CN101547917A

CN101547917A - 用作jnk调节剂的取代的嘧啶类化合物及它们的应用

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Publication number: CN101547917A
Application number: CNA2007800450228A
Authority: CN
Inventors: 詹姆斯·帕特里克·邓恩; 戴维·迈克尔·戈尔茨坦; 龚乐一; 约安·希瑟·豪格; 克里斯托夫·米舒; 怀利·索伦·帕尔梅; 阿奇尤萨罗·西迪瑞; 坦尼亚·席尔瓦; 帕沙里·蒂维玛哈伊苏恩; 特蕾莎·亚力杭德拉·特雷霍-马丁
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG; Hoffmann La Roche Inc
Priority date: 2006-12-08
Filing date: 2007-11-28
Publication date: 2009-09-30
Also published as: BRPI0720003A2; MX2009005508A; AU2007328981B2; TW200831101A; US20080146565A1; KR20090075877A; RU2009125672A; NO20091942L; EP2102194A1; US8399462B2; WO2008068171A9; IL198543A0; AR064133A1; WO2008068171A1; JP5179509B2; RU2493155C2; PE20081507A1; ZA200903495B; JP2010511655A; AU2007328981A1

Abstract

本发明涉及式(I)的新型JNK调节剂及其生理学上可接受的盐，其中X¹，X²，X³，X⁴，X⁵，X⁶，R，R¹，Z和n如说明书和权利要求书中所定义。

Description

用作JNK调节剂的取代的嘧啶类化合物及它们的应用

本发明涉及调节c-Jun N-末端激酶(JNK)的方法，和用于治疗患有疾病或病症的受试者的方法，所述疾病或病症可以通过用杂环化合物调节JNK来缓解。本发明进一步涉及新型的杂环化合物和包含所述化合物的药物组合物。

c-Jun N-末端激酶(JNK)连同p38和细胞外信号调节激酶(ERK)是裂原活化蛋白激酶家族的成员。已经鉴定了三个截然不同的基因(jnk1，jnk2和jnk3)，它们编码10种剪接变体(Y.T.Ip和R.J.Davis，当代细胞生物学评论(Curr,Opin.Cell Biol.)(1998)10：205-19)。JNK1和JNK2在广泛多样的组织中表达，而JNK3主要在神经元中表达，和较小程度地在心脏和睾丸中表达(D.D.Yang等，自然(Nature)(1997)389：865-70)。JNK家族的成员通过促炎细胞因子如肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)以及环境紧张活化。JNK的活化通过它的上游激酶，MKK4和MKK7，经由Thr-183和Tyr-185的双磷酸化而介导(B.Derijard等，细胞(Cell)(1994)76：1025-37)。已经显示，MKK4和MMK7可以通过不同的上游激酶激活，所述不同的上游激酶包括MEKK1和MEKK4，这取决于外部刺激和细胞情境(D.Boyle等，类风湿性关节炎(Arthritis Rheum)(2003)48：2450-24)。JNK信号转导的特异性是通过使用称为JNK-相互作用蛋白的支架蛋白形成JNK-特异的信号转导复合物来实现的，所述复合物含有激酶级联的多个组分(J.Yasuda等，分子细胞生物学(Mol.Cell.Biol.)(1999)19：7245-54)。通过磷酸化特异底物，JNK已经显示在炎症、T细胞功能、编程性细胞死亡和细胞存活中发挥重要作用，所述底物包括转录因子如c-Jun，激活蛋白-1(AP1)家族成员，和ATF2，以及非转录因子如IRS-1和Bcl-2(A.M.Manning和R.J.Davis，自然综述：药物开发(Nat.Rev.Drug Discov.)(2003)2：554-65)。认为JNK的过度活化是自身免疫、炎性、代谢、神经学疾病以及癌症中的重要机制。

类风湿性关节炎(RA)是一种***自身免疫疾病，其特征在于关节的慢性炎症。除了由炎症过程导致的关节肿胀和疼痛以外，大多数RA患者最终发展使人衰弱的关节损伤和变形。在细胞和动物模型中几条令人信服的药理学和遗传学证据强烈提示活化的JNK在RA发病机理中的相关性和重要性。首先，在来自RA患者的人关节炎关节(G.Schett等，类风湿性关节炎(Arthritis Rheum)(2000)43：2501-12)和来自关节炎动物模型的啮齿动物的关节炎关节(Z.Han等，临床研究杂志(J.Clin.Invest.)(2001)108：73-81)中都检测到JNK的异常激活。另外，通过选择性JNK抑制剂抑制JNK的激活阻断了人滑膜细胞、巨噬细胞和淋巴细胞中的促炎细胞因子和MMP的生成(Z.Han等，(2001)，上文)。重要地，在具有佐剂性关节炎的大鼠中(Z.Han等，(2001)，上文)或在具有胶原诱导性关节炎的小鼠中(P.Gaillard等，药物化学杂志(J Med Chem.)(2005)14：4596-607)施用选择性JNK抑制剂，通过抑制细胞因子和胶原酶表达，有效地保护关节免于破坏并且显著地减轻了爪肿胀。另外，在被动胶原诱导性关节炎模型中，JNK2缺陷型小鼠被部分保护免于关节破坏，但是对于爪肿胀和炎症几乎不显示效果。这些研究表明JNK2与JNK1关于它们在基质降解、炎症和爪肿胀中的作用方面是功能冗余的。因此，JNK1和JNK2两者活性的联合抑制对于RA的有效治疗是必需的(Z.Han等，类风湿性关节炎(Arthritis Rheum)(2002)46：818-23)。

哮喘是一种气道慢性炎性疾病，其特征在于细胞炎症过程的存在和与气道结构变化相关的支气管高反应性(B.Bradley等，***反应临床免疫学杂志(J.Allergy Clin.Immunol.)(1991)88：661-74)。该病症已经显示由气道中的许多细胞类型所驱动，所述细胞包括T淋巴细胞，嗜酸性粒细胞，肥大细胞，嗜中性粒细胞和上皮细胞(J.Bousquet等，美国呼吸和重症护理医学杂志(Am.J.Respir.Crit.Care Med.)(2000)161：1720-45)。基于最近的在使用选择性JNK抑制剂的细胞和哮喘动物模型中的概念验证研究，JNK已经显现为对于哮喘的有希望的治疗靶标(K.Blease等，新兴药物专家评论(Expert Opin.Emerg.Drugs)(2003)8：71-81)。已经显示，JNK抑制剂显著阻断在活化的人气道平滑细胞中的RANTES生产(K.Kujime等，免疫学杂志(J.Immunol.)(2000)164：3222-28)。更重要地，JNK抑制剂在慢性大鼠和小鼠模型中由于它们减少细胞浸润、炎症、高反应性、平滑肌增生和IgE生产的能力而显示良好的功效(P.Nath等，欧洲药理学杂志(Eur.J.Pharmacol.)(2005)506：273-83；P.Eynott等，英国药理学杂志(Br.J.Pharmacol.)(2003)140：1373-80)。这些观察结果提示JNK在变应性炎症、与高反应性相关的气道重塑过程中的重要作用。因此，预计JNK活性的阻断将对哮喘的治疗有益。

2型糖尿病是最严重和普遍的代谢疾病，其特征在于胰岛素抗性和胰岛素分泌损害，其是长期低水平炎症和与氧化应激相关的异常脂质代谢的结果。已经报道，JNK活性在肥胖和糖尿病病症下的各种糖尿病靶组织中异常升高(J.Hirosumi等，自然(Nature)(2002)420：333-36；H.Kaneto，治疗靶标专家评论(Expert.Opin.Ther.Targets)(2005)9：581-92)。JNK途径被促炎细胞因子的激活和氧化应激通过在Ser³⁰⁷处磷酸化胰岛素受体底物-1(IRS-1)来调节胰岛素信号转导，由此促进胰岛素抗性和葡萄糖耐量(J.Hirosumi等，自然(Nature)(2002)，上文；Y.Lee等，生物化学杂志(J.Biol.Chem.)(2003)278：2896-902；Y.Nakatani等，生物化学杂志(J.Biol.Chem.)(2004)279：45803-09)。有说服力的遗传学证据来自精细的动物模型研究，该研究使用与遗传性(ob/ob)肥胖小鼠或饮食性肥胖小鼠杂交的jnk^-/-小鼠。JNK1丧失(JNK1^-/-)，但是JNK2功能未丧失(jnk2^-/-)，保护肥胖小鼠免于体重增加，增加血糖稳态水平，和降低血浆胰岛素水平(J.Hirosumi等，自然(Nature)(2002)，上文)。另外，通过施用小分子JNK抑制剂CC105(B.Bennett等，当前药理学评论(Curr.Opin.Pharmacol.)(2003)3：420-25)或从JNK-相互作用蛋白-1(JIP-1)的JNK结合结构域衍生的JNK抑制性肽I(JIP)(H.Kaneto等，自然医学(Nat.Med.)(2004)10：1128-32)，在遗传性糖尿病模型(db/db小鼠)中观察到了有益效果，包括显著更低的血糖和更高的血浆胰岛素水平。更有趣地，另一个新近的报道(A.Jaeschke等，美国国家科学院院刊(Proc.Natl.Acad.Sci.)USA.(2005)102：6931-35)揭示了JNK2在由产胰岛素β细胞的自身免疫破坏导致的1型糖尿病中发挥重要作用。JNK2表达缺陷的非肥胖糖尿病小鼠显示减轻的破坏性胰岛炎和较小的糖尿病疾病进展，这可能是由于向Th2表型的偏极化。总之，这些研究证明了JNK抑制剂在治疗肥胖/2型糖尿病中的效用。

神经变性疾病，如阿尔茨海默病(AD)，帕金森病(PD)和中风，其特征在于突触损失，神经元萎缩和死亡。导致c-Jun活化的JNK途径已经显示在分离的原代胚胎神经元和多种神经元细胞系在引入各种各样的刺激之后的编程性细胞死亡中发挥因果作用(D.Bozyczko-Coyne等，当代CNS神经病症药物靶标(Curr.Drug Targets CNS Neurol.Disord.)(2002)1：31-49)。在来自AD患者的人脑(J.Pei等，阿尔茨海默病杂志(J.Alzheimers Dis.)(2001)3：41-48)或啮齿动物的脑切片(M.Saporito等，神经化学杂志(J.Neurochem.)(2000)75：1200-08)中观察到了JNK的过度激活，所述啮齿动物的脑切片来源于神经变性疾病的动物模型。例如，在来自AD患者的事后检查的脑中检测到增加的磷酸-JNK。在啮齿动物的AD模型中施用JNK抑制性肽(JIP-1肽)防止突触可塑性的损害，所述AD是通过施用β-淀粉样蛋白肽来诱导的。在PD的动物模型(MPTP模型)中，与神经元细胞死亡同时观察到升高的磷酸-MKK4和磷酸-JNK。将JNK抑制性肽(JIP-1肽)用腺病毒基因转移到小鼠纹状体中，减轻了行为损伤，其中通过抑制MPTP-介导的JNK、c-Jun和caspase活化，因此阻断了黑质中的神经元细胞死亡(X.Xia等，美国国家科学院院刊(Proc.Natl.Acad.Sci.)USA.(2001)98：10433-38)。另外，在由谷氨酸兴奋毒性诱导的缺血性中风的动物模型中，缺失JNK3但是不缺失JNK1或JNK2的小鼠对于红藻氨酸(谷氨酸受体激动剂)-介导的发作或神经元死亡具有抗性(D.D.YAng等，自然(Nature)(1997)389：865-70)。这些数据提示，JNK3主要负责谷氨酸兴奋毒性，谷氨酸兴奋毒性是缺血性病症中的一个重要成分。总之，这些数据提示JNK是对于与神经元细胞死亡相关的多种CNS疾病的有吸引力的靶标。

不受控制的细胞生长，增殖和迁移以及脱调节的血管发生导致恶性肿瘤形成。JNK信号转导途径可能在编程性细胞死亡中不是独自起作用，持续的JNK活化导致AP1活化最近已经暗示促进特定癌症类型的细胞存活，所述癌症如神经胶质肿瘤和BCL-ABL转化的B淋巴母细胞(M.Antonyak等，癌基因(Oncogene)(2002)21：5038-46；P.Hess等，自然遗传学(Nat.Genet.)(2002)32：201-05)。在神经胶质肿瘤的情形中，在大多数原发性脑瘤样品中看到增强的JNK/AP1活性。对于转化的B淋巴母细胞，显示BCL-ABL激活JNK途径，其又上调抗凋亡bcl-2基因的表达。有趣地，在难治性AML患者中看到的多药耐药性和过度增殖已经与这些AML样品中存在的持续的JNK活性因果关联(L.Cripe等，白血病(Leukemia)(2002)16：799-812)。白血病细胞中JNK的激活导致外排泵的诱导表达，所述外排泵如负责多药耐药性的mdr1和MRP1。此外，激活的JNK途径还上调响应于氧化应激具有生存益处的基因，包括谷胱甘肽-S-转移酶π和γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶。

因此，JNK调节剂有效用于治疗各种各样的疾病和/或病症。

本发明的一个方面提供式I的化合物：

其中

X¹为N，N-R³，CHR³，C-R³，或O；

X²为N，NH，N-CH₃，CH，CH₂，CHCH₃或C-CH₃；

X³为N，C或CH，其中X¹，X²，和X³不同时全部为N；

X⁴，X⁵各自独立地为C，CH或N；

X⁶为N或C-R¹；

其中X¹，X²，X³，X⁴，X⁵，和X⁶中的至少两个并且不超过4个为N；并且其中X¹和X²，X²和X³，X³和X⁴，X⁴和X⁵，X⁵和X¹以及X⁵和X⁶之间的键可以各自独立地是单键，双键，或形成芳族环，条件是得到化学稳定的结构；

R为-(环己基)-R²或-(苯基)-R⁸，其中环己基和苯基各自任选被甲基、氟、氯或羟基取代；

R¹为卤素，硝基，-CN，-CH₂CN，-OH，-NH₂，-COOH，或-Y¹R⁴；

Y¹为-O-，-NH-，-S-，-SO-，-SO₂-，-NHSO₂-，-NHC(O)-，-C(O)NH-，-C(O)O-，或键；

R⁴为C_1-6烷基，酰基，苯基，或苄基，它们中的每一个被0-3个羟基或卤素取代；

n为0，1，或2；

R³为H或C_1-6烷基；

R²为H，-OH，-SO₂NH₂，＝O，-CN，或-Y²-Y³-Y⁴-R⁵，其中

Y²为-C(O)-，-C(O)NR^a-，-SO₂-，-O-，-NH-，或键；

Y³为C_1-6亚烷基或键；

Y⁴为-O-，-NR^a-，-S-，-SO₂-，-C(O)-，-C(O)NR^a-，

-NR^aC(O)-，-NR^aC(O)O-，-NR^aC(O)NR^a-，-NHSO₂-，-SO₂NH-，或键；

R⁵为C_1-6烷基，C_3-10环烷基，杂环基，其中R⁵任选被-OH或-NHR^a取代；其中每个R^a独立地为H或C_1-6烷基；

R⁸为H，C_1-6烷基，-OR³，-SO₂NH₂，-NHSO₂R³，-COOR³，-SO₂R³，-NH₂，-CONR^aR³，-NHC(O)R³，-CF₃，-NO₂，卤素，或-CN；

Z为氢，卤素，C_1-12烷基，或NH₂；

或其药用盐。

优选X¹为N，N-R³，C-R³，或O；

X²为N，NH，N-CH₃，CH或C-CH₃；

X³为N或C，其中X¹，X²，和X³不同时全部为N，并且

X⁴，X⁵各自独立地为C或N。

本发明还提供药物组合物，使用方法，和制备上述化合物的方法。

本发明的化合物和组合物有效用于治疗和/或预防c-Jun N-末端激酶介导的疾病，如自身免疫疾病，炎性疾病，代谢疾病，神经病，和癌症。在一些实施方案中，本发明的化合物和组合物有效用于治疗和/或预防类风湿性关节炎，哮喘，II型糖尿病，阿尔茨海默病，帕金森病和/或中风。

定义

除非另外指出，用于本申请(包括说明书和权利要求书)中的下列术语具有以下给出的定义。应当注意，如在说明书和后附权利要求书中所用，单数形式“一个(a)”、“一个(an)”和“所述(the)”包括复数对象，除非上下文有清楚不同指示。

“烷基”是指单价直链或支链饱和烃部分，其完全由碳和氢原子组成，具有1-12个碳原子。“低级烷基”是指1-6个碳原子的烷基，即C₁-C₆烷基。烷基的实例包括但不限于甲基，乙基，丙基，异丙基，异丁基，仲丁基，叔丁基，戊基，正己基，辛基，十二烷基。“支链烷基”是指具有至少一个支链的烷基部分，例如异丙基，异丁基，叔丁基。类似地，“低级烷氧基”是指-OR形式的部分，并且“酰基”是指-C(O)R形式的部分，其中R是低级烷基。

“亚烷基”是指1-6个碳原子的直链饱和二价烃部分或3-6个碳原子的支链饱和二价烃基团，例如亚甲基，亚乙基，2，2-二甲基亚乙基，亚丙基，2-甲基亚丙基，亚丁基，亚戊基。

“亚烷二氧基”是指式-O-R-O-的二价部分，其中R是本文定义的亚烷基。

“芳基”是指单价环状芳族烃部分，其由单-、二-或三环芳环组成。芳基可以任选地如本文定义被取代。芳基部分的实例包括但不限于，任选取代的苯基，萘基，菲基，芴基，茚基，并环戊二烯基，甘菊环基，氧联二苯基，联苯基，亚甲二苯基，氨基二苯基，二苯硫基，二苯磺酰基，二苯基亚异丙基，苯并二噁烷基，苯并呋喃基，苯并间二氧杂环戊烯基(benzodioxylyl)，苯并吡喃基，苯并噁嗪基，苯并噁嗪酮基，苯并哌啶基(benzopiperadinyl)，苯并哌嗪基，苯并吡咯烷基，苯并吗啉基，亚甲二氧基苯基，亚乙二氧基苯基，包括它们部分氢化的衍生物。

“环烷基”是指具有3至10个环碳原子的单环或二环的单价饱和碳环部分。优选环烷基为C_3-7单环环烷基。环烷基可以任选地被一个或多个取代基取代，其中每个取代基独立地为羟基，烷基，烷氧基，卤素，卤代烷基，氨基，单烷基氨基，或二烷基氨基，除非另外特别指出。环烷基部分的实例包括但不限于环丙基，环丁基，环戊基，环己基，环庚基，包括它们部分不饱和的衍生物。

