EA027984B1

EA027984B1 - Аминохинолины в качестве ингибиторов rip2 киназы

Info

Publication number: EA027984B1
Application number: EA201590552A
Authority: EA
Inventors: Линда Н. Касиллас; Майкл П. Демартино; Памела А. Хейл; Джон Ф. Мелманн; Джоши М. Раманджулу; Роберт мл. Сингхаус
Original assignee: Глэксосмитклайн Интеллекчуал Проперти Дивелопмент Лимитед
Priority date: 2012-09-13
Filing date: 2013-09-13
Publication date: 2017-09-29
Also published as: JP6258331B2; PH12015500345A1; CL2015000615A1; CN104602692A; AU2013315387B2; DOP2015000059A; EP2895167A4; CN104602692B; KR20150053920A; TW201425307A; EA201590552A1; US9216965B2; EP2895167A1; IL237158A0; EP2895167B1; AR092530A1; CR20150133A; US20150094333A1; JP2015528508A; PE20150774A1

Abstract

Аминохинолины, имеющие формулугде R, R, R, Rи Rпредставляют собой такие, как определено в данном документе в качестве ингибиторов RIP2 киназ.

Description

Изобретение относится к 4-аминохинолинам, которые ингибируют К1Р2 киназу, и к способам их получения и применения. В частности, настоящее изобретение относится к замещенным 4аминохинолинам в качестве ингибиторов К1Р2 киназы.

Предшествующий уровень техники

Рецептор-взаимодействующая протеин-2 (К1Р2) киназа, которую также называют САКЭ3, К1СК, САКЭ1АК или К1РК2, принадлежит к ТКЙ семейству серин/треониновых протеинкиназ, вовлеченных в генетически детерминированные сигнальные пути иммунной системы. К1Р2 киназа состоит из Νконцевого киназного домена и С-концевого домена рекрутирования каспазы (САКИ), соединенных посредством промежуточной (ΙΜ) области ((1998) I. ΒίοΙ. Сйет. 273, 12296-12300; (1998) Сиггеп! ВЫоду 8, 885-889; и (1998) I. ΒίοΙ. Сйет. 273, 16968-16975). САКИ домен К1Р2 киназы опосредует взаимодействие с другими САКЭ-содержащими белками, такими как ΝΘΌ1 и ΝΘΌ2 ((2000) I. ΒίοΙ. Сйет. 275, 2782327831 и (2001) ΕΜΒΟ герог!з 2, 736-742). ΝΘΌ1 и ΝΘΌ2 представляют собой цитоплазматические рецепторы, которые играют ключевую роль в генетически детерминированном иммунном надзоре. Они распознают как грам-положительные, так и грам-отрицательные бактериальные патогены и активируются посредством специфических пептидогликановых мотивов, диаминопимелиновой кислоты (т.е. ЭАР) и мурамилдипептида (МОР), соответственно ((2007) I. 1ттипо1. 178, 2380-2386).

После активации К1Р2 киназа связывается с ΝΟΌ1 или ΝΟΌ2 и начинает действовать прежде всего как молекулярный каркас, предоставляющий возможность находиться вместе другим киназам (ТАК1, ΙΚΚα/β/γ), вовлеченным в активацию ΝΡ-κΒ И митоген-активируемой протеинкиназы ((2006) ХаИле Ке\ае\уз 1ттипо1оду 6, 9-20). К1Р2 киназа подвергается К63-связанному полиубиквитинированию по лизину-209, обеспечивающему рекрутинг ТАК1 ((2008) ΕΜΒΟ 1оигпа1 27, 373-383). Такая посттрансляционная модификация требуется для активации сигнального пути, в силу того, что мутация этого остатка предотвращает опосредованную ΝΟΌ 1/2 активацию ΝΡ-κΒ. К1Р2 киназа также подвергается аутофосфорилированию по серину-176 и, возможно, по другим остаткам ((2006) Се11и1аг 81дпаШп§ 18, 2223-2229). Исследования с использованием мутантов с нефункционирующей киназой (К47А) и неселективных низкомолекулярных ингибиторов показали, что активность К1Р2 киназы важна для регулирования стабильности экспрессии К1Р2 киназы и активации сигнального пути ((2007) Β^οсйет. I. 404, 179-190 и (2009) I. ΒώΡ Сйет. 284, 19183-19188).

Нарушение регуляции К1Р2-зависимого сигнального пути связывают с аутовоспалительными заболеваниями. Мутации с приобретением патологической фунции в NАСΗТ-домене в ΝΟΌ2 вызывают синдром Блау, юношеский саркоидоз, детскую гранулематозную болезнь, характеризующуюся увеитом, дерматитом и артритом ((2001) ХаШге Оепейсз 29, 19-20; (2005) 1оигпа1 о£ Кйеита!о1оду 32, 373-375; (2005) Сиггеп! Кйеита!о1оду КерогЕ 7, 427-433; (2005) ΒΡηκΙ 105, 1195-1197; (2005) Еигореап 1оигпа1 о£ Нитап Оепейсз 13, 742-747; (2006) Атепсап 1оигпа1 о£ Οрй!йа1тο1οду 142, 1089-1092; (2006) Аг!йп!Е & Кйеитайзт 54, 3337-3344; (2009) Аййлйз & Кйеитайзт 60, 1797-1803; и (2010) Кйеита!о1оду 49, 194196). Мутации в ЙКК-домене ΝΟΌ2 тесно связаны с предрасположенностью к болезни Крона ((2002) Ат. I. Нит. Оепе!. 70, 845-857; (2004) Еигореап 1оигпа1 о£ Нитап Оепейсз 12, 206-212; (2008) Мисоза1 1ттипо1оду (2008) I (8ирр1 1), 85-89. 1, 85-89; (2008) 1пЙатта!огу 13о\уе1 ЭЕеазез 14, 295-302; (2008) Ехрептеп!а1 Эегта!о1оду 17, 1057-1058; (2008) ΒηΐΕΡ Мейюа1 Β^Εΐώ 87, 17-30; (2009) 1пйатта!огу Исже! Эхзеазез 15, 1145-1154 и (2009) М1сгойез апй 1п1есйоп 11, 912-918). Мутации в ΝΟΌ1 сопровождаются астмой ((2005) Нит. Мо1. Оепе!. 14, 935-941) и юношеским воспалительным заболеванием кишечника и внекишечными проявлениями воспалительного заболевания кишечника ((2005) Нит. Мо1. Оепе!. 14, 1245-1250). Генетические и функциональные исследования также дают основания предполагать роль К1Р2-зависимых сигнальных путей во множестве других гранулематозных нарушений, таких как саркоидоз ((2009) 1оигпа1 о£ Сйшеа1 1ттипо1оду 29, 78-89 и (2006) 8агсо1йоз1з Уазсиййз апй Эхйизе йипд Όΐδеазез 23, 23-29) и гранулематоз Вегенера ((2009) Эхадпозйс Ра!йо1оду 4, 23).

Эффективный, селективный, низкомолекулярный ингибитор активности К1Р2 киназы будет блокировать К1Р2-зависимый провоспалительный сигнальный путь и тем самым обеспечит терапевтический эффект в случае аутовоспалительного заболевания, характеризующегося повышением и/или нарушением регуляции активности К1Р2 киназы.

Сущность изобретения

Изобретение относится к соединению, которое представляет собой

1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Я-пиразол-5ил)амино)хинолин-7-ил)окси)-2-метилпропан-2-ол,

1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Я-пиразол-5ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ол, или

6-(трет-бутилсульфонил)-Ν-(3,4-диметил-1Я-пиразол-5-ил)-7(2-метоксиэтокси)хинолин-4-амин,

- 1 027984 или его фармацевтически приемлемой соли.

В предпочтительном варианте изобретение относится к соединению, которое представляет собой 1((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ол формулы

или его фармацевтически приемлемую соль.

В еще более предпочтительном варианте изобретение относится к соединению, которое представляет собой 1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси) пропан-2-ол формулы

или его фармацевтически приемлемую соль.

В еще более предпочтительном варианте изобретение относится к соединению формулы

или его фармацевтически приемлемой соли.

В наиболее предпочтительном варианте изобретение относится к соединению формулы

или его фармацевтически приемлемой соли.

Настоящее изобретение дополнительно относится к фармацевтической композиции, содержащей упомянутые выше соединения, или их фармацевтически приемлемые соли, и фармацевтически приемлемый эксципиент или несколько фармацевтически приемлемых эксципиентов. В частности, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для лечения опосредованного К4Р2 киназой заболевания или нарушения.

Изобретение дополнительно относится к способу лечения опосредованного К4Р2 киназой заболевания или нарушения, который включает введение терапевтически эффективного количества упомянутых выше соединений, или их фармацевтически приемлемых солей, нуждающемуся в этом пациенту (человеку или другому млекопитающему, в частности человеку). Опосредованные К4Р2 киназой заболевания или нарушения выбраны из увеита, лихорадочного синдрома, связанного с интерлейкин-1 конвертирующим ферментом, дерматита, острого повреждения легких, сахарного диабета 2 типа, артрита, ревматоидного артрита, неспецифического язвенного колита, болезни Крона, юношеского воспалительного заболевания кишечника, внекишечных проявлений воспалительного заболевания кишечника, профилактики ишемически-реперфузионного повреждения в трансплантате солидного органа, неалкогольного стеатогепатита, алкогольного стеатогепатита, аутоиммунного гепатита, астмы, реакции трансплантат против хозяина, системной красной волчанки, множественного склероза, саркоидоза, синдрома Блау/юношеского саркоидоза, гранулематоза Вегенера и интерстициального заболевания легких.

В предпочтительном варианте настоящего изобретения заболевание представляет собой болезнь

- 2 027984

Крона, неспецифический язвенный колит или синдром Блау.

Краткое описание чертежей

Фиг. 1 представляет собой порошковую рентгеновскую дифрактограмму (ΡΧΚΏ) кристаллической формы гидрохлорида (К)-1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин7-ил)окси)пропан-2-ола;

фиг. 2 - ΡΧΚΏ кристаллической формы моногидрата гидрохлорида 6-(трет-бутилсульфонил)-Ы-(4,5диметил-1Н-пиразол-3-ил)-7-(2-метоксизтокси)хинолин-4-амина;

фиг. 3 демонстрирует ответную характеристику содержания 1Б-8 цитокина в образцах цельной крови крыс, полученную после предварительного дозирования крысам соединения примера 3, с последующим дозированием Ε18-ΜΌΡ;

фиг. 4 - ответную характеристику содержания 1Б-8 цитокина в образцах цельной крови крыс, полученную после предварительного дозирования крысам соединения примера 9, с последующим дозированием Ε18-ΜΠΡ.

Подробное описание изобретения

Типичные соединения изобретения включают соединения примеров 1-10.

В другом варианте осуществления соединение изобретения выбрано из

1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ола, (К)-1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-( (3,4-диметил-1Нпиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ола, (3)-1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Нпиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ола,

1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-( (3,4-диметил-1Н-пиразол-5ил)амино)хинолин-7-ил)окси)-2-метилпропан-2-ола,

6-(трет-бутилсульфонил)-7-(2,2-дифторэтокси)-Ν-(3,4диме тил-1Н-пиразол-5-ил)хинолин-4-амина,

6-(трет-бутилсульфонил)-Ν-(3,4-диметил-1Н-пиразол~5-ил)-7(3-метоксипропокси)хинолин-4-амина,

6-(трет-бутилсульфонил)-Ν-(4,5-диметил-1Н-пиразол-3-ил)-7(2,2,2-трифторэтокси)хинолин-4-амина,

6-(трет-бутилсульфонил)-Ν-(3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)-7(2-метоксиэтокси)хинолин-4-амина и

6-(трет-бутилсульфонил)-Ν-(3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)-7фторхинолин-4-амина, или из его соли, в частности, его фармацевтически приемлемой соли.

В другом варианте осуществления типичные соединения изобретения включают нижеприведенные соединения:

1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ол;

1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5ил)амино)хинолин-7-ил)окси)-2-метилпропан-2-ол;

6-(трет-бутилсульфонил)-7-(2,2-дифторэтокси)-Ν-(3,4диметил-1Н-пиразол-5-ил)хинолин-4-амин;

6-(трет-бутилсульфонил)-Ν-(3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)-7(3-метоксипропокси)хинолин-4-амин;

6-(трет-бутилсульфонил)-Ν-(4,5-диметил-1Н-пиразол-3-ил)-7(2-метоксиэтокси)хинолин-4-амин;

6-(трет-бутилсульфонил)-Ν-(4,5-диметил-1Н-пиразол-3-ил)-7(2,2,2-трифторэтокси)хинолин-4-амин;

6-(трет-бутилсульфонил)-Ν-(3,4-диметил-1Н-лиразол-5-ил)-7фторхинолин-4-амин;

или их соль, в частности их фармацевтически приемлемую соль.

- 3 027984

Конкретное соединение изобретения представляет собой 1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ол в виде свободного основания. В другом варианте осуществления соединение изобретения представляет собой 1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ол или его соль. В другом варианте осуществления соединение изобретения представляет собой 1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ол или его фармацевтически приемлемую соль.

В другом варианте осуществления соединение изобретения представляет собой (К)-1-((6-(третбутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ол или (8)-1-((6(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ол в виде свободного основания. В другом варианте осуществления соединение изобретения представляет собой (К)-1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2ол или (8)-1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ол, или их соль. В другом варианте осуществления соединение изобретения представляет собой (К)-1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2ол или (8)-1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ол или их фармацевтически приемлемую соль.

Конкретное соединение изобретения представляет собой (К)-1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ол в виде свободного основания. Один конкретный вариант осуществления изобретения представляет собой соединение (К)-1-((6-(третбутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ол или его соль. Другой конкретный вариант осуществления изобретения представляет собой соединение (К)-1-((6-(третбутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси) пропан-2-ол или его фармацевтически приемлемую соль. Один конкретный вариант осуществления изобретения представляет собой соединение гидрохлорид (К)-1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ола. Следующий конкретный вариант осуществления изобретения представляет собой соединение гидрохлорид (К)-1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Нпиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси) пропан-2-ола, имеющий ΡΧΚΌ фиг. 1.

