KR100901939B1

KR100901939B1 - 신규한 키나제 억제제

Info

Publication number: KR100901939B1
Application number: KR1020087022726A
Authority: KR
Inventors: 라지브 바이드; 젠-웨이 카이; 리강 퀴안; 스테파니 바르보사; 루이스 롬바르도; 제프리 로블
Original assignee: 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니
Priority date: 2002-07-19
Filing date: 2003-07-18
Publication date: 2009-06-10
Also published as: NO20050417L; HRP20050059B1; BR0312801A; CN1315833C; US20090170853A1; IS7647A; CA2492804A1; HRP20050058A2; RS52325B; EP1534290B1; CA2492804C; DK1534290T3; IL166232A0; CN101880283A; US20070299075A1; JP4381978B2; NZ537523A; CN1681508B; US20040063707A1; RU2005104818A

Abstract

본 발명은 화학식 1의 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다. 화학식 1의 화합물은 VEGFR-2 및 FGFR-1과 같은 성장 인자 수용체의 티로신 키나제 활성을 억제하며, 이에 의해 항암제로서 유용하다. 화학식 1의 화합물은 또한 성장 인자 수용체를 통해 작동하는 신호 전달 경로와 관련된 다른 질환의 치료에 유용하다.

성장 인자 수용체, VEGFR-2, FGFR-1, 티로신 키나제, 항암제, 항혈관신생

Description

신규한 키나제 억제제 {NOVEL INHIBITORS OF KINASES}

본 발명은 VEGFR-2 및 FGFR-1과 같은 성장 인자 수용체의 티로신 키나제 활성을 억제함으로써 항암제로서 유용한 화합물에 관한 것이다. 상기 화합물은 또한 VEGFR-2와 같은 성장 인자 및 항-혈관신생 수용체를 통해 작동하는 신호 전달 경로와 관련된, 암 이외의 질환의 치료에 유용하다.

정상 혈관신생은 배아 발생, 상처 치유, 비만 및 여성 생식 기능의 몇 가지 구성요소를 비롯한 다양한 과정에서 중요한 역할을 한다. 바람직하지 않고 병리적인 혈관신생은 당뇨병성 망막증, 건선, 류마티스성 관절염, 죽종, 카포시 육종 및 혈관종, 천식, 암 및 전이성 질환을 비롯한 질환 상태와 관련되어 있다 (문헌 [Fan et al., 1995, Trend Pharmacol. Sci. 16: 57-66]; [Folkman, 1995, Nature Medicine 1:27-31] 참조). 혈관 투과성의 변화는 정상적 및 병리생리학적 과정 둘 다에서 역할을 수행하는 것으로 생각된다 (문헌 [Cullinan-Bove et al., 1993, Endocrinology 133:829-837]; [Senger et al., 1993 Canser and Metastasis Reviews, 12:303-324] 참조).

수용체 티로신 키나제 (RTK)는 세포의 원형질막을 통과하는 생화학적 신호의 전달에서 중요하다. 상기 막횡단 분자는 세포내 티로신 키나제 도메인에 원형질막 내의 세그먼트를 통하여 연결된 세포외 리간드-결합 도메인으로 특징적으로 이루어진다. 수용체에 리간드가 결합함으로써 수용체와 다른 세포내 단백질 둘 다의 티로신 잔기의 인산화를 유도하는 수용체-관련 티로신 키나제 활성을 자극하여, 다양한 세포 반응을 유도한다. 이제까지, 아미노산 서열 상동성으로 정의되는 19개 이상의 별개의 RTK 서브패밀리가 확인되었다. 상기 서브패밀리 중 하나는 현재 fms-유사 티로신 키나제 수용체인 Flt 또는 Flt1 (VEGFR-1), 키나제 삽입 도메인-함유 수용체인 KDR (또한 Flk-1 또는 VEGFR-2로도 지칭됨) 및 다른 fms-유사 티로신 키나제 수용체인 Flt4 (VEGFR-3)로 이루어진다. 상기 관련된 RTK 중 2종, Flt 및 KDR은 혈관 내피 성장 인자 (VEGF)와 고친화성으로 결합하는 것으로 나타났다 (문헌 [De Vries et al., 1992, Science 255:989-991]; [Terman et al., 1992, Biochem. Biophys. Res. Comm. 1992, 187:1579-1586] 참조). 이종 세포에서 발현되는 이들 수용체에 대한 VEGF의 결합은 세포성 단백질과 칼슘 플럭스의 티로신 인산화 상태의 변화와 관련되어 있다. VEGF는 산성 및 염기성 섬유아세포 성장 인자 (aFGF 및 bFGF)와 함께 생체외에서 내피 세포 성장 촉진 활성을 갖는 것으로 확인되었다. aFGF 및 bFGF는 FGFR-1이라는 수용체 티로신 키나제에 결합하여 이를 활성화시킴이 주목된다. 그의 수용체의 제한된 발현 때문에, VEGF의 성장 인자 활성은 FGF의 활성과 비교하여 내피 세포에 대해 상대적으로 특이적이다. 최근의 증거는 VEGF가 정상적 및 병리학적 혈관신생 둘 다 (문헌 [Jakeman et al., 1993, Endocrinology, 133:848-859]; [Kolch et al., 1995, Breast Cancer Research and Treatment, 36:139-155]) 및 혈관 투과성 (문헌 [Connolly et al., 1989, J. Biol. Chem. 264:20017-20024])의 중요한 자극제임을 제시하고 있다.

성인에 있어서, 내피 세포는 상처 치유 및 여성 생식 주기와 같은 조직 리모델링 및 지방생성의 경우를 제외하고는 낮은 증식 지수를 갖는다. 그러나, 암, 유전적 혈관 질환, 자궁내막증, 건선, 관절염, 망막병증 및 죽상경화증과 같은 병리학적 상태에서, 내피 세포는 맥관으로 활성적으로 증식되고 조직화된다. VEGF 및 bFGF와 같은 성장 인자로의 혈관신생 자극에 노출될 때, 내피 세포는 세포 주기로 재진입하고, 증식하고, 이동하고, 3차원 네트워크로 조직화된다. 종양이 팽창하고 전이하는 능력은 이러한 혈관 네트워크의 형성에 좌우되는 것이 현재 널리 받아들여지고 있다.

VEGF 또는 bFGF가 그의 상응하는 수용체에 결합하면 이량체화, 티로신 잔기의 자가인산화 및 효소적 활성화를 유발한다. 상기 포스포티로신 잔기는 특정 하류 신호화 분자를 위한 도킹 ("docking") 부위로서 기능하고, 효소적 활성화는 내피 세포 활성화를 유발한다. 상기 경로의 파괴는 내피 세포 활성화를 억제할 것이다. FGFR-1 경로의 파괴는 또한 상기 키나제가 증식성 내피 세포 이외에 많은 악성종양에서 활성화되기 때문에 종양 세포 증식에 영향을 준다. 마지막으로, 최근의 증거는 또한 VEGF 신호화의 파괴는 혈관 네트워크 형성에서 중요한 과정인 내피 세포 이동을 억제한다고 제시한다.

종양-관련 맥관구조에서 VEGFR-2와 FGFR-1의 과발현 및 활성화는 종양 혈관신생에서 상기 분자에 대한 역할을 제시하였다. 혈관신생 및 이어지는 종양 성장 은 VEGF 리간드 및 VEGF 수용체에 대해 지시된 항체에 의해, 그리고 절단된 (막횡단 서열 및 세포질 키나제 도메인이 결실됨) 가용성 VEGFR-2 수용체에 의해 억제된다. VEGFR-2 또는 FGFR-1내로 도입되어 효소 활성을 상실한 우성 돌연변이는 생체 내에서 종양 성장을 억제한다. 상기 수용체 또는 그의 동족 리간드의 안티센스 표적화는 또한 혈관신생 및 종양 성장을 억제한다. 최근의 증거는 종양 성장에서 상기 수용체의 일시적인 필요성을 부분적으로 설명하였다. VEGF 신호화는 초기 종양 성장에 중요하며, bFGF는 종양 팽창과 관련된 후기에 보다 중요한 것으로 보인다.

본 발명의 목적은 VEGFR-2 및 FGFR-1과 같은 성장 인자 수용체의 티로신 키나제 활성을 억제하는 유용한 화합물을 제공하는 것이다.

본 발명에 따르면, 하기 화학식 1의 화합물, 그의 거울상 이성질체, 부분입체 이성질체, 및 그의 제약상 허용되는 염, 프로드러그 및 용매화물은 VEGFR-2와 같은 성장 인자 수용체의 티로신 키나제 활성을 억제한다.

<화학식 1>

화학식 1에서 그리고 본 명세서를 통해, 상기 기호는 하기와 같이 정의된다:

Z는 O, S, N, OH, 및 Cl로 이루어진 군으로부터 선택되며, 단 Z가 O 또는 S일 경우, R⁴¹은 존재하지 않고, Z가 OH 또는 Cl일 경우, R⁴¹ 및 R⁴²는 둘 다 존재하지 않고, Z가 N일 경우, R⁴¹은 H이고;

X 및 Y는 O, OCO, S, SO, SO₂, CO, CO₂, NR¹⁰, NR¹¹CO, NR¹²CONR¹³, NR¹⁴CO₂, NR¹⁵SO₂, NR¹⁶SO₂NR¹⁷, SO₂NR¹⁸, CONR¹⁹, 할로겐, 니트로 및 시아노로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X 또는 Y는 존재하지 않고;

R¹은 수소, CH₃, OH, OCH₃, SH, SCH₃, OCOR²¹, SOR²², SO₂R²³, SO₂NR²⁴R²⁵, CO₂R²⁶, CONR²⁷R²⁸, NH₂, NR²⁹SO₂NR³⁰R³¹, NR³²SO₂R³³, NR³⁴COR³⁵, NR³⁶CO₂R³⁷, NR³⁸CONR³⁹R⁴⁰, 할로겐, 니트로, 또는 시아노이고;

R² 및 R³은 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로시클로, 치환된 헤테로시클로, 아르알킬, 치환된 아르알킬, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로시클로알킬 또는 치환된 헤테로시클로알킬이며; 단 X가 할로, 니트로 또는 시아노일 경우, R²는 존재하지 않고, Y가 할로, 니트로 또는 시아노일 경우, R³은 존재하지 않고;

R⁶은 H, 알킬, 치환된 알킬, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로시클로, 치환된 헤테로시클로, NR⁷R⁸, OR⁹ 또는 할로겐이고;

R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁴, R¹⁵, R¹⁶, R¹⁷, R¹⁸, R¹⁹, R²¹, R²⁴, R²⁵, R²⁶ R²⁷, R²⁸, R²⁹, R³⁰, R³¹, R³², R³⁴, R³⁵, R³⁶, R³⁸, R³⁹ 및 R⁴⁰은 수소, 알킬, 치환된 알킬, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로시클로, 및 치환된 헤테로시클로로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고;

R²², R²³, R³³ 및 R³⁷은 알킬, 치환된 알킬, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로시클로, 및 치환된 헤테로시클로로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고;

R⁴²는

(식 중, (R⁴³)_n에서, n은 0,1 또는 2이고, 각각의 R⁴³은 수소, 불소, 염소 및 메틸로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택됨)이고;

R⁴⁴는 메틸, 또는 수소이며, 추가로 단

a. X가 SO, SO₂, NR¹³CO₂, 또는 NR¹⁴SO₂일 경우, R²는 수소가 아닐 수 있고;

b. Y가 SO, SO₂, NR¹³C0₂, 또는 NR¹⁴SO₂일 경우, R³은 수소가 아닐 수 있다.

바람직한 실시양태에서, R¹은 수소 또는 메틸이고; R⁶은 수소이고; R³은 저급 알킬이고; Z는 산소 또는 질소이다.

또다른 바람직한 실시양태에서, R¹은 수소이고; R³은 저급 알킬이고; Y는 존재하지 않고; X는 산소 또는 질소이고; R⁴³은 플루오로 또는 수소이고; R⁴⁴는 수소 또는 메틸이다.

또다른 바람직한 실시양태에서, X는 산소이고; R²는 치환된 알킬이고; R⁴³은 플루오로이다.

본 발명의 바람직한 화합물의 예로는

4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-올,

1-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-4-(아미노술포닐)아미노부탄-2-올,

N-{3-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-2-히드록시-프로필}-메탄술폰아미드,

(2S)-3-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-프로판-1,2-디올,

(2R)-3-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-프로판-1,2-디올,

(2R)-1-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-프로판-2-올,

(2S)-1-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-프로판-2-올,

(2R)-1-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-3-메톡시-프로판-2-올,

(2S)-1-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-3-메톡시-프로판-2-올,

2-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-에탄올,

N-{2-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-에틸}-메탄술폰아미드,

(2R)-1-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-4-메탄술포닐-부탄-2-올,

(2S)-1-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-4-메탄술포닐-부탄-2-올,

5-메틸-4-(2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-6-(3-피페리딘-1-일프로폭시)-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진,

4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-6-(2-피페리딘-4-일-에톡시)-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진,

4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-6-(3-피리딘-4-일-프로폭시)-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진,

{1-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시메틸]-3-메탄술포닐-프로필}-디메틸-아민,

2-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-1-메틸에틸아민,

{2-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-1-메틸에틸}-메틸아민,

4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-6-(모르폴린-2-일메톡시)-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진,

[(1R),2S]-2-디메틸아미노프로피온산-[2-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]]-1-메틸에틸 에스테르,

[(1R),2S]-2-아미노-4-메틸펜탄산 [2-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]]-1-메틸에틸 에스테르,

[(1R),2S]-2-아미노프로피온산 2-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-1-메틸에틸 에스테르,

4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-6-(3-메탄술포닐-프로폭시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진, 및

N-{3-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-프로필}-메탄술폰아미드를 들 수 있다.

본 발명의 보다 바람직한 화합물은

(2S)-3-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-프로판-1,2-디올,

2-[4-(4-플로오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트 리아진-6-일옥시]-1-메틸에틸아민,

N-{3-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-프로필}-메탄술폰아미드이다.

본 발명은 또한 화학식 1 또는 2의 화합물 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물을 제공한다.

본 발명은 또한 제약상 허용되는 담체와 배합된 화학식 1 또는 2의 화합물 및 항암제 또는 세포독성제를 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 바람직한 실시양태에서, 상기 항암제 및 세포독성제는 리노미드; 인테그린 ανβ3 기능의 억제제; 안지오스타틴; 라족산; 타목시펜; 토레미펜 ; 랄록시펜; 드롤록시펜; 요오독시펜; 메게스트롤 아세테이트; 아나스트로졸; 레트로졸; 보라졸; 엑세메스탄; 플루타미드; 닐루타미드; 비칼루타미드; 시프로테론 아세테이트; 고세렐린 아세테이트; 류프롤리드; 피나스테리드; 메탈로프로테이나제 억제제; 우로키나제 플라스미노겐 활 성화제 수용체 기능의 억제제; 성장 인자 항체; 아바스틴 (Avastin)(등록상표) (베바시주마브) 및 에르비툭스 (Eribitux)(등록상표) (세툭시마브)와 같은 성장 인자 수용체 항체; 티로신 키나제 억제제; 세린/트레오닌 키나제 억제제; 메토트렉세이트; 5-플루오로우라실; 푸린; 아데노신 유사체; 시토신 아라비노시드; 독소루비신; 다우노마이신; 에피루비신; 이다루비신; 미토마이신-C; 닥티노마이신; 미트라마이신; 시스플라틴; 카르보플라틴; 니트로겐 머스타드; 멜팔란; 클로람부실; 부술판; 시클로포스파미드; 이포스파미드; 니트로소우레아; 티오테파; 빈크리스틴; 탁솔 (Taxol)(등록상표) (파클리탁셀); 탁소테레 (Taxotere)(등록상표) (도세탁셀); 에포틸론 유사체; 디스코데르몰리드 유사체; 엘류테로빈 유사체; 에토포시드; 테니포시드; 암사크린; 토포테칸; 플라보피리돌; 벨카드 (Velcade)(등록상표) (보르테조미브)와 같은 생물학적 반응 조절제 및 프로테아좀 억제제로부터 선택된다.

