BR112014030655B1

BR112014030655B1 - compostos inibidores de pirimidinil tirosina quinase, e composição farmacêutica que os compreende

Info

Publication number: BR112014030655B1
Application number: BR112014030655-9A
Authority: BR
Inventors: Brian T. Hopkins; Patrick Conlon; Timothy R. Chan; Tracy J. Jenkins; Xiongwei Cai; Michael Humora; Xianglin Shi; Ross A. Miller; Andrew Thompson
Original assignee: Biogen Ma Inc.; Sunesis Pharmaceuticals, Inc
Priority date: 2012-06-08
Filing date: 2013-06-07
Publication date: 2021-04-20
Also published as: MX2019003618A; AU2013271407A1; KR102468430B1; KR20150036020A; PH12014502699A1; US20210017155A1; KR20210072139A; IL235938A0; AU2013271407B2; JP6214643B2; PH12014502699B1; JP2017193583A; JP2019077728A; RS57978B1; NZ702715A; DK2858499T3; LT2858499T; EA027823B1; US20230174511A1; JP2023052415A

Abstract

INIBIDORES DE PIRIMIDINIL TIROSINA QUINASE, SEU USO E COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA QUE OS COMPREENDE A presente invenção fornece compostos e composições dos mesmos úteis como inibidores de tirosina quinase de Bruton e que apresentam características desejáveis para isso.

Description

Referência Cruzada a Pedidos Relacionados

[0001] O presente pedido reivindica prioridade ao pedido provisório U.S. número de série 61/657.360, depositado em 8 de junho de 2012, todo o conteúdo do qual está incorporado por meio deste por referência. Antecedentes da Invenção

[0002] As Tec quinases são tirosina quinases não-receptoras inclu indo: Tec (tirosina quinase expressa no carcinoma hepatocelular), Btk (tirosina quinase de Bruton), Itk (quinase de célula T induzível pela inter- leucina-2 (IL-2); também conhecida como Emt ou Tsk), Rlk (quinase de linfócitos em repouso; também conhecida como Txk), Lck (proteína tiro- sina quinase linfócito-específica), e Bmx (gene da tirosina quinase da medula óssea no cromossomo X; também conhecida como Etk)). Essas quinases são principalmente expressas em células hematopoiéticas, embora a expressão de Bmx e Tec tenha sido detectada em células endote- liais e hepáticas. Tec quinases (Itk, Rlk e Tec) são expressas em células T e são todas ativadas a jusante do receptor de célula T (TCR). Btk é um mediador a jusante do receptor de célula B (BCR) que sinaliza quem está envolvido na regulação da ativação, proliferação e diferenciação das células B. Mais especificamente, a Btk contém um domínio PH que se liga ao fosfatidilinositol (3,4,5)-trisfosfato (PIP3). A ligação ao PIP3 induz a Btk a fosforilar a fosfolipase C (PLCY), que, por sua vez, hidrolisa o PIP2 para produzir dois mensageiros secundários, o inositol trifosfato (IP3) e o diacilglicerol (DAG), que ativa a proteína quinase PKC, que então induz a sinalização adicional das células B. Mutações que desativam a atividade enzimática da Btk resultam na síndrome XLA (agamaglobulinemia ligada ao X), uma imunodeficiência primária. Dados os papéis críticos que as Tec quinases desempenham na sinalização de células B e de células T, as Tec são alvos de interesse de distúrbios autoimunes.

[0003] Consequentemente, há uma grande necessidade na técnica de inibidores eficazes das Tec quinase, tais como Btk. A presente invenção atende a essas e outras necessidades.

Sumário da Invenção

[0004] Em determinadas modalidades, a presente invenção fornece um composto da fórmula I:

[0005] ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R1 e o Anel A são conforme definidos e descritos neste documento. Esses compostos são inibidores da família da Tec quinase, incluindo a Btk. Nesse sentido, são fornecidos compostos que podem ser usados numa variedade de métodos incluindo triagem e ensaios de atividade in vitro, bem como situações pré-clínicas, clínicas e terapêuticas in vivo, conforme descrito em detalhes neste documento.

[0006] Em determinadas modalidades, a presente invenção fornece formulações farmacêuticas que compreendem os compostos fornecidos.

[0007] Em determinadas modalidades, a presente invenção fornece um método de diminuir a atividade enzimática da Btk. Em algumas mo-dalidades, esses métodos incluem o contato da Btk com uma quantidade eficaz de um inibidor de Btk.

[0008] Em determinadas modalidades, a presente invenção fornece um método de tratamento de um distúrbio responsivo à inibição da Btk em um sujeito em necessidade. Esses distúrbios e métodos são descritos em detalhes neste documento. Descrição Detalhada de Determinadas Modalidades

[0009] Em determinadas modalidades, a presente invenção fornece um composto da fórmula I:

[00010] ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo;

[00011] em que:

[00012] cada R1 é independentemente hidrogênio, um grupo alifático C1-6 opcionalmente substituído, em grupo heterocíclico monocíclico com 3-7 membros opcionalmente substituído, ou um grupo heterociclilalquil opcionalmente substituído tendo 3-7 átomos de carbono e 1-3 heteroáto- mos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre;

[00013] ou dois grupos R1 são tomados em conjunto com seus átomos intervenientes para formar um anel heterocíclico monocíclico saturado ou parcialmente insaturado com 3-7 membros opcionalmente substituído tendo 1-2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre;

[00014] em que os grupos opcionalmente substituídos podem ser substituídos por halogênio, -NO2, -CN, -OR, -SR, -N(R)2, -C(O)R, -CO2R, -N(R)C(O)OR, -C(O)N(R)2, -OC(O)R, -N(R)C(O)R, -S(O)R, -S(O)2R, ou -S(O)2N(R)2;

[00015] cada R é independentemente hidrogênio ou C1-6 alifático;

[00016] ou dois grupos R ligados ao mesmo nitrogênio são tomados em conjunto com seus átomos intervenientes para formar um anel hete- rocíclico monocíclico saturado ou parcialmente insaturado com 3-7 mem- bros opcionalmente substituído tendo 1-2 heteroátomos, em que qualquer segundo heteroátomo é independentemente selecionado de nitrogênio, oxigênio ou enxofre; R2

[00017] Anel A é

[00018] R2 é -Cl ou -F; e

[00019] R3 é -CF3, -OCF3, ou -F.

Definições

[00020] Os compostos desta invenção incluem aqueles descritos de forma geral acima, e são ilustrados ainda pelas classes, subclasses e espécies divulgadas neste documento. Conforme usado neste documento, as seguintes definições dever-se-ão aplicar, a menos que indicado de outra forma. Para os fins desta invenção, os elementos químicos são identificados de acordo com a Tabela Periódica dos Elementos, versão CAS, Handbook of Chemistry and Physics, 75a Ed. Adicionalmente, os princípios gerais da química orgânica são descritos em "Organic Chemistry", Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito: 1999, e "March's Advanced Organic Chemistry", 5a Ed., Ed.: Smith, M.B. e March, J., John Wiley & Sons, Nova York: 2001, todo o conteúdo dos quais estão incorporados por meio deste por referência.

[00021] As abreviaturas usadas neste documento têm seu significado convencional nas técnicas químicas e biológicas. As estruturas e fórmulas químicas representadas neste documento são construídas de acordo com as regras padrão de valência química conhecida nas técnicas químicas.

[00022] O termo "alifático" ou "grupo alifático", conforme usado neste documento, significa uma cadeia linear (isto é, não ramificada) ou ramifi-cada, cadeia de hidrocarboneto substituído ou não substituído que é completamente saturada ou que contém uma ou mais unidades de insa- turação, ou um hidrocarboneto monocíclico ou hidrocarboneto bicíclico que é completamente saturado ou que contém uma ou mais unidades de insaturação, mas que não é aromático (também referido neste documento como "carbociclo", "cicloalifático" ou "cicloalquil"), que tem um único ponto de ligação ao resto da molécula. A menos que especificado de outra forma, os grupos alifáticos contêm 1-6 átomos de carbono alifático. Em algumas modalidades, os grupos alifáticos contêm 1-5 átomos de carbono alifáticos. Em algumas modalidades, os grupos alifáticos contêm 1-4 átomos de carbono alifáticos. Em algumas modalidades, os grupos alifáticos contêm 1-3 átomos de carbono alifáticos e, em ainda outras modalidades, os grupos alifáticos contêm 1-2 átomos de carbono alifáti- cos. Os grupos alifáticos adequados incluem, mas não estão limitados a, grupos alquila, alquenila, alquinila lineares ou ramificadas, substituídas ou não substituídas e seus híbridos, tais como (cicloalquil)alquila, (ciclo- alquenil)alquila ou (cicloalquil)alquenila.

[00023] Conforme usado neste documento, o termo "cicloalifático" (ou "carbociclo ou "cicloalquil") refere-se a um hidrocarboneto C3-C6 monocí- clico que é completamente saturado ou que contém uma ou mais unidades de insaturação, mas que não é aromática, que tem um único ponto de ligação ao resto da molécula.

[00024] Conforme usado neste documento, os termos "heterociclo", "heterociclila" e "anel heterocíclico" são usados permutavelmente e referem-se a uma porção heterocíclica monocíclica estável com 3 a 7 membros que é saturada ou parcialmente insaturada, e que tem, além dos átomos de carbono, um ou mais, preferencialmente de um a quatro, hete- roátomos, conforme definido acima. Quando usado em referência a um átomo de um heterociclo, o termo "nitrogênio" inclui um nitrogênio substituído. Por exemplo, em um anel saturado ou parcialmente insaturado tendo 0-3 heteroátomos selecionados de oxigênio, enxofre ou nitrogênio, o nitrogênio pode ser N (como em 3,4-di-hidro-2H-pirrolila), NH (como em pirrolidinila), ou +NR (como em pirrolidinila N-substituída). O termo "hete- rociclialquila" refere-se a um grupo alquila substituída por uma heterocicli- la, em que as partes de alquila e heterociclila são independentemente opcionalmente substituídas.

[00025] Um anel heterocíclico pode estar ligado ao seu grupo pendente em qualquer heteroátomo ou átomo de carbono que resulta em uma estrutura estável e qualquer um dos átomos do anel pode ser opcionalmente substituído. Exemplos desses radicais heterocíclicos saturados ou parcialmente insaturados incluem, sem limitação, tetra-hidrofuranila, te- tra-hidrotiofenil pirrolidinila, piperidinila, pirrolinila, tetra-hidroquinolinila, tetra-hidroisoquinolinila, deca-hidroquinolinila, oxazolidinila, piperazinila, dioxanila, dioxolanila, diazepinila, oxazepinila, tiazepinila, morfolinil e qui- nuclidinila.

[00026] Conforme usado neste documento, o termo "parcialmente insaturado" refere-se a uma porção do anel que inclui pelo menos uma ligação dupla ou tripla. O termo "parcialmente insaturado" destina-se a abranger anéis tendo vários sítios de insaturação, mas não se destina a incluir frações de aril ou heteroarila, conforme definido neste documento.

[00027] O termo "heteroátomo" significa um ou mais de oxigênio, enxofre, nitrogênio, fósforo ou silício (incluindo, qualquer forma oxidada de nitrogênio, enxofre, fósforo ou silício; a forma quartenizada de qualquer nitrogênio básico ou; um nitrogênio substituível de um anel heterocíclico, por exemplo, N (como em 3,4-di-hidro-2H-pirrolil), NH (como no pirroli- dinil) ou NR+ (como no pirrolidinil N-substituído)).

[00028] Conforme usado neste documento, o termo "sal farmaceuti- camente aceitável" refere-se àqueles sais que são, dentro do escopo do bom julgamento médico, adequados para uso no contato com os tecidos de humanos e animais menores sem toxicidade, irritação, resposta alérgica inadequadas e similares, e são comensuráveis com uma razão be- nefício/risco razoável. Os sais farmaceuticamente aceitáveis são bem conhecidos na técnica. Por exemplo, S. M. Berge et al., descreve sais farmaceuticamente aceitáveis em detalhes em J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19, incorporado neste documento por referência.

[00029] Em determinadas modalidades, as formas neutras dos compostos são regeneradas pelo contato do sal com uma base ou ácido e isolamento do composto de origem de forma convencional. Em algumas modalidades, a forma de origem do composto difere das diversas formas de sal em determinadas propriedades físicas, tais como solubilidade em solventes polares.

[00030] A menos que indicado de outra forma, as estruturas representadas neste documento também destinam-se a incluir todas as formas isoméricas (por exemplo, enantiomérica, diastereomérica e geométrica (ou conformacional) da estrutura; por exemplo, as configurações R e S para cada cento assimétrico, isômeros de ligação dupla Z e E, e isôme- ros conformacionais Z e E. Portanto, os isômeros estereoquímicos simples, bem como misturas enantioméricas, diastereoméricas e geométricas (ou conformacionais) dos presentes compostos estão dentro do escopo da invenção. A menos que indicado de outra forma, todas as formas tautoméricas dos compostos da invenção estão dentro do escopo da invenção. Adicionalmente, a menos que indicado de outra forma, as estruturas representadas neste documento também se destinam a incluir compostos que diferem apenas na presença de um ou mais átomos iso- topicamente enriquecidos. Por exemplo, os compostos tendo as presentes estruturas incluindo a substituição do hidrogênio pelo deutério ou trí- tio, ou a substituição de um carbono por um carbono enriquecido com 13C- ou 14C estão dentro do escopo desta invenção. Esses compostos são úteis, por exemplo, como ferramentas analíticas, como sondas em ensaios biológicos, ou como agentes terapêuticos de acordo com a presente invenção. Compostos

[00031] Conforme descrito acima, em determinadas modalidades, a presente invenção fornece um composto da fórmula I:

[00032] ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R1 e o Anel A são conforme definidos e descritos neste documento.

[00033] Descobriu-se inesperadamente que os compostos da fórmula I exibem propriedades vantajosas sobre os inibidores conhecidos da Btk. Em determinadas modalidades, os compostos da fórmula I têm maior potência. Sem estar vinculado a nenhuma teoria em particular, acredita- se que os compostos divulgados neste documento possuem melhor potência como inibidores da Btk, um melhor perfil inespecífico, conforme medido pela inibição de hERG ou de ensaios de indução de PXR, ou uma combinação dos mesmos. São fornecidos dados experimentais mostrando essas propriedades vantajosas nos Exemplos seguintes.

[00034] Em algumas modalidades, ambos os R1 são hidrogênio. Em algumas modalidades, ambos os R1 são metila.

[00035] Em algumas modalidades, cada R1 é independentemente hi-drogênio ou C1-6 alifático. Em algumas modalidades, cada R1 é indepen- dentemente hidrogênio ou C1-5 alifático. Em algumas modalidades, cada R1 é independentemente hidrogênio ou C1-4 alifático. Em algumas modalidades, cada R1 é independentemente hidrogênio ou C1-3 alifático. Em algumas modalidades, cada R1 é independentemente hidrogênio ou C1-2 alifático. Em algumas modalidades, cada R1 é independentemente hidrogênio ou metila.

[00036] Em algumas modalidades, um R1 é hidrogênio e o outro R1 é C1-6 alifático. Em algumas modalidades, um R1 é hidrogênio e o outro R1 é metila. Em algumas modalidades, um R1 é hidrogênio e o outro R1 é etila. Em algumas modalidades, um R1 é hidrogênio e o outro R1 é C1-6 (cicloalquil)alquila. Em algumas modalidades, um R1 é hidrogênio e o outro R1 é C1-6 (cicloalquila).

[00037] Em algumas modalidades, um R1 é hidrogênio e o outro R1 é Ci-6 alifático opcionalmente substituído por -OR, em que R é hidrogênio ou C1-6 alifático.

[00038] Em algumas modalidades, um Ri é hidrogênio e o outro Ri é um grupo heterociclilalquil tendo 3-7 átomos de carbono e i-3 heteroá- tomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre. Em algumas modalidades, um Ri é hidrogênio e o outro Ri é um he- terociclo monocíclico de 3-7 membros opcionalmente substituído.

[00039] Em algumas modalidades, dois grupos Ri são tomados em conjunto com seus átomos intervenientes para formar um anel heterocí- clico monocíclico saturado ou parcialmente insaturado com 3-5 membros opcionalmente substituído tendo i-2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre. Em algumas modalidades, dois grupos Ri são tomados em conjunto com seus átomos intervenientes para formar um anel de piperazina opcionalmente substituído. R2

[00040] Conforme descrito acima, o Anel A

. Em de-terminadas modalidades, R2 é -Cl. Em outras modalidades, R2 é -F. Em algumas modalidades, R3 é -CF3. Em algumas modalidades, R3 é - OCF3. Em algumas modalidades, R3 é -F.

[00041] Em determinadas modalidades, o Anel A é selecionado do grupo consistindo em:

[00042] Em algumas modalidades, nos compostos descritos neste documento, há uma relação estereoquímica trans entre o substituinte de piperidina que porta o grupo carboxamida e o substituinte de piperidina que porta o grupo lactâmico.

[00043] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um composto da fórmula II-a:

[00044] ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que cada um de R1, R2, e R3 é como definido acima e descrito em classes e subclasses neste documento.

[00045] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um composto da fórmula II-b:

[00046] ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que cada um de R1, R2, e R3 é como definido acima e descrito em classes e subclasses neste documento.

[00047] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um composto da fórmula III:

[00048] ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que cada um de R2 e R3 é como definido acima e descrito em classes e subclasses neste documento.

[00049] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um composto da fórmula IV:

[00050] ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que cada um de R1 e R3 é como definido acima e descrito em classes e subclasses neste documento. Em algumas modalidades, ambos os R1 são hidrogênio. Em algumas modalidades, um R1 é hidrogênio e o outro R1 é metila.

[00051] Em algumas modalidades, um composto fornecido é um composto representado na Tabela 1 abaixo, ou um sal farmaceuticamen- te aceitável do mesmo. Tabela 1 - Compostos selecionados da fórmula I.

[00052] Os compostos da invenção são sintetizados por uma combi-nação apropriada dos métodos sintéticos geralmente conhecidos. As técnicas úteis na síntese dos compostos da invenção são prontamente evidentes e acessíveis àqueles versados na técnica relevante. A discussão abaixo é oferecida para ilustrar alguns dos diversos métodos disponíveis para uso na montagem dos compostos da invenção. No entanto, a discussão não se destina a definir o escopo das reações ou das sequências de reação que são úteis na preparação dos compostos da presente invenção.

[00053] Os compostos da fórmula I podem preparados de forma geral de acordo com o Esquema 1. Esquema 1

[00054] Os compostos da fórmula I também podem ser preparados de forma geral de acordo com os Esquemas 2, 3, 3a, 4, 4a, 5, ou 5a. Esquema 2

Esquema 3

Esquema 3a

Esquema 4

Esquema 4a

Esquema 5

Esquema 5a

[00055] Os grupos PG, PG1, PG2, e PG3 dos compostos nos Esquemas 1 ao 5a são, cada um, independentemente, um grupo protetor ade-quado. Esses grupos protetores de éster e amina são conhecidos na técnica e são descritos em detalhes em Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene e P. G. M. Wuts, 3a edição, John Wiley & Sons, 1999, cuja totalidade está incorporada neste documento por referência. Em algumas modalidades, um grupo protetor é um grupo Boc.

[00056] Em determinadas modalidades, cada uma das etapas sintéti-cas nos Esquemas 1 ao 5a pode ser realizada sequencialmente com o isolamento de cada intermediário realizado após cada etapa. Alternati-vamente, cada uma das etapas conforme descritas nos Esquemas 1, 2, 3 e 4 acima, pode ser realizada de uma forma, pela qual nenhum isolamento de um ou mais intermediários seja realizado.