“环烷基烷基”是指式-R^a-R^b的部分，其中R^a是亚烷基并且R^b是本文定义的环烷基。

“杂烷基”是指本文定义的烷基部分，包括支链C₄-C₇烷基，其中一个、两个或三个氢原子已经被取代基替换，所述取代基独立地选自由-OR^a，-NR^bR^c，和-S(O)_nR^d(其中n是0-2的整数)组成的组，条件是杂烷基基团的连接点是通过碳原子，其中R^a是氢，酰基，烷基，环烷基，或环烷基烷基；R^b和R^c彼此独立地为氢，酰基，烷基，环烷基，或环烷基烷基；并且当n是0时，R^d是氢，烷基，环烷基，或环烷基烷基；当n是1时，R^d是烷基，环烷基，或环烷基烷基；并且当n是2时，R^d是烷基，环烷基，环烷基烷基，氨基，酰基氨基，单烷基氨基，或二烷基氨基。代表性的实例包括但不限于2-羟基乙基，3-羟基丙基，2-羟基-1-羟基甲基乙基，2，3-二羟基丙基，1-羟基甲基乙基，3-羟基丁基，2，3-二羟基丁基，2-羟基-1-甲基丙基，2-氨基乙基，3-氨基丙基，2-甲基磺酰基乙基，氨基磺酰基甲基，氨基磺酰基乙基，氨基磺酰基丙基，甲基氨基磺酰基甲基，甲基氨基磺酰基乙基，甲基氨基磺酰基丙基。

“杂芳基”是指5-12个环原子的单环或二环部分，其具有至少一个芳环，含有一个、两个或三个选自N、O或S的环杂原子，其余的环原子是C，条件是杂芳基的连接点将是在芳环上。杂芳环可以任选地如本文定义被取代。杂芳基部分的实例包括但不限于：任选取代的咪唑基，噁唑基，异噁唑基，噻唑基，异噻唑基，噁二唑基，噻二唑基，吡嗪基，噻吩基(thienyl)，噻吩基(thiophenyl)，呋喃基，吡喃基，吡啶基，吡咯基，吡唑基，嘧啶基，哒嗪基，喹啉基，异喹啉基，苯并呋喃基(benzofuryl)，苯并呋喃基(benzofuranyl)，苯并噻吩基，苯并噻喃基，苯并咪唑基，苯并噁唑基，苯并噁二唑基，苯并噻唑基，苯并噻二唑基，苯并吡喃基，吲哚基，异氮杂茚基，吲唑基，***基，三嗪基，喹喔啉基，嘌呤基，喹唑啉基，喹嗪基，1，5-二氮杂萘基，蝶啶基，咔唑基，氮杂

基，二氮杂

基，吖啶基，包括它们部分氢化的衍生物。

术语“卤”，“卤素”，和“卤化物”在本文中可以交换使用并且是指取代基氟，氯，溴或碘。

“卤代烷基”是指其中一个或多个氢已经被相同或不同的卤素替换的本文定义的烷基。例举性的卤代烷基包括-CH₂Cl，-CH₂CF₃，-CH₂CCl₃，全氟烷基(例如，-CF₃)。

“杂环基”是指由1-3个环组成的结合一个、两个或三个或四个杂原子(选自氮、氧或硫)的单价饱和部分。优选具有3-8个环原子的单环杂环基。杂环基的环可以任选地如本文定义被取代。杂环基部分的实例包括但不限于任选取代的哌啶基，哌嗪基，高哌嗪基(homopiperazinyl)，氮杂

基，吡咯烷基，吡唑烷基，咪唑啉基，咪唑烷基，吡啶基，哒嗪基，嘧啶基，噁唑烷基，异噁唑烷基，吗啉基，噻唑烷基，异噻唑烷基，奎宁环基，喹啉基，异喹啉基，苯并咪唑基，噻二唑烷基，苯并噻唑烷基，苯并吡咯烷基，二氢呋喃基，四氢呋喃基，二氢吡喃基，四氢吡喃基，硫代吗啉基(thiamorpholinyl)，硫代吗啉基亚砜，硫代吗啉基砜，二氢喹啉基，二氢异喹啉基，四氢喹啉基，四氢异喹啉基。

“任选取代的”，当与“芳基”，“苯基”，“杂芳基”或“杂环基”关联使用时，是指任选独立地被一个或多个、优选1-4个、更优选1-3个取代基取代的芳基，苯基，杂芳基或杂环基，所述取代基选自C_1-6烷基，C_1-6杂烷基，氧代(即，＝O)，卤代烷基，-(CH₂)_mCOX¹，-(CH₂)_mSO₂X²，C_1-6烷氧基，卤素，C_1-6烷硫基，C_1-6烷基磺酰基，-SO₂NR⁴R⁵，氰基，硝基，和-NR⁶R⁷，其中m，X¹，X²，R⁴，和R⁵如本文所定义。

“离去基团”是指具有与它在合成有机化学中常规相关的含义的基团，即在置换反应条件下可替换的原子或基团。离去基团的实例包括但不限于卤素，烷-或亚芳基磺酰基氧基，如甲磺酰基氧基，乙磺酰基氧基，硫甲基，苯磺酰基氧基，甲苯磺酰基氧基，和噻吩基氧基，二卤代膦酰基氧基，任选取代的苄氧基，异丙氧基，酰氧基。

“任选的”或“任选地”是指随后描述的事件或情形可以发生但不一定发生，并且所述描述包括其中时间或情形发生的情况和它不发生的情况。

“疾病”和“疾病状态”是指任何疾病，病症，症状，障碍或适应症。

“惰性有机溶剂”或“惰性溶剂”是指溶剂在与之描述的反应条件下是惰性的，包括例如苯，甲苯，乙腈，四氢呋喃，N，N-二甲基甲酰胺，氯仿，甲叉二氯或二氯甲烷，二氯乙烷，二***，乙酸乙酯，丙酮，甲基乙基酮，甲醇，乙醇，丙醇，异丙醇，叔丁醇，二噁烷，吡啶。除非指示相反，在本发明的反应中使用的溶剂是惰性溶剂。

“药用的”是指其有效用于制备药物组合物，通常是安全、非毒性的和既不在生物学上，也不在其它方面不合需要的，并且包括适合于兽医学以及人类药用的那些。

化合物的“药用盐”是指如本文定义的药用的盐，并且该盐具有所需的母体化合物药理学活性。这些盐包括：

与无机酸形成的酸加成盐或与有机酸形成的酸加成盐，所述无机酸如盐酸，氢溴酸，硫酸，硝酸，磷酸，所述有机酸如乙酸，苯磺酸，苯甲酸，樟脑磺酸，柠檬酸，乙磺酸，富马酸，葡庚糖酸，葡糖酸，谷氨酸，羟基乙酸，羟萘甲酸，2-羟基乙磺酸，乳酸，马来酸，苹果酸，丙二酸，苦杏仁酸，甲磺酸，粘康酸，2-萘磺酸，丙酸，水杨酸，琥珀酸，酒石酸，对甲苯磺酸，三甲基乙酸；

或当在母体化合物中存在的酸性质子被金属离子(例如碱金属离子，碱土离子，或铝离子)替换时或与有机或无机碱配位形成的盐。可接受的有机碱包括二乙醇胺，乙醇胺，N-甲基葡糖胺，三乙醇胺，氨丁三醇。可接受的无机碱包括氢氧化铝，氢氧化钙，氢氧化钾，碳酸钠，氢氧化钠。优选的药用盐是从乙酸、盐酸、硫酸、甲磺酸、马来酸、磷酸、酒石酸、柠檬酸、钠、钾、钙、锌和镁形成的盐。

“保护基”或“保护基团”是指在多官能化合物中选择性地封闭一个活性位点以使化学反应可以选择性地在另一个未保护的活性位点进行的基团，其含义属于与其在合成化学中相关的常规含义。本发明的某些方法依赖于保护基以封闭在反应物中存在的活性氮和/或氧原子。例如，术语“氨基保护基”和“氮保护基”在本文中可以交换使用，并且是指意欲在合成步骤中保护氮原子免于不希望有的反应的那些有机基团。例举性的氮保护基包括但不限于三氟乙酰基，乙酰氨基，苄基(Bn)，苄氧羰基(苯甲氧甲酰基，CBZ)，对甲氧基苄氧羰基，对硝基苄氧羰基，叔丁氧羰基(BOC)。本领域技术人员将知道如何选择易于去除和能够经受下列反应的基团。

“受试者”是指哺乳动物和非哺乳动物。哺乳动物是指哺乳纲的任何成员，包括但不限于：人类；非人类灵长类如黑猩猩和其它类人猿以及猴种；农畜如牛，马，绵羊，山羊，和猪；家畜如兔，狗，和猫；实验室动物，包括啮齿动物，如大鼠，小鼠和豚鼠。非哺乳动物的实例包括但不限于鸟类。术语“受试者”不指定具体年龄或性别。

“治疗有效量”指当向受试者给药以治疗疾病状态时，足以实现对该疾病状态的这种治疗的化合物的量。“治疗有效量”将根据化合物、被治疗的疾病状态、被治疗的疾病状态的严重性、受试者的年龄和相对健康、给药途径和形式、主治医师或兽医从业者的判断、和其它因素而改变。

术语“如上所定义的那些”和“本文中所定义的那些”当涉及变量时，通过引用而结合该变量的广义定义，以及优选的、更优选的和最优选的定义(如果有的话)。

疾病状态的“治疗”或“疗法”包括：

(i)预防疾病状态，也就是使疾病状态的临床症状不会在受试者中发展，所述的受试者可能与该疾病状态接触或易患有该疾病状态但还不曾经历或显现出疾病状态的症状，

(ii)抑制疾病状态，即，阻止或减轻该疾病状态或其临床症状的发展，或

(iii)缓解疾病状态，也就是引起疾病状态或其临床症状的暂时或永久消退。

术语“处理”、“接触”和“反应”，当涉及化学反应时，是指在适宜的条件下加入或混合两种或更多种的试剂，以生成所示和/或所需要的产物。应当理解的是，生成所示和/或所需产物的反应可以不必直接由最初加入的两种试剂的组合而得到，即，可以存在一种或多种在混合物中生成的中间体，所述的中间体最终导致所示和/或所需产物的形成。

命名法和结构

通常，本申请中使用的命名法基于AUTONOM^TMv.4.0，一种用于生成IUPAC***命名的Beilstein研究所(Beilstein Institute)计算机化***。本文中所示的化学结构是使用

2.2版得到的。本文所示结构中的碳、氧或氮原子上出现的任何空的价态表示氢原子的存在。

只要在化学结构中存在手性碳，这意味着该结构涵盖所有与该手性碳相关的立体异构体。

在本文中标识的所有专利和出版物通过引用将它们完整地结合于此。

通用方法

本发明的一个方面提供式I的化合物：

其中

X¹为N，N-R³，C-R³，或O；

X²为N，NH，N-CH₃，CH，或C-CH₃；

X³为N或C，其中X¹，X²，和X³不同时全部为N；

X⁴，X⁵各自独立地为C或N；

X⁶为N或C-R¹；

其中X¹，X²，X³，X⁴，X⁵，和X⁶中的至少两个并且不超过4个为N；并且其中X¹和X²，X²和X³，X³和X⁴，X⁴和X⁵，X⁵和X¹以及X⁵和X⁶之间的键可以各自独立地是单键，双键，或形成芳族环，条件是得到化学稳定的结构

(得到“化学稳定的结构”，其中不超过正常的价态和键数；例如，化学稳定的结构在X³-X⁴，X⁴-X⁵，和X⁵-X¹之间将不同时具有双键)；

R¹为卤素，硝基，-CN，-CH₂CN，-OH，-NH₂，-COOH，或-Y¹R⁴；

R⁴为低级烷基，酰基，苯基，或苄基，它们中的每一个被0-3个羟基或卤素取代；

n为0，1，或2；

R³为H或低级烷基；

R²为H，-OH，-SO₂NH₂，＝O，-CN，或-Y²-Y³-Y⁴-R⁵，其中

Y²为-C(O)-，-C(O)NR^a-，-SO₂-，-O-，-NH-，或键；

Y³为低级亚烷基或键；

Y⁴为-O-，-NR^a-，-S-，-SO₂-，-C(O)-，-C(O)NR^a-，-NR^aC(O)-，-NR^aC(O)O-，-NR^aC(O)NR^a-，-NHSO₂-，-SO₂NH-，或键；

R⁵为低级烷基，环烷基，杂环基，其中R⁵任选被-OH或-NHR^a取代；其中每个R^a独立地为H或低级烷基；

R⁸为H，低级烷基，-OR³，-SO₂NH₂，-NHSO₂R³，-COOR³，-SO₂R³，-NH₂，-CONR^aR³，-NHC(O)R³，-CF₃，-NO₂，卤素，或-CN；

Z为氢，卤素，烷基，或NH₂；

或其药用盐。

在一些实施方案中，X⁴，X⁵，和X⁶各自是C。在其它实施方案中，R为-(环己基)-R²。在进一步的实施方案中，X³为N，并且X¹为C。在另外的实施方案中，R²为OH。在一些实施方案中，R¹为苄基氧基，并且n为1。在又一个其它的实施方案中，R¹为-CN。

在一些实施方案中，X²为N。在其它实施方案中，R²为-Y²-Y³-Y⁴-R⁵，其中Y²为-C(O)NR^a-，R^a为H，并且Y³为低级亚烷基。在其它实施方案中，Y⁴为-SO₂-。在进一步的实施方案中，R⁵为低级烷基。

在一些实施方案中，Y⁴为-S-。在一些实施方案中，R⁵为低级烷基。

在其它实施方案中，Y⁴为键，和R⁵为低级烷基。

本发明的另一方面是治疗炎症的方法，该方法包括将有效量的本发明化合物给需要其的患者给药。

本发明的另一方面是药物组合物，该组合物包含本发明的化合物和药用赋形剂。

应当理解，本发明中描述的不同基团的组合可以形成其它实施方案。如此，各种不同的化合物具体体现在本发明内。

本发明的代表性化合物显示在下表1中。

表1.代表性的式I化合物

合成

本发明的化合物可以通过在以下实施例部分中所示的例举性实施例描述的各种各样的方法进行制备。在制备这些化合物中所用的原料和试剂通常可以从商业供应商如奥尔德利希化学公司(Aldrich Chemical Co.)获得，或者通过本领域技术人员已知的方法，按照在参考文献中规定的程序制备，所述参考文献如有机合成费尔舍和费尔舍氏试剂(Fieser and Fieser’sReagents for Organis Synthesis)；Wiley & Sons：纽约，1991，卷1-15；罗德氏碳化合物化学(Rodd’s Chemistry of Carbon Compounds)，Elsevier科学出版社，1989，卷1-5和增刊；和有机反应(Organic Reactions)，Wiley & Sons：纽约，1991，卷1-40。下面的合成反应方案仅仅是一些方法的举例说明，通过所述的方法可以合成本发明的化合物，并且可以对这些合成反应方案进行各种改进，而且本领域的技术人员在参考本申请中所包含的公开内容后将受到启示。

如果需要，可以对合成反应方案中的原料和中间体使用常规技术进行分离和纯化，所述的常规技术包括但不限于，过滤、蒸馏、结晶、色谱法。这些物质可以使用常规手段，包括物理常数和光谱数据，来表征。

除非有相反的规定，本文中所述的反应优选在下面的条件下进行：惰性气氛，大气压，反应温度约-78℃至约230℃，并且最优选和适宜地为室温(或环境温度)，例如约20℃。

在下列方案中，如果没有不同规定，R¹，X¹，X²，X³等如上定义；同时

A为Cl或SR_b

A_l为Cl，(S＝O)Me，SO₂Me或SO₂Bu

R_a为烷基，环烷基

R_b为Me或Bu

Z为N或C

X为Cl，Br，I

R_e和R_f独立地为氢，羟基烷基，烷氧基，烷基，环烷基杂烷基，烷基磺酰基，烷基亚磺酰基

R_g为低级烷基

R_h为烷基或环烷基

R_i为烷基，环烷基，杂环基

方案I：

步骤A：1.碘化1，3-二甲基咪唑鎓，NaH，1，4-二噁烷，回流；2.肼基甲酸叔丁酯，AcOH，MeOH，回流；或NH₂OH，EtOH，回流；3.DBU，THF，MW 150℃。

步骤B：NaH，DMF；或LiHMDS或NaHMDS，乙腈/THF，低温；或DIPEA，DMF 100℃。

步骤C：四(三苯膦)钯(O)，Na₂CO₃，乙腈，水。

步骤D：1.EtOH，回流；2.二乙酸碘代苯，DCM。

步骤E：KOH，水，DCM。

步骤A中，4-氯-2-甲硫基-嘧啶或4-氯-2-丁硫基-嘧啶通过在强碱如氢化钠，和碘化1，3-二甲基咪唑鎓存在下，加热到回流，与不定取代的邻-氟苯甲醛在极性非质子溶剂如1，4-二噁烷中反应，得到相应的酮。此产物通过在乙酸存在下，在非极性质子溶剂如甲醇中，通过加热至回流，用肼基甲酸叔丁酯处理，得到相应的腙，该腙在碱如DBU存在下并且在极性溶剂如THF中，通过在微波条件下加热，环化得到相应的吲唑。当使用羟基胺代替肼基甲酸叔丁酯时，得到相应的苯并噁唑。在步骤B中，在2位带有巯基烷基-或氯-部分的4-氯嘧啶与不定取代的吲哚，吲唑，氮杂吲哚或二氢吲哚在下面的条件下进行SNAr反应：在碱如NaH，LiHMDS，NaHMDS或DIPEA存在下，在极性溶剂如DMF，乙腈，THF，1，4-二噁烷或上述的混合物中，在-10℃至100℃范围内的温度，提供相应的：N1-芳化的吲哚，N1-或N2-芳化的吲唑，N1-芳化的氮杂吲哚和N1-芳化的二氢吲哚。步骤C中，2，4-二氯嘧啶与N1保护的不定取代的3-吲哚硼酸在下面条件下进行Buchwald偶合：在催化剂如四(三苯膦)钯(O)和无机碱如Na₂CO₃存在下，在极性溶剂的混合物如乙腈/水中，提供相应的2-氯-4-芳化的嘧啶。在步骤D中，2-甲硫基-嘧啶-4-甲醛与取代或未取代的吡啶-2-基-肼在极性质子溶剂如乙醇中通过加热至回流而反应，得到相应的腙，所述的腙在二乙酸碘代苯存在下，在非极性溶剂如DCM中环化，得到相应的不定取代的[1，2，4]***并[4，3-a]吡啶。在步骤E中，4-乙炔基-2-甲硫基-嘧啶与碘化1-氨基-吡啶-1-鎓(J.Med.Chem.2004，47，4716-30)在下面的条件下反应，在水和无机碱如KOH存在下，在非极性溶剂如DCM中，提供相应的3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-吡唑并[1，5-b]哒嗪。

