TW404944B - Process for extracting 10-deacetylbaccatin III - Google Patents

Description

404944 A6 B6 五、發明説明（I ) 木發明係有關中間物之分離•而該等中間物可烴由半合 成之方法而用來製造紫杉酵、紫杉i£<taxotere)和其類似 物0 更特別地•本發明係有Μ 10 -去乙醯基漿果赤黴素自紫 杉樹棰之樹皮、樹幹、樹根或樹Μ中之選擇性的分雛。 紫杉酵、紫杉和其類似物之通式為： ·

RrCO-NH Ar

OH

(I) (請先閲讀背面之注意事項冉塡寫本頁) •裝. 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 其顯示 化學治 腊癌、 在通 自由基 ffi 醯 Γ! 瑤Μ及 R2代表 综基、 紫杉 苯自由 出令人注 療劑· Μ 胃癌、腎 式（I )中 、R可代 fll « ' R ' 著一個饶 苯基或雜 酵為分子 基、R代 目的抗 治療某 • A r可 表著一 基、烯 瑁基之 式（1 ) 表著一 癌和抗 些癌症 扎癌W 更特別m u η 片· PI 笨tH山 基•块 自由基 之產物 個乙醯 白血病特性*而為可信賴的 •例如乳癌、攝護腺癌、直 及更特別地谢巢痛。 池代表著一個随意的取代苯 子或***自由基或N-取代胺 Μ原了-或N -収代胺甲醯自由 自由基•.而其中 基、環烷基、壤烯基、雙環 Ο •而其中Adn I代表著一個 自由基以及R·代表著一個氫 -II. .線丨 ,本紙張/gtjt用中a國家«準(CNS).甲4規格（210 X 297 ¾釐） ί04944 A6 B6 五、發明説明（2 ) 原子。紫杉萜亦為分子式（T >之產物 傾笨自由基、R和R’代表著一傾氳原 個第三丁氧自由基。 紫杉酵是天然地存在於紫杉之不同 極微，因此若不完全毀壞該植物體· 。例如：紫杉酵可以Huang, C.H.O. Prod. 665 (1986)之方法而加 K 括 Μ 甲醉來處理 b.£e.y i f ο 1 i a 萃出液、M二氛^來萃取濃縮液、 物敗置於己烷/丙酮（1/1體積比）之 性部分Μ矽酸鎂（Florisil)管柱層析 紫杉酵•該粗紫杉酵則再Μ甲酵/水 來進行連續再结晶處理*接著烴層析 而予以鈍化之。如此萃出紫杉醇之虽 0 . 0 0 5 至 0.017!« 。 •而其中Ar*代表著一 子以及JU可代表著一 樹種中•而由於其董 是很難將之分離出來 等人· J. Matl. 分《之•該方法也包 胯成粉的樹皮、澹墒 再纆過湄镰、將殘留 混合液中，再將可溶 法來加以純化而得粗 和己烷/丙酮混合液 法和另一種结晶處理 可為植物雅部分之 紫杉萜在自然界中並不存在•但可經由半合成而自分子 式如下的10-去乙釀基漿果赤嫌素H 來製造之： 請先閲讀背面之注意事項再塡寫本頁) 裝. . .線丨 經 濟 部 中 央 標 準 局 貝 X 消 費 合 作 杜 印 製

(Π) 而所根據之方法則描述於•例如美國專利第4,8 1 4,470或 本紙張尺度適用中國國家櫺準（C—S)..斤规格(210.X:297公釐）#專琢寒為於礙— 404944 A6 B6 五、發明説明（3)4,924,012號或画際（PCT)專利出版第W0 92/09589號。 紫杉酵也可自10-去乙醯基漿果赤嫌素B來製造之，而 依美國專利第4,857,653號所描述之條件來繼攮紫杉萜中 間物之製備，或依歐洲專利出版第400,971或428,376號 所描述之條件來酯化漿果赤徽素IB ·或依美國專利第 4,924,01 1號所描述之條件來酿化10-去乙醣基漿果赤鍵 素I *而後再予Μ乙醢化。 不同的紫杉樹種（如T a X u s ba ccata . Taxus h r e v 1 f ο 1 i a . Taxus canadensis. Taxus r u d » d a t. a . Taxus f 1 q r i d a n a . Taxus madia 和 Taxus wal 1 ip.hiana) 皆含有紫杉烷衍生物。主要的衍生物刖為紫杉酵和10-去 乙醢基漿果赤徽素1B。