TW438812B - Purified heparin fractions, method for obtaining them and pharmaceutical compositions containing them - Google Patents
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4 3 8 8 12 A7 B7 五、發明説明(1 〉 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 本發明係有《純化肝素份•且更特别是有藺不含緦亞硝 基化合物之肝素份,及有Μ其製法及含其之《藥產物。 更特別地,本發明係有翡由亞硝酸解聚作用所得之肝素 ,其實際上缺乏亞硝基化合物。 肝素份已知可由亞硝酸解聚作用而得,例如述於專利申 謫某ΕΡ-Α-0,014,184及ΕΡ-Α-0,027.089者。由亞硝酸解聚 作用所製備之某些肝素份係已在名為"低分子量肝素"或 ”小分子質悬之肝素”下正常使用之Β槩產物之活性主成 份。所有有«使用作為Β第產物之低分子最肝素*其分析 及其硫酸鹽化程度(·Κ磓酸鹽/羧基比例表示),均可參 考公開刊物”Heparines de fa ible masse moleculaire’* 〔•小分子質量之肝素〕,Phareeuropa ,1991年8月, 2_, N. 3 ,第161-165頁*及參考歐洲藥典”HepaMna massae molecuiaris rainoris” 1993年 2月(PA/PH/Exp. 3 丁 (92) 93)專趙論文。因而製備目使用作為路藥產物之 活性主成份之某些低分子fit#素述於號數為 FR-A-2478643; ΕΡ-Α-0,037,319; ΕΡ-Α-0,076,279及 ΕΡ-Α-0 , 1 8 1,259之專利申謓案或專利公報中。其在國際非 專有名稱(I Μ N)下,己知為n a d r 〇 p a r i n耗,d a 11 e p a r i η納 及reviparin納,且構成巳上市或可能上市之產品之活性 主成份。特別是reviparin納_成在德國上市之產品 CLIVARIN®之活性主成份。其他由亞硝酸期[解聚作用所得 之低分子量肝素亦存在於德國(MOHOEMBOLEX® NM),涣洲 (SAHDOPARIN1® 及 TROPARIN*® 及瑞士(SANDOPARINE®·)之 (請先W讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度速用中國國家標準(〇娜)八4規格(210父297公釐)_4一 83. 3.10,000 4388 1 2 a? B7 五、發明説明(2 ) 經濟部中央榡準局員工消費合作杜印裝 轚藥闾業處方下之某些產品中。 亞硝酸鹽解聚作用之方法偽賴由添加-H0基至存在於阡 素中或在其份敝或片段中易進行亞硝基化之化合物上而形 成非揮發性亞硝基化合物(後文中亦表示為N-HO化合物或 相當簡單表示為N-NO)。雎然存在於肝素份中亞硝基化合 物之量非常低且不利於其使用作為B藥產品*且由於fc化 合物為非揮發性,因此此等產物K工業規棋製造時需處理 大*粉末=因而其似乎可用以使其完全移除或幾乎完全移 除,以使使用作為》蕖產品之活性主成份之低分子量肝素 之特性更完整。 在其平均分子質量小之低分子虽肝素之情況中,例如· 在卞文中命名為CY 222 (平均分子質壘自1,700 Da至 3, 300 Da)之產品之情況中*亞硝基化合物之量可高於具 有較高分子質量之產品之量。此產物通合在專利申謫案及 專利公告號数FR-2,47 8,646及ΕΡ-0,037,319中申請之產物 之定義,且可依據述於相同_利申謂菜或專利中之方法製 備。 因而基於上述理由·高度期望可提供由亞硝酸鹽解度所 得且寊際上不含亞硝基化合物之肝素份。 Μ低於200 tira波長,且較好為135 η»波長之紫外線照射 及在驗性pH下,於飲用水中同時消毒木而移除硝酸鹽之方 法•述於 P. PRIHCZ 等人論文,Water Supply, 1988, δ_, 199-205中。然而,有期水處理之此文件無法預知紫外 線照射i否可用於生物活性產物而不會對其生物及/或物 ί請先閲讀背面之注意事項再填寫本X ) 訂 Λ 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4规格(210X297公釐)—5 ~ 83.3.10,000 4388 1 2 A7 B7 五、發明説明(3 ) 經濟部令央樣準扃員工消費合作杜印製 理化學性質有不良影響。 目前已躇由使亞硝酸邏解聚所得之肝素份進行紫外猓作 用(後文中表示為簡易UV)而發現•存在之亞硝基化合物 幾乎可完全移除,而可得到含有亞硝基化合物逋含蠆等於 或甚至低於天然肝素之純化肝素份。 在所用條件下,亦已發現UV照射不會改良肝素份之洁構 ,而可維持其所有生物及物理化學性質。 因而,依據其目的之一,本發明係有關由亞硝酸鹽解聚 而得且具有亞硝基化合物缌含量不超過5 00份每兆(ppb) 之肝素份•較有利者為不超過150 ppb ,較好不超遇100 PPb,又更好不超過50 ppb,在目前知識狀態下,50 PPb 含‘量為可定曼之最小量。該肝素份較好為低分子量肝素。 依據有利之目的,本發明係有關由亞硝酸鹽解聚所得之 純化低分子量肝素,亦即由天然濠·較好源自豬腸黏膜或 牛肺之肝素或任何萃取自各種動物之姐嫌或器官之其他肝 素,K亞硝酸纽解聚作用所#之解聚化肝素|其具有下列 特戡: —低於8,000 Da之平均分子質霣, 一至少60X之所有構成份具有低於分子質量, —不低於60 Ιϋ/ig之抗_埋子XaSft, 一抗因子Xa/抗因子Ila活性比例不fS於1.5 , -亞硝基化合物缌含最不超過500 ppb ,較有利為不超過 150 ppb ,較好不超過100 ppb ,且更好不超過50 t>pb; 該解^化肝素係圼《蕖可接受皤形態,較好為納或鈣鹽 (請>1閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 、tr 本紙張尺度適用中國國家揉準(CNS )八4規^格(210X297公釐)—6- 83. 