DE69532645T2

DE69532645T2 - Heterozyklische pentapeptitische und halophenyl amide als hemmer für menschlichen krebs

Info

Publication number: DE69532645T2
Application number: DE69532645T
Authority: DE
Inventors: R. George PETTIT; K. Jayaram SRIRANGAM; Darko Kantoci
Original assignee: ARIZONA BOARD OF REGENTS TEMPE; Arizona Board of Regents of ASU
Current assignee: ARIZONA BOARD OF REGENTS TEMPE; Arizona Board of Regents of ASU
Priority date: 1994-12-13
Filing date: 1995-12-08
Publication date: 2005-03-10
Anticipated expiration: 2015-12-09
Also published as: WO1996018408A1; EP0797447A4; EP0797447A1; DE69532645D1; CA2203689C; AU4378196A; US5663149A; EP0797447B1; CA2203689A1; JPH11503717A

Description

Technisches Gebiet
Die vorliegende Erfindung betrifft allgemein das Gebiet von chemotherapeutischen Mitteln und insbesondere Pentapeptidheterocyclus- und Halogenphenylamidderivate von Dolastatin 10.
Diese Forschungen wurden teilweise durch Outstanding Investigator Grant CA 44344-01-04-05, das vom National Cancer Institute, DHHS, zugebilligt wurde, finanziert. Die Regierung der Vereinigten Staaten kann an dieser Erfindung gewisse Rechte besitzen.
Technischer Hintergrund
Alte Marineinvertebratenarten vom Phyla, Bryozoa, Molluska, und Porifera sind in den Ozeanen seit mehr als einer Milliarde Jahren etabliert. Diese Organismen machten Billionen von Biosynthesereaktionen in ihrer Evolutionschemie durch, bis sie zum derzeitigen Stand der zellulären Organisation, Regulation und Verteidigung gelangten.
Marineschwämme änderten jedoch ihr physisches Aussehen während der letzten 500 Millionen Jahre nur minimal. Dies legt eine sehr wirksame chemische Beständigkeit gegenüber einer Evolution als Reaktion auf sich ändernde Umgebungsbedingungen über diesen Zeitraum nahe. Das Erkennen der Möglichkeit, dieses biologisch wirksame Meereslebewesen für medizinische Zwecke zu nutzen, wurde in Ägypten etwa 2700 v. Chr. dokumentiert und um 200 v. Chr. wurden Seehasenextrakte in Griechenland wegen ihrer Heilwirkung verwendet. Diese Überlegung zusammen mit der Beobachtung, dass Meerestiere, beispielsweise Invertebraten und Haie, kaum Krebs entwickeln, führte zur systematischen Untersuchung von Antikrebsverbindungen von Meerestieren und -pflanzen.
1968 hatte man auf der Grundlage von als Schlüssel dienenden experimentellen Krebsuntersuchungssystemen des U.S. National Cancer Institute (NCI) breite Hinweise erhalten, dass bestimmte Meeresorganismen neue und antineoplastische und/oder cytotoxische Mittel bereitstellen können und auch zu Verbindungen, die zur Bekämpfung und/oder Ausrottung von Viruserkrankungen wirksam sind, führen können. Ferner wurde angenommen, dass diese Meeresorganismen möglicherweise verwendbare Arzneimittelkandidaten einer bisher unbekannten Struktur, die sich der Entdeckung durch andere Methoden der medizinischen Chemie entzogen hatten, besitzen. Glücklicherweise wurden diese Erwartungen erfüllt, beispielsweise durch die Entdeckung der Bryostatine, Dolastatine und Cephalostatine, von denen viele sich nun in präklinischen oder humanen kainischen Untersuchungen befinden.
Die Forscher, die derzeit mit medizinischer Chemie befasst sind, kennen sehr wohl die Zeitverzögerung zwischen der Isolierung einer neuen Verbindung und deren Einführung auf dem Markt. Dieses Verfahren dauert mehrere Jahre und häufig Jahrzehnte. Daher entwickelte die Industrie in Verbindung mit der U.S.-Regierung ein System von Testkriterien, das zwei Zwecken dient. Einer ist das Ausscheiden der Substanzen, bei denen sich durch Testen zeigte, dass sie wirtschaftlich kontraproduktiv sind. Der zweite wichtigere Zweck dient dem Identifizieren der Verbindungen, die eine hohe Erfolgswahrscheinlichkeit zeigen und daher die weitere Untersuchung und Qualifizierung und die damit zusammenhängenden Kosten, die notwendig sind, um die strengen Regulierungsvorschriften, die den letztendlichen Markt kontrollieren, zu erfüllen, zu rechtfertigen.
Die derzeitigen Kosten zur Entwicklung dieser notwendigen Daten reichen bis zu 10 Mio. Dollar pro Verbindung. Eine derart große Investition erfolgt nur, wenn eine vernünftige Gelegen heit, diese zurückzugewinnen, besteht. Fehlt diese Gelegenheit, erfolgt keine Investition und die Forschung, die die Ermittlung dieser möglicherweise lebensrettenden Verbindungen umfasst, stoppt.
Noch vor 200 Jahren plagten die Menschheit viele Erkrankungen. Viele von diesen sind nun unter Kontrolle oder ausgelöscht. Während der fortschreitenden Entwicklung von Mitteln zur Behandlung oder Beseitigung dieser Erkrankungen war die Arbeit mit geeigneten Lebewesen von entscheidender Bedeutung.
Die derzeitige Forschung hinsichtlich der Kontrolle von Krebs wird in den Vereinigten Staaten durch das National Cancer Institute (NCI) koordiniert. Um zu bestimmen, ob eine Substanz Antikrebseigenschaften aufweist, etablierte das NCI ein systematisches Protokoll. Diese Protokoll, das das Testen einer Substanz gegen ein Standardzelllinienpanel, das 60 humane Tumorzelllinien enthält, umfasst, wurde verifiziert und wird in wissenschaftlichen Kreisen akzeptiert. Das Protokoll und die geläufigen statistischen Mittel zum Analysieren der durch die standardisierten Tests erhaltenen Ergebnisse sind in der Literatur vollständig beschrieben. Siehe: Dr. Michael R. Boyd, Principles & Practice of Oncology, PPO Updates, Band 3, Nummer 10, Oktober 1989, für eine in die Tiefe gehende Beschreibung des Testprotokolls; und K. D. Paull, "Display and Analysis of Patterns of Differential Activity of Drugs Against Human Tumor Cell Lines; Development of Mean Graph and Compare Algorithm", Journal of the National Cancer Institute Reports, Band 81, Nummer 14, Seite 1088, 14. Juli 1989, für eine Beschreibung der Verfahren der statistischen Analyse. Jede dieser Literaturstellen ist hier durch diesen Verweis darauf als Bezug aufgenommen.
Zahlreiche Substanzen, die signifikante antineoplastische oder tumorhemmende Eigenschaften aufweisen, wurden ermittelt. Wie im Vorhergehenden festgestellt, wurden viele dieser Verbindungen, wenn auch mit großen Schwierigkeiten, von Meerestieren, wie Schwämmen und Seehasen, gewonnen. Nachdem die Isolierung und das Testen dieser Verbindungen erreicht wurde, verbleibt eine praktische Frage, nämlich, wie kommerziell signifikante Mengen der gewünschten Substanz hergestellt werden können.
Chinin, das in praktischen Mengen aus der Rinde des Chinarindenbaums erhältlich ist, unterscheidet sich von den Verbindungen, die Extrakte von Meereslebewesen sind, die antineoplastische Eigenschaften besitzen. Die Gewinnung und Prozessierung dieser letzteren Verbindungen aus ihren natürlichen Quellen liegt im Bereich von äußerst inpraktikabel bis vollständig unmöglich. Auch wenn die ökologischen Auswirkungen dieses Aberntens ignoriert werden, machen die Population dieser Lebewesen und die Kosten der Gewinnung und Extraktion das Verfahren undurchführbar. Eine künstliche Synthese der aktiven Verbindungen ist die einzige mögliche Lösung.
Die Verfassung der Vereinigten Staaten (Art. 1, Abschnitt 8) ermächtigte den Kongress, das United States Patent and Trademark Office (USPTO) zur Förderung des wissenschaftlichen Fortschritts einzurichten. Um Patentrechte zu erhalten, muss die Verwendbarkeit der Erfindung aufgezeigt werden. Krebszellwachstum bei Menschen verursacht häufig Schmerzen, Leiden und vorzeitigen Tod. Die Beeinträchtigung des Wachstums von humanen Krebstumoren ist insofern nützlich, als sie diese Zustände lindert, wodurch es den auf diese Weise betroffenen Menschen ermöglicht wird, eine längeres produktiveres Leben zu führen. Weniges kann nützlicher als dieses Ergebnis sein.
Das einzige Recht, das durch die Erteilung eines Patents erhalten wird, besteht darin, andere darin zu hindern, den Gegenstand des Patents auszunutzen. Dies führt zum Schutz des Erfinders während eines adäquaten Zeitraums, was das Wiedereinbringen der Investition ermöglicht. Dies ergibt wiederum einen Anreiz für weitere Forschungen.
Das Erkennen einer antineoplastischen und tumorhemmenden Aktivität, die durch die akzeptierten NCI-Kriterien als "Nutzbarkeit" belegt wird, kann Forschungsanstrengungen in den Vereinigten Staaten fördern und ist unzweideutig entscheidend, wenn diese Anstrengungen auch nur zu einem bescheidenen bisschen Erfolg führen sollen.
Die EP-A-611775 und EP-A-598129 offenbaren Dolastatin-10-Analoga.
Zusammenfassung der Erfindung