其他的衍生物包括更特別地臞甘霣 素（cephalomanniu)、10 -去乙睡基腦甘露素和獎果赤黴素 a ，而亦可連接至糖類上。 然而紫杉酵主要是存在於樹幹中· 10-去乙醢基漿果赤 徽素I基本上是存在於樹絜中。再者，一般而言*樹窠之 10-去乙醢基漿果赤徽素1含量是遠大於樹皮、樹幹或樹 Μ 含 酵 取， 萃酵 之杉 ιβ 紫 素的 徽多 赤更 果備 漿製 基取 皤萃 乙杉 去紫 I -QQ 10接 是直 的較 要造 重製 別來 杉特用 紫，可 之此其 中因而 葉， -----------；---：------I 、----裝------訂--.----線· ，--Π .(請先閱¾背面之注意事項再塡寫衣頁) · . 經AIE部中央標準局R工消費合作社印製 萜取 杉萃 紫絮 造樹 製杉 來紫 用自 和 植 致 導 不 並 I 素黴 赤 果 漿 基醣 乙 去 每 為 因 分 部 同 不 之 杉 紫 壞自 毀， 全言 完而 之般 體一 物 絮 樹 的 多 5 生 產 期 遇 長 生 俚 皮 樹 根 樹 、 幹 榭 樹 5 較八本紙張尺度逋用中a國家樣準（CNS)甲4规格（210 X 297·»*) .々.d 404944 A6 B6 經 濟 部 中 央 標 準 局 8 工 消 費 合 作 社 印 褽 五、發明説明（4 ) 絜和其類似物）來萃取紫杉烷衍生物之已知方法需要使用 冗長和昂貴的層析技術，但其技術並不能完全並定量地分 離最先即存在於植物體中之紫杉烷衍生物。例如：1〇_去乙 醣基漿果赤雛素I可製備自（Taxus baccata的）樹絜，其 產量為每公斤樹絮約300毫克•而依美圃專利第 4,814,47 0號所描述的方法·其方法包括針絜在乙酵中之 浸钦、有機溶爾如二氯甲烷之萃取和連鑛的層析法。 存在於紫杉中之不同的紫杉烷衍生姐成物也可依*特別 是依國際（PCT)專利出版第W0 92/07842號之方法，而使 用”逆相"液相曆析法來加以分離之。這些方法基本上包 含有以”逆相”層析法來通過處理粗紫杉萃出液•而其中 之吸附劑可固定紫杉烷衍生物，再溶析該等紫杉烷衍生 物而分離之。根據此方法•自〗公斤磨成粉而乾嫌的樹絜 中可分離出200奄克之10-去乙醣基漿果赤徽素I。 因此，本發明係闞於一種籣易的方法•其中不使用層析 技術，而能自紫杉之不同部位（更特別地自其樹葉）來選擇 性地萃取出10-去乙醸基漿果赤徽素®，並有著極佳的產 量。例如：本發明之方法可自每公斤紫杉（TajLU.s baccata)榭鹫中分繾出約&00奄克之10-去乙醢基槳果赤 黴素B。 根據本發明之方法包含有自紫杉樹絜之水性萃出液中分 離出10-去***基漿果赤徽素I。 更特別地，根據本發明之方法包括： 1) 从水來萃取紫杉（Taxus sp.)之粉狀部分* -----------— — I.-----------裝------ir-J----線- - <請先閱讀背面之注意事項再塡寫本頁) 本紙張尺度適用中B國家標準（CNS)甲4规格（210 X 297女妗釦，? 年月 5) 將 1 0 -自脂族 6) 將純化 根據本發 皮、樹幹、 第82108097號專利申謫菜 中文說明窨修正頁（87年8月） 五、發明説明（上；） 404944 2) 將所得含有10-去乙醣基獎果赤徽素B之水萃出液與 萃取過的紫杉粉狀部分分開， 3) Μ有楗溶劑將來自分開的水萃出液中萃取出10-去乙 醯基漿果赤徽素J[。然後將含有10 -去乙醸基漿果赤 徽素BI之有機萃出液與水曆分開，或首先將10_去乙 醢基漿果赤徽素m吸附至合適之受質上然後再以有機 溶劑將之自該受質脫附， 4) 自分開的有機萃出液或脫附液中除去有櫬溶劑而生成 残留物， 去乙醸基漿果赤徽素1Π自所得的殘留物中以選 腈之有機溶劑選擇性地结晶出來，和 的ίο -去乙醢基漿果赤徽素m分離出來。 明之方法可使用紫杉之任何合適的部分，如樹 樹根或樹葉。可用來完成根據本發明之方法的 1. I - - ------丨- —^- - - I I n li、1τ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） 404944 A6 B6 經濟部中央標準局8工消費合作社印* 五、發明説明（6 ) 紫杉較佳地是驅於Μ下樹棰：Tax us_ b a c c a t a . Taxus b r e v i f 〇 1 i a . Taxus t^anadfinsis. Taxus c u d i d a t a . Taxus f1q r i d a n a . Taxus media 或 Taxus wal 1 ichiana) 。