O paládio foi filtrado e a mistura bruta obtida após evaporação do solvente foi purificada por HPLC preparativa. HPLC preparativa: coluna 08 Gemini de fase reversa, 5 micrómetros, 30 x 100 mm, 40 ml/minuto, gradiente de acetonitrilo/ácido fórmico a 0,1% : água/ácido fórmico a 0,1%; 25 a 50% de acetonitrilo/ácido fórmico a 0,1% ao longo de 18 minutos; Deteção UV: 220 nm. A HPLC indicou um rácio de diastereómeros de 1,1:1 (1A:1B). (IA) : (60 mg, 29% de rendimento); Rt = 12,4 minutos; as frações contendo o produto foram concentradas sob pressão reduzida. 0 material bruto foi precipitado a partir de acetato de etilo e heptano. 0 sólido branco resultante foi lavado com heptano 2 vezes e seco sob pressão reduzida. MS (LCMS) 437,3 (M+H+; modo positivo); 481,3 (M+HCO2_; modo negativo). RMN (400 MHz, metanol-ch) delta 7,43 (d, 1H, J = 1,9 Hz), 7,36 (dd, 1H, J = 8,3 e 2 Hz), 7,32 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7, 08-7, 04 (m, 2H) , 6, 79-6, 75 (m, 2H) , 4,12 (d, 1H, J = 7,5 Hz), 4,00 (s, 2H) , 3,96 (q, 2H, J = 7,0 Hz), 3,81 (d, 1H, J = 12,5 Hz), 3,75 (dd, 1H, J = 8,3 e 1,3

Hz), 3,65 (d, 1H, J = 12,5 Hz), 3,63 (t, 1H, J = 8,2 Hz), 3,57 (dd, 1H, J = 7,5 e 1,3 Hz), 3,52 (d, 1H, J = 8,0 Hz),

1,33 (t, 3H, J = 6,9 Hz). HRMS calculado para C22H26O7CI (M+H+) 437,1361, encontrado 437,1360. (IB) : (30 mg, 15% de rendimento); Rt = 13,2 minutos; as frações contendo o produto foram concentradas sob pressão reduzida. O material bruto foi precipitado a partir de acetato de etilo e heptano. 0 sólido branco resultante foi lavado com heptano 2 vezes e seco sob pressão reduzida. MS (LCMS) 437,3 (M+H+; modo positivo), 481,3 (M+HCO2_; modo negativo) . ΧΗ RMN (400 MHz, metanol-d4) delta 7,48 (d, 1 H, J = 1,9 Hz) 7,40 (dd, 1H, J = 8,1 e 1,9 Hz), 7,32 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,08-7,03 (m, 2H) , 6, 80-6, 74 (m, 2H) , 4, 04-3, 99 (m, 3H) , 3,95 (q, 2H, J = 7 Hz), 3,89-3,81 (m, 4H) , 3,73 (d, 1H, J = 12,5 Hz), 3,49 (d, 1H, J = 7,3 Hz), 1,32 (t, 3H, J = 7 Hz). HRMS calculado para C22H26O7CI (M+H+) 437,1361, encontrado 437,1358.

(2S,3R,4S,5S,6R)-2-[4-Cloro~3-(4-hidroxi-benzil)-fenil]~6~ hidroximetil-2-metoxi-tetrahidropiran-3,4,5-triol.

Um solução a 2,5 M de n-butil-lítio em hexano (15 ml, 37,5 mmol) foi lentamente adicionada a uma solução agitada de [4-(5-bromo-2-cloro-benzil)-fenoxi]-tert-butil-dimetil-silano (12,6 g, 30,6 mmol) em 75 ml de uma solução de THF (25 ml) e tolueno (50 ml) seca arrefecida a -78 graus Celsius sob nitrogénio. Após agitação durante 30 minutos a seguir à adição, a solução foi transferida por cÂnula a um solução de agitação de (3R,4S,5R,6R)-3,4,5-tris-trimetilsilaniloxi- 6-trimetil-silaniloximetil- tetrahidropiran-2-ona (18,6 g, 40 mmol) em 50 ml de tolueno a -78 graus Celsius. Após 1,5 horas a seguir à adição, a reação foi extinta a -78 graus Celsius pela adição gota a gota de 5 ml de metanol contendo ácido metanossulfónico (0,5 ml) e a mistura resultante foi deixada a aquecer durante a noite (~ 16 horas) . Uns 4,5 ml adicionais de ácido metilsulfónico em 50 ml de metanol foram adicionados gota a gota à temperatura ambiente e a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante umas 24 horas adicionais. Uma solução de bicarbonato de sódio aquoso saturado (300 ml) e acetato de etilo (100 ml) foram adicionados e a mistura resultante foi agitada durante 1 hora. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraida duas vezes adicionais com acetato de etilo (100 ml) As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por cromatografia rápida sobre silica gel usando a unidade de cromatografia automatizada ISCO (duas colunas de silica gel

de 120 g) e eluindo com um gradiente de 0 a 30% de metanol em diclorometano. 4,2 g (33% de rendimento) de produto obtidos como um sólido esbranguiçado. LCMS 433 (M+Na+, modo positivo) . XH RMN (500 MHz, METANOL-cb) delta ppm 3, 08 (s, 3H) , 3,10 (d, J = 9,5 Hz, 1H) , 3,43 (t, J = 9,3 Hz, 1H) , 3,60 (ddd, J = 9,9, 5,7, 2,0 Hz, 1H) , 3,76 (t, J = 9,1 Hz, 1H) , 3,82 (dd, J = 12,0, 5,6 Hz, 1H) , 3,94 (dd, J = 12,1, 1,8 Hz, 1H) , 3,96-4,10 (m, 2H) , 6,69 (d, J = 8,3 Hz, 2H) , 7,02 (d, J = 8,3 Hz, 2H) , 7,37 (d, J = 8,3 Hz, 1H) , 7,46 (dd, J = 8,3, 2,0 Hz, 1H) , 7,54 (d, J = 1,7 Hz, 1H) . 1-C- [4-Cloro-3- (4-{ [ (2,6- diclorofenil) sulfonil]oxi}benzil)fenil]-6-Q-[(2,6 diclorofenil) sulfonil]-alfa-D-glucopiranósido de metilo

A uma solução de [(2S,3R,4S,5S,6R)-2-[4-cloro-3-(4-hidroxi-benzil)-fenil]-6-hidroximetil-2-metoxi-tetrahidropiran-3,4,5-triol (4,2 g, 10,22 mmol) dissolvida em 2-metiltetrahidrofurano (40 ml) e arrefecida até 0 graus Celsius foi adicionada trietilamina (4,27 ml, 30,7 mmol), brometo de zinco (6,53 g, 26,6 mmol) seguido por adição em porções de cloreto de 2,6-diclorobenzenossulfonilo (0,610 g, 2,48 mmol) . A mistura de reação foi aguecida até à temperatura ambiente e deixada a agitar durante a noite (-16 horas) . A reação foi extinta por adição de uma solução aguosa de ácido clorídrico a 1 N (100 ml) e água (100 ml) . A mistura de reação foi extraida usando acetato de etilo (100 ml) e a camada aguosa foi extraida com acetato de etilo (100 ml) um tempo adicional. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida.

5,6 g (66% de rendimento) do produto desejado obtidos como um sólido esbranquiçado. XH RMN (400 MHz, METANOL-c^) delta ppm 3,00 (s, 3H) , 3,03 (d, J = 9,4 Hz, 1H) , 3,38 (t, J = 9.5 Hz, 1H) , 3,71 (t, J= 9,2 Hz, 1H) , 3,79 (ddd, J= 10,1, 5,9, 1,5 Hz, 1H) , 4,00-4,14 (m, 2H) , 4,43 (dd, J = 10,7, 5,9 Hz, 1H) , 4,55 (dd, J = 10,8, 1,5 Hz, 1H) , 7,01 (d, J = 8.6 Hz, 2H) , 7,16 (d, J= 8,6 Hz, 2H) , 7,24-7,30 (m, 1H) , 7,31-7,36 (m, 1H) , 7,44-7,61 (m, 7H) . (2S,3R,4S,5S)-2-[4-Cloro-3-(4-hidroxi-benzil)-fenil] -6, 6-bis-hidroximetil-2-metoxi-tetrahidropiran-3,4,5-triol

Uma solução de 1-C-[4-cloro-3-(4-{ [ (2, 6- diclorofenil)sulfonil]oxi}benzil)fenil]-6-0-[ (2,6-diclorofenil)sulfonil]-alfa-D-glucopiranósido de metilo (7 g, 8,44 mmol) dissolvida em dimetilsulfóxido (35,3 ml) foi colocada num balão de fundo redondo de três gargalos de 250 ml pré-seco equipado com um termómetro para monitorizar a temperatura interna. A esta solução foi adicionada 2,4,6-colidina (5,6 ml, 42,2 mmol) e a mistura de reação foi aquecida a 127 graus Celsius. A temperatura interna atingiu 123 graus Celsius após 20 minutos, altura em que o bloco de aquecimento foi desligado e após uns 20 minutos adicionais, o balão foi removido do bloco de aquecimento e a mistura de reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e utilizada na etapa seguinte sem trabalho ou purificação adicionais. À solução em bruto anterior foi adicionado etanol (70 ml) e a mistura resultante foi aquecida a 55 graus Celsius. Paraformaldeido (5090 mg, 169 mmol) foi adicionado seguido pela adição de uma solução de etóxido de sódio a 21% em etanol desnaturado (15,8 ml, 42,4 mmol) e a mistura

resultante foi deixada a agitar a 55 graus Celsius durante 16 horas antes de ser arrefecida até à temperatura ambiente. A reação foi extinta pela adição de água (125 ml) contendo 18 eguivalentes de NaHSCg e a mistura resultante foi agitada durante 90 minutos. Os voláteis foram removidos sob pressão reduzida. Água (625 ml) foi adicionada e a mistura resultante foi extraida com acetato de etilo (250 ml) . A camada aguosa foi extraida 4 vezes com acetato de etilo. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. A reação foi purificada por cromatografia rápida sobre silica gel usando a unidade de cromatografia automatizada ISCO (duas colunas de silica gel de 120 g) e eluindo com um gradiente de 5 a 25% de metanol em diclorometano. O material em bruto foi purificado por HPLC preparativa numa coluna Phenomenex HILIC(Diol) 250 x 21,2 mm, 5 micrómetros eluindo com uma taxa de fluxo de 28 ml/ minuto; fases móveis A: Heptano e B: Etanol. O produto foi eluido utilizando um gradiente de 5% de etanol durante 1,5 minutos e aumentou num gradiente linear até 100% de etanol ao longo de 8,5 minutos para dar o produto (586 mg, 16% de rendimento, tempo de retenção = 9,8 minutos) . Deteção UV: 220 nm. LCMS 439 (M-H+; modo negativo) XH RMN (400 MHz, METANOL-cb) delta ppm 3, 03 (d, J=9, 6 Hz, 1H) , 3,09 (s, 3H) , 3,74 (d, J = 10,0 Hz, 1H) , 3,80 (d, J = 11,9 Hz, 1H) , 3, 87-3, 97 (m, 4H) , 4, 00-4, 07 (m, 1H) , 4,14 (d, J = 11,5 Hz, 1H) , 6,65 (d, J = 8,4 Hz, 2H) , 6,98 (d, J = 8,4 Hz, 2H) , 7,31 (d, J = 8,4 Hz, 1H) , 7,45 (dd, J = 8,4, 2,0 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 1,8 Hz, 1H). (5-bromo-2-Clorofenil) (4-etoxifenil)metanol.