方案II：

在X³为NH或NSO₂Ph时，步骤A：NaH，R_aX，NMP，或1.NaOH，MeOH/THF；2.NaH，R_aX，NMP。

在R1为COOMe时，步骤B：R_aMgCl，THF，低温。

在R1为NO₂时，步骡C：Fe(O)，NH₄Cl，EtOH，水，加热；步骤D：R_aCOCl，TEA，THF。

在X¹为C＝O时，步骤E：NaH，R_aX，DMF，0℃。

在步骤A中，其中X³为NH的通用结构I的化合物可以通过用强碱如NaH和适宜的烷基或环烷基卤如MeI在极性溶剂如NMP中处理而烷基化。在X³为苯基磺酰胺部分时，通用结构I的化合物可以首先通过用强无机碱如NaOH在极性溶剂混合物如MeOH/THF处理而脱保护，然后如上所述烷基化。在步骤B中，其中R1为甲基酯部分的通用结构I的化合物可以被格利雅试剂如MeMgCl在下面的条件下进行双倍加成：在低温，在极性溶剂如THF中，得到相应的叔醇。在步骤C中，R¹为NO₂时的通用结构I的化合物通过在还原剂如Fe(O)Fisher，氯化铵和水存在下，在极性质子溶剂如乙醇中加热，而还原成相应的苯胺。随后，可以将通式II的苯胺通过在碱如三乙胺存在下，在极性溶剂如THF中，用适宜的酰氯处理而酰基化，得到如在步骤D中所述的相应的仲酰胺。在步骤E中，X¹为C＝O时的通用结构I的化合物可以通过在极性溶剂如DMF中，在低温，用强碱如NaH脱质子化后，用烷基化试剂如MeI处理而O-烷基化。

方案III：

步骤A：NCS，NMP或m-CPBA或MeReO₃/H₂O₂，DCM。

步骤B：R²C₆H₁₀NH₂，NMP，加热或R²C₆H₁₀NH₂，DIPEA，NMP，加热。

步骤C：R⁸C₆H₄NH₂，p-TSA，i-PrOH，150℃，MW。

步骤A中，可以将A为硫代甲基部分时的通式I的化合物在下面的条件下氯化：在N-氯琥珀酰亚胺存在下，在极性溶剂如NMP中，在高温。备选地，利用3-氯过氧苯甲酸或利用甲基三氧化铼和过氧化氢的混合物作为氧化剂，在非极性溶剂如DCM或氯仿中，在0℃和室温之间的温度，可以将通式I的化合物氧化成相应的砜或亚砜。如在步骤B中所述，利用不定取代或未取代的环己基胺作为亲核试剂，在使用或不使用碱如二异丙基乙胺的情况下，在非极性溶剂如NMP中，在90和150℃之间的温度，相应的氯化物，砜或亚砜III可以进行S_NAr反应。备选地，如在步骤C中所述，在对甲苯磺酸存在下，在极性质子溶剂如异丙醇中，在150℃的微波条件下，通用结构III的亚砜可以与不定取代或未取代的苯胺反应。

方案IV：

在R¹为COOMe，COOEt时：步骤A：LiOH或NaOH，THF/MeOH。

在R¹为NO₂时：步骤B：Fe(O)，NH₄Cl，EtOH，水，加热。

在R¹为OBn时：步骤C：H₂，Pd/C，EtOH。

在R¹为COOMe时：步骤D：LAH或LiEt₃BH，THF-10℃或RT。

在R¹为SBn时：步骤E：m-CPBA，氯仿。

在R¹为NH₂时：步骤F：R_iX，Na₂CO₃，DMF，80℃。

在步骤A中，在R¹为甲基-或乙基-酯部分时的通式IV的化合物在强无机碱如氢氧化钠或氢氧化锂存在下，在极性溶剂混合物如THF和MeOH中，可以水解成相应的羧酸。步骤B中，在R¹为硝基部分时的通式IV的化合物可以通过在下面条件下的加热而还原成相应的苯胺：在氯化铵和水存在下，在极性质子溶剂如乙醇中，利用还原试剂如铁Fisher。在步骤C中，在作为催化剂的碳载钯存在下，在极性质子溶剂如乙醇中，在R1为苄基氧基部分时的通式IV的化合物可以利用氢作为还原剂还原成相应的苯酚。在步骤D中，在R1为甲基-或乙基-酯部分时的通式IV的化合物可以在下面的条件下利用氢化铝锂或三甲基硼氢化锂作为还原剂而还原成相应的苄醇：在极性溶剂如THF中，在-10℃和室温之间的温度。在步骤E中，在R1为巯基苄基部分时的通式IV的化合物可以利用3-氯过氧化苯甲酸作为氧化剂，在极性溶剂如氯仿中氧化成相应的砜。步骤F中，在R¹为胺部分时的通式IV的化合物可以利用烷基-，环烷基-，杂环基-卤作为烷基化剂，通过在无机碱如碳酸钠存在下，在极性溶剂如DMF中加热而烷基化成相应的仲或叔胺。

方案V：

在R²为COOEt时：步骤A：1.NaOH，THF；2.R_eR_fNH，BOP，DIPEA，THF。

在R²为O(CH₂)₂O时：步骤B：1.HCl，THF，加热；2.R_hMgCl，THF，-78℃。

在R²为NH₂时：步骤C：(R_gSO₂)O。

在X³为NHSO₂Ph时：步骤D：NaOH，MeOH。

在X¹为C-OMe时：步骤E：TMSI，CHCl₃。

步骤A中，在R²为乙基-或甲基-酯部分时的通式V的化合物可以在强无机碱如氢氧化钠存在下，在极性溶剂如THF中水解为相应的羧酸。随后，在偶合剂如如BOP和碱如DIPEA存在下，在极性溶剂如THF中，可以将羧酸与羟基烷基-，烷氧基-，烷基-，环烷基-，杂烷基-，烷基磺酰基-，烷基亚磺酰基-胺偶合，得到相应的酰胺。在步骤B中，在强无机酸如HCl存在下，在极性溶剂如THF中，可以将在R²为1，3-二氧戊环部分时的通式V的化合物通过加热而水解成相应的酮。可以将以这种方式得到的酮由格利雅试剂在低温，在极性溶剂如THF中进行加成反应，得到相应的叔醇。在步骤C中，在R²为胺部分时的通式V的化合物可以在磺酸酐存在下，在极性溶剂如NMP中磺酰化，得到相应的磺酰胺。在步骤D中，在无机碱如氢氧化钠存在下，在极性溶剂如甲醇中，在X³为苯基磺酰基酰胺部分时的通式V的化合物可以水解为相应的吲哚，吲唑或苯并噁唑。在步骤E中，在X¹为甲基醚部分时的通式V的化合物可以通过在极性溶剂中与碘化三甲基硅烷反应而氧化成相应的酮。

然后，可以将产物例如通过萃取、结晶、制备HPLC，快速色谱，薄层色谱纯化。

本发明的化合物是JNK调节剂，因此预计有效用于治疗各种各样的JNK介导的疾病。例举的JNK介导的病症包括但不限于自身免疫疾病，炎性疾病，代谢疾病，神经病，和癌症。因此，本发明的化合物可以用于治疗一种或多种这些病症。在一些实施方案中，本发明的化合物可以用于治疗JNK介导的疾病，如类风湿性关节炎，哮喘，II型糖尿病，阿尔茨海默病，帕金森病或中风。

给药和药物组合物

本发明包括药物组合物，该药物组合物包含本发明的至少一种化合物，或其单独的异构体、异构体的外消旋或非消旋混合物，或其药用盐或溶剂化物，以及至少一种药用载体，和任选的其它治疗和/或预防成分。

通常，本发明的化合物将以治疗有效量，通过所接受的起类似效用的药剂给药方式中的任何一种给药。适宜的剂量范围典型地为每天1-500mg，优选每天1-100mg，并且最优选每天1-30mg，这取决于众多因素，如待治疗疾病的严重性、患者的年龄和相对健康，所使用化合物的效力，给药途径和形式，给药针对的适应症以及有关医师的喜好和经验。治疗这种疾病的领域中的普通技术人员将能够在不经过多实验并且依靠个人知识和本申请的公开内容的情况下，确定本发明的化合物对于给定疾病的治疗有效量。

本发明化合物将以药物制剂形式给药，所述的制剂包括适宜于下列的那些：口服(包括含服和舌下服用)、直肠、鼻、局部、肺、***或胃肠外(包括肌肉内、动脉内、鞘内、皮下和静脉内)给药；或以适宜于通过吸入或吹入给药的形式给药。优选的给药方式通常是口服，使用可以根据痛苦的程度而调节的方便的每日剂量服法。

可以将本发明的化合物与一种或多种常规的辅剂、载体或稀释剂放入药物组合物或单位剂量形式中。药物组合物和单位剂量形式可以包括常规比例的常规成分，具有或没有另外的活性化合物或要素，并且单位剂量形式可以含有与将采用的预定每日剂量范围相称的任何适宜有效量的活性成分。药物组合物的采用形式可以是固体如片剂或填充胶囊，半固体，粉剂，持续释放制剂，或液体如溶液剂、混悬剂、乳剂、酏剂，或口服用的填充胶囊；或者是直肠或***给药的栓剂形式；或者是胃肠外使用的无菌注射性溶液形式。每片含有约一(1)毫克活性成分，或者更广泛地，约0.01至约一百(100)毫克活性成分的制剂相应地是适宜的代表性单位剂量形式。

可以将本发明的化合物配制成各种各样的口服给药剂量形式。药物组合物和剂量形式可以包含本发明的一种或多种化合物或其药用盐作为活性组分。药用载体可以是固体或液体。固体形式的制剂包括粉剂、片剂、丸剂、胶囊、扁囊剂、栓剂和分散性颗粒。固体载体可以是一种或多种还可以用作以下的物质：稀释剂、调味剂、增溶剂、润滑剂、混悬剂、粘合剂、防腐剂、片剂崩解剂或包封材料。粉剂中，载体通常是细碎的固体，其是与细碎的活性组分的混合物。在片剂中，活性组分通常与具有所需要粘合能力的载体以适宜比例混合并且压制为所需要的形状和大小。粉剂和片剂优选含有约一(1)至约七十(70)百分比的活性化合物。适宜的载体包括但不限于碳酸镁、硬脂酸镁、滑石、糖、乳糖、果胶、糊精、淀粉、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素和羧甲基纤维素钠、低熔点蜡、可可脂。术语“制剂”意在包括活性化合物与作为载体的包封材料的制剂，以提供胶囊，其中有或没有载体的活性组分被与它结合的载体包围。类似地，包括扁囊剂和锭剂。片剂、粉剂、胶囊、丸剂、扁囊剂和锭剂可以是适宜于口服给药的固体形式。

适宜于口服给药的其它形式包括液体形式制剂，包括乳剂、糖浆剂、酏剂、水性溶液剂、水性混悬剂，或意欲在即将使用前转变为液体形式制剂的固体形式制剂。乳剂可以在溶液中制备，例如在丙二醇水溶液中制备，或者可以含有乳化剂，例如卵磷脂、脱水山梨糖醇一油酸酯或***胶。水溶液可以通过将活性组分溶解于水中并且加入适宜的着色剂、调味剂、稳定剂和增稠剂来制备。水性混悬剂可以通过将细碎的活性组分分散在具有粘性物质的水中来制备，所述的粘性物质如天然或合成树胶、树脂、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和其它公知的混悬剂。固体形式制剂包括溶液剂、混悬剂和乳剂，并且除了活性组分外，还可以含有着色剂、调味剂、稳定剂、缓冲剂、人工或天然甜味剂、分散剂、增稠剂、增溶剂。

可以配制本发明的化合物用于肠胃外给药(例如，通过注射如推注或连续输注)，并且可以以单位剂量形式存在于安瓿、预装注射器、小体积输注中，或者存在于加有防腐剂的多剂量容器中。该组合物可以采取的形式如在油性或水性赋形剂中的混悬剂、溶液剂或乳剂，例如在聚乙二醇水溶液中的溶液剂。油性或非水性载体、稀释剂、溶剂或赋形剂的实例包括丙二醇、聚乙二醇、植物油(例如，橄榄油)以及可注射的有机酯类(例如，油酸乙酯)，并且可以含有配制剂如防腐剂、湿润剂、乳化剂或混悬剂、稳定剂和/或分散剂。备选地，活性成分可以是粉末形式，其是通过灭菌固体的无菌分离或通过使用前用适宜赋形剂如无菌的无热原水配制的溶液的冻干而得到的。

可以配制本发明的化合物，作为软膏、乳膏或洗剂，或作为透皮贴片用于给表皮的局部给药。软膏和乳膏例如可以用水性或油性基质，在加入适宜的增稠剂和/或胶凝剂的情况下配制。洗剂可以用水性或油性基质配制，并且通常也将含有一种或多种乳化剂、稳定剂、分散剂、混悬剂、增稠剂或着色剂。适宜于口中局部给药的制剂包括：锭剂，其在调味基质中包含活性成分，所述的调味基质通常是蔗糖和***胶或黄蓍胶；软锭剂，其在惰性基质中包含活性成分，所述的惰性基质如明胶和甘油或蔗糖和***胶；以及漱口药，其在适宜液体载体中包含活性成分。

可以配制本发明的化合物作为栓剂用于给药。将低熔点蜡如脂肪酸甘油酯或可可脂的混合物首先熔化，并且将活性组分通过例如搅拌均匀地分散。然后，将熔融的均匀混合物倾倒入适宜大小的模具中，使其冷却，并且固化。

可以配制本发明的化合物用于***给药。本领域中已知适宜的是***栓剂、棉塞、乳膏、凝胶、膏剂、泡沫或喷雾剂，其除了活性成分外还含有例如载体。

可以配制本发明的化合物用于经鼻给药。由常规装置例如用滴管、吸管或喷雾器将溶液剂或混悬剂直接施用至鼻腔。制剂可以以单剂量或多剂量形式提供。在滴管或吸管的后一种情况下，这可以通过患者给药适宜的、预定体积的溶液剂或混悬剂来实现。在喷雾器的情况下，这可以通过例如计量的喷雾泵来实现。

可以配制本发明的化合物用于气雾剂给药，特别是对呼吸道给药，并且包括鼻内给药。该化合物通常具有小的粒子大小，例如约五(5)微米或更小。这样的粒子大小可以通过本领域中已知的方式获得，例如通过微粉化获得。将活性成分提供在具有适宜推进剂的加压容器中，所述的推进剂如氯氟烃(CFC)，例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷或二氯四氟乙烷，或二氧化碳或其它适宜的气体。气雾剂还可以方便地含有表面活性剂如卵磷脂。药物的剂量可以通过计量阀来控制。备选地，活性成分可以以干粉的形式提供，例如化合物在适宜粉末基质中的粉末混合物，所述的粉末基质如乳糖、淀粉、淀粉衍生物如羟丙基甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。粉末载体将在鼻腔中形成凝胶。粉末组合物可以以单位剂量形式存在，例如在如明胶的胶囊或药筒中，或泡眼包装中，这些包装中的粉末剂可以通过吸入器给药。

需要时，可以用适宜于活性成分的持续或受控释放给药的肠溶衣制备制剂。例如，可以将本发明的化合物配制在透皮或皮下药物递送装置中。当需要化合物的持续释放时，以及当患者对治疗方式的顺从性是关键时，这些递送***是有利的。常常将透皮递送***中的化合物粘附至皮肤-粘合性固体载体上。感兴趣的化合物也可以与渗透增强剂例如月桂氮

酮(1-十二烷基氮杂环庚烷-2-酮)组合。将持续释放***通过外科手术或注射皮下***至皮下层。皮下植入物将该化合物封装在脂溶性膜如硅橡胶或可生物降解的聚合物如聚乳酸中。

药物制剂优选为单位剂量形式。在这种形式下，将制剂再分成含有适宜量的活性成分的单位剂量。单位剂量形式可以是包装制剂，该包装含有离散量的制剂，如小包片剂、胶囊或在管瓶或安瓿中的粉剂。此外，单位剂量形式可以是胶囊、片剂、扁囊剂或锭剂本身，或者它可以是适宜数量的这些包装形式中的任何一种。

其它适宜的药物载体以及它们的制剂描述于：雷明顿：药物科学与实践(Remington：The Science and Practice of Pharmacy)1995，由E.W.Martin编辑，Mack出版公司，第19版，Easton，宾夕法尼亚州。下面描述了含有本发明化合物的代表性药物制剂。

在研究本发明的下列实施例后，本发明的另外的目的、优势和新特征对于本领域技术人员而言将是很明显的，这些实施例不意欲是限制性的。

实施例

简写名单

AcOH 乙酸

Bn 苄基

BOP 苯并***-1-基氧基三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸盐

(BOC)₂O 二碳酸二叔丁酯

DBU 1，8-二氮杂双环[5.4.0]-十一-7-烯

DCM 二氯甲烷(甲叉二氯)

DEA 二乙胺

DIPEA 二异丙基乙胺

DMF N，N-二甲基甲酰胺

EDCI 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐

Et₂O ***

EtOH 乙醇

EtOAc 乙酸乙酯

HOBt 1-羟基苯并***

i-PrOH 异丙醇

LAH 氢化铝锂

m-CPBA 3-氯过氧苯甲酸

MeOH 甲醇

MW 微波

NCS N-氯琥珀酰亚胺

NMP 1-甲基-2-吡咯烷酮

p-TSA 对甲苯磺酸

RT 室温

TEA 三乙胺

THF 四氢呋喃

TLC 薄层色谱

制备1：3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑的合成

根据方案1中所示的方法进行3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑的合成。

方案1

步骤A：(2-氟-苯基)-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-甲酮的合成

将氢化钠(在矿物油中的60％分散体，598mg，14.94mmol)加入到4-氯-2-甲硫基嘧啶(1.45mL，12.45mmol)，2-氟苯甲醛(1.57mL，14.94mmol)和碘化1，3-二甲基咪唑鎓(517mg，4.15mmol)(如Org.Synth.(1986)64：9中所述制备)在1，4-二噁烷(20mL)中的搅拌溶液中。将得到的混合物加热回流1小时；然后将其冷却，并且在EtOAc和水之间分配。将有机层分离并且用Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下蒸发。将粗制剩余物由快速色谱(己烷/EtOAc，95/5)纯化，得到840mg的(2-氟苯基)-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-甲酮。

