CN105476030A - 一种多功能复合低聚肽营养粉 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种多功能复合低聚肽营养粉，包括以下重量份的原料：1-2份鱼皮胶原低聚肽、0.5-2份玉米低聚肽、2份-3份牛骨低聚肽、0.2份-1份海参低聚肽、0.2份-1份牡蛎低聚肽、0.5份-2份核桃低聚肽、0.5份-2份大豆低聚肽和0.5份-1份辅料。本发明的多功能复合低聚肽营养粉能够调节免疫、缓解疲劳、防癌、改善中老年记忆功能、抗早老性痴呆、抗氧化、解酒护肝、调节血糖、调节血压、调节血脂和改善皮肤等功能。
Description
技术领域
本发明涉及一种低聚肽粉，具体涉及一种多功能复合低聚肽营养粉及其制备方法。
背景技术
蛋白质是构成生命物质的基础，也是人体三大功能物质之一，但目前，人群每天摄取的蛋白质的吸收量远远不能满足身体的正常需求，尤其是节奏快的大城市，生活和工作的双重压力，往往使人们处于亚健康状态。人们一般依靠实物补充蛋白质，但靠此途径摄取的蛋白质吸收率低、肽含量少，远远达不到人体对蛋白质的需求。现有技术的蛋白粉成分单一，不能保证机体氨基酸平衡的营养需要。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种多功能复合低聚肽营养粉。
本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种多功能复合低聚肽营养粉，包括以下重量份的原料：1-2份鱼皮胶原低聚肽、0.5-2份玉米低聚肽、2份-3份牛骨低聚肽、0.2份-1份海参低聚肽、0.2份-1份牡蛎低聚肽、0.5份-2份核桃低聚肽、0.5份-2份大豆低聚肽和0.5份-1份辅料。
本发明的有益效果是：本发明的营养粉能够调节免疫、缓解疲劳、防癌、改善中老年记忆功能、抗早老性痴呆、抗氧化、解酒护肝、调节血糖、调节血压、调节血脂和改善皮肤等功能。
在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进。
进一步，包括以下重量份的原料：1.7份鱼皮胶原低聚肽、1份玉米低聚肽、2.3份牛骨低聚肽、0.5份海参低聚肽、0.5份牡蛎低聚肽、1份核桃低聚肽、1份大豆低聚肽和0.8份辅料。
进一步，包括以下重量份的原料：1.5份鱼皮胶原低聚肽、1.2份玉米低聚肽、2.5份牛骨低聚肽、0.6份海参低聚肽、0.6份牡蛎低聚肽、0.8份核桃低聚肽、0.8份大豆低聚肽和0.6份辅料。
进一步，包括以下重量份的原料：1份鱼皮胶原低聚肽、0.5份玉米低聚肽、2份牛骨低聚肽、0.2份海参低聚肽、0.2份牡蛎低聚肽、0.5份核桃低聚肽、0.5份大豆低聚肽和0.5份辅料。
进一步，包括以下重量份的原料：2份鱼皮胶原低聚肽、2份玉米低聚肽、3份牛骨低聚肽、1份海参低聚肽、1份牡蛎低聚肽、2份核桃低聚肽、2份大豆低聚肽和1份辅料。
进一步，所述辅料包括以任意比混合的柠檬酸钠/柠檬酸、食盐、果胶、食用香精、甜味剂和糊精。
进一步，所述鱼皮胶原低聚肽、牛骨低聚肽、海参低聚肽、牡蛎低聚肽、核桃低聚肽、大豆低聚肽的平均分子量均小于1000道尔顿。
进一步，所述大豆低聚肽的制备方法为：将大豆依次经过粉碎、蛋白分离、酶解、浓缩、脱色和干燥制得；
所述蛋白分离过程为：将大豆碎粉后得到大豆粉，将大豆粉与蒸馏水混合后得到大豆水溶液，调节大豆水溶液的pH至为8-10，将大豆水溶液进行搅拌和离心后，收集大豆上清液；将大豆上清液的pH值调整至4-6后，搅拌离心后过滤得到大豆蛋白。
进一步，所述酶解过程为：将大豆蛋白制成pH值为8-10的蛋白水溶液，加入相当于大豆粉质量0.25％-1％的碱性蛋白酶进行一次酶解，一次酶解时间为3h-5h，一次酶解温度为50℃-55℃，得到一次酶解液；调整一次酶解液的pH值至6-8，加入相当于大豆粉重量0.25％-1％的中性蛋白酶和风味蛋白酶进行二次酶解，二次酶解时间为3h-5h，二次酶解温度为50℃-55℃，灭酶后得到二次酶解液。
进一步，所述牡蛎低聚肽的制备方法为：将牡蛎经过干燥、粉碎、溶解、酶解、过滤、脱盐、脱色、离子交换和浓缩干燥制得牡蛎低聚肽；
所述酶解过程为：将牡蛎干燥粉碎后得到牡蛎粉中加入去离子水并升温至50℃-55℃后搅拌0.5-1h过滤得到牡蛎清液，调节牡蛎清液的pH值为8.5-8.8，然后加入相当于牡蛎粉重量0.25％-1％的碱性蛋白酶酶解4h-4.5h，酶解温度为50℃-55℃；调节牡蛎清液的pH值为6-6.5，然后进行灭酶处理，得到酶解液。
具体实施方式
以下对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。
实施例1
本实施例的一种多功能复合低聚肽营养粉，包括以下重量份的原料：1.7份鱼皮胶原低聚肽、1份玉米低聚肽、2.3份牛骨低聚肽、0.5份海参低聚肽、0.5份牡蛎低聚肽、1份核桃低聚肽、1份大豆低聚肽和0.8份辅料。辅料包括以任意比混合的柠檬酸钠/柠檬酸、食盐、果胶、食用香精、甜味剂和糊精。
本实施例中鱼皮胶原低聚肽的制备方法。具体制备步骤为：(1)清洗：将鱼皮投入提取罐中，加入投料鱼皮重量5倍的软化水进行清洗，搅拌10min后，将水和杂质排掉。(2)预处理：将洗净后的鱼皮加入软化水中，形成鱼皮质量分数为8％的鱼皮溶液，将鱼皮溶液升温至85℃，保温10min。(3)酶解：将经过预处理后的鱼皮溶液温度保持在50℃，并调节pH值在5.0之间，在鱼皮溶液中加入碱性蛋白酶和中性蛋白酶，碱性蛋白酶和中性蛋白酶的加入量均相当于鱼皮原料重量0.1％，酶解时间为3h，酶解结束后进行灭酶处理，得到酶解液。(4)过滤：将经过酶解得到的酶解液先经硅藻土过滤，得到胶原低聚肽过滤液；将胶原低聚肽过滤液加入大孔吸附树脂层析柱中进行吸附洗脱，得到胶原低聚肽洗脱液；采用孔径为0.1μm的过滤膜对胶原低聚肽洗脱液进行过滤，得到胶原低聚肽清液，过滤压力为0.1MPa。(5)浓缩干燥：将过滤得到的胶原低聚肽清液浓缩至固形物含量为30％以上，浓缩温度为60℃，浓缩压力为0.12MPa；将浓缩得到的浓缩液进行喷雾干燥，喷雾干燥的进口温度为190℃，出口温度为85℃。干燥结束即得到实施例中的鱼皮胶原低聚肽。
本实施例中玉米低聚肽的制备方法。具体制备步骤为：(1)粉碎：将玉米蛋白粉粉碎，过20目筛，用去离子水配制成玉米蛋白溶液，将玉米蛋白溶液混合均匀，使玉米蛋白粉在水溶液中分散。(2)酶解：将粉碎得到的玉米蛋白细粉中加入去离子水，将玉米蛋白细粉分散在水中，得到玉米蛋白粉分散液；调节玉米蛋白粉分散液的pH值至6，并加热至85℃，保温30min；在玉米蛋白粉分散液中加入相当于粉碎的玉米蛋白粉质量0.2％的α-高温淀粉酶，并将加酶后的玉米蛋白粉分散液升温至90℃，搅拌酶解30min，得到一次酶解液；对一次酶解液进行灭酶处理并过滤得到玉米蛋白沉淀；在玉米蛋白沉淀中加入去离子水将其分散成蛋白质质量分数为0.2％的玉米蛋白浆，调整玉米蛋白浆的pH值至6之间，加入相当于玉米蛋白浆中蛋白质质量0.2％的中性蛋白酶，将加酶后的玉米蛋白浆加热至45℃并搅拌酶解2h，得到二次酶解液；将二次酶解液加热至55℃，加入相当于玉米蛋白浆中蛋白质质量0.2％的木瓜蛋白酶并搅拌酶解6h，酶解结束后，进行灭酶处理，得到三次酶解液。(3)脱色：对第三次酶解最终得到的三次酶解液升温至40℃，加入活性炭粉末恒温搅拌30min。(4)过滤：将脱色后的溶液经过粗滤、压滤得到玉米蛋白过滤液，将玉米蛋白过滤液经过超滤和纳滤进行脱盐和去游离氨基酸，得到玉米蛋白清液，将玉米蛋白清液浓缩干燥，得到实施例的玉米低聚肽粉。
本实施例的牛骨低聚肽的制备方法，具体包括以下步骤：(1)粉碎：将新鲜的牛骨头先人工除去骨头上的杂质后，再利用碎骨机粉碎至2cm的骨块。(2)提取分离：提取分离过程为：将经过粉碎后的牛骨清洗干净后，放入蒸煮罐中进行蒸煮，牛骨与水的体积比为1:3，蒸煮压力为0.15MPa，蒸煮温度为100℃，蒸煮时间为2h。提取分离后得到牛骨胶原蛋白提取液，采用波美计或凯氏定氮法对牛骨胶原蛋白提取液中的牛骨胶原蛋白含量进行检测。(3)酶解：在牛骨胶原蛋白提取液中加入骨胶原蛋白酶进行一次酶解，一次酶解温度为50℃，一次酶解时间为1h，骨胶原蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.1％；骨胶原蛋白酶解后，用混合酸调节一次酶解液的pH值至7，然后加入脯氨酸蛋白酶进行二次酶解，二次酶解时间为2h，脯氨酸蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.1％；将经过二次酶解的牛骨胶原蛋白酶解液加热至90℃，并保持5min，进行灭酶处理。(4)复合过滤：复合过滤包括活性炭过滤和膜过滤，活性炭过滤为将灭酶处理后的牛骨胶原蛋白酶解液中加入活性炭，活性炭的加入量为牛骨胶原蛋白质量的2％，将牛骨胶原蛋白酶解液升温至80℃，并保温10min；然后降温至70℃，静置30min；膜过滤为将经过活性炭过滤后的牛骨胶原肽溶液依次经过桶式过滤器、棉饼过滤器和孔径为0.1μm的多层膜过滤器进行过滤，膜过滤压力为0.1MPa。(5)浓缩：将经过过滤的牛骨胶原肽溶液进入蒸发器中浓缩至固形物含量为30％，浓缩温度控制在65℃，浓缩压力为-0.6MPa。(6)干燥：将经过浓缩的牛骨胶原蛋白浓缩液经干燥塔干燥，干燥过程中的进口温度为190℃，出口温度为95℃。采用上述方法即制得本实施例的牛骨低聚肽，小分子牛骨胶原肽的平均分子量为200道尔顿-1000道尔顿。
本实施例的海参低聚肽的制备方法，具体包括以下步骤：(1)清洗：先将干海参清洗干净，再投入浸泡罐中，加入干海参体积4倍的20℃的去离子水，浸泡8h后，用去离子水清洗两遍，将水和杂质排掉。(2)提取：将洗净后的海参打碎磨浆，加入相当于清洗后海参重量8倍的去离子水，然后升温至110℃，保温30min后经过滤去除不溶性残渣，得到海参提取液。本实施例对海参蛋白进行了单独提取，而不是将海参打碎磨浆后直接进行酶解，对采用本发明方法提取的海参蛋白进行酶解，减少了其他因素对酶的干扰，大大提升了酶解效率，提高了小分子海参肽的生产得率；将海参粉碎后，采用110℃高温蒸煮，蒸煮时间为30min，将蒸煮时间由现有的2h缩短至30min，避免了现有技术中采用长时间高温提取会破坏海参中营养成分，同时节省了能源，极大的提高了生产效率；本实施例不采用乙醇等有机溶剂作为提取剂，完全采用水和酶进行提取分解，不但能把海参中的所有成分提取出来，而且没有任何污染，适合于工业化生产。(3)酶解：将海参提取液降温至50℃，调节溶液pH值至5，加入相当于投料海参干重0.2％的胃蛋白酶和胰蛋白酶进行酶解反应，胃蛋白酶和胰蛋白酶的重量比为1:1；酶解反应时间为2h，酶解反应结束后将海参酶解液升温到100℃进行灭酶，灭酶过程保持5min。通过复合酶解技术对海参进行酶解，得到分子量主要集中在1000道尔顿以下的小分子活性肽，同时产品中富含海参多糖和海参皂甙等其他功效成分，产品水溶性好，小分子肽含量高，更有利于海参活性成分的吸收和利用。(4)过滤：将酶解后的酶解溶液经硅藻土过滤，得到海参肽清液，硅藻土过滤过程中的压力控制在0.2MPa；将经过硅藻土过滤得到的海参肽清液中加入相当于投料海参干重4％的活性炭，静置0.5h，去除海参肽清液中的颜色、异味、盐类以及重金属。将经过活性炭吸附过的海参肽溶液依次经过桶式过滤器、棉饼过滤器和孔径为0.1μm的多层膜过滤器进行过滤，过滤过程的操作压力为0.1MPa。因为生长环境的原因，海参体内往往含有砷、铅、汞等有害重金属，利用硅藻土、活性炭的吸附作用以及膜设备过滤作用，能有效去除有害重金属，使最终得到的海参肽产品安全无毒。(5)浓缩：将经过步骤4)无菌过滤后的海参肽溶液经蒸发器进行蒸发浓缩，将蒸发浓缩时的温度控制在55℃，浓缩压力控制在-0.4MPa，浓缩至固形物含量为25％左右。(6)干燥：将浓缩液经过干燥塔进行喷雾干燥，喷雾干燥的进口温度为180℃，出口温度为85℃，干燥结束后即得到本发明的海参低聚肽。
本实施例的核桃低聚肽的制备方法，包括以下步骤：(1)蛋白提取：蛋白提取的过程为将核桃进行脱脂处理，得到脱脂核桃渣，将脱脂核桃渣粉碎至40目后，加入核桃渣质量5倍的去离子水，加入碳酸氢钠溶液或氢氧化钠溶液调节pH至9，浸泡2h后，用离心机去除下层沉淀；加入柠檬酸溶液或冰醋酸溶液调节离心液的pH至4.2，静置3h后离心分离，取下层沉淀并水洗至中性，得到核桃蛋白提取液，采用波美计或凯氏定氮法对核桃蛋白提取液中的核桃蛋白质量进行检测。本实施例充分利用桃核榨油后的副产品——脱脂核桃渣来制备小分子肽，成本低廉，采用碱溶酸沉方法提取核桃蛋白，提取率大于85％；本实施例的核桃原料优选采用山核桃。(2)两次酶解：两次酶解过程为向核桃蛋白提取液中加入相当于核桃蛋白质量1％的碱性蛋白酶进行一次酶解，一次酶解温度为50℃，一次酶解pH值为8.5，一次酶解时间为3h；一次酶解结束后将一次酶解液升温至85℃，恒温10min进行灭酶处理；将经过灭酶处理的一次酶解液降温至20℃，并加入相当于核桃蛋白质量1％的中性蛋白酶进行二次酶解，二次酶解温度为45℃，二次酶解反应pH值为7，二次酶解时间为3h；二次酶解结束后将二次酶解液升温至85℃，恒温20min进行灭酶处理。(3)过滤：过滤过程为向经过两次酶解的酶解液中加入活性炭，活性炭的加入量为核桃蛋白质量的2％，并升温至100℃，保持5min，然后降温至80℃后静置2h，以去除酶解液中的颜色和异味。(4)纯化浓缩：将经过过滤的核桃肽溶液离心除去固体残渣，将得到的清液用分子量为3500道尔顿的超滤膜过滤去除清液中的大分子杂质，超滤膜的膜压为0.6MPa，超滤温度为30℃；再用分子量为200道尔顿的纳滤膜去除无机盐和小分子杂质，纳滤膜的膜压为1.5MPa，纳滤温度为30℃。将过滤后的清液浓缩至固形物含量为30％，即得到小分子核桃肽溶液。(5)干燥：将纯化浓缩后的小分子核桃肽溶液进行喷雾干燥，喷雾干燥的出风温度为80℃，进风温度为160℃，干燥后即得到小分子核桃肽粉。
本实施例的大豆低聚肽的制备方法，包括以下步骤：将大豆依次经过粉碎、蛋白分离、酶解、浓缩、脱色和干燥制得；蛋白分离过程为：将大豆碎粉后得到大豆粉，将大豆粉与蒸馏水混合后得到大豆水溶液，调节大豆水溶液的pH至为8.5，将大豆水溶液进行搅拌和离心后，收集大豆上清液；将大豆上清液的pH值调整至5后，搅拌离心后过滤得到大豆蛋白。
酶解过程为：将大豆蛋白制成pH值为9.5的蛋白水溶液，加入相当于大豆粉质量0.25％的碱性蛋白酶进行一次酶解，一次酶解时间为4.5h，一次酶解温度为55℃，得到一次酶解液；调整一次酶解液的pH值至7.5，加入相当于大豆粉重量0.25％的中性蛋白酶和风味蛋白酶进行二次酶解，二次酶解时间为4.5h，二次酶解温度为50℃，灭酶后得到二次酶解液。
采用孔径为500nm的有机膜对二次酶解液进行过滤后，对滤液进行浓缩、脱色、干燥，制得大豆低聚肽。
本实施例的牡蛎低聚肽的制备方法，包括以下步骤：将牡蛎干燥粉碎后得到牡蛎粉，在牡蛎粉中加入去离子水升温至52℃后进行搅拌过滤得到牡蛎清液，调节牡蛎清液的pH值为8.6，然后加入相当于牡蛎粉重量0.3％的碱性蛋白酶酶解4.2h，酶解温度为52℃；调节牡蛎清液的pH值为6，然后进行灭酶处理，得到酶解液；将酶解液进行高速离心分离，用0.1μm的有机膜进行过滤，得到过滤液，对过滤液进行脱盐、脱色、离子交换后，得到牡蛎肽清液；将牡蛎肽清液进行真空浓缩至20％，得到浓缩液，对浓缩液进行喷雾干燥，得到牡蛎低聚肽。
实施例2
本实施例的一种多功能复合低聚肽营养粉，包括以下重量份的原料：1.5份鱼皮胶原低聚肽、1.2份玉米低聚肽、2.5份牛骨低聚肽、0.6份海参低聚肽、0.6份牡蛎低聚肽、0.8份核桃低聚肽、0.8份大豆低聚肽和0.6份辅料。辅料包括以任意比混合的柠檬酸钠/柠檬酸、食盐、果胶、食用香精、甜味剂和糊精。
本实施例中鱼皮胶原低聚肽的制备方法。具体制备步骤为：(1)清洗：将鱼皮投入提取罐中，加入投料鱼皮重量6倍的软化水进行清洗，搅拌20min后，将水和杂质排掉。(2)预处理：将洗净后的鱼皮加入软化水中，形成鱼皮质量分数为10％的鱼皮溶液，将鱼皮溶液升温至96℃，保温15min。(3)酶解：将经过预处理后的鱼皮溶液温度保持在60℃，并调节pH值在6.5之间，在鱼皮溶液中加入碱性蛋白酶和中性蛋白酶，碱性蛋白酶和中性蛋白酶的加入量均相当于鱼皮原料重量0.3％，酶解时间为4h，酶解结束后进行灭酶处理，得到酶解液。(4)过滤：将经过酶解得到的酶解液先经硅藻土过滤，得到胶原低聚肽过滤液；将胶原低聚肽过滤液加入大孔吸附树脂层析柱中进行吸附洗脱，得到胶原低聚肽洗脱液；采用孔径为0.15μm的过滤膜对胶原低聚肽洗脱液进行过滤，得到胶原低聚肽清液，过滤压力为0.2MPa。(5)浓缩干燥：将过滤得到的胶原低聚肽清液浓缩至固形物含量为30％以上，浓缩温度为65℃，浓缩压力为0.15MPa；将浓缩得到的浓缩液进行喷雾干燥，喷雾干燥的进口温度为200℃，出口温度为90℃。干燥结束即得到本实施例中的鱼皮胶原低聚肽。
本实施例中玉米低聚肽的制备方法。具体制备步骤为：(1)粉碎：将玉米蛋白粉粉碎，过50目筛，用去离子水配制成玉米蛋白溶液，将玉米蛋白溶液混合均匀，使玉米蛋白粉在水溶液中分散。(2)酶解：将粉碎得到的玉米蛋白细粉中加入去离子水，将玉米蛋白细粉分散在水中，得到玉米蛋白粉分散液；调节玉米蛋白粉分散液的pH值至6.5，并加热至87℃，保温40min；在玉米蛋白粉分散液中加入相当于粉碎的玉米蛋白粉质量0.3％的α-高温淀粉酶，并将加酶后的玉米蛋白粉分散液升温至92℃，搅拌酶解40min，得到一次酶解液；对一次酶解液进行灭酶处理并过滤得到玉米蛋白沉淀；在玉米蛋白沉淀中加入去离子水将其分散成蛋白质质量分数为0.5％的玉米蛋白浆，调整玉米蛋白浆的pH值至6.5之间，加入相当于玉米蛋白浆中蛋白质质量1％的中性蛋白酶，将加酶后的玉米蛋白浆加热至48℃并搅拌酶解3h，得到二次酶解液；将二次酶解液加热至57℃，加入相当于玉米蛋白浆中蛋白质质量0.8％的木瓜蛋白酶并搅拌酶解7h，酶解结束后，进行灭酶处理，得到三次酶解液。(3)脱色：对第三次酶解最终得到的三次酶解液升温至45℃，加入活性炭粉末恒温搅拌40min。(4)过滤：将脱色后的溶液经过粗滤、压滤得到玉米蛋白过滤液，将玉米蛋白过滤液经过超滤和纳滤进行脱盐和去游离氨基酸，得到玉米蛋白清液，将玉米蛋白清液浓缩干燥，得到实施例的玉米低聚肽粉。
本实施例的牛骨低聚肽的制备方法，具体包括以下步骤：(1)粉碎：将新鲜的牛骨头先人工除去骨头上的杂质后，再利用碎骨机粉碎至2.5cm的骨块。(2)提取分离：提取分离过程为：将经过粉碎后的牛骨清洗干净后，放入蒸煮罐中进行蒸煮，牛骨与水的体积比为1:4，蒸煮压力为0.18MPa，蒸煮温度为110℃，蒸煮时间为3h。提取分离后得到牛骨胶原蛋白提取液，采用波美计或凯氏定氮法对牛骨胶原蛋白提取液中的牛骨胶原蛋白含量进行检测。(3)酶解：在牛骨胶原蛋白提取液中加入骨胶原蛋白酶进行一次酶解，一次酶解温度为53℃，一次酶解时间为1.5h，骨胶原蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.2％；骨胶原蛋白酶解后，用混合酸调节一次酶解液的pH值至6.5，然后加入脯氨酸蛋白酶进行二次酶解，二次酶解时间为3h，脯氨酸蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.2％；将经过二次酶解的牛骨胶原蛋白酶解液加热至95℃，并保持8min，进行灭酶处理。(4)复合过滤：复合过滤包括活性炭过滤和膜过滤，活性炭过滤为将灭酶处理后的牛骨胶原蛋白酶解液中加入活性炭，活性炭的加入量为牛骨胶原蛋白质量的3％，将牛骨胶原蛋白酶解液升温至90℃，并保温8min；然后降温至78℃，静置1h；膜过滤为将经过活性炭过滤后的牛骨胶原肽溶液依次经过桶式过滤器、棉饼过滤器和孔径为0.1μm的多层膜过滤器进行过滤，膜过滤压力为0.2MPa。(5)浓缩：将经过过滤的牛骨胶原肽溶液进入蒸发器中浓缩至固形物含量为35％，浓缩温度控制在60℃，浓缩压力为-0.5MPa。(6)干燥：将经过浓缩的牛骨胶原蛋白浓缩液经干燥塔干燥，干燥过程中的进口温度为188℃，出口温度为90℃。采用上述方法即制得本实施例的牛骨低聚肽，牛骨低聚肽的平均分子量为200道尔顿-1000道尔顿。
本实施例的一种小分子海参肽的制备方法，具体包括以下步骤：(1)清洗：先将干海参清洗干净，再投入浸泡罐中，加入干海参体积5倍的22℃的去离子水，浸泡9h后，用去离子水清洗两遍，将水和杂质排掉。(2)提取：将洗净后的海参打碎磨浆，加入相当于清洗后海参重量9倍的去离子水，然后升温至115℃，保温40min后经过滤去除不溶性残渣，得到海参提取液。本实施例对海参蛋白进行了单独提取，而不是将海参打碎磨浆后直接进行酶解，对采用本发明方法提取的海参蛋白进行酶解，减少了其他因素对酶的干扰，大大提升了酶解效率，提高了小分子海参肽的生产得率；将海参粉碎后，采用115℃高温蒸煮，蒸煮时间为30min，将蒸煮时间由现有的3h缩短至30min，避免了现有技术中采用长时间高温提取会破坏海参中营养成分，同时节省了能源，极大的提高了生产效率；本实施例不采用乙醇等有机溶剂作为提取剂，完全采用水和酶进行提取分解，不但能把海参中的所有成分提取出来，而且没有任何污染，适合于工业化生产。(3)酶解：将海参提取液降温至55℃，调节溶液pH值至6，加入相当于投料海参干重0.3％的木瓜蛋白酶进行酶解；酶解反应时间为3h，酶解反应结束后将海参酶解液升温到100℃进行灭酶，灭酶过程保持5min。通过复合酶解技术对海参进行酶解，得到分子量主要集中在1000道尔顿以下的小分子活性肽，同时产品中富含海参多糖和海参皂甙等其他功效成分，产品水溶性好，小分子肽含量高，更有利于海参活性成分的吸收和利用。(4)过滤：将酶解后的酶解溶液经硅藻土过滤，得到海参肽清液，硅藻土过滤过程中的压力控制在0.3MPa；将经过硅藻土过滤得到的海参肽清液中加入相当于投料海参干重3％的活性炭，静置2h，去除海参肽清液中的颜色、异味、盐类以及重金属。将经过活性炭吸附过的海参肽溶液依次经过桶式过滤器、棉饼过滤器和孔径为0.1μm的多层膜过滤器进行过滤，过滤过程的操作压力为0.2MPa。因为生长环境的原因，海参体内往往含有砷、铅、汞等有害重金属，利用硅藻土、活性炭的吸附作用以及膜设备过滤作用，能有效去除有害重金属，使最终得到的海参肽产品安全无毒。(5)浓缩：将经过步骤(4)无菌过滤后的海参肽溶液经蒸发器进行蒸发浓缩，将蒸发浓缩时的温度控制在60℃，浓缩压力控制在-0.5MPa，浓缩至固形物含量为30％左右。(6)干燥：将浓缩液经过干燥塔进行喷雾干燥，喷雾干燥的进口温度为185℃，出口温度为90℃，干燥结束后即得到本实施例的海参低聚肽。
本实施例的一种小分子核桃肽的制备方法，包括以下步骤：(1)蛋白提取：蛋白提取的过程为将核桃进行脱脂处理，得到脱脂核桃渣，将脱脂核桃渣粉碎至40目后，加入核桃渣质量8倍的去离子水，加入碳酸氢钠溶液或氢氧化钠溶液调节pH至8.5，浸泡1h后，用离心机去除下层沉淀；加入柠檬酸溶液或冰醋酸溶液调节离心液的pH至4，静置1h后离心分离，取下层沉淀并水洗至中性，得到核桃蛋白提取液，采用波美计或凯氏定氮法对核桃蛋白提取液中的核桃蛋白质量进行检测。本实施例充分利用桃核榨油后的副产品——脱脂核桃渣来制备小分子肽，成本低廉，采用碱溶酸沉方法提取核桃蛋白，提取率大于85％；本实施例的核桃原料优选采用山核桃。(2)两次酶解：两次酶解过程为向核桃蛋白提取液中加入相当于核桃蛋白质量3％的碱性蛋白酶进行一次酶解，一次酶解温度为30℃，一次酶解pH值为8，一次酶解时间为3h；一次酶解结束后将一次酶解液升温至80℃，恒温10min进行灭酶处理；将经过灭酶处理的一次酶解液降温至20℃，并加入相当于核桃蛋白质量1％的风味蛋白酶进行二次酶解，二次酶解温度为40℃，二次酶解反应pH值为6，二次酶解时间为3h；二次酶解结束后将二次酶解液升温至80℃，恒温10min进行灭酶处理。(3)过滤：过滤过程为向经过两次酶解的酶解液中加入活性炭，活性炭的加入量为核桃蛋白质量的2％，并升温至100℃，保持5min，然后降温至80℃后静置30min，以去除酶解液中的颜色和异味。(4)纯化浓缩：将经过过滤的核桃肽溶液离心除去固体残渣，将得到的清液用分子量为1000道尔顿的超滤膜过滤去除清液中的大分子杂质，超滤膜的膜压为0.5MPa，超滤温度为25℃；再用分子量为200道尔顿的纳滤膜去除无机盐和小分子杂质，纳滤膜的膜压为1MPa，纳滤温度为25℃。将过滤后的清液浓缩至固形物含量为20％，即得到小分子核桃肽溶液。采用离心协同多级膜分离***纯化核桃肽，除杂、除盐和浓缩效果好，低温纳滤浓缩保证了产品的活性，同时产品含盐量低，适合规模化工业生产。(5)干燥：将纯化浓缩后的小分子核桃肽溶液进行喷雾干燥，喷雾干燥的出风温度为70℃，进风温度为180℃，干燥后即得到小分子核桃肽粉。
本实施例的大豆低聚肽的制备方法，包括以下步骤：将大豆依次经过粉碎、蛋白分离、酶解、浓缩、脱色和干燥制得；蛋白分离过程为：将大豆碎粉后得到大豆粉，将大豆粉与蒸馏水混合后得到大豆水溶液，调节大豆水溶液的pH至为9，将大豆水溶液进行搅拌和离心后，收集大豆上清液；将大豆上清液的pH值调整至5后，搅拌离心后过滤得到大豆蛋白。
酶解过程为：将大豆蛋白制成pH值为9的蛋白水溶液，加入相当于大豆粉质量0.25％的碱性蛋白酶进行一次酶解，一次酶解时间为4h，一次酶解温度为52℃，得到一次酶解液；调整一次酶解液的pH值至7，加入相当于大豆粉重量0.25％的中性蛋白酶和风味蛋白酶进行二次酶解，二次酶解时间为4h，二次酶解温度为55℃，灭酶后得到二次酶解液。
采用孔径为1200nm的有机膜对二次酶解液进行过滤后，对滤液进行浓缩、脱色、干燥，制得大豆低聚肽。
本实施例的牡蛎低聚肽的制备方法，包括以下步骤：将牡蛎干燥粉碎后得到牡蛎粉，在牡蛎粉中加入去离子水升温至55℃后进行搅拌过滤得到牡蛎清液，调节牡蛎清液的pH值为8.8，然后加入相当于牡蛎粉重量0.5％的碱性蛋白酶酶解4.5h，酶解温度为55℃；调节牡蛎清液的pH值为6.5，然后进行灭酶处理，得到酶解液；将酶解液进行高速离心分离，用0.1μm的有机膜进行过滤，得到过滤液，对过滤液进行脱盐、脱色、离子交换后，得到牡蛎肽清液；将牡蛎肽清液进行真空浓缩至20％，得到浓缩液，对浓缩液进行喷雾干燥，得到牡蛎低聚肽。
实施例3
本实施例的一种多功能复合低聚肽营养粉，包括以下重量份的原料：1份鱼皮胶原低聚肽、0.5份玉米低聚肽、2份牛骨低聚肽、0.2份海参低聚肽、0.2份牡蛎低聚肽、0.5份核桃低聚肽、0.5份大豆低聚肽和0.5份辅料。辅料包括以任意比混合的柠檬酸钠/柠檬酸、食盐、果胶、食用香精、甜味剂和糊精。
本实施例中鱼皮胶原低聚肽的制备方法。具体制备步骤为：(1)清洗：将鱼皮投入提取罐中，加入投料鱼皮重量8倍的软化水进行清洗，搅拌30min后，将水和杂质排掉。(2)预处理：将洗净后的鱼皮加入软化水中，形成鱼皮质量分数为15％的鱼皮溶液，将鱼皮溶液升温至100℃，保温20min。(3)酶解：将经过预处理后的鱼皮溶液温度保持在65℃，并调节pH值在7.5之间，在鱼皮溶液中加入碱性蛋白酶和中性蛋白酶，碱性蛋白酶和中性蛋白酶的加入量均相当于鱼皮原料重量0.5％，酶解时间为5h，酶解结束后进行灭酶处理，得到酶解液。(4)过滤：将经过酶解得到的酶解液先经硅藻土过滤，得到胶原低聚肽过滤液；将胶原低聚肽过滤液加入大孔吸附树脂层析柱中进行吸附洗脱，得到胶原低聚肽洗脱液；采用孔径为0.2μm的过滤膜对胶原低聚肽洗脱液进行过滤，得到胶原低聚肽清液，过滤压力为0.3MPa。(5)浓缩干燥：将过滤得到的胶原低聚肽清液浓缩至固形物含量为30％以上，浓缩温度为72℃，浓缩压力为0.2MPa；将浓缩得到的浓缩液进行喷雾干燥，喷雾干燥的进口温度为210℃，出口温度为95℃。干燥结束即得到实施例中的鱼皮胶原低聚肽。
本实施例中玉米低聚肽的制备方法。具体制备步骤为：(1)粉碎：将玉米蛋白粉粉碎，过80目筛，用去离子水配制成玉米蛋白溶液，将玉米蛋白溶液混合均匀，使玉米蛋白粉在水溶液中分散。(2)酶解：将粉碎得到的玉米蛋白细粉中加入去离子水，将玉米蛋白细粉分散在水中，得到玉米蛋白粉分散液；调节玉米蛋白粉分散液的pH值至7，并加热至90℃，保温60min；在玉米蛋白粉分散液中加入相当于粉碎的玉米蛋白粉质量0.5％的α-高温淀粉酶，并将加酶后的玉米蛋白粉分散液升温至95℃，搅拌酶解60min，得到一次酶解液；对一次酶解液进行灭酶处理并过滤得到玉米蛋白沉淀；在玉米蛋白沉淀中加入去离子水将其分散成蛋白质质量分数为1％的玉米蛋白浆，调整玉米蛋白浆的pH值至7之间，加入相当于玉米蛋白浆中蛋白质质量2％的中性蛋白酶，将加酶后的玉米蛋白浆加热至50℃并搅拌酶解4h，得到二次酶解液；将二次酶解液加热至60℃，加入相当于玉米蛋白浆中蛋白质质量1％的木瓜蛋白酶并搅拌酶解8h，酶解结束后，进行灭酶处理，得到三次酶解液。(3)脱色：对第三次酶解最终得到的三次酶解液升温至50℃，加入活性炭粉末恒温搅拌60min。(4)过滤：将脱色后的溶液经过粗滤、压滤得到玉米蛋白过滤液，将玉米蛋白过滤液经过超滤和纳滤进行脱盐和去游离氨基酸，得到玉米蛋白清液，将玉米蛋白清液浓缩干燥，得到实施例的玉米低聚肽粉。
本实施例的一种牛骨胶原肽的制备方法，具体包括以下步骤：(1)粉碎：将新鲜的牛骨头先人工除去骨头上的杂质后，再利用碎骨机粉碎至2cm的骨块。(2)提取分离：提取分离过程为：将经过粉碎后的牛骨清洗干净后，放入蒸煮罐中进行蒸煮，牛骨与水的体积比为1:3，蒸煮压力为0.15MPa，蒸煮温度为100℃，蒸煮时间为2h。提取分离后得到牛骨胶原蛋白提取液，采用波美计或凯氏定氮法对牛骨胶原蛋白提取液中的牛骨胶原蛋白含量进行检测。(3)酶解：在牛骨胶原蛋白提取液中加入骨胶原蛋白酶进行一次酶解，一次酶解温度为50℃，一次酶解时间为1h，骨胶原蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.1％；骨胶原蛋白酶解后，用混合酸调节一次酶解液的pH值至6，然后加入脯氨酸蛋白酶进行二次酶解，二次酶解时间为2h，脯氨酸蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.1％；将经过二次酶解的牛骨胶原蛋白酶解液加热至90℃，并保持5min，进行灭酶处理。(4)复合过滤：复合过滤包括活性炭过滤和膜过滤，活性炭过滤为将灭酶处理后的牛骨胶原蛋白酶解液中加入活性炭，活性炭的加入量为牛骨胶原蛋白质量的2％，将牛骨胶原蛋白酶解液升温至80℃，并保温5min；然后降温至70℃，静置30min；膜过滤为将经过活性炭过滤后的牛骨胶原肽溶液依次经过桶式过滤器、棉饼过滤器和孔径为0.1μm的多层膜过滤器进行过滤，膜过滤压力为0.1MPa。(5)浓缩：将经过过滤的牛骨胶原肽溶液进入蒸发器中浓缩至固形物含量为30％，浓缩温度控制在55℃，浓缩压力为-0.4MPa。(6)干燥：将经过浓缩的牛骨胶原蛋白浓缩液经干燥塔干燥，干燥过程中的进口温度为180℃，出口温度为85℃。采用上述方法即制得本实施例的牛骨低聚肽，小分子牛骨胶原肽的平均分子量为200道尔顿-1000道尔顿。
本实施例的一种海参肽的制备方法，具体包括以下步骤：(1)清洗：先将干海参清洗干净，再投入浸泡罐中，加入干海参体积6倍的25℃的去离子水，浸泡10h后，用去离子水清洗两遍，将水和杂质排掉。(2)提取：将洗净后的海参打碎磨浆，加入相当于清洗后海参重量9倍的去离子水，然后升温至120℃，保温50min后经过滤去除不溶性残渣，得到海参提取液。本实施例对海参蛋白进行了单独提取，而不是将海参打碎磨浆后直接进行酶解，对采用本发明方法提取的海参蛋白进行酶解，减少了其他因素对酶的干扰，大大提升了酶解效率，提高了小分子海参肽的生产得率；将海参粉碎后，采用120°高温蒸煮，蒸煮时间为30min，将蒸煮时间由现有的3h缩短至30min，避免了现有技术中采用长时间高温提取会破坏海参中营养成分，同时节省了能源，极大的提高了生产效率；本实施例不采用乙醇等有机溶剂作为提取剂，完全采用水和酶进行提取分解，不但能把海参中的所有成分提取出来，而且没有任何污染，适合于工业化生产。(3)酶解：将海参提取液降温至65℃，调节溶液pH值至7.5，加入相当于投料海参干重0.4％的胃蛋白酶进行酶解反应；酶解反应时间为4h，酶解反应结束后将海参酶解液升温到100℃进行灭酶，灭酶过程保持5min。通过复合酶解技术对海参进行酶解，得到分子量主要集中在1000道尔顿以下的小分子活性肽，同时产品中富含海参多糖和海参皂甙等其他功效成分，产品水溶性好，小分子肽含量高，更有利于海参活性成分的吸收和利用。(4)过滤：将酶解后的酶解溶液经硅藻土过滤，得到海参肽清液，硅藻土过滤过程中的压力控制在0.4MPa；将经过硅藻土过滤得到的海参肽清液中加入相当于投料海参干重4％的活性炭，静置1h，去除海参肽清液中的颜色、异味、盐类以及重金属。将经过活性炭吸附过的海参肽溶液依次经过桶式过滤器、棉饼过滤器和孔径为0.1μm的多层膜过滤器进行过滤，过滤过程的操作压力为0.3MPa。因为生长环境的原因，海参体内往往含有砷、铅、汞等有害重金属，利用硅藻土、活性炭的吸附作用以及膜设备过滤作用，能有效去除有害重金属，使最终得到的海参肽产品安全无毒。(5)浓缩：将经过步骤4)无菌过滤后的海参肽溶液经蒸发器进行蒸发浓缩，将蒸发浓缩时的温度控制在65℃，浓缩压力控制在-0.6MPa，浓缩至固形物含量为35％左右。(6)干燥：将浓缩液经过干燥塔进行喷雾干燥，喷雾干燥的进口温度为190℃，出口温度为95℃，干燥结束后即得到本发明的小分子海参肽粉成品。
本实施例的一种核桃低聚肽的制备方法，包括以下步骤：(1)蛋白提取：蛋白提取的过程为将核桃进行脱脂处理，得到脱脂核桃渣，将脱脂核桃渣粉碎至60目后，加入核桃渣质量8倍的去离子水，加入碳酸氢钠溶液或氢氧化钠溶液调节pH至9，浸泡1h后，用离心机去除下层沉淀；加入柠檬酸溶液或冰醋酸溶液调节离心液的pH至4.5，静置3h后离心分离，取下层沉淀并水洗至中性，得到核桃蛋白提取液，采用波美计或凯氏定氮法对核桃蛋白提取液中的核桃蛋白质量进行检测。本实施例充分利用桃核榨油后的副产品——脱脂核桃渣来制备小分子肽，成本低廉，采用碱溶酸沉方法提取核桃蛋白，提取率大于85％；本实施例的核桃原料优选采用山核桃。(2)两次酶解：两次酶解过程为向核桃蛋白提取液中加入相当于核桃蛋白质量3％的碱性蛋白酶进行一次酶解，一次酶解温度为60℃，一次酶解pH值为9，一次酶解时间为6h；一次酶解结束后将一次酶解液升温至85℃，恒温20min进行灭酶处理；将经过灭酶处理的一次酶解液降温至25℃，并加入相当于核桃蛋白质量3％的木瓜蛋白酶进行二次酶解，二次酶解温度为60℃，二次酶解反应pH值为7，二次酶解时间为6h；二次酶解结束后将二次酶解液升温至85℃，恒温20min进行灭酶处理；两次酶解采用的蛋白酶为碱性蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶的至少一种。(3)过滤：过滤过程为向经过两次酶解的酶解液中加入活性炭，活性炭的加入量为核桃蛋白质量的4％，并升温至100℃，保持10min，然后降温至80℃后静置2h，以去除酶解液中的颜色和异味。(4)纯化浓缩：将经过过滤的核桃肽溶液离心除去固体残渣，将得到的清液用分子量为5000道尔顿的超滤膜过滤去除清液中的大分子杂质，超滤膜的膜压为1MPa，超滤温度为40℃；再用分子量为200道尔顿的纳滤膜去除无机盐和小分子杂质，纳滤膜的膜压为2MPa，纳滤温度为40℃。将过滤后的清液浓缩至固形物含量为30％，即得到小分子核桃肽溶液。(5)干燥：将纯化浓缩后的小分子核桃肽溶液进行喷雾干燥，喷雾干燥的出风温度为90℃，进风温度为180℃，干燥后即得到小分子核桃肽粉。
本实施例的大豆低聚肽的制备方法，包括以下步骤：将大豆依次经过粉碎、蛋白分离、酶解、浓缩、脱色和干燥制得；蛋白分离过程为：将大豆碎粉后得到大豆粉，将大豆粉与蒸馏水混合后得到大豆水溶液，调节大豆水溶液的pH至为8-10，将大豆水溶液进行搅拌和离心后，收集大豆上清液；将大豆上清液的pH值调整至6后，搅拌离心后过滤得到大豆蛋白。
酶解过程为：将大豆蛋白制成pH值为10的蛋白水溶液，加入相当于大豆粉质量1％的碱性蛋白酶进行一次酶解，一次酶解时间为5h，一次酶解温度为55℃，得到一次酶解液；调整一次酶解液的pH值至8，加入相当于大豆粉重量1％的中性蛋白酶和风味蛋白酶进行二次酶解，二次酶解时间为5h，二次酶解温度为50℃，灭酶后得到二次酶解液。
采用孔径为50nm的有机膜对二次酶解液进行过滤后，对滤液进行浓缩、脱色、干燥，制得大豆低聚肽。
本实施例的牡蛎低聚肽的制备方法，包括以下步骤：将牡蛎干燥粉碎后得到牡蛎粉，在牡蛎粉中加入去离子水升温至52℃后进行搅拌过滤得到牡蛎清液，调节牡蛎清液的pH值为8.5，然后加入相当于牡蛎粉重量0.1％-0.5％的碱性蛋白酶酶解4h，酶解温度为55℃；调节牡蛎清液的pH值为6.5，然后进行灭酶处理，得到酶解液；将酶解液进行高速离心分离，用0.1μm的有机膜进行过滤，得到过滤液，对过滤液进行脱盐、脱色、离子交换后，得到牡蛎肽清液；将牡蛎肽清液进行真空浓缩至20％，得到浓缩液，对浓缩液进行喷雾干燥，得到牡蛎低聚肽。
实施例4
本实施例的一种多功能复合低聚肽营养粉，包括以下重量份的原料：2份鱼皮胶原低聚肽、2份玉米低聚肽、3份牛骨低聚肽、1份海参低聚肽、1份牡蛎低聚肽、2份核桃低聚肽、2份大豆低聚肽和1份辅料。辅料包括以任意比混合的柠檬酸钠/柠檬酸、食盐、果胶、食用香精、甜味剂和糊精。
本实施例中鱼皮胶原低聚肽的制备方法。具体制备步骤为：(1)清洗：将鱼皮投入提取罐中，加入投料鱼皮重量6倍的软化水进行清洗，搅拌20min后，将水和杂质排掉。(2)预处理：将洗净后的鱼皮加入软化水中，形成鱼皮质量分数为10％的鱼皮溶液，将鱼皮溶液升温至90℃，保温15min。(3)酶解：将经过预处理后的鱼皮溶液温度保持在62℃，并调节pH值在6.5之间，在鱼皮溶液中加入碱性蛋白酶和中性蛋白酶，碱性蛋白酶和中性蛋白酶的加入量均相当于鱼皮原料重量0.3％，酶解时间为4h，酶解结束后进行灭酶处理，得到酶解液。(4)过滤：将经过酶解得到的酶解液先经硅藻土过滤，得到胶原低聚肽过滤液；将胶原低聚肽过滤液加入大孔吸附树脂层析柱中进行吸附洗脱，得到胶原低聚肽洗脱液；采用孔径为0.15μm的过滤膜对胶原低聚肽洗脱液进行过滤，得到胶原低聚肽清液，过滤压力为0.2MPa。(5)浓缩干燥：将过滤得到的胶原低聚肽清液浓缩至固形物含量为30％以上，浓缩温度为65℃，浓缩压力为0.15MPa；将浓缩得到的浓缩液进行喷雾干燥，喷雾干燥的进口温度为200℃，出口温度为90℃。干燥结束即得到本实施例中的鱼皮胶原低聚肽。
本实施例中玉米低聚肽的制备方法。具体制备步骤为：(1)粉碎：将玉米蛋白粉粉碎，过50目筛，用去离子水配制成玉米蛋白溶液，将玉米蛋白溶液混合均匀，使玉米蛋白粉在水溶液中分散。(2)酶解：将粉碎得到的玉米蛋白细粉中加入去离子水，将玉米蛋白细粉分散在水中，得到玉米蛋白粉分散液；调节玉米蛋白粉分散液的pH值至6.5，并加热至87℃，保温40min；在玉米蛋白粉分散液中加入相当于粉碎的玉米蛋白粉质量0.3％的α-高温淀粉酶，并将加酶后的玉米蛋白粉分散液升温至92℃，搅拌酶解40min，得到一次酶解液；对一次酶解液进行灭酶处理并过滤得到玉米蛋白沉淀；在玉米蛋白沉淀中加入去离子水将其分散成蛋白质质量分数为0.5％的玉米蛋白浆，调整玉米蛋白浆的pH值至6.5之间，加入相当于玉米蛋白浆中蛋白质质量1％的中性蛋白酶，将加酶后的玉米蛋白浆加热至48℃并搅拌酶解3h，得到二次酶解液；将二次酶解液加热至57℃，加入相当于玉米蛋白浆中蛋白质质量0.8％的木瓜蛋白酶并搅拌酶解7h，酶解结束后，进行灭酶处理，得到三次酶解液。(3)脱色：对第三次酶解最终得到的三次酶解液升温至45℃，加入活性炭粉末恒温搅拌40min。(4)过滤：将脱色后的溶液经过粗滤、压滤得到玉米蛋白过滤液，将玉米蛋白过滤液经过超滤和纳滤进行脱盐和去游离氨基酸，得到玉米蛋白清液，将玉米蛋白清液浓缩干燥，得到实施例的玉米低聚肽粉。
本实施例的一种牛骨胶原肽的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)粉碎：将新鲜的牛骨头先人工除去骨头上的杂质后，再利用碎骨机粉碎至2cm的骨块。
(2)提取分离：提取分离过程为：将经过粉碎后的牛骨清洗干净后，放入蒸煮罐中进行蒸煮，牛骨与水的体积比为1:3，蒸煮压力为0.15MPa，蒸煮温度为100℃，蒸煮时间为2h。提取分离后得到牛骨胶原蛋白提取液，采用波美计或凯氏定氮法对牛骨胶原蛋白提取液中的牛骨胶原蛋白含量进行检测。
(3)酶解：在牛骨胶原蛋白提取液中加入骨胶原蛋白酶进行一次酶解，一次酶解温度为50℃，一次酶解时间为1h，骨胶原蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.1％；
骨胶原蛋白酶解后，用混合酸调节一次酶解液的pH值至7，然后加入脯氨酸蛋白酶进行二次酶解，二次酶解时间为2h，脯氨酸蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.1％；
将经过二次酶解的牛骨胶原蛋白酶解液加热至90℃，并保持5min，进行灭酶处理。
本实施例根据牛骨胶原蛋白的特殊性，首次采用脯氨酸蛋白酶和骨胶原蛋白酶进行复合酶解，使得到的产品实用性强，小分子活性肽的得率很高，得率高达90％。
(4)复合过滤：复合过滤包括活性炭过滤和膜过滤，活性炭过滤为将灭酶处理后的牛骨胶原蛋白酶解液中加入活性炭，活性炭的加入量为牛骨胶原蛋白质量的2％，将牛骨胶原蛋白酶解液升温至80℃，并保温10min；然后降温至70℃，静置30min；
膜过滤为将经过活性炭过滤后的牛骨胶原肽溶液依次经过桶式过滤器、棉饼过滤器和孔径为0.1μm的多层膜过滤器进行过滤，膜过滤压力为0.1MPa。
本实施例利用活性炭的吸附作用以及膜设备过滤作用，能有效去除有害重金属，使最终得到的小分子骨胶原肽产品安全无毒。
(5)浓缩：将经过过滤的牛骨胶原肽溶液进入蒸发器中浓缩至固形物含量为30％，浓缩温度控制在65℃，浓缩压力为-0.6MPa。
(6)干燥：将经过浓缩的牛骨胶原蛋白浓缩液经干燥塔干燥，干燥过程中的进口温度为190℃，出口温度为95℃。
采用上述方法即制得本发明的一种小分子牛骨胶原肽，小分子牛骨胶原肽的平均分子量为200道尔顿-1000道尔顿。
本实施例的一种海参肽的制备方法，具体包括以下步骤：(1)清洗：先将干海参清洗干净，再投入浸泡罐中，加入干海参体积4倍的25℃的去离子水，浸泡10h后，用去离子水清洗两遍，将水和杂质排掉。(2)提取：将洗净后的海参打碎磨浆，加入相当于清洗后海参重量8倍的去离子水，然后升温至110℃，保温30min后经过滤去除不溶性残渣，得到海参提取液。本实施例对海参蛋白进行了单独提取，而不是将海参打碎磨浆后直接进行酶解，对采用本发明方法提取的海参蛋白进行酶解，减少了其他因素对酶的干扰，大大提升了酶解效率，提高了小分子海参肽的生产得率；将海参粉碎后，采用120°高温蒸煮，蒸煮时间为30min，将蒸煮时间由现有的2.5h缩短至30min，避免了现有技术中采用长时间高温提取会破坏海参中营养成分，同时节省了能源，极大的提高了生产效率；本实施例不采用乙醇等有机溶剂作为提取剂，完全采用水和酶进行提取分解，不但能把海参中的所有成分提取出来，而且没有任何污染，适合于工业化生产。(3)酶解：将海参提取液降温至60℃，调节溶液pH值至7，加入相当于投料海参干重0.1％的碱性蛋白酶和中性蛋白酶进行酶解反应，碱性蛋白酶和中性蛋白酶的重量比为1:1；酶解反应时间为4h，酶解反应结束后将海参酶解液升温到100℃进行灭酶，灭酶过程保持5min。通过复合酶解技术对海参进行酶解，得到分子量主要集中在1000道尔顿以下的小分子活性肽，同时产品中富含海参多糖和海参皂甙等其他功效成分，产品水溶性好，小分子肽含量高，更有利于海参活性成分的吸收和利用。(4)过滤：将酶解后的酶解溶液经硅藻土过滤，得到海参肽清液，硅藻土过滤过程中的压力控制在0.2MPa；将经过硅藻土过滤得到的海参肽清液中加入相当于投料海参干重3％的活性炭，静置1.5h，去除海参肽清液中的颜色、异味、盐类以及重金属。将经过活性炭吸附过的海参肽溶液依次经过桶式过滤器、棉饼过滤器和孔径为0.1μm的多层膜过滤器进行过滤，过滤过程的操作压力为0.15MPa。因为生长环境的原因，海参体内往往含有砷、铅、汞等有害重金属，利用硅藻土、活性炭的吸附作用以及膜设备过滤作用，能有效去除有害重金属，使最终得到的海参肽产品安全无毒。(5)浓缩：将经过步骤4)无菌过滤后的海参肽溶液经蒸发器进行蒸发浓缩，将蒸发浓缩时的温度控制在65℃，浓缩压力控制在-0.6MPa，浓缩至固形物含量为33％左右。(6)干燥：将浓缩液经过干燥塔进行喷雾干燥，喷雾干燥的进口温度为190℃，出口温度为95℃，干燥结束后即得到本发明的小分子海参肽粉成品。
本实施例的一种核桃肽的制备方法，包括以下步骤：(1)蛋白提取：蛋白提取的过程为将核桃进行脱脂处理，得到脱脂核桃渣，将脱脂核桃渣粉碎至50目后，加入核桃渣质量7倍的去离子水，加入碳酸氢钠溶液或氢氧化钠溶液调节pH至8.9，浸泡2h后，用离心机去除下层沉淀；加入柠檬酸溶液或冰醋酸溶液调节离心液的pH至4.2，静置2h后离心分离，取下层沉淀并水洗至中性，得到核桃蛋白提取液，采用波美计或凯氏定氮法对核桃蛋白提取液中的核桃蛋白质量进行检测。本实施例充分利用桃核榨油后的副产品——脱脂核桃渣来制备小分子肽，成本低廉，采用碱溶酸沉方法提取核桃蛋白，提取率大于85％；本实施例的核桃原料优选采用山核桃。(2)两次酶解：两次酶解过程为向核桃蛋白提取液中加入相当于核桃蛋白质量2％的碱性蛋白酶进行一次酶解，一次酶解温度为40℃，一次酶解pH值为9，一次酶解时间为4h；一次酶解结束后将一次酶解液升温至83℃，恒温15min进行灭酶处理；将经过灭酶处理的一次酶解液降温至23℃，并加入相当于核桃蛋白质量2％的木瓜蛋白酶进行二次酶解，二次酶解温度为50℃，二次酶解反应pH值为6.5，二次酶解时间为4h；二次酶解结束后将二次酶解液升温至82℃，恒温15min进行灭酶处理。(3)过滤：过滤过程为向经过两次酶解的酶解液中加入活性炭，活性炭的加入量为核桃蛋白质量的4％，并升温至100℃，保持8min，然后降温至80℃后静置30min-2h，以去除酶解液中的颜色和异味。(4)纯化浓缩：将经过过滤的核桃肽溶液离心除去固体残渣，将得到的清液用分子量为2500道尔顿的超滤膜过滤去除清液中的大分子杂质，超滤膜的膜压为0.8MPa，超滤温度为30℃；再用分子量为200道尔顿的纳滤膜去除无机盐和小分子杂质，纳滤膜的膜压为1.5MPa，纳滤温度为30℃。将过滤后的清液浓缩至固形物含量为25％，即得到小分子核桃肽溶液。(5)干燥：将纯化浓缩后的小分子核桃肽溶液进行喷雾干燥，喷雾干燥的出风温度为80℃，进风温度为160℃，干燥后即得到核桃低聚肽粉。
本实施例的大豆低聚肽的制备方法，包括以下步骤：将大豆依次经过粉碎、蛋白分离、酶解、浓缩、脱色和干燥制得；蛋白分离过程为：将大豆碎粉后得到大豆粉，将大豆粉与蒸馏水混合后得到大豆水溶液，调节大豆水溶液的pH至为8，将大豆水溶液进行搅拌和离心后，收集大豆上清液；将大豆上清液的pH值调整至4后，搅拌离心后过滤得到大豆蛋白。
酶解过程为：将大豆蛋白制成pH值为8的蛋白水溶液，加入相当于大豆粉质量0.25％的碱性蛋白酶进行一次酶解，一次酶解时间为3h，一次酶解温度为50℃，得到一次酶解液；调整一次酶解液的pH值至6，加入相当于大豆粉重量0.25％的中性蛋白酶和风味蛋白酶进行二次酶解，二次酶解时间为3h，二次酶解温度为50℃，灭酶后得到二次酶解液。
采用孔径为200nm的有机膜对二次酶解液进行过滤后，对滤液进行浓缩、脱色、干燥，制得大豆低聚肽。
本实施例的牡蛎低聚肽的制备方法，包括以下步骤：将牡蛎干燥粉碎后得到牡蛎粉，在牡蛎粉中加入去离子水升温至50℃后进行搅拌过滤得到牡蛎清液，调节牡蛎清液的pH值为8.5，然后加入相当于牡蛎粉重量0.1％的碱性蛋白酶酶解4h，酶解温度为50℃；调节牡蛎清液的pH值为6，然后进行灭酶处理，得到酶解液；将酶解液进行高速离心分离，用0.1μm的有机膜进行过滤，得到过滤液，对过滤液进行脱盐、脱色、离子交换后，得到牡蛎肽清液；将牡蛎肽清液进行真空浓缩至20％，得到浓缩液，对浓缩液进行喷雾干燥，得到牡蛎低聚肽。
上述实施例的鱼皮胶原低聚肽、牛骨低聚肽、海参低聚肽、牡蛎低聚肽、核桃低聚肽、大豆低聚肽的平均分子量均小于1000道尔顿。上述实施例的多功能复合低聚肽营养粉的原料均按照企业标准规定，经检验合格后再使用。按上述配方比例将鱼皮胶原低聚肽、玉米低聚肽、牛骨低聚肽、海参低聚肽、牡蛎低聚肽、核桃低聚肽、大豆低聚肽、柠檬酸钠/柠檬酸、食盐、果胶、食用香精、甜味剂和糊精配比后，在三维运动机内充分混合50min使其混合均匀。然后在GMP车间，将混合后的粉体过40目震动筛后，采用包装机灌装成袋即可。
本发明的多功能复合营养粉可制成冲剂服用，每包冲剂8g-10g，每天服用2次-3次，每次服用1包，可适用于18岁以上的各个年龄段人群。
采用本发明的复合营养粉针对40岁-60岁的100例的记忆力减退和三高患者(高血压、高血脂和高血糖)进行治疗，服用本发明的营养粉1个月后，60％的被治疗人群的记忆力有所提升，三高症状也有所降低。复用本发明的应用粉2个月后，80％的被治疗人群的记忆力明显提升，三高症状也明显降低。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种多功能复合低聚肽营养粉，其特征在于，包括以下重量份的原料：1-2份鱼皮胶原低聚肽、0.5-2份玉米低聚肽、2份-3份牛骨低聚肽、0.2份-1份海参低聚肽、0.2份-1份牡蛎低聚肽、0.5份-2份核桃低聚肽、0.5份-2份大豆低聚肽和0.5份-1份辅料。
2.根据权利要求1所述一种多功能复合低聚肽营养粉，其特征在于，包括以下重量份的原料：1.7份鱼皮胶原低聚肽、1份玉米低聚肽、2.3份牛骨低聚肽、0.5份海参低聚肽、0.5份牡蛎低聚肽、1份核桃低聚肽、1份大豆低聚肽和0.8份辅料。
3.根据权利要求1所述一种多功能复合低聚肽营养粉，其特征在于，包括以下重量份的原料：1.5份鱼皮胶原低聚肽、1.2份玉米低聚肽、2.5份牛骨低聚肽、0.6份海参低聚肽、0.6份牡蛎低聚肽、0.8份核桃低聚肽、0.8份大豆低聚肽和0.6份辅料。
4.根据权利要求1所述一种多功能复合低聚肽营养粉，其特征在于，包括以下重量份的原料：1份鱼皮胶原低聚肽、0.5份玉米低聚肽、2份牛骨低聚肽、0.2份海参低聚肽、0.2份牡蛎低聚肽、0.5份核桃低聚肽、0.5份大豆低聚肽和0.5份辅料。
5.根据权利要求1所述一种多功能复合低聚肽营养粉，其特征在于，包括以下重量份的原料：2份鱼皮胶原低聚肽、2份玉米低聚肽、3份牛骨低聚肽、1份海参低聚肽、1份牡蛎低聚肽、2份核桃低聚肽、2份大豆低聚肽和1份辅料。
6.根据权利要求1-5任一项所述一种多功能复合低聚肽营养粉，其特征在于，所述辅料包括以任意比混合的柠檬酸钠/柠檬酸、食盐、果胶、食用香精、甜味剂和糊精。
7.根据权利要求6所述一种多功能复合低聚肽营养粉，其特征在于，所述鱼皮胶原低聚肽、牛骨低聚肽、海参低聚肽、牡蛎低聚肽、核桃低聚肽、大豆低聚肽的平均分子量均小于1000道尔顿。
8.根据权利要求7所述一种多功能复合低聚肽营养粉，其特征在于，所述大豆低聚肽的制备方法为：将大豆依次经过粉碎、蛋白分离、酶解、浓缩、脱色和干燥制得；
所述蛋白分离过程为：将大豆碎粉后得到大豆粉，将大豆粉与蒸馏水混合后得到大豆水溶液，调节大豆水溶液的pH至为8-10，将大豆水溶液进行搅拌和离心后，收集大豆上清液；将大豆上清液的pH值调整至4-6后，搅拌离心后过滤得到大豆蛋白。
9.根据权利要求8所述一种多功能复合低聚肽营养粉，其特征在于，所述酶解过程为：将大豆蛋白制成pH值为8-10的蛋白水溶液，加入相当于大豆粉质量0.25％-1％的碱性蛋白酶进行一次酶解，一次酶解时间为3h-5h，一次酶解温度为50℃-55℃，得到一次酶解液；调整一次酶解液的pH值至6-8，加入相当于大豆粉重量0.25％-1％的任意比混合的中性蛋白酶和风味蛋白酶进行二次酶解，二次酶解时间为3h-5h，二次酶解温度为50℃-55℃，灭酶后得到二次酶解液。
10.根据权利要求8或9所述一种多功能复合低聚肽营养粉，其特征在于，所述牡蛎低聚肽的制备方法为：将牡蛎经过干燥、粉碎、溶解、酶解、过滤、脱盐、脱色、离子交换和浓缩干燥制得牡蛎低聚肽；
所述酶解过程为：将牡蛎干燥粉碎后得到牡蛎粉中加入去离子水并升温至50℃-55℃后搅拌0.5-1h过滤得到牡蛎清液，调节牡蛎清液的pH值为8.5-8.8，然后加入相当于牡蛎粉重量0.25％-1％的碱性蛋白酶酶解4h-4.5h，酶解温度为50℃-55℃；调节牡蛎清液的pH值为6-6.5，然后进行灭酶处理，得到酶解液。
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