SK902004A3

SK902004A3 - Kryštály obsahujúce soľ N-[2-(dietylamino)etyl]-5-[(5-fluór-2- oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl]-2,4,dimetyl-1H-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou jablčnou, spôsob ich výroby a kompozície na ich báze

Info

Publication number: SK902004A3
Application number: SK90-2004A
Authority: SK
Inventors: Michael Hawley; Thomas J. Fleck; Stephen P. Prescott; Mark T. Maloney
Original assignee: Pharmacia & Upjohn Company
Priority date: 2001-08-15
Filing date: 2002-08-13
Publication date: 2005-03-04
Also published as: RS53251B; PT3168218T; EP2332934A1; TR201900509T4; GEP20063777B; CA2455050A1; CN1543462A; IS7147A; MA27058A1; AR036261A1; SI3168218T1; CN100439360C; EA006445B9; ZA200400706B; EA200400183A1; HK1066542A1; HK1088008A1; EP1419151A1; CA2455050C; CY1121552T1

Description

Vynález sa týka kryštálov obsahujúcich soľ N-[2-(dietylamino)etyl] -5 - [(5-fluór-1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou jablčnou a kompozícii na báze týchto kryštálov. Vynález sa ďalej týka spôsobov výroby takých kryštálov.

Doterajší stav techniky

PK sú enzýmy, ktoré katalyzujú fosforyláciu hydroxyskupín na tyrosínových, serínových a treonínových zvyškoch proteínov. Dôsledky tejto zdanlivo jednoduchej aktivity sú omračujúce: rast, diferenciácia a prolyferácia buniek, tzn. že v skutočnosti všetky aspekty života bunky tak či onak závisia na aktivite PK. Abnormálna aktivita PK bola okrem toho daná do súvislosti s radom porúch, od chorôb, ktoré relatívne neohrozujú život, ako je psoriasis, až po extrémne zhubné choroby, ako je glioblastom (rakovina mozgu). PK je možné účelne rozdeliť na dve triedy, proteínový tyrosín kinázy (PTK) a serín-treonín kinázy (STK).

Jedním z najdôležitejších aspektov aktivity PTK je ich podiel na receptoroch rastových faktorov. Receptory rastových faktorov sú proteíny bunkového povrchu. V prípade, že sa k nim naviaže ako ligand rastový faktor, tieto receptory prechádzajú na aktívnu formu, čo interaguje s proteinmi na vnútornom povrchu bunkovej membrány. To vedie k fosforylácii cyrosínových zvyškov receptora a iných proteínov a vnútrobunkovej tvorbe komplexov s rôznymi cytoplazmatickými signálnymi molekulami, ktoré ďalej ovplyvňujú rad bunkových odpovedi, ako je bunkové delenie (prolyferácia), bunková diferenciácia, bunkový rast, expresia metabolických účinkov na extracelulárne mikroprostredie atď.

Boli identifikované malé molekuly, ktoré pôsobia ako inhibitory PK a ako ich príklad je možné uviesť 3-pyrrolsubstituované 2-indolínové zlúčeniny, ako sú opísané v PCT medzinárodnej prihláške zverejnenej ako WO 01/60814 (Táng et al.). Ako 3-pyrrolsubstituovanú 2-indolínovú zlúčeninu je napríklad možné uviesť N-[2-(dietylamíno) etyl]-5-[(5-fluór1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl] -2,4-dimetyl-1Hpyrrol-3-karboxamid, ako je opísaný v PCT medzinárodnej prihláške WO 01/60814 (Táng et al.) . 0 príprave a charaktere konkrétnych kryštalických foriem N-[2-(dietylamíno)etyl]-5[(5-fluór-1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl]-2,4dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamidu sa ale táto prihláška nezmieňuje. Existuje teda potreba nájsť kryštalické formy takých látok, ktoré by vykazovali lepšie chemické a/alebo fyzikálne vlastnosti, ktoré by boli užitočné v rámci aplikácii pri dodávke liečiv.

Podstata vynálezu

Predmetom vynálezu je kryštál, ktorý obsahuje soľ zlúčeniny vzorca

s kyselinou jablčnou.

Zlúčenina vyššie uvedeného vzorca je tiež známa ako N- [2-(dietylamino)etyl]-5- [ (5-fluór-1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamid. Soľou s kyselinou jablčnou môže byť soľ s kyselinou D-jablčnou; D,L-jablčnou; L-jablčnou; alebo ich zmes. Prednostne je soľou s kyselinou jablčnou soľ s kyselinou L-jablčnou. Kryštál je prednostne bezvodný. Kryštál prednostne vykazuje v práškovom róntgenovom difraktograme charakteristické difrakčné piky pri asi 13,2 a 24,2 stupňa dva-théta, výhodnejšie pri asi 13,2, 19,4, 24,2 a 25,5 stupňa dva-théta, a najvýhodnejšie piky uvedené v tabuľke 1 pre kryštalickú formu I. V prednostnom uskutočnení kryštál obsahuje nanajvýš asi 2 % hmotnostné vody, výhodnejšie nanajvýš asi 0,5 % hmotnostného vody, a najvýhodnejšie nanajvýš asi 0,2 % hmotnostného vody. Kryštál má prednostne teplotu tavenia aspoň asi 190°C, výhodnejšie aspoň asi 195°C. Predmetom vynálezu sú tiež kompozície, ktoré obsahujú kryštály podľa vynálezu. V prednostnom uskutočnení kompozície obsahujú terapeuticky účinné množstvo kryštálov. Kompozícia prípadne obsahuje excipient, prednostne farmaceutický vhodný excipient.

Predmetom vynálezu je tiež kryštál, ktorý obsahuje soľ N-[2-(dietylamino)etyl]-5- [ (5-fluór-l,2-dihydro-2-oxo-3H3

-indol-3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou jablčnou, pričom kryštál má v práškovom róntgencvom difraktograme charakteristické difrakčné piky pri asi 3,0 a 27,7 stupňa dva-théta, výhodnejšie pri asi 3,0, 12,1, 14,5 a

27,7 stupňa dva-théta, najvýhodnejšie piky uvedené v tabuľke 1 pre kryštalickú formu II. Kryštál typicky pri vystavení 80% relatívnej vlhkosti absorbuje aspoň asi 5 % hmotnostných vody a jeho teplota tavenia je nanajvýš asi 185°C. Predmetom vynálezu sú tiež kompozície, ktoré obsahujú kryštály podľa vynálezu. V prednostnom uskutočnení kompozície obsahujú terapeuticky účinné množstvo kryštálov. Kompozícia prípadne obsahuje excipient, prednostne farmaceutický vhodný excipient.

Predmetom vynálezu sú ďalej spôsoby výroby bezvodného kryštálu, ktorý obsahuje soľ N-[2-(dietylamíno)etyl]-5-[(5-fluór-1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl -lH-pyrrol- 3 -karboxamidu s kyselinou jablčnou (napríklad kryštalickú formu I) . V jednom uskutočnení sa pri tomto spôsobe zmieša kyselina jablčná, N-[2-(dietylamíno)-etyl]-5[ (5-fluór-1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)-metyl]-2,4dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamid a rozpúšťadlo; a vyvolá kryštalizáciu soli za podmienok kryštalizácie (napríklad za podmienok kryštalizácie formy I), ktoré zahŕňajú jeden alebo viacej faktorov, ako je: rozdiel medzi východzou a konečnou teplotou kryštalizačného roztoku nanajvýš asi 100°C; rýchlosť chladenia nanajvýš o asi 50°C za hodinu; žiadne zaočkovanie; pomer presýtenosti nanajvýš asi 10; žiadne zrážadlo; a/alebo ich kombináciu. V prednostnom uskutočnení je kyselinou jablčnou kyselina L-jablčná. V prednostnom uskutočnení rozpúšťadlo obsahuje jedno alebo viacej rozpúšťadiel, ako je napríklad acetonitril, metanol, etanol, izopropylalkohol, toluén, n-butanol, tetrahydrofurán, N,N-dimetylformamid, acetón, voda a ich zmesi.

V ďalšom uskutočnení je predmetom vynálezu spôsob výroby bezvodného kryštálu, ktorý obsahuje soľ N-[2-(dietylamíno) etyl]-5- [ (5-fluór-l,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)-metyl]2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou jablčnou (napríklad kryštalickú formu I), pri ktorom sa: kryštál obsahujúci soľ N-[2-(dietylamíno)etyl]-5-[(5-fluór-l,2dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl] -2,4-dimetyl-lH-pyrrol3-karboxamidu s kyselinou jablčnou uvedie do styku s rozpúšťadlom, v ktorom je kryštál uvádzaný do styku v podstate rozpustný, pričom kryštál uvádzaný do styku (napríklad kryštalická forma II) má v práškovom rontgenovom difraktograme charakteristické difrakčné piky pri asi 3,0 a 27,7 stupňa dvathéta. V prednostnom uskutočnení rozpúšťadlo obsahuje jedno alebo viacej rozpúšťadiel, ako je napríklad acetonitril, etanol, metanol a ich zmesi. V prednostnom uskutočnení kryštál, ktorý je uvádzaný do styku, utvorí s rozpúšťadlom suspenziu a táto suspenzia sa prednostne mieša a/alebo zahrieva. Bezvodný kryštál je prípadne možné zo suspenzie izolovať.