본 발명은 또한 치료학적으로 유효한 단백질 키나제 억제량의 화학식 1의 화합물을 성장 인자 수용체의 단백질 키나제 활성 억제를 필요로 하는 포유동물 종에게 투여하는 것을 포함하는, 성장 인자 수용체의 단백질 키나제 활성 억제 방법을 제공한다.

또한, 치료학적 유효량의 화학식 1 또는 2의 화합물을 하나 이상의 성장 인자 수용체의 티로신 키나제 활성 억제를 필요로 하는 포유동물 종에게 투여하는 것을 포함하는, 하나 이상의 성장 인자 수용체의 티로신 키나제 활성 억제 방법이 개시되어 있다. 바람직한 실시양태에서, 상기 성장 인자 수용체는 VEGFR-2 및 FGFR-1로 이루어진 군으로부터 선택된다.

마지막으로, 치료학적 유효량의 화학식 1의 화합물을 증식성 질환의 치료를 필요로 하는 포유동물 종에게 투여하는 것을 포함하는, 증식성 질환의 치료 방법이 개시되어 있다. 바람직한 실시양태에서, 증식성 질환은 암이다.

이하는 본 명세서에 사용되는 용어의 정의이다. 본 명세서에서 기 또는 용어에 대해 제공되는 처음 정의는 달리 지시되지 않는다면 본 명세서를 통해 상기 기 또는 용어에 개별적으로 적용되거나, 또다른 기의 일부로서 적용된다.

"알킬"이라는 용어는 탄소 원자수 1 내지 20, 바람직하게는 탄소 원자수 1 내지 7의 직쇄 또는 분지쇄 비치환된 탄화수소기를 지칭한다. "저급 알킬"이라는 표현은 탄소 원자수 1 내지 4의 비치환된 알킬기를 지칭한다.

"치환된 알킬"이라는 용어는 예를 들어 할로, 히드록시, 알콕시, 옥소, 알카노일, 아릴옥시, 알카노일옥시, 아미노, 알킬아미노, 아릴아미노, 아르알킬아미노, 이치환된 아민 (2개의 아미노 치환기는 알킬, 아릴 또는 아르알킬로부터 선택됨), 알카노일아미노, 아로일아미노, 아르알카노일아미노, 치환된 알카노일아미노, 치환된 아릴아미노, 치환된 아르알카노일아미노, 티올, 아킬티오, 아릴티오, 아르알킬티오, 알킬티오노, 아릴티오노, 아르알킬알오노, 알킬술포닐, 아릴술포닐, 아르알킬술포닐, 술폰아미도 (예, SO₂NH₂), 치환된 술폰아미도, 니트로, 시아노, 카르복시, 카르바밀 (예, CONH₂), 치환된 카르바밀 (예, CONH알킬, CONH아릴, CONH아르알킬, 또는 질소상에 알킬, 아릴 또는 아르알킬로부터 선택된 2개의 치환기가 있는 경우), 알콕시카르보닐, 아릴, 치환된 아릴, 구아니디노 및 헤테로시클로 (예, 인 돌릴, 이미다졸릴, 푸릴, 티에닐, 티아졸릴, 피롤리딜, 피리딜, 피리미딜 등)와 같은 1 내지 4개의 치환기로 치환된 알킬기를 지칭한다. 상기에서 치환기가 추가로 치환되는 경우 치환기는 알킬, 알콕시, 아릴 또는 아르알킬일 것이다.

"할로겐" 또는 "할로"라는 용어는 불소,염소, 브롬 및 요오드를 지칭한다.

"아릴"이라는 용어는 페닐, 나프틸, 비페닐 및 디페닐기 (각각 치환될 수 있음)와 같은, 고리 부분에 6 내지 12개의 탄소 원자를 갖는 모노시클릭 또는 비시클릭 방향족 탄화수소기를 지칭한다.

"아르알킬"이라는 용어는 알킬기를 통해 직접적으로 결합된 아릴기, 예를 들어 벤질을 지칭한다.

"치환된 아릴"이라는 용어는 예를 들어 알킬, 치환된 알킬, 할로, 트리플루오로메톡시, 트리플루오로메틸, 히드록시, 알콕시, 알카노일, 알카노일옥시, 아미노, 알킬아미노, 아르알킬아미노, 디알킬아미노, 알카노일아미노, 티올, 알킬티오, 우레이도, 니트로, 시아노, 카르복시, 카르복실알킬, 카르바밀, 알콕시카르보닐, 알킬티오노, 아릴티오노, 아릴술포닐아민, 술폰산, 알킬술포닐, 술폰아미도, 아릴옥시 등과 같은 1 내지 4개의 치환기로 치환된 아릴기를 지칭한다. 치환기는 히드록시, 알킬, 알콕시, 아릴, 치환된 아릴, 치환된 알킬 또는 아르알킬로 더 치환될 수 있다.

"헤테로아릴"이라는 용어는 예를 들어 4 내지 7원 모노시클릭, 7 내지 11원 비시클릭 또는 10 내지 15원 트리시클릭 고리계이고, 하나 이상의 헤테로원자 및 하나 이상의 탄소 원자-함유 고리를 갖는 임의로 치환된 방향족기를 지칭하며, 예 를 들어 피리딘, 테트라졸, 인다졸, 인돌을 들 수 있다.

"알케닐"이라는 용어는 1 내지 4개의 이중 결합을 갖는 탄소 원자수 2 내지 20, 바람직하게는 탄소 원자수 2 내지 15, 가장 바람직하게는 탄소 원자수 2 내지 8의 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소를 지칭한다.

"치환된 알케닐"이라는 용어는 할로, 히드록시, 알콕시, 알카노일, 알카노일옥시, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노, 알카노일아미노, 티올, 알킬티오, 알킬티오노, 알킬술포닐, 술폰아미도, 니트로, 시아노, 카르복시, 카르바밀, 치환된 카르바밀, 구아니디노, 인돌릴, 이미다졸릴, 푸릴, 티에닐, 티아졸릴, 피롤리딜, 피리딜, 피리미딜 등과 같은, 1 내지 2개의 치환기로 치환된 알케닐기를 지칭한다.

"알키닐"이라는 용어는 1 내지 4개의 삼중 결합을 갖는 탄소 원자수 2 내지 20, 바람직하게는 탄소 원자수 2 내지 15, 가장 바람직하게는 탄소 원자수 2 내지 8의 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소를 지칭한다.

"치환된 알키닐"이라는 용어는 할로, 히드록시, 알콕시, 알카노일, 알카노일옥시, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노, 알카노일아미노, 티올, 알킬티오, 알킬티오노, 알킬술포닐, 술폰아미도, 니트로, 시아노, 카르복시, 카르바밀, 치환된 카르바밀, 구아니디노, 및 헤테로시클로 (예, 이미다졸, 푸릴, 티에닐, 티아졸릴, 피롤리딜, 피리딜, 피리미딜 등)와 같은 치환기로 치환된 알키닐을 지칭한다.

"시클로알킬"이라는 용어는 바람직하게는 1 내지 3개의 고리와 고리 당 3 내지 7개의 탄소를 함유하는, 임의로 치환된 포화 시클릭 탄화수소 고리계를 지칭하 며, 상기 고리는 추가로 불포화 C₃-C₇ 카르보시클릭 고리와 융합될 수 있다. 예시적인 기로는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸, 시클로옥틸, 시클로데실, 시클로도데실 및 아다만틸을 들 수 있다. 예시적인 치환기로는 상기 기재된 바와 같은 하나 이상의 알킬기 또는 알킬 치환기로 상기 기재된 하나 이상의 기를 들 수 있다.

"헤테로시클", "헤테로시클릭" 및 "헤테로시클로"라는 용어는 예를 들어 4 내지 7원 모노시클릭, 7 내지 11원 비시클릭 또는 10 내지 15원 트리시클릭 고리계이며, 하나 이상의 탄소 원자-함유 고리에 하나 이상의 헤테로원자를 갖는, 임의로 치환된 완전히 포화되거나 또는 불포화된 방향족 또는 비방향족 시클릭기를 지칭한다. 헤테로원자를 함유하는 헤테로시클릭기의 각각의 고리는 질소 원자, 산소 원자 및 황 원자로부터 선택된 1, 2 또는 3개의 헤테로원자를 가질 수 있고, 여기서, 질소 및 황 헤테로원자는 또한 임의로 산화될 수 있고, 질소 헤테로원자는 또한 임의로 4급화될 수 있다. 헤테로시클릭기는 임의의 헤테로원자 또는 탄소 원자에 부착될 수 있다.

모노시클릭 헤테로시클릭기의 예는 피롤리디닐, 피롤릴, 피라졸릴, 옥세타닐, 피라졸리닐, 이미다졸릴, 이미다졸리닐, 이미다졸리디닐, 옥사졸릴, 옥사졸리디닐, 이소옥사졸리닐, 이속사졸릴, 티아졸릴, 티아디아졸릴, 티아졸리디닐, 이소티아졸릴, 이소티아졸리디닐, 푸릴, 테트라히드로푸릴, 티에닐, 옥사디아졸릴, 피페리디닐, 피페라지닐, 2-옥소피페라지닐, 2-옥소피페리디닐, 2-옥소피롤리디닐, 2-옥사제피닐, 아제피닐, 4-피페리도닐, 피리딜, N-옥소-피리딜, 피라지닐, 피리미디닐, 피리다지닐, 테트라히드로피라닐, 모르폴리닐, 티아모르폴리닐, 티아모르폴리닐 술폭시드, 티아모르폴리닐 술폰, 1,3-디옥솔란 및 테트라히드로-1,1-디옥소티에닐, 디옥사닐, 이소티아졸리디닐, 티에타닐, 티이라닐, 트리아지닐 및 트리아졸릴 등을 들 수 있다.

비시클릭 헤테로시클릭기의 예로는 2,3-디히드로-2-옥소-1H-인돌릴, 벤조티아졸릴, 벤즈옥사졸릴, 벤조티에닐, 퀴누클리디닐, 퀴놀리닐, 퀴놀리닐-N-옥시드, 테트라히드로이소퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 벤즈이미다졸릴, 벤조피라닐, 인돌리지닐, 벤조푸릴, 크로모닐, 쿠마리닐, 신놀리닐, 퀴녹살리닐, 인다졸릴, 피롤로피리딜, 푸로피리디닐 (예, 푸로[2,3-c]피리디닐, 푸로[3,1-b]피리디닐 또는 푸로[2,3-b]피리디닐), 디히드로이소인돌릴, 디히드로퀴나졸리닐 (예, 3,4-디히드로-4-옥소-퀴나졸리닐), 벤즈이소티아졸릴, 벤즈이속사졸릴, 벤조디아지닐, 벤즈이미다졸릴, 벤조푸라자닐, 벤조티오피라닐, 벤조트리아졸릴, 벤즈피라졸릴, 디히드로벤조푸릴, 디히드로벤조티에닐, 디히드로벤조티오피라닐, 디히드로벤조티오피라닐 술폰, 디히드로벤조피라닐, 인돌리닐, 인돌릴, 이소크로마닐, 이소인돌리닐, 나프티리디닐, 프탈라지닐, 피페로닐, 푸리닐, 피리도피리딜, 퀴나졸리닐, 테트라히드로퀴놀리닐, 티에노푸릴, 티에노피리딜, 티에노티에닐 등을 들 수 있다.

예시적인 치환기로는 상기 기재된 바와 같은 하나 이상의 알킬 또는 아르알킬기 또는 알킬 치환기로 상기 기재된 하나 이상의 기를 들 수 있다. 또한 에폭시드 및 아지리딘과 같은 저급 헤테로시클로도 포함된다.

"헤테로원자"라는 용어는 산소, 황 및 질소를 포함할 것이다.

화학식 1의 화합물은 또한 본 발명의 범위 내에 속하는 염을 형성할 수 있다. 제약상 허용되는 (즉, 무독성이고 생리학적으로 허용되는) 염이 바람직하지만, 다른 염도 예를 들어, 본 발명의 화합물의 단리와 정제에서 또한 유용하다.

화학식 1의 화합물은 나트륨, 칼륨 및 리튬과 같은 알칼리 금속, 칼슘과 마그네슘과 같은 알칼리 토금속, 디시클로헥실아민, 트리부틸아민, 피리딘, 및 아르기닌 및 라이신 등과 같은 아미노산과 같은 유기 염기와 염을 형성할 수 있다. 이러한 염은 당업자에게 공지된 바와 같이 형성될 수 있다.

화학식 1의 화합물은 다양한 유기 및 무기산과 염을 형성할 수 있다. 이러한 염의 예로는 염화수소, 브롬화수소, 메탄술폰산, 황산, 아세트산, 트리플루오로아세트산, 옥살산, 말레산, 벤젠술폰산, 톨루엔술폰산과 함께 염을 형성하는 것, 및 다양한 다른 염 (니트레이트, 포스페이트, 보레이트, 타르타레이트, 시트레이트, 숙시네이트, 벤조에이트, 아스코르베이트, 살리실레이트 등)을 들 수 있다. 이러한 염은 당업자에게 공지된 바와 같이 형성될 수 있다.

또한, 쯔비터이온 ("내부 염")이 형성될 수 있다.

본 발명의 화합물의 모든 입체 이성질체는 혼합물로, 또는 순수한 또는 실질적으로 순수한 형태로서 고려된다. 본 발명에 따른 화합물의 정의는 가능한 모든 입체이성질체 및 그의 혼합물을 포함한다. 이는 매우 특히 라세미체 형태 및 특이적인 활성을 갖는 단리된 광학 이성질체를 포함한다. 라세미체 형태는 예를 들어 분별 결정화, 부분입체 이성질체 유도체의 분리 또는 결정화, 또는 키랄 컬럼 크로 마토그래피에 의한 분리와 같은 물리적인 방법에 의해 분할될 수 있다. 개별 광학 이성질체는 예를 들어 광학적 활성산과 염을 형성한 후, 결정화하는 것과 같은 통상적인 방법에 의해 라세미체로부터 수득할 수 있다.

화학식 1의 화합물은 또한 프로드러그 형태를 가질 수 있다. 생체내에서 전환되어 생체활성제로 제공되는 임의의 화합물 (즉, 화학식 1의 화합물)은 본 발명의 범위 및 개념 내에서 프로드러그이다.

프로드러그의 다양한 형태는 당업계에 널리 공지되어 있다. 이러한 프로드러그 유도체의 예에 대해서는 하기 문헌을 참조한다.

a) Design of Prodrugs, edited by H. Bundgaard, (Elsevier, 1985) 및 Methods in Enzymology, Vol.42, p.309-396, edited by K. Widder, et al. (Academic Press, 1985);

b) A Textbook of Drug Design and Deveolpment, edited by Krosgaard-Larsen and H. Bundgaard, Chapter 5, "Design and Application of Prodrugs," by H. Bundgaard, p. 113-191(1991);

c) H. Bundgaard, Advanced Drug Deliverv Reviews, 8, 1-38(1992).