[00057] Em determinadas modalidades, todas as etapas da síntese mencionada anteriormente podem ser realizadas para preparar o produto final desejado. Em outras modalidades, duas, três, quatro, cinco ou mais etapas sequenciais podem ser realizadas para preparar um intermediário ou o produto final desejado. Usos, Formulação e Administração

[00058] Em determinadas modalidades, os compostos da presente invenção são para uso na medicina. Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um método de diminuição da atividade enzimática de uma quinase na família da Tec quinase (por exemplo, Tec, Btk, Itk, Txk, Lck e Bmx). Em algumas modalidades, esses métodos incluem o contato de uma quinase da família da Tec quinase com uma quantidade eficaz de um inibidor da família da Tec quinase. Portanto, a presente invenção fornece ainda métodos de inibição da atividade enzimática da família da Tec quinase pelo contato de um membro da família da Tec quinase com um inibidor da família da Tec quinase da presente invenção. Conforme usados neste documento, o termo "membro da família da Tec quinase" refere-se a qualquer tirosina quinase não receptora na família da Tec quinase. Em algumas modalidades, os membros da família da Tec qui- nase são Tec, Btk, Itk, Txk, Lck e Bmx.

[00059] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece mé-todos de diminuir a atividade enzimática da Btk. Em algumas modalida-des, esses métodos incluem o contato da Btk com uma quantidade eficaz de um inibidor de Btk. Portanto, a presente invenção fornece ainda métodos de inibição da atividade enzimática da Btk pelo contato de uma Btk com um inibidor da Btk da presente invenção.

[00060] A atividade enzimática da Btk, conforme usada neste docu-mento, refere-se à atividade enzimática da Btk quinase. Por exemplo, onde a atividade enzimática da Btk está diminuída, a ligação de PIP3 e/ou fosforilação da PLCY está diminuída. Em algumas modalidades, a meia concentração inibitória máxima (IC50) do inibidor da Btk contra a Btk é menor que 1 μM. Em algumas modalidades, a IC50 do inibidor da Btk contra a Btk é menor que 500 nM. Em algumas modalidades, a IC50 do inibidor da Btk contra a Btk é menor que 100 nM. Em algumas modalidades, a IC50 do inibidor da Btk contra a Btk é menor que 10 nM. Em algu- mas modalidades, a IC50 do inibidor da Btk contra a Btk é menor que 1 nM. Em algumas modalidades, a IC50 do inibidor da Btk contra a Btk é de 0,1 nM a 10 μM. Em algumas modalidades, a IC50 do inibidor da Btk contra a Btk é de 0,1 nM a 1 μM. Em algumas modalidades, a IC50 do inibidor da Btk contra a Btk é de 0,1 nM a 100 nM. Em algumas modalidades, a IC50 do inibidor da Btk contra a Btk é de 0,1 nM a 10 nM.

[00061] Em algumas modalidades, os inibidores dessas Tec quinases são úteis para o tratamento de doenças e distúrbios que podem ser me-lhoradas pela inibição (isto é, diminuição) da atividade enzimática de uma ou mais Tec quinases. Os compostos da invenção são inibidores eficazes das quinases da família Tec e, assim, seriam úteis no tratamento de doenças associadas à atividade de uma ou mais das quinases da família Tec. O termo "doenças" significa doenças, síndromes ou sintomas da doença. Assim, a presente invenção fornece métodos de tratamento de doenças autoimunes, doenças inflamatórias e cânceres em um sujeito em necessidade. Esses métodos incluem administração ao sujeito de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um inibidor de Tec, Btk, Itk, Txk, Lck, e/ou Bmx quinase.

[00062] O termo "distúrbios autoimunes" inclui doenças ou distúrbios que envolvem uma resposta imune inapropriada contra antígenos nati-vos, tais como encefalomielite aguda disseminada (ADEM), doença de Addison, alopecia areata, síndrome de anticorpo antifosfolipídeo (APS), anemia hemolítica, hepatite autoimune, penfigoide bolhoso (BP), doença celíaca, dermatomiosite, diabetes mellitus tipo 1, síndrome de Goodpasture, doença de Graves, síndrome de Guillain-Barré (GBS), doença de Hashimoto, púrpura trombocitopênica idiopática, lúpus ou lúpus eritema- toso sistêmico (SLE), doença mista do tecido conjuntivo, esclerose múltipla, miastenia gravis, pênfigo vulgar, hemofilia com inibidores, anemia perniciosa, polimiosite, cirrose biliar primária, síndrome de Sjogren, arterite temporal, e granulomatose de Wegener. O termo "doenças inflamató- rias" inclui doenças ou distúrbios que envolvem inflamação aguda ou crônica, tais como alergias, asma (por exemplo, asma alérgica), dermatite atópica, prostatite, glomerulonefrite, doença inflamatória pélvica (PID), doença inflamatória intestinal (IBD, por exemplo, doença de Crohn, colite ulcerativa), lesão por reperfusão, artrite reumatoide, rejeição de transplante (incluindo pacientes de transplante com uma compatibilidade positiva) e vasculite. Em determinadas modalidades, a presente invenção fornece métodos de tratamento de doenças, distúrbios ou condições que foram aprovadas para o tratamento com rituximab (um anticorpo monoclonal contra CD20), incluindo linfoma não-Hodgkin (NHL), leucemia lin- focítica crônica (CLL), RA, granulomatose de Wegener (WG), e poliangií- te microscópica (MPA). Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um método de tratamento da artrite reumatoide (RA), SLE ou dermatite atópica usando os compostos divulgados neste documento.

[00063] O termo "câncer" inclui doenças ou distúrbios que envolvem crescimento e/ou proliferação celular anormal, tais como glioma, carci-noma de tireoide, carcinoma de mama, câncer de pulmão (por exemplo, carcinoma de pulmão de células pequenas, carcinoma de pulmão de células não pequenas), carcinoma gástrico, tumores estromais gastrointestinais, carcinoma pancreático, carcinoma do duto biliar, carcinoma ovari- ano, carcinoma do endométrio, carcinoma de próstata, carcinoma de células renais, linfoma (por exemplo, linfoma anaplásico de células grandes), leucemia (por exemplo, leucemia mieloide aguda, leucemia de células T, leucemia linfocítica crônica), mieloma múltiplo, mesotelioma maligno, melanoma maligno, e câncer de cólon (por exemplo, câncer colorretal de alta instabilidade de microssatélite). Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um método de tratamento de leucemia ou de lin- foma.

[00064] O termo "sujeito", conforme usado neste documento, refere- se a um mamífero ao qual uma composição farmacêutica é administrada. Sujeitos exemplares incluem humanos, bem como animais veterinários e laboratoriais, tais como cavalos, porcos, gado, cães, gatos, coelhos, ratos, camundongos e mamíferos aquáticos. Indicações Selecionadas e Inibição de Células B

[00065] Conforme descrito acima, os compostos fornecidos são úteis para o tratamento de doença, incluindo RA e SLE. Conforme descrito em mais detalhes abaixo, essas doenças são afiliadas com as células B. Assim, a presente divulgação abrange o reconhecimento de que os compostos fornecidos são úteis como terapêuticos para essas e outras indicações.

[00066] A desregulação do sistema imune é central para a patogêne- se (Panayi GS, et al. Rheum Dis Clin North Am 2001; 27:317-334) de RA. Embora a maior parte dos leucócitos infiltrantes no sinóvio são linfócitos T (células T CD4+ ativadas primariamente) e células de origem monocíti- ca/macrófaga (que liberam citocinas pró-inflamatórias, tais como IL-1, TNF-alfa e IL-6 e enzimas proteolíticas incluindo colagenases e metalo- proteinases), células B e células plasmáticas também são encontradas no líquido sinovial (Zhang Z, Bridges SL. Rheum Dis Clin North Am 2001; 27:335-353). Um claro papel para as células B e suas funções efetoras associadas em RA tem sido demonstrado pela eficácia do rituximab, um terapêutico para depleção seletiva de células B, que é aprovado para o tratamento de RA (Cohen SB, et al.; REFLEX Trial Group. Arthritis Rheum. setembro de 2006; 54(9):2793-806).

[00067] Embora a etiologia de SLE não seja totalmente entendida, autoanticorpos patogênicos e a deposição de complexos imunes são sentidos como sendo críticos para o desenvolvimento de dano tecidual difundido (Klippel JH, et al. Primer on the rheumatic diseases. Atlanta: Arthritis Foundation; 2001). Autoanticorpo e a ativação mediada por complexo imune pode ser estudados pela medição da inibição da ativa-ção de macrófagos por macrófagos estimulados através de receptores de Fc (ver a exemplificação - ativação de FCYR de macrófagos humanos primários). A perda de tolerância a autoantígenos levou enfim à estimulação das células B para produzirem autoanticorpo geralmente direcionados contra componentes nucleares ou citoplasmáticos. Os anticorpos contra componentes nucleares (anticorpos antinuclear) se direcionam a antígenos nucleares incluindo DNA (DNA de fita dupla típico [dsDNA]), RNA, histonas e ribonucleoproteínas nucleares pequenas. Esses anticorpos se combinam com autoantígenos formando complexos imunes que se depositam nos tecidos, estimulam reações inflamatórias e levam à lesão tecidual. Além de seus papéis na produção de autoanticorpo patogênico, as células B também funcionam como células apresentadoras de antígeno (APCs) para as células T, desempenhando, assim, um papel no início de uma resposta antígeno-específica. Dado o papel central do ramo humoral do sistema imune na patogênese de SLE, as células B ou a via das células B representam alvos terapêuticos desejáveis. Belimumab, um anticorpo monoclonal recentemente aprovado para SLE, bloqueia a ligação de BAFF a seus receptores que são células B expressas. Esses receptores servem para ativar e potencializar a sobrevida de células B consistente com a redução de células B circulantes observadas após o tratamento com belimumab. Ver também Chan OT, et al. Immunol Rev. 1999b;169:107-121; Navarra SV, et al. Lancet. 26 de fevereiro, 2011;377(9767):721-31; Furie R, et al. Arthritis Rheum. dezembro, 2011;63(12):3918-30. O papel de células B e as células da linhagem mie- loide em doenças autoimunes, tais como SLE, são ainda apoiados por uma publicação recente que descreve a eficácia em um modelo animal de SLE pré-clínico quando camundongos são tratados com um inibidor de Btk irreversível de molécula pequena (Honigberg, L.A. PNAS. 2010; 107: 13075). Combinações

[00068] Em determinadas modalidades, um composto da presente invenção é administrado em combinação com outro agente. Em algumas modalidades, um composto da presente invenção é útil para o tratamento de RA e é administrado em combinação com drogas antirreumáticas modificadoras de doença (DMARD), incluindo, sem limitação: metotrexato, abatacept, azatioprina, certolizumab, cloroquina e hidroxicloroquina, ci- closporina, D-penicilamina, adalimumab, etanercept, golimumab, sais de ouro (incluindo auranofina e aurotiomalato de sódio), infliximab, lefluno- mida, minociclina, rituximab, sulfasalazina, tocilizumab, ou combinações dos mesmos. Em algumas modalidades, um composto da presente invenção é administrado em combinação com um AINE ou corticoide. Em algumas modalidades, um composto da presente invenção é útil para o tratamento de SLE e é administrado em combinação com um agente para o tratamento de SLE, incluindo, sem limitação: corticosteroides, anti- maláricos, belimumab, micofenolato de mofetil (MMF) ou micofenolato de sódio, azatioprina, ou combinações dos mesmos. Em algumas modalidades, um composto da presente invenção é útil para o tratamento de der-matite atópica e é administrado em combinação com um agente tópico para o tratamento de dermatite atópica, incluindo, sem limitação: esteroi- des tópicos, tacrolimus, metotrexato, furoato de mometasona (MMF), azatioprina, retinoides, ou combinações dos mesmos. Ensaios

[00069] Para desenvolver inibidores da família Tec quinase úteis, ini-bidores candidatos capazes de diminuir a atividade enzimática da família da Tec quinase podem ser identificados in vitro. A atividade dos compostos inibidores pode ser analisada utilizando métodos conhecidos na técnica e/ou aqueles métodos apresentados neste documento.

[00070] Os compostos que diminuem a atividade enzimática dos membros da família da Tec quinase podem ser identificados e testados usando um membro da família da Tec quinase biologicamente ativo, tanto recombinante quanto de ocorrência natural. As Tec quinases podem ser encontradas em células nativas, isoladas in vitro, ou coexpressas ou expressas numa célula. A medição da redução da atividade enzimática do membro da família da Tec quinase na presença de um inibidor em relação à atividade na ausência do inibidor pode ser realizada usando uma variedade de métodos conhecidos na técnica, tais como os ensaios POLYGAT-LS descritos abaixo nos Exemplos. Outros métodos para analisar a atividade da Btk e outras Tec quinases são conhecidos na técnica. A seleção dos métodos de ensaio apropriados está dentro das capacidades daqueles versados na técnica.

[00071] Uma vez que os compostos são identificados como capazes de reduzir a atividade enzimática dos membros da família de Tec qui- nase, os compostos podem ser testados ainda para sua capacidade de inibir seletivamente um membro da família de Tec quinase em relação a outras enzimas.

[00072] Os compostos podem ser testados ainda em modelos celulares ou modelos animais para sua capacidade em causar mudanças de- tectáveis no fenótipo relacionado a uma atividade do membro da família da Tec quinase. Além de culturas celulares, modelos animais podem ser usados para testar inibidores do membro da família da Tec quinase para sua capacidade de tratar doenças autoimunes, doenças inflamatórias ou câncer em um modelo animal. Composições Farmacêuticas

[00073] Em outro aspecto, a presente invenção fornece composições farmacêuticas compreendendo um composto da fórmula I ou um com-posto da fórmula I em combinação com um excipiente farmaceuticamen- te aceitável (por exemplo, carreador).

[00074] As composições farmacêuticas incluem isômeros ópticos, di- astereômeros ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos inibidores divulgados neste documento. O composto da fórmula I incluído na composição farmacêutica pode ser covalentemente ligado a uma porção do car- reador, conforme descrito acima. Alternativamente, o composto da fórmula I incluído na composição farmacêutica não é covalentemente ligado a uma porção do carreador.

[00075] Um "carreador farmaceuticamente aceitável", conforme usado neste documento, refere-se a excipientes farmacêuticos, por exemplo, substâncias de carreador farmaceuticamente, fisiologicamente aceitáveis orgânicas ou inorgânicas adequadas para aplicação entérica e parentéri- ca que não reagem de forma deletéria com o agente ativo. Carreadores farmaceuticamente aceitáveis adequados incluem água, soluções de sal (tal como solução de Ringer), alcoóis, óleos, gelatinas e carboidratos, tais como lactose, amilose ou amido, ésteres de ácido graxo, hidroximetilcelu- lose e polivinil pirrolidina. Essas preparações podem ser esterilizadas e, se desejado, misturadas com agentes auxiliares, tais como lubrificantes, conservantes, estabilizantes, agentes umidificantes, emulsificantes, sais para influenciar a pressão osmótica, tampões, coloração e/ou substâncias aromáticas e similares, que não reagem de forma deletéria com os compostos da invenção.

[00076] Os compostos da invenção podem ser administrados sozinhos ou podem ser coadministrados ao sujeito. A coadministração destina-se a incluir a administração simultânea ou sequencial dos compostos individualmente ou em combinação (mais de um composto). As preparações também podem ser combinadas, quando desejado, com outras substâncias ativas (por exemplo, para reduzir a degradação metabólica).

[00077] Os compostos da presente invenção podem ser preparados e administrados numa ampla variedade de formas de dosagem oral, parenteral e tópica. Assim, os compostos da presente invenção podem ser administrados por injeção (por exemplo, por via intravenosa, intramuscular, intracutânea, subcutânea, intraduodenal ou intraperitoneal). Além disso, os compostos descritos neste documento podem ser administrados por inalação, por exemplo, por via intranasal. Adicionalmente, os com-postos da presente invenção podem ser administrados por via transdér- mica. Prevê-se também que várias vias de administração (por exemplo, intramuscular, oral, transdérmica) podem ser usadas para administrar os compostos da invenção.

[00078] Para a preparação das composições farmacêuticas dos com-postos da presente invenção, carreadores farmaceuticamente aceitáveis podem ser sólidos ou líquidos. As preparações de forma sólida incluem pós, comprimidos, pílulas, cápsulas, cachets, supositórios e grânulos dis- persíveis. Um carreador sólido pode ser uma ou mais substância que também pode agir como diluentes, agentes aromatizantes, ligantes, conservantes, agentes de desintegrantes de comprimido, ou um material en- capsulante.

[00079] Em pós, o carreador é um sólido finamente dividido em uma mistura com o componente ativo finamente dividido. Em comprimidos, o componente ativo é misturado com o carreador tendo as propriedades de ligação necessárias em proporções adequadas e compactado na forma e tamanho desejados.

[00080] Os pós e comprimidos contêm preferencialmente de 5% a 70% do composto ativo. Carreadores adequados são carbonato de mag-nésio, estearato de magnésio, talco, açúcar, lactose, pectina, dextrina, amido, gelatina, tragacanto, metilcelulose, carboximetilcelulose de sódio, uma cera de baixa fundição, manteiga de cacau, e similares. O termo "preparação" destina-se a incluir a formulação do composto ativo com um material encapsulante como um carreador fornecendo uma cápsula na qual o componente ativo com ou sem outros carreadores, está rodeado por um carreador, que está, portanto, em associação com ele. De forma semelhante, cachets e pastilhas estão incluídos. Comprimidos, pós, cápsulas, pílulas, cachets e pastilhas podem ser usados como formas de dosagem sólidas adequadas para a administração oral.

[00081] Para a preparação de supositórios, uma cera de baixa fundi-ção, tal como uma mistura de glicerídeos de ácido graxo ou manteiga de cacau, é primeiro derretida e o componente ativo é dispersado homogeneamente nela, como por agitação. A mistura homogênea derretida é então derramada em moldes de tamanhos convenientes, deixadas resfriar e, desse modo, solidificar.

[00082] As preparações de forma líquida incluem soluções, suspensões e emulsões, por exemplo, água ou soluções de água/propilenoglicol. Para a injeção parenteral, as preparações líquidas podem ser formuladas em solução em solução de polietilenoglicol aquoso.

[00083] Quando a aplicação parentérica é necessária ou desejada, misturas particularmente adequadas para os compostos da invenção são injetáveis, soluções estéreis, preferencialmente soluções oleosas ou aquosas, bem como suspensões, emulsões ou implantes, incluindo supositórios. Em particular, os carreadores para a administração parentéri- ca incluem soluções aquosas de dextrose, salina, água pura, etanol, gli- cerol, propilenoglicol, óleo de amendoim, óleo de sésamo, polímeros em bloco de polioxietileno, e similares. Ampolas são as dosagens unitárias convenientes. Os compostos da invenção também podem ser incorporados em lipossomos ou administrados através de bombas ou adesivos transdérmicos. Misturas farmacêuticas adequadas para uso na presente invenção incluem aquelas descritas, por exemplo, em Pharmaceutical Sciences (17a Ed., Mack Pub. Co., Easton, PA) e WO 96/05309, os ensinamentos de ambos os quais estão incorporados, por meio deste, por referência.

[00084] Soluções aquosas adequadas para uso oral podem ser pre-paradas, dissolvendo-se o componente ativo em água e adicionando corantes, aromatizantes, estabilizantes e agentes espessantes adequados, conforme desejado. Suspensões aquosas adequadas para uso oral podem ser feitas, dispersando-se o componente ativo finamente dividido em água com material viscoso, tal como gomas naturais ou sintéticas, resi-nas, metilcelulose, carboximetilcelulose de sódio, e outros agentes de suspensão conhecidos.