Predmetom vynálezu je tiež spôsob výroby kryštálu, ktorý obsahuje soľ N-[2-(dietylamíno)etyl]-5-[(5-fluór-l,2-di-hydro2-oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3karboxamidu s kyselinou jablčnou (napríklad kryštalickú formu II). Pri tomto spôsobe sa: zmieša kyselina jablčná, N-[2(dietylamíno)etyl]-5-[(5-fluór-l,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamid a rozpúšťadlo; a vyvolá kryštalizácia soli za podmienok kryštalizácie (napríklad za podmienok kryštalizácie kryštalickej formy II), ktoré zahŕňajú jeden alebo viacej faktorov, ako je: rozdiel medzi východzou a konečnou teplotou kryštalizačného roztoku aspoň asi 25°C; rýchlosť chladenia aspoň asi 25°C za hodinu; zaočkovanie; pomer presýtenosti aspoň 2; prítomnosť zrážadla; a/alebo ich kombinácie. V prednostnom uskutočnení je kyselinou jablčnou kyselina Ljablčná. V prednostnom uskutočnení rozpúšťadlo obsahuje jedno alebo viacej rozpúšťadiel, ako je napríklad metanol, voda, zmes tetrahydrofuránu a vody, a ich zmesi. Kryštál v práškovom rontgenovom difraktograme prednostne vykazuje charakteristické difrakčné piky pri asi 3,0 a 27,7 stupňa dva-théta.

Bezvodná kryštalická forma I je v porovnaní s kryštalickou formou II pre rad aplikácií výhodná, pretože sa medzi vlastnosti, ktoré kryštalická forma I ponúka, radí vyššia termodynamická stabilita, vyššia kryštaličnosť a nižšia hygroskopičnosť vzhladom k týmto vlastnostiam pri forme II.

Podmienky kryštalizácie ovplyvňuje rad faktorov, ktoré sú odborníkom v tomto odbore známe. Ako príklady takých faktorov je možné uviesť: koncentráciu soli v kryštalizačnom roztoku; rozdiel, pokiaľ existuje, medzi východzou a konečnou teplotou kryštalizačného roztoku; rýchlosť chladenia, pokiaľ sa chladenie uskutočňuje; rýchlosť vyparovania rozpúšťadla, pokiaľ sa používa; zaočkovanie; pomer presýtenia; a prítomnosť zrážadla. Na základe tohto opisu, ako vodítka, je odborník v tomto odbore bez veľkého experimentovania schopný zvoliť a nastaviť jeden alebo viacej z takých faktorov tak, aby dosiahol podmienky kryštalizácie, za ktorých sa získa kryštalická forma I a/alebo kryštalická forma II.

Definície

Pod pojmom pomer presýtenosti sa rozumie pomer koncentrácie látky v roztoku ku koncentrácii látky v nasýtenom roztoku pri teplote kryštalizácie.

Pod pojmom zaočkovanie sa rozumie postup, pri ktorom sa ku kryštalizačnému roztoku za účelom podporenia tvorby kryštálov pridáva očkovací kryštál. V prednostnom uskutočnení je zloženie očkovacieho kryštálu rovnaké ako zloženie kryštálov, ktoré vznikajú.

Pod pojmom zrážadlo sa rozumie látka, ktorá, pridaná ku kryštalizačnému roztoku, má sklon vyvolať kryštalizáciu. Ako užitočné zrážadlá je možné uviesť napríklad nerozpúšťadlá solí a roztokov obsahujúce nadbytočné protióny. V tomto texte sa pod pojmom nerozpúšťadlo rozumie rozpúšťadlo, v ktorom je rozpustnosť soli prednostne nanajvýš asi 1 % hmotn., výhodnejšie nanajvýš asi 0,1 % hmotn., a najvýhodnejšie

nanajvýš	asi 0,01	% hmotn.
Pod	pojmom	bezvodný kryštál sa	rozumie	kryštál, ku
ktorému	nie j e	špecificky viazaná	voda.	V	prednostnom

uskutočnení bezvodné kryštály neobsahujú podstatné množstvá vody. Obsah vody je možné stanoviť spôsobmi, ktoré sú v tomto odbore známe, napríklad Karl-Fisherovou titráciou. Bezvodný kryštál prednostne obsahuje nanajvýš asi 2 % hmotn. vody, výhodnejšie nanajvýš asi 0,5 % hmotn. vody, a najvýhodnejšie nanajvýš asi 0,2 % hmotn. vody.

Prívlastkom kryštalická sa označuje molekulárnu štruktúru. Stupeň látka, ktorá má usporiadanú ďalekodosahovú kryštaličnosti kryštalickej formy je možné stanoviť pomocou radu postupov, napríklad pomocou práškovej difrakcie, sorpcie vlhkosti, diferenciálnej kalorimetrie, rozpúšťacej kalorimetrie a pomocou rontgenovej skenovacej disolučných vlastností.

Pod pojmom kryštalickej ši sa rozumie, že látka má vyšší stupeň kryštaličnosti ako látka, s ktorou je porovnávaná. Látky s vyšším stupňom kryštaličnosti obvykle majú usporiadanejšiu ďalekodosahovú molekulárnu štruktúru s menším počtom porúch v štruktúre kryštálu ako látky s nižšími stupňami kryštaličnosti. Vyšší stupeň kryštaličnosti vzhľadom k iným formám je možné hodnotiť na základe takých vlastností, ako sú napríklad ostrejšia reflexia v rôntgenovom difraktograme, nižšia sorpcia vlhkosti u častíc podobná veľkosti pri danej relatívnej vlhkosti, nižšie rozpúšťacie teplo, vyššie tavné teplo, nižšia rýchlosť rozpúšťania a ich kombinácie.

Prívlastkom menej kryštalická sa označuje látka, ktorá má nižší stupeň kryštaličnosti ako látka, s ktorou je Látky s nižším stupňom kryštaličnosti obvykle a viacej porúch v vyššími stupňami je možné vzhľadom k porovnávaná.

ďalekodosahové usporiadanie štruktúre ako látky s Nižší stupeň kryštalinity hodnotiť na základe takých vlastností, ako sú vlhkosti u častíc majú nižšie kryštalickej kryštalinity.

inej forme napríklad širšie a/alebo menej početné reflexie v práškovom rontgenovom difraktograme, vyššie sorpcie podobné veľkosti pri danej relatívnej rozpúšťacie teplo, nižšie tavné rozpúšťania a ich kombinácie.

vlhkosti, vyššie teplo, vyššia rýchlosť

Pod pojmom stabilný sa pri neadjustovaných do liekových foriem skúškach rozumie, stability liečiv že po skladovaní za daných podmienok po danú dobu zostáva nezmenených aspoň asi % hmotn., prednostne aspoň asi 98 % hmotn., a výhodnejšie aspoň asi 99 % hmotn. liečiva neadjustovaného do liekových foriem.

Prehľad obr. na výkresoch

Na obr. 1 sú graficky znázornené dáta práškovej rontgenovej difrakcie (PXRD) kryštalickej formy I soli kyseliny L-jablčnej s N-[2-(dietylamino)etyl]-5-[(5-fluór-l,2-di-hydro2-oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3karboxamidom. Tento difraktogram sa odlišuje od iných kryštalických foriem soli a volnej bázy a zodpovedá látke, ktorá je kryštalickéjšia ako kryštalická forma II (napríklad obr. 2) .

Na obr. 2 sú graficky znázornené dáta práškovej rontgenovej difrakcie (PXRD) kryštalickej formy II soli kyseliny L-jablčnej s N-[2-(dietylamíno)etyl]-5-[(5-fluór-l,2-di-hydro2-oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3 karboxamidom. Tento difraktogram sa odlišuje od iných kryštalických foriem soli a voľnej bázy a zodpovedá látke, ktorá je menej kryštalická ako kryštalická forma I, ako je zrejmé zo širších reflexií v práškovom rdntgenovom difraktograme (napríklad obr. 1).

Na obr. 3 sú znázornené sorpčné izotermy stanovené gravimetrický pri dynamickej skúške sorpcie vlhkosti vyjadrujúce profily sorpcie vlhkosti kryštalickej formy I a kryštalickej formy II soli N-[2-(dietylamíno)etyl]-5-[(5fluór-1,2-di-hydro-2-OXO-3H-indol-3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyllH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou L-jablčnou. Kryštalickéj ši polymorf, kryštalická forma I, je menej hygroskopický: absorbuje menej ako 0,5 % vody pri relatívnej vlhkosti v rozmedzí od 0 do 90 %. Menej kryštalický polymorf, kryštalická forma II, je veľmi hygroskopický: absorbuje viac ako 15 % vody pri relatívnej vlhkosti v rozmedzí do 0 do 90 %.

Na obr. 4 sú graficky znázornené dáca dif erenciálne j skenovacej kalorimetrie (DSC) vyjadrujúce DSC profily kryštalickej formy I a kryštalickej formy II soli N-[2-(dietylamino)etyl]-5 -[(5 - fluór-1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol -3-ylidén) metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou L-jablčnou. Exotermické prechody sú uvádzané vzostupne. Kryštalická forma I sa rozpúšťa pri vyššej teplote (asi 196°C) s vyššou entalpiou tavenia (asi 141 J/g) ako kryštalická forma II, ktorá sa rozpúšťa pri asi 181°C s entalpiou tavenia asi

105 J/g. To napovedá, že tieto dve kryštalické formy sú monotropné, aj keď po roztavení kryštálu dochádza na degradáciu. Monotropizmus potvrdzuje prechod kryštalickej formy II na kryštalickú formu I v suspenzii s teplotou miestnosti, ako je opísané v tomto texte.

Nasleduje podrobnejší opis prednostných uskutočnení.

N-[2-(Dietylamíno)etyl]-5-[(5-fluór-l, 2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamid je 3-pyrrolsubstituovanou 2-indolínovou zlúčeninou vzorca

N-[2 - (Dietylamíno)etyl]-5-[(5-fluór-l,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamid vo forme voľnej bázy je možné pripravovať štandardnými syntetickými spôsobmi, ako sú napríklad spôsoby opísané v PCT medzinárodnej patentovej prihláške zverejnenej ako WO 01/60814 (Táng et al.) . Napriek tomu, že volnú bázu je možné vykryštalizovať vo forme malých častíc, pri výrobe vo velkom meradle je žiadúce napríklad dosiahnuť väčšiu časticovú veľkosť kryštálov, a tak zjednodušiť filtráciu. Za týmto účelom boli pripravené soli N-[2-(dietylamíno)etyl]-5-[ (5fluór-1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl] -2,4-dimetyllH-pyrrol-3-karboxamidu a boli hodnotené ich výsledné vlastnosti týkajúce sa spracovania soli a prípravy perorálnych farmaceutických kompozícii.

