JP2021073298A - ピリミジニルチロシンキナーゼ阻害剤 - Google Patents

Abstract

【課題】ピリミジニルチロシンキナーゼ阻害剤を提供すること。【解決手段】本発明は、ブルトン型チロシンキナーゼの阻害剤として有用であり、それに関する所望の特徴を示す化合物およびその組成物を提供する。特定の実施形態において、本発明は、Ｂｔｋの酵素活性を低下させる方法を提供する。幾つかの実施形態において、そのような方法は、ＢｔｋをＢｔｋ阻害剤の有効量と接触させることを含む。特定の実施形態において、本発明は、必要とする対象においてＢｔｋ阻害に応答する疾患を治療する方法を提供する。【選択図】なし

Description

関連出願の相互参照
本願は、参照することで内容全体が本明細書に組み込まれる、２０１２年６月８日出願
の米国特許仮出願第６１／６５７，３６０号への優先権を主張する。

Ｔｅｃキナーゼは、Ｔｅｃ（肝細胞癌内で発現するチロシンキナーゼ）、Ｂｔｋ（ブル
トン型チロシンキナーゼ）、Ｉｔｋ（インターロイキン−２（ＩＬ−２）誘導性Ｔ細胞キ
ナーゼ、ＥｍｔまたはＴｓｋとしても知られる）、Ｒｌｋ（静止期リンパ球キナーゼ、Ｔ
ｘｋとしても知られる）、Ｌｃｋ（リンパ球特異的プロテインチロシンキナーゼ）、およ
びＢｍｘ（染色体Ｘ上の骨髄チロシンキナーゼ遺伝子、Ｅｔｋとしても知られる）を含む
非受容体チロシンキナーゼである。これらのキナーゼは、主として造血細胞中で発現する
が、ＢｍｘおよびＴｅｃの発現は、内皮細胞および肝細胞において検出されている。Ｔｅ
ｃキナーゼ（Ｉｔｋ、ＲｌｋおよびＴｅｃ）は、Ｔ細胞内で発現し、全てＴ細胞受容体（
ＴＣＲ）の下流で活性化される。Ｂｔｋは、Ｂ細胞活性化、増殖、および分化の調節に関
与するＢ細胞受容体（ＢＣＲ）シグナル伝達の下流媒介物質である。より具体的にはＢｔ
ｋは、ホスファチジルイノシトール（３，４，５）−トリホスファート（ＰＩＰ３）に結
合するＰＨドメインを含む。ＰＩＰ３の結合は、Ｂｔｋを誘導してホスホリパーゼＣ（Ｐ
ＬＣγ）をリン酸化し、その一方でＰＩＰ２を加水分解して２つの二次メッセンジャー：
イノシトールトリホスファート（ＩＰ３）およびジアシルグリセロール（ＤＡＧ）を生成
して、プロテインキナーゼＰＫＣを活性化し、その後、追加的なＢ細胞シグナル伝達を誘
導する。Ｂｔｋ酵素活性を不能にする突然変異により、原発性免疫不全であるＸＬＡ症候
群（Ｘ連鎖無ガンマグロブリン血症）を生じる。ＴｅｃキナーゼがＢ細胞およびＴ細胞シ
グナル伝達の両方において果たす重大な役割が付与されることで、Ｔｅｃキナーゼは、自
己免疫疾患の関心の的になっている。

その結果、当該技術分野において、ＢｔｋなどのＴｅｃキナーゼの効果的阻害剤の必要
性が高まっている。本発明は、これらおよび他の必要性に適うものである。

特定の実施形態において、本発明は、式Ｉ：

（式中、Ｒ^１および環Ａは、本明細書に定義および記載された通りである）で示される化
合物またはそれらの医薬的に許容し得る塩を提供する。そのような化合物は、Ｂｔｋを含
むＴｅｃキナーゼファミリーの阻害剤である。従って、提供される化合物は、本明細書に
詳細に記載される通り、ｉｎ ｖｉｔｒｏスクリーニングおよび活性アッセイに加え、イ
ンビボ前臨床、臨床、および治療設定を含む様々な方法において、使用することができる
。

特定の実施形態において、本発明は、提供される化合物を含む医薬配合剤を提供する。

特定の実施形態において、本発明は、Ｂｔｋの酵素活性を低下させる方法を提供する。
幾つかの実施形態において、そのような方法は、ＢｔｋをＢｔｋ阻害剤の有効量と接触さ
せることを含む。

特定の実施形態において、本発明は、必要とする対象においてＢｔｋ阻害に応答する疾
患を治療する方法を提供する。そのような疾患および方法は、本明細書に詳細に記載され
る。
本発明は、例えば、以下の項目も提供する。
（項目１）
式Ｉ：

（式中、
各Ｒ^１は、独立して、水素、場合により置換されたＣ_１〜６脂肪族基、場合により置換
された３〜７員単環式複素環基、または炭素原子３〜７個と、独立して窒素、酸素、もし
くは硫黄から選択されるヘテロ原子１〜３個と、を有する場合により置換されたヘテロシ
クリルアルキル基であるか、
あるいは２個のＲ^１基が、介在する原子と一緒になって、独立して窒素、酸素、また
は硫黄から選択されるヘテロ原子を１〜２個有する、場合により置換された３〜７員飽和
または部分不飽和単環式複素環式環を形成しており、
ここで、場合により置換された基は、ハロゲン、−ＮＯ_２、−ＣＮ、−ＯＲ、−ＳＲ、−
Ｎ（Ｒ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−ＣＯ_２Ｒ、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）
_２、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、−Ｓ（Ｏ）Ｒ、−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ、または−
Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ）_２で置換されていてもよく、
各Ｒは、独立して、水素もしくはＣ_１〜６脂肪族であるか、
または前記同じ窒素原子に結合した２個のＲ基が、介在する原子と一緒になって、ヘ
テロ原子を１〜２個有する、場合により置換された３〜７員飽和もしくは部分不飽和単環
式複素環式環を形成しており、ここで任意の第二のヘテロ原子は、独立して窒素、酸素、
もしくは硫黄から選択され、
環Ａは、

であり、
Ｒ^２は、−Ｃｌまたは−Ｆであり、
Ｒ^３は、−ＣＦ_３、−ＯＣＦ_３、または−Ｆである）で示される化合物またはその医薬
的に許容し得る塩。
（項目２）
式ＩＩ−ａ：

で示される前記化合物またはその医薬的に許容し得る塩である、項目１に記載の化合物。
（項目３）
式ＩＩ−ｂ：

で示される前記化合物またはその医薬的に許容し得る塩である、項目１に記載の化合物。
（項目４）
式ＩＩＩ：

で示される、項目１に記載の化合物。
（項目５）
式ＩＶ：

で示される、項目１に記載の化合物。
（項目６）
Ｒ^３が−ＣＦ_３である、項目５に記載の化合物。
（項目７）
Ｒ^３が−Ｆである、項目５に記載の化合物。
（項目８）
両方のＲ^１が水素である、項目５に記載の化合物。
（項目９）
一方のＲ^１が水素であり、他方のＲ^１が場合により置換されたＣ_１〜６脂肪族である、
項目５に記載の化合物。
（項目１０）
一方のＲ^１が水素であり、他方のＲ^１がメチルである、項目９に記載の化合物。
（項目１１）
両方のＲ^１が場合により置換されたＣ_１〜６脂肪族基である、項目５に記載の化合物。
（項目１２）
一方のＲ^１が水素であり、他方が、場合により置換されたＣ_１〜６脂肪族である、項目
１に記載の化合物。
（項目１３）
両方のＲ^１が場合により置換されたＣ_１〜６脂肪族基である、項目１に記載の化合物。
（項目１４）
両方のＲ^１が水素である、項目１に記載の化合物。
（項目１５）
Ｒ^２が−Ｃｌである、項目１に記載の化合物。
（項目１６）
Ｒ^２が−Ｆである、項目１に記載の化合物。
（項目１７）
Ｒ^３が−ＣＦ_３である、項目１に記載の化合物。
（項目１８）
Ｒ^３が−ＯＣＦ_３である、項目１に記載の化合物。
（項目１９）
Ｒ^３が−Ｆである、項目１に記載の化合物。
（項目２０）

からなる群より選択される化合物。
（項目２１）
ブルトン型チロシンキナーゼを、項目１〜２０のいずれか１項に記載の化合物またはそ
の組成物の有効量と接触させることを含む、ブルトン型チロシンキナーゼの酵素活性を低
下させる方法。
（項目２２）
項目１〜２０のいずれか１項に記載の化合物またはその組成物の有効量を対象に投与す
ることを含む、ブルトン型チロシンキナーゼの阻害に応答する疾患を治療する方法。
（項目２３）
項目１〜２０のいずれか１項に記載の化合物またはその組成物の有効量を対象に投与す
ることを含む、自己免疫疾患、炎症性疾患、および癌からなる群より選択される疾患を治
療する方法。
（項目２４）
前記疾患が関節リウマチである、項目２３に記載の方法。
（項目２５）
前記疾患が全身エリテマトーデスである、項目２３に記載の方法。
（項目２６）
前記疾患がアトピー性皮膚炎である、項目２３に記載の方法。
（項目２７）
前記疾患が白血病またはリンパ腫である、項目２３に記載の方法。

特定の実施形態において、本発明は、式Ｉ：

（式中、
各Ｒ^１は、独立して、水素、場合により置換されたＣ_１〜６脂肪族基、場合により置換
された３〜７員単環式複素環基、または炭素原子３〜７個と、独立して窒素、酸素、もし
くは硫黄から選択されるヘテロ原子１〜３個と、を有する場合により置換されたヘテロシ
クリルアルキル基であるか、
あるいは２個のＲ^１基が、介在する原子と一緒になって、独立して窒素、酸素、また
は硫黄から選択されるヘテロ原子を１〜２個有する、場合により置換された３〜７員飽和
または部分不飽和単環式複素環式環を形成しており、
ここで、場合により置換された基は、ハロゲン、−ＮＯ_２、−ＣＮ、−ＯＲ、−ＳＲ、−
Ｎ（Ｒ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−ＣＯ_２Ｒ、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）
_２、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、−Ｓ（Ｏ）Ｒ、−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ、または−
Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ）_２で置換されてもよく、
各Ｒは、独立して、水素もしくはＣ_１〜６脂肪族であるか、
または同じ窒素原子に結合した２個のＲ基が、介在する原子と一緒になって、ヘテロ
原子を１〜２個有する、場合により置換された３〜７員飽和もしくは部分不飽和単環式複
素環式環を形成しており、ここで任意の第二のヘテロ原子は、独立して窒素、酸素、もし
くは硫黄から選択され、
環Ａは、

であり、
Ｒ^２は、−Ｃｌまたは−Ｆであり、
Ｒ^３は、−ＣＦ_３、−ＯＣＦ_３、または−Ｆである）で示される化合物またはその医薬
的に許容し得る塩を提供する。

定義
本発明の化合物は、先に概ね記載されたものを包含し、更に、本明細書に開示された分
類、下位分類、および種により示される。本明細書で用いられる通り、特に指示がないか
ぎり、以下の定義が適用される。本発明の目的では、化学元素は、Ｐｅｒｉｏｄｉｃ Ｔ
ａｂｌｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｅｌｅｍｅｎｔｓ，ＣＡＳ ｖｅｒｓｉｏｎ，Ｈａｎｄｂｏｏ
ｋ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｐｈｙｓｉｃｓ，７５^ｔｈ Ｅｄに従って同定
される。加えて、有機化学の一般的原理は、「Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」、
Ｔｈｏｍａｓ Ｓｏｒｒｅｌｌ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｂｏｏｋｓ，
Ｓａｕｓａｌｉｔｏ：１９９９、および「Ｍａｒｃｈ’ｓ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａ
ｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」、５ｔｈ Ｅｄ．，Ｅｄ．：Ｓｍｉｔｈ，Ｍ．Ｂ．ａｎｄ
Ｍａｒｃｈ，Ｊ．，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：２００
１に記載されており、参照することでそれらの内容全体が本明細書に組み込まれる。

本明細書で用いられる略語は、化学および生物学の技術分野における従来の意義を有す
る。本明細書で示される化学構造および化学式は、化学の技術分野で公知の化学原子価の
標準的規定に従って組み立てられている。

本明細書で用いられる用語「脂肪族」または「脂肪族基」は、完全に飽和されているか
、もしくは不飽和単位を１個以上含む直鎖（即ち、非分枝状）もしくは分枝鎖の飽和もし
くは不飽和炭化水素鎖、または完全に飽和されているか、もしくは不飽和単位を１個以上
含むが、芳香族でなく（本明細書において「炭素環式」、「脂環式」または「シクロアル
キル」とも称される）、分子の残り部分への結合点を１個有する単環式炭化水素もしくは
二環式炭化水素を意味する。特に指示がないかぎり、脂肪族基は、脂肪族炭素原子を１〜
６個含む。幾つかの実施形態において、脂肪族基は、脂肪族炭素原子を１〜５個含む。幾
つかの実施形態において、脂肪族基は、脂肪族炭素原子を１〜４個含む。幾つかの実施形
態において、脂肪族基は、脂肪族炭素原子を１〜３個含み、更に別の実施形態において、
脂肪族基は、脂肪族炭素原子を１〜２個含む。適切な脂肪族基としては、非限定的に、直
鎖状または分枝状で置換または非置換のアルキル、アルケニル、アルキニル基およびそれ
らの組み合わせ、例えば（シクロアルキル）アルキル、（シクロアルケニル）アルキルま
たは（シクロアルキル）アルケニルが挙げられる。

本明細書で用いられる用語「脂環式」（または「炭素環式」または「シクロアルキル」
）は、完全に飽和されているか、または不飽和単位を１個以上含むが、芳香族でなく、分
子の残り部分への結合点を１個有する、単環式Ｃ_３〜Ｃ_６炭化水素を指す。

本明細書で用いられる用語「複素環」、「ヘテロシクリル」、および「複素環式環」は
、同義的に用いられており、飽和または部分不飽和であり炭素原子に加えて先に定義され
たヘテロ原子を１個以上、好ましくは１〜４個有する安定した３〜７員単環式複素環部分
を指す。複素環の環原子に関連して用いられる場合に、用語「窒素」は、置換された窒素
を包含する。例として酸素、硫黄または窒素から選択されるヘテロ原子を０〜３個有する
飽和または部分不飽和環において、窒素は、Ｎ（３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピロリルなど
）、ＮＨ（ピロリジニル内と同様）、または^＋ＮＲ（Ｎ−置換ピロリジニルなど）であっ
てもよい。用語「ヘテロシクリルアルキル」は、ヘテロシクリルにより置換されたアルキ
ル基を指し、ここでアルキルおよびヘテロシクリル部分は、独立して場合により置換され
る。

複素環式環は、安定した構造を生成する任意のヘテロ原子または炭素原子のペンダント
基に結合することができ、環原子のいずれかは、場合により置換されてもよい。そのよう
な飽和または部分不飽和複素環式ラジカルの例としては、非限定的に、テトラヒドロフラ
ニル、テトラヒドロチオフェニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピロリニル、テトラヒ
ドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、デカヒドロキノリニル、オキサゾリジニ
ル、ピペラジニル、ジオキサニル、ジオキソラニル、ジアゼピニル、オキサゼピニル、チ
アゼピニル、モルホリニル、およびキヌクリジニルが挙げられる。

本明細書で用いられる用語「部分不飽和」は、少なくとも１個の二重または三重結合を
含む環部分を指す。用語「部分不飽和」は、複数の不飽和部位を有する環を包含するもの
とし、本明細書で定義されたアリールまたはヘテロアリール部分を包含するものではない
。

用語「ヘテロ原子」は、１つ以上の酸素、硫黄、窒素、リンまたはケイ素（窒素、硫黄
、リンまたはケイ素の任意の酸化形態）、任意の塩基性窒素の第四級形態、または複素環
式環の置換可能な窒素を意味し、例えばＮ（３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピロリルなど）、
ＮＨ（ピロリジニルなど）、またはＮＲ^＋（Ｎ−置換ピロリジニルなど）が挙げられる。

本明細書で用いられる用語「医薬的に許容し得る塩」は、正確全な医学的判断の範囲内
でヒトおよび下等動物の組織と接触させる使用に適し、過度の毒性、刺激、アレルギー反
応などを有さず、合理的な利益／リスク比に従うそれらの塩を指す。医薬的に許容し得る
塩は、当該技術分野で周知である。例えばＳ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅらは、参照することにより
本明細書に組み入れられるＪ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１９
７７，６６，１〜１９では、医薬的に許容し得る塩を詳細に記載している。

特定の実施形態において、この化合物の中性形態は、この塩を塩基または酸と接触させ
て、その親化合物を従来の手法で単離することにより再生される。幾つかの実施形態にお
いて、この化合物の親形態は、特定の物理的性質、例えば極性溶媒における溶解度が様々
な塩形態と異なる。

特に指示がないかぎり、本明細書で示された構造は、全ての異性体（例えば、この構造
の鏡像異性体、ジアステレオマー、および幾何異性体（または配座異性体））形態、例え
ば各不斉中心に関してＲおよびＳ配置、ＺおよびＥ二重結合異性体、ならびにＺおよびＥ
配座異性体も包含することを意味する。それゆえ単一の立体化学的異性体に加え、本発明
の化合物の鏡像異性体とジアステレオマーと幾何異性体（または配座異性体）との混合物
は、本発明の範囲内である。特に指示がないかぎり、本発明の化合物の全ての互変異性体
形態は、本発明の範囲内である。加えて特に指示がないかぎり、本明細書に示された構造
は、１つ以上の同位体を豊富に含む原子の存在のみが異なる化合物も包含することを意味
する。例えばジュウテリウムもしくはトリチウムによる水素の置換、または^１３Ｃ−もし
くは^１４Ｃ−を豊富に含む炭素による炭素の置換を含む、本発明の構造を有する化合物は
、本発明の範囲内である。そのような化合物は、例えば分析ツールとして、生物学的アッ
セイにおけるプローブとして、または本発明による治療薬として有用である。

化合物
先に記載された通り、特定の実施形態において本発明は、医薬的に許容し得る塩の式Ｉ
：

（式中、Ｒ^１および環Ａは、本明細書に定義および記載された通りである）で示される化
合物を提供する。

式（Ｉ）で示される化合物は、意外にも、Ｂｔｋの公知の阻害剤よりも有利な性質を示
すことが見出された。特定の実施形態において、式Ｉで示される化合物は、高い能力を有
する。任意の特定の理論に束縛されるのを望むものではないが、本明細書に開示された化
合物は、Ｂｔｋ阻害剤としての改善された能力、ｈＥＲＧ阻害もしくはＰＸＲ誘導アッセ
イにより測定される改善されたオフターゲットプロファイル、またはそれらの組み合わせ
を有すると考えられる。そのような有利な性質を示す実験データを、裏づけとなる実施例
において示す。

幾つかの実施形態において、両方のＲ^１は、水素である。幾つかの実施形態において、
各Ｒ^１は、独立してＣ_１〜６脂肪族である。幾つかの実施形態において、各Ｒ^１は、独立
してＣ_１〜５脂肪族である。幾つかの実施形態において、各Ｒ^１は、独立してＣ_１〜４脂
肪族である。幾つかの実施形態において、各Ｒ^１は、独立してＣ_１〜３脂肪族である。幾
つかの実施形態において、各Ｒ^１は、独立してＣ_１〜２脂肪族である。幾つかの実施形態
において、両方のＲ^１は、メチルである。

幾つかの実施形態において、各Ｒ^１は、独立して水素またはＣ_１〜６脂肪族である。幾
つかの実施形態において、各Ｒ^１は、独立して水素またはＣ_１〜５脂肪族である。幾つか
の実施形態において、各Ｒ^１は、独立して水素またはＣ_１〜４脂肪族である。幾つかの実
施形態において、各Ｒ^１は、独立して水素またはＣ_１〜３脂肪族である。幾つかの実施形
態において、各Ｒ^１は、独立して水素またはＣ_１〜２脂肪族である。幾つかの実施形態に
おいて、各Ｒ^１は、独立して水素またはメチルである。

幾つかの実施形態において、一方のＲ^１は、水素であり、または／そして他方のＲ^１は
、Ｃ_１〜６脂肪族である。幾つかの実施形態において、一方のＲ^１は、水素であり、他方
のＲ^１は、メチルである。幾つかの実施形態において、一方のＲ^１は、水素であり、他方
のＲ^１は、エチルである。幾つかの実施形態において、一方のＲ^１は、水素であり、他方
のＲ^１は、Ｃ_１〜６（シクロアルキル）アルキルである。幾つかの実施形態において、一
方のＲ^１は、水素であり、他方のＲ^１は、Ｃ_１〜６（シクロアルキル）である。

幾つかの実施形態において、一方のＲ^１は、水素であり、他方のＲ^１は、−ＯＲ（ここ
で、Ｒは、水素またはＣ_１〜６脂肪族である）で場合により置換されたＣ_１〜６脂肪族で
ある。

幾つかの実施形態において、一方のＲ^１は、水素であり、他方のＲ^１は、炭素原子３〜
７個と、独立して窒素、酸素または硫黄から選択されるヘテロ原子１〜３個と、を有する
ヘテロシクリルアルキル基である。幾つかの実施形態において、一方のＲ^１は、水素であ
り、他方のＲ^１は、場合により置換された３〜７員単環式複素環である。

幾つかの実施形態において、２個のＲ^１基が、介在する原子と一緒になって、独立して
窒素、酸素、または硫黄から選択されるヘテロ原子を１〜２個有する、場合により置換さ
れた３〜５員飽和または部分不飽和単環式複素環式環を形成する。幾つかの実施形態にお
いて、２個のＲ^１基が、介在する原子と一緒になって、場合により置換されたピペラジン
環を形成する。

先に記載された通り、環Ａは、

である。特定の実施形態において、Ｒ^２は、−Ｃｌである。別の実施形態において、Ｒ^２
は、−Ｆである。幾つかの実施形態において、Ｒ^３は、−ＣＦ_３である。幾つかの実施形
態において、Ｒ^３は、−ＯＣＦ_３である。幾つかの実施形態において、Ｒ^３は、−Ｆであ
る。

特定の実施形態において、環Ａは、

からなる群より選択される。

幾つかの実施形態において、本明細書に記載された化合物には、カルボキサミド基を担
うピペリジン置換基とラクタム基を担うピペリジン置換基の間に、トランスの立体化学関
係が存在する。

幾つかの実施形態において、本発明は、式ＩＩ−ａ：

（式中、Ｒ^１、Ｒ^２、およびＲ^３のそれぞれは、先に定義され、本明細書の分類および下
位分類に記載された通りである）で示される化合物、またはその医薬的に許容し得る塩を
提供する。

幾つかの実施形態において、本発明は、式ＩＩ−ｂ：

（式中、Ｒ^１、Ｒ^２、およびＲ^３のそれぞれは、先に定義され、本明細書の分類および下
位分類に記載された通りである）で示される化合物、またはその医薬的に許容し得る塩を
提供する。

幾つかの実施形態において、本発明は、式ＩＩＩ：

（式中、Ｒ^２およびＲ^３のそれぞれは、先に定義され、本明細書の分類および下位分類に
記載された通りである）で示される化合物、またはその医薬的に許容し得る塩を提供する
。

幾つかの実施形態において、本発明は、式ＩＶ：

（式中、Ｒ^１およびＲ^３のそれぞれは、先に定義され、本明細書の分類および下位分類に
記載された通りである）で示される化合物、またはその医薬的に許容し得る塩を提供する
。幾つかの実施形態において、両方のＲ^１は、水素である。幾つかの実施形態において、
一方のＲ^１は、水素であり、他方のＲ^１は、メチルである。

幾つかの実施形態において、提供される化合物は、以下の表１に示される化合物、また
はその医薬的に許容し得る塩である。

本発明の化合物は、一般に周知の合成法の適切な組み合わせにより合成される。本発明
の化合物を合成するのに有用な技術は、即座に自明となり、かつ関連の技術分野の当業者
により入手可能である。以下の議論は、本発明の化合物の構成において使用するために入
手可能な多様な方法の幾つかを示すために提示されている。しかしその議論は、本発明の
化合物を調製する際に有用となる反応または反応系列の範囲を定義するものではない。

式Ｉで示される化合物は、一般にスキーム１により調製することができる。

式Ｉで示される化合物は、一般にスキーム２、３、３ａ、４、４ａ、５、または５ａに
より調製することもできる。

スキーム１〜５ａの化合物のＰＧ、ＰＧ_１、ＰＧ_２およびＰＧ_３基は、それぞれ独立し
て、適切な保護基である。そのようなエステルおよびアミン保護基は、当該技術分野で公
知であり、全体が参照により本明細書に組み入れられるＰｒｏｔｅｃｔｉｎｇ Ｇｒｏｕ
ｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ， Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ ａｎｄ
Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，３^ｒｄ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ
，１９９９に詳細に記載される。幾つかの実施形態において、保護基は、Ｂｏｃ基である
。

特定の実施形態において、スキーム１〜５ａの合成ステップそれぞれは、各ステップの
後に各中間体の単離を実施しながら、連続的に実施されてもよい。あるいは、１種以上の
中間体の単離を実施しないような手法で、先のスキーム１、２、３、および４に示された
ステップそれぞれが実施されてもよい。

特定の実施形態において、前述の合成のステップは全て、所望の最終生成物を調製する
ために実施されてもよい。他の実施形態において、２、３、４、５、またはそれを超える
連続したステップを実施して、中間体または所望の最終生成物を調製してもよい。

使用、配合および投与
特定の実施形態において、本発明の化合物は、薬品中での使用に向けたものである。幾
つかの実施形態において、本発明は、Ｔｅｃキナーゼファミリー（例えば、Ｔｅｃ、Ｂｔ
ｋ、Ｉｔｋ、Ｔｘｋ，Ｌｃｋ、およびＢｍｘ）におけるキナーゼの酵素活性を低下させる
方法を提供する。幾つかの実施形態において、そのような方法は、Ｔｅｃキナーゼファミ
リーのキナーゼをＴｅｃキナーゼファミリー阻害剤の有効量と接触させることを含む。そ
れゆえ本発明は、更に、Ｔｅｃキナーゼファミリーメンバーを本発明のＴｅｃキナーゼフ
ァミリー阻害剤と接触させることにより、Ｔｅｃキナーゼファミリーの酵素活性を阻害す
る方法を提供する。本明細書で用いられる用語「Ｔｅｃキナーゼファミリーメンバー」は
、Ｔｅｃキナーゼファミリーのうちの任意の非受容体チロシンキナーゼを指す。幾つかの
実施形態において、Ｔｅｃキナーゼファミリーメンバーは、Ｔｅｃ、Ｂｔｋ、Ｉｔｋ、Ｔ
ｘｋ，Ｌｃｋ、およびＢｍｘである。

幾つかの実施形態において、本発明は、Ｂｔｋ酵素活性を低下させる方法を提供する。
幾つかの実施形態において、そのような方法は、ＢｔｋをＢｔｋ阻害剤の有効量と接触さ
せることを含む。それゆえ本発明は、更に、Ｂｔｋを本発明のＢｔｋ阻害剤と接触させる
ことによりＢｔｋ酵素活性を阻害する方法を提供する。

本明細書で用いられるＢｔｋ酵素活性は、Ｂｔｋキナーゼ酵素活性を指す。例えばＢｔ
ｋ酵素活性が低下すると、ＰＬＣγのＰＩＰ３結合および／またはリン酸化が減少する。
幾つかの実施形態において、Ｂｔｋに対するＢｔｋ阻害剤の半数阻害濃度（ＩＣ_５０）は
、１μＭ未満である。幾つかの実施形態において、Ｂｔｋに対するＢｔｋ阻害剤のＩＣ_５
０は、５００ｎＭ未満である。幾つかの実施形態において、Ｂｔｋに対するＢｔｋ阻害剤
のＩＣ_５０は、１００ｎＭ未満である。幾つかの実施形態において、Ｂｔｋに対するＢｔ
ｋ阻害剤のＩＣ_５０は、１０ｎＭ未満である。幾つかの実施形態において、Ｂｔｋに対す
るＢｔｋ阻害剤のＩＣ_５０は、１ｎＭ未満である。幾つかの実施形態において、Ｂｔｋに
対するＢｔｋ阻害剤のＩＣ_５０は、０．１ｎＭ〜１０μＭである。幾つかの実施形態にお
いて、Ｂｔｋに対するＢｔｋ阻害剤のＩＣ_５０は、０．１ｎＭ〜１μＭである。幾つかの
実施形態において、Ｂｔｋに対するＢｔｋ阻害剤のＩＣ_５０は、０．１ｎＭ〜１００ｎＭ
である。幾つかの実施形態において、Ｂｔｋに対するＢｔｋ阻害剤のＩＣ_５０は、０．１
ｎＭ〜１０ｎＭである。

幾つかの実施形態において、そのようなＴｅｃキナーゼの阻害剤は、１種以上のＴｅｃ
キナーゼの酵素活性を阻害すること（即ち、低下させること）により緩和され得る疾病お
よび疾患の治療に有用である。本発明の化合物は、Ｔｅｃファミリーキナーゼの効果的な
阻害剤であり、このためＴｅｃファミリーキナーゼの１種以上の活性に関連する疾患を治
療するのに有用である。用語「疾病」は、疾病、症候群、または疾病症状を意味する。こ
のため本発明は、必要とする対象において自己免疫疾患、炎症性疾患、および癌を治療す
る方法を提供する。そのような方法は、Ｔｅｃ、Ｂｔｋ、Ｉｔｋ、Ｔｘｋ，Ｌｃｋ、およ
び／またはＢｍｘキナーゼの阻害剤の治療有効量を対象に投与することを含む。

用語「自己免疫疾患」は、急性播種性脳脊髄炎（ＡＤＥＭ）、アジソン病、円形脱毛症
、抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、溶血性貧血、自己免疫性肝炎、水疱性類天疱瘡（Ｂ
Ｐ）、セリアック病、皮膚筋炎、１型糖尿病、グッドパスチャー症候群、グレーブス病、
ギランバレー症候群（ＧＢＳ）、橋本病、特発性血小板減少性紫斑病、エリテマトーデス
または全身エリテマトーデス（ＳＬＥ）、混合性結合組織病、多発性硬化症、重症筋無力
症、尋常性天疱瘡、阻害剤による血友病、悪性貧血、多発性筋炎、原発性胆汁性肝硬変、
ジョーグレン症候群、側頭動脈炎、およびウェゲナー病など、天然の抗原に対する不適切
な免疫応答を含む疾患または疾患を包含する。用語「炎症性疾患」は、アレルギー、喘息
（例えば、アレルギー性喘息）、アトピー性皮膚炎、乾癬、糸球体腎炎、骨盤内炎症性疾
患（ＰＩＤ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ、例えばクローン病、潰瘍性大腸炎）、再灌流傷害
、関節リウマチ、移植片拒絶（クロスマッチ陽性の移植患者を含む）および脈管炎などの
急性または慢性炎症を含む疾患または疾患を包含する。特定の実施形態において、本発明
は、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、ＲＡ、ウェゲナ
ー肉芽腫（ＷＧ）、および顕微鏡的多発血管炎（ＭＰＡ）を含む、リツキシマブ（ＣＤ２
０に対するモノクローナル抗体）での治療が認可された疾病、疾患、または状態を治療す
る方法を提供する。幾つかの実施形態において、本発明は、本明細書に開示された化合物
を用いて関節リウマチ（ＲＡ）、ＳＬＥ、またはアトピー性皮膚炎を治療する方法を提供
する。

用語「癌」は、グリオーマ、甲状腺癌、乳癌、肺癌（例えば、小細胞肺癌、非小細胞肺
癌）、胃癌、胃腸間質腫瘍、膵臓癌、胆管癌、卵巣癌、子宮内膜癌、前立腺癌、腎細胞癌
、リンパ腫（例えば、未分化大細胞型リンパ腫）、白血病（例えば、急性骨髄性白血病、
Ｔ細胞白血病、慢性リンパ球性白血病）、多発性骨髄腫、悪性中皮腫、悪性黒色腫および
結腸癌（例えば、高頻度マイクロサテライト不安定性の大腸癌）など、異常な細胞の発育
および／または増殖を含む疾病または疾患を包含する。幾つかの実施形態において、本発
明は、白血病またはリンパ腫を治療する方法を提供する。

本明細書で用いられる用語「対象」は、医薬組成物が投与される哺乳動物を指す。模範
的な対象としては、ヒトに加え、獣医学的動物および実験動物、例えばウマ、ブタ、ウシ
、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、マウス、および水生哺乳動物が挙げられる。

選択される適応症およびＢ細胞阻害
先に記載された通り、提供される化合物は、ＲＡおよびＳＬＥを含む疾病の治療に有用
である。以下により詳細に記載される通り、これらの疾病は、Ｂ細胞に関連する。このた
め本開示は、提供される化合物がこれらおよび他の適応症の治療薬として有用であるとい
う認識を包含する。

免疫系の調節不全は、ＲＡの病原の中核をなす（Ｐａｎａｙｉ ＧＳ，ｅｔ ａｌ．Ｒ
ｈｅｕｍ Ｄｉｓ Ｃｌｉｎ Ｎｏｒｔｈ Ａｍ ２００１、２７：３１７−３３４）。
滑膜における浸潤白血球のほとんどは、Ｔリンパ球（主として活性化されたＣＤ４＋Ｔ細
胞）および単球／マクロファージを起源とする細胞（ＩＬ−１、ＴＮＦ−αおよびＩＬ−
６などの炎症促進性サイトカイン、ならびにコラゲナーゼおよびメタロプロテイナーゼを
含む蛋白質分解酵素を放出するもの）であるが、Ｂ細胞および形質細胞も、滑膜液中で見
出される（Ｚｈａｎｇ Ｚ，Ｂｒｉｄｇｅｓ ＳＬ．Ｒｈｅｕｍ Ｄｉｓ Ｃｌｉｎ Ｎ
ｏｒｔｈ Ａｍ ２００１、２７：３３５−３５３）。ＲＡにおけるＢ細胞およびその関
連エフェクター機能の明白な役割が、ＲＡの治療に認可された選択的Ｂ細胞枯渇治療薬リ
ツキシマブの効能により実証された（Ｃｏｈｅｎ ＳＢ，ｅｔ ａｌ．、ＲＥＦＬＥＸ
Ｔｒｉａｌ Ｇｒｏｕｐ．Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍ．２００６ Ｓｅｐ、５４（
９）：２７９３−８０６）。

ＳＬＥの病因は完全には理解されていないが、病原性自己抗体および免疫複合体の沈着
が、広範囲の組織損傷の発症に不可欠であると思われる（Ｋｌｉｐｐｅｌ ＪＨ，ｅｔ
ａｌ．Ｐｒｉｍｅｒ ｏｎ ｔｈｅ ｒｈｅｕｍａｔｉｃ ｄｉｓｅａｓｅｓ．Ａｔｌａ
ｎｔａ：Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ、２００１）。Ｆｃ受容体を通して
刺激されるマクロファージによってマクロファージ活性化の阻害を測定することにより、
自己抗体および免疫複合体を介した活性化を試験することができる（例証にある初代ヒト
マクロファージのＦｃγＲ活性化を参照）。自己抗原への耐容性の喪失は、Ｂ細胞の刺激
となり、多くの場合、核または細胞質成分に対して自己抗体を産生する。核成分に対する
抗体（抗核抗体［ＡＮＡ］）は、ＤＮＡ（典型的には二本鎖ＤＮＡ［ｄｓＤＮＡ］）、Ｒ
ＮＡ、ヒストンおよび核内低分子リボヌクレオ蛋白質を含む核抗原を標的とする。これら
の抗体は、自己抗原と一緒になって免疫複合体を形成して組織内に沈着し、炎症反応を誘
発して、組織傷害を導く。Ｂ細胞は、病原性自己抗体産生における役割に加えて、Ｔ細胞
への抗原提示細胞（ＡＰＣ）としても機能し、こうして抗原特異性反応の開始において役
割を担う。ＳＬＥの病原性における免疫系の体液部門の中心的役割を仮定すれば、Ｂ細胞
またはＢ細胞経路が、所望の治療ターゲットになる。近年、ＳＬＥに認可されたモノクロ
ーナル抗体ベリムマブは、Ｂ細胞で発現される受容体へのＢＡＦＦ結合を遮断する。これ
らの受容体は、ベリムマブでの治療後に観察されるＢ細胞循環の減少と一致して、Ｂ細胞
を活性化して、Ｂ細胞生存を増強する働きがある。Ｃｈａｎ ＯＴ，ｅｔ ａｌ．Ｉｍｍ
ｕｎｏｌ Ｒｅｖ．１９９９ｂ、１６９：１０７−１２１、Ｎａｖａｒｒａ ＳＶ，ｅｔ
ａｌ．Ｌａｎｃｅｔ．２０１１ Ｆｅｂ ２６、３７７（９７６７）：７２１−３１、
Ｆｕｒｉｅ Ｒ，ｅｔ ａｌ．Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍ．２０１１ Ｄｅｃ、６
３（１２）：３９１８−３０も参照されたい。ＳＬＥなどの自己免疫疾患におけるＢ細胞
および骨髄細胞系列の役割は、マウスを低分子化合物不可逆性Ｂｔｋ阻害剤で治療した場
合の前臨床ＳＬＥ動物モデルにおける効能を記載した近年の発行物によって更に裏づけら
れている（Ｈｏｎｉｇｂｅｒｇ，Ｌ．Ａ．ＰＮＡＳ．２０１０、１０７：１３０７５）。

併用
特定の実施形態において、本発明の化合物は、別の薬剤と併用で投与される。幾つかの
実施形態において、本発明の化合物は、ＲＡの治療に有用であり、非限定的にメトトレキ
サート、アバタセプト、アザチオプリン、セルトリズマブ、クロロキンおよびヒドロキシ
クロロキン、シクロスポリン、Ｄ−ペニシラミン、アダリムマブ、エタネルセプト、ゴリ
ムマブ、金塩（オーラノフィンおよび金チオリンゴ酸ナトリウムなどを含む）、インフリ
キシマブ、レフルノミド、ミノサイクリン、リツキシマブ、スルファサラジン、トシリズ
マブ、またはそれらの組み合わせを含む、疾患修飾性抗リウマチ薬（ＤＭＡＲＤ）と併用
で投与される。幾つかの実施形態において、本発明の化合物は、ＮＳＡＩＤまたはコルチ
コステロイドと併用で投与される。幾つかの実施形態において、本発明の化合物は、ＳＬ
Ｅを治療するのに有用であり、非限定的にコルチコステロイド、抗マラリア薬、ベリムマ
ブ、マイコフェノラートモフェチル（ＭＭＦ）もしくはマイコフェノラートナトリウム、
アザチオプリン、またはそれらの組み合わせを含む、ＳＬＥ治療のための薬剤と併用で投
与される。幾つかの実施形態において、本発明の化合物は、アトピー性皮膚炎を治療する
のに有用であり、非限定的にステロイド外用薬、タクロリムス、メトトレキサート、モメ
タゾンフロアート（ＭＭＦ）、アザチオプリン、レチノイド、またはそれらの組み合わせ
を含む、アトピー性皮膚炎の治療用の外用薬と併用で投与される。

アッセイ
有用なＴｅｃキナーゼファミリー阻害剤を開発するために、Ｔｅｃキナーゼファミリー
の酵素活性を低下させることが可能な候補阻害剤を、ｉｎ ｖｉｔｒｏで同定してもよい
。当該技術分野で公知の方法および／または本明細書で示されたそれらの方法を利用して
、阻害剤化合物の活性をアッセイすることができる。

組換えまたは天然由来のいずれかの生物活性Ｔｅｃキナーゼファミリーメンバーを利用
して、Ｔｅｃキナーゼファミリーメンバーの酵素活性を低下させる化合物を同定および試
験してもよい。Ｔｅｃキナーゼは、天然型細胞において見出され得るか、ｉｎ ｖｉｔｒ
ｏで単離され得るか、または細胞内で共発現もしくは発現され得る。阻害剤の非存在下で
のＴｅｃキナーゼファミリーメンバーの酵素活性に対する、阻害剤の存在下でのその活性
の低下を測定することが、以下の実施例に記載されたｐｏｌｙＧＡＴ−ＬＳアッセイなど
の当該技術分野で公知の様々な方法を利用して実施されてもよい。Ｂｔｋおよび他のＴｅ
ｃキナーゼの活性をアッセイする他の方法は、当該技術分野で公知である。適切なアッセ
イ法の選択は、当業者の能力内で十分に行われる。

Ｔｅｃキナーゼファミリーメンバーの酵素活性を低下させることが可能な化合物が同定
されたら、この化合物が、Ｔｅｃキナーゼファミリーメンバーを他の酵素に対して選択的
に阻害する能力について試験されてもよい。

Ｔｅｃキナーゼファミリーメンバーの活性に関連する表現型において検出可能な変化を
誘発する能力について、化合物を細胞モデルまたは動物モデルで更に試験してもよい。細
胞培養に加えて、動物モデルを用いて、動物モデルにおける自己免疫疾患、炎症性疾患、
または癌を治療する能力について、Ｔｅｃキナーゼファミリーメンバー阻害剤を試験して
もよい。

医薬組成物
別の態様において、本発明は、式Ｉで示される化合物または医薬的に許容し得る賦形剤
（例えば、担体）と組み合わせた式Ｉで示される化合物を含む医薬組成物を提供する。

この医薬組成物は、本明細書に開示された阻害剤の光学異性体、ジアステレオマー、ま
たは医薬的に許容し得る塩を包含する。医薬組成物中に含まれる式Ｉで示される化合物は
、先に記載された担体部分に共有結合で付着されてもよい。あるいはこの医薬組成物中に
含まれる式Ｉで示される化合物は、担体部分に共有結合でつながっていない。

本明細書で用いられる「医薬的に許容し得る担体」は、医薬賦形剤、例えば活性剤と有
害に反応しない腸内または非経口適用に適した医薬的、生理学的に許容し得る有機または
無機担体物質を指す。適切な医薬的に許容し得る担体としては、水、塩溶液（リンガー液
など）、アルコール、油、ゼラチン、および炭水化物、例えばラクトース、アミロースま
たはデンプン、脂肪酸エステル、ヒドロキシメチルセルロース、ならびにポリビニルピロ
リドンが挙げられる。そのような調製物は、滅菌されて、所望なら、本発明の化合物と有
害に反応しない補助剤、例えば潤滑剤、防腐剤、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影
響を及ぼす塩、緩衝剤、着色剤、および／または芳香物質などと混合させることができる
。

本発明の化合物は、対象に単独で投与することができ、または共投与することができる
。共投与は、この化合物の個別で、または組み合わせ（１種を超える化合物）での、同時
または連続の投与を包含することを意味する。この調製物は、所望なら、他の活性物質（
例えば、代謝分解を減少させるもの）と併用することもできる

本発明の化合物は、非常に様々な経口、非経口、および外用投与剤型で調製および投与
することができる。このため本発明の化合物は、注射により（例えば、静脈内、筋肉内、
皮内、皮下、十二指腸内、または腹腔内に）投与することができる。同じく本明細書に記
載された化合物は、吸入により、例えば鼻内に投与することができる。加えて本発明の化
合物は、経皮投与することができる。複数の投与経路（例えば、筋肉内、経口、経皮）を
用いて、本発明の化合物を投与し得ることも予測される。

本発明の化合物から医薬組成物を調製するために、医薬的に許容し得る担体は、固体ま
たは液体のいずれであってもよい。固体形態の調製物としては、粉末、錠剤、丸薬、カプ
セル、カシェ剤、坐剤、および分散性顆粒が挙げられる。固体担体は、希釈剤、着香剤、
結合剤、防腐剤、錠剤崩壊剤、または封入材料としても作用し得る１種以上の物質であっ
てもよい。

粉末において、担体は、微粉化された活性成分との混合物中の微粉化固体である。錠剤
において、活性成分は、必要な結合特性を有する担体と適切な割合で混合されて、所望の
形状およびサイズに圧縮される。

粉末および錠剤は、好ましくは活性化合物を５％〜７０％含有する。適切な担体は、炭
酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、糖、ラクトース、ペクチン、デキ
ストリン、デンプン、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、カルボキシメチルセ
ルロースナトリウム、低融点ワックス、カカオ脂などである。用語「調製物」は、他の担
体を含む、または含まない活性化成分が担体により取り囲まれ、つまり担体と会合された
カプセルを提供する、活性化合物と担体としての封入材料との配合剤を包含するものとす
る。同様に、カシェ剤およびロゼンジが含まれる。錠剤、粉末、カプセル、ピル、カシェ
剤、およびロゼンジを、経口投与に適した固体投与剤型として用いることができる。

坐剤を調製するために、脂肪酸グリセリドまたはカカオ脂の混合物などの低融点ワック
スが最初に融解され、活性成分が撹拌などにより均質に分散される。融解された均質混合
物は、その後、簡便なサイズの鋳型に注がれて、放冷され、それにより固化される。

液体形態の調製物としては、溶液、懸濁液、およびエマルション、例えば水または水／
プロピレングリコール溶液が挙げられる。非経口注射の場合、液体調製物は、水性ポリエ
チレングリコール溶液に溶解して配合することができる。

非経口適用が必要または所望である場合には、本発明の化合物に特に適した混和物は、
注射用滅菌溶液、好ましくは油性または水性溶液、および懸濁液、エマルション、または
坐剤を含む挿入物である。特に非経口投与用の担体としては、デキストロースの水溶液、
生理食塩水、純水、エタノール、グリセロール、プロピレングリコール、ピーナッツオイ
ル、ごま油、ポリオキシエチレンブロックポリマーなどが挙げられる。アンプルは、簡便
な単位用量である。本発明の化合物は、リポソーム中に組み込ませること、または経皮ポ
ンプもしくはパッチにより投与することもできる。本発明における使用に適した医薬混和
物は、例えば、教示が参照により本明細書に組み入れられる、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃ
ａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１７ｔｈ Ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂ．Ｃｏ．，ペンシルバニ
ア州イーストン所在）およびＷＯ９６／０５３０９号に記載されるものを包含する。

経口使用に適した水性溶液は、活性成分を水に溶解し、所望なら適切な着色剤、着香剤
、安定化剤、および増粘剤を添加することにより調製することができる。経口使用に適し
た水性懸濁液は、水中の微粉化活性成分を粘性材料、例えば天然または合成ゴム、樹脂、
メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および他の周知の懸濁剤に
分散することにより作製することができる。

同じく、使用の少し前に経口投与用の液体形態調製物に変換される固体形態調製物も、
含まれる。そのような液体形態としては、溶液、懸濁液、およびエマルションが挙げられ
る。これらの調製物は、活性成分に加えて、着色剤、着香剤、安定化剤、緩衝剤、人工お
よび天然甘味剤、分散剤、増粘剤、可溶化剤などを含有してもよい。

医薬調製物は、好ましくは単位投与剤型である。そのような形態において、調製物は、
活性成分を適切な量で含有する単位用量に細分される。単位投与剤型は、個別の量の調製
物を含む包装された調製物、例えば包装された錠剤、カプセル、およびバイアルまたはア
ンプル中の粉末であってもよい。同じく単位投与剤型は、カプセル、錠剤、カシェ剤、も
しくはロゼンジそのものであってもよく、またはこれらのいずれかの適切な数が包装され
た形態であってもよい。

単位用量調製物中の活性成分の量は、活性成分の特定の適用法および能力に応じて０．
１ｍｇ〜１００００ｍｇ、典型的には１．０ｍｇ〜１０００ｍｇ、最も典型的には１０ｍ
ｇ〜５００ｍｇで変動または調整されてもよい。この組成物は、所望なら他の適合性治療
剤を含有してもよい。

幾つかの化合物は、低い水溶性を有する場合があり、それゆえこの組成物中に界面活性
剤または他の適切な共溶媒を必要とする場合がある。そのような共溶媒としては、ポリソ
ルベート２０、６０および８０、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、Ｆ８４、およびＰ−１０
３、シクロデキストリン、ならびにポリオキシル３５ヒマシ油が挙げられる。そのような
共溶媒は、典型的には約０．０１重量％〜約２重量％のレベルで用いられる。

配合剤を分散させる際の変動性を低下させるため、配合剤の懸濁物もしくはエマルショ
ンの成分の物理的分離を減少させるため、および／またはその他では配合を改善するため
に、簡単な水性溶液よりも大きな粘度が望ましい場合がある。そのような粘度上昇剤とし
ては、例えばポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、ヒドロ
キシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロ
ース、ヒドロキシプロピルセルロース、コンドロイチン硫酸およびその塩、ヒアルロン酸
およびその塩、ならびに前述の者の組み合わせが挙げられる。そのような薬剤は、典型的
には約０．０１重量％〜約２重量％のレベルで用いられる。

本発明の組成物は、追加的に、徐放性および／または快適性を与える成分を含んでいて
もよい。そのような成分としては、高分子量の、陰イオン性粘液模倣ポリマー（ａｎｉｏ
ｎｉｃ ｍｕｃｏｍｉｍｅｔｉｃ ｐｏｌｙｍｅｒｓ）、ゲル化多糖類、および微粉化薬
物担体基質が挙げられる。これらの成分は、米国特許第４，９１１，９２０号、同第５，
４０３，８４１号、同第５，２１２，１６２号、および同第４，８６１，７６０号により
詳細に議論されている。これらの特許の内容全体は、参照することで全ての目的で全体と
して本明細書に組み入れられる。

効果的投薬量
本発明により提供される医薬組成物は、有効成分が治療有効量、即ち意図する目的を実
現するのに効果的な量で含有される組成物を包含する。特定の適用例に効果的な実際の量
は、とりわけ治療される状態に依存する。例えば癌を治療する方法において投与される場
合、そのような組成物は、所望の結果を実現する（例えば、対象における癌細胞数を減少
させる）のに効果的な有効成分の量を含有する。

投与される化合物の投薬量および頻度（単回または反復投与）は、投与経路、レシピエ
ントのサイズ、年齢、性別、健康、体重、肥満指数、および食事、治療される疾患（例え
ば、Ｂｔｋ阻害に応答する疾患）の症状の性質および程度、他の疾患または他の健康関連
問題の存在、同時治療の種類、ならびに任意の疾患または治療レジメンによる合併症を含
む様々な因子に応じて変動させることができる。

本明細書に記載された任意の化合物では、治療有効量は、最初に細胞培養アッセイによ
り決定することができる。目的濃度は、例えば記載された方法を利用して、測定されたキ
ナーゼ酵素活性を低下せることが可能な活性化合物（複数可）の濃度である。

ヒトにおいて使用される治療有効量が、動物モデルにより決定されてもよい。例えばヒ
ト用の用量を、動物において効果的であることが見出された濃度を実現するように配合す
ることができる。ヒトにおける投薬量は、先に記載された通り、キナーゼ阻害をモニタリ
ングして、投薬量を上方または下方に調整することにより、調整することができる。特定
の実施形態において、投与される用量は、１日あたり約１０ｍｇ〜約１０００ｍｇの範囲
内で、１日に１回、２回、または２回を超える回数である。

投薬量は、患者の要件および用いられる化合物に応じて変動してもよい。本発明の状況
において、患者に投与される用量は、時間の経過と共に患者における有益な治療的応答を
実行するのに十分でなければならない。用量のサイズも、任意の有害な副作用の存在、性
質および程度により決定される。一般に治療は、この化合物の最適用量よりも少ない、少
なめの投薬量で開始される。その後、投薬量は、環境下で最適な効果に到達するまで、少
しの増分により増加される。幾つかの実施形態において、投薬範囲は、０．００１〜１０
％ｗ／ｖである。幾つかの実施形態において、投薬範囲は、０．１〜５％ｗ／ｖである。

投薬量および間隔は、治療される特定の臨床的適応症に効果的な投与化合物レベルを提
供するように、個別に調整することができる。これは、個々の疾患状態の重症度に相応し
い治療レジメンを提供する。

本明細書に記載された発明がより完全に理解され得る順序で、以下の実施例を示してい
る。これらの実施例は、例示目的に過ぎないと理解されるべきであり、本発明を限定する
ものと解釈されてはならない。

例証
以下の実施例に示される通り、特定の模範的実施形態において、化合物は、以下の一般
的手順に従って調製される。一般的方法が本発明の特定の化合物の合成を示しながら、以
下の一般的方法および当業者に公知の他の方法が、本明細書に記載される通り、全ての化
合物、ならびにこれらの化合物それぞれの下位分類および種に適用され得ることは認識さ
れよう。

実施例１
（３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−ｔｅｒｔ−ブチル４’−エチル２−オキソ−［１，３’−ビ
ピペリジン］−１’，４’−ジカルボキシラートの合成

エチル３−オキソピペリジン−４−カルボキシラートの調製。エチル１−ベンジル−３
−オキソピペリジン−４−カルボキシラート１（１５．０ｇ、５０．５ｍｍｏｌ、１．０
当量）を、ＭｅＯＨ（２５０ｍＬ）中、大気圧のＨ_２下、１０％Ｐｄ／Ｃ（１．５ｇ）触
媒の存在下で１６ｈ水素化させた。触媒を濾別して、溶媒を真空濃縮し、エチル３−オキ
ソピペリジン−４−カルボキシラート２を淡黄色固体として得た（１０．２ｇ、収率９８
％）。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）^＋：１７２．１。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ
−ｄ_６）δ：４．２３（ｑ，２Ｈ），３．７５（ｓ，２Ｈ），３．３７（ｓ，２Ｈ），３
．２０−３．１６（ｍ，２Ｈ），２．４４（ｔ，１Ｈ），１．２５（ｔ，３Ｈ）。

１−ｔｅｒｔ−ブチル４−エチル３−オキソピペリジン−１，４−ジカルボキシラート
の調製。エチル３−オキソピペリジン−４−カルボキシラート２（１０．２ｇ、６０．０
ｍｍｏｌ、１．０当量）を乾燥ＭｅＯＨ（２００ｍＬ）に溶解して、Ｅｔ_３Ｎ（３３．１
ｍＬ，２４０ｍｍｏｌ、４．０当量）を添加した。混合物を１時間撹拌し、Ｂｏｃ_２Ｏ（
１９．５ｇ、９０．０ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加して、１６時間撹拌した。溶媒を真
空濃縮して、粗製物をカラムクロマトグラフィー（シリカ、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝
９：１）により精製して、１−ｔｅｒｔ−ブチル４−エチル３−オキソピペリジン−１，
４−ジカルボキシラート３を淡黄色油状物として得た（１１．５ｇ、収率：８６％）。
ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ−５６）^＋：２１６．０。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ
_３）δ：４．２４（ｑ，２Ｈ），４．０３（ｓ，２Ｈ），３．４９（ｔ，２Ｈ），２．３
３（ｔ，２Ｈ），１．４７（ｓ，９Ｈ），１．３１（ｔ，３Ｈ）。

（Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル４−エチル３−（（１−フェニルエチル）アミノ）−５
，６−ジヒドロピリジン−１，４−（２Ｈ）−ジカルボキシラートの調製。ディーンスタ
ークトラップおよび還流冷却装置を備えた乾燥フラスコにおいて、１−ｔｅｒｔ−ブチル
４−エチル３−オキソピペリジン−１，４−ジカルボキシラート３（１０．０ｇ、３７．
０ｍｍｏｌ、１．１当量）をトルエン（１００ｍＬ）に溶解した。Ｓ−（−）−α−メチ
ルベンジルアミン（４．９ｇ、４０．５ｍｍｏｌ、１．１当量）およびｐ−トルエンスル
ホン酸一水和物（０．７ｇ、３．７ｍｍｏｌ、０．１当量）を添加して、混合物を１６時
間、加熱還流した。粗反応混合物を真空濃縮して、（Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル４−エ
チル３−（（１−フェニルエチル）アミノ）−５，６−ジヒドロピリジン−１，４（２Ｈ
）−ジカルボキシラート４（１２．０ｇ、収率Ｙ：８８％）を濃厚な橙色油状物として得
て、次のステップで更に精製せずに使用した。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）^＋：３７５．２。

１−ｔｅｒｔ−ブチル４−エチル３−（（（Ｓ）１−フェニルエチル）アミノ）−５，
６−ジヒドロピリジン−１，４（２Ｈ）−ジカルボキシラートの調製。１−ｔｅｒｔ−ブ
チル４−エチル３−（（（Ｓ）−１−フェニルエチル）アミノ）ピペリジン−１，４−ジ
カルボキシラート４（１１．２ｇ、３０．０ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ＣＨ_３ＣＮ（６
０ｍＬ）と酢酸（６０ｍＬ）との混合物に溶解して、０℃に冷却した。ＮａＢＨ（ＯＡｃ
）_３（１９．０ｇ、９０．０ｍｍｏｌ、３．０当量）を緩やかに添加して、反応混合物を
０℃で２時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ_３を緩やかに添加して溶液を中和し、フラスコの
内部温度を１０℃未満に保持した。混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬで３回）で抽出した。
ひとまとめにした有機層を乾燥させて（Ｎａ_２ＳＯ_４）濾過し、真空濃縮し、その後、カ
ラムクロマトグラフィー（シリカ、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝９：１）により精製して
、４−エチル３−（（（Ｓ）１−フェニルエチル）アミノ）−５，６−ジヒドロピリジン
−１，４（２Ｈ）−ジカルボキシラート５を淡黄色油状物として得た（８．２ｇ、収率：
７３％）。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）^＋：３７７．２。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ
_３ＯＤ）δ：７．３１〜７．２２（ｍ，５Ｈ），４．２０（ｑ，２Ｈ），４．１１〜３．
８６（ｍ，３Ｈ），３．１５（ｓ，１Ｈ），３．００〜２．９０（ｍ，２Ｈ），２．６４
（ｄ，２Ｈ），１．８７〜１．８５（ｍ，１Ｈ），１．６８（ｓ，１Ｈ），１．５０〜１
．２５（ｍ，１５Ｈ）。

トランス−１−ｔｅｒｔ−ブチル４−エチル３−（（（Ｓ）−１−フェニルエチル）ア
ミノ）ピペリジン−１，４−ジカルボキシラートの調製。１−ｔｅｒｔ−ブチル４−エチ
ル３−（（（Ｓ）−１−フェニルエチル）アミノ）ピペリジン−１，４−ジカルボキシラ
ート５（８．０ｇ、２１．２ｍｍｏｌ、１．０当量）を、Ｎ_２下で乾燥ＥｔＯＨ（２０ｍ
Ｌ）に溶解した。別の火炎乾燥させたシュレンクフラスコに乾燥ＥｔＯＨ（１５０ｍＬ）
を入れて、ナトリウム（０．４５０ｇ、６３．６ｍｍｏｌ、３．０当量）をＮ_２下で少し
ずつ添加した。混合物をＮ_２下に保持し、ナトリウムの全てが溶解するまで換気して放出
された気体を除去した。１−ｔｅｒｔ−ブチル４−エチル３−（（（Ｓ）−１−フェニル
エチル）アミノ）ピペリジン−１，４−ジカルボキシラートの透明溶液を、その後、Ｎａ
ＯＥｔ溶液に移して、混合物をＮ_２下、８０℃で１６時間撹拌した。溶媒を真空除去して
、ブライン（１５０ｍＬ）を添加し、混合物を１Ｎ ＮａＯＨでｐＨ＝１０にして、Ｅｔ
ＯＡｃで抽出した（１００ｍＬで３回）。ひとまとめにした有機層を乾燥させて（Ｎａ_２
ＳＯ_４）、真空濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカ、石油エーテル／Ｅ
ｔＯＡｃ＝５：１）により精製して、（トランス）−１−ｔｅｒｔ−ブチル４−エチル３
−（（（Ｓ）−１−フェニルエチル）アミノ）ピペリジン−１，４−ジカルボキシラート
６を淡黄色固体として得た（３．７ｇ、収率：４６％）。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）^＋：３
７７．２。

トランス−１−ｔｅｒｔ−ブチル４−エチル３−アミノピペリジン−１，４−ジカルボ
キシラートの調製。トランス−１−ｔｅｒｔ−ブチル４−エチル３−（（（Ｓ）−１−フ
ェニルエチル）アミノ）ピペリジン−１，４−ジカルボキシラート６（３．７ｇ、８．３
ｍｍｏｌ、１．０当量）をＭｅＯＨ（１００ｍＬ）中、３０大気圧のＨ_２下、１０％Ｐｄ
／Ｃ（０．３７ｇ）触媒の存在下、５０℃で８ｈ水素化させた。触媒を濾別して、溶媒を
真空除去し、（トランス）−１−ｔｅｒｔ−ブチル４−エチル３−アミノピペリジン−１
，４−ジカルボキシラート７を淡黄色油状物として得た（２．５ｇ、収率：９２％）。Ｅ
ＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）^＋：２７３．１。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：
４．１８（ｑ，２Ｈ），３．９７〜３．９４（ｍ，２Ｈ），３．３７（ｓ，１Ｈ），３．
０７〜３．０２（ｍ，１Ｈ），２．８９〜２．８５（ｍ，１Ｈ），２．６０〜２．５５（
ｍ，１Ｈ），２．０１〜１．９１（ｍ，１Ｈ），１．７０〜１．５４（ｍ，３Ｈ），１．
４６（ｓ，９Ｈ），１．２８（ｔ，３Ｈ）。

トランス−１−ｔｅｒｔ−ブチル４−エチル３−（５−ブロモペンタンアミド）ピペリ
ジン−１，４−ジカルボキシラートの合成。ＣＨ_２Ｃｌ_２（５０ｍＬ）中の（トランス）
−１−ｔｅｒｔ−ブチル４−エチル３−アミノピペリジン−１，４−ジカルボキシラート
７（２．５ｇ、９．２ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、Ｅｔ_３Ｎ（２．５ｍＬ、１８．
４ｍｍｏｌ、２．０当量）を室温で添加した。反応溶液を室温で１０分間撹拌した後、塩
化５−ブロモバレリル（１．９ｇ、９．６ｍｍｏｌ、１．０５当量）を添加した。反応溶
液を室温で２時間撹拌した。混合物をＨ_２Ｏ（２０ｍＬ）でクエンチして、ＣＨ_２Ｃｌ_２
で抽出した（５０ｍＬで３回）。有機層を回収し、真空濃縮し、残渣をカラムクロマトグ
ラフィー（シリカ、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝１：１）により精製して、（トランス）
−１−ｔｅｒｔ−ブチル４−エチル３−（５−ブロモペンタンアミド）ピペリジン−１，
４−ジカルボキシラート８を黄色油状物として得た（３．２ｇ、収率：８０％）。ＥＳＩ
−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ−５６）^＋：３７９．０。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ
：５．９９（ｄ，１Ｈ），４．３９〜４．３８（ｍ，１Ｈ），４．１５ （ｑ，２Ｈ），
３．７９〜３．７４（ｍ，１Ｈ），３．６６〜３．６０（ｍ，１Ｈ），３．４１（ｔ，２
Ｈ），３．３０〜３．２６（ｍ，１Ｈ），３．２１〜３．１４（ｍ，１Ｈ），２．７８〜
２．７４（ｍ，１Ｈ），２．１９（ｔ，２Ｈ），１．９９〜１．８５（ｍ，３Ｈ），１．
８０〜１．７２（ｍ，３Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ），１．２７（ｔ，３Ｈ）。

トランス−１’−ｔｅｒｔ−ブチル４’−エチル２−オキソ−［１，３’−ビピペリジ
ン］−１’，４’−ジカルボキシラートの合成。ＴＨＦ（２０ｍＬ）中のトランス−１−
ｔｅｒｔ−ブチル４−エチル３−（５−ブロモペンタンアミド）ピペリジン−１，４−ジ
カルボキシラート８（３．０ｇ、６．９ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＮａＨ（２７
６ｍｇ、６．９ｍｍｏｌ、１．０当量）を０℃で少量ずつ注意深く添加した。反応溶液を
還流条件で４ｈ撹拌した。混合物をＨ_２Ｏ（２０ｍＬ）でクエンチして、ＥｔＯＡｃで抽
出した（３０ｍＬで３回）。有機層を回収し、乾燥させて（Ｎａ_２ＳＯ_４）濾過し、真空
濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカ、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝１：
２）により精製して、（トランス）−１’−ｔｅｒｔ−ブチル４’−エチル２−オキソ−
［１，３’−ビピペリジン］−１’，４’−ジカルボキシラート９を淡黄色油状物として
得た（２．１ｇ、収率：８８％）。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ−５６）^＋：２９９．１。^１Ｈ
ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：４．１０（ｑ，４Ｈ），３．３８〜３．１９
（ｍ，４Ｈ），２．７０〜２．６１（ｍ，１Ｈ），２．３６〜２．３１（ｍ，２Ｈ），１
．９５〜１．９２（ｍ，１Ｈ），１．７５〜１．７１（ｍ，６Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ
），１．２３（ｔ，３Ｈ）。

実施例２
トランス−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３−（（３−
クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ−［１，３’−ビ
ピペリジン］−４’−カルボキサミドの調製

トランス−１’−ｔｅｒｔ−ブチル−４’−エチル−３−ヨード−２−オキソ−［１，
３’−ビピペリジン］−１’，４’−ジカルボキシラートの合成。０℃の乾燥トルエン（
１０ｍＬ）中のトランス−１’−ｔｅｒｔ−ブチル４’−エチル２−オキソ−［１，３’
−ビピペリジン］−１’，４’−ジカルボキシラート８（１４１ｍｇ、２．５８ｍｍｏｌ
、１．０当量）の溶液に、ＴＭＥＤＡ（０．８９ｇ、７．７ｍｍｏｌ、３．０当量）およ
びＴＭＳＣｌ（０．６ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ、２．０当量）をＮ_２下で逐次添加した。０
．５時間後、Ｉ_２（０．９８ｇ、３．８７ｍｍｏｌ、１．５当量）を少量ずつ注意深く添
加した。反応溶液を０℃〜室温で１６時間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）
で希釈し、飽和Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_３（２０ｍＬで２回）およびブライン（２０ｍＬ）洗浄し、
乾燥させて（Ｎａ_２ＳＯ_４）濾過し、真空濃縮した。粗生成物９（２．２ｇ、Ｙ：８１％
）を、更に精製せずに次のステップで直接用いた。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ−５６）^＋：４
２４．９。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：４．７８〜４．７３（ｍ，１
Ｈ），４．１９〜４．０４（ｍ，４Ｈ），３．５５〜３．３０（ｍ，４Ｈ），３．２４〜
３．１６（ｍ，２Ｈ），２．７３〜２．６０（ｍ，１Ｈ），２．２２〜２．１４（ｍ，２
Ｈ），１．９６〜１．７８（ｍ，２Ｈ），１．７０〜１．６０（ｍ，１Ｈ），１．４４（
ｓ，９Ｈ），１．２５（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）。

トランス−１’−ｔｅｒｔ−ブチル４’−エチル３−（（３−クロロ−５−（トリフル
オロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−１’，４
’−ジカルボキシラートの合成。ＴＨＦ（１３ｍＬ、１２ｍｍｏｌ、２．０当量）中のリ
チウムビス（トリメチルジシリル）アミドの１．０Ｍ溶液を、１０〜１５℃の添加用漏斗
を通して、ＴＨＦ（１３ｍＬ）中の３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）アニリン（
１５ｇ、７８ｍｍｏｌ、１．２当量）の溶液に添加した。混合物を室温で２０分間撹拌し
て、ＴＨＦ（１３ｍＬ）中の粗製トランス−１’−ｔｅｒｔ−ブチル−４’−エチル−３
−ヨード−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−１’，４’−ジカルボキシラート
９（３．７ｇ、６５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を、１０〜１５℃の添加用漏斗を通し
て３０分間かけて添加した。添加後に、反応物をその温度で３０分間撹拌した。完了後に
、反応物を５℃に冷却して、水（１０ｍＬ）で緩やかにクエンチし、２０℃未満の温度に
保持した。クエンチされた反応物をＥｔＯＡｃで抽出した（３０ｍＬで２回）。ひとまと
めにした有機層を飽和ブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させて（Ｎａ_２ＳＯ_４）濾過
し、真空濃縮した。得られた粗生成物を、シリカゲルを用い、１０％から７５％勾配のヘ
プタン中ＥｔＯＡｃで溶出して精製し、所望の生成物１０を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ
−５６）^＋：４６３．１。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：６．９２（ｓ
，１Ｈ），６．７１〜６．６９（ｍ，２Ｈ），４．１７〜４．０６（ｍ，４Ｈ），３．７
８〜３．６８（ｍ，２Ｈ），３．４６〜３．３６（ｍ，３Ｈ），３．２３〜３．０７（ｍ
，２Ｈ），２．７３〜２．６５（ｍ，１Ｈ），２．４４〜２．３７（ｍ，１Ｈ），２．０
３〜１．８５（ｍ，３Ｈ），１．７１〜１．６１（ｍ，２Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ），
１．２７〜１．１９（ｍ，３Ｈ）。

トランス−１’−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（（３−クロロ−５−（ト
リフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４
’−カルボン酸の合成。ＥｔＯＨ（５ｍＬ）中のトランス−１’−ｔｅｒｔ−ブチル４’
−エチル３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オ
キソ−［１，３’−ビピペリジン］−１’，４’−ジカルボキシラート１０（１８０ｍｇ
、０．３３ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＮａＯＨ（４０ｍｇ、０．９９ｍｍｏｌ、
３．０当量）を添加して、溶液を８０℃で１時間撹拌した。溶媒を真空濃縮し、残渣を水
（１０ｍＬ）に懸濁させて、ＨＣｌ（４Ｎ）でｐＨ＝６に調整した。沈殿物を濾過して、
（トランス）−１’−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（（３−クロロ−５−（
トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−
４’−カルボン酸１１（１５０ｍｇ、Ｙ：８２％）を黄色固体として得て、更に精製せず
に次のステップで用いた。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ−８５）^＋：４６３．１。^１Ｈ ＮＭＲ
（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：６．８５（ｓ，１Ｈ），６．８２（ｓ，１Ｈ），６．
７８（ｓ，１Ｈ），４．１２−３．９６（ｍ，４Ｈ），３．５３〜３．３７（ｍ，２Ｈ）
，３．１１〜３．０４（ｍ，２Ｈ），２．７５〜２．６７（ｍ，１Ｈ），２．２４〜２．
１８（ｍ，１Ｈ），１．９８〜１．８９（ｍ，３Ｈ），１．７１〜１．５８（ｍ，２Ｈ）
，１．４４（ｓ，９Ｈ）。

トランス−ｔｅｒｔ−ブチル４’−カルバモイル−３−（（３−クロロ−５−（トリフ
ルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−１’−
カルボキシラートの合成。ＤＭＦ（２ｍＬ）中のトランス−１’−（ｔｅｒｔ−ブトキシ
カルボニル）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−
２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボン酸１１（７０ｍｇ、０．１４
ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＮＨ_４Ｃｌ（２２ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ、３．０当
量）、ＨＢＴＵ（１０３ｍｇ、０．２７０ｍｍｏｌ、２．０当量）およびＤＩＰＥＡ（５
２ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加した。反応溶液を室温で１６時間撹拌し
、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で希釈して、水（５ｍＬ）およびブライン（５ｍＬ）で洗浄し
た。有機相を分離し、真空濃縮して、粗油状物を得て、プレＨＰＬＣ（移動相としてＭｅ
ＯＨ／０．０５％ＴＦＡを含むＨ_２Ｏ）により精製して、化合物（トランス）−ｔｅｒｔ
−ブチル４’−カルバモイル−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニ
ル）アミノ）−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−１’−カルボキシラート１２
を軽量の固体として得た（６０ｍｇ、収率：８６％）。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ−５６）^＋
：４６３．１。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：６．８７〜６．８６（ｍ
，１Ｈ），６．８４〜６．８３（ｍ，１Ｈ），６．８０（ｓ，１Ｈ），４．１１〜４．０
３（ｍ，３Ｈ），３．５３〜３．３５（ｍ，２Ｈ），３．２０〜３．０８（ｍ，２Ｈ），
２．７７〜２．７４（ｍ，１Ｈ），２．２５〜２．１８（ｍ，１Ｈ），１．９９〜１．８
８（ｍ，３Ｈ），１．７０〜１．６０（ｍ，２Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ）。

トランス−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２
−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミドの合成。ＣＨ_２Ｃｌ_２（
１．０ｍＬ）中のトランス−ｔｅｒｔ−ブチル４’−カルバモイル−３−（（３−クロロ
−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ−［１，３’−ビピペリ
ジン］−１’−カルボキシラート１２（６０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）の溶液に、ＣＦ_３
ＣＯ_２Ｈ（１．０ｍＬ）を室温で添加した。反応混合物を室温で２ｈ撹拌し、真空濃縮し
て、所望の生成物１３（４３ｍｇ、９０％）を得て、更に精製せずに次のステップで直接
用いた。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）^＋：４１９．０。

トランス−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３−（（３−
クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ−［１，３’−ビ
ピペリジン］−４’−カルボキサミドの合成。１−ブタノール（２ｍＬ）中のトランス−
３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ−［
１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド１３（４２ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ、
１．０当量）の溶液に、および６−クロロ−５−フルオロピリミジン−４−アミン（１８
ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。ＤＩＰＥＡ（２６ｍｇ、０．２０ｍ
ｍｏｌ、２．０当量）。反応溶液を、１２０℃で１６時間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃ
（２０ｍＬ）で希釈し、Ｈ_２Ｏ（１０ｍＬ）およびブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、乾燥
させて（Ｎａ_２ＳＯ_４）濾過し、真空濃縮した。粗製物をプレＨＰＬＣ（移動相としてＭ
ｅＯＨ／０．０５％ＴＦＡを含むＨ_２Ｏ）により精製して、化合物（トランス）−１’−
（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３−（（３−クロロ−５−（トリ
フルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’
−カルボキサミド１４を黄色固体として得た（４４ｍｇ、収率：８３％）。ＥＳＩ−ＭＳ
（Ｍ＋Ｈ）^＋：５３０．０。ＨＰＬＣ：（２１４ｎｍ：１００％、２５４ｎｍ：１００％
）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：７．９７（ｓ，１Ｈ），６．８４（
ｓ，１Ｈ），６．８１（ｓ，１Ｈ），６．７６（ｓ，１Ｈ），４．５８〜４．５２（ｍ，
２Ｈ），４．０９〜４．０３（ｍ，１Ｈ），３．５２〜３．３５（ｍ，３Ｈ），３．２９
〜３．２７（ｍ，４Ｈ），３．１２〜３．０５（ｍ，１Ｈ），２．２４〜２．１７（ｍ，
１Ｈ），２．０２−１．９１（ｍ，３Ｈ），１．８０〜１．６３（ｍ，２Ｈ）。

（３Ｒ，３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ
−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド。化合物１４の４種のジアステレ
オマーの混合物を、ＳＦＣ（ＩＡ（２×１５ｃｍ）、３０％ＥｔＯＨ（０．１％ＤＥＡ）
／ＣＯ_２、１００ｂａｒ、６０ｍｌ／分）により３つのピークに分離し、表題化合物は、
ピーク３に対応した。ＬＣＭＳ（Ａｇｉｌｅｎｔ４６０，２５４ｎｍ）：ＥＳ（＋）ＭＳ
ｍ／ｅ＝５３０．１（Ｍ＋１）＠１．２０ｍｉｎ。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭ
ＳＯ−ｄ６）δ：７．７７（ｄ，Ｊ＝２．０１Ｈｚ，１Ｈ），７．３８（ｂｒ．ｓ．，１
Ｈ），６．９４（ｓ，２Ｈ），６．７５〜６．８７（ｍ，２Ｈ），６．４１〜６．６６（
ｍ，３Ｈ），４．２９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），４．２３（ｄ，Ｊ＝１３．０５Ｈｚ，１Ｈ
），３．９６〜４．１８（ｍ，２Ｈ），３．４４（ｔｄ，Ｊ＝６．１５，１２．３０Ｈｚ
，１Ｈ），３．２４〜３．３３（ｍ，１Ｈ），３．１０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），２．８８
（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），２．８２（ｔ，Ｊ＝１２．３０Ｈｚ，１Ｈ），２．１３（ｑｄ，
Ｊ＝５．９４，１２．３０Ｈｚ，１Ｈ），１．７４〜１．９３（ｍ，３Ｈ），１．５８〜
１．７４（ｍ，１Ｈ），１．４１〜１．５８（ｍ，１Ｈ）。

（３Ｓ，３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ
−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド。化合物１４の４種のジアステレ
オマーの混合物を、ＳＦＣ（ＩＡ（２×１５ｃｍ）、３０％ＥｔＯＨ（０．１％ＤＥＡ）
／ＣＯ_２、１００ｂａｒ、６０ｍｌ／分）により３つのピークに分離し、表題化合物は、
ピーク２に対応した。ＬＣＭＳ（Ａｇｉｌｅｎｔ４６０，２５４ｎｍ）：ＥＳ（＋）ＭＳ
ｍ／ｅ＝５３０．１（Ｍ＋１）＠１．１９ｍｉｎ。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭ
ＳＯ−ｄ６）δ：７．７７（ｄ，Ｊ＝１．７６ Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｂｒ．ｓ．，
１Ｈ），６．９８（ｓ，１Ｈ），６．９６（ｓ，１Ｈ），６．７２〜６．８８（ｍ，２Ｈ
），６．５７（ｓ，２Ｈ），６．５４（ｄ，Ｊ＝７．７８Ｈｚ，１Ｈ），４．０５〜４．
３３（ｍ，４Ｈ），３．３７（ｔ，Ｊ＝６．２７Ｈｚ，２Ｈ），３．１１（ｂｒ．ｓ．，
１Ｈ），２．９４（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），２．８２（ｔ，Ｊ＝１２．３０Ｈｚ，１Ｈ），
２．０２〜２．１６（ｍ，１Ｈ），１．７５〜１．９２（ｍ，３Ｈ），１．５７〜１．７
４（ｍ，１Ｈ），１．３６〜１．５４（ｍ，１Ｈ）。

（３Ｓ，３’Ｓ，４’Ｒ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ
−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド。化合物１４の４種のジアステレ
オマーの混合物を、ＳＦＣ（ＩＡ（２×１５ｃｍ）、３０％ＥｔＯＨ（０．１％ＤＥＡ）
／ＣＯ_２、１００ｂａｒ、６０ｍｌ／分）により３つのピークに分離して、上記化合物は
ピーク２に相当しました。ＬＣＭＳ（Ａｇｉｌｅｎｔ４６０，２５４ｎｍ）：ＥＳ（＋）
ＭＳ ｍ／ｅ＝５３０．１（Ｍ＋１）＠１．２０ｍｉｎ。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，
ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：７．７７（ｄ，Ｊ＝１．７６Ｈｚ，１Ｈ），７．３８（ｂｒ．ｓ．
，１Ｈ），６．９４（ｓ，２Ｈ），６．８３（ｓ，１Ｈ），６．８０（ｓ，１Ｈ），６．
４２〜６．６６（ｍ，３Ｈ），４．１８〜４．４７（ｍ，２Ｈ），３．９５〜４．１８（
ｍ，２Ｈ），３．３９〜３．５２（ｍ，１Ｈ），３．２４〜３．３１（ｍ，１Ｈ），３．
１０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），２．８８（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），２．８２（ｔ，Ｊ＝１２．
３０Ｈｚ，１Ｈ），２．１３（ｑｄ，Ｊ＝５．９１，１２．３９Ｈｚ，１Ｈ），１．７３
〜１．９２（ｍ，３Ｈ），１．５８〜１．７３（ｍ，１Ｈ），１．４２〜１．５８（ｍ，
１Ｈ）。

（３Ｒ，３’Ｓ，４’Ｒ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ
−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド。化合物１４の４種のジアステレ
オマーの混合物を、ＳＦＣ（ＩＡ（２×１５ｃｍ）、３０％ＥｔＯＨ（０．１％ＤＥＡ）
／ＣＯ_２、１００ｂａｒ、６０ｍｌ／分）により３つのピークに分離した。３つのピーク
のうちピーク１をＳＦＣ（ＡＤ−Ｈ（２×１５ｃｍ）、３０％ｉＰｒＯＨ（０．１％ＤＥ
Ａ）／ＣＯ_２、１００ｂａｒ、６０ｍｌ／分）で更に精製して、表題化合物を得た。ＬＣ
ＭＳ（Ａｇｉｌｅｎｔ４６０，２５４ｎｍ）：ＥＳ（＋）ＭＳ ｍ／ｅ＝５３０．１（Ｍ
＋１）＠１．２０ｍｉｎ。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ：７．７７
（ｄ，Ｊ＝１．７６Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），６．９８（ｓ，１Ｈ
），６．９６（ｓ，１Ｈ），６．７３〜６．８８（ｍ，２Ｈ），６．５７（ｓ，２Ｈ），
６．５４（ｄ，Ｊ＝７．７８Ｈｚ，１Ｈ），４．０５〜４．３５（ｍ，４Ｈ），３．３７
（ｔ，Ｊ＝６．１５Ｈｚ，２Ｈ），３．１２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），２．９４（ｂｒ．ｓ
．，１Ｈ），２．８２（ｔ，Ｊ＝１２．３０Ｈｚ，１Ｈ），２．０９（ｓｘｔ，Ｊ＝５．
８０Ｈｚ，１Ｈ），１．７４〜１．９２（ｍ，３Ｈ），１．５６〜１．７３（ｍ，１Ｈ）
，１．３６〜１．５２（ｍ，１Ｈ）。

実施例３
（３Ｒ，３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）
−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ−
［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミドの別の合成。
実施例２に記載された方法に加えて、（３Ｒ，３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ
−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチ
ル）フェニル）アミノＩ−１）−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カル
ボキサミド（化合物）を、スキーム６によっても合成した。

１−ｔｅｒｔ−ブチル４−エチル３−オキソピペリジン−１，４−ジカルボキシラート
３−２。Ｎ_２下、ＥｔＯＨ（５０Ｌ）中の３−１（５．０ｋｇ、１９．１ｍｏｌ、１．０
当量）の溶液に、（Ｂｏｃ）_２Ｏ（４．２ｋｇ、１９．１ｍｏｌ、１．０当量）、Ｅｔ_３
Ｎ（１．９ｋｇ、１９．１ｍｏｌ、１．０当量）および１０％Ｐｄ（ＯＨ）_２／Ｃ（２５
０ｇ、１０％ｗ／ｗ）を添加した。排気および水素再充填を３回実施した後、混合物を水
素１気圧の下、５０℃で１５時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳにより、３−１の完全な消費が示
された。混合物を周囲温度に冷却した後、触媒をセライト層で濾過して、ＥｔＯＨ（２．
５Ｌ）で洗浄した。濾液を真空濃縮して、粗製３−２（５．２ｋｇ）を油状物として得て
、更に精製せずに次のステップで用いた。

（Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル４−エチル３−（（１−フェニルエチル）アミノ）−５
，６−ジヒドロピリジン−１，４（２Ｈ）−ジカルボキシラート（３−３）。ディーンス
ターク装置を備えた１００Ｌ反応器にトルエン（２０Ｌ）を充填し、粗化合物３−２（５
．２ｋｇ、１９．１ｍｏｌ、１．０当量）を、トルエン（３０Ｌ）、ｐＴＳＡ（３２９ｇ
、０．２ｍｏｌ、０．０１当量）、およびＳ−（−）−α−メチルベンジルアミン（．９
５ｋｇ、１６．２ｍｏｌ、０．８５当量）ですすいだ。窒素ブランケットを用いて混合物
を加熱還流し、ディーンスタークにより水を除去した。１８時間後、ＬＣ−ＭＳにより３
−２の完全な消費が示された。その後、混合物を周囲温度まで冷却した。不溶物を濾過に
より除去し、濾液を真空濃縮して乾固させ、粗製物３−３を濃厚な油状物として得た。こ
の粗生成物を更に精製せずに次のステップで用いた。この反応で形成されたアミド副生物
の３〜１０％およびその構造を、ＬＣ−ＭＳデータに基づいて仮に割り付けた。

（３Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル４−エチル３−（（（Ｓ）−１−フェニルエチル）ア
ミノ）ピペリジン−１，４−ジカルボキシラート（３−４）。窒素下の、ＮａＢＨ_４（１
．１６ｋｇ、３０．５ｍｏｌ、２．０当量）および無水ＴＨＦ（６０Ｌ）を充填された１
００Ｌ反応器に、０〜５℃の温度を保持しながら、ＴＦＡ（１０．５ｋｇ、９２ｍｏｌ、
６．０当量）を３０分間にわたり緩やかに添加した。その後、混合物を−４５℃に冷却し
た。分離反応器において、粗生成物３−３を無水アセトニトリル（３０Ｌ）に溶解して、
−４５〜３０℃の内部温度を保持しながら、ＮａＢＨ_４／ＴＦＡの先の溶液に緩やかに添
加した。混合物を−４５℃で１時間撹拌し、その後、ＨＰＬＣにより、化合物３−３の完
全な消費が示された。混合物を氷水（５０ｋｇ）で緩やかに希釈し、その後、混合物を１
０℃に加温した。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し（４０Ｌで２回）、ひとまとめにした有機
層を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（２０Ｌ）で洗浄した。水溶液のｐＨは、約８であった。有機
層を乾燥させて（Ｎａ_２ＳＯ_４）、真空濃縮してほとんど乾固させ、残渣を与えてＭｅＯ
Ｈと更に共沸させて（１０Ｌで３回）過剰のＥｔＯＡｃを除去した。最後に、ＭｅＯＨ中
の粗製物３−４の１０Ｌ溶液を得て、更に精製せずに次のステップで直接用いた。ＥＳＩ
−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ−１）^＋：３７７．２。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：
７．３１〜７．２２（ｍ，５Ｈ），４．２０（ｑ，２Ｈ），４．１１〜３．８６（ｍ，３
Ｈ），３．１５（ｓ，１Ｈ），３．００〜２．９０（ｍ，２Ｈ），２．６４（ｄ，２Ｈ）
，１．８７〜１．８５（ｍ，１Ｈ），１．６８（ｓ，１Ｈ），１．５０〜１．２５（ｍ，
１５Ｈ）。

（３Ｒ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（（（Ｓ）−１−フェニルエ
チル）アミノ）ピペリジン−４−カルボン酸（３−５）。１００Ｌ反応器にＴＨＦ／Ｍｅ
ＯＨ（１：１、８０Ｌ）を充填し、水（１０Ｌ）中のＬｉＯＨ・Ｈ_２Ｏ（２．５ｋｇ、６
０ｍｏｌ、４．０当量）の溶液および先にステップから得られたＭｅＯＨ（１０Ｌ）中の
粗製物３−４の溶液を添加した。得られた混合物を２２℃で１８時間撹拌し、その時点で
のＬＣ／ＭＳにより、出発原料３−４の完全な消費が示された。溶液をＭＴＢＥ（４０Ｌ
）で希釈して、２０分間撹拌した。水層を分離して０℃に冷却し、１０℃未満の内部温度
を保持しながら３Ｎ ＨＣｌ溶液で７〜８のｐＨに中和した。溶液をＤＣＭ ３０Ｌで５
回洗浄するか、またはＬＣ／ＭＳで生成物３−５が７水層に残留しなくなるまでＤＣＭで
洗浄した。ひとまとめにした有機層を真空濃縮して乾固させ、ＥｔＯＡｃおよび石油エー
テル（２：１、１０Ｌ）で懸濁させて、２時間撹拌し、固体を濾過して石油エーテル（５
Ｌ）で洗浄し、真空下、５０℃で１８時間乾燥させて、生成物を固体として純度９５％で
得た（３．５ｋｇ、収率５３％）。化合物３−５は、Ｃ−４で３０：７０までのトランス
／シスとＣ−３でＲ：Ｓが９３：７までの混合物である。３−１からの全体的収率の平均
は、４３〜５５％である。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ−１）^＋：３４９．２。^１Ｈ ＮＭＲ（
４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：８．２２〜８．０６（ｍ，５Ｈ）４．１１（ｍ，１Ｈ）
，３．８６〜３．８２（ｍ，１Ｈ），３．５９〜３．５６（ｍ，１Ｈ），２．７９〜２．
６５（ｍ，１Ｈ），３．２２〜２．６２（ｍ，２Ｈ），２．０６〜２．１６（ｍ，１２Ｈ
）。

（３Ｒ）−１−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３−（（（Ｓ）
−１−フェニルエチル）アミノ）ピペリジン−４−カルボン酸（３−７）。５０Ｌ反応器
に、２Ｎ ＨＣｌ １０Ｌおよび３−５（８５０ｇ、２．４４ｍｏｌ、１．０当量）を充
填した。混合物を３０℃に加温し、２時間撹拌して、その時点でＨＰＬＣにより開始物質
３−５の完全な消費が示された。溶液をＭＴＢＥ（４Ｌ）で希釈して２０分間撹拌し、層
を分離させて、水層に固体Ｋ_２ＣＯ_３（６６０ｇ）を１時間かけてｐＨ約７まで添加した
。６−クロロ−５−フルオロピリミジン−４−イルアミン（３６０ｇ、２．４４ｍｏｌ、
１．０当量）および１，４−ジオキサン（５Ｌ）に続いて、更なるＫ_２ＣＯ_３（６６０ｇ
、４．８ｍｏｌ、２．０当量）を添加した。混合物を１００℃で穏やかに還流するまで加
熱し、この温度で１６時間撹拌した。ＨＰＬＣにより化合物３−６の２％未満の残留が示
された。混合物をＤＣＭで洗浄し（５Ｌで２回）、有機洗浄溶液を廃棄した。水層と活性
炭のスラリーを３０℃で１時間撹拌した後、珪藻土で濾過することにより、水層を活性炭
（４２５ｇ）で処理した。この活性炭処理を、繰り返し行った。得られた水性溶液を、濃
ＨＣｌでｐＨ約７に中和し、２２℃で３時間撹拌し、得られたスラリーを濾過して、湿潤
ケーキを１，４−ジオキサン／水（１：１、１．２Ｌ）で洗浄して、生成物３−７のＫＦ
約０．５％が青白い固体として純度９８．６％（６９０ｇ、収率８１％）で得られるまで
、５０℃で１８時間真空乾燥させた。生成物は、Ｃ３およびＣ４の位置に１：９シス／ト
ランス異性体混合物を含む。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ−１）^＋：４６０．２。^１Ｈ ＮＭＲ
（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：８．４９（ｄ，Ｊ＝２．０１Ｈｚ，１Ｈ），８．２１
〜８．１４（ｍ，５Ｈ）４．９４〜４．９０（ｍ，１Ｈ），４．６３（ｄ，Ｊ＝１１．５
５Ｈｚ，１Ｈ），４．４２（ｍ，１Ｈ），４．０３（ｍ，２Ｈ），３．５９〜３．７２（
ｍ，３Ｈ），２．８４〜２．９３（ｍ，１Ｈ），２．２０〜２．３１（ｍ，１Ｈ），２．
１５（ｄ，Ｊ＝６．７８Ｈｚ，３Ｈ）。

（３Ｒ）−３−アミノ−１−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）ピペ
リジン−４−カルボン酸（３−８）。１０Ｌ反応物に、Ｎ_２下で、ｉＰｒＯＨ（３．５Ｌ
）、Ｈ_２Ｏ（３．５Ｌ）、３−７（１．０当量、０．９７ｍｏｌ、３５０ｇ）フッ化カリ
ウム一水和物（２９０ｇ、３．０当量、３．０ｍｏｌ）および２０％Ｐｄ（ＯＨ）_２／Ｃ
（１０％ｖ／ｗ）３５ｇを充填した。三回の排気／水素再充填の後、混合物を４０〜５０
℃に加温して、１水素雰囲気の下、その温度で激しく撹拌した。１８時間後に、ＬＣ／Ｍ
Ｓにより、出発原料３−７の１％未満の残留が示された。混合物をＮ_２で２０分間パージ
し、２２℃に冷却して濾過した。湿潤ケーキと濾液は両者とも生成物を含み、別個に加工
された。

濾液を５０℃で約２００ｍＬの容量まで真空濃縮した。２０℃に冷却し、この温度で２
時間撹拌した後、スラリーを得て、固体を濾過し、水（４００ｍＬ）で洗浄して、５０℃
で真空乾燥させて、生成物３−８（６５ｇ）を得た。反応物濾過から得られた湿潤ケーキ
を１Ｎ ＨＣｌ（１Ｌ）で２時間撹拌して、生成物を溶解し、その後、残留する触媒固体
を濾過により除去した。酸性濾液を固体ＬｉＯＨでｐＨ約７に中和して、生成物３−８を
沈殿させた。生成物を水（２００ｍＬ）で洗浄し、５０℃で真空乾燥させて、生成物１２
０ｇを得た。全１８５ｇの生成物を、Ｈ ＮＭＲに基づく純度９８．７％および収率７５
％で得た。母液の全てをひとまとめにして、約容量４００ｍＬに濃縮してスラリーを得、
濾過して水で洗浄し、乾燥により更に６４ｇの固体を約５０％純度とした。^１Ｈ ＮＭＲ
（４００ＭＨｚ，Ｄ_２Ｏ）：δ７．７７（ｓ，１Ｈ）４．１２（ｄ，Ｊ＝１４．０５Ｈｚ
，１Ｈ），４．０１（ｄ，Ｊ＝１３．０５Ｈｚ，１Ｈ），３．２６（ｄ，Ｊ＝１３．８０
Ｈｚ，１），２．９９〜３．１０（ｍ，１Ｈ），２．６４〜２．７３（ｍ，１Ｈ），１．
９８（ｄｄ，Ｊ＝３．３９，１４．１８Ｈｚ，１Ｈ），１．７４〜１．８７（ｍ，１Ｈ）
。

（（３Ｒ，３’Ｒ）−１’−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（（３−クロロ
−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ−［１，３’−ビピペリ
ジン］−４’−カルボン酸（３−１０）。ＤＭＳＯ（１０Ｌ）中の３−８（４４０ｇ、１
．９ｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、３−８Ａ（６４０ｇ、１．９ｍｏｌ、１．０当量）
およびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（ＳＴＡＢ、４０２．０ｇ、３．８ｍｏｌ
、２当量）およびＥｔ_３Ｎ（１９０ｇ、１．９ｍｏｌ、１．０当量）を逐次添加した。混
合物を５０℃に加熱して３時間撹拌し、ＨＰＬＣにより中間体３−９への完全な変換が示
された。

溶液をＭｅＯＨ（１８２ｇ、５．７ｍｏｌ、３．０当量）で希釈して過剰なＳＴＡＢを
クエンチし、反応物を７０〜８０℃に加熱した。１６時間後に、ＨＰＬＣにより２２％の
生成物３−１０が形成されて６１％の中間体３−９が残留することが示され、キラルＨＰ
ＬＣにより約３％のラクタムエピマーが示された。混合物を７０〜８０℃で更に２４時間
に保持して、３−１０が５０％、３−９が３５％、およびラクタムエピマーが７％となっ
た。更に４０時間撹拌した後、３−１０が８０％形成され、３−９が４％残留し、ラクタ
ムエピマーが１４％まで増加した。混合物を２２℃に冷却し、２Ｎ ＮＨ_４Ｃｌ溶液（５
Ｌ）でクエンチして、スラリー混合物を得た。３０分撹拌した後、混合物を濾過し、湿潤
ケーキを水（３Ｌ）で洗浄して、ＫＦ＜０．１になるまで５５℃で真空乾燥した。粗製物
３−１０を褐色固体として得て（８５０ｇ、９７．７％）、キラルＨＰＬＣにより１２．
５％のラクタムエピマーが示された。この生成物を更に精製せずに直接用いた。

（３Ｒ，３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ
−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボン酸（３−１０−トランス）。１０Ｌ反応
器に、Ｎ_２下でＤＭＦ（４．２５Ｌ、５ｖ／ｗ）中の３−１０（８５０ｇ、１．９ｍｏｌ
、１．０当量）を充填して、透明溶液を得て、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ
１１６ｇ、０．９５ｍｏｌ、０．５当量）および１−エチル−３−（３−ジメチルアミノ
プロピル）カルボジイミド（ＥＤＣＩ、３６．５ｇ、０．１９ｍｏｌ、０．１当量）を添
加した。混合物を１５〜２２℃で約１時間撹拌して、更なるＥＤＣＩ（３６．５ｇ、０．
１９ｍｏｌ、０．１当量）を添加し、更に１時間撹拌した。ＨＰＬＣにより、６９：１ト
ランス／シス混合物が示された。生成物３−１０−トランスは単離せず、１つのポットで
化合物Ｉ−１に変換した。^１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ ｄ_６）：δ１．４７
−１．５５（ｍ，１Ｈ），１．６３〜１．６８（ｍ，１Ｈ），１．８１〜１．８７（ｍ，
１Ｈ），１．９０〜１．９７（ｍ，１Ｈ），２．９３〜３．１９（ｍ，１Ｈ），３．１６
〜３．２３（ｍ，１Ｈ），３．３３〜３．４５（ｍ，２Ｈ）４．０７〜４．３３（ｍ，３
Ｈ），６．８０（ｍ，１Ｈ），６．９４〜６．９８（ｍ，１Ｈ），７．１０〜７．１６（
ｍ，２Ｈ）、７．９１（ｓ，１Ｈ）。

（３Ｒ，３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ
−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド（Ｉ−１）。先の反応混合物に、
Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾル−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロ
ニウムヘキサフルオロホスファート（ＨＡＴＵ、６００ｇ、１．９ｍｏｌ、１．０当量）
、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ、１．０ｋｇ、９．５ｍｏｌ、５．
０当量）および最後にＮＨ_４Ｃｌ（２６０ｇ、５．７ｍｏｌ、３．０当量）を２２℃で充
填した。得られた混合物を１５℃で１時間撹拌し、ＨＰＬＣにより３−１０−トランスの
完全な消費が示され、混合物をブライン（２５Ｌ）に注いで、ＥｔＯＡｃで抽出した（２
Ｌで２回）。ひとまとめにした有機物をブラインで洗浄し（２Ｌで２回）、４５℃未満で
真空濃縮して乾固させ、粗製物Ｉ−１を得て、ＥｔＯＡｃ／石油エーテル／ＭｅＯＨ（１
：１：０から５０：５０：１０へ）でのクロマトグラフィーにより精製して、それぞれ３
１６ｇ、９８．８％化学純度および１０．８％エピマーと、１６０ｇ、８２．３％化学純
度および１７．５％エピマーと、１８０ｇ、６１％純度および１１．３％エピマーとを含
む３つの分画を得た。先の最初の２つの分画をひとまとめにして、プレＨＰＬＣにより更
に精製し、９９％を超える純度の生成物２００ｇ、および１％未満のエピマーを得た。^１
Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ ｄ_６）：δ１．４８〜１．５３（ｍ，１Ｈ），１
．６６〜１．６９（ｍ，１Ｈ），１．７７〜１．７９（ｍ，３Ｈ），２．１１〜２．１６
（ｍ，１Ｈ），２．８０〜２．８８（ｍ，２Ｈ），３．１１（ｓ，１Ｈ），３．４２〜３
．４８（ｍ，１Ｈ），４．０〜４．２５（ｍ，４Ｈ），６．５８（ｓ，３Ｈ），６．８０
〜６．８５（ｄ，Ｊ＝１０．２，２Ｈ），６．９５（ｓ，２Ｈ），７．４０（ｓ，１Ｈ）
，７．７７（ｓ，１Ｈ）。

実施例４
（３Ｒ，３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ
−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミドの別の合成。
実施例２および３に記載された方法に加えて、（３Ｒ，３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６
−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３−（（３−クロロ−５−（トリフル
オロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カ
ルボキサミド（化合物Ｉ−１）を、スキーム６によっても合成した。

（３Ｒ）−３−アミノ−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−カル
ボン酸（４−ｌ−６）。１０Ｌ反応器に、窒素下で化合物４−５（１００ｇ、０．２８７
ｍｏｌ）、ＭｅＯＨ（６Ｌ，６０ｖ／ｗ）および２０％Ｐｄ（ＯＨ）_２／Ｃ１０ｇを充填
した。反応器を排気／水素再充填を３回行い、混合物を水素３Ｍｐａの下で４０時間、撹
拌しながら４０〜５０℃に加温した。ＬＣ／ＭＳにより、出発原料４−５の完全な消費が
示された。混合物を２２℃に冷却して濾過し、濾液を真空濃縮して乾固させ、固体生成物
を得た。この粗生成物を２２℃のＥｔＯＨ（５００ｍＬ）中で２時間スラリー化させて、
濾過して５０℃で真空乾燥させ、生成物４−Ｌ−６を収率８５％で白色固体として得た（
６０ｇ、０．２４５ｍｏｌ）。

（３Ｒ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（（（Ｒ）−４−（（３−ク
ロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−５−エトキシ−５−オキソペン
チル）アミノ）ピペリジン−４−カルボン酸（４−ｌ−８）。ＤＭＳＯ（４５０ｍＬ）中
の４−Ｌ−６（４８．４ｇ、０．１９７ｍｏｌ）の溶液に、Ｅｔ_３Ｎ（２０．２ｇ、０．
１９９ｍｏｌ、１当量）、３−８Ａ（６７．４ｇ、０．１９９ｍｏｌ、１当量）およびト
リアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（ＳＴＡＢ、８４．８ｇ、０．４０ｍｏｌ、２．０
当量）を添加した。混合物を３０分間かけて５０℃に加熱し、その温度で３時間撹拌した
。ＬＣ／ＭＳにより、出発原料４−Ｌ−６のほとんどの消費および４−Ｌ−８の形成が示
された。

ＥｔＯＨ（３５ｍＬ）を添加し、５０℃で３０分間撹拌することにより、反応をクエン
チした。混合物を７５〜８５℃で３日間加熱した。混合物を１８℃に冷却し、激しく撹拌
しながら水（６Ｌ）に緩やかに注いで、スラリーを得た。２時間後、固体を濾過して、水
で洗浄し（３Ｌで３回）、６０〜７０℃で２４時間真空乾燥させて、４−Ｌ−９（１１４
ｇ）を褐色固体として得た。その固体を、次のステップで直接用いた。

（３Ｒ，３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（（３−
クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ−［１，３’−ビ
ピペリジン］−４’−カルボン酸（４−ｌ−９−トランス）。ＤＭＦ（５００ｍＬ）中の
粗製物４−Ｌ−９（１００ｇ）の溶液に、４−ジメチルアミノピリジン（１１ｇ、０．０
９ｍｏｌ、０．５当量）を添加して、２０℃で１０分間撹拌した。１−エチル−３−（３
−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（７．０ｇ、０．０３６ｍｏｌ、０．２当量
）を添加して、反応物を２０℃で３時間撹拌した。ＨＰＬＣにより、５７：４３のシス／
トランス混合物比が示され、更なるＥＤＡＣ（３．５ｇ、０．０１８ｍｏｌ、０．１当量
）を添加した。５時間後に、ＨＰＬＣにより、４−Ｌ−９−トランスへの完全な変換が示
された。混合物を水（２．２５Ｌ）に緩やかに移して、混合物をＥｔＯＡｃで抽出し（５
００ｍＬで２回）、有機層をブライン（５００ｍＬ）および水（５００ｍＬ）で洗浄し、
真空濃縮して乾固させ、粗製物４−Ｌ−９−トランス（１００ｇ）を褐色固体として得た
。粗製物を６０℃のＥｔＯＡｃ（１３５ｍＬ）に溶解し、その後、１時間かけて２０℃に
冷却して、石油エーテル５０ｍＬを添加した。混合物を２時間熟成させた。固体を濾過し
、３：１ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（５０ｍＬ）で洗浄して、５０℃で１６時間真空乾燥
させ、４−Ｌ−９−トランスを得た（２３ｇ、収率２２％、純度９９％）。^１Ｈ ＮＭＲ
（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ６．９４（ｓ，２Ｈ），６．８１（ｓ，１Ｈ），６
．５４〜６．６１（ｍ，１Ｈ），３．９９〜４．０８（ｍ，１Ｈ），３．４２〜３．３８
（ｍ，２Ｈ），２．０７〜２．１６（ｍ，１Ｈ），１．７４〜１．９２（ｍ，３Ｈ），１
．３９（ｓ，９Ｈ）。

（３Ｒ，３’Ｒ，４’Ｓ）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニ
ル）アミノ）−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボン酸塩酸（４−
ｌ−１０トランス）。ＥｔＯＡｃ（７６ｍＬ）中の０．５Ｎ ＨＣｌの溶液に、４−ｌ−
９トランス（２０ｇ、３８ｍｍｏｌ）を添加して、２０℃で１８時間加熱し、スラリーを
得た。固体を濾過して、ＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）で洗浄し、４５℃で１８時間真空乾燥させ
て、４−Ｌ−１０をＨＣｌ塩として得た（１７ｇ、収率９７％）。

（３Ｒ，３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ
−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボン酸（３−１０−トランス）。４０ｍＬ
ｎＢｕＯＨ中の４−ｌ−１０（２．０ｇ、４．３８ｍｏｌ）、６−クロロ−５−フルオロ
−ピリミジン−４−イルアミン（７１１ｍｇ、４．８２ｍｍｏｌ、１．１当量）、ＤＩＰ
ＥＡ（１．５２ｍＬ、８．７７ｍｏｌ、２当量）の溶液を、７２時間の間１３０〜１４０
℃に加熱した。混合物を２２℃に冷却し、真空濃縮して残渣を得て、カラムにより精製し
て、３−１０−トランスを得た（１．１ｇ、４７％）。比較的少量のエピマー（３Ｓ，３
’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３−（（
３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ−［１，３’
−ビピペリジン］−４’−カルボン酸も観察された。中間体３−１０−トランスを、先に
記載された手順により化合物Ｉ−１に変換することができる。

化合物Ｉ−１を、スキーム８によっても合成した。

（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）
−５−オキソピロリジン−２−カルボキシラート４−ｅを、Ｐｈｉｌｌｉｐｓ，Ｄ．Ｐ．
、Ｚｈｕ，Ｘ．−Ｆ．、Ｌａｕ，Ｔ．ｌ．、Ｙａｎｇ，Ｋ．、Ｌｉｕ，Ｈ．Ｔｅｔｒａｈ
ｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ，２００９，５０，７２９３と類似の手順を利用し、（Ｓ）
−メチル５−オキソピロリジン−２−カルボキシラートおよび１−クロロ−４−ヨードベ
ンゼンを、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−オキソピロリジン−２−カルボキシラートおよ
び１−クロロ−３−ヨード−５−（トリフルオロメチル）ベンゼンの代わりに用いて、合
成した。

（２Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル
）−５−ヒドロキシピロリジン−２−カルボキシラート。Ｍｅ−ＴＨＦ（１００ｍＬ）中
の４−ｅ（１１ｇ、３０ｍｍｏｌ）の無水溶液を、窒素雰囲気下で−３５℃に冷却した。
−３５℃の温度を保持しながら、トルエン（４２ｍＬ）中のＤＩＡＢＬ−Ｈ（５．９ｇ、
４２ｍｍｏｌ）の溶液を滴加した。反応をＨＰＬＣによりモニタリングして、完了時に、
０℃未満の反応温度を保持しながら１Ｎロッシェル塩（１００ｍＬ）を添加した。有機相
を分離して、１Ｎロッシェル塩で洗浄し（５０ｍＬで３回）して分離し、Ｅｔ_３Ｎ（４ｍ
Ｌ）で希釈し、乾燥させて（Ｎａ_２ＳＯ_４）真空濃縮し、４−ｆを油状物として得た（８
．３ｇ）。

（３Ｒ）−１−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３−（（（Ｒ）
−５−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−４−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェ
ニル）アミノ）−５−オキソペンチル）アミノ）ピペリジン−４−カルボン酸。ＤＭＦ（
７００ｍＬ）中の４−ｆ（３７．４ｇ、０．１４６ｍｍｏｌ）の溶液を３−８（４０．２
ｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、Ｅｔ_３Ｎ（１０．１ｇ、０．１ｍｍｏｌ）、ＳＴＡＢ（４２．
４ｇ、０．２ｍｍｏｌ）で処理して、混合物を５時間の間５５℃に加熱した。反応物を水
（２．５Ｌ）で希釈して、ＥｔＯＡｃで抽出し（５００ｍＬで３回）、有機相をひとまと
めにしてブラインで洗浄し、分離し乾燥させて（Ｎａ_２ＳＯ_４）真空濃縮し、４−ａ（４
０．２ｇ）を固体として得て更に精製せずに用いた。

（３Ｒ）−１−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３−（（（Ｒ）
−４−カルボキシ−４−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ
）ブチル）アミノ）ピペリジン−４−カルボン酸。５Ｎ ＨＣｌ（２５０ｍＬ）の溶液に
、ｔ−ブチルエステル４−ａを添加して、加水分解をＨＰＬＣによりモニタリングしなが
ら、懸濁液を５時間の間５５℃に加熱した。生成物が完全に形成されたら、水を真空除去
して固体４−ｂを得て、真空乾燥させて任意の更なる精製を行わずに用いた。

（３Ｒ，３’Ｒ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３−
（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ−［１，
３’−ビピペリジン］−４’−カルボン酸。ＤＭＦ（５００ｍＬ）中の酸４−ｂ（５５ｇ
、０．１ｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＥＡ（６４．５ｇ、０．５ｍｏｌ）、ＣＤＩ（３２．５
ｇ、０．２ｍｏｌ）を０℃で添加した。溶液を０℃で１．５時間撹拌して水（３Ｌ）で希
釈し、ＨＣｌでｐＨ３に調整して、ＥｔＯＡｃで抽出した（２Ｌで３回）。有機相をひと
まとめにして、乾燥させて（Ｎａ_２ＳＯ_４）真空濃縮し、４−ｃを得た（４８ｇ）。

化合物Ｉ−１までの残りのステップは、先に記載された手順により完了される。

実施例５
トランス−ｔｅｒｔ−ブチル３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル
）アミノ）−４’−（メチルカルバモイル）−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］
−１’−カルボキシラートの合成。

トランス−ｔｅｒｔ−ブチル３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニ
ル）アミノ）−４’−（メチルカルバモイル）−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン
］−１’−カルボキシラートの合成。（３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フ
ルオロピリミジン−４−イル）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェ
ニル）アミノ）−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド１４
の合成に関して記載されたものと類似の手順を用いて粗材料を得て、プレＨＰＬＣ（移動
相としてＭｅＯＨ／０．０５％ＮＨ_３．Ｈ_２Ｏを含むＨ_２Ｏ）により精製して、表題化合
物を黄色固体として得た（３６０ｍｇ、収率：６７％）。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）^＋：５
４４．１８。ＨＰＬＣ：（２１４ｎｍ：１００．０％，２５４ｎｍ：１００．０％）。^１
Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）（異性体混合物）δ：７．６９〜７．６８（ｍ
，１Ｈ），６．７８（ｓ，１Ｈ），６．７５（ｓ，１Ｈ），６．７１（ｓ，１Ｈ），４．
３９〜４．３６（ｍ，２Ｈ），４．０９〜４．０３（ｍ，１Ｈ），３．５３〜３．３１（
ｍ，３Ｈ），３．２０〜３．１０（ｍ，１Ｈ），２．９９〜２．９２（ｍ，１Ｈ），２．
５５（ｓ，３Ｈ），２．２８〜２．１９（ｍ，１Ｈ），１．９６〜１．７７（ｍ，５Ｈ）
，１．６８〜１．５８（ｍ，１Ｈ）。

（３Ｒ，３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−Ｎ−メチル
−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド。４種のジアステレ
オマーの混合物をＳＦＣ（ＡＤ−Ｈ（２×１５ｃｍ）、５０％１：１ ＩＰＡ：メタノー
ル（０．１％ＤＥＡ）／ＣＯ_２、１００ｂａｒ、６０ｍｌ／分）により２つのピークに分
離した。ピーク２をＳＦＣ分離（ＡＤ−Ｈ（２×１５ｃｍ）、３０％ｉＰｒＯＨ（０．１
５％ＤＥＡ）／ＣＯ_２、１００ｂａｒ、６０ｍｌ／分）により更に精製して、表題化合物
を得た。ＬＣＭＳ（Ａｇｉｌｅｎｔ４６０，２５４ｎｍ）：ＥＳ（＋）ＭＳ ｍ／ｅ＝５
４４．１（Ｍ＋１）＠１．２４ｍｉｎ。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）
δ：７．７２〜７．８５（ｍ，２Ｈ），６．９２（ｓ，２Ｈ），６．８１（ｓ，１Ｈ），
６．４３〜６．６４（ｍ，３Ｈ），４．３４（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），４．２３（ｄ，Ｊ＝
１３．０５Ｈｚ，１Ｈ），３．９３〜４．１９（ｍ，２Ｈ），３．３７〜３．４９（ｍ，
１Ｈ），３．２２〜３．３０（ｍ，１Ｈ），３．１３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），２．８４（
ｔ，Ｊ＝１２．０５Ｈｚ，２Ｈ），２．５７（ｄ，Ｊ＝４．５２Ｈｚ，３Ｈ），２．１３
（ｑｄ，Ｊ＝６．０５，１２．４５Ｈｚ，１Ｈ），１．６０〜１．８９（ｍ，４Ｈ），１
．４０〜１．５８（ｍ，１Ｈ）。

（３Ｓ，３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−Ｎ−メチル
−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド。４種のジアステレ
オマーの混合物をＳＦＣ（ＡＤ−Ｈ（２×１５ｃｍ）、５０％１：１ ＩＰＡ：メタノー
ル（０．１％ＤＥＡ）／ＣＯ_２、１００ｂａｒ、６０ｍｌ／分）により２つのピークに分
離した。ピーク２をＳＦＣ分離（ＡＤ−Ｈ（２×１５ｃｍ）、３０％ｉＰｒＯＨ（０．１
５％ＤＥＡ）／ＣＯ_２、１００ｂａｒ、６０ｍｌ／分）により更に精製して、表題化合物
を得た。ＬＣＭＳ（Ａｇｉｌｅｎｔ４６０，２５４ｎｍ）：ＥＳ（＋）ＭＳ ｍ／ｅ＝５
４４．１（Ｍ＋１）＠１．２４ｍｉｎ。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）
δ：７．８３（ｑ，Ｊ＝４．６０Ｈｚ，１Ｈ），７．７７（ｄ，Ｊ＝１．７６ Ｈｚ，１
Ｈ），６．９７（ｄ，Ｊ＝６．７８Ｈｚ，２Ｈ），６．８１（ｓ，１Ｈ），６．５８（ｓ
，２Ｈ），６．５３（ｄ，Ｊ＝７．７８Ｈｚ，１Ｈ），４．２３（ｄ，Ｊ＝１３．０５Ｈ
ｚ，２Ｈ），３．９０〜４．１９（ｍ，２Ｈ），３．１４（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），２．９
２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），２．７４〜２．９０（ｍ，１Ｈ），２．５５（ｄ，Ｊ＝４．５
２Ｈｚ，３Ｈ），２．００〜２．１８（ｍ，１Ｈ），１．７４〜１．８９（ｍ，３Ｈ），
１．５６〜１．７４（ｍ，１Ｈ），１．３４〜１．５０（ｍ，１Ｈ）。

（３Ｓ，３’Ｓ，４’Ｒ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−Ｎ−メチル
−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド。４種のジアステレ
オマーの混合物をＳＦＣ（ＡＤ−Ｈ（２×１５ｃｍ）、５０％１：１ ＩＰＡ：メタノー
ル（０．１％ＤＥＡ）／ＣＯ_２、１００ｂａｒ、６０ｍｌ／分）により２つのピークに分
離した。ピーク１をＳＦＣ（ＡＤ−Ｈ（２×１５ｃｍ）、３０％ＭｅＯＨ（０．１５％Ｄ
ＥＡ）／ＣＯ_２、１００ｂａｒ、６０ｍｌ／分）により更に精製して、表題化合物を得た
。ＬＣＭＳ（Ａｇｉｌｅｎｔ４６０，２５４ｎｍ）：ＥＳ（＋）ＭＳ ｍ／ｅ＝５４４．
１（Ｍ＋１）＠１．２３ｍｉｎ。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：７
．７２〜７．８５（ｍ，２Ｈ），６．９２（ｓ，２Ｈ），６．８１（ｓ，１Ｈ），６．５
７（ｓ，２Ｈ），６．５４（ｄ，Ｊ＝７．５３Ｈｚ，１Ｈ），４．２３（ｄ，Ｊ＝１３．
３０Ｈｚ，１Ｈ），４．１５（ｄｄ，Ｊ＝３．２６，１２．３０Ｈｚ，１Ｈ），４．０８
（ｔｄ，Ｊ＝７．０６，１０．４８Ｈｚ，１Ｈ），３．３６〜３．４７（ｍ，１Ｈ），３
．２３〜３．３０（ｍ，１Ｈ），３．１３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），２．８４（ｔ，Ｊ＝１
１．８０Ｈｚ，２Ｈ），２．５７（ｄ，Ｊ＝４．５２Ｈｚ，３Ｈ），２．１３（ｑｄ，Ｊ
＝６．１７，１２．６１Ｈｚ，１Ｈ），１．６２〜１．９１（ｍ，４Ｈ），１．４２〜１
．５７（ｍ，１Ｈ）。

トランス−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３−（（３−
クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−Ｎ−メチル−２−オキソ−［
１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド。４種のジアステレオマーの混合物を
ＳＦＣ（ＡＤ−Ｈ（２×１５ｃｍ）、５０％１：１ ＩＰＡ：メタノール（０．１％ＤＥ
Ａ）／ＣＯ_２、１００ｂａｒ、６０ｍｌ／分）により２つのピークに分離した。ピーク１
をＳＦＣ（ＡＤ−Ｈ（２×１５ｃｍ）、３０％ＭｅＯＨ（０．１５％ＤＥＡ）／ＣＯ_２、
１００ｂａｒ、６０ｍｌ／分）により更に精製して、表題化合物を得た。ＬＣＭＳ（Ａｇ
ｉｌｅｎｔ４６０，２５４ｎｍ）：ＥＳ（＋）ＭＳ ｍ／ｅ＝５４４．１（Ｍ＋１）＠１
．２３ｍｉｎ。ＬＣＭＳ（Ａｇｉｌｅｎｔ４６０，２５４ｎｍ）：ＥＳ（＋）ＭＳ ｍ／
ｅ＝５４４．１（Ｍ＋１）＠１．２４ｍｉｎ。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−
ｄ６）δ：７．８０〜７．８９（ｍ，１Ｈ），７．７２〜７．８０（ｍ，１Ｈ），６．９
７（ｄ，Ｊ＝６．５３Ｈｚ，２Ｈ），６．８１（ｓ，１Ｈ），６．５８（ｓ，２Ｈ），６
．５３（ｄ，Ｊ＝７．７８Ｈｚ，１Ｈ），４．２３（ｄ，Ｊ＝１３．０５Ｈｚ，２Ｈ），
３．８９〜４．１９（ｍ，２Ｈ），３．１３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），２．７４〜３．０２
（ｍ，Ｊ＝１２．４２，１２．４２Ｈｚ，２Ｈ），２．５５（ｄ，Ｊ＝４．５２Ｈｚ，３
Ｈ），２．０８（ｑｄ，Ｊ＝５．９７，１２．２０Ｈｚ，１Ｈ），１．８１（ｔｄ，Ｊ＝
６．２４，１２．３６Ｈｚ，３Ｈ），１．５６〜１．７４（ｍ，１Ｈ），１．３３〜１．
５１（ｍ，１Ｈ）。

トランス−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３−（（３−
クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−オキ
ソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミドの合成。（３’Ｒ，４’Ｓ）−
１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３−（（３−クロロ−５−
（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］
−４’−カルボキサミド１４の合成に関して記載されたものと類似の手順を用いて粗材料
を得て、プレＨＰＬＣ（移動相としてＭｅＯＨ／０．０５％ＴＦＡを含むＨ_２Ｏ）により
精製して、表題化合物を黄色固体として得た（４５ｍｇ、収率：９０％）。ＥＳＩ−ＭＳ
（Ｍ＋Ｈ）^＋：５５８．０。ＨＰＬＣ：（２１４ｎｍ：９８．２％，２５４ｎｍ：１００
．０％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：７．７７（ｓ，１Ｈ），６．
９２〜６．８９（ｍ，１Ｈ），６．８３〜６．８１（ｍ，１Ｈ），６．７９（ｓ，１Ｈ）
，４．３８〜４．３８（ｍ，２Ｈ），４．０５〜４．００（ｍ，２Ｈ），３．５５〜３．
５３（ｍ，１Ｈ），３．４５〜３．４０（ｍ，２Ｈ），３．１５〜２．８９（ｍ，７Ｈ）
，２．２１〜２．１６（ｍ，１Ｈ），１．９０〜１．８６（ｍ，３Ｈ），１．６６〜１．
５６（ｍ，２Ｈ）。

（３Ｒ，３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジ
メチル−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド。表題化合物
を、２ステップキラルＳＦＣ分離を利用したトランス−１’−（６−アミノ−５−フルオ
ロピリミジン−４−イル）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル
）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カル
ボキサミドのキラル分離により得た。最初に、ＣｈｉｒａｌＰａｋ ＩＣ（２×１５ｃｍ
，３０％メタノール０．１ＤＥＡ）カラムを用いて、混合物を２種のジアステレオマー（
（３’Ｓ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３−
（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−
２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミドおよび（３’Ｓ，４’
Ｒ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３−（（３−クロロ
−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−オキソ−［
１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド）の混合物を含む２つのピークに分離
し、その後、得られた一組の異性体を含む混合物を更に、ＣｈｉｒａｌＰａｋ ＩＡ（２
×１５ｃｍ，３０％メタノール＋０．１％ＤＥＡ１００ｂａｒ）カラムを用いて単一鏡像
異性体に分離した。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）^＋：５５８．０。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨ
ｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：７．９２（ｄ，Ｊ＝１．７６Ｈｚ，１Ｈ），６．９４（ｓ，１Ｈ）
，６．７２（ｄ，Ｊ＝７．７８Ｈｚ，２Ｈ），５．２１（ｄ，Ｊ＝３．５１Ｈｚ，１Ｈ）
，４．７０（ｓ，２Ｈ），４．４５（ｄｄ，Ｊ＝２．７６，１２．８０Ｈｚ，２Ｈ），４
．１７〜４．３２（ｍ，１Ｈ），３．６４〜３．８０（ｍ，２Ｈ），３．４４〜３．５８
（ｓ，３Ｈ），３．０９（ｓ，３Ｈ），３．００〜３．０９（ｍ，１Ｈ），２．９５（ｓ
，３Ｈ），２．４０（ｄｄ，Ｊ＝５．５２，１３．３０Ｈｚ，１Ｈ），１．６３〜１．９
９（ｍ，３Ｈ），１．２６〜１．４３（ｍ，１Ｈ）。

（３Ｓ，３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジ
メチル−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド。表題化合物
を、２ステップキラルＳＦＣ分離を利用したトランス−１’−（６−アミノ−５−フルオ
ロピリミジン−４−イル）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル
）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カル
ボキサミドのキラル分離により得た。最初に、ＣｈｉｒａｌＰａｋ ＩＣ（２×１５ｃｍ
，３０％メタノール＋０．１ＤＥＡ）カラムを用いて、混合物を２種のジアステレオマー
（（３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３
−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル
−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミドおよび（３’Ｓ，４
’Ｒ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３−（（３−クロ
ロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−オキソ−
［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド）の混合物を含む２つのピークに分
離し、その後、得られた一組の異性体を含む混合物を更に、ＣｈｉｒａｌＰａｋ ＩＡ（
２×１５ｃｍ，３０％メタノール＋０．１％ＤＥＡ １００ｂａｒ）カラムを用いて単一
鏡像異性体に分離した。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）^＋：５５８．０。^１Ｈ ＮＭＲ（４００
ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：７．９３（ｄ，Ｊ＝１．２６Ｈｚ，１Ｈ），６．９３（ｓ，１
Ｈ），６．６９（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），５．０６（ｄ，Ｊ＝４．２７Ｈｚ，１Ｈ），４．
７１（ｓ，１Ｈ），４．４５（ｄ，Ｊ＝１２．５５Ｈｚ，２Ｈ），４．１６〜４．２６（
ｍ，１Ｈ），３．６６〜３．８１（ｍ，２Ｈ），３．５４〜３．６４（ｍ，１Ｈ），３．
４０〜３．５４（ｍ，２Ｈ），３．０１〜３．１０（ｍ，４Ｈ），２．９５（ｓ，３Ｈ）
，２．３７（ｄｄ，Ｊ＝５．２７，１３．０５Ｈｚ，１Ｈ），１．９１〜２．０２（ｍ，
２Ｈ），１．４８〜１．７５（ｍ，２Ｈ）。

（３Ｓ，３’Ｓ，４’Ｒ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジ
メチル−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド。表題化合物
を、２ステップキラルＳＦＣ分離を利用したトランス−１’−（６−アミノ−５−フルオ
ロピリミジン−４−イル）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル
）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カル
ボキサミドのキラル分離により得た。最初に、ＣｈｉｒａｌＰａｋ ＩＣ（２×１５ｃｍ
，３０％メタノール＋０．１ＤＥＡ）カラムを用いて、混合物を２種のジアステレオマー
（（３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３
−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル
−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミドおよび（３’Ｓ，４
’Ｒ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３−（（３−クロ
ロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−オキソ−
［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド）の混合物を含む２つのピークに分
離し、その後、得られた一組の異性体を含む混合物を更に、ＣｈｉｒａｌＰａｋ ＩＡ（
２×１５ｃｍ，３０％メタノール＋０．１％ＤＥＡ １００ｂａｒ）カラムを用いて単一
鏡像異性体に分離した。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）^＋：５５８．０。^１Ｈ ＮＭＲ（４００
ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：７．９２（ｄ，Ｊ＝１．７６Ｈｚ，１Ｈ），６．９４（ｓ，１
Ｈ），６．７２（ｄ，Ｊ ＝７．７８Ｈｚ，２Ｈ），５．２１（ｄ，Ｊ＝３．５１Ｈｚ，
１Ｈ），４．７０（ｓ ２Ｈ），４．４５（ｄｄ，Ｊ＝２．７６，１２．８０Ｈｚ，２Ｈ
），４．１９〜４．３０（ｍ，１Ｈ），３．６６〜３．７９（ｍ，２Ｈ），３．４７〜３
．５６（ｍ，３Ｈ），３．０９（ｓ，３Ｈ），２．９７〜３．０７（ｍ，１Ｈ），２．９
５（ｓ，３Ｈ），２．４０（ｄｄ，Ｊ＝５．５２，１３．３０Ｈｚ，１Ｈ），１．８１〜
１．９７（ｍ，３Ｈ），１．７３（ｄｄ，Ｊ＝３．７６，１２．８０Ｈｚ，１Ｈ）。

（３Ｒ，３’Ｓ，４’Ｒ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジ
メチル−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド。表題化合物
を、２ステップキラルＳＦＣ分離を利用したトランス−１’−（６−アミノ−５−フルオ
ロピリミジン−４−イル）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル
）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カル
ボキサミドのキラル分離により得た。最初に、ＣｈｉｒａｌＰａｋ ＩＣ（２×１５ｃｍ
，３０％メタノール＋０．１ＤＥＡ）カラムを用いて、混合物を２種のジアステレオマー
（（３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３
−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル
−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミドおよび（３’Ｓ，４
’Ｒ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３−（（３−クロ
ロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−オキソ−
［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド）の混合物を含む２つのピークに分
離し、その後、一組の異性体を含む各混合物を更に、ＣｈｉｒａｌＰａｋ ＩＡ（２×１
５ｃｍ，３０％メタノール＋０．１％ＤＥＡ １００ｂａｒ）カラムを用いて単一鏡像異
性体に分離した。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）^＋：５５８．０。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ
，（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：７．９３（ｄ，Ｊ＝１．２６Ｈｚ，１Ｈ），６．９
３（ｓ，１Ｈ），６．６９（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），５．０６（ｄ，Ｊ＝４．２７Ｈｚ，１
Ｈ），４．７１（ｓ，１Ｈ），４．４５（ｄ，Ｊ＝１２．５５Ｈｚ，２Ｈ），４．１６〜
４．２６（ｍ，１Ｈ），３．６６〜３．８１（ｍ，２Ｈ），３．５４〜３．６４（ｍ，１
Ｈ），３．４０〜３．５４（ｍ，２Ｈ），３．０１〜３．１０（ｍ，４Ｈ），２．９５（
ｓ，３Ｈ），２．３７（ｄｄ，Ｊ＝５．２７，１３．０５Ｈｚ，１Ｈ），１．９１〜２．
０２（ｍ，２Ｈ），１．４８〜１．７５（ｍ，２Ｈ）。

トランス−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３−（（３−
クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−４’−（４−メチルピペラジ
ン−１−カルボニル）−［１，３’−ビピペリジン］−２−オンの合成。トランス−１’
−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３−（（３−クロロ−５−（ト
リフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４
’−カルボキサミド１４の合成に関して記載されたものと類似の手順を用いて２３を得て
、逆相ＨＰＬＣ（移動相としてＭｅＯＨ／０．０５％ＮＨ_３．Ｈ_２Ｏを含むＨ_２Ｏ）によ
り精製して、表題化合物を黄色固体として得た（１００ｍｇ、収率：７０％）。ＥＳＩ−
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）^＋：６１３．２４。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：７．
９４（ｓ，１Ｈ），６．９４（ｓ，１Ｈ），６．７３〜６．６７（ｍ，２Ｈ），５．２５
〜５．０３（ｍ，１Ｈ），４．７１（ｓ，２Ｈ），４．４９〜４．４０（ｍ，２Ｈ），４
．３５〜４．１６（ｍ，１Ｈ），３．８２〜３．６４（ｍ，３Ｈ），３．６２〜３．４１
（ｍ，６Ｈ），３．０８〜２．９７（ｍ，１Ｈ），２．５２〜２．３４（ｍ，３Ｈ），２
．３０〜２．２５（ｍ，２Ｈ），２．２０（ｓ，３Ｈ），１．８５〜１．６４（ｍ，２Ｈ
），１．７２〜１．６４（ｍ，２Ｈ），１．４９〜１．３１（ｍ，１Ｈ）。

（３Ｒ，３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−４’−（４
−メチルピペラジン−１−カルボニル）−［１，３’−ビピペリジン］−２−オン。表題
化合物を、２ステップキラルＳＦＣ分離を利用したトランス−１’−（６−アミノ−５−
フルオロピリミジン−４−イル）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フ
ェニル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’
−カルボキサミド２３のキラル分離により得た。最初に、ＣｈｉｒａｌＰａｋ ＩＣ（２
×１５ｃｍ，３０％メタノール＋０．１ＤＥＡ）カラムを用いて、混合物を２種のジアス
テレオマー（（３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−
イル）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−Ｎ，Ｎ
−ジメチル−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミドおよび（
３’Ｓ，４’Ｒ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３−（
（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２
−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド）との混合物を含む２つ
のピークに分離し、その後、得られた一組の異性体を含む混合物を更に、ＣｈｉｒａｌＰ
ａｋ ＩＡ（２×１５ｃｍ，３０％メタノール＋０．１％ＤＥＡ １００ｂａｒ）カラム
を用いて単一鏡像異性体に分離した。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）^＋：６１３．２。^１Ｈ Ｎ
ＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：７．９５（ｓ，１Ｈ），６．８３〜６．９７（ｍ
，３Ｈ），４．５０〜４．６８（ｍ，２Ｈ），４．２８〜４．４０（ｍ，１Ｈ），３．６
６〜３．９１（ｍ，８Ｈ），３．３０〜３．５２（ｍ，４Ｈ），３．１４（ｔ，Ｊ＝１２
．４２Ｈｚ，２Ｈ），２．７３（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），２．２７（ｄｄ，Ｊ＝５．６５，
１２．９３Ｈｚ，１Ｈ），１．８３〜２．０５（ｍ，２Ｈ），１．５４〜１．７９（ｍ，
２Ｈ）。

（３Ｓ，３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−４’−（４
−メチルピペラジン−１−カルボニル）−［１，３’−ビピペリジン］−２−オン。表題
化合物を、２ステップキラルＳＦＣ分離を利用したトランス−１’−（６−アミノ−５−
フルオロピリミジン−４−イル）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フ
ェニル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’
−カルボキサミド２３のキラル分離により得た。最初に、ＣｈｉｒａｌＰａｋ ＩＣ（２
×１５ｃｍ，３０％メタノール＋０．１ＤＥＡ）カラムを用いて、混合物を２種のジアス
テレオマー（（３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−
イル）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−Ｎ，Ｎ
−ジメチル−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミドおよび（
３’Ｓ，４’Ｒ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３−（
（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２
−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド）の混合物を含む２つの
ピークに分離し、その後、得られた一組の異性体を含む混合物を更に、ＣｈｉｒａｌＰａ
ｋ ＩＡ（２×１５ｃｍ，３０％メタノール＋０．１％ＤＥＡ １００ｂａｒ）カラムを
用いて単一鏡像異性体に分離した。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）^＋：６１３．２。^１Ｈ ＮＭ
Ｒ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：７．９１〜７．９９（ｍ，１Ｈ），６．８４〜６．
９７（ｍ，３Ｈ），４．５７（ｄｄ，Ｊ＝１４．１８，１９．７０Ｈｚ，２Ｈ），４．３
４（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），３．４２〜３．５３（ｍ，１Ｈ），３．３７（ｄ，Ｊ＝１．５
１Ｈｚ，３Ｈ），３．０５〜３．１９（ｍ，１Ｈ），２．８６（ｔ，Ｊ＝７．５３Ｈｚ，
１Ｈ），２．６８〜２．７８（ｍ，２Ｈ），２．２６（ｄｄ，Ｊ＝５．６５，１２．９３
Ｈｚ，１Ｈ），１．８２〜２．０３（ｍ，３Ｈ），１．５５〜１．７９（ｍ，２Ｈ）。

（３Ｓ，３’Ｓ，４’Ｒ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−４’−（４
−メチルピペラジン−１−カルボニル）−［１，３’−ビピペリジン］−２−オン。表題
化合物を、２ステップキラルＳＦＣ分離を利用したトランス−１’−（６−アミノ−５−
フルオロピリミジン−４−イル）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フ
ェニル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’
−カルボキサミド２３のキラル分離により得た。最初に、ＣｈｉｒａｌＰａｋＩＣ（２×
１５ｃｍ，３０％メタノール＋０．１ＤＥＡ）カラムを用いて、混合物を２種のジアステ
レオマー（（３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イ
ル）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−
ジメチル−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミドおよび（３
’Ｓ，４’Ｒ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３−（（
３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−
オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド）の混合物を含む２つのピ
ークに分離し、その後、得られた一組の異性体を含む混合物を更に、ＣｈｉｒａｌＰａｋ
ＩＡ（２×１５ｃｍ，３０％メタノール＋０．１％ＤＥＡ １００ｂａｒ）カラムを用
いて単一鏡像異性体に分離した。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）^＋：６１３．２。^１Ｈ ＮＭＲ
（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：７．９４（ｓ，１Ｈ），６．８７〜６．９３（ｍ，３
Ｈ），４．５７（ｄｄ，Ｊ＝１４．１８，１９．７０Ｈｚ，１Ｈ），４．３４（ｂｒ．ｓ
．，１Ｈ），３．４３〜３．５１（ｍ，１Ｈ），３．３６〜３．３８（ｍ，２Ｈ），３．
１３（ｔ，Ｊ＝１２．３０Ｈｚ，１Ｈ），２．８６（ｔ，Ｊ＝７．５３Ｈｚ，１Ｈ），２
．７３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），２．２６（ｄｄ，Ｊ＝５．６５，１２．９３Ｈｚ，１Ｈ）
，１．９６〜２．０３（ｍ，１Ｈ），１．８３〜１．９４（ｍ，１Ｈ），１．５１〜１．
７５（ｍ，１Ｈ）。

（３Ｒ，３’Ｓ，４’Ｒ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−４’−（４
−メチルピペラジン−１−カルボニル）−［１，３’−ビピペリジン］−２−オン。表題
化合物を、２ステップキラルＳＦＣ分離を利用したトランス−１’−（６−アミノ−５−
フルオロピリミジン−４−イル）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フ
ェニル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’
−カルボキサミド２３のキラル分離により得た。最初に、ＣｈｉｒａｌＰａｋ ＩＣ（２
×１５ｃｍ，３０％メタノール＋０．１ＤＥＡ）カラムを用いて、混合物を２種のジアス
テレオマー（（３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−
イル）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−Ｎ，Ｎ
−ジメチル−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミドおよび（
３’Ｓ，４’Ｒ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３−（
（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２
−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド）の混合物を含む２つの
ピークに分離し、その後、一組の異性体を含む各混合物を更に、ＣｈｉｒａｌＰａｋ Ｉ
Ａ（２×１５ｃｍ，３０％メタノール＋０．１％ＤＥＡ １００ｂａｒ）カラムを用いて
単一鏡像異性体に分離した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：７．９６（
ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），６．９０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），６．７６（ｄ，Ｊ＝１０．０４Ｈ
ｚ，２Ｈ），４．６０（ｔ，Ｊ＝１４．０６Ｈｚ，２Ｈ），４．１９〜４．３２（ｍ，１
Ｈ），３．６７〜３．７８（ｍ，１Ｈ），３．４３〜３．５４（ｍ，３Ｈ），３．３５〜
３．３８（ｍ，３Ｈ），３．１６（ｔ，Ｊ＝１２．４２Ｈｚ，１Ｈ），２．８６（ｔ，Ｊ
＝７．４０Ｈｚ，２Ｈ），２．７９（ｓ，３Ｈ），２．３２（ｄｄ，Ｊ＝５．０２，１２
．８０Ｈｚ，１Ｈ），１．８９〜２．０７（ｍ，４Ｈ），１．６２〜１．７６（ｍ，５Ｈ
）。

１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３−（（３−フルオロ−
５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジ
ン］−４’−カルボキサミドの合成。（３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フ
ルオロピリミジン−４−イル）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェ
ニル）アミノ）−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド１４
の合成に関して記載されたものと類似の手順を用いて粗材料を得て、プレＨＰＬＣ（移動
相としてＭｅＯＨ／０．０５％ＮＨ_３．Ｈ_２Ｏを含むＨ_２Ｏ）により精製して、表題化合
物を黄色固体として得た（１７５ｍｇ、収率：６９％）。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）^＋：５
１４．１９。ＨＰＬＣ：（２１４ｎｍ：９６．１３％，２５４ｎｍ：９６．５３％）。^１
Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：７．７９〜７．７８（ｍ，１Ｈ），６．７
６（ｓ，１Ｈ），６．６３〜６．５４（ｍ，２Ｈ），４．４１〜４．３６（ｍ，２Ｈ），
４．０８〜４．０６（ｍ，１Ｈ），３．５５〜３．４１（ｍ，３Ｈ），３．２８〜３．２
５（ｍ，１Ｈ），２．９９〜２．９３（ｍ，１Ｈ），２．２８〜２．２１（ｍ，１Ｈ），
１．９８〜１．７８（ｍ，６Ｈ）。

（３Ｒ，３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−フルオロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキ
ソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド。４種のジアステレオマーの混
合物を、ＳＦＣ（ＩＡ（３×１５ｃｍ）、３０％ＥｔＯＨ（０．１％ＤＥＡ）／ＣＯ_２、
１００ｂａｒ、７０ｍｌ／分）により３つのピークに分離し、ピーク３が表題化合物に対
応した。ＬＣＭＳ（Ａｇｉｌｅｎｔ４６０，２５４ｎｍ）：ＥＳ（＋）ＭＳ ｍ／ｅ＝５
１４．０（Ｍ＋１）＠１．０９ｍｉｎ。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：
７．９１（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），６．６６（ｄ，Ｊ＝８．５３Ｈｚ，１Ｈ），６．６３（
ｓ，１Ｈ），６．４６（ｄ，Ｊ＝１０．７９Ｈｚ，１Ｈ），６．１２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ
），５．４７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），５．１６（ｄ，Ｊ＝３．５１Ｈｚ，１Ｈ），４．９
１（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），４．３５〜４．５４（ｍ，２Ｈ），３．８２（ｔｄ，Ｊ＝５．
１１，１０．６０Ｈｚ，２Ｈ），３．５１〜３．６０（ｍ，１Ｈ），３．３４〜３．４８
（ｍ，３Ｈ），２．９６（ｔ，Ｊ＝１２．３０Ｈｚ，１Ｈ），２．３５〜２．４７（ｍ，
１Ｈ），１．９１〜２．０６（ｍ，３Ｈ），１．８４（ｄｑ，Ｊ＝３．８９，１２．７６
Ｈｚ，１Ｈ），１．４８〜１．６２（ｍ，１Ｈ）。

（３Ｓ，３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−フルオロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキ
ソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド。４種のジアステレオマーの混
合物を、ＳＦＣ（ＩＡ（３×１５ｃｍ）、３０％ＥｔＯＨ（０．１％ＤＥＡ）／ＣＯ_２、
１００ｂａｒ、７０ｍｌ／分）により３つのピークに分離した。３つのピークのうちピー
ク２が、所望の化合物に対応した。ＬＣＭＳ（Ａｇｉｌｅｎｔ４６０，２５４ｎｍ）：Ｅ
Ｓ（＋）ＭＳ ｍ／ｅ＝５１４．０（Ｍ＋１）＠１．１０ｍｉｎ。^１Ｈ ＮＭＲ（４００
ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ：７．７７（ｄ，Ｊ＝１．７６Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｓ
，１Ｈ），６．８５（ｓ，１Ｈ），６．８１（ｓ，１Ｈ），６．７４（ｄ，Ｊ＝１２．３
０Ｈｚ，１Ｈ），６．４７〜６．６６（ｍ，４Ｈ），４．２３（ｄ，Ｊ＝１２．８０Ｈｚ
，２Ｈ），３．９０〜４．１８（ｍ，２Ｈ），３．３４〜３．４６（ｍ，２Ｈ），３．１
２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），２．９４（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），２．８２（ｔ，Ｊ＝１２．４
２Ｈｚ，１Ｈ），２．１０（ｑｄ，Ｊ＝５．７５，１２．１１Ｈｚ，１Ｈ），１．７４〜
１．９２（ｍ，３Ｈ），１．５６〜１．７２（ｍ，１Ｈ），１．３７〜１．５２（ｍ，１
Ｈ）。

（３Ｒ，３’Ｓ，４’Ｒ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−フルオロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキ
ソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド。４種のジアステレオマーの混
合物を、ＳＦＣ（ＩＡ（３×１５ｃｍ）、３０％ＥｔＯＨ（０．１％ＤＥＡ）／ＣＯ_２、
１００ｂａｒ、７０ｍｌ／分）により３つのピークに分離した。３つのピークのうちピー
ク１をＳＦＣ（ＩＡ（３×１５ｃｍ）、３０％ｉＰｒＯＨ（０．１％ＤＥＡ）／ＣＯ_２、
１００ｂａｒ、７０ｍｌ／分）で更に精製して、表題化合物を得た。ＬＣＭＳ（Ａｇｉｌ
ｅｎｔ４６０，２５４ｎｍ）：ＥＳ（＋）ＭＳ ｍ／ｅ＝５１４．０（Ｍ＋１）＠１．１
０ｍｉｎ。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ：７．７７（ｄ，１．５Ｈ
ｚ，１Ｈ），７．３９（ｓ．，１Ｈ），６．８５（ｓ，１Ｈ），６．８１（ｓ．，１Ｈ）
，６．７４（ｄ，Ｊ＝１２．３０Ｈｚ，１Ｈ），６．４７〜６．６６（ｍ，４Ｈ），４．
１６〜４．４６（ｍ，２Ｈ），３．９５〜４．１６（ｍ，２Ｈ），３．３４〜３．４８（
ｍ，２Ｈ），３．１２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），２．８７〜３．０１（ｍ，２Ｈ），２．８
２（ｔ，Ｊ＝１２．３０Ｈｚ，１Ｈ），２．１０（ｑｄ，Ｊ＝５．７５，１２．１１Ｈｚ
，１Ｈ），１．７４〜１．９２（ｍ，３Ｈ），１．５４〜１．７４（ｍ，１Ｈ），１．３
５〜１．５２（ｍ，１Ｈ）。

（３Ｓ，３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−フルオロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキ
ソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド。４種のジアステレオマーの混
合物を、ＳＦＣ（ＩＡ（３×１５ｃｍ）、３０％ＥｔＯＨ（０．１％ＤＥＡ）／ＣＯ_２、
１００ｂａｒ、７０ｍｌ／分）により３つのピークに分離した。３つのピークのうちピー
ク１をＳＦＣ（ＩＡ（３×１５ｃｍ）、３０％ｉＰｒＯＨ（０．１％ＤＥＡ）／ＣＯ_２、
１００ｂａｒ、７０ｍｌ／分）で更に精製して、表題化合物を得た。ＬＣＭＳ（Ａｇｉｌ
ｅｎｔ４６０，２５４ｎｍ）：ＥＳ（＋）ＭＳ ｍ／ｅ＝５１４．０（Ｍ＋１）＠１．１
０ｍｉｎ。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ：７．７７（ｄ，Ｊ＝１．
７６Ｈｚ，１Ｈ）、７．３８（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），６．８４（ｓ，２Ｈ），６．７０（
ｄ， Ｊ＝１２．３０Ｈｚ，１Ｈ），６．４７〜６．６５（ｍ，４Ｈ），４．１８〜４．
４８（ｍ，２Ｈ），３．９２〜４．１８（ｍ，２Ｈ），３．３８〜３．４９（ｍ，１Ｈ）
，３．２０〜３．３０（ｍ，１Ｈ），３．１１（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），２．８８〜２．９
９（ｍ，１Ｈ），２．８３（ｔ，Ｊ＝１２．３０Ｈｚ，１Ｈ），２．１４（ｑｄ，Ｊ＝６
．０３，１２．５２Ｈｚ，１Ｈ），１．７４〜１．９２（ｍ，３Ｈ），１．５９〜１．７
４（ｍ，１Ｈ），１．４１〜１．５８（ｍ，１Ｈ）。

（３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３
−（（３−クロロ−５−フルオロフェニル）アミノ）−２−オキソ−［１，３’−ビピペ
リジン］−４’−カルボキサミドの合成。（３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５
−フルオロピリミジン−４−イル）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）
フェニル）アミノ）−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド
１４の合成に関して記載されたものと類似の手順を用いて粗材料を得て、プレＨＰＬＣ（
移動相としてＭｅＯＨ／０．０５％ＮＨ_３．Ｈ_２Ｏを含むＨ_２Ｏ）により精製して、表題
化合物を白色固体として得た（１４１ｍｇ、収率：３０％）。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）^＋
：４７９．９。ＨＰＬＣ：（２１４ｎｍ：１００．０％、２５４ｎｍ：１００．０％）。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ ｄ_６）δ：７．７８〜７．７７（ｍ，１Ｈ），
７．４０〜７．３８（ｍ，１Ｈ），６．８６〜６．８２（ｍ，１Ｈ），６．６２〜６．５
５（ｍ，３Ｈ），６．４５〜６．３７（ｍ，３Ｈ），４．２６〜３．９４（ｍ，４Ｈ），
３．４７〜３．３９（ｍ，１Ｈ），３．２０〜３．０３（ｍ，２Ｈ），２．９０〜２．７
８（ｍ，２Ｈ），２．１８〜２．０４（ｍ，１Ｈ），１．８６〜１．３４（ｍ，５Ｈ）。

（３Ｒ，３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−フルオロフェニル）アミノ）−２−オキソ−［１，３’−
ビピペリジン］−４’−カルボキサミド。４種のジアステレオマーの混合物を、ＳＦＣ（
ＩＣ（２×１５ｃｍ）、２５％ＭｅＯＨ（０．１％ＤＥＡ）／ＣＯ_２、１００ｂａｒ、６
０ｍｌ／分）により３つのピークに分離して、表題化合物を個別にピーク３として得た。
ＬＣＭＳ（Ａｇｉｌｅｎｔ４６０，２５４ｎｍ）：ＥＳ（＋）ＭＳ ｍ／ｅ＝４８０．０
（Ｍ＋１）＠１．０１ｍｉｎ。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：７．９０
（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），６．４４（ｄ，Ｊ＝８．５３Ｈｚ，１Ｈ），６．４０（ｓ，１Ｈ
），６．３０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），６．２３（ｄ，Ｊ＝１１．０４Ｈｚ，１Ｈ），５．
６３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），５．０９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），４．９４（ｂｒ．ｓ．，２
Ｈ），４．４５（ｄ，Ｊ＝１２．８０Ｈｚ ２Ｈ），３．６８〜３．９５（ｍ，２Ｈ），
３．４９〜３．５６（ｍ，２Ｈ），３．３５〜３．４６（ｍ，２Ｈ），２．８９〜２．９
９（ｍ，１Ｈ），２．３１〜２．４４（ｍ，１Ｈ），１．９０〜２．０４（ｍ，３Ｈ），
１．７６〜１．８９（ｍ，１Ｈ），１．４９〜１．６１（ｍ，１Ｈ）。

（３Ｓ，３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−フルオロフェニル）アミノ）−２−オキソ−［１，３’−
ビピペリジン］−４’−カルボキサミド。４種のジアステレオマーの混合物を、ＳＦＣ（
ＩＣ（２×１５ｃｍ）、２５％ＭｅＯＨ（０．１％ＤＥＡ）／ＣＯ_２、１００ｂａｒ、６
０ｍｌ／分）により３つのピークに分離して、表題化合物を個別にピーク１として得た。
ＬＣＭＳ（Ａｇｉｌｅｎｔ４６０，２５４ｎｍ）：ＥＳ（＋）ＭＳ ｍ／ｅ＝４８０．０
（Ｍ＋１）＠１．０１ｍｉｎ。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ ｄ_６）δ：７．
７７（ｄ，Ｊ＝１．７６Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｓ．，１Ｈ），６．８１（ｓ，１Ｈ）
，６．５７（ｓ，３Ｈ），６．４６（ｄ，Ｊ＝１２．３０Ｈｚ，１Ｈ），６．３９（ｄｄ
，Ｊ＝１．７６，８．７８Ｈｚ，１Ｈ），６．３４（ｄ，Ｊ＝７．５３Ｈｚ，１Ｈ），４
．２８（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），４．２３（ｄ，Ｊ＝１３．０５Ｈｚ，１Ｈ），４．１３（
ｄｄ，Ｊ＝２．７６，１２．３０Ｈｚ，１Ｈ），４．０３（ｔｄ，Ｊ＝６．５６，１０．
９８Ｈｚ，１Ｈ），３．３３〜３．４６（ｍ，２Ｈ），３．１１（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），
２．９４（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），２．８２（ｔ，Ｊ＝１２．３０Ｈｚ，１Ｈ），２．０９
（ｑｄ，Ｊ＝５．７５，１２．１１Ｈｚ，１Ｈ），１．７２〜１．９２（ｍ，３Ｈ），１
．５６〜１．７２（ｍ，１Ｈ），１．２９〜１．５０（ｍ，１Ｈ）。

（３Ｓ，３’Ｓ，４’Ｒ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−フルオロフェニル）アミノ）−２−オキソ−［１，３’−
ビピペリジン］−４’−カルボキサミド。４種のジアステレオマーの混合物を、ＳＦＣ（
ＩＣ（２×１５ｃｍ）、２５％ＭｅＯＨ（０．１％ＤＥＡ）／ＣＯ_２、１００ｂａｒ、６
０ｍｌ／分）により３つのピークに分離した。３つのピークのうちピーク２をＳＦＣ（Ｉ
Ａ（３×１５ｃｍ）、３０％ｉＰｒＯＨ（０．１％ＤＥＡ）／ＣＯ_２、１００ｂａｒ、６
０ｍｌ／分）で更に精製して、表題化合物を得た。ＬＣＭＳ（Ａｇｉｌｅｎｔ４６０，２
５４ｎｍ）：ＥＳ（＋）ＭＳ ｍ／ｅ＝４８０．０（Ｍ＋１）＠１．０１ｍｉｎ。^１Ｈ
ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：７．７７（ｄ，Ｊ＝２．０１Ｈｚ，１Ｈ）
，７．３７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），６．８４（ｓ，１Ｈ），６．５７（ｓ，２Ｈ），６．
５５（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），６．３０〜６．４８（ｍ，３Ｈ），４．２８（ｂｒ．ｓ．，
１Ｈ），４．２３（ｄ，Ｊ＝１３．０５Ｈｚ，１Ｈ），４．１３（ｄｄ，Ｊ＝３．３９，
１２．６７Ｈｚ，１Ｈ），３．９７（ｔｄ，Ｊ＝６．８４，１０．４２Ｈｚ，１Ｈ），３
．３８〜３．５０（ｍ，１Ｈ），３．２２〜３．２９（ｍ，１Ｈ），３．１０（ｂｒ．ｓ
．，１Ｈ），２．７１〜２．９７（ｍ，１Ｈ），２．８３（ｔ，Ｊ＝１２．３０Ｈｚ，１
Ｈ），２．１３（ｑｄ，Ｊ＝６．１３，１２．４９Ｈｚ，１Ｈ），１．７３〜１．９１（
ｍ，３Ｈ），１．５８〜１．７３（ｍ，１Ｈ），１．３９〜１．５３（ｍ，１Ｈ）。

（３Ｒ，３’Ｓ，４’Ｒ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−フルオロフェニル）アミノ）−２−オキソ−［１，３’−
ビピペリジン］−４’−カルボキサミド。４種のジアステレオマーの混合物を、ＳＦＣ（
ＩＣ（２×１５ｃｍ）、２５％ＭｅＯＨ（０．１％ＤＥＡ）／ＣＯ_２、１００ｂａｒ、６
０ｍｌ／分）により３つのピークに分離した。３つのピークのうちピーク２をＳＦＣ（Ｉ
Ａ（３３×１５ｃｍ）、３０％ｉＰｒＯＨ（０．１％ＤＥＡ）／ＣＯ_２、１００ｂａｒ、
６０ｍｌ／分）で更に精製して、表題化合物を得た。ＬＣＭＳ（Ａｇｉｌｅｎｔ４６０，
２５４ｎｍ）：ＥＳ（＋）ＭＳ ｍ／ｅ＝４８０．０（Ｍ＋１）＠１．０１ｍｉｎ。^１Ｈ
ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ：７．７７（ｄ，Ｊ＝１．７６Ｈｚ，１Ｈ
），７．３９（ｓ，１Ｈ），６．８１（ｓ，１Ｈ），６．５７（ｓ，３Ｈ），６．４６（
ｔｄ，Ｊ＝２．０１，１２．３０Ｈｚ，１Ｈ），６．３９（ｔｄ，Ｊ＝１．９５，８．６
６Ｈｚ，１Ｈ），６．３４（ｄ，Ｊ＝７．５３Ｈｚ，１Ｈ），４．１８〜４．４８（ｍ，
２Ｈ），４．０９〜４．１８（ｍ，１Ｈ），３．７９〜４．０９（ｍ，１Ｈ），３．３３
〜３．４５（ｍ，２Ｈ），３．１１（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），２．９２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ
），２．８２（ｔ，Ｊ＝１２．４２Ｈｚ，１Ｈ），２．０９（ｑｄ，Ｊ＝５．７５，１２
．１１Ｈｚ，１Ｈ），１．７４〜１．９３（ｍ，３Ｈ），１．５１〜１．７４（ｍ，１Ｈ
），１．３２〜１．５１（ｍ，１Ｈ）。

（３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３
−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメトキシ）フェニル）アミノ）−２−オキソ−［
１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミドの合成。（３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−
（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル）−３−（（３−クロロ−５−（トリ
フルオロメチル）フェニル）アミノ）−２−オキソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’
−カルボキサミド１４の合成に関して記載されたものと類似の手順を用いて粗材料を得て
、プレＨＰＬＣ（移動相としてＭｅＯＨ／０．０５％ＮＨ_３．Ｈ_２Ｏを含むＨ_２Ｏ）によ
り精製して、表題化合物を黄色固体として得た（３２０ｍｇ、収率：４４％）。ＥＳＩ−
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）^＋：５４６．１６。ＨＰＬＣ：（２１４ｎｍ：９８．４％，２５４ｎｍ：
９８．０％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：７．７７（ｓ，１Ｈ
），７．３９（ｓ，１Ｈ），６．８４〜６．８１（ｍ，１Ｈ），６．７５〜６．７２（ｍ
，１Ｈ），６．６２〜６．５７（ｍ，３Ｈ），６．５２〜６．４７（ｍ，２Ｈ），４．２
４〜３．９８（ｍ，４Ｈ），３．４７〜３．４０（ｍ，１Ｈ），３．１７〜２．９９（ｍ
，２Ｈ），２．８６〜２．７９（ｍ，２Ｈ），２．１５〜１．９９（ｍ，１Ｈ），１．８
６〜１．６０（ｍ，４Ｈ），１．４８〜１．３９（ｍ，１Ｈ）。

（３Ｒ，３’Ｓ，４’Ｒ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメトキシ）フェニル）アミノ）−２−オキ
ソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド。４種のジアステレオマーの混
合物をＳＦＣ（ＡＤ−Ｈ（２×２５ｃｍ）、３０％ＥｔＯＨ（０．１％ＤＥＡ）／ＣＯ_２
、１００ｂａｒ、７０ｍｌ／分）により精製して、表題化合物を得た。ＬＣＭＳ（Ａｇｉ
ｌｅｎｔ４６０，２５４ｎｍ）：ＥＳ（＋）ＭＳ ｍ／ｅ＝５４６．０（Ｍ＋１）＠１．
２０ｍｉｎ。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ：７．７７（ｄ，Ｊ＝１
．７６Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），６．８１（ｓ，１Ｈ），６．７５
（ｓ，１Ｈ），６．６２（ｓ，１Ｈ），６．５７（ｓ，２Ｈ），６．３８〜６．５２（ｍ
，２Ｈ），４．２３（ｄ，Ｊ＝１３．０５Ｈｚ，２Ｈ），３．９２〜４．１８（ｍ，２Ｈ
），３．３４〜３．４５（ｍ，２Ｈ），３．１１（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），２．９３（ｂｒ
．ｓ．，１Ｈ），２．８２（ｔ，Ｊ＝１２．３０Ｈｚ，１Ｈ），２．０８（ｑｄ，Ｊ＝５
．７５，１２．１１Ｈｚ，１Ｈ），１．７４〜１．９２（ｍ，３Ｈ），１．５６〜１．７
３（ｍ，１Ｈ），１．３６〜１．５０（ｍ，１Ｈ）。

（３Ｓ，３’Ｓ，４’Ｒ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメトキシ）フェニル）アミノ）−２−オキ
ソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド。４種のジアステレオマーの混
合物をＳＦＣ（ＡＤ−Ｈ（２×２５ｃｍ）、３０％ＥｔＯＨ（０．１％ＤＥＡ）／ＣＯ_２
、１００ｂａｒ、７０ｍｌ／分）により精製して、表題化合物を得た。ＬＣＭＳ（Ａｇｉ
ｌｅｎｔ４６０，２５４ｎｍ）：ＥＳ（＋）ＭＳ ｍ／ｅ＝５４６．０（Ｍ＋１）＠１．
２３ｍｉｎ。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ：７．７７（ｄ，Ｊ＝２
．０１Ｈｚ，１Ｈ），７．３７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），６．８４（ｓ，１Ｈ），６．７２
（ｓ，１Ｈ），６．６０（ｓ，１Ｈ），６．５７（ｓ，２Ｈ），６．４３〜６．５４（ｍ
，２Ｈ），４．２３（ｄ，Ｊ＝１３．０５Ｈｚ，１Ｈ），４．２２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）
，４．１３（ｄｄ，Ｊ＝３．２６，１２．３０Ｈｚ，１Ｈ），４．０１（ｔｄ，Ｊ＝６．
８１，１０．２３Ｈｚ，１Ｈ），３．４４（ｔｄ，Ｊ＝６．１８，１２．４９Ｈｚ，１Ｈ
），３．２０〜３．２９（ｍ，１Ｈ），３．１１（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），２．８８（ｂｒ
．ｓ．，１Ｈ），２．８３（ｔ，Ｊ＝１２．３０Ｈｚ，１Ｈ），２．１２（ｑｄ，Ｊ＝６
．０５，１２．４６Ｈｚ，１Ｈ），１．７３〜１．９１（ｍ，３Ｈ），１．５９〜１．７
３（ｍ，１Ｈ），１．４８（ｔｄ，Ｊ＝９．４１，１９．３３Ｈｚ，１Ｈ）。

（３Ｓ，３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメトキシ）フェニル）アミノ）−２−オキ
ソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド。４種のジアステレオマーの混
合物をＳＦＣ（ＡＤ−Ｈ（２×２５ｃｍ）、３０％ＥｔＯＨ（０．１％ＤＥＡ）／ＣＯ_２
、１００ｂａｒ、７０ｍｌ／分）により精製して、表題化合物を得た。ＬＣＭＳ（Ａｇｉ
ｌｅｎｔ４６０，２５４ｎｍ）：ＥＳ（＋）ＭＳ ｍ／ｅ＝５４６．０（Ｍ＋１）＠１．
２２ｍｉｎ。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：７．７７（ｄ，Ｊ＝２
．０１Ｈｚ，１Ｈ），７．３８（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），６．８１（ｓ，１Ｈ），６．７５
（ｓ，１Ｈ），６．６２（ｓ，１Ｈ），６．５７（ｓ，２Ｈ），６．４２〜６．５１（ｍ
，２Ｈ），４．２３（ｄ，Ｊ＝１２．８０Ｈｚ，２Ｈ），３．９７〜４．１８（ｍ，２Ｈ
），３．３４〜３．４４（ｍ，２Ｈ），３．１０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），２．９３（ｂｒ
．ｓ．，１Ｈ），２．８２（ｔ，Ｊ＝１２．１７Ｈｚ，１Ｈ），２．０３〜２．１５（ｍ
，１Ｈ），１．７７〜１．９０（ｍ，３Ｈ），１．５７〜１．７３（ｍ，１Ｈ），１．３
７〜１．４８（ｍ，１Ｈ）。

（３Ｒ，３’Ｒ，４’Ｓ）−１’−（６−アミノ−５−フルオロピリミジン−４−イル
）−３−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメトキシ）フェニル）アミノ）−２−オキ
ソ−［１，３’−ビピペリジン］−４’−カルボキサミド。４種のジアステレオマーの混
合物をＳＦＣ（ＡＤ−Ｈ（２×２５ｃｍ）、３０％ＥｔＯＨ（０．１％ＤＥＡ）／ＣＯ_２
、１００ｂａｒ、７０ｍｌ／分）により精製して、表題化合物を得た。ＬＣＭＳ（Ａｇｉ
ｌｅｎｔ４６０，２５４ｎｍ）：ＥＳ（＋）ＭＳ ｍ／ｅ＝５４６．０（Ｍ＋１）＠１．
２３ｍｉｎ。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：７．９３（ｓ，１Ｈ），６
．６０（ｓ，１Ｈ），６．５２（ｓ，１Ｈ），６．３５（ｓ，１Ｈ），５．８５（ｂｒ．
ｓ．，１Ｈ），５．３２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），４．９７−５．１５（ｍ，１Ｈ），４．
７８（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），４．４６（ｄ，Ｊ＝１３．０５Ｈｚ，２Ｈ），３．６７〜３
．８７（ｍ，２Ｈ），３．３４〜３．６０（ｍ，４Ｈ），２．９９（ｔ，Ｊ＝１２．１７
Ｈｚ，１Ｈ），２．３４〜２．４９（ｍ，１Ｈ），１．９１〜２．０８（ｍ，３Ｈ），１
．８３（ｄｑ，Ｊ＝３．７６，１２．７２Ｈｚ，１Ｈ），１．４７〜１．７４（ｍ，１Ｈ
）。

実施例１１
Ｉｎ ｖｉｔｒｏＢＴＫキナーゼアッセイ：ＢＴＫ−ｐｏｌｙＧＡＴ−ＬＳアッセイ。
ｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイでのＢＴＫの目的は、ＩＣ_５０の測定を通してＢＴＫに対する
化合物の能力を決定することである。化合物の阻害は、活性ＢＴＫ酵素（Ｕｐｓｔａｔｅ
１４−５５２）、ＡＴＰおよび阻害剤の存在下でフルオレセイン標識ｐｏｌｙＧＡＴペ
プチド（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ＰＶ３６１１）のリン酸化量をモニタリングした後に測
定した。ＢＴＫキナーゼ反応は、黒色９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ ３６９４）で
実施した。典型的なアッセイでは、キナーゼ緩衝液（１０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ ｐＨ
７．５、１０ｍＭ ＭｇＣｌ_２、２００μＭ Ｎａ_３ＰＯ_４、５ｍＭ ＤＴＴ、０．０１
％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００、および０．２ｍｇ／ｍｌカゼイン）中のＡＴＰ／ペプチド
マスターミックス（最終濃度：ＡＴＰ１０μＭ、ｐｏｌｙＧＡＴ１００ｎＭ）のアリコッ
ト２４μＬを、各ウェルに添加した。次に、１００％ＤＭＳＯ溶媒中の４倍の４０×化合
物滴定液１μＬを添加した後、１×キナーゼ緩衝液中のＢＴＫ酵素ミックス１５μＬ（最
終濃度０．２５ｎＭ）を添加した。このアッセイ液を３０分間インキュベートした後、５
０ｍＭＥＤＴＡ溶液２８μＬで停止させた。キナーゼ反応物のアリコット（５μＬ）を低
容量の白色３８４ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ ３６７４）に移して、２×検出緩衝
液（４ｎＭ Ｔｂ−ＰＹ２０抗体を含むＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎＰＶ３５７４：Ｉｎｖｉｔ
ｒｏｇｅｎＰＶ３５５２）５μＬを添加した。プレートを覆って、室温で４５分間インキ
ュベートした。Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ Ｍ５（３３２ｎｍ励起、４８８ｎ
ｍ、発光、５１８ｎｍ、フルオレセイン発光）での時間分解蛍光（ＴＲＦ）を測定した。
ＩＣ_５０値を、ＤＭＳＯ対照から決定された１００％酵素活性と、ＥＤＴＡ対照から決定
された０％活性との４パラメータフィッティングを利用して計算した。

選択された式Ｉで示される化合物を試験して、ｐｏｌｙＧＡＴアッセイにおける活性が
見出された。化合物Ｉ−１、Ｉ−２、Ｉ−３、Ｉ−４、Ｉ−５およびＩ−７は、それぞれ
０．７３ｎＭ、０．６８ｎＭ、２．０７ｎＭ、０．６３ｎＭ、１．６ｎＭ、および１．２
ｎＭのＩＣ_５０値を得た。化合物Ｉ−６は、１ｎＭ未満のＩＣ_５０値を有する。下に示さ
れた比較化合物Ｉ^ｃは、ＩＣ_５０値２．０ｎＭを生じた。

実施例１２
ヒトＤＰＸ２細胞中のＰＸＲ核受容体の活性を検出するための試験プロトコル
ａ）プロトコルの概要：ＰＸＲは、ＣＹＰ３Ａ４の薬物誘導性発現を仲介する主な核受
容体であることが示された（Ｂｅｒｔｉｌｓｓｏｎ Ｇ，ｅｔ ａｌ．、Ｐｒｏｃ Ｎａ
ｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．１９９８ Ｏｃｔ １３、９５（２１）：１２２０８
−１３）。このＣＹＰ３Ａ４誘導経路に基づき、細胞によるＰＸＲ受容体遺伝子アッセイ
が、初期創薬段階でＣＹＰ３Ａ４を誘導する能力に関して新規分子化合物（ＮＭＥ）をス
クリーニングするのに一般に用いられている（Ｌｕｏ Ｇ，ｅｔ ａｌ．、Ｄｒｕｇ Ｍ
ｅｔａｂ Ｄｉｓｐｏｓ．２００２ Ｊｕｌ、３０（７）：７９５〜８０４）。ＤＰＸ２
細胞でのヒトＰＸＲの活性化に及ぼす新規分子化合物（ＮＭＥ）の影響を評価する試験が
、設計された。ＰＸＲ核受容体および対応する応答要素を安定してトランスフェクトする
細胞株を、９６ウェルプレートに播種した。播種後２４時間目に、細胞を６種の異なるＮ
ＭＥ濃度で３ウェルずつ処理し（以下参照）、その後、細胞を更に２４時間インキュベー
タに戻した。このインキュベーション期間の終了時に、生存細胞数／ウェルを、Ｐｒｏｍ
ｅｇａのＣｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ Ｆｌｏｕｒ細胞毒性アッセイを利用して決定した。この
アッセイ続いて、ＰｒｏｍｅｇａのＯＮＥ−Ｇｌｏを同じウェルに添加して、レポータ遺
伝子活性を評価した。

ｂ）試験システム：試験システムは、９６ウェルマイクロタイタープレートに播種され
た、安定して形質転換されたＤＰＸ２腫瘍細胞株で構成された。ＰＸＲ核受容体に加えて
、ルシフェラーゼレポータ遺伝子に連結された適切なエンハンサおよびプロモータを内部
に含む発現ベクターを、これらの腫瘍細胞株に安定して取り込ませた。受容体活性化を、
受容体遺伝子活性化をモニタリングすること、およびその結果をビヒクル治療細胞の結果
と比較することにより評価した。陽性対照は、６種の異なる濃度（０．１、０．５、１、
５、１０、および２０μＭ）のリファンピシンで処理された細胞で構成される。この手法
において、ＰＸＲを活性化する化合物を、容易にかつ迅速に同定することができる。安定
して取り込まれた細胞株を利用したため、３０〜７０倍の受容体活性化を観察することが
可能である。

ｃ）データ処理および受容体活性化速度論：ＭＳ−Ｅｘｃｅｌを用いて処理されたデー
タを、異なる6つの用量それぞれでのビヒクル処理細胞に対するＰＸＲ活性化倍率の平均
（ｎ＝３）および％ＣＶとして計算した。全ての活性化データを、生存細胞数／ウェルに
標準化させた。結果は、１０μＭ用量の適切な陽性対照により付与された応答のパーセン
ト率としても表した。ＥＣ_５０およびＥ_ｍａｘ値を、典型的な対数用量反応曲線の非線形
回帰（Ｐｒｉｓｍ Ｖ５．０ｃ，ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ，カリフォルニア
州サンディエゴ所在）を利用して、受容体活性化を与える試験化合物について得た。非定
型の用量反応曲線を示す物質は、この方式で解析しなかった。

ｄ）新規分子化合物（ＮＭＥ）：試験化合物を、０．０５、０．１、０．５、１、２．
５および１０μＭで試験した。

選択された式Ｉで示される化合物を、ＰＸＲアッセイで試験した。化合物Ｉ−１、Ｉ−
２、Ｉ−３、Ｉ−４、およびＩ−５は、それぞれ６２％、４２％、４７％、６７％、およ
び９０％のＰＸＲ％誘導率（１０μＭリファンピシンに対する）を得た。先に示された比
較化合物Ｉ^ｃは、ＰＸＲ％誘導率９５％を生じた。

実施例１３
ＦａｓｔＰａｔｃｈ ｈＥＲＧ阻害アッセイのためのプロトコル：
心臓カリウムチャネルｈＥＲＧは、ヒト心室における急速な遅延整流性電流（Ｉ_Ｋｒ）
を担い、Ｉ_Ｋｒの阻害は、非心臓薬による心臓活動電位延長の最も一般的な原因である（
例えば、Ｗｅｉｒｉｃｈ ａｎｄ Ａｎｔｏｎｉ，Ｂａｓｉｃ Ｒｅｓ．Ｃａｒｄｉｏｌ
．，９３，Ｓｕｐｐｌ．１，１２５−３２，１９９８、Ｙａｐ ａｎｄ Ｃａｍｍ，Ｃｌ
ｉｎ．Ｅｘｐ．Ａｌｌｅｒｇｙ，２９，Ｓｕｐｐｌ．３，１７４−８１，１９９９参照）
。活動電位の持続時間増加は、危険な心室性不整脈トルサード・ド・ポアンツに関連づけ
られたＱＴ間隔の延長を誘発する因子として引き合いに出された（Ｂｒｏｗｎ ａｎｄ
Ｒａｍｐｅ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｎｅｗｓ，７，１５〜２０，２０００）。

提供される化合物のｉｎ ｖｉｔｒｏ効果を、ｈＥＲＧ（ヒト遅延整流性カリウムイオ
ンチャネル遺伝子）ｃＤＮＡを安定してトランスフェクトされたヒト胎児腎臓（ＨＥＫ２
９３）細胞において発現されるｈＥＲＧカリウムチャネル電流（Ｉ_Ｋｒの代用、急速に活
性化する遅延整流性心臓カリウム電流）について研究した。細胞をガラスの内張りがある
９６ウェルプレート中のＨＰＥＰＥＳ緩衝生理食塩水溶液に入れて、各濃度での３分間暴
露の期間に、適切な量の試験溶液および対照溶液を負荷した。試験化合物を、０．３％Ｄ
ＭＳＯで希釈した。自動パラレルパッチクランプシステムＱｐａｔｃｈ ＨＴ（Ｓｏｐｈ
ｉｏｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ Ａ／Ｓ、Ｄｅｎｍａｒｋ）を用いて、様々な濃度（例え
ば、１０μＭ）で評価した。ＩＣ_５０値は、ｈＥＲＧ阻害データに基づいて推定した。Ｃ
ｈａｎＴｅｓｔ（１４６５６ Ｎｅｏ Ｐａｒｋｗａｙ、Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ、ＯＨ）で
、試験を実施した。ＱＰａｔｃｈスクリーンは、Ｊａｎｚｅｎ ａｎｄ Ｂｅｒｎａｓｃ
ｏｎｉ（ｅｄｓ．），Ｈｉｇｈ Ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ，Ｍｅｔｈ
ｏｄｓ ａｎｄ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，Ｓｅｃｏｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，ｖｏｌ．５６５
，ｃｈａｐｔｅｒ １０，ｐ．２０９〜２２３，２００９に更に記載されている。

選択された式Ｉで示される化合物を、ｈＥＲＧアッセイで試験した。化合物Ｉ−１、Ｉ
−２、Ｉ−３、およびＩ−４は、それぞれ１５．６μＭ、３０μＭ、１４．６μＭ、およ
び１３．７μＭのｈＥＲＧ ＩＣ_５０を得た。化合物Ｉ−５は、１０μＭでのｈＥＲＧア
ッセイで観察可能な活性を示していない（ＩＣ_５０値は得られなかった）。化合物Ｉ−６
は、１０μＭでほとんど観察不能なｈＥＲＧ活性（＜２０％阻害）を示している（ＩＣ_５
０値は得られなかった）。化合物Ｉ−７は、１０μＭでｈＥＲＧ活性（６５％阻害）を示
している（ＩＣ_５０値は得られなかった）。先に示された比較化合物Ｉ^ｃは、１．１８μ
ＭのｈＥＲＧ ＩＣ_５０または１０μＭでの活性（８７％阻害）を生じた。

実施例１４
ヒト肝ミクロソームにおけるＧＳＨ捕捉：プロトコル
試験化合物（最終濃度１０μＭ）を、活性化コファクターＮＡＤＰＨ（最終濃度１ｍＭ
）、リン酸カリウム（最終濃度１００ｍＭ ｐＨ７．４）、塩化マグネシウム（最終濃度
３．３ｍＭ）および捕捉剤ＧＳＨ（最終濃度５ｍｍ）と共に、ヒトまたはラットのいずれ
かの肝ミクロソーム（最終濃度１ｍｇ／ｍＬ）とインキュベートする。インキュベーショ
ン混合物を３７℃で６０分間インキュベートし、氷冷アセトニトリル（インキュベーショ
ン混合物と同容量）で停止させて、上清を単離する。上清は、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析用に
直接注入されるか、またはＮ_２下で乾燥されて、水：アセトニトリル（８０：２０）混合
物で再構成させた後でＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析に供する。対応するＧＳＨコンジュゲートを
、Ｔｒｉｐｌｅ ＴＯＦ５６００／Ｘｅｖｏ Ｑｔｏｆ ＭＳｅを利用してＬＣ／ＭＳ／
ＭＳにより評価する。

実施例１５
ラットコラーゲン誘発関節炎モデル
雌Ｌｅｗｉｓラットのコラーゲン誘発関節炎（ＣＩＡ）モデルは、重度の炎症性疾患の
発症のためにコラーゲンＩＩ型（ＣＩＩ）免疫化への一次ＴおよびＢ細胞免疫応答を必要
とする（Ｇｏｌｄｓｃｈｍｉｄｔ ＴＪ，Ｈｏｌｍｄａｈｌ Ｒ．Ｃｅｌｌ Ｉｍｍｕｎ
ｏｌ．１５４（１）：２４０−８，１９９４、Ｈｅｌｆｇｏｔｔ，Ｓ．Ｍ．，ｅｔ ａｌ
，、Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ．３１：４０３，１９８４、
Ｈｏｌｍｄａｈｌ Ｒ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ａｕｔｏｉｍｍｕｎ．７（６）：７３９−５
２，１９９４、およびＳｔｕａｒｔ，Ｊ．Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１
５５：１，１９８２参照）。臨床疾患は、二次ＣＩＩ抗原刺激後に発病し、その後８日に
わたり疾患が進行する。

一般に雌Ｌｅｗｉｓラットは、不完全フロイントアジュバント中のウシコラーゲンＩＩ
型で免疫化される。ラット（Ｎ＝１０匹／群）が、１日目に経口強制投与の開始により試
験化合物またはビヒクルの経口投与を１日２回、連日受ける（治療的）。関節炎の臨床重
症度を、０日目に開始して毎日実施される足首のノギス測定により評価する。

詳細なプロトコル：雌ＬｅｗｉｓラットをウシコラーゲンＩＩ型（１：１ ０．０１Ｎ
酢酸中２ｍｇ／ｍｌウシＣＩＩエマルション：不完全フロイントアジュバント）を、背中
の皮膚の３箇所での皮下投与により免疫化させる。免疫化の６日後にラットに、ウシＣＩ
Ｉの二回目の皮下注射を受ける。式Ｉで示される化合物の懸濁液またはビヒクル（０．５
％ＣＭＣ、０．１％Ｔｗｅｅｎ８０）を、０日目に開始する経口強制投与により１日２回
投与する（予防的）（ｎ＝１０匹／群）。ＣＩＡの臨床重症度を、９日目に開始する連日
の足首のノギス測定により評価する。ベースラインの足首ノギス測定を実施して、予防的
治療で臨床的に正常であること（０．２６０〜０．２６４の範囲内）を確認する。疾患が
確定された動物でのベースライン足首ノギス測定を、治療的投薬の１日目に評価し、臨床
疾患の発病（０．２７５１〜０．２７５５の範囲内）を確認した後に治療群に無作為に割
り付ける。適切な多重比較の事後検定と共に一元配置分散分析法（一元配置ＡＮＯＶＡ）
を用いて、データを全群にわたり解析する。全ての検定の有意性は、ｐ≦０．０５に設定
されている。

実施例１６
ＰＬＣγ２のリン酸化阻害を介したＢＣＲ経路活性化の分析
プロトコル：治療の１日前に、ラモス細胞を９６ウェル組織培養フィルタープレート（
Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、マサチューセッツ州ビレリカ所在）中の完全培地２００μＬに３×
１０^５個／ウェルの密度で播種する。治療の当日に、用いられた培地を濾過により除去し
て、系列希釈された化合物およびＤＭＳＯを含有する無血清培地２００μＬに細胞を０．
１％に再懸濁させ、その後、３７℃で２時間インキュベートする。細胞を３７℃の１０μ
ｇ／ｍＬヤギ抗ヒトＩｇＭで５分間刺激する。全ての培地を濾過により除去して、細胞を
氷冷ＰＢＳですすぎ、その後、２０ｍＭ Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．５）、１５０ｍＭ ＮａＣ
ｌ、１ｍＭ ＥＤＴＡ、１ｍＭ ＥＧＴＡ、２ｍＭ Ｎａ_３ＶＯ_４、１％Ｔｒｉｔｏｎ
Ｘ−１００、０．１％ＳＤＳ、プロテアーゼ阻害剤カクテル、１ｍＭフッ化フェニルメチ
ルスルホニル（ＰＭＳＦ）、プロテアーゼ阻害剤ミックス２（Ｓｉｇｍａカタログ番号Ｐ
５７２６、Ｓｉｇｍａ製、ミズーリ州セントルイス所在）およびプロテアーゼ阻害剤ミッ
クス３（Ｓｉｇｍａカタログ番号Ｐ００４、Ｓｉｇｍａ製、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓｅ、ＭＯ）
を含有する溶解緩衝液により、細胞を氷上で１時間溶解させる。溶解物を続いて標準ＭＳ
Ｄプレート（Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ（ＭＳＤ）（Ｇａｉｔｈｅｒｓ
ｂｕｒｇ．Ｍａｒｙｌａｎｄ））に移して、捕捉抗体（抗トータルＰＬＣγ２抗体（ａｎ
ｔｉ−ｔｏｔａｌ ＰＬＣγ２ ａｎｔｉｂｏｄｙ）Ｂ１０）（ＳａｎｔａＣｒｕｚ Ｂ
ｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ，ＣＡ））で前処理して、製造業
者の指導に従いＢＳＡで阻害する。溶解物を準備されたＭＳＤプレート中で穏やかに撹拌
しながら４℃で一晩インキュベートする。ウェルをＴＢＳＴで３回洗浄して、ＰＢＳ中１
％ＢＳＡ中の抗ｐＰＬＣγ２（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ）で室温で１時間処理する。ウェル
を再度、ＴＢＳＴで３回処理して、抗ウサギｓｕｌｆｏ−ｔａｇ抗体（ＭＳＤ）で室温で
１時間処理する。ＴＢＳＴで洗浄した後、ＭＳＤ読み取り緩衝液を添加して、発光をＭＳ
Ｄ ＳＥＣＴＯＲ Ｉｍａｇｅｒ ６０００で測定する。最大応答は、抗ＩｇＭおよびＤ
ＭＳＯで処理された刺激細胞を含むウェルの平均発光として決定する。最小応答を、ＤＭ
ＳＯ単独で処理された非刺激細胞を含有するウェルの平均発光として決定する。最大値お
よび最小値を用いて、化合物処理されたウェルの発光を標準化する。標準化された値を対
数スケールの化合物濃度に対してプロットして、Ｐｒｉｚｍソフトウエア（ＧｒａｐｈＰ
ａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．）を用いて解析する。様々な勾配を有するＳ字形用量
相関式を用いてデータをフィッティングして、５０％阻害濃度（ＩＣ_５０）を生成する。

ラモス細胞を９６ウェルプレート中で一定濃度範囲の式Ｉで示される化合物と共に２時
間インキュベートして、１０μｇ／ｍＬ抗ＩｇＭで５分間刺激し、電子化学ルミネッセン
ス免疫アッセイを利用してＰＬＣγ２リン酸化を測定する。ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓ
ｍソフトウエアを用いて、ＥＣ_５０を計算する。

実施例１７
ＢＣＲ誘導性ヒトＢ細胞増殖の阻害
ヒトＣＤ１９＋Ｂ細胞を、抗ＩｇＭ抗体で刺激して、式Ｉで示される化合物の活性を、
７２時間後の細胞代謝の変化に関して評価する。これに関連して、細胞代謝を、細胞活性
化および増殖に直接相関させて、増殖時の相対的細胞生存率を反映させることも可能であ
る。抗ＩｇＭ抗体を、Ｂ細胞増殖に及ぼす影響について評価して、活性化の半数阻害濃度
１０μｇ／ｍｌを示すことが決定される。これらの活性化条件を利用して、異なるドナー
から単離されたＣＤ１９＋Ｂ細胞の細胞代謝に及ぼす影響について、様々な濃度の試験化
合物を０．１％ＤＭＳＯ中で三重測定でアッセイする。

プロトコル：ヒトＢ細胞を、Ｆｉｃｏｌｌ−Ｈｙｐａｑｕｅ比重遠心（Ａｍｅｒｓｈａ
ｍ）を使用して末梢血単核細胞または非精製バフィーコートから単離し、磁気細胞分離（
Ｈｕｍａｎ Ｂ Ｃｅｌｌ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ Ｋｉｔ ＩＩ，Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂ
ｉｏｔｅｃ）により負に選択する。標的細胞の純度を、Ｂ細胞、Ｔ細胞および単球（それ
ぞれＣＤ１９、ＣＤ３、ＣＤ１４、ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）のマーカを染色する
フローサイトメトリーにより決定する。データをＦＡＣｓＣａｌｉｂｅｒフローサイトメ
ータで回収して、ＦｌｏＪｏソフトウエア（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いて解
析する。ヒトＢ細胞調製物の純度は、日常的に９５％を超える。負に選択されたヒトＢ細
胞を、９６ウェルプレート中で１０μｇ／ｍＬ抗ＩｇＭ Ｆ（ａｂ’）_２（Ｊａｃｋｓｏ
ｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ）で刺激する。ＲＰＭＩ＋１０％ＦＢＳ０．２ｍＬ中
のＢ細胞１００，０００個を、３ウェルずつ様々な濃度（０．５％ＤＳＭＯに５０００ｎ
Ｍから０ｎＭまで滴定されたあ）の式Ｉで示される化合物、または０．５％ＤＭＳＯ最終
濃度のビヒクル対照で、３７℃、５％ＣＯ_２で３０分間治療し、その後、細胞を１０μｇ
／ｍＬ抗ＩｇＭ Ｆ（ａｂ’）２で刺激する。Ｂ細胞を３７℃、５％ＣＯ_２で７２時間刺
激する。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）を用いルミノメータでの測
定で、増殖を測定する。平均値を最大増殖に対してプロットして、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐ
ｒｉｓｍ ｖ５ソフトウエアを用いてＩＣ_５０値を決定する。

実施例１８
Ｉｎ ｖｉｔｒｏでの骨髄細胞活性化に及ぼす化合物の影響の評価
初代ヒトマクロファージのＦｃγＲ活性化。ＦｃγＲによる自己抗体および免疫複合体
を介した活性化は、免疫化ＩｇＧでのマクロファージの活性化によりモデル化することが
できる。ＧＭ−ＣＳＦ処理された単球から得られた初代ヒトマクロファージは、ＣＤ８０
、ＣＤ８６、ＭＨＣ抗原およびＦＣγＲＩＩＩ受容体などの活性化マーカをアップレギュ
レートする。ヒト単球由来マクロファージを、プレートに結合させた精製ヒトＩｇＧによ
り活性化することができる。この刺激は、ＦｃγＲＩＩＩ受容体を架橋して、ＴＮＦα、
ＩＬ−６、ＩＬ１βおよびＭＣＰ−１などの炎症促進性サイトカインの分泌を誘発する。
式Ｉで示される化合物を、ヒトマクロファージのＦｃＲ活性化によるサイトカイン発現の
阻害について評価する。

一般に、精製ＩｇＧと共に予めインキュベートされたプレート中でマクロファージを培
養し、その後、洗浄する。複数の力価（１０，０００ｎｍ〜０ｎＭ）の試験化合物をこれ
らの培養物に添加する。細胞培養上清を、ＴＮＦαおよびＩＬ−６の発現についてＥＬＩ
ＳＡにより分析する。

プロトコル：ヒト単球を健常なドナーのバフィーコートから単離して、磁気細胞分離（
Ｍｏｎｏｃｙｔｅ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ Ｋｉｔ ＩＩ， Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔ
ｅｃ）により負に選択する。精製された単球を、低ＩｇＧ ＦＢＳおよび１００ｎｇ／ｍ
Ｌ ＧＭ−ＣＳＦを補充された標準培地中で５〜７日間培養して、マクロファージの分化
を誘導する。培養されたマクロファージを、１００μｇ／ｍＬのプレートに結合された精
製ＩｇＧ±様々な力価の試験化合物（１０μＭ〜０ｎＭ）で刺激する。上清を４時間後お
よび１８時間後に回収して、それぞれＴＮＦαおよびＩＬ−６について分析する。

実施例１９
マウスコラーゲン抗体誘発関節炎における効能
この実施例は、関節炎に関係するのみならず、インビボでの自己抗体および免疫複合体
の活性を評価するものであり、そのためＳＬＥなどの他の炎症性疾患に関連する。この実
験において、自己抗体および免疫複合体の活性は、ＦｃＲシグナル伝達に依存する病理学
的エンドポイントを生成し、そのような抗体のＦｃ部分が、式Ｉで示される化合物の投与
により阻害される。

雌ＤＢＡ／１マウスでのコラーゲン抗体誘発関節炎（ＣＡＩＡ）モデルは、炎症誘発の
ための同族Ｔ細胞およびＢ細胞応答を必要とせず、むしろ臨床疾患発症の免疫エフェクタ
ー機構に依存する。４種の抗コラーゲンＩＩ型（ＣＩＩ）特異性モノクローナル抗体のカ
クテル、およびＣＩＩ特異性抗体移入の３日後に投与された免疫刺激リポ多糖（ＬＰＳ）
は、抗体−Ｆｃ−受容体の結合（Ｋａｇａｒｉ Ｔ．ｅｔ ａｌ．、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ
．１７０：３１８−２４（２００３））、免疫複合体形成、補体活性化（Ｂａｎｄａ Ｎ
Ｋ，ｅｔ ａｌ．、Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５９：１００−８（２０１０
））および炎症促進性サイトカイン産生を促進し、１０日間にわたり重度の炎症疾患を誘
発する。

一般に関節炎は、０日目にモノクローナル抗コラーゲン抗体のカクテルをＤＢＡ／１マ
ウスに注射することにより誘発される。マウス（Ｎ＝１０匹／群）は、試験化合物の経口
投与を、０日目に開始して連日、示された通り１日１回または１日２回のいずれかにより
受ける。足の炎症を、連日評価する。

プロトコル：６〜８週齢の雌ＤＢＡ／ｌマウスが、関節炎誘発性のある４種のクローン
のモノクローナル抗体カクテル（Ｃｈｏｎｄｒｅｘ＃１０１００）２ｍｇを０日目に、そ
してＬＰＳ５０μｇ用量をその３日後に静脈内に受ける。抗体カクテルの静脈内移入の直
前に、試験化合物懸濁液またはビヒクル（０．５％ＣＭＣ、０．１％Ｔｗｅｅｎ８０）を
、経口強制投与により０日目（１０匹動物/群）に開始して１日２回投与する。４つの足
全ての炎症をモニタリングし、０〜４の範囲内のスケールを適用することにより、ＣＩＡ
の臨床重症度を評価する。各足を、以下の通り等級づけする：０、正常、１、足首もしく
は手首の軽度であるが明確な発赤および腫脹、または１もしくは２本の指の任意の重症度
の発赤および腫脹、２、足首もしくは手首、または２本を超える指の中等度〜重度の発赤
および腫脹、３、足全体の発赤および腫脹（顕著な浮腫）、ならびに４、複数の関節での
併発を含む最大の肢部炎症。４種の各スコアの合計が、関節炎指数となり、各動物の可能
な最大スコアは１６である。

Claims (20)

1. 式Ｉ’：
   

   

   
   （式中、
   各Ｒ ^１ は、独立して、水素、場合により置換されたＣ _１〜６ 脂肪族基、場合により置換された３〜７員単環式複素環基、または炭素原子３〜７個と、独立して窒素、酸素、もしくは硫黄から選択されるヘテロ原子１〜３個と、を有する場合により置換されたヘテロシクリルアルキル基であるか、
   あるいは２個のＲ ^１ 基が、介在する原子と一緒になって、独立して窒素、酸素、または硫黄から選択されるヘテロ原子を１〜２個有する、場合により置換された３〜７員飽和または部分不飽和単環式複素環式環を形成しており、
   ここで、場合により置換された基は、ハロゲン、−ＮＯ _２ 、−ＣＮ、−ＯＲ、−ＳＲ、−Ｎ（Ｒ） _２ 、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−ＣＯ _２ Ｒ、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ） _２ 、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、−Ｓ（Ｏ）Ｒ、−Ｓ（Ｏ） _２ Ｒ、または−Ｓ（Ｏ） _２ Ｎ（Ｒ） _２ で置換されていてもよく、
   各Ｒは、独立して、水素もしくはＣ _１〜６ 脂肪族基であるか、
   または前記同じ窒素原子に結合した２個のＲ基が、介在する原子と一緒になって、ヘテロ原子を１個有する、場合により置換された３〜７員飽和もしくは部分不飽和単環式複素環式環を形成しており、ここで前記ヘテロ原子は、前記Ｒ基が結合する窒素であるか、
   または前記同じ窒素原子に結合した２個のＲ基が、介在する原子と一緒になって、ヘテロ原子を２個有する、場合により置換された３〜７員飽和もしくは部分不飽和単環式複素環式環を形成しており、ここで前記ヘテロ原子のうちの一方は、前記Ｒ基が結合する窒素であり、他方のヘテロ原子は、独立して窒素、酸素、もしくは硫黄から選択され、
   環Ａは、
   

   

   
   であり、
   Ｒ ^２ は、−Ｃｌまたは−Ｆであり、
   Ｒ ^３ は、−ＣＦ _３ 、−ＯＣＦ _３ 、または−Ｆである）の化合物またはその医薬的に許容し得る塩。
2. 前記化合物が、
   式ＩＩ’：
   

   

   
   で示される、請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容し得る塩。
3. 前記化合物が、
   式ＩＩＩ’：
   

   

   
   で示される、請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容し得る塩。
4. 前記化合物が、
   式ＩＶ’：
   

   

   
   で示される、請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容し得る塩。
5. 前記化合物が、
   式Ｖ’：
   

   

   
   で示される、請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容し得る塩。
6. Ｒ ^３ が−ＣＦ _３ である、請求項５に記載の化合物またはその医薬的に許容し得る塩。
7. Ｒ ^３ が−Ｆである、請求項５に記載の化合物またはその医薬的に許容し得る塩。
8. 両方のＲ ^１ が水素である、請求項５〜７のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬的に許容し得る塩。
9. 一方のＲ ^１ が水素であり、他方のＲ ^１ が場合により置換されたＣ _１〜６ 脂肪族基である、請求項５〜７のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬的に許容し得る塩。
10. 一方のＲ ^１ が水素であり、他方のＲ ^１ がメチルである、請求項９に記載の化合物またはその医薬的に許容し得る塩。
11. 両方のＲ ^１ が場合により置換されたＣ _１〜６ 脂肪族基である、請求項５〜７のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬的に許容し得る塩。
12. 一方のＲ ^１ が水素であり、他方のＲ ^１ が、場合により置換されたＣ _１〜６ 脂肪族基である、請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容し得る塩。
13. 両方のＲ ^１ が場合により置換されたＣ _１〜６ 脂肪族基である、請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容し得る塩。
14. 両方のＲ ^１ が水素である、請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容し得る塩。
15. Ｒ ^２ が−Ｃｌである、請求項１および１２〜１４のいずれかに記載の化合物またはその医薬的に許容し得る塩。
16. Ｒ ^２ が−Ｆである、請求項１および１２〜１４のいずれかに記載の化合物またはその医薬的に許容し得る塩。
17. Ｒ ^３ が−ＣＦ _３ である、請求項１および１２〜１６のいずれかに記載の化合物またはその医薬的に許容し得る塩。
18. Ｒ ^３ が−ＯＣＦ _３ である、請求項１および１２〜１６のいずれかに記載の化合物またはその医薬的に許容し得る塩。
19. Ｒ ^３ が−Ｆである、請求項１および１２〜１６のいずれかに記載の化合物またはその医薬的に許容し得る塩。
20. 

    
    からなる群より選択される化合物またはその医薬的に許容し得る塩。