JP2004359630A

JP2004359630A - ジフルオロジフェニルメタン誘導体及びその塩

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Publication number: JP2004359630A
Application number: JP2003161718A
Authority: JP
Inventors: Yasushi Tomiyama; 泰冨山; Atsushi Noda; 淳野田; Kayoko Kitsuta; 香代子橘田; Yoshinori Kobayashi; 義典小林; Masakazu Imamura; 雅一今村; Hideshi Kurosaki; 英志黒▲崎▼
Original assignee: Kotobuki Seiyaku Co Ltd; Yamanouchi Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Kotobuki Seiyaku Co Ltd; Yamanouchi Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2003-06-06
Filing date: 2003-06-06
Publication date: 2004-12-24

Abstract

【課題】Ｎａ^＋−グルコース共輸送体阻害剤として、特にインスリン非依存性糖尿病（２型糖尿病）、インスリン依存性糖尿病（１型糖尿病）、インスリン抵抗性疾患、脂肪肝及び肥満の治療剤並びにこれらの予防剤として有用な化合物を提供する。
【解決手段】ベンゼン環がジフルオロメチレン（−ＣＦ_２−）を介して、もう一つのベンゼン環と結合し、そのベンゼン環が糖残基と直接結合することを特徴とする、ジフルオロジフェニルメタン誘導体及びその塩。
【選択図】なし

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、医薬、特にＮａ^＋−グルコース共輸送体阻害剤として有用な、ジフルオロジフェニルメタン誘導体及びその塩に関する。本発明のジフルオロジフェニルメタン誘導体及びその塩は、インスリン依存性糖尿病（１型糖尿病）、インスリン非依存性糖尿病（２型糖尿病）、インスリン抵抗性疾患及び肥満の治療、並びにこれらの予防に有用である。
【０００２】
【従来の技術】
近年、高血糖を速やかに正常化し、同時に体内のエネルギーバランスを改善する抗糖尿病薬として、腸管及び腎臓での糖再吸収を行うＮａ^＋−グルコース共輸送体（ＳＧＬＴ）を阻害する薬剤（Ｎａ^＋−グルコース共輸送体阻害剤）が求められている。このようなＮａ^＋−グルコース共輸送体阻害剤は、インスリン依存性糖尿病（１型糖尿病）、インスリン非依存性糖尿病（２型糖尿病）等の糖尿病の他、インスリン抵抗性疾患、脂肪肝及び肥満の優れた治療剤、並びにこれらの優れた予防剤として期待されている。
【０００３】
従来、Ｎａ^＋−グルコース共輸送体阻害剤として用いられる化合物としては、例えば、ＷｅｌｃｈＣ．Ａ．ｅｔａｌ．，Ｊ．Ｎａｔｒ．，１９８９，１１９（１１）１６９８に記載されたフロリジンや、例えば、Ｈｏｎｇｕ，Ｍ．ｅｔａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．１９９８，４６（１）２２、及び特開平１１−２１２４３号公報に記載された合成Ｏ−配糖体が知られている。これらの化合物は、腸管及び腎臓に存在するＮａ^＋−グルコース共輸送体を阻害することにより、過剰の糖を尿糖として体外に***し、血糖を降下させることが報告されている。
【０００４】
しかしながら、これらの化合物は、いずれも糖とアグリコン部分とがＯ−グルコシド結合してなるＯ−配糖体であり、経口投与されると小腸に存在するグルコシダーゼ等により加水分解され、作用が消減してしまうという課題があった。
【０００５】
また、フロリジンの場合、アグリコン部分であるフロレチンは促進拡散型の糖輸送体を強力に阻害することが知られている。例えば、ラット静脈にフロレチンを投与すると脳内グルコース濃度が減少するという悪影響が報告されている（例えば、Ｓｔｒｏｋｅ，１９８３，１４，３８８）。更に、フロレチンはビタミンＣのトランスポーターを阻害することも知られている（ｗａｎｇ，Ｙｅｔ．ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，２０００，２６７，４８８−４９４）。
【０００６】
そこで、Ｏ−配糖体のグルコシド結合の酸素を炭素に変換したＣ−配糖体をＮａ^＋−グルコース共輸送体阻害剤として用いることが試みられている。
【０００７】
例えば、特許文献１には、下記一般式で示される化合物がＮａ^＋−グルコース共輸送体阻害作用を有し、糖尿病の治療剤、予防剤及び血糖降下剤として有用であることが記載されている。
【０００８】
【化２】

（上記一般式中、Ｒ_１はＨ、ＯＨ、低級アルキル基、−Ｏ−低級アルキル基等を、Ｒ_２はＨ、−ＣＯＯ−低級アルキル基等を、Ｒ_５は−ＣＨ_２ＯＨ、−ＣＨ_２ＯＣＯＯ−低級アルキル基等を、Ａ_１はピリジン、フラン、チオフェン、キノリン、インドール等を、ｎは０〜３の整数を、ｍは０又は１の整数を表す。式中の記号の詳細は公報参照。）
【０００９】
また、特許文献２には、下記一般式で示される化合物をＮａ^＋−グルコース共輸送体阻害剤として、肥満や２型糖尿病の治療に用いることができると記載されている。
【００１０】
【化３】

