EA032463B1 - Применение ингибиторов тирозинкиназы брутона (втк) - Google Patents

Применение ингибиторов тирозинкиназы брутона (втк) Download PDF

Info

Publication number
EA032463B1
EA032463B1 EA201490798A EA201490798A EA032463B1 EA 032463 B1 EA032463 B1 EA 032463B1 EA 201490798 A EA201490798 A EA 201490798A EA 201490798 A EA201490798 A EA 201490798A EA 032463 B1 EA032463 B1 EA 032463B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
inhibitor
substituted
unsubstituted
alkyl
irreversible
Prior art date
Application number
EA201490798A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201490798A1 (ru
Inventor
Джозеф Дж. Багги
Лоренс Элиас
Гвен Фи
Эрик Хедрик
Дэвид Дж. Лаури
Тарак Д. Моди
Original Assignee
Фармасайкликс Элэлси
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Фармасайкликс Элэлси filed Critical Фармасайкликс Элэлси
Publication of EA201490798A1 publication Critical patent/EA201490798A1/ru
Publication of EA032463B1 publication Critical patent/EA032463B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/337—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having four-membered rings, e.g. taxol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4184—1,3-Diazoles condensed with carbocyclic rings, e.g. benzimidazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/454—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pimozide, domperidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/475—Quinolines; Isoquinolines having an indole ring, e.g. yohimbine, reserpine, strychnine, vinblastine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A61K31/52—Purines, e.g. adenine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5383—1,4-Oxazines, e.g. morpholine ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
    • A61K31/704—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin attached to a condensed carbocyclic ring system, e.g. sennosides, thiocolchicosides, escin, daunorubicin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7076—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
    • C12Q1/6886—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material for cancer
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G01N33/57484—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Abstract

Описана комбинация: а) необратимого ингибитора тирозинкиназы Брутона (Btk), причем необратимый ингибитор тирозинкиназы Брутона (Btk) представляет собой (R)-1-(3-(4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пиперидин-1-ил)проп-2-ен-1-он (PCI-32765/ибрутиниб); и b) GA 101; в которой необратимый ингибитор Btk и GA 101 находятся в виде раздельных лекарственных форм. Также описано применение указанной комбинации для изготовления лекарственного средства для лечения гематологической злокачественной опухоли у субъекта, нуждающегося в этом.