또한 화학식 1의 화합물의 용매화물 (예, 수화물)도 본 발명의 범위 내에 속하는 것으로 이해되어야 한다. 용매화 방법은 당업계에 일반적으로 공지되어 있다.

용도 및 유용성

본 발명은 특정 피롤로트리아진이 단백질 키나제의 억제제라는 발견에 기초 한다. 보다 구체적으로, 이들은 VEGF의 효과를 억제하고, 혈관신생 및(또는) 암과 같은 증가된 혈관 투과성과 관련된 질환 상태의 치료에서 유용한 특성을 갖는다. 본 발명은 포유동물의 과잉증식성 장애의 치료에서 화학식 1의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 수화물, 및 제약상 허용되는 담체의 제약 조성물에 관한 것이다. 특히, 상기 제약 조성물은 예를 들어 방광, 편평세포, 두부, 직장결장, 식도, 부인과 (예, 난소), 췌장, 유방, 전립선, 폐, 음부, 피부, 뇌, 비뇨생식관, 림프계 (예, 갑상선), 위, 후두 및 폐의 암을 비롯한, VEGF와 관련된 초발성 및 재발성 고형 종양, 특히 그의 성장 및 전개가 VEGF에 상당히 의존하는 종양의 성장을 억제할 것으로 예상된다. 또다른 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 또한 암이 아닌 장애, 예를 들어 당뇨병, 당뇨병성 망막병증, 건선, 류마티스성 관절염, 비만, 카포시 육종, 혈관종, 급성 및 만성 신병증 (증식성 사구체신염 및 당뇨병-유도 신장병을 포함), 죽종, 동맥염성 재발협착증, 자가면역 질환, 급성 염증, 및 망막 혈관 증식, 당뇨병성 망막병증, 미숙아의 망막병증 및 망막변성과 관련된 안구 질환에 또한 유용하다. 본 발명은 또한 포유동물에서 배반포 이식의 방지, 죽상경화증, 습진, 피부경화증 및 혈관종의 치료에 관한 것이다. 본 발명의 화합물은 다른 티로신 키나제에 대해 약간의 활성을 갖는 반면, VEGF 수용체 티로신 키나제에 대해서는 우수한 활성을 갖는다.

따라서, 본 발명의 추가의 측면에 따라, 인간과 같은 포유동물에서 항혈관신생 및(또는) 혈관 투과성 감소 효과를 생성하는데 사용되는 의약의 제조에서 화학식 1의 화합물 또는 제약상 허용되는 염의 용도가 제공된다.

본 발명의 추가의 측면에 따라, 항혈관신생 및(또는) 혈관 투과성 감소 효과의 생성을 필요로 하는 인간과 같은 포유동물에게, 유효량의 본 명세서에서 이미 정의된 바와 같은 화학식 1의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 항혈관신생 및(또는) 혈관 투과성 감소 효과의 생성 방법을 제공한다.

본 명세서에 기재된 화합물은 또한 HER1 및 HER2를 비롯한 다른 수용체 티로신 키나제를 억제하며, 따라서 건선 및 암과 같은 증식성 장애의 치료에 유용하다. HER1 수용체 키나제는 비-소세포 폐, 직장결장 및 유방암을 비롯한 많은 고형 종양에서 발현되고 활성화되는 것으로 나타났다. 유사하게, HER2 수용체 키나제는 유방, 난소, 폐 및 위암에서 과발현되는 것으로 나타났다. HER2 수용체의 과잉을 하향조절하거나 HER1 수용체에 의한 신호화를 억제하는 모노클로날 항체는 임상 전 및 임상 연구에서 항종양 효능을 나타내었다. 따라서, HER1 및 HER2 키나제의 억제제는 2개의 수용체 중 하나로부터의 신호화에 의존하는 종양의 치료에 효능을 가질 것으로 예상된다. HER1을 억제하는 상기 화합물의 활성은 항혈관신생제로서의 그의 용도를 더 증가시킨다. 하기의 문헌 및 그에 인용된 참고문헌을 참조한다: [Cobleigh, M. A., Vogel, C. L., Tripathy, D., Robert, N. J., Scholl, S., Fehrenbacher, L., Wolter, J.M., Paton, V., Shak, S., Lieberman, G., and Slamon, D. J., "Multinational study of the efficacy and safety of humanized anti-HER2 monoclonal antibody in women who have HER2-overexpressing metastatic breast cancer that has progressed after chemotherapy for metastatic disease", J. of Clin . Oncol . 17(9), p. 2639-2648(1999)]; [Baselga, J., Pfister, D., Cooper, M. R., Cohen, R., Burtness, B., Bos, M., D'Andrea, G., Seidman, A., Norton, L., Gunnett, K., Falcey, J., Anderson, V., Waksal, H., and Mendelsohn, J., "Phase I studies of anti-epidermal growth fator receptor chimeric antibody C225 alone and in combination with cisplatin", J. Clin. Oncol . 18(4), p. 904-914(2000)].

또한, 본 발명의 화학식 1의 화합물은 포유동물에서 피임제로서 사용될 수 있다.

본 명세서에서 이미 정의된 항증식, 항혈관신생 및(또는) 혈관 투과성 감소 치료는 단독 치료요법으로 적용될 수 있거나, 본 발명의 화합물 이외에 하나 이상의 다른 물질 및(또는) 치료를 포함할 수 있다. 이러한 병용 치료는 치료의 개별 성분을 동시에, 연속적으로 또는 별개로 투여하는 방법으로 달성될 수 있다. 본 발명의 화합물은 또한 공지된 항암제와 세포독성제 및 방사선을 비롯한 치료와 조합될 때 유용할 수 있다. 일정한 투여량으로 제제화되는 경우, 이러한 배합 생성물은 하기 기재된 투여량 범위 내의 본 발명의 화합물 및 인정된 투여량 범위 내의 다른 제약학적 활성제를 사용한다. 화학식 1의 화합물은 배합 제제가 부적절한 경우, 공지된 항암제 또는 세포독성제 및 방사선을 비롯한 치료와 연속적으로 사용될 수 있다.

종양의학 분야에서, 암이 걸린 각각의 환자를 치료하기 위해 다른 형태의 치료법을 조합하여 사용하는 것은 통상적인 관행이다. 종양의학에서 본 명세서에서 이미 정의된 항증식, 항혈관신생 및(또는) 혈관 투과성 감소 치료 이외에, 이러한 병용 치료의 다른 구성 요소(들)는 외과적 요법, 방사능요법 또는 화학요법일 수 있다. 이러한 화학요법은 하기 주요한 3종의 치료제의 카테고리를 포함할 수 있다:

(i) 상기에 정의된 것과는 다른 메카니즘으로 작용하는 항혈관신생제 (예를 들어, 리노미드, 인테그린 αvβ3 기능의 억제제, 안지오스타틴, 라족산);

(ii) 세포 증식 억제제, 예를 들어 항에스트로겐 (예를 들어, 타목시펜, 토레미펜, 랄록시펜, 드롤옥시펜, 요오독시펜), 프로게스토겐 (예를 들어, 메게스트롤 아세테이트), 아로마타제 억제제 (예를 들어 아나스트로졸, 레트라졸, 보라졸, 엑세메스탄), 항호르몬, 항프로게스토겐, 항안드로겐 (예를 들어, 플루타미드, 닐루타미드, 비칼루타미드, 시프로테론 아세테이트), LHRH 작용제 및 길항제 (예를 들어, 고세렐린 아세테이트, 류프롤리드), 테스토스테론 5α-디히드로리덕타제의 억제제 (예를 들어, 피나스테리드), 파르네실트란스페라제 억제제, 항-침습제 (예를 들어, 마리마스타트와 같은 메탈로프로테이나제 억제제 및 우로키나제 플라스미노겐 활성체 수용체 기능의 억제제) 및 성장 인자 기능의 억제제 (이러한 성장 인자의 예로는 EGF, FGF, 혈소판 유래 성장 인자 및 간세포 성장 인자를 들 수 있고, 상기 억제제의 예로는 성장 인자 항체, 아바스틴(등록상표) (베바시주마브) 및 에르비툭스(등록상표) (세툭시마브)와 같은 성장 인자 수용체 항체, 티로신 키나제 억제제 및 세린/트레오닌 키나제 억제제를 들 수 있음);

(iii) 종양의학 분야에서 사용되는 항증식/항신생물 약물 및 그의 배합물, 예를 들어, 항대사물질 (예를 들어, 메토트렉세이트과 같은 항엽산염제, 5-플루오로우라실과 같은 플루오로피리미딘, 푸린 및 아데노신 유사체, 시토신 아라비노시드); 삽입성 항종양 항체 (예를 들어, 독소루비신, 다우노마이신, 에피루비신 및 이다루비신과 같은 안트라시클린, 미토마이신-C, 닥티노마이신, 미트라마이신); 백금 유도체 (예를 들어, 시스플라틴 및 카르보플라틴); 알킬화제 (예를 들어, 니트로겐 머스타드, 멜팔란, 클로람부실, 부술판, 시클로포스파미드, 이포스파미드, 니트로소우레아, 티오테파); 유사분열 억제제 (예를 들어, 빈크리스틴과 같은 빈카 알칼로이드 및 탁솔(등록상표)과 같은 탁소이드, 탁소테레(등록상표) (도세탁셀) 및 에포틸론 유사체, 디스코데르몰리드 유사체 및 엘류테로빈 유사체와 같은 신규 미소관 제제); 토포이소머라제 억제제 (예를 들어, 에토포시드 및 테니포시드와 같은 에피포도필로톡신, 암사크린, 토포테칸); 세포 주기 억제제 (예를 들어, 플라보피리돌) 및 벨카드(등록상표) (보르테조미브)와 같은 생물학적 반응 조절제 및 프로테아좀 억제제.

상기에 언급한 바와 같이, 본 발명의 화학식 1의 화합물은 그의 항-혈관신생 및(또는) 혈관 투과성 감소 효과에 대해 흥미롭다. 이러한 본 발명의 화합물은 암, 당뇨병, 건선, 류마티스성 관절염, 카포시 육종, 혈관종, 비만, 급성 및 만성 신병증, 죽종, 동맥염성 재발협착증, 자가면역 질환, 급성 염증 및 당뇨병성 망막병증과 같은 망막 혈관 증식과 관련된 안구 질환을 비롯한 광범위한 질환 상태에 유용할 것으로 예상된다.

보다 구체적으로, 화학식 1의 화합물은 하기의 것을 비롯한 (제한적이지는 않음) 다양한 암 치료에 유용하다.

- 방광, 유방, 결장, 신장, 간, 소세포 폐암을 비롯한 폐, 식도, 담낭, 난소, 췌장, 위, 자궁경부, 갑상선, 전립선 및 편평세포 암종을 비롯한 피부를 포함하는 암종,

- 백혈병, 급성 림프구성 백혈병, 급성 림프아구성 백혈병, B-세포 림프종, T-세포 림프종, 호지킨 (Hodgkin) 림프종, 비-호지킨 림프종, 모발상 세포 림프종 및 버킷트 (Burkett) 림프종을 비롯한 림프 계열의 조혈성 종양,

- 급성 및 만성 골수성 백혈병, 골수이형성 증후군, 전림프구성 골수병을 비롯한 골수 계열의 조혈성 종양,

- 섬유육종 및 횡문근육종을 비롯한 중간엽 기원의 종양,

- 성상세포종, 신경모세종, 신경교종 및 신경초종을 비롯한 중추 및 말초신경계의 종양, 및

- 흑색종, 정상피종, 기형암종, 골육종, 색소성 건피증, 각결막종, 갑상선샘소포암 및 카포시 육종을 비롯한 기타 악성종양.

일반적으로 세포 증식의 조절에서 키나제의 중요한 역할 때문에, 억제제는 예를 들어, 양성 전립성비대증, 가족성 용종, 신경 섬유종증, 죽상경화증, 폐 섬유증, 관절염, 건선, 사구체신염, 혈관성형술 및 혈관 수술에 이은 재발협착증, 비후성 반흔 형성, 염증성 장 질환, 이식 거부반응, 내독소성 쇼크 및 진균 감염과 같은 비정상적인 세포 증식을 보이는 임의의 질환 과정의 치료에 유용할 수 있는 가역적인 세포 증식 억제제로 작용할 수 있다.

화학식 1의 화합물은 아포프토시스를 유발하거나 억제할 수 있다. 아포프토시스 반응은 다양한 인간 질환에서 이상 반응이다. 화학식 1의 화합물은 아포프토시스의 조절자로서, 암 (상기 언급된 종류를 포함하나 이에 제한되지는 않음), 바이러스성 감염 (헤르페스바이러스, 폭스바이러스, 엡슈타인-바 (Epstein-Barr) 바이러스, 신드비스 (Sindbis) 바이러스 및 아데노바이러스를 포함하나 이에 제한되지는 않음), HIV-감염 개체에 있어서 AIDS 발달의 예방, 자가면역 질환 (전신성 홍반성 루푸스, 자가면역-매개 사구체신염, 류마티스 관절염, 건선, 염증성 장 질환 및 자가면역 당뇨병을 포함하나 이에 제한되지는 않음), 신경퇴행성 질환 (알츠하이머병, AIDS-관련 치매, 파킨슨병, 근위축성 측삭 경화증, 색소성 망막염, 척수 근위축증 및 소뇌 변성을 포함하나 이에 제한되지는 않음), 골수이형성 증후군, 재생불량성 빈혈, 심근경색증, 졸증 및 재관류 손상과 관련된 허혈성 손상, 부정맥, 죽상경화증, 독소-유도 또는 알콜-관련 간 질환, 혈액학적 질환 (만성 빈혈 및 재생불량성 빈혈을 포함하나 이에 제한되지는 않음), 근골격계의 퇴행성 질환 (골다공증 및 관절염을 포함하나 이에 제한되지는 않음), 아스피린-민감성 비부비동염, 낭성 섬유증, 다발성 경화증, 신장 질환 및 암 통증의 치료에 유용할 것이다.

화학식 1의 화합물은 결장, 폐 및 췌장 종양과 같은 티로신 키나제 활성의 높은 발병률을 갖는 종양의 치료에 특히 유용하다. 본 발명의 화합물의 조성물 (또는 배합물)의 투여에 의해 포유동물 숙주에서의 종양 발달이 감소된다.

화학식 1의 화합물은 또한 VEGFR-2 및 FGFR-1과 같은 성장 인자 수용체를 통해 작동하는 신호 전달 경로와 관련될 수 있는 암 이외의 질환의 치료에 유용할 수 있다.

본 발명의 화합물은 경구, 정맥내 또는 피하 투여용 제약학적 비히클 또는 희석제와 함께 제제화될 수 있다. 제약 조성물은 전형적인 방법으로 목적하는 투여 방식에 적절한 고체 또는 액체 비히클, 희석제 및 첨가제를 사용하여 제제화될 수 있다. 화합물은 정제, 캡슐제, 과립제, 분말제 등의 형태로 경구 투여될 수 있다. 화합물은 또한 상기 투여 방식에 적절한 담체를 사용하여 현탁제로서 투여될 수 있다. 화합물은 약 0.05 내지 300 mg/kg/일, 바람직하게는 200 mg/kg/일 미만의 투여량 범위로 단일 투여 또는 2 내지 4회 분할 투여로 투여될 수 있다.