Kryštalické formy N-[2-(dietylamíno)etyl]-5-[(5-fluór1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl] -2,4-dimetyl-lHpyrrol-3-karboxamidu, vrátane volnej bázy a solí (napríklad solí s kyselinou cyklámovou, kyselinou maleinovou, kyselinou brómo-vodíkovou, kyselinou mandľovou, kyselinou vínnou, kyselinou fumarovou, kyselinou askorbovou, kyselinou fosforečnou, kyselinou chlorovodíkovou, kyselinou ptoluénsulfónovou, kyselinou citrónovou a kyselinou jablčnou) boli podrobené hodnoteniu z hľadiska vlastností súvisiacich so spracovaním soli a prípravou perorálnej farmaceutickej kompozície na jej báze, ako je napríklad kryštaličnosť (napríklad či je látka kryštalická alebo amorfná, stupeň kryštaličnosti, či sú kryštály bezvodné alebo hydrátované), toxicity, hygroskopičnosti, stability a morfológie. Na základe tohto hodnotenia bola ako látka, ktorá vykazuje najlepšiu rovnováhu požadovaných vlastností, určená soľ N- [2(dietylamíno)etyl]-5 - [ (5-fluór-1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3ylidén)metyl] -2,4-di-metyl-ΙΗ-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou jablčnou. Pri ďalšej štúdii sa zistilo, že soľ N-[2(dietylamíno)etyl]-5- [ (5 - fluór-1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol- 3 11 ylidén)metyl]- 2,4-di-metyl-lH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou jablčnou kryštalizuje v niekoľkých kryštalických formách.

Predmetom vynálezu sú spôsoby výroby kryštalických foriem obsahujúcich soľ N-[2-(dietylamíno)etyl]-5-[(5-fluór-l,2-dihydro-2-ΟΧΟ-3Η-indol-3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3 karboxamidu s kyselinou jablčnou a identifikácia týchto kryštalických foriem. Ďalej je opísaná príprava bezvodných kryštálov obsahujúcich soľ s kyselinou jablčnou podľa vynálezu. V rade aplikácií má lepšie vlastnosti bezvodná kryštalická forma I.

Kryštalická forma I

V jednom uskutočnení sa soľ N-[2-(dietylamíno)etyl]-5[ (5--fluór-1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol- 3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl -lH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou jablčnou pripraví vo forme bezvodných kryštálov (napríklad kryštalická forma I) . Bezvodná kryštalická forma I je termodynamicky stabilnejšia ako iné kryštalické formy (napríklad kryštalická forma II) . Pri jednom spôsobe je kryštalickú formu I možné pripravovať napríklad tak, že sa vyvolá kryštalizácia soli s kyselinou jablčnou z presýteného roztoku za podmienok kryštalizácie kryštalickej formy I.

Pod pojmom podmienky kryštalizácie kryštalickej formy I sa rozumejú kryštalizačné podmienky, pri ktorých sa získa termodynamická kryštalická forma (napríklad kryštalická forma I) . Takéto podmienky sú obvykle označované ako podmienky pomalej kryštalizácie. Odborník v tomto odbore je schopný podmienky kryštalizácie kryštalickej formy I vytvoriť voľbou jedného alebo viacero faktorov, ako je napríklad rozdiel medzi východzou a konečnou teplotou kryštalizačného roztoku nanajvýš asi 100°C, výhodnejšie nanajvýš asi 50°C, ešte výhodnejšie nanajvýš asi 25°C, a najvýhodnejšie asi 0°C; rýchlosť chladenia nanajvýš asi 50°C za hodinu, výhodnejšie nanajvýš asi 25°C za hodinu, ešte výhodnejšie nanajvýš asi 2°C za hodinu, a najvýhodnejšie asi 0°C za hodinu; žiadne zaočkovanie; pomer presýtenosti nanajvýš asi 10, výhodnejšie nanajvýš asi 5, a najvýhodnejšie nanajvýš asi 1,5; žiadne zrážadlo; a/alebo ich kombinácii.

Ako rozpúšťadlá užitočné pri príprave kryštalizačného roztoku je možné napríklad uviesť acetonitril, metanol, etanol, izopropylalkohol, toluén, n-butanol, tetrahydrofurán, N,N-dimetylformamid, acetón, vodu a ich zmesi.

Iným spôsobom je kryštalickú formu I možné pripravovať napríklad tak, že sa získa suspenzia kryštalickej formy II v rozpúšťadlách, v ktorých je kryštalická forma II v podstate rozpustná. Pod pojmom v podstate rozpustná sa rozumie, že kryštál je prednostne v rozpúšťadle pri teplote miestnosti (napríklad pri asi 15 až asi 30°C) rozpustný v koncentráciách aspoň asi 0,1 % hmotn., výhodnejšie aspoň asi 1 % hmotn., a najvýhodnejšie aspoň asi 10 % hmotn. Kryštál je prípadne možné v uvedenej koncentrácii pri teplote miestnosti v uvedenom rozpúšťadle rozpustiť.

Ako rozpúšťadlá je možné uviesť napríklad acetonitril, etanol, metanol a ich zmesi.

Kryštalická forma II

V inom uskutočnení sa sol N-[2-(dietylamíno)etyl]-5-[(5- fluór-1,2-dihydro-2-OXO-3H-indol- 3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou jablčnou pripraví v ďalšej kryštalickej forme (napríklad kryštalickej forme II) . Kryštalická forma II je užitočná napríklad ako medziprodukt pri príprave bezvodnej kryštalickej formy I.

Kryštalickú formu II je možné pripravovať napríklad tak, že sa vyvolá kryštalizácia soli s kyselinou jablčnou z presýteného roztoku za podmienok kryštalizácie kryštalickej formy II.

Pod pojmom podmienky kryštalizácie kryštalickej formy II sa rozumejú kryštalizačné podmienky, za ktorých sa získa kryštalická forma odlišná od termodynamickej formy. Takéto podmienky sú obvykle označované ako podmienky rýchlej kryštalizácie. Odborník v tomto odbore je schopný podmienky kryštalizácie kryštalickej formy II dosiahnuť volbou jedného alebo viacero faktorov, ako je napríklad rozdiel medzi východzou a konečnou teplotou kryštalizačného roztoku prednostne aspoň asi 25°C, výhodnejšie aspoň asi 50°C, a najvýhodnejšie aspoň asi 100°C; rýchlosť chladenia prednostne aspoň asi 25 °C za hodinu, výhodnejšie aspoň asi 100°C, a najvýhodnejšie aspoň asi 300°C; zaočkovanie; pomer presýtenosti prednostne aspoň asi 2, výhodnejšie aspoň asi 5, a najvýhodnejšie aspoň asi 10; 'prítomnosť zrážadla; a/alebo ich kombinácie.

Ako rozpúšťadlá užitočné pri príprave kryštalizačného roztoku je napríklad možné uviesť metanol, vodu, zmesi tetrahydrofuránu a vody a ich zmesi.

Prášková rontgenová difrakcia (PXRD)

Kryštalické organické zlúčeniny tvoria veľký počet atómov, ktoré sú usporiadané s trojrozmernou periodicitou.

Štrukturálna periodicita normálne vykazuje príznačné fyzikálne vlastnosti, ako sú výrazné, jednoznačné znaky spektra vo väčšine spektroskcpických skúšobných metódach (ako je napríklad rontgenová difrakcia, infračervená NMR, NMR v pevnej fáze) . Za jednu z najcitlivejších metód stanovenia kryštaličnosti pevných látok je považovaná rontgenová difrakcia (XRD). Kryštály poskytujú jednoznačné difrakčné maximá, ktoré vznikajú na špecifických uhloch zodpovedajúcich medzirovinným vzdialenostiam kryštálovej mriežky, ako sú vypočítané pomocou Braggovej rovnice. Oproti tomu amorfné látky toto dlhodosahové usporiadanie nevykazujú. Často obsahujú ďalší objem medzi molekulami, ako je to v kvapalnom skupenstve. Amorfné pevné látky vzhľadom na absenciu dlhodosahového usporiadania periodickej kryštalickej mriežky normálne vykazujú XRD difraktogramy bez zvláštnych znakov so širokými difýznymi halo.

Prášková rontgenová difrakcia sa doložené používa pri charakterizácii rôznych kryštalických foriem organických zlúčenín (napríklad zlúčenín užitočných vo farmaceutických kompozíciách). Pozri napríklad US patent č. 5 504 216 (Holohan et al.), 5 721 359 (Dunn et al.), 5 910 588 (Wangnick et al.) , 6 066 647 (Douglas et al.) , 6 225 474 (Matsumoto et al.) , 6 239 141 (Alien et al.) , 6 251 355 (Murata et al.) , 6 288 057 (Harkness) , 6 316 672 (Stowell et al.) , 6 329 364 (Truleau) a US patentové prihlášky č. 2001/0003752 (Talley et al.), 2002/0038021 (Barton et al) a 2002/0045746 (Barton et al.).

Kryštalickým látkam sa dáva prednosť v rade farmaceutických aplikácií. Kryštalické formy sú obvykle termodynamicky stabilnejšie ako amorfné formy tej istej látky. Táto termodynamická stabilita sa prednostne odráža v nižšej rozpustnosti a lepšej fyzikálnej stabilite kryštalickej formy.

Pravidelné usporiadanie molekúl v kryštalickej pevnej látke prednes sne znemožňuj e zabudovanie chemických nečistôt.

Kryštalické látky teda obvykle vykazujú čistotu ako ich kryštalickej pevnej amorfné náprotivky, látke obvykle molekuly vyššiu chemickú

Usporiadanie v udržuje v dobre definovaných polohách v kryštalickej mriežke a znižuje pohyblivosť chemických evidentných predpokladom na niekoľko ako amorfné

Kryštalické molekúl, ktorá je potrebným reakcii. Kryštalické pevné látky, až výnimok, sú chemicky stabilnejšie pevné látky s rovnakým molekulárnym zložením, formy soli N-[2-(dietylamíno)etyl]-5-[(5-fluór-l,2-dihydro-2ΟΧΟ-3Η-indol-3-ylidén)metyl]- 2,4-dimetyl-ÍH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou jablčnou opísané v tomto texte prednostne vykazujú jednu alebo viacero z uvedených výhodných chemických a/alebo fyzikálnych vlastností.