Die Synthese von möglicherweise verwendbaren Peptiden stellt einen der wichtigsten und vielversprechendsten Ansätze für neue Arten von Aritikrebsmitteln und Immunsuppresiva dar Hier und im Folgenden werden die Synthesen von mehreren Pentapeptiden, die modifizierte Aminosäuren umfassen und heterocyclische oder Halogenphenylgruppen am C-Terminus tragen, angegeben. Die hier gewählten modifizierten Aminosäuren sind die Bestandteile des bekannten marinen Peptids Dolastatin 10, das eines der besten Profile antineoplastischer Aktivität gegenüber verschiedenen Krebsrastern, die bisher bekannt sind, aufweist. Singuläre Strukturmodifikationen wurden durchgeführt, um die Synthese neuer Peptide, die heterocyclische/Halogenphenylgruppen am C-Terminus tragen und eine außergewöhnliche antineoplastische und/oder cytostatische Aktivität besitzen, zu erreichen.
Diese Forschungen führten zu einem effektiven Verfahren zur Synthese von neuen und sehr wirksamen gegen Krebs wirkenden Pentapeptiden. Die vorliegende Erfindung umfasst die Synthese von 19 derartigen Peptiden, die im Folgenden angegeben sind. Daher ist die Hauptaufgabe der vorliegenden Erfindung die Synthese von 19 Pentapeptidamiden, die eine wirksame antineoplastische Aktivität gegenüber verschiedenen humanen Krebs- und Mausleukämie(P-388)tumorzelllinien zeigen.
Das allgemeine Verfahren und die in dieser Offenbarung angegebenen Abkürzungen sind im Folgenden angegeben:
Abkürzungen
Die hier genannte Modifikation führt eine Peptidbindung zwischen verschiedenen Aminosäuren (1a-f) und verschiedenen aromatischen Amineinheiten (2a-k) ein, wobei jeweils Pentapeptidamide (9a-s) erhalten werden. Siehe 1 aaO.
Als erste Stufe wurden die entsprechenden Amine (2a-k) mit Boc-L-Aminosäuren (1a-f) reagieren gelassen. Die Amine waren: 4-Fluoranilin (2a), 2-Chloranilin (2b), 3-Chloranilin (2c), 4-Chloranilin (2d), 2,5-Dichloranilin (2e), 4-Chlorphenethylamin (2f), 2-Amino-6-fluorbenzothiazol (2g), 2-Amino-6-chlor-benzothiazol (2h), 2-Aminobenzothiazol (2i), 2-Aminopyridin (2j), 3-Aminochinolin (2k); und die Aminosäuren waren: N-tert-Boc-Methionin (1a), N-tert-Boc-Phenylalanin (1b), N-tert-Boc-Prolin (1c), N-tert-Boc-Valin (1d), N-tert-Boc-Isoleucin (1e), N-tert-Boc-p-Chlor-phenylalanin (1f). Die Synthese von Amiden (3a-s) in Gegenwart von 2-Ethoxy-1-ethoxy-carbonyl-1,2-dihydrochinolin (EEDQ) oder Isobutylchlorformiat oder 1,3-Dicyclohexylcarbodiimid als Kondensationsmittel führte zu hervorragenden Ausbeuten. Keine Racemisierung wurde während dieser Reaktionen beobachtet.
Wie in 2 aaO angegeben ist, wurde die Schutzgruppe (N-tert-Boc) der obigen Amide (3a-s) mit Chlorwasserstoff in Essigsäure oder Chlorwasserstoff in Dioxan oder Trifluoressigsäure in Methylenchlorid entfernt, wobei die entsprechenden Hydrochlorid- oder Trifluoracetatsalze (4a-s) gebildet wurden. Die Kopplung dieser entsprechenden entschützten N-tert-Butyloxycarbonyl-L-aminosäureamide (4a-s) mit Dolaproin (5) in Gegenwart von Diethylphosphorcyanidat (DEPC) und Triethylamin führte zur Bildung der geschützten Dipeptidamide (6a-s) in merklichen Ausbeuten, was in 3 aaO angegeben ist.
Die Schutzgruppen der im Vorhergehenden genannten Amide (6a-s) wurden mit Trifluoressigsäure entfernt, wobei die entsprechenden Trifluoracetatsalze (7a-s) gebildet wurden, wie in 4 aaO angegeben ist. Diethylphosphorocyanidat wurde erneut mit hervorragenden Ergebnissen für die Kopplung von Tripeptidtrifluoracetat (TFA* Dov-Val-Dil-OH)(8)) mit jedem der Amidsalze (7a-s) verwendet, wobei die Strukturmodifikationen von Dolastatin 10 (9a-s), die in 5 aaO angegeben sind, und die eine Hemmung von Zellwachstum zeigen, erhalten wurden.
Alle diese Verbindungen (9a-s) zeigten eine hervorragende Wirksamkeit, wenn sie an humane Tumor- und Mausleukämiezelllinien verabreicht wurden. Die verschiedenen in-vitro-Tests für alle diese Verbindungen sind im Folgenden in Tabelle 1 offenbart.
Daher ist eine Hauptaufgabe der vorliegenden Erfindung die Bereitstellung der Aufklärung und Synthese von neuen und neuartigen Derivaten von Dolastatin 10, die jeweils eine wirksame Aktivität gegenüber verschiedenen Einheiten der Zelllinie des National Cancer Institute zeigen.
Eine weitere Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist die Bereitstellung neuer und einzigartiger Substanzen, die Dolastatin therapeutisch ähnlich sind und die durch wirtschaftlich durchführbare Verfahren in kommerziell lohnenden Mengen erzeugt werden können.
Diese und noch weitere Aufgaben, die im Folgenden klar werden, werden durch die vorliegende Erfindung auf eine deutlich unerwartete Weise gelöst, wie dies ohne weiteres aus der folgenden detaillierten Beschreibung eines Ausführungsbeispiels derselben deutlich wird.
Beschreibung der bevorzugten Ausführungsform
Die Synthese der offenbarten Verbindungen umfasst die Verwendung mehrerer allgemeiner Verfahren, die im Folgenden angegeben sind, mit der Verwendung von mehreren Aminen als erste Stufe, wobei die entsprechenden Amine (2a-k) mit Boc- L-Aminosäuren (1a-f) reagieren gelassen wurden. Die Amine waren: 4-Fluoranilin (2a), 2-Chloranilin (2b), 3-Chloranilin (2c), 4-Chloranilin (2d), 2,5-Dichloranilin (2e), 4-Chlorphenethylamin (2f), 2-Amino-6-fluorbenzothiazol (2g), 2-Amino-6-chlor-benzothiazol (2h), 2-Aminobenzothiazol (2i), 2-Aminopyridin (2j), 3-Aminochinolin (2k); und die Aminosäuren waren: N-tert-Boc-Methionin (1a), N-tert-Boc-Phenylalanin (1b), N-tert-Boc-Prolin (1c), N-tert-Boc-Valin (1d), N-tert-Boc-Isoleucin (1e), N-tert-Boc-p-Chlor-phenylalanin (1f). Die Synthese von Amiden (3a-s) in Gegenwart von 2-Ethoxy-1-ethoxy-carbonyl-1,2-dihydrochinolin (EEDQ) oder Isobutylchlorformiat oder 1,3-Dicyclohexylcarbodiimid als Kondensationsmittel führte zu hervorragenden Ausbeuten. Keine Racemisierung wurde während dieser Reaktionen beobachtet.
Allgemeines Verfahren A
Eine Lösung der N-tert-Butoxycarbonyl-L-aminosäure (1, 10 mmol) in trockenem Tetrahydrofuran (40 ml) wurde auf –15 °C gekühlt und mit N-Methylmorpholin neutralisiert. Isobutylchlorformiat (10 mmol) und anschließend 1 min später das jeweilige Amin 2 (11 mmol) wurden zugegeben. Das Reaktionsgemisch wurde sich auf Raumtemperatur erwärmen gelassen. Nach 1-stündigem Rühren bei Raumtemperatur wurde THF unter vermindertem Druck entfernt und der Rückstand in Ethylacetat (250 ml) aufgenommen. Die Ethylacetatlösung wurde nacheinander mit KHSO₄ (10 %, 2 × 150 ml), Wasser, einer gesättigten Natriumbicarbonatlösung (2 × 150 ml) und Wasser gewaschen und getrocknet (Na₂SO₄). Die Behandlung mit Aktivkohle und das Entfernen des Lösemittels ließen einen Rückstand des Amids zurück, der in geeigneter Weise gereinigt wurde.
Allgemeines Verfahren B
Eine Lösung der N-tert-Butoxycarbonyl-L-aminosäure (1, 10 mmol) in trockenem Tetrahydrofuran (40 ml) wurde auf –15 °C gekühlt und mit N-Methylmorpholin neutralisiert. Isobutyl chlorformiat (10 mmol) und anschließend 1 min später das jeweilige Amin 2 (11 mmol) wurden zugegeben. Das Reaktionsgemisch wurde sich auf Raumtemperatur erwärmen gelassen. Nach 1-stündigem Rühren bei Raumtemperatur wurde das ausgefallene Salz durch Filtration entfernt und der Rückstand eingeengt und aus Aceton-Hexan kristallisiert, wobei die Kristalle des gewünschten Amids erhalten wurden.
Allgemeines Verfahren C
Zu einer Lösung der N-tert-Butoxycarbonyl-L-aminosäure (1, 10 mmol) in trockenem Tetrahydrofuran (20 ml) wurden das jeweilige Amin 2 (11 mmol) und anschließend 2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1,2-dihydrochinolin (EEDQ) (11 mmol) gegeben, und die Lösung wurde 24 h bei 20 °C gerührt. Das Lösemittel wurde bei Raumtemperatur unter Vakuum entfernt, und das erhaltene ölige Produkt wurde aus Ethylacetat-Hexan kristallisiert, wobei die farblosen Kristalle des gewünschten Amids erhalten wurden.
Allgemeines Verfahren D
In trockenem Tetrahydrofuran (30 ml) wurden die N-tert-Butoxycarbonyl-L-aminosäure (1, 10 mmol), das Amin 2 (10 mmol), 1-Hydroxybenzotriazol (10 mmol) und 1,3-Dicyclohexylcarbodiimid (11 mmol) bei 2 – 5 °C gelöst. Das Reaktionsgemisch wurde 1 h bei 2 – 5 °C und 1 h bei 23 °C gerührt. Ausgefallener Dicyclohexylharnstoff wurde abfiltriert, das Lösemittel wurde entfernt (verminderter Druck) und der Rückstand wurde mit Ethylacetat (150 ml) verdünnt. Die organische Phase wurde mit KHSO₄ (10 %, 40 ml), Wasser (50 ml) und einer gesättigten wässrigen Hydrogencarbonatlösung (50 ml) gewaschen und dann getrocknet (Natriumsulfat). Das Lösemittel wurde unter vermindertem Druck entfernt und der Rückstand wurde auf einer Silicagel (0,040 – 0,063 mm)-Flash-Säule (3,5 × 22 cm) mit Hexan-Aceton (3:1) als Lösemittel chromatographiert. Nach dem Abdampfen des Lösemittels von den Fraktionen (die durch Dünnschichtchromatographie ausgewählt wurden), wurde der Feststoff kristallisiert, wobei das reine Amid erhalten wurde.
Allgemeines Verfahren E
Eine Lösung des N-tert-Boc-Aminosäureamids (3a, 3c, 3e-g, 3i, 3l-m, 2 mmol) in Chlorwasserstoff/Dioxan (4,0 M Chlorwasserstoff, 10 ml) wurde ½ h bei 20 °C gerührt. Danach wurde Diethylether (150 ml) zugegeben, und der erhaltene Feststoff wurde durch Filtration gewonnen und in einem Vakuumexsikkator getrocknet, wobei das jeweilige Hydrochloridsalz erhalten wurde, das ohne weitere Reinigung verwendet wurde.
