KR101152162B1 - 치환된 피리미딘 및 ｊｎｋ 조절제로서 그의 용도 - Google Patents

Abstract

본 발명은 식 (I)의 신규한 JNK 조절제 및 이의 생리학적으로 허용가능한 염에 관한 것이다:

[식 중, X¹, X², X³, X⁴, X⁵, X⁶, R, R¹, Z 및 n 은 상세한 설명 및 청구항에 정의된 바와 같음].

JNK 조절제, 헤테로시클릭 화합물, 치환된 피리미딘

Description

치환된 피리미딘 및 ＪＮＫ 조절제로서 그의 용도 {SUBSTITUTED PYRIMIDINES AND THEIR USE AS JNK MODULATORS}

본 발명은 c-Jun N-말단 키나아제 (JNK)를 조절하기 위한 방법, 및 헤테로시클릭 화합물로의 JNK 조절에 의해 경감될 수 있는 질환 또는 상태를 앓고 있는 대상체를 치료하기 위한 방법에 관한 것이다. 본 발명은 또한 신규한 헤테로시클릭 화합물 및 상기 화합물을 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다.

c-Jun N-말단 키나아제 (JNK)는 p38 및 세포외 신호 조절 키나아제 (ERK)와 함께 미토젠 활성화 단백질 키나아제 계통의 구성원이다. 10 개의 스플라이스(splice) 변이체를 인코딩하는 3 가지 상이한 유전자 (jnk1, jnk2 및 jnk3)가 규명되어 있다 (Y.T. Ip 및 R.J. Davis, Curr . Opin . Cell Biol . (1998) 10:205-19). JNK1 및 JNK2 는 다양한 조직에서 발현되는 반면, JNK3 은 주로 뉴런에서, 및 더 적은 범위로 심장 및 정소에서 발현된다 (D.D. Yang 등, Nature (1997) 389:865-70). JNK 계통의 구성원은 전구염증성 시토킨, 예컨대 종양 괴사 인자α (TNF-α) 및 인터루킨-1β (IL-1β), 및 주위의 자극에 의해 활성화된다. JNK 의 활성화는 Thr-183 및 Tyr-185 의 2중 인산화를 통해, 그의 상부 키나아제, MKK4 및 MKK7 에 의해 매개된다 (B. Derijard 등, Cell (1994) 76:1025-37). MKK4 및 MKK7 은 외부 자극 및 세포 환경에 따라, MEKK1 및 MEKK4 를 포함하는, 다양한 상부 키나아제에 의해 활성화될 수 있다고 제시되어 있다 (D. Boyle 등, Arthritis Rheum (2003) 48:2450-24). JNK 신호전달의 특이성은 JNK-상호작용 단백질이라 불리는 골격 단백질을 사용하여, 다단계 키나아제의 복합 성분을 함유하는 JNK-특이적 신호전달 복합체 형성에 의해 달성된다 (J. Yasuda 등, Mol . Cell . Biol. (1999) 19:7245-54). JNK 는 전사 인자, 예컨대 c-Jun, 활성제 단백질-1 (AP1) 계통의 구성 요소, 및 ATF2, 및 비전사 인자, 예컨대 IRS-1 및 Bcl-2 를 포함하는, 특정 기질의 인산화에 의해, 염증, T 세포 기능, 아포토시스(apotosis) 및 세포의 생존에서 중요한 역할을 수행하는 것으로 제시되어 있다 (A.M. Manning 및 R.J. Davis, Nat . Rev . Drug Discov . (2003) 2:554-65). JNK 의 과잉활성화는 자가면역, 염증성, 대사성, 신경학적 질환 및 암에서 중요한 메카니즘으로 여겨진다.

류마티스 관절염 (RA)은 관절의 만성 염증을 특징으로 하는 전신적 자가면역 질환이다. 염증 과정에 의해 야기된 관절 부종 및 통증에 더하여, 대부분의 RA 환자들에서는 궁극적으로 쇠약성 관절 손상 및 변형이 발병한다. 세포 및 동물 모델에서 주목할 만한 약리학적 및 유전적 증거의 몇몇 계열은 RA 의 병인에서 활성화된 JNK 의 관련성 및 중요성을 강력하게 제안한다. 우선, JNK 의 비정상 활성화는 RA 환자로부터 인간 관절염 관절 (G. Schett 등, Arthritis Rheum (2000) 43:2501-12) 및 관절염의 동물 모델로부터 설치류 관절염 관절 (Z. Han 등, J. Clin . Invest . (2001) 108:73-81) 모두에서 검출되었다. 또한, 선택적인 JNK 억제제에 의한 JNK 활성화의 억제는 인간 활막세포, 대식세포 및 림프구에서 전구염증성 시토킨 및 MMP 생성을 차단했다 (Z. Han 등, (2001) 상기). 중요하게는, 애주번트 관절염을 가진 래트에서 (Z. Han 등, (2001) 상기) 또는 콜라겐 유도성 관절염을 가진 마우스에서 (P. Gaillard 등, J Med Chem . (2005) 14:4596-607) 선택적인 JNK 억제제의 투여는 시토킨 및 콜라게네이즈 발현 억제에 의해, 관절을 파괴로부터 효과적으로 보호하고, 발 부종을 유의하게 감소시켰다. 또한, JNK2 결핍 마우스는 부분적으로 관절 파괴로부터 보호되었으나, 잠복성 콜라겐 유도성 관절염 모델에서는 발 부종 및 염증에 거의 효과를 나타내지 않았다. 이러한 연구는 JNK2 가 기질 분해, 염증 및 발 부종에서, JNK1 과 이들의 역할에 대해 기능적으로 중복된다는 것을 나타낸다. 따라서, RA 의 효과적인 치료를 위해 JNK1 및 JNK2 둘 모두의 활성에 대한 통합된 억제가 요구된다 (Z. Han 등, Arrthritis Rheum . (2002) 46:818-23).

천식은 세포의 염증 과정의 존재 및 기도의 구조적 변화와 관련된 기관지 과민화를 특징으로 하는, 기도의 만성 염증성 질환이다 (B. Bradley 등, J. Allergy Clin . Immunol . (1991) 88:661-74). 이러한 장애는 T 림프구, 호산구, 비만 세포, 호중구 및 상피 세포를 포함하는, 기도 내 다수의 세포 유형에 의해 유도된다고 제시되어 있다 (J. Bousquet 등, Am . J. Respir . Crit . Care Med. (2000) 161:1720-45). JNK 는 선택적인 JNK 억제제를 사용한 천식의 세포 및 동물 모델에서, 최근 기술 검증(proof-of-concept) 연구에 기초하여 천식을 위한 가망성 있는 치료 대상으로서 판명되었다 (K. Blease 등, Expert Opin . Emerg. Drugs (2003) 8:71-81). JNK 억제제는 활성화된 인간 기도 평활 세포에서, RANTES 생성을 유의하게 차단하는 것으로 제시되었다 (K. Kujime 등, J. Immunol. (2000) 164:3222-28). 더욱 중요하게는, JNK 억제제는 만성 래트 및 마우스 모델에서 세포 침윤, 염증, 과민화, 평활근 증식, 및 IgE 생성을 감소시키는 이들의 능력에 대한 우수한 효능을 나타냈다 (P. Nath 등, Eur . J. Pharmacol. (2005) 506:273-83; P. Eynott 등, Br . J. Pharmacol . (2003) 140:1373-80). 이러한 관찰은 과민화와 관련된 기도 리모델링 과정인, 알러지성 염증에서 JNK 의 중요한 역할을 제안한다. 따라서, JNK 활성의 차단은 천식의 치료를 위해 유익한 것으로 예상된다.

제 2 형 당뇨병은 만성 저수준 염증 및 산화적 스트레스와 관련된 비정상 지질 대사의 결과로서 인슐린 저항 및 인슐린 분비 장애를 특징으로 하는, 가장 심각하고 널리 퍼진 대사성 질환이다. JNK 활성은 비만 및 당뇨병 조건 하에서, 각종 당뇨병 대상 조직에서 비정상적으로 상승된다고 보고되어 있다 (J. Hirosumi 등, Nature (2002) 420:333-36; H. Kaneto, Expert . Opin . Ther . Targets (2005) 9:581-92). 전구염증성 시토킨 및 산화적 스트레스에 의한 JNK 경로의 활성화는 Ser³⁰⁷ 에서 인슐린 수용체 기질-1 (IRS-1)의 인산화를 통해 인슐린 신호전달을 부정적으로 조절하고, 따라서 인슐린 저항 및 포도당 부하에 기여한다 (J. Hirosumi 등, Nature (2002) supra; Y. Lee 등, J. Biol . Chem . (2003) 278:2896-902; Y. Nakatani 등, J. Biol . Chem . (2004) 279:45803-09). 강력한 유전적 증거가 유전적 (ob / ob) 비만 마우스 또는 식이적 비만 마우스로 교차된 jnk^-/- 마우스를 사용한 명쾌한 동물 모델 연구로부터 제시되었다. JNK2 기능 (jnk2^-/- )이 아닌, JNK1(JNK1^-/- )의 손실은 비만 마우스를 체중 증가, 혈당의 증가된 항정상태 수준, 및 감소된 혈장 인슐린 수준으로부터 보호하였다 (J. Hirosumi 등, Nature (2002) 상기). 또한, 유전적 당뇨병 모델 (db/db 마우스)에서, 소분자 JNK 억제제, CC105 (B. Bennett 등, Curr . Opin . Pharmacol. (2003) 3:420-25) 또는 JNK-상호작용 단백질-1 (JIP-1)의 JNK 결합 도메인으로부터 유래한 JNK 억제성 펩티드 I (JIP)(H. Kaneto 등, Nat . Med . (2004) 10:1128-32)의 투여에 의해, 유의하게 더 낮은 혈당 및 더 높은 혈장 인슐린 수준을 포함하는 유익한 효과가 관찰되었다. 더욱 흥미롭게는, 또 다른 최근 보고서 (A. Jaeschke 등, Proc . Natl . Acad . Sci . U S A. (2005) 102:6931-35)에서는 JNK2 가 인슐린 생성 β세포의 자가면역 파괴에 의해 야기되는 제 1 형 당뇨병에서 중요한 역할을 수행한다고 제시하였다. JNK2 발현이 결핍된 비만이 아닌 당뇨병 마우스는 아마도 Th2 표현형에 대한 편향된 분극 때문에, 감소된 파괴적인 인슐린염 및 당뇨병으로의 더 낮은 질환 진행을 나타냈다. 종합해서, 이러한 연구들는 비만/제 2 형 당뇨병의 치료에서 JNK 억제제의 효용을 증명하였다.

신경변성 질환, 예컨대 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD) 및 뇌졸중은 시냅스 손실, 뉴런 위축 및 사멸을 특징으로 한다. c-Jun 활성화를 유도하는 JNK 경로는 단리된 1차 배아 뉴런 및 복합 뉴런 세포주의 아포토시스에서 각종 자극의 유도에 따른 인과적인 역할을 수행한다고 제시되어 있다 (D. Bozyczko-Coyne 등, Curr . Drug Targets CNS Neurol . Disord . (2002) 1:31-49). JNK 의 과잉활성화는 AD 환자로부터 인간 뇌에서 (J. Pei 등, J. Alzheimers Dis. (2001) 3:41-48) 또는 신경변성 질환의 동물 모델로부터 유래한 설치류 뇌 절편 (M. Saporito 등, J. Neurochem . (2000) 75:1200-08)에서 관찰되었다. 예를 들어, 증가된 포스포-JNK 가 AD 환자로부터의 사후(post-mortem) 뇌에서 검출되었다. β-아밀로이드 펩티드 투여에 의해 유도된 AD 의 설치류 모델에서 JNK 억제성 펩티드 (JIP-1 펩티드)의 투여는 시냅스 가소성의 장애를 예방하였다. PD 의 동물 모델 (MPTP 모델)에서, 상승된 포스포-MKK4 및 포스포-JNK 는 뉴런 세포 사멸과 함께 동시에 관찰되었다. JNK 억제성 펩티드 (JIP-1 펩티드)의 마우스의 선조체(stiatum)로의 아데노바이러스 유전자 전이는 MPTP-매개 JNK, c-Jun 및 카스파제 활성화를 억제하고, 따라서 흑색질에서 뉴런 세포 사멸을 방지함에 의해 행동 장애를 약화시켰다 (X. Xia 등, Proc . Natl . Acad . Sci . USA . (2001) 98:10433-38). 또한, 글루타메이트 흥분독성에 의해 유도된 허혈성 뇌졸중의 동물 모델에서, JNK1 또는 JNK2 가 아닌, JNK3 이 결핍된 마우스는 카인산 (글루타메이트 수용체 아고니스트)-매개 발작 또는 뉴런 사멸에 저항력이 있었다 (D. D.Yang 등, Nature (1997) 389:865-70). 이러한 자료는 JNK3 이 허혈성 상태에서의 중요한 구성 요소인 글루타메이트 흥분독성의 주요한 원인이라고 제안한다. 통합하여, 상기 자료는 JNK 가 뉴런 세포 사멸과 관련된 복합 CNS 질환을 위한 흥미있는 대상이라고 제안한다.

비조절된 혈관형성과 함께 비제어된 세포 성장, 증식 및 이동은 악성 종양의 형성을 야기한다. JNK 신호 전달 경로는 아포토시스에서 배타적으로 작용할 수 없고, AP1 활성화를 유도하는 지속된 JNK 활성화는 최근 특정 암 유형, 예컨대 교종양 및 BCL-ABL 형질전환 B 림프모구의 세포의 생존에 기여하는 것으로 여겨지고 있다 (M. Antonyak 등, Oncogene (2002) 21:5038-46; P. Hess 등, Nat. Genet. (2002) 32:201-05). 교종양의 경우, 증강된 JNK/AP1 활성이 대부분의 1차 뇌 종양 시료에서 관찰되었다. 형질전환 B 림프모구에 있어서, BCL-ABL 은 JNK 경로를 활성화시켜, 항아포토시스 bcl-2 유전자의 발현을 상향조절하는 것으로 나타났다. 흥미롭게는, 난치성 AML 환자에서 나타나는 다중약물 저항 및 과증식은 상기 AML 시료에 존재하는 지속된 JNK 활성과 인과적으로 연결되어 있었다 (L. Cripe 등, Leukemia (2002) 16:799-812). 백혈병 세포에서의 JNK 의 활성화는 다중약물 저항의 원인이 되는 유출 펌프, 예컨대 mdr1 및 MRP1 의 유도 발현을 야기하였다. 또한, 글루타티온-S-전이효소 π 및 γ-글루타밀 시스테인 신타아제를 포함하는, 산화적 스트레스에 반응하여 생존 이익을 갖는 유전자는 또한 활성화된 JNK 경로에 의해 상향조절되었다.

따라서, JNK 조절제는 각종 질환 및/또는 상태를 치료하는데 유용하다.

본 발명의 한 측면은 식 I 의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하는 것이다:

[식 중,

X¹ 은 N, N-R³, CHR³, C-R³, 또는 O 이고;

X² 는 N, NH, N-CH₃, CH, CH₂, CHCH₃ 또는 C-CH₃ 이고;

X³ 은 N, C 또는 CH 이고, 이때 X¹, X², 및 X³ 은 모두 동시에 N 은 아니고;

X⁴, X⁵ 는 각각 독립적으로 C, CH 또는 N 이고;

X⁶ 은 N 또는 C-R¹ 이고;

이때 X¹, X², X³, X⁴, X⁵, 및 X⁶ 중 2 개 이상 및 4 개 이하는 N 이고; 이때 X¹ 과 X², X² 와 X³, X³ 과 X⁴, X⁴ 와 X⁵, X⁵ 와 X¹, 및 X⁵ 와 X⁶ 사이의 결합은 화학적으로 안정한 구조를 갖는 것을 조건으로 하며, 각각 독립적으로 단일, 이중이거나, 또는 방향족 환을 형성할 수 있고;

R 은 -(시클로헥실)-R² 또는 -(페닐)-R⁸ 이고, 이때 시클로헥실 및 페닐은 각각 메틸, 플루오로, 클로로, 또는 히드록시로 임의로 치환되고;

R¹ 은 할로, 니트로, -CN, -CH₂CN, -OH, -NH₂, -COOH, 또는 -Y¹R⁴ 이고;

Y¹ 은 -O-, -NH-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NHSO₂-, -NHC(O)-, -C(O)NH-, -C(O)O-, 또는 결합이고;

R⁴ 는 C_{1 -6} 알킬, 아실, 페닐, 또는 벤질이고, 이들 각각은 0-3 개의 히드록시 또는 할로로 치환되고;

n 은 0, 1, 또는 2 이고;

R³ 은 H 또는 C_{1 -6} 알킬이고;

R² 는 H, -OH, -SO₂NH₂, =O, -CN, 또는 -Y²-Y³-Y⁴-R⁵ 이고, 이때

Y² 는 -C(O)-, -C(O)NR^a-, -SO₂-, -O-, -NH-, 또는 결합이고;

Y³ 은 C_{1 -6} 알킬렌 또는 결합이고;

Y⁴ 는 -O-, -NR^a-, -S-, -SO₂-, -C(O)-, -C(O)NR^a-, -NR^aC(O)-, -NR^aC(O)O-, -NR^aC(O)NR^a-, -NHSO₂-, -SO₂NH-, 또는 결합이고;

R⁵ 는 C_{1 -6} 알킬, C_{3 -10} 시클로알킬, 헤테로시클릴이고, 이때 R⁵ 는 -OH 또는 -NHR^a 로 임의로 치환되고; 이때 각 R^a 는 독립적으로 H 또는 C_{1 -6} 알킬이고;

R⁸ 은 H, C_{1 -6} 알킬, -OR³, -SO₂NH₂, -NHSO₂R³, -COOR³, -SO₂R³, -NH₂, -CONR^aR³, -NHC(O)R³, -CF₃, -NO₂, 할로, 또는 -CN 이고;

Z 는 수소, 할로, C_{1 -12} 알킬, 또는 NH₂ 임].

바람직하게는, X¹ 은 N, N-R³, C-R³, 또는 O 이고;

X² 는 N, NH, N-CH₃, CH 또는 C-CH₃ 이고;

X³ 은 N 또는 C 이고, 이때 X¹, X², 및 X³ 은 모두 동시에 N 은 아니고,

X⁴, X⁵ 는 각각 독립적으로 C 또는 N 이다.

본 발명은 또한 약학적 조성물, 상기 언급한 화합물의 사용 방법, 및 제조 방법을 제공한다.

본 발명의 화합물 및 조성물은 c-Jun N-말단 키나아제 매개 장애, 예컨대 자가면역 장애, 염증성 장애, 대사성 장애, 신경학적 질환, 및 암의 치료 및/또는 예방에 유용하다. 일부 구현예에서, 본 발명의 화합물 및 조성물은 류마티스 관절염, 천식, 제 II 형 당뇨병, 알츠하이머병, 파킨슨병 및/또는 뇌졸중의 치료 및/또는 예방에 유용하다.

정의

다른 언급이 없는 한, 명세서 및 청구항을 포함하는, 본 출원에서 사용된 하기 용어는 하기 제시된 정의를 갖는다. 명세서 및 첨부된 청구항에 사용된 바, 단수 형태는 문맥에서 명백하게 다른 언급이 없는 한, 복수 형태를 포함하는 것으로 기술된 것이다.

"알킬" 은 오직 탄소 및 수소 원자로 이루어지고, 탄소수 1 내지 12 인 1가 선형 또는 분지형 포화 탄화수소 잔기를 의미한다. "저급 알킬" 은 탄소수 1 내지 6 의 알킬기, 즉 C₁-C₆ 알킬을 지칭한다. 알킬기의 예로는, 비제한적으로, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, 펜틸, n-헥실, 옥틸, 도데실이 포함된다. "분지형 알킬" 은 하나 이상의 분지를 갖는 알킬 잔기를 지칭하고, 예를 들어, 이소프로필, 이소부틸, tert-부틸이다. 유사하게는, "저급 알콕시" 는 -OR 형태의 잔기를 지칭하고, "아실" 은 -C(O)R 형태의 잔기를 지칭하며, 이때 R 은 저급 알킬이다.

"알킬렌" 은 탄소수 1 내지 6 의 선형 포화 2가 탄화수소 잔기 또는 탄소수 3 내지 6 의 분지형 포화 2가 탄화수소 라디칼, 예컨대 메틸렌, 에틸렌, 2,2-디메틸에틸렌, 프로필렌, 2-메틸프로필렌, 부틸렌, 펜틸렌을 의미한다.

"알킬렌 디옥시" 는 식 -O-R-O- 의 2가 잔기를 의미하고, 이때 R 은 본원에 정의된 바와 같은 알킬렌이다.

"아릴" 은 모노-, 비- 또는 트리시클릭 방향족 환으로 이루어진, 1가 시클릭 방향족 탄화수소 잔기를 의미한다. 상기 아릴기는 본원에 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다. 아릴 잔기의 예로는, 비제한적으로, 이들의 부분적으로 수소화된 유도체를 포함하여, 임의로 치환된 페닐, 나프틸, 페난트릴, 플루오레닐, 인데닐, 펜탈레닐, 아줄레닐, 옥시디페닐, 비페닐, 메틸렌디페닐, 아미노디페닐, 디페닐술피딜, 디페닐술포닐, 디페닐이소프로필리데닐, 벤조디옥사닐, 벤조푸라닐, 벤조디옥실릴, 벤조피라닐, 벤족사지닐, 벤족사지노닐, 벤조피페라디닐, 벤조피페라지닐, 벤조피롤리디닐, 벤조모르폴리닐, 메틸렌디옥시페닐, 에틸렌디옥시페닐이 포함된다.

"시클로알킬" 은 탄소수 3 내지 10 인, 모노- 또는 비시클릭 환의 1가 포화 카르보시클릭 잔기를 의미한다. 바람직한 시클로알킬은 C_{3 -7} 모노-시클릭 시클로알킬이다. 시클로알킬은 하나 이상의 치환기로 임의로 치환될 수 있고, 이때 각각의 치환기는 특별히 다른 언급이 없는 한, 독립적으로 히드록시, 알킬, 알콕시, 할로, 할로알킬, 아미노, 모노알킬아미노, 또는 디알킬아미노이다. 시클로알킬 잔기의 예로는, 비제한적으로, 이들의 부분적으로 불포화된 유도체를 포함하는, 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸이 포함된다.

"시클로알킬알킬" 은 식 -R^a-R^b 의 잔기를 의미하고, 이때 R^a 는 알킬렌이고, R^b 는 본원에 정의된 바와 같은 시클로알킬이다.

"헤테로알킬" 은 분지형 C₄-C₇ 알킬을 포함하는, 본원에 정의된 바와 같은 알킬 잔기를 의미하고, 이때 1, 2 또는 3 개의 수소 원자는 -OR^a, -NR^bR^c, 및 -S(O)_nR^d (이때, n 은 0 내지 2 의 정수임)로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 치환기로 대체되며, 헤테로알킬 라디칼의 부착 지점은 탄소 원자를 통해서인 것으로 이해되고, 이때 R^a 는 수소, 아실, 알킬, 시클로알킬, 또는 시클로알킬알킬이고; R^b 및 R^c 는 서로 독립적으로 수소, 아실, 알킬, 시클로알킬, 또는 시클로알킬알킬이고; n 이 0 인 경우, R^d 는 수소, 알킬, 시클로알킬, 또는 시클로알킬알킬이고; n 이 1 인 경우, R^d 는 알킬, 시클로알킬, 또는 시클로알킬알킬이고; n 이 2 인 경우, R^d 는 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 아미노, 아실아미노, 모노알킬아미노, 또는 디알킬아미노이다. 대표적인 예로는, 비제한적으로, 2-히드록시에틸, 3-히드록시프로필, 2-히드록시-1-히드록시메틸에틸, 2,3-디히드록시프로필, 1-히드록시메틸에틸, 3-히드록시부틸, 2,3-디히드록시부틸, 2-히드록시-1-메틸프로필, 2-아미노에틸, 3-아미노프로필, 2-메틸술포닐에틸, 아미노술포닐메틸, 아미노술포닐에틸, 아미노술포닐프로필, 메틸아미노술포닐메틸, 메틸아미노술포닐에틸, 메틸아미노술포닐프로필이 포함된다.