[00085] Também estão incluídos preparações de forma sólida que pretendem ser convertidas, imediatamente antes do uso, em prepara-ções de forma líquida para administração oral. Essas formas líquidas incluem soluções, suspensões e emulsões. Essas preparações podem conter, além do componente ativo, corante, aromatizantes, estabilizantes, tampões, adoçantes artificiais e naturais, dispersantes, espessantes, agente solubilizantes, e similares.

[00086] A preparação farmacêutica está preferencialmente na forma de dosagem unitária. Nessa forma de preparação é subdividida em doses unitárias contendo quantidades apropriadas do componente ativo. A forma de dosagem unitária pode ser uma preparação embalada, a embalagem contendo quantidades discretas da preparação, tais como comprimidos, cápsulas e pós em frascos ou ampolas embalados. Além disso, a forma de dosagem unitária pode ser uma cápsula, comprimido, cachet ou pastilha em si, ou pode ser o número apropriado de qualquer um desses na forma embalada.

[00087] A quantidade do componente ativo numa preparação de dose unitária pode ser variada ou ajustada de 0,1 mg a 10000 mg, mais nor-malmente 1,0 mg a 1000 mg, mais normalmente 10 mg a 500 mg, de acordo com a aplicação específica e a potência do componente ativo. A composição pode, se desejado, também contém outros agentes terapêuticos compatíveis.

[00088] Alguns compostos podem ter solubilidade limitada em água e, portanto, podem necessitar de um surfactante ou outro co-solvente apropriado na composição. Esses co-solventes incluem: Polissorbato 20, 60 e 80; Plurônico F-68, F-84 e P-103; ciclodextrina; e óleo de rícino polioxil 35. Esses co-solventes são normalmente empregados em um nível entre cerca de 0,01% e cerca de 2% em peso.

[00089] A viscosidade maior que aquela de soluções aquosas simples pode ser desejável diminuir a variabilidade na distribuição das formula-ções, para diminuir a separação física dos componentes de uma suspensão ou emulsão da formulação, e/ou para melhorar, de outra forma, a formulação. Esses agentes formadores de viscosidade incluem, por exemplo, álcool polivinílico, polivinil pirrolidona, metilcelulose, hidroxipro- pil metilcelulose, hidroxietilcelulose, carboximetilcelulose, hidroxipropil celulose, sulfato de condroitina e sais dos mesmos, ácido hialurônico e sais do mesmo, e combinações dos anteriores. Esses agentes são normalmente empregados num nível entre cerca de 0,01% e cerca de 2% em peso.

[00090] As composições da presente invenção podem incluir adicio-nalmente componentes para fornecer liberação sustentada e/ou conforto. Esses componentes incluem polímeros mucomiméticos aniônicos de alto peso molecular, polissacarídeos gelificantes, e substratos de carreador de droga dividido finamente. Esses componentes são discutidos em mais detalhes na Pat. U.S. N°s. 4.911.920; 5.403.841; 5.212.162; e 4.861.760. Todos os conteúdos dessas patentes estão incorporados neste documento me sua totalidade por referência para todos os fins. Doses Eficazes

[00091] As composições farmacêuticas fornecidas pela presente in-venção incluem composições, em que o ingrediente ativo está contido numa quantidade terapeuticamente eficaz, isto é, numa quantidade efi-caz para atingir sua finalidade pretendida. A quantidade real efetiva para uma aplicação específica dependerá, inter alia, da condição sendo tratada. Por exemplo, quando administradas nos métodos para tratar câncer, essas composições conterão uma quantidade de ingrediente ativo eficaz para atingir o resultado desejado (por exemplo, diminuição do número de células cancerosas em um sujeito).

[00092] A dosagem e frequência (dose única ou múltiplas) do composto administrado podem variar dependendo de uma variedade de fatores, incluindo a via de administração; tamanho, idade, sexo, saúde, peso corporal, índice de massa corporal, e dieta do recebedor; natureza e grau dos sintomas da doença sendo tratada (por exemplo, a doença responsi- va à inibição de Btk); presença de outras doenças ou outros problemas relacionados à saúde; tipo de tratamento simultâneo; e complicações de qualquer doença ou regime de tratamento. Outros regimes ou agentes terapêuticos podem ser usados em conjunto com os métodos e compostos da invenção.

[00093] Para qualquer composto descrito neste documento, a quanti-dade terapeuticamente eficaz pode ser inicialmente determinada a partir de ensaios de cultura celular. As concentrações alvo serão aquelas concentrações do(s) composto(s) ativo(s) que são capazes de diminuir a atividade enzimática da quinase conforme medido, por exemplo, usando os métodos descritos.

[00094] Quantidades terapeuticamente eficazes para uso em humanos podem ser determinadas a partir de modelos animais. Por exemplo, uma dose para humanos pode ser formulada para atingir uma concentração que foi descoberta como sendo eficaz em animais. A dosagem em humanos pode ser ajustada pelo monitoramento da inibição da quinase e ajuste da dosagem para mais ou para menos, conforme descrito acima. Em determinadas modalidades, a dose administrada está no intervalo de cerca de 10 mg a cerca de 1000 mg por dia, tanto uma vez, duas vezes quanto mais de duas vezes por dia.

[00095] As dosagens podem ser variadas dependendo das exigências do paciente e do composto sendo empregado. A dose administrada a um paciente, no contexto da presente invenção, deveria ser suficiente para efetuar uma resposta terapêutica benéfica no paciente ao longo do tempo. O tamanho da dose também será determinado pela existência, natureza e grau de quaisquer efeitos colaterais adversos. Geralmente, o tratamento é iniciado com dosagens menores, que são menores que a dose ideal do composto. Posteriormente, a dosagem é aumentada em pequenos incrementos até que seja atingido o efeito ideal sob as circunstâncias. Em algumas modalidades, o intervalo de dosagem é 0,001% a 10% p/v. Em algumas modalidades, o intervalo de dosagem é 0,1% a 5% p/v.

[00096] As quantidades e os intervalos de dosagem podem ser ajus-tados individualmente para proporcionar níveis do composto administra-do efetivos para a indicação clínica específica sendo tratada. Isto proporcionará um regime terapêutico que é proporcional com a gravidade do estado da doença do indivíduo.

[00097] A fim de que a invenção descrita neste documento possa ser mais completamente entendida, os seguintes exemplos são representa-dos. Deve ser compreendido que esses exemplos são para fins ilustrativos apenas e não devem ser interpretados como limitantes desta invenção de qualquer maneira. Exemplificação

[00098] Conforme retratado nos Exemplos abaixo, em determinadas modalidades exemplares, os compostos são preparados de acordo com os seguintes procedimentos gerais. Será contemplado que, apesar dos métodos gerais retratarem a síntese de determinados compostos da presente invenção, os seguintes métodos gerais, e outros métodos conhecidos a um versado na técnica, podem ser aplicados a todos os compostos e subclasses e espécies de cada um desses compostos, conforme descrito neste documento. Exemplo 1 Síntese de 2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-1',4'-dicarboxilato de (3'R,4'S)- 1'-terc-butil 4'-etila

[00099] Preparação do intermediário 3-oxopiperidina-4- carboxilato de etila. 1-Benzil-3-oxopiperidina-4-carboxilato de etila 1 (15,0 g, 50,5 mmols, 1,0 equiv) foi hidrogenado na presença de catalisador Pd/C 10% (1,5 g) sob H2 a pressão atmosférica em MeOH (250 mL) por 16 horas. O catalisador foi filtrado e o solvente foi concentrado in vacuo para gerar 3-oxopiperidina-4-carboxilato de etila 2 como um sólido amarelo claro (10,2 g, rendimento: 98,0%). ESI-MS (M+H) +: 172,1. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 4,23 (q, 2H), 3,75 (s, 2H), 3,37 (s, 2H), 3,20-3,16 (m, 2H), 2,44 (t, 1H), 1,25 (t, 3H).

[000100] Preparação de 3-oxopiperidina-1,4-dicarboxilato de 1- terc-butil 4-etila. 3-Oxopiperidina-4-carboxilato de etil 2 (10,2 g, 60,0 mmols, 1,0 equiv) foi dissolvido em MeOH seco (200 mL), e Et3N (33,1 mL, 240 mmols, 4,0 equiv) foi adicionado. A mistura foi agitada por uma hora e Boc2O (19,5 g, 90,0 mmols, 1,5 equiv) foi adicionado e agitado por 16 horas. O solvente foi concentrado in vacuo e o produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna (sílica, éter de petróleo/EtOAc =9:1) para gerar um óleo amarelo claro de 3-oxopiperidina-1,4-dicarboxilato de 1-terc-butil 4-etil 3 (11,5 g, rendimento: 86%). ESI-MS (M+H-56) +: 216,0. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 4,24 (q, 2H), 4,03 (s, 2H), 3,49 (t, 2H), 2,33 (t, 2H), 1,47 (s, 9H), 1,31 (t, 3H).

[000101] Preparação de 3-((1-feniletil)amino)-5,6-di-hidropiridina- 1,4-(2H)-dicarboxilato de (S)-1-terc-butil 4-etila. Em um frasco seco equipado com um trap de Dean-Stark e um condensador de refluxo, o 3- oxopiperidina-1,4-dicarboxilato de 1-terc-butil 4-etila 3 (10,0 g, 37,0 mmols, 1,1 equiv) foi dissolvido em tolueno (100 mL). S-(-)-α- Metilbenzilamina (4,9 g, 40,5 mmols, 1,1 equiv) e ácido p- toluenossulfônico mono-hidratado (0,7 g, 3,7 mmols, 0,1 equiv) foram adicionados e a mistura foi aquecida para refluxar por 16 horas. A mistura de reação bruta foi concentrada in vacuo para gerar 3-((1- feniletil)amino)-5,6-di-hidropiridina-1,4(2H)-dicarboxilato de (S)-1-terc-butil 4-etila 4 (12,0 g, R: 88%) como óleo laranja espesso que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional, ESI-MS (M+H) +: 375,2.

[000102] Preparação de 3-(((S)1-feniletil)amino)-5,6-di- hidropiridina-1,4(2H)-dicarboxilato de 1-terc-butil 4-etila. 3-(((S)-1- feniletil)amino)piperidina-1,4-dicarboxilato de 1-terc-butil 4-etila 4 (11,2 g, 30,0 mmols, 1,0 equiv) foi dissolvido numa mistura de CH3CN (60 mL) e ácido acético (60 mL) e resfriado a 0°C. NaBH(OAc)3 (19,0 g, 90,0 mmols, 3,0 equiv) foi lentamente adicionado e a mistura de reação foi deixada agitar por duas horas a 0°C. NaHCO3 saturado foi lentamente adicionado para neutralizar a solução para manter a temperatura interna do frasco abaixo 10°C. A mistura foi extraída com EtOAc (50 mL x 3). A camada orgânica combinada foi seca (Na2SO4), filtrada, concentrada in vacuo, e então purificada por cromatografia de coluna (sílica, éter de pe- tróleo/EtOAc =9:1) para gerar 3-(((S)1-feniletil)amino)-5,6-di-hidropiridina- 1,4(2H)-dicarboxilato de 4-etila 5 (8,2 g, R: 73%) como óleo amarelo claro. ESI-MS (M+H) +: 377,2. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ: 7,31-7,22 (m, 5H), 4,20 (q, 2H), 4,11-3,86 (m, 3H), 3,15 (s, 1H), 3,00-2,90 (m, 2H), 2,64 (d, 2H), 1,87-1,85 (m, 1H), 1,68 (s, 1H), 1,50-1,25 (m, 15H).

[000103] Preparação de 3-(((S)-1-feniletil)amino)piperidina-1,4- dicarboxilato de trans-1-terc-butil 4-etila. O 3-(((S)-1- feniletil)amino)piperidina-1,4-dicarboxilato de 1-terc-butil 4-etila 5 (8,0 g, 21,2 mmols, 1,0 equiv) foi dissolvido em EtOH seco (20 mL) sob N2. Em um frasco Schlenk seco por chamas separado foi colocado EtOH seco (150 mL), e sódio (0,450 g, 63,6 mmols, 3,0 equiv) foi adicionado em porções sob N2. A mistura foi mantida sob N2 e ventilada para remover os gases emitidos até todo o sódio ter se dissolvido. A solução clara de 3- (((S)-1-feniletil)amino)piperidina-1,4-dicarboxilato de 1-terc-butil 4-etil foi então transferida à solução de NaOEt, e a mistura foi agitada a 80°C sob N2por 16 horas. O solvente foi removido in vacuo, e salmoura (150 mL) foi adicionada e a mistura foi posta em pH =10 com 1 N NaOH e extraída com EtOAc (100 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas (Na2SO4) e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado por cro- matografia de coluna (sílica, éter de petróleo/EtOAc = 5:1) para gerar 3- (((S)-1-feniletil)amino)piperidina-1,4-dicarboxilato de (trans)-1-terc-butil 4- etil 6 como um sólido ligeiramente amarelo (3,7 g, rendimento: 46%). ESI-MS (M+H) +: 377,2.

[000104] Preparação de 3-aminopiperidina-1,4-dicarboxilato de trans-1-terc-butil 4-etila. 3-(((S)-1-feniletil)amino)piperidina-1,4- dicarbo- xilato de trans-1-terc-butil 4-etila 6 (3,7 g, 8,3 mmols, 1,0 equiv) foi hidro- genado na presença de catalisador Pd/C 10% (0,37 g) sob H2 a pressão atmosférica 30 em MeOH (100 mL) a 50°C por 8 h. O catalisador foi fil- trado e o solvente foi removido in vacuo para gerar 3-aminopiperidina- 1,4-dicarboxilato de (trans)-1-terc-butil 4-etila 7 como um óleo amarelo claro (2,5 g, rendimento: 92%). ESI-MS (M+H) +: 273,1. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 4,18 (q, 2H), 3,97-3,94 (m, 2H), 3,37 (s, 1H), 3,07-3,02 (m, 1H), 2,89-2,85 (m, 1H), 2,60-2,55 (m, 1H), 2,01-1,91 (m, 1H), 1,70-1,54 (m, 3H), 1,46 (s, 9H), 1,28 (t, 3H).

[000105] Síntese de 3-(5-bromopentanamido)piperidina-1,4- dicarboxilato de trans-1-terc-butil 4-etila. A uma solução de 3- aminopiperidina-1,4-dicarboxilato de trans-1-terc-butil 4-etila 7 (2,5 g, 9,2 mmols, 1,0 equiv) em CH2Cl2 (50 mL), Et3N (2,5 mL, 18,4 mmols, 2,0 equiv) foi adicionado a temperatura ambiente. Após a solução de reação ter sido agitada na temperatura ambiente por 10 min, cloreto de 5- bromovaleril (1,9 g, 9,6 mmols, 1,05 eq) foi adicionado. A solução de reação foi agitada na temperatura ambiente por duas horas. A mistura foi interrompida com H2O (20 mL) e extraída com CH2Cl2 (50 mL x 3). A camada orgânica foi coletada, concentrada in vacuo, e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (sílica, éter de petróleo/EtOAc =1:1) para gerar 3-(5-bromopentanamido)piperidina-1,4-dicarboxilato de (trans)-1-terc-butil 4-etila 8 como um óleo amarelo (3,2 g, rendimento: 80%). ESI-MS (M+H-56) +: 379,0. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 5,99 (d, 1H), 4,39-4,38 (m, 1H), 4,15 (q, 2H), 3,79-3,74 (m, 1H), 3,66-3,60 (m, 1H), 3,41 (t, 2H), 3,30-3,26 (m, 1H), 3,21-3,14 (m, 1H), 2,78-2,74 (m, 1H), 2,19 (t, 2H), 1,99-1,85 (m, 3H), 1,80-1,72 (m, 3H), 1,45 (s, 9H), 1,27 (t, 3H).

[000106] Síntese de 2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-1',4'-dicarboxilato de trans-1'-terc-butil 4'-etila. A uma solução de 3-(5-bromopentana- mido)piperidina-1,4-dicarboxilato de trans-1-terc-butil 4-etila 8 (3,0 g, 6,9 mmols, 1,0 equiv) em THF (20 mL), NaH (276 mg, 6,9 mmols, 1,0 equiv) foi adicionado cuidadosamente em pequenas porção a 0°C. A solução de reação foi agitada na condição de refluxo por 4 horas. A mistura foi inter- rompida com H2O (20 mL), e extraída com EtOAc (30 mL x 3). A camada orgânica foi coletada, seca (Na2SO4), filtrada e concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (sílica, éter de petró- leo/EtOAc = 1:2) para gerar 2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-1',4'-dicarboxilato de (trans)-1'-terc-butil 4'-etil 9 como um óleo ligeiramente amarelo (2,1 g, rendimento: 88%). ESI-MS (M+H-56)+: 299,1. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 4,10 (q, 4H), 3,38-3,19 (m, 4H), 2,70-2,61 (m, 1H), 2,36-2,31 (m, 2H), 1,95-1,92 (m, 1H), 1,75-1,71 (m, 6H), 1,46 (s, 9H), 1,23 (t, 3H). Exemplo 2 Preparação de trans-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida

[000107] Síntese de trans-1'-terc-butil-4'-etil-3-iodo-2-oxo-[1,3'- bipiperidina]-1',4'-dicarboxilato. À solução de 2-oxo-[1,3'-bipiperidina]- 1',4'-dicarboxilato de trans-1'-terc-butil 4'-etila 8 (141 mg, 2,58 mmols, 1,0 equiv) em tolueno seco (10 mL) a 0°C, TMEDA (0,89 g, 7,7 mmols, 3,0 equiv) e TMSCl (0,6 mg, 1,0 mmol, 2,0 equiv) foram adicionados suces-sivamente sob N2. Após 0,5 h, I2 (0,98 g, 3,87 mmols, 1,5 equiv) foi cui-dadosamente adicionado em pequenas porções. A solução de reação foi agitada a 0°C a temperatura ambiente por 16 horas. A mistura foi diluída com EtOAc (100 mL), lavada com Na2S2O3 saturado (20 mL x 2) e salmoura (20 mL), seca (Na2SO4), filtrada e concentrada in vacuo. O produto bruto 9 (2,2 g, R: 81%) foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional. ESI-MS (M+H-56)+: 424,9.1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 4,78-4,73 (m, 1H), 4,19-4,04 (m, 4H), 3,55-3,30 (m, 4H), 3,24-3,16 (m, 2H), 2,73-2,60 (m, 1H), 2,22-2,14 (m, 2H), 1,96-1,78 (m, 2H), 1,70-1,60 (m, 1H),1,44 (s, 9H), 1,25 (t, J = 7,2 Hz, 3H).