特別有利地是使用紫杉樹絮（如Taxus baccata, Taxus brevifol ia)，因其内通常含有豐富的10 -去乙醸基漿果赤 徽素B。所使用的樹葉片斷•其大小可從0.5至數毫米之 間。為了方便起見•使用其大小少於1奄米之片斷也是有 利的。紫杉之磨成粉的、乾煉亦可部分可經由研磨或乾煉 亦可之作來製備之*而植物體之新鲜部分亦可在冷凍和融 化操作之前、同時或之後加入之。 絷杉粉狀部分之水處理是使用热諳此藝者所知的技術來 進行。特別地|含10-去乙醯基漿果赤徽素Μ之水溶液通 常是Κ紫杉之粉狀部分在水中攪拌30分鐮至2小時，而溫 度在20至65 t：之間，而製備之。水之用量可在寬廣的範圍 内變化；無論如何*其遴當之用董為每公斤粉狀的乾植物 部分2至10公升水，而較佳地每公斤植物部分使用約5公 升的水。有利地是使用去礦物質的水來進行處理，和以超 音波來進行處理。 為了改進產量之目的，有利地是可依Μ下所述的條件來 進行水與植物體之一些處理* Μ得到^溶液而可再由其中 萃取出10-去乙醢基漿果赤徽素I。 所得含10-去乙醯基漿果赤黻素II之水溶液是Μ普通技 術如遇《、雕心或沉降來與植物體分開。該生成的水溶液 *亦可冷卻之，可依Μ下方法之一種來處理： -------------------------裝------1T-T-----線- .(請先間讀背面之注意事項再塡寫本一H) _ 一 本紙張尺度逋用中鼷國家櫟準<CNS)甲4规格（210 X 297公嫠〉 第82108097¾専利申請案 1 二. 年月日 A7 中文說明書修正頁(87年8月)[__補乾j___ 五、弩明説明（f). 404944 1) Κ 一種有機溶劑來萃取10-去乙醯基漿果赤嫌素里一段 時間。有機溶劑係選自甲基第三丁基醚、乙基第三丁基醚 、甲基正丁基醚、甲基正戊基醚、乙基第三戊基醚、第三 丁基異丙基醚、乙基異丁基醚、第三丁基丙基醚和乙基正 己基醚* Μ及腊族酯如乙酸乙酷、乙酸丙酯、乙酸異丙酯 、乙酸正丁酯、乙酸第三丁酯、乙酸甲基第三丁酷、丙酸 第三丁酯和乙酸第三戊酯。甲基第三丁基醚、乙基第三丁 基鰱、乙酸乙酯或乙酸正丁酷則為特別有利的。 有機溶液之萃取通常在水溶液中進行，而其出值是低於 7，較佳地低於6。 含10-去乙睡基漿果赤嫌秦Μ之有機萃出液是以普通技 術如沉降之應用來與水層分開。 該有機萃出液亦可以弱馘水溶液（例如碳酸納水溶液）和 /或水來清洗之。經過乾燥後，該萃出液之有櫬溶液是以 普通方法來除去，較佳地為蒸餾，亦可在減壓下進行*而 產生通常為固體之殘留物，而其中可分離出10-去乙醢基i 漿果赤嫌素ίί。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (讀先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 2) 以一種合適的受質來自水溶液中吸附而固定10-去乙瞌 基漿果赤徽素Π。該受質較佳地為一種吸附樹脂，更佳地 為聚笨乙烯/二乙烯笨共聚樹脂。 10-去乙醯基漿果赤徽素JI之脫附是以一種合適的溶劑 來清洗該受質而完成之。該溶劑較佳地為含1至3個碳原子 之脂族醇，更特別地為甲醇。 本纸乐尺度適用中國國家捸準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） 第82108097號專利申請案 ...A7 ; 中文說明^^毬箸8月)^一…一 m__ 五、發明説明（家） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本i )