Kryštalické formy solí N-[2-(dietylamíno)etyl]-5-[(5-fluór-1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl -ÍH-pyrrol- 3 -karboxamidu s kyselinou jablčnou opísané v tomto texte prednostne vykazujú charakteristické práškové rontgenové difrakčné profily. Napríklad bezvodné kryštály obsahujúce soľ N-[2-(dietylamíno)etyl]-5-[(5-fluór-l,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3karboxamidu s kyselinou jablčnou je prednostne možné odlíšiť od iných kryštalických foriem obsahujúcich soľ s kyselinou jablčnou opísanou charakteristických difrakčnými píkmi v tomto texte na základe prítomnosti Charakteristickými piky zvolené z difrakčných píkov. sú v tomto texte naj intenzívnej ších píkov pozorovaných

Prednostne sú charakteristické piky zvolené výhodnejšie v d i f rakt ograme.

asi naj intenzívnej ších naj intenzívnej ších naj intenzívnej ších píkov, asi píkov, a najvýhodnejšie píkov v difraktograme.

asi

Na obr. 1 a obr. 2 sú znázornené práškové rôntgenové difraktogramy kryštalickej formy I (obr. 1) a formy II (obr. 2) soli N-[2-(dietylamíno)etyl]-5-[(5-fluór-l,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl]- 2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karbox-amidu s kyselinou jablčnou. V tabuľke 1 je uvedený zoznam najintenzívnejších píkov pre každý PXR difraktogram v rozmedzí 2 až 35 stupňov dva théta. Voľná báza, kryštalická forma I a kryštalická forma II sú jednoducho rozlíšiteľné na základe jedinečných PXR difraktogramov.

V prednostnom uskutočnení bezvodný kryštál obsahujúci soľ N-[2-(dietylamino)etyl]-5- [ (5-fluór-1,2-dihydro-2-oxo-3H-

-indol-3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou jablčnou (napríklad kryštalická forma I) vykazuje charakteristické difrakčné piky pri asi 13,2 a 24,2 stupňa dva théta, výhodnejšie pri asi 13,2, 19,4, 24,2 a 25,5 stupňa dva théta, a najvýhodnejšie vykazuje charakteristické difrakčné piky uvedené v tabuľke 1 pre kryštalickú formu I.

V prednostnom uskutočnení kryštalická forma II soli N-[2-(dietylamino)etyl]-5- [ (5-fluór-l,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou jablčnou vykazuje charakteristické difrakčné piky pri asi 3,0 a 27,7 stupňa dva théta, výhodnejšie pri asi 3,0, 12,1, 14,5 a 27,7 stupňa dva théta, a najvýhodnejšie vykazuje charakteristické difrakčné piky uvedené v tabuľke 1 pre kryštalickú formu II.

Kryštalická forma I	Kryštalická forma II
Dva théta [°]	Relatívna intenzita	Dva théta [°]	Relatívna intenzita
11,39	7	3,02	* 100
11,90	7	5,93	12
13,16	82	7,61	18
15,92	27	9,26	7
16,79	25	12,08	32
17,18	24	14,54	42
19,40	76	17,54	19
20,30	20	19,46	28
21,26	31	23,36	54
21,68	28	24,77	28
22,13	48	27,71	80
22,91	21
24,17	100
25,46	79
26,06	23
26,96	26
27,56	28
32,27	13
32,93	17
34,43	23

Čistota a stabilita v pevnom skupenstve

Čistota kryštalickej formy I soli N-[2 -(dietylamíno)etyl]-5-[(5 - fluór-1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)-metyl]2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou jablčnou sa vyhodnocuje vysokotlakovou kvapalinovou chromatografiou (HPLC). Výsledky ukazujú viac ako asi 98% (plocha) čistotu a menej ako asi 2 % (plocha) detegovaných nečistôt (tabuľka 2).

Tiež sa uskutočnili stabilitné štúdie kryštalickej formy I soli N-[2-(dietylamíno)-etyl]-5-[(5-fluór-l,2-dihydro-2-oxo3H-indol-3-ylidén)-metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou L-jablčnou v pevnom skupenstve (pozri tabuľka 2). Štvortýždňové dáta po starnutí pri 60°C/relatívnej vlhkosti okolia, 60°C/75% relatívnej vlhkosti a 80°C/relatívnej vlhkosti okolia neukazujú významnú degradáciu. Prášková rôntgenová difrakcia dvojtýždňových vzoriek tiež nesvedčí o zmene v kryštalickej forme.

Tabuľka 2

Stabilita kryštalickej formy I na základe HPLC analýzy

Stav	Čistota [% (plocha)]	Nečistoty celkom [% (plocha)]
Východzi	99,7	1,5
2 týždne pri 60°C/RV okolia	98,2	1,1
2 týždne pri 60°C/75% RV	98,2	1,2
2 týždne pri 80°C/RV okolia	99,5	1,2
4 týždne pri 60°C/RV okolia	100,4	1,2
4 týždne pri 60°C/75% RV	100,1	2,2
4 týždne pri 80°C/RV okolia	98,0	^3,1

RV = relatívna vlhkosť

Údaje o sorpcii vlhkosti

Údaje o sorpcii vlhkosti kryštalickej formy I a II soli N- [2-(dietylamino)etyl]-5 - [ (5-fluór-1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou L-jablčnou pri 25°C sú znázornené na obr. 3. Kryštalickéj ši polymorf, kryštalická forma I, je menej hygroskopický - pri relatívnej vlhkosti 0 až 90 % absorbuje menej ako 0,5 % vody. Menej kryštalický polymorf, kryštalická forma II, je velmi hygroskopický - pri relatívnej vlhkosti 0 až 90 % absorbuje viac ako 15 % vody.

Termické dáta

Dáta diferenciálnej skenovacej kalorimetrie sú znázornené na obr. 4. Bezvodná kryštalická forma soli N-[2-(dietylamíno)etyl]-5-[(5-fluór-1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)-metyl]2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou L-jablčnou sa rozpúšťa pri asi 196°C, zatiaľ čo kryštalická forma II sa rozpúšťa pri asi 181°C. Javy pozorované po zahájení tavenia naznačujú, že pravdepodobne dochádza na určitý rozklad, ktorý súvisí s tavením. Presné tavné teplo teda nebolo možné priamo merať.

Dáta TGA kryštalickej formy I (nie sú znázornené) neukazujú významný úbytok hmotnosti až do teploty tavenia, čo svedčí o neprítomnosti zvyškového rozpúšťadla a/alebo vody zadržanej v kryštáloch.

Podávanie a farmaceutické kompozície

Kryštály podľa vynálezu je možné podávať humánnym pacientom ako takéto alebo je ich možné podávať vo farmaceutických kompozíciách, v ktorých sú tieto kryštály zmiešané s vhodnými nosičmi alebo excipientami. Spôsoby formulácie a podávania liečiv sú opísané napríklad v Remington's Pharmacological Sciences, Mack Publishing Co. , Easton, PA, USA, posledné vydanie.

Pod pojmom podávanie sa rozumie dodávka kryštálu podľa vynálezu alebo farmaceutickej kompozície na jeho báze organizmu za účelom prevencie alebo liečenia poruchy súvisiacej s PK.

Ako neobmedzujúce príklady podávania je možné uviesť podávanie perorálne, rektálne, transmukusálne alebo intestinálne intramuskulárne, subkutánne, intramedulárne, intratekálne, priame intraventrikulárne, intravenózne, intravitreálne, intraperitoneálne, intranasálne alebo intraokulárne injekčné podávanie. Prednosť sa dáva podávaniu perorálnemu a parenterálnemu.

Alternatívne je kryštál podlá vynálezu alebo farmaceutickú kompozíciu na jeho báze možné podávať lokálne, a nie systemicky, napríklad injekciou kryštálu podľa vynálezu alebo farmaceutickej kompozície na jeho báze do solidného nádoru, často vo forme depotu alebo formulácie s dlhodobým uvoľňovaním.

Liečivo je možné tiež podávať pomocou systému pre cielenú dodávku, napríklad vo forme lipozómov potiahnutých špecifickou protilátkou proti nádoru. Lipozómy budú cielené a budú vychytávané selektívne nádorom.

Farmaceutické kompozície podľa vynálezu je možné pripravovať spôsobmi, ktoré sú dobre známe, napríklad obvyklými postupmi miešania, rozpúšťania, granulácie, dražovania, rozmliažďovania, emulgácie, zapuzdrovania, zachycovania alebo lyofilizácie.

na použitie podľa tohto vynálezu spôsobom za použitia jedného vhodných nosičov, vrátane ktoré zjednodušujú spracovanie prípravky s farmaceutickým závisia na zvolenom spôsobe

Farmaceutické kompozície je možné formulovať obvyklým alebo viacero fyziologicky excipientov a pomocných látok, kryštálov podľa vynálezu na využitím. Konkrétne formulácie podávania.

V prípade injekcií je kryštál podľa vynálezu alebo farmaceutickú kompozíciu na jeho báze možné spracovávať na vodné roztoky, prednostne vo fyziologicky kompatibilných pufroch, ako sú Hanksov roztok, Ringerov roztok alebo fyziologické soľné pufry. Pri formulácii transmukosálnych prípravkov sa používajú zmáčadlá, ktoré sú vhodné vzhľadom k bariére, ktorou majú preniknúť. Také zmáčadlá sú všeobecne známe.

Kryštály podľa vynálezu alebo farmaceutické kompozície na ich báze je za účelom perorálneho podávania možné formulovať za použitia dobre známych farmaceutický vhodných nosičov. Takéto nosiče umožňujú kryštály podľa vynálezu formulovať do podoby tabliet, piluliek, pastiliek, dražé, toboliek, kvapalín, gélov, sirupov, suspenzií a podobne určených na perorálne podanie pacientovi. Farmaceutické prípravky na perorálne podávanie je možné pripravovať za použitia tuhého excipientu tak, že sa vzniknutá zmes prípadne rozmrví a v prípade potreby po spracováva dražé. Ako ako cukry, celulózové prípravky, pridaní iných vhodných pomocných látok na granule, čím sa získajú tablety alebo jadrá užitočné excipienty je najmä možné uviesť plnivá, sacharózu, mannitol alebo sorbitol, laktózu, ako napríklad kukuričný škrob, pšeničný a zemiakový škrob a iné látky, ako škrob, ryžový škrob želatínu, tragant, metylcelulózu, hydroxypropylmetylcelulózu, sodnú soľ karboxymetylcelulózy a/alebo polyvinylpyrrolidón to žiadúce, je možné polyvinylpyrrolidón, možné použiť soli, ako (PVP). Pokiaľ je ako zosieťovaný alginovú. Tiež je pridať rozvoľňovadlá, agar alebo kyselinu je alginát sodný.

Jadrá dražé sa opatrujú vhodnými obalmi. Na tento účel je možné použiť koncentrované cukrové roztoky, ktoré pripadne obsahujú arabskú gumu, mastenec, polyvinylpyrrolidón, gél Carbopol, polyetylénglykol a/alebo oxid titaničitý, lakové roztoky a vhodné organické rozpúšťadlá alebo rozpúšťadlové zmesi. K obalom tabliet alebo dražé je možné pridať farbivá alebo pigmenty, ktoré slúžia na identifikáciu alebo charakterizáciu rôznych kombinácii účinných dávok.

Ako farmaceutické kompozície, ktoré je možné podávať perorálne, je možné uviesť dvojdielne zasúvacie želatínové tobolky a mäkké uzavrené želatínové tobolky, ktoré obsahujú zmäkčovadlá, ako glycerol alebo sorbitol. Dvojdielne zasúvacie tobolky môžu účinnú prísadu obsahovať v zmesi s plnivom, ako laktózou, spojivom, ako škrobom a/alebo lubrikantom, ako mastencom alebo stearanom horečnatým, a prípadne stabilizátormi. V mäkkých tobolkách sú kryštály prítomné vo forme roztokov alebo suspenzií vo vhodných kvapalinách, ako mastných olejoch, kvapalnom parafíne alebo kvapalných polyetylénglykoloch. Tiež do týchto formulácií je možné pridávať stabilizátory.

Tobolky môžu byť balené do hnedých sklenených alebo plastových flaštičiek, ktoré kryštály podlá vynálezu alebo farmaceutické kompozície na ich báze chránia pred svetlom. Nádobky obsahujúce účinnú tobolkovú formuláciu musia byť skladované pri riadenej teplote (napríklad asi 15 až asi 30°C).

Pri inhalačnom podávaní sa kryštál podľa vynálezu alebo farmaceutická kompozícia na jeho báze účelne dodáva vo forme aerosolového spreja uvoľňovaného z tlakovky alebo rozprašovača, ktoré obsahujú vhodný hnací plyn. Ako neobmedzujúce príklady vhodných hnacích plynov je možné uviesť dichlórdifluórmetán, trichlórfluórmetán, dichlórtetrafluórmetán alebo oxid uhličitý. V prípade tlakovaných aerosolov je možné dávkovaciu jednotku regulovať ventilom uvoľňujúcim odmerané množstvo. Tiež je možné pripravovať tobolky a patróny, napríklad želatínové, ktoré sa používajú v inhalátoroch alebo insuflátoroch a ktoré obsahujú zmes kryštálu podľa vynálezu alebo farmaceutické kompozície na jeho báze s vhodným práškovým základom, ako je laktóza alebo škrob.

Kryštál podľa vynálezu alebo farmaceutickú kompozíciu na jeho báze je možné tiež formulovať na parenterálne podávanie, napríklad pomocou injekčného bólu Injekčné formulácie môžu byť dávkovacích formách, napríklad obsahujúcich väčší počet dávok alebo kontinuálnej infúzie, prítomné v jednotkových ampulkách alebo nádobách s pridanými konzervačnými činidlami. Kompozície môžu mať formu suspenzií, roztokov alebo emulzií v olejovitých alebo vodných vehikuloch a môžu obsahovať formulačné prísady, ako suspenzné, stabilizačné a/alebo disperzné činidlá.

Farmaceutické kompozície na parenterálne podávanie obsahujú vodné roztoky vodorozpustnej formy kryštálu podía vynálezu alebo farmaceutické kompozície na jeho báze. Okrem toho je možné pripravovať suspenzie kryštálov podía vynálezu alebo kompozícii na ich báze v lipofilných vehikuloch. Ako vhodné lipofilné vehikulá je možné uviesť mastné oleje, ako sezamový olej, syntetické estery mastných kyselín, ako etyloleát a triglyceridy, alebo látky, ako sú lipozómy. Vodné injekčné suspenzie môžu obsahovať látky, ktoré zvyšujú viskozitu suspenzie, ako je sodná sol karboxymetylcelulózy, sorbitol alebo dextrán. Suspenzia tiež prípadne môže obsahovať vhodné stabilizátory a/alebo iné činidlá, ktoré zvyšujú rozpustnosť kryštálov podľa vynálezu alebo farmaceutické kompozície na ich báze, a tak umožňujú prípravu vysoko koncentrovaných roztokov.

Účinná prísada tiež môže byť vo forme prášku určeného na prípravu prípravku pred aplikáciou za použitia vhodného vehikulá, napríklad sterilnej apyrogénnej vody.

Kryštál podľa vynálezu alebo farmaceutickú kompozíciu na jeho báze je možné tiež formulovať na rektálne kompozície, ako čapíky alebo retenčné nálevy. Pri tom sa používajú obvyklé čapíkové základy, ako sú kakaové maslo alebo iné triglyceridy.

Okrem viacero opísaných formulácií, je možné kryštál podía vynálezu alebo farmaceutickú kompozíciu na. jeho báze tiež formulovať ako depotné prípravky. Takéto dlhodobo pôsobiace formulácie je možné podávať implantáciou (napríklad subkutánnou alebo intramuskulárnou) alebo pomocou intramuskulárnych injekcií. Kryštál podľa vynálezu alebo farmaceutickú kompozíciu na jeho báze je možné za týmto účelom formulovať pomocou vhodných polymérnych alebo hydrofóbnych látok (napríklad v podobe emulzie vo farmakologicky vhodnom oleji), ionexových živíc alebo ako zle rozpustný derivát.

Kryštál podľa jeho báze je uvoľňovaním, ďalej ako vynálezu alebo farmaceutickú kompozíciu na možné dodávať pomocou systému s dlhodobým sú semipermeabilné matrice z pevných hydrofóbnych polymérov zavedené rôzne látky odbore sú dobre tomto môžu, alebo obsahujúce terapeutické i dlhodobým uvoľňovaním a známe. Tobolky s svojej chemickej farmaceutickú kompozíciu na jej v závislosti na činidlo. Sú odborníkom v dlhodobým uvoľňovaním povahe, uvoľňovať soľ báze počas niekoľkých týždňov až viac ako 100 dní. V závislosti na chemickej povahe a biologickej stabilite terapeutického činidla je možné využiť ďalšie stratégie stabilizácie proteinov.

Farmaceutické kompozície tiež môžu obsahovať vhodné pevné alebo gélové nosiče alebo excipienty. Ako neobmedzujúce príklady takých nosičov alebo excipientov je možné uviesť uhličitan vápenatý, fosforečnan vápenatý, rôzne cukry, škroby, deriváty celulózy, želatínu a polymérne látky, ako polyetylénglykoly.

Ako farmaceutické kompozície vhodné na použitie v rámci tohto vynálezu je možné uviesť kompozície, ktoré obsahujú účinné prísady v množstve, ktoré je dostatočné na dosiahnutie zamýšľaného účelu, napríklad modulácie aktivity PK alebo liečenie alebo prevencie poruchy súvisiace s PK.

Konkrétnejšie terapeuticky účinné množstvo znamená množstvo kryštálov podľa vynálezu alebo farmaceutických kompozícií na ich báze, ktoré je účinné pri prevencii, potlačovaní alebo zmierňovaní symptómov choroby alebo predlžovaní doby prežitia liečeného subjektu.

Stanovenie terapeuticky účinného množstva, najmä vo svetle tohto opisu, je v rozsahu odbornej rutiny.

Terapeuticky účinné množstvo alebo dávku ktoréhokoľvek kryštálu podľa vynálezu alebo farmaceutickej kompozície na jeho báze je možné najprv odhadnúť zo stanovenia v bunkových kultúrach. Potom je možné formulovať dávku na použitie na zvieracích modeloch tak, aby sa dosiahla cirkulujúca koncentrácia v rozmedzí, ktoré zahŕňa IC_S0, ako bola stanovená v bunkovej kultúre (to je koncentráciu kryštálov podľa vynálezu alebo farmaceutickej kompozície na ich báze, pri ktorej sa dosahuje polovica maximálnej inhibície aktivity PK) . Také informácie je možné potom využiť na presné stanovenie užitočných dávok pre človeka.

Toxicitu a terapeutickú efektívnosť kryštálu podľa vynálezu alebo farmaceutickej kompozície na jeho báze je možné stanoviť štandardnými farmaceutickými postupmi v bunkových kultúrach alebo na pokusných zvieratách, napríklad tak, že sa stanoví IC₅o a LD₅₀ (obidve hodnoty sú diskutované) daného kryštálu podľa vynálezu alebo farmaceutickej kompozície na jeho báze. Údaje získané z týchto stanovení na bunkových kultúrach a zvieratách sa použijú pri formulácii rozmedzia dávok pre človeka. Dávka môže kolísať v závislosti na použitej aplikačnej forme a spôsobe podávania. Konkrétnu formuláciu, spôsob podávania a dávku môže voliť ošetrujúci lekár s ohľadom na stav pacienta, (pozri napríklad Fingl et al., 1375, The Pharmacoľogical Basis of Therapeutics, kap. 1, str. 1.)

