NL8400338A

NL8400338A - Mytomycine analoga; farmaceutische preparaten; werkwijze voor het behandelen van een neoplasma-ziektetoestand.

Info

Publication number: NL8400338A
Application number: NL8400338A
Authority: NL
Original assignee: University Patents Inc
Priority date: 1983-02-07
Filing date: 1984-02-03
Publication date: 1984-09-03
Also published as: FI80698C; ATA37684A; ES529478A0; ZA84788B; CA1252789A; IE840272L; ES8607305A1; GB8402233D0; PT78067A; JPS59152384A; OA07654A; NZ206932A; GB2134514B; AU2407384A; HU190236B; IL70897A0; NO161374C; FI840502A0; IL70897A; FI80698B

Description

V '3 .V

-1- VO 6056

Mytomycine Analoga; Farmaceutische preparaten; Werkwijze voor het behan-delen van een neoplasma-ziektetoestand.__

De onderhavige uitvinding heeft, in zijn algemeenheid betrekking op antibiotische mitosanverbindingen alsmede op hun gebruik in de behandeling van neoplasma-ziektetoestanden in dieren.

De inhoud van het Amerikaanse octrooischrift 4.268.676; de samen-5 hangende Amerikaanse octrooiaanvrage 206.529 (ingediend 13 november 1980); en de samenhangende Amerikaanse octrooiaanvrage 264.187 (ingediend 15 mei 1981), alle van dezelfde aanvrager, worden door verwijzing hierin inbegrepen voor zover ze essentiële of niet-essentiële materie, verband houdend met de onderhavige uitvinding, bevatten.

10 Kort samengevat verschaffen genoemd Amerikaanse octrooischrift 4.268.676 en genoemde samenhangende octrooiaanvrage 206.529 een beeld van de achtergrond van het voortgaande onderzoek op dit gebied naar nieuwe en bruikbare verbindingen, die structureel verwant zijn met de mitomycinen, die antibiotische werkzaamheid bezitten, een lage toxiciteit 15 hébben en een aanzienlijke mate van anti-tumorwerkzaamheid in dieren ten toon spreiden. Meer in het bijzonder worden daarin nieuwe verbindingen met formule 1 van het formuleblad beschreven, waarin Y waterstof of lage alkyl is; en X een thiazolaminogroep, een furfurylaminogroep of een 12 3 12 groep met de formule -N(R)-CR R R voorstelt, waarin R, R en R gelijk 20 of verschillend zijn en gekozen worden uit de groep, bestaande uit waterstof en lage alkyl, en gekozen wordt uit de groep, bestaande uit lage alkenyl, halogeen-lage alkenyl, lage alkynyl, lage alkoxycarbonyl, thienyl, formamyl, tetrahydrofuryl en benzeensulfonamlde.

Genoemd Amerikaans octrooischrift en genoemde samenhangende oc-25 trooiaanvrage beschrijven ook nieuwe werkwijzen voor het behandelen van neoplasma-ziektetoestanden in dieren, welke werkwijzen de toediening omvatten van een therapeutisch werkzame hoeveelheid van een verbinding met de formule la, waarin Y waterstof of lage alkyl is; en Z een thiazolaminogroep, een furfurylaminogroep, een cyclopropylaminogroep, een pyri- 30 dylaminogrcep, of een groep met de formule -N(R )-CR^R^R^ voorstelt, 4 5 6 waarin R , R , en R gelijk of verschillend zijn en gekozen worden uit de 7 groep, bestaande uit waterstof en lage alkyl, en R gekozen wordt uit de groep, bestaande uit lage alkenyl, halogeen-lage alkenyl, lage alkynyl, lage alkoxycarbonyl, halogeen-lage alkyl, hydroxy-lage alkyl, pyridyl, 35 thienyl, formamyl, tetrahydrofuryl, benzyl, en benzeensulfonamide.

8400338 ' ί ϊ . ? -2-

De samenhangende Amerikaanse octrooiaanvrage 264.187 beschrijft ook verbindingen met een aanzienlijke mate van anti-tumorwerkzaamheid in dieren met de formule 2a, waarin Y waterstof of lage alkyl is; en Z een door lage alkoxy gesubstitueerde quinolinylaminogroep, een door cyano 5 gesubstitueerde pyrazolylaminogroep of een mono- of di-lage alkyl gesubstitueerde thiazolaminogroep, of een stikstof-houdende heterocyclische groep, gekozen uit de groep bestaande uit 1-pyrrolinyl, 1-indolinyl, N-thiazolidinyl, N-morfolinyl, 1-piperazinyl, en N-thiomorfolinyl groepen, of een door cyano, fenyl, carboxamido of lage alkoxy-carbonyl gesubsti-10 tueerde 1-aziridinylgroep, of een door lage alkyl, formyl of acetylfenyl gesubstitueerde 1-piperazinylgroep, of een door hydroxy of piperidyl gesubstitueerde 1-piperidylgroep, of een door lage alkoxy, amino of halogeen gesubstitueerde pyridylaminogroep, of een door carboxamido, mercapto of methyleendioxy gesubstitueerde anilinogroep, of een groep 15 met de formule, -NBR’, waarin R waterstof of lage alkyl is en R' een stikstof-houdende heterocyclische groep gekozen uit de groep bestaande uit quinuclidinyl, pyrazolyl, 1-triazolyl, isoquinolinyl, indazolyl, benzoxazolyl, thiaöiazolyl en benzothiadiazolyl, en door lage alkyl en halogeen gesubstitueerde derivaten daarvan, of een butyrolactonylgroep, 20 of een adamantylgroep, of een mono-lage alkoxy gesubstitueerde fenylgroep, of een gesubstitueerde lage alkylgroep, gekozen uit de groep bestaande uit mercapto lage alkyl, carboxy lage alkyl, mono-, di- en tri-lage alkoxy lage alkyl, lage alkyl thio lage alkyl en lage alkoxycarbonyl gesubstitueerde derivaten daarvan, cyano lage alkyl, mono-, di- en tri-lage 25 alkoxy fenyl lage alkyl, fenyl cylo lage alkyl, 1-pyrrolidinyl lage alkyl, N-lage alkyl pyrrolidinyl lage alkyl, N-morf olinyl lage alkyl, en lage dialkylamino lage alkyl, voorstelt.

Van belang voor de achtergrond van de onderhavige uitvinding zijn verder de volgende publicaties; Amerikaans octrooischrift 3.332.944 van 30 Cosulich, et al; Amerikaans octrooischrift 3.410.867 van Matsui, et al;

Amerikaans octrooischrift 4.231.936 van Nakano, et al; Amerikaans octrooischrift 3.429.894 van Matsui, et al; Amerikaans octrooischrift 4.268.676 van Remers; Amerikaans octrooischrift 3.450,705 van Matsui, et al; Amerikaans octrooischrift 3.514.452 van Matsui,et al; en Imai, et al, Gann, 35 71_, blz. 650 - 562 (1980).

8400338 «. “ · A 4 * -3-

De onderhavige uitvinding verschaft nieuwe verbindingen met formule 3 van het formuleblad, waarin Y waterstof of lage alkyl is; en X een door hydroxy gesubstitueerde 1 -pyrrolidinylgroep of een door lage alkyl gesubstitueerde piperidylgroep of een door acetamino, acetyl, 5 carbamido, cyano, cafboxy lage alkylami.no, di-lage alkoxy, nitro, of sulfamyl gesubstitueerde anilinogroep, of een groep met de formule -NRR^ voorstelt, waarin R waterstof of lage alkyl is en R^ een stikstofhouden-de heterocyclische groep is, gekozen uit de groep bestaande uit door amino gesubstitueerde triazolyl, door lage alkyl gesubstitueerde iso-10 thiazolyl, benzothiazolyl, en door nitro en halogeen gesubstitueerde derivaten van benzothiazolyl, of R* staat- voor een gesubstitueerde lage alkyigroep, gekozen uit de groep bestaande uit amino lage alkyl, lage alkylamino lage alkyl, hydroxy lage alkylamino lage alkyl, hydroxy lage alkoxy lage alkyl, imidazolyl lage. alkyl, nitro gesubstitueerde 15 imidazolyl lage alkyl, mono- en di-hydroxy fenyl lage alkyl, nitro gesubstitueerde pyridylamino lage alkyl, en piperazinyl lage alkyl.