Num balão de reação adequado foi carregado (5-bromo-2-clorofenil) (4-etoxifenil)metanona (103, 06 mmol, 35, 00 g) e acetonitrilo (6,68 mol, 350,00 ml, 274,15 g) para dar uma solução límpida. A solução foi arrefecida até 0 graus Celsius e boroidreto de sódio (128,82 mmol, 4,87 g) foi adicionado em porções. A reação foi agitada durante aproximadamente 30 minutos a 0 graus Celsius, e em seguida à temperatura ambiente até à conclusão (como determinado por análise de HPLC). À mistura de reação foi, em seguida, adicionada água (40 ml) , seguido por salmoura (50 ml) . As camadas foram agitadas em conjunto, deixadas assentar e depois separadas. A fase orgânica foi concentrada até um óleo. Éter metil-tert-butílico (200 ml) foi adicionado seguido por uma adição lenta de ácido clorídrico a 1 N. Evolução de gás vigorosa foi observada. As camadas foram agitadas em conjunto, deixadas assentar e depois separadas. A fase orgânica foi lavada com salmoura (50 ml), seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada para dar o produto bruto como um sólido amarelo pálido (35,38 g, 100% de rendimento). 1H-RMN (400 MHz, dimetilsulf óxido-d^) delta 7,84 (d, 1H, J = 2,5 Hz), 7,47 (dd, 1H, J = 8,5, 2,5 Hz), 7,33 (d, 1H, 8,5 Hz), 7,21 (d, 2H, 8,5 Hz), 6,85 (d, 2H, 8,5 Hz), 5,88 (s, 1H) , 3,97 (q, 2H, 7 Hz), 1,29 (t, 3H, 7

Hz) . 2-(Benziloxi (4-etoxifenil)metil)-4-bromo-l-clorobenzeno

Num balão de reação adequado foi carregado (5-bromo-2-clorofenil)(4-etoxifenil)metanol (5,85 mmol, 2,00 g) e tetrahidrofurano (245,77 mmol, 20,00 ml, 17,72 g) para dar

uma solução límpida. Hidreto de sódio (8,78 mmol; 351,22 mg) foi, em seguida, adicionado em pequenas porções para minimizar a taxa de evolução de gás de hidrogénio. A reação foi agitada durante aproximadamente 30 minutos à temperatura ambiente, e, em seguida, brometo de benzilo (8,78 mmol; 1,05 ml; 1,50 g) foi adicionado lentamente. A reação foi deixada a agitar à temperatura ambiente até à conclusão (como determinado por análise de HPLC). À mistura de reação foi, em seguida, adicionado ácido clorídrico a 1 N (10 ml) e acetato de etilo (30 ml) . As camadas foram agitadas em conjunto, deixadas assentar e depois separadas. A fase orgânica foi lavada com cloreto de sódio aquoso saturado (10 ml) e, em seguida, foi seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada para proporcionar o produto bruto (3,12 g). O óleo bruto foi purificado por cromatografia rápida sobre sílica gel, eluindo com um gradiente de 0 a 5% de acetato de etilo em hexanos para dar 1,98 g de produto como um óleo límpido (78% de rendimento). 1H-RMN (400 MHz, dimetilsulf óxido-d^) delta 7,78 (d, 1H, J = 2,5 Hz), 7,53 (dd, 1H, J = 8,5, 2,5 Hz), 7,39 (d, 1H, 8,5 Hz), 7,36 - 7,25 (m, 7H) , 6,90 (m, 2H) , 5,72 (s, 1H), 4,48 (m, 2H), 3,99 (q, 2H, 7 Hz), 1,30 (t, 3H, 7 Hz). 13C-RMN (100 MHz, dimetilsulf óxido-ch) delta 158,2, 142,0, 137,8, 131,8, 131,5, 131,2, 131,0, 130,2, 128,7, 128,3, 127, 6, 127,6, 120,5, 114,3, 77,8, 70,1, 63,0, 14, 6. 2-(Aliloxi (4-etoxifenil)metil)-4-bromo-l-clorobenzeno.

Num balão de reação adequado foi carregado (5-bromo-2-clorofenil)(4-etoxifenil)metanol (2,93 mmol, 1,00 g) e tetrahidrofurano (122,89 mmol, 10,00 ml, 8,86 g) para dar

uma solução límpida. Hidreto de sódio (8,14 mmol; 325,61 mg) foi, em seguida, adicionado em pequenas porções para minimizar a taxa de evolução de gás de hidrogénio. A reação foi agitada durante aproximadamente 30 minutos à temperatura ambiente, e, em seguida, brometo de alilo (8,55 mmol; 0,740 ml; 1,03 g) foi adicionado lentamente. A reação foi deixada a agitar à temperatura ambiente até à conclusão (como determinado por análise de GCMS). À mistura de reação foi, em seguida, adicionado ácido clorídrico a 1 N (10 ml) e acetato de etilo (20 ml) . As camadas foram agitadas em conjunto, deixadas assentar e depois separadas. A fase orgânica foi lavada com cloreto de sódio aquoso saturado (10 ml) e, em seguida, foi seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada para proporcionar o produto bruto (1,07 g) . O óleo bruto foi purificado por cromatografia rápida sobre sílica gel, eluindo com um gradiente de 0 a 5% de acetato de etilo em hexanos para dar 858 mg de produto como um óleo límpido (77% de rendimento). 1H-RMN (400 MHz, dimetilsulf óxido-d^) delta 7,75 (d, 1H, J = 2,5 Hz), 7,51 (dd, 1H, J = 8,5, 2,5 Hz), 7,38 (d, 1H, 8,5 Hz), 7,23 (m, 2H) , 6,88 (m, 2H) , 5,92 (m, 1H) , 5,65 (s, 1H) , 5,26 (m, 1H) , 5,18 (m, 1H) , 4,01-3,93 (m, 4H) , 1,30 (t, 3H, 7 Hz). 13C-RMN (100 MHz, dimetilsulf óxido-d^) delta 158,6, 142,5, 135,1, 132,2,131,9, 131,6, 131,3, 130,4, 129,1, 120,8, 117,3, 114,7, 77,9, 69,4, 63,4, 15,0. ((5-Bromo-2-clorofenil) (4-etoxifenil)metoxi) (tert-butil)dimetilsilano.

Num balão de reação adequado foi carregado (5-bromo-2-clorofenil)(4-etoxifenil)metanol (2,93 mmol, 1,00 g) e tetrahidrofurano (122,89 mmol, 10,00 ml, 8,86 g) para dar

uma solução límpida. Trietilamina (3,81 mmol; 0,530 ml; 385,06 mg) foi, em seguida, adicionada através de seringa, seguido por trifluorometanossulfonato de tert-butil-dimetilsililo (3,81 mmol; 0,875 ml; 1,01 g) à temperatura ambiente. A reação foi deixada a agitar à temperatura ambiente até à conclusão (como determinado por análise de GCMS). À mistura de reação foi, em seguida, adicionada água desionizada (10 ml) e acetato de etilo (20 ml) . As camadas foram agitadas em conjunto, deixadas assentar e depois separadas. A fase orgânica foi lavada com cloreto de sódio aquoso saturado (10 ml) e, em seguida, foi seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada para proporcionar o produto bruto (1,45 g). O óleo bruto foi purificado por cromatografia rápida sobre sílica gel, eluindo com um gradiente de 0 a 5% de acetato de etilo em hexanos para dar 1,00 g de produto como um óleo límpido (75% de rendimento). 1H-RMN (400 MHz, dimetilsulf óxido-d^) delta 7,81 (d, 1H, J = 2,5 Hz), 7,46 (dd, 1H, J = 8,5, 2,5 Hz), 7,34 (d, 1H, 8,3 Hz), 7,24 (m, 2H) , 6,85 (m, 2H) , 6,00 (s, 1H) , 3,95 (q, 2H, 7 Hz), 1,28 (t, 3H, 7 Hz), 0,85 (s, 9H) , -0,02 (s, 3H), -0,06 (s, 3H). 13C-RMN (100 MHz, dimetilsulf óxido-d^) delta 157,8, 144,5, 134,0, 131,5, 131,2, 130,3, 129,7, 127,6, 120,3, 114,1, 71,7, 62,9, 25,5, 17,8, 14,6, -5,0, -5,2.

Exemplo 1 (lS,2S,3S,4R,5S)-5-[4-Cloro-3-(4-hidroxi-benzil)-fenil]-9-hidroximetil-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]octano-2,3,4-triol

A uma solução de (2S, 3R, 4S,5S)-2-[4-cloro-3-(4-hidroxi-benzil)-fenil]-6,6-bis-hidroximetil-2-metoxi-tetrahidropiran-3,4,5-triol (580 mg, 1,32 mmol) numa mistura de diclorometano (5 ml) e 2-metil-tetrahidrofurano (5 ml) foi adicionado ácido tosílico Silicycle® derivado de sílica gel (40-63 micrómetros, 0,68 mmol/g) sílica gel ligada a ácido toluenossulfónico (1 g), e a mistura de

reação foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante a noite (-16 horas) . A mistura foi filtrada através de um tampão de Celite® e o tampão enxaguado com diclorometano:2-metil-tetrahidrofurano (40 ml; 1:1 de volume). O material bruto foi purificado por HPLC preparativa numa coluna de 150 x 21,2 mm, 5 milímetros Phenomenex Gemini® NX, eluindo com uma taxa de fluxo de 28 ml/minuto; fases móveis A: água com 1% de modificador de hidróxido de amónio e B: metanol com 1% modificador de hidróxido de amónio. O produto foi eluído utilizando um gradiente de 5% de metanol com 1% de modificador de hidróxido de amónio durante 1,5 minutos e aumentou num gradiente linear até 100% de metanol com 1% de modificador de hidróxido de amónio ao longo de 8,5 minutos para dar o produto (375 mg; 69,7% de rendimento, tempo de retenção =9,8 minutos). LCMS 407 (M-H+, modo negativo). 1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) delta ppm 3,56 (d, J = 7,8 Hz, 1H) , 3,61 (d, J = 7,3 Hz, 1H) , 3,66 (t, J = 8,2 Hz, 1H) , 3,69 (d, J = 12,4 Hz, 1H) , 3,79 (d, J = 8,3 Hz, 1H) , 3,85 (d, J = 12,4 Hz, 1H) , 4,01 (s, 2H) , 4,16 (d, J = 7,3 Hz, 1H) , 6,69 (d, J = 8,3 Hz, 2H) , 7,02 (d, J = 8,3 Hz, 2H) , 7,34-7,37 (m, 1H), 7,37-7,41 (m, 1H) , 7,45 (d, J = 1,5 Hz, 1H) .

Exemplo 2 Éster de (IR,2S,3S,4R,5S)-3,4-diacetoxi-l-acetoximetil-5-[4-cloro-3-(4-etoxi-benzil)-fenil]-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]oct-2-ilo de ácido acético

A uma solução de (IS,2S,3S,4R,5S)-5-[4-cloro-3-(4-etoxi-benzil)-fenil]-l-hidroximetil-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]octano-2,3,4-triol (IA, 1,22 g, 2,792 mmol) em tetrahidrofurano (10 ml) arrefecida até 0 graus Celsius foram adicionados N,N-diisopropiletilamina (3,5 ml, 20 mmol) e 4-dimetilaminopiridina (0,25 g, 2,0 mmol). Anidrido acético (1,58 ml, 16,8 mmol) foi lentamente adicionado de modo que a temperatura não excedeu os 10 graus Celsius e a solução resultante foi aquecida até à temperatura ambiente e agitada durante a noite (~ 16 horas). Acetato de etilo e uma solução aquosa de ácido clorídrico a 1 N foram adicionados, a fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída três vezes com acetato de etilo. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de magnésio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia rápida sobre sílica gel usando a unidade de cromatografia automatizada Biotage (coluna de sílica gel de 50 g) e eluindo com um gradiente de 0 a 100% de acetato de etilo em heptano. O produto foi recristalizado usando metanol quente (30 ml) e deixando o material arrefecer formando pequenos fragmentos brancos. O sólido branco foi filtrado e lavado com 50 ml de metanol frio produzindo 590 mg (35% de rendimento) de um sólido branco cristalino (p.f. a 134,3 graus Celsius) . (LCMS) 622,4 (M+NH4+; modo

positivo). RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) delta ppm 1,39 (t, J = 7,03 Hz, 3H) , 1,69 (s, 3H) , 1,98 (s, 3H) , 2,04 (s, 3H) , 2,09 (s, 3H) , 3,70 (dd, J = 8,10, 1,46 Hz, 1H) , 3,93- 4,02 (m, 2H) , 3,99 (d, J = 7,03 Hz, 2H) , 4,08 (d, J = 15,20

Hz, 1H), 4,42 (d, J = 8,20 Hz, 1H), 4,53 (d, J = 12,50 Hz, 1H), 5,28 (d, J = 8,01 Hz, 1H), 5,39 (t, J = 8,30 Hz, 1H), 5,48 (dd, J = 8,6, 1 Hz, 1H) , 6,80 (d, J = 8,79 Hz, 2H) , 7,06 (d, J = 8,79 Hz, 2H), 7,30-7,37 (m, 3H). O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. Ao sólido foi adicionado metanol (~ 15 ml) e a mistura foi aquecida até que o sólido se dissolveu. A solução foi deixada a arrefecer e a esta solução foram adicionados cristais semente. Os fragmentos cristalinos brancos resultantes foram filtrados e recolhidos produzindo 577 mg adicionais (34% de rendimento) de um sólido branco cristalino.