（上記一般式中、Ｒ^１、Ｒ^２及びＲ^２ａは、独立して、水素原子、ＯＨ、ＯＲ^５、アルキル、ＣＦ_３、ＯＣＨＦ_２、ＯＣＦ_３等を、Ｒ^３及びＲ^４は、独立して、水素原子、ＯＨ、ＯＲ^５ａ、−Ｏ−アリール、−Ｏ−ＣＨ_２−アリール、アルキル、シクロアルキル、ＣＦ_３等を、ＡはＯ、Ｓ、ＮＨ、又は（ＣＨ_２）ｎを、ｎは０〜３の整数を表す。式中の記号の詳細は公報参照。）
【００１１】
【特許文献１】
特開２００１−２８８１７８号公報
【特許文献２】
国際公開第０１／２７１２８号パンフレット
【００１２】
【発明が解決しようとする課題】
糖尿病が生活習慣病として増加している昨今、糖尿病の治療等の現場においては、従来の化合物とは化学的構造が異なり、かつ、更に強力なＮａ^＋−グルコース共輸送体阻害作用剤の創製が切望されている。
【００１３】
【課題を解決するための手段】
本発明者等は、ベンゼン環がジフルオロメチレン（−ＣＦ_２−）を介して、もう一つのベンゼン環と結合し、そのベンゼン環が糖残基と直接結合することを特徴とする、下記一般式（Ｉ）で示される新規なジフルオロジフェニルメタン誘導体が、優れたＮａ^＋−グルコース共輸送体阻害作用を有することを見出し、本発明を完成させた。即ち本発明は、下記一般式（Ｉ）で示される化合物及びその塩（以下、「本発明化合物」と記す）に関する。本発明化合物は、それらを有効成分とするＮａ^＋−グルコース共輸送体阻害剤、特に糖尿病の治療剤又は予防剤として好適に利用することができる。
【００１４】
【化４】