[000108] Síntese de 3-((3-cloro-5-(trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'- bipiperidina]-1',4'-dicarboxilato de trans-1'-terc-butil 4'-etila. Uma solução 1,0 M de bis(trimetildisilil)amida de lítio em THF (13 mL, 12 mmols, 2,0 equiv) foi adicionada através de um funil de adição a 10-15°C a uma solução de 3-cloro-5-(trifluorometil)anilina (15 g, 78 mmols, 1,2 equiv) em THF (13 mL). A mistura foi deixada agitar na temperatura ambiente por 20 minutos e uma solução de trans-1'-terc-butil-4'-etil-3-iodo-2-oxo-[1,3'- bipiperidina]-1',4'-dicarboxilato bruto 9 (3,7 g, 65 mmols, 1,0 equiv) em THF (13 mL) foi adicionado através de um funil de adição a 10-15°C durante 30 minutos. Após a adição, a reação foi deixada agitar na temperatura por 30 minutos. Após a conclusão, a reação foi resfriada a 5°C e interrompida lentamente com água (10 mL), mantendo a temperatura abaixo de 20°C. A reação interrompida foi extraída com EtOAc (2 x 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura saturada (30 mL), seca (Na2SO4), filtrada e concentrada in vacuo. O produto bruto resultante foi purificada com gel de sílica eluindo-se com um gradiente de 10% a 75% de EtOAc em heptanos para gerar o produto desejado 10. ESI-MS (M+H-56)+: 463,1. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 6,92 (s, 1H), 6,71-6,69 (m, 2H), 4,17-4,06 (m, 4H), 3,78-3,68 (m, 2H), 3,46-3,36 (m, 3H), 3,23-3,07 (m, 2H), 2,73-2,65 (m, 1H), 2,44-2,37 (m, 1H), 2,03-1,85 (m, 3H), 1,71-1,61 (m, 2H), 1,46 (s, 9H), 1,27-1,19 (m, 3H).

[000109] Síntese de ácido trans-1'-(terc-butoxicarbonil)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxilíco. A uma solução de 3-((3-cloro-5-(trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'- bipiperidina]-1',4'-dicarboxilato de trans-1'-terc-butil 4'-etila 10 (180 mg, 0,33 mmol, 1,0 equiv) em EtOH (5 mL) foi adicionado NaOH (40 mg, 0,99 mmol, 3,0 equiv) e a solução foi agitada a 80°C por uma hora. O solvente foi concentrado in vacuo e o resíduo foi suspenso em água (10 mL) e ajustado para pH = 6 com HCl (4 N). O precipitado foi filtrado para gerar o ácido (trans)-1'-(terc-butoxicarbonil)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxílico 11 (150 mg, R: 82%) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. ESI-MS (M+H-85) +: 463,1. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 6,85 (s, 1H), 6,82 (s, 1H), 6,78 (s, 1H), 4,12-3,96 (m, 4H), 3,533,37 (m, 2H), 3,11-3,04 (m, 2H), 2,75-2,67 (m, 1H), 2,24-2,18 (m, 1H), 1,98-1,89 (m, 3H), 1,71-1,58 (m, 2H), 1,44 (s, 9H).

[000110] Síntese de 4'-carbamoil-3-((3-cloro-5-(trifluorometil)fenil)- -amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-1'-carboxilato de trans-terc-butila. À solução de ácido trans 1'-(terc-butoxicarbonil)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxilíco 11 (70 mg, 0,14 mmol, 1,0 equiv) em DMF (2 mL), foi adicionado NH4Cl (22 mg, 0,41 mmol, 3,0 equiv), HBTU (103 mg, 0,270 mmol, 2,0 equiv) e DIPEA (52 mg, 0,41 mmol, 3,0 equiv). A solução da reação foi agitada a temperatura ambiente por 16 horas, diluído com EtOAc (10 mL) e lavada com água (5 mL) e salmoura (5 mL). A fase orgânica foi separada e concentrada in vacuo para gerar um óleo bruto que foi purificado por pre-HPLC (MeOH/H2O com TFA 0,05% como fase móvel) para gerar o composto 4'-carbamoil-3-((3-cloro-5-(trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'- bipiperidina]-1'-carboxilato de (trans)-terc-butil 12 (60 mg, rendimento: 86%) como um sólido claro. ESI-MS (M+H-56)+: 463,1. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ: 6,87-6,86 (m, 1H), 6,84-6,83 (m, 1H), 6,80 (s, 1H), 4,114,03 (m, 3H), 3,53-3,35 (m, 2H), 3,20-3,08 (m, 2H), 2,77-2,74 (m, 1H), 2,25-2,18 (m, 1H), 1,99-1,88 (m, 3H), 1,70-1,60 (m, 2H), 1,46 (s, 9H).

[000111] Síntese de trans-3-((3-cloro-5-(trifluorometil)fenil)amino)-2- oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida. À solução de 4'-carbamoil-3-((3- cloro-5-(trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-1'-carboxilato de trans-terc-butila 12 (60 mg, 0,11 mmol) em CH2Cl2 (1,0 mL) foi adicionado CF3CO2H (1,0 mL) em temperatura ambiente. A mistura da reação foi agitada a temperatura ambiente por duas horas, concentrada in vacuo para gerar o produto desejado 13 (43 mg, 90%) que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional. ESI-MS (M+H)+: 419,0.

[000112] Síntese de trans-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro- 5-(trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida. A uma solução de trans-3-((3-cloro-5-(trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'- bipiperidina]-4'-carboxamida 13 (42 mg, 0,10 mmol, 1,0 equiv) em 1- butanol (2 mL), 6-cloro-5-fluoropirimidin-4-amina (18 mg, 0,12 mmol, 1,2 equiv) foi adicionado DIPEA (26 mg, 0,20 mmol, 2,0 equiv). A solução de reação foi agitada a 120°C por 16 horas. A mistura foi diluída com EtOAc (20 mL), lavada com H2O (10 mL) e salmoura (10 mL), seca (Na2SO4), filtrada e concentrada in vacuo. O produto bruto foi purificado por pre- HPLC (MeOH/H2O com TFA 0,05% como fase móvel) para gerar o composto (trans)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorome- til)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida 14 (44 mg, rendimento: 83%) como um sólido amarelo. ESI-MS (M+H) +: 530,0. HPLC: (214 nm: 100%, 254 nm: 100%). 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ: 7,97 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 6,81 (s, 1H), 6,76 (s, 1H), 4,58-4,52 (m, 2H), 4,09-4,03 (m, 1H), 3,52-3,35 (m, 3H), 3,29-3,27 (m, 4H), 3,12-3,05 (m, 1H), 2,242,17 (m, 1H), 2,02-1,91 (m, 3H), 1,80-1,63 (m, 2H).

[000113] (3R,3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida. A mistura de quatro diastereômeros do composto 14 foi separada em três picos por SFC (IA(2 x 15 cm), EtOH 30% (0,1% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 60 ml/min) e o composto do título correspondia ao pico 3. LCMS (Agilent460, 254 nm): ES (+) MS m/e = 530,1 (M+1) @ 1,20 min. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7,77 (d, J = 2,01 Hz, 1H), 7,38 (br. s., 1H), 6,94 (s, 2H), 6,75 - 6,87 (m, 2H), 6,41 - 6,66 (m, 3H), 4,29 (br. s., 1H), 4,23 (d, J = 13,05 Hz, 1H), 3,96 - 4,18 (m, 2H), 3,44 (td, J = 6,15, 12,30 Hz, 1H), 3,24 - 3,33 (m, 1H), 3,10 (br. s., 1H), 2,88 (br. s., 1H), 2,82 (t, J = 12,30 Hz, 1H), 2,13 (qd, J = 5,94, 12,30 Hz, 1H), 1,74 - 1,93 (m, 3H), 1,58 - 1,74 (m, 1H), 1,41 - 1,58 (m, 1H).

[000114] (3S,3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida. A mistura de quatro diastereômeros do composto 14 foi separada em três picos por SFC (IA(2 x 15 cm), EtOH 30% (0,1% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 60 ml/min) e o composto do título correspondia ao pico 2. LCMS (Agilent460, 254 nm): ES (+) MS m/e = 530,1 (M+1) @ 1,19 min. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7,77 (d, J = 1,76 Hz, 1H), 7,39 (br. s., 1H), 6,98 (s, 1H), 6,96 (s, 1H), 6,72 - 6,88 (m, 2H), 6,57 (s, 2H), 6,54 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 4,05 - 4,33 (m, 4H), 3,37 (t, J = 6,27 Hz, 2H), 3,11 (br. s., 1H), 2,94 (br. s., 1H), 2,82 (t, J = 12,30 Hz, 1H), 2,02 - 2,16 (m, 1H), 1,75 - 1,92 (m, 3H), 1,57 - 1,74 (m, 1H), 1,36 - 1,54 (m, 1H).

[000115] (3S,3'S,4'R)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida. A mistura de quatro diastereômeros do composto 14 foi separada em três picos por SFC (IA(2 x 15 cm), EtOH 30% (0,1% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 60 ml/min). O pico 1 de 3 foi purificado adicionalmente SFC (AD-H (2 x 15cm), iPrOH 30% (0,1% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 60 ml/min) para gerar o composto do título. LCMS (Agilent 460, 254 nm): ES (+) MS m/e = 530,1 (M+1) @ 1,20 min. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7,77 (d, J = 1,76 Hz, 1H), 7,38 (br. s., 1H), 6,94 (s, 2H), 6,83 (s, 1H), 6,80 (s, 1H), 6,42 - 6,66 (m, 3H), 4,18 - 4,47 (m, 2H), 3,95 - 4,18 (m, 2H), 3,39 - 3,52 (m, 1H), 3,24 - 3,31 (m, 1H), 3,10 (br. s., 1H), 2,88 (br. s., 1H), 2,82 (t, J = 12,30 Hz, 1H), 2,13 (qd, J = 5,91, 12,39 Hz, 1H), 1,73 - 1,92 (m, 3H), 1,58 - 1,73 (m, 1H), 1,42 - 1,58 (m, 1H).

[000116] (3R,3'S,4'R)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida. A mistura de quatro diastereômeros do composto 14 foi separada em três picos por SFC (IA(2 x 15 cm), EtOH 30% (0,1% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 60 ml/min). O pico 1 de 3 foi purificado adicionalmente SFC (AD-H (2 x 15 cm), iPrOH 30% (0,1% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 60 ml/min) para gerar o composto do título. LCMS (Agilent 460, 254 nm): ES (+) MS m/e = 530,1 (M+1) @ 1,20 min. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7,77 (d, J = 1,76 Hz, 1H), 7,39 (br. s., 1H), 6,98 (s, 1H), 6,96 (s, 1H), 6,73 - 6,88 (m, 2H), 6,57 (s, 2H), 6,54 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 4,05 - 4,35 (m, 4H), 3,37 (t, J = 6,15 Hz, 2H), 3,12 (br. s., 1H), 2,94 (br. s., 1H), 2,82 (t, J = 12,30 Hz, 1H), 2,09 (sxt, J = 5,80 Hz, 1H), 1,74 - 1,92 (m, 3H), 1,56 - 1,73 (m, 1H), 1,36 - 1,52 (m, 1H). Exemplo 3 Síntese alternativa de (3R,3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4- il)-3-((3-cloro-5-(trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]- 4'-carboxamida.

[000117] Além dos métodos descritos no Exemplo 2, (3R,3'R,4'S)-1'-(6- amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5-(trifluorometil)fenil)amino)-2- oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida (composto I-1) também foi sinteti-zado de acordo com o Esquema 6. Esquema 6

[000118] 3-Oxopiperidina-1,4-dicarboxilato de 1-terc-butil 4-etil 3-2. A uma solução de 3-1 (5,0 kg, 19,1 mols, 1,0 equiv) em EtOH (50 L) sob N2 foi adicionado (Boc)2O (4,2 kg, 19,1 mols, 1,0 equiv), Et3N (1,9 kg, 19,1 mols, 1,0 equiv) e Pd(OH)2/C 10% (250 g, 10% p/p). Após esvaziada e reenchida com hidrogenação três vezes, a mistura foi agitada sob 1 atm de hidrogênio a 50°C por 15 horas. LC-MS indicou completamente o consumo de 3-1. Após a mistura ter resfriado a temperatura ambiente, o catalisador foi filtrado através de uma camada de celite e lavado com EtOH (2,5 L). O filtrado foi concentrado in vacuo para gerar um 3-2 bruto (5,2 kg) como um óleo, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional.

[000119] 3-((1-Feniletil)amino)-5,6-di-hidropiridina-1,4 (2H)- dicarboxilato de (S)-1-terc-butil 4-etila (3-3). A um reator de 100 L equipado com um aparelho de Dean-Stark foi carregado tolueno (20 L), composto bruto 3-2 (5,2 kg, 19,1 mols, 1,0 equiv) lavado com tolueno (30 L), pTSA (329 g, 0,2 mol, 0,01 equiv), e S-(-)-α-metilbenzilamina .95 kg, 16,2 mols, 0,85 equiv). A mistura foi aquecida para refluxar com uma camada de nitrogênio e a água foi removida através de Dean-Stark. Após 18 horas, a LC-MS indicou o consumo completo de 3-2. A mistura foi en- tão resfriada a temperatura ambiente. Os insolúveis foram removidos por filtração, e o filtrado foi concentrado in vacuo até secar para gerar um 3-3 bruto como um óleo espesso. Este produto bruto foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. 3-10% de subproduto de amida formado nesta reação e sua estrutura foi atribuída como tentativa com base nos dados de LC-MS.

[000120] 3-(((S)-1-feniletil)amino)piperidina-1,4-dicarboxilato de (3R)-1-terc-butil 4-etila (3-4). A um reator de 100 L carregado com NaBH4 (1,16 kg, 30,5 mols, 2,0 equiv) e THF anidro (60 L) sob nitrogênio foi adicionado TFA (10,5 kg, 92 mols, 6,0 equiv) lentamente durante 30 min enquanto mantém a temperatura a 0~5°C. A mistura foi então resfriada a -45°C. Em um reator de separação, o produto bruto 3-3 foi dissolvido em acetonitrila anidra (30 L), que foi adicionada lentamente à solução acima de NaBH4/TFA enquanto mantém a temperatura interna entre -45~-30°C. A mistura foi agitada a -45°C por uma hora, após o que, a HPLC indicou o consumo completo do composto 3-3. A mistura foi lentamente diluída com água gelada (50 kg) e a mistura foi então aquecida a 10°C. O produto foi extraído com EtOAc (2 x 40 L) e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução de NaHCO3 saturada (20 L). O pH da solução aquosa foi de ~8. As camadas orgânicas foram secas (Na2SO4) e concentradas in vacuo até secarem para gerar um resíduo que se tornou azeotropo posteriormente com MeOH (10 L x 3) para remover o excesso de EtOAc. No final, uma solução de 10 L de 3-4 bruto em MeOH foi obtida, que foi usada diretamente na etapa subsequente sem purificação adicional. ESI-MS (M+H-1) +: 377,2. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ: 7,31-7,22 (m, 5H), 4,20 (q, 2H), 4,11-3,86 (m, 3H), 3,15 (s, 1H), 3,00-2,90 (m, 2H), 2,64 (d, 2H), 1,87-1,85 (m, 1H), 1,68 (s, 1H), 1,50-1,25 (m, 15H).

[000121] Ácido (3R)-1-(terc-butoxicarbonil)-3-(((S)-1- feniletil)amino)piperidina-4-carboxílico (3-5). Um reator de 100 L foi carregado com THF/MeOH (1:1, 80 L), foi adicionada uma solução de LiOH·H2O (2,5 kg, 60 mol, 4,0 equiv) em água (10 L) e uma solução de 3-4 bruto em MeOH (10 L) da etapa acima. A mistura resultante foi agitada a 22°C por 18 horas, tempo no qual a LC/MS indicou o consumo completo do material inicial 3-4. A solução foi diluída com MTBE (40 L) e agitada por 20 minutos. A camada aquosa foi separada, resfriada a 0°C e neutralizada com solução de 3N HCl para um pH entre 7-8, enquanto mantinha a temperatura interna abaixo de 10°C. A solução foi lavada com DCM (5 x 30 L) ou até que a LC/MS indicasse nenhum produto 3-5 restante na camada aquosa. As camadas orgânicas combinadas foram concentradas in vacuo até secarem, suspensas em EtOAc e éter de petróleo (2:1, 10 L) e agitadas por duas horas, os sólidos foram filtrados, lavados por éter de petróleo (5 L) e secos sob vácuo a 50°C por 18 horas para gerar o produto (3,5 Kg, 53% de rendimento) como um sólido com 95% de pureza. O composto 3-5 é uma mistura de ~30:70 trans/cis em C-4 e ~93:7 R:S em C-3. O rendimento geral médio do 3-1 é de 43-55%. ESI-MS (M+H-1) +: 349,2. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ: 8,22-8,06 (m, 5H) 4,11 (m, 1H), 3,86-3,82 (m, 1H), 3,59-3,56 (m, 1H), 2,79-2,65 (m, 1H), 3,22-2,62 (m, 2H), 2,06-2,16 (m, 12H).

[000122] Ácido (3R)-1-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-(((S)-1- feniletil)amino)piperidina-4-carboxílico (3-7). Um reator de 50 L foi car-regado com 10 L de 2N HCl e 3-5 (850 g, 2,44 mols, 1,0 equiv). A mistura foi aquecida a 30°C e agitada por duas horas, tempo no qual a HPLC indicou o consumo completo do 3-5 inicial. A solução foi diluída com MTBE (4 L) e agitada por 20 min, as camadas foram separadas e à camada aquosa foi adicionado K2CO3 sólido (660 g) durante uma hora para pH ~7. K2CO3 adicional (660 g, 4,8 mols, 2,0 equiv) foi adicionado seguido por 6-cloro-5-fluoropirimidina-4-ilamina (360 g, 2,44 mols, 1,0 equiv) e 1,4-dioxano (5 L). A mistura foi aquecida para refluxar suavemente a 100°C a agitada nesta temperatura por 16 horas. A HPLC indicou <2% do composto 3-6 restante. A mistura foi lavada com DCM (2 x 5 L) e as soluções orgânicas de lavagem foram descartadas. A camada aquosa foi tratada com carvão ativado (425 g), agitando-se a pasta fluida por uma hora a 30°C seguido por filtração através de diatomita. Este tratamento de carvão ativado foi repetido. A solução aquosa resultante foi neutralizada para pH ~7 com HCl concentrado, e agitada a 22°C por 3 horas, a pasta fluida resultante foi filtrada e a torta úmida foi lavada com 1,4- dioxano/água (1:1, 1,2 L), seca sob vácuo a 50°C por 18 horas até KF ~0,5% do produto 3-7 ser obtido como um sólido branco pálido (690 g, 81% de rendimento) com pureza de 98,6%. O produto contém uma mistura de 1:9 isômeros cis/trans nas posições C3 e C4. ESI-MS (M+H-1) +: 460,2. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ: 8,49 (d, J = 2,01 Hz, 1H), 8,21-8,14 (m, 5H) 4,94-4,90 (m, 1H), 4,63 (d, J = 11,55 Hz, 1H), 4,42 (m, 1H), 4,03 (m, 2H), 3,59 - 3,72 (m, 3H), 2,84 - 2,93 (m, 1H), 2,20 - 2,31 (m, 1H), 2,15 (d, J = 6,78 Hz, 3H).

[000123] Ácido (3R)-3-amino-1-(6-amino-5-fluoropirimidin-4- il)piperidina-4-carboxílico (3-8). Uma reação de 10 L foi carregada sob N2, i-PrOH (3,5 L), H2O (3,5 L), 3-7 (1,0 equiv, 0,97 mol, 350 g), fluoreto de potássio mono-hidratado (290 g, 3,0 eq, 3,0 mols) e 35 g de Pd(OH)2/C 20% (10% v/p). Após esvaziada/reenchida com hidrogênio três vezes, a mistura foi aquecida a 40-50°C e vigorosamente agitada nessa temperatura sob uma atmosfera de hidrogênio. Após 18 horas, a LC/MS indicou <1% do material inicial 3-7 restante. A mistura foi purgada com N2 por 20 min, resfriada a 22°C, e filtrada. A torta úmida e o filtrado continham o produto e foram processadas separadamente.