"헤테로아릴" 은 N, O, 또는 S 로부터 선택되는 1, 2 또는 3 개의 환 헤테로원자를 함유하고, 나머지 환 원자는 C 인, 하나 이상의 방향족 환을 갖는, 5 내지 12 개의 환 원자의 모노시클릭 또는 비시클릭 잔기를 의미하고, 이때 헤테로아릴 라디칼의 부착 지점은 방향족 환 상에 있을 것으로 이해된다. 상기 헤테로아릴 환은 본원에 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다. 헤테로아릴 잔기의 예로는, 비제한적으로, 이들의 부분적으로 수소화된 유도체를 포함하는, 임의로 치환된 이미다졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 옥사디아졸릴, 티아디아졸릴, 피라지닐, 티에닐, 티오페닐, 푸라닐, 피라닐, 피리디닐, 피롤릴, 피라졸릴, 피리미딜, 피리다지닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 벤조푸릴, 벤조푸라닐, 벤조티오페닐, 벤조티오피라닐, 벤즈이미다졸릴, 벤즈옥사졸릴, 벤조옥사디아졸릴, 벤조티아졸릴, 벤조티아디아졸릴, 벤조피라닐, 인돌릴, 이소인돌릴, 인다졸릴, 트리아졸릴, 트리아지닐, 퀴녹살리닐, 푸리닐, 퀴나졸리닐, 퀴놀리지닐, 나프티리디닐, 프테리디닐, 카르바졸릴, 아제피닐, 디아제피닐, 아크리디닐이 포함된다.

용어 "할로", "할로겐", 및 "할라이드" 는 본원에서 교환가능하게 사용되고, 플루오로, 클로로, 브로모, 또는 요오도 치환기를 지칭한다.

"할로알킬" 은 하나 이상의 수소가 동일 또는 상이한 할로겐으로 대체된 본원에 정의된 바와 같은 알킬을 의미한다. 할로알킬의 예로는 -CH₂Cl, -CH₂CF₃, -CH₂CCl₃, 퍼플루오로알킬 (예컨대, -CF₃)이 포함된다.

"헤테로시클릴" 은 1, 2 또는 3 또는 4 개의 헤테로원자 (질소, 산소 또는 황으로부터 선택됨)가 혼입된, 1 내지 3 개의 환으로 이루어진, 1가 포화 잔기를 의미한다. 3 내지 8 개의 환 원자를 가진, 모노시클릭 헤테로시클릴이 바람직하다. 상기 헤테로시클릴 환은 본원에 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다. 헤테로시클릴 잔기의 예로는, 비제한적으로, 임의로 치환된 피페리디닐, 피페라지닐, 호모피페라지닐, 아제피닐, 피롤리디닐, 피라졸리디닐, 이미다졸리닐, 이미다졸리디닐, 피리디닐, 피리다지닐, 피리미디닐, 옥사졸리디닐, 이속사졸리디닐, 모르폴리닐, 티아졸리디닐, 이소티아졸리디닐, 퀴누클리디닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 벤즈이미다졸릴, 티아디아졸리디닐, 벤조티아졸리디닐, 벤조아졸리디닐, 디히드로푸릴, 테트라히드로푸릴, 디히드로피라닐, 테트라히드로피라닐, 티아모르폴리닐, 티아모르폴리닐술폭시드, 티아모르폴리닐술폰, 디히드로퀴놀리닐, 디히드로이소퀴놀리닐, 테트라히드로퀴놀리닐, 테트라히드로이소퀴놀리닐이 포함된다.

"아릴", "페닐", "헤테로아릴" 또는 "헤테로시클릴" 과 관련되어 사용된 경우, "임의로 치환된" 은 C_{1 -6} 알킬, C_{1 -6} 헤테로알킬, 옥소 (즉, =O), 할로알킬, -(CH₂)_mCOX¹, -(CH₂)_mSO₂X², C_{1 -6} 알콕시, 할로겐, C_{1 -6} 알킬티오, C_{1 -6} 알킬술포닐, -SO₂NR⁴R⁵, 시아노, 니트로, 및 -NR⁶R⁷ 로부터 선택되는, 하나 이상의 치환기, 바람직하게는 1 내지 4 개, 및 더욱 바람직하게는, 1 내지 3 개의 치환기로 독립적으로 임의로 치환된, 아릴, 페닐, 헤테로아릴 또는 헤테로시클릴을 의미하고, 이때 m, X¹, X², R⁴, 및 R⁵ 는 본원에 정의된 바와 같다.

"이탈기" 는 통상적으로 합성 유기 화학에서 이와 관련된 의미를 갖는 기, 즉, 치환 반응 조건 하에서 대체가능한 원자 또는 기를 의미한다. 이탈기의 예로는, 비제한적으로, 할로겐, 알칸- 또는 아릴렌술포닐옥시, 예컨대 메탄술포닐옥시, 에탄술포닐옥시, 티오메틸, 벤젠술포닐옥시, 토실옥시, 및 티에닐옥시, 디할로포스피노일옥시, 임의로 치환된 벤질옥시, 이소프로필옥시, 아실옥시가 포함된다.

"임의적" 또는 "임의로" 는 뒤이어 기술되는 사건 또는 상황이 발생할 필요가 없을 수 있는 것을 의미하고, 상기 기술은 사건 또는 상황이 발생하는 경우 및 발생하지 않는 경우를 포함한다.

"질환" 및 "질환 상태" 는 임의의 질환, 상태, 증상, 장애 또는 징후를 의미한다.

"불활성 유기 용매" 또는 "불활성 용매" 는 그와 관련하여 기술된 반응 조건 하에서 불활성인 용매를 의미하고, 예를 들어, 벤젠, 톨루엔, 아세토니트릴, 테트라히드로푸란, N,N-디메틸포름아미드, 클로로포름, 메틸렌 클로라이드 또는 디클로로메탄, 디클로로에탄, 디에틸 에테르, 에틸 아세테이트, 아세톤, 메틸 에틸 케톤, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, tert-부탄올, 디옥산, 피리딘이 포함된다. 반대의 언급이 없는 한, 본 발명의 반응에서 사용된 용매는 불활성 용매이다.

"약학적으로 허용가능한" 은 일반적으로 안전하고, 무독성이며, 생물학적으로 및 다른 방식으로도 비바람직하지 않은, 약학적 조성물을 제조하는데 유용한 것을 의미하며, 수의학적 및 인간의 약학적 사용을 위해 허용가능한 것을 포함한다.

화합물의 "약학적으로 허용가능한 염" 은 본원에 정의된 바와 같이, 약학적으로 허용가능하고, 모(parent) 화합물의 목적하는 약리학적 활성을 가지는 염을 의미한다. 상기와 같은 염에는 하기가 포함된다:

무기산, 예컨대 염산, 브롬산, 황산, 질산, 인산; 또는 유기산, 예컨대 아세트산, 벤젠술폰산, 벤조산, 캠퍼술폰산, 시트르산, 에탄술폰산, 푸마르산, 글루코헵톤산, 글루콘산, 글루탐산, 글리콜산, 히드록시나프토산, 2-히드록시에탄술폰산, 락트산, 말레산, 말산, 말론산, 만델산, 메탄술폰산, 뮤콘산, 2-나프탈렌술폰산, 프로피온산, 살리실산, 숙신산, 타르타르산, p-톨루엔술폰산, 트리메틸아세트산과 함께 형성되는 산 부가염; 또는 모 화합물에 존재하는 산성 양성자가 금속 이온, 예컨대, 알칼리 금속 이온, 알칼리 토금속 이온, 또는 알루미늄 이온으로 대체되거나; 또는 유기 또는 무기 염기와 배위결합되는 경우 형성되는 염. 허용가능한 유기 염기에는 디에탄올아민, 에탄올아민, N-메틸글루카민, 트리에탄올아민, 트로메타민이 포함된다. 허용가능한 무기 염기에는 수산화알루미늄, 수산화칼슘, 수산화칼륨, 탄산나트륨, 수산화나트륨이 포함된다. 바람직한 약학적으로 허용가능한 염은 아세트산, 염산, 황산, 메탄술폰산, 말레산, 인산, 타르타르산, 시트르산, 나트륨, 칼륨, 칼슘, 아연, 및 마그네슘으로부터 형성되는 염이다.

"보호기" 또는 "보호하는 기" 는 통상적으로 합성 화학에서 이와 관련된 의미에서, 화학 반응이 또 다른 비보호된 반응 부위에서 선택적으로 수행될 수 있는, 다관능 화합물에서의 한 반응 부위를 선택적으로 차단하는 기를 의미한다. 본 발명의 특정 과정들은 반응물에 존재하는 반응성 질소 및/또는 산소 원자를 차단하는 보호기에 의존한다. 예를 들어, 용어 "아미노 보호기" 및 "질소 보호기" 는 본원에서 교환가능하게 사용되고, 합성 절차 중 바람직하지 않은 반응에 대하여 질소 원자를 보호하도록 의도된 유기기를 지칭한다. 질소 보호기의 예로는, 비제한적으로, 트리플루오로아세틸, 아세트아미도, 벤질 (Bn), 벤질옥시카르보닐 (카르보벤질옥시, CBZ), p-메톡시벤질옥시카르보닐, p-니트로벤질옥시카르보닐, tert-부톡시카르보닐 (BOC)이 포함된다. 숙련된 자는 용이한 제거 및 뒤이은 반응을 견딜 수 있는 능력을 위해 기를 선택하는 방법을 숙지하고 있을 것이다.

"대상체" 는 포유동물 및 비포유동물을 의미한다. 포유동물은 포유동물 강(class)의 임의의 구성원을 의미하고, 비제한적으로, 인간; 비인간 영장류, 예컨대 침팬지 및 기타 유인원 및 원숭이 종; 사육 동물, 예컨대 소, 말, 양, 염소, 및 돼지; 가축, 예컨대 토끼, 개, 및 고양이; 설치류를 포함하는 실험용 동물, 예컨대 래트, 마우스, 및 기니어 피그가 포함된다. 비포유동물의 예로는, 비제한적으로, 조류가 포함된다. 용어 "대상체" 는 특정 연령 또는 성별을 의미하지 않는다.

"치료적 유효량" 은 질환 상태를 치료하기 위해 대상체에 투여할 때, 상기 질환 상태를 위한 상기와 같은 치료가 효과를 나타내기에 충분한 화합물의 양을 의미한다. "치료적 유효량" 은 화합물, 치료될 질환 상태, 치료되는 질환의 중증도, 대상체의 연령 및 상대적인 건강, 투여의 경로 및 형태, 의학 또는 수의학 주치의의 판단, 및 기타 인자에 따라 달라질 것이다.

가변적인 것에 관련된 경우, 용어 "상기 정의된 바" 및 "본원에 정의된 바" 는, 존재한다면, 바람직한, 더욱 바람직한 및 가장 바람직한 정의와 더불어 가변적인 것의 폭넓은 정의를 참조로 포함한다.

질환 상태의 "치료하는 것" 또는 "치료" 에는 하기가 포함된다:

(i) 질환 상태를 예방하는 것, 즉 질환 상태에 노출 또는 걸리기 쉬울 수 있으나, 아직 상기 질환 상태의 증상을 나타내거나 경험하지 않은 대상체에 있어서, 질환 상태의 임상적 증상이 발전되지 않도록 유도하는 것.

(ii) 질환 상태를 억제하는 것, 즉, 질환 상태 또는 이의 임상적 증상의 발전을 저지하는 것, 또는

(iii) 질환 상태를 경감시키는 것, 즉, 질환 상태 또는 이의 임상적 증상의 일시적 또는 영구적 퇴보를 유도하는 것.

화학적 반응에 관련되는 경우, 용어 "처리하는 것", "접촉시키는 것" 및 "반응하는 것" 은 2 가지 이상의 시약을 적합한 조건 하에서 첨가 또는 혼합하여, 지시된 및/또는 목적하는 생성물을 생성하는 것을 의미한다. 지시된 및/또는 목적하는 생성물을 생성하는 반응이 반드시 초기에 첨가되었던 2 가지 시약의 조합으로부터 직접적으로 수득되지 않을 수 있으며, 즉, 지시된 및/또는 목적하는 생성물의 형성을 궁극적으로 유도하는 혼합물 중에서 생성되는 하나 이상의 중간체가 존재할 수 있다는 것을 이해하여야 한다.

명명법 및 구조

일반적으로, 본 출원에서 사용된 명명법은 IUPAC 체계명의 생성을 위한 Beilstein Institute 컴퓨터화 시스템인 AUTONOM^TM v.4.0 에 기초한 것이다. 본원에서 나타낸 화학 구조는 ISIS^®2.2 버전을 사용하여 작성되었다. 본원의 구조에서 탄소, 산소 또는 질소 원자 상에 나타난 임의의 열린(open) 원자가는 수소 원자의 존재를 의미한다.

화학 구조에 카이랄 탄소가 존재하는 경우, 카이랄 탄소와 관련된 모든 입체이성질체가 상기 구조에 의해 포함되는 것으로 의도된다.

본원에서 명시된 모든 특허 및 출판물은 그들의 전체가 본원에 참조 병합된다.

일반적인 방법

본 발명의 한 측면은 식 I 의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하는 것이다:

[식 중,

X¹ 은 N, N-R³, C-R³, 또는 O 이고;

X² 는 N, NH, N-CH₃, CH, 또는 C-CH₃ 이고;

X³ 은 N 또는 C 이고, 이때 X¹, X², 및 X³ 은 모두 동시에 N 은 아니고;

X⁴, X⁵ 는 각각 독립적으로 C 또는 N 이고;

X⁶ 은 N 또는 C-R¹ 이고;

이때 X¹, X², X³, X⁴, X⁵, 및 X⁶ 중 2 개 이상 및 4 개 이하는 N 이고; 이때 X¹ 과 X², X² 와 X³, X³ 과 X⁴, X⁴ 와 X⁵, X⁵ 와 X¹, 및 X⁵ 와 X⁶ 사이의 결합은 화학적으로 안정한 구조를 갖는 것을 조건으로 하며, 각각 독립적으로 단일, 이중이거나, 또는 방향족 환을 형성할 수 있고

("화학적으로 안정한 구조" 는 통상적인 원자가 및 결합 수를 초과하지 않는 경우 생성되며; 예를 들어, 화학적으로 안정한 구조는 X³-X⁴, X⁴-X⁵, 및 X⁵-X¹ 사이에 동시에 이중 결합을 갖지 않을 것임);

R 은 -(시클로헥실)-R² 또는 -(페닐)-R⁸ 이고, 이때 시클로헥실 및 페닐은 각각 메틸, 플루오로, 클로로, 또는 히드록시로 임의로 치환되고;

R¹ 은 할로, 니트로, -CN, -CH₂CN, -OH, -NH₂, -COOH, 또는 -Y¹R⁴ 이고;

Y¹ 은 -O-, -NH-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NHSO₂-, -NHC(O)-, -C(O)NH-, -C(O)O-, 또는 결합이고;

R⁴ 는 저급 알킬, 아실, 페닐, 또는 벤질이고, 이들 각각은 0-3 개의 히드록시 또는 할로로 치환되고;

n 은 0, 1, 또는 2 이고;

R³ 은 H 또는 저급 알킬이고;

R² 는 H, -OH, -SO₂NH₂, =O, -CN, 또는 -Y²-Y³-Y⁴-R⁵ 이고, 이때

Y² 는 -C(O)-, -C(O)NR^a-, -SO₂-, -O-, -NH-, 또는 결합이고;

Y³ 은 저급 알킬렌 또는 결합이고;

Y⁴ 는 -O-, -NR^a-, -S-, -SO₂-, -C(O)-, -C(O)NR^a-, -NR^aC(O)-, -NR^aC(O)O-, -NR^aC(O)NR^a-, -NHSO₂-, -SO₂NH-, 또는 결합이고;

R⁵ 는 저급 알킬, 시클로알킬, 헤테로시클릴이고, 이때 R⁵ 는 -OH 또는 -NHR^a 로 임의로 치환되고; 이때 각 R^a 는 독립적으로 H 또는 저급 알킬이고;

R⁸ 은 H, 저급 알킬, -OR³, -SO₂NH₂, -NHSO₂R³, -COOR³, -SO₂R³, -NH₂, -CONR^aR³, -NHC(O)R³, -CF₃, -NO₂, 할로, 또는 -CN 이고;

Z 는 수소, 할로, 알킬, 또는 NH₂ 임].

일부 구현예에서, X⁴ , X⁵, 및 X⁶ 은 각각 C 이다. 다른 구현예에서, R 은 -(시클로헥실)-R² 이다. 또 다른 구현예에서, X³ 은 N 이고, X¹ 은 C 이다. 부가적인 구현예에서, R² 는 OH 이다. 일부 구현예에서, R¹ 은 벤질옥시이고, n 은 1 이다. 또 다른 구현예에서, R¹ 은 -CN 이다.

일부 구현예에서, X² 는 N 이다. 다른 구현예에서, R² 는 -Y²-Y³-Y⁴-R⁵ 이고, 이때 Y² 는 -C(O)NR^a- 이고, R^a 는 H 이고, Y³ 은 저급 알킬렌이다. 다른 구현예에서, Y⁴ 는 -SO₂- 이다. 또 다른 구현예에서, R⁵ 는 저급 알킬이다.

일부 구현예에서, Y⁴ 는 -S- 이다. 일부 구현예에서, R⁵ 는 저급 알킬이다.

다른 구현예에서, Y⁴ 는 결합이고, R⁵ 는 저급 알킬이다.

본 발명의 다른 측면은 본 발명의 화합물의 유효량을 이를 필요로 하는 대상체에 투여하는 것을 포함하는, 염증 치료를 위한 방법이다.

본 발명의 또 다른 측면은 본 발명의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는, 약학적 조성물이다.

본원에서 기술된 상이한 기들의 조합은 다른 구현예들을 형성할 수 있는 것으로 이해되어야 한다. 이와 같이, 각종 상이한 화합물들이 본 발명에서 구현된다.

본 발명의 대표적인 화합물은 하기 표 1 에 제시하였다.

합성

본 발명의 화합물은 하기 실시예 단락에 제시된 실례에서 서술된 각종 방법에 의해 제조될 수 있다. 상기 화합물의 제조에 사용되는 출발 물질 및 시약은 일반적으로 판매업체, 예컨대 Aldrich Chemical Co. 로부터 입수가능하거나, 또는 참고문헌, 예컨대 [Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis; Wiley & Sons: New York, 1991, Volumes 1-15; Rodd's Chemistry of Carbon Compounds, Elsevier Science Publishers, 1989, Volumes 1-5 및 부록; 및 Organic Reactions, Wiley & Sons: New York, 1991, Volumes 1-40]에 제시된 절차에 따라 당업계의 숙련된 자에게 공지된 방법에 의해 제조된다. 하기 합성 반응식들은 단지 본 발명의 화합물이 합성될 수 있는 일부 방법들의 예시이고, 이러한 합성 반응식에 대해서는 각종 변형이 성립될 수 있으며, 이는 본 출원에 포함된 개시내용을 참조하는 당업계의 숙련된 자에게 제안될 것이다.

합성 반응식의 출발 물질 및 중간체는 요구되는 경우, 비제한적으로, 여과, 증류, 결정화, 크로마토그래피를 포함하는, 통상적인 기술을 사용하여 단리 및 정제될 수 있다. 상기와 같은 물질들은 물리 상수 및 스펙트럼 데이타를 포함하는, 통상적인 방법을 사용하여 특성이 파악될 수 있다.

다르게 언급되지 않는 한, 본원에서 기술된 반응은 바람직하게는 불활성 대기 하에서, 대기압에서, 약 -78℃ 내지 약 230℃ 의 반응 온도 범위에서, 및 가장 바람직하게 및 용이하게는 실온 (또는 주위 온도), 예컨대, 약 20℃ 에서 수행된다.

하기 반응식에서, 다르게 상술되지 않는 한, R¹, X¹, X², X³, 등은 상기 정의된 바와 같고; 한편

A 는 Cl 또는 SR_b 이고,

A₁ 은 Cl, (S=O)Me, SO₂Me 또는 SO₂Bu 이고,

R_a 는 알킬, 시클로알킬이고,

R_b 는 Me 또는 Bu 이고,

Z 는 N 또는 C 이고,

X 는 Cl, Br, I 이고,

R_e 및 R_f 는 독립적으로 수소, 히드록시알킬, 알콕시, 알킬, 시클로알킬, 헤테로알킬, 알킬술포닐, 알킬술피닐이고,

R_g 는 저급 알킬이고,

R_h 는 알킬 또는 시클로알킬이고,

R_i 는 알킬, 시클로알킬, 헤테로시클릭이다.

반응식 I:

단계 A: 1. 1,3-디메틸이미다졸륨 요오다이드, NaH, 1,4-디옥산, 환류; 2. tert-부틸 카르바제이트, AcOH, MeOH, 환류; 또는 NH₂OH, EtOH, 환류; 3. DBU, THF, MW 150℃.

단계 B: NaH, DMF; 또는 LiHMDS 또는 NaHMDS, 아세토니트릴/THF, 저온; 또는 DIPEA, DMF 100℃.

단계 C: 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0), Na₂CO₃, 아세토니트릴, 물.

단계 D: 1. EtOH, 환류; 2. 요오도벤젠 디아세테이트, DCM.

단계 E: KOH, 물, DCM.

단계 A 에서, 4-클로로-2-메틸술파닐-피리미딘 또는 4-클로로-2-부틸술파닐-피리미딘을 강염기, 예컨대 수소화나트륨, 및 1,3-디메틸-이미다졸륨 요오다이드 존재 하에서, 극성 비양성자성 용매, 예컨대 1,4-디옥산 중에서, 가열하여 환류에 의해, 각종 치환된 o-플루오로벤즈알데히드와 반응시켜, 해당 케톤을 수득한다. 상기 생성물을 아세트산 존재 하에서, 비극성 양성자성 용매, 예컨대 메탄올 중에서, 가열하여 환류에 의해, tert-부틸 카르바제이트로 처리하여, 해당 히드라존을 수득하고, 이를 염기, 예컨대 DBU 존재 하에서, 및 극성 용매, 예컨대 THF 중에서, 마이크로파 조건 하에서 가열에 의해, 고리화하여, 해당 인다졸을 수득한다. tert-부틸 카르바제이트 대신 히드록실아민이 사용된 경우, 해당 벤족사졸이 수득된다. 단계 B 에서, 2-위치에 메르캅토알킬- 또는 클로로- 잔기를 갖는 4-클로로피리미딘을 염기, 예컨대 NaH, LiHMDS, NaHMDS 또는 DIPEA 존재 하에서, 극성 용매, 예컨대 DMF, 아세토니트릴, THF, 1,4-디옥산 또는 상기의 혼합물 중에서, -10℃ 내지 100℃ 범위의 온도에서, 각종 치환된 인돌, 인다졸, 아자인돌 또는 인돌린과 함께 S_NAr 반응시켜, 해당: N1-아릴화 인돌, N1- 또는 N2- 아릴화 인다졸, N1-아릴화 아자인돌 및 N1-아릴화 인돌린을 수득한다. 단계 C 에서, 2,4-디클로로피리미딘을 촉매, 예컨대 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0), 및 무기 염기, 예컨대 Na₂CO₃ 존재 하에서, 극성 용매의 혼합물, 예컨대 아세토니트릴/물 중에서, N1 보호된, 각종 치환된 3-인돌 보론산과 함께 부흐발트(Buchwald) 커플링하여, 해당 2-클로로-4-아릴화 피리미딘을 수득한다. 단계 D 에서, 2-메틸술파닐-피리미딘-4-카르발데히드를 극성 양성자성 용매, 예컨대 에탄올 중에서, 가열하여 환류에 의해, 치환된 또는 비치환된 피리딘-2-일-히드라진과 반응시켜, 해당 히드라존을 수득하고, 이를 요오도벤젠 디아세테이트 존재 하에서, 비극성 용매, 예컨대 DCM 중에서 고리화하여, 해당하는 각종 치환된 [1,2,4]트리아졸로[4,3-a]-피리딘을 수득한다. 단계 E 에서, 4-에티닐-2-메틸술파닐-피리미딘을 물 및 무기 염기, 예컨대 KOH 존재 하에서, 비극성 용매, 예컨대 DCM 중에서, 1-아미노-피리다진-1-윰 요오다이드 (J. Med . Chem . 2004, 47, 4716-30)와 반응시켜, 해당 3-(2-메틸-술파닐-피리미딘-4-일)-피라졸로[1,5-b]피리다진을 수득한다.

반응식 II :

X³ 이 NH 또는 NSO₂Ph 인 경우, 단계 A: NaH, R_aX, NMP, 또는 1. NaOH, MeOH/THF; 2. NaH, R_aX, NMP.

R1 이 COOMe 인 경우, 단계 B: R_aMgCl, THF, 저온.

R1 이 NO₂ 인 경우, 단계 C: Fe(0), NH₄Cl, EtOH, 물, 가열; 단계 D: R_aCOCl, TEA, THF.

X¹ 이 C=O 인 경우, 단계 E: NaH, R_aX, DMF, 0℃.

단계 A 에서, X³ 이 NH 인 경우 일반 구조 I 의 화합물을 극성 용매, 예컨대 NMP 중에서, 강염기, 예컨대 NaH, 및 적합한 알킬 또는 시클로알킬 할라이드, 예컨대 MeI 로 처리하여 알킬화할 수 있다. X³ 이 페닐술포닐아미드 잔기인 경우, 일반 구조 I 의 화합물을 우선 극성 용매의 혼합물, 예컨대 MeOH/THF 중에서, 강한 무기 염기, 예컨대 NaOH 로 처리하여 탈보호한 후, 상기 기술된 바와 같이 알킬화할 수 있다. 단계 B 에서, R1 이 메틸 에스테르 잔기인 경우 일반 구조 I 의 화합물을 저온에서, 극성 용매, 예컨대 THF 중에서, Grignard 반응물, 예컨대 MeMgCl 로 이중 부가하여, 해당 3차 알콜을 수득할 수 있다. 단계 C 에서, R¹ 이 NO₂ 인 경우 일반 구조 I 의 화합물을 환원제, 예컨대 Fe(0) 피셔(Fisher), 염화암모늄 및 물 존재 하에서, 극성 양성자성 용매, 예컨대 에탄올 중에서, 가열에 의해 해당 아닐린으로 환원시킬 수 있다. 일반식 II 의 아닐린을 이어서 염기, 예컨대 트리에틸아민 존재 하에서, 극성 용매, 예컨대 THF 중에서, 적합한 아실 클로라이드로의 처리에 의해 아실화하여, 단계 D 에 기술된 바와 같은 해당 2차 아미드를 수득할 수 있다. 단계 E 에서, X¹ 이 C=O 인 경우 일반 구조 I 의 화합물을 극성 용매, 예컨대 DMF 중에서, 저온에서, 강염기, 예컨대 NaH 로 탈양성자화한 후, 알킬화제, 예컨대 MeI 로 처리하여 O-알킬화할 수 있다.

반응식 III :

단계 A: NCS, NMP 또는 m-CPBA 또는 MeReO₃/H₂O₂, DCM.

단계 B: R²C₆H₁₀NH₂, NMP, 가열 또는 R²C₆H₁₀NH₂, DIPEA, NMP, 가열.

단계 C: R⁸C₆H₄NH₂, p-TSA, i-PrOH, 150℃, MW.

단계 A 에서, A 가 티오메틸 잔기인 경우 일반식 I 의 화합물을 극성 용매, 예컨대 NMP 중에서, 고온에서, N-클로로숙신이미드 존재 하에서 염소화시킬 수 있다. 대안적으로는, 일반식 I 의 화합물을 비극성 용매, 예컨대 DCM 또는 클로로포름 중에서, 0℃ 내지 실온 범위의 온도에서, 산화제로서 3-클로로퍼옥시벤조산 또는 메틸트리옥소레늄 및 과산화수소의 혼합물을 사용하여 해당 술폰 또는 술폭시드로 산화시킬 수 있다. 상기 해당 클로라이드, 술폰 또는 술폭시드 III 을 단계 B 에 기술된 바와 같이, 비극성 용매, 예컨대 NMP 중에서, 90 내지 150℃ 범위의 온도에서, 염기, 예컨대 디이소프로필에틸아민 존재 또는 부재에서, 친핵체로서 각종 치환된 또는 비치환된 시클로헥실아민을 사용하여 S_NAr 반응시킬 수 있다. 대안적으로는, 일반 구조 III 의 술폭시드를 단계 C 에 기술된 바와 같이, p-톨루엔술폰산 존재 하에서, 극성 양성자성 용매, 예컨대 이소프로판올 중에서, 마이크로파 조건 하 150℃ 에서, 각종 치환된 또는 비치환된 아닐린과 반응시킬 수 있다.

반응식 IV :

R¹ 이 COOMe, COOEt 인 경우: 단계 A: LiOH 또는 NaOH, THF/MeOH.

R¹ 이 NO₂ 인 경우: 단계 B: Fe(0), NH₄Cl, EtOH, 물, 가열.

R¹ 이 OBn 인 경우: 단계 C: H₂, Pd/C, EtOH.

R¹ 이 COOMe 인 경우: 단계 D: LAH 또는 LiEt₃BH, THF, -10℃ 또는 RT.

R¹ 이 SBn 인 경우: 단계 E: m-CPBA, 클로로포름.

R¹ 이 NH₂ 인 경우: 단계 F: R_iX, Na₂CO₃, DMF, 80℃.

단계 A 에서, R¹ 이 메틸- 또는 에틸- 에스테르 잔기인 경우 일반식 IV 의 화합물을 강한 무기 염기, 예컨대 수산화나트륨 또는 수산화리튬 존재 하에서, 극성 용매, 예컨대 THF 및 MeOH 의 혼합물 중에서, 해당 카르복실산으로 가수분해할 수 있다. 단계 B 에서, R¹ 이 니트로 잔기인 경우 일반식 IV 의 화합물을 염화암모늄 및 물 존재 하에서, 극성 양성자성 용매, 예컨대 에탄올 중에서, 환원제, 예컨대 철 피셔(Fisher)를 사용하여, 가열에 의해 해당 아닐린으로 환원시킬 수 있다. 단계 C 에서, R1 이 벤질옥시 잔기인 경우 일반식 IV 의 화합물을 촉매로서 탄소 상의 팔라듐 존재 하에서, 극성 양성자성 용매, 예컨대 에탄올 중에서, 환원제로서 수소를 사용하여, 해당 페놀로 환원시킬 수 있다. 단계 D 에서, R1 이 메틸- 또는 에틸- 에스테르 잔기인 경우 일반식 IV 의 화합물을 극성 용매, 예컨대 THF 중에서, -10℃ 내지 실온 범위의 온도에서, 환원제로서 리튬 알루미늄 히드라이드 또는 리튬 트리메틸보로히드라이드를 사용하여, 해당 벤질 알콜로 환원시킬 수 있다. 단계 E 에서, R1 이 메르캅토벤질 잔기인 경우 일반식 IV 의 화합물을 비극성 용매, 예컨대 클로로포름 중에서, 산화되는 것으로서 3-클로로퍼옥시벤조산을 사용하여, 해당 술폰으로 산화시킬 수 있다. 단계 F 에서, R¹ 이 아민 잔기인 경우 일반식 IV 의 화합물을 무기 염기, 예컨대 탄산나트륨 존재 하에서, 극성 용매, 예컨대 DMF 중에서, 알킬화제로서 알킬-, 시클로알킬-, 헤테로시클릭- 할라이드를 사용하여, 가열에 의해 해당 2차 또는 3차 아민으로 알킬화할 수 있다.

반응식 V:

R² 가 COOEt 인 경우: 단계 A: 1. NaOH, THF; 2. R_eR_fNH, BOP, DIPEA, THF.

R² 가 O(CH₂)₂O 인 경우: 단계 B: 1. HCl, THF, 가열; 2. R_hMgCl, THF, -78℃.

R² 가 NH₂ 인 경우: 단계 C: (R_gSO₂)O.

X³ 이 NHSO₂Ph 인 경우: 단계 D: NaOH, MeOH.

X¹ 이 C-OMe 인 경우: 단계 E: TMSI, CHCl₃.

단계 A 에서, R² 가 에틸- 또는 메틸- 에스테르 잔기인 경우 일반식 V 의 화합물을 강한 무기 염기, 예컨대 수산화나트륨 존재 하에서, 극성 용매, 예컨대 THF 중에서, 해당 카르복실산으로 가수분해할 수 있다. 이어서 상기 카르복실산을 커플링화제, 예컨대 BOP 및 염기, 예컨대 DIPEA 존재 하에서, 극성 용매, 예컨대 THF 중에서, 히드록시알킬-, 알콕시-, 알킬-, 시클로알킬-, 헤테로알킬-, 알킬술포닐-, 알킬술피닐- 아민과 커플링하여, 해당 아미드를 수득할 수 있다. 단계 B 에서, R² 가 1,3-디옥솔란 잔기인 경우 일반식 V 의 화합물을 강한 무기 산, 예컨대 HCl 존재 하에서, 극성 용매, 예컨대 THF 중에서, 가열에 의해 해당 케톤으로 가수분해할 수 있다. 상기 방식으로 수득된 케톤을 저온에서, 극성 용매, 예컨대 THF 중에서, Grignard 반응물로 부가 반응시켜, 해당 3차 알콜을 수득할 수 있다. 단계 C 에서, R² 가 아민 잔기인 경우 일반식 V 의 화합물을 술포닐무수물 존재 하에서, 극성 용매, 예컨대 NMP 중에서 술포닐화하여, 해당 술포닐아미드를 수득할 수 있다. 단계 D 에서, X³ 이 페닐술포닐아미드 잔기인 경우 일반식 V 의 화합물을 무기 염기, 예컨대 수산화나트륨 존재 하에서, 극성 용매, 예컨대 메탄올 중에서, 해당 인돌, 인다졸 또는 벤족사졸로 가수분해할 수 있다. 단계 E 에서, X¹ 이 메틸 에테르 잔기인 경우 일반식 V 의 화합물을 비극성 용매 중에서, 트리메틸실릴요오다이드와의 반응에 의해 해당 케톤으로 산화시킬 수 있다.

그 후, 상기 생성물을, 예컨대, 추출, 결정화, 제조용 HPLC, 플래시 크로마토그래피, 박층 크로마토그래피에 의해 정제할 수 있다.

본 발명의 화합물은 JNK 조절제이고, 이와 같은 것들은 광범위한 JNK 매개 장애의 치료에 유효한 것으로 예상된다. JNK 매개 장애의 예로는, 비제한적으로, 자가면역 장애, 염증성 장애, 대사성 장애, 신경학적 질환, 및 암이 포함된다. 따라서, 본 발명의 화합물은 하나 이상의 이와 같은 장애를 치료하는데 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 본 발명의 화합물은 JNK 매개 장애, 예컨대 류마티스 관절염, 천식, 제 II 형 당뇨병, 알츠하이머병, 파킨슨병 또는 뇌졸중을 치료하는데 사용될 수 있다.

투여 및 약학적 조성물

본 발명에는 본 발명의 하나 이상의 화합물, 또는 그의 각 이성질체, 이성질체의 라세미형 또는 비라세미형 혼합물 또는 이들의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물과 함께, 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체, 및 임의로 기타 치료 및/또는 예방 성분들을 포함하는 약학적 조성물이 포함된다.

일반적으로, 본 발명의 화합물은 유사한 효용을 제공하는 제제에 대한 임의의 허용된 투여 방식에 의해 치료적 유효량으로 투여될 수 있다. 적당한 투여량 범위는 수많은 인자, 예컨대 치료될 질환의 중증도, 대상체의 연령 및 상대적인 건강, 사용되는 화합물의 효능, 투여의 경로 및 형태, 투여의 표적이 되는 징후, 및 담당 의사의 선택 및 경험에 따라, 통상적으로 1 일 1-500 mg, 바람직하게는 1 일 1-100 mg, 및 가장 바람직하게는 1 일 1-30 mg 이다. 이와 같은 질환을 치료하는 당업계의 통상의 기술자는, 과도한 실험 없이 및 개인적 지식 및 본 출원의 개시내용에 따라, 제시된 질환에 대한 본 발명의 화합물의 치료적 유효량을 결정할 수 있을 것이다.

본 발명의 화합물은 경구 (구강 및 설하 포함), 직장, 비강, 국소, 폐, 질, 또는 비경구 (근육 내, 동맥 내, 경막 내, 피하 및 정맥 내 포함) 투여에 적당한 것을 포함하는 약학적 제형물로서 또는 흡입 또는 통기에 의한 투여에 적당한 형태로 투여될 수 있다. 투여의 바람직한 방식은 일반적으로 경구로서, 고통의 정도에 따라 조정될 수 있는 용이한 1 일 투여량 계획을 사용하는 것이다.

본 발명의 화합물 또는 화합물들은, 하나 이상의 통상적인 보조제, 담체, 또는 희석제와 함께, 약학적 조성물 및 단위 투여량 형태를 취할 수 있다. 약학적 조성물 및 단위 투여량 형태는 부가적인 활성 화합물 또는 성분을 사용하거나 사용하지 않고, 통상적인 비율로의 통상적인 성분들로 이루어질 수 있고, 상기 단위 투여량 형태는 사용하고자 하는 1 일 투여량 범위에 상응하는 임의의 적당한 유효량의 활성 성분을 함유할 수 있다. 약학적 조성물은 경구용으로는 고체, 예컨대 정제 또는 충전 캡슐, 반고체, 분말, 서방형 제형물, 또는 액체, 예컨대 용액, 현탁액, 에멀젼, 엘릭시르, 또는 충전 캡슐로서; 또는 직장 또는 질 투여용으로는 좌제의 형태로; 또는 비경구용으로는 무균 주사 용액의 형태로서 사용될 수 있다. 따라서, 정제 당 약 1 mg 또는, 더욱 폭넓게는, 약 0.01 내지 약 100 mg 의 활성 성분을 함유하는 제형물이 적당한 대표적인 단위 투여량 형태이다.

본 발명의 화합물은 다양한 각종 경구 투여량 형태로 제형화될 수 있다. 약학적 조성물 및 투여량 형태는 활성 성분으로서 본 발명의 화합물 또는 화합물들 또는 이들의 약학적으로 허용가능한 염을 포함할 수 있다. 약학적으로 허용가능한 담체는 고체 또는 액체일 수 있다. 고체형 제제에는 분말, 정제, 환약, 캡슐, 카세제, 좌제, 및 분산성 과립이 포함된다. 고체 담체는 또한 희석제, 향미제, 가용화제, 윤활제, 현탁제, 결합제, 방부제, 정제 붕해제, 또는 캡슐화 물질로서 작용할 수 있는 하나 이상의 물질일 수 있다. 분말에 있어서, 담체는 일반적으로 미분된 활성 성분과의 혼합물인 미분된 고체이다. 정제에 있어서, 활성 성분은 일반적으로 필요한 결합능을 갖는 담체와 적당한 비율로 혼합되고, 목적하는 모양 및 크기로 압축된다. 분말 및 정제는 바람직하게는 약 1 내지 약 70 % 의 활성 화합물을 함유한다. 적당한 담체에는, 비제한적으로, 탄산마그네슘, 마그네슘 스테아레이트, 탈크, 당, 락토오스, 펙틴, 덱스트린, 전분, 젤라틴, 트래거캔스, 메틸셀룰로오스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오스, 저용융 왁스, 코코아 버터가 포함된다. 용어 "제제" 는 담체를 갖거나 갖지 않는, 활성 성분이 그와 연관된 담체에 둘러싸여 있는 캡슐을 제공하는, 담체로서의 캡슐화 물질을 갖는 활성 화합물의 제형물이 포함되는 것으로 의도된다. 유사하게는, 카세제 및 로젠지가 포함된다. 정제, 분말, 캡슐, 환약, 카세제, 및 로젠지는 경구 투여에 적당한 고체 형태일 수 있다.

경구 투여에 적당한 다른 형태에는 에멀젼, 시럽, 엘릭시르, 수용액, 수성 현탁액을 포함하는 액체형 제제, 또는 사용되기 직전에 액체형 제제로 전환되도록 의도된 고체형 제제가 포함된다. 에멀젼은 용액, 예를 들어, 프로필렌 글리콜 수용액 중에서 제조될 수 있거나, 유화제, 예를 들어, 예컨대 레시틴, 소르비탄 모노올레에이트, 또는 아카시아를 함유할 수 있다. 수용액은 활성 성분을 물 중에 용해시키고, 적당한 착색제, 향미제, 안정화제, 및 증점제를 첨가함으로써 제조될 수 있다. 수성 현탁액은 미분된 활성 성분을 점성 물질, 예컨대 천연 또는 합성 검, 수지, 메틸셀룰로오스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오스, 및 기타 널리 공지된 현탁제와 함께 물 중에 분산시킴으로써 제조될 수 있다. 고체형 제제에는 용액, 현탁액, 및 에멀젼이 포함되며, 이는 활성 성분에 더하여, 착색제, 향미제, 안정화제, 완충제, 인공 및 천연 감미제, 분산제, 증점제, 가용화제를 함유할 수 있다.

본 발명의 화합물은 비경구 투여 (예컨대, 주사, 예를 들어 볼루스 주사 또는 연속 주사) 용으로 제형화될 수 있고, 앰플, 예비 충전 시린지, 소부피 주사의 단위 용량 형태 또는 방부제가 첨가된 다용량 용기로 제시될 수 있다. 조성물은 유성 또는 수성 비히클 중의 현탁액, 용액, 또는 에멀젼, 예를 들어 수성 폴리에틸렌 글리콜 중의 용액과 같은 형태를 취할 수 있다. 유성 또는 비수성 담체, 희석제, 용매 또는 비히클의 예로는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 식물성 오일 (예컨대, 올리브 오일), 및 주사용 유기 에스테르 (예컨대, 에틸 올레에이트)가 포함되고, 이는 제형제, 예컨대 방부제, 습윤제, 유화제 또는 현탁제, 안정화제 및/또는 분산제를 함유할 수 있다. 대안적으로는, 활성 성분은 적당한 비히클, 예컨대, 무균의 무발열원수로 사용 전에 구성하기 위한 용액으로부터의 동결건조에 의해, 또는 무균 고체의 무균 단리에 의해 수득된, 분말 형태일 수 있다.

본 발명의 화합물은 연고, 크림 또는 로션으로서, 또는 경피성 패치로서 표피에 국소 투여용으로 제형화 될 수 있다. 연고 및 크림은, 예를 들어, 적당한 증점제 및/또는 겔화제의 첨가와 함께 수성 또는 유성 기제를 이용하여 제형화 될 수 있다. 로션은 수성 또는 유성 기제를 이용하여 제형화될 수 있으며, 또한 일반적으로 하나 이상의 유화제, 안정화제, 분산제, 현탁제, 증점제, 또는 착색제를 함유할 수 있다. 구강 내 국소 투여에 적당한 제형물에는 유향 기제, 통상적으로 수크로오스 및 아카시아 또는 트래거캔스 중에 활성 제제를 포함하는 로젠지; 불활성 기제, 예컨대 젤라틴 및 글리세린 또는 수크로오스 및 아카시아 중에 활성 성분을 포함하는 향정; 및 적당한 액체 담체 중에 활성 성분을 포함하는 구강세정액이 포함된다.

본 발명의 화합물은 좌제로서의 투여용으로 제형화될 수 있다. 저용융 왁스, 예컨대 지방산 글리세리드 또는 코코아 버터의 혼합물을 우선 용융시키고, 활성 성분을 균질하게, 예를 들어, 교반에 의해 분산시킨다. 그 후, 용융된 균질 혼합물을 용이한 크기의 몰드에 붓고, 냉각시켜, 고체화시킨다.

본 발명의 화합물은 질 투여용으로 제형화될 수 있다. 활성 성분에 더하여 상기와 같은 담체를 함유하는 페서리, 탐폰, 크림, 겔, 페이스트, 발포체 또는 분사체가 적합한 것으로서 당업계에 공지되어 있다.

본 발명의 화합물은 비강 투여용으로 제형화될 수 있다. 용액 또는 현탁액은 통상적인 방법에 의해, 예를 들어, 점적기, 피펫 또는 분사를 이용하여 비강에 직접적으로 적용된다. 제형물은 단일 또는 다용량 형태로 제공될 수 있다. 후자에 있어 점적기 또는 피펫의 경우에는, 환자가 적합한, 소정의 부피의 용액 또는 현탁액을 투여하게 함으로써 달성될 수 있다. 분사의 경우에는, 예를 들어 계량형 원자화 분사 펌프에 의해 달성될 수 있다.

본 발명의 화합물은 에어로졸 투여용으로, 특히 비강 내 투여를 포함하여 기도로의 투여용으로 제형화될 수 있다. 화합물은 일반적으로 작은 입자 크기, 예를 들어 약 5 마이크론 이하를 가질 것이다. 이와 같은 입자 크기는 당업계에 공지된 방법, 예를 들어 마이크로화에 의해 수득될 수 있다. 활성 성분은 적당한 추진제, 예컨대 클로로플루오로탄소 (CFC), 예를 들어, 디클로로디플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 또는 디클로로테트라플루오로에탄, 또는 이산화탄소 또는 기타 적당한 기체를 이용하여 가압 팩으로 제공된다. 에어로졸은 또한 용이하게는 계면활성제, 예컨대 레시틴을 함유할 수 있다. 약물의 용량은 계량 밸브에 의해 조절될 수 있다. 대안적으로는, 활성 성분은 건조 분말, 예를 들어 적당한 분말 기제, 예컨대 락토오스, 전분, 전분 유도체, 예컨대 히드록시프로필메틸 셀룰로오스 및 폴리비닐피롤리딘 (PVP) 중의 화합물의 분말 혼합물의 형태로 제공될 수 있다. 분말 담체는 비강 내에서 겔을 형성할 것이다. 분말 조성물은 단위 용량 형태, 예를 들어 분말이 흡입기에 의해 투여될 수 있는, 예컨대 젤라틴 또는 블리스터 팩의 카트리지 또는 캡슐로 제시될 수 있다.

원하는 경우, 제형물은 활성 성분의 서방형 또는 제어 방출형 투여에 적당한 장 코팅물로 제조될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 화합물은 경피 또는 피하 약물 전달 장치로 제형화될 수 있다. 이러한 전달계는 화합물의 서방형 방출이 필요한 경우 및 치료 계획에 대한 환자의 순응이 중요한 경우에 유리하다. 경피 전달계 내의 화합물은 흔히 피부 접착용 고체 지지체에 부착된다. 관심 대상의 화합물은 또한 침투 증강제, 예컨대, 아존 (1-도데실아자시클로헵탄-2-온)과 조합될 수 있다. 서방형 전달계는 수술 또는 주사에 의해 피하를 통해 피하층 내로 삽입된다. 피하 이식은 지질 용해성 막, 예컨대, 실리콘 고무, 또는 생분해성 중합체, 예컨대, 폴리락트산 중에 화합물을 캡슐화한다.

약학적 제제는 바람직하게는 단위 투여량 형태이다. 이와 같은 형태에 있어서, 제제는 적합한 양의 활성 성분을 함유하는 단위 용량으로 세분된다. 단위 투여량 형태는 패키지 제제일 수 있고, 이때 패키지는 바이알 또는 앰플 내에 분리된 양의 제제, 예컨대 패킷 정제, 캡슐, 및 분말을 함유한다. 또한, 단위 투여량 형태는 캡슐, 정제, 카세제, 또는 로젠지 그 자체일 수 있고, 또는 패키지 형태 중의 적합한 수의 이들 중 임의의 것일 수 있다.

기타 적당한 약학적 담체 및 이들의 제형물은 [Remington : The Science and Practice Pharmacy 1995, E. W. Martin 편저, Mack Publishing Company, 19th edition, Easton, Pennsylvania]에 기술되어 있다. 본 발명의 화합물을 함유하는 대표적인 약학적 제형물은 하기에 기술되어 있다.

본 발명의 부가적인 목적, 이점, 및 신규한 특징은 하기 실시예의 시험에 따라 당업계의 숙련된 자에게 명백하게 될 것이며, 이는 제한하기 위한 의도가 아니다.

약어 목록

AcOH 아세트산

Bn 벤질

BOP 벤조트리아졸-1-일옥시트리스(디메틸아미노)포스포늄

헥사플루오로포스페이트

(BOC)₂O 디-tert-부틸 디카르보네이트

DBU 1,8-디아자비시클로[5.4.0]-운데크-7-엔

DCM 디클로로메탄 (메틸렌 클로라이드)

DEA 디에틸아민

DIPEA 디이소프로필에틸아민

DMF N,N-디메틸포름아미드

EDCI 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드

Et₂O 디에틸 에테르

EtOH 에탄올

EtOAc 에틸 아세테이트

HOBt 1-히드록시벤조트리아졸

i-PrOH 이소프로판올

LAH 리튬 알루미늄 히드라이드

m-CPBA 3-클로로퍼옥시벤조산

MeOH 메탄올

MW 마이크로파

NCS N-클로로숙신이미드

NMP 1-메틸-2-피롤리디논

p-TSA p-톨루엔술폰산

RT 실온

TEA 트리에틸아민

THF 테트라히드로푸란

TLC 박층 크로마토그래피

제조 1: 3-(2- 메틸술파닐 -피리미딘-4-일)-1 H - 인다졸의 합성

3-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸의 합성을 반응식 1 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 1

단계 A: (2- 플루오로 - 페닐 )-(2- 메틸술파닐 -피리미딘-4-일)- 메타논의 합성

수소화나트륨 (광유 중의 60% 분산액, 598 mg, 14.94 mmol)을 1,4-디옥산 (20 mL) 중의 4-클로로-2-메틸티오피리미딘 (1.45 mL, 12.45 mmol), 2-플루오로벤 즈알데히드 (1.57 mL, 14.94 mmol) 및 1,3-디메틸이미다졸륨 요오다이드 (517 mg, 4.15 mmol) (Org . Synth . (1986) 64:9 에 기술된 바와 같이 제조)의 교반 용액에 첨가하였다. 상기 수득한 혼합물을 환류에서 1 시간 동안 가열하고; 그 후, 이를 냉각시키고, EtOAc 와 물 사이에 분할시켰다. 유기층을 분리하고, Na₂SO₄ 상에서 건조, 여과 및 감압 하에서 증발시켰다. 미정제 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (헥산/EtOAc, 95/5)로 정제하여, 840 mg 의 (2-플루오로페닐)-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-메타논을 수득하였다.

동일한 방식으로, 적합한 출발 물질을 사용하여, 하기 화합물들을 제조하였다:

(2-플루오로-3-메톡시-페닐)-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-메타논; 및

(2,5-디플루오로-페닐)-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-메타논.

단계 B: 3-(2- 메틸술파닐 -피리미딘-4-일)-1 H - 인다졸의 합성

tert-부틸카르바제이트 (899 mg, 6.8 mmol) 및 아세트산 (0.5 mL)을 MeOH 중의 (2-플루오로-페닐)-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-메타논 (840 mg, 3.4 mmol)의 혼합물에 첨가하였다. 상기 수득한 혼합물을 환류에서 16 시간 동안 가열하고; 그 후, 이를 RT 까지 냉각시키고, EtOAc 와 수성 탄산수소나트륨 사이에 분할시켰다. 유기층을 분리하고, Na₂SO₄ 상에서 건조, 여과 및 감압 하에서 증발시켰다. 잔류물을 DBU (0.79 mL, 5.3 mmol) 및 THF 와 함께 봉합된 튜브에 위치시켰다. 상기 수득한 혼합물을 마이크로파 반응기 내에서, 150℃ 까지 30 분 동안 가열 하였다. 그 후, 상기 반응 혼합물을 감압 하에서 증발시키고, 미정제 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (헥산/EtOAc, 4/1)로 정제하여, 525 mg 의 3-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸을 수득하였다.

유사한 방식으로, 적합한 출발 물질을 사용하여, 하기 화합물들을 제조하였다:

7-메톡시-3-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸, 및

3-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-7-트리플루오로메틸-1H-인다졸.

제조 2: 1- 메틸 -3-(2- 메틸술파닐 -피리미딘-4-일)-1 H - 인다졸의 합성

1-메틸-3-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸의 합성을 반응식 2 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 2

수소화나트륨 (광유 중의 60% 현탁액, 99 mg, 2.47 mmol)을 0℃ 에서, NMP 중의 3-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸 (520 mg, 2.15 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 상기 혼합물을 15 분 동안 교반한 후, 메틸요오다이드 (0.14 mL, 2.25 mmol)를 첨가하고, 수득한 혼합물을 2 시간 동안 교반하였다. 그 후, 상기 반응 혼합물을 물에 붓고, EtOAc 로 2 번 추출하였다. 통합한 유기 추출 물을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과 및 감압 하에서 증발시켰다. 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (헥산/ EtOAc, 9/1)로 정제하여, 415 mg 의 1-메틸-3-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸을 수득하였다.

제조 3: 7- 메톡시 -3-(2- 메틸술파닐 -피리미딘-4-일)- 벤조[ d ]이속사졸의 합성

7-메톡시-3-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-벤조[d]이속사졸의 합성을 반응식 3 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 3

에탄올 중의 (2-플루오로-3-메톡시-페닐)-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-메타논 (1 g, 3.59 mmol) 및 히드록실아민 (물 중의 50%, 1.5 mL)의 혼합물을 밤새 가열하여 환류시켰다. 상기 수득한 혼합물을 RT 까지 냉각시키고, EtOAc 로 희석한 후, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 THF 중에 용해시키고, DBU (0.84 mL, 5.6 mmol)를 첨가하고, 수득한 혼합물을 마이크로파 반응기 내에서, 150℃ 까지 30 분 동안 가열하였다. 그 후, 상기 반응 혼합물을 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (헥산/EtOAc, 95/5)로 정제하여, 458 mg 의 7-메톡시-3-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-벤조[d]이속사졸을 수득하였다.

동일한 방식으로, 적합한 출발 물질을 사용하여, 하기 화합물들을 제조하였 다:

3-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-벤조[d]이속사졸; 및

5-플루오로-3-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-벤조[d]이속사졸.

제조 4: 3-브로모-1-(2- 메틸술파닐 -피리미딘-4-일)-1 H - 인다졸의 합성

3-브로모-1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸의 합성을 반응식 4 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 4

DMF (100 mL) 중의 4-브로모-1H-인다졸 (8.831 g, 44.82 mmol) 용액에, NaH (광유 중의 60% 현탁액, 74.7 mmol, 2.988 g) 및 이어서 4-클로로-2-메틸-술파닐-피리미딘 (4.34 mL, 37.35 mmol)을 첨가하였다. 상기 수득한 혼합물을 RT 에서 2 시간 동안 교반하고; 고체 침전물을 여과에 의해 수집하고, 세정 및 감압 하에서 건조시켜, 10.7 g (89% 수율)의 3-브로모-1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸을 수득하였다.

유사한 방식으로, 적합한 출발 물질을 사용하여, 하기 화합물들을 제조하였다:

1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸;

6-메틸-1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸;

5-메틸-1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸;

3-메틸-1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인돌;

6-플루오로-1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인돌;

4-벤질옥시-1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인돌;

5-벤질옥시-1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인돌;

1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인돌;

1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸;

1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-6-니트로-1H-인다졸;

1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘 (백색 결정성 고체), MS = 243 [M+H]⁺, MP = 120.1-123.0℃; 및

1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-피롤로[3,2-c]피리딘 (황갈색(tan) 고체), MS = 243 [M+H]⁺, MP = 167.7-169.2℃.

제조 5: 2- 부틸술파닐 -4- 클로로 -피리미딘의 합성

2-부틸술파닐-4-클로로-피리미딘의 합성을 반응식 5 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 5

단계 A: 2- 부틸술파닐 -3 H -피리미딘-4-온의 합성

2-티옥소-2,3-디히드로-1H-피리미딘-4-온 (12.8 g)을 물 (70 mL) 중의 NaOH (8.0 g) 용액에 첨가하였다. 상기 고체가 완전히 용해된 후, 부틸 요오다이드 (12.4 mL)를 상기 용액에 첨가하고, 수득한 혼합물을 RT 에서 밤새 교반하였다. 그 후, 두번째 분취량의 부틸 요오다이드 (1.2 mL)를 첨가하고, 상기 반응 혼합물을 24 시간 동안 교반하였다. 세번째 분취량의 부틸 요오다이드 (1.2 mL)를 첨가하고, 수득한 혼합물을 6 일 동안 교반하였다. 빙초산 (5.5 mL)을 첨가하고, 상기 반응 혼합물을 30 분 동안 교반한 후, 이를 4℃ 에서 밤새 보관하였다. 형성된 침전물을 여과에 의해 수집하고, 감압 하에서 건조시켜, 12.3 g 의 2-부틸술파닐-3H-피리미딘-4-온을 수득하였다.

단계 B: 2- 부틸술파닐 -4- 클로로 -피리미딘의 합성

2-부틸술파닐-3H-피리미딘-4-온 (3.0 g) 및 포스포러스 옥시클로라이드 (15 mL)의 혼합물을 환류에서 3 시간 동안 가열하고; 그 후, 이를 RT 까지 냉각시키고, 감압 하에서 증발시켰다. 잔류물을 얼음-물 혼합물에 붓고, 수득한 혼합물을 DCM 으로 추출하였다. 통합한 유기 추출물을 희석된 NaHCO₃ 수용액으로 세정하고, Na₂SO₄ 상에서 건조, 여과 및 감압 하에서 증발시켜, 1.2 g 의 2-부틸술파닐-4-클로로-피리미딘을 수득하였다.

제조 6: 1-(2- 메틸술파닐 -피리미딘-4-일)-4-니트로-1 H - 인돌의 합성

1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-4-니트로-1H-인돌의 합성을 반응식 6 에 나 타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 6

나트륨(비스트리메틸실릴)아미드 (THF 중의 1 M, 26.42 mL) 용액을 아세토니트릴/THF (2/1, 75 mL)의 혼합물 중의 냉각된 (아세톤/드라이아이스 배쓰) 4-니트로인돌 (4.2 g, 25.9 mmol) 용액에 천천히 첨가하고, 수득한 혼합물을 1 시간 동안 교반하였다. 그 후, 4-클로로-4-메틸티오피리미딘 (4.202 g, 26.2 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 RT 까지 가온시키고, 21 시간 동안 교반하였다. 상기 수득한 혼합물을 감압 하에서 증발시키고, 고체 잔류물을 헥산/EtOAc/Et₂O (5/1/1)의 혼합물로 분쇄하였다. 상기 고체를 여과에 의해 수집하고, 세정 및 감압 하에서 건조시켜, 2.56 g 의 1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-4-니트로-1H-인돌을 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

동일한 방식으로, 적합한 출발 물질을 사용하여, 하기 화합물들을 제조하였다:

1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인돌-4-카르복실산 메틸 에스테르;

4-메톡시-1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인돌;

6-메틸-1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인돌;

4-메틸-1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인돌;

4-플루오로-1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인돌;

5-플루오로-1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인돌;

1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인돌-3-카르복실산 메틸 에스테르;

1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인돌-5-카르복실산 메틸 에스테르; 및

5-메톡시-1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인돌.

동일한 방식으로, 적당한 출발 물질 및 염기로서 LiHMDS 를 사용하여, 하기 화합물들을 제조하였다:

1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인돌-4-카르보니트릴;

1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인돌-6-카르복실산 메틸 에스테르; 및

5-메틸-1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인돌.

제조 7: 4-아미노- 시클로헥산카르복실산 디메틸아미드 히드로클로라이드 염의 합성

4-아미노-시클로헥산카르복실산 디메틸아미드 히드로클로라이드 염의 합성을 반응식 7 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 7

단계 A: (4- 디메틸카르바모일 - 시클로헥실 )- 카르밤산 tert -부틸 에스테르의 합성

NMP (20 mL) 중의 4-tert-부톡시카르보닐아미노-시클로헥산카르복실산 (2.43 g, 10 mmol), EDCI (6.52 g, 34 mmol) 및 HOBt (4.59 g, 34 mmol)의 혼합물을 RT 에서 3 시간 동안 교반하였다. 디메틸아민 (THF 중의 2.0 M, 15 mL, 30 mmol) 용액을 첨가하고, 수득한 혼합물을 RT 에서 64 시간 동안 교반하였다. 그 후, 물 및 EtOAc 를 첨가하고, 유기층을 분리하고, K₂CO₃ 포화 수용액, 수성 HCl (1 M), K₂CO₃ 포화 수용액, 및 염수로 2 번 세정하였다. 유기층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과 및 감압 하에서 증발시켜, (4-디메틸카르바모일-시클로헥실)-카르밤산 tert-부틸 에스테르 (1.6 g, 59% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 B: 4-아미노- 시클로헥산카르복실산 디메틸아미드 히드로클로라이드 염의 합성

HCl (농축된 것, 7 mL)을 1,4-디옥산 (20 mL) 중의 (4-디메틸카르바모일-시클로헥실)-카르밤산 tert-부틸 에스테르 (1.5 g) 용액에 첨가하고, 수득한 혼합물을 RT 에서 5 시간 동안 교반하였다. 톨루엔을 첨가하고, 반응 혼합물을 감압 하에서 증발시켰다. 유성 잔류물을 EtOAc 로 분쇄하여, 4-아미노-시클로헥산카르복실산 디메틸아미드 히드로클로라이드 염 (0.9 g)을 수득하였다.

트랜스-(4-아미노-시클로헥실)-모르폴린-4-일-메타논을 적합한 출발 물질을 사용하여, 유사한 방식으로 제조하였다.

제조 8: 트랜스- 4-아미노- 시클로헥산카르복실산 에틸 에스테르의 합성

트랜스-4-아미노-시클로헥산카르복실산 에틸 에스테르의 합성을 반응식 8 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 8

트랜스-4-아미노-시클로헥산카르복실산 (15 g, 83.8 mmol), 황산 (9 mL) 및 EtOH (400 mL)의 혼합물을 RT 에서 밤새 교반하였다. NaHCO₃ 포화 수용액 및 NaHCO₃ (고체)를 상기 혼합물의 pH 가 7 이 될 때까지 첨가하였다. 그 후, 용매를 감압 하에서 제거하였다. 수성 K₂CO₃ (50%)를 첨가하고, 수득한 혼합물을 EtOAc 로 추출하고, 유기 추출물을 Na₂SO₄ 상에서 건조, 여과 및 감압 하에서 증발시켜, 트랜스-4-아미노-시클로헥산카르복실산 에틸 에스테르 (12.81 g)를 밝은 황색 오일로서 수득하였다.

제조 9:　2-[1-(2- 메틸술파닐 -피리미딘-4-일)-1 H -인돌-4-일]-프로판-2-올의 합성

2-[1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인돌-4-일]-프로판-2-올의 합성을 반응식 9 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 9

THF (6 mL) 중의 1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인돌-4-카르복실산 메틸 에스테르 (500 mg)의 현탁액을 메틸마그네슘 브로마이드 (Et₂O 중의 3.0 M, 3.51 mL) 및 THF (2 mL)의 용액에 첨가하고, 0℃ 까지 냉각시키고, 수득한 혼합물을 N₂ 하에서, 5 시간 동안 교반하였다. 그 후, 두번째 분취량의 메틸마그네슘 브로마이드 (Et₂O 중의 3.0 M, 1.80 mL)를 첨가하고, 반응 혼합물울 RT 에서, N₂ 대기 하에서, 30 분 동안 교반하였다. 그 후, 상기 수득한 혼합물을 0℃ 까지 냉각시키고, 냉각된 물/HCl (1 M, 1:1, 75 mL)의 혼합물에 붓고, EtOAc 로 추출하였다. 통합한 유기 추출물울 물로 1 번 및 NaHCO₃ 포화 수용액으로 2 번 세정하고, Na₂SO₄ 상에서 건조, 여과 및 감압 하에서 증발시켜, 2-[1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인돌-4-일]-프로판-2-올 (0.48 g)을 수득하였다.

제조 10: [6-(2,4- 디플루오로 - 페녹시 )-1 H - 피라졸로[3,4-d]피리미딘 -3-일]-이소프로필- 아민의 합성

[6-(2,4-디플루오로-페녹시)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일]-이소프로필- 아민의 합성을 반응식 10 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 10

단계 A: (R)-2- boc -아미노-프로판-1-올의 합성

(R)-2-아미노-프로판-1-올 (30.0 g, 0.3994 mol)을 MeOH (800 mL) 중에 용해시키고, 용액을 얼음 배쓰에서 30 분 동안 냉각시켰다. MeOH (250 mL) 중의 디-tert-부틸 디카르보네이트 (87.17 g, 0.3994 mol) 용액을 상기 교반 중인 반응 혼합물에 분할로 첨가하였다. 얼음 배쓰를 제거하고, 교반을 3 시간 동안 지속하였다. 상기 반응 혼합물을 감압 하에서 증발시켜 건조시켜, (R)-2-boc-아미노-프로판-1-올을 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 B: (R)-2- Boc -아미노-1- 메탄술포닐 -프로판-1-올의 합성

DCM (400 mL) 및 트리에틸아민 (83.9 mL, 0.60 mol)을 (R)-2-boc-아미노-프로판-1-올을 함유한 플라스크에 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 얼음 배쓰에서 30 분 동안 냉각시키고, 메탄술포닐 클로라이드 (37.0 mL, 0.478 mol)를 5 분에 걸쳐 적가하였다. 상기 수득한 혼합물을 1 시간 동안 교반하고, 얼음 배쓰를 제거하고, 상기 혼합물을 RT 에서 18 시간 동안 교반하였다. 상기 수득한 혼합물을 수성 NaOH (10%)로 세정하고, 유기층을 MgSO₄ 상에서 건조, 여과, 및 감압 하에서 농축시켜, (R)-2-boc-아미노-1-메탄술포닐-프로판-1-올 (91.93 g)을 수득하였 다.

단계 C: (R)-2- Boc -아미노-1- 메탄술파닐 -프로판의 합성

(R)-2-boc-아미노-1-메탄술포닐-프로판-1-올 (91.93 g, 363 mmol), THF (350 mL) 및 나트륨 티오메톡시드 (30.0 g, 406 mmol)의 혼합물을 RT 에서 18 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 Et₂O 와 물 사이에 분할시켰다. 유기층을 염수로 세정하고, MgSO₄ 상에서 건조, 여과, 및 감압 하에서 농축시켜, (R)-2-boc-아미노-1-메탄술파닐-프로판 (70.8 g)을 수득하였다.

단계 D: (R)-1- 메틸 -2- 메틸술파닐 - 에틸아민의 합성

메탄올 (400 mL)을 얼음 배쓰에서 30 분 동안 냉각시키고, 아세틸 클로라이드 (100 mL)를 45 분에 걸쳐 적가하였다. 상기 수득한 용액을 얼음 배쓰 온도에서 교반 중인 (R)-2-Boc-아미노-1-메탄술파닐-프로판 (70.47 g, 343 mmol)에 첨가하였다. 첨가의 종결 후, 상기 반응 혼합물을 15 분 동안 교반하고, 얼음 배쓰를 제거하고, 교반을 2 시간 동안 지속하였다. 상기 반응 혼합물을 감압 하에서 농축시켜 고체를 얻은 후, THF (700 mL) 중에 녹였다. 상기 수득한 혼합물을 모든 고체가 용해될 때까지 가열하여 환류시킨 후, RT 까지 냉각시키고, 이어서 0℃ 까지 30 분 동안 냉각시켰다. 수득한 침천물을 여과에 의해 수집하고, 냉각된 THF 로 세정하고, 감압 하에서 건조시켜, (R)-1-메틸-2-메틸술파닐-에틸아민 (23.57 g)을 수득하였다. MS = 106 [M+H]⁺.

(S)-1-메틸-2-메틸술파닐-에틸아민을 적합한 출발 물질을 사용하여, 상기 기 술된 절차에 따라 제조하였다.

제조 11: (R)-2- 메탄술포닐 -1- 메틸 - 에틸아민의 합성

(R)-2-메탄술포닐-1-메틸-에틸아민의 합성을 반응식 11 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 11

단계 A: 메탄술폰산 (R)-2- 벤질옥시카르보닐아미노 -프로필 에스테르의 합성

DCM (25 mL) 중의 벤질 클로로포르메이트 (10.0 mL) 용액을 DCM (75 mL) 중의 교반되고 냉각된 R-(-)-2-아미노-1-프로판올 (5.0 g) 및 트리에틸아민 (6.8 g) 용액에 -5℃ 미만의 온도를 유지하는 속도로 첨가하였다. 냉각 및 교반을 1 시간 동안 지속한 후, DCM (25 mL) 중의 메탄술포닐 클로라이드 (7.7 g) 용액을 -5℃ 미만의 온도를 유지하는 속도로 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 5℃ 까지 가온시킨 후, 물 (150 mL)로 2 번 세정하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 여과하고, 용매를 진공 증류로 제거하여, 19.2 g 의 백색 고체를 수득하였다. 상기 물질의 일부분 (15 g)을 DCM (100 mL) 중에 용해시키고, 수득한 용액을 증류하였다. 메틸-t-부틸 에테르를 첨가하여 부피를 유지시켰다. 결정화가 시작되면, 상기 혼합물을 약 75 mL 부피까지 증류하고, 가열을 중지하였다. 상기 수득한 혼합물에 헥산을 적가하여 약 150 mL 부피로 희석하였다. 냉각 후, 백 색 결정성 고체를 수집하고, 헥산/메틸-t-부틸 에테르 (1:1)로 세정하고, 건조시켜, 메탄술폰산 (R)-2-벤질옥시카르보닐아미노-프로필 에스테르 (11.1 g)를 수득하였다.

단계 B: ((R)-2- 메탄술포닐 -1- 메틸 -에틸)- 카르밤산 벤질 에스테르의 합성

아세토니트릴 (72 mL) 중의 메탄술폰산 (R)-2-벤질옥시카르보닐아미노-프로필 에스테르 (11.1 g)의 교반 중인 혼합물에, 수성 나트륨 메틸메르캅티드 (15%, 35 mL)를 첨가하였다. 상기 수득한 혼합물을 약 55℃ 까지 4-5 시간 동안 가열하고; 그 후, 이를 냉각시키고, 아래 수성층을 분리하였다. 유기층을 물 (10 mL)과 함께 진탕하고, 아래층을 다시 분리하였다. 포름산 (15 mL)을 유기층에 첨가하고, 수득한 혼합물을 교반하고, 수성 H₂O₂ (30%, 12 g)를 적가하였다. 초기 발열 후, 상기 혼합물을 냉각시킨 후, 약 65℃ 까지 가열하였다. 3 시간 후, 두번째 분취량의 H₂O₂ (30%, 2 mL) 및 포름산 (6 mL)을 상기 혼합물에 첨가하였다. 4 시간 후, 상기 두 가지 시약을 유사하게 첨가하였다. 6 시간 후, 상기 반응 혼합물을 냉각시키고, 물 (약 200 mL)로 천천히 희석하였다. 상기 첨가 중에 백색 고체가 결정화되었다. 상기 혼합물을 얼음 배쓰에서 냉각시키고, 고체를 여과에 의해 수집, 물로 세정, 및 감압 하에서 건조시켜, ((R)-2-메탄술포닐-1-메틸-에틸)-카르밤산 벤질 에스테르 (9.2 g)를 수득하였다.

단계 C: (R)-2- 메탄술포닐 -1- 메틸 - 에틸아민의 합성

((R)-2-메탄술포닐-1-메틸-에틸)-카르밤산 벤질 에스테르 (2.7 g), 탄소 상 의 팔라듐 히드록시드 (20%, 0.3 g), 및 이소프로판올 (30 mL)의 혼합물을 질소 대기 하에서, 약 65℃ 까지 가열하였다. 물 (4 mL) 중의 칼륨 포르메이트 (2.7 g) 용액을 약 1 시간에 걸쳐 상기 혼합물에 첨가하였다. 6 시간 후, 상기 혼합물을 냉각시키고, 여과하였다. 여과액을 진공 증류하여 점성 오일을 얻고, 이를 이소프로판올 (30 mL) 중에 용해시켰다. 상기 수득한 용액을 여과하고, 감압 하에서 증발시켜, (R)-2-메탄술포닐-1-메틸-에틸아민 (1.2 g)을 점성 오일로서 수득하였다.

제조 12: 3- 트리메틸실라닐옥시 -1-(2- 트리메틸실라닐옥시 -에틸)- 프로필아민의 합성

3-트리메틸실라닐옥시-1-(2-트리메틸실라닐옥시-에틸)-프로필아민의 합성을 반응식 12 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 12

단계 A: 디메틸-3- 아미노글루타코네이트의 합성

디메틸아세톤-1,3-디카르복실레이트 (24.55 Kg), 탄산수소암모늄 (22.9 Kg) 및 MeOH (81.8 Kg)의 혼합물을 RT 에서 밤새 교반하였다. 상기 고체를 여과에 의해 제거하고, 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 이소프로판올 (27.2 Kg)을 첨가하고, 반응액의 물을 공비 증류로 제거하였다. 남아있는 용매를 증류하여, 디메틸-3-아미노글루타코네이트 (24.705 Kg, 99% 수율)를 오일로서 수득하였다.

단계 B: 3-아미노- 펜탄디오익산 디메틸 에스테르의 합성

희석된 알콜성 황산 용액을 0-5℃ 에서, 이소프로판올 (51.7 Kg)에 황산 (20.69 Kg)을 첨가하여 제조하였다. 상기 수득한 용액을 THF (69.3 Kg) 중의tert-부틸아민 보란 (9.19 Kg) 용액에 -5℃ 미만의 온도를 유지하면서, 천천히 첨가하였다. 디메틸-3-아미노글루타코네이트 (18.28 Kg)를 상기 수득한 혼합물에 0℃ 미만의 온도를 유지하면서, 천천히 첨가하였다. 상기 수득한 반응 혼합물을 0℃ 내지 15℃ 에서 밤새 교반한 후, 온도를 10℃ 미만으로 및 농축된 수성 NaOH 를 첨가하여 pH 를 5 내지 7 사이로 유지하면서, 물 (166 Kg)을 천천히 첨가하여 켄칭하였다. 그 후, 켄칭 과정의 마지막에서 상기 혼합물의 pH 를 농축된 수성 NaOH 를 첨가하여 약 9-10 로 조정하였다. 상을 분리하고, 수성상을 DCM 으로 추출하였다. 통합한 유기 추출물을 염수 (20.6 Kg)로 세정하고, 면 카트리지를 통해 여과, 및 감압 하에서 농축시켜, 3-아미노-펜탄디오익산 디메틸 에스테르 (17.87 Kg, 97% 수율)를 수득하였다.

단계 C: 3-아미노-펜탄-1,5- 디올의 합성

THF (101.5 Kg) 중의 3-아미노-펜탄디오익산 디메틸 에스테르 (17.67 Kg) 용액을 10-30℃ 사이의 포트 온도에서, LAH (THF 중의 1.0 M, 90.2 Kg) 용액에 첨가하고, 수득한 혼합물을 25℃ 에서 14-20 시간 동안 교반하였다. 상기 반응액을 물 및 THF (1:1)를 천천히 첨가하여 켄칭하였다. 고체를 여과하고, iPrOH/THF/DEA/프로필아민으로 세정하였다. 여과액을 감압 하에서 증발시켜, 3-아미노펜탄-1,5-디올 (9.55 Kg, 72% 수율)을 진한 오일로서 수득하였다.

단계 D: 3- 트리메틸실라닐옥시 -1-(2- 트리메틸실라닐옥시 -에틸)- 프로필아민의 합성

i-PrOH (16.91 Kg) 중의 3-아미노펜탄-1,5-디올 (18.29 Kg)의 슬러리를 반응기에 첨가하고, 용매를 감압 하에서 증발시켰다. 그 후, THF (55.3 Kg) 중의 헥사메틸디실라잔 (31.985 Kg) 및 THF (172.03 Kg) 중의 트리메틸실릴클로라이드 (35.57 Kg)를 첨가하고, 수득한 혼합물을 밤새 환류시켰다. 상기 반응 혼합물을 냉각시키고, 용매를 감압 하에서 증발시키고, 잔류물을 증류 (97-99℃)에 의해 정제하여, 3-트리메틸실라닐옥시-1-(2-트리-메틸실라닐옥시에틸)-프로필아민 (24.36 Kg)을 수득하였다.

제조 13: 3-(2- 메틸술파닐 -피리미딘-4-일)-[1,2,4] 트리아졸로 [4,3- a ]-피리딘의 합성

3-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-a]피리딘의 합성을 반응식 13 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 13

EtOH (20 mL) 중의 2-메틸술파닐-피리미딘-4-카르발데히드 (1.00 g) (US 6218537) 및 2-히드라지노피리딘 (0.71 g)의 혼합물을 24 시간 동안 가열하여 환류 시킨 후, RT 까지 냉각시키고, 수득한 고체를 여과에 의해 수집하여, N-[1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-메트-(E)-일리덴]-N'-피리딘-2-일-히드라진 (1.26 g)을 수득하였다. 상기 물질 및 DCM (20 mL)의 혼합물을 서서히 가열하고, 두번째 분취량의 DCM (10 mL) 및 클로로포름 (5 mL)를 첨가하여 용해화를 촉진시켰다. 요오도벤젠 디아세테이트 (1.65 g)를 첨가하고, 수득한 혼합물을 RT 에서, N₂ 하에서, 17 시간 동안 교반하였다. 그 후, 상기 반응 혼합물을 감압 하에서 증발시키고, 미정제 잔류물을 고온의 Et₂O 로 분쇄하였다. 상기 혼합물이 RT 까지 냉각되면, 고체를 여과에 의해 수집하여, 3-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-[1,2,4]-트리아졸로-[4,3-a]피리딘 (1.12 g)을 수득하였다.

제조 14: 1-(2- 메틸술파닐 -피리미딘-4-일)-2,3- 디히드로 -1 H - 인돌의 합성

1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-2,3-디히드로-1H-인돌의 합성을 반응식 14 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 14

DMF (10 mL) 중의 4-클로로-2-메틸티오피리미딘 (4.02 g, 25 mmol), 2,3-디히드로-1H-인돌 (4.0 mL, 36 mmol) 및 N,N-디이소프로필 에틸 아민 (4 mL, 22 mmol)의 혼합물을 N₂ 하에서, 100℃ 까지 16 시간 동안 가열하였다. 고체화된 반응 혼합물을 냉각시키고, EtOAc 로 희석하고, 여과하였다. 수집한 고체를 DCM 및 MeOH 중에 용해시키고, DCM/EtOAc 로부터 재결정하여, 1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-2,3-디히드로-1H-인돌 (2.32 g, 38% 수율)을 밝은 황색 고체로서 수득하였다. MS = 244[M+H]⁺.

실시예 1: 트랜스 -4-[4-(1- 메틸 -1 H - 인다졸 -3-일)-피리미딘-2- 일아미노 ]- 시클로헥산올의 합성

트랜스-4-[4-(1-메틸-1H-인다졸-3-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올의 합성을 반응식 15 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 15

N-클로로숙신이미드 (239 mg, 1.77 mmol)를 NMP 중의 1-메틸-3-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸 (413 mg, 1.6 mmol) 용액에 첨가하고, 수득한 혼합물을 85℃ 에서 15 분 동안 교반하였다. 그 후, 트랜스-아미노시클로헥산올을 첨가하고, 상기 반응 혼합물을 1 시간 동안 교반한 후, 물에 붓고, EtOAc 로 2 번 추출하였다. 통합한 유기 추출물을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과, 및 감압 하 에서 증발시켰다. 미정제 잔류물을 제조용 TLC 로 정제하여, 트랜스-4-[4-(1-메틸-1H-인다졸-3-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올을 수득하였다. MS = 324 [M+H]⁺; MP = 180-183.3℃.

트랜스-4-[4-(4-브로모-인다졸-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (백색 고체)을 적합한 출발 물질을 사용하여, 동일한 방식으로 제조하였다. MS = 388 [M+H]⁺; MP = 200.5-201.9℃.

실시예 2: 트랜스 -4-[4-(7- 메톡시 -1 H - 인다졸 -3-일)-피리미딘-2- 일아미노 ]- 시클로헥산올의 합성

트랜스-4-[4-(7-메톡시-1H-인다졸-3-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올의 합성을 반응식 16 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 16

3-클로로퍼옥시벤조산 (77%, 407 mg, 1.82 mmol)을 0℃ 에서, DCM 중의 7-메톡시-3-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸 (225 mg, 0.8 mmol) 용액에 첨가하고, 수득한 혼합물을 3 시간 동안 교반하였다. 그 후, 상기 반응 혼합물을 DCM 으로 희석하고, 수성 NaHCO₃ (5%)로 세정, Na₂SO₄ 상에서 건조, 여과 및 감압 하에서 증발시켜, 3-(2-메탄술포닐-피리미딘-4-일)-7-메톡시-1H-인다졸을 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. NMP 중의 상기 물질의 용액에, 트랜스-아미노시클로헥산올 (190 mg)을 첨가하고, 수득한 혼합물을 봉합된 튜브 내에서, 120℃ 까지 1.5 시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 RT 까지 냉각시키고, 물을 첨가하고, 수득한 현탁액을 30 분 동안 교반하였다. 고체 침전물을 여과에 의해 수집하고, 물로 세정, 및 감압 하에서 밤새 건조시켜, 트랜스-4-[4-(7-메톡시-1H-인다졸-3-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올을 수득하였다. MS = 341 [M+H]⁺; MP = 243.3-244.9℃.

유사한 방식으로, 적합한 출발 물질을 사용하여, 하기 화합물들을 제조하였다:

트랜스-4-[4-(1H-인다졸-3-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올, MS = 310 [M+H]⁺;

트랜스-4-(4-벤조[d]이속사졸-3-일-피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산올, MS = 311 [M+H]⁺;

트랜스-1-[2-(4-히드록시-시클로헥실아미노)-피리미딘-4-일]-1H-인돌-4-카르복실산 메틸 에스테르 (황색 고체), MS = 367 [M+H]⁺; MP = 206.7-208.3℃;

시클로헥실-(4-인돌-1-일-피리미딘-2-일)-아민 (회백색 결정성 고체), MS = 293 [M+H]⁺; MP = 192.5-193.0℃;

트랜스-4-(4-인돌-1-일-피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산올 (회백색 고체), MS = 309 [M+H]⁺; MP = 202.4-204.4℃;

트랜스-N-(4-인돌-1-일-피리미딘-2-일)-시클로헥산-1,4-디아민 (회백색 고체), MS = 308 [M+H]⁺; MP = 270.1-273.3℃;

트랜스-4-(4-인다졸-2-일-피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산올 (백색 바늘형 결정), MS = 310 [M+H]⁺; MP = 214.7-216.0℃;

트랜스-4-(4-인다졸-1-일-피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산올 (백색 고체), MS = 310 [M+H]⁺; MP = 232.6-233.7℃;

트랜스-4-[4-(6-니트로-인다졸-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (황색 분말), MS = 355 [M+H]⁺; MP = 221.8-223.0℃;

트랜스-4-(4-[1,2,4]트리아졸로[4,3-a]피리딘-3-일-피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산올 (회백색 고체), MS = 311 [M+H]⁺; MP = 253.4-255.7℃; 및

트랜스-4-(4-피라졸로[1,5-b]피리다진-3-일-피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산올 (백색 바늘형 결정), (출발 물질, 3-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-피라졸로[1,5-b]피리다진을 [J. Med . Chem . 2004, 47, 4716-30]에 기술된 절차에 따라 제조함), MS = 311 [M+H]⁺; MP = 214.9-215.6℃;

트랜스-4-(4-피롤로[3,2-b]피리딘-1-일-피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산올 (백색 고체), MS = 310 [M+H]⁺, MP = 198.9-200.3℃;

트랜스-4-(4-피롤로[3,2-c]피리딘-1-일-피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산올 (백색 결정성 고체), MS = 310 [M+H]⁺, MP = 229.9-230.2℃; 및

트랜스-4-[4-(2,3-디히드로-인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (백색 고체), MS = 311 [M+H]⁺, MP = 230.5-231.2℃.

실시예 3: 트랜스 -4-[4-(7- 트리플루오로메틸 -1 H - 인다졸 -3-일)-피리미딘-2- 일아미노 ]- 시클로헥산올의 합성

트랜스-4-[4-(7-트리플루오로메틸-1H-인다졸-3-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올의 합성을 반응식 17 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 17

3-클로로퍼옥시벤조산 (77%, 318 mg, 0.64 mmol)을 0℃ 에서, DCM 중의 3-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-7-트리플루오로메틸-1H-인다졸 (200 mg, 0.64 mmol) 용액에 첨가하고, 수득한 혼합물을 2 시간 동안 교반하였다. 그 후, 상기 반응 혼합물을 DCM 으로 희석하고, 수성 NaHCO₃ (5%)로 세정, Na₂SO₄ 상에서 건조, 여과, 및 감압 하에서 증발시켜, 3-(2-메탄술포닐-피리미딘-4-일)-7-트리플루오로메틸-1H-인다졸을 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. NMP 중의 상기 물질의 용액에, 트랜스-아미노시클로헥산올 (148 mg) 및 이어서 DIPEA (0.11 mL, 0.64 mmol)를 첨가하고, 수득한 혼합물을 120℃ 에서 1 시간 동안 교반한 후, RT 까지 냉각시키고, 물을 첨가하였다. 상기 수득한 현탁액을 30 분 동안 교반하고, 고체 침전물을 여과에 의해 수집하고, 물로 세정, 및 감압 하에서 밤새 건조시켰다. 상기 고체 물질을 고온의 EtOAc 로 세정하고, 여과 및 감압 하에서 건조시켜, 트랜 스-4-[4-(7-메톡시-1H-인다졸-3-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (75 mg)을 수득하였다. MS = 378 [M+H]⁺; MP = 265.5-270℃.

동일한 방식으로, 적합한 출발 물질을 사용하여, 하기 화합물들을 제조하였다:

트랜스-4-[4-(5-플루오로-벤조[d]이속사졸-3-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올, MS = 329 [M+H]⁺; MP = 172-173.9℃;

(1,4-디옥사-스피로[4.5]데크-8-일)-(4-인다졸-1-일-피리미딘-2-일)-아민 (백색 고체), MS = 352 [M+H]⁺; MP = 207.5-208.8℃;

트랜스-4-[4-(6-메톡시-인다졸-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (분홍색 분말); MS = 340 [M+H]⁺; MP = 166.8-167.3℃;

트랜스-1-[2-(4-히드록시-시클로헥실아미노)-피리미딘-4-일]-1H-인다졸-6-카르보니트릴 (백색 분말); MS = 335 [M+H]⁺; MP = 212.0-212.6℃; 및

트랜스-1-[2-(4-히드록시-시클로헥실아미노)-피리미딘-4-일]-1H-인다졸-6-카르복실산 메틸 에스테르 (밝은 황색 분말); MS = 368 [M+H]⁺; MP = 214.9-216.3℃.

실시예 4: 트랜스 -(4- 메틸 - 시클로헥실 )-[4-(4-니트로- 인다졸 -1-일)-피리미딘-2-일]- 아민의 합성

트랜스-(4-메틸-시클로헥실)-[4-(4-니트로-인다졸-1-일)-피리미딘-2-일]-아민의 합성을 반응식 18 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 18

단계 A: 1-(2- 부틸술파닐 -피리미딘-4-일)-4-니트로-1 H - 인다졸의 합성

2-부틸술파닐-4-클로로-피리미딘 (202 mg)으로 충전된 플라스크에, 4-니트로-1H-인다졸 (228 mg) 및 이어서 NaH (광유 중의 60% 분산액, 84 mg) 및 NMP (4 mL)를 첨가하였다. 상기 수득한 혼합물을 RT 에서 밤새 교반하고, 물을 첨가하고, 상기 혼합물을 EtOAc 로 추출하였다. 통합한 유기 추출물을 물로 세정하고, Na₂SO₄ 상에서 건조, 여과 및 감압 하에서 증발시켰다. 미정제 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (헥산/EtOAc, 80:20)로 정제하여, 1-(2-부틸술파닐-피리미딘-4-일)-4-니트로-1H-인다졸 (156 mg)을 수득하였다.

유사한 방식으로, 적합한 출발 물질을 사용하여, 하기 화합물들을 제조하였다:

1-(2-부틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸-6-카르보니트릴 (출발 물질, 1H-인다졸-6-카르보니트릴을 [J. Med . Chem. 2000, 43(23):4398-415]에 기술된 방법에 따라 제조함);

1-(2-부틸술파닐-피리미딘-4-일)-6-메톡시-1H-인다졸 (출발 물질, 6-메톡시-1H-인다졸을 [Annalen der Chemie 1980, 908-27]에 기술된 방법에 따라 제조함); 및

1-(2-부틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸-6-카르복실산 메틸 에스테르 (출발 물질, 1H-인다졸-6-카르복실산 메틸 에스테르를 [J. Med . Chem. 2000, 43, 47]에 기술된 방법에 따라 제조함).

단계 B: 1-[2-(부탄-1- 술포닐 )-피리미딘-4-일]-4-니트로-1 H - 인다졸의 합성

0℃ 까지 냉각된 DCM 중의 1-(2-부틸술파닐-피리미딘-4-일)-4-니트로-1H-인다졸 (660 mg) 용액에, 메틸트리옥소레늄 (30 mg) 및 이어서 수성 H₂O₂ (30%, 1.3 mL)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 RT 에서 2 시간 동안 교반한 후, 물 및 DCM 의 혼합물에 부었다. 유기층을 분리하고, 수성층을 DCM 으로 추출하였다. 통합한 유기 추출물을 수성 Na₂SO₃ 로 2 번, 염수로 1 번 세정하고, Na₂SO₄ 상에서 건조, 여과 및 감압 하에서 증발시켜, 1-[2-(부탄-1-술포닐)-피리미딘-4-일]-4-니트로-1H-인다졸 (680 mg)을 수득하였다.

단계 C: 트랜스 -(4- 메틸 - 시클로헥실 )-[4-(4- 니트로인다졸 -1-일)-피리미딘-2-일]- 아민의 합성

1-[2-(부탄-1-술포닐)-피리미딘-4-일]-4-니트로-1H-인다졸 (480 mg) 및 트랜스-아미노시클로헥산올 (500 mg)의 혼합물을 순수하게 120℃ 까지 가열하였다. 침전물의 형성 후, NMP (0.8 mL)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 2 시간 동안 교반한 후, RT 까지 냉각시키고, 물 및 DCM 의 혼합물에 부었다. 고체 침전물을 여과에 의해 수집하고, 감압 하에서 건조시켜, 트랜스-(4-메틸-시클로헥실)-[4-(4-니트로-인다졸-1-일)-피리미딘-2-일]-아민 (160 mg)을 황색 분말로서 수득하였다. MS = 355 [M+H]⁺; MP = 253.9-254.8℃.

실시예 5: 트랜스- 4-(4- 인다졸 -1- 일피리미딘 -2- 일아미노 )-시클로헥산- 카르복실산 (3-히드록시-부틸)-아미드의 합성

트랜스-4-(4-인다졸-1-일-피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 (3-히드록시-부틸)-아미드의 합성을 반응식 19 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 19

THF (8 mL) 중의 트랜스-4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 (100 mg, 0.30 mmol), 2-아미노-2-부탄올 (39.2 mg, 0.44 mmol), BOP (194.6 mg, 0.44 mmol), DIPEA (77.4 mg, 0.60 mmol)의 혼합물을 RT 에서 밤새 교반하였다. 물 (20 mL)을 상기 수득한 현탁액에 첨가하여: 우선 고체를 용해시킨 후, 더 많은 물 (100 mL)의 첨가로 침전시켰다. 침전물을 여과에 의해 수집하고, 물 및 Et₂O 로 세정하고, 감압 하에서 건조시켜, 트랜스-4-(4-인다졸-1-일-피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 (3-히드록시-부틸)아미드 (78 mg)를 백색 고체로서 수득하였다. MS = 409 [M+H]⁺.

동일한 방식으로, 적합한 출발 물질을 사용하여, 하기 화합물들을 제조하였다:

트랜스-4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 (2-메탄술포닐에틸)-아미드 (밝은 갈색 고체), MS = 443 [M+H]⁺; MP = 229.6-231.2℃;

트랜스-4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 ((R)-2-메탄-술포닐-1-메틸에틸)-아미드 (백색 분말), MS = 457 [M+H]⁺; MP = 289.0-291.0℃;

트랜스-4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 [3-히드록시-1-(2-히드록시에틸)프로필]-아미드 (백색 고체), MS = 439 [M+H]⁺; MP = 215.0-217.8℃;

트랜스-4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 (1-히드록시메틸-프로필)아미드 (백색 분말), MS = 409 [M+H]⁺; MP = 222.0-224.7℃;

트랜스-4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 (2,3-디히드록시-프로필)-아미드 (백색 분말), MS = 411 [M+H]⁺; MP = 243.3-245.1℃;

트랜스-4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 (3-히드록시-1-메틸-프로필)-아미드 (백색 고체), MS = 409 [M+H]⁺; MP = 231.9-234.4℃;

트랜스-(4-히드록시피페리딘-1-일)-[4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥실]-메타논 (밝은 갈색 고체), MS = 421 [M+H]⁺; MP = 125.5-128.8℃;

트랜스-1-[4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르보닐]-피롤리딘-3-온 (밝은 갈색 분말) (아민 출발 물질을 시판되는 3-옥소-피롤리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르의 일반적인 BOC 탈보호에 의해 제조함), MS = 405 [M+H]⁺; MP = 172.6-174.8℃;

트랜스-4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 이소프로필아미드 (백색 고체), MS = 379 [M+H]⁺; MP = 270.0-271.0℃;

트랜스-4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 ((S)-2-히드록시-1-메틸에틸)아미드 (백색 분말), MS = 395 [M+H]⁺; MP = 254.6-256.9℃;

트랜스-4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 (2-메톡시에틸)-아미드 (백색 분말), MS = 395 [M+H]⁺; MP = 216.9-219.1℃;

트랜스-4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 (2-히드록시-1-히드록시메틸에틸)-아미드 (백색 분말), MS = 411 [M+H]⁺; MP = 239.1-240.9℃;

트랜스-((R)-3-히드록시피롤리딘-1-일)-[4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥실]-메타논 (백색 분말), MS = 407 [M+H]⁺; MP = 203.3-204.0℃;

트랜스-((S)-3-히드록시피롤리딘-1-일)-[4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥실]-메타논 (백색 고체), MS = 407 [M+H]⁺; MP = 201.7-202.7℃;

트랜스-4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 (2-히드록시-1,1-디메틸에틸)-아미드 (백색 분말), MS = 409 [M+H]⁺; MP = 256.5-259.5℃;

트랜스-4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 (2-히드록시-2-메틸프로필)아미드 (백색 고체) (아민 출발 물질을 [J. Med . Chem . 1998, 41, 3347]에 따라 제조함), MS = 409 [M+H]⁺; MP = 224.2-225.9℃;

트랜스-4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 (2-히드록시에틸)-메틸-아미드 (백색 고체), MS = 395 [M+H]⁺; MP = 168.1-169.6℃;

트랜스-4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 ((R)-1-메틸-2-메틸술파닐에틸)-아미드 (백색 고체), MS = 425 [M+H]⁺; MP = 215.1-218.8℃;

트랜스-4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 ((S)-2-히드록시-1,2-디메틸프로필)아미드 (밝은 갈색 분말) (아민 출발 물질을 WO 2002064594 에 기술된 바와 같이 합성함), MS = 423 [M+H]⁺; MP = 214.2-215.2℃;

트랜스-4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 (2-히드록시프로필)-아미드 (회백색 분말), MS = 395 [M+H]⁺; MP = 234.0-236.6℃;

트랜스-4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 ((S)-1-메틸-2-메틸술파닐-에틸)-아미드 (백색 고체), MS = 425 [M+H]⁺; MP = 221.5-222.5℃;

트랜스-4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 에틸- (2-히드록시에틸)아미드 (백색 고체), MS = 409 [M+H]⁺; MP = 111.5-113.0℃;

트랜스-4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 시클로프로필메틸-아미드 (백색 고체), MS = 391 [M+H]⁺; MP = 248.5-252.5℃; 및

트랜스-4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 시클로펜틸아미드 (백색 분말), MS = 405 [M+H]⁺; MP = 272.2-274.4℃.

실시예 6: 트랜스- [4-(4- 인다졸 -1-일-피리미딘-2- 일아미노 )- 시클로헥실 ]-모르폴린-4-일- 메타논의 합성

트랜스-[4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)시클로헥실]-모르폴린-4-일-메타논의 합성을 반응식 20 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 20

봉합가능한 (5 mL) 튜브에 트랜스-(4-아미노-시클로헥실)-모르폴린-4-일-메타논 (89.3 mg, 0.36 mmol), DIPEA (0.19 mL, 1.10 mmol) 및 NMP (1 mL)를 충전하였다. 두번째 봉합가능한 (10 mL) 튜브에 1-(2-메탄술포닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸 (100 mg, 0.36 mmol) 및 NMP (1 mL)를 충전하였다. 상기 고체가 완전히 용해될 때까지, 두 개의 혼합물을 모두 120℃ 까지 가열하였다. 그 후, 1-(2-메탄술포닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸 용액을 캐뉼라를 통해 상기 아민 혼합물이 함유된 바이알로 옮기고, 수득한 혼합물을 120℃ 까지 3 시간 동안 가열하였다. 그 후, 상기 반응 혼합물을 RT 까지 냉각시키고, 2 일 동안 교반한 후, 수성 NH₄Cl (포화된 것)과 DCM 사이에 분할시켰다. 유기층을 분리하고, 수성층을 DCM 으로 추출하였다. 통합한 유기 추출물을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과 및 감압 하에서 증발시켜, 호박색 오일을 수득하였다. 상기 미정제 물질을 Et₂O 로부터 재결정하여, 상청액을 제거하고, 수득한 결정을 Et₂O 로 세정하였다. 상기 결정성 물질을 DCM 으로부터 재결정하여, 57 mg 의 연한 베이지색 결정성 물질을 수득하고, 이를 플래시 크로마토그래피 (EtOAc/헥산, 구배 50:50 에서 70:30)로 정제하여, 트랜스-[4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥실]-모르폴린-4-일-메타논 (34 mg)을 회백색 분말로서 수득하였다. MS = 407 [M+H]⁺; MP = 191.0-192.0℃.

유사한 방식으로, 적합한 출발 물질을 사용하여, 하기 화합물들을 제조하였다:

트랜스-4-[4-(6-메틸인다졸-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (황색 분말), MS = 324 [M+H]⁺; MP = 211.0-212.5℃;

트랜스-4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 디메틸 아미드 (백색 분말), MS = 365 [M+H]⁺; MP = 223.0-225.0℃; 및

트랜스-4-[4-(5-메틸인다졸-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (회백색 분말), MS = 324 [M+H]⁺; MP = 221.5-223.5℃.

실시예 7: 트랜스- 1-[2-(4-히드록시- 시클로헥실아미노 )-피리미딘-4-일]-1 H -인돌-4-카르복실산의 합성

트랜스-1-[2-(4-히드록시시클로헥실아미노)-피리미딘-4-일]-1H-인돌-4-카르복실산의 합성을 반응식 21 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 21

LAH (327 mg, 13.6 mmol)를 THF (4 mL), 물 (4 mL) 및 MeOH (1 mL)의 혼합물 중의 1-[2-(4-히드록시시클로헥실-아미노)-피리미딘-4-일]-1H-인돌-4-카르복실산 메틸 에스테르 (1.0 g, 2.7 mmol)의 현탁액에 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 RT 에서 16 시간 동안 교반한 후, 감압 하에서 증발시켜, 베이지색 고체를 수득하였다. 수성 HCl (1 M, 14 mL)을 잔류물에 첨가하고, 수득한 혼합물을 교반하고, 감압 하에서 증발시켰다. 잔류물을 MeOH 로 분쇄하여, 트랜스-1-[2-(4-히드록시시클로헥실아미노)-피리미딘-4-일]-1H-인돌-4-카르복실산 (700 mg)을 회백색 고체로서 수득하였다. MS = 353 [M+H]⁺; MP = 259.0-261.0℃.

실시예 8: 트랜스- 4-[4-(4-아미노인돌-1-일)-피리미딘-2- 일아미노 ]- 시클로헥산올의 합성

트랜스-4-[4-(4-아미노인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올의 합성을 반응식 22 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 22

단계 A: 1-(2- 메탄술피닐피리미딘 -4-일)-4-니트로-1 H - 인돌의 합성

CHCl₃ (40 mL) 중의 3-클로로퍼옥시벤조산 (77%, 3.11 g)의 현탁액을 0℃ 에서, N₂ 하에서, CHCl₃ (50 mL) 중의 1-(2-메틸술파닐피리미딘-4-일)-4-니트로-1H-인돌 (3.93 g, 14.0 mmol)의 혼합물에 천천히 첨가하였다. 상기 수득한 혼합물을 RT 까지 가온시키고, 밤새 교반하였다. 그 후, 상기 반응 혼합물을 DCM (200 mL)으로 희석하고, 수성 NaHCO₃ (포화된 것)로 세정하였다. 수득한 황색 침전물 을 여과에 의해 수집하고, 감압 하에서 건조시켜, 1-(2-메탄술피닐-피리미딘-4-일)-4-니트로-1H-인돌 (2.36 g)을 수득하였다. 모액을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과 및 감압 하에서 증발시켜, 두번째 분취량 (690 mg)을 수득하였다.

단계 B: 트랜스- 4-[4-(4- 니트로인돌 -1-일)-피리미딘-2- 일아미노 ]- 시클로헥산올의 합성

1-(2-메탄술피닐피리미딘-4-일)-4-니트로-1H-인돌 (3.02 g) 및 트랜스-아미노시클로헥산올 (2.87 g)로 충전된 둥근 바닥 플라스크를 75℃ 의 오일 배쓰 내에 위치시키고, NMP (5 mL)를 첨가하였다. 상기 수득한 혼합물을 105℃ 까지 20 분 동안 가열한 후, RT 에서 밤새 교반하였다. 수득한 고체를 헥산/Et₂O (1:1, 50 mL)로 3 번 분쇄하고, 상청액을 제거하고, 잔류 용매를 감압 하에서 증발시켰다. 고체 잔류물을 교반하면서 물 (70 mL) 중에 현탁시킨 후, 여과에 의해 수집하고, 감압 하에서 건조시켜, 트랜스-4-[4-(4-니트로인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (2.47 g)을 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

동일한 방식으로, 적합한 출발 물질을 사용하여, 하기 화합물들을 제조하였다:

트랜스-4-[4-(4-메톡시인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (회백색 고체), MS = 339 [M+H]⁺; MP = 208.0-209.8℃;

트랜스-4-[4-(3-메틸인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (백색 고체), MS = 323 [M+H]⁺; MP = 213.9-215.7℃;

트랜스-4-[4-(6-플루오로인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (백색 고체), MS = 327 [M+H]⁺; MP = 188.0-190.0℃;

트랜스-4-[4-(4-벤질옥시인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (밝은 황색 고체), MS = 415 [M+H]⁺; MP = 171.1-173.2℃;

트랜스-4-[4-(5-벤질옥시인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (회백색 고체), MS = 415 [M+H]⁺; MP = 185.1-186.7℃;

트랜스-4-[4-(6-메틸인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (백색 고체), MS = 323 [M+H]⁺; MP = 207.0-208.0℃;

트랜스-4-[4-(4-메틸인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (회백색 고체), MS = 323 [M+H]⁺; MP = 205.5-205.9℃;

트랜스-4-[4-(4-플루오로인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (백색 고체), MS = 327 [M+H]⁺; MP = 210.5-212.0℃;

트랜스-4-[4-(5-플루오로인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (백색 고체), MS = 327 [M+H]⁺; MP = 217.2-217.8℃;

트랜스-1-[2-(4-히드록시시클로헥실아미노)-피리미딘-4-일]-1H-인돌-3-카르 복실산 메틸 에스테르 (회백색 고체), MS = 367 [M+H]⁺; MP = 177.5-178.8℃;

트랜스-1-[2-(4-히드록시시클로헥실아미노)-피리미딘-4-일]-1H-인돌-5-카르복실산 메틸 에스테르 (백색 고체), MS = 367 [M+H]⁺; MP = 238.5-239.2℃;

트랜스-4-[4-(5-메톡시인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (회백색 분말), MS = 339 [M+H]⁺; MP = 203.6-204.0℃;

트랜스-1-[2-(4-히드록시시클로헥실아미노)-피리미딘-4-일]-1H-인돌-4-카르보니트릴 (회백색 고체), MS = 334 [M+H]⁺; MP = 234.9-235.3℃;

트랜스-1-[2-(4-히드록시시클로헥실아미노)-피리미딘-4-일]-1H-인돌-6-카르복실산 메틸 에스테르 (밝은 황색 고체), MS = 367 [M+H]⁺; MP = 232.2-234.5℃;

트랜스-4-[4-(5-메틸인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (회백색 고체), MS = 323 [M+H]⁺; MP = 202.5-203.5℃; 및

트랜스-4-{4-[4-(1-히드록시-1-메틸에틸)-인돌-1-일]-피리미딘-2-일아미노}-시클로헥산올 (회백색 고체), MS = 367 [M+H]⁺; MP = 168.0-169.0℃.

단계 C: 트랜스- 4-[4-(4-아미노인돌-1-일)-피리미딘-2- 일아미노 ]- 시클로헥산올의 합성

트랜스-4-[4-(4-니트로인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (2.44 g), EtOH (35 mL) 및 물 (11 mL)의 혼합물을 80℃ 까지 가열하였다. 고온의 상 기 현탁액에, 염화암모늄 (1.46 g) 및 이어서 철 (0) (피셔(Fisher), 1.55 g)을 첨가하고, 수득한 혼합물을 80℃ 까지 2 시간 동안, 그 후, 50℃ 까지 추가로 24 시간 동안 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 CELITE^TM 패드를 통해 여과하고, 여과 케이크를 EtOAc/MeOH (3:2)로 세정하고, 여과액을 감압 하에서 증발시켰다. 미정제 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (MeOH/DCM, 구배 2.5:97.5 에서 10:90)로 정제하여, 트랜스-4-[4-(4-아미노인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올을 밝은 황색 고체로서 수득하였다. MS = 324 [M+H]⁺; MP = 218.9-220.1℃.

트랜스-4-[4-(6-아미노-인다졸-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올을 동일한 방식으로, 적합한 출발 물질을 사용하여 제조하였다. MS = 325 [M+H]⁺; MP = 236.5-237.5℃.

실시예 9: 트랜스- 1-[2-(4- 히드록시시클로헥실아미노 )-피리미딘-4-일]-1 H -인돌-5-올의 합성

본 실시예에 기술된 합성 절차는 반응식 23 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 23

EtOH 중의 4-[4-(5-벤질옥시인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (70 mg) 및 Pd/C (15%, 38 mg)의 혼합물을 H₂ (풍선 압력)하에서, RT 에서 4 일 동안 교반하였다. 그 후, 상기 반응 혼합물을 CELITE^TM 패드를 통해 여과하고, 여과 케이크를 EtOH 로 세정하고, 여과액을 감압 하에서 증발시켰다. 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (DCM/MeOH, 95:5)로 정제하여, 트랜스-1-[2-(4-히드록시-시클로헥실아미노)-피리미딘-4-일]-1H-인돌-5-올 (51 mg)을 회백색 고체로서 수득하였다. MS = 325 [M+H]⁺; MP = 246.5-248.0℃.

실시예 10: 트랜스- 4-[4-(4- 히드록시메틸인돌 -1-일)-피리미딘-2- 일아미노 ]- 시클로헥산올의 합성

트랜스-4-[4-(4-히드록시메틸인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올의 합성을 반응식 24 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 24

LAH (THF 중의 1 M, 0.57 mL) 용액을 -10℃ 에서, 아르곤 대기 하에서, THF (0.3 mL) 중의 1-[2-(4-히드록시시클로헥실아미노)-피리미딘-4-일]-1H-인돌-4-카르복실산 메틸 에스테르 (100 mg) 용액에 천천히 첨가하였다. 상기 수득한 혼합 물을 -10℃ 에서 30 분 동안 및 RT 에서 밤새 교반하였다. 그 후, 상기 반응 혼합물을 0℃ 까지 냉각시키고, 물 (20 μL) 및 이어서 수성 NaOH (15%, 20 μL) 및 두번째 분취량의 물 (70 μL)을 첨가하였다. 상기 수득한 혼합물을 30 분 동안 교반한 후, CELITE^TM 패드를 통해 여과하였다. 무기 염을 분쇄하고, 상청액을 여과액에 첨가하고, 용액을 감압 하에서 증발시켜, 트랜스-4-[4-(4-히드록시메틸인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (32.5 g, 35% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. MS = 339 [M+H]⁺; MP = 212.0-213.3℃.

트랜스-4-[4-(5-히드록시메틸인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (백색 고체)을 유사한 방식으로, 적합한 출발 물질을 사용하여 제조하였다. MS = 339 [M+H]⁺; MP = 232.0-233.9℃.

실시예 11: 트랜스 -4-(4- 인다졸 -1- 일피리미딘 -2- 일아미노 )-시클로헥산- 카르복실산의 합성

트랜스-4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산의 합성을 반응식 25 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 25

단계 A: 1-(2- 메탄술포닐 -피리미딘-4-일)-1 H - 인다졸의 합성

3-클로로퍼옥시벤조산 (77%, 14.97 g, 86.7 mmol)을 얼음/아세톤 배쓰에서 냉각된 CHCl₃ (50 mL) 중의 1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸 (10 g, 41.3 mmol) 용액에 첨가하고, 수득한 혼합물을 밤새 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 수성 나트륨 비술피트 (10%)로 세정하였다. 수득한 고체를 여과하고, 여과액 상을 분리하였다. 수성층을 DCM 으로 추출하고, 통합한 유기 추출물을 수성 NaOH, 수성 NaHCO₃ (포화된 것)로 세정하고, MgSO₄ 상에서 건조, 여과 및 감압 하에서 증발시켜, 1-(2-메탄술포닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸 (6.4 g)을 주황색 고체로서 수득하고, 추가 정제 없이 사용하였다. MS = 275 [M+H]⁺; MP = 177.0-181.1℃.

동일한 방식으로, 적합한 출발 물질을 사용하여, 하기 화합물들을 제조하였다:

1-(2-메탄술포닐피리미딘-4-일)-6-메틸-1H-인다졸; 및

1-(2-메탄술포닐피리미딘-4-일)-5-메틸-1H-인다졸.

단계 B: 트랜스- 4-(4- 인다졸 -1- 일피리미딘 -2- 일아미노 )- 시클로헥산카르복실산 에틸 에스테르의 합성

1-(2-메탄술포닐피리미딘-4-일)-1H-인다졸 (6.4 g)을 THF 중에 현탁시키고, 혼합물을 상기 고체가 완전히 용해될 때까지 60℃ 까지 가열하였다. 트랜스-4-아미노-시클로헥산카르복실산 에틸 에스테르 (7.99 g, 46.6 mmol) 및 이어서 TEA (9.7 mL, 69.9 mmol)를 첨가하고, 수득한 혼합물을 밤새 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 고체가 침전되기 시작할 때까지 감압 하에서 농축시킨 후, 60℃ 까지 24 시간 동안 가열하였다. THF (4 mL)를 첨가하고, 상기 반응 혼합물을 60℃ 에서 64 시간 동안 교반하였다. 상기 수득한 혼합물을 EtOAc 로 추출하고, 통합한 유기 추출물을 물로 세정하고, MgSO₄ 상에서 건조, 여과, 및 감압 하에서 증발시켰다. 미정제 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (DCM/MeOH, 98:2)로 정제하고, 수득한 갈색 고체를 Et₂O 로 분쇄하여, 트랜스-4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 에틸 에스테르 (2.883 g)를 백색 고체로서 수득하였다.

단계 C: 트랜스- 4-(4- 인다졸 -1- 일피리미딘 -2- 일아미노 ) 시클로헥산카르복실산의 합성

트랜스-4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 에틸 에스테르 (2.88 g, 7.9 mmol), 수성 NaOH (2 M, 65 mL) 및 THF (65 mL)의 혼합물을 밤새 교반하였다. MeOH (40 mL)를 첨가하고, 상기 반응 혼합물을 추가로 105 분 동안 교반하였다. 수성 HCl (1M)을 첨가하여 pH 3 에 이르게 하고, 수득한 고체를 여과에 의해 수집하여, 추가 정제 없이 트랜스-4-(4-인다졸-1-일-피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 (2.739 g)을 수득하였다.

실시예 12: 트랜스-N -[4-(4- 인다졸 -1- 일피리미딘 -2- 일아미노 )- 시클로헥실 ]-메탄술폰아미드의 합성

트랜스-N-[4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥실]-메탄술폰아미드의 합성을 반응식 26 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 26

트랜스-시클로헥산-1,4-디아민 (0.62 g, 5.5 mmol) 및 NMP (10 mL)의 혼합물을 120℃ 까지 5 분 동안 가열한 후, NMP (10 mL) 중의 1-(2-메탄술포닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸 (300 mg)을 적가하고, 수득한 혼합물을 15 분 동안 교반하였다. 메탄술폰산 무수물 (1.88 g, 10.8 mmol)을 천천히 첨가하고, 반응 혼합물을 30 분 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에서 증류에 의해 증발시키고, EtOAc 를 잔류물에 첨가하고, 수득한 용액을 물로 세정하였다. 유기층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과 및 감압 하에서 증발시켰다. 미정제 잔류물을 고온의 DCM/MeOH (90:10)로의 분쇄에 의해 정제하여, 트랜스-N-[4-(4-인다졸-1-일-피리미딘-2-일아미노)-시클로헥실]-메탄술폰아미드 (38.0 mg)를 백색 고체로서 수득하였다. MS = 387 [M+H]⁺; MP = 269.6-270.4℃.

실시예 13: 4-(4- 인다졸 -1- 일피리미딘 -2- 일아미노 )-1- 메틸시클로헥산올의 합성

4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-1-메틸시클로헥산올의 합성을 반응식 27 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 27

단계 A: 4-(4- 인다졸 -1- 일피리미딘 -2- 일아미노 )-시클로헥사논의 합성

수성 HCl (3 M, 40 mL)을 THF (40 mL) 중의 (1,4-디옥사스피로-[4.5]-데크-8-일)-(4-인다졸-1-일-피리미딘-2-일)-아민 (1.89 g, 5 mmol)에 첨가하고, 수득한 혼합물을 80℃ 까지 1 시간 동안 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 냉각시키고, 얼음 및 수성 NaOH (1 M, 120 mL)의 혼합물 상에 붓고, 수득한 현탁액을 여과하였다. 수집한 고체를 물로 세정하고, DCM/MeOH 중에 녹이고, 용매의 일부분을 감 압 하에서 증발시켰다. 상기 수득한 현탁액을 여과하고, 수집한 고체를 헥산으로 세정하고, 감압 하에서 건조시켜, 4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥사논 (1.57 g, 95% 수율)을 백색 분말로서 수득하였다. MS = 308 [M+H]⁺; MP = 211.8-213.2℃.

단계 B: 4-(4- 인다졸 -1-일-피리미딘-2- 일아미노 )-1- 메틸 - 시클로헥산올의 합성

메틸마그네슘 클로라이드 (THF 중의 3 M, 2.4 mL, 7.2 mmol) 용액을 -78℃ 에서, N₂ 하에서, THF (100 mL) 중의 4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥사논 (600 mg, 2 mmol)의 현탁액에 천천히 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 15 분 동안 교반하고, 두번째 분취량의 메틸마그네슘 클로라이드 (THF 중의 3 M, 1.0 mL, 3 mmol)를 첨가하고, 수득한 혼합물을 -78℃ 에서 30 분 동안 교반하였다. 그 후, 상기 반응 혼합물을 RT 까지 가온시키고, 4 시간 동안 교반한 후, 얼음 및 수성 NH₄Cl (포화된 것)의 혼합물 상에 부었다. 상기 수득한 혼합물을 EtOAc로 추출하고, 통합한 유기 추출물을 염수로 세정하고, MgSO₄ 상에서 건조, 여과, 및 감압 하에서 증발시켜, 백색 고체 (609 mg, 96% 수율)를 수득하였다. 상기 미정제 물질을 플래시 크로마토그래피 (MeOH/DCM, 구배 3:97 에서 5:95)로 2 번 정제하여, 4-(4-인다졸-1-일-피리미딘-2-일아미노)-1-메틸-시클로헥산올 (백색 고체로서 123 mg, 19% 수율의 더 낮은 극성의 이성질체; 및 백색 고체로서 360 mg, 57% 수율의 더 높은 극성의 이성질체)을 수득하였다. 두 가지 이성질체를 모두 DCM/헥산 (약 1:1)으로부터 재결정하여, 더 낮은 극성의 이성질체 A (100 mg)를 백색 고체로서 및 더 높은 극성의 이성질체 B (290 mg)를 결정성 자유 유동성 고체로서 수득하였다.

이성질체 A: MS = 324 [M+H]⁺; MP = 211.9-213.3℃.

이성질체 B: MS = 324 [M+H]⁺; MP = 168.1-170.1℃.

실시예 14: 트랜스- 4-[4-(4- 페닐메탄술포닐인돌 -1-일)-피리미딘-2-일아미노]- 시클로헥산올의 합성

트랜스-4-[4-(4-페닐메탄술포닐인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올의 합성을 반응식 28 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 28

단계 A: 4- 벤질술파닐 -1-(2- 클로로 -피리미딘-4-일)-1 H -인돌 및 4-벤질- 술파닐 -1-(4-클로로-피리미딘-2-일)-1 H - 인돌의 합성

4-벤질술파닐-1H-인돌 (5.00 g, 21 mmol) (Can . J. Chem . 1962 , 40, 511)을 0℃ 에서, DMF (40 mL) 중의 NaH (광유 중의 60% 분산액, 1.37 g, 34 mmol)의 현탁액에 천천히 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 기체 방출이 멈출 때까지 15 분 동안 교반한 후, 2,4-디클로로피리미딘 (3.03 g, 20 mmol)을 분할로 및 이어서 부가적인 분취량의 DMF (10 mL)를 첨가하였다. 상기 수득한 혼합물을 RT 까지 천천히 가온시킨 후, 얼음 및 물의 슬러리 상에 붓고, EtOAc 로 추출하였다. 유기층을 물 및 염수의 혼합물로 2 번 세정하고, Na₂SO₄ 상에서 건조, 여과 및 감압 하에서 증발시켰다. 미정제 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (EtOAc/헥산, 구배 10:90 에서 50:50)로 정제하여, 연한 황색의 왁스형 고체로서 4-벤질술파닐-1-(4-클로로피리미딘-2-일)-1H-인돌 (979 mg, 14% 수율) 및 DCM/EtOAc 로부터 침전 후, 4-벤질술파닐-1-(2-클로로피리미딘-4-일)-1H-인돌 및 이중치환된 생성물 (691 mg)의 혼합물을 수득하였다. 상기 혼합물을 플래시 크로마토그래피 (EtOAc/헥산, 20:80)로 재정제하여, 4-벤질술파닐-1-(2-클로로피리미딘-4-일)-1H-인돌 (270 mg, 4% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. MS = 352 [M+H]⁺; MP = 159.0-161.2℃.

단계 B: 트랜스 -4-[4-(4- 벤질술파닐인돌 -1-일)-피리미딘-2- 일아미노 ]- 시클로헥산올의 합성

트랜스-4-아미노시클로헥산올 (1.37 g, 12 mmol)을 NMP (10 mL) 중의 4-벤질-술파닐-1-(2-클로로-피리미딘-4-일)-1H-인돌 및 이중치환된 생성물 (673 mg, 2 mmol)의 용액에 첨가하고, 수득한 혼합물을 110℃ 까지 4 시간 동안 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 냉각시키고, 물과 EtOAc 사이에 분할시키고, 유기층을 물로 2 번 세정하고, Na₂SO₄ 상에서 건조, 여과, 및 감압 하에서 증발시켰다. 미정제 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (EtOAc/헥산, 10:90 에서 20:80)로 정제하여, DCM/헥산/EtOAc 로부터 재결정 후, 트랜스-4-[4-(4-벤질술파닐-인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (309 mg, 38% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. 부가적인 분취량의 상기 생성물을 모액으로부터 회수하였다. MS = 431 [M+H]⁺; MP = 150.2-150.9℃.

단계 C: 트랜스- 4-[4-(4- 페닐메탄술포닐인돌 -1-일)-피리미딘-2- 일아미노 ]- 시클로헥산올의 합성

3-클로로퍼옥시벤조산 (0.55 g, 2.5 mmol)을 클로로포름 (25 mL) 중의 트랜스-4-[4-(4-벤질술파닐인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (397 mg, 0.9 mmol)에 첨가하고, 수득한 혼합물을 RT 에서 1 시간 동안 교반하였다. 두번째 분취량의 3-클로로퍼옥시벤조산 (150 mg)을 첨가하고, 반응 혼합물을 잠시동안 가열한 후; 냉각시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 수성 NaHCO₃ 와 EtOAc 사이에 분할시켰다. 유기층을 분리하고, 수성 NaHCO₃ 및 물로 2 번 세정하고, Na₂SO₄ 상에서 건조, 여과, 및 실리카겔 상에서, 감압 하에서 증발시켰다. 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (MeOH/DCM, 5:95)로 정제하여, 트랜스-4-[4-(4-페닐메탄술포닐인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (30 mg, 7% 수율)을 밝은 황색 고체로서 수득하였다. MS = 463 [M+H]⁺; MP = 132.1-134.5℃.