Exemplo 3 Éster_(IR, 2S, 3S, 4R, 5S) - 5- [4-cloro-3 - (4-etoxi-benzil) - fenil]-2,3,4-trihidroxi-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]oct-l-ilmetilico de ácido acético

A uma solução vigorosamente agitada de (IS, 2S, 3S, 4R, 5S)-5-[4-cloro-3-(4-etoxi-benzil)-fenil]-1-hidroximetil-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]octano-2,3,4-triol (IA, 0,481 g, 1,1 mmol) em colidina (2,5 ml) arrefecida até -35 graus Celsius foi adicionado gota a gota ao longo de 10 minutos cloreto de acetilo (0,149 ml, 2,1 mmol). Após 1 hora, metanol (0,5 ml) foi adicionado e a mistura de reação foi deixada aquecer até à temperatura ambiente. A mistura bruta foi concentrada sob pressão reduzida e co-destilada

três vezes com tolueno. 0 material bruto foi purificado por cromatografia rápida sobre silica gel usando a unidade de cromatografia automatizada Biotage (coluna de silica gel de 50 g) e eluindo com um gradiente de 0 a 15% de metanol em diclorometano. 456 mg (87% de rendimento) de produto obtidos como um sólido branco. (LCMS) 523, 3 (M+HCOO': modo negativo). RMN (400 MHz, METANOL-d4) delta ppm 1,35 (t, J = 6,93 Hz, 3H) , 2,05 (s, 3H) , 3,52 (d, J = 7,81 Hz, 1H) , 3,59 (dd, J = 7,71, 1,46 Hz, 1H) , 3,63 (t, J = 8,10 Hz, 1H) , 3,76 (dd, J = 8,30, 1,27 Hz, 1H) , 3,98 (q, J= 6,96 Hz, 2H) , 4,03 (s, 2H) , 4,17 (d, J = 12,7 Hz, 1H) , 4,19 (d, J = 8 Hz, 1H) , 4,41 (d, J = 12,30 Hz, 1H) , 6,80 (d, J= 8,79 Hz, 2H) , 7,08 (d, J= 8,79 Hz, 2H) , 7,34-7,36 (m, 2H) , 7,40 (s, 1H) .

Exemplo 4 Éster etílico de éster (IR,2S,3S,4R,5S)-5-[4-cloro-3-(4-etoxi-benzil)-fenil]-2,3,4-trihidroxi-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]oct-l-ilmetílico de ácido carbónico

A uma solução vigorosamente agitada de (IS,2S,3S,4R,5S)-5-[4-cloro-3-(4-etoxi-benzil)-fenil]-1-hidroximetil-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]octano-2,3,4-triol (IA, 288 mg, 0, 659 itimol) em colidina (6,6 ml) arrefecida até -35 graus Celsius foi adicionado gota a gota ao longo de 10 minutos etilcloroformato (0,112 ml, 1,19 mmol). A mistura de reação foi deixada a agitar durante a noite à temperatura ambiente. A reação foi extinta com uma solução aquosa de ácido cítrico saturado e extraída com acetato de etilo (2 vezes). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de magnésio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O material

bruto foi purificado por cromatografia rápida sobre silica gel usando a unidade de cromatografia automatizada Biotage (coluna de silica gel de 50 g) e eluindo com um gradiente de 0 a 20% de metanol em diclorometano. 134 mg (40% de rendimento) de produto desejado como um sólido branco. (LCMS) 526 (M+NH4+: modo positivo). ΧΗ RMN(400 MHz,

METANOL-cb) delta ppm 1,25 (t, J = 7,1 Hz, 3H) , 1,35 (t, J = 7,0 Hz, 3H) , 3,52 (d, J = 7,8 Hz, 1H) , 3,59 (d, J = 7,8

Hz, 1H) , 3,61-3,66 (m, 1H) , 3,76 (d, J = 8,2 Hz, 1H) , 3,98 (g, J = 7,0 Hz, 2H) , 4,03 (s, 2H) , 4,15 (g, 2H) , 4,19 (d, J = 7,8 Hz, 1H) , 4,23 (d, J = 11,9 Hz, 1H) , 4,46 (d, J = 12,1

Hz, 1H) , 6,79 (d, J = 8,6 Hz, 2H) , 7,08 (d, J = 8,4 Hz, 2H) , 7,35 (s, 2H) , 7,42 (s, 1H) .

Exemplo 5 (lS,2S,3S,4R,5S)-5-[ 4-Cloro-3- (4- [D 5 ]etoxi-benzil) -fenil J -1-hidroximetil-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]octano-2,3,4-triol

A uma solução de (IS,2S,3S,4R,5S)-5-[4-cloro-3-(4-hidroxi-benzil)-fenil]-l-hidroximetil-6, 8-dioxa-biciclo[3.2.1]octano-2,3,4-triol (54 mg, 0,13 mmol) em acetonitrilo (0,5 ml) foi adicionado carbonato de potássio (55 mg, 0,40 mmol) seguido pela adição de iodoetano-d5 (0,016 ml, 0,198 mmol). A mistura de reação foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 4 horas e foi em seguida aguecida até 50 graus Celsius durante 16 horas. A reação foi extinta com água (20 ml) e a mistura resultante foi extraida 3 vezes com acetato de etilo (20 ml) . As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob

pressão reduzida. 0 material bruto foi purificado por cromatografia rápida usando a unidade de cromatografia automatizada ISCO (coluna de silica gel de 4 g) eluindo com um gradiente de 0 a 23% de metanol em diclorometano. 28,3 mg (48% de rendimento) do produto desejado foram obtidos como um sólido branco. LCMS 486 (M+HCCq-, modo negativo). ΧΗ RMN (400 MHz, METANOL-d4) delta ppm 3,52 (d, J = 7,8 Hz, 1H) , 3,57 (dd, J = 7,4, 1,0 Hz, 1H) , 3,62 (t, J = 8,2 Hz, 1H) , 3,66 (d, J = 12,3 Hz, 1H) , 3,75 (d, J = 8,2 Hz, 1H) , 3,81 (d, J = 12,5 Hz, 1H), 4,01 (s, 2H), 4,12 (d, J = 7,4

Hz, 1H) , 6,77 (d, J = 8,8 Hz, 2H) , 7,06 (d, J = 8,6 Hz, 2H) , 7,31-7,34 (m, 1H) , 7,34-7,39 (m, 1H) , 7,43 (d, J = 1,8

Hz, 1H).

Exemplo 6 Éster 2-{4 - [2-cloro-5- ((IS,2S,3S,4R,5S)-2,3,4-trihidroxi-l-hidroximetil-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]oct-5-il)-benzi 1J-fenoxi}-etílico

A uma solução de (IS, 2S, 3S,4R,5S)-5-[4-cloro-3-(4-hidroxi-benzil)-fenil]-l-hidroximetil-6, 8-dioxa-biciclo[3.2.1]octano-2,3,4-triol (38 mg, 0,093 mmol) em acetonitrilo (0,9 ml) foi adicionado carbonato de potássio (40 mg, 0,28 mmol) seguido pela adição de éster 2-bromo-etilico de ácido acético (0,012 ml, 0,112 mmol) e a mistura resultante foi aquecida até 50 graus Celsius durante 72 horas. A reação mostrou alguma formação do produto, mas a maioria do material de partida manteve-se. Uns 2 equivalentes adicionais de éster 2-bromo-etilico de ácido acético foram adicionados e a mistura foi aquecida a 50 graus Celsius durante uma 24 horas adicionais. Água (20 ml) e acetato de etilo foram adicionados, as duas fases separadas e a fase aguosa foi extraida 3 vezes com acetato de etilo (20 ml) . As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por cromatografia rápida sobre silica gel usando a unidade de cromatografia automatizada ISCO (coluna de silica gel de 4 g) e eluindo com um gradiente de 0 a 30% de metanol em diclorometano. 10 mg (22% de rendimento) de uma mistura a ~ 2:1 do produto desejado contaminado com algum composto não identificado foram obtidos. (LCMS 539 M+HCOO”, modo negativo). O composto foi purificado por HPLC numa coluna Phenomenex Lux Celulose-2 5u eluindo com uma taxa de fluxo de 28 ml/min e fases móveis A: heptano e B: etanol. O produto foi eluido utilizando um gradiente 5% de etanol durante 2 minutos e aumentado para 100% de etanol no tempo de 10,0 minutos para dar 1,1 mg do produto desejado. (LCMS modo positivo M+Na+ = 517) RMN (500 MHz, METANOL-d4) delta ppm 2,07 (s, 3H) , 3,56 (d, J = 7,8 Hz, 1H) , 3,58-3, 63 (m, 1 H) , 3, 64-3,72 (m, 2H) , 3,79 (d, 1H) , 3,85 (d, J = 12,4 Hz, 1H) , 4,06 (s, 2H) , 4,13-4,19 (m, 3H) , 4,36-4,41 (m, 2H) , 6, 82-6, 88 (m, 2H) , 7,09-7,15 (m, 2H), 7,35-7,43 (m, 2H) , 7,47 (d, J = 2,2 Hz, 1H) . LCMS (ES+) : 495,4 (M+H+) .

Exemplo 7 (IS,2S,3S,4R,5S)-5-{4-cloro-3-[4-(2-hidroxi-etoxi)-benzi 1]-fértil} —1 -hidroximetil-6, 8-dioxa-biciclo [3.2.1] octano-2,3,4-triol

A uma solução de (IS,2S,3S,4R,5S)-5-[4-cloro-3-(4-hidroxi-benzil)-fenil]-l-hidroximetil-6, 8-dioxa-biciclo[3.2.1]octano-2,3,4-triol (14 mg, 0,034 mmol) em acetonitrilo (0,5 ml) foi adicionado carbonato de potássio (14 mg, 0,1 mmol) seguido pela adição de (2-bromo-etoximetil)-benzeno (0,010 ml, 0,063 mmol) e a mistura de reação foi aquecida até 50 graus Celsius durante 24 horas. A reação mostrou alguma formação do produto, mas a maioria do material de partida manteve-se. Uns 3 equivalentes adicionais de carbonato de potássio foram adicionados, a temperatura foi aumentada para 83 graus Celsius e a mistura de reação agitada durante umas 5 horas adicionais. A mistura de reação foi arrefecida até à temperatura ambiente, água (20 ml) e acetato de etilo foram adicionados, a fase orgânica separada e a fase aquosa foi extraída 3 vezes com acetato de etilo (20 ml) . As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por cromatografia rápida sobre sílica gel usando a unidade de cromatografia automatizada ISCO (coluna de sílica gel de 4 g) e eluindo com um gradiente de 0 a 23% de metanol em diclorometano. 4 mg do composto desejado (IS,2S,3S,4R,5S)- 5 - (3 - (4 - (2-(benziloxi)etoxi)benzil)-4-clorofenil)-1-(hidroximetil)-6,8-dioxabiciclo[3.2.1]octano-2,3,4-triol

foram obtidos. LCMS 587 (M+HCO2 , modo negativo) . XH RMN (500 MHz, METANOL-cb) delta ppm 3,56 (d, J = 8,1 Hz, 1H) , 3,60 (d, J = 7,6 Hz, 1H) , 3, 63-3, 67 (m, 1H) , 3,69 (d, J = 12,7 Hz, 2H) , 3,79 (d, J = 8,3 Hz, 1H) , 3,82 (d, J = 4,6 Hz, 1H) , 3, 83-3, 87 (m, 1H) , 4,05 (s, 2H) , 4,11-4,14 (m, 2H) , 4,16 (d, J = 7,3 Hz, 1H) , 4,62 (s, 2H) , 6,86 (d, J = 8,5 Hz, 2H) , 7,12 (d, J = 8,5 Hz, 2H) , 7,29 (d, J = 7,1 Hz, 1H) , 7,31-7,43 (m, 6H), 7,47 (s, 1H) .

A uma solução de (IS,2S,3S,4R,5S)-5-(3-(4-(2-(benziloxi)etoxi)benzil)-4-clorofenil)-1-(hidroximetil)-6, 8-dioxabiciclo[3.2.1]octano-2,3,4-triol intermediário (4 mg, 0,007 mmol) numa mistura de etanol e tetrahidrofurano (1 ml, 4 a 1 em volume) foi sucessivamente adicionado ácido fórmico (12 microlitros, 0,30 mmol) e negro de paládio (7,5 mg, 0,07 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas, o paládio foi filtrado através de uma almofada de Celite®, o filtrado foi evaporado e o residuo foi seco sob alto vácuo para dar 2,6 mg (80% de rendimento) do produto desejado. LCMS 453,5 (M+H+; modo positivo) . ΧΗ RMN (500 MHz, METANOL-d4) delta ppm 3,56 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 3,58-3,72 (m, 4H), 3,79 (d, J = 7,8 Hz, 1H) , 3, 82-3, 88 (m, 2H) , 4,02 (t, J = 4,9 Hz, 2H) , 4,05 (s, 2H) , 4,16 (d, J = 7,6 Hz, 1H) , 6, 84-6, 89 (m, 2H) , 7,11 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,35-7,42 (m, 2H), 7,47 (d, J = 2,0 Hz, 1H).