De uitvinding verschaft ook nieuwe werkwijzen, voor het behandelen van neoplasma-ziektetoestanden in dieren, welke werkwijzen de toediening omvatten van een therapeutisch werkzame hoeveelheid van een verbinding 20 met de formule 3a, waarin Y waterstof of lage alkyl is ; en Z. een door hydroxy gesubstitueerde i-pyrrolidinylgroep, of een. door lage alkyl gesubstitueerde. piperidylgroep, of een 1-piperazinylgroep of een door acetamno, acetyl, carbamido, cyano, carboxy lage alkylamino, di-lage alkoxy, nitro, sulfamyl, of lage alkyl gesubstitueerde anilinogroep, of 25 een groep met de formule -NRR* voorstelt, waarin R waterstof of lage alkyl is en R* staat voor een stikstofhoudende heterocyclische groep, gekozen uit de groep bestaande uit amino gesubstitueerde triazolyl, lage alkyl gesubstitueerde isothiazolyl, benzothhzolyl, en nitro en halogeen gesubstitueerde derivaten van benzothiazolyl, of R* staat voor 3Q een gesubstitueerde lage alkyigroep, gekozen uit de groep bestaande uit amino lage alkyl,lage alkylamino lage alkyl, hydroxy lage alkylamino lage alkyl, hydroxy lage alkoxy lage alkyl, Imidazolyl lage alkyl, nitro gesubstitueerde imidazolyl lage alkyl, mono- en di-hydroxy fenyl lage alkyl, nitro gesubstitueerde pyridylamino lage alkyl, piperazinyl lage 35 alkyl en pyridyl ethyl.

Tenzij anders is aangegeven duidt de term "lage”, gebruikt bij "alkyl” groepen, rechte of vertakte groepen met een t/m zes koolstof-atomen aan. Bij wijze van illustratie betekent en omvat "lage alkyl" 8400338 -4- ' * methyl, ethyl/ propyl, butyl, pentyl en hexylgroepen. alsmede isopropyl-groepen, t-butyl groepen en. dergelijke. Evenzo zal de aanduiding "lage" gebruikt bij "alkoxy" een groep met één t/m zes koolstofatomen aanduiden.

Het zal duidelijk zijn dat de verbindingen met. formule 3 alle 5 worden omvat door de omschrijvingen van formule 3a. Anders gezegd,zijn alle nieuwe antibiotische mitomycine derivaten met formule 3 bruikbaar voor het uitvoeren van de nieuwe anti-neoplasma therapeutische methoden waarbij verbindingen met formule 3a worden toegediend..

Mitomycine derivaten volgens de uitvinding worden bereid door de 10 reactie van mitomycine A met de geschikt gekozen amine-verbindingen.

De N-alkylmitomycinne (bijvoorbeeld N-methylmitomycine) derivaten worden evenzo bereid door de reactie van een geselecteerd amine met N-alkylmitomycine A bereid uit mitomycine C, bijvoorbeeld volgens de me-: thoden die in hun algemeenheid zijn beschreven in Cheng et al., J.Med. 15 Chem, 20, No. 6, 767 - 770 (1977). De preparatieve reacties geven in het algemeen het gewenste produkt als een kristallijne vaste stof die gemakkelijk in alcohol oplost.

Therapeutische methoden volgens de uitvinding omvatten de toediening van werkzame hoeveelheden van één of meer van de verbindingen met 20 de formule 3a, als actieve ingrediënt, samen met gewenste farmaceutisch aanvaardbare verdunningsmiddelen, adjuvantia en dragers, aan een dier dat aan een neoplasma-ziektetoestand lijdt. Doseringseenheden van ver- bindingen die volgens de werkwijzen volgens de uitvinding worden toegediend, kunnen variëren van ongeveer 0,001 tot ongeveer 5,0 mg en bij 25 voorkeur van ongeveer 0,004 tot ongeveer 1,0 mg van de verbindingen. Dergelijke hoeveelheden voor doseringseenheden kunnen zodanig worden toegediend dat een dagelijkse dosering van ongeveer 0,1 tot ongeveer 100 mg per kg, en bij voorkeur ongeveer 0,2 tot ongeveer 51,2 mg per kg lichaamsgewicht van het behandelde dier wordt verkregen.

30 De geprefereerde route voor het in de praktijk brengen van de methoden volgens de uitvinding is parenterale toediening, en in het bijzonder intraperitoneale toediening.

Andere aspecten en voordelen van de onderhavige uitvinding zullen bij lezing van de volgende beschrijving duidelijk worden.

35 De volgende voorbeelden I t/m XXXII, waarin de bereiding van be paalde momenteel geprefereerde verbindingen volgens de uitvinding Wordt beschreven, dienen slechts ter toelichting en moge niet beperkend worden 8400338 • k i -5- uitgelegd. Tenzij anders is aangegeven werden alle reacties uitgevoerd bij kamertenperatuur (20°C), zonder toevoeging van warmte. Tenzij anders is aangegeven werd bij alle dunne-laag chromatografische (TLC) procedures die voor controle van de voortgang van reacties werden ge-5 bruikt, een tevoren beklede silicagelplaat en als ontwikkelingsoplos-middel een mengsel van methanol en chloroform (volumeverhouding 2 : 8) toegepast.

Voorbeeld I.

1, la,2,8,8a,8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methyl-6-(3-hydroxy-l-pyrrolidinyl)-azirino [21 , 3* : 3,4] pyrrolo[1,2-a] 10 indool-4,7-dion carbamaat.

Een oplossing van 50 mg mitomycine A in 6 ml watervrije methanol werd onder stikstof bij kamertemperatuur behandeld met 13 mg 3-pyrroli— dinol.Toen dunne-laag chromatografie over silicagel (2:8 methanol-chloroform als oplosmiddel) liet zien dat niet-langer uitgangsmateriaal 15 aanwezig was, werd het mengsel gefiltreerd en onder verminderde druk verdampt. Het residu werd gezuiverd door preparatieve dunne-laag chromatografie, waarbij het zelfde oplosmiddelsysteem werd gebruikt. Deze procedure gaf 23 mg (40 % opbrengst) van het gewenste produkt met een smeltpunt van 82 - 85°C (ontleding). Het produkt gaf de volgende analyse: 20 HMR (DMSO-d., TS): 1 δ1 waarden in ppm.

“ 6

Afwezigheid van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het verschijnen van nieuwe pieken bij. 1,6 - 2,2 (m,2), 2,8 - 3,1 (breed s,5) en 4,0 - 4,3 (m,l)

Voorbeeld II.

25 1,la,2,8,8a,8b-Eexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methyl-6- (3-methylpiperdyl) -azirino [2', 3' : 3,4]pyrrolo [1,2-a]indool- 4,7-dion carbamaat._

Deze verbinding werd met de procedure als beschreven in voorbeeld I bereid. Uit 70 mg mitomycine A en 200 mg 3-methyl piperdine werden 46 mg (55 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen met een smelt- 30 punt van 75 - 88°C (ontleding). Het produkt gaf de volgende analyse: HMR (CDClg, TS): ' δ ' waarden in ppm

Afwezigheid van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het verschijnen van nieuwe pieken bij 0,85 (d,3), 1,10 - 2,15 (m,5) en 2,15 - 3,32 (m,4).

8400338 " y * -6-

Voorbeeld III.

1,13,2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6- (1-pipe-razinyl)— azjrino [2*, 3* : 3,4]pyrrolo-[ 1,2-a]indool-4,7-dion caxbamaat.

Deze verbinding werd met de procedure als beschreven in voorbeeld 5 I bereid. Uit 60 mg mitomycine A en 30 mg watervrij piperazine werden 23 mg (34 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen met een smeltpunt boven. 200°C (ontleding). Het produkt gaf de volgende analyse: NMR (DMSO-dg, TS): '6' waarden in ppm Afwezigheid van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het 10 verschijnen van nieuwe pieken bij 1,9 (breed s,l) en 2,9 (s, 8).

Voorbeeld IV.

1, la, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-[4-(acetylaïïii.no)anilino]-azirino £2', 3' : 3,4]pyrrolo-[1,2-a] indool-4,7-dion carbamaat,.