생물학적 분석

VEGFR -2 및 FGFR -1 키나제 분석

시약 최종 농도

원액 VEGFR -2 FGFR -1

트리스 pH 7.0 20 mM 20 mM

BSA 10 mg/ml 25 ㎍/ml 25 ㎍/ml

MnCl₂ (1M) 1.5 mM 0.5 mM

MgCl₂ (1M) - - - - 0.5mM

DTT (1M) 0.5 mM 0.5 mM

10％ 글리세롤 (1mg/ml) 중의 효소 원액 7.5 ng/rxn 30 ng/rxn

폴리 glu/tyr (10 mg/ml) 75 ㎍/ml 30 ㎍/ml

ATP (1 mM) 2.5 μM 1.0 μM

γ-ATP (10 μCi/㎕) 0.5 μCi/ml 0.5 μCi/ml

VEGFR-2 또는 FGFR-1 분석에 사용된 인큐베이션 혼합물은 합성 기질 폴리 glu/tyr (4:1), ATP, ATP-γ-³³P, 및 Mn⁺⁺ 및(또는) Mg⁺⁺, DTT, BSA 및 트리스 완충액을 함유하는 완충액을 함유한다. 효소를 첨가하여 반응을 시작하고, 60분 후 실온에서 30％ TCA를 첨가하여 최종 농도 15％ TCA가 되게 하여 종료시킨다. 억제제는 100％ DMSO 중 10 mM로 만든다. 분석은 96웰 포맷에서 4중으로 준비한다. 화합물을 100％ DMSO 중에 1:500으로 희석한 후, 물로 1:10으로 희석하여 최종 DMSO 농도가 10％가 되게 한다. 10 ㎕를 10％ DMSO 96웰 포맷의 B 내지 H열에 첨가한다. 화합물 20 ㎕를 작동 조건보다 5배 높은 농도로 A열에 첨가한다. 10 ㎕를 각각의 열에 옮긴 후, 6회 연속 희석을 혼합하면서 수행하고, F열에서 10 ㎕를 제거한다. G열은 화합물이 없는 대조군이고 H열은 화합물 및 효소가 없는 대조군이다. 효소 및 기질은 톰텍 쿠아드라 스테이션 (Tomtec Quadra station)을 사용하여 분배한다.

플레이트를 점착성 플레이트 뚜껑으로 덮고, 27℃에서 60분 동안 인큐베이션한 후, TCA로 20분 동안 얼음상에서 산 침전을 시킨다. 침전물을 유니필터 (UniFilter)-96, GF/C 마이크로플레이트로 톰텍 또는 팩커드 필터메이트 하베스터 (Packard FilterMate harvester)를 사용하여 옮긴다. 팩커드 탑카운트 마이크로플레이트 섬광 계수기 (TopCount Microplate Scintillation Counter)를 사용하고 마이크로신트 (Microscint)-20 칵테일을 유니필터 마이크로플레이트의 각각의 건조된 웰에 첨가하여 혼입된 방사능을 정량함으로써 활성을 측정한다.

본 발명의 화합물은 VEGFR-2 및 FGFR-1 키나제를 IC₅₀ 값 0.001 내지 10 μM로 억제한다. 바람직한 화합물은 IC₅₀ 값이 0.3 μM 미만이다.

이들 화합물은 VEGFR-2 및 FGFR-1 키나제 효소에 대해 선택적이다. 이들은 HER-2, CDK 키나제, LCK 및 Src 키나제에 대해 최소 활성을 갖는다. 이들 키나제에 대한 활성은 ＞ 2 μM이다.

제조 방법

화학식 1의 특정 화합물은 하기 반응식 및 당업자의 지식에 따라 제조될 수 있다.

모든 온도는 달리 지시되지 않는다면 섭씨 도 (℃)이다. 정제용 역상 (RP) HPLC 정제는 완충 용액으로서 0.1％ TFA를 갖는 물/메탄올 혼합물을 사용한 C18 역상 (RP) 컬럼 상에서 수행하였다. 모든 합성된 화합물은 적어도 양성자 NMR 및 LC/MS에 의해 특성화되었다. 달리 언급되지 않는다면 반응의 후처리 동안, 유기 추출물을 황산마그네슘 (MgSO₄) 상에서 건조하였다.

하기 약어는 통상적으로 사용되는 시약에 대해 사용된다. NMM; N-메틸모르폴린, DIBAL; 디이소부틸알루미늄 히드리드, BOP 시약; 벤조트리아졸-1-일옥시-트리스(트리메틸아미노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트, DCE; 디클로로에탄, K₂CO₃; 탄산칼륨, KOH; 수산화칼륨, DCC; 디시클로헥실 카르보디이미드, EDCI; 1-(디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드, RT; 실온, HOBt ; 히드록 시벤조트리아졸, DCM; 디클로로메탄, CbzCl; 클로로벤조일 클로라이드, mCPBA; 메타-클로로퍼벤조산, NaHCO₃; 중탄산나트륨, HCl; 염산, TFA; 트리플루오로아세트산, NH₄Cl; 염화암모늄, DIPEA; 디이소프로필아민, Et₃N; 트리에틸아민, Na₂SO₄; 황산나트륨, DEAD; 디에틸 아조디카르복실레이트, DPPA; 디페닐포스포릴아지드, DMF; 디메틸포름아미드, THF; 테트라히드로푸란.

단계 1

제1 단계는 온화한 염기의 존재하에서 XR²가 에스테르이고, YR³이 메틸인 임의로 치환된 말로네이트 (1)를 글리신 에스테르와 반응시켜 화합물 2를 수득함으로써 수행된다.

단계 2

그 후, 상기 반응식의 화합물 2를 칼륨 tert-부톡시드와 같은 염기의 존재하에서 고리화하여 화합물 3을 수득할 수 있다.

단계 3

상기 반응식의 생성물 3을 KOH 또는 수소화나트륨과 같은 염기의 존재하에서 히드록실아민-O-술폰산 또는 클로로아민과 같은 아민화제와 반응시켜 생성물 4를 형성한다.

단계 4

상기 반응식의 화합물 4를 MeOH 중 메톡시화나트륨과 같은 염기의 존재하에서 가열하면서 포름아미드로 처리함으로써 고리화하여 반응식 1의 생성물 5를 형성한다.

단계 5

상기 반응식의 화합물 5를 예를 들어 승온에서 옥시염화인으로 할로겐화하여 반응식 1의 생성물 6을 형성한다.

단계 6

화합물 6을 아세토니트릴 또는 DMF와 같은 유기 용매에서 아닐린과 같은 아민 또는 페놀과 반응시켜 반응식 1의 생성물 7을 형성한다.

단계 1

YR³이 메틸과 같은 알킬기이고, XR² 기가 에스테르인 반응식 1의 화합물 7을 저온에서 메틸 마그네슘 브로마이드 또는 메틸 마그네슘 클로라이드로 처리하여 반응식 2의 화합물 2를 수득할 수 있다.

단계 2

그 후, 상기 반응식의 화합물 2를 삼불화붕소와 같은 루이스산의 존재하에서 저온에서 과산화수소 또는 과붕산나트륨과 같은 과산화물로 처리하여 반응식 2의 페놀성 화합물 3을 수득할 수 있다.

단계 3

상기 반응식의 화합물 3의 페놀성 기를 수소화나트륨과 같은 염기의 존재하에서 브로모에탄과 같은 알킬화제로 알킬화시키면 반응식 2의 화합물 4를 수득할 것이다. 별법으로, 화합물 3을 화합물 3 및 알콜을 트리페닐 포스핀 및 DEAD의 존 재하에서 교반하는 미쯔노부 (Mitsunobu) 조건하에서 알콜로 처리하여 반응식 2의 화합물 4를 수득할 수 있다.

단계 1

반응식 2의 화합물 1을 수성 KOH와 같은 염기로 처리함으로써 카르복실산으로 전환시킨다. 상기 산을 벤질 알콜과 같은 알콜의 존재하에서 1,4-디옥산과 같은 유기 용매에서 디페닐 포스포릴 아지드로 처리함으로써 커티우스 (Curtius) 재배열하여 상기 반응식의 화합물 1을 수득한다.

단계 2

카르보벤질옥시 (Cbz)와 같은 기에 의해 임의로 탈보호될 경우, 팔라듐과 같은 촉매 상에서 수소화에 의해 카르바메이트기를 탈보호하여 상기 반응식의 화합물 2를 수득한다.

단계 3

상기 반응식의 화합물 2의 아미노기를 예를 들어 DCC와 같은 커플링제의 존재하에서 카르복실산으로 처리함으로써 아실화하거나, 예를 들어 술포닐 클로라이드로 처리함으로써 술포닐화한다. 별법으로, 상기 반응식의 화합물 2의 아미노기를 알킬 할라이드로 알킬화하거나, 시아노붕수소화나트륨 또는 붕수소화나트륨과 같은 환원제의 존재하에서 알데히드로 환원 아민화한다.

단계 1

반응식 1의 화합물 6을 예를 들어 페녹시드 또는 메톡시드 음이온으로 처리함으로써 4-위치에서 에테르로 전환 (에테르화)시킨다.

단계 2

톨루엔과 같은 유기 용매에서 디이소부틸알루미늄 히드리드 (DIBAL)와 같은 환원제로 환원시켜 상기 반응식의 알콜 2를 수득한다.

단계 3

상기 반응식의 화합물 2를 예를 들어 승온에서 톨루엔과 같은 유기 용매에서 이산화망간 (MnO₂)으로 처리함으로써 알콜을 산화시킨다.

단계 4

상기 반응식의 화합물 3을 디클로로메탄 (DCM)과 같은 유기 용매에서 m-클로로퍼벤조산 (m-CPBA)과 같은 산화제로 처리한 후, 중탄산칼륨과 같은 염기로 수성 가수분해하여 히드록실 화합물 4를 수득한다.

단계 5

화합물 4에서 페놀기를 NaH와 같은 염기의 존재하에서 0℃ 내지 100℃에서 친전자제로 알킬화하여 화합물 5를 수득한다.

단계 6

상기 반응식의 화합물 5를 승온에서 수성 HCl과 같은 산으로 처리함으로써 가수분해하여 화합물 6을 수득한다.

단계 7

상기 반응식의 화합물 6을 반응식 1에 기재된 것과 유사한 절차를 사용하여 화합물 7로 전환시킨다.

단계 1

XR²가 카르복실산인 반응식 1의 화합물 5를 디시클로헥실카르보디이미드 (DCC)와 같은 커플링제의 존재하에서 암모니아, N,O-디메틸히드록실 아민 또는 치환된 히드라진과 같은 아민으로 처리하여 화합물 1을 아미드 또는 히드라지드로서 수득할 수 있다.

단계 2

단계 1에 사용된 아민이 N,O-디메틸히드록실 아민일 경우, 생성된 화합물을 메틸리튬과 같은 알킬화제로 처리하여 화합물 2를 수득할 수 있다.

단계 3

그 후, 상기 반응식의 화합물 2를 반응식 1에 기재된 바와 같이 화합물 3으로 전환시킬 수 있다.

단계 1

반응식 5의 단계 1에 사용된 아민이 암모니아일 경우, 생성된 화합물을 옥시염화인과 같은 탈수제로 처리하여 화합물 1을 수득할 수 있다.

단계 2

그 후, 상기 반응식의 화합물 1을 에탄올과 같은 알콜 중 황산과 같은 강산으로 처리하여 이미데이트를 수득할 수 있고, 그 후, 이를 메틸히드라진과 같은 치환된 히드라진으로 처리하여 화합물 2를 수득할 수 있다.

단계 3

그 후, 상기 반응식의 화합물 2를 옥시염화인과 같은 탈수제로 처리하여 중간체 클로로이미데이트를 수득할 수 있고, 이를 반응식 1에 기재된 바와 같이 적절 한 아닐린 또는 페놀로 더 처리하여 상기 반응식의 화합물 3을 수득할 수 있다.

단계 1

반응식 5의 단계 1에 사용된 아민이 히드라진일 경우, 생성된 화합물을 옥시염화인과 같은 탈수제의 존재하에서 디플루오로아세트산과 같은 산, 또는 치환된 아세트이미드산 에스테르 또는 포스겐 이미디늄 클로라이드로 처리하여 화합물 1을 수득할 수 있다.

단계 2

그 후, 화합물 1을 반응식 2에서 이미 기재된 바와 같이 화합물 2로 전환시킬 수 있다.

그리고, 화학식 1의 다른 화합물은 당업자에게 일반적으로 공지된 절차를 사용하여 제조할 수 있다. 특히, 하기 실시예는 본 발명의 화합물의 추가의 제조 방법을 제공한다.

본 발명에 의해, VEGFR-2 및 FGFR-1과 같은 성장 인자 수용체의 티로신 키나제 활성을 억제하는 유용한 화합물을 제공할 수 있다.

본 발명은 이제 본 발명의 바람직한 실시양태인 하기 제조 실시예에 의해 더 기재될 것이다. 상기 실시예는 제한적이라기보다 예시적이며, 첨부된 청구항에 의해 한정된 바와 같은 본 발명의 개념 및 범위 내에 해당하는 다른 실시양태가 있을 수 있음이 이해되어야 한다.

<실시예 1>

4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-올

A. 4-클로로-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-카르복실산 에틸 에스테르

톨루엔 (800 mL) 중 4-히드록시-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-카르복실산 에틸 에스테르 (60.0 g, 271.2 mmol, 제조 방법은 WO 0071129를 참조), 옥시염화인 (30.3 mL, 325.4 mmol) 및 디이소프로필에틸 아민 (37.7 mL, 217 mmol)의 혼합물을 아르곤하에 18시간 동안 가열하여 환류시키고 이어서 실온으로 냉각시켰 다. 혼합물을 회전증발기 (rotovap) 상에서 농축하고 잔류물을 디클로로메탄 (1000 mL) 및 저온 중탄산나트륨 용액 (300 mL)으로 희석하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 분리된 유기 층을 저온 염수 (300 mL)로 세척하고, 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 조 물질을 디클로로메탄으로 용출하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 황색 고체로서 목적하는 화합물 (64.8 g, 99％)을 수득하였다.

B. 4-에톡시-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-카르복실산 에틸 에스테르

0℃에서 아르곤하에 테트라히드로푸란 (0.6 L) 중 이 실시예의 화합물 A (23 g, 96 mmol)의 용액에 에탄올 중 소듐 에톡시드 (21％ w/w, 43 mL, 115.2 mmol)를 20분에 걸쳐 적가하였다. 반응물을 0℃에서 1시간 동안 교반하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 염화암모늄 용액 및 염수로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고, 농축하고 잔류물을 디클로로메탄으로 용출한 후 헥산 중 50％ 에틸 아세테이트로 용출하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 백색 고체로서 목적하는 화합물 (23.5 g, 98％)을 수득하였다. LC/MS; (M+H)⁺= 250.17

C. 2-(4-에톡시-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일)-프로판-2-올

0℃에서 THF (2.5 L) 중 이 실시예의 화합물 B의 용액에 첨가 깔대기로 메틸 마그네슘 브로마이드 (Et₂O 중 3 M, 360 mL, 1.08 mol)를 천천히 첨가하였다. 혼합물을 실온으로 가온하고, 4시간 동안 계속 교반하였다. 반응물을 염화암모늄 용액 으로 켄칭하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 염화나트륨 용액으로 세척하고 건조시켜, 황색 고체로서 목적하는 화합물 (78 g, 100％)을 수득하였다. LC/MS; (M+H)⁺= 236.1

D. 4-에톡시-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-올

과산화수소 (30％, 10.3 mL, 178.5 mmol) 및 보론 트리플루오라이드 디에틸 에테레이트 (271.4 mL, 2.14 mol)의 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 이어서 혼합물을 -20℃로 냉각시키고 -15℃에서 디클로로메탄 (1.45 L) 중 이 실시예의 화합물 C (30 g, 129.5 mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물은 -3℃에 도달되고 이어서 -40℃로 냉각시켰다. 상기 혼합물에 아황산나트륨 포화 용액을 교반하면서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 건조시키고, 진공하에 농축하여 화합물 D (26 g, 76％)를 수득하였다. LC/MS; (M+H)⁺= 194.2

E. 6-벤질옥시-4-에톡시-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진

디메틸 포름아미드 (10 mL) 중 이 실시예의 화합물 D (1 g, 5.2 mmol), 벤질 브로마이드 (0.62 mL, 5.2 mmol) 및 탄산칼륨 (2.1 g, 15.5 mmol)의 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물, 10％ 염화리튬 용액 및 염수로 세척하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고 진공하에 농축하여 황색 고체로서 추가 정제 없이 다음 단계에 사용되는 화합물 E (1 g)를 수득하였다.

F. 6-벤질옥시-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-올

1 N HCl (600 mL) 및 에탄올 (800 mL) 중 이 실시예의 화합물 E (90 g, 조)를 4시간 동안 가열하여 환류시켰다. 침전된 고체를 여과로 수집하고, 혼성 용매 (물/에탄올/메탄올=4/4/2)로 세척하고 건조시켜 회백색 고체를 수득하고, 이를 디클로로메탄으로 세척하여 백색 고체로서 화합물 F (65 g)를 수득하였다. LC/MS; (M+H)⁺= 256.2

G. 6-벤질옥시-4-클로로-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진

톨루엔 (150 mL) 중 이 실시예의 화합물 F (10 g, 39.2 mmol), 옥시염화인 (4.4 mL, 47.1 mmol) 및 디이소프로필에틸 아민 (5.5 mL, 31.4 mmol)의 혼합물을 85℃에서 2시간 동안 교반하고 이어서 추가 옥시염화인 (1.1 mL, 11.8 mmol)을 첨가하였다. 2시간 후, 추가 옥시염화인 (1.1 mL, 11.8 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 85℃에서 1시간 동안 계속 교반하고 이어서 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄 중에 용해시키고, 저온 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 조 물질을 디클로로메탄으로 용출하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 황색 고체로서 화합물 G (9.9 g, 93％)를 수득하였다.

H. 6-벤질옥시-4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진

디메틸 포름아미드 (100 mL) 중 4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-올 (6.47 g, 39.2 mmol, 제조 방법은 하기를 참조)의 용액을 아르곤으로 탈기시키고 이어서 -20℃로 냉각시켰다. 수소화나트륨 (오일 중 60％, 1.57 g, 39.2 mmol)을 한번에 첨 가하였다. 반응 혼합물을 교반하면서 30분에 걸쳐 0℃로 가온하고, -20℃로 다시 냉각시키고 디메틸 포름아미드 (100 mL) 중 이 실시예의 화합물 G의 용액을 한번에 첨가하였다. 반응물을 실온으로 가온하였다. 30분 후, 혼합물을 1 N HCl (200 mL)로 산성화시키고, 에틸 아세테이트 (1.8 L)로 희석하고, 10％ 염화리튬 용액 (0.4 L x 2), 1N NaOH 용액 (0.3 L x 2), 완충액 (pH= 2, 200 mL), 및 NaCl 용액 (0.4 L)으로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고, 진공하에 농축하여 황갈색 고체로서 화합물 H (15 g, 95％)를 수득하였다. LC/MS;(M+H)⁺= 403.1

I. 4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-올

디메틸 포름아미드 (100 mL) 중 이 실시예의 화합물 H (15 g, 37.3 mmol), 암모늄 포르메이트 (12 g, 190 mmol) 및 Pd/C (10％, 1.5 g)의 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 셀라이트(등록상표)를 통해 여과하고 여과액을 에틸 아세테이트로 희석하고 10％ 염화리튬 용액 (2x), 5％ 중탄산나트륨 용액 (2x) 및 염수로 연속 세척하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 담갈색 고체를 수득하고, 이를 디클로로메탄으로 세척하여 회백색 고체로서 표제 화합물 (7.8 g, 64％)을 수득하였다.

또한 하기 기재된 또 다른 경로에 의해 실시예 1을 제조할 수 있다.

A-1. 4-클로로-5-메틸-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-카르복실산 에틸 에 스테르

10 L 반응기에 4-히드록시-5-메틸-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-카르복실산 에틸 에스테르 (155.1 g, 0.70 mol) 및 톨루엔 (2.7 L)을 도입하였다. 이어서 옥시염화인 (128.8 g, 78 mL, 0.84 mol)을 첨가한 후 디이소프로필에틸 아민 (94.2 g, 127 mL, 0.70 mol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 5분 동안 교반하고 이어서 20시간 동안 환류하에 가열하였다. HPLC 분석으로 출발 물질이 완전히 사라졌음이 증명되었다. 이어서 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고 저온 K₂HP0₄ 용액 (2.4 L의 물 중 527 g)을 반응 혼합물의 내부 온도를 5℃ 미만으로 유지시키는 속도로 첨가하였다. 혼합물의 최종 pH는 8이었다. 이어서 혼합물을 0℃ 내지 5℃에서 20분 동안 교반하고 이어서 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 유기 상을 분리하고 K₂HPO₄ 용액 (405 mL의 물 중 85 g) 및 물 (345 mL)로 세척하고 이어서 여과하고 황색 고체가 침전하기 시작할 때까지 진공하에 농축하였다. 디메틸 포름아미드 (1 L)를 첨가하고 잔류하는 톨루엔을 진공하에 제거하였다 (조 온도= 38℃, 압력= 9 Torr). 농축 후, 대략 4％의 톨루엔이 HPLC에 의해 관찰될 수 있었다.

J. 4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-카르복실산 에틸 에스테르

전 단계 A-1의 잔류물을 10 L 반응기에 옮기고 디메틸 포름아미드 (1.1 L)를 첨가한 후 K₂CO₃ (276 g, 2.1 mol) 및 4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-올 (109.5 g, 0.70 mol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 주변 온도에서 16시간 동안 교반하고 이 어서 0℃로 냉각시켰다. 물 (2.0 L) 및 에틸 아세테이트 (2 L)를 내부 온도를 20℃ 미만으로 유지시키는 속도로 첨가하였다. 이어서 상을 분리하고 수성 상을 에틸 아세테이트 (2 L)로 추출하였다. 이어서 합한 유기 추출물을 물 (2 L), 10％ 수성 LiCl (2 L) 및 물 (2 L)로 세척하였다. 이어서 톨루엔 (1 L)을 첨가하고 유기 추출물을 진공하에 농축하였다. 추가 톨루엔 (500 mL)을 첨가하고 혼합물을 진공하에 재농축하였다.

K. 2-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]-프로판-2-올

전 단계 (단계 J)의 잔류물을 10 L 반응기에 옮기고 충분한 톨루엔을 가하여 1.1 L의 총 반응 부피를 수득하였다. 이어서 THF (1.1 L)를 첨가한 후 LiCl (140 g)을 첨가하고 반응 혼합물을 0℃로 냉각시켰다. 이어서 메틸 마그네슘 브로마이드 [톨루엔 중 1.4 M, THF (75:25), 2.1 L, 2.8 mol]를 5℃ 미만의 내부 온도를 유지시키는 속도로 첨가하였다. 총 첨가 시간은 대략 2시간이었다. 반응 혼합물을 0℃에서 추가 2시간 교반하고 이어서 3시간에 걸쳐 15℃로 가온하였는데, 이 때 5％의 출발 물질이 여전히 HPLC에 의해 관찰되었다. 이어서 반응 혼합물을 5℃로 재냉각시키고 추가 100 mL의 메틸마그네슘 브로마이드를 첨가하고 혼합물을 추가 1.5시간 동안 교반하였다. 이어서 내부 온도를 5℃ 미만으로 유지시키는 속도로 에틸 아세테이트 (1.5 L 및 15％ NH₄Cl (3.2 L) 용액)를 첨가하였다. 이어서 층을 분리하고 수성 상을 에틸 아세테이트 (2 L)로 추출하였다. 합한 유기 층을 15％ NH₄C1 (2 x 2 L) 및 물 (2 x 2L)로 세척하고 이어서 진공하에 농축하여 비정질 황색 고체로서 목적하는 생성물을 수득하였다. 용해를 돕는 수조 (T= 37℃)를 사용하여 조 생성물을 디클로로메탄 (5 L) 중에 용해시켰다. 이어서 용액을 짧은 실리카 겔 (400 g) 패드에 통과시키고 패드를 디클로로메탄 (7 L) 및 5％ 에틸 아세테이트/디클로로메탄 (1.2 L)으로 세척하였다. 여과액을 증발시켜 회백색 고체를 수득하고 여기에 에틸 아세테이트 (1.2 L)를 첨가하였다. 생성된 슬러리를 10 L 반응기에 옮기고 50℃에서 2시간 동안 교반 후 투명한 용액을 수득하였다. 이어서 용액을 주변 온도로 냉각시키고 백색 고체를 침전시켰다. 이어서 헵탄 (2.6 L)을 첨가하고 혼합물을 실온에서 20시간 동안 교반하였다. 생성된 고체를 여과하고, 헵탄(1 L)으로 세척하고 50℃에서 24시간 동안 감압하에 건조시켰다. 백색 고체로서 2-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]-프로판-2-올 (3 단계에 걸쳐 186 g, 75％)을 수득하였다. LC/MS; (M+H)⁺= 355.4

I-1. 4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-올

0℃에서 디클로로메탄 (200 mL) 중 BF₃ㆍOEt₂ (120 mL, 0.948 mol)의 용액에 H₂O₂ (50％ 수용액, 4.6 mL, 0.0790 mol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고 이어서 -20℃로 냉각시켰다. 별도의 플라스크에서, 전 단계의 2-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]-프로판-2-올 (20 g, 0.0564 mol)을 완전히 용해시키기 위해 간접 가열을 사용하여 디클로로메탄 (400 mL) 중에 용해시켰다. 이어서 상기 용액을 캐뉼라를 통해 과산화물 용액에 신속하게 첨가하였다 (첨가 시간= 20분). 첨가 동안의 반응 온도는 -15℃ 내지 -25℃였다. 첨가가 완료된 후, 반응 온도를 -15℃로 올리고 추가 40분 동안 상기 온도를 유지시켰다. 반응 혼합물을 Na₂SO₃ (200 mL, 20％ 수용액) 및 에탄올아민 (33％ 수용액, 300 mL)를 첨가하여 켄칭하였다. 내부 온도를 0℃ 미만으로 유지시키는 속도로 두 시약을 첨가하였다. 냉각 조를 제거하고 반응 혼합물을 2시간 동안 교반하고 이어서 분리 깔대기에 부었다. 층을 분리하고 수성 상을 에틸 아세테이트 (100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 5％ 수성 시트르산 (100 mL), 10％ 수성 NaHCO₃ (100 mL), 물 (2 x 100 mL), 및 염수 (100 mL)로 세척하고 이어서 건조시키고 여과하고 진공하에 농축하여 오렌지색 발포체를 수득하였다. 조 물질을 적재 용매로서 테트라히드로푸란을 사용하여 플로리실 (Florisil)(등록상표) 컬럼 상에 적재하고 컬럼을 30％ 에틸 아세테이트/헵탄으로 용출하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획을 수집하고 진공하에 농축하고 이어서 에틸아세테이트/헵탄으로부터 재결정화시켰다. 고체를 수집하고 헵탄으로 세척하여 회백색 고체로서 9.1 g (52％)의 목적하는 생성물을 수득하였다. 여과액을 진공하에 농축하고 용출제로서 40％ 에틸아세테이트/헵탄을 사용하여 실리카 겔 상에서 정제하여 추가 2.5 g (14％)의 목적하는 생성물을 수득하였다. 4-(4-플루오 로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-올의 총 수율은 (11.6 g, 66％)이었다.

역상 HPLC: 3.75분 (YMC S5 ODS 컬럼 4.6 x 50 mm, 0.2％ 인산 함유 10-90％ 수성 메탄올 4분에 걸쳐, 4 mL/분, 220 nm에서 모니터링). LC/MS; (M+H)⁺= 313.2

4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-올의 제조

L. 1-(2,3-디플루오로-6-니트로페닐)-프로판-2-온

10 L 반응기에 칼륨 tert-부톡시드 (570.6 g, 5.082 mol) 및 테트라히드로푸란 (2 L)을 도입하였다. 오버헤드 교반을 개시하고 생성된 현탁액을 11℃로 냉각시킨 후 에틸 아세토아세테이트 (668 mL, 5.082 mol)를 첨가하였다. 에틸 아세토아세테이트의 첨가는 1시간을 요했고, 발열이 관찰되었다. 첨가 속도를 조절하여 반응기의 내부 온도가 25℃를 초과하지 않게 하였다. 생성된 혼합물은 균질하게 되었고 색은 담황색이었다. 첨가 완료 후, 반응 혼합물을 10℃ 내지 15℃로 냉각시키고 이어서 1,2,3-트리플루오로니트로벤젠 (260 mL, 600 g, 2.259 mol)을 테트라히드로푸란 (1 L) 중의 용액으로서 적가하였다. 첨가는 35분을 요했고 발열이 관찰되었다. 첨가 속도를 조절하여 내부 온도가 21℃를 초과하지 않게 하였다. 첨가 완료 후, 생성된 갈색 반응 혼합물을 실온으로 가온하고 2.5시간 동안 교반하였는데, LC 분석으로 미량의 1,2,3-트리플루오로니트로벤젠도 잔류하지 않고 100％ 전환되었음을 확인하였다. 반응 혼합물을 15℃로 재냉각시키고 3 L의 1 N HCl를 15분에 걸쳐 천천히 첨가하니 갈색 용액은 최종적으로 투명한 황색 용액이 되었다. 수성 상의 pH는 약 pH 4이었다. 혼합물을 에틸 아세테이트 (2 x 1 L)로 추출하고 합한 유기 추출물을 염수 (1 L)로 세척하고 진공하에 농축하여 오렌지색 오일을 수득하였다.

수득된 오일을 10 L 반응기에 도입하고 및 빙초산 (1 L) 중에 용해시켰다. 이어서 황산 (농축, 1 L)을 첨가하니 약간 발열하면서 격렬한 가스 방출이 관찰되었다. 기계적 교반을 개시하고 반응 혼합물을 3시간 동안 70℃로 가열한 후, LC 분석으로 100％ 전환이 확인되었다. 반응 혼합물을 15℃ 내지 20℃로 냉각시키고 에틸 아세테이트 (3 L)를 첨가한 후 물 (6 L)을 첨가하였다. 가시적인 계면은 관찰되지 않았다. 수성 상 7 L를 분리하고 이어서 에틸 아세테이트 (2 x 2 L)로 추출하였다. 이 때, 가시적인 계면이 관찰되었다. 합한 유기 추출물을 1 N NaOH (6 x 1 L) (수성 상의 pH는 6.6임) 및 염수 (3 x 1 L)로 세척하였다. 갈색 유기 추출물을 약 10시간 동안 감압하에 농축하여 (조 온도 35℃, 36 torr) HPLC에 의해 82％ AP인 조 갈색 오일로서 569 g의 목적하는 화합물을 수득하였다.