Description

Настоящее изобретение выполняет эту давно ощущаемую потребность в данной области.
Лимфома из клеток мантийной зоны
В определенных вариантах осуществления в настоящем документе раскрыт способ лечения лимфомы из клеток мантийной зоны у субъектов, нуждающихся в таком лечении, включающий: (а) проведение у субъекта первой терапии, содержащей количество необратимого ингибитора В1к, достаточное для мобилизации множества клеток из злокачественной опухоли; (Ь) анализ мобилизованного множества клеток в образце, полученном от субъекта; и (с) проведение второй терапии у субъекта. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В1к является достаточным для индукции лимфоцитоза множества клеток из злокачественной опухоли. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение концентрации в периферической крови мобилизованного множества клеток. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после повышения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с концентрацией до введения ингибитора В1к. В некоторых вариантах осуществления проведение второй терапии происходит после последующего понижения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение продолжительности повышения в периферической крови концентрации мобилизованного множества клеток по сравнению с концентрацией до введения ингибитора В1к. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после повышения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови в течение предварительно установленного промежутка времени. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает подсчет числа мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с числом до введения ингибитора В1к. В некоторых вариантах осуществления проведение второй терапии начинают после последующего уменьшения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение продолжительности увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с числом до введения ингибитора В1к. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови в течение предварительно определенного промежутка времени. В некоторых вариантах осуществления второй терапией является темсиролимус.
Термин лимфома из клеток мантийной зоны, используемый здесь, относится к подтипу Вклеточной лимфомы, возникающей из СО5-позитивных антиген-наивных В-клеток прегерминального центра, локализованных в мантийной зоне, которая окружает фолликулы с нормальными герминальными центрами. Клетки МСЬ обычно сверх-экспрессируют циклин Ό1 по причине 1(11:14) хромосомной транслокации в ДНК. В частности, транслокация происходит в 1(11;14)(с|13;с.|32). Только около 5% лимфом представляют лимфому данного типа. Клетки имеют размер от маленького до среднего. Мужчины поражаются более часто. Средний возраст пациентов составляет 60 лет. Лимфома, как правило, является
- 26 032463 широко распространенной при ее диагностике, с вовлечением лимфатических узлов, костного мозга и очень часто селезенки. Лимфома из клеток мантийной зоны представляет собой не очень быстро растущую лимфому, но является трудной для лечения.
В-клеточная лимфома маргинальной зоны
В определенных вариантах осуществления в настоящем документе раскрыт способ лечения Вклеточной лимфомы маргинальной зоны у субъектов, нуждающихся в таком лечении, включающий: (а) проведение у субъекта первой терапии, содержащей количество необратимого ингибитора Вкк, достаточное для мобилизации множества клеток из злокачественной опухоли; (Ь) анализ мобилизованного множества клеток в образце, полученном от субъекта; и (с) проведение второй терапии у субъекта. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В1к является достаточным для индукции лимфоцитоза множества клеток из злокачественной опухоли. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение концентрации в периферической крови мобилизованного множества клеток. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после повышения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с концентрацией до введения ингибитора Вкк. В некоторых вариантах осуществления проведение второй терапии происходит после последующего понижения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение продолжительности повышения в периферической крови концентрации мобилизованного множества клеток по сравнению с концентрацией до введения ингибитора В1к. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после повышения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови в течение предварительно установленного промежутка времени. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает подсчет числа мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с числом до введения ингибитора Вкк. В некоторых вариантах осуществления проведение второй терапии начинают после последующего уменьшения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение продолжительности увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с числом до введения ингибитора Вкк. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови в течение предварительно определенного промежутка времени.
Термин В-клеточная лимфома маргинальной зоны, используемый здесь, относится к группе родственных В-клеточных злокачественных новообразований, которые охватывают лимфоидные ткани в маргинальной зоне, очаговую область снаружи фолликулярной мантийной зоны. На долю лимфом маргинальной зоны приходится примерно от 5 до 10% лимфом. Клетки в этих лимфомах выглядят маленькими под микроскопом. Существует 3 основных типа лимфом маргинальной зоны, включающие экстранодальную В-клеточную лимфому маргинальной зоны, нодальную В-клеточную лимфому маргинальной зоны и лимфому маргинальной зоны селезенки.
МАЬТ-лимфома
В определенных вариантах осуществления в настоящем документе раскрыт способ лечения МАЬТ у субъектов, нуждающихся в таком лечении, включающий: (а) проведение у субъекта первой терапии, содержащей количество необратимого ингибитора Вкк, достаточное для мобилизации множества клеток из злокачественной опухоли; (Ь) анализ мобилизованного множества клеток в образце, полученном от субъекта; и (с) проведение второй терапии у субъекта. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В1к является достаточным для индукции лимфоцитоза множества клеток из злокачественной опухоли. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение концентрации в периферической крови мобилизованного множества клеток. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после повышения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с концентрацией до введения ингибитора В1к. В некоторых вариантах осуществления проведение второй терапии происходит после последующего понижения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение продолжительности повышения в периферической крови концентрации мобилизованного множества клеток по сравнению с концентрацией до введения ингибитора Вкк. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после повышения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови в течение предварительно установленного промежутка времени. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает подсчет числа мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравне
- 27 032463 нию с числом до введения ингибитора В1к. В некоторых вариантах осуществления проведение второй терапии начинают после последующего уменьшения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение продолжительности увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с числом до введения ингибитора В1к. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови в течение предварительно определенного промежутка времени.
Термин лимфома лимфоидной ткани, ассоциированной со слизистой оболочкой (МАЬТ), используемый здесь, относится к экстранодальным проявлениям лимфомы маргинальной зоны. Большинство МАЬТ-лимфом имеют низкую степень злокачественности, хотя незначительное количество проявляется изначально как неходжкинская лимфома (ЫНЬ) средней степени или развивается из формы с низкой степенью злокачественности. Большинство МАЬТ-лимфом возникает в желудке, и примерно 70% желудочных МАЬТ-лимфом ассоциировано с инфекцией Не11соЬас1ег ру1оп. Некоторые цитогенетические нарушения были идентифицированы, наиболее распространенным является трисомия 3 или ΐ(11;18). Многие из этих других МАЬТ-лимфом также связаны с инфекциями бактериями или вирусами. Средний возраст пациентов с МАЬТ-лимфомой составляет примерно 60 лет.
Нодальная В-клеточная лимфома маргинальной зоны
В определенных вариантах осуществления в настоящем документе раскрыт способ лечения нодальной В-клеточной лимфомы маргинальной зоны у субъектов, нуждающихся в таком лечении, включающий: (а) проведение у субъекта первой терапии, содержащей количество необратимого ингибитора В!к, достаточное для мобилизации множества клеток из злокачественной опухоли; (Ь) анализ мобилизованного множества клеток в образце, полученном от субъекта; и (с) проведение второй терапии у субъекта. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В1к является достаточным для индукции лимфоцитоза множества клеток из злокачественной опухоли. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение концентрации в периферической крови мобилизованного множества клеток. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после повышения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с концентрацией до введения ингибитора В1к. В некоторых вариантах осуществления проведение второй терапии происходит после последующего понижения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение продолжительности повышения в периферической крови концентрации мобилизованного множества клеток по сравнению с концентрацией до введения ингибитора В1к. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после повышения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови в течение предварительно установленного промежутка времени. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает подсчет числа мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с числом до введения ингибитора В1к. В некоторых вариантах осуществления проведение второй терапии начинают после последующего уменьшения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение продолжительности увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с числом до введения ингибитора В1к. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови в течение предварительно определенного промежутка времени.
Термин нодальная В-клеточная лимфома маргинальной зоны относится к индолентной Вклеточной лимфоме, которая обнаруживается в основном в лимфатических узлах. Заболевание является редким и на его долю приходится только 1% от всех неходжкинских лимфом (ЫНЬ). Данная лимфома чаще всего диагностируется у пациентов старшего возраста, причем женщины являются в большей степени подверженными данному заболеванию, чем мужчины. Заболевание классифицируется как лимфома маргинальной зоны, так как мутации возникают в маргинальной зоне В-клеток. По причине ее локализации в лимфатических узлах, данное заболевание также классифицируется как нодальное.
В-клеточная лифома маргинальной зоны селезенки
В определенных вариантах осуществления в настоящем документе раскрыт способ лечения Вклеточной лимфомы маргинальной зоны селезенки у субъектов, нуждающихся в таком лечении, включающий: (а) проведение у субъекта первой терапии, содержащей количество необратимого ингибитора В1к, достаточное для мобилизации множества клеток из злокачественной опухоли; (Ь) анализ мобилизованного множества клеток в образце, полученном от субъекта; и (с) проведение второй терапии у субъекта. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В1к является достаточным для индукции лимфоцитоза множества клеток из злокачественной опухоли. В некоторых вариантах
- 28 032463 осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение концентрации в периферической крови мобилизованного множества клеток. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после повышения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с концентрацией до введения ингибитора В(к. В некоторых вариантах осуществления проведение второй терапии происходит после последующего понижения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение продолжительности повышения в периферической крови концентрации мобилизованного множества клеток по сравнению с концентрацией до введения ингибитора В(к. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после повышения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови в течение предварительно установленного промежутка времени. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает подсчет числа мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с числом до введения ингибитора В(к. В некоторых вариантах осуществления проведение второй терапии начинают после последующего уменьшения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение продолжительности увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с числом до введения ингибитора В(к. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови в течение предварительно определенного промежутка времени.
Термин В-клеточная лимфома маргинальной зоны селезенки относится к специфической Вмелкоклеточной лимфоме низкой степени, которая включена в классификацию Всемирной Организации здравоохранения. Отличительными признаками являются спленомегалия, умеренный лимфоцитоз с ворсинчатой морфологией, интрасинусоидальная картина вовлечения различных органов, в особенности костного мозга, и относительно индолентное течение. У незначительного числа пациентов наблюдается прогрессирование опухоли с увеличением бластических форм и агрессивного поведения. Молекулярные и цитогенетические исследования показали разнородные результаты, возможно из-за отсутствия стандартизированного диагностического критерия.
Лимфома Беркитта
В определенных вариантах осуществления в настоящем документе раскрыт способ лечения лимфомы Беркитта у субъектов, нуждающихся в таком лечении, включающий: (а) проведение у субъекта первой терапии, содержащей количество необратимого ингибитора В(к, достаточное для мобилизации множества клеток из злокачественной опухоли; (Ь) анализ мобилизованного множества клеток в образце, полученном от субъекта; и (с) проведение второй терапии у субъекту. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В(к является достаточным для индукции лимфоцитоза множества клеток из злокачественной опухоли. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение концентрации в периферической крови мобилизованного множества клеток. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после повышения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с концентрацией до введения ингибитора В(к. В некоторых вариантах осуществления проведение второй терапии происходит после последующего понижения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение продолжительности повышения в периферической крови концентрации мобилизованного множества клеток по сравнению с концентрацией до введения ингибитора В(к. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после повышения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови в течение предварительно установленного промежутка времени. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает подсчет числа мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с числом до введения ингибитора В(к. В некоторых вариантах осуществления проведение второй терапии начинают после последующего уменьшения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение продолжительности увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с числом до введения ингибитора В(к. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови в течение предварительно определенного промежутка времени.
Термин лимфома Беркитта относится к типу неходжкинской лимфомы (ΝΗΕ), который обычно поражает детей. Данная лимфома представляет собой высоко агрессивный тип В-клеточной лимфомы,
- 29 032463 который часто начинается и вовлекает части тела, оличные от лимфатических узлов. Несмотря на ее быстрорастущую природу, лимфома Беркетта часто излечивается современными интенсивными терапиями. Существует два широких типа лимфомы Беркитта - спорадический и эндемический варианты:
Эндемическая лимфома Беркитта: Заболевание поражает детей значительно в большей степени, чем взрослых и в 95% случаев относится к инфекции вирусом Эпштейна-Барра (ЕВУ). Данная лимфома возникает преимущественно в экваториальной Африке, где примерно половина из всех раковых заболеваний детей представляют собой лимфому Беркитта. Характеристически, данная лимфома имеет высокий шанс вовлечения челюстной кости, довольно отличительный признак, который является редким в спорадической лимфоме Беркитта. В данную лимфому также обычно вовлечен желудок.
Спорадическая лимфома Беркитта: Спорадический тип является типом лимфомы Беркитта, которая поражает остальные регионы мира, включая Европу и Америку. И в данном случае, главным образом, это заболевание детей. Связь между вирусом Эпштейна-Барра (ЕВУ) не является такой сильной, как в эндемическом варианте, хотя прямое свидетельство инфекции ЕВУ присутствует у одного из пяти пациентов. В большей степени, чем лимфатические узлы, является вовлеченным желудок, который значительно поражен более чем у 90% детей. Вовлечение костного мозга более распространено, чем в спорадическом варианте.
Макроглобулинемия Вальденстрема
В определенных вариантах осуществления в настоящем документе раскрыт способ лечения макроглобулинемии Вальденстрема у субъектов, нуждающихся в таком лечении, включающий: (а) проведение у субъекта первой терапии, содержащей количество необратимого ингибитора В!к, достаточное для мобилизации множества клеток из злокачественной опухоли; (Ь) анализ мобилизованного множества клеток в образце, полученном от субъекта; и (с) проведение второй терапии у субъекта. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В!к является достаточным для индукции лимфоцитоза множества клеток из злокачественной опухоли. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение концентрации в периферической крови мобилизованного множества клеток. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после повышения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с концентрацией до введения ингибитора В!к. В некоторых вариантах осуществления проведение второй терапии происходит после последующего понижения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение продолжительности повышения в периферической крови концентрации мобилизованного множества клеток по сравнению с концентрацией до введения ингибитора В!к. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после повышения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови в течение предварительно установленного промежутка времени. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает подсчет числа мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с числом до введения ингибитора В!к. В некоторых вариантах осуществления проведение второй терапии начинают после последующего уменьшения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение продолжительности увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с числом до введения ингибитора В!к. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови в течение предварительно определенного промежутка времени. В некоторых вариантах осуществления второй терапией является ритуксимаб, циклофосфамид, доксорубицина гидрохлорид, винкристина сульфат и преднизон (В-СНОР).
Термин макроглобулинемия Вальденстрема, также известная как лимфоплазматическая лимфома, представляет собой рак, включающий подтип белых клеток крови, называемых лимфоцитами. Указанное заболевание характеризуется неконтролируемой клональной пролиферацией герминально дифференцированных В-лимфоцитов. Указанное заболевание также характеризуется клетками лимфомы, продуцирующими антитело, называемое иммуноглобулин М (1дМ). 1дМ-антитела циркулируют в крови в больших количествах и вызывают сгущение жидкой фазы крови, наподобие сиропа. Это может привести к уменьшению кровотока во многие органы, что может вызвать проблемы со зрением (из-за слабой циркуляции в кровеностных сосудах на заднем отделе глаза) и неврологическим проблемам (таким как головная боль, головокружение и помрачнение сознания), вызванное слабым кровотоком в головном мозге. Другие симптомы могут включать утомляемость и слабость, а также склонность к легкому кровотечению. Лежащая в основе этиология остается полностью неясной, но ряд факторов риска были идентифицированы, включая локус 6р21.3 на хромосоме 6. Существует от 2- до 3-кратный риск увеличения развития \УМ у людей с персональной историей аутоиммунных заболеваний с аутоантителами, и особенно повышенные риски, связанные с гепатитом, вирусом иммунодефецита человека и риккетсиозом.
- 30 032463
Множественная миелома
В определенных вариантах осуществления в настоящем документе раскрыт способ лечения миеломы у субъектов, нуждающихся в таком лечении, включающий:
(а) проведение у субъекта первой терапии, содержащей количество необратимого ингибитора В!к, достаточное для мобилизации множества клеток из злокачественной опухоли; (Ь) анализ мобилизованного множества клеток в образце, полученном от субъекта; и (с) проведение второй терапии у субъекта. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В1к является достаточным для индукции лимфоцитоза множества клеток из злокачественной опухоли. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение концентрации в периферической крови мобилизованного множества клеток. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после повышения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с концентрацией до введения ингибитора В1к. В некоторых вариантах осуществления проведение второй терапии происходит после последующего понижения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение продолжительности повышения в периферической крови концентрации мобилизованного множества клеток по сравнению с концентрацией до введения ингибитора В1к. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после повышения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови в течение предварительно установленного промежутка времени. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает подсчет числа мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с числом до введения ингибитора В1к. В некоторых вариантах осуществления проведение второй терапии начинают после последующего уменьшения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение продолжительности увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с числом до введения ингибитора В1к. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови в течение предварительно определенного промежутка времени. В некоторых вариантах осуществления второй терапией является леналидомид.
Множественная миелома, также известная как ММ, миелома, миелома плазматических клеток, или как болезнь Калера (по имени Отто Калера), представляет собой рак белых клеток крови, известных как плазматические клетки. Тип В-клеток, плазматические клетки являются важной частью иммунной системы, ответственной за выработку антител у человека и других позвоночных. Они вырабатываются в костном мозге и переносятся по лимфатической системе.
Лейкоз
В определенных вариантах осуществления в настоящем документе раскрыт способ лечения лейкоза у субъектов, нуждающихся в таком лечении, включающий: (а) проведение у субъекта первой терапии, содержащей количество необратимого ингибитора В!к, достаточное для мобилизации множества клеток из злокачественной опухоли; (Ь) анализ мобилизованного множества клеток в образце, полученном от субъекта; и (с) проведение второй терапии у субъекта. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В1к является достаточным для индукции лимфоцитоза множества клеток из злокачественной опухоли. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение концентрации в периферической крови мобилизованного множества клеток. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после повышения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с концентрацией до введения ингибитора В1к. В некоторых вариантах осуществления проведение второй терапии происходит после последующего понижения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение продолжительности повышения в периферической крови концентрации мобилизованного множества клеток по сравнению с концентрацией до введения ингибитора В1к. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после повышения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови в течение предварительно установленного промежутка времени. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает подсчет числа мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с числом до введения ингибитора В1к. В некоторых вариантах осуществления проведение второй терапии начинают после последующего уменьшения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение продолжительности увеличения числа мобилизованного множества клеток в пери
- 31 032463 ферической крови по сравнению с числом до введения ингибитора В1к. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение второй терапии после увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови в течение предварительно определенного промежутка времени.
Лейкоз представляет собой рак крови или костного мозга. характеризующийся аномальным увеличением клеток крови. как правило. лейкоцитов (белых клеток крови). Лейкоз является широким понятием. охватывающим спектр заболеваний. Лейкоз подразделяется на острые и хронические формы: (ί) острый лейкоз характеризуется быстрым увеличением незрелых клеток крови. Этот рост делает костный мозг неспособным вырабатывать здоровые клетки крови. При остром лейкозе требуется немедленное лечение из-за быстрого прогрессирования и накопления злокачественных клеток. которые затем входят в кровоток и распространяются в другие органы тела. Острые формы лейкоза являются самыми распространенными формами лейкоза у детей; (ίί) хронический лейкоз отличается избыточным образованием относительно зрелых. но все еще аномальных белых клеток крови. Обычно требуются месяцы или годы для прогрессирования. клетки продуцируются с гораздо более высокой скоростью. чем нормальные клетки. что приводит к образованию большого количества аномальных лейкоцитов в крови. Хронический лейкоз в основном возникает у пожилых людей. но может теоретически возникать в любой возрастной группе. Кроме того. заболевания подразделяются в соответствии с видом пораженных клеток крови. Это позволяет разделить лейкоз на лимфобластный или лимфоцитарный лейкоз. и миелоидный или миелогенный лейкоз: (ί) лимфобластный или лимфоцитарный лейкоз. злокачественное изменение. которое происходит в типе клетки костного мозга. который обычно функционирует с образованием лимфоцитов. которые представляют собой клетки иммунной системы. сражающиеся против инфекции; (ίί) миелоидный или миелогенный лейкоз. раковое изменение. которое происходит в типе клетки костного мозга. который в нормальном состоянии функционируют с образованием красных клеток крови. некоторых других типов лимфоцитов и тромбоцитов.
В пределах этих основных категорий. существует несколько подкатегорий. включая. но без ограничея. острый лимфобластный лейкоз (АЬЬ). острый миелогенный лейкоз (АМЬ). хронический миелогенный лейкоз (СМЬ) и волосатоклеточный лейкоз (НСЬ).
Ингибиторы В1к
Также. в настоящем документе представлены способы лечения рака. такого как. в качестве примера только. ВСЬИ. у субъекта. при этом субъект получал лечение путем введения ингибитора В1к. В следующем описании соединений необратимого ингибитора В1к. пригодных для применения в описанных здесь способах. определения упоминаемых стандартных химических терминов. можно найти в различных источниках (если иное не указано). в том числе Сагеу апб 8ипбЬегд Абνапсеб Огдашс СЬетШгу 411 Еб. Уо1к. А (2000) апб В (2001). Р1епит Ргекк. Ыете Уогк. Если не указано иначе. стандартные методы масс-спектроскопии. ЯМР. ВЭЖХ. химии белков. биохии. технологий рекомбинантной ДНК и фармакологии. применяются в пределах компетенции специалиста в данной области. Кроме того. нуклеотидные и аминокислотные последовательности для В1к (например. человеческой В1к) известны в данной области и описаны. например. в патенте США № 6326469. Если не представлены точные определения. номенклатура. а также описанные здесь лабораторные процедуры и методы. относящиеся к аналитической химии. химии органического синтеза. а также медицинской и фармацевтической химии. соответствуют общепринятым в данной области. Для химического синтеза. химического анализа. фармацевтического приготовления. формулирования и доставки фармацевтических препаратов. а также лечения пациентов могут быть использованы стандартные методики.
Соединения ингибитора В1к. описанные здесь. являются селективными в отношении В1к и киназ. имеющих цистеиновый остаток в положении аминокислотной последовательности тирозинкиназы. который гомологичен положению цистеина 481 в аминокислотной последовательности в В1к. Как правило. соединение необратимого ингибитора В1к. используемое в способах. описанных здесь. идентифицируют или характеризуют в анализе ίπ \з1го. например. биохимическом анализе в бесклеточной системе или функциональном анализа в клеточной системе. Такие способы анализа применяются для определения ш νίύΌ 1С50 для соединения необратимого ингибитора В1к.
Например. анализ киназы в бесклеточной системе может быть использован для определения активности В1к после инкубации киназы в отсутствие или в присутствии диапазона концентраций кандидатного соединения необратимого ингибитора В1к. Если кандидатное соединение действительно является необратимым ингибитором В1к. киназная активность В1к не будет восстановлена путем повторной промывки средой. не содержащей ингибитор. См.. например. 1. В. 8таб1. е1 а1. (1999). ί. Меб. Скет. 42(10): 1803-1815. Кроме того. образование ковалентного комплекса между В1к и кандидатным необратимым ингибитором В1к является эффективным индикатором необратимого ингибирования В1к. которое может быть легко определено с помощью ряда способов. известных в данной области (например. массспектометрия). Например. некоторые соединения необратимого ингибитора В1к могут образовывать ковалентную связь с Сук 481 В1к (например. посредством реакции Михаэля).
Функциональные анализы ингибирования В1к в клеточной системе включают измерение одной или более клеточных конечных точек в ответ на стимулирование В1к-опосредованного сигнального пути в
- 32 032463 клеточной линии (например, активация ВСЯ в клетках Рамоса (Яаток се11к)) в отсутствие или в присутствии диапазона концентраций кандидатного соединения необратимого ингибитора В1к. Полезные конечные точки для определения ответа на активацию ВСЯ включают, например, аутофосфорилирование В!к, фосфорилирование белка-мишени В1к (например, РЬС-γ), и поток цитоплазматического кальция.
Высокопроизводительные анализы для многих биохимических анализов в бесклеточной системе (например, анализов киназной активности) и функциональных анализов в клеточной системе (например, кальциевого потока) хорошо известны специалистам в данной области. Кроме того, коммерчески доступны системы высокопроизводительного скрининга (см., например, 2утагк Согр., НорктФп, МА; Ап Тес11шса1 1пйи81пе8, МеШог, ОН; Весктап ИМгитепК 1пс. Еи11ег1оп, СА; Ргеспюп 8у51ет5, 1пс., МЮск, МА, е1с.). Эти системы, как правило, автоматизируют все процедуры, включая пипетирование всех образцов и реагентов, дозирование жидкостей, инкубацию в течение заданного промежутка времени и конечные считывания микропланшета в детекторе(ах), подходящем для анализа. Таким образом, автоматизированные системы обеспечивают идентификацию и определение характеристик большого числа соединений необратимого ингибитора В11< без лишних усилий.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор В11< выбран из группы, состоящей из малой органической молекулы, макромолекулы, пептида или не петида.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор В!к, обеспеченный здесь, представляет собой обратимый или необратимый ингибитор. В определенных вариантах осуществления ингибитор В1к представляет собой необратимый ингибитор.
В некоторых вариантах осуществления необратимый ингибитор В1к образует ковалентную связь с цистеиновой боковой цепью тирозинкиназы Брутона, гомологом тирозинкиназы Брутона или цистеиновым гомологом тирозинкиназы В1к.
Соединения необратимого ингибитора В1к можно использовать для изготовления лекарственных препаратов для лечения любого из описанных выше патологических состояний (например, аутоиммунных заболеваний, воспалительных заболеваний, аллергических нарушений, В-клеточных пролиферативных заболеваний или тромбоэмболических нарушений).
В некоторых вариантах осуществления соединение необратимого ингибитора В!к, используемое в описанных здесь способах, ингибирует киназную активность В11< или гомолога В1к с 1С50 ш νίΙΐΌ меньше чем 10 мкМ (например, меньше чем 1 мкМ, меньше чем 0.5 мкМ, меньше чем 0.4 мкМ, меньше чем 0.3 мкМ, меньше чем 0.1 мкМ, меньше чем 0.08 мкМ, меньше чем 0.06 мкМ, меньше чем 0.05 мкМ, меньше чем 0.04 мкМ, меньше чем 0.03 мкМ, меньше чем 0.02 мкМ, меньше чем 0.01 мкМ, меньше чем 0.008 мкМ, меньше чем 0.006 мкМ, меньше чем 0.005 мкМ, меньше чем 0.004 мкМ, меньше чем 0.003 мкМ, меньше чем 0.002 мкМ, меньше чем 0.001 мкМ, меньше чем 0.00099 мкМ, меньше чем 0.00098 мкМ, меньше чем 0.00097 мкМ, меньше чем 0.00096 мкМ, меньше чем 0.00095 мкМ, меньше чем 0.00094 мкМ, меньше чем 0.00093 мкМ, меньше чем 0.00092 мкМ или меньше чем 0.00090 мкМ).
В одном варианте осуществления соединение необратимого ингибитора В11< селективно и необратимо ингибирует активированную форму ее тирозинкиназы-мишени (например, фосфорилированную форму тирозинкиназы). Например, активированная В11< является трансфосфорилированной по тирозину 551. Таким образом, в данных вариантах осуществления необратимый ингибитор В11< ингибирует киназумишень в клетках сразу же после активации киназы-мишени событиями пути передачи сигнала.
В других вариантах осуществления ингибитор В1к, используемый в способах, описанных здесь, имеет структуру Формулы (А), Формулы (В), Формулы (С), Формулы (Ό), Формулы (Е) или Формулы (Е). Кроме того, в настоящем документе описаны фармацевтически приемлемые соли, фармацевтически приемлемые сольваты, фармацевтически активные метаболиты и фармацевтически приемлемые пролекарства таких соединений. Обеспечены фармацевтические композиции, которые включают, по меньшей мере, одно такое соединение или фармацевтически приемлемую соль, фармацевтически приемлемый сольват, фармацевтически активный метаболит или фармацевтически приемлемое пролекарство такого соединения. В некоторых вариантах осуществления, когда соединения, описанные здесь, содержат окисляемый атом азота, атом азота может быть преобразован в Ν-оксид способами, хорошо известными в данной области. В определенных вариантах осуществления также обеспечены изомеры и химически защищенные формы соединений, имеющие структуру, представленную Формулой (А), Формулой (В), Формулой (С), Формулой (Ό), Формулой (Е) или Формулой (Е).
Формула (А) имеет следующий вид:
к4
Формула (А) в которой
А независимо выбран из N или СЯ5;
Я1 представляет собой Н, Ь2-(замещенный или незамещенный алкил), Ь2-(замещенный или незаме
- 33 032463 щенный циклоалкил), Ь2-(замещенный или незамещенный алкенил), Ь2-(замещенный или незамещенный циклоалкенил), Ь2-(замещенный или незамещенный гетероцикл), Ь2-(замещенный или незамещенный гетероарил) или Ь2-(замещенный или незамещенный арил), где 1.2 представляет собой связь, О, 8, -8(=О), -8(=О)2, С(=О), -(замещенный или незамещенный С1-С6 алкил) или -(замещенный или незамещенный С2С6 алкенил);
К2 и К3 независимо выбраны из Н, низшего алкила и замещенного низшего алкила;
Кд представляет собой Ь3-Х-Ь4-О, где
1,3 является необязательным и в случае присутствия представляет собой связь, необязательно замещенный или незамещенный алкил, необязательно замещенный или незамещенный циклоалкил, необязательно замещенный или незамещенный алкенил, необязательно замещенный или незамещенный алкинил;
X является необязательным и в случае присутствия представляет собой связь, О, -С(=О), 8, -8(=О), -8(=0)2, -ΝΗ, -ΝΚ9, -ИИС(О), -С(О)№, -ΝΚ<£(Ό), -С(О)Ж9, -З^О^ЫИ, -ЫИ8(=О)2, -8(=О)2ЫК9-, -№98(=О)2, -ОС(о)ж-, -№С(О)О-, -ОС(О)Ж9-, -ЫК9С(О)О-, -СИ=ЫО-, -ОЫ=СИ-, -МК1оС(О)МК1о-, гетероарил, арил, -НК.10С(=НК.11)НК.10-, -ΝΚ^^ΝΚπ)-, -С^НКЩМКщ-, -ОС(=NК11)- или -С(=NК11)О-;
Ь4 вляется необязательным и в случае присутствия представляет собой связь, замещенный или незамещенный алкил, замещенный или незамещенный циклоалкил, замещенный или незамещенный алкенил, замещенный или незамещенный алкинил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный гетероарил, замещенный или незамещенный гетероцикл;
или Ь3, X и Ь4, взятые вместе, образуют содержащее азот гетероциклическое кольцо;
О представляет собой
где
Кб, К7 и К8 независимо выбраны из Н, низшего алкила или замещенного низшего алкила, низшего гетероалкила или замещенного низшего гетероалкила, замещенного или незамещенного низшего циклоалкила и замещенного, или незамещенного низшего гетероциклоалкила;
К5 представляет собой Н, галоген, -Ь6-(замещенный или незамещенный С1-С3 алкил), -Ь6(замещенный или незамещенный С2-С4алкенил), -Ь6-(замещенный или незамещенный гетероарил) или -Ь6-(замещенный или незамещенный арил), где Ь6 представляет собой связь, О, 8, -8(=О), 8(=О)2, ΝΙ I, С(О), -ЫИС(О)О, -ОС(О)№, -№С(О) или -С(О)ЫИ;
каждый К9 независимо выбран из Н, замещенного или незамещенного низшего алкила и замещенного или незамещенного низшего циклоалкила;
каждый К10 независимо представляет собой Н, замещенный или незамещенный низший алкил, или замещенный или незамещенный низший циклоалкил; или две группы К10 могут вместе образовывать 5-, 6-, 7- или 8-членное гетероциклическое кольцо; или К9 и К10 могут вместе образовывать 5-, 6-, 7- или 8-членное гетероциклическое кольцо; или каждый Кп независимо выбран из Н, -8(=О)2К8, -8(=О)^И2, -С(О)К8, -СК, -КО2, гетероарила или гетероалкила; и их фармацевтически активные метаболиты, фармацевтически приемлемые сольваты, фармацевтически приемлемые соли или фармацевтически приемлемые пролекарства.
В одном аспекте представлены соединения, имеющие структуру Формулы (А1)
к4
Формула (А1) в которой
А независимо выбран из Ν или СК5;
К1 представляет собой Н, Ь2-(замещенный или незамещенный алкил), Ь2-(замещенный или незамещенный циклоалкил), Ь2-(замещенный или незамещенный алкенил), Ь2-(замещенный или незамещенный циклоалкенил), Ь2-(замещенный или незамещенный гетероцикл), Ь2-(замещенный или незамещенный гетероарил) или Ь2-(замещенный или незамещенный арил), где 1.2 представляет собой связь, О, 8, -8(=О), -8(=О)2, С(=О), -(замещенный или незамещенный С1-С6 алкил) или -(замещенный или незамещенный С2С6 алкенил);
К2 и К3 независимо выбраны из Н, низшего алкила и замещенного низшего алкила;
К4 представляет собой Ь3-Х-Ь4-О, где
- 34 032463
Ь3 является необязательным и в случае присутствия представляет собой связь или необязательно замещенную группу, выбранную из алкила, гетероалкила, арила, гетероарила, алкиларила, алкилгетероарила или алкилгетероциклоалкила;
X является необязательным и в случае присутствия представляет собой связь, О, -С(=О), 8, -8(=О), -8(=О)2, -ΝΗ, -ΝΚ9, -ЫНС(О), -С(О)ЫН, -ЫК9С(О), -С(О)ЫК9, -8(=Ο)2ΝΗ, -ΝΗ8(=Ο)2, -8(=Ο)2ΝΚ9-, -ΝΚ98(=Ο)2, -ОС(о)кН-, -КНС(О)О-, -ОС(О)К&г, -КК9С(О)О-, -СН=№-, -О^СН-, ^юССО^ю-, гетероарил, арил, -ΝΚ10^=ΝΚΠ)ΝΚ10-, -ΝΚ10^=ΝΚΠ)-, ^(=ΝΚΠ)ΝΚ10-, -ΟС(=NΚ11) или -С(=КК.П)О-;
Ь4 является необязательным и в случае присутствия представляет собой связь, замещенный или незамещенный алкил, замещенный или незамещенный циклоалкил, замещенный или незамещенный алкенил, замещенный или незамещенный алкинил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный гетероарил, замещенный или незамещенный гетероцикл;
или Ь3, X и Ь4, взятые вместе, образуют содержащее азот гетероциклическое кольцо или необязательно замещенную группу, выбранную из алкила, гетероалкила, арила, гетероарила, алкиларила, алкил-
ный циклоалкил; и каждый из К7 и К8 представляют собой Н;
К6 представляет собой Н, замещенный или незамещенный С1-С4алкил, замещенный или незамещенный С1-С4гетероалкил, С1-С8алкиламиноалкил, С1-С8 гидроксиалкиламиноалкил, С1-С8 алкоксиалкиламиноалкил, замещенный или незамещенный С3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный С1С8алкил С3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный С2С8гетероциклоалкил, замещенный или незамещенный гетероарил, С1-С4алкил(арил), С1С4алкил(гетероарил), С1-С8алкилэфиры, С1-С8алкиламиды, или С1-С4алкил(С2-С8гетероциклоалкил);
К6 и К8 представляют собой Н;
К7 представляет собой Н, замещенный или незамещенный С1-С4алкил, замещенный или незамещенный С1-С4гетероалкил, С1-С8алкиламиноалкил, С1-С8гидроксиалкиламиноалкил, СгС8алкоксиалкиламиноалкил, замещенный или незамещенный С3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный С1-С8алкилС3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный С2С8гетероциклоалкил, замещенный или незамещенный гетероарил, С1-С4алкил(арил), С1С4алкил(гетероарил), С1-С8алкилэфиры, С1-С8алкиламиды или С1-С4алкил(С2-С8гетероциклоалкил); или К6 и К8, взятые вместе, образуют связь;
К7 представляет собой Н, замещенный или незамещенный С1-С4алкил, замещенный или незамещенный С1-С4гетероалкил, С1-С8алкиламиноалкил, С1-С8гидроксиалкиламиноалкил, С1-С8алкоксиалкиламиноалкил, замещенный или незамещенный С3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный С1-С8алкилС3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный С2С8гетероциклоалкил, замещенный или незамещенный гетероарил, С1-С4алкил(арил), С1-С4алкил(гетероарил), С1-С8алкилэфиры, С1-С8алкиламиды или С1-С4алкил(С2-С8гетероциклоалкил); или
К5 представляет собой Н, -Ь6-(замещенный или незамещенный С1-С3алкил), -Ь6-(замещенный или незамещенный С2-С4алкенил), -Ь6-(замещенный или незамещенный гетероарил) или -Ь6-(замещенный или незамещенный арил), где Ь6 представляет собой связь, О, 8, -8(=О), 8(=О)2, ΝΗ С(О), -№НС(О)О, ОС(О)КН, -КНС(О) или -С(О)КН;
каждый К9 независимо выбран из Н, замещенного или незамещенного низшего алкила и замещенного или незамещенного низшего циклоалкила;
каждый К10 независимо выбран из Н, замещенного или незамещенного низшего алкила, или замещенного или незамещенного низшего циклоалкила; или две группы К10 могут вместе образовывать 5-, 6-, 7- или 8-членное гетероциклическое кольцо; или
К9 и К10 могут вместе образовывать 5-, 6-, 7- или 8-членное гетероциклическое кольцо; или каждый Кц независимо выбран из Н, -8(=О)2К8, -8(=О)^Н2, -С(О)К8, -СН -№О2, гетероарила или гетероалкила; и их фармацевтически активные метаболиты, фармацевтически приемлемые сольваты, фармацевтически приемлемые соли или фармацевтически приемлемые пролекарства.
В другом варианте осуществления представлены фармацевтически приемлемые соли соединений Формулы (А1). Только в качестве примера представлены соли аминогруппы, образованные с неорганическими кислотами, такими как соляная кислота, бромистоводородная кислота, фосфорная кислота, серная кислота и перхлорная кислота, или с органическими кислотами, такими как уксусная кислота, щаве
- 35 032463 левая кислота, малеиновая кислота, винная килсота, лимонная кислота, янтарная кислота или малоновая кислота. Другие соли включают такие соли, в которых противоион представляет собой анион, такой как адипат, альгинат, аскорбат, аспартат, бензолсульфонат, бензоат, бисульфат, борат, бутират, камфорат, камфорсульфонат, цитрат, циклопентанпропионат, диглюконат, додецилсульфат, этансульфонат, формиат, фумарат, глюкогептонат, глицерофосфат, глюконат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, гидроиодид, 2-гидрокси-этансульфонат, лактобионат, лактат, лаурат, лаурилсульфат, малат, малеат, малонат, метансульфонат, 2-нафталинсульфонат, никотинат, нитрат, олеат, оксалат, пальмитат, памоат, пектинат, персульфат, 3-фенилпропионат, фосфат, пикрат, пивалат, пропионат, стеарат, сукцинат, сульфат, тартрат, тиоцианат, п-толуолсульфонат, ундеканоат и валерат. Дополнительные соли включают такие соли, в которых противоион представляет собой катион, такой как катионы натрия, лития, калия, кальция, магния, аммония и четвертичного аммония (замещенного, по меньшей мере, одной органической группой).
В другом варианте осуществления представлены фармацевтически приемлемые сложные эфиры соединений формулы (А1), включая такие сложные эфиры, в которых сложноэфирная группа выбрана из формиата, ацетата, пропионата, бутирата, акрилата и этилсукцината.
В другом варианте осуществления представлены фармацевтически приемлемые карбаматы соединений формулы (А1). В другом варианте осуществления представлены фармацевтически приемлемые Νацильные производные соединений формулы (А1). Примеры Ν-ацильных групп включают Ν-ацетильные и Ν-этоксикарбонильные группы.
В еще одном варианте осуществления соединение формулы (А) имеет следующую структуру формулы (В):
*12-ν' с
Формула (В) в которой
Υ представляет собой алкил или замещенный алкил, или 4-, 5- или 6-членное циклоалкильное кольцо;
каждый Ка независимо представляет собой Н, галоген, -СР3, -ΟΝ, -ΝΟ2, ОН, ΝΗ2, -Ьа-(замещенный или незамещенный алкил), -Ьа-(замещенный или незамещенный алкенил), -Ьа-(замещенный или незамещенный гетероарил) или -Ьа-(замещенный или незамещенный арил), где Ьа представляет собой связь, 8, -8(=Ο), -8(=0)2, ΝΗ, С(О), СН2, -ΝΗΟ(Ο)Ο, -ΝΗΟ(Ο) или -Ο(Ο)ΝΗ;
О представляет собой
где
К6, К7 и К8 независимо выбраны из Н, низшего алкила или замещенного низшего алкила, низшего гетероалкила или замещенного низшего гетероалкила, замещенного или незамещенного низшего цикло алкила, и замещенного или незамещенного низшего гетероциклоалкила;
К12 представляет собой Н или низший алкил или
Υ и К12, взятые вместе, образуют 4-, 5- или 6-членное гетероциклическое кольцо; и его фармацевтически приемлемые активные метаболиты, фармацевтически приемлемые сольваты, фармацевтически приемлемые соли или фармацевтически приемлемые пролекарства.
В еще других вариантах осуществления О выбран из
В еще других вариантах осуществления — выбран из
- 36 032463
В еще одном варианте осуществления соединение формулы (А1) имеет следующую структуру Формулы (В1):
,γ
Κΐ2~Ν
Формула (В1), в которой:
Υ представляет собой необязательно замещенную группу, выбранную из алкилена, гетероалкилена, арилена, гетероарилена, алкиленарилена, алкиленгетероарилена и алкиленгетероциклоалкилена;
каждый Ва независимо представляет собой Н, галоген, -СВ3, -СЫ, -ЫО2, ОН, ЫН2, -Ьа-(замещенный или незамещенный алкил), -Ьа-(замещенный или незамещенный алкенил), -Ьа-(замещенный или незамещенный гетероарил) или -Ьа-(замещенный или незамещенный арил), где Ьа представляет собой связь, О, 8, -8(=О), -8(=О)2, ЫН, С(О), СН2, -ЫНС(О)О, -ЫНС(О) или -С(О)ЫН;
С представляет собой
где Ва представляет собой Н, замещенный или незамещенный алкил, замещенный или незамещенный циклоалкил; и каждый В7 и В8 представляют собой Н;
В6 представляет собой Н, замещенный или незамещенный С1-С4алкил, замещенный или незамещенный С1-С4гетероалкил, С1-С8алкиламиноалкил, С1-С8гидроксиалкиламиноалкил, С1С8алкоксиалкиламиноалкил, замещенный или незамещенный С3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный С1-С8алкилС3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный С2-С8гетероциклоалкил, замещенный или незамещенный гетероарил, С1-С4алкил(арил), Ср С4алкил(гетероарил), С1-С8алкилэфиры, С1-С8алкиламиды или С1-С4алкил(С2-С8гетероциклоалкил); В6 и В8 представляют собой Н;
В7 представляет собой Н, замещенный или незамещенный СрС4алкил, замещенный или незамещенный С1-С4гетероалкил, С1-С8алкиламиноалкил, С1-С8гидроксиалкиламиноалкил, СрС8алкоксиалкиламиноалкил, замещенный или незамещенный С3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный С1-С8алкилС3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный С2С8гетероциклоалкил, замещенный или незамещенный гетероарил, С1-С4алкил(арил), С1С4алкил(гетероарил), С1-С8алкилэфиры, С1-С8алкиламиды или С1-С4алкил(С2-С8гетероциклоалкил); или В6 и В8, взятые вместе, образуют связь;
В7 представляет собой Н, замещенный или незамещенный С1-С4алкил, замещенный или незамещенный С1-С4гетероалкил, С1-С8алкиламиноалкил, С1-С8гидроксиалкиламиноалкил, СрС8алкоксиалкиламиноалкил, замещенный или незамещенный С3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный С1-С8алкилС3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный С2С8гетероциклоалкил, замещенный или незамещенный гетероарил, С1-С4алкил(арил), С1С4алкил(гетероарил), С1-С8алкилэфиры, С1-С8алкиламиды или С1-С4алкил(С2-С8гетероциклоалкил);
В12 представляет собой Н или низший алкил; или
Υ и В10, взятые вместе, образуют 4-, 5- или 6-членное гетероциклическое кольцо; и его фармацевтически приемлемые активные метаболиты, фармацевтически приемлемые сольваты, фармацевтически приемлемые соли или фармацевтически приемлемые пролекарства.
- 37 032463
В еще других вариантах осуществления С выбран из где В представляет собой Н, алкил, алкилгидрокси, гетероциклоалкил, гетероарил, алкилалкокси, алкилалкоксиалкил.
В еще других вариантах осуществления выбран из
В еще одном варианте осуществления соединение формулы (В) имеет следующую структуру формулы (С):
С
Формула (С)
Υ представляет собой алкил или замещенный алкил, или 4-, 5- или 6-членное циклоалкильное коль цо;
В12 представляет собой Н или низший алкил; или
Υ и В12, взятые вместе, образуют 4-, 5- или 6-членное гетероциклическое кольцо; С представляет собой
^8 , ОГ где
В6, В7 и В8 независимо выбраны из Н, низшего алкила или замещенного низшего алкила, низшего гетероалкила или замещенного низшего гетероалкила, замещенного или незамещенного низшего гетероциклоалкила; и его фармацевтически приемлемые активные метаболиты, фармацевтически приемлемые сольваты, фармацевтически приемлемые соли или фармацевтически приемлемые пролекарства.
В еще одном варианте осуществления соединение формулы (В1) имеет следующую структуру формулы (С1):
Формула (С1),
(3
Υ представляет собой необязательно замещенную группу, выбранную из алкила, гетероалкила, арила, гетероарила, алкиларила, алкилгетероарила и алкилгетероциклоалкила;
В10 представляет собой Н или низший алкил или
Υ и В10, взятые вместе, образуют 4-, 5- или 6-членное гетероциклическое кольцо;
С представляет собой
собой Н, замещенный или незамещенный алкил, замещенный или незамещенный циклоалкил; и каждый из К7 и К8 представляют собой Н;
К6 представляет собой Н, замещенный или незамещенный СгС4алкил, замещенный или незамещенный С1-С4гетероалкил, С1-С8алкиламиноалкил, СгС8гидроксиалкиламиноалкил, СгС8алкоксиалкиламиноалкил, замещенный или незамещенный С3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный С1-С8алкилС3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный С2С8гетероциклоалкил, замещенный или незамещенный гетероарил, СгС4алкил(арил), С1С4алкил(гетероарил), СгС8алкилэфиры, С1-С8алкиламиды или СгС4алкил(С2-С8гетероциклоалкил);
К6 и К8 представляют собой Н;
К7 представляет собой Н, замещенный или незамещенный С1-С4алкил, замещенный или незамещенный С1-С4гетероалкил, СгС8алкиламиноалкил, СгС8гидроксиалкиламиноалкил, СгС8алкоксиалкиламиноалкил, замещенный или незамещенный С3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный С1-С8алкилС3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный С2С8гетероциклоалкил, замещенный или незамещенный гетероарил, С1-С4алкил(арил), С1С4алкил(гетероарил), С1-С8алкилэфиры, С1-С8алкиламиды или С1-С4алкил(С2-С8гетероциклоалкил); или
К6 и К8, взятые вместе, образуют связь;
К7 представляет собой Н, замещенный или незамещенный С1-С4алкил, замещенный или незамещенный С1-С4гетероалкил, СгС8алкиламиноалкил, С1-С8гидроксиалкиламиноалкил, С1С8алкоксиалкиламиноалкил, замещенный или незамещенный С3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный С1-С8алкилС3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный С2-С8гетероциклоалкил, замещенный или незамещенный гетероарил, СгС4алкил(арил), С1С4алкил(гетероарил), С1-С8алкилэфиры, С1-С8алкиламиды или С1-С4алкил(С2-С8гетероциклоалкил); и его фармацевтически приемлемые активные метаболиты, фармацевтически приемлемые сольваты, фармацевтически приемлемые соли или фармацевтически приемлемые пролекарства.
В еще одном или альтернативном варианте осуществления группа О Формулы (А1), Формулы (В1) или Формулы (С1) представляет собой группу, которая применяется для варьирования физических и биологических свойств молекулы. Такое варьирование/модификации достигаются с использованием групп, которые модулируют химическую активность акцептора Михаэля, кислотность, основность, липофильность, растворимость и другие физические свойства молекулы. Физические и биологические свойства, модулированные такими модификациями группы О, включают, в качестве примера только, увеличение химической активности группы акцептора Михаэля, растворимости, ΐη νίνο абсорбции и ΐη νίνο метаболизма. Кроме того, ΐη νίνο метаболизм включает, в качестве примера только, регулирование ΐη νίνο РК свойств, нецелевые активности, возможные токсичности, связанные с взаимодействиями сурР450, межлекарственными взаимодействиями и т.п. Кроме того, модификации группы О позволяют варьировать ΐη νίνο эффективность соединения посредством модулирования, в качестве примера только, специфического и неспецифического белкового связывания с белками плазмы, и распределения ΐη νίνο в липидах и тканях.
В другом варианте осуществления в настоящем документе обеспечено соединение формулы (Ό). Формула (Ό) имеет следующую структуру:
в которой
Ьа представляет собой СН2, О, ΝΗ или 8;
Аг представляет собой замещенный или незамещенный арил, или замещенный или незамещенный гетероарил;
Υ представляет собой необязательно замещенную группу, выбранную из алкила, гетероалкила, циклоалкила, гетероциклоалкила, арила и гетероарила;
Ζ представляет собой С(=О), ОС(=О), ЫИС(=0), С(=8), 8(=0)х, 08(=0)х, ΝΗ8(=0)Χ, где х равен 1 или 2;
К6, К7 и К8, каждый, независимо выбран из Н, замещенного или незамещенного СгС4алкила, заме
- 39 032463 щенного или незамещенного С1-С4гетероалкила, замещенного или незамещенного С3-С6циклоалкила, замещенного или незамещенного С2-С6гетероциклоалкила, С1-С6алкоксиалкила, С1-С8алкиламиноалкила, замещенного или незамещенного С3-С6циклоалкила, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного гетероарила, замещенного или незамещенного С1-С4алкил(арила), замещенного или незамещенного С1-С4алкил(гетероарила), замещенного или незамещенного С1-С4алкил(С3С8циклоалкила) или замещенного или незамещенного С1-С4алкил(С2-С8гетероциклоалкила); или
В7 и В8, взятые вместе, образуют связь; и его фармацевтически приемлемые активные метаболиты, фармацевтически приемлемые сольваты, фармацевтически приемлемые соли или фармацевтически приемлемые пролекарства.
В одном варианте осуществления представлены соединения, имеющие структуру формулы (Ό1)
Формула (Ό1) в которой
Ьа представляет собой СН2, О, NН или 8;
Аг представляет собой замещенный ароматический карбоцикл или ароматический гетероцикл;
Υ представляет собой необязательно замещенную группу, выбранную из алкилена, гетероалкилена, арилена, гетероарилена, алкиленарилена, алкиленгетероарилена и алкиленгетероциклоалкилена или их комбинации;
Ζ представляет собой С(=О), ННС(=О), НВаС(=О), НВа8(=О)х, где х равен 1 или 2, и Ва представляет собой Н, замещенный или незамещенный алкил, замещенный или незамещенный циклоалкил; и каждый из В7 и В8 представляют собой Н;
Кб представляет собой Н, замещенный или незамещенный С1-С4алкил, замещенный или незамещенный С1-С4гетероалкил, С1-С8алкиламиноалкил, С1-С8гидроксиалкиламиноалкил, С1-С8алкоксиалкиламиноалкил, замещенный или незамещенный С3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный С1-С8алкилС3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный С2С8гетероциклоалкил, замещенный или незамещенный гетероарил, С1-С4алкил(арил), С1С4алкил(гетероарил), С1-С8алкилэфиры, С1-С8алкиламиды или С1-С4алкил(С2-С8гетероциклоалкил);
В6 и В8 представляют собой Н;
В7 представляет собой Н, замещенный или незамещенный С1-С4алкил, замещенный или незамещенный С1-С4гетероалкил, С1-С8алкиламиноалкил, С1-С8гидроксиалкиламиноалкил, С1-С8алкоксиалкиламиноалкил, замещенный или незамещенный С3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный С1-С8алкилС3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный С2С8гетероциклоалкил, замещенный или незамещенный гетероарил, С1-С4алкил(арил), С1-С4алкил(гетероарил), С1-С8алкилэфиры, С1-С8алкиламиды или С1-С4алкил(С2-С8гетероциклоалкил); или
В6 и В8, взятые вместе, образуют связь;
В7 представляет собой Н, замещенный или незамещенный С1-С4алкил, замещенный или незамещенный С1-С4гетероалкил, С1-С8алкиламиноалкил, С1-С8гидроксиалкиламиноалкил, С1С8алкоксиалкиламиноалкил, замещенный или незамещенный С3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный С1-С8алкилС3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный С2-С8гетероциклоалкил, замещенный или незамещенный гетероарил, С1-С4алкил(арил), С1С4алкил(гетероарил), С1-С8алкилэфиры, С1-С8алкиламиды или С1-С4алкил(С2-С8гетероциклоалкил);
или их комбинации; и его фармацевтически приемлемые активные метаболиты, фармацевтически приемлемые сольваты, фармацевтически приемлемые соли или фармацевтически приемлемые пролекарства.
В другом варианте осуществления представлены фармацевтически приемлемые соли соединений Формулы (Ό1). Только в качестве примера, представлены соли аминогруппы, образованные с неорганическими кислотами, такими как соляная кислота, бромистоводородная кислота, фосфорная кислота, серная кислота и перхлорная кислота, и с органическими кислотами, такими как уксусная кислота, щавелевая кислота, малеиновая кислота, винная кислота, лимонная кислота, янтарная кислота или малоновая кислота. Другие соли включают такие соли, в которых противоион представляет собой анион, такой как адипат, альгинат, аскорбат, аспартат, бензолсульфонат, бензоат, бисульфат, борат, битурат, камфорат, камфорсульфонат, цитрат, циклопентапропионат, диглюконат, додецилсульфат, этансульфонат, формиат, фумарат, глюкогептонат, глицерофосфат, глюконат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, гидроиодид, 2гидрокси-этансульфонат, лактобионат, лактат, лаурат, лаурилсульфат, малат, малеата малонат, метан
- 40 032463 сульфонат, 2-нафталинсульфонат, никотинат, нитрат, олеат, оксалат, пальмитат, памоат, пектинат, персульфат, 3-фенилпропионат, фосфат, пикрат, пивалат, пропионат, стеарат, сукцинат, сульфат, тартрат, тиоцианат, п-толуолсульфонат, ундеканоат и валерат. Еще другие соли включают соединения, в которых противоион представляет собой катион, такой как катионы натрия, лития, калия, кальция, магния, аммония и четвертичного аммония (замещенного, по меньшей мере, одной органической группой).
В другом варианте осуществления представлены фармацевтически приемлемые сложные эфиры соединений формулы (Ό1), включая соединения, в которых сложноэфирная группа выбрана из формиата, ацетата, пропионата, бутирата, акрилата и этилсукцината.
В другом варианте осуществления представлены фармацевтически приемлемые карбаматы соединений формулы (Ό1). В другом варианте осуществления представлены фармацевтически приемлемые Νацильные производные соединений формулы (Ό1). Примеры Ν-ацильных групп включают Ν-ацетильную и Ν-этоксикарбонильную группы.
В еще одном варианте осуществления Ьа представляет собой О.
В еще одном варианте осуществления Аг представляет собой фенил.
В еще одном варианте осуществления Ζ представляет собой С(=О), ΝΗί.’(=ϋ) или ΝίΉ30(=0).
В еще одном варианте осуществления каждый из К1, К2 и К3 представляет собой Н.
В одном варианте осуществления представлено соединение формулы (Ό1), в котором все из К6, К7 и К8 представляют собой Н. В другом варианте осуществления не все из Кб, К7 и К8 представляют собой Н.
Для любого или всех вариантов осуществления заместители могут быть выбраны из подгруппы перечисленных альтернатив. Например, в некоторых вариантах осуществления Ьа представляет собой СН2, О или ΝΗ. В других вариантах осуществления Ьа представляет собой О или ΝΗ. В еще других вариантах осуществления Ьа представляет собой О.
В некоторых вариантах осуществления Аг представляет собой замещенный или незамещенный арил. В еще других вариантах осуществления Аг представляет собой 6-членный арил. В некоторых других вариантах осуществления Аг представляет собой фенил.
В некоторых вариантах осуществления х равен 2. В еще других вариантах осуществления Ζ представляет собой С(=О), ОС(=О), ΝΗί(=Ο), 8(=0)х, 08(=0)х или ΝΗ8(=Ο)Χ. В некоторых других вариантах осуществления Ζ представляет собой С(=О), ΝΗί.’(=0) или 8(=0)2.
В некоторых вариантах осуществления К7 и К8 независимо выбраны из Н, незамещенного С1С4алкила, замещенного С1-С4алкила, незамещенного С1-С4гетероалкила и замещенного С1С4гетероалкила; или К7 и К8, взятые вместе, образуют связь. В еще других вариантах осуществления каждый из К7 и К8 представляет собой Н; или К7 и К8, взятые вместе, образуют связь.
В некоторых вариантах осуществления Кб представляет собой Н, замещенный или незамещенный С1-С4алкил, замещенный или незамещенный С1-С4гетероалкил, С1-С6алкоксиалкил, С1-С2алкил-Ы(С1С3алкил)2, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный гетероарил, С1С4алкил(арил), С1-С4алкил(гетероарил), С1-С4алкил(С3-С8циклоалкил) или С1-С4алкил(С2С8гетероциклоалкил). В некоторых других вариантах осуществления К6 представляет собой Н, замещенный или незамещенный С1-С4алкил, замещенный или незамещенный С1-С4гетероалкил, С1С6алкоксиалкил, С1-С2алкил-М(С1-С3алкил)2, С1-С4алкил(арил), С1-С4алкил(гетероарил), С1-С4алкил(С3С8циклоалкил) или С1-С4алкил(С2-С8гетероциклоалкил). В еще других вариантах осуществления К6 представляет собой Н, замещенный или незамещенный С1-С4алкил, -СН2-0-(С1-С3алкил), -СН2-Ы(С1С3алкил)2, С1-С4алкил(фенил) или С1-С4алкил(5- или 6-членный гетероарил). В некоторых вариантах осуществления К6 представляет собой Н, замещенный или незамещенный С1-С4алкил, -СН2-0-(С1С3алкил), -СН2-Ы(С1-С3алкил)2, С1-С4алкил(фенил) или С1-С4алкил(5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1 или 2 атома Ν), или С1-С4алкил(5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1 или 2 атома Ν).
В некоторых вариантах осуществления Υ представляет собой необязательно замещенную группу, выбранную из алкила, гетероалкила, циклоалкила и гетероциклоалкила. В других вариантах осуществления Υ представляет собой необязательно замещенную группу, выбранную из С1-С6алкила, С1С6гетероалкила, 4-, 5-, 6- или 7-членного циклоалкила, и 4-, 5-, 6- или 7-членного гетероциклоалкила. В еще других вариантах осуществления Υ представляет собой необязательно замещенную группу, выбранную из С1-С6алкила, С1-С6гетероалкила, 5- или 6-членного циклоалкила, и 5- или 6-членного гетероциклоалкила, содержащего 1 или 2 атома Ν. В некоторых других вариантах осуществления Υ представляет собой 5- или 6-членный циклоалкил, или 5- или 6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1 или 2 атома Ν.
Любая комбинация групп, описанных выше для различных переменных, рассматривается в настоящем документе. При этом, заместители и паттерны замещения в соединениях, обеспеченных здесь, могут быть выбраны специалистом в данной области для получения соединений, которые являются химически стабильными и которые могут быть синтезированы с помощью методов, известных в данной области, а также с помощью методов, представленных в настоящем документе.
В одном варианте осуществления необратимый ингибитор киназы имеет структуру формулы (Е)
- 41 032463
Кт
Формула (Е) в которой представляет собой фрагмент, который связывается с активным центром киназы, включая тирозинкиназу, дополнительно включая цистеиновый гомолог В11< киназы;
Υ представляет собой необязательно замещенную группу, выбранную из алкилена, гетероалкилена, арилена, гетероарилена, гетероциклоалкилена, циклоалкилена, алкиленарилена, алкиленгетероарилена, алкиленциклоалкилена и алкиленгетероциклоалкилена;
Ζ представляет собой С(=О), ОС(=О), ΝΗΟ(=Ο), ЫСН3С(=О), С(=8), 8(=О)Х, О8(=О)Х, ΝΗ8(=Ο)Χ, где X равен 1 или 2;
К6, К7 и К8, каждый, независимо выбран из Н, замещенного или незамещенного С1-С4алкила, замещенного или незамещенного С1-С4гетероалкила, замещенного или незамещенного С3-С6циклоалкила, замещенного или незамещенного С2-С6гетероциклоалкила, С1-С6алкоксиалкила, С1-С8алкиламиноалкила, замещенного или незамещенного С3-С6циклоалкила, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного гетероарила, замещенного или незамещенного С1-С4алкил(арила), замещенного или незамещенного С1-С4алкил(гетероарила), замещенного или незамещенного С1-С4алкил(С3С8циклоалкила) или замещенного или незамещенного С1-С4алкил(С2-С8гетероциклоалкила); или
К7 и К8, взятые вместе, образуют связь; и его фармацевтически приемлемые активные метаболиты, фармацевтически приемлемые сольваты, фармацевтически приемлемые соли или фармацевтически приемлемые пролекарства.
В некоторых вариантах осуществления рильный фрагмент, выбранный из представляет собой замещенный конденсированный биа-
В одном аспекте в настоящем документе обеспечены соединения формулы (В). Формула (В) имеет следующий вид:
в которой
Ва представляет собой СН2, О, ΝΗ или 8;
Аг представляет собой замещенный или незамещенный арил, или замещенный или незамещенный гетероарил; и также (а) Υ представляет собой необязательно замещенную группу, выбранную из алкилена, гетероалкилена, арилена, гетероарилена, алкиленарилена, алкиленгетероарилена, алкиленциклоалкилена и алкиленгетероциклоалкилена;
Ζ представляет собой С(=О), ΝΗΟ(=Ο), ΝΚαϋ(=Ο), ΝΚα8(=Ο)χ, где х равен 1 или 2, и Ка представляет собой Н, замещенный или незамещенный алкил, замещенный или незамещенный циклоалкил; и также (ΐ) Кб, К7 и К8, каждый, независимо выбран из Н, замещенного или незамещенного С1-С4алкила, за
-42032463 мещенного или незамещенного С1-С4гетероалкила, замещенного или незамещенного С3-С6циклоалкила, замещенного или незамещенного С2-С6гетероциклоалкила, С1-С6алкоксиалкила, С1-С8алкиламиноалкила, замещенного или незамещенного С3-С6циклоалкила, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного гетероарила, замещенного или незамещенного С1-С4алкил(арила), замещенного или незамещенного С1-С4алкил(гетероарила), замещенного или незамещенного С1-С4алкил(С3С8циклоалкила), или замещенного или незамещенного С1-С4алкил(С2-С8гетероциклоалкила);
(ίί) Я6 и Я8 представляют собой Н;
Я7 представляет собой Н, замещенный или незамещенный С1-С4алкил, замещенный или незамещенный С1-С4гетероалкил, С1-С8алкиламиноалкил, С1-С8 гидроксиалкиламиноалкил, С1-С8алкоксиалкиламиноалкил, замещенный или незамещенный С3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный С1-С8алкилС3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный С2С8гетероциклоалкил, замещенный или незамещенный гетероарил, С1-С4алкил(арил), С1-С4алкил(гетероарил), С1-С8алкилэфиры, С1-С8алкиламиды или С1-С4алкил(С2-С8гетероциклоалкил); или (ΐϊϊ) Я7 и Я8, взятые вместе, образуют связь;
Я6 выбран из Н, замещенного или незамещенного С1-С4алкила, замещенного или незамещенного С1-С4гетероалкила, замещенного или незамещенного С3-С6циклоалкила, замещенного или незамещенного С2-С6гетероциклоалкила, С1-С6алкоксиалкила, С1-С8алкиламиноалкила, замещенного или незамещенного С3-С6циклоалкила, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного гетероарила, замещенного или незамещенного С1-С4алкил(арила), замещенного или незамещенного С1С4алкил(гетероарила), замещенного или незамещенного С1-С4алкил(С3-С8циклоалкила), или замещенного или незамещенного С1-С4алкил(С2-С8гетероциклоалкила); или (Ь) Υ представляет собой необязательно замещенную группу, выбранную из циклоалкилена или гетероциклоалкилена; Ζ представляет собой С(=О), ΝΗ^=Ο), ΝΒ/ΤρΟ), N^§(=0)» где х равен 1 или 2, и Яа представляет собой Н, замещенный или незамещенный алкил, замещенный или незамещенный циклоалкил; и также (ί) Я7 и Я8 представляют собой Н;
Я6 представляет собой замещенный или незамещенный С1-С4алкил, замещенный или незамещенный С1-С4гетероалкил, С1-С8алкиламиноалкил, С1-С8гидроксиалкиламиноалкил, С1-С8алкоксиалкиламиноалкил, замещенный или незамещенный С3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный С1-С8алкилС3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный С2С8гетероциклоалкил, замещенный или незамещенный гетероарил, С1-С4алкил(арил), С1-С4алкил(гетероарил), С1-С8алкилэфиры, С1-С8алкиламиды или С1-С4алкил(С2-С8гетероциклоалкил);
(ίί) Яб и Я8 представляют собой Н;
Я7 представляет собой замещенный или незамещенный С1-С4алкил, замещенный или незамещенный С1-С4гетероалкил, С1-С8алкиламиноалкил, С1-С8гидроксиалкиламиноалкил, С1-С8алкоксиалкиламиноалкил, замещенный или незамещенный С3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный С1-С8алкилС3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный С2С8гетероциклоалкил, замещенный или незамещенный гетероарил, С1-С4алкил(арил), С1С4алкил(гетероарил), С1-С8алкилэфиры, С1-С8алкиламиды или С1-С4алкил(С2-С8гетероциклоалкил); или (ίίί) Я7 и Я8, взятые вместе, образуют связь;
Я6 представляет собой замещенный или незамещенный С1-С4алкил, замещенный или незамещенный С1-С4гетероалкил, С1-С8алкиламиноалкил, С1-С8гидроксиалкиламиноалкил, С1-С8алкоксиалкиламиноалкил, замещенный или незамещенный С3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный С1-С8алкилС3-С6циклоалкил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный С2С8гетероциклоалкил, замещенный или незамещенный гетероарил, С1-С4алкил(арил), С1С4алкил(гетероарил), С1-С8алкилэфиры, С1-С8алкиламиды или С1-С4алкил(С2-С8гетероциклоалкил); и его фармацевтически приемлемые активные метаболиты, фармацевтически приемлемые сольваты, фармацевтически приемлемые соли или фармацевтически приемлемые пролекарства.
Еще другие варианты осуществления соединений формулы (А), формулы (В), формулы (С), формулы (Ό) включают, но без ограничения, соединения, выбранные из группы, состоящей из:
- 43 032463
- 44 032463
В еще других вариантах осуществления соединения, обеспеченные здесь, выбраны из:
В одном аспекте в настоящем документе обеспечено соединение, выбранное из следующих:
1-(3-(4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3.4-й]пиримидин-1-ил)пиперидин-1-ил)проп-2-ен1-он (Соединение 4);
(Е)-1-(3-(4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Η-пиразоло[3.4-й]пиримидин-1-ил)пиперидин-1-ил)бут-2ен-1-он (Соединение 5);
1-(3-(4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Η-пиразоло[3.4-й]пиримидин-1-ил)пиперидин-1-ил)сульфонилэтен (Соединение 6);
1-(3-(4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3.4-й]пиримидин-1-ил)пиперидин-1-ил)проп-2-ин1-он (Соединение 8);
1-(4-(4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3.4-й]пиримидин-1-ил)пиперидин-1-ил)проп-2-ен1-он (Соединение 9);
N-((18.48)-4-(4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Η-пиразоло[3.4-й]пиримидин-1-ил)циклогексил)акриламид (Соединение 10);
- 45 032463
1-((К)-3-(4-амино-3 -(4-феноксифенил)-1 Н-пиразоло[3.4-б] пиримидин-1 -ил)пирролидин-1-ил)проп-
2-ен-1-он (Соединение 11);
1-((8)-3-(4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3.4-б]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп2-ен-1-он (Соединение 12);
1-((К)-3-(4-амино-3 -(4-феноксифенил)-1 Н-пиразоло[3.4-б]пиримидин-1 -ил)пиперидин-1-ил)проп-2ен-1-он (Соединение 13);
1-((8)-3 -(4-амино-3-(4-феноксифенил)-1 Н-пиразоло[3.4-б] пиримидин-1-ил)пиперидин-1-ил)проп-2ен-1-он (Соединение 14) и (Е)- 1-(3-(4-амино-3 -(4-феноксифенил)-1 Н-пиразоло[3.4-б]пиримидин-1 -ил)пиперидин-1-ил)-4(диметиламино)бут-2-ен-1-он (Соединение 15).
В некоторых вариантах осуществления ингибитор В1к имеет структуру:
В некоторых вариантах осуществления ингибитор В1к представляет собой (К)-1-(3-(4-амино-3-(4феноксифенил)-1 Н-пиразоло[3.4-б] пиримидин-1-ил)пиперидин-1-ил)проп-2-ен-1-он (то есть РС132765/ибрутиниб).
В одном варианте осуществления ингибитор В1к представляет собой а-циано-З-гидрокси-З-метил-Ы-(2.5-дибромфенил)пропенамид (СРМ-А13).
АУЬ-101.
4- трет-бутил-Ы-(3-(8-(фениламино)имидазо[1.2-а]пиразин-6-ил)фенил)бензамид.
5- (3-амино-2-метилфенил)-1-метил-3-(4-(морфолин-4-карбонил)фениламино)пиразин-2(1Н)-он. Ы-(2-метил-3-(4-метил-6-(4-(морфолин-4-карбонил)фениламино)-5-оксо-4.5-дигидропиразин-2- ил)фенил)ацетамид.
4- трет-бутил-Ы-(2-метил-3-(4-метил-6-(4-(морфолин-4-карбонил)фениламино)-5-оксо-4.5-дигидропиразин-2-ил)фенил)бензамид.
5- (3-(4-трет-бутилбензиламино)-2-метилфенил)-1-метил-3-(4-(морфолин-4-карбонил)фениламино)пиразин-2(1 Н)-он.
5- (3-(3-трет-бутилбензиламино)-2-метилфенил)-1-метил-3-(4-(морфолин-4-карбонил)фениламино)пиразин-2(1 Н)-он.
3-трет-бутил-Ы-(2-метил-3-(4-метил-6-(4-(морфолин-4-карбонил)фениламино)-5-оксо-4.5-дигидропиразин-2-ил)фенил)бензамид.
6- трет-бутил-Ы-(2-метил-3-(4-метил-6-(4-(морфолин-4-карбонил)фениламино)-5-оксо-4.5-дигидропиразин-2-ил)фенил) никотинамид. и терреиновую кислоту.
По всему описанию группы и их заместители могут быть выбраны специалистом в данной области для получения стабильных фрагментов и соединений.
Получение Соединений
Соединения Формулы Ό могут быть синтезированы с использованием стандартных методов синтеза. известных специалистам в данной области. или с использованием способов. известных в данной области. в сочетании со способами. описанными в настоящем документе. Кроме того. растворители. температурные режимы и другие условия реакций. представленные здесь. могут изменяться специалистами в данной области. В качестве дополнительного руководства могут быть использованы следующие способы синтеза.
Реакции могут быть использованы в линейной последовательности для получения соединений. описанных здесь. или могут быть использованы для синтеза фрагментов. которые последовательно соединены с помощью способов. описанных здесь и/или известных в данной области.
Образование ковалентных связей с помощью реакции электрофила с нуклеофилом
Соединения. описанные здесь. могут быть модифицированы с использованием различных электрофилов или нуклеофилов для образования новых функциональных групп или заместителей. В табл. 1. озаглавленной Примеры ковалентных связей и их предшественников перечислены выбранные примеры ковалентных связей и функциональных групп предшественников. которые получают и могут быть использованы в качестве руководства по различным доступным комбинациям электрофилов и нуклеофилов. Функциональные группы-предшественники показаны как электрофильные группы и нуклеофильные группы.
- 46 032463
Таблица 1. Примеры ковалентных связей и их предшественников
Нуклеофил
Продукт ковалентной связи
Карбоксамиды
Карбоксамиды
Карбоксамиды
Сложные эфиры
Сложные эфиры Карбоксамиды
Имины
Гидразоны
Оксимы
Алкиламины
Электрофил
Активированные эфиры Ацилазиды
Г алогенангидриды Г алогенангидриды Ацилнитрилы Ацилнитрилы Альдегиды сложные
Амины/анилины
Амины/анилины
Амины/анилины
Спирты/фенолы
Спирты/фенолы
Амины/анилины
Амины/анилины
Альдегиды или кетоны
Альдегиды или кетоны
Алкилгалогениды
Гидразины
Г идроксиламины
Амины/анилины
Сложные эфиры Тиоэфиры
Сложные эфиры Тиоэфиры
Сложные эфиры
Сложные эфиры Сложные эфиры Карбоксамиды Тиофенолы Ариламины Тиоэфиры Боронатные эфиры Карбоксамиды Сложные эфиры Гидразины
А'-ацил моче вины или
Алкилгалогениды
Алкилгалогениды
Алкилгалогениды
Алкилсульфонаты Алкилсульфонаты Алкилсульфонаты Ангидриды Ангидриды Арилгалогениды
Арилгалогениды
Азиндины
Боронаты
Карбоновые кислоты Карбоновые кислоты Гидразиды Карбодиимиды
Карбоновые кислоты
Тиолы
Спирты/фенолы
Тиолы
Карбоновые кислоты
Спирты/фенолы Спирты/фенолы Амины/анилины
Тиолы
Амины
Тиолы
Гликоли
Амины/анилины
Спирты
Карбоновые кислоты
Карбоновые кислоты ангидриды
Сложные эфиры
Тиоэфиры
Тиоэфиры
Аммотриазины
Триазиниловые эфиры
Амидины
Мочевины
Диазоалканы
Эпоксиды
Г алогенацетамиды
Г алогентриазины Г алогентриазины Имидоэфиры Изоцианаты
Карбоновые кислоты
Тиолы
Тиолы
Амины/анилины
Спирты/фенолы
Амины/анилины
Амины/анилины
Уретаны
Тиомочевины
Изоцианаты
Изотиоцианаты
Спирты/фенолы
Амины/анилины
Тиоэфиры
Фосфиты
Силиловые эфиры
Алкиламины
Малеимиды
Фосфорамидиты
Силилгалогениды
Тиолы
Тиоэфиры
Сложные эфиры
Сложные эфиры
Сульфонамиды
Сложные сульфонатные эфиры
Сложные сульфонатные эфиры Сложные сульфонатные эфиры Сложные сульфонатные эфиры Сложные сульфонатные эфиры Сульфонилгалогениды Сульфонилгалогениды
Спирты
Спирты
Амины/анилины
Тиолы
Карбоновые кислоты
Спирты
Амины/анилины
Фенолы/спирты
- 47 032463
Алкилтиол α,β-ненасыщенный сложный эфир Тиолы
Алкиловые эфиры α,β-ненасыщенный сложный эфир Спирты
Алкиламины α,β-ненасыщенный сложный эфир Амины
Алкилтиол Винилсульфон Тиолы
Алкиловые эфиры Винилсульфон Спирты
Алкиламины Винилсульфон Амины
Винилсульфид Пропаргиламид Тиолы
Использование защитных групп
В описанных реакциях может быть необходимой защита реакционноспособных функциональных групп, например, гидроксильных групп, аминогрупп, иминогрупп, тиогрупп или карбоксильных группы, где желательно их присутствие в конечном продукте, во избежание их нежелательного участия в реакциях. Защиту групп используют для того, чтобы блокировать некоторые или все реакционноспособные фрагменты и предотвратить участие таких групп в химических реакциях до удаления защитной группы. В одном варианте осуществления каждую защитную группу можно удалить отличным от других защитных групп способом. Защитные группы, которые отщепляются в полностью несопоставимых условиях реакции, удовлетворяют требованию дифференциального удаления. Защитные группы могут быть удалены с помощью кислоты, основания и гидрогенолиза. Группы, такие как тритил, диметокситритил, ацеталь и трет-бутилдиметилсилил, кислотонеустойчивы и могут быть использованы для защиты реакционноспособных карбоксильных или гидроксильных групп в присутствии аминогрупп, защищенных карбобензоксигруппами (С^-группами), которые могут быть удалены путем гидрогенолиза, и флуоренилметоксикарбонильными группами (Ртос-группами), которые неустойчивы к действию оснований. Реакционноспособные группы карбоновой кислоты и гидроксильные группы могут быть блокированы с помощью неустойчивых к действию оснований групп, таких как, но без ограничения, метил, этил и ацетил, в присутствии аминов, блокированных с помощью неустойчивых к действию кислот групп, таких как третбутилкарбамат, или с помощью карбаматов, которые устойчивы к действию кислот и оснований, но уда ляются гидролитически.
