KR102619015B1 - 면역 반응을 조절하는 방법 - Google Patents

면역 반응을 조절하는 방법 Download PDF

Info

Publication number
KR102619015B1
KR102619015B1 KR1020197027119A KR20197027119A KR102619015B1 KR 102619015 B1 KR102619015 B1 KR 102619015B1 KR 1020197027119 A KR1020197027119 A KR 1020197027119A KR 20197027119 A KR20197027119 A KR 20197027119A KR 102619015 B1 KR102619015 B1 KR 102619015B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
amino acid
polypeptide
acid sequence
cases
polypeptides
Prior art date
Application number
KR1020197027119A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20190141125A (ko
Inventor
로날드 디. 3세 사이델
로돌포 제이. 차파로
Original Assignee
큐 바이오파마, 인크.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 큐 바이오파마, 인크. filed Critical 큐 바이오파마, 인크.
Priority to KR1020237044568A priority Critical patent/KR20240005989A/ko
Publication of KR20190141125A publication Critical patent/KR20190141125A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102619015B1 publication Critical patent/KR102619015B1/ko

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • A61K38/1774—Immunoglobulin superfamily (e.g. CD2, CD4, CD8, ICAM molecules, B7 molecules, Fc-receptors, MHC-molecules)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
    • C07K14/70539—MHC-molecules, e.g. HLA-molecules
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/162—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/20—Interleukins [IL]
    • A61K38/2013—IL-2
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A61K47/644—Transferrin, e.g. a lactoferrin or ovotransferrin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/54—Interleukins [IL]
    • C07K14/55—IL-2
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/79—Transferrins, e.g. lactoferrins, ovotransferrins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2818—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against CD28 or CD152
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2827—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against B7 molecules, e.g. CD80, CD86
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/62—DNA sequences coding for fusion proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C07K2317/524—CH2 domain
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/71—Decreased effector function due to an Fc-modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/36011—Togaviridae
    • C12N2770/36111—Alphavirus, e.g. Sindbis virus, VEE, EEE, WEE, Semliki
    • C12N2770/36141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2770/36143—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector

Abstract

본 개시내용은 개체에서 면역 반응을 조절하는 방법을 제공한다. 본 개시내용은 치료 방법을 제공한다. 본 개시내용은 개체에 다량체 폴리펩타이드(synTac) 및 면역관문 저해제를 투여하는 방법을 제공한다. 본 개시내용은 면역관문 저해제로 치료를 받고 있는 개체에 다량체 폴리펩타이드(synTac)를 투여하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.

Description

면역 반응을 조절하는 방법
상호 참조
본 출원은 2017년 3월 15일자로 출원된 미국 가출원 특허 제62/471,832호 및 2017년 6월 16일자로 출원된 미국 가출원 특허 제62/521,009호의 유익을 주장하며, 이들 기초출원은 본 명세서에 이들의 전문이 참고로 편입된다.
적응 면역 반응은 주조직 적합 복합체(major histocompatibility complex: MHC; 또한 인간에서 인간 백혈구 항원(human leukocyte antigen: HLA) 복합체로서 지칭됨)에 의해 항원 제시 세포(antigen presenting cell: APC) 표면 상에 비공유적으로 제시되는 작은 펩타이드 항원과, T 세포 표면 상에 존재하는 T 세포 수용체(TCR)의 맞물림을 수반한다. 이 맞물림은 면역계의 표적화 메커니즘을 나타내고, T 세포 조절(활성화 또는 저해)을 위한 필수 분자 상호작용 및 효과기 기능이다. 에피토프-특이적 세포 표적화 후에, 표적화된 T 세포는 APC 상에서 발견되는 공자극 단백질과 T 세포의 상대 공자극 단백질의 맞물림을 통해 활성화된다. 신호는 둘 다 - T 세포 공자극 단백질과 APC 공자극 단백질의 에피토프/TCR 결합 및 맞물림 - T 세포 특이성 및 활성화 또는 저해를 유도하는 데 필요하다. TCR은 주어진 에피토프에 대해 특이적이지만; 그러나, 공자극 단백질은 에피토프 특이적이지 않으며 대신에 모든 T 세포 상에서 또는 거대 T 세포 서브세트 상에서 일반적으로 발현된다.
US 2017/0058015는 면역 반응을 조절하는 데 사용하기 위한 다량체 폴리펩티드를 개시합니다. Karaki et al. ((2016) Vaccines 4:37)은 암 치료에서 암 백신과 면역 체크포인트 차단의 조합을 개시합니다.
US 2017/0058015
Karaki et al. (2016) Vaccines 4:37
본 개시내용은 개체에서 면역 반응을 조절하는 방법을 제공한다. 본 개시내용은 치료 방법을 제공한다. 본 개시내용은 개체에게 다량체 폴리펩타이드(synTac) 및 면역관문 저해제를 투여하는 방법을 제공한다. 본 개시내용은 면역관문 저해제로 치료를 받고 있는 개체에게 다량체 폴리펩타이드(synTac)를 투여하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
도 1A 내지 도 1D는 T-세포 조절 다량체 폴리펩타이드의 다양한 실시형태를 개략적으로 도시하는 도면. 이들 실시형태에서, 이황화 결합은 MHC(예를 들어, HLA)와 별개의 폴리펩타이드에 존재하는 폴리펩타이드 사이에 형성된다.
도 2A 내지 도 2q는 야생형 인간 IL-2의 아미노산 서열(도 2A); 및 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 아미노산 서열(도 2B 내지 도 2q)을 제공하는 도면.
도 3A 내지 도 3c는 IL-2 수용체 알파쇄(도 3A), 베타쇄(도 3B) 및 감마쇄(도 3c)의 아미노산 서열을 제공하는 도면.
도 4a 내지 도 4c는 면역글로불린 Fc 폴리펩타이드의 아미노산 서열을 제공하는 도면.
도 5a 내지 도 5c는 인간 백혈구 항원(HLA) 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드의 아미노산 서열을 제공하는 도면. 신호 서열은 밑줄 표시한다.
도 6은 호모 사피엔스(Homo sapiens)(NP_004039.1; 서열번호 95), 판 트로글로다이테스(Pan troglodytes)(NP_001009066.1; 서열번호 195), 마카카 물라타(Macaca mulatta)(NP_001040602.1; 서열번호 96), 보스 타우루스(Bos taurus)(NP_776318.1; 서열번호 97) 및 무스 무수스쿨루스(Mus musculus)(NP_033865.2; 서열번호 98)로부터의 베타-2 마이크로글로불린(β2M) 전구체(즉, 리더 서열을 포함)의 다중 아미노산 서열 정렬을 제공하는 도면. 아미노산 1 내지 20은 신호 펩타이드이다.
도 7a 내지 도 7b는 일시적 형질감염 후에 본 개시내용의 IL-2/synTac("Cue-IL-2-a" 및 Cue-IL-2-b")의 생산을 도시한 도면. 도 7a는 비정제 수율을 도시하고; 도 7b는 정제된 생성물을 도시한다.
도 8a 내지 도 8b는 IL-2 폴리펩타이드가 경쇄(MHC 클래스 I 분자의 경쇄(예를 들어, β2M)을 갖는 폴리펩타이드 쇄) 상에 또는 중쇄(MHC 클래스 I 분자의 중쇄를 갖는 폴리펩타이드 쇄) 상에 존재하는 본 개시내용의 IL-2/synTac 생산을 도시한 도면.
도 9는 IL-2가 야생형(wt)이거나, 또는 F42A, D20K, Q126A, E15A, Y45A 및 H16A의 다양한 조합물을 포함하는 IL-2/syn-Tac의 발현 수준을 도시한 도면.
도 10은 IL-2가 synTac에서 1개의 복제물(1X), 2개의 복제물(2X) 또는 3개의 복제물(3X)로 존재하는 본 개시내용의 IL-2/synTac의 발현을 도시한 도면.
도 11은 본 개시내용의 IL-2/synTac에 의한 항원-특이적 CD8+ T 세포 및 비-특이적 CD8+ T 세포의 시험관내 자극을 도시하되, F42A 및 H16A 치환을 포함하는 IL-2 변이체가 2개의 복제물로 synTac에 존재하는 도면.
도 12는 특이적(림프구성 맥락수막염 바이러스; LCMV) 또는 비-특이적(OT1; 오발부민 인식) CD8+ T 세포에 대한 IL-2/synTac 결합을 도시한 도면.
도 13은 항원-특이적(LCMV) 또는 비-특이적(BL6) CD8+ T 세포에서 IL-2/synTac-매개 신호전달을 도시한 도면.
도 14a 내지 도 14f는 다양한 IL-2/synTac 농도에서 본 개시내용의 IL-2/synTac에 의한 CD8+ 항원-특이적(LCMV) 또는 비-특이적(BL6) 세포의 자극 후 포스포-신호 변환기 및 전사 활성체 5(pSTAT5)-양성 세포의 백분율을 도시한 도면.
도 15는 본 개시내용의 IL-2/synTac의 생체내 활성을 도시한 도면. 좌측 패널은 인산염 완충 식염수(PBS), 재조합 IL-2(rIL-2), 또는 본 개시내용의 IL-2/synTac의 투여 후 항원-특이적 CD8+ T 세포 수의 배수 변화를 도시한 도면. 우측 패널은 본 개시내용의 PBS, rIL-2 또는 IL-2/synTac의 투여 후 항원-특이적 및 비-항원-특이적 반응을 도시한 도면.
도 16a 내지 도 16b는 용량 상승(도 16a) 및 투여 경로(도 16b) 효과를 도시한 도면.
도 17a 내지 도 17b는 종양에 대한 생체내 효능에 대한 IL-2 복제수의 효과를 도시한 도면.
도 18은 10㎎/㎏의 양으로 IL-2/synTac의 복강내 투여 후, 본 개시내용의 IL-2/synTac의 혈청 반감기를 도시한 도면.
도 19는 10㎎/㎏의 양으로 IL-2/synTac의 복강내 투여 2시간 후 본 개시내용의 IL-2/synTac의 안정성을 도시한 도면.
도 20은 4℃ 또는 37℃에서 5일 동안 IL-2/synTac을 유지한 후에 본 개시내용의 IL-2/synTac에 대한 크기 배제 크로마토그래피 데이터를 도시한 도면.
도 21은 리더 펩타이드를 갖는 본 개시내용의 IL-2/synTac의 중쇄의 아미노산 서열을 제공하되, IL-2/synTac 중쇄는 N297A 치환을 갖는 IgG1 Fc를 포함하는 도면.
도 22은 리더 펩타이드가 없는 본 개시내용의 IL-2/synTac의 중쇄의 아미노산 서열을 제공하되, IL-2/synTac 중쇄는 N297A 치환을 갖는 IgG1 Fc를 포함하는 도면.
도 23a 내지 도 23b는 도 21에 도시된 IL-2/synTac 중쇄를 암호화하는 뉴클레오타이드 서열(도 23a); 및 서열에 대한 열쇠(도 23b)를 제공하는 도면.
도 24는 리더 펩타이드를 갖는 IL-2/synTac의 중쇄의 아미노산 서열을 제공하되, IL-2/synTac 중쇄는 L234A 및 L235A 치환을 갖는 IgG1 Fc를 포함하는 도면.
도 25는 리더 펩타이드가 없는 IL-2/synTac의 중쇄의 아미노산 서열을 제공하되, IL-2/synTac 중쇄는 L234A 및 L235A 치환을 갖는 IgG1 Fc를 포함하는 도면.
도 26a 내지 도 26b는 도 24에 도시된 IL-2/synTac 중쇄를 암호화하는 뉴클레오타이드 서열(도 26a); 및 서열에 대한 열쇠(도 26b)를 제공하는 도면.
도 27는 리더 펩타이드를 갖는 IL-2/synTac의 중쇄의 아미노산 서열을 제공하되, IL-2/synTac 중쇄는 L234F, L235E, 및 P331S 치환을 갖는 IgG1 Fc를 포함하는 도면.
도 28은 리더 펩타이드가 없는 IL-2/synTac의 중쇄의 아미노산 서열을 제공하되, IL-2/synTac 중쇄는 L234F, L235E, 및 P331S 치환을 갖는 IgG1 Fc를 포함하는 도면.
도 29a 내지 도 29b는 도 27에 도시된 IL-2/synTac 중쇄를 암호화하는 뉴클레오타이드 서열(도 29a); 및 서열에 대한 열쇠(도 29b)를 제공하는 도면.
도 30은 펩타이드를 갖는 IL-2/synTac 경쇄의 아미노산 서열을 제공하되, IL-2/synTac 경쇄는 인유두종 바이러스(HPV) E7 에피토프를 포함하는 도면.
도 31은 펩타이드가 없는 IL-2/synTac 경쇄의 아미노산 서열을 제공하되, IL-2/synTac 경쇄는 HPV E7 에피토프를 포함하는 도면.
도 32는 도 30에 도시된 IL-2/synTac 경쇄를 암호화하는 뉴클레오타이드 서열을 제공한 도면.
도 33A 내지 도 33D는 야생형 인간 IgG1 Fc(도 33A), L234F, L235E 및 P331S 치환의 IgG1 Fc(도 33B), N297A 치환의 IgG1 Fc(도 33C), 및 L234A 및 L235A 치환의 IgG1 Fc(도 33D)의 아미노산 서열을 제공한 도면.
도 34A 내지 도 34C는 β2-마이크로글로불린(R12C) 폴리펩타이드(도 34A), 변이체 IL-2(H16A; F42A) 폴리펩타이드(도 34B), 및 클래스 I MHC-H 쇄 A0201(Y84A; A236C)(도 34C)의 아미노산 서열을 제공하는 도면.
도 35는 감소된 종양 용적에 대한 IL-2/synTac 및 항-PD1 항체의 상승적 효과를 도시한 도면.
도 36a 내지 도 36IIII은 4-1BBL의 아미노산 서열(도 36a) 및 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드의 예(도 36B 내지 도 36IIII)를 제공하는 도면.
도 37은 4-1BB의 아미노산 서열을 제공하는 도면.
도 38A 내지 도 38B는 본 개시내용의 실시형태에 따라 3일(도 38A) 또는 5일(도 8b) 동안 synTac 폴리펩타이드와 접촉되는 표적 세포에 의한 인터페론-감마(IFN-γ) 분비를 도시한 도면.
도 39A 내지 도 39B는 본 개시내용의 실시형태에 따라 3일(도 39A) 또는 5일(도 9B) 동안 synTac 폴리펩타이드와 접촉되는 표적 세포에 의한 인터류킨-2(IL-2) 분비를 도시한 도면.
도 40A 내지 도 40B는 본 개시내용의 실시형태에 따라 3일(도 40A) 또는 5일(도 40B) 동안 synTac 폴리펩타이드와 접촉되는 표적 세포에 의한 인터류킨-6(IL-6) 분비를 도시한 도면.
도 41A 내지 도 41B는 본 개시내용의 실시형태에 따라 3일(도 41A) 또는 5일(도 41B) 동안 synTac 폴리펩타이드와 접촉되는 표적 세포에 의한 종양 괴사 인자-알파(TNFα) 분비를 도시한 도면.
도 42A 내지 도 42B는 본 개시내용의 실시형태에 따라 3일(도 42A) 또는 5일(도 42B) 동안 synTac 폴리펩타이드와 접촉되는 표적 세포에 의한 인터류킨-10(IL-10) 분비를 도시한 도면.
도 43A 내지 도 43B는 본 개시내용의 실시형태에 따라 3일(도 43A) 또는 5일(도 43B) 동안 synTac 폴리펩타이드와 접촉되는 표적 세포에 의한 인터류킨-17A(IL-17A) 분비를 도시한 도면.
도 44A 내지 도 44B는 본 개시내용의 실시형태에 따라 3일(도 44A) 또는 5일(도 44B) 동안 synTac 폴리펩타이드와 접촉되는 표적 세포에 의한 인터류킨-4(IL-4) 분비를 도시한 도면.
도 45는 본 개시내용의 실시형태에 따른 synTac 폴리펩타이드와 접촉되는 표적 세포의 증식을 도시한 도면.
도 46은 본 개시내용의 실시형태에 따른 synTac 폴리펩타이드와 접촉되는 표적 세포의 생존도를 도시한 도면.
도 47은 CHO 세포에서 생성된 다양한 synTac 폴리펩타이드의 발현 수준을 도시한 도면.
도 48은 종양 용적에 대한 본 개시내용의 synTac 폴리펩타이드의 생체내 효과를 도시한 도면.
도 49는 종양 질량에 대한 다양한 용량의 4-1BBL/synTac 및 항-PD1 항체의 공동투여 효과 및 그랜자임 B+ 종양 침윤성 림프구(tumor infiltrating lymphocyte: TIL) 백분율을 도시한 도면.
도 50A 내지 도 50B는 PD-L1 폴리펩타이드의 아미노산 서열을 제공하는 도면.
도 51은 CD80 폴리펩타이드의 아미노산 서열을 제공하는 도면.
도 52는 ICOS-L 폴리펩타이드의 아미노산 서열을 제공하는 도면.
도 53은 OX40L 폴리펩타이드의 아미노산 서열을 제공하는 도면.
도 54는 PD-L2 폴리펩타이드의 아미노산 서열을 제공하는 도면.
도 55는 CD86 (B7-2) 폴리펩타이드의 아미노산 서열을 제공하는 도면.
도 56은 Fas 리간드(FAS-L) 폴리펩타이드의 아미노산 서열을 제공하는 도면.
정의
본 명세서에서 상호 호환적으로 사용되는 용어 "폴리뉴클레오타이드" 및 "핵산"은 리보뉴클레오타이드 또는 데옥시리보뉴클레오타이드 중 하나인 임의의 길이의 뉴클레오타이드의 중합체 형태를 지칭한다. 따라서, 이 용어는 단일-, 이중-, 또는 다중-가닥 DNA 또는 RNA, 게놈 DNA, cDNA, DNA-RNA 혼성체, 또는 퓨린 및 피리미딘 염기 또는 다른 천연, 화학적 또는 생화학적으로 변형된, 비천연 또는 유도체화된 뉴클레오타이드 염기를 포함하는 중합체를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다.
용어 "펩타이드", "폴리펩타이드" 및 "단백질"은 본 명세서에서 상호호환적으로 사용되며, 암호 및 비암호 아미노산, 화학적으로 또는 생화학적으로 변형된 또는 유도체화된 아미노산, 및 변형된 펩타이드 골격을 갖는 폴리펩타이드를 포함할 수 있는 임의의 길이의 아미노산의 중합체 형태를 지칭한다.
폴리뉴클레오타이드 또는 폴리펩타이드는 다른 폴리뉴클레오타이드 또는 폴리펩타이드에 대해 "서열 동일성"의 특정 백분율을 갖는데, 이는 정렬될 때, 염기 또는 아미노산의 백분율이 동일하고, 두 서열을 비교할 때 동일한 상대적 위치에 있다는 것을 의미한다. 서열 동일성은 다수의 상이한 방법으로 결정될 수 있다. 서열 동일성을 결정하기 위해, 서열은 월드 와이드 웹 상에서 ncbi.nlm.nili.gov/BLAST, ebi.ac.uk/Tools/msa/tcoffee/, ebi.ac.uk/Tools/msa/muscle/, mafft.cbrc.jp/alignment/software/를 포함하는 사이트에서 이용 가능한 다양한 편리한 방법 및 컴퓨터 프로그램(예를 들어, BLAST, T-COFFEE, MUSCLE, MAFFT 등)을 이용하여 정렬할 수 있다. 예를 들어, 문헌[Altschul et al. (1990), J. Mol. Bioi. 215:403-10] 참조.
용어 "보존적 아미노산 치환"은 유사한 측쇄를 갖는 아미노산 잔기의 단백질에서의 상호 호환성을 지칭한다. 예를 들어, 지방족 측쇄를 갖는 아미노산 그룹은 글리신, 알라닌, 발린, 류신 및 아이소류신으로 이루어지고; 지방족-하이드록실 측쇄를 갖는 아미노산의 그룹은 세린 및 트레오닌으로 이루어지며; 아마이드 함유 측쇄를 갖는 아미노산의 그룹은 아스파라긴 및 글루타민으로 이루어지고; 방향족 측쇄를 갖는 아미노산의 그룹은 페닐알라닌, 타이로신 및 트립토판으로 이루어지며; 염기성 측쇄를 갖는 아미노산의 그룹은 라이신, 알기닌 및 히스티딘으로 이루어지고; 산성 측쇄를 갖는 아미노산의 그룹은 글루타메이트 및 아스파르테이트로 이루어지며; 그리고 황 함유 측쇄를 갖는 아미노산의 그룹은 시스테인 및 메티오닌으로 이루어진다. 예시적인 보존적 아미노산 치환기는 발린-류신-아이소류신, 페닐알라닌-타이로신, 라이신-알기닌, 알라닌-발린-글리신 및 아스파라긴-글루타민이다.
본 명세서에서 사용되는 "결합"은 (예를 들어, T 세포 상에서 폴리펩타이드(예를 들어, T-세포 수용체)에 대한 T-세포 조절 다량체 폴리펩타이드의 결합에 대해) 그 사이의 비공유적 상호작용을 지칭한다. 결합 상호작용은 일반적으로 10-6M 미만, 10- 7M 미만, 10- 8M 미만, 10- 9M 미만, 10- 10M 미만, 10- 11M 미만, 10-12M 미만, 10- 13M 미만, 10- 14M 미만 또는 10-15M 미만의 해리 상수(KD)를 특징으로 한다. "친화도"는 결합 강도를 지칭하며, 증가된 결합 친화도는 더 낮은 KD와 상호 관련된다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "면역학적 시냅스" 또는 "면역 시냅스"는 일반적으로 적응 면역 반응의 두 상호작용 면역 세포 사이의 천연 계면(예를 들어, 항원-제시 세포(APC) 또는 표적 세포와 효과기 세포, 예를 들어, 림프구, 효과기 T 세포, 자연 살해 세포 등 사이의 계면을 포함)을 지칭한다. APC와 T 세포 사이의 면역학적 시냅스는 일반적으로, 예를 들어, 문헌[Bromley et al., Annu Rev Immunol. 2001;19:375-96]에 기재하는 T 세포 항원 수용체와 주조직 적합 복합체 분자의 상호작용에 의해 개시되며; 이의 개시내용은 본 명세서에 전문이 참고로 포함된다.
"T 세포"는 T-헬퍼 세포(CD4+ 세포), 세포독성 T-세포(CD8+ 세포), T-조절 세포(Treg) 및 NK-T 세포를 포함하는 CD3을 발현시키는 모든 유형의 면역 세포를 포함한다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "공자극 폴리펩타이드"(또한 본 명세서에서 "면역조절 폴리펩타이드"로서 지칭됨)는 T 세포 상에서 동족 공자극 폴리펩타이드 폴리펩타이드(또한 "동족 공동면역조절 폴리펩타이드")에 특이적으로 결합함으로써, 예를 들어, 펩타이드가 부하된 주조직 적합 복합체(MHC) 폴리펩타이드와의 TCR/CD3 복합체의 결합에 의해 제공되는 1차 신호에 추가로, 증식, 활성화, 분화 등을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는 T 세포 반응을 매개하는 신호를 제공하는 항원 제시 세포(APC)(예를 들어, 수지상 세포, B 세포 등) 상의 폴리펩타이드를 포함한다. 공자극 리간드는 CD7, B7-1(CD80), B7-2(CD86), PD-L1, PD-L2, 4-1BBL, OX40L, Fas 리간드(FasL), 유도성 공자극 리간드(ICOS-L), 세포내 부착 분자 (ICAM), CD30L, CD40, CD70, CD83, HLA-G, MICA, MICB, HVEM, 림포톡신 베타 수용체, 3/TR6, ILT3, ILT4, HVEM, Toll 리간드 수용체에 결합하는 작용제 또는 항체 및 B7-H3에 특이적으로 결합하는 리간드를 포함할 수 있지만, 이들로 제한되지 않는다. 공자극 리간드는 또한, 특히, T 세포 상에 존재하는 공자극 분자(예컨대, 이하로 제한되는 것은 아니지만, CD27, CD28, 4-1BB, OX40, CD30, CD40, PD-1, ICOS, 림프구 기능-관련 항원-1(LFA-1), CD2, LIGHT, NKG2C, B7-H3, 및 CD83에 특이적으로 결합하는 리간드)에 특이적으로 결합하는 항체를 포함한다.
T-세포 조절 다량체 폴리펩타이드의 "조절 도메인"(modulatory domain: "MOD")은 공자극 폴리펩타이드, 예를 들어, IL-2 폴리펩타이드, 예컨대 변이체 IL-2 폴리펩타이드를 포함한다.
본 명세서에서 사용되는 "이종성"은 각각 천연 핵산 또는 단백질에서 발견되지 않는 뉴클레오타이드 또는 폴리펩타이드를 의미한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같은 "재조합체"는 특정 핵산(DNA 또는 RNA)이 천연 시스템에서 발견되는 내인성 핵산과 구별되는 구조적 암호 또는 비암호 서열을 갖는 작제물을 야기하는 클로닝, 제한, 중합효소 연쇄 반응(polymerase chain reaction: PCR) 및/또는 결찰 단계의 다양한 조합물의 산물이라는 것을 의미한다. 폴리펩타이드를 암호화하는 DNA 서열은 cDNA 단편으로부터 또는 일련의 합성 올리고뉴클레오타이드로부터 조립되어, 세포에서 또는 무 세포 전사 및 번역 시스템에서 함유된 재조합 전사 단위로부터 발현될 수 있는 합성 핵산을 제공할 수 있다.
용어 "재조합 발현 벡터" 또는 "DNA 작제물"은 벡터 및 하나의 삽입물을 포함하는 DNA 분자를 지칭하기 위해 본 명세서에서 상호 호환적으로 사용된다. 재조합 발현 벡터는 보통 삽입물(들)을 발현 및/또는 증식시킬 목적을 위해, 또는 다른 재조합 뉴클레오타이드 서열의 구성을 위해 생성된다. 삽입물(들)은 프로모터 서열에 작동 가능하게 연결될 수도 있거나 연결되지 않을 수도 있고, DNA 조절 서열에 작동 가능하게 연결될 수도 있고 연결되지 않을 수도 있다.
용어 "항체" 및 "면역글로불린"은 Fab, Fv, 단일-쇄 Fv(scFv) 및 Fd 단편; 키메라 항체; 인간화된 항체; 단일-쇄 항체(scAb), 단일 도메인 항체(dAb); 단일 도메인 중쇄 항체; 단일 도메인 경쇄 항체; 이중 특이성 항체, 다중 특이성 항체, 및 항체 및 비항체 단백질의 항원-결합(또한 본 명세서에서 항원 결합으로서 지칭됨) 일부를 포함하는 융합 단백질을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는 항원에 대한 특정 결합을 보유하는 임의의 아이소타입의 항체 또는 면역글로불린, 항체의 단편을 포함한다. 또한 상기 용어는 항원 및 단클론성 항체에 대한 특이적 결합을 보유하는 Fab', Fv, F(ab')2, 및 또는 다른 항체 단편이 포함된다. 본 명세서에 사용되는 바와 같은, 단클론성 항체는 동일한 세포의 그룹에 의해 생산되는 항체이며, 이들 모두는 반복적 세포 복제에 의해 단일 세포로부터 생산되었다. 즉, 세포의 클론은 단일 항체 종만을 생산한다. 단클론성 항체는 하이브리도마 생산 기법을 이용하여 생산될 수 있지만, 당업자에게 공지된 다른 생산 방법이 또한 사용될 수 있다(예를 들어, 항체 파지 라이브러리로부터 유래된 항체). 항체는 1가 또는 2가일 수 있다. 항체는 4개의 폴리펩타이드 쇄(이황화 결합에 의해 연결되는 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄)로 이루어진 "Y-형" 분자인 Ig 단량체일 수 있다.
본 명세서에 사용되는 바와 같은 용어 "인간화된 항체"는 상이한 유래의 항체의 부분을 포함하는 항체를 지칭하되, 적어도 하나의 부분은 인간 유래의 아미노산 서열을 포함한다. 예를 들어, 인간화된 항체는 통상적인 기법(예를 들어, 합성)에 의해 화학적으로 함께 결합되거나 또는 유전자 조작 기법을 이용하여 인접한 폴리펩타이드로서 제조되는(예를 들어, 키메라 항체의 단백질 부분을 암호화하는 DNA는 폴리펩타이드 쇄를 생산하도록 발현될 수 있음) 필요한 특이성을 갖는 비인간 유래의 면역글로불린으로부터 유래된 그리고 인간 유래의 면역글로불린 서열(예를 들어, 키메라 면역글로불린)으로부터 유래된 부분을 포함할 수 있다. 인간화된 항체의 다른 예는 비인간 유래 항체로부터 유래된 CDR 및 인간 유래의 경쇄 및/또는 중쇄로부터 유래된 프레임워크 영역을 포함하는 하나 이상의 항체 쇄를 함유하는 항체(예를 들어, 프레임워크 변화가 있는 또는 없는 CDR-접합 항체)이다. 키메라 또는 CDR-접합 단일쇄 항체는 또한 인간화된 면역글로불린이라는 용어에 의해 포함된다. 예를 들어, 카빌리(Cabilly) 등의 미국 특허 제4,816,567호; 카빌리 등의 유럽 특허 제0,125,023 B1호; 보스(Boss) 등의 미국 특허 제4,816,397호; 보스 등의 유럽 특허 제0,120,694 B1호; 뉴버거, 엠. 에스. 등(Neuberger, M. S. et al.)의 WO 86/01533; 뉴버거 엠. 에스 등의 유럽 특허 제0,194,276 B1호; 윈터(Winter)의 미국 특허 제5,225,539호; 윈터의 유럽 특허 제0,239,400 B1호; 패들란, 이. 에이. 등(Padlan, E. A. et al.)의 유럽 특허 출원 제0,519,596 A1호. 또한 단일쇄 항체에 관해 래드너(Ladner) 등의 미국 특허 제4,946,778호; 허스톤(Huston)의 미국 특허 제5,476,786호; 및 버드, 알. 이. 등(Bird, R. E. et al.)의 문헌[Science, 242: 423-426 (1988))]을 참조한다.
예를 들어, 인간화된 항체는 목적하는 인간화된 쇄를 암호화하는 유전자(예를 들어, cDNA)를 제조하기 위해 합성 및/또는 재조합 핵산을 이용하여 생산될 수 있다. 예를 들어, 인간화된 가변 영역에 대한 핵산(예를 들어, DNA) 서열 암호화는 인간 또는 인간화된 쇄를 암호화하는 DNA 서열, 예컨대 이전에 인간화된 가변 영역으로부터의 DNA 주형을 변경시키기 위한 PCR 돌연변이유발 방법을 이용하여 작제될 수 있다(예를 들어, 문헌[Kamman, M., et al., Nucl. Acids Res., 17: 5404 (1989)); Sato, K., et al., Cancer Research, 53: 851-856 (1993); Daugherty, B. L. et al., Nucleic Acids Res., 19(9): 2471-2476 (1991); 및 Lewis, A. P. and J. S. Crowe, Gene, 101: 297-302(1991)] 참조). 이들 또는 다른 적합한 방법을 이용하여, 변이체가 또한 용이하게 생산될 수 있다. 예를 들어, 클로닝된 가변 영역은 돌연변이유발될 수 있고, 그리고 목적하는 특이성을 갖는 변이체를 암호화하는 서열은 선택될 수 있다(예를 들어, 파지 라이브러리로부터; 예를 들어, 크레버(Krebber) 등의 미국 특허 제5,514,548호; 문헌[Hoogenboom et al., WO 93/06213, published Apr. 1, 1993] 참조).
"항체 단편"은 무손상 항체의 부분, 예를 들어, 무손상 항체의 항원 결합 또는 가변 영역을 포함한다. 항체 단편의 예는 Fab, Fab', F(ab')2, 및 Fv 단편; 다이어바디; 선형 항체(Zapata et al., Protein Eng. 8(10): 1057-1062 (1995)); 도메인 항체(dAb; Holt et al. (2003) Trends Biotechnol . 21:484); 단일쇄 항체 분자; 및 항체 단편으로부터 형성된 다중 특이성 항체를 포함한다. 항체의 파파인 분해는 "Fab" 단편으로 불리는 2개의 동일한 항원-결합 단편을 생산하는데, 각각은 단일 항원-결합 부위, 및 잔여 "Fc" 단편, 용이하게 결정화하는 능력을 반영하는 설계를 가진다. 펩신 처리는 2개의 항원 조합 부위를 갖고 여전히 항원을 가교할 수 있는 F(ab')2 단편을 수득한다.
"Fv"는 완전한 항원-인식 및 -결합-부위를 함유하는 최소 항원 단편이다. 이 영역은 밀집한, 비공유 회합에서 하나의 중쇄- 및 하나의 경쇄 가변 도메인의 이량체로 이루어진다. 이는 이 입체배치에서 각각의 가변 도메인의 3개의 CDRS는 VH-VL 이량체 표면 상의 표면 상에서 항원-결합 부위를 정하도록 상호작용한다는 것이다. 종합적으로, 6개의 CDR은 항체에 대한 항원-결합 특이성을 부여한다. 그러나, 심지어 단일 가변 도메인(또는 항원에 특이적인 3개의 CDR만을 포함하는 Fv의 절반)은, 전체 결합 부위보다 더 낮은 친화도에서 일지라도, 항원을 인식하고 이에 결합하는 능력을 가진다.
"Fab" 단편은 또한 경쇄의 불변 도메인 및 중쇄의 제1 불변 도메인(CH1)을 함유한다. Fab 단편은 항체 힌지 영역으로부터 하나 이상의 시스테인을 포함하는 중쇄 CH1 도메인의 카복실 말단에서 소수의 잔기의 첨가에 의해 Fab' 단편과 상이하다. Fab'-SH는 불변 도메인의 시스테인 잔기(들)가 유리 티올기를 보유하는 Fab'에 대한 본 명세서의 설계이다. F(ab')2 항체 단편은 본래 그들 사이에 힌지 시스테인을 갖는 Fab' 단편의 쌍으로서 생산되었다. 항체 단편의 다른 화학적 결합이 또한 공지되어 있다.
임의의 척추동물 종으로부터의 항체(면역그로불린)의 "경쇄"는 그들의 불변 도메인의 아미노산 서열에 기반하여 카파 및 람다로 불리는 2가지의 분명하게 별개의 유형 중 하나에 부여될 수 있다. 그들의 중쇄의 불변 도메인의 아미노산 서열에 따라서, 면역글로불린은 상이한 부류에 부여될 수 있다. 5가지 주된 부류(IgA, IgD, IgE, IgG 및 IgM)의 면역글로불린이 있으며, 이들 부류 중 몇몇은 하위부류(아이소타입), 예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA 및 IgA2로 추가로 나누어질 수 있다. 하위부류는 유형, 예를 들어, IgG2a 및 IgG2b로 추가로 나누어질 수 있다.
"단일쇄 Fv" 또는 "sFv" 또는 "scFv" 항체 단편은 항체의 VH 및 VL 도메인을 포함하되, 이들 도메인은 단일 폴리펩타이드쇄에 존재한다. 일부 실시형태에서, Fv 폴리펩타이드는 sFv가 항원 결합에 대해 목적하는 구조를 형성할 수 있게 하는 VH와 VL 도메인 사이의 폴리펩타이드 링커를 추가로 포함한다. sFv의 검토를 위해, 문헌[Pluckthun in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113, Rosenburg and Moore eds., Springer- Verlag , New York, pp. 269-315 (1994)] 참조.
용어 "다이어바디"는 2개의 항원-결합 부위를 갖는 작은 항체 단편을 지칭하되, 이 단편이 동일한 폴리펩타이드 쇄(VH-VL)에서 경쇄 가변 도메인(VL)에 연결된 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 동일한 쇄 상에서 2개의 도메인 사이의 짝짓기를 허용하기에 너무 짧은 링커를 이용함으로써, 도메인은 다른 쇄의 상보성 도메인과 짝지어지고 2개의 항원-결합 부위를 생성하도록 강제된다. 다이어바디는, 예를 들어, 유럽 특허 제404,097호; WO 93/11161; 및 문헌[Hollinger et al. (1993) Proc . Natl . Acad . Sci . USA90:6444-6448]에서 더욱 완전하게 기재되어 있다.
본 명세서에서 용어 "친화도"는 2가지 제제(예를 들어, 항체 및 항원)의 가역적 결합에 대한 평형 상수를 지칭하며 해리 상수(KD)로서 표현된다. 친화도는 관련없는 아미노산 서열에 대한 항체의 친화도보다 적어도 1배 초과, 적어도 2배 초과, 적어도 3배 초과, 적어도 4배 초과, 적어도 5배 초과, 적어도 6배 초과, 적어도 7배 초과, 적어도 8배 초과, 적어도 9배 초과, 적어도 10배 초과, 적어도 20배 초과, 적어도 30배 초과, 적어도 40배 초과, 적어도 50배 초과, 적어도 60배 초과, 적어도 70배 초과, 적어도 80배 초과, 적어도 90배 초과, 적어도 100배 초과 또는 적어도 1,000배 초과, 또는 더 큰 수 초과일 수 있다. 표적 단백질에 대한 항체의 친화도는, 예를 들어, 약 100나노몰(nM) 내지 약 0.1nM, 약 100nM 내지 약 1 피코몰(pM), 또는 약 100nM 내지 약 1 펨토몰(fM) 이상일 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 용어 "결합활성(avidity)"은 희석 후 분리에 대한 2 이상의 제제 복합체의 저항성을 지칭한다. 용어 "면역반응성" 및 "우선적으로 결합하는"은 항체 및/또는 항원-결합 단편에 대해 본 명세서에서 상호 호환 가능하게 사용된다.
용어 "결합하는"은, 예를 들어, 염 브리지와 물 브리지와 같은 상호작용을 비롯한, 공유, 정전기적, 소수성 및 이온성 및/또는 수소-결합 상호작용에 기인하는 두 분자 사이의 직접적 회합을 지칭한다. "특이적 결합"은 적어도 약 10-7 M 이상, 예를 들어, 5x 10-7 M, 10-8 M, 5 x 10-8 M 이상의 친화도를 갖는 결합을 지칭한다. "비특이적 결합"은 약 10-7 M 미만의 친화도로 결합, 예를 들어, 10-6 M, 10-5 M, 10-4 M 등의 친화도로 결합을 지칭한다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "CDR" 또는 "상보성 결정 영역"은 중쇄와 경쇄 폴리펩타이드 둘 다의 가변 영역 내에서 발견된 비인접 항원 조합 부위를 의미하는 것으로 의도된다. CDR은 문헌[Kabat et al., J. Biol. Chem. 252:6609-6616 (1977)]; [Kabat et al., U.S. Dept. of Health and Human Services, "Sequences of proteins of immunological interest" (1991)(또한 본 명세서에서 문헌[Kabat 1991]으로서 지칭됨)]에 의해; 문헌[Chothia et al., J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)(또한 본 명세서에서 문헌[Chothia 1987]으로서 지칭됨)]; 및 [MacCallum et al., J. Mol. Biol. 262:732-745 (1996)]에 의해 기재되었고, 여기서 정의는 서로에 비교될 때 아미노산 잔기의 중복 또는 서브세트를 포함한다. 그럼에도 불구하고, 항체 또는 접합된 항체 또는 이의 변이체의 CDR을 지칭하기 위한 정의의 적용은 본 명세서에 정의되고 사용되는 용어의 범주 내에서 의도된다. 상기 인용된 참고문헌의 각각에 의해 정의되는 바와 같은 CDR을 포함하는 아미노산 서열은 비교로서 이하의 표에 제시한다. 표 2에 열거되는 CDR은 문헌[Kabat 1991]에 따라 정의되었다.
[표]
본 명세서에서 사용되는 용어 "CDR-L1", "CDR-L2" 및 "CDR-L3"은 각각 경쇄 가변 영역에서 제1, 제2 및 제3의 CDR을 지칭한다. 본 명세서에서 사용되는 용어 "CDR-H1", "CDR-H2" 및 "CDR-H3"은 각각 중쇄 가변 영역에서 제1, 제2 및 제3의 CDR을 지칭한다. 본 명세서에서 사용되는 용어 "CDR-1", "CDR-2" 및 "CDR-3"은 각각 쇄의 가변 영역 중 하나의 제1, 제2 및 제3의 CDR을 지칭한다.
항체 가변 영역에 대해 사용될 때 본 명세서에서 사용되는 용어 "프레임워크"는 항체의 가변 영역 내에서 CDR 영역 밖의 모든 아미노사 잔기를 의미하는 것으로 의도된다. 가변 영역 프레임워크는 일반적으로 길이가 약 100 내지 120개의 아미노산의 불연속 아미노산 서열이지만, CDR 이외의 이들 아미노산만을 참조하는 것으로 의도된다. 본 명세서에서 사용되는 용어 "프레임워크 영역"은 CDR에 의해 분리된 프레임워크의 각각의 도메인을 의미하는 것으로 의도된다.
용어 "치료", 치료하는" 등은 본 명세서에서 목적하는 약학적 및/또는 생리적 효과를 얻는 것을 의미하기 위해 사용된다. 상기 효과는 질환 또는 이의 증상을 완전히 또는 부분적으로 방지하는 데 예방적일 수 있고/있거나 질환 및/또는 질환에 기인하는 유해 효과에 대한 부분적 또는 완전한 치유에 관해 치료적일 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 "치료"는 포유류에서 질환 또는 증상의 임의의 치료를 아우르며, (a) 질환 또는 증상을 획득하는 성향이 있을 수 있지만 그것을 갖는 것으로 아직 진단되지 않은 대상체에서 질환 또는 증상이 생기는 것을 방지하는 것; (b) 질환 또는 증상을 저해하는 것, 즉, 그의 발생을 저지하는 것; 또는 (c) 질환을 완화시키는 것, 즉, 질환의 퇴행을 야기하는 것을 포함한다. 치료제는 질환 또는 손상의 개시 전에, 개시 동안에 또는 개시 후에 투여될 수 있다. 진행 중인 질환의 치료에 특히 관심이 있으며, 치료는 환자의 원치 않는 임상 증상을 안정화시키거나 또는 감소시킨다. 이러한 치료는 영향 받은 조직에서 기능의 완전한 상실 전에 바람직하게 수행된다. 대상 요법은 질환의 증상 단계 동안, 일부 경우에 질환의 증상 단계 후에 바람직하게 투여될 것이다.
용어 "개체", "대상체", "숙주" 및 "환자"는 본 명세서에서 상호 호환적으로 사용되고, 진단, 치료 또는 요법이 요망되는 임의의 포유류 대상체를 지칭한다. 포유류는, 예를 들어, 인간, 비인간 영장류, 설치류(예를 들어, 래트, 마우스), 토끼목(예를 들어, 토끼), 유제류(예를 들어, 소, 양, 돼지, 말, 염소 등) 등을 포함한다.
본 발명을 추가로 설명하기 전에, 본 발명은 물론 변할 수 있는 기재된 특정 실시형태로 제한되지 않는다는 것이 이해되어야 한다. 또한 본 명세서에서 사용되는 용어는 단지 특정 실시형태를 기재하는 목적을 위한 것이며, 제한되는 것으로 의도되지 않는다는 것이 이해되어야 하는데, 본 발명의 범주는 첨부하는 청구범위에 의해서만 제한될 것이기 때문이다.
수치 범위가 제공되는 경우, 문맥에서 달리 명확하게 표시되지 않는 한, 하한 단위의 1/10까지 각각의 개재 값, 해당 범위의 상한과 하한 사이 및 언급된 범위 내 임의의 다른 언급된 또는 개재된 값은 본 발명 내에 포함된다. 이들 더 작은 범위의 상한 및 하한은 독립적으로 더 작은 범위에 포함될 수 있고, 또한 언급된 범위에서 임의의 구체적으로 제외된 한계까지 대상으로 본 발명 내에 포함된다. 언급된 범위가 한계 중 하나 또는 둘 다를 포함하는 경우, 한계를 포함하는 것 중 하나 또는 둘 다를 제외하는 범위가 또한 본 발명에 포함된다.
달리 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 모든 기술적 및 과학적 용어는 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자에 의해 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가진다. 본 명세서에 기재된 것과 유사한 또는 동등한 임의의 방법 및 물질이 또한 본 발명의 실행 또는 시험에서 사용될 수 있지만, 바람직한 방법 및 물질이 이해 기재된다. 본 명세서에 언급된 모든 간행물은 간행물이 인용하는 것과 관련한 방법 및/또는 물질을 개시하고 기재하기 위해 본 명세서에 참고로 포함된다.
본 명세서에서 그리고 첨부하는 청구범위에서 사용되는 단수의 형태는 명확하게 달리 표시되지 않는 한 복수의 대상을 포함하는 것으로 언급되어야 한다. 따라서, 예를 들어, "변이체 IL-2 폴리펩타이드"에 대한 언급은 복수의 이러한 폴리펩타이드를 포함하고, "클래스 I HLA 중쇄 폴리펩타이드"에 대한 언급은 하나 이상의 클래스 I HLA 중쇄 폴리펩타이드 및 당업자에게 공지된 이의 동등물 등에 대한 언급을 포함한다. 청구범위는 임의의 선택적 요소를 제외하도록 초안이 작성될 수 있다는 것을 추가로 주목한다. 이렇게 해서, 이 언급은 청구범위 요소의 인용과 관련하여 "유일하게", 단지" 등으로서 이러한 제외하는 용어의 사용 또는 "부정적" 제한의 사용을 위한 선행 사건 기반으로서 작용하는 것으로 의도된다.
명확함을 위해, 별개의 실시형태와 관련하여 기재된 본 발명의 특정 특징은 또한 단일 실시형태와 조합하여 제공될 수 있다는 것을 인식한다. 대조적으로, 간단함을 위해, 단일 실시형태와 관련하여 기재된 본 발명의 다양한 특징은 또한 별개로 또는 임의의 적합한 하위 조합으로 제공될 수 있다. 본 발명이 속하는 실시형태의 모든 조합은 본 발명에 의해 구체적으로 포괄되며, 각각의 그리고 모든 조합이 개별적으로 그리고 명확하게 개시되는 것과 같이 본 명세서에 개시된다. 추가로, 다양한 실시형태 및 이의 요소의 모든 하위 조합은 또한 본 발명에 의해 구체적으로 포함되며, 각각의 그리고 모든 이러한 하위 조합이 본 명세서에서 개별적으로 그리고 명확하게 개시되는 것과 같이 본 명세서에 개시된다.
본 명세서에 논의되는 간행물은 본 출원의 출원일 전의 그들의 개시내용에 대해서만 제공된다. 본 명세서의 어떤 것도 본 발명이 선행 발명 때문에 이러한 간행물보다 선행한다는 자격이 부여되지 않는다는 용인으로서 해석되어서는 안 된다. 추가로, 제공되는 간행물의 날짜는 독립적으로 확인할 필요가 있을 수 있는 실제 공개일과 상이할 수 있다.
발명을 실시하기 위한 구체적인 내용
본 개시내용은 치료가 필요한 개체에게 T-세포 조절 다량체 폴리펩타이드("synTac" 다량체 폴리펩타이드) 및 적어도 1종의 추가적인 치료제를 투여하는 단계를 포함하는, 치료 방법을 제공한다. 일부 경우에, 적어도 1종의 추가적인 치료제는 면역관문 저해제이다. 일부 경우에, 면역관문 저해제는 면역관문에 특이적인 항체이다. 본 개시내용은 개체에게 다량체 폴리펩타이드(synTac) 및 면역관문 저해제를 투여하는 방법을 제공한다. 본 개시내용은 면역관문 저해제로 치료를 받고 있는 개체에게 다량체 폴리펩타이드(synTac)를 투여하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
"T-세포 조절 다량체 폴리펩타이드"는 또한 "synTac 폴리펩타이드" 또는 "synTac 다량체 폴리펩타이드" 또는 단순히 "synTac"로서 본 명세서에서 지칭된다. synTac 폴리펩타이드는 조절 도메인을 포함한다. 일부 경우에, 조절 도메인은 야생형 아미노산 서열, 예를 들어, 천연 유래 조절 폴리펩타이드에서 발견되는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 조절 도메인은 변이체 조절 도메인이며, 변이체 조절 도메인은 면역조절 폴리펩타이드에 대한 야생형 조절 도메인의 친화도에 비해 감소된 결합 친화도를 나타낸다. synTac 폴리펩타이드는 표적 T-세포의 활성을 조절할 수 있다. 변이체 조절 도메인을 포함하는 synTac 폴리펩타이드는 향상된 표적 세포 특이성을 제공한다.
일부 경우에, 본 개시내용의 치료 방법은 치료가 필요한 개체에게 synTac 및 면역관문 저해제를 투여하는 단계를 포함한다. 일부 경우에, synTac 및 면역관문 저해제는 단독으로(단일요법에서) 또는 면역관문 저해제 단독(단일요법에서)으로 투여될 때 synTac의 효과(들)에 비해, 상승효과를 제공한다.
synTac과 면역관문 저해제의 조합은 일부 경우에 단일요법으로서 투여되는 synTac 또는 단일요법으로서 투여되는 면역관문 저해제의 상가적 효과보다 더 효과적이다. 예를 들어, 일부 경우에, synTac과 면역관문 저해제의 상승 효과는 이들이 필요한 개체에 대한 synTac 또는 면역관문 저해제의 더 적은 투약량 및/또는 synTac 또는 면역관문 저해제의 덜 빈번한 투여의 사용을 허용한다. 더 적은 투약량의 치료제(synTac 또는 면역관문 저해제)를 이용하고/이용하거나 이러한 제제를 덜 빈번하게 투여하는 능력은 치료에서 치료제의 효능을 감소시키는 일 없이 단일 요법에서 치료제의 투여와 연관될 수 있는 독성 또는 다른 부작용을 감소시킬 수 있다. 추가로, synTac 및 면역관문 저해제의 상승적 효과는 synTac 단일요법 또는 면역관문 저해제 단일요법으로 얻어진 임상적 이점에 비해, 향상된 임상적 이점을 초래할 수 있다. 임상적 이점의 예는, 예를 들어, 개체에서 감소된 종양 질량; 개체에서 감소된 암세포 수; 개체의 증가된 생존 시간; 증가된 관해 시간 등을 포함한다. 최종적으로, synTac 및 면역관문 저해제의 상승 효과는 synTac 단일요법 또는 면역관문 저해제 단일요법과 연관된 유해한 또는 원치않는 부작용을 감소시킬 수 있다.
면역관문 저해제
예시적인 면역관문 저해제는 면역관문 폴리펩타이드, 예컨대 CD27, CD28, CD40, CD122, CD96, CD73, CD47, OX40, GITR, CSF1R, JAK, PI3K 델타, PI3K 감마, TAM, 알기나제, CD137(4-1BB로서도 알려짐), ICOS, A2AR, B7-H3, B7-H4, BTLA, CTLA-4, LAG3, TIM3, VISTA, CD96, TIGIT, CD122, PD-1, PD-L1 및 PD-L2를 표적화하는 저해제를 포함한다. 일부 경우에, 면역관문 폴리펩타이드는 CD27, CD28, CD40, ICOS, OX40, GITR, CD122 및 CD137로부터 선택된 자극 관문 분자이다. 일부 경우에, 면역관문 폴리펩타이드는 A2AR, B7-H3, B7-H4, BTLA, CTLA-4, IDO, KIR, LAG3, PD-1, TIM3, CD96, TIGIT 및 VISTA로부터 선택된 저해 관문 분자이다.
일부 경우에, 면역관문 저해제는 면역관문에 특이적인 항체이다. 일부 경우에, 항-면역관문 항체는 단클론성 항체이다. 일부 경우에, 항-면역관문 항체는 항체가 인간에서 면역 반응을 실질적으로 유발하지 않도록 인간화 또는 탈면역화된다. 일부 경우에, 항-면역관문 항체는 인간화된 단클론성 항체이다. 일부 경우에, 항-면역관문 항체는 탈면역화된 단클론성 항체이다. 일부 경우에, 항-면역관문 항체는 완전히 인간 단클론성 항체이다. 일부 경우에, 항-면역관문 항체는 면역관문 폴리펩타이드에 대한 리간드에 대한 면역관문 폴리펩타이드의 결합을 저해한다. 일부 경우에, 항-면역관문 항체는 면역관문 폴리펩타이드에 대한 수용체에 대한 면역관문 폴리펩타이드의 결합을 저해한다.
항체, 예를 들어, 면역관문에 특이적이고 면역관문 저해제로서 작용하는 단클론성 항체는 당업계에 공지되어 있다. 예를 들어, 문헌[Wurz et al. (2016) Ther . Adv . Med . Oncol . 8:4; 및 Naidoo et al. (2015) Ann. Oncol . 26:2375] 참조.
적합한 항-면역관문 항체는 니볼루맙(브리스톨-마이어스 스큅(Bristol-Myers Squibb)), 펨브롤리주맙(머크(Merck)), 피딜리주맙(큐어테크(Curetech)), AMP-224 (글락소스미스클라인(GlaxoSmithKline)/암플리뮨(Amplimmune)), MPDL3280A(로슈(Roche)), MDX-1105(메다렉스 인코포레이티드(Medarex, Inc.)/브리스톨 마이어스 스큅), MEDI-4736(메디뮨(Medimmune)/아스트라제네카(AstraZeneca)), 아렐루맙(머크 세로노(Merck Serono)), 이필리무맙(여보이(YERVOY), (브리스톨-마이어스 스큅), 트레멜리무맙(화이자(Pfizer)), 피딜리주맙(큐어테크 엘티디(CureTech, Ltd.)), IMP321(이뮤텝 에스. 에이(Immutep S.A.)), MGA271(마크로게닉스(Macrogenics)), BMS-986016(브리스톨 마이어스 스큅), 릴리루맙(Bristol-Myers Squibb), 유렐루맙(브리스톨-마이어스 스큅), PF-05082566(화이자), IPH2101(인네이트 파마(Innate Pharma)/브리스톨-마이어스 스큅), MEDI-6469(메디뮨/AZ), CP-870,893(제네테크(Genentech)), 모가뮬리주맙(교와 하코 키린(Kyowa Hakko Kirin)), 바릴루맙(셀리덱스 쎄라퓨틱스(CelIDex Therapeutics)), 아벨루맙(EMD 세로노(EMD Serono)), 갈릭시맙(바이오겐 인데크(Biogen Idec)), AMP-514(암플리뮨/AZ), AUNP 12(아우리겐 및 피에르 파브르(Aurigene and Pierre Fabre)), 인독시모드(뉴링크 제네틱스(NewLink Genetics)), NLG-919(뉴링크 제네틱스), INCB024360(인사이트); KN035; 및 이들의 조합물을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다.
적합한 항-LAG3 항체는, 예를 들어, BMS-986016 및 LAG525를 포함한다. 적합한 항-GITR 항체는, 예를 들어, TRX518, MK-4166, INCAGN01876 및 MK-1248을 포함한다. 적합한 항-OX40 항체는, 예를 들어, MEDI0562, INCAGN01949, GSK2831781, GSK-3174998, MOXR-0916, PF-04518600, 및 LAG525를 포함한다. 적합한 항-VISTA 항체는, 예를 들어, WO 2015/097536에서 제공된다.
적합한 투약량의 항-면역관문 항체는 1일당 약 1㎎/㎏ 내지 약 2400㎎/㎏, 예컨대 1일당 약 1㎎/㎏ 내지 약 1200㎎/㎏(1일당 약 50㎎/㎏ 내지 약 1200㎎/㎏을 포함)이다. 이러한 제제의 다른 대표적인 투약량은 1일당 약 5㎎/㎏, 10㎎/㎏, 15㎎/㎏, 20㎎/㎏, 25㎎/㎏, 30㎎/㎏, 35㎎/㎏, 40㎎/㎏, 45㎎/㎏, 50㎎/㎏, 60㎎/㎏, 70㎎/㎏, 80㎎/㎏, 90㎎/㎏, 100㎎/㎏, 125㎎/㎏, 150㎎/㎏, 175㎎/㎏, 200㎎/㎏, 250㎎/㎏, 300㎎/㎏, 400㎎/㎏, 500㎎/㎏, 600㎎/㎏, 700㎎/㎏, 800㎎/㎏, 900㎎/㎏, 1000㎎/㎏, 1100㎎/㎏, 1200㎎/㎏, 1300㎎/㎏, 1400㎎/㎏, 1500㎎/㎏, 1600㎎/㎏, 1700㎎/㎏, 1800㎎/㎏, 1900㎎/㎏, 2000㎎/㎏, 2100㎎/㎏, 2200㎎/㎏ 및 2300㎎/㎏을 포함한다. 항체의 유효 용량은 2, 3, 4, 5, 6회 이상의 하위 용량으로 투여될 수 있고, 1일 내내 적절한 간격으로 별개로 투여될 수 있다.
항-PD-1 항체
일부 경우에, 면역관문 저해제는 항-PD-1 항체이다.
적합한 항-PD-1 항체는, 예를 들어, 니볼루맙, 펨브롤리주맙(또한 MK-3475로서 알려짐), 피딜리주맙, SHR-1210, PDR001 및 AMP-224를 포함한다. 일부 경우에, 항-PD-1 단클론성 항체는 니볼루맙, 펨브롤리주맙 또는 PDR001이다. 적합한 항-PD1 항체는 미국 특허 공개 제2017/0044259호에 기재되어 있다. 피딜리주맙에 대해, 예를 들어, 문헌[Rosenblatt et al. (2011) J. Immunother. 34:409-18] 참조.
일부 경우에, 항-PD1 항체는 펨브롤리주맙이다. 펨브롤리주맙 중쇄의 아미노산 서열은 하기와 같다:
중쇄 가변(VH) 영역의 아미노산 서열은 밑줄 표시되어 있다.
펨브롤리주맙 경쇄의 아미노산 서열은 하기와 같다:
경쇄 가변(VL) 영역의 아미노산 서열은 밑줄표시되어 있다.
일부 경우에, 항-PD-1 항체는펨브롤리주맙의 VH 및 VL 영역을 포함한다. 일부 경우에, 항-PD-1 항체는 펨브롤리주맙의 중쇄 및 경쇄 CDR을 포함한다.
일부 경우에, 항-PD-1 항체는 니볼루맙(또한 MDX-1106 또는 BMS-936558로서 알려짐; 예를 들어, 문헌[Topalian et al. (2012) N. Eng . J. Med. 366:2443-2454]; 및 미국 특허 제8,008,449호 참조). 니볼루맙 중쇄의 아미노산 서열은 하기와 같다:
니볼루맙 경쇄의 아미노산 서열은 하기와 같다:
일부 경우에, 항-PD-1 항체는 니볼루맙의 중쇄 및 경쇄 CDR을 포함한다.
항- CTLA4 항체
일부 경우에, 항-CTLA-4 항체는 이필리무맙 또는 트레멜리무맙이다. 트레멜리무맙에 대해, 예를 들어, 문헌[Ribas et al. (2013) J. Clin . Oncol. 31:616-22] 참조.
일부 경우에, 항-CTLA-4 항체는 이필리무맙이다. 이필리무맙 중쇄의 아미노산 서열은 하기와 같다:
VH 영역의 아미노산 서열은 밑줄표시되어 있다.
이필리무맙 경쇄의 아미노산 서열은 하기와 같다:
VL 영역의 아미노산 서열은 밑줄표시되어 있다.
일부 경우에, 항-CTLA4 항체는 이필리무맙의 VH 및 VL 영역을 포함한다. 일부 경우에, 항-CTLA4 항체는 이필리무맙의 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
항-PD-L1 항체
일부 경우에, 면역관문 저해제는 항-PD-L1 단클론성 항체이다. 일부 경우에, 항-PD-L1 단클론성 항체는 BMS-935559, MEDI4736, MPDL3280A(또한 RG7446로서 알려짐), KN035 또는 MSB0010718C이다. 일부 실시형태에서, 항-PD-L1 단클론성 항체는 MPDL3280A(아테졸리주맙) 또는 MEDI4736(두르발루맙)이다. 두르발루맙에 대해, 예를 들어, WO 2011/066389 참조. 아테졸리주맙에 대해, 예를 들어, 미국 특허 제8,217,149호 참조.
일부 경우에, 항-PD-L1 항체는 아테졸리주맙이다. 아테졸리주맙 중쇄의 아미노산 서열은 하기와 같다:
아테졸리주맙 경쇄의 아미노산 서열은 하기와 같다:
일부 경우에, 항-PD-L1 항체는 아테졸리주맙의 중쇄 및 경쇄 CDR을 포함한다.
일부 경우에, 항-PDL1 항체는 KN035, 인간 IgG1 Fc 폴리펩타이드에 융합된 완전히 인간화된 항-PD-L1 단일 도메인 항체이다. 문헌[Zhang et al. (2017) Cell Discov . 3:17004]; 및 WO2017/020801. KN035의 단일-도메인 항체 부분은 아미노산 서열을 포함할 수 있다: , 여기서 밑줄 표시된 아미노산은 CDR1, CDR2 및 CDR3이다.
T-세포 조절 다량체 폴리펩타이드 ( synTac )
본 개시내용의 방법에서 사용하는 데 적합한 다량체(예를 들어, 이형이량체, 이형삼량체) 폴리펩타이드는 이하에 기재한다. 다량체 폴리펩타이드는 T 세포 조절 폴리펩타이드, 또한 본 명세서에서 "T-세포 조절 다량체 폴리펩타이드" 또는 "synTac"("T 세포 활성화를 위한 면역학적 시냅스(immunological synapse for T cell activation)")로서 지칭된다.
T-세포 조절 다량체 폴리펩타이드는, a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 에피토프; ii) 제1 주조직 적합 복합체(MHC) 폴리펩타이드를 포함하는, 제1 폴리펩타이드; 및 b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 제2 MHC 폴리펩타이드; 및 ii) 선택적으로 면역글로불린(Ig) Fc 폴리펩타이드 또는 비-Ig 스캐폴드를 포함하는, 제2 폴리펩타이드를 포함하며, 여기서 다량체 폴리펩타이드는 하나 이상의 면역조절("MOD") 도메인을 포함하되, 하나 이상의 면역조절 도메인은: A) 제1 폴리펩타이드의 C-말단에; B) 제2 폴리펩타이드의 N-말단에; C) 제2 폴리펩타이드의 C-말단에; 또는 D) 제1 폴리펩타이드의 C-말단에 그리고 제2 폴리펩타이드의 N-말단에 있다. 일부 경우에, T-세포 다량체 폴리펩타이드는, a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 에피토프; ii) 제1 MHC 폴리펩타이드; 및 iii) 면역조절 도메인을 포함하는, 제1 폴리펩타이드; 및 b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 제2 MHC 폴리펩타이드; 및 ii) Ig Fc 폴리펩타이드를 포함하는, 제2 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, T-세포 다량체 폴리펩타이드는, a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 에피토프; 및 ii) 제1 MHC 폴리펩타이드를 포함하는, 제1 폴리펩타이드; 및 b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 면역조절 도메인; iii) 제2 MHC 폴리펩타이드; 및 ii) Ig Fc 폴리펩타이드를 포함하는, 제2 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, T-세포 다량체 폴리펩타이드는, a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 에피토프; 및 ii) 제1 MHC 폴리펩타이드를 포함하는, 제1 폴리펩타이드; 및 b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 제2 MHC 폴리펩타이드; 및 ii) Ig Fc 폴리펩타이드; 및 iii) 면역조절("MOD") 도메인을 포함하는, 제2 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, T-세포 다량체 폴리펩타이드는, a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 에피토프; 및 ii) 제1 MHC 폴리펩타이드를 포함하는, 제1 폴리펩타이드; 및 b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 제2 MHC 폴리펩타이드; 및 ii) 면역조절 도메인을 포함하는, 제2 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, T-세포 다량체 폴리펩타이드는, a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 에피토프; 및 ii) 제1 MHC 폴리펩타이드를 포함하는, 제1 폴리펩타이드; 및 b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 면역조절 도메인; 및 ii) 제2 MHC 폴리펩타이드를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, T-세포 다량체 폴리펩타이드는, a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 에피토프; ii) 제1 MHC 폴리펩타이드; 및 iii) 면역조절 도메인을 포함하는, 제1 폴리펩타이드; 및 b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 제2 MHC 폴리펩타이드를 포함하는, 제2 폴리펩타이드를 포함한다.
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는 비-Ig 스캐폴드를 포함한다. 예를 들어, 일부 경우에, 비-Ig 스캐폴드는 XTEN 폴리펩타이드, 트랜스페린 폴리펩타이드, Fc 수용체 폴리펩타이드, 엘라스틴-유사 폴리펩타이드, 실크-유사 폴리펩타이드, 또는 실크-엘라스틴-유사 폴리펩타이드이다.
일부 경우에, 제1 MHC 폴리펩타이드는 β2-마이크로글로불린(β2M) 폴리펩타이드이며; 그리고 제2 MHC 폴리펩타이드는 MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드이다. 적합한 β2-M 폴리펩타이드는 도 6에 도시된 β2M 폴리펩타이드의 아미노산 서열에 대해 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 HLA-A, HLA-B 또는 HLA-C 중쇄이다. 일부 경우에, MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 도 5a 내지 도 5c 중 하나에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 제1 MHC 폴리펩타이드는 MHC 클래스 II 알파쇄 폴리펩타이드이고; 제2 MHC 폴리펩타이드는 MHC 클래스 II 베타쇄 폴리펩타이드이다.
다량체 폴리펩타이드에 존재하는 에피토프는 T-세포 에피토프일 수 있다.
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는 Ig Fc 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, Ig Fc 폴리펩타이드는 IgG1 Fc 폴리펩타이드, IgG2 Fc 폴리펩타이드, IgG3 Fc 폴리펩타이드, IgG4 Fc 폴리펩타이드, IgA Fc 폴리펩타이드, 또는 IgM Fc 폴리펩타이드이다. 일부 경우에, Ig Fc 폴리펩타이드는 도 4a 내지 도 4c에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.
다량체 폴리펩타이드의 제1 폴리펩타이드 및 제2 폴리펩타이드는 비공유적으로 결합될 수 있다. 다량체 폴리펩타이드의 제1 폴리펩타이드 및 제2 폴리펩타이드는 공유 결합될 수 있다. 다량체 폴리펩타이드의 제1 폴리펩타이드 및 제2 폴리펩타이드는 공유 결합될 수 있으며, 공유 결합은 이황화 결합을 통한다. 일부 경우에, 제1 MHC 폴리펩타이드 또는 에피토프와 제1 MHC 폴리펩타이드 사이의 링커는 제1 Cys 잔기를 제공하는 아미노산 치환을 포함하고, 제2 MHC 폴리펩타이드는 제2 Cys 잔기를 제공하는 아미노산 치환을 포함하며, 이황화 결합은 제1 Cys과 제2 Cys 잔기 사이에 있다.
다량체 폴리펩타이드는, 에피토프와 제1 MHC 폴리펩타이드; 면역조절("MOD") 폴리펩타이드의 2개의 복제물; 면역조절 폴리펩타이드와 제2 MHC 폴리펩타이드; 및 제2 MHC 폴리펩타이드와 Ig Fc 폴리펩타이드 중 하나 이상 사이에 링커를 포함할 수 있다.
T-세포 다량체 폴리펩타이드에서 포함하기에 적합한 면역조절 폴리펩타이드는 4-1BBL 폴리펩타이드, B7-1 폴리펩타이드; B7-2 폴리펩타이드, ICOS-L 폴리펩타이드, OX-40L 폴리펩타이드, CD80 폴리펩타이드, CD86 폴리펩타이드, IL-2 폴리펩타이드, PD-L1 폴리펩타이드, FasL 폴리펩타이드 및 PD-L2 폴리펩타이드를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다.
다량체 폴리펩타이드는 2 이상의 면역조절 폴리펩타이드를 포함할 수 있다. 다량체 폴리펩타이드는 2개의 면역조절 폴리펩타이드를 포함할 수 있다. 일부 경우에, 2개의 면역조절 폴리펩타이드는 일렬로 있다. 다량체 폴리펩타이드는 3개의 면역조절 폴리펩타이드를 포함할 수 있다. 일부 경우에, 3개의 면역조절 폴리펩타이드는 일렬로 있다.
다량체 폴리펩타이드는 제3 폴리펩타이드를 포함할 수 있으며, 제3 폴리펩타이드는 제1 폴리펩타이드 또는 제2 폴리펩타이드의 면역조절 폴리펩타이드에 대해 적어도 90%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 면역조절 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, 제3 폴리펩타이드는 제1 폴리펩타이드에 공유 결합된다.
적합한 다량체 폴리펩타이드의 예는 WO 2017/151940; WO 2017/201210; 및 PCT/US2017/067663에 기재되어 있다. WO 2017/151940, WO 2017/201210 및 PCT/US2017/067663의 개시내용은 본 명세서에 참고로 편입된다.
MHC 폴리펩타이드
상기 언급한 바와 같이, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 MHC 폴리펩타이드를 포함한다. 본 개시내용의 목적을 위해, 용어 "주조직 적합 복합체(MHC) 폴리펩타이드"는 인간 MHC(또한 인간 백혈구 항원(HLA)으로 지칭됨) 폴리펩타이드, 설치류(예를 들어, 마우스, 래트 등), 다른 포유류 종(예를 들어, 토끼목, 비인간 영장류, 갯과, 고양잇과, 유제류(예를 들어, 말, 소, 양, 염소 등) 등의 MHC 폴리펩타이드 및 MHC 폴리펩타이드를 포함하는, 다양한 종의 MHC 폴리펩타이드를 포함하는 것을 의미한다. 용어 "MHC 폴리펩타이드"는 클래스 I MHC 폴리펩타이드(예를 들어, β-2 마이크로글로불린 및 MHC 클래스 I 중쇄) 및 MHC 클래스 II 폴리펩타이드(예를 들어, MHC 클래스 II α 폴리펩타이드 및 MHC 클래스 II β 폴리펩타이드)를 포함하는 것을 의미한다.
상기 언급한 바와 같이, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드의 일부 실시형태에서, 제1 및 제2 MHC 폴리펩타이드는 클래스 I MHC 폴리펩타이드이고; 예를 들어, 일부 경우에, 제1 MHC 폴리펩타이드는 MHC 클래스 I β2-마이크로글로불린(β2M) 폴리펩타이드이며, 제2 MHC 폴리펩타이드는 MHC 클래스 I 중쇄(H 쇄)이다. 다른 경우에, 제1 및 제2 MHC 폴리펩타이드는 클래스 II MHC 폴리펩타이드이고; 예를 들어, 일부 경우에, 제1 MHC 폴리펩타이드는 MHC 클래스 II α-쇄 폴리펩타이드이며, 제2 MHC 폴리펩타이드는 MHC 클래스 II β-쇄 폴리펩타이드이다. 다른 경우에, 제1 폴리펩타이드는 MHC 클래스 II β-쇄 폴리펩타이드이고, 제2 MHC 폴리펩타이드는 MHC 클래스 II α-쇄 폴리펩타이드이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드의 MHC 폴리펩타이드는 인간 MHC 폴리펩타이드이며, 여기서 인간 MHC 폴리펩타이드는 또한 "인간 백혈구 항원"("HLA") 폴리펩타이드로서 지칭된다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드의 MHC 폴리펩타이드는 클래스 I HLA 폴리펩타이드, 예를 들어, β2-마이크로글로불린 폴리펩타이드, 또는 클래스 I HLA 중쇄 폴리펩타이드이다. 클래스 I HLA 중쇄 폴리펩타이드는 HLA-A 중쇄 폴리펩타이드, HLA-B 중쇄 폴리펩타이드, HLA-C 중쇄 폴리펩타이드, HLA-E 중쇄 폴리펩타이드, HLA-F 중쇄 폴리펩타이드, 및 HLA-G 중쇄 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드의 MHC 폴리펩타이드는 클래스 II HLA 폴리펩타이드, 예를 들어, 클래스 II HLA α 쇄 또는 클래스 II HLA β 쇄이다. MHC 클래스 II 폴리펩타이드는 MCH 클래스 II DP α 및 β 폴리펩타이드, DM α 및 β 폴리펩타이드, DOA α 및 β 폴리펩타이드, DOB α 및 β 폴리펩타이드, DQ α 및 β 폴리펩타이드, 및 DR α 및 β 폴리펩타이드를 포함한다.
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드의 MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 도 5a 내지 도 5c 중 하나에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
HLA -A
예로서, 다량체 폴리펩타이드의 MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 다음의 인간 HLA-A 중쇄 아미노산 서열에 대해 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다:
HLA -A ( Y84A;A236C )
일부 경우에, MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 Y84A 및 A236C 치환을 포함한다. 예를 들어, 일부 경우에, the MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 다음의 인간 HLA-A 중쇄(Y84A; A236C) 아미노산 서열에 대해 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99%, 또는 100%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다: , 여기서 아미노산 84는 Ala이고, 아미노산 236은 Cys이다. 일부 경우에, Cys-236은 R12C 치환을 포함하는 변이체 β2M 폴리펩타이드의 Cys-12와 쇄간 이황화 결합을 형성한다.
HLA -A( Y84C;A139C )
일부 경우에, MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 Y84C 및 A139C 치환을 포함한다. 예를 들어, 일부 경우에, MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 다음의 인간 HLA-A 중쇄(Y84C; A139C) 아미노산 서열에 대해 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99%, 또는 100%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다: , 여기서 아미노산 84는 Cys이고, 아미노산 139는 Cys이다. 일부 경우에, Cys-84는 Cys-139와 쇄내 이황화 결합을 형성한다.
HLA -AA11( HLA -A11)
하나의 비제한적 예로서, 다량체 폴리펩타이드의 MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 다음의 인간 HLA-A A11(또한 "HLA-A11"로서 지칭됨) 중쇄 아미노산 서열에 대해 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다: 이러한 MHC 클래스 I 중쇄는 아시아 혈통의 개체의 집단을 포함하는 아시아 집단에서 현저할 수 있다.
HLA -AA11( Y84A;A236C )
하나의 비제한적 예로서, 일부 경우에, MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 Y84A 및 A236C 치환을 포함하는 HLA-A A11 대립유전자이다. 예를 들어, 일부 경우에, MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 다음의 인간 HLA-A A11 중쇄(Y84A; A236C) 아미노산 서열에 대해 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99%, 또는 100%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다: 여기서 아미노산 84는 Ala이고, 아미노산 236은 Cys이다. 일부 경우에, Cys-236은 R12C 치환을 포함하는 변이체 β2M 폴리펩타이드의 Cys-12와 쇄간 이황화 결합을 형성한다.
HLA -B
다른 예로서, 다량체 폴리펩타이드의 MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 다음의 인간 HLA-B 중쇄 아미노산 서열에 대해 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다:
HLA -B ( Y84A;A236C )
하나의 비제한적 예로서, 일부 경우에, MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 Y84A 및 A236C 치환을 포함하는 HLA-B 폴리펩타이드이다. 예를 들어, 일부 경우에, MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 다음의 인간 HLA-B 중쇄(Y84A; A236C) 아미노산 서열에 대해 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99%, 또는 100%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다: 여기서 아미노산 84는 Ala이고, 아미노산 236은 Cys이다. 일부 경우에, Cys-236은 R12C 치환을 포함하는 변이체 β2M 폴리펩타이드의 Cys-12와 쇄간 이황화 결합을 형성한다.
HLA -B ( Y84C;A139C )
일부 경우에, MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 Y84C 및 A139C 치환을 포함한다. 예를 들어, 일부 경우에, MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 다음의 인간 HLA-B 중쇄(Y84C; A139C) 아미노산 서열에 대해 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99%, 또는 100%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다: 여기서 아미노산 84는 Cys이고, 아미노산 139는 Cys이다. 일부 경우에, Cys-84는 Cys-139와 쇄내 이황화 결합을 형성한다.
HLA -C
다른 예로서, 다량체 폴리펩타이드의 MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 다음의 인간 HLA-C 중쇄 아미노산 서열에 대해 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다:
HLA -C ( Y84A;A236C )
하나의 비제한적 예로서, 일부 경우에, MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 Y84A 및 A236C 치환을 포함하는 HLA-C 폴리펩타이드이다. 예를 들어, 일부 경우에, MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 다음의 인간 HLA-C 중쇄(Y84A; A236C) 아미노산 서열에 대해 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99%, 또는 100%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다: 여기서 아미노산 84는 Ala이고, 아미노산 236은 Cys이다. 일부 경우에, Cys-236은 R12C 치환을 포함하는 변이체 β2M 폴리펩타이드의 Cys-12와 쇄간 이황화 결합을 형성한다.
HLA -C ( Y84C;A139C )
일부 경우에, MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 Y84C 및 A139C 치환을 포함한다. 예를 들어, 일부 경우에, MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 다음의 인간 HLA-C 중쇄(Y84C; A139C) 아미노산 서열에 대해 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99%, 또는 100%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다: 여기서, 아미노산 84는 Cys이고, 아미노산 139는 Cys이다. 일부 경우에, Cys-84는 Cys-139와 쇄내 이황화 결합을 형성한다.
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드의 MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 도 3A 내지 도 3c 중 하나에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
예로서, 다량체 폴리펩타이드의 MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 도 3A에 도시된 인간 HLA-A 중쇄 폴리펩타이드의 아미노산 서열의 아미노산 25 내지 365에 대해 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
다른 예로서, 다량체 폴리펩타이드의 MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 도 3B에 도시된 인간 HLA-B 중쇄 폴리펩타이드의 아미노산 서열의 아미노산 25 내지 362에 대해 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
다른 예로서, 다량체 폴리펩타이드의 MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 도 3c에 도시된 인간 HLA-C 중쇄 폴리펩타이드의 아미노산 서열의 아미노산 25 내지 362에 대해 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
다른 예로서, 다량체 폴리펩타이드의 MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 다음의 아미노산 서열에 대해 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
다량체 폴리펩타이드의 β2-마이크로글로불린(β2M) 폴리펩타이드는 인간 β2M 폴리펩타이드, 비인간 영장류 β2M 폴리펩타이드, 뮤린 β2M 폴리펩타이드 등일 수 있다. 일부 예에서, β2M 폴리펩타이드는 도 6에 도시된 β2M 아미노산 서열에 대해 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99%, 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 예에서, β2M 폴리펩타이드는 도 6에 도시된 β2M 아미노산 서열의 아미노산 21 내지 119에 대해 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99%, 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.
일부 경우에, MHC 폴리펩타이드는 기준 MHC 폴리펩타이드에 비해 단일 아미노산 치환을 포함하며(여기서, 기준 MHC 폴리펩타이드는 야생형 MHC 폴리펩타이드일 수 있음), 단일 아미노산 치환은 아미노산을 시스테인(Cys) 잔기로 치환한다. 이러한 시스테인 잔기는, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드의 제1 폴리펩타이드의 MHC 폴리펩타이드에 존재할 때, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드의 제2 폴리펩타이드에 존재하는 시스테인 잔기와 이황화 결합을 형성할 수 있다.
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드의 제1 폴리펩타이드 내 제1 MHC 폴리펩타이드 및/또는 다량체 폴리펩타이드의 제2 폴리펩타이드 내 제2 MHC 폴리펩타이드는 아미노산을 시스테인으로 치환하는 아미노산 치환을 포함하며, 제1 MHC 폴리펩타이드 내 치환된 시스테인은 제2 MHC 폴리펩타이드에서 시스테인과의 이황화 결합을 형성하며, 제1 MHC 폴리펩타이드 내 시스테인은 제2 MHC 폴리펩타이드 내 치환된 시스테인과의 이황화 결합을 형성하거나, 또는 제1 MHC 폴리펩타이드 내 치환된 시스테인은 제2 MHC 폴리펩타이드 내 치환된 시스테인과의 이황화 결합을 형성한다.
예를 들어, 일부 경우에, HLA β2-마이크로글로불린 및 HLA 클래스 I 중쇄에서 다음의 잔기 쌍 중 하나는 시스테인으로 치환된다(여기서 잔기 수는 성숙 폴리펩타이드의 수임): 1) β2M 잔기 12, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 236; 2) β2M 잔기 12, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 237; 3) β2M 잔기 8, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 234; 4) β2M 잔기 10, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 235; 5) β2M 잔기 24, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 236; 6) β2M 잔기 28, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 232; 7) β2M 잔기 98, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 192; 8) β2M 잔기 99, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 234; 9) β2M 잔기 3, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 120; 10) β2M 잔기 31, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 96; 11) β2M 잔기 53, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 35; 12) β2M 잔기 60, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 96; 13) β2M 잔기 60, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 122; 14) β2M 잔기 63, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 27; 15) β2M 잔기 Arg3, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 Gly120; 16) β2M 잔기 His31, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 Gln96; 17) β2M 잔기 Asp53, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 Arg35; 18) β2M 잔기 Trp60, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 Gln96; 19) β2M 잔기 Trp60, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 Asp122; 20) β2M 잔기 Tyr63, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 Tyr27; 21) β2M 잔기 Lys6, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 Glu232; 22) β2M 잔기 Gln8, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 Arg234; 23) β2M 잔기 Tyr10, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 Pro235; 24) β2M 잔기 Ser11, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 Gln242; 25) β2M 잔기 Asn24, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 Ala236; 26) β2M 잔기 Ser28, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 Glu232; 27) β2M 잔기 Asp98, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 His192; 및 28) β2M 잔기 Met99, HLA 클래스 I 중쇄 잔기 Arg234. MHC/HLA 클래스 I 중쇄의 아미노산 넘버링은 신호 펩타이드가 없는 성숙 MHC/HLA 클래스 I 중쇄에 관한 것이다. 예를 들어, 신호 펩타이드를 포함하는 도 5a에 도시된 아미노산 서열에서, Gly120은 Gly144이고; Gln96은 Gln120 등이다. 일부 경우에서, β2M 폴리펩타이드는 R12C 치환을 포함하고, HLA 클래스 I 중쇄는 A236C 치환을 포함하며; 이러한 경우에, 이황화 결합은 β2M 폴리펩타이드의 Cys-12와 HLA 클래스 I 중쇄의 Cys-236을 형성한다. 예를 들어, 일부 경우에, 성숙 HLA-A 아미노산 서열의 잔기 236(즉, 도 5a에 도시된 아미노산 서열의 잔기 260)은 Cys으로 치환된다. 일부 경우에, 성숙 HLA-B 아미노산 서열의 잔기 236(즉, 도 5b에 도시된 아미노산 서열의 잔기 260)은 Cys으로 치환된다. 일부 경우에서, 성숙 HLA-C 아미노산 서열의 잔기 236(즉, 도 5c에 도시된 아미노산 서열의 잔기 260)은 Cys으로 치환된다. 일부 경우에, 도 6에 도시된 아미노산 서열의 잔기 32(성숙 β2M의 Arg-12에 대응)는 Cys으로 치환된다.
일부 경우에, β2M 폴리펩타이드는 다음의 아미노산 서열을 포함한다: 일부 경우에, β2M 폴리펩타이드는 다음의 아미노산 서열을 포함한다:
일부 경우에, HLA 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 아미노산 서열을 포함한다:
일부 경우에, HLA 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 아미노산 서열을 포함한다:
일부 경우에, HLA 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 아미노산 서열을 포함한다:
일부 경우에, β2M 폴리펩타이드는 다음의 아미노산 서열을 포함한다:
; 및 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드의 HLA 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 다음의 아미노산 서열을 포함한다:
여기서 밑줄 표시되고 볼드체인 Cys 잔기는 다량체 폴리펩타이드에서 서로 이황화 결합을 형성한다.
일부 경우에, β2M 폴리펩타이드는 아미노산 서열을 포함한다:
스캐폴드 폴리펩타이드
본 개시내용의 T-세포 조절 다량체 폴리펩타이드는 Fc 폴리펩타이드, 또는 다른 적합한 스캐폴드 폴리펩타이드를 포함한다.
적합한 스캐폴드 폴리펩타이드는 항체-기반 스캐폴드 폴리펩타이드및 비-항체-기반 스캐폴드를 포함한다. 비-항체-기반 스캐폴드는, 예를 들어, 알부민, XTEN(연장된 재조합체) 폴리펩타이드, 트랜스페린, Fc 수용체 폴리펩타이드, 엘라스틴-유사 폴리펩타이드(예를 들어, 문헌[Hassouneh et al. (2012) Methods Enzymol. 502:215]; 예를 들어, (Val-Pro-Gly-X-Gly; 서열번호 212)의 펜타펩타이드 반복 단위를 포함하는 폴리펩타이드, 여기서, X는 프롤린이 아닌 임의의 아미노산임), 알부민-결합 폴리펩타이드, 실크-유사 폴리펩타이드(예를 들어, 문헌[Valluzzi et al. (2002) Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci . 357:165] 참조), 실크-엘라스틴-유사 폴리펩타이드(SELP; 예를 들어, 문헌[Megeed et al. (2002) Adv Drug Deliv Rev. 54:1075]) 등을 포함한다. 적합한 XTEN 폴리펩타이드는, 예를 들어, WO 2009/023270, WO 2010/091122, WO 2007/103515, 미국 특허 제2010/0189682호 및 미국 특허 제2009/0092582호에 개시된 것을 포함하고; 또한 문헌[Schellenberger et al. (2009) Nat Biotechnol. 27:1186)] 참조. 적합한 알부민 폴리펩타이드는, 예를 들어, 인간 혈청 알부민을 포함한다.
적합한 스캐폴드 폴리펩타이드는 일부 경우에 반감기 연장 폴리펩타이드일 수 있다. 따라서, 일부 경우에, 적합한 스캐폴드 폴리펩타이드는 스캐폴드 폴리펩타이드가 없는 대조군 다량체 폴리펩타이드에 비해 다량체 폴리펩타이드의 생체내 반감기(예를 들어, 혈청 반감기)를 증가시킨다. 예를 들어, 일부 경우에, 스캐폴드 폴리펩타이드는 스캐폴드 폴리펩타이드가 없는 대조군 다량체 폴리펩타이드에 비해 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 50%, 적어도 약 2-배, 적어도 약 2.5-배, 적어도 약 5-배, 적어도 약 10-배, 적어도 약 25-배, 적어도 약 50-배, 적어도 약 100-배, 또는 100-배 초과만큼 다량체 폴리펩타이드의 생체내 반감기(예를 들어, 혈청 반감기)를 증가시킨다. 예로서, 일부 경우에, Fc 폴리펩타이드는 Fc 폴리펩타이드가 없는 대조군 다량체 폴리펩타이드에 비해 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 50%, 적어도 약 2-배, 적어도 약 2.5-배, 적어도 약 5-배, 적어도 약 10-배, 적어도 약 25-배, 적어도 약 50-배, 적어도 약 100-배, 또는 100-배 초과만큼 다량체 폴리펩타이드의 생체내 반감기(예를 들어, 혈청 반감기)를 증가시킨다.
Fc 폴리펩타이드
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드의 제1 및/또는 제2 폴리펩타이드는 Fc 폴리펩타이드를 포함한다. 다량체 폴리펩타이드의 Fc 폴리펩타이드는 인간 IgG1 Fc, 인간 IgG2 Fc, 인간 IgG3 Fc, 인간 IgG4 Fc 등일 수 있다. 일부 경우에, Fc 폴리펩타이드는 도 4a 내지 도 4c에 도시된 Fc 영역의 아미노산 서열에 대해 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 98%, 적어도 약 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, Fc 영역은 도 4a에 도시된 인간 IgG1 Fc 폴리펩타이드에 대해 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 98%, 적어도 약 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, Fc 영역은 도 4a에 도시된 인간 IgG1 Fc 폴리펩타이드에 대해 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 98%, 적어도 약 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고; 그리고 N77의 치환을 포함하며; 예를 들어, Fc 폴리펩타이드는 N77A 치환을 포함한다. 일부 경우에, Fc 폴리펩타이드는 도 4a에 도시된 인간 IgG2 Fc 폴리펩타이드에 대해 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 98%, 적어도 약 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고; 예를 들어, Fc 폴리펩타이드는 도 4a에 도시된 인간 IgG2 Fc 폴리펩타이드의 아미노산 99 내지 325에 대해 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 98%, 적어도 약 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에서, Fc 폴리펩타이드는 도 4a에 도시된 인간 IgG3 Fc 폴리펩타이드에 대해 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 98%, 적어도 약 99% 또는 100%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고; 예를 들어, Fc 폴리펩타이드는 도 4a에 도시된 인간 IgG3 Fc 폴리펩타이드의 아미노산 19 내지 246에 대해 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 98%, 적어도 약 99% 또는 100%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, Fc 폴리펩타이드는 도 4b에 도시된 인간 IgM Fc 폴리펩타이드에 대해 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 98%, 적어도 약 99%, 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고; 예를 들어, Fc 폴리펩타이드는 도 4b에 도시된 인간 IgM Fc 폴리펩타이드의 아미노산 1 내지 276에 대해 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 98%, 적어도 약 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, Fc 폴리펩타이드는 도 4c에 도시된 인간 IgA 폴리펩타이드에 대해 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 98%, 적어도 약 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고; 예를 들어, Fc 폴리펩타이드는 도 4c에 도시된 인간 IgA Fc 폴리펩타이드의 아미노산 1 내지 234에 대해 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 98%, 적어도 약 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 Fc 폴리펩타이드는 도 33A에 도시된 아미노산 서열(인간 IgG1 Fc)을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 Fc 폴리펩타이드는 N297의 아스파라긴 이외의 아미노산으로의 치환을 제외하고 도 33A에 도시된 아미노산 서열(인간 IgG1 Fc)을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 Fc 폴리펩타이드는 도 33C에 도시된 아미노산 서열(N297A 치환을 포함하는 인간 IgG1 Fc)을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 Fc 폴리펩타이드는 L234의 류신 이외의 아미노산으로의 치환을 제외하고 도 33A에 도시된 아미노산 서열(인간 IgG1 Fc)을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 Fc 폴리펩타이드는 L235의 류신 이외의 아미노산으로의 치환을 제외하고 도 33A에 도시된 아미노산 서열(인간 IgG1 Fc)을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 Fc 폴리펩타이드는 도 33D에 도시된 아미노산 서열(L234A 치환 및 L235A 치환을 포함하는 인간 IgG1 Fc)을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 Fc 폴리펩타이드는 P331의 프롤린 이외의 아미노산으로의 치환을 제외하고, 도 33A에 도시된 아미노산 서열(인간 IgG1 Fc)을 포함하고; 일부 경우에, 치환은 P331S 치환이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 Fc 폴리펩타이드는 L234 및 L235의 류신 이외의 아미노산으로의 치환을 제외하고 도 33A에 도시된 아미노산 서열(인간 IgG1 Fc)을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 Fc 폴리펩타이드는 L234 및 L235의 류신 이외의 아미노산으로의 치환, 및 P331의 프롤린 이외의 아미노산으로의 치환을 제외하고 도 33A에 도시된 아미노산 서열(인간 IgG1 Fc)을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 Fc 폴리펩타이드는 도 33B에 도시된 아미노산 서열(L234F, L235E 및 P331S 치환을 포함하는 인간 IgG1 Fc)을 포함한다. 일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 Fc 폴리펩타이드는 L234A 및 L235A 치환을 포함하는 IgG1 Fc 폴리펩타이드이다.
링커
다량체 폴리펩타이드는, 예를 들어, 에피토프와 MHC 폴리펩타이드 사이에; MHC 폴리펩타이드와 면역조절 폴리펩타이드 사이에; MHC 폴리펩타이드와 Ig Fc 폴리펩타이드 사이에; 제1 면역조절 폴리펩타이드 폴리펩타이드와 제2 면역조절 폴리펩타이드 폴리펩타이드 사이에; 또는 제2 면역조절 폴리펩타이드 폴리펩타이드와 제3 면역조절 폴리펩타이드 폴리펩타이드 사이에 개재된 링커 펩타이드를 포함할 수 있다.
예를 들어, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는, 예를 들어, 에피토프와 MHC 폴리펩타이드 사이에; MHC 폴리펩타이드와 면역조절 폴리펩타이드 사이에; MHC 폴리펩타이드와 Ig Fc 폴리펩타이드 사이에; 제1 변이체 IL-2 폴리펩타이드와 제2 변이체 IL-2 폴리펩타이드 사이에; 또는 제2 변이체 IL-2 폴리펩타이드와 제3 변이체 IL-2 폴리펩타이드 사이에 개재된 링커 펩타이드를 포함할 수 있다. 다른 예로서, 다량체 폴리펩타이드는, 예를 들어, 에피토프와 MHC 폴리펩타이드 사이에; MHC 폴리펩타이드와 면역조절 폴리펩타이드 사이에; MHC 폴리펩타이드와 Ig Fc 폴리펩타이드 사이에; 제1 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드와 제2 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드 사이에; 또는 제2 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드와 제3 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드 사이에 개재된 링커 펩타이드를 포함할 수 있다.
적합한 링커(또한 "스페이서"로서 지칭됨)는 용이하게 선택될 수 있고, 임의의 다수의 적합한 길이, 예컨대 1개의 아미노산 내지 25개의 아미노산, 3개의 아미노산 내지 20개의 아미노산, 2개의 아미노산 내지 15개의 아미노산, 3개의 아미노산 내지 12개의 아미노산(4개의 아미노산 내지 10개의 아미노산, 5개의 아미노산 내지 9개의 아미노산, 6개의 아미노산 내지 8개의 아미노산, 또는 7개의 아미노산 내지 8개의 아미노산을 포함)을 가질 수 있다. 적합한 링커는 길이가 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 또는 25개의 아미노산일 수 있다.
예시적인 링커는 글리신 중합체(G)n, 글리신-세린 중합체(예를 들어, (GS)n, (GSGGS)n(서열번호 210) 및 (GGGS)n(서열번호 211)을 포함하며, n은 적어도 1의 정수임), 글리신-알라닌 중합체, 알라닌-세린 중합체 및 당업계에 공지된 다른 유연한 링커를 포함한다. 글리신 및 글리신-세린 중합체가 사용될 수 있으며; Gly과 Ser은 둘 다 상대적으로 불포화이고, 따라서 성분 사이의 중성 테더(tether)로서 작용할 수 있다. 글리신 중합체가 사용될 수 있으며; 글리신은 심지어 알라닌보다 상당히 더 많은 파이-프사이 공간에 접근하고, 더 긴 측쇄를 갖는 잔기보다 훨씬 덜 제한되어 있다(문헌[Scheraga, Rev. Computational Chem . 11173-142 (1992)] 참조).
예시적인 링커는 GGSG(서열번호 65), GGSGG(서열번호 66), GSGSG(서열번호 67), GSGGG(서열번호 68), GGGSG(서열번호 69), GSSSG(서열번호 70) 등을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는 아미노산 서열을 포함할 수 있다. 예시적인 링커는, 예를 들어, Gly(Ser4)n일 수 있으며, 여기서 n은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10이다. 일부 경우에, 링커는 아미노산 서열 (GSSSS)n(서열번호 71)을 포함하며, n은 4이다. 일부 경우에, 링커는 아미노산 서열 (GSSSS)n(서열번호 72)을 포함하며, n은 5이다. 일부 경우에, 링커는 아미노산 서열 (GGGGS)n(서열번호 205)을 포함하며, n은 1이다. 일부 경우에, 링커는 아미노산 서열 (GGGGS)n(서열번호 206)을 포함하며, n은 2이다. 일부 경우에, 링커는 아미노산 서열 (GGGGS)n(서열번호 207)을 포함하며, n은 3이다. 일부 경우에, 링커는 아미노산 서열 (GGGGS)n(서열번호 208)을 포함하며, n은 4이다. 일부 경우에, 링커는 아미노산 서열 (GGGGS)n(서열번호 209)을 포함하며, n은 5이다. 일부 경우에, 링커는 아미노산 서열 AAAGG(서열번호 73)를 포함한다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드의 제1 폴리펩타이드에 존재하는 링커 폴리펩타이드는 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드의 제2 폴리펩타이드에 존재하는 시스테인 잔기와 이황화 결합을 형성할 수 있는 시스테인 잔기를 포함한다. 일부 경우에, 예를 들어, 적합한 링커는 아미노산 서열 G C GASGGGGSGGGGS(서열번호 74)를 포함한다.
에피토프
본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 에피토프(하나 이상의 에피토프를 제시하는 펩타이드)는 길이가 약 4개의 아미노산 내지 약 25개의 아미노산일 수 있으며, 예를 들어, 에피토프는 길이가 4개의 아미노산(aa) 내지 10 aa, 10 aa 내지 15 aa, 15 aa 내지 20 aa, 또는 20 aa 내지 25 aa일 수 있다. 예를 들어, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 에피토프는 길이가 4개의 아미노산(aa), 5 aa, 6 aa, 7, aa, 8 aa, 9 aa, 10 aa, 11 aa, 12 aa, 13 aa, 14 aa, 15 aa, 16 aa, 17 aa, 18 aa, 19 aa, 20 aa, 21 aa, 22 aa, 23 aa, 24 aa 또는 25 aa일 수 있다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 에피토프는 길이가 5개의 아미노산 내지 10개의 아미노산, 예를 들어, 5 aa, 6 aa, 7 aa, 8 aa, 9 aa 또는 10 aa이다.
본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 에피토프는 T-세포에 의해 특이적으로 결합되고, 즉, 에피토프는 에피토프-특이적 T 세포에 의해 특이적으로 결합된다. 에피토프-특이적 T 세포는 기준 아미노산 서열을 갖는 에피토프에 결합하지만, 기준 아미노산 서열과 상이한 에피토프에 실질적으로 결합하지 않는다. 예를 들어, 10-6 M 미만, 10- 5 M 미만, 또는 10-4 M 미만인 친화도라고 하더라도, 에피토프-특이적 T 세포는 기준 아미노산 서열을 갖는 에피토프에 결합하고, 기준 아미노산 서열과 상이한 에피토프에 결합한다. 에피토프-특이적 T 세포는 적어도 10-7 M, 적어도 10-8 M, 적어도 10-9 M 또는 적어도 10-10 M의 친화도로 특이적인 에피토프에 결합할 수 있다.
적합한 에피토프는 암-관련 항원에 존재하는 에피토프를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 암-관련 항원은 α-엽산 수용체; 탄산무수화 효소 IX(CAIX); CD19; CD20; CD22; CD30; CD33; CD44v7/8; 암배 항원(CEA); 상피 당단백-2 (EGP-2); 상피 당단백-40(EGP-40); 엽산 결합 단백질(FBP); 태아 아세틸콜린 수용체; 강글리오사이드 항원 GD2; Her2/neu; IL-13R-a2; 카파 경쇄; LeY; L1 세포 부착 분자; 흑색종-관련 항원(MAGE); MAGE-A1; 메소텔린; MUC1; NKG2D 리간드; 종양 태아 항원(h5T4); 전립선 줄기 세포 항원(PSCA); 전립선-특이적 막 항원(PSMA); 종양-관련 당단백질-72(TAG-72); 및 혈관 내피세포 성장인자 수용체-2(VEGF-R2)를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 예를 들어, 문헌[Vigneron et al. (2013) Cancer Immunity 13:15; 및 Vigneron (2015) BioMed Res. Int'l Article ID 948501] 참조. 일부 경우에, 에피토프는 인유두종 바이러스 E7 항원 에피토프이며; 예를 들어, 문헌[Ramos et al. (2013) J. Immunother. 36:66] 참조.
일부 경우에, 에피토프는 HPV16E7/82-90 (LLMGTLGIV; 서열번호 75)이다. 일부 경우에, 에피토프는 HPV16E7/86-93 (TLGIVCPI; 서열번호 76)이다. 일부 경우에, 에피토프는 HPV16E7/11-20 (YMLDLQPETT; 서열번호 77)이다. 일부 경우에, 에피토프는 HPV16E7/11-19 (YMLDLQPET; 서열번호 78)이다. 예를 들어, 추가적인 적합한 HPV 에피토프에 대해 문헌[Ressing et al. ((1995) J. Immunol . 154:5934)] 참조.
면역조절 폴리펩타이드
적합한 면역조절 폴리펩타이드는 IL-2 폴리펩타이드, 4-1BBL 폴리펩타이드, B7-1 폴리펩타이드; B7-2 폴리펩타이드, ICOS-L 폴리펩타이드, OX-40L 폴리펩타이드, CD80 폴리펩타이드, CD86 폴리펩타이드, PD-L1 폴리펩타이드, FasL 폴리펩타이드 및 PD-L2 폴리펩타이드를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다.
일부 경우에, 면역조절 폴리펩타이드는 도 50A 또는 도 50B에 도시된 PD-L1 폴리펩타이드의 아미노산 서열과 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.
일부 경우에, 면역조절 폴리펩타이드는 도 51에 도시된 CD80 폴리펩타이드의 아미노산 서열과 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.
일부 경우에, 면역조절 폴리펩타이드는 도 51에 도시된 ICOS-L 폴리펩타이드의 아미노산 서열과 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.
일부 경우에, 면역조절 폴리펩타이드는 도 53에 도시된 OX40L 폴리펩타이드의 아미노산 서열과 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.
일부 경우에, 면역조절 폴리펩타이드는 도 54에 도시된 PD-L2 폴리펩타이드의 아미노산 서열과 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.
일부 경우에, 면역조절 폴리펩타이드는 도 55에 도시된 CD86 폴리펩타이드의 아미노산 서열과 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.
일부 경우에, 면역조절 폴리펩타이드는 도 56에 도시된 FAS-L 폴리펩타이드의 아미노산 서열과 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.
일부 경우에, synTac에 존재하는 면역조절 폴리펩타이드는 동일한 동족 공동-면역조절 폴리펩타이드에 대한 야생형 면역조절 폴리펩타이드의 결합 친화도에 비해 T 세포 표면 상에서 발현된 동종 공동-면역조절 폴리펩타이드에 대한 감소된 결합 친화도를 나타낸다. 일부 경우에, synTac가 감소된-친화도 면역조절 폴리펩타이드인 경우에, synTac 폴리펩타이드는 T 세포 표면 상에서 발현된 동종 공동-면역조절 폴리펩타이드에 대해 감소된 결합을 나타낸다. 예를 들어, 일부 경우에, 감소된-친화도 면역조절 폴리펩타이드를 포함하는 synTac 폴리펩타이드는 동일한 동족 공동-면역조절 폴리펩타이드에 대해 야생형 면역조절 폴리펩타이드를 포함하는 대조군 synTac 폴리펩타이드의 결합 친화도보다 적어도 10%, 적어도 15%, 적어도 20%, 적어도 25%, 적어도 30%, 적어도 35%, 적어도 40%, 적어도 45%, 적어도 50% 미만, 적어도 55% 미만, 적어도 60% 미만, 적어도 65% 미만, 적어도 70% 미만, 적어도 75% 미만, 적어도 80% 미만, 적어도 85% 미만, 적어도 90% 미만, 적어도 95% 미만, 또는 95% 이상의 수 미만인 결합 친화도로 동종 공동-면역조절 폴리펩타이드에 결합한다.
결합 친화도 결정
면역조절 폴리펩타이드와 그의 동족 공동-면역조절 폴리펩타이드 사이의 결합 친화도는 정제된 면역조절 폴리펩타이드 및 정제된 동족 공동-면역조절 폴리펩타이드를 이용하는 생물층 간섭계(bio-layer interferometry: BLI)에 의해 결정될 수 있다. 본 개시내용의 synTac와 그의 동족 공동-면역조절 폴리펩타이드 사이의 결합 친화도는 또한 정제된 synTac 및 동족 공동-면역조절 폴리펩타이드를 이용하는 BLI에 의해 결정될 수 있다. BLI 방법은 당업자에게 잘 공지되어 있다. 예를 들어, 문헌[Lad et al. (2015) J. Biomol . Screen. 20(4):498-507; 및 Shah and Duncan (2014) J. Vis . Exp . 18:e51383] 참조. 면역조절 폴리펩타이드와 그의 동족 공동-면역조절 폴리펩타이드 사이의, 또는 synTac와 그의 동족 공동-면역조절 폴리펩타이드 사이의 본 개시내용에 기재된 특정 및 상대적 결합 친화도는 다음의 절차를 이용하여 결정될 수 있다.
본 개시내용의 synTac와 그의 동족 공동-면역조절 폴리펩타이드 사이의 결합 친화도를 결정하기 위해, BLI 분석은 다음과 같이, 옥텟 레드 96(Octet RED 96)(Pal ) 기기 또는 유사한 기기를 이용하여 수행될 수 있다. T-세포 조절 다량체 폴리펩타이드(예를 들어, 본 개시내용의 synTac; 또는 대조군 T-세포 조절 다량체 폴리펩타이드(여기서, 대조군 T-세포 조절 다량체 폴리펩타이드는 야생형 면역조절 폴리펩타이드를 포함함))의 결합 친화도를 결정하기 위해, T-세포 조절 다량체 폴리펩타이드는 불용성 지지체("바이오센서") 상에 고정된다. 고정된 T-세포 조절 다량체 폴리펩타이드는 "표적"이다. 고정화는 불용성 지지체 상에 포획 항체를 고정시킴으로써 달성될 수 있으며, 여기서 포획 항체는 T-세포 조절 다량체 폴리펩타이드를 고정시킨다. 예를 들어, 고정화는 불용성 지지체 상에 항-Fc(예를 들어, 항-인간 IgG Fc) 항체를 고정시킴으로써 달성될 수 있으며, 여기서, 고정된 항-Fc 항체는 T-세포 조절 다량체 폴리펩타이드에 결합하고 고정된다(여기서, T-세포 조절 다량체 폴리펩타이드는 IgFc 폴리펩타이드를 포함한다). 공동-면역조절 폴리펩타이드는 몇몇 상이한 농도에서, 고정된 T-세포 조절 다량체 폴리펩타이드, 및 기록된 기기의 반응에 적용된다. 분석은 25mM HEPES pH 6.8, 5% 폴리(에틸렌 글리콜) 6000, 50mM KCl, 0.1% 소 혈청 알부민 및 0.02% 트윈(Tween) 20 비이온성 세정제를 포함하는 액체 배지에서 수행된다. 고정된 T-세포 조절 다량체 폴리펩타이드에 대한 공동-면역조절 폴리펩타이드의 결합은 30℃에서 수행된다. 결합 친화도에 대한 양성 대조군으로서, 항-MHC 클래스 I 단클론성 항체가 사용될 수 있다. 예를 들어, KD가 7nM인 항-HLA 클래스 I 단클론성 항체 W6/32(American Type Culture Collection No. HB-95; Parham et al. (1979) J. Immunol. 123:342)가 사용될 수 있다. 표준 곡선은 항-MHC 클래스 I 단클론성 항체의 연속 희석을 이용하여 생성될 수 있다. 공동-면역조절 폴리펩타이드 또는 항-MHC 클래스 I mAb는 "분석물"이다. BLI는 두 표면으로부터: i) 고정된 폴리펩타이드("표적"); 및 ii) 내부 기준층으로부터 반사된 백색광의 간섭 패턴을 분석한다. 바이오센서 팁에 결합된 분자("분석물"; 예를 들어, 공동-면역조절 폴리펩타이드; 항-HLA 항체) 수의 변화는 간섭 패턴의 이동을 야기하며; 간섭 패턴의 이런 이동은 실시갖으로 측정될 수 있다. 표적/분석물 상호작용의 친화도를 기재하는 두 역학 용어는 결합 상수(k a) 및 해리 상수(k d)이다. 이들 두 용어의 비(k d/a)는 친화도 상수 KD를 생기게 한다.
상기 언급한 바와 같이, 면역조절 폴리펩타이드(예를 들어, IL-2 또는 IL-2 변이체)와 그의 동족 공동-면역조절 폴리펩타이드(예를 들어, IL-2R) 사이의 결합 친화도를 결정하는 것은 BLI에 의해 결정될 수 있다. 분석은 synTac 다량체 폴리펩타이드에 대해 상기 기재한 것과 유사하다. BLI 분석은 다음과 같이, 옥텟 레드 96(Pal ) 기기 또는 유사한 기기를 이용하여 수행될 수 있다. 본 개시내용의 synTac의 성분 면역조절 폴리펩타이드(예를 들어, 본 개시내용의 변이체 IL-2 폴리펩타이드); 및 대조군 면역조절 폴리펩타이드(대조군 면역조절 폴리펩타이드는 야생형 면역조절 폴리펩타이드, 예를 들어, 야생형 IL-2를 포함함))는 불용성 지지체("바이오센서") 상에 고정된다. 면역조절 폴리펩타이드는 "표적"이다. 고정화는 불용성 지지체 상에 포획 항체를 고정시킴으로써 달성될 수 있으며, 여기서 포획 항체는 면역조절 폴리펩타이드를 고정시킨다. 예를 들어, 표적이 면역-친화도 태그(예를 들어, FLAG, 인간 IgG Fc)에 융합된다면, 면역화는 불용성 지지체 상에 면역-친화도 태그(예를 들어, 항-인간 IgG Fc)에 적절한 항체를 고정시킴으로써 달성될 수 있으며, 고정된 항체는 면역조절 폴리펩타이드에 결합하고 고정한다(여기서, 면역조절 폴리펩타이드는 IgFc 폴리펩타이드를 포함한다). 공동-면역조절 폴리펩타이드(또는 폴리펩타이드)는 몇몇 상이한 농도로 고정된 면역조절 폴리펩타이드, 및 기록된 기기의 반응에 적용된다. 대안적으로, 공동-면역조절 폴리펩타이드(또는 폴리펩타이드)는 바이오센서에(예를 들어, IL-2 수용체 이형삼량체에 대해, 단량체 서브유닛, 이형이량체 부분복합체 또는 완전한 이형삼량체로서) 고정되고, 면역조절 폴리펩타이드는 몇몇 상이한 농도로 고정된 공동면역조절 폴리펩타이드(들)에 적용되고, 기기의 반응은 기록된다. 분석은 25mM HEPES pH 6.8, 5% 폴리(에틸렌 글리콜) 6000, 50 mM KCl, 0.1% 소 혈청 알부민 및 0.02% 트윈(Tween) 20 비이온성 세정제를 포함하는 액체 배지에서 수행된다. 고정된 면역조절 폴리펩타이드 폴리펩타이드에 대한 공동-면역조절 폴리펩타이드의 결합은 30℃에서 수행된다. 결합 친화도에 대한 양성 대조군으로서, 항-MHC 클래스 I 단클론성 항체가 사용될 수 있다. 예를 들어, KD가 7 nM인 항-HLA 클래스 I 단클론성 항체 W6/32(American Type Culture Collection No. HB-95; Parham et al. (1979) J. Immunol. 123:342)가 사용될 수 있다. 표준 곡선은 항-MHC 클래스 I 단클론성 항체의 연속 희석을 이용하여 생성될 수 있다. 공동-면역조절 폴리펩타이드 또는 항-MHC 클래스 I mAb는 "분석물"이다. BLI는 두 표면으로부터: i) 고정된 폴리펩타이드("표적"); 및 ii) 내부 기준층으로부터 반사된 백색광의 간섭 패턴을 분석한다. 바이오센서 팁에 결합된 분자("분석물"; 예를 들어, 공동-면역조절 폴리펩타이드; 항-HLA 항체) 수의 변화는 간섭 패턴의 이동을 야기하며; 간섭 패턴의 이런 이동은 실시갖으로 측정될 수 있다. 표적/분석물 상호작용의 친화도를 기재하는 두 역학 용어는 결합 상수(k a) 및 해리 상수(k d)이다. 이들 두 용어의 비(k d/a)는 친화도 상수 KD를 생기게 한다. 따라서 야생형 면역조절 폴리펩타이드(예를 들어, IL-2)의 그의 수용체(예를 들어, IL-2R)에 대한 그리고 변이체 면역조절 폴리펩타이드(예를 들어, 본 명세서에 개시된 바와 같은 IL-2 변이체)의 그의 동족 공동-면역조절 폴리펩타이드(예를 들어, 그의 수용체)(예를 들어, IL-2R)에 대한 결합 친화도를 둘 다 결정하는 것은 동족 공동-면역조절 폴리펩타이드에 대해, 야생형 공동 면역 조절 폴리펩타이드에 비해 변이체 공동-면역조절 폴리펩타이드의 상대적 결합 친화도를 결정하도록 허용한다. 즉, 변이체 면역조절 폴리펩타이드의 그의 수용체(그의 동족 공동-면역조절 폴리펩타이드)에 대한 결합 친화도가 동일한 동족 공동-면역조절 폴리펩타이드에 대한 야생형 면역조절 폴리펩타이드의 결합 친화도에 비해 감소되는지의 여부, 그리고 만약에 그렇다면, 야생형 공동-면역조절 폴리펩타이드의 결합친화도로부터의 감소 백분율이 무엇인지를 결정할 수 있다.
BLI 분석은 다중-웰 플레이트에서 수행된다. 분석을 실행하기 위해, 플레이트 레이아웃을 정하고, 분석 단계를 정하고 나서, 옥텟 데이터 획득 소프트웨어에서 바이오센서를 부여한다. 바이오센서 조립체는 수화된다. 수화된 바이오센서 조립체 및 분석 플레이트는 옥텟 기기 상에서 10분 동안 평형상태가 된다. 일단 데이터가 획득되면, 획득된 데이터는 옥텟 데이터 분석 소프트웨어에 부하된다. 데이터는 기준 차감, y-축 정렬, 단계간 보정 및 사비츠기-골레이 필터링(Savitzky-Golay filtering)에 대한 방법을 구체화함으로써 가공 창에서 가공된다. 데이터는 분석을 위해 단계들(결합 및 해리)을 구체화함으로써, 곡선 적합 모델(1:1), 적합화 방법(글로벌(global)) 및 관심 대상의 창(초)을 선택함으로써 분석 창에서 분석된다. 적합도 품질이 평가된다. 각각의 데이터 추적에 대한 KD 값(분석물 농도)은 3배 범위 내라면 평균화될 수 있다. KD 오차값은 친화도 상수 값의 10배 내이어야 하고; R2 값은 0.95 초과이어야 한다. 예를 들어, 문헌[Abdiche et al. (2008) J. Anal. Biochem . 377:209] 참조.
일부 경우에, i) 동족 공동 면역조절 폴리펩타이드(예를 들어, IL-2R)에 대한 대조군 T-세포 조절 다량체 폴리펩타이드(대조군이 야생형 면역조절 폴리펩타이드, 예를 들어, 야생형 IL-2를 포함함)의 결합 친화도 대 ii) 동족 공동-면역조절 폴리펩타이드(예를 들어, IL-2R)에 대한 야생형 면역조절 폴리펩타이드의 변이체(예를 들어, 변이체 IL-2)를 포함하는 본 개시내용의 T-세포 조절 다량체 폴리펩타이드의 결합 친화도의 비는, BLI(상기 기재한 바와 같음)에 의해 측정할 때, 적어도 1.5:1, 적어도 2:1, 적어도 5:1, 적어도 10:1, 적어도 15:1, 적어도 20:1, 적어도 25:1, 적어도 50:1, 적어도 100:1, 적어도 500:1, 적어도 102:1, 적어도 5 x 102:1, 적어도 103:1, 적어도 5 x 103:1, 적어도 104:1, 적어도 105:1 또는 적어도 106:1이다. 일부 경우에, i) 동족 공동-면역조절 폴리펩타이드에 대한 대조군 T-세포 조절 다량체 폴리펩타이드(대조군은 야생형 면역조절 폴리펩타이드를 포함함)의 결합 친화도 대 ii) 동족 공동-면역조절 폴리펩타이드에 대한 야생형 면역조절 폴리펩타이드의 변이체를 포함하는 본 개시내용의 T-세포 조절 다량체 폴리펩타이드의 결합 친화도의 비는, BLI에 의해 측정할 때, 1.5:1 대 106:1, 예를 들어, 1.5:1 대 10:1, 10:1 내지 50:1, 50:1 내지 102:1, 102:1 대 103:1, 103:1 대 104:1, 104:1 내지 105:1, 또는 105:1 내지 106:1의 범위이다.
일부 경우에, i) 동족 공동 면역조절 폴리펩타이드(예를 들어, IL-2R)에 대한 대조군 면역조절 폴리펩타이드(대조군이 야생형 면역조절 폴리펩타이드, 예를 들어, 야생형 IL-2를 포함함)의 결합 친화도 대 ii) 동족 공동-면역조절 폴리펩타이드(예를 들어, IL-2R)에 대한 야생형 면역조절 폴리펩타이드의 변이체(예를 들어, 변이체 IL-2)를 포함하는 본 개시내용의 면역조절 폴리펩타이드의 결합 친화도의 비는, BLI(상기 기재한 바와 같음)에 의해 측정할 때, 적어도 1.5:1, 적어도 2:1, 적어도 5:1, 적어도 10:1, 적어도 15:1, 적어도 20:1, 적어도 25:1, 적어도 50:1, 적어도 100:1, 적어도 500:1, 적어도 102:1, 적어도 5 x 102:1, 적어도 103:1, 적어도 5 x 103:1, 적어도 104:1, 적어도 105:1 또는 적어도 106:1이다. 일부 경우에, i) 동족 공동-면역조절 폴리펩타이드에 대한 대조군 면역조절 폴리펩타이드(대조군은 야생형 면역조절 폴리펩타이드를 포함함)의 결합 친화도 대 ii) 동족 공동-면역조절 폴리펩타이드에 대한 야생형 면역조절 폴리펩타이드의 변이체를 포함하는 본 개시내용의 면역조절 폴리펩타이드의 결합 친화도의 비는, BLI에 의해 측정할 때, 1.5:1 대 106:1, 예를 들어, 1.5:1 대 10:1, 10:1 내지 50:1, 50:1 내지 102:1, 102:1 대 103:1, 103:1 대 104:1, 104:1 내지 105:1, 또는 105:1 내지 106:1의 범위이다.
IL-2/ synTac
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는 조절 도메인으로서 야생형(천연 유래) IL-2를 포함한다. 일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는 조절 도메인으로서 변이체 IL-2 폴리펩타이드를 포함한다.
조절("MOD") 도메인으로서 IL-2 폴리펩타이드를 포함하는 T-세포 조절 다량체 폴리펩타이드는 또한 "IL-2/synTac", "IL-2/synTac 폴리펩타이드" 또는 "IL-2/다량체 폴리펩타이드"으로서 지칭된다
일부 경우에, IL-2/synTac 폴리펩타이드는 야생형 IL-2 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, synTac 폴리펩타이드는 야생형 IL-2 폴리펩타이드의 단일 복제물을 포함한다. 일부 경우에, synTac 폴리펩타이드는 야생형 IL-2 폴리펩타이드의 2개의 복제물을 포함한다. 일부 경우에, synTac 폴리펩타이드는 야생형 IL-2 폴리펩타이드의 3개의 복제물을 포함한다. 일부 경우에, 야생형 IL-2 폴리펩타이드는 도 2A에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 인간 IL2 폴리펩타이드 야생형 아미노산 서열은 다음과 같을 수 있다:
일부 경우에, synTac 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드를 포함한다. 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 IL2R에 대한 야생형 IL-2의 결합 친화도에 비해 IL2R에 대한 감소된 결합 친화도를 나타낸다. 변이체 IL-2 폴리펩타이드를 포함하는 다량체 폴리펩타이드는 또한 IL2R(예를 들어, 도 3A 내지 도 3c에 도시된 아미노산 서열(성숙 형태)을 포함하는 알파, 베타 및 감마 폴리펩타이드를 포함하는 IL2R)에 대한 야생형 IL-2를 포함하는 대조군 다량체 폴리펩타이드에 비해 IL2R에 대한 감소된 결합 친화도를 나타낸다.
일부 경우에, IL-2/synTac 폴리펩타이드는 IL2R에 대해 도 2A에 도시한 아미노산 서열을 포함하는 IL2 폴리펩타이드의 결합 친화도에 비해, IL2R에 대해 감소된 결합 친화도를 나타낸다. 예를 들어, 일부 경우에, IL-2/synTac 폴리펩타이드는 도 3A 내지 도 3c에 도시된 아미노산 서열(성숙 형태)을 포함하는 알파, 베타 및 감마 폴리펩타이드를 포함하는 IL2R에 대해 도 2A에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 IL2 폴리펩타이드를 포함하는 대조군 synTac 폴리펩타이드의 결합 친화도 미만인 결합 친화도로 IL2R에 결합한다. 예를 들어, 일부 경우에, IL-2/synTac 폴리펩타이드는 IL2R(예를 들어, 도 3A 내지 도 3c에 도시된 아미노산 서열(성숙 형태)을 포함하는 알파, 베타 및 감마 폴리펩타이드를 포함하는 IL2R)에 대해 도 2A에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 IL-2 폴리펩타이드를 포함하는 대조군 synTac 폴리펩타이드의 결합 친화도보다 적어도 10%, 적어도 15%, 적어도 20%, 적어도 25%, 적어도 30%, 적어도 35%, 적어도 40%, 적어도 45%, 적어도 50% 미만, 적어도 55% 미만, 적어도 60% 미만, 적어도 65% 미만, 적어도 70% 미만, 적어도 75% 미만, 적어도 80% 미만, 적어도 85% 미만, 적어도 90% 미만, 적어도 95% 미만, 또는 95% 초과의 수 미만인 결합 친화도로 IL2R에 결합한다.
일부 경우에, IL-2/synTac 폴리펩타이드는 IL2R에 대한 결합 친화도가 100 nm 내지 약 100μM이다. 일부 경우에, IL-2/synTac 폴리펩타이드는 IL2R에 대한 결합 친화도가 약 100nM 내지 500 nM이다. 예를 들어, 일부 경우에, IL-2/synTac 폴리펩타이드는 IL2R(예를 들어, 도 3A 내지 도 3c에 도시된 아미노산 서열(성숙 형태)을 포함하는 알파, 베타 및 감마 폴리펩타이드를 포함하는 IL2R)에 대한 결합 친화도가 약 100nM 내지 약 150nM, 약 150nM 내지 약 200nM, 약 200nM 내지 약 250nM, 약 250nM 내지 약 300nM, 약 300nM 내지 약 350nM, 약 350nM 내지 약 400nM, 약 400nM 내지 약 450nM, 또는 약 450nM 내지 약 500nM이다. 일부 경우에, IL-2/synTac 폴리펩타이드는 IL2R(예를 들어, 도 3A 내지 도 3c에 도시된 아미노산 서열(성숙 형태)을 포함하는 알파, 베타 및 감마 폴리펩타이드를 포함하는 IL2R)에 대한 결합 친화도가 약 500nM 내지 1μM이다. 예를 들어, 일부 경우에, IL-2/synTac 폴리펩타이드는 IL2R(예를 들어, 도 3A 내지 도 3c에 도시된 아미노산 서열(성숙 형태)을 포함하는 알파, 베타 및 감마 폴리펩타이드를 포함하는 IL2R)에 대한 결합 친화도가 약 500nM 내지 약 600nM, 약 600nM 내지 약 700nM, 약 700nM 내지 약 800nM, 약 800nM 내지 약 900nM, 또는 약 900nM 내지 약 1μM이다. 일부 경우에, IL-2/synTac 폴리펩타이드는 IL2R(예를 들어, 도 3A 내지 도 3c에 도시된 아미노산 서열(성숙 형태)을 포함하는 알파, 베타 및 감마 폴리펩타이드를 포함하는 IL2R)에 대한 결합 친화도가 약 1μM 내지 10μM이다. 예를 들어, 일부 경우에, IL-2/synTac 폴리펩타이드는 IL2R(예를 들어, 도 3A 내지 도 3c에 도시된 아미노산 서열(성숙 형태)을 포함하는 알파, 베타 및 감마 폴리펩타이드를 포함하는 IL2R)에 대한 결합 친화도가 약 1μM 내지 2μM, 약 2μM 내지 약 3μM, 약 3μM 내지 약 4μM, 약 4μM 내지 약 5μM, 약 5μM 내지 약 6μM, 약 6μM 내지 약 7μM, 약 7μM 내지 약 8μM, 약 8μM 내지 약 9μM, 또는 약 9μM 내지 약 10μM이다. 일부 경우에, IL-2/synTac 폴리펩타이드는 IL2R(예를 들어, 도 3A 내지 도 3c에 도시된 아미노산 서열(성숙 형태)을 포함하는 알파, 베타 및 감마 폴리펩타이드를 포함하는 IL2R)에 대한 결합 친화도가 약 10μM 내지 100μM이다. 예를 들어, 일부 경우에, IL-2/synTac 폴리펩타이드는 IL2R(예를 들어, 도 3A 내지 도 3c에 도시된 아미노산 서열(성숙 형태)을 포함하는 알파, 베타 및 감마 폴리펩타이드를 포함하는 IL2R)에 대한 결합 친화도가 약 10μM 내지 약 20μM, 약 20μM 내지 약 30μM, 약 30μM 내지 약 40μM, 약 40μM 내지 약 50μM, 약 50μM 내지 약 60μM, 약 60μM 내지 약 70μM, 약 70μM 내지 약 80μM, 약 80μM 내지 약 90μM, 또는 약 90μM 내지 약 100μM이다.
IL-2/synTac 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL2 폴리펩타이드는 야생형 IL2 폴리펩타이드(예를 들어, 도 2A에 도시되거나 또는 서열번호 1에 제시된 바와 같은 아미노산 서열을 포함하는 IL2 폴리펩타이드)에 대해 단일 아미노산 치환을 가질 수 있다. 일부 경우에, IL-2/synTac 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL2 폴리펩타이드는 야생형 IL2 폴리펩타이드(예를 들어, 도 2A에 도시되거나 또는 서열번호 1에 제시된 바와 같은 아미노산 서열을 포함하는 IL2 폴리펩타이드)에 대해 2 내지 10개의 아미노산 치환을 가진다. 일부 경우에, 본 개시내용의 synTac 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL2 폴리펩타이드는 야생형 IL2 폴리펩타이드(예를 들어, 도 2A에 도시되거나 또는 서열번호 1에 제시된 바와 같은 아미노산 서열을 포함하는 IL2 폴리펩타이드)에 대해 2개의 아미노산 치환을 가진다. 일부 경우에, 본 개시내용의 synTac 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL2 폴리펩타이드는 야생형 IL2 폴리펩타이드(예를 들어, 도 2A에 도시되거나 또는 서열번호 1에 제시된 바와 같은 아미노산 서열을 포함하는 IL2 폴리펩타이드)에 대해 3개의 아미노산 치환을 가진다. 일부 경우에, 본 개시내용의 synTac 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL2 폴리펩타이드는 야생형 IL2 폴리펩타이드(예를 들어, 도 2A에 도시되거나 또는 서열번호 1에 제시된 바와 같은 아미노산 서열을 포함하는 IL2 폴리펩타이드)에 대해 4개의 아미노산 치환을 가진다. 일부 경우에, 본 개시내용의 synTac 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL2 폴리펩타이드는 야생형 IL2 폴리펩타이드(예를 들어, 도 2A에 도시되거나 또는 서열번호 1에 제시된 바와 같은 아미노산 서열을 포함하는 IL2 폴리펩타이드)에 대해 5개의 아미노산 치환을 가진다. 일부 경우에, 본 개시내용의 synTac 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL2 폴리펩타이드는 야생형 IL2 폴리펩타이드(예를 들어, 도 2A에 도시되거나 또는 서열번호 1에 제시된 바와 같은 아미노산 서열을 포함하는 IL2 폴리펩타이드)에 대해 6개의 아미노산 치환을 가진다. 일부 경우에, 본 개시내용의 synTac 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL2 폴리펩타이드는 야생형 IL2 폴리펩타이드(예를 들어, 도 2A에 도시되거나 또는 서열번호 1에 제시된 바와 같은 아미노산 서열을 포함하는 IL2 폴리펩타이드)에 대해 7개의 아미노산 치환을 가진다. 일부 경우에, 본 개시내용의 synTac 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL2 폴리펩타이드는 야생형 IL2 폴리펩타이드(예를 들어, 도 2A에 도시되거나 또는 서열번호 1에 제시된 바와 같은 아미노산 서열을 포함하는 IL2 폴리펩타이드)에 대해 8개의 아미노산 치환을 가진다. 일부 경우에, 본 개시내용의 synTac 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL2 폴리펩타이드는 야생형 IL2 폴리펩타이드(예를 들어, 도 2A에 도시되거나 또는 서열번호 1에 제시된 바와 같은 아미노산 서열을 포함하는 IL2 폴리펩타이드)에 대해 9개의 아미노산 치환을 가진다. 일부 경우에, 본 개시내용의 synTac 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL2 폴리펩타이드는 야생형 IL2 폴리펩타이드(예를 들어, 도 2A에 도시되거나 또는 서열번호 1에 제시된 바와 같은 아미노산 서열을 포함하는 IL2 폴리펩타이드)에 대해 10개의 아미노산 치환을 가진다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 제1 폴리펩타이드 및 제2 폴리펩타이드를 포함하며, 여기서 제1 폴리펩타이드 아미노 말단(N-말단)으로부터 카복실 말단(C-말단)의 순서로, a) 에피토프(예를 들어, T-세포 에피토프); b) 제1 주조직 적합 복합체(MHC) 폴리펩타이드 및 c) 면역조절 폴리펩타이드(예를 들어, 본 개시내용의 변이체 IL2 폴리펩타이드)를 포함하며; 그리고 제2 폴리펩타이드는 N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, a) 제2 MHC 폴리펩타이드; 및 b) 면역글로불린(Ig) Fc 폴리펩타이드를 포함한다. 다른 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 제1 폴리펩타이드 및 제2 폴리펩타이드를 포함하며, 제1 폴리펩타이드는 N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, a) 에피토프(예를 들어, T-세포 에피토프); 및 b) 제1 MHC 폴리펩타이드를 포함하고; 그리고 제2 폴리펩타이드는 N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, a) 면역조절 폴리펩타이드(예를 들어, 본 개시내용의 변이체 IL2 폴리펩타이드); b) 제2 MHC 폴리펩타이드; 및 c) Ig Fc 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 예에서, 제1 및 제2 MHC 폴리펩타이드는 클래스 I MHC 폴리펩타이드이며; 예를 들어, 일부 경우에, 제1 MHC 폴리펩타이드는 MHC 클래스 I β2-마이크로글로불린(B2M 또는 β2M) 폴리펩타이드이고, 제2 MHC 폴리펩타이드는 MHC 클래스 I 중쇄(H 쇄)이거나; 또는 제1 MHC 폴리펩타이드는 MHC 클래스 I H 쇄이고, 제2 MHC 폴리펩타이드는 MHC클래스 I β2M 폴리펩타이드)이다. 다른 경우에, 제1 및 제2 MHC 폴리펩타이드는 클래스 II MHC 폴리펩타이드이고; 예를 들어, 일부 경우에, 제1 MHC 폴리펩타이드는 MHC 클래스 II α-쇄 폴리펩타이드이며, 제2 MHC 폴리펩타이드는 MHC 클래스 II β-쇄 폴리펩타이드이다. 다른 경우에, 제1 폴리펩타이드는 MHC 클래스 II β-쇄 폴리펩타이드이고, 제2 MHC 폴리펩타이드는 MHC 클래스 II α-쇄 폴리펩타이드이다. 일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는 2개 이상의 면역조절 폴리펩타이드이며, 여기서 면역조절 폴리펩타이드의 적어도 하나는 본 개시내용의 변이체 IL2 면역조절 폴리펩타이드이다. 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드가 2개 이상의 면역조절 폴리펩타이드를 포함하는 경우, 일부 경우에, 2개 이상의 면역조절 폴리펩타이드는 동일한 폴리펩타이드 쇄에 존재하며, 일렬로 있을 수 있다. 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드가 2개 이상의 면역조절 폴리펩타이드를 포함하는 경우, 일부 경우에, 2개 이상의 면역조절 폴리펩타이드는 별개의 폴리펩타이드에 존재한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 이형이량체이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 삼량체 폴리펩타이드이다.
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는 a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로 하기를 포함하는 제1 폴리펩타이드: i) 에피토프; 및 ii) 제1 MHC 폴리펩타이드; 및 b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로 하기를 포함하는 제2 폴리펩타이드: i) 제2 MHC 폴리펩타이드; 및 ii) Ig Fc 폴리펩타이드; 및 iii) 면역조절 도메인(예를 들어, 본 개시내용의 변이체 IL2 폴리펩타이드)을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 에피토프; 및 ii) 제1 MHC 폴리펩타이드를 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및 b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 제2 MHC 폴리펩타이드; 및 ii) 면역조절 도메인(예를 들어, 본 개시내용의 변이체 IL2 폴리펩타이드)을 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 에피토프; 및 ii) 제1 MHC 폴리펩타이드를 포함하는, 제1 폴리펩타이드; 및 b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 면역조절 도메인(예를 들어, 본 개시내용의 변이체 IL2 폴리펩타이드); 및 ii) 제2 MHC 폴리펩타이드를 포함하는, 제2 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 에피토프; ii) 제1 MHC 폴리펩타이드; 및 iii) 면역조절 도메인(예를 들어, 본 개시내용의 변이체 IL2 폴리펩타이드)을 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및 b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 제2 MHC 폴리펩타이드를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드가 비-Ig 스캐폴드를 포함하는 경우, 비-Ig 스캐폴드는 XTEN 펩타이드, 트랜스페린 폴리펩타이드, Fc 수용체 폴리펩타이드, 엘라스틴-유사 폴리펩타이드, 실크-유사 폴리펩타이드, 또는 실크-엘라스틴-유사 폴리펩타이드이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 1가이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 다가이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다가 다량체 폴리펩타이드는 제1 또는 제2 폴리펩타이드 중 하나 상에서 면역글로불린 Fc 폴리펩타이드를 포함한다. 예를 들어, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 Fc 폴리펩타이드에 따라서, 다량체 폴리펩타이드는 동종이량체일 수 있으며, 여기서 다량체 폴리펩타이드의 2개 분자는 동종이량체에 존재하고, 다량체 폴리펩타이드의 2개 분자는, 예를 들어, 2개 분자에 존재하는 Fc 폴리펩타이드를 통해 서로 이황화 결합될 수 있다. 다른 예로서, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 다량체 폴리펩타이드의 3, 4 또는 5개의 분자를 포함할 수 있으며, 다량체 폴리펩타이드의 분자는, 예를 들어, 분자에 존재하는 Fc 폴리펩타이드를 통해 서로 이황화결합될 수 있다.
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는 a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 에피토프; ii) β2M 폴리펩타이드; 및 iii) 본 개시내용의 변이체 IL2 폴리펩타이드를 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및 b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 클래스 I MHC 중쇄; 및 ii) Fc 폴리펩타이드를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 에피토프; 및 ii) β2M 폴리펩타이드를 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및 b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 본 개시내용의 변이체 IL2 폴리펩타이드는; ii) 클래스 I MHC 중쇄; 및 iii) Fc 폴리펩타이드를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 에피토프; ii) β2M 폴리펩타이드; iii) 본 개시내용의 제1 변이체 IL2 폴리펩타이드; iv) 본 개시내용의 제2 변이체 IL2 폴리펩타이드는; 및 v) 본 개시내용의 제3 변이체 IL2 폴리펩타이드를 포함하는, 제1 폴리펩타이드; 및 b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 클래스 I MHC 중쇄; 및 ii) Fc 폴리펩타이드를 포함하는, 제2 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, 제1, 제2 및 제3 변이체 IL2 폴리펩타이드는 동일한 아미노산 서열을 가진다. 일부 경우에, 제1, 제2 및 제3 변이체 IL2 폴리펩타이드는 아미노산 서열이 서로 상이하다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 에피토프; 및 ii) β2M 폴리펩타이드를 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및 b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 본 개시내용의 제1 변이체 IL2 폴리펩타이드; ii) 본 개시내용의 제2 변이체 IL2 폴리펩타이드; 및 iii) 본 개시내용의 제3 변이체 IL2 폴리펩타이드; iv) 클래스 I MHC 중쇄; 및 v) Fc 폴리펩타이드를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, 제1, 제2 및 제3 변이체 IL2 폴리펩타이드는 동일한 아미노산 서열을 가진다. 일부 경우에, 제1, 제2 및 제3 변이체 IL2 폴리펩타이드는 아미노산 서열이 서로 상이하다.
F42 치환
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 42는 페닐알라닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 42는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Gly이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Val이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Leu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ile이다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 단일 복제물은 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 2개의 복제물을 포함하며, 예를 들어, 2개의 복제물은 2개의 복제물 사이에 링커 없이 일렬이거나 또는 링커 펩타이드에 의해 분리된다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 3개의 복제물을 포함하며, 예를 들어, 3개의 복제물은 3개의 복제물 사이에 링커 없이 일렬이거나 또는 링커 펩타이드에 의해 분리된다. 일부 경우에, IL-2/본 개시내용의 synTac가 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M을 포함하는 경우, IL-2 폴리펩타이드(들)는 HLA 클래스 I 중쇄를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, IL-2/본 개시내용의 synTac가 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M을 포함하는 경우, IL-2 폴리펩타이드(들)는 β2M 폴리펩타이드를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드, 또는 이를 포함하는 synTac은 IL2R에 대한 결합 친화도가 약 100nM 내지 150nM, 약 150nM 내지 약 200nM, 약 200nM 내지 약 250nM, 약 250nM 내지 약 300nM, 약 300nM 내지 약 350nM, 약 350nM 내지 약 400nM, 약 400nM 내지 약 500nM, 약 500nM 내지 약 600nM, 약 600nM 내지 약 700nM, 약 700nM 내지 약 800nM, 약 800nM 내지 약 900nM, 약 900nM 내지 약 1μM, 약 1μM 내지 약 5μM, 약 5μM 내지 약 10μM, 약 10μM 내지 약 15μM, 약 15μM 내지 약 20μM, 약 20μM 내지 약 25μM, 약 25μM 내지 약 50μM, 약 50μM 내지 약 75μM, 또는 약 75μM 내지 약 100μM이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 길이가 133개의 아미노산이다.
Y45 치환
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2F에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 45는 타이로신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 45는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2F에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 45는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2F에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 45는 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2F에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 45는 Gly이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2F에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 45는 Val이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2F에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 45는 Leu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2F에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 45는 Ile이다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 단일 복제물은 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 2개의 복제물을 포함하며, 예를 들어, 2개의 복제물은 2개의 복제물 사이에 링커 없이 일렬이거나 또는 링커 펩타이드에 의해 분리된다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 3개의 복제물을 포함하며, 예를 들어, 3개의 복제물은 3개의 복제물 사이에 링커 없이 일렬이거나 또는 링커 펩타이드에 의해 분리된다. 일부 경우에, IL-2/본 개시내용의 synTac가 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M을 포함하는 경우, IL-2 폴리펩타이드(들)는 HLA 클래스 I 중쇄를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, IL-2/본 개시내용의 synTac가 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M을 포함하는 경우, IL-2 폴리펩타이드(들)는 β2M 폴리펩타이드를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드, 또는 이를 포함하는 synTac은 IL2R에 대한 결합 친화도가 약 100nM 내지 150nM, 약 150nM 내지 약 200nM, 약 200nM 내지 약 250nM, 약 250nM 내지 약 300nM, 약 300nM 내지 약 350nM, 약 350nM 내지 약 400nM, 약 400nM 내지 약 500nM, 약 500nM 내지 약 600nM, 약 600nM 내지 약 700nM, 약 700nM 내지 약 800nM, 약 800nM 내지 약 900nM, 약 900nM 내지 약 1μM, 약 1μM 내지 약 5μM, 약 5μM 내지 약 10μM, 약 10μM 내지 약 15μM, 약 15μM 내지 약 20μM, 약 20μM 내지 약 25μM, 약 25μM 내지 약 50μM, 약 50μM 내지 약 75μM, 또는 약 75μM 내지 약 100μM이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 길이가 133개의 아미노산이다.
Q126 치환
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2G에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 126은 글루타민이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 126은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2G에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 126은 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2G에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 126은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2G에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 126은 Gly이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2G에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 126은 Val이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2G에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 126은 Leu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2G에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 126은 Ile이다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 단일 복제물은 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 2개의 복제물을 포함하며, 예를 들어, 2개의 복제물은 2개의 복제물 사이에 링커 없이 일렬이거나 또는 링커 펩타이드에 의해 분리된다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 3개의 복제물을 포함하며, 예를 들어, 3개의 복제물은 3개의 복제물 사이에 링커 없이 일렬이거나 또는 링커 펩타이드에 의해 분리된다. 일부 경우에, IL-2/본 개시내용의 synTac가 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M을 포함하는 경우, IL-2 폴리펩타이드(들)는 HLA 클래스 I 중쇄를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, IL-2/본 개시내용의 synTac가 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M을 포함하는 경우, IL-2 폴리펩타이드(들)는 β2M 폴리펩타이드를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드, 또는 이를 포함하는 synTac은 IL2R에 대한 결합 친화도가 약 100nM 내지 150nM, 약 150nM 내지 약 200nM, 약 200nM 내지 약 250nM, 약 250nM 내지 약 300nM, 약 300nM 내지 약 350nM, 약 350nM 내지 약 400nM, 약 400nM 내지 약 500nM, 약 500nM 내지 약 600nM, 약 600nM 내지 약 700nM, 약 700nM 내지 약 800nM, 약 800nM 내지 약 900nM, 약 900nM 내지 약 1μM, 약 1μM 내지 약 5μM, 약 5μM 내지 약 10μM, 약 10μM 내지 약 15μM, 약 15μM 내지 약 20μM, 약 20μM 내지 약 25μM, 약 25μM 내지 약 50μM, 약 50μM 내지 약 75μM, 또는 약 75μM 내지 약 100μM이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 길이가 133개의 아미노산이다.
F42 및 H16 치환
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2H에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 42는 페닐알라닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 42는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 아미노산 16은 히스티딘이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 16은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2H에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이고; 그리고 아미노산 16은 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2H에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2H에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 16은 Gly이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2H에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Val이고, 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2H에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Leu이고, 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2H에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ile이고, 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 단일 복제물은 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 2개의 복제물을 포함하며, 예를 들어, 2개의 복제물은 2개의 복제물 사이에 링커 없이 일렬이거나 또는 링커 펩타이드에 의해 분리된다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 3개의 복제물을 포함하며, 예를 들어, 3개의 복제물은 3개의 복제물 사이에 링커 없이 일렬이거나 또는 링커 펩타이드에 의해 분리된다. 일부 경우에, IL-2/본 개시내용의 synTac가 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M을 포함하는 경우, IL-2 폴리펩타이드(들)는 HLA 클래스 I 중쇄를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, IL-2/본 개시내용의 synTac가 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M을 포함하는 경우, IL-2 폴리펩타이드(들)는 β2M 폴리펩타이드를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 F42A 및 H16A 치환을 포함하는 IL-2 변이체의 2개의 복제물을 포함하며, 여기서 다량체 폴리펩타이드는 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M 폴리펩타이드를 포함하고, 그리고 IL-2의 2개의 복제물(F42A, H16A)은 HLA 클래스 I 중쇄를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드, 또는 이를 포함하는 synTac은 IL2R에 대한 결합 친화도가 약 100nM 내지 150nM, 약 150nM 내지 약 200nM, 약 200nM 내지 약 250nM, 약 250nM 내지 약 300nM, 약 300nM 내지 약 350nM, 약 350nM 내지 약 400nM, 약 400nM 내지 약 500nM, 약 500nM 내지 약 600nM, 약 600nM 내지 약 700nM, 약 700nM 내지 약 800nM, 약 800nM 내지 약 900nM, 약 900nM 내지 약 1μM, 약 1μM 내지 약 5μM, 약 5μM 내지 약 10μM, 약 10μM 내지 약 15μM, 약 15μM 내지 약 20μM, 약 20μM 내지 약 25μM, 약 25μM 내지 약 50μM, 약 50μM 내지 약 75μM, 또는 약 75μM 내지 약 100μM이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 길이가 133개의 아미노산이다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 34B에 도시된 아미노산 서열을 포함한다(H16A 및 F42A 치환을 포함함).
F42 및 D20 치환
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2I에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 42는 페닐알라닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 42는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 아미노산 20은 아스파르트산이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 20은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2I에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이고; 그리고 아미노산 20은 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2I에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이고; 그리고 아미노산 20은 Asn, Gln, Lys, Arg 또는 His이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2I에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2I에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Gly이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2I에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Val이고, 아미노산 20은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2I에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Leu이고, 아미노산 20은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2I에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ile이고, 아미노산 20은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2I에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Asn이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2I에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Gln이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2I에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Lys이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2I에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Arg이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2I에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 His이다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 단일 복제물은 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 2개의 복제물을 포함하며, 예를 들어, 2개의 복제물은 2개의 복제물 사이에 링커 없이 일렬이거나 또는 링커 펩타이드에 의해 분리된다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 3개의 복제물을 포함하며, 예를 들어, 3개의 복제물은 3개의 복제물 사이에 링커 없이 일렬이거나 또는 링커 펩타이드에 의해 분리된다. 일부 경우에, IL-2/본 개시내용의 synTac가 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M을 포함하는 경우, IL-2 폴리펩타이드(들)는 HLA 클래스 I 중쇄를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, IL-2/본 개시내용의 synTac가 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M을 포함하는 경우, IL-2 폴리펩타이드(들)는 β2M 폴리펩타이드를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드, 또는 이를 포함하는 synTac은 IL2R에 대한 결합 친화도가 약 100nM 내지 150nM, 약 150nM 내지 약 200nM, 약 200nM 내지 약 250nM, 약 250nM 내지 약 300nM, 약 300nM 내지 약 350nM, 약 350nM 내지 약 400nM, 약 400nM 내지 약 500nM, 약 500nM 내지 약 600nM, 약 600nM 내지 약 700nM, 약 700nM 내지 약 800nM, 약 800nM 내지 약 900nM, 약 900nM 내지 약 1μM, 약 1μM 내지 약 5μM, 약 5μM 내지 약 10μM, 약 10μM 내지 약 15μM, 약 15μM 내지 약 20μM, 약 20μM 내지 약 25μM, 약 25μM 내지 약 50μM, 약 50μM 내지 약 75μM, 또는 약 75μM 내지 약 100μM이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 길이가 133개의 아미노산이다.
F42, D20 및 E15 치환
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2J에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 42는 페닐알라닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 42는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 아미노산 20은 아스파르트산이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 20은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Glu이고; 그리고 아미노산 15는 글루탐산이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 15는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Asp이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2J에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이고; 그리고 아미노산 20은 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이며; 그리고 아미노산 15는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2J에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이고; 아미노산 20은 Asn, Gln, Lys, Arg 또는 His이며; 그리고 아미노산 15는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2J에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Ala이며, 그리고 아미노산 15는 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2J에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Gly이며, 그리고 아미노산 15는 Gly이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2J에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Val이고, 아미노산 20은 Ala이며, 그리고 아미노산 15는 Gly이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2J에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Leu이고, 아미노산 20은 Ala이며, 그리고 아미노산 15는 Gly이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2J에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ile이고, 아미노산 20은 Ala이며, 그리고 아미노산 15는 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2J에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Asn이며, 그리고 아미노산 15는 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2I에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Gln이며, 그리고 아미노산 15는 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2J에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Lys이며, 그리고 아미노산 15는 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2J에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Arg이며, 그리고 아미노산 15는 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2I에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 His이며, 그리고 아미노산 15는 Ala이다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 단일 복제물은 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 2개의 복제물을 포함하며, 예를 들어, 2개의 복제물은 2개의 복제물 사이에 링커 없이 일렬이거나 또는 링커 펩타이드에 의해 분리된다. 일부 경우에, IL-2/본 개시내용의 synTac가 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M을 포함하는 경우, IL-2 폴리펩타이드(들)는 HLA 클래스 I 중쇄를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, IL-2/본 개시내용의 synTac가 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M을 포함하는 경우, IL-2 폴리펩타이드(들)는 β2M 폴리펩타이드를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 3개의 복제물을 포함하며, 예를 들어, 3개의 복제물은 3개의 복제물 사이에 링커 없이 일렬이거나 또는 링커 펩타이드에 의해 분리된다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드, 또는 이를 포함하는 synTac은 IL2R에 대한 결합 친화도가 약 100nM 내지 150nM, 약 150nM 내지 약 200nM, 약 200nM 내지 약 250nM, 약 250nM 내지 약 300nM, 약 300nM 내지 약 350nM, 약 350nM 내지 약 400nM, 약 400nM 내지 약 500nM, 약 500nM 내지 약 600nM, 약 600nM 내지 약 700nM, 약 700nM 내지 약 800nM, 약 800nM 내지 약 900nM, 약 900nM 내지 약 1μM, 약 1μM 내지 약 5μM, 약 5μM 내지 약 10μM, 약 10μM 내지 약 15μM, 약 15μM 내지 약 20μM, 약 20μM 내지 약 25μM, 약 25μM 내지 약 50μM, 약 50μM 내지 약 75μM, 또는 약 75μM 내지 약 100μM이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 길이가 133개의 아미노산이다.
F42, D20 및 H16 치환
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2K에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 42는 페닐알라닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 42는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 아미노산 20은 아스파르트산이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 20은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Glu이고; 그리고 아미노산 16은 히스티딘이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 16은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2K에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이고; 그리고 아미노산 20은 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이며; 그리고 아미노산 16은 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2K에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이고; 아미노산 20은 Asn, Gln, Lys, Arg 또는 His이며; 그리고 아미노산 16은 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2K에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Ala이며, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2K에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Gly이며, 그리고 아미노산 16은 Gly이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2K에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Val이고, 아미노산 20은 Ala이며, 그리고 아미노산 16은 Gly이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2K에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Leu이고, 아미노산 20은 Ala이며, 그리고 아미노산 16은 Gly이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2K에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ile이고, 아미노산 20은 Ala이며, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2K에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Asn이며, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2K에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Gln이며, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2K에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Lys이며, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2K에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Arg이며, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2K에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 His이며, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 단일 복제물은 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 2개의 복제물을 포함하며, 예를 들어, 2개의 복제물은 2개의 복제물 사이에 링커 없이 일렬이거나 또는 링커 펩타이드에 의해 분리된다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 3개의 복제물을 포함하며, 예를 들어, 3개의 복제물은 3개의 복제물 사이에 링커 없이 일렬이거나 또는 링커 펩타이드에 의해 분리된다. 일부 경우에, IL-2/본 개시내용의 synTac가 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M을 포함하는 경우, IL-2 폴리펩타이드(들)는 HLA 클래스 I 중쇄를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, IL-2/본 개시내용의 synTac가 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M을 포함하는 경우, IL-2 폴리펩타이드(들)는 β2M 폴리펩타이드를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드, 또는 이를 포함하는 synTac은 IL2R에 대한 결합 친화도가 약 100nM 내지 150nM, 약 150nM 내지 약 200nM, 약 200nM 내지 약 250nM, 약 250nM 내지 약 300nM, 약 300nM 내지 약 350nM, 약 350nM 내지 약 400nM, 약 400nM 내지 약 500nM, 약 500nM 내지 약 600nM, 약 600nM 내지 약 700nM, 약 700nM 내지 약 800nM, 약 800nM 내지 약 900nM, 약 900nM 내지 약 1μM, 약 1μM 내지 약 5μM, 약 5μM 내지 약 10μM, 약 10μM 내지 약 15μM, 약 15μM 내지 약 20μM, 약 20μM 내지 약 25μM, 약 25μM 내지 약 50μM, 약 50μM 내지 약 75μM, 또는 약 75μM 내지 약 100μM이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 길이가 133개의 아미노산이다.
F42, D20 및 Q126 치환
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2L에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 42는 페닐알라닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 42는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 아미노산 20은 아스파르트산이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 20은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Glu이고; 그리고 아미노산 126은 글루타민이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 126은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2L에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이고; 그리고 아미노산 20은 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이며; 그리고 아미노산 126은 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2L에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이고; 아미노산 20은 Asn, Gln, Lys, Arg 또는 His이며; 그리고 아미노산 126은 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2L에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Ala이며, 그리고 아미노산 126은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2L에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Gly이며, 그리고 아미노산 126은 Gly이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2L에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Val이고, 아미노산 20은 Ala이며, 그리고 아미노산 126은 Gly이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2L에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Leu이고, 아미노산 20은 Ala이며, 그리고 아미노산 126은 Gly이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2L에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ile이고, 아미노산 20은 Ala이며, 그리고 아미노산 126은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2L에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Asn이며, 그리고 아미노산 126은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2L에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Gln이며, 그리고 아미노산 126은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2L에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Lys이며, 그리고 아미노산 126은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2L에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Arg이며, 그리고 아미노산 126은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2L에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 His이며, 그리고 아미노산 126은 Ala이다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 단일 복제물은 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 2개의 복제물을 포함하며, 예를 들어, 2개의 복제물은 2개의 복제물 사이에 링커 없이 일렬이거나 또는 링커 펩타이드에 의해 분리된다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 3개의 복제물을 포함하며, 예를 들어, 3개의 복제물은 3개의 복제물 사이에 링커 없이 일렬이거나 또는 링커 펩타이드에 의해 분리된다. 일부 경우에, IL-2/본 개시내용의 synTac가 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M을 포함하는 경우, IL-2 폴리펩타이드(들)는 HLA 클래스 I 중쇄를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, IL-2/본 개시내용의 synTac가 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M을 포함하는 경우, IL-2 폴리펩타이드(들)는 β2M 폴리펩타이드를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드, 또는 이를 포함하는 synTac은 IL2R에 대한 결합 친화도가 약 100nM 내지 150nM, 약 150nM 내지 약 200nM, 약 200nM 내지 약 250nM, 약 250nM 내지 약 300nM, 약 300nM 내지 약 350nM, 약 350nM 내지 약 400nM, 약 400nM 내지 약 500nM, 약 500nM 내지 약 600nM, 약 600nM 내지 약 700nM, 약 700nM 내지 약 800nM, 약 800nM 내지 약 900nM, 약 900nM 내지 약 1μM, 약 1μM 내지 약 5μM, 약 5μM 내지 약 10μM, 약 10μM 내지 약 15μM, 약 15μM 내지 약 20μM, 약 20μM 내지 약 25μM, 약 25μM 내지 약 50μM, 약 50μM 내지 약 75μM, 또는 약 75μM 내지 약 100μM이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 길이가 133개의 아미노산이다.
F42, D20 및 Y45 치환
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2M에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 42는 페닐알라닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 42는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 아미노산 20은 아스파르트산이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 20은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Glu이고; 그리고 아미노산 45는 타이로신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 45는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2M에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이고; 그리고 아미노산 20은 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이며; 그리고 아미노산 45는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2M에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이고; 아미노산 20은 Asn, Gln, Lys, Arg 또는 His이며; 그리고 아미노산 45는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2M에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Ala이며, 그리고 아미노산 45는 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2M에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Gly이며, 그리고 아미노산 45는 Gly이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2M에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Val이고, 아미노산 20은 Ala이며, 그리고 아미노산 45는 Gly이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2M에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Leu이고, 아미노산 20은 Ala이며, 그리고 아미노산 45는 Gly이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2M에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ile이고, 아미노산 20은 Ala이며, 그리고 아미노산 45는 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2M에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Asn이며, 그리고 아미노산 45는 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2M에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Gln이며, 그리고 아미노산 45는 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2M에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Lys이며, 그리고 아미노산 45는 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2M에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Arg이며, 그리고 아미노산 45는 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2M에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 His이며, 그리고 아미노산 45는 Ala이다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 단일 복제물은 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 2개의 복제물을 포함하며, 예를 들어, 2개의 복제물은 2개의 복제물 사이에 링커 없이 일렬이거나 또는 링커 펩타이드에 의해 분리된다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 3개의 복제물을 포함하며, 예를 들어, 3개의 복제물은 3개의 복제물 사이에 링커 없이 일렬이거나 또는 링커 펩타이드에 의해 분리된다. 일부 경우에, IL-2/본 개시내용의 synTac가 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M을 포함하는 경우, IL-2 폴리펩타이드(들)는 HLA 클래스 I 중쇄를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, IL-2/본 개시내용의 synTac가 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M을 포함하는 경우, IL-2 폴리펩타이드(들)는 β2M 폴리펩타이드를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드, 또는 이를 포함하는 synTac은 IL2R에 대한 결합 친화도가 약 100nM 내지 150nM, 약 150nM 내지 약 200nM, 약 200nM 내지 약 250nM, 약 250nM 내지 약 300nM, 약 300nM 내지 약 350nM, 약 350nM 내지 약 400nM, 약 400nM 내지 약 500nM, 약 500nM 내지 약 600nM, 약 600nM 내지 약 700nM, 약 700nM 내지 약 800nM, 약 800nM 내지 약 900nM, 약 900nM 내지 약 1μM, 약 1μM 내지 약 5μM, 약 5μM 내지 약 10μM, 약 10μM 내지 약 15μM, 약 15μM 내지 약 20μM, 약 20μM 내지 약 25μM, 약 25μM 내지 약 50μM, 약 50μM 내지 약 75μM, 또는 약 75μM 내지 약 100μM이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 길이가 133개의 아미노산이다.
F4, D20, Y45 및 H16 치환
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2N에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 42는 페닐알라닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 42는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 아미노산 20은 아스파르트산이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 20은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Glu이고; 그리고 아미노산 45는 타이로신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 45는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 아미노산 16은 히스티딘 이외의 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 16은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2N에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이고; 그리고 아미노산 20은 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이며; 아미노산 45는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이고; 그리고 아미노산 16은 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2N에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이고; 그리고 아미노산 20은 Asn, Gln, Lys, Arg 또는 His이며; 아미노산 45는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이며; 그리고 아미노산 16은 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2N에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Ala이며, 그리고 아미노산 45는Ala이고, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2N에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Gly이며, 그리고 아미노산 45는 Gly이고, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2N에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Val이고, 아미노산 20은 Ala이며, 그리고 아미노산 45는 Gly이고, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2N에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Leu이고, 아미노산 20은 Ala이며, 그리고 아미노산 45는 Gly이고, 그리고 아미노산 16은 Val이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2N에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ile이고, 아미노산 20은 Ala이며, 아미노산 45는 Ala이고, 아미노산 16은 Gly이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2N에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Asn이며, 그리고 아미노산 45는Ala이고, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2N에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Gln이며, 그리고 아미노산 45는Ala이고, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2N에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Lys이며, 그리고 아미노산 45는Ala이고, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2N에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Arg이며, 그리고 아미노산 45는Ala이고, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2N에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 His이며, 그리고 아미노산 45는Ala이고, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 단일 복제물은 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 2개의 복제물을 포함하며, 예를 들어, 2개의 복제물은 2개의 복제물 사이에 링커 없이 일렬이거나 또는 링커 펩타이드에 의해 분리된다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 3개의 복제물을 포함하며, 예를 들어, 3개의 복제물은 3개의 복제물 사이에 링커 없이 일렬이거나 또는 링커 펩타이드에 의해 분리된다. 일부 경우에, IL-2/본 개시내용의 synTac가 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M을 포함하는 경우, IL-2 폴리펩타이드(들)는 HLA 클래스 I 중쇄를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, IL-2/본 개시내용의 synTac가 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M을 포함하는 경우, IL-2 폴리펩타이드(들)는 β2M 폴리펩타이드를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드, 또는 이를 포함하는 synTac은 IL2R에 대한 결합 친화도가 약 100nM 내지 150nM, 약 150nM 내지 약 200nM, 약 200nM 내지 약 250nM, 약 250nM 내지 약 300nM, 약 300nM 내지 약 350nM, 약 350nM 내지 약 400nM, 약 400nM 내지 약 500nM, 약 500nM 내지 약 600nM, 약 600nM 내지 약 700nM, 약 700nM 내지 약 800nM, 약 800nM 내지 약 900nM, 약 900nM 내지 약 1μM, 약 1μM 내지 약 5μM, 약 5μM 내지 약 10μM, 약 10μM 내지 약 15μM, 약 15μM 내지 약 20μM, 약 20μM 내지 약 25μM, 약 25μM 내지 약 50μM, 약 50μM 내지 약 75μM, 또는 약 75μM 내지 약 100μM이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 길이가 133개의 아미노산이다.
F42, D20, Y45 및 Q126 치환
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2O에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 42는 페닐알라닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 42는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 아미노산 20은 아스파르트산이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 20은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Glu이고; 그리고 아미노산 45는 타이로신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 45는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 아미노산 126은 글루타민 이외의 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 126은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2O에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이고; 그리고 아미노산 20은 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이며; 아미노산 45는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이고; 그리고 아미노산 126은 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2O에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이고; 그리고 아미노산 20은 Asn, Gln, Lys, Arg 또는 His이며; 아미노산 45는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이며; 그리고 아미노산 126은 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2O에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Ala이며, 그리고 아미노산 45는Ala이고, 그리고 아미노산 126은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2O에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Gly이며, 그리고 아미노산 45는 Gly이고, 그리고 아미노산 126은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2O에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Val이고, 아미노산 20은 Ala이며, 그리고 아미노산 45는 Gly이고, 그리고 아미노산 126은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2O에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Leu이고, 아미노산 20은 Ala이며, 그리고 아미노산 45는 Gly이고, 그리고 아미노산 126은 Val이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2O에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ile이고, 아미노산 20은 Ala이며, 아미노산 45는 Ala이고, 아미노산 126은 Gly이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2O에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Asn이며, 그리고 아미노산 45는Ala이고, 그리고 아미노산 126은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2O에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Gln이며, 그리고 아미노산 45는Ala이고, 그리고 아미노산 126은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2O에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Lys이며, 그리고 아미노산 45는Ala이고, 그리고 아미노산 126은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2O에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Arg이며, 그리고 아미노산 45는Ala이고, 그리고 아미노산 126은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2O에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 His이며, 그리고 아미노산 45는Ala이고, 그리고 아미노산 126은 Ala이다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 단일 복제물은 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 2개의 복제물을 포함하며, 예를 들어, 2개의 복제물은 2개의 복제물 사이에 링커 없이 일렬이거나 또는 링커 펩타이드에 의해 분리된다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 3개의 복제물을 포함하며, 예를 들어, 3개의 복제물은 3개의 복제물 사이에 링커 없이 일렬이거나 또는 링커 펩타이드에 의해 분리된다. 일부 경우에, IL-2/본 개시내용의 synTac가 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M을 포함하는 경우, IL-2 폴리펩타이드(들)는 HLA 클래스 I 중쇄를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, IL-2/본 개시내용의 synTac가 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M을 포함하는 경우, IL-2 폴리펩타이드(들)는 β2M 폴리펩타이드를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드, 또는 이를 포함하는 synTac은 IL2R에 대한 결합 친화도가 약 100nM 내지 150nM, 약 150nM 내지 약 200nM, 약 200nM 내지 약 250nM, 약 250nM 내지 약 300nM, 약 300nM 내지 약 350nM, 약 350nM 내지 약 400nM, 약 400nM 내지 약 500nM, 약 500nM 내지 약 600nM, 약 600nM 내지 약 700nM, 약 700nM 내지 약 800nM, 약 800nM 내지 약 900nM, 약 900nM 내지 약 1μM, 약 1μM 내지 약 5μM, 약 5μM 내지 약 10μM, 약 10μM 내지 약 15μM, 약 15μM 내지 약 20μM, 약 20μM 내지 약 25μM, 약 25μM 내지 약 50μM, 약 50μM 내지 약 75μM, 또는 약 75μM 내지 약 100μM이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 길이가 133개의 아미노산이다.
F42, D20, Y45, H16 및 Q126 치환
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2P에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 42는 페닐알라닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 42는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 아미노산 20은 아스파르트산이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 20은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Glu이고; 그리고 아미노산 45는 타이로신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 45는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 아미노산 126은 글루타민 이외의 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 126은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이며; 그리고 아미노산 16은 히스티딘 이외의 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 16은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2P에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이고; 그리고 아미노산 20은 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이며; 아미노산 45는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이고; 아미노산 126은 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이며; 그리고 아미노산 16은 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2P에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이고; 그리고 아미노산 20은 Asn, Gln, Lys, Arg 또는 His이며; 아미노산 45는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이며; 아미노산 126은 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이고; 그리고 아미노산 16은 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2P에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Ala이며, 그리고 아미노산 45는Ala이고, 아미노산 126은 Ala이며, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2P에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Gly이며, 그리고 아미노산 45는 Gly이고, 아미노산 126은 Ala이며 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2P에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Val이고, 아미노산 20은 Ala이며, 그리고 아미노산 45는 Gly이고, 아미노산 126은 Ala이며 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2P에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Leu이고, 아미노산 20은 Ala이며, 그리고 아미노산 45는 Gly이고, 아미노산 126은 Val이며 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2P에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ile이고, 아미노산 20은 Ala이며, 아미노산 45는 Ala이고, 아미노산 126은 Gly이며, 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2P에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Asn이며, 그리고 아미노산 45는 Ala이고, 아미노산 126은 Ala이며, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2P에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Gln이며, 그리고 아미노산 45는 Ala이고, 아미노산 126은 Ala이며, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2P에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Lys이며, 아미노산 45는 Ala이고, 아미노산 126은 Ala이며, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2P에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 Arg이며, 아미노산 45는 Ala이고, 아미노산 126은 Ala이며, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2P에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 20은 His이며, 아미노산 45는 Ala이고, 아미노산 126은 Ala이며, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 단일 복제물은 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 2개의 복제물을 포함하며, 예를 들어, 2개의 복제물은 2개의 복제물 사이에 링커 없이 일렬이거나 또는 링커 펩타이드에 의해 분리된다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 3개의 복제물을 포함하며, 예를 들어, 3개의 복제물은 3개의 복제물 사이에 링커 없이 일렬이거나 또는 링커 펩타이드에 의해 분리된다. 일부 경우에, IL-2/본 개시내용의 synTac가 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M을 포함하는 경우, IL-2 폴리펩타이드(들)는 HLA 클래스 I 중쇄를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, IL-2/본 개시내용의 synTac가 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M을 포함하는 경우, IL-2 폴리펩타이드(들)는 β2M 폴리펩타이드를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드, 또는 이를 포함하는 synTac은 IL2R에 대한 결합 친화도가 약 100nM 내지 150nM, 약 150nM 내지 약 200nM, 약 200nM 내지 약 250nM, 약 250nM 내지 약 300nM, 약 300nM 내지 약 350nM, 약 350nM 내지 약 400nM, 약 400nM 내지 약 500nM, 약 500nM 내지 약 600nM, 약 600nM 내지 약 700nM, 약 700nM 내지 약 800nM, 약 800nM 내지 약 900nM, 약 900nM 내지 약 1μM, 약 1μM 내지 약 5μM, 약 5μM 내지 약 10μM, 약 10μM 내지 약 15μM, 약 15μM 내지 약 20μM, 약 20μM 내지 약 25μM, 약 25μM 내지 약 50μM, 약 50μM 내지 약 75μM, 또는 약 75μM 내지 약 100μM이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 길이가 133개의 아미노산이다.
F42, Q126 및 H16 치환
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2q에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 42는 페닐알라닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 42는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 아미노산 126은 글루타민이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 126은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 아미노산 16은 히스티딘이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 16은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2q에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이고; 그리고 아미노산 126은 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이며; 그리고 아미노산 16은 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2q에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이고; 아미노산 126은 Asn, Gln, Lys, Arg 또는 His이며; 그리고 아미노산 16은 Ala, Gly, Val, Leu 또는 Ile이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2q에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 126은 Ala이며, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2q에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 126은 Gly이며, 그리고 아미노산 16은 Gly이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2q에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Val이고, 아미노산 126은 Ala이며, 그리고 아미노산 16은 Gly이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2q에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Leu이고, 아미노산 126은 Ala이며, 그리고 아미노산 16은 Gly이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2q에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ile이고, 아미노산 126은 Ala이며, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2q에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 126은 Asn이며, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2q에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 126은 Ala이며, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2q에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 126은 Lys이며, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2q에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 126은 Arg이며, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 도 2q에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%, 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 아미노산 42는 Ala이고, 아미노산 126은 His이며, 그리고 아미노산 16은 Ala이다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 단일 복제물은 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 2개의 복제물을 포함하며, 예를 들어, 2개의 복제물은 2개의 복제물 사이에 링커 없이 일렬이거나 또는 링커 펩타이드에 의해 분리된다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 3개의 복제물을 포함하며, 예를 들어, 3개의 복제물은 3개의 복제물 사이에 링커 없이 일렬이거나 또는 링커 펩타이드에 의해 분리된다. 일부 경우에, IL-2/본 개시내용의 synTac가 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M을 포함하는 경우, IL-2 폴리펩타이드(들)는 HLA 클래스 I 중쇄를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, IL-2/본 개시내용의 synTac가 HLA 클래스 I 중쇄 및 β2M을 포함하는 경우, IL-2 폴리펩타이드(들)는 β2M 폴리펩타이드를 포함하는 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드, 또는 변이체 IL-2 폴리펩타이드를 포함하는 synTac은 IL2R에 대한 결합 친화도가 약 100nM 내지 150nM, 약 150nM 내지 약 200nM, 약 200nM 내지 약 250nM, 약 250nM 내지 약 300nM, 약 300nM 내지 약 350nM, 약 350nM 내지 약 400nM, 약 400nM 내지 약 500nM, 약 500nM 내지 약 600nM, 약 600nM 내지 약 700nM, 약 700nM 내지 약 800nM, 약 800nM 내지 약 900nM, 약 900nM 내지 약 1μM, 약 1μM 내지 약 5μM, 약 5μM 내지 약 10μM, 약 10μM 내지 약 15μM, 약 15μM 내지 약 20μM, 약 20μM 내지 약 25μM, 약 25μM 내지 약 50μM, 약 50μM 내지 약 75μM, 또는 약 75μM 내지 약 100μM이다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 길이가 133개의 아미노산이다.
4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 방법에서 사용하기에 적합한 synTac은 면역조절 도메인(들)으로서 4-1BBL 폴리펩타이드를 포함한다. 적합한 4-1BBL 면역조절 도메인은 야생형 4-1BBL 면역조절 도메인, 및 변이체 4-1BBL 면역조절 도메인을 포함한다.
야생형 인간 4-1BBL 아미노산 서열은 도 36a에 제공된다. 인간 4-1BBL의 종양 괴사 인자(TNF) 상동성 도메인(THD)은 도 36a에 도시된 아미노산 서열의 아미노산 81-254, 아미노산 80-254, 또는 아미노산 80-246을 포함한다. 따라서, 인간 4-1BBL의 THD의 야생형 아미노산 서열은, 예를 들어, 다음과 같은 서열번호 213 내지 215 중 하나일 수 있다:
야생형 4-1BBL은 4-1BB(CD137)에 결합한다. 4-1BB의 아미노산 서열은 도 37에 제공된다. 본 개시내용의 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 4-1BB에 대한 야생형 4-1BBL의 결합에 비해 감소된 친화도로 4-1BB에 결합한다.
변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 대응하는 야생형 4-1BBL 폴리펩타이드에 대해 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 갖는 것을 포함하고, 그리고 대응하는 야생형 4-1BBL 폴리펩타이드에 비해 1, 2, 3,4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 또는 15개의 아미노산, 또는 15 초과의 아미노산만큼 상이한 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 야생형 4-1BBL 폴리펩타이드로부터의 아미노산 서열에서 단지 단일 아미노산만큼 상이하다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 야생형 4-1BBL 폴리펩타이드로부터의 아미노산 서열에서 단지 2개의 아미노산만큼 상이하다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 야생형 4-1BBL 폴리펩타이드로부터의 아미노산 서열에서 단지 3개의 아미노산만큼 상이하다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 야생형 4-1BBL 폴리펩타이드로부터의 아미노산 서열에서 단지 4개의 아미노산만큼 상이하다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 야생형 4-1BBL 폴리펩타이드로부터의 아미노산 서열에서 단지 5개의 아미노산만큼 상이하다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 4-1BB에 대해 도 36a에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 4-1BBL 폴리펩타이드의 결합 친화도에 비해 4-1BB에 대해 감소된 결합 친화도를 나타낸다. 예를 들어, 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 37에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 4-1BB 폴리펩타이드에 대해 도 36a에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 4-1BBL 폴리펩타이드의 결합 친화도보다 더 적은 결합 친화도로 4-1BB에 결합한다. 예를 들어, 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 4-1BB에 대해 도 36a에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 4-1BBL 폴리펩타이드(예를 들어, 도 37에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 4-1BB 폴리펩타이드)의 결합 친화도보다 적어도 10% 미만, 적어도 15% 미만, 적어도 20% 미만, 적어도 25% 미만, 적어도 30% 미만, 적어도 35% 미만, 적어도 40% 미만, 적어도 45% 미만, 적어도 50% 미만, 적어도 55% 미만, 적어도 60% 미만, 적어도 65% 미만, 적어도 70% 미만, 적어도 75% 미만, 적어도 80% 미만, 적어도 85% 미만, 적어도 90% 미만, 적어도 95% 미만 또는 95% 이상의 수 미만인 결합 친화도로 4-1BB에 결합한다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 4-1BB에 대해 서열번호 213에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 4-1BBL 폴리펩타이드의 결합 친화도에 비해 4-1BB에 대해 감소된 결합 친화도를 나타낸다. 예를 들어, 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 37A 내지 도 37C에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 4-1BB 폴리펩타이드에 대해 서열번호 213에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 4-1BBL 폴리펩타이드의 결합 친화도보다 더 적은 결합 친화도로 4-1BB에 결합한다. 예를 들어, 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 4-1BB에 대해 서열번호 213에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 4-1BBL 폴리펩타이드(예를 들어, 도 37에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 4-1BB 폴리펩타이드)의 결합 친화도보다 적어도 10% 미만, 적어도 15% 미만, 적어도 20% 미만, 적어도 25% 미만, 적어도 30% 미만, 적어도 35% 미만, 적어도 40% 미만, 적어도 45% 미만, 적어도 50% 미만, 적어도 55% 미만, 적어도 60% 미만, 적어도 65% 미만, 적어도 70% 미만, 적어도 75% 미만, 적어도 80% 미만, 적어도 85% 미만, 적어도 90% 미만, 적어도 95% 미만 또는 95% 이상의 수 미만인 결합 친화도로 4-1BB에 결합한다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 4-1BB에 대한 결합 친화도가 100nM 내지 100μM이다. 다른 예로서, 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 4-1BB(예를 들어, 도 37에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 4-1BB 폴리펩타이드)에 대한 결합 친화도가 약 100nM 내지 150nM, 약 150nM 내지 약 200nM, 약 200nM 내지 약 250nM, 약 250nM 내지 약 300nM, 약 300nM 내지 약 350nM, 약 350nM 내지 약 400nM, 약 400nM 내지 약 500nM, 약 500nM 내지 약 600nM, 약 600nM 내지 약 700nM, 약 700nM 내지 약 800nM, 약 800nM 내지 약 900nM, 약 900nM 내지 약 1μM, 약 1μM 내지 약 5μM, 약 5μM 내지 약 10μM, 약 10μM 내지 약 15μM, 약 15μM 내지 약 20μM, 약 20μM 내지 약 25μM, 약 25μM 내지 약 50μM, 약 50μM 내지 약 75μM, 또는 약 75μM 내지 약 100μM이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL은 야생형 4-1BBL 폴리펩타이드(예를 들어, 도 36a에 도시된 또는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 4-1BBL 폴리펩타이드)를 포함하는 대조군 다량체 폴리펩타이드의 동일한 포유류 숙주 세포의 생산에 비해, 포유류 숙주 세포에서 증가된 생산을 나타낸다. 예를 들어, 일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는, 포유류 숙주 세포에서 발현될 때, 동일한 포유류 숙주 세포에서 생산된 야생형 4-1BBL 폴리펩타이드(예를 들어, 도 36a에 도시되거나 또는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 4-1BBL 폴리펩타이드)를 포함하는 대조군 다량체 폴리펩타이드의 양보다 25% 더 높은 내지 약 50% 초과, 약 50% 더 높은 내지 약 75% 초과, 약 75% 더 높은 내지 약 2-배 더 높은, 약 2-배 더 높은 내지 약 5-배 더 높은, 약 5-배 더 높은 내지 약 10-배 더 높은, 약 10-배 더 높은 내지 약 20-배 더 높은, 약 20-배 더 높은 내지 약 30-배 더 높은, 약 30-배 더 높은 내지 약 40-배 더 높은, 약 40-배 더 높은 내지 약 50-배 더 높은, 약 50-배 더 높은 내지 약 75-배 더 높은, 약 75-배 더 높은 내지 약 100-배 더 높은, 또는 100배 초과인 양으로 생산된다.
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 약 50㎎/ℓ 내지 약 75㎎/ℓ, 약 75㎎/ℓ 내지 약 100㎎/ℓ, 약 100㎎/ℓ 내지 약 150㎎/ℓ, 약 150㎎/ℓ 내지 약 200㎎/ℓ, 약 200㎎/ℓ 내지 약 250㎎/ℓ, 약 250㎎/ℓ 내지 약 500㎎/ℓ, 또는 500㎎/ℓ 초과의 양으로 포유류 숙주 세포에서 생산된다. 일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 약 10㎎/ℓ 내지 약 15㎎/ℓ, 약 15㎎/ℓ 내지 약 20㎎/ℓ, 약 20㎎/ℓ 내지 약 25㎎/ℓ, 약 25㎎/ℓ 내지 약 30㎎/ℓ, 약 35㎎/ℓ 내지 약 40㎎/ℓ, 약 40㎎/ℓ 내지 약 45㎎/ℓ, 또는 약 45㎎/ℓ 내지 약 50㎎/ℓ의 양으로 포유류 숙주 세포에서 생산된다.
다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 야생형 4-1BBL 폴리펩타이드(예를 들어, 도 36a에 도시된 또는 서열번호 213에 제시된 바와 같은 아미노산 서열을 포함하는 4-1BBL 폴리펩타이드)에 비해 단일 아미노산 치환을 가질 수 있다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 야생형 4-1BBL 폴리펩타이드(예를 들어, 도 36a에 도시된 또는 서열번호 213에 제시된 바와 같은 아미노산 서열을 포함하는 4-1BBL 폴리펩타이드)에 비해 2 내지 10개의 아미노산 치환을 가진다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 야생형 4-1BBL 폴리펩타이드(예를 들어, 도 36a에 도시된 또는 서열번호 213에 제시된 바와 같은 아미노산 서열을 포함하는 4-1BBL 폴리펩타이드)에 비해 2개의 아미노산 치환을 가진다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 야생형 4-1BBL 폴리펩타이드(예를 들어, 도 36a에 도시된 또는 서열번호 213에 제시된 바와 같은 아미노산 서열을 포함하는 4-1BBL 폴리펩타이드)에 비해 3개의 아미노산 치환을 가진다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 야생형 4-1BBL 폴리펩타이드(예를 들어, 도 36a에 도시된 또는 서열번호 213에 제시된 바와 같은 아미노산 서열을 포함하는 4-1BBL 폴리펩타이드)에 비해 4개의 아미노산 치환을 가진다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 야생형 4-1BBL 폴리펩타이드(예를 들어, 도 36a에 도시된 또는 서열번호 213에 제시된 바와 같은 아미노산 서열을 포함하는 4-1BBL 폴리펩타이드)에 비해 5개의 아미노산 치환을 가진다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 야생형 4-1BBL 폴리펩타이드(예를 들어, 도 36a에 도시된 또는 서열번호 213에 제시된 바와 같은 아미노산 서열을 포함하는 4-1BBL 폴리펩타이드)에 비해 6개의 아미노산 치환을 가진다. 일부 경우에, 본 개시내용의 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 야생형 4-1BBL 폴리펩타이드(예를 들어, 도 36a에 도시된 또는 서열번호 213에 제시된 바와 같은 아미노산 서열을 포함하는 4-1BBL 폴리펩타이드)에 비해 7개의 아미노산 치환을 가진다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 야생형 4-1BBL 폴리펩타이드(예를 들어, 도 36a에 도시된 또는 서열번호 213에 제시된 바와 같은 아미노산 서열을 포함하는 4-1BBL 폴리펩타이드)에 비해 8개의 아미노산 치환을 가진다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 야생형 4-1BBL 폴리펩타이드(예를 들어, 도 36a에 도시된 또는 서열번호 213에 제시된 바와 같은 아미노산 서열을 포함하는 4-1BBL 폴리펩타이드)에 비해 9개의 아미노산 치환을 가진다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 야생형 4-1BBL 폴리펩타이드(예를 들어, 도 36a에 도시된 또는 서열번호 213에 제시된 바와 같은 아미노산 서열을 포함하는 4-1BBL 폴리펩타이드)에 비해 10개의 아미노산 치환을 가진다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 야생형 4-1BBL 폴리펩타이드(예를 들어, 도 36a에 도시된 또는 서열번호 213에 제시된 바와 같은 아미노산 서열을 포함하는 4-1BBL 폴리펩타이드)에 비해 11 내지 50개의 아미노산 치환을 가진다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 야생형4-1BBL 폴리펩타이드(예를 들어, 도 36a에 도시된 또는 서열번호 213에 제시된 바와 같은 아미노산 서열을 포함하는 4-1BBL 폴리펩타이드)에 비해 11 내지 15, 15 내지 20, 20 내지 25, 25 내지 30, 30 내지 35, 35 내지 40, 40 내지 45, 또는 45 내지 50개의 아미노산 치환을 가진다.
본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 포함될 수 있는 적합한 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 상기 기재한 것을 포함한다.
K127 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 47은 라이신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 47은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp, 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 K48에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 K48에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 K48에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 K48에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
K127 + M91 치환
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 ii) M91에서의 아미노산 치환, 아미노산 91은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 127은 Ala이고; 그리고 아미노산 91은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 47은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 47은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이며; 그리고 ii) 아미노산 11은 메티오닌이 아니고, 예를 들어 아미노산 11은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 47은 Ala이고; 그리고 아미노산 11은 Ala이다.
K127 + F92 치환
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 ii) F92에서의 아미노산 치환, 아미노산 92는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 127은 Ala이고; 그리고 아미노산 92는 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 47은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 47은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이며; 그리고 ii) 아미노산 12는 페닐알라닌이 아니고, 예를 들어 아미노산 12는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 47은 Ala이고; 그리고 아미노산 12는 Ala이다.
K127 + Q94 치환
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 ii) Q94에서의 아미노산 치환, 아미노산 94는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 127은 Ala이고; 그리고 아미노산 94는 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 47은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 47은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이며; 그리고 ii) 아미노산 14는 글루타민이 아니고, 예를 들어 아미노산 14는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 47은 Ala이고; 그리고 아미노산 14는 Ala이다.
K127 + L95 치환
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 ii) L95에서의 아미노산 치환, 아미노산 95는 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 127은 Ala이고; 그리고 아미노산 95는 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 47은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 47는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이며; 그리고 ii) 아미노산 15는 류신이 아니고, 예를 들어 아미노산 15는 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 47은 Ala이고; 그리고 아미노산 15는 Ala이다.
K127 + V96 치환
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 ii) V96에서의 아미노산 치환, 아미노산 96은 Gly, Ala, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 127은 Ala이고; 그리고 아미노산 96은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 47은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 47는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이며; 그리고 ii) 아미노산 16은 발린이 아니고, 예를 들어 아미노산 16은 Gly, Ala, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 47은 Ala이고; 그리고 아미노산 16는 Ala이다.
K127 + Q98 치환
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 ii) Q98에서의 아미노산 치환, 아미노산 98은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 127은 Ala이고; 그리고 아미노산 98은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 47은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 47은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이며; 그리고 ii) 아미노산 18은 글루타민이 아니고, 예를 들어 아미노산 18은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 47은 Ala이고; 그리고 아미노산 18는 Ala이다.
K127 + N99 치환
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 ii) N99에서의 아미노산 치환, 아미노산 99는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 127은 Ala이고; 그리고 아미노산 99는 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 47은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 47은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이며; 그리고 ii) 아미노산 19는 아스파라긴이 아니고, 예를 들어 아미노산 19는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 47은 Ala이고; 그리고 아미노산 19는 Ala이다.
K127 + V100 치환
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 ii) V100에서의 아미노산 치환, 아미노산 100은 Gly, Ala, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 127은 Ala이고; 그리고 아미노산 100은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 47은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 47는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이며; 그리고 ii) 아미노산 20은 발린이 아니고, 예를 들어 아미노산 20은 Gly, Ala, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 47은 Ala이고; 그리고 아미노산 20은 Ala이다.
K127 + L101 치환
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 ii) L101에서의 아미노산 치환, 아미노산 101은 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 127은 Ala이고; 그리고 아미노산 101은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 47은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 47은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이며; 그리고 ii) 아미노산 21은 류신이 아니고, 예를 들어 아미노산 21은 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 47은 Ala이고; 그리고 아미노산 21은 Ala이다.
K127 + L102 치환
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 ii) L102에서의 아미노산 치환, 아미노산 102는 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 127은 Ala이고; 그리고 아미노산 102는 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 47은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 47은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이며; 그리고 ii) 아미노산 22는 류신이 아니고, 예를 들어 아미노산 22는 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 47은 Ala이고; 그리고 아미노산 22는 Ala이다.
K127 + I103 치환
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 ii) I103에서의 아미노산 치환, 아미노산 103은 Gly, Ala, Val, Leu, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 127은 Ala이고; 그리고 아미노산 103은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 47은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 47은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이며; 그리고 ii) 아미노산 23은 류신이 아니고, 예를 들어 아미노산 23은 Gly, Ala, Val, Leu, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 47은 Ala이고; 그리고 아미노산 23은 Ala이다.
K127 + D104 치환
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 ii) D104에서의 아미노산 치환, 아미노산 104는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 127은 Ala이고; 그리고 아미노산 104는 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 47은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 47은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이며; 그리고 ii) 아미노산 24는 아스파르트산이 아니고, 예를 들어 아미노산 24는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 47은 Ala이고; 그리고 아미노산 24는 Ala이다.
K127 + G105 치환
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 ii) G105에서의 아미노산 치환, 아미노산 105는 Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 127은 Ala이고; 그리고 아미노산 105는 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 47은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 47는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이며; 그리고 ii) 아미노산 25는 글리신이 아니고, 예를 들어 아미노산 25는 Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 47은 Ala이고; 그리고 아미노산 25는 Ala이다.
K127 + P106 치환
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 ii) P106에서의 아미노산 치환, 아미노산 106은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 127은 Ala이고; 그리고 아미노산 106은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 47은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 47은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이며; 그리고 ii) 아미노산 26은 프롤린이 아니고, 예를 들어 아미노산 26은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 47은 Ala이고; 그리고 아미노산 26는 Ala이다.
K127 + L107 치환
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 ii) L107에서의 아미노산 치환, 아미노산 107은 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 127은 Ala이고; 그리고 아미노산 107은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 47은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 47은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이며; 그리고 ii) 아미노산 27은 류신이 아니고, 예를 들어 아미노산 27은 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 47은 Ala이고; 그리고 아미노산 27은 Ala이다.
K127 + S108 치환
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 ii) S108에서의 아미노산 치환, 아미노산 108은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 127은 Ala이고; 그리고 아미노산 108은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 47은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 47은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이며; 그리고 ii) 아미노산 28는 세린이 아니고, 예를 들어 아미노산 28은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 47은 Ala이고; 그리고 아미노산 28은 Ala이다.
K127 + W109 치환
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 ii) W109에서의 아미노산 치환, 아미노산 109는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 127은 Ala이고; 그리고 아미노산 109는 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 47은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 47은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이며; 그리고 ii) 아미노산 29는 트립토판이 아니고, 예를 들어 아미노산 29는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 47은 Ala이고; 그리고 아미노산 29은 Ala이다.
K127 + Y110 치환
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 ii) Y110에서의 아미노산 치환, 아미노산 110은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 127은 Ala이고; 그리고 아미노산 110은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 47은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 47은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이며; 그리고 ii) 아미노산 30은 타이로신이 아니고, 예를 들어 아미노산 30은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 47은 Ala이고; 그리고 아미노산 30는 Ala이다.
K127 + S111 치환
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 ii) S111에서의 아미노산 치환, 아미노산 111은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 127은 Ala이고; 그리고 아미노산 111은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 47은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 47은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이며; 그리고 ii) 아미노산 31은 세린이 아니고, 예를 들어 아미노산 31은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 47은 Ala이고; 그리고 아미노산 31는 Ala이다.
K127 + D112 치환
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 ii) D112에서의 아미노산 치환, 아미노산 112는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 127은 Ala이고; 그리고 아미노산 112는 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 47은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 47은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이며; 그리고 ii) 아미노산 32는 아스파르트산이 아니고, 예를 들어 아미노산 32는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 47은 Ala이고; 그리고 아미노산 32는 Ala이다.
K127 + P113 치환
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 ii) P113에서의 아미노산 치환, 아미노산 113은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 127은 Ala이고; 그리고 아미노산 113은 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 47은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 47은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이며; 그리고 ii) 아미노산 33은 프롤린이 아니고, 예를 들어 아미노산 33은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 47은 Ala이고; 그리고 아미노산 33은 Ala이다.
K127 + G114 치환
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 ii) G114에서의 아미노산 치환, 아미노산 114는 Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 127은 Ala이고; 그리고 아미노산 114는 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 47은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 47는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이며; 그리고 ii) 아미노산 34는 글리신이 아니고, 예를 들어 아미노산 34는 Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 47은 Ala이고; 그리고 아미노산 34는 Ala이다.
K127 + L115 치환
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 그리고 ii) L115에서의 아미노산 치환, 아미노산 115는 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 127은 Ala이고; 그리고 아미노산 115는 Ala이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서: i) 아미노산 47은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 47은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이며; 그리고 ii) 아미노산 35는 류신이 아니고, 예를 들어 아미노산 35는 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 아미노산 47은 Ala이고; 그리고 아미노산 35는 Ala이다.
Q227 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36D에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 227("x"로 나타냄)은 글루타민이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 227은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 147은 글루타민이 아니며, 예를 들어, 아미노산 147은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q148에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q148에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q148에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q148에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
M91 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36E에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 91("x"로 표시됨)은 메티오닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 91은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp, 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 11은 메티오닌이 아니며, 예를 들어, 아미노산 11은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 M12에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 M12에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 M12에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 M12에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
F92 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36F에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 92("x"로 표시됨)는 페닐알라닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 92는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 12는 페닐알라닌이 아니며, 예를 들어, 아미노산 12는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 F13에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 F13에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 F13에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 F13에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
Q94 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36G에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 94("x"로 나타냄)는 글루타민이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 94는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 14는 글루타민이 아니며, 예를 들어, 아미노산 14는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q15에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q15에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q15에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q15에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
L95 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36H에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 95("x"로 나타냄)는 류신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 95는 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 15는 류신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 15는 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L16에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L16에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L16에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L16에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
V96 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36I에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 96("x"로 나타냄)은 발린이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 96은 Gly, Ala, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 16은 류신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 16은 Gly, Ala, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V17에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V17에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V17에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V17에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
Q98 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36J에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 98("x"로 나타냄)은 글루타민이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 98은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 18은 글루타민이 아니며, 예를 들어, 아미노산 18은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q19에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q19에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q19에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q19에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
N99 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36K에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 99("x"로 나타냄)은 아스파라긴이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 99는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 19는 아스파라긴이 아니며, 예를 들어, 아미노산 19는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 N20에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 N20에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 N20에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 N20에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
V100 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36L에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 100("x"로 나타냄)은 발린이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 100은 Gly, Ala, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 20은 류신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 20은 Gly, Ala, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V21에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V21에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V21에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V21에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
L101 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36M에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 101("x"로 나타냄)은 류신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 101은 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 21은 류신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 21은 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L22에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L22에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L22에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L22에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
L102 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36N에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 102("x"로 나타냄)는 류신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 102는 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 22는 류신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 22는 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L23에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L23에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L23에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L23에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
I103 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36O에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 103("x"로 나타냄)은 아이소류신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 103은 Gly, Ala, Val, Leu, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 23은 아이소류신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 23은 Gly, Ala, Val, Leu, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 I24에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 I24에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 I24에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 I24에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
D104 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36P에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 104("x"로 나타냄)는 아스파르트산이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 104는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 24는 아이소류신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 24는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 D25에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 D25에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 D25에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 D25에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
G105 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36Q에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 105("x"로 나타냄)는 글리신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 105는 Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 25는 글리신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 25는 Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G26에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G26에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G26에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G26에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
P106 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36R에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 106("x"로 나타냄)은 프롤린이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 106은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 26은 프롤린이 아니며, 예를 들어, 아미노산 26은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 P27에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 P27에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 P27에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 P27에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
L107 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36S에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 107("x"로 나타냄)은 류신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 107은 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 27은 류신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 27은 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L28에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L28에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L28에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L28에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
S108 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36T에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 108("x"로 나타냄)은 세린이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 108은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 28은 세린이 아니며, 예를 들어, 아미노산 28은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S29에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S29에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S29에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S29에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
W109 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36U에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 109("x"로 나타냄)는 트립토판이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 109는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 29는 트립토판이 아니며, 예를 들어, 아미노산 29는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 W30에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 W30에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 W30에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 W30에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
Y110 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36V에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 110("x"로 나타냄)는 타이로신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 110는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 30은 타이로신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 30은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Y31에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Y31에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Y31에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Y31에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
S111 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36W에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 111("x"로 나타냄)은 세린이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 111은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 31은 세린이 아니며, 예를 들어, 아미노산 31은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S32에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S32에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S32에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S32에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
D112 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36X에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 112("x"로 나타냄)는 아스파르트산이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 112는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 32는 아이소류신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 32는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 D33에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 D33에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 D33에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 D33에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
P113 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36Y에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 113("x"로 나타냄)은 프롤린이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 113은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 33은 프롤린이 아니며, 예를 들어, 아미노산 33은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 P34에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 P34에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 P34에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 P34에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
G114 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36Z에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 114("x"로 나타냄)는 글리신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 114는 Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 34는 글리신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 34는 Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G35에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G35에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G35에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G35에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
L115 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36aA에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 115("x"로 나타냄)는 류신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 115는 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 35는 류신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 35는 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L36에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L36에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L36에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L36에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
G117 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36BB에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 117("x"로 나타냄)은 글리신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 117은 Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 37은 글리신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 37은 Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G38에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G38에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G38에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G38에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
V118 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36CC에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 118("x"로 나타냄)은 발린이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 118은 Gly, Ala, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 38은 류신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 38은 Gly, Ala, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V39에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V39에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V39에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V39에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
S119 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36DD에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 119("x"로 나타냄)는 세린이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 119는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 39는 세린이 아니며, 예를 들어, 아미노산 39는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S40에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S40에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S40에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S40에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
L120 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36EE에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 120("x"로 나타냄)은 류신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 120은 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 40은 류신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 40은 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L41에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L41에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L41에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L41에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
T121 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36FF에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 121("x"로 나타냄)은 트레오닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 121은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 41은 트레오닌이 아니며, 예를 들어, 아미노산 41은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 T42에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 T42에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 T42에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 T42에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
G122 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36GG에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 122("x"로 나타냄)는 글리신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 122는 Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 42는 글리신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 42는 Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G43에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G43에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G43에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G43에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
G123 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36HH에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 123("x"로 나타냄)은 글리신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 123은 Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 43은 글리신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 43은 Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G44에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G44에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G44에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G44에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
L124 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36II에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 124("x"로 나타냄)는 류신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 124는 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 44는 류신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 44는 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L45에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L45에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L45에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L45에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
S125 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36JJ에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 125("x"로 나타냄)는 세린이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 125는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 45는 세린이 아니며, 예를 들어, 아미노산 45는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S46에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S46에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S46에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S46에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
Y126 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36KK에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 126("x"로 나타냄)은 타이로신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 126은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 46은 타이로신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 46은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Y47에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Y47에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Y47에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Y47에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
E128 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36LL에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 128("x"로 나타냄)은 글루탐산이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 128은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Asp이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 48은 글루탐산이 아니며, 예를 들어, 아미노산 48은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Asp이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 E49에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 E49에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 E49에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 E49에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
D129 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36MM에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 129("x"로 나타냄)는 아스파르트산이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 129는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 49는 아이소류신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 49는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 D50에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 D50에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 D50에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 D50에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
T130 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36NN에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 130("x"로 나타냄)은 트레오닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 130은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 50은 트레오닌이 아니며, 예를 들어, 아미노산 50은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 T51에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 T51에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 T51에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 T51에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
K131 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36OO에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 131("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 131은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 51은 라이신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 51은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp, 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 K52에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 K52에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 K52에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 K52에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
E132 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36PP에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 132("x"로 나타냄)는 글루탐산이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 132는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Asp이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 52는 글루탐산이 아니며, 예를 들어, 아미노산 52는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Asp이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 E53에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 E53에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 E53에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 E53에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
F144 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36QQ에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 144("x"로 나타냄)는 페닐알라닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 144는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 64는 페닐알라닌이 아니며, 예를 들어, 아미노산 64는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 F65에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 F65에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 F65에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 F65에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
F145 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36RR에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 145("x"로 나타냄)는 페닐알라닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 145는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 65는 페닐알라닌이 아니며, 예를 들어, 아미노산 65는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 F66에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 F66에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 F66에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 F66에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
Q146 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36SS에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 146("x"로 나타냄)은 글루타민이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 146은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 66은 글루타민이 아니며, 예를 들어, 아미노산 66은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q67에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q67에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q67에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q67에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
L147 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36TT에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 147("x"로 나타냄)은 류신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 147은 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 67은 류신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 67은 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L68에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L68에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L68에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L68에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
E148 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36UU에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 148("x"로 나타냄)은 글루탐산이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 148은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Asp이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 68은 글루탐산이 아니며, 예를 들어, 아미노산 68은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Asp이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 E69에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 E69에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 E69에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 E69에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
L149 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36VV에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 149("x"로 나타냄)는 류신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 149는 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 69는 류신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 69는 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L70에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L70에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L70에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L70에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
R150 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36WW에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 150("x"로 나타냄)은 아르기닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 150은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 70은 아르기닌이 아니며, 예를 들어, 아미노산 70은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 R71에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 R71에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 R71에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 R71에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
R151 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36XX에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 151("x"로 나타냄)은 아르기닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 151은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 71은 아르기닌이 아니며, 예를 들어, 아미노산 71은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 R72에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 R72에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 R72에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 R72에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
V152 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36YY에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 152("x"로 나타냄)는 발린이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 152는 Gly, Ala, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 72은 류신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 72은 Gly, Ala, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V73에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V73에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V73에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V73에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
V153 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36ZZ에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 153("x"로 나타냄)은 발린이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 153은 Gly, Ala, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 73은 류신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 73은 Gly, Ala, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V74에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V74에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V74에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V74에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
G155 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36aAA에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 155("x"로 나타냄)는 글리신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 155는 Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 75는 글리신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 75는 Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G76에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G76에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G76에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G76에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
E156 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36BBB에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 156("x"로 나타냄)은 글루탐산이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 156은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Asp이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 76은 글루탐산이 아니며, 예를 들어, 아미노산 76은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Asp이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 E77에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 E77에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 E77에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 E77에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
G157 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36CCC에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 157("x"로 나타냄)은 글리신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 157은 Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 77은 글리신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 77은 Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G78에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G78에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G78에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G78에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
S158 치환을 갖는 4- 1BBL
부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36DDD에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 158("x"로 나타냄)은 세린이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 158은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 78은 세린이 아니며, 예를 들어, 아미노산 78은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S79에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S79에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S79에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S79에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
D184 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36EEE에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 184("x"로 나타냄)는 아스파르트산이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 184는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 104는 아이소류신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 104는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 D105에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 D105에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 D105에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 D105에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
L185 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36FFF에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 185("x"로 나타냄)는 류신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 185는 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 105는 류신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 105는 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L106에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L106에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L106에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L106에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
P186 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36GGG에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 186("x"로 나타냄)은 프롤린이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 186은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 106은 프롤린이 아니며, 예를 들어, 아미노산 106은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 P107에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 P107에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 P107에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 P107에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
P187 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36HHH에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 187("x"로 나타냄)은 프롤린이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 187은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 107은 프롤린이 아니며, 예를 들어, 아미노산 107은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 P108에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 P108에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 P108에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 P108에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
S189 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36III에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 189("x"로 나타냄)는 세린이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 189는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 109는 세린이 아니며, 예를 들어, 아미노산 109는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S110에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S110에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S110에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S110에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
S190 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36JJJ에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 190("x"로 나타냄)은 세린이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 190은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 110은 세린이 아니며, 예를 들어, 아미노산 110은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S111에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S111에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S111에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S111에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
E191 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36KKK에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 191("x"로 나타냄)은 글루탐산이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 191은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Asp이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 111은 글루탐산이 아니며, 예를 들어, 아미노산 111은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Asp이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 E112에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 E112에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 E112에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 E112에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
R193 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36LLL에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 193("x"로 나타냄)은 아르기닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 193은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 113은 아르기닌이 아니며, 예를 들어, 아미노산 113은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 R114에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 R114에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 R114에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 R114에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
N194 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36MMM에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 194("x"로 나타냄)는 아스파라긴이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 194는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 114는 아스파라긴이 아니며, 예를 들어, 아미노산 114는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 N115에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 N115에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 N115에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 N115에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
S195 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36NNN에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 195("x"로 나타냄)는 세린이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 195는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 115는 세린이 아니며, 예를 들어, 아미노산 115는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S116에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S116에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S116에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 S116에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
F197 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36OOO에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 197("x"로 나타냄)은 페닐알라닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 197은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 117은 페닐알라닌이 아니며, 예를 들어, 아미노산 117은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 F118에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 F118에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 F118에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 F118에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
Q210 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36PPP에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 210("x"로 나타냄)은 글루타민이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 210은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 130은 글루타민이 아니며, 예를 들어, 아미노산 130은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q131에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q131에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q131에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q131에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
R211 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36QQQ에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 211("x"로 나타냄)은 아르기닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 211은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 131은 아르기닌이 아니며, 예를 들어, 아미노산 131은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 R132에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 R132에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 R132에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 R132에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
L212 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36RRR에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 212("x"로 나타냄)는 류신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 212는 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 132는 류신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 132는 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L133에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L133에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L133에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L133에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
G213 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36SSS에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 213("x"로 나타냄)은 글리신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 213은 Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 133은 글리신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 133은 Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G134에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G134에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G134에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G134에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
V214 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36TTT에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 214("x"로 나타냄)는 발린이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 214는 Gly, Ala, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 134는 류신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 134는 Gly, Ala, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V135에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V135에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V135에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V135에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
H215 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36UUU에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 215("x"로 나타냄)는 류신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 215는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 135는 히스티딘이 아니며, 예를 들어, 아미노산 135는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 H136에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 H136에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 H136에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 H136에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
L216 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36VVV에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 216("x"로 나타냄)은 류신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 216은 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 136은 류신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 136은 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L137에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L137에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L137에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L137에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
H217 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36WWW에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 217("x"로 나타냄)은 류신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 217은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 137은 히스티딘이 아니며, 예를 들어, 아미노산 137은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 H138에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 H138에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 H138에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 H138에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
T218 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36XXX에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 218("x"로 나타냄)은 트레오닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 218은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 138은 트레오닌이 아니며, 예를 들어, 아미노산 138은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 T139에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 T139에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 T139에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 T139에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
E219 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36YYY에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 219("x"로 나타냄)는 글루탐산이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 219는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Asp이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 139는 글루탐산이 아니며, 예를 들어, 아미노산 139는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His 또는 Asp이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 E140에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 E140에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 E140에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 E140에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
R221 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36ZZZ에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 221("x"로 나타냄)은 아르기닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 221은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 141은 아르기닌이 아니며, 예를 들어, 아미노산 141은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 R142에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 R142에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 R142에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 R142에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
R223 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36aAAA에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 223("x"로 나타냄)은 아르기닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 223은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 143은 아르기닌이 아니며, 예를 들어, 아미노산 143은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 R144에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 R144에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 R144에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 R144에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
H224 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36BBBB에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 224("x"로 나타냄)는 류신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 224는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 144는 히스티딘이 아니며, 예를 들어, 아미노산 144는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 H145에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 H145에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 H145에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 H145에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
W226 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36CCCC에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 226("x"로 나타냄)은 트립토판이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 226은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 146은 트립토판이 아니며, 예를 들어, 아미노산 146은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 W147에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 W147에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 W147에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 W147에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
L228 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36DDDD에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 228("x"로 나타냄)은 류신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 228은 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 148은 류신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 148은 Gly, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L149에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L149에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L149에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 L149에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
T229 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36EEEE에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 229("x"로 나타냄)는 트레오닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 229는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 149는 트레오닌이 아니며, 예를 들어, 아미노산 149는 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 T150에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 T150에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 T150에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 T150에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
Q230 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36FFFF에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 230("x"로 나타냄)은 글루타민이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 230은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 150은 글루타민이 아니며, 예를 들어, 아미노산 150은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q151에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q151에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q151에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q151에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
G231 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36GGGG에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 231("x"로 나타냄)은 글리신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 231은 Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 151은 글리신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 151은 Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G152에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G152에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G152에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 G152에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
T233 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36HHHH에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 233("x"로 나타냄)은 트레오닌이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 233은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 153은 트레오닌이 아니며, 예를 들어, 아미노산 153은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 T154에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 T154에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 T154에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 T154에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
V234 치환을 갖는 4- 1BBL
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36IIII에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 234("x"로 나타냄)는 발린이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 234는 Gly, Ala, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 아미노산 154는 류신이 아니며, 예를 들어, 아미노산 154는 Gly, Ala, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V155에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V155에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V155에서 아미노산 치환이 있는, 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 V155에서 아미노산 치환과 함께 서열번호 215에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
4- 1BBL 면역조절 폴리펩타이드를 포함하는 예시적인 다량체 폴리펩타이드
본 개시내용의 방법에서 사용하기에 적합한 예시적인 다량체 폴리펩타이드는 이하에 기재된다.
K127
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는, a) N-말단에서 C-말단의 순서로, i) 에피토프; ii) β2M 폴리펩타이드; 및 iii) 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드(여기서, 아미노산 127("x"로 표시됨)은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu임)를 포함하는, 제1 폴리펩타이드; 또는 K47에서 아미노산 치환을 갖는, 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 본 개시내용의 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드(예를 들어, 여기서, 아미노산 47은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 및 b) N-말단에서 C-말단의 순서로, i) 클래스 I MHC 중쇄; 및 ii) Fc 폴리펩타이드를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는, a) N-말단에서 C-말단의 순서로, i) 에피토프; 및 ii) β2M 폴리펩타이드를 포함하는, 제1 폴리펩타이드; 및 b) N-말단에서 C-말단의 순서로, i) 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드(여기서, 아미노산 127("x"로 표시됨)은 라이신이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu임); 또는 K47에서 아미노산 치환을 갖는, 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 본 개시내용의 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드(예를 들어, 여기서, 아미노산 47은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu임); ii) 클래스 I MHC 중쇄; 및 iii) Fc 폴리펩타이드를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 에피토프; ii) β2M 폴리펩타이드; iii) 본 개시내용의 제1 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드; iv) 본 개시내용의 제2 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는; 및 v) 본 개시내용의 제3 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드를 포함하는, 제1 폴리펩타이드; 및 b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 클래스 I MHC 중쇄; 및 ii) Fc 폴리펩타이드를 포함하는, 제2 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, 각각의 제1, 제2 및 제3 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고, 여기서 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 예를 들어, 각각의 제1, 제2 및 제3 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 K47에서 아미노산 치환을 갖는, 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 예를 들어, 아미노산 47은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 에피토프; 및 ii) β2M 폴리펩타이드를 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및 b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 본 개시내용의 제1 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드; ii) 본 개시내용의 제2 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드; 및 iii) 본 개시내용의 제3 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드; iv) 클래스 I MHC 중쇄; 및 v) Fc 폴리펩타이드를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, 각각의 제1, 제2 및 제3 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고, 여기서 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 예를 들어, 각각의 제1, 제2 및 제3 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 K47에서 아미노산 치환을 갖는, 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 예를 들어, 아미노산 47은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 M91 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 F92 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 Q94 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 L95 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 V96 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 Q98 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 N99 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 V100 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 L101 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및L102 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 I103 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 D104 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 G105 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 P106 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 L107 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 S108 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 W109 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 Y110 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 S111 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 D112 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 P113 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 G114 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 L115 치환을 포함한다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 에피토프; 및 ii) β2M 폴리펩타이드를 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및 b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 본 개시내용의 제1 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드; ii) 링커; iii) 본 개시내용의 제2 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드; iv) 링커; v) 본 개시내용의 제3 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드; vi) 클래스 I MHC 중쇄; 및 vii) Fc 폴리펩타이드를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, 각각의 제1, 제2 및 제3 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36B에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고, 여기서 아미노산 127("x"로 나타냄)은 라이신이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 127은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 예를 들어, 각각의 제1, 제2 및 제3 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 K47에서 아미노산 치환을 갖는, 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 예를 들어, 아미노산 47은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Gln, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 링커는 (GSSSS)n(서열번호 131) 서열을 포함하며, 여기서 n은 1, 2, 3, 4 또는 5이다. 일부 경우에, n은 4이다. 일부 경우에서, n은 5이다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 M91 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 F92 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 Q94 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 L95 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 V96 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 Q98 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 N99 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 V100 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 L101 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및L102 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 I103 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 D104 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 G105 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 P106 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 L107 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 S108 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 W109 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 Y110 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 S111 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 D112 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 P113 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 G114 치환을 포함한다. 일부 경우에, 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 (도 36a에 도시된 넘버링에 기반하여) K127 치환 및 L115 치환을 포함한다.
Q227
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는, a) N-말단에서 C-말단의 순서로, i) 에피토프; ii) β2M 폴리펩타이드; 및 iii) 도 36D에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드(여기서, 아미노산 227("x"로 표시됨)은 글루타민이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 227은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu임)를 포함하는, 제1 폴리펩타이드; 또는 Q147에서 아미노산 치환을 갖는, 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 본 개시내용의 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드(예를 들어, 여기서, 아미노산 147은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 및 b) N-말단에서 C-말단의 순서로, i) 클래스 I MHC 중쇄; 및 ii) Fc 폴리펩타이드를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는, a) N-말단에서 C-말단의 순서로, i) 에피토프; 및 ii) β2M 폴리펩타이드를 포함하는, 제1 폴리펩타이드; 및 b) N-말단에서 C-말단의 순서로, i) 도 36D에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드(여기서, 아미노산 227("x"로 표시됨)은 글루타민이 아닌 아미노산이고, 예를 들어, 아미노산 227은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu임); 또는 Q147에서 아미노산 치환을 갖는, 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 본 개시내용의 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드(예를 들어, 여기서, 아미노산 147은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu임); ii) 클래스 I MHC 중쇄; 및 iii) Fc 폴리펩타이드를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 에피토프; ii) β2M 폴리펩타이드; iii) 본 개시내용의 제1 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드; iv) 본 개시내용의 제2 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는; 및 v) 본 개시내용의 제3 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드를 포함하는, 제1 폴리펩타이드; 및 b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 클래스 I MHC 중쇄; 및 ii) Fc 폴리펩타이드를 포함하는, 제2 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, 각각의 제1, 제2 및 제3 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36D에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고, 여기서 아미노산 227("x"로 나타냄)은 글루타민이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 227은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 또는 각각의 제1, 제2 및 제3 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q147에서 아미노산 치환을 갖는, 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 예를 들어, 아미노산 147은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 에피토프; 및 ii) β2M 폴리펩타이드를 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및 b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 본 개시내용의 제1 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드; ii) 본 개시내용의 제2 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드; 및 iii) 본 개시내용의 제3 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드; iv) 클래스 I MHC 중쇄; 및 v) Fc 폴리펩타이드를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, 각각의 제1, 제2 및 제3 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36D에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고, 여기서 아미노산 227("x"로 나타냄)은 글루타민이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 227은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 또는 각각의 제1, 제2 및 제3 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q147에서 아미노산 치환을 갖는, 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 예를 들어, 아미노산 147은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다.
일부 경우에, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는 a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 에피토프; 및 ii) β2M 폴리펩타이드를 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및 b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 본 개시내용의 제1 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드; ii) 링커; iii) 본 개시내용의 제2 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드; iv) 링커; v) 본 개시내용의 제3 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드; vi) 클래스 I MHC 중쇄; 및 vii) Fc 폴리펩타이드를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, 각각의 제1, 제2 및 제3 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 도 36D에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고, 여기서 아미노산 227("x"로 나타냄)은 글루타민이 아닌 아미노산이며, 예를 들어, 아미노산 227은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이고; 또는 각각의 제1, 제2 및 제3 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드는 Q147에서 아미노산 치환을 갖는, 서열번호 213에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 예를 들어, 아미노산 147은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr, Cys, Met, Asn, Lys, Arg, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 경우에, 링커는 (GSSSS)n(서열번호 131) 서열을 포함하며, 여기서 n은 1, 2, 3, 4 또는 5이다. 일부 경우에, 링커는 (GSSSS)n(서열번호 131) 서열을 포함하며, 여기서 n은 4이다. 일부 경우에, 링커는 (GSSSS)n(서열번호 131) 서열을 포함하며, 여기서 n은 5이다. 일부 경우에, 링커는 (GGGGS)n 서열을 포함하며, 여기서 n은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10이다. 일부 경우에, 링커는 (GGGGS)n 서열을 포함하며, 여기서 n은 2이다. 일부 경우에, 링커는 (GGGGS)n 서열을 포함하며, 여기서 n은 3이다. 일부 경우에, 링커는 (GGGGS)n 서열을 포함하며, 여기서 n은 4이다. 일부 경우에, 링커는 (GGGGS)n 서열을 포함하며, 여기서 n은 5이다.
다중 면역조절 도메인
상기 언급한 바와 같이, 일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는 2 이상의 면역조절 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, 2 이상의 면역조절 폴리펩타이드 중 적어도 하나는 변이체 면역조절 폴리펩타이드이다. 예를 들어, IL-2/synTac의 경우에, 일부 경우에, 2 이상의 면역조절 폴리펩타이드 중 적어도 하나는 변이체 IL-2 폴리펩타이드이다. 다른 예로서, 4-1BBL/synTac의 경우에, 일부 경우에, 2 이상의 면역조절 폴리펩타이드 중 적어도 하나는 변이체 4-1BBL 폴리펩타이드이다.
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는 본 개시내용의 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 2 이상의 복제물을 포함한다. 일부 경우에, 2 이상의 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 다량체 폴리펩타이드의 동일한 폴리펩타이드 쇄 상에 있다. 일부 경우에, 2 이상의 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 다량체 폴리펩타이드의 별개의 폴리펩타이드 쇄 상에 있다.
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는 제1 면역조절 폴리펩타이드 및 적어도 제2 면역조절 폴리펩타이드를 포함하며, 여기서 제1 면역조절 폴리펩타이드는 본 개시내용의 변이체 IL-2 폴리펩타이드이고, 제2 면역조절 폴리펩타이드는 IL-2 폴리펩타이드가 아니다. 예를 들어, 일부 경우에, 제2 면역조절 폴리펩타이드는 종양 괴사 인자(TNF) 슈퍼패밀리의 구성원; 예를 들어, FasL 폴리펩타이드, 4-1BBL 폴리펩타이드, CD40 폴리펩타이드, OX40L 폴리펩타이드, CD30L 폴리펩타이드, CD70 폴리펩타이드 등이다. 일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드의 제2 면역조절 폴리펩타이드는 T-세포 공자극 폴리펩타이드이고, 면역글로불린(Ig) 슈퍼패밀리의 구성원; 예를 들어, CD7 폴리펩타이드, CD86 폴리펩타이드, ICAM 폴리펩타이드 등이다. 일부 경우에, 제2 면역조절 폴리펩타이드는 4-1BBL, OX40L, ICOS-L, ICAM, PD-L1, CD86, FasL 및 PD-L2이다. 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드의 적합한 면역조절 폴리펩타이드는, 예를 들어, CD7, CD30L, CD40, CD70, CD83, HLA-G, MICA, MICB, HVEM, 림포톡신 베타 수용체, 3/TR6, ILT3, ILT4 또는 HVEM을 포함한다.
본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 포함될 수 있는 추가적인 T 세포 조절 도메인(MOD)은 고전적 및 비고전적(예를 들어, FGF2, IL1, S100A4) 분비 메커니즘으로부터 생기는 모든 분비된 단백질, 및 천연 유래 유전자 암호화된 단백질 세그먼트(단일 또는 다중 막 스팬(span)) 또는 번역후 변형, 예컨대 GPI 결합)에 의해 걸리는 모든 세포 표면 단백질의 엑토-도메인을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는 인간 유전자 산물을 표적화하는 천연 유래 또는 합성 인간 유전자 산물(단백질), 친화도 시약(예를 들어, 항체, 항체 단편, 단일쇄 Fv, 앱타머, 나노바디)을 포함한다. 세포 표면 그리칸 또는 다른 번역후 변형(예를 들어, 황산화)을 표적화하는 임의의 천연 유래 또는 합성 친화도 시약(예를 들어, 항체, 항체 단편, 단일쇄 Fv, 앱타머, 나노바디, 렉틴 등). 예는 TNF/TNFR 패밀리의 구성원(OX40L, ICOSL, FASL, LTA, LTB TRAIL, CD153, TNFSF9, RANKL, TWEAK, TNFSF13, TNFSF13b, TNFSF14, TNFSF15, TNFSF18, CD40LG, CD70) 또는 TNF/TNFR 패밀리 구성원과 관련된 친화도 시약; 면역글로불린 슈퍼패밀리의 구성원(VISTA, PD1, PD-L1, PD-L2, B71, B72, CTLA4, CD28, TIM3, CD4, CD8, CD19, T 세포 수용체 쇄, ICOS, ICOS 리간드, HHLA2, 뷰티로필린, BTLA, B7-H3, B7-H4, CD3, CD79a, CD79b, IgSF CAMS (CD2, CD58, CD48, CD150, CD229, CD244, ICAM-1을 포함), 백혈구 면역글로불린 유사 수용체(LILR), 살해 세포 면역글로불린 유사 수용체(KIR)), 렉틴 슈퍼패밀리 구성원, 셀렉틴, 사이토카인/케모카인 및 사이토카인/케모카인 수용체, 성장 인자 및 성장 인자 수용체), 접착 분자(인테그린, 피브로넥틴, 카데린), 또는 다중-스팬 내재막 단백질, 또는 면역글로불린 슈퍼패밀리와 관련된 친화도 시약 및 열거된 유전자 산물을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 추가로, 이들 유전자 산물의 활성 상동체/오솔로그는 바이러스 서열(예를 들어, CMV, EBV), 박테리아 서열, 진균 서열, 진핵 병원균(예를 들어, 주혈흡충(Schistosoma), 말라리아원충(Plasmodium), 바베시아(Babesia), 아이메리아(Eimeria), 타일레리아(Theileria), 톡소플라스마(Toxoplasma), 엔트아메바(Entamoeba), 리슈마니아(Leishmania) 및 트리파노라마(Trypanosoma)) 및 포유류-유래 암호 영역을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 추가로, MOD는 인간 유전자 산물을 표적화하는 소분자 약물을 포함할 수 있다.
추가적인 폴리펩타이드
다량체 폴리펩타이드의 폴리펩타이드 쇄는 상기 기재한 것에 추가로 하나 이상의 폴리펩타이드를 포함할 수 있다. 적합한 추가적인 폴리펩타이드는 에피토프 태그 및 친화도 도메인을 포함한다. 하나 이상의 추가적인 폴리펩타이드는 다량체 폴리펩타이드의 폴리펩타이드 쇄의 C-말단에서, 또는 다량체 폴리펩타이드의 폴리펩타이드 쇄 내에서 내부로 다량체 폴리펩타이드의 폴리펩타이드의 N-말단에 포함될 수 있다.
에피토프 태그
적합한 에피토프 태그는 혈구응집소(HA; 예를 들어, YPYDVPDYA(서열번호 79); FLAG(예를 들어, DYKDDDDK(서열번호 80); c-myc(예를 들어, EQKLISEEDL; 서열번호 81) 등을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다.
친화도 도메인
친화도 도메인은 동정 또는 정제에 유용한 결합 상대, 예를 들어, 고체 지지체 상에 고정된 것과 상호작용할 수 있는 펩타이드 서열을 포함한다. 다중 연속적 단일 아미노산, 예컨대 히스티딘을 암호화하는 DNA 서열은 발현된 단백질에 융합될 때, 수지 칼럼, 예컨대 니켈 세파로스에 대해 고친화도 결합에 의해 재조합 단백질의 1단계 정제를 위해 사용될 수 있다. 예시적인 친화도 도메인은 His5(HHHHH)(서열번호 82), HisX6(HHHHHH)(서열번호 83), C-myc(EQKLISEEDL)(서열번호 81), Flag(DYKDDDDK)(서열번호 80), Strep 태그(WSHPQFEK)(서열번호 84), 혈구응집소, 예를 들어, HA 태그(YPYDVPDYA)(서열번호 79), 글루타티온-S-트랜스퍼라제(GST), 티오레독신, 셀룰로스 결합 도메인, RYIRS(서열번호 85), Phe-His-His-Thr(서열번호 86), 키틴 결합 도메인, S-펩타이드, T7 펩타이드, SH2 도메인, C-말단 RNA 태그, WEAAAREACCRECCARA(서열번호 87), 금속 결합 도메인, 예를 들어, 아연 결합 도메인 또는 칼슘 결합 도메인, 예컨대 칼슘-결합 단백질로부터의 도메인, 예를 들어, 칼모듈린, 트로포닌 C, 칼시네우린 B, 마이오신 경쇄, 리커버린, S-모듈린, 비시닌, VILIP, 뉴로칼신, 히포칼신, 프레쿼닌, 칼트락틴, 칼파인 거대 서브유닛, S100 단백질, 파브알부민, 칼빈딘 D9K, 칼빈딘 D28K, 및 칼레티닌, 인테인, 바이오틴, 스트렙타비딘, MyoD, Id, 류신 지퍼 서열 및 말토스 결합 단백질을 포함한다.
IL-2/ 다량체 폴리펩타이드의 예
다음은 본 개시내용의 치료 방법에서 사용하기에 적합한 IL-2/synTac 다량체 폴리펩타이드의 비제한적 실시형태이다.
일부 경우에, IL-2/synTac 다량체 폴리펩타이드는, a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 에피토프; ii) 도 34A에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 β2-마이크로글로불린(β2M) 폴리펩타이드를 포함하는, 제1 폴리펩타이드; 및 b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 본 개시내용의 변이체 IL-2 폴리펩타이드; ii) 도 34C에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 주조직 적합 복합체(MHC) 중쇄 폴리펩타이드; 및 iii) N297A, L234A, L235A, L234F, L235E 및 P331S로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하는 IgG1 Fc 폴리펩타이드를 포함하는, 제2 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 H16A 및 F42A 치환을 포함한다. 일부 경우에, IgG1 Fc 폴리펩타이드는 N297A 치환을 포함한다. 일부 경우에, IgG1 Fc 폴리펩타이드는 L234A 치환 및 L235A 치환을 포함한다. 일부 경우에, IgG1 Fc 폴리펩타이드는 L234F 치환 및 L235E 치환을 포함한다. 일부 경우에, IgG1 Fc 폴리펩타이드는 L234F 치환, L235E 치환 및 P331S 치환을 포함한다. 일부 경우에, 제2 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 2개의 복제물을 포함한다. 일부 경우에, 제1 폴리펩타이드는 에피토프와 β2M 폴리펩타이드 사이에 펩타이드 링커를 포함한다. 일부 경우에, 제2 폴리펩타이드는, a) 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 제1 복제물과 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 제2 복제물 사이; b) 변이체 IL-2 폴리펩타이드와 MHC 중쇄 폴리펩타이드 사이; 및 c) MHC 중쇄 폴리펩타이드와 IgG1 Fc 폴리펩타이드 사이 중 하나 이상에 펩타이드 링커를 포함한다. 일부 경우에, 펩타이드 링커는 (GGGGS)3(서열번호 207), (GGGGS)4(서열번호 208), 및 AAAGG(서열번호 73)로부터 선택된다. 일부 경우에, IgG1 Fc 폴리펩타이드는 도 33B에 도시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, IgG1 Fc 폴리펩타이드는 도 33C에 도시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, IgG1 Fc 폴리펩타이드는 도 33D에 도시된 아미노산 서열을 포함한다.
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는, a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 에피토프; ii) 도 34A에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 β2-마이크로글로불린 폴리펩타이드를 포함하는, 제1 폴리펩타이드; 및 b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 도 34B에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드; ii) 도 34C에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 주조직 적합 복합체(MHC) 중쇄 폴리펩타이드; 및 iii) N297A, L234A, L235A, L234F, L235E 및 P331S로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하는 IgG1 Fc 폴리펩타이드를 포함하는, 제2 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, IgG1 Fc 폴리펩타이드는 N297A 치환을 포함한다. 일부 경우에, IgG1 Fc 폴리펩타이드는 L234A 치환 및 L235A 치환을 포함한다. 일부 경우에, IgG1 Fc 폴리펩타이드는 L234F 치환 및 L235E 치환을 포함한다. 일부 경우에, IgG1 Fc 폴리펩타이드는 L234F 치환, L235E 치환 및 P331S 치환을 포함한다. 일부 경우에, IgG1 Fc 폴리펩타이드는 도 33B에 도시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, IgG1 Fc 폴리펩타이드는 도 33C에 도시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, IgG1 Fc 폴리펩타이드는 도 33D에 도시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 제2 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 2개의 복제물을 포함한다. 일부 경우에, 제1 폴리펩타이드는 에피토프와 β2M 폴리펩타이드 사이에 펩타이드 링커를 포함한다. 일부 경우에, 제2 폴리펩타이드는, a) 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 제1 복제물과 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 제2 복제물 사이; b) 변이체 IL-2 폴리펩타이드와 MHC 중쇄 폴리펩타이드 사이; 및 c) MHC 중쇄 폴리펩타이드와 IgG1 Fc 폴리펩타이드 사이 중 하나 이상에 펩타이드 링커를 포함한다. 일부 경우에, 펩타이드 링커는 (GGGGS)3(서열번호 207), (GGGGS)4(서열번호 208) 및 AAAGG(서열번호 73)로부터 선택된다.
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는, a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 아미노산 서열 YMLDLQPETT(서열번호 77)를 포함하는 에피토프; ii) 도 34A에서 도시된 아미노산 서열을 포함하는 β2-마이크로글로불린 폴리펩타이드를 포함하는, 제1 폴리펩타이드; 및 b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로, i) 도 34B에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드; ii) 도 34C에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 주조직 적합 복합체(MHC); 및 iii) 도 33A, 도 33B, 도 33C 또는 도 33D에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 IgG1 Fc 폴리펩타이드를 포함하는, 제2 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 경우에, IgG1 Fc 폴리펩타이드는 도 33B에 도시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, IgG1 Fc 폴리펩타이드는 도 33C에 도시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, IgG1 Fc 폴리펩타이드는 도 33D에 도시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, 제2 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 2개의 복제물을 포함한다. 일부 경우에, 제1 폴리펩타이드는 에피토프와 β2M 폴리펩타이드 사이에 펩타이드 링커를 포함한다. 일부 경우에, 제2 폴리펩타이드는, a) 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 제1 복제물과 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 제2 복제물 사이; b) 변이체 IL-2 폴리펩타이드와 MHC 중쇄 폴리펩타이드 사이; 및 c) MHC 중쇄 폴리펩타이드와 IgG1 Fc 폴리펩타이드 사이 중 하나 이상에 펩타이드 링커를 포함한다. 일부 경우에, 펩타이드 링커는 (GGGGS)3(서열번호 207), (GGGGS)4(서열번호 208), 및 AAAGG(서열번호 73)로부터 선택된다. 일부 경우에, IgG1 Fc 폴리펩타이드는 도 33B에 도시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, IgG1 Fc 폴리펩타이드는 도 33C에 도시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에, IgG1 Fc 폴리펩타이드는 도 33D에 도시된 아미노산 서열을 포함한다.
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는, a) 도 31에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및 b) 도 22에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함한다.
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는, a) 도 31에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및 b) 도 25에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함한다.
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는, a) 도 31에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및 ab) 도 28에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함한다.
제형, 용량 및 투여 경로
본 개시내용의 치료 방법을 수행함에 있어서, synTac은 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 포함하는 조성물로 제형화될 수 있고, 면역관문 저해제는 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 포함하는 조성물로 제형화될 수 있다. 간단함을 위해, 용어 "활성제"는 synTac 또는 면역관문 저해제를 지칭하기 위해 이하에 사용된다. 일반적으로, synTac 및 면역관문 저해제는 별개의 조성물에 존재한다.
조성물은 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 포함할 수 있으며, 이 중 다수는 당업계에 공지되어 있고 본 명세서에서 상세하게 논의할 필요가 없다. 약제학적으로 허용 가능한 부형제는, 예를 들어, 문헌["Remington: The Science and Practice of Pharmacy", 19th Ed. (1995), 또는 최종판, Mack Publishing Co; A. Gennaro (2000) "Remington: The Science and Practice of Pharmacy", 20th edition, Lippincott, Williams, & Wilkins; Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems (1999) H.C. Ansel et al., eds 7th ed., Lippincott, Williams, & Wilkins; 및 Handbook of Pharmaceutical Excipients (2000) A.H. Kibbe et al., eds., 3rd ed. Amer. Pharmaceutical Assoc]을 포함하는 다양한 간행물에 충분히 기재되어 있다.
약제학적 조성물은 synTac 또는 면역관문 저해제, 및 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 포함할 수 있다. 일부 경우에, 약제학적 조성물은 대상체에 대한 투여에 적합할 것이며, 예를 들어, 멸균일 것이다. 예를 들어, 일부 경우에, 약제학적 조성물은 인간 대상체에 대한 투여에 적합할 것이며, 예를 들어, 조성물은 멸균이며 검출 가능한 발열원 및/또는 다른 독소가 없다.
조성물은 다른 성분, 예컨대 약제학적 등급의 만니톨, 락토스, 전분, 스테아르산마그네슘, 사카린나트륨, 탤컴, 셀룰로스, 글루코스, 수크로스, 마그네슘, 탄산염 등을 포함할 수 있다. 조성물은 생리적 조건에 근접하게 하는데 필요한 약제학적으로 허용 가능한 보조 물질, 예컨대 pH 조절 및 완충제, 독성 조절제 등, 예를 들어, 아세트산나트륨, 염화나트륨, 염화칼륨, 염화칼슘, 락트산나트륨, 염산, 황산염, 용매화물(예를 들어, 혼합된 이온성염, 물, 유기물), 수화물(예를 들어, 물) 등을 함유할 수 있다.
예를 들어, 조성물은 수용액, 분말 형태, 과립, 정제, 알약, 좌약, 캡슐, 현탁액, 스프레이 등을 포함할 수 있다. 조성물은 이하에 기재되는 다양한 투여 경로에 따라 제형화될 수 있다.
활성제(synTac 또는 면역관문 저해제)가 조직 내로 직접 주사 가능한 경우(예를 들어, 피하로, 복강내, 근육내 및/또는 정맥내), 제형은 바로 사용 가능한 투약 형태로서, 또는 비수성 형태(예를 들어, 재구성 가능한 저장-안정성 분말) 또는 수성 형태, 예컨대 약제학적으로 허용 가능한 담체 및 부형제로 구성된 액체로서 제공될 수 있다. 제형은 또한 투여 후 활성제의 혈청 반감기를 향상시키기 위해 제공될 수 있다. 예를 들어, 단백질은 리포좀 제형에서 제공될 수 있고, 콜로이드 또는 혈청 반감기를 연장시키기 위한 다른 통상적인 기법으로서 제조될 수 있다. 예를 들어, 문헌[Szoka et al. 1980 Ann. Rev. Biophys . Bioeng . 9:467], 미국 특허 제4,235,871호, 제4,501,728호 및 제4,837,028호에 기재된 리포좀을 제조하기 위한 다양한 방법이 이용 가능하다. 제제는 또한 제어 방출 또는 서방출 형태로 제공될 수 있다.
비경구 투여에 적합한 제형의 다른 예는 등장성 멸균 주사 용액, 항산화제, 제균제, 및 의도된 수용자의 혈액과 등장성인 제형을 제공하는 용질, 현탁제, 가용화제, 증점제, 안정제 및 보존제를 포함한다. 예를 들어, 대상 약제학적 조성물은 용기, 예를 들어, 멸균 용기, 예컨대 주사기에 제공될 수 있다. 제형은 단일 용량 또는 다회 용량 밀봉 용기, 예컨대 앰플 및 바이알에 제공될 수 있고, 사용 직전에 멸균 액체 부형제, 예를 들어, 주사용수의 첨가만을 필요로 하는 냉동-건조(동결건조) 조건에서 저장될 수 있다. 즉석 주사 용액 및 현탁액은 멸균 분말, 과립 및 정제로부터 제조될 수 있다.
제형 내 활성제(synTac 또는 면역관문 저해제)의 농도는 크게 다를 수 있고(예를 들어, 약 0.1중량% 미만으로부터, 보통 또는 적어도 약 2중량%에서 20% 내지 50% 이상만큼 많이) 보통 유체 용적, 점성도 및 선택된 특정 투여 방식 및 환자의 필요에 따르는 환자 기반 인자일 것이다.
본 개시내용은 활성제(synTac 또는 면역관문 저해제)를 포함하는 용기, 예를 들어, 활성제를 포함하는 액체 조성물을 포함하는 용기를 제공한다. 용기는, 예를 들어, 주사기, 앰플 등일 수 있다. 일부 경우에, 용기는 멸균이다. 일부 경우에, 용기와 조성물 둘 다 멸균이다.
본 개시내용은 활성제(synTac 또는 면역관문 저해제)를 포함하는 약제학적 조성물을 포함하는 조성물을 제공한다. 조성물은 상기 기재한 바와 같이, a) 활성제(synTac 또는 면역관문 저해제); 및 b) 부형제를 포함할 수 있다. 일부 경우에, 부형제는 약제학적으로 허용 가능한 부형제이다.
핵산 또는 재조합 발현 벡터를 포함하는 조성물
일부 경우에, synTac은 다량체 폴리펩타이드 그 자체로서 투여된다. 다른 예에서, 다량체 폴리펩타이드 그 자체로서 synTac을 투여하는 대신에 synTac을 암호화하는 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 하나 이상의 핵산이 투여된다. 핵산(들)을 약제학적 조성물로 존재할 수 있다. 약제학적 조성물은 하나 이상의 핵산을 포함하는 하나 이상의 재조합 발현 벡터를 포함할 수 있다. 매우 다양한 약제학적으로 허용 가능한 부형제가 당업계에 공지되어 있으며, 본 명세서에서 상세하게 논의할 필요는 없다. 약제학적으로 허용 가능한 부형제는, 예를 들어, 문헌[A. Gennaro (2000) "Remington: The Science and Practice of Pharmacy", 20th edition, Lippincott, Williams, & Wilkins; Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems (1999) H. C. Ansel et al., eds 7th ed., Lippincott, Williams, & Wilkins; 및 Handbook of Pharmaceutical Excipients (2000) A. H. Kibbe et al., eds., 3rd ed. Amer. Pharmaceutical Assoc]을 포함하는 다양한 간행물에 다양하게 기재되었다.
약제학적 제형은 약 0.001% 내지 약 90%(w/w)의 양으로 본 개시내용의 핵산 또는 재조합 발현 벡터를 포함할 수 있다. 제형의 설명에서, 이하의 "핵산 또는 재조합 발현 벡터"는 synTac을 암호화하는 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 핵산 또는 재조합 발현 벡터를 포함하는 것으로 이해될 것이다.
핵산 또는 재조합 발현 벡터는 다른 화합물 또는 화합물의 혼합물과 혼합, 캡슐화, 접합 또는 달리 결합될 수 있고; 이러한 화합물은, 예를 들어 리포좀 또는 수용체 표적화 분자를 포함할 수 있다. 핵산 또는 재조합 발현 벡터는 섭취, 분포 및/또는 흡수를 돕는 1종 이상의 성분과 제형에서 조합될 수 있다.
핵산 또는 재조합 발현 벡터 조성물은 임의의 다수의 가능한 투약 형태, 예컨대, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 정제, 캡슐, 젤 캡슐, 액체 시럽, 연질젤, 좌약 및 관장제로 제형화될 수 있다. 핵산 또는 재조합 발현 벡터 조성물은 또한 수성, 비수성 또는 혼합 배지에서 현탁액으로서 제형화될 수 있다. 수성 현탁액은, 예를 들어, 카복시메틸셀룰로스나트륨, 솔비톨 및/또는 덱스트란을 포함하는 현탁액의 점성도를 증가시키는 물질을 추가로 함유할 수 있다. 현탁액은 또한 안정제를 함유할 수 있다.
핵산 또는 재조합 발현 벡터를 포함하는 제형은 리포좀 제형일 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 용어 "리포좀"은 구형 이중층 또는 이중층들에 배열된 양친매성 지질로 구성된 소수포를 의미한다. 리포좀은 전달될 조성물을 함유하는 친유성 물질 및 수성 내부로부터 형성된 막을 갖는 단일층 또는 다층 소수포이다. 양이온성 리포좀은 음으로 하전된 DNA 분자와 상호작용하여 안정한 복합체를 형성할 수 있는 양으로 하전된 리포좀이다. pH 민감성 또는 음으로 하전된 리포좀은 그것과의 복합체보다는 DNA를 붙잡는 것으로 여겨진다. 양이온성 리포좀과 비양이온성 리포좀은 둘 다 대상 핵산 또는 재조합 발현 벡터를 전달하기 위해 사용될 수 있다.
리포좀은 또한 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 리포좀 내로 혼입될 때 전문화된 지질이 없는 리포좀에 비해 향상된 순환 수명을 초래하는 1종 이상의 전문화된 지질을 포함하는 리포좀을 지칭하는 용어인 "입체적으로 안정화된" 리포좀을 포함한다. 입체적으로 안정화된 리포좀의 예는 리포좀의 소수포-형성 지질 부분이 1종 이상의 당지질을 포함하거나 또는 1종 이상의 친수성 중합체, 예컨대 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 모이어티에 의해 유도체화된다. 리포좀 및 그들의 용도는 본 명세서에 전문이 참고로 포함된 미국 특허 제6,287,860호에 추가로 기재되어 있다.
본 개시내용의 제형 및 조성물은 또한 계면활성제를 포함할 수 있다. 약물 제품, 제형 중의 그리고 에멀션 중의 계면활성제의 용도는 당업계에 잘 공지되어 있다. 계면활성제 및 그들의 용도는 미국 특허 제6,287,860호에 추가로 기재되어 있다.
일 실시형태에서, 핵산의 효율적인 전달을 달성하기 위한 다양한 침투 향상제가 포함된다. 세포막을 가로지르는 비친수성 약물의 확산을 돕는 것에 추가로, 침투 향상제는 또한 친유성 약물의 투과성을 향상시킨다. 침투 인핸서는 5가지 넓은 범주, 즉, 계면활성제, 지방산, 담즙염, 킬레이트제, 및 비킬레이트 비계면활성제 중 하나에 속하는 것으로 분류될 수 있다. 침투 향상제 및 그들의 용도는 본 명세서에 전문이 참고로 포함된 미국 특허 제6,287,860호에 추가로 기재되어 있다.
경구 투여를 위한 조성물 및 제형은 분말 또는 과립, 마이크로미립자, 나노미립자, 현탁액 또는 수 중 또는 비수성 배지 중의 용액, 캡슐, 겔 캡슐, 사쉐, 정제 또는 미니정제를 포함한다. 증점제, 향미제, 희석제, 유화제, 분산 보조제 또는 결합제가 바람직할 수 있다. 적합한 경구 제형은 대상 안티센스 핵산이 1종 이상의 향상제 계면활성제 및 킬레이터와 함께 투여되는 것을 포함한다. 적합한 계면활성제는, 지방산 및/또는 에스터 또는 이들의 염, 담즙산 및/또는 이들의 염을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 적합한 담즙산/염 및 지방산 및 그들의 용도는 미국 특허 제6,287,860호에 추가로 기재되어 있다. 또한 침투 향상제, 예를 들어, 지방산/담즙산/염과 조합한 염의 조합물이 적합하다. 예시적인 적합한 조합은 라우르산, 카프르산 및 UDCA의 나트륨염이다. 추가 침투 향상제는 폴리옥시에틸렌-9-라우릴 에터 및 폴리옥시에틸렌-20-세틸 에터를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 적합한 침투 향상제는 또한 프로필렌 글리콜, 다이메틸설폭사이드, 트라이에타노이아민, N,N-다이메틸아세트아마이드, N,N-다이메틸폼아마이드, 2-피롤리돈 및 이들의 유도체, 테트라하이드로푸르푸릴 알코올 및 아존(AZONE)(상표명)을 포함한다.
치료 방법
본 개시내용은 synTac 및 면역관문 저해제를 투여하는 단계를 포함하는, 치료 방법을 제공한다. 일부 경우에, 상기 방법은 치료가 필요한 개체에게: a) synTac을 포함하는 제1 조성물; 및 b) 면역관문 저해제를 포함하는 제2 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 치료 방법은 치료가 필요한 개체에게: a) synTac을 암호화하는 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 하나 이상의 재조합 발현 벡터를 포함하는 제1 조성물; 및 b) 면역관문 저해제를 포함하는 제2 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 치료 방법은 치료가 필요한 개체에게: a) 다량체 폴리펩타이드를 암호화하는 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 하나 이상의 mRNA 분자를 포함하는 제1 조성물; 및 b) 면역관문 저해제를 포함하는 제2 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 사례에서, 면역관문 저해제 폴리펩타이드는 면역관문에 특이적인 항체이다.
따라서, 예를 들어, 본 개시내용의 치료 방법은 synTac(예를 들어, 상기 기재된 바와 같은 4-1BBL synTac, IL-2 synTac 등)과 면역관문에 특이적인 항체의 공동 투여를 포함할 수 있다. "공동 투여"는 synTac과 면역관문 저해제를 둘 다 투여한 결과인 치료적 효과를 달성하기 위해, 반드시 동시는 아니지만, synTac(예를 들어, 상기 기재한 바와 같은 4-1BBL synTac, IL-2 synTac 등)과 면역관문에 특이적인 항체가 둘 다 개체에게 투여된다는 것을 의미한다. synTac(예를 들어, 4-1BBL synTac, IL-2 synTac 등)과 면역관문에 특이적인 항체의 투여는 실질적으로 동시일 수 있고, 예를 들어, synTac(예를 들어, 4-1BBL synTac, IL-2 synTac 등)은 면역관문에 특이적인 항체 투여의 약 1분 내지 약 24시간 내에(예를 들어, 약 1분 내에, 약 5분 내에, 약 15분 내에, 약 30분 내에, 약 1시간 내에, 약 4시간 내에, 약 8시간 내에, 약 12시간 내에 또는 약 24시간 내에) 개체에게 투여될 수 있다. 일부 경우에, synTac(예를 들어, 4-1BBL synTac, IL-2 synTac 등)은 면역관문에 특이적인 항체로 치료를 받는 개체에게 투여된다. synTac(예를 들어, 4-1BBL synTac, IL-2 synTac 등)과 면역관문에 특이적인 항체의 투여는 상이한 시간 및/또는 상이한 빈도로 일어날 수 있다.
따라서, 예를 들어, 본 개시내용의 치료 방법은 4-1BBL synTac 및 면역관문에 특이적인 항체의 공동투여를 포함할 수 있다. "공동 투여"는, synTac과 면역관문 저해제를 둘 다 투여한 결과인 치료적 효과를 달성하기 위해, 반드시 동시는 아니지만, 4-1BBL synTac과 면역관문에 특이적인 항체가 둘 다 개체에게 투여된다는 것을 의미한다. 4-1BBL synTac과 면역관문에 특이적인 항체의 투여는 실질적으로 동시일 수 있고, 예를 들어, 4-1BBL synTac은 면역관문에 특이적인 항체 투여의 약 1분 내지 약 24시간 내에(예를 들어, 약 1분 내에, 약 5분 내에, 약 15분 내에, 약 30분 내에, 약 1시간 내에, 약 4시간 내에, 약 8시간 내에, 약 12시간 내에 또는 약 24시간 내에) 개체에게 투여될 수 있다. 일부 경우에, 4-1BBL synTac은 면역관문에 특이적인 항체로 치료를 받는 개체에게 투여된다. 4-1BBL synTac과 면역관문에 특이적인 항체의 투여는 상이한 시간 및/또는 상이한 빈도로 일어날 수 있다.
다른 예로서, 본 개시내용의 치료 방법은 synTac(예를 들어, 상기 기재된 바와 같은 IL-2 synTac)과 면역관문에 특이적인 항체의 공동 투여를 포함할 수 있다. "공동 투여"는, synTac과 면역관문 저해제를 둘 다 투여한 결과인 치료적 효과를 달성하기 위해, 반드시 동시는 아니지만, IL-2 synTac과 면역관문에 특이적인 항체가 둘 다 개체에게 투여된다는 것을 의미한다. IL-2 synTac과 면역관문에 특이적인 항체의 투여는 실질적으로 동시일 수 있고, 예를 들어, IL-2 synTac은 면역관문에 특이적인 항체 투여의 약 1분 내지 약 24시간 내에(예를 들어, 약 1분 내에, 약 5분 내에, 약 15분 내에, 약 30분 내에, 약 1시간 내에, 약 4시간 내에, 약 8시간 내에, 약 12시간 내에 또는 약 24시간 내에) 개체에게 투여될 수 있다. 일부 경우에, IL-2 synTac은 면역관문에 특이적인 항체로 치료를 받는 개체에게 투여된다. IL-2 synTac과 면역관문에 특이적인 항체의 투여는 상이한 시간 및/또는 상이한 빈도로 일어날 수 있다.
본 개시내용은 synTac 및 면역관문 저해제를 투여하는 단계를 포함하는, 치료 방법을 제공한다. 본 개시내용의 치료 방법은 표적 T 세포의 활성을 조절할 수 있다. 일부 경우에, 예를 들어, 표적 T 세포가 CD8+ T 세포인 경우, 다량체 폴리펩타이드는 클래스 I MHC 폴리펩타이드(예를 들어, β2-마이크로글로불린 및 클래스 I MHC 중쇄)를 포함한다. 일부 경우에, 예를 들어, 표적 T 세포가 CD4+ T 세포인 경우, 다량체 폴리펩타이드는 클래스 II MHC 폴리펩타이드(예를 들어, 클래스 II MHC α 쇄; 클래스 II MHC β 쇄)를 포함한다.
다량체 폴리펩타이드가 활성화 폴리펩타이드인 면역조절 폴리펩타이드를 포함하는 경우, 본 개시내용의 방법은 에피토프-특이적 T 세포를 활성화시킨다. 일부 예에서, 에피토프-특이적 T 세포는 암 세포 상에 존재하는 에피토프에 특이적인 T 세포이며, 에피토프-특이적 T 세포를 다량체 폴리펩타이드와 접촉시키는 단계는 암 세포에 대한 T 세포의 세포독성 활성을 증가시킨다. 일부 예에서, 에피토프-특이적 T 세포는 암 세포 상에 존재하는 에피토프에 특이적인 T 세포이고, 본 개시내용의 방법은 에피토프-특이적 T 세포 수를 증가시킨다.
일부 예에서, 에피토프-특이적 T 세포는 바이러스 감염 세포에 존재하는 에피토프에 특이적인 T 세포이고, 본 개시내용의 방법은 바이러스-감염 세포에 대한 T 세포의 세포독성 활성을 증가시킨다. 일부 예에서, 에피토프-특이적 T 세포는 바이러스-감염 세포 상에 존재하는 에피토프에 특이적인 T 세포이고, 본 개시내용의 방법은 에피토프-특이적 T 세포 수를 증가시킨다.
본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드가 저해 폴리펩타이드인 면역조절 폴리펩타이드를 포함하는 경우, 본 개시내용의 방법은 에피토프-특이적 T 세포를 저해한다. 일부 예에서, 에피토프-특이적 T 세포는 자기 항원에 존재하는 에피토프에 특이적인 자기-반응성 T 세포이고, 본 개시내용의 방법은 자기-반응성 T 세포의 수를 감소시킨다.
일부 경우에, 면역조절 폴리펩타이드는 활성화 폴리펩타이드이며, 다량체 폴리펩타이드는 에피토프-특이적 T 세포를 활성화시킨다. 일부 경우에, 에피토프는 암-관련 에피토프이며, 다량체 폴리펩타이드는 암 관련 에피토프에 특이적인 T 세포의 활성을 증가시킨다.
일부 경우에, 본 개시내용의 치료 방법은 암을 갖는 개체에서 암을 치료한다. 본 개시내용은 개체에서 암을 치료하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 개체에게: a) 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드, 또는 다량체 폴리펩타이드를 암호화하는 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 한 가지 이상의 핵산(예를 들어, 발현 벡터; mRNA; 등)(상기 다량체 폴리펩타이드는 암 에피토프인 T-세포 에피토프를 포함하고 그리고 상기 다량체 폴리펩타이드는 자극 면역조절 폴리펩타이드를 포함함); 및 b) 면역관문 저해제를 투여하는 단계를 포함한다. 일부 경우에, "유효량"의 다량체 폴리펩타이드 및 면역관문 저해제는 이들이 필요한 개체에게 1회 이상의 용량으로 투여될 때, 개체에서 암 세포의 수를 감소시키는 양이다. 예를 들어, 일부 경우에, "유효량"의 다량체 폴리펩타이드 및 면역관문 저해제는 치료가 필요한 개체에 대해 1회 이상의 용량으로 투여될 때, 다량체 폴리펩타이드 및 면역관문 저해제의 투여 전의 또는 다량체 폴리펩타이드 및 면역관문 저해제에 의한 투여의 부재 하의 개체에서 암 세포 수에 비해 적어도 10%, 적어도 15%, 적어도 20%, 적어도 25%, 적어도 30%, 적어도 40%, 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 적어도 95%만큼 개체에서 암 세포의 수를 감소시키는 양이다. 일부 경우에, "유효량"의 다량체 폴리펩타이드 및 면역관문 저해제는 이들이 필요한 개체에게 1회 이상의 용량으로 투여될 때, 개체에서 암 세포의 수를 검출 가능하지 않은 수준으로 감소시키는 양이다. 일부 경우에, "유효량"의 다량체 폴리펩타이드 및 면역관문 저해제는 이들이 필요한 개체에게 1회 이상의 용량으로 투여될 때, 개체에서 종양 질량을 감소시키는 양이다. 예를 들어, 일부 경우에, "유효량"의 다량체 폴리펩타이드 및 면역관문 저해제는 치료가 필요한 개체에 대해 1회 이상의 용량으로 투여될 때, 다량체 폴리펩타이드 및 면역관문 저해제의 투여 전의 또는 다량체 폴리펩타이드 및 면역관문 저해제에 의한 투여의 부재 하의 개체에서 종양 질량에 비해 적어도 10%, 적어도 15%, 적어도 20%, 적어도 25%, 적어도 30%, 적어도 40%, 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90% 또는 적어도 95%만큼 개체에서 종양 질량을 감소시키는 양이다. 일부 경우에, "유효량"의 다량체 폴리펩타이드 및 면역관문 저해제는 이들이 필요한 개체에게 1회 이상의 용량으로 투여될 때, 개체에서 생존 시간을 증가시키는 양이다. 예를 들어, 일부 경우에, "유효량"의 다량체 폴리펩타이드와 면역관문 저해제는 생존 시간의 증가가 필요한 개체에 대해 1회 이상의 용량이 투여될 때 다량체 폴리펩타이드의 투여 및 면역관문 저해제가 없는 개체의 예상되는 생존 시간에 비해 적어도 1개월, 적어도 2개월, 적어도 3개월, 3개월 내지 6개월, 6개월 내지 1년, 1년 내지 2년, 2년 내지 5년, 5년 내지 10년 또는 10년 초과만큼 개체의 생존 시간을 증가시키는 양이다.
일부 예에서, 에피토프-특이적 T 세포는 바이러스 감염 세포에 존재하는 에피토프에 특이적인 T 세포이고, 본 개시내용의 방법은 바이러스-감염 세포에 대한 T 세포의 세포독성 활성을 증가시킨다. 일부 예에서, 에피토프-특이적 T 세포는 바이러스-감염 세포 상에 존재하는 에피토프에 특이적인 T 세포이고, 본 개시내용의 방법은 에피토프-특이적 T 세포 수를 증가시킨다.
상기 언급한 바와 같이, 일부 경우에, 대상 치료를 수행함에 있어서, 다량체 폴리펩타이드는 폴리펩타이드 그 자체로서 치료가 필요한 개체에게 투여된다. 다른 예에서, 대상 치료 방법을 수행함에 있어서, 다량체 폴리펩타이드를 암호화하는 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 한 가지 이상의 핵산은 치료가 필요한 개체에게 투여 중이다. 따라서, 다른 예에서, synTac을 암호화하는 하나 이상의 핵산은 치료가 필요한 개체에게 투여된다.
투약량 - synTac
synTac의 적합한 투약량은 다양한 임상 인자에 기반하여 담당 의사 또는 다른 자격있는 의료인에 의해 결정될 수 있다. 의학 분야에 잘 공지되어 있는 바와 같이, 임의의 한 명의 환자에 대한 투약량은 환자의 크기, 신체 표면적, 연령, 투여될 특정 폴리펩타이드 또는 핵산, 환자의 성별, 시간 투여 경로, 일반적 건강상태 및 동시에 투여 중인 다른 약물을 포함하는 다수의 인자에 의존한다. 다량체 폴리펩타이드(synTac) 는 1 ng/㎏ 체중 내지 20㎎/㎏ 체중/용량, 예를 들어, 0.1㎎/㎏ 체중 내지 10㎎/㎏ 체중, 예를 들어, 0.5㎎/㎏ 체중 내지 5㎎/㎏ 체중의 양으로 투여될 수 있지만; 그러나, 특히 앞서 언급한 인자를 고려하여 이 범위 미만의 또는 초과의 용량이 생각된다. 요법이 연속 주입이라면, 이는 또한 1㎍ 내지 10㎎/체중 킬로그램/분의 범위일 수 있다. 다량체 폴리펩타이드는 약 1㎎/㎏ 체중 내지 50㎎/㎏ 체중, 예를 들어, 약 1㎎/㎏ 체중 내지 약 5㎎/㎏ 체중, 약 5㎎/㎏ 체중 내지 약 10㎎/㎏ 체중, 약 10㎎/㎏ 체중 내지 약 15㎎/㎏ 체중, 약 15㎎/㎏ 체중 내지 약 20㎎/㎏ 체중, 약 20㎎/㎏ 체중 내지 약 25㎎/㎏ 체중, 약 25㎎/㎏ 체중 내지 약 30㎎/㎏ 체중, 약 30㎎/㎏ 체중 내지 약 35㎎/㎏ 체중, 약 35㎎/㎏ 체중 내지 약 40㎎/㎏ 체중, 또는 약 40㎎/㎏ 체중 내지 약 50㎎/㎏ 체중의 양으로 투여된다.
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드의 적합한 용량은 0.01㎍ 내지 100 g/체중 kg, 0.1㎍ 내지 10 g/체중 kg, 1㎍ 내지 1 g/체중 kg, 10㎍ 내지 100㎎/체중 kg, 100㎍ 내지 10㎎/체중 kg, 또는 100㎍ 내지 1㎎/체중 kg이다. 당업자는 체액 또는 조직 내 투여된 제제의 측정된 체류 시간 및 농도에 기반하여 투약에 대한 반복 속도를 용이하게 추정할 수 있다. 성공적인 치료 후에, 환자는 질환 상태의 재발을 방지하기 위한 유지 요법을 받는 것이 바람직할 수 있되, 다량체 폴리펩타이드는 0.01㎍ 내지 100 g/체중 kg, 0.1㎍ 내지 10 g/체중 kg, 1㎍ 내지 1 g/체중 kg, 10㎍ 내지 100㎎/체중 kg, 100㎍ 내지 10㎎/체중 kg, 또는 100㎍ 내지 1㎎/체중 kg 범위의 유지 용량으로 투여된다.
당업자는 용량 수준이 특정 다량체 폴리펩타이드, 증상의 중증도 및 대상체의 부작용에 대한 감수성의 함수로서 다를 수 있다는 것을 용이하게 인식할 것이다. 주어진 화합물의 바람직한 투약량은 다양한 수단에 의해 당업자에 의해 용이하게 결정 가능하다.
일부 실시형태에서, 다회 용량의 다량체 폴리펩타이드(또는 핵산 또는 이를 암호화하는 재조합 발현 벡터)가 투여된다. 다량체 폴리펩타이드의 투여 빈도는 임의의 다양한 인자, 예를 들어, 증상의 중증도 등에 따라 다를 수 있다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 다량체 폴리펩타이드는 1개월당 1회, 1개월당 2회, 1개월당 3회, 격주(qow), 주당 1회(qw), 주당 2회(biw), 주당 3회(tiw), 주당 4회, 주당 5회, 주당 6회, 격일(qod), 매일(qd), 1일 2회(qid), 또는 1일 3회(tid)로 투여된다.
다량체 폴리펩타이드 투여의 지속기간, 예를 들어, 다량체 폴리펩타이드가 투여되는 시간의 기간은 임의의 다양한 인자, 예를 들어, 환자 반응 등에 따라 다를 수 있다. 예를 들어, 다량체 폴리펩타이드는 약 1일 내지 약 1주, 약 2주 내지 약 4주, 약 1개월 내지 약 2개월, 약 2개월 내지 약 4개월, 약 4개월 내지 약 6개월, 약 6개월 내지 약 8개월, 약 8개월 내지 약 1년, 약 1년 내지 약 2년, 또는 약 2년 내지 약 4년 또는 그 이상의 범위의 시간 기간에 걸쳐 투여될 수 있다.
synTac의 적합한 투약량은 다양한 임상 인자에 기반하여 담당 의사 또는 다른 자격있는 의료인에 의해 결정될 수 있다. 의학 분야에 잘 공지되어 있는 바와 같이, 임의의 한 명의 환자에 대한 투약량은 환자의 크기, 신체 표면적, 연령, 투여될 특정 폴리펩타이드 또는 핵산, 환자의 성별, 시간 투여 경로, 일반적 건강상태 및 동시에 투여 중인 다른 약물을 포함하는 다수의 인자에 의존한다. 다량체 폴리펩타이드(synTac) 는 1 ng/㎏ 체중 내지 20㎎/㎏ 체중/용량, 예를 들어, 0.1㎎/㎏ 체중 내지 10㎎/㎏ 체중, 예를 들어, 0.5㎎/㎏ 체중 내지 5㎎/㎏ 체중의 양으로 투여될 수 있지만; 그러나, 특히 앞서 언급한 인자를 고려하여 이 범위 미만의 또는 초과의 용량이 생각된다. 요법이 연속 주입이라면, 이는 또한 1㎍ 내지 10㎎/체중 킬로그램/분의 범위일 수 있다. 다량체 폴리펩타이드는 약 1㎎/㎏ 체중 내지 50㎎/㎏ 체중, 예를 들어, 약 1㎎/㎏ 체중 내지 약 5㎎/㎏ 체중, 약 5㎎/㎏ 체중 내지 약 10㎎/㎏ 체중, 약 10㎎/㎏ 체중 내지 약 15㎎/㎏ 체중, 약 15㎎/㎏ 체중 내지 약 20㎎/㎏ 체중, 약 20㎎/㎏ 체중 내지 약 25㎎/㎏ 체중, 약 25㎎/㎏ 체중 내지 약 30㎎/㎏ 체중, 약 30㎎/㎏ 체중 내지 약 35㎎/㎏ 체중, 약 35㎎/㎏ 체중 내지 약 40㎎/㎏ 체중, 또는 약 40㎎/㎏ 체중 내지 약 50㎎/㎏ 체중의 양으로 투여된다.
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드의 적합한 용량은 0.01㎍ 내지 100 g/체중 kg, 0.1㎍ 내지 10 g/체중 kg, 1㎍ 내지 1 g/체중 kg, 10㎍ 내지 100㎎/체중 kg, 100㎍ 내지 10㎎/체중 kg, 또는 100㎍ 내지 1㎎/체중 kg이다. 당업자는 체액 또는 조직 내 투여된 제제의 측정된 체류 시간 및 농도에 기반하여 투약에 대한 반복 속도를 용이하게 추정할 수 있다. 성공적인 치료 후에, 환자는 질환 상태의 재발을 방지하기 위한 유지 요법을 받는 것이 바람직할 수 있되, 다량체 폴리펩타이드는 0.01㎍ 내지 100 g/체중 kg, 0.1㎍ 내지 10 g/체중 kg, 1㎍ 내지 1 g/체중 kg, 10㎍ 내지 100㎎/체중 kg, 100㎍ 내지 10㎎/체중 kg, 또는 100㎍ 내지 1㎎/체중 kg 범위의 유지 용량으로 투여된다.
당업자는 용량 수준이 특정 다량체 폴리펩타이드, 증상의 중증도 및 대상체의 부작용에 대한 감수성의 함수로서 다를 수 있다는 것을 용이하게 인식할 것이다. 주어진 화합물의 바람직한 투약량은 다양한 수단에 의해 당업자에 의해 용이하게 결정 가능하다.
일부 실시형태에서, 다회 용량의 다량체 폴리펩타이드(또는 핵산 또는 이를 암호화하는 재조합 발현 벡터)가 투여된다. 다량체 폴리펩타이드의 투여 빈도는 임의의 다양한 인자, 예를 들어, 증상의 중증도 등에 따라 다를 수 있다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 다량체 폴리펩타이드는 1개월당 1회, 1개월당 2회, 1개월당 3회, 격주(qow), 주당 1회(qw), 주당 2회(biw), 주당 3회(tiw), 주당 4회, 주당 5회, 주당 6회, 격일(qod), 매일(qd), 1일 2회(qid), 또는 1일 3회(tid)로 투여된다.
다량체 폴리펩타이드 투여의 지속기간, 예를 들어, 다량체 폴리펩타이드가 투여되는 시간의 기간은 임의의 다양한 인자, 예를 들어, 환자 반응 등에 따라 다를 수 있다. 예를 들어, 다량체 폴리펩타이드는 약 1일 내지 약 1주, 약 2주 내지 약 4주, 약 1개월 내지 약 2개월, 약 2개월 내지 약 4개월, 약 4개월 내지 약 6개월, 약 6개월 내지 약 8개월, 약 8개월 내지 약 1년, 약 1년 내지 약 2년, 또는 약 2년 내지 약 4년 또는 그 이상의 범위의 시간 기간에 걸쳐 투여될 수 있다.
투약량 - 면역관문 저해제
면역관문 저해제의 적합한 투약량은 다양한 임상 인자에 기반하여 담당 의사 또는 다른 자격있는 의료인에 의해 결정될 수 있다. 의학 분야에 잘 공지되어 있는 바와 같이, 임의의 한 명의 환자에 대한 투약량은 환자의 크기, 신체 표면적, 연령, 투여될 특정 폴리펩타이드 또는 핵산, 환자의 성별, 시간 투여 경로, 일반적 건강상태 및 동시에 투여 중인 다른 약물을 포함하는 다수의 인자에 의존한다. 면역관문 저해제는 1ng/㎏ 체중 내지 20㎎/㎏ 체중/용량, 예를 들어, 0.1㎎/㎏ 체중 내지 10㎎/㎏ 체중, 예를 들어, 0.5㎎/㎏ 체중 내지 5㎎/㎏ 체중의 양으로 투여될 수 있지만; 그러나, 특히 앞서 언급한 인자를 고려하여 이 범위 미만의 또는 초과의 용량이 생각된다. 요법이 연속 주입이라면, 이는 또한 1㎍ 내지 10㎎/체중 킬로그램/분의 범위일 수 있다. 면역관문 저해제는 약 1㎎/㎏ 체중 내지 50㎎/㎏ 체중, 예를 들어, 약 1㎎/㎏ 체중 내지 약 5㎎/㎏ 체중, 약 5㎎/㎏ 체중 내지 약 10㎎/㎏ 체중, 약 10㎎/㎏ 체중 내지 약 15㎎/㎏ 체중, 약 15㎎/㎏ 체중 내지 약 20㎎/㎏ 체중, 약 20㎎/㎏ 체중 내지 약 25㎎/㎏ 체중, 약 25㎎/㎏ 체중 내지 약 30㎎/㎏ 체중, 약 30㎎/㎏ 체중 내지 약 35㎎/㎏ 체중, 약 35㎎/㎏ 체중 내지 약 40㎎/㎏ 체중, 또는 약 40㎎/㎏ 체중 내지 약 50㎎/㎏ 체중의 양으로 투여된다.
일부 경우에, 면역관문 저해제의 적합한 용량은 0.01㎍ 내지 100 g/체중 kg, 0.1㎍ 내지 10 g/체중 kg, 1㎍ 내지 1 g/체중 kg, 10㎍ 내지 100㎎/체중 kg, 100㎍ 내지 10㎎/체중 kg, 또는 100㎍ 내지 1㎎/체중 kg이다. 당업자는 체액 또는 조직 내 투여된 제제의 측정된 체류 시간 및 농도에 기반하여 투약에 대한 반복 속도를 용이하게 추정할 수 있다. 성공적인 치료 후에, 환자는 질환 상태의 재발을 방지하기 위한 유지 요법을 받는 것이 바람직할 수 있되, 면역관문 저해제는 0.01㎍ 내지 100 g/체중 kg, 0.1㎍ 내지 10 g/체중 kg, 1㎍ 내지 1g/체중 kg, 10㎍ 내지 100㎎/체중 kg, 100㎍ 내지 10㎎/체중 kg, 또는 100㎍ 내지 1㎎/체중 kg 범위의 유지 용량으로 투여된다.
당업자는 용량 수준이 특정 면역관문 저해제, 증상의 중증도 및 대상체의 부작용에 대한 감수성의 함수로서 다를 수 있다는 것을 용이하게 인식할 것이다. 주어진 화합물의 바람직한 투약량은 다양한 수단에 의해 당업자에 의해 용이하게 결정 가능하다.
일부 실시형태에서, 다회 용량의 면역관문 저해제가 투여된다. 면역관문 저해제의 투여 빈도는 임의의 다양한 인자, 예를 들어 증상의 중증도 등에 따라 다를 수 있다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 다량체 폴리펩타이드는 1개월당 1회, 1개월당 2회, 1개월당 3회, 격주(qow), 주당 1회(qw), 주당 2회(biw), 주당 3회(tiw), 주당 4회, 주당 5회, 주당 6회, 격일(qod), 매일(qd), 1일 2회(qid), 또는 1일 3회(tid)로 투여된다.
면역관문 저해제 투여의 지속기간, 예를 들어, 면역관문 저해제가 투여되는 시간의 기간은 임의의 다양한 인자, 예를 들어, 환자 반응 등에 따라 다를 수 있다. 예를 들어, 면역관문 저해제는 약 1일 내지 약 1주, 약 2주 내지 약 4주, 약 1개월 내지 약 2개월, 약 2개월 내지 약 4개월, 약 4개월 내지 약 6개월, 약 6개월 내지 약 8개월, 약 8개월 내지 약 1년, 약 1년 내지 약 2년, 또는 약 2년 내지 약 4년 또는 그 이상의 범위의 시간 기간에 걸쳐 투여될 수 있다.
다음은 비제한적 예이다.
펨브롤리주맙은 치료가 필요한 개체에게 2㎎/㎏의 양으로 3주마다 투여될 수 있다. 펨브롤리주맙은 치료가 필요한 개체에게 200㎎의 양으로 3주마다 투여될 수 있다. 일부 경우에, 본 개시내용의 방법은 임상적 이점을 달성하기 위해 투여될 필요가 있는 감소된 양의 항-PD1을 제공한다. 예를 들어, 일부 경우에, 임상적 이점을 달성하기 위해 투여될 필요가 있는 펨브롤리주맙의 양은 synTac에 의한 치료의 부재 하에서의 임상적 이점을 달성하기 위해 투여될 필요가 있는 펨브롤리주맙의 양에 비해, 10% 내지 50%, 또는 50% 초과만큼 감소될 수 있다.
니볼루맙은 치료가 필요한 개체에게 3㎎/㎏의 양으로 2주마다 투여될 수 있다. 니볼루맙은 치료가 필요한 개체에게 240㎎의 양으로 2주마다 투여될 수 있다. 일부 경우에, 본 개시내용의 방법은 임상적 이점을 달성하기 위해 투여될 필요가 있는 감소된 양의 항-PD1을 제공한다. 예를 들어, 일부 경우에, 임상적 이점을 달성하기 위해 투여될 필요가 있는 니볼루맙의 양은 synTac에 의한 치료의 부재 하에서의 임상적 이점을 달성하기 위해 투여될 필요가 있는 니볼루맙의 양에 비해, 10% 내지 50%, 또는 50% 초과만큼 감소될 수 있다.
아테졸리주맙은 치료가 필요한 개체에게 1200㎎의 양으로 3주마다 투여될 수 있다. 일부 경우에, 본 개시내용의 방법은 임상적 이점을 달성하기 위해 투여될 필요가 있는 감소된 양의 항-PD1을 제공한다. 예를 들어, 일부 경우에, 임상적 이점을 달성하기 위해 투여될 필요가 있는 아테졸리주맙의 양은 synTac에 의한 치료의 부재 하에서의 임상적 이점을 달성하기 위해 투여될 필요가 있는 아테졸리주맙의 양에 비해, 10% 내지 50%, 또는 50% 초과만큼 감소될 수 있다.
이필리무맙은 치료가 필요한 개체에게 3㎎/㎏의 양으로 3주마다 투여될 수 있다. 이필리무맙은 치료가 필요한 개체에게 10㎎/㎏의 양으로 3주마다 투여될 수 있다. 이필리무맙은 치료가 필요한 개체에게 10㎎/㎏의 양으로 12주마다 투여될 수 있다. 일부 경우에, 본 개시내용의 방법은 임상적 이점을 달성하기 위해 투여될 필요가 있는 감소된 양의 항-PD1을 제공한다. 예를 들어, 일부 경우에, 임상적 이점을 달성하기 위해 투여될 필요가 있는 이필리무맙의 양은 synTac에 의한 치료의 부재 하에서의 임상적 이점을 달성하기 위해 투여될 필요가 있는 이필리무맙의 양에 비해, 10% 내지 50%, 또는 50% 초과만큼 감소될 수 있다.
투여 경로
활성제(다량체 폴리펩타이드; 면역관문 저해제)는 생체내 및 생체외 방법을 포함하는 약물 전달에 적합한 임의의 이용 가능한 방법 및 투여 경로뿐만 아니라 전신 및 국소화된 투여 경로를 이용하여 개체에게 투여된다. 일부 경우에, synTac은 제1 투여 경로에 의해 투여되고; 그리고 면역관문 저해제는 제1 투여 경로와 상이한 제2 투여 경로에 의해 투여된다. 일부 경우에, synTac 및 면역관문 저해제는 동일한 투여 경로에 의해 투여된다.
통상적인 및 약제학적으로 허용 가능한 투여 경로는 종양내, 종양 주위, 근육내, 기관내, 두개내, 피하, 진피내, 국소 적용, 정맥내, 동맥내, 직장, 비강, 경구 및 다른 장 및 비경구 투여 경로를 포함한다. 투여 경로는 원한다면 조합될 수 있고, 또는 다량체 폴리펩타이드, 면역관문 저해제 및/또는 원하는 효과에 따라 조절될 수 있다.
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는 정맥내로 투여되고; 면역관문 저해제는 정맥내로 투여된다. 일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는 근육내로 투여되고; 면역관문 저해제는 근육내로 투여된다. 일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는 국소로 투여되고; 면역관문 저해제는 국소로 투여된다. 일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는 종양내로 투여되고; 면역관문 저해제는 종양내로 투여된다. 일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는 종양 주변에 투여되고; 면역관문 저해제는 종양 주변에 투여된다. 일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는 두개내로 투여되고; 면역관문 저해제는 두개내로 투여된다. 일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는 피하로 투여되고; 면역관문 저해제는 피하로 투여된다.
일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는 정맥내로 투여되고; 면역관문 저해제는 종양 주변으로 투여된다. 일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는 근육내로 투여되고; 면역관문 저해제는 정맥내로 투여된다. 일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는 전신으로 투여되고; 면역관문 저해제는 국소로 투여된다. 일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는 종양내로 투여되고; 면역관문 저해제는 정맥내로 투여된다. 일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는 전신으로 투여되고; 면역관문 저해제는 종양 주변에 투여된다. 일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는 정맥내로 투여되고; 면역관문 저해제는 두개내로 투여된다. 일부 경우에, 다량체 폴리펩타이드는 피하로 투여되고; 면역관문 저해제는 정맥내로 투여된다.
다량체 폴리펩타이드 및 면역관문 저해제는 임의의 이용 가능한 통상적인 방법 및 전신 또는 국소화된 경로를 포함하는 통상적인 약물의 전달에 적합한 경로를 이용하여 숙주에게 투여될 수 있다. 일반적으로, 본 개시내용의 방법에서 사용하기 위해 상정된 투여 경로는 장, 비경구 및 흡입 경로를 포함하지만, 반드시 이들로 제한되는 것은 아니다.
흡입 투여 이외의 비경구 투여 경로는 국소, 경피, 피하, 근육내, 안와내, 낭내, 척수내, 흉골내, 종양내, 종양 주위, 및 정맥내 경로, 즉, 소화관을 통하는 것 이외의 임의의 투여 경로를 포함하지만, 반드시 이들로 제한되지는 않는다. 비경구 투여는 활성제(synTac 또는 면역관문 저해제)의 전신 또는 국소 전달을 달성하기 위해 수행될 수 있다. 전신 전달을 원하는 경우에, 투여는 정맥내 전달을 수반할 수 있다.
치료에 적합한 대상체
본 개시내용의 방법에 의한 치료에 적합한 대상체는 암이 있는 것으로 진단된 개체, 암에 대해 치료되었지만, 치료에 대한 반응이 없는 개체, 및 암에 대해 치료되고 초기에 반응하였지만, 후속적으로 치료에 대해 난치성이 된 개체를 포함하는, 암이 있는 개체를 포함한다. 본 개시내용의 방법에 의한 치료에 적합한 대상체는 감염으로 진단된 개체, 및 감염에 대해 치료되었지만 치료에 반응하지 않은 개체를 포함하는 감염(예를 들어, 병원균, 예컨대 박테리아, 바이러스, 원생동물 등에 의한 감염)을 갖는 개체를 포함한다. 본 개시내용의 방법에 의한 치료에 적합한 대상체는 박테리아 감염을 갖는 것으로 진단된 개체, 및 박테리아 감염에 대해 치료되었지만, 치료에 반응하지 않은 개체를 포함하는, 박테리아 감염을 갖는 개체를 포함한다. 본 개시내용의 방법에 의한 치료에 적합한 대상체는 바이러스 감염을 갖는 것으로 진단된 개체, 및 바이러스 감염에 대해 치료되었지만, 치료에 반응하지 않은 개체를 포함하는, 바이러스 감염을 갖는 개체를 포함한다. 본 개시내용의 방법에 의한 치료에 적합한 대상체는 자가면역 질환을 갖는 것으로 진단된 개체, 및 자가면역 질환에 대해 치료되었지만, 치료에 반응하지 않은 개체를 포함하는, 자가면역 질환을 갖는 개체를 포함한다.
일부 경우에, 본 개시내용의 방법은 면역관문 저해제에 의한 치료를 받고 있는 개체에게 synTac을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 방법은 항-PD1 항체에 의한 치료를 받고 있는 개체에게 synTac을 투여하는 단계를 포함한다. 예를 들어, 일부 경우에, 본 개시내용의 방법은 펨브롤리주맙에 의한 치료를 받고 있는 개체에게 synTac을 투여하는 단계를 포함한다. 다른 예로서, 일부 경우에, 본 개시내용의 방법은 니볼루맙에 의한 치료를 받고 있는 개체에게 synTac을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 방법은 항-PD-L1 항체에 의한 치료를 받고 있는 개체에게 synTac을 투여하는 단계를 포함한다. 예를 들어, 일부 경우에, 본 개시내용의 방법은 아테졸리주맙에 의한 치료를 받고 있는 개체에게 synTac을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 방법은 항-CTLA4 항체에 의한 치료를 받고 있는 개체에게 synTac을 투여하는 단계를 포함한다. 예를 들어, 일부 경우에, 본 개시내용의 방법은 이필리무맙에 의한 치료를 받고 있는 개체에게 synTac을 투여하는 단계를 포함한다. 다른 예로서, 일부 경우에, 본 개시내용의 방법은 트레멜리무맙에 의한 치료를 받고 있는 개체에게 synTac을 투여하는 단계를 포함한다.
일부 경우에, 예를 들어, 에피토프가 HPV 에피토프인 경우, 본 개시내용의 방법에 의한 치료에 적합한 대상체는 HPV-연관 암 또는 HPV에 기인하는 암으로 진단된 개체이다. HPV-연관된 암 및 HPV가 원인인 암은, 예를 들어, 두경부암; 자궁경부암; 및 생식기 암을 포함한다.
개체에 면역관문 저해제와 함께 공자극 폴리펩타이드를 선택적으로 전달하는 방법
따라서 본 개시내용은, 예를 들어, 주어진 에피토프에 특이적인 TCR은이 표적화되는 방식으로, 환자에게 공자극 폴리펩타이드와 관문 저해제의 선택적 전달 둘 다의 치료 효과를 제공하기 위해 관문 저해제의 공동 투여와 함께 공자극 폴리펩타이드, 예컨대 IL-2, 또는 천연 유래 공자극 폴리펩타이드의 감소된-친화도 변이체, 예컨대 본 명세서에 개시된 IL-2 변이체를 선택된 T 세포 또는 선택된 T 세포 집단에 전달하는 방법을 제공한다. 본 개시내용은 환자에게 공자극 폴리펩타이드와 관문 저해제의 선택적 전달 둘 다의 치료 효과를 제공하기 위해 관문 저해제의 공동 투여와 함께 공자극 폴리펩타이드, 예컨대 IL-2, 또는 천연 유래 공자극 폴리펩타이드의 감소된-친화도 변이체, 예컨대 본 명세서애 개시된 IL-2 변이체를 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 에피토프에 특이적인 TCR을 보유하는 표적 T 세포에 선택적으로 전달하는 방법을 제공한다. 상기 방법은 T 세포 집단을 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드와 접촉시키는 단계를 포함한다. T 세포 집단은: i) 표적 T 세포; 및 ii) 에피토프에 특이적이지 않은 비표적 T 세포(예를 들어, 에피토프-특이적 T 세포에 결합하는 에피토프 이외의 에피토프(들)에 특이적인 T 세포)를 포함하는 혼합된 집단일 수 있다. 에피토프-특이적 T 세포는 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 에피토프-제시 펩타이드에 특이적이고, 다량체 폴리펩타이드에 의해 제공된 펩타이드 HLA 복합체 또는 펩타이드 MHC 복합체에 결합한다. T 세포 집단을 다량체 폴리펩타이드에 접촉시키는 것은 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 공자극 폴리펩타이드(예를 들어, IL-2 또는 IL-2의 감소된-친화도 변이체)를 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 에피토프에 특이적인 T 세포(들)에 선택적으로 전달한다. 관문 저해제는 환자에게 공자극 폴리펩타이드와 관문 저해제 둘 다의 선택적 전달의 치료 효과를 제공하기 위해 다량체 폴리펩타이드와 함께(다량체 폴리펩타이드의 투여 전에 그리고/또는 후에 함께 또는 상이한 시간에) 공동 투여된다.
따라서, 본 개시내용은 환자에게 (i) 상기 기재한 관문 저해제 및 (ii) 공자극 폴리펩타이드, 예컨대 IL-2, 또는 천연 유래 공자극 폴리펩타이드의 감소된-친화도 변이체, 예컨대 본 명세서에 개시된 IL-2 변이체, 또는 둘 다의 조합을, 표적 T 세포에 선택적으로 전달한느 방법을 제공하며, 상기 방법은 혼합된 T 세포 집단을 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드와 접촉시키는 단계를 포함한다. 혼합된 T 세포 집단은 표적 T 세포 및 비-표적 T 세포를 포함한다. 표적 T 세포는 다량체 폴리펩타이드 내에 존재하는 에피토프에 특이적이다. 혼합된 T 세포 집단를 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드와 접촉시키는 것은 다량체 폴리펩타이드 내에 존재하는 공자극 폴리펩타이드(들)를 표적 T 세포에 전달한다. 다량체 폴리펩타이드와 함께(다량체 폴리펩타이드의 투여 전에 그리고/또는 후에 함께 또는 상이한 시간에) 관문 저해제의 공동 투여는 따라서 환자에게 공자극 폴리펩타이드와 관문 저해제 둘 다의 선택적 전달의 치료 효과를 제공한다.
예를 들어, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드는, i) 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 에피토프에 특이적인 표적 T 세포(들); 및 ii) 비-표적 T 세포(들), 예를 들어, 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 에피토프가 아닌 제2 에피토프(들)에 특이적인 T 세포(들)를 포함하는, T 세포 집단과 접촉된다. 집단을 접촉시키는 것은 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 공자극 폴리펩타이드(들)(예를 들어, 천연 유래 공자극 폴리펩타이드(예를 들어, 천연 유래 공자극 폴리펩타이드의 천연 유래 IL-2) 또는 감소된-친화도 변이체(예를 들어, 본 명세서에 개시된 IL-2 변이체))의 표적 T 세포에 대한 선택적 전달을 초래한다. 따라서, 예를 들어, 50% 미만, 40% 미만, 30% 미만, 25% 미만, 20% 미만, 15% 미만, 10% 미만, 5% 미만 또는 4%, 3%, 2% 또는 1% 미만의 비-표적 T 세포는 다량체 폴리펩타이드에 결합하고, 그 결과, 다량체 폴리펩타이드에 존재하는 공자극 폴리펩타이드(예를 들어, IL-2 또는 IL-2 변이체)는 비-표적 T 세포에 실질적으로 전달되지 않는다. 다량체 폴리펩타이드와 함께(다량체 폴리펩타이드의 투여 전에 그리고/또는 후에 함께 또는 상이한 시간에) 관문 저해제의 공동 투여는 따라서 환자에게 공자극 폴리펩타이드와 관문 저해제 둘 다의 선택적 전달의 치료 효과를 제공한다.
일부 경우에, T 세포 집단은 시험관내이다. 일부 경우에, T 세포 집단은 시험관내이고, 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 대한 표적 T 세포 집단의 생물학적 반응(예를 들어, T 세포 활성화 및/또는 확성 및/또는 표현형 분화)은 시험관내 배양물과 관련하여 일어난다. 예를 들어, 혼합된 T 세포 집단은 개체로부터 얻을 수 있으며, 시험관내에서 다량체 폴리펩타이드와 접촉될 수 있다. 이러한 접촉은 정해진 용량(들) 및/또는 노출 스케줄(들)에 대한 T 세포 집단의 단일 또는 다회 노출을 포함할 수 있다. 일부 경우에, 상기 접촉은 T 세포 집단 내에서 표적 T 세포를 선택적으로 결합/활성화 및/또는 확장시키는 것을 초래하고, 활성화된 그리고/또는 확장된 표적 T 세포의 집단 생성을 초래한다. 예로서, 혼합된 T 세포 집단은 말초 혈액 단핵구 세포(PBMC)일 수 있다. 예를 들어, 환자로부터의 PBMC는 표준 림프구 배양 조건 하에 0.1 내지 1000 nM의 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드에 노출되기 전 표준 혈액 회수 및 PBMC 농축에 의해 얻을 수 있다. 정해진 용량 및 스케줄에서 혼합된 T 세포 집단의 노출 전, 노출 동안 그리고 노출 후 시점에서, 시험관내 배양물에서 표적 T 세포의 존재비는 특정 펩타이드-MHC 다량체 및/또는 표현형 마커 및/또는 기능성 활성(예를 들어, 사이토카인 ELISpot 분석)에 의해 모니터링될 수 있다. 일부 경우에, 시험관내에서 항원 특이적 세포의 최적의 존재비 및/또는 표현형을 달성할 때, 활성화된 그리고/또는 확장된 표적 T 세포 집단의 모두 또는 일부는 개체에게 투여되는데(혼합된 T 세포가 얻어진 개체), 이 개체는 이미 표적 T 세포의 투여 전에 관문 저해제의 투여를 받았고/받았거나 표적 T 세포의 투여 후에 관문 저해제의 투여를 받을 것이다.
일부 경우에, T 세포 집단은 시험관내이다. 예를 들어, 혼합된 T 세포 집단은 개체로부터 얻으며, 시험관내에서 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드와 접촉된다. 시험관내 세포 배양물과 관련하여 정해진 용량(들) 및/또는 노출 계획(들)에 대한 T 세포의 단일 또는 다회 노출을 포함할 수 있는 이러한 접촉은 혼합된 T 세포 집단이 다량체 폴리펩타이드에 의해 제시된 에피토프에 특이적인 T 세포를 포함하는지의 여부를 결정하기 위해 사용될 수 있다. 다량체 폴리펩타이드의 에피토프에 특이적인 T 세포의 존재는 혼합된 T 세포 집단을 포함하는 샘플을 분석함으로써 결정될 수 있는데, 이 T 세포 집단은 에피토프에 특이적이지 않은 T 세포(비-표적 T 세포)를 포함하고 에피토프에 특이적인 T 세포(표적 T 세포)를 포함할 수 있다. 공지된 분석은 표적 T 세포의 활성화 및/또는 증식을 검출하기 위해 사용될 수 있고, 이에 의해 특정 다량체 폴리펩타이드(synTac)가 개체에서 존재하는 T 세포에 결합하는 에피토프를 갖는지 여부 및 그에 따라 다량체 폴리펩타이드가 해당 개체에 대한 치료적 조성물로서 잠재적 용도를 갖는지의 여부를 결정할 수 있는 생체외 분석을 제공한다. 표적 T 세포의 활성화 및/또는 증식 검출을 위한 적합한 공지된 분석은, 예를 들어, T 세포 표현형 및/또는 항원 특이성 및/또는 증식의 유세포 특성규명을 포함한다. 에피토프-특이적 T 세포의 존재를 검출하기 위한 이러한 분석, 예를 들어, 동반 진단 기기는 다량체 폴리펩타이드가 표적 T 세포에 선택적으로 결합/활성화 및/또는 확장시키는지의 여부를 결정하기 위해 추가적인 분석(예를 들어, 효과기 사이토카인 ELISpot 분석) 및/또는 적절한 대조군(예를 들어, 항원-특이적 및 항원 비특이적 다량체 펩타이드-HLA 염색 시약)을 추가로 포함할 수 있다. 따라서, 예를 들어, 본 개시내용은 개체로부터 얻은 혼합된 T 세포 집단에서 관심 대상의 에피토프에 결합 하는 표적 T 세포의 존재를 검출하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 a) 시험관내 혼합된 T 세포 집단을 본 개시내용의 다량체 폴리펩타이드와 접촉시키는 단계로서, 다량체 폴리펩타이드는 관심 대상의 에피토프를 포함하는, 상기 접촉시키는 단계; 및 b) 상기 접촉시키는 단계에 반응한 T 세포의 활성화 그리고/또는 증식을 검출하는 단계로서, 활성화된 그리고/또는 증식된 T 세포는 표적 T 세포의 존재를 나타내는, 상기 검출하는 단계를 포함한다. 대안적으로, 그리고/또는 추가로, 다량체 폴리펩타이드를 이용하여 목적하는 T 세포 집단의 활성화 및/또는 확장(증식)이 얻어지면, 활성화된/확장된 T 세포를 포함하는 T 세포 집단의 모두 또는 일부는 요법으로서 (T 세포의 투여 전에 관문 저해제의 투여를 받은 그리고/또는 T 세포의 투여 후에 관문 저해제의 투여를 받을) 개체에게 다시 투여될 수 있다.
일부 예에서, T 세포 집단은 개체에서 생체내이다. 이러한 예에서, 공자극 폴리펩타이드(예를 들어, IL-2 또는 감소된-친화도 IL-2)를 에피토프-특이적 T 세포에 선택적으로 전달하기 위한 본 개시내용의 방법은 개체에게 다량체 폴리펩타이드를 투여하는 단계를 포함한다.
공자극 폴리펩타이드(예를 들어, IL-2 또는 감소된-친화도 IL-2)가 선택적으로 전달 중인 에피토프-특이적 T 세포는 또한 본 명세서에서 "표적 T 세포"로서 지칭된다. 일부 경우에, 표적 T 세포는 조절 T 세포(Treg)이다. 일부 경우에, Treg는 자가반응성 T 세포의 활성을 저해하거나 또는 억제한다.
일부 경우에, 표적 T 세포는 세포독성 T 세포이다. 예를 들어, 표적 T 세포는 암 에피토프(예를 들어, 암 세포에 의해 제시된 에피토프)에 특이적인 세포독성 T 세포일 수 있다.
본 개시내용의 비제한적 양상의 예
상기 기재한 본 발명의 대상의 실시형태를 포함하는 양상은 단독으로 또는 하나 이상의 다른 양상 또는 실시형태와 조합하여 유리하게 될 수 있다. 앞서 언급한 설명으로 제한되는 일 없이, 양상 1 내지 122, 양상 A 내지 Z, 양상 AA 내지 ZZ 및 AAA 내지 BBB로 표기되는 본 개시내용의 소정의 비제한적 양상을 이하에 제공한다. 본 개시내용을 읽을 때 당업자에게 분명하게 되는 바와 같이, 개개로 넘버링된 양상의 각각이 사용되거나 또는 앞의 또는 이후의 개개의 넘버링된 양상 중 어떤 것과 조합될 수 있다. 이는 양상의 모든 이러한 조합에 대한 근거를 제공하는 것으로 의도되며, 이하에 명확하게 제공되는 양상의 조합으로 제한되지 않는다:
양상 1. 서열번호 1에 제시된 것에 적어도 85%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드로서, 상기 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 것에 대해 하나 이상의 아미노산 치환을 갖고, 그리고 상기 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 IL-2 수용체(IL2R)에 대해 서열번호 1 중 하나에 제시된 IL-2 아미노산 서열의 결합 친화도에 비해, 도 3 A 내지 도 3c에 도시된 아미노산 서열을 갖는 알파, 베타 및 감마 폴리펩타이드를 포함하는 IL2R에 대해 감소된 결합 친화도를 나타내는, 변이체 IL-2 폴리펩타이드.
양상 2. 양상 1에 있어서, 상기 변이체는 E15, H16, D20, F42, Y45 및 Q126 중 하나 이상의 치환을 포함하는, 변이체 IL2 폴리펩타이드.
양상 3. 양상 1 또는 2에 있어서, 상기 변이체 면역조절 폴리펩타이드는 IL2R에 대해 서열번호 1에 제시된 상기 IL2 아미노산 서열에 의해 나타난 결합 친화도의 10% 미만 내지 50% 미만을 나타내는, 변이체 IL2 폴리펩타이드.
양상 4. 양상 1 내지 3 중 어느 하나에 있어서, 상기 변이체는 F42의 Ala, Gly, Val, Ile 또는 Leu으로의 치환을 포함하는, 변이체 IL2 폴리펩타이드.
양상 5. 양상 1 내지 3 중 어느 하나에 있어서, 상기 변이체는 F42 및 D20의 치환을 포함하는, 변이체 IL2 폴리펩타이드.
양상 6. 양상 1 내지 3 중 어느 하나에 있어서, 상기 변이체는 F42 및 H16의 치환을 포함하는, 변이체 IL2 폴리펩타이드.
양상 7. 양상 1 내지 3 중 어느 하나에 있어서, 상기 변이체는 F42, D20 및 Y45의 치환을 포함하거나; 또는 상기 변이체는 F42, H16 및 Q126의 치환을 포함하는, 변이체 IL2 폴리펩타이드.
양상 8. 다량체 폴리펩타이드로서,
a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 에피토프;
ii) 제1 주조직 적합 복합체(MHC) 폴리펩타이드
를 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및
b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 제2 MHC 폴리펩타이드; 및
ii) 선택적으로 면역글로불린(Ig) Fc 폴리펩타이드 또는 비-Ig 스캐폴드
를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함하고,
상기 다량체 폴리펩타이드는 하나 이상의 면역조절 도메인을 포함하되, 상기 하나 이상의 면역조절 도메인은:
A) 제1 폴리펩타이드의 C-말단에;
B) 제2 폴리펩타이드의 N-말단에;
C) 제2 폴리펩타이드의 C-말단에; 또는
D) 제1 폴리펩타이드의 C-말단에 그리고 제2 폴리펩타이드의 N-말단에 있고,
상기 하나 이상의 면역조절 도메인 중 적어도 하나는 양상 1 내지 7 중 어느 하나의 변이체 IL2 폴리펩타이드이고, 그리고
상기 다량체 폴리펩타이드는 IL-2 수용체(IL2R) 폴리펩타이드에 대해 서열번호 1에 제시된 상기 IL2 아미노산 서열을 포함하는 대조군 다량체 폴리펩타이드의 결합 친화도에 비해, 도 3A 내지 도 3c에 도시된 아미노산 서열을 갖는 알파, 베타 및 감마를 포함하는 IL2R에 대해 감소된 결합 친화도를 나타내는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 9. 양상 8에 있어서,
a) 상기 제1 폴리펩타이드는, N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 상기 에피토프;
ii) 상기 제1 MHC 폴리펩타이드; 및
iii) 상기 변이체 IL2 폴리펩타이드를 포함하고; 그리고
b) 상기 제2 폴리펩타이드는 N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 제2 MHC 폴리펩타이드; 및
ii) 상기 Ig Fc 폴리펩타이드
를 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 10. 양상 8에 있어서,
a) 상기 제1 폴리펩타이드는, N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 상기 에피토프; 및
ii) 상기 제1 MHC 폴리펩타이드를 포함하고; 그리고
b) 상기 제2 폴리펩타이드는 N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 상기 변이체 IL2 폴리펩타이드;
ii) 상기 제2 MHC 폴리펩타이드; 및
iii) 상기 Ig Fc 폴리펩타이드
를 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 11. 양상 8에 있어서,
a) 상기 제1 폴리펩타이드는, N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 상기 에피토프; 및
ii) 상기 제1 MHC 폴리펩타이드를 포함하고; 그리고
b) 상기 제2 폴리펩타이드는 N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 제2 MHC 폴리펩타이드; 및
ii) 상기 변이체 IL2 폴리펩타이드를 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 12. 양상 8에 있어서,
a) 상기 제1 폴리펩타이드는 N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 상기 에피토프; 및
ii) 상기 제1 MHC 폴리펩타이드를 포함하고; 그리고
b) 제2 폴리펩타이드는 N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 상기 변이체 IL2 폴리펩타이드; 및
ii) 상기 제2 MHC 폴리펩타이드를 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 13. 양상 8에 있어서,
a) 상기 제1 폴리펩타이드는, N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 상기 에피토프;
ii) 상기 제1 MHC 폴리펩타이드; 및
iii) 상기 변이체 IL2 폴리펩타이드를 포함하고; 그리고
b) 상기 제2 폴리펩타이드는 상기 제2 MHC 폴리펩타이드를 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 14. 양상 8에 있어서, 상기 비-Ig 스캐폴드는 XTEN 폴리펩타이드, 트랜스페린 폴리펩타이드, 엘라스틴-유사 폴리펩타이드, 실크-유사 폴리펩타이드, 또는 실크-엘라스틴-유사 폴리펩타이드인, 다량체 폴리펩타이드.
양상 15. 양상 8 내지 14 중 어느 하나에 있어서, 상기 제1 MHC 폴리펩타이드는 β2-마이크로글로불린 폴리펩타이드이고; 그리고 상기 제2 MHC 폴리펩타이드는 MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드인, 다량체 폴리펩타이드.
양상 16. 양상 15에 있어서, 상기 β2-마이크로글로불린 폴리펩타이드는 도면 6에 제시된 아미노산 서열 중 하나에 대해 적어도 85%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 17. 양상 15에 있어서, 상기 MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 HLA-A, HLA-B 또는 HLA-C 중쇄인, 다량체 폴리펩타이드.
양상 18. 양상 15에 있어서, 상기 MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 도 5a 내지 도 5c 중 하나에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 85%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 19. 양상 8 내지 14 중 어느 하나에 있어서, 상기 제1 MHC 폴리펩타이드는 MHC 클래스 II 알파쇄 폴리펩타이드이고; 그리고 상기 제2 MHC 폴리펩타이드는 MHC 클래스 II 베타쇄 폴리펩타이드인, 다량체 폴리펩타이드.
양상 20. 양상 8 내지 19 중 어느 하나에 있어서, 상기 에피토프는 T-세포 에피토프인, 다량체 폴리펩타이드.
양상 21. 양상 8 내지 13 및 15 내지 20 중 어느 하나에 있어서, 다량체 폴리펩타이드는 Fc 폴리펩타이드를 포함하고, 상기 Ig Fc 폴리펩타이드는 IgG1 Fc 폴리펩타이드, IgG2 Fc 폴리펩타이드, IgG3 Fc 폴리펩타이드, IgG4 Fc 폴리펩타이드, IgA Fc 폴리펩타이드 또는 IgM Fc 폴리펩타이드인, 다량체 폴리펩타이드.
양상 22. 양상 21에 있어서, 상기 Ig Fc 폴리펩타이드는 도 4a 내지 도 4c에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 85%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 23. 양상 8 내지 22 중 어느 하나에 있어서, 상기 제1 폴리펩타이드와 상기 제2 폴리펩타이드는 비공유 결합된, 다량체 폴리펩타이드.
양상 24. 양상 8 내지 22 중 어느 하나에 있어서, 상기 제1 폴리펩타이드와 상기 제2 폴리펩타이드는 서로 공유 결합된, 다량체 폴리펩타이드.
양상 25. 양상 24에 있어서, 상기 공유 결합은 이황화 결합을 통하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 26. 양상 25에 있어서, 상기 제1 MHC 폴리펩타이드 또는 상기 에피토프와 상기 제1 MHC 폴리펩타이드 사이의 링커는 제1 Cys 잔기를 제공하는 아미노산 치환을 포함하고, 상기 제2 MHC 폴리펩타이드는 제2 Cys 잔기를 제공하는 아미노산 치환을 포함하며, 상기 이황화 결합은 제1 Cys과 제2 Cys 잔기 사이에 있는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 27. 양상 8 내지 26 중 어느 하나에 있어서, 상기 에피토프와 상기 제1 MHC 폴리펩타이드 사이에 개재된 링커를 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 28. 양상 8 내지 26 중 어느 하나에 있어서, 상기 MHC 폴리펩타이드와 상기 면역조절 폴리펩타이드 사이에 개재된 링커를 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 29. 양상 8 내지 28 중 어느 하나에 있어서, 2개의 변이체 IL2 폴리펩타이드를 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 30. 양상 8 내지 28 중 어느 하나에 있어서, 3개의 변이체 IL2 폴리펩타이드를 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 31. 양상 29 또는 양상 30에 있어서, 상기 2 또는 3개의 변이체 IL2 폴리펩타이드는 일렬이되, 상기 다량체 폴리펩타이드는 상기 변이체 IL2 폴리펩타이드 사이에 링커를 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 32. 양상 8 또는 양상 28 중 어느 하나에 있어서, 상기 변이체 IL2는 E15, H16, D20, F42, Y45 및 Q126 중 하나 이상의 치환을 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 33. 양상 8 또는 양상 28 중 어느 하나에 있어서, 상기 변이체 IL2는 F42의 Ala, Gly, Val, Ile 또는 Leu으로의 치환을 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 34. 양상 33에 있어서, 상기 변이체 IL2는 F42 및 D20의 치환을 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 35. 양상 33에 있어서, 상기 변이체 IL2는 F42 및 H16의 치환을 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 36. 양상 33에 있어서, 상기 변이체 IL2는 F42, D20 및 Y45의 치환을 포함하거나; 또는 상기 변이체 IL-2는 F42, H16 및 Q126의 치환을 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 37. 재조합 폴리펩타이드를 암호화하는 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 핵산으로서,
i) 상기 재조합 폴리펩타이드는 N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
a) 에피토프;
b) 제1 주조직 적합 복합체(MHC) 폴리펩타이드;
c) 면역조절 폴리펩타이드;
d) 단백질 분해로 절단 가능한 링커 또는 리보솜 스키핑 신호;
e) 제2 MHC 폴리펩타이드; 및
f) 면역글로불린(Ig) Fc 폴리펩타이드를 포함하되;
상기 면역조절 폴리펩타이드는 양상 1 내지 7 중 어느 하나의 변이체 면역조절 폴리펩타이드이거나, 또는
ii) 상기 재조합 폴리펩타이드는 N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
a) 에피토프;
b) 제1 MHC 폴리펩타이드;
c) 단백질 분해로 절단 가능한 링커 또는 리보솜 스키핑 신호;
d) 면역조절 폴리펩타이드
e) 제2 MHC 폴리펩타이드; 및
f) Ig Fc 폴리펩타이드를 포함하되,
상기 면역조절 폴리펩타이드는 양상 1 내지 7 중 어느 하나의 변이체 면역조절 폴리펩타이드인, 핵산.
양상 38. 양상 37에 있어서, 상기 제1 MHC 폴리펩타이드는 β2-마이크로글로불린 폴리펩타이드이고; 그리고 상기 제2 MHC 폴리펩타이드는 MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드인, 핵산.
양상 39. 양상 38에 있어서, 상기 β2-마이크로글로불린 폴리펩타이드는 도면 6에 제시된 아미노산 서열 중 하나에 대해 적어도 85%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는, 핵산.
양상 40. 양상 38에 있어서, 상기 MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 HLA-A, HLA-B 또는 HLA-C 중쇄인, 핵산.
양상 41. 양상 40에 있어서, 상기 MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 도 5a 내지 도 5c 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 85%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 42. 양상 37에 있어서, 상기 제1 MHC 폴리펩타이드는 MHC 클래스 II 알파쇄 폴리펩타이드이고; 그리고 상기 제2 MHC 폴리펩타이드는 MHC 클래스 II 베타쇄 폴리펩타이드인, 핵산.
양상 43. 양상 37 내지 43 중 어느 하나에 있어서, 상기 에피토프는 T-세포 에피토프인, 핵산.
양상 44. 양상 37 내지 43에 있어서, 상기 Ig Fc 폴리펩타이드는 IgG1 Fc 폴리펩타이드, IgG2 Fc 폴리펩타이드, IgG3 Fc 폴리펩타이드, IgG4 Fc 폴리펩타이드, IgA Fc 폴리펩타이드, 또는 IgM Fc 폴리펩타이드인, 핵산.
양상 45. 양상 44에 있어서, 상기 Ig Fc 폴리펩타이드는 도 4a 내지 도 4c에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 85%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는, 핵산.
양상 46. 양상 37 내지 45 중 어느 하나에 있어서, 상기 변이체 IL2 면역조절 폴리펩타이드는 E15, H16, D20, F42, Y45 및 Q126 중 하나 이상의 치환을 포함하는, 핵산.
양상 47. 양상 37 내지 46 중 어느 하나에 있어서, 상기 다량체 폴리펩타이드는 CD7, CD30L, CD40, CD70, CD83, HLA-G, MICA, MICB, HVEM, 림포톡신 베타 수용체, 3/TR6, ILT3, ILT4 및 HVEM으로부터 선택되는 제2 면역조절 폴리펩타이드를 포함하는, 핵산.
양상 48. 양상 37 내지 47 중 어느 하나에 있어서, 상기 단백질 분해로 절단 가능한 링커 또는 리보솜 스키핑 신호는:
a) LEVLFQGP(서열번호 88);
b) ENLYTQS(서열번호 90);
c) 퓨린 절단 부위;
d) LVPR(서열번호 89);
e) GSGATNFSLLKQAGDVEENPGP(서열번호 91);
f) GSGEGRGSLLTCGDVEENPGP(서열번호 92);
g) GSGQCTNYALLKLAGDVESNPGP(서열번호 93); 및
h) GSGVKQTLNFDLLKLAGDVESNPGP(서열번호 94)로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하는, 핵산.
양상 49. 양상 31에 있어서, 상기 재조합 폴리펩타이드는 N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
a) 제1 리더 펩타이드;
b) 에피토프;
c) 제1 MHC 폴리펩타이드;
d) 면역조절 폴리펩타이드;
e) 단백질 분해로 절단 가능한 링커 또는 리보솜 스키핑 신호;
f) 제2 리더 펩타이드;
g) 제2 MHC 폴리펩타이드; 및
h) 면역글로불린(Ig) Fc 폴리펩타이드를 포함하는, 핵산.
양상 50. 양상 49에 있어서, 상기 제1 리더 펩타이드 및 제2 리더 펩타이드는 β2-M 리더 펩타이드인, 핵산.
양상 51. 양상 37 내지 50 중 어느 하나에 있어서, 상기 뉴클레오타이드 서열은 전사 제어 요소에 작동 가능하게 연결된, 핵산.
양상 52. 양상 51에 있어서, 상기 전사 제어 요소는 진핵 세포에서 기능성인 프로모터인, 핵산.
양상 53. 양상 37 내지 52 중 어느 하나에 있어서, 상기 제1 MHC 폴리펩타이드 또는 상기 에피토프와 상기 제1 MHC 폴리펩타이드 사이의 링커는 제1 Cys 잔기를 제공하는 아미노산 치환을 포함하고, 제2 MHC 폴리펩타이드는 제2 Cys 잔기를 제공하는 아미노산 치환을 포함하며, 상기 제1 Cys과 상기 제2 Cys 잔기는 제1 MHC 폴리펩타이드와 제2 MHC 폴리펩타이드 사이에 이황화 결합을 제공하는, 핵산.
양상 54. 양상 37 내지 52 중 어느 하나의 핵산을 포함하는 재조합 발현 벡터.
양상 55. 양상 54에 있어서, 상기 벡터는 바이러스 벡터 또는 비-바이러스 벡터인, 재조합 발현 벡터.
양상 56. 양상 48 내지 55의 재조합 발현 벡터에 의해 유전자 변형된 숙주 세포.
양상 57. 양상 56에 있어서, 상기 숙주 세포는 시험관내인, 숙주 세포.
양상 58. 양상 57에 있어서, 상기 세포가 내인성 MHC β2-마이크로글로불린 폴리펩타이드를 생산하지 않도록 상기 숙주 세포는 유전자 변형된, 숙주 세포.
양상 59. 조성물로서,
a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 에피토프;
ii) 제1 MHC 폴리펩타이드; 및
iii) 면역조절 도메인
을 포함하는 제1 폴리펩타이드를 암호화하는 뉴클레오타이드 서열을 포함하되,
상기 면역조절 도메인은 양상 1 내지 7 중 어느 하나의 변이체 IL2 폴리펩타이드인, 상기 제1 핵산; 그리고
b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 제2 MHC 폴리펩타이드; 및
ii) Ig Fc 폴리펩타이드
를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 암호화하는 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 제1 핵산을 포함하는, 조성물.
양상 60. 조성물로서,
a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 에피토프; 및
ii) 제1 MHC 폴리펩타이드
를 포함하는 제1 폴리펩타이드를 암호화하는 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 제1 핵산; 및
b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 면역조절 도메인으로서, 상기 면역조절 도메인은 양상 1 내지 7 중 어느 하나의 변이체 IL2 폴리펩타이드인, 상기 면역조절 도메인;
ii) 제2 MHC 폴리펩타이드; 및
iii) Ig Fc 폴리펩타이드
를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 암호화하는 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 제1 핵산을 포함하는, 조성물.
양상 61. 양상 59 또는 양상 60에 있어서, 상기 제1 및/또는 제2 핵산은 재조합 발현 벡터에 존재하는, 조성물.
양상 62. 양상 59 내지 61 중 어느 하나의 조성물에 의해 유전자 변형된 숙주 세포.
양상 63. 양상 8 내지 36 중 어느 하나의 다량체 폴리펩타이드의 생산 방법으로서,
a) 상기 숙주 세포가 상기 다량체 폴리펩타이드를 합성하는 조건 하에 배양 배지 내 시험관내에서 양상 56 내지 58 및 62의 숙주 세포를 배양시키는 단계; 및
b) 상기 숙주 세포로부터 그리고/또는 상기 배양 배지로부터 상기 다량체 폴리펩타이드를 단리시키는 단계를 포함하는, 방법.
양상 64. 양상 63에 있어서, 상기 제2 폴리펩타이드는 친화도 태그를 포함하되, 상기 단리시키는 단계는 세포에 의해 생산된 다량체 폴리펩타이드를 친화도 태그에 대한 결합 상대와 접촉시키는 것을 포함하고, 결합 상대가 고정됨으로써 다량체 폴리펩타이드를 고정시키는, 방법.
양상 65. 양상 64에 있어서, 상기 고정된 다량체 폴리펩타이드를 포함하는, 방법.
양상 66. 에피토프-특이적 T 세포를 선택적으로 활성화시키는 방법으로서, 상기 방법은 상기 T 세포를 양상 8 내지 36 중 어느 하나의 다량체 폴리펩타이드와 접촉시키는 단계를 포함하되, 상기 접촉시키는 단계는 상기 에피토프-특이적 T 세포를 선택적으로 활성화시키는, 방법.
양상 67. 양상 66에 있어서, 상기 접촉시키는 단계는 시험관내에서인, 방법.
양상 68. 양상 66에 있어서, 상기 접촉시키는 단계는 생체내에서인, 방법.
양상 69. 양상 66에 있어서, 상기 에피토프는 암-관련 에피토프이며, 상기 투여하는 단계는 암 관련 에피토프에 특이적인 T 세포의 활성을 선택적으로 증가시키는, 방법.
양상 70. 개체에서 암을 치료하는 방법으로서, 상기 개체에게 유효량의,
a) 양상 8 내지 36 중 어느 하나의 다량체 폴리펩타이드; 또는
b) 양상 8 내지 36 중 어느 하나의 다량체 폴리펩타이드를 암호화하는 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 하나 이상의 재조합 발현 벡터; 또는
c) 양상 8 내지 36 중 어느 하나의 다량체 폴리펩타이드를 암호화하는 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 하나 이상의 mRNA를 투여하는 단계를 포함하되,
상기 에피토프는 암-관련 에피토프이고, 상기 투여하는 단계는 개체에서 암 에피토프-특이적 T 세포를 선택적으로 활성화시키는 데 효과적인, 방법.
양상 71. 양상 70에 있어서, 상기 투여하는 단계는 피하인, 방법.
양상 72. 양상 70에 있어서, 상기 투여하는 단계는 정맥내인, 방법.
양상 73. 양상 70에 있어서, 상기 투여하는 단계는 종양주변인, 방법.
양상 74. 양상 70에 있어서, 상기 투여하는 단계는 전신인, 방법.
양상 75. 양상 70에 있어서, 상기 투여하는 단계는 치료 부위에 대해 원위인, 방법.
양상 76. 양상 70에 있어서, 상기 투여하는 단계는 국소인, 방법.
양상 77. 양상 70에 있어서, 상기 투여하는 단계는 치료 부위에서 또는 치료 부위 근처에서인, 방법.
양상 78. 조성물로서,
a) 양상 8 내지 36 중 어느 하나의 다량체 폴리펩타이드; 및
b) 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 포함하는, 조성물.
양상 79. 조성물로서,
a) 양상 37 내지 53 중 어느 하나의 핵산 또는 양상 54 또는 양상 55의 재조합 발현 벡터; 및
b) 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 포함하는, 조성물.
양상 80. 다량체 폴리펩타이드로서,
a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 에피토프;
ii) 도 34A에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 β2-마이크로글로불린(β2M) 폴리펩타이드
를 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및
b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 양상 1 내지 7 중 어느 하나의 변이체 IL-2 폴리펩타이드;
ii) 도 34C에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 주조직 적합 복합체(MHC) 중쇄 폴리펩타이드; 및
iii) N297A, L234A, L235A, L234F, L235E 및 P331S(도 33A에 도시된 아미노산 넘버링에 기반하여 각각 N77A, L14A, L15A, L14F, L15E 및 P111S)로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하는 IgG1 Fc 폴리펩타이드
를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 81. 양상 80에 있어서, 상기 IgG1 Fc 폴리펩타이드는 N297A 치환(도 33A에 도시된 아미노산 넘버링에 기반하여 N77A)을 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 82. 양상 80에 있어서, 상기 IgG1 Fc 폴리펩타이드는 L234A 치환 및 L235A 치환(도 33A에 도시된 아미노산 넘버링에 기반하여 L14A 및 L15A)을 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 83. 양상 80에 있어서, 상기 IgG1 Fc 폴리펩타이드는 L234F 치환 및 L235E 치환(도 33A에 도시된 아미노산 넘버링에 기반하여 L14F 및 L15E)을 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 84. 양상 80에 있어서, 상기 IgG1 Fc 폴리펩타이드는 L234F 치환, L235E 치환, 및 P331S(도 33A에 도시된 아미노산 넘버링에 기반하여 L14F, L15E 및 P111S 치환)을 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 85. 양상 80 내지 84 중 어느 하나에 있어서, 상기 제2 폴리펩타이드는 상기 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 2개의 복제물을 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 86. 양상 80 내지 85 중 어느 하나에 있어서, 상기 제1 폴리펩타이드는 상기 에피토프와 β2M 폴리펩타이드 사이에 펩타이드 링커를 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 87. 양상 80 내지 86 중 어느 하나에 있어서, 상기 제2 폴리펩타이드는,
a) 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 제1 복제물과 상기 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 제2 복제물 사이;
b) 상기 변이체 IL-2 폴리펩타이드와 상기 MHC 중쇄 폴리펩타이드 사이; 및
c) 상기 MHC 중쇄 폴리펩타이드와 상기 IgG1 Fc 폴리펩타이드 사이
중 하나 이상에 펩타이드 링커를 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 88. 양상 86 또는 양상 87에 있어서, 상기 펩타이드 링커는 (GGGGS)3, (GGGGS)4 및 AAAGG로부터 선택되는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 89. 다량체 폴리펩타이드로서,
a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 에피토프;
ii) 도 34A에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 β2-마이크로글로불린 폴리펩타이드
를 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및
b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
ii) 도 34B에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드;
ii) 도 34C에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 주조직 적합 복합체(MHC) 중쇄 폴리펩타이드; 및
iii) N297A, L234A, L235A, L234F, L235E 및 P331S(도 33A에 도시된 아미노산 넘버링에 기반하여 각각 N77A, L14A, L15A, L14F, L15E 및 P111S)로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하는 IgG1 Fc 폴리펩타이드
를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 90. 양상 89에 있어서, 상기 IgG1 Fc 폴리펩타이드는 N297A 치환 (도 33A에 도시된 아미노산 넘버링에 기반하여 N77A)을 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 91. 양상 89에 있어서, 상기 IgG1 Fc 폴리펩타이드는 L234A 치환 및 L235A 치환(도 33A에 도시된 아미노산 넘버링에 기반하여 L14A 및 L15A)을 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 92. 양상 89에 있어서, 상기 IgG1 Fc 폴리펩타이드는 L234F 치환 및 L235E 치환(도 33A에 도시된 아미노산 넘버링에 기반하여 L14F 및 L15E)을 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 93. 양상 89에 있어서, 상기 IgG1 Fc 폴리펩타이드는 L234F 치환, L235E 치환, 및 P331S(도 33A에 도시된 아미노산 넘버링에 기반하여 L14F, L15E 및 P111S 치환)을 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 94. 양상 89 내지 93 중 어느 하나에 있어서, 상기 제2 폴리펩타이드는 상기 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 2개의 복제물을 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 95. 양상 89 내지 94 중 어느 하나에 있어서, 상기 제1 폴리펩타이드는 상기 에피토프와 β2M 폴리펩타이드 사이에 펩타이드 링커를 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 96. 양상 89 내지 95 중 어느 하나에 있어서, 상기 제2 폴리펩타이드는,
a) 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 제1 복제물과 상기 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 제2 복제물 사이;
b) 상기 변이체 IL-2 폴리펩타이드와 상기 MHC 중쇄 폴리펩타이드 사이; 및
c) 상기 MHC 중쇄 폴리펩타이드와 상기 IgG1 Fc 폴리펩타이드 사이
중 하나 이상에 펩타이드 링커를 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 97. 양상 95 또는 양상 96에 있어서, 상기 펩타이드 링커는 (GGGGS)3, (GGGGS)4 및 AAAGG로부터 선택되는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 98. 다량체 폴리펩타이드로서,
a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 아미노산 서열 YMLDLQPETT(서열번호 77)를 포함하는 에피토프;
ii) 도 34A에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 β2-마이크로글로불린 폴리펩타이드
를 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및
b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 도 34B에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드;
ii) 도 34C에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 주조직 적합 복합체(MHC) 중쇄 폴리펩타이드; 및
iii) 도 33A, 도 33B, 도 33C 또는 도 33D에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 IgG1 Fc 폴리펩타이드
를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함하는 다량체 폴리펩타이드.
양상 99. 양상 98에 있어서, 상기 IgG1 Fc 폴리펩타이드는 도 33B에 도시된 아미노산 서열을 포함하는, 다샹체 폴리펩타이드.
양상 100. 양상 98에 있어서, 상기 IgG1 Fc 폴리펩타이드는 도 33C에 도시된 아미노산 서열을 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 101. 양상 98에 있어서, 상기 IgG1 Fc 폴리펩타이드는 도 33D에 도시된 아미노산 서열을 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 102. 양상 98 내지 101 중 어느 하나에 있어서, 상기 제2 폴리펩타이드는 상기 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 2개의 복제물을 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 103. 양상 98 내지 102 중 어느 하나에 있어서, 상기 제1 폴리펩타이드는 상기 에피토프와 상기 β2M 폴리펩타이드 사이에 펩타이드 링커를 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 104. 양상 98 내지 103 중 어느 하나에 있어서, 상기 제2 폴리펩타이드는,
a) 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 제1 복제물과 상기 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 제2 복제물 사이;
b) 상기 변이체 IL-2 폴리펩타이드와 상기 MHC 중쇄 폴리펩타이드 사이; 및
c) 상기 MHC 중쇄 폴리펩타이드와 상기 IgG1 Fc 폴리펩타이드 사이
중 하나 이상에 펩타이드 링커를 포함하는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 105. 양상 103 또는 양상 104에 있어서, 상기 펩타이드 링커는 (GGGGS)3, (GGGGS)4 및 AAAGG로부터 선택되는, 다량체 폴리펩타이드.
양상 106. 다량체 폴리펩타이드로서,
a) 도 31에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 제1 폴리펩타이드;
b) 도 22에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 제2 폴리펩타이드
를 포함하는 다량체 폴리펩타이드.
양상 107. 다량체 폴리펩타이드로서,
a) 도 31에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 제1 폴리펩타이드;
b) 도 25에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 제2 폴리펩타이드
를 포함하는 다량체 폴리펩타이드.
양상 108. 다량체 폴리펩타이드로서,
a) 도 31에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 제1 폴리펩타이드;
b) 도 28에 도시된 아미노산 서열을 포함하는 제2 폴리펩타이드
를 포함하는 다량체 폴리펩타이드.
양상 109. 약제학적 조성물로서,
a) 양상 80 내지 108 중 어느 하나에 따른 다량체 폴리펩타이드; 및
b) 약제학적으로 허용 가능한 부형제
를 포함하는, 약제학적 조성물.
양상 110. 양상 80 내지 108 중 어느 하나에 따른 다량체 폴리펩타이드의 제1 및/또는 제2 폴리펩타이드를 암호화하는 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 하나 이상의 핵산.
양상 111. 양상 110에 있어서, 상기 핵산(들)은 재조합 발현 벡터에 존재하는, 하나 이상의 핵산.
양상 112. 에피토프-특이적 T 세포를 선택적으로 활성화시키는 방법으로서, 상기 T 세포를 양상 80 내지 108 중 어느 하나의 다량체 폴리펩타이드와 접촉시키는 단계를 포함하되, 상기 접촉시키는 단계는 상기 에피토프-특이적 T 세포를 선택적으로 활성화시키는, 방법.
양상 113. 양상 112에 있어서, 상기 접촉시키는 단계는 시험관내에서인, 방법.
양상 114. 양상 112에 있어서, 상기 접촉시키는 단계는 생체내에서인, 방법.
양상 115. 개체에게 유효량의:
a) 양상 80 내지 108 중 어느 하나의 다량체 폴리펩타이드; 또는
b) 양상 80 내지 108 중 어느 하나의 다량체 폴리펩타이드를 암호화하는 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 하나 이상의 재조합 발현 벡터; 또는
c) 양상 80 내지 108 중 어느 하나의 다량체 폴리펩타이드를 암호화하는 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 하나 이상의 mRNA
를 투여하는 단계를 포함하되,
상기 투여하는 단계는 상기 개체에서 에피토프에 T 세포 반응을 유도하는, 방법.
양상 116. 양상 115에 있어서, 상기 투여하는 단계는 피하인, 방법.
양상 117. 양상 115에 있어서, 상기 투여하는 단계는 정맥내인, 방법.
양상 118. 양상 115에 있어서, 상기 투여하는 단계는 전신인, 방법.
양상 119. 양상 115에 있어서, 상기 투여하는 단계는 근육내인, 방법.
양상 120. 양상 115에 있어서, 상기 투여하는 단계는 치료 부위에 대해 원위인, 방법.
양상 121. 양상 115에 있어서, 상기 투여하는 단계는 국소인, 방법.
양상 122. 양상 115에 있어서, 상기 투여하는 단계는 치료 부위에서 또는 치료 부위 근처에서인, 방법.
양상 A. 면역 반응의 조절이 필요한 개체의 면역 반응을 조절하는 방법으로서, 상기 개체에 다량체 폴리펩타이드 및 면역관문 저해제를 투여하는 단계를 포함하되,
상기 다량체 폴리펩타이드는,
a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 에피토프;
ii) 제1 주조직 적합 복합체(MHC) 폴리펩타이드
를 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및
b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 제2 MHC 폴리펩타이드; 및
ii) 선택적으로 면역글로불린(Ig) Fc 폴리펩타이드 또는 비-Ig 스캐폴드
를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함하고,
상기 다량체 폴리펩타이드는 하나 이상의 면역조절 폴리펩타이드를 포함하되, 상기 하나 이상의 면역조절 폴리펩타이드는,
A) 제1 폴리펩타이드의 C-말단에;
B) 제2 폴리펩타이드의 N-말단에;
C) 제2 폴리펩타이드의 C-말단에; 또는
D) 제1 폴리펩타이드의 C-말단에 그리고 제2 폴리펩타이드의 N-말단에 있고; 그리고
상기 투여하는 단계는 개체에서 면역 반응을 조절하는, 면역 반응을 조절하는 방법.
양상 B. 개체에게 다량체 폴리펩타이드 및 면역관문 저해제를 투여하는 단계를 포함하는 치료 방법으로서,
상기 다량체 폴리펩타이드는,
a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 에피토프;
ii) 제1 주조직 적합 복합체(MHC) 폴리펩타이드
를 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및
b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 제2 MHC 폴리펩타이드; 및
ii) 선택적으로 면역글로불린(Ig) Fc 폴리펩타이드 또는 비-Ig 스캐폴드
를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함하고,
상기 다량체 폴리펩타이드는 하나 이상의 면역조절 폴리펩타이드를 포함하되, 상기 하나 이상의 면역조절 폴리펩타이드는,
A) 제1 폴리펩타이드의 C-말단에;
B) 제2 폴리펩타이드의 N-말단에;
C) 제2 폴리펩타이드의 C-말단에; 또는
D) 제1 폴리펩타이드의 C-말단에 그리고 제2 폴리펩타이드의 N-말단에 있고; 그리고
상기 투여하는 단계는 상기 개체를 치료하는, 치료 방법.
양상 C. 개체에서 암을 치료하는 방법으로서, 상기 개체에게 다량체 폴리펩타이드 및 면역관문 저해제를 투여하는 단계를 포함하되,
상기 다량체 폴리펩타이드는,
a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 에피토프;
ii) 제1 주조직 적합 복합체(MHC) 폴리펩타이드
를 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및
b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 제2 MHC 폴리펩타이드; 및
ii) 선택적으로 면역글로불린(Ig) Fc 폴리펩타이드 또는 비-Ig 스캐폴드
를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함하고,
상기 다량체 폴리펩타이드는 하나 이상의 면역조절 폴리펩타이드를 포함하되, 상기 하나 이상의 면역조절 폴리펩타이드는,
A) 제1 폴리펩타이드의 C-말단에;
B) 제2 폴리펩타이드의 N-말단에;
C) 제2 폴리펩타이드의 C-말단에; 또는
D) 제1 폴리펩타이드의 C-말단에 그리고 제2 폴리펩타이드의 N-말단에 있고; 그리고
상기 투여하는 단계는 상기 개체에서 암을 치료하는, 암을 치료하는 방법.
양상 D. 개체에 다량체 폴리펩타이드를 투여하는 단계를 포함하는 치료 방법으로서, 상기 개체는 면역관문 저해제에 의한 치료를 받되,
상기 다량체 폴리펩타이드는,
a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 에피토프;
ii) 제1 주조직 적합 복합체(MHC) 폴리펩타이드
를 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및
b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 제2 MHC 폴리펩타이드; 및
ii) 선택적으로 면역글로불린(Ig) Fc 폴리펩타이드 또는 비-Ig 스캐폴드
를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함하고,
상기 다량체 폴리펩타이드는 하나 이상의 면역조절 폴리펩타이드를 포함하되, 상기 하나 이상의 면역조절 폴리펩타이드는,
A) 제1 폴리펩타이드의 C-말단에;
B) 제2 폴리펩타이드의 N-말단에;
C) 제2 폴리펩타이드의 C-말단에; 또는
D) 제1 폴리펩타이드의 C-말단에 그리고 제2 폴리펩타이드의 N-말단에 있고; 그리고
상기 투여하는 단계는 상기 개체를 치료하는, 치료 방법.
양상 E. 양상 A 내지 D 중 어느 하나에 있어서, 상기 다량체 폴리펩타이드는,
a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 에피토프;
ii) 제1 MHC 폴리펩타이드; 및
iii) 면역조절 도메인
를 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및
b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 제2 MHC 폴리펩타이드; 및
ii) Ig Fc 폴리펩타이드
를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함하는, 방법.
양상 F. 양상 A 내지 D 중 어느 하나에 있어서, 상기 다량체 폴리펩타이드는,
a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 에피토프; 및
ii) 제1 MHC 폴리펩타이드
를 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및
b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 면역조절 도메인;
iii) 제2 MHC 폴리펩타이드; 및
ii) 면역글로불린(Ig) Fc 폴리펩타이드
를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함하는, 방법.
양상 G. 양상 A 내지 D 중 어느 하나에 있어서, 상기 다량체 폴리펩타이드는,
a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 에피토프; 및
ii) 제1 MHC 폴리펩타이드
를 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및
b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 제2 MHC 폴리펩타이드; 및
ii) Ig Fc 폴리펩타이드; 및
iii) 면역조절 도메인
를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함하는, 방법.
양상 H. 양상 A 내지 D 중 어느 하나에 있어서, 상기 다량체 폴리펩타이드는,
a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 에피토프; 및
ii) 제1 MHC 폴리펩타이드
를 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및
b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 제2 MHC 폴리펩타이드; 및
ii) 면역조절 도메인
를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함하는, 방법.
양상 I. 양상 A 내지 D 중 어느 하나에 있어서, 상기 다량체 폴리펩타이드는,
a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 에피토프; 및
ii) 제1 MHC 폴리펩타이드
를 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및
b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 면역조절 도메인; 및
ii) 제2 MHC 폴리펩타이드
를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함하는, 방법.
양상 J. 양상 A 내지 D 중 어느 하나에 있어서, 상기 다량체 폴리펩타이드는,
a) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 에피토프;
ii) 제1 MHC 폴리펩타이드; 및
iii) 면역조절 도메인
를 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및
b) N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로,
i) 제2 MHC 폴리펩타이드
를 포함하는 제2 폴리펩타이드를 포함하는, 방법.
양상 K. 양상 A 내지 D 중 어느 하나에 있어서, 상기 다량체 폴리펩타이드의 비-Ig 스캐폴드는 XTEN 폴리펩타이드, 트랜스페린 폴리펩타이드, Fc 수용체 폴리펩타이드, 엘라스틴-유사 폴리펩타이드, 실크-유사 폴리펩타이드 또는 실크-엘라스틴-유사 폴리펩타이드인, 방법.
양상 L. 양상 A 내지 K 중 어느 하나에 있어서, 상기 다량체 폴리펩타이드의 상기 제1 MHC 폴리펩타이드는 β2-마이크로글로불린 폴리펩타이드이고; 그리고 상기 제2 MHC 폴리펩타이드는 MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드인, 방법.
양상 M. 양상 L에 있어서, 상기 다량체 폴리펩타이드의 상기 β2-마이크로글로불린 폴리펩타이드는 도 6에 제시된 아미노산 서열 중 하나에 대해 적어도 85%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는, 방법.
양상 N. 양상 L에 있어서, 상기 다량체 폴리펩타이드의 상기 MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 HLA-A, HLA-B 또는 HLA-C 중쇄인, 방법.
양상 O. 양상 11에 있어서, 상기 MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드는 도 5a 내지 도 5c 중 하나에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 85%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는, 방법.
양상 P. 양상 A 내지 K 중 어느 하나에 있어서, 상기 다량체 폴리펩타이드의 상기 제1 MHC 폴리펩타이드는 MHC 클래스 II 알파쇄 폴리펩타이드이고; 그리고 상기 제2 MHC 폴리펩타이드는 MHC 클래스 II 베타쇄 폴리펩타이드인, 방법.
양상 Q. 양상 A 내지 P 중 어느 하나에 있어서, 상기 에피토프는 T-세포 에피토프인, 방법.
양상 R. 양상 A 내지 J 중 어느 하나에 있어서, 상기 다량체 폴리펩타이드의 상기 다량체 폴리펩타이드는 Fc 폴리펩타이드를 포함하고, 그리고 상기 Ig Fc 폴리펩타이드는 IgG1 Fc 폴리펩타이드, IgG2 Fc 폴리펩타이드, IgG3 Fc 폴리펩타이드, IgG4 Fc 폴리펩타이드, IgA Fc 폴리펩타이드 또는 IgM Fc 폴리펩타이드인, 방법.
양상 S. 양상 R에 있어서, 상기 Ig Fc 폴리펩타이드는 도 4a 내지 도 4c에 도시된 아미노산 서열에 대해 적어도 85%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는, 방법.
양상 T. 양상 A 내지 S 중 어느 하나에 있어서, 상기 다량체 폴리펩타이드의 상기 제1 폴리펩타이드와 상기 제2 폴리펩타이드는 비공유적으로 결합된, 방법.
양상 U. 양상 A 내지 S 중 어느 하나에 있어서, 상기 다량체 폴리펩타이드의 상기 제1 폴리펩타이드와 상기 제2 폴리펩타이드는 공유적으로 결합된, 방법.
양상 V. 양상 U에 있어서, 상기 공유 결합은 이황화 결합을 통하는, 방법.
양상 W. 양상 V에 있어서, 상기 제1 MHC 폴리펩타이드 또는 에피토프와 다량체 폴리펩타이드의 제1 MHC 폴리펩타이드 사이의 링커는 제1 Cys 잔기를 제공하는 아미노산 치환을 포함하고, 상기 다량체 폴리펩타이드의 상기 제2 MHC 폴리펩타이드는 제2 Cys 잔기를 제공하는 아미노산 치환을 포함하며, 이황화 결합은 제1 Cys과 제2 Cys 잔기 사이에 있는, 방법.
양상 X. 양상 A 내지 K 중 어느 하나에 있어서, 상기 다량체 폴리펩타이드는 상기 에피토프와 상기 제1 MHC 폴리펩타이드 사이, 상기 면역조절 폴리펩타이드와 상기 MHC 폴리펩타이드 사이, 또는 상기 MHC 폴리펩타이드와 상기 Ig Fc 사이에 링커를 포함하는, 방법.
양상 Y. 양상 A 내지 K 중 어느 하나에 있어서, 상기 다량체 폴리펩타이드의 상기 면역조절 폴리펩타이드는 4-1BBL 폴리펩타이드, B7-1 폴리펩타이드; B7-2 폴리펩타이드, ICOS-L 폴리펩타이드, OX-40L 폴리펩타이드, CD80 폴리펩타이드, CD86 폴리펩타이드, PD-L1 폴리펩타이드, FasL 폴리펩타이드 및 PD-L2 폴리펩타이드로부터 선택되는, 방법.
양상 Z. 양상 A 내지 Y 중 어느 하나에 있어서, 상기 다량체 폴리펩타이드는 2 이상의 면역조절 폴리펩타이드를 포함하는, 방법.
양상 AA. 양상 Z에 있어서, 상기 2 이상의 면역조절 폴리펩타이드는 일렬인, 방법.
양상 BB. 양상 A 내지 Z 및 AA 중 어느 하나에 있어서, 상기 면역조절 폴리펩타이드는 4-1BBL 폴리펩타이드, CD80 폴리펩타이드, CD86 폴리펩타이드, IL-2 폴리펩타이드, B7-1 폴리펩타이드; B7-2 폴리펩타이드, ICOS-L 폴리펩타이드, OX-40L 폴리펩타이드, CD86 폴리펩타이드, PD-L1 폴리펩타이드, FasL 폴리펩타이드 및 PD-L2 폴리펩타이드로부터 선택되는, 방법.
양상 CC. 양상 A 내지 Z 및 AA 내지 BB 중 어느 하나에 있어서, 상기 면역조절 폴리펩타이드는 면역조절 폴리펩타이드의 천연 유래 형태에 비해 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 변이체 면역조절 폴리펩타이드이며, 상기 변이체 면역조절 폴리펩타이드는 상기 면역조절 폴리펩타이드의 천연 유래 형태에 결합하는 공동 조절 폴리펩타이드에 대해 감소된 결합 친화도를 나타내는, 방법.
양상 DD. 양상 A 내지 Z 및 AA 내지 BB 중 어느 하나에 있어서, 상기 면역조절 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 것에 적어도 85%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드이되, 상기 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 것에 대해 하나 이상의 아미노산 치환을 갖고, 그리고 상기 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 IL2R에 대해 서열번호 1 중 하나에 제시된 IL-2 아미노산 서열의 결합 친화도에 비해, 도 3A 내지 도 3c에 도시된 아미노산 서열을 갖는 알파, 베타 및 감마 폴리펩타이드를 포함하는 IL-2 수용체(IL2R)에 대해 감소된 결합 친화도를 나타내는, 방법.
양상 EE. 양상 DD에 있어서, 상기 변이체 IL-2 폴리펩타이드는 E15, H16, D20, F42, Y45 및 Q126 중 하나 이상의 치환을 포함하는, 방법.
양상 FF. 양상 EE에 있어서, 상기 변이체 IL-2 폴리펩타이드는,
a) F42 및 D20의 치환;
b) F42 및 H16의 치환;
c) F42, D20 및 Y45의 치환; 또는
d) F42, H16 및 Q126의 치환
을 포함하는, 방법.
양상 GG. 양상 A 내지 Z 및 AA 내지 FF 중 어느 하나에 있어서, 상기 다량체 폴리펩타이드는 N297A, L234A, L235A, L234F, L235E 및 P331S로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하는 Ig Fc 폴리펩타이드를 포함하는, 방법.
양상 HH. 양상 GG에 있어서, 상기 Ig Fc 폴리펩타이드는,
a) N297A 치환;
b) L234A 치환 및 L235A 치환;
c) L234F 치환 및 L235E 치환; 또는
d) L234F 치환, L235E 치환 및 P331S 치환을 포함하는, 방법.
양상 II. 양상 A 내지 Z 및 AA 내지 HH 중 어느 하나에 있어서, 상기 다량체 폴리펩타이드의 상기 에피토프는 아미노산 서열 YMLDLQPETT(서열번호 77)를 포함하는, 방법.
양상 JJ. 양상 A 내지 Z 및 AA 내지 HH 중 어느 하나에 있어서, 상기 다량체 폴리펩타이드의 상기 β2-마이크로글로불린 폴리펩타이드는 도 34A에 도시된 아미노산 서열을 포함하는, 방법.
양상 KK. 양상 A 내지 Z 및 AA 내지 JJ 중 어느 하나에 있어서, 상기 다량체 폴리펩타이드의 주조직 적합 복합체(MHC) 중쇄 폴리펩타이드는 도 34C에 도시된 아미노산 서열을 포함하는, 방법.
양상 LL. 양상 A 내지 Z 및 AA 내지 KK 중 어느 하나에 있어서, 상기 면역관문 저해제는 상기 면역관문 저해제에 특이적인 항체인, 방법.
양상 MM. 양상 LL에 있어서, 상기 항체는 단클론성 항체인, 방법.
양상 NN. 양상 KK 또는 양상 LL에 있어서, 상기 항체는 적어도 하나의 인간화된 경쇄 및/또는 중쇄 프레임워크 영역을 포함하는, 방법.
양상 OO. 양상 LL에 있어서, 상기 항체는 Fc 폴리펩타이드를 포함하고, Ig Fc 폴리펩타이드는 IgG1 Fc 폴리펩타이드, IgG2 Fc 폴리펩타이드, IgG3 Fc 폴리펩타이드, IgG4 Fc 폴리펩타이드, IgA Fc 폴리펩타이드, 또는 IgM Fc 폴리펩타이드인, 방법.
양상 PP. 양상 LL에 있어서, 상기 항체는 Fv 단편, 나노바디 또는 Fab 단편인, 방법.
양상 QQ. 양상 LL 내지 PP 중 어느 하나에 있어서, 상기 면역관문 저해제는 CD27, CD28, CD40, CD122, CD96, CD73, CD47, OX40, GITR, CSF1R, JAK, PI3K 델타, PI3K 감마, TAM, 알기나제, CD137(또한 4-1BB로서 알려짐), ICOS, A2AR, B7-H3, B7-H4, BTLA, CTLA-4, LAG3, TIM3, VISTA, CD96, TIGIT, CD122, PD-1, PD-L1 및 PD-L2로부터 선택된 면역관문 저해제에 특이적인 항체인, 방법.
양상 RR. 양상 LL 내지 PP 중 어느 하나에 있어서, 상기 면역관문 저해제는 PD1에 특이적인 항체인, 방법.
양상 SS. 양상 RR에 있어서, 상기 항체는 펨브롤리주맙, 니볼루맙, 피딜리주맙 또는 BMS-39886인, 방법.
양상 TT. 양상 LL 내지 PP 중 어느 하나에 있어서, 상기 면역관문 저해제는 PD-L1에 특이적인 항체인, 방법.
양상 UU. 양상 TT에 있어서, 상기 항체는 두르발루맙, 아테졸리주맙, KN035 또는 아벨루맙인, 방법.
양상 VV. 양상 LL 내지 PP 중 어느 하나에 있어서, 상기 면역관문 저해제는 CTLA4에 특이적인 항체인, 방법.
양상 WW. 양상 VV에 있어서, 상기 항체는 이필리무맙 또는 트레멜리무맙인, 방법.
양상 XX. 양상 A 내지 Z 및 AA 내지 WW 중 어느 하나에 있어서, 상기 다량체 폴리펩타이드 및 상기 면역관문 저해제는 동일한 투여 경로에 의해 투여되는, 방법.
양상 YY. 양상 A 내지 Z 및 AA 내지 WW 중 어느 하나에 있어서, 상기 다량체 폴리펩타이드 및 상기 면역관문 저해제는 상이한 투여 경로에 의해 투여되는, 방법.
양상 ZZ. 양상 A 내지 Z 및 AA 내지 YY 중 어느 하나에 있어서, 상기 다량체 폴리펩타이드는 피하, 정맥내, 종양 주변 및 근육내로부터 선택된 투여 경로에 의해 투여되는, 방법.
양상 AAA. 양상 A 내지 Z 및 AA 내지 YY 중 어느 하나에 있어서, 상기 면역관문 저해제는 피하, 정맥내, 종양 주변 및 근육내로부터 선택된 투여 경로에 의해 투여되는, 방법.
양상 BBB. 양상 A 내지 Z, AA 내지 ZZ 및 AAA 중 어느 하나에 있어서, 상기 개체는 인간인, 방법.
실시예
다음의 실시예는 당업자에게 본 발명을 제조하고 사용하는 방법의 완전한 개시 및 설명을 제공하기 위해 제시하며, 본 발명자들이 그들의 발명으로 간주하는 것의 범주를 제한하는 것으로 의도하지도 또는 이하의 실험이 모든 또는 단지 수행되는 실험이라는 것을 나타내는 것으로 의도되지도 않는다. 사용한 수(예를 들어, 양, 온도 등)에 대한 정확성을 보장하기 위한 노력을 하였지만, 일부 실험 오차 및 편차를 고려하여야 한다. 달리 표시되지 않는 한, 부분은 중량부이며, 분자량은 평균분자량이고, 온도는 섭씨이며, 그리고 압력은 대기압 또는 대기압 근처이다. 표준 약어, 예를 들어, bp, 염기쌍(들); kb, 킬로염기(들); pl, 피코리터(들); s 또는 sec, 초(들); 분, 분(들); h 또는 hr, 시간(들); aa, 아미노산(들); kb, 킬로염기(들); bp, 염기쌍(들); nt, 뉴클레오타이드(들); 킬로달톤(들), kDa; i.m., 근육내(로); i.p., 복강내(로); s.c., 피하(로); 등이 사용될 수 있다.
실시예 1: IL-2/synTac의 생산
일시적으로 형질감염된 포유류 세포에 의해 IL-2/synTac의 생산을 분석하였다. 도 7a에 나타낸 바와 같이, 세포의 일시적 형질감염 후 6 내지 7일에 두 상이한 IL-2/synTac의 생산 수준(㎎/ℓ의 배양 배지)은 90㎎/ℓ 초과였다.
포유류 세포에 의해 생산된 IL-2/synTac을 정제하고 나서, 환원성 및 비환원성 폴리아크릴아마이드 겔 전기영동을 실시하였다. 결과를 도 7b에 도시한다. 크기를 kDa으로 제공한다.
IL-2/synTac을 생성하였는데, 이때 IL-2 폴리펩타이드는 "경쇄"(즉, MHC 클래스 I 경쇄를 포함하는 폴리펩타이드; 예를 들어, β2M)에 또는 "중쇄"(즉, MHC 클래스 I 중쇄를 포함하는 폴리펩타이드)에 있다. IL-2/synTac의 발현 수준 및 안정성을 분석하였다.
포유류 세포에서 synTac을 생산하였다. 도 8a에 나타낸 바와 같이, 중쇄 상에서 IL-2를 포함하는 IL-2/synTac을 경쇄 상에서 IL-2를 포함하는 IL-2/synTac의 수준보다 약 25배 더 높은 수준으로 생산하였다.
포유류 세포에 의해 생산되는 IL-2/synTac에 환원성 및 비환원성 폴리아크릴아마이드 겔 전기영동을 실시하고; 겔을 쿠마씨 블루로 염색하였다. 도 8b에 나타낸 바와 같이, 중쇄 상에서 IL-2를 포함하는 IL-2/synTac은 경쇄 상에서 IL-2를 포함하는 IL-2/synTac보다 더 안정하였다. 크기를 kDa으로 제공한다.
변이체 IL-2를 포함하는 IL-2/synTac의 발현 수준을 평가하였다. 도 9는 IL-2가 야생형(wt)이거나, 또는 F42A, D20K, Q126A, E15A, Y45A 및 H16A의 다양한 조합물을 포함하는 IL-2/syn-Tac의 발현 수준을 도시한다. 발현 수준을 야생형 IL-2에 의한 synTac의 발현 수준에 대한 변화 백분율로서 표현한다.
발현 수준에 대한 IL-2/synTac에서 IL-2의 복제수의 효과를 평가하였다. synTac에서 1개의 복제물(1X), 2개의 복제물(2X) 또는 3개의 복제물(3X)을 포함하는 IL-2/synTac. 다양한 IL-2/synTac을 포유류 세포에서 생산하였고, 발현 수준을 분석하였다. 데이터는 도 10에 도시된다. IL-2의 1 또는 2개의 복제물을 갖는 IL-2/synTac은 유사한 발현 수준을 나타내는 한편, IL-2의 3개의 복제물을 갖는 IL-2/synTac은 더 낮은 발현 수준을 나타내었다. 발현 수준은 IL-2의 단일 복제물에 의한 IL-2/synTac의 발현 수준에 대한 배수 변화로서 표현한다.
실시예 2: IL-2/synTac의 시험관내 활성
T-세포 수용체를 통한 표적화의 최대 특이성을 달성하기 위해, 그의 리간드에 대한 공자극 폴리펩타이드의 친화도는 TCR에 대한 MHC의 친화도보다 더 낮아야만 한다. TCR에 대한 펩타이드/MHC 친화도는 약 10μM일 수 있다.
F42A 및 H16A 치환을 포함하는 변이체 IL-2의 2개의 복제물을 포함하는, IL-2/synTac을 생성하였다. IL-2/synTac에 의해 유도된 공자극 신호전달을 항원-특이적 CD8+ T 세포 및 비-특이적 CD8+ T 세포에 대해 시험하였다. 항원-특이적 CD8+ T 세포 및 비-특이적 CD8+ T 세포를 다양한 농도의 IL-2/synTac과 접촉시켰다.
도 11에 나타낸 바와 같이, IL-2/synTac은 비-특이적 CD8+ T 세포에서보다 훨씬 더 낮은 농도로 항원-특이적 CD8+ T 세포에서 공자극 신호전달을 유도하였다.
IL-2/synTac 결합의 선택성을 시험하였다. CD8+ T 세포를 LCMV 또는 OT1 마우스의 비장으로부터 단리시켰다. CD8+ T 세포를 다양한 농도에서 IL-2/synTac과 함께 인큐베이션시키고 나서, 20분 동안 결합시켰다. IL-2/synTac은 IgG2a Fc를 포함한다. 피코에리트린(PE)-표지된 항-IgG2a 항체를 이용하여 CD8+ T 세포에 대한 IL-2/synTac의 결합을 검출하였다. IL-2/synTac에 결합된 세포의 백분율을 결정하기 위해 유세포 분석을 이용하여 PE 형광을 검출하였다.
도 12에 나타낸 바와 같이, IL-2/synTac은 LCMV CD8+ T 세포에 대해 항원-특이적 방식으로 결합하지만, OT1 CD8+ T 세포에 대한 상당한 결합을 나타내지 않는다. 따라서, IL-2/synTac은 IL-2/synTac에 존재하는 에피토프에 특이적인 CD8+ T 세포에 선택적으로 결합한다.
IL-2/synTac가 표적 T 세포를 선택적으로 활성화시키는지의 여부를 결정하였다. CD8+ T 세포를 LCMV 또는 OT1 마우스의 비장으로부터 단리시켰다. 사용한 IL-2/synTac은 F42A 단일 아미노산 치환, 또는 F42A 및 H16A 치환 중 하나를 포함하였다. CD8+ T 세포를 20분 동안 다양한 농도에서 IL-2/synTac으로 자극하였다. 이어서, 세포를 PE-표지된 항-포스포-STAT5 항체로 염색하였다. 포스포-STAT5 양성인 세포의 백분율을 결정하기 위해 유세포분석을 이용하여 PE 형광을 검출하였고, 여기서 포스포-STAT5는 활성화의 마커이다.
도 13에 나타낸 바와 같이, IL-2/synTac은 비-특이적(BL6) CD8+ T 세포에서보다 훨씬 더 높은 농도로 항원-특이적(LCMV) CD8+ T 세포에서 CD8+ 자극(포스포-STAT5-양성 세포%로서 나타냄)을 유도하였다.
다양한 IL-2/synTac의 특정 활성을 분석하였다. IL-2의 단일 복제물, IL-2의 2개의 복제물 또는 IL-2의 3개의 복제물을 포함하는 IL-2/synTac을 CD8+ 항원-특이적(LCMV) 또는 비-특이적(BL6) 세포의 자극을 위해 다양한 농도에서 시험하였으며, 여기서 IL-2는 F42A, D20K, Q126A, E15A, H16A 및 Y45A 치환의 다양한 조합을 포함하였다. 포스포-신호 전달 및 전사 5(pSTAT5)-양성의 활성체 백분율을 결정하였다. 도 14a 내지 도 14f에 데이터를 도시한다.
실시예 3: IL-2/synTac의 생체내 활성
IL-2/synTac의 생체내 활성을 시험하였다. 인산염 완충 식염수 (PBS), 재조합 IL-2(rIL-2), 또는 IL-2/본 개시내용의 synTac의 투여 후에 항원-특이적 CD8+ T 세포의 생체내 배수 변화를 시험하였다. 데이터를 도 15, 좌측 패널에 나타낸다. 데이터는 IL-2/synTac가 rIL-2보다 10배 더 강하다는 것을 나타낸다.
IL-2/synTac의 생체내 특이성을 시험하였다. PBS, rIL-2 또는 IL-2/synTac의 투여 후 항원-특이적 및 비-항원 특이적 반응을 평가하였다. 데이터를 PBS, rIL-2 또는 IL-2/synTac의 투여 후 항원-특이적 또는 항원 비-특이적인 림프절 세포의 백분율로서 표현한다. 도 15, 우측 패널에 도시한 바와 같이, IL-2/synTac은 항원-특이적 반응을 유도하였다(카복시플루오레세인 석신이미딜 에스터(CFSE)의 최대 희석%, T 세포 증식의 지표로서 표현함). 대조적으로, rIL-2에 의해 유도되는 반응은 항원-특이적이 아니었다.
용량 반응 분석을 수행하였다. IL-2/synTac(F42A, H16A)을 4㎎/㎏, 8㎎/㎏ 및 16㎎/㎏의 농도로 복강내로 투여하였다. 결과를 도 16a에 나타낸다. 도 16a에 나타낸 바와 같이, 4㎎/㎏ 또는 8㎎/㎏으로 투여된 IL-2/synTac은 유사한 결과를 제공하였고; 16㎎/㎏으로 투여된 IL-2/synTac은 가장 강한 면역자극 활성을 유도하였다.
IL-2/synTac의 투여 경로 효과를 시험하였다. IL-2/synTac(F42A, H16A)을 피하로(SubQ) 또는 복강내로(IP) 4㎎/㎏으로 투여하였다. 도 16b에 나타낸 바와 같이, 피하 투여는 IP 투여보다 더 강한 면역자극 활성을 초래하였다.
효능에 대한 IL-2 복제물 수의 효과를 결정하였다. IL-2의 단일 복제물(F42A, H16A) 또는 IL-2의 2개의 복제물(F42A, H16A)을 포함하는 IL-2/synTac을 HPV E7 에피토프를 보유하는 종양을 갖는 마우스에 주사하였다. IL-2/synTac에 포함된 에피토프는 HPV E7 에피토프였다. 도 17a 및 도 17b에 나타낸 바와 같이, IL-2의 2개의 복제물(F42A, H16A)을 포함하는 IL-2/synTac은 IL-2의 단일 복제물(F42A, H16A)만을 포함하는 IL-2/synTac보다 종양 크기를 감소시키는 데 더 효과적이었다.
실시예 4: PK/PD 및 IL-2/synTac의 안정성 연구
IL-2/synTac의 약물동태학적(PK) 분석을 수행하였다. IL-2/synTac(F42A, D20K, H16A)을 10㎎/㎏에서 IP로 투여하였다. 투여 후 다양한 시점에, 혈청 샘플을 얻었고, IL-2/synTac 수준을 혈청 샘플에서 측정하였다. 도 18에 나타낸 바와 같이, IL-2/synTac의 혈청 반감기는 약 4시간이었다.
IL-2/synTac을 10㎎/㎏으로 C57BL/6 마우스에 IP로 주사하였고, 주사 후 2시간에 혈청을 수집하였다. IL-2/synTac은 His6 태그를 포함하였다. 100ng의 유입 단백질, 또는 동등한 40 μl의 혈청에 도데실 황산나트륨-폴리아크릴아마이드 겔 전기영동(SDS-PAGE)을 실시하였고, 항-(His)6 항체 또는 항-β-2M 항체로 프로빙하였다. 도 19에 도시된 결과는 IL-2/synTac가 안정하게 남아있고, 생체내에서 적어도 2시간 동안 무손상으로 남아있다는 것을 나타낸다.
IL-2/synTac은 4℃ 또는 37℃에서 5일 동안 유지하였다. 0.5㎎의 각각의 샘플(10㎎/ml)을 크기 배제 크로마토그래피에 의해 분석하였다. 도 20에 나타낸 바와 같이, IL-2/synTac은 안정하고, 적어도 5일 동안 4℃ 또는 37℃에서 무손상이었다.
실시예 5: 종양 용적에 대한 IL-2/synTac 및 항-PD1 항체의 효과
도 35에 나타낸 바와 같이, 종양을 갖는 마우스에 대한 IL-2/synTac 및 항-PD1 항체의 투여는 종양 용적을 감소시켰다.
실시예 6: 변이체 4-1BBL을 이용하는 synTac 폴리펩타이드의 생성 및 특성규명
synTac 폴리펩타이드를 합성하고 특성규명하였다. 오발부민(OVA)-특이적 T 세포에 대한 활성에 대해 다음의 synTac 폴리펩타이드를 시험하였다:
1) Syn83/51. Syn83/51의 경쇄는 a) OVA T-세포 에피토프; b) 야생형 4-1BBL 폴리펩타이드의 아미노산 50 내지 254; 및 c) β2M을 포함하고; Syn83/51의 중쇄는 a) MHC 중쇄; 및 b) Ig Fc를 포함한다.
2) Syn239/345. Syn239/345의 경쇄는 a) OVA T-세포 에피토프; b) 야생형 4-1BBL 폴리펩타이드의 아미노산 80 내지 254의 삼량체; 및 c) β2M을 포함하고; Syn239/345의 중쇄는 a) MHC 중쇄; 및 b) IgG2a Fc를 포함한다.
3)Syn341/348. Syn341/348의 경쇄는 a) OVA T-세포 에피토프; b) 야생형 4-1BBL의 삼량체; 및 c) β2M을 포함하고; Syn239/345의 중쇄는 a) MHC 중쇄; 및 b) IgG2a Fc를 포함한다. Syn341/348에서, 4-1BBL 삼량체의 제1 단위는 야생형 4-1BBL의 아미노산 50 내지 254를 포함하고; 4-1BBL 삼량체의 제2 및 제3 단위는 야생형 4-1BBL의 아미노산 80 내지 254를 포함한다.
4) Syn341/349. Syn341/349의 경쇄는 OVA T-세포 에피토프; b) 제1 단위와 제2 단위 사이에 그리고 삼량체의 제2 단위와 제3 단위 사이에 링커를 갖는, 삼량체의 각각의 단위에서 K127A 치환을 포함하는 4-1BBL의 아미노산 80 내지 254의 삼량체; 및 c) β2M을 포함하고; 그리고 Syn239/345의 중쇄는 a) MHC 중쇄; 및 b) IgG2a Fc를 포함한다.
얻어진 synTac 이형이량체를 0, 1, 3.17, 10.01, 31.65 및 100nM synTac의 농도로 3일 또는 5일 동안 오발부민 특이적 T 세포와 함께 시험관내에서 배양시켰다. 대조군은: a) 배지 단독; b) 포볼 12-미리스테이트 13-아세테이트(PMA) 및 이오노포어 A23187; 및 c) 항-CD3 항체 및 항-CD28 항체를 포함하였다.
3일 후에 그리고 5일 후에, 배양 배지 내 IFN-γ, IL-2, IL-6, TNF, IL-10, IL-17A 및 IL-4 의 농도를 결정하였다. 추가로, OVA-특이적 T 세포의 생존도, 및 OVA-특이적 T 세포의 증식을 결정하였다.
도 38 내지 도 46에 데이터를 도시한다.
도 38 내지 도 46에 나타내는 바와 같이, Syn 341/349는 IL-2(세포 적합 사이토카인)의 생성을 유도하고; 세포독성 사이토카인 TNFα 및 IFN-γ의 생성을 유도하며; 그리고 또한 에피토프-특이적 T 세포의 증식을 유도하고 생존도를 향상시킨다.
실시예 7: CHO 세포에서 synTac의 생성
야생형(wt) 4-1BBL을 포함하거나, 또는 도 47에 제시된 바와 같은 아미노산 치환을 갖는 4-1BBL을 포함하는 SynTac을 CHO 세포에서 일시적으로 발현시켰다. 생성된 synTac의 양을 결정하였다. 생성된 양을 도 47에 제공한다.
실시예 8: 4-1BBL synTac의 생체내 효과
옆구리에 생착된 HPV+ TC-1 폐 암종을 보유하는 마우스에 복강내(IP) 주사에 의해 인유두종 바이러스(HPV) E7 항원 펩타이드 및 본 개시내용의 4-1BBL K127A 변이체(도 48에서 "CUE:4-1BBL(K127A)"로서 지칭)를 포함하는 synTac을 5㎎/㎏으로 투여하였다. 대조군으로서, 동일한 종양을 보유하는 마우스에 인산염 완충 식염수(PBS)를 투여하였다. 도 48에 나타내는 바와 같이, 종양 용적은 PBS로 치료한 마우스에 비해, CUE:4-1BBL(K127A)로 치료한 마우스에서 감소되었다.
실시예 9: 4-1BBL synTac과 면역관문 저해제의 공동 투여의 생체내 효과
도 49에 도시한 바와 같이, 4-1BBL 본 개시내용의 synTac과 항-PD1 항체의 공동 투여는 마우스 종양 모델에서 종양 용적을 감소시켰고, 그리고 그랜자임 B+인 종양 침윤성 림프구(tumor infiltrating lymphocyte: TIL)의 종양 백분율을 증가시켰다.
본 발명은 이의 특정 실시형태를 참고로 하여 기재하였지만, 본 발명의 진정한 정신과 범주로부터 벗어나는 일 없이 다양한 변화가 만들어질 수 있고, 동등물이 치환될 수 있다는 것은 당업자에 의해 이해되어야 한다. 추가로, 본 발명의 목적, 정신 및 범주에 대해 특정 상황, 물질, 물질의 조성, 공정, 공정 단계 또는 단계들을 적합화시키기 위한 다수의 변형이 이루어질 수 있다. 모든 이러한 변형은 본 명세서에 첨부하는 청구범위의 범주 내인 것으로 의도된다.
SEQUENCE LISTING <110> Cue Biopharma, Inc. <120> Methods for Modulating an Immune Response <130> WO/2018/170168 <140> PCT/US2018/022492 <141> 2018-03-14 <150> US 62/471,832 <151> 2017-03-15 <150> US 62/521,009 <151> 2017-06-16 <160> 216 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 133 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His 1 5 10 15 Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys 20 25 30 Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys 35 40 45 Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 50 55 60 Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu 65 70 75 80 Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu 85 90 95 Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 100 105 110 Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile 115 120 125 Ile Ser Thr Leu Thr 130 <210> 2 <211> 133 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic polypeptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (42)..(42) <223> Xaa is any amino acid other than a phenylalanine <400> 2 Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His 1 5 10 15 Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys 20 25 30 Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Xaa Lys Phe Tyr Met Pro Lys 35 40 45 Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 50 55 60 Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu 65 70 75 80 Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu 85 90 95 Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 100 105 110 Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile 115 120 125 Ile Ser Thr Leu Thr 130 <210> 3 <211> 133 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (20)..(20) <223> Xaa is any amino acid other than an aspartic acid <400> 3 Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His 1 5 10 15 Leu Leu Leu Xaa Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys 20 25 30 Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys 35 40 45 Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 50 55 60 Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu 65 70 75 80 Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu 85 90 95 Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 100 105 110 Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile 115 120 125 Ile Ser Thr Leu Thr 130 <210> 4 <211> 133 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (15)..(15) <223> Xaa is any amino acid other than a glutamic acid <400> 4 Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Xaa His 1 5 10 15 Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys 20 25 30 Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys 35 40 45 Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 50 55 60 Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu 65 70 75 80 Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu 85 90 95 Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 100 105 110 Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile 115 120 125 Ile Ser Thr Leu Thr 130 <210> 5 <211> 133 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (16)..(16) <223> Xaa is any amino acid other than a histidine <400> 5 Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu Xaa 1 5 10 15 Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys 20 25 30 Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys 35 40 45 Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 50 55 60 Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu 65 70 75 80 Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu 85 90 95 Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 100 105 110 Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile 115 120 125 Ile Ser Thr Leu Thr 130 <210> 6 <211> 133 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (45)..(45) <223> Xaa is any amino acid other than a tyrosine <400> 6 Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His 1 5 10 15 Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys 20 25 30 Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Xaa Met Pro Lys 35 40 45 Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 50 55 60 Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu 65 70 75 80 Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu 85 90 95 Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 100 105 110 Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile 115 120 125 Ile Ser Thr Leu Thr 130 <210> 7 <211> 133 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (126)..(126) <223> Xaa is any amino acid other than a glutamine <400> 7 Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His 1 5 10 15 Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys 20 25 30 Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys 35 40 45 Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 50 55 60 Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu 65 70 75 80 Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu 85 90 95 Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 100 105 110 Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Xaa Ser Ile 115 120 125 Ile Ser Thr Leu Thr 130 <210> 8 <211> 133 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (16)..(16) <223> Xaa is any amino acid other than a histidine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (42)..(42) <223> Xaa is any amino acid other than a phenylalanine <400> 8 Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu Xaa 1 5 10 15 Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys 20 25 30 Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Xaa Lys Phe Tyr Met Pro Lys 35 40 45 Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 50 55 60 Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu 65 70 75 80 Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu 85 90 95 Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 100 105 110 Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile 115 120 125 Ile Ser Thr Leu Thr 130 <210> 9 <211> 133 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (20)..(20) <223> Xaa is any amino acid other than an aspartic acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (42)..(42) <223> Xaa is any amino acid other than a phenylalanine <400> 9 Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His 1 5 10 15 Leu Leu Leu Xaa Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys 20 25 30 Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Xaa Lys Phe Tyr Met Pro Lys 35 40 45 Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 50 55 60 Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu 65 70 75 80 Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu 85 90 95 Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 100 105 110 Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile 115 120 125 Ile Ser Thr Leu Thr 130 <210> 10 <211> 133 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (15)..(15) <223> Xaa is any amino acid other than a glutamic acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (20)..(20) <223> Xaa is any amino acid other than an aspartic acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (42)..(42) <223> Xaa is any amino acid other than a phenylalanine <400> 10 Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Xaa His 1 5 10 15 Leu Leu Leu Xaa Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys 20 25 30 Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Xaa Lys Phe Tyr Met Pro Lys 35 40 45 Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 50 55 60 Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu 65 70 75 80 Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu 85 90 95 Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 100 105 110 Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile 115 120 125 Ile Ser Thr Leu Thr 130 <210> 11 <211> 133 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (16)..(16) <223> Xaa is any amino acid other than a histidine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (20)..(20) <223> Xaa is any amino acid other than an aspartic acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (42)..(42) <223> Xaa is any amino acid other than a phenylalanine <400> 11 Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu Xaa 1 5 10 15 Leu Leu Leu Xaa Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys 20 25 30 Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Xaa Lys Phe Tyr Met Pro Lys 35 40 45 Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 50 55 60 Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu 65 70 75 80 Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu 85 90 95 Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 100 105 110 Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile 115 120 125 Ile Ser Thr Leu Thr 130 <210> 12 <211> 133 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (20)..(20) <223> Xaa is any amino acid other than an aspartic acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (42)..(42) <223> Xaa is any amino acid other than a phenylalanine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (126)..(126) <223> Xaa is any amino acid other than a glutamine <400> 12 Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His 1 5 10 15 Leu Leu Leu Xaa Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys 20 25 30 Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Xaa Lys Phe Tyr Met Pro Lys 35 40 45 Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 50 55 60 Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu 65 70 75 80 Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu 85 90 95 Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 100 105 110 Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Xaa Ser Ile 115 120 125 Ile Ser Thr Leu Thr 130 <210> 13 <211> 133 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (20)..(20) <223> Xaa is any amino acid other than an aspartic acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (42)..(42) <223> Xaa is any amino acid other than a phenylalanine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (45)..(45) <223> Xaa is any amino acid other than a tyrosine <400> 13 Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His 1 5 10 15 Leu Leu Leu Xaa Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys 20 25 30 Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Xaa Lys Phe Xaa Met Pro Lys 35 40 45 Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 50 55 60 Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu 65 70 75 80 Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu 85 90 95 Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 100 105 110 Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile 115 120 125 Ile Ser Thr Leu Thr 130 <210> 14 <211> 133 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (16)..(16) <223> Xaa is any amino acid other than a histidine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (20)..(20) <223> Xaa is any amino acid other than an aspartic acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (42)..(42) <223> Xaa is any amino acid other than a phenylalanine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (45)..(45) <223> Xaa is any amino acid other than a tyrosine <400> 14 Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu Xaa 1 5 10 15 Leu Leu Leu Xaa Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys 20 25 30 Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Xaa Lys Phe Xaa Met Pro Lys 35 40 45 Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 50 55 60 Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu 65 70 75 80 Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu 85 90 95 Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 100 105 110 Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile 115 120 125 Ile Ser Thr Leu Thr 130 <210> 15 <211> 133 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (20)..(20) <223> Xaa is any amino acid other than an aspartic acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (42)..(42) <223> Xaa is any amino acid other than a phenylalanine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (45)..(45) <223> Xaa is any amino acid other than a tyrosine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (126)..(126) <223> Xaa is any amino acid other than a glutamine <400> 15 Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His 1 5 10 15 Leu Leu Leu Xaa Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys 20 25 30 Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Xaa Lys Phe Xaa Met Pro Lys 35 40 45 Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 50 55 60 Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu 65 70 75 80 Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu 85 90 95 Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 100 105 110 Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Xaa Ser Ile 115 120 125 Ile Ser Thr Leu Thr 130 <210> 16 <211> 133 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (16)..(16) <223> Xaa is any amino acid other than a histidine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (20)..(20) <223> Xaa is any amino acid other than an aspartic acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (42)..(42) <223> Xaa is any amino acid other than a phenylalanine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (45)..(45) <223> Xaa is any amino acid other than a tyrosine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (126)..(126) <223> Xaa is any amino acid other than a glutamine <400> 16 Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu Xaa 1 5 10 15 Leu Leu Leu Xaa Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys 20 25 30 Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Xaa Lys Phe Xaa Met Pro Lys 35 40 45 Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 50 55 60 Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu 65 70 75 80 Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu 85 90 95 Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 100 105 110 Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Xaa Ser Ile 115 120 125 Ile Ser Thr Leu Thr 130 <210> 17 <211> 133 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (16)..(16) <223> Xaa is any amino acid other than a histidine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (42)..(42) <223> Xaa is any amino acid other than a phenylalanine <220> <221> MISC_FEATURE <222> (126)..(126) <223> Xaa is any amino acid other than a glutamine <400> 17 Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu Xaa 1 5 10 15 Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys 20 25 30 Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Xaa Lys Phe Tyr Met Pro Lys 35 40 45 Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 50 55 60 Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu 65 70 75 80 Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu 85 90 95 Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 100 105 110 Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Xaa Ser Ile 115 120 125 Ile Ser Thr Leu Thr 130 <210> 18 <211> 272 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 18 Met Asp Ser Tyr Leu Leu Met Trp Gly Leu Leu Thr Phe Ile Met Val 1 5 10 15 Pro Gly Cys Gln Ala Glu Leu Cys Asp Asp Asp Pro Pro Glu Ile Pro 20 25 30 His Ala Thr Phe Lys Ala Met Ala Tyr Lys Glu Gly Thr Met Leu Asn 35 40 45 Cys Glu Cys Lys Arg Gly Phe Arg Arg Ile Lys Ser Gly Ser Leu Tyr 50 55 60 Met Leu Cys Thr Gly Asn Ser Ser His Ser Ser Trp Asp Asn Gln Cys 65 70 75 80 Gln Cys Thr Ser Ser Ala Thr Arg Asn Thr Thr Lys Gln Val Thr Pro 85 90 95 Gln Pro Glu Glu Gln Lys Glu Arg Lys Thr Thr Glu Met Gln Ser Pro 100 105 110 Met Gln Pro Val Asp Gln Ala Ser Leu Pro Gly His Cys Arg Glu Pro 115 120 125 Pro Pro Trp Glu Asn Glu Ala Thr Glu Arg Ile Tyr His Phe Val Val 130 135 140 Gly Gln Met Val Tyr Tyr Gln Cys Val Gln Gly Tyr Arg Ala Leu His 145 150 155 160 Arg Gly Pro Ala Glu Ser Val Cys Lys Met Thr His Gly Lys Thr Arg 165 170 175 Trp Thr Gln Pro Gln Leu Ile Cys Thr Gly Glu Met Glu Thr Ser Gln 180 185 190 Phe Pro Gly Glu Glu Lys Pro Gln Ala Ser Pro Glu Gly Arg Pro Glu 195 200 205 Ser Glu Thr Ser Cys Leu Val Thr Thr Thr Asp Phe Gln Ile Gln Thr 210 215 220 Glu Met Ala Ala Thr Met Glu Thr Ser Ile Phe Thr Thr Glu Tyr Gln 225 230 235 240 Val Ala Val Ala Gly Cys Val Phe Leu Leu Ile Ser Val Leu Leu Leu 245 250 255 Ser Gly Leu Thr Trp Gln Arg Arg Gln Arg Lys Ser Arg Arg Thr Ile 260 265 270 <210> 19 <211> 551 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 19 Met Ala Ala Pro Ala Leu Ser Trp Arg Leu Pro Leu Leu Ile Leu Leu 1 5 10 15 Leu Pro Leu Ala Thr Ser Trp Ala Ser Ala Ala Val Asn Gly Thr Ser 20 25 30 Gln Phe Thr Cys Phe Tyr Asn Ser Arg Ala Asn Ile Ser Cys Val Trp 35 40 45 Ser Gln Asp Gly Ala Leu Gln Asp Thr Ser Cys Gln Val His Ala Trp 50 55 60 Pro Asp Arg Arg Arg Trp Asn Gln Thr Cys Glu Leu Leu Pro Val Ser 65 70 75 80 Gln Ala Ser Trp Ala Cys Asn Leu Ile Leu Gly Ala Pro Asp Ser Gln 85 90 95 Lys Leu Thr Thr Val Asp Ile Val Thr Leu Arg Val Leu Cys Arg Glu 100 105 110 Gly Val Arg Trp Arg Val Met Ala Ile Gln Asp Phe Lys Pro Phe Glu 115 120 125 Asn Leu Arg Leu Met Ala Pro Ile Ser Leu Gln Val Val His Val Glu 130 135 140 Thr His Arg Cys Asn Ile Ser Trp Glu Ile Ser Gln Ala Ser His Tyr 145 150 155 160 Phe Glu Arg His Leu Glu Phe Glu Ala Arg Thr Leu Ser Pro Gly His 165 170 175 Thr Trp Glu Glu Ala Pro Leu Leu Thr Leu Lys Gln Lys Gln Glu Trp 180 185 190 Ile Cys Leu Glu Thr Leu Thr Pro Asp Thr Gln Tyr Glu Phe Gln Val 195 200 205 Arg Val Lys Pro Leu Gln Gly Glu Phe Thr Thr Trp Ser Pro Trp Ser 210 215 220 Gln Pro Leu Ala Phe Arg Thr Lys Pro Ala Ala Leu Gly Lys Asp Thr 225 230 235 240 Ile Pro Trp Leu Gly His Leu Leu Val Gly Leu Ser Gly Ala Phe Gly 245 250 255 Phe Ile Ile Leu Val Tyr Leu Leu Ile Asn Cys Arg Asn Thr Gly Pro 260 265 270 Trp Leu Lys Lys Val Leu Lys Cys Asn Thr Pro Asp Pro Ser Lys Phe 275 280 285 Phe Ser Gln Leu Ser Ser Glu His Gly Gly Asp Val Gln Lys Trp Leu 290 295 300 Ser Ser Pro Phe Pro Ser Ser Ser Phe Ser Pro Gly Gly Leu Ala Pro 305 310 315 320 Glu Ile Ser Pro Leu Glu Val Leu Glu Arg Asp Lys Val Thr Gln Leu 325 330 335 Leu Leu Gln Gln Asp Lys Val Pro Glu Pro Ala Ser Leu Ser Ser Asn 340 345 350 His Ser Leu Thr Ser Cys Phe Thr Asn Gln Gly Tyr Phe Phe Phe His 355 360 365 Leu Pro Asp Ala Leu Glu Ile Glu Ala Cys Gln Val Tyr Phe Thr Tyr 370 375 380 Asp Pro Tyr Ser Glu Glu Asp Pro Asp Glu Gly Val Ala Gly Ala Pro 385 390 395 400 Thr Gly Ser Ser Pro Gln Pro Leu Gln Pro Leu Ser Gly Glu Asp Asp 405 410 415 Ala Tyr Cys Thr Phe Pro Ser Arg Asp Asp Leu Leu Leu Phe Ser Pro 420 425 430 Ser Leu Leu Gly Gly Pro Ser Pro Pro Ser Thr Ala Pro Gly Gly Ser 435 440 445 Gly Ala Gly Glu Glu Arg Met Pro Pro Ser Leu Gln Glu Arg Val Pro 450 455 460 Arg Asp Trp Asp Pro Gln Pro Leu Gly Pro Pro Thr Pro Gly Val Pro 465 470 475 480 Asp Leu Val Asp Phe Gln Pro Pro Pro Glu Leu Val Leu Arg Glu Ala 485 490 495 Gly Glu Glu Val Pro Asp Ala Gly Pro Arg Glu Gly Val Ser Phe Pro 500 505 510 Trp Ser Arg Pro Pro Gly Gln Gly Glu Phe Arg Ala Leu Asn Ala Arg 515 520 525 Leu Pro Leu Asn Thr Asp Ala Tyr Leu Ser Leu Gln Glu Leu Gln Gly 530 535 540 Gln Asp Pro Thr His Leu Val 545 550 <210> 20 <211> 369 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 20 Met Leu Lys Pro Ser Leu Pro Phe Thr Ser Leu Leu Phe Leu Gln Leu 1 5 10 15 Pro Leu Leu Gly Val Gly Leu Asn Thr Thr Ile Leu Thr Pro Asn Gly 20 25 30 Asn Glu Asp Thr Thr Ala Asp Phe Phe Leu Thr Thr Met Pro Thr Asp 35 40 45 Ser Leu Ser Val Ser Thr Leu Pro Leu Pro Glu Val Gln Cys Phe Val 50 55 60 Phe Asn Val Glu Tyr Met Asn Cys Thr Trp Asn Ser Ser Ser Glu Pro 65 70 75 80 Gln Pro Thr Asn Leu Thr Leu His Tyr Trp Tyr Lys Asn Ser Asp Asn 85 90 95 Asp Lys Val Gln Lys Cys Ser His Tyr Leu Phe Ser Glu Glu Ile Thr 100 105 110 Ser Gly Cys Gln Leu Gln Lys Lys Glu Ile His Leu Tyr Gln Thr Phe 115 120 125 Val Val Gln Leu Gln Asp Pro Arg Glu Pro Arg Arg Gln Ala Thr Gln 130 135 140 Met Leu Lys Leu Gln Asn Leu Val Ile Pro Trp Ala Pro Glu Asn Leu 145 150 155 160 Thr Leu His Lys Leu Ser Glu Ser Gln Leu Glu Leu Asn Trp Asn Asn 165 170 175 Arg Phe Leu Asn His Cys Leu Glu His Leu Val Gln Tyr Arg Thr Asp 180 185 190 Trp Asp His Ser Trp Thr Glu Gln Ser Val Asp Tyr Arg His Lys Phe 195 200 205 Ser Leu Pro Ser Val Asp Gly Gln Lys Arg Tyr Thr Phe Arg Val Arg 210 215 220 Ser Arg Phe Asn Pro Leu Cys Gly Ser Ala Gln His Trp Ser Glu Trp 225 230 235 240 Ser His Pro Ile His Trp Gly Ser Asn Thr Ser Lys Glu Asn Pro Phe 245 250 255 Leu Phe Ala Leu Glu Ala Val Val Ile Ser Val Gly Ser Met Gly Leu 260 265 270 Ile Ile Ser Leu Leu Cys Val Tyr Phe Trp Leu Glu Arg Thr Met Pro 275 280 285 Arg Ile Pro Thr Leu Lys Asn Leu Glu Asp Leu Val Thr Glu Tyr His 290 295 300 Gly Asn Phe Ser Ala Trp Ser Gly Val Ser Lys Gly Leu Ala Glu Ser 305 310 315 320 Leu Gln Pro Asp Tyr Ser Glu Arg Leu Cys Leu Val Ser Glu Ile Pro 325 330 335 Pro Lys Gly Gly Ala Leu Gly Glu Gly Pro Gly Ala Ser Pro Cys Asn 340 345 350 Gln His Ser Pro Tyr Trp Ala Pro Pro Cys Tyr Thr Leu Lys Pro Glu 355 360 365 Thr <210> 21 <211> 227 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 21 Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly 1 5 10 15 Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 20 25 30 Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 35 40 45 Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 50 55 60 His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 65 70 75 80 Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 85 90 95 Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile 100 105 110 Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 115 120 125 Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 130 135 140 Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 145 150 155 160 Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 165 170 175 Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 180 185 190 Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 195 200 205 His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 210 215 220 Pro Gly Lys 225 <210> 22 <211> 325 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 22 Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser 1 5 10 15 Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe 20 25 30 Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly 35 40 45 Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu 50 55 60 Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr 65 70 75 80 Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr 85 90 95 Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro 100 105 110 Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr 115 120 125 Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val 130 135 140 Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val 145 150 155 160 Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser 165 170 175 Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu 180 185 190 Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala 195 200 205 Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro 210 215 220 Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln 225 230 235 240 Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala 245 250 255 Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr 260 265 270 Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu 275 280 285 Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser 290 295 300 Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser 305 310 315 320 Leu Ser Pro Gly Lys 325 <210> 23 <211> 246 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 23 His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Leu Lys Thr 1 5 10 15 Pro Leu Gly Asp Thr Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu 20 25 30 Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 35 40 45 Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 50 55 60 Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 65 70 75 80 Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn 85 90 95 Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp 100 105 110 Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro 115 120 125 Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu 130 135 140 Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn 145 150 155 160 Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile 165 170 175 Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 180 185 190 Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 195 200 205 Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys 210 215 220 Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu 225 230 235 240 Ser Leu Ser Pro Gly Lys 245 <210> 24 <211> 383 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 24 Pro Thr Lys Ala Pro Asp Val Phe Pro Ile Ile Ser Gly Cys Arg His 1 5 10 15 Pro Lys Asp Asn Ser Pro Val Val Leu Ala Cys Leu Ile Thr Gly Tyr 20 25 30 His Pro Thr Ser Val Thr Val Thr Trp Tyr Met Gly Thr Gln Ser Gln 35 40 45 Pro Gln Arg Thr Phe Pro Glu Ile Gln Arg Arg Asp Ser Tyr Tyr Met 50 55 60 Thr Ser Ser Gln Leu Ser Thr Pro Leu Gln Gln Trp Arg Gln Gly Glu 65 70 75 80 Tyr Lys Cys Val Val Gln His Thr Ala Ser Lys Ser Lys Lys Glu Ile 85 90 95 Phe Arg Trp Pro Glu Ser Pro Lys Ala Gln Ala Ser Ser Val Pro Thr 100 105 110 Ala Gln Pro Gln Ala Glu Gly Ser Leu Ala Lys Ala Thr Thr Ala Pro 115 120 125 Ala Thr Thr Arg Asn Thr Gly Arg Gly Gly Glu Glu Lys Lys Lys Glu 130 135 140 Lys Glu Lys Glu Glu Gln Glu Glu Arg Glu Thr Lys Thr Pro Glu Cys 145 150 155 160 Pro Ser His Thr Gln Pro Leu Gly Val Tyr Leu Leu Thr Pro Ala Val 165 170 175 Gln Asp Leu Trp Leu Arg Asp Lys Ala Thr Phe Thr Cys Phe Val Val 180 185 190 Gly Ser Asp Leu Lys Asp Ala His Leu Thr Trp Glu Val Ala Gly Lys 195 200 205 Val Pro Thr Gly Gly Val Glu Glu Gly Leu Leu Glu Arg His Ser Asn 210 215 220 Gly Ser Gln Ser Gln His Ser Arg Leu Thr Leu Pro Arg Ser Leu Trp 225 230 235 240 Asn Ala Gly Thr Ser Val Thr Cys Thr Leu Asn His Pro Ser Leu Pro 245 250 255 Pro Gln Arg Leu Met Ala Leu Arg Glu Pro Ala Ala Gln Ala Pro Val 260 265 270 Lys Leu Ser Leu Asn Leu Leu Ala Ser Ser Asp Pro Pro Glu Ala Ala 275 280 285 Ser Trp Leu Leu Cys Glu Val Ser Gly Phe Ser Pro Pro Asn Ile Leu 290 295 300 Leu Met Trp Leu Glu Asp Gln Arg Glu Val Asn Thr Ser Gly Phe Ala 305 310 315 320 Pro Ala Arg Pro Pro Pro Gln Pro Arg Ser Thr Thr Phe Trp Ala Trp 325 330 335 Ser Val Leu Arg Val Pro Ala Pro Pro Ser Pro Gln Pro Ala Thr Tyr 340 345 350 Thr Cys Val Val Ser His Glu Asp Ser Arg Thr Leu Leu Asn Ala Ser 355 360 365 Arg Ser Leu Glu Val Ser Tyr Val Thr Asp His Gly Pro Met Lys 370 375 380 <210> 25 <211> 276 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 25 Val Thr Ser Thr Leu Thr Ile Lys Glx Ser Asp Trp Leu Gly Glu Ser 1 5 10 15 Met Phe Thr Cys Arg Val Asp His Arg Gly Leu Thr Phe Gln Gln Asn 20 25 30 Ala Ser Ser Met Cys Val Pro Asp Gln Asp Thr Ala Ile Arg Val Phe 35 40 45 Ala Ile Pro Pro Ser Phe Ala Ser Ile Phe Leu Thr Lys Ser Thr Lys 50 55 60 Leu Thr Cys Leu Val Thr Asp Leu Thr Thr Tyr Asx Ser Val Thr Ile 65 70 75 80 Ser Trp Thr Arg Glu Glu Asn Gly Ala Val Lys Thr His Thr Asn Ile 85 90 95 Ser Glu Ser His Pro Asn Ala Thr Phe Ser Ala Val Gly Glu Ala Ser 100 105 110 Ile Cys Glu Asp Asx Asp Trp Ser Gly Glu Arg Phe Thr Cys Thr Val 115 120 125 Thr His Thr Asp Leu Pro Ser Pro Leu Lys Gln Thr Ile Ser Arg Pro 130 135 140 Lys Gly Val Ala Leu His Arg Pro Asx Val Tyr Leu Leu Pro Pro Ala 145 150 155 160 Arg Glx Glx Leu Asn Leu Arg Glu Ser Ala Thr Ile Thr Cys Leu Val 165 170 175 Thr Gly Phe Ser Pro Ala Asp Val Phe Val Glu Trp Met Gln Arg Gly 180 185 190 Glu Pro Leu Ser Pro Gln Lys Tyr Val Thr Ser Ala Pro Met Pro Glu 195 200 205 Pro Gln Ala Pro Gly Arg Tyr Phe Ala His Ser Ile Leu Thr Val Ser 210 215 220 Glu Glu Glu Trp Asn Thr Gly Gly Thr Tyr Thr Cys Val Val Ala His 225 230 235 240 Glu Ala Leu Pro Asn Arg Val Thr Glu Arg Thr Val Asp Lys Ser Thr 245 250 255 Gly Lys Pro Thr Leu Tyr Asn Val Ser Leu Val Met Ser Asp Thr Ala 260 265 270 Gly Thr Cys Tyr 275 <210> 26 <211> 353 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 26 Ala Ser Pro Thr Ser Pro Lys Val Phe Pro Leu Ser Leu Cys Ser Thr 1 5 10 15 Gln Pro Asp Gly Asn Val Val Ile Ala Cys Leu Val Gln Gly Phe Phe 20 25 30 Pro Gln Glu Pro Leu Ser Val Thr Trp Ser Glu Ser Gly Gln Gly Val 35 40 45 Thr Ala Arg Asn Phe Pro Pro Ser Gln Asp Ala Ser Gly Asp Leu Tyr 50 55 60 Thr Thr Ser Ser Gln Leu Thr Leu Pro Ala Thr Gln Cys Leu Ala Gly 65 70 75 80 Lys Ser Val Thr Cys His Val Lys His Tyr Thr Asn Pro Ser Gln Asp 85 90 95 Val Thr Val Pro Cys Pro Val Pro Ser Thr Pro Pro Thr Pro Ser Pro 100 105 110 Ser Thr Pro Pro Thr Pro Ser Pro Ser Cys Cys His Pro Arg Leu Ser 115 120 125 Leu His Arg Pro Ala Leu Glu Asp Leu Leu Leu Gly Ser Glu Ala Asn 130 135 140 Leu Thr Cys Thr Leu Thr Gly Leu Arg Asp Ala Ser Gly Val Thr Phe 145 150 155 160 Thr Trp Thr Pro Ser Ser Gly Lys Ser Ala Val Gln Gly Pro Pro Glu 165 170 175 Arg Asp Leu Cys Gly Cys Tyr Ser Val Ser Ser Val Leu Pro Gly Cys 180 185 190 Ala Glu Pro Trp Asn His Gly Lys Thr Phe Thr Cys Thr Ala Ala Tyr 195 200 205 Pro Glu Ser Lys Thr Pro Leu Thr Ala Thr Leu Ser Lys Ser Gly Asn 210 215 220 Thr Phe Arg Pro Glu Val His Leu Leu Pro Pro Pro Ser Glu Glu Leu 225 230 235 240 Ala Leu Asn Glu Leu Val Thr Leu Thr Cys Leu Ala Arg Gly Phe Ser 245 250 255 Pro Lys Asp Val Leu Val Arg Trp Leu Gln Gly Ser Gln Glu Leu Pro 260 265 270 Arg Glu Lys Tyr Leu Thr Trp Ala Ser Arg Gln Glu Pro Ser Gln Gly 275 280 285 Thr Thr Thr Phe Ala Val Thr Ser Ile Leu Arg Val Ala Ala Glu Asp 290 295 300 Trp Lys Lys Gly Asp Thr Phe Ser Cys Met Val Gly His Glu Ala Leu 305 310 315 320 Pro Leu Ala Phe Thr Gln Lys Thr Ile Asp Arg Leu Ala Gly Lys Pro 325 330 335 Thr His Val Asn Val Ser Val Val Met Ala Glu Val Asp Gly Thr Cys 340 345 350 Tyr <210> 27 <211> 222 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 27 Ala Asp Pro Cys Asp Ser Asn Pro Arg Gly Val Ser Ala Tyr Leu Ser 1 5 10 15 Arg Pro Ser Pro Phe Asp Leu Phe Ile Arg Lys Ser Pro Thr Ile Thr 20 25 30 Cys Leu Val Val Asp Leu Ala Pro Ser Lys Gly Thr Val Asn Leu Thr 35 40 45 Trp Ser Arg Ala Ser Gly Lys Pro Val Asn His Ser Thr Arg Lys Glu 50 55 60 Glu Lys Gln Arg Asn Gly Thr Leu Thr Val Thr Ser Thr Leu Pro Val 65 70 75 80 Gly Thr Arg Asp Trp Ile Glu Gly Glu Thr Tyr Gln Cys Arg Val Thr 85 90 95 His Pro His Leu Pro Arg Ala Leu Met Arg Ser Thr Thr Lys Thr Ser 100 105 110 Gly Pro Arg Ala Ala Pro Glu Val Tyr Ala Phe Ala Thr Pro Glu Trp 115 120 125 Pro Gly Ser Arg Asp Lys Arg Thr Leu Ala Cys Leu Ile Gln Asn Phe 130 135 140 Met Pro Glu Asp Ile Ser Val Gln Trp Leu His Asn Glu Val Gln Leu 145 150 155 160 Pro Asp Ala Arg His Ser Thr Thr Gln Pro Arg Lys Thr Lys Gly Ser 165 170 175 Gly Phe Phe Val Phe Ser Arg Leu Glu Val Thr Arg Ala Glu Trp Glu 180 185 190 Gln Lys Asp Glu Phe Ile Cys Arg Ala Val His Glu Ala Ala Ser Pro 195 200 205 Ser Gln Thr Val Gln Arg Ala Val Ser Val Asn Pro Gly Lys 210 215 220 <210> 28 <211> 327 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 28 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140 Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 165 170 175 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 180 185 190 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 210 215 220 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 225 230 235 240 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285 Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 305 310 315 320 Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 325 <210> 29 <211> 365 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 29 Met Ala Val Met Ala Pro Arg Thr Leu Leu Leu Leu Leu Ser Gly Ala 1 5 10 15 Leu Ala Leu Thr Gln Thr Trp Ala Gly Ser His Ser Met Arg Tyr Phe 20 25 30 Phe Thr Ser Val Ser Arg Pro Gly Arg Gly Glu Pro Arg Phe Ile Ala 35 40 45 Val Gly Tyr Val Asp Asp Thr Gln Phe Val Arg Phe Asp Ser Asp Ala 50 55 60 Ala Ser Gln Lys Met Glu Pro Arg Ala Pro Trp Ile Glu Gln Glu Gly 65 70 75 80 Pro Glu Tyr Trp Asp Gln Glu Thr Arg Asn Met Lys Ala His Ser Gln 85 90 95 Thr Asp Arg Ala Asn Leu Gly Thr Leu Arg Gly Tyr Tyr Asn Gln Ser 100 105 110 Glu Asp Gly Ser His Thr Ile Gln Ile Met Tyr Gly Cys Asp Val Gly 115 120 125 Pro Asp Gly Arg Phe Leu Arg Gly Tyr Arg Gln Asp Ala Tyr Asp Gly 130 135 140 Lys Asp Tyr Ile Ala Leu Asn Glu Asp Leu Arg Ser Trp Thr Ala Ala 145 150 155 160 Asp Met Ala Ala Gln Ile Thr Lys Arg Lys Trp Glu Ala Val His Ala 165 170 175 Ala Glu Gln Arg Arg Val Tyr Leu Glu Gly Arg Cys Val Asp Gly Leu 180 185 190 Arg Arg Tyr Leu Glu Asn Gly Lys Glu Thr Leu Gln Arg Thr Asp Pro 195 200 205 Pro Lys Thr His Met Thr His His Pro Ile Ser Asp His Glu Ala Thr 210 215 220 Leu Arg Cys Trp Ala Leu Gly Phe Tyr Pro Ala Glu Ile Thr Leu Thr 225 230 235 240 Trp Gln Arg Asp Gly Glu Asp Gln Thr Gln Asp Thr Glu Leu Val Glu 245 250 255 Thr Arg Pro Ala Gly Asp Gly Thr Phe Gln Lys Trp Ala Ala Val Val 260 265 270 Val Pro Ser Gly Glu Glu Gln Arg Tyr Thr Cys His Val Gln His Glu 275 280 285 Gly Leu Pro Lys Pro Leu Thr Leu Arg Trp Glu Leu Ser Ser Gln Pro 290 295 300 Thr Ile Pro Ile Val Gly Ile Ile Ala Gly Leu Val Leu Leu Gly Ala 305 310 315 320 Val Ile Thr Gly Ala Val Val Ala Ala Val Met Trp Arg Arg Lys Ser 325 330 335 Ser Asp Arg Lys Gly Gly Ser Tyr Thr Gln Ala Ala Ser Ser Asp Ser 340 345 350 Ala Gln Gly Ser Asp Val Ser Leu Thr Ala Cys Lys Val 355 360 365 <210> 30 <211> 362 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 30 Met Leu Val Met Ala Pro Arg Thr Val Leu Leu Leu Leu Ser Ala Ala 1 5 10 15 Leu Ala Leu Thr Glu Thr Trp Ala Gly Ser His Ser Met Arg Tyr Phe 20 25 30 Tyr Thr Ser Val Ser Arg Pro Gly Arg Gly Glu Pro Arg Phe Ile Ser 35 40 45 Val Gly Tyr Val Asp Asp Thr Gln Phe Val Arg Phe Asp Ser Asp Ala 50 55 60 Ala Ser Pro Arg Glu Glu Pro Arg Ala Pro Trp Ile Glu Gln Glu Gly 65 70 75 80 Pro Glu Tyr Trp Asp Arg Asn Thr Gln Ile Tyr Lys Ala Gln Ala Gln 85 90 95 Thr Asp Arg Glu Ser Leu Arg Asn Leu Arg Gly Tyr Tyr Asn Gln Ser 100 105 110 Glu Ala Gly Ser His Thr Leu Gln Ser Met Tyr Gly Cys Asp Val Gly 115 120 125 Pro Asp Gly Arg Leu Leu Arg Gly His Asp Gln Tyr Ala Tyr Asp Gly 130 135 140 Lys Asp Tyr Ile Ala Leu Asn Glu Asp Leu Arg Ser Trp Thr Ala Ala 145 150 155 160 Asp Thr Ala Ala Gln Ile Thr Gln Arg Lys Trp Glu Ala Ala Arg Glu 165 170 175 Ala Glu Gln Arg Arg Ala Tyr Leu Glu Gly Glu Cys Val Glu Trp Leu 180 185 190 Arg Arg Tyr Leu Glu Asn Gly Lys Asp Lys Leu Glu Arg Ala Asp Pro 195 200 205 Pro Lys Thr His Val Thr His His Pro Ile Ser Asp His Glu Ala Thr 210 215 220 Leu Arg Cys Trp Ala Leu Gly Phe Tyr Pro Ala Glu Ile Thr Leu Thr 225 230 235 240 Trp Gln Arg Asp Gly Glu Asp Gln Thr Gln Asp Thr Glu Leu Val Glu 245 250 255 Thr Arg Pro Ala Gly Asp Arg Thr Phe Gln Lys Trp Ala Ala Val Val 260 265 270 Val Pro Ser Gly Glu Glu Gln Arg Tyr Thr Cys His Val Gln His Glu 275 280 285 Gly Leu Pro Lys Pro Leu Thr Leu Arg Trp Glu Pro Ser Ser Gln Ser 290 295 300 Thr Val Pro Ile Val Gly Ile Val Ala Gly Leu Ala Val Leu Ala Val 305 310 315 320 Val Val Ile Gly Ala Val Val Ala Ala Val Met Cys Arg Arg Lys Ser 325 330 335 Ser Gly Gly Lys Gly Gly Ser Tyr Ser Gln Ala Ala Cys Ser Asp Ser 340 345 350 Ala Gln Gly Ser Asp Val Ser Leu Thr Ala 355 360 <210> 31 <211> 366 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 31 Met Arg Val Met Ala Pro Arg Ala Leu Leu Leu Leu Leu Ser Gly Gly 1 5 10 15 Leu Ala Leu Thr Glu Thr Trp Ala Cys Ser His Ser Met Arg Tyr Phe 20 25 30 Asp Thr Ala Val Ser Arg Pro Gly Arg Gly Glu Pro Arg Phe Ile Ser 35 40 45 Val Gly Tyr Val Asp Asp Thr Gln Phe Val Arg Phe Asp Ser Asp Ala 50 55 60 Ala Ser Pro Arg Gly Glu Pro Arg Ala Pro Trp Val Glu Gln Glu Gly 65 70 75 80 Pro Glu Tyr Trp Asp Arg Glu Thr Gln Asn Tyr Lys Arg Gln Ala Gln 85 90 95 Ala Asp Arg Val Ser Leu Arg Asn Leu Arg Gly Tyr Tyr Asn Gln Ser 100 105 110 Glu Asp Gly Ser His Thr Leu Gln Arg Met Tyr Gly Cys Asp Leu Gly 115 120 125 Pro Asp Gly Arg Leu Leu Arg Gly Tyr Asp Gln Ser Ala Tyr Asp Gly 130 135 140 Lys Asp Tyr Ile Ala Leu Asn Glu Asp Leu Arg Ser Trp Thr Ala Ala 145 150 155 160 Asp Thr Ala Ala Gln Ile Thr Gln Arg Lys Leu Glu Ala Ala Arg Ala 165 170 175 Ala Glu Gln Leu Arg Ala Tyr Leu Glu Gly Thr Cys Val Glu Trp Leu 180 185 190 Arg Arg Tyr Leu Glu Asn Gly Lys Glu Thr Leu Gln Arg Ala Glu Pro 195 200 205 Pro Lys Thr His Val Thr His His Pro Leu Ser Asp His Glu Ala Thr 210 215 220 Leu Arg Cys Trp Ala Leu Gly Phe Tyr Pro Ala Glu Ile Thr Leu Thr 225 230 235 240 Trp Gln Arg Asp Gly Glu Asp Gln Thr Gln Asp Thr Glu Leu Val Glu 245 250 255 Thr Arg Pro Ala Gly Asp Gly Thr Phe Gln Lys Trp Ala Ala Val Val 260 265 270 Val Pro Ser Gly Gln Glu Gln Arg Tyr Thr Cys His Met Gln His Glu 275 280 285 Gly Leu Gln Glu Pro Leu Thr Leu Ser Trp Glu Pro Ser Ser Gln Pro 290 295 300 Thr Ile Pro Ile Met Gly Ile Val Ala Gly Leu Ala Val Leu Val Val 305 310 315 320 Leu Ala Val Leu Gly Ala Val Val Thr Ala Met Met Cys Arg Arg Lys 325 330 335 Ser Ser Gly Gly Lys Gly Gly Ser Cys Ser Gln Ala Ala Cys Ser Asn 340 345 350 Ser Ala Gln Gly Ser Asp Glu Ser Leu Ile Thr Cys Lys Ala 355 360 365 <210> 32 <211> 833 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 32 Met Tyr Arg Met Gln Leu Leu Ser Cys Ile Ala Leu Ser Leu Ala Leu 1 5 10 15 Val Thr Asn Ser Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu 20 25 30 Gln Leu Glu Ala Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile 35 40 45 Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Ala Lys Phe 50 55 60 Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu 65 70 75 80 Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys 85 90 95 Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile 100 105 110 Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala 115 120 125 Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe 130 135 140 Cys Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 145 150 155 160 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Pro Thr 165 170 175 Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu Ala Leu Leu Leu 180 185 190 Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys 195 200 205 Leu Thr Arg Met Leu Thr Ala Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr 210 215 220 Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu 225 230 235 240 Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg 245 250 255 Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser 260 265 270 Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val 275 280 285 Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile Ile Ser Thr 290 295 300 Leu Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 305 310 315 320 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Ser His Ser Met Arg Tyr Phe Phe Thr 325 330 335 Ser Val Ser Arg Pro Gly Arg Gly Glu Pro Arg Phe Ile Ala Val Gly 340 345 350 Tyr Val Asp Asp Thr Gln Phe Val Arg Phe Asp Ser Asp Ala Ala Ser 355 360 365 Gln Arg Met Glu Pro Arg Ala Pro Trp Ile Glu Gln Glu Gly Pro Glu 370 375 380 Tyr Trp Asp Gly Glu Thr Arg Lys Val Lys Ala His Ser Gln Thr His 385 390 395 400 Arg Val Asp Leu Gly Thr Leu Arg Gly Ala Tyr Asn Gln Ser Glu Ala 405 410 415 Gly Ser His Thr Val Gln Arg Met Tyr Gly Cys Asp Val Gly Ser Asp 420 425 430 Trp Arg Phe Leu Arg Gly Tyr His Gln Tyr Ala Tyr Asp Gly Lys Asp 435 440 445 Tyr Ile Ala Leu Lys Glu Asp Leu Arg Ser Trp Thr Ala Ala Asp Met 450 455 460 Ala Ala Gln Thr Thr Lys His Lys Trp Glu Ala Ala His Val Ala Glu 465 470 475 480 Gln Leu Arg Ala Tyr Leu Glu Gly Thr Cys Val Glu Trp Leu Arg Arg 485 490 495 Tyr Leu Glu Asn Gly Lys Glu Thr Leu Gln Arg Thr Asp Ala Pro Lys 500 505 510 Thr His Met Thr His His Ala Val Ser Asp His Glu Ala Thr Leu Arg 515 520 525 Cys Trp Ala Leu Ser Phe Tyr Pro Ala Glu Ile Thr Leu Thr Trp Gln 530 535 540 Arg Asp Gly Glu Asp Gln Thr Gln Asp Thr Glu Leu Val Glu Thr Arg 545 550 555 560 Pro Cys Gly Asp Gly Thr Phe Gln Lys Trp Ala Ala Val Val Val Pro 565 570 575 Ser Gly Gln Glu Gln Arg Tyr Thr Cys His Val Gln His Glu Gly Leu 580 585 590 Pro Lys Pro Leu Thr Leu Arg Trp Glu Ala Ala Ala Gly Gly Asp Lys 595 600 605 Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro 610 615 620 Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser 625 630 635 640 Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp 645 650 655 Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 660 665 670 Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val 675 680 685 Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 690 695 700 Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys 705 710 715 720 Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr 725 730 735 Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr 740 745 750 Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 755 760 765 Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 770 775 780 Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys 785 790 795 800 Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 805 810 815 Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 820 825 830 Lys <210> 33 <211> 813 <212> PRT <213> homo sapiens <400> 33 Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu Ala 1 5 10 15 Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys 20 25 30 Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Ala Lys Phe Tyr Met Pro Lys 35 40 45 Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 50 55 60 Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu 65 70 75 80 Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu 85 90 95 Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 100 105 110 Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile 115 120 125 Ile Ser Thr Leu Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 130 135 140 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr 145 150 155 160 Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu Ala Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met 165 170 175 Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met 180 185 190 Leu Thr Ala Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu Lys His 195 200 205 Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn 210 215 220 Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser 225 230 235 240 Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe 245 250 255 Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn 260 265 270 Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr Gly Gly 275 280 285 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 290 295 300 Gly Ser Gly Ser His Ser Met Arg Tyr Phe Phe Thr Ser Val Ser Arg 305 310 315 320 Pro Gly Arg Gly Glu Pro Arg Phe Ile Ala Val Gly Tyr Val Asp Asp 325 330 335 Thr Gln Phe Val Arg Phe Asp Ser Asp Ala Ala Ser Gln Arg Met Glu 340 345 350 Pro Arg Ala Pro Trp Ile Glu Gln Glu Gly Pro Glu Tyr Trp Asp Gly 355 360 365 Glu Thr Arg Lys Val Lys Ala His Ser Gln Thr His Arg Val Asp Leu 370 375 380 Gly Thr Leu Arg Gly Ala Tyr Asn Gln Ser Glu Ala Gly Ser His Thr 385 390 395 400 Val Gln Arg Met Tyr Gly Cys Asp Val Gly Ser Asp Trp Arg Phe Leu 405 410 415 Arg Gly Tyr His Gln Tyr Ala Tyr Asp Gly Lys Asp Tyr Ile Ala Leu 420 425 430 Lys Glu Asp Leu Arg Ser Trp Thr Ala Ala Asp Met Ala Ala Gln Thr 435 440 445 Thr Lys His Lys Trp Glu Ala Ala His Val Ala Glu Gln Leu Arg Ala 450 455 460 Tyr Leu Glu Gly Thr Cys Val Glu Trp Leu Arg Arg Tyr Leu Glu Asn 465 470 475 480 Gly Lys Glu Thr Leu Gln Arg Thr Asp Ala Pro Lys Thr His Met Thr 485 490 495 His His Ala Val Ser Asp His Glu Ala Thr Leu Arg Cys Trp Ala Leu 500 505 510 Ser Phe Tyr Pro Ala Glu Ile Thr Leu Thr Trp Gln Arg Asp Gly Glu 515 520 525 Asp Gln Thr Gln Asp Thr Glu Leu Val Glu Thr Arg Pro Cys Gly Asp 530 535 540 Gly Thr Phe Gln Lys Trp Ala Ala Val Val Val Pro Ser Gly Gln Glu 545 550 555 560 Gln Arg Tyr Thr Cys His Val Gln His Glu Gly Leu Pro Lys Pro Leu 565 570 575 Thr Leu Arg Trp Glu Ala Ala Ala Gly Gly Asp Lys Thr His Thr Cys 580 585 590 Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu 595 600 605 Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu 610 615 620 Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys 625 630 635 640 Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys 645 650 655 Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu 660 665 670 Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys 675 680 685 Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys 690 695 700 Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser 705 710 715 720 Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys 725 730 735 Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln 740 745 750 Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly 755 760 765 Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln 770 775 780 Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn 785 790 795 800 His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 805 810 <210> 34 <211> 2505 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polynucleotide <400> 34 atgtacagga tgcaactcct gtcttgcatt gcactaagtc ttgcacttgt cacaaacagt 60 gcacctactt caagttctac aaagaaaaca cagctacaac tggaggcatt actgctggat 120 ttacagatga ttttgaatgg aattaataat tacaagaatc ccaaactcac caggatgctc 180 acagcaaagt tttacatgcc caagaaggcc acagaactga aacatcttca gtgtctagaa 240 gaagaactca aacctctgga ggaagtgcta aatttagctc aaagcaaaaa ctttcactta 300 agacccaggg acttaatcag caatatcaac gtaatagttc tggaactaaa gggatctgaa 360 acaacattca tgtgtgaata tgctgatgag acagcaacca ttgtagaatt tctgaacaga 420 tggattacct tttgtcaaag catcatctca acactgactg gaggcggagg atctggtggt 480 ggaggttctg gtggtggggg atctggaggc ggaggatctg cacctacttc aagttctaca 540 aagaaaacac agctacaact ggaggcatta ctgctggatt tacagatgat tttgaatgga 600 attaataatt acaagaatcc caaactcacc aggatgctca cagcaaagtt ttacatgccc 660 aagaaggcca cagaactgaa acatcttcag tgtctagaag aagaactcaa acctctggag 720 gaagtgctaa atttagctca aagcaaaaac tttcacttaa gacccaggga cttaatcagc 780 aatatcaacg taatagttct ggaactaaag ggatctgaaa caacattcat gtgtgaatat 840 gctgatgaga cagcaaccat tgtagaattt ctgaacagat ggattacctt ttgtcaaagc 900 atcatctcaa cactgactgg aggcggagga tctggtggtg gaggttctgg tggtggggga 960 tctggaggcg gaggatctgg ctctcactcc atgaggtatt tcttcacatc cgtgtcccgg 1020 cccggccgcg gggagccccg cttcatcgca gtgggctacg tggacgacac gcagttcgtg 1080 cggttcgaca gcgacgccgc gagccagagg atggagccgc gggcgccgtg gatagagcag 1140 gagggtccgg agtattggga cggggagaca cggaaagtga aggcccactc acagactcac 1200 cgagtggacc tggggaccct gcgcggcgcc tacaaccaga gcgaggccgg ttctcacacc 1260 gtccagagga tgtatggctg cgacgtgggg tcggactggc gcttcctccg cgggtaccac 1320 cagtacgcct acgacggcaa ggattacatc gccctgaaag aggacctgcg ctcttggacc 1380 gcggcggaca tggcagctca gaccaccaag cacaagtggg aggcggccca tgtggcggag 1440 cagttgagag cctacctgga gggcacgtgc gtggagtggc tccgcagata cctggagaac 1500 gggaaggaga cgctgcagcg cacggacgcc cccaaaacgc atatgactca ccacgctgtc 1560 tctgaccatg aagccaccct gaggtgctgg gccctgagct tctaccctgc ggagatcaca 1620 ctgacctggc agcgggatgg ggaggaccag acccaggaca cggagctcgt ggagaccagg 1680 ccttgcgggg atggaacctt ccagaagtgg gcggctgtgg tggtgccttc tggacaggag 1740 cagagataca cctgccatgt gcagcatgag ggtttgccca agcccctcac cctgagatgg 1800 gaggcagctg cgggtggcga caaaactcac acatgcccac cgtgcccagc acctgaactc 1860 ctggggggac cgtcagtctt cctcttcccc ccaaaaccca aggacaccct catgatctcc 1920 cggacccctg aggtcacatg cgtggtggtg gacgtgagcc acgaagaccc tgaggtcaag 1980 ttcaactggt acgtggacgg cgtggaggtg cataatgcca agacaaagcc gcgggaggag 2040 cagtacgcaa gcacgtaccg tgtggtcagc gtcctcaccg tcctgcacca ggactggctg 2100 aatggcaagg agtacaagtg caaggtctcc aacaaagccc tcccagcccc catcgagaaa 2160 accatctcca aagccaaagg gcagccccga gaaccacagg tgtacaccct gcccccatcc 2220 cgggaggaga tgaccaagaa ccaggtcagc ctgacctgcc tggtcaaagg cttctatccc 2280 agcgacatcg ccgtggagtg ggagagcaat gggcagccgg agaacaacta caagaccacg 2340 cctcccgtgc tggactccga cggctccttc ttcctctaca gcaagctcac cgtggacaag 2400 agcagatggc agcaggggaa cgtcttctca tgctccgtga tgcacgaggc tctgcacaac 2460 cactacacgc agaagtccct ctccctgtct ccgggtaaat agtga 2505 <210> 35 <211> 833 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 35 Met Tyr Arg Met Gln Leu Leu Ser Cys Ile Ala Leu Ser Leu Ala Leu 1 5 10 15 Val Thr Asn Ser Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu 20 25 30 Gln Leu Glu Ala Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile 35 40 45 Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Ala Lys Phe 50 55 60 Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu 65 70 75 80 Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys 85 90 95 Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile 100 105 110 Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala 115 120 125 Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe 130 135 140 Cys Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 145 150 155 160 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Pro Thr 165 170 175 Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu Ala Leu Leu Leu 180 185 190 Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys 195 200 205 Leu Thr Arg Met Leu Thr Ala Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr 210 215 220 Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu 225 230 235 240 Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg 245 250 255 Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser 260 265 270 Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val 275 280 285 Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile Ile Ser Thr 290 295 300 Leu Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 305 310 315 320 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Ser His Ser Met Arg Tyr Phe Phe Thr 325 330 335 Ser Val Ser Arg Pro Gly Arg Gly Glu Pro Arg Phe Ile Ala Val Gly 340 345 350 Tyr Val Asp Asp Thr Gln Phe Val Arg Phe Asp Ser Asp Ala Ala Ser 355 360 365 Gln Arg Met Glu Pro Arg Ala Pro Trp Ile Glu Gln Glu Gly Pro Glu 370 375 380 Tyr Trp Asp Gly Glu Thr Arg Lys Val Lys Ala His Ser Gln Thr His 385 390 395 400 Arg Val Asp Leu Gly Thr Leu Arg Gly Ala Tyr Asn Gln Ser Glu Ala 405 410 415 Gly Ser His Thr Val Gln Arg Met Tyr Gly Cys Asp Val Gly Ser Asp 420 425 430 Trp Arg Phe Leu Arg Gly Tyr His Gln Tyr Ala Tyr Asp Gly Lys Asp 435 440 445 Tyr Ile Ala Leu Lys Glu Asp Leu Arg Ser Trp Thr Ala Ala Asp Met 450 455 460 Ala Ala Gln Thr Thr Lys His Lys Trp Glu Ala Ala His Val Ala Glu 465 470 475 480 Gln Leu Arg Ala Tyr Leu Glu Gly Thr Cys Val Glu Trp Leu Arg Arg 485 490 495 Tyr Leu Glu Asn Gly Lys Glu Thr Leu Gln Arg Thr Asp Ala Pro Lys 500 505 510 Thr His Met Thr His His Ala Val Ser Asp His Glu Ala Thr Leu Arg 515 520 525 Cys Trp Ala Leu Ser Phe Tyr Pro Ala Glu Ile Thr Leu Thr Trp Gln 530 535 540 Arg Asp Gly Glu Asp Gln Thr Gln Asp Thr Glu Leu Val Glu Thr Arg 545 550 555 560 Pro Cys Gly Asp Gly Thr Phe Gln Lys Trp Ala Ala Val Val Val Pro 565 570 575 Ser Gly Gln Glu Gln Arg Tyr Thr Cys His Val Gln His Glu Gly Leu 580 585 590 Pro Lys Pro Leu Thr Leu Arg Trp Glu Ala Ala Ala Gly Gly Asp Lys 595 600 605 Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro 610 615 620 Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser 625 630 635 640 Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp 645 650 655 Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 660 665 670 Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val 675 680 685 Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 690 695 700 Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys 705 710 715 720 Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr 725 730 735 Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr 740 745 750 Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 755 760 765 Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 770 775 780 Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys 785 790 795 800 Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 805 810 815 Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 820 825 830 Lys <210> 36 <211> 813 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 36 Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu Ala 1 5 10 15 Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys 20 25 30 Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Ala Lys Phe Tyr Met Pro Lys 35 40 45 Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 50 55 60 Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu 65 70 75 80 Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu 85 90 95 Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 100 105 110 Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile 115 120 125 Ile Ser Thr Leu Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 130 135 140 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr 145 150 155 160 Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu Ala Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met 165 170 175 Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met 180 185 190 Leu Thr Ala Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu Lys His 195 200 205 Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn 210 215 220 Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser 225 230 235 240 Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe 245 250 255 Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn 260 265 270 Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr Gly Gly 275 280 285 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 290 295 300 Gly Ser Gly Ser His Ser Met Arg Tyr Phe Phe Thr Ser Val Ser Arg 305 310 315 320 Pro Gly Arg Gly Glu Pro Arg Phe Ile Ala Val Gly Tyr Val Asp Asp 325 330 335 Thr Gln Phe Val Arg Phe Asp Ser Asp Ala Ala Ser Gln Arg Met Glu 340 345 350 Pro Arg Ala Pro Trp Ile Glu Gln Glu Gly Pro Glu Tyr Trp Asp Gly 355 360 365 Glu Thr Arg Lys Val Lys Ala His Ser Gln Thr His Arg Val Asp Leu 370 375 380 Gly Thr Leu Arg Gly Ala Tyr Asn Gln Ser Glu Ala Gly Ser His Thr 385 390 395 400 Val Gln Arg Met Tyr Gly Cys Asp Val Gly Ser Asp Trp Arg Phe Leu 405 410 415 Arg Gly Tyr His Gln Tyr Ala Tyr Asp Gly Lys Asp Tyr Ile Ala Leu 420 425 430 Lys Glu Asp Leu Arg Ser Trp Thr Ala Ala Asp Met Ala Ala Gln Thr 435 440 445 Thr Lys His Lys Trp Glu Ala Ala His Val Ala Glu Gln Leu Arg Ala 450 455 460 Tyr Leu Glu Gly Thr Cys Val Glu Trp Leu Arg Arg Tyr Leu Glu Asn 465 470 475 480 Gly Lys Glu Thr Leu Gln Arg Thr Asp Ala Pro Lys Thr His Met Thr 485 490 495 His His Ala Val Ser Asp His Glu Ala Thr Leu Arg Cys Trp Ala Leu 500 505 510 Ser Phe Tyr Pro Ala Glu Ile Thr Leu Thr Trp Gln Arg Asp Gly Glu 515 520 525 Asp Gln Thr Gln Asp Thr Glu Leu Val Glu Thr Arg Pro Cys Gly Asp 530 535 540 Gly Thr Phe Gln Lys Trp Ala Ala Val Val Val Pro Ser Gly Gln Glu 545 550 555 560 Gln Arg Tyr Thr Cys His Val Gln His Glu Gly Leu Pro Lys Pro Leu 565 570 575 Thr Leu Arg Trp Glu Ala Ala Ala Gly Gly Asp Lys Thr His Thr Cys 580 585 590 Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu 595 600 605 Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu 610 615 620 Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys 625 630 635 640 Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys 645 650 655 Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu 660 665 670 Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys 675 680 685 Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys 690 695 700 Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser 705 710 715 720 Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys 725 730 735 Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln 740 745 750 Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly 755 760 765 Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln 770 775 780 Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn 785 790 795 800 His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 805 810 <210> 37 <211> 2505 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polynucleotide <400> 37 atgtacagga tgcaactcct gtcttgcatt gcactaagtc ttgcacttgt cacaaacagt 60 gcacctactt caagttctac aaagaaaaca cagctacaac tggaggcatt actgctggat 120 ttacagatga ttttgaatgg aattaataat tacaagaatc ccaaactcac caggatgctc 180 acagcaaagt tttacatgcc caagaaggcc acagaactga aacatcttca gtgtctagaa 240 gaagaactca aacctctgga ggaagtgcta aatttagctc aaagcaaaaa ctttcactta 300 agacccaggg acttaatcag caatatcaac gtaatagttc tggaactaaa gggatctgaa 360 acaacattca tgtgtgaata tgctgatgag acagcaacca ttgtagaatt tctgaacaga 420 tggattacct tttgtcaaag catcatctca acactgactg gaggcggagg atctggtggt 480 ggaggttctg gtggtggggg atctggaggc ggaggatctg cacctacttc aagttctaca 540 aagaaaacac agctacaact ggaggcatta ctgctggatt tacagatgat tttgaatgga 600 attaataatt acaagaatcc caaactcacc aggatgctca cagcaaagtt ttacatgccc 660 aagaaggcca cagaactgaa acatcttcag tgtctagaag aagaactcaa acctctggag 720 gaagtgctaa atttagctca aagcaaaaac tttcacttaa gacccaggga cttaatcagc 780 aatatcaacg taatagttct ggaactaaag ggatctgaaa caacattcat gtgtgaatat 840 gctgatgaga cagcaaccat tgtagaattt ctgaacagat ggattacctt ttgtcaaagc 900 atcatctcaa cactgactgg aggcggagga tctggtggtg gaggttctgg tggtggggga 960 tctggaggcg gaggatctgg ctctcactcc atgaggtatt tcttcacatc cgtgtcccgg 1020 cccggccgcg gggagccccg cttcatcgca gtgggctacg tggacgacac gcagttcgtg 1080 cggttcgaca gcgacgccgc gagccagagg atggagccgc gggcgccgtg gatagagcag 1140 gagggtccgg agtattggga cggggagaca cggaaagtga aggcccactc acagactcac 1200 cgagtggacc tggggaccct gcgcggcgcc tacaaccaga gcgaggccgg ttctcacacc 1260 gtccagagga tgtatggctg cgacgtgggg tcggactggc gcttcctccg cgggtaccac 1320 cagtacgcct acgacggcaa ggattacatc gccctgaaag aggacctgcg ctcttggacc 1380 gcggcggaca tggcagctca gaccaccaag cacaagtggg aggcggccca tgtggcggag 1440 cagttgagag cctacctgga gggcacgtgc gtggagtggc tccgcagata cctggagaac 1500 gggaaggaga cgctgcagcg cacggacgcc cccaaaacgc atatgactca ccacgctgtc 1560 tctgaccatg aagccaccct gaggtgctgg gccctgagct tctaccctgc ggagatcaca 1620 ctgacctggc agcgggatgg ggaggaccag acccaggaca cggagctcgt ggagaccagg 1680 ccttgcgggg atggaacctt ccagaagtgg gcggctgtgg tggtgccttc tggacaggag 1740 cagagataca cctgccatgt gcagcatgag ggtttgccca agcccctcac cctgagatgg 1800 gaggcagctg cgggtggcga caaaactcac acatgcccac cgtgcccagc acctgaagcc 1860 gccgggggac cgtcagtctt cctcttcccc ccaaaaccca aggacaccct catgatctcc 1920 cggacccctg aggtcacatg cgtggtggtg gacgtgagcc acgaagaccc tgaggtcaag 1980 ttcaactggt acgtggacgg cgtggaggtg cataatgcca agacaaagcc gcgggaggag 2040 cagtacaaca gcacgtaccg tgtggtcagc gtcctcaccg tcctgcacca ggactggctg 2100 aatggcaagg agtacaagtg caaggtctcc aacaaagccc tcccagcccc catcgagaaa 2160 accatctcca aagccaaagg gcagccccga gaaccacagg tgtacaccct gcccccatcc 2220 cgggaggaga tgaccaagaa ccaggtcagc ctgacctgcc tggtcaaagg cttctatccc 2280 agcgacatcg ccgtggagtg ggagagcaat gggcagccgg agaacaacta caagaccacg 2340 cctcccgtgc tggactccga cggctccttc ttcctctaca gcaagctcac cgtggacaag 2400 agcagatggc agcaggggaa cgtcttctca tgctccgtga tgcacgaggc tctgcacaac 2460 cactacacgc agaagtccct ctccctgtct ccgggtaaat agtga 2505 <210> 38 <211> 833 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 38 Met Tyr Arg Met Gln Leu Leu Ser Cys Ile Ala Leu Ser Leu Ala Leu 1 5 10 15 Val Thr Asn Ser Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu 20 25 30 Gln Leu Glu Ala Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile 35 40 45 Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Ala Lys Phe 50 55 60 Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu 65 70 75 80 Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys 85 90 95 Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile 100 105 110 Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala 115 120 125 Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe 130 135 140 Cys Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 145 150 155 160 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Pro Thr 165 170 175 Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu Ala Leu Leu Leu 180 185 190 Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys 195 200 205 Leu Thr Arg Met Leu Thr Ala Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr 210 215 220 Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu 225 230 235 240 Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg 245 250 255 Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser 260 265 270 Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val 275 280 285 Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile Ile Ser Thr 290 295 300 Leu Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 305 310 315 320 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Ser His Ser Met Arg Tyr Phe Phe Thr 325 330 335 Ser Val Ser Arg Pro Gly Arg Gly Glu Pro Arg Phe Ile Ala Val Gly 340 345 350 Tyr Val Asp Asp Thr Gln Phe Val Arg Phe Asp Ser Asp Ala Ala Ser 355 360 365 Gln Arg Met Glu Pro Arg Ala Pro Trp Ile Glu Gln Glu Gly Pro Glu 370 375 380 Tyr Trp Asp Gly Glu Thr Arg Lys Val Lys Ala His Ser Gln Thr His 385 390 395 400 Arg Val Asp Leu Gly Thr Leu Arg Gly Ala Tyr Asn Gln Ser Glu Ala 405 410 415 Gly Ser His Thr Val Gln Arg Met Tyr Gly Cys Asp Val Gly Ser Asp 420 425 430 Trp Arg Phe Leu Arg Gly Tyr His Gln Tyr Ala Tyr Asp Gly Lys Asp 435 440 445 Tyr Ile Ala Leu Lys Glu Asp Leu Arg Ser Trp Thr Ala Ala Asp Met 450 455 460 Ala Ala Gln Thr Thr Lys His Lys Trp Glu Ala Ala His Val Ala Glu 465 470 475 480 Gln Leu Arg Ala Tyr Leu Glu Gly Thr Cys Val Glu Trp Leu Arg Arg 485 490 495 Tyr Leu Glu Asn Gly Lys Glu Thr Leu Gln Arg Thr Asp Ala Pro Lys 500 505 510 Thr His Met Thr His His Ala Val Ser Asp His Glu Ala Thr Leu Arg 515 520 525 Cys Trp Ala Leu Ser Phe Tyr Pro Ala Glu Ile Thr Leu Thr Trp Gln 530 535 540 Arg Asp Gly Glu Asp Gln Thr Gln Asp Thr Glu Leu Val Glu Thr Arg 545 550 555 560 Pro Cys Gly Asp Gly Thr Phe Gln Lys Trp Ala Ala Val Val Val Pro 565 570 575 Ser Gly Gln Glu Gln Arg Tyr Thr Cys His Val Gln His Glu Gly Leu 580 585 590 Pro Lys Pro Leu Thr Leu Arg Trp Glu Ala Ala Ala Gly Gly Asp Lys 595 600 605 Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Glu Gly Gly Pro 610 615 620 Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser 625 630 635 640 Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp 645 650 655 Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 660 665 670 Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val 675 680 685 Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 690 695 700 Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Ser Ile Glu Lys 705 710 715 720 Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr 725 730 735 Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr 740 745 750 Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 755 760 765 Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 770 775 780 Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys 785 790 795 800 Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 805 810 815 Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 820 825 830 Lys <210> 39 <211> 813 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 39 Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu Ala 1 5 10 15 Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys 20 25 30 Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Ala Lys Phe Tyr Met Pro Lys 35 40 45 Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 50 55 60 Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu 65 70 75 80 Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu 85 90 95 Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 100 105 110 Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile 115 120 125 Ile Ser Thr Leu Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 130 135 140 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr 145 150 155 160 Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu Ala Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met 165 170 175 Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met 180 185 190 Leu Thr Ala Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu Lys His 195 200 205 Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn 210 215 220 Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser 225 230 235 240 Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe 245 250 255 Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn 260 265 270 Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr Gly Gly 275 280 285 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 290 295 300 Gly Ser Gly Ser His Ser Met Arg Tyr Phe Phe Thr Ser Val Ser Arg 305 310 315 320 Pro Gly Arg Gly Glu Pro Arg Phe Ile Ala Val Gly Tyr Val Asp Asp 325 330 335 Thr Gln Phe Val Arg Phe Asp Ser Asp Ala Ala Ser Gln Arg Met Glu 340 345 350 Pro Arg Ala Pro Trp Ile Glu Gln Glu Gly Pro Glu Tyr Trp Asp Gly 355 360 365 Glu Thr Arg Lys Val Lys Ala His Ser Gln Thr His Arg Val Asp Leu 370 375 380 Gly Thr Leu Arg Gly Ala Tyr Asn Gln Ser Glu Ala Gly Ser His Thr 385 390 395 400 Val Gln Arg Met Tyr Gly Cys Asp Val Gly Ser Asp Trp Arg Phe Leu 405 410 415 Arg Gly Tyr His Gln Tyr Ala Tyr Asp Gly Lys Asp Tyr Ile Ala Leu 420 425 430 Lys Glu Asp Leu Arg Ser Trp Thr Ala Ala Asp Met Ala Ala Gln Thr 435 440 445 Thr Lys His Lys Trp Glu Ala Ala His Val Ala Glu Gln Leu Arg Ala 450 455 460 Tyr Leu Glu Gly Thr Cys Val Glu Trp Leu Arg Arg Tyr Leu Glu Asn 465 470 475 480 Gly Lys Glu Thr Leu Gln Arg Thr Asp Ala Pro Lys Thr His Met Thr 485 490 495 His His Ala Val Ser Asp His Glu Ala Thr Leu Arg Cys Trp Ala Leu 500 505 510 Ser Phe Tyr Pro Ala Glu Ile Thr Leu Thr Trp Gln Arg Asp Gly Glu 515 520 525 Asp Gln Thr Gln Asp Thr Glu Leu Val Glu Thr Arg Pro Cys Gly Asp 530 535 540 Gly Thr Phe Gln Lys Trp Ala Ala Val Val Val Pro Ser Gly Gln Glu 545 550 555 560 Gln Arg Tyr Thr Cys His Val Gln His Glu Gly Leu Pro Lys Pro Leu 565 570 575 Thr Leu Arg Trp Glu Ala Ala Ala Gly Gly Asp Lys Thr His Thr Cys 580 585 590 Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Glu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu 595 600 605 Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu 610 615 620 Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys 625 630 635 640 Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys 645 650 655 Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu 660 665 670 Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys 675 680 685 Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys 690 695 700 Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser 705 710 715 720 Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys 725 730 735 Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln 740 745 750 Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly 755 760 765 Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln 770 775 780 Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn 785 790 795 800 His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 805 810 <210> 40 <211> 2505 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polynucleotide <400> 40 atgtacagga tgcaactcct gtcttgcatt gcactaagtc ttgcacttgt cacaaacagt 60 gcacctactt caagttctac aaagaaaaca cagctacaac tggaggcatt actgctggat 120 ttacagatga ttttgaatgg aattaataat tacaagaatc ccaaactcac caggatgctc 180 acagcaaagt tttacatgcc caagaaggcc acagaactga aacatcttca gtgtctagaa 240 gaagaactca aacctctgga ggaagtgcta aatttagctc aaagcaaaaa ctttcactta 300 agacccaggg acttaatcag caatatcaac gtaatagttc tggaactaaa gggatctgaa 360 acaacattca tgtgtgaata tgctgatgag acagcaacca ttgtagaatt tctgaacaga 420 tggattacct tttgtcaaag catcatctca acactgactg gaggcggagg atctggtggt 480 ggaggttctg gtggtggggg atctggaggc ggaggatctg cacctacttc aagttctaca 540 aagaaaacac agctacaact ggaggcatta ctgctggatt tacagatgat tttgaatgga 600 attaataatt acaagaatcc caaactcacc aggatgctca cagcaaagtt ttacatgccc 660 aagaaggcca cagaactgaa acatcttcag tgtctagaag aagaactcaa acctctggag 720 gaagtgctaa atttagctca aagcaaaaac tttcacttaa gacccaggga cttaatcagc 780 aatatcaacg taatagttct ggaactaaag ggatctgaaa caacattcat gtgtgaatat 840 gctgatgaga cagcaaccat tgtagaattt ctgaacagat ggattacctt ttgtcaaagc 900 atcatctcaa cactgactgg aggcggagga tctggtggtg gaggttctgg tggtggggga 960 tctggaggcg gaggatctgg ctctcactcc atgaggtatt tcttcacatc cgtgtcccgg 1020 cccggccgcg gggagccccg cttcatcgca gtgggctacg tggacgacac gcagttcgtg 1080 cggttcgaca gcgacgccgc gagccagagg atggagccgc gggcgccgtg gatagagcag 1140 gagggtccgg agtattggga cggggagaca cggaaagtga aggcccactc acagactcac 1200 cgagtggacc tggggaccct gcgcggcgcc tacaaccaga gcgaggccgg ttctcacacc 1260 gtccagagga tgtatggctg cgacgtgggg tcggactggc gcttcctccg cgggtaccac 1320 cagtacgcct acgacggcaa ggattacatc gccctgaaag aggacctgcg ctcttggacc 1380 gcggcggaca tggcagctca gaccaccaag cacaagtggg aggcggccca tgtggcggag 1440 cagttgagag cctacctgga gggcacgtgc gtggagtggc tccgcagata cctggagaac 1500 gggaaggaga cgctgcagcg cacggacgcc cccaaaacgc atatgactca ccacgctgtc 1560 tctgaccatg aagccaccct gaggtgctgg gccctgagct tctaccctgc ggagatcaca 1620 ctgacctggc agcgggatgg ggaggaccag acccaggaca cggagctcgt ggagaccagg 1680 ccttgcgggg atggaacctt ccagaagtgg gcggctgtgg tggtgccttc tggacaggag 1740 cagagataca cctgccatgt gcagcatgag ggtttgccca agcccctcac cctgagatgg 1800 gaggcagctg cgggtggcga caaaactcac acatgcccac cgtgcccagc acctgaattc 1860 gaggggggac cgtcagtctt cctcttcccc ccaaaaccca aggacaccct catgatctcc 1920 cggacccctg aggtcacatg cgtggtggtg gacgtgagcc acgaagaccc tgaggtcaag 1980 ttcaactggt acgtggacgg cgtggaggtg cataatgcca agacaaagcc gcgggaggag 2040 cagtacaaca gcacgtaccg tgtggtcagc gtcctcaccg tcctgcacca ggactggctg 2100 aatggcaagg agtacaagtg caaggtctcc aacaaagccc tcccagccag catcgagaaa 2160 accatctcca aagccaaagg gcagccccga gaaccacagg tgtacaccct gcccccatcc 2220 cgggaggaga tgaccaagaa ccaggtcagc ctgacctgcc tggtcaaagg cttctatccc 2280 agcgacatcg ccgtggagtg ggagagcaat gggcagccgg agaacaacta caagaccacg 2340 cctcccgtgc tggactccga cggctccttc ttcctctaca gcaagctcac cgtggacaag 2400 agcagatggc agcaggggaa cgtcttctca tgctccgtga tgcacgaggc tctgcacaac 2460 cactacacgc agaagtccct ctccctgtct ccgggtaaat agtga 2505 <210> 41 <211> 144 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 41 Met Ser Arg Ser Val Ala Leu Ala Val Leu Ala Leu Leu Ser Leu Ser 1 5 10 15 Gly Leu Glu Ala Tyr Met Leu Asp Leu Gln Pro Glu Thr Thr Gly Gly 20 25 30 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ile Gln Arg 35 40 45 Thr Pro Lys Ile Gln Val Tyr Ser Cys His Pro Ala Glu Asn Gly Lys 50 55 60 Ser Asn Phe Leu Asn Cys Tyr Val Ser Gly Phe His Pro Ser Asp Ile 65 70 75 80 Glu Val Asp Leu Leu Lys Asn Gly Glu Arg Ile Glu Lys Val Glu His 85 90 95 Ser Asp Leu Ser Phe Ser Lys Asp Trp Ser Phe Tyr Leu Leu Tyr Tyr 100 105 110 Thr Glu Phe Thr Pro Thr Glu Lys Asp Glu Tyr Ala Cys Arg Val Asn 115 120 125 His Val Thr Leu Ser Gln Pro Lys Ile Val Lys Trp Asp Arg Asp Met 130 135 140 <210> 42 <211> 248 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 42 Tyr Met Leu Asp Leu Gln Pro Glu Thr Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly 1 5 10 15 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ile Gln Tyr Met Leu Asp Leu 20 25 30 Gln Pro Glu Thr Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 35 40 45 Gly Gly Gly Ser Ile Gln Arg Thr Pro Lys Ile Gln Val Tyr Ser Cys 50 55 60 His Pro Ala Glu Asn Gly Lys Ser Asn Phe Leu Asn Cys Tyr Val Ser 65 70 75 80 Gly Phe His Pro Ser Asp Ile Glu Val Asp Leu Leu Lys Asn Gly Glu 85 90 95 Arg Ile Glu Lys Val Glu His Ser Asp Leu Ser Phe Ser Lys Asp Trp 100 105 110 Ser Phe Tyr Leu Leu Tyr Tyr Thr Glu Phe Thr Pro Thr Glu Lys Asp 115 120 125 Glu Tyr Ala Cys Arg Val Asn His Val Thr Leu Ser Gln Pro Lys Ile 130 135 140 Val Lys Trp Asp Arg Asp Met Arg Thr Pro Lys Ile Gln Val Tyr Ser 145 150 155 160 Cys His Pro Ala Glu Asn Gly Lys Ser Asn Phe Leu Asn Cys Tyr Val 165 170 175 Ser Gly Phe His Pro Ser Asp Ile Glu Val Asp Leu Leu Lys Asn Gly 180 185 190 Glu Arg Ile Glu Lys Val Glu His Ser Asp Leu Ser Phe Ser Lys Asp 195 200 205 Trp Ser Phe Tyr Leu Leu Tyr Tyr Thr Glu Phe Thr Pro Thr Glu Lys 210 215 220 Asp Glu Tyr Ala Cys Arg Val Asn His Val Thr Leu Ser Gln Pro Lys 225 230 235 240 Ile Val Lys Trp Asp Arg Asp Met 245 <210> 43 <211> 438 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polynucleotide <400> 43 atgtctcgct ccgtggcctt agctgtgctc gcgctactct ctctttctgg cctggaggcc 60 tacatgctcg atttgcagcc cgaaacgacg ggtggaggtg gttctggagg aggcggttcg 120 ggcggaggtg gtagtatcca gcgtactcca aagattcagg tttactcatg ccatccagca 180 gagaatggaa agtcaaattt cctgaattgc tatgtgtctg ggtttcatcc atccgacatt 240 gaagttgact tactgaagaa tggagagaga attgaaaaag tggagcattc agacttgtct 300 ttcagcaagg actggtcttt ctatctcttg tattatactg aattcacccc cactgaaaaa 360 gatgagtatg cctgccgtgt gaaccacgtg actttgtcac agcccaagat agttaagtgg 420 gatcgagaca tgtagtga 438 <210> 44 <211> 227 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 44 Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly 1 5 10 15 Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 20 25 30 Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 35 40 45 Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 50 55 60 His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 65 70 75 80 Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 85 90 95 Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile 100 105 110 Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 115 120 125 Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser 130 135 140 Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 145 150 155 160 Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 165 170 175 Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 180 185 190 Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 195 200 205 His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 210 215 220 Pro Gly Lys 225 <210> 45 <211> 227 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 45 Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Glu Gly 1 5 10 15 Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 20 25 30 Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 35 40 45 Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 50 55 60 His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 65 70 75 80 Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 85 90 95 Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Ser Ile 100 105 110 Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 115 120 125 Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser 130 135 140 Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 145 150 155 160 Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 165 170 175 Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 180 185 190 Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 195 200 205 His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 210 215 220 Pro Gly Lys 225 <210> 46 <211> 227 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 46 Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly 1 5 10 15 Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 20 25 30 Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 35 40 45 Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 50 55 60 His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr 65 70 75 80 Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 85 90 95 Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile 100 105 110 Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 115 120 125 Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser 130 135 140 Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 145 150 155 160 Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 165 170 175 Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 180 185 190 Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 195 200 205 His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 210 215 220 Pro Gly Lys 225 <210> 47 <211> 227 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 47 Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 1 5 10 15 Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 20 25 30 Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 35 40 45 Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 50 55 60 His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 65 70 75 80 Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 85 90 95 Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile 100 105 110 Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 115 120 125 Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser 130 135 140 Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 145 150 155 160 Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 165 170 175 Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 180 185 190 Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 195 200 205 His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 210 215 220 Pro Gly Lys 225 <210> 48 <211> 99 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 48 Ile Gln Arg Thr Pro Lys Ile Gln Val Tyr Ser Cys His Pro Ala Glu 1 5 10 15 Asn Gly Lys Ser Asn Phe Leu Asn Cys Tyr Val Ser Gly Phe His Pro 20 25 30 Ser Asp Ile Glu Val Asp Leu Leu Lys Asn Gly Glu Arg Ile Glu Lys 35 40 45 Val Glu His Ser Asp Leu Ser Phe Ser Lys Asp Trp Ser Phe Tyr Leu 50 55 60 Leu Tyr Tyr Thr Glu Phe Thr Pro Thr Glu Lys Asp Glu Tyr Ala Cys 65 70 75 80 Arg Val Asn His Val Thr Leu Ser Gln Pro Lys Ile Val Lys Trp Asp 85 90 95 Arg Asp Met <210> 49 <211> 133 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 49 Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu Ala 1 5 10 15 Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys 20 25 30 Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Ala Lys Phe Tyr Met Pro Lys 35 40 45 Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 50 55 60 Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu 65 70 75 80 Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu 85 90 95 Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 100 105 110 Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile 115 120 125 Ile Ser Thr Leu Thr 130 <210> 50 <211> 275 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 50 Gly Ser His Ser Met Arg Tyr Phe Phe Thr Ser Val Ser Arg Pro Gly 1 5 10 15 Arg Gly Glu Pro Arg Phe Ile Ala Val Gly Tyr Val Asp Asp Thr Gln 20 25 30 Phe Val Arg Phe Asp Ser Asp Ala Ala Ser Gln Arg Met Glu Pro Arg 35 40 45 Ala Pro Trp Ile Glu Gln Glu Gly Pro Glu Tyr Trp Asp Gly Glu Thr 50 55 60 Arg Lys Val Lys Ala His Ser Gln Thr His Arg Val Asp Leu Gly Thr 65 70 75 80 Leu Arg Gly Ala Tyr Asn Gln Ser Glu Ala Gly Ser His Thr Val Gln 85 90 95 Arg Met Tyr Gly Cys Asp Val Gly Ser Asp Trp Arg Phe Leu Arg Gly 100 105 110 Tyr His Gln Tyr Ala Tyr Asp Gly Lys Asp Tyr Ile Ala Leu Lys Glu 115 120 125 Asp Leu Arg Ser Trp Thr Ala Ala Asp Met Ala Ala Gln Thr Thr Lys 130 135 140 His Lys Trp Glu Ala Ala His Val Ala Glu Gln Leu Arg Ala Tyr Leu 145 150 155 160 Glu Gly Thr Cys Val Glu Trp Leu Arg Arg Tyr Leu Glu Asn Gly Lys 165 170 175 Glu Thr Leu Gln Arg Thr Asp Ala Pro Lys Thr His Met Thr His His 180 185 190 Ala Val Ser Asp His Glu Ala Thr Leu Arg Cys Trp Ala Leu Ser Phe 195 200 205 Tyr Pro Ala Glu Ile Thr Leu Thr Trp Gln Arg Asp Gly Glu Asp Gln 210 215 220 Thr Gln Asp Thr Glu Leu Val Glu Thr Arg Pro Cys Gly Asp Gly Thr 225 230 235 240 Phe Gln Lys Trp Ala Ala Val Val Val Pro Ser Gly Gln Glu Gln Arg 245 250 255 Tyr Thr Cys His Val Gln His Glu Gly Leu Pro Lys Pro Leu Thr Leu 260 265 270 Arg Trp Glu 275 <210> 51 <211> 447 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 51 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Val Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Gly Ile Asn Pro Ser Asn Gly Gly Thr Asn Phe Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Asn Arg Val Thr Leu Thr Thr Asp Ser Ser Thr Thr Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Lys Ser Leu Gln Phe Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Asp Tyr Arg Phe Asp Met Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro 210 215 220 Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 445 <210> 52 <211> 218 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 52 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Lys Gly Val Ser Thr Ser 20 25 30 Gly Tyr Ser Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro 35 40 45 Arg Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Tyr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 65 70 75 80 Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Ser Arg 85 90 95 Asp Leu Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 110 Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 115 120 125 Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 130 135 140 Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 145 150 155 160 Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 165 170 175 Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 180 185 190 His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 195 200 205 Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 53 <211> 440 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 53 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Asp Cys Lys Ala Ser Gly Ile Thr Phe Ser Asn Ser 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Lys Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Asn Asp Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser 100 105 110 Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser 115 120 125 Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp 130 135 140 Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr 145 150 155 160 Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr 165 170 175 Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys 180 185 190 Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp 195 200 205 Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala 210 215 220 Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 225 230 235 240 Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val 245 250 255 Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val 260 265 270 Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln 275 280 285 Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln 290 295 300 Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly 305 310 315 320 Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro 325 330 335 Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr 340 345 350 Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 355 360 365 Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr 370 375 380 Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr 385 390 395 400 Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe 405 410 415 Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys 420 425 430 Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 <210> 54 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 54 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Ser Asn Trp Pro Arg 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 55 <211> 448 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 55 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Thr Phe Ile Ser Tyr Asp Gly Asn Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Thr Gly Trp Leu Gly Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro 115 120 125 Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly 130 135 140 Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn 145 150 155 160 Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln 165 170 175 Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser 180 185 190 Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser 195 200 205 Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr 210 215 220 His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser 225 230 235 240 Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg 245 250 255 Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro 260 265 270 Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 275 280 285 Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val 290 295 300 Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 305 310 315 320 Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr 325 330 335 Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu 340 345 350 Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys 355 360 365 Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser 370 375 380 Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp 385 390 395 400 Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser 405 410 415 Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 420 425 430 Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 56 <211> 215 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 56 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Gly Ser Ser 20 25 30 Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Ala Phe Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro 85 90 95 Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala 100 105 110 Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser 115 120 125 Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 130 135 140 Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser 145 150 155 160 Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu 165 170 175 Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val 180 185 190 Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 195 200 205 Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 57 <211> 448 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 57 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ser 20 25 30 Trp Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Trp Ile Ser Pro Tyr Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg His Trp Pro Gly Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro 115 120 125 Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly 130 135 140 Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn 145 150 155 160 Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln 165 170 175 Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser 180 185 190 Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser 195 200 205 Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr 210 215 220 His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser 225 230 235 240 Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg 245 250 255 Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro 260 265 270 Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 275 280 285 Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val 290 295 300 Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 305 310 315 320 Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr 325 330 335 Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu 340 345 350 Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys 355 360 365 Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser 370 375 380 Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp 385 390 395 400 Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser 405 410 415 Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 420 425 430 Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 58 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 58 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Leu Tyr His Pro Ala 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 59 <211> 276 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 59 Gly Ser His Ser Met Arg Tyr Phe Phe Thr Ser Val Ser Arg Pro Gly 1 5 10 15 Arg Gly Glu Pro Arg Phe Ile Ala Val Gly Tyr Val Asp Asp Thr Gln 20 25 30 Phe Val Arg Phe Asp Ser Asp Ala Ala Ser Gln Arg Met Glu Pro Arg 35 40 45 Ala Pro Trp Ile Glu Gln Glu Gly Pro Glu Tyr Trp Asp Gly Glu Thr 50 55 60 Arg Lys Val Lys Ala His Ser Gln Thr His Arg Val Asp Leu Gly Thr 65 70 75 80 Leu Arg Gly Tyr Tyr Asn Gln Ser Glu Ala Gly Ser His Thr Val Gln 85 90 95 Arg Met Tyr Gly Cys Asp Val Gly Ser Asp Trp Arg Phe Leu Arg Gly 100 105 110 Tyr His Gln Tyr Ala Tyr Asp Gly Lys Asp Tyr Ile Ala Leu Lys Glu 115 120 125 Asp Leu Arg Ser Trp Thr Ala Ala Asp Met Ala Ala Gln Thr Thr Lys 130 135 140 His Lys Trp Glu Ala Ala His Val Ala Glu Gln Leu Arg Ala Tyr Leu 145 150 155 160 Glu Gly Thr Cys Val Glu Trp Leu Arg Arg Tyr Leu Glu Asn Gly Lys 165 170 175 Glu Thr Leu Gln Arg Thr Asp Ala Pro Lys Thr His Met Thr His His 180 185 190 Ala Val Ser Asp His Glu Ala Thr Leu Arg Cys Trp Ala Leu Ser Phe 195 200 205 Tyr Pro Ala Glu Ile Thr Leu Thr Trp Gln Arg Asp Gly Glu Asp Gln 210 215 220 Thr Gln Asp Thr Glu Leu Val Glu Thr Arg Pro Ala Gly Asp Gly Thr 225 230 235 240 Phe Gln Lys Trp Ala Ala Val Val Val Pro Ser Gly Gln Glu Gln Arg 245 250 255 Tyr Thr Cys His Val Gln His Glu Gly Leu Pro Lys Pro Leu Thr Leu 260 265 270 Arg Trp Glu Pro 275 <210> 60 <211> 274 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 60 Gly Pro His Ser Leu Arg Tyr Phe Val Thr Ala Val Ser Arg Pro Gly 1 5 10 15 Leu Gly Glu Pro Arg Phe Ile Ala Val Gly Tyr Val Asp Asp Thr Gln 20 25 30 Phe Val Arg Phe Asp Ser Asp Ala Asp Asn Pro Arg Phe Glu Pro Arg 35 40 45 Ala Pro Trp Met Glu Gln Glu Gly Pro Glu Tyr Trp Glu Glu Gln Thr 50 55 60 Gln Arg Ala Lys Ser Asp Glu Gln Trp Phe Arg Val Ser Leu Arg Thr 65 70 75 80 Ala Gln Arg Tyr Tyr Asn Gln Ser Lys Gly Gly Ser His Thr Phe Gln 85 90 95 Arg Met Phe Gly Cys Asp Val Gly Ser Asp Trp Arg Leu Leu Arg Gly 100 105 110 Tyr Gln Gln Phe Ala Tyr Asp Gly Arg Asp Tyr Ile Ala Leu Asn Glu 115 120 125 Asp Leu Lys Thr Trp Thr Ala Ala Asp Thr Ala Ala Leu Ile Thr Arg 130 135 140 Arg Lys Trp Glu Gln Ala Gly Asp Ala Glu Tyr Tyr Arg Ala Tyr Leu 145 150 155 160 Glu Gly Glu Cys Val Glu Trp Leu Arg Arg Tyr Leu Glu Leu Gly Asn 165 170 175 Glu Thr Leu Leu Arg Thr Asp Ser Pro Lys Ala His Val Thr Tyr His 180 185 190 Pro Arg Ser Gln Val Asp Val Thr Leu Arg Cys Trp Ala Leu Gly Phe 195 200 205 Tyr Pro Ala Asp Ile Thr Leu Thr Trp Gln Leu Asn Gly Glu Asp Leu 210 215 220 Thr Gln Asp Met Glu Leu Val Glu Thr Arg Pro Ala Gly Asp Gly Thr 225 230 235 240 Phe Gln Lys Trp Ala Ala Val Val Val Pro Leu Gly Lys Glu Gln Asn 245 250 255 Tyr Thr Cys His Val His His Lys Gly Leu Pro Glu Pro Leu Thr Leu 260 265 270 Arg Trp <210> 61 <211> 99 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 61 Ile Gln Arg Thr Pro Lys Ile Gln Val Tyr Ser Arg His Pro Ala Glu 1 5 10 15 Asn Gly Lys Ser Asn Phe Leu Asn Cys Tyr Val Ser Gly Phe His Pro 20 25 30 Ser Asp Ile Glu Val Asp Leu Leu Lys Asn Gly Glu Arg Ile Glu Lys 35 40 45 Val Glu His Ser Asp Leu Ser Phe Ser Lys Asp Trp Ser Phe Tyr Leu 50 55 60 Leu Tyr Tyr Thr Glu Phe Thr Pro Thr Glu Lys Asp Glu Tyr Ala Cys 65 70 75 80 Arg Val Asn His Val Thr Leu Ser Gln Pro Lys Ile Val Lys Trp Asp 85 90 95 Arg Asp Met <210> 62 <211> 276 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 62 Gly Ser His Ser Met Arg Tyr Phe Phe Thr Ser Val Ser Arg Pro Gly 1 5 10 15 Arg Gly Glu Pro Arg Phe Ile Ala Val Gly Tyr Val Asp Asp Thr Gln 20 25 30 Phe Val Arg Phe Asp Ser Asp Ala Ala Ser Gln Arg Met Glu Pro Arg 35 40 45 Ala Pro Trp Ile Glu Gln Glu Gly Pro Glu Tyr Trp Asp Gly Glu Thr 50 55 60 Arg Lys Val Lys Ala His Ser Gln Thr His Arg Val Asp Leu Gly Thr 65 70 75 80 Leu Arg Gly Tyr Tyr Asn Gln Ser Glu Ala Gly Ser His Thr Val Gln 85 90 95 Arg Met Tyr Gly Cys Asp Val Gly Ser Asp Trp Arg Phe Leu Arg Gly 100 105 110 Tyr His Gln Tyr Ala Tyr Asp Gly Lys Asp Tyr Ile Ala Leu Lys Glu 115 120 125 Asp Leu Arg Ser Trp Thr Ala Ala Asp Met Ala Ala Gln Thr Thr Lys 130 135 140 His Lys Trp Glu Ala Ala His Val Ala Glu Gln Leu Arg Ala Tyr Leu 145 150 155 160 Glu Gly Thr Cys Val Glu Trp Leu Arg Arg Tyr Leu Glu Asn Gly Lys 165 170 175 Glu Thr Leu Gln Arg Thr Asp Ala Pro Lys Thr His Met Thr His His 180 185 190 Ala Val Ser Asp His Glu Ala Thr Leu Arg Cys Trp Ala Leu Ser Phe 195 200 205 Tyr Pro Ala Glu Ile Thr Leu Thr Trp Gln Arg Asp Gly Glu Asp Gln 210 215 220 Thr Gln Asp Thr Glu Leu Val Glu Thr Arg Pro Cys Gly Asp Gly Thr 225 230 235 240 Phe Gln Lys Trp Ala Ala Val Val Val Pro Ser Gly Gln Glu Gln Arg 245 250 255 Tyr Thr Cys His Val Gln His Glu Gly Leu Pro Lys Pro Leu Thr Leu 260 265 270 Arg Trp Glu Pro 275 <210> 63 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 63 Gly Ser Gly Gly Ser 1 5 <210> 64 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 64 Gly Gly Gly Ser 1 <210> 65 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 65 Gly Gly Ser Gly 1 <210> 66 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 66 Gly Gly Ser Gly Gly 1 5 <210> 67 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 67 Gly Ser Gly Ser Gly 1 5 <210> 68 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 68 Gly Ser Gly Gly Gly 1 5 <210> 69 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 69 Gly Gly Gly Ser Gly 1 5 <210> 70 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 70 Gly Ser Ser Ser Gly 1 5 <210> 71 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 71 Gly Ser Ser Ser Ser 1 5 <210> 72 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 72 Gly Gly Gly Gly Ser 1 5 <210> 73 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 73 Ala Ala Ala Gly Gly 1 5 <210> 74 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 74 Gly Cys Gly Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 1 5 10 15 <210> 75 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 75 Leu Leu Met Gly Thr Leu Gly Ile Val 1 5 <210> 76 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 76 Thr Leu Gly Ile Val Cys Pro Ile 1 5 <210> 77 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 77 Tyr Met Leu Asp Leu Gln Pro Glu Thr Thr 1 5 10 <210> 78 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 78 Tyr Met Leu Asp Leu Gln Pro Glu Thr 1 5 <210> 79 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 79 Tyr Pro Tyr Asp Val Pro Asp Tyr Ala 1 5 <210> 80 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 80 Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys 1 5 <210> 81 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 81 Glu Gln Lys Leu Ile Ser Glu Glu Asp Leu 1 5 10 <210> 82 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 82 His His His His His 1 5 <210> 83 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 83 His His His His His His 1 5 <210> 84 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 84 Trp Ser His Pro Gln Phe Glu Lys 1 5 <210> 85 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 85 Arg Tyr Ile Arg Ser 1 5 <210> 86 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 86 Phe His His Thr 1 <210> 87 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 87 Trp Glu Ala Ala Ala Arg Glu Ala Cys Cys Arg Glu Cys Cys Ala Arg 1 5 10 15 Ala <210> 88 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 88 Leu Glu Val Leu Phe Gln Gly Pro 1 5 <210> 89 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 89 Leu Val Pro Arg 1 <210> 90 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 90 Glu Asn Leu Tyr Thr Gln Ser 1 5 <210> 91 <211> 22 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 91 Gly Ser Gly Ala Thr Asn Phe Ser Leu Leu Lys Gln Ala Gly Asp Val 1 5 10 15 Glu Glu Asn Pro Gly Pro 20 <210> 92 <211> 21 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 92 Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val Glu 1 5 10 15 Glu Asn Pro Gly Pro 20 <210> 93 <211> 23 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 93 Gly Ser Gly Gln Cys Thr Asn Tyr Ala Leu Leu Lys Leu Ala Gly Asp 1 5 10 15 Val Glu Ser Asn Pro Gly Pro 20 <210> 94 <211> 25 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic polypeptide <400> 94 Gly Ser Gly Val Lys Gln Thr Leu Asn Phe Asp Leu Leu Lys Leu Ala 1 5 10 15 Gly Asp Val Glu Ser Asn Pro Gly Pro 20 25 <210> 95 <211> 119 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 95 Met Ser Arg Ser Val Ala Leu Ala Val Leu Ala Leu Leu Ser Leu Ser 1 5 10 15 Gly Leu Glu Ala Ile Gln Arg Thr Pro Lys Ile Gln Val Tyr Ser Arg 20 25 30 His Pro Ala Glu Asn Gly Lys Ser Asn Phe Leu Asn Cys Tyr Val Ser 35 40 45 Gly Phe His Pro Ser Asp Ile Glu Val Asp Leu Leu Lys Asn Gly Glu 50 55 60 Arg Ile Glu Lys Val Glu His Ser Asp Leu Ser Phe Ser Lys Asp Trp 65 70 75 80 Ser Phe Tyr Leu Leu Tyr Tyr Thr Glu Phe Thr Pro Thr Glu Lys Asp 85 90 95 Glu Tyr Ala Cys Arg Val Asn His Val Thr Leu Ser Gln Pro Lys Ile 100 105 110 Val Lys Trp Asp Arg Asp Met 115 <210> 96 <211> 119 <212> PRT <213> Macaca mulatta <400> 96 Met Ser Arg Ser Val Ala Leu Ala Val Leu Ala Leu Leu Ser Leu Ser 1 5 10 15 Gly Leu Glu Ala Ile Gln Arg Thr Pro Lys Ile Gln Val Tyr Ser Arg 20 25 30 His Pro Pro Glu Asn Gly Lys Pro Asn Phe Leu Asn Cys Tyr Val Ser 35 40 45 Gly Phe His Pro Ser Asp Ile Glu Val Asp Leu Leu Lys Asn Gly Glu 50 55 60 Lys Met Gly Lys Val Glu His Ser Asp Leu Ser Phe Ser Lys Asp Trp 65 70 75 80 Ser Phe Tyr Leu Leu Tyr Tyr Thr Glu Phe Thr Pro Asn Glu Lys Asp 85 90 95 Glu Tyr Ala Cys Arg Val Asn His Val Thr Leu Ser Gly Pro Arg Thr 100 105 110 Val Lys Trp Asp Arg Asp Met 115 <210> 97 <211> 118 <212> PRT <213> Bos taurus <400> 97 Met Ala Arg Phe Val Ala Leu Val Leu Leu Gly Leu Leu Ser Leu Ser 1 5 10 15 Gly Leu Asp Ala Ile Gln Arg Pro Pro Lys Ile Gln Val Tyr Ser Arg 20 25 30 His Pro Pro Glu Asp Gly Lys Pro Asn Tyr Leu Asn Cys Tyr Val Tyr 35 40 45 Gly Phe His Pro Pro Gln Ile Glu Ile Asp Leu Leu Lys Asn Gly Glu 50 55 60 Lys Ile Lys Ser Glu Gln Ser Asp Leu Ser Phe Ser Lys Asp Trp Ser 65 70 75 80 Phe Tyr Leu Leu Ser His Ala Glu Phe Thr Pro Asn Ser Lys Asp Gln 85 90 95 Tyr Ser Cys Arg Val Lys His Val Thr Leu Glu Gln Pro Arg Ile Val 100 105 110 Lys Trp Asp Arg Asp Leu 115 <210> 98 <211> 119 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 98 Met Ala Arg Ser Val Thr Leu Val Phe Leu Val Leu Val Ser Leu Thr 1 5 10 15 Gly Leu Tyr Ala Ile Gln Lys Thr Pro Gln Ile Gln Val Tyr Ser Arg 20 25 30 His Pro Pro Glu Asn Gly Lys Pro Asn Ile Leu Asn Cys Tyr Val Thr 35 40 45 Gln Phe His Pro Pro His Ile Glu Ile Gln Met Leu Lys Asn Gly Lys 50 55 60 Lys Ile Pro Lys Val Glu Met Ser Asp Met Ser Phe Ser Lys Asp Trp 65 70 75 80 Ser Phe Tyr Ile Leu Ala His Thr Glu Phe Thr Pro Thr Glu Thr Asp 85 90 95 Thr Tyr Ala Cys Arg Val Lys His Ala Ser Met Ala Glu Pro Lys Thr 100 105 110 Val Tyr Trp Asp Arg Asp Met 115 <210> 99 <211> 254 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 99 Met Glu Tyr Ala Ser Asp Ala Ser Leu Asp Pro Glu Ala Pro Trp Pro 1 5 10 15 Pro Ala Pro Arg Ala Arg Ala Cys Arg Val Leu Pro Trp Ala Leu Val 20 25 30 Ala Gly Leu Leu Leu Leu Leu Leu Leu Ala Ala Ala Cys Ala Val Phe 35 40 45 Leu Ala Cys Pro Trp Ala Val Ser Gly Ala Arg Ala Ser Pro Gly Ser 50 55 60 Ala Ala Ser Pro Arg Leu Arg Glu Gly Pro Glu Leu Ser Pro Asp Asp 65 70 75 80 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 85 90 95 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 100 105 110 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 115 120 125 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 130 135 140 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 145 150 155 160 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 165 170 175 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 180 185 190 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 195 200 205 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 210 215 220 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 225 230 235 240 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 245 250 <210> 100 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (47)..(47) <223> Xaa is any amino acid other than a lysine <400> 100 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Xaa Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 101 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <400> 101 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Ala Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 102 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (147)..(147) <223> Xaa is any amino acid other than a glutamine <400> 102 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Xaa Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 103 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (11)..(11) <223> Xaa is any amino acid other than a methionine <400> 103 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Xaa Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 104 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (12)..(12) <223> Xaa is any amino acid other than a phenylalanine <400> 104 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Xaa Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 105 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (14)..(14) <223> Xaa is any amino acid other than a glutamine <400> 105 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Xaa Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 106 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (15)..(15) <223> Xaa is any amino acid other than a leucine <400> 106 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Xaa Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 107 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (16)..(16) <223> Xaa is any amino acid other than a valine <400> 107 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Xaa 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 108 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (18)..(18) <223> Xaa is any amino acid other than a glutamine <400> 108 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Xaa Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 109 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (19)..(19) <223> Xaa is any amino acid other than a asparagine <400> 109 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Xaa Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 110 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (20)..(20) <223> Xaa is any amino acid other than a valine <400> 110 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Xaa Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 111 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (21)..(21) <223> Xaa is any amino acid other than a leucine <400> 111 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Xaa Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 112 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (22)..(22) <223> Xaa is any amino acid other than a leucine <400> 112 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Xaa Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 113 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (23)..(23) <223> Xaa is any amino acid other than a isoleucine <400> 113 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Xaa Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 114 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (24)..(24) <223> Xaa is any amino acid other than a aspartic acid <400> 114 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Xaa Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 115 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (25)..(25) <223> Xaa is any amino acid other than a glycine <400> 115 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Xaa Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 116 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (26)..(26) <223> Xaa is any amino acid other than a proline <400> 116 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Xaa Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 117 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (27)..(27) <223> Xaa is any amino acid other than a leucine <400> 117 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Xaa Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 118 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (28)..(28) <223> Xaa is any amino acid other than a serine <400> 118 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Xaa Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 119 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (29)..(29) <223> Xaa is any amino acid other than a Tryptophan <400> 119 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Xaa Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 120 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (30)..(30) <223> Xaa is any amino acid other than a tyrosine <400> 120 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Xaa Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 121 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (31)..(31) <223> Xaa is any amino acid other than a Serine <400> 121 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Xaa Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 122 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (32)..(32) <223> Xaa is any amino acid other than a Aspartic acid <400> 122 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Xaa 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 123 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (33)..(33) <223> Xaa is any amino acid other than a Proline <400> 123 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Xaa Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 124 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (34)..(34) <223> Xaa is any amino acid other than a glycine <400> 124 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Xaa Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 125 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (35)..(35) <223> Xaa is any amino acid other than a Leucine <400> 125 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Xaa Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 126 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (37)..(37) <223> Xaa is any amino acid other than a Glycine <400> 126 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Xaa Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 127 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (38)..(38) <223> Xaa is any amino acid other than a Valine <400> 127 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Xaa Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 128 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (39)..(39) <223> Xaa is any amino acid other than a Serine <400> 128 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Xaa Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 129 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (40)..(40) <223> Xaa is any amino acid other than a Leucine <400> 129 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Xaa Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 130 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (41)..(41) <223> Xaa is any amino acid other than a Threonine <400> 130 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Xaa Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 131 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (42)..(42) <223> Xaa is any amino acid other than a Glycine <400> 131 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Xaa Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 132 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (43)..(43) <223> Xaa is any amino acid other than a Glycine <400> 132 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Xaa Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 133 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (44)..(44) <223> Xaa is any amino acid other than a Leucine <400> 133 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Xaa Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 134 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (45)..(45) <223> Xaa is any amino acid other than a Serine <400> 134 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Xaa Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 135 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (46)..(46) <223> Xaa is any amino acid other than a Tyrosine <400> 135 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Xaa Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 136 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (48)..(48) <223> Xaa is any amino acid other than a Glutamic Acid <400> 136 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Xaa 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 137 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (49)..(49) <223> Xaa is any amino acid other than a Aspartic acid <400> 137 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Xaa Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 138 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (50)..(50) <223> Xaa is any amino acid other than a Threonine <400> 138 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Xaa Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 139 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (51)..(51) <223> Xaa is any amino acid other than a Lysine <400> 139 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Xaa Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 140 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (52)..(52) <223> Xaa is any amino acid other than a Glutamic acid <400> 140 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Xaa Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 141 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (64)..(64) <223> Xaa is any amino acid other than a Phenylalanine <400> 141 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Xaa 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 142 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (65)..(65) <223> Xaa is any amino acid other than a Phenylalanine <400> 142 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Xaa Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 143 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (66)..(66) <223> Xaa is any amino acid other than a Glutamine <400> 143 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Xaa Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 144 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (67)..(67) <223> Xaa is any amino acid other than a Leucine <400> 144 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Xaa Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 145 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (68)..(68) <223> Xaa is any amino acid other than a Glutamic acid <400> 145 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Xaa Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 146 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (69)..(69) <223> Xaa is any amino acid other than a Leucine <400> 146 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Xaa Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 147 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (70)..(70) <223> Xaa is any amino acid other than a Arginine <400> 147 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Xaa Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 148 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (71)..(71) <223> Xaa is any amino acid other than a Arginine <400> 148 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Xaa Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 149 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (72)..(72) <223> Xaa is any amino acid other than a Valine <400> 149 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Xaa Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 150 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (73)..(73) <223> Xaa is any amino acid other than a Valine <400> 150 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Xaa Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 151 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (75)..(75) <223> Xaa is any amino acid other than a Glycine <400> 151 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Xaa Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 152 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (76)..(76) <223> Xaa is any amino acid other than a Glutamic acid <400> 152 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Xaa Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 153 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (77)..(77) <223> Xaa is any amino acid other than a Glycine <400> 153 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Xaa Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 154 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (78)..(78) <223> Xaa is any amino acid other than a Serine <400> 154 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Xaa Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 155 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (104)..(104) <223> Xaa is any amino acid other than a Aspartic acid <400> 155 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Xaa Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 156 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (105)..(105) <223> Xaa is any amino acid other than a Leucine <400> 156 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Xaa Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 157 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (106)..(106) <223> Xaa is any amino acid other than a Proline <400> 157 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Xaa Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 158 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (107)..(107) <223> Xaa is any amino acid other than a Proline <400> 158 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Xaa Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 159 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (109)..(109) <223> Xaa is any amino acid other than a Serine <400> 159 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Xaa Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 160 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (110)..(110) <223> Xaa is any amino acid other than a Serine <400> 160 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Xaa Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 161 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (111)..(111) <223> Xaa is any amino acid other than a Glutamic acid <400> 161 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Xaa Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 162 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (113)..(113) <223> Xaa is any amino acid other than a Arginine <400> 162 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Xaa Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 163 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (114)..(114) <223> Xaa is any amino acid other than a Asparagine <400> 163 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Xaa Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 164 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (115)..(115) <223> Xaa is any amino acid other than a Serine <400> 164 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Xaa Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 165 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (117)..(117) <223> Xaa is any amino acid other than a Phenylalanine <400> 165 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Xaa Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 166 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (130)..(130) <223> Xaa is any amino acid other than a Glutamine <400> 166 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Xaa Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 167 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (131)..(131) <223> Xaa is any amino acid other than a Asparagine <400> 167 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Xaa Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 168 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (132)..(132) <223> Xaa is any amino acid other than a Leucine <400> 168 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Xaa Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 169 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (133)..(133) <223> Xaa is any amino acid other than a Glycine <400> 169 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Xaa Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 170 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (134)..(134) <223> Xaa is any amino acid other than a Valine <400> 170 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Xaa His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 171 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (135)..(135) <223> Xaa is any amino acid other than a Histidine <400> 171 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val Xaa Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 172 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (136)..(136) <223> Xaa is any amino acid other than a Leucine <400> 172 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Xaa His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 173 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (137)..(137) <223> Xaa is any amino acid other than a Histidine <400> 173 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu Xaa Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 174 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (138)..(138) <223> Xaa is any amino acid other than a Threonine <400> 174 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Xaa Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 175 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (139)..(139) <223> Xaa is any amino acid other than a Glutamic acid <400> 175 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Xaa Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 176 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (141)..(141) <223> Xaa is any amino acid other than Arginine <400> 176 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Xaa Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 177 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (143)..(143) <223> Xaa is any amino acid other than a Arginine <400> 177 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Xaa His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 178 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (144)..(144) <223> Xaa is any amino acid other than a Histidine <400> 178 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg Xaa 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 179 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (146)..(146) <223> Xaa is any amino acid other than a Tryptophan <400> 179 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Xaa Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 180 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (148)..(148) <223> Xaa is any amino acid other than a Leucine <400> 180 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Xaa Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 181 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (149)..(149) <223> Xaa is any amino acid other than a Threonine <400> 181 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Xaa Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 182 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (150)..(150) <223> Xaa is any amino acid other than a Glutamine <400> 182 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Xaa Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 183 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (151)..(151) <223> Xaa is any amino acid other than a Glycine <400> 183 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Xaa Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 184 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (153)..(153) <223> Xaa is any amino acid other than a Threonine <400> 184 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Xaa Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 185 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <220> <221> misc_feature <222> (154)..(154) <223> Xaa is any amino acid other than a Valine <400> 185 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Xaa Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 186 <211> 255 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 186 Met Gly Asn Ser Cys Tyr Asn Ile Val Ala Thr Leu Leu Leu Val Leu 1 5 10 15 Asn Phe Glu Arg Thr Arg Ser Leu Gln Asp Pro Cys Ser Asn Cys Pro 20 25 30 Ala Gly Thr Phe Cys Asp Asn Asn Arg Asn Gln Ile Cys Ser Pro Cys 35 40 45 Pro Pro Asn Ser Phe Ser Ser Ala Gly Gly Gln Arg Thr Cys Asp Ile 50 55 60 Cys Arg Gln Cys Lys Gly Val Phe Arg Thr Arg Lys Glu Cys Ser Ser 65 70 75 80 Thr Ser Asn Ala Glu Cys Asp Cys Thr Pro Gly Phe His Cys Leu Gly 85 90 95 Ala Gly Cys Ser Met Cys Glu Gln Asp Cys Lys Gln Gly Gln Glu Leu 100 105 110 Thr Lys Lys Gly Cys Lys Asp Cys Cys Phe Gly Thr Phe Asn Asp Gln 115 120 125 Lys Arg Gly Ile Cys Arg Pro Trp Thr Asn Cys Ser Leu Asp Gly Lys 130 135 140 Ser Val Leu Val Asn Gly Thr Lys Glu Arg Asp Val Val Cys Gly Pro 145 150 155 160 Ser Pro Ala Asp Leu Ser Pro Gly Ala Ser Ser Val Thr Pro Pro Ala 165 170 175 Pro Ala Arg Glu Pro Gly His Ser Pro Gln Ile Ile Ser Phe Phe Leu 180 185 190 Ala Leu Thr Ser Thr Ala Leu Leu Phe Leu Leu Phe Phe Leu Thr Leu 195 200 205 Arg Phe Ser Val Val Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe 210 215 220 Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly 225 230 235 240 Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu 245 250 255 <210> 187 <211> 290 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 187 Met Arg Ile Phe Ala Gly Ile Ile Phe Thr Ala Cys Cys His Leu Leu 1 5 10 15 Arg Ala Phe Thr Ile Thr Ala Pro Lys Asp Leu Tyr Val Val Glu Tyr 20 25 30 Gly Ser Asn Val Thr Met Glu Cys Arg Phe Pro Val Glu Arg Glu Leu 35 40 45 Asp Leu Leu Ala Leu Val Val Tyr Trp Glu Lys Glu Asp Glu Gln Val 50 55 60 Ile Gln Phe Val Ala Gly Glu Glu Asp Leu Lys Pro Gln His Ser Asn 65 70 75 80 Phe Arg Gly Arg Ala Ser Leu Pro Lys Asp Gln Leu Leu Lys Gly Asn 85 90 95 Ala Ala Leu Gln Ile Thr Asp Val Lys Leu Gln Asp Ala Gly Val Tyr 100 105 110 Cys Cys Ile Ile Ser Tyr Gly Gly Ala Asp Tyr Lys Arg Ile Thr Leu 115 120 125 Lys Val Asn Ala Pro Tyr Arg Lys Ile Asn Gln Arg Ile Ser Val Asp 130 135 140 Pro Ala Thr Ser Glu His Glu Leu Ile Cys Gln Ala Glu Gly Tyr Pro 145 150 155 160 Glu Ala Glu Val Ile Trp Thr Asn Ser Asp His Gln Pro Val Ser Gly 165 170 175 Lys Arg Ser Val Thr Thr Ser Arg Thr Glu Gly Met Leu Leu Asn Val 180 185 190 Thr Ser Ser Leu Arg Val Asn Ala Thr Ala Asn Asp Val Phe Tyr Cys 195 200 205 Thr Phe Trp Arg Ser Gln Pro Gly Gln Asn His Thr Ala Glu Leu Ile 210 215 220 Ile Pro Glu Leu Pro Ala Thr His Pro Pro Gln Asn Arg Thr His Trp 225 230 235 240 Val Leu Leu Gly Ser Ile Leu Leu Phe Leu Ile Val Val Ser Thr Val 245 250 255 Leu Leu Phe Leu Arg Lys Gln Val Arg Met Leu Asp Val Glu Lys Cys 260 265 270 Gly Val Glu Asp Thr Ser Ser Lys Asn Arg Asn Asp Thr Gln Phe Glu 275 280 285 Glu Thr 290 <210> 188 <211> 290 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 188 Met Arg Ile Phe Ala Val Phe Ile Phe Met Thr Tyr Trp His Leu Leu 1 5 10 15 Asn Ala Phe Thr Val Thr Val Pro Lys Asp Leu Tyr Val Val Glu Tyr 20 25 30 Gly Ser Asn Met Thr Ile Glu Cys Lys Phe Pro Val Glu Lys Gln Leu 35 40 45 Asp Leu Ala Ala Leu Ile Val Tyr Trp Glu Met Glu Asp Lys Asn Ile 50 55 60 Ile Gln Phe Val His Gly Glu Glu Asp Leu Lys Val Gln His Ser Ser 65 70 75 80 Tyr Arg Gln Arg Ala Arg Leu Leu Lys Asp Gln Leu Ser Leu Gly Asn 85 90 95 Ala Ala Leu Gln Ile Thr Asp Val Lys Leu Gln Asp Ala Gly Val Tyr 100 105 110 Arg Cys Met Ile Ser Tyr Gly Gly Ala Asp Tyr Lys Arg Ile Thr Val 115 120 125 Lys Val Asn Ala Pro Tyr Asn Lys Ile Asn Gln Arg Ile Leu Val Val 130 135 140 Asp Pro Val Thr Ser Glu His Glu Leu Thr Cys Gln Ala Glu Gly Tyr 145 150 155 160 Pro Lys Ala Glu Val Ile Trp Thr Ser Ser Asp His Gln Val Leu Ser 165 170 175 Gly Lys Thr Thr Thr Thr Asn Ser Lys Arg Glu Glu Lys Leu Phe Asn 180 185 190 Val Thr Ser Thr Leu Arg Ile Asn Thr Thr Thr Asn Glu Ile Phe Tyr 195 200 205 Cys Thr Phe Arg Arg Leu Asp Pro Glu Glu Asn His Thr Ala Glu Leu 210 215 220 Val Ile Pro Glu Leu Pro Leu Ala His Pro Pro Asn Glu Arg Thr His 225 230 235 240 Leu Val Ile Leu Gly Ala Ile Leu Leu Cys Leu Gly Val Ala Leu Thr 245 250 255 Phe Ile Phe Arg Leu Arg Lys Gly Arg Met Met Asp Val Lys Lys Cys 260 265 270 Gly Ile Gln Asp Thr Asn Ser Lys Lys Gln Ser Asp Thr His Leu Glu 275 280 285 Glu Thr 290 <210> 189 <211> 208 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic sequence <400> 189 Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys 1 5 10 15 Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 20 25 30 Gln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn 35 40 45 Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 50 55 60 Leu Ser Ile Val Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 65 70 75 80 Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg Glu His 85 90 95 Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser 100 105 110 Ile Ser Asp Phe Glu Ile Pro Thr Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile Cys 115 120 125 Ser Thr Ser Gly Gly Phe Pro Glu Pro His Leu Ser Trp Leu Glu Asn 130 135 140 Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro Glu 145 150 155 160 Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser Lys Leu Asp Phe Asn Met Thr Thr 165 170 175 Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile Lys Tyr Gly His Leu Arg Val Asn 180 185 190 Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro Asp Asn 195 200 205 <210> 190 <211> 302 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 190 Met Arg Leu Gly Ser Pro Gly Leu Leu Phe Leu Leu Phe Ser Ser Leu 1 5 10 15 Arg Ala Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp 20 25 30 Val Glu Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn 35 40 45 Asp Val Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr 50 55 60 Tyr His Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr 65 70 75 80 Arg Asn Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe 85 90 95 Ser Leu Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His 100 105 110 Cys Leu Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val 115 120 125 Glu Val Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser 130 135 140 Ala Pro His Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu Thr Phe Thr Cys Thr Ser 145 150 155 160 Ile Asn Gly Tyr Pro Arg Pro Asn Val Tyr Trp Ile Asn Lys Thr Asp 165 170 175 Asn Ser Leu Leu Asp Gln Ala Leu Gln Asn Asp Thr Val Phe Leu Asn 180 185 190 Met Arg Gly Leu Tyr Asp Val Val Ser Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr 195 200 205 Pro Ser Val Asn Ile Gly Cys Cys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln 210 215 220 Asn Leu Thr Val Gly Ser Gln Thr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp 225 230 235 240 Lys Ile Thr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr 245 250 255 Trp Ser Ile Leu Ala Val Leu Cys Leu Leu Val Val Val Ala Val Ala 260 265 270 Ile Gly Trp Val Cys Arg Asp Arg Cys Leu Gln His Ser Tyr Ala Gly 275 280 285 Ala Trp Ala Val Ser Pro Glu Thr Glu Leu Thr Gly His Val 290 295 300 <210> 191 <211> 183 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 191 Met Glu Arg Val Gln Pro Leu Glu Glu Asn Val Gly Asn Ala Ala Arg 1 5 10 15 Pro Arg Phe Glu Arg Asn Lys Leu Leu Leu Val Ala Ser Val Ile Gln 20 25 30 Gly Leu Gly Leu Leu Leu Cys Phe Thr Tyr Ile Cys Leu His Phe Ser 35 40 45 Ala Leu Gln Val Ser His Arg Tyr Pro Arg Ile Gln Ser Ile Lys Val 50 55 60 Gln Phe Thr Glu Tyr Lys Lys Glu Lys Gly Phe Ile Leu Thr Ser Gln 65 70 75 80 Lys Glu Asp Glu Ile Met Lys Val Gln Asn Asn Ser Val Ile Ile Asn 85 90 95 Cys Asp Gly Phe Tyr Leu Ile Ser Leu Lys Gly Tyr Phe Ser Gln Glu 100 105 110 Val Asn Ile Ser Leu His Tyr Gln Lys Asp Glu Glu Pro Leu Phe Gln 115 120 125 Leu Lys Lys Val Arg Ser Val Asn Ser Leu Met Val Ala Ser Leu Thr 130 135 140 Tyr Lys Asp Lys Val Tyr Leu Asn Val Thr Thr Asp Asn Thr Ser Leu 145 150 155 160 Asp Asp Phe His Val Asn Gly Gly Glu Leu Ile Leu Ile His Gln Asn 165 170 175 Pro Gly Glu Phe Cys Val Leu 180 <210> 192 <211> 273 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 192 Met Ile Phe Leu Leu Leu Met Leu Ser Leu Glu Leu Gln Leu His Gln 1 5 10 15 Ile Ala Ala Leu Phe Thr Val Thr Val Pro Lys Glu Leu Tyr Ile Ile 20 25 30 Glu His Gly Ser Asn Val Thr Leu Glu Cys Asn Phe Asp Thr Gly Ser 35 40 45 His Val Asn Leu Gly Ala Ile Thr Ala Ser Leu Gln Lys Val Glu Asn 50 55 60 Asp Thr Ser Pro His Arg Glu Arg Ala Thr Leu Leu Glu Glu Gln Leu 65 70 75 80 Pro Leu Gly Lys Ala Ser Phe His Ile Pro Gln Val Gln Val Arg Asp 85 90 95 Glu Gly Gln Tyr Gln Cys Ile Ile Ile Tyr Gly Val Ala Trp Asp Tyr 100 105 110 Lys Tyr Leu Thr Leu Lys Val Lys Ala Ser Tyr Arg Lys Ile Asn Thr 115 120 125 His Ile Leu Lys Val Pro Glu Thr Asp Glu Val Glu Leu Thr Cys Gln 130 135 140 Ala Thr Gly Tyr Pro Leu Ala Glu Val Ser Trp Pro Asn Val Ser Val 145 150 155 160 Pro Ala Asn Thr Ser His Ser Arg Thr Pro Glu Gly Leu Tyr Gln Val 165 170 175 Thr Ser Val Leu Arg Leu Lys Pro Pro Pro Gly Arg Asn Phe Ser Cys 180 185 190 Val Phe Trp Asn Thr His Val Arg Glu Leu Thr Leu Ala Ser Ile Asp 195 200 205 Leu Gln Ser Gln Met Glu Pro Arg Thr His Pro Thr Trp Leu Leu His 210 215 220 Ile Phe Ile Pro Phe Cys Ile Ile Ala Phe Ile Phe Ile Ala Thr Val 225 230 235 240 Ile Ala Leu Arg Lys Gln Leu Cys Gln Lys Leu Tyr Ser Ser Lys Asp 245 250 255 Thr Thr Lys Arg Pro Val Thr Thr Thr Lys Arg Glu Val Asn Ser Ala 260 265 270 Ile <210> 193 <211> 329 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 193 Met Asp Pro Gln Cys Thr Met Gly Leu Ser Asn Ile Leu Phe Val Met 1 5 10 15 Ala Phe Leu Leu Ser Gly Ala Ala Pro Leu Lys Ile Gln Ala Tyr Phe 20 25 30 Asn Glu Thr Ala Asp Leu Pro Cys Gln Phe Ala Asn Ser Gln Asn Gln 35 40 45 Ser Leu Ser Glu Leu Val Val Phe Trp Gln Asp Gln Glu Asn Leu Val 50 55 60 Leu Asn Glu Val Tyr Leu Gly Lys Glu Lys Phe Asp Ser Val His Ser 65 70 75 80 Lys Tyr Met Gly Arg Thr Ser Phe Asp Ser Asp Ser Trp Thr Leu Arg 85 90 95 Leu His Asn Leu Gln Ile Lys Asp Lys Gly Leu Tyr Gln Cys Ile Ile 100 105 110 His His Lys Lys Pro Thr Gly Met Ile Arg Ile His Gln Met Asn Ser 115 120 125 Glu Leu Ser Val Leu Ala Asn Phe Ser Gln Pro Glu Ile Val Pro Ile 130 135 140 Ser Asn Ile Thr Glu Asn Val Tyr Ile Asn Leu Thr Cys Ser Ser Ile 145 150 155 160 His Gly Tyr Pro Glu Pro Lys Lys Met Ser Val Leu Leu Arg Thr Lys 165 170 175 Asn Ser Thr Ile Glu Tyr Asp Gly Ile Met Gln Lys Ser Gln Asp Asn 180 185 190 Val Thr Glu Leu Tyr Asp Val Ser Ile Ser Leu Ser Val Ser Phe Pro 195 200 205 Asp Val Thr Ser Asn Met Thr Ile Phe Cys Ile Leu Glu Thr Asp Lys 210 215 220 Thr Arg Leu Leu Ser Ser Pro Phe Ser Ile Glu Leu Glu Asp Pro Gln 225 230 235 240 Pro Pro Pro Asp His Ile Pro Trp Ile Thr Ala Val Leu Pro Thr Val 245 250 255 Ile Ile Cys Val Met Val Phe Cys Leu Ile Leu Trp Lys Trp Lys Lys 260 265 270 Lys Lys Arg Pro Arg Asn Ser Tyr Lys Cys Gly Thr Asn Thr Met Glu 275 280 285 Arg Glu Glu Ser Glu Gln Thr Lys Lys Arg Glu Lys Ile His Ile Pro 290 295 300 Glu Arg Ser Asp Glu Ala Gln Arg Val Phe Lys Ser Ser Lys Thr Ser 305 310 315 320 Ser Cys Asp Lys Ser Asp Thr Cys Phe 325 <210> 194 <211> 281 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 194 Met Gln Gln Pro Phe Asn Tyr Pro Tyr Pro Gln Ile Tyr Trp Val Asp 1 5 10 15 Ser Ser Ala Ser Ser Pro Trp Ala Pro Pro Gly Thr Val Leu Pro Cys 20 25 30 Pro Thr Ser Val Pro Arg Arg Pro Gly Gln Arg Arg Pro Pro Pro Pro 35 40 45 Pro Pro Pro Pro Pro Leu Pro Pro Pro Pro Pro Pro Pro Pro Leu Pro 50 55 60 Pro Leu Pro Leu Pro Pro Leu Lys Lys Arg Gly Asn His Ser Thr Gly 65 70 75 80 Leu Cys Leu Leu Val Met Phe Phe Met Val Leu Val Ala Leu Val Gly 85 90 95 Leu Gly Leu Gly Met Phe Gln Leu Phe His Leu Gln Lys Glu Leu Ala 100 105 110 Glu Leu Arg Glu Ser Thr Ser Gln Met His Thr Ala Ser Ser Leu Glu 115 120 125 Lys Gln Ile Gly His Pro Ser Pro Pro Pro Glu Lys Lys Glu Leu Arg 130 135 140 Lys Val Ala His Leu Thr Gly Lys Ser Asn Ser Arg Ser Met Pro Leu 145 150 155 160 Glu Trp Glu Asp Thr Tyr Gly Ile Val Leu Leu Ser Gly Val Lys Tyr 165 170 175 Lys Lys Gly Gly Leu Val Ile Asn Glu Thr Gly Leu Tyr Phe Val Tyr 180 185 190 Ser Lys Val Tyr Phe Arg Gly Gln Ser Cys Asn Asn Leu Pro Leu Ser 195 200 205 His Lys Val Tyr Met Arg Asn Ser Lys Tyr Pro Gln Asp Leu Val Met 210 215 220 Met Glu Gly Lys Met Met Ser Tyr Cys Thr Thr Gly Gln Met Trp Ala 225 230 235 240 Arg Ser Ser Tyr Leu Gly Ala Val Phe Asn Leu Thr Ser Ala Asp His 245 250 255 Leu Tyr Val Asn Val Ser Glu Leu Ser Leu Val Asn Phe Glu Glu Ser 260 265 270 Gln Thr Phe Phe Gly Leu Tyr Lys Leu 275 280 <210> 195 <211> 119 <212> PRT <213> Pan troglodytes <400> 195 Met Ser Arg Ser Val Ala Leu Ala Val Leu Ala Leu Leu Ser Leu Ser 1 5 10 15 Gly Leu Glu Ala Ile Gln Arg Thr Pro Lys Ile Gln Val Tyr Ser Arg 20 25 30 His Pro Ala Glu Asn Gly Lys Ser Asn Phe Leu Asn Cys Tyr Val Ser 35 40 45 Gly Phe His Pro Ser Asp Ile Glu Val Asp Leu Leu Lys Asn Gly Glu 50 55 60 Arg Ile Glu Lys Val Glu His Ser Asp Leu Ser Phe Ser Lys Asp Trp 65 70 75 80 Ser Phe Tyr Leu Leu Tyr Tyr Thr Glu Phe Thr Pro Thr Glu Lys Asp 85 90 95 Glu Tyr Ala Cys Arg Val Asn His Val Thr Leu Ser Gln Pro Lys Ile 100 105 110 Val Lys Trp Asp Arg Asp Met 115 <210> 196 <211> 276 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Sequence <400> 196 Gly Ser His Ser Met Arg Tyr Phe Phe Thr Ser Val Ser Arg Pro Gly 1 5 10 15 Arg Gly Glu Pro Arg Phe Ile Ala Val Gly Tyr Val Asp Asp Thr Gln 20 25 30 Phe Val Arg Phe Asp Ser Asp Ala Ala Ser Gln Arg Met Glu Pro Arg 35 40 45 Ala Pro Trp Ile Glu Gln Glu Gly Pro Glu Tyr Trp Asp Gly Glu Thr 50 55 60 Arg Lys Val Lys Ala His Ser Gln Thr His Arg Val Asp Leu Gly Thr 65 70 75 80 Leu Arg Gly Cys Tyr Asn Gln Ser Glu Ala Gly Ser His Thr Val Gln 85 90 95 Arg Met Tyr Gly Cys Asp Val Gly Ser Asp Trp Arg Phe Leu Arg Gly 100 105 110 Tyr His Gln Tyr Ala Tyr Asp Gly Lys Asp Tyr Ile Ala Leu Lys Glu 115 120 125 Asp Leu Arg Ser Trp Thr Ala Ala Asp Met Cys Ala Gln Thr Thr Lys 130 135 140 His Lys Trp Glu Ala Ala His Val Ala Glu Gln Leu Arg Ala Tyr Leu 145 150 155 160 Glu Gly Thr Cys Val Glu Trp Leu Arg Arg Tyr Leu Glu Asn Gly Lys 165 170 175 Glu Thr Leu Gln Arg Thr Asp Ala Pro Lys Thr His Met Thr His His 180 185 190 Ala Val Ser Asp His Glu Ala Thr Leu Arg Cys Trp Ala Leu Ser Phe 195 200 205 Tyr Pro Ala Glu Ile Thr Leu Thr Trp Gln Arg Asp Gly Glu Asp Gln 210 215 220 Thr Gln Asp Thr Glu Leu Val Glu Thr Arg Pro Ala Gly Asp Gly Thr 225 230 235 240 Phe Gln Lys Trp Ala Ala Val Val Val Pro Ser Gly Gln Glu Gln Arg 245 250 255 Tyr Thr Cys His Val Gln His Glu Gly Leu Pro Lys Pro Leu Thr Leu 260 265 270 Arg Trp Glu Pro 275 <210> 197 <211> 275 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Sequence <400> 197 Gly Ser His Ser Met Arg Tyr Phe Tyr Thr Ser Val Ser Arg Pro Gly 1 5 10 15 Arg Gly Glu Pro Arg Phe Ile Ala Val Gly Tyr Val Asp Asp Thr Gln 20 25 30 Phe Val Arg Phe Asp Ser Asp Ala Ala Ser Gln Arg Met Glu Pro Arg 35 40 45 Ala Pro Trp Ile Glu Gln Glu Gly Pro Glu Tyr Trp Asp Gln Glu Thr 50 55 60 Arg Asn Val Lys Ala Gln Ser Gln Thr Asp Arg Val Asp Leu Gly Thr 65 70 75 80 Leu Arg Gly Tyr Tyr Asn Gln Ser Glu Asp Gly Ser His Thr Ile Gln 85 90 95 Ile Met Tyr Gly Cys Asp Val Gly Pro Asp Gly Arg Phe Leu Arg Gly 100 105 110 Tyr Arg Gln Asp Ala Tyr Asp Gly Lys Asp Tyr Ile Ala Leu Asn Glu 115 120 125 Asp Leu Arg Ser Trp Thr Ala Ala Asp Met Ala Ala Gln Ile Thr Lys 130 135 140 Arg Lys Trp Glu Ala Ala His Ala Ala Glu Gln Gln Arg Ala Tyr Leu 145 150 155 160 Glu Gly Thr Cys Val Glu Trp Leu Arg Arg Tyr Leu Glu Asn Gly Lys 165 170 175 Glu Thr Leu Gln Arg Thr Asp Pro Pro Lys Thr His Met Thr His His 180 185 190 Pro Ile Ser Asp His Glu Ala Thr Leu Arg Cys Trp Ala Leu Gly Phe 195 200 205 Tyr Pro Ala Glu Ile Thr Leu Thr Trp Gln Arg Asp Gly Glu Asp Gln 210 215 220 Thr Gln Asp Thr Glu Leu Val Glu Thr Arg Pro Ala Gly Asp Gly Thr 225 230 235 240 Phe Gln Lys Trp Ala Ala Val Val Val Pro Ser Gly Glu Glu Gln Arg 245 250 255 Tyr Thr Cys His Val Gln His Glu Gly Leu Pro Lys Pro Leu Thr Leu 260 265 270 Arg Trp Glu 275 <210> 198 <211> 275 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Sequence <400> 198 Gly Ser His Ser Met Arg Tyr Phe Tyr Thr Ser Val Ser Arg Pro Gly 1 5 10 15 Arg Gly Glu Pro Arg Phe Ile Ala Val Gly Tyr Val Asp Asp Thr Gln 20 25 30 Phe Val Arg Phe Asp Ser Asp Ala Ala Ser Gln Arg Met Glu Pro Arg 35 40 45 Ala Pro Trp Ile Glu Gln Glu Gly Pro Glu Tyr Trp Asp Gln Glu Thr 50 55 60 Arg Asn Val Lys Ala Gln Ser Gln Thr Asp Arg Val Asp Leu Gly Thr 65 70 75 80 Leu Arg Gly Ala Tyr Asn Gln Ser Glu Asp Gly Ser His Thr Ile Gln 85 90 95 Ile Met Tyr Gly Cys Asp Val Gly Pro Asp Gly Arg Phe Leu Arg Gly 100 105 110 Tyr Arg Gln Asp Ala Tyr Asp Gly Lys Asp Tyr Ile Ala Leu Asn Glu 115 120 125 Asp Leu Arg Ser Trp Thr Ala Ala Asp Met Ala Ala Gln Ile Thr Lys 130 135 140 Arg Lys Trp Glu Ala Ala His Ala Ala Glu Gln Gln Arg Ala Tyr Leu 145 150 155 160 Glu Gly Thr Cys Val Glu Trp Leu Arg Arg Tyr Leu Glu Asn Gly Lys 165 170 175 Glu Thr Leu Gln Arg Thr Asp Pro Pro Lys Thr His Met Thr His His 180 185 190 Pro Ile Ser Asp His Glu Ala Thr Leu Arg Cys Trp Ala Leu Gly Phe 195 200 205 Tyr Pro Ala Glu Ile Thr Leu Thr Trp Gln Arg Asp Gly Glu Asp Gln 210 215 220 Thr Gln Asp Thr Glu Leu Val Glu Thr Arg Pro Cys Gly Asp Gly Thr 225 230 235 240 Phe Gln Lys Trp Ala Ala Val Val Val Pro Ser Gly Glu Glu Gln Arg 245 250 255 Tyr Thr Cys His Val Gln His Glu Gly Leu Pro Lys Pro Leu Thr Leu 260 265 270 Arg Trp Glu 275 <210> 199 <211> 276 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Sequence <400> 199 Gly Ser His Ser Met Arg Tyr Phe Tyr Thr Ser Val Ser Arg Pro Gly 1 5 10 15 Arg Gly Glu Pro Arg Phe Ile Ser Val Gly Tyr Val Asp Asp Thr Gln 20 25 30 Phe Val Arg Phe Asp Ser Asp Ala Ala Ser Pro Arg Glu Glu Pro Arg 35 40 45 Ala Pro Trp Ile Glu Gln Glu Gly Pro Glu Tyr Trp Asp Arg Asn Thr 50 55 60 Gln Ile Tyr Lys Ala Gln Ala Gln Thr Asp Arg Glu Ser Leu Arg Asn 65 70 75 80 Leu Arg Gly Tyr Tyr Asn Gln Ser Glu Ala Gly Ser His Thr Leu Gln 85 90 95 Ser Met Tyr Gly Cys Asp Val Gly Pro Asp Gly Arg Leu Leu Arg Gly 100 105 110 His Asp Gln Tyr Ala Tyr Asp Gly Lys Asp Tyr Ile Ala Leu Asn Glu 115 120 125 Asp Leu Arg Ser Trp Thr Ala Ala Asp Thr Ala Ala Gln Ile Thr Gln 130 135 140 Arg Lys Trp Glu Ala Ala Arg Glu Ala Glu Gln Arg Arg Ala Tyr Leu 145 150 155 160 Glu Gly Glu Cys Val Glu Trp Leu Arg Arg Tyr Leu Glu Asn Gly Lys 165 170 175 Asp Lys Leu Glu Arg Ala Asp Pro Pro Lys Thr His Val Thr His His 180 185 190 Pro Ile Ser Asp His Glu Ala Thr Leu Arg Cys Trp Ala Leu Gly Phe 195 200 205 Tyr Pro Ala Glu Ile Thr Leu Thr Trp Gln Arg Asp Gly Glu Asp Gln 210 215 220 Thr Gln Asp Thr Glu Leu Val Glu Thr Arg Pro Ala Gly Asp Arg Thr 225 230 235 240 Phe Gln Lys Trp Ala Ala Val Val Val Pro Ser Gly Glu Glu Gln Arg 245 250 255 Tyr Thr Cys His Val Gln His Glu Gly Leu Pro Lys Pro Leu Thr Leu 260 265 270 Arg Trp Glu Pro 275 <210> 200 <211> 276 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Sequence <400> 200 Gly Ser His Ser Met Arg Tyr Phe Tyr Thr Ser Val Ser Arg Pro Gly 1 5 10 15 Arg Gly Glu Pro Arg Phe Ile Ser Val Gly Tyr Val Asp Asp Thr Gln 20 25 30 Phe Val Arg Phe Asp Ser Asp Ala Ala Ser Pro Arg Glu Glu Pro Arg 35 40 45 Ala Pro Trp Ile Glu Gln Glu Gly Pro Glu Tyr Trp Asp Arg Asn Thr 50 55 60 Gln Ile Tyr Lys Ala Gln Ala Gln Thr Asp Arg Glu Ser Leu Arg Asn 65 70 75 80 Leu Arg Gly Ala Tyr Asn Gln Ser Glu Ala Gly Ser His Thr Leu Gln 85 90 95 Ser Met Tyr Gly Cys Asp Val Gly Pro Asp Gly Arg Leu Leu Arg Gly 100 105 110 His Asp Gln Tyr Ala Tyr Asp Gly Lys Asp Tyr Ile Ala Leu Asn Glu 115 120 125 Asp Leu Arg Ser Trp Thr Ala Ala Asp Thr Ala Ala Gln Ile Thr Gln 130 135 140 Arg Lys Trp Glu Ala Ala Arg Glu Ala Glu Gln Arg Arg Ala Tyr Leu 145 150 155 160 Glu Gly Glu Cys Val Glu Trp Leu Arg Arg Tyr Leu Glu Asn Gly Lys 165 170 175 Asp Lys Leu Glu Arg Ala Asp Pro Pro Lys Thr His Val Thr His His 180 185 190 Pro Ile Ser Asp His Glu Ala Thr Leu Arg Cys Trp Ala Leu Gly Phe 195 200 205 Tyr Pro Ala Glu Ile Thr Leu Thr Trp Gln Arg Asp Gly Glu Asp Gln 210 215 220 Thr Gln Asp Thr Glu Leu Val Glu Thr Arg Pro Cys Gly Asp Arg Thr 225 230 235 240 Phe Gln Lys Trp Ala Ala Val Val Val Pro Ser Gly Glu Glu Gln Arg 245 250 255 Tyr Thr Cys His Val Gln His Glu Gly Leu Pro Lys Pro Leu Thr Leu 260 265 270 Arg Trp Glu Pro 275 <210> 201 <211> 276 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Sequence <400> 201 Gly Ser His Ser Met Arg Tyr Phe Tyr Thr Ser Val Ser Arg Pro Gly 1 5 10 15 Arg Gly Glu Pro Arg Phe Ile Ser Val Gly Tyr Val Asp Asp Thr Gln 20 25 30 Phe Val Arg Phe Asp Ser Asp Ala Ala Ser Pro Arg Glu Glu Pro Arg 35 40 45 Ala Pro Trp Ile Glu Gln Glu Gly Pro Glu Tyr Trp Asp Arg Asn Thr 50 55 60 Gln Ile Tyr Lys Ala Gln Ala Gln Thr Asp Arg Glu Ser Leu Arg Asn 65 70 75 80 Leu Arg Gly Cys Tyr Asn Gln Ser Glu Ala Gly Ser His Thr Leu Gln 85 90 95 Ser Met Tyr Gly Cys Asp Val Gly Pro Asp Gly Arg Leu Leu Arg Gly 100 105 110 His Asp Gln Tyr Ala Tyr Asp Gly Lys Asp Tyr Ile Ala Leu Asn Glu 115 120 125 Asp Leu Arg Ser Trp Thr Ala Ala Asp Thr Cys Ala Gln Ile Thr Gln 130 135 140 Arg Lys Trp Glu Ala Ala Arg Glu Ala Glu Gln Arg Arg Ala Tyr Leu 145 150 155 160 Glu Gly Glu Cys Val Glu Trp Leu Arg Arg Tyr Leu Glu Asn Gly Lys 165 170 175 Asp Lys Leu Glu Arg Ala Asp Pro Pro Lys Thr His Val Thr His His 180 185 190 Pro Ile Ser Asp His Glu Ala Thr Leu Arg Cys Trp Ala Leu Gly Phe 195 200 205 Tyr Pro Ala Glu Ile Thr Leu Thr Trp Gln Arg Asp Gly Glu Asp Gln 210 215 220 Thr Gln Asp Thr Glu Leu Val Glu Thr Arg Pro Ala Gly Asp Arg Thr 225 230 235 240 Phe Gln Lys Trp Ala Ala Val Val Val Pro Ser Gly Glu Glu Gln Arg 245 250 255 Tyr Thr Cys His Val Gln His Glu Gly Leu Pro Lys Pro Leu Thr Leu 260 265 270 Arg Trp Glu Pro 275 <210> 202 <211> 276 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Sequence <400> 202 Cys Ser His Ser Met Arg Tyr Phe Asp Thr Ala Val Ser Arg Pro Gly 1 5 10 15 Arg Gly Glu Pro Arg Phe Ile Ser Val Gly Tyr Val Asp Asp Thr Gln 20 25 30 Phe Val Arg Phe Asp Ser Asp Ala Ala Ser Pro Arg Gly Glu Pro Arg 35 40 45 Ala Pro Trp Val Glu Gln Glu Gly Pro Glu Tyr Trp Asp Arg Glu Thr 50 55 60 Gln Asn Tyr Lys Arg Gln Ala Gln Ala Asp Arg Val Ser Leu Arg Asn 65 70 75 80 Leu Arg Gly Tyr Tyr Asn Gln Ser Glu Asp Gly Ser His Thr Leu Gln 85 90 95 Arg Met Tyr Gly Cys Asp Leu Gly Pro Asp Gly Arg Leu Leu Arg Gly 100 105 110 Tyr Asp Gln Ser Ala Tyr Asp Gly Lys Asp Tyr Ile Ala Leu Asn Glu 115 120 125 Asp Leu Arg Ser Trp Thr Ala Ala Asp Thr Ala Ala Gln Ile Thr Gln 130 135 140 Arg Lys Leu Glu Ala Ala Arg Ala Ala Glu Gln Leu Arg Ala Tyr Leu 145 150 155 160 Glu Gly Thr Cys Val Glu Trp Leu Arg Arg Tyr Leu Glu Asn Gly Lys 165 170 175 Glu Thr Leu Gln Arg Ala Glu Pro Pro Lys Thr His Val Thr His His 180 185 190 Pro Leu Ser Asp His Glu Ala Thr Leu Arg Cys Trp Ala Leu Gly Phe 195 200 205 Tyr Pro Ala Glu Ile Thr Leu Thr Trp Gln Arg Asp Gly Glu Asp Gln 210 215 220 Thr Gln Asp Thr Glu Leu Val Glu Thr Arg Pro Ala Gly Asp Gly Thr 225 230 235 240 Phe Gln Lys Trp Ala Ala Val Val Val Pro Ser Gly Gln Glu Gln Arg 245 250 255 Tyr Thr Cys His Met Gln His Glu Gly Leu Gln Glu Pro Leu Thr Leu 260 265 270 Ser Trp Glu Pro 275 <210> 203 <211> 276 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Sequence <400> 203 Cys Ser His Ser Met Arg Tyr Phe Asp Thr Ala Val Ser Arg Pro Gly 1 5 10 15 Arg Gly Glu Pro Arg Phe Ile Ser Val Gly Tyr Val Asp Asp Thr Gln 20 25 30 Phe Val Arg Phe Asp Ser Asp Ala Ala Ser Pro Arg Gly Glu Pro Arg 35 40 45 Ala Pro Trp Val Glu Gln Glu Gly Pro Glu Tyr Trp Asp Arg Glu Thr 50 55 60 Gln Asn Tyr Lys Arg Gln Ala Gln Ala Asp Arg Val Ser Leu Arg Asn 65 70 75 80 Leu Arg Gly Ala Tyr Asn Gln Ser Glu Asp Gly Ser His Thr Leu Gln 85 90 95 Arg Met Tyr Gly Cys Asp Leu Gly Pro Asp Gly Arg Leu Leu Arg Gly 100 105 110 Tyr Asp Gln Ser Ala Tyr Asp Gly Lys Asp Tyr Ile Ala Leu Asn Glu 115 120 125 Asp Leu Arg Ser Trp Thr Ala Ala Asp Thr Ala Ala Gln Ile Thr Gln 130 135 140 Arg Lys Leu Glu Ala Ala Arg Ala Ala Glu Gln Leu Arg Ala Tyr Leu 145 150 155 160 Glu Gly Thr Cys Val Glu Trp Leu Arg Arg Tyr Leu Glu Asn Gly Lys 165 170 175 Glu Thr Leu Gln Arg Ala Glu Pro Pro Lys Thr His Val Thr His His 180 185 190 Pro Leu Ser Asp His Glu Ala Thr Leu Arg Cys Trp Ala Leu Gly Phe 195 200 205 Tyr Pro Ala Glu Ile Thr Leu Thr Trp Gln Arg Asp Gly Glu Asp Gln 210 215 220 Thr Gln Asp Thr Glu Leu Val Glu Thr Arg Pro Cys Gly Asp Gly Thr 225 230 235 240 Phe Gln Lys Trp Ala Ala Val Val Val Pro Ser Gly Gln Glu Gln Arg 245 250 255 Tyr Thr Cys His Met Gln His Glu Gly Leu Gln Glu Pro Leu Thr Leu 260 265 270 Ser Trp Glu Pro 275 <210> 204 <211> 276 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Sequence <400> 204 Cys Ser His Ser Met Arg Tyr Phe Asp Thr Ala Val Ser Arg Pro Gly 1 5 10 15 Arg Gly Glu Pro Arg Phe Ile Ser Val Gly Tyr Val Asp Asp Thr Gln 20 25 30 Phe Val Arg Phe Asp Ser Asp Ala Ala Ser Pro Arg Gly Glu Pro Arg 35 40 45 Ala Pro Trp Val Glu Gln Glu Gly Pro Glu Tyr Trp Asp Arg Glu Thr 50 55 60 Gln Asn Tyr Lys Arg Gln Ala Gln Ala Asp Arg Val Ser Leu Arg Asn 65 70 75 80 Leu Arg Gly Cys Tyr Asn Gln Ser Glu Asp Gly Ser His Thr Leu Gln 85 90 95 Arg Met Tyr Gly Cys Asp Leu Gly Pro Asp Gly Arg Leu Leu Arg Gly 100 105 110 Tyr Asp Gln Ser Ala Tyr Asp Gly Lys Asp Tyr Ile Ala Leu Asn Glu 115 120 125 Asp Leu Arg Ser Trp Thr Ala Ala Asp Thr Cys Ala Gln Ile Thr Gln 130 135 140 Arg Lys Leu Glu Ala Ala Arg Ala Ala Glu Gln Leu Arg Ala Tyr Leu 145 150 155 160 Glu Gly Thr Cys Val Glu Trp Leu Arg Arg Tyr Leu Glu Asn Gly Lys 165 170 175 Glu Thr Leu Gln Arg Ala Glu Pro Pro Lys Thr His Val Thr His His 180 185 190 Pro Leu Ser Asp His Glu Ala Thr Leu Arg Cys Trp Ala Leu Gly Phe 195 200 205 Tyr Pro Ala Glu Ile Thr Leu Thr Trp Gln Arg Asp Gly Glu Asp Gln 210 215 220 Thr Gln Asp Thr Glu Leu Val Glu Thr Arg Pro Ala Gly Asp Gly Thr 225 230 235 240 Phe Gln Lys Trp Ala Ala Val Val Val Pro Ser Gly Gln Glu Gln Arg 245 250 255 Tyr Thr Cys His Met Gln His Glu Gly Leu Gln Glu Pro Leu Thr Leu 260 265 270 Ser Trp Glu Pro 275 <210> 205 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Sequence <400> 205 Gly Gly Gly Gly Ser 1 5 <210> 206 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Sequence <400> 206 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 1 5 10 <210> 207 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Sequence <400> 207 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 1 5 10 15 <210> 208 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Sequence <400> 208 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 1 5 10 15 Gly Gly Gly Ser 20 <210> 209 <211> 25 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Sequence <400> 209 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 1 5 10 15 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 20 25 <210> 210 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Sequence <400> 210 Gly Ser Gly Gly Ser 1 5 <210> 211 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Sequence <400> 211 Gly Gly Gly Ser 1 <210> 212 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Sequence <220> <221> Misc_Feature <222> (4)..(4) <223> Xaa is any amino acid other than proline <400> 212 Val Pro Gly Xaa Gly 1 5 <210> 213 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Sequence <400> 213 Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val 1 5 10 15 Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp 20 25 30 Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu 35 40 45 Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe 50 55 60 Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser 65 70 75 80 Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala 85 90 95 Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala 100 105 110 Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala 115 120 125 Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His 130 135 140 Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val 145 150 155 160 Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 <210> 214 <211> 175 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Sequence <400> 214 Asp Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu 1 5 10 15 Val Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser 20 25 30 Asp Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys 35 40 45 Glu Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val 50 55 60 Phe Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly 65 70 75 80 Ser Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly 85 90 95 Ala Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu 100 105 110 Ala Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser 115 120 125 Ala Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg 130 135 140 His Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg 145 150 155 160 Val Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu 165 170 175 <210> 215 <211> 167 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Sequence <400> 215 Asp Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu 1 5 10 15 Val Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser 20 25 30 Asp Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys 35 40 45 Glu Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val 50 55 60 Phe Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly 65 70 75 80 Ser Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly 85 90 95 Ala Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu 100 105 110 Ala Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser 115 120 125 Ala Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg 130 135 140 His Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg 145 150 155 160 Val Thr Pro Glu Ile Pro Ala 165 <210> 216 <211> 127 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Sequence <400> 216 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Lys Met Ser Ser Arg Arg 20 25 30 Cys Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Arg Val 35 40 45 Ala Lys Leu Leu Thr Thr Ser Gly Ser Thr Tyr Leu Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asn Asn Ala Lys Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Ala Asp Ser Phe Glu Asp Pro Thr Cys Thr Leu Val Thr Ser Ser 100 105 110 Gly Ala Phe Gln Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser 115 120 125