該有機溶液通常是MS»來與受質分開，然後再以通常 的蒸皤，亦可在減壓下進行，來濃縮至乾煉•而產生通常 為固體之殘留物，而其中可再分«Γ出10-去乙醯基槳果赤i 嫌素]ί。 I 粗10-去乙瞌基漿果赤徽素ΒΙ選擇性的结晶作用可經由i 兩種方法之任一種，而Μ殘留物之溶液在一種有機溶劑或1 其混合液中進行之，該溶劑係選自腈類如乙腈、丙腈或異 丁腈。特別有利地是在乙腈•亦可存在有乙酵和/或乙酸 乙酯或乙酸正丁酯和/或丙嗣，之中來進行選擇性的结晶 作用。 沉澱的10-去乙皤基漿果赤-徽素Μ.可以過滤、沉降或離 心來加Κ分開。 根據本發明之方法可能地製備出一樣純的10-去乙醣基 漿果赤徽素I，而其產量通常遠大於上述巳知方法所得之： 產量。本發明方法可能地萃取出含在植物體部分，尤是樹 葉中之等量全部的10-去乙醯基漿果赤嫌素Μ。 經濟部中央標準局員工消費合作社印装 本發明之萃取方法所製備之10-去乙醯基漿果赤徽素]I丨 可用於製造紫杉醇、紫杉萜和其衍生物，而更特別地依歐 洲專利說明書第 0,253,738、0,253,739、0,336,841、 〇,336,840、0,400,971和 0,428,376 號以及國際（卩01')專 -10 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） 404Θ44 五、發明説明（9 ) 利出版第tfO 92/09589號中所述之條件來進疔之。 本發明之方法可藉以下實施例作進一步之說明，該等實 施例僅作為說明之用，而非用於限制本發明之範圍。 500克粉狀的乾装杉榭M (Taxus baccata)在50C下加 入至2.5升去礦物質的水中·而其樹葉粒子之平均大小是 小於1毫米*和其10-去乙醮基漿果赤嫌素I烴由高性能 液相層析法（HPLC)之分析為0.08X (即500克樹絮中含有 40 0毫克之10-去乙》基漿果赤徽素H)。該混合液在 50它下搢拌1小時後過濾之。 該過濾液（1.8升）*其由值為5.4 ，是以0.9升乙酸乙 酯來萃取三次。該姐合的有機層（2.7升）則K1升0.1莫耳 濃度之碳酸納溶液來清洗2次*再K1升去礦物質的水來 清洗2次*最後Μ無水硫酸納來脫水之。經遇滤及漉縮至 乾煉後，可製備得一個3.2克之固體，而於701C溫度範圍 内，以9毫升乙臍來溶取之。經+41C之溫度下冷卻過夜後 ，該沉澱物是Μ遇濾來分開之。經乾燥後，如此可得2 45 奄克之结晶，而纆HPLC分析後，其中含有75Χ之純10-去 乙醸基漿果赤徽素Μ ，即183奄克。ίδ據HP LC之分析•母 <請先閲讀背面之注意事項再填寫表頁) 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 紙 次 2 取 。萃 B來 素件 黴條 赤之 果述 漿上 基依 釀再 乙則 去體 - 物 10植 克之 毫水 40升 有 7 含0. 仍有 中保 液 之經 克。 5 之 2 取 得溶 可來 此脯 如乙 。升 之奄 理 5 處 Μ 來， 述内 上園 依範 再度 液溫 濾 Ρ 遇70 性於 水而 合 ， 组♦體 該♦固 1Λ 11 準 標 家 國 國 中 用 適 s) (21 A6 404944 B6 五、發明説明（10) + 41之溫度下冷卻過夜後，169毫克之结晶是Μ過濾來加 Μ分開。根據HPLC之分析，結晶中含有75Χ之純10-去乙 醢基漿果赤徽素I ，即127毫克。母液中，根據HPLC之分 析·仍含有47毫克之10-去乙醣基漿果赤嫌素U。 以水所萃出10-去乙醢基漿果赤黴素置之總量為 183 + 40 + 127 + 47 = 397毫克。該產量是等量的。 g撫锎2 3升的去礦物霣水經加熱至50C ·而後再加入500克粉 狀的乾紫杉樹絮*而其樹葉粒子之平均直徑為1毫米，和 其10-去乙«基漿果赤«素IB經由高性能液相層析法 (HPLC)之分析為0.08X(即5 00克樹莆中含有400毫克之10-去乙醢基漿果赤黴素11)。該混合液在50t：下攪拌1小時 後過濾之。該過濾液（1 . 97升 >，其出值為5.15，是以添加 瀟鹽酸來調整其出值至4.6，然後在Seitz過滹器内過滤之 ，而其過滤膜為石綿板。所收集的過濾液為1.8升。 300毫升之過濾液是以150毫升甲基第三丁基醚 (MTBE)來萃取2次，再以60毫升來萃取4次。該組合的和 濃縮的萃出液生成620毫克的固體，而於70t!下以3毫升 乙臃來溶取之。 經冷卻遇夜後，28毫克结晶的10-去乙醢基漿果赤 徽素1是K過濾來加K分開，而其純度經HPLC分析為90X 。