3.10,000 4 3 88 1 2 at ____B7五、發明説明(4 ) 經濟部中央標準局員工消費合作社中製 抗因子Xa活性及抗因字Xa/.抗因子I la活性比例係參考 圃際檁準低分子量肝素而^% ;參考物WHO 1-85/600。 上述平均分子《質量之測定係依據歐洲藥典(參見上述 參考文獻)之專題論文而拥得。 本說明書中,”不含缌亞硝基化合物”一詞係用Μ限定由 亞硝酸鹽解聚所得之肝素份或低分子量肝素*且含有至多 500 ppb ,更有利為至多150 ppb ,特別是至多100 PPb 且較好至多50 ppb之總亞硝基化合物者。而"構成份·’一詞 涤用以表示由低分子·逢肝素所構成之分子姐。 本發明主題之不含總亞硝基化合物之低分子量肝素,在 其'主要檐成份中*為在未遒原端之2-0-磺基- d~L-idopyrancsuronic结構及在堪原端之6-0 -播基-2,5-脫水 -D-甘兹糖酵结構,且磺化程度本質上與天然源之未分豳 盱素無不同•此磺化程度係介於2及2.5之間且較好介 於2 ·0及2.3之間。 · 依據本發明有利之低分子童肝素具有可變分子質童分佈 ,其9〇56檎成份之分子質量介於2,000 〇3及10,000 1)3之 範圍,較好介於2,000 Da及9,000 Da之範圍,更好介於 2.0 00 Da及8,000 Da之範圍S;再者,這些肝素具有落於 3.000 Da 及 6,000 Da 間,且較好落於[ 000 Da 及 5,000 Da間之歷倒性分子質量。 本發明之其他較佳低分子鼉肝素具有在1,700 1)3及 3,300 Da範圍間之壓倒性分子質量,且90S!之所有構成份 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中圃國家標準(CNS ) A4規格(2〗OX297公釐)一7 — 813.10,000 4388 1 2 A7 B7五、發明説明(5 ) 經濟部中央揉準局貝工消費合作社印製 之分子質量介於I , 0 0 0 D a及δ , 0 0 0 D a之間。 ”壓倒性分子質里"一詞係表示相當於使用UV偵测器在λ = 205 γϊβ時,胆排層析儀(exclusion chromatography) 所得之庸析輪廊圖之峰之肝素構成份之分子質量。 純化CY 222,係定義為得自豬臈黏膜之天然來源之肝素 Μ亞硝酸解聚所得之解聚化肝素之納盥,其具有: 一介於1 , 700 Da及3,300 Da範圍間之懕倒性分子質簷* 90J!構成具有介於1,000 Da及8,000 Da範鼷間之分子質霣 , —在其播成份主要部份之未堪原端之2-0-磺基-cx -L-艾杜 吡喃suronic结構及在堪原端之6-0-磺棊-2,5-脫水-D-甘尨糖酵结構, —約2·. 1之磺化程度* 一 6 0 -8 0 IU/ag之抗因子Xa活性, —抗因子Ila活性不大於25 IU/ms,更好為10-15 IU/ag 9 一亞硝基化合物缌含量不超過100 Pf>b (每毫克產物為1 xlO-7毫克之亞硝基化合物),更好不超過5〇PPb (每毫 克產物為5xl〇-e毫克亞硝基化合物), 該CY 222表示本發明之較佳肝素份。 本發明之不含總亞硝基化合物之阡素份(低分子量肝素 )偽依據本發明之另一目的製備者。 因而,本發明亦有藺一種製備至多含有50 PPb總亞硝基 化合物之肝素份之方法,其特徵為使由亞硝酸鹽解聚作用 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度遄用中國國家揉準(CNS ) A4規格(210X297公釐)—8 — 83. 3.10,000 4388 1 2 A7 B7 五、發明説明(6 ) 經濟部中央楯隼局員工消费合作社印製 所得之肝素份之水溶液進行紫外繚照射。 至於起始物,可使用由亞硝酸《解聚作用所得之任何肝 素份此棰起始物通常含有介於1,000及20,000 ppb間之 亞硝基化合物總含量。 雄亞硝基化合物之測定係JWB. Pignatelli等人述於 Analyst. 1989年 9月,;LU_,第 1103-1108 頁及於 Anslyst ,1987年7月,UL2_,第945-949頁中,迪用於肝素及其份 數•較好逋用於低分子量肝素之方法進行。 本發明方法可在溶於水中之《藥级低分子最肝索上進行 ,或在工業製造上*·在亞硝酸鹽解聚步驟之後及在纯翳藥 级產物單離之前進行。較好使用B蕖级低分子霣肝素。 而,作為本發明方法之起始物,可使用由亞硝酸鹽解 聚作用所得之任何低分子量肝素。為了獲得最大效率之方 法,可有利地使用不含懸浮微粒之解聚化肝素溶液。這些 微粒之存在可能係由於解聚化肝素之不良溶解度或由於各 種雜質,或由於使用於解聚作用或鈍化作用中之試劑殘留 物。因此,解聚化肝素之各種溶液較好進行事先過濾。 本發明方法由於可籣單,快速且安全地移除亞硝基化合 物,因此預期有效且易埵用者。此外,本發明之方法不會 引起jum结mE-何改變,因而可嚴格地維持相同之生 —— — — ···· _______ 物性質及物理化學特徴。 本發明方法之進行,可使由亞硝酸播解聚作用所得之犴 素份之5-15¾ m/V水溶液,較好為欲纯化之低分子量肝素 之5-15¾ */V水溶液•在180至350 nffl之波長,且較好在 {請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 "丨. 本紙張尺度逍用中國國家標準(CNS)A4規格UlOX297公釐)一 9一 83.3.10,000 4388 1 2 a7 _B7五、發明説明(7 ) 經濟部中央標準局員工消費合作杜印製 254na之波長下之UV照射***下,於5 至50t,較好在 15t:至35C *且更好在室溫下進行。 溶获之pH為略酸性或略鹼性,特別是介於3及8之間. 較好介於5及8之間。 照射時間係視所用之照射***,照射功率及存在於肝素 份中而欲移除之结!亞硝基化合物之量而定。雖然通常實際 上完全纯化係在9-15分鐘後,但為約2至30分鐘。 至於(IV照射***•可能為可使肝素份溶液循環在(IV照射 源附近之靜態条铳或動態***•以動態糸统較佳。在後者 儈況中* (JV照射源可與圓茼管(”密閉"型裝置)或與専管 (”開放”型装置)姐合使用;至於B密閉"型装置,可使用 JRi-50 UATADYN) UV殺菌器或任何其他對等裝置。 第1圖顔示"密閉’’型裝置之一段。此裝置係由在配置之 石英護套(2)周圍之ϋ\ί燈(1)所组成。此含低分子量肝素 之溶液循環至受石英護套所保護之UV燈周圃(循環疲體 (3)之護套)。其係經由位於UV燈一端之入口(4)導入· 而出口( 5 )係位於(J V燈之另一端。 當使用動態系統時•肝素份溶液循瓖至UV照射源附近之 流速需通當地調整* Μ獲得移除亞硝基化合物所需之照射 時間。可包含之不同參數為循環液體氣流之參數,UV照射 源之大小及/或功率•水溶液之肝素份濃度及含於該份中 欲移除之亞硝基化合物之量。 因此獲得之不含埋亞硝基化合物之肝素份,或較好為低 分子量肝素,可使用習知方法回收。 (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度逋用中國國家標隼(CNS ) Α4規格(210X297公釐)—10- 83. 3.10*000 4 3 881 2 A7 B7五、發明説明(8 ) 當使用B蕖級之低分子霣肝素作為起始物時,其足Μ使 產物溶於水中,而調整溶液之pH介於3及8之間,較好介 於5及8之間,並使此溶液進行本發明之方法。 亦可能使用天然來源之未分豳肝素作為起始物,較好呈 鹽態,待別是肝素納•較好為源自豬腸黏膜者.。此情況中 ,本發明方法在亞硝酸鹽解聚後•於製備不含總亞硝基化 合物之純化終產物中*僅構成一涸步驟。自肝素起始之接 個方法代表本發明之進一步目檷。 因而,依據其另一目的|本發明係有關一種由亞硝酸鼸 解聚作用,而製餚具有不超過500 PPb *較好不超a 150 PPb ,且更好不超過100 ppb *又更好不超«50 t>pb之缌 亞^酸基化合物含虽之低分子量肝素之方法•其特激在於 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標隼局貝工消費合作社印裝 (a) 以鹼金屬亞硝酸鹽*較好為亞硝酸納之溶液(其比例 為每公斤専入之肝素為15至69克亞硝酸鹽)*在鹽酸 存在下,於pH 1至5 ,i較好於pH 1.5至4下,處理 未分謅肝素納之5-15¾ ϋ/V水溶液20至50分鐘,並使 所得產物•較好在驗性介質中•以每公斤肝素起起物 為5-2 0克之棚氫化納進行堪原反應,以鹽酸破壊過量 之硼氫化納,反應介質適當地中和,且產物Μ乙酵沉 澱出,之後*因而所得之低分子單肝素適當地進行一 或多次之醇分餾, (b) 因而所得之溶液進行紫外線照射· (c) 適當地進行層析鈍化•且純化且不含结!亞硝基化合物 本纸張尺度適用t國國家揉準(CNS ) A4洗格(210X297公漦)一 1 1 _ 83.3.10,000
438812 S 五、發明説明(9) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 之解聚化肝素納,K氣化納及乙酵沉澱而單雛,及遘 當地· (d)使納鹽轉化成其他路槩可接受麴,較好為鈣鹽。 依據較佳目的,本發明係有Μ —種製備純化CY 2 2 2之方 法,該纯化CY 222係定義為由源自豬腺黏瞑之天然源肝素 Κ亞硝酸解聚作用而得之解聚化肝素之納鹽,且具有: —介於1,700 Da及3,300 Da間範围之壓倒性分子質量· — 90X之構成份具有介於1,000 Da及8,000 Da間範園之分 子質S, 一在其主要構成份之未堪原端具有2-0 -磺基- a -L -艾杜吡 喃suronic结構及在堪原端具6-0-磺基-2,5-脫水-D-甘 露_酵结構, 一約2 . 1之磺化程度* - 60-80 UJ/eg之抗因子Xa活性, 一不大於25 ΠΙ/mg之抗因子Ila活性, _亞硝基化合物之含量不超過100 PPb ,較好不超遇50 ppb * 該方法之特激為: (a)以馥酸及相對於等人之肝素之3.5至4X重虽之鐮金鼸 亞硝酸邇«理天然來源之未分餵肝素納之水溶液*同 時pH维持酸性,並追踪亞硝酸鹽子之存在*直至呈 陰性反應,接著使混合物鲰化,產物Μ蘭氫化納堪原 ,並Μ乙醇沉澱於中性介質中單離出解聚化產物,接 著. (请先閲读背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4規格(210Χ297公釐)—1 2 — 83. 3.10,000 4388 12 a? B7 五、發明説明(10) 經濟部中央標準局員Η消費合作社印製 (b)因而所得產物之水溶液在約pH 7下 > 通過在254 η 之 紫外埭照射系铳•因而所得溶液隨後専入陰鏟子交換 管柱之上端,之後管柱Μ水且在的pH 7下沖洗,终產 物Μ氛化納及乙酵沉澱而回收。 步驟U)中,使用上述比例之亞硝酸納作為鑣金龎亞硝 酸由。 較好,在方法之步驟(b)中•紫外線照射***偽S置 16W燈管,且在254 nm之紫外線照射曝露時間約9-15分鐘 • Μ動態U V照射系統較佳,且特別是”密閉”型裝置。有利 地,進行UV照射之溶·液濃度為8-12* m/V。 依據進一步目的,本發明偽有關含有不含缌亞硝基化合 物i純化肝素*較好是含有上述不含结!亞硝基化合物之純 化低分子量肝素作為活性主成份之路藥姐合物。 至於本發明之组合物,肝素份可呈凍乾態,或可為於殺 菌之生物可接受溶劑(如水)或於生理溶液中,而於小玻 璃的安缻*於預填人之針筒或於”筆”型自我注射裝置中之 皮下注射用溶液。各單位之B藥劑量姐合物珂含有50至 50.000 IU 抗因子 Xa。 本發明之肝素份亦可單獨或與其他活性主成份混合而經 猙脈内注射投藥。此外,其可藉橐内或肺内噴菝而投藥。 本發明之較佳骼蕖姐合物含有上述之不含總亞硝基化合 物之CY 222作為活性主成份*於劑量單位中含有10 mg至 5.0 0 0 mg之圼訥鹽態之CY 222。 如上所述|總亞硝基化合物之測定係由B. PUnatelli (请先Μ讀背面之注意ί項再填寫本頁) ------------—----- I-----訂------妗 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4说格(2丨ΟΧ2?7公釐)一 1 3 — 83.3.10,000 經濟部中央標準局貞工消费合作社印裝 438812 A7 _B7 五、發明说明(11) ~ τ, 等人於Ana bst, 1 979年9月,Π4.第1 1 03-1 1 08頁及於 Analyst,1987年7月,;LL2L,第945-949頁中,遘於肝素及 低分子量肝素之方法進行。 圃式匍要銳明 _ 1顯示"密閉”型装置之一段。 圔2顯示分析肝素所使用之設備。 鼸式羊響完件菥逋撖瞄 圓1 : 1 UV燈 2 石英護套 3 循環液體 4 入口 5 出口 圖2 : 1 圖底瓶 2 冷凝管 3 起泡器 4 起泡器 5 起泡器 6 對等物 7 稹分器/記錄器 8 穿剌塞子 9 隔膜 ^14" 本紙伕尺度適用中國國家捸準(CNS ) Α4規潘(210X297公釐)
--------^------1T------^ (請先Μ讀背面之注意事項再填寫本頁J 經濟部中央標準局貝工消费合作社印策 438812 A7 B7 五、發明説明(I丨% - 欲分析之產物較好圼粉末狀,因此*在拥定存在於溶液 中總亞硝基化合物之情況中*需先進行該溶液之冷凍乾燥 ,且嫌後分析此凍乾之樣品。 1 -試《 用於100奄克肝素份之試劑如下: -以20X 1«八胺基磺酸處理之酵酸乙酯( 200克胺基磺酸 於1,000奄升_酸乙酷中之溶液,播拌3天並在使用前經 濾紙過濾)· 一含15X氫溴酸之酺酸(具聚乙烯塞子之小安瓿*含5亳 升之30X氫溴酸,在氬氣中冷卻並貯存於暗處;使用時, 加入5奄升炖_酸•且混合物於暗處於小容器中搖晃並貯 存,每一糸列分析使用1安瓿), -K5X m/V胺基磺_處理之95X甲醯胺(1克胺基磺酸於 含5X純水之20毫升甲醢胺之溶液)》 2-捶進游液》歆分析律品夕脚備 亞硝基二一正丙胺(HDPA)之標準溶液 78.62克鈍乙酵經由隔联注射入含1克N-亞硝基二-正 丙胺之3丨8疆3 15(^点(:瓶中,濟度為10,000 ?>?1*之》0卩八( 3379 ρρ·之Ν-Η0)。接著溶液Μ纯乙酵稀釋至1/100並以 0.5奄升份數分®於小密封安瓿中·瀟度為100 ρρ·之 -14a - 本紙張尺度逍用中國國家標準(CNS M4規格(2t0X297公釐} I n n n n 11 I 訂 I I I I — ^ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 438812 - 五、發明説明(12) 經濟部中央標李局男工消費合作社印策 HDPA,安85於+ 4C下於暗處貯存。 *低檷準溶液••使用時•於乙酵中稀釋成"100 ,接著於 纆處理甲釀胺中稀揮至1/17·澹度為0.0588 ppb之HDPA或 19.9 ppb之 Ν-Η0。 *中範園標準溶液:使用時,於乙酵中稀釋成1/61,接著 於连®理甲豳胺中稀釋至1/11,濃度為0.149 ppm NDP A或 50.4· ppb Ν_Η0ο *高標準溶液:使用時,於乙酵中稀釋成1/10’接著於經 處理甲醯胺中稀釋至1/10,濃度為1 ppm之NDPA或338 PPb 之 Ν-Ν0 。 —欲分析之樣品 素份之探品於60¾真空下使用五氧化磷乾燥12小時; 100毫兒肝素份溶於〗毫升經處理甲皤胺中,且混合物於 徭晃器上搖晃30分鐘。 3-所用設備 所用之設示於第2圖 装配 設備係由載有冷卻至-15 t:之雙表面冷凝管(2)之500 毫升派瑞斯(pyrex)圃底瓶(1)所構成。冷凝管連接至各 含30毫并3 OX氫氧化納之三Μ串瞄起泡器(3),這些起泡 器連接至兩個串瞄装設之冷卻阱,一輝Μ熔融乙酵在 -120Τ:製備(4)及另一個Μ熔融異戊烯在-16〇·〇製備(5) 。這些阱最後連接至化學發光偵測器(ΤΕΑ)610型( Ther»e<HCS偵测器公司〉或對等物(6>上。偵測器連接至 (请先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家揲準(CNS ) A4規格(210X297公釐)一 1 5 — 813.10,000 經濟部中夬標準局員工消费合作社印装 43881 2 A7 ___ B7 五、發明説明(丨> ) ί 稹分器/記錄器(7)。 瓶之一端配置有可使氨氣流經過而等入之套管之穿剌塞 子(8) >另一嫌,則為可使欲連接之GC型隔膜(9)(其可使 樣品烴由其注射)所提供之螺旋接頭。氬氣流及由TEA興 空泵所產生之真空使氣髑朝TEA吸引。 4-播作方忒 4.1 一設定偵測器 依據製造廠商之指示設定TEA 狸得最大感應度及再 現性。 分析前1小時•在2巴(bar)之壓力下打開氧供應器且 流速於TEA 610 (Thernedics偵拥器公司)之流量計上調 整至0.02。 4.2 -氬氧化納阱之製備 各阱填入30¾升之30X氫氧化納。 4.3 -冷卻阱之製備 -120阱:煖慢於含250奄升乙酵之Dewar中倒人液態 氮同時以木製竹板攪拌,直至獲得糊狀物。 -1601:阱:於含250亳升異戊烷之Dewar中緩慢倒入液 態氰•同時Μ木製竹板攪拌•直至獲得糊狀物。 兩個玻薄阱置於其各別Dewar中,並串脚成迴路。 4.4 一瓶一冷凝管脫水裝配 在氬氣下而無連接至TEA下,使50奄升醣酸乙酯回流] 小時。 4.5 -反應及分析 _ 16 - 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(21^X 297公釐) ^ I 11 I n I— I n I n I '-v (請先M讀背面之注意事項再填寫本頁) 43881 2 A7 B7五、發明説明(14 ) 經濟部中夹標準局男工消費合作社印製 30奄升經處理之醋酸乙酯導入配有隔膜之新乾淨且乾埭 圓底焴瓶中,瓶在冷凝管下裝設(低溫保持器需於2小時 前打開至〜15 t:),瓶加熱器置於規定位置且使瓶加熱( 位置4)。連接氬氣套管,潦速調整至0>1升/分鑪且檢査 整涸迺路是苔灌漏。僅與TEA之連接打開Μ避免遇度壓力 。會醋酸乙酯回流時,非常溫和地施加真空,且同時旋緊 至TEA之人口,整個酒流中普邊充滿真空,且當糸统平衡 時,達2-4 na Hg 。在積分器/記錄器之103;完全大小下 之TEA上設定為0 。 經由隔膜•依序注入0.5毫升純水* 2奄升稀氫溴酸, 接著再次注入2奄升稀氫澳酸。在各注射之間,檢査指示 器^積分器/記錄器上是否回至基準線。當試劑注入瓶中 時,使指示器回至基準線,接著注射50微升(ul)之檁準液 或樣品。注射之間,使指示器回至基準線。在分析中》5 個樣品係穿插於2儸摞準品之間,且Μ完全操作時間不超 過60分鑪之方式進行此步驟。 4.6 —雄亞硝基化合物量之評估 Κ下式計表示之Ν-Κ0量: 樣品面積 X Cs X 0.05 X 44 X 1000 N-NO PPb量=-;- 棵準品面稹X 0.05 X 0.1 X 130.2 其中: (請先《讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙浪XJL適用中國国家標準(CNS )八4祕(210X297公羡)~ 17 ~ ' 83.3.10,000 4388 1 2 經濟部中央標準局舅工消费合作社印製 A7 B7 ._五、發明説明(15 ) -Cs:標準获之NDPA以ppm表示之滬度(〇.05δ8或0.149 r 或 1 p P B ) -0.05:檷準品(nl>之測試試樣(分子) -44 : H-HG之分子質虽 -1,000: ppa縛化成 ppb -0.05:樣品(·1)之测試試樣(分母) -0.1 :樣品以克數表示之測試試樣 -130.2 : HDPA之分子質量。 下列實例係用Μ說明本發明"n m 1 亘有Φ於loo DPh之曲亞珀某彳h合物》妹化 nadrftoarin耗之教備 喏铅A :«聚作爾»乙《1分鏞柞用 於反懕器中•滬自豬腸黏膜之肝素納20公斤以純水溶解 ,因而得10.3X (b/V)區域中之終港度·溶液之pHM«SI 酸調整至2.5 。 57 2克亞硝酸納導入反應器中|同時pH以渥獼酸維捋在 2.5 〇 使用澱粉/碘化鉀試紙追踪解聚反應,當測試圼險性表 不反應完全|反應溶液之pH以濃氫氧化納調至10·接著添 加200克硼氫化納。混合物撟拌15小.時•接著ρΗΜ濃a酸 調至4及3.5之間| Μ破壤過量之硼氢化物。pH接著藉添 加濃氫氧化納而調至7 ,產物接著K每賭積水溶液添加2 體積之乙醇而沉澱*使沉澱物沉降接著移除酵性水溶液上 (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度逋用中國國家揉準(CNS ) A4规格(210X297公釐> —18- 83.3.10,000 438812 A7 B7 五、發明説明) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 澄液。沉積物溶於400升纯水中,於此溶液中添加氛化納 直至得到20, 000 w S/Cm之導電度。接著Μ pHK濃鹽酸調 至4之值|攢拌下添加1體積絕對乙醇至溶液中。使產物 沉降約60小時接著移除酵性水溶液上澄液,因而得呈納鹽 之 nadropar i π 0 接著沉澱物溶於純水中•而得以開始導入之阡素納為傘 為約18X m/V濃度之溶液*且pH以濃氫氧化納諝至7 。接 著溶液於S有孔隙度0.2 «m之過»匣之糸统上過濾,自 含nadroparU納之過濾溶液中,取出樣品*其不經階段B 之方法處理(KUV照射處理),此樣品表示為”對照组”。 聃跺B :W丨丨V稱射之虔捆 照射處理,係使用Katadyn型JIM-50管,有用賭 模為750奄升。使用波長為254 nm。流速事先K使用純水
I 之動性(peristaltic)泵之方式適當地調整( 4,800毫升 /小時),因而得到的9分鐘之曝S於UV下之總時間(僅 一次虽而非再循環)。接著‘人欲處理之nadroparin納, 且垣路以纯水洗滌直至經處理之產物於槽(接於Katadyn JIH-50管之出口處)中完全回收。 限段C : Μ 18析法婶朴;祐_化成钙_ 經濟部中央梯準局貝工消费合作社印装 於前述階段中所得之na dr oparin溶液於陰離子交換管柱 上純化(0.5升/公斤之導入之肝素鸿)。收集之溶出液 之導電性Μ氛化納調整至10,000-20,000 wS/cni,接著添 加1.5體横之乙醇。產物靜置沉降約41小時,接著移除上 澄液。 83. 3.10,000 本紙張尺度適用中國固家揉準(CNS ) A4洗格(210X2?7公釐)—1 9 — 43881 2 A7 B7 五、發明説明(Π) 沉锻物溶於純水(>i導人之肝素納之贵為準,濃度: 18!β ii^V)·並加人氛化鈣六水合物(9.63克/之導人之肝 素納),接著藉添加1 . 5體積乙酵而進行乙酵沉溅|重複 以氛化鈣六水合物之馥化步驟及以乙酵沉載之純水步嫌》 所得沉澱物在不高於60 TC之溫度乾嫌。 囟而獲得批式1 。 階段Α中所得之"對照姐”批式亦依據此階段C之方法處 理,並軍離nadropar U鈣之"對照姐”批式。 在批式1及nadroparin鈣之"對照姐”批式上,進行物理 化學分析,及廁定其·生物活性之分析。 各種结果示於表I及II。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央橾準扃貝工消費合作社印裂 本紙張尺度遥用中國囷家揉準(CNS)A4規格(2I0X297公釐)一 20 — 83.3.10,000 4388 1 2 A7 B7 五、發明説明(18 ) B_L 物化測試 拊忒1 0?l丨V菝理) 對聛姐f去if UV眩拥1 總亞硝某化合物 R3 ooh 3.150 D〇h 舱雜處敌醣 0.05 % 0.0R % Μ溶液之dH fi.O fi.O 脓SiNH, < 30 DDra < 30 di>ib HPLC-GPC (UV 205 mn) 重量平均分子質量(Mw) • 5,017 Da 4,933 Da 數平均分子質遒(Μη) 4,043 Da 4,052 Da 峰分>虽 4,181 Da 4,192 Da 分散性 1.24 1.21 X HW > 10.000 Da 2,4 2.1 % HW > 8,000 Da 7.2 6.9 % MM > 2,000 Da 3.0 2,9 X MU > 1.800 Da 2Λ 2.3 (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標隼局員工消f合作社印製 生物測試 迫踪之參齡 拊(III/赓揮) 對照姐(去辉I丨V虚揮) 杭闵罕Xa话# 124 ΤΙΙ/ϋΐκ 12.Ί ΤΙΙ/nii 抗闵芊na活件 29..^ m/mz 30.4 Ttl/πικ 本纸浪尺度適用中國困家揉準(CNS M4規格(210X2M公釐) 21 83. 3.10,000 438812 绖濟部中央標隼局員工消費合作杜印製 五、發明説明(19) 表I及II所示之结果證明UV處理不會引起nadropain之 . 任何降解:.實際上批式1之各種物理化學及生物特激,如 產物之層析輪廓,不同雜筲含悬,抗因子Xa活性及抗因子 Ila活性與未經UV照射處理之對照組相同•僅有一姐例外 :在未處理對照組中结!亞硝基化合物含量約為烴UV照射處 理乏批式1中缌亞硝基化合物含最之60倍高。 再者,鼋子常磁共振分析之结果證實KUV照射處理不會 引起游濉基之釋出。 啻例2 具纗亞硪某化舍物含最小於50 DDh^nY 222纳嫌之脚備 睡@ A : 期作用 ^反應器中,使源自豬腸黏膜之肝素钠250克从純水溶 解,而得終濃度為10.335 U/y) ,ρΗΜ溏鹽酸調整至2.5 ,導入9.49克亞硝酸納於反®器中,同時pH维持在2.5 , 使用澱粉/碘化鉀試紙追踪解聚反應,當測試為陰性時表 示反應完全,反應溶液之pHK濃氮氧化納調整至10及 10.5之間,接著加入2.5克纽氫化納,混合物攪拌15小時 •接著使用缠鼸酸調鏊pH至3,5與4之間•而破壞過t之 砸《化物。PHK添加濃氫化納調至7 ,接著產物以對每體 積溶液添加2鶼積乙酵而沉濉,.使沉濉物沉降並移除上澄 液,因而獲得呈納薄態之CY 222。因而所得產物含有 3·000至1〇,〇〇〇 ppb間之缌亞确基化合物(得自3次製備 )° 賭段B ·· μ ιιν睹射a揮 (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家揉準(CNS)A4規格(210X297公釐)一22 — 83.3.10,000 4388 1 2 a? B7 五、發明説明(20) 經濟部t央標準局負工消費合作杜印裝 前述步驟之沉澱物溶於纯水中,而得終溶液濃度約為所 導入肝素納1為準之10¾ B/V ,旦pH以鹽酸或氫氧化钠調 至7 。調整泵之檐出後,因而所得溶液通過在254 ηπ下之 紫外線照射系铳(Katadyn JU-50***,其設有16 V燈管 )。曝兹於UV照射之時間為9至15分鐘。 階爵C :暦析之鈍作及甚玖沉葙作用 M ITV照射處理後所得溶疲在含有每公斤導入肝素納為至 少2升之陰離子交換樹脂之層析管柱上純化。所收集之溶 出液之導電度使用®化納調至30 -35 nS/c·,且其pH使用 鹽酸調至7 *接著對·每體積之水溶液添加2體積乙酵•使 沉毅物沉降並移除上澄液;沉澱物溶於纯水中,而得以開 始^導人之肝素納虽為準,濃度為20¾ b/V之終溶疲》溶 液之専電度Μ氛化納調至30-35 mS/cm ·且pH使用濃蘧酸 或漘氫氣化納調至7及7.5之間,接著溶液M2體積之絕 對乙酵沉澱*使沉澱物沉降。收集沉澱物,以乙醇洗滌並 在不超過601之溫度乾燥。因而得到純CY 222,其定義為 由豬腸黏膜之肝素經亞硝酸解聚作用而得之解聚化肝素之 納馥,此產物具有: —在1,700 Da及3,300 Da間範圍之壓倒性分子質量,90X 之構成份在1,000 Da及8,000 Da範圃間, 一其梅成份主要部份之未堪原端有2-0-磺基-a -L-艾杜吡 哺suronic结構,及在堪原蝙有6-0-磺基-2,5-脫水-D-甘露糖酵结構, 一約2.1之磺化.度, (請先聞讀背面之注^^項再填寫本頁) 本紙張尺度通用中國8家揉準(CNS > A4规格(210X297公釐)—2 3 — 83.3,10,000 4388 1 2 at B7 五、發明説明(21 ) -60-80 IU/ng之抗因子Xa活性· , _不大於25 Ιϋ/ng之抗因子Ila活性,持別是10-15 I U / m S之活性* -亞硝基化合物含量小於50 ppb。 (請先閲讀背面之注意ί項再填寫本頁) 訂 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4规格(210X297公釐)一 24— S3.3.10,000
Claims (1)
- 第赛碑請茱 中文申謫専利範園修正本(90年2月) 8888 ABCD 經濟部中央標準局貝工消费合作社印I 々、申請專利範圍 1. 一種由亞硝酸鹽解聚作用所得之低分子量肝素I其具有 50p{>b至500 ppb範園内之總亞硝基化合物含量。 2. 根據申請專利範園第1項之低分子量肝素•其中該低分 子量肝索為其特徴在於其係由源自豬腸黏膜或源自牛肺 之天然源肝素或任何萃取自各種動物之姐雄或器官之肝 素烴亞硝酸蘼解聚作用所得之解聚化肝素•其具有下列 特激: —介於1,700至8,OOODa間之平均分子質量· -至少60¾之所有構成份具有介於1,700至8,000 Da 間之平均分子霣量* —不小於60 IU/ng之抗因子Xa活性。 一抗因子Xa/抗因子Ila活性比例介於1.5至5之間 » -其構成主要部份之未堪原端有2-0-磧基- a 艾杜 吡喃糖醛酸结構及在堪原端有6-0-磺基-2,5-脫水-D-甘兹糖醇结構, 其偽呈轚藥可接受性驪態。 3. 根據申請専利範圍第2項之低分子量肝素,其中該低分 子fl肝素係圼納鹽或鈣鹽態。 4. 一種由源自豬腸黏膜之夭然源肝素烴亞硝酸麴解聚作用 所得之解聚化肝素之納9,其具有: 一介於1,700 Da及3 , 300 Da間範_之壓倒性分子質量 一 90X之構成份具有介於1,000 Da及8,000 Da間輅圍 之分子質量* ^^1 1^1 1^— ^^^1 I ^^^1 ^^^1 n HI ^^^1 ^^^1 ^^aJ (請先M讀背面之注意Ϋ項再填寫本頁) 本紙張尺度逍用中困國家梂準(CNS ) A4規格(210X297公釐) 2 v 8 8 3 4 8 8 8 8 ABCD 娌濟部中央揉率局工消费合作社印SL 六、申請專利範圍 -其構成主要部份之未堪原镰有2-0-磺基-<x -L-艾杜 吡喃糖醛酸结構及在堪原薄有6-0-磺基-2,5-脫水-D-甘霣糖酵结櫞· 一介於2至2.5間之碾化度* 一 60-δ0 IU/Bg之抗因子Xa活性, 一介於10IU/Bg與25 IU/as間之抗因子Ila活性, 一亞硝基化合物含ft不超過100 PPb 。 5. 根據申請専利範圍第4項之解聚化肝素之納強,其特激 為總亞硝基化合物之含量不超過50 ppb。 6. 一種製備根據申請専利範國第1至3項中任一項之低分子 S肝素之方法,其特微為由亞硝酸鹽解聚作用所得之低 分子量肝素水溶液係進行紫外線照射。 7. 一種製備根據申請專利範圃第4及5項之解聚化肝素之納 馥之方法•其特微為由亞硝酸Μ解聚作用所得之低分子 霣肝素水溶液係進行紫外嫌照射。 8. 根掸申謫専利範園第6或7項之方法,其特擞為溻度為 5-15Χ B/V之由亞硝酸鹽解聚作用所得低分子最肝素水 溶液*在5 〇及50Ρ間之溫度*嚅露於波長為180至 350 DB之紫外線照射糸统下,而溶液之pH介於3及8之 間。 9. 根據申請專利範圔第6或7項之方法|其特徴為曝露係在 254 ηπι· 15=及25勺間之溫度及5至8間之pH值下發生 Ο 10. —種製造根據申請専利範豳第1至3項中任一項之低分子 量肝素之方法,其特激為: (請先W讀背面之注$項再填寫本頁) 本紙诛尺度適用中BH家梯準(CNS ) A4規格(2!0X297公釐) 43 88 1 2 經濟部中央棣率局β;工消费合作社印策 AS BS C8 _ D8々、申請專利範圍 (a) 在鹽酸存在下,於pH 1至5 ,較好為1.5至4之 間* K每公斤之導入之肝素為15至69克亞硝酸期之比例 *以亞硝酸钠溶联處理5-15X B/V之未分餾肝素納之水 溶液20至50分鐘•因而所得產物較好在嫌性介質中* K 每公斤之開始時等入之肝素為5-20克之硼氩化納進行還 原,Μ鹽酸破壊遇最之硼氫化納,班當地中和反應介霣 ,且產物以乙酵沉澱,接著,«當地使所得低分子量肝 素進行一或多次酵分皤; (b) 因而所得溶液進行紫外線光照射* (c) 適當地進行層析鈍化,並以氣化納及乙酵沉澱而 單雄出純化且不含總亞硝基化合物之解聚化肝素納,及 遴當地 (d) 使納鹽轉化成其他》第可接受腰。 11·根據申誚専利範園第10項之方法,其中鹽酸在pH 1.5至 4之間。 12· —種製造根據申請專利範圍第4項之解聚化肝素之納鹽 之方法•其特激為: U)在鹽酸存在下•於pH 1至5 *較好為1.5至4之 間· K每公斤之等入之肝素為15至69克亞硝酸»之比例 亞硝酸納溶液處理5-15X «/V之未分《肝素纳之水 溶液20至50分鐘,因而所得產物較好在_性介質中· Μ 每公斤之開始時導入之肝素為5-20克之β氲化納進行還 原* Μ鹽酸破壞過量之«I氳化納迪當地中和反應介質 ,且產物以乙酵沉澱*接著,迪當地使所得低分子量肝 素進行一或多次酵分ft ; ^^1 ^^^^1 ^^^^1 ^pl^i ^―— .- ----- ^^^1 (請先聞讀背面之注$項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中Ββ家橾率(CNS > Α4规格(210Χ297公釐) 4388 1 2 Α8 BS C8 D8 申請專利範圍 經濟部中央揉準局負工消费合作社印装 (b)因而所得溶液進行紫外線光照射· (C)通當地進行層析纯化*並κ«化納及乙酵沉《而 單離出純化且不含總亞硝基化合物之解聚化肝素納•及 遘當地 (d)使釣鹽轉化成其他轚蕖可接受邇。 13.根據申請専利範園第12項之方法*其中鹽酸在pH 1.5至 4之間。 14· 一種製備根據申箱専利範園第4項之得自天然來源肝素 烴亞硝酸鹽解聚作用所得之解聚化肝素之纳鹽之方法· 其特激為: (a) K鹽酸及相對於所等人肝素為3.5至4X重量之霣 之醮金賜亞硝酸鹽處理未分皤之肝素納水溶液,同時 pH維持酸性·追踪亞硝酸鹽讎子之存在直至呈陰性反應 ,接使_化混合物,產物Μ礓氯化納埋原,並以乙酵沉 澱而於中性介質中單離出解聚產物,接著, (1>)因而所得產物之水溶液在約pH 5至8之間下通過 在254 na之紫外光照射糸铳,播後因而所得溶液導入陰 離子交換管柱之上端*之後管柱K水沖洗且在pH 5至8 之間之下,Μ氯化納及乙酵沉澱而固收終產物。 15. 根據申請專利範圃第14項之方法·其特激為在步《(b) 中· 254 η·之紫外光照射糸铳係Κ16 V UV燈照射9至 15分鐘,進行UV照射之產物溶液濃度為8-12Xa/V 。 16. —種《藥姐合物,其含有根據申請専利範園第1至3項中 任一項之低分子量肝素作為活性主成份。 17. —種«藥姐合物*其含有根據申謫専利範圍第5項之解 -4 - 本紙張尺度逍用中國國家揉準(CNS ) Α4说格(210X297公釐) -----------裝-- (諸先»讀背面之注+^項再填寫本頁) 4388 1 2 A8 Β8 C8 D8々、申請專利範圍 聚化肝素之納鹽作為活性主成份。 18.—種»藥姐合物*其每劑童單位含有10奄克至5,000毫 克之根據申請專利範圍第4項之納鹽作為活性主成份。 (請先Μ讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝. 訂 經濟部中央槺率局員工消费合作社印装 本纸張尺度適用中國困家揉準(CNS ) A4洗格(210X297公釐)
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US8227449B2 (en) * | 2000-03-30 | 2012-07-24 | Glycores 2000 S.R.L. | Glycosaminoglycans derived from K5 polysaccharide having high anticoagulant and antithrombotic activities and process for their preparation |
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JP2002293804A (ja) * | 2001-03-28 | 2002-10-09 | Itoham Foods Inc | 低分子量ヘパリンの製造法 |
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ITMO20040199A1 (it) * | 2004-07-29 | 2004-10-29 | Biofer Spa | Procedimento per la purificazione da gruppi e n no rsidui di eparine a basso peso molecolare ottentite tramite nitrosazione. |
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR2478646A2 (fr) * | 1980-03-20 | 1981-09-25 | Choay Sa | Composition mucopolysaccharidique ayant une activite regulatrice de la coagulation, medicament la contenant et procede pour l'obtenir |
US4438261A (en) * | 1980-05-19 | 1984-03-20 | Riker Laboratories, Inc. | Anticoagulant substance |
US4351938A (en) * | 1980-05-19 | 1982-09-28 | Riker Laboratories, Inc. | Anticoagulant substance |
CA1171375A (en) * | 1980-09-15 | 1984-07-24 | Ulf P.F. Lindahl | Oligosaccharides having selective anticoagulation activity |
FR2503714B1 (fr) * | 1981-04-10 | 1986-11-21 | Choay Sa | Procede d'obtention de mucopolysaccharides biologiquement actifs, de purete elevee, par depolymerisation de l'heparine |
US5094815A (en) * | 1988-05-18 | 1992-03-10 | Cornell Research Foundation, Inc. | Photolytic interface for HPLC-chemiluminescence detection of non volatile N-nitroso compounds |
US5032679A (en) * | 1988-12-15 | 1991-07-16 | Glycomed, Inc. | Heparin fragments as inhibitors of smooth muscle cell proliferation |
IT1243300B (it) * | 1990-12-20 | 1994-05-26 | Fidia Spa | Derivati dell'eparina |
US5385937A (en) * | 1991-04-10 | 1995-01-31 | Brigham & Women's Hospital | Nitrosation of homocysteine as a method for treating homocysteinemia |
-
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