Claims (54)

  1. 인간 환자의 인유두종 바이러스(human papilloma virus; HPV)-연관 암을 치료하는 방법에 사용하기 위한 다량체 폴리펩타이드를 포함하는 조성물로서, 상기 방법은 다량체 폴리펩타이드 및 면역관문 저해제를 투여하는 단계를 포함하고,
    상기 다량체 폴리펩타이드는 이형이량체를 포함하되, 상기 이형이량체는:
    a) 제1 폴리펩타이드로서, N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로:
    i) 서열번호 77의 YMLDLQPETT 아미노산 서열을 포함하는 HPV16 E7 에피토프; 및
    ii) 제1 주조직 적합 복합체(major histocompatibility complex: MHC) 폴리펩타이드이되, 상기 제1 MHC 폴리펩타이드는 서열번호 48의 아미노산 서열을 포함하는 β2-마이크로글로불린(β2M) 폴리펩타이드인, 제1 주조직 적합 복합체(MHC) 폴리펩타이드
    를 포함하는 제1 폴리펩타이드; 및
    b) 제2 폴리펩타이드로서, N-말단으로부터 C-말단까지의 순서로:
    i) 서열번호 49의 아미노산 서열을 포함하는 변이체 IL-2 폴리펩타이드;
    ii) 제2 MHC 폴리펩타이드이되, 상기 제2 MHC 폴리펩타이드는 서열번호 50의 아미노산 서열을 포함하는 MHC 클래스 I 중쇄 폴리펩타이드인, 제2 MHC 폴리펩타이드; 및
    iii) 면역글로불린(Ig) Fc 폴리펩타이드
    를 포함하는 제2 폴리펩타이드
    를 가지고,
    면역관문 저해제는 면역관문에 특이적인 항체인, 조성물.
  2. 제1 항에 있어서, Ig Fc 폴리펩타이드는 IgG1 Fc 폴리펩타이드이고, 서열번호 21의 아미노산 서열에 적어도 85%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  3. 제2 항에 있어서, Ig Fc 폴리펩타이드는 서열번호 21의 아미노산 서열에 적어도 85%의 아미노산 서열 동일성을 갖는 IgG1 Fc 폴리펩타이드이고, IgG1 Fc 폴리펩타이드는 서열번호 21의 아미노산 서열의 위치 14에서의 류신이 알라닌으로의 치환 및 위치 15에서의 류신이 알라닌으로의 치환을 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  4. 제3 항에 있어서, IgG1 Fc 폴리펩타이드는 서열번호 44, 45, 46, 또는 47의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  5. 제4 항에 있어서, IgG1 Fc 폴리펩타이드는 서열번호 47의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  6. 제3 항에 있어서, 제2 폴리펩타이드는 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 2개의 복제물을 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  7. 제6 항에 있어서, 제1 폴리펩타이드는 에피토프 및 β2M 폴리펩타이드 사이의 펩타이드 링커를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  8. 제7 항에 있어서, 제2 폴리펩타이드는:
    a) 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 제1 복제물과 상기 변이체 IL-2 폴리펩타이드의 제2 복제물 사이;
    b) 상기 변이체 IL-2 폴리펩타이드와 상기 MHC 중쇄 폴리펩타이드 사이; 및
    c) 상기 MHC 중쇄 폴리펩타이드와 상기 IgG1 Fc 폴리펩타이드 사이
    중 하나 이상에 펩타이드 링커를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  9. 제8 항에 있어서, 각각의 펩타이드 링커는 서열번호 207의 (GGGGS)3, 서열번호 208의 (GGGGS)4 및 서열번호 73의 AAAGG로부터 독립적으로 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  10. 제1 항에 있어서, 제1 폴리펩타이드는 서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩타이드는 서열번호 36의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  11. 제1 항 내지 제10 항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물은 다량체 폴리펩타이드의 두 분자를 포함하는 동종이량체를 포함하고, 두 분자는 두 분자에 존재하는 Ig Fc 폴리펩타이드를 통해 서로 이황화 결합되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  12. 제1 항 내지 제10 항 중 어느 한 항에 있어서, HPV-연관 암은 두경부암, 자궁경부암 및 생식기 암으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  13. 제1 항 내지 제10 항 중 어느 한 항에 있어서, 면역관문 저해제는 PD1에 특이적인 항체인 것을 특징으로 하는 조성물.
  14. 제13 항에 있어서, PD1에 특이적인 항체는 펨브롤리주맙, 니볼루맙, 피딜리주맙 및 BMS-39886으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  15. 제1 항 내지 제10 항 중 어느 한 항에 있어서, 면역관문 저해제는 PD-L1, CTLA-4, 또는 TIGIT에 특이적인 항체인 것을 특징으로 하는 조성물.
  16. 제15 항에 있어서, 면역관문 저해제는 이필리무맙인 것을 특징으로 하는 조성물.
  17. 제1 항 내지 제10 항 중 어느 한 항에 있어서, 환자는 암에 대한 이전의 치료에 불응하게되거나 또는 환자는 암에 대한 이전의 치료에 반응하지 않는 것을 특징으로 하는 조성물.
  18. 제1 항 내지 제10 항 중 어느 한 항에 있어서, 다량체 폴리펩타이드 및 면역관문 저해제는 동일한 투여 경로에 의해 투여되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  19. 제1 항 내지 제10 항 중 어느 한 항에 있어서, 다량체 폴리펩타이드 및 면역관문 저해제는 상이한 투여 경로에 의해 투여되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  20. 제1 항 내지 제10 항 중 어느 한 항에 있어서, 다량체 폴리펩타이드 및 면역관문 저해제를 포함하는 조성물은 피하, 정맥내, 종양 주변 및 근육내에서 선택된 투여 경로에 의해 투여되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  21. 삭제
  22. 삭제
  23. 삭제
  24. 삭제
  25. 삭제
  26. 삭제
  27. 삭제
  28. 삭제
  29. 삭제
  30. 삭제
  31. 삭제
  32. 삭제
  33. 삭제
  34. 삭제
  35. 삭제
  36. 삭제
  37. 삭제
  38. 삭제
  39. 삭제
  40. 삭제
  41. 삭제
  42. 삭제
  43. 삭제
  44. 삭제
  45. 삭제
  46. 삭제
  47. 삭제
  48. 삭제
  49. 삭제
  50. 삭제
  51. 삭제
  52. 삭제
  53. 삭제
  54. 삭제
KR1020197027119A 2017-03-15 2018-03-14 면역 반응을 조절하는 방법 KR102619015B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020237044568A KR20240005989A (ko) 2017-03-15 2018-03-14 면역 반응을 조절하는 방법