[000124] O filtrado foi concentrado in vacuo a 50°C a um volume de ~200 mL. Após resfriada a 20°C e agitada nesta temperatura por duas horas, uma pasta fluida foi obtida, e o sólido foi filtrado, lavado com água (400 mL) e seco sob vácuo e a 50°C para gerar o produto 3-8 (65 g). A torta úmida da filtração da reação foi agitada em 1N HCl (1 L) por 2 horas para dissolver o produto e o catalisador restante sólido foi então removido por filtração. O filtrado ácido foi neutralizado com LiOH sólido para pH ~7 para precipitar o produto 3-8. O produto foi lavado com água (200 mL), seco sob vácuo e a 50°C para gerar 120 g do produto. Um total de 185 g do produto foi obtido com 98,7% de pureza em 75% de rendimento com base em H RMN. Todos os líquidos de origem foram combinados e concentrados a um volume de ~400 mL, resultando numa pasta fluida, a filtração, a lavagem com água e a secagem geraram um sólido de 64 g adicional com ~50% de pureza. 1H RMN (400 MHz, D2O): δ 7,77 (s, 1H) 4,12 (d, J = 14,05 Hz, 1H), 4,01 (d, J = 13,05 Hz, 1H), 3,26 (d, J = 13,80 Hz,1), 2,99 - 3,10 (m, 1H), 2,64 - 2,73 (m, 1H), 1,98 (dd, J = 3,39, 14,18 Hz, 1H), 1,74 - 1,87 (m, 1H).

[000125] Ácido ((3R,3'R)-1'-(terc-butoxicarbonil)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxílico (3-10). A uma solução de 3-8 (440 g, 1,9 mol, 1,0 equiv) em DMSO (10 L) foi adi cionado o 3-8A sequencialmente (640 g, 1,9 mol, 1,0 equiv) e triacetoxi- borohidreto de sódio (STAB, 402,0 g, 3,8 mols, 2 equiv) e Et3N (190 g, 1,9 mol, 1,0 equiv). A mistura foi aquecida a 50°C e agitada por 3 horas para mostrar a conversão completa pela HPLC no intermediário 3-9.

[000126] A solução foi diluída com MeOH (182 g, 5,7 mols, 3,0 eq,) pa-ra interromper o excesso de STAB, e a reação foi aquecida a 70~80°C. Após 16 horas, a HPLC indicou 22% do produto 3-10 formado e 61% do intermediário 3-9 restante e a HPLC quiral indicou ~3% de epímero lac- tâmico. A mistura foi mantida a 70-80°C por 24 horas adicionais para gerar 50% de 3-10, 35% de 3-9, e 7% de epímero lactâmico. Após outras 40 horas de agitação, 80% de 3-10 formado, 4% de 3-9 restante, e o epímero lactâmico aumentou para 14%. A mistura foi resfriada a 22°C, e interrompida com uma solução de 2N NH4Cl (5 L) para gerar uma mistura de pasta fluida. Após 30 minutos de agitação, a mistura foi filtrada e a torta úmida foi lavada com água (3 L), seca sob vácuo e a 55°C até que KF<0,1. O 3-10 bruto foi obtido como um sólido marrom (850 g, 97,7%); a HPLC quiral indicou 12,5% de epímero lactâmico. Este produto foi usa- do diretamente sem purificação adicional.

[000127] Ácido (3R,3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3- cloro-5-(trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxílico (3-10-trans). Um reator de 10 L foi carregado sob N2 com 3-10 (850 g, 1,9 mol, 1,0 equiv) em DMF (4,25 L, 5 v/p) para gerar uma solução clara foram adicionados 4-dimetilaminopiridina (DMAP 116g, 0,95 mol, 0,5 equiv) e 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (EDCI, 36,5 g, 0,19 mol, 0,1 equiv). Após a mistura ter sido agitada em 15 a 22°C por cerca de uma hora, EDCI adicional (36,5 g, 0,19 mol, 0,1 equiv) foi adicionado e agitado por outra uma hora. HPLC indicou uma mistura 69:1 trans/cis. O produto 3-10-trans não foi isolado e foi convertido no composto I-1 em única etapa. 1H RMN (300 MHz, DMSO d6): δ 1,47-1,55 (m, 1H), 1,63-1,68 (m, 1H), 1,81-1,87 (m, 1H), 1,90-1,97 (m, 1H), 2,93-3,19 (m, 1H), 3,16-3,23 (m, 1H), 3,33-3,45 (m, 2H) 4,07-4,33 (m, 3H), 6,80 (m, 1H), 6,94-6,98 (m, 1H), 7,10-7,16 (m, 2H), 7,91 (s, 1H).

[000128] (3R,3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida (I-1). A mistura da reação acima foi carregada a 22°C com hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N‘,N‘- tetrametilurônio (HATU, 600 g, 1,9 mol, 1,0 equiv), N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA, 1,0 kg, 9,5 mol, 5,0 equiv) e finalmente NH4Cl (260 g, 5,7 mols, 3,0 equiv). A mistura resultante foi agitada a 15°C por uma hora, a HPLC indicou o consumo completo de 3-10-trans, a mistura foi derramada em salmoura (25 L) e extraída com EtOAc (2 x 2L). Os compostos orgânicos combinados foram lavados com salmoura (2 x 2L) e concentrados in vacuo abaixo de 45°C até secar para resultar em I-1 bruto, que foi purificado por cromatografia com EtOAc/éter de petróleo/MeOH (1:1:0 a 50:50:10) para gerar três frações, que continham 316 g, 98,8% de pureza química e 10,8% de epíme- ro, 160 g, 82,3% de pureza química e 17,5% de epímero e 180 g, 61% de pureza e 11,3% de epímero, respectivamente. As duas primeiras reações acima foram combinadas e purificadas adicionalmente por prep- HPLC para gerar 200 g do produto com >99% de pureza e <1% de epí- mero. 1H RMN (400 MHz, DMSO d6): δ 1,48-1,53 (m, 1H), 1,66-1,69 (m, 1H), 1,77-1,79 (m, 3H), 2,11-2,16 (m, 1H), 2,80-2,88 (m, 2H), 3,11 (s, 1H), 3,42-3,48 (m, 1H), 4,0-4,25 (m, 4H), 6,58 (s, 3H), 6,80-6,85 (d, J = 10,2, 2H), 6,95 (s, 2H), 7,40 (s, 1H), 7,77 (s, 1H). Exemplo 4 Síntese alternativa de (3R,3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4- il)-3-((3-cloro-5-(trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]- 4'-carboxamida.

[000129] Além dos métodos descritos nos Exemplos 2 e 3, (3R,3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5-(trifluoro-

[000130] metil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida (composto I-1) também foi sintetizado de acordo com o Esquema 6. Esquema 7

[000131] Ácido (3R)-3-amino-1-(terc-butoxicarbonil)piperidina-4- carboxílico (4-L-6). Um reator de 10 L carregado sob nitrogênio com o composto 4-5 (100 g, 0,287 mol), MeOH (6 L, 60 v/p) e 10 g de Pd(OH)2/C 20%. O reator foi evacuado/reenchido com hidrogênio três vezes e a mistura foi aquecida a 40-50°C enquanto agitava sob 3 Mpa de hidrogênio por 40 horas. A LC/MS indicou o consumo completo do material inicial 4-5. A mistura foi resfriada a 22°C e filtrada, e o filtrado foi concentrado in vacuo até secar para gerar um produto sólido. Este produto bruto se tornou uma pasta fluida em EtOH (500 mL) a 22°C por duas horas, filtrado e seco sob vácuo a 50°C para gerar 85% de rendimento do produto 4-L-6 (60 g, 0,245 mol) como um sólido branco.

Ácido (3R)-1-(terc-butoxicarbonil)-3-(((R)-4-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-5-etóxi-5-oxopentil)amino)piperidina-4- carboxílico (4-L-8). A uma solução de 4-L-6 (48,4 g, 0,197 mol) em DMSO (450 mL) foi adicionado Et3N (20,2 g, 0,199 mol, 1 equiv), 3-8A (67,4 g, 0,199 mol, 1 equiv) e triacetoxiborohidreto de sódio (STAB, 84,8 g, 0,40 mol, 2,0 equiv). A mistura foi aquecida a 50°C durante 30 min e agitada nessa temperatura por 3 horas. A LC/MS indicou o consumo da maior parte do material inicial 4-L-6 e a formação de 4-L-8.

[000132] A reação foi interrompida pela adição de EtOH (35 mL) e agi-tada a 50°C por 30 min. A mistura foi aquecida a 75-85°C por 3 dias. A mistura foi resfriada a 18°C e transferida lentamente para água (6 L) enquanto agitava-se vigorosamente para gerar uma pasta fluida. Após duas horas, os sólidos foram filtrados e lavados com água (3 x 3 L), secos sob vácuo a 60-70°C por 24 horas para gerar o 4-L-9 (114 g) como um sólido marrom. O sólido foi usado diretamente na etapa subsequente.

[000133] Ácido (3R,3'R,4'S)-1'-(terc-butoxicarbonil)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxílico (4-L-9- trans). A uma solução de 4-L-9 bruto (100 g), em DMF (500 mL), foi adi-cionado 4-dimetilaminopiridina (11 g, 0,09 mol, 0,5 equiv) e agitada a 20°C por 10 min. 1-Etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (7,0 g, 0,036 mol, 0,2 equiv) foi adicionada e a reação foi agitada a 20°C por 3 horas. A HPLC indicou uma razão de mistura 57:43 cis/trans e EDAC adicional (3,5 g, 0,018 mol, 0,1 equiv) foi adicionado. Após 5 horas, a HPLC indicou a conversão completa em 4-L-9-trans. A mistura foi transferida para água (2,25 L) lentamente e a mistura foi extraída com EtOAc (2 x 500 mL), e as camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (500 mL) e água (500 mL), concentradas in vacuo até secar para gerar o 4-L-9-trans bruto (100 g) como um sólido marrom. O produto bruto foi dissolvido em EtOAc (135 mL) a 60°C e, em seguida, resfriado a 20°C durante uma hora, seguido pela adição de 50 mL de éter de petróleo. A mistura foi envelhecida por duas horas. Os sólidos foram filtrados e lavados com 3:1 de EtOAc/éter de petróleo (50 mL), secos sob vácuo a 50°C por 16 horas para gerar 4-L-9-trans (23 g, 22% de rendimento com 99% de pureza).1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 6,94 (s, 2H), 6,81 (s, 1H), 6,54 - 6,61 (m, 1H), 3,99 - 4,08 (m, 1H), 3. 42 - 3,38 (m, 2H), 2,07 - 2,16 (m, 1H), 1,74 - 1,92 (m, 3H), 1,39 (s, 9H).

[000134] Cloridrato de ácido (3R,3'R,4'S)-3-((3-cloro-5-(trifluoro- metil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxílico (4-L-10 trans). A uma solução de 0,5N HCl em EtOAc (76 mL) foi adicionado 4-L-9 trans (20 g, 38 mmols) e aquecida a 20°C por 18 horas para gerar uma pasta fluida. O sólido foi filtrado, lavado com EtOAc (5 mL) e seco sob vácuo a 45°C por 18 horas para gerar 4-L-10 como o sal de HCl (17 g, 97% de

[000135] Ácido (3R,3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3- cloro-5-(trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxí-lico (3-10-trans). Uma solução de 4-L-10 (2,0 g, 4,38 mols), 6-cloro-5-flúor- pirimidin-4-ilamina (711 mg, 4,82 mmols, 1,1 equiv), DIPEA (1,52 mL, 8,77 mols, 2 eq.) em 40 mL de nBuOH foi aquecido a 130-140°C por 72 horas. A mistura foi resfriada a 22°C e concentrada in vacuo para gerar um resíduo que foi purificado por coluna para gerar o 3-10-trans (1,1 g, 47%). Uma quantidade relativamente menor de epímero de ácido (3S,3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxílico também foi observada. O intermediário 3-10-trans pode ser convertido no com-posto I-1 através do procedimento descrito acima.

[000136] O Composto I-1 também foi sintetizado de acordo com o Es-quema 8.

[000137] A síntese de 1-(3-cloro-5-(trifluorometil)fenil)-5- oxopirrolidina-2-carboxilato de (R)-terc-butila 4-e foi sintetizada usando um procedimento semelhante como em Phillips, D. P.; Zhu, X. -F.; Lau, T. L.; Yang, K.; Liu, H. Tetrahedron Letters, 2009, 50, 7293, pelo qual o 5-oxopirrolidina-2-carboxilato de (S)-metil e o 1-cloro-4- iodobenzeno foram substituídos pelo 5-oxopirrolidina-2-carboxilato de (R)-terc-butil e 1-cloro-3-iodo-5-(trifluorometil)benzeno.

[000138] 1-(3-cloro-5-(trifluorometil)fenil)-5-hidroxipirrolidina-2- carboxilato de (2R)-terc-butila. Uma solução anidra de 4-e (11 g, 30 mmols) em Me-THF (100 mL) foi resfriada a -35°C sob uma atmosfera de nitrogênio. Uma solução de DIABL-H (5,9 g, 42 mmols) em tolueno (42 mL) foi adicionada gota-a-gota enquanto mantém a temperatura a -35°C. A reação foi monitorada por HPLC e após a conclusão de uma solução de 1N sal de Rochell (100 mL) foi adicionada enquanto mantendo a temperatura de reação abaixo de 0°C. A fase orgânica foi separada, lavada com 1N sal de Rochell (50 mL x 3) e separada, diluída com Et3N (4 mL), seca (Na2SO4) e concentrada in vacuo para gerar o 4-f (8,3 g) como um óleo.

[000139] Ácido (3R)-1-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-(((R)-5-(terc- butóxi)-4-((3-cloro-5-(trifluorometil)fenil)amino)-5-oxopentil)amino)pipe- ridina-4-carboxílico. Uma solução de 4-f (37,4 g, 0,146 mmol) em DMF (700 mL) foi tratada com 3-8 (40,2 g, 0,11 mmol), Et3N (10,1 g, 0,1 mmol) STAB (42,4 g, 0,2 mmol) e a mistura foi aquecida a 55°C por 5 horas. A reação foi diluída com água (2,5 L), extraída com EtOAc (500 mL x 3), as fases orgânicas foram combinadas e lavadas com salmoura, separadas, secas (Na2SO4) e concentradas in vacuo para gerar o 4-a (40,2 g) como um sólido que foi usado sem qualquer purificação adicional.

[000140] Ácido (3R)-1-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-(((R)-4-carbóxi- 4-((3-cloro-5-(trifluorometil)fenil)amino)butil)amino)piperidina-4- carboxílico. A uma solução de 5 N HCl (250 mL) foi adicionado éster t- butil 4-a e a suspensão foi aquecida a 55°C por 5 horas enquanto a hi-drólise foi monitorada por HPLC. Após a conclusão da formação do produto, a água foi removida in vacuo, resultando em um 4-b sólido que foi seco sob vácuo e usado sem qualquer purificação adicional.

[000141] Ácido (3R,3'R)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxílico. A uma solução de 4-b ácido (55 g, 0,1 mol) em DMF (500 mL) foi adicionado um DIEA (64,5 g, 0,5 mol), CDI (32,5 g, 0,2 mol) a 0°C. A solução foi agitada a 1,5 h a 0°C, diluída com água (3 L), ajustada para um pH 3 com HCl e extraída com EtOAc (2 L x 3). As fases orgânicas foram combinadas, secas (Na2SO4) e concentradas in vacuo para gerar o 4-c (48 g).

[000142] As etapas restantes para o composto I-1 são concluídas atra-vés dos procedimentos descritos acima. Exemplo 5 Síntese de 3-((3-cloro-5-(trifluorometil)fenil)amino)-4'- (metilcarbamoil)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-1'-carboxilato de trans- terc-butila.

[000143] Síntese de 3-((3-cloro-5-(trifluorometil)fenil)amino)-4'- (metilcarbamoil)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-1'-carboxilato de trans-terc- butila. Um procedimento semelhante foi usado, conforme descrito para a síntese de (3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida 14, para gerar o material bruto que foi purificado por pre-HPLC (MeOH/H2O com 0,05% NH3.H2O como fase móvel) para gerar o composto do título (360 mg, rendimento: 67%) como um sólido amarelo. ESI-MS (M+H) +: 544,18. HPLC: (214 nm: 100,0%, 254 nm: 100,0%). 1H RMN (400 MHz, CD3OD) (mistura de isômeros) δ: 7,69-7,68 (m, 1H), 6,78 (s, 1H), 6,75 (s, 1H), 6,71 (s, 1H), 4,39-4,36 (m, 2H), 4,09-4,03 (m, 1H), 3,53-3,31 (m, 3H), 3,20-3,10 (m, 1H), 2,99-2,92 (m, 1H), 2,55 (s, 3H), 2,28-2,19 (m, 1H), 1,96-1,77 (m, 5H), 1,68-1,58 (m, 1H).

[000144] (3R,3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-N-metil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida. A mistura de quatro diastereômeros foi separada em dois picos por SFC (AD-H (2 x 15 cm), 50% 1:1 IPA:metanol (0,1% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 60 ml/min). O pico 2 foi purificado ainda por separação SFC (AD-H (2 x 15 cm), 30% iPrOH(0,15% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 60 ml/min) para gerar o composto do título. LCMS (Agilent 460, 254 nm): ES (+) MS m/e = 544,1 (M+1) @ 1,24 min. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7,72 - 7,85 (m, 2H), 6,92 (s, 2H), 6,81 (s, 1H), 6,43 - 6,64 (m, 3H), 4,34 (br. s., 1H), 4,23 (d, J = 13,05 Hz, 1H), 3,93 - 4,19 (m, 2H), 3,37 - 3,49 (m, 1H), 3,22 - 3,30 (m, 1H), 3,13 (br. s., 1H), 2,84 (t, J = 12,05 Hz, 2H), 2,57 (d, J = 4,52 Hz, 3H), 2,13 (qd, J = 6,05, 12,45 Hz, 1H), 1,60 - 1,89 (m, 4H), 1,40 - 1,58 (m, 1H).

[000145] (3S,3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-N-metil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida. A mistura de quatro diastereômeros foi separada em dois picos por SFC (AD-H (2 x 15 cm), 50% 1:1 IPA:metanol (0,1% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 60 ml/min). O pico 2 foi purificado ainda por separação SFC (AD-H (2 x 15 cm), 30% iPrOH(0,15% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 60 ml/min) para gerar o composto do título. LCMS (Agilent 460, 254 nm): ES (+) MS m/e = 544,1 (M+1) @ 1,24 min. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7,83 (q, J = 4,60 Hz, 1H), 7,77 (d, J = 1,76 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 6,78 Hz, 2H), 6,81 (s, 1H), 6,58 (s, 2H), 6,53 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 4,23 (d, J = 13,05 Hz, 2H), 3,90 - 4,19 (m, 2H), 3,14 (br. s., 1H), 2,92 (br. s., 1H), 2,74 - 2,90 (m, 1H), 2,55 (d, J = 4,52 Hz, 3H), 2,00 - 2,18 (m, 1H), 1,74 - 1,89 (m, 3H), 1,56 - 1,74 (m, 1H), 1,34 - 1,50 (m, 1H).