잔류 에틸 아세테이트는 GC에 의해 3％이었다. KF: 0.25％. ¹H 및 ¹³C NMR은 보고된 데이타와 일치하였다. 주요 불순물: 파라 위치 이성질체.

M. 메탄올 (1 L) 중 1-(2,3-디플루오로-6-니트로페닐)-프로판-2-온 (183 g) 및 탄산칼륨 (100 g)의 혼합물을 3시간 동안 환류하에 가열하였다. 이어서 반응 혼합물을 냉각시키고 진공하에 농축하여 대부분의 메탄올을 제거하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트 (1 L)로 희석하고, 여과하고 물로 세척하였다. 분리된 수성 층을 2N HCl로 중화시키고 에틸 아세테이트 (2 x 500 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고 진공하에 농축하여 갈색 고체를 수득하였다. 고체를 디에틸 에테르로 처리하고 여과하여 황색 고체로서 1-(2-플루오로-3-메톡시-6-니트로페닐)-프로판-2-온 (121 g, 71％)을 수득하였다. LC/MS; (M+H)⁺= 228.2.

N. 전 단계의 1-(2-플루오로-3-메톡시-6-니트로페닐)-프로판-2-온 (454 mg, 21 mmol) 및 피리디늄 클로라이드 (0.9 g, 7.8 mmol)의 혼합물을 180℃에서 75분 동안 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, 1 N HCl (3 mL) 및 에틸 아세테이트 (10 mL)로 희석하고 여과하였다. 여과액을 염수 (2x)로 세척하고, 건조시키고 진공하에 농축하여 회색 고체로서 1-(2-플루오로-3-히드록시-6-니트로페닐)-프로판-2-온 (410 mg, 96％)을 수득하고, 이를 다음 단계를 위한 추가 정제 없이 사용하였다.

O. 전 단계의 1-(2-플루오로-3-히드록시-6-니트로페닐)-프로판-2-온 (50 g, 0.234 mol)을 2 L 둥근 바닥 플라스크에 첨가하였다. 물 (1 L)을 첨가하고, 황색 현탁액을 실온에서 교반하였다. 소듐 디티오나이트 (225 g, 5.5 당량)를 한번에 첨가하고 반응 혼합물을 교반하고 HPLC 분석으로 출발 물질이 잔류하지 않음이 확 인될 때까지 (일반적으로 1시간 미만) 30℃ 미만으로 유지하였다. 완료 시, 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고 황갈색 고체 생성물을 진공 여과로 수집하였다. 습윤 생성물을 하우스 진공하에 50℃ 미만에서 건조시켜 황갈색 결정 분말로서 단리되는 4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-올 (31.4 g, 81％ 수율)을 수득하였다. 물질의 HPLC 순도는 99.8 초과였다.

또한, 하기 기재된 바와 같은 또 다른 경로에 의해 1-(2,3-디플루오로-6-니트로페닐)-프로판-2-온을 표제 화합물로 전환시킬 수 있다.

P. 1-(3-벤질옥시-2-플루오로-6-니트로-페닐)-프로판-2-온

1-(2,3-디플루오로-6-니트로페닐)-프로판-2-온 (2.5 g, HPLC 분석에 의한 82％ 순도, 9.54 mmol)의 용액에 벤질 알콜 (2.5 mL) 및 LiOHㆍH₂O (1.07 g, 25.58 mmol)를 첨가하였다. 이어서 반응 혼합물을 100 내지 110℃로 가열하고 HPLC 분석으로 반응이 완료되었음을 확인할 때까지 4시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄 (18 mL)으로 희석하고 1 N HCl로 pH 6 내지 7로 중화시켰다. 층을 분리하고 유기 상을 염수로 세척하고 수집하였다. 교반하면서, 헵탄 (30-25 mL)을 유기 용액에 첨가하면 결정화가 개시되었다. 생성된 슬러리를 0 내지 5℃로 냉각시키고 추가 1시간 동안 교반하였다. 이어서 슬러리를 여과하고 필터 케익을 헵탄으로 세척하였다. 이어서 황갈색 고체를 50℃에서 12 내지 15시간 동안 진공하에 건조시켜 HPLC 분석에 의해 순도가 95％인 1.6 g의 목적하는 화합물을 수득하였다. HPLC 방법: 컬럼: YMC 팩 시아노 3um 4.6x50 mm, 용매 A: MeOH: 물 (20:80) 중 0.05％ TFA, 용매 B: MeOH: 물 (20:80) 중 0.05％ TFA, 파장: 254 nm, 유속: 3 mL/분, 구배 시간: 3분, 최종％B: 100 초기, 유지: 0.5분, 개시％B: 0, 일반적인 체류 시간: SM, 1.2분; 생성물 2.2-2.3분.

Q. 4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-올

빛 없이 실온에서 질소 분위기 하에 메탄올 (300 mL) 중 전 단계의 화합물 P (20.00 g, 66.03.30 mmol)의 용액에 10％ Pd/C (2.0 g) 및 암모늄 포르메이트 (60.0 g, 0.95 mol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 3.5시간 동안 교반하고 이어서 에틸 아세테이트 (200 mL)로 희석하고 셀라이트(등록상표)/실리카 겔 패드를 통해 여과하였다. 이어서 잔류물을 하기 방법을 사용하여 정제할 수 있었다:

진공하에 농축한 후, 생성된 잔류물을 30％ 에틸 아세테이트/헥산으로 용출하는 크로마토그래피로 정제하고 디클로로메탄/헥산으로 처리한 후 백색 고체로서 목적하는 화합물 (7.32 g, 67％)을 수득하였다. 진공하에 농축한 후, 잔류물을 디클로로메탄 중에 용해시키고 디클로로메탄으로 세척한 실리카 겔 패드를 통과시켰다. 여과액을 진공하에 농축하여 백색 고체로서 표제 화합물 (6.66 g, 61％)을 수득하였다.

또한 하기 두 가지 별법으로 1-(3-벤질옥시-2-플루오로-6-니트로-페닐)-프로판-2-온을 1-(2-플루오로-3-히드록시-6-니트로페닐)-프로판-2-온으로 전환시킬 수 있다.

1-(2-플루오로-3-히드록시-6-니트로페닐)-프로판-2-온

방법 R-1: 실온에서 아세트산 무수물 (5 mL) 및 아세트산 (5 mL) 중 1-(3-벤질옥시-2-플루오로-6-니트로페닐)-프로판-2-온 (3.03 g, 10 mmol)의 용액에 브롬화수소산 (48％ 수용액, 3 mL)을 첨가하였다. 첨가 후, 반응물을 30분 동안 100℃로 가열하고 이어서 실온으로 냉각시켰다. 상기 혼합물에 10 mL의 헥산을 교반하면서 첨가하였다. 용액을 경사 분리하고 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트 (50 mL)로 희석하고 염수 (3 x 20 mL)로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 진공하에 농축하여 갈색 고체로서 1-(2-플루오로-3-히드록시-6-니트로페닐)-프로판-2-온 (1.70 g, 80％)을 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LC/MS; (M+H)⁺= 213.2

방법 R-2: 1-(3-벤질옥시-2-플루오로-6-니트로페닐)-프로판-2-온 (65.0 g, 0.214 mol) 및 피리디늄 클로라이드 (60.74 g, 0.526 mol)의 혼합물을 180℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 3N HCl(100 mL) 및 에틸 아세테이트 (500 mL)로 희석하고 여과하였다. 수성 층을 에틸 아세테이트 (2X)로 추출하고 합한 유기 층을 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 실리카 겔 패드를 통해 여과시키고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올 중 목탄으로 탈색시키고, 여과하고 진공하에 농축하여 갈색 고체로서 1-(2-플루오로-3-히드록시-6- 니트로페닐)-프로판-2-온 (37 g, 81％)을 수득하였다. LC/MS; (M+H)⁺= 213.2

별법으로, 1-(3-벤질옥시-2-플루오로-6-니트로페닐)-프로판-2-온을 하기 기재된 바와 같이 5-벤질옥시-4-플루오로-2-메틸-1H-인돌로 고리화 반응시키고, 이것은 상기 기재된 바와 같이 탈벤질화시킬 수 있다.

S. 메탄올 (100 mL) 중 1-(3-벤질옥시-2-플루오로-6-니트로페닐)-프로판-2-온 (9.09 g, 30 mmol) 및 라니 니켈 (Raney nickel) (약 5 g)의 혼합물을 40℃로 가열하고 이어서 메탄올 (15 mL) 중 히드라진의 용액을 30분에 걸쳐 격렬히 교반하면서 적가하였다. 1시간 동안 환류시킨 후 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 셀라이트를 통해 여과하고 농축하였다. 조 물질을 디클로로메탄으로 용출하는 실리카 겔 패드를 통과시키고 진공하에 농축하여 황색 오일로서 5-벤질옥시-4-플루오로-2-메틸-1H-인돌 (6.1 g, 80％)을 수득하였다. LC/MS; (M+H)⁺= 256.3⁺.

<실시예 2>

4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-6-옥시라닐메톡시피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진

DMF (1 mL) 중 4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-올 (실시예 1) (200 mg, 0.64 mmol), 에피클로로히드린 (297 mg, 3.21 mmol) 및 탄산칼륨 (445 mg, 3.21 mmol)의 혼합물을 50℃에서 6시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각시키고 진공하에 농축한 후 조 물질을 헥산 중 50％ 에틸 아세테이트로 용출하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 황색 고체로서 표제 화합물 (190 mg, 81％)을 수득하였다. MS: (M+H)⁺= 369.

<실시예 3>

1-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-3-메탄술포닐-프로판-2-올

DMSO 중 실시예 2 (10 mg, 0.027 mmol) 및 소듐 메탄술피네이트 (120 mg, 85％, 1.0 mmol)의 혼합물을 1시간 동안 105℃로 가열하였다. 혼합물을 농축하고 에틸 아세테이트 중 5％ 메탄올로 용출하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 백색 고체로서 표제 화합물 (5.5 mg, 45％)을 수득하였다. MS: (M+H)⁺= 449.3

<실시예 4>

1-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-피롤로[2,1-f][1,2,4]트 리아진-6-일옥시]-4-(디메틸아미노술포닐)아미노부탄-2-올

DMF (0.5 mL) 중 실시예 2 (40 mg, 0.11 mmol), N,N-디메틸술파미드 (94 mg, 0.66 mmol) 및 탄산칼륨 (91 mg, 0.66 mmol)의 혼합물을 80℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고, 여과하고 진공하에 농축하였다. 조 물질을 정제용 HPLC로 정제한 후, 에틸 아세테이트 중 10％ 메탄올로 용출하는 크로마토그래피로 정제하여 백색 고체로서 표제 화합물 (13.7 mg, 25％ 수율)을 수득하였다. MS: (M+H)⁺= 493.1

하기 표에 나타낸 적절한 친핵체를 사용하여 실시예 4의 제조를 위해 기재된 것과 유사한 절차를 사용하여 하기 화합물을 제조하였다.

<실시예 13>

(2S)-3-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-프로판-1,2-디올

에탄올 (15 mL) 중 실시예 1 (45 mg, 0.14 mmol), S-(-) 글리시돌 (330 mg, 4.2 mmol) 및 트리에틸아민 (5 μL)의 혼합물을 2시간 동안 75℃로 가열하였다. 반응물을 진공하에 농축하였다. 조 물질을 100％ 에틸 아세테이트로 용출하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 백색 고체로서 표제 화합물 (26 mg, 48％ 수율)을 수득하였다. MS: (M+H)⁺= 387.2

적절한 에폭시드를 사용하여 실시예 13의 제조를 위해 기재된 것과 유사한 절차를 사용하여 실시예 1로부터 하기 화합물을 제조하였다. 실시예 15 및 16의 경우, 적절한 키랄 프로필렌 옥시드 (10 당량)를 사용하였다. 실시예 17 및 18의 경우, 적절한 키랄 글리시딜 메틸 에테르 (7 당량)를 사용하였다.

실시예 14에 대한 원소 분석:

실시예 15에 대한 원소 분석:

실시예 17에 대한 원소 분석:

실시예 18에 대한 원소 분석:

<실시예 19>

3-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-프로판-1-올

아세토니트릴 (1.5 mL) 중 실시예 1 (50 mg, 0.16 mmol), 3-브로모-1-프로판올 (100 μL, 1.1 mmol) 및 탄산칼륨 (100 mg, 0.72 mmol)의 혼합물을 35℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 농축하고 디클로로메탄 중 30％ 에틸 아세테이트로 용출하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 밝은 베이지색 고체 로서 표제 화합물 (26 mg, 39％ 수율)을 수득하였다. MS: (M+H)⁺= 371

<실시예 20>

2-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-에탄올

실시예 1을 실시예 19의 제조와 유사한 방식으로 브로모에탄올 (13 당량)로 처리하여 표제 화합물 (49％)을 수득하였다. LC/MS; (M+H)⁺= 357.

<실시예 21>

6-(2-브로모에톡시)-4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진

아세토니트릴 (10 mL) 중 실시예 1 (300 mg, 0.96 mmol), 1,2-디브로모에탄 (1.5 mL, 17.4 mmol), 및 탄산칼륨 (1.0 g, 7.2 mmol)의 혼합물을 6시간 동안 50℃로 가열하였다. 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고, 여과하고 진공하에 농축하였다. 조 물질을 디클로로메탄 중 10％ 에틸 아세테이트로 용출하는 실리카 겔 상 에서 크로마토그래피로 정제하여 백색 고체로서 표제 화합물 (405 mg, 100％)을 수득하였다. MS: (M+H)⁺= 419.

적절한 브롬화물을 사용하여 실시예 21의 제조를 위해 기재된 것과 유사한 절차를 사용하여 하기 화합물을 제조하였다.

<실시예 24>

N-{2-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]}-(디메틸아미노술포닐)에틸아민

아르곤하에 DMF (1.5 mL) 중 실시예 21 (80 mg, 0.19 mmol), N,N-디메틸술파 미드 (150 mg, 1.2 mmol) 및 탄산칼륨 (400 mg, 2.9 mmol)의 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 CH₂Cl₂로 희석하고, 여과하고 농축하였다. 조 물질을 정제용 HPLC로 정제하여 백색 고체로서 표제 화합물 (48 mg, 55％ 수율)을 수득하였다. MS: (M+H)⁺= 463.2

적절한 친핵체를 사용하여 실시예 24의 제조를 위해 기재된 것과 유사한 절차를 사용하여 하기 화합물을 제조하였다. 실시예 27의 제조를 위해서 포르밀우레아를 사용하였다.