실시예 15: 트랜스- 4-[4-(1 H -인돌-3-일)-피리미딘-2- 일아미노 ]- 시클로헥산올의 합성

트랜스-4-[4-(1H-인돌-3-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올의 합성을 반응식 29 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 29

단계 A: 1- 벤젠술포닐 -3-(2- 클로로피리미딘 -4-일)-1 H - 인돌의 합성

아세토니트릴/물 (2:1, 60 mL) 중의 2,4-디클로로피리미딘 (2.42 g, 16 mmol), 1-(페닐술포닐)-1H-인돌-3-일보론산 (3.89 g, 13 mmol) 및 탄산나트륨 (5.03 g, 47 mmol)의 용액을 아르곤으로 탈기시킨 후, 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐 (300 mg, 1.6 mol)을 첨가하였다. 상기 수득한 혼합물을 2 시간 동안 가열하여 환류시키는 중에 백색 현탁액이 형성되었다. 침전물을 냉각시키고, CELITE^TM/실리카겔 플러그를 통해 여과하였다. 상기 여과 케이크를 EtOAc 로 세정하고, 유기층을 분리하고, 염수로 세정하고, Na₂SO₄ 상에서 건조, 여과, 및 감압 하에서 증발시켰다. 잔류물을 EtOAc/헥산으로부터 재결정하여, 1-벤젠술포닐-3-(2-클로로-피리미딘-4-일)-1H-인돌을 밝은 분홍색 고체로서 수득하였다. 상기 반응 혼합물로부터의 고체 여과물을 DCM 중에 용해시키고, Na₂SO₄ 상에서 건조, 여과하여, 이전 배치의 생성물과 통합하였다. 수집한 고체를 DCM 중에 용해시키고, 용매를 감압 하에서 증발시키고, EtOAc 를 첨가하여 현탁액을 형성시키고, 생성물을 여과 및 헥산으로 세정하여, 1-벤젠술포닐-3-(2-클로로-피리미딘-4-일)-1H-인돌 (2.0 g, 33% 수율)을 밝은 분홍색 고체로서 수득하였다. 부가적인 0.45 g 의 생성물을 모액으로부터 수득하였다.

단계 B: 트랜스- 4-[4-(1- 벤젠술포닐 -1 H -인돌-3-일)-피리미딘-2- 일아미노 ]- 시클로헥산올의 합성

NMP (8 mL) 중의 1-벤젠술포닐-3-(2-클로로피리미딘-4-일)-1H-인돌 (0.45 g, 1 mmol) 및 트랜스-4-아미노시클로헥산올 (0.50 g, 4 mmol)의 용액을 N₂ 하에서, 120℃ 까지, 3 시간 동안 가열하였다. 그 후, 상기 혼합물을 냉각시키고, 물과 EtOAc 사이에 분할시키고, 유기층을 분리하고, 염수로 2 번 세정하고, Na₂SO₄ 상에서 건조, 여과 및 감압 하에서 증발시켰다. 미정제 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (MeOH/DCM, 5:95)로 정제하여, 405 mg 의 황색 발포체를 형성하였다. 상기 물질을 EtOAc 중에 용해시키고, 물로 2 번 세정하고, Na₂SO₄ 상에서 건조, 여과 및 감압 하에서 증발시켰다. 고체 잔류물을 헥산으로 분쇄하고, 높은 진공 하에서 건조시켜, 트랜스-4-[4-(1-벤젠술포닐-1H-인돌-3-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (365 mg, 19% 수율)을 밝은 황색 비결정성 고체로서 수득하였다. MS = 449 [M+H]⁺; MP = 132.1-133.3℃.

단계 C: 트랜스- 4-[4-(1 H -인돌-3-일)-피리미딘-2- 일아미노 ]- 시클로헥산올의 합성

NaOH (200 mg, 5 mmol)를 MeOH (15 mL) 중의 트랜스-4-[4-(1-벤젠술포닐-1H-인돌-3-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (296 mg, 0.66 mmol) 용액에 첨가하고, 수득한 혼합물을 RT 에서 6 시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 수성 HCl (1 M)의 첨가로 중화시킨 후, 물과 EtOAc 사이에 분할시켰다. 유기층을 분리하고, 물로 세정하고, Na₂SO₄ 상에서 건조, 여과 및 감압 하에서 증발시켜, 미정제 황색 고체를 수득하였다. 상기 미정제 물질을 플래시 크로마토그래피 (MeOH/DCM, 5:95)로 정제하여, 트랜스-4-[4-(1H-인돌-3-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (115 mg, 57% 수율)을 백색 분말로서 수득하였다. MS = 309 [M+H]⁺; MP = 258.1-259.9℃.

실시예 16: 트랜스- 1-[2-(4- 히드록시시클로헥실아미노 )-피리미딘-4-일]-1,2- 디히드 로인다졸-3-온의 합성

트랜스-1-[2-(4-히드록시시클로헥실아미노)-피리미딘-4-일]-1,2-디히드로-인다졸-3-온의 합성은 반응식 30 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 30

단계 A: 1-(2- 메틸술파닐피리미딘 -4-일)-1,2- 디히드로인다졸 -3-온의 합성

3-인다졸리논 (5.07 g, 38 mmol)을 0℃ 에서, DMF (50 mL) 중의 NaH (광유 중의 ~ 60% 분산액, 2.18 g, 55 mmol)의 현탁액에 분할로 첨가하고, 수득한 혼합물을 기체 방출이 멈출 때까지 20 분 동안 교반하였다. 4-클로로-2-메틸티오피리미딘 (6.10 g, 38 mmol)을 첨가하고, 상기 반응 혼합물을 RT 까지 가온시킨 후, 100℃ 까지 3 시간 동안 가열하였다. 상기 수득한 혼합물을 냉각시키고, 물 (150 mL)에 붓고, 수성 HCl (1 M)로 중화시키고, EtOAc 를 첨가하였다. 상기 수득한 불용성 현탁액을 여과하고, 건조시켜, 1-(2-메틸술파닐피리미딘-4-일)-1,2-디히드로인다졸-3-온 (7.05 g, 72% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. MS = 259 [M+H]⁺; MP = 277.0-280.9℃.

단계 B: 3- 메톡시 -1-(2- 메틸술파닐피리미딘 -4-일)-1 H - 인다졸의 합성

NaH (광유 중의 ~ 60% 분산액, 0.75 g, 19 mmol)를 0℃ 에서, DMF (30 mL) 중의 1-(2-메틸술파닐피리미딘-4-일)-1,2-디히드로인다졸-3-온 (2.70 g, 10 mmol)에 첨가하고, 수득한 혼합물을 기체 방출이 멈출 때까지 교반하였다. 요오도메탄 (0.90 mL, 14 mmol)을 첨가하고, 혼합물 30 분 동안 교반한 후, 물 (100 mL)에 붓고, EtOAc 로 추출하였다 (100 mL). 통합한 유기물을 물 (100 mL)로 2 번 세정하고, Na₂SO₄ 상에서 건조, 여과, 및 감압 하에서 증발시켰다. 미정제 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (EtOAc/헥산, 20:80 에서 50:50)로 정제하고, 헥산으로부터 재결정하여, 3-메톡시-1-(2-메틸술파닐피리미딘-4-일)-1H-인다졸 (286 mg, 10% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. MS = 272.9 [M+H]⁺.

단계 C: 1-(2- 메탄술포닐피리미딘 -4-일)-3- 메톡시 -1 H - 인다졸의 합성

3-클로로퍼옥시벤조산 (약 77%, 2.86 g, 18 mmol)을 클로로포름 (30 mL) 중의 3-메톡시-1-(2-메틸술파닐피리미딘-4-일)-1H-인다졸 (1.34 g, 5 mmol) 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 RT 에서 20 분 동안 교반하였다. 상기 수득한 혼합물을 수성 NaHCO₃ 에 붓고, 1 시간 동안 교반한 후, DCM 으로 추출하였다. 통합한 유기 추출물을 수성 NaHCO₃ 및 물로 2 번 세정하고, Na₂SO₄ 상에서 건조, 여과 및 감압 하에서 증발시켰다. 미정제 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (EtOAc/헥산, 구배 50:50 에서 100:0)로 정제하고, DCM/헥산/EtOAc 로부터 재결정하여, 2 회 수확분의 1-(2-메탄술포닐피리미딘-4-일)-3-메톡시-1H-인다졸을 회백색 고체 (927 mg, 62% 수율)로서 수득하였다. 부가적인 양의 생성물을 모액으로부터 황색 고 체 (0.44 g, 29% 수율)로서 회수하였다. MS = 305 [M+H]⁺; MP = 206.3-207.8℃.

단계 D: 트랜스- 4-[4-(3- 메톡시인다졸 -1-일)-피리미딘-2- 일아미노 ]- 시클로헥산올의 합성

트랜스-4-아미노시클로헥산올 (870 mg, 8 mmol)을 NMP (15 mL) 중의 1-(2-메탄술포닐피리미딘-4-일)-3-메톡시-1H-인다졸 (440 mg, 1 mmol)에 첨가하고, 수득한 혼합물을 120℃ 까지 3 시간 동안 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 냉각시키고, EtOAc 와 물 사이에 분할시켰다. 유기층을 분리하고, 물로 세정하고, Na₂SO₄ 상에서 건조, 여과, 및 감압 하에서 농축시켜, 미정제 황색 고체를 수득하였다. 상기 미정제 물질을 플래시 크로마토그래피 (MeOH/DCM, 5:95)로 정제하고, DCM/헥산으로부터 재결정하여, 트랜스-4-[4-(3-메톡시-인다졸-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (181 mg (37% 수율))을 백색 고체로서 수득하였다. MS = 340 [M+H]⁺; MP = 202.3-205.1℃.

단계 E: 트랜스- 1-[2-(4- 히드록시시클로헥실아미노 )-피리미딘-4-일]-1,2- 디히드로 -인다졸-3-온의 합성

트리메틸실릴요오다이드 (0.80 mL, 5.6 mmol)를 N₂ 하에서, 클로로포름 (10 mL) 중의 트랜스-4-[4-(3-메톡시인다졸-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (251 mg, 0.7 mmol)의 현탁액에 첨가하였다. 상기 반응 혼합물이 즉시 균질화 되었지만, 1 시간 안에 현탁액을 형성하였고, 상기 수득한 혼합물을 3 일 동안 교 반하였다. 부가적인 분취량의 트리메틸실릴요오다이드 (2 mL, 14 mmol)를 첨가하고, 수득한 혼합물을 밤새 가열하여 환류시키고, RT 에서 1일 동안 교반하였다. 그 후, 상기 반응 혼합물을 얼음물 상에 붓고, DCM 으로 추출하였다. 불용성 고체를 여과하고, MeOH 및 DCM 의 혼합물 중에 용해시키고, 통합한 유기층을 Na₂SO₄ 상에서 건조, 여과 및 실리카겔 상에서, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (MeOH/DCM, 구배 3:97 에서 5:95)로 정제하여, 트랜 스-1-[2-(4-히드록시시클로헥실아미노)-피리미딘-4-일]-1,2-디히드로인다졸-3-온 (71 mg, 30% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. MS = 326 [M+H]⁺; MP = 263.5-264.4℃.

실시예 17: 트랜스- 4-[4-(1- 메틸 -1 H -인돌-3-일)-피리미딘-2- 일아미노 ]- 시클로헥산 올의 합성

본 실시예에 기술된 합성 절차는 실시예 반응식 31 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 31

단계 A: 3-(2- 클로로 -피리미딘-4-일)-1 H - 인돌의 합성

MeOH (20 mL) 중의 새로 분쇄된 NaOH (740 mg)의 현탁액을 0℃ 에서, MeOH/THF (1:1, 40 mL) 중의 1-벤젠술포닐-3-(2-클로로피리미딘-4-일)-1H-인돌 (0.91 g, 2 mmol)의 현탁액에 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 RT 까지 가온시키고, 균질화될 때까지 2 시간 동안 교반하였다. 상기 수득한 혼합물을 수성 HCl (1 M)로 중화시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 물과 EtOAc 사이에 분할시키고, 유기층을 분리하고, 물로 세정, Na₂SO₄ 상에서 건조, 여과, 및 감압 하에서 농축시켜, 밝은 황색 고체 (0.63 g)를 수득하였다. 상기 미정제 물질을 플래시 크로마토그래피 (1:1 EtOAc/헥산)로 정제하여, 3-(2-클로로-피리미딘-4-일)-1H-인돌 (502 mg, 89% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다.

단계 B: 3-(2- 클로로 -피리미딘-4-일)-1- 메틸 -1 H - 인돌의 합성

NaH (광유 중의 60% 분산액, 0.16 g, 7 mmol)를 0℃ 에서, DMF (8 mL) 중의 3-(2-클로로-피리미딘-4-일)-1H-인돌 (0.24 g, 1 mmol)에 첨가하였다. 상기 수득한 혼합물을 10 분 동안 교반한 후, 요오도메탄 (0.20 mL, 3.2 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 RT 까지 가온시키고, 얼음물 상에 부었다. 상기 수득한 혼합물을 EtOAc 로 추출하고, 통합한 유기물을 물로 2 번 세정하고, Na₂SO₄ 상에서 건조, 여과 및 감압 하에서 농축시켜, 3-(2-클로로-피리미딘-4-일)-1-메틸-1H-인돌 (270 mg)을 황색 고체로서 수득하였다.

단계 C: 트랜스- 4-[4-(1- 메틸 -1 H -인돌-3-일)-피리미딘-2- 일아미노 ]- 시클로헥 산올의 합성

트랜스-4-아미노시클로헥산올 (0.45 g, 4 mmol)을 NMP (8 mL) 중의 3-(2-클로로피리미딘-4-일)-1-메틸-1H-인돌 (0.23 g, 1 mmol)에 첨가하고, 수득한 혼합물을 120℃ 까지 3 시간 동안 가열하였다. 두번째 분취량의 트랜스-4-아미노시클로헥산올 (0.16 g, 1 mmol)을 첨가하고, 수득한 혼합물을 130℃ 까지 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 냉각시키고, 물과 EtOAc 사이에 분할시키고, 유기층을 분리하고, 물로 2 번 세정하고, Na₂SO₄ 상에서 건조, 여과, 및 감압 하에서 농축시켰다. 미정제 잔류물을 DCM/EtOAc/헥산으로부터 재결정하여, 트랜스-4-[4-(1-메틸-1H-인돌-3-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (148 mg, 46% 수율)을 밝은 황색 고체로서 수득하였다. MS = 323 [M+H]⁺; MP = 194.5-195.3℃.

실시예 18: 트랜스- 4-{4-[6-(2- 히드록시에틸아미노 )- 인다졸 -1-일]-피리미딘-2- 일아 미노}- 시클로헥산올의 합성

트랜스-4-{4-[6-(2-히드록시-에틸아미노)-인다졸-1-일]-피리미딘-2-일아미노}-시클로헥산올의 합성을 반응식 32 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 32

2-브로모에탄올 (42 μL, 0.6 mmol)을 아세토니트릴 (1 mL) 중의 트랜스-4-[4-(6-아미노-인다졸-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (100 mg, 0.30 mmol) 및 탄산수소나트륨 (25 mg, 0.30 mmol)의 혼합물에 첨가하고, 수득한 혼합물을 80℃ 까지 2 시간 동안 가열하였다. DMF (0.5 mL)를 첨가하고, 수득한 혼합물을 80℃ 까지 밤새 가열하였다. 두번째 분취량의 2-브로모에탄올 (20 μL)을 첨가하고, 3 일 동안 가열을 지속하였다. 상기 수득한 혼합물을 MeOH 로 희석하고, Et₂O 를 첨가하였다. 용액에서 나온 고무성 잔류물을 제조용 TLC 로 정제하여, 트랜스-4-{4-[6-(2-히드록시에틸아미노)-인다졸-1-일]-피리미딘-2-일아미노}-시클로헥산올 (29 mg)을 황색 고체로서 수득하였다. MS = 369 [M+H]⁺.

실시예 19: 트랜스-N -{1-[2-(4- 히드록시시클로헥실아미노 )-피리미딘-4-일]-1H- 인다졸 -6-일}- 아세트아미드의 합성

트랜스-N-{1-[2-(4-히드록시시클로헥실아미노)-피리미딘-4-일]-1H-인다졸-6-일}-아세트아미드의 합성을 반응식 33 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 33

단계 A: 1-(2- 메틸술파닐피리미딘 -4-일)-1 H - 인다졸 -6- 일아민의 합성

1-(2-메틸술파닐피리미딘-4-일)-6-니트로-1H-인다졸을 실시예 8 에 기술된 절차에 따라 환원시켰다.

단계 B: N -[1-(2- 메틸술파닐피리미딘 -4-일)-1 H - 인다졸 -6-일]- 아세트아미드의 합성

아세틸 클로라이드 (10 방울)를 RT 에서, THF (5 mL) 중의 1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸-6-일아민 (0.13 g, 0.5 mmol) 및 트리에틸아민 (15 방울)에 적가하고, 수득한 혼합물을 30 분 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 DCM 및 MeOH 로 희석하고, 수성 NaHCO₃ 로 2 번, 염수로 1 번 세정하고, Na₂SO₄ 상에서 건조, 여과 및 감압 하에서 농축시켰다. 미정제 잔류물을 Et₂O 및 헥산으로 처리하고, 침전물을 여과에 의해 수집하여, N-[1-(2-메틸술파닐피리미딘-4-일)-1H-인다졸-6-일]-아세트아미드 (146 mg)를 회백색 고체로서 수득하였다.

단계 C: 트랜스-N -{1-[2-(4- 히드록시시클로헥실아미노 )-피리미딘-4-일]-1H- 인다졸 -6-일}- 아세트아미드의 합성

3-클로로퍼옥시벤조산 (77%, 200 mg, 0.87 mmol)을 클로로포름 (5 mL) 중의 N-[1-(2-메틸술파닐피리미딘-4-일)-1H-인다졸-6-일]-아세트아미드 (0.43 mmol, 0.13 g)의 슬러리에 첨가하고, 수득한 혼합물을 RT 에서 밤새 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 DCM/MeOH (4:1, 25 mL)로 희석하고, 수성 NaOH (0.1 M) 및 염수로 세정하고, MgSO₄ 상에서 건조, 여과, 및 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Et₂O 로 분쇄하여, N-[1-(2-메탄술포닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸-6-일]-아세트아미드 (120 mg)를 회백색 고체로서 수득하였다. 상기 물질의 일부분 (100 mg)을 트랜스-4-아미노시클로헥산올 (0.12 g)과 혼합하고, 혼합물을 130℃ 까지 85 분 동안 가열하였다. 잔류물을 DCM/MeOH 로 처리하고, 용매를 감압 하에서 증발시켰다. 상기 잔류물을 MeOH (5 mL) 및 Et₂O 로 처리하고, 액체 상청액을 제거하고, 형성된 고무성 고체를 두번째 분취량의 MeOH (5 mL) 및 EtOAc (15 mL)로 처리하였다. 수득한 미세 침전물을 여과에 의해 수집하여, 트랜스-N-{1-[2-(4-히드록시시클로헥실아미노)-피리미딘-4-일]-1H-인다졸-6-일}-아세트아미드 (72 mg, 65% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. MS = 367 [M+H]⁺; MP = 288.0-289.5℃.

실시예 20: 트랜스- 4-[4-(6- 히드록시메틸인다졸 -1-일)-피리미딘-2- 일아미노 ]- 시클 로헥산올의 합성

트랜스-4-[4-(6-히드록시메틸인다졸-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산 올의 합성을 반응식 34 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 34

리튬 트리에틸보로히드라이드 (THF 중의 1 M, 0.8 mL) 용액을 RT 에서, THF (3 mL) 중의 트랜스-1-[2-(4-히드록시시클로헥실아미노)-피리미딘-4-일]-1H-인다졸-6-카르복실산 메틸 에스테르 (100 mg)에 천천히 첨가하였다. 상기 수득한 혼합물을 30 분 동안 교반하고, AcOH/EtOH (1:1, 2 mL)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 30 분 동안 교반한 후, 수성 HCl (0.1 M) 상에 부었다. 상기 수득한 혼합물을 수성 NaOH 및 수성 NaHCO₃ 로 pH 8 까지 염기성화시킨 후, DCM 으로 추출하였다. 통합한 유기 추출물을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과 및 감압 하에서 농축시켰다. 미정제 잔류물을 제조용 TLC (DCM/MeOH, 95:5)로 정제하여, 트랜스-4-[4-(6-히드록시메틸-인다졸-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올 (22 mg)을 백색 고체로서 수득하였다. MS = 340 [M+H]⁺; MP = 216.0 -217.7℃.

실시예 21: 3-(4- 인다졸 -1- 일피리미딘 -2- 일아미노 )- 벤젠술폰아미드의 합성

3-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-벤젠술폰아미드의 합성을 반응식 35 에 나타낸 과정에 따라 수행하였다.

반응식 35

단계 A: 1-(2- 메틸술파닐 -피리미딘-4-일)-1 H - 인다졸 및 2-(2- 메틸술파닐 -피리미딘-4-일)-2 H - 인다졸의 합성

무수 DMF (100 mL) 중의 1H-인다졸 (2.36 g, 20.0 mmol) 용액을 NaH (광유 중의 60% 분산액, 1.60 g, 40.0 mmol)로 RT 에서 10 분 동안 처리하였다. 그 후, 4-클로로-2-메틸-티오피리미딘 (2.55 ml, 22.0 mmol)을 RT 에서, 한 번에 첨가하고, 수득한 혼합물을 70℃ 에서 2.5 시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 RT 까지 냉각시키고, 수성 HCl (1 M)로 켄칭하고, EtOAc 로 추출하였다. 층을 분리하고, 유기층을 염수로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조, 여과, 및 감압 하에서 농축시켰다. 미정제 생성물을 실리카겔 상에 흡수시키고, 플래시 크로마토그래피 (에틸 아세테이트/헥산, 구배 5:95 에서 25:75)로 정제하여, 1- (2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸 및 2-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-2H-인다졸의 혼합물 (3.77 g, 78% 수율)을 베이지색 고체로서 수득하였다.

단계 B: 1-(2- 메탄술포닐피리미딘 -4-일)-1 H - 인다졸 및 2-(2- 메탄술포닐 -피리미딘-4-일)-2 H - 인다졸의 합성

클로로포름 (80 mL) 중의 1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸 및 2-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-2H-인다졸 (3.77 g, 15.55 mmol)의 혼합물을 3-클로로퍼옥시벤조산 (80%, 7.37 g, 34.21 mmol)으로 처리하였다. 상기 반응 혼합물을 50℃ 에서 1.5 시간 동안 교반한 후, 수성 NaOH (1 M)로 켄칭하였다. 상기 수득한 혼합물을 DCM 으로 추출하고, 층을 분리하고, 유기층을 염수로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조, 여과 및 감압 하에서 농축시켰다. 미정제 생성물을 실리카겔 상에 흡수시키고, 플래시 크로마토그래피 (DCM/에틸 아세테이트, 구배 0:100 에서 5:95)로 정제하여, 1-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸 (더 낮은 극성의 이성질체) (1.92 g, 45% 수율) 및 2-(2-메틸술파닐-피리미딘-4-일)-2H-인다졸 (더 높은 극성의 이성질체) (1.04 g, 24% 수율)을 수득하였다.

단계 C: 3-(4- 인다졸 -1- 일피리미딘 -2- 일아미노 )- 벤젠술폰아미드의 합성

i-PrOH (4 ml) 중의 1-(2-메틸술포닐-피리미딘-4-일)-1H-인다졸 (100 mg, 0.36 mmol) 및 p-톨루엔술폰산 (139 mg, 0.73 mmol)의 용액을 3-아미노벤젠술폰아미드 (251 mg, 1.46 mmol)로 마이크로파 합성기 내에서, 150℃ 에서 20 분 동안 처리하였다. 상기 혼합물을 물과 에틸 아세테이트 사이에 분할시키고, 유기층을 분리하고, 염수로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조, 여과 및 감압 하에서 농축시켰다. 미정제 잔류물을 실리카겔 상에 흡수시키고, 플래시 크로마토그래피 (EtOAc/헥산, 구배 30:70 에서 50:50)로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. 잔류물을 수성 NaOH (1 M)로 분쇄하고, 고체를 여과에 의해 수집하고, 물로 세정 및 진공 하에서 건조시켜, 3-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-벤젠술폰아미드 (50 mg, 37% 수율)를 수득하였다. MS = 367 [M+H]⁺.

4-(4-인다졸-1-일-피리미딘-2-일아미노)-시클로헥실]-카르밤산 tert-부틸 에스테르 (백색 고체)를 동일한 방식으로, 적합한 출발 물질을 사용하여 제조하였다. MS = 409.2 [M+H]⁺.