（上記一般式（Ｉ）中の記号は、それぞれ以下の意味を有する。
Ｒ^１〜Ｒ^４：同一又は異なって、水素原子、低級アルキル、−Ｃ（＝Ｏ）−低級アルキル、又は−低級アルキレン−アリール、
Ｒ^５〜Ｒ^１１：同一又は異なって、水素原子、低級アルキル、ハロゲン、ハロゲン置換低級アルキル、−ＯＨ、−Ｏ−低級アルキル、−低級アルキレン−ＯＨ、−低級アルキレン−Ｏ−低級アルキル、−Ｏ−低級アルキレン−Ｏ−低級アルキル、−Ｏ−低級アルキレン−アリール、−Ｏ−低級アルキレン−ＣＯＯＨ、−Ｏ−低級アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ_２、−Ｏ−低級アルキレン−ＯＨ、−Ｏ−低級アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−低級アルキル、−Ｏ−低級アルキレン−ＮＨ_２、−低級アルキレン−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−低級アルキル、−ＣＯＯＨ、−ＮＯ_２、−ＣＮ、−ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−低級アルキル、−ＳＯ_２−低級アルキル、又は−ＳＯ_２−アリール、
但し、Ｒ^５及びＲ^６並びに／又はＲ^８及びＲ^９は、ベンゼン環上の隣接する炭素原子に結合するときは、一体となってベンゼン環をそれぞれ形成しても良い。）
【００１５】
なお、本発明化合物と特許文献１及び２に記載された化合物とは、本発明化合物が、２個のベンゼン環が必ずジフルオロメチレン（−ＣＦ_２−）を介して結合する点等において、構造を異にするものである。
【００１６】
【発明の実施の形態】
以下、本発明（本発明化合物）の実施の形態を具体的に説明する。
本明細書中の一般式の定義において「低級」なる用語は、特に断らない限り、炭素数が１〜６の直鎖又は分枝状の炭素鎖を意味する。従って「低級アルキル」としては、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ヘキシル、イソヘキシル等の直鎖又は分枝状のＣ_１−６アルキルが挙げられる。これらの中では炭素数１〜３のものが好ましく、メチル、エチルが特に好ましい。
「低級アルキレン」としては、メチレン、エチレン、プロピレン、ブチレン等の他、分枝を有した低級アルキレンでも良い。メチレン及びエチレンが好ましく、メチレンが特に好ましい。
「ハロゲン」としては、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子が挙げられるが、中でも、フッ素原子、塩素原子及び臭素原子が好ましい。「ハロゲン置換低級アルキル」としては、上記ハロゲン原子によって置換された上記低級アルキルが挙げられ、特にトリフルオロメチル等の、フッ素原子で置換されたものが好ましい。
【００１７】
「アリール」とは、炭素数が６〜１４個の１〜３環系芳香族炭化水素環基を意味する。例えば、フェニル、ナフチル、アントリル、フェナントリル等が挙げられ、特にフェニル及びナフチルが好ましい。「−低級アルキレン−アリール」としては、特にベンジル及びフェネチルが好ましい。
また、Ｒ^５及びＲ^６並びに／又はＲ^８及びＲ^９は、ベンゼン環上の隣接する炭素原子に結合するときは、一体となってベンゼン環をそれぞれ形成しても良い。
【００１８】
また、本発明化合物には、互変異性体、光学異性体等の各種の異性体の混合物や単離されたものが含まれる。
本発明化合物は、酸付加塩を形成する場合がある。また、置換基の種類によっては塩基との塩を形成する場合もある。かかる塩としては、具体的には、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等の鉱酸；ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸等の有機酸；アスパラギン酸、グルタミン酸等の酸性アミノ酸との酸付加塩、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム、アルミニウム等の無機塩基；メチルアミン、エチルアミン、エタノールアミン等の有機塩基；リジン、オルニチン等の塩基性アミノ酸との塩やアンモニウム塩等が挙げられる。
【００１９】
更に、本発明化合物には、水和物、製薬学的に許容可能な各種溶媒和物や結晶多形の物質等も含まれる。
なお、当然のことながら、本発明化合物は後述する実施例に記載された化合物に限定されるものではなく、上記一般式（Ｉ）で示される化合物及びその製薬学的に許容される塩の全てを包含するものである。
【００２０】
また、本発明化合物には、生体内において代謝されて上記一般式（Ｉ）に示される化合物、又はその塩に変換される化合物、いわゆるプロドラッグもすべて含むものである。本発明化合物のプロドラッグを形成する基としては、Ｐｒｏｇ．Ｍｅｄ．５：２１５７−２１６１（１９８５）に記載されている基や、広川書店１９９０年刊「医薬品の開発」第７巻分子設計１６３〜１９８頁に記載されている基が挙げられる。
【００２１】
［製造法］
本発明化合物は、その基本骨格或いは置換基の種類に基づく特徴を利用し、種々の公知の合成法を適用して製造することができる。その際、官能基の種類によっては、この官能基を原料又は中間体の段階で適当な保護基、即ち、容易にこの官能基に転化可能な基に置き換えておくことが製造技術上、効果的な場合がある。しかるのち、必要に応じて保護基を除去し、所望の化合物を得ることができる。このような官能基としては例えば水酸基やカルボキシル基等を挙げることができ、それらの保護基としては例えばグリーン（Ｇｒｅｅｎｅ）及びウッツ（Ｗｕｔｓ）著、「ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅＧｒｏｕｐｓｉｎＯｒｇａｎｉｃＳｙｎｔｈｅｓｉｓ」第２版に記載の保護基を挙げることができ、これらを反応条件に応じて適宜用いればよい。
【００２２】
以下に本発明化合物の代表的な製造法を説明する。
（製造法）
製造法は、下記反応式に示すように、ハロベンゼン誘導体（１）とラクトン誘導体（２）で付加反応を行い化合物（３）を得、酸化して安息香酸誘導体（４）を得た後、還元して化合物（５）を得、アミド化し化合物（６）を得、置換反応でベンゾフェノン誘導体（７）を得、そのカルボニル基の部分でジチオケタール（８）へ導いた後フッ素化して化合物（Ｉ）を得、必要により脱保護して、Ｒ^１〜Ｒ^４が水素原子である化合物を得る方法である。
【００２３】
【化５】