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201762471832P 2017-03-15 2017-03-15
US62/471,832 2017-03-15
US201762521009P 2017-06-16 2017-06-16
US62/521,009 2017-06-16
PCT/US2018/022492 WO2018170168A1 (en) 2017-03-15 2018-03-14 Methods for modulating an immune response

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020237044568A Division KR20240005989A (ko) 2017-03-15 2018-03-14 면역 반응을 조절하는 방법

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20190141125A KR20190141125A (ko) 2019-12-23
KR102619015B1 true KR102619015B1 (ko) 2023-12-28

Family

ID=63523265

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020197027119A KR102619015B1 (ko) 2017-03-15 2018-03-14 면역 반응을 조절하는 방법
KR1020237044568A KR20240005989A (ko) 2017-03-15 2018-03-14 면역 반응을 조절하는 방법

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020237044568A KR20240005989A (ko) 2017-03-15 2018-03-14 면역 반응을 조절하는 방법

Country Status (10)

Country Link
US (7) US20200010528A1 (ko)
EP (1) EP3596118A4 (ko)
JP (3) JP2020514375A (ko)
KR (2) KR102619015B1 (ko)
CN (1) CN111010875B (ko)
AU (2) AU2018234628B2 (ko)
CA (1) CA3054955A1 (ko)
IL (2) IL269000B1 (ko)
SG (1) SG11201908391XA (ko)
WO (1) WO2018170168A1 (ko)

Families Citing this family (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10580122B2 (en) 2015-04-14 2020-03-03 Chongqing University Of Ports And Telecommunications Method and system for image enhancement
CN106397592A (zh) * 2015-07-31 2017-02-15 苏州康宁杰瑞生物科技有限公司 针对程序性死亡配体(pd-l1)的单域抗体及其衍生蛋白
CA3019005A1 (en) 2016-05-18 2017-11-23 Cue Biopharma, Inc. T-cell modulatory multimeric polypeptides and methods of use thereof
CA3043630A1 (en) 2016-12-22 2018-06-28 Cue Biopharma, Inc. T-cell modulatory multimeric polypeptides and methods of use thereof
EP3565829A4 (en) 2017-01-09 2021-01-27 Cue Biopharma, Inc. MULTIMER POLYPEPTIDES T-LYMPHOCYTE MODULATORS AND THEIR METHODS OF USE
US11377497B2 (en) * 2017-01-23 2022-07-05 Suzhou Alphamab Co., Ltd. PD-L1 binding polypeptide or composite
CN111010875B (zh) 2017-03-15 2024-04-05 库尔生物制药有限公司 用于调节免疫应答的方法
WO2018170288A1 (en) 2017-03-15 2018-09-20 Pandion Therapeutics, Inc. Targeted immunotolerance
BR112019024127A2 (pt) 2017-05-24 2020-06-23 Pandion Therapeutics, Inc. Imunotolerância alvejada
KR20200064085A (ko) * 2017-09-07 2020-06-05 큐 바이오파마, 인크. 접합 부위를 갖는 t-세포 조절 다량체 폴리펩타이드 및 이의 사용 방법
US10946068B2 (en) 2017-12-06 2021-03-16 Pandion Operations, Inc. IL-2 muteins and uses thereof
US10174091B1 (en) 2017-12-06 2019-01-08 Pandion Therapeutics, Inc. IL-2 muteins
EP3737689A4 (en) * 2018-01-09 2021-12-01 Cue Biopharma, Inc. MULTIMERIC T CELL-MODULATING POLYPEPTIDES AND METHOD OF USING THEREOF
WO2020132368A1 (en) * 2018-12-19 2020-06-25 Cue Biopharma, Inc. T-cell modulatory multimeric polypeptides with conjugation sites and methods of use thereof
TW202039542A (zh) * 2018-12-19 2020-11-01 美商庫爾生物製藥有限公司 多聚體ｔ細胞調節多肽及其使用方法
EP3935080A4 (en) * 2019-03-06 2023-04-05 Cue Biopharma, Inc. T-CELL-MODULATING MULTIMERIC POLYPEPTIDES AND METHODS OF USE THEREOF
KR20220035333A (ko) 2019-05-20 2022-03-22 팬디온 오퍼레이션스, 인코포레이티드 Madcam 표적 면역관용
WO2020243315A1 (en) * 2019-05-29 2020-12-03 Cue Biopharma, Inc. Multimeric t-cell modulatory polypeptides and methods of use thereof
JP2022536581A (ja) * 2019-06-19 2022-08-18 キュー バイオファーマ， インコーポレイテッド 多量体ｔ細胞調節性ポリペプチド及びその使用方法
WO2021007434A1 (en) * 2019-07-09 2021-01-14 Tavotek Biotherapeutics (Hong Kong) Limited Modulator of antigen specific t cell (modastc) molecules and uses thereof
AU2020348373A1 (en) * 2019-09-20 2022-02-24 Cue Biopharma, Inc. T-cell modulatory polypeptides and methods of use thereof
EP4048689A4 (en) * 2019-10-23 2023-11-01 Cue Biopharma, Inc. T-CELL MODULATING CHIMERIC MOLECULES AND METHOD OF USE THEREOF
WO2021102063A1 (en) 2019-11-20 2021-05-27 Anwita Biosciences, Inc. Cytokine fusion proteins, and their pharmaceutical compositions and therapeutic applications
CN115023444A (zh) * 2019-12-20 2022-09-06 再生元制药公司 新型il2激动剂及其使用方法
WO2021163371A1 (en) * 2020-02-12 2021-08-19 La Jolla Institute For Immunology Coronavirus t cell epitopes and uses thereof
CN113521268A (zh) 2020-04-22 2021-10-22 生物技术Rna制药有限公司 冠状病毒疫苗
WO2021222150A2 (en) 2020-04-28 2021-11-04 Anwita Biosciences, Inc. Interleukin-2 polypeptides and fusion proteins thereof, and their pharmaceutical compositions and therapeutic applications
JP2023526723A (ja) 2020-05-12 2023-06-23 キュー バイオファーマ， インコーポレイテッド 多量体ｔ細胞調節性ポリペプチド及びその使用方法
US20220226465A1 (en) * 2021-01-18 2022-07-21 ConserV Bioscience Coronavirus Immunogenic Compositions, Methods and Uses Thereof
US11878055B1 (en) 2022-06-26 2024-01-23 BioNTech SE Coronavirus vaccine

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2015195531A2 (en) * 2014-06-18 2015-12-23 Albert Einstein College Of Medicine, Inc. Syntac polypeptides and uses thereof
WO2016025642A1 (en) 2014-08-12 2016-02-18 Massachusetts Institute Of Technology Synergistic tumor treatment with il-2 and integrin-binding-fc-fusion protein
WO2016030350A1 (en) * 2014-08-29 2016-03-03 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy of tumor-targeted il-2 variant immunocytokines and antibodies against human pd-l1

Family Cites Families (166)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4235871A (en) 1978-02-24 1980-11-25 Papahadjopoulos Demetrios P Method of encapsulating biologically active materials in lipid vesicles
US4501728A (en) 1983-01-06 1985-02-26 Technology Unlimited, Inc. Masking of liposomes from RES recognition
GB8308235D0 (en) 1983-03-25 1983-05-05 Celltech Ltd Polypeptides
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
GB8422238D0 (en) 1984-09-03 1984-10-10 Neuberger M S Chimeric proteins
GB8607679D0 (en) 1986-03-27 1986-04-30 Winter G P Recombinant dna product
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
US4946778A (en) 1987-09-21 1990-08-07 Genex Corporation Single polypeptide chain binding molecules
US4837028A (en) 1986-12-24 1989-06-06 Liposome Technology, Inc. Liposomes with enhanced circulation time
ATE120761T1 (de) 1987-05-21 1995-04-15 Creative Biomolecules Inc Multifunktionelle proteine mit vorbestimmter zielsetzung.
DE3920358A1 (de) 1989-06-22 1991-01-17 Behringwerke Ag Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung
EP0519596B1 (en) 1991-05-17 2005-02-23 Merck & Co. Inc. A method for reducing the immunogenicity of antibody variable domains
US6322789B1 (en) 1991-08-26 2001-11-27 Epimmune, Inc. HLA-restricted hepatitis B virus CTL epitopes
DK0605522T3 (da) 1991-09-23 2000-01-17 Medical Res Council Fremgangsmåde til fremstilling af humaniserede antistoffer
JPH07501451A (ja) 1991-11-25 1995-02-16 エンゾン・インコーポレイテッド 多価抗原結合タンパク質
DE614989T1 (de) 1993-02-17 1995-09-28 Morphosys Proteinoptimierung Verfahren für in vivo Selektion von Ligandenbindende Proteine.
US5635363A (en) 1995-02-28 1997-06-03 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Compositions and methods for the detection, quantitation and purification of antigen-specific T cells
US5869270A (en) 1996-01-31 1999-02-09 Sunol Molecular Corporation Single chain MHC complexes and uses thereof
US6211342B1 (en) 1996-07-18 2001-04-03 Children's Hospital Medical Center Multivalent MHC complex peptide fusion protein complex for stimulating specific T cell function
US20050003431A1 (en) 1996-08-16 2005-01-06 Wucherpfennig Kai W. Monovalent, multivalent, and multimeric MHC binding domain fusion proteins and conjugates, and uses therefor
US6218363B1 (en) 1996-08-28 2001-04-17 Thomas Jefferson University MHC peptides and methods of use
US7098306B2 (en) 1997-02-13 2006-08-29 The Regents Of The University Of California Method and compositions for treating hepatocellular cancer
CN1739791A (zh) 1997-02-13 2006-03-01 加利福尼亚大学董事会 肝细胞癌的预防及治疗
US6268411B1 (en) 1997-09-11 2001-07-31 The Johns Hopkins University Use of multivalent chimeric peptide-loaded, MHC/ig molecules to detect, activate or suppress antigen-specific T cell-dependent immune responses
DE69842060D1 (de) 1997-05-08 2011-01-27 Oncothyreon Inc Verfahren zur Gewinnung aktivierter T-Zellen und mit Antigen-inkubierten Antigen-präsentierender Zellen
US20030007978A1 (en) 1997-09-16 2003-01-09 Burrows Gregory G. Recombinant MHC molecules useful for manipulation of antigen-specific T-cells
US6696304B1 (en) 1999-02-24 2004-02-24 Luminex Corporation Particulate solid phase immobilized protein quantitation
CN1196495C (zh) 1999-04-30 2005-04-13 宾夕法尼亚大学理事会 突变的人cd80及其制备和应用组合物和方法
US20020006664A1 (en) 1999-09-17 2002-01-17 Sabatini David M. Arrayed transfection method and uses related thereto
US6287860B1 (en) 2000-01-20 2001-09-11 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense inhibition of MEKK2 expression
CN1430728A (zh) 2000-05-25 2003-07-16 苏诺尔分子公司 T细胞受体交互作用的调节
WO2004029197A2 (en) 2001-06-22 2004-04-08 Maxygen, Inc. Co-stimulatory molecules
US20020122820A1 (en) 2001-01-16 2002-09-05 Hildebrand William H. Soluble MHC artificial antigen presenting cells
US6800748B2 (en) 2001-01-25 2004-10-05 Large Scale Biology Corporation Cytoplasmic inhibition of gene expression and expression of a foreign protein in a monocot plant by a plant viral vector
DK2336167T3 (da) 2001-03-14 2019-09-02 Dako Denmark As MHC-molekylkonstrukter og deres anvendelse til diagnose og terapi
US20030044847A1 (en) 2001-05-15 2003-03-06 Sidney Pestka Methods for anlyzing interactions between proteins in live and intact cells
WO2002099070A2 (en) 2001-06-04 2002-12-12 Corixa Corporation Compositions and methods for high-level, large-scale production of recombinant proteins
US20030017134A1 (en) 2001-06-19 2003-01-23 Technion Research And Development Foundation Ltd. Methods and pharmaceutical compositions for immune deception, particularly useful in the treatment of cancer
AU2002322211A1 (en) 2001-07-12 2003-01-29 Canvac Methods and compisitions for activation human t cells in vitro
AU2002363354A1 (en) 2001-07-27 2003-05-19 Human Genome Sciences, Inc. Heteromultimeric tnf ligand family members
ES2381025T3 (es) 2001-12-04 2012-05-22 Merck Patent Gmbh Inmunocitocinas con selectividad modulada
AU2002316574B2 (en) 2002-03-15 2008-05-01 Brandeis University Central airway administration for systemic delivery of therapeutics
US8895020B2 (en) 2002-04-19 2014-11-25 Washington University Single chain trimers and uses therefor
CA2498319A1 (en) 2002-09-09 2004-03-18 Nautilus Biotech Rational evolution of cytokines for higher stability, the cytokines and encoding nucleic acid molecules
US7432351B1 (en) 2002-10-04 2008-10-07 Mayo Foundation For Medical Education And Research B7-H1 variants
WO2004076488A1 (en) 2003-02-27 2004-09-10 Theravision Gmbh A molecule which binds cd80 and cd86
AU2003901876A0 (en) 2003-04-17 2003-05-08 The Macfarlane Burnet Institute For Medical Research And Public Health Viral vector
US20050042641A1 (en) 2003-05-27 2005-02-24 Cold Spring Harbor Laboratory In vivo high throughput selection of RNAi probes
US7696306B2 (en) 2003-07-11 2010-04-13 Board of Agents of the University of Nebraska Compositions and methods for preventing or treating cancer
AU2004288157B2 (en) 2003-09-05 2011-03-17 Oregon Health & Science University Monomeric recombinant MHC molecules useful for manipulation of antigen-specific T cells
US7470513B2 (en) 2003-11-10 2008-12-30 Academia Sinica Risk assessment for adverse drug reactions
JP2007527242A (ja) 2004-03-05 2007-09-27 カイロン コーポレーション 治療剤の患者耐容性を予測するためのインビトロ試験システム
DE102004014983A1 (de) 2004-03-26 2005-10-20 Univ Stuttgart Rekombinante Polypeptide der Mitglieder der TNF Ligandenfamilie und deren Verwendung
US20060034850A1 (en) 2004-05-27 2006-02-16 Weidanz Jon A Antibodies as T cell receptor mimics, methods of production and uses thereof
US7670595B2 (en) 2004-06-28 2010-03-02 Merck Patent Gmbh Fc-interferon-beta fusion proteins
LT2439273T (lt) 2005-05-09 2019-05-10 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Žmogaus monokloniniai antikūnai prieš programuotos mirties 1(pd-1) baltymą, ir vėžio gydymo būdai, naudojant vien tik anti-pd-1 antikūnus arba derinyje su kitais imunoterapiniais vaistais
CA2523032A1 (en) 2005-10-07 2007-04-07 Immunovaccine Technologies Inc. Vaccines for cancer therapy
CN101384621A (zh) 2005-11-10 2009-03-11 受体生物公司 产生受体和配体同种型的方法
US7943133B2 (en) 2006-02-02 2011-05-17 Boston Biocom Llc Mesothelin antibody protein fusions and methods of use
US8518697B2 (en) 2006-04-04 2013-08-27 Washington University Single chain trimers and uses therefor
CN101448951B (zh) 2006-05-19 2013-04-10 泰华制药工业有限公司 融合蛋白、其用途以及制备方法
EP1889851A1 (en) 2006-08-18 2008-02-20 Charite Universitätsmedizin-Berlin PAX2 and PAX8 as targets for immunologic and molecular tumour treatment strategies
US8992937B2 (en) 2006-08-28 2015-03-31 Washington University Disulfide trap MHC class I molecules and uses therefor
EP2980219B1 (en) 2006-12-28 2018-11-14 International Institute of Cancer Immunology, Inc. Hla-a*1101-restricted wt1 peptide and pharmaceutical composition comprising the same
JP5755839B2 (ja) 2007-02-15 2015-07-29 マンカインド コーポレイション Ｔ細胞応答の増強方法
WO2008113970A2 (en) 2007-03-16 2008-09-25 Ucl Business Plc Peptides
EP2361930A3 (en) 2007-03-26 2011-10-26 Dako Denmark A/S Multimers of MHC-peptide complexes and uses thereof in Borrelia infectious diseases
CN101688213A (zh) 2007-04-27 2010-03-31 陶氏环球技术公司 用于快速筛选微生物宿主以鉴定某些在表达异源蛋白质方面具有改善的产量和/或质量的菌株的方法
KR20100058541A (ko) 2007-08-15 2010-06-03 아뮤닉스 인코포레이티드 생물학적 활성 폴리펩티드의 특성을 변경하기 위한 조성물 및 방법
US8926961B2 (en) 2007-10-03 2015-01-06 Board Of Trustees Of The University Of Arkansas HPV E6 protein T cell epitopes and uses thereof
CN101418309B (zh) 2007-10-23 2011-05-04 中国农业科学院上海兽医研究所 柔嫩艾美耳球虫蛋白质二硫键异构酶基因的克隆、表达及应用
DE102008023820A1 (de) 2008-05-08 2009-11-12 Aicuris Gmbh & Co. Kg Mittel zur Behandlung und/oder Prophylaxe einer Autoimmunerkrankung und zur Bildung von Regulatorischen T-Zellen
TW201008574A (en) 2008-08-19 2010-03-01 Oncotherapy Science Inc INHBB epitope peptides and vaccines containing the same
US20110318380A1 (en) 2008-10-01 2011-12-29 Dako Denmark A/S MHC Multimers in Cancer Vaccines and Immune Monitoring
EP2184070A1 (en) 2008-11-07 2010-05-12 Hla-G Technologies HLA-G proteins and pharmaceutical uses thereof
SI2376535T1 (sl) 2008-12-09 2017-07-31 F. Hoffmann-La Roche Ag Protitelesa anti-pd-l1 in njihova uporaba za izboljšanje funkcije celic t
JP5766124B2 (ja) 2009-01-21 2015-08-19 アムジェン インコーポレイテッド 炎症性疾患および自己免疫疾患の処置の組成物および方法
CN116925238A (zh) 2009-02-03 2023-10-24 阿穆尼克斯制药公司 延伸重组多肽和包含该延伸重组多肽的组合物
EP2445935B1 (en) 2009-06-25 2015-07-01 Commissariat à l'Énergie Atomique et aux Énergies Alternatives Multimeric polypeptides of hla-g including alpha1-alpha3 monomers and pharmaceutical uses thereof
NZ599405A (en) 2009-11-24 2014-09-26 Medimmune Ltd Targeted binding agents against b7-h1
JP2013512251A (ja) 2009-11-24 2013-04-11 アンプリミューン、インコーポレーテッド Ｐｄ−ｌ１／ｐｄ−ｌ２の同時阻害
US9695410B2 (en) 2010-07-15 2017-07-04 Technion Research & Development Foundation Limited Isolated high affinity entities with T-cell receptor like specificity towards native complexes of MHC class II and glutamic acid decarboxylase (GAD) autoantigenic peptides
PT2918607T (pt) 2010-09-21 2018-01-11 Altor Bioscience Corp Moléculas de fusão de il-15 multiméricas solúveis e métodos de produção e utilização das mesmas
JP6093712B2 (ja) 2010-12-22 2017-03-08 ザ ボード オブ トラスティーズ オブ ザ レランド スタンフォード ジュニア ユニバーシティー インターロイキン２のスーパーアゴニストおよびアンタゴニスト
PE20140303A1 (es) * 2011-02-10 2014-03-22 Roche Glycart Ag Polipeptidos interleuquina-2 mutantes
WO2012127464A2 (en) 2011-03-23 2012-09-27 Gavish-Galilee Bio Applications Ltd Constitutively activated t cells for use in adoptive cell therapy
EA201892619A1 (ru) * 2011-04-29 2019-04-30 Роше Гликарт Аг Иммуноконъюгаты, содержащие мутантные полипептиды интерлейкина-2
SG195077A1 (en) 2011-06-22 2013-12-30 Hoffmann La Roche Removal of target cells by circulating virus-specific cytotoxic t-cells using mhc class i comprising complexes
EP3357511B1 (en) 2011-06-30 2020-05-13 Genzyme Corporation Inhibitors of t-cell activation
WO2013030620A2 (de) 2011-08-30 2013-03-07 Jacobs University Bremen Ggmbh Gen codiert für ein mhc-klasse-i-molekül, plasmid, expressionssystem protein, multimer, reagenz und kit zum analysieren einer t-zellen-frequenz
US8956619B2 (en) 2011-10-25 2015-02-17 University Of Maryland, Baltimore County Soluble CD80 as a therapeutic to reverse immune supression in cancer patients
KR101981873B1 (ko) 2011-11-28 2019-05-23 메르크 파텐트 게엠베하 항-ｐｄ-ｌ1 항체 및 그의 용도
AU2013207669C1 (en) 2012-01-13 2018-05-31 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Immunogenic WT-1 peptides and methods of use thereof
CA2863658C (en) 2012-02-03 2023-03-14 Emory University Immunostimulatory compositions, particles, and uses related thereto
US20140044675A1 (en) 2012-08-10 2014-02-13 Roche Glycart Ag Interleukin-2 fusion proteins and uses thereof
KR20150088881A (ko) 2012-11-30 2015-08-03 로슈 글리카트 아게 암세포 표적화된 mhc 클래스 i 포함 다중기능 단백질을 사용하는 순환 바이러스-특이적 세포독성 t-세포에 의한 암세포의 제거
CN109324190A (zh) 2012-12-11 2019-02-12 艾伯特叶史瓦大学爱因斯坦医学院 高通量受体:配体鉴定方法
JP6475167B2 (ja) 2012-12-21 2019-02-27 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ ジスルフィド結合した多価ｍｈｃクラスｉを含む多機能タンパク質
PL2945647T3 (pl) 2013-01-15 2021-03-08 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Immunogenne peptydy wt-1 i sposoby ich zastosowania
US10815273B2 (en) 2013-01-15 2020-10-27 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Immunogenic WT-1 peptides and methods of use thereof
EP2948475A2 (en) 2013-01-23 2015-12-02 AbbVie Inc. Methods and compositions for modulating an immune response
JP2016519651A (ja) 2013-03-15 2016-07-07 アンジェリカ セラピューティックス，インク． 改質された毒素
CN111138543A (zh) 2013-03-15 2020-05-12 Xencor股份有限公司 异二聚体蛋白
CA2907782C (en) 2013-03-29 2021-01-05 Sumitomo Dainippon Pharma Co., Ltd. Wt1 antigen peptide conjugate vaccine
WO2014185387A1 (ja) 2013-05-13 2014-11-20 株式会社癌免疫研究所 免疫療法の臨床効果の予測法
GB201311475D0 (en) 2013-06-27 2013-08-14 Alligator Bioscience Ab Polypeptides
BR112016001114B1 (pt) 2013-07-19 2023-02-14 Vib Vzw Composição compreendendo uma proteína de fusão e uso da referida composição
PL3712174T3 (pl) 2013-12-24 2022-07-04 Janssen Pharmaceutica Nv Przeciwciała i fragmenty anty-vista
CA2936352A1 (en) 2014-01-21 2015-07-30 Albert Einstein College Of Medicine, Inc. Cellular platform for rapid and comprehensive t-cell immunomonitoring
US20160152725A1 (en) 2014-02-25 2016-06-02 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Antigen-binding proteins specific for hla-a2-restricted wilms tumor 1 peptide
KR101804343B1 (ko) 2014-02-26 2017-12-04 텔라 가부시키가이샤 Ｗｔ１ 항원성 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드를 포함하는 항종양제
US10150802B2 (en) 2014-04-24 2018-12-11 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Superagonists, partial agonists and antagonists of interleukin-2
JP6526189B2 (ja) 2014-07-03 2019-06-05 ベイジーン リミテッド 抗ｐｄ−ｌ１抗体並びにその治療及び診断のための使用
MX2017000821A (es) 2014-07-21 2017-08-18 Delinia Inc Moleculas que activan selectivamente celulas t reguladoras para el tratamiento de enfermedades autoinmunes.
JP2017525370A (ja) 2014-08-21 2017-09-07 ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション 腫瘍壊死因子スーパーファミリーおよびｔｎｆ様リガンドムテインならびに腫瘍壊死因子スーパーファミリーおよびｔｎｆ様リガンドムテインを調製および使用する方法
MY189195A (en) 2015-03-05 2022-01-31 Hutchinson Fred Cancer Res Immunomodulatory fusion proteins and uses thereof
CA2980292A1 (en) 2015-03-23 2016-09-29 The Johns Hopkins University Hla-restricted epitopes encoded by somatically mutated genes
CN107969128A (zh) 2015-04-17 2018-04-27 高山免疫科学股份有限公司 具有可调的亲和力的免疫调节蛋白
SG10201913957PA (en) 2015-05-06 2020-03-30 Uti Lp Nanoparticle compositions for sustained therapy
KR20180040138A (ko) 2015-07-13 2018-04-19 싸이톰스 테라퓨틱스, 인크. 항pd-1 항체, 활성화 가능한 항pd-1 항체, 및 이들의 사용 방법
WO2017008844A1 (en) 2015-07-14 2017-01-19 Biontech Ag Peptide mimotopes of the cd3 t-cell co-receptor epsilon chain and uses thereof
CN106397592A (zh) 2015-07-31 2017-02-15 苏州康宁杰瑞生物科技有限公司 针对程序性死亡配体(pd-l1)的单域抗体及其衍生蛋白
AU2016303497A1 (en) 2015-07-31 2018-03-01 Tarveda Therapeutics, Inc. Compositions and methods for immuno-oncology therapies
CN106565836B (zh) 2015-10-10 2020-08-18 中国科学院广州生物医药与健康研究院 高亲和力的可溶性pdl-1分子
AU2016356708B2 (en) 2015-11-20 2022-02-03 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Methods and compositions for treating cancer
JP6904959B2 (ja) 2016-01-04 2021-07-21 クール ファーマシューティカルズ ディベロップメント カンパニー インコーポレイテッド 結合エピトープを含有する融合タンパク質を封入する粒子
SG11201805579SA (en) 2016-01-27 2018-08-30 CSL Behring Lengnau AG Recombinant igg fc multimers
JP2019516665A (ja) 2016-03-02 2019-06-20 キュー バイオファーマ， インコーポレイテッド Ｔ細胞調節多量体ポリペプチド及びその使用方法
WO2017151940A2 (en) 2016-03-03 2017-09-08 Cue Biopharma, Inc. T-cell modulatory multimeric polypeptides and methods of use thereof
KR20180133198A (ko) 2016-05-04 2018-12-13 암젠 인크 T-조절 세포의 증식을 위한 인터류킨-2 뮤테인
CA3019005A1 (en) 2016-05-18 2017-11-23 Cue Biopharma, Inc. T-cell modulatory multimeric polypeptides and methods of use thereof
JP2019522466A (ja) * 2016-05-18 2019-08-15 アルバート アインシュタイン カレッジ オブ メディシン，インコーポレイティド 変異ｐｄ−ｌ１ポリペプチド、ｔ細胞調節多量体ポリペプチド、及びそれらの使用方法
KR102646495B1 (ko) 2016-11-09 2024-03-12 유티아이 리미티드 파트너쉽 재조합 pMHC II형 분자
CA3043630A1 (en) 2016-12-22 2018-06-28 Cue Biopharma, Inc. T-cell modulatory multimeric polypeptides and methods of use thereof
EP3565829A4 (en) 2017-01-09 2021-01-27 Cue Biopharma, Inc. MULTIMER POLYPEPTIDES T-LYMPHOCYTE MODULATORS AND THEIR METHODS OF USE
KR20190123328A (ko) 2017-03-09 2019-10-31 프레지던트 앤드 펠로우즈 오브 하바드 칼리지 암 백신
CN111010875B (zh) * 2017-03-15 2024-04-05 库尔生物制药有限公司 用于调节免疫应答的方法
EP3595706A1 (en) 2017-03-17 2020-01-22 Fred Hutchinson Cancer Research Center Immunomodulatory fusion proteins and uses thereof
EP3446702A1 (en) 2017-08-23 2019-02-27 Medizinische Hochschule Hannover Synthetic vaccine
KR20200064085A (ko) 2017-09-07 2020-06-05 큐 바이오파마, 인크. 접합 부위를 갖는 t-세포 조절 다량체 폴리펩타이드 및 이의 사용 방법
TW201925235A (zh) 2017-09-07 2019-07-01 美商信號生物製藥公司 具有化學結合位點之抗原呈現多肽及其使用方法
EA202090471A1 (ru) 2017-09-07 2020-06-10 Кью Биофарма, Инк. Модулирующие т-клетки мультимерные полипептиды и способы их применения
JP2021500855A (ja) 2017-09-07 2021-01-14 キュー バイオファーマ， インコーポレイテッド 抗原提示ポリペプチドおよびその使用方法
CA3080546A1 (en) 2017-10-03 2019-04-11 Juno Therapeutics, Inc. Hpv-specific binding molecules
EP3737689A4 (en) 2018-01-09 2021-12-01 Cue Biopharma, Inc. MULTIMERIC T CELL-MODULATING POLYPEPTIDES AND METHOD OF USING THEREOF
EP3755711A4 (en) 2018-02-20 2021-11-24 Technion Research & Development Foundation Limited IMMUNOTHERAPEUTIC COMPOSITION FOR THE TREATMENT OF CANCER
TW202039542A (zh) 2018-12-19 2020-11-01 美商庫爾生物製藥有限公司 多聚體ｔ細胞調節多肽及其使用方法
WO2020132136A1 (en) 2018-12-19 2020-06-25 Cue Biopharma, Inc. Multimeric t-cell modulatory polypeptides and methods of use thereof
TW202039541A (zh) 2018-12-19 2020-11-01 美商庫爾生物製藥有限公司 多聚體ｔ細胞調節多肽及其使用方法
EP3935079A4 (en) 2019-03-06 2023-03-22 Cue Biopharma, Inc. T-CELL MODULATING ANTIGEN PRESENT POLYPEPTIDES AND METHODS OF USE THEREOF
EP3935080A4 (en) 2019-03-06 2023-04-05 Cue Biopharma, Inc. T-CELL-MODULATING MULTIMERIC POLYPEPTIDES AND METHODS OF USE THEREOF
WO2020243315A1 (en) 2019-05-29 2020-12-03 Cue Biopharma, Inc. Multimeric t-cell modulatory polypeptides and methods of use thereof
WO2020247843A2 (en) 2019-06-05 2020-12-10 Asher Biotherapeutics, Inc. Fusions of mutant interleukin-2 polypeptides with antigen binding molecules for modulating immune cell function
JP2022536581A (ja) 2019-06-19 2022-08-18 キュー バイオファーマ， インコーポレイテッド 多量体ｔ細胞調節性ポリペプチド及びその使用方法
AU2020348373A1 (en) 2019-09-20 2022-02-24 Cue Biopharma, Inc. T-cell modulatory polypeptides and methods of use thereof
EP4048689A4 (en) 2019-10-23 2023-11-01 Cue Biopharma, Inc. T-CELL MODULATING CHIMERIC MOLECULES AND METHOD OF USE THEREOF
EP4048402A4 (en) 2019-10-23 2023-11-22 Cue Biopharma, Inc. MODIFIED CYTOXIC T CELLS AND METHODS OF USE THEREOF
WO2021113297A1 (en) 2019-12-02 2021-06-10 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Peptide-mhc ii protein constructs and uses thereof
CN115023444A (zh) 2019-12-20 2022-09-06 再生元制药公司 新型il2激动剂及其使用方法
CN115176015A (zh) 2020-02-28 2022-10-11 国立大学法人金泽大学 免疫调节法、免疫调节用核酸组合物及其用途
GB202005617D0 (en) 2020-04-17 2020-06-03 Adaptimmune Ltd Improved t cell manufacturing process
CN113823723A (zh) 2020-06-18 2021-12-21 光宝光电(常州)有限公司 发光二极管封装结构
EP4182465A2 (en) 2020-07-14 2023-05-24 Cue Biopharma, Inc. T-cell modulatory polypeptides with conjugation sites and methods of use thereof
TW202233673A (zh) 2020-10-23 2022-09-01 美商雅雪生物治療公司 含調節免疫細胞功能之ｃｄ８抗原結合分子之融合物
WO2022125694A1 (en) 2020-12-09 2022-06-16 Asher Biotherapeutics, Inc. Fusions of interleukin polypeptides with bispecific antigen binding molecules for modulating immune cell function
CA3201573A1 (en) 2020-12-09 2022-06-16 Ivana DJURETIC Targeted cytokine construct for engineered cell therapy

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2015195531A2 (en) * 2014-06-18 2015-12-23 Albert Einstein College Of Medicine, Inc. Syntac polypeptides and uses thereof
US20170058015A1 (en) 2014-06-18 2017-03-02 Albert Einstein College Of Medicine, Inc. Syntac polypeptides and uses thereof
WO2016025642A1 (en) 2014-08-12 2016-02-18 Massachusetts Institute Of Technology Synergistic tumor treatment with il-2 and integrin-binding-fc-fusion protein
WO2016030350A1 (en) * 2014-08-29 2016-03-03 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy of tumor-targeted il-2 variant immunocytokines and antibodies against human pd-l1

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Vaccines, Vol. 4, No. 4, pp. 1-6 (2016)

Also Published As

Publication number Publication date
AU2018234628A1 (en) 2019-09-19
AU2018234628B2 (en) 2023-07-20
JP7412622B2 (ja) 2024-01-12
KR20240005989A (ko) 2024-01-12
CA3054955A1 (en) 2018-09-20
US20200325205A1 (en) 2020-10-15
US10927161B2 (en) 2021-02-23
CN111010875A (zh) 2020-04-14
US20210206830A1 (en) 2021-07-08
US11767355B2 (en) 2023-09-26
IL269000A (en) 2019-10-31
AU2023251412A1 (en) 2023-11-09
IL269000B1 (en) 2024-02-01
US11958893B2 (en) 2024-04-16
IL309479A (en) 2024-02-01
US20230109980A1 (en) 2023-04-13
US11479595B2 (en) 2022-10-25
US20200331982A1 (en) 2020-10-22
CN111010875B (zh) 2024-04-05
JP2023082126A (ja) 2023-06-13
SG11201908391XA (en) 2019-10-30
JP2024026521A (ja) 2024-02-28
AU2023251412B2 (en) 2023-12-07
JP2020514375A (ja) 2020-05-21
EP3596118A1 (en) 2020-01-22
EP3596118A4 (en) 2021-04-07
US20200010528A1 (en) 2020-01-09
KR20190141125A (ko) 2019-12-23
US20230374102A1 (en) 2023-11-23
US11104712B2 (en) 2021-08-31
WO2018170168A1 (en) 2018-09-20
US20220089681A1 (en) 2022-03-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102619015B1 (ko) 면역 반응을 조절하는 방법
JP6995151B2 (ja) ｓｙｎＴａｃポリペプチド及びその使用
CN110325205B (zh) T细胞调节性多聚体多肽及其使用方法
JP7079171B2 (ja) インターロイキン－２１ムテイン及び治療方法
JP2020516276A (ja) 腫瘍微小環境を標的にするキメラ抗原受容体ｔ細胞
SK15702002A3 (sk) Rozpustné molekuly mutantu CTLA4 a ich použitie
JP2022534846A (ja) 多量体ｔ細胞調節性ポリペプチド及びその使用方法
JP2022514702A (ja) 二機能性抗ｐｄ－１／ｉｌ－７分子
CA3197935A1 (en) Interleukin-2-fc fusion proteins and methods of use
JP2023534460A (ja) コンジュゲーション部位を有するｔ細胞調節性ポリペプチド及びその使用方法
JP2020536552A (ja) Ｃｔｌａ−４変異型免疫調節タンパク質およびそれらの使用
EA042111B1 (ru) Способы модулирования иммунного ответа
KR20200099118A (ko) 뉴로필린 1 (Neuropilin 1, NRP1)에 특이적으로 결합하는 펩타이드를 포함하는 조절 T 세포의 활성을 억제하기 위한 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right