以相同的方式，使用适宜的原料，制备下列化合物：

(2-氟-3-甲氧基-苯基)-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-甲酮；和

(2，5-二氟-苯基)-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-甲酮。

步骤B：3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑的合成

将肼基甲酸叔丁酯(899mg，6.8mmol)和乙酸(0.5mL)加入到(2-氟-苯基)-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-甲酮(840mg，3.4mmol)在MeOH中的混合物中。将得到的混合物加热回流16h；然后，将其冷却至RT，并且在EtOAc和碳酸氢钠水溶液之间分配。将有机层分离，并且用Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下蒸发。将剩余物放置在容纳有DBU(0.79mL，5.3mmol)和THF的密封管中。将得到的混合物在微波反应器中加热至150℃ 30分钟。然后，将反应混合物在减压下蒸发，并且将粗制剩余物由快速色谱(己烷/EtOAc，4/1)纯化，提供525mg的3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑。

以类似的方式，采用适宜的原料，制备下列化合物：

7-甲氧基-3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑，和

3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-7-三氟甲基-1H-吲唑。

制备2：1-甲基-3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑的合成

根据方案2中所示的方法进行1-甲基-3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑的合成。

方案2

于0℃，将氢化钠(在矿物油中的60％悬浮液，99mg，2.47mmol)加入到3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑(520mg，2.15mmol)在NMP中的搅拌溶液中。将混合物搅拌15min，然后加入甲基碘(0.14mL，2.25mmol)，并且将得到的混合物搅拌2h。然后，将反应混合物倾倒入水中，并且用EtOAc萃取两次。将合并的有机萃取物用Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下蒸发。将剩余物由快速色谱(己烷/EtOAc，9/1)纯化，得到415mg的1-甲基-3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑。

制备3：7-甲氧基-3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-苯并[d]异噁唑的合成

根据方案3中所示的方法进行7-甲氧基-3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-苯并[d]异噁唑的合成。

方案3

将(2-氟-3-甲氧基-苯基)-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-甲酮(1g，3.59mmol)和羟基胺(50％，在水中，1.5mL)在乙醇中的混合物加热至回流过夜。将得到的混合物冷却至RT，用EtOAc稀释，然后在减压下浓缩。将剩余物溶解于THF，并且加入DBU(0.84mL，5.6mmol)，将得到的混合物在微波反应器中加热至150℃ 30min。然后，将反应混合物在减压下浓缩，并且将剩余物由快速色谱(己烷/EtOAc，95/5)纯化，得到458mg的7-甲氧基-3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-苯并[d]异噁唑。

以相同的方式，使用适宜的原料，制备下列化合物：

3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-苯并[d]异噁唑；和

5-氟-3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-苯并[d]异噁唑。

制备4：3-溴-1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑的合成

根据方案4中所示的方法进行3-溴-1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑的合成。

方案4

向4-溴-1H-吲唑(8.831g，44.82mmol)在DMF(100mL)中的溶液中，加入NaH(在矿物油中的60％悬浮液，74.7mmol，2.988g)，接着加入4-氯-2-甲硫基-嘧啶(4.34mL，37.35mmol)。将得到的混合物于RT搅拌2h；将固体沉淀通过过滤收集，洗涤，并且在减压下干燥，得到10.7g(89％收率)的3-溴-1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑。

以类似的方式，采用适宜的原料，制备下列化合物：

1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑；

6-甲基-1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑；

5-甲基-1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑；

3-甲基-1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲哚；

6-氟-1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲哚；

4-苄基氧基-1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲哚；

5-苄基氧基-1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲哚；

1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲哚；

1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑；

1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-6-硝基-1H-吲唑；

1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶(白色结晶固体)，MS＝243[M+H]⁺，MP＝120.1-123.0℃；和

1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吡咯并[3，2-c]吡啶(茶色固体)，MS＝243[M+H]⁺，MP＝167.7-169.2℃。

制备5：2-丁硫基-4-氯-嘧啶的合成

根据方案5中所示的方法进行2-丁硫基-4-氯-嘧啶的合成。

方案5

步骤A：2-丁硫基-3H-嘧啶-4-酮的合成

将2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(12.8g)加入到NaOH(8.0g)在水(70mL)中的溶液中。在固体完全溶解后，将丁基碘(12.4mL)加入到溶液中，并且将得到的混合物于RT搅拌过夜。然后加入第二等份的丁基碘(1.2mL)，并且将反应混合物搅拌24h。加入第三等份的丁基碘(1.2mL)，并且将得到的混合物搅拌6天。加入冰醋酸(5.5mL)，并且将反应混合物搅拌30min，然后将其于4℃贮存过夜。将形成的沉淀物通过过滤收集，并且在减压下干燥，得到12.3g的2-丁硫基-3H-嘧啶-4-酮。

步骤B：2-丁硫基-4-氯-嘧啶的合成

将2-丁硫基-3H-嘧啶-4-酮(3.0g)和磷酰氯(15mL)的混合物加热回流3h；然后，将其冷却至RT并且在减压下蒸发。将剩余物倾倒入冰-水混合物中，并且将得到的混合物用DCM萃取。将合并的有机萃取物用NaHCO₃的稀释水溶液洗涤，用Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下蒸发，得到1.2g的2-丁硫基-4-氯-嘧啶。

制备6：1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-4-硝基-1H-吲哚的合成

根据方案6中所示的方法进行1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-4-硝基-1H-吲哚的合成。

方案6

将二(三甲代甲硅烷基)氨基钠(1M，在THF中，26.42mL)的溶液慢慢地加入到4-硝基吲哚(4.2g，25.9mmol)在乙腈/THF(2/1，75mL)的混合物中的冷却(丙酮/干冰浴)溶液中，并且将得到的混合物搅拌1小时。然后加入4-氯-4-甲硫基嘧啶(4.202g，26.2mmol)，并且将反应混合物温热至RT，并且搅拌21h。将得到的混合物在减压下蒸发，并且将固体剩余物与己烷/EtOAc/Et₂O(5/1/1)的混合物一起研磨。将固体通过过滤收集，洗涤，并且在减压下干燥，得到2.56g的1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-4-硝基-1H-吲哚，其在没有进一步纯化的情况下使用。

以相同的方式，采用适宜的原料，制备下列化合物：

1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲哚-4-羧酸甲酯；

4-甲氧基-1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲哚；

6-甲基-1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲哚

4-甲基-1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲哚；

4-氟-1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲哚；

5-氟-1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲哚；

1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲哚-3-羧酸甲酯；

1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲哚-5-羧酸甲酯；和

5-甲氧基-1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲哚。

以相同的方式，采用适宜的原料和作为碱的LiHMDS，制备下列化合物：

1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲哚-4-腈；

1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲哚-6-羧酸甲酯；和

5-甲基-1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲哚。

制备7：4-氨基-环己烷羧酸二甲基酰胺盐酸盐的合成。

根据方案7中所示的方法进行4-氨基-环己烷羧酸二甲基酰胺盐酸盐的合成。

方案7

步骤A：(4-二甲基氨基甲酰基-环己基)-氨基甲酸叔丁酯的合成

将4-叔丁氧基羰基氨基-环己烷羧酸(2.43g，10mmol)，EDCI(6.52g，34mmol)和HOBt(4.59g，34mmol)在NMP(20mL)中的混合物于RT搅拌3h。加入二甲胺的溶液(2.0M，在THF中，15mL，30mmol)，并且将得到的混合物于RT搅拌64h。然后加入水和EtOAc，并且将有机层分离，并且用K₂CO₃饱和水溶液，HCl水溶液(1M)，K₂CO₃饱和水溶液和盐水洗涤两次。将有机层用Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下蒸发，得到(4-二甲基氨基甲酰基-环己基)-氨基甲酸叔丁酯(1.6g，59％收率)，为白色固体。

步骤2：4-氨基-环己烷羧酸二甲基酰胺盐酸盐的合成

将HCl(浓，7mL)加入到(4-二甲基氨基甲酰基-环己基)-氨基甲酸叔丁酯(1.5g)在1，4-二噁烷(20mL)中的溶液中，并且将得到的混合物于RT搅拌5h。加入甲苯，并且将反应混合物在减压下蒸发。将油性剩余物与EtOAc一起研磨，得到4-氨基-环己烷羧酸二甲基酰胺盐酸盐(0.9g)。

以类似的方式，采用适宜的原料制备反式-(4-氨基-环己基)-吗啉-4-基-甲酮。

制备8：反式-4-氨基-环己烷羧酸乙酯的合成

根据方案8中所示的方法进行反式-4-氨基-环己烷羧酸乙酯的合成。

方案8

将反式-4-氨基-环己烷羧酸(15g，83.8mmol)，硫酸(9mL)和EtOH(400mL)的混合物于RT搅拌过夜。加入NaHCO₃饱和水溶液和NaHCO₃(固体)，直到混合物的pH达到7。然后在减压下除去溶剂。加入K₂CO₃水溶液(50％)，并且将得到的混合物用EtOAc萃取，将有机萃取物用Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下蒸发，提供反式-4-氨基-环己烷羧酸乙酯(12.81g)，为淡黄色油状物。

制备9：2-[1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲哚-4-基]-丙-2-醇的合成

根据方案9中所示的方法进行2-[1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲哚-4-基]-丙-2-醇的合成。

方案9

将1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲哚-4-羧酸甲酯(500mg)在THF(6mL)中的悬浮液加入到甲基镁化溴(3.0M，在Et₂O中，3.51mL)和THF(2mL)的溶液中，冷却至0℃，并且将得到混合物在N₂下搅拌5h。然后加入第二等份的甲基镁化溴(3.0M，在Et₂O中，1.80mL)，并且将反应混合物在N₂气氛下于RT搅拌30min。然后将得到的混合物冷却至0℃，倾倒入水/HCl的冷混合物(1M，1:1，75mL)中，并且用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用水洗涤一次，并且用NaHCO₃饱和水溶液洗涤两次，用Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下蒸发，得到2-[1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲哚-4-基]-丙-2-醇(0.48g)。

制备10：[6-(2，4-二氟-苯氧基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-异丙基-胺的合成

根据方案10中所示的方法进行[6-(2，4-二氟-苯氧基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-异丙基-胺的合成。

方案10

步骤A：(R)-2-boc-氨基-丙-1-醇的合成

将(R)-2-氨基-丙-1-醇(30.0g，0.3994mol)溶解于MeOH(800mL)，并且将溶液在冰浴中冷却30min。将二碳酸二叔丁酯(87.17g，0.3994mol)在MeOH(250mL)中的溶液分份加入到搅拌的反应混合物中。移走冰浴，并且继续搅拌3h。将反应混合物在减压下蒸发至干燥，得到(R)-2-boc-氨基-丙-1-醇，其在没有进一步纯化下使用。

步骤B：(R)-2-Boc-氨基-1-甲磺酰基-丙-1-醇的合成

将DCM(400mL)和三乙胺(83.9mL，0.60mol)加入到容纳有(R)-2-boc-氨基-丙-1-醇的烧瓶中。将反应混合物在冰浴中冷却30min，并且在5min的时间内滴加甲烷磺酰氯(37.0mL，0.478mol)。将得到的混合物搅拌1小时，移走冰浴，并且将混合物于RT搅拌18h。将得到的混合物用NaOH水溶液(10％)洗涤，并且将有机层用MgSO₄干燥，过滤，并且在减压下浓缩，得到(R)-2-boc-氨基-1-甲磺酰基-丙-1-醇(91.93g)。

步骤C：(R)-2-Boc-氨基-1-甲硫基-丙烷的合成

将(R)-2-boc-氨基-1-甲磺酰基-丙-1-醇(91.93g，363mmol)，THF(350mL)和硫代甲醇钠(30.0g，406mmol)的混合物于RT搅拌18h。将混合物在减压下浓缩，并且将剩余物在Et₂O和水之间分配。将有机层用盐水洗涤，用MgSO₄干燥，过滤，并且在减压下浓缩，得到(R)-2-boc-氨基-1-甲硫基-丙烷(70.8g)。

步骤D：(R)-1-甲基-2-甲硫基-乙胺的合成

将甲醇(400mL)在冰浴中冷却30min，并且，在45min的时间内，滴加乙酰氯(100mL)。在冰浴温度下，在搅拌的情况下，将得到的溶液加入到(R)-2-Boc-氨基-1-甲硫基-丙烷(70.47g，343mmol)。在加入完成后，将反应混合物搅拌15min，移走冰浴，并且继续搅拌2h。将反应混合物在减压下浓缩为固体，然后放入THF(700mL)中。将得到的混合物加热至回流，直到全部固体溶解，然后冷却至RT，然后至0℃冷却30min。将得到的沉淀物通过过滤收集，用冷THF洗涤，并且在减压下干燥，得到(R)-1-甲基-2-甲硫基-乙胺(23.57g)。MS＝106[M+H]⁺。

按照上述程序，采用适宜的原料，制备(S)-1-甲基-2-甲硫基-乙胺。

制备11：(R)-2-甲烷磺酰基-1-甲基-乙胺的合成

根据方案11中所示的方法进行(R)-2-甲磺酰基-1-甲基-乙胺的合成

方案11

步骤A：甲烷磺酸(R)-2-苄基氧基羰基氨基-丙酯的合成

将氯甲酸苄酯(10.0mL)在DCM(25mL)中的溶液以保持低于-5℃的温度的速度加入到R-(-)-2-氨基-1-丙醇(5.0g)和三乙胺(6.8g)在DCM(75mL)中的搅拌的冷却溶液中。继续冷却和搅拌1小时，然后以保持低于-5℃的温度的速度加入甲烷磺酰氯(7.7g)在DCM(25mL)中的溶液。将反应混合物温热至5℃，然后用水(150mL)洗涤两次。将有机层用无水硫酸钠过滤，并且通过真空蒸馏除去溶剂，得到19.2g的白色固体。将此物质的一部分(15g)溶解于DCM(100mL)中，并且蒸馏得到的溶液。通过加入甲基-叔丁醚保持体积。在开始结晶时，将混合物蒸馏至约75mL的体积，并且停止加热。通过滴加己烷，将得到的混合物稀释至约150mL的体积。冷却后，收集白色结晶固体，用己烷/甲基-叔丁基醚(1:1)洗涤，并且干燥，得到甲烷磺酸(R)-2-苄基氧基羰基氨基-丙酯(11.1g)。

步骤B：((R)-2-甲磺酰基-1-甲基-乙基)-氨基甲酸苄酯的合成

向甲烷磺酸(R)-2-苄基氧基羰基氨基-丙酯(11.1g)在乙腈(72mL)中的搅拌混合物中，加入甲基硫醇钠水溶液(15％，35mL)。将得到的混合物加热至约55℃4-5h；然后将其冷却，并且将下面的水层分离。将有机层与水(10mL)一起摇动，并且将下层再次分离。将甲酸(15mL)加入到有机层中，将得到的混合物搅拌，并且滴加H₂O₂水溶液(30％，12g)。在最初的放热后，将混合物冷却，然后加热至约65℃，在3h后，将第二等份的H₂O₂(30％，2mL)和甲酸(6mL)加入到混合物中。在4h后，进行两种试剂的类似加入。在6h后，将反应混合物冷却，并且用水(约200mL)慢慢地稀释。在加入期间，白色固体结晶。将混合物在冰浴中冷却，并且将固体通过过滤收集，用水洗涤，并且在减压下干燥，得到((R)-2-甲磺酰基-1-甲基-乙基)-氨基甲酸苄酯(9.2g)。

步骤C：(R)-2-甲磺酰基-1-甲基-乙胺的合成

将((R)-2-甲磺酰基-1-甲基-乙基)-氨基甲酸苄酯(2.7g)，碳载氢氧化钯(20％，0.3g)和异丙醇(30mL)的混合物在氮气气氛下加热至约65℃。在约1小时的时间内，将甲酸钾(2.7g)在水(4mL)中的溶液加入到混合物中。在6h后，将混合物冷却并且过滤。将滤液真空蒸馏成粘性油状物，将其溶解于异丙醇(30mL)中。得到的溶液过滤并且在减压下蒸发，得到(R)-2-甲磺酰基-1-甲基-乙胺(1.2g)，为粘性油状物。

制备12：3-三甲代甲硅烷基氧基-1-(2-三甲代甲硅烷基氧基-乙基)-丙基胺的合成

根据方案12中所示的方法进行3-三甲代甲硅烷基氧基-1-(2-三甲代甲硅烷基氧基-乙基)-丙基胺的合成。

方案12

步骤A：二甲基-3-氨基戊烯二酸酯的合成

将丙酮-1，3-二羧酸二甲酯(24.55Kg)，碳酸氢铵(22.9Kg)和MeOH(81.8Kg)的混合物于RT搅拌过夜。将固体通过过滤除去，并且滤液在减压下浓缩。加入异丙醇(27.2Kg)，并且通过共沸蒸馏除去反应物中的水。将余下的溶剂蒸馏出，提供二甲基-3-氨基戊烯二酸酯(24.705Kg，99％收率)，为油状物。

步骤B：3-氨基-戊二酸二甲酯的合成

于0-5℃，通过将硫酸(20.69Kg)加入到异丙醇(51.7Kg)而制备硫酸的稀醇溶液。得到的溶液慢慢地加入到叔丁胺硼烷(9.19Kg)在THF(69.3Kg)中的溶液，从而保持温度低于-5℃。将二甲基-3-氨基戊烯二酸酯(18.28Kg)慢慢地加入到得到的混合物，从而保持温度低于0℃。得到的反应混合物在0℃和15℃之间搅拌过夜，然后通过慢慢地加入到水(166Kg)中而猝灭，从而保持温度低于10℃，并且通过加入浓NaOH水溶液而将pH保持在5和7之间。然后，在猝灭过程结束时，通过加入浓NaOH水溶液而将混合物的pH调节至约9-10。进行相分离，并且将水相用DCM萃取。将合并的有机萃取物用盐水(20.6Kg)洗涤，通过棉花筒过滤并且在减压下浓缩，得到3-氨基-戊二酸二甲酯(17.87Kg，97％收率)。

步骤C：3-氨基-戊-1，5-二醇的合成

在10-30℃之间的罐温，将3-氨基-戊二酸二甲酯(17.67Kg)在THF(101.5Kg)中的溶液加入到LAH的溶液(1.0M，在THF中，90.2Kg)中，并且得到的混合物于25℃搅拌14-20h。通过慢慢地加入水和THF(1:1)，而猝灭反应。将固体过滤，并且用iPrOH/THF/DEA/丙胺洗涤。将滤液在减压下蒸发，得到3-氨基戊烷-1，5-二醇(9.55Kg，72％收率)，为稠的油状物。