Другое конкретное соединение изобретения представляет собой 1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)-2-метилпропан-2-ол в виде свободного основания. Один конкретный вариант осуществления изобретения представляет собой соединение 1-((6(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)-2-метилпропан-2-ол или его соль. Другой конкретный вариант осуществления изобретения представляет собой соединение 1((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)-2-метилпропан2-ол или его фармацевтически приемлемую соль.

Другое конкретное соединение изобретения представляет собой 6-(трет-бутилсульфонил)-Ы-(3,4диметил-1Н-пиразол-5-ил)-7-(2-метоксиэтокси)хинолин-4-амин в виде свободного основания. Один конкретный вариант осуществления изобретения представляет собой соединение 6-(трет-бутилсульфонил)Ы-(3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)-7-(2-метоксиэтокси)хинолин-4-амин или его соль. Другой конкретный вариант осуществления изобретения представляет собой соединение 6-(трет-бутилсульфонил)-Ы-(3,4диметил-1Н-пиразол-5-ил)-7-(2-метоксиэтокси)хинолин-4-амин или его фармацевтически приемлемую соль. Другой конкретный вариант осуществления представляет собой соединение гидрохлорид 6-(третбутилсульфонил)-Ы-(3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)-7-(2-метоксиэтокси)хинолин-4-амина. Другой конкретный вариант осуществления соединения изобретения представляет собой моногидрат гидрохлорида 6-(трет-бутилсульфонил)-Ы-(4,5-диметил-1Н-пиразол-3-ил)-7-(2-метоксиэтокси)хинолин-4-амина. Следующий конкретный вариант осуществления соединения изобретения представляет собой моногидрат гидрохлорида 6-(трет-бутилсульфонил)-Ы-(4,5-диметил-1Н-пиразол-3-ил)-7-(2-метоксиэтокси)хинолин4-амина, имеющий ΡΧΚΌ фиг. 2.

Настоящее изобретение относится к способу лечения заболевания или нарушения, опосредованного ингибированием ΚΣΡ2 киназы, включающему введение терапевтически эффективного количества соединения изобретения нуждающемуся в этом человеку. Настоящее изобретение также относится к способу лечения заболевания или нарушения, опосредованного ингибированием ΚΙΡ2 киназы, включающему введение терапевтически эффективного количества заявленных соединений, или их фармацевтически приемлемых солей нуждающемуся в этом человеку.

Следует понимать, что твердая форма соединения изобретения может существовать в кристаллических формах, некристаллических формах или их смесях. Такие кристаллические формы также могут проявлять полиморфизм (т.е. способность существовать в различных кристаллических формах). Эти различные кристаллические формы обычно известны как полиморфы. Полиморфы имеют одинаковый химический состав, но различаются компоновкой, пространственной конфигурацией и другими описательными свойствами кристаллического твердого состояния. Полиморфы, в силу вышесказанного, могут иметь различные физические свойства, такие как форма, плотность, твердость, способность к деформации, стабильность и свойства растворимости. Полиморфы обычно показывают различные точки плавле- 4 027984 ния, ИК-спектры и порошковые рентгеновские дифрактограммы, которые можно использовать для идентификации. Средний специалист в данной области техники поймет, что различные полиморфы можно получить, например, путем изменения или регулировки условий, используемых при кристаллизации/перекристаллизации соединения.

Термин фармацевтически приемлемый относится к таким соединениям, материалам, композициям и лекарственным формам, которые, с медицинской точки зрения, в рамках результатов тщательной медицинской оценки, подходят для применения в контакте с тканями организма человека и животных без превышения нормы токсичности, раздражающего действия или другой проблемы или осложнения, соразмерно с допустимым соотношением польза/риск.

Фармацевтически приемлемая соль(-и) обозначает соединение, которое подходит для фармацевтического применения. Солевые и сольватные (например, гидраты и гидраты солей) формы соединений, которые подходят для применения в медицине, представляют собой такие, в которых противоион или связанный растворитель являются фармацевтически приемлемыми. Однако соли и сольваты, имеющие не являющиеся фармацевтически приемлемыми противоионы или связанные растворители, находятся в рамках объема притязаний настоящего изобретения, например для использования в качестве промежуточных соединений при получении других соединений изобретения и их солей и сольватов.

Примеры фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты включают ацетат, адипат, аскорбат, аспартат, бензолсульфонат, бензоат, камфорат, камфор-сульфонат (камсилат), капрат (деканоат), капроат (гексаноат), каприлат (октаноат), карбонат, бикарбонат, циннамат, цитрат, цикламат, додецилсульфат (эстолат), этан-1,2-дисульфонат (эдисилат), этансульфонат (эсилат), формиат, фумарат, галактарат (мукат), гентисад (2,5-дигидроксибензоат), глюкогептонат (глюцептат), глюконат, глюкуронат, глутамат, глутарат, глицерофосфат, гликолят, гиппурат, гидробромид, гидрохлорид, гидроиодид, изобутират, лактат, лактобионат, лаурат, малеат, малат, малонат, манделат, метансульфонат (мезилат), нафталин-1,5-дисульфонат (нападизилат), нафталин-сульфонат (напсилат), никотинат, нитрат, олеат, оксалат, пальмитат, памоат, фосфат, дифосфат, пропионат, пироглутамат, салицилат, себацинат, стеарат, сукцинат, сульфат, тартрат, тиоцианат, тозилат, ундециленат, 1-гидрокси-2-нафтоат, 2,2-дихлорацетат, 2гидроксиэтансульфонат (изетионат), 2-оксоглутарат, 4-ацетамидобензоат и 4-аминосалицилат. В одном варианте осуществления фармацевтически премлемая соль присоединения кислоты представляет собой гидрохлорид. Соли, не являющиеся фармацевтически приемлемыми, например трифторацетат, могут использоваться, например, при выделении соединения формулы (I), и они включены в рамки объема притязаний настоящего изобретения.

Примеры фармацевтически приемлемых основно-аддитивных солей включают соли аммония, лития, натрия, калия, кальция, магния, алюминия, соли цинка, триметиламина, триэтиламина, морфолина, пиридина, пиперидина, пиколина, дициклогексиламина, Ν,Ν'-дибензилэтилендиамина, 2гидроксиэтиламина, бис-(2-гидроксиэтил)амина, три-(2-гидроксиэтил)амина, прокаина, дибензилпиперидина, дегидроабиэтиламина, глюкамина, Ν-метилглюкамина, коллидина, хинина, хинолина, лизина и аргинина.

Определенные соединения изобретения могут образовывать соли с одним или несколькими эквивалентами кислоты (если соединение содержит основный фрагмент) или основания (если соединение содержит кислотный фрагмент). Настоящее изобретение включает в рамки объема все возможные стехиометрические и нестехиометрические солевые формы.

Поскольку заявленные соединения предназначаются для использования в фармацевтических композициях, следует абсолютно четко понимать, что каждое из них предпочтительно предлагается в, по существу, чистой форме, например по меньшей мере 60% чистоты, более приемлемо по меньшей мере 75% чистоты и предпочтительно по меньшей мере 85%, в особенности по меньшей мере 98% чистоты (% представляют собой массовые, расчитанные на основе массы). Неочищенные препараты соединений могут использоваться для получения более чистых форм, используемых в фармацевтических композициях.

Общие способы синтеза.

Соединения, раскрытые в рамках настоящей заявки, могут быть получены, используя способы синтеза, проиллюстрированные на нижеприведенных схемах, или привлекая знания специалиста в области органической химии. Синтезы, предложенные на этих схемах, применимы для получения соединений изобретения, имеющих множество различных замещающих групп, осуществляются с использованием подходящих предшественников, которые, в случае необходимости, подходящим образом защищены, для достижения совместимости реакций, представленных в настоящем описании. Последующее снятие защитных групп там, где это необходимо, позволяет получить соединения того вида, которые в целом раскрыты. Хотя схемы представлены с соединениями только формулы (I), они наглядны для способов, которые можно использовать для получения соединений изобретения.

Промежуточные соединения (соединения, используемые при получении соединений изобретения) также могут быть представлены в виде солей. Таким образом, в ссылках на промежуточные соединения фраза соединение(я) формулы (номер формулы) обозначает соединение, имеющее эту указанную структурную формулу или его фармацевтически приемлемую соль.

Схема 1. 6-Бром-4-хлор-7-(метилокси)хинолины могут быть синтезированы посредством конденса- 5 027984 ции анилина с кислотой Мельдрума с последующей циклизацией до гидроксихинолина. Превращение гидроксихинолина в хлорхинолин можно осуществить с помощью Р0С1₃

Схема 2. 6-(трет-Бутилсульфонил)-4-хлорхинолин-7-олы могут быть синтезированы посредством катализируемого палладием замещения арилбромида с последующим оксон-опосредованным окислением тиоэфира до сульфона и последующего деметилирования с помощью ЬЙ

Схема 3. 1-((6-(трет-Бутилсульфонил)-4-хлорхинолин-7-ил)окси)пропан-2-олы могут быть получены посредством алкилирования 7-хинолинола хлорацетоном и последующего восстановления борогидридом натрия

Схема 4. Замещающие Ζ группы могут быть присоединены к хинолиновому ядру после прикрепления К^а посредством обработки хлорхинолинового ядра соответствующим ароматическим амином в этаноле при повышенной температуре при каталитическом воздействии НС1. Ν-метилпирролидинон также может быть использован в качестве растворителя для этой реакции в нейтральных условиях (без

НС1) при 100°С.

Схема 5. Заместитель К^а может быть добавлен к 7-хинолинолу путем алкилирования электрофилов, таких как алкилгалогениды или эпоксиды, под действием основания, обычно ΝαΗ, К₂С0₃ или КОШи, в присутствии или в отсутствии катализатора (такого как ΝαΙ), в растворителях, таких как ΌΜΡ или ацетонитрил при температурах в диапазоне 0-100°С. Эту реакцию также можно осуществить путем реакции замещения Мицунобу по гидроксиалкильной группе

Схема 6. 6-(трет-Бутилтио)-4-хлор-7-фторхинолин/6-(трет-бутилтио)-4-хлор-5-фторхинолины могут быть синтезированы посредством конденсации 4-бром-3-фторанилина с кислотой Мельдрума с последующей циклизацией до 5- и 7-изомеров фторхинолонов. Эти изомеры можно хлорировать с помощью РОС1₃ с последующим образованием тиоэфира, катализируемым палладием, и окислением до сульфона с помощью оксона. Конечный 6-(трет-бутилтио)-4-хлор-7-фторхинолин и 6-(трет-бутилтио)-4-хлор-5фторхинолины можно разделить с помощью колоночной хроматографии с нормальными фазами

- 6 027984

Соединения изобретения могут найти применение, в частности, при лечении опосредованных ШР2 киназой заболеваний или нарушений, в частности заболеваний или нарушений, опосредованных ингибированием К1Р2 киназы, таких как увеит, лихорадочный синдром (1СЕ лихорадка), связанный с интерлейкин-1 конвертирующим ферментом (1СЕ, также известный как Каспаза-1), дерматит, острое повреждение легких, сахарный диабет 2 типа, артрит (в частности, ревматоидный артрит), воспалительные заболевания кишечника (такие как неспецифический язвенный колит и болезнь Крона), юношеское воспалительное заболевание кишечника, внекишечные проявления воспалительного заболевания кишечника, профилактика ишемически-реперфузионного повреждения в солидных органах (в частности, в почках) при ремиссии ишемии, вызванной операцией на сердце, трансплантацией органов, сепсис и кровоизлияния, заболевания печени (неалкогольный стеатогепатит, алкогольный стеатогепатит и аутоиммунный гепатит), аллергические заболевания (такие как астма), реакции трансплантата (такие как реакция трансплантат против хозяина), аутоиммунные заболевания (такие как системная красная волчанка и множественный склероз) и гранулематозные нарушения (такие как саркоидоз, Синдром Блау, юношеский саркоидоз, гранулематоз Вегенера и интерстициальное заболевание легких).

Соединения настоящего изобретения могут применяться, в частности, при лечении увеита, 1СЕ лихорадки, Синдрома Блау, юношеского саркоидоза, неспецифического язвенного колита, Болезни Крона, гранулематоза Вегенера и саркоидоза.

Лечение опосредованных К.1Р2 киназой заболеваний и нарушений, или в более широком смысле, лечение иммуноопосредованных заболеваний, включающих, но не ограничиваясь ими, аллергические заболевания, аутоиммунные заболевания, профилактика отторжения трансплантата и т.п. могут быть достигнуты посредством применения соединения настоящего изобретения в качестве монотерапии или путем двойной или многосоставной комбинированной терапии, в частности для лечения рефракторных случаев, например в комбинации с другими противовоспалительными и/или анти-ΤΝΡ средствами, которые могут быть введены в терапевтически эффективных количествах, как это известно в данной области техники.

Терапевтически эффективное количество предназначается для обозначения такого количества соединения, которое в случае введения его нуждающемуся в таком лечении пациенту является достаточным для осуществления лечения, как определено в данном документе. Из вышесказанного следует, что, например, терапевтически эффективное количество раскрытых соединений представляет собой количество средства, являющегося объектом изобретения, которое в случае введения нуждающемуся в этом человеку является достаточным для регулирования или ингибирования активности К1Р2 киназы, так что болезненное состояние, которое опосредовано такой активностью, уменьшается, облегчается или предотвращается. Количество введеного соединения, которое будет соответствовать такому количеству, будет меняться, исходя из таких факторов, как характерные особенности соединения (например, активность (р1С₅₀), эффективность действия (ЕС₅₀) и биологический период полувыведения определенного вещества из организма), характеристика условий заболевания и его степень тяжести, индивидуальные характеристики (например, возраст, рост и масса тела) пациента, нуждающегося в лечении, но тем не менее, оно может быть в рабочем порядке определено специалистом в данной области техники. Аналогичным образом, продолжительность лечения и временной период введения (период времени между введением доз и выбор момента времени введения доз, например, до/во время/после еды) соединения будет

- 7 027984 изменяться в соответствии с индивидуальными характеристиками млекопитающего, нуждающегося в лечении, (например, масса), с конкретным соединением и его свойствами (например, фармацевтические характеристики), с заболеванием или нарушением, и с его тяжестью, с особенностями конкретной композиции и способа применения, но тем не менее, все это может быть в рабочем порядке определено специалистом в данной области техники.