母液中仍含有12.8鼍克之10-去乙醣基漿果赤徽素II ( 經由HPLC之分析）。 .(請先閱讀背面之注急事項再填驾本頁) ----裝------# i J----Ί 線· 經濟部中央標準局貝工消费合作社印製 -12 - 404944 B： 經濟部中央標準局貝工消费合作社印製 五、發明説明（li) g倫例3 1公斤新鲜切下的紫杉(Taxus. b.a.cca.t.a)樹葉，其水分 含量為69X和其10-去乙醸基漿果赤徽素II含量為每公斤 651毫克（M HPLC來測定），和去礦物質水一同在混合_内 粉碎之，而在101連續相同的操作中每次使用100克樹絮 和500毫升水，其溫度為201C。所得的混合液以棉布過濾 後，再Μ濾紙過之，而後W缌最2P0奄升的水來潤洗。所 收集的過濾液為5000毫升•即水的總體積之84.9!Κ (所用 的水和樹葉内所含的水）。根據HPLC之定量澜定，如此而 得之水溶液含有72克固體*包括550毫克之10-去乙醯基 漿果赤嫌素I ，即等於理綸值之5 52.7毫克（651毫克之 84.9¾) ° 植物體所吸附水中之刺餘的10-去乙醯基漿果赤黴素I 可Μ水來清洗植物體而予Μ回收。 該水溶液（5000毫升）則通過內徑5公分而填充有10公分 聚苯乙烯/二乙烯苯共聚樹脂（德國Stuttgart之 Tosohaas公司之 Anberchro· CG. 161 nd*®)之管柱。 該樹脂Μ水來濶湄、乾煉後再懸浮於甲酵中。該遇濾液 經過濾和濃縮至乾煉後•可製備得15.5克之殘留物，而Κ 100毫升乙酸乙酯來溶取之。8.7克之不溶性產物是Μ過 濾來加Κ分開，而該過濾液則再濃縮至5奄升之體積。加 入30毫升之乙腩後，可得到淸镦的溶液，而其中很快地有 白色结晶生成。經4X：下靜置過夜後，該白色结晶以遇滹 -13 - {請先閲讀背面之;i意事項再場寫衣頁)

衣纸張尺度適用中國Β家標準(CNS)甲一规格(210 X 404944 A6 B6 五、發明説明（12) 分開而乾烽之。以一莫耳之乙臍來當溶劑，如此可得到 548毫克之10-去乙醢基漿果赤嫌素BI *而有92¾之純度 K内標準法之HPLC定量测定顯示出這些结晶含有82¾ 10-去***基漿果赤嫌素®。該10-去乙醯基漿果赤黴素 I之產量因此為75.4«。 (請先間讀背面之注意事項再塡寫衣I) --° 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本紙張九度適用中國國家標準(CNS>甲4破格(210><^297全釐）_部命^〇^

Claims (1)

1. 第82108097號専利申謫系 中文申正本(89年6月） A8 B8 C8 D8 P· 6. 2~8 年月 曰 i丄二 fill 經濟部申央梯隼局貝工消費合作社印製 ττ、申請專利範固一 l —種自紫杉樹（lajun sp.)之部分萃取10-去乙醣基漿果 赤徽素I之方法•其包括 1) Μ水萃取經研磨之紫杉部分； 2) 將所得含有10 -去乙醯基漿果赤徽素II之水萃出液 與萃取過的經研磨遇之紫杉部分分離； 3) Μ選自甲基第三丁基醚、乙基第三丁基醚、甲基正 丁基醚、甲基正戊基醚、乙基第三戊基醚、第三丁 基異丙基醚、乙基異丁基醚、第三丁基丙基醚、乙 基正己基醚、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸異丙酯、 乙酸正丁酯、乙酸第三丁醋、乙酸甲基第三丁酯、 丙酸第三丁酯和乙酸第三戊酯之有機溶劑自经分離 之水萃出液中萃出10-去乙醯基漿果赤徽素I然後 將含有10-去乙醢基漿果赤徽素HI之有機萃出液與 水相分離*或首先將10-去乙醯基漿果赤徽素B吸 附至適宜之受質上然後再K有楗溶劑將之自受質上 脫附； 4) 自分離之有機萃出液或脫附液中移除有櫬溶劑而生 成殘留物， 5) 將10-去乙醢基漿果赤徽素I自所得的殘留物中Μ 選自脂族腈之有機溶劑内埋擇性地晶析；Μ及 6) 將纯化的10-去乙醢基漿果赤黴素II單離出來。 2· 根據申請專利範圍第1項之方法，其中該水性萃出液之 出值小於7。 3· 根據申請専利範圍第2項之方法*其中該水性萃出液之 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X29?