（上記反応式中、Ｒ^１〜Ｒ^１１は前掲と同じものを意味し、ＸはハロゲンをＹは低級アルキルを意味する。また、ｎは０または１を意味する。）
【００２４】
ハロベンゼン誘導体（１）とラクトン誘導体（２）の付加反応は、ｎ−ブチルリチウム、ｓｅｃ−ブチルリチウム、ｔｅｒｔ−ブチルリチウム等のアルキルリチウム試薬の存在下、不活性な溶媒中で行われる。溶媒の具体例としては、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジグライム等のエーテル類等が挙げられ、反応基質の種類、反応条件に応じて適宜選択される。反応温度は、原料化合物の種類、反応条件等により異なるが、通常冷却〜還流下、好ましくは約−８０℃〜約３０℃である。
【００２５】
酸化反応は常法の酸化、例えば適当な酸と、酸化剤の存在下、適当な溶媒中で行うことができる。酸の具体例としてはスルファミン酸などが挙げられ、酸化剤の具体例としては亜塩素酸ナトリウムなどが挙げられる。溶媒の具体例としてはアセトン、酢酸エチル、ジクロロメタン、クロロホルム、水、これらの混合溶媒が挙げられ、反応基質の種類、反応条件に応じて適宜選択される。反応温度は、原料化合物の種類、反応条件等により異なるが、通常冷却〜還流下、好ましくは約−１０℃〜約３０℃である。
【００２６】
還元反応は常法の還元、例えば適当な還元剤及び酸触媒の存在下、適当な溶媒中で行うことができる。還元剤の具体例としては、トリエチルシラン、トリイソプロピルシラン、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラン等が挙げられ、酸触媒としては、三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体、トリフルオロ酢酸、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル等が挙げられる。溶媒の具体例としては、クロロホルム、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタンのようなハロゲン化アルキル類；ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジグライム等のエーテル類；アセトニトリル；これらの混合溶媒が挙げられ、反応基質の種類、反応条件に応じて適宜選択される。反応温度は、原料化合物の種類、反応条件等により異なるが、通常冷却〜還流下、好ましくは約−４０℃〜約２０℃である。
【００２７】
アミド化は、適当な溶媒中で塩化オキザリルや塩化チオニルと反応させ、酸クロリドを得た後に、この酸クロリドを適当な溶媒中で適当な塩基の存在下、Ｎ，Ｏ−ジメトキシヒドロキシルアミンなどのアミンと反応させることによって行われるか、或いは適当な溶媒中で適当な塩基、および１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ジシクロヘキシルカルボジイミドなどの縮合剤の存在下、安息香酸誘導体と、Ｎ，Ｏ−ジメトキシヒドロキシルアミンなどのアミンを反応させることによって実施するのが好ましい。塩基の具体例としてはトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリンなどが挙げられる。溶媒の具体例としてはテトラヒドロフラン、ジオキサンなどのエーテル類；ジメチルホルムアミドなどのアミド類；アセトニトリル；これらの混合溶媒が挙げられ、反応基質の種類、反応条件に応じて適宜選択される。反応温度は、原料化合物の種類、反応条件等により異なるが、通常冷却〜還流下、好ましくは約−２０℃〜約６０℃である。
【００２８】
置換反応は適当な求核試薬の存在下、適当な溶媒中で行われる。求核試薬の具体例としてはグリニヤール試薬、定法によって調整されるアリールリチウム試薬などが挙げられる。溶媒の具体例としては、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジグライム等のエーテル類等が挙げられ、反応基質の種類、反応条件に応じて適宜選択される。反応温度は、原料化合物の種類、反応条件等により異なるが、通常冷却〜還流下、好ましくは約−８０℃〜約８０℃である。
ジチオケタール化は適当なジチオールおよび適当な酸触媒の存在下、適当な溶媒中で行われる。ジチオールの具体例としては、１，２−エタンジチオール、１，３−プロパンジチオールなどが挙げられる。酸触媒の具体例としては三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体、トリフルオロ酢酸、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル等が挙げられる。溶媒の具体例としては、クロロホルム、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン等のハロゲン化アルキル類；ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジグライム等のエーテル類；アセトニトリル；これらの混合溶媒が挙げられ、反応基質の種類、反応条件に応じて適宜選択される。反応温度は、原料化合物の種類、反応条件等により異なるが、通常冷却〜還流下、好ましくは約−４０℃〜約３０℃である。
ジフルオロ化は適当なフッ素化剤の存在下、適当な溶媒中で行われる。フッ素化剤の具体例としては、フッ化水素ピリジン錯体、（ジメチルアミノ）サルファートリフルオリド、トリス（ジメチルアミノ）サルファー（トリメチルシリル）ジフルオリドなどが挙げられる。溶媒の具体例としてはクロロホルム、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン等のハロゲン化アルキル類；ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジグライム等のエーテル類；アセトニトリル；これらの混合溶媒が挙げられ、反応基質の種類、反応条件に応じて適宜選択される。反応温度は、原料化合物の種類、反応条件等により異なるが、通常冷却〜還流下、好ましくは約−８０℃〜約３０℃である。
【００２９】
脱保護は適当な塩基の存在下、適当な溶媒中で行われる。塩基の具体的な例としては水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシドなどが挙げられる。溶媒の具体的な例としてはテトラヒドロフラン、ジオキサン、ジグライムなどのエーテル類；メタノール、エタノール、イソプロパノールなどのアルコール類；アセトニトリル；水；これらの混合溶媒が挙げられ、反応基質の種類、反応条件に応じて適宜選択される。反応温度は、原料化合物の種類、反応条件等により異なるが、通常冷却〜還流下、好ましくは約０℃〜約１００℃である。
また、この脱保護はパラジウム−炭素、水酸化パラジウム、白金−炭素などの金属触媒の存在下適当な溶媒中水素雰囲気下で行うか、或いは適当なルイス酸存在下適当な溶媒中で行うこともできる。ルイス酸の具体例としては三塩化ホウ素、三臭化ホウ素、三塩化アルミニウムなどが挙げられ、溶媒の具体例としてはテトラヒドロフラン、ジオキサンなどのエーテル類；酢酸エチルなどのエステル類；メタノール、エタノールなどのアルコール類；アセトニトリル；これらの混媒が挙げられ、反応基質の種類、反応条件に応じて適宜選択される。反応温度は、原料化合物の種類、反応条件等により異なるが、通常冷却〜還流下、好ましくは約−８０℃〜約３０℃である。
【００３０】
【発明の効果】
本発明化合物は、Ｎａ^＋−グルコース共輸送体阻害作用を有しており、糖尿病、特にインスリン非依存性糖尿病（２型糖尿病）、インスリン依存性糖尿病（１型糖尿病）に有効である。また、インスリン抵抗性疾患、肥満、及び脂肪肝等にも有効である。本発明化合物の顕著なＮａ^＋−グルコース共輸送体阻害作用は、以下に示す試験方法により確認された。
【００３１】
［ヒトＮａ^＋−グルコース共輸送体（ヒトＳＧＬＴ２）阻害試験］
１）ヒトＳＧＬＴ２発現ベクターの作製
まず、ＳｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔＩＩ（Ｇｉｂｃｏ社製）とランダムヘキサマーを用いて、ヒト腎臓由来の全ＲＮＡ（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ社製）から１本鎖ｃＤＮＡを逆転写した。次に、これを鋳型とし、ＰｙｒｏｂｅｓｔＤＮＡポリメラーゼ（Ｔａｋａｒａ社製）を用いたＰＣＲ反応により、ヒトＳＧＬＴ２（ＷｅｌｌｓＲ．Ｇ．ｅｔａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，１９９２，２６３（３）Ｆ４５９）をコードするＤＮＡ断片を増幅した（このＤＮＡ断片の５’側にＨｉｎｄＩＩＩサイトが、３’側にＥｃｏＲＩサイトが導入されるようなプライマーを用いた）。
【００３２】
増幅された断片をＴｏｐｏＴＡＣｌｏｎｉｎｇキット（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）を用いてｐＣＲ２．１−Ｔｏｐｏベクターにクローニングし、大腸菌ＪＭ１０９株のコンピテントセルに導入して、アンピシリン耐性を示すクローンをアンピシリン（１００ｍｇ／Ｌ）を含むＬＢ培地中で増殖した。増殖した大腸菌からＨａｎａｈａｎの方法（Ｍａｎｉａｔｉｓら、ＭｏｌｅｃｕｌａｒＣｌｏｎｉｎｇを参照）によりプラスミドを精製し、このプラスミドをＨｉｎｄＩＩＩ、ＥｃｏＲＩ消化して得られるヒトＳＧＬＴ２をコードするＤＮＡ断片を、発現ベクターｐｃＤＮＡ３．１（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）の同サイトにＴ４ＤＮＡリガーゼ（ＲｏｃｈｅＤｉａｇｏｎｏｓｔｉｃｓ社製）を用いてライゲーションし、クローニングした。ライゲーションしたクローンを、上記と同様に大腸菌ＪＭ１０９株のコンピテントセルに導入し、アンピシリンを含むＬＢ培地中で増殖させ、Ｈａｎａｈａｎの方法によりヒトＳＧＬＴ２発現ベクターを取得した。
【００３３】
２）ヒトＳＧＬＴ２安定発現細胞の作製
ヒトＳＧＬＴ２発現ベクターをＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００（Ｇｉｂｃｏ社製）を用いてＣＨＯ−Ｋ１細胞に導入した。遺伝子導入後、細胞をペニシリン（５０ＩＵ／ｍＬ。大日本製薬社製）、ストレプトマイシン（５０μｇ／ｍＬ。大日本製薬社製）、Ｇｅｎｅｔｉｃｉｎ（４０μｇ／ｍＬ。Ｇｉｂｃｏ社製）と１０％ウシ胎児血清を含むＨａｍ’ｓＦ１２培地（日水製薬社製）中で、３７℃、５％ＣＯ_２存在下で２週間培養し、Ｇｅｎｅｔｉｃｉｎ耐性のクローンを得た。これらのクローンの中からヒトＳＧＬＴ２を安定発現する細胞を、定常レベルに対するナトリウム存在下の糖取り込みの比活性を指標に選択し取得した。
【００３４】
３）メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド取り込み阻害活性の測定
ヒトＳＧＬＴ２安定発現ＣＨＯ細胞の培地を除去し、１ウェルあたり前処置用緩衝液（塩化コリン１４０ｍＭ、塩化カリウム２ｍＭ、塩化カルシウム１ｍＭ、塩化マグネシウム１ｍＭ、２−［４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジニル］エタンスルホン酸１０ｍＭ、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン５ｍＭを含む緩衝液ｐＨ７．４）を１００μＬ加え、３７℃で２０分間静置した。
【００３５】
試験化合物を含む取り込み用緩衝液（塩化ナトリウム１４０ｍＭ、塩化カリウム２ｍＭ、塩化カルシウム１ｍＭ、塩化マグネシウム１ｍＭ、メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド５０μＭ、２−［４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジニル］エタンスルホン酸１０ｍＭ、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン５ｍＭを含む緩衝液ｐＨ７．４）１０００μＬに１１μＬのメチル−α−Ｄ−（Ｕ−１４Ｃ）グルコピラノシド（ＡｍｅｒｓｈａｍＰｈａｒｍａｃｉａＢｉｏｔｅｃｈ社製）を加え混合し、取り込み用緩衝液とした。対照群に試験化合物を含まない取り込み用緩衝液を調製した。また、試験化合物及びナトリウム非存在下の基礎取り込み測定用に塩化ナトリウムに替えて１４０ｍＭの塩化コリンを含む基礎取り込み用緩衝液を同様に調製した。
【００３６】
前処置用緩衝液を除去し、取り込み用緩衝液を１ウェルあたり２５μＬずつ加え３７℃で２時間静置した。取り込み用緩衝液を除去し、洗浄用緩衝液（塩化コリン１４０ｍＭ、塩化カリウム２ｍＭ、塩化カルシウム１ｍＭ、塩化マグネシウム１ｍＭ、メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド１０ｍＭ、２−［４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジニル］エタンスルホン酸１０ｍＭ、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン５ｍＭを含む緩衝液ｐＨ７．４）を１ウェルあたり２００μＬずつ加え、すぐに除去した。この洗浄操作を更に１回行い、０．５％ラウリル硫酸ナトリウムを１ウェルあたり２５μＬずつ加え、細胞を可溶化した。ここに７５μＬのマイクロシンチ４０（Ｐａｃｋａｒｄ社製）を加えマイクロシンチレーションカウンタートップカウント（Ｐａｃｋａｒｄ社製）にて放射活性を計測した。対照群の取り込み量から基礎取り込み量を差し引いた値を１００％とし、取り込み量の５０％阻害する濃度（ＩＣ_５０値）を濃度−阻害曲線から最小二乗法により算出した。
その結果、本発明化合物は、強いＮａ^＋−グルコース共輸送体阻害作用を示した。本発明の代表的化合物のＩＣ_５０値は下記表１の通りである。
【００３７】
【表１】

【００３８】
本発明化合物や、その製薬学的に許容される塩の１種又は２種以上を有効成分として含有する医薬組成物は、通常用いられている製剤用の担体や賦形剤、その他の添加剤を用いて、錠剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、液剤、注射剤、坐剤、軟膏、貼付剤等に調製され、経口的又は非経口的に投与される。
【００３９】
本発明化合物のヒトに対する臨床投与量は適用される患者の症状、体重、年齢や性別等を考慮して適宜決定されるが、通常成人１日当たり経口で０．１〜５００ｍｇ、非経口で０．０１〜１００ｍｇであり、これを１回或いは数回に分けて投与する。投与量は種々の条件で変動するので、上記投与量範囲より少ない量で十分な場合もある。
【００４０】
本発明化合物の経口投与のための固体組成物としては、錠剤、散剤、顆粒剤等が用いられる。このような固体組成物においては、一つ又はそれ以上の活性物質が、少なくとも一つの不活性な希釈剤、例えば乳糖、マンニトール、ブドウ糖、ヒドロキシプロピルセルロース、微結晶セルロース、デンプン、ポリビニルピロリドン、メタケイ酸アルミン酸マグネシウムと混合される。組成物は、常法に従って、不活性な希釈剤以外の添加剤、例えばステアリン酸マグネシウムのような滑沢剤や繊維素グリコール酸カルシウムのような崩壊剤、ラクトースのような安定化剤、グルタミン酸、アスパラギン酸のような可溶化剤又は溶解補助剤を含有していてもよい。錠剤又は丸剤は必要により糖衣又は胃溶性若しくは腸溶性物質のフィルムで被膜してもよい。
【００４１】
経口投与のための液体組成物は、薬剤的に許容される乳濁剤、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤等を含み、一般的に用いられる不活性な希釈剤、例えば精製水、エチルアルコールを含む。この組成物は不活性な希釈剤以外に可溶化剤、溶解補助剤、湿潤剤、懸濁剤のような補助剤、甘味剤、風味剤、芳香剤、防腐剤を含有していてもよい。非経口投与のための注射剤としては、無菌の水性又は非水性の溶液剤、懸濁剤、乳濁剤を包含する。水性の溶液剤、懸濁剤の希釈剤としては、例えば注射剤用蒸留水及び生理食塩水が含まれる。非水溶性の溶液剤、懸濁剤の希釈剤としては、例えばプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油のような植物油、エチルアルコールのようなアルコール類、ポリソルベート８０（商品名）等がある。
【００４２】
このような組成物は、更に等張化剤、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、安定化剤、可溶化剤、溶解補助剤のような添加剤を含んでもよい。これらは例えばバクテリア保留フィルターを通す濾過、殺菌剤の配合又は照射によって無菌化される。これらはまた無菌の固体組成物を製造し、使用前に無菌水又は無菌の注射用溶媒に溶解して使用することもできる。
【００４３】
【実施例】
以下、本発明（本発明化合物）を実施例によってさらに具体的に説明する。
なお、本発明化合物の原料化合物には新規な化合物も含まれているため、これらの製造例を参考例として記載する。
【００４４】
参考例１
１−ブロモ−３−ジエトキシメチルベンゼン（６．７ｍＬ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液に−７８℃にてｎ−ブチルリチウムの１．６Ｍヘキサン溶液（１９．３ｍＬ）を滴下し、１時間撹拌した。次いで２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンジルグルコノラクトン（１６．６ｇ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液を滴下し１時間撹拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後減圧下溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル−ｎ−ヘキサン）で精製して２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンジル−１−Ｃ−［３−（ジエトキシメチル）フェニル］−Ｄ−グルコピラノース（１５．８ｇ）を得た。
【００４５】
参考例２
２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンジル−１−Ｃ−［３−（ジメトキシメチル）フェニル］−Ｄ−グルコピラノース（１５．８ｇ）のアセトン−水＝２：１（２００ｍＬ）溶液にスルファミン酸（４．２７ｇ）と亜塩素酸ナトリウム（４．９７ｇ）を加え、室温にて２４時間撹拌した。アセトンを減圧下留去し、残渣に水を加えて酢酸エチルで抽出した。有機層を水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を濃縮し、３−［２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−グルコピラノース−１−Ｃ］−イル−安息香酸（１７．０ｇ）を得た。
【００４６】
参考例３
３−［２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−グルコピラノース−１−Ｃ］−イル−安息香酸（１７．０ｇ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）溶液にトリエチルシラン（８．３ｍＬ）とトリフルオロ酢酸（２．０ｍＬ）を加え、室温にて２４時間撹拌した。反応液に水を加え、クロロホルムで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過後減圧下溶媒を留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル−ｎ−ヘキサン）で精製し、３−［（１Ｓ）−１，５−アンヒドロ−２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−グルシトール−１−イル］安息香酸（１０．６ｇ）を得た。
【００４７】
参考例４
３−［（１Ｓ）−１，５−アンヒドロ−２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−グルシトール−１−イル］安息香酸（９．１４ｇ）のＴＨＦ（８０ｍＬ）溶液に０℃にてオキザリルクロリドの２．９Ｍジクロロメタン溶液（４．９ｍＬ）を滴下し、ＤＭＦ（１．０ｍＬ）を加えて２時間撹拌した。次いで、Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（３９ｇ）、Ｎ−メチルモルホリン（３．２ｍＬ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を加え、室温にて１時間撹拌した。反応液を塩化アンモニウム水溶液に空け、ジエチルエーテルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過後減圧下溶媒を留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル−ｎ−ヘキサン）で精製し、３−［（１Ｓ）−１，５−アンヒドロ−２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−グルシトール−１−イル］−Ｎ−メチル−Ｎ−メトキシベンズアミド（９．６４ｇ）を得た。
【００４８】
参考例５
３−［（１Ｓ）−１，５−アンヒドロ−２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−グルシトール−１−イル］−Ｎ−メチル−Ｎ−メトキシベンズアミド（０．３９ｇ）のジエチルエーテル（２．０ｍＬ）溶液に０℃にて４−エチルフェニルマグネシウムブロミドの０．８５Ｍジエチルエーテル溶液（２．０ｍＬ）を加え、室温にて１．５時間撹拌した。反応液を氷水に空け、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過後減圧下溶媒を留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン）で精製し、（４−エチルフェニル）［３‐（（１Ｓ）−１，５−アンヒドロ−２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−グルシトール−１−イル）フェニル］メタノン（０．３４ｇ）を得た。
【００４９】
参考例６
（４−エチルフェニル）［３‐（（１Ｓ）−１，５−アンヒドロ−２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−グルシトール−１−イル）フェニル］メタノン（２．２５ｇ）のジクロロメタン（２０ｍＬ）溶液に−７８℃にて三塩化ホウ素の１．０Ｍジクロロメタン溶液（６１．３ｍＬ）を滴下し、１時間撹拌した。反応液を氷水に空け、ジエチルエーテルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過後減圧下溶媒を留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール：クロロホルム）で精製した。得られた残渣をピリジン（１．０ｍＬ）に溶解し、無水酢酸（０．８５ｍＬ）を加えて室温にて時間撹拌した。反応液を氷水に空け、酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過後減圧下溶媒を留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン）で精製し（４−エチルフェニル）［３‐（（１Ｓ）−２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−１，５−アンヒドロ−Ｄ−グルシトール−１−イル）フェニル］メタノン（１．０７ｇ）を得た。
【００５０】
参考例７
（４−エチルフェニル）［３‐（（１Ｓ）−２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−１，５−アンヒドロ−Ｄ−グルシトール−１−イル）フェニル］メタノン（０．４５ｇ）のジクロロメタン（５．０ｍＬ）溶液に１，２−エタンジチオール（０．０７ｍＬ）と三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（１．２３ｍＬ）を加え、室温にて１２時間撹拌した。反応液を酢酸エチルで希釈し、水、２０％炭酸カリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過後減圧下溶媒を留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン）で精製し、（１Ｓ）−２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−１，５−アンヒドロ−１−｛３−［２−（４−エチルフェニル）−１，３−ジチオラン−２−イル］フェニル｝−Ｄ−グルシトール（０．４６ｇ）を得た。
【００５１】
参考例８
（４−エチルフェニル）［３‐（（１Ｓ）−１，５−アンヒドロ−２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−グルシトール−１−イル）フェニル］メタノン（１．６６ｇ）から参考例７と同様の方法で（１Ｓ）−１，５−アンヒドロ−２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンジル−１−｛３−［２−（４−エチルフェニル）−１，３−ジチオラン−２−イル］フェニル｝−Ｄ−グルシトール（０．１６ｇ）を得た。
【００５２】
実施例１
参考例８で得られた（１Ｓ）−１，５−アンヒドロ−２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンジル−１−｛３−［２−（４−エチルフェニル）−１，３−ジチオラン−２−イル］フェニル｝−Ｄ−グルシトール（０．１６ｇ）のジクロロメタン（３．０ｍＬ）溶液を−７８℃にて７０％ＨＦ−ピリジン錯体（２．４ｍＬ）と塩化スルフリル（０．３ｍＬ）のジクロロメタン（３．０ｍＬ）溶液に滴下し、０．５時間撹拌した。反応液にフッ化カリウム（３．０ｇ）、アルミナ（３．０ｇ）、硫酸マグネシウム（２．５ｇ）を加え、セライト濾過した。濾液を濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン）で精製して（１Ｓ）−１，５−アンヒドロ−２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンジル−１−｛３−［（４−エチルフェニル）（ジフルオロ）メチル］フェニル｝−Ｄ−グルシトール（０．０４３ｇ）を得た。
【００５３】
実施例２
参考例７で得られた（１Ｓ）−２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−１，５−アンヒドロ−１−｛３−［２−（４−エチルフェニル）−１，３−ジチオラン−２−イル］フェニル｝−Ｄ−グルシトール（０．４６ｇ）から実施例１と同様の方法で（１Ｓ）−２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−１，５−アンヒドロ−１−｛３−［（４−エチルフェニル）（ジフルオロ）メチル］フェニル｝−Ｄ−グルシトール（０．４６ｇ）を得た。
【００５４】
実施例３
（１Ｓ）−２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−１，５−アンヒドロ−１−｛３−［（４−エチルフェニル）（ジフルオロ）メチル］フェニル｝−Ｄ−グルシトール（０．４６ｇ）のメタノール：ＴＨＦ＝１：１（６．０ｍＬ）溶液にナトリウムメトキシド（３７ｍｇ）を加え、室温にて０．５時間撹拌した。反応液に陽イオン交換樹脂を加え、中和した後に濾過し、濾液を濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール：クロロホルム）で精製して（１Ｓ）−１，５−アンヒドロ−１−｛３−［（４−エチルフェニル）（ジフルオロ）メチル］フェニル｝−Ｄ−グルシトール（０．１９ｇ）を得た。
【００５５】
上記参考例化合物、及び実施例化合物の構造式と物理化学的性状を表２〜４に示す。また、表５に記載する化合物は、上記実施例又は製造法に記載の方法と同様にして、又はそれらに当業者に自明の若干の変法を適用して容易に製造することができる。なお、表中の記号は以下の意味を有する。
Ｒｆ．：参考例番号、Ｅｘ．：実施例番号、ＳＴＲＵＣＴＵＲＥ：構造式、Ｂｎ：ベンジル基、Ａｃ：アセチル基、Ｍｅ：メチル基、Ｅｔ：エチル基、ＤＡＴＡ：物性データ、ＮＭＲ：核磁気共鳴スペクトル（ＴＭＳ内部標準）、ＭＳ：質量分析値
【００５６】
【表２】