Allgemeines Verfahren F
Eine Lösung des N-tert-Boc-Aminosäureamids (3h, 3j, 3n, 3p-s, 2 mmol) in Chlorwasserstoff/Essigsäure (1,0 M Chlorwasserstoff, 20 ml) wurde ½ h bei 10 °C gerührt. Danach wurde Diethylether (150 ml) zugegeben, und der erhaltene Feststoff wurde durch Filtration gewonnen und in einem Vakuumexsikkator getrocknet, wobei das jeweilige Hydrochloridsalz erhalten wurde, das ohne weitere Reinigung verwendet wurde.
Allgemeines Verfahren G
Eine Lösung des N-tert-Boc-Aminosäureamids (3b und 3o, 2 mmol) in Dichlormethan (2 ml) und Trifluoressigsäure (2 ml) wurde ½ h bei 10 °C gerührt. Die Lösemittel wurden unter vermindertem Druck entfernt und der Rückstand wurde in Toluol aufgenommen, und Toluol wurde ebenfalls unter vermindertem Druck entfernt. Der Rückstand wurde dann in einem Vakuumexsikkator getrocknet, wobei das jeweilige Trifluoracetatsalz erhalten wurde, das ohne weitere Reinigung verwendet wurde.
Allgemeines Verfahren H
Zu einer Lösung von [2S-[2R*(αS*,βS*)]]-1-[(1,1-Dimethylethoxy)carbonyl]-β-methoxy-α-methyl-2-pyrrolidin-propansäure (N-tert-Boc-Dolaproin, 5, 287 mg, 1 mmol) in trockenem N,N-Dimethylformamid (5 ml) wurden das jeweilige Aminosäureamidhydrogenchlorid/Trifluoracetatsalz (4, 1 mmol) und anschließend Triethylamin (2 mmol) und Diethylphosphocyanidat (DEPC) (1 mmol, Eisbad) gegeben, und die Lösung wurde 2 h bei 0 – 5 °C unter Stickstoff gerührt. Das Lösemittel wurde (unter Vakuum bei Raumtemperatur) entfernt, und der Rückstand wurde mit Ethylacetat (100 ml) verdünnt. Die organische Schicht wurde mit Citronensäure (10 %, 30 ml), Wasser (30 ml), einer gesättigten NaHCO₃-Lösung (30 ml) und Wasser (30 ml) gewaschen und dann getrocknet (Na₂SO₄). Das Lösemittel wurde unter vermindertem Druck bei 40 °C entfernt, und der Rückstand wurde auf einer Silicagel (0,040 – 0,063 mm)-Säule chromatographiert. Nach dem Abdampfen des Lösemittels von den Fraktionen (die durch Dünnschichtchromatographie ausgewählt wurden) wurden 2 ml trockenes Methylenchlorid zugegeben und das Abdampfen wiederholt. Der Rückstand wurde in einem Exsikkator unter Vakuum (über Nacht) getrocknet, wobei das entsprechende Dipeptidamid (6) als viskoses Öl erhalten wurde, das aus Aceton-Hexan gereinigt wurde, wobei ein farbloser Feststoff erhalten wurde.
Allgemeines Verfahren I
Zu einer Lösung von [25-[2R*(αS*,βS*)]]-1-[(1,1-Dimethylethoxy)carbonyl]-β-methoxy-α-methyl-2-pyrrolidin-propansäure (N-tert-Boc-Dolaproin, 5, 1 mmol) in trockenem N,N-Dimethylformamid (5 ml) wurden das jeweilige Aminosäureamidhydrogenchlorid/Trifluoracetatsalz (4, 1 mmol) und anschließend Triethylamin (2 mmol) und DEPC (1 mmol, Eisbad) gegeben, und die Lösung wurde 2 h bei 0 – 5 °C unter Argon gerührt. Das Lösemittel wurde (unter Vakuum bei Raumtemperatur) entfernt, und der Rückstand wurde mit Ethylacetat (100 ml) verdünnt. Die organische Schicht wurde mit Citronensäure (10 %, 30 ml), Wasser (30 ml), einer gesättigten NaHCO₃-Lösung (30 ml) und Wasser (30 ml) gewaschen und dann getrocknet (Na₂SO₄). Das Lösemittel wurde unter vermindertem Druck bei 40 °C entfernt. Der Rückstand wurde in einem Exsikkator unter Vakuum (über Nacht) getrocknet, wobei das entsprechende Dipeptidamid (6) als Feststoff erhalten wurde, das aus Aceton-Hexan gereinigt wurde, wobei ein farbloser Feststoff erhalten wurde.
Allgemeines Verfahren J
Zu einer Lösung von [2S-[2R*(αS*,βS*)]]-1-[(1,1-Dimethylethoxy)carbonyl]-β-methoxy-α-methyl-2-pyrrolidin-propansäure (N-tert-Boc-Dolaproin, 5, 1 mmol) in trockenem Methylenchlorid (3 ml, über Calciumhydrid destilliert) wurden das jeweilige Aminosäureamidhydrogenchloridsalz (4, 1 mmol) und anschließend Triethylamin [2 mmol (für Aminosäure-3-aminochinolinsalze 3 mmol)] und DEPC (1 mmol, Eisbad) gegeben, und die Lösung wurde 2 h unter Argon gerührt. Das Lösemittel wurde (unter Vakuum bei Raumtemperatur) entfernt, und der Rückstand wurde auf einer Silicagel(0,040 – 0,063 mm)-Säule chromatographiert. Nach dem Abdampfen des Lösemittels von den Fraktionen (die durch Dünnschichtchromatographie ausgewählt wurden) wurden 2 ml trockenes Methylenchlorid zugegeben und das Abdampfen wiederholt. Der Rückstand wurde in einem Exsikkator unter Vakuum (über Nacht) getrocknet, wobei das entsprechende Dipeptidamid (6) als viskoses Öl erhalten wurde, das aus Methylenchlorid-Hexan ausgefällt wurde, wobei ein farbloser Feststoff erhalten wurde.
Allgemeines Verfahren K
Eine Lösung der N-tert-Boc-Dipeptidamide 6a-s (1 mmol) in Methylenchlorid (2 ml) und Trifluoressigsäure (2 ml) wurde 30 min gerührt (Eisbad unter Argonatmosphäre). Das Lösemittel wurde unter vermindertem Druck entfernt und Toluol wurde zu dem Rückstand gegeben. Das Lösemittel wurde erneut unter Vakuum entfernt und dieser Vorgang wurde wiederholt. Der Rückstand wurde in einem Exsikkator (unter Vakuum über Nacht) getrocknet, wobei das Trifluoracetatsalz als viskoses Öl erhalten wurde, das in der nächsten Stufe ohne weitere Reinigung verwendet wurde.
Allgemeines Verfahren L
Zu einer Lösung des Trifluoracetatsalzes (7a-s, 0,2 mmol) in Methylenchlorid (2 ml, über Calciumhydrid destilliert) wurden das Dov-Val-Dil-Tripeptidtrifluoracetatsalz (8, 0,2 mmol) und anschließend Triethylamin (0,63 mmol) und DEPC (0,22 mmol, Eisbad) gegeben. Die Lösung wurde 1 – 2 h bei 0 – 5 °C unter Argon gerührt. Das Lösemittel wurde (unter Vakuum bei Raumtemperatur) entfernt, und der Rückstand wurde auf einer Silicagel(0,040 – 0,063 mm)-Säule chromatographiert. Nach dem Abdampfen des Lösemittels von den Fraktionen (die durch Dünnschichtchromatographie ausgewählt wurden) wurden 2 ml trockenes Methylenchlorid und anschließend 10 ml n-Hexan zugegeben und die Lösemittel unter einem Argonstrom abgedampft, wobei ein farbloser flockiger Feststoff des gewünschten Pentapeptidamids (9a-s) erhalten wurde.
Dolastatin 10 zeigte in vivo eine siginifikante gegen Krebs wirkende Aktivität, was im Folgenden angegeben wird, doch sollen zunächst unsere Ausdrücke definiert werden.
Statistische Definitionen
Die folgenden Maßeinheiten werden verwendet, um eine Arzneimittelaktivität auszudrücken, wobei die Arzneimitteldosis, die das Zellwachstum auf einen spezifizierten Prozentsatz des Wachstums verringert, angegeben wird:
ED₅₀ (P-388) und GI₅₀ (HTCL) sind die Arzneimitteldosen, die nötig sind, um das prozentuale Wachstum auf 50 % zu verrin gern. Es besteht kein mathematischer Unterschied zwischen ED₅₀ und GI₅₀, die beide unter Verwendung der gleichen Formel berechnet werden. Der einzige Unterschied ist die Verwendungsgeschichte.
TGI (Hemmung des gesamten Wachstums) ist die Arzneimitteldosis, die notwendig ist, dass ein Wachstum von 0 % erhalten wird, d. h. genau so viele Zellen am Ende des Experiments, wie am Beginn vorhanden waren. Ob genau so viele Zellen abgetötet wie gebildet wurden (Gleichgewichtszustand), oder ob kein Wachstum erfolgt ist (vollständige Hemmung), kann nicht unterschieden werden.
LC₅₀ (zu 50 % letale Konzentration) ist die Arzneimittelkonzentration, die das Wachstum auf –50 % verringert, d. h. die Hälfte der ursprünglich am Beginn des Experiments vorhandenen Zellen entfernt.
Jedes Arzneimittel wird mit fünf (5) Dosen getestet: 100 – 10 – 1 – 0,1 – 0,01 μg/ml. Das prozentuale Wachstum wird für jede Dosis berechnet. Die zwei (oder drei) Dosen mit Wachstumswerten über, unter (oder nahe) einem Wachstum von 50 o werden zur Berechnung des ED₅₀/GI₅₀-Werts unter Verwendung einer linearen Regressionsformel verwendet. Der Logarithmus der Dosis wird während der Regressionsberechnung verwendet. Wenn keine Dosis einen Wachstumswert unter 50 % ergibt, werden die Ergebnisse als: ED₅₀ > (höchste Dosis) ausgedrückt. Wenn keine Dosis ein Wachstum von höher als einem Wachstum von 50 % ergibt, gilt dann ED₅₀ < (niedrigste Dosis). Ähnliche Berechnungen werden für den TGI-Wert bei einem Wachstum von 0 % und bei einem Wachstum von –50 % für den LC₅₀-Wert durchgeführt.
Prozentsatz des Wachstums
Am Beginn eines Experiments werden Zellen von den in-vitro-Zellkulturen in die entsprechenden Röhrchen oder Mikrotiterplatten überimpft. Ein Satz von Kontrollröhrchen/Platten wird unmittelbar gezählt, um die Zahl der Zellen am Beginn des Experiments zu bestimmen. Dies ist die "Grundlinienzahl" oder "T₀-Ablesung". Am Ende des Experiments (48 h später) wird ein zweiter Satz von Kontrollröhrchen/Platten analysiert, um den "Kontrollwachstum"-Wert zu bestimmen. Das Wachstum (oder der Tod) von Zellen, bezogen auf die Anfangsmenge der Zellen wird zum Definieren des "Prozentsatz des Wachstums" verwendet.
Experimentelle gegen Krebs wirkende Aktivität von Dolastatin 10 in Maus-in-vivo-Systemen, T/C (μg/kg)
P388-Lymphocytenleukämie