Лечить или лечение предназначены для обозначения, по меньшей мере, уменьшения отрицательных последствий заболевания или нарушения у пациента. Способы лечения для уменьшения отрицательных последствий заболевания или нарушения включают применение соединений в настоящем изобретении любым общепринятым приемлемым способом, например, для предотвращения, замедления, профилактики, терапии или устранения опосредованного заболевания или нарушения. Конкретные заболевания и нарушения, которые, в частности, могут быть подвергнуты лечению с использованием соединения настоящего изобретения, описаны в данном документе.

Соединения изобретения могут быть введены любым подходящим способом введения, включая как системное введение, так и местное применение. Системное введение включает пероральное введение, парентеральное введение, трансдермальное введение, ректальное введение и введение путем ингаляции. Парентеральное введение относится к способам введения, отличающимся от энтерального, трансдермального или от введения путем ингаляции, и обычно осуществляется путем инъекции или инфузии. Парентеральное введение включает внутривенную, внутримышечную и подкожную инъекцию или инфузию. Ингалация относится к введению в легкие пациента, будь то ингалирование через полость рта, или через носовые проходы. Местное применение включает нанесение на кожу.

Соединения изобретения могут быть введены однократно или в соответствии с режимом дозирования, при котором определенное количество доз вводится через регулируемые интервалы времени в течение заданного периода времени. Например, дозы могут вводиться один, два, три или четыре раза в сутки. Дозы могут вводиться до тех пор, пока не будет достигнут необходимый терапевтический эффект или неопределенно долго для поддержания необходимого терапевтического эффекта. Подходящие режимы дозирования для соединения изобретения зависят от фармакокинетических свойств соединения, таких как абсорбция, распределение и период полувыведения, которые могут быть определены специалистом в данной области техники. Кроме того, подходящие режимы дозирования, включая продолжительность применения таких режимов, для соединения изобретения зависят от того, какое заболевание или нарушение подлежит лечению, от тяжести подлежащего лечению заболевания или нарушения, от возраста и физического состояния пациента, подвергаемого лечению, от анамнеза болезни пациента, подвергаемого лечению, от особенностей сопутствующей терапии, от необходимого терапевтического эффекта и от других подобных факторов, находящихся в рамках знаний и опыта специалиста в данной области техники. Кроме того, специалист в данной области техники поймет, что подходящие режимы дозирования могут нуждаться в регулировании с учетом индивидуального отклика организма данного пациента на режим дозирования или по прошествии времени, после которого отдельный пациент нуждается в изменениях.

Фармацевтические композиции изобретения могут быть получены и упакованы в насыпной форме, из которой эффективное количество соединения изобретения может быть извлечено и затем дано пациенту в составе порошков, сиропов и растворов для инъекции. Альтернативно, фармацевтические композиции изобретения могут быть получены и упакованы в виде стандартной лекарственной формы. При пероральном применении, например, могут быть введены одна или несколько таблеток или капсул. Доза фармацевтической композиции содержит по меньшей мере терапевтически эффективное количество соединения настоящего изобретения. В случае получения в виде стандартной лекарственной формы фармацевтические композиции могут содержать от 1 до 1000 мг соединения настоящего изобретения.

Согласно предложенному в данном документе, стандартные лекарственные формы (фармацевтические композиции), содержащие от 1 до 1000 мг соединения изобретения, могут вводиться один, два, три или четыре раза в сутки, предпочтительно один, два или три раза в сутки и более предпочтительно один или два раза в сутки, чтобы обеспечить лечение опосредованного ΚΙΡ2 заболевания или нарушения.

Употребляемый в настоящем документе термин фармацевтически приемлемый эксципиент обозначает вещество, композицию или наполнитель, включенные в данную готовую лекарственную форму или в состав композиции. Каждый эксципиент должен быть совместим с другими ингредиентами фармацевтической композиции при образовании механической смеси, чтобы взаимодействия, которые могут существенно снижать эффективность соединения изобретения при введении пациенту, и взаимодействия, которые могут в результате привести к тому, что фармацевтические композиции станут фармацевтически неприемлемыми, сделать ничтожными. Кроме того, каждый эксципиент конечно же должен иметь достаточно высокую степень чистоты для выполнения требования фармацевтической приемлемости.

Соединения изобретения и фармацевтически приемлемый эксципиент или эксципиенты, как правило, будут составлены в лекарственную форму, приспособленную для введения пациенту посредством требуемого способа введения. Обычные лекарственные формы включают такие, которые приспособлены для (1) перорального введения, такие как таблетки, капсулы, каплеты, пилюли, пастилки, порошки, сиро- 8 027984 пы, эликсиры, суспензии, растворы, эмульсии, порошки для приготовления раствора, принимаемого внутрь, и крахмальные капсулы; (2) парентерального введения, такие как стерильные растворы, суспензии и порошки для разбавления раствором; (3) трансдермального введения, такие как трансдермальные пластыри; (4) ректального введения, такие как суппозитории; (5) для ингаляции, такие как аэрозоли и растворы; и (6) местного применения, такие как кремы, мази, лосьоны, растворы, пасты, спреи, пенки и гели.

Подходящие фармацевтически приемлемые эксципиенты будут меняться в зависимости от конкретной выбранной лекарственной формы. Кроме того, подходящие фармацевтически приемлемые эксципиенты могут быть выбраны в соответствии с определенной функцией, которую они будут выполнять в композиции. Например, определенные фармацевтически приемлемые эксципиенты могут быть выбраны по их способности содействовать получению однородных лекарственных форм. Определенные фармацевтически приемлемые эксципиенты могут быть выбраны по их способности содействовать получению стабильных лекарственных форм. Определенные фармацевтически приемлемые эксципиенты могут быть выбраны по их способности содействовать переносу или транспортировке соединения или соединений изобретения после того, как они введены пациенту, из одного органа или части тела в другой орган или часть тела. Определенные фармацевтически приемлемые эксципиенты могут быть выбраны по их способности совершенствовать схему лечения пациента.

Подходящие фармацевтически приемлемые эксципиенты включают следующие типы эксципиентов: разбавители, наполнители, связующие вещества, разрыхлители, лубриканты, скользящие вещества, гранулирующие вещества, покрывающие вещества, смачивающие вещества, растворители, вспомогательные растворители, суспендирующие вещества, эмульгаторы, подсластители, вкусоароматизирующие вещества, маскирующие вкус и запах вещества, красители, предотвращающие слеживание вещества, увлажнители, хелатирующие вещества, пластификаторы, загустители, антиоксиданты, консерванты, стабилизирующие вещества, поверхностно-активные вещества и забуферивающие вещества. Специалист в данной области техники будет учитывать, что определенные фармацевтически приемлемые эксципиенты могут выполнять более одной функции и могут выполнять альтернативные функции в зависимости от того, сколько эксципиентов присутствует в составе и какие другие ингредиенты присутствуют в составе.

Специалисты в данной области техники обладают знанием и компетентностью в данной области техники, дающей им возможность выбрать подходящие фармацевтически приемлемые эксципиенты в надлежащих количествах для использования в изобретении. Помимо этого существует ряд источников, которые доступны специалисту в данной области техники, в которых описаны фармацевтически приемлемые эксципиенты, и они могут быть использованы при выборе подходящих фармацевтически приемлемых эксципиентов. Примеры включают РетпщГОп'з Рйагтасеийса1 8сюпсс5 (Маск РиЪНзЫпд Сотрапу), Тйе НапаЪоок οί РЬаттасеийса1 Лаайуез (Со\\сг РиЪйзйтд Птйеа) и Тйе НапаЪоок οί РйагтасеиПса1 Е\с1р1еп15 (1йе Лтепсап Рйагтасеиаса1 Лззоаайоп апа 1Пе РНагтасеи11са1 Ргезз).

Фармацевтические композиции изобретения получают посредством использования технологий и способов, известных специалисту из уровня техники в данной области техники. Некоторые способы, обычно используемые в данной области техники, описаны в РеттдЮп'з РНагтасеи11са1 §с1епсез (Маск РиЪНзЫпд Сотрапу).

В одном аспекте изобретение относится к твердой пероральной лекарственной форме, такой как таблетка или капсула, содержащая эффективное количество соединения изобретения и разбавитель или наполнитель. Подходящие для использования разбавители и наполнители включают лактозу, сахарозу, декстрозу, маннитол, сорбитол, крахмал (например, кукурузный крахмал, картофельный крахмал и прежелатинизированный крахмал), целлюлозу и ее производные (например, микрокристаллическую целлюлозу), сульфат кальция и гидрофосфат кальция. Пероральная твердая лекарственная форма может дополнительно содержать связующее вещество. Подходящие связующие вещества включают крахмал (например, кукурузный крахмал, картофельный крахмал и прежелатинизированный крахмал), желатин, аравийскую камедь, альгинат натрия, альгиновую кислоту, трагакантовую камедь, гуаровую камедь, повидон и целлюлозу, и ее производные (например, микрокристаллическую целлюлозу). Пероральная твердая лекарственная форма может дополнительно содержать разрыхлитель. Подходящие разрыхлители включают кросповидон, натрия крахмалгликолят, кроскармеллозу, альгиновую кислоту и натрия карбоксиметилцеллюлозу. Пероральная твердая лекарственная форма может дополнительно содержать лубрикант. Подходящие лубриканты включают стеариновую кислоту, стеарат магния, стеарат кальция и тальк.

Примеры

Нижеследующие примеры иллюстрируют изобретение. Эти примеры не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения, но, наоборот, предоставляют методическую помощь для специалиста в данной области техники в получении и применении соединений, композиций и способов настоящего изобретения. При том что конкретные варианты осуществления для настоящего изобретения описаны, специалист в данной области техники поймет, что различные изменения и модификации могут быть сделаны без отступления от сущности и объема изобретения.

Названия промежуточных соединений и конечных соединений, описанных в данном документе, были составлены с помощью программного продукта для составления названий ЛСЭ/№1те Рго Υ6.02,

- 9 027984 доступного от Адуапсед Сйет151гу Беуе1ортеп1, 1пс., 110 Уопце 51гее1, 14¹¹' Р1оог, Τογοπϊο, Оп1апо, Сапада, М5С 1Т4 (ИИр:ммм.асд1аЪ8.сот) или с помощью программы для составления названий в СИетГ)га\у. 51гис1=Ыате Рго 12.0, в качестве части СИетВгоГ)га\у Ш1га, поставляемой компанией СатЪпбдеЗой. 100 СатЪпбдеРагк Бпуе, СатЪпбде, МА 02140 ϋδΑ (ммм.сатЪпбце^оН.сот). Специалисту в данной области техники следует принять во внимание, что в некоторых частных случаях эта программа даст название по изображенной структуре соединения, соответствующие таутомеру этого соединения. Следует понимать, что любая ссылка на название соединения или на изображение структуры соединения предназначена для охвата всех таутомеров таких соединений и любых смесей их таутомеров.

В нижеприведенных описаниях экспериментов могут использоваться следующие сокращения:

Сокращение	Значение сокращения
2-МеТНГ	2-метилтетрагидрофуран
АсОН	уксусная кислота
водн.	водный
насыщенный солевой раствор	насыщенный водный раствор ЫаС1
СН₂С1₂, ОСМ	метиленхлорид
СНзСИ или МеСЫ или ΑΟΝ	ацетонитрил
СНзСЦ₂	метиламин
Сз₂СОз	карбонат цезия
конц.	концентрированный
Д	день (сутки)
ОСЕ	1,2-дихлорэтан
ϋΜΓ	Ν,Ν-диметилформамид
ϋΜ5Ο	диметилсульфоксид

- 10 027984

эквив.	эквиваленты
ЕТ	этил
ЕТгО или ϋΜΕ	диэтиловый эфир
ЕЪОАс	этилацетат
ЕТОН	этанол
ч, час	часы
НС1	хлороводородная кислота
ΙΡΑ	изопропиловый спирт
1РГ2О	диизопропиловый эфир
КОТ-Ви	трет-бутоксид калия
К₂СОз	карбонат калия
Ме	метил
МеОН или СНзОН	метанол
МдЗО₄	сульфат магния
мин	минута(—ы)
М3	масс-спектр
μν	микроволновое облучение
ИаВН₄	борогидрид натрия
Иа₂СОз	карбонат натрия
ИаНСОз	гидрокарбонат натрия
Ν3₂30₄	сульфат натрия
νη₄οι	хлорид аммония
ΝΜΡ	И-метил-2-пирролидон
РсЬсЗЬаз	трис(дибензилиденацетон)дипалладий (0)
РН	фенил
КВЕ или гЬ£	круглодонная колба
кт или КТ	комнатная температура
насыщ.	насыщенный
ТЕА	трифторуксусная кислота
ТНЕ	тетрагидрофуран
Тк	время удерживания

Получение 1. 6-(трет-Бутилсульфонил)-4-хлорхинолин-7-ол

Стадия 1. 6-(трет-Бутилтио)-4-хлор-7-метоксихинолин.