실시예 22: 제형물

하기 표에 나타낸 바와 같이 각종 경로에 의한 전달을 위한 약학적 제제를 제형화하였다. 표에서 사용된 바와 같은 "활성 성분" 또는 "활성 화합물"은 하나 이상의 식 I 의 화합물을 의미한다.

상기 성분들을 혼합하여, 각각 약 100 mg 을 함유하는 캡슐 내로 분배하였으며; 1 개의 캡슐은 1 일 총 투여량과 유사할 것이다.

상기 성분들을 조합하고, 메탄올과 같은 용매를 사용하여 과립화하였다. 그 후, 상기 제형물을 건조시키고, 적당한 타정기를 이용하여 정제 (활성 화합물 약 20 mg 함유)로 형성시켰다.

상기 성분들을 혼합하여 경구 투여용 현탁액을 형성시켰다.

활성 성분을 주사용수의 일부에 용해시켰다. 그 후, 충분한 양의 염화나트륨을 교반하면서 첨가하여, 용액을 등장성이 되게 하였다. 나머지 주사용수 로 용액의 중량을 보충한 후, 0.2 마이크론 막 여과기를 통해 여과하고, 무균 조건 하에서 패키징하였다.

상기 성분들을 함께 용융시키고, 증기 배쓰 상에서 혼합하고, 총 중량 2.5 g 을 함유하는 몰드에 부었다.

물을 제외한 상기 성분들을 모두 조합하고, 교반하면서, 약 60℃ 까지 가열하였다. 그 후, 충분한 양의 약 60℃ 의 물을 격렬한 교반과 함께 첨가하여 상기 성분들을 유화시킨 후, 물을 충분히 (약 100 g) 첨가하였다.

비강 분사 제형물

약 0.025-0.5 % 의 활성 화합물을 함유하는 몇몇의 수성 현탁액을 비강 분사 제형물로서 제조하였다. 상기 제형물은 임의로 비활성 성분, 예컨대, 예를 들어, 미세결정성 셀룰로오스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오스, 덱스트로오스를 함유 한다. pH 를 조정하기 위해 염산을 첨가할 수 있다. 상기 비강 분사 제형물은 통상적으로 작업 당 약 50-100 μL 의 제형물을 전달하는, 비강 분사 계량 펌프를 통해 전달될 수 있다. 통상의 투여 계획은 2-4 분사/4-12 시간이다.

실시예 23: 시험관 내 JNK 검정

JNK 활성을 [γ-³³P] ATP 를 사용하여 GST-ATF2 (19-96)의 인산화에 의해 측정하였다. 효소 반응을 25 mM 헤페스(HEPES), pH 7.5, 2 mM 디티오트레이톨, 150 mM NaCl, 20 mM MgCl₂, 0.001% Tween® 20, 0.1% BSA 및 10% DMSO 를 함유한 완충액 중의 40 μl 의 최종 부피에서, 기질 및 ATP 의 Km 농도에서 수행하였다. 인간 JNK2α2 검정은 1 μCi [γ-³³P] ATP 와 함께 1nM 효소, 1 μM ATF2, 8 μM ATP 를 함유하였다. 인간 JNK1α1 검정은 1 μCi [γ-³³P] ATP 와 함께 2 nM 효소, 1 μM ATF2, 6 μM ATP 를 함유하였다. 인간 JNK3 (Upstate Biotech #14-501M) 검정은 1 μCi [γ-³³P] ATP 와 함께 2 nM 효소, 1 μM ATF2, 4 μM ATP 를 함유하였다. 효소 검정을 몇몇의 화합물 농도의 존재 또는 부재에서 수행하였다. JNK 및 화합물을 10 분 동안 예비인큐베이션하고, 이어서 효소 반응을 ATP 및 기질의 첨가에 의해 개시하였다. 상기 반응 혼합물을 30℃ 에서, 30 분 동안 인큐베이션하였다. 인큐베이션의 종결에서, 25 μl 의 상기 반응 혼합물을 135 mM EDTA 를 함유한 150 μl 의 10% 글루타티온 Sepharose® 슬러리 (Amersham # 27-4574-01)에 옮겨 상기 반응을 종결시켰다. 상기 반응 생성물을 친화 수지 상에서 포획하고, 여과 플레이트 (Millipore, MABVNOB50) 상에서 포스페이트 완충 식염수로 6 번 세정하여, 유리된 방사성 뉴클레오티드를 제거하였다. ³³P 의 ATF2 로의 혼입을 미세플레이트 신틸레이션 계수기 (Packard Topcount) 상에서 정량화하였다. JNK 에 대한 화합물 억제 효능을 3-변수 모델로 피팅한 10 개 농도 억제 곡선으로부터 제공된 IC₅₀ 값으로 측정하였다: % 억제 = 최대/(1+ (IC₅₀/[억제제])^기울기). 데이타를 변수 추정을 위해 Microsoft Excel 로 분석하였다. 결과는 하기 표 2 에 제시하였다:

실시예 24: 래트 생체 내의 TNF α-유도 IL -6 생성 검정

찰스리버사(Charles River Laboratories)로부터 입수한 암컷 위스타-한(Wistar-Han) 래트를 사용 전 1 주일 동안 순응시키고, 대략 95-130g 의 체중에 이르게 하였다. 래트에 0.5 μg 의 재조합된 래트 TNF-α (Biosource)의 복강 내 접종 30 분 전에, 경구 위관섭식(gavage)을 통해 시험 화합물을 투여하였다. 채혈을 TNF-α접종 90 분 후, 심장천자를 통해 수집하였다. 혈장을 리튬 헤파린 분리 튜브 (BD microtainer)를 사용하여 준비하고, 분석할 때까지 -80℃ 에서 동결시켰다. IL-6 수준을 래트 특이 IL-6 ELISA 키트 (Biosource)를 사용하여 결정하였다. % 억제 및 ED₅₀ 값 (TNF-α 생성이 대조군 값의 50% 인 지점에서의 화합물의 용량으로서 계산함)을 결정하였다. 결과는 하기 표 3 에 제시하였다:

실시예 25: 설치류 콜라겐 유도성 관절염

할란사(Harlan Laboratories)로부터 입수한 생후 7-8 주의 암컷 루이스(Lewis) 래트를 사용 전 1 주일 동안 순응시키고, 대략 120-140 g 의 체중에 이르게 하였다. 실험 당일에, 래트에 프로인트 불완전 애주번트(Incomplete Freund's adjuvant) 중의 100 μg 소 II 형 콜라겐 (Chondrex)의 에멀젼을 사용하여 등의 몇몇 부위에 피내 초회자극하였다 (IFA; 2-3 부위에 총 0.1 ml). 관절염 유도는 일반적으로 초회자극으로부터 12-14 일 후에 관찰되지만; 100 μg 콜라겐/IFA 의 촉진 주사를 꼬리의 바닥에 또는 등의 다른 부위에 7-10 일 근처에 투여하여 (총 0.1 ml 이하로 피내로), 동시에 질환을 유도하였다. 화합물 투여는 예방적 (촉진시 또는 1-2 일 전에 시작) 또는 치료적 (촉진 후 시작 및 초기 질환 점수 1-2 일 때 - 하기 임상소견 점수화 참조)일 수 있다. 동물들을 그 후 21 일에 걸쳐 질환의 발전 및 진행에 대해 평가하였다.

래트를 점수화 시스템 (하기에 기술)을 사용하거나, 체적변화유량계를 사용하여 각각의 발에 대한 발 부피 측정, 또는 캘리퍼스로 발 또는 관절 두께를 측정함으로써 평가하였다. 기준선 측정은 실험 당일 및 부종의 첫 번째 징후에서부터 다시 시작하여 실험의 종결 때까지 주 당 3 번 이하로 수행하였다. 점수화는 각각의 발에 대하여 하기에 따라 평가하였다:

1 = 발 또는 발가락 하나의 부종 및/또는 발적.

2 = 둘 이상의 관절에서의 부종.

3 = 둘 이상의 관절이 포함된 발의 심한 부종.

4 = 발 및 발가락 전체의 심각한 관절염.

각각의 래트에 대한 관절염 지수는 각각의 발의 4 개의 점수를 더하고, 최대 점수 16 점을 부여하여 평가하였다. 질환 발병 및 진행을 연속적으로 측정하기 위해, 뒷발의 발 부피 또한 체적변화유량계를 사용하여 측정하였다.

연구의 마지막에, 뒷발 (및 기타 조직)의 중량 측정, 조직학, 세포적 및/또는 분자적 분석을 수행하였다. 또한, 채혈을 심장천자를 통해 수행하고, 혈장을 리튬 헤파린 분리 튜브 (BD microtainer)를 사용하여 준비 및 분석 때까지 -70℃ 에서 동결시켰다. 혈장 또는 균질 관절 조직으로부터의 염증성 시토킨 수준 (예컨대, TNF-α, IL-1 및 IL-6)을 래트-특이 ELISA 키트 (R&D)를 사용하여 결정하였다. 질환 보호 또는 억제의 수준을 대조군 동물과 비교하여, 임상소견 점수, 발 부피 및 조직병리학에서의 변화의 복합으로서 결정하였다.

실시예 26: TNF α-유도성 인간 연골육종 SW1353 세포에서의 IL -8 생성 검정

SW1353 세포를 American Tissue Culture Collection 으로부터 구입하고, 5% CO₂ 중의 37℃ 배양 조건 하에서, 10% 소태아 혈청 (Invitrogen), 아스코르브산 (Sigma) 및 페니실린 (Invitrogen)을 함유한 DMEM 배지 (Invitrogen)로 이루어진 성장 배지 중에 유지시켰다. 세포를 화합물 처리 48 시간 전, 100 μl 의 배지 중에서 웰 당 1.0 x 10⁴ 세포의 밀도로 플레이팅하였다. 화합물 처리 직전에, 배지를 160 μl 의 새로운 배지로 대체하였다. 화합물 저장액 (10 mM)을 성장 배지 중에서 희석하고, 20 μl 부피 중의 10 배 농축 용액으로서 각각의 웰에 첨가하고, 혼합하여, 세포와 함께 30 분 동안 예비인큐베이션하였다. 화합물 비히클 (DMSO)은 모든 시료 중에서 1% 의 최종 농도로 유지하였다. 30 분 후, 세포를 10 ng/ml 의 TNF-α (Roche Biochem)를 사용하여 활성화시켰다. TNF-α 를 성장 배지 중에서 제조된 10 배 농축 용액으로서 첨가하였으며, 웰 당 20 μl 부피로 첨가하였다. 세포 플레이트를 5 시간 동안 배양하였다. 세포 배지를 수득하고, -20℃ 에서 보관하였다. 배지 분취량을 IL-8 존재 여부에 대해, 제조업자의 지시에 따라 (BD Bioscience) 샌드위치(sandwich) ELISA 로 분석하였다. IC₅₀ 값을 Microsoft Excel 프로그램 중 Xlfit3 을 사용하여, IL-8 생성이 대조군 값의 50% 로 감소된 지점에서의 화합물의 농도로서 계산하였다. 특정 화합물은 상기 검정에서 0.1-20 μM 의 범위의 IC₅₀ 값을 가졌다.

Claims (23)

1. 식 I 의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:

   

   [식 중,

   X¹ 은 N, N-R³, CHR³, C-R³, 또는 O 이고;

   X² 는 N, NH, N-CH₃, CH, CH₂, CHCH₃ 또는 C-CH₃ 이고;

   X³ 은 N, C 또는 CH 이고, 이때 X¹, X², 및 X³ 은 모두 동시에 N 은 아니고;

   X⁴, X⁵ 는 각각 독립적으로 C, CH 또는 N 이고;

   X⁶ 은 N 또는 C-R¹ 이고;

   이때 X¹, X², X³, X⁴, X⁵, 및 X⁶ 중 2 개 이상 및 4 개 이하는 N 이고; 이때 X¹ 과 X², X² 와 X³, X³ 과 X⁴, X⁴ 와 X⁵, X⁵ 와 X¹, 및 X⁵ 와 X⁶ 사이의 결합은 각각 독립적으로 단일, 이중이거나, 또는 방향족 환을 형성할 수 있고;

   R 은 -(시클로헥실)-R² 이고, 이때 시클로헥실은 메틸, 플루오로, 클로로, 또는 히드록시로 임의로 치환되고;

   R¹ 은 할로, 니트로, -CN, -CH₂CN, -OH, -NH₂, -COOH, 또는 -Y¹R⁴ 이고;

   Y¹ 은 -O-, -NH-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NHSO₂-, -NHC(O)-, -C(O)NH-, -C(O)O-, 또는 결합이고;

   R⁴ 는 C_1-6 알킬, 아실, 페닐, 또는 벤질이고, 이들 각각은 0-3 개의 히드록시 또는 할로로 치환되고;

   n 은 0, 1, 또는 2 이고;

   R³ 은 H 또는 C_1-6 알킬이고;

   R² 는 H, -OH, -SO₂NH₂, =O, -CN, 또는 -Y²-Y³-Y⁴-R⁵ 이고, 이때

   Y² 는 -C(O)-, -C(O)NR^a-, -SO₂-, -O-, -NH-, 또는 결합이고;

   Y³ 은 C_1-6 알킬렌 또는 결합이고;

   Y⁴ 는 -O-, -NR^a-, -S-, -SO₂-, -C(O)-, -C(O)NR^a-, -NR^aC(O)-, -NR^aC(O)O-, -NR^aC(O)NR^a-, -NHSO₂-, -SO₂NH-, 또는 결합이고;

   R⁵ 는 C_1-6 알킬, C_3-10 시클로알킬, 헤테로시클릴이고, 이때 R⁵ 는 -OH 또는 -NHR^a 로 임의로 치환되고; 이때 각 R^a 는 독립적으로 H 또는 C_1-6 알킬이고;

   Z 는 수소, 할로, C_1-12 알킬, 또는 NH₂ 이고;

   상기 "헤테로시클릴" 은 질소, 산소 또는 황으로부터 선택된 1, 2, 3 또는 4 개의 헤테로원자가 혼입된, 1 내지 3 개의 환으로 이루어진, 1가 포화 잔기를 의미함].
2. 제 1 항에 있어서, 하기와 같은 화합물:

   X¹ 은 N, N-R³, C-R³, 또는 O 이고;

   X² 는 N, NH, N-CH₃, CH 또는 C-CH₃ 이고;

   X³ 은 N 또는 C 이고, 이때 X¹, X², 및 X³ 은 모두 동시에 N 은 아니고,

   X⁴, X⁵ 는 각각 독립적으로 C 또는 N 임.
3. 삭제
4. 삭제
5. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 식 중 X³ 은 N 이고, X¹ 은 CR³ 인 화합물.
6. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 식 중 R² 는 OH 인 화합물.
7. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 식 중 R¹ 은 벤질옥시이고, n 은 1 인 화합물.
8. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 식 중 X² 는 N 인 화합물.
9. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 식 중 R² 는 -Y²-Y³-Y⁴-R⁵ 이고, 이때 Y² 는 -C(O)NR^a- 이고, R^a 는 H 이고, Y³ 은 C_1-6 알킬렌인 화합물.
10. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 식 중 Y⁴ 는 -SO₂- 인 화합물.
11. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 식 중 R⁵ 는 C_1-6 알킬인 화합물.
12. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 식 중 Y⁴ 는 -S- 인 화합물.
13. 삭제
14. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 식 중 Y⁴ 는 결합이고, R⁵ 는 C_1-6 알킬인 화합물.
15. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 식 중 R¹ 은 -CN 인 화합물.
16. 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물:

    4-[4-(4-벤질옥시-인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-[4-(4-브로모인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-(4-인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노-시클로헥산 카르복실산 (2-메탄술포닐에틸)아미드;

    4-[4-(4-플루오로인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-[4-(4-메톡시-인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-[4-(4-메틸-인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-[4-(4-시아노-인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-(4-인다졸-1-일)-피리미딘-2-일아미노-시클로헥산 카르복실산 (3-히드록시-부틸)-아미드;

    4-[4-(4-니트로-인다졸-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-(4-인다졸-1-일)-피리미딘-2-일아미노-시클로헥산올;

    N-[4-(4-인다졸-1-일)-피리미딘-2-일아미노-시클로헥실] 메탄술폰아미드;

    4-(4-인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노-시클로헥산올;

    4-(4-인다졸-1-일)-피리미딘-2-일아미노-시클로헥산 카르복실산 (1-메틸술포닐-프로프-2-일)-아미드;

    4-(4-인다졸-1-일)-피리미딘-2-일아미노-시클로헥산 카르복실산 (1,5-디히드록시-펜트-3-일)-아미드;

    4-(4-인다졸-1-일)-피리미딘-2-일아미노-시클로헥산 카르복실산 (1-히드록시-부트-2-일)-아미드;

    4-(4-인다졸-1-일)-피리미딘-2-일아미노-시클로헥산 카르복실산 (2,3-디히드록시-프로프-1-일)-아미드;

    4-(4-인다졸-1-일)-피리미딘-2-일아미노-시클로헥산 카르복실산 (1-히드록시부트-3-일)-아미드;

    4-[4-(4-(2-히드록시프로프-2-일)-인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    (4-히드록시피페리딘-1-일)-[4-(4-인다졸-1-일-피리미딘-2-일아미노)-시클로헥실]-메타논;

    (3-피롤리돈-1-일)-[4-(4-인다졸-1-일-피리미딘-2-일아미노)-시클로헥실]-메타논;

    4-[4-(4-히드록시메틸인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-[4-(5-메톡시-인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)시클로헥산 카르복실산 이소프로필아미드;

    4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)시클로헥산 카르복실산 1-히드록시프로프-2-일아미드;

    4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)시클로헥산 카르복실산 2-메톡시에틸아미드;

    4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)시클로헥산 카르복실산 1,3-디히드록시프로프-2-일-아미드;

    4-[4-(6-니트로인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)]-시클로헥산올;

    (3-히드록시피롤리딘-1-일)-[4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥실]-메타논;

    (3-히드록시피롤리딘-1-일)-[4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥실]-메타논;

    4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)시클로헥산 카르복실산 3-히드록시-2-메틸프로프-2-일-아미드;

    1-[2-(4-히드록시시클로헥실아미노)-피리미딘-4-일]-1H-인돌-5-올;

    [4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥실]-모르폴린-4-일-메타논;

    4-[4-(4-아미노인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    1-[2-(4-히드록시시클로헥실아미노)-피리미딘-4-일]-1H-인다졸-6-카르복실산 메틸 에스테르;

    4-[4-(5-메틸인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-[4-(6-플루오로인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    1-[2-(4-히드록시시클로헥실아미노)-피리미딘-4-일]-1H-인돌-4-카르복실산 메틸 에스테르;

    4-[4-(6-메틸인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-(4-인다졸-1-일-피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산 카르복실산 (2-히드록시-2-메틸프로필)아미드;

    4-[4-(3-메틸인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-[4-(3-메톡시인다졸-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-(4-인다졸-1-일-피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산 카르복실산 (2-히드록시에틸)-메틸-아미드;

    1-[2-(4-히드록시시클로헥실아미노)-피리미딘-2-일]-1H-인돌-6-카르복실산 메틸 에스테르;

    4-[4-(5-플루오로인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산 카르복실산 (1-메틸-2-메틸술파닐)-에틸아미드;

    4-[4-(6-메틸인다졸-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-[4-(6-히드록시메틸인다졸-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-(4-인다졸-1-일-피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산 카르복실산 (2-히드록시-2-메틸부트-3-일)아미드;

    4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산 카르복실산 (2-히드록시-프로필)-아미드;

    4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산 카르복실산 (1-메틸술파닐프로프-2-일)-아미드;

    4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산 카르복실산 N-(2-히드록시-에틸)-N-에틸-아미드;

    N-(4-인돌-1-일피리미딘-2-일)-시클로헥산-1,4-디아민;

    N-(1-[2-(4-히드록시시클로헥실아미노)-피리미딘-4-일]-1H-인다졸-6-일)-아세트아미드;

    4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산 카르복실산 시클로프로필메틸 아미드;

    4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산 카르복실산 디메틸아미드;

    4-[4-(5-메틸인다졸-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-1-메틸시클로헥산올;

    4-[4-(5-히드록시메틸인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-[4-(6-아미노인다졸-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    1-[2-(4-히드록시시클로헥실아미노)-피리미딘-4-일]-1H-인돌-3-카르복실산 메틸 에스테르;

    4-(4-[6-(2-히드록시에틸아미노)-인다졸-1-일]-피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산올;

    4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-1-메틸-시클로헥산올;

    4-[4-(5-벤질옥시인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-[4-(4-벤질술파닐-인돌-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    시클로헥실-(4-인돌-1-일피리미딘-2-일)아민;

    1-[2-(4-히드록시시클로헥실아미노)-피리미딘-4-일]-1H-인돌-5-카르복실산 메틸 에스테르;

    4-(4-인다졸-1-일-피리미딘-2-일아미노)-시클로헥사논;

    (1,4-디옥사스피로[4.5]데크-8-일)-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일)아민;

    1-[2-(4-히드록시시클로헥실아미노)-피리미딘-4-일]-1H-인돌-4-카르복실산;

    4-[4-(4-벤질술포닐-인돌-1-일)피리미딘-2-일아미노]시클로헥산올;

    4-(4-인다졸-1-일-피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산카르복실산 시클로펜틸아미드;

    [4-(4-인다졸-1-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥실]-카르밤산 t-부틸 에스테르;

    4-[4-(1-페닐술포닐-1H-인돌-3-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-[4-(1H-인돌-3-일)피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-[4-(1-메틸-1H-인돌-3-일)피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-[4-(1-메틸-1H-인다졸-3-일)피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-[4-(1H-인다졸-3-일)피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-(4-벤조[d]이속사졸-3-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산올;

    4-[4-(7-메톡시-1H-인다졸-3-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-[4-(7-메톡시벤조[d]이속사졸-3-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-[4-(7-메틸-1H-인다졸-3-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-[4-(5-플루오로벤조[d]이속사졸-3-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    4-(4-피라졸로[1,5-b]피리다진-3-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산올;

    4-(4-[1,2,4]트리아졸[4,3-a]피리딘-3-일피리미딘-2-일아미노)-시클로헥산올;

    4-[4-(4-메톡시인다졸-1-일)-피리미딘-2-일아미노]-시클로헥산올;

    (1-[2-(4-히드록시시클로헥실아미노)-피리미딘-4-일]-1H-인다졸-4-일옥시)-아세토니트릴; 및

    N-(1-[2-(4-히드록시시클로헥실아미노)-피리미딘-4-일]-1H-인다졸-4-일)-이소부티르-아미드.
17. 하기 단계를 포함하는 식 (I')의 화합물의 제조 방법:

    

    식 (V)의 화합물을 해당 카르복실산으로 가수분해하는 단계,

    

    [식 중, R² 는 COOMt 또는 COOEt 이고, R_e 및 R_f 는 독립적으로 수소, 히드록실 C_{1 -6} 알킬, C_{1 -6} 알콕시, C_{1 -6} 알킬, C_{3 -10} 시클로알킬, 헤테로알킬, C_{1 -6} 알킬술포닐 또는 C_{1 -6} 알킬술피닐이고, Z 는 N 또는 C 이고, X¹, X², X³ 및 R¹ 은 제 1 항에 정의된 바와 같음],

    및, 상기 카르복실산을 히드록실 C_{1 -6} 알킬-, C_{1 -6} 알콕시-, C_{1 -6} 알킬-, C_{3 -10} 시클로알킬-, 헤테로알킬-, C_{1 -6} 알킬술포닐- 또는 C_{1 -6} 알킬술피닐- 아민과 커플링하는 단계.
18. 제 1 항 또는 제 2 항에 따른 화합물 및 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는, 류마티스 관절염, 천식, 제Ⅱ형 당뇨병, 알츠하이머병, 파킨슨병 또는 뇌졸중의 치료적 또는 예방적 처치를 위한 약학적 조성물.
19. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 치료 활성 물질로서 사용되는 화합물.
20. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, c-Jun N-말단 키나아제 매개 장애의 치료적 및/또는 예방적 처치를 위한 약제의 제조를 위해 사용되는 화합물.
21. 제 20 항에 있어서, c-Jun N-말단 키나아제 매개 장애는 자가면역 장애, 염증성 장애, 대사성 장애, 신경학적 질환, 또는 암인 것인 화합물.
22. 제 20 항에 있어서, c-Jun N-말단 키나아제 매개 장애는 류마티스 관절염, 천식, 제 II 형 당뇨병, 알츠하이머병, 파킨슨병 또는 뇌졸중인 것인 화합물.
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