公釐） ---------裝----ί J-4—ir---1---線 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) Α8404944 ?1 D8六、申請專利範圍 有分 含層 使水 降與 沉液 Μ 出 是萃 中劑 其溶 ，櫬 法有 方之 之 I 項素 1嫌 第赤 圍果 範漿 。利基 60專睹 於請乙 小申去 值據 _ 由根10 Μ 出水 是萃之 劑機碱 溶有弱 櫬之經 有 Β 性 該素擇 中徽選 其赤可 ，果亦 法漿前 方基之 之豳此 項乙在 1 去液 第-出 圍10萃 範含該 利自而 專之， 請將除 申而移 據餾中 根蒸液 在 是 劑 溶 機 有。 該去 中除 其移 , 中 法液 方出 之萃 項機 。5 有 洗第自 沖圍之 來範將 水利而 或專餾 \請蒸 和申下 液據壓 溶根減 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 7· 根據申請専利範圍第1項之方法，其中步驟（3)中之水 性萃出液是Μ通過樹脂而進行吸附作用。 a 根據申請專利範圍第7項之方法，其中該樹脂為聚笨乙 烯/二乙烯苯樹脂。 a 根據申請專利範圍第1項之方法·其中該10-去乙醢基 漿果赤黴素II自受質之脫附作用是Μ有機溶劑進行。 ία 根據申請專利範团第9項之方法，其中所使用的有機溶 劑為含有1至3個碳原子之脂族酵。 11 根據申請專利範圍第10項之方法，其中該有櫬溶劑為甲 酵。 12 根據申請專利範圍第1項之方法，其中含有10-去乙醢 基漿果赤徽素I之有機溶劑溶液是濃縮至乾煉。 13. 根據申請專利範圍第12項之方法，其中該濃縮是Κ蒸豳 (可選擇性在減壓下）進行。 ^ ： 裝----訂---r[LI 線 (請先閲讀背面之注意Ϋ項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家榇準（CNS ) A4現格（210X297公釐） A8 B8 侧 944_〇8 々、申請專利範圍 W. 根據申請專利範圍第1項之方法，其中用於選擇性地晶 析之溶劑係乙脯或丙腈。 15· 根據申請專利範圍第1項之方法，其中10-去乙醢基漿 果赤徽素I是以過漳、沉降或離心加Μ分離。 根據申請專利範園第1項之方法，其中經研磨之絮杉（ 可選擇性經乾堍）部分是Μ水於20至65C下攪拌而萃取 0 17- 根據申請專利範圃第16項之方法，其中該烴研磨之紫杉 之（可選擇性經乾燦）部分是經由研磨和選擇性乾堍處理 而製備*其可在新鲜紫杉部分冷凍與融化處理之前、之 間或之後進行。 ia 根據申謓專利範圍第16項之方法·其中每公斤烴研磨乾 燥紫杉部分使用2至10公升的水。 ia 根據申請專利範圍第16項之方法，其中使用去礦物質水 〇 2α 根據申請專利範圍第16項之方法，其中Μ水之萃取是使 用超音波進行處理。 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 21 根據申請專利範圍第16項之方法，其中含有10-去乙醸 基漿果赤嫌素Ε之水性萃出液是Μ過滅、離心或沉降而 與萃取過的紫杉粉狀部分分離。 22 根據申請專利範圍第1項之方法*其中10-去乙睡基漿果 赤徽素m是萃取自紫杉之樹皮、樹幹、樹根或樹葉。 2a 根據申請專利範圍第1項之方法，其中ίο-去乙醯基漿 果赤徽素μ是萃取自紫杉之樹葉。 本紙張尺度逋用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） 8 88 8 ABCD a04u44 申請專利範圍 24. 根據申請專利範圍第1項之方法，其中該紫杉是屬於Μ 下樹種：Ta X u s b a g c a t a‘ Ta x u s b r e v i f ο I i a . Ta x u s canadensis. T a x u s c u p i d a t a . T a x u s floridana. Ta x u s media 和 T a x u s wal 1 ichiana) 〇 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印策 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 绶齊郎t矢溧隼苟員二省斧含咋^平釔