步骤D：3-三甲代甲硅烷基氧基-1-(2-三甲代甲硅烷基氧基-乙基)-丙基胺的合成

将3-氨基戊烷-1，5-二醇(18.29Kg)在i-PrOH(16.91Kg)中的浆液加入到反应器中，并且在减压下蒸发溶剂。然后加入在THF(55.3Kg)中的六甲基二硅氮烷(31.985Kg)和在THF(172.03Kg)中的氯化三甲基硅烷(35.57Kg)，并且得到的混合物回流过夜。将反应混合物冷却，在减压下蒸发溶剂，并且将剩余物通过蒸馏(97-99℃)纯化，得到3-三甲代甲硅烷基氧基-1-(2-三甲代甲硅烷基氧基乙基)-丙基胺(24.36Kg)。

制备13：3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-[1，2，4]***并[4，3-a]吡啶的合成

根据方案13中所示的方法进行3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-[1，2，4]***并[4，3-a]吡啶的合成。

方案13

将2-甲硫基-嘧啶-4-甲醛(1.00g)(US 6218537)和2-肼基吡啶(0.71g)在EtOH(20mL)中的混合物加热至回流24h，然后冷却至RT，并且将得到的固体通过过滤收集，得到N-[1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-甲-(E)-亚基]-N′-吡啶-2-基-肼(1.26g)。将此物质和DCM(20mL)的混合物温和地加热并且将第二等份的DCM(10mL)和氯仿(5mL)加入，以有利于溶解。加入二乙酸碘代苯(1.65g)，并且将得到的混合物于RT，在N₂下搅拌17h。然后，将反应混合物在减压下蒸发，并且将粗制剩余物与热Et₂O一起研磨。一旦将混合物冷却至RT，就将固体通过过滤收集，提供3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-[1，2，4]***并[4，3-a]吡啶(1.12g)。

制备14：1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-2，3-二氢-1H-吲哚的合成

根据方案14中所示的方法进行1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-2，3-二氢-1H-吲哚的合成。

方案14

将4-氯-2-甲硫基嘧啶(4.02g，25mmol)，2，3-二氢-1H-吲哚(4.0mL，36mmol)和N，N-二异丙基乙胺(4mL，22mmol)在DMF(10mL)中的混合物在N₂下，加热至100℃16h。将固化的反应混合物冷却，用EtOAc稀释，并且过滤。将收集的固体溶解于DCM和MeOH中，并且从DCM/EtOAc中重结晶，得到1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-2，3-二氢-1H-吲哚(2.32g，38％收率)，为淡黄色固体。MS＝244[M+H]⁺。

实施例1：反式-4-[4-(1-甲基-1H-吲唑-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇的合成

根据方案15中所示的方法进行反式-4-[4-(1-甲基-1H-吲唑-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇的合成。

方案15

将N-氯琥珀酰亚胺(239mg，1.77mmol)加入到1-甲基-3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑(413mg，1.6mmol)在NMP中的溶液中，并且将得到的混合物于85℃搅拌15min。然后加入反式-氨基环己醇，将反应混合物搅拌1h，然后倾倒入水中，并且用EtOAc萃取两次。将合并的有机萃取物用Na₂SO₄干燥，过滤，并且在减压下蒸发。将粗制剩余物由制备TLC纯化，得到反式-4-[4-(1-甲基-1H-吲唑-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇。MS＝324[M+H]⁺；MP＝180-183.3℃。

以相同的方式，采用适宜的原料，制备反式-4-[4-(4-溴-吲唑-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(白色固体)。MS＝388[M+H]⁺；MP＝200.5-201.9℃。

实施例2：反式-4-[4-(7-甲氧基-1H-吲唑-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇的合成

根据方案16中所示的方法进行反式-4-[4-(7-甲氧基-1H-吲唑-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇的合成。

方案16

于0℃，3-氯过氧苯甲酸(77％，407mg，1.82mmol)加入到7-甲氧基-3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑(225mg，0.8mmol)在DCM中的溶液中，并且将得到的混合物搅拌3h，然后将反应混合物用DCM稀释，用NaHCO₃水溶液(5％)洗涤，用Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下蒸发，得到3-(2-甲磺酰基-嘧啶-4-基)-7-甲氧基-1H-吲唑，其在没有进一步纯化的情况下使用。向此物质在NMP中的溶液中，加入反式-氨基环己醇(190mg)，并且将得到的混合物在密封管中加热至120℃ 1.5小时。将反应混合物冷却至RT，加入水，并且将得到的悬浮液搅拌30min。将固体沉淀物通过过滤收集，用水洗涤，并且在减压下干燥过夜，得到反式-4-[4-(7-甲氧基-1H-吲唑-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇。MS＝341[M+H]⁺；MP＝243.3-244.9℃。

以类似的方式，采用适宜的原料，制备下列化合物：

反式-4-[4-(1H-吲唑-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇，MS＝310[M+H]⁺；

反式-4-(4-苯并[d]异噁唑-3-基-嘧啶-2-基氨基)-环己醇，MS＝311[M+H]⁺；

反式-1-[2-(4-羟基-环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吲哚-4-羧酸甲酯(黄色固体)，MS＝367[M+H]⁺；MP＝206.7-208.3℃；

环己基-(4-吲哚-1-基-嘧啶-2-基)-胺(灰白色结晶固体)，MS＝293[M+H]⁺；MP＝192.5-193.0℃；

反式-4-(4-吲哚-1-基-嘧啶-2-基氨基)-环己醇(灰白色固体)，MS＝309[M+H]⁺；MP＝202.4-204.4℃；

反式-N-(4-吲哚-1-基-嘧啶-2-基)-环己烷-1，4-二胺(灰白色固体)，MS＝308[M+H]⁺；MP＝270.1-273.3℃；

反式-4-(4-吲唑-2-基-嘧啶-2-基氨基)-环己醇(白色针状物)，MS＝310[M+H]⁺；MP＝214.7-216.0℃；

反式-4-(4-吲唑-1-基-嘧啶-2-基氨基)-环己醇(白色固体)，MS＝310[M+H]⁺；MP＝232.6-233.7℃；

反式-4-[4-(6-硝基-吲唑-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(黄色粉末)，MS＝355[M+H]⁺；MP＝221.8-223.0℃；

反式-4-(4-[1，2，4]***并[4，3-a]吡啶-3-基-嘧啶-2-基氨基)-环己醇(灰白色固体)，MS＝311[M+H]⁺；MP＝253.4-255.7℃；和

反式-4-(4-吡唑并[1，5-b]哒嗪-3-基-嘧啶-2-基氨基)-环己醇(白色针状物)，(原料3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-吡唑并[1，5-b]哒嗪是根据J.Med.Chem.2004，47，4716-30中所述的程序制备的)，MS＝311[M+H]⁺；MP＝214.9-215.6℃：

反式-4-(4-吡咯并[3，2-b]吡啶-1-基-嘧啶-2-基氨基)-环己醇(白色固体)，MS＝310[M+H]⁺，MP＝198.9-200.3℃；

反式-4-(4-吡咯并[3，2-c]吡啶-1-基-嘧啶-2-基氨基)-环己醇(白色结晶固体)，MS＝310[M+H]⁺，MP＝229.9-230.2℃；和

反式-4-[4-(2，3-二氢-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(白色固体)，MS＝311[M+H]⁺，MP＝230.5-231.2℃。

实施例3：反式-4-[4-(7-三氟甲基-1H-吲唑-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇的合成

根据方案17中所示的方法进行反式-4-[4-(7-三氟甲基-1H-吲唑-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇的合成。

方案17

于0℃，将3-氯过氧苯甲酸(77％，318mg，0.64mmol)加入到3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-7-三氟甲基-1H-吲唑(200mg，0.64mmol)在DCM中的溶液中，并且将得到的混合物搅拌2h。然后，将反应混合物用DCM稀释，用NaHCO₃水溶液(5％)洗涤，用Na₂SO₄干燥，过滤，并且在减压下蒸发，得到3-(2-甲磺酰基-嘧啶-4-基)-7-三氟甲基-1H-吲唑，其在没有进一步纯化的情况下使用。向此物质在NMP中的溶液中，加入反式-氨基环己醇(148mg)，接着加入DIPEA(0.11mL，0.64mmol)，得到的混合物于120℃搅拌1小时，然后冷却至RT，并且加入水。将得到的悬浮液搅拌30min，将固体沉淀物通过过滤收集，用水洗涤，并且在减压下干燥过夜。将固体物质用热EtOAc洗涤，过滤，并且在减压下干燥，得到反式-4-[4-(7-甲氧基-1H-吲唑-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(75mg)。MS＝378[M+H]⁺；MP＝265.5-270℃。

以相同的方式，使用适宜的原料，制备下列化合物：

反式-4-[4-(5-氟-苯并[d]异噁唑-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇，MS＝329[M+H]⁺；MP＝172-173.9℃；

(1，4-二氧杂-螺[4.5]癸-8-基)-(4-吲唑-1-基-嘧啶-2-基)-胺(白色固体)，MS＝352[M+H]⁺；MP＝207.5-208.8℃；

反式-4-[4-(6-甲氧基-吲唑-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(粉红色粉末)；MS＝340[M+H]⁺；MP＝166.8-167.3℃；

反式-1-[2-(4-羟基-环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吲唑-6-腈(白色粉末)；MS＝335[M+H]⁺；MP＝212.0-212.6℃；和

反式-1-[2-(4-羟基-环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吲唑-6-羧酸甲酯(淡黄色粉末)；MS＝368[M+H]⁺；MP＝214.9-216.3℃。

实施例4：反式-(4-甲基-环己基)-[4-(4-硝基-吲唑-1-基)-嘧啶-2-基]-胺的合成

根据方案18中所示的方法进行反式-(4-甲基-环己基)-[4-(4-硝基-吲唑-1-基)-嘧啶-2-基]-胺的合成。

方案18

步骤A：1-(2-丁硫基-嘧啶-4-基)-4-硝基-1H-吲唑的合成

向装有2-丁硫基-4-氯-嘧啶(202mg)的烧瓶中，加入4-硝基-1H-吲唑(228mg)，接着加入NaH(在矿物油中的60％分散体，84mg)和NMP(4mL)。将得到的混合物于RT搅拌过夜，加入水，并且将混合物用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用水洗涤，用Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下蒸发。将粗制剩余物由快速色谱(己烷/EtOAc，80:20)纯化，得到1-(2-丁硫基-嘧啶-4-基)-4-硝基-1H-吲唑(156mg)。

以类似的方式，采用适宜的原料，制备下列化合物：

1-(2-丁硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑-6-腈(原料1H-吲唑-6-腈是按照J.Med.Chem.2000，43(23)：4398-415中所述的方法制备的)；

1-(2-丁硫基-嘧啶-4-基)-6-甲氧基-1H-吲唑(原料6-甲氧基-1H-吲唑是按照Annalen der Chemie 1980，908-27中所述的方法制备的)；和

1-(2-丁硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑-6-羧酸甲酯(原料1H-吲唑-6-羧酸甲酯是按照J.Med.Chem.2000，43，47中所述的方法制备的)。

步骤B：1-[2-(丁烷-1-磺酰基)-嘧啶-4-基]-4-硝基-1H-吲唑的合成

向1-(2-丁硫基-嘧啶-4-基)-4-硝基-1H-吲唑(660mg)在DCM中的冷却至0℃的溶液中，加入甲基三氧铼(30mg)，接着加入H₂O₂水溶液(30％，1.3mL)。将反应混合物于RT搅拌2h，然后倾倒入水和DCM的混合物中。将有机层分离，并且将水层用DCM萃取。将合并的有机萃取物用Na₂SO₃水溶液洗涤两次，用盐水洗涤一次，用Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下蒸发，得到1-[2-(丁烷-1-磺酰基)-嘧啶-4-基]-4-硝基-1H-吲唑(680mg)。

步骤C：反式-(4-甲基-环己基)-[4-(4-硝基吲唑-1-基)-嘧啶-2-基]-胺的合成

将1-[2-(丁烷-1-磺酰基)-嘧啶-4-基]-4-硝基-1H-吲唑(480mg)和反式-氨基环己醇(500mg)的混合物加热至约120℃。在形成沉淀物后，加入NMP(0.8mL)。将反应混合物搅拌2h，然后冷却至RT，并且倾倒入水和DCM的混合物中。将固体沉淀物通过过滤收集，并且在减压下干燥，得到反式-(4-甲基-环己基)-[4-(4-硝基吲唑-1-基)-嘧啶-2-基]-胺(160mg)，为黄色粉末。MS＝355[M+H]⁺；MP＝253.9-254.8℃。

实施例5：反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸(3-羟基-丁基)-酰胺的合成

根据方案19中所示的方法进行反式-4-(4-吲唑-1-基-嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸(3-羟基-丁基)-酰胺的合成。

方案19

将反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸(100mg，0.30mmol)，2-氨基-2-丁醇(39.2mg，0.44mmol)，BOP(194.6mg，0.44mmol)，DIPEA(77.4mg，0.60mmol)在THF(8mL)中的混合物于RT搅拌过夜。将水(20mL)加入到得到的悬浮液中：固体首先溶解，然后通过加入更多的水(100mL)而沉淀。将沉淀物通过过滤收集，用水和Et₂O洗涤，并且在减压下干燥，得到反式-4-(4-吲唑-1-基-嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸(3-羟基-丁基)酰胺(78mg)，为白色固体。MS＝409[M+H]⁺。

以相同的方式，采用适宜的原料，制备下列化合物：

反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸(2-甲磺酰基-乙基)-酰胺(淡褐色固体)，MS＝443[M+H]⁺；MP＝229.6-231.2℃；

反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸((R)-2-甲磺酰基-1-甲基乙基)-酰胺(白色粉末)，MS＝457[M+H]⁺；MP＝289.0-291.0℃；

反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸[3-羟基-1-(2-羟基乙基)丙基]-酰胺(白色固体)，MS＝439[M+H]⁺；MP＝215.0-217.8℃；

反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸(1-羟基甲基-丙基)酰胺(白色粉末)，MS＝409[M+H]⁺；MP＝222.0-224.7℃；

反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸(2，3-二羟基-丙基)-酰胺(白色粉末)，MS＝411[M+H]⁺；MP＝243.3-245.1℃；

反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸(3-羟基-1-甲基-丙基)-酰胺(白色固体)，MS＝409[M+H]⁺；MP＝231.9-234.4℃；

反式-(4-羟基哌啶-1-基)-[4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己基]-甲酮(淡褐色固体)，MS＝421[M+H]⁺；MP＝125.5-128.8℃；

反式-1-[4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羰基]-吡咯烷-3-酮(淡褐色粉末)(胺原料是通过标准BOC脱保护可商购的3-氧代-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯而制备的)，MS＝405[M+H]⁺；MP＝172.6-174.8℃；

反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸异丙基酰胺(白色固体)，MS＝379[M+H]⁺；MP＝270.0-271.0℃；

反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸((S)-2-羟基-1-甲基乙基)酰胺(白色粉末)，MS＝395[M+H]⁺；MP＝254.6-256.9℃；

反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸(2-甲氧基乙基)-酰胺(白色粉末)，MS＝395[M+H]⁺；MP＝216.9-219.1℃；

反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸(2-羟基-1-羟基甲基乙基)-酰胺(白色粉末)，MS＝411[M+H]⁺；MP＝239.1-240.9℃；

反式-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)-[4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己基]-甲酮(白色粉末)，MS＝407[M+H]⁺；MP＝203.3-204.0℃；

反式-((S)-3-羟基吡咯烷-1-基)-[4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己基]-甲酮(白色固体)，MS＝407[M+H]⁺；MP＝201.7-202.7℃；

反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸(2-羟基-1，1-二甲基乙基)-酰胺(白色粉末)，MS＝409[M+H]⁺；MP＝256.5-259.5℃；

反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸(2-羟基-2-甲基丙基)酰胺(白色固体)(胺原料是按照J.Med.Chem.1998，41，3347制备的)，MS＝409[M+H]⁺；MP＝224.2-225.9℃；

反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸(2-羟基乙基)-甲基-酰胺(白色固体)，MS＝395[M+H]⁺；MP＝168.1-169.6℃；

反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸((R)-1-甲基-2-甲硫基乙基)-酰胺(白色固体)，MS＝425[M+H]⁺；MP＝215.1-218.8℃；

反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸((S)-2-羟基-1，2-二甲基丙基)酰胺(淡褐色粉末)(胺原料是如WO 2002064594中所述合成的)，MS＝423[M+H]⁺；MP＝214.2-215.2℃；

反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸(2-羟基丙基)-酰胺(灰白色粉末)，MS＝395[M+H]⁺；MP＝234.0-236.6℃；

反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸((S)-1-甲基-2-甲硫基-乙基)-酰胺(白色固体)，MS＝425[M+H]⁺；MP＝221.5-222.5℃；

反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸乙基-(2-羟基乙基)酰胺(白色固体)，MS＝409[M+H]⁺；MP＝111.5-113.0℃；

反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸环丙基甲基-酰胺(白色固体)，MS＝391[M+H]⁺；MP＝248.5-252.5℃；和

反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸环戊基酰胺(白色粉末)，MS＝405[M+H]⁺；MP＝272.2-274.4℃。

实施例6：反式-[4-(4-吲唑-1-基-嘧啶-2-基氨基)-环己基]-吗啉-4-基-甲酮的合成

根据方案20中所示的方法进行反式-[4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)环己基]-吗啉-4-基-甲酮的合成。

方案20

将可密封(5mL)管中装入反式-(4-氨基-环己基)-吗啉-4-基-甲酮(89.3mg，0.36mmol)，DIPEA(0.19mL，1.10mmol)和NMP(1mL)。将第二可密封(5mL)管中装入1-(2-甲磺酰基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑(100mg，0.36mmol)和NMP(1mL)。将两种混合物加热至120℃，直到固体完全溶解。然后，将1-(2-甲磺酰基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑的溶液通过套管转移至容纳有所述胺混合物的小瓶中，并且将得到的混合物加热至120℃3h。然后将反应混合物冷却至RT并且搅拌2天，然后在NH₄Cl水溶液(饱和)和DCM之间分配。将有机层分离，并且将水层用DCM萃取。将合并的有机萃取物用Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下蒸发，得到琥珀色油状物。将此粗制物质从Et₂O中重结晶，将上清液滗析掉，并且将得到的晶体用Et₂O洗涤。将结晶物质从DCM重结晶，得到57mg的浅米色结晶物质，其由快速色谱(EtOAc/己烷，50:50至70:30的梯度)纯化，得到反式-[4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己基]-吗啉-4-基-甲酮(34mg)，为灰白色粉末。MS＝407[M+H]⁺；MP＝191.0-192.0℃。

以类似的方式，采用适宜的原料，制备下列化合物：

反式-4-[4-(6-甲基吲唑-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(黄色粉末)，MS＝324[M+H]⁺；MP＝211.0-212.5℃；

反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸二甲基酰胺(白色粉末)，MS＝365[M+H]⁺；MP＝223.0-225.0℃；和

反式-4-[4-(5-甲基吲唑-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(灰白色粉末)，MS＝324[M+H]⁺；MP＝221.5-223.5℃。

实施例7：反式-1-[2-(4-羟基-环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吲哚-4-羧酸的合成

根据方案21中所示的方法进行反式-1-[2-(4-羟基环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吲哚-4-羧酸的合成。

方案21

将LAH(327mg，13.6mmol)加入到1-[2-(4-羟基环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吲哚-4-羧酸甲酯(1.0g，2.7mmol)在THF(4mL)，水(4mL)和MeOH(1mL)的混合物中的悬浮液中。将反应混合物于RT搅拌16h，然后在减压下蒸发，得到米色固体。将HCl水溶液(1M，14mL)加入到剩余物中，并且将得到的混合物搅拌并且在减压下蒸发。将剩余物与MeOH一起研磨，得到反式-1-[2-(4-羟基环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吲哚-4-羧酸(700mg)，为灰白色固体。MS＝353[M+H]⁺；MP＝259.0-261.0℃。

实施例8：反式-4-[4-(4-氨基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇的合成

根据方案22中所示的方法进行反式-4-[4-(4-氨基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇的合成。

方案22

步骤A：1-(2-甲烷亚磺酰基嘧啶-4-基)-4-硝基-1H-吲哚的合成

于0℃，在N₂下，将3-氯过氧苯甲酸(77％，3.11g)在CHCl₃(40mL)中的悬浮液慢慢地加入到1-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-4-硝基-1H-吲哚(3.93g，14.0mmol)在CHCl₃(50mL)中的混合物中。将得到的混合物温热至RT，并且搅拌过夜。然后，将反应混合物用DCM(200mL)稀释，并且用NaHCO₃水溶液(饱和)洗涤。得到的黄色沉淀物通过过滤收集，并且在减压下干燥，得到1-(2-甲烷亚磺酰基-嘧啶-4-基)-4-硝基-1H-吲哚(2.36g)。将母液用Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下蒸发，得到第二部分(690mg)。

步骤B：反式-4-[4-(4-硝基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇的合成

将装有1-(2-甲烷亚磺酰基嘧啶-4-基)-4-硝基-1H-吲哚(3.02g)和反式-氨基环己醇(2.87g)的圆底烧瓶放置于75℃的油浴中，并且加入NMP(5mL)。将得到的混合物加热至105℃20min，然后于RT搅拌过夜。将得到的固体与己烷/Et₂O(1:1，50mL)一起研磨3次，弃掉上清液，并且将剩余溶剂在减压下蒸发。将固体剩余物在搅拌下悬浮于水(70mL)中，然后通过过滤收集，并且在减压下干燥，得到反式-4-[4-(4-硝基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(2.47g)，其在没有进一步纯化下使用。

以相同的方式，采用适宜的原料，制备下列化合物：

反式-4-[4-(4-甲氧基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(灰白色固体)，MS＝339[M+H]⁺；MP＝208.0-209.8℃；

反式-4-[4-(3-甲基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(白色固体)，MS＝323[M+H]⁺；MP＝213.9-215.7℃；

反式-4-[4-(6-氟吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(白色固体)，MS＝327[M+H]⁺；MP＝188.0-190.0℃；

反式-4-[4-(4-苄基氧基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(淡黄色固体)，MS＝415[M+H]⁺；MP＝171.1-173.2℃；

反式-4-[4-(5-苄基氧基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(灰白色固体)，MS＝415[M+H]⁺；MP＝185.1-186.7℃；

反式-4-[4-(6-甲基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(白色固体)，MS＝323[M+H]⁺；MP＝207.0-208.0℃；

反式-4-[4-(4-甲基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(灰白色固体)，MS＝323[M+H]⁺；MP＝205.5-205.9℃；

反式-4-[4-(4-氟吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(白色固体)，MS＝327[M+H]⁺；MP＝210.5-212.0℃；

反式-4-[4-(5-氟吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(白色固体)，MS＝327[M+H]⁺；MP＝217.2-217.8℃；

反式-1-[2-(4-羟基环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吲哚-3-羧酸甲酯(灰白色固体)，MS＝367[M+H]⁺；MP＝177.5-178.8℃；

反式-1-[2-(4-羟基环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吲哚-5-羧酸甲酯(白色固体)，MS＝367[M+H]⁺；MP＝238.5-239.2℃；

反式-4-[4-(5-甲氧基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(灰白色粉末)，MS＝339[M+H]⁺；MP＝203.6-204.0℃；

反式-1-[2-(4-羟基环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吲哚-4-腈(灰白色固体)，MS＝334[M+H]⁺；MP＝234.9-235.3℃；

反式-1-[2-(4-羟基环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(淡黄色固体)，MS＝367[M+H]⁺；MP＝232.2-234.5℃；

反式-4-[4-(5-甲基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(灰白色固体)，MS＝323[M+H]⁺；MP＝202.5-203.5℃；和

反式-4-{4-[4-(1-羟基-1-甲基乙基)-吲哚-1-基]-嘧啶-2-基氨基}-环己醇(灰白色固体)，MS＝367[M+H]⁺；MP＝168.0-169.0℃。

步骤C：反式-4-[4-(4-氨基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇的合成

将反式-4-[4-(4-硝基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(2.44g)，EtOH(35mL)和水(11mL)的混合物加热至80℃。向热悬浮液中，加入氯化铵(1.46g)，接着加入铁(O)(Fisher，1.55g)，并且将得到的混合物加热至80℃2h，然后加热至50℃另外24h。将反应混合物通过CELITE^TM垫过滤，将滤饼用EtOAc/MeOH(3:2)洗涤，并且将滤液在减压下蒸发。将粗制剩余物由快速色谱(MeOH/DCM，2.5:97.5至10:90的梯度)纯化，得到反式-4-[4-(4-氨基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇，为淡黄色固体。MS＝324[M+H]⁺；MP＝218.9-220.1℃。

以相同的方式，采用适宜的原料制备反式-4-[4-(6-氨基-吲唑-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇。MS＝325[M+H]⁺；MP＝236.5-237.5℃。

实施例9：反式-1-[2-(4-羟基环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吲哚-5-醇的合成

根据方案23中所示的方法进行此实施例中所述的合成程序。

方案23

将4-[4-(5-苄基氧基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(70mg)和Pd/C(15％，38mg)在EtOH中的混合物在H₂(气球压力)下，于RT搅拌4天。然后将反应混合物通过CELITE^TM垫过滤，将滤饼用EtOH洗涤，并且将滤液在减压下蒸发。将剩余物由快速色谱(DCM/MeOH，95:5)纯化，得到反式-1-[2-(4-羟基-环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吲哚-5-醇(51mg)，为灰白色固体。MS＝325[M+H]⁺；MP＝246.5-248.0℃。

实施例10：反式-4-[4-(4-羟基甲基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇的合成

根据方案24中所示的方法进行反式-4-[4-(4-羟基甲基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇的合成。

方案24

于-10℃，在氩气气氛下，将LAH(1M，在THF中，0.57mL)的溶液慢慢地加入到1-[2-(4-羟基环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吲哚-4-羧酸甲酯(100mg)在THF(0.3mL)中的溶液中。将得到的混合物于-10℃搅拌30min，并且于RT搅拌过夜。然后将反应混合物冷却至0℃，并且加入水(20μL)，接着加入NaOH水溶液(15％，20μL)，并且第二份的水(70μL)。将得到的混合物搅拌30min，然后通过CELITE^TM垫过滤。将无机盐研磨，将上清液加入到滤液中，并且将溶液在减压下蒸发，得到反式-4-[4-(4-羟基甲基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(32.5g，35％收率)，为白色固体。MS＝339[M+H]⁺；MP＝212.0-213.3℃。

以类似的方式，采用适宜的原料制备反式-4-[4-(5-羟基甲基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(白色固体)。MS＝339[M+H]⁺；MP＝232.0-233.9℃。

实施例11：反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸的合成

根据方案25中所示的方法进行反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸的合成。

方案25

步骤A：1-(2-甲磺酰基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑的合成

将3-氯过氧苯甲酸(77％，14.97g，86.7mmol)加入到1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑(10g，41.3mmol)在CHCl₃(50mL)中的在冰/丙酮中冷却的溶液中，并且将得到的混合物搅拌过夜。将反应混合物用亚硫酸氢钠水溶液(10％)洗涤。将得到的固体过滤掉，并且进行滤液的相分离。将水层用DCM萃取，将合并的有机萃取物用NaOH，NaHCO₃水溶液(饱和)洗涤，用MgSO₄干燥，过滤并且在减压下蒸发，得到1-(2-甲磺酰基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑(6.4g)，为橙色固体，其在没有进一步纯化下使用。MS＝275[M+H]⁺；MP＝177.0-181.1℃。

以相同的方式，采用适宜的原料，制备下列化合物：

1-(2-甲烷磺酰基嘧啶-4-基)-6-甲基-1H-吲唑；和

1-(2-甲烷磺酰基嘧啶-4-基)-5-甲基-1H-吲唑。

步骤B：反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸乙酯的合成

将1-(2-甲烷磺酰基嘧啶-4-基)-1H-吲唑(6.4g)悬浮于THF，并且将混合物加热至60℃，直到固体完全溶解。加入反式-4-氨基-环己烷羧酸乙酯(7.99g，46.6mmol)，接着加入TEA(9.7mL，69.9mmol)，并且将得到的混合物搅拌过夜。将反应混合物在减压下浓缩，直到固体开始沉淀，然后加热至60℃24h。加入THF(4mL)，并且将反应混合物于60℃搅拌64h。将得到的混合物用EtOAc萃取，合并的有机萃取物用水洗涤，用MgSO₄干燥，过滤，并且在减压下蒸发。将粗制剩余物由快速色谱(DCM/MeOH，98:2)纯化，并且将得到的褐色固体与Et₂O一起研磨，得到反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸乙酯(2.883g)，为白色固体。

步骤C：反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)环己烷羧酸的合成

将反式-4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸乙酯(2.88g，7.9mmol)，NaOH水溶液(2M，65mL)和THF(65mL)的混合物搅拌过夜。加入MeOH(40mL)，并且将反应混合物搅拌另外105min。加入HCl水溶液(1M)，以达到pH3，并且将得到的固体通过过滤收集，得到反式-4-(4-吲唑-1-基-嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸(2.739g)而没有进一步纯化。

实施例12：反式-N-[4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己基]-甲烷磺酰胺的合成

根据方案26中所示的方法进行反式-N-[4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己基]-甲烷磺酰胺的合成。

方案26

将反式-环己烷-1，4-二胺(0.62g，5.5mmol)和NMP(10mL)的混合物加热至120℃5min，然后滴加在NMP(10mL)中的1-(2-甲磺酰基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑(300mg)，并且将得到的混合物搅拌15min。慢慢地加入甲磺酸酐(1.88g，10.8mmol)，并且将反应混合物搅拌30min。通过在真空下蒸馏除去溶剂，将EtOAc加入到剩余物中，并且将得到的溶液用水洗涤。将有机层用Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下蒸发。将粗制剩余物通过与热DCM/MeOH(90:10)一起研磨而纯化，得到反式-N-[4-(4-吲唑-1-基-嘧啶-2-基氨基)-环己基]-甲烷磺酰胺(38.0mg)，为白色固体。MS＝387[M+H]⁺；MP＝269.6-270.4℃。

实施例13：4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-1-甲基环己醇的合成

根据方案27中所示的方法进行4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-1-甲基环己醇的合成。

方案27

步骤A：4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己酮的合成

将HCl水溶液(3M，40mL)加入到在THF(40mL)中的(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基)-胺(1.89g，5mmol)中，并且将得到的混合物加热至80℃ 1h。将反应混合物冷却，并且倾倒到冰和NaOH水溶液(1M，120mL)的混合物上，并且将得到的悬浮液过滤。将收集的固体用水洗涤，放入DCM/MeOH中，并且在减压下蒸发部分溶剂。得到的悬浮液过滤，将收集的固体用己烷洗涤，并且在减压下干燥，得到4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己酮(1.57g，95％收率)，为白色粉末。MS＝308[M+H]⁺；MP＝211.8-213.2℃。

步骤B：4-(4-吲唑-1-基-嘧啶-2-基氨基)-1-甲基-环己醇的合成

于-78℃，在N₂下，将甲基氯化镁的溶液(3M，在THF中，2.4mL，7.2mmol)慢慢地加入到4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己酮(600mg，2mmol)在THF(100mL)中的悬浮液中。将反应混合物搅拌15min，加入第二份的甲基氯化镁(3M，在THF中，1.0mL，3mmol)，并且将得到的混合物于-78℃搅拌30min。然后将反应混合物温热至RT并且搅拌4h，然后倾倒到冰和NH₄Cl水溶液(饱和)的混合物上。将得到的混合物用EtOAc萃取，合并的有机萃取物用盐水洗涤，用MgSO₄干燥，过滤，并且在减压下蒸发，得到白色固体(609mg，96％收率)。将此粗制物质由快速色谱(MeOH/DCM，3:97至5:95的梯度)纯化两次，得到4-(4-吲唑-1-基-嘧啶-2-基氨基)-1-甲基-环己醇(123mg，19％收率的极性较低异构体，为白色固体；和360mg，57％收率的极性较高异构体，为白色固体)。将两种异构体从DCM/己烷(约1:1)中重结晶，得到极性较低异构体A的白色固体(100mg)和极性较高异构体B的结晶自由流动固体(290mg)。

异构体A：MS＝324[M+H]⁺；MP＝211.9-213.3℃。

异构体B：MS＝324[M+H]⁺；MP＝168.1-170.1℃。

实施例14：反式-4-[4-(4-苯基甲烷磺酰基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇的合成

根据方案28中所示的方法进行反式-4-[4-(4-苯基甲烷磺酰基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇的合成

方案28

步骤A：4-苄硫基-1-(2-氯-嘧啶-4-基)-1H-吲哚和4-苄硫基-1-(4-氯-嘧啶-2-基)-1H-吲哚的合成

于0℃，将4-苄硫基-1H-吲哚(5.00g，21mmol)(Can.J.Chem.1962，40，511)慢慢地加入到NaH(在矿物油中的60％分散体，1.37g，34mmol)在DMF(40mL)中的悬浮液中。将反应混合物搅拌15min，直到气体逸出停止，然后分份地加入2，4-二氯嘧啶(3.03g，20mmol)，接着加入另一份的DMF(10mL)。将得到的混合物慢慢地温热至RT，然后倾倒到冰和水的浆液中，并且用EtOAc萃取。将有机层用水和盐水的混合物洗涤两次，用Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下蒸发。将粗制剩余物由快速色谱(EtOAc/己烷，10:90至50:50的梯度)纯化，得到4-苄硫基-1-(4-氯嘧啶-2-基)-1H-吲哚(979mg，14％收率)，为淡黄色蜡状固体，并且在从DCM/EtOAc中沉淀后得到4-苄硫基-1-(2-氯嘧啶-4-基)-1H-吲哚和双取代产物(691mg)的混合物。将混合物由快速色谱(EtOAc/己烷，20:80)再次纯化，得到4-苄硫基-1-(2-氯嘧啶-4-基)-1H-吲哚(270mg，4％收率)，为灰白色固体。MS＝352[M+H]⁺；MP＝159.0-161.2℃。

步骤B：反式-4-[4-(4-苄硫基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇的合成

将反式-4-氨基环己醇(1.37g，12mmol)加入到4-苄硫基-1-(2-氯-嘧啶-4-基)-1H-吲哚和双取代产物(673mg，2mmol)在NMP(10mL)中的溶液中，并且将得到的混合物加热至110℃4h。将反应混合物冷却，并且在水和EtOAc之间分配，有机层用水洗涤两次，用Na₂SO₄干燥，过滤，并且在减压下蒸发。将粗制剩余物由快速色谱(EtOAc/己烷，10:90至20:80)纯化，在从DCM/己烷/EtOAc中重结晶后得到反式-4-[4-(4-苄硫基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(309mg，38％收率)，为白色固体。从母液中回收另一份的产物。MS＝431[M+H]⁺；MP＝150.2-150.9℃。

步骤C：反式-4-[4-(4-苯基甲烷磺酰基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇的合成

将3-氯过氧苯甲酸(0.55g，2.5mmol)加入到在氯仿(25mL)中的反式-4-[4-(4-苄硫基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(397mg，0.9mmol)，并且将得到的混合物于RT搅拌1小时。加入第二份的3-氯过氧苯甲酸(150mg)，并且将反应混合物短暂地加热；然后冷却并且在减压下浓缩。将剩余物在NaHCO₃水溶液和EtOAc之间分配。将有机层分离，用NaHCO₃水溶液和水洗涤两次，用Na₂SO₄干燥，过滤，并且在减压下蒸发到硅胶上。将剩余物由快速色谱(MeOH/DCM，5:95)纯化，得到反式-4-[4-(4-苯基甲烷磺酰基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(30mg，7％收率)，为淡黄色固体。MS＝463[M+H]⁺；MP＝132.1-134.5℃。

实施例15：反式-4-[4-(1H-吲哚-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇的合成

根据方案29中所示的方法进行反式-4-[4-(1H-吲哚-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇的合成。

方案29

步骤A：1-苯磺酰基-3-(2-氯嘧啶-4-基)-1H-吲哚的合成

将2，4-二氯嘧啶(2.42g，16mmol)，1-(苯基磺酰基)-1H-吲哚-3-基硼酸(3.89g，13mmol)和碳酸钠(5.03g，47mmol)在乙腈/水(2:1，60mL)中的溶液用氩气脱气，然后加入四(三苯膦)钯(300mg，1.6mol)。将得到的混合物加热至回流2h，同时形成白色悬浮液。将沉淀物冷却，并且通过CELITE^TM/硅胶塞过滤。将滤饼用EtOAc洗涤，将有机层分离，用盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥，过滤，并且在减压下蒸发。将剩余物从EtOAc/己烷中重结晶，得到1-苯磺酰基-3-(2-氯-嘧啶-4-基)-1H-吲哚，为淡粉红色固体。将来自反应混合物的固体滤物溶解于DCM，用Na₂SO₄干燥，过滤，并且与前一批产物合并。将收集的固体溶解于DCM，在减压下蒸发溶剂，并且加入EtOAc，以形成悬浮液，将产物过滤，并且用己烷洗涤，得到1-苯磺酰基-3-(2-氯-嘧啶-4-基)-1H-吲哚(2.0g，33％收率)，为淡粉红色固体。从母液中得到另外0.45g的产物。