【００５７】
【表３】

【００５８】
【表４】

【００５９】
【表５】

Claims

下記一般式（Ｉ）で示されるジフルオロジフェニルメタン誘導体及びその塩。

（上記一般式（Ｉ）中の記号は、それぞれ以下の意味を有する。
Ｒ^１〜Ｒ^４：同一又は異なって、水素原子、低級アルキル、−Ｃ（＝Ｏ）−低級アルキル、又は−低級アルキレン−アリール、
Ｒ^５〜Ｒ^１１：同一又は異なって、水素原子、低級アルキル、ハロゲン、ハロゲン置換低級アルキル、−ＯＨ、−Ｏ−低級アルキル、−低級アルキレン−ＯＨ、−低級アルキレン−Ｏ−低級アルキル、−Ｏ−低級アルキレン−Ｏ−低級アルキル、−Ｏ−低級アルキレン−アリール、−Ｏ−低級アルキレン−ＣＯＯＨ、−Ｏ−低級アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ_２、−Ｏ−低級アルキレン−ＯＨ、−Ｏ−低級アルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−低級アルキル、−Ｏ−低級アルキレン−ＮＨ_２、−低級アルキレン−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−低級アルキル、−ＣＯＯＨ、−ＮＯ_２、−ＣＮ、−ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−低級アルキル、−ＳＯ_２−低級アルキル、又は−ＳＯ_２−アリール、
但し、Ｒ^５及びＲ^６並びに／又はＲ^８及びＲ^９は、ベンゼン環上の隣接する炭素原子に結合するときは、一体となってベンゼン環をそれぞれ形成しても良い。）