   年月 5) 將 1 0 -自脂族 6) 將純化 根據本發 皮、樹幹、 第82108097號專利申謫菜 中文說明窨修正頁（87年8月） 五、發明説明（上；） 404944 2) 將所得含有10-去乙醣基獎果赤徽素B之水萃出液與 萃取過的紫杉粉狀部分分開， 3) Μ有楗溶劑將來自分開的水萃出液中萃取出10-去乙 醯基漿果赤徽素J[。然後將含有10 -去乙醸基漿果赤 徽素BI之有機萃出液與水曆分開，或首先將10_去乙 醢基漿果赤徽素m吸附至合適之受質上然後再以有機 溶劑將之自該受質脫附， 4) 自分開的有機萃出液或脫附液中除去有櫬溶劑而生成 残留物， 去乙醸基漿果赤徽素1Π自所得的殘留物中以選 腈之有機溶劑選擇性地结晶出來，和 的ίο -去乙醢基漿果赤徽素m分離出來。 明之方法可使用紫杉之任何合適的部分，如樹 樹根或樹葉。可用來完成根據本發明之方法的 1. I - - ------丨- —^- - - I I n li、1τ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） 第82108097¾専利申請案 1 二. 年月日 A7 中文說明書修正頁(87年8月)[__補乾j___ 五、弩明説明（f). 404944 1) Κ 一種有機溶劑來萃取10-去乙醯基漿果赤嫌素里一段 時間。有機溶劑係選自甲基第三丁基醚、乙基第三丁基醚 、甲基正丁基醚、甲基正戊基醚、乙基第三戊基醚、第三 丁基異丙基醚、乙基異丁基醚、第三丁基丙基醚和乙基正 己基醚* Μ及腊族酯如乙酸乙酷、乙酸丙酯、乙酸異丙酯 、乙酸正丁酯、乙酸第三丁酯、乙酸甲基第三丁酷、丙酸 第三丁酯和乙酸第三戊酯。甲基第三丁基醚、乙基第三丁 基鰱、乙酸乙酯或乙酸正丁酷則為特別有利的。 有機溶液之萃取通常在水溶液中進行，而其出值是低於 7，較佳地低於6。 含10-去乙睡基漿果赤嫌秦Μ之有機萃出液是以普通技 術如沉降之應用來與水層分開。 該有機萃出液亦可以弱馘水溶液（例如碳酸納水溶液）和 /或水來清洗之。經過乾燥後，該萃出液之有櫬溶液是以 普通方法來除去，較佳地為蒸餾，亦可在減壓下進行*而 產生通常為固體之殘留物，而其中可分離出10-去乙醢基i 漿果赤嫌素ίί。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (讀先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 2) 以一種合適的受質來自水溶液中吸附而固定10-去乙瞌 基漿果赤徽素Π。該受質較佳地為一種吸附樹脂，更佳地 為聚笨乙烯/二乙烯笨共聚樹脂。 10-去乙醯基漿果赤徽素JI之脫附是以一種合適的溶劑 來清洗該受質而完成之。該溶劑較佳地為含1至3個碳原子 之脂族醇，更特別地為甲醇。 本纸乐尺度適用中國國家捸準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） 第82108097號專利申請案 ...A7 ; 中文說明^^毬箸8月)^一…一 m__ 五、發明説明（家） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本i ) 該有機溶液通常是MS»來與受質分開，然後再以通常 的蒸皤，亦可在減壓下進行，來濃縮至乾煉•而產生通常 為固體之殘留物，而其中可再分«Γ出10-去乙醯基槳果赤i 嫌素]ί。 I 粗10-去乙瞌基漿果赤徽素ΒΙ選擇性的结晶作用可經由i 兩種方法之任一種，而Μ殘留物之溶液在一種有機溶劑或1 其混合液中進行之，該溶劑係選自腈類如乙腈、丙腈或異 丁腈。特別有利地是在乙腈•亦可存在有乙酵和/或乙酸 乙酯或乙酸正丁酯和/或丙嗣，之中來進行選擇性的结晶 作用。 沉澱的10-去乙皤基漿果赤-徽素Μ.可以過滤、沉降或離 心來加Κ分開。 根據本發明之方法可能地製備出一樣純的10-去乙醣基 漿果赤徽素I，而其產量通常遠大於上述巳知方法所得之： 產量。本發明方法可能地萃取出含在植物體部分，尤是樹 葉中之等量全部的10-去乙醯基漿果赤嫌素Μ。 