- 11 027984

Смесь 6-бром-4-хлор-7-метоксихинолина (50 г, 183 ммоль), Ρά(ΡΗ₃Ρ)₄ (5,30 г, 4,59 ммоль), Ха₂СО₃(48,6 г, 459 ммоль) и 1,4-диоксана (895 мл) продували азотом в течение 10 мин. 2-Метил-2-пропантиол (1ВиЗН; 22,75 мл, 202 ммоль) добавляли и реакционную смесь нагревали при 70°С в течение 4 суток. Реакционную смесь охлаждали до кт и пропускали через слой силикагеля, который был предварительно пропитан ЕЮАс, используя 100% ЕЮАс в качестве элюента. Фракции, содержащие продукт, затирали с МеОН и объединяли, получая 6-(трет-бутилтио)-4-хлор-7-метоксихинолин (37,5 г, 128 ммоль, 69,6% выход). ¹Н ЯМР (400 МГц, ΏΜδΟ-ά₆) δ м.д. 8,79 (д, 1=4,8 Гц, 1Н), 8,25 (с, 1Н), 7,63 (д, 1=4,8 Гц, 1Н), 7,5 (с, 1Н), 3,99 (с, 3Н), 1,31 (с, 9 Н). МЗ (т/ζ) 282.

Стадия 2. 6-(трет-Бутилсульфонил)-4-хлор-7-метоксихинолин.

К раствору 6-(трет-бутилтио)-4-хлор-7-метоксихинолина (18,5 г, 63,0 ммоль) в ЕЮАс (315 мл) и воде (315 мл) добавляли оксон (44,6 г, 72,5 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 18 ч. Слои разделяли и водный слой дважды экстрагировали ЕЮАс. Объединенные органические экстракты концентрировали досуха, растворяли в минимальном количестве 10% МеОН/ОСМ, наносили на колонку Вю1а§е с 340 г силикагеля и очищали посредством колоночной хроматографии (Вю1а§е 3Ρ-1, 340 г, 100% ЕЮАс в течение 20 мин, затем 0-20% МеОН/ЕЮАс). Ощищенные фракции концентрировали досуха и затирали с ЕЮАс, получая 6-(трет-бутилсульфонил)-4-хлор-7-метоксихинолин (15,2 г). ¹Н ЯМР (400 МГц, ΏΜδΟ-ά₆) δ м.д. 8,95 (д, 1=4,8 Гц, 1Н), 8,65 (с, 1Н), 7,71-7,79 (м, 2Н), 4,04 (с, 3Н), 1,31 (с, 9Н). МЗ (т/ζ) 314.

Стадия 3. 6-(трет-Бутилсульфонил)-4-хлорхинолин-7-ол.

В высушенную в сушильном шкафу круглодонную колбу добавляли 6-(трет-бутилсульфонил)-4хлор-7-метоксихинолин (5,85 г, 18,64 ммоль), затем добавляли иодид лития (7,49 г, 55,9 ммоль) и 2,4,6коллидин (37,3 мл). Полученное нагревали до 100°С в течение 4 ч. Разбавляли реакционную смесь ϊΡγ₂Ο при интенсивном перемешивании и отфильтровывали полученное в результате твердое вещество. Во время фильтрования через воронку Бюхнера осадок на фильтре промывали большим количеством ϊΡγ₂Ο, при этом оставляя слой растворителя над осадком на фильтре, чтобы он не контактировал с воздухом. Затем очень быстро завершали фильтрование и переносили осадок с фильтра в химический стакан. Разбавляли 1н. НС1 (125 мл) и 2-МеТНР. Слои разделяли и экстрагировали 4 раза 2-МеТНР и один раз ЕЮАс. Промывали объединенную органическую фазу водой, затем дважды 5% раствором тиосульфата натрия (эти промывки выполняли быстро, чтобы не способствовать протеканию любых побочных реакций). Промывали объединенную органическую фазу насыщенным солевым раствором, затем сушили над МдЗО₄, отфильтровывали и концентрировали, получая продукт в виде коричневого твердого вещества: 6-(трет-бутилсульфонил)-4-хлорхинолин-7-ол (5,07 г, 16,91 ммоль, 91% выход). ¹Н ЯМР (400 МГц, ОМЗО-0₆) δ м.д. 1,33 (с, 9Н), 7,56 (с, 1Н), 7,66 (д, 1=4,80 Гц, 1Н), 8,59 (с, 1Н), 8,85 (д, 1=4,80 Гц, 1Н), 11,46 (с, 1Н). МЗ: т/ζ: 300,0 [М+Н]+.

Пример 1. 1-((6-(трет-Бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7ил)окси)пропан-2-ол

Стадия 1. 1-((6-(трет-Бутилсульфонил)-4-хлорхинолин-7-ил)окси)пропан-2-он.

К раствору 6-(трет-бутилсульфонил)-4-хлорхинолин-7-ола (500 мг, 1,668 ммоль) в ОМР (8162 мкл) добавляли К₂СО₃ (692 мг, 5,00 ммоль), затем добавляли 1-хлорпропан-2-он (178 мкл, 2,502 ммоль). Нагревали до 60°С в течение 30 мин. Неочищенный образец подвергали очистке посредством нормальнофазовой хроматографии Вю1а§е (25 г колонка ЗNАΡ, 0-65%, 65%. гексан/ЕЮАс). Фракции, содержащие очищенный продукт, объединяли и концентрировали, что в результате приводило к получению продукта в виде не совсем белого твердого вещества: 1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-хлорхинолин-7ил)окси)пропан-2-он (192 мг, 0,540 ммоль, 32,3% выход). ¹Н ЯМР (400 МГц, ОМЗО-0₆) δ м.д. 1,34 (с, 9Н), 2,27 (с, 3Н), 5,21 (с, 2Н), 7,64 (с, 1Н), 7,76 (д, 1=4,80 Гц, 1Н), 8,67 (с, 1Н), 8,93 (д, 1=4,80 Гц, 1Н). МЗ: т/ζ: 356,1 [М+Н]+.

Стадия 2. 1-((6-(трет-Бутилсульфонил)-4-хлорхинолин-7-ил)окси)пропан-2-ол.

К суспензии 1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-хлорхинолин-7-ил)окси)пропан-2-она (100 мг, 0,281

- 12 027984 ммоль) в МеОН (2810 мкл) добавляли КаБНд (13,29 мг, 0,351 ммоль) при кт. Полученное перемешивали при кт в течение 20 мин. Растворитель удаляли в вакууме. Повторно растворяли в ΏΟΜ и гасили насыщенным водным раствором ΝΗ₄Ο1. Слои разделяли и дважды экстрагировали ΩΟΜ. Промывали объединенную органическую фазу насыщенным солевым раствором, затем сушили над Μ§δΟ₄, фильтровали и концентрировали, получая 1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-хлорхинолин-7-ил)окси)пропан-2-ол (98,8 мг, 0,276 ммоль, 98% выход) в виде не совсем белой пены. ¹Н ЯМР (400 МГц, ΏΜδΟ-ά₆) δ м.д. 1,25 (д, 3=6,06 Гц, 3Н), 1,33 (с, 9Н), 4,00-4,20 (м, 3Н), 4,81 (д, 3=4,29 Гц, 1Н), 7,74 (с, 1Н), 7,76 (д, 3=4,80 Гц, 1Н), 8,65 (с, 1Н), 8,94 (д, 3=4,80 Гц, 1Н). Μδ^ζ:358,1 [Μ+Η]+.

Стадия 3. 1-((6-(трет-Бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7ил)окси)пропан-2-ол.

К 1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-хлорхинолин-7-ил)окси)пропан-2-олу (98 мг, 0,274 ммоль) и 3,4диметил-1Н-пиразол-5-амину (39,6 мг, 0,356 ммоль) добавляли ΕίΟΗ (685 мкл), затем 1 каплю 2н. водн. НС1 (9,99 мг, 0,274 ммоль). Флакон для микроволновой печи закрывали и нагревали до 80°С за защитным экраном в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный образец фильтровали и очищали с помощью Ойзоп обращенно-фазовой ВЭЖХ системы, используя хроматографическую колонку δυηΐΊΓβ С18 ΟΒΏ 30x100 мм, с градиентом 10-45% ацетонитрил (0,1% ТЕЛ)/вода (0,1% ТЕЛ) и скоростью потока 30 мл/мин в течение 10 мин. Фракции, содержащие чистый продукт, объединяли и концентрировали. Полученный в результате остаток желтого цвета ресуспендировали в МеОН. Пропускали через Вю1аде δί-ίΗΓόοηαΐβ картридж, промывая МеОН. Концентрировали, получая в результате желтоватое твердое вещество. Затирали с ιΡγ₂Ο и отфильтровывали, получая свободное основание продукта в виде бледно-желтого порошка: 1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ол (51,3 мг, 0,116 ммоль, 42,4% выход). 'И ЯМР (400 МГц, □ΜδΟ-φ,) δ м.д. 1,24 (д, 3=5,81 Гц, 3Н), 1,32 (с, 9Н), 1,76 (с, 3Н), 2,18 (с, 4Н), 3,91-4,13 (м, 3Н), 4,72 (ушир. с, 1Н), 6,37 д, 3=4,29 Гц, 1Н), 7,37 (с, 1Н), 8,38 (д, 3=4,80 Гц, 1Н), 8,92 (с, 1Н), 9,33 (ушир. с, 1Н). Μδ: тА:433,3 [М+Н]+.

Пример 2. Гидрохлорид (К)-1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ола и гидрохлорид ^)-1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ола

Рацемическую смесь 1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ола разделяли на его чистые энантиомеры посредством хиральной препаративной ВЭЖХ (СЫга1рак ΑΩ-Н 30x250 мм, поставляемая компанией СЫга1 Тесйпо1о§1ез, 1пс., Аез! СЬез1ег, РА, υδΑ. Элюент: 70:15:15 - гептан:ЕЮН:СН₃ОН, 45 мл/мин). ^)-1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ол элюировали первым (99,5% энантиомерный избыток). (К)-1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7ил)окси)пропан-2-ол элюировали вторым (99,5% энантиомерный избыток). Разделенные изомеры затем каждый индивидуально растворяли в МеОН (требуется подогрев до 45°С для растворения), охлаждали до кт и затем добавляли 1,5 экв. 1,25М НС1 в МеОН и раствор перемешивали в течение 10 мин. Концентрировали индивидуальные растворы и помещали под вакуум полученное желтое твердое вещество. Затирали индивидуальные твердые вещества с ΑСN (20 мл), применяя обработку ультразвуком в течение 10 мин. Отфильтровывали и сушили твердые вещества, получая в результате соли НС1 каждого из энантиомеров в виде светло-желтых/желтовато-коричневых твердых веществ. Данные анализа гидрохлорида (К)1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ола:

Ή ЯМР (400 МГц, ϋΜδΟ-06) δ м.д. 14,47 (ушир. с, 1Н), 12,73 (ушир. с, 1Н), 11,24 (с, 1Н), 9,24 (ушир. с, 1Н), 8,50 (д, 3=7,07 Гц, 1Н), 7,67 (с, 1Н), 6,64 (д, 3=6,82 Гц, 1Н), 3,97-4,18 (м, 3Н), 2,24 (с, 3Н), 1,84 (с, 3Н), 1,35 (с, 9Н), 1,28 (д, 3=5,81 Гц, 3Н). Μδ (т/ζ) 433. [α]_ο=+0,4 градусов (с=1,3, СН₃ОН). Т.пл. 275-276°С. Данные анализа гидрохлорида ^)-1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино) хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ола: 'И ЯМР (400 МГц, ΏΜδΟ-ά₆) δ м.д. 14,47 (ушир. с, 1Н), 12,73 (ушир. с, 1Н), 11,24 (с, 1Н), 9,24 (ушир. с, 1Н), 8,50 (д, 3=7,07 Гц, 1Н), 7,67 (с, 1Н), 6,64 (д, 3=6,82 Гц, 1Н), 3,97-4,18 (м, 3Н), 2,24 (с, 3Н), 1,84 (с, 3Н), 1,35 (с, 9Н), 1,28 (д, 3=5,81 Гц, 3Н). Μδ (т/ζ) 433. [α]π=-0,3 градуса (с=1,3, СН₃ОН). Т.пл. 266-267°С.

Пример 3. Гидрохлорид (К)-1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино) хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ола

- 13 027984

Стадия 1. 6-Бром-4-хлор-7-((2К)-2-((тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)окси)пропокси)хинолин.

Смесь неочищенных 6-бром-4-хлорхинолин-7-ола (67,5 г, 206 ммоль), (2К)-2-((тетрагидро-2Нпиран-2-ил)окси)пропил-4-метилбензолсульфоната (1опе8, В. е1. а1. 1. Не!. СНет. 1982, 19(3), 551) (61,6 г, 196 ммоль) и карбоната цезия (202 г, 619 ммоль) в ΌΜΡ (150 мл) нагревали до 80°С в течение 12 ч, затем перемешивали при 25°С в течение 2 суток. Реакционную смесь добавляли к смеси воды (1200 мл) и Εΐ₂Ο (500 мл). Органический слой отделяли и промывали насыщенным водным раствором №НСО₃, насыщенным солевым раствором, сушили над Мд8О₄ и концентрировали в вакууме, получая 6-бром-4-хлор-7((2К)-2-((тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)окси)пропокси)хинолин в виде масла (57,8 г, 69,9% выход). ¹Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά₆) δ м.д. 8,75-8,85 (м, 1Н), 8,34-8,42 (м, 1Н), 7,65 (д, 1=4,8 Гц, 1Н), 7,63 (д, 1=4,0 Гц, 1Н), 4,95-5,05 (м, 1Н), 4,85 (т, 1=3,0 Гц, 1Н), 4,23-4,37 (м, 2Н), 4,12-4,23 (м, 2Н), 3,88-4,01 (м, 1Н), 3,783,88 (м, 1Н), 3,40-3,54 (м, 1Н), 1,54-1,80 (м, 3Н), 1,28 (м, 3Н). М8 (т/ζ) 402,0.

Стадия 2. 6-(трет-Бутилтио)-4-хлор-7-((2К)-2-((тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)окси)пропокси)хинолин. Смесь 6-бром-4-хлор-7-((2К)-2-((тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)окси)пропокси)хинолина (37,8 г, 94 ммоль) в диоксане (397 мл) продували газообразным Ν₂ в течение 5 минут при перемешивании. Тетракис(трифенилфосфин)палладий (16,35 г, 14,15 ммоль) и №₂СО₃ (25,00 г, 236 ммоль) добавляли, затем добавляли 2-метилпропан-2-тиол (11,17 мл, 99 ммоль). Реакционную смесь продували (Ν₂) и вакуумировали 5 раз, затем перемешивали при 70°С. Спустя 18 ч, добавляли дополнительно тетракис(трифенилфосфин)палладий (1,6 г, 1,4 ммоль) и 2-метилпропан-2-тиол (1,2 мл, 10,6 ммоль) и реакционную смесь нагревали снова до 70°С в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали до кт и смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме до получения вязкого масла, которое было растворено в смеси гексанов (80 мл) и ЭСМ (30 мл). Раствор очищали, пропуская через слой силикагеля, элюируя 2 л гексанов, затем 4,5 л 20% ΕΐΟΆο в гексанах и наконец элюируя 2 л 50% этилацетата в гексанах, получая 6-(трет-бутилтио)-4-хлор-7-((2К)-2-((тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)окси)пропокси)хинолин (26,2 г, 67,8% выход) в виде густого красновато-коричневого масла после удаления растворителя в вакууме. ¹Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά₆) δ м.д. 8,78 (д, 1=4,8 Гц, 1Н), 8,26 (с, 1Н), 7,62 (д, 1=4,8 Гц, 1Н), 7,54 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 5,00-5,22 (м, 1Н), 4,73-4,97 (м, 1Н), 4,14-4,28 (м, 4Н), 4,03 (д, 1=7,3 Гц, 1Н), 3,75-3,86 (м, 2Н), 3,38-3,61 (м, 3Н), 1,69-1,80 (м, 2Н), 1,58-1,65 (м, 1Н), 1,32-1,34 (м, 9Н). М8 (т/ζ) 410,0.

Стадия 3. (К)-1-((6-(трет-Бутилсульфонил)-4-хлорхинолин-7-ил)окси)пропан-2-ол.

Смесь 6-(трет-бутилтио)-4-хлор-7-((2К)-2-((тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)окси)пропокси)хинолина (30 г, 73,2 ммоль) и оксона (67,5 г, 110 ммоль) в ΕΐΟΆο (362 мл) и воде (362 мл) перемешивали в течение 18 ч при 25°С. Органический слой отделяли, промывали насыщенным раствором NаНСΟ₃ (100 мл) и объединенные водные слои подщелачивали твердым NаНСΟ₃ и экстрагировали ΕΐΟΆο (2x400 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным Μд8Ο₄ и концентрировали в вакууме, получая масло. Это масло растворяли в СН₂С1₂ (50 мл) и очищали посредством колоночной хроматографии (30-70% гексаны 3:1 ΕΐΟΗΕΐΟΆο, Гео КЕ, 330 г силикагеля в колонке), получая (К)-1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4хлорхинолин-7-ил)окси)пропан-2-ол (14,0 г, 53,5% выход) в виде светло-персикового твердого вещества после удаления растворителя в вакууме. ¹Н ЯМР (400 МГц, ^Μ8Ο-ά₆) δ м.д. 8,94 (д, 1=4,8 Гц, 1Н), 8,65 (с, 1Н), 7,76 (д, 1=4,8 Гц, 1Н), 7,74 (с, 1Н), 4,81 (д, 1=4,3 Гц, 1Н), 3,89-4,29 (м, 3Н), 1,33 (с, 9Н), 1,26 (д, 1=6,1 Гц, 3Н). М8 (т/ζ) 358,0. Это вещество объединяли с дополнительными порциями и проводили очистку Ρά. Раствор (К)-1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-хлорхинолин-7-ил)окси)пропан-2-ола (60,1 г, 134 ммоль) в ΕΐΟН/СН₂С1₂ (258 мл/258 мл) перемешивали с Вкладе 8ΐ-ΤΗΐο1 (335,9 ммоль, 258,4 г, 1,3 ммоль/г) в течение 4 ч при 25°С. Смесь фильтровали через фильтровальную бумагу на стеклянном фильтре, используя ΕΐΟΆο для переноса и промывки. Твердый остаток промывали, используя по 2 л каждого из БЮИ, ΕΐΟΆο и СН₂С1₂. Фильтрат повторно фильтровали через фильтровальную бумагу на стеклянном фильтре, затем концентрировали в вакууме, получая белое твердое вещество, (К)-1-((6-(третбутилсульфонил)-4-хлорхинолин-7-ил)окси) пропан-2-ол (60 г, 125% выход), которое можно использовать без дополнительной очистки.

- 14 027984

Стадия 4. (К)-1-((6-(трет-Бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7ил)окси)пропан-2-ола гидрохлорид.

Смесь (К)-1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-хлорхинолин-7-ил)окси)пропан-2-ола (55 г, 154 ммоль) и 3,4-диметил-1Н-пиразол-5-амина (22,21 г, 200 ммоль) в ЕЮН (468 мл) и концентрированной НС1 (0,179 мл, 2,152 ммоль) перемешивали при 80°С в течение 18 ч. Дополнительно 3,4-диметил-1Н-пиразол-5-амин (2,3 г, 20,7 ммоль) в ЕЮН (100 мл) добавляли и реакционную смесь нагревали в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали в вакууме до получения густой желтовато-коричневой суспензии. Суспензию нагревали в ΜеСN (240 мл) при кипячении с обратным холодильником в течение 45 мин при интенсивном перемешивании. Реакционную смесь охлаждали до 25°С, подвергали действию ультразвука в течение 1 мин и твердое вещество отфильтровывали и промывали ΜеСN (50 мл). Твердый остаток на фильтре сушили в течение 2 ч, затем растворяли в МеОН (1 л), нагревая до растворения. Раствор концентрировали в вакууме, в результате получая густое темное вещество (100 мл общий объем). Аценонитрил (250 мл) добавляли, получали белый осадок. Смесь нагревали при кипячении с обратным холодильником в течение 1 ч, затем охлаждали до 25°С в течение 17 ч. Белое твердое вещество отфильтровывали, промывали ΜеСN (53 мл) и сушили под вакуумом, получая гидрохлорид (К)-1-((6-(третбутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ола (46,0 г, 63,8% выход) в виде белого твердого вещества, которое, как было установлено, представляет собой моно-НС1 соль. РХКО образца этого вещества представлена на фигуре 1. ¹Н ЯМР (400 МГц, ΏΜδ0-ά₆) δ м.д. 14,11-14,47 (м, 1Н), 12,72 (с, 1Н), 11,22 (ушир. с, 1Н), 9,23 (ушир. с, 1Н), 8,49 (д, 1=6,9 Гц, 1Н), 7,64 (с, 1Н), 6,64 (д, 1=6, 9 Гц, 1Н), 3,82-4,05 (м, 2Н), 2,24 (с, 3Н), 1,84 (с, 3Н), 1,35 (с, 9Н), 1,28 (д, 1=5,8 Гц, 3Н). Μδ (т/ζ) 477,0.

Пример 4. 1-((6-(трет-Бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7ил)окси)-2-метилпропан-2-ол

Стадия 1. 1-((6-(трет-Бутилсульфонил)-4-хлорхинолин-7-ил)окси)-2-метилпропан-2-ол.

К раствору 6-(трет-бутилсульфонил)-4-хлорхинолин-7-ола (250 мг, 0,834 ммоль) в ΏΜΡ (2756 мкл) добавляли К₂СО₃ (576 мг, 4,17 ммоль), затем добавляли 1-хлор-2-метилпропан-2-ол (209 мкл, 2,502 ммоль). Спустя 10 мин результаты ΙΧΑΙδ показали отсутствие продукта. Нагревали реакционную смесь до 60°С. Не наблюдали протекание реакции спустя 3 ч при этой температуре. Добавляли иодид натрия (375 мг, 2,50 ммоль) и 2,2-диметилоксиран (371 мкл, 4,17 ммоль) и перемешивали в течение 2 суток при 60°С. Неочищенный образец подвергали очистке посредством нормально-фазовой хроматографии Βΐο1ауе (25 г колонка δΝΑΡ, 0-80%, 80%. гексан/ЕЮАс). Фракции, содержащие чистый продукт, объединяли и концентрировали, что приводило к получению продукта в виде твердого вещества не совсем белого цвета: 1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-хлорхинолин-7-ил)окси)-2-метилпропан-2-ол (46 мг, 0,124 ммоль, 14,83% выход). ¹Н ЯМР (400 МГц, ΏΜδ0-ά₆) δ м.д. 1,29 (с, 6Н), 1,33 (с, 9Н), 4,03 (с, 2Н), 4,56 (с, 1Н), 7,72 (с, 1Н), 7,76 (д, 1=4,80 Гц, 1Н), 8,64 (с, 1Н), 8,94 (д, 1=4,80 Гц, 1Н). Μδ (т/ζ) 372,2 (М+Н+).

Стадия 2. 1-((6-(трет-Бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7ил)окси)-2-метилпропан-2-ол.

К 1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-хлорхинолин-7-ил)окси)-2-метилпропан-2-олу (45 мг, 0,121 ммоль) и 3,4-диметил-1Н-пиразол-5-амину (17,48 мг, 0,157 ммоль) во флакон для микроволновой печи добавляли ЕЮН (303 мкл), затем добавляли 1 каплю 1Ν водн. НС1 (4,41 мг, 0,121 ммоль). Флакон для микроволновой печи закрывали и нагревали до 80°С за защитным экраном в течение ночи. Результаты 1,(Α1δ показали полное превращение в продукт. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенное вещество фильтровали и очищали с помощью Οΐ1δοη обращенно-фазовой ВЭЖХ системы, используя хроматографическую колонку διιηΙϊΐΌ С18 0ВО 30x100 мм, с градиентом 25-65% ацетонитрил (0,1% ТРА)/вода (0,1% ТРА) и скоростью потока 30 мл/мин в течение 15 мин. Фракции, содержащие чистый продукт, объединяли и концентрировали. Полученный в результате остаток желтого цвета ресуспендировали в МеОН и полученную смесь пропускали через Вю1а§е δΐ^ατΒοηαΐΌ картридж, который промывали МеОН, затем концентрировали, получая в результате желтое твердое вещество. Затирали с ΐΡτ₂0 и отфильтровывали, получая свободное основание продукта в виде не совсем белого порошка: 1-((6-(третбутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)-2-метилпропан-2-ол (13,5 мг, 0,030 ммоль, 24,98% выход). ¹Н ЯМР (400 МГц, ΏΜδ0-ά₆) δ м.д. 1,29 (с, 6Н), 1,34 (с, 9Н), 1,77 (с, 3Н),

2,19 (с, 3Н), 3,94 (с, 2Н), 4,49 (с, 1Н), 6,38 (ушир. с, 1Н), 7,36 (с, 1Н), 8,39 (д, 1=5,31 Гц, 1Н), 8,94 (с, 1Н), 9,34 (с, 1Н), 12,26 (ушир. с, 1Н). Μδ (т/ζ) 447,3 (М+Н+).

Пример 5. 6-(трет-Бутилсульфонил)-7-(2,2-дифторэтокси)-Ы-(3,4-диметил-1Н-пиразол-5- 15 027984 ил)хинолин-4-амин

Стадия 1. 6-(трет-Бутилсульфонил)-4-хлор-7-(2,2-дифторэтокси)хинолин.

К раствору 6-(трет-бутилсульфонил)-4-хлорхинолин-7-ола (100 мг, 0,334 ммоль) добавляли К₂СО₃(138 мг, 1,001 ммоль), затем добавляли 1,1-дифтор-2-иодэтан (44,1 мкл, 0,500 ммоль). Все это нагревали до 60°С в течение ночи. Результаты ЬСМ3 показали неполное превращение. Дополнительно добавляли 1,1-дифтор-2-иодэтан (44,1 мкл, 0,500 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение 5 ч. Реакция все еще не была завершена по результатам ЬСМ3, поэтому добавляли другую аликвоту 1,1дифтор-2-иодэтана (44,1 мкл, 0,500 ммоль) и реакционную смесь снова перемешивали при 60°С в течение ночи. Результаты ЬСМЗ показали завершение реакции и полное без примесей превращение в необходимый продукт. Неочищенный образец подвергали очистке посредством нормально-фазовой хроматографии (25 г колонка 3ΝΑΡ, 0-50%, 50% гексан/ЕЮАс). Фракции, содержащие чистый продукт, объединяли и концентрировали, что приводило к получению продукта в виде твердого вещества не совсем белого цвета: 6-(трет-бутилсульфонил)-4-хлор-7-(2,2-дифторэтокси)хинолин (88,8 мг, 0,244 ммоль, 73,2% выход). ^ХН ЯМР (400 МГц, ΌΜ3Ο-ά₆) δ м.д. 1,32 (с, 9Н), 4,66 (тд, 1=14,53, 3,54 Гц, 2Н), 6,28-6,63 (м, 1Н), 7,80 (д, 1=4,80 Гц, 1Н), 7,85 (с, 1Н), 8,67 (с, 1Н), 8,97 (д, 1=4,80 Гц, 1Н). МЗ: т/ζ: 364,1 [М+Н]+.

Стадия 2. 6-(трет-Бутилсульфонил)-7-(2,2-дифторэтокси)-Ы-(3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)хинолин-4-амин.

К 6-(трет-бутилсульфонил)-4-хлор-7-(2,2-дифторэтокси)хинолину (85 мг, 0,234 ммоль) и 3,4диметил-1Н-пиразол-5-амину (33,8 мг, 0,304 ммоль) во флакон для микроволновой печи добавляли ЕЮН (779 мкл), затем добавляли 1 каплю 1Ν водн. НС1 (8,52 мг, 0,234 ммоль). Флакон закрывали и нагревали до 80°С за защитным экраном в течение ночи. Результаты ЬСМЗ показали полное превращение в продукт. Реакционную смесь концентрировали и затирали полученный в результате остаток с ~2 мл МеСХ применяя ультразвук ~1 мин. Отфильтровывали полученное в результате твердое вещество, промывали ΜеСN и сушили под вакуумом, получая продукт гидрохлорид 6-(трет-бутилсульфонил)-7-(2,2дифторэтокси)Х-(3,4-диметил-'1Н-пиразол-5-ил)хинолин-4-амина (93,5 мг, 0,197 ммоль, 84% выход) в виде твердого вещества не совсем белого цвета. ¹Н ЯМР (400 МГц, ОМ3О-4₆) δ м.д. 12,70 (с, 1Н), 11,25 (ушир. с, 1Н), 9,26 (ушир. с, 1Н), 8,51 (д, 1=7,07 Гц, 1Н), 7,57 (с, 1Н), 6,67 (д, 1=7,33 Гц, 1Н), 6,47 (тт, 1=3,28, 53,81 Гц, 1Н), 4,63 (тд, 1=3,16, 14,46 Гц, 2Н), 2,24 (с, 3Н), 1,84 (с, 3Н), 1,34 (с, 9Н). МЗ: т/ζ: 439,3 [М+Н]+.

Пример 6. 6-(трет-Бутилсульфонил)-Ы-(3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)-7-(3-метоксипропокси)хинолин-4-амин

Стадия 1. 6-(трет-Бутилсульфонил)-4-хлор-7-(3-метоксипропокси)хинолин.

6-(трет-Бутилсульфонил)-4-хлорхинолин-7-ол (60 мг, 0,196 ммоль), К₂СО₃ (55 мг, 0,392 ммоль) и 1бром-3-метоксипропан (0,088 мл, 0,785 ммоль) в ОМЕ (1 мл) нагревали до 70°С. Реакционную смесь разделяли между ЕЮАс и насыщенным солевым раствором. Водный слой дважды экстрагировали ЕЮАс и объединенные ЕЮАс слои сушили над Να₂3Ο₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью ВюГаде (3ΝΑΡ СагГпйде КР 3Ϊ1 10 г, 30-75% ЕЮАс/гексан), получая 6-(трет-бутилсульфонил)-4хлор-7-(3-метоксипропокси)хинолин (0,071 г, 0,185 ммоль, 94% выход). ¹Н ЯМР (400 МГц, ОМ3О-4₆) δ м.д. 1,33 (с, 9Н), 1,99-2,08 (м, 2Н), 3,27 (с, 3Н), 3,58 (т, 1=6,19 Гц, 2Н), 4,32 (т, 1=6,19 Гц, 2Н), 7,73 (с, 1Н), 7,76 (д, 1=4,80 Гц, 1Н), 8,65 (с, 1Н), 8,94 (д, 1=4,55 Гц, 1Н). М3: т/ζ: 372,1 [М+Н]+.

Стадия 2. 6-(трет-Бутилсульфонил)-Ы-(3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)-7-(3-метоксипропокси)хинолин-4-амин.

К раствору 6-(трет-бутилсульфонил)-4-хлор-7-(3-метоксипропокси)хинолина (0,07 г, 0,184 ммоль) в NΜΡ (1 мл) добавляли 4,5-диметил-1Н-пиразол-3-амин (0,025 г, 0,221 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 100°С. Реакционную смесь охлаждали и затем очищали посредством обращенно-фазовой ВЭЖХ

- 16 027984 (^а!егз 8ипйге С18, 30x100 мм, 10-50% ацетонитрил/вода 0,1% ТРА, 35 мл/мин, 10 мин), получая соль трифторуксусной кислоты. Соль подщелачивали насыщенным раствором №₂С'О₃, затем экстрагировали дихлорметаном. Слой ЭСМ сушили над Να₂8₄, фильтровали, концентрировали и сушили под вакуумом, получая 6-(трет-бутилсульфонил)-Ы-(3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)-7-(3-метоксипропокси)хинолин-4амин (0,050 г, 0,104 ммоль, 56,4% выход). Ίί ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά₆) δ м.д. 1,33 (с, 9Н), 1,78 (с, 3Н), 1,98-2,06 (м, 2Н), 2,20 (с, 3Н), 3,27 (с, 3Н), 3,59 (т, 1=6,32 Гц, 2Н), 4,22 (т, 1=6,06 Гц, 2Н), 6,38 (ушир. с, 1Н), 7,37 (с, 1н), 8,39 (д, 1=5,56 Гц, 1Н), 8,94 (с, 1Н), 9,33 (ушир. с, 1Н), 12,27 (ушир. с, 1Н). М8: т/ζ: 447,2 [М+Н]+.

В случае нижеприведенного примера проводили синтез таким же образом, как в вышеприведенном примере, используя СР₃СН₂1 в качестве алкилирующего агента

Пример	Структура	Название	М5 (М+Н)+	ЯМР
7	Ν-ΝΗ	6- (третбутилсульфонил)Ν-(4,5-диметил1Н-пираэол-3-ил)7-(2,2,2трифторэтокси)хинолин-4-амин	457	1Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-ά) δ м.д. 9,03 (с, 1Н), 8,49 (д, 5,56 Гц, 1Н), 7,58 (ушир. с, 1Н), 6,39 (д, Э=5,56 Гц, 1Н), 4,59 (кв., Э=8,08 Гц, 2Н), 2,34 (с, ЗН), 1,80 (с,ЗН), 1,42 (с, 9 Н)

Пример 8. Гидрохлорид 6-(трет-Бутилсульфонил)-Ы-(3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)-7-(2метоксиэтокси)хинолин-4-амина

Стадия 1. 6-(трет-Бутилсульфонил)-4-хлор-7-(2-метоксиэтокси)хинолин.

6-(трет-Бутилсульфонил)-4-хлорхинолин-7-ол (0,81 г, 2,70 ммоль), К₂СО₃ (1,143 г, 8,11 ммоль) и 1бром-2-метоксиэтан (0,508 мл, 5,40 ммоль) в ΌΜΓ (8,50 мл) нагревали при 70°С. Реакционную смесь охлаждали и разделяли между ЕЮАс и насыщенным солевым раствором. Водный слой дважды экстрагировали ЕЮАс и объединенные ЕЮАс слои сушили над Να₂8Ο₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью Бю(а§е (8ΝΛΡ СаНпйде КР 8ίί 25 г, 10-50% ЕЮАс/гексан), получая 6-(третбутилсульфонил)-4-хлор-7-(2-метоксиэтокси)хинолин (0,461 г, 1,262 ммоль, 46,7% выход). 'И ЯМР (400 МГц, Р)М8О-с1₆) δ м.д. 8,93 (д, 1=4,55 Гц, 1Н), 8,66 (с, 1Н), 7,73-7,79 (м, 2Н), 4,40 (дд, 1=3,54, 5,31 Гц, 2Н), 3,76 (дд, 1=3,66, 5,18 Гц, 2н), 3,34 (с, 3Н), 1,33 (с, 9Н). М8: т/ζ: 358,1 [М+Н]+.

Стадия 2. Гидрохлорид 6-(трет-бутилсульфонил)-Ы-(3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)-7-(2-метоксиэтокси)хинолин-4-амина.

6-(трет-Бутилсульфонил)-4-хлор-7-(2-метоксиэтокси)хинолин (0,461 г, 1,288 ммоль), 4,5-диметил1Н-пиразол-3-амин (0,175 г, 1,546 ммоль) и 2 капли водн. НС1 (0,161 мл, 0,322 ммоль) в ЕЮН (3,06 мл) нагревали при 80°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до кт и осадок отфильтровывали, промывали ΜеСN и сушили под вакуумом, получая гидрохлорид 6-(трет-бутилсульфонил)-Ы-(3,4диметил-1Н-пиразол-5-ил)-7-(2-метоксиэтокси)хинолин-4-амина (0,290 г, 0,618 ммоль, 48,0% выход), Т. пл. 181-184°С. Ίί ЯМР (400 МГц, ОМ8О-й₆) δ м.д. 12,71 (с, 1Н), 11,20 (ушир. с, 1Н), 9,22 (ушир. с, 1Н), 8,48 (д, 1=7,07 ГЦ, 1Н), 7,63 (с, 1Н), 6,64 (д, 1=7,07 Гц, 1Н), 4,36 (т, 1=4,29 Гц, 2Н), 3,78 (т, 1=4,29 Гц, 2н), 3,35 (с, 3Н), 2,24 (с, 3Н), 1,84 (с, 3Н), 1,35 (с, 9Н). М8: т/ζ: 433,2 [М+Н]+.

Пример 9. Моногидрат гидрохлорида 6-(трет-бутилсульфонил)-Ы-(4,5-диметил-1Н-пиразол-3-ил)-7(2-метоксиэтокси)хинолин-4-амина

- 17 027984

Смесь 6-бром-4-хлор-7-метоксихинолина (50,00 г, 183 ммоль) и трибромида бора (37,3 мл, 394 ммоль) в ЭСЕ (200 мл) перемешивали в атмосфере азота при 90°С в течение 2,5 ч. Реакционную смесь охлаждали до кт и выливали в насыщенный раствор №НСО₃ при интенсивном перемешивании. Твердое вещество отфильтровывали и промывали водой и сушили, получая ~83 г коричневого твердого вещества. Это вещество делили на 2 равные порции. Каждую порцию помещали в круглодонную колбу объемом 1 л вместе с 500 мл 1-Рг₂О и нагревали при 70°С в течение 15 мин. Смесь затвердевала; ее охлаждали до кт, разбавляя еще 1-Рг₂О и фильтровали, затем сушили, получая 6-бром-4-хлорхинолин-7-ол (59,99 г, 126%) в виде коричневого твердого вещества. Этот образец возможно загрязнен неорганическими солями, которые следует принять в расчет избыточной массы. ¹Н ЯМР (400 МГц, ΏΜδΟ-ά₆) δ м.д. 8,97 (д, 1=5,56 Гц, 1Н), 8,48 (с, 1Н), 7,85 (д, 1=5,56 Гц, 1Н), 7,60 (с, 1Н). Μδ (т/ζ) 258/260.

Стадия 2. 6-Бром-4-хлор-7-(2-метоксиэтокси)хинолин.

Смесь 6-бром-4-хлорхинолин-7-ола (42,82 г, 166 ммоль), 1-бром-2-метоксиэтана (18,68 мл, 199 ммоль) и карбоната цезия (162 г, 497 ммоль) в ΩΜΕ (395 мл) перемешивали в атмосфере азота при 80°С в течение 4 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли воду (~500 мл). Приблизительно ~1/16 смеси выливали в воду (500 мл) и твердое вещество отфильтровывали. Этот процесс повторяли до тех пор, пока весь образец израсходовался, отфильтровывая твердое вещество каждый раз на одной и той же воронке Бюхнера. После фильтрования твердое вещество промывали 1500 мл воды и сушили под вакуумом в течение нескольких часов, затем переносили в кристаллизатор и помещали в сушильный шкаф под вакуумом при 80°С на период времени 65 ч, получая 6-бром-4-хлор-7-(2метоксиэтокси)хинолин (27,38 г, 52,2%) в виде коричневого твердого вещества. ¹Н ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-άβ) δ м.д. 8,81 (д, 1=4,80 Гц, 1Н), 8,38 (с, 1Н), 7,66 (д, 1=4,80 Гц, 1Н), 7,63 (с, 1Н), 4,37-4,41 (м, 2Н), 3,77-3,82 (м, 2Н), 3,38 (с, 3Н). Μδ (т/ζ) 316/318.

Стадия 3. 6-(трет-Бутилтио)-4-хлор-7-(2-метоксиэтокси)хинолин.

Смесь 6-бром-4-хлор-7-(2-метоксиэтокси)хинолина (27,18 г, 86 ммоль) в 1,4-диоксане (300 мл) перемешивали при комнатной температуре, при этом продувая азотом в течение 20 мин. После завершения продувания добавляли №₂СО₃ (22,75 г, 215 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий (2,480 г, 2,146 ммоль) и 2-метилпропан-2-тиол (10,16 мл, 90 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 70°С в течение 3 ч. Только минимальное протекание реакции наблюдали; еще одну порцию Рй(РРй₃)₄ (2,480 г, 2,146 ммоль) и 2-метилпропан-2-тиола (10,16 мл, 90 ммоль) добавляли и нагревание продолжали в течение 2 ч. Этот процесс повторяли дважды, при этом весь исходный бромид израсходовали. Реакционную смесь охлаждали до кт и пропускали через слой силикагеля (предварительно пропитанного ЕЮАс), используя этилацетат для элюирования продукта. Элюат концентрировали, получая черное масло. Это вещество реконцентрировали на Се1йе и делили на 2 порции для очистки. Каждую порцию очищали следующим образом: неочищенные образцы очищали с помощью нормально-фазовой хроматографии 1зсо (330 г колонка, 0-60%, ЕЮАс/гексаны). Фракции, содержащие чистый продукт, объединяли и концентрировали, что приводило к получению продукта: 6-(трет-бутилтио)-4-хлор-7-(2-метоксиэтокси)хинолин (25,53 г, 91%) в виде коричневого твердого вещества. ¹Н ЯМР (400 МГц, ^ΜδΟ-ά6) δ м.д. 8,76-8,80 (м, 1Н), 8,26 (с, 1Н), 7,60-7,66 (м, 1Н), 7,55 (с, 1Н), 4,25-4,39 (м, 2Н), 3,68-3,83 (м, 2Н), 3,37 (с, 3Н), 1,32 (с, 9Н). Μδ (т/ζ) 326.

Стадия 4. 6-(трет-Бутилсульфонил)-4-хлор-7-(2-метоксиэтокси)хинолин.