Реакционноспособные группы карбоновых кислот и гидроксильные группы могут также быть блокированы удаляемыми при гидролизе защитными группами, такими как бензильная группа, тогда как аминогруппы, способные образовывать водородные связи с кислотами, могут быть блокированы группами, неустойчивыми к действию оснований, такими как Ртос-группа. Реакционноспособные группы карбоновых кислот могут быть защищены путем превращения в соединения простого эфира, как приведено в качестве примера здесь, или могут быть блокированы удаляемыми путем окисления защитными группами, такими как 2,4-диметоксибензил, тогда как совместно присутствующие аминогруппы могут быть блокированы неустойчивыми к действию фторидов силилкарбаматами.
Аллильные блокирующие группы можно использовать в присутствии кислотных и основных защитных групп, так как последние стабильны и могут быть впоследствии удалены с помощью металлсодержащих или кислотных катализаторов. Например, защита аллил-блокированной карбоновой кислоты может быть снята с помощью Рй0-катализируемой реакции в присутствии неустойчивой к действию кислоты трет-бутилкарбаматной или неустойчивой к действию основания ацетатной защитных групп амина. Еще одной формой защитной группы является смола, к которой может быть присоединено соединение или промежуточный продукт. Пока остаток присоединен к смоле, функциональная группа остается блокированной и не может вступать в реакцию. После высвобождения из смолы функциональная группа доступна для взаимодействия.
Типичные блокирующие/защитные группы могут быть выбраны из
н н2 н2с*сс- \ м2 сх ОДА о н3с^
аллил бензил (Вп) СЬ/-группа АИос-группа метил (Ме)
Н2 н3с (Н3С)3С^ Н3сх сн3 (Н3С)3С^5|\ Н2 (сн3)3с< О
этил (Е1) трет-бутильная ТВЦМЙ-груииа Теос-группа
Н- 2 О и
(сн3)3с/ОДХ О (С6Н5)3С— Н2С и
бутоксикарбонильная группа (Вос-группа) параметоксибензил (РМВ) тритил ацетил Ршос-группа
- 48 032463
Другие защитные группы и подробное описание методик, применимых для создания защитных групп и их удаления, описаны в Сгееие апб \Уи1з. Рго1ссй\с бгоирв ίη Огдашс 8упб1ез18, Згб Еб., ίοΐιη XV Ису & 8опв, Νε\ν Уогк, ΝΥ, 1999, и Кос1епзк1, Рго1ссО\с Сгоирз. ТЫете Уег1ад, Νε\ν Уогк, ΝΥ, 1994, которые включены в настоящий документ посредством отсылки в полном объеме.
Другие формы соединений
Соединения, описанные здесь, могут обладать одним или более стереоцентрами, и каждый центр может существовать в В или 8 конфигурации. Соединения, представленные здесь, включают все диастереомерные, энантиомерные и эпимерные формы, а также их подходящие смеси. При желании, стереоизомеры могут быть получены способами, известными в данной области, например, разделением стереоизомеров с помощью хиральных хроматографических колонок.
Диастереомерные смеси могут быть разделены на их индивидуальные диастереомеры на основании их физико-химических различий с помощью известных способов, например с помощью хроматографии и/или фракционной кристаллизации. В одном варианте осуществления энантиомеры могут быть разделены с помощью хиральных хроматографических колонок. В других вариантах осуществления энантиомеры могут быть разделены путем преобразования энантиомерной смеси в диастереомерную с помощью реакции с подходящим оптически активным соединением (например, спиртом), разделения диастереомеров и превращения (например, гидролиза) индивидуальных диастереомеров в соответствующие чистые энантиомеры. Все такие изомеры, включая диастереомеры, энантиомеры и их смеси, рассматриваются как часть композиций, описанных в настоящем документе.
Способы и композиции, описанные здесь, включают применение Ν-оксидов, кристаллических форм (также известных как полиморфы) или фармацевтически приемлемых солей соединений, описанных здесь, а также активных метаболитов этих соединений, обладающих таким же типом активности. В некоторых случаях соединения могут существовать в виде таутомеров. Все таутомеры включены в объем соединений, описанных в настоящем документе. Кроме того, соединения, описанные здесь, могут существовать в несольватированной, а также в сольватированной формах с фармацевтически приемлемыми растворителями, такими как вода, этанол и т.п. Предполагается, что сольватированные формы соединений, представленных в настоящем документе, также раскрыты в настоящем документе.
Соединения Формулы Б в неокисленной форме могут быть получены из Ν-оксидов соединений Формулы Б путем обработки восстановителем, таким как, но без ограничения, сера, диоксид серы, трифенилфосфин, борогидрид лития, борогидрид натрия, трихлорид фосфора, трибромид фосфора или т.п., в пригодном инертном органическом растворителе, таком как, но без ограничения, ацетонитрил, этанол, водный диоксан или т.п., при температуре от 0 до 80°С.
В некоторых вариантах осуществления соединения, описанные здесь, получают в форме пролекарств. «Пролекарство» относится к агенту, который превращается в родительское лекарственное средство ίη νΐνο. Пролекарства часто являются полезными, поскольку в некоторых ситуациях их легче вводить, чем родительское лекарственное средство. Пролекарства могут, например, быть биодоступными при пероральном введении, в то время как родительское лекарственное средство не является таковым. Пролекарство может также иметь улучшенную растворимость в фармацевтических композициях по сравнению с родительским лекарственным средством. Не ограничивающим примером пролекарства может быть соединение, описанное здесь, вводимое в форме сложного эфира («пролекарства») для облегчения передачи через клеточную мембрану, где растворимость в воде вредна для подвижности, но который затем проходит метаболический гидролиз с образованием карбоновой кислоты, активного вещества, после его попадания в клетку, где растворимость в воде является полезной. Еще другим примером пролекарства может являться короткий пептид (полиаминокислота), связанный с кислотной группой, при метаболизме которого происходит высвобождение активного фрагмента. В определенных вариантах осуществления при введении ίη νΐνο пролекарство химическим путем превращается в биологически, фармацевтически или терапевтически активную форму соединения. В определенных вариантах осуществления пролекарство метаболизируется под действием ферментов в ходе одной или более стадий или процессов в биологически, фармацевтически или терапевтически активную форму соединения. Для получения пролекарства фармацевтически активное соединение модифицируют таким образом, что активное соединение будет восстановлено при введении ίη νΐνο. Про лекарство может быть разработано для изменения метаболической стабильности или транспортных характеристик лекарственного средства, маскировки побочных эффектов или токсичности, для улучшения вкуса и запаха лекарственного средства, или для изменения других характеристик или свойств лекарственного средства. На основании знания фармакодинамических процессов и метаболизма лекарственного средства ίη νΐνο, специалисты в данной области могут разработать пролекарство соединения, если фармацевтически активное соединение известно (см., например, в №дгабу (1985) Мссйста! Сйепйвйу А Вюсйепйса! Арргоасй, Ох Гоге! ишуегвйу Ргезз, Νε\ν Уогк, радев 388-392; 8й\ сгтап (1992), ТНс Огдашс Сйепйвйу оГ Бгид Бев1ди апб Бгид Асбоп, Асабепйс Ргевв, 1ис., 8аи Б1едо, радев 352-401, 8аи1шег с1 а1., (1994), Вюогдашс апб Мебкта1 Сйепйвбу Ьейегв, Уо1. 4, р. 1985).
Пролекарственные формы соединений, описанных здесь, где пролекарство подвержено метаболизму ίη νΐνο с образованием производного, как описано здесь, включены в объем формулы изобретения. В
-49032463 некоторых случаях отдельные из описанных здесь соединений могут представлять собой пролекарство для другого производного или активного соединения.
Пролекарства часто являются полезными, поскольку в некоторых ситуациях их легче вводить, чем родительское лекарственное средство. Пролекарства, например, могут быть биодоступными при пероральном введении, в то время как родительское лекарственное средство таковым не является. Пролекарство может также иметь улучшенную растворимостью в фармацевтических композициях по сравнению с родительским лекарственным средством. Пролекарства могут быть разработаны как обратимые производные лекарственного средства для применения в качестве модификаторов для усиления транспорта лекарственного средства в сайт-специфические ткани. В некоторых вариантах осуществления разработка пролекарства повышает эффективную растворимость в воде. См., например, Ребогак е! а1., Ат. 1. Рйукю1., 269:6210-218 (1995); МсЬоеб е! а1., 6ак!гоеп!его1, 106:405-413 (1994); Носййаик е! а1., Вютеб. Сйгот., 6:283-286 (1992); 1. Ьагкеп апб Н. Випбдаагб, Ιη!. 1. Рйагтасеибск, 37, 87 (1987); 1. Ьагкеп е! а1., Ιη!. 1. Ркагтасеибск, 47, 103 (1988); 81пки1а е! а1., 1. Рйагт. 8с1., 64:181-210 (1975); Т. ШдисЫ апб V. 8!е11а, Ргобгидк ак Nονе1 ОеПуегу 8ук!етк, ^1. 14 о£ !йе А.С.8. 8утрокшт 8епек; и Еб\\пгб В. Коске, В|огеуегк1Ь1е Саглегк ίη Эгид Оек1дп, Ателсап Рйагтасеи11са1 Аккос1а1юп апб Регдатоп Ргекк, 1987, все из которых включены в настоящий документ посредством отсылки в полном объеме.
Сайты на ароматической кольцевой части соединений Формулы Ό могут быть подвержены различным метаболическим реакциям, таким образом, введение подходящих заместителей в ароматические кольцевые структуры, таких как, в качестве примера только, галогены, может снижать, минимизировать или устранять этот метаболический путь.
Соединения, описанные здесь, включают меченные изотопами соединения, которые идентичны соединениям, указанным в различных формулах и структурах, представленных здесь, за исключением того факта, что один или более чем один атом заменен атомом, имеющим атомную массу или массовое число, отличающееся от атомной массы или массового числа, обычно обнаруживаемого в природе. Примеры изотопов, которые могут быть включены в соединения по настоящему изобретению, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фтора и хлора, такие как 2Н, 3Н, 13С, 14С, 15Ν, 18О, 17О, 358, 18Р, 36С1, соответственно. Определенные меченные изотопами соединения, описанные здесь, например те, в которые включены радиоактивные изотопы, такие как 3Н и 14С, эффективны в анализе распределения лекарственного средства и/или субстрата в тканях. Кроме того, замещение изотопами, такими как дейтерий, то есть 2Н, может обеспечивать определенные терапевтические преимущества, обусловленные большей метаболической стабильностью, например, увеличенный период полувыведения ίη νί\Ό или сниженные требования в отношении доз.
В дополнительных или других вариантах осуществления соединения, описанные здесь, подвержены метаболизму при введении в организм, нуждающийся в этом, с образованием метаболита, используемого затем для оказания желаемого эффекта, в том числе желаемого терапевтического эффекта.
Соединения, описанные здесь, могут быть получены и/или быть использованы в форме фармацевтически приемлемых солей. Типы фармацевтически приемлемых солей включают, но без ограничения: (1) соли присоединения кислот, образованные при взаимодействии соединения в форме свободного основания с фармацевтически приемлемой неорганической кислотой, такой как соляная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота, метафосфорная кислота и т.п.; или органической кислотой, такой как уксусная кислота, пропионовая кислота, капроновая кислота, циклопентанпропионовая кислота, гликолевая кислота, пировиноградная кислота, молочная кислота, малоновая кислота, янтарная кислота, яблочная кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, трифторуксусная кислота, винная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, 3-(4гидроксибензоил)бензойная кислота, коричная кислота, миндальная кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, 1,2-этандисульфоновая кислота, 2-гидроксиэтансульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота, толуолсульфоновая кислота, 2-нафталинсульфоновая кислота, 4-метилбицикло2.2.2]окт-2-ене-1-карбоновая кислота, глюкогептоновая кислота, 4,4'-метиленбис-(3-гидрокси-2-ен-1карбоновая кислота), 3-фенилпропионовая кислота, триметилуксусная кислота, трет-бутилуксусная кислота, лаурилсерная кислота, глюконовая кислота, глутаминовая кислота, гидроксинафтойная кислота, салициловая кислота, стеариновая кислота, муконовая кислота и т.п.; (2) соли, образованные при замене кислотного протона, присутствующего в родительском соединении, ионом металла, например ионом щелочного металла (например, лития, натрия, калия), ионом щелочно-земельного металла (например, магния или кальция), или ионом алюминия; или образует координационную связь с органическим основанием. Приемлемые органические основания включают этаноламин, диэтаноламин, триэтаноламин, трометамин, Ν-метилглюкамин и т.п. Приемлемые неорганические основания включают гидроксид алюминия, гидроксид кальция, гидроксид калия, карбонат натрия, гидроксид натрия и т.п.
Анализ и идентификацию соответствующих противоионов фармацевтически приемлемых солей можно выполнить с использованием различных методов, включая, но без ограничения, ионообменную хроматографию, ионную хроматографию, капиллярный электрофорез, индуктивно-связанную плазму, атомно-абсорбционную спектроскопию, масс-спектрометрию или любую их комбинацию.
Соли восстанавливают с использованием по меньшей мере одного из следующих методов: фильт
- 50 032463 рации, осаждения с помощью осадителя с последующей фильтрацией, выпаривания растворителя или в случае водных растворов лиофилизации.
Следует понимать, что ссылка на фармацевтически приемлемые соли включает ее формы присоединения растворителя или кристаллические формы, в частности сольваты или полиморфы. Сольваты содержат либо стехиометрические, либо нестехиометрические количества растворителя и могут быть образованы в процессе кристаллизации с фармацевтически приемлемыми растворителями, такими как вода, этанол и т.п. Гидраты образуются в случае, когда растворителем является вода, и алкоголяты образуются в случае, когда растворителем является спирт. Сольваты соединений, описанных здесь, могут быть легко получены или образованы в способах, описанных здесь. Кроме того, соединения, обеспеченные здесь, могут существовать в несольватированных, а также сольватированных формах. В большинстве случаев в целях соединений и способов, обеспеченных здесь, сольватированные формы рассматривают как эквивалентные несольватированным формам.
Следует понимать, что ссылка на соль включает ее формы присоединения растворителя или кристаллические формы, в частности сольваты или полиморфы. Сольваты содержат либо стехиометрические, либо нестехиометрические количества растворителя и часто образуются в процессе кристаллизации с фармацевтически приемлемыми растворителями, такими как вода, этанол и т. п. Гидраты образуются в случае, когда растворителем является вода, и алкоголяты образуются в случае, когда растворителем является спирт. Полиморфы включают различные конфигурации укладки кристаллов одного и того же элементного состава соединения. Полиморфы, как правило, имеют разные картины дифракции рентгеновских лучей, разные инфракрасные спектры, температуры плавления, плотность, твердость, форму кристаллов, оптические и электрические свойства, стабильность и растворимость. Различные факторы, такие как растворитель для рекристаллизации, скорость кристаллизации и температура хранения, могут привести к доминированию одной кристаллической формы.
Соединения, описанные здесь, могут быть представлены в различных формах, включая, но без ограничения, аморфные формы, измельченные формы и формы наночастиц. Кроме того, соединения, описанные здесь, включают кристаллические формы, также известные как полиморфы. Полиморфы включают различные конфигурации укладки кристаллов одного и того же элементного состава соединения. Полиморфы, как правило, имеют разные картины дифракции рентгеновских лучей, разные инфракрасные спектры, температуры плавления, плотность, твердость, форму кристаллов, оптические и электрические свойства, стабильность и растворимость. Различные факторы, такие как растворитель рекристаллизации, скорость кристаллизации и температура хранения, могут привести к доминированию одной кристаллической формы.
Скрининг и описание фармацевтически приемлемых солей, полиморфов и/или сольватов могут быть проведены с применением множества методик, включая, но без ограничения, термический анализ, дифракцию рентгеновских лучей, спектроскопию, сорбцию пара и микроскопию. Методы термического анализа направлены на термохимическую деградацию или термофизические процессы, включая, но без ограничения, полиморфные превращения, и такие способы применяют для анализа взаимосвязи различных полиморфных форм, для определения потери массы, для установления температуры стеклования или для исследований совместимости вспомогательных веществ. Такие способы включают, но без ограничения, дифференциальную сканирующую калориметрию (О8С), модулированную дифференциальную сканирующую калориметрию (ΜΟΟ), термогравиметрический анализ (ΤΟΑ) и термогравиметрический анализ и инфракрасную спектроскопию (ΤΟ/ΙΚ). Способы дифракции рентгеновских лучей включают, но без ограничения, дифрактометры на монокристалле и порошковые дифрактометры, и источники синхротронного излучения. Различные используемые спектроскопические методики включают, но без ограничения, спектроскопию комбинационного рассеяния света, инфракрасную спектроскопию на основе преобразования Фурье (ΕΤΙΚ), спектроскопию в видимой и ультрафиолетовой части спектра (ИУ18) и ядерный магнитный резонанс (ΝΜΚ) (жидко- или твердотельный). Различные микроскопические методики включают, но без ограничения, микроскопию в поляризованном свете, сканирующую электронную микроскопию (8ΕΜ) с энергорассеивающим рентгеновским анализом (ΕΌΧ), сканирующую электроннную микроскопию в режиме естественной среды с ΕΌΧ (в газовой атмосфере или атмосфере водяного пара), инфракрасную микроскопию (ΙΚ-микроскопию) и микроскопию с комбинационным рассеянием.
В данном описании все описанные группы и их заместители могут быть выбраны специалистом в данной области для обеспечения стабильных групп и соединений.
Фармакокинетика
В определенных вариантах осуществления в настоящем документе представлен способ лечения гематологической злокачественной опухоли у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий проведение у субъекта первой терапии, содержащей количество необратимого ингибитора В(к, достаточное для мобилизации множества клеток из злокачественной опухоли. В некоторых вариантах осуществления способ, кроме того, включает проведение второй терапии у субъекта.
В некоторых вариантах осуществления на день 1 максимальная концентрация в плазме (Стах) ингибитора В(к составила между 40 мг/мл и 400 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления на день 1 Стах ингибитора В(к составила между 44 мг/мл и 390 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления на день 1
- 51 032463
Стах ингибитора В1к составила между 48.7 и 383 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления на день 1 Стах ингибитора В1к составила между 40 мг/мл и 50 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления на день 1 Стах ингибитора В1к составила между 80 мг/мл и 90 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления на день 1 Стах ингибитора В1к составила между 90 и 100 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления на день 1 Стах ингибитора В1к составила между 100 и 110 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления на день 1 Стах ингибитора В1к составила между 110 и 120 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления на день 1 Стах ингибитора В1к составила между 120 и 130 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления на день 1 Стах ингибитор В1к составила между 130 и 140 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления на день 1 Стах ингибитора В1к составила между 140 и 150 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления на день 1 Стах ингибитора В1к составила между 150 и 160 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления на день 1 Стах ингибитора В1к составила между 160 и 170 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления на день 1 Стах ингибитора В1к составила между 170 и 180 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления на день 1 Стах ингибитора В1к составила между 180 и 190 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления на день 1 Стах ингибитора В1к составила между 190 и 200 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления на день 1 Стах ингибитора В1к составила между 200 и 300 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления на день 1 Стах ингибитора В1к составила между 300 и 400 нг/мл.
В некоторых вариантах осуществления на день 1 Стах ингибитора В1к составила между 40 мг/мл и 400 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления на день 1 Стах ингибитора В1к составила между 48.7 и 383 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления на день 1 Стах ингибитора В1к в дозе 1.25 мг/кг составила 48.7 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления на день 1 Стах ингибитора В1к в дозе 2.5 мг/кг составила 90.4 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления на день 1 Стах ингибитора В1к в дозе 5 мг/кг составила 86.1 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления на день 1 Стах ингибитора В1к в дозе 8.3 мг/кг составила 135 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления на день 1 Стах ингибитора В1к в дозе 12.5 мг/кг составила 383 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления на день 1 Стах ингибитора В1к в дозе 560 мг/кг составила 156 нг/мл.
В некоторых вариантах осуществления стационарная (йеабу к1а1е) Стах ингибитора В1к составила между 20 мг/мл и 300 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная Стах ингибитора В1к составила между 20 мг/мл и 30 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная Стах ингибитора В1к составила между 30 мг/мл и 50 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная Стах ингибитора В1к составила между 50 мг/мл и 70 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная Стах ингибитора В1к составила между 70 мг/мл и 90 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная Стах ингибитора В1к составила между 90 мг/мл и 100 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная Стах ингибитора В1к составила между 100 мг/мл и 110 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная Стах ингибитора В1к составила между 110 мг/мл и 120 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная Стах ингибитора В1к составила между 120 мг/мл и 130 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная Стах ингибитора В1к составила между 130 мг/мл и 140 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная Стах ингибитора В1к составила между 140 мг/мл и 150 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная Стах ингибитора В1к составила между 150 мг/мл и 160 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная Стах ингибитора В1к составила между 160 мг/мл и 170 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная Стах ингибитора В1к составила между 170 мг/мл и 180 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная Стах ингибитора В1к составила между 180 мг/мл и 190 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная Стах ингибитора В1к составила между 200 мг/мл и 240 нг/мл.
В некоторых вариантах осуществления стационарная Стах ингибитора В1к составила между 27 нг/мл и 236 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная Стах ингибитора В1к в дозе 1.25 мг/кг составила 27 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная Стах ингибитора В1к в дозе 2.5 мг/кг составила 114 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная Стах ингибитора В1к в дозе 5 мг/кг составила 112 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная Стах ингибитора В1к в дозе 8.3 мг/кг составила 183 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная Стах ингибитора В1к в дозе 12.5 мг/кг составила 236 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная Стах ингибитора В1к в дозе 560 мг/сутки ингибитора В1к составила 122 нг/мл.
В некоторых вариантах осуществления время достижения максимальной концентрации в плазме крови (Ттах) ингибитора В1к колеблется от 1 до 2.5 ч. В некоторых вариантах осуществления Ттах ингибитора В1к колеблется от 1.5 до 2.3 ч. В некоторых вариантах осуществления Ттах ингибитора В1к колеблется от 1.7 до 2.3 ч. В некоторых вариантах осуществления Ттах ингибитора В1к колеблется от 1.8 до 2.2 ч.
В некоторых вариантах осуществления Ттах ингибитора В1к в дозе 1.25 мг/кг составляет 1 ч. В некоторых вариантах осуществления Ттах ингибитора В1к в дозе 2.5 мг/кг составляет 2.1 ч. В некоторых вариантах осуществления Ттах ингибитора В1к в дозе 5 мг/кг составляет 2.3 ч. В некоторых вариантах осуществления Ттах ингибитора В1к в дозе 8.3 мг/кг составляет 1.8 ч. В некоторых вариантах осуществления Ттах ингибитора В1к в дозе 12.5 мг/кг составляет 1.7 ч. В некоторых вариантах осуществления Ттах ингибитора В1к в дозе 560 мг/сутки составляет 1.8 ч.
- 52 032463
В некоторых вариантах осуществления средний период полувыведения ингибитора В1к от Ттах колеблется от 1.5 до 3 ч. В некоторых вариантах осуществления средний период полувыведения ингибитора В1к от Ттах колеблется от 1.5 до 2.7 ч. В некоторых вариантах осуществления средний период полувыведения ингибитора В1к от Ттах колеблется от 1.5 до 2.5 ч. В некоторых вариантах осуществления средний период полувыведения ингибитора В1к от Ттах колеблется от 1.5 и 2.2 ч. В некоторых вариантах осуществления средний период полувыведения ингибитора В1к от Ттах колеблется от 1.5 и 1.7 ч. В некоторых вариантах осуществления средний период полувыведения ингибитора В1к от Ттах колеблется от 2 до 3 ч. В некоторых вариантах осуществления средний период полувыведения ингибитора В1к от Ттах колеблется от 2.5 до 3 ч. В некоторых вариантах осуществления средний период полувыведения ингибитора В1к от Ттах колеблется от 2.5 до 2.9 ч. В некоторых вариантах осуществления средний период полувыведения ингибитора В1к от Ттах колеблется от 2.5 и 2.8 ч. В некоторых вариантах осуществления средний период полувыведения ингибитора В1к от Ттах колеблется от 2.5 и 2.7 ч.
В некоторых вариантах осуществления средний период полувыведения от Ттах ингибитора В1к в дозе 1.25 мг/кг составляет 1.7 ч. В некоторых вариантах осуществления средний период полувыведения от Ттах ингибитора В1к в дозе 2.5 мг/кг составляет 1.5 ч. В некоторых вариантах осуществления средний период полувыведения от Ттах ингибитора В1к в дозе 5 мг/кг составляет 2.5 ч. В некоторых вариантах осуществления средний период полувыведения от Ттах ингибитора В1к в дозе 8.3 мг/кг составляет 2.1 ч. В некоторых вариантах осуществления средний период полувыведения от Ттах ингибитора В1к в дозе 12.5 мг/кг составляет 1.5 ч. В некоторых вариантах осуществления средний период полувыведения от Ттах ингибитора В1к в дозе 560 мг составляет 2.65 ч.
В некоторых вариантах осуществления площадь под фармакокинетической кривой концентрациявремя от нуля до бесконечности (АИС0-„) ингибитора В1к на День 1 составила между 100 и 2000 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления АИС0-„ ингибитора В1к на День 1 составила между 150 и 1600 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления АиС0-, ингибитора В1к на День 1 составила между 150 и 1100 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления АиС0-, ингибитора В1к на День 1 составила между 150 и 1000 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления ингибитор В1к имеет в День 1 АиС0-, между 150 и 750 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления АиС0-, ингибитора В1к на День 1 составила между 150 и 500 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления АиС0-, ингибитора В1к на День 1 составила между 100 и 200 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления АиС0-, ингибитора В1к на День 1 составила между 400 и 500 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления АиС0-, ингибитора В1к на День 1 составила между 400 и 800 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления АиС0-, ингибитора В1к на День 1 составила между 400 и 1000 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления АИС0-, ингибитора В1к на День 1 составила между 700 и 1000 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления АиС0-, ингибитора В1к на День 1 составила между 700 и 800 нг-ч/мл.
В некоторых вариантах осуществления АиС0-, ингибитора В1к в дозе 1.25 мг/кг на День 1 составила 181 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления АиС0-, ингибитора В1к в дозе 2.5 мг/кг на День 1 составила 494 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления АиС0-, ингибитора В1к в дозе 5 мг/кг на День 1 составила 419 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления АиС0-, ингибитора В1к в дозе 8.3 мг/кг на День 1 составила 923 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления АиС0-, ингибитора В1к в дозе 12.5 мг/кг на День 1 составила 1550 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления АиС0-, ингибитора В1к в дозе 560 мг на День 1 составила 749 нг-ч/мл.
В некоторых вариантах осуществления, нормализованное по массе тела дозирование (мг/кг/сутки) ингибитора В1к на День 1 приводит вариабельной АиС0-, и стационарной (зкеабу-зкаке) АИС0-24.
В некоторых вариантах осуществления стационарная (зкеабу ькаке) площадь под кривой концентрация-время от нуля до 24 ч (АИС0-24) ингибитора В1к составляет между 300 и 3000 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная (зкеабу ькаке) АИС0-24 ингибитора В1к составляет между 300 и 2500 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная (зкеабу 81а1е) АИС0-24 ингибитора В1к составляет между 300 и 2000 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная (зкеабу 81а1е) АИС0-24 ингибитора В1к составляет между 300 и 1600 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная (зкеабу ькаке) АИС0-24 ингибитора В1к составляет между 1500 и 2500 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная (зкеабу ь1а1е) АИС0-24 ингибитора В1к составляет между 1500 и 2000 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная (зкеабу 81а1е) АИС0-24 ингибитора В1к составляет между 1500 и 1900 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная (зкеабу 81а1е) АИС0-24 ингибитора В1к составляет между 1500 и 1600 нг-ч/мл.
В некоторых вариантах осуществления стационарная (зкеабу ь1а1е) АИС0-24 ингибитора В1к в дозе 1.25 мг/кг составляет 301 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная (зкеабу 81а1е) АИС0-24 ингибитора В1к в дозе 2.5 мг/кг составляет 1840 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная (зкеабу ь1а1е) АИС0-24 ингибитора В1к в дозе 5 мг/кг составляет 1580 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная (зкеабу 81а1е) АИС0-24 ингибитора В1к в дозе 8.3 мг/кг составляет
- 53 032463
2330 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная (§!еайу 51а1е) ЛИС0-24 ингибитора В1к в дозе 12.5 мг/кг составляет 2936 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления стационарная (Оеайу 81а!е) АИС0-24 ингибитора В1к в дозе 560 мг составляет 1553 нг-ч/мл.
В некоторых вариантах осуществления несвязанная фракция ингибитора В1к колеблется между 1 и 5%. В некоторых вариантах осуществления несвязанная фракция ингибитора В1к колеблется между 1.5 и 4%. В некоторых вариантах осуществления несвязанная фракция ингибитора В1к колеблется между 2 и 3%. В некоторых вариантах осуществления несвязанная фракция ингибитора В1к составляет 2.5%.
Вторые терапии
В определенных вариантах осуществления в настоящем документе раскрыт способ лечения гематологической злокачественной опухоли у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий: (а) проведение у субъекта первой терапии, содержащей количество необратимого ингибитора В1к; и (Ь) проведение второй терапии у субъекта. Кроме того, в определенных вариантах осуществления в настоящем документе раскрыт способ лечения гематологической злокачественной опухоли у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий: (а) проведение первой терапии у субъекта, содержащей количество необратимого ингибитора В1к, достаточное для мобилизации множества клеток из злокачественной опухоли; (Ь) анализ мобилизованного множества клеток в образце, полученном от субъекта; и (с) проведение второй терапии у субъекта. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В1к является достаточным для индукции лимфоцитоза множества клеток из злокачественной опухоли. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления способ, кроме того, включает проведение второй терапии после повышения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с концентрацией до введения ингибитора В1к. В некоторых вариантах осуществления проведение второй терапии начинают после последующего понижения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение продолжительности повышения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с концентрацией до введения ингибитора В1к. В некоторых вариантах осуществления способ, кроме того, включает проведение второй терапии после повышения концентрации мобилизованного множества клеток в периферической крови в течение предварительно установелнного промежутка времени. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает подсчет числа мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления способ, кроме того, включает проведение второй терапии после увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с числом до введения ингибитора В1к. В некоторых вариантах осуществления проведение второй терапии начинают после последующего уменьшения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови. В некоторых вариантах осуществления анализ мобилизованного множества клеток включает измерение продолжительности увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови по сравнению с числом до введения ингибитора В1к. В некоторых вариантах осуществления способ, кроме того, включает проведение второй терапии после увеличения числа мобилизованного множества клеток в периферической крови в течение предварительно установленного промежутка времени.
В некоторых вариантах осуществления введение ингибитора В1к до второй терапии уменьшает иммуноопосредованные реакции на вторую терапию. В некоторых вариантах осуществления введение ингибитора В1к до офатумумаба уменьшает иммуноопосредованные реакции на офатумумаб.
В некоторых вариантах осуществления вторая терапия включает химиотерапевтический агент, стероид, иммунотерапевтический агент, таргетную терапию или их комбинацию. В некоторых вариантах осуществления вторая терапия включает ингибитор пути В-клеточного рецептора. В некоторых вариантах осуществления ингибитор пути В-клеточного рецептора представляет собой ингибитор СО79А, ингибитор СЭ79В, ингибитор СЭ19, ингибитор Ьуп, ингибитор 8ук, ингибитор ΡΙ3Κ, ингибитор В1пк, ингибитор РЬСу, ингибитор РКСЗ или их комбинацию. В некоторых вариантах осуществления вторая терапия включает антитело, ингибитор передачи сигнала от В-клеточного рецептора, ингибитор Р13К, ингибитор 1АР, ингибитор тТ0К, радиоиммунотерапевтическое средство, ДНК-повреждающий агент, ингибитор протеасом, ингибитор гистондеацетилазы, ингибитор протеинкиназы, ингибитор белка гэджехог (йейдейод), ингибитор Н§р90, ингибитор теломеразы, ингибитор 1ак1/2, ингибитор протеазы, ингибитор РКС, ингибитор РАКР или их комбинацию.
В некоторых вариантах осуществления вторая терапия включает хлорамбуцил, ифосфамид, доксорубицин, месалазин, талидомид, леналидомид, темсиролимус, эверолимус, флударабин, фостаматиниб, паклитаксел, доксетаксел, офатумумаб, ритуксимаб, дексаметазон, преднизон, САЬ-101, ибритумомаб, тозитумомаб, бортезомиб, пентостатин, эндостатин или их комбинацию.
В некоторых вариантах осуществления вторая терапия включает леналидомид.
В некоторых вариантах осуществления вторая терапия включает бортезомиб.
В некоторых вариантах осуществления вторая терапия включает сорафениб.
- 54 032463
В некоторых вариантах осуществления вторая терапия включает гемцитабин.
В некоторых вариантах осуществления вторая терапия включает дексаметазон.
В некоторых вариантах осуществления вторая терапия включает бендамустин.
В некоторых вариантах осуществления вторая терапия включает К-406.
В некоторых вариантах осуществления вторая терапия включает ингибитор 1 ЮАС. В некоторых вариантах осуществления ингибитор 1 ЮАС имеет структуру формулы (I)
в которой
К1 представляет собой водород или алкил;
X представляет собой -О-, -ΝΚ2- или -8(Ο)η, где η равен 0-2 и К2 представляет собой водород или алкил;
Υ представляет собой необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный фенил, алкилтио, алкилсульфинил, алкилсульфонил, необязательно замещенный фенилалкилтио, необязательно замещенный фенилалкилсульфонил, гидрокси или необязательно замещенный фенокси;
Аг1 представляет собой фенилен или гетероарилен, при этом указанный Аг1 является необязательно замещенным одной или двумя группами, независимо выбранными из алкила, галогена, гидрокси, алкокси, галогеналкокси или галогеналкила;
К3 представляет собой водород, алкил, гидроксиалкил или необязательно замещенный фенил; и
Аг2 представляет собой арил, аралкил, аралкенил, гетероарил, гетероаралкил, гетероаралкенил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклоалкил или гетероциклоалкилалкил;
и индивидуальные стереоизомеры, индивидуальные геометрические изомеры или их смеси; или его фармацевтически приемлемые соли.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор гистондеацтилазы представляет собой 3((диметиламино)метил)-П-(2-(4-(гидроксикарбамоил)фенокси) этил)бензофуран-2-карбоксамид.
В некоторых вариантах осуществления вторая терапия включает таксол.
В некоторых вариантах осуществления вторая терапия включает винкристин.
В некоторых вариантах осуществления вторая терапия включает доксорубицин.
В некоторых вариантах осуществления вторая терапия включает темсиролимус.
В некоторых вариантах осуществления вторая терапия включает карбоплатин.
В некоторых вариантах осуществления вторая терапия включает офатумумаб.
В некоторых вариантах осуществления вторая терапия включает ритуксимаб.
В некоторых вариантах осуществления вторая терапия включает циклофосфамид, гидроксидаунорубицин, винкристин и преднизон и, необязательно, ритуксимаб.
В некоторых вариантах осуществления вторая терапия включает бендамустин и ритуксимаб.
В некоторых вариантах осуществления вторая терапия включает флударабин, циклофосфамид и ритуксимаб.
В некоторых вариантах осуществления вторая терапия включает циклофосфамид, винкристин и преднизон, и, необязательно, ритуксимаб.
В некоторых вариантах осуществления вторая терапия включает этопозид, доксорубицин, винкристин, циклофосфамид, преднизолон и, необязательно, ритуксимаб.
В некоторых вариантах осуществления вторая терапия включает дексаметазон и леналидомид.
Дополнительная терапия рака включает Азотистые иприты, такие как, например, бендамустин, хлорамбуцил, хлорметин, циклофосфамид, ифосфамид, мелфалан, преднимустин, трофосфамид; алкилсульфонаты, такие как бусульфан, манносульфан, треосульфан; этиленимины, такие как карбоквон, тиотепа, триазиквон; нитрозомочевины, такие как кармустин, фотемустин, ломустин, нимустин, ранимустин, семистин, стрептозоцин; эпоксиды, такие как, например, этоглюцид; другие алкилирующие агенты, такие как, например, дакарбазин, митобронитол, пипоброман, темозоломид; аналоги фолиевой кислоты, такие как, например, метотрексат, перметрексед, пралатрексат, ралтитрексед; аналоги пурина, такие как, например, кладрибин, клофарабин, флударабин, меркаптопурин, неларабин, тиогуанин; аналоги пиримидина, такие как, например, азацитидин, капецитабин, кармофур, цитарабин, децитабин, фторурацил, гемцитабин, тегафур; алкалоиды барвинка, такие как, например, винбластин, винкристин, виндезин, винфлунин, винорелбин; производные подофиллотоксина, такие как, например, этопозид, тенипозид; производные колхицина, такие как, например, демеколцин; таксаны, такие как, например, доцетаксел, паклитаксел, полиглумекс паклитаксела; другие растительные алкалоиды и природные продукты, такие как, например, трабектедин; актиномицины, такие как, например, дактиномицин; антрациклины, такие как, например, акларубицин, даунорубицин, доксорубицин, эпирубицин, идарубицин, митоксантрон, пирарубицин, валрубицин, зорубицин; другие цитотоксические антитела, такие как, например, блеомицин, ик
- 55 032463 сабепилон. митомицин. пликамицин; соединения платины. такие как. например. карбоплатин. цисплатин. оксаплатин. сатраплатин; метилгидразины. такие как. например. прокарбазин; сенсибилизирующие средства. такие как. например. аминолевулиновая кислота. эфапроксирал. метиламинолевулинат. порфимер натрия. темопорфин; ингибиторы протеинкиназы. такие как. например. дазатиниб. эрлотиниб. эверолимус. гефитиниб. иматиниб. лапатиниб. нилотиниб. пазонаниб. сорафениб. сунитиниб. темсиролимус; другие противоопухолевые средства. такие как. например. алитретиноин. алтретамин. амзакрин. анагрелид. триоксид арсения. аспарагиназа. бексаротен. бортезомиб. целекоксиб. денилейкин дифтитокс. эстрамустин. гидроксикарбамид. иринотекан. лонидамин. мазопрокол. милтефозеин. митогуазон. митотан. облимерсен. пегаспаргаза. пентостатин. ромидепсин. ситимаген цераденовек. триазофурин. топотекан. третиноин. вориностат; эстрогены. такие как. например. диэтилстилбенол. этинилэстрадиол. фосфестрол. полиэстрадиол-фосфат; прогестогены. такие как. например. гестонорон. медроксипрогестерон. мегестрол; аналоги гонадотропин-высвобождающего гормона. такие как. например. бусерелин. гозерелин. леупрорелин. трипторелин; антиэстрогены. такие как. например. фулвестрант. тамоксифен. торемифен; антиандрогены. такие как. например. бикалутамид. флутамид. нилутамид; ингибиторы ферментов. аминоглутетимид. анастрозол. экземестан. форместан. летрозол. ворозол; другие антагонисты гормонов. такие как. например. абареликс. дегареликс; иммуностимуляторы. такие как. например. гистамина дигидрохлорид. мифамуртид. пидотимод. плериксафор. роквинимекс. тимопентин; иммуносупрессанты. такие как. например. эверолимус. гусперимус. лефлуномид. микофеноловая кислота. сиролимус; ингибиторы кальциневрина. такие как. например. циклоспорин. такролимус; другие иммуносупрессанты. такие как. например. азатиоприн. леналидомид. метотрексат. талидомид; и радиофармацевтические препараты. такие как. например. иобенгуан.
Дополнительная терапия рака включает интерфероны. интерлейкины. факторы некроза опухоли. фаторы роста или т.п.
Дополнительные терапии рака включают иммуностимуляторы. такие как. например. анцестим. филграстим. ленограстим. молграмостим. пегфилграстим. сарграмостим; интерфероны. такие как. например. природный альфа-интерферон. интерферон альфа-2а. интерферон альфа-2Ь. интерферон альфакон-1. интерферон альфа-п1. природный бета-интерферон. интерферон бета-1а. интерферон бета-1Ь. гамма-интерферон. пегинтерферон альфа-2а. пегинтерферон альфа-2Ь; интерлейкины. такие как. например. алдеслейкин. опрелвекин; другие иммуностимуляторы. такие как. например. вакцина против туберкулеза ВСС. глатирамера ацетат. гистамина дигидрохлорид. иммуноцианин. лентинан. вакцина против меланомы. мифамуртид. пегадемаза. пидотимод. плериксафор. поли 1:С (ро1у 1:С). поли 1СЬС (ро1у 1СЬС). роквинимекс. тазонермин. тимопентин; иммуносупрессанты. такие как. например. абатацепт. абетимус. алефацепт. антилимфоцитарный иммуноглобулин (лошадиный). антитимоцитарный иммуноглобулин (кроличий). экулизумаб. эфализумаб. эверолимус. гусперимус. лефлуномид. муромаб-СО3. микофеноловая кислота. натализумаб. сиролимус; ингибиторы фактора некроза опухоли альфа (ТЫЕ-альфа). такие как. например. адалимумаб. афелимомаб. цертолизумаб пегол. этанерцепт. голимумаб. инфликсимаб; ингибиторы интерлейкина. такие как. например. анакинра. базиликсимаб. канакинумаб. даклизумаб. меполизумаб. рилонацепт. тоцилизумаб. устекинумаб; ингибиторы кальциневрина. такие как. например. циклоспорин. такролимус; Другие иммуносупрессанты. такие как. например. азатиоприн. леналидомид. метотрексат. талидомид.
Дополнительные терапии рака включают адалимумаб. алемтузумаб. базиликсимаб. бевацизумаб. цетуксимаб. цертолизумаб пегол. даклизумаб. экулизумаб. эфализумаб. гемтузумаб. ибритумомаб тиуксетан. инфликсимаб. муромонаб-СО3. натализумаб. панитумумаб. ранибизумаб. ритуксимаб. тозитумомаб. трастизумаб или т. п.. или их комбинацию.
Дополнительные терапии рака включают моноклональные антитела. такие как. например. алемтузумаб. бевацизумаб. катумаксомаб. цетуксимаб. эдреколомаб. гемтузумаб. офатумумаб. панитумумаб. ритуксимаб. трастузумаб; иммуносупрессанты. экулизумаб. эфализумаб. муромаб-СО3. натализумаб; ингибиторы фактора некроза опухоли альфа (ТЫЕ-альфа). такие как. например. адалимумаб. афелимомаб. цертолизумаб пегол. голимумаб. инфликсимаб; ингибиторы интерлейкина. базиликсимаб. канакинумаб. даклизумаб. меполизумаб. тоцилизумаб. устекинумаб; радиофармацевтические препараты. ибритумомаб тиуксетан. тозитумомаб; Другие моноклональные антитела. такие как. например. абаговомаб. адекатумумаб. алемтузумаб. анти-СЭ30 моноклональное антитело ХтаЬ2513. анти-МЕТ моноклональное антитело Ме!МаЬ. аполизумаб. апомаб. арцитумомаб. базиликсимаб. биспецефическое антитело 2В1. блинатумомаб. брентуксимаб ведотин. капромаб пендетид. циксутумумаб. клаудиксимаб. конатумумаб. дацетузумаб. деносумаб. экулизумаб. эпратузумаб. эпратузумаб. эртумаксомаб. этарацизумаб. фигитумумаб. фрезолимумаб. галиксимаб. ганитумаб. гемтузумаб озогамицин. глембатумумаб. ибритумомаб. инотузумаб озогамицин. ипилимумаб. лексатумумаб. линтузумаб. лукатумумаб. мапатумумаб. матузумаб. милатузумаб. моноклональное антитело СС49. нецитумумаб. нимотузумаб. офатумумаб. ореговомаб. пертузумаб. рамакуримаб. ранибизумаб. сиплизумаб. сонепцизумаб. танезумаб. тозитумомаб. трастузумаб. тремелимумаб. тукотузумаб целмолейкин. велтузумаб. визилизумаб. волоциксимаб. залутумумаб.
Дополнительная терапия рака включает агенты. которые воздействуют на микроокружение опухо
- 56 032463 ли, такое как сеть клеточной сигнализации (например, сигнальный путь фосфатидилинозитол-3-киназы (Р13К), передающей сигнал от В-клеточного рецептора и 1дЕ-рецептора). В некоторых вариантах осуществления вторым агентом является ингибитор передачи сигнала Р13К или ингибитор кус-киназы. В одном варианте осуществления ингибитор ,ук представляет собой фостаматиниб (К788). В другом варианте осуществления вторым агентом является ингибитор РКСу, такой как, в качестве примера только, энзастаурин.
Примеры агентов, которые воздействуют на микроокружение опухоли, включают ингибиторы передачи сигнала Р13К, ингибиторы кус-киназы, ингибиторы протеинкиназы, такие как, например, дазатиниб, эрлотиниб, эверолимус, гефитиниб, иматиниб, лапатиниб, нилотиниб, пазонаниб, сорафениб, сунитиниб, темсиролимус; другие ингибиторы ангиогенеза, такие как, например, ΟΤ-111, Л-101, К1530; другие ингибиторы киназы, такие как, например, АС220, АС480, АСЕ-041, ΑΜΟ 900, АР24534, Аггу-614, ΑΤ7519, АТ9283, АУ-951, акситиниб, ΑΖΌ1152, ΑΖΌ7762, ΑΖΌ8055, ΑΖΌ8931, бафетиниб, ВАΥ 734506, В6Й398, В6Τ226, В1 811283, В16727, В1ВЕ 1120, ВП’\\' 2992, ВΜ8-690154, ВΜ8-777607, В1У18863233, В8К-461364, САЬ-101, СЕР-11981, €Υϋ116, ПСС-2036, динациклиб, довитиниб лактат, Е7050, ΕΜΌ 1214063, ΕΝΜΌ-2076, динатрия фостаматиниб, О8К2256098, О8К690693, ШСВ18424, ΙΝΝ0-406, ЖЙ-26483327, ЙХ-594, КХ2-391, линифаниб, ΕΥ2603618, Μ6С^265, Μ^0457, ΜК1496, ΜΕΝ8054, ΜΕΝ8237, ΜΓ470, ΝΜ8-1116354, ΝΜ8-1286937, 0Ν 01919.Ыа, 08Ι-027, 08Ι-930, ингибиторы В1к, РЕ00562271, РЕ-02341066, РЕ-03814735, РЕ-04217903, РЕ-04554878, РЕ-04691502, РЕ-3758309, РИА-739358, РЛС3397, прогенипоэтин, К547, К763, рамуцирумаб, регорафениб, К05185426, 8АК103168, 83333333СЫ 727965, 8ΟΙ-1176, 8ОХ523, 8Ν8-314, ΤΑК-593, 1АК-901, 1К1258, ΤΕΝ-232, ГГР607, ХЬ147, ХЬ228, ХЛ281К05126766, ХЬ418, ХЬ765.
Другие примеры противоопухолевых агентов для применения в комбинации с соединением ингибитора В(к включают ингибиторы передачи сигнала митоген-активируемыми протеинкиназами, например, И0126, РИ98059, РП184352, РП0325901, АКОТ-142886, 8В239063, 8Р600125, ВΑΥ 43-9006, вортманнин или ΕΥ294002; ингибиторы 8ук; ингибиторы тΤ0К; и антитела (например, ритуксан).
Другие противоопухолевые препараты, которые можно применять в комбинации с соединением ингибитора В(к, включают адриамицин, дактиномицин, блеомицин, винбластин, цисплатин, ацивицин; акларубицин; акозадола гидрохлорид; акронин; адозелезин; альдеслейкин; алтретамин; амбомицин; аметантрона ацетат; аминоглутетимид; амсакрин; анастрозол; антрамицин; аспарагиназу; асперлин; азацитидин; азетепу; азотомицин; батимастат; бензодепу; бикалутамид; бисантрена гидрохлорид; биснафида димезилат; бизелезин; блеомицина сульфат; бреквинар натрия; бропиримин; бусульфан; кактиномицин; калустерон; карацемид; карбетимер; карбоплатин; кармустин; карубицина гидрохлорид; карзелезин; цедефингол; хлорамбуцил; циролемицин; кладрибин; криснатола мезилат; циклофосфамид; цитарабин; дакарбазин; даунорубицина гидрохлорид; децитабин; дексормаплатин; дезагуанин; дезагуанина мезилат; диазиквон; доксорубицин; доксорубицина гидрохлорид; дролоксифен; дролоксифена цитрат; дромостанолона пропионат; дуазомицин; эдатрексат; эфлорнитина гидрохлорид; элсамитруцин; энлоплатин; энпромат; эпипропидин; эпирубицина гидрохлорид; эрбулозол; эзорубицина гидрохлорид; эстрамустин; эстрамустина натрия фосфат; этанидазол; этопозид; этопозида фосфат; этоприн; фадрозола гидрохлорид; фазарабин; фенретинид; флоксуридин; флударабина фосфат; фторурацил; фторцитабин; фосквидон; фостриецин-натрий; гемцитабин; гемцитабина гидрохлорид; гидросимочевину; идарубицина гидрохлорид; ифосфамид; иимофозин; интерлейкин ΙΙ (включая рекомбинантный интерлейкин ΙΙ или г1Ь2), интерферон альфа-2а; интерферон альфа-2Ь; интерферон альфа-п1; интерферон альфа-п3; интерферон бета-1а; интерферон гамма-1Ь; ипроплатин; иринотекана гидрохлорид; ланреотида ацетат; летрозол; лейпролида ацетат; лиарозола гидрохлорид; лометрексол натрий; ломустин; лозоксантрона гидрохлорид; мазопрокол; майтанзин; мехлорэтамина гидрохлорид; мегестрола ацетат; меленгестрола ацетат; мелфалан; меногарил; меркаптопурин; метотрексат; метотрексат натрий; метоприн; метуредепу; митиндомид; митокарцин; митокромин; митогиллин; митомалцин; митомицин; митоспер; митотан; митоксантрона гидрохлорид; микофеноловую кислоту; нокодазол; ногаламицин; ормаплатин; оксисуран; пегаспаргазу; пелиомицин; пентамустин; пепломицина сульфат; перфосфамид; пипоброман; пипосульфан; пироксантрона гидрохлорид; пликамицин; пломестан; порфимер натрий; порфиромицин; преднимустин; прокарбазина гидрохлорид; пуромицин; пуромицина гидрохлорид; пиразофурин; рибоприн; роглетимид; сафингол; сафингола гидрохлорид; семустин; симтразен; спарфосат натрий; спарсомицин; спирогермания гидрохлорид; спиромустин; спироплатин; стрептонигрин; стрептозоцин; сулофенур; тализомицин; текогалан натрий; тегафур; телоксантрона гидрохлорид; темопорфин; тенипозид; тероксирон; тестолактон; тиамиприн; тиогуанин; тиотепу; тиазофурин; тирапазамин; торемифена цитрат; трестолона ацетат; трицирибина фосфат; триметрексат; триметрексата глюкуронат; трипторелин; тубулозола гидрохлорид; урацил мустард; уредепу; вапреотид; вертепорфин; винбластина сульфат; винкристина сульфат; виндезин; виндезина сульфат; винепидина сульфат; винглицината сульфат; винлейрозина сульфат; винорельбина тартрат; винрозидина сульфат; винзолидина сульфат; ворозол; зениплатин; зиностатин; зорубицина гидрохлорид.
Другие противоопухолевые препараты, которые можно применять в комбинации с соединением ингибитора В(к, включают 20-эпи-1,25 дигидроксивитамин Ό3; 5-этинилурацил; абиратерон; акларубицин; ацилфульвен; адеципенол; адозелизин; альдеслейкин; антагонисты Α^^-ΤК; альтретамин; амбамустин;
- 57 032463 амидокс; амифосфин; аминолевулиновую кислоту; амрубицин; амсакрин; анагрелид; анастрозол; андографолид; ингибиторы ангиогенеза; антрагонист Ό; антагонист О; антареликс; антидорсализирующий морфогенетический белок-1; антиандроген, при карциноме предстательной железы; антиэстроген; антинеопластон; антисмысловые олигонуклеотиды; афидиколина глицинат; гены-модуляторы апоптоза; регуляторы апоптоза; апуриновую кислоту; ага-СОР-ОЬ-РТВА; аргининдеаминазу; асулакрин; атаместан; атримустин; аксинастатин 1; аксинастатин 2; аксинастатин 3; азасетрон; азатоксин; азатирозин; производные баккатина III; баланол; батимастат; антагонисты ВСК/АВЬ; бензохлорины; бензоилстауроспорин; производные бета-лактама; бета-алетин; бетакламицин В; бетулиновую кислоту; ингибитор ЬРСР; бикалутамид; бисантрен; бисазиридинилспермин; биснафид; бистратен А; бизелезин; брефлат; бропиримин; будотитан; бутионина сульфоксимин; кальципотриол; кальфостин С; производные камптотецина; канарипокс [Ή-2; капецитабин; карбоксамидоаминотриазол; карбоксиамидотриазол; СаКек! М3; САКN 700; ингибитор, выделенный из хряща; карзелезин; ингибиторы казеинкиназы (ΚΌ8); кастаноспермин; цекропин В; цетрореликс; хлорины; хлорхиноксалина сульфнамид; цикапрост; цис-порфирин; кладрибин; аналоги кломифена; клотримазол; коллисмицин А; коллисмицин В; комбретастатин А4; аналоги комбретастатина; конагенин; кармбесцидин 816; кристанол; криптофицин 8; производные криптофицина А; курацин А; циклопентантрахиноны; циклоплатам; ципермицин; цитарабина окфосфат; цитолитический фактор; цитостатин; дакликсимаб; децитабин; дегидродидемнин В; деслорелин; дексаметазон; дексифосфамид; дексразоксан; дексверапамил; диазиквон; дидемнин В; дидокс; диэтилнорспермин; дигидро-5-азацитидин; 9-диоксамицин; дифенилспиромустин; докозанол; доласетрон; доксифлуридин; дролоксифен; дронабинол; дуокармуцин 8А; эбселен; экомустин; эдельфосин; эдреколомаб; эфлорнитин; элемин; эмитефур; эпирубицин; эпристерид; аналог эстрамустина; агонисты эстрогена; антаагонисты эстрогена; этанидазол; этопозида фосфат; эксеместан; фадрозол; фазарабин; фенретинид; филграстим; финастерид; флавопиридол; флезеластин; флуастерон; флударабин; фдуродаунорубицина гидрохлорид; форфенимекс; форместан; фостриецин; фотемустин; гадолиния тексафирин; галлия нитрат; галоцитабин; ганиреликс; ингибиторы желатиназы; гемцитабин; ингибиторы глутатиона; гепсульфам; герегулин; гексаметилена бисацетамид; гиперицин; ибандроновую кислоту; идарубицин; иодоксифен; идрамантон; илмофозин; иломастат; имидазоакридоны; имихимод; иммуностимулирующие пептиды; инсулин, такой как, например, ингибитор рецептора инсулиноподобного фактора роста 1; агонисты интерферона; интерфероны; интерлейкины; иобенгуан; иододоксорубицин; ипомеанол, 4-; ироплакт; ирсогладин; изобенгазол; изогомогаликондрин В; итасетрон; джасплакинолид; кагалалид Р; ламераллина-Ν триацетат; ланреотид; лейнамицин; ленограстим; лентинана сульфат; лептолстатин; летрозол; лейкоз-ингибирующий фактор; лейкоцитарный альфа-интерферон; лейпролид+эстроген+прогестерон; лейпрорелин; левамизол; лиарозол; аналог линейного полиамина; липофильный дисахарид-пептид; липофильные соединения платины; лиссоклинамид 7; лобаплатин; ломбрицин; лометрексол; лонидамин; лозоксантрон; ловастатин; локсорибин; луртотекан; лютеция тексафирин; лизофиллин; литические пептиды; майтанзин; манностатин А; маримастат; мазопрокол; маспин; ингибиторы матрилизина; ингибиторы матриксной металлопротеиназы; меногарил; мербарон; метерелин; метиониназу; метоклопрамид; ингибиторы МГР; мифепристон; милтефозин; миримостин; мисматч двухцепочечную РНК; митогуазон; митолактол; аналоги митомицина; митонафид; митотоксин фактор роста фибробластов-сапорин; митоксантрон; мафаротен; малграмостим; моноклональное антитело, человеческий хорионический гонадотропин; монофосфорильный липид А+кк клеточной стенки миобактерии; мопидамол; ингибитор гена множественной лекарственной резистентности; терапию на основе множественного опухолевого супрессора 1; противораковый агентмустард; микапероксид В; экстракт клеточных стенок микобактерий; мириапорон; Ν-ацетилдиналин; Νзамещенные бензамиды; нафарелин; нагрестип; налоксон+пентазоцин; напавин; нафтерпин; нартограстим; недаплатин; неморубицин; неридроновую кислоту; нейтральную эндопептидазу; нилутамид; низамицин; модуляторы оксида азота; антиоксиданты нитроксида; нитруллин; Ο6-бензилгуанин; октереотид; окиценон; олигонуклеотиды; онапристон; ондансетрон; орацин; пероральный индуктор цитокинов; ормаплатин; осатерон; оксалиплатин; оксауномицин; палауамин; пальмитоулризоксин; памидроновую кислоту; панакситриол; паномифен; парабактин; пазеллиптин; пегаспаргазу; пелдизин; пентозан полисульфат натрия; пентостатин; пентрозол; перфлуброн; перфосфамид; периллиловый спирт; феназиномицин; фенилацетат; ингибиторы фосфатаз; пикибинил; пилокарпина гидрохлорид; пирарубицин; пиритрексим; плацетин А; плацетин В; ингибитор активатора плазминогена; комплексы платины; соединения платины; комплекс платины с триамином; порфимер натрий; порфиромицин; преднизон; пропил бис-акридон; простагландин 12; ингибиторы протеасом; иммунный модулятор на основе белка А; ингибитор протеинкиназы С; ингибиторы протеинкиназы С, микроалгал; ингибиторы протеинтирозинфосфатаз; ингибиторы пуриннуклеозид-фосфорилаз; пиразолакридин; конъюгат полиоксиэтилена с пиридоксилированным гемоглобином; антагонисты га£; ралтитрексед; рамосетрон; ингибиторы гак фарнезилпротеинтрансферазы; ингибиторы гак; ингибитор гак-САР; деметилированный ретеллиптин; этидронат рения Ке 186; ризоксин; рибозимы; КП ретинамид; роглетимид; рохитукин; ромуртид; роквинимекс; рубигинон В1; рубоксил; сафингол; саинтопин; 8агС№и; саркофитол А; сарграмостим; миметики 8άί 1; семустин; ингибитор старения 1; смысловые олигонуклеотиды; ингибиторы сигнальной трансдукции; модуляторы сигнальной трансдукции; одноцепочечный антиген-связывающий белок; сизофиран; собузоксан; борокаптат
- 58 032463 натрия; фенилацетат натрия; солверол; соматомедин-связывающий белок; сонермин; спарфосовую кислоту; спикамицин Б; спиромустин; спленопентин; спонгистатин 1; скваламин; ингибитор стволовых клеток; ингибиторы деления стволовых клеток; стипиамид; ингибиторы стромелизина; сульфонизин; гиперактивный антагонист вазоактивного интестинального пептида; сурадисту; сурамин; сваинсонин; синтетические гликозаминогликаны; таллимустин; тамоксифен метиодид; тауромустин; тазаротен; текогалан натрия; тегафур; теллурапирилий; ингибиторы теломераз; темопорфин; темозоломид; тенипозид; тетрахлордекаоксид; тетразомин; талибластин; тиокоралин; тромбопоэтин; миметик тромбопоэтина; тималфазин; агонист рецептора тимопоэтина; тимотринан; тиреоидный стимулирующий гормон; олово этиопурпурин; тирапазамин; титаноцен бихлорид; топсентин; торемифен; фактор тотипотентности стволовых клеток; ингибиторы трансляции; третиноин; триацетилуридин; трицирибин; триметрексат; трипторелин; трописетрон; туростерид; ингибиторы тирозинкиназ; тирофостины; ингибиторы ИВС; убенимекс; ингибирующий фактор роста урогенитального синуса; антагонисты урокиназного рецептора; вапреотид; вариолин В; векторную систему, эритроцитная генная терапия; веларезол; верамин; вердины; вертепорфин; винорельбин; винксалтин; витаксин; ворозол; занотерон; зениплатин; зиласкорб; и зиностатин стималамер.
Еще другие противоопухолевые препараты, которые можно применять в комбинации с соединением ингибитора Вкк, включают алкилирующие агенты, антиметаболиты, природные продукты или гормоны, например азотистые иприты (например, мехлорэтамин, циклофосфамид, хлорамбуцил и т. д.), алкилсульфонаты (например, бусульфан), нитрозомочевины (например, кармустин, ломустин и т. д.) или триазены (декарбазин, и т.д.). Примеры антиметаболитов включают, но без ограничения, аналог фолиевой кислоты (например, метотрексат) или аналоги пиримидина (например, цитарабин), аналоги пурина (например, меркаптопурин, тиогуанин, пентостатин).
Примеры алкилирующих агентов, которые можно применять в комбинации с соединением ингибитора В!к, включают, но без ограничения, азотистые иприты (например, мехлорэтамин, циклофосфамид, хлорамбуцил, мелфалан и т.д.), этиленимин метилмеламины (например, гексаметилмеламин, тиотепа), алкилсульфонаты (например, бусульфан), нитрозомочевины (например, кармустин, ломустин, семустин, стрептозоцин и т.д.) или триазены (декарбазин и т.д.). Примеры антиметаболитов включают, но без ограничения, аналоги фолиевой кислоты (например, метотексат) или аналоги пиримидина (например, фторурацил, флоксоуридин, цитарабин), аналоги пурина (например, меркаптопурин, тиогуанин, пентастатин).
Примеры противоопухолевых препаратов, которые действуют путем ареста клеток в С2-М фазах благодаря стабилизированным микротрубочкам и могут применяться в комбинации с соединением ингибитора Вкк, включают, но без ограничения, следующие имеющиеся в продаже лекарственные средства и лекарственные средства, находящиеся в стадии разработки: эрбулозол (также известный как В-55104), доластатин 10 (также известный как ББ8-10 и Ы8С-376128), мивобулина изетионат (также известный как С1-980), винкристин, Ы8С-639829, дискодермолид (также известный как NVР-XX-А-296), АВТ-751 (АЬЬоЕ, также известный как Е-7010), алторгиртины (такие как алторгиртин А и алторгиртин С), спонгистатины (такие как спонгистатин 1, спонгистатин 2, спонгистатин 3, спонгистатин 4, спонгистатин 5, спонгистатин 6, спонгистатин 7, спонгистатин 8 и спонгистатин 9), цемадотина гидрохлорид (также известный как ЬИ-103793 и Ы8С-Б-669356), эпотилоны (такие как эпотилон А, эпотилон В, эпотилон С (также известные как дезоксиэпотилон А или бЕроА), эпотилон Б (также называемый КО8-862, бЕроВ) и дезоксиэпотилон В), эпотилон Е, эпотилон Р, эпотилон В Ы-оксид, эпотилон А Ы-оксид, 16-аза-эпотилон В, 21-аминоэпотилон В (также известный как ВМ8-310705), 21-гидроксиэпотилон Б (также известный как дезоксиэпотилон Р и бЕроР), 26-фторэпотилон), ауристатин РЕ (также известный как Ы8С-654663), соблидотин (также известный как Т2Т-1027), Ь8-4559-Р (РЕагтас1а, также известный как Ь8-4577), Ь84578 (Ркагтас1а, также известный как Ь8-477-Р), Ь8-4477 (РЕагтааа), Ь8-4559 (РЕагтата), ВРВ-112378 (АуеиЕк), винкристина сульфат, ΌΖ-3358 (БаЕсЫ), РВ-182877 (Рицката, также известный как \У89885В), С8-164 (Такеба), С8-198 (Такеба), КАК-2 (Ниидапаи Асабету ок 8с1епсек), В8Р-223651 (ВА8Р, также известный как +N-651 и Ьи-223651), 8АН-49960 (ЬШу/ЫоуагЕк), 8ΒΖ-268970 (ЬШу/ЫоуагЕк), АМ97 (Агтаб/Куо^а Накко), АМ-132 (Агтаб), АМ-138 (Агтаб/Куо^а Накко), 1БЫ-5005 (1пбепа), криптофицин 52 (также известный как ΕΥ-355703), АС-7739 (АциотоЮ, также известный как АУЕ-8063А и С839.НС1), АС-7700 (А_)1пото1о, также известный как АУЕ-8062, АУЕ-8062А, С8-39-Ь-8ег.НС1, и ВРВ258062А), витилевуамид, тубулизин А, канаденсол, центауреидин (также известный как Ы8С-106969), Т138067 (Ти1апк, также известный как Т-67, ТЬ-138067 и Т1-138067), СОВВА-1 (Рагкег НидЕек 1икЕ1и1е, также известный как ББЕ-261 и ^РО-261), Н10 (Капкак 8(а(е ИтуегкИу), Н16 (Капкак 81а1е ИтуегкИу), онкоцидин А1 (также известный как ВТО-956 и Б1МЕ), ББЕ-313 (Рагкег НидЕек 1пкЕ1и1е), фуджианолид В, лаулималид, 8РА-2 (Рагкег НидЕек 1пкЕ1и1е), 8РА-1 (Рагкег НидЕек 1пкЕ1и1е, также известный как 8Р1КЕТ-Р), 3-1ААВИ (Су1окке1е1оп/М1. 8та1 8сЕоо1 ок Мебюте, также известный как МР-569), наркозин (также известный как Ы8С-5366), наскапин, Б-24851 (Ак1а Мебюа), А-105972 (АЬЬоЕ), гемиастерлин, 3ВААВи (СуЮкке1еЮп/М1. 8та1 8сЕоо1 ок Мебюте, также известный как МР-191), ТМРЫ (Лахопа 8(а(е Цшуегкбу), ванадоцен ацетилацетонат, Т-138026 (Ти1апк), монсатрол, инаноцин (также известный как Ы8С-698666), 3-1ААВЕ (Су1окке1еЮп/М1. 8ша1 8сЕоо1 ок Мебюте), А-204197 (АЬЬоЕ), Т-607 (Тшапк, также известный как Т-900607), ВРВ-115781 (АуепЕк), элеутеробины (такие как десметилэлеутеробин,
- 59 032463 дезаэтилелеутеробин, изоэлеутеробин А и Ζ-элеутеробин), карибаэозид, карибаэолин, галихондрин В, Ό64131 (Айа МеШса), 0-68144 (Айа МеШса), диазонамид А, А-293620 (АЬЬо11), ΝΓΙ-2350 (Ыегеик), таккалонолид А, ТИВ-245 (Ауепйк), А-259754 (АЬЬой), диозостатин, (-)-фенилагистин (также известный как Ы8СЬ-96Р037), 0-68838 (Айа МеШса), 0-68836 (Айа МеШса), миосеверин В, 0-43411 ^еп1ап8, также известный как 0-81862), А-289099 (АЬЬой), А-318315 (АЬЬой), НТ1-286 (также известный как 8РА-110, трифторацетатная соль) (\Ууе(11), 0-82317 ^еп1ап8), 0-82318 ^еп1ап8), 8С-12983 (ΝΟ), резверастатин фосфат натрия, ВΡК-ΟΥ-007 (Ыайопа1 Неайй Кекеагсй 1пййи1е8) и 88К-250411 (8апой).
Биомаркеры
В определенных вариантах осуществления в настоящем документе раскрыт способ лечения гематологической злокачественной опухоли у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий: (а) проведение у субъекта первой терапии, содержащей количество необратимого ингибитора В1к, достаточное для мобилизации множества клеток из злокачественной опухоли; и (Ь) получение профиля биомаркеров для популяции клеток, изолированных из множества клеток. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В1к является достаточным для индукции лимфоцитоза множества клеток из злокачественной опухоли.
В некоторых вариантах осуществления профиль экспрессии биомаркеров используется для диагностики, установления прогноза или создания прогностического профиля гематологической злокачественной опухоли. В некоторых вариантах осуществления профиль биомаркеров указывает на экспрессию биомаркера, уровень экспрессии биомаркера, мутации в биомаркере или присутствие биомаркера.
В некоторых вариантах осуществления профиль биомаркеров указывает, вовлечена ли В1копосредованная передача сигнала в развитие злокачественной опухоли. В некоторых вариантах осуществления профиль биомаркеров указывает, вовлечена ли В1к-опосредованная передача сигнала в выживаемость гематологической злокачественной опухоли.
В некоторых вариантах осуществления профиль биомаркеров указывает, что В1к-опосредованная передача сигнала не вовлечена в развитие гематологической злокачественной опухоли. В некоторых вариантах осуществления профиль биомаркеров указывает, что В1к-опосредованная передача сигнала не вовлечена в выживаемость гематологической злокачественной опухоли.
В некоторых вариантах осуществления профиль биомаркеров указывает, вовлечена ли ВСКопосредованная передача сигнала в развитие гематологической злокачественной опухоли. В некоторых вариантах осуществления профиль биомаркеров указывает, вовлечена ли ВСК-опосредованная передача сигнала в выживаемость гематологической злокачественной опухоли.
В некоторых вариантах осуществления профиль биомаркеров указывает, что ВСК-опосредованная передача сигнала не вовлечена в развитие гематологической злокачественной опухоли. В некоторых вариантах осуществления профиль биомаркеров указывает, что ВСК-опосредованная передача сигнала не вовлечена в выживаемость гематологической злокачественной опухоли.
В некоторых вариантах осуществления гематологическая злокачественная опухоль представляет собой хронический лимфоцитарный лейкоз (СЬЬ). В некоторых вариантах осуществления гематологическая злокачественная опухоль представляет собой диффузную В-крупноклеточную лимфому (ОЬВСЬ). В некоторых вариантах осуществления гематологическая злокачественная опухоль представляет собой диффузную В-крупноклеточную лимфому, АВС-подтипа (АВС-ОЬВСЬ). В некоторых вариантах осуществления гематологическая злокачественная опухоль представляет собой лимфому из клеток мантийной зоны (МСЬ). В некоторых вариантах осуществления гематологическая злокачественная опухоль представляет собой фолликулярную лимфому (РЬ).
В некоторых вариантах осуществления биомаркер представляет собой любой цитогенетический маркер, молекулярный маркер клеточной поверхности или белок, или маркер РНК экспрессии. В некоторых вариантах осуществления биомаркер представляет собой: ΖАΡ70; 1(14,18); β-2-микроглобулин; мутационный статус р53; мутационный статус АТМ; йе1(17)р; ие1(11)с]; йе1(6)ц; СО5; СО11с; СО19; СО20; СО22; СО25; СО38; СО103; СО138; экспрессию секретируемого поверхностного или цитоплазматического иммуноглобулина; мутационный статус УН; или их комбинацию.
В некоторых вариантах осуществления способ, кроме того, включает проведение у субъекта второй терапии на основе профиля биомаркеров. В некоторых вариантах осуществления способ, кроме того, включает отсутствие введения необратимого ингибитора В1к на основе профиля биомаркеров. В некоторых вариантах осуществления способ, кроме того, включает отсутствие проведения второй терапии на основе профиля биомаркеров. В некоторых вариантах осуществления способ, кроме того, включает прогнозирование эффективности терапии на основе профиля биомаркеров.
В определенных вариантах осуществления способы включают диагностику, установление прогноза или создание прогностического профиля гематологической злокачественной опухоли на основе экспрессии или присутствия определенных биомаркеров. В других вариантах осуществления способы, кроме того, включают разделение популяций пациентов на основе экспрессии или присутствия определенных биомаркеров в пораженных лимфоцитах. В еще других вариантах осуществления способы, кроме того, включают определение терапевтического средства для субъекта на основе экспрессии или присутствия определенных биомаркеров в пораженных лимфоцитах. В еще других вариантах осуществления спосо
- 60 032463 бы, кроме того, включают прогнозирование ответа на терапию у субъекта на основе экспрессии или присутствия определенных биомаркеров в пораженных лимфоцитах.
В определенных аспектах в настоящем документе обеспечены способы диагностики, установления прогноза или создания прогностического профиля гематологической злокачественной опухоли у субъекта, включающие: (а) введение ингибитора В!к субъекту в количестве, достаточном для того, чтобы вызвать увеличение или появление в крови субпопуляции лимфоцитов; и (Ь) определение экспрессии или присутствия одного или более биомаркеров из одной или более субпопуляций лимфоцитов; при этом экспрессия или присутствие одного или более биомаркеров используется для диагностики гематологической злокачественной опухоли, установления прогноза гематологической злокачественной опухоли или создания прогностического профиля гематологической злокачественной опухоли. В одном варианте осуществления увеличение или появление в крови субпопуляции лимфоцитов определяется с помощью иммунофенотипирования. В другом варианте осуществления увеличение или появление в крови субпопуляции лимфоцитов определяется с использованием флуоресцентно-активированной клеточной сортировки (РАС8).
В других аспектах в настоящем документе обеспечены способы разделения популяций пациентов, имеющих гематологическую злокачественную опухоль, включающие: (а) введение ингибитора В!к субъекту в количестве, достаточном для того, чтобы вызвать увеличение или появление в крови субпопуляции лимфоцитов; и (Ь) определение экспрессии или присутствия одного или более биомаркеров из одной или более субпопуляций лимфоцитов; при этом экспрессия или присутствие одного или более биомаркеров используется для разделения пациентов для лечения гематологической злокачественной опухоли. В одном варианте осуществления увеличение или появление в крови субпопуляции лимфоцитов определяется с помощью иммунофенотипирования. В другом варианте осуществления увеличение или появление в крови субпопуляции лимфоцитов определяется с использованием флуоресцентно-активированной клеточной сортировки (РАС8).
В еще других аспектах в настоящем документе обеспечены способы определения терапевтического средства у субъекта, имеющего гематологическую злокачественную опухоль, включающие: (а) введение ингибитора В!к субъекту в количестве, достаточном для того, чтобы вызвать увеличение или появление в крови субпопуляции лимфоцитов; и (Ь) определение экспрессии или присутствия одного или более биомаркеров из одной или более субпопуляций лимфоцитов; при этом экспрессия или присутствие одного или более биомаркеров используется для определения терапевтического средства для лечения гематологической злокачественной опухоли. В одном варианте осуществления увеличение или появление в крови субпопуляции лимфоцитов определяется с помощью иммунофенотипирования. В другом варианте осуществления увеличение или появление в крови субпопуляции лимфоцитов определяется с использованием флуоресцентно-активированной клеточной сортировки (РАС8).
В еще других аспектах в настоящем документе обеспечены способы прогнозирования ответа на терапию у субъекта, имеющего гематологическую злокачественную опухоль, включающие: (а) введение ингибитора В!к субъекту в количестве, достаточном для того, чтобы вызвать увеличение или появление в крови субпопуляции лимфоцитов; и (Ь) определение экспрессии или присутствия одного или более биомаркеров из одной или более субпопуляций лимфоцитов; при этом экспрессия или присутствие одного или более биомаркеров используется для прогнозирования ответа субъекта на терапию гематологической злокачественной опухоли. В одном варианте осуществления увеличение или появление в крови субпопуляции лимфоцитов определяется с помощью иммунофенотипирования. В другом варианте осуществления увеличение или появление в крови субпопуляции лимфоцитов определяется с использованием флуоресцентно-активированной клеточной сортировки (РАС8).
В определенных аспектах в настоящем документе обеспечены способы диагностики, установления прогноза или создания прогностического профиля гематологической злокачественной опухоли у субъекта, включающие определение экспрессии или присутствия одного или более биомаркеров из одной или более субпопуляций лимфоцитов у субъектов, которые получили дозу ингибитора В!к, при этом экспрессия или присутствие одного или более биомаркеров используется для диагностики гематологической злокачественной опухоли, установления прогноза гематологической злокачественной опухоли или создания прогностического профиля гематологической злокачественной опухоли. В одном варианте осуществления доза ингибитора В!к является достаточной для того, чтобы вызвать увеличение или появление в крови субпопуляции лимфоцитов, определенное с помощью иммунофенотипирования. В другом варианте осуществления определение экспрессии или присутствия одного или более биомаркеров из одной или более субпопуляций лимфоцитов, кроме того, включает выделение, обнаружение или измерение одного или более типов лимфоцитов. В еще другом варианте осуществления ингибитор В!к представляет собой обратимый или необратимый ингибитор.
В других аспектах в настоящем документе обеспечены способы разделения популяции пациентов, имеющих гематологическую злокачественную опухоль, включающие определение экспрессии или присутствия одного или более биомаркеров из одной или более субпопуляций лимфоцитов у субъекта, который получил дозу ингибитора В!к, при этом экспрессия или присутствие одного или более биомаркеров используется для разделения пациентов для лечения гематологической злокачественной опухоли. В од
- 61 032463 ном варианте осуществления доза ингибитора В1к является достаточной для того, чтобы вызвать увеличение или появление в крови субпопуляции лимфоцитов, определенное с помощью иммунофенотипирования. В другом варианте осуществления определение экспрессии или присутствия одного или более биомаркеров из одной или более субпопуляций лимфоцитов, кроме того, включает выделение, обнаружение или измерение одного или более типов лимфоцитов. В еще другом варианте осуществления ингибитор В1к представляет собой обратимый или необратимый ингибитор.
В еще других аспектах в настоящем документе обеспечены способы определения терапевтического средства для субъектов, имеющих гематологическую злокачественную опухоль, включающие определение экспрессии или присутствия одного или более биомаркеров из одной или более субпопуляций лимфоцитов у субъекта, который получил дозу ингибитора В!к, при этом экспрессия или присутствие одного или более биомаркеров используется для определения терапевтического средства для лечения гематологической злокачественной опухоли. В одном варианте осуществления доза ингибитора В1к является достаточной для того, чтобы вызвать увеличение или появление в крови субпопуляции лимфоцитов, определенное с помощью иммунофенотипирования. В другом варианте осуществления определение экспрессии или присутствия одного или более биомаркеров из одной или более субпопуляций лимфоцитов, кроме того, включает выделение, обнаружение или измерение одного или более типов лимфоцитов. В еще другом варианте осуществления ингибитор В1к представляет собой обратимый или необратимый ингибитор.
В еще других аспектах в настоящем документе обеспечены способы прогнозирования ответа на терапию у субъектов, имеющих гематологическую злокачественную опухоль, включающие определение экспрессии или присутствия одного или более биомаркеров из одной или более субпопуляций лимфоцитов у субъекта, который получил дозу ингибитора В!к, при этом экспрессия или присутствие одного или более биомаркеров используется для прогнозирования ответа субъекта на терапию гематологической злокачественной опухоли. В одном варианте осуществления доза ингибитора В1к является достаточной для того, чтобы вызвать увеличение или появление в крови субпопуляции лимфоцитов, определенное с помощью иммунофенотипирования. В другом варианте осуществления определение экспрессии или присутствия одного или более биомаркеров из одной или более субпопуляций лимфоцитов, кроме того, включает выделение, обнаружение или измерение одного или более типов лимфоцитов. В еще другом варианте осуществления ингибитор В1к представляет собой обратимый или необратимый ингибитор.
В настоящем документе предполагается, что в некоторых вариантах осуществления могут быть использованы любые биомаркеры, связанные с гематологическими злокачественными опухолями. Эти биомаркеры включают любую биологическую молекулу (обнаруженную в крови, других жидкостях организма или тканях) или любую хромосомную аберрацию, которая является признаком гематологической злокачественной опухоли. В определенных вариантах осуществления биомаркеры включают, но без ограничения, ЮТ, СО5, СП11с, СП19, СП20, СОЗЗ, СП79а, СП15, СП30, СП38, СП138, СП103, СП25, ΖΛΡ-70, мутационный статус р53, мутационный статус АТМ, мутационный статус 1дУН, делеции хромосомы 17 (бе1 17р), делеции хромосомы 6 (бе1 6ц), делеции хромосомы 7 (бе1 7ф, делеции хромосомы 11 (бе1 11ц), трисомию 12 хромосомы, делеции хромосомы 13 (бе1 13 ц), хромосомную транслокацию 1(11:14), хромосомную транслокацию 1(14:18), СЭ10, СЭ23, бета-2-микроглобулин, экспрессию Ьс1-2, СЭ9, присутствие Не1юоЬас1ег ру1оп, СЭ154/СЭ40, Ак1, ΝΕ-κΡΑΫΝΈ М1ог, ЕЯК, МАРК, и экспрессию 8гс тирозинкиназы. В определенных вариантах осуществления биомаркеры включают ΖΛΡ-70, СЭ5, 1(14;18), СЭ38, β-2-микроглобулин, мутационный статус р53, мутационный статус АТМ, делецию хромосомы 17р, делецию хромосомы 11ц, поверхностный или цитоплазматический иммуноглобулин, СО138, СО25, делецию 6ц, СО19, СЭ20, СЭ22, СО11с, СО 103, делецию хромосомы 7ц, мутационный статус УН и их комбинацию.
В определенных вариантах осуществления субпопуляции пациентов, имеющие гематологическую злокачественную опухоль или предраковое состояние, которые будут иметь положительный результат после общеизвестного лечения, идентифицированы путем скрининга кандидатных субъектов на один или несколько клинически значимых биомаркеров, известных в данной области. Любой клинически значимый прогностический маркер, известный специалистам в данной области, может быть использован. В некоторых вариантах осуществления субпопуляция включает пациентов, имеющих хронический лимфоцитарный лейкоз (СЬЬ), и клинически значимые прогностические маркеры, представляющие особый интерес, включают, но без ограничения, ΖАР-70, СЭ38, бета-2-микроглобулин и цитогенетические маркеры, например, мутационный статус р53, мутационный статус АТМ, делеции хромосом, такие как делеция хромосомы 17р и делеция хромосомы 11ц, все из которых являются клинически значимыми прогностическими маркерами для этого заболевания.
ΖΛΡ-70 представляет собой тирозинкиназу, которая связана с зета субъединицей Т-клеточного антигенного рецептора (ТСЯ) и играет ключевую роль в активации и развитии Т-клеток (Сйап е1 а1. (1992) Се11 71:649-662). ΖАР-70 подвергается фосфорилированию по тирозину и является важной в опосредовании сигнальной трансдукции после стимуляции ТСЯ. Было продемонстрировано, что сверхэкспрессия или конститутивная активация тирозинкиназ вовлечена в развитие ряда злокачественных опухолей,
- 62 032463 включая лейкоз и некоторые типы солидных опухолей. Например. повышенные уровни экспрессии РНК 2АР-70 являются прогностическим маркером хронического лимфоцитарного лейкоза (СЬЬ) (Кокеита1б е! а1. (2001) 1. Ехр. Меб. 194:1639-1647). 2АР-70 экспрессируется в Т-клетках и естественных клеткахкиллерах. но неизвестно об экспрессии 2АР-70 в нормальных В-клетках. Однако 2АР-70 экспрессируется при высоких уровнях в В-клетках у пациентов с хроническим лимфоцитарным лейкозом/мелкоклеточной лимфоцитарной лимфомой (СЬЬ/8ЬЬ) и. в частности. в подгруппе пациентов с СЬЬ. которые имеют тенденцию к более агрессивному клиническому течению. которое обнаруживается у пациентов с СЬЬ/8ЬЬ с немутированными генами 1д (\У|е81пег е! а1. (2003) В1ооб 101: 4944-4951; заявка на патент США № 20030203416). Благодаря корреляции между уровнями экспрессии 2АР-70 и мутационным статусом гена 1д. 2АР-70 можно применять в качестве прогностического индикатора для идентификации тех пациентов. которые вероятно имеют болезнь тяжелой степени (высокий уровень 2АР-70. немутированные гены 1д). и которые. следовательно. являются кандидатами на агрессивную терапию.
СЭ38 представляет собой молекулу сигнальной трансдукции. а также экзофермент. катализирующий синтез и распад циклической АДФ-рибозы (сАЭРК). Экспрессия СЭ38 присутствует на высоких уровнях в В-клетах-предшественниках костного мозга. подавлена в дремлющих нормальных В-клетках и затем реэкспрессирована в герминально дифференцированных клетках плазмы (Сатрапа е! а1. (2000) Скет. 1ттипо1. 75:169-188). СЭ38 является надежным прогностическим индикатором в В-СЬЬ. с экспрессией СЭ38. в целом указывающей на менее благоприятный исход (Э'Агепа е! а1. (2001) Ьеик. Ьутркота 42:109; Эе1 Рое!а е! а1. (2001) В1ооб 98:2633; Энид е! а1. (2002) Ьеикет1а 16:30; 1Ьгак1т е! а1. (2001) В1ооб 98:181; Эеадко е! а1. (2003) В1ооб 102:2146-2155). Неблагоприятные клинические признаки связи с экспрессией СЭ38 включают позднюю стадию заболевания. слабый ответ на химиотерапию. необходимость более коротких сроков начала лечения и более короткое время выживания (Эеад1ю е! а1. (2003) В1ооб 102:2146-2155). Вначале наблюдалась сильная корреляция между экспрессией СЭ38 и мутацией гена 1дУ. при этом пациенты. имеющие немутированные гены V. показывали более высокое процентное содержание клеток СЭ38.8ир.+ В-СЬЬ. чем пациенты с мутированными генами V (Эат1е е! а1. (1999) В1ооб 94:1840-1847). Однако последующие исследования показали. что экспрессия СЭ38 не всегда коррелирует с перестройкой генов 1дУ (НатЬ1ш е! а1. (2002) В1ооб 99:1023; ТЬипЬегд е! а1. (2001) В1ооб 97: 1892).
р53 представляет собой ядерный фосфопротеин. который действует в качестве супрессора опухоли. р53 дикого типа вовлечен в регуляцию клеточного роста и деления. р53 связывается с ДНК. стимулируя выработку белка (р21). который взаимодействует со стимулирующим клеточное деление белком (сбк2). Когда р21 связан с сбк2. клетка блокирована от вступления на следующую стадию клеточного деления. Мутантный р53 не способен к эффективному связыванию с ДНК. предотвращая. таким образом. р21 от действия в качестве сигнала остановки для клеточного деления. что приводит к неконтролируемому клеточному делению и формированию опухоли. Кроме того. р53 регулирует индукцию программируемой клеточной гибели (апоптоз) в ответ на повреждение ДНК. клеточный стресс или аберрантную экспрессию некоторых онкогенов. Было доказано. что экспрессия р53 дикого типа в некоторых раковых клеточных линиях восстанавливает контроль супрессии роста (Сакеу е! а1. (1991) Опсодепе 6:1791-1797; Такакакк1 е! а1. (1992) Сапсег Кек. 52:734-736). Мутации в р53 обнаружены в большинстве типов опухолей. включая опухоли толстой кишки. молочной железы. легких. яичника. мочевого пузыря и многих других органов. Было обнаружено. что мутации р53 ассоциированы с лимфомой Беркитта. В-клеточным острым лимфобластным лейкозом Ь3-типа. хроническим В-клеточным лимфоцитарным лейкозом (Оа1бапо е! а1. (1991) Ргос. Ыа!1. Асаб. 8сг И.8.А. 88:5413-5417). Было также обнаружено. что аномалии р53 ассоциируются с В-клеточным пролимфоцитарным лейкозом (Ьепк е! а1. (1997) В1ооб 89:2015-2023). Ген р53 расположен на коротком плече хромосомы 17 в 17р13.105-р12.
В-2-микроглобулин представляет собой внеклеточный белок. который нековалентно связан с альфацепью главного комплекса гистосовместимости класса I (МНС). В-2-микроглобулин детектируется в сыворотке. и является неблагоприятным прогностическим индикатором в СЬЬ (Кеайпд е! а1. (1998) В1ооб 86:606а) и лимфоме Ходжкина (Скгопо\\ък| е! а1. (2002) Сапсег 95:2534-2538). В-2-микроглобулин применяется в клинической практике в отношении лимфопролиферативных заболеваний. включая лейкоз. лимфому и множественную миелому. при этом уровни в сыворотке β-2-микроглобулина связаны с нагрузкой опухолевыми клетками. прогнозом и активностью заболевания (Ва!а111е е! а1. (1983) Вг. 1. Наета!о1. 55:439-447; АтПек е! а1. (1992) Кет. Штекк СНп. 44:215-220). В-2-микроглобулин также является эффективным в стадировании пациентов с миеломой (Ра8С|иа1еШ е! а1. (1991) Еиг. 1. Сапсег 27:1123-1126).
Цитогенетические аберрации могут также применяться в качестве маркеров для создания прогностического профиля гематологической злокачественной опухоли. Например. хромосомные аномалии обнаружены у большого процента пациентов с СЬЬ и помогают при прогнозировании течения СЬЬ. Например. делеция 17р является показателем агрессивного развития заболевания. Кроме того. известно. что пациенты с СЬЬ с хромосомной делецией 17р или мутацией в р53. или и те и другие слабо отвечают на химиотерапевтические средства и ритуксимаб. Аллельная потеря на хромосоме 17р также может являться эффективным прогностическим маркером в колоректальном раке. при этом пациенты с делецией 17р ассоциируются с повышенной тенденцией распространения заболевания в колоректальном раке (КЫпе е!
- 63 032463 а1. (1994) Сапсег 73:28-35).
Делеции длинного плеча хромосомы 11 (11д) являются одной из наиболее частых структурных перестроек хромосом в различных типах лимфопролиферативных нарушений. Пациенты с СЬЬ с делецией хромосомы 11с.| и возможными АТМ мутациями имеют слабую выживаемость по сравнению с пациентами без этого дефекта или делеции 17р. Кроме того, делеция 11с.| часто сопровождается обширным вовлечением лимфатических узлов (БоНпег е! а1. (1997) В1ооб 89:2516-2522). Эта делеция также идентифицирует пациентов, которые имеют высокий риск персистирующего течения заболевания после терапии высокими дозами и аутотрансплантации.
Мутированный ген атаксии телеангиэкстазии (АТА4) представляет собой опухоль-супрессорный ген, который вовлечен в арест клеточного цикла, апоптоз и восстановление двухнитиевых разрывов ДНК. Он обнаружен на хромосоме 11. Мутации АТМ ассоциированы с повышенным риском рака молочной железы у женщин с семейной историей рака молочной железы (С11епе\зх-Тгепс11 е! а1. (2002) 1. Наб. Сапсег 1пз!. 94:205-215; Тбогз!епзоп е! а1. (2003) Сапсег Вез. 63:3325-3333) и/или рака молочной железы с ранним началом (Паб е! а1. (1999) Сепез Сбготозотез Сапсег 26:286-294; Тегаока е! а1. (2001) Сапсег 92:479-487). Существует также высокая частота связи рабдомиосаркомы с мутацией/делецией гена АТМ (Ζ1ι;πι§ е! а1. (2003) Сапсег Вю1. ТНег. 1:87-91).
Способы детекции хромосомных аномалий у пациента хорошо известны в данной области (смотри, например, Сипео е! а1. (1999) В1ооб 93:1372-1380; Бобпег е! а1. (1997) В1ооб 89:2516-2522). Способы измерения мутированных белков, таких как АТМ, хорошо известны в данной области (смотри, например, Ви!сб е! а1. (2004) С1т. СНет. 50: 2302-2308).
Таким образом, биомаркеры, которые оценивают в способах, описанных здесь, включают белки клеточной выживаемости и апоптотические белки, описанные выше, а также белки, вовлеченные в сигнальные пути, связанные с гематологической злокачественной опухолью. Определение экспрессии или присутствия может быть на уровне белка или нуклеиновой кислоты. Таким образом, биомаркеры включают эти белки и гены, кодирующие эти белки. Когда детекция проводится на уровне белка, биомаркерный белок содержит полипептид полной длины или его любой детектируемый фрагмент, и может включать варианты этих белковых последовательностей. Аналогичным образом, когда обнаружение осуществляют на нуклеотидном уровне, биомаркерная нуклеиновая кислота включает ДНК, содержащую кодирующую последовательность полной длины, фрагмент кодирующей последовательности полной длины, варианты этих последовательностей, например естественным образом возникающие варианты или сплайс-варианты, или комплемент такой последовательности. Биомаркерные нуклеиновые кислоты также включают РНК, например мРНК, содержащую последовательность полной длины, кодирующую представляющий интерес биомаркерный белок, фрагмент представляющей интерес последовательности РНК полной длины или варианты этих последовательностей. Биомаркерные белки и биомаркерные нуклеиновые кислоты также включают варианты этих последовательностей. Под фрагментом предполагается часть полинуклеотида или часть аминокислотной последовательности и, таким образом, белок кодируется. Полинуклеотиды, которые являются фрагментами биомаркерной нуклеотидной последовательности, обычно содержат по меньшей мере 10, 15, 20, 50, 75, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300 или 1400 соседних нуклеотидов или вплоть до числа нуклеотидов, присутствующих в биомаркерном полинуклиотиде полной длины, раскрытом здесь. Фрагмент биомаркерного полинуклеотида будет, как правило, кодировать по меньшей мере 15, 25, 30, 50, 100, 150, 200 или 250 соседних аминокислот, или вплоть до общего числа аминокислот, присутствующих в биомаркерном белке полной длины по данном изобретению. Вариант означает, по-существу, сходные последовательности. Как правило, варианты конкретного биомаркера изобретения будут иметь по меньшей мере примерно 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентичности последовательности с биомаркером, как определено с помощью программ выравнивания последовательностей, известных в данной области.
Как указано выше, любой способ, известный в данной области, может быть использован в способах для определения экспрессии или присутствия биомаркера, описанного здесь. Уровни биомаркеров, циркулирующих в образцах крови, полученных от кандидатного субъекта, могут быть измерены, например, с помощью ЕЬ18А, радиоиммуноанализа (В1А), электрохемилюминесценции (ЕСЬ), Вестерн-блоттинга, мультиплексных технологий или других аналогичных способов. Экспрессия биомаркеров на клеточной поверхности может быть измерена, например, с помощью проточной цитометрии, иммуногистохимии, Вестерн-блоттинга, иммунной преципитации, выбора магнитного микроносителя и количественного определения клеток, экспрессирующих любые из этих маркеров клеточной поверхности. Уровни экспрессии РНК биомаркеров могут быть измерены с помощью ВТ-РСВ, Οΐ-РСР, микрочипов, Нозернблоттинга или других аналогичных методов.
Как отмечено ранее, определение экспрессии или присутствия представляющего интерес биомаркера на белковом или нуклеотидном уровне может быть выполнено с использованием любого метода детекции, известного специалистам в данной области. Под детекцией экспрессии или детекцией уровня понимается определение уровня экспрессии или присутствия биомаркерного белка или гена в биологическом образце. Таким образом, детекция экспрессии охватывает ситуации, когда определено, что
- 64 032463 биомаркер не экспрессируется, не экспрессируется детектируемым образом, экспрессируется на низком уровне, экспрессируется на нормальном уровне или сверхэкспрессируется.
В определенных аспектах обеспеченного в настоящем документе способа одну или более субпопуляций лимфоцитов изолируют, детектируют или измеряют. В определенных вариантах осуществления одну или более субпопуляций лимфоцитов изолируют, детектируют или измеряют с использованием методов иммунофенотипирования. В других вариантах осуществления одну или более субпопуляций лимфоцитов изолируют, детектируют или измеряют с использованием методов сортировки флуоресцентно-активированных клеток (РАС8).
В определенных вариантах осуществления способов, обеспеченных здесь, один или более биомаркеров включают 2АР-70, СЭ5, !(14;18), СЭ38, β-2-микроглобулин, мутационный статус р53, мутационный статус АТМ, делецию хромосомы 17р, делецию хромосомы 11ц, поверхностный или цитоплазматический иммуноглобулин, СЦ138, СЦ25, делецию 6ц, СЦ19, СЭ20, СЭ22, СЦ11с, СЭ 103, делецию хромосомы 7ц, мутационный статус УН или их комбинацию.
В определенных аспектах описанных здесь способов стадия определения предусматривает определение экспрессии или присутствия комбинации биомаркеров. В определенных вариантах осуществления комбинация биомаркеров представляет собой СЭ19 и СЭ5, или СЭ20 и СЭ5.
В определенных аспектах экспрессия или присутствие этих различных биомаркеров и любых клинически значимых прогностических маркеров в биологическом образце может быть детектировано на уровне белка или нуклеиновой кислоты с использованием, например, иммуногистохимических методов или методов на основе нуклеиновой кислоты, таких как гибридизация ΐπ κίΐιι и ВТ-РСВ. В одних вариантах осуществления детекцию экспрессии или присутствия одного или более биомаркеров проводят с помощью метода амплификации нуклеиновой кислоты, метода секвенирования нуклеиновой кислоты, методом, в котором используется микрочип с нуклеиновой кислотой (ДНК и РНК), или методом гибридизации ш К1!и с использованием меченых специфических зондов.
В других вариантах осуществления определение экспрессии или присутствия одного или более биомаркеров проводят посредством гель-электрофореза. В одном варианте осуществления определение проводят посредством переноса в мембрану и гибридизации со специфическим зондом.
В других вариантах осуществления определение экспрессии или присутствия одного или более биомаркеров проводят методом диагностической визуализации.
В еще других вариантах осуществления определение экспрессии или присутствия одного или более биомаркеров проводят с помощью детектируемого твердого субстрата. В одном варианте осуществления детектируемый твердый субстрат представляет собой парамагнитные наночастицы, функционализированные антителами.
В другом аспекте в настоящем документе обеспечены способы детекции или измерения резидуальной лимфомы после курса терапии для принятия решения о необходимостим продолжения или прекращения лечения, или изменения одного терапевтического средства на другое, включающие определение экспрессии или присутствия одного или более биомаркеров из одной или более субпопуляций лимфоцитов у субъекта, при этом курс терапии представляет собой терапию ингибитором В!к.
Способы детекции экспрессии биомаркеров, описанных здесь, и необязательно цитокиновых маркеров в тестируемых и контрольных биологических образцах включают любые способы, которые определяют количество или присутствие этих маркеров на уровне нуклеиновой кислоты или на уровне белка. Такие способы хорошо известны в данной области и включают, но без ограничения, Вестерн-блоттинг, Нозерн-блоты, ЕЫ8А, иммуннопреципитацию, иммунофлуоресценцию, проточную цитометрию, иммуногистохимию, методики гибридизации нуклеиновой кислоты, способы обратной транскрипции нуклеиновой кислоты и способы амплификации нуклеиновой кислоты, В конкретных вариантах осуществления экспрессию биомаркера детектируют на уровне белка с использованием, например, антител, которые направлены против специфических биомаркерных белков. Эти антитела могут быть использованы в различных методах, таких как Вестерн-блот-анализ, ЕЫ8А, мультиплексные технологии, иммунопреципитация или методы иммуногистохимического исследования. В некоторых вариантах осуществления детекцию цитокиновых маркеров выполняют с помощью электрохемилюминесценции (ЕСЬ).
Любые средства предполагаются для специфической идентификации и количественной оценки биомаркера (например, биомаркера, биомаркера клеточной выживаемости или пролиферации, биомаркера апоптоза, биомаркера В!к-опосредованного сигнального пути) в биологическом образце кандидатного субъекта. Так, в некоторых вариантах осуществления уровень экспрессии в биологическом образце представляющего интерес биомаркерного белка детектируют с помощью связывающего белка, способного к специфическому взаимодействию с этим биомаркерным белком или его биологически активным вариантом. Предпочтительно, могут быть использованы меченые антитела, их связывающие части или другие партнеры связывания. Слово метка при использовании здесь относится к детектируемому соединению или композиции, которая конъюгирована непосредственно или опосредованно с антителом таким образом, чтобы генерировать «меченое» антитело. Метка может быть детектируемой сама по себе (например, радиоизотопные метки или флуоресцентные метки) или, в случае ферментативной метки, может катализировать химическое изменение соединения субстрата или композиции, которая является детектируемой.
- 65 032463
Антитела для детекции биомаркерного белка могут быть моноклонального или поликлонального происхождения,или могут быть получены синтетическими или рекомбинантными методами. Количество комплексного белка, например количество биомаркерного белка, ассоциированного со связывающим белком, например антителом, которое специфически связывается с биомаркерным белком, определяют с использованием стандартных методов детекции белка, изестных специалистам в данной области. Подробный обзор дизайна иммунологического анализа, теории и протоколов можно найти в многочисленных материалах в данной области (смотри, например, АикиЬе1 е! а1., ебк. (1995) Сштеп! Рго!осо1к ίη Мо1еси1аг Вю1оду) (бгеепе РиЬбкЫпд апб ^11еу-1п!егкс1епсе, ΝΥ)); Собдап е! а1., ебк. (1994) Сштеп! Рго!осо1к ίη 1ттипо1оду (1обп ^11еу & 8опк, 1пс., Νο\ν Υο^к, Ν.Υ.).
Выбор маркера, используемого для мечения антител, будет изменяться в зависимости от применения. Однако выбор маркера может быть легко осуществлен специалистом в данной области. Эти меченые антитела можно использовать в иммуноанализах, а также в гистологических исследованиях для детекции присутствия любого представляющего интерес биомаркера или белка. Меченые антитела могут быть поликлональными или моноклональными. Кроме того, антитела, предназначенные для детекции представляющего интерес белка, могут быть мечеными радиоактивным атомом, ферментом, хромофорным или флуоресцентным фрагментом, или колориметрической меткой, как описано где-либо еще в настоящем документе. Выбор метки также будет зависеть от желательных пределов детекции. Ферментные анализы (ЕЬ18А) обычно обеспечивают детекцию окрашенного продукта, образованного путем взаимодействия меченного ферментом комплекса с субстратом фермента. Радионуклиды, которые могут служить в качестве детектируемых меток, включают, например, Ι-131, Ι-123, Ι-125, Υ-90, Ке-188, Ке-186, А!211, Си-67, В1-212 и Рб-109. Примеры ферментов, которые могут служить в качестве детектируемых меток, включают, но без ограничения, пероксидазу хрена, щелочную фосфатазу, бета-галактозидазу и глюкоза-6-фосфат-дегидрогеназу. Хромофорные фрагменты включают, но без ограничения, флуоресцеин и родамин. Антитела могут быть конъюгированы с этими метками способами, известными в данной области. Например, ферменты и хромофорные молекулы могут быть конъюгированы с антителами при помощи связывающих агентов, таких как диальдегиды, карбодиимиды, дималеимиды и т.п. Альтернативно, конъюгирование может происходить посредством пары лиганд-рецептор. Примерами пригодных пар лиганд-рецептор являются биотин-авидин или биотин-стрептавидин и антитело-антиген.
В определенных вариантах осуществления экспрессию или присутствие одного или более биомаркеров, или других представляющих интерес белков в биологическом образце, например образце физиологической жидкости, определяют с помощью радиоммуноанализов или иммуноанализов со связанным ферментом (ЕЫ8А), конкурентно-связывающих иммуноанализов со связанным ферментом, дот-блот анализа (смотри, например, Рготеда Рго!осо1к апб Аррбсабопк 6шбе (2пб еб.; Рготеда Согрогабоп (1991)), вестерн-блоттинга (смотри, например, 8атЬгоок е! а1. (1989) Мо1еси1аг С1ошпд, А ЬаЬога!огу Мапиа1, ^1. 3, СЬар!ег 18 (Со1б 8рппд НагЬог ЬаЬога!огу Ргекк, Р1а1№1ете, Ν.Υ.)), хроматографии, предпочтительно высокоэффективной жидкостной хроматографии (НРЬС), или других анализов, известных в данной области. Таким образом, анализы на детекцию могут выключать стадии, такие как, но без ограничения, иммуноблоттинг, иммунодиффузию, иммуноэлектрофорез или иммунопреципитацию.
В определенных других вариантах осуществления способы по изобретению полезны для идентификации и лечения гематологических злокачественных опухолей, включая злокачественные опухоли, перечисленные выше, которые являются рефрактерными (то есть устойчивые или стали устойчивыми) к онкотерапевтическим терапиям первой линии.
Экспрессия или присутствие одного или более биомаркеров, описанных здесь, может быть также определено на уровне нуклеиновой кислоты. Методы оценки экспрессии на основе нуклеиновой кислоты хорошо известны в данной области и включают, например, определение уровня биомаркерной мРНК в биологическом образце. Во многих методах детекции экспрессии используется выделенная РНК. Любой способ выделения РНК, который не идет вразрез с выделением мРНК, может быть использован для очистки РНК из клеток крови (смотри, например, АикиЬе1 е! а1., еб. (1987-1999) Сштеп! Рго!осо1к ίη Мо1еси1аг Вю1оду (Зойп ^11еу & 8опк, Νονν Уогк). Дополнительно, большое количество образцов тканей может быть легко обработано с использованием методов, хорошо известных специалистам в данной области, таких как, например, одностадийный способ выделения РНК, описанный в патенте США № 4843155.
Таким образом, в некоторых вариантах осуществления детекцию биомаркера или другого представляющего интерес белка оценивают на уровне нуклеиновой кислоты с использованием зондов нуклеиновой кислоты. Термин зонд нуклеиновой кислоты относится к любой молекуле, которая способна к селективному связыванию со специально предназначенной для этого целевой молекулой нуклеиновой кислоты, например нуклеотидным транскриптом. Зонды могут быть синтезированы специалистом в данной области или получены из подходящих биологических препаратов. Зонды могут быть специально сконструированы для мечения, например, радиоактивной меткой, флуоресцентной меткой, ферментом, хемилюминесцентной меткой, колориметрической меткой или другими метками или маркировками, которые описаны выше или известны в данной области. Примеры молекул, которые могут быть использованы в качестве зондов, включают, но без ограничения, РНК и ДНК.
Например, выделенная мРНК может быть использована в анализах гибридизации или амплифика
- 66 032463 ции, которые включают, но без ограничения, анализ по Саузерну и Нозерн-анализ, полимеразные цепные реакции и микрочипы с использованием зондов. Один метод детекции уровней мРНК включает контактирование выделенной мРНК с молекулой нуклеиновой кислоты (зондом), которая может гибридизоваться с мРНК, кодируемой детектируемым геном. Зонд в виде нуклеиновой кислоты может представлять собой, например, полноразмерную кДНК или ее участок, такой как олигонуклеотид, содержащий по меньшей мере 7, 15, 30, 50, 100, 250 или 500 нуклеотидов и достаточный для специфической гибридизации в жестких условиях с мРНК или геномной ДНК, кодирующей биомаркер, биомаркер, описанный здесь выше. Гибридизация мРНК с зондом указывает на экспрессию биомаркера или другого представляющего интерес целевого белка.
В одном варианте осуществления мРНК иммобилизована на твердой подложке и контактирует с зондом, например, после проведения электрофореза выделенной мРНК в агарозном геле и переноса мРНК из геля на мембрану, такую как нитроцеллюлозная мембрана. В альтернативных вариантах осуществления зонд(ы) иммобилизованы на твердой подложке, и мРНК контактирует с зондом(ами), например, в массиве генных чипов. Опытный специалист легко адаптирует известные способы детекции мРНК для использования в детекции уровня мРНК, кодирующей биомаркеры или другие представляющие интерес белки.
Альтернативный метод определения уровня представляющей интерес мРНК в образце включает процесс амплификации нуклеиновой кислоты, например, с помощью КТ-РСК (см., например, патент США № 4683202), лигазную цепную реакцию (Вагапу (1991) Ргос. №11. Асаб. 8с1. И8А 88:189-193), самоподдерживающуюся репликацию последовательностей (Сиа1еШ е1 а1. (1990) Ргос. №11. Асаб. 8с1. И8А 87:1874-1878), систему транскрипционной амплификации (К^ой е1 а1. (1989) Ргос. №11. Асаб. 8с1. И8А 86:1173-1177), использование 0-Бета Репликазы (Ыхагб| е1 а1. (1988) Вю/Тесйпо1о§у 6:1197), репликацию по типу катящегося кольца (патент США № 5854033) или любые другие методы амплификации нуклеиновой кислоты с последующим детектированием амплифицированных молекул с использованием методов, хорошо известных специалистам в данной области. Эти схемы детектирования особенно полезны для детекции молекул нуклеиновой кислоты, если такие молекулы присутствуют в очень низких количествах. В конкретных аспектах изобретения экспрессию биомаркера оценивают с помощью количественной реакции КТ-РСК (то есть системы ТацМап® 8ук1ет).
Уровни экспрессии представляющей интерес РНК могут отслеживаться с использованием мембраны-блота (например такой, которая используется в гибридизационном анализе, таком как Нозерн-анализ, дот-анализ и т.п.), или с помощью микролунок, пробирок, гелей, гранул или волокон (или любой твердой подложки, содержащей связанные нуклеиновые кислоты). См. патенты США №№ 5770722, 5874219, 5744305, 5677195 и 5445934, которые включены здесь путем осылки. Детекция экспрессии может также включать использование зондов в виде нуклеиновых кислот в растворе.
В одном варианте осуществления изобретения для определения экспрессии или присутствия одного или более биомаркеров используются микрочипы. Микрочипы являются особенно подходящими для этой цели по причине воспроизводимости между различными экспериментами. ДНК-микрочипы обеспечивают один способ одновременного измерения уровней экспрессии большого числа генов. Каждый чип состоит из репродуцируемого изображения зондов захвата, закрепленных на твердой подложке. Меченная РНК или ДНК гибридизируется с комплементарными зондами на чипе и затем детектируется путем лазерного сканирования. Интенсивности гибридизации для каждого зонда на чипе определяются и переводятся в количественную величину, представляющую относительные уровни экспрессии генов. См., патент США № 6040138, 5800992 и 6020135, 6033860 и 6344316, которые включены здесь путем отсылки. Высокоплотные олигонуклеотидные массивы являются особенно полезными для определения профиля генной экспрессии для большого числа РНК в образце.
Методы синтеза этих чипов с использованием способов механического синтеза описаны, например, в патенте США 5384261, включенном здесь путем отсылки в полном объеме. Хотя плоская поверхность чипа является предпочтительной, чип может быть изготовлен на поверхности фактически любой формы или даже на множестве поверхностей. Чипы могут представлять собой пептиды или нуклеиновые кислоты на гранулах, гелях, полимерных поверхностях, волокнах, таких как оптические волокна, стекло или любом другом подходящем субстрате, смотри патент США №№ 5770358, 5789162, 5708153, 6040193 и 5800992, каждый из которых включен полностью здесь для всех целей. Чипы могут быть упакованы таким образом, чтобы обеспечить диагностику или другие манипуляции комплексного устройства. См., например, патенты США 5856174 и 5922591, включенные здесь путем отсылки.
Фармацевтические композиции/лекарственные формы
Фармацевтические композиции могут быть формулированы стандартными способами с использованием одного или более физиологически приемлемых носителей, включая вспомогательные вещества и добавки, которые способствуют переработке активных соединений в препараты, которые можно применять фармацевтически. Надлежащая лекарственная форма зависит от выбранного способа введения. Любые хорошо известные методы, носители и вспомогательные вещества могут быть использованы в качестве пригодных и как понимается в данной области. Краткое описание фармацевтических композиций, описанных здесь, можно найти, например, в Кетшд1оп: Тйе 8с1епсе апб Ргасйсе о£ Рйагтасу, №пе1ееп1й
- 67 032463
Еб (Еайоп, Ра.: Маск РиЫЫипд Сотрапу, 1995); Иооуег, бо11п Е., Кеттдкоп'з Ркагтасеибса1 8аепсе5, Маск РиЫЫипд Со., Еайоп, Реппзуката 1975; ЫЬегтап, И.А. апб Ьасктап, Ь., Еб§., Р11агтасеибса1 Эо5аде Рогтз, Магсе1 Иескег, №\ν Уогк, Ν.Υ., 1980; и Ркагтасеибса1 Эо^аде Рогтз апб Эгид Ие1кегу 8у§кет§, 8еуеп111 Еб. (Ырртсой ^1Шат8 & ^11кт§1999), содержание которых включено здесь путем отсылки в полном объеме.
Фармацевтическая композиция, использованная в данном контексте, относится к смеси соединения, описанного здесь, такого как, например, соединения Формулы Ό или второго агента с другими химическими компонентами, такими как носители, стабилизаторы, разбавители, диспергирующие агенты, суспендирующие агенты, загустители и/или вспомогательные вещества. Фармацевтическая композиция облегчает введение соединения в огранизм. При осуществлении на практике способов лечения или применения, обеспеченных здесь, терапевтически эффективные количества соединений, описанных здесь, вводят в виде фармацевтической композиции млекопитающему, имеющему заболевание, нарушение или состояние, подлежащее лечению. Предпочтительно млекопитающим является человек. Терапевтически эффективное количество может изменяться в широком диапазоне в зависимости от степени тяжести заболевания, возраста и относительного состояния здоровья субъекта, активности применяемого соединения и других факторов. Соединения можно применять отдельно или в комбинации с одним или более терапевтическими агентами в качестве компонентов смесей.
В определенных вариантах осуществления композиции могут также включать один или более регулирующих рН агентов или буферных веществ, включая кислоты, такие как уксусная, борная, лимонная, молочная, фосфорная и соляная кислоты; основания, такие как гидроксид натрия, фосфат натрия, борат натрия, цитрат натрия, ацетат натрия, лактат натрия и трис-гидроксиметиламинометан; и буферы, такие как циктрат/декстроза, бикарбонат натрия и хлорид аммония. Такие кислоты, основания и буферы включены в количестве, необходимом для поддержания рН композиции в приемлемом диапазоне.
В других вариантах осуществления композиции также могут включать одну или более солей в количестве, необходимом для приведения осмолярности композиции в приемлемый диапазон. Такие соли включают соли, содержащие катионы натрия, калия или аммония, и хлорид-, цитрат-, аскорбат-, борат-, фосфат-, бикарбонат-, сульфат-, тиосульфат- или бисульфит-анионы; пригодные соли включают хлорид натрия, хлорид калия, тиосульфат натрия, бисульфит натрия и сульфат аммония.
Термин фармацевтическая комбинация, используемый здесь, означает продукт, который получен в результате смешивания или объединения более чем одного активного ингредиента, и включает как фиксированные, так и нефиксированные комбинации активных ингредиентов. Термин фиксированная комбинация означает, что активные ингредиенты, например описанное здесь соединение и сопутствующий агент, вводят пациенту одновременно в форме единого целого или дозы. Термин нефиксированная комбинация означает, что активные ингредиенты, например, описанное здесь соединение и сопутствующий агент, вводят пациенту в виде отдельных единиц одновременно, параллельно или последовательно без конкретных ограничений по времени, при этом такое введение обеспечивает эффективные уровни двух соединений в организме пациента. Последнее также относится к коктейльной терапии, например, введению трех или более активных ингредиентов.
Фармацевтические лекарственные формы, описанные здесь, можно вводить субъекту различными способами, включая, но без ограничения, пероральный, парентеральный (например, внутривенный, подкожный, внутримышечный), интраназальный, буккальный, местный, ректальный или трансдермальный способы введения. Фармацевтические композиции, описанные здесь, включают, но без ограничения, водные жидкие дисперсии, самоэмульгирующиеся дисперсии, твердые растворы, липосомальные дисперсии, аэрозоли, твердые лекарственные формы, порошки, лекарственные формы с немедленным высвобождением, лекарственные формы с контролируемым высвобождением, быстроплавящиеся лекарственные формы, таблетки, капсулы, пилюли, лекарственные формы с отсроченным высвобождением, лекарственные формы с продленным высвобождеием, лекарственные формы с импульсным высвобождением, лекарственные формы, состоящие из множества частиц, и смешанные лекарственные формы с немедленным и контролируемым высвобождением.
Фармацевтические композиции, включая описанное здесь соединение, могут быть изготовлены стандартными способами, такими как, в качестве примера только, обычное смешивание, растворение, грануляция, дражирование, растирание в порошок, эмульгирование, инкапсулирование, захват или прессование.
Противовспенивающие агенты уменьшают пенообразование во время обработки, которое может привести к коагуляции водных дисперсий, пузырькам в конечной оболочке или в целом ухудшить процесс обработки. Иллюстративные противовспенивающие агенты включают силиконовые эмульсии или сорбит сесквиолеат.
Антиоксиданты включают, например, бутилированный гидрокситолуол (ВНТ), аскорбат натрия, аскорбиновую кислоту, метабисульфит натрия и токоферол. В определенных вариантах осуществления антиоксиданты повышают химическую стабильность, если это необходимо.
В определенных вариантах осуществления композиции, обеспеченные здесь, могут также включать один или более консервантов для ингибирования микробной активности. Пригодные консерванты вклю
- 68 032463 чают содержащие ртуть вещества, такие как мерфен и тиомерсал; стабилизированный диоксид хлора; и четвертичные аммониевые соединения, такие как бензалкония хлорид, цетилметиламмония бромид и цетилпиридиния хлорид.
Лекарственные формы, описанные здесь, могут быть улучшены с помощью антиоксидантов, металл-хелатирующих агентов, тиолсодержащих соединений и других общих стабилизирующих агентов. Примеры таких стабилизирующих агентов включают, но без ограничения: (а) примерно от 0.5 до примерно 2% мас./об. глицерина, (Ь) примерно от 0.1 до примерно 1% мас./об. метионина, (с) примерно от 0.1 до примерно 2% мас./об. монотиоглицерина, (й) примерно от 1 до примерно 10 мМ ЕОТА, (е) примерно от 0.01 до примерно 2% мас./об. аскорбиновой кислоты, (Г) от 0.003 до примерно 0.02% мас./об. полисорбата-80, (д) от 0.001 до примерно 0.05% мас./об. полисорбата-20, (1) аргинин, (ί) гепарин, (ί) сульфат декстрана, (к) циклодекстрины, (1) пентозанполисульфат и другие гепариноиды, (т) бивалентные катионы, такие как катионы магния и цинка; или (п) их комбинации.
Связующие вещества наделяют когезивными свойствами и включают, например, альгиновую кислоту и ее соли; производные целлюлозы, такие как карбоксиметилцеллюлоза, метилцеллюлоза (например, Ме!йосе1®), гидроксипропилметилцеллюлоза, гидроксиэтилцеллюлоза, гидроксипропилцеллюлоза (например, К1исе1®), этилцеллюлоза (например, Е1йосе1®) и микрокристаллическая целлюлоза (например, Ау1се1®); микрокристаллическую декстрозу; амилозу; алюмосиликат магния; кислоты полисахаридов; бентониты; желатин; сополимер поливинилпирролидона и винилацетата; кросповидон; повидон; крахмал; прежелатинизированный крахмал; трагант, декстрин, сахар, такой как сахароза (например, Όίрас®), глюкоза, декстроза, патока, маннит, сорбит, ксилол (например, Ху1йаЬ) и лактоза; природную или синтетическую камедь, такую как аравийская камедь, трагантовая камедь, гхатти камедь, слизь шелухи (1каро1 йиккк), поливинилпирролидон (например, Ро1уу1йопе® СЬ, КоШйоп® СЬ, Ро1ур1акйопе® ХЬ-10), арабогалактан лиственницы, Уеедит®, полиэтиленгликоль, воски, альгинат натрия и т.п.
Носитель или вещество-носитель включает любые обычно применяемые в фармацевтике вспомогательные вещества и должны быть выбраны на основе совместимости с соединениями, раскрытыми здесь, такими как соединения любой Формулы Ό и второй агент, и характеристик профиля высвобождения желаемой лекарственной формы. Примеры веществ-носителей включают, например, связующие вещества, суспендирующие агенты, дезинтегрирующие агенты, наполнители, поверхностно-активные вещества, солюбилизаторы, стабилизаторы, лубриканты, смачивающие агенты, разбавители и т.п.
Фармацевтически приемлемые вещества-носители могут включать, но без ограничения, аравийскую камедь, желатин, коллоидный диоксид кремния, глицерофосфат кальция, лактат кальция, мальтодекстрин, глицерин, силикат магния, поливинилпирролидон (РУР), холестерин, сложные эфиры холестерина, казеинат натрия, соевый лецитин, таурохолевую кислоту, фосфотидилхолин, хлорид натрия, трикальцийфосфат, дикалийфосфат, целлюлозу и конъюгаты целлюлозы, сахара, натрия стеароиллактилат, каррагенан, моноглицерид, диглицерид, прежелатинизированный крахмал и т.п. См., например, Веттд1оп: Тйе 8с1епсе апй Ргасйсе о£ Рйагтасу, №пе1ееп111 Ей (Еак!оп, Ра.: Маск РиЫйЫпд Сотрапу, 1995); Нооуег, 1о1т Е., ВеттдФп'к Рйагтасеийса1 8с1епсек, Маск РиЫййтд Со., Еак!оп, Реппкукаша 1975; ЫЬегтап, Н.А. апй Ьасйтап, Ь., Ейк., Рйагтасеийса1 Цокаде Рогтк, Магсе1 Цескег, Ыете Υо^к, Ν.Υ., 1980; и Рйагтасеи!юа1 Ьокаде Рогтк апй Эгид ЬеПуегу 8ук!етк, 8еуеп1й Ей. (Ырртсо!! ^1Шатк & ХУйкиъ 1999).
Диспергирующие агенты и/или модулирующие вязкость агенты включают вещества, которые контролируют диффузию и однородность лекарственного средства в жидкой среде, или в способе грануляции, или в способе смешивания. В некоторых вариантах осуществления такие агенты также облегчают эффективность нанесения оболочки или эрозии матрицы. Примеры агентов, способствующих диффузии/диспергирующих агентов включают, например, гидрофильные полимеры, электролиты, Тетееп -60 или -80, РЕС, поливинилпирролидон (РУР; коммерчески известный как Р1акйопе®) и диспергирующие агенты на основе углеводов, такие как, например, гидроксипропилцеллюлозы (например, НРС, НРС-8Ь и НРС-Ь), гидроксипропилметилцеллюлозы (например, НРМС К100, НРМС К4М, НРМС К15М и НРМС К100М), натрийкарбоксиметилцеллюлоза, метилцеллюлоза, гидроксиэтилцеллюлоза, гидроксипропилцеллюлоза, фталат гидроксипропилметилцеллюлозы, ацетат-стеарат гидроксипропилметилцеллюлозы (НРМСА8), некристаллическая целлюлоза, алюмосиликат магния, триэтаноламин, поливиниловый спирт (РУА), сополимер винилпирролидона и винилацетата (8630), полимер на основе 4-(1,1,3,3тетраметилбутил)фенола с этиленоксидом и формальдегидом (также известный как тилоксапол), полоксамеры (например, Р1игошск Р68®, Р88® и Р108®, которые являются блок-сополимерами этиленоксида и пропиленоксида); и полоксамины (например, Те!гошс 908®, также известный как Ро1охатте 908®, который является тетрафункциональным блоксополимером, полученным при последовательном добавлении пропиленоксида и этиленоксида к этилендиамину (ВА8Р Согрогайоп, Рагыррапу, N.1.)), поливинилпирролидон К12, поливинилпирролидон К17, поливинилпирролидон К25 или поливинилпирролидон К30, сополимер поливинилпирролидона и винилацетата (8-630), полиэтиленгликоль, например полиэтиленгликоль может иметь молекулярную массу примерно от 300 до примерно 6000, или примерно от 3350 до примерно 4000, или примерно от 7000 до примерно 5400, натрийкарбоксиметилцеллюлозу, метилцел
- 69 032463 люлозу, полисорбат-80, альгинат натрия, камеди, такие как, например, трагантовая камедь, аравийская камедь, гуаровая камедь, ксантаны, включая ксантановую камедь, сахара, целлюлозы, такие как, например, натрийкарбоксиметилцеллюлоза, метилцеллюлоза, натрийкарбоксиметилцеллюлоза, полисорбат-80, альгинат натрия, полиэтоксилированный сорбитан монолаурат, повидон, карбомеры, поливиниловый спирт (РУА), альгинаты, хитозаны и их комбинации. Пластификаторы, такие как целлюлоза или триэтилцеллюлоза, также могут быть использованы в качестве диспергирующих агентов. Диспергирующие агенты, особенно полезные в липосомальных дисперсиях и самоэмульгирующихся дисперсиях, представляют собой димиростоилфосфатидилхолин, природный фосфатидилхолин из яиц, природный фосфатидилглицерин из яиц, холестерин и изопропилмиристат.
Комбинации одного или более агентов, способствующих эрозии, с одним или более агентов, способствующих диффузии, могут быть также использованы в композициях по настоящему изобретению.
Термин разбавитель относится к химическим соединениям, которые используют для разбавления представляющего интерес соединения перед доставкой. Разбавители можно также использовать для стабилизации соединений, так как они могут обеспечить более стабильное окружение. Соли, растворенные в буферных растворах (которые также могут обеспечить контроль или поддержание рН), используются в качестве разбавителей в данной области, включая, но без ограничения, забуференный фосфатом солевой раствор. В определенных вариантах осуществления разбавители увеличивают объем композиции для содействия прессованию или создания массы, достаточной для гомогенного перемешивания для наполнения капсул. Такие соединения включают, например, лактозу, крахмал, маннит, сорбит, декстрозу, микрокристаллическую целлюлозу, такую как Ау1се1®, двухосновный фосфат кальция, дикальция фосфат дигидрат; трикальцийфосфат, фосфат кальция; безводную лактозу, высушенную распылением лактозу, прежелатинизированный крахмал, прессуемый сахар, такой как Όί-Рас® (Атйаг); маннит, гидроксипропилметилцеллюлозу, ацетат-стеарат гидроксипропилметилцеллюлозы, разбавители на основе сахарозы, кондитерский сахар; моноосновный моногидрат сульфата кальция, дигидрат сульфата кальция; тригидрат лактата кальция, декстраты; гидролизованные твердые вещества злаков, амилозу; порошковую целлюлозу, карбонат кальция; глицин, каолин; маннит, хлорид натрия; инозитол, бентонит и т.п.
Термин дезинтегрировать включает как растворение, так и диспергирование лекарственной формы при контакте с желудочно-кишечной жидкостью. Дезинтегрирующие агенты или дезинтеграторы облегчают распад или дезинтеграцию вещества. Примеры дезинтегрирующих агентов включают крахмал, например крахмал природного происхождения, такой как крахмал зерновых или картофельный крахмал, прежелатинизированный крахмал, такой как, например, Ыа!1опа1 1551 или Атуе1®, или натрия крахмалгликолят, такой как Рготоде1® или Ехр1о!аЬ®, целлюлозу, такую как древесные продукты, метилкристаллическая целлюлоза, например, Ау1се1®, Ау1се1® РН101, Ау1се1® РН102, Ау1се1® РН105, Е1сета® Р100, Етсосе1®, У1уасе1®, Мшд Т1а® и 8о1ка-Р1ос®, метилцеллюлоза, кроскармеллоза или поперечносшитая целлюлоза, такая как поперечно-сшитая натрийкарбоксиметилцеллюлоза (Ас-Э1-8о1®), поперечно-сшитая карбоксиметилцеллюлоза или поперечно-сшитая кроскармеллоза, поперечно-сшитый крахмал, такой как натрия крахмалгликолят; поперечно-сшитый полимер, такой как кросповидон, поперечно-сшитый поливинилпирролидон, альгинат, такой как альгиновая кислота или соль альгиновой кислоты, такая как альгинат натрия, глину, такую как Уеедит® НУ (алюмосиликат магния), камедь, такую как агар, гуаровая камедь, камедь плодов рожкового дерева, камедь карайи, пектин или трагантовая камедь, натрия крахмалгликолят, бентонит, природную губку, поверхностно-активное вещество, смолу, такую как катионообменная смола, мякоть цитруса, натрия лаурилсульфат, натрия лаурилсульфат в комбинации с крахмалом и т.п.
Абсорбция лекарственного средства или абсорбция обычно относится к процессу транспорта лекарственного средства из области введения лекарственного средства через барьер в кровеносный сосуд или участок действия, например лекарственное средство движется из желудочно-кишечного тракта в портальную вену или лимфатическую систему.
Энтеросолюбильное покрытие представляет собой вещество, которое сохраняется, по существу, в неизменном виде в желудке, но растворяется и высвобождает лекарственное средство в тонкой кишке или толстой кишке. Как правило, энтеросолюбильное покрытие включает полимерное вещество, которое препятствует высвобождению в среде с низкими значениями рН в желудке, но которое ионизируется при более высоких значениях рН, обычно рН от 6 до 7 и, таким образом, растворяется в достаточной степени в тонкой кишке или толстой кишке с высвобождением там активного агента.
Вещества, способствующие эрозии включают вещества, которые регулируют эрозию конкретного вещества в желудочно-кишечной жидкости. Вещества, способствующие эрозии, в целом известны специалистам в данной области. Примеры веществ, способствующих эрозии, включают, в частности, гидрофильные полимеры, электролиты, белки, пептиды и аминокислоты.
Наполнители включают соединения, такие как лактоза, карбонат кальция, фосфат кальция, двузамещенный фосфат кальция, сульфат кальция, микрокристаллическая целлюлоза, порошковая целлюлоза, декстроза, декстраты, декстран, крахмалы, прежелатинизированный крахмал, сахароза, ксилит, лактитол, маннит, сорбит, хлорид натрия, полиэтиленгликоль и т.п.
- 70 032463
Вкусовые агенты и/или подсластители, применяемые в лекарственных формах, описанных здесь, включают, например, сироп акации, ацесульфам калия, алитам, анис, яблоко, аспартам, банан, баварские сливки, ягоды, черную смородину, ириски, цитрат кальция, камфору, карамель, вишню, вишню со сливками, шоколад, корицу, жевательную резинку, цитрус, цитрусовый пунш, цитрусовые сливки, сахарную вату, какао, колу, свежую вишню, свежий цитрус, цикламат, циламат, декстрозу, эвкалипт, эвгенол, фруктозу, фруктовый пунш, имбирь, глицирретинат, сироп солодки (лакрица), виноград, грейпфрут, мед, изомальт, лимон, лайм, лимон со сливками, моноаммоний глицирризинат (Μадηа8гееΐ®), мальтол, маннит, клен, алтей, ментол, мяту со сливками, смесь ягод, неогесперидин ОС, неотам, апельсин, грушу, персик, перечную мяту, перечную мяту со сливками, порошок Ргокгее!®, малину, рутбир, ром, сахарин, сафрол, сорбит, зеленую мяту, зеленую мяту со сливками, землянику, землянику со сливками, стевию, сукралозу, сахарозу, сахарин натрия, сахарин, аспартам, ацесульфам калия, маннит, талин, силитол, сукралозу, сорбит, швейцарские сливки, тагатозу, мндарин, тауматин, тутти-фрутти, ваниль, грецкий орех, арбуз, дикую вишню, гаультерию, ксилитол или любую комбинацию таких ароматизаторов, например анис-ментол, вишня-анис, корица-апельсин, вишня-шоколад, шоколад-мята, мед-лимон, лимон-лайм, лимон-мята, ментол-эвкалипт, апельсин-сливки, ваниль-мята и их смеси.
Лубриканты и глиданты представляют собой соединения, которые предотвращают, уменьшают или ингибируют слипание или трение веществ. Примеры лубрикантов включают, например, стеариновую кислоту, гидроксид кальция, тальк, натрия стеарилфумерат, углеводороды, такие как минеральное масло или гидрогенизированное растительное масло, такое как гидрогенизированное соевое масло (81его!ех®), высшие жирные кислоты и соли щелочных и щелочно-земельных металлов, таких как алюминий, кальций, магний, цинк, стеариновую кислоту, стеараты натрия, глицерин, тальк, воски, 8ΐеа^οгеΐ®, борную кислоту, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия, лейцин, полиэтиленгликоль (например, РБО4000) или метоксиполиэтиленгликоль, такой как Са^Ьοгаx™, олеат натрия, бензоат натрия, глицерилбегенат, полиэтиленгликоль, лаурилсульфат натрия, коллоидный кремнезем, такой как 8ν1οί6'^, СаЬ-0811®, крахмал, такой как зерновой крахмал, силиконовое масло, поверхностно-активное вещество и т.п.
Измеряемая концентрация в сыворотке или измеряемая концентрация в плазме описывает концентрацию в сыворотке крови или плазме крови, обычно измеряемую в мг, мкг или нг терапевтического агента на мл, дл или л сыворотки крови, абсорбированную в кровоток после введения. Измеряемые концентрации в плазме, использованные в данном контексте, обычно измеряются в нг/мл или мкг/мл.
Фармакодинамика относится к факторам, которые определяют биологический ответ, наблюдаемый в зависимости от концентрации лекарственного средства в месте действия.
Фармакокинетика относится к факторам, которые определяют достижение и поддержание соответствующей концентрации лекарственного средства в месте действия.
Пластификаторы представляют собой соединения, используемые для смягчения микроинкапсулирующего материала или пленочных покрытий с целью уменьшения их хрупкости. Пригодные пластификаторы включают, например, полиэтиленгликоли, такие как РΕ6 300, РΕ6 400, РΕ6 600, РΕ6 1450, РБО 3350 и РБО 800, стериновую кислоту, пропиленгликоль, олеиновую кислоту, триэтилцеллюлозу и триацетин. В некоторых вариантах осуществления пластификаторы могут также функционировать в качестве диспергирующих агентов или увлажняющих средств.
Солюбилизаторы включают соединения, такие как триацетин, триэтилцитрат, этилолеат, этилкаприлат, лаурилсульфат натрия, докузат натрия, витамин Е ΤΓΟ8, диметилацетамид, Ν-метилпирролидон, Ν-гидроксиэтилпирролидон, поливинилпирролидон, гидроксипропилметилцеллюлоза, гидроксипропилциклодекстрины, этанол, н-бутанол, изопропиловый спирт, холистерин, соли желчных кислот, полиэтиленгликоль 200-600, гликофурол, транскутол, пропиленгликоль и диметилизосорбид и т. п.
Стабилизаторы включают соединения, такие как любые антиокислительные агенты, буферы, кислоты, консерванты и т.п.
Стационарное состояние, использованное в данном контексте, представляет собой состояние, при котором количество введенного лекарственного средства равно количеству выведенного лекарственного средства в течение одного интервала между дозированиями, что приводит к плато или постоянному воздействию лекарственного средства в плазме.
Суспендирующие агенты включают соединения, такие как поливинилпирролидон, например поливинилпирролидон К12, поливинилпирролидон К17, поливинилпирролидон К25 или поливинилпирролидон К30, сополимеры винилпирролидона и винилацетата (8630), полиэтиленгликоль, например, полиэтиленгликоль может иметь молекулярную массу примерно от 300 до примерно 6000, или от примерно 3350 до примерно 4000, или от примерно 7000 до примерно 5400, натрийкарбоксиметилцеллюлоза, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, ацетат-стеарат гидроксиметилцеллюлозы, полисорбат80, гидроксиэтилцеллюлоза, альгинат натрия, камеди, такие как, например, трагантовая камедь и аравийская камедь, гуаровая камедь, ксантаны, включая ксантановую камедь, сахара, целлюлозы, такие как, например, натрийкарбоксиметилцеллюлоза, метилцеллюлоза, натрийкарбоксиметилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, гидроксиэтилцеллюлоза, полисорбат-80, альгинат натрия, полиэтоксилированный монолаурат сорбита, повидон и т.п.
- 71 032463
Поверхностно-активные вещества включают соединения, такие как лаурилсульфат натрия, докузат натрия, Твин-60 и -80, триацетин, витамин Е ТРС8, моноолеат сорбита, полиоксиэтилен сорбита моноолеат, полисорбаты, полаксомеры, соли желчных кислот, глцерина моностеарат, сополимеры этиленоксида и пропиленоксида, например Р1игошс® (ВАЗЕ), и т.п. Некоторые другие поверхностно-активные вещества включают эфиры полиоксиэтилена и глицеридов жирных кислот, и растительные масла, например полиоксиэтилен (60) гидрогенизированное касторовое масло; и алкиловые эфиры полиоксиэтилена и алкилфениловые эфиры, например октоксинол 10, октоксинол 40. В некоторых вариантах осуществления поверхностно-активные вещества могут быть включены для повышения физической стабильности или в других целях.
Повышающие вязкость агенты» включают, например, метилцеллюлозу, ксантановую камедь, карбоксиметилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, ацетат-стеарат гидроксипропилметилцеллюлозы, фталат гидроксипропилметилцеллюлозы, карбомер, поливиниловый спирт, альгинаты, аравийскую камедь, хитозаны и их комбинации.
Увлажняющие средства включают соединения, такие как олеиновая кислота, глицерина моностеарат, моноолеат сорбита, сорбитан монолаурат, триэтаноламин олеат, моноолеат полиоксиэтилен сорбита, монолаурат полиоксиэтилен сорбита, докузат натрия, олеат натрия, лаурилсульфат натрия, триацетин, Твин-80, витамин Е ТРС8, аммониевые соли и т.п.
Лекарственные формы
Композиции, описанные здесь, могут быть формулированы для введения пациенту любым подходящим способом, включая, но без ограничения, пероральный, парентеральный (например, внутривенный, подкожный или внутримышечный), буккальный, интраназальный, ректальный или трансдермальный способы введения. Термин субъект, использованный в данном контексте, означает животное, предпочтительно млекопитающее, включая человека или не являющееся человеком животное. Термины пациент и субъект могут использоваться взаимозаменяемо.
Кроме того, фармацевтические композиции, описанные здесь, которые включают соединение Формулы Ό или второго агента, могут быть формулированы в виде любой подходящей лекарственной формы, включая, но без ограничения, водные пероральные дисперсии, жидкости, гели, сиропы, элексиры, взвеси, суспензии и т.п, для перорального проглатывания пациентом, подлежащим лечению, твердые пероральные лекарственные формы, аэрозоли, лекарственные формы с контролируемым высвобождением, быстроплавящиеся лекарственные формы, шипучие лекарственные формы, лиофилизированные лекарственные формы, таблетки, порошки, пилюли, драже, капсулы, лекарственные формы с отсроченным высвобождением, лекарственные формы с продленным высвобождением, лекарственные формы с импульсным высвобождением, лекарственные формы, состоящие из множества частиц, и смешанные лекарственные формы с немедленным высвобождением и контролируемым высвобождением.
Фармацевтические препараты для перорального применения могут быть получены путем смешивания одного или более твердых вспомогательных веществ с одним или более из соединений, описанных здесь, необязательно с помолом полученной смеси и изготовлением смеси гранул после добавления пригодных добавок, если это необходимо, с получением таблеток или сердцевин драже. Пригодные вспомогательные вещества включают, например, наполнители, такие как сахара, включая лактозу, сахарозу, маннит или сорбит; целлюлозные компоненты, такие как, например, зерновой крахмал, пшеничный крахмал, рисовый крахмал, картофельный крахмал, желатин, трагантовую камедь, метилцеллюлозу, микрокристаллическую целлюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, натрий-карбоксиметилцеллюлозу; или другие, такие как: поливинилпирролидон (РУР или повидон) или фосфат кальция. При желании могут быть добавлены дезинтегрирующие агенты, такие как поперечно-сшитая кроскармеллоза натрия, поливинилпирролидон, агар или альгиновая кислота, или ее соль, такая как альгинат натрия.
Ядра драже снабжены пригодными оболочками. Для этой цели могут быть использованы концентрированные растворы сахара, которые необязательно могут содержать аравийскую камедь, тальк, поливинилпирролидон, карбопольный гель, полиэтиленгликоль и/или диоксид титана, лакировочный раствор и подходящие органические растворители или смеси растворителей. Красители или пигменты могут быть добавлены в покрытия таблеток или драже для идентификации или для характеристики различных комбинаций доз активного соединения.
Фармацевтические препараты, которые можно применять перорально, включают твердые капсулы, изготовленные из желатина, а также мягкие, герметично закрытые капсулы, изготовленные из желатина и пластификатора, такого как глицерин или сорбит. Твердые капсулы содержат активные ингредиенты в смеси с наполнителем, таким как лактоза, связующими веществами, такими как крахмалы, и/или лубрикантами, такими как тальк или стеарат магния, и, необязательно, стабилизаторами. В мягких капсулах активные соединения могут быть растворены или суспендированы в подходящих жидкостях, таких как нелетучие масла, жидкий парафин или жидкие полиэтиленгликоли. Дополнительно могут быть добавлены стабилизаторы. Все лекарственные формы для перорального введения должны быть в дозировках, пригодных для такого введения.
В некоторых вариантах осуществления твердые лекарственные формы, раскрытые здесь, могут быть представлены в форме таблетки (включая суспензионную таблетку, быстрорасплавляющуюся таб
- 72 032463 летку, распадающуюся под действием желчных кислот таблетку, быстрораспадающуюся таблетку, шипучую таблетку или каплет), пилюли, порошка (включая стерильный расфасованный порошок, порошок для самостоятельного дозирования или шипучий порошок), капсулы (включая мягкую и твердую капсулы, например, капсулы, изготовленные из желатина животного происхождения или НРМС растительного происхождения, или разбрызгивающиеся капсулы»), твердой дисперсии, твердого раствора, биоразлагаемой лекарственной формы, лекарственных форм с контролируемым высвобождением, лекарственных форм с импульсным высвобожеднием, лекарственных форм, состоящих из множества частиц, пеллет, гранул или аэрозоля. В других вариантах осуществления фармацевтическая лекарственная форма представлена в форме порошка. В еще других вариантах осуществления фармацевтическая лекарственная форма представлена в форме таблетки, включая, но без ограничения, быстроплавящиеся таблетки. Кроме того, фармацевтические лекарственные формы, описанные здесь, можно вводить в виде одной капсулы или в виде лекарственной формы, состоящей из множества капсул. В некоторых вариантах осуществления фармацевтические лекарственные формы вводят в виде двух или трех, или четырех капсул или таблеток.
В некоторых вариантах осуществления твердые лекарственные формы, например, таблетки, шипучие таблетки и капсулы изготовлены путем смешивания частиц соединения по любой из Формулы (А1А6), Формулы (В1-В6), Формулы (С1-С6) или Формулы (Ό1-Ό6) с одним или более фармацевтическими вспомогательными веществами с образованием сыпучей смешанной композиции. Когда эти сыпучие смешанные композиции называют гомогенными, это означает, что частицы соединения по любой из Формулы (А1-А6), Формулы (В1-В6), Формулы (С1-С6) или Формулы (Ό1-Ό6) равномерно распределены по всей композиции таким образом, что композиция может быть легко подразделена на стандартные лекарственные формы одинаковой эффективности, такие как таблетки, пилюли и капсулы. Индивидуальные стандартные лекарственные формы могут также включать пленочные покрытия, которые разрушаются при пероральном проглатывании или при контакте с разбавителем. Эти лекарственные формы могут быть изготовлены с помощью обычных фармакологических методов.
Обычные фармакологические методы включают, например, один или комбинацию способов: (1) сухое перемешивание, (2) прямое прессование, (3) помол, (4) сушку или безводную грануляцию, (5) влажную грануляцию или (6) спекание. См., например, Ьасбтап е! а1., ТНе Тбеогу апб Ргасбсе о£ 1пбиз!па1 РНагтасу (1986). Другие способы включают, например, сушку распылением, дражирование, гранулирование из расплава, гранулирование, сушка распылением или нанесение покрытия в псевдоожиженном слое (например, наслаивание Вюрстера), тангенциальное нанесение покрытия, поверхностное распыление, таблетирование, экструдирование и т. п.
Фармацевтические твердые лекарственные формы, описанные здесь, могут включать соединение, описанное здесь, и одну или более фармацевтически приемлемых добавок, таких как совместимый носитель, связующее, агент-наполнитель, суспендирующий агент, вкусовая добавка, подсластитель, дезинтегрирующий агент, диспергирующий агент, поверхностно-активное вещество, лубрикант, краситель, разбавитель, солюбилизатор, увлажняющий агент, пластификатор, стабилизатор, усилитель проникновения, смачивающий агент, противовспенивающий агент, антиоксидант, консервант, или одну или более их комбинацию. В еще других аспектах, с использованием стандартных методов нанесения покрытия, таких, которые описаны в Веттд!оп'з Рбагтасеи!юа1 8с1епсез, 20!1 Ебйюп (2000), обеспечено пленочное покрытие вокруг лекарственной формы соединения по любой из Формулы (А1-А6), Формулы (В1-В6), Формулы (С1-С6) или Формулы (Ό1-Ό6). В одном варианте осуществления некоторые или все частицы соединения по любой из Формулы (А1-А6), Формулы (В1-В6), Формулы (С1-С6) или Формулы (Ό1-Ό6) являются покрытыми. В другом варианте осуществления некоторые или все частицы соединения по любой из Формулы (А1-А6), Формулы (В1-В6), Формулы (С1-С6) или Формулы (Ό1-Ό6) являются микроинкапсулированными. В еще других вариантах осуществления частицы соединения по любой из Формулы (А1-А6), Формулы (В1-В6), Формулы (С1-С6) или Формулы (Ό1-Ό6) не являются микроинкапсулированными и являются непокрытыми.
Пригодные носители для использования в твердых лекарственных формах, описанных здесь, включают, но без ограничения, аравийскую камедь, желатин, коллоидный диоксид кремния, глицерофосфат кальция, лактат кальция, мальтодекстрин, глицерин, силикат магния, казеинат натрия, соевый лецитин, хлорид натрия, трикальцийфосфат, дикалия фосфат, стеароил лактилат натрия, каррагенан, моноглицерид, диглицерид, прежелатинизированный крахмал, гидроксипропилметилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозы ацетат стеарат, сахарозу, микрокристаллическую целлюлозу, лактозу, маннит и т. п.
Пригодные наполнители для использования в твердых лекарственных формах, описанных здесь, включают, но без ограничения, лактозу, карбонат кальция, фосфат кальция, двухосновный фосфат кальция, сульфат кальция, микрокристаллическую целлюлозу, целлюлозный порошок, декстрозу, декстраты, декстран, крахмалы, прежелатинизированный крахмал, гидроксипропилметилцеллюлозу (НРМС), фталат гидроксипропилметилцеллюлозы, ацетат-стеарат гидроксипропилметилцеллюлозы (НРМСА8), сахарозу, ксилит, лактитол, маннит, сорбит, хлорид натрия, полиэтиленгликоль и т.п.
Для высвобождения соединения по любой из Формулы (А1-А6), Формулы (В1-В6), Формулы (С1С6) или Формулы (Ό1-Ό6) из матрицы твердой лекарственной формы с наибольшей эффективностью, в
- 73 032463 лекарственных формах часто используют дезинтеграторы. особенно в тех случаях. когда лекарственные формы прессуют со связующими веществами. Дезинтеграторы способствуют разрушению матрицы лекарственной формы благодаря набуханию или капиллярным эффектам. когда лекарственная форма впитывает влагу. Пригодные дезинтеграторы для использования в твердых лекарственных формах. описанных здесь. включают. но без ограничения. природные крахмалы. такие как зерновой крахмал или картофельный крахмал. прежелатинизированный крахмал. такой как Ыайопа1 1551 или Атце1®. или натрия гликоляткрахмал. такой как Рготоде1® или Ехр1о!аЬ®. целлюлозу. такую как древесный продукт. метилированная кристаллическая целлюлоза. например Ат1се1®. Ат1се1® РН101. Ат1се1® РН102. Ат1се1® РН105. Е1сета® Р100. Етсосе1®. У|тасе1®. Мтд Т1а® и 8о1ка-Е1ос®. метилцеллюлоза. кроскармеллоза или поперечносшитая целлюлоза. такая как поперечно-сшитая натрийкарбоксиметилцеллюлоза (Ас-Όί8о1®). поперечно-сшитая карбоксиметилцеллюлоза или поперечно-сшитая кроскармеллоза. поперечносшитый крахмал. такой как гликоляткрахмал натрия. поперечно-сшитый полимер. такой как кросповидон. поперечно-сшитый поливинилпирролидон. альгинат. такой как альгиновая кислота или соль альгиновой кислоты. такая как альгинат натрия. глину. такую как Уеедит® НУ (алюмосиликат магния). камедь. такую как агар. гуаровую камедь. камедь плодов рожкового дерева. камедь карайи. пектин или трагант. гликоляткрахмал натрия. бентонит. природную губку. поверхностно-активное вещество. смолу. такую как катионообменная смола. цитрусовую пульпу. лаурилсульфат натрия. лаурилсульфат натрия в комбинации с крахмалом и т. п.
Связующие вещества наделяют когезивностью твердые пероральные лекарственные формы: в отношении лекарственной формы в виде капсулы. заполненной порошком. связующие вещества способствуют формированию заполняющей массы. которая может быть помещена в капсулы с мягкой или твердой оболочкой. и в отношении лекарственных форм в виде таблеток. связующие вещества обеспечивают целостность таблетки после прессования и однородность смеси до стадии прессования или заполнения. Материалы. пригодные для использования в качестве связующих веществ в твердых лекарственных формах. описанных здесь. включают. но без ограничения. карбоксиметилцеллюлозу. метилцеллюлозу (например. Ме!косе1®). гидроксипропилметилцеллюлозу (например. Нурготе11оке И8Р РЬагтасоа!-603. ацетат-стеарат гидроксипропилметилцеллюлозы (Адоа!е Н8-ЬЕ и Н8). гидроксиэтилцеллюлозу. гидроксипропилцеллюлозу (например. К1исе1®). этилцеллюлозу (например. Е!косе1®) и микрокристаллическую целлюлозу (например. Ат1се1®). микрокристаллическую декстрозу. амилозу. алюмосиликат магния. кислоты полисахаридов. бентониты. желатин. сополимер поливинилпирролидона и винилацетата. кросповидон. повидон. крахмал. прежелатинизированный крахмал. трагант. декстрин. сахар. такой как сахароза (например. О1рас®). глюкоза. декстроза. меласса. маннит. сорбит. ксилол (например. Ху1йаЬ®). лактоза. природную или синтетическую камедь. такую как аравийская камедь. трагантовая камедь. камедь гхатти. экстракт слизи шелухи 1каро1 киккк. крахмал. поливинилпирролидон (например. Роттбопе® СЬ. КоШбоп® СЬ. Ро1ур1акбопе® ХЬ-10 и Рот1бопе® К-12). арабогалактан лиственницы. Уеедит®. полиэтиленгликоль. воски. альгинат натрия. и т.п.
Как правило. в лекарственных формах в виде желатиновых капсул. заполненных порошком. содержание связующих веществ составляет 20-70%. Содержание связующих веществ в лекарственных формах в виде таблеток изменяется в зависимости от использования прямого прессования. влажной грануляции. вальцевания или использования других вспомогательных веществ. таких как наполнители. которые сами по себе могут действовать в качестве умеренного связующего. Специалисты в данной области могут определить уровень содержания связующего для лекарственных форм. но. как правило. в лекарственных формах в виде таблеток уровень содержания связующего составляет до 70%.
Пригодные лубриканты или глиданты для применения в твердых лекарственных формах. описанных здесь. включают. но без ограничения. стеариновую кислоту. гидроксид кальция. тальк. кукурузный крахмал. стеарилфумерат натрия. соли щелочных и щелочно-земельных металлов. таких как алюминий. кальций. магний. цинк. стеариновую кислоту. стеараты натрия. стеарат магния. стеарат цинка. воски. 8!еаго^е!®. борную кислоту. бензоат натрия. ацетат натрия. хлорид натрия. лейцин. полиэтиленгликоль или метоксиполиэтиленгликоль. такой как СагЬо^ах™. РЕ6 4000. РЕ6 5000. РЕ6 6000. пропиленгликоль. олеат натрия. глицерил бегенат. глицерил палмитостеарат. глицерил бензоат. лаурилсульфат магния или натрия. и т. п.
Пригодные разбавители для использования в твердых лекарственных формах. описанных здесь. включают. но без ограничения. сахара (включая лактозу. сахарозу и декстрозу). полисахариды (включая декстраты и мальтодекстрин). полиолы (включая маннит. ксилитол и сорбит). циклодекстрины и т. п.
Термин водонерастворимый разбавитель представляет соединения. обычно используемые при формулировании фармацевтических препаратов. такие как фосфат кальция. сульфат кальция. крахмалы. модифицированные крахмалы и микрокристаллическая целлюлоза. и микроцеллюлоза (например. имеющая плотность примерно 0.45 г/см3. например. авицел. полошковая целлюлоза). и тальк.
Пригодные смачивающие агенты для использования в твердых лекарственных формах. описанных здесь. включают. например. олеиновую кислоту. глицерилмоностеарат. сорбитанмоноолеат. сорбитанмонолаурат. триэтаноламин олеат. полиоксиэтилен сорбитанмоноолеат. полиоксиэтилен сорбитан моно
- 74 032463 лаурат, четвертичные аммониевые соединения (например, Ро1ус.|иа1 10®), олеат натрия, лаурилсульфат натрия, стеарат магния, докузат натрия, триацетин, витамин Е ТРСЗ и т.п.
Пригодные поверхностно-активные вещества для использования в твердых лекарственных формах, описанных здесь, включают, например, лаурилсульфат натрия, сорбитанмоноолеат, полиоксиэтилен сорбитанмоноолеат, полисорбаты, полаксомеры, соли желчных кислот, глицерилмоностеарат, сополимеры этиленоксида и пропиленоксида, например Р1игошс® (ВАЗЕ), и т.п.
Пригодные суспендирующие агенты для использования в твердых лекарственных формах, описанных здесь, включают, но без ограничения, поливинилпирролидон, например поливинилпирролидон К12, поливинилпирролидон К17, поливинилпирролидон К25 или поливинилпирролидон К30, полиэтиленгликоль, например полиэтиленгликоль может иметь молекулярную массу примерно от 300 до 6000, или примерно от 3350 до примерно 4000, или примерно от 7000 до примерно 5400, сополимер винилпирролидона и винилацетата (3630), натрийкарбоксиметилцеллюлозу, метилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, полисорбат-80, гидроксиэтилцеллюлозу, альгинат натрия, камеди, такие как, например, трагантовая камедь и аравийская камедь, гуаровая камедь, ксантаны, включая ксантановую камедь, сахара, целлюлозы, такие как, например, натрийкарбоксиметилцеллюлоза, метилцеллюлоза, натрийкарбоксиметилцеллюлоза,гидроксипропилметилцеллюлоза, гидроксиэтилцеллюлоза, полисорбат-80, альгинат натрия, полиэтоксилированный сорбитан монолаурат, полиэтоксилированный сорбитан монолаурат, повидон и т.п.
Пригодные антиоксиданты для использования в твердых лекарственных формах, описанных здесь, включают, например, бутилированный гидрокситолуол (ВНТ), аскорбат натрия и токоферол.
Следует учесть, что добавки, используемые в твердых лекарственных формах, описанных здесь, существенно пересекаются. Таким образом, перечисленные выше добавки должны рассматриваться только как иллюстративные и не ограничивающие примеры типов добавок, которые могут быть включены в твердые лекарственные формы, описанные здесь. Количество таких добавок может быть без труда определено специалистами в данной области в соответствии с конкретными желаемыми свойствами.
В других вариантах осуществления один или более слоев фармацевтической лекарственной формы являются пластифицированными. В качестве примера, пластификатор обычно представляет собой твердое вещество или жидкость с высокой температурой кипения. Пригодные пластификаторы могут быть добавлены в количестве примерно от 0.01 до примерно 50 мас.% (мас./мас.) композиции покрытия. Пластификаторы включают, но без ограничения, диэтилфталат, сложные эфиры цитрата, полиэтиленгликоль, глицерин, ацетилизованные глицериды, триацетин, полипропиленгликоль, полиэтиленгликоль, триэтилцитрат, дибутилсебакат, стеариновую кислоту, стеарол, стеарат и касторовое масло.
Прессованные таблетки представляют собой твердые лекарственные формы, полученные путем прессования объемной смеси композиций, описанных выше. В различных вариантах осуществления прессованные таблетки, которые разработаны для растворения во рту, будут включать один или более вкусовых агентов. В других вариантах осуществления прессованные таблетки будут включать пленку, окружающую конечную прессованную таблетку. В некоторых вариантах осуществления пленочное покрытие может обеспечить отсроченное высвобождение соединения Формулы Ό или второго агента из лекарственной формы. В других вариантах осуществления пленочное покрытие содействует удобству для пациента (например, покрытия Орабгу® или сахарные покрытия). Пленочные покрытия, в том числе Орабгу®, обычно составляют примерно от 1 до примерно 3 мас.% таблетки. В других вариантах осуществления прессованные таблетки включают одно или более вспомогательных веществ.
Капсула может быть приготовлена, например, путем помещения объемной смеси композиции соединения Формулы Ό или второго агента, описанного выше, внутрь капсулы. В некоторых вариантах осуществления композиции (неводные суспензии и растворы) помещены в мягкую желатиновую капсулу. В других вариантах осуществления композции помещены в стандартные желатиновые капсулы или нежелатиновые капсулы, такие как капсулы, содержащие НРМС. В других вариантах осуществления композиця помещена в разбрызгиваемую капсулу, при этом капсула может разбухать целиком или может открываться и содержимое разбрызгиваться на пищу до приема пищи. В некоторых вариантах осуществления терапевтическая доза разделена на множество капсул (например, две, три или четыре). В некоторых вариантах осуществления вся доза композиции доставляется в форме капсулы.
В различных вариантах осуществления частицы соединения Формулы Ό или второго агента и одно или более вспомогательных веществ смешивают в сухом состоянии и прессуют в массу, такую как таблетка, имеющая твердость, достаточную для обеспечения фармацевтической композиции, которая по существу дезинтегрирует в течение менее чем примерно 30 мин, менее чем примерно 35 мин, менее чем примерно 40 мин, менее чем примерно 45 мин, менее чем примерно 50 мин, менее чем примерно 55 мин или менее чем примерно 60 мин после перорального введения, высвобождая, таким образом, композицию в желудочно-кишечную жидкость.
В другом аспекте лекарственные формы могут включать лекарственные формы в виде микрокапсул. В некоторых вариантах осуществления один или более других совместимых материалов присутствуют в материале для микроинкапсуляции. Примеры материалов включают, но без ограничения, моди
- 75 032463 фикаторы рН, вещества, способствующие эрозии, противовспенивающие агенты, антиоксиданты, вкусовые агенты и материалы носителя, такие как связующие вещества, суспендирующие агенты, дезинтегрирующие агенты, наполняющие агенты, поверхностно-активные вещества, солюбилизаторы, стабилизаторы, лубриканты, смачивающие вещества и разбавители.
Материалы, полезные для микроинкапсуляции, описанной здесь, включают материалы, совместимые с соединениями формулы Ό или второго агента, которые в достаточной степени изолируют соединение формулы Ό или второго агента от других несовместимых вспомогательных веществ. Материалы, совместимые с соединениями формулы Ό или второго агента, представляют собой материалы, которые задерживают высвобождение соединений формулы Ό или второго агента ίπ у1уо.
Иллюстративные вещества для микроинкапсуляции, подходящие для задержки высвобождения препаратов, включающих описанные здесь соединения, включают, но без ограничения, простые эфиры гидроксипропилцеллюлозы (НРС), такие как К1исе1® или Ы1кко НРС, простые эфиры гидроксипропилцеллюлозы с низкой степенью замещения (Ь-НРС), простые эфиры гидроксипропилметилцеллюлозы (НРМС), такие как 8еррШ1т-ЬС, РЕагтасоа!®, Ме1о1оке 8В, МеШосе1®-Е, Орабгу Υ8, РптаР1о, Вепесе1 МР824 и Вепесе1 МР843, полимеры метилцеллюлозы, такие как МеШосе1®-А, ацетат-стеарат гидроксипропилметилцеллюлозы Адоа1 (НР-Ь8, НР-ЬС,НР-М8) и Ме1о1оке®, этилцеллюлозы (ЕС) и их смеси, такие как Е461, ЕШосе1®, Адиа1оп®-ЕС, 8иге1еаке®, поливиниловый спирт (РУА), такой как Орабгу АМВ, гидроксиэтилцеллюлозы, такие как Ыа1гоко1®, карбоксиметилцеллюлозы и соли карбоксиметилцеллюлоз (СМС), такие как Адиа1оп®-СМС, сополимеры поливинилового спирта и полиэтиленгликоля, такие как КоШсоа! 1В®, моноглицериды (Мууего1), триглицериды (К^X), полиэтиленгликоли, модифицированный пищевой крахмал, акриловые полимеры и смеси акриловых полимеров с простыми эфирами целлюлозы, такие как Еибгадб® ЕРО, Еибгадб® Ь30Б-55, Еибгадб® Р8 30Ό Еибгадб® Ь100-55, Еибгадб® Ь100, Еибгадб® 8100, Еибгадб® ВБ100, Еибгадб® Е100, Еибгадб® Ь12.5, Еибгадб® 812.5, Еибгадб® ЫЕ30Б и Еибгадб® ЫЕ 40Ό, целлюлозы ацетатфталат, сепифилмы, такие как смеси Р1РМС и стеариновой кислоты, циклодекстрины и смеси этих материалов.
В еще других вариантах осуществления пластификаторы, такие как полиэтиленгликоли, например, РЕС 300, РЕС 400, РЕС 600, РЕС 1450, РЕС 3350 и РЕС 800, стеариновая кислота, пропиленгликоль, олеиновая кислота и триацетин, включены в материал для микроинкапсуляции. В других вариантах осуществления материал для микроинкапсуляции, эффективный для задержки высвобождения фармацевтических композиций, описан в И8Р или ЫаЕопа1 Рогти1агу (ЫР). В еще других вариантах осуществления материал для микроинкапсуляции представляет собой К1исе1. В еще других вариантах осуществления материал для микроинкапсуляции представляет собой метоцел.
Микроинкапсулированные соединения формулы Ό или второго агента могут быть формулированы способами, известными специалистам в данной области. Такие известные способы включают, например, сушку распылением, процессы растворения с вращающимся диском, плавление при высоких температурах, охлаждение с распылением, ожижение слоя, электростатическое осаждение, центрифугульную экструзию, ротационное разделение суспензий, полимеризацию на поверхности раздела жидкость-газ или твердое тело-газ, экструзию под давлением или экстракцию растворителя с распылением. Дополнительно к перечисленным методам также можно применять некоторые химические методы, например, комплексную коацервацию, выпаривание растворителя, межполимерную несовместимость, межфазную полимеризацию в жидкой среде, полимеризацию 1п кби, сушку в жидкой фазе и десольватацию в жидкой среде. Кроме того, также можно применять другие методы, такие как роликовое уплотнение, экструзия/сферонизация, коацервация или покрытие покрытия из наночастиц.
В одном варианте осуществления частицы соединений формулы Ό или второго агента микроинкапсулируют перед формулированием в одну из указанных выше форм. В еще другом варианте осуществления некоторые или большинство частиц заключают в оболочку перед формулированием с использованием стандартных методов нанесения покрытий, например таких, которые описаны в Веттд1оп'к РЕагтасеиЕса1 8с1епсек, 20111 ЕбШоп (2000).
В других вариантах осуществления твердые лекарственные формы соединений формулы Ό или второго агента пластифицированы (покрыты) одним или более слоями. Для примера, пластификатор, как правило, представляет собой твердое вещество или жидкость с высокой температурой кипения. Пригодные пластификаторы могут быть добавлены в количестве примерно от 0.01 до примерно 50% по массе (масса/масса) композиции покрытия. Пластификаторы включают, но без ограничения, диэтилфталат, сложные эфиры лимонной кислоты, полиэтиленгликоль, глицерин, ацетилированные глицериды, триацетин, полипропиленгликоль, полиэтиленгликоль, триэтилцитрат, дибутилсебакат, стеариновую кислоту, стеарол, стеарат и касторовое масло.
В других вариантах осуществления порошок, включая лекарственные формы с соединением формулы Ό или вторым агентом, описанным здесь, может быть формулирован с включением одного или более фармацевтических вспомогательных веществ и вкусовых агентов. Такие порошки могут быть приготовлены, например, путем перемешивания композиции и необязательных фармацевтических вспомогательных веществ с получением объемной смеси композиции. Дополнительные варианты осуществления
- 76 032463 также включают суспендирующий агент и/или смачивающий агент. Эта объемная смесь равномерно разделена на упаковки с единичными дозами или упаковки, содержащие множество доз.
В еще других вариантах осуществления шипучие порошки также приготовлены согласно настоящему изобретению. Шипучие соли использовали для диспергирования лекарственных средств в воде для перорального введения. Шипучие соли представляют собой гранулы или крупные порошки, содержащие лекарственное средство в сухой смеси, обычно состоящей из бикарбоната натрия, лимонной кислоты и/или винной кислоты. При добавлении солей композиций, описанных здесь, к воде кислоты и основание реагируют с высвобождением углекислого газа, вызывая тем самым шипение. Примеры шипучих солей включают, например, следующие ингредиенты: бикарбонат натрия или смесь бикарбоната натрия и карбоната натрия, лимонную кислоту и/или винную кислоту. Любая комбинация кислота-основание, которая вызывает высвобождение углекислого газа, может быть использована вместо комбинации бикарбоната натрия и лимонной и винной кислоты, при условии, что ингредиенты пригодными для фармацевтического применения и обеспечивают рН около 6.0 или выше.
В некоторых вариантах осуществления твердые лекарственные формы, описанные здесь, могут быть формулированы в виде пероральных лекарственных форм с энтеросолюбильным покрытием с отсроченным высвобождением, то есть в виде периральной лекарственной формы фармацевтической композиции, описанной здесь, которая использует энтеросолюбильное покрытие для достижения высвобождения в тонком кишечнике желудочно-кишечного тракта. Лекарственные формы с энтеросолюбильным покрытием могут представлять собой прессованную или формованную, или экструдированную таблетку/форму (покрытую или непокрытую), содержащую гранулы, порошок, пеллеты, шарики или частицы активного ингредиента и/или другие компоненты композиции, которые сами по себе являются покрытыми или непокрытыми. Лекарственная форма с энтеросолюбильным покрытием может также представлять собой капсулу (покрытую или непокрытую), содержащую пеллеты, шарики или гранулы твердого носителя или композиции, которые сами по себе являются покрытыми или непокрытыми.
Термин отсроченное высвобождение, использованный в данном контексте, относится к такой доставке, при которой высвобождение может осуществляться в какой-либо, в целом, предсказуемой области кишечного тракта, более дистальной по отношению к области, в которой бы осуществлялось высвобождение при отсутствии изменений, вызванных отсроченным высвобождением. В некоторых вариантах осуществления способом отсрочки высвобождения является покрытие. Любые покрытия должны иметь достаточную толщину таким образом, чтобы оболочка в целом не растворялась в желудочно-кишечном соке при рН ниже около 5, но при этом растворялась при рН около 5 или выше. Как ожидается, любые анионные полимеры, характеризующиеся рН-зависимым профилем растворимости, можно применять в качестве энтеросолюбильного покрытия в способах и композициях, описанных здесь, для достижения доставки в нижний отдел желудочно-кишечного тракта. В некоторых вариантах осуществления полимеры, описанные здесь, представляют собой анионные карбоксильные полимеры. В других вариантах осуществления полимеры и их совместимые смеси, и некоторые их свойства включают, но без ограничения
Шеллак, также называемый как очищенный сырой шеллак, очищенный продукт, полученный из смолистого секрета насекомого. Это покрытие растворяется в среде, имеющей рН>7;
Акриловые полимеры
Характеристики акриловых полимеров (главным образом, их растворимость в биологических жидкостях) могут изменяться в зависимости от степени и типа замещения. Примеры пригодных акриловых полимеров включают сополимеры метакриловой кислоты и сополимеры метакрилата аммония. Серии эудрагит (Еибгадй) Е, Ь, К, 8, КЬ, К8 и ΝΕ (Койт Рйагта) доступны как солюбилизированные в органическом растворителе, водной дисперсии или сухих порошках. Серии Еибгадй КЬ, ΝΕ и К8 нерастворимы в желудочно-кишечном тракте, но являются проницаемыми и используются главным образом для доставки в толстую кишку. Серии Еибгадй Е растворяются в желудке. Серии Еибгадй Ь, Ь-30Э и 8 нерастворимы в желудке и растворяются в кишечнике;
Производные целлюлозы
Примерами пригодных производных целлюлозы являются этилцеллюлоза; реакционные смеси неполных ацетатных эфиров целлюлозы с фталевым ангидридом. Свойства могут изменяться в зависимости от степени и типа замещения. Ацетат-фталат целлюлозы (САР) растворяется при рН>6. Ас.|иа1епс (РМС) является водной системой и представляет собой высушенный распылением САР-псевдолатекс с частицами <1 мкм. Другие компоненты в Ас.|иа1епс могут включать плюроники (р1игошск), разновидности Т\гееп и ацетилированные моноглицериды. Другие пригодные производные целлюлозы включают ацетат-тримеллитат целлюлозы (Еак!тап); метилцеллюлозу (Рйагтасоа!, Ме!йосе1); фталат гидроксипропилметилцеллюлозы (НРМСР); сукцинат гидроксипропилметилцеллюлозы (НРМС8); и ацетат-сукцинат гидроксипропилметилцеллюлозы (напр., АООАТ (8й1п Е!ки)). Свойства могут изменяться в зависимости от степени и типа замещения. Например, НРМСР таких марок, как НР-50, НР-55, НР-558, НР-55Р является пригодным. Свойства могут изменяться в зависимости от степени и типа замещения. Например, пригодные марки ацетата сукцината гидроксипропилметилцеллюлозы включают, но без ограничения, А8Ь6 (ЬР), который растворяется при рН 5, А8-М6 (МР), который растворяется при рН 5.5, и А8-Н6 (НР),
- 77 032463 который растворяется при более высоком рН. Эти полимеры предлагаются в виде гранул или тонкоизмельченных порошков для водных дисперсий; фталат поливинилацетата (РУАР). РУАР растворяется при рН>5 и является значительно менее проницаемым для водяного пара и желудочного сока.
В некоторых вариантах осуществления покрытие может содержать и, как правило, содержит пластификатор, и возможно другие вспомогательные вещества покрытия, такие как красители, тальк и/или стеарат магния, которые хорошо известны в данной области. Пригодные пластификаторы включают триэтилцитрат (С11го£1ех 2), триацетин (глицеринтриацетат), ацетилтриэтилцитрат (С11гоПес А2), СагЬо^ах 400 (полиэтиленгликоль 400), диэтилфталат, трибутилцитрат, ацетилированные моноглицериды, глицерин, сложные эфиры жирных кислот, пропиленгликоль и дибутилфталат. В частности, анионные карбоксилсодержащие акриловые полимеры обычно содержат 10-25 мас.% пластификатора, в частности дибутилфталат, полиэтиленгликоль, триэтилцитрат и триацетин. Для нанесения покрытий используют обычные методы нанесения покрытия, такие как покрытие распылением или нанесение оболочки. Толщина покрытия должна быть достаточной для гарантии того, что пероральная лекарственная форма остается интактной до достижения желаемой области местной доставки в кишечнике.
Помимо пластификаторов в покрытия могут быть добавлены красители, средства для устранения клейкости, поверхностно-активные вещества, противовспенивающие агенты, лубриканты (напр., карнаубский воск или РЕС) для солюбилизации или диспергирования материала покрытия, а также для улучшения свойств покрытия и покрытого продукта.
В других вариантах осуществления лекарственные формы, описанные здесь, которые включают соединения формулы Ό или второго агента, доставляют с использованием лекарственной формы с импульсным высвобождением. Лекарственная форма с импульсным высвобождением может обеспечить один или более импульсов немедленного высвобождения в заданные моменты времени после контролируемого времени задержки или в определенных местах. Много других типов систем с контролируемым высвобождением известно специалистам в данной области и являются пригодными для использования с композициями, описанными здесь.
Примеры таких систем доставки включают, например, системы на основе полимеров, таких как полимолочная кислота и полигликолевая кислота, полиангидриды и поликапролактон; пористые матрицы, системы на основе неполимеров, которые представляют собой липиды, включая стеролы, такие как холестерил, сложные эфиры холестерина и жирные кислоты, или нейтральные жиры, такие как моно-, ди- и триглицериды; гидрогелевые системы высвобождения; силастиковые системы; системы на основе петидов; восковые покрытия, биоэродируемые лекарственные формы, прессованные таблетки с использованием обычных связывающих веществ и т.п. См., например, ЫЬегтап е1 а1., Рйагтасеийса1 Эокаде Рогтк, 2 Еб., уо1. 1, рр. 209-214 (1990); 8тдй е1 а1., Епсус1ореб1а о£ Рйагтасеийса1 Тесйпо1оду, 2пб Еб., рр. 751-753 (2002); и.8. Ра1. №к. 4327725, 4624848, 4968509, 5461140, 5456923, 5516527, 5622721, 5686105, 5700410, 5977175, 6465014 и 6932983, каждый из который включен путем отсылки.
В некоторых вариантах осуществления обеспечены фармацевтические лекарственные формы, которые включают частицы соединений формулы Ό или второго агента, описанных здесь, и по меньшей мере один диспергирующий агент или суспендирующий агент для перорального введения субъекту. Лекарственные формы могут представлять собой порошок и/или гранулы для суспензии и при смешивании с водой получают, по-существу, однородную суспензию.
Жидкие лекарственные формы для перорального введения могут представлять собой водные суспензии, выбранные из группы, включающей, но без ограничения, фармацевтически приемлемые водные пероральные дисперсии, эмульсии, растворы, элексиры, гели и сиропы. См., например, 8шдй е1 а1., Епсус1ореб1а о£ Рйагтасеи1юа1 Тесйпо1оду, 2пб Еб., рр. 754-757 (2002). Дополнительно к частицам соединений формул (А1-А6), жидкие лекарственные формы могут включать добавки, такие как: (а) дезинтегрирующие агенты; (Ь) диспергирующие агенты; (с) смачивающие агенты; (б) по меньшей мере один консервант, (е) повышающие вязкость агенты, (ί) по меньшей мере один подсластитель и (д) по меньшей мере одну вкусовую добавку. В некоторых вариантах осуществления водные дисперсии могут дополнительно включать кристаллический ингибитор.
Водные суспензии и дисперсии, описанные здесь, могут оставаться в гомогенном состоянии, как определено в И8Р Рйагтас1к1к' Рйагтасоре1а (2005 ебйюп, сйар1ег 905) в течение по меньшей мере 4 ч. Гомогенность должна определяться с помощью метода отбора проб, согласующегося в отношении определения гомогенности всей композиции. В одном варианте осуществления водная суспензия может быть ресуспендирована в гомогенную суспензию путем физического осаждения, продолжающегося менее 1 мин. В другом варианте осуществления водная суспензия может быть ресуспендирована в гомогенную суспензию путем физического осаждения в течение менее чем 45 с. В еще другом варианте осуществления водная суспензия может быть ресуспендирована в гомогенную суспензию путем физического осаждения в течение менее чем 30 с. В еще другом варианте осуществления осаждение не требуется для поддержания гомогенной водной дисперсии.
Примеры дезинтегрирующих агентов для использования в водных суспензиях и дисперсиях включают, но без ограничения, кархмал, например природный крахмал, такой как кукурузный крахмал или
- 78 032463 картофельный крахмал, прежелатинизированный крахмал, такой как №10опа1 1551 или Атг)е1®, или гликоляткрахмал натрия, такой как Рготоде1® или Ехр1о!аЬ®, целлюлозу, такую как древесный продукт, метилкристаллическая целлюлоза, например, Ау1се1®, Ау1се1® РН101, Ау1се1® РН102, Ау1се1® РН105, Е1сета® Р100, Етсосе1®, У1уасе1®, Мшд Т1а® и 8о1ка-Р1ос®, метилцеллюлоза, кроскармеллоза или поперечно-сшитая целлюлоза, такая как поперечно-сшитая натрий-карбоксиметилцеллюлоза (Ас-Э1-8о1®), поперечно-сшитая карбоксиметилцеллюлоза или поперечно-сшитая кроскармеллоза, поперечно-сшитый крахмал, такой как гликоляткрахмал натрия, поперечно-сшитый полимер, такой как кросповидон, поперечно-сшитый поливинилпирролидон, альгинат, такой как альгиновая кислота или соль альгиновой кислоты, такая как альгинат натрия, глину, такую как Уеедит® НУ (алюмосиликат магния), камедь, такую как агар, гуаровую камедь, камедь плодов рожкового дерева, камедь карайи, пектин или трагантовую камедь, гликоляткрахмал натрия, бентонит, природную губку, поверхностно-активное вещество, смолу, такую как катионообменная смола, цитрусовую пульпу, лаурилсульфат натрия, лаурилсульфат натрия в комбинации с крахмалом и т. п.
В некоторых вариантах осуществления диспергирующие агенты, пригодные для водных суспензий и дисперсий, описанных здесь, известны в данной области и включают, например, гидрофильные полимеры, электролиты, Т\гееп ® 60 или 80, РЕС, поливинилпирролидон (РУР; коммерчески известный как Р1а8йопе®), и диспергирующие агенты на основе углеводов, такие как, например, гидроксипропилцеллюлоза и простые эфиры гидроксипропилцеллюлозы (например, НРС, НРС-8Ь и НРС-Ь), гидроксипропилметилцеллюлоза и простые эфиры гидроксипропилметилцеллюлозы (например, НРМС К100, НРМС К4М, НРМС К15М НРМС К100М), натрий-карбоксиметилцеллюлоза, метилцеллюлоза, гидроксиэтилцеллюлоза, фталат гидроксипропилметилцеллюлозы, ацетат-стеарат гидроксипропилметилцеллюлозы, некристаллическая целлюлоза, алюмосиликат магния, триэтаноламин, поливиниловый спирт (РУА), сополимеры поливинилпирролидона и винилацетата (Р1а8йопе®, например, 8-630), 4-(1,1,3,3тетраметилбутил)фенольный полимер с этиленоксидоа и формальдегидом (также известный как тилоксапол), полоксамеры (например, Р1игошс8 Р68®, Р88® и Р108®, которые являются блок-сополимерами этиленоксида и пропиленоксида); и полоксамины (например, Те!гошс 908®, также известный как Ро1охатте 908®, который является тетрафункциональным блок-сополимером, полученным в результате последовательного добавления пропиленоксида и этиленоксида в этилендиамин (ВА8Р Согрогайоп, Рагйррапу, Ν.Ι.)). В других вариантах осуществления диспергирующий агент выбран из группы, не содержащей один из следующих агентов: гидрофильные полимеры; электролиты; Тетееп® 60 или 80; РЕС; поливинилпирролидон (РУР); гидроксипропилцеллюлоза и простые эфиры гидроксипропилцеллюлозы (например, Р1РС, Р1РС-8Ь и Р1РС-Ь); гидроксипропилметилцеллюлоза и простые эфиры гидроксипропилметилцеллюлозы (например, НРМС К100, НРМС К4М, НРМС К15М, НРМС К100М и Рйагтасоа!® И8Р 2910 (8Ып-Е!5и)); натрий-карбоксиметилцеллюлоза; метилцеллюлоза; гидроксиэтилцеллюлоза; фталат гидроксипропилметилцеллюлозы; ацетат-стеарат гидроксипропилметилцеллюлозы; некристаллическая целлюлоза; алюмосиликат магния; триэтаноламин; поливиниловый спирт (РУА); 4-(1,1,3,3триметилбутил)-фенольный полимер с этиленоксидом и формальдегидом; полоксамеры (например, Р1игошск Р68®, Р88® и Р108®, которые представляют собой блок-сополимеры этиленоксида и пропиленоксида); или полоксамины (например, Те!гошс 908®, также называемый как Ро1охатше 908®).
Смачивающие агенты, пригодные для водных суспензий и дисперсий, описанных здесь, известны в данной области и включают, но без ограничения, цетиловый спирт, глицеролмоностеарат, сложные эфиры полиоксиэтилен сорбитана и жирной кислоты (например, коммерчески доступные Тетеепк®, такие как, например, Т\гееп 20® и Т\гееп 80® (1С1 8рес1а11у Сйешкак)) и полиэтиленгликоли (например, СагЬоетахк 3350® и 1450®, и СагЬоро1 934® (Ишоп СагЬИе)), олеиновую кислоту, глицерил моностеарат, сорбитан моноолеат, сорбитан монолаурат, триэтаноламин олеат, полиоксиэтилен сорбитан моноолеат, полиоксиэтилен сорбитан монолаурат, натрий олеат, лаурилсульфат натрия, докузат натрия, триацетин, витамин Е ТРС8, таурохолат натрия, симетикон, фосфотидилхолин и т.п.
Пригодные консерванты для водных суспензий или дисперсий, описанных здесь, включают, например, сорбат калия, парабены (например, метилпарабен и пропилпарабен), бензойную кислоту и ее соли, другие эфиры парагидроксибензойной кислоты, такие как бутилпарабен, спирты, такие как этиловый спирт или бензиловый спирт, фенольные соединения, такие как фенол, или четвертичные соединения, такие как бензалкония хлорид. Консерванты, используемые здесь, включены в лекарственную форму в концентрации, достаточной для ингибирования микробного роста.
Пригодные агенты, увеличивающие вязкость, для водных суспензий или дисперсий, описанных здесь, включают, но без ограничения, метилцеллюлозу, ксантановую камедь, карбоксиметилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, Р1а§йоп® 8-630, карбомер, поливиниловый спирт, альгинаты, аравийскую камедь, хитозаны и их комбинации. Концентрация увеличивающих вязкость агентов будет зависеть от выбранного агента и требуемой вязкости.
Примеры подсластителей, пригодных для водных суспензий или дисперсий, описанных здесь, включают, например, сироп акации, ацесульфам калия, алитам, анис, яблоко, аспартам, банан, баварские
- 79 032463 сливки, ягоды, черную смородину, ириски, цитрат кальция, камфору, карамель, вишню, вишню со сливками, шоколад, корицу, жевательную резинку, цитрус, цитрусовый пунш, цитрусовые сливки, сахарную вату, какао, колу, свежую вишню, свежий цитрус, цикламат, циламат, декстрозу, эвкалипт, эвгенол, фруктозу, фруктовый пунш, имбирь, глицирретинат, сироп солодки (лакрица), виноград, грейпфрут, мед, изомальт, лимон, лайм, лимон со сливками, моноаммоний глицирризинат (Μадηа8гееΐ®), мальтол, маннит, клен, алтей, ментол, мяту со сливками, смесь ягод, неогесперидин ОС, неотам, апельсин, грушу, персик, перечную мяту, перечную мяту со сливками, порошок Ргокгее!®, малину, рутбир, ром, сахарин, сафрол, сорбит, зеленую мяту, зеленую мяту со сливками, землянику, землянику со сливками, стевию, сукралозу, сахарозу, сахарин натрия, сахарин, аспартам, ацесульфам калия, маннит, талин, сукралозу, сорбит, швейцарские сливки, тагатозу, мандарин, тауматин, тутти-фрутти, ваниль, грецкий орех, арбуз, дикую вишню, гаультерию, ксилитол или любую комбинацию таких ароматизаторов, например, анисментол, вишня-анис, корица-апельсин, вишня-корица, шоколад-мята, мед-лимон, лимон-лайм, лимонмята, ментол-эвкалипт, апельсин-сливки, ваниль-мята, и их смеси. В одном варианте осуществления водная жидкая дисперсия может содержать подсластитель или вкусовую добавку в концентрации, изменяющейся от примерно 0.001 до примерно 1.0 об.% водной дисперсии. В другом варианте осуществления водная жидкая дисперсия может содержать подсластитель или вкусовую добавку в концентрации, изменяющейся от примерно 0.005 до примерно 0.5 об.% водной дисперсии. В еще другом варианте осуществления водная жидкая дисперсия может содержать подсластитель или вкусовую добавку в концентрации, изменяющейся от примерно 0.01 до примерно 1.0 об.% водной дисперсии.
Дополнительно к добавкам, перечисленным выше, жидкие лекарственные формы могут также включать инертные разбавители, обычно используемые в данной области, такие как вода и другие растворители, солюбилизирующие агенты и эмульгаторы. Иллюстративными эмульгаторами являются этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, диметилформамид, лаурилсульфат натрия, доккузат натрия, холестерин, сложные эфиры холестерина, таурохолевая кислота, фосфотидилхолин, масла, такие как хлопковое масло, масло арахисовое масло, кукурузное масло, оливковое масло, касторовое масло и кунжутное масло, глицерол, тетрагидрофурфуриловый спирт, полиэтиленгликоль, сложные эфиры жирных кислот сорбитана или смеси этих веществ и т.п.
В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции, описанные здесь, могут представлять собой самоэмульгирующиеся системы доставки лекарственного средства (8ΕΌΌ8). Эмульсии представляют собой дисперсии одной несмешиваемой фазы в другой, как правило, в форме капель. В целом, эмульсии образуются при интенсивном механическом перемешивании. 8ΕΌΌ8, в отличие от эмульсий или микроэмульсий, спонтанно образуются при добавлении в избыточное количество воды без какого-либо внешнего механического диспергирования или перемешивания. Преимущество 8ΕΌΌ8 заключается в том, что для распределения капель в растворе необходимо лишь незначительное перемешивание. Кроме того, вода или водная фаза может быть добавлена непосредственно перед введением, что обеспечивает стабильность неустойчивого или гидрофобного активного ингредиента. Таким образом, 8ΕΌΌ8 обеспечивает эффективную систему доставки при пероральном или парентеральном введении гидрофобных активных ингредиентов. 8ΕΌΌ8 могут улучшить биодоступность гидрофобных активных ингредиентов. Способы получения самоэмульгирующихся лекарственных форм известны в данной области и включают, но без ограничения, например патенты США №№ 5858401, 6667048 и 6960563, каждый из которых специально включен здесь путем отсылки.
Следует отметить, перечисленные выше добавки, используемые в водных дисперсиях или суспензиях, описанных здесь, частично совпадают, так как данные добавки часто классифицируются поразному различными пользователями или обычно используются для различных целей. Так, перечисленные выше добавки следует рассматривать только в качестве примеров, но не ограничения типов добавок, которые могут быть включены в описанные здесь композиции. Количество таких добавок может быть без труда определено специалистом в данной области в зависимости от желаемых свойств.
Лекарственные формы для интраназального введения
Лекарственные формы для интраназального введения известны в данной области и описаны, например, в патентах США №№ 4476116, 5116817 и 6391452, каждый из которых специально включен путем отсылки. Лекарственные формы, которые включают соединение по любой из формулы (А1-А6), формулы (В1-В6), формулы (С1-С6) или формулы (Ό1-Ό6), которые изготовлены в соответствии с этими и другими способами, хорошо известными в данной области, получены в виде растворов в физиологическом растворе с использованием бензилового спирта или других пригодных консервантов, фторуглеродов и/или других солюбилизирующих или диспергирующих агентов, известных в данной области. См., например, Апке1, Η. С. е( а1., РйагтасеиДса1 Όο^^ Еο^тκ апб Эгид ОеНуегу 8ук!етк, 8ίχ(Π Ε6. (1995). Предпочтительно эти композиции и лекарственные формы приготовлены с пригодными нетоксичными фармацевтически приемлемыми ингредиентами. Эти ингредиенты известны специалистам, имеющим опыт в приготовлении назальных лекарственных форм, и некоторые из них можно найти в ΚΕΜΙΝ6Τ0Ν: ΤΗΕ 8ΟΕ^Ε АХО РΚΑСΤIСΕ 0Е РЧА^АС^ 2181 ебиюп, 2005, стандартная ссылка в
- 80 032463 данной области. Выбор пригодных носителей сильно зависит от природы требуемой назальной лекарственной формы, например, растворов, суспензий, мазей или гелей. Назальные лекарственные формы, как правило, содержат большие количества воды дополнительно к активному ингредиенту. Также могут присутствовать незначительные количества других ингредиентов, таких как регуляторы рН, эмульгаторы или диспергирующие агенты, консерванты, поверхностно-активные вещества, гелеобразующие агенты или буферные и другие стабилизирующие и солюбилизирующие агенты. Назальная лекарственная форма должна быть изотоничной по отношению к назальным выделениям.
Для введения путем ингаляции соединения формулы Ό или второго агента, описанные здесь, могут быть представлены в форме аэрозоля, тумана или порошка. Фармацевтические композиции, описанные здесь, обычно доставляют в форме распыляемого аэрозоля из вакуумированных упаковок или небулайзера, с использованием подходящего пропеллента, например, дихлордифторметана, трихлорфторметана, дихлортетрафторэтана, диоксида углерода или другого пригодного газа. В случае находящегося под давлением аэрозоля единица дозирования может быть определена путем обеспечения клапана для доставки отмеренного количества. Капсулы и картриджи, изготовленные в качестве примера только из желатина, для использования в ингаляторе или инсуффляторе, могут содержать порошковую смесь соединения, описанного здесь, и пригодную порошковую основу, такую как лактоза или крахмал.
Лекарственные формы для буккального введения
Лекарственные формы для буккального введения, которые включают соединения формулы Ό или второго агента, могут быть введены с ипользованием различных лекарственных форм, известных в данной области. Например, такие лекарственные формы включают, но без ограничения, описанные в патентах США №№ 4229447, 4596795, 4755386 и 5739136, каждый из которых специально включен здесь путем отсылки. Кроме того, буккальные лекарственные формы, описанные здесь, могут дополнительно включать биоразлагаемый (гидролизуемый) полимерный носитель, который также служит для прилипания лекарственной формы к слизистой оболочке щеки. Буккальные лекарственные формы изготовлены таким образом, чтобы постепенно разлагаться в течение заданного периода времени, в течение которого, по-существу, обеспечивается доставка соединения любой формулы Ό или второго агента. Буккальная доставка лекарственного средства, как будет очевидно специалистам в данной области, позволяет избежать недостатков, присущих пероральному введению лекарственного средства, например, медленной абсорбции, разложения активного агента жидкостями, присутствующими в желудочно-кишечном тракте и/или инактивации в печени при первом проходе. В отношении биоразлагаемого (гидролизуемого) полимерного носителя, очевидно, что может быть использован любой такой носитель, если только он не препятствует желаемому характеру высвобождения лекарственного средства и если такой носитель совместим с соединением формулы Ό или второго агента, и любыми другими компонентами, которые могут присутствовать в буккальной дозированной единице. Как правило, полимерный носитель содержит гидрофильные (водорастворимые и водонабухаемые) полимеры, которые прилипают к влажной поверхности слизистой оболочки щеки. Примеры полимерных носителей, подходящих для применения здесь, включают полимеры акриловой кислоты и другие полимеры, например, соединения, известные как карбомеры (СагЬоро1® от В.Б. СообпсН является одним из таких полимеров). Другие компоненты, которые могут быть также включены в буккальные лекарственные формы, описанные здесь, включают, но без ограничения, дезинтегрирующие агенты, разбавители, связующие вещества, лубриканты, вкусовые добавки, красители, консерванты и т.п. Для буккального или сублингвального введения композиции могут быть представлены в виде таблеток, пастилок или гелей, изготовленных обычным способом.
Лекарственные формы для трансдермального введения
Лекарственные формы для трансдермального введения, описанные здесь, можно вводить с использование различных устройств, описанных в данной области. Например, такие устройства включают, но без ограничения, патенты США №№ 3598122, 3598123, 3710795, 3731683, 3742951, 3814097, 3921636, 3972995, 3993072, 3993073, 3996934, 4031894, 4060084, 4069307, 4077407, 4201211, 4230105, 4292299, 4292303, 5336168, 5665378, 5837280, 5869090, 6923983, 6929801 и 6946144, каждый из которых специально включен здесь путем отсылки в полном объеме.
Лекарственные формы для трансдермального введения, описанные здесь, могут включать конкретные фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, которые обычно используются в данной области. В одном варианте осуществления трансдермальные лекарственные формы, описанные здесь, включают по меньшей мере три компонента: (1) композицию на основе соединения формулы Ό или второго агента; (2) усилители проникновения и (3) вспомогательный агент на водной основе. Кроме того, лекарственные формы для трансдермального введения могут включать дополнительные компоненты, такие как, но без ограничения, желирующие агенты, основы для кремов и мазей и т. п. В некоторых вариантах осуществления лекарственная форма для трансдермального введения дополнительно включает подложку из тканого или нетканого материала для повышения абсорбции и предотвращения удаления трансдермального препарата с кожи. В других вариантах осуществления лекарственные формы для трансдермального введения, описанные здесь, могут находиться в насыщенном или перенасыщенном состоянии для улучшения диффузии через кожу.
Лекарственные формы, пригодные для трансдермального введения соединений, описанных здесь,
- 81 032463 могут использовать устройства трансдермальной доставки и пластыри трансдермальной доставки, и могут представлять собой липофильные эмульсии или буферные водные растворы, растворенные и/или диспергированные в полимере или связующем веществе. Такие пластыри могут быть сконструированы для непрерывной, импульсной доставки или доставки фармацевтических агентов в тот момент, когда это необходимо. Кроме того, трансдермальная доставка соединений, описанных здесь, может быть осуществлена посредством ионтофоретических пластырей и т. п. Кроме того, пластыри для трандермального введения могут обеспечивать контролируемую доставку соединений формулы Ό или второго агента. Скорость абсорбции может быть снижена с помощью мембран, контролирующих скорость абсорбции, или путем заключения соединения в полимерную матрицу или гель. И наоборот, для увеличения абсорбции могут быть использованы средства для усиления поглощения. Усилитель абсорбции или носитель может включать абсорбируемые фармацевтически приемлемые растворители для способствования прохождению через кожу. Например, устройства для трансдермального введения представлены в виде бандажа, содержащего материал основы, резервуар, содержащий соединение, необязательно с носителями, необязательно с контролирующим скорость барьером для доставки соединения через кожу хозяина с контролируемой и предварительно установленной скоростью в течение продолжительного периода времени, и средства для закрепления устройства на коже.
Лекарственные формы для инъекций
Лекарственные формы, которые включают соединение формулы Ό или второго агента, пригодные для внутримышечной, подкожной или внутривенной инъекции, могут включать физиологически приемлемые стерильные водные или неводные растворы, дисперсии, суспензии или эмульсии и стерильные порошки для восстановления в стерильных растворах или дисперсиях для инъекций. Примеры пригодных водных или неводных носителей, разбавителей, растворителей или наполнителей включают воду, этанол, полиолы (пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, глицерин, кремофор и т.п.), их пригодные смеси, растительные масла (такие как оливковое масло) и инъецируемые органические сложные эфиры, такие как этилолеат. Необходимая текучесть может поддерживаться, например, путем использования оболочки, такой как лецитиновая оболочка, путем поддержания необходимого размера частиц в случае дисперсий, и путем использования поверхностно-активных веществ. Лекарственные формы, пригодные для подкожной инъекции, могут также содержать добавки, такие как консерванты, увлажнители, эмульгаторы и диспергирующие агенты. Предотвращение роста микроорганизмов может быть обеспечено за счет использования различных антибактериальных и противогрибковых агентов, таких как парабены, хлорбутанол, фенол, сорбиновая кислота и т. п. Может быть желательным включение изотонических агентов, таких как сахара, хлорид натрия и т.п. Пролонгированное поглощение инъецируемой фармацевтической формы может быть достигнуто путем использования агентов, задерживающих абсорбцию, таких как моностеарат алюминия и желатин.
Для внутривенных инъекций соединения, описанные здесь, могут быть формулированы в водных растворах, предпочтительно в физиологически совместимых буферах, такие как раствор Хэнка, раствор Рингера или физиологический солевой раствор. Для трансмукозального введения в лекарственной форме используются вещества, способствующие проникновению, соответствующие барьеру, через который должно осуществляться проникновение. Такие пенетранты в целом известны в данной области. Для других парентеральных инъекций соответствующие лекарственные формы могут включать водные или неводные растворы, предпочтительно с физиологически совместимыми буферами или вспомогательными веществами. Такие вспомогательные вещества в целом известны в данной области.
Парентеральные инъекции могут включать болюсную инъекцию или непрерывное вливание. Лекарственные формы для инъекции могут быть представлены в виде стандартной лекарственной формы, например, в ампулах или в контейнерах, содержащих множество доз, с добавленным консервантом. Фармацевтическая композиция, описанная здесь, может быть представлена в форме, пригодной для парентеральной инъекции в виде стерильных суспензий, растворов или эмульсий в масляных или водных наполнителях, и может содержать вспомогательные агенты, такие как суспендирующие, стабилизирующие и/или диспергирующие агенты. Фармацевтические лекарственные формы для парентерального введения включают водные растворы активных соединений в водорастворимой форме. Кроме того, суспензии активных соединений могут быть приготовлены в виде соответствующих масляных суспензий для инъекции. Пригодные липофильные растворители или наполнители включают нелетучие масла, такие как кунжутное масло, или сложные эфиры синтетических нелетучих кислот, такие как этилолеат или триголицериды, или липосомы. Водные суспензии для инъекции могут содержать вещества, которые повышают вязкость суспензии, такие как натрийкарбоксиметилцеллюлоза, сорбит или декстран. Необязательно суспензия может также содержать пригодные стабилизаторы или агенты, которые увеличивают растворимость соединений для обеспечения проникновения высококонцентрированных растворов. Альтернативно, активный ингредиент может быть представлен в порошковой форме для восстановления пригодным наполнителем, например, стерильной апирогенной водой, перед использованием. Другие лекарственные формы
В определенных вариантах осуществления могут быть использованы системы доставки фармацевтических соединений, такие как, например, липосомы и эмульсии. В определенных вариантах осуществ
- 82 032463 ления композиции, обеспеченные здесь, могут также включать мукоадгезивный полимер, выбранный, например, из карбоксиметилцеллюлозы, карбомера (полимера акриловой кислоты), поли(метилметакрилата), полиакриламида, поликарбофила, сополимера акриловой кислоты и бутилакрилата, альгината натрия и декстрана.
В некоторых вариантах осуществления соединения, описанные здесь, могут быть введены местно и могут быть формулированы в различные вводимые местно композиции, такие как растворы, суспензии, лосьоны, гели, пасты, карандаши, тампоны, кремы или мази. Такие фармацевтические соединение могут содержать солюбилизаторы, стабилизаторы, повышающие тоничность агенты, буферы и консерванты.
Соединения, описанные здесь, могут быть также формулированы в композиции для ректального введения, такие как клизмы, ректальные гели, ректальные пены, ректальные аэрозоли, суппозитории, гелевые суппозитории или удерживающие клизмы, содержащие обычные основы суппозиториев, такие как масло какао или другие глицериды, а также синтетические полимеры, такие как поливинилпирролидон, РЕС и т.п. В композициях в виде суппозиториев в первую очередь происходит плавление легкоплавкого воска, такой как, но без ограничения, смесь глицеридов жирных кислот, необязательно в комбинации с маслом какао.
Дозирование и терапии
В определенных вариантах осуществления в настоящем документе раскрыты способы лечения гематологической злокачественной опухоли у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающие: (а) проведение у субъекта первой терапии, содержащей количество необратимого ингибитора В1к, достаточное для мобилизации множества клеток из злокачественной опухоли; и (Ь) анализ мобилизованного множества клеток. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В1к является достаточным для индукции лимфоцитоза множества клеток из злокачественной опухоли. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В1к составляет от 300 до 1000 мг/сутки включительно. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В1к составляет от 420 до 840 мг/сутки включительно. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В1к составляет примерно 420 мг/сутки, примерно 560 мг/сутки или примерно 840 мг/сутки. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В1к составляет примерно 420 мг/сутки. В некоторых вариантах осуществления АИС0-24 ингибитора В1к составляет между примерно 150 и примерно 3500 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления АИС0-24 ингибитора В11< составляет между примерно 500 и примерно 1100 нг-ч/мл. В некоторых вариантах осуществления ингибитор В1к вводят перорально. В некоторых вариантах осуществления ингибитор В1к вводят один раз в сутки, два раза в сутки или три раза в сутки. В некоторых вариантах осуществления ингибитор В1к вводят до прогрессирования заболевания, неприемлемой токсичности или индивидуального выбора. В некоторых вариантах осуществления ингибитор В1к вводят ежедневно до прогрессирования заболевания, неприемлемой токсичности или индивидуального выбора. В некоторых вариантах осуществления ингибитор В1к вводят через день до прогрессирования заболевания, неприемлемой токсичности или индивидуального выбора. В некоторых вариантах осуществления ингибитор В1к представляет собой поддерживающую терапию.
Соединения, описанные здесь, могут быть использованы для приготовления лекарственных препаратов для ингибирования В1к или его гомолога, или для лечения заболеваний или состояний, которые будут иметь положительный эффект в результате ингибирования В1к или его гомолога, включая пациента и/или субъекта, у которого диагностирована гематологическая злокачественная опухоль. Кроме того, способ лечения любого из заболеваний или состояний, описанных здесь, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включает введение фармацевтических композиций, содержащих, по меньшей мере, одно соединение по любой из формулы (А), формулы (В), формулы (С) или формулы (Ό), описанных здесь, или его фармацевтически приемлемую соль, фармацевтически приемлемый Ν-оксид, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемое пролекарство или фармацевтически приемлемый сольват в терапевтически эффективных количествах указанному субъекту.
Композиции, содержащие соединение(я), описанное здесь, может быть введено для профилактического, терапевтического или поддерживающего лечения. В некоторых вариантах осуществления композиции, содержащие соединения, описанные здесь, вводят для терапевтических целей (например, вводят пациенту, у которого диагностирована гематологическая злокачественная опухоль). В некоторых вариантах осуществления композиции, содержащие соединения, описанные здесь, вводят в терапевтических целях (например, вводят пациенту, подверженному или иным образом имеющему риск развития гематологической злокачественной опухоли). В некоторых вариантах осуществления композиции, содержащие соединения, описанные здесь, вводят пациенту, который находится в стадии ремиссии, в качестве поддерживающей терапии.
Количества соединения, раскрытого здесь, будут зависеть от применения (например, терапевтического, профилактического или поддерживающего). Количества соединения, раскрытого здесь, будут зависеть от степени тяжести и течения заболевания или состояния, предшествующей терапии, состояния здоровья пациента, массы тела и ответа на лекарственные средства, а также заключения лечащего тера
- 83 032463 певта. В компетенции специалиста в данной области находится определение таких терапевтически эффективных количеств с помощью простых экспериментов (включая, но без ограничения, клинические исследования увеличения дозы). В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В!к составляет от 300 до 1000 мг/сутки включительно. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В!к составляет от 420 до 840 мг/сутки включительно. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В!к составляет от 400 и 860 мг/сутки включительно. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В!к составляет примерно 360 мг/сутки. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В!к составляет примерно 420 мг/сутки. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В!к составляет примерно 560 мг/сутки. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В!к составляет примерно 840 мг/сутки. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В!к составляет от 2 до 13 мг/кг/сутки включительно. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В!к составляет от 2.5 до 8 мг/кг/сутки включительно. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В!к составляет от 2.5 до 6 мг/кг/сутки включительно. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В!к составляет от 2.5 до 4 мг/кг/сутки включительно. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В!к составляет примерно 2.5 мг/кг/сутки. В некоторых вариантах осуществления количество необратимого ингибитора В!к составляет примерно 8 мг/кг/сутки.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор В!к, раскрытый здесь, вводят ежедневно. В некоторых вариантах осуществления ингибитор В!к, раскрытый здесь, вводят через день.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор В!к, раскрытый здесь, вводят один раз в сутки. В некоторых вариантах осуществления ингибитор В!к, раскрытый здесь, вводят два раза в сутки. В некоторых вариантах осуществления ингибитор В!к, раскрытый здесь, вводят три раза в сутки. В некоторых вариантах осуществления ингибитор В!к, раскрытый здесь, вводят п раз в сутки.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор В!к, раскрытый здесь, вводят до прогрессирования заболевания, неприемлемой токсичности или индивидульного выбора. В некоторых вариантах осуществления ингибитор В!к, раскрытый здесь, вводят ежедневно до прогрессирования заболевания, неприемлемой токсичности или индивидульного выбора. В некоторых вариантах осуществления ингибитор В!к, раскрытый здесь, вводят через день до прогрессирования заболевания, неприемлемой токсичности или индивидульного выбора.
В случае, когда статус пациента не улучшается, по решению врача введение соединений может быть назначено непрерывным; альтернативно, доза вводимого лекарственного средства может быть временно снижена или временно остановлена на некоторый промежуток времени (то есть лекарственные каникулы). Продолжительность лекарственных каникул может колебаться от 2 дней до 1 года, включая, в качестве примера только 2 дня, 3 дня, 4 дня, 5 дней, 6 дней, 7 дней, 10 дней, 12 дней, 15 дней, 20 дней, 28 дней, 35 дней, 50 дней, 70 дней, 100 дней, 120 дней, 150 дней, 180 дней, 200 дней, 250 дней, 280 дней, 300 дней, 320 дней, 350 дней или 365 дней. Снижение дозы во время лекарственных каникул может составлять 10-100%, в качестве примера только 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95 или 100%.
После наступления улучшения состояния пациента при необходимости вводят поддерживающую дозу. Соответственно, дозирование или частота введения, или и то и другое, могут быть уменьшены как функция симптомов до уровня, при котором поддерживается улучшение заболевания, нарушения или состояния. Тем не менее, пациентам может потребоваться интермиттирующуая терапия на длительной основе при любом повторном возникновении симптомов.
Количество заданного агента, которое будет соответствовать такому количеству, будет изменяться в зависимости от факторов, таких как конкретное соединение, степень тяжести заболевания, идентичность (например, масса тела) субъекта или хозяина, нуждающегося в лечении, но может быть легко определено известным в данной области способом в соответствии с конкретными сопровождающими случай обстоятельствами, включая, например, конкретный вводимый агент, способ введения и проходящий лечение субъект или хозяин. В целом, тем не менее, для лечения взрослого человека дозы применяют дозы, которые, как правило, изменяются в диапазоне 0.02-5000 мг в сутки или примерно 1-1500 мг в сутки. Требуемая доза может быть удобным образом представлена в виде однократной дозы или разделенных доз, вводимых одновременно (или в течение короткого промеждутка времени) или с соответствующими интервалами в виде двух, трех, четырех или более субдоз в сутки.
Фармацевтические композиции, описанные здесь, могут быть представлены в виде стандарных лекарственных форм, пригодных для однократного введения точных доз. В стандартной лекарственной форме композиция разделена на единичные дозы, содержащие соответствующие количества одного или более соединений. Единичная доза может быть представлена в форме упаковки, содержащей дискретные количества композиции. Неограничивающими примерами являются таблетки или капсулы, а также порошки во флаконах или ампулах. Водные суспензионные композиции могут быть упакованы в одноразовые или не закрываемые повторно контейнеры. Альтернативно, могут быть использованы повторно за- 84 032463 крываемые контейнеры. содержащие множество доз. и в этом случае. как правило. в композицию включают консервант. В качестве примера только. лекарственные формы для парентеральной инъекции могут быть представлены в виде стандартной лекарственной формы. которая включает. но без ограничения. ампулы. или в виде контейнеров. содержащих множество доз с добавлением консерванта. В некоторых вариантах осуществления каждая стандартная лекарственная форма содержит 210 мг соединения. описанного здесь. В некоторых вариантах осуществления субъекту вводят 1 стандартную лекарственную форму в сутки. В некоторых вариантах осуществления субъекту вводят 2 стандартные лекарственные формы в сутки. В некоторых вариантах осуществления субъекту вводят 3 стандартные лекарственные формы в сутки. В некоторых вариантах осуществления субъекту вводят 4 стандартные лекарственные формы в сутки.
Указанные выше диапазоны являются лишь иллюстративными. поскольку существует большое число переменных. касающихся режима лечения субъекта. и частно имеются значительные отклонения от этих рекомендуемых величин. Такие дозы могут быть изменены в зависимости от количества переменных. не ограничивающихся активностью используемого соединения. заболеванием или состоянием. подлежащим лечению. способом введения. требованиями к индидуальному субъекту. степени тяжести заболевания или состояния. подлежащего лечению. и заключением практикующего врача.
Токсичность и терапевтическая эффективность таких терапевтических средств может быть определена с помощью стандартных фармацевтических процедур в клеточных культурах или экспериментальных животных. включая. но без ограничения. определение ЬО50 (дозы. летальной для 50% популяции) и ЕЭ50 (дозы. терапевтически эффективной для 50% популяции). Соотношение доз между токсическими и терапевтическими эффектами представляет собой терапевтический индекс и может быть выражен как отношение между ЬП50 и ЕЭ50. Соединения. проявляющие высокие терапевтические индексы. являются предпочтительными. Данные. полученные в результате анализов клеточных культур и исследований животных. могут быть использованы в составлении диапазона доз для применения у человека. Дозы таких соединений предпочтительно лежат в диапазоне циркулирующих концентраций. которые включают ЕЭ50 с минимальной токсичностью. Доза может изменяться в пределах данного диапазона в зависимости от используемой лекарственной формы и способа введения. Наборы/готовые изделия
Настоящее изобретение также охватывает наборы для осуществления способов настоящего изобретения. Например. набор может содержать маркированное соединение или агент. способный детектировать биомаркер. описанный здесь. например. биомаркер апоптоза. клеточной пролиферации или выживаемости. или В!к-опосредованный путь передачи сигнала на уровне белка или нуклеиновой кислоты в биологическом образце. и средства определения количества биомаркера в образце (например. антитело или олигонуклеотидный зонд. который связывается с РНК. кодируя представляющий интерес биомаркер) после инкубации образца с представляющим интерес терапевтическим агентом против ВСЬЭ. Наборы могут быть упакованы таким образом. чтобы обеспечить детекцию множества представляющих интерес биомаркеров путем включения индивидуально меченых соединений или агентов. способных детектировать каждый индивидуальный представляющий интерес биомаркер. и средств определения количества каждого биомаркера в образце.
Конкретный выбор второго используемого агента будет зависеть от диагноза лечащих врачей и их заключения о состоянии пациента. и соответствующего протокола лечения для ингибиторов В!к.
Примеры
Приведенные ниже частные и неограничивающие примеры следует рассматривать только как иллюстративные и они никоим образом не ограничивают настоящее изобретение. Без более детального пояснения предполагается. что специалист в данной области может применить настоящее изобретение в полном объеме. основываясь на настоящем описании. Все публикации. цитируемые в настоящем документе. включены здесь посредством отсылки в полном объеме. Если ссылка указывает на ИКЬ или другой подобный идентификатор или адрес. подразумевается. что такие идентификаторы могут изменяться. и конкретная информация в сети Интернет может появляться и исчезать. но при этом равноценная информация может быть найдена путем поиска в Интернете. Ссылка на данную информацию свидетельствует о том. что она доступна и ее можно распространять.
Клинические исследования. представленные здесь ниже. проиллюстрированы с помощью необратимого ингибитора В!к. (К)-1-(3-(4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3.4-б]пиримидин-1ил)пиперидин-1-ил)проп-2-ен-1-она (то есть РС1-32765/ибрутиниб). В некоторых вариантах осуществления такие исследования выполнены с использованием ингибитора В!к по любой из формул (А). (А1). (В). (В1). (С). (С1). (Ό). (Ό1). (Е) или (Е). В некоторых вариантах осуществления такие исследования выполнены с использованием ингибитора В!к формулы Ό.
Пример 1. Клиническое исследование по определению безопасности и эффективности ингибитора В!к РС1-32765
Основными конечными точками исследования РС1-32765 с увеличением дозы. проводимого у человека впервые. были определение профиля нежелательных явлений; определение занятости активного сайта В!к; нахождение максимально переносимой дозы (МТИ) (если МТИ не достигнута. максимальная доза будет на 3 уровня дозы выше дозы. при которой была достигнута полная занятость В!к); и опреде
- 85 032463 ление фармакокинетики (РК) РС1-32765. Вторичной конечной точкой являлась оценка ответа опухоли на монотерапию РС1-32765.
В исследование с увеличением дозы, которое является частью открытого исследования, включены субъекты с В-клеточными злокачественными опухолями (данные гистологических исследований приведены в табл. 2 ниже), и в настоящее время является завершенным.
Пять уровней доз (всего п=56) тестировали с использованием схемы лечения, состоящей из 28 дней лечения и 7 дней отсутствия лечения; уровни доз составили 1.25 (п=7), 2.5 (п=9), 5.0 (п=6), 8.3 (п=8) и 12.5 (п=7) мг/кг/сутки. Две дополнительные группы пациентов получали непрерывное ежедневное дозирование по 35-дневной схеме: одна группа получала 8.3 мг/кг/сутки (п=10), тогда как другая группа получала 560 мг/сутки (фиксированная когорта; п=9). Лечение пациентов с АВС ОБВСЬ проводили в дозе 560 мг/день; отбор пациентов с другими гистологиями был завершен, и данные, полученные у этих пациентов, были опубликованы (Айуат е! а1., 2010).
Семь полных ответов (СВ) и 23 частичных ответа (РВ) были зафиксированы у всех 56 пациентов; дополнительные 10 субъектов имели стабильное заболевание (8Ώ). Ответы наблюдались при всех уровнях доз и во всех гистологиях. Данные по ответам сведены в табл. 2 (ниже).
аНачавшие получать лечение
СВ - полный ответ;
РВ - частичный ответ;
81) - стабильное течение заболевания;
Р1) -прогрессирующее течение заболевания;
ОВВ - частота объективного ответа на терапию;
1ТТа - пациенты, начавшие получать лечение ТЩепМо-ТгеаТ'
Максимально переносимая доза (МТЭ) не была достигнута. Зафиксировано две дозолимитирующие токсичности (ЭБТ): один субъект имел длительную нейтропению при уровне дозы 2.5 мг/кг/сутки, и другой субъект имел аллергическую реакцию при уровне дозы 8.3 мг/кг/сутки. Дозолимитирующих токсичностей (ЭБТ) не наблюдалось при конечном уровне дозы (12.5 мг/кг/сутки). Полная занятость В1к наблюдалась у всех пациентов при уровне дозы 2.5 мг/кг/сутки.
Результаты фармакокинетического исследования на День 1 и День 8 (стационарное состояние) представлены в табл. 3 и 4 ниже. Общие концентрации в плазме соединения формулы Ώ (общая=связанная фракция + несвязанная фракция) в целом увеличивались с увеличением нормализованных по массе тела доз, составляющих 1.25, 2.5, 5.0, 8.3 и 12.5 мг/кг на День 1.
- 86 032463
Таблица 3. Средние значения (коэффициент вариации) фармакокинетических параметров соединения Формулы I) на День 1
Когорта Колво Доза (мг/кг) Стах1* (нг/мл) Ттах (ч) Аисг, (нг»ч/мл) Т1/2Ь (Ч)
1 5е 1.25 48.7 (54%) 1.0(0%) 181 (50%) 1.7(27%)
2 9 2.5 90.4 (92%) 2.1 (60%) 494 (83%) 1.5 (33%)
3 6 5 86.1 (136%) 2.3 (59%) 419 (95%) 2.5 (51%)
4 8 8.3 135 (71%) 1.8(59%) 923 (84%) 2.1 (28%)
сэ 10 8.3 155 (81%) 2.2 (49%) 1027 (77%) 2.1 (35%)
5 7 12.5 383 (72%) 1.7(28%) 1550 (57%) 1.5 (27%)
Фикс. 9 560 мг фиксирова иная доза 156(91%) 1.8(55%) 749 (69%) 2.65 (69%)
АИС = площадь под кривой;
СО = непрерывное дозирование;
Стах = максимальная наблюдаемая концентрация лекарственного средства;
ΐι/2 = период полувыведения;
Ттах = время до достижения максимальной концентрации а - нижний предел количественного определения составил 0.050 нг/мл для РС1-32765
Ь - период полувыведения от Ттах до 6 ч после дозирования с 2 из 7 субъектов имели резко отклоняющиеся значения
Таблица 4. Средние значения (коэффициент вариации) фармакокинетических параметров РС1-32765 в стационарном состоянии (День 8) (Исследование РСΥС-04753)
Когорта Колво Доза (мг/кг) Стах1* (нг/мл) Стах/ДОЗа (г/л) АиСо-24Ь (нг»ч/мл) АиС0-24ь/доза (г«ч/мл)
1 5 1.25 27.0 (56%)Ь 22.3 (49%) 301 (61%) 250 (53%)
2 9 2.5 114(93%) 37.2 (108%) 1840 (122%) 408 (114%)
3 6 5 112(96%) 22.4 (96%) 1580 (89%) 291 (94%)
4 8 8.3 183 (124%) 22.0 (124%) 2330 (121%) 281 (121%)
СЭ 10 8.3 130 (84%) 15.6(84%) 1545 (89%) 186 (89%)
5 7 12.5 236 (67%) 18.9(67%) 2936 (67%) 235 (68%)
Фикс. 9 560 мг фиксиро ванная доза 122 (29%) 1553 (25%)
АИС = площадь под кривой;
СО = непрерывное дозирование;
Стах = максимальная наблюдаемая концентрация лекарственного средства а - нижний предел количественного определения составил 0.050 нг/мл для РС1-32765
На День 1 значения площади под кривой были установлены от 0 до бесконечности (АИС0.,) и в стационарном состоянии (81еабу-81а1е) от 0 до 24 ч после дозирования (АиС0.24Н). Значения Стах и АИС увеличивались с увеличением дозы от 1.25 до 12.5 мг/кг на День 1 и в стационарном состоянии. Нормализованные по дозе значения Стах и АИС в стационарном состоянии в целом показали дозопропорциональные увеличения, однако большие, чем дозопропорциональные увеличения, наблюдались при уровне дозы 2.5 мг/кг на День 1 и в стационарном состоянии. Время достижения максимальной концентрации в плазме (Ттах) колебалось от 1.0 до 2.3 ч. Средний период полувыведения соединения формулы О после достижения Ттах колебался от 1.5 до 2.5 ч. У пациентов, которые получали нормализованные по массе тела дозы (мг/кг/сутки), высокая межсубъектная вариабельность наблюдалась по всем уровням доз в отношении АИС0_, на День 1 и среднего значения АиС0.24ь в стационарном состоянии (День 8). Введение фиксированной дозы 560 мг/сутки привело к среднему значению системного воздействия соединения формулы О, измеренному как АиС0-,, которое было промежуточным по отношению к средним воздействиям, измеренным при уровнях доз 5 и 8.3 мг/кг. В стационарном состоянии (День 8) системные воздействия у субъектов, которые получали фиксированную дозу 560 мг, имели меньшую межсубъектную вариабельность (измеренную как коэффициент вариаций для АИС0.24) при сравнении с воздействиями у субъектов, которые получали нормализованные по массе тела дозы.
- 87 032463
Анализ РК и фармакодинамических профилей на День 1 показал, что занятость активного сайта В1к была насыщенной через 4 и 24 ч после дозирования при значениях АИС >200 нг-ч/мл. В стационарном состоянии все субъекты, которые получали дозы >2.5 мг/кг/сутки, имели значения АИС >245 нг-ч/мл. Это указывает на то, что несмотря на короткий период полувыведения из плазмы соединения РС1-32765, оно является эффективным необратимым ингибитором в течение по меньшей мере 24 ч и, таким образом, введение один раз в сутки является достаточным для поддержания полной занятости активного сайта В1к.
В СЬЬ, РС1-32765 ингибирует секрецию хемокина и опосредованную хемокином миграцию и адгезию злокачественных клеток. В качестве сравнительного исследования в рамках клинического исследования образцы первичных опухолей пациентов совместно культивировали с клетками, подобными нурзальным, и инкубировали в течение 24 часов с 1 нМ РС1-32765. После обработки секретируемые уровни хемокина ССЬ3 падали от 393 ± 172 пг/мкл до 54 ± 46 пг/мкл (р<0.05) и уровни хемокина ССЬ4 падали от 2550 ± 678 пг/мкл до 394 ± 188 пг/мл (р<0.05). Более того, в культурах первичных СБЬ, полученных из образцов от пациентов этого же самого клинического исследования, 1 мкМ РС1-32765 уменьшал опосредованный хемокином СХСБ12 хемотаксис (57 ± 9% контроль, п=10) и опосредованный хемокином СХСБ13 хемотаксис (46 ± 5% контроль, п=10). Образцы плазмы от пациентов с СЬЬ по этому исследованию показали высокие уровни хемокинов ССБ3/4 до начала лечения, и эти уровни были значительно снижены после лечения: через 24 ч после первой дозы РС1-32765 уровни хемокина ССБ3 снизились от 60 ± 29 пг/мл до 16 ± 13 пг/мл, и уровни хемокина ССБ4, имеющиеся до начала лечения, снизились от 106 ± 55 пг/мл до 23 ± 12 пг/мл (п=6).
Пример 2. Клиническое исследование с использованием РС1-32765 у пациентов с СЬЬ
Фазу 1Ь/11 клинического исследования выполняли для изучения эффектов РС1-32765 на субъектов с рецидивирующим или рефрактерным (В/В) хроническим лимфоцитарным лейкозом/мелкоклеточной лимфоцитарной лимфомой (СГЬ/ЗЬЕ).
Тип исследования: Интервенционный
Порядок распределения участников исследования: Нерандомизированный Классификация конечных точек исследования: Исследование безопасности Экспериментальная модель: Параллельная оценка
Маскировка: Открытое исследование
Основная цель: Лечение
Группа I (пожилые, ранее не получавшие лечения субъекты) получала 420 мг/сутки РС1-32765. Группа II (пожилые, ранее не получавшие лечения субъекты) получала 840 мг/сутки РС1-32765.
Группа III (В/В субъекты, которые дважды получали лечение препаратом Флудара) получала 420 мг/сутки РСГ32765.
Группа IV (В/В субъекты, которые дважды получали лечение препаратом Флудара) получала 840 мг/сутки РСГ32765.
Характеристики пациентов приведены в табл. 5 и 6.
Таблица 5. Характеристики пациентов
Группа I (ранее не получавшие лечения) 420 мг/сутки (N=26) Группа II (ранее не получавшие лечения) 840 мг/сутки (N=5) Всего (N=31)
Возраст, лет Средний: 71 (66-84) 71 (65-77) 71 (65 -84)
=70 лет, # (%) 20 (77) 3(60) 23 (74)
Общее состояние по шкале ЕСОС, # (%) 0 18/25 (72) 2(40) 20/30 (67)
1 7/25 (28) 3(60) 10/30 (33)
Β-2-Микроглобулин > 3 мг/л 7(27) 0 7(23)
Цитопения на исходном уровне, # (%) Гемоглобин (НОВ) < 11г/дл 8(31) 2(40) 10 (32)
Тромбоциты < 100000/мкл 11(42) 1(20) 12 (39)
НОВ < 11г/дл или РЬТ < 100000/мкл 16 (62) 3(60) 19(61)
Прогностические маркеры, # (%) Немутированный статус ЦУН: 11(42) 2/4 (50) 13/30 (43)
Ое1(17р): 2(8) 0 2(6)
- 88 032463
Группа III К/КСЬЬ 420 мг/сутки (N=27) Группа IV - К/КСЬЬ 840 мг/сутки (N=34) Всего (N=61)
Возраст, лет Средний: 64 64 64
Диапазон: 40-81 44-80 40-81
=70 лет, # (%) 9(33) 10 (29) 19(31)
Диагноз, # (%) СЬЬ: 26 (96) 33 (97) 59 (97)
8ЬЬ: 1(4) 1(3) 2(3)
Общее состояние по шкале ЕСОС, # (%) 0 Н(41) 13 (38) 24 (39)
1/2 16 (59) 21 (62) 37 (61)
Число предшествующих терапий, # Среднее значение: 3 5 4
Диапазон: 2 - 10 1 - 12 1-12
Предшествующая терапия, # (%) Нуклеозидный аналог 27 (100) 34 (100) 61 (100)
Ритуксимаб 25 (93) 33 (97) 58 (95)
Алкилятор 24 (89) 28 (82) 52 (85)
Алемтузумаб 5(19) 3(9) 8(13)
Бендамустин 8(30) 13 (38) 21 (34)
Офатумумаб 8(30) 10 (29) 18 (30)
Генерализованная лимфаденопатия, # (%) > 5 см 13 (48) 20 (59) 33 (54)
> 10 см 1(4) 9(26) 10 (16)
Цитопения на исходном уровне, # (%) Абс.число нейтрофилов (АИС) < 1500/мкл 7(26) 17 (50) 24 (39)
Гемоглобин (НСВ) < 11г/дл 4(15) 18(53) 22 (36)
Тромбоциты < 100000/мкл 8(30) 24 (71) 32 (52)
НСВ < 11 г/дл или РЬТ < 100000 мкл 9(33) 27 (79) 36 (59)
Рефрактерные к аналогам пурина, # (%) (отсутствие лечения в течение <12 месяцев после терапии аналогом пурина) 10 (37) 18(53) 28 (46)
Прогностические маркеры, # (%) Немутированный статус 1дУН: 19/25 (76) 23/28 (82) 42/53 (79)
Це1(17р): 9/24 (38) 11/32 (34) 20/56 (36)
ϋε1(11φ: 8/24 (33) 14/32 (44) 22/56 (39)
В-2-Микроглобулин > 3 мг/л 9/25 (36) 20/32 (63) 29/57 (51)
Оценку опухоли выполняли после каждых 2 циклов терапии.
Цели клинического исследования:
1. Описание характеристик противоопухолевого действия РС!-32765 у субъектов с С1.1781,1,, например, уменьшения лимфаденопатии/спленомегалии, и кинетики изменения абсолютного числа лимфоцитов (АСЬ).
2. Обобщение результатов исследования безопасности РСЕ32765.
Критерии включения:
Только для групп, не получавших ранее лекарственной терапии: Мужчины и женщины в возрасте > 65 лет с подтвержденным диагнозом С1,1,'81,1,, которым требуется лечение в соответствии с руководствами 11-14 Национального института исследования рака (ХСЧ) или Международной рабочей группы.
Только для рецидивирующих/рефрактерных групп: Мужчины и женщины в возрасте >18 лет с подтвержденным диагнозом рецидивирующего/рефрактерного Скк'8Рк, не отвечающие на терапию (то есть > 2 неудачных предшествующих терапий в отношении С1,1,'81,1, и по меньшей мере 1 схема лечения включала аналог пурина [например, флударабин] для субъектов с СЬЬ).
Масса тела >40 кг;
Общее состояние по шкале 1·Χ'Ό6 <2;
Согласие на использование противозачаточных средств во время исследования и в течение 30 дней после последней дозы исследуемого лекарственного средства в случае сексуальной активности и способности рожать детей;
Желание и способность участвовать во всех требуемых оценках и процедурах данного протокола исследования, включая отсутствие затруднений в проглатывании капсул;
Способность понять цели и риски исследования и предоставить подписанное и датированное информированное согласие и разрешение на использование охраняемой законом информации о состоянии здоровья (в соответствии с национальными и местными законами о конфиденциальности информации о субъектах).
Критерии исключения:
Угрожающее жизни заболевание, общее состояние или системная дисфункция органа, которая, по мнению исследователя, может негативно сказаться на безопасности субъекта, препятствовать абсорбции или метаболизму РСЕ32765 РО, или подвергнуть неоправданному риску результаты исследования;
- 89 032463
Любая иммунотерапия, химиотерапия, лучевая терапия или экспериментальная терапия в течение 4 недель до первой дозы исследуемого лекарственного средства (кортикостероиды для связанных с заболеванием симптомов разрешены, но требуется 1 неделя выведения перед введением исследуемого лекарственного средства);
Вовлечение в лимфому центральной нервной системы (СЫ8);
Обширное оперативное вмешательство в течение 4 недель до первой дозы исследуемого лекарственного средства;
Креатинин >1.5 х установленная верхняя граница нормы (иЬЫ); общий билирубин >1.5 х υΤΝ (если только не по причине болезни Жильбера); и аспартатаминотрансфераза (А8’) или аланинаминотрансфераза (АЬ’) > 2.5 х υΕΝ, если только не связано с заболеванием;
Сочетанное применение лекарственных средств, которые вызывают синдром удлиненного интервала 9’ или двунаправленную желудочковую тахикардию;
Значительные аномалии по данным электрокардиографии (ΕСО), включая блокаду левой ножки пучка, 2 степень блокады АУ типа ΙΙ, 3 степень блокады, брадикардию и ^Гс > 470 мс;
Кормление грудью или беременность.
Критерии оценки ответа:
Критерий 1 ΝΗΤ применяется ко всем случаям 8ЬЬ без изменения.
Критерий 2008 С1.1. Ι^6 применяется ко всем случаям СЬЬ со следующими изменениями:
1) Изолированный лимфоцитоз, в отсутствие других параметров отвечающий критерию прогрессирующего заболевания (РЭ), не рассматривался как прогрессирующее заболевание (РЭ);
2) Пациенты, испытывающие лимфоцитоз, но получающие частичный ответ (РК) по другим измеряемым параметрам, были классифицированы как нодальный ответ, пока не было 50%-ного уменьшения абсолютного числа лимфоцитов (АЬС) от исходного уровня, и в этом случае они были классифицированы как частичный ответ (РК).
3) У пациентов с нормальным абсолютным числом лимфоцитов (АЬС) (<5К) на исходном уровне с лимфоцитозом, связанным с лечением, требовалась нормализация до <5К для классификации как частичный ответ (РК).
Результаты
Результаты исследования представлены в табл. 6-11.
Таблица 6. Распределение участников клинического исследования, не получавших ранее лекарственной терапии
Группа I-Не получавшие лек.терапии 420 мг/сутки (N=26) Группа II - Не получавшие леклерапии 840 мг/сутки (N=5)
Субъекты, досрочно выбывшие из исследования, # (%) 4(15) 1(20)
Основные причины досрочного выбывания из исследования, # (%) Прогрессирование заболевания Нежелательные явления Несвязанные: вирусный синдром Несвязанные: Ухудшение ЖК кровотечения Возможно связанные: утомляемость Субъекты, отозвавшие согласие “желающие получить более быстрый ответ” 1(4)а 2 (8)ь’с 1(4/ 0(0) 1 (20)е
Смертельные исходы во время исследования, # (%) 0 0
# дни приема ибрутиниба:
a) 280 дней;
b) 41 дней;
c) 115 дней;
б) 41 дней;
е) 9 дней
- 90 032463
Таблица 7. Распределение участников клинического , исследования - В/В СЬЬ
Группа III - К/К СЬЬ 420 мг/сутки (N=27) Группа IV - К/К СЬЬ 840 мг/сутки (N=34)
Субъекты, досрочно выбывшие из исследования, # (%) 7(26) 8(24)
Основные причины досрочного выбывания из исследования, # (%) Прогрессирование заболевания Нежелательные явления Другие 2 Смертельные исходы во время исследования1 2(7) 1(4) 1(4)“ 1(4) 1(3) 1(3) 2(6)
причина смерти: 1 пневмония, 1 острый респираторный дистресс-синдром (ЛК^8)/криптококковая пневмония, 1 ретикулоклеточная саркома 2 Другие: 5 трансплантат, 1 диагностирован немелкоклеточный рак легкого (Ы8СЬС) на день 5, 1 прием не включенного в исследование лекарственного средства > 2 не дель
Таблица 8. Наилучший ответ - не получавшие ранее лекарственной терапии
Группа I- Не получавшие леклерапии 420 мг/сутки (N=26) Средняя продолжительность последующего врачебного наблюдения (ί/и) = 14.4 мес. #(%) Сгоир II-Не получавшие лек.терапии 840 мг/сутки (N=5) Средняя продолжительность последующего врачебного наблюдения (17и)= 7.4 мес. #(%) всего (N=31) Средняя продолжительность последующего врачебного наблюдения (Г/и )= 12.8 мес. #(%)
СК (полный ответ) 3(12) 0 3(10)
РК (частичный ответ) 18 (69) 2(40) 20 (65)
ОКК (частота объективного ответа) (согласно критерию 1\¥СЬЬ 2008) 81% 40% 74%
Нодальный ответ 3(12) 1(20) 4(13)
8Б (стабильное течение заболевания) 1(4) 1(20) 2(6)
ΡΙ) (прогрессирующее течение заболевания) 0 0 0
ΝΕ (не установлено) 1(4) 1(20) 2(6)
Таблица 9. Наилучший ответ - В/В СЬЬ
Группа III - К/К СЬЬ 420 мг/сутки (N=27) Средняя продолжительность последующего врачебного наблюдения (Г/н) = 14.4 мес. #(%) Группа IV - К/К СЬЬ 840 мг/сутки (N=34) Средняя продолжительность последующего врачебного наблюдения (ί/и) = 7.4 мес. #(%) Всего (N=31) Средняя продолжительность последующего врачебного наблюдения (Г/н) = 12.8 мес. #(%)
СК (полный ответ) 1(4) 0 1(2)
РК (частичный ответ) 17 (63) 23 (68) 40 (66)
ОКК (частота объективного ответа на терапию) (согласно критерию 1\¥СЬЬ 2008) 67% 6% 67%
Нодальный ответ 6(22) 8(24) 12 (23)
8ϋ (стабильное течение заболевания) 1(4) 1(3) 2(3)
ΡΏ (прогрессирующее течение заболевания) 1(4) 0 1(2)
ΝΕ (не установлено) 1(4) 2(6) 3(5)
- 91 032463
Таблица 10. Наилучший ответ по характеристикам риска - не получавшие ранее лекарственной терапии
N Частота объективного ответа на терапию (ОКИ), % (и) Полный ответ (СК), % (и)
Все пациенты 31 74 (23) 10(3)
Возраст > 70 лет 23 70 (16) 13(3)
Н§Ь <11 г/дл или РЬТ < 100К/мкл при скрининге 19 79(15) 11(2)
Немутированный статус 1§УН 13 92 (12) 15(2)
Присутствует делеции ϋε117ρ 2 100 (2) 0(0)
02-Микроглобулин > 3 мг/л 7 86 (6) 29 (2)
Таблица 11. Наилучший ответ по характеристикам риска - Я/Я СЬЬ
η/Ν Частота объективного ответа на терапию (ОКК), %
Все пациенты 41/61 67
Возраст > 70 лет 13/19 68
Массивное поражение (Ьи1к <1 ΐ хеахе) > 5 см 24/33 73
Массивное поражение (Ьи1к (йзеазе) > 10 см 7/10 70
НцЬ < 11 г/дл или РЬТ < ΙΟΟΚ/мкл при скрининге 22/36 61
Немутированный статус 1цУН 31/42 74
Присутствует делеции Ое117р 13/20 65
присутствует делеции ОеНПц 16/22 73
β2-Микроглобулин > 3 мг/л 19/29 66
Рефрактерный к аналогу пурина (>12 мес после терапии любым аналогом пурина до следующей терапии) 17/28 61
Результаты этого исследования далее обобщены на фиг. 2-7. На фиг. 2 показан ответ лимфатического узла (ЬК) у пациента, страдающего СЬЬ, до и после лечения с помощью РС1-32765. На фиг. 3 показано уменьшение опухолевой массы после курса терапии с помощью РС1-32765 у пациентов с Я/Я СЬЬ, проводимой в дозе 420 мг/сутки или 840 мг/сутки РС1-32765. На фиг. 4 представлено абсолютное число лимфоцитов (АЬС) и сумма произведений наибольших диаметров (ЗРЭ) лимфатических узлов (ЬК) во время курса терапии с помощью РС1-32765 у пациентов, ранее не получавших лекарственной терапии или имеющих Я/Я СЬЬ, которым вводили 420 мг/сутки РС1-32765. На фиг. 5 представлен суммарный наилучший ответ на лечение у пациентов, ранее не получавших лекарственной терапии, которым вводили 420 мг/сутки РС1-32765 в течение последовательных циклов лечения (циклы 2, 5, 8, 11 и лучший ответ). На фиг. 6 представлен суммарный наилучший ответ у пациентов с Я/Я СЬЬ, которым вводили 420 мг/сутки РС1-32765 в течение последовательных циклов лечения (циклы 2, 5, 8, 11 и лучший ответ). На фиг. 7 представлено сравнение суммарного наилучшего ответа у пациентов с Я/Я СЬЬ (ЯЯ) с пациентами, ранее не получавшими лекарственной терапии ('ΓΝ), которым вводили 420 мг/сутки РС1-32765 в течение последовательных циклов лечения. Выводы:
Предварительные данные Фазы II подтверждают, что РС1-32765 является высоко активным как у пациентов, не получавших ранее лекарственной терапии, так и у пациентов с рецидивирующей/рефракторной СЬЬ/ЗЬЬ. Класс-специфическое быстрое уменьшение лимфатических узлов с сопутствующим лимфоцитозом наблюдается у большинства пациентов. Согласно ΙΛ6 СЬЬ 2008, объективные ответы на терапию (частичный ответ (РЯ) + полный ответ (СЯ)) и нодальные ответы оказались длительными и не зависящими от геномных признаков высокого риска. Высокая доля (86%) рецидивирующих или рефрактерных пациентов не имеют прогрессирования в течение 12 месяцев (кагорта, получавшая 420 мг).
Пример 3. Исследование во время длительного последующего наблюдения субъектов, получавших РС1-32765
Целью данного исследования является определения длительной безопасности схемы, предусматривающей ежедневный прием фиксированной дозы РС1-32765, у субъектов с В-клеточной лимфомой или хроническим лимфоцитарным лейкозом/мелкоклеточной лимфоцитарной лимфомой (СЬЬ/ЗЬЬ).
Тип исследования: Интервенционный
Порядок распределения участников исследования: Нерандомизированный
Классификация конечных точек исследования: Исследование безопасности
Экспериментальная модель: Оценка одной группы
Маскировка: Открытое исследование
Основная цель: Лечение
Введение: 420 мг/сутки РС1-32765
- 92 032463
Состояния, в отношении которых применяется: В-клеточный хронический лимфоцитарный лейкоз; мелкоклеточная лимфоцитарная лимфома; диффузная высокодифференцированная лимфоцитарная лимфома; В-клеточная лимфома; фолликулярная лимфома; лимфома из клеток мантийной зоны; неходжкинская лимфома; макроглобулинемия Вальденстрема; лимфома Беркитта; В-клеточная диффузная лимфома Первичные конечные точки исследования:
Нежелательные явления/Безопасная переносимость [Период проведения: в течение 30 дней после последней дозы исследуемого лекарственного средства] - частота, степень тяжести и связь нежелательных явлений с исследуемым лекарственным средством
Вторичные конечные точки исследования:
1. Ответ опухоли [Период проведения: частота оценки опухоли соответствует стандарту лечения] ответ опухоли оценивается согласно установленным критериям ответа. В данном исследовании фиксируется время до прогрессирования заболевания и длительность ответа.
2. Ответ опухоли [Период проведения: Время до прогрессирования заболевания] -Длительность ответа, измеренная с помощью установленного критерия ответа для В-клеточной лимфомы и хронического лимфоцитарного лейкоза
Критерии включения:
Мужчины и женщины с В-клеточной лимфомой или хроническим лимфоцитарным лейкозом (СЬЬ)/мелкоклеточной лимфоцитарной лимфомой (8ЬЬ), которые имеют стабильное течение заболевания или ответ на РС1-32765 РО (порошкообразный) в течение по меньшей мере 6 месяцев в предшествующем исследовании РС1-32765 и желают продолжить лечение исследуемым лекарственным средством, или которые имели прогрессирующее течение заболевания в исследовании ΡСΥС-04753 и желают попробовать более высокую дозу;
Общее состояние по шкале Восточной Объединенной Онкологической группы США (ЕС0С)<2;
Согласие на использование противозачаточных средств во время исследования и в течение 30 дней после приема последней дозы исследуемого лекарственного средства в случае сексуальной активности и способности рожать детей;
Желание и способность участвовать во всех требуемых оценках и процедурах в данном протоколе исследования, включая отсутствие затруднений при проглатывании капсул;
Способность понять цели и риски исследования и предоставить подписанное и датированное информированное согласие и разрешение на использование охраняемой законом информации о состоянии здоровья (в соответствии с национальными и местными законами о конфиденциальности информации о субъектах) .
Критерии исключения:
Угрожающее жизни заболевание, общее состояние или системная дисфункция органа, что по мнению исследователя может негативно сказаться на безопасности субъекта, препятствовать абсорбции или метаболизму РС1-32765 Р0 или подвергнуть неоправданному риску результаты исследования
Сопутствующая иммунотерапия, химиотерапия, лучевая терапия, кортикостероиды (при дозах, эквивалентных преднизону >20 мг/день) или экспериментальная терапия;
Сочетанное применение лекарственных средств, которые вызывают синдром удлиненного интервала ОТ или двунаправленную желудочковую тахикардию;
Вовлечение в лимфому центральной нервной системы (СЫ8);
Креатинин >1.5 х установленная верхняя граница нормы (ϋΣΝ); общий билирубин >1.5 х ИБИ (если только не по причине болезни Жильбера) и аспартатаминотрансфераза (А8Т) или аланинаминотрансфераза (АЬТ) > 2.5 х ИБИ, если только не связано с заболеванием;
Кормление грудью или беременность.
Пример 4. Фаза II исследования РС1-32765 у пациентов с рецидивирующей/рефрактерной лимфомой из клеток мантийной зоны (МСЬ)
Целью данного исследования является оценка эффективности РС1-32765 у субъектов с рецидивирующей/рефрактерной МСЬ, которые ранее не получали бортезомиб и которые получали ранее бортезомиб. Вторичной целью является оценка безопасности схемы, предусматривающей ежедневное дозирование фиксированной дозы РС1-32765 в форме капсул в этой популяции.
Тип исследования: Интервенционный
Порядок распределения участников исследования: Нерандомизированный
Классификация конечных точек исследования: Исследование безопасности/эффективности
Экспериментальная модель: Параллельная оценка
Маскировка: Открытое исследование
Основная цель: Лечение
Введение: 560 мг/сутки РС1-32765
Первичные конечные точки исследования
Оценка некоторого количества участников, имеющих ответ на исследуемое лекарственное средство [Период выполнения: Участники будут оставаться под наблюдением до прогрессирования заболевания
- 93 032463 или до начала другой противораковой терапии].
Вторичные конечные точки исследования
1. Оценка некоторого количества участников, имеющих нежелательные явления как показатель безопасности и переносимости [Период проведения: Участники будут оставаться под наблюдением до прогрессирования заболевания или начала другой противораковой терапии];
2. Оценка фармакокинетики некоторого количества участников для содействия в определении, каким образом организм отвечает на исследуемое лекарственное средство [Период проведения: Процедура выполняется в течение первого месяца получения исследуемого лекарственного средства];
3. Анкета с оценками результатов, полученными от участников [Период проведения: Участники будут оставаться под наблюдением до прогрессирования заболевания или начала другой противораковой терапии];
4. Оценка полученных от некоторого количества участников анкет с оценками результатов для определения связанного с состоянием здоровья качества жизни.
Критерии включения:
Мужчины и женщины в возрасте >18 лет
Общее состояние по шкале ЕСОС <2
Патологически подтвержденная МСЬ с документально подтвержденной сверхэкспрессией циклина Ό1 или !(11;14), и измеряемые проявления болезни на изображении поперечного разреза, а именно >2 см в самом длинном диаметре, и измеряемые в 2 перпендикулярных направлениях;
Документально подтвержденная неудача в достижении, по меньшей мере, частичного ответа (РВ) во время самой последней схемы лечения или документально подтвержденное прогрессирование заболевания впоследствии;
По меньшей мере 1, но не более 5 предшествующих схем лечения МСЬ (Примечание: Субъекты, получившие >2 циклов предшествующей терапии бортезомибом в качестве монотерапии или в составе комбинированной схемы лечения, будут рассматриваться как подвергшиеся воздействию бортезомиба);
Желание и способность участвовать во всех требуемых оценках и процедурах в данном протоколе исследования, включая отсутствие затруднений в проглатывании капсул;
Способность понять цели и риски исследования и предоставить подписанное и датированное информированное согласие, и разрешение на использование охраняемой законом информации о состоянии здоровья (в соответствии с национальными и местными законами о конфиденциальности информации о субъектах).
Основные критерии исключения:
Предшествующая химиотерапия в течение 3 недель, нитрозомочевины в течение 6 недель, терапевтические противораковые антитела в течение 4 недель, радио- или токсин-иммуноконъюгаты в течение 10 недель, лучевая терапия в течение 3 недель или обширное оперативное вмешательство в течение 2 недель до введения первой дозы исследуемого лекарственного средства;
Любое угрожающее жизни заболевание, общее состояние или системная дисфункция органа, что, по мнению исследователя, может негативно сказаться на безопасности субъекта, препятствовать абсорбции или метаболизму капсул РС1-32765 РО, или подвергнуть неоправданному риску результаты исследования;
Клинически значимое сердечно-сосудистое заболевание, такое как неконтролируемая или симптоматическая аритмия, застойная сердечная недостаточность или инфаркт миокарда в течение 6 месяцев до скрининга, или любое кардиологическое заболевание Класса 3 или 4, определенное по классификации Нью-Йоркской кардиологической ассоциации
Синдром мальабсорбции, заболевание, значительно поражающее желудочно-кишечную функцию, или резекция желудка или тонкого кишечника, или язвенный колит, симптоматическое воспалительное заболевание кишечника, или полная кишечная непроходимость;
Любое из следующих лабораторных отклонений от нормы: абсолютное число нейтрофилов ^N0) < 750 клеток/мм3 (0.75 х 109/л), если только не зафиксировано вовлечение костного мозга; число тромбоцитов < 50000 клеток/мм3 (50 х 109/л), независимо от поддержки гемотрансфузией, если только не зафиксировано вовлечение костного мозга; сывороточная аспартаттрансаминаза (А8Т/8СОТ) или аланинтрансаминаза (АЬТ/8СРТ) > 3.0 х верхняя граница нормы (ИЬк); креатинин > 2.0 х ЬЬК
Характеристики пациентов, включенных в исследование, представлены в табл. 12 и 13 ниже
- 94 032463
Таблица 12
Ранее не получали терапию Бортезомибом (N=41) Получали терапию Бортезомибом (N=27) Всего (N=68)
Возраст: Средний: 66 69 67
Диапазон: 47-83 54-83 47-83
Пол: Мужской 31 (76) 23 (85) 54 (79)
Время от первичного диагноза, # (%) <3 лет до 1-й дозы 20 (49) 6(22) 26 (38)
>3 лет до 1-й дозы 21(51) 21 (78) 42 (62)
Состояние здоровья по шкале ЕСОО: 0 24 (59) 13 (48) 37 (54)
1 12 (29) 12 (44) 24 (35)
2 5(12) 2(7) 7(Ю)
Количество предшествующих схем лечения, # (%) Среднее 2 3 2
Диапазон 1-5 1-5 1-5
<3 режимов 28 (68) И(41) 39 (57)
>3 режимов 13 (32) 16 (59) 29 (43)
Таблица 13
Ранее не получали терапию Бортезомибом (N=41) Получали терапию Бортезомибом (N=27) Всего (N=68)
Предшествующая высокоинтенсивная терапия, # (%) Химиотерапия Нерег-СУАО 17(41) И(41) 28 (41)
Трансплантация стволовых клеток 5(12) 2(7) 7(Ю)
Консервативная терапия препаратами платины 2(5) 0(0) 2(3)
Прогностический индекс ΜΙΡΙ, # (%)
Низкий риск 7(17) 3(11) 10(15)
Промежуточный риск 16 (39) 10 (37) 26 (38)
Высокий риск 17(41) И(41) 28 (41)
Массивное поражение (Ьи1ку Фзеазе) 5(12) 4(15) 9(13)
(размер опухолевой массы >10 см ЬБ), # (%) Стадия IV заболевания, # (%) 32 (78) 23 (85) 55 (81)
Рефрактерное заболевание*, # (%) 14 (34) 13 (48) 27 (40)
МГР^МСЬ Международный прогностический индекс;
IТ) Самый длинный диаметр *Рефрактерное заболевание = неудача в достижении, по меньшей мере, частичного ответа (РК) на последнюю терапию до начала исследования
Распределение пациентов для исследования представлено в табл. 14.
- 95 032463
Таблица 14
Ранее не получали терапию Бортезомибом (N=41) Получали терапию Бортезомибом (N=27) Всего (N=68)
Продолжительность участия в исследовании (мес), #
Кол-во 36 25 61
Среднее 3.7 3.7 3.7
Диапазон 0.9-7.0 0.7-7.5 0.7-7.5
Пациенты, все еще находящиеся на лечении в программе исследования 29 (71) 19 (70) 48(71)
Пациенты, досрочно прервавшие лечение, # (%) Основные причины для досрочного прерывания лечения, # (%) 12 (29) 8 (30) 20 (29)
Прогрессирование заболевания 7(17) 6(22) 13 (19)
Нежелательное явление 2(5) 1(4) 3(4)
Решение спонсора 1(2) 0(0) 1(1)
Решение исследователя 2(5) 1(4) 3(4)
Смертельные исходы в период исследования1, # (%) 0(0) 1(4) 1(2)
1 Причина смертельных исходов: пневмония
Результаты:
Результаты наилучшего ответа для пациентов с рецидивирующей или рефрактерной МСЬ. не получавших ранее терапию бортезомибом и получавших терапию бортезомибом. представлены на фиг. 19 и в табл. 15 ниже.
Таблица 15
η/Ν Частота объективного ответа (ОВК), %
Все пациенты 35/51 69
Массивное поражение (Ьи1ку (Нкеаве) 4/7 57
Рефрактерная
Да 14/21 67
Нет 21/30 70
Число предшествующих терапий рака
<3 схем лечения 23/30 77
>3 схем лечения 12/21 57
Предшествующая высокоинтенсивная терапия
Да 22/31 71
Нет 13/20 65
Прогностический индекс ΜΙΡΙ: Низкий риск 6/8 75
Промежуточный риск 13/20 65
Высокий риск 15/20 75
РС1-32765 индуцировал высокую частоту ответа в случае рецидивирующей или рефрактерной МС1, и был ассоциирован с благоприятным профилем безопасности. Значительной миелосупрессии у пациентов во время исследования не наблюдалось.
- 96 032463
Пример 5. Фаза II исследования РС1-32765+офатумумаб в рецидивирующем/рефрактерном хроническом лимфоцитарном лейкозе (СЬЬ)
Целью данного исследования является определение эффективности и безопасности схемы терапии, предусматривающей ежедневное пероральное введение фиксированной дозы РСЧ-32765 в комбинации с офатумумабом, у субъектов с рецидивирующим/рефрактерным СЬЬ/8ЬЬ и связанными заболеваниями.
Тип исследования: Интервенционный
Порядок распределения участников исследования: Нерандомизированный
Классификация конечных точек исследования: Исследование безопасности
Экспериментальная модель: Оценка одной группы
Маскировка: Открытое исследование
Основная цель: Лечение
Введение: 420 мг/сутки РСГ32765, стандартная доза офатумумаба
Состояния, к которым применяется: В-клеточный хронический лимфоцитарный лейкоз; мелкоклеточная лимфоцитарная лимфома; диффузная высокодифференцированная лимфоцитарная лимфома; пролимфоцитарный лейкоз; трансформация Рихтера
Первичные конечные точки исследования:
Ответ и безопасность РСЧ-32765 [Период проведения: В конце циклов 1 и 3]
Частота ответа, определенная согласно последним рекомендациями по хроническому лимфоцитарному лейкозу
Вторичные конечные точки исследования:
1. Фармакокинетические/Фармакодинамические оценки [Период проведения: в течение 1-2 циклов]
2. Фармакодинамика РСГ32765 (то есть занятость лекарственного средства В1к и эффект на биологический маркер 1/2) РСЧ-32765
3. Ответ опухоли [Период проведения: в конце Циклов 2, 4 и 6 (28 дней для каждого цикла)]
4. Общая частота ответа, определенная с помощью последних рекомендаций по СЬЬ
Критерии включения:
Субъекты с гистологически подтвержденным хроническим лимфоцитарным лейкозом (СЬЬ), мелкоклеточной лимфоцитарной лимфомой (8ЬЬ), пролимфоцитарным лейкозом (РЬЬ), определенные согласно классификации ВОЗ гематопоэтических неоплазм, или трансформацией Рихтера, возникшей из СЬЬ/8кк, и удовлетворяющие > 1 из следующих условий:
Прогрессирующая спленомегалия и/или лимфаденопатия, идентифицированная с помощью физического обследования или рентгенографических исследований; Анемия (<11 г/дл) или тромбоцитопения (<100000/мкл) по причине вовлечения костного мозга;
Присутствие непреднамеренной потери массы >10% в течение предшествующих 6 месяцев;
Степень 2 или 3 утомляемости по классификации ΝΌ СТСАЕ;
Повышенная температура >100.5 степени или ночные приливы в течение >2 недель без признаков инфекции
Прогрессирующий лимфоцитоз с увеличением на >50% в течение 2-х месячного периода или предполагаемое время удвоения <6 месяцев
Необходимость в циторедукции до трансплантации стволовых клеток
Субъекты должны иметь неудачу в >2 предшествующих терапиях СЬЬ, включая аналоги нуклеозидов, или > 2 предшествующих терапиях, не включающих аналоги нуклеозидов в случае наличия противопоказаний для такой терапии >10% экспрессии СЭ20 на опухолевых клетках
Состояние здоровья по шкале ЕС0С <2
Ожидаемая продолжительность жизни >12 недель
Субъекты должны иметь функцию органа или костного мозга, как определено ниже:
Абсолютное число нейтрофилов (АЫС) > 1000/мкл в отсутствие вовлечения костного мозга, тромбоциты >30000/мкл, общий билирубин<1.5 х установленная верхняя граница нормы, если только не по причине болезни Гиблерта, А8Т(8С0Т) < 2.5 х установленная верхняя граница нормы, если только не по причине инфильтрации печени, креатинин <2.0 мг/дл 0К клиренс креатинина >50 мл/мин
Отсутствие истории предшествующей анафилактической реакции на ритуксимаб
Возраст >18 лет - Масса тела > 40 кг
Способность проглатывать капсулы без затруднения и отсутствие истории синдрома малабсорбции, заболевания, значительно поражающего желудочнокишечную функцию, или резекция желудка или тонкого кишечника, или язвенный колит, симптоматическое воспалительное заболевание кишечника, или частичная или полная непроходимость кишечника.
Критерии исключения:
Угрожающее жизни заболевание, общее состояние или системная дисфункция органа, что по мнению исследователя может негативно сказаться на безопасности субъекта, препятствовать абсорбции или метаболизму РСЧ-32765 РО, или подвергнуть неоправданному риску результаты исследования;
- 97 032463
Любая противораковая иммунотерапия, химиотерапия, лучевая терапия или экспериментальная терапия в течение 4 недель до первой дозы исследуемого лекарственного средства. Кортикостероиды для связанных с заболеванием симптомов разрешены при условии 1 недели периода вымывания;.
Вовлечение в лимфому центральной нервной системы (С№) - Обширное оперативное вмешательство в течение 4 недель до первой дозы исследуемого лекарственного средства;
Кормление грудью или беременность;
История предшествующей злокачественной опухоли, за исключением излечения базальноклеточного или сквамозно-клеточного рака кожи, рака шейки матки т κίΐιι или другого рака, в той мере, в которой это возможно, благодаря которому субъект не имел заболевания по меньшей мере в течение 2 лет, или которое не будет ограничивать выживаемость < 2 годами
История токсичности степени >2 (отличной от алопеции), продолжающейся в результате предшествующей противораковой терапии.
Характеристики пациентов, включенных в исследование, представлены в табл. 16 и 17 ниже.
Таблица 16
(N=27)
Возраст, лет Средний: Диапазон: >70 лет, # (%) 66 51-85 12 (44)
Диагноз, # (%) Хронический лифоцитарный лейкоз (СЬЬ) Мелкоклеточная лимфоцитарная лимфома (8ЕЕ) Пролимфоцитарный лейкоз (РЬЬ) Синдром Рихтера 22 (81) 1(4) 1(4) 3(И)
Общее состояние по 0 10 (37)
шкале ЕСОО, # (%) 1 17 (63)
Число предшествующих Среднее: 3
терапий Диапазон: >3 режимов 2-10 16 (59)
Стадирование тКак # Низкий риск 1(4)
(%) Промежуточный риск Высокий риск 13 (48) 13 (48)
Таблица 17
(N=27) (%)
Рефрактерный к аналогу пуринов, # (%) Н(41)
Цитопения на исходном уровне, # (%)
Абсолютное число нейтрофилов (ΑΝΟ) < 1500/мкл 4(15)
Гемоглобин (НОВ) <11 г/дл 9(33)
Тромбоциты < 100000/мкл 9(33)
НОВ <11 г/дл или РСТ < 100000 мкл 13 (48)
Прогностические маркеры, # (%)
Немутированный статус 1§УН 20/22 (91)
Делеция Ое1(17р): 10 (37)
Делеция ϋε1(1Ις): 9(33)
Данные по распределению пациентов представлены в табл. 18.
Таблица 18
(N=27)
Последующее наблюдение Среднее (месяцы) 9.8
Диапазон 5.2-12.9
Пациенты, все еще находящиеся на исследовании, # (%) 24 (89)
Пациенты, досрочно выбывшие из исследования, # (%) 3(И)
Основные причины досрочного выбывания из исследования, # (%)
Направление на трансплантацию 1(4)
Прогрессирование заболевания 1(4)
Смертельный исход 1(4)
Результаты:
Результаты наилучшей частоты ответа показаны в табл. 19. На фиг. 20 показана мобилизация лим- 98 032463 фоцитов и уменьшение размера лимфатических узлов после лечения с помощью РСГ32756 или комбинированной терапии с офатумумабом. Комбинированная терапия снизила общее число лимфоцитов в крови. На фиг. 21 показана гистология ответа костного мозга у пациента.
Таблица 18
СШ/8Ш/РШ (N=24) Рихтера (N=3)
# (%) # (%)
Полный ответ (СК) 1 (4%) 0
Частичный ответ (РК) 23 (96%) 2 (67%)
Частота объективного ответа (ОКК) 100% 67%
Стабильное течение заболевания (8Э) 0 1 (33%)
Прогрессирующее течение заболевания (РЭ) 0 0
Не установлено (ΝΕ) 0 0
РСГ32756 в комбинации с офатумумабом хорошо переносился и являлся высокоактивным у пациентов с В/В СТТ/ЗТЬ/РТТ. У 6 пациентов оценивали дозо-лимитирующую токсичность (ЭЛТ) по окончании цикла 2. 0 ЭЛТ наблюдалось у этих пациентов. По завершении цикла 3 у 4 пациентов проводили сканирование и анализ крови. 3 из 4 отвечали на лечение согласно критерию ^6. Среди пациентов с СТТ/88Т/РТТ комбинированная терапия привела к 100% ОВВ вне зависимости от геномики.
Пример 6. Фаза II исследования РСР32765 в комбинации с ритуксимабом в рецидивирующем/рефрактерном хроническом лимфоцитарном лейкозе (СЛЬ)
Пациенты с хроническим лимфоцитарным лейкозом (СЛЬ) с признаками заболевания высокой степени риска имеют более короткие ремиссии и слабый результат при использовании обычной химиотерапии, в особенности в случае рецидивирующего заболевания. Ингибитор тирозинкиназы Брутона (ВТК), ибрутиниб (РСР32765), препятствует передаче сигнала через В-клеточный рецептор (ВСВ) и является потенциально успешной новой таргетной терапией для пациентов со зрелыми В-клеточными злокачественными опухолями, в особенности для пациентов с СЛЬ. Данные, полученные на Фазе 1/2 клинических испытаний, показали, что пациенты с СГГ высокого риска отвечали, равно как и пациенты с низким риском, на ибрутиниб. Пациенты с СТЬ, которым проводили монотерапию ибрутинибом, проявляли характерные замедленную реакцию или стабильное течение заболевания по причине персистирующего лимфоцитоза, вызванного перераспределением тканевых резидентных клеток СГГ в периферическую кровь. Для ускорения и улучшения ответов, а также для расширения при применении ибрутиниба у пациентов высокого риска СГГ проводили Фазу 2 одноцентрового клинического исследования ибрутиниба плюс ритуксимаб.
Пациенты получали 420 мг ибрутиниба перорально (РО) раз в день в комбинации с ритуксимабом (375 мг/м2) раз в неделю в течение 1-4 недель (цикл 1), затем ибрутиниб раз в день плюс ритуксимаб раз в месяц до цикла 6, с последующей монотерапией ибрутинибом раз в день. Для включения в исследование требовалось заболевание высокого риска (бе117р или мутация ТР53 [подвергавшиеся или не подвергавшиеся лечению], пациенты с беспрогрессивной выживаемостью (РТ8) < 36 месяцев после химиоиммунотерапии первой линии или с рецидивирующим СГГ с бе111ц.
Характеристики пациента включали средний возраст 65 лет (диапазон 35-82); в среднем 2 предшествующих терапии, 14 пациентов женского пола и 26 мужского пола. Средний показатель по методу ВА! составил 4 (диапазон 1-4), 32-микроглобулин 4.2 мг/л (2.2 -12.3), 31 пациент имел немутированный статус ЮНУ, только один пациент имел мутированный статус ЮНУ, остальные пациенты имели неубедительные результаты в отношении ЮНУ. 19 пациентов имели бе117р или мутацию ТР53 (4 без предшествующей терапии), и 13 пациентов имели бе111ц. При последующем наблюдении в среднем в течении 4 месяцев 38 пациентов из 40 продолжили терапию без прогрессирования заболевания. 1 пациент умер от несвязанного инфекционного осложнения и один пациент отозвал информированное согласие до начала лечения. Из 20 пациентов, пригодных для оценки раннего ответа через 3 месяца, 17 пациентов достигли частичной ремиссии (РВ) при частоте объективного ответа (ОВВ) 85%, и трое достигли РВ с персистирующим лимфоцитозом. Примечательно, что в испытании этой комбинации лимфоцитоз, обусловленный перераспределением лимфоцитов, достигал максимума раньше и длительность была короче (см. чертеж), чем при монотерапии ибрутинибом, предположительно по причине добавления ритуксимаба.
Лечение хорошо переносилось, только с 13 случаями степени 3 (п=11) или степени 4 (п=2) токсичностей, которые были, как правило, не связаны с основным заболеванием и временными, такими как нейтропения, утомляемость, пневмония ((п=1), бессонница и боль в костях. Анкеты выявили улучшенное общее состояние здоровья и качество жизни после 3 циклов лечения у оцениваемых пациентов (п=21). Заключение: ибрутиниб в комбинации с ритуксимабом является безопасной, хорошо переносимой схемой лечения для пациентов с СГГ высокого риска, которая дает очень высокую частоту ранних ответов.
Пример 7. Фаза I исследования РСР32765 в комбинации с бендамустином и ритуксимабом у пациентов с рецидивирующей/рефрактерной неходжкинской лимфомой
Данная фаза I исследования разработана для определения максимально переносимой дозы, дозо
- 99 032463 лимитирующей токсичности (ΌΕΤ), токсичностей и предварительной эффективности К-бендамустина в комбинации с ибрутинибом у пациентов с рецидивирующей/рефрактерной неходжкинской лимфомой (ΝΗΣ).
Критерии отбора включали пациентов с рецидивирующими/рефрактерными фолликулярной лимфомой (ЕЬ), лимфомой маргинальной зоны (ΜΖΕ), лимфомой из клеток мантийной зоны (ЫСЕ), трансформированной неходжкинской лимфомой (ΝΗΕ) и диффузной В-крупноклеточной лимфомой (ПЬВСЬ), а также пациентов с Μί.Έ ранее не получавших лечение, не являющихся кандидатами на трансплантацию аутологичных стволовых клеток (А8СТ). Для включения в исследование требовалось, чтобы абсолютное число нейтрофилов (АЫС) > 1000/мм3, тромбоциты > 50000/мм3 и креатинин < 2.0 мг/дл. Допускалась предшествующая трансплантация аутологичных стволовых клеток (А8СТ), ритуксимаб, бендамустин и ибрутиниб. Лечение состояло из ритуксимаба (К) 375 мг/м2 на день 1, бендамустина 90 мг/м2 на дни 1 и 2, и увеличивающихся доз ибрутиниба (280 мг или 560 мг) на дни 1-28, каждые 28 дней в течение 6 циклов. На каждый уровень дозы было отобрано шесть пациентов. Отвечающие пациенты могли продолжать прием только ибрутиниба после цикла 6 до прогрессирования заболевания или неприемлемой токсичности. Пегфилграстим был разрешен для пациентов с нейтропенией 4 степени во время циклов 16. Ответ оценивали после циклов 3 и 6 с помощью Международного критерия гармонизации (И'Иегпа1юпа1 ΗηηηοηίζηΙίοη Сгйепа, Οκκοη, ЙС0 2007).
В исследование было включено одиннадцать пациентов (9 мужчин) в среднем возрасте 72 г (диапазон 45-84), ранее получавших лечение в среднем 3 предшествующими терапиями (диапазон 0-10). Шесть пациентов были рефрактерными к их самой последней терапии, 4 пациента имели предшествующую трансплантацию аутологичных стволовых клеток (А8СТ), 2 пациента получали ранее бендамустин, и 0 пациентов получали ранее ибрутиниб. Другие характеристики включали заболевание ΙΙΙ-Ιν стадии у 82%, увеличенный Международный прогностический индекс (ΙΓΙ) > 3 у 64%, экстранодальное вовлечение у 64%, массивную аденопатию > 5 см у 45%, В-симптомы у 45% и повышенный уровень лактатдегидрогеназы (ΕΌΗ) у 36%. Гистология включала лимфому из клеток мантийной зоны (ЫСЬ) (п=3), диффузную В-крупноклеточную лимфому (ПЬВСЬ) (п=3), трансформированную неходжкинскую лимфому (ΝΗΕ) (п=2), фолликулярную лимфому (ЕЬ) (п=2), лимфому маргинальной зоны (ΜΖΕ) (п=1). Девять пациентов завершили два или более циклов терапии (в среднем 3, диапазон 1-6) ибрутинибом в дозе 280 мг (п=6) и ибрутинибом в дозе 560 мг (п=3), и 2 пациента, досрочно прервавшие терапию до завершения цикла 1 по причине прогрессирующего течения заболевания (РЭ) при 280 мг и 560 мг ибрутиниба, были заменены. Шесть пациентов продолжили получать лечение согласно протоколу. 5 пациентов, которые покинули исследование, включали 2 пациентов с диффузной В-крупноклеточной лимфомой (ПЬВСЬ) и трансформированной неходжкинской лимфомой (ΝΗΕ), которые были заменены по причине прогрессирующего течения заболевания (РЭ) до завершения цикла 1, 2 пациентов с диффузной В-крупноклеточной лимфомой (ПЬВСЬ) и прогрессирующим течением заболевания (РЭ) после циклов 3 и 4, и 1 пациента с лимфомой из клеток мантийной зоны (ЫСЬ), получающего 280 мг ибрутиниба с бендамустином (90 мг/м2), который прервал лечение по причине нейтропении 3 степени, продолжающейся > 14 дней, после цикла 4. Дозолимитирующих токсичностей (ΌΕΤ) не наблюдалось. Осложнения 3-4 степени включали лимфопению (64%), нейтропению (27%), тромбоцитопению (18%), панкреатит (9%), рвоту (9%), опоясывающий герпес (9%) и сыпь (9%). Уменьшения доз ибрутиниба с 280 мг до 140 мг потребовалось 3 пациентам по причине тромбоцитопении 3 степени, панкреатита и сыпи. Уменьшения доз бендамустина до 60 мг/м2 потребовалось 1 пациенту по причине тромбоцитопении 3 степени. Приостановка лечения произошла у 4 пациентов по причине тромбоцитопении (п=1), нейтропении (п=1), панкреатита (п=1) и сыпи (п=1). Частота объективного ответа на терапию (0КК) составила 38% у 8 оцениваемых пациентов, с 3 пациентами, получавшими лечение согласно протоколу, которые еще не проходили сканирования с целью рестадирования. Ответы включали 2 полных ответа и 1 частичный ответ у 3 пациентов с лимфомой из клеток мантийной зоны (ЫСЬ). Выводы: Комбинирование ибрутиниба с К-бендамустином хорошо переносится без непредвиденной токсичности и со значительной активностью у пациентов с лимфомой из клеток мантийной зоны (ЫСЬ), ранее не получавших лечения, и с рецидивирующей ЫСЬ. Для трех дополнительных пациентов уровень дозы будет увеличен до 560 мг и планируется расширенные когорты, испытывающие эту комбинацию, в особенности пациенты с ЕЬ, ПЬВСЬ и ЫСЬ.
Пример 8. Фаза ΙΙ исследования РСЧ-32765 в комбинации с бендамустином и ритуксимабом или флударабином/циклофосфамидом/ритуксимабом (ЕСК) в рецидивирующем/рефрактерном хроническом лимфоцитарном лейкозе (СЬЬ)
Целью данного исследования является установление безопасности перорально вводимого РСЕ 32765 в комбинации с флударабином/циклофосфамидом/ритуксимабом (ЕСК) и бендамустином/ритуксимабом (ВК) у пациентов с хроническим лимфоцитарным лейкозом (СЬЬ)/мелкоклеточной лимфоцитарной лимфомой (8ЬЬ).
Тип исследования: Интервенционный
Порядок распределения участников исследования: Нерандомизированный
Классификация конечных точек исследования: Исследование безопасности
- 100 032463
Экспериментальная модель: Оценка одной группы
Маскировка: Открытое исследование
Основная цель: Лечение
Введение: 420 мг/сутки РС1-32765, стандартная схема лечения РСК или ВК
Состояния, к которым возможно применение: В-клеточный хронический лимфоцитарный лейкоз; мелкоклеточная лимфоцитарная лимфома; диффузная высокодифференцированная лимфоцитарная лимфома
Первичные конечные точки исследования:
Оценка некоторого количества участников с продолжительной гематологической токсичностью [Период проведения: 8 недель от первой дозы]
Вторичные конечные точки исследования:
1. Оценка некоторого количества участников с нежелательными явлениями в качестве показателя безопасности и переносимости [
Период проведения: В течение 30 дней после последней дозы РС1-32765]
2. Оценка некоторого количества пациентов, которые отвечают на лечение, с помощью измерения увеличения или уменьшения проявления заболевания в лимфатических узлах, и/или результатов анализов крови [
Период проведения: Пациенты могут оставаться на исследовании до завершения последним субъектом из включенных в исследование максимум 12 циклов терапии РС1-32765. Любые субъекты, все еще получающие в это время РС1-32765, могут быть включены в длительное исследование с отслеживанием для продолжения получения капсул РС1-32765]
Критерии включения:
Гистологически подтвержденный хронический лимфоцитарный лейкоз (СЬЬ) или мелкоклеточная лимфоцитарная лимфома (8ЬЬ) и удовлетворение по меньшей мере 1 из следующих критериев для требуемого лечения:
Прогрессирующая спленомегалия и/или лимфаденопатия, идентифицированные путем физического обследования или рентгенографических исследований;
Анемия (<11 г/дл) или тромбоцитопения (<100000/мкл) по причине вовлечения костного мозга;
Присутствие непреднамеренной потери массы >10% в течение предшествующих 6 месяцев;
Утомляемость 2 или 3 степени согласно Νί'Ί СТСАЕ;
Температура >100.5°С или ночные приливы в течение >2 недель без признаков инфекции;
Прогрессирующий лимфоцитоз с увеличением на >50% в течение 2-х месячного периода или прогнозируемое время удвоения <6 месяцев;
От 1 до 3 предшествующих схем терапии для СЬЬ/8ЬЬ
Общее состояние больного по шкале ЕСОО <1;
Возраст > 18 лет;
Желание и способность участвовать во всех требуемых оценках и процедурах в этом протоколе исследования, включая проглатывание капсул без затруднений;
Способность понимать цель и риски исследования и обеспечение подписанного и датированного информированного согласия и разрешения на использование охраняемой законом информации о состоянии здоровья (в соответствии с национальными и местными законами, регулирующими конфиденциальность субъекта).
Критерии исключения:
Любая химиотерапия, терапевтические противоопухолевые антитела (не включая радио- или токсин-иммуноконъюгаты), лучевая терапия или экспериментальная противоопухолевая терапия в течение 4 недель до первой дозы исследуемого лекарственного средства, терапия радио- или токсинконъюгированным антителом в течение 10 недель до первой дозы исследуемого лекарственного средства;
Сочетанное применение лекарственных средств, о которых известно, что они вызывают синдром удлиненного интервала ОТ или двунаправленную желудочковую тахикардию;
Трансформированная лимфома или трансформация Рихтера;
Любое угрожающее жизни заболевание, состояние здоровья или дисфункция системны органов, что по мнению исследователя может угрожать безопасности субъекта, препятствовать абсорбции или метаболизму РС1-32765 РО или поставить результаты исследования под угрозу;
Любое из следующих отклонений в лабораторных анализах: абсолютное число нейтрофилов (АХС) < 1000 клеток/мм3 (1.0 х 109/л); число тромбоцитов >50000/мм3 (50 х 109/л); сывороточная аспартаттрансаминаза (А8Т/86ОТ) или аланинтрансаминаза (АЬТ/86РТ) > 3.0 х верхняя граница нормы (ϋΒΝ); креатинин >2.0 х Р'1.\ или клиренс креатинина <40 мл/мин
Характеристики пациентов, включенных в исследование, показаны в табл. 19 и 20.
- 101 032463
Таблица 19
Ибрутиниб + ВК (N=30)
Возраст, лет Средний 61.5
Диапазон 41-82
>70 лет, # (%) 7(23)
Диагноз, # (%) СЬЬ 29 (97)
зьь 1(3)
Общее состояние больного по шкале ЕСОСг, # (%) 0 15 (50)
1 15 (50)
Число предшествующих терапий, # (%) Среднее: 2
Диапазон: 1-3
3 предшествующих схемы: 12 (40)
Массивное поражение (Ьи1ку сйзсазс). # (%) >5 см 16(53)
Гемоглобин (Н§Ь) <11 г/дл или Тромбоциты (РЬТ) <100 тыс/мкл при скрининге 14 (47)
Таблица 20
Ибрутиниб + ВК (N=30)
Рефрактерные к аналогу пурина, # (%) (отсутствие лечения в течение <12 месяцев после схемы терапии, предусмаривающей аналог пурина) 11(37)
Рефрактерные к бендамустину, # (%) (отсутствие лечения в течение <12 месяцев после схемы терапии, содержащей бендамустин) 4(13)
Прогностические маркеры, # (%)
Делеция ϋε1(17ρ) 7(23)
Делеция ϋεΐ(ΐΐς) 13 (43)
В2-Микроглобулин > 3 мг/л 16 (59)
Распределение пациентов представлено в табл. 21.
Таблица 21
Ибрутиниб + ВК (N=30)
Последующее наблюдение В среднем (месяцев) 8.1
Диапазон 2.7-11.3
Пациенты, все еще находящиеся на исследовании, # (%) 23 (77)
Пациенты, досрочно выбывшие из исследования, # (%) 7(23)
Основные причины для досрочного выбывания из исследования, # (%)
Направление на трансплантацию стволовых клеток (8СТ) 5(17)
Прогрессирующее течение заболевания 2(7)
Обобщенные данные по схеме лечения представлены в табл. 22.
Ибрутиниб + ВК (N=30)
Полученное количество циклов бендамустина Среднее значение Диапазон 6 2-6
Полученное количество циклов ритуксимаба Среднее значение Диапазон 6 2-6
Полученная общая планируемая доза ибрутиниба % Среднее значение Диапазон 97 73-100
Субъекты с изменениями дозы, # (%) Бендамустин Ритуксимаб Ибрутиниб 7(23) 0 1(3)
- 102 032463
Результаты:
Результаты наилучшей частоты ответа показаны в табл. 23 и 24. Фиг. 22 показывает мобилизацию лимфоцитов и уменьшение размера лимфатического узла после лечения РС1-32756 или комбинированной терапией с бендамустином и ритуксимабом. Комбинированная терапия уменьшила общее число лимфоцитов в крови.
Таблица 23
Ибрутиниб + ВК (N=30) средний период последующего врачебного наблюдения (£/и) 8.1 мес # (%)
Полный ответ (СК) 4(13)
Частичный ответ (РК) 24 (80)
Частота объективного ответа (ОКК) 93%
Нодальный 1(3)
Стабильное течение заболевания (8ϋ) 0(0)
Прогрессирующее течение заболевания (РЭ) 1(3)
Не установлено (ΝΕ) 0(0)
Таблица 24
N Частота объективного ответа (ОКК), % Полный ответ (СК), %
Все пациенты 30 93 13
Возраст >70 лет 7 86 29
Число предшествующих терапий = 3 схемы лечения 12 83 0
Гемоглобин (Н§Ь) <11 г/дл или Тромбоциты (РЕТ) <100 тыс/мкл 14 93 7
Присутствует делеция Эс1 11ц 13 100 15
В2-Микроглобулин >3 мг/л 16 94 0
Рефрактерные к аналогу пурина 11 91 0
Рефрактерные к бендамустину 4 75 0
Присутствует делеция Эс1 17р 7 71 14
Введение РС1-32765 в комбинации с бендамустином и ритуксимабом вызывает 93% ОЯЯ, если пациенты достигают ответа согласно 1ШСГГ с 13% полных ответов (СЯ). Дополнительной токсичности не наблюдалось при добавлении РС1-32765 к бендамустину и ритуксимабу. В предыдущих исследованиях комбинированная терапия бендамустином и ритуксимабом достигала только 59% ответа, включая 9% полных ответов (СЯ). Таким образом, РС1-32765 значительно улучшает лечение при введении в комбинации с бендамустином и ритуксимабом.
Исследования с использованием РС1-32765 в комбинации с ЕСЯ у пациентов с СЬЕ/ЗЬЯ проводятся в настоящее время. 3 пациентов получили лечение во время начального исследования в течение 6 циклов. Лечение хорошо перенесли все 3 пациента с общим ответом 100% (3/3) с 2 подтвержденными МЯЛнегативными СЯ (МЯР-негативные при 10-4). Все 3 пациента не имеют прогрессирования заболевания после РС1-32765 в период последующего наблюдении в среднем в течение 8.5 месяцев.
Пример 9. Фаза II исследования РС1-32765 в рецидивирующей/рефрактерной диффузной Вкрупноклеточной лимфоме (РЬВСЬ)
Целью данного исследования является оценка эффективности РСЯ32765 в рецидивирующей/рефрактерной диффузной В-крупноклеточной лимфоме (РЬВСЬ) подтипа ССВ (лимфома из Вклеток герминального центра) и подтипа АВС (лимфома из активированных бе поуо В-клеток)
Тип исследования: Интервенционный
Порядок распределения участников исследования: Нерандомизированный
Классификация конечных точек исследования: Исследование безопасности
Экспериментальная модель: Оценка одной группы
Маскировка: Открытое исследование
Основная цель: Лечение
Введение: 560 мг/сутки РСЕ32765
Первичные конечные точки исследования:
Оценка некоторого количества пациентов с ответом на исследуемое лекарственное средство [Период проведения: В течение 24 недель после первой дозы]. Участники будут наблюдаться до прогрессиро
- 103 032463 вания заболевания или начала другого противоракового лечения.
Вторичные конечные точки исследования:
1. Оценка некоторого количества пациентов с нежелательными явлениями в качестве показателя безопасности и переносимости. [Период проведения: В течение 30 дней после последней дозы РСЬ 32765]. Участники будут наблюдаться до прогрессирования заболевания или до начала другого противоракового лечения.
2. Оценка фармакокинетики некоторого количества участников для содействия в определении, каким образом организм отвечает на исследуемое лекарственное средство. [Период проведения: Процедуры будут выполняться в течение первого месяца получения лекарственного средства.]
Критерии включения:
Мужчины и женщины в возрасте >18 лет.
Общее состояние больного по шкале Восточной объединенной онкологической группы (ЕСОС) <2.
Патологически подтвержденная бе поуо ОЬВСЬ; субъекты должны иметь в наличии архивные образцы ткани для рассмотрения центральной комиссией для включения в исследование.
Рецидивирующее или рефрактерное заболевание, определенное как:
1) рецидив заболевания после полной ремиссии (СК) или
2) частичный ответ (РК), стабильное течение заболевания (8Ό), или прогрессирующее течение заболевания (РИ) при завершении схемы лечения, предшествующей включению в исследование (остаточное заболевание): Субъекты должны ранее получить соответствующую схему лечения первой линии. Субъекты с предполагаемым остаточным заболеванием после схемы лечения, непосредственно предшествующей включению в исследование, должны иметь подтвержденную биопсией остаточную ОЬВСЬ.
Субъекты, которые не получали высокодозную химиотерапию/аутологичную трансплантацию стволовых клеток (НЭТ/А8СТ), должны быть неподходящими для НЭТ/А8СТ, что определяется соответствием любому из следующих критериев: - Возраст >70 лет - Диффузная способность легких по монооксиду углерода (ЭЬСО) <50% согласно легочной функциональной пробе (РРТ)
Фракция выброса левого желудочка (ΕνΈΤ1) <50% согласно радиоизотопной вентрикулографии (МисА)/эхокардиографии (ЕСНО)
Иная дисфункция органов или сопутствующие заболевания, не позволяющие применять НИТ/А8СТ по причине недопустимого риска заболеваемости, связанной с проводимой терапией - Отказ субъекта от НИТ/А8СТ
Субъекты должны иметь >1 измеряемого (>2 см в самом длинном направлении) участка заболевания согласно снимку компьютерной томографии (СТ).
Критерии исключения:
Трансформированная ИЬВСЬ или ОЬВСЬ с сопутствующей гистологией (например, фолликулярной лимфомой или лимфомой из лимфоидной ткани, ассоциированной со слизистыми оболочками [МАЬТ]);
Первичная медиастинальная (тимическая) В-крупноклеточная лимфома (РМВЬ);
Известная лимфома центральной нервной системы (ΟΝ8);
Любая химиотерапия, наружная дистанционная лучевая терапия или противоопухолевые антитела в течение 3 недель до первой дозы исследуемого лекарственного средства;
Радио- или токсин-иммуноконъюгаты в течение 10 недель до первой дозы исследуемого лекарственного средства;
Обширное оперативное вмешательство в течение 2 недель до первой дозы исследуемого лекарственного средства;
Любое угрожающее жизни заболевание, состояние здоровья или дисфункция системы органов, что, по мнению исследователя, может угрожать безопасности субъекта или поставить результаты исследования под неоправданный риск;
Клинически значимое сердечно-сосудистое заболевание, такое как неконтролируемая или симптоматическая аритмия, застойная сердечная недостаточность или инфаркт миокарда в течение 6 месяцев до скрининга, или заболевание сердца 3 или 4 класса согласно функциональной классификации НьюЙоркской кардиологической ассоциации;
Неспособность к проглатыванию капсул или синдром малабсорбции, заболевание, значительно поражающее желудочно-кишечную функцию, или резекция желудка или тонкого кишечника, или язвенный колит, симптоматическое воспалительное заболевание кишечника, или частичная или полная непроходимость кишечника;
Любое из следующих отклонений в лабораторных анализах:
Абсолютное число нейтрофилов (АИС) < 750 клеток/мм3 (0.75 х 109/л), если не зафиксировано вовлечение костного мозга;
Число тромбоцитов <50000/мм3 (50 х 109/л), независимо от поддержки гемотрансфузией, если не зафиксировано вовлечение костного мозга;
Сывороточная аспартаттрансаминаза (А8Т/8СОТ) или аланинтрансаминаза (АЬТ/8СРТ) > 3.0 х
- 104 032463 верхняя граница нормы (ИЬЫ);
Креатинин >2.0 х ИЬЫ
Пример 10. Ингибирование роста с помощью РС1-32765 в субпопуляции линий клеток из Вклеточной лимфомы
РС1-32765 ингибировал рост субпопуляции линий клеток из В-клеточной лимформы со значениями С150, изменяющимися от 0.1 до 5.5 мкМ (см. табл. 5 ниже).
В клеточных линиях РС1-32765 продемонстрировал слабый синергизм с леналидомидом, бортезомибом, сорафенибом, гемцитабином, дексаметазоном, бендамустином, 3-((диметиламино)метил)-Ы-(2-(4гидроксикарбамоил)фенокси)этил)бензофуран-2-карбоксамидом и 8ук-ингибитором В-406; и дополнительно с таксолом, винкристином, доксорубицином, темсиролимусом и карбоплатином. Тестирование комбинированного препарата в ксенографтах недавно началось; начальный эксперимент на ксенографте ЭРВСЬ продемонстрировал большую аддитивность по сравнению с РС1-32765 и бортезомибом.
Обработка клеток первичной СТЬ с помощью 0.01-100 мкмоль РС1-32765 вызвала:
1) зависимый от дозы и времени апоптоз,
2) апоптоз, на который не влияют генетические изменения, которые, как известно, прогнозируют слабый ответ на другие агенты, то есть, бе111ц, бе117р и мутационный статус генов 1дУН;
3) цитотоксичность, сопровождающуюся расщеплением поли(АДФ-рибоза)полимеразы (РАВР) и индукцией активности каспазы-3; и
4) апоптоз, который не зависит от присутствия или отсутствия фибронектина или линии стромальных клеток Нк5, что указывает на то, что активность РС1-32765 не была уменьшена влиянием микроокружения.
РС1-32765 ингибировал рост субпопуляции линий клеток из В-клеточной лимфомы со значениями С150, изменяющимися от 0.1 до 5.5 мкМ (см. табл. 25 ниже).
Таблица 25. Ингибирование роста с помощью РС1-32765 в субпопуляции линий клеток лимфомы человека
Линия клеток Влимфомы Происхождение Подтип СЬо (мкМ)
ЬУЮ ЦЦВСЦ АВС 0.10
ЦНЬ-6 ЦЦВСЦ сев 0.18
ЦНЬ-4 ЦЦВСЦ сев 0.53
цныо ЦЦВСЦ сев 3.7
ЬУЗ ЦЦВСЦ АВС (САКО 11) >10
БУ19 ЦЦВСЦ ССВ (САКО 11) >10
цв ЦЦВСЦ па >10
\Υ8υ-ΝΗΕ РБ-трансформированная па 0.12
ЦОНН2 РБ-трансформированная па 0.12
иъи-цьсщ РБ-трансформированная па 0.5
Катов Беркитта па 5.5
Μίηο Клеток мантийной зоны па 0.15
Огап1а-519 Клеток мантийной зоны па >10
1еко-1 Клеток мантийной зоны па >10
па = данные отсутствуют
Пример 11. Анализ ш у1уо комбинаций ингибитора В!к в клетках ЭРВСЬ
Комбинации В1к-ингибитора РС1-32765 и дополнительных противораковых агентов анализировали с использованием клеток 1)о11Н2. 1)о11Н2 представляет собой линию клеток ЭРВСР (диффузной Вкрупноклеточной лимфомы) от пациента с трансформированной фолликулярной лимфомой. Клеточная линия является умеренно чувствительной к РС1-32765. РС1-32765 инкубировали с другими противораковыми лекарственными средствами в течение 2 дней. Анализ представлял собой анализ с окрашиванием аламаровым синим.
Тестируемые комбинации представляли собой:
РС1-32765 и гемцитабин;
РС1-32765 и дексаметазон;
РС1-32765 и леналиномид;
РС1-32765 и В-406;
РС1-32765 и темсиролимус;
РС1-32765 и карбоплатин;
РС1-32765 и бортезомиб; и
РС1-32765 и доксорубицин.
Результаты представлены на фиг. 23-25.
Пример 10. Анализ ш у1уо комбинаций ингибитора В!к в клетках АВС-ЭРВСР
- 105 032463
Комбинации В!к-ингибитора РСГ32765 и дополнительных противораковых агентов анализировали с использованием клеток ТМЭ8. Линия клеток ТМЭ8 представляет собой независимую от передачи сигнала ΝΕ-кВ линию клеток АВС-ЭЬВСЬ. Линия клеток ТМЭ8 чувствительна к ингибиторам ВТК только при низких нонамолярных концентрациях (СЕ0 -1-3 нМ). Ингибитор В1к инкубировали с другими противораковыми лекарственными средствами в течение 2 дней. Анализ представлял собой анализ с окрашиванием аламаровым синим.
Тестируемые комбинации представляли собой:
РСВ32765 и САЬ-101;
РС-32765 и леналиномид;
РС-32765 и К-406;
РСВ32765 и бортезомиб;
РСЧ-32765 и винкристин;
РСВ32765 и таксол;
РСЧ-32765 и флударабин и
РСЧ-32765 и доксорубицин.
Результаты представлены на фиг. 26-33.
Пример 11. Клиническое исследование ингибитора В1к в комбинации с ВК
Клиническое исследование проводили для определения эффектов комбинирования ингибитора В1к (например, РСЧ-32765) с ВК (бендамустином и ритуксимабом) у пациентов с неходжкинской лимфомой. Ингибитор В1к вводили. После увеличения концентрации лимфоидных клеток в периферической крови вводили ВК.
Пример 12. Клиническое исследование ингибитора В1к в комбинации с бортезомибом
Клиническое исследование инициировали для определения эффектов комбинирования ингибитора В11< (например, РСЧ-32765) с бортезомибом у пациентов с неходжкинской лимфомой. Вводили ингибитор В1к. После увеличения концентрации лимфоидных клеток в периферической крови вводили бортезомиб.
Пример 13. Клиническое исследование ингибитора В1к в комбинации с ВК
Клиническое исследование выполняли для определения эффектов комбинирования ингибитора В1к (например, РСЧ-32765) с ВК (бендамустином и ритуксимабом) у пациентов с СЬЬ. Вводили ингибитор В1к. После увеличения концентрации лимфоидных клеток в периферической крови вводили ВК.
Пример 14. Клиническое исследование ингибитора В1к в комбинации с РСК
Клиническое исследование проводили для определения эффектов комбинирования ингибитора В1к (например, РСЧ-32765) с РСК (флударабином, циклофосфамидом, ритуксимабом) у пациентов с СЬЬ. Вводили ингибитор В1к. После увеличения концентрации лимфоидных клеток в периферической крови вводили РСК.
Пример 15. Клиническое исследование ингибитора В1к в комбинации с офатумумабом
Клиническое исследование проводили для определения эффектов комбинирования ингибитора В1к (например, РСЧ-32765) с офатумумабом у пациентов с СЬЬ. Вводили ингибитор В1к. После увеличения концентрации лимфоидных клеток в периферической крови вводили офатумумаб.
Пример 16. Клиническое исследование ингибитора В1к в комбинации с ритуксимабом
Клиническое исследование проводили для определения эффектов комбинирования ингибитора В1к (например, РСЧ-32765) с ритуксимабом у пациентов с СЬЬ. Вводили ингибитор В1к. После увеличения концентрации лимфоидных клеток в периферической крови вводили ритуксимаб.
Пример 17. Клиническое исследование ингибитора В1к в комбинации с леналидомидом
Клиническое исследование проводили для определения эффектов комбинирования ингибитора В1к (например, РСЧ-32765) с леналидомидом у пациентов с рецидивирующими или рефрактерными Вклеточными злокачественными опухолями. Вводили ингибитор В1к. После увеличения концентрации лимфоидных клеток в периферической крови вводили леналидомид.
Пример 18. Клиническое исследование ингибитора В1к в комбинации с леналидомидом
Клиническое исследование проводили для определения эффектов комбинирования ингибитора В1к (например, РСЧ-32765) с леналидомидом у пациентов с ПЬВСЬ, индолентной В-клеточной лимфомой, СЬЬ и множественной миеломой. Вводили ингибитор В1к. После увеличения концентрации лимфоидных клеток в периферической крови вводили леналидомид.
Пример 19. Клиническое исследование ингибитора В11< в комбинации с ^ΕΚΟΒ
Клиническое исследование проводили для определения эффектов комбинирования ингибитора В1к (например, РСЧ-32765) с ^ΕΚΟΒ (ритукисмаб, циклофосфамид, доксорубицина гидрохлорид, винкристина сульфат, преднизон) у пациентов с рецидивирующими или рефрактерными В-клеточными злокачественными опухолями. Вводили ингибитор В1к. После увеличения концентрации лимфоидных клеток в периферической крови вводили ^ΕΚΟΒ.
Пример 20. Клиническое исследование ингибитора В11< в комбинации с ^ΓΕΟ?
Клиническое исследование проводили для определения эффектов комбинирования ингибитора В1к (например, РСЧ-32765) с ^^Ο? у пациентов с ПЬВСЬ, индолентной В-клеточной лимфомой и макро
- 106 032463 глобулинемией Вальденстрема. Вводили ингибитор В!к. После увеличения концентрации лимфоидных клеток в периферической крови вводили К-СН0Р.
Пример 21. Клиническое исследование ингибитора В1к в комбинации с темсиролимусом
Клиническое исследование проводили для определения эффектов комбинирования ингибитора В1к (например, РСЧ-32765) с темсиролимусом у пациентов с рецидивирующими или рефрактерными Вклеточными злокачественными опухолями. Вводили ингибитор В1к. После увеличения концентрации лимфоидных клеток в периферической крови вводили темсиролимус.
Пример 22. Клиническое исследование ингибитора В1к в комбинации с темсиролимусом
Клиническое исследование проводили для определения эффектов комбинирования ингибитора В1к (например, РСЧ-32765) с темсиролимусом у пациентов с МСЬ, ОЬВСЬ и индолентной В-клеточной лимфомой. Вводили ингибитор В!к. После увеличения концентрации лимфоидных клеток в периферической крови вводили темсиролимус.
Пример 23. Анализ ш νίΙΐΌ ингибитора В1к в комбинации со второй терапией
Комбинации В!к-ингибитора РСГ32765 и второй терапии исследовали с использованием клеток ТМО8.
ТМО8 представляют собой независимую от передачи сигнала ΝΡ-кВ линию клеток АВС-ОЬВСЬ. Указанная линия клеток чувствительна к ингибиторам ВТК только при низких наномолярных концентрациях (СЬо ~1-3 нМ). Ингибитор В1к инкубировали с другими противораковыми лекарственными средствами в течение 2 дней. Анализ представлял собой анализ с окрашиванием аламаровым синим.
Комбинации представляют собой следующие:
РСЧ-32765 и леналидомид и дексаметазон
РСГ32765 и бортезомиб
РСЧ-32765 и К-СН0Р (циклофосфамид, гидроксидаунорубицин, винкристин и преднизон, и, необязательно, ритуксимаб)
РСЧ-32765 и К-ЕР0СН (этопозид, доксорубицин, винкристин, циклофосфамид, преднизолон и, необязательно, ритуксимаб)
РСЧ-32765 и КЧСЕ (ифосфамид, карбоплатин, этопозид)
РСГ32765 и офатумумаб
РСГ32765 и ритуксимаб
РСГ32765 и СА101 (Сепеп1есй)
РСЧ-32765 и ВК (бендамустин/ритуксимаб)
Пример 24. Фармацевтические композиции
Композиции, описанные ниже, представлены с соединением Формулы (О) в иллюстративных целях; любые из соединений Формул (А), (В), (С) или (О) могут быть использованы в таких фармацевтических композициях. В конкретных примерах соединение представляет собой (К)-1-(3-(4-амино-3-(4феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-1-ил)пиперидин-1-ил)проп-2-ен-1-он (то есть РСЬ 32765/ибрутиниб).
Пример 24а. Парентеральная композиция
Для приготовления парентеральной фармацевтической композиции, пригодной для введения путем инъекции, 100 мг водорастворимой соли соединения формулы (О) (например, РСЬ32765/ибрутиниб) растворяли в ОМ80 и затем смешивали с 10 мл 0.9% стерильного физиологического раствора. Смесь вводили в дозированную лекарственную форму, пригодную для введения путем инъекции.
Пример 24Ь. Пероральная композиция
Для приготовления фармацевтической композиции для пероральной доставки 100 мг соединения формулы (О) (например, РСЬ32765/ибрутиниб) смешивали с 750 мг крахмала. Смесь вводили в пероральную дозированную лекарственную форму, такую как твердая желатиновая капсула, которая пригодна для перорального введения.
Пример 24с. Композиция для сублингвального введения (твердая пластинка для рассасывания)
Для приготовления фармацевтической композиции для буккальной доставки, такой как твердая пластинка для рассасывания, смешивали 100 мг соединения формулы (О) (например, РСЬ 32765/ибрутиниб) с 420 мг сахарной пудры, 1.6 мл низковязкой кукурузной патоки, 2.4 мл дистиллированной воды и 0.42 мл экстракта мяты. Смесь осторожно перемешивали и заливали в форму для получения пластинки, пригодной для буккального введения.
Пример 24й. Ингаляционная композиция
Для приготовления фармацевтической композиции для доставки путем ингаляции 20 мг соединения формулы (О) (то есть РСЬ32765/ибрутиниб) смешивали с 50 мг безводной лимонной кислоты и 100 мл 0.9% раствора хлорида натрия. Смесь вводили в ингаляционное устройство доставки, такое как небулайзер, которое является пригодным для ингаляционного введения.
Пример 24е. Ректальная гелевая композиция
Для приготовления фармацевтической композиции для ректальной доставки 100 мг соединения формулы (О) (то есть РСЬ32765/ибрутиниб) смешивали с 2.5 г метилцеллюлозы (1500 мПа), 100 мг ме
- 107 032463 тилпарапена, 5 г глицерина и 100 мл очищенной воды. Полученную гелевую смесь затем вводили в устройства для ректальной доставки, такое как шприцы, которые пригодны для ректального введения.
Пример 24Г. Гелевая композиция для местного введения
Для приготовления фармацевтической гелевой композиции для местного введения 100 мг соединения формулы (Ό) (то есть РС1-32765/ибрутиниб) смешивали с 1.75 г гидроксипропилцеллюлозы, 10 мл пропиленгликоля, 10 мл изопропилмиристата и 100 мл очищенного спирта И8Р. Полученную гелевую смесь затем вводили в контейнеры, такие как тюбики, которые пригодны для местного введения.
Пример 24д. Композиция офтальмологического раствора
Для приготовления фармацевтической композиции офтальмологического раствора 100 мг соединения формулы (Ό) (то есть РС1-32765/ибрутиниб) смешивали с 0.9 г №С1 в 100 мл очищенной воды и фильтровали с использованием фильтра 0.2 мкм. Полученный изотонический раствор затем вводили в устройства для офтальмологической доставки, такие как контейнеры для глазных капель, которые пригодны для офтальмологического введения.
Пример 25. Влияние РС1-32765 на мобилизацию лимфоцитов в лимфоме из клеток мантийной зоны
Пациенты с хроническим лимфоцитарным лейкозом (СЬЬ) часто имеют значительные, но временные увеличения циркулирующих в крови лимфоцитов СЬЬ после лечения ибрутинибом, как наблюдается с другими ингибиторами пути В-клеточного рецептора (ВСК). Во время Фазы I исследования ибрутиниба сходные эффекты были отмечены среди получавших лечение пациентов с другими типами неходжкинской лимфомы (ЫИЬ), включая лимфому из клеток мантийной зоны (МСЬ). В этом примере авторы охарактеризовали паттерны и фенотипы клеток, мобилизованных у пациентов с МСЬ и, кроме того, изучили механизм этого эффекта. Было обнаружено, что клетки периферической крови ί.Ό19+ί.Ό5+ от пациентов с МСЬ, получавших лечение ибрутинибом (РС1-32765), через 7 дней имели значительное снижение экспрессии СХСК4, СЭ38 и К167 по сравнению с уровнем до лечения. Кроме того, содержание хемокинов в плазме, таких как МОС, М1Р-1 β и СХСЬ13, уменьшились на 40-60% после одной недели после лечения. С точки зрения механизма авторы обнаружили, что ибрутиниб ингибировал ВСК и опосредованную хемокином адгезию и хемотксис клеточных линий МСЬ, и дозозависимым образом ингибировал ВСК, стимуляции рВкк, рРЬСу2, рЕгк или рАкк стромальными клетками и СХСЬ12/СХСЬ13. Важно отметить, что ибрутиниб дозозависимо ингибировал псевдоэмпериполез МСЬ в сокультуре. Авторы предполагают, что Вкк является важным для хоминга клеток МСЬ во вторичные лимфоидные органы и его ингибирование приводит к выходу злокачественных клеток в периферическую кровь.
Материалы и способы
Образцы биопсии первичной человеческой МСЬ от пациентов, получавших лечение лекарственным средством: Кровь собирали у пациентов с МСЬ, включенных в исследования РСΥС-04753 или РСΥС1104 в США в соответствии с Руководством по надлежащей клинической практике (ОСР) Международной конференции по гармонизации (1СИ) и принципами Хельсинской Декларации, с информированным согласием и соблюдением протоколов, утвержденных соответствующим Экспертным советом(ами) организации (1п8к1кикюпа1 Ве\ге\\' Воагб). Образцы цельной крови собирали в пробирки (ВО) с гепарином натрия (СРТ), перемешивали в течение 5 мин, затем центрифугировали при 1500 гсГ в течение 20 мин на месте сбора. Образцы отправляли вечером в Фармасайкликс (Ркагтасуб1е8) в течение 36 ч. В ламинарном боксе мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС) удаляли из верхнего слоя пробирок, отмывали РВ8 и замораживали в 90% РВ8 + 10% ЭМ8О (81дта, 8к Ьошк, МО) в жидком азоте до использования.
Клеточные линии и исходный материал для ех у1уо исследований:
Клеточные линии МСЬ ИВЬ2 (любезно предоставленные Όγ. \Уо1Ггат К1аррег, Оерагктепк оГ Ракко1оду, Ишуегаку оГ К1е1, Германия), 1еКо1 (любезно предоставленные Όγ. Ьуб1а У188ег, Оерагктепк оГ Ракко1оду, Итуегаку Мебюа1 Сепкег Сгошпдеп, Нидерланды) и Мто (О8М2, Германия) культивировали в среде КРМ1 1640, дополненной 10% термоинактивированной фетальной бычьей сывороткой, 2 мМ Ьглутамина, 100 Ед/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина (Ь1Ге Тескпо1од1е8, Тке №111ег1апб5). Клетки Мто для анализа сокультуры и анализов миграции, и линию мышиных стромальных клеток М210В4 получали от АТСС и поддерживали в среде КРМ1, дополненной 15 или 10% фетальной бычьей сывороткой соответственно. Все реагенты для культивирования клеток были получены от Ь1Ге Тес11по1од1е5 (Огапб Ыапб, ΝΥ).
Для исследований ех у1уо периферическую кровь от пациентов с МСЬ получали из отделения Гематологии Асабетю Мебюа1 Сепкег (АМС), Амстердам, РВМС выделяли с помощью Рюо11 и В-клетки были очищены с использованием МАС8 с негативным отбором (М11кепу1 Вюкес). Это исследование было проведено и утверждено Медицинским комитетом АМС по проведению экспериментов на людях (АМС Меб1са1 Сотт1ккее оп Иитап Ехрептепкакюп). Информированное согласие получали в соответствии с Хельсинской Декларацией (Оес1агакюп оГ ИеШпИ).
В случае получения информированного согласия в соответствии с Хельсинской Декларацией (Эес1агакюп оГ ИеЫпкк) и подтверждения Экспертного совета организации Национального института здоровья (МИ), периферическую кровь (РВ) и биопсии лимфатических узлов (ΌΝ) собирали у пациентов с
- 108 032463
МСЬ, ранее не получавших лекарственной терапии (!геа!теп!-па1уе), включенных в исследование Национального института онкологии Ща!юпа1 Сапсег 1пк111и(е 8!ийу) #05-С-0170 (Ы1р://с11шса11па1к.доу 1йепййег: NСТ00114738). Парные образцы РВ и Ь-Ν получали в один и тот же день, обрабатывали и параллельно анализировали. Мононуклеарные клетки выделяли путем центрифугирования в градиенте плотности (Р1со11 Ьутрйосу!е 8ерагайоп Мей1а; ΙΟΝ В1отей1са1к) и замораживали живыми в 90% фетальной бычьей сыворотке (РВ8), 10% диметилсульфоксиде (Э8МО) (81дта) в жидком азоте до использования.
Антитела: Антитела, используемые в проточной цитометрии, получали от фирмы ВО (8ап 1оке, СА) и использовали в соответствии с инструкциями: СЦ3-У500, СП19-АРССу7, СО19-АРС, СО5-РегСРСу5.5, СЭ5- Р1ТС, СХСВ4-РЕСу7, СХСВ4-РЕ, СП38-РЕ, 01)621.-14/ ССВ7-У450, СХСВ3-А1еха488, СХСВ5А1еха647, СО49й-АРС, С1)29-Р12 СП44-У450, СО54-РЕ, СОПа-АРС, СП11с-У450, СЭ18-РГТС, С1)40РЕСу7, К167-А1еха488, легкая к-цепь 1д - АРС, легкая λ-цепь 1д - Р1ТС. Антитела, используемые для вестерн-блоттинга: фосфо-р44/42 МАР киназа [Т202/У204] против ЕВК1 и 2, фосфо-АКТ [8ег473] против РКВ/АКТ (Νον Епд1апй Вю1аЬк, 1рк\У1с11, МА), фосфо-ВТК [Υ551] против ВТК (ВО Вюктепсек), фосфоВТК [Υ223] против ВТК (Ерйотюк, Вигйпдате, СА) и фосфо-РЬСу2 [Υ759] против РЬСу2 (ВО Вюксь епсек); анти-ЕВК2 (С-14; 8ап!а Сшх В1о!есйио1оду, 8аи!а Сгих, СА), анти-АКТ (Н-136; 8ап!а Сгих Вю!есйио1оду), анти-ВТК (С1опе 53; ВО Вюкаепсек), козьи Р(аЬ)'2 античеловеческие 1дМ (ЬЕ/АР; 8ои!йегп В1о!есй, В1гттдйат, АЬ), кроличьи антимышиные, конъюгированные с пероксидазой хрена (НВР) и НВР-конъюгированные козьи антикроличьи (ПАКО, Ноик!оп, ТХ).
Соединения и реагенты для экспериментов 1п уйго: Ибрутиниб получали от фирмы Рйагтасусйск (8ипнууа1е, СА), В406 от фирмы Ахоп Мейсйет (Сгошпдеп, ^Шепапйк), вортманнин и форбол-12миристат-13-ацетат (РМА) получали от фирмы 81дта-А1ййсй (8ΐ Ьошк, МО); рекомбинантный человеческий кУСАМ-1, человеческий плазменный фибронектин, В8А (фракция У), г11СХСЬ12 и г11СХСЬ13 от фирмы В&Ь 8ук1етк (Ми^арой^ МЦ), г11ССЬ19 и г11ССЬ21 от фирмы МТ-й1адпокйск ЩеШепапйк, ВУ) и поли-1-лизин (РЬЬ) от фирмы 81дта-А1ййсй.
Фенотипирование МСЬ:
Замороженные РВМС оттаивали в водяной ванне при 37°С, ресуспендировали в ВРМ1 + 10% РВ8 и восстанавливали при 37°С в атмосфере 5% СО2 в 5 мл полипропиленовых пробирках (ВЬ-Ра1соп) в течение 2 ч перед фенотипированием. РВМС отмывали с помощью РВ8 + 2% РВ8, пеллетировали и ресуспендировали в РВ8 + 2% РВ8, содержащей определяющие фенотип поверхностные антитела. Все окрашивающие коктейли готовили в пробирках в двух экземплярах. Клетки окрашивали в течение 30 мин, отмывали РВ8, пеллетировали при 1300 об/мин в течение 5 мин, затем фиксировали в РВ8 + 1.6% параформальдегид (Е1ес!гоп Мюгоксору 8егуюек, НаШе1й, РА). Клетки, подлежащие анализу на пролиферацию К167, пермеабилизировали 70% этанолом при -20°С в течение ночи, регидратировали в РВ8 и окрашивали антителом к К1-67.
Проточная цитометрия:
Проточный цитофлюориметр ВО РАС8 СапЮ II (ВО, 8ап 1оке, СА) использовали для всех сборов данных проточной цитометрии. Прибор эксплуатировали в соответствии с рекомендациями изготовителя. Калибровочные частицы С8&Т (ВО) использовали ежедневно для измерений базового уровня и воспроизводимости согласно инструкциям изготовителя. Окрашивание проб для фосфопроточной цитометрии выполняли, как описано. Указанные выше антитела использовали с ВО СотрВеай Р1ик для установления параметров компенсации и равномерности окрашивания антителами. Из каждого окрашиваемого образца собирали 10000 СЭ19+ клеток. Данные анализировали и количественно определяли с использованием программного обеспечения Р1о\\'1о7.6 (Тгее 8!аг, АкЫапй, ОВ).
Анализы сокультур:
Сокультуры стромальных клеток М2-10В4 и В-клеточной линии Мто получали согласно способу Вигдег е! а1. В1оой. 1999;94(11): 3658-3667. Клетки Мто обрабатывали носителем, коклюшным токсином (81дта) или ибрутинибом в течение одного часа при 37°С, отмывали средой и затем добавляли в планшеты, содержащие конфлюэнтные монослои стромальных клеток. Сокультуры инкубировали при 37°С в течение 5 ч до вечера для обеспечения миграции клеток Мто под слой стромальных клеток, после чего их тщательно отмывали для удаления немигрировавших клеток. Для сокультур, использующих красители для мечения живых клеток, клетки сначала нагружали А1еха Р1иог Се11Тгаскег (ЫГе Тесйнокдхек, Сганй 1к1апй, ΝΥ) согласно инструкциям изготовителя. Для микроскопии клетки фиксировали параформальдегидом и закрепляли на предметных стеклах с помощью заключающей среды ПАИ (Уес!акЫе1й, УесЮг ЬаЬога!ойек, Вигйпдате, СА). Для количественного определения миграции клеток Мто в сокультурах с помощью проточной цитометрии клетки трипсинизировали и окрашивали АРС-Су7-меченым анти-СЬ19 антителом (ВО ЬайогаЮпек). Клетки подсчитывали с использованием Соип1Вйдй1 АЬко1и!е соипйпд Ьеайк (ЫГе Тесйпо1од1ек) на проточном цитометре ВО СаШоП.
Полимеризация актина в клетках Мто:
Клетки М1по оставляли для адгезии с покровными стеклами в бессывороточной среде в течение 30 мин при 37°С и затем обрабатывали ЬМ8О, коклюшным токсином или ибрутинибом в течение 1 ч.
- 109 032463
Клетки фиксировали параформальдегидом. пермеабилизировали с помощью Тгйоп Х-100 и окрашивали А1еха Е1иог495-меченым фаллоидином (Мо1еси1аг РгоЬек. Сгапб 1к1апб. ЫУ). Покровные стекла закреплялии на предметные стекла с использованием заключающей среды Уес!акЫе1б. содержащей ОАР1 (Уес!ог ЬаЬога!опек). Микроскопию выполняли на микроскопе 2ейк Ахюр1ап2 с использованием 63х/1.40 объектива для масляной иммерсии Р1ап-Ароскгота!. и изображения получали с помощью камеры 2е1кк АхюСат МКт ССЬ. и программного обеспечения АхюУйюп ν.4.8. Для денситометрии делали снимки по меньшей мере 30 клеток для каждого состояния.
Анализ адгезии:
Анализы клеточной адгезии выполняли в основном как описано ранее. В частности. анализы адгезии проводили в трех повторностях на 96-луночных планшетах для Е1А/К1А (Сок!аг). покрытых накануне при 4°С содержащим РВ8 фибронектином в концентрации 10 мкг/мл или УСАМ-1 в концентрации 500 нг/мл. 4% В8А. или в течение 15 мин при 37°С поли-1-лизином (РЬЬ) в концентрации 1 мг/мл и блокировали 4% раствором В8А в среде КРМ1-1640 в течение 2 ч при 37°С. Клетки предварительно обрабатывали 100 нМ ибрутиниба. 100 нМ вортманнина. 1 мкМ К406. или при 37°С в течение 1 ч в среде КРМ1. содержащей 1% В8А. Затем клетки стимулировали 100 нг/мл (ЕаЬ')2 фрагмента козьего античеловеческого 1дМ или 50 нг/мл РМА и клетки ЫашаЮа в количестве 1.5х105 или клетки СЬЬ в количестве 3х105 сразу же высевали в объеме 100 мкл на лунку и инкубировали при 37°С в течение 30 мин. После тщательной отмывки планшета средой КРМ1. содержащей 1% В8А. для удаления неадгезировавших клеток. адгезировавшие клетки фиксировали в течение 10 мин 10% глутаральдегидом в РВ8 и затем окрашивали в течение 45 мин 0.5% кристаллическим фиолетовым в 20% метаноле. После тщательной отмывки водой краситель элюировали метанолом и поглощение измеряли через 40 мин при 570 нм на спектрофотометре (МиШккап КС крес1горко!оте!ег. Ткегто Нккег 8с1еп!Шс. РкйаберЫа. РА). Фоновую величину поглощения (без добавления клеток) вычитали. Поглощение за счет неспецифической адгезии. определенное в лунках. покрытых 4% В8А. всегда было меньше чем 10% поглощения анти-1дМ-стимулированных клеток. Максимальную адгезию (100%) определяли путем нанесения клеток на лунки. покрытые РЬЬ. без отмывки лунок перед фиксацией. Адгезию предварительно не обработанных анти-1дМ-стимулированных клеток нормализовали к 100% и стобцы представляют среднее + 8ЕМ независимых экспериментов. каждый из которых проведен в трех повторностях.
Хемокин-опосредованную адгезию оценивали. как описано выше. за исключением того. что хемокины 100 нг/мл СХСЬ12. 100 нг/мл СХСЬ13. 100 нг/мл ССЬ19 или 100 нг/мл ССЬ21 соиммобилизировали с 500 нг/мл УСАМ-1. Планшеты центрифугировали сразу же после нанесения клеток на планшет. и клетки оставляли для адгезии в течение 2 мин.
Альтернативно. бессывороточные клетки сначала стимулировали и оставляли для адгезии. как описано. и после этого добавляли ибрутиниб (1 мкМ) в течение 2 ч при 37°С и затем планшеты отмывали для удаления несвязанных клеток.
Анализ миграции:
Анализы миграции выполняли в основном. как описано (бе Сойег е! а1. 1шшипйу. 2007; 26(1): 93104; бе Сойег е! а1. В1ооб. 2008;111(7):3364-3372). В частности. анализы миграции в трех повторностях с системой Трансвелл (размер пор 5 мкм. Сок!аг) покрывали 500 нг/мл УСАМ-1. Нижний отдел содержал 100 нг/мл СХСЬ12. Клетки. предварительно обработанные 100 нМ ибрутиниба при 37°С в течение 1 ч в среде КРМ1. содержащей 0.5% В8А. наносили на верхний отдел и оставляли для миграции в течение 2 ч при 37°С. Количество живых мигрировавших клеток определяли с помощью ЕАС8 и выражали в виде процента поступления.
Иммуноблоттинг:
Иммуноблоттинг выполняли в основном. как описано (бе Кооу е! а1. В1ооб. 2012; 119(11): 25902594; бе Сойег е! а1. В1ооб. 2008; 111(7): 3364-3372). В частности. 107 клеток/мл в КРМ1 предварительно обрабатывали 100 нМ ибрутиниба при 37°С в течение 1 ч. После стимуляции 100 нг/мл фрагмента (ЕаЬ')2 козьего антитела против человеческого 1дМ или 100 нг/мл СХСЬ12 в течение 5 мин (или как указано). клетки лизировали непосредственно в буфере для образцов δΌδ-РАСЕ. 2х105 клеток наносили на 10% гель δΌδ-РАСЕ. и подвергали блоттингу с использованием кроличьего анти-фосфо-ЕКК1/2 (Се11 81дпа11пд. Ьаптегк. МА). кроличьего анти-фосфо-АКТ. мышиного анти-фосфо-ВТК или мышиного анти-βактина с последующим нКР-конъюгированным козьим анти-кроличьим или кроличьи анти-мышиным антителом. и регистрировали с помощью усиленной хемилюминесценции (СЕ НеаЙксаге. Р1кса!агау. Ы1). Для подтверждения равной экспрессии и нагрузки блоты соскребали и инкубировали с антителами кроличьими анти-ЕКК2. кроличьими анти-АКТ и мышиными анти-ВТК.
Статистический анализ:
Анализы выполняли с помощью программы СгаркРаб Рпкт 4.0 (Ьап П1едо. СА). Статистически значимые различия определяли с помощью АЫОУА со сравнением рок! кос Бонферрони. или двусторонний непарный !-тест Стьюдента использовали для определения значимости различий между двумя средними значениями. Одновыборочный !-критерий использовали для определения значимости различий между средними значениями и нормированными значениями (100%). * р<0.05; ** р<0.01; *** р<0.001.
- 110 032463
Результаты
Временное увеличение абсолютного числа лимфоцитов (ЛЬС) после введения ибрутиниба пациентам с МСЬ
В Фазе I исследования, которое включало пациентов с различными В-клеточными злокачественными опухолями, пациентов с МСЬ (п=9) обрабатывали ибрутинибом циклами, состоящими из 35 дней, во время которых лекарственное средство вводили один раз в сутки в течение 28 дней с 7-дневными лекарственными каникулами между циклами. В этих условиях наблюдалась циклическая картина увеличения и уменьшения АЬС. Это было продемонстрировано увеличением АЬС после первых нескольких недель лечения с последующим возвращением к исходному состоянию после 7-дневных лекарственных каникул. Эта циклическая картина АЬС продолжалась на протяжении лечения. Во время курса терапий ибрутинибом объемы опухолей, определенные суммой перпендикулярных диаметров (8РБ), уменьшились в среднем на 80% во время оценок после 2, 4 и 6 циклов терапий. Таким образом, во время первых 6 циклов лечения наблюдалась пилообразная картина увеличения и уменьшения АЬС в периферической крови, сопровождающаяся нодальным ответом у этих пациентов. Такое же увеличение АЬС наблюдали в последующем (Фаза 2) исследовании, во время которого пациенты с МСЬ получали фиксированную дозу 560 мг в сутки без лекарственных каникул. В этом исследовании АЬС увеличилось на 100-150% после 24 недель терапии лекарственным средством. Увеличение АЬС было временным с ощутимыми снижениями АЬС, наблюдаемыми в конце второго цикла. Непрерывное понижение АЬС наблюдали до схождения на нет в циклах 4-5. Повышенное абсолютное число лимфоцитов (АЬС) вызвано увеличением рестриктированных по легкой цепи клеток СБ19'СБ5'.
Для определения популяции лимфоцитов, увеличенных с помощью ибрутиниба, РВМС пациентов, выделенные до (Ό1) и после одной недели терапии (Ό8), окрашивали СБ3, СБ19, СБ5 и анализировали с помощью проточной цитометрии. Увеличенные лимфоциты характеризовались как СБ3-СП19+СП5+, абсолютное число и процентное содержание СО19'СБ5' клеток в популяции лимфоцитов были значительно увеличены после одной недели терапии ибрутинибом (р<0.05), тогда как популяция СБ19'СБ5 не была увеличена. Пример одного пациента показан на фиг. 35, где популяции СО19'СБ3- и СБ19'СБ5' перед терапиями лекарственным средством составляли 9.29 и 84.4% соответственно и увеличились до 63 и 98.8% после одной недели лечения. Клетки СБ19'СБ3-СБ5' были рестриктированы по легкой цепи (данные не показаны), по-видимому, отражая увеличенную циркуляцию клеток МСЬ в периферической крови после одной недели лечения лекарственным средством. В некоторых случаях мобилизованные клетки содержали различающиеся субпопуляции малых клеток СБ45б1т, которые также указывают на МСЬ.
Для подтверждения достижения полного ингибирования целевой ВТК у этих пациентов, занятость активного сайта ВТК ибрутинибом оценивали в РВМС от пациентов с МСЬ с помощью анализа конкурентного связывания с использованием флуоресцентного зонда. В среднем свыше 90% занятости мишени наблюдалось у пациентов после 1 недели лечения.
Популяция периферических СБ19'СБ5' представляет собой СХСВ41оСБ38ь и уменьшена в К167 после терапии лекарственным средством
Далее авторы анализировали клетки СО19'СБ5' на экспрессию СХСВ4, хемокинового рецептора, который, как известно, вовлечен в миграцию и хоуминг в ткани. Поверхностная экспрессия СХСВ4 была значительно снижена (р<0.05) в популяции СБ19'СБ5' после одной недели терапии лекарственным средством (фиг. 36А). Сообщалось, что экспрессия СХСВ4 и СБ38 у пациентов с СЬЬ была ниже в резидентных клетках лимфатических узлов по сравнению с клетками СЬЬ в периферической крови. Поэтому авторы анализировали экспрессию СХСВ4 и СБ38 на лимфатических узлах выбранных пациентов и резидентных клетках МСЬ периферической крови. Экспрессия СХСВ4 была ниже в клетках МСЬ, изолированных из ЬК, по сравнению с периферической кровью у всех 3 обследуемых пациентов (фиг. 36Ό). Это согласуется с наблюдаемой вновь циркулирующей популяцией клеток СХСВ4Ь МСЬ и согласуется с мобилизованными клетками, происходящими из тканей, таких как ЬМ. Это мнение в дальнейшем подтвердилось значительным уменьшением лимфаденопатии, наблюдаемым в этот же период. Последующее исследование мобилизованной популяции выявило высокую экспрессию СБ38+, соответствующую увеличенной экспрессии СБ38, обнаруженной в ЬХ-резидентных клетках МСЬ (фиг. 36В/Б). Это начальное увеличение в клетках СБ38+ было значительно снижено после терапии в клетках СБ19'СБ5' (р<0.01), тогда как клетки СО19'СБ5- (которые имели стабильно низкую экспрессию СБ38) не были значительно изменены (фиг. 36В/С).
Далее авторы изучали изменения маркеров пролиферативного потенциала, а также хоуминг и миграцию в мобилизованные фракции. Межклеточная экспрессия К167 была значительно снижена после терапии (р<0.05) (фиг. 36С). Фосфорилированный ЕВК также был уменьшен, как продемонстрировано фосфоро-проточной цитометрией, в субпопуляции СО20'СБ5' от пациентов до и после лечения. Экспрессия рЕгк была в целом выше в клетках СБ20 'СБ5' пациентов с МСЬ по сравнению со здоровыми добровольцами, и была снижена терапией ибрутинибом (фиг. 36С, внизу), хотя эти различия не были статистически значимыми.
- 111 032463
Кроме того, хемокины, важные в хоуминге (ЫПС, Μ№-1β, СХСЬ13 и СХСЬ17), были снижены в среднем на более чем 50% после одной недели лечения. К концу первого цикла лечения, дополнительно к уменьшению ΜΙΓ-1β> и ЫПС, также ΙΒ-10 и ΤΝΡ-α были уменьшены на 50% (фиг. 36Е). Ибрутиниб ингибирует псевдоэмпериполез в ЫСЬ/стромальной сокультуре.
Временное увеличение АЬС у пациентов с ΜΘΕ, получавших лечение ибрутинибом, может быть вызвано нарушением клеточной адгезии и миграции в пределах лимфатического узла или тканевых компартментах. Для изучения этого авторы использовали сокультуры ЫСЬ - стромальных клеток для определения действия лекарственного средства ίη νίίτο. Первичные клетки ЫСЬ или линию клеток Μίηο выращивали в сокультуре со стромальными клетками костного мозга мышей М2-10В4. Авторы обнаружили, что первичные клетки ЫСЬ или клетки Μίηο, и те и другие прилипают и быстро мигрируют под клетки М2-10В4 (псевдоэмпериполез). Наблюдали значительное ингибирование псевдоэмпериполеза ибрутинибом, как показано с помощью оптической микроскопии, и некоторое количество клеток Μίηο или первичных клеток Μ0Ε, оставшихся в сокультуре, количественно определяли с помощью проточной цитометрии клеток ЕСП19+, собранных путем осторожного отмывания после 4 ч сокультивирования (фиг. 37А и 37В, слева). Ибрутиниб дозозависимо ингибировал миграцию клеток Μίηο под стромальные клетки, и ингибирование было значительным при 100 нМ (р<0.01) и 1000 нМ (р<0.001). Коклюшный токсин, хорошо изученный ингибитор ОРСК, используемый в качестве положительного контроля для ингибирования миграции клеток Μίηο, значительно ингибировал миграцию при 200 нг/мл (р<0.001). Кроме того, СХСЬ12, важный хемокин для В-клеточного хоуминга и продуцируемый стромальными клетками, повышал кортикальный актин клеток Μίηο, как было оценено с помощью флуоресцентной микроскопии с использованием фаллоидина, и этот ответ был также дозозависимо и значительно ингибирован терапией ибрутинибом при 10 и 100 нМ (р<0.001) (фиг. 37А справа). Ибрутиниб также подавлял полимеризацию актина первичной Μ^ в сокультуре при 100 нМ (р<0.001) (фиг. 37В, справа). Ибрутиниб ингибирует активность В(к в ΜС^/стромальной сокультуре и подавляет индуцированную стромальными клетками секрецию хемокина и цитокина.
Для дополнительного понимания действия лекарственного средства на клетки ΜΘΕ в сокультуре со стромальными клетками клетки Μίηο обрабатывали лекарственным средством и сокультивировали с мышиными стромальными клетками (М2-10В4) или стимулировали анти-IдΜ. Ибрутиниб дозозависимо ингибировал рВ(к, рРЬСу2 и рАк! в клетках Μίηο, взятых отдельно, или в сокультуре с М2 клетками. Концентрации хемокина и цитокина в кондиционированной среде определяли из обработанных ибрутинибом клеточных линий Μ0Ε, взятых отдельно, или в сокультуре с М2 стромальными клетками, или стимулированными анти-IдΜ. Несмотря на отсутствие детектируемой активации сигнальных белков при сокультивировании с М2, клетки Μίηο увеличивали секреции хемокина и цитокина после стимуляций ВСК или сокультивирования. Сходные результаты наблюдали с клеточной линией Κ1<ο. Ибрутиниб дозозависимо и активно подавлял выработку человеческого ΙΒ-10, ЫПС, ΜΙΓ-1(/., Μ№-1β, ΤΝΕα, ССЬ17 и ССЬ21 после активации ВСК или сокультивирования, тогда как мышиные стромальные клетки, взятые отдельно, не вырабатывали человеческие хемокины или цитокины. Аналогично, ибрутиниб подавлял выработку ΙΒ-10, ЫПС, Μ^Ησ, Μ№-1β, ΤΝΕα клеток йеЩ1 в сокультуре с М2-10В4 или человеческой линией стромальных клеток Η8-5. Эти результаты ίη νίίτο клеточных линий Μ0Ε коррелируют с уменьшением в плазме хемокина/цитокина у пациентов, получавших лечение ибрутинибом.
Ибрутиниб ингибирует ВСК- и хемокин-опосредованную адгезию и миграцию ίη νίίτο.
Авторы измерили прямое действие ибрутиниба на миграцию и адгезию линий клеток Μίηο, Κ1<ο1 и ΐνΜ-1 Μ0Ε. Сначала, в этих клетках Μ0Ε определяли действие ибрутиниба на передачу сигнала В(к. Как ожидалось, ибрутиниб ингибировал фосфорилирование В(к и нисходящие бοгηκί^еат сигнальные белки РЬСу2, Εγ1< ΜΑР киназа, ЙЯК и Ак! после стимуляций анти-IдΜ и хемокинами СХСЬ12 и СХСЬ13. Поверхностную клеточную экспрессию СХСК4, СХСК5, ССК7, поверхностного Ι§Μ и интегрина α4β1 подтверждали проточной цитометрией, и последующие анализы ίη νίίτο адгезии и хемотксиса выполняли с лекарственным средством. Ибрутиниб значительно ингибировал стимулированную анти-IдΜ адгезию клеток йеЩ1 и ЯВЫ на фибронектин или VСΑΜ1 при 100 нМ (клинически значимая концентрация ибрутиниба) с более 50-70% ингибированием. Ингибирование адгезии ибрутинибом было также дозозависимым. Аналогично, адгезия обеих, клеток Μίηο и йеЩ1 к VСΑΜ1 или фибронектину была ингибирована ибрутинибом при 100 нМ после активаций СХСЬ12 или СХСЬ13. Степень ингибирования была больше в клетках Μίηο (50-70%), чем в клетках йеЩ1 (20-30%). Дополнительно к изменениям в адгезии авторы обнаружили, что ибрутиниб дозозависимо ингибировал СХСЬ12-индуцированную миграцию клеток Μίηο, йеЩ1 и ΐνΜ-1, при этом клетки Μίηο и йеЩ1 были более чувствительными к лекарственному средству, чем клетки ΐνΜ-1. Ибрутиниб также значительно ингибировал СХСЬ13-стимулированную миграцию клеток Μίηο дозозависимо в интервале от 1 нМ до 1 мкМ.
Затем авторы изучили действие ибрутиниба на передачу сигнала и адгезию в первичных клетках ΜΘΕ Фосфорилирование Υ223 было увеличено в клетках ΜΘΕ по сравнению с нормальными Влимфоцитами, что указывало на повышенную передачу сигнала ВСК в злокачественных В-клетках. Ибрутиниб ингибировал рВ(к как в первичных клетках ΜΘΕ, так и в нормальных В-клетках на Υ223, участ
- 112 032463 ке аутофосфорилирования В!к и Υ551 (тирозин фосфорилированный киназами 8гс-семейства) и понижал рРЬС/2 на Υ759 и Υ1217 при концентрациях 10 нМ и выше. Эти результаты демонстрируют, что ибрутиниб напрямую ингибирует активность В!к в первичных клетках МСЬ. Важно отметить, что ибрутиниб также ингибировал активированную СХСБ12 или СХСБ13 адгезию с УСАМ1, а также ВСКстимулированную адгезию с фибронектином при 100 нМ в первичных клетках МСЬ. Степень ингибирования в этих первичных клетках составила около 10-20%, и магнитуда была менее выраженной по сравнению с линиями клеток МСЬ, но ингибирование было статистически значимым.
Эти исследования в целом демонстрируют, что ибрутиниб ингибирует активированную ВСК и СХСЬ12, СХСЫ3 адгезию и миграцию в линиях клеток МСЬ, а также первичных клетках МСЬ, которые связаны с В!к-ингибированием в этих клетках.

Claims (18)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Комбинация для применения в лечении гематологической злокачественной опухоли, содержащая:
    a) необратимый ингибитор тирозинкиназы Брутона (В!к), причем необратимый ингибитор тирозинкиназы Брутона (В!к) представляет собой (К)-1-(3-(4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4б] пиримидин-1 -ил)пиперидин-1-ил)проп-2-ен-1-он (РС^32765/ибрутиниб); и
    b) СА 101 (т.е. обинутузумаб);
    в которой необратимый ингибитор В!к и СА 101 находятся в виде раздельных лекарственных форм.
  2. 2. Комбинация по п.1, в которой размер дозировки необратимого ингибитора В!к составляет приблизительно от 300 до приблизительно 1000 мг/день.
  3. 3. Комбинация по п.1, в которой размер дозировки необратимого ингибитора В!к составляет приблизительно от 420 до приблизительно 840 мг/день.
  4. 4. Комбинация по п.1, в которой размер дозировки необратимого ингибитора В!к составляет приблизительно от 420 или приблизительно 560 мг/день.
  5. 5. Комбинация по п.1, где гематологическая злокачественная опухоль представляет собой Вклеточную злокачественную опухоль.
  6. 6. Комбинация по п.5, где В-клеточная злокачественная опухоль представляет собой хронический лимфоцитарный лейкоз (СЬЬ).
  7. 7. Комбинация по п.5, где В-клеточная злокачественная опухоль представляет собой лимфому из клеток мантийной зоны (МСЬ).
  8. 8. Комбинация по п.5, где В-клеточная злокачественная опухоль представляет собой макроглобулинемию Вальденстрема.
  9. 9. Комбинация по п.5, в которой В-клеточная злокачественная опухоль представляет собой диффузную В-крупноклеточную лимфому (ОЬВСЬ).
  10. 10. Комбинация по п.5, в которой В-клеточная злокачественная опухоль представляет собой фолликулярную лимфому (РЬ).
  11. 11. Применение комбинации:
    a) необратимого ингибитора тирозинкиназы Брутона (В!к), причем необратимый ингибитор тирозинкиназы Брутона (В!к) представляет собой (К)-1-(3-(4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4б]пиримидин-1 -ил)пиперидин-1-ил)проп-2-ен-1-он (РС^32765/ибрутиниб); и
    b) СА 101 (т.е. обинутузумаб);
    где необратимый ингибитор В!к и СА 101 находятся в виде раздельных лекарственных форм, для изготовления лекарственного средства для лечения гематологической злокачественной опухоли у субъекта, нуждающегося в этом.
  12. 12. Применение по п.11 для изготовления лекарственного средства для лечения гематологической злокачественной опухоли, выбранной из лейкоза, лимфопролиферативного нарушения или миелоидного нарушения.
  13. 13. Применение по п.11 для изготовления лекарственного средства для лечения хронического лимфоцитарного лейкоза (СЬЬ).
  14. 14. Применение по п.11 для изготовления лекарственного средства для лечения лимфомы из клеток мантийной зоны (МСЬ).
  15. 15. Применение по п.11 для изготовления лекарственного средства для лечения макроглобулинемии Вальденстрема.
  16. 16. Применение по п.11 для изготовления лекарственного средства для лечения диффузной Вкрупноклеточной лимфомы (ОЬВСЬ).
  17. 17. Применение по п.11 для изготовления лекарственного средства для лечения фолликулярной лимфомы (РЬ).
  18. 18. Применение комбинации:
    а) необратимого ингибитора тирозинкиназы Брутона (В!к), причем необратимый ингибитор тирозинкиназы Брутона (В!к) представляет собой (К)-1-(3-(4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4
    - 113 032463
    б]пиримидин-1 -ил)пиперидин-1-ил)проп-2-ен-1-он (РО-32765/ибрутиниб); и
    Ь) СА 101 (т.е. обинутузумаб);
    где необратимый ингибитор В1к и СА 101 находятся в виде раздельных лекарственных форм, для изготовления лекарственного средства для лечения гематологической злокачественной опухоли у субъекта, нуждающегося в этом, где СА 101 вводят субъекту, когда субъект идентифицирован как имеющий увеличенную мобилизацию множества клеток из злокачественной опухоли после введения необратимого ингибитора тирозинкиназы Брутона (В1к), причем идентификация увеличения мобилизации множества клеток из злокачественной опухоли основана на детекции присутствия, экспрессии или уровня экспрессии одного или более из следующих биомаркеров: СХСЯ4, К167, МЭС, М^-^, СХСЬ-13, СХСБ17, Ш-10, МТР-1а, ССБ17 и ССБ21.
    1-К.1С1К11
EA201490798A 2011-10-19 2012-10-19 Применение ингибиторов тирозинкиназы брутона (втк) EA032463B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161549067P 2011-10-19 2011-10-19
PCT/US2012/061208 WO2013059738A2 (en) 2011-10-19 2012-10-19 Use of inhibitors of bruton's tyrosine kinase (btk)

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201490798A1 EA201490798A1 (ru) 2015-02-27
EA032463B1 true EA032463B1 (ru) 2019-05-31

Family

ID=48141634

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201490798A EA032463B1 (ru) 2011-10-19 2012-10-19 Применение ингибиторов тирозинкиназы брутона (втк)
EA201892766A EA201892766A1 (ru) 2011-10-19 2012-10-19 ПРИМЕНЕНИЕ ИНГИБИТОРОВ ТИРОЗИНКИНАЗЫ БРУТОНА (Btk)

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201892766A EA201892766A1 (ru) 2011-10-19 2012-10-19 ПРИМЕНЕНИЕ ИНГИБИТОРОВ ТИРОЗИНКИНАЗЫ БРУТОНА (Btk)

Country Status (13)

Country Link
US (3) US20140303191A1 (ru)
EP (1) EP2771010A4 (ru)
JP (5) JP6506555B2 (ru)
KR (4) KR102258778B1 (ru)
CN (2) CN104039325A (ru)
AU (4) AU2012325804B2 (ru)
BR (1) BR112014009276A8 (ru)
CA (2) CA2851808C (ru)
EA (2) EA032463B1 (ru)
IL (3) IL232059B (ru)
MX (1) MX361772B (ru)
SG (2) SG11201401625TA (ru)
WO (1) WO2013059738A2 (ru)

Families Citing this family (95)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8193182B2 (en) 2008-01-04 2012-06-05 Intellikine, Inc. Substituted isoquinolin-1(2H)-ones, and methods of use thereof
DK2240451T3 (da) 2008-01-04 2017-11-20 Intellikine Llc Isoquinolinonderivater substitueret med en purin, der er anvendelig som pi3k-inhibitorer
US8338439B2 (en) 2008-06-27 2012-12-25 Celgene Avilomics Research, Inc. 2,4-disubstituted pyrimidines useful as kinase inhibitors
US11351168B1 (en) 2008-06-27 2022-06-07 Celgene Car Llc 2,4-disubstituted pyrimidines useful as kinase inhibitors
CA2986640C (en) 2008-06-27 2019-03-26 Celgene Avilomics Research, Inc. Heteroaryl compounds and uses thereof
US20110224235A1 (en) 2008-07-16 2011-09-15 Pharmacyclics, Inc. Inhibitors of bruton's tyrosine kinase for the treatment of solid tumors
CA2760794C (en) 2009-05-05 2017-07-25 Dana Farber Cancer Institute Egfr inhibitors and methods of treating disorders
WO2011152351A1 (ja) 2010-05-31 2011-12-08 小野薬品工業株式会社 プリノン誘導体
NZ772688A (en) 2010-06-03 2022-09-30 Pharmacyclics Llc The use of inhibitors of bruton’s tyrosine kinase (btk)
KR20130099040A (ko) 2010-08-10 2013-09-05 셀진 아빌로믹스 리서치, 인코포레이티드 Ｂｔｋ 억제제의 베실레이트 염
US8975249B2 (en) 2010-11-01 2015-03-10 Celgene Avilomics Research, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
EP2635285B1 (en) 2010-11-01 2017-05-03 Celgene Avilomics Research, Inc. Heteroaryl compounds and uses thereof
US8796255B2 (en) 2010-11-10 2014-08-05 Celgene Avilomics Research, Inc Mutant-selective EGFR inhibitors and uses thereof
TWI546305B (zh) 2011-01-10 2016-08-21 英菲尼提製藥股份有限公司 製備異喹啉酮之方法及異喹啉酮之固體形式
MX347040B (es) 2011-05-17 2017-04-10 Principia Biopharma Inc Inhibidores de tirosina-cinasas.
US9376438B2 (en) 2011-05-17 2016-06-28 Principia Biopharma, Inc. Pyrazolopyrimidine derivatives as tyrosine kinase inhibitors
ES2548414T3 (es) 2011-07-08 2015-10-16 Novartis Ag Novedosos derivados de pirrolo pirimidina
AU2012283775A1 (en) 2011-07-13 2014-01-23 Pharmacyclics Llc Inhibitors of Bruton's tyrosine kinase
MY192354A (en) 2011-07-19 2022-08-17 Merck Sharp & Dohme 4-imidazopyridazin-1-yl-benzamides and 4-imidazotriazin-1-yl-benzamides as btk-inhibitors
EP2548877A1 (en) 2011-07-19 2013-01-23 MSD Oss B.V. 4-(5-Membered fused pyridinyl)benzamides as BTK-inhibitors
EP3812387A1 (en) 2011-07-21 2021-04-28 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Heterocyclic protein kinase inhibitors
EA032463B1 (ru) * 2011-10-19 2019-05-31 Фармасайкликс Элэлси Применение ингибиторов тирозинкиназы брутона (втк)
CA2853498A1 (en) 2011-10-28 2013-05-02 Celgene Avilomics Research, Inc. Methods of treating a bruton's tyrosine kinase disease or disorder
RU2615999C2 (ru) 2011-11-29 2017-04-12 Оно Фармасьютикал Ко., Лтд. Гидрохлорид производного пуринона
US8828998B2 (en) 2012-06-25 2014-09-09 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Treatment of lupus, fibrotic conditions, and inflammatory myopathies and other disorders using PI3 kinase inhibitors
US20150140085A1 (en) * 2012-06-29 2015-05-21 Principia Biopharma Inc. Formulations comprising ibrutinib
KR20180088926A (ko) 2012-07-24 2018-08-07 파마싸이클릭스 엘엘씨 브루톤 티로신 키나제(btk)의 억제제에 대한 내성과 관련된 돌연변이
EA027213B9 (ru) 2012-09-10 2017-09-29 Принсипиа Биофарма Инк. Соединения пиразолопиримидина в качестве ингибиторов киназ
US9375485B2 (en) 2012-12-07 2016-06-28 Geron Corporation Use of telomerase inhibitors for the treatment of myeloproliferative disorders and myeloproliferative neoplasms
EP2935226A4 (en) 2012-12-21 2016-11-02 Celgene Avilomics Res Inc HETEROARYL COMPOUNDS AND USES THEREOF
PE20151274A1 (es) 2013-02-08 2015-09-12 Celgene Avilomics Res Inc Inhibidores de erk y sus usos
CA2905993C (en) 2013-03-14 2022-12-06 Tolero Pharmaceuticals, Inc. Substituted 4-amino-pyrimidinyl-2-amino-phenyl derivatives and pharmaceutical compositions thereof for use as jak2 and alk2 inhibitors
US8957080B2 (en) 2013-04-09 2015-02-17 Principia Biopharma Inc. Tyrosine kinase inhibitors
US20140377258A1 (en) * 2013-05-30 2014-12-25 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Treatment Of Cancers Using PI3 Kinase Isoform Modulators
CA2920534A1 (en) 2013-08-12 2015-02-19 Pharmacyclics Llc Methods for the treatment of her2 amplified cancer
US9492471B2 (en) 2013-08-27 2016-11-15 Celgene Avilomics Research, Inc. Methods of treating a disease or disorder associated with Bruton'S Tyrosine Kinase
JP2016536354A (ja) * 2013-10-10 2016-11-24 アセチロン ファーマシューティカルズ インコーポレイテッドＡｃｅｔｙｌｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ． 非ホジキンリンパ腫を治療するための、ｈｄａｃ阻害剤単独またはｂｔｋ阻害剤との組み合わせ
CN111265531B (zh) * 2013-10-25 2023-11-10 药品循环有限责任公司 治疗和预防移植物抗宿主病的方法
ES2717777T3 (es) 2013-11-06 2019-06-25 Mayo Found Medical Education & Res Métodos y materiales para tratar neoplasias hematológicas
US20150125446A1 (en) * 2013-11-07 2015-05-07 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Combination therapy of an anti cd20 antibody with a btk inhibitor
WO2015071432A1 (en) * 2013-11-14 2015-05-21 Sandoz Ag Pharmaceutical compositions of ibrutinib
US9512084B2 (en) 2013-11-29 2016-12-06 Novartis Ag Amino pyrimidine derivatives
WO2015084892A1 (en) 2013-12-02 2015-06-11 Cornell University Methods for treating b cell proliferative disorders
AU2014358868A1 (en) 2013-12-05 2016-06-09 Acerta Pharma B.V. Therapeutic combination of a PI3K inhibitor and a BTK inhibitor
US10272083B2 (en) 2014-01-21 2019-04-30 Acerta Pharma B.V. Methods of treating chronic lymphocytic leukemia and small lymphocytic leukemia using a BTK inhibitor
WO2015127261A1 (en) * 2014-02-21 2015-08-27 Pharmacyclics, Inc. Biomarkers for predicting response of dlbcl to treatment with ibrutinib
KR20160117614A (ko) 2014-02-21 2016-10-10 프린시피아 바이오파마, 인코퍼레이티드 Btk 억제제의 염 및 고체 형태
CA2942528A1 (en) 2014-03-20 2015-09-24 Pharmacyclics Inc. Phospholipase c gamma 2 and resistance associated mutations
ES2806506T3 (es) 2014-03-25 2021-02-17 Ono Pharmaceutical Co Agente profiláctico y/o agente terapéutico para el linfoma difuso de células B grandes
RU2718542C2 (ru) * 2014-04-07 2020-04-08 Новартис Аг Лечение злокачественной опухоли с использованием химерного рецептора антигена против cd19
US9937171B2 (en) 2014-04-11 2018-04-10 Acerta Pharma B.V. Methods of blocking the CXCR-4/SDF-1 signaling pathway with inhibitors of bruton's tyrosine kinase
WO2015185998A2 (en) * 2014-04-11 2015-12-10 Acerta Pharma B.V. Methods of blocking the cxcr-4/sdf-1 signaling pathway with inhibitors of bone marrow x kinase
WO2015160975A2 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Combination therapies
CN104825455B (zh) * 2014-06-11 2017-08-15 中国科学院合肥物质科学研究院 依鲁替尼的用途
WO2015192081A1 (en) * 2014-06-13 2015-12-17 Byrd, John C. Biomarker for predicting response of cll to treatment with a btk inhibitor
TW201613644A (en) 2014-06-17 2016-04-16 Acerta Pharma Bv Therapeutic combinations of a BTK inhibitor, a PI3K inhibitor, and/or a JAK-2 inhibitor
WO2016010961A1 (en) * 2014-07-15 2016-01-21 Abbvie Inc. Enzyme occupancy assay
US20160022684A1 (en) * 2014-07-25 2016-01-28 Pharmacyclics Llc Bet inhibitor and bruton's tyrosine kinase inhibitor combinations
BR112017001677A2 (pt) * 2014-08-01 2018-07-17 Pharmacyclics Llc biomarcadores para predizer resposta de dlbcl ao tratamento com um inibidor de btk
US9730938B2 (en) 2014-08-08 2017-08-15 Pharmacyclics Llc Bruton's tyrosine kinase inhibitor combinations and uses thereof
HRP20211813T1 (hr) 2014-08-11 2022-03-04 Acerta Pharma B.V. Terapeutske kombinacije inhibitora btk i inhibitora bcl-2
ES2741785T3 (es) 2014-08-13 2020-02-12 Celgene Car Llc Formas y composiciones de un inhibidor de ERK
WO2016040858A1 (en) 2014-09-12 2016-03-17 G1 Therapeutics, Inc. Combinations and dosing regimes to treat rb-positive tumors
CN104873515B (zh) * 2014-10-30 2017-04-05 中国科学院合肥物质科学研究院 依鲁替尼对flt3‑itd突变的急性白血病的应用
WO2016071770A2 (en) * 2014-11-05 2016-05-12 Janssen Pharmaceutica Nv Biological markers for identifying ibrutinib resistance in patients having mantle cell lymphoma and methods of using the same
CN104407067B (zh) * 2014-11-17 2016-01-20 广东东阳光药业有限公司 依鲁替尼及其异构体的检测方法
WO2016090255A1 (en) * 2014-12-05 2016-06-09 Sriram Balasubramanian Biological markers for predicting responsiveness to ibrutinib and r-chop combination therapy and methods of using the same
SG11201704808VA (en) 2014-12-18 2017-07-28 Principia Biopharma Inc Treatment of pemphigus
MX2017008486A (es) * 2014-12-23 2017-09-19 Pharmacyclics Llc Combinaciones del inhibidor de tirosina cinasa de bruton (btk) y regimenes de dosificacion.
MA41265B1 (fr) * 2014-12-24 2023-05-31 Principia Biopharma Inc Compositions pour administration de médicaments iléo-jéjunal.
MX2017012822A (es) 2015-04-06 2018-06-13 Janssen Pharmaceutica Nv Composiciones que contienen ibrutinib.
EP3281943B1 (en) 2015-04-09 2023-06-28 ONO Pharmaceutical Co., Ltd. Process for producing purinone derivative
US10485794B2 (en) 2015-04-13 2019-11-26 Daiichi Sankyo Company, Limited Treatment method by combined use of MDM2 inhibitor and BTK inhibitor
KR101776238B1 (ko) * 2015-06-12 2017-09-12 사회복지법인 삼성생명공익재단 교모세포종 환자에서 이브루티닙 감수성과 관련된 유전자 및 그 용도
WO2016210165A1 (en) 2015-06-24 2016-12-29 Principia Biopharma Inc. Tyrosine kinase inhibitors
EP3613745B1 (en) 2015-07-02 2021-09-01 Acerta Pharma B.V. Solid forms and formulations of (s)-4-(8-amino-3-(1-(but-2-ynoyl)pyrrolidin-2-yl)imidazo[1,5-a]pyrazin-1-yl)-n-(pyridin-2-yl)benzamide
MA44909A (fr) * 2015-09-15 2018-07-25 Acerta Pharma Bv Association thérapeutique d'un inhibiteur du cd19 et d'un inhibiteur de la btk
US20190290650A1 (en) * 2016-01-19 2019-09-26 Janssen Pharmaceutic Nv Formulations/compositions comprising a btk inhibitor
WO2017184774A1 (en) * 2016-04-19 2017-10-26 Acetylon Pharmaceuticals, Inc. Hdac inhibitors, alone or in combination with btk inhibitors, for treating chronic lymphocytic leukemia
WO2017223422A1 (en) 2016-06-24 2017-12-28 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Combination therapies
MX2018016330A (es) 2016-06-27 2020-02-17 Univ California Combinaciones para tratamiento del cáncer.
EP3478273A1 (en) 2016-06-29 2019-05-08 Principia Biopharma Inc. Modified release formulations of 2-[3-[4-amino-3-(2-fluoro-4-phenoxy-phenyl)pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl]piperidine-1-carbonyl]-4-methyl-4-[4-(oxetan-3-yl)piperazin-1-yl]pent-2-enenitrile
KR20190068544A (ko) 2016-10-17 2019-06-18 다이이찌 산쿄 가부시키가이샤 Mdm2 저해제와 dna 메틸트랜스페라아제 저해제의 병용 치료법
WO2018090792A1 (zh) * 2016-11-15 2018-05-24 杭州和正医药有限公司 一种选择性布鲁顿酪氨酸激酶抑制剂及其应用
US11013741B1 (en) 2018-04-05 2021-05-25 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. AXL kinase inhibitors and use of the same
KR20200143454A (ko) 2018-04-13 2020-12-23 스미토모 다이니폰 파마 온콜로지, 인크. 골수증식성 신생물 및 암과 연관된 섬유증의 치료를 위한 pim 키나제 억제제
CN112512597A (zh) 2018-07-26 2021-03-16 大日本住友制药肿瘤公司 用于治疗与acvr1表达异常相关的疾病的方法以及用于此的acvr1抑制剂
KR20210146290A (ko) 2019-02-12 2021-12-03 스미토모 다이니폰 파마 온콜로지, 인크. 헤테로시클릭 단백질 키나제 억제제를 포함하는 제제
CN114364798A (zh) 2019-03-21 2022-04-15 欧恩科斯欧公司 用于治疗癌症的Dbait分子与激酶抑制剂的组合
WO2020198281A1 (en) * 2019-03-28 2020-10-01 Cardiff Oncology, Inc. Plk1 inhibitors and psa levels in prostate cancer
CN114761006A (zh) 2019-11-08 2022-07-15 Inserm(法国国家健康医学研究院) 对激酶抑制剂产生耐药性的癌症的治疗方法
WO2021148581A1 (en) 2020-01-22 2021-07-29 Onxeo Novel dbait molecule and its use
IL303343A (en) * 2020-12-02 2023-08-01 Telios Pharma Inc Methods and preparations for the treatment of eye conditions
CN114681459B (zh) * 2020-12-29 2024-02-27 上海云晟研新生物科技有限公司 伊布替尼药物组合物、其制备方法及应用
WO2023133444A1 (en) * 2022-01-07 2023-07-13 University Of Florida Research Foundation, Incorporated Bruton's tyrosine kinase inhibitors as antiviral agents

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2847852A1 (en) * 2006-09-22 2008-04-03 Pharmacyclics, Inc. Inhibitors of bruton's tyrosine kinase
WO2011112623A1 (en) * 2010-03-08 2011-09-15 Spectrum Pharmaceuticals, Inc. Thioxanthone-based autophagy inhibitor therapies to treat cancer

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2004518615A (ja) * 2000-08-09 2004-06-24 ザ・リージェンツ・オブ・ザ・ユニバーシティー・オブ・カリフォルニア 癌の処置に有用なインドール化合物
CN101475632B (zh) * 2008-01-03 2012-01-04 张喜田 具有抗肿瘤作用的重组灵芝免疫调节蛋白及其药物制剂
UA108193C2 (uk) * 2008-12-04 2015-04-10 Апоптозіндукуючий засіб для лікування раку і імунних і аутоімунних захворювань
US20100160322A1 (en) * 2008-12-04 2010-06-24 Abbott Laboratories Apoptosis-inducing agents for the treatment of cancer and immune and autoimmune diseases
US8299077B2 (en) * 2009-03-02 2012-10-30 Roche Palo Alto Llc Inhibitors of Bruton's tyrosine kinase
NZ772688A (en) * 2010-06-03 2022-09-30 Pharmacyclics Llc The use of inhibitors of bruton’s tyrosine kinase (btk)
EA032463B1 (ru) * 2011-10-19 2019-05-31 Фармасайкликс Элэлси Применение ингибиторов тирозинкиназы брутона (втк)

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2847852A1 (en) * 2006-09-22 2008-04-03 Pharmacyclics, Inc. Inhibitors of bruton's tyrosine kinase
WO2011112623A1 (en) * 2010-03-08 2011-09-15 Spectrum Pharmaceuticals, Inc. Thioxanthone-based autophagy inhibitor therapies to treat cancer

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
GHOBRIAL Irene M. et al. Expression of the Chemokine Receptors CXCR4 and CCR7 and Disease Progression in B-Cell Chronic Lymphocytic Leukemia/Small Lymphocytic Lymphoma. Mayo Clin Proc., 2004; 79: pp. 318-325, особенно, реферат, табл. 1, 3, 4 *
HONIGBERG Lee A. et al. The Bruton tyrosine kinase inhibitor PCI-32765 blocks B-cell activation and is efficacious in models of autoimmune disease and B-cell malignancy. PNAS, 2010, vol. 107, no. 29, pp. 13075-13080 *

Also Published As

Publication number Publication date
EP2771010A4 (en) 2015-04-01
IL272622A (en) 2020-03-31
US20140303191A1 (en) 2014-10-09
KR102258778B1 (ko) 2021-06-02
SG11201401625TA (en) 2014-05-29
IL232059B (en) 2020-02-27
JP2018024686A (ja) 2018-02-15
US20170266186A1 (en) 2017-09-21
JP2021169468A (ja) 2021-10-28
CA3110966A1 (en) 2013-04-25
KR20210065203A (ko) 2021-06-03
JP6588515B2 (ja) 2019-10-09
KR20190138703A (ko) 2019-12-13
KR102054468B1 (ko) 2019-12-11
KR20230109775A (ko) 2023-07-20
AU2017272271A1 (en) 2018-01-04
EA201490798A1 (ru) 2015-02-27
AU2012325804A1 (en) 2014-05-01
EP2771010A2 (en) 2014-09-03
JP2024020199A (ja) 2024-02-14
US20210361657A1 (en) 2021-11-25
WO2013059738A2 (en) 2013-04-25
CN110801454A (zh) 2020-02-18
BR112014009276A2 (pt) 2017-06-13
IL288009A (en) 2022-01-01
JP6909255B2 (ja) 2021-07-28
AU2012325804B2 (en) 2017-09-07
JP2019151651A (ja) 2019-09-12
CA2851808A1 (en) 2013-04-25
AU2021286264A1 (en) 2022-01-06
JP6506555B2 (ja) 2019-04-24
JP7366084B2 (ja) 2023-10-20
CN104039325A (zh) 2014-09-10
JP2014530877A (ja) 2014-11-20
CA2851808C (en) 2021-04-13
EA201892766A1 (ru) 2019-08-30
BR112014009276A8 (pt) 2017-06-20
AU2019229398B2 (en) 2021-09-16
KR20140077208A (ko) 2014-06-23
MX361772B (es) 2018-12-17
IL232059A0 (en) 2014-05-28
SG10201702913XA (en) 2017-06-29
MX2014004647A (es) 2014-11-10
AU2019229398A1 (en) 2019-10-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11672803B2 (en) Use of inhibitors of Brutons tyrosine kinase (Btk)
EA032463B1 (ru) Применение ингибиторов тирозинкиназы брутона (втк)