toxisch (13,0)
155 und 17 % geheilte Fälle (6,5)
146 und 17 % geheilte Fälle (3,25)
137 (1,63)

L1210-Lymphocytenleukämie

152 (13)
135 (6,5)
139 (3,25)
120 (1,63)

B16-Melanom

238 und 40 % geheilte Fälle (11,11)
182 (6,67)
205 (4,0)
171 (3,4)
142 (1,44)

M5076-Eierstocksarkom

toxisch (26)
166 (13)
142 (6,5)
151 (3,25)

LOX-humanes-Melanom-Xenotransplantat

auf (nackte Maus)
toxisch (52)
301 und 67 % geheilte Fälle (26)
301 und 50 % geheilte Fälle (13)
206 und 33 % geheilte Fälle (6,5)
170 und 17 % geheilte Fälle (3,25)
LOX in getrennten Experimenten
340 und 50 % geheilte Fälle (43) 181 und 33 % geheilte Fälle (26)
192 (15)
138 und 17 % geheilte Fälle (9,0)

Humanes Mamma-Xenotransplantat

nackte Maus
toxisch (26)
137 (13)
178 (6, 25)

OVCAR-3-humanes-Eierstockxenotransplantat

nackte Maus
300 (40)

MX-1-humanes-Mammaxenotransplantat

(Tumorregression)
14 (52)
50 (26)
61 (13)
69 (6,25)