Interval a výšku dávok je možné individuálne prispôsobiť tak, aby sa dosiahla koncentrácia aktívnej látky v plazme, ktorá je dostatočná z hľadiska udržania modulačných účinkov na kinázu. Tieto koncentrácie v plazme sa označujú ako minimálna účinná koncentrácia (MEC). MEC sa pre každý kryštál podľa vynálezu alebo farmaceutickú kompozíciu na jeho báze líši, ale je možné ju odhadnúť na základe dát získaných in vitro. Napríklad je za použitia opísaných stanovení možné zistiť koncentráciu potrebnú na dosiahnutie 50 až 90% inhibície kinázy. Dávky potrebné na dosiahnutie MEC budú kolísať v závislosti na individuálnych charakteristikách a spôsobe podávania. Koncentráciu v plazme je možné stanoviť pomocou HPLC stanovení alebo biologických stanovení.

Na základe hodnoty MEC je možné tiež stanoviť intervaly dávok. Kryštál podľa vynálezu alebo farmaceutická soľ na jeho báze by sa mali podávať v režime, ktorý zaistí udržanie koncentrácie v plazme, ktorá je vyššia ako MEC, po 10 až 90 % času, prednostne 30 až 90 % času, a najvýhodnejšie 50 až 90 % času.

Pri lokálnom podávaní alebo selektívnom vychytávaní účinná miestna koncentrácia nemusí súvisieť s koncentráciou v plazme. V týchto prípadoch je správne dávkové množstvo a interval podávania možné stanoviť inými spôsobmi, ktoré sú v tomto odbore známe.

Množstvo podávanej kompozície bude samozrejme závisieť na liečenom subjekte, závažnosti postihnutia, spôsobe podávania, úsudku predpisujúceho lekára a podobne.

V prípade potreby kompozície môžu byť prítomné v balení alebo dávkovacom zariadení, ako je kit schválený US FDA, ktoré môžu obsahovať jednu alebo viacej jednotkových dávkovacích foriem obsahujúcich účinnú prísadu. Balenie napríklad môže obsahovať kovovú alebo plastovú fóliu, ako je v prípade blistrového balenia. Balenie alebo dávkovacie zariadenie môžu byť sprevádzané inštrukciami a tiež písomnou informáciou (ktorá je spojená s obalom vo forme predpísanej štátnou inštitúciou regulujúcou výrobu, použitím alebo distribúciou liečiv), ktorá reflektuje súhlas tejto inštitúcie s formou kompozície alebo jej aplikáciou v humánnom alebo veterinárnom lekárstve. Takéto oznámenie napríklad môže byť na etikete schválenej US FDA pre preskripčné liečivá alebo schválenej vloženej informácie. Kompozíciu obsahujúcu kryštál podľa vynálezu formulovanú za použitia kompatibilného nosiča je možné umiestniť do vhodného obalu s informáciou o liečbe a indikáciách. Ako indikované stavy je napríklad možné uviesť liečenie nádorových ochorení, inhibíciu antiogenézie, liečenie fibrózy, diabetes a podobne.

Ďalší aspekt tohto vynálezu predstavujú kombinácie kryštálu podľa vynálezu alebo farmaceutické kompozície na jeho báze s inými chemoterapeutickými činidlami na liečenie chorôb a porúch uvedených vyššie. Kryštál podľa vynálezu alebo farmaceutickú kompozíciu na jeho báze je napríklad možné kombinovať s alkylačnými činidlami, ako je fluóruracil (5-FU) samotný alebo v ďalšej kombinácii s leukovorínom; alebo inými alkylačnými činidlami, ktorých neobmedzujúcimi príkladmi sú iné pyrimidínové analógy, ako UFT, kapecitabín, gamcitabín a cytarabín, alkylsulfonáty, ako je napríklad busulfán (používaný pri liečení chronickej granulocytovej leukémie), improsulfán, a piposulfán; aziridíny, ako je napríklad benzodepa, karbochón, meturedepa a uredepa; etylénimíny a metylmelamíny, ako je napríklad altretamin, trietylénmelamín, trietylénfosforamid, trietyléntiofosforamid a metylolmelamín; a analógy dusíkatého yperitu, ako je napríklad chlórambucil (používaný pri liečení chronickej lýmfocytárnej leukémie, primárnej makroglobulinémie a non-Hodgkinského lymfómu), cyklofosfamid (používaný pri liečení Hodgkinovej choroby, mnohopočetného myelómu, neuroblastómu, rakoviny prsníka, rakoviny vaječníkov, rakoviny pľúc, Wilmovho nádoru a rhabdomyosarkómu), estramustín, ifosfamid, novembrichín, prednimustín a uramustín (používaný pri liečení primárnej trombocytózy, non-Hodgkinských lymfómov, Hodgkinovej choroby a rakoviny vaječníkov) a triazíny, ako je napríklad dakarbazín (používaný pri liečení sarkómov mäkkých tkanív).

Kryštál podľa vynálezu alebo farmaceutickú kompozíciu na jeho báze je tiež možné používať v kombinácii s inými antimetabolickými chemoterapeutickými činidlami, ktorých neobmedzujúcimi príkladmi sú analógy kyseliny listovej, napríklad metotrexat (používaný pri liečení akútnej lýmfocytárnej leukémie, chorio-karcinómu, mykosis fungoides, rakoviny prsníka, hlavy a krku a osteogénnych sarkómov) a pteropterín;

a purínové analógy, ako je merkaptopurín a tioguanín, ktoré nachádzajú použitie pri liečení akútnej granulocytárnej, akútnej lymfocytárnej a chronickej granulocytárnej leukémie.

Kryštál podľa vynálezu alebo farmaceutickú kompozíciu na jeho báze je tiež možné používať v kombinácii chemoterapeutiky na báze prírodných produktov, ktorých neobmedzujúcimi príkladmi sú alkaloidy zimozelene, ako je napríklad vinblastín (používaný pri liečení rakoviny pľúc a mužských pohlavných žliaz), vinkristin a vindesín; epipo-dofylotoxíny, ako je napríklad etoposid a teniposid, ktoré sa používajú pri liečení rakoviny mužských pohlavných žliaz a Kaposiho sarkómu; antibiotické chemoterapeutiká, ako je napríklad daunorubicín, doxorubicin, epirubicin, mitomycín (používaný pri liečení rakoviny žalúdka, čapíka, časti hrubého čreva, prsníka, žlčníka a slinivky), daktinomycín, temozolomid, pliamycin, bleomycín (používaný pri liečení rakoviny kože, pažeráka a urogenitálneho traktu); a enzymatické chemoterapeutiká, ako je L-asparagináza.

Okrem toho je kryštál podľa vynálezu alebo farmaceutickú kompozíciu na jeho báze tiež možné používať v kombinácii s komplexnými zlúčeninami platiny (cisplatinou atď.), substituovanými močovinami, ako je hydroxymočovina; metylhydrazínovými derivátmi, ako je napríklad prokarbazín; adrenokortiáInými supresívami, ako je napríklad mitotán, amínoglutetimid; a hormónami a antagonistami hormónov, ako sú adrenokortikoidy (napríklad prednizón) , progestíny hydroxyprogesterón dietylstilbesterol) ;

androgény, ako je aromatázy, ako je anastrozol.

kaproát); estrogény antiestrogény, ako je testosterón (napríklad (napríklad tamoxifén;

propionát;

inhibítory

Kryštál podľa vynálezu alebo farmaceutické kompozície na jeho báze tiež môžu byť účinné v kombinácii s mitoxantrónom alebo paklitaxelom pri liečení solídnych rakovinových nádorov alebo leukémií, ktorých neobmedzujúcim príkladom je akútna myelogénna (nelymfocytová) leukémia.

Vynález je bližšie objasnený v nasledujúcich príkladoch uskutočnenia. Tieto príklady majú výhradne ilustratívny charakter a rozsah vynálezu v žiadnom ohľade neobmedzujú.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Rontgenové difraktogramy (XRD) boli stanovené za použitia difraktometra Scintag X2 (Thermo ARL, Ecublens, Švajčiarsko) vybaveného goniometrom théta-théta. Teploty tavenia boli stanovené za použitia diferenciálneho skenovacieho kalorimetra

TA Inštrumente 2920 (TA Instruments, New Castle, DE, USA) so štandardnými miskami s obrubou pri rýchlosti zahrievania

10°C/min. Hygroskopicita bola hodnotená gravimetrický pri dynamickej skúške sorpcie vlhkosti (DMSG) za použitia mikroanalytických váh s riadenou atmosférou

Kalamazoo, MI, USA) . Všetky chemikálie pochádzajú od

Corp., firmy

Aldrich Chemical Co., Milwaukee, WI, USA, pokiaľ nie je uvedené inak. N-[2-(Dietylamíno)etyl]-5-[(5-fluór-l,2-dihydro2-oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3 -karboxamid sa pripraví podobným spôsobom, aký je opísaný v príklade 80 PCT medzinárodnej prihlášky WO 01/60814 (Táng et al.) .

Postupy

Prášková rontgenová difrakcia (XRD)

Prášková rontgenová difrakcia sa uskutočňuje za použitia systému Scintag X2 Advanced Diffraction Systém so softwarom Scintag DMS/TN 1.30a a Microsoft Windows NT 4.0. Tento využíva Cu zdroje žiarenia udržiavaného pri 45kV a 40 MA, čím sa získa CuKou emisia s vlnovou dĺžkou 0,15406 nm, a pevný detektor chladený Peltierom. Plocha prierezu zväzku sa reguluje pomocou vychýlenia trubice a protirozptylovými štrbinami 2 a 4 mm a výstupnou a protirozptylovou štrbinou detektora so šírkou 0,5 a 0,2 mm. Dáta sa zhromažďujú v rozmedzí 2 až 35° dva-théta za použitia snímacieho kroku 0,03°/bod s 1 s/časový krok. Pri pokusoch sa používajú guľaté misky Scintag z nehrdzavejúcej ocele s horným vkladaním vzorky s vložkami s priemerom 12 mm. Liečivo neadjustované do liekových foriem sa navzorkuje v takom stave, v akom je, a bez akejkoľvek prípravy umiestni do misky pre vzorku. Pre niektoré špeciálne vzorky sa liečivo pred pokusom tiež ručne rozmrví za použitia misky a tíčika. Dáta sa analyzujú za použitia programu Origin S. C (Microcal Software, Norhamptom, MA, USA).