Смесь 6-(трет-бутилтио)-4-хлор-7-(2-метоксиэтокси)хинолина (25,51 г, 78 ммоль) в ЕЮАс (300 мл) и воде (300 мл) перемешивали при кт. После этого добавляли оксон Охопе® (55,3 г, 90 ммоль) порциями в течение 10 мин, затем перемешивали в течение ночи. Реакция не была завершена; дополнительно добавляли 5,5 г Охопе® (0,1 экв.) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч. Этот процесс повторяли дважды, после этого реакция была завершена. Полученную в результате реакционную смесь выливали в делительную воронку и слои разделяли. Водный слой три раза экстрагировали ЕЮАс. Объединенную органическую фазу концентрировали, получая оранжевое масло, затвердевающее при отстаивании. Это вещество растворяли в СН₂С1₂, концентрировали на Се1йе и делили на 2 порции для очистки. Каждую порцию очищали следующим образом: неочищенный образец очищали посредством нормально- 18 027984 фазовой хроматографии Ьео (330 г колонка Οο1ά, 0-100%, ЕЮАс/гексаны). Фракции, содержащие чистый продукт, объединяли и концентрировали, что приводило к получению продукта: 6-(третбутилсульфонил)-4-хлор-7-(2-метоксиэтокси)хинолин (19,51 г, 69,6%) в виде светло-оранжевого твердого вещества. ¹Н ЯМР (400 МГц, ΏΜδΟ-άΟ δ м.д. 8,93 (д, 1Н), 7,62-7,82 (м, 2Н), 4,31-4,46 (м, 2Н), 3,683,81 (м, 2Н), 3,34 (с, 3Н), 1,32 (с, 9Н). Μδ (т/ζ) 358. Это вещество объединяли с дополнительными порциями и проводили очистку Ρά: 6-(трет-бутилсульфонил)-4-хлор-7-(2-метоксиэтокси)хинолин (24,18 г, 67,57 ммоль) растворяли в 3:1 ЭСМ:ЕЮН. К этому раствору добавляли ионит ВЮаде δΐ-ΤΕΐοΙ (270,28 ммоль, 207,6 г, 4 экв.) и полученную в результате суспензию перемешивали в течение 4 ч при кт. Суспензию фильтровали через слой СеШе, используя СН₂С1₂ для промывки. Фильтрат концентрировали, получая 6-(трет-бутилсульфонил)-4- хлор-7-(2-метоксиэтокси)хинолин (26 г) в виде вязкого желтого масла, которое можно использовать без дополнительной очистки.

Стадия 5. Моногидрат гидрохлорида 6-(трет-бутилсульфонил)-Х-(4,5-диметил-1Н-пиразол-3-ил)-7(2-метоксиэтокси)хинолин-4-амина.

Смесь 6-(трет-бутилсульфонил)-4-хлор-7-(2-метоксиэтокси)хинолина (24 г, 67,1 ммоль) и 4,5диметил-1Н-пиразол-3-амина (9,69 г, 87 ммоль) и 6н. НС1 (несколько капель из пипетки) в ΕΐΟΗ (200 мл) перемешивали в атмосфере азота при 80°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до кт. Большую часть ЕЮН удаляли в вакууме до тех пор, пока осталась густая суспензия. Добавляли МеС\ (700 мл) и суспензию нагревали при кипячении с обратным холодильником в течение 45 мин при интенсивном перемешивании. Суспензию охлаждали до кт, затем подвергали воздействию ультразвука в течение 15 мин. Твердое вещество отфильтровывали, промывали МеСН Вещество сушили на фильтре с использованием вытяжной вакуумной системы в течение 45 мин, затем переносили в круглодонную колбу и помещали под вакуум на несколько часов (получено 28,5 г). Твердое вещество затем помещали в вакуумный сушильный шкаф при 50°С на ночь. Полученное в результате твердое вещество переносили в кристаллизатор и вручную растирали в более свободнотекучий порошок, затем продолжали нагревание в вакуумном сушильном шкафу в течение 48 ч. Образец подвергали дополнительному размельчению и опять помещали в вакуумный сушильный шкаф при 50°С на ночь, получая в результате моногидрат гидрохлорида 6-(трет-бутилсульфонил)-Х-(4,5-диметил-1Н-пиразол-3-ил)-7-(2-метоксиэтокси)хинолин-4амина (26,9 г, 86%) в виде бледно-желтого порошка, который, как было установлено, представляет собой моно-НС1 соль и моногидрат. ΡΧΚΌ образца этого вещества представлена на фиг. 2. ¹Н ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-ά₆) δ м.д. 14,05-14,15 (м, 1Н), 12,69 (с, 1Н), 11,21 (ушир. с, 1Н), 9,24 (ушир. с, 1Н), 8,49 (д, 1=7,07 Гц, 1Н), 7,55 (с, 1Н), 6,65 (д, 1=6,82 Гц, 1Н), 4,32-4,43 (м, 2Н), 3,73-3,83 (м, 2Н), 3,35 (с, 3Н), 2,24 (с, 3Н), 1,84 (с, 3Н), 1,35 (с, 9Н). Μδ (т/ζ) 433.

Пример 10. 6-(трет-Бутилсульфонил)-Х-(3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)-7-фторхинолин-4-амин

Стадия 1. 5-(((4-Бром-3-фторфенил)амино)метилен)-2,2-диметил-1,3-диоксан-4,6-дион.

Смесь 2,2-диметил-1,3-диоксан-4,6-диона (36,4 г, 253 ммоль) в триметилортоформиате (125 мл) перемешивали при 100°С в течение 1,5 ч. Эту смесь охлаждали до 80°С и добавляли 4-бром-3-фторанилин (40 г, 211 ммоль), используя АСХ для содействия переносу при добавлении. Нагревали до 100°С в течение 3,5 ч. Реакционную смесь охлаждали до кт и выливали в Εΐ₂Ο (750 мл) и перемешивали в течение нескольких минут. Отфильтровывали полученное в результате твердое вещество, промывали Εΐ₂Ο и сушили, получая 5-(((4-бром-3-фторфенил)амино)метилен)-2,2-диметил-1,3-диоксан-4,6-дион (61,41 г, 178 ммоль, 85% выход) в виде светло-желтого порошка. ¹Н ЯМР (ΌΜδΟ-ά₆) δ м.д. 11,25 (д, 1=14,4 Гц, 1Н),

- 19 027984

8,59 (д, 1=14,4 Гц, 1Н), 7,67-7,85 (м, 2Н), 7,42 (дд, 1=8,6, 2,0 Гц, 1Н), 1, 68 (с, 6Н).

Стадия 2. 6-Бром-7-фторхинолин-4(1Н)-он/6-бром-5-фторхинолин-4(1Н)-он.

5-(((4-Бром-3-фторфенил)амино)метилен)-2,2-диметил-1,3-диоксан-4,6-дион (61,14 г, 177,6 ммоль) порциями добавляли к высококипящей жидкости Даутерм (270 мл) при 245°С. После добавления перемешивали при 245°С в течение 20 мин. Охлаждали до кт. Добавляли гексаны (~830 мл) и отфильтровывали твердое вещество, промывая дополнительным количеством гексанов и сушили, получая 6-бром-7фторхинолин-4(1Н)-он/6-бром-5-фторхинолин-4(1Н)-он (38,02 г, 88,5%) в виде коричневого твердого вещества, представляющего собой смесь региоизомеров (46:54, посредством ЬСМ8). М8: т/ζ: 242,0/244, 0 [М+Н]+. Эту смесь в том виде, как она есть, использовали для осуществления следующей стадии.

Стадия 3. 6-Бром-4-хлор-7-фторхинолин/6-бром-4-хлор-5-фторхинолин.

Смесь 6-бром-7-фторхинолин-4(1Н)-он/6-бром-5-фторхинолин-4(1Н)-он (37,6 г, 155 ммоль) и оксихлорида фосфора (101 мл, 1087 ммоль) перемешивали при кт в течение ночи. Удаляли РОС1₃ с помощью роторного испарителя и полученное в результате вещество растворяли в ИСМ. Эту смесь гасили (с большой осторожностью) посредством добавления из пипетки насыщенного водного раствора №-ьСО₃. После того как смесь была нейтрализована, слои разделяли. Водный слой далее экстрагировали ИСМ. Объединенные органические слои концентрировали. Полученное в результате вещество вносили в ЕЮАс и пропускали через невысокий слой силикагеля и концентрировали, получая 6-бром-4-хлор-7фторхинолин/6-бром-4-хлор-5-фторхинолин (40,42 г, 100%) в виде коричневого твердого вещества, которое представляло собой смесь региоизомеров (31:69, посредством ЬСМ8). М8: т/ζ: 260,0/262,0 [М+Н]+.

Стадия 4. 6-(трет-Бутилтио)-4-хлор-7-фторхинолин/6-(трет-бутилтио)-4-хлор-5-фторхинолин.

Смесь 6-бром-4-хлор-7-фторхинолина/6-бром-4-хлор-5-фторхинолина (20,35 г, 78 ммоль), 2метилпропан-2-тиола (9,68 мл, 86 ммоль), Ыа₂СО₃ (24,84 г, 234 ммоль), Рб₂бЪа₃ (7,15 г, 7,81 ммоль) и Ксантфоса (4,52 г, 7,81 ммоль) в 1,4-диоксане (300 мл) перемешивали в атмосфере азота при 95°С в течение ночи. Охлаждали до кт и концентрировали. Растворяли полученное в результате вещество в ИСМ/воде и разделяли слои. Экстрагировали водный слой ИСМ. Объединенные органические слои концентрировали. Неочищенный образец подвергали очистке путем нормально-фазовой хроматографии Есо (330 г колонка, 0-15%, Е/Н), получая 6-(трет-бутилтио)-4-хлор-7-фторхинолин/6-(трет-бутилтио)-4-хлор5-фторхинолин (~20,5 г) в виде желтого твердого вещества, которое все еще содержало бЪа (дибензилиденацетон). М8: т/ζ: 270,0 [М+Н]+. Этот образец представлял собой смесь региоизомеров, который в том виде, как он есть, использовали на следующей стадии.

Стадия 5. 6-(трет-Бутилсульфонил)-4-хлор-7-фторхинолин/6-(трет-бутилсульфонил)-4-хлор-5фторхинолин.

Смесь 6-(трет-бутилтио)-4-хлор-7-фторхинолина и 6-(трет-бутилтио)-4-хлор-5-фторхинолина (21,24 г, 79 ммоль) и оксона (48,4 г, 79 ммоль) в ЕЮАс (200 мл) и воде (200 мл) перемешивали при кт в течение ночи. Результаты ЬСМ8 показали наличие сульфоксида, а также сульфона. Дополнительно добавляли 15 г оксона и перемешивали в течение 3 ч; сульфоксид все еще присутствовал. Добавляли дополнительно 15 г оксона и перемешивали в еще течение 3 ч. Сульфоксид все еще присутствовал. Добавляли дополнительно 5 г оксона и перемешивали в течение ночи. Замечено, что каждый раз при дополнительном добавлении оксона количества ЕЮАс и воды надо увеличивать точно так же. Конечные количества растворителя представляли собой ~500 мл ЕЮАс и ~500 мл воды. Слои разделяли и водный слой экстрагировали один раз этилацетатом. Объединенные органические слои фильтровали и концентрировали. Разделяли вещество на две порции для очистки. Каждую порцию очищали следующим образом: неочищенный образец подвергали очистке с помощью нормально-фазовой хроматографии Есо (330 г колонка Со1<, 020%, Е/Н). Эта очистка приводила в результате к разделению региоизомеров. Две порции очищенных продуктов повторно объединяли. Пик 1 соответствовал продукту 6-(трет-бутилтио)-4-хлор-7фторхинолину (9,86 г) в виде твердого вещества белого цвета с кремовым оттенком. ¹Н ЯМР (ацетонитрил-<3) δ м.д. 8,96 (д, 1Н), 8,77 (д, 1=7,3 Гц, 1Н), 7,99 (д, 1=11,4 Гц, 1Н), 7,74 (д, 1=4,8 Гц, 1Н), 1,41 (д, 1=1,0 Гц, 9Н). М8: т/ζ: 302,0 [М+Н]+. Пик 2 соответствовал продукту 6-(трет-бутилсульфонил)-4-хлор-5фторхинолину (1,71 г) в виде белого порошка. ¹Н ЯМР (ацетонитрил-б3) δ м.д. 8,94 (д, 1Н), 8,04-8,15 (м, 2Н), 7,75 (д, 1=4,8 Гц, 1Н), 1,41 (д, 1=1,3 Гц, 9Н). М8: т/ζ: 302,0 [М+Н]+.

Стадия 6. 6-(трет-Бутилсульфонил)-П-(3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)-7-фторхинолин-4-амин.

Смесь 6-(трет-бутилсульфонил)-4-хлор-7-фторхинолина (0,200 г, 0,663 ммоль) и 3,4-диметил-1Нпиразол-5-амина (0,110 г, 0,994 ммоль) в ЕЮН (3 мл), содержащую 3 капли (добавленных с помощью шприца) 1н. водн. НС1, перемешивали при 75°С в течение ночи. Охлаждали и пропускали через Вю1аде §1-СатЪопа1е картридж, промывая МеОН. Промывочный раствор с МеОН концентрировали и неочищенный образец подвергали очистке с помощью нормально-фазовой хроматографии Есо (12 г колонка Со1<Т 0-10%, МеОН/ОСМ). Все фракции, содержащие продукт, объединяли и концентрировали, получая ~300 мг желтого пенистого твердого вещества (>100%). Растворяли в АСЫ и подвергали действию ультразвука; происходило образование белого осадка. Помещали в центрифугу Оепеуас (для центрифугирования вещества) и жидкость удаляли. Затирали полученное в результате вещество с Е1₂О и фильтровали, про- 20 027984 мывали твердое вещество дополнительными количествами Εΐ₂Ο и гексанов. Сушили твердое вещество, получая 6-(трет-бутилсульфонил)-Ы-(3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)-7-фторхинолин-4-амин в виде белого порошка. ¹Н ЯМР (ΌΜ8Ο-ά₆) δ м.д. 12,33 (с, 1Н), 9,56 (с, 1Н), 9,05 (д, 1=7,3 Гц, 1Н), 8,49 (д, 1=5,6 Гц, 1Н), 7,74 (д, 1=12,1 Гц, 1Н), 6,47-6,58 (м, 1Н), 2,21 (с, 3Н), 1,79 (с, 3Н), 1,36 (с, 9Н). М8: т/ζ: 377,0 [М+Н]+.