<실시예 28>

{3-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-프로필}-포스폰산 디에틸 에스테르

A. 6-(3-브로모-프로폭시)-4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진

0℃에서 아르곤하에 실시예 1 (40 mg, 0.13 mmol), 3-브로모-1-프로판올 (36 mg, 0.26 mmol) 및 트리페닐포스핀 (68 mg, 0.26 mmol)의 용액에 DEAD (45 mg, 0.26 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄 중 20％ 에틸 아세테이트로 용출하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 백색 고체로서 화합물 A (37 mg, 66％)를 수득하였다. LC/MS; (M+H)⁺= 433

B. {3-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-프로필}-포스폰산 디에틸 에스테르

트리에틸 포스파이트 (0.5 mL) 중 화합물 A (8 mg, 0.018 mmol)의 용액을 밤새 110℃로 가열하였다. 조 물질을 에틸 아세테이트 및 에틸 아세테이트 중 10％ 메탄올로 용출하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 투명한 오일로서 표제 화합물 (7 mg, 79％)을 수득하였다. MS: (M+H)⁺= 491

<실시예 29>

4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-6-(3-메틸술파닐-프로폭시)-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진

알콜로서 3-메틸티오-1-프로판올을 사용하는 것을 제외하고 실시예 28의 단계 A의 제조를 위해 기재된 유사한 절차를 사용하여 표제 화합물 (32％)을 제조하였다. LC/MS; (M+H)⁺= 400

<실시예 30>

4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-6-(3-메탄술피닐-프로폭시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진

0℃에서 디클로로메탄 중 실시예 29 (25 mg, 0.0625 mmol)의 용액에 m-CPBA (77％, 14 mg, 0.0625 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반한 후, 트리페닐포스핀 (5 mg, 0.019 mmol)을 첨가하였다. 0℃에서 추가 30분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 진공하에 농축하였다. 조 물질을 정제용 HPLC로 정제하여 백색 고체로서 표제 화합물 (11 mg, 42％ 수율)을 수득하였다. MS: (M+H)⁺= 417.

<실시예 31>

(2S)-4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-6-옥시라닐메톡시-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진

DMF (3 mL) 중 실시예 1 (311 mg, 1 mmol), (2S)-(+)-글리시딜 노실레이트 (311 mg, 1.2 mmol), 및 K₂CO₃ (200 mg, 1.45 mmol)의 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고 고체를 여과하였다. 여과액을 염수로 세척하고, 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중 50％ 에틸 아세테이트)로 정제하여 표제 화합물 (340 mg, 92％ 수율)을 수득하였다. LC/MS; (M+H)⁺= 369.1

<실시예 32>

(2R)-4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-6-옥시라닐메톡시-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진

실시예 31의 제조와 유사한 방식으로 실시예 1을 (2R)-(-)-글리시딜 노실레이트로 처리하여 표제 화합물을 수득하였다. LC/MS; (M+H)⁺= 369.2

<실시예 33>

(2R)-1-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-4-메탄술포닐-부탄-2-올

-78℃에서 아르곤하에 THF (2 mL) 중 디메틸 술폰 (282 mg, 3 mmol)의 용액에 n-부틸 리튬 (헥산 중 1.6 M, 1.12 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 10분 동안 -78℃에서 교반하고 실시예 32 (30 mg, 0.08 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 디클로로메탄으로 희석하고 1％ NaH₂PO₄ 용액으로 세척하였다. 조 물질을 정제용 HPLC로 정제하여 백색 고체로서 표제 화합물 (20 mg, 53％)을 수득하였다. MS; (M+H)⁺= 463.2

<실시예 34>

(2S)-1-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-4-메탄술포닐-부탄-2-올

실시예 33의 제조를 위해 기재된 절차를 사용하여 실시예 31을 표제 화합물로 전환시켰다 (40％). LC/MS; (M+H)⁺ = 463.2.

실시예 4로의 실시예 2의 전환을 위해 기재된 것과 유사한 절차를 사용하여 적절한 키랄 에폭시드, 실시예 31 및 실시예 32를 트리아졸로 처리하여 하기 실시예를 제조하였다.

<실시예 43>

5-메틸-4-(2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-6-(3-피페리딘-1-일프로폭시)-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진

A. 5-메틸-4-페녹시-6-(3-피페리딘-1-일-프로폭시)-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진

0℃에서 아르곤하에 테르라히드로푸란 (20 mL) 중 5-메틸-4-페녹시피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-올 (1.47 g, 6.1 mmol, 제조 방법은 WO 0071129를 참 조), 1-피페리딘프로판올 (1.74 g, 12.2 mmol) 및 트리페닐포스핀 (3.2 g, 12.2 mmol)의 혼합물에 DEAD (1.9 mL, 12.2 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고 이어서 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 휘발성 물질을 진공하에서 제거하였다. 잔류물을 5％ (MeOH 중 2 M NH₃)/20％ 에틸 아세테이트/CH₂Cl₂를 사용한 실리카 겔 플래쉬 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 베이지색 고체로서 목적하는 생성물 (1.6 g, 72％ 수율)을 수득하였다.

B. 5-메틸-4-히드록시-6-(3-피페리딘-1-일-프로폭시)-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진

수성 HCl (1 N, 15 mmol) 중 상기 화합물 A (1.7 g, 5.05 mmol)의 혼합물을 70℃에서 3시간 동안 가열하였다. 용매를 진공하에서 제거하였다. 생성물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피 [실리카 겔, MeOH/EtOAc=2/8 (ｖ/ｖ) 중 2 M NH₃]에 의해 정제하여 백색 고체로서 5-메틸-4-페녹시-6-(3-피페리딘-1-일-프로폭시)-피롤로[2,1-f][1,2,4] 트리아진 (1.1 g, 75％ 수율)을 수득하였다.

C. 4-클로로-5-메틸-6-(3-피페리딘-1-일-프로폭시)-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진

POCl₃ (8 mL) 중 화합물 B (0.45 g, 1.55 mmol)의 용액을 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 진공하에서 제거하였다. 잔류물을 디클로로메탄 중에 용해시키고 용액을 순차적으로 얼음으로 냉각한 NaHCO₃ 용액 및 염수로 세척하 고 건조시키고 여과하였다. 여과액을 농축하여 황색 고체로서 4-클로로-5-메틸-6-(3-피페리딘-1-일-프로폭시)-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진 (0.47 g, 98％ 수율)을 수득하였다.

D. 5-메틸-4-(2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-6-(3-피페리딘-1-일프로폭시)-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진

DMF (1 mL) 중 화합물 C (40 mg, 0.13 mmol), 2-메틸-5-히드록시인돌 (40 mg, 0.27 mmol) 및 K₂CO₃ (100 mg, 0.72 mmol)의 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 가열하였다. 고체를 여과하고 CH₂Cl₂로 세척하고 여과액을 농축하였다. 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 20％ NH₃ (MeOH 중 2 M)/에틸 아세테이트]에 의해 정제하여 황색 고체로서 표제 화합물 (24 mg, 44％ 수율)을 수득하였다.

적절한 히드록시인돌 또는 아미노인돌을 사용하여 실시예 43의 제조를 위해 기재된 것과 유사한 절차를 사용하여 하기 화합물을 제조하였다.

<실시예 51>

4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-6-(2-피페리딘-4-일-에톡시)-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진

0℃에서 THF (1.5 mL) 중 트리페닐포스핀 (168 mg, 0.640 mmol)의 용액에 DEAD (76 μL, 0.48 mmol)를 천천히 첨가하였다. 5분 동안 교반 이후, 4-피페리딘에탄올 (0.48 mmol)을 첨가하고 생성된 혼합물을 추가 5분 동안 교반하였다. 이 어서 실시예 1을 첨가하고 반응 혼합물을 실온으로 천천히 가온하고 18시간 동안 교반하였다. 이어서 반응 혼합물을 진공하에서 농축하고 정제용 HPLC 이어서 플래쉬 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 수성 1 N HCl을 첨가하고 혼합물을 진공하에서 농축하여 연분홍색 고체 (30 mg, 74％)를 수득하였다.

적절한 알콜로 실시예 1을 처리함으로써 실시예 51의 제조를 위해 기재된 것과 유사한 절차를 사용하여 하기 실시예를 제조하였다.

<실시예 71>

{1-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시메틸]-3-메탄술포닐-프로필}-디메틸-아민

단계 A

0℃에서 DMF/THF (1:1, 1 mL)의 혼합물 중 실시예 64 (20 mg, 0.0336 mmol) 의 용액에 NaH (1 mg, 0.0336 mmol)를 첨가하고 생성된 혼합물을 20분 동안 교반하였다. 이어서 메틸 요오다이드 (0.2 mL, 과량)를 첨가하고 반응 혼합물을 추가 30분 동안 교반하고 물 (20 mL) 및 디클로로메탄 (20 mL)의 혼합물에 붓고 층을 분리시켰다. 수성 상을 디클로로메탄 (10 mL)으로 추출하고 합한 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에서 농축하고 추가 정제없이 다음 단계에서 사용하였다.

단계 B

DMF (1 mL) 중 이전 단계에서 수득된 물질에 NH₄CO₂H (21 mg, 0.336 mmol) 및 5％ Pd/C (3 mg)를 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 추가 NH₄CO₂H (21 mg) 및 Pd/C (5 mg)를 첨가하고, 반응 혼합물을 15분 동안 70℃로 가열하고 이어서 실온에서 14시간 동안 가열하였다. 이어서 반응 혼합물을 셀라이트(등록상표)를 통해 여과하고 디클로로메탄 (50 mL)으로 헹구었다. 여과액을 물 (20 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고 진공하에서 농축하였다. 잔류물을 정제용 HPLC에 의해 정제하고 디클로로메탄 (20 mL) 중에 취하고 NaHCO₃ (20 mL)로 세척하고 진공하에서 농축하여 표제 화합물 (3.5 mg, 2 단계에 걸쳐서 21％)을 수득하였다. MS: (M+H)⁺ = 490.

실시예 64 화합물의 제조를 위해 요구되는 중간체를 하기와 같이 제조하였다.

(1-히드록시메틸-3-메탄술포닐-프로필)-카르밤산 벤질 에스테르

0℃에서 MeOH (12 mL) 중 Cbz-L-메티오닌 메틸 에스테르 (500 mg, 1.68 mmol)의 용액에 물 (8 mL) 중 옥손(등록상표) (1.53 g, 5.044 mmol)을 첨가하였다. 빙조를 제거하고 반응 혼합물을 1시간 동안 교반하고, 진공하에서 농축하여 휘발성 물질을 제거하고 이어서 잔류물을 디클로로메탄 (50 mL) 및 물 (50 mL)에 부어 넣었다. 층을 분리하고 수성 상을 디클로로메탄 (2×40 mL)로 추출하고 합한 유기 추출물을 물 (40 mL)로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고 진공하에서 농축하여 추가 정제없이 사용되는 생성물 612 mg (＞100％ 수율)을 수득하였다.

-78℃에서 디클로로메탄 (6 mL) 중 이전 단계에서 수득된 물질 (350 mg)의 용액에 DIBAL (헥산 중 1.0 M, 2.33 mL, 2.33 mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 1시간 동안 교반하고 이어서 저온에서 로쉘 (Rochelle) 염 (포화 수용액 10 mL)으로 켄칭하고 실온에서 추가 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 분리 깔때기에 붓고 층을 분리하였다. 수성 상을 디클로로메탄 (2×25 mL)으로 추출하고 합한 유기 추출물을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고 진공하에서 농축하여 백색 고체로서 알데히드 및 알콜의 혼합물을 수득하였다. 디클로메탄 (6 mL) 중 고체를 용해시키고, -78℃로 냉각하고 DIBAL-H (헥산 중 1.0 M, 1.59 mL, 1.41 mmol)를 첨가함으로써 상기 물질을 반응 조건으로 다시 처리하였다. 로쉘 염 (포화 수용액 10 mL)으 로 켄칭하기 이전에 반응 혼합물을 2시간에 걸쳐서 0℃로 천천히 가온하고 실온에서 추가 1시간 동안 교반하였다. 층을 분리하고, 수성 상을 디클로로메탄 (2×25 mL)으로 추출하고 합한 유기 추출물을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고 진공하에서 농축하였다. 이어서 잔류물을 디클로로메탄:헥산의 1:2 혼합물로 연화처리하여 백색 고체로서 (1-히드록시메틸-3-메탄술포닐-프로필)-카르밤산 벤질 에스테르 (118 mg, 42％ 수율)를 수득하였다.

<실시예 72>

5-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-펜탄-2-올

0℃에서 THF (1 mL) 및 MeOH (0.1 mL) 중 실시예 58 (16 mg, 0.0404 mmol)의 용액에 NaBH₄ (3 mg, 0.0808 mmol)를 첨가하고 반응 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 추가 5 mg의 NaBH₄를 첨가하고 혼합물을 10℃에서 2시간 동안 계속 교반하고 이어서 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서 반응 혼합물을 NaHCO₃ (20 mL) 및 디클로로메탄 (30 mL)에 부어 넣었다. 층을 분리하고 유기 상을 건조시키고, 여과하고 진공하에서 농축하였다. 잔류물을 실리카 상에 흡수시키고 플래쉬 컬럼 크로마토그래피 (50％ 에틸 아세테이트/헥산 내지 100％ 에틸 아세테이트)에 의해 정제 하여 표제 화합물 (10 mg, 63％ 수율)을 수득하였다.

<실시예 73>

2-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-1-메틸에틸아민

A. 1-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-프로판-2-온

아세톤 (100 mL) 중 실시예 1 (3.1 g, 10 mmol), 클로로아세톤 (1.02 g, 11 mmol), 및 K₂CO₃ (4.1 g, 30 mmol)의 혼합물을 6시간 동안 50℃에서 가열하였다. 혼합물을 냉각하고 농축하여 베이지색 고체를 수득하고, 이를 에틸 아세테이트/디클로로메탄 (1:1)으로 세척하였다. 여과액을 짧은 실리카 겔 패드를 통과시켜 정제하여 연베이지색 고체로서 목적하는 생성물 (3.34 g, 91％ 수율)을 수득하였다.

B. 2-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-1-메틸에틸아민

THF (2 mL) 중 상기 화합물 A (56 mg, 0.15 mmol), 암모늄 포르메이트 (100 mg, 1.6 mmol), NaBH(OAc)₃ (84 mg, 0.4 mmol), 아세트산 (0.2 mL) 및 분자 체 (100 mg)의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 암모늄 포르메이트 (100 mg, 1.6 mmol) 및 NaBH(OAc)₃ (84 mg, 0.4 mmol)의 다른 분획을 첨가하고 혼합물을 추가 5시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하고 여과액을 정제용 HPLC에 의해 정제하였다. 목적하는 분획을 동결 건조하여 백색 고체로서 목적하는 화합물의 TFA 염 (20 mg, 28％ 수율)을 수득하였다.

<실시예 74>

{2-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-1-메틸에틸}-메틸아민

THF (2 mL) 중 실시예 73의 화합물 A (56 mg, 0.15 mmol), 메틸아민 (THF 중 2M, 0.2 mmol), NaBH(OAc)₃ (42 mg, 0.2 mmol), 아세트산 (20 μL) 및 3Å 분자 체 (100 mg)의 혼합물을 실온에서 20시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하고 여과액을 정제용 HPLC에 의해 정제하여 백색 고체로서 표제 화합물 (21 mg, 37％ 수율)을 수득하였다.