Gravimetria pri dynamickej skúške sorpcie vlhkosti (DMSG)

DMSG izotermy sa získajú za použitia mikroanalytických váh s riadenou atmosférou a premennou teplotou. Použije sa asi 10 mg vzoriek, ktoré sa nechajú v stave, v akom boli dodané. Vlhkosť sa postupne po 3 % nastavuje na 0 až 90 % relatívnej vlhkosti (RV). Hmotnosť sa stanovuje každé dve minúty. RV sa mení na nasledujúcu hodnotu, keď je hmotnosť vzorky stabilná, to je v rámci 0,5 pg počas 480 sekúnd. Súbor dát sa kontroluje v programe Visual Basic a informácie sa exportujú do tabuľkového procesora Excel.

Termická analýza

Dáta z diferenciálnej skenovacej kalorimetrie (DSC) sa získajú tak, že sa napráškovaná vzorka obrubovanim uzavrie v hliníkovej DSC miske. Vzorky sa používajú v stave, v akom boli dodané a ich veľkosť je asi 1 mg. Teploty sa typicky snímajú do 320°C rýchlosťou 10°C/min. Používa sa kalorimeter TA Inštruments 2920. Analýza dát sa uskutoční v programe TA Universal Analysis VI. 1 OB.

Dáta z termogravimetrickej analýzy (TGA) sa získajú za použitia TA prístroja TGA 2950. Vzorky sa ekvilibrujú pri 25°C s rosným bodom 20°C počas 30 minút a potom sa spustí teplotný program. Teplotná zmena je 10°C/min, ale snímanie sa uskutočňuje za podmienok vysokého rozlíšenia TA. Tento postup spomaľuje rýchlosť snímania v prípade, že dôjde k prechodu, čo zlepšuje schopnosť zariadenia rozlíšiť nezávislé javy spojené s hmotnostným úbytkom.

Príklad

Príprava bezvodnej kryštalickej formy I soli N-[2(dietylamíno)-etyl]-5-[(5-fluór-l,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3ylidén)-metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou L-j ablčnou

Spôsob A

N-[2-(Dietylamino)etyl]-5-[(5-fluór-l,2-dihydro-2-oxo-3H-indol- 3-ylidén)metyl]- 2,4-dimetyl-IH-pyrrol- 3-karboxamid (130 mg, 0,326 mmol) sa pridá k 20 ml metanolu. Výsledná zmes sa mieša a pridá sa k nej kyselina L-jablčná (47,2 mg, 0,352 mmol). Dôjde na rýchle rozpustenie všetkých pevných látok. Metanol sa odstráni za zníženého tlaku a získa sa málo kryštalická oranžová pevná látka. K tejto látke sa pridá acetonitril (5 ml) a výsledná suspenzia sa asi 10 minút za miešania zahrieva a potom za miešania nechá schladnúť na teplotu miestnosti. Kryštály sa odfiltrujú a vysušia. Získa sa 149 mg pevnej látky (86% výťažok), kryštalickej formy I.

Spôsob B

N- [2- (Dietylamino) etyl] -5- [ (5-fluór-l, 2-dihydro-2-oxo-, -3H-indol-3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamid je možné pred prípravou soli s kyselinou L-jablčnou prečistiť premytím vodným roztokom s pH = 11. Pri 80° C sa pripraví roztok voľnej bázy v zmesi n-butanolu a vody v pomere 80 : 20 (objemovo) . Zmes sa ochladí na 20°C a 1 hodinu mieša, pričom dôjde na výraznú kryštalizáciu. Vzorka sa analyzuje PXRD, pri ktorej sa zistí, že bola získaná kryštalická forma I. Po odfiltrovaní, vysušení a rozmrvení kryštálov sa dosiahne 99% výťažok.

Príklad

Príprava kryštalickej formy II soli N-[2 -(dietylamíno)etyl]- 5 -[(5 - fluór-1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol- 3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou L-jablčnou

Kryštály kryštalickej formy I soli N-[2-(dietylamíno)etyl]-5-[(5-fluór-l,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)-metyl]-

2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou L-jablčnou (25 mg) sa pridajú do tetrahydrofuránu (2 ml) . Do vzniknutej zmesi sa potom pridá voda (250 pi). Výsledná zmes sa zahrieva, dokiaľ sa kryštály nerozpustia. Rozpúšťadlo sa cez noc odparí. Získajú sa kryštály kryštalickej formy II.

Príklad 3

Príprava bezvodnej kryštalickej formy I soli N- [2(dietylamíno)-etyl]-5- [ (5-fluór-l,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3ylidén)-metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou L-jablčnou z kryštalickej formy II

Do kryštalickej formy II (150 mg) sa pridá acetonitril (asi 5 ml) . Výsledná suspenzia sa asi 10 minút mieša a potom za miešania nechá schladnúť na teplotu miestnosti. Kryštály sa odfiltrujú a vysušia. Získajú sa kryštály kryštalickej formy

I.

Príklad 4

Rozpustnosť kryštalickej formy I soli N-[2 -(dietylamíno)etyl]-5-[(5-fluór-l,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)-metyl]-

2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou L-jablčnou

Rozpustnosť kryštalickej formy I soli N-[2-(dietylamíno)etyl]-5-[(5-fluór-l,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)-metyl]-

2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou L-jablčnou pri °C vo vode bola stanovená 5 mg/ml. To svedčí o tom, že rozpustnosť by nemala predstavovať obmedzujúci faktor biologickej dostupnosti tejto látky.

Všetky citácie publikácií sú uvádzané náhradou za prenesenie ich obsahu do tohto textu.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Bezvodný kryštál obsahujúci sol zlúčeniny vzorca s kyselinou jablčnou.
2. Kryštál podía nároku 1, kde kyselinou jablčnou je kyselina L-jablčná.
3. Bezvodný kryštál obsahujúci soľ N-[2-(dietylamino)etyl]-5-[(5-fluór-l,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)-metyl]-

2,4-dimetyl-ΙΗ-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou L-jablčnou.
4. Kryštál obsahujúci soľ N-[2-(dietylamino)etyl]-5-[(5fluór-1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl]-2,4-di-metyllH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou jablčnou, ktorý v práškovom rontgenovom difraktograme vykazuje charakteristické difrakčné piky pri asi 13,2 a 24,2 stupňa dva théta.
5. Kryštál podľa nároku 4, ktorý v práškovom rontgenovom difraktograme vykazuje charakteristické difrakčné piky pri asi 13,2, 19,4, 24,2 a 25,5 stupňa dva théta.
6. Kryštál podľa nároku 5, ktorý v práškovom rontgenovom difraktograme vykazuje charakteristické difrakčné piky, ako sú uvedené v tabuľke 1 pre kryštalickú formu I.