Dolastatin 10 wurde ferner gegen ein Minipanel von dem NCI-Primärraster getestet. Diese Ergebnisse sind im Folgenden angegeben, wobei die Menge von Dolastatin 10 in μg/ml angegeben ist, die zum Erreichen von GI₅₀ gegenüber den im Folgenden angegebenen Zelllinien erforderlich ist.
Aus dem Vorstehenden ist ersichtlich, dass die in-vitro-Aktivität von Dolastatin 10 in dem Primärraster durch in-vivo-Tiertests bestätigt wurde.
Für die in dieser Anmeldung offenbarten Verbindungen sind die im Vorhergehenden offenbarten in-vitro-Tests verständlicherweise genaue Mittel zur Vorhersage von gegen Krebs wirkender Aktivität und nicht nur Indikatoren für den Wunsch nach weiteren Tests.
Alle diese Verbindungen (9a-s) zeigten eine hervorragende Wirksamkeit, wenn sie gegen humane Krebs- und Mausleukämiezelllinien verwendet wurden. Insbesondere zeigte die Verbindung (9d) eine bisher unbekannte und außergewöhnliche Hemmaktivität von humanen Tumoren gegenüber der Melanom-SK-MEL-5-Zelllinie. Die Bewertung hinsichtlich der Hemmung des Zellwachstums von verschiedenen Krebsarten für alle diese Verbindungen ist in der Tabelle 1 offenbart.
Zur weiteren Unterstützung des Verständnisses der vorliegenden Erfindung und nicht zur Beschränkung werden die folgenden Beispiele angegeben.
Beispiel I
Die Synthese der N-tert-Butoxycarbonyl-aminosäureamide (3a-s) wurde durch selektive Verwendung der allgemeinen Verfahren A, B, C und D wie im Folgenden angegeben durchgeführt.
Beispiel I-a
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-L-methionin-N-4-fluorphenylamid (3a)
Die Kopplung von N-tert-Butoxycarbonyl-L-methionin (1a) und 4-Fluoranilin (2a) gemäß dem allgemeinen Verfahren A ergab (3a) (C₁₆H₂₃N₂O₃S₁F₁, 88 %), Rf = 0,39 (Hexan-Aceton 3:1), Fp 110 – 111 °C, [α]_D ²³ = –33,8° (c 0,6, CHCl₃), IR (KBr) v: 449, 461, 500, 519, 565, 685, 725, 752, 777, 812, 837, 870, 918, 961, 1026, 1047, 1099, 1167, 1217, 1254, 1296, 1346, 1368, 1393, 1410, 1443, 1510, 1539, 1557, 1618, 1669, 1888, 1991, 2066, 2363, 2836, 2868, 2920, 2980, 3100, 3162, 3225, 3287, 3567 cm^–1, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 8,433 – 8,440 (br s, 1H, Ar-NH), 7,414 – 7,460 (m, 2H, ArH), 6,940 – 6,997 (m, 2H, ArH), 5,247 – 5,275 (br d, 1H, NH), 4,349 –4,396 (m, 1H, H^α), 2,542 – 2,651 (m, 2H, CH₂ ^γ), 2,199 – 2,129 (m, 1H, H^β), 2,099 (s, 3H, CH₃ ^ε), 1,940 – 2,036 (m, 1H, H^β), 1,429 (s, 9H, t-Bu); EIMS (70eV) m/z (%) : 342 (M⁺, 5).
Beispiel I-b
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-L-methionin-N-2-chlorphenylamid (3b)
Die Reaktion von N-tert-Butoxycarbonyl-L-methionin (1a) und 2-Chloranilin (2b) gemäß dem allgemeinen Verfahren A ergab nach der Reinigung auf einer Silicagelsäule mit Hexan-Aceton (3:1) als Elutionsmittel eine ölige Flüssigkeit von (3b) (C₁₆H₂₃N₂O₃S₁Cl₁, 79 %), Rf = 0,43 (Hexan-Aceton 3:1), [α]_D ²³ = –41,5° (c 0,65, CHCl₃), IR (KBr) ν: 536, 548, 606, 648, 667, 691, 752, 864, 963, 1036, 1055, 1165, 1250, 1298, 1368, 1393, 1441, 1524, 1593, 1616, 1684, 1696, 2338, 2361, 2870, 2920, 2978, 3036, 3061, 3121, 3314 cm^–1, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 8,551 (s, 1H, Ar-NH), 8,321 – 8,355 (m, 1H, ArH), 7,334 – 7,336 (m, 1H, ArH), 7,221 – 7,279 (m, 1H, ArH), 7,005 – 7,062 (m, 1H, ArH), 5,194 – 5,214 (br s, 1H, NH), 4,442 – 4,462 (m, 1H, H^α), 2,590 – 2,638 (m, 2H, CH₂ ^γ), 2,144 – 2,281 (m, 1H, H^β), 2,112 (s, 3H, CH₃ ^ε), 1,966 – 2,112 (m, 1H, H^β), 1,444 (s, 9H, t-Bu); EIMS (70eV) m/z (%): 358 (M⁺, 2).
Beispiel I-c
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-L-methionin-N-3-chlorphenylamid (3c)
Die Kopplung von N-tert-Butoxycarbonyl-L-methionin (1a) und 3-Chloranilin (2c) gemäß dem allgemeinen Verfahren A ergab nach der Reinigung auf einer Silicagelsäule mit Hexan-Aceton (3: 1) eine ölige Flüssigkeit von (3c) (C₁₆H₂₃N₂O₃5₁Cl₁, 94 %), Rf = 0,40 (Hexan-Aceton 3:1), [α]_D ²³ = –36,8° (c 1,44, CHCl₃), CHCl₃), IR (KBr) ν: 440, 461, 519, 548, 606, 681, 739, 777, 864, 880, 903, 963, 999, 1026, 1049, 1076, 1099, 1165, 1252, 1267, 1300, 1368, 1393, 1427, 1456, 1483, 1506, 1522, 1539, 1595, 1670, 1684, 1697, 2336, 2361, 2868, 2918, 2978, 3061, 3086, 3131, 3198, 3291, 3522, 3545 cm^–1, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 8,472 (br s, 1H, Ar-NH), 7,616 – 7,629 (m, 1H, ArH), 7,240 – 7,283 (m, 1H, ArH), 7,153 (dd, 1H, J 7,8 Hz und 8,1 Hz, ArH), 7,023 (d, 1H, J 7,8 Hz, ArH), 5,377 (br s, 1H, NH), 4,407 – 4,427 (m, 1H, H^α), 2,566 – 2,618 (m, 2H, CH₂ ^γ), 2,116 – 2,184 (m, 1H, H^β), 2,084 (s, 3H, CH₃ ^ε), 1,940 – 2,070 (m, 1H, H^β), 1,425 (s, 9H, t-Bu); EIMS (70eV) m/z (%): 358 (M⁺, 2).
Beispiel I-d
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-L-phenylalanin-N-3-chlorphenylamid (3d)
Die Kondensation von N-tert-Butoxycarbonyl-L-phenylalanin (1b) mit 3-Chloranilin (2c) gemäß dem allgemeinen Verfahren D ergab (3d) (C₂₀H₂₃N₂O₃Cl₁, 86 %), Rf = 0,37 (Hexan-Aceton 3:1), Fp 154 – 155 °C, [α]_D ²³ = –18,2° (c 0,45, CHCl₃), CHCl₃), IR (KBr) ν: 440, 496, 565, 606, 621, 679, 694, 731, 775, 856, 882, 903, 999, 1026, 1053, 1080, 1099, 1167, 1223, 1250, 1267, 1294, 1368, 1393, 1425, 1454, 1483, 1497, 1537, 1597, 1669, 2980, 3003, 3032, 3063, 3088, 3135, 3200, 3287 cm^–1, 1H-NMR (CDCl₃) δ: 8,00 (s, 1H, NH), 7,50 – 7,01 (m, 9H, 2Ph), 5,13 (m, 1H, NH), 4,45 (m, 1H, CH^α), 3,11 (2d, 2H, J 7,2 Hz, CH₂ ^β), 1,39 (s, 9H, t-Bu); EIMS (70eV) m/z (%): 374 (M⁺, 4).
Beispiel I-e
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-L-methionin-N-4-chlorphenylamid (3e)
Die Kondensation von N-tert-Butoxycarbonyl-L-methionin (1a) mit 4-Chloranilin (2d) gemäß dem allgemeinen Verfahren A ergab (3e) (C₁₆H₂₃N₂O₃S₁Cl₁, 94 %), Rf = 0,40 (Hexan-Aceton 3:1), Fp 125 – 126 °C, [α]_D ²³ = –32,6° (c 0,73, CHCl₃), IR (KBr) v: 473, 509, 540, 644, 673, 719, 762, 828, 868, 924, 963, 1013, 1026, 1047 1088, 1105, 1117, 1167, 1250, 1285, 1346, 1368, 1402, 1435, 1454, 1495, 1541, 1605, 1667, 1678, 1896, 2793, 2847, 2861, 2918, 2976, 3069, 3127, 3194, 3300 cm^–1, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 8,433 – 8,449 (br s, 1H, Ar-NH), 7,416 – 7,466 (m, 2H, ArH), 7,234 – 7,264 (m, 2H, ArH, 5,175 – 5,196 (m, 1H, NH), 4,369 (m, 1H, H^α), 2,538 – 2,655 (m, 2H, CH₂ ^γ), 2,134 – 2,205 (m, 1H, H^β), 2,103 (s, 3H, CH₃ ^ε), 1,934 – 2,031 (m, 1H, H^β), 1,434 (s, 9H, t-Bu); EIMS (70eV) m/z (%): 358 (M⁺, 4).
Beispiel I-f
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-L-phenylalanin-N-4-chlorphenylamid (3f)
Die Kondensation von N-tert-Butoxycarbonyl-L-phenylalanin (1b) mit 4-Chloranilin (2d) gemäß dem allgemeinen Verfahren D ergab (3f) (C₂₀H₂₃N₂O₃Cl₁, 84 %), Rf = 0,44 (Hexan-Aceton 3:1), [α]_D ²⁵ = +44,1° (c 0,8, CH₃OH), Fp 145 – 147 °C, IR (KBr) ν: 457, 492, 503, 540, 571, 596, 654, 675, 698, 745, 781, 826, 872, 883, 916, 982, 1013, 1034, 1053, 1071, 1088, 1105, 1163, 1223, 1248, 1269, 1287, 1298, 1314, 1366, 1381, 1402, 1454, 1493, 1539, 1601, 1667, 1688, 1707, 2791, 2853, 2864, 2932, 2982, 2999, 3030, 3040, 3057, 3069, 3131, 3200, 3285, 3318, 3430 cm^–1, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7,84 (s, 1H, NH), 7,32 – 7,19 (m, 9H, 2Ph), 5,09 (m, 1H, NH), 4,42 (m, 1H, CH^α), 3,11 (d, 2H, J 7,2 Hz, CH₂ ^β), 1,39 (s, 9H, t-Bu); EIMS (70eV) m/z (%): 374 (M⁺, 5).
Beispiel I-g
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-L-methionin-N-2,5-dichlorphenylamid (3g)
Die Reaktion von N-tert-Butoxycarbonyl-L-methionin (1a) mit 2,5-Dichloranilin (2e) gemäß dem allgemeinen Verfahren A ergab (3g) (C₁₆H₂₂N₂O₃S₁Cl₂, 98 %), Rf = 0,48 (Hexan-Aceton 3:1), Fp 109 – 110 °C, [α]_D ²³ = –52,1° (c 0, 96, CHCl₃), IR (KBr) v: 442, 486, 507, 557, 602, 631, 669, 698, 718, 743, 758, 787, 802, 822, 853, 880, 909, 936, 957, 978, 1030, 1059, 1092, 1157, 1167, 1208, 1227, 1262, 1294, 1333, 1368, 1393, 1408, 1425, 1441, 1452, 1522, 1586, 1669, 1705, 2832, 2868, 2905, 2922, 2938, 2980, 3005, 3015, 3077, 3119, 3190, 3347 cm^–1, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 8,653 (s, 1H, Ar-NH), 8,450 (d, 1H, J 2,7 Hz, ArH), 7,240 – 7,281 (m, 1H, ArH), 6,992 – 7,029 (m, 1H, ArH), 5,173 – 5,196 (m, 1H, NH), 4,444 (m, 1H, H^α), 2,584 – 2,634 (m, 2H, CH₂ ^γ), 2,144 – 2,255 (m, 1H, H^α), 2,110 (s, 3H, CH₃ ^ε), 1,959 – 2,055 (m, 1H, H^β), 1,440 (s, 9H, t-Bu); EIMS (70eV) m/z (%) : 392 (M⁺, 1).
Beispiel I-h
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-L-phenylalanin-N-2,5-dichlorphenylamid (3h)