15 Deze verbinding werd met de procedure als beschreven in voorbeeld 1 bereid. Uit 100 mg mitomycine A en overmaat, 4-(acetylamino)aniline werden 102 mg (76 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen met een smeltpunt van 143 - 145°C (ontleding) . Het produkt gaf de volgende analyse: 20 NMR (CDClg, TS): ·<5' waarden in ppm

Afwezigheid van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het verschijnen van nieuwe pieken bij 2,1 (s,3), 7,4 (d,2), 7,6 (s,1) en 8,9 - 9,3 (s,l).

Voorbeeld V.

25 1, la, 2,8,8a,8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6- [3.-(acetylamino)anilino]-azirino[21, 3' : 3,4]pyrrolo[l,2-a]indool- 4,7-dion carbamaat. __________________

Deze verbinding werd met de procedure als beschreven in voorbeeld I bereid,met deze uitzondering dat een kleine hoeveelheid vast kalium- carbonaat werd toegevoegd. Uit 70 mg mitomycine A en 150 mg 3-(acetyl- 30 amino) aniline werden 67 mg (72 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen met een smeltpunt van 140 - 143°C (ontleding). Het produkt gaf de volgende analyse: NMR (aceton--dg, TS): '5' waarden in ppm

Afwezigheid van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het 35 verschijnen van nieuwe pieken bij 2,1 (s,3), 6,7 - 7,5 (m,4), 8,0 (breeds s,l) en 9,3 (s,l).

8400338 ► * -7-

Voorbeeld VI, I, la ,2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-(4-acetylanilino)-azirino [2*, 3' : 3r4]pyrrolo[1,2-a]indool-4,7-dion carbamaat.____

Deze verbinding werd met de procedure als beschreven in voorbeeld 5 I bereid, met deze uitzondering dat een kleine hoeveelheid vast kalium-carbonaat werd toegevoegd. Dit 70 mg mitornycine A en 510 mg 4-acetyl-ani.i-f.ne werden 25 mg (28 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen met een smeltpunt van 103 - 1Q4°C (ontleding) . Het produkt gaf de volgende analyse: 10 NMR (CDCl^, TS): *5* waarden in ppm

Afwezigheid van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het verschijnen van nieuwe pieken bij 2,1 (s,3), 6,6 (d,2) 7,3 (d,2) en 7,0 - 7,3 (breed s, 1)

Voorbeeld VII.

15 1,1a,2,8,8a,8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6- · [4-(l-ureido)anilino]-azirino[2*, 3' :3,4]pyrrolo[l,2-a]-indool-4,7 dion carbamaat._

Deze carbamido-gesubstitueerde verbinding werd bereid met de in voorbeeld I beschreven procedure. Dit 50 mg mitornycine A en 227 mg 4- (1-ureido) aniline werden 49 mg (67 % opbrengst) van het gewenste pro- 20 dukt verkregen met een smeltpunt van 93 - 95°C (ontleding) . Het produkt gaf de volgende analyse: NMR (CDCly TS) : '5' waarden in ppm.

Afwezigheid van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het verschijnen van nieuwe pieken bij 5,03 (s,2), 6,9 25 (d,2, 7,3 (d,2), 8,0 (s,l) en 8,4 (s,l)

Voorbeeld VIII.

1,1a,2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-(4-cyanoanilino)-azirino [2', 3* :3,4]pyrrolo[l,2-a] indool-4,7 dion carbamaat.______

Deze verbinding werd bereid met de procedure die beschreven is 30 in voorbeeld I, met dit verschil dat een kleine hoeveelheid vast kalium-carbonaat werd toegevoegd. Uit 70 mg mitornycine A en 472 mg 4-aminobenzo-nitrile werden 23 mg (24 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen met een smeltpunt van 124 - 126°C (ontleding). Het produkt gaf de volgende analyse: 8400338 -8- NMR (CDCl^, TS) : ' δ 1 waarden in ppm.

Afwezigheid van de β-methoxy piek bij 4,02 an het verschijnen van nieuwe pieken bij 6,6 (d,2) , 7r4 (d,2) en 7,0 - 7,3 (breeds s,l).

5 Voorbeeld IX.

1,1a,2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-me thyl-6 -(3-cyanoanilino)-azirino[2', 3' :3,4]pyrrolo[1,2-a] indool-4,7,dion carbamaat._· _

Deze verbinding werd bereid met de in voorbeeld I beschreven procedure, behalve dat een kleine hoeveelheid vast kalium-carbonaat werd 10 toegevoegd» Uit 71 mg van mitomycine A en 500 mg 3-aminobenzonitrile werden 30 mg (34 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen met een smeltpunt, van 97 - 98°C (ontleding) » Het produkt. gaf de volgende analysei NMR (CDCl^/TS)" '5' waarden in ppm 15 Afwezigheid van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het verschijnen van nieuwe pieken bij 7,2 - 7,8 (m,4).

Voorbeeld X.

1,1 a, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6- [4-(N-glycyl)anilino]-azirino[2', 3' :3,-4]pyrrolo[l,2-a]indool-4,7 dion carbamaat» 20 Deze verbinding werd. bereid volgens de in voorbeeld I beschreven procedure. Uit 50 mg mitomycine A en 249 mg 4-(N-glycyl) aniline werden 62 mg (90 % opbrengst) van het. gewenste produkt verkregen met een smeltpunt van 83 - 85°C (ontleding) . Het produkt. gaf de volgende analyse: NMR (DMSO-Dg, TS): '5' waarden in ppm 25. Afwezigheid van. de β-methoxy piek. bij 4,02 en het verschijnen van nieuwe pieken bij 3,1 (s,2), 6,3 - 6,6 (breed s,2), 6,6 - 6,8 (breed s,.2) en 6,6 - 7,1 (breed s,2) Voorbeeld XI.

1, la, 2, -, 8 a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-30 ^aféamaatthOX^anilin° ^ “azirino £ 2', 3' : 3,4 ]pyrrolo (1,2-a] indool-4,7-dion

Deze verbinding werd bereid’ met de in voorbeeld I beschreven procedure. Uit 50 mg mitomycine A en 229 mg 3,4-dimethoxyaniline werden 61 mg (91 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen met een smeltpunt van 114 - 116°c (ontleding). Het produkt gaf de volgende analyse: 8400338 ψ * -9- NMR (CDCl^, TS): *6’ waarden in ppm.

Afwezigheid van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het verschijnen van nieuwe pieken bij 3,8 Cs, 6), 6,3 - 6,9 (m, 3) en 7,7 (s,l) 5 Voorbeeld XII.

1,la, 2,8,8a,8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methyl-6-(3,5-dlmethoxyanilino)-azirino[21, 3' :3,4}pyrrolo[1,2-a]indool-4,7 dion carbamaat._'

Deze verbinding werd bereid met de procedure die in voorbeeld I is beschreven. Uit 50 mg mitomycine A en 229 mg 3,5-dimethoxy-10 aniline werden 60 mg (88 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen met een smeltpunt van 98 - 100°C (ontleding). Het produkt gaf de volgende analyse: NMR (CDCl^, TS): ’5' waarden in ppm.

Afwezigheid, van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het 15 verschijnen van nieuwe pieken bij 3,8 (s, 6), 5,9-6,4 (breed s,3) en 7,6 (s, 1)

Voorbeeld XIII.

1, la,2,8,8a,8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-(4-nitroaniline)azirino[21, 3' :3,4)pyrrolo[1,2-a]indool-4,7-dion carbamaat. ______ 20 Deze verbinding werd bereid met de in voorbeeld I beschreven procedure, behalve dat een kleine hoeveelheid vast kalium-carbonaat werd toegevoegd. Uit 70 mg mitomycine A en 276 mg 4-nitroaniline werden 16 mg (9 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen met een smeltpunt van 132 - 134°C (ontleding). Het produkt gaf de volgende analyse: 25 NMR (Aceton-d_, TS): '6' waarden in ppm.

"" O

Afwezigheid van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het verschijnen van nieuwe pieken bij 6,9-7,3 (d,2) 7,4 - 7,9 (d,2) en 7,9 - 8,4 (breed s,l)

Voorbeeld XIV.