<실시예 75>

[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]-메탄올

아르곤하에 -78℃에서 무수 메틸렌 클로라이드 (2.0 mL) 중 4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-카르복실산 에틸에스테르 (68 mg, 0.19 mmol)의 용액에 DIBAL (0.48 mmol, 0.48 mL, 1.0M, 2.5 당량)을 적가하였다. 5분 후에, 혼합물을 -15℃로 가온하고 추가 15분 동안 교반하였다. 에탄올 1 방울을 첨가하여 반응을 켄칭하고 1 N 수산화나트륨 (0.2 mL) 및 에틸 아세테이트 1.0 mL 및 THF 1.0 mL를 첨가하였다. 30분 후에, 혼합물을 여과하여 생성된 고체를 제거하였다. 여과액을 건조시키고, 진공하에서 농축하고 헥산 중 40 내지 75％ 에틸 아세테이트 (구배)로 용출하는 실리카 겔을 사용하여 크로마토그래피 정제하였다. 목적하는 분획을 농축하여 투명 오일로서 표제 화합물 (39 mg, 63％)을 수득하였다.

<실시예 76>

[5-메틸-4-(2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]-카르밤산 3-피페리딘-1-일-프로필 에스테르

A. 아르곤하에 아세토니트릴 (10.0 mL) 중 4-클로로-5-메틸-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-카르복실산 메틸 에스테르 (0.5 g, 2.22 mmol) 및 2-메틸-5-히드록시인돌 (424 mg, 2.9 mmol)의 교반된 용액에 트리에틸아민 (6.65 mmol, 0.93 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 17시간 동안 교반한 후에 용매를 진공하에서 제거하고 잔류물을 헥산 중 20 내지 30％ 에틸 아세테이트 (구배)로 용출하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피 정제하였다. 용매를 진공하에서 제거하여 백색 고체로서 5-메틸-4-(2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-카르복실산 메틸 에스테르 (0.58 g, 85％)를 수득하였다.

B. 피리딘 (20 mL) 중 화합물 A (575 mg, 1.71 mmol)의 용액에 리튬 요오다이드 (17 mmol, 2.3 g)를 첨가하였다. 혼합물을 45시간 동안 환류하에 교반하였다. 혼합물을 냉각하고 이어서 피리딘을 진공하에서 제거하였다. 잔류 고체 물질을 정제용 HPLC에 의해 정제하였다. 진공하에서 용출제를 제거하여 갈색 고체로서 5-메틸-4-(2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-카르복실산 (228 mg, 41％)을 수득하였다.

C. 디옥산 (7 mL) 중 화합물 B (35 mg, 0.11 mmol)의 용액에 분쇄된 4Å 분자 체 약 5 mg, 트리에틸아민 (0.13 mmol, 18 μL), 및 DPPA (0.13 mmol, 28 μL)를 첨가하였다. 혼합물을 아르곤하에 50℃에서 6시간 동안 가열하고, 디옥산 (2.0 mL) 중 3-피페리딘프로판올 (1.1 mmol, 156 mg)을 첨가하고, 76℃로 가온하고, 이어서 약 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 정제용 HPLC에 의해 정제하였다. 이어서 수득된 생성물을 에틸 아세테이트 (100 mL) 중에 용해시키고 포화 중탄산나트륨 수용액 30 mL로 세척하고, 건조시키고, 여과하고 진공하에서 농축하였다. 이어서 클로로포름 중 1％의 트리에틸아민, 10％의 메탄올로 용출하는 실리카 겔을 사용하여 오일을 크로마토그래피 정제하였다. 진공하에서 용매를 제거하여 오렌지색 오일로서 표제 화합물 (9.2 mg, 18％)을 수득하였다.

<실시예 77>

4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-6-(모르폴린-2-일메톡시)-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진

A. 0℃에서 디클로로메탄 (0.5 mL) 중 (2S)-4-tert-부톡시카르보닐-2-히드록시메틸모르폴린 [28.6 mg, 0.13 mmol, 제조 방법은 문헌 [Heterocycles (1993), 35(1), 105] 참조] 및 트리에틸아민 (16 mg, 0.16 mmol)의 용액에 메탄술포닐 클로라이드 (18 mg, 0.157 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하고 이어서 에틸 아세테이트 (5 mL)로 희석시켰다. 혼합물을 연속으로 1M KHSO₄ 용액 및 염수로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, 건조시키고 농축하여 오일로서 다 음 단계에 직접 사용되는 조 생성물 38 mg (99％)을 수득하였다.

DMF (0.5 mL) 중 조 화합물 (38 mg, 0.13 mmol), 실시예 1 (45 mg, 0.14 mmol) 및 K₂CO₃ (50 mg, 0.36 mmol)의 혼합물을 실온에서 48시간 동안 교반하였다. 혼합물을 디클로로메탄올로 희석시키고 여과하였다. 여과액을 물로 세척하고, 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 정제용 HPLC에 의해 정제하여 겔로서 (2S)-2-메탄술포닐옥시메틸-모르폴린-4-카르복실산 tert-부틸 에스테르 (15 mg, 22.6％)를 수득하였다.

B. 0℃에서 화합물 A (15 mg)를 디옥산 (0.1 mL) 중 4 M HCl 중에 용해시키고 상기 온도에서 10시간 동안 교반하고 72시간 동안 냉장고에 저장하였다. 혼합물을 NaHCO₃ 수용액으로 중화하고 정제용 HPLC에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획을 NaHCO₃로 중화하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 추출물을 건조시키고 농축하고 잔류물을 동결 건조시켜 고체로서 표제 화합물 (2 mg, 16％)을 수득하였다.

<실시예 78>

6-(5-디플루오로메틸-[1,3,4]옥사디아졸-2-일)-4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로-[2,1-f][1,2,4]트리아진

A. 4-히드록시-5-메틸-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-카르복실산 에틸 에스테르 (1.5 mmol, 331 mg)를 에탄올 (2 mL) 중 히드라진의 4:1 혼합물에 용해시키고 혼합물을 90℃에서 8시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각하고 진공하에서 농축하여 회백색 고체로서 4-[[2,4-디플루오로-5-[(메톡시아미노)카르보닐]페닐]아미노]-5-(1-메틸에틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-카르복실산 히드라지드 (300 mg, 97％)를 수득하였다.

B. 화합물 A (100 mg, 0.43 mmol) 및 디플루오로아세트산을 옥시염화인 (3 mL)에 첨가하고 생성된 혼합물을 120℃에서 10시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주변 온도로 냉각하고 진공하에서 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트와 NaHCO₃ 포화 용액 사이에 분배하였다. 유기 층을 분리하고, (Na₂SO₄) 상에서 건조시키고, 여과하고 농축하였다. 이어서 생성된 오일 잔류물을 DMF (2 mL) 중에 용해시키고 4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-올 (0.13 g, 0.63 mmol) 및 탄산칼륨을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 5시간 동안 교반하고, 이어서 주변 온도로 냉각하고 메틸렌 클로라이드로 희석시켰다. 유기 층을 물로 세척하고, (Na₂SO₄) 상에서 건조시키고, 여과하고 농축하였다. 정제용 HPLC에 의해 정제하여 백색 고체로서 표제 화합물 (22 mg, 총 31％)을 수득하였다.

<실시예 79>

[(1R),2S]-2-디메틸아미노프로피온산-[2-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]]-1-메틸에틸 에스테르

DMF (1.5 mL) 중 실시예 15 (80 mg, 0.22 mmol), N,N-디메틸-L-알라닌 (41 mg, 0.35 mmol), HATU (132 mg, 0.69 mmol), DIPEA (91 mg, 0.69 mmol), 및 DMAP (3 mg)의 혼합물을 16시간 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 진공하에서 제거하고 잔류물을 정제용 HPLC에 의해 정제하였다. 목적하는 분획을 수집하고, 수성 HCl (1 M)로 처리하고 이어서 동결 건조하여 백색 고체로서 표제 화합물 (69 mg, 63％ 수율)을 수득하였다.

<실시예 80>

[(1R),2S]-2-아미노-4-메틸펜탄산 [2-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]]-1-메틸에틸 에스테르

단계 A

DMF (1.5 mL) 중 실시예 15 (93 mg, 0.3 mmol), N-Cbz-L-류신 (159 mg, 0.6 mmol), HATU (228 mg, 0.6 mmol), DIPEA (154 mg, 1.2 mmol), 및 DMAP (5 mg)의 혼합물을 밤새 교반하였다. 휘발성 물질을 진공하에서 제거하고 잔류물을 정제용 HPLC에 의해 정제하여 백색 고체로서 2-벤질옥시카르보닐아미노-4-메틸펜탄산[2-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]]-1-메틸에틸 에스테르 (145 mg, 단일 부분 입체 이성질체로서 78％ 수율)를 수득하였다.

단계 B

DMF (4 mL) 중 상기 단계 A의 화합물 (130 mg, 0.21 mmol), Pd/C (10％, 26 mg) 및 암모늄 포르메이트 (400 mg)를 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석시키고, 셀라이트(등록상표) 패드를 통해 여과하고 농축하였다. 잔류물을 정제용 HPLC에 의해 정제하였다. 목적하는 분획을 수집하고, 1 N 수성 HCl과 혼합하고 동결 건조하여 백색 고체로서 표제 화합물 (92 mg, 84％ 수율)을 수득하였다.

<실시예 81>

[(1R,2S]-2-아미노프로피온산 2-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-1-메틸에틸 에스테르

단계 A

DMF (1 mL) 중 실시예 15 (60 mg, 0.16 mmol), N-Cbz-L-알라닌 (89 mg, 0.4 mmol), HATU (253 mg, 0.4 mmol), DIPEA (103 mg, 0.8 mmol), 및 DMAP (5 mg)의 혼합물을 밤새 교반하였다. 휘발성 물질을 진공하에서 제거하고 잔류물을 정제용 HPLC에 의해 정제하여 백색 고체로서 호모키랄 2-벤질옥시카르보닐아미노-프로피온산 [2-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]]-1-메틸에틸 에스테르 (77 mg, 84％ 수율)를 수득하였다.

단계 B

DMF (1.5 mL) 중 상기 단계 A의 화합물 (60 mg, 0.11 mmol), Pd/C (6 mg) 및 암모늄 포르메이트 (200 mg)의 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석시키고 이어서 셀라이트(등록상표) 패드를 통해 여과하였다. 여과액을 물로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고 농축하였다. 생성물을 1 N 수성 HCl과 혼합하고 동결 건조하여 백색 고체로서 표제 화합물 (53 mg, 99％ 수율)을 수득하였다.

<실시예 82>

4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-6-(3-메탄술포닐-프로폭시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진

A. 0℃에서 THF (12 mL) 중 4-페녹시-5-메틸-6-히드록시피롤로-[2,1-f][1,2,4]트리아진 (1.0 g, 4.15 mmol, 본원에 인용문헌으로 도입된 WO 00/71129 대로 제조됨), 3-메탄술포닐프로판-1-올 (1.15 g, 8.3 mmol) 및 PPh₃ (2.17 g, 8.3 mmol)의 용액에 DEAD (1.42 g, 8.3 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에서 제거하였다. 잔류물을 디클로로메탄 중에 용해시키고, 염수로 세척하고 Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 휘발성 물질을 제거하고 수득된 고체를 디클로로메탄으로 처리하여 백색 고체로서 6-(3-메탄술포닐프로폭시)-5-메틸-4-페녹시피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진 (1.1 g, 73％ 수율)을 수득하였다.

B. 6-(3-메탄술포닐-프로폭시)-5-메틸-4-페녹시피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진 (1.1 g, 3.04 mmol), HCl (1 N, 20 mL) 및 에탄올 (20 mL)의 혼합물을 80℃에서 3시간 동안 가열하였다. 휘발성 물질을 진공하에서 제거하였다. 백색 고체를 디에틸 에테르/헥산 (2:1)으로 처리하여 백색 고체로서 6-(3-메탄술포닐-프로폭시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-올 (820 mg, 95％)을 수득하였다. MS: (M+H)⁺ = 286.

C. 6-(3-메탄술포닐-프로폭시)-5-메틸-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-올 (620 mg, 2.17 mmol) 및 POCl₃ (10 mL)의 혼합물을 85℃에서 3시간 동안 가열하였다. POCl₃를 진공하에서 제거하여 황색 고체를 수득하고, 이를 디클로로메탄 중에 용해시키고 연속으로 저온 NaHCO₃ 용액 및 염수로 세척하였다. 유기물을 건조시키고, 여과하고 농축하여 조 클로로이미데이트 중간체 (610 mg)을 수득하고, 이를 0℃에서 DMF 중 4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-올 (664 mg, 4.02 mmol) 및 NaH (광유 중 60％, 160 mg, 4.02 mmol)의 예비-혼합된 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고 디클로로메탄으로 희석시키고 10％ LiCl 수용액으로 세척하고, 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 10％ 에틸 아세테이트/디클로로메탄 내지 30％ 에틸아세테이트/디클로로메탄으로부터 용출함)에 의해 정제하였다. 목적하는 분획을 합하고 진공하에서 농축하여 고체를 수득하고, 이를 MeOH로 세척하여 백색 고체로서 표제 화합물 (610 mg, 65％ 수율)을 수득하였다.

<실시예 83>

N-{3-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-프로필}-메탄술폰아미드

A. 4-페녹시-5-메틸-6-히드록시피롤로-[2,1-f][1,2,4]트리아진 (1.05 g, 4.35 mmol), 1,3-디브로모프로판 (4.0 g, 20 mmol), 및 K₂CO₃ (3 g, 22 mmol)의 용액을 70℃에서 2시간 동안 가열하였다. 용매를 진공하에서 제거하였다. 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 디클로로메탄 내지 20％ 에틸 아세테이트/디클로로메탄으로부터 용출함)에 의해 정제하여 조 중간체 (1.35 g, 86％ 수율)를 수득하였다. 상기 중간체 (1.3 g, 3.59 mmol)를 DMF (15 mL) 중 메탄술폰아미드 (2.0 g, 21 mmol) 및 K₂CO₃ (4 g, 29 mmol)과 함께 2시간 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 디클로로메탄으로 희석시키고, 5％ Na₂CO₃ 용액으로 2회 세척하고, 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 20％ 에틸 아세테이트/디클로로메탄)에 의해 정제하여 백색 고체로서 N-[3-(5-메틸-4-페녹 시-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시)-프로필]-메탄술폰아미드 (1.1 g, 81％)를 수득하였다.

B. 앞서 기재한 실시예 24의 제조 방법과 유사한 절차에 의해 상기 단계 A의 화합물을 메탄 술폰아미드로 처리하여 N-[3-(4-히드록시-5-메틸-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시)-프로필]-메탄술폰아미드 (64％ 수율)를 수득하였다.

C. N-[3-(4-히드록시-5-메틸-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시)-프로필]-메탄술폰아미드 (530 mg, 1.77 mmol) 및 POCl₃의 혼합물을 80℃에서 1.5시간 동안 가열하였다. 휘발성 물질을 제거하고 잔류물을 디클로로메탄으로 희석시키고, 연속으로 저온 NaHCO₃ 용액 및 염수로 세척하고, 건조시키고 진공하에서 농축하여 조 클로로이미데이트 중간체 (610 mg)를 수득하고, 이를 DMF (8 mL) 중 4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-올 (495 mg, 3.0 mmol) 및 K₂CO₃ (3.0 g, 22 mmol)와 함께 80℃ 내지 85℃에서 2시간 동안 가열하였다. 혼합물을 디클로로메탄으로 희석시키고 고체를 여과하였다. 여과액을 농축하고 잔류물을 30％ 에틸 아세테이트/디클로로메탄으로 용출하는 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 정제용 HPLC에 의해 추가 정제하여 황갈색 고체로서 표제 화합물 (290 mg, 34％ 수율)을 수득하였다.

Claims

(2S)-1-[4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시]-프로판-2-올 화합물 또는 이의 제약상 허용되는 염.