經濟部中央標準局員工消費合作社印装 本發明之萃取方法所製備之10-去乙醯基漿果赤徽素]I丨 可用於製造紫杉醇、紫杉萜和其衍生物，而更特別地依歐 洲專利說明書第 0,253,738、0,253,739、0,336,841、 〇,336,840、0,400,971和 0,428,376 號以及國際（卩01')專 -10 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） A5 B5 404944 中文發明Μ委（使咧之名W : 萃取10-去乙發基獎果赤嫌素Μ之方法 自紫杉樹（I a X υ ^ sp.)之部分製備10 -去乙豳基维果赤黴 素Μ ’其係Μ水處理紫杉之通當部分，然後再Μ有櫬溶细 萃取所得水性溶液，或者是使用適當的受質^吸附10_去乙 醢基雖果赤緻素JJ，然後再以合通的溶爾脫附，兩種方法 均接著邇擇性晶析1〇_去乙醢基漿果赤徽素I。 先 閱 讀 背 意 事 項 Λ 4 % 本 1Γ 备 撊 ‘装 英文發明摘委（發明之名稱： "PROCESS FOR EXTRACTING 10-DEACETYLBACCATIN IIΓ 訂 l〇-Deacetylbaccatin III is obtained from parts of yew (Taxus sp·) by treating appropriate parts of yew with water and then extracting the aqueous solution obtained with an organic solvent or adsorbing the 10-deacetylbaccatin III on an appropriate substrate followed by desorption of the 10-deacetylbaccatin III with a suitable solvent, and then in both cases selectively crystallizing the 10-deacetylbaccatin III. 附:本f己向 β] i池15 / f锖專刊.申：ίτ曰ΛΙ : 素St : 法 1992.10.5. 9211745 2 線 鳗濟部中兴樣；ί-扃印ti 第82108097號専利申謫系 中文申正本(89年6月） A8 B8 C8 D8 P· 6. 2~8 年月 曰 i丄二 fill 經濟部申央梯隼局貝工消費合作社印製 ττ、申請專利範固一 l —種自紫杉樹（lajun sp.)之部分萃取10-去乙醣基漿果 赤徽素I之方法•其包括 1) Μ水萃取經研磨之紫杉部分； 2) 將所得含有10 -去乙醯基漿果赤徽素II之水萃出液 與萃取過的經研磨遇之紫杉部分分離； 3) Μ選自甲基第三丁基醚、乙基第三丁基醚、甲基正 丁基醚、甲基正戊基醚、乙基第三戊基醚、第三丁 基異丙基醚、乙基異丁基醚、第三丁基丙基醚、乙 基正己基醚、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸異丙酯、 乙酸正丁酯、乙酸第三丁醋、乙酸甲基第三丁酯、 丙酸第三丁酯和乙酸第三戊酯之有機溶劑自经分離 之水萃出液中萃出10-去乙醯基漿果赤徽素I然後 將含有10-去乙醢基漿果赤徽素HI之有機萃出液與 水相分離*或首先將10-去乙醯基漿果赤徽素B吸 附至適宜之受質上然後再K有楗溶劑將之自受質上 脫附； 4) 自分離之有機萃出液或脫附液中移除有櫬溶劑而生 成殘留物， 5) 將10-去乙醢基漿果赤徽素I自所得的殘留物中Μ 選自脂族腈之有機溶劑内埋擇性地晶析；Μ及 6) 將纯化的10-去乙醢基漿果赤黴素II單離出來。 2· 根據申請專利範圍第1項之方法，其中該水性萃出液之 出值小於7。 3· 根據申請専利範圍第2項之方法*其中該水性萃出液之 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X29?公釐） ---------裝----ί J-4—ir---1---線 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)