Exemplo 8 (1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-Cloro-3-(4-etoxi-benzil)-fenil]-1-fluorometil-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]octano-2,3,4-triol.

A uma solução de {(IS,2S,3S,4R,5S)-2,3,4-tris-benziloxi-5-[4-cloro-3-(4-etoxi-benzil)-fenil]-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]oct-l-il}-metanol (616 mg, 0,871 mmol) em diclorometano (3 ml) a 0 graus Celsius foi adicionado trifluoreto de dietilaminoenxofre (170 microlitros, 1,3 mmol) e a mistura resultante foi lentamente aquecida até à temperatura ambiente e agitada a esta temperatura durante 16 horas. A mistura foi diluída com diclorometano e lavada com uma solução saturada de bicarbonato de sódio aquoso, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida sobre sílica gel utilizando um cartucho de sílica RediSep de 40 g (eluindo com um gradiente de 0 a 20% de acetato de etilo em heptano) para dar (IS,2S,3S,4R,5S)-2,3,4-trisbenziloxi-5-[4-cloro-3-(4-etoxi-benzil)-fenil]-1-fluorometil-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]octano como um óleo incolor (40 mg, 7% de rendimento). (LCMS) 753,4 (M+HCOO”: modo negativo). A uma suspensão de (IS, 2S, 3S, 4R,5S)-2,3,4-tris-benziloxi-5-[4-cloro-3-(4-etoxi-benzil)-fenil]-1-fluorometil-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]octano (40 mg, 0,06 mmol) e negro de paládio (40 mg, 0,38 mmol, elevada área de superfície de Aldrich®) em etanol (0,5 ml) e tetrahidrofurano (0,1 ml) foi adicionado ácido fórmico (0,085 ml, 2,24 mmol) e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 1,5 horas. Acetato de etilo foi adicionado e a mistura foi filtrada através de uma almofada curta de Celite® e concentrada a vácuo. O material bruto foi purificado por cromatografia rápida sobre sílica gel usando um cartucho de sílica RediSep de 4 g (eluindo com um gradiente de 50 a 100% de acetato de etilo em heptano) para dar o composto do título como um sólido (15,6 mg, 63% de rendimento) . (LCMS) 483, 0 (M+HCOO”: modo negativo) . XH RMN (500 MHz, METANOL-cU) delta ppm 7,44 (s, 1H) , 7,38 (s, 1H) , 7,37 (s, 1H) , 7,09-7,12 (m, 2H) , 6,80-

6,83 (m, 2H) , 4,71 (dd, J = 46, 59, 10,49 Hz, 1H) , 4,50 (dd, J= 48,30, 10,73 Hz, 1H) , 4,19 (dd, J = 7,56, 0, 98 Hz, 1H) , 4,04 (d, J = 0,98 Hz, 2H) , 4,00 (q, J = 6,99 Hz, 2H) , 3,80 (dd, J = 8,29, 0, 98 Hz, 1H) , 3,67 (t, J = 8,17 Hz, 1H) , 3,54-3,57 (m, 2H) , 1,37 (t, 3H) .

Exemplo 9 (IS,2S,3S,4R,5S)-5-{4-Cloro-3-[(4-etoxi-fenil)-hidroxi-metilJ-fenil}-l-hidroximetil-6,8-dioxa-biciclo [3 . 2 . 1 ]octano-2,3,4-triol

A uma solução de éster de (IR,2S,3S,4R,5S)-3,4-diacetoxi-l-acetoximetil-5-[4-cloro-3-(4-etoxi-benzoil)-fenil]-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]oct-2-il de ácido acético (veja-se Exemplo 11 para a preparação; 85 mg, 0,14 mmol) em metanol (3 ml) foi adicionado boroidreto de sódio (25 mg, 0,66 mmol) à temperatura ambiente. Após uma hora, a reação foi extinta por meio da adição de água (20 ml) e a mistura resultante foi concentrada sob pressão reduzida. A camada aquosa resultante foi extraida três vezes com acetato de etilo (15 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. A uma solução deste material bruto em metanol (5 ml) foi adicionado metóxido de sódio em metanol (25% em peso) até ser obtido um pH de 12 e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente. Após 16 horas, a mistura de reação foi neutralizada pela adição de resina de troca catiónica Dowex Monospfere 650C (H) (a resina foi lavada com metanol 3 vezes antes de se usar) até que o pH da solução foi < 7. A mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 material resultante foi precipitado a partir de acetato de etilo e heptano. 0 sólido resultante foi lavado com heptano 2 vezes e seo sob pressão reduzida para produzir o produto desejado (58,9 mg, 93% de rendimento) como um sólido branco. MS (LCMS) 497,3 (M+HCOO”, modo negativo) 7H RMN (400 MHz, METANOL-d4) delta ppm 1,33 (t, J = 6,9 Hz, 6H) , 3,56 (d, J= 8,0 Hz, 1H) , 3,59-3, 64 (m, 3H) , 3, 64-3, 69 (m, 2H) , 3,68 (d, J= 12,5 Hz, 2H) , 3,78 (d, J = 8,2 Hz, 2H) , 3,84 (d, J = 12,5 Hz, 2H) , 3,98 (q, J = 7,0

Hz, 4H) , 4,15 (d, J = Hz, 1H) , 4,16 (d, J = Hz, 1H) , 6,04 (s, 1H) , 6,05 (s, 1H) , 6,80 (d, J= 8,4 Hz, 4H) , 7,21 (d, J = 8,6 Hz, 2H) , 7,22 (d, J = 8,6 Hz, 2H) , 7,29 (d, J = 8,2 Hz, 2H) , 7,40-7,42 (m, 2H) , 7,91 (d, J = 2,0 Hz, 1H) , 7,93 (d, J= 2,0 Hz, 1H) . Método analítico: Coluna: Chiralpak AD-H (4,6 mm x 25 cm), Taxa de fluxo: 2,5 ml/minuto, fase móvel: 65/35 CCg/propanol; deteção UV: 210 nm. Pico 1 (Rt = 2,80 minutos, 45,5% área), Pico 2 (Rt = 5,51 minutos, 54,5% área).

Como representado no Esquema 6, o Exemplo 9, também poderia ser preparado de acordo com os procedimentos descritos nas etapas 1 a 6 do Esquema 2, utilizando o reagente organometálico apropriado (IX-1) em que M é Li ou Mg, X' é Cl, Br ou I e p é 0-2 (R7 é OPMB, OBn, OTBS, OTMS, OTES, OTIPS, OAlilo, OBOM, OPMBM, ODMBM, OMOM, OMEM, OMTM, OSEM, OM(X')P ou qualquer precursor adequadamente protegido para o composto reivindicado do exemplo 9).

Dependendo de R8 (R8 é OPMB, OBn, OTBS, OTMS, OTES, OTIPS, OAlilo, OBOM, OPMBM, ODMBM, OMOM, OMEM, OMTM, OSEM, OH ou qualquer precursor adequadamente protegido para o composto reivindicado do exemplo 9), os compostos de estrutura geral (IX-la) obtidos a partir da via de síntese exemplificada no Esquema 2 (etapas 1 a 6) poderiam ser facilmente convertidos no Exemplo 9 a partir da presente invenção utilizando sequências de manipulação de grupos de proteção bem conhecidas, conhecidas por aqueles peritos na especialidade. Para uma descrição geral de grupos de proteção e suas utilizações, veja-se T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley &amp; Sons, Nova York, 1991. No caso de que o composto (IX-la) seja submetido a condições de hidrogenólise (tais condições poderiam ser, mas não estão limitadas a: negro de Pd na presença de ácido fórmico num solvente alcoólico, tal como etanol, com a presença opcional de um co-solvente, tal como tetrahidrofurano, a uma temperatura variando de cerca de 0 a cerca de 50 graus Celsius; condições alternativas poderiam envolver a utilização de Pd-C ou Pd(OH)2 como catalisadores sob uma atmosfera de gás de hidrogénio num solvente alcoólico, tal como etanol, com a presença opcional de um co-solvente, tal como tetrahidrofurano, a uma temperatura variando de cerca de 0 a cerca de 50 graus Celsius e com a presença opcional de um ácido como ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido clorídrico ou ácido fórmico), em seguida, o composto IA poderia ser obtido em vez do Exemplo 9. Alternativamente, o composto IA poderia ser obtido por tratamento de uma solução de (IX-la) num solvente , tal como diclorometano, com um derivado de hidreto de silício, tal como trietilsilano, na presença de um ácido, tal como ácido trifluoroacético, ácido fórmico ou dietileterato de trifluoreto de boro, a uma temperatura variando de cerca de -30 graus e cerca de 23 graus Celsius (para um protocolo geral, veja-se o procedimento descrito no exemplo VII da

Publicação PCT N.° WO 06/089872). O composto IA assim obtido poderia ser convertido no Exemplo 9 através do Exemplo 2 na sequência dos procedimentos descritos na secção experimental.

Pode também ser vantajoso proteger os grupos hidroxilo no motivo dioxa-biciclo[3.2.1]octano. Alguém perito na especialidade reconheceria que se poderia aceder ao composto (IX-lb) a partir de (IX-la) por proteção seletiva do grupo hidroxilo primário com um grupo de proteção adequado (Pg3) , seguido por proteção dos restantes grupos hidroxilo secundários com grupos de proteção (Pg4) adequados, seguindo procedimentos semelhantes para os grupos de proteção particulares escolhidos, conforme descrito nas etapas 1 e 2 do Esquema 3. Para uma descrição geral de grupos de proteção de hidroxilo e suas utilizações em síntese química, veja-se T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley &amp; Sons, Nova York, 1991. No caso em que Pg3 = Pg4 a proteção poderia ser realizada em uma etapa. A manipulação do grupo funcional, como descrito para (IX-la) aplicada a (IX-lb), seguido por remoção dos grupos de proteção restantes (Pg3) e (Pg4) utilizando a química apropriada para os grupos de proteção particulares, poderia levar a IA. O reagente organometálico (IX-1) poderia ser sintetizado a partir do halogeneto de arilo correspondente (IX-2) ou (IX-3) usando protocolos de troca de halogéneo-metal conhecidos por aqueles peritos na especialidade (veja-se a secção experimental, para um exemplo de troca de halogénio-metal, seguido pela adição nucleofílica a um derivado de benzaldeído, veja-se o exemplo VI da Publicação PCT N.° WO 06/089872) . O halogeneto de arilo de partida pode ser sintetizado como se segue (veja-se Esquema 7) : adição nucleofílica (para um exemplo de adição nucleofílica de um reagente organometálico a um derivado de benzaldeído veja-se: exemplo VI da Publicação PCT N.° WO 06/089872) de

brometo de 4-etoxifenilmagnésio (Rieke Metals, Inc) ou 4-etoxifenil-lítio (prontamente disponível por troca lítio-halogénio partinde de l-etoxi-4-iodobenzeno (TCI America) ou l-bromo-4-etoxibenzeno (TCI America)) a 5-bromo-2-clorobenzaldeído (Apollo Scientific Ltd.) poderia levar a (5-bromo-2-clorofenil)(4-etoxifenil)metanol, que na sequência da proteção do grupo hidroxilo resultante (seguindo protocolos conhecidos por aqueles peritos na especialidade; veja-se a secção de exemplo para mais detalhes, bem como T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley &amp; Sons, Nova York, 1991) daria halogeneto de arilo (IX-2). De uma forma semelhante, o halogeneto de arilo (IX-3) pode ser produzido a partir de (2-cloro-5-iodofenil) (4-etoxifenil)metanol partindo de 2-cloro-5-iodobenzaldeído (Aldlab Chemicals, LLC) e brometo de 4-etoxifenilmagnésio ou 4-etoxifenil-lítio.

Esquema 7

Alternativamente, o Exemplo 9 poderia ser sintetizado através de (IX-la) utilizando o procedimento reportado por Mascitti, V. et al., Organic Letters 12, 2940, (2010) usando o intermediário de 1,3-ditiano correspondente (IX-4) (onde R8 é OPMB, OBn, OTBS, OTMS, OTES, OTIPS, OAlilo, OBOM, OPMBM, ODMBM, OMOM, OMEM, OMTM, OSEM, OH ou qualquer precursor adequadamente protegido para o exemplo 9 reivindicado):

Como representado no Esquema 8, poderia aceder-se ao intermediário (IX-4) a partir de compostos (IX-2) ou (IX-3) por troca halogénio-metal seguido por captura com N,N-dimetilformamida ou N-formilmorfolina sob condições clássicas (veja-se, por exemplo, o procedimento para a sintese de 3- (tert-butil-dimetil-silaniloximetil)-4-cloro-benzaldeido na Publicação PCT N.° WO 06/129237) para produzir o correspondente aldeido (IX-5). O aldeido (IX-5) poderia, então, ser convertido no derivado de 1,3-ditiano correspondente (IX-4) sob condições conhecidas por aqueles peritos na especialidade (veja-se, por exemplo, a formação do composto 1 em Sarnas, B. et al. Acta Crystallographica E66, ol386, (2010) e o procedimento geral em Ouyang, Y. et al. Synthesis, 3801 (2006)).