[000146] (3S,3'S,4'R)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-N-metil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida. A mistura de quatro diastereômeros foi separada em dois picos por SFC (AD-H (2 x 15 cm), 50% 1:1 IPA:metanol (0,1% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 60 ml/min). O pico 1 foi purificado ainda por SFC (AD-H (2 x 15 cm), 30% MeOH (0,15% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 60 ml/min) para gerar o composto do título. LCMS (Agilent 460, 254nm): ES (+) MS m/e = 544.1 (M+1) @ 1,23 min. 1H RMN (400 MHz, DMSO- d6) δ: 7,72 - 7,85 (m, 2H), 6,92 (s, 2H), 6,81 (s, 1H), 6,57 (s, 2H), 6,54 (d, J = 7,53 Hz, 1H), 4,23 (d, J = 13,30 Hz, 1H), 4,15 (dd, J = 3,26, 12,30 Hz, 1H), 4,08 (td, J = 7,06, 10,48 Hz, 1H), 3,36 - 3,47 (m, 1H), 3,23 - 3,30 (m, 1H), 3,13 (br. s., 1H), 2,84 (t, J = 11,80 Hz, 2H), 2,57 (d, J = 4,52 Hz, 3H), 2,13 (qd, J = 6,17, 12,61 Hz, 1H), 1,62 - 1,91 (m, 4H), 1,42 - 1,57 (m, 1H).

[000147] trans-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5-(tri- fluorometil)fenil)amino)-N-metil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carbo-xamida. A mistura de quatro diastereômeros foi separada em dois picos por SFC (AD-H (2 x 15 cm), 50% 1:1 IPA:metanol (0,1% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 60 ml/min). O pico 1 foi purificado ainda por SFC (AD-H (2 x 15 cm), 30% MeOH (0,15% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 60 ml/min) para gerar o composto do título. LCMS (Agilent 460, 254 nm): ES (+) MS m/e = 544,1 (M+1) @ 1,23 min. LCMS (Agilent 460, 254 nm): ES (+) MS m/e = 544,1 (M+1) @ 1,24 min. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7,80 - 7,89 (m, 1H), 7,72 - 7,80 (m, 1H), 6,97 (d, J = 6,53 Hz, 2H), 6,81 (s, 1H), 6,58 (s, 2H), 6,53 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 4,23 (d, J = 13,05 Hz, 2H), 3,89 - 4,19 (m, 2H), 3,13 (br. s., 1H), 2,74 - 3,02 (m, J = 12,42, 12,42 Hz, 2H), 2,55 (d, J = 4,52 Hz, 3H), 2,08 (qd, J = 5,97, 12,20 Hz, 1H), 1,81 (td, J = 6,24, 12,36 Hz, 3H), 1,56 - 1,74 (m, 1H), 1,33 - 1,51 (m, 1H). Exemplo 6

[000148] Síntese de trans-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro- 5-(trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida. Um procedimento semelhante foi usado, conforme descrito para a síntese de (3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida 14, para gerar o material bruto que foi purificado por pre-HPLC (MeOH/H2O com 0,05% TFA como fase móvel) para gerar o composto do título (45 mg, rendimento: 90%) como um sólido amarelo. ESI-MS (M+H) +: 558,0. HPLC: (214 nm: 98,2%, 254 nm: 100,0%). 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ: 7,77 (s, 1H), 6,92-6,89 (m, 1H), 6,83-6,81 (m, 1H), 6,79 (s, 1H), 4,38-4,38 (m, 2H), 4,05-4,00 (m, 2H), 3,55-3,53 (m, 1H), 3,45-3,40 (m, 2H), 3,152,89 (m, 7H), 2,21-2,16 (m, 1H), 1,90-1,86 (m, 3H), 1,66-1,56 (m, 2H).

[000149] (3R,3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-car- boxamida. O composto do título foi obtido a partir da separação quiral de trans-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida usando uma separação SFC quiral de duas etapas. Primeiramente, a mistura foi separada em dois picos contendo uma mistura de dois diastereômeros ((3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3- cloro-5-(trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida e (3'S,4'R)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida) usando uma coluna ChiralPak IC(2 x 15 cm, 30% metanol p/0,1 DEA) e, em seguida, a mistura resultante contendo um par de isô- meros foi separada ainda nos enantiômeros simples usando uma coluna ChiralPak IA (2 x 15 cm, 30% metanol p/0,1% DEA 10000 KPa (100 bar)). ESI-MS (M+H) +: 558,0 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 7,92 (d, J = 1,76 Hz, 1H), 6,94 (s, 1H), 6,72 (d, J = 7,78 Hz, 2H), 5,21 (d, J = 3,51 Hz, 1H), 4,70 (s, 2H), 4,45 (dd, J = 2,76, 12,80 Hz, 2H), 4,17 - 4,32 (m, 1H), 3,64 - 3,80 (m, 2H), 3,44 - 3,58 (s, 3H), 3,09 (s, 3H), 3,00 - 3,09 (m, 1H), 2,95 (s, 3H), 2,40 (dd, J = 5,52, 13,30 Hz, 1H), 1,63 - 1,99 (m, 3H), 1,26 - 1,43 (m, 1H).

[000150] (3S,3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida. O composto do título foi obtido a partir da separação quiral de trans-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5-(trifluoro- -metil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida usando uma separação SFC quiral de duas etapas. Primeiramente, a mistura foi separada em dois picos contendo uma mistura de dois diaste- reômeros ((3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida e (3'S,4'R)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida) usando uma coluna ChiralPak IC(2 x 15 cm, 30% metanol p/0,1 DEA) e, em seguida, a mistura resultante contendo um par de isô- meros foi separada ainda nos enantiômeros simples usando uma coluna ChiralPak IA (2 x 15 cm, 30% metanol p/0,1% DEA 10000 KPa (100 bar)). ESI-MS (M+H) +: 558,0 1H RMN (400 MHz, (400 MHz, CDCl3) δ: 7,93 (d, J = 1,26 Hz, 1H), 6,93 (s, 1H), 6,69 (br. s., 2H), 5,06 (d, J = 4,27 Hz, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,45 (d, J = 12,55 Hz, 2H), 4,16 - 4,26 (m, 1H), 3,66 - 3,81 (m, 2H), 3,54 - 3,64 (m, 1H), 3,40 - 3,54 (m, 2H), 3,01 - 3,10 (m, 4H), 2,95 (s, 3H), 2,37 (dd, J = 5,27, 13,05 Hz, 1H), 1,91 - 2,02 (m, 2H), 1,48 - 1,75 (m, 2H).

[000151] (3S,3'S,4'R)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida. O composto do título foi obtido a partir da separação quiral de trans-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida usando uma separação SFC quiral de duas etapas. Primeiramente, a mistura foi separada em dois picos contendo uma mistura de dois diastereômeros ((3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3- cloro-5-(trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida e (3'S,4'R)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida) usando uma coluna ChiralPak IC(2 x 15 cm, 30% metanol p/0,1 DEA) e, em seguida, a mistura resultante contendo um par de isô- meros foi separada ainda nos enantiômeros simples usando uma coluna ChiralPak IA (2 x 15 cm, 30% metanol p/0,1% DEA 10000 KPa (100 bar)). ESI-MS (M+H) +: 558,0 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 7,92 (d, J = 1,76 Hz, 1H), 6,94 (s, 1H), 6,72 (d, J = 7,78 Hz, 2H), 5,21 (d, J = 3,51 Hz, 1H), 4,70 (s, 2H), 4,45 (dd, J = 2,76, 12,80 Hz, 2H), 4,19 - 4,30 (m, 1H), 3,66 - 3,79 (m, 2H), 3,47 - 3,56 (m, 3H), 3,09 (s, 3H), 2,97 - 3,07 (m, 1H), 2,95 (s, 3H), 2,40 (dd, J = 5,52, 13,30 Hz, 1H), 1,81 - 1,97 (m, 3H), 1,73 (dd, J = 3,76, 12,80 Hz, 1H).

[000152] (3R,3'S,4'R)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida. O composto do título foi obtido a partir da separação quiral de trans-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5-(trifluoro- metil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida usando uma separação SFC quiral de duas etapas. Primeiramente, a mistura foi separada em dois picos contendo uma mistura de dois diaste- reômeros ((3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida e (3'S,4'R)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida) usando uma coluna ChiralPak IC(2 x 15 cm, 30% metanol p/0,1 DEA) e, em seguida, uma coluna ChiralPak IA (2 x 15 cm, 30% metanol p/0,1% DEA 10000 KPa (100 bar)). ESI-MS (M+H) +: 558,0 1H RMN (400 MHz, (400 MHz, CDCl3) δ: 7,93 (d, J = 1,26 Hz, 1H), 6,93 (s, 1H), 6,69 (br. s., 2H), 5,06 (d, J = 4,27 Hz, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,45 (d, J = 12,55 Hz, 2H), 4,16 - 4,26 (m, 1H), 3,66 - 3,81 (m, 2H), 3,54 - 3,64 (m, 1H), 3,40 - 3,54 (m, 2H), 3,01 - 3,10 (m, 4H), 2,95 (s, 3H), 2,37 (dd, J = 5,27, 13,05 Hz, 1H), 1,91 - 2,02 (m, 2H), 1,48 - 1,75 (m, 2H). Exemplo 7

[000153] Síntese de trans-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro- 5-(trifluorometil)fenil)amino)-4'-(4-metilpiperazina-1-carbonil)-[1,3'- bipiperidin]-2-ona. Um procedimento semelhante foi usado como descrito para a síntese de trans-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida 14 para gerar o 23 que foi purificado por HPLC de fase reversa (MeOH/H2O com 0,05% NH3.H2O como fase móvel) para gerar o composto do título (100 mg, rendimento: 70%) como um sólido amarelo. ESI-MS (M+H) +: 613,24. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 7,94 (s, 1H), 6,94 (s, 1H), 6,73-6,67 (m, 2H), 5,25-5,03 (m, 1H), 4,71 (s, 2H), 4,49-4,40 (m, 2H), 4,35-4,16 (m, 1H), 3,82-3,64 (m, 3H), 3,62-3,41 (m, 6H), 3,08-2,97 (m, 1H), 2,52-2,34 (m, 3H), 2,30-2,25 (m, 2H), 2,20 (s, 3H), 1,85-1,64 (m, 2H), 1,72-1,64 (m, 2H), 1,49-1,31 (m, 1H).

[000154] (3R,3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-4'-(4-metilpiperazina-1-carbonil)-[1,3'- bipiperidin]-2-ona. O composto do título foi obtido a partir da separação quiral de trans-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida 23 usando uma separação SFC quiral de duas etapas. Primeiramente, a mistura foi separada em dois picos contendo uma mistura de dois diastereômeros ((3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3- cloro-5-(trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida e (3'S,4'R)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida) usando uma coluna ChiralPak IC (2 x 15 cm, 30% metanol p/0,1 DEA) e, em seguida, a mistura resultante contendo um par de isô- meros foi separada em dois enantiômeros simples usando uma coluna ChiralPak IA (2 x 15 cm, 30% metanol p/0,1% DEA 10000 KPa (100 bar)). ESI-MS (M+H) +: 613,2 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ: 7,95 (s, 1H), 6,83 - 6,97 (m, 3H), 4,50 - 4,68 (m, 2H), 4,28 - 4,40 (m, 1H), 3,66 - 3,91 (m, 8H), 3,30 - 3,52 (m, 4H), 3,14 (t, J = 12,42 Hz, 2H), 2,73 (br. s., 2H), 2,27 (dd, J = 5,65, 12,93 Hz, 1H), 1,83 - 2,05 (m, 2H), 1,54 - 1,79 (m, 2H).

[000155] (3S,3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-4'-(4-metilpiperazina-1-carbonil)-[1,3'- bipiperidin]-2-ona. O composto do título foi obtido a partir da separação quiral de trans-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida 23 usando uma separação SFC quiral de duas etapas. Primeiramente, a mistura foi separada em dois picos contendo uma mistura de dois diastereômeros ((3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3- cloro-5-(trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida e (3'S,4'R)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida) usando uma coluna ChiralPak IC(2 x 15 cm, 30% metanol p/0,1 DEA) e, em seguida, a mistura resultante contendo um par de isô- meros foi separada ainda nos enantiômeros simples usando uma coluna ChiralPak IA (2 x 15 cm, 30% metanol p/0,1% DEA 10000 KPa (100 bar)). ESI-MS (M+H)+: 613,2. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ: 7,91 - 7,99 (m, 1H), 6,84 - 6,97 (m, 3H), 4,57 (dd, J = 14,18, 19,70 Hz, 2H), 4,34 (br. s., 1H), 3,42 - 3,53 (m, 1H), 3,37 (d, J = 1,51 Hz, 3H), 3,05 - 3,19 (m, 1H), 2,86 (t, J = 7,53 Hz, 1H), 2,68 - 2,78 (m, 2H), 2,26 (dd, J = 5,65, 12,93 Hz, 1H), 1,82 - 2,03 (m, 3H), 1,55 - 1,79 (m, 2H).

[000156] (3S,3'S,4'R)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-4'-(4-metilpiperazina-1-carbonil)-[1,3'-bipi- peridin]-2-ona. O composto do título foi obtido a partir da separação quiral de trans-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida 23 usando uma separação SFC quiral de duas etapas. Primeiramente, a mistura foi separada em dois picos contendo uma mistura de dois diastereômeros ((3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3- cloro-5-(trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida e (3'S,4'R)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida) usando uma coluna ChiralPak IC(2 x 15 cm, 30% metanol p/0,1 DEA) e, em seguida, a mistura resultante contendo um par de isô- meros foi separada ainda nos enantiômeros simples usando uma coluna ChiralPak IA (2 x 15 cm, 30% metanol p/0,1% DEA 10000 KPa (100 bar)). ESI-MS (M+H)+: 613,2. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ: 7,94 (s, 1H), 6,87 - 6,93 (m, 3H), 4,57 (dd, J = 14,18, 19,70 Hz, 1H), 4,34 (br. s., 1H), 3,43 - 3,51 (m, 1H), 3,36 - 3,38 (m, 2H), 3,13 (t, J = 12,30 Hz, 1H), 2,86 (t, J = 7,53 Hz, 1H), 2,73 (br. s., 1H), 2,26 (dd, J = 5,65, 12,93 Hz, 1H), 1,96 - 2,03 (m, 1H), 1,83 - 1,94 (m, 1H), 1,51 - 1,75 (m, 1H).

[000157] ((3R,3'S,4'R)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-4'-(4-metilpiperazina-1-carbonil)-[1,3'- bipiperidin]-2-ona. O composto do título foi obtido a partir da separação quiral de trans-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida 23 usando uma separação SFC quiral de duas etapas. Primeiramente, a mistura foi separada em dois picos contendo uma mistura de dois diastereômeros ((3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il) -3-((3- cloro-5-(trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida e (3'S,4'R)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-N,N-dimetil-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida) usando uma coluna ChiralPak IC(2 x 15 cm, 30% metanol p/0,1 DEA) e, em seguida, cada mistura contendo um par de isômeros foi separada ainda nos dois enatiômeros simples usando uma coluna Chi- ralPak IA (2 x 15 cm, 30% metanol p/0,1% DEA 10000 KPa (100 bar)). 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ: 7,96 (br. s., 1H), 6,90 (br. s., 1H), 6,76 (d, J = 10,04 Hz, 2H), 4,60 (t, J = 14,06 Hz, 2H), 4,19 - 4,32 (m, 1H), 3,67 - 3,78 (m, 1H), 3,43 - 3,54 (m, 3H), 3,35 - 3,38 (m, 3H), 3,16 (t, J = 12,42 Hz, 1H), 2,86 (t, J = 7,40 Hz, 2H), 2,79 (s, 3H), 2,32 (dd, J = 5,02, 12,80 Hz, 1H), 1,89 - 2,07 (m, 4H), 1,62 - 1,76 (m, 5H). Exemplo 8

[000158] Síntese de 1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-flúor-5- (trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida. Um procedimento semelhante foi usado como descrito para a síntese de (3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5-(trifluorome- til)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida 14 para gerar o material bruto que foi purificado por pre-HPLC (MeOH/H2O com 0,05% NH3.H2O como fase móvel) para gerar o composto do título (175 mg, rendimento: 69%) como um sólido amarelo. ESI-MS (M+H)+: 514,19. HPLC: (214 nm: 96,13%, 254 nm: 96,53%). 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ: 7,79-7,78 (m, 1H), 6,76 (s, 1H), 6,63-6,54 (m, 2H), 4,41-4,36 (m, 2H), 4,08-4,06 (m, 1H), 3,55-3,41 (m, 3H), 3,28-3,25 (m, 1H), 2,99-2,93 (m, 1H), 2,28-2,21 (m, 1H), 1,98-1,78 (m, 6H).

[000159] (3R,3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-flúor-5- (trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida. A mistura dos quatro diastereômeros foi separada em três picos por SFC (IA( 3 x 15 cm), 30% EtOH (0,1% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 70 ml/min) e o pico 3 correspondia ao composto do titulo. LCMS (Agilent 460, 254 nm): ES (+) MS m/e = 514,0 (M+1) @ 1,09 min. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 7,91 (br. s., 1H), 6,66 (d, J = 8,53 Hz, 1H), 6,63 (s, 1H), 6,46 (d, J = 10,79 Hz, 1H), 6,12 (br. s., 1H), 5,47 (br. s., 1H), 5,16 (d, J = 3,51 Hz, 1H), 4,91 (br. s., 2H), 4,35 - 4,54 (m, 2H), 3,82 (td, J = 5,11, 10,60 Hz, 2H), 3,51 - 3,60 (m, 1H), 3,34 - 3,48 (m, 3H), 2,96 (t, J = 12,30 Hz, 1H), 2,35 - 2,47 (m, 1H), 1,91 - 2,06 (m, 3H), 1,84 (dq, J = 3,89, 12,76 Hz, 1H),

[000160] (3S,3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-flúor-5- (trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida. A mistura dos quatro diastereômeros foi separada em três picos por SFC (IA(3 x 15 cm), 30% EtOH (0,1% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 70 ml/min). O pico 2 de 3 correspondia ao composto desejado. LCMS (Agilent 460, 254 nm): ES (+) MS m/e = 514,0 (M+1) @ 1,10 min. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7,77 (d, J = 1,76 Hz, 1H), 7,39 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 6,81 (s, 1H), 6,74 (d, J = 12,30 Hz, 1H), 6,47 - 6,66 (m, 4H), 4,23 (d, J = 12,80 Hz, 2H), 3,90 - 4,18 (m, 2H), 3,34 - 3,46 (m, 2H), 3,12 (br. s., 1H), 2,94 (br. s., 1H), 2,82 (t, J = 12,42 Hz, 1H), 2,10 (qd, J = 5,75, 12,11 Hz, 1H), 1,74 - 1,92 (m, 3H), 1,56 - 1,72 (m, 1H), 1,37 - 1,52 (m, 1H).

[000161] (3R,3'S,4'R)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-flúor-5- (trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida. A mistura dos quatro diastereômeros foi separada em três picos por SFC (IA( 3 x 15 cm), 30% EtOH (0,1% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 70 ml/min). O pico 1 de 3 foi purificado ainda por SFC (IA (3 x 15 cm), 30% iPrOH (0,1% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 70 ml/min) para gerar o composto do título. LCMS (Agilent 460, 254 nm): ES (+) MS m/e = 514,0 (M+1) @ 1,10 min. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7,77 (d, 1,5 Hz, 1H), 7,39 (s., 1H), 6,85 (s, 1H), 6,81 (s., 1H), 6,74 (d, J = 12,30 Hz, 1H), 6,47 - 6,66 (m, 4H), 4,16 - 4,46 (m, 2H), 3,95 - 4,16 (m, 2H), 3,34 - 3,48 (m, 2H), 3,12 (br. s., 1H), 2,87 - 3,01 (m, 2H), 2,82 (t, J = 12,30 Hz, 1H), 2,10 (qd, J = 5,75, 12,11 Hz, 1H), 1,74 - 1,92 (m, 3H), 1,54 - 1,74 (m, 1H), 1,35 - 1,52 (m, 1H).

[000162] (3S,3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-flúor-5- (trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida. A mistura dos quatro diastereômeros foi separada em três picos por SFC (IA( 3 x 15 cm), 30% EtOH (0,1% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 70 ml/min). O pico 1 de 3 foi purificado ainda por SFC (IA (3 x 15 cm), 30% iPrOH (0,1% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 70 ml/min) para gerar o composto do título. LCMS (Agilent 460, 254 nm): ES (+) MS m/e = 514,0 (M+1) @ 1,10 min. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7,77 (d, J = 1,76 Hz, 1H), 7,38 (br. s., 1H), 6,84 (s, 2H), 6,70 (d, J = 12,30 Hz, 1H), 6,47 - 6,65 (m, 4H), 4,18 - 4,48 (m, 2H), 3,92 - 4,18 (m, 2H), 3,38 - 3,49 (m, 1H), 3,20 - 3,30 (m, 1H), 3,11 (br. s., 1H), 2,88 - 2,99 (m, 1H), 2,83 (t, J = 12,30 Hz, 1H), 2,14 (qd, J = 6,03, 12,52 Hz, 1H), 1,74 - 1,92 (m, 3H), 1,59 - 1,74 (m, 1H), 1,41 - 1,58 (m, 1H). Exemplo 9

[000163] Síntese de (3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3- cloro-5-fluorofenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida. Um procedimento semelhante foi usado como descrito para a síntese de (3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5-(trifluorome- til)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida 14 para gerar o material bruto que foi purificado por pre-HPLC (MeOH/H2O com 0,05% NH3.H2O como fase móvel) para gerar o composto do título (141 mg, R: 30%) como um sólido branco. ESI-MS (M+H) +: 479,9. HPLC: (214 nm: 100%, 254 nm: 100%). 1H RMN (400 MHz, DMSO d6) δ: 7,78-7,77 (m, 1H), 7,40-7,38 (m, 1H), 6,86-6,82 (m, 1H), 6,62-6,55 (m, 3H), 6,45-6,37 (m, 3H), 4,26-3,94 (m, 4H), 3,47-3,39 (m, 1H), 3,20-3,03 (m, 2H), 2,90-2,78 (m, 2H), 2,18-2,04 (m, 1H), 1,86-1,34 (m, 5H).

[000164] (3R,3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro- 5-fluorofenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida. A mistura dos quatro diastereômeros foi separada em três picos por SFC (IC (2 x 15 cm), 25% MeOH (0,1% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 60 ml/min) para gerar o composto do título como o pico 3, respectivamente. LCMS (Agilent 460, 254nm): ES (+) MS m/e = 480,0 (M+1) @ 1,01 min. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 7,90 (br. s., 1H), 6,44 (d, J = 8,53 Hz, 1H), 6,40 (s, 1H), 6,30 (br. s., 1H), 6,23 (d, J = 11,04 Hz, 1H), 5,63 (br. s., 1H), 5,09 (br. s., 1H), 4,94 (br. s., 2H), 4,45 (d, J = 12,80 Hz, 2H), 3,68 - 3,95 (m, 2H), 3,49 - 3,56 (m, 2H), 3,35 - 3,46 (m, 2H), 2,89 - 2,99 (m, 1H), 2,31 - 2,44 (m, 1H), 1,90 - 2,04 (m, 3H), 1,76 - 1,89 (m, 1H), 1,49 - 1,61 (m, 1H).

[000165] (3S,3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro- 5-fluorofenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida. A mistura dos quatro diastereômeros foi separada em três picos por SFC (IC (2 x 15 cm), 25% MeOH (0,1% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 60 ml/min) para gerar o composto do título como o pico 1, respectivamente. LCMS (Agilent 460, 254nm): ES (+) MS m/e = 480,0 (M+1) @ 1,01 min. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7,77 (d, J = 1,76 Hz, 1H), 7,39 (s., 1H), 6,81 (s, 1H), 6,57 (s, 3H), 6,46 (d, J = 12,30 Hz, 1H), 6,39 (dd, J = 1,76, 8,78 Hz, 1H), 6,34 (d, J = 7,53 Hz, 1H), 4,28 (br. s., 1H), 4,23 (d, J = 13,05 Hz, 1H), 4,13 (dd, J = 2,76, 12,30 Hz, 1H), 4,03 (td, J = 6,56, 10,98 Hz, 1H), 3,33 - 3,46 (m, 2H), 3,11 (br. s., 1H), 2,94 (br. s., 1H), 2,82 (t, J = 12,30 Hz, 1H), 2,09 (qd, J = 5,75, 12,11 Hz, 1H), 1,72 - 1,92 (m, 3H), 1,56 - 1,72 (m, 1H), 1,29 - 1,50 (m, 1H).

[000166] (3S,3'S,4'R)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro- 5-fluorofenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida. A mistura dos quatro diastereômeros foi separada em três picos por SFC (IC (2 x 15 cm), 25% MeOH(0,1% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 60 ml/min). O pico 2 de 3 foi purificado ainda por SFC (IA (3 x 15 cm), 30% iPrOH (0,1% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 60 ml/min) para gerar o composto do título. LCMS (Agilent460, 254 nm): ES (+) MS m/e = 480,0 (M+1) @ 1,01 min. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7,77 (d, J = 2,01 Hz, 1H), 7,37 (br. s., 1H), 6,84 (s, 1H), 6,57 (s, 2H), 6,55 (br. s., 1H), 6,30 - 6,48 (m, 3H), 4,28 (br. s., 1H), 4,23 (d, J = 13,05 Hz, 1H), 4,13 (dd, J = 3,39, 12,67 Hz, 1H), 3,97 (td, J = 6,84, 10,42 Hz, 1H), 3,38 - 3,50 (m, 1H), 3,22 - 3,29 (m, 1H), 3,10 (br. s., 1H), 2,71-2,97 (m, 1H), 2,83 (t, J = 12,30 Hz, 1H), 2,13 (qd, J = 6,13, 12,49 Hz, 1H), 1,73 - 1,91 (m, 3H), 1,58 - 1,73 (m, 1H), 1,39 - 1,53 (m, 1H).

[000167] (3R,3'S,4'R)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro- 5-fluorofenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida. A mistura dos quatro diastereômeros foi separada em três picos por SFC (IC (2 x 15 cm), 25% MeOH(0,1% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 60 ml/min). O pico 2 de 3 foi purificado ainda por SFC (IA (3 x 15 cm), 30% iPrOH (0,1% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 60 ml/min) para gerar o composto do título. LCMS (Agilent460, 254 nm): ES (+) MS m/e = 480,0 (M+1) @ 1,01 min. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,77 (d, J = 1,76 Hz, 1H), 7,39 (s, 1H), 6,81 (s, 1H), 6,57 (s, 3H), 6,46 (td, J = 2,01, 12,30 Hz, 1H), 6,39 (td, J = 1,95, 8,66 Hz, 1H), 6,34 (d, J = 7,53 Hz, 1H), 4,18 - 4,48 (m, 2H), 4,09 - 4,18 (m, 1H), 3,79 - 4,09 (m, 1H), 3,33 - 3,45 (m, 2H), 3,11 (br. s., 1H), 2,92 (br. s., 1H), 2,82 (t, J = 12,42 Hz, 1H), 2,09 (qd, J = 5,75, 12,11 Hz, 1H), 1,74 - 1,93 (m, 3H), 1,51 - 1,74 (m, 1H), 1,32 - 1,51 (m, 1H). Exemplo 10

[000168] Síntese de (3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3- cloro-5-(trifluorometóxi)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'- carboxamida. Um procedimento semelhante foi usado como descrito para a síntese de (3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometil)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida 14 para gerar o material bruto que foi purificado por pre-HPLC (MeOH/H2O com 0,05% NH3.H2O como fase móvel) para gerar o composto do título (320 mg, rendimento: 44%) como um sólido amarelo. ESI-MS (M+H)+: 546,16. HPLC: (214 nm: 98,4%, 254 nm: 98,0%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7,77 (s, 1H), 7,39 (s, 1H), 6,84-6,81 (m, 1H), 6,75-6,72 (m, 1H), 6,62-6,57 (m, 3H), 6,52-6,47 (m, 2H), 4,24-3,98 (m, 4H), 3,47-3,40 (m, 1H), 3,17-2,99 (m, 2H), 2,86-2,79 (m, 2H), 2,15-1,99 (m, 1H), 1,861,60 (m, 4H), 1,48-1,39 (m, 1H).

[000169] (3R,3'S,4'R)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometóxi)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida. A mistura dos quatro diastereômeros foi purificada por SFC (AD-H(2 x 25 cm), 30% EtOH(0,1% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 70 ml/min) para gerar o composto do título. LCMS (Agilent460, 254 nm): ES (+) MS m/e = 546,0 (M+1) @ 1,20 min. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7,77 (d, J = 1,76 Hz, 1H), 7,39 (br. s., 1H), 6,81 (s, 1H), 6,75 (s, 1H), 6,62 (s, 1H), 6,57 (s, 2H), 6,38 - 6,52 (m, 2H), 4,23 (d, J = 13,05 Hz, 2H), 3,92 - 4,18 (m, 2H), 3,34 - 3,45 (m, 2H), 3,11 (br. s., 1H), 2,93 (br. s., 1H), 2,82 (t, J = 12,30 Hz, 1H), 2,08 (qd, J = 5,75, 12,11 Hz, 1H), 1,74 - 1,92 (m, 3H), 1,56 - 1,73 (m, 1H), 1,36 - 1,50 (m, 1H).

[000170] (3S,3'S,4'R)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometóxi)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida. A mistura dos quatro diastereômeros foi purificada por SFC (AD-H(2 x 25 cm), 30% EtOH (0,1% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 70 ml/min) para gerar o composto do título. LCMS (Agilent 460, 254 nm): ES (+) MS m/e = 546,0 (M+1) @ 1,23 min. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7,77 (d, J = 2,01 Hz, 1H), 7,37 (br. s., 1H), 6,84 (s, 1H), 6,72 (s, 1H), 6,60 (s, 1H), 6,57 (s, 2H), 6,43 - 6,54 (m, 2H), 4,23 (d, J = 13,05 Hz, 1H), 4,22 (br. s., 1H), 4,13 (dd, J = 3,26, 12,30 Hz, 1H), 4,01 (td, J = 6,81, 10,23 Hz, 1H), 3,44 (td, J = 6,18, 12,49 Hz, 1H), 3,20 - 3,29 (m, 1H), 3,11 (br. s., 1H), 2,88 (br. s., 1H), 2,83 (t, J = 12,30 Hz, 1H), 2,12 (qd, J = 6,05, 12,46 Hz, 1H), 1,73 - 1,91 (m, 3H), 1,59 - 1,73 (m, 1H), 1,48 (td, J = 9,41, 19,33 Hz, 1H).

[000171] (3S,3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometóxi)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida. A mistura dos quatro diastereômeros foi purificada por SFC (AD-H (2 x 25 cm), 30% EtOH (0,1% DEA)/CO2, 10000 KPa (100 bar), 70 ml/min) para gerar o composto do título. LCMS (Agilent 460, 254 nm): ES (+) MS m/e = 546,0 (M+1) @ 1,22 min. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7,77 (d, J = 2,01 Hz, 1H), 7,38 (br. s., 1H), 6,81 (s, 1H), 6,75 (s, 1H), 6,62 (s, 1H), 6,57 (s, 2H), 6,42 - 6,51 (m, 2H), 4,23 (d, J = 12,80 Hz, 2H), 3,97 - 4,18 (m, 2H), 3,34 - 3,44 (m, 2H), 3,10 (br. s., 1H), 2,93 (br. s., 1H), 2,82 (t, J = 12,17 Hz, 1H), 2,03 - 2,15 (m, 1H), 1,77 - 1,90 (m, 3H), 1,57 - 1,73 (m, 1H), 1,37 - 1,48 (m, 1H).

[000172] (3R,3'R,4'S)-1'-(6-amino-5-fluoropirimidin-4-il)-3-((3-cloro-5- (trifluorometóxi)fenil)amino)-2-oxo-[1,3'-bipiperidina]-4'-carboxamida. A mistura dos quatro diastereômeros foi purificada por SFC (AD-H (2 x 25 cm), 30% EtOH(0,1% DEA)/CO2, 100bar, 70 ml/min) para gerar o com-posto do título. LCMS(Agilent 460, 254nm): ES (+) MS m/e = 546,0 (M+1) @ 1,23 min. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 7,93 (s, 1H), 6,60 (s, 1H), 6,52 (s, 1H), 6,35 (s, 1H), 5,85 (br. s., 1H), 5,32 (br. s., 1H), 4,97 - 5,15 (m, 1H), 4,78 (br. s., 2H), 4,46 (d, J = 13,05 Hz, 2H), 3,67 - 3,87 (m, 2H), 3,34 - 3,60 (m, 4H), 2,99 (t, J = 12,17 Hz, 1H), 2,34 - 2,49 (m, 1H), 1,91 - 2,08 (m, 3H), 1,83 (dq, J = 3,76, 12,72 Hz, 1H), 1,47 - 1,74 (m, 1H). Exemplo 11

[000173] Ensaio da BTK quinase in vitro: ENSAIO BTK-POLYGAT-LS. A finalidade do ensaio de BTK in vitro foi determinar a potência do com-posto contra a BTK através da medição da IC50. A inibição do composto foi medida após o monitoramento da quantidade de fosforilação de um peptídeo polyGAT marcado com fluoresceína (Invitrogen PV3611) na presença da enzima BTK ativa (Upstate 14-552), ATP, e inibidor. A rea-ção da BTK quinase foi feita numa placa de 96 poços preta (costar 3694). Para um ensaio típico, uma alíquota de 24 uL de um master mix de ATP/peptídeo (concentração final; ATP 10 uM, polyGAT 100 nM) em tampão de quinase (10 mM Tris-HCl pH 7,5, 10 mM MgCl2, 200 uM Na3PO4, 5 mM DTT, 0,01% Triton X-100, e 0,2 mg/ml de caseína) foi adicionado em cada poço. A seguir, 1 uL de uma titulação de 40X do composto de 4 vezes em solvente DMSO 100% foi adicionado, seguido pela adição de 15 uL do mix da enzima BTK em tampão de quinase 1X (com uma concentração final de 0,25 nM). O ensaio foi incubado por 30 minutos antes de ser interrompido com 28 uL de uma solução de 50 mM EDTA. As alíquotas (5 uL) da reação de quinase foram transferidas para uma placa de 384 poços branca de baixo volume (Corning 3674), e 5 uL de um tampão de detecção 2X (Invitrogen PV3574, com 4 nM de anticorpo Tb-PY20, Invitrogen PV3552) foi adicionado. A placa foi coberta e incubada por 45 minutos à temperatura ambiente. Foi medida a fluorescência resolvida no tempo (TRF) em Dispositivos Moleculares M5 (332 nm de excitação; 488 nm de emissão; 518 nm de emissão de fluoresceí- na). Os valores de IC50 foram calculados usando um ajuste de quatro parâmetros com 100% da atividade enzimática determinada a partir do controle de DMSO e 0% da atividade a partir do controle de EDTA.

[000174] Os compostos selecionados da fórmula I foram testados e descobertos como sendo ativos no ensaio de polyGAT. Os compostos I1, I-2, I-3, I-4, I-5 e I-7 geraram valores de IC50 de 0,73 nM, 0,68 nM, 2,07 nM, 0,63 nM, 1,6 nM, e 1,2 nM respectivamente. O composto I-6 tem um valor de IC50 menor que 1 nM. O composto comparador IC, mostrado abaixo, produziu um valor de IC50 de 2,0 nM.

Exemplo 12 Protocolo de Estudo Para Determinar a Ativação do Receptor Nuclear PXR em Células DPX2 Humanas

[000175] a) Resumo do Protocolo: O PXR tem sido mostrado como sendo um receptor nuclear primário que medeia a expressão de CYP3A4 induzida por droga (Bertilsson G, et al.; Proc Natl Acad Sci U S A. 1998, 13 out;95(21):12208-13). Com base nesta via de indução de CYP3A4, o ensaio de gene repórter de PXR baseado em células é comumente usado para triar novas entidades moleculares (NMEs) em um estágio de descoberta da droga precoce, para seu potencial em induzir o CYP3A4 (Luo G, et al.; Drug Metab Dispos. 2002 Jul;30(7):795-804.) Estudos foram projetados para avaliar o efeito de novas entidades moleculares (NMEs) na ativação de PXR humano em células DPX2. Linha celulares estavelmente transfectadas com o receptor nuclear PXR e elementos de resposta correspondentes foram semeados em placas de 96 poços. Vinte e quatro horas após a semeadura, as células foram tratadas com 6 concentrações distintas de NMEs em poços triplicados (ver abaixo), e as células foram devolvidas então ao incubador por mais 24 horas. No fim deste período de incubação, o número de células viáveis/poço foi determinado usando um ensaio de citotoxicidade Cell Titer Fluor da Promega. Após este ensaio, o ONE-Glo da Promega foi adicionado aos mesmos poços e a atividade do gene repórter foi avaliada.

[000176] b) Sistema de Teste: O sistema de teste consistia na linha de células tumorais DPX2 estavelmente transformadas colocadas em placas de microtitulação de 96 poços. Um vetor de expressão que porta o receptor nuclear PXR mais o potencializadores e promotores apropriados ligados ao gene repórter da luciferase foram estavelmente integrados nessas linhas de células tumorais. A ativação do receptor foi avaliada pelo monitoramento da atividade do gene repórter e pela comparação dos resultados com células tratadas com o veículo. Os controles positivos consistem em células tratadas com 6 diferentes concentrações (0,1, 0,5, 1, 5, 10, e 20 μM) de rifampicina. Desta forma, os compostos que ativam o PXR podem ser fácil e rapidamente identificados. Uma vez que linhas celulares estavelmente integradas foram usadas, é possível observar uma ativação do receptor de 3 a 70 vezes.

[000177] c) Processamento de Dados e Cinética da Ativação do Receptor: Os dados processados usando MS-Excel foram calculados como a média (n = 3) e % de CV da quantidade de ativação de PXR em relação às células tratadas com o veículo em cada uma das 6 diferentes doses. Todos os dados de ativação foram normalizados para o número de células viáveis/poço. Os resultados também foram expressos como uma porcentagem da resposta gerada pelo controle positivo apropriado numa dose de 10 μM. Os valores de EC50 e Emax foram derivados para os compostos do teste que geram a ativação do receptor usando regressão não-linear das curvas de dose-resposta em log típicas (Prism V5.0c, GraphPad Software, San Diego, CA). Os agentes que exibiam curvas de dose-resposta atípicas não foram analisados desta forma.

[000178] Novas Entidades Moleculares (NMEs): Os compostos do teste foram testados em 0,05, 0,1,0,5, 1,2,5, e 10 μM

[000179] Os compostos selecionados da fórmula I foram testados no ensaio de PXR. Os compostos I-1, I-2, I-3, I-4, e I-5 geraram um % de indução de PXR (relativo a 10 uM de rifampina) de 62%, 42%, 47%, 67%, e 90%, respectivamente. O composto comparador IC, mostrado acima, produziu um % de indução de PXR de 95%. Exemplo 13 Protocolo para o ensaio de inibição de hERG FastPatch:

[000180] O canal cardíaco de potássio, hERG, é responsável por uma corrente retificadora retardada rápida (IKr) no ventrículo humano e a inibição de IKr é a causa mais comum da prolongação do potencial de ação cardíaco por drogas não cardíacas (ver, por exemplo, Weirich e Antoni, Basic Res. Cardiol., 93, Suppl. 1, 125-32, 1998; Yap e Camm, Clin. Exp. Allergy, 29, Suppl. 3, 174-81, 1999). A maior duração do potencial de ação foi citada como um fator causador da prolongação do intervalo QT que foi associado a uma arritmia ventricular perigosa, torsade de pointes (Brown e Rampe, Pharmaceutical News, 7, 15-20, 2000).