30 1,1a,2,3,8a,8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methyl-6- (4-sulfamylanilino)-azirino[21, 3’ :3,4]pyrrolo[1,2-a]indool-4,7-dion carbamaat._____________________

Deze verbinding, werd bereid met de in. voorbeeld I beschreven procedure, behalve dat een kleine hoeveelheid vast kalium-carbonaat werd toegevoegd. Uit 70 mg mitomycine A en 688 mg sulfanilamide werden 35 25 mg (26 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen met een smelt punt van 113 - 115°C (ontleding). Het produkt gaf de volgende analyse: 8400338 ir > -10- NMR (CDCl^/ TS) : 'δ' waarden in ppm.

Afwezigheid van de β-methoxy piek bij 4,02 en het verschijnen van nieuwe pieken bij 7,0 (d,.2) , 7/5 (8,1) en 7,9 (d,2) 5 Voorbeeld XV.

1, la, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-(4-methylanilino)-azirino[2', 3' : 3,4] pyrrolo[1,2-a]indool-4,7-dion carbamaat.. _

Deze verbinding werd bereid met de in voorbeeld I beschreven procedure. Uit 60 mg mitomycine A en overmaat 4-methylaniline werden 10 63 mg (86 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen met een smelt punt van 113 - 115° (ontleding). Het produkt gaf de volgende analyse: NMR (CDClg, TS): ' δ 1 waarden in ppm.

Afwezigheid van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het verschijnen van nieuwe pieken bij 2,3 (s,3), 6,5 - 7,3 15 (breed s,4) en 7,6 (breed s,i).

Voorbeeld XVI.

1,1 a, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-(3-methylanilino)-azirino[2', 3' :3,4]pyrrolo[1,2-a]indool-4.7 dion carbamaat.. _

Deze verbinding werd bereid door de in voorbeeld I beschreven 20 procedure. Uit 70 mg mitomycine A en 276 mg 3-methylaniline werden 66 mg (78 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen met een smeltpunt van 89 - 91°C (ontleding). Het produkt gaf de volgende analyse: NMR (CDCl^, TS): ’δ’ waarden in ppm. ·

Afwezigheid van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het 25 verschijnen van nieuwe pieken bij 2,4 (s,3), 6,7 - 7,5 (m,4) en 7,8 (s,l).

Voorbeeld XVII.

1,1a,2,8,8a,8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methy1-6-[ (5-amino—1,2,4-triazol-3-yl) amino]-azirino[2', 3' :3,4]pyrrolo [1,2,-a3 indool-4,7-dion carbamaat.

30 Deze verbinding werd met de procedure als beschreven in voorbeeld I bereid, met deze uitzondering dat. een kleine hoeveelheid vast kalium-carbonaat werd toegevoegd. Uit 50 mg mitomycine A en 30 mg 3,5-diamlno- 1,2,4-triazool werden 13 mg (5,5 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen met een smeltpunt van 117 - 120°C (ontleding). Het produkt 35 gaf de volgende analyse: 9400338 -11.- NMR (DMSO-dg., TS): 1 δ* waarden in ppm.

Afwezigheid van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het verschijnen van een nieuwe piek bij 5,37 (s,3)

Voorbeeld XVIII.

5 l,la,2,8,8a , 8b-Hexahydro-3- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6- [(3-methylisothiazol-5-yl)amino]-azirino[2', 31 :3,4]pyrrolo [ 1,2-a] indool-5,7-dion carbamaat. ___

Deze verbinding werd bereid, door de in voorbeeld I beschreven procedure met deze uitzondering dat 0,5 ml triethylamine werd toegevoegd. Dit 60 mg mitomycine A en 30 mg 5-amino-3-methylisothiazole 10 hydrochloride werden 4,5 mg(8,5 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen met een smeltpunt van 87-90°C (ontleding). Het produkt gaf de volgende analyse: NMR (CDCl^, TS): 'δ' waarden in ppm.

Afwezigheid van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het 15 verschijnen, van nieuwe pieken bij 2,3 (s,3), 6,1 (s,l) en 6,4 (s,l).

Voorbeeld XIX.

1,1a,2,8,8a,8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-raethyl-6-[(2-benzöthiazolyl)amino]-azirino[2‘, 3' :3,4]pyrrolo[l,2-a]indool- 4,7-dion carbamaat._ 20 Deze verbinding werd volgens de in voorbeeld I beschreven proce dure bereid, behalve dat een kleine hoeveelheid vast kalium-carbonaat werd toegevoegd. Dit 50 mg mitomycine A en 25 mg: 2-aminobenzothiazole werden 12 mg (18 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen met een smeltpunt van 82 - 85°C (ontleding). Het produkt gaf de volgende 25 analyse: NMR (CDClj, TS): '5* waarden in ppm.

Afwezigheid van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het verschijnen van nieuwe pieken bij 7,1 - 8,0 (m,5)

Voorbeeld XX.

30 1,la, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methyl-6- [(6-nitrobenzothkzol-2-yl)amino]-azirino[2*, 3‘ :3,4]pyrrolo [ 1,2-a ] indool-4,7-dion-carbamaat.___

Deze verbinding werd bereid volgens de in voorbeeld I beschreven procedure, behalve dat een kleine hoeveelheid vast kalium-carbonaat werd toegevoegd. Dit 50 mg mitomycine A en 30 mg 2-amino-6-nitrobenzo-35 thiazole werden 20 mg (27 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen met een smeltpunt van 86 - 89°C (ontleding). Het produkt gaf de volgende analyse: 8400338 -12- NMR (DMSO-dg, TS): '<$' waarden in ppm.

Afwezigheid van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het verschijnen van nieuwe pieken bij 6,9-8,3 (m,‘4)

Voorbeeld XXI, 5 1,1a,2,8,8a,8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methyl-6- C(4-chlorobenzothiazol-2-yl)amino]-azirino [2', 3' : 3,4]pyrrolo [1,2-a]indool-4,7-dion-carbamaat._

Deze verbinding, werd bereid volgens de in voorbeeld I beschreven procedure, behalve dat. een kleine hoeveelheid vast kalium-carbonaat werd toegevoegd. Uit 150 mg mitomycine A en 27 mg 2-amino-chlorobenzo-10 thiazole werden. 30 mg (.14 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen met een smeltpunt van 89 - 91°C (ontleding.) . Het produkt gaf de volgende analyse: NMR (CDCl^, TS): '5' waarden in ppm.

Afwezigheid van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het 15 verschijnen van nieuwe pieken bij 7,1 - 8,0 (breed s,4)

Voorbeeld XXII.

1,1a,2,8,8a,8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methyl-6-[(2-aminoethyl)amino]-azirino[2*, 3' :3,4]pyrrolo [l,2-a]indool- 4,7-dion carbamaat.

Deze verbinding werd bereid door de in voorbeeld I beschreven 20 procedure, behalve dat het oplosmiddel dichloromethaan was. Uit 50 mg mitomycine A en 10 mg 1,2-diaminoethaan werden 35 mg (65 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen met een smeltpunt 202 - 205°C (ont-leding). Het produkt gaf de volgende analyse: NMR (CDClg, TS): '5' waarden in ppm.

25 Afwezigheid, van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het verschijnen van de nieuwe pieken bij 1,5 (breed s,2) en 3,5 (breed s,4)

Voorbeeld XXIII.

1, la, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methyl-6~ (methyl(2-methylaminoethyl)amino]-azirino [2', 3' :3,4]pyrrolo 30 (1,2-a] indool-4,7-dion-carbamaat.__

Deze verbinding werd bereid volgens de in voorbeeld I beschreven procedure, behalve dat een kleine hoeveelheid vast kalium-carbonaat werd toegevoegd. Uit 50 mg mitomycine A en 25 mg sym-dimethylethyleen-diamine werden 28 mg (50 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen 35 met een smeltpunt van 99 - 101°C (ontleding). Het produkt gaf de volgende analyse: 8400338

• V

-13- NMR (CDCl^, TS): '5' waarden in ppm.

Afwezigheid van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het verschijnen van de nieuwe pieken 1,3 (s,l), 2,5-(s,6), en 2,7 Cs,4).

5 Voorbeeld XXXV.

1,1a,2,8,8a, 8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methyl-6-[2-(2-hydroxyethylamino)ethylamino]-azirino [2', 3' :3,4]pyrrolo [1,2-a]indool-4,7-dion carbamaat._

Deze verbinding werd. bereid volgens de in voorbeeld I beschreven procedure, behalve dat het oplosmiddel, dichloromethaan was. Uit 50 mg 10 mitomycine A en 18 mg 2-(2-aminoethylamino) ethanol werden 35 mg (58 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen met een smeltpunt van 115 - 118°C (ontleding)« Set produkt gaf de volgende analyse: NMR (CDC1,, TS): '5' waarden in ppm.

Afwezigheid van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het.

15 verschijnen van de nieuwe pieken 2,7 (breed s,7) en 3,7 (t,3).

Voorbeeld XXV.

1, la,2,8,8a,8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-[2-(2-hydroxyethoxy)ethylamino]-azirino [2‘, 3' :3,4]pyrrolo[l,2-a] indool-4,7-dion carbamaat.____ 20 Deze verbinding werd bereid volgens de in voorbeeld I beschreven procedure, behalve dat het oplosmiddel dichloromethaan was. Uit 60 mg mitomycine A en 20 mg 2-(2-aminoethoxy)ethanol werden 30 mg (42 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen met een smeltpunt van 99 -102°C (ontleding). Het produkt gaf de volgende analyse: 25 NMR (CDCij, TS): ’5* waarden in ppm.

Afwezigheid van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het verschijnen van de nieuwe pieken bij 3,3 - 3,9 (breed s,9) en 6,4 - 6,8 (breed s,l).

Voorbeeld xxvi.

30 l,la,2,8,8a,8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methyl-6-[2-(4-imidazolyl)ethylamino]-azirino[2*, 3' :3,4]pyrrolo [1,2-a] indool-4,7-dion carbamaat.

Deze verbinding werd bereid volgens de in voorbeeld I beschreven procedure, behalve dat 128 mg natrium methoxide werden toegevoegd. Uit 70 mg mitomycine A en 368 mg histamine dihydrochloride. werden 61 mg 35 (71 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen met een smeltpunt van 72 - 73°C (ontleding). Het produkt gaf de volgende analyse: 8400338 -14- . <- NMR (DMSO-dg, TS): '5' waarden in ppm.

Afwezigheid van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het verschijnen van de nieuwe pieken, bij 3,0 - 3,27 (m,4) 7,5 (s,l), 8,0 - 8,7 (breed s,2) en 8,1 (s,l).

5 Voorbeeld XXVII.

1,1a,2,.8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-[(2-nitro-l-imidazolyl)ethylamino]-azirino (2', 3' : 3,4]pyrrolo [1,2-a]indool.4,7-dion carbamaat.

Deze verbinding werd volgens de in voorbeeld I beschreven procedure bereid,. Uit 72 mg mitomycine A en overmaat 1- (2-aminoethyl) -2- 10 nitroimidazole werden 60 mg (70 % opbrengst) van het gewenste produkt o ' verkregen met een smeltpunt van 83 - 85 C (ontleding) . Het produkt gaf de volgende analyses NMR (CDCl^t TS): '5' waarden in ppm.

Afwezigheid van de β-methoxy piek bij 4,02 en het 15 verschijnen van de nieuwe pieken bij 3,4 (t,2), 4,6 (t,2), 7,3 (breed s,2) en 7,6 (s,l).

Voorbeeld XXVIII.

1,1a ^, 8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-[2-(4-hydroxyfenyl)ethylamino]-azirino[2', 3' :3,4]pyrrolo[1,2-a] indool-4,7-dion carbamaat._ 20 Deze verbinding werd bereid volgens de in voorbeeld I beschreven procedure. Uit 130 mg mitomycine A en 510 mg tyramine werden 138 mg (81 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen met een smeltpunt van 120 - 125°C (ontleding) . Het produkt gaf de volgende analyse: NMR (CDCl^, TS) : '5* waarden in ppm.

25 Afwezigheid van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het verschijnen van de nieuwe pieken bij 2,6 (t,2), 2,8 (t,2), 6,7 (d,2), 7,0 (d,2) en 8,0 (s,l)

Voorbeeld XXIX.

1, la, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-[2-(3,4-dihydroxyfenyi)ethylamino)-azirino[2', 3' :3,4]pyrrolo 30 [1,2-a]indool-4,7-dion carbamaat._

Deze verbinding werd bereid met de in voorbeeld I beschreven procedure, behalve dat 138 mg natrium-methoxide werden toegevoegd. Uit 110 mg mitomycine A en 660 mg 3 -hydroxytyramine hydrobromide werden 60 mg (40 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen, dat zonder te 35 smelten boven 125°C ontleedde en de volgende analyse gaf: 8400338 -15- NMR (CDCl^f TS) : ’ 51 waarden in ppm.

Afwezigheid van de β-methoxy piek bij 4,02 en het verschijnen van de nieuwe pieken bij 2,6 (t,2)2,8 (t,2), 6,4 - 6,8 (m,3) en 8,3 (breed s,2) 5 Voorbeeld XXX.

1,1a,2,8,8a, 8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl -6-£2—E(5-nitro-2-pyridyl)amino]ethyl amino}-azirino(2', 3' i3,4]pyrrolo [ 1,2-a] indool-4,7-dion-carbamaat._· _

Deze verbinding werd bereid met de in voorbeeld I beschreven procedure, behalve dat het oplosmiddel dichloromethaan was, Uit 50 mg 10 mitomycine A en 30 mg 2-(2-aminoethylamino)-5-nitropyridine werden 40 mg (56 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen met een smeltpunt van 76 - 79°C (ontleding) . Het produkt gaf de volgende analyse: NMR (CDClg, TS') " 1<5 1 waarden in ppm.

Afwezigheid van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het 15 * verschijnen van de nieuwe pieken bij 3,3 - 4,0 (m,4) 6.2 - 6,7 (breed s,2), 8,1 (d,l), 8,2 (d,l) en 9,0 (s,l).

Voorbeeld XXXI.

1, la, 2,8,8a,8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methy1-6-[2- (1-piperazinyl) ethylamino] -azirino [21, 3' : 3,4]pyrrolo [ 1,2-a] 20 indool-4,7-dion carbamaat._

Deze verbinding werd bereid met de in voorbeeld I beschreven procedure, behalve dat het oplosmiddel dichloromethaan was. Uit 50 mg mitomycine A en 20 mg N- (2-aminoethyl) piperazine werden 23 mg (36 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen met een smeltpunt van 25 138 - 141°C (ontleding). Het produkt gaf de volgende analyse: NMR (CDCl^, TS): '<5r waarden in ppm.

Afwezigheid van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het verschijnen van de nieuwe pieken bij 1,6 - 2,1 (breed s,l) 2.2 - 2,6 (breed s,8), 2,6 - 2,8 (breed s,4) en 6,9 (t,l).

30 Voorbeeld XXXII.

1,1a,2,8,8a,8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methyl-6-[2-(2-pyridyl)ethylamino]-azirino[2', 3' :3,4]pyrrolo[1,2-a] indool- 4,7-dion carbamaat.

Deze verbinding werd bereid volgens de in voorbeeld I beschreven procedure. Uit 70 mg mitomycine A en 250 mg overmaat 2-(2-aminoethyl) 35 pyridine werden 51 mg (56 % opbrengst) van het gewenste produkt verkregen met een smeltpunt van 64 - 77°C (ontleding). Het produkt gaf de volgende analyse: 8400338 W Ψ -16- MMR (CDCl^, TS) : "δ1 waarden in ppm.

Afwezigheid van de 6-methoxy piek bij 4,02 en het verschijnen van nieuwe pieken bij 2,8 (m,4) , 7,0 - 7,8 Cm,3) en 8,5 (d,l) 5 In het bijzonder verwijzend naar de door formule 3a omvatte verbindingen, illustreren de bovenstaande voorbeelden de volgende structuurvariaties.

1. Verbindingen waarin Z een door hydroxy gesubstitueerde 1-pyrroli-dinylgroep is, vertegenwoordigd door voorbeeld I.

10 2. Verbindingen waarin Z een door lage alkyl gesubstitueerde piperidyl- groep is, vertegenwoordigd door voorbeeld II.

3. Verbindingen waarin Z een 1-piperazinylgroep of een door acetamino, acetyl, carbamido, cyano, carboxy lage alkylamino, di-lage alkoxy, nitro,· sulfamyl of lage alkyl gesubstitueerde anilinogroep voorstelt, 15 worden respectievelijk vertegenwoordigd door de voorbeelden III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII, XIV, XV en XVI.

4. Verbindingen waarin Z een groep met de formule -NRR* voorstelt, waarin R* een stikstof-houdende.heterocyclische groep is, gekozen uit de groep bestaande uit door amino gesubstitueerde triazolyl, door 20 lage alkyl gesubstitueerde isothiazolyl, benzothiazolyl en nitro en halogeen gesubstitueerde derivaten van benzothiazolyl, worden respectievelijk vertegenwoordigd door de voorbeelden XVII, XVIII, XIX, XX en XXI.

5. Verbindingen waarin Z een groep met de formule -NRR voorstelt, en 25 waarin staat voor een gesubstitueerde lage alkylgroep, gekozen uit de groep bestaande uit amino lage alkyl, lage alkylamino lage alkyl, hydroxy lage alkylamino lage alkyl, hydroxy lage alkoxy lage alkyl, imidazolyl lage alkyl, nitro gesubstitueerde imidazolyl lage alkyl, mono- en di-hydroxy fenyl lage alkyl, nitro gesubstitueerde 30 pyridylamino lage alkyl, piperazinyl lage alkyl en pyridyl ethyl, worden respectievelijk vertegenwoordigd door de voorbeelden XXII, XXIII, XXIV, XXV, XXVI, XXVII, XXVIII, XXIX, XXX, XXXI en XXXII.

Hoewel geen van de bovenstaande voorbeelden verbindingen toelicht,, waarin Y anders is dan waterstof,, worden niettemin verbindingen 35 waarin Y lage alkyl voorstelt door de uitvinding omvat, waartoe verwezen wordt naar op analoge wijze gesubstitueerde verbindingen in het eerder genoemde Amerikaanse octrooischrift 4.268.676 en de samenhangende 8400338 -17- octrooiaanvragen 206.529 en 264.187.

Gemeend wordt dat verbindingen volgens de onderhavige uitvinding anti-bacteriële werkzaamheid tegen gram-positieve en gram-negatieve mi-cro-organismen bezitten op een soortgelijke wijze als is waargenomen 5 voor de in de natuur voorkomende mitomycinen en derhalve potentiële bruikbaarheid bezitten als therapeutische middelen voor het behandelen van bacteriële infecties in mensen en dieren.

De bruikbaarheid van verbindingen met formule 3a in de anti-neo-plasma therapeutische methoden volgens de uitvinding, wordt gedemonstreerd 10 aan de hand van de resultaten van in vivo onderzoeksprocedures waarbij de verbindingen in variërende . doseringshoeveelheden worden toegediend aan muizen, waarin een P388 leukemie-toestand. is opgewekt. De procedures werden uitgevoerd volgens "Lymphocytic Leukemia P388 - Protocol 1.200" in Cancer Chemotherapy Reports deel 3, Vol. 3, No. 2, blz. 9 15 (September, 1972). Kort gezegd omvatten de onderzoekprocedures de toediening van de testverbinding aan CDF vrouwtjesmuizen die tevoren ge- 6 infecteerd waren met 10 ascites cellen die intraperitoneaal waren geïmplanteerd. De testverbindingen werden alleen op de eerste dag van de proeven toegediend, en de dieren werden in een periode van 35 dagen 20 onder andere op vitaliteit gevolgd.

Resultaten van het onderzoek van verbindingen van de voorbeelden X t/m XXXII zijn in onderstaande tabel A vermeld. De getoonde gegevens . omvatten de optimale dosis (nO.D"), dat wil zeggen de dosering in mg/kg lichaamsgewicht van het dier, waarbij constant de maximale therapeutische 25 werkingen, werden waargenomen. Ook wordt de middelbare overlevingsduur ("MSI") vermeld, uitgedrukt als de MST van de testdieren vergeleken met de MST van contröledieren x 100 ("% T/C"). Binnen de context van de bovenstaand vermelde in vivo P388 procedure, vormt een % T/C waarde van 125 of meer een aanwijzing voor een significante anti-neoplasma thera-30 peutische werkzaamheid. De laagste dosis in mg/kg lichaamsgewicht, waarbij de 125 % T/C-waarde werd verkregen, staat bekend als de minimale effectieve dosis (nMED“). Deze doses worden eveneens in tabel A vermeld. Het verdient opmerking dat de exceptioneel hoge MST-waarden, die in de in tabel A vermelde P388 onderzoeken werden verkregen, ook een aanwijzing 35 vormen voor de afwezigheid van een aanmerkelijke toxiciteit van de verbindingen bij de aangegeven doseringen.

8400338 -18- TABEL A.

Voorbeeld Optimale dosis ^ ^ nr> ______' ~ gg/kq· als % ^/C _ X 25,6 163 0,8 H 25,6 238 <0,2 XXX 12,8 200 0,2 xv 25,6 >333 <0,2 v ! 25,6 231 0,2 VI 6,4 167 0,4 vil 25,6 194 1,6 VIII 3,2 150 0,8 IX. 12,8 172 <0,2 x 25,6 322 0,8 XI 12,8 >333 0,2 XII 6,4 161 0,4 xiil 3,2 172 >0,2 xiv 25,6 225 0,2 XV v 12,8 167 0,4 XVI 12,8 181 0,4 XVII 12,8 181 1,6 xvili 25,6 169 0,8 xix 25,6 150 12,8 xx 25,6 128 25,6 XXI 25,6 144 1,6 xxii 372 178 0*4 XXIII 25,6 133 12,8 XXIV 12,8 133 12^8 xxv 25,6 181 0,4 XXVI 25,6 163 1,6 xxvil 25,6 150 3,2 xxviil 25,6 218 1,6 xxix 12,8 139 12,8 xxx 12,8 144 6,4 XXXI 25,6 138 12,8 XXXII -25,6 >375 0,2 8400338 -19-

Tot de meest geprefereerde verbindingen die volgens de uitvinding als aiti-neoplasma middelen worden gebruikt, behoren duidelijk die verbindingen, welke meer dan twee keer het relatieve levensverlengende vermogen vertonen dat in het algemeen kenmerkend wordt geacht als bewijs 5 voor e *n significante therapeutische sterkte, dat wil zeggen die met een MST % '.7/C-waarde groter dan 2 x 125. Men ziet dat de tot die klasse behorende verbindingen de verbindingen van de voorbeelden IV, X, XI en XXXII omvatten.

Zoals men uit tabel A kan zien, vertoonden initiële enkelvoudige 10 doseringen van slechts 0,2 mg/kg reeds een aanzienlijke langdurige anti-neoplasma werkzaamheid. Daarom kunnen de werkwijze volgens de uitvinding de therapeutische toediening omvatten van doseringseeriheden van slechts 0,001 mg, of van wel 5 mg, bij voorkeur 0,004 mg tot 10 mg van de verbindingen als de actieve ingrediënt in een geschikt farmaceutisch prepa-15 raat. Dergelijke preparaten kunnen in een dagelijks schema worden toegediend dat varieert van 0,1 mg tot 100 mg per kg, bij voorkeur ongeveer 0,2 tot ongeveer 51,2 mg per kg lichaamsgewicht van het dier dat aan de neoplasma-ziekte lijdt. Het heeft de voorkeur dat de verbindingen pa-renteraal worden toegediend. Farmaceutische preparaten die voor prak-20 tische toepassing van methoden volgens de uitvinding geschikt zijn, kunnen eenvoudige oplossingen in water van een of meer van de verbindingen met formule 3a omvatten, maar kunnen ook wel bekende farmaceutisch aanvaardbare verdunningsmiddelen, adjuvantia en/of dragers zoals voor medicinaal gebruik geschikte zoutoplossing omvatten.

25 Verdere aspecten en voordelen van de onderhavige uitvinding zul len deskundigen duidelijk worden bij beschouwing van de voorgaande beschrijving en dientengevolge dienen slechts die beperkingen te gelden die in de conclusies zijn vermeld.

• - ---- 8400338

Claims

1. Verbindingen met de formule 3, waarin Y waterstof of lage alkyl is ? en X staat, voor een door hydroxy gesubstitueerde 1-pyrrolidinyl-groep,. of een door lage alkyl gesubstitueerde piperidylgroep, of een door acetamino, acetyl, carbamido, cyano., carboxy lage alkylamino, 5 di^lage alkoxy, nitro of- sulfamyl gesubstitueerde anilinogroep of een groep met. de formule -NRR. ,· waarin R staat voor waterstof of lage alkyl en R1 staat voor een stikstof-houdende heterocyclische groep, gekozen, uit de groep bestaande, uit door amino gesubstitueerde triazolyl, door. lage alkyl gesubstitueerde, isothiazolyl, benzothiazolyl, en door 10 nitro. en halogeen gesubstitueerde derivaten van· benzothiazolyl, of R* staat voor een gesubstitueerde lage alkylgroep, gekozen uit de groep bestaande uit amino lage alkyl, lage alkylamino lage alkyl, hydroxy lage alkylamino lage alkyl, hydroxy lage alkoxy lage alkyl, imidazolyl lage alkyl, door nitro gesubstitueerde imidazolyl lage alkyl, mono- en di-15 hydroxy fenyl lage alkyl, door. nitro gesubstitueerde, pyridylamino lage alkyl, en piperazinyl lage alkyl.

2. Verbindingen volgens conclusie 1, genaamd:. 1, la, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-(3-hydroxy-l-pyrrolidinyl)-azirino[2', 3' /3,4]pyrrolo[l,2-a]indool-20 4,7-dion carbamaat. 1,1a,2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-(3-methylpiperdyl)-azirino[2', 31:3,4]pyrrolo[1,2-a]indool-4,7-dion carbamaat. 1,1a,2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-25 [4-(acetylamino) anilino] -azirino (2', 3' :3,4]pyrrolo [ 1,2-a]indool-4,7- dion carbamaat. 1, la, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-[3- (acetylamino) anilino] -azirino [2',3 ’: 3,4]pyrrolo [ 1,2-a] indool-4,7-dion carbamaat. 30 1,la ,2,8,8a,8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methyl-6 (4-acetylanilino)-azirino[21 ,3':3,4]pyrrolo[1,2-a]indool-4,7-dion carbamaat. 8400338 ψ -21- 1, la,2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-[4-{1-ureido)anilino]-azirino[21 ,3':3,4]pyrrolo[1,2-a]indool-4,7-dion carbamaat. 1,la,2,8,8a,8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methyl-6-5 (4-cyanoanilino)-azirino[2',3':3,4]pyrrolo[1,2-a]indool-4,7-dion carbamaat. 1, la,2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-(3-cyanoanilino)-azirino[2*,3':3,4]pyrrolo[1,2-a]indool-4,7-dion carba-maat. 10 1, la, 2,8,8a,8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6- [4-(N-glycyl)anilino]-azirino[21,3':3,4]pyrrolo[1,2-a]indool-4,7-dion carbamaat. 1, la, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-(3,4-dimethoxyanilino) -azirino £2V,3,:3,4] pyrrolo [ 1,2-a] indool-4,7-dion 15 carbamaat. 1, la,2,8,8a,8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methyl-6-{3 f 5-dimethoxyanilino) -azirino [ 21,31:3,4] pyrrolo [ 1,2-a] indool-4,7-dion carbamaat. 1, la,2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6- 20 (4-nitroanilino)-azirino[2 *,3’:3,4]pyrrolo[1,2-a]indool-4,7-dion carba-maat. 1,1a,2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-(4-sulfamylanilino)-azirino[2',3' :3,4]pyrrolo[ 1,2-a]indool-4,7-dion-carbamaat. 25 1, la,2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-[ 5-amino-l, 2,4-triazol-3-yl) amino] -azirino (21 , 3 *: 3,4]pyrrolo [ 1,2-a] indool-4,7-dion carbamaat. 1,1a,2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6- 30 [ (3-methylisothiazol-5-yl) ami no] -azirino [2', 3': 3,4] pyrrolo [ 1,2-a] indool- 4.7- dion carbamaat. 1, la, 2,8,8a,8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-[(2-benzothiazolyl) amino]-azirino[2f,3':3,4]pyrrolo[1,2-a]indool-4,7-dion carbamaat. 35 1,1a,2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6- [(6-nitrobenzothiazol-2-yl)amino]-azirino[2* ,3' :3,4]pyrrolo[l,2-a]indool- 4.7- dion carbamaat. 8. n 0 3 3 8 _A -22- 1, la, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8-(hydroxym-thyl)-8a-methoxy-5-methyl-6-[ (4-chlorobenzothiazol-2-yl)amino]-azirino[2',3':3,4]pyrrolo[1,2-a] 1110001-4,7-(11011 carbamaat. 1,1a,2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methy1-6-5 [ (2-aminoethyl) amino] -azirino [2',3': 3,4]pyrrolo [ 1,2-a] indool-4,7-dion carbamaat. 1,1a,2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methy 1-6-[methyl(2-methylaminoethyl)amino]-azirino[2' ,3' :3,4]pyrrolo[ 1,2-a]indool- 4.7- dion carbamaat. 10 1,1a, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6- [ 2 - (2-hydroxyethylamino(athylamino]-azirino[21,3':3,4]pyrrolo[1,2-a] indool-4,7-dion carbamaat. 1, la, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-[2-(2-hydroxyethoxy)ethylamino]-azirino[2' ,3' :3,4]pyrroloC1,2-a]indool-15 4,7-dion carbamaat. 1, la, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methy1-6-[2- (4-imidazolyl) ethylamino] -azirino [2', 3': 3,4] pyrrolo [ 1,2-a] indool-4,7-dion carbamaat. 1, la ,2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8-methoxy-5-methyl-6-20 [ (2-nitro-l-imidazolyl) ethylamino]-azirino[2' ,3':3,4]pyrrolo[1,2-a] indool-4,7-dion carbamaat. 1,1a,2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-[2-(4-hydroxyfenyl) ethylamino]-azirino [2'3':3,4]pyrrolo [ 1,2-a] indool- 4.7- dion carbamaat. 25 1,la, 2,8,8a,8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methyl-6- [2-(3,4-dihydroxyfenyl)ethylamino]-azirino[2',3':3,4]pyrrolo[1,2-a] indool-4,7-dion carbamaat. 1, la, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-{2-[ (5-nitro-2-pyridyl) amino]ethylamino}-azirino[2' ,3':3,4]pyrrolo(1,2-a] 30 indool-4,7-dion carbamaat. 1, la, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a.-methoxy-5-methyl-6-[2- (1-piperazinyl) ethylamino] -azirino [2', 3 ’: 3,4]pyrrolo [ 1,2-a] indool-4,7-dion carbamaat.

3. Werkwijze voor het behandelen van een neoplasma-ziektetoestand in 35 een dier, welke werkwijze de toediening omvat aan een dier met een dergelijke ziekte van een therapeutisch werkzame hoeveelheid van een verbinding met de formule 3a, waarin Y waterstof of lage alkyl is; en Z 8400338 5. -23- staat voor een door hydroxy gesubstitueerde 1-pyrrolidinylgroep, of een door lage alkyl gesubstitueerde piperidylgroep, of een 1-piperazinylgroep of een door acetamino , acetyl, carbamido, cyano, carb'oxy lage alkylamino, di-lage alkoxv, nitro, sulfamyl, of lage alkyl gesubstitueerde anilino-5 groep, of een groep met de formule -NRR , waarin R waterstof of lage alkyl is ea R staat voor een stikstof-houdende heterocyclische groep, gekozen uit de groep bestaande uit door amino gesubstitueerde triazolyl, door lage alkyl gesubstitueerde isothiazolyl, benzothiazolyl, en door nitro en halogeen gesubstitueerde derivaten van benzothiazolyl, of R1 10 staat voor een gesubstitueerde lage alkylgroep, gekozen uit de groep bestaande uit amino lage alkyl, lage alkylamino lage alkyl, hydroxy lage alkylamino lage alkyl, hydroxy lage alkoxy lage alkyl, imidazolyl lage alkyl, nitro gesubstitueerde imidazolyl lage alkyl, mono- en di-hydroxy fenyl lage alkyl, nitro gesubstitueerde pyridylamino lage alkyl, pipera-15 zinyl lage alkyl, en pyridyl ethyl*

4. Werkwijzen volgens conclusie 3, waarin de verbinding werd gekozen uit de groep bestaande uit: 1,1a,2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-(3-hydroxy-l-pyrrolidinyl)-azirino f2',3':3,4]pyrrolo[1.2-a]indool-4,7-20 dion carbamaat. 1,la,2,8,8a,8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methyl-6-(3-methylpiperdyl)-azirino[2r,3*:3,4]pyrrolo[1,2-a]indool-4,7-dion carbamaat. l,la,2,8,8a, 8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-25 (1-piperazinyl)-azirino[2',3':3,4]pyrrolo[1,2-a]indool-4,7-dion carba maat. 1,la,2,8,8a,8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methyl-6-[4- (acetylamino) anilino] -azirino [21,3': 3,4]pyrrolo [ 1,2-a] indool-4 ,.7-dion-carbamaat. 30 1,1a,2,8,8a,8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methyl-6- [3-(acetylamino)anilino]-azirino[2 * 3 * s 3,4]pyrrolo[1,2-a]indool-4,7-dion carbamaat. 1,1a,2,8,8a,8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methyl-6-(4-acetylanilino)-azirino(213':3,4]pyrrolo(l,2-a]indool-4,7-dion carba-35 maat. 8400338 * -24- 1,1a, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-{4-(1-ureido) anilino]-azirino[2' ,3':3,4]pyrrolo[ 1,2-a] indool-4,7-dion-carbamaat. 1,1a, 2,8,8a., 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-5 (4-cyanoanilino)-azirino[2' ,3’: 3,4] pyrrolo [1,2-a] indool-4', 7-dion carbamaat.. 1, la, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-(3-cyanoanilino)-azirino.[2' ,3':3,4]pyrroio[1,2-a]indool-4,7-dion carbamaat.. 10. 1, la, 2,8,8a,8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6- [4- (N-glycyl) anilino] -azirino [213 *: 3,4]pyrrolo C1,2-a] indool-4,7-dion carbamaat. 1, la, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-(3·, 4-dimethoxy anilino) -azirino [ 21,31:3,4 ] pyrrolo [ 1,2-a] indool-4,7-dion 15 carbamaat. 1, la, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-(3,5-dimethoxyanilino)-azirino[2 *,3’:3,4]pyrrolo[1,2-a]indool-4,7-dion carbamaat. 1, la, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-20 (4-nitroanilino)-azirino[2131:3,4]pyrrolo[1,2-a]indool-4,7-dion-carba- maat, 1, la,2,8,8a,8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-(4-sulf amylanilino) -azirino [ 2'3': 3,4 ] pyrrolo [ 1,2-a] indool-4,7-dion carbamaat. 25 1, la, 2,8,8a,8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methyl-6- (4-methylani lino) -azirino [ 2'3': 3,4 ] pyrrolo [ 1,2 -a] indool-4,7-dion carbamaat. 1, la, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methyl-6-(3-methylanilino)-azirino[2'3r:3,4]pyrrolo[1,2-a]indool-4,7-dion carba-30 maat. 1, la, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-[.(5-amino-1,2,4-triazol-3-yl)amino]-azirino(2*3' :3,4]pyrrolo[ 1,2-a]indool-4) 7-dion carbamaat. 1, la, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methyl-6-35 [(3-methylisothiazol-5-yl)amino]-azirino[2'3’:3,4] pyrrolo[1,2-a]indool- 4,7-dion carbamaat. 8 4 0 Ö53 o * -25- 1, la,2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-[ (2-benzothiazolyl) amino] -azirino [2*3':3,4] pyrrolo [ 1,2-a] indool-4,7-dion carbamaat. 1,1a,2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-5 [(6-nitrobenzothiazol-2-y1) amino]-azirino[213 *:3,4]pyrrolo[1,2ra]indool- 4.7- dion carbamaat. 1,la,2,8,8a,8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-[(4-chlorobenzothiazol-2-yl)amino]-azirino[2'3 *:3,4]pyrrolo[1,2-a] indool -4,7-dion carbamaat. 10 1,la, 2,8,8a,8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methy1-6- ((2-aminoethyl) amino]-azirino [2*,31:3,4]pyrrolo[1,2-a]indool-4,7-dion carbamaat. 1,1a,2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-[methyl(2-methylaminoethy 1)amino]-azirino[2'3' :3,4]pyrrolo[1,2-a]indool-15 4,7-dion carbamaat. 1, la, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-[2-(2-hydroxyethylamino)ethylamino]-azirino[2*3*:3,4]pyrrolo[1,2-a] indool-4,7-dion carbamaat. 1,1a,2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-20 [2-(2-hydroxyethoxy)ethylamino]-azirino[2 * 31:3,4]pyrrolo(1,2-a]indool- 4.7- dion carbamaat. 1,la,2,8,8a,8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methyl-6-[2- (4-imidazolyl) ethylamino] -azirino (2131:3,4] pyrrolo [ 1,2-a] indool-4,7-dion carbamaat. 25 1, la, 2,8,8 a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6- [ (2-nitro-l-imidazolyl) ethylamino] -azirino [2'31:3,4] pyrrolo [1,2-a] indool 4.7- dion carbamaat. 1,1a,2,8,8a,8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methyl-6-[2-(4-hydroxyfenyl)ethylamino]-azirino[21,3 * :3,4]pyrrolo(1,2-a]indool-30 4,7-dion carbamaat. 1,la,2,8,8a,8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5methvl-6-[2-(3,4-dihydroxyfenyl)ethylamino]-azirino[21,3':3,4]pyrrolo[1,2-a] indool-4,7-dion carbamaat. 1, la, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8a-methoxy-5-methyl-6-35 {2-[(5-nitro-2-pyridyl)amino]ethylamino}-azirino[2131:3,4]pyrrolo[1,2-a] indool-4,7-dion carbamaat. 8400338 -26- -ίϊ 1,1a,2,8,8a, 8b-Hexahydro-8-(hydroxymethyl)-8a-methoxy-5-methyl-6-[2-(1-piperazinyl)ethylamino]-azirino[2*,3*:3,4] pyrrolo[1,2-a]indool- 4,7-dion carbamaat. 1, la, 2,8,8a, 8b-Hexahydro-8- (hydroxymethyl) -8-methoxy-5-methyl-6-5 [2- (2-pyridyl) ethylami.no] -azirino [213': 3,4] pyrrolo [ 1,2-a] indool-4,7-dion carbamaat.

5. Werkwijze volgens conclusie 3, waarbij, de verbinding wordt toegediend in een dagelijkse hoeveelheid van. ongeveer 0,2 mg tot ongeveer 51,2 mg .per kg lichaamsgewicht van het dier.

6. Farmaceutisch preparaat, voor gebruik in.de behandeling van een neoplasma-ziekte in een dier, welk preparaat een farmaceutisch aanvaardbaar oplosmiddel, verdunningsmiddel, adjuvans of drager, alsmede als actieve ingrediënt ongeveer 0,001 tot ongeveer 5 mg van een verbinding met de formule 3a omvat, waarin Y waterstof of lage. alkyl is; en Z 15 staat voor een door hydroxygesubstitueerde 1-pyrrolidinylgroep, of een door lage alkyl gesubstitueerde piperidylgroep, of een 1-piperazinyl-groep of een door acetamino, acetyl, carbamido, cyano, carboxy lage alkylamino, di-lage alkoxy, nitro, sulfamyl, of lage alkyl gesubstitueerde anilinogroep, of een groep met de formule -NRR* waarin R waterstof of 20_ lage alkyl is en staat voor een stikstofhoudende heterocyclische groep, gekozen uit de groep bestaande uit door amino gesubstitueerde triazolyl, door lage alkyl gesubstitueerde isothiazolyl, benzothiazolyl, en door nitro en halogeen gesubstitueerde derivaten van benzothiazolyl, of R1 staat voor een gesubstitueerde lage alkylgroep,gekozen uit de groep be-25 staande uit amino lage alkyl, lage alkylamino lage alkyl, hydroxy lage alkylamino lage alkyl, hydroxy lage alkoxy lage alkyl, imidazolyl lage alkyl, door nitro gesubstitueerde imidazolyl lage alkyl, mono- en di-hydroxy fenyl lage alkyl, door nitro gesubstitueerde pyridylamino lage alkyl, piperazinyl lage alkyl, en pyridyl ethyl. 0400338 w 4»· ° ' ? x ^ ch2ocnh2 O ^NY la c O II ^CH2OCNH2 I | —0CH3 h3ct ^ w ï i_1> J » lG s

2. CH2OCNII2 X Γ O NY 0 -^ 3 o J o II II χ^>Λ__ch2ocnh2 O |_pNY o 3a z Jl ii \/\__— ch2ocnh2 O ^NY 8400338 UNIVERSITY PATENTS,INC.