Esquema 8

Os compostos de estrutura geral (Sl-A) no Esquema 1 também poderiam ser preparados utilizando o procedimento reportado por Mascitti, V. et al., Organic Letters 12, 2940, (2010). Ao material de partida 1,3-ditiano desejado pode aceder-se de uma forma semelhante a (IX-4) partindo do halogeneto de arilo correspondente (se R5 for OTBS, veja-se o documento US 2007/0054867 para a preparação de {4—[(5— bromo-2-cloro-fenil)-metil]-fenoxi}-tert-butil- dimetilsilano). Dependendo de R5, os compostos assim obtidos poderiam, então, ser facilmente funcionalizados noutros compostos de estrutura (A) da presente invenção,

utilizando sequências de manipulação de grupos de proteção e funcionais bem conhecidas, conhecidos por aqueles peritos na especialidade. Consulte a secção de exemplos para mais detalhes.

Quando se utiliza o reagente organometálico apropriado (X-l) em que M é Li ou Mg, X' é Cl, Br ou I e o p é 0-2 (R9 é Η, OPMB, OTBS, OTES, OTIPS, OAlilo, OPh, OBOM, OPMBM, ODMBM, OMOM, OMEM, OMTM, OSEM), os procedimentos descritos nas etapas de 1 a 6 do Esquema 2 permitem o acesso a intermediários de estrutura geral (X-2) (Esquema 9).

Os reagentes organometálicos (X-l) são acessíveis a partir do halogeneto de arilo correspondente (X-3), onde R10 é Cl, Br ou I, utilizando protocolos gerais de troca halogénio-metal conhecidos por aqueles peritos na especialidade (veja-se, por exemplo, exemplo XII na Publicação PCT N.° WO 07/031548).

Geralmente, os halogenetos de arilo (X-3) onde R10 é Br ou I, estão quer comercialmente disponíveis (4-bromo-l-cloro-2-metilbenzeno está disponível a partir de TCI America e l-cloro-4-iodo-2-metilbenzeno está disponível a partir de Best Pharma Tech Inc.) ou podem ser preparados a partir de materiais de partida prontamente disponíveis (tais como (5-bromo-2-clorofenil)metanol disponível a partir de Sigma-Aldrich ou (2-cloro-5-iodofenil)metanol que pode ser preparado de acordo com o exemplo 27 da Publicação PCT N.° WO 08/077009) por proteção adequada do grupo hidroxilo seguindo protocolos experimentais conhecidos por aqueles peritos na especialidade. Para uma descrição geral de grupos de proteção e suas utilizações, veja-se T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley &amp; Sons, Nova York, 1991. Mais especificamente, os seguintes materiais de partida podem ser preparados utilizando os procedimentos descritos nas referências correspondentes: 4-Bromo-l-cloro-2-((metoximetoxi)metil)benzeno pode ser preparado por um processo descrito na Publicação PCT N.° WO 04/093544. 4-Bromo-l-cloro-2-(((2-metoxietoxi)metoxi)metil)benzeno pode ser preparado por um processo descrito no exemplo 12 da Patente U.S. US 5043142. (5-Bromo-2-clorobenziloxi)(tert-butil)dimetilsilano pode ser preparado por um procedimento descrito no exemplo 14 da Publicação PCT N.° WO 06/005914. (5-Bromo-2-clorobenziloxi)triisopropilsilano pode ser preparado por um procedimento descrito para produzir o composto 17 da seguinte referência: Lee, J et al. Bioorganic and Medicinal Chemistry 18, 2178 (2010) . 4-Bromo-l-cloro-2-(fenoximetil)benzeno pode ser preparado por um processo descrito no exemplo VII na Publicação PCT N.° WO 07/031548.

Seguindo as vias de síntese no Esquema 10, os compostos de estrutura geral (X-2) podem ser convertidos em intermediários que permitem o acesso a compostos reivindicados na presente invenção.

Na etapa 1 do Esquema 10, os grupos hidroxilo de (X-2) poderiam ser protegidos pelos grupos de proteção adequados (PG6) · Por exemplo, grupos benzilo (Pg6 é Bn) poderiam ser introduzidos por tratamento do intermediário (X-2) com o brometo de benzilo ou cloreto de benzilo na presença de hidreto de sódio, hidreto de potássio, tert-butóxido de potássio num solvente tal como tetrahidrofurano, 1,2-dimetoxietano ou N,N-dimetilformamida, a uma temperatura variando de cerca de 0 graus Celsius a cerca de 80 graus Celsius. Condições envolvendo benziltricloroacetimidato na presença de uma quantidade catalítica de ácido (por exemplo, ácido trifluorometanossulfónico, ácido metanossulfónico, ou ácido canforsulfónico) num solvente tal como diclorometano, heptano ou hexanos, também poderiam ser usadas. Grupos acetilo ou benzoil (Pg6 = Ac ou Bz) podem ser introduzidos por tratamento do intermediário (X-2) com cloreto de acetilo, brometo de acetilo ou anidrido acético ou cloreto de benzoil ou anidrido benzóico, na presença de uma base tal como trietilamina, N,N- diisopropiletilamina ou 4-(dimetilamino)piridina, num solvente tal como tetrahidrofurano, 1,2-dimetoxietano ou diclorometano, a uma temperatura variando de cerca de 0 graus Celsius a cerca de 80 graus Celsius.

Na etapa 2 do Esquema 10, quando R9 é H, a bromação do composto (X-2a) com N-bromossuccinimida e dibenzoilperóxido em CCI4 sob refluxo (veja-se exemplo 2 do documento EP 0151529 por um procedimento experimental representativo) poderia ser utilizada para se obter (X-4). Se R9 é OPh, o tratamento de uma solução de (X-2a) em ácido acético na presença de HBr a uma temperatura variando de cerca de 0 graus e cerca de 80 graus Celsius (preferencialmente cerca da temperatura ambiente) poderia levar a (X-4) (para um procedimento experimental representativo veja-se exemplo XIV da Publicação PCT N.° WO 07/031548).

Na etapa 3 do Esquema 10, quando R9 é OPMB, OTBS, OTES, OTIPS, OAlilo, OBOM, OPMBM, ODMBM, OMOM, OMEM, OMTM, ou OSEM, o grupo de proteção mascarando a funcionalidade do álcool benzílico no composto (X-2a) pode ser removido usando a química apropriada para o grupo de proteção particular, seguindo procedimentos conhecidos por aqueles peritos na especialidade, para produzir o intermediário (X-5) . Para uma descrição geral de grupos de proteção e suas utilizações, veja-se T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley &amp; Sons, Nova York, 1991.

Na etapa 4 do esquema 10, o intermediário (X-4) poderia ser produzido por tratamento de uma solução do intermediário (X-5) num solvente, tal como tetrahidrofurano ou 2-metiltetrahidrofurano, na presença de trifenilfosfina e N-bromosuccinimida (ou tetrabrometo de carbono), a uma temperatura que varia de cerca de 0 graus Celsius a cerca de 40 graus Celsius (para um procedimento experimental representativo veja-se o exemplo II da Publicação PCT N.° WO 07/031548).

Quando Pg6 não é Ac ou Bz, na etapa 5 do Esquema 10, o intermediário (X-4) poderia ser convertido no intermediário (X-5) por (1) conversão de (X-4) no acetato benzilico correspondente, sob condições conhecidas por aqueles peritos na especialidade, seguida por (2) hidrólise do grupo de proteção de acetato, sob condições conhecidas por aqueles peritos na especialidade. Para um procedimento representativo veja-se o protocolo para a formação do composto 5 a partir do 4 em Sarnas, B. et al. Acta Crystallographica E66, ol386, (2010).

Na etapa 6 do Esquema 10, o intermediário (X-6) poderia ser produzido por oxidação benzilica do intermediário (X-5). A oxidação de Swern descrita por Kanji Omura e Daniel Swern em Tetrahedron, 34, 1651 (1978) ou a oxidação de Parikh-Doering descrita em Parikh, J. et al. Journal of the American Chemical Society 89, 5505 (1967) poderiam ser usadas. Modificações deste processo conhecidas por aqueles peritos na especialidade podem também ser usadas. Por exemplo, outros oxidantes, tais como ácido 2-iodoxibenzóico estabilizado descrito por Ozanne, A. et al. em Organic Letters, 5, 2903 (2003), ou semelhantes, podem também ser usados. Também poderia aceder-se ao intermediário (X-6) através de uma oxidação de Kornblum (etapa 7 do Esquema 10) do intermediário (X-4) (Kornblum, N., et al. , Journal of The American Chemical Society, 81, 4113 (1959); para um procedimento representativo veja-se também a formação do composto 6 em Sarnas, B. et al. Acta Crystallographica E66, ol386, (2010); para um procedimento usando N-metilmorfolina-N-óxido como um reagente veja-se o exemplo VII da Publicação PCT N.° WO 08/034859). Poderia aceder-se ao composto (X-6) a partir de (X-5) seguindo procedimentos semelhantes àqueles descritos anteriormente para as etapas 1 e 2 do Esquema 4.

Na etapa 1 do Esquema 11, a ativação ou a funcionalização de derivados bromobenzilicos de estrutura

geral (X-4) poderia levar ao intermediário (X-7).

Vários métodos conhecidos por aqueles peritos na especialidade para a formação de motivos diarilmetano a partir de derivados de bromobenzilo poderiam ser utilizados (veja-se, Liégault, B. et ai. Chemical Society Reviews 37, 290, (2008)).

Na etapa 1 do Esquema 11, um acoplamento de tipo Suzuki entre o composto (X-4) e ácido 4-etoxifenilborónico (disponível a partir de Matrix Scientific ou Frontier Scientific Inc.), sob condições conhecidas por aqueles peritos na especialidade (para protocolos clássicos de acoplamentos de Suzuki, veja-se, por exemplo, o exemplo XV da Publicação PCT N.° WO 07/031548; Nobre, S. M. et ai. Tetrahedron Letters 45, 8225 (2004); Bandgar, B. P. et ai. Tetrahedron Letters 45, 6959 (2004); e a Tabela 1 e referência citados em Liégault, B. et ai. Chemical Society Reviews 37, 290, (2008)) poderia produzir o composto (X-7). (4-Etoxifenil)trifluoroborato de potássio (disponível a partir de Combi-Blocks) também poderia ser utilizado no acoplamento de tipo Suzuki com (X-4); para um procedimento geral para o acoplamento cruzado Suzuki-Miyaura usando ariltrifluoroboratos de potássio, veja-se Molander, GA et al. em Journal of Organic Chemistry 71, 9198 (2006) e a referência aqui citada. Protocolos adicionais para acoplamentos de Suzuki, também poderiam ser utilizados (veja-se, por exemplo, Srimani, D. et al. Tetrahedron Letters 49, 6304, (2008); Fairlamb, I. J. S. et al. Synthesis 508 (2009); Tabela 1 estrada 7 em Singh, R. et al. Organic Letters 7, 1829, (2005). Um derivado de éster 4-etoxifenilborónico tal como 2-(4-etoxifenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (veja-se a Publicação PCT N.° WO 06/108695) também pode ser utilizado como um reagente nos acoplamentos de Suzuki acima mencionados.

Na etapa 1 do Esquema 11, um acoplamento de tipo Stille entre (X-4) e tributil(4-etoxifenil)estanano (para a síntese e caracterização deste reagente veja-se Wardell, J. L. et al. Journal of Organometallic Chemistry 78, 395 (1974)), seguindo protocolos conhecidos por aqueles peritos na especialidade poderia ser utilizado para produzir (X-7) . Para exemplos representativos de protocolos de acoplamento de Stille veja-se Tabela 2, entrada 6 em Crawforth C. M. et al. em Tetrahedron 61, 9736 (2005), e Kuribayashi, T. et al. em Synlett 737 (1999).

Alternativamente, quando Pg6 não é Ac ou Bz, na etapa 1 do Esquema 11, um acoplamento de tipo Kumada entre (X-4) e brometo de 4-etoxifenilmagnésio (Rieke Metals, Inc) pode ser utilizado para produzir (X-7), seguindo procedimentos para acoplamentos de tipo Kumada conhecidos por aqueles peritos na especialidade (veja-se, por exemplo, nota de rodapé 14 em Lopez-Perez, A. et al. Organic Letters 11, 5514 (2009)).

Alternativamente, quando Pg6 não é Ac ou Bz, na etapa 1 do Esquema 11, l-etoxi-4-iodobenzeno (TCI America) pode ser tratado a baixa temperatura (entre cerca de -78 e cerca de 0 graus Celsius) com uma solução de cloreto de isopropilmagnésio num solvente tal como tetrahidrofurano ou semelhante, seguido pela adição de CuCN*2LiCl em tetrahidrofurano ou semelhante, à mesma temperatura. As espécies reativas assim formadas podem, em seguida, ser reagidas com uma solução de tetrahidrofurano (X-4) a uma temperatura variando de cerca de -20 a cerca de 23 graus Celsius para produzir depois de composto trabalhado (X-7) (veja-se o procedimento descrito no exemplo X da Publicação PCT N.° WO 06/089872) . Em alternativa, na etapa 1 do

Esquema 11, um acoplamento de tipo Negishi entre (X-4) e bromo(4-etoxifenil)-zinco; iodo (4-etoxifenil)-zinco ou cloro (4-etoxifenil)-zinco (preparado a partir do halogeneto de arilo correspondente seguindo protocolos conhecidos por aqueles peritos na especialidade) poderia produzir (X-7), seguindo protocolos para o acoplamento de tipo Negishi conhecidos por aqueles peritos na especialidade (veja-se entrada 4, tabela 1 e procedimento de acoplamento cruzado tipico em de Lang, R-J. et al.r em Tetrahedron 54, 2953 (1998)).

Em alternativa, na etapa 1 do Esquema 11, a reação do reagente organometálico de indio, tris(4-etoxifenil)indio (preparado a partir do reagente de Grignard ou reagente de organolitio correspondente), poderia ser feita com (X-4) para produzir (X-7), seguindo o procedimento geral descrito (tabela 4, entrada 1) em Perez, I. et al. Journal of The American Chemical Society 123, 4155 (2001).

Na etapa 1 do Esquema 11, (X-4) poderia ser convertido no reagente de benzilzinco correspondente (seguindo vários protocolos conhecidos por aqueles peritos na especialidade, tal como aqueles encontrados em, mas não limitados a, Utas, J. E. et al. Synlett 1965 (2006); Knochel, P. et al. Organic Letters 10, 1107 (2008)) e reagido com l-etoxi-4-iodobenzeno (TCI America) ou l-bromo-4-etoxibenzeno (TCI America) para produzir (X-7). Para protocolos gerais veja-se Negishi, E. et al. Journal of Organic Chemistry 42, 1821 (1977); Utas, J. E. et al. Synlett 1965 (2006); tabela 2, entrada 3 em Stefko, M. et al. European Journal of Organic Chemistry 1689 (2008); tabela 1, entrada 3 em Knochel, P. et al. Organic Letters 10, 1107 (2008); formação do composto 16 etapa 2 em Sato, M. et al. Journal of Medicinal Chemistry 52, 4869 (2009); tabela 2, entrada 7 e 8 em Knochel, P. et al. Journal of Organic Chemistry 73, 7380 (2008).

Na etapa 2 do Esquema 11, os grupos de proteção remanescentes (Pg6) podem, em seguida, ser removidos utilizando a quimica apropriada para os grupos de proteção particulares. Por exemplo, grupos de proteção de benzilo podem ser removidos por tratamento com ácido fórmico na presença de paládio (negro de Pd) num solvente prótico (por exemplo, etanol/THF) em torno da temperatura ambiente para produzir um composto IA que pode ser facilmente funcionalizado noutros compostos de estrutura (A) da presente invenção, utilizando sequências de manipulação de grupos de proteção e funcionais bem conhecidas, conhecidas por aqueles peritos na especialidade. Veja-se a secção de exemplos para mais detalhes. Outras condições conhecidas para a remoção de grupos de proteção de benzilo podem também ser usadas. Se Pg6 é Ac ou Bz, em seguida, grupos de proteção de acetato e benzoato podem ser removidos por tratamento de uma solução de (X-7) num solvente alcoólico tal como metanol (um co-solvente tal como tetrahidrofurano também pode ser adicionado) na presença de metóxido de sódio a uma temperatura variando de cerca de 0 a cerca de 70 graus Celsius para produzir o composto IA. Outras condições conhecidas para a remoção de grupos de proteção de acetatos e benzoato podem também ser usadas.

Uma sintese alternativa do composto (X-7) é apresentada no Esquema 12. Na etapa 1 do Esquema 12, o composto (X-5) pode ser convertido no acetato benzilico, carbonato benzilico ou fosfato benzilico correspondente e subsequentemente reagido com ácido 4-etoxifenilborónico (disponível a partir de Matrix Scientific ou Frontier Scientific Inc), seguindo protocolos gerais conhecidos por aqueles peritos na especialidade e respetivamente rportados em Kuwano, R. et ai. Chemical Communications 5899 (2005), Kuwano, R. et ai. Organic Letters 7, 945 (2005), McLaughlin, M. Organic Letters 7,4875 (2005). O composto (X-7) assim obtido poderia então ser facilmente convertido

no composto IA seguindo a etapa 2 do Esquema 11.

Como descrito no Esquema 13, o composto (X-6) poderia também ser utilizado para aceder ao Exemplo 9 ou composto de estrutura IA.

Na etapa 1 do Esquema 13, o composto (X-6) pode ser tratado com um reagente organometálico, tal como o brometo de 4-etoxifenilmagnésio ou 4-etoxifenil-litio, para produzir (X-8) (seguindo protocolos conhecidos por aqueles peritos na especialidade para a adição nucleofilica de um reagente de Grignard ou de organolitio a um derivado de benzaldeido; veja-se a formação de (IX-2) e (IX-3) ou o procedimento descrito no exemplo VI da Publicação PCT N.° WO 06/089872) . No caso particular onde Pgg é Ac ou Bz, um excesso do reagente organometálico (brometo de 4-etoxifenilmagnésio ou 4-etoxifenil-litio) tem de ser utilizado (veja-se o procedimento descrito para a etapa de adição de organometálico do exemplo 1 da Publicação PCT N.° WO 08/034859) para produzir o Exemplo 9 após trabalho aquoso para tais reações de adição nucleofilicas organometálicas e tratamento da mistura bruta resultante com uma solução de metóxido de sódio (ou uma solução aquosa de hidróxido de potássio ou de sódio) num solvente alcoólico, tal como metanol (na presença opcional de um co-solvente tal como tetrahidrofurano) , a uma temperatura variando de cerca de 0 a cerca de 60 graus Celsius para remover os restantes grupos de proteção de Ac ou Bz.

Na etapa 2 do Esquema 13, o Exemplo 9 pode ser produzido por remoção dos grupos de proteção restantes (Pgs) utilizando a quimica apropriada para os grupos de proteção particulares, usando protocolos conhecidos por aqueles peritos na especialidade. Para uma descrição geral de grupos de proteção e suas utilizações, veja-se T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley &amp; Sons, Nova York, 1991.

No caso em que condições de hidrogenólise são utilizadas (por exemplo, se Pg6 é Bn; tais condições poderiam ser, mas não estão limitadas a: negro de Pd em presença de ácido fórmico num solvente alcoólico, tal como etanol, com a presença opcional de um co-solvente, tal como tetrahidrofurano, a uma temperatura variando de cerca de 0 a cerca de 50 graus Celsius; condições alternativas envolvem a utilização de Pd-C ou Pd(OH)2 como catalisadores sob uma atmosfera de gás de hidrogénio num solvente alcoólico, tal como etanol, com a presença opcional de um co-solvente, tal como tetrahidrofurano, a uma temperatura variando de cerca de 0 a cerca de 50 graus Celsius e com a presença opcional de um ácido como ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido clorídrico ou ácido fórmico), em seguida, o composto IA pode ser obtido em vez do Exemplo 9 (etapa 3 do Esquema 13). O composto IA assim obtido poderia ser convertido no Exemplo 9 através do Exemplo 2 na sequência dos procedimentos descritos na secção experimental. De um modo semelhante, na etapa 4 do Esquema 13, o tratamento do Exemplo 9 sob condições de hidrogenólise (por exemplo, mas não limitado às condições descritas acima) poderia proporcionar o composto IA. Alternativamente, na etapa 4 do Esquema 13, o composto IA pode ser obtido por tratamento de uma solução do Exemplo 9 num solvente, tal como diclorometano, com um derivado de hidreto de silicio, tal como trietilsilano, na presença de um ácido, tal como ácido trifluoroacético, ácido fórmico ou dietileterato de trifluoreto de boro, a uma temperatura variando de cerca de -30 graus e cerca de 23 graus Celsius (para um protocolo geral, veja-se o procedimento descrito no exemplo VII da Publicação PCT N.° WO 06/089872).

Em alternativa, na etapa 3 do Esquema 13, o pode aceder-se ao composto IA a partir do intermediário (X—8) por (1) tratamento sob condições de hidrogenólise (por exemplo, mas não limitado às condições descritas acima) ou tratamento com um derivado de hidreto de silicio sob condições ácidas (por exemplo, mas não limitado às condições descritas acima) e (2) remoção dos grupos de proteção (Pg6) restantes utilizando a quimica apropriada para os grupos de proteção particulares.

Partindo de (X-2), pode também ser vantajoso proteger seletivamente os grupos hidroxilo no motivo dioxa-biciclo[3.2.1]octano (Esguema 14). Alguém perito na especialidade reconheceria gue poderia aceder-se ao composto (X-2b) a partir de (X-2) por proteção seletiva do grupo hidroxilo primário com um grupo de proteção adequado (Pg3) , seguido por proteção dos restantes grupos hidroxilo secundários com grupos de proteção (Pg4) adequados, seguindo procedimentos semelhantes para os grupos de proteção particulares escolhidos, descritos nas etapas 1 e 2 do Esquema 3. De forma semelhante à descrita para (X-2a), o composto (X-2b) poderia levar a intermediários (X-4a), (X-5a), e (X-6a) (Esquema 14). Por sua vez, (X-4a), (X-5a) e (X-6a) poderiam ser convertidos no Exemplo 9 e/ou IA seguindo os protocolos descritos nos Esquemas 11, 12 e 13, substituindo a etapa de desproteção do grupo de proteção (Pg6) pela remoção dos grupos de proteção restantes (Pg3) e (Pg4) , usando a quimica apropriada para os grupos de proteção particulares.

Exemplo 10 (IS,2S,3S,4R,5S)-5-[4-Cloro-3~(4-etoxi-benzil)-fenil]-1-clorometil-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]octano-2,3,4-triol

A uma solução de {(IS,2S,3S,4R,5S)-2,3,4-tris-benziloxi-5-[4-cloro-3-(4-etoxi-benzil)-fenil]-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]oct-l-il}-metanol (200 mg, 0,28 mmol) em diclorometano (3 ml) a 0 graus Celsius foi adicionado trifluoreto de dietilaminoenxofre (40 microlitros, 0,30 mmol) e a mistura resultante foi lentamente aguecida até à temperatura ambiente e agitada a esta temperatura durante 16 horas. A mistura foi diluída com diclorometano e lavada com uma solução saturada de bicarbonato de sódio aguoso, e salmoura, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida sobre sílica gel utilizando um cartucho de sílica RediSep de 12 g (eluindo com um gradiente de 0 a 20% de acetato de etilo em heptano) para dar uma mistura de (IS,2S,3S,4R,5S)-2,3,4-tris-benziloxi-5-[4-cloro-3- (4-etoxi-benzil)-fenil]-1-fluorometil-6, 8-dioxa-biciclo[3.2.1]octano e (IS,2S,3S,4R,5S)-2,3,4-tris- benziloxi-5-[4-cloro-3-(4-etoxi-benzil)-fenil]-1-clorometil-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]octano como um óleo incolor (50 mg) . (MS) 725 (M+H+, modo positivo) . A uma suspensão de uma mistura de (IS,2S,3S,4R,5S)-2,3,4-tris-benziloxi-5-[4-cloro-3-(4-etoxi-benzil)-fenil]-1-fluorometil-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]octano e IS,2S,3S,4R,5S)-2,3,4-tris-benzyloxy-5-[4-cloro-3-(4-etoxi-

benzil)-fenil]-1-clorometil-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]octano (50 mg, 0,07 mmol) e negro de paládio (50 mg, 0,38 mmol, elevada área de superfície de Aldrich®) em etanol (0,5 ml) e tetrahidrofurano (0,1 ml) foi adicionado ácido fórmico (0,10 ml, 2,80 mmol) e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 1,5 horas. Acetato de etilo foi adicionado e a mistura foi filtrada através de uma almofada curta de Celite® e concentrada a vácuo. O material bruto foi purificado por cromatografia rápida sobre sílica gel usando um cartucho de sílica Redisep de 4 g (eluindo com um gradiente de 50 a 100% de acetato de etilo em heptano) para dar o composto do título como um sólido (8,6 mg; ~ 80% puro, contaminado com algum Exemplo 8) . (LCMS) 455,2 (M+H+: modo positivo). RMN (400 MHz, METANOL-d4) delta ppm 7,40 (t, J = 1,17 Hz, 1H), 7,34 (s, 1H) , 7,34 (s, 1H) , 7, 05-7, 09 (m, 2H) , 6, 76-6, 80 (m, 2H) , 4,18 (d, J = 7,61 Hz, 1H) , 4,01 (s, 2H) , 3,97 (q, J= 7,03 Hz, 2H) , 3,90 (d, J = 12,30 Hz, 1H) , 3,83 (dd, J = 8,20, 1,56 Hz, 1H) , 3,72 (d, J = 12,30 Hz, 1H) , 3, 60-3, 65 (m, 2H) , 3,50-3,54 (m, 1H), 1,33 (t, J= 7,03 Hz, 3H).

Exemplo 11 (lS,2S,3S,4R,5S)-5-{4-Cloro-3-[(R)-(4-etoxi-fenil)-hidroxi-metil]-fenil}-l-hidroximetil-6,8-dioxa- biciclo[3.2.1]octano-2,3,4-triol (9A-1) e (IS, 2S, 3S, 4R, 5S)-5-{4-cloro-3-[ (S)-(4-etoxi-fenil)-hidroxi-metil]-fenil}-l-hidroximetil-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]octano-2,3,4-triol (9A-2)

A uma solução de éster de (IR,2S,3S,4R, 5S)-3,4-diacetoxi-l-acetoximetil-5-[4-cloro-3-(4-etoxi-benzil)-fenil]-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]oct-2-il de ácido acético (Exemplo 2; 344 mg, 0,569 mmol) em tetracloreto de carbono (8 ml) foi adicionada N-bromossuccinimida (159 mg, 0,893 mmol) seguido pela adição de 2,2'-azobisisobutironitrilo (AIBN, 8 mg, 0,05 mmol) e a mistura de reação foi aquecida sob refluxo sob nitrogénio. Após 16 horas, a mistura de reação foi arrefecida até à temperatura ambiente, água (50 ml) e diclorometano (25 ml) foram adicionados e a mistura resultante foi agitada durante 24 horas à temperatura ambiente. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída duas vezes adicionais com diclorometano (25 ml) . As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 ml), secas sobre sulfato de magnésio, filtradas através de uma almofada de Celite, e concentradas sob pressão reduzida. O material bruto foi cromatografiado com a unidade de cromatografia automatizada Biotage SP4 (coluna de sílica gel de 25 g SNAP) eluindo com um gradiente de 0-80% de acetato de etilo em heptano para produzir 316 mg (89% de rendimento) de éster de (IR,2S,3S,4R,5S)-3,4-diacetoxi-l-acetoximetil-5-{4-cloro-3-[(4-etoxi-fenil)-hidroxi-metil]-fenil}6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]oct-2-il de ácido acético como uma mistura de diastereoisómeros na posição bis-benzílica. A uma solução de éster de (IR, 2S,3S,4R,5S)-3,4-diacetoxi-l-acetoximetil-5-{4-cloro-3-[ (4-etoxi-fenil)-hidroxi-metil]-fenil}6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]oct-2-il de ácido acético (400 mg, 0,644 mmol) em diclorometano (10 ml) a 0 graus Celsius foi adicionado reagente de periodinano de Dess-Martin (609 mg, 1,0 mmol) e a mistura de reação foi deixada a agitar a esta temperatura durante 1,5 horas. A mistura de reação foi, em seguida, diluída com diclorometano (20 ml) , seguido pela adição de uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (20 ml) e uma solução aquosa saturada de tiossulfato de sódio (20 ml) . A mistura foi deixada a agitar vigorosamente durante 30 minutos antes de se separar as camadas. A camada aquosa foi lavada com diclorometano (2 x 20 ml) e as camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de magnésio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O material bruto foi cromatografiado usando a unidade de cromatografia automatizada Biotage SP4 (coluna de sílica gel de 25 g SNAP) e eluindo com um gradiente de 0-80% de acetato de etilo em heptano para produzir 178 mg (44,7% de rendimento) de éster de (IR,2S,3S,4R,5S)-3,4-diacetoxi-l-acetoximetil-5-[4-cloro-3-(4-etoxi-benzoil)-fenil]-6,8-dioxa- biciclo[3.2.1]oct-2-il de ácido acético e 145 mg de uma mistura 4/1 de éster de (IR,2S,3S,4R,5S)-3,4-diacetoxi-l-acetoximetil-5-[4-cloro-3-(4-etoxi-benzoil)-fenil]-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]oct-2-il de ácido acético/éster de (IR,2S,3S,4R,5S)-3,4-diacetoxi-l-acetoximetil-5-{4-cloro-3-[(4-etoxi-fenil)-hidroxi-metil]-fenil}6,8-dioxa- biciclo[3.2.1]oct-2-il de ácido acético. Dados para éster de (lR,2S,3S,4R,5S)-3,4-diacetoxi-l-acetoximetil-5-[4- cloro-3-(4-etoxi-benzoil)-fenil]-6,8-dioxa- biciclo[3.2.1]oct-2-il de ácido acético: MS (LCMS) 619 (M+H+; modo positivo) ΧΗ RMN (400 MHz, METANOL-d4) delta ppm 1,40 (t, J= 7,0 Hz, 3H) , 1,81 (s, 3H) , 1,94 (s, 3H) , 2,01 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 3,78 (d, J= 8,2 Hz, 1H), 4,01 (d, J = 12,7 Hz, 1H) , 4,12 (g, J= 6,9 Hz, 2H) , 4,43 (d, J = 8,4

Hz, 1H) , 4,59 (d, J = 12,9 Hz, 1H) , 5,25 (d, J = 8,0 Hz, 1H) , 5,38 (t, J = 8,0 Hz, 1H) , 5,44 (d, J = 8,2 Hz, 1H) , 6,98 (d, J = 8,8 Hz, 2H) , 7,44 (d, J = 2,0 Hz, 1H) , 7,52 (d, J = 8,4 Hz, 1H) , 7,62 (dd, J = 8,4, 2,0 Hz, 1H) , 7,68 (d, J = 8,8 Hz, 2H) . A uma solução da mistura 4/1 acima de éster de (IR, 2S, 3S, 4R, 5S)-3,4-diacetoxi-l-acetoximetil-5-[4-cloro-3-(4-etoxi-benzoil)-fenil]-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]oct-2-il de ácido acético/éster de (IR,2S,3S,4R,5S)-3,4-diacetoxi-l-acetoximetil-5-{4-cloro-3-[(4-etoxi-fenil)-hidroxi-metil]-fenil}6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]oct-2-il de ácid acético (145 mg) em metanol (2,5 ml) foi adicionado boroidreto de sódio (35 mg, 0,92 mmol) à temperatura ambiente. Após uma hora, a mistura de reação foi extinta pela adição de água (20 ml) e a mistura resultante foi concentrada sob pressão reduzida. A camada aguosa resultante foi extraida três vezes com acetato de etilo (15 ml) . As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 ml) , secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. A uma solução do material bruto em metanol (5 ml) foi adicionado metóxido de sódio em metanol (25% em peso) até ser obtido um pH de 12 e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente. Após 16 horas, a mistura de reação foi neutralizada pela adição de resina de troca catiónica Dowex Monospfere 650C (H) até gue o pH da solução foi < 7. A mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida produzindo 100 mg do produto desejado como uma mistura de diastereoisómeros (veja-se Exemplo 9). A mistura resultante foi separada por HPLC quiral. Método de purificação: Coluna: Chiralpak AD-H (10 x 250), Taxa de fluxo: 10,0 mL/minuto, contrapressão: 120 Bar, fase móvel: 65/35 de CCg/propanol; deteção UV: 210 nm. A configuração do carbono na posição bis-benzilica em compostos 9A-1 e 9A-2 foi arbitrariamente atribuída a R e S, respetivamente. (9A-1): (17,5 mg, 16,5% de rendimento); Rt = 4,68 minutos; as frações contendo o produto foram concentradas sob pressão reduzida. O material resultante foi precipitado a partir de acetato de etilo e heptano. O sólido branco resultante foi lavado com heptano 2 vezes e seco sob pressão reduzida. MS (LCMS) 451,2 (M-H+, modo negativo) RMN (400 MHz,

METANOL-d4) delta ppm 1,33 (t, J = 6, 9 Hz, 3H) , 3,62 (d, J = 7,6 Hz, 2H) , 3,67 (t, J = 8,0 Hz, 1H) , 3,68 (d, J = 11,9

Hz, 1H) , 3,79 (d, J = 8,0 Hz, 1H) , 3,83 (d, J = 12,5 Hz, 1H) , 3,97 (q, J = 6,9 Hz, 2H) , 4,16 (d, J = 7,4 Hz, 1H) , 6,04 (s, 1H) , 6,80 (d, J = 8,8 Hz, 2H) , 7,22 (d, J = 8,6

Hz, 2H) , 7,29 (d, J = 8,4 Hz, 1H) , 7,42 (dd, J = 8,2, 2,0

Hz, 1H) , 7,93 (d, J = 2,0 Hz, 1H) . HRMS calculado para C22H25O8CI (M) 452,1238, encontrado 452,1237. (9A-2): (25,9 mg, 24,4% de rendimento); Rt = 10,26 minutos; as frações contendo o produto foram concentradas sob pressão reduzida. O material resultante foi precipitado a partir de acetato de etilo e heptano. O sólido branco resultante foi lavado com heptano 2 vezes e seco sob pressão reduzida. MS (LCMS) 497,2 (M+HCOO', modo negativo) XH RMN (400 MHz, METANOL-cb) delta ppm 1,33 (t, J = 6, 9 Hz, 3H), 3,56 (d, J = 7,8 Hz, 1H) , 3,61 (d, J = 7,2 Hz, 1H) , 3,66 (t, J = 8,0 Hz, 1H) , 3,68 (d, J = 12,8, 1H) , 3,79 (d, J = 8,2 Hz, 1H) , 3,84 (d, J = 12,5 Hz, 1H) , 3,97 (q, J = 7,0 Hz, 2H) , 4,15 (d, J = 7,4 Hz, 1H) , 6,05 (s, 1H) , 6,80 (d, J = 8,4 Hz, 2H) , 7,21 (d, J = 8,4 Hz, 2H) , 7,29 (d, J = 8,4 Hz, 1H) , 7,41 (dd, J = 8,2, 1,6 Hz, 1H) , 7,91 (d, J = 1,6 Hz, 1H) . HRMS calculado para C22H25O8CI (M) 452,1238, encontrado 452,1235.

Exemplo 12 [2-Cloro-5-((1S,2S,3S,4R,5S)~2,3,4-trihidroxi-l- hidroximetil-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]oct-5-il)-fenil] - (4-etoxi-fenil)-metanona

A uma solução de éster de (IR,2S,3S,4R,5S)-3,4-diacetoxi-l-acetoximetil-5-[4-cloro-3-(4-etoxi-benzoil)-fenil]-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]oct-2-il de ácido acético (veja-se Exemplo 11 para a preparação; 65 mg, 0,10 mmol) em metanol (3 ml) e tetrahidrofurano (2 ml) foi adicionado metóxido de sódio em metanol (25% em peso) até que se obteve pH de 12 e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente. Após 16 horas, a mistura de reação foi neutralizada pela adição de resina de troca catiónica Dowex Monospfere 650C (H) até que o pH da solução foi < 7, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 material resultante foi precipitado a partir de acetato de etilo e heptanos e o sólido branco resultante foi lavado com heptano 2 vezes e seco sob pressão reduzida para produzir o produto desejado (44,5 mg, 94% de rendimento). MS (LCMS) 451,1 (M+H+; modo positivo) RMN (400 MHz, METANOL-d4) delta ppm 1,40 (t, J = 6,9 Hz, 3H) , 3,55 (d, J = 8,0 Hz, 1H) , 3,60 (d, J = Hz, 1H) , 3,65 (t, J = 8,1 Hz, 1H) , 3,67 (d, J = 12,5 Hz, 1H) , 3,77 (d, J = 8,0 Hz, 1H) , 3,83 (d, J = 12,5 Hz, 1H) , 4,12 (q, J = 7,0 Hz, 2H) , 4,14 (d, J = 7,6 Hz, 1H) , 6,98 (d, J = 8,8 Hz, 2H) , 7,48 (d, J = 8,4

Hz, 1H) , 7,52 (d, J = 2,0 Hz, 1H) , 7,65 (dd, J = 8,4, 2,0

Hz, 1H) , 7,73 (d, J = 8,8 Hz, 2H) . HRMS calculado para C22H23O8CI (M) 450,1081, encontrado 450,1079.