[000181] Os efeitos in vitro dos compostos fornecidos foram investiga- dos na corrente do canal de potássio hERG (gene humano relacionado a ether-à-go-go) (um substituto para IKr, a corrente cardíaca de potássio retificadora retardada de rápida ativação) expresso em células de rim embrionário humano (HEK293) estavelmente transfectadas com cDNA de hERG. As células foram colocadas em solução salina fisiológica tam- ponada com HEPES numa placa de 96 poços de vidro revestida e carregadas com quantidades apropriadas de soluções de teste e de controle por uma duração de uma exposição de 3 minutos em cada concentração. O composto de teste foi diluído em DMSO 0,3%. Um sistema de patch clamp paralelo automatizado, QPatch HT (Sophion Bioscience A/S, Dinamarca), foi usado para avaliar em várias concentrações (por exemplo, 10 μM). Os valores de IC50 foram estimados com base nos dados de inibição de hERG. O estudo foi realizado em ChanTest (14656 Neo Parkway, Cleveland, OH). A triagem de QPatch é descrita ainda por Janzen e Bernasconi (eds.), High Throughput Screening, Methods and Protocols, Segunda Edição, vol. 565, capítulo 10, pg. 209-223, 2009.

[000182] Os compostos selecionados da fórmula I foram testados no ensaio de hERG. Os compostos I-1, I-2, I-3, e I-4 geraram IC50 de hERG de 15,6 uM, 30 uM, 14,6 uM, e 13,7 uM, respectivamente. O composto I5 não mostra nenhuma atividade observável no ensaio de hERG a 10 uM (nenhuma IC50 disponível). O composto I-6 mostra pouca atividade de hERG observável (< 20% de inibição) a 10uM (nenhuma IC50 disponível). O composto I-7 mostra atividade de hERG (65% de inibição) a 10uM (nenhuma IC50 disponível). O composto comparador IC, mostrado acima, produziu uma IC50 de hERG de 1,18 uM ou atividade (87% de inibição) a 10 uM. Exemplo 14 Retenção de GSH em Microssomo de Fígado Humano: Protocolo

[000183] O composto de teste (concentração final 10 uM) é incubado com microssomas de fígado tanto humano quanto de rato (concentração final 1 mg/mL), juntamente com cofatores de ativação NADPH (concen-tração final 1 mM), fosfato de potássio (concentração final 100 mM pH 7,4), cloreto de magnésio (concentração final 3,3 mM) e o agente de re-tenção de GSH (concentração final 5 mM). A mistura de incubação é incubada por 60 min a 37°C e finalizada com acetonitrila gelada (volume igual que a mistura de incubação) e os sobrenadantes isolados. Os so- brenadantes são injetados diretamente para a análise de LC/MS/MS ou secos sob N2 e reconstituídos numa mistura de água:acetonitrila (80:20) antes da análise de LC/MS/MS. O conjugado de GSH correspondente é avaliado através de LC/MS/MS, usando um Qtof MSe TOF5600/Xevo Triplo. Exemplo 15 Modelo de Artrite Induzido por Colágeno de Rato

[000184] O modelo de artrite induzida por colágeno (CIA) em ratos Le-wis fêmeas necessitam de respostas imunes de células B e T primárias para a imunização de colágeno tipo II (CII) para o desenvolvimento de uma doença inflamatória grave (ver Goldschmidt TJ, Holmdahl R. Cell Immunol. 154(1):240-8, 1994; Helfgott, S. M., et al,; Clin. Immunol. Immunopathol. 31:403, 1984; Holmdahl R. et al., J Autoimmun. 7(6):739- 52, 1994; e Stuart, J. M., et al., J. Exp. Med. 155:1, 1982). A doença clínica se inicia após um desafia de CII secundário e a doença progride durante os oito dias seguintes.

[000185] Geralmente, os ratos Lewis fêmeas são imunizados com co- lágeno tipo II bovino em adjuvante de Freund incompleto. Os ratos (N=10/grupo) recebem administração oral diária do composto de teste ou veículo BID por gavagem oral começando no dia 1 (terapêutico). A gravidade clínica da artrite é avaliada por medições de calibradores dos tornozelos tomadas todos os dias, começando no Dia 0.

[000186] Protocolo detalhado: Os ratos Lewis fêmeas são imunizados subcutaneamente com colágeno tipo II bovino (emulsão 1:1 de 2 mg/ml de CII bovino em ácido acético 0,01 N: Adjuvante de Freund Incompleto) em três locais da pele dorsal. Seis dias após a imunização, os ratos receberam uma segunda injeção subcutânea de CII bovino. Um composto de suspensão ou veículo da fórmula I (0,5% CMC, 0,1% Tween 80) é administrado por gavagem oral BID, começando no dia 0 (profilático) (n=10 animais/grupo). A gravidade clínica de CIA é avaliada por medições de calibradores dos tornozelos tomadas todos os dias, começando no Dia 9. As medições de calibradores de tornozelo de base de referência são tomadas e confirmadas como clinicamente normais (0,260-0,264 polegada) para o tratamento profilático. As medições de calibradores de tornozelo de base de referência para animais com doença estabilizada são avaliadas no dia 1 da dosagem terapêutica e os animais são aleatoriamente atribuídos a grupos de tratamento após a confirmação do início clínico da doença (0,2751-0,2755 polegada). Os dados são analisados por todos os grupos usando uma análise unidirecional de variância (ANOVA unidirecional), juntamente com pó-teste de comparação múltipla apropriado. A significância para todos os testes é definida em p < 0,05. Exemplo 16 Análise da ativação da via de BCR através da inibição da fosfori- lação da PLCY2

[000187] Protocolo: Um dia antes do tratamento, células de Ramos fo-ram plaqueadas numa densidade de 3x105 células por poço em 200 μL de meio completo em placas de filtro de cultura de tecido de 96 poços (Millipore, Billerica, MA). No dia do tratamento, o meio usado foi removido por filtração e as células ressuspensas em 200 μL de meio livre de soro contendo diluições em série do composto e DMSO a 0,1%, então incubadas por duas horas a 37°C. As células foram estimuladas por 5 minutos com 10 μg/mL de IgM anti-humano de cabra a 37°C. Todo o meio foi removido por filtração e as células foram lavadas com PBS gelado, em seguida, lisadas em gelo por 1 hora com tampão de lise contendo: 20 mM Tris (pH 7,5), 150 mM NaCl, 1 mM EDTA, 1 mM EGTA, 2 mM Na3VO4, 1% Triton X-100, 0,1% SDS, coquetel de inibidor de protease, 1 mM fluoreto de fenilmetilsulfonila, (PMSF), mix de inibidor da fosfatase 2 (Sigma cat # P5726 da Sigma, St. Louis, Mo.), e mix de inibidor da fosfa- tase 3 (Sigma cat # P0044 da Sigma, St. Louis, Mo.). Os lisados foram subsequentemente transferidos para placas MSD padrão (Meso Scale Discovery, (MSD), (Gaithersburg, Maryland)), pré-tratadas com anticorpo de captura (anticorpo B10 anti-total PLCy2, (SantaCruz Biotechnologies (Santa Cruz, CA)) e bloqueados com BSA, de acordo com as instruções do fabricante. Os lisados foram incubados nas placas MSD preparadas durante a noite 4°C com agitação suave. Os poços foram lavados três vezes com TBST e tratados com anti pPLCy2 (SantaCruz) em BSA 1% em PBS por uma hora à temperatura ambiente. Os poços foram novamente lavados três vezes com TBST e tratados com anticorpo anticoelho marcado com sulfo (MSD), por uma hora à temperatura ambiente. Após a lavagem com TBST, o tampão pronto MSD foi adicionado e a luminescência é medida em um MSD SECTOR Imager 6000. A resposta máxima é determinada como a luminescência média nos poços contendo células estimuladas tratadas com anti-IgM e DMSO. A resposta mínima é determinada como a luminescência média nos poços contendo células não estimuladas tratadas com DMSO sozinho. Os valores máximo e mínimo são usados para normalizar a luminescência nos poços de tratamento do composto. Os valores normalizados são representados graficamente contra a concentração do composto numa escala de log, e então analisados usando o software Prizm (GraphPad Software, Inc.). Uma equação de dose-resposta sigmoide com inclinação variável é usada para ajustar os dados e gerar uma concentração de 50% de inibição (IC50).

[000188] As células de Ramos foram incubadas em placas de 96 poços com uma variedade de concentrações de um composto da fórmula I por duas horas, estimuladas com 10 μg/mL de anti-IgM por 5 minutos, e a fosforilação de PLCY2 foi medida usando um imunoensaio luminescen- te eletroquímico. A EC50 é calculada usando o software GraphPad Prism. Exemplo 17 Proliferação de células B humanas induzida pela inibição de BCR

[000189] As células B CD19+ humanas são estimuladas com um anti-corpo anti-IgM e a atividade de um composto da fórmula I é avaliado em termos de alteração do metabolismo celular após 72 horas. Neste contexto, o metabolismo celular se correlaciona diretamente com a ativação e proliferação celular, e também pode refletir a sobrevivência da célula durante a proliferação. O anticorpo anti-IgM é avaliado pelo efeito na proliferação de células B e determinado a exibir uma meia concentração máxima para a ativação de 10 μg/ml. Usando essas condições de ativação, foram avaliadas as concentrações variáveis do composto de teste, em triplicadas em DMSO 0,1%, para o impacto no metabolismo celular de células B CD19+ isoladas de diferentes doadores.

[000190] Protocolo: As células B humanas foram isoladas de células mononucleares do sangue periférico ou camadas leucocitárias usando gradientes de Ficoll-Hypaque (Amersham) e selecionadas negativamente por separação celular magnética (Human B Cell Isolation Kit II, Miltenyi Biotec). A pureza das células alvo é determinada por citometria de fluxo, corando-se para marcadores de células B, células T e monócitos (CD19, CD3, CD14, respectivamente; BD Biosciences). Os dados foram coletados em um citômetro de fluxo FACsCaliber e analisados usando o software FloJo (BD Biosciences). A pureza das preparações de células B humanas é rotineiramente maior que 95%. As células B humanas negativamente selecionadas foram estimuladas com 10 μg/mL de anti-IgM F(ab’)2 (Jackson ImmunoResearch) em placas de 96 poços. 100.000 células B em 0,2 mL RPMI + 10% FBS foram tratadas com concentrações variantes (tituladas de 5000 nM a 0 nM em DMSO 0,5%) de um composto da fórmula I em poços triplicados ou controle do veículo em concentra ção final de DMSO 0,5% por 30 minutos a 37°C, 5% CO2, em seguida, as células foram estimuladas com 10 μg/mL de anti-IgM F(ab’)2. As células B foram estimuladas por 72 horas a 37°C, 5% CO2. A proliferação foi medida usando o reagente CellTiter-Glo (Promega), conforme medido em um luminômetro. Os valores médios foram representados graficamente contra a proliferação máxima e os valores de IC50 foram determinados usando o software GraphPad Prism v5. Exemplo 18 Avaliação do efeito dos compostos na ativação de células mieloi- des in vitro

[000191] Ativação de FCYR de macrófagos humanos primários. O au- toanticorpo e a ativação mediada por complexo imune através de FcyR podem ser modeladas pela ativação de macrófagos com IgG imobilizado. Os macrófagos humanos primários derivados de monócitos tratados com GM-CSF regulam positivamente a ativação de marcadores, tais como antígenos CD80, CD86, MHC e do receptor FCYRIII. Macrófagos derivados de monócitos humanos podem ser ativados pela IgG humana purificada ligada à placa. Este estímulo liga cruzadamente o receptor FCYRIII e induz a secreção de citocinas pró-inflamatórias, tais como TNFα, IL-6, IL1β e MCP-1. O composto da fórmula I foi avaliado para inibição a expressão de citocina após a ativação de FcR de macrófagos humanos.

[000192] Em geral, os macrófagos foram cultivados em placas anteri-ormente incubados com IgG purificada e depois lavados. As titulações do composto de teste (10.000 nM a 0 nM) são adicionadas a essas culturas. Os sobrenadantes da cultura celular foram analisados por ELISA para a expressão de TNFα e IL-6.

[000193] Protocolo: Os monócitos humanos foram isolados de cama-das leucocitárias de doadores saudáveis e selecionados negativamente por separação celular magnética (Monocyte Isolation Kit II, Miltenyi Bio-tec). Os monócitos purificados foram cultivados em meios padrão suple- mentados com FBS de baixa IgG e 100 ng/mL de GM-CSF por 5-7 dias para induzir a diferenciação dos macrófagos. Os macrófagos cultivados foram estimulados com 100 μg/mL de IgG purificada ligada à placa ± uma titulação do composto de teste (10 μM a 0 nM). Os sobrenadantes foram coletados após 4 horas e 18 horas e analisados para TNFα e IL-6, respectivamente. Exemplo 19 Eficácia na Artrite Induzida por Anticorpo de Colágeno de Camundongo

[000194] Este Exemplo refere-se não apenas à artrite, mas também avalia a atividade de autoanticorpos e complexos imune in vivo e, portanto, é relevante para outras doenças inflamatórias, tais como SLE. Neste experimento, a atividade de autoanticorpos e complexos imune produzem um parâmetro patológico que é dependente da sinalização de FcR, e a porção Fc dessas anticorpos é inibida pela administração de um composto da fórmula I.

[000195] O modelo de artrite induzida por anticorpo de colágeno (CAIA) em camundongos DBA/1 fêmeas não requerem respostas de células T e B cognatas para a indução de inflamação, mas sim depende de mecanismos efetores imunes para o desenvolvimento da doença clínica. Um coquetel de quatro anticorpos monoclonais específicos anti-colágeno II (CII) e lipopolissacarídeo estimulatório imune (LPS) administrados 3 dias após a transferência do anticorpo específico de CII promover a ligação do anticorpo-receptor de Fc (Kagari T.et al.; J Immunol.170:4318-24 (2003)), formação de complexo imune, ativação do complemento (Banda NK, et al.; Clin Exp Immunol. 159:100-8 (2010)) e produção de citocina pró-inflamatória para induzir uma doença inflamatória grave durante um período de 10 dias.

[000196] Em geral, a artrite é induzida pela injeção de um coquetel de anticorpos anti-colágeno monoclonais em camundongos DBA/1 no dia 0. Os camundongos (N=10/grupo) recebem administração oral diária do composto de teste QD ou BID, conforme indicado, começando no dia 0. A inflamação da pata foi avaliada diariamente.

[000197] Protocolo: Camundongos DBA/1 de 6-8 semanas de idade receberam 2 mg de um coquetel de anticorpo monoclonal de quatro clo-nes artritogênico (Chondrex#10100) i.v. no dia 0 seguido por uma dose de 50 ug de LPS nos 3 dias posteriores. A suspensão do composto de teste ou veículo (0,5% CMC, 0,1% Tween 80) é administrada BID por gavagem oral, começando no dia 0 (10 animais/grupo) imediatamente antes à transferência i.v. do coquetel de anticorpo. A gravidade clínica de CIA foi avaliada pelo monitoramento da inflamação em todas as quatro patas, aplicando uma escala variando de 0 a 4. Cada pata é classificada como se segue: 0, normal; 1, vermelhidão branda, mas definida e inchaço do tornozelo ou pulso, ou vermelhidão e inchaço de qualquer gravidade para 1 ou 2 dedos; 2, vermelhidão moderada a grave e inchaço do tornozelo ou pulso, ou mais de dois dedos; 3, vermelhidão e inchaço (edema pronunciado) da pata inteira; e 4, membro maximamente inflamado com envolvimento de várias articulações. A soma das quatro pontuações individuais é o índice de artrite, com uma pontuação máxima possível de 16 para cada animal.

Claims

1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula I:

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: cada R1 é independentemente hidrogênio, um grupo alifáti- co C1-6 opcionalmente substituído, um grupo heterocíclico monocíclico de 3-7 membros opcionalmente substituído, ou um grupo heterocicli- lalquil tendo 3-7 átomos de carbono opcionalmente substituído e 1-3 heteroátomos independentemente selecionado de nitrogênio, oxigênio e enxofre; ou dois grupos R1 são unidos com seus átomos intermediá-rios formando um anel heterocíclico monocíclico de 3-7 membros opcionalmente substituído saturado ou parcialmente insaturado tendo 1-2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxi-gênio e enxofre; em que grupos opcionalmente substituídos podem ser substituídos com halogênio, -NO2, -CN, -OR, -SR, -N(R)2, -C(O)R, -CO2R, -N(R)C(O)OR, -C(O)N(R)2, -OC(O)R, -N(R)C(O)R, -S(O)R, -S(O)2R, ou -S(O)2N(R)2; cada R é independentemente hidrogênio ou C1-6 alifático; ou dois grupos R anexados no mesmo nitrogênio são uni-dos com seus átomos intermediários para formar um anel heterocíclico monocíclico de 3-7 membros opcionalmente substituído, saturado ou parcialmente insaturado tendo 1-2 heteroátomos, em que qualquer se-gundo heteroátomo é independentemente selecionado de nitrogênio, oxigênio e enxofre; R2 Anel A

R2 é -Cl ou -F; e R3 é -CF3, -OCF3, ou -F.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteriza-do pelo fato de que o composto é da fórmula II-a:

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

3. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteriza-do pelo fato de que o composto é da fórmula II-b:

II-b ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

4. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteriza-do pelo fato de que o composto é da fórmula III:

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

5. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteriza- do pelo fato de que o composto é da fórmula IV:

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

6. Composto de acordo com a reivindicação 5, caracteriza-do pelo fato de que R3 é -CF3.

7. Composto de acordo com a reivindicação 5, caracteriza-do pelo fato de que R3 é -F.

8. Composto de acordo com a reivindicação 5, caracteriza-do pelo fato de que ambos R1 são hidrogênio.

9. Composto de acordo com a reivindicação 5, caracteriza-do pelo fato de que um R1 é hidrogênio e o outro R1 é um C1-6 alifático opcionalmente substituído.

10. Composto de acordo com a reivindicação 9, caracteri- zado pelo fato de que um R1 é hidrogênio e o outro R1 é metila.

11. Composto de acordo com a reivindicação 5, caracteri-zado pelo fato de que ambos R1 são grupo alifáticos C1-6 opcionalmente substituído.

12. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteri-zado pelo fato de que um R1 é hidrogênio e o outro é um C1-6 alifático opcionalmente substituído.

13. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteri-zado pelo fato de que ambos R1 são grupos alifáticos C1-6 opcional-mente substituído.

14. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteri-zado pelo fato de que ambos R1 são hidrogênio.

15. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteri-zado pelo fato de que R2 é -Cl.

16. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteri-zado pelo fato de que R2 é -F.

17. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteri-zado pelo fato de que R3 é -CF3.

18. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteri-zado pelo fato de que R3 é -OCF3.

19. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteri-zado pelo fato de que R3 é -F.

20. Composto, caracterizado pelo fato de que é selecionado do grupo que consiste em:

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

21. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 20 em combinação com um excipiente farmaceuti- camente aceitável.