Фармацевтические композиции.

Пример А.

Таблетки получали, используя стандартные способы, и составляли следующим образом: Ингредиент Количество на таблетку

Соединение примера 1	5 :	мг
Микрокристаллическая целлюлоза	100	мг
Лактоза	100	мг
Натрия крахмалгликолят	30	мг
Стеарат магния	2 :	мг
Итого	237	мг

Пример В.

Капсулы получали, используя стандартные способы, и составляли следующим образом:

Ингредиент Количество на таблетку

Соединение примера 3 15 мг

Сухой крахмал 178 мг

Стеарат магния 2 мг

Итого 195 мг

Биологические испытания.

Анализ связывания, основанный на измерении поляризации флуоресценции, проводили для количественного определения взаимодействия тестируемых соединений с АТР связывающим карманом К1РК2 путем конкурентного связывания с флуоресцентно меченным АТР конкурентным лигандом. Полноразмерную РБАС Ηΐδ меченную К1РК2 очищали из бакуловирусной экспрессионной системы и использовали в конечной аналитической концентрации, вдвое превышающей наблюдаемое значение ΚΌ. Флуоресцентно меченный лиганд (5-({[2-({[3-({4-[(5 -гидрокси-2-метилфенил)амино] -2-пиримидинил} амино)фенил]карбонил}амино)этил]амино}карбонил)-2-(6-гидрокси-3-оксо-3Н-ксантен-9-ил)бензойная кислота, полученная как описано в документе ^О 2011/120025) использовали в конечной аналитической концентрации 5 нМ. Как фермент, так и лиганд готовили в виде растворов в 50 мМ НЕРЕ8 рН 7,5, 150 мМ ЫаС1, 10 мМ МдС1₂, 1 мМ ΌΤΤ и 1 мМ СНАР8. Тестируемые соединения готовили в 100% ΌΜ8Ο и 100 нл распределяли в индивидуальные лунки многолуночного планшета. После этого 5 мкл К1РК2 добавляли к тестируемым соединениям в удвоенной конечной аналитической концентрации и инкубировали при кт в течение 10 мин. После инкубации 5 мкл раствора флуоресцентно меченного лиганда добавляли в каждую реакционную смесь с удвоенной конечной аналитической концентрацией и инкубировали при кт в течение по меньшей мере 10 мин. В конечном итоге, образцы анализировали путем считывания показаний прибора, измеряющего поляризацию флуоресценции. Ингибирующую способность тестируемых соединений выражали как процент (%) ингибирования от присущего контрольным испытаниям.

Для экспериментов по выявлению зависимости концентрация/доза нормализованные данные устанавливали и р1С₅₀₈ определяли, используя общепринятые методы. Вычисляли среднее значение р1С₅₀₈, опредяляя усредненную величину путем использования результатов как минимум 2 экспериментов.

Номер примера рТСьо (К)

2(3)

8.4

8.5 8,5 8,2

8.3

8.4 8,3 8,3 7,8

Получение РБАС Н15 меченной К1РК2.

кДНК полноразмерной человеческой К1РК2 (взаимодействующей с рецептором серинтреонинкиназы 2) приобретали у компании 1пуДго§еп (СагГЪаб, СаБГогша, И8А, С1опе ГО:ЮН6368, К1РК2-рЕЫТК 221). Са1е\\ау® БК клонирование использовали, чтобы сайт-специфически рекомбиниро- 21 027984 вать ΚΤΡΚ2 в прямом направлении в Ν-концевую РЬАО-6Н1к, содержащуюся в векторе доставки рПЕЗТ8-РЬАО-Н1к6, в соответствии с протоколом, описанным компанией 1пуйгодеп. Трансфекцию в клетки насекомых Зройор1ета Ггищрегйа (ЗГ9) осуществляли, используя Се11Гесйп® Дпуйгодеп), в соответствии с протоколом компании-производителя.

ЗГ9 клетки культивировали в питательной среде Ехсе11 420 (ЗАРС Вюкаепсек, Ьепеха, Капкан, ИЗ; Апйоусг. НатркЫте ИК) при 27°С, 80 об/мин в колбе на качалке до достижения достаточного объема для внесения инокулята в биореактор. Клетки культивировали в биореакторе 50-литрового рабочего объема (Аррйкоп, Рок1ет Сйу, СаНГотша, ИЗ; ЗсЫейат, №1йег1апйк) при 27°С, 30% содержании растворенного кислорода и скорости перемешивания 60-140 об/мин до достижения необходимого объема, в котором концентрация клеток составляет приблизительно 3,7хе6 клеток/мл. Клетки насекомых инфицировали бакуловирусом при множественности заражения (МО1), равной 12,7. Культивирование продолжали в течение 43 ч фазы экспрессии. Инфицированные клетки удаляли из культуральной среды посредством центрифугирования при 2500 д, используя центрифугу непрерывного действия У1а£иде (Сагг) со скоростью потока 80 л/ч. Дебрис немедленно замораживали и затем направляли на очистку.

Методика очистки I: 9,83х 10¹⁰ клеток насекомых ресуспендировали в 1,4 л лизирующего буфера (50 мМ Тпк (рН 8,0), 150 мМ №С1, 0,5 мМ NаР, 0,1% Тгйоп Х-100, 1 мл/л смеси ингибиторов протеаз Гго1еаке 1пЫЬйог Соск1ай Зе1 III (поставляемая компанией ЕМЭ Огоир; Са1Вюсйет/Мегск Вюкаепсек, О1ЬЬкЮип, №\ν .Гегкеу, ИЗ; ЭаткГай!, Оегтапу) и гомогенизировали в гомогенизаторе, применяя охлаждение льдом. Затем суспензию осветляли посредством центрифугирования при 47900 д в течение 2 ч, при 4°С. Лизат декантировали с нерастворимого дебриса и загружали при линейной скорости потока 16 см/ч в колонку для аффинной хроматографии 55 мл РЬАО-М2 (2,6x10,4 см), которая была предварительно уравновешена 10 объемами колонки буферного раствора А (50 мМ Тпк (рН 8,0), 150 мМ №С1, 0,5 мМ NаР, 1 мл/л смеси ингибиторов протеаз ЕгоЮаке !пН1Ы1ог Соск1ай ЗеГ III). Колонку затем промывали 15 объемами колонки буферного раствора А и элюировали 6 объемами колонки буферного раствора В (буфер А + 150 мкг/мл пептида 3Х РЬАО) при линейной скорости потока 57 см/ч. Фракции, идентифицированные с помощью ЗОЗ-БДОЕ в качестве содержащих представляющий интерес белок, подвергали диализу для удаления пептида 3Х РЬАО из препарата, против 5 л буфера А (не содержащего смесь ингибиторов протеаз) в течение ночи, используя диализную трубку 10 кЭа МАСО ЗпакеЗкш Ρ1еаΐеά Э|а1ук1к ТиЬшд. Процесс очистки приводил к получению 11,3 мг общего белка, в котором ΚΤΡΚ2 присутствовала с 40% чистотой по данным денситометрического сканирования геля и идентичность подтверждали методом отпечатков пептидных масс (рерййе такк йпдегргтйпд). Основные контаминирующие белки в препарате были идентифицированы как низкомолекулярные фрагменты расщепления ΚΤΡΚ2.

Методика очистки II: 100 г дебриса (масштаб ферментации 10 л) замораживали, размораживали и ресуспендировали в 1 л лизирующего буфера (50 мМ Тпк НС1 рН 7,5, 250 мМ №С1, 0,1 мМ ТСЕР, 3 мл смеси ингибиторов протеаз) и лизировали посредством однократной гомогенизации при высоком давлении 10000 фунт/дюйм² (700 кг/см²) (АмекЕм). Затем суспензию осветляли посредством центрифугирования при 35000 д в течение 45 мин при 4°С. Супернатант собирали центрифугированием и инкубировали с 5 мл анти-РЬАО-М2 ионитом, который был предварительно уравновешен буферным раствором А (50 мМ Тпк НС1 рН 7,5, 250 мМ №С1, 0,1 мМ ТСЕР). После связывания белка при 4°С в течение 1 ч ионит набивали в две 25 мл колонки одноразового использования. Каждую колонку промывали 25 мл буфера А и элюировали 10 мл (буфер А + 200 мкг/мл пептида РЬАО). Общий объем элюата концентрировали до 1 мл и наносили на колонку кирегйех 200 (16/60), калиброванную по размеру. Фракции, содержащие полноразмерную ΚΣΡΚ2, собирали в соответствии с ЗЭЗ-ЕАОЕ результатами анализа. В результате процесса очистки получали 1,36 мг/л 80% чистоты ΚΤΡΚ2 белок и идентичность подтверждали методом отпечатков пептидных масс.

Биологические испытания ш νί\Ό.

Эффективность ингибиторов ΚΤΡ2 также может быть оценена ш νί\Ό у грызунов.

Интраперитонеальное Д.р.) или внутривенное (ί.ν.) введение ^18-Μ^Ρ мышам, как было показано, вызывает воспалительную реакцию вследствие активации NΟ^₂ сигнального пути (Кокеп№е1д Н.Ь., е1 а1. 2008. Гонгпа1 оГ Еенкосу1е Вю1оду 84:529-536). Уровень воспалительной реакции у обработанных Ь18МЭЕ мышей/крыс контролировали путем использования общепринятых стандартных методик измерения возрастания уровней цитокинов ДЬ8, Т№а, Ю6 и Ю-1 β) в сыворотке крови и/или в жидкости перитонеального лаважа и посредством измерения поступления нейтрофилов в полость брюшины (когда Ь18МОГ вводится дозами 1.р.). Ингибирование вызванной Ь^-МЭГ воспалительной реакции у обработанных грызунов может быть показана посредством предварительного перорального введения доз выбранных соединений настоящего изобретения с последующим определением и сравнением уровней цитокинов (ГЕ8, Т№а, Ю6 и ГЕ-1 β) в сыворотке крови и/или в жидкости перитонеального лаважа и посредством измерения поступления нейтрофилов в полость брюшины (когда Е18-МЭЕ вводится дозами 1.р.), используя общепринятые методики.

Например, крысам предварительно перорально вводили дозы соединения примера 3, с дозировками 0,02, 0,2 и 2 мг/кг (п=8 крыс/группа), затем следовало введение дозы Е18-МЭЕ (50 мкг/крыса) спустя 0,25

- 22 027984 ч после предварительного введения дозы соединения. Уровни содержания 1Й8 цитокина в образцах цельной крови, взятых у крыс в этом исследовании, определяли путем использования детекции на основе антител (Мезо-8са1е И1зсоуегу р1айогт). Процентные уровни содержания 1Й8 цитокина рассчитывали как относительные уровни, наблюдаемые в сравнении с крысами, обработанными носителем и результаты представлены на фиг. 3 как среднее ± стандартная ошибка среднего (п=8 крыс/группа).

В другом примере крысам предварительно перорально вводили дозы соединения примера 9 с дозировками 0,016, 0,16 и 1,6 мг/кг (п=8 крыс/группа), затем следовало введение дозы Е18-МИР (50 мкг/крыса) спустя 0,25 ч после предварительного введения дозы соединения. Уровни содержания 1Й8 цитокина и процентные уровни содержания рассчитывали, как описано выше, и результаты представлены на фиг. 4 как среднее ± стандартная ошибка среднего (п=8 крыс/группа).

Ссылки: νθ 98/13350, νθ 2011/120025, νθ 2011/120026, νθ 2011/123609, νθ 2011/140442, νθ 2012/021580, νθ 2012/122011, νθ 2013/025958, ΒίοοΓ§. Мей. Сйет. Ье«. (2007), 17(21), 5886-5893.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение, которое представляет собой

1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)-2-метилпропан-2-ол,

1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2ол или

6-(трет-бутилсульфонил)-И-(3,4-диметил-1Н-пиразол-5-ил)-7-(2-метоксиэтокси)хинолин-4-амин, или его фармацевтически приемлемая соль.
2. Соединение по п.1, которое представляет собой 1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Нпиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ол формулы или его фармацевтически приемлемая соль.
3. Соединение по п.1, которое представляет собой 1-((6-(трет-бутилсульфонил)-4-((3,4-диметил-1Нпиразол-5-ил)амино)хинолин-7-ил)окси)пропан-2-ол формулы или его фармацевтически приемлемая соль.
4. Соединение по п. 1 формулы или его фармацевтически приемлемая соль.
5. Соединение по п.1 формулы или его фармацевтически приемлемая соль.
6. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение или его фармацевтически приемлемую соль по любому из пп.1-5 и один или несколько фармацевтически приемлемых эксципиентов.
7. Способ лечения заболевания или нарушения, опосредованного ингибированием К1Р2 киназы, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-5 нуждающемуся в этом человеку.
8. Способ по п.7, где заболевание выбрано из увеита, лихорадочного синдрома, связанного с интерлейкин-1 конвертирующим ферментом, дерматита, острого повреждения легких, сахарного диабета 2 типа, артрита, ревматоидного артрита, неспецифического язвенного колита, болезни Крона, юношеского воспалительного заболевания кишечника, внекишечных проявлений воспалительного заболевания кишечника, профилактики ишемически-реперфузионного повреждения в трансплантате солидного органа, неалкогольного стеатогепатита, алкогольного стеатогепатита, аутоиммунного гепатита, астмы, реакции трансплантат против хозяина, системной красной волчанки, множественного склероза, саркоидоза, синдрома Блау/юношеского саркоидоза, гранулематоза Вегенера и интерстициального заболевания легких.
9. Способ по п.7, где заболевание представляет собой болезнь Крона, неспецифический язвенный колит или синдром Блау.