步骤B：反式-4-[4-(1-苯磺酰基-1H-吲哚-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇的合成

在N₂下，将1-苯磺酰基-3-(2-氯嘧啶-4-基)-1H-吲哚(0.45g，1mmol)和反式-4-氨基环己醇(0.50g，4mmol)在NMP(8mL)中的溶液加热至120℃3h。然后将混合物冷却，并且在水和EtOAc之间分配，分离有机层，用盐水洗涤两次，用Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下蒸发。将粗制剩余物由快速色谱(MeOH/DCM，5:95)纯化，得到405mg的黄色泡沫。将此物质溶解到EtOAc中，用水洗涤两次，用Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下蒸发。将固体剩余物与己烷一起研磨，并且在高真空下干燥，得到反式-4-[4-(1-苯磺酰基-1H-吲哚-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(365mg，19％收率)，为淡黄色无定形固体。MS＝449[M+H]⁺；MP＝132.1-133.3℃。

步骤C：反式-4-[4-(1H-吲哚-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇的合成

将NaOH(200mg，5mmol)加入到反式-4-[4-(1-苯磺酰基-1H-吲哚-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(296mg，0.66mmol)在MeOH(15mL)中的溶液中，并且将得到的混合物于RT搅拌6h。将反应混合物在减压下浓缩，将剩余物通过加入HCl水溶液(1M)而中和，然后在水和EtOAc之间分配。将有机层分离，用水洗涤，用Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下蒸发，得到粗制的黄色固体。将此粗制物质由快速色谱(MeOH/DCM，5:95)纯化，得到反式-4-[4-(1H-吲哚-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(115mg，57％收率)，为白色粉末。MS＝309[M+H]⁺；MP＝258.1-259.9℃。

实施例16：反式-1-[2-(4-羟基环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1，2-二氢吲唑-3-酮的合成

根据方案30中所示的方法进行反式-1-[2-(4-羟基环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1，2-二氢-吲唑-3-酮的合成。

方案30

步骤A：1-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-1，2-二氢吲唑-3-酮的合成

于0℃，将3-吲唑啉酮(5.07g，38mmol)分份地加入NaH(在矿物油中的～60％分散体，2.18g，55mmol)在DMF(50mL)中的悬浮液中，并且将得到的混合物搅拌20min，直到气体逸出停止。加入4-氯-2-甲硫基嘧啶(6.10g，38mmol)，并且将反应混合物温热至RT，然后加热至100℃3h。将得到的混合物冷却，倾倒入水(150mL)，用HCl水溶液(1M)中和，并且加入EtOAc。得到的不溶性悬浮物过滤并且干燥，得到1-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-1，2-二氢吲唑-3-酮(7.05g，72％收率)，为灰白色固体。MS＝259[M+H]⁺；MP＝277.0-280.9℃。

步骤B：3-甲氧基-1-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-1H-吲唑的合成

于0℃，将NaH(在矿物油中的～60％分散体，0.75g，19mmol)加入到在DMF(30mL)中的1-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-1，2-二氢吲唑-3-酮(2.70g，10mmol)，并且将得到的混合物搅拌，直到气体逸出停止。加入碘代甲烷(0.90mL，14mmol)，将混合物搅拌30min，然后倾倒入水(100mL)中，并且用EtOAc萃取(100mL)。将合并的有机物用水(100mL)洗涤两次，用Na₂SO₄干燥，过滤，并且在减压下蒸发。将粗制剩余物由快速色谱(EtOAc/己烷，20:80至50:50)纯化，并且从己烷重结晶，得到3-甲氧基-1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑(286mg，10％收率)，为白色固体。MS＝272.9[M+H]⁺。

步骤C：1-(2-甲烷磺酰基嘧啶-4-基)-3-甲氧基-1H-吲唑的合成

将3-氯过氧苯甲酸(约77％，2.86g，18mmol)加入到3-甲氧基-1-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-1H-吲唑(1.34g，5mmol)在氯仿(30mL)中的溶液中，并且将反应混合物于RT搅拌20min。将得到的混合物倾倒入NaHCO₃水溶液中，搅拌1小时，然后用DCM萃取。将合并的有机萃取物用NaHCO₃水溶液和用水洗涤两次，用Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下蒸发。将粗制剩余物由快速色谱(EtOAc/己烷，50:50至100:0的梯度)纯化，并且从DCM/己烷/EtOAc中重结晶，得到2批的1-(2-甲烷磺酰基嘧啶-4-基)-3-甲氧基-1H-吲唑，为灰白色固体(927mg，62％收率)。从母液中回收另外量的产物，为黄色固体(0.44g，29％收率)。MS＝305[M+H]⁺；MP＝206.3-207.8℃。

步骤D：反式-4-[4-(3-甲氧基吲唑-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇的合成

将反式-4-氨基环己醇(870mg，8mmol)加入到在NMP(15mL)中的1-(2-甲磺酰基-嘧啶-4-基)-3-甲氧基-1H-吲唑(440mg，1mmol)，并且将得到的混合物加热至120℃3h。将反应混合物冷却并且在EtOAc和水之间分配。将有机层分离，用水洗涤，用Na₂SO₄干燥，过滤，并且在减压下浓缩，得到粗制的黄色固体。将此粗制物质由快速色谱(MeOH/DCM，5:95)纯化，并且从DCM/己烷中重结晶，得到反式-4-[4-(3-甲氧基-吲唑-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(181mg(37％收率)，为白色固体。MS＝340[M+H]⁺；MP＝202.3-205.1℃。

步骤E：反式-1-[2-(4-羟基环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1，2-二氢-吲唑-3-酮的合成

在N₂下，将碘化三甲基硅烷(0.80mL，5.6mmol)加入至反式-4-[4-(3-甲氧基吲唑-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(251mg，0.7mmol)在氯仿(10mL)中的悬浮液中。反应混合物立即变成均相的，但是在1小时内，形成悬浮液，并且将得到的混合物搅拌3天。加入另一份的碘化三甲基硅烷(2mL，14mmol)，并且将得到的混合物加热至回流过夜，并且于RT搅拌1天。然后将反应混合物倾倒到冰水上，并且用DCM萃取。将不溶性固体过滤，并且溶解于MeOH和DCM的混合物，将合并的有机层用Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下浓缩到硅胶上。将剩余物由快速色谱(MeOH/DCM，3:97至5:95的梯度)纯化，得到反式-1-[2-(4-羟基环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1，2-二氢吲唑-3-酮(71mg，30％收率)，为灰白色固体。MS＝326[M+H]⁺；MP＝263.5-264.4℃。

实施例17：反式-4-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇的合成

根据方案31中所示的方法进行此实施例中所述的合成程序。

方案31

步骤A：3-(2-氯-嘧啶-4-基)-1H-吲哚的合成

于0℃，将新粉碎的NaOH(740mg)在MeOH(20mL)中的悬浮液加入至1-苯磺酰基-3-(2-氯嘧啶-4-基)-1H-吲哚(0.91g，2mmol)在MeOH/THF(1:1，40mL)中的悬浮液中。将反应混合物温热至RT，并且搅拌2h，直到均相。将得到的混合物用HCl水溶液(1M)中和，并且在减压下浓缩。将剩余物在水和EtOAc之间分配，有机层分离，用水洗涤，用Na₂SO₄干燥，过滤，并且在减压下浓缩，得到亮黄色固体(0.63g)。将此粗制物质由快速色谱(1:1 EtOAc/己烷)纯化，得到3-(2-氯-嘧啶-4-基)-1H-吲哚(502mg，89％收率)，为黄色固体。

步骤B：3-(2-氯-嘧啶-4-基)-1-甲基-1H-吲哚的合成

于0℃，将NaH(在矿物油中的60％分散体，0.16g，7mmol)加入至在DMF(8mL)中的3-(2-氯-嘧啶-4-基)-1H-吲哚(0.24g，1mmol)。将得到的混合物搅拌10min，然后加入碘代甲烷(0.20mL，3.2mmol)，并且将反应混合物温热至RT且倾倒到冰水上。将得到的混合物用EtOAc萃取，将合并的有机物用水洗涤两次，用Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下浓缩，得到3-(2-氯-嘧啶-4-基)-1-甲基-1H-吲哚(270mg)，为黄色固体。

步骤C：反式-4-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇的合成

将反式-4-氨基环己醇(0.45g，4mmol)加入到在NMP(8mL)中的3-(2-氯嘧啶-4-基)-1-甲基-1H-吲哚(0.23g，1mmol)，并将得到的混合物加热至120℃3h。加入第二份的反式-4-氨基环己醇(0.16g，1mmol)，并且将得到的混合物加热至130℃。将反应混合物冷却，并且在水和EtOAc之间分配，有机层分离，用水洗涤两次，用Na₂SO₄干燥，过滤，并且在减压下浓缩。将粗制剩余物从DCM/EtOAc/己烷中重结晶，得到反式-4-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(148mg，46％收率)，为淡黄色固体。MS＝323[M+H]⁺；MP＝194.5-195.3℃。

实施例18：反式-4-{4-[6-(2-羟基乙基氨基)-吲唑-1-基]-嘧啶-2-基氨基}-环己醇的合成

根据方案32中所示的方法进行反式-4-{4-[6-(2-羟基-乙基氨基)-吲唑-1-基]-嘧啶-2-基氨基}-环己醇的合成。

方案32

将2-溴乙醇(42μL，0.6mmol)加入到反式-4-[4-(6-氨基吲唑-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(100mg，0.30mmol)和碳酸氢钠(25mg，0.30mmol)在乙腈(1mL)中的混合物中，并且将得到的混合物加热至80℃ 2h。加入DMF(0.5mL)，并且将得到的混合物加热至80℃过夜。加入第二份的2-溴乙醇(20μL)，并且将加热继续3天。将得到的混合物用MeOH稀释，并且加入Et₂O。将从溶液中析出的胶状剩余物由制备TLC纯化，得到反式-4-{4-[6-(2-羟基乙基氨基)-吲唑-1-基]-嘧啶-2-基氨基}-环己醇(29mg)，为黄色固体。MS＝369[M+H]⁺。

实施例19：反式-N-{1-[2-(4-羟基环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吲唑-6-基}-乙酰胺的合成

根据方案33中所示的方法进行反式-N-{1-[2-(4-羟基环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吲唑-6-基}-乙酰胺的合成。

方案33

步骤A：1-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-1H-吲唑-6-基胺的合成

按照实施例8中所述的程序还原1-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-6-硝基-1H-吲唑。

步骤B：N-[1-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-1H-吲唑-6-基]-乙酰胺的合成

于RT，将乙酰氯(10滴)滴加至在THF(5mL)中的1-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-1H-吲唑-6-基胺(0.13g，0.5mmol)和三乙胺(15滴)中，并且将得到的混合物搅拌30min。将反应混合物用DCM和MeOH稀释，用NaHCO₃水溶液洗涤两次，并且用盐水洗涤一次，用Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下浓缩。将粗制剩余物用Et₂O和己烷处理，并且将沉淀物通过过滤收集，得到N-[1-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-1H-吲唑-6-基]-乙酰胺(146mg)，为灰白色固体。

步骤C：反式-N-{1-[2-(4-羟基环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吲唑-6-基}-乙酰胺的合成

将3-氯过氧苯甲酸(77％，200mg，0.87mmol)加入到N-[1-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-1H-吲唑-6-基]-乙酰胺(0.43mmol，0.13g)在氯仿(5mL)中的浆液中，并且将得到的混合物于RT搅拌过夜。将反应混合物用DCM/MeOH(4:1，25mL)稀释，用NaOH水溶液(0.1M)并且用盐水洗涤，用MgSO₄干燥，过滤，并且在减压下浓缩。将剩余物与Et₂O一起研磨，得到N-[1-(2-甲磺酰基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑-6-基]-乙酰胺(120mg)，为灰白色固体。将此物质的一部分(100mg)与反式-4-氨基环己醇(0.12g)混合，并且将混合物加热至130℃85min。将剩余物用DCM/MeOH处理，并且在减压下蒸发溶剂。将剩余物用MeOH(5mL)和Et₂O处理，将上清液滗析掉，并且将形成的胶性固体用第二份的MeOH(5mL)和EtOAc(15mL)处理。将得到的微细沉淀物通过过滤收集，得到反式-N-{1-[2-(4-羟基环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吲唑-6-基}-乙酰胺(72mg，65％收率)，为灰白色固体。MS＝367[M+H]⁺；MP＝288.0-289.5℃。

实施例20：反式-4-[4-(6-羟基甲基吲唑-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇的合成

根据方案34中所示的方法进行反式-4-[4-(6-羟基甲基吲唑-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇的合成。

方案34

于RT，将三乙基硼氢化锂的溶液(1M，在THF中，0.8mL)慢慢地加入到在THF(3mL)中的反式-1-[2-(4-羟基环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吲唑-6-羧酸甲酯(100mg)中。将得到的混合物搅拌30min，并且加入AcOH/EtOH(1:1，2mL)。将反应混合物搅拌30min，然后倾倒到HCl水溶液(0.1M)上。将得到的混合物用NaOH和NaHCO₃水溶液碱化至pH8，然后用DCM萃取。将合并的有机萃取物用Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下浓缩。将粗制剩余物由制备TLC(DCM/MeOH，95:5)纯化，得到反式-4-[4-(6-羟基甲基-吲唑-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇(22mg)，为白色固体。MS＝340[M+H]⁺；MP＝216.0-217.7℃。

实施例21：3-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-苯磺酰胺的合成

根据方案35中所示的方法进行3-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-苯磺酰胺的合成。

方案35

步骤A：1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑和2-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-2H-吲唑的合成

将1H-吲唑(2.36g，20.0mmol)在无水DMF(100mL)中的溶液于RT用NaH(在矿物油中的60％分散体，1.60g，40.0mmol)处理10min。然后于RT将4-氯-2-甲硫基嘧啶(2.55ml，22.0mmol)以一份加入，并且将得到的混合物于70℃搅拌2.5h。将反应混合物冷却至RT，用HCl水溶液(1M)猝灭，并且用EtOAc萃取。进行层分离，有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，并且在减压下浓缩。将粗制产物吸收到硅胶上，并且由快速色谱(乙酸乙酯/己烷，5:95至25:75的梯度)纯化，提供1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑和2-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-2H-吲唑(3.77g，78％收率)的混合物，为米色固体。

步骤B：1-(2-甲烷磺酰基嘧啶-4-基)-1H-吲唑和2-(2-甲磺酰基-嘧啶-4-基)-2H-吲唑的合成

将1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑和2-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-2H-吲唑(3.77g，15.55mmol)在氯仿(80mL)中的混合物用3-氯过氧苯甲酸(80％，7.37g，34.21mmol)处理。将反应混合物于50℃搅拌1.5小时，然后用NaOH水溶液(1M)猝灭。将得到的混合物用DCM萃取，进行层分离，并且将有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。将粗制产物吸收到硅胶上，并且由快速色谱(DCM/乙酸乙酯，0:100至5:95的梯度)纯化，提供1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑(极性更低异构体)(1.92g，45％收率)和2-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-2H-吲唑(极性更高异构体)(1.04g，24％收率)。

步骤C：3-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-苯磺酰胺的合成

在150℃的微波合成器中，将1-(2-甲基磺酰基-嘧啶-4-基)-1H-吲唑(100mg，0.36mmol)和对甲苯磺酸(139mg，0.73mmol)在i-PrOH(4ml)中的溶液用3-氨基苯磺酰胺(251mg，1.46mmol)处理20min。将混合物在水和乙酸乙酯之间分配，将有机层分离，用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。将粗制剩余物吸收到硅胶上，并且由快速色谱(EtOAc/己烷，30:70至50:50的梯度)纯化，提供标题化合物。将此剩余物与NaOH水溶液(1M)一起研磨，将固体通过过滤收集，用水洗涤并且在真空下干燥，提供3-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-苯磺酰胺(50mg，37％收率)。MS＝367[M+H]⁺。

以相同的方式，采用适宜的原料制备4-(4-吲唑-1-基-嘧啶-2-基氨基)-环己基]-氨基甲酸叔丁酯(白色固体)。MS＝409.2[M+H]⁺。

实施例22：制剂

如下表所示配制用于通过各种路线递送的药物制剂。表中所使用的“活性成分”或“活性化合物”是指一种或多种式I的化合物。

用于口服给药的组合物

成分	％重量/重量
成分	％重量/重量	活性成分	20.0％
乳糖	79.5％	活性成分	20.0％
乳糖	79.5％	硬脂酸镁	0.5％

将这些成分混合，并且分配在胶囊中，每个胶囊含有约100mg；一个胶囊接近于总的每日剂量。

用于口服给药的组合物

成分	％重量/重量
成分	％重量/重量	活性成分	20.0％
硬脂酸镁	0.5％	活性成分	20.0％
硬脂酸镁	0.5％	交联羧甲纤维素钠	2.0％
乳糖	76.5％	交联羧甲纤维素钠	2.0％
乳糖	76.5％	PVP(聚乙烯吡咯烷酮)	1.0％

将这些成分混合，并且使用溶剂如甲醇造粒。然后将制剂干燥，并且用合适的压片机形成为片剂(含有约20mg的活性化合物)。

用于口服给药的组合物

成分	量
成分	量	活性化合物	1.0g
富马酸	0.5g	活性化合物	1.0g
富马酸	0.5g	氯化钠	2.0g
羟苯甲酸甲酯	0.15g	氯化钠	2.0g
羟苯甲酸甲酯	0.15g	羟苯甲酸丙酯	0.05g
粒状糖	25.5g	羟苯甲酸丙酯	0.05g
粒状糖	25.5g	山梨糖醇(70％溶液)	12.85g
Veegum K(范德比尔特公司)	1.0g	山梨糖醇(70％溶液)	12.85g
Veegum K(范德比尔特公司)	1.0g	调味剂	0.035ml
着色剂	0.5mg	调味剂	0.035ml
着色剂	0.5mg	蒸馏水	适量至100ml

将这些成分混合，形成口服给药的混悬液。

肠胃外制剂

成分	％重量/重量
成分	％重量/重量	活性成分	0.25g
氯化钠	适量以等渗	活性成分	0.25g
氯化钠	适量以等渗	注射用水	100ml

将活性成分溶解在部分注射用水中。然后在搅拌下加入足够量的氯化钠，以使溶液等渗。用剩余的注射用水将该溶液补足重量，用0.2微米膜过滤器过滤，并且在无菌条件下包装。

栓剂制剂

成分	％重量/重量
成分	％重量/重量	活性成分	1.0％
聚乙二醇1000	74.5％	活性成分	1.0％
聚乙二醇1000	74.5％	聚乙二醇4000	24.5％

在蒸气浴上将这些成分一起熔化并且混合，倾倒入含有2.5g总重量的模具中。

局部制剂

成分	克
成分	克	活性化合物	0.2-2
司盘60	2	活性化合物	0.2-2
司盘60	2	吐温60	2
矿物油	5	吐温60	2
矿物油	5	矿脂	10
羟苯甲酸甲酯	0.15	矿脂	10
羟苯甲酸甲酯	0.15	羟苯甲酸丙酯	0.05
BHA(丁基化的羟基苯甲醚)	0.01	羟苯甲酸丙酯	0.05
BHA(丁基化的羟基苯甲醚)	0.01	水	适量至100

将除水外的所有成分混合，并且在搅拌的情况下加热至约60℃。然后，在剧烈搅拌的情况下加入足够量的约60℃的水，以乳化成分，然后加入适量水至约100g。

鼻喷雾制剂

制备几种含有约0.025-0.5％的活性化合物的水性混悬液，作为鼻喷雾制剂。这些制剂任选含有例如微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、葡萄糖的惰性成分。可以加入盐酸以调节pH。鼻喷雾制剂可以通过鼻喷雾计量泵来输送，该计量泵典型地每次启动输送约50-100μL制剂。典型的剂量进度是每4-12h喷2-4次。

实施例23：体外JNK测定

通过用[γ-³³P]ATP磷酸化GST-ATF2(19-96)来测量JNK活性。在缓冲液中以40μl的终体积以Km浓度的ATP和底物进行酶反应，所述缓冲液含有25mM HEPES，pH7.5，2mM二硫苏糖醇，150mM NaCl，20mM MgCl₂，0.001％吐温

20，0.1％BSA和10％DMSO。人JNK2α2测定含有1nM酶，1μM ATF2，8-ATP和1uCi[γ-³³P]ATP。人JNK1α1测定含有2nM酶，1μMATF2，6μM ATP和1μCi[γ-³³P]ATP。人JNK3(Upstate生物技术(UpstateBiotech)#14-501M)测定含有2nM酶，1μM ATF2，4μM ATP和1μCi[γ-³³P]ATP。在存在或不存在几种化合物浓度下进行该酶测定。将JNK和化合物预温育10min，接着通过加入ATP和底物引发酶促反应。将反应混合物在30℃温育30min。在温育结束时，通过将25μl反应混合物转移至150μl的含有135mM EDTA的10％谷胱甘肽琼脂糖

(Sepharose

)淤浆(Amersham#27-4574-01)来终止反应。将反应产物捕获在亲和树脂上并在过滤板(Millipore，MABVNOB50)上用磷酸盐缓冲盐水洗涤6次以去除游离的放射性核苷酸。在微板闪烁计数器(Packard Topcount)上将³³P对ATF2的掺入定量。通过IC₅₀值测量化合物对JNK的抑制效力，所述IC₅₀值是从10个浓度的抑制曲线产生的，并将IC₅₀值适用到以下3-参数模型：％抑制＝最大值/(1+(IC₅₀/[抑制剂])^斜率)。在微软Excel上分析数据以用于参数评估。结果显示于下表2中。

表2：p(IC₅₀)

化合物	JNK1(μM)	JNK2(μM)	c-jun(μM)
化合物	JNK1(μM)	JNK2(μM)	c-jun(μM)	3	0.0412	0.4578	ND
15	0.0678	0.4583	1.286	3	0.0412	0.4578	ND
15	0.0678	0.4583	1.286	16	0.0708	0.5924	4.133
18	0.0735	0.3375	1.9533	16	0.0708	0.5924	4.133
18	0.0735	0.3375	1.9533	26	0.085	0.6949	1.894
86	0.0228	0.1777	ND	26	0.085	0.6949	1.894
86	0.0228	0.1777	ND	87	0.0297	0.1908	1.706
88	0.0709	0.4803	ND	87	0.0297	0.1908	1.706

实施例24：大鼠体内TNFα-诱导的IL-6生产测定

在使用前，使得获自查尔斯河实验室(Charles River Laboratories)的雌性Wistar-Han大鼠适应一周，并达到约95-130g的体重。在腹膜内攻击0.5μg重组大鼠TNF-α(Biosource)之前30分钟，通过经口管饲法向大鼠施用测试化合物。在TNF-α攻击之后90分钟通过心脏穿刺术收集血液。使用肝素锂分离管(BD microtainer)制备血浆，并在-80℃冷冻直至进行分析。使用大鼠特异性IL-6ELISA试剂盒(Biosource)测定IL-6水平。测定百分比抑制和ED₅₀值(计算为当TNF-α生产是对照值的50％时的化合物的剂量)。结果显示于下表3中。

表3：IL-6生产的抑制

化合物	剂量(mg/Kg)	IL-6抑制(％)
化合物	剂量(mg/Kg)	IL-6抑制(％)	16	30	47.4％
26	30	59.6％	16	30	47.4％
26	30	59.6％	87	10	64％

实施例25：啮齿动物胶原诱导的关节炎

在使用前使获自Harlan实验室(Harlan Laboratories)的7-8周龄的雌性Lewis大鼠适应一周，并达到约120-140g的体重。在研究的第0天，在背部不同部位将大鼠皮内(i.d.)接触抗原，其中使用100μg II型牛胶原(Chondrex)在不完全弗氏佐剂中的乳剂(IFA；在2-3个部位总共0.1ml)。在接触抗原后12-14天通常观察到关节炎诱导；然而，在约第7-10天在尾巴基部或背部的备选位点提供100μg胶原/IFA(i.d.总共可达0.1ml)的加强注射，以使疾病诱导同步化。化合物剂量给药可以是预防性的(在加强时或之前1-2天开始)或治疗性的(在加强和符合1-2的初始疾病得分后开始-参见以下临床得分)。在接下来的21天内评估动物的疾病发展和进展。

使用得分***(以下描述)，对每个爪使用体积测量计测量爪体积，或用卡钳测量爪或关节厚度，对大鼠进行评估。在第0天进行基线测量，在第一个征候或肿胀时再次开始，每周可达三次，直至实验结束。如下对于每个爪评估得分：

1＝肿胀和/或发红的爪或一个趾。

2＝两个或多个关节肿胀。

3＝爪的严重肿胀，涉及多于两个关节。

4＝整个爪和趾的严重关节炎。

通过将四个单爪得分加和来评估每只大鼠的关节炎指数，得出最大分数为16。为了连续测量疾病发作和进展，还通过使用体积测量计测定后爪的爪体积。

在研究结束时，收集后爪(和其它组织)以进行重量测定，组织学，细胞和/或分子分析。另外，通过心脏穿刺术收集血液，使用肝素锂分离管(BDmicrotainer)制备血浆，并在-70℃冷冻直至进行分析。使用大鼠特异性ELISA试剂盒(R&D)测定来自血浆或来自均化关节组织的炎症细胞因子水平(例如，TNF-α，IL-1和IL-6)。综合相对于对照动物在临床得分、爪体积和组织病理学方面的变化来测定疾病防护或抑制水平。

实施例26：在TNFα-诱导的人软骨肉瘤SW1353细胞中的IL-8生产测定

SW1353细胞购自美国典型组织培养物保藏中心并且在37℃、5％CO₂的培养条件下在培养基中保持，所述培养基由DMEM培养基(Invitrogen)组成，其中含有10％胎牛血清(Invitrogen)，抗坏血酸(Sigma)和青霉素(Invitrogen)。将细胞以1.0 x 10⁴细胞/孔的密度在100μl培养基中铺平板，48小时后用化合物处理。在即将进行化合物处理前，用160μl的新鲜培养基替换培养基。在培养基中稀释化合物贮液(10mM)，并以20μl的体积作为10x浓缩的溶液加入每孔，混合并使得与细胞预温育30min。保持化合物载体(DMSO)的终浓度在所有样品中为1％。在30min后，用10ng/ml的TNF-α(罗氏生物化学(Roche Biochem))活化细胞。将TNF-α作为在培养基中制成的10x浓缩的溶液加入，并且以20μl/孔的体积加入。培养细胞板5h。收集细胞培养基并贮存在-20℃。按照制造商的使用说明(BD Bioscience)，通过夹层ELISA分析培养基等分试样中IL-8的存在。使用微软Excel程序中的Xlfit3，将IC₅₀值计算为IL-8生产降低至对照值的50％时化合物的浓度。在本测定中，某些化合物具有的IC₅₀值在0.1-20μM范围内。

Claims

1.式(I)的化合物

其中

X¹为N，N-R³，CHR³，C-R³，或O；

X²为N，NH，N-CH₃，CH，CH₂，CHCH₃或C-CH₃；

X³为N，C或CH，其中X¹，X²，和X³不同时全部为N；

X⁴，X⁵各自独立地为C，CH或N；

X⁶为N或C-R¹；

R¹为卤素，硝基，-CN，-CH₂CN，-OH，-NH₂，-COOH，或-Y¹R⁴；

n为0，1，或2；

R³为H或C_1-6烷基；

R²为H，-OH，-SO₂NH₂，＝O，-CN，或-Y²-Y³-Y⁴-R⁵，其中

Y²为-C(O)-，-C(O)NR^a-，-SO₂-，-O-，-NH-，或键；

Y³为C_1-6亚烷基或键；

Z为氢，卤素，C_1-12烷基，或NH₂；

或其药用盐。

2.权利要求1所述的化合物，其中

X¹为N，N-R³，C-R³，或O；

X²为N，NH，N-CH₃，CH或C-CH₃；

X³为N或C，其中X¹，X²，和X³不同时全部为N，并且

X⁴，X⁵各自独立地为C或N。

3.权利要求1或2所述的化合物，其中X⁴，X⁵，和X⁶各自是C-R¹。

4.权利要求1至3中任何一项所述的化合物，其中R为-(环己基)-R²。

5.权利要求1至4中任何一项所述的化合物，其中X³为N，并且X¹为CR³。

6.权利要求1至5中任何一项所述的化合物，其中R²为OH。

7.权利要求1至5中任何一项所述的化合物，其中R¹为苄基氧基，n为1。

8.权利要求1至5中任何一项所述的化合物，其中X²为N。

9.权利要求1至5中任何一项所述的化合物，其中R²为-Y²-Y³-Y⁴-R⁵，其中Y²为-C(O)NR^a-，R^a为H，并且Y³为C_1-6亚烷基。

10.权利要求1至9中任何一项所述的化合物，其中Y⁴为-SO₂-。

11.权利要求1至10中任何一项所述的化合物，其中R⁵为C_1-6烷基。

12.权利要求1至9中任何一项所述的化合物，其中Y⁴为-S-。

13.权利要求1至12中任何一项所述的化合物，其中R⁵为C_1-6烷基。

14.权利要求1至9中任何一项所述的化合物，其中Y⁴为键，并且R⁵为C_1-6烷基。

15.权利要求3所述的化合物，其中R¹为-CN。

16.选自下组中的化合物：

4-[4-(4-苄基氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

4-[4-(4-溴吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

4-(4-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己烷羧酸(2-甲磺酰基乙基)酰胺；

4-[4-(4-氟吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

4-[4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

4-[4-(4-甲基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

4-[4-(4-氰基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

4-(4-吲唑-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己烷羧酸(3-羟基丁基)-酰胺；

4-[4-(4-硝基-吲唑-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

4-(4-吲唑-1-基)-密啶-2-基氨基-环己醇；

N-[4-(4-吲唑-1-基)-密啶-2-基氨基-环己基]甲烷磺酰胺；

4-(4-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基-环己醇；

4-(4-吲唑-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己烷羧酸(1-甲基磺酰基-丙-2-基)-酰胺；

4-(4-吲唑-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己烷羧酸(1，5-二羟基-戊-3-基)-酰胺；

4-(4-吲唑-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己烷羧酸(1-羟基-丁-2-基)-酰胺；

4-(4-吲唑-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己烷羧酸(2，3-二羟基-丙-1-基)-酰胺；

4-(4-吲唑-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己烷羧酸(1-羟基丁-3-基)-酰胺；

4-[4-(4-(2-羟基丙-2-基)-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

(4-羟基哌啶-1-基)-[4-(4-吲唑-1-基-嘧啶-2-基氨基)-环己基]-甲酮；

(3-吡咯烷酮-1-基)-[4-(4-吲唑-1-基-嘧啶-2-基氨基)-环己基]-甲酮；

4-[4-(4-羟基甲基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

4-[4-(5-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)环己烷羧酸异丙基酰胺；

4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)环己烷羧酸1-羟基丙-2-基酰胺；

4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)环己烷羧酸2-甲氧基乙基酰胺；

4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)环己烷羧酸1，3-二羟基丙-2-基酰胺；

4-[4-(6-硝基吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)环己醇；

(3-羟基吡咯烷-1-基)-[4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己基]-甲酮；

4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)环己烷羧酸3-羟基-2-甲基丙-2-基-酰胺；

1-[2-(4-羟基环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吲哚-5-醇；

[4-(4-吲唑-1-基-嘧啶-2-基氨基)-环己基]-吗啉-4-基-甲酮；

4-[4-(4-氨基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

1-[2-(4-羟基环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吲唑-6-羧酸甲酯；

4-[4-(5-甲基吲哚-1-基)-密啶-2-基氨基]-环己醇；

4-[4-(6-氟吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

1-[2-(4-羟基环己基氨基)-密啶-4-基]-1H-吲哚-4-羧酸甲酯；

4-[4-(6-甲基吲哚-1-基)-密啶-2-基氨基]-环己醇；

4-(4-吲唑-1-基-嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸(2-羟基-2-甲基丙基)酰胺；

4-[4-(3-甲基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

4-[4-(3-甲氧基吲唑-1-基)嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸(2-羟基乙基)-甲基-酰胺；

1-[2-(4-羟基环己基氨基)-嘧啶-2-基]-1H-吲哚-6-羧酸甲酯；

4-[4-(5-氟吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸(1-甲基-2-甲硫基)乙基酰胺；

4-[4-(6-甲基吲唑-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

4-[4-(6-羟基甲基吲唑-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

4-(4-吲唑-1-基-嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸(2-羟基-2-甲基丁-3-基)酰胺；

4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸(2-羟基丙基)酰胺；

4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸(1-甲硫基丙-2-基)酰胺；

4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸N-(2-羟基乙基)-N-乙基-酰胺；

N-(4-吲哚-1-基嘧啶-2-基)-环己烷-1，4-二胺；

N-(1-[2-(4-羟基环己基氨基)-密啶-4-基]-1H-吲唑-6-基)-乙酰胺；

4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸环丙基甲基酰胺；

4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸二甲基酰胺；

4-[4-(5-甲基吲唑-1-基)-密啶-2-基氨基]-环己醇；

4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-1-甲基环己醇；

3-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-苯磺酰胺；

4-[4-(5-羟基甲基吲哚-1-基)嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

4-[4-(6-氨基吲唑-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

1-[2-(4-羟基环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吲哚-3-羧酸甲酯；

4-(4-[6-(2-羟基乙基氨基)-吲唑-1-基]-嘧啶-2-基氨基)-环己醇；

4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-1-甲基-环己醇；

4-[4-(5-苄基氧基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

4-[4-(4-苄硫基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

环己基-(4-吲哚-1-基嘧啶-2-基)胺；

1-[2-(4-羟基环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吲哚-5-羧酸甲酯；

4-(4-吲唑-1-基-嘧啶-2-基氨基)-环己酮；

(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基)胺；

1-[2-(4-羟基环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吲哚-4-羧酸；

4-[4-(4-苄基磺酰基-吲哚-1-基)嘧啶-2-基氨基]环己醇；

4-(4-吲唑-1-基-嘧啶-2-基氨基)-环己烷羧酸环戊基酰胺；

[4-(4-吲唑-1-基嘧啶-2-基氨基)-环己基]-氨基甲酸叔丁酯；

4-[4-(1-苯基磺酰基-1H-吲哚-3-基)-密啶-2-基氨基]-环己醇；

4-[4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

4-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

4-[4-(1-甲基-1H-吲唑-3-基)嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

4-[4-(1H-吲唑-3-基)嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

4-(4-苯并[d]异噁唑-3-基嘧啶-2-基氨基)-环己醇；

4-[4-(7-甲氧基-1H-吲唑-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

4-[4-(7-甲氧基苯并[d]异噁唑-3-基)-密啶-2-基氨基]-环己醇；

4-[4-(7-甲基-1H-吲唑-3-基)-密啶-2-基氨基]-环己醇；

4-[4-(5-氟苯并[d]异噁唑-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-环己醇；

4-(4-吡唑并[1，5-b]哒嗪-3-基嘧啶-2-基氨基)-环己醇；

4-(4-[1，2，4]***[4，3-a]吡啶-3-基嘧啶-2-基氨基)-环己醇；

4-[4-(4-甲氧基吲唑-1-基)-密啶-2-基氨基]-环己醇；

(1-[2-(4-羟基环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吲唑-4-基氧基)乙腈；和

N-(1-[2-(4-羟基环己基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吲唑-4-基)-异丁酰胺。

17.一种用于制备式(I’)的化合物的方法，

该方法包括：将式(V)化合物水解为相应羧酸的步骤，

(V)，和

将所述羧酸与羟基C_1-6烷基-，C_1-6烷氧基-，C_1-6烷基-，C_3-10环烷基-，杂烷基-，C_1-6烷基磺酰基-或C_1-6烷基亚磺酰基-胺偶合的步骤；

其中R²为COOMt或COOEt，R_e和R_f独立地为氢，羟基C_1-6烷基，C_1-6烷氧基，C_1-6烷基，C_3-10环烷基杂烷基，C_1-6烷基磺酰基或C_1-6烷基亚磺酰基，Z为N或C和X¹，X²，X³和R¹如权利要求1中定义。

18.药物组合物，该组合物包含权利要求1至16中任何一项的化合物和药用赋形剂。

19.根据权利要求1至16中任何一项的化合物，其用作治疗活性物质。

20.根据权利要求1至16中任何一项的化合物在制备药物中的应用，所述药物用于治疗性和预防性处理c-Jun N-末端激酶介导的疾病。

21.根据权利要求20的应用，其中所述c-Jun N-末端激酶介导的疾病是自身免疫疾病，炎性疾病，代谢疾病，神经病，或癌症。

22.根据权利要求20的应用，其中所述c-Jun N-末端激酶介导的疾病是类风湿性关节炎，哮喘，II型糖尿病，阿尔茨海默病，帕金森病或中风。

23.如上定义的本发明，特别是指新化合物、中间体、药物、应用和方法。