asi 7. Kryštál podľa nároku 2 % hmotnostné vody. 4 , ktorý ďalej obsahuje nanajvýš 8. Kryštál podľa nároku 7, ktorý obsahuj e nanajvýš asi 0,5 % hmotnostného vody. 9. Kryštál podľa nároku 8, ktorý obsahuj e nanajvýš asi 0,2 % hmotnostného vody.
10. Kryštál obsahujúci sol N-[2-(dietylamino)etyl]-5-[(5fluór-1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl]-2,4-di-metyllH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou jablčnou, ktorý má teplotu tavenia aspoň asi 190°C.
11. Kryštál podľa nároku 10, ktorý má teplotu tavenia aspoň asi 195°C.
12. Kryštál podľa nároku 10, ktorý ďalej obsahuje nanajvýš asi 2 % hmotnostné vody.
13. Kryštál podľa nároku 12, ktorý obsahuje nanajvýš asi 0,5 % hmotnostného vody.
14. Kryštál podľa nároku 13, ktorý obsahuje nanajvýš asi 0,2 % hmotnostného vody.
15. Kryštál obsahujúci sol N-[2-(dietylamino)etyl]-5-[(5fluór-1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl]-2,4-di-metyllH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou jablčnou, ktorý v práškovom rôntgenovom difraktograme vykazuje charakteristické difrakčné piky pri asi 3,0 a 27,7 stupňa dva théta.
16. Kryštál podľa nároku 15, ktorý v práškovom rontgenovom difraktograme vykazuje charakteristické difrakčné piky pri asi 3,0, 12,1, 14,5 a 27,7 stupňa dva théta.
17. Kryštál podlá nároku 16, ktorý v práškovom rontgenovom difraktograme vykazuje charakteristické difrakčné piky, ako sú uvedené v tabuľke 1 pre kryštalickú formu II.
18. Kryštál podľa nároku 15, ktorý po expozícii 80% relatívnej vlhkosti absorbuje aspoň asi 5 % hmotnostných vody.
19. Kryštál obsahujúci soľ N-[2-(dietylamíno)etyl]-5-[(5fluór-1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol- 3-ylidén)metyl] -2,4 -di-metyllH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou jablčnou, ktorý má teplotu tavenia nanajvýš asi 185°C.
20. Kryštál podľa nároku 19, ktorý pri expozícii 80% relatívnej vlhkosti absorbuje aspoň asi 5 % hmotnostných vody.
21. Spôsob výroby bezvodného kryštálu, ktorý obsahuje sol N-[2-(dietylamíno)etyl]-5- [ (5-fluór-l,2-di-hydro-2-oxo-3Hindol-3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou jablčnou, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa stupne, v ktorých sa zmieša kyselina jablčná, N-[2-(dietylamino)etyl]-5-[(5-fluór-1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl] - 2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamid a rozpúšťadlo; a vyvolá kryštalizácie soli za podmienok kryštalizácie, ktoré zahŕňajú jeden alebo viacero faktorov zahŕňajúcich: rozdiel medzi východzou a konečnou teplotou kryštalizačného roztoku nanajvýš asi 100°C; rýchlosť chladenia nanajvýš o asi 50°C za hodinu; žiadne zaočkovanie; pomer presýtenosti nanajvýš asi 10; žiadne zrážadlo; a/alebo ich kombinácie.
22. Spôsob podľa nároku 21, vyznačujúci sa tým, že kyselinou jablčnou je kyselina L-jablčná.
23. Spôsob podlá nároku 21, vyznačujúci sa tým, že jeden alebo viacero faktorov zahŕňa: rozdiel medzi východzou a konečnou teplotou kryštalizačného roztoku nanajvýš asi 50 °C; rýchlosť chladenia nanajvýš o asi 20°C za hodinu; pomer presýtenosti nanajvýš asi 5; a/alebo ich kombinácie.
24. Spôsob podľa nároku 23, vyznačujúci sa tým, že jeden alebo viacero faktorov zahŕňa: rozdiel medzi východzou a konečnou teplotou kryštalizačného roztoku nanajvýš asi 25°C; rýchlosť chladenia nanajvýš o asi 2°C za hodinu; pomer presýtenosti nanajvýš asi 1,5; a/alebo ich kombinácie.
25. Spôsob podľa nároku 24, vyznačujúci sa tým, že východzia teplota a konečná teplota kryštalizačných roztokov sú rovnaké.
26. Spôsob podľa nároku 21, vyznačujúci sa tým, že rozpúšťadlo je zvolené zo súboru pozostávajúceho z acetonitrilu, metanolu, etanolu, izopropylalkoholu, n-butanolu, tetrahydrofuránu, N,N-dimetylformamidu, acetónu, vody a ich zmesí.
27. Spôsob podľa nároku 21, vyznačujúci sa tým, že bezvodný kryštál v práškovom rontgenovom difraktograme vykazuje charakteristické difrakčné piky pri asi 13,2 a 24,2 stupňa dva théta.
28. Kryštál podľa nároku 27, ktorý v práškovom rontgenovom difraktograme vykazuje charakteristické difrakčné piky pri asi 13,2, 19,4, 24,2 a 25,5 stupňa dva théta.
29. Kryštál podlá nároku 28, ktorý v práškovom rôntgenovom difraktograme vykazuje charakteristické difrakčné piky, ako sú uvedené v tabuľke 1 pre kryštalickú formu I.
30. Spôsob výroby bezvodného kryštálu, ktorý obsahuje soľ N-[2-(dietylamino)etyl]-5-[(5-fluór-l, 2-di-hydro-2-oxo-3Hindol-3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou jablčnou, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa stupne, v ktorých sa kryštál obsahujúci soľ N-[2-(dietylamino)etyl]-5-[(5-fluór-l,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl -lH-pyrrol- 3 -karboxamidu s kyselinou jablčnou uvedie do styku s rozpúšťadlom, v ktorom je kryštál uvádzaný do styku v podstate rozpustný, pričom kryštál uvádzaný do styku má v práškovom rôntgenovom difraktograme charakteristické difrakčné piky pri asi 3,0 a 27,7 stupňa dva-théta.
31. Spôsob podľa nároku 30, vyznačujúci sa tým, že kryštál uvádzaný do styku má v práškovom rôntgenovom difraktograme charakteristické difrakčné piky pri asi 3,0, 12,1, 14,5 a 27,7 stupňa dva théta.
32. Spôsob podľa nároku 31, vyznačujúci sa tým, že kryštál uvádzaný do styku má v práškovom rôntgenovom difraktograme charakteristické difrakčné piky ako sú uvedené v tabuľke 1 pre kryštalickú formu II.
33. Spôsob podľa nároku 30, vyznačujúci sa tým, že rozpúšťadlo je zvolené zo súboru pozostávajúceho z acetonitrilu, etanolu, metanolu a ich zmesí.
34. Spôsob podľa nároku 30, vyznačujúci sa tým, že kryštál uvádzaný do styku s rozpúšťadlom tvorí suspenziu.

35. Spôsob podľa nároku 34, vyznačujúci sa tým, že ďa 1 e j zahŕňa miešanie suspenzie. 36. Spôsob podľa nároku 34, vyznačujúci sa tým, že ďalej zahŕňa zahrievanie suspenzie. 37. Spôsob podľa nároku 34, vyznačujúci sa tým, že ďalej

zahŕňa izoláciu bezvodného kryštálu zo suspenzie.
38. Spôsob podľa nároku 30, vyznačujúci sa tým, že bezvodný kryštál v práškovom rontgenovom difraktograme vykazuje charakteristické difrakčné piky pri asi 13,2 a 24,2 stupňa dva théta.
39. Spôsob podľa nároku 38, vyznačujúci sa tým, že bezvodný kryštál v práškovom rontgenovom difraktograme vykazuje charakteristické difrakčné piky pri asi 13,2, 19,4, 24,2 a 25,5 stupňa dva théta.
40. Spôsob podľa nároku 39, vyznačujúci sa tým, že bezvodný kryštál v práškovom rontgenovom difraktograme vykazuje charakteristické difrakčné piky, ako sú uvedené v tabuľke 1 pre kryštalickú formu I.
41. Spôsob výroby kryštálu, ktorý obsahuje soľ N-[2-(dietylamino)etyl]-5-[(5-fluór-l,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou jablčnou, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa stupne, v ktorých sa zmieša kyselina jablčná; N- [2-(dietylamino)etyl] -5- [ (5-fluór-1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3-karbo?:amid a rozpúšťadlo; a vyvolá kryštalizácia soli za podmienok kryštalizácie, ktoré zahŕňajú jeden alebo viacero faktorov zahŕňajúcich: rozdiel medzi východzou a konečnou teplotou kryštalizačného roztoku aspoň asi 25°C; rýchlosť chladenia o aspoň asi 25°C za hodinu; zaočkovanie; pomer presýtenosti aspoň asi 2; prítomnosť zrážadla; a/alebo ich kombinácie.
42. Spôsob podľa nároku 41, vyznačujúci sa tým, že kyselinou jablčnou je kyselina L-jablčná.
43. Spôsob podľa nároku 41, vyznačujúci sa tým, že jeden alebo viacero faktorov zahŕňa: rozdiel medzi východzou a konečnou teplotou kryštalizačného roztoku aspoň asi 50 °C; rýchlosť chladenia o aspoň asi 100’C za hodinu; pomer presýtenosti aspoň asi 5; a/alebo ich kombinácie.
44. Spôsob podľa nároku 43, vyznačujúci sa tým, že jeden alebo viacero faktorov zahŕňa: rozdiel medzi východzou a konečnou teplotou kryštalizačného roztoku aspoň asi 100°C; rýchlosť chladenia o aspoň asi 3 00°C za hodinu; pomer presýtenosti aspoň asi 10; a/alebo ich kombinácie.
45. Spôsob podľa nároku 41, vyznačujúci sa tým, že rozpúšťadlo je zvolené zo súboru pozostávajúceho z metanolu, vody, zmesi tetrahydrofuránu a vody, a ich zmesí.
46. Spôsob podľa nároku 41, vyznačujúci sa tým, že kryštál má v práškovom rôntgenovom difraktograme charakteristické difrakčné piky pri asi 3,0 a 27,7 stupňa dva théta.
47. Spôsob podľa nároku 46, vyznačujúci sa tým, že kryštál má v práškovom rôntgenovom difraktograme charakteristické difrakčné piky pri asi 3,0, 12,1, 14,5 a 27,7 stupňa dva théta.
48. Spôsob podlá nároku 37, vyznačujúci sa tým, že kryštál má v práškovom rontgenovom difraktograme charakteristické difrakčné piky ako sú uvedené v tabuľke 1 pre kryštalickú formu II.
49. Kompozícia, vyznačujúca sa tým, že obsahuje bezvodné kryštály obsahujúce soľ N-[2-(dietylamíno)etyl]-5-[(5-fluór-1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-1H-pyrrol-3-karboxamidu s kyselinou L-jablčnou.
50. Kompozícia podľa nároku 49, vyznačujúca sa tým, že ďalej obsahuje excipient.
51. Kompozícia, vyznačujúca sa tým, že obsahuje kryštály obsahujúce soľ N-[2 -(dietylamíno)etyl]- 5-[(5 - fluór-1,2-dihydro-2 -oxo-3H- indol-3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-IH-pyrrol-3 karboxamidu s kyselinou jablčnou, ktoré v práškovom rontgenovom difraktograme vykazujú charakteristické difrakčné piky pri asi 13,2 a 24,2 stupňa dva théta.
52. Kompozícia, vyznačujúca sa tým, že obsahuje kryštály obsahujúce soľ N-[2-(dietylamíno)etyl]-5-[(5-fluór-l,2-dihydro-2-oxo-3H-indol- 3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3karboxamidu s kyselinou jablčnou, ktorých teplota tavenia je aspoň asi 190°C.
53. Kompozícia, vyznačujúca sa tým, že obsahuje kryštály obsahujúce soľ N-[2-(dietylamíno)etyl]-5-[(5-fluór-1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol- 3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-lH-pyrrol-3 karboxamidu s kyselinou jablčnou, ktoré v práškovom rôntgenovom difraktograme vykazujú charakteristické dífrakčné piky pri asi 3,0 a 27,7 stupňa dva théta.
54. Kompozícia, vyznačujúca sa tým, že obsahuje kryštály obsahujúce soľ N-[2-(dietylamíno)etyl]-5-[ (5-fluór1,2-di-hydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidén)metyl]-2,4-dimetyl-lHpyrrol-3-karboxamidu s kyselinou jablčnou, ktorých teplota tavenia je nanajvýš asi 185°C.