TESTES FARMACOLÓGICOS A prática da presente invenção para o tratamento de doenças moduladas pela inibição de SGLT2 pode ser evidenciada pela atividade em pelo menos um dos protocolos descritos aqui abaixo.

Ensaios biológicos

Ensaio in vitro O ensaio funcional de SGLT2 foi concebido para detetar a inibição da captação de alfa-D glucopiranósido de metilo (AMG - uma forma não metabolizável de glucose) através do transportador SGLT2. O transportador SGLT2 recupera glucose dos túbulos proximais do rim; a sua inibição resulta em açúcar perdido na urina. O composto de controlo positivo, florizina, é um inibidor conhecido da captação de glucose para SGLT2 e foi utilizado para comparar a elevada percentagem de efeito de inibição de SGLT2 dos compostos de teste. Células CHO-Flpln (Invitrogen, Carlsbad, CA) que expressam estavelmente SGLT2 humano (pcDNA5/FRT) foram semeadas em placas Iso-TC de 96 poços (Perkin Elmer, Waltham, MA) a uma densidade de 100 000 células/poço em 100 microlitros de meio de crescimento (1:1 de meio F-12/DMEM (Gibco, Carlsbad, CA), FBS a 10% (Sigma, St. Louis, MO), IX Pen./Estrep. (Gibco, Carlsbad, CA), 600 microgramas/ml de higromicina (Invitrogen, Carlsbad, CA)). Antes do tratamento com o composto de teste, as células confluentes foram privadas de soro durante 2 horas a 37 °C em 1:1 de meio F-12/DMEM, substituindo com meio F-12/DMEM fresco após 1 hora. Os compostos de teste em dimetilsulfóxido (Sigma, St. Louis, MO) foram diluídos 100 vezes em tampão de captação (NaCl a 140 mM (Promega, Madison, WI), KCl a 2 mM (Teknova, Hollister, CA), CaCÍ2 a 1 mM (Teknova, Hollister, CA ) , MgCÍ2 a 1 mM (Teknova, Hollister, CA) , e HEPES a 10 mM (Gibco, Carlsbad, CA) para placas de células pré-lavada com tampão de captação. As células foram pré-incubadas com o composto de teste durante 15 minutos antes da adição de 50 microlitros de AMG (40 nCi de AMG [U-14C] (Perkin Elmer, Waltham, MA) em AMG não marcado (Aldrich, St. Louis, MO)) por poço produzindo-se uma concentração final de AMG a 11,33 micromolar. ** As placas celulares foram, depois, incubadas durante 3 horas a 37 °C para a captação de AMG. Após a incubação, as células foram lavadas duas vezes com tampão de lavagem arrefecido em gelo (tampão de captação contendo florizina (Sigma) a 200 micromolar), secas ao ar e lisadas em 30 microlitros de NaOH a 200 mM e tampão de SDS a 1%, num agitador orbital. Microscint 40 (Perkin Elmer, Waltham, MA) foi adicionado às células lisadas (dando um volume final de 200 microlitros) e misturado por agitação orbital durante 30 minutos. As placas foram armazenadas no escuro durante a noite e quantificadas no 1540 Microbeta Trilux (Wallac, Waltham, MA), utilizando um protocolo normalizado para a deteção de 14C. O efeito percentual de

compostos de teste na inibição da captação de AMG foi calculado usando o seguinte cálculo: [% Efeito = ((ZPE-T)/(ZPE-HPE)) x 100%] onde "ZPE" é a contagem por minuto (CCPM) corrigida em poços de controlo contendo DMSO a 0,5%, "T" é o CCPM em poços contendo o composto de teste em várias concentrações da curva padrão, e "HPE" é o elevado efeito percentual que se refere à CCPM em poços de controlo contendo florizina a 10 micromolar. Os valores de IC50 foram calculados usando uma equação de dose-resposta e estão sumarizados para os compostos testados na Tabela 1.

Abreviações usadas na descrição dos testes in vitro incluem: SGLT2 Co-transportador de sódio/glucose tipo 2 AMG α-D-glucopiranósido de metilo DMEM Meio de Eagle modificado por Dulbecco IC50 Concentração inibitória de 50% FBS Soro bovino fetal DMSO Dimetilsulfóxido SDS Dodecil sulfato de sódio

CHO-Flpln Células de ovário de hamster chinês contendo o sitio FRT ** Para o composto de teste 1, as células foram pré-incubadas com o composto de teste 1 durante 15 minutos antes da adição da quantidade apropriada de AMG (40 nCi de AMG [U-14C] (Perkin Elmer, Waltham, MA) em AMG não marcado (Aldrich, St. Louis, MO)) por poço produzindo-se uma concentração final de AMG a 200 micromolar.

Ao longo deste pedido, várias publicações são referenciadas.

Pretende-se que os exemplos sejam considerados apenas como exemplificativos, com um âmbito verdadeiro da invenção sendo indicado pelas seguintes reivindicações.

DOCUMENTOS REFERIDOS NA DESCRIÇÃO

Esta lista de documentos referidos pelo autor do presente pedido de patente foi elaborada apenas para informação do leitor. Não é parte integrante do documento de patente europeia. Não obstante o cuidado na sua elaboração, o IEP não assume qualquer responsabilidade por eventuais erros ou omissões.

Documentos de patente referidos na descrição • US 6515117 B [0004] • US 6414126 B [0004] • US 7101856 B [0004] • US 7169761 B [0004] • US 7202350 B [0004] • US 20020111315 A [0004] • US 20020137903 A [0004] • US 20040138439 A [0004] • US 20050233988 A [0004] • US 20060025349 A [0004] • US 20060035841 A [0004] • US 20060632722 A [0004] • WO 01027128 A [0004] • WO 02044192 A [0004] • WO 02088157 A [0004] • WO 03099836 A [0004] • WO 04087727 A [0004] • WO 05021566 A [0004] • WO 05085267 A [0004] • WO 06008038 A [0004] • WO 06002912 A [0004] • WO 06062224 A [0004] • WO 07000445 A [0004] • WO 07093610 A [0004] • WO 08002824 A [0004] [0072] • US 20070054867 A [0064] [0181] • WO 2005116034 A [0083] • US 20050267100 AI [0083] • US 6818658 B [0083] • US 20060178501 A [0083] • US 20080132563 A [0090] • US 20070259821 A [0090] • EP 1828216 BI [0091] • WO 06089872 A [0176] [0178] [0196] [0202] [0204] • WO 06129237 A [0180] • WO 07031548 A [0183] [0184] [0187] [0189] [0193] • WO 08077009 A [0184] • WO 04093544 A [0184] • US 5043142 A [0184] • WO 06005914 A [0184] • EP 0151529 A [0187] • WO 08034859 A [0191] [0202] • WO 06108695 A [0193]

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Claims (15)

REIVINDICAÇÕES

1. Um composto de Fórmula (A) ou Fórmula (B)

em que R é -OH ou, quando R1 é -0-C (0)-alquilo (C1-C4) ou -0-C(0)-arilo, R é o mesmo que R1 ou -OH; R1 é -OH, F, Cl, -0-C (0)-alquilo (C1-C4) , -0-C (0)-arilo, - 0-C(0)-0-alquilo(C1-C4) ou -0-C(0)-0-arilo; e R2 3 4 5 6 é -OH, -0-alquilo (C1-C4) ou -O-CH2-CH2-O-R2a; com a condição que quando R é -OH e R1 é -OH, R2 é -OH ou -0-CH2-CH2-O-R2a; R2a é H, -C (0)-alquilo (C4-C4) , -C (0) -arilo, -C (0)-0-alquilo (C1-C4) ou -C (0)-0-arilo . e sais farmaceuticamente aceitáveis destes.

2. 0 composto da reivindicação 1, em que o dito composto é um composto de Fórmula (A).

3. 0 composto das reivindicações 1 ou 2, em que R1 é -OH.

4. 0 composto da reivindicação 3, em que R2 é -OH.

5. 0 composto da reivindicação 3, em que R2 é -O-CH2CH2OH.

6. 0 composto selecionado a partir do grupo que consiste em: Éster de (IR,2S,3S,4R,5S)-3,4-diacetoxi-l- acetoximetil-5-[4-cloro-3-(4-etoxi-benzil)-fenil]- 6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]oct-2-ilo de ácido acético; Éster (IR,2S,3S,4R,5S)-5-[4-cloro-3 - (4-etoxi-benzil)-fenil]-2,3,4-trihidroxi-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]oct-1-ilmetílico de ácido acético; Éster etilico de éster (IR, 2S,3S,4R,5S)-5-[4-cloro-3-(4-etoxi-benzil)-fenil]-2,3,4-trihidroxi-6, 8-dioxa-biciclo [ 3 . 2 .1 ] oct-l-ilmetilico de ácido carbónico; (IS, 2S, 3S,4R,5S)-5-[4-cloro-3 - (4 - [D5] etoxi-benzi1)-fenil]-l-hidroximetil-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]octano-2,3,4-triol; Éster 2-{4-[2-cloro-5-((lS,2S,3S,4R,5S)-2,3,4- trihidroxi-l-hidroximetil-6,8-dioxa- biciclo [3.2.1]oct-5-il)-benzi1]-fenoxi}-etilico de ácido acético; (IS,2S,3S,4R,5S)-5-{4-cloro-3-[4-(2-hidroxi-etoxi)-benzil]-fenil}-l-hidroximetil-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]octano-2,3,4-triol; e (IS,2S,3S,4R,5S)-5-[4-cloro-3-(4-etoxi-benzil)-fenil]-1-fluorometil-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]octano-2,3,4-triol; ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

7. Um composto da reivindicação 1, em que o dito composto é (lS,2S,3S,4R,5S)-5-[4-cloro-3-(4-hidroxi-benzil)-fenil]-l-hidroximetil-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]octano-2,3,4-triol.

8. 0 composto selecionado a partir do grupo que consiste em: (IS,2S,3S,4R,5S)-5-{4-cloro-3-[ (4-etoxi-fenil)-hidroxi-metil]-fenil}-l-hidroximetil-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]octano-2,3,4-triol; (IS,2S,3S,4R,5S)-5-{4-cloro-3-[(R)-(4-etoxi-fenil)-hidroxi-metil]-fenil}-l-hidroximetil-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]octano-2,3,4-triol; e (IS,2S,3S,4R,5S)-5-{4-cloro-3-[ (S)- (4-etoxi-fenil)- hidroximetil]-fenil}-l-hidroximetil-6,8-dioxa-biciclo[3.2.1]octano-2,3,4-triol.

9. Uma composição farmacêutica compreendendo: (i) um composto de qualquer uma das reivindicações anteriores ou um sal farmaceuticamente aceitável deste; e (ii) um excipiente, diluente ou veiculo farmaceuticamente aceitável.

10. Uma composição da reivindicação 9, em que o dito composto ou dito sal farmaceuticamente aceitável deste está presente numa quantidade terapeuticamente eficaz.

11. A composição das reivindicações 9 ou 10 compreendendo ainda pelo menos um agente farmacêutico adicional selecionado a partir do grupo que consiste num agente anti-obesidade e um agente anti-diabético.

12. A composição da reivindicação 11, em que o dito agente anti-obesidade é selecionado a partir do grupo que consiste em rimonabant, taranabant, surinabant, otenabant, SLV319 (CAS No. 464213-10-3), AVE1625 (CAS No. 358970-97-5), dirlotapida, mitratapida, implitapida, R56918 (CAS No. 403987), CAS No. 913541-47-6, lorcaserina, cetilistato, PYY3-36, naltrexona, oleoil-estrona, obinepitida, pramlintida, tesofensina, leptina, liraglutida, bromocriptina, orlistato, exenatido, AOD-9604 (CAS No. 221231-10-3) e sibutramina.

13. A composição da reivindicação 11, em que o dito agente anti-diabético é selecionado a partir do grupo que consiste em metformina, acetohexamida, clorpropamida, diabinese, glibenclamida, glipizida, gliburida, glimepirida, gliclazida, glipentida, gliquidona, glisolamida, tolazamida, tolbutamida, tendamistato, trestatina, acarbose, adiposina, camiglibose, emiglitato, miglitol, voglibose, pradimicina Q, salbostatina, balaglitazona, ciglitazona, darglitazona, englitazona, isaglitazona, pioglitazona, rosiglitazona, troglitazona, exendina-3, exendina-4, liraglutida, trodusguemina, reservatrol, extrato de hirtiosal, sitagliptina, vildagliptina, alogliptina e saxagliptina.

14. Um composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 8, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, ou uma composição de qualquer uma das reivindicações 9 a 13, para utilização no tratamento de obesidade e distúrbios relacionados com a obesidade em animais.

15. Um composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 8, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, ou uma composição de qualquer uma das reivindicações 9 a 13, para utilização no tratamento ou atraso da progressão ou inicio de diabetes tipo 2 e distúrbios relacionados com diabetes em animais.