Die Kondensation von N-tert-Butoxycarbonyl-L-phenylalanin (1b) mit 2,5-Dichloranilin (2e) gemäß dem allgemeinen Verfahren A ergab (3h) (C₂₀H₂₂N₂O₃Cl₂, 82 %), Rf = 0,52 (Hexan-Aceton 3:1), [α]_D ²⁵ = –21,9° (c 0,81, CH₃OH), Fp 127 – 128 °C, IR (KBr) ν: 440, 498, 513, 554, 565, 583, 662, 700, 719, 741, 754, 781, 795, 853, 874, 889, 909, 972, 1024, 1038, 1057, 1090, 1159, 1200, 1215, 1260, 1271, 1294, 1308, 1323, 1368, 1393, 1408, 1449, 1460, 1516, 1586, 1669, 1707, 2853, 2936, 2982, 3009, 3038, 3067, 3119, 3165, 3287, 3320, 3374, cm^–1, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 8,30 (s, 1H, NH), 8,5 – 8,4, 7,33 – 6,97 (m, 8H, 2Ph), 4, 96 (m, 1H, NH), 4,5 (m, 1H, CH^α), 3,16 (d, 2H, J 6,6 Hz, CH₂ ^β), 1,4 (s, 9H, t-Bu); EIMS (70eV) m/z (%): 408 (M⁺, 2).
Beispiel I-i
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-L-methionin-N-1-(2-p-chlorphenylethyl)amid (3i)
Die Kondensation von N-tert-Butoxycarbonyl-L-methionin (1a) mit 4-Chlorphenethylamin (2f) gemäß dem allgemeinen Verfahren B ergab (3i) (C₁₆H₂₂N₂O₃S₁Cl₂, 78 %), Rf = 0,32 (Hexan-Aceton 3 : 1), Fp 130 – 132 °C, [α]_D ²³ = –10,3° (c 0, 79, CHCl₃), IR (KBr) ν: 434, 465, 502, 534, 552, 629, 681, 702, 743, 754, 779, 802, 826, 856, 895, 909, 924, 955, 974, 1017, 1026, 1049, 1086, 1107, 1175, 1236, 1246, 1292, 1308, 1331, 1350, 1371, 1395, 1406, 1445, 1491, 1526, 1657, 1680, 1844, 1869, 1896, 1908, 2338, 2363, 2787, 2836, 2868, 2930, 2982, 3019, 3065, 3081, 3318, 3337 cm^–1, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7,240 – 7,275 (m, 2H, ArH), 7,079 – 7,123 (m, 2H, ArH), 6,175 (s, 1H, Ar-NH), 5,057 – 5,077 (m, 1H, NH), 4,156 (dd, 1H, J 14,4 & 7,2 Hz, H^α), 3,414 – 3,523 (m, 2H, N-CH₂), 2,762 (t, 2H, J 7,2 Hz,Ar-CH₂), 2,368 – 2,547 (m, 2H, CH₂ ^γ), 2,053 (s, 3H, CH₃ ^ε), 1,962 – 2,031 (m, 1H, H^β), 1,809 – 1,903 (m, 1H, H^β), 1,809 – 1,903 (m, 1H, Hp), 1,401 (s, 9H, t-Bu); EIMS (70eV) m/z (%): 386 (M⁺, 2).
Beispiel I-j
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-L-phenylalanin-N-2-(6-fluor)benzothiazolamid (3j)
Die Kondensation von N-tert-Butoxycarbonyl-L-phenylalanin (1b) mit 3-Chloranilin (2g) gemäß dem allgemeinen Verfahren D ergab (3j) (C₂₁H₂₂N₃O₃S₁F₁, 92 %), Rf = 0,39 (Hexan-Aceton 3:1), [α]_D ²⁵ = +50,7° (c 0,73, CH₃OH), Fp 183 – 185 °C, IR (KBr) ν: 426, 446, 471, 505, 542, 569, 611, 650, 667, 704, 733, 745, 793, 814, 828, 855, 883, 912, 943, 995, 1024, 1044, 1080, 1165, 1200, 1225, 1250, 1290, 1319, 1366, 1375, 1441, 1460, 1499, 1539, 1555, 1611, 1670, 1715, 2635, 2718, 2729, 2810, 2857, 2922, 2978, 3009, 3030, 3046, 3088, 3268, 3412 cm^–1, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7,70 – 7,10 (m, 8H, 2Ph), 4,9 (m, 1H, NH), 4,64 (m, 1H, CH^α), 3,27 – 3,07 (m, 2H, CH₂ ^β), 1,38 (s, 9H, t-Bu); EIMS (70eV) m/z (%): 415 (M⁺, 6).
Beispiel I-k
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-L-phenylalanin-N-2-(6-chlor)benzothiazolamid (3k)
Die Kondensation von N-tert-Butoxycarbonyl-L-phenylalanin (1b) mit 2-Amino-6-chlorbenzothiazol (2h) gemäß dem allgemeinen Verfahren D ergab (3k) (C₂₁H₂₂N₃O₃S₁Cl₁, 85 %), Rf = 0,42 (Hexan-Aceton 3:1), [α]_D ²⁵ = +53,8° (c 0,7, CH₃OH), Fp 187 – 188 °C, IR (KBr) ν: 463, 482, 496, 529, 554, 571, 592, 621, 698, 727, 748, 762, 783, 833, 856, 870, 920, 964, 991, 1017, 1045, 1080, 1098, 1126, 1169, 1202, 1240, 1275, 1314, 1366, 1391, 1451, 1503, 1545, 1597, 1674, 1696, 1707, 2814, 2864, 2932, 2978, 3019, 3030, 3063, 3086, 3144, 3231, 3349, 3387, 3407 cm^–1, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7,77 – 7,13 (m, 8H, 2Ph), 4,99 (m, 1H, NH), 4,64 (m, 1H, CH^α), 3,26 – 3,07 (m, 2H, CH₂ ^β), 1,38 (s, 9H, t-Bu); EIMS (70eV) m/z (%): 431 (M⁺, 9).
Beispiel I-l
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-L-(p-chlor)phenylalanin-N-2-(6-chlor)benzothiazolamid (31)
Die Kondensation von N-tert-Butoxycarbonyl-L-(p-chlor)phenylalanin (1f) mit 2-Amino-6-chlorbenzothiazol (2h) gemäß dem allgemeinen Verfahren D ergab (31) (C₂₁H₂₁N₃O₃S₁Cl₂, 78 %), Rf = 0,43 (Hexan-Aceton 3 : 1), [α]_D ²⁵ = +61,6° (c 0,38, CH₃OH), Fp 200 – 201 °C, IR (KBr) ν: 467, 492, 536, 583, 594, 621, 665, 698, 739, 762, 785, 797, 816, 835, 858, 868, 899, 963, 993, 1017, 1026, 1049, 1086, 1107, 1175, 1236, 1246, 963, 1017, 1045, 1094, 1128, 1167, 1200, 1242, 1275, 1317, 1352, 1368, 1391, 1410, 1449, 1499, 1545, 1595, 1626, 1676, 1696, 1707, 2853, 2932, 2980, 3011, 3065, 3086, 3183, 3351, 3385, 3405 cm^–1, ¹H-NMR (CDCl₃) δ : 7,77 – 7,01 (m, 7H, 2Ph), 5,02 (m, 1H, NH), 4,64 (m, 1H, CH^α), 3,25 – 3,02 (m, 2H, CH₂ ^β), 1,39 (s, 9H, t-Bu); EIMS (70eV) m/z (%): 465 (M⁺, 7).
Beispiel I-m
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-L-methionin-N-2-benzothiazolamid (3m)
Die Kondensation von N-tert-Butoxycarbonyl-L-methionin (1a) mit 2-Aminobenzothiazol (2i) gemäß dem allgemeinen Verfahren C ergab (3m) (C₁₇H₂₃N₃O₃S₂, 48 %), Rf = 0,62 (Hexan-Aceton 3:2), [α] _D ²⁵ = –35,2° (c 0, 69, CH₃OH), Fp 155,5 – 156,1 °C, IR (KBr) ν: 438, 469, 509, 527, 546, 569, 615, 654, 689, 704, 714, 729, 760, 816, 870, 926, 939, 953, 972, 1013, 1026, 1051, 1169, 1211, 1252, 1267, 1285, 1298, 1316, 1343, 1368, 1393, 1441, 1454, 1524, 1599, 1678, 1701, 2728, 2778, 2828, 2913, 2928, 2949, 2978, 2999, 3013, 3067, 3098, 3262 cm^–1, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7,82 – 7,28 (m, 4H, Ar-H), 5,33 (bs, 1H, NH-Met), 4,59 (m, 1H, H^α-Met), 2,59 (m, 2H, CH₂ ^γ), 2,31 – 2,19 (m, 1H, CH^β), 2,11 – 1,97 (m, 1H, CH^β), 2,07 (s, 3H, S-Me), 1,45 (s, 9H, t-Bu); EIMS m/z (%): 381 (M⁺, 21).
Beispiel I-n
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-L-prolin-N-2-benzothiazolamid (3n)
Die Reaktion von N-tert-Butoxycarbonyl-L-prolin (1c) mit 2-Aminobenzothiazol (2i) gemäß dem allgemeinen Verfahren C ergab (3n) ( C₁₇H₂₁N₃O₃S, 57 %), Rf = 0,58 (Hexan-Aceton 3 : 2 ), [α]_D ²⁵ = –63,7° (c 0, 86, CH₃OH), Fp 163,6 – 164,8 °C, IR (KBr) ν: 436, 519, 540, 588, 640, 664, 704, 731, 756, 777, 853, 868, 880, 891, 909, 930, 970, 1001, 1017, 1028, 1047, 1069, 1092, 1125, 1167, 1225, 1263, 1292, 1314, 1346, 1368, 1393, 1427, 1478, 1497, 1557, 1601, 1651, 1721, 1750, 2851, 2880, 2930, 2974, 2990, 3057, 3067, 3140, 3185, 3208, 3283, 3325 cm^–1, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7,81 – 7,24 (m, 4H, Ar-H), 4,60 – 4,35 (m, 1H, H^α-Pro), 3,60 – 3,36 (m, 2H, CH₂ ^δ-Pro), 4,11 – 3,81 (m, 2H, H^α-Pro, CH-Dap), 2,51 – 2,14 (bs, 1H, NH-BnThz), 2,05 – 1,90 (m, 2H, CH₂), 1,65 – 1,70 (m, 2H, CH₂), 1,47 (s, 9H, t-Bu); EIMS m/z (%): 347 (M⁺, 33).
Beispiel I-o
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-L-methionin-N-2-pyridylamid (3o)
Die Kondensation von N-tert-Butoxycarbonyl-L-methionin (1a) mit 2-Aminopyridin (2j) gemäß dem allgemeinen Verfahren A ergab nach der Reinigung auf einer Silicagelsäule (Hexan-Aceton 3:1) (3o) (C₁₅H₂₃N₃O₃S₁, 62 %), Rf = 0,33 (Hexan-Aceton 3: 1), Fp 135 – 137 °C, [α]_D ²³ = –28,2° (c 0,11, CHCl₃), IR (KBr) ν: 432, 459, 471, 496, 527, 623, 681, 737, 775, 829, 847, 864, 924, 964, 999, 1028, 1053, 1099, 1165, 1252, 1283, 1304, 1366, 1389, 1435, 1462, 1532, 1580, 1603, 1674, 1711, 2363, 2832, 2915, 2953, 2974, 2999, 3046, 3127 cm^–1, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 8,647 – 8,655 (br s, 1H, Ar-NH), 8,264 – 8,290 (m, 1H, ArH), 8,1705 (d, 1H, J 8,1 Hz, ArH), 7,659 – 7,718 (m, 1H, ArH), 7,016 – 7,055 (m, 1H, ArH), 5,210 – 5,227 (m, 1H, NH), 4,440 (m, 1H, H^α), 2,540 – 2,638 (m, 2H, CH₂ ^γ), 2,138 – 2,253 (m, 1H, H^β), 2,099 (s, 3H, CH₃ ^ε), 1,968 – 2,040 (m, 1H, H^β), 1,436 (s, 9H, t-Bu); EIMS (70eV) m/z (%): 325 (M⁺, 5).
Beispiel I-p
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-L-methionin-N-3-chinolinamid (3p)
Die Kondensation von N-tert-Butoxycarbonyl-L-methionin (1a) mit 3-Aminochinolin (2k) gemäß dem allgemeinen Verfahren C ergab eine ölige Flüssigkeit von (3p) (C₁₉H₂₅N₃O₃S, 56 %), Rf = 0,47 (Hexan-Aceton 3:2) , [α]_D ²⁵ = –40,6° (c 0,47, CH₃OH), IR (KBr) ν: 476, 567, 613, 642, 667, 687, 750, 783, 808, 860, 901, 957, 990, 1024, 1047, 1165, 1233, 1285, 1302, 1346, 1368, 1391, 1424, 1456, 1470, 1491, 1506, 1522, 1541, 1559, 1580, 1615, 1674, 1684, 1697, 2870, 2918, 2976, 3001, 3036, 3057, 3088, 3291, 3486, 3505, 3567, 3588 cm¹, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 9,02 (bs, 1H, NH-Chinolin), 8,80 (s, 1H, Ar-H), 8,77 (s, 1H, Ar-H), 8,06 – 7,50 (m, 4H, Ar-H), 5,26 (d, J 8,3 Hz, 1H, NH-Met), 4,47 (m, 1H, H^α-Met), 2,70 – 2,60 (m, 2H, CH₂ ^γ), 2,31 – 1,98 (m, 2H, CH₂ ^β), 2,13 (s, 3H, SMe), 1,46 (s, 9H, t-Bu); EIMS m/z (%): 375 (M⁺, 17).
Beispiel I-q
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-L-prolin-N-3-chinolinamid (3q)
Die Kopplung von N-tert-Butoxycarbonyl-L-prolin (1c) und 3-Aminochinolin (2k) gemäß dem allgemeinen Verfahren C ergab (3q) (C₁₉H₂₃N₃O₃ 54 %), Rf = 0,40 (Hexan-Aceton 3:2), [α]_D ²⁵ = –106,8° (c 0,41, CH₃OH), Fp 199,8 – 200,2 °C, IR (KBr) v: 434, 475, 500, 527, 540, 586, 611, 696, 756, 772, 785, 855, 883, 905, 920, 959, 990, 1018, 1092, 1126, 1159, 1194, 1217, 1242, 1254, 1275, 1312, 1344, 1362, 1391, 1418, 1447, 1456, 1478, 1493, 1557, 1580, 1669, 1703, 1829, 2363, 2874, 2932, 2953, 2974, 3052, 3094, 3127, 3163, 3189, 3254, 3300 cm¹, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 10,07 (bs, 1H, NH-Chinolin), 8,70 (s, 2H, Ar-H), 8,00 – 7,45 (m, 4H, Ar-H), 4,53 (m, 1H, H^α-Pro), 3,46 – 3,36 (m, 2H, CH₂ ^δ), 2,04 – 1,91 (m, 4H, CH₂ ^β, CH₂ ^γ), 1,49 (s, 9H, t-Bu); EIMS m/z (%): 341 (M⁺, 21).
Beispiel I-r
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-L-valin-N-3-chinolinamid (3r)
Die Kopplung von N-tert-Butoxycarbonyl-L-valin (1d) und 3-Aminochinolin (2k) gemäß dem allgemeinen Verfahren C ergab (3r) (C₁₉H₂₅N₃O₃, 61 %), Rf = 0,51 (Hexan-Aceton 3 : 2), [α]_D ²⁵ = –47,7° (c 0, 92, CH₃OH), Fp 181,6 – 182,7 °C, IR (KBr) ν: 436, 476, 581, 598, 619, 681, 729, 756, 783, 870, 905, 932, 961, 990, 1009, 1040, 1096, 1167, 1213, 1250, 1283, 1323, 1346, 1364, 1398, 1422, 1470, 1495, 1555, 1580, 1682, 1707, 1807, 1819, 2874, 2899, 2934, 2972, 3007, 3054, 3094, 3133, 3225, 3248, 3304 cm¹, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 8,99 (bs, 1H, NH-Chinolin), 8,69 (bs, 1H, Ar-H), 8,64 (s, 1H, Ar-H), 7,93 – 7,38 (m, 4H, Ar-H), 5,26 (d, J 8,3 Hz, 1H, NH-Val), 4,14 (m, 1H, H^α-Val), 2,28 – 2,21 (m, 1H, CHR), 1,46 (s, 9H, t-Bu), 1,03 (m, 6H, Me^8,8'-Val); EIMS m/z (%): 343 (M⁺, 20).
Beispiel I-s
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-L-isoleucin-N-3-chinolinamid (3s)
Die Reaktion von N-tert-Butoxycarbonyl-L-isoleucin (1e) und 3-Aminochinolin (2k) gemäß dem allgemeinen Verfahren C ergab (3s) (C₂₀H₂₇N₃O₃, 58 %), Rf = 0,54 (Hexan-Aceton 3 : 2), [α]_D ²⁵ = –40,0° (c 0,57, CH₃OH), Fp 163,5 – 164,1 °C, IR (KBr) ν: 422, 444, 476, 534, 581, 617, 692, 733, 756, 783, 820, 862, 905, 941, 961, 988, 1011, 1018, 1042, 1090, 1167, 1192, 1211, 1236, 1254, 1289, 1312, 1346, 1364, 1395, 1420, 1468, 1493, 1553, 1580, 1682, 2865, 2878, 2891, 2936, 2974, 3009, 3038, 3088, 3214, 3243, 3300 cm¹, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 8,98 (bs, 1H, NH-Chinolin), 8,69 (m, 2H, Ar-H), 7,93 – 7,39 (m, 4H, Ar-H), 5,23 (d, J 8,9 Hz, 1H, NH-Ile), 4,18 (m, 1H, H^α-Ile), 2,14 – 1,96 (m, 2H, CH₂ ^γ), 1,66 – 1,58 (m, 1H, CH^β), 1,45 (s, 9H, t-Bu), 1,03 – 0,89 (m, 6H, Me^β-Ile, Me^δ-Ile); EIMS m/z (%): 357 (M⁺, 15).
Beispiel II-a
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-methionin-N-4-fluorphenylamid (6a)
Die Reaktion von N-tert-Boc-Dolaproin (5) mit dem Methioninamidhydrochlorid (4a) und die anschließende Chromatographie (Hexan-Aceton 3:1) gemäß dem allgemeinen Verfahren H ergaben das Boc-Dipeptidamid (6a) (C₂₅H₃₈N₃O₅S₁F₁, 77 %), Rf = 0,27 (Hexan-Aceton 3: 1), Fp 205 – 210 °C, [α]_D ²³ = –67,8° (c 0,46, CHCl₃), IR (KBr) ν: 471, 496, 517, 546, 598, 696, 775, 806, 833, 860, 895, 922, 951, 974, 1017, 1038, 1065, 1111, 1169, 1215, 1256, 1298, 1312, 1337, 1366, 1400, 1456, 1478, 1512, 1541, 1634, 1686, 1844, 1869, 1881, 1917, 2363, 2834, 2880, 2932, 2980, 3071, 3158, 3221, 3270, 3302 cm¹, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 8,583, 8,847 (br s, 1H, Ar-NH), 7,409 – 7,453 (m, 2H, ArH), 7,105 – 7,147, 6,520 (m, 1H, NH), 6,933 – 6,979 (m, 2H, ArH), 4,627 – 4,690 (m, 1H, H^α), 3,781 – 3,884 (m, 2H, N-CH, CH-OCH₃), 3,416 (s, 3H, OCH₃), 3,538 – 3,192 (m, 2H, N-CH₂), 2,547 – 2,705 (m, 2H, CH₂ ^γ), 2,430 – 2,497 (m, 1H, CH-CH₃), 1,62 – 2,35 (m, 6H, CH₂ ^β, CH₂-CH₂), 2,112 (s, 3H, CH₃ ^ε), 1,405, 1,425 (s, 9H, t-Bu), 1,275 (m, 3H, CH₃); EIMS m/z (%): 511 (M⁺, 0,52).
Beispiel II-b
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-methionin-2-chlorphenylamid (6b)
Die Reaktion von N-tert-Boc-Dolaproin (5) mit dem Methioninamidtrifluoracetat (4b) und die anschließende Chromatographie (Hexan-Aceton 3:1) gemäß dem allgemeinen Verfahren H ergaben das Boc-Dipeptidamid (6b) (C₂₅H₃₈N₃O₅S₁Cl₁, 74 %), Rf = 0,31 (Hexan-Aceton 3 : 1), Fp 112 – 114 °C, [α]_D ²³ = –76,2° (c 0,21, CHCl₃), IR (KBr) ν: 488, 521, 544, 575, 615, 689, 750, 775, 820, 864, 893, 922, 957, 974, 1005, 1036, 1063, 1107, 1134, 1173, 1242, 1287, 1308, 1321, 1339, 1366, 1391, 1443, 1479, 1530, 1588, 1634, 1690, 1869, 2834, 2876, 2932, 2974, 3046, 3119, 3225, 3256, 3312 cm¹, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 8,575, 8,716 (br s, 1H, Ar-NH), 8,197 – 8,286 (m, 1H, ArH), 7,327 – 7,381 (m, 1H, ArH), 7,207 – 7,262 (m, 1H, ArH), 7,001 – 7,049 (m, 1H, ArH), 7,2, 6,542 (m, 1H, NH), 4,7 – 4.4.82 (m, 1H, H^α), 3,7 – 3,95 (m, 2H, N-CH, CH-OCH₃), 3,422 (s, 3H, OCH₃), 3,2 – 3,6 (m, 2H, N-CH₂), 2,6 – 2,7 (m, 2H, CH₂ ^γ), 2,4 – 2,5 (m, 1H, CH-CH₃), 1,65 – 2,3 (m, 6H, CH₂ ^β, CH₂-CH₂), 2,118 (s, 3H, CH₃ ^ε), 1,388, 1,460 (s, 9H, t-Bu), 1,270 (m, 3H, CH₃) EIMS (70eV) m/z (%): 527 (M⁺, 0,70).
Beispiel II-c
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-methionin-3-chlorphenylamid (6c)
Die Reaktion von N-tert-Boc-Dolaproin (5) mit dem Methioninamidhydrochlorid (4c) und die anschließende Chromatographie (Hexan-Aceton 1:1) gemäß dem allgemeinen Verfahren H ergaben das Boc-Dipeptidamid (6c) (C₂₅H₃₈N₃O₅S₁Cl₁, 88 %), Rf = 0,29 (Hexan-Aceton 3:1), Fp 140 – 145 °C, [α]_D ²³ = –67,5° (c 0,64, CHCl₃), IR (KBr) ν: 440, 486, 521, 532, 554, 575, 592, 617, 685, 775, 878, 899, 920, 961, 974, 999, 1065, 1113, 1140, 1171, 1244, 1310, 1366, 1393, 1454, 1481, 1539, 1595, 1636, 1684, 1844, 1869, 2361, 2834, 2878, 2932, 2976, 3059, 3129, 3192, 3258, 3308, 3567 cm¹, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 9,018, 8,810 (s, 1H, Ar-NH), 7,612 – 7,623, 6,581 – 6,570 (m, 1H, NH), 7,547 (s, 1H, ArH), 7,104 – 7,351 (m, 3H, ArH), 4,638 – 4,660 (m, 1H, H^α), 3,772 – 3,886 (m, 2H, N-CH, CH-OCH₃), 3,423 (s, 3H, OCH₃), 3,184 – 3,6 (m, 2H, N-CH₂), 2,609 – 2,677 (m, 2H, CH₂ ^γ), 2,403 – 2,499 (m, 1H, CH-CH₃), 1,65 – 2,3 (m, 6H, CH₂ ^β, CH₂-CH₂), 2,107 (s, 3H, CH₃ ^ε), 1,412, 1,436 (s, 9H, t-Bu), 1,259 (m, 3H, CH₃); EIMS (70eV) m/z (%): 527 (M⁺, 0,67).
Beispiel II-d
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-(S,R, R)-dolaproinyl-L-phenylalanin-N-3-chlorphenylamid (6d)
Die Reaktion von N-tert-Boc-Dolaproin (5) mit dem Phenylalaninamidhydrochlorid (4d) und die anschließende Chromatographie (Hexan-Aceton 3:1) gemäß dem allgemeinen Verfahren H ergaben das Boc-Dipeptidamid (6d) (C₂₉H₃₈N₃O₅Cl₁, 86 %), Rf = 0,29 (Hexan-Aceton 3 : 1), Fp 152 – 153 °C, [α]_D ²³ = –69,5° (c 0,43, CHCl₃), IR (KBr) ν: 446, 465, 490, 503, 532, 559, 581, 669, 681, 698, 748, 774, 870, 901, 918, 966, 1001, 1034, 1063, 1107, 1165, 1231, 1248, 1296, 1308, 1323, 1339, 1366, 1406, 1454, 1481, 1537, 1595, 1642, 1686, 2826, 2878, 2938, 2974, 3027, 3059, 3081, 3127, 3190, 3275, 3295, 3335 cm¹, 1H-NMR (CDCl₃) δ: 7,50 – 6,93 (m, 9H, 2Ph), 4,76 (m, 1H, PHeCH^α), 3,81 – 3,40 (m, 2H), 3,34 (s, 3H, OMe), 3,30 – 3,00 (m, 4H), 2,35 – 2,30 (m, 1H), 1,90 – 1,50 (m, 6H), 1,41 (s, 9H, t-Bu), 1,09 (d, 3H, Me); EIMS (70eV) m/z (%) : 513 (M⁺, 2).
Beispiel II-e
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-methionin-N-4-chlorphenylamid (6e)
Die Reaktion von N-tert-Boc-Dolaproin (5) mit dem Methioninamidhydrochlorid (4e) gemäß dem allgemeinen Verfahren I ergab das Boc-Dipeptidamid (6d) (C₂₅H₃₈N₃O₅S₁Cl₁, 93 %), Rf = 0,29 (Hexan-Aceton 3 : 1), Fp 220 – 225 °C, [α]_D ²³ = –71,7° (c 0,42, CHCl₃), IR (KBr) ν: 424, 509, 546, 579, 596, 681, 696, 774, 829, 845, 866, 895, 922, 951, 964, 974, 1015, 10.38, 1065, 1109, 1171, 1252, 1287, 1310, 1339, 1366, 1402, 1454, 1495, 1541, 1597, 1634, 1686, 1771, 1844, 1883, 1927, 2336, 2361, 2834, 2878, 2932, 2980, 3061, 3123, 3190, 3258, 3291, 3308 cm¹, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 8,947, 8,714, (s, 1H, Ar-NH), 7,205 – 7,468 (m, 4H, ArH), 7,233, 6,53 – 6,58 (m, 1H, NH), 4,638 – 4,660 (m, 1H, H^α), 3,770 – 3,883 (m, 2H, N-CH, CH-OCH₃), 3,414 (s, 3H, OCH₃), 3,184 – 3,6 (m, 2H, N-CH₂), 2,6 – 2,7 (m, 2H, CH₂ ^γ), 2,4 – 2,5 (m, 1H, CH-CH₃), 1,65 – 2,3 (m, 6H, CH₂ ^β), CH₂-CH₂), 2,105 (s, 3H, CH₃ ^ε), 1,416 (s, 9H, t-Bu), 1,247 (m, 3H, CH₃); EIMS (70eV) m/z (%): 527 (M⁺, 0,48).
Beispiel II-f
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-methionin-L-pheylalanin-N-4-chlorphenylamid (6f)
Die Reaktion von N-tert-Boc-Dolaproin (5) mit dem Phenylalaninamidhydrochlorid (4f) und die anschließende Chromatographie (Hexan-Rceton 3:2) gemäß dem allgemeinen Verfahren H ergaben das Boc-Dipeptidamid (6f) (C₂₉H₃₈N₃O₅S₁), 78 %, Rf = 0,31 (Hexan-Aceton 3:1), [α]_D ²⁵ = –31,1° (c 0, 35, CH₃OH), Fp 188 – 190 °C, IR (KBr) ν: 463, 500, 540, 556, 575, 596, 673, 698, 741, 774, 826, 866, 889, 922, 974, 1013, 1034, 1042, 1065, 1103, 1171, 1211, 1248, 1269, 1289, 1308, 1339, 1366, 1400, 1456, 1493, 1545, 1609, 1643, 1694, 1782, 1885, 1946, 2837, 2880, 2934, 2976, 3032, 3065, 3127, 3196, 3298 cm¹, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7,38 – 7,19 (m, 9H, 2Ph), 4,70 (m, 1H, Phe-CH^α), 3,80 – 3,40 (m, 2H), 3,34 (s, 3H, OMe), 3,30 – 3,07 (m, 4H), 2,35 – 2,30 (m, 1H), 1,90 – 1,50 (m, 6H), 1,42 (s, 9H, t-Bu), 1,1 (d, 3H, Me); EIMS (70eV) m/z (%) : 543 (M⁺, 0,26).
Beispiel II-g
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-methionin-N-2,5-dichlorphenylamid (6g)
Die Reaktion von N-tert-Boc-Dolaproin (5) mit dem Methioninamidhydrochlorid (4g) gemäß dem allgemeinen Verfahren I ergab das Boc-Dipeptidamid (6g) (C₂₅H₃₇N₃O₅5₁Cl₂, 77 %), Rf = 0,35 (Hexan-Aceton 3 : 1), Fp 125 – 130 °C, [α]_D ²³ = –73,2° (c 0,57, CHCl₃), IR (KBr) ν: 446, 554, 586, 613, 625, 662, 671, 739, 774, 808, 868, 914, 972, 1032, 1096, 1167, 1262, 1368, 1402, 1454, 1478, 1524, 1584, 1655, 1690, 2834, 2880, 2934, 2976, 3065, 3102, 3304, 3493 cm¹, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 8,840, 8,721 (s, 1H, Ar-NH), 8,340 – 8,407 (m, 1H, ArH), 7,416 – 7,434, 6,557 (m, 1H, NH), 7,251 (d, J 6,6 Hz, 1H, ArH), 6,996 (d, J 8,1 Hz, 1H, ArH), 4,709 – 4,733 (m, 1H, H^α), 3,694 – 3,957 (m, 2H, N-CH, CH-OCH₃), 3,414, 3,459 (s, 3H, OCH₃), 3,196 – 3,564 (m, 2H, N-CH₂), 2,6 – 2,7 (m, 2H, CH₂ ^γ), 2,4 – 2,5 (m, 1H, CH-CH₃), 1,65 – 2,3 (m, 6H, CH₂ ^β, CH₂-CH₂), 2,109 (s, 3H, CH₃ ^ε), 1,396, 1,401 (s, 9H, t-Bu), 1,262 (m, 3H, CH₃); EIMS (70eV) m/z (%): 561 (M⁺, 0,80).
Beispiel II-h
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-phenylalanin-N-2,5-dichlorphenylamid (6h)
Die Reaktion von N-tert-Boc-Dolaproin (5) mit dem Phenylalaninamidhydrochlorid (4h) und die anschließende Chromatographie (Hexan-Aceton 3:2) gemäß dem allgemeinen Verfahren H ergaben das Boc-Dipeptidamid (6h) (C₂₉H₃₇N₃O₅Cl₂, 86 %), Rf = 0,38 (Hexan-Aceton 3:1), [α]_D ²⁵ = –73,6° (c 0,55, CH₃OH), festes Öl, IR (KBr) ν: 446, 503, 521, 557, 588, 621, 669, 700, 739, 774, 806, 847, 868, 910, 961, 974, 1007, 1057, 1096, 1111, 1169, 1262, 1285, 1310, 1366, 1406, 1454, 1476, 1522, 1584, 1653, 1692, 2720, 2834, 2878, 2934, 2976, 3030, 3065, 3088, 3104, 3300, 3491 cm¹, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 8,41, 7,32 – 6,98 (m, 8H, 2Ph), 4,77 (m, 1H, PheCH^α), 3,77 – 3,40 (m, 2H), 3,34 (s, 3H, OMe), 3,30 – 3,08 (m, 4H), 2,40 – 2,34 (m, 1H), 1,80 – 1,50 (m, 6H), 1,43 (s, 9H, t-Bu), 1,1 (d, 3H 5,5 Hz, Me); EIMS (70eV) m/z (%): 578 (M⁺, 0,17).
Beispiel II-i
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-methionin-N-1-(2-p-chlorphenylethyl)amid (6i)
Die Reaktion von N-tert-Boc-Dolaproin (5) mit dem Methioninamidhydrochlorid (4i) gemäß dem allgemeinen Verfahren I ergab das Boc-Dipeptidamid (6i) (C₂₇H₄₂N₃O₅S₁Cl₁, 72 %), Rf = 0,19 (Hexan-Aceton 3:1), FP 146 – 148 °C, [α]_D ²³ = –44,0° (c 0,15, CHCl₃), IR (KBr) ν: 469, 519, 544, 594, 669, 712, 745, 775, 808, 837, 866, 918, 974, 1017, 1063, 1094, 1109, 1169, 1211, 1233, 1252, 1271, 1310, 1339, 1366, 1397, 1456, 1493, 1543, 1634, 1694, 1761, 1844, 1869, 1892, 2363, 2832, 2876, 2932, 2974, 3032, 3104, 3277 cm¹, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7,068 – 7,260 (m, 4H, ArH), 6,997, 6,692 – 6,714 (m, 1H, Ar-NH), 6,410, 6,299 – 6,316 (m, 1H, NH), 4,455 – 4,549 (m, 1H, Ha), 3,647 – 3,796 (m, 2H, N-CH, CH-OCH₃), 3,401 (s, 3H, OCH₃), 3,164 – 3,560 (m, 4H, N-CH₂), NH-CH₂), 2,7 – 2,8 (m, 2H, Ar-CH₂), 2,5 – 2,6 (m, 2H, CH₂ ^γ), 2,4 – 2,5 (m, 1H, CH-CH₃), 1,65 – 2,2 (m, 6H, CH₂ ^β), CH₂-CH₂), 2,070 (s, 3H, CH₃ ^ε), 1,429 (s, 9H, t-Bu), 1,22 (m, 3H, CH₃); EIMS (70eV) m/z (%): 555 (M⁺, 1).
Beispiel II-j
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-phenylalanin-N-2-(6-fluor)benzothiazolamid (6j)
Die Reaktion von N-tert-Boc-Dolaproin (5) mit dem Phenylalaninamidhydrochlorid (4j) und die anschließende Chromatographie (Hexan-Aceton 3.1) gemäß dem allgemeinen Verfahren H ergaben das Boc-Dipeptidamid (6j) (C₃₀H₃₇N₄O₅S₁F₁, 95 %), Rf = 0,27 (Hexan-Rceton 3 : 1), [α]_D ²⁵ = –23,2° (c 0,57, CH₃OH), Fp 110 – 112 °C, IR (KBr) ν: 436, 475, 509, 540, 552, 569, 592, 627, 652, 669, 700, 746, 774, 812, 824, 853, 895, 912, 928, 953, 974, 990, 1032, 1049, 1065, 1107, 1171, 1217, 1250, 1263, 1283, 1302, 1317, 1339, 1366, 1395, 1458, 1478, 1499, 1561, 1611,1643, 1697, 2743, 2878, 2938, 2972, 3084, 3160, 3190, 3256, 3335 cm¹, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7,65 – 7,07 (m, 8H, 2Ph), 4,88 (m, 1H, PheCH^α), 3,84 – 3,43 (m, 2H), 3,36 (s, 3H, OMe), 3,31 – 3,00 (m, 4H), 2,42 – 2,36 (m, 1H), 1,80 – 1,50 (m, 6H), 1,43 (s, 9H, t-Bu), 1,11 (d, 3H, J 6,1 Hz, Me); EIMS (70eV) m/z (%): 584 (M⁺, 0,61).
Beispiel II-k
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-phenylalanin-N-2-(6-chlor)benzothiazolamid (6k)
Die Reaktion von N-tert-Boc-Dolaproin (5) mit dem Phenylalaninamidhydrochlorid (4 k) und die anschließende Chromatographie (Hexan-Aceton 3:1) gemäß dem allgemeinen Verfahren H ergaben das Boc-Dipeptidamid (6k) (C₃₀H₃₇N₄O₅5₁Cl₁, 91 %), Rf = 0,30 (Hexan-Aceton 3 : 1), [α]_D ²⁵ = –32,6° (c 0,72, CH₃OH), Fp 93 – 95 °C, IR (KBr) v : 503, 540, 561, 592, 623, 662, 698, 745, 766, 814, 853, 864, 891, 916, 974, 991, 1032, 1099, 1169, 1262, 1287, 1310, 1366, 1398, 1445, 1478, 1499, 1549, 1599, 1649, 1694, 2876, 2934, 2976, 3065, 3138, 3183, 3339 cm¹, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7,74 7,10 (m, 8H, 2Ph), 4,85 (m, 1H, PheCH^α), 3,83 – 3,42 (m, 2H), 3,36 (s, 3H, OMe), 3,28 – 3,00 (m, 4H), 2,42 – 2,36 (m, 1H), 1,80 – 1,50 (m, 6H), 1,44 (s, 9H, t-Bu), 1,10 (d, 3H, J 6,7 Hz, Me); EIMS (70eV) m/z (%) 601 (M⁺, 0,16).
Beispiel II-l
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-(p-chlor)-phenylalanin-N-2-(6-chlor)benzothiazolamid (6l)
Die Reaktion von N-tert-Boc-Dolaproin (5) mit dem (p-Chlor)-phenylalaninamidhydrochlorid (4l) und die anschließende Chromatographie (Hexan-Aceton 3:1) gemäß dem allgemeinen Verfahren H ergaben das Boc-Dipeptidamid (6l) (C₃₀H₃₆N₄O₅S₁Cl₂, 98 %), Rf = 0,28 (Hexan-Aceton 3:1), [α]_D ²⁵ = –11,1° (c 0,18, CH₃OH), Fp 107 – 109 °C, IR (KBr) ν: 527, 563, 619, 644, 665, 698, 729, 766, 789, 814, 864, 918, 978, 991, 1017, 1036, 1053, 1099, 1167, 1262, 1287, 1310, 1339, 1366, 1400, 1445, 1478, 1493, 1549, 1599, 1649, 1692, 1771, 2878, 2934, 2976, 3067, 3138, 3181, 3206, 3318 cm¹, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7,74 – 7,10 (m, 8H, 2Ph), 4,85 (m, 1H, PHeCH^α), 3,82 – 3,42 (m, 2H), 3,37 (s, 3H, OMe), 3,30 – 3,00 (m, 4H), 2,43 – 2,36 (m, 1H), 1,80 – 1,50 (m, 6H), 1,44 (s, 9H, t-Bu), 1,13 (d, 3H, J 7,2 Hz, Me); EIMS (70eV) m/z (%): 634 (M⁺, 0,95).
Beispiel II-m
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-methionin-N-2-benzothiazolamid (6m)
Die Reaktion von N-tert-Boc-Dolaproin (5) mit dem Methioninamidhydrochlorid (4m) und die anschließende Chromatographie (Hexan-Rceton 3:1) gemäß dem allgemeinen Verfahren J ergaben das Dipeptidamid (6m) (C₂₆H₃₈N₄O₅S₂, 56 %), Rf = 0,52 (Hexan-Aceton 3:2), [α]_D ²⁵ = –69° (c 0,32, CH₃OH), Fp 183 – 185 °C, IR (KBr) ν: 596, 687, 727, 754, 822, 866, 895, 926, 970, 1017, 1036, 1103, 1167, 1211, 1223, 1265, 1292, 1317, 1341, 1366, 1397, 1441, 1454, 1478, 1530, 1553, 1603, 1643, 1697, 2876, 2930, 2974, 3059, 3071, 3148, 3187, 3331 cm¹, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7,79 – 7,70 (m, 2H, Ar-H), 7,46 – 7,24 (m, 2H, Ar-H), 6,68 (bs, 1H, NH-Met), 4,84 (bs, 1H, NH-BnThz), 4,75 – 4,70 (m, 1H) , H^α-Met), 3,93 – 3,78 (m, 2H, H^α-Pro, CH-Dap), 3,50 – 3,19 (m, 3H), 3,45 (s, 3H, OMe), 2,65 – 2,47 (m, 2H, CH-OMe, CH-Me), 2,32 – 1,65 (m, 6H, 3×CH₂, 2,10 (s, 3H, S-Me), 1,43 (2s, 9H, t-Bu), 1,29 (d, J 7,7 Hz, 3H, CH₃); EIMS m/z (%): 550 (M⁺, 31).
Beispiel II-n
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-prolin-N-2-benzothiazolamid (6n)
Die Reaktion von N-tert-Boc-Dolaproin (5) mit dem Prolinamidhydrochlorid (4n) und die anschließende Chromatographie (Hexan-Aceton 3:1) gemäß dem allgemeinen Verfahren J ergaben das Dipeptidamid (6n) als glasartigen Feststoff (C₂₆H₃₆N₄O₅S, 78 %), Rf = 0,47 (Hexan-Aceton 3:2), [α]_D ²⁵ = –138,3° (c 0,18, