KR20230031981A

KR20230031981A - 제1형 당뇨병을 예방하기 위한 방법 및 조성물

Info

Publication number: KR20230031981A
Application number: KR1020237005889A
Authority: KR
Inventors: 프란시스코 레온; 케반 씨. 헤롤드; 제이 에스. 스카일러
Original assignee: 프로벤션 바이오, 인코포레이티드
Priority date: 2019-05-14
Filing date: 2020-05-14
Publication date: 2023-03-07
Also published as: KR102503349B1; JOP20210298A1; US20230013752A1; BR112021022682A2; JP2021534224A; JP2023002501A; US20200399368A1; KR20220034029A; US11434291B2; JP7137696B2; IL288024A; WO2020232247A1

Abstract

한 양상에서, 본원은 임상 제1형 당뇨병(T1D)의 발병을 예방 또는 지연시키는 다음 단계들을 포함하는 방법을 제공한다: T1D의 위험이 있는 비-당뇨병 대상자를 제공하는 단계; 비-당뇨병 대상자가 (1) 아연 수송체 8(ZnT8)에 대한 항체가 실질적으로 없고, (2) HLA-DR4+이고 및/또는 (3) HLA-DR3+가 아님을 결정하는 단계; 및 예방적 유효량의 항-CD3 항체를 비-당뇨병 대상자에게 투여하는 단계.

Description

제1형 당뇨병을 예방하기 위한 방법 및 조성물{METHODS AND COMPOSITIONS FOR PREVENTING TYPE 1 DIABETES}

관련 출원에 대한 상호 참조

본 출원은 2019년 5월 14일에 출원된 미국 가출원 번호 62/847,466 및 2020년 5월 14일에 출원된 미국 실용신안 특허출원 번호 15/931,685에 대한 우선권 및 이익을 주장하며, 이들 문헌의 전체 개시 내용은 본원에 참조로 포함된다.

서열 목록

2020년 5월 14일 EFS-Web을 통해 제출된 "010701seq.txt"라는 파일명의 ASCII 텍스트 파일은 2020년 5월 14일에 생성되었으며 크기는 6,083바이트이고 그 전체 내용이 본원에 참조로 포함된다.

기술분야

본 발명은 일반적으로 위험에 처한 대상자에서 임상 제1형 당뇨병(T1D)의 발병을 예방하거나 지연시키는 조성물 및 방법, 보다 구체적으로 항-CD3 항체의 용도에 관한 것이다.

배경

제1형 당뇨병(T1D)은 랑게르한스 섬에서 인슐린을 생성하는 베타 세포의 자가면역 파괴로 인해 발생하며, 이는 생존을 위해 외인성 인슐린 주사에 의존하게 한다. 약 160만 명의 미국인이 제1형 당뇨병을 앓고 있으며 천식 다음으로 아동기의 가장 흔한 질환 중 하나로 남아 있다¹. 치료의 개선에도 불구하고 대부분의 T1D 개체는 원하는 혈당 목표를 일관되게 달성할 수 없다². 제1형 당뇨병 개체의 경우 이환율과 사망률의 위험이 증가하는 것에 대한 지속적인 우려가 존재한다. 최근 2개 연구에서는 10세 이전에 진단받은 어린이의 경우 17.7년의 수명, 진단을 받은 성인 스코틀랜드 남성 및 여성의 경우 각각 11 및 13년의 수명 손실을 기록했다^3,4.

유전적으로 취약한 개인에서 T1D는 먼저 자가항체의 출현 (1단계) 후 혈당 이상 (2단계)을 특징으로 하는 명백한 고혈당증 이전에 무증상 단계를 통해 진행된다. 2단계에서는 포도당 부하에 대한 대사 반응은 손상되지만, 당화 헤모글로빈과 같은 다른 대사 지표는 정상이며 인슐린 치료가 필요하지 않다⁵. 이러한 면역학적 및 대사적 특징은 명백한 고혈당증 및 인슐린 치료가 필요한 임상 질환의 발병 위험이 높은 개체를 식별한다 (3단계). 최근 발병한 T1D 임상에서 연구하였을 때 여러가지 면역 중재술들이 베타 세포 기능의 감소를 지연시키는 것으로 나타났다⁶. 한 가지 유망한 치료제는 FcR 비결합 항-CD3 단일클론 항체 테플리주맙(테플리주맙)으로서, 여러 연구에서 단기 치료가 β세포 기능의 손실을 지속적으로 감소시키고 진단 및 치료 후 7년 동안 관찰 가능한 효과를 나타내었음을 보여주었다^7-11. 이 약물은 베타 세포 사멸을 일으키는 중요한 효과기 세포로 생각되는 CD8+ T 림프구의 기능을 변형시킨다^12,13.

현재까지 임상 진단(즉, 1기 또는 2기) 전에 시작된 어떠한 중재술도 임상 3기 T1D로의 진행을 변경시키지 못했다. 따라서, 고위험 개체에서 임상 T1D의 발병을 예방하거나 지연시킬 치료제가 필요하다.

한 양상에서, 임상 제1형 당뇨병 (T1D)의 발병을 예방 또는 지연시키는 다음 단계를 포함하는 방법이 제공된다:

T1D의 위험이 있는 비당뇨병 대상자를 제공하는 단계;

비-당뇨병 대상자가 (1) 아연 수송체 8 (ZnT8)에 대한 항체가 실질적으로 없고, (2) HLA-DR4+이고 및/또는 (3) HLA-DR3+가 아님을 결정하는 단계; 그리고

항-CD3 항체의 예방적 유효량을 비-당뇨병 대상자에게 투여하는 단계.

일부 구체예에서, 비-당뇨병 대상자는 T1D 환자의 친척이다. 특정 구체예에서, 비-당뇨병 대상자는 섬 세포 항체 (ICA), 인슐린 자가항체 (IAA), 및 글루탐산 탈탄산효소 (GAD), 티로신 포스파타제 (IA-2/ICA512) 또는 ZnT8에 대한 항체로부터 선택된 2개 이상의 당뇨병-관련 자가항체를 가진다.

일부 구체예에서, T1D-관련 자가항체의 검출은 일반 집단 또는 T1D 환자의 친척에서 현장 진단 (POC) 스크리닝 방법에 의해 수행된다. 이러한 POC 방법은 정성적 급속 측방 유동 검사일 수 있다.

일부 구체예에서, 비-당뇨병 대상자는 콕사키 B 바이러스(CVB) 및/또는 다른 베타 세포 친화성(tropic) 바이러스(들)에 의한 감염을 갖는다. 일부 구체예에서, 베타 세포 친화성 바이러스에 감염된 이 대상자는 HLA-DR4를 가지며 테플리주맙에 더 반응성이다.

다양한 구체예에서, 비-당뇨병 대상자는 경구 내당능 검사 (OGTT)에서 비정상 내당능을 가진다. OGTT에서 비정상적인 내당능은 OGTT에서 110-125 mg/dL의 공복 혈당 수준 또는 ≥ 140 및 < 200 mg/dL의 2시간 혈장 혈당 또는 30, 60 또는 90분에서 > 200mg/dL의 중간 혈당 값으로 정의된다.

일부 구체예에서, 비-당뇨병 대상자는 ZnT8에 대한 항체를 갖지 않는다. 특정 구체예에서, 비-당뇨병 대상자는 HLA-DR4+이고 HLA-DR3+가 아니다.

한 구체예에서, 항-CD3 항체는 테플리주맙이다.

다양한 구체예에서, 예방적 유효량은 항-CD3 항체, 예를 들어, 총 6-15 밀리그램 용량의 항-CD3/테플리주맙의 경우, 10-1000 마이크로그램/미터 제곱 (μg/m²)의 테플리주맙을 10 내지 14일 피하 (SC) 주사 또는 정맥내 (IV) 매일 주입하는 과정, 바람직하게는 0-3 일차에, 각각 51 μg/m², 103 μg/m², 207 μg/m², 및 413 μg/m², 그리고 4-13일차에 각각 826 μg/m² 1회 용량의 테플리주맙을 14일 IV 주입하는 과정을 포함한다. 특정 구체예에서, 예방 유효량의 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙은 T1D의 임상 진단까지의 시간 중앙값을 적어도 50%, 적어도 80%, 또는 적어도 90%, 적어도 12개월, 적어도 18개월, 적어도 24개월, 적어도 36개월, 적어도 48개월, 또는 적어도 60개월, 또는 그 이상 지연시킨다.

일부 구체예들에서, 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙, 오텔릭시주맙 또는 포랄루맙은, SC 펌프로 투여되거나 지속 방출형 생체재료에 내장되거나 경구 투여된다. 다른 구체예들에서, 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙, 오텔릭시주맙 또는 포랄루맙은, 베타 세포 전구체 또는 베타 세포를 캡슐화하는 생체재료에 내장되거나 베타 세포 전구체 또는 베타 세포와 함께 비경구적으로 제공된다.

일부 구체예들에서, 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙, 오텔릭시주맙 또는 포랄루맙은, 대사제, B 세포 억제제 또는 기타 면역 조절제와 같은 다른 약리학적 제제와 함께 투여된다.

일부 구체예들에서, 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙, 오텔릭시주맙 또는 포랄루맙은, 항원-특이적 면역 치료제 및/또는 백신과 함께 투여된다.

일부 구체예들에서, 상기 방법은 유세포 분석에 의해 비-당뇨병 환자의 말초혈액 단핵 세포에서 TIGIT+KLRG1+CD8+ T-세포의 백분율을 결정하는 단계를 추가로 포함하며, 여기서 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙, 오텔릭시주맙 또는 포랄루맙을 투여한 후 백분율의 증가는 항-CD3 항체, 예를 들어 테플리주맙에 대한 반응성을 나타낸다.

또 다른 양상은 제1형 당뇨병(T1D)의 발병을 예방하거나 지연시키는 데 있어 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙, 오텔릭시주맙 또는 포랄루맙의 반응성을 예측하는 다음 단계를 포함하는 방법에 관한 것이다:

T1D의 위험이 있는 비당뇨병 대상자를 제공하는 단계;

비당뇨병 대상자에게 예방적 유효량의 테플리주맙, 오텔릭시주맙 또는 포랄루맙을 투여하는 단계; 그리고

유세포 분석에 의해 비-당뇨병 환자의 말초혈액 단핵 세포에서 TIGIT+KLRG1+CD8+ T-세포의 백분율을 결정하는 단계, 여기서 백분율의 증가는 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙, 오텔릭시주맙 또는 포랄루맙에 대한 반응성을 나타낸다.

일부 구체예들에서, 상기 방법은 비-당뇨병 대상자가 (1) 아연 수송체 8 (ZnT8)에 대한 항체가 실질적으로 없고, (2) HLA-DR4+이고 및/또는 (3) HLA-DR3+가 아님을 결정하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.

본 명세서에 기재된 양상들 및/또는 구체예들이 조합될 수 있음은 당업자에게 명백할 것이다.

도면의 간단한 설명
도 1: 참가자의 스크리닝, 등록 및 추적관찰 (follow-up). 총 112명의 대상자가 TrialNet 기관에서 적격에 대해 스크리닝 되었다 (연구 기관 목록은 부록 참조). 대상자들 중 76명이 약물 또는 위약 그룹에 무작위 배정되었다. 그들은 14개의 TrialNet 기관 중 하나에서 연구 약물을 주입하고 33개 기관 중 하나에서 연구 프로토콜에 따라 추적되었다. 모든 무작위 대상자들이 분석에 포함된다.
도 2A-2C: T1D 발병에 대한 테플리주맙 치료의 효과. 도 2A. 카플란-마이어 (Kaplan-Meier)는 당뇨병이 없는 참가자의 비율을 추정한다. 전체 위험 비율은 0.437이었다 (95% CI:0.229, 0.832) (p=0.006, 단측, Cox 모델). T1D까지 걸리는 시간 중앙값은 테플리주맙 그룹의 경우 48.4개월, 위약 그룹의 경우 24.4개월이었다. 인서트는 연구 종료 시 T1D가 있는 그리고 당뇨병이 없는 총 대상자 수를 보여준다. 도 2B. 치료 그룹별 제1형 당뇨병의 백분율 및 연구 연도별 누적 및 구간 위험비 (95% 신뢰 구간). (* 연도 구간 동안 각 치료 그룹에서 T1D가 발병한 참가자 수가 표시된다. 또한 누적 HR과 연도 구간별 HR을 계산하였다. †멘텔-헨젤 (Mantel-Haenszel) 방법은 카이 제곱 검정 및 위험비 추정치 모두의 사건 대 시간 데이터에 적용된다³⁴. € Cox 모델로부터 우도비 검정 및 위험비 추정 및 95% CI). 도 2C. 연구 그룹들의 절대 림프구 수 (ALC).
도 3A-3E: 테플리주맙에 대한 반응의 면역학적 효과 및 하위그룹 분석. 도 3A. 테플리주맙 및 위약 치료 대상자에서 CD8+KLRG1+TIGIT+CD57- T-세포의 백분율. (* 테플리주맙 대 위약 치료 참가자에서 p<0.05). 평균±95% CI가 표시된다. 각 시점에 대해 ANCOVA를 사용하여 비교하고 기준 값에 대해 수정했다. 또한, 3개월 (p=0.009) 및 6개월 (p=0.007)시 테플리주맙 치료 참가자에서 이들 세포의 백분율이 유의하게 증가했지만 위약 치료 참가자에서는 그렇지 않았다 (대응표본 t-검정). 도 3B. 래더 플롯은 기준선에서 참가자들의 명시된 특징들 각각에 대한 위험비를 보여준다. 항-ZnT8 항체의 부재 (p=0.004, HR: 음성의 경우 0.031, 양성의 경우 0.657), HLA-DR4의 존재 (p=0.004, HR: 음성의 경우 1.47, 양성의 경우 0.201), 및 HLA-DR3의 부재 (p=0.01, HR: 음성의 경우 0.181, 양성의 경우 0.907)는 위험비에 유의한 영향을 주었다. 기준선 (도 3C)에서 항-ZnT8 항체가 있거나 없는 환자의 당뇨병 발병 또는 HLA-DR3 (도 3D) 또는 HLA-DR4 (도 3E)에 대해 양성 또는 음성이 표시된다.
도 4: 유세포 분석에 사용되는 단클론 항체.
도 5: 시험 등록.
도 6: TIGIT(Y 축) 대 KLRG1(X 축)의 염색을 보여주는 FACS 등고선 플롯. 전자 게이트는 살아있는 CD8+CD57-T 세포에 배치되었으며 KLRG1 및 TIGIT의 발현은 테플리주맙으로 치료받은 3명의 대상자 (맨 윗줄)와 위약으로 치료받은 3명의 대상자의 말초혈액 세포에서 나타난다. 숫자는 각 사분면에서 전체 게이트 셀의 비율을 나타낸다. 사분면은 염색 대조 그룹을 기반으로 배치되었다.
도 7A-7B: 치료 그룹에서 T 세포 하위 집합의 백분율. 연구 방문시 CD4+ TREG (도 7A) CD4+CD127_loFoxp3+ 및 CD8+TIGIT-KLRG1-CD57- T 세포의 백분율 (도 7B)가 표시된다. 각 치료 그룹에 대한 테플리주맙과 위약 간의 그리고 기준선으로부터 치료 후까지의 두 세포 하위집합들에 있어서의 차이는, 각 시점에 대해 ANCOVA로 비교하고 기준선 값에 대해 보정했을 때 통계적으로 유의하지 않았다.

상세한 설명

일부 구체예들에서, 본 발명은 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙 치료에 반응할 비-당뇨병 대상자가 ZnT8에 대한 항체를 갖지 않는다는 놀라운 발견을 제공한다. 특정 구체예에서, 이러한 비-당뇨병 대상자는 HLA-DR4+이고 HLA-DR3+가 아니다. 예기치 않게, 항-CD3 항체 치료에 반응하게 되는 이러한 비당뇨병 대상자는 테플리주맙 투여 후 (예를 들어, 1개월 후, 2개월 후, 3개월 후 또는 그 이상 또는 그 이하) 말초 혈액 단핵 세포에서 TIGIT+KLRG1+CD8+ T-세포의 백분율 (또는 상대량)의 증가를 (예를 들어, 유세포 분석에 의해) 나타낸다.

일부 구체예들에서, 본원은 임상 제1형 당뇨병(T1D)의 발병을 예방 또는 지연시키는 방법을 제공하며, 이 방법은 다음 단계들을 포함한다: T1D의 위험이 있는 비-당뇨병 대상자를 제공하는 단계; 비-당뇨병 대상자가 (1) 아연 수송체 8(ZnT8)에 대한 항체가 실질적으로 없고, (2) HLA-DR4+이고 및/또는 (3) HLA-DR3+가 아님을 결정하는 단계; 및 예방적 유효량의 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙을 비-당뇨병 대상자에게 투여하는 단계.

특정 구체예에서, T1D의 발병을 예방 또는 지연시키는 데 있어서 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙의 반응성을 예측하는 방법이 제공된다. 상기 방법은 다음 단계를 포함할 수 있다: T1D의 위험이 있는 비당뇨병 환자를 제공하는 단계; 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙의 예방적 유효량을 비당뇨병 대상자에게 투여하는 단계; 그리고 유세포 분석에 의해 비-당뇨병 환자의 말초혈액 단핵 세포에서 TIGIT+KLRG1+CD8+ T-세포의 백분율을 결정하는 단계, 여기서 백분율의 증가는 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙에 대한 반응성을 나타낸다.

정의

특정 용어는 아래에 정의되어 있다. 본 출원 전반에 걸쳐 추가 정의들이 제공된다.

본 명세서에 사용된 관사 “하나” (“a” 및 “an”)는 관사의 문법적 대상 중 하나 이상, 예를 들어 적어도 하나를 지칭한다. 본 명세서에서 “포함하는”이라는 용어와 함께 사용될 때 “하나” 또는 “한”이라는 단어의 사용은 “하나”를 의미할 수 있지만, 또한 “하나 또는 그 이상”, “적어도 하나” 및 “하나 또는 하나 이상”의 의미와 일치한다.

본원에서 사용되는, “약” 및 “대략”은 일반적으로 측정의 성질 또는 정밀도가 주어지면 측정된 양에 대해 허용 가능한 오차 정도를 의미한다. 예시적인 오차 정도는 주어진 값 범위의 20 퍼센트 (%) 이내, 일반적으로 10% 이내, 보다 일반적으로 5% 이내이다. 용어 “실질적으로”는 50% 초과, 바람직하게는 80% 초과, 가장 바람직하게는 90% 또는 95% 초과를 의미한다.

본원에서 사용되는 용어 “포함하는” 또는 “포함하다”는 주어진 구체예에 존재하지만 불특정 요소를 포함할 수 있는 조성물, 방법 및 이들의 각각의 구성요소(들)와 관련하여 사용된다.

본원에서 사용되는 용어 “~으로 본질적으로 구성되는”은 주어진 구체예에 필요한 요소들을 지칭한다. 이 용어는 본 발명의 구체예들의 기본적이고 신규한 또는 기능적 특성(들)에 실질적으로 영향을 미치지 않는 추가 요소의 존재를 허용한다.

“~으로 구성된”이라는 용어는 본원에 기재된 조성물, 방법 및 이들의 각각의 구성요소를 지칭하며, 구체예의 설명에서 인용되지 않은 임의의 요소를 제외시킨다.

본원에서 용어 “항체”는 가장 넓은 의미로 사용되며 원하는 항원 결합 활성을 나타내는 한 단클론 항체, 다클론 항체, 다중특이성 항체 (예를 들어, 이중특이성 항체) 및 항체 단편을 포함하는 (그러나 이에 제한되지 않음) 다양한 항체 구조를 포함한다.

“항체 단편”은 무손상 항체가 결합하는 항원에 결합하는 무손상 항체의 일부를 포함하는 무손상 항체 이외의 분자를 지칭한다. 항체 단편의 예는 Fv, Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab')₂; 디아바디; 선형 항체; 단일쇄 항체 분자 (예를 들어, scFv); 및 항체 단편들로부터 형성된 다중특이적 항체를 포함하나 이에 제한되는 것은 아니다.

본원에서 사용되는 용어 “예방제”는 T1D의 하나 이상의 증상의 예방, 치료, 관리 또는 개선에 사용될 수 있는 테플리주맙과 같은 CD3 결합 분자를 지칭한다.

본 명세서에 사용된, 제1형 당뇨병과 관련하여 질환의 “발병”이라는 용어는 미국 당뇨병 협회 (American Diabetes Association)에서 제1형 당뇨병 진단을 위해 확립된 기준을 충족하는 환자를 지칭한다 (Mayfield et al., 2006, Am. Fam. Physician 58:1355-1362 참조).

본원에서 사용되는 용어 “예방하다”, “예방하는” 및 “예방”은 예방제 또는 치료제의 투여로 인해 대상자에서 T1D의 하나 이상의 증상의 발병을 예방하는 것을 지칭한다.

본원에서 사용되는 “프로토콜”은 투약 일정 및 투약 요법을 포함한다. 본원의 프로토콜은 사용 방법이며 예방 및 치료 프로토콜을 포함한다. “투약 요법” 또는 “치료 과정”은 1 내지 20일에 걸친 수회 용량의 치료제 또는 예방제의 투여를 포함할 수 있다.

본원에서 사용되는 용어 “대상자” 및 “환자”는 상호교환적으로 사용된다. 본원에서 사용되는 용어 “대상자” 및 “대상자들”은 동물, 바람직하게는 비영장류 (예를 들어, 소, 돼지, 말, 고양이, 개, 래트 및 마우스) 및 영장류 (예를 들어, 원숭이 또는 인간), 보다 바람직하게는 인간을 지칭한다.

본원에서 사용되는 용어 “예방적 유효량”은 T1D의 발병, 재발 또는 하나 이상의 증상의 발병을 지연 또는 예방하기에 충분한 테플리주맙의 양을 지칭한다. 일부 구체예들에서, 예방적 유효량은 바람직하게는 대상자의 T1D 발병을 적어도 20% 만큼, 적어도 25% 만큼, 적어도 30% 만큼, 적어도 35% 만큼, 적어도 40% 만큼, 적어도 45% 만큼, 적어도 50% 만큼, 적어도 55% 만큼, 적어도 60% 만큼, 적어도 65% 만큼, 적어도 70% 만큼, 적어도 75% 만큼, 적어도 80% 만큼, 적어도 85% 만큼, 적어도 90% 만큼, 적어도 95% 만큼 지연시키는 테플리주맙의 양을 지칭한다.

본 발명의 다양한 양상들을 아래에서 더욱 상세하게 설명한다. 본 출원 전반에 걸쳐 추가 정의들이 제시되어 있다.

항-CD3 항체 및 약학 조성물

용어 “항-CD3 항체” 및 “CD3에 결합하는 항체”는 항체가 CD3을 표적화함에 있어서 예방제, 진단제 및/또는 치료제로 유용하기에 충분한 친화도로 분화 클러스터 3(CD3)에 결합할 수 있는 항체 또는 항체 단편을 지칭한다. 한 구체예에서, 관련되지 않은 비-CD3 단백질에 대한 항-CD3 항체의 결합 정도는, 예를 들어, 방사성면역검정(RIA)으로 측정시 CD3에 대한 항체의 결합의 약 10% 미만이다. 특정 구체예들에서, CD3에 결합하는 항체는 < 1 μΜ, < 100 nM, < 10 nM, < 1 nM, < 0.1 nM, < 0.01 nM, 또는 < 0.001 nM (예를 들어 10^-8 M 또는 미만, 예를 들어 10^-8 M 내지 10^-13 M, 예를 들어, 10^-9 M 내지 10^-13 M)의 해리 상수 (Kd)를 가진다. 특정 구체예들에서, 항-CD3 항체는 상이한 종들의 CD3 사이에 보존된 CD3의 에피토프에 결합한다.

한 구체예에서, 항-CD3 항체는 ChAglyCD3 (오텔릭시주맙)일 수 있다. 오텔릭시주맙은 인간화 Fc 비결합성 항-CD3로, 벨기에 당뇨병 등록소 (BDR)의 2상 연구에서 초기에 평가된 후 Tolerx가 개발했으며, 그 후 GSK와 협력하여 3상 DEFEND 새로운 발병 T1D 시험들 (NCT00678886, NCT01123083, NCT00763451)을 수행하였다. 오텔릭시주맙은 8일에 걸쳐 주입으로 IV 투여된다. 예를 들어, Wiczling et al., J. Clin. Pharmacol. 50 (5) (May 2010) 494-506; Keymeulen et al., N Engl J Med. 2005;352:2598-608; Keymeulen et al., Diabetologia. 2010;53:614-23; Hagopian et al., Diabetes. 2013;62:3901-8; Aronson et al., Diabetes Care. 2014;37:2746-54; Ambery et al., Diabet Med. 2014;31:399-402; Bolt et al., Eur. J. Immunol. lYY3. 23: 403-411; Vlasakakis et al., Br J Clin Pharmacol (2019) 85 704-714; Guglielmi et al, Expert Opinion on Biological Therapy, 16:6, 841-846; Keymeulen et al., N Engl J Med 2005;352:2598-608; Keymeulen et al., BLOOD 2010, VOL 115, No. 6; Sprangers et al., Immunotherapy (2011) 3(11), 1303-1316; Daifotis et al., Clinical Immunology (2013) 149, 268-278을 참조하며; 이들 문헌 모두는 본원에 참고로 포함된다.

또 다른 구체예에서, 항-CD3 항체는 비실리주맙 (HuM291로도 불림; Nuvion) 일 수 있다. 비실리주맙은 돌연변이된 IgG2 아이소형, Fcγ수용체에 대한 결합 부족, 활성화된 T 세포에서 선택적으로 세포자멸사를 유도하는 능력을 특징으로 하는 인간화 항-CD3 단클론 항체이다. 이는 이식편 대 숙주 질환(NCT00720629; NCT00032279) 및 궤양성 대장염(NCT00267306) 및 크론병(NCT00267709) 환자에서 평가되었다. 예를 들어, Sandborn et al., Gut 59 (11) (2010년 11월) 1485-1492를 참조하며, 이 문헌은 본원에 참고로 포함된다.

또 다른 구체예에서, 항-CD3 항체는 NASH 및 T2D(NCT03291249)에서 Tiziana Life Sciences, PLC에 의해 개발되고 있는 완전 인간 항-CD3 단일클론 항체인 포랄루맙일 수 있다. 예를 들어, Ogura et al., Clin Immunol. 2017;183:240-246; Ishikawa et al., Diabetes. 2007;56(8):2103-9; Wu et al., J Immunol. 2010;185(6):3401-7를 참조하며; 이들 문헌 모두는 본원에 참고로 포함된다.

또 다른 구체예에서, 항-CD3 항체는 테플리주맙 일 수 있다. hOKT3yl(Ala-Ala) (위치 234 및 235에 알라닌 함유)로도 알려진 테플리주맙은 췌장의 섬의 인슐린 생성 베타 세포의 파괴를 매개하는 T 림프구의 기능을 변경하도록 설계된 항-CD3 항체이다. 테플리주맙은 성숙한 T 세포에 발현된 CD3들 사슬의 에피토프에 결합하고 이렇게 함으로써 이들 세포의 기능을 변화시킨다. 테플리주맙의 서열 및 조성은 미국 특허 제 6,491,916; 8,663,634; 및 9,056,906에 개시되어 있으며, 이들 각각은 그 전문이 본원에 참고로 포함된다. 경쇄 및 중쇄의 전체 서열은 아래 제시되어 있다. 굵게 표시된 부분은 상보성 결정 영역이다.

테플리주맙 경쇄 (서열 번호: 1):

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASSSVSYMNWYQQTPGKAPKRWIYDTSKLASGVPSRFSGSGSGTDYTFTISSLQPEDIATYYCQQWSSNPFTFGQGTKLQITRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

테플리주맙 중쇄 (서열 번호: 2):

QVQLVQSGGGVVQPGRSLRLSCKASGYTFTRYTMHWVRQAPGKGLEWIGYINPSRGYTNYNQKVKDRFTISRDNSKNTAFLQMDSLRPEDTGVYFCARYYDDHYCLDYWGQGTPVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK

일부 구체예들에서, 본원은 약학 조성물을 제공한다. 이러한 조성물은 예방적 유효량의 항-CD3 항체, 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함한다. 특정 구체예에서, 용어 “약학적으로 허용되는”은 동물에서, 보다 특히 인간에서의 사용에 대해 연방 또는 주 정부의 규제 기관에 의해 승인되거나 미국 약전 또는 일반적으로 인정되는 기타 약전에 열거됨을 의미한다. 용어 “담체”는 치료제와 함께 투여되는 희석제, 보조제 (예를 들어, 프로인트 보조제 (완전 및 불완전)), 부형제 또는 비히클을 지칭한다. 이러한 약학적 담체는 물과 같은 멸균 액체 및 석유, 동물성, 식물성 또는 합성 유래를 비롯한 오일, 예를 들어 땅콩유, 대두유, 광유, 참기름 등일 수 있다. 물은 약학 조성물이 정맥내 투여될 때 바람직한 담체이다. 식염수, 덱스트로스 및 글리세롤 수용액 또한, 특히 주사용액의 경우 액체 담체로 사용할 수 있다. 적합한 약학적 부형제는 전분, 글루코스, 락토스, 수크로스, 젤라틴, 맥아, 쌀, 밀가루, 백악, 실리카겔, 스테아르산나트륨, 모노스테아르산글리세롤, 탈크, 염화나트륨, 건조 탈지분유, 글리세롤, 프로필렌, 글리콜, 물, 에탄올 등을 포함한다 (예를 들어, Handbook of Pharmaceutical Excipients, Arthur H. Kibbe (ed., 2000 참조, 이는 본원에 그 전문이 참고로 포함됨), Am. Pharmaceutical Association, Washington, D.C).

원하는 경우, 조성물은 또한 소량의 습윤제 또는 유화제, 또는 pH 완충제를 함유할 수 있다. 이러한 조성물은 용액, 현탁액, 에멀젼, 정제, 환제, 캡슐, 분말, 지속 방출형 제제 등의 형태를 취할 수 있다. 경구 제형은 약학 등급의 만니톨, 락토스, 전분, 스테아르산마그네슘, 사카린나트륨, 셀룰로스, 탄산마그네슘 등과 같은 표준 담체를 포함할 수 있다. 적합한 약학적 담체의 예는 E. W. Martin의 “Remington's Pharmaceutical Sciences”에 기재되어 있다. 이러한 조성물은 환자에게 적절히 투여하기 위한 형태를 제공하기 위해 적절한 양의 담체와 함께, 바람직하게는 예방적 또는 치료적 유효량의 예방제 또는 치료제를 정제된 형태로 함유할 것이다. 제형은 투여 방식에 적합해야 한다. 바람직한 구체예에서, 약학 조성물은 멸균되고 대상자, 바람직하게는 동물 대상자, 보다 바람직하게는 포유동물 대상자, 가장 바람직하게는 인간 대상자에 투여하기에 적합한 형태이다.

특정 구체예에서, 치료를 필요로 하는 영역에 국소적으로 약학 조성물을 투여하는 것이 바람직할 수 있고; 이것은 예를 들어 국소 주입, 주사, 또는 임플란트에 의해 달성될 수 있지만 이에 제한되는 것은 아니며, 상기 임플란트는 막, 가령, 실라스틱 막, 또는 섬유를 비롯한, 다공성, 비-다공성, 또는 젤라틴 물질이다. 바람직하게는 항-CD3 항체를 투여할 때 항-CD3 항체가 흡수하지 않는 물질의 사용에 주의를 기울여야 한다.

또 다른 구체예에서, 조성물은 소포, 특히 리포솜으로 전달될 수 있다 (Langer, Science 249:1527-1533 (1990); Treat et al., in Liposomes in the Therapy of Infectious Disease and Cancer, Lopez-Berestein and Fidler (eds.), Liss, New York, pp. 353-365 (1989); Lopez-Berestein, ibid., pp. 317-327; 일반적으로 ibid를 참조).

또 다른 구체예에서, 조성물은 제어 방출 또는 지속 방출 시스템으로 전달될 수 있다. 한 구체예에서, 제어 또는 지속 방출을 달성하기 위해 펌프가 사용될 수 있다 (상기 Langer; Sefton, 1987, CRC Crit. Ref. Biomed. Eng. 14:20; Buchwald et al., 1980, Surgery 88:507; Saudek et al., 1989, N. Engl. J. Med. 321:574 참조). 또 다른 구체예에서, 중합체 물질을 사용하여 본 발명의 항체 또는 이의 단편의 제어 또는 지속 방출을 구현할 수 있다 (예를 들어, Medical Applications of Controlled Release, Langer and Wise (eds.), CRC Pres., Boca Raton, Fla. (1974); Controlled Drug Bioavailability, Drug Product Design and Performance, Smolen and Ball (eds.), Wiley, New York (1984); Ranger and Peppas, 1983, J., Macromol. Sci. Rev. Macromol. Chem. 23:61; 또한 Levy et al., 1985, Science 228:190; During et al., 1989, Ann. Neurol. 25:351; Howard et al., 1989, J. Neurosurg. 71:105 참조); 미국 특허 제 5,679,377; 미국 특허 제 5,916,597; 미국 특허 제 5,912,015; 미국 특허 제 5,989,463; 미국 특허 제 5,128,326; PCT 특허출원 공개공보 WO 99/15154; 및 PCT 특허출원 공개공보 WO 99/20253. 지속 방출 제형에 사용되는 중합체의 예에는 폴리(2-하이드록시 에틸 메타크릴레이트), 폴리(메틸 메타크릴레이트), 폴리(아크릴산), 폴리(에틸렌-코-비닐 아세테이트), 폴리(메타크릴 산), 폴리글리콜라이드(PLG), 폴리무수물, 폴리(N-비닐 피롤리돈), 폴리(비닐 알코올), 폴리아크릴아미드, 폴리(에틸렌 글리콜), 폴리락티드(PLA), 폴리(락티드-코-글리콜라이드)(PLGA) 및 폴리오르소에스터가 포함되나 이에 제한되는 것은 아니다. 바람직한 구체예에서, 지속 방출 제형에 사용되는 중합체는 불활성이고, 침출성 불순물이 없고, 저장 시 안정하고, 멸균이며, 생분해성이다. 또 다른 구체예에서, 제어 또는 지속 방출 시스템은 치료 표적, 즉 폐에 근접하여 배치될 수 있으며, 따라서 전신 투여량의 일부만을 필요로 한다 (예를 들어, 상기Goodson, in Medical Applications of Controlled Release, vol. 2, pp. 115-138 (1984) 참조).

제어 방출 시스템은 Langer (1990, Science 249:1527-1533)에 의한 리뷰에 논의되어 있다. 당업자에게 공지된 임의의 기술을 사용하여 본 발명의 하나 이상의 항체 또는 이의 단편을 포함하는 지속 방출 제형을 생성할 수 있다. 예를 들어, 미국 특허 제 4,526,938; PCT 공개공보 WO 91/05548; PCT 공개공보 WO 96/20698; Ning et al., 1996, Radiotherapy & Oncology 39:179-189; Song et al., 1995, PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology 50:372-397; Cleek et al., 1997, Pro. Int'l. Symp. Control. Rel. Bioact. Mater. 24:853-854; 및 Lam et al., 1997, Proc. Int'l. Symp. Control Rel. Bioact. Mater. 24:759-760을 참조하며, 이들 문헌 각각은 본원에 그 전문이 참고로 포함된다.

약학 조성물은 그 의도한 투여 경로에 적합하도록 제형화될 수 있다. 투여 경로의 예는 비경구, 예를 들어 정맥내, 피내, 피하, 경구, 비강내 (예를 들어, 흡입), 경피(국소), 경점막 및 직장 투여를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다. 특정 구체예에서, 조성물은 인간에 대한 정맥내, 피하, 근육내, 경구, 비강내 또는 국소 투여에 적합한 제약 조성물로서 관례적인 절차에 따라 제형화된다. 바람직한 구체예에서, 제약 조성물은 인간에게 피하 투여하기 위한 관례적인 절차에 따라 제형화된다. 전형적으로, 정맥내 투여용 조성물은 멸균 등장성 수성 완충액 중의 용액이다. 필요한 경우, 조성물은 주사 부위의 통증을 완화하기 위해 가용화제 및 국소 마취제, 가령, 리그노캄네를 또한 포함할 수 있다.

조성물은 주사, 예를 들어, 볼루스 주사 또는 연속 주입에 의한 비경구 투여용으로 제형화될 수 있다. 주사용 제제는 방부제가 첨가된 단위 투여 형태, 예를 들어 앰플 또는 다중 투여 용기로 제공될 수 있다. 조성물은 유성 또는 수성 비히클 중의 현탁액, 용액 또는 에멀젼과 같은 형태를 취할 수 있고, 현탁제, 안정화제 및/또는 분산제와 같은 제형화제를 함유할 수 있다. 대안적으로, 활성 성분은 사용 전에 적합한 비히클, 예를 들어 멸균 발열물질 제거수와 함께 구성하기 위한 분말 형태일 수 있다.

특정 구체예에서, 본 발명은 항-CD3 항체를 수 시간 또는 수일의 기간에 걸쳐 연속적으로 (예를 들어, 펌프 또는 이러한 전달을 위한 다른 장치와 결합하여), 예를 들어 1시간, 2시간, 3시간, 4시간, 6시간, 8시간, 10시간, 12시간, 16 시간, 20 시간, 24 시간, 30 시간, 36 시간, 4 일, 5 일, 7 일, 10 일 또는 14 일의 기간에 걸쳐 투여할 수 있게 하는 투여 형태를 제공한다. 다른 특정 구체예들에서, 본 발명은 24 시간, 30 시간, 36 시간, 4 일, 5 일, 7 일, 10 일 또는 14 일의 기간에 걸쳐 연속적으로 증가하는 용량, 예를 들어, 51 μg/m²/일에서 826 μg/m²/일로 증가하는 용량의 투여를 가능하게 하는 투여 형태를 제공한다.

조성물은 중성 또는 염 형태로 제형화될 수 있다. 약학적으로 허용되는 염은 염산, 인산, 아세트산, 옥살산, 타르타르산 등으로부터 유래된 것과 같은 음이온으로 형성된 염, 및 나트륨, 칼륨, 암모늄, 칼슘, 수산화 제2철, 아이소프로필아민, 트리에틸아민, 2-에틸아미노에탄올, 히스티딘, 프로카인 등으로부터 유래된 것과 같은 양이온으로 형성된 염을 포함한다.

일반적으로, 본원에 개시된 조성물의 성분들은 개별적으로 또는 단위 투여 형태로 함께 혼합되어, 예를 들어 활성제의 양을 표시하는 앰플 또는 사셰와 같은 밀폐 용기에 건조 동결건조 분말 또는 물이 없는 농축물로서 함께 공급된다. 조성물이 주입에 의해 투여되는 경우, 멸균 약학적 등급의 물 또는 식염수가 들어 있는 주입 병과 함께 분배될 수 있다. 조성물이 주사에 의해 투여되는 경우, 투여 전에 성분들이 혼합될 수 있도록 주사용 멸균수 또는 식염수의 앰플이 제공될 수 있다.

특히, 본 발명은 항-CD3 항체 또는 이의 약학 조성물이 제제의 양을 표시하는 앰플 또는 사셰와 같은 밀폐 용기에 포장될 수 있음을 제공한다. 한 구체예에서, 항-CD3 항체, 또는 이의 약학 조성물은 밀폐 용기에 건조 멸균 동결건조 분말 또는 물이 없는 농축물로 공급되며, 예를 들어 물 또는 식염수를 사용하여 대상자에 투여하기에 적절한 농도로 재구성될 수 있다. 바람직하게는, 항-CD3 항체 또는 이의 약학 조성물은 밀폐 용기에 건조 멸균 동결건조 분말로서 적어도 5 mg, 보다 바람직하게는 적어도 10 mg, 적어도 15 mg, 적어도 25 mg, 적어도 35 mg, 적어도 45 mg, 적어도 50 mg, 적어도 75 mg, 또는 적어도 100 mg의 단위 투여량으로 공급된다. 본 발명의 동결건조된 예방제 또는 약학 조성물은 최초 용기에 2~8℃에서 보관해야 하며 본 발명의 예방제 또는 치료제 또는 약학 조성물은 재구성 후 1주 이내, 바람직하게는 5일 이내, 72시간 이내, 48시간 이내, 24시간 이내, 12시간 이내, 6시간 이내, 5시간 이내, 3시간 이내, 또는 1시간 이내에 투여되어야 한다. 대안적인 구체예에서, 약학 조성물은 제제의 양 및 농도를 나타내는 밀폐 용기에 액체 형태로 공급된다. 바람직하게는, 투여된 조성물의 액체 형태는 적어도 0.25 mg/ml, 보다 바람직하게는 적어도 0.5 mg/ml, 적어도 1 mg/ml, 적어도 2.5 mg/ml, 적어도 5 mg/ml, 적어도 8 mg/ml, 적어도 10 mg/ml, 적어도 15 mg/kg, 적어도 25 mg/ml, 적어도 50 mg/ml, 적어도 75 mg/ml 또는 적어도 100 mg/ ml의 밀폐 용기에 공급된다. 액체 형태는 최초 용기에 넣어 2º에서 8º사이에서 보관해야 한다.

특정 구체예에서, 본원은 본 발명의 조성물이 항-CD3 항체의 양을 표시하는 앰플 또는 사셰와 같은 밀폐 용기에 포장됨을 제공한다.

조성물은 원하는 경우 활성 성분을 함유하는 하나 이상의 단위 투여 형태를 함유할 수 있는 팩 또는 디스펜서 장치로 제공될 수 있다. 팩은 예를 들어, 금속 또는 플라스틱 호일, 예를 들어, 블리스터 팩을 포함할 수 있다.

T1D와 관련된 하나 이상의 증상의 예방 또는 개선에 효과적인 본 발명의 조성물의 양은 표준 임상 기술에 의해 결정될 수 있다. 제형에 사용되는 정확한 용량 역시 투여 경로 및 상태의 심각성에 따라 달라지며, 의사의 판단과 환자 개개인의 상황에 따라 결정되어야 한다. 체외 또는 동물 모델 테스트 시스템에서 유래한 용량-반응 곡선으로부터 유효 투여량을 외삽할 수 있다.

방법 및 사용

특정 구체예들에서, 본 발명은 제1형 당뇨병이 발병할 소인이 있는 또는 제1형 당뇨병의 전임상 단계를 갖고 있지만 미국 당뇨병 협회 또는 당뇨병 학회의 면역학에 의해 확립된 진단 기준을 충족하지 않는 개체들에 대한 항-인간 CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙의 투여를 포함하여, 제1형 당뇨병 발병을 예방 또는 지연시키고 및/또는 이러한 환자들에 대한 인슐린 투여의 필요성을 예방 또는 지연시킨다. 특정 구체예들에서, 소인이 있는 대상자를 식별하기 위한 고-위험 요인들에는 제1형 당뇨병 진단을 받은 1촌 또는 2촌 친척, 공복 혈당 수준 장애 (예를 들어, (8시간 동안 음식 없이) 공복 후 혈당 수준이 적어도 한 번 100-125 mg/dl로 측정됨), 75 g OGTT에 대한 반응에서 내당능 장애 (예를 들어, 75 g OGTT에 대한 반응으로 2시간 혈당 수준이 적어도 한 번 140-199 mg/dl로 측정됨), 백인의 HLA 유형 DR3, DR4 또는 DR7, 아프리카계 사람의 HLA 유형 DR3, DR4, 일본계 사람의 HLA 유형 DR3, DR4 또는 DR9, 바이러스 (예를 들어, 콕사키 B 바이러스, 엔테로바이러스, 아데노바이러스, 풍진, 거대세포바이러스, 엡스타인-바 바이러스))에 대한 노출, 적어도 하나의 다른 자가면역 질환 (예를 들어, 갑상선 질환, 체강 질환)에 대해 기술적으로 허용되는 기준에 따른 양성 진단, 및/또는 혈청 또는 기타 조직에서 자가항체, 특히 ICA 및 제1형 당뇨병 관련 자가항체의 검출. 특정 구체예들에서, 제1형 당뇨병이 발병할 소인이 있는 것으로 식별된 대상자는 본원에 기재된 및/또는 당업계에 공지된 위험 요인들 중 적어도 하나를 갖는다. 본 발명은 또한 제1형 당뇨병의 발병 소인이 있는 대상자의 식별을 포함하며, 이때 상기 대상자는 본원에 개시된 또는 당업계에 공지된 위험 요인들 중 2개 이상, 3개 이상, 4개 이상, 또는 5개 초과의 조합을 나타낸다.

제1형 당뇨병과 관련되거나 제1형 당뇨병 발병의 소인이 있는 혈청 자가항체는 섬세포 자가항체 (예를 들어, 항-ICA512 자가항체), 글루탐산 데카르바밀라제 자가항체 (예를 들어, 항-GAD65 자가항체), IA2 항체, ZnT8 항체 및/또는 항-인슐린 자가항체이다. 따라서, 본 구체예에 따른 특정 실시예에서, 본 발명은 제1형 당뇨병 발병 소인과 관련되거나 초기 제1형 당뇨병과 관련된 검출가능한 자가항체 (예를 들어, 항-IA2, 항-ICA512, 항-GAD 또는 항-인슐린 자가항체)를 이용한 개체의 치료를 포함하며, 이때 상기 개체는 제1형 당뇨병을 진단받은 적이 없으며 및/또는 제1형 당뇨병의 1촌 또는 2촌 친척이다. 특정 구체예들에서, 자가항체들의 존재는 ELISA, 전기화학발광 (ECL), 방사선검정 (예를 들어, Yu et al., 1996, J. Clin. Endocrinol. Metab. 81:4264-4267), 응집반응 PCR (Tsai et al, ACS Central Science 2016 2 (3), 139-147)에 의해 또는 본원에 기재된 또는 당업자에게 공지된 항체의 면역특이적 검출을 위한 임의의 다른 방법에 의해 수행될 수 있다.

치료 전, 치료 중 및 치료 후 β세포 기능은 본원에 기재된 방법 또는 당업자에게 공지된 임의의 방법에 의해 평가될 수 있다. 예를 들어, 당뇨병 관리 및 합병증 시험 (DCCT) 연구 그룹은 혈당 조절 평가를 위한 표준으로 당화 헤모글로빈(HA1 및 HA1c) 백분율 모니터링을 설정했다 (DCCT, 1993, N. Engl. J. Med. 329:977-986). 대안적으로, 일일 인슐린 요구량, C-펩티드 수준/반응, 저혈당 에피소드 및/또는 FPIR의 특성화는 β세포 기능의 마커로 또는 치료 지수를 설정하기 위해 사용될 수 있다 (각각 Keymeulen et al., 2005, N. Engl. J. Med. 352:2598-2608; Herold et al., 2005, Diabetes 54:1763-1769; 미국 특허출원 공개공보 제 2004/0038867 A1; 및 Greenbaum et al., 2001, Diabetes 50:470-476 참조). 예를 들어, FPIR은 섬 세포 항체 등록 사용자 연구 프로토콜에 따라 수행되는 IGTT 후 1분과 3분에 인슐린 값의 합으로 계산된다 (예를 들어, Bingley et al., 1996, Diabetes 45:1720-1728 and McCulloch et al., 1993, Diabetes Care 16:911-915 참조).

일부 구체예들에서, T1D 발병 소인이 있는 개체들은 T1D 환자의 친척인 비당뇨병 환자일 수 있다. 특정 구체예에서, 비-당뇨병 대상자는 섬 세포 항체 (ICA), 인슐린 자가항체 (IAA), 및 글루탐산 탈탄산효소 (GAD), 티로신 포스파타제 (IA-2/ICA512) 또는 ZnT8에 대한 항체로부터 선택된 2개 이상의 당뇨병-관련 자가항체를 가진다.

일부 구체예들에서, 테플리주맙과 같은 항-CD3 항체에 반응할 비-당뇨병 대상자는 ZnT8에 대한 항체를 가지고 있지 않다. 특정 구체예들에서, 이러한 비-당뇨병 대상자는 HLA-DR4+이고 HLA-DR3+은 아니다. 일부 구체예들에서, 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙에 반응하게 되는 이러한 비당뇨병 대상자는 투여 후 (예를 들어, 1개월 후, 2개월 후, 3개월 후 또는 그 이상 또는 그 이하) 말초 혈액 단핵 세포에서 TIGIT+KLRG1+CD8+ T-세포의 백분율 (또는 상대량)의 증가를 (예를 들어, 유세포 분석에 의해) 나타낸다.

다양한 구체예에서, 예방적 유효량은 항-CD3 항체, 예를 들어, 10-1000 마이크로그램/미터 제곱 (μg/m²)의 테플리주맙을 피하 (SC) 주사 또는 정맥내 (IV) 주입하는 10 내지 14일 과정을 포함한다. 한 예에서, 예방적 유효량은 0-3일차에 각각 51 μg/m², 103 μg/m², 207 μg/m², 및 413 μg/m², 그리고 각 4-13일차에 826 μg/m²의 1회 용량의 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙을 IV 주입하는 14-일 과정을 포함한다. 특정 구체예에서, 예방 유효량은 T1D의 임상 진단까지의 시간 중앙값을 적어도 50%, 적어도 80%, 또는 적어도 90%, 적어도 12개월, 적어도 18개월, 적어도 24개월, 적어도 36개월, 적어도 48개월, 또는 적어도 60개월, 또는 그 이상 지연시킨다.

특정 구체예들에서, 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙 투여 과정은 2 개월, 4 개월, 6 개월, 8 개월, 9 개월, 10 개월, 12 개월, 15 개월, 18 개월, 24 개월, 30 개월, 또는 36 개월 간격으로 반복될 수 있다. 특정 구체예에서, 테플리주맙과 같은 항-CD3 항체를 사용한 치료의 효능은 이전 치료 후 2개월, 4개월, 6개월, 9개월, 12개월, 15개월, 18개월, 24개월, 30개월 또는 36개월에 본원에 기재된 바와 같이 또는 당업계에 공지된 바와 같이 결정된다.

또 다른 구체예에서, 대상자는 T1D의 하나 이상의 증상들을 예방, 치료 또는 완화시키기 위해 대략 0.5-50 μg/kg, 대략 0.5-40 μg/kg, 대략 0.5-30 μg/kg, 대략 0.5-20 μg/kg, 대략 0.5-15 μg/kg, 대략 0.5-10 μg/kg, 대략 0.5-5 μg/kg, 대략 1-5 μg/kg, 대략 1-10 μg/kg, 대략 20-40 μg/kg, 대략 20-30 μg/kg, 대략 22-28 μg/kg 또는 대략 25-26 μg/kg 단위 용량의 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙을 1회 이상 투여받는다. 또 다른 구체예에서, 대상자는 T1D의 하나 이상의 증상들을 예방, 치료 또는 완화시키기 위해 약 200 μg/kg, 178 μg/kg, 180 μg/kg, 128 μg/kg, 100 μg/kg, 95 μg/kg, 90 μg/kg, 85 μg/kg, 80 μg/kg, 75 μg/kg, 70 μg/kg, 65 μg/kg, 60 μg/kg, 55 μg/kg, 50 μg/kg, 45 μg/kg, 40 μg/kg, 35 μg/kg, 30 μg/kg, 26 μg/kg, 25 μg/kg, 20 μg/kg, 15 μg/kg, 13 μg/kg, 10 μg/kg, 6.5 μg/kg, 5 μg/kg, 3.2 μg/kg, 3 μg/kg, 2.5 μg/kg, 2 μg/kg, 1.6 μg/kg, 1.5 μg/kg, 1 μg/kg, 0.5 μg/kg, 0.25 μg/kg, 0.1 μg/kg, 또는 0.05 μg/kg 단위 용량의 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙을 1회 이상 투여받는다.

특정 구체예들에서, 대상자는 약 5-1200 μg/m2, 바람직하게는, 51-826 μg/m2 용량의 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙을 1회 이상 투여받는다. 또 다른 구체예에서, 대상자는 T1D를 예방, 치료, 이의 진행을 저속화, 이의 발병을 지연, 또는 이의 하나 이상의 증상들을 완화시키기 위해 1200 μg/m², 1150 μg/m2, 1100 μg/m2, 1050 μg/m2, 1000 μg/m2, 950 μg/m2, 900 μg/m2, 850 μg/m2, 800 μg/m2, 750 μg/m2, 700 μg/m2, 650 μg/m2, 600 μg/m2, 550 μg/m2, 500 μg/m2, 450 μg/m2, 400 μg/m2, 350 μg/m2, 300 μg/m2, 250 μg/m2, 200 μg/m2, 150 μg/m2, 100 μg/m2, 50 μg/m2, 40 μg/m2, 30 μg/m2, 20 μg/m2, 15 μg/m2, 10 μg/m2, 또는 5 μg/m2 단위 용량의 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙을 1회 이상 투여받는다.

또 다른 구체예에서, 대상자는 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙의 예방적 유효량을 하나 이상의 용량으로 포함하는 치료 요법을 투여받으며, 이때 치료 과정은 2 일, 3 일, 4 일, 5 일, 6 일, 7 일, 8 일, 9 일, 10 일, 11 일, 12 일, 13 일 또는 14 일에 걸쳐 투여된다. 한 구체예에서, 치료 요법은 예방적 유효량 용량을 매일, 2일마다, 3일마다 또는 4일마다 투여하는 것을 포함한다. 특정 구체예들에서, 치료 요법은 주어진 주의 월요일, 화요일, 수요일, 목요일에 예방적 유효량 용량을 투여하고 14회 용량, 13회 용량, 12회 용량, 11회 용량, 10회 용량, 9회 용량, 또는 8회 용량이 투여될 때까지 까지 같은 주의 금요일, 토요일 및 일요일에 예방적 유효량 용량을 투여하지 않는 것을 포함한다. 특정 구체예에서 투여되는 용량은 해당 요법의 각 일차마다 동일하다.

특정 구체예들에서, 대상자는 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙의 예방적 유효량 용량을 하나 이상 포함하는 치료 요법을 투여받으며, 이때 예방적 유효량은 200 μg/kg/일, 175 μg/kg/일, 150 μg/kg/일, 125 μg/kg/일, 100 μg/kg/일, 95 μg/kg/일, 90 μg/kg/일, 85 μg/kg/일, 80 μg/kg/일, 75 μg/kg/일, 70 μg/kg/일, 65 μg/kg/일, 60 μg/kg/일, 55 μg/kg/일, 50 μg/kg/일, 45 μg/kg/일, 40 μg/kg/일, 35 μg/kg/일, 30 μg/kg/일, 26 μg/kg/일, 25 μg/kg/일, 20 μg/kg/일, 15 μg/kg/일, 13 μg/kg/일, 10 μg/kg/일, 6.5 μg/kg/일, 5 μg/kg/일, 3.2 μg/kg/일, 3 μg/kg/일, 2.5 μg/kg/일, 2 μg/kg/일, 1.6 μg/kg/일, 1.5 μg/kg/일, 1 μg/kg/일, 0.5 μg/kg/일, 0.25 μg/kg/일, 0.1 μg/kg/일, 또는 0.05 μg/kg/일이고; 및/또는 예방적 유효량은 1200 μg/m2/일, 1150 μg/m2/일, 1100 μg/m2/일, 1050 μg/m2/일, 1000 μg/m2/일, 950 μg/m2/일, 900 μg/m2/일, 850 μg/m2/일, 800 μg/m2/일, 750 μg/m2/일, 700 μg/m2/일, 650 μg/m2/일, 600 μg/m2/일, 550 μg/m2/일, 500 μg/m2/일, 450 μg/m2/일, 400 μg/m2/일, 350 μg/m2/일, 300 μg/m2/일, 250 μg/m2 day, 200 μg/m2/일, 150 μg/m2/일, 100 μg/m2/일, 50 μg/m2/일, 40 μg/m2/일, 30 μg/m2/일, 20 μg/m2/일, 15 μg/m2/일, 10 μg/m2/일, 또는 5 μg/m2/일이다.

또 다른 구체예에서, 제1형 당뇨병의 하나 이상의 증상들을 예방, 치료 또는 완화시키기 위해 1200 μg/m2 또는 미만, 1150 μg/m2 또는 미만, 1100 μg/m2 또는 미만, 1050 μg/m2 또는 미만, 1000 μg/m2 또는 미만, 950 μg/m2 또는 미만, 900 μg/m2 또는 미만, 850 μg/m2 또는 미만, 800 μg/m2 또는 미만, 750 μg/m2 또는 미만, 700 μg/m2 또는 미만, 650 μg/m2 또는 미만, 600 μg/m2 또는 미만, 550 μg/m2 또는 미만, 500 μg/m2 또는 미만, 450 μg/m2 또는 미만, 400 μg/m2 또는 미만, 350 μg/m2 또는 미만, 300 μg/m2 또는 미만, 250 μg/m2 또는 미만, 200 μg/m2 또는 미만, 150 μg/m2 또는 미만, 100 μg/m2 또는 미만, 50 μg/m2 또는 미만, 40 μg/m2 또는 미만, 30 μg/m2 또는 미만, 20 μg/m2 또는 미만, 15 μg/m2 또는 미만, 10 μg/m2 또는 미만, 또는 5 μg/m2 또는 미만의 정맥내 용량의 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙은 약 24 시간, 약 22 시간, 약 20 시간, 약 18 시간, 약 16 시간, 약 14 시간, 약 12 시간, 약 10 시간, 약 8 시간, 약 6 시간, 약 4 시간, 약 2 시간, 약 1.5 시간, 약 1 시간, 약 50 분, 약 40 분, 약 30 분, 약 20 분, 약 10 분, 약 5 분, 약 2 분, 약 1 분, 약 30 초 또는 약 10 초에 걸쳐 투여된다. 요법 기간에 걸친 총 투여량은 바람직하게는 총 9000 μg/m2, 8000 μg/m2, 7000 μg/m2, 6000 μg/m2, and may be less than 5000 μg/m2, 4000 μg/m2, 3000 μg/m2, 2000 μg/m2, 또는 1000 μg/m2 미만이다. 특정 구체예들에서, 해당 요법에서 투여되는 총 투여량은 100 μg/m2 내지 200 μg/m2, 100 μg/m2 내지 500 μg/m2, 100 μg/m2 내지 1000 μg/m2, 또는 500 μg/m2 내지 1000 μg/m2이다.

바람직한 구체예들에서, 투여량은 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙의 일일 예방적 유효량이 달성될 때까지 치료 요법 투약의 처음 1/4, 처음 1/2, 또는 처음 2/3일에 걸쳐 (예를 들어, 1일 1회 투약의 10, 12, 14, 16, 18 또는 20일 요법의 첫 2, 3, 4, 5, 또는 6일에 걸쳐) 증량된다. 특정 구체예들에서, 대상자는 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙의 예방적 유효량의 1회 이상 투약을 포함하는 치료 요법을 투여받으며, 이때 예방적 유효량은 치료가 진행됨에 따라, 예를 들어, 매일 0.01 μg/kg, 0.02 μg/kg, 0.04 μg/kg, 0.05 μg/kg, 0.06 μg/kg, 0.08 μg/kg, 0.1 μg/kg, 0.2 μg/kg, 0.25 μg/kg, 0.5 μg/kg, 0.75 μg/kg, 1 μg/kg, 1.5 μg/kg, 2 μg/kg, 4 μg/kg, 5 μg/kg, 10 μg/kg, 15 μg/kg, 20 μg/kg, 25 μg/kg, 30 μg/kg, 35 μg/kg, 40 μg/kg, 45 μg/kg, 50 μg/kg, 55 μg/kg, 60 μg/kg, 65 μg/kg, 70 μg/kg, 75 μg/kg, 80 μg/kg, 85 μg/kg, 90 μg/kg, 95 μg/kg, 100 μg/kg, 또는 125 μg/kg만큼 증가되고; 또는 예를 들어, 매일 1 μg/m2, 5 μg/m2, 10 μg/m2, 15 μg/m2, 20 μg/m2, 30 μg/m2, 40 μg/m2, 50 μg/m2, 60 μg/m2, 70 μg/m2, 80 μg/m2, 90 μg/m2, 100 μg/m2, 150 μg/m2, 200 μg/m2, 250 μg/m2, 300 μg/m2, 350 μg/m2, 400 μg/m2, 450 μg/m2, 500 μg/m2, 550 μg/m2, 600 μg/m2, 또는 650 μg/m2 만큼 증가된다. 특정 구체예들에서, 대상자는 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙의 예방적 유효량의 1회 이상 투약을 포함하는 치료 요법을 투여받으며, 이때 예방적 유효량은 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙의 일일 예방적 유효량이 달성될 때까지 1.25 인자, 1.5 인자, 2 인자, 2.25 인자, 2.5 인자, 또는 5 인자 만큼 증가된다.

한 특정 구체예에서, 대상자는 T1D의 하나 이상의 증상들을 예방, 치료 또는 완화하기 위해서 200 μg/kg 또는 미만, 바람직하게는 175 μg/kg 또는 미만, 150 μg/kg 또는 미만, 125 μg/kg 또는 미만, 100 μg/kg 또는 미만, 95 μg/kg 또는 미만, 90 μg/kg 또는 미만, 85 μg/kg 또는 미만, 80 μg/kg 또는 미만, 75 μg/kg 또는 미만, 70 μg/kg 또는 미만, 65 μg/kg 또는 미만, 60 μg/kg 또는 미만, 55 μg/kg 또는 미만, 50 μg/kg 또는 미만, 45 μg/kg 또는 미만, 40 μg/kg 또는 미만, 35 μg/kg 또는 미만, 30 μg/kg 또는 미만, 25 μg/kg 또는 미만, 20 μg/kg 또는 미만, 15 μg/kg 또는 미만, 10 μg/kg 또는 미만, 5 μg/kg 또는 미만, 2.5 μg/kg 또는 미만, 2 μg/kg 또는 미만, 1.5 μg/kg 또는 미만, 1 μg/kg 또는 미만, 0.5 μg/kg 또는 미만, 또는 0.5 μg/kg 또는 미만 용량의 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙, 오텔릭시주맙 또는 포랄루맙을 1회 이상 근육내 투여받는다.

또 다른 구체예에서, 대상자는 T1D의 하나 이상의 증상들을 예방, 치료 또는 완화하기 위해서 200 μg/kg 또는 미만, 바람직하게는 175 μg/kg 또는 미만, 150 μg/kg 또는 미만, 125 μg/kg 또는 미만, 100 μg/kg 또는 미만, 95 μg/kg 또는 미만, 90 μg/kg 또는 미만, 85 μg/kg 또는 미만, 80 μg/kg 또는 미만, 75 μg/kg 또는 미만, 70 μg/kg 또는 미만, 65 μg/kg 또는 미만, 60 μg/kg 또는 미만, 55 μg/kg 또는 미만, 50 μg/kg 또는 미만, 45 μg/kg 또는 미만, 40 μg/kg 또는 미만, 35 μg/kg 또는 미만, 30 μg/kg 또는 미만, 25 μg/kg 또는 미만, 20 μg/kg 또는 미만, 15 μg/kg 또는 미만, 10 μg/kg 또는 미만, 5 μg/kg 또는 미만, 2.5 μg/kg 또는 미만, 2 μg/kg 또는 미만, 1.5 μg/kg 또는 미만, 1 μg/kg 또는 미만, 0.5 μg/kg 또는 미만, 또는 0.5 μg/kg 또는 미만 용량의 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙, 오텔릭시주맙 또는 포랄루맙을 1회 이상 피하 투여받는다.

또 다른 구체예에서, 대상자는 T1D의 하나 이상의 증상들을 예방, 치료 또는 완화하기 위해서 100 μg/kg 또는 미만, 바람직하게는 95 μg/kg 또는 미만, 90 μg/kg 또는 미만, 85 μg/kg 또는 미만, 80 μg/kg 또는 미만, 75 μg/kg 또는 미만, 70 μg/kg 또는 미만, 65 μg/kg 또는 미만, 60 μg/kg 또는 미만, 55 μg/kg 또는 미만, 50 μg/kg 또는 미만, 45 μg/kg 또는 미만, 40 μg/kg 또는 미만, 35 μg/kg 또는 미만, 30 μg/kg 또는 미만, 25 μg/kg 또는 미만, 20 μg/kg 또는 미만, 15 μg/kg 또는 미만, 10 μg/kg 또는 미만, 5 μg/kg 또는 미만, 2.5 μg/kg 또는 미만, 2 μg/kg 또는 미만, 1.5 μg/kg 또는 미만, 1 μg/kg 또는 미만, 0.5 μg/kg 또는 미만, 또는 0.5 μg/kg 또는 미만 용량의 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙, 오텔릭시주맙 또는 포랄루맙을 1회 이상 정맥내 투여받는다. 또 다른 구체예에서, T1D의 하나 이상의 증상들을 예방, 치료 또는 완화하기 위해 100 μg/kg 또는 미만, 95 μg/kg 또는 미만, 90 μg/kg 또는 미만, 85 μg/kg 또는 미만, 80 μg/kg 또는 미만, 75 μg/kg 또는 미만, 70 μg/kg 또는 미만, 65 μg/kg 또는 미만, 60 μg/kg 또는 미만, 55 μg/kg 또는 미만, 50 μg/kg 또는 미만, 45 μg/kg 또는 미만, 40 μg/kg 또는 미만, 35 μg/kg 또는 미만, 30 μg/kg 또는 미만, 25 μg/kg 또는 미만, 20 μg/kg 또는 미만, 15 μg/kg 또는 미만, 10 μg/kg 또는 미만, 5 μg/kg 또는 미만, 2.5 μg/kg 또는 미만, 2 μg/kg 또는 미만, 1.5 μg/kg 또는 미만, 1 μg/kg 또는 미만, 0.5 μg/kg 또는 미만, 또는 0.5 μg/kg 또는 미만 용량의 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙, 오텔릭시주맙 또는 포랄루맙이, 약 6 시간, 약 4 시간, 약 2 시간, 약 1.5 시간, 약 1 시간, 약 50 분, 약 40 분, 약 30 분, 약 20 분, 약 10 분, 약 5 분, 약 2 분, 약 1 분, 약 30 초 또는 약 10 초에 걸쳐 정맥내 투여된다.

또 다른 구체예에서, 대상자는 T1D의 하나 이상의 증상들을 예방, 치료 또는 완화하기 위해서 100 μg/kg 또는 미만, 바람직하게는 95 μg/kg 또는 미만, 90 μg/kg 또는 미만, 85 μg/kg 또는 미만, 80 μg/kg 또는 미만, 75 μg/kg 또는 미만, 70 μg/kg 또는 미만, 65 μg/kg 또는 미만, 60 μg/kg 또는 미만, 55 μg/kg 또는 미만, 50 μg/kg 또는 미만, 45 μg/kg 또는 미만, 40 μg/kg 또는 미만, 35 μg/kg 또는 미만, 30 μg/kg 또는 미만, 25 μg/kg 또는 미만, 20 μg/kg 또는 미만, 15 μg/kg 또는 미만, 10 μg/kg 또는 미만, 5 μg/kg 또는 미만, 2.5 μg/kg 또는 미만, 2 μg/kg 또는 미만, 1.5 μg/kg 또는 미만, 1 μg/kg 또는 미만, 0.5 μg/kg 또는 미만, 또는 0.5 μg/kg 또는 미만 용량의 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙, 오텔릭시주맙 또는 포랄루맙을 1회 이상 경구 투여받는다. 또 다른 구체예에서, T1D의 하나 이상의 증상들을 예방, 치료 또는 완화하기 위해 100 μg/kg 또는 미만, 95 μg/kg 또는 미만, 90 μg/kg 또는 미만, 85 μg/kg 또는 미만, 80 μg/kg 또는 미만, 75 μg/kg 또는 미만, 70 μg/kg 또는 미만, 65 μg/kg 또는 미만, 60 μg/kg 또는 미만, 55 μg/kg 또는 미만, 50 μg/kg 또는 미만, 45 μg/kg 또는 미만, 40 μg/kg 또는 미만, 35 μg/kg 또는 미만, 30 μg/kg 또는 미만, 25 μg/kg 또는 미만, 20 μg/kg 또는 미만, 15 μg/kg 또는 미만, 10 μg/kg 또는 미만, 5 μg/kg 또는 미만, 2.5 μg/kg 또는 미만, 2 μg/kg 또는 미만, 1.5 μg/kg 또는 미만, 1 μg/kg 또는 미만, 0.5 μg/kg 또는 미만, 또는 0.5 μg/kg 또는 미만 용량의 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙, 오텔릭시주맙 또는 포랄루맙이, 약 6 시간, 약 4 시간, 약 2 시간, 약 1.5 시간, 약 1 시간, 약 50 분, 약 40 분, 약 30 분, 약 20 분, 약 10 분, 약 5 분, 약 2 분, 약 1 분, 약 30 초 또는 약 10 초에 걸쳐 경구 투여된다.

증량 투여량이 투약 요법의 처음 며칠간 투여되는 특정 구체예들에서, 해당 요법의 1일차 투여량은 5-100 μg/m2/일, 바람직하게는 51 μg/m2/일이고 바로 앞에서 언급한 바와 같이 3, 4, 5, 6 또는 7일차까지 일일 투여량까지 증량된다. 예를 들어, 요법 1일차에, 대상자는 대략 51 μg/m²/일의 투여량으로, 2일차에 대략 103 μg/m²/일, 3일차에 대략 207 μg/m²/일, 4일차에 대략 413 μg/m²/일 그리고 이후 일차 (예를 들어, 5-14일차)에 826 μg/m²/일의 투여량으로 투여된다. 또 다른 구체예에서, 1일차에, 대상자는 대략 227 μg/m²/일, 2일차에 대략 459 μg/m²/일, 3일차 및 이후 일차에, 대략 919 μg/m²/일의 투여량을 투여받는다. 또 다른 구체예에서, 1일차에, 대상자는 대략 284 μg/m²/일, 2일차에 대략 574 μg/m²/일, 3일차 및 이후 일차에, 대략 1148 μg/m²/일의 투여량을 투여받는다.

다른 구체예들에서, 초기 투여량은 요법 종료시 일일 투여량과 동일한 투여량에 대해 1/4, 내지 1/2이고, 6, 8, 10 및 12시간 간격으로 부분으로 투여된다. 예를 들어, 13 μg/kg/일 투여량은 항체 투여에 의해 유발되는 사이토카인 방출 수준을 감소시키기 위해 6시간 간격으로 4회 3-4 μg/kg 투여량으로 투여된다. 특정 구체예들에서, 사이토카인 방출 및 기타 부작용의 가능성을 줄이기 위해 해당 요법의 처음 1, 2, 3 또는 4회 투여량 또는 모든 투여량은 정맥내 투여에 의해 더 천천히 투여된다. 예를 들어, 51 μg/m²/일의 투여량은 약 5 분, 약 15 분, 약 30 분, 약 45 분, 약 1 시간, 약 2 시간, 약 4 시간, 약 6 시간, 약 8 시간, 약 10 시간, 약 12 시간, 약 14 시간, 약 16 시간, 약 18 시간, 약 20 시간, 및 약 22 시간에 걸쳐 투여될 수 있다. 특정 구체예들에서, 투여량은 예를 들어, 20 내지 24 시간의 기간에 걸쳐 저속 주입에 의해 투여된다. 특정 구체예들에서, 투여량은 펌프로 주입되며, 바람직하게는 주입이 진행됨에 따라 투여되는 항체의 농도가 증가한다.

다른 구체예들에서, 투여량을 증량시킴에 있어서 상기 설명한 51 μg/m²/일 내지 826 μg/m²/일 요법에 대한 투여량의 설정 비율이 투여된다. 특정 구체예들에서, 비율은 상기 설명한 요법들의 일일 투여량의 1/10, 1/4, 1/3, 1/2, 2/3 또는 3/4이다. 따라서, 비율이 1/10일 때, 일일 투여량은 1일차에 5.1 μg/m², 2일차에 10.3 μg/m², 3일차에 20.7 g/m², 4일차에 41.3 μg/m² 그리고 5 내지 14일차에 82.6 μg/m²가 될 것이다. 비율이 1/4일 때, 투여량은 1일차에 12.75 μg/m², 2일차에 25.5 μg/m², 3일차에 51 μg/m², 4일차에 103 μg/m², 그리고 5 내지 14일차에 207 μg/m²가 될 것이다. 비율이 1/3일 때, 투여량은 1일차에 17 μg/m², 2일차에 34.3 μg/m², 3일차에 69 μg/m², 4일차에 137.6 μg/m², 그리고 5 내지 14일차에 275.3 μg/m²가 될 것이다. 비율이 1/2일 때, 투여량은 1일차에 25.5 μg/m², 2일차에 51 μg/m², 3일차에 103 μg/m², 4일차에 207 μg/m², 그리고 5 내지 14일차에 413 μg/m²가 될 것이다. 비율이 2/3일 때, 투여량은 1일차에 34 μg/m², 2일차에 69 μg/m², 3일차에 137.6 μg/m², 4일차에 275.3 μg/m², 그리고 5 내지 14일차에 550.1 μg/m²가 될 것이다. 비율이 3/4일 때, 투여량은 1일차에 38.3 μg/m², 2일차에 77.3 μg/m², 3일차에 155.3 μg/m², 4일차에 309.8 μg/m², 그리고 5 내지 14일차에 620 μg/m²가 될 것이다. 다른 구체예들에서, 요법은 위에서 설명한 것과 동일하지만 1 내지 4일차, 1 내지 5일차 또는 1 내지 6일차에만 적용된다. 예를 들어, 특정 구체예에서, 투여량은 1일차에 17 μg/m², 2일차에 34.3 μg/m², 3일차에 69 μg/m², 4일차에 137.6 μg/m², 그리고 5 및 6일차에 275.3 μg/m²이 될 것이다.

특정 구체예들에서, 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙, 오텔릭시주맙 또는 포랄루맙은, 1일 투여량으로 여러 날에 걸쳐 투여하는 것이 아니라 4시간, 6시간, 8시간, 10시간, 12시간, 15시간, 18시간, 20시간, 24시간, 30시간 또는 36시간에 걸쳐 중단 없이 주입하여 투여한다. 주입은 일정할 수 있거나, 예를 들어, 주입의 처음 1, 2, 3, 5, 6 또는 8시간 동안 더 낮은 투여량으로 시작한 다음 그 후에 더 높은 투여량으로 증가할 수 있다. 주입 과정에 걸쳐 환자는 상기 제시된 5-20일 요법에서 투여된 양과 동일한 투여량을 받는다. 예를 들어, 투여량은 대략 150 μg/m², 200 μg/m², 250 μg/m², 500 μg/m², 750 μg/m², 1000 μg/m², 1500 μg/m², 2000 μg/m², 3000 μg/m², 4000 μg/m², 5000 μg/m², 6000 μg/m², 7000 μg/m², 8000 μg/m², 또는 9000 μg/m²이다. 특히, 주입 속도와 기간은 투여 후 대상자에서 유리 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙, 오텔릭시주맙 또는 포랄루맙 수준을 최소화하도록 설계됐다. 특정 구체예들에서, 유리 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙 수준은 200 ng/ml 유리 항체를 초과하지 않아야 한다. 또한, 주입은 적어도 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95% 또는 100%의 조합된 T 세포 수용체 코팅 및 조절을 달성하도록 설계되었다.

다른 구체예들에서, 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙, 오텔릭시주맙 또는 포랄루맙은 제1형 당뇨병을 치료, 예방 또는 이의 발병 또는 진행을 저속화 또는 지연, 또는 이의 하나 이상의 증상들을 완화시키기 위해 만성적으로 투여된다. 예를 들어, 특정 구체예들에서, 상기 논의한 6 내지 14일 투여 요법에 대한 대안으로서 또는 이러한 요법 투여 후 그 효과를 향상 또는 유지하기 위하여 낮은 투여량의 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙이 월 1회, 월 2회, 월 3회, 주 1회 또는 훨씬 더 자주 투여된다. 이러한 낮은 투여량은 1 μg/m² 내지 100 μg/m² 중 임의의 양, 예를 들어, 대략 5 μg/m², 10 μg/m², 15 μg/m², 20 μg/m², 25 μg/m², 30 μg/m², 35 μg/m², 40 μg/m², 45 μg/m², 또는 50 μg/m²일 수 있다.

다른 구체예들에서, 대상자는, 예를 들어 하나 이상의 생리학적 매개변수에 기초하여 항-CD3 항체, 예를 들어, 테플리주맙, 오텔릭시주맙 또는 포랄루맙 투여 요법의 투여 후 어느 시점에 재투약 받을 수 있고 또는 이러한 재투약은 치료 과정에서 이루어질 수도 있다. 이러한 재투약은 투여될 수 있으며 및/또는 이러한 재투여 필요성은 투약 요법의 투여 후 2 개월, 4 개월, 6 개월, 8 개월, 9 개월, 1 년, 15 개월, 18 개월, 2 년, 30 개월 또는 3 년에 평가될 수 있고, 그리고 6 개월, 9 개월, 1 년, 15 개월, 18 개월, 2 년, 30 개월 또는 3 년 마다 무기한으로 한 치료 과정을 투여하는 것을 포함할 수 있다.

실시예

요약

배경: 제1형 당뇨병(T1D)은 인슐린 생성 베타 세포의 파괴 및 생존을 위해 외인성 인슐린에 대한 의존성을 초래하는 만성 자가면역 질환이다. 일부 중재술은 임상 질환이 있는 환자에서 인슐린 생산 손실을 줄이는데 성공했지만 현재까지 발병 위험이 높은 개인의 질환 진행에 영향을 줄 수 있는 중재술은 없다.

방법: 우리는 임상 질환의 위험이 높은 T1D 환자의 비당뇨병 친척을 대상으로 테플리주맙 (FcR 비결합 항-CD3 mAb)에 대한 무작위 위약 대조 이중 맹검 연구를 수행했다. 환자는 약물 또는 위약의 단일 14일 과정에 무작위 배정되었고 대략 6개월 간격으로 경구 내당능 테스트를 사용하여 질환 진행을 추적했다.

결과: 테플리주맙 그룹 44명, 위약 그룹 32명으로 총 76명이 대상이 무작위 배정됐다. 참가자의 72%는 어린이였다. 테플리주맙 치료는 T1D의 임상 진단까지의 시간 중앙값을 24.4개월에서 48.4개월로 지연시켰고 (Cox 비례 위험, p=0.006) 당뇨병 발병률이 연간 9.8%에서 4.1%가 되었다. 약물 치료는 TIGIT+KLRG1+CD8+ T-세포의 비율을 증가시켰다. HLA-DR4+ (p=0.006)이고 HLA-DR3+ (p=0.05)가 아닌 ZnT8 (p=0.01)에 대한 항체가 없는 참가자는 테플리주맙에 반응할 가능성이 가장 높았다.

결론: 테플리주맙은 고위험 개체들에서 T1D 진단을 지연시킬 수 있다. 개체들의 하위그룹은 치료와 효과에 더 잘 반응할 수 있다.

방법

시험 참가자

참가자들을 TrialNet Natural History Study를 통해 식별하였다¹⁴. 시험은 2011년 7월과 2018년 11월 사이에 미국, 캐나다 및 독일의 기관들에서 수행되었다. 각 참여 기관에서 임상시험 윤리 위원회 (IRB) 승인을 받았다. 환자, 이들의 부모 또는 이들 모두 시험 시작 전에 서면 동의서를 제공했다.

적격 참가자는 무작위 배정시 ≥ 8세인 임상 당뇨병 발병 위험이 높은 제1형 당뇨병 환자의 비당뇨병 친척이었다. 이들은 무작위 배정 전 6개월 이내에 2개의 샘플 수집에서 2개 이상의 당뇨병 관련 자가항체를 가졌다. 또한, 경구 내당능 검사 (OGTT)에서 비정상 내당능을 가졌으며, 이는 등록 52 일 이내 2회에 걸친 OGTT에서 110-125 mg/dL의 공복 혈당 수준, 또는 > 140 및 < 200 mg/dL의 2시간 혈장 혈당, 또는 30, 60, 또는 90분시 > 200 mg/d의 중간 혈당 값으로 정의된다. 이 프로토콜은 18세 미만의 참가자를 단일 비정상 OGTT로 등록할 수 있도록 2014년에 수정되었는데, 그 이유는 이 연령 그룹에서 T1D 진행률이 확증적 OGTT 유무와 유사했기 때문이다. 이 8명의 대상자 (테플리주맙에서 5명 및 위약 그룹에서 3명)에서 두 번째 치료 전 OGTT는 연구 약물 투여 첫날에 수행되었다. 다른 중요한 병력, 비정상적인 실험실 화학 물질 또는 혈구 수를 가진 개체들은 제외되었다.

환자 식별

대상은 TrialNet PTP (Pathway to Prevention) 연구에서 확인되었다. 도 5를 참고하라. PTP 연구는 1-45세의 T1D 환자들의 1촌 친척, 및 20세 이하의 2촌 또는 3촌 친척을 등록시키고, 마이크로인슐린 (mIAA), 글루탐산 탈탄산효소-65 (GAD), 및 인슐린종-관련 항원-2 (IA-2, 또는 ICA512)에 대한 당뇨병 자가항체를 평가하였다. 섬 세포 (ICA) 및 아연 수송체 8 (ZnT8) 자가항체는 적어도 1개의 다른 항체가 양성인 경우 측정되었다.

시험 설계 및 개입

참가자들은 각 그룹에 테플리주맙 또는 위약이 균등하게 배정되도록 무작위 배정되었다. 무작위배정은 각 TrialNet 연구 기관에서 연령 (< 또는 > 18세) 및 무작위배정 전 OGTT 상태 동안의 당으로 계층화되었다. 치료 배정은 이중 맹검되었다.

참가자들은 앞서 설명한 약물 투여 요법을 사용하여 임상 연구 센터에서 외래 환자로 14일 동안 테플리주맙 또는 위약을 투여 받았다^9,10. 구체적으로, 활성 연구 약물에 배정된 사람들은 다음 일일 일정에 따라 테플리주맙을 매일 IV 주입하여 테플리주맙을 제공받았다: 각 0-3 연구일에 51 마이크로그램/미터 제곱 (μg/m²), 103 μg/m², 207 μg/m², 및 413 μg/m², 각 4-13 연구일에 826 μg/m²의 1회 투여량. 위약 그룹에 무작위배정된 참가자들은 14일 과정의 매칭 IV 식염수를 제공받았다. 참가자들은 첫 5일 동안 주입 전에 이부프로펜과 디펜하이드라민을 투여받았고, 이후 증상 완화를 위해 필요에 따라 이부프로펜, 디펜하이드라민 및/또는 아세트아미노펜을 추가로 투여받았다. 연구 약물 주입에 대한 프로토콜 정의 중단 기준을 따랐다.

전체 연구 동안, 모든 대상자는 당뇨병의 부작용 및 증상에 대한 공식적인 문의를 위해 연구 직원과 중간 접촉 했다.

결과 변수 및 평가

1차 결과는 미국 당뇨병 협회 (American Diabetes Association)에서 정의한 기준을 사용하여 무작위 배정에서 당뇨병 진단까지의 경과 시간이었다¹⁵.

예정된 OGTT 검사는 주입 후 3개월과 6개월 후, 그리고 그 이후에는 6개월마다 실시했다. 무작위 혈당 스크리닝은 3개월 간격으로 수행되었으며 무작위 혈당이 200mg/dl 이상이고 당뇨병 증상이 있는 경우 OGTT 테스트를 수행했다. 당뇨병 OGTT 검사들은 순차적으로 확인하여야 하며 진단 날짜는 2차 진단 검사 시점으로 표시하였다. 결과 검토는 치료 배정에 대하여 알지 못하고 수행되었다.

혈액 샘플은 실험실 방법에 설명된 방법으로 TrialNet 핵심 실험실에서 중점적으로 분석되었다. 유세포 분석을 사용하여 말초 혈액에서 CD8+ T-세포 하위 집합을 분석했다 (도 4).

실험실 방법

C-펩티드는 2부위 면역효소 분석법 (Tosoh Bioscience, South San Francisco, CA)에 의해 동결된 혈장에서 측정되었다. HbA_1c는 이온 교환 고성능 액체 크로마토그래피 (Variant II, Bio-Rad Diagnostics, Hercules, CA)를 사용하여 측정되었다. 각 분석에 대한 신뢰도 계수는 분할 중복 샘플에서 0.99 이상이었다. mIAA, GAD-65Ab, ICA-512Ab, ZnT8A는 Barbara Davis Diabetes Center, Anschultz CO의 방사성-면역결합 분석법, 및 Gainesville의 플로리다 대학에서 간접 면역형광법을 사용하여 측정되었다. C-펩티드, 포도당 및 HbA1c는 워싱턴주 시애틀에 있는 Northwest Research Laboratory에서 측정되었다. C-펩티드는 2개-기관 면역효소 분석법 (Tosoh Bioscience, South San Francisco, CA)에 의해 동결된 혈장으로부터 측정되었으며 HbA_1c는 이온-교환 고성능 액체 크로마토그래피 (Variant II, Bio-Rad Diagnostics, Hercules, CA)를 사용하여 측정되었다. 각 분석에 대한 신뢰도 계수는 분할 중복 샘플에서 0.99 이상이었다. 이전에 설명한 방법을 사용하여 콜로라도 대학에서 전혈에서 EBV 및 CMV 바이러스 부하를 측정했다¹.

유세포 분석

말초 혈액 단핵 세포(PBMC)를 처리하고 NIDDK 저장소에 보관했다. PBMC의 냉동 바이알은 도 4에 표시된 항체 패널을 사용하여 유세포 분석으로 분석하기 위해 Benaroya 연구소로 보냈다. T 세포 표현형은 FACS Diva 소프트웨어가 있는 LSR-Fortess (BD Biosciences)에서 이전에 설명된 바와 같이 PBMC에서 수행하고 FlowJo 소프트웨어 버전 9.5(Tree Star, Ashland, OR)로 분석했다. TIGIT+KLRG+CD57-, TIGIT-KLRG1-CD57-, 또는 CD4+CD127^loFoxp3+ (CD4+TREG)인 CD8+ T 세포의 백분율을 이전에 설명한 바와 같이 결정하였다². 사분면은 염색 대조 그룹을 기반으로 배치되었다.

시험 감독

이 연구는 미국 국립 보건원(National Institutes of Health)과 청소년 당뇨병 연구 재단(Juvenile Diabetes Research Foundation)이 자금을 지원하는 제1형 당뇨병 TrialNet에 의해 개발 및 수행되었다.

연구 조정, 실험실 테스트 및 데이터 관리는 중앙에서 수행되었으며, 예외적으로 CBC 및 특이형태(differentials) 및 관례적인 화학물질들은 주입 기관들에서 분석되었다. (치료 배정에 대해 알지 못하는) 독립적인 의료 모니터요원은 누적된 모든 안전성 데이터를 검토했다.

통계적 분석

각 그룹 내 무작위 배정 이후 시간 경과에 따른 당뇨병 발병의 누적 발생률은 “무당뇨병” 생존 함수의 카플란-마이어 추정으로부터 추정되었다¹⁶. 6개월 간격 누적 발생 함수에서 치료 그룹들 간의 차이는 위험비 (HR)에 의해 추정되었으며 가설 검정은 우도비 검정을 사용했고; 이들 둘 모두 Cox 비례 위험 (PH) 모델에 기반한다¹⁷. 일차 가설에 대한 검정 통계량의 임계값은 그룹-순서별 절차에 의해 결정되었다.

예상 누적률(accrual rates) 보다 느리기 때문에 최초 프로토콜 (n=144) 대상자는 0.025의 알파 수준에서 80% 통계적 검정력 (단측)과 함께 위험비 (HR = 0.4)의 60% 감소를 감지하도록 수정되었다 (이전에는 50%). 이것은 적어도 71명의 대상자를 등록하고 40명의 대상자가 T1D로 진단될 때까지 추적하는 연구 목표를 설정했다.¹⁸.

안전성과 효능에 대한 데이터는 독립적인 데이터 안전 모니터링 위원회(DSMB)에 의해 연 2회 평가되었다. 중간 분석은 예상 T1D 사례수의 50%가 관찰되었을 때 수행되었으며, 이때 공식적인 비교가 DSMB에 제공되었으며, Lan DeMets 중단 규칙이 사용되었다¹⁹. 데이터는 치료 의향 원칙에 따라 분석되었다. 본원에 보고된 유의도 검정은 설계에 따라 0.025의 유의도 임계값을 사용하는 단측이었으나, 치료 상호작용 검정에 대하여는 양측이었다. 달리 표시되지 않는 한, 95% 신뢰 구간이 기록된다. 유세포 분석 데이터는 반복 측정 ANOVA에 의해 분석되었다. TIBCO Spotfire S+ 8.2 Workbench 또는 SAS 9.4를 사용하여 통계 분석을 수행했다.

결과

환자: 적격성을 위해 스크리닝된 112명의 대상자들 중 76명이 등록되었다: 44명은 테플리주맙에, 32명은 위약에 무작위 배정되었다 (도 1). 무작위 배정 과정으로부터 연구 그룹들의 비율이 동등하지 않게 되었으며, 이는 아마도 무작위배정으로 인해 시험 그룹들 간에 동등하지 않은 분포가 발생할 수 있었던, 등록된 대상자들의 수가 적은 (< 3) 연구 기관들에 의해 설명될 수 있었다. 모든 참가자는 적어도 2+의 자가항체를 가지고 있었고 참가자의 71%는 3개 이상을 가지고 있었다. 치료 그룹들은 일반적으로 잘 균형을 이루고 있었다 (표 1). 대상자의 대다수 (55, 72%)는 어린이였고 약 절반은 T1D 환자의 형제자매였다. <18세의 대상자들 중 47명이 무작위 배정 전에 혈당이상 OGTT로 확인되었다. 1번의 이상혈당 OGTT 후 무작위 배정된 사람들 중 2명은 “당뇨병”이었고 6명은 정상적인 치료 전 OGTT를 가졌다: 이들 8명의 개체는 등록 전 이상혈당 OGTT를 기준으로 등록되었다.

각각 테플리주맙 그룹과 위약 그룹으로 무작위 배정된 대상자의 93% (41/44)와 87.5% (28/32)가 14일 간의 약물 요법을 완료했다. 투여된 테플리주맙의 총 투여량은 9.¹⁴ (IQR:9.01-9.37) μg/m²였다. 3명의 약물 치료 및 4명의 위약 치료 대상자는 검사실 이상 (n=4), 정맥내 접근 불가능 (n=2) 또는 발진 (n=1)으로 인해 치료를 완료하지 못했다. 추적관찰의 중앙값은 745일 (74-2683일 범위)이었다. 추적관찰 기간은 대상자의 75%에서 3년 이상이었다. T1D는 참가자의 42명 (55%)에서 진단되었다.

효능: 테플리주맙 단일 과정 치료는 T1D까지의 시간을 지연시켰다 (도 2A, p=0.006): T1D까지 걸리는 시간 중앙값은 위약 그룹에서 24.4개월, 테플리주맙 그룹에서 48.4개월이었다 (위험비=0.437 (IQR: 0.229, 0.832). 연간 T1D 발병률은 위약 그룹과 테플리주맙 그룹에서 각각 9.8%와 4.1%였다. 테플리주맙 그룹의 대상자 25명(57%)과 위약 그룹의 9명(28%)은 시험 종료 시점에 T1D가 없었다 (카이제곱, p=0.012). 위험비는 미리 지정된 연령 공변량, 무작위 배정 전 OGTT 동안의 포도당 또는 항-GAD65 항체에 대해 조정했을 때 통계적으로 다른 상태를 유지했다.

T1D로의 전체 진행률은 2년차 (n=10, 24%), 3년차 (n=6, 14%) 또는 4(n=5, 12%)에 비해 시험 등록 후 첫해 (n=17, 41%)에 가장 높았다. 테플리주맙 치료 효과도 그 기간 중에 가장 컸다 (도 1B). 위험 비율은 연구 등록 후 처음 36개월 동안 가장 낮았고 그 이후에는 상대적으로 일정하고 통계적으로 유의하게 유지되었다 (p<0.01).

치료 투여 및 안전성: 일반적으로 테플리주맙 치료는 내약성이 우수하였다- 연구 약물과 관련 가능성이 있거나, 아마도 또는 확실히 관련이 있는 것으로 지정된 이상 사례들을 표 2에 제시한다. 림프구 수는 5일차에 72.3%까지 최하점으로 감소했지만 (IQR 82.1, 68.4%)(p<0.0001) 이후 빠르게 회복되었다. 테플리주맙 그룹의 3등급 사건 중 15건 (34.1%)이 연구 약물 투여 후 처음 30일 동안의 림프구감소증과 연관되었다. 두 치료 그룹에서 30일 후 림프구감소증의 사례는 없었다 (도 1C). 이전에 언급했듯이 자발적으로 해결되는 발진은 약물 치료 대상자의 36%에서 발생했다¹¹. 감염률은 두 치료 그룹에서 유사했다.

시작 당시 30명의 대상자 (39%) (16명은 테플리주맙 및 14명은 위약으로 치료)가 EBV 바이러스에 대한 항체를 가지고 있었다. 연구 약물 치료 후, 3-6주차에 7명의 참가자에게 정량화가능한 EBV 바이러스 부하가 있었으며, 이들 모두는 테플리주맙 그룹이었다. 바이러스 부하가 감지된 사람들 중 1명은 38일째에 인두염, 콧물, 기침 증상을 보였다. EBV 바이러스 부하는 43일에서 134일(평균 74일) 사이에 정량화 수준 아래로 감소했다. 시작 당시 17명의 참가자 (테플리주맙 10명, 위약 7명)는 CMV 바이러스에 대한 항체를 가지고 있었다. CMV 혈청 양성인 한 테플리주맙 대상자는, 20일차에 검출가능한 수준의 CMV 바이러스를 가졌으나 42일차까지는 검출할 수 없었다.

반응 바이오마커: 우리는 이전에 테플리주맙 치료 후 TIGIT, KLRG1 및 기타 반응성 감소와 관련된 마커의 발현과 같은 CD8+ T 세포의 변화를 설명하였다^12,13. 임상 결과가 이러한 CD8+ T 세포의 변화와 관련이 있는지 확인하기 위해 두 치료 그룹들에서 CD8+KLRG1+TIGIT+CD57- T 세포의 백분율을 비교했다. 테플리주맙 치료는 기준선과 비교하여 3개월 및 6개월에 이러한 T 세포의 백분율을 증가시켰고 (각각 p=0.009, 0.007), 3개월 및 6개월째에 테플리주맙 대 위약 치료 참가자에서 수준이 더 높았다(p=0.02, 각각 0.04) (도 3A, 도 6). 우리는 위약 치료 대상자들에서 이러한 세포의 변화를 확인하지 못했다. 모든 T 세포 하위집합들이 테플리주맙에 영향을 받은 것은 아니다: 두 그룹 모두에서 CD4+ TREG 또는 CD8+KLRG1-TIGIT-CD57- 세포에서의 유의한 변화는 없었다^8,20 (도 7A, 7B).

참가자의 인구 통계학적 특성이 임상 반응과 관련이 있는지 확인하기 위해 사전 지정된 분석에서 OGTT 기간 동안 연령, HLA 유형, 치료 전 C-펩티드 및 포도당, 및 자가 항체를 기준으로 참가자의 하위그룹들에서 테플리주맙의 효과를 분석했다 (도 3B). 항-ZnT8 항체가 없는 참가자는 있는 참가자에 비해 테플리주맙에 더 큰 반응을 보였다 (p=0.004)(도 3C). 다른 자가항체의 유무는 임상 반응과 관련이 없었다. 테플리주맙 대상자의 49%와 65%는 각각 HLA-DR3와 HLA-DR4였다. HLA-DR4의 존재 및 HLA-DR3의 부재는 테플리주맙에 대한 보다 강력한 반응과 관련이 있었다 (각각 p=0.004 및 0.01, 양측 검정) (도 3D, E).

논의

이러한 2상 연구에서, 우리는 테플리주맙 단일 과정이 연구 시작 시 OGTT 동안 비정상적인 내당능을 보인 비당뇨병 친척에서 T1D로의 진행을 유의하게 늦추는 것을 발견했다. 당뇨병 진단 지연 중앙값은 2년이었고, 시험 종료 시점에서 당뇨병이 없는 개체의 백분율은 위약-치료 대상자 (28%)에 비해 약물-치료 대상자에서 2배였다 (57%). 어린이와 성인에 대한 안전성 경험은 예상되었던 발진 및 일시적인 림프구감소증 유해 사례로 양호했다. 우리가 아는 한, 이것은 T1D의 발병을 지연시키거나 예방한 최초의 치료법이다. 일상적인 관리의 어려움이 있는 임상 T1D 발병의 지연은 임상적으로 중요하다. 또한 진단 연령이 낮을수록 더 나쁜 결과와 관련이 있다^2,4. 잘 설계되었지만 성공적이지 못한 이전의 대규모 예방 실험은 면역 세포에 대한 면역 요법을 활용하지 않았으며, 우리의 연구 결과는 T1D가 만성 T 세포 매개 질환이라는 개념을 뒷받침한다^21,22. 또한, 이 요법이 진단 전 질환 진행 그리고 진단 후 베타 세포 기능의 상실에 영향을 미친다는 관찰결과는 자가면역 과정에 연속체가 있음을 시사하며 임상 질환의 발병 전에 면역조절을 사용하려는 노력을 검증하는 것이다^9-11,23-25.

약물의 효과는 투여 후 첫 3년 동안 가장 컸다. 당뇨병이 발병한 사람들의 41%가 무작위 배정 후 첫 해에 그러하였으며, 그 당시 테플리주맙에 노출된 사람들의 HR이 가장 낮았다. 위약 그룹에서 상대적으로 빠른 당뇨병 진행 속도는 이러한 개체들의 매우 높은 위험을 반영한다⁵. 실제로, 임상 질환이 없는 이들 대상자들을 등록하기로 한 우리의 결정은 > 2 이상의 자가항체 및 이상혈당증이 발견될 때 진행의 불가피성을 반영하며, 이는 이들 개체들의 높은 베타 세포 사멸 비율에 대한 보고와 일치한다²⁶. 또한 임상 T1D의 급속한 발달은 진행 속도가 빠른 소아 참가자가 많아짐 (72.4%)을 반영할 수 있다^27,28.

연구 등록 당시 대상자의 특성에 따라 테플리주맙에 대한 반응에 차이가 있었다. 하나의 T1D 관련 MHC 대립유전자인 HLA-DR3은 없지만 다른 HLA-DR4의 존재 및 항-ZnT8 항체의 부재는 반응할 가능성이 가장 큰 개체들을 식별했다. MHC는 T 세포 레퍼토리에 대한 효과를 통해 테플리주맙에 대한 반응성을 조절할 수 있으며, 이는 아마도 T 세포 활성화 상태와 약물 효과에 대한 감수성을 변경시킬 수 있다. 또한 항-ZnT8 항체는 더 강력한 면역 반응 또는 T 세포를 테플리주맙에 취약하게 만드는 기타 특징들을 가진 개체들에 대한 마커일 수 있다. 우리는 질환의 초기 단계에 있는 사람들에게 이러한 치료가 효과적인지 확신할 수 없다. 추가 면역학 및 대사 연구를 통해 이 치료의 혜택을 받을 가능성이 가장 높은 개인을 정의하는 특징들을 식별할 수 있다.

약물 치료의 림프구 수에 대한 일시적인 효과는 세포 고갈보다는 말초 혈액으로부터의 유출을 반영할 가능성이 가장 높다^29,30. 우리의 유세포 분석 연구는 CD8+ T-세포의 표현형의 변화가 임상 반응의 마커임을 시사한다. 그러나 무반응 또는 “소진된” 표현형과 관련된 이러한 효과는 CD8+ T-세포를 비활성화시키지 않는데, 왜냐하면 바이러스 부하가 증가한 사람들에서 EBV 및 CMV에 대한 활발한 반응이 있었기 때문이다^31,32. T 세포에 대한 테플리주맙의 기능적 효과는 항원에 대한 결합력에 의해 영향을 받을 수 있다: 높은 결합력을 갖는 T-세포, 예를 들어, 바이러스 항원 반응성 세포는 영향을 받지 않을 수 있지만 결합력이 낮은 세포, 예를 들어, 자가반응성 T 세포는 비활성화될 수 있다. 이러한 가설을 다루기 위해서 항원 반응성 T 세포에 대한 추가 연구가 필요할 것이다.

이 임상 연구에는 고려해야 할 몇 가지 제한 사항이 있다. 코호트는 상대적으로 작았고 T1D로의 진행 속도는 위약 그룹에서 빨랐다. 연구 대상은 T1D 환자들의 친척들이었으므로, 이러한 결과가 T1D에 대한 위험이 있는 것으로 밝혀진 친척이 아닌 사람들에게 일반적으로 적용될 수 있는지 여부는 알 수 없다. 최근 보고에 따르면 유전적으로 고위험군 개체들에서 당뇨병 발병률은 친척 및 친척이 아닌 사람들에서 유사함을 시사한다³³. 더욱이, 공지된 질환 발병률을 반영하면서도, 해당 집단은 압도적으로 비히스패닉 백인이었다. 질환 발병 지연 중앙값을 늘리는 것이 이상적이다. 본 연구에서 약물은 한 과정에만 제공되었으며 HR에 대한 분석은 활동성 질환이 있는 더 많은 개체들을 포착하고 치료 효과를 연장하기 위해 반복 투여가 필요할 수 있음을 시사한다^9,25. 치료 표적 집단과 약물 과정의 수를 확인할 필요가 있다.

요약하면, 이것은 T1D의 지연 또는 예방을 보여주는 첫 번째 시도이다. 당뇨병의 발병 연령과 기간은 대사 관리 및 합병증에 대한 중요한 결정요인이며 매일의 관리 부담이 되기 때문에, 당뇨병이 없는 시간은 임상적 중요성을 가진다. 반응 가능성이 가장 높은 사람을 선택하거나 반복 투여하거나 테플리주맙과 상보적 작용 기전이 있는 다른 약제를 병용하면 장기간 임상 질환을 예방할 수 있다.

표 1: 기준선에서의 치료 그룹별 대상자 특성

*괄호 값(들): 사분위수 범위는 중앙값으로 표시되고 대상자의 백분율은 대상자 수와 함께 표시된다.

^ 무작위배정 시. 모든 대상자는 무작위 배정 전에 적어도 2+의 자가항체를 가졌다.

† 누락: 1명의 대상자에 대해 HLA 대립유전자 상태가 누락됨

표 2: 능동 추적관찰 동안 연구 약물과 가능하게는, 아마도, 또는 확실히 관련이 있는 것으로 제시된 유해 사례들.

*** p < 0.001 테플리주맙 vs 위약

본 발명의 기재된 방법 및 조성물의 수정 및 변형은 본 발명 내의 범위 및 사상을 벗어나지 않고 당업자에게 명백할 것이다. 본 발명을 특정 실시예와 관련하여 설명하였지만, 청구범위에 기재된 발명이 이러한 특정 실시예에 과도하게 제한되어서는 안된다는 것을 이해해야 한다. 실제로, 본 발명을 실시하기 위해 설명된 방식들의 다양한 변형이 의도되며, 이들은 본 발명이 존재하는 관련 분야의 당업자들이 다음 청구범위로 제시되는 발명의 범위에 속하는 것으로 이해한다.

참조문헌으로 포함

본 명세서에 언급된 모든 특허 및 간행물은 마치 각각의 독립 특허 및 간행물이 참고문헌으로 포함되는 것으로 구체적이고 개별적으로 표시된 바와 동일한 정도로 참조로 본원에 포함된다.

SEQUENCE LISTING <110> Provention Bio, Inc. <120> Methods and Compositions for Preventing Type 1 Diabetes <130> 178833-010701/US <150> US 62/847,466 <151> 2019-05-14 <160> 2 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 213 <212> PRT <213> Unknown <220> <223> Synthetic <400> 1 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 Asn Trp Tyr Gln Gln Thr Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr 35 40 45 Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu 65 70 75 80 Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Phe Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Gln Ile Thr Arg Thr Val Ala Ala Pro 100 105 110 Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr 115 120 125 Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys 130 135 140 Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu 145 150 155 160 Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser 165 170 175 Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala 180 185 190 Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe 195 200 205 Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 2 <211> 449 <212> PRT <213> Unknown <220> <223> Synthetic <400> 2 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr 20 25 30 Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Val 50 55 60 Lys Asp Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Ala Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Gly Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Pro Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 115 120 125 Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu 130 135 140 Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 145 150 155 160 Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 165 170 175 Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 180 185 190 Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro 195 200 205 Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys 210 215 220 Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro 225 230 235 240 Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser 245 250 255 Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp 260 265 270 Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 275 280 285 Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val 290 295 300 Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 305 310 315 320 Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys 325 330 335 Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr 340 345 350 Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr 355 360 365 Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 370 375 380 Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 385 390 395 400 Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys 405 410 415 Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 420 425 430 Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 435 440 445 Lys

Claims

임상 제1형 당뇨병(T1D)의 위험이 있으나 무증상인 비당뇨병 대상자에서 T1D의 발병을 예방 또는 지연시키기 위한 약학 조성물로서,
이러한 약학 조성물은 테플리주맙의 예방적 유효량을 포함하고,
이때 테플리주맙의 예방적 유효량은 5-1200 마이크로그램/제곱미터(μg/m²)의 테플리주맙 10 내지 14일 과정을 포함하고,
이때 비-당뇨병 대상자는 (1) 아연 수송체 8 (ZnT8)에 대한 항체가 없고, (2) HLA-DR4+이고, 그리고 (3) HLA-DR3+가 아닌,
약학 조성물.
청구항 1에 있어서, 테플리주맙의 예방적 유효량은 14일 과정에 걸쳐 총 투여량 9034μg/m² 내지 13486μg/m²의 테플리주맙을 포함하는, 약학 조성물.
청구항 1에 있어서, 비-당뇨병 대상자는 T1D 환자의 친척인, 약학 조성물.
청구항 1에 있어서, 비-당뇨병 대상자는 섬 세포 항체(ICA), 인슐린 자가항체(IAA), 및, 글루탐산 탈탄산효소(GAD)에 대한 항체, 및 티로신 포스파타제 (IA-2/ICA512)로부터 선택된 2개 이상의 당뇨병-관련 자가항체를 가지는, 약학 조성물.
청구항 1에 있어서, 비-당뇨병 대상자는 경구 내당능 검사(OGTT)에서 비정상 내당능을 가지는, 약학 조성물.
청구항 5에 있어서, OGTT에서 비정상 내당능은, 공복 혈당 수준이 110-125 mg/dL이거나 또는 OGTT 시작 2시간 후 혈장 혈당 수준이 ≥140 및 < 200 mg/dL이고, 또는 OGTT 시작 30, 60 또는 90분 후 혈당 값이 > 200mg/dL인, 약학 조성물.
청구항 1 내지 5 중 어느 한 항에 있어서, 예방적 유효량은 5-1200 마이크로그램/제곱미터(μg/m²)의 테플리주맙을 피하 (SC) 주사 또는 정맥내 (IV) 주입 또는 경구 투여하는 10 내지 14일 과정을 포함하는, 약학 조성물.
청구항 1 내지 5 중 어느 한 항에 있어서, 예방적 유효량은 T1D의 임상 진단까지의 시간 중앙값을 적어도 50%, 적어도 80%, 또는 적어도 90% 지연시키는, 약학 조성물.
청구항 1 내지 5 중 어느 한 항에 있어서, 예방적 유효량은 T1D의 임상 진단까지의 시간 중앙값을 적어도 12개월, 적어도 18개월, 적어도 24개월, 적어도 36개월, 적어도 48개월, 또는 적어도 60개월 지연시키는, 약학 조성물.
청구항 1 내지 5 중 어느 한 항에 있어서, 테플리주맙 투여 후 비-당뇨병 대상자의 말초혈액 단핵 세포에서 TIGIT+KLRG1+CD8+ T-세포의 백분율 증가는 테플리주맙에 대한 반응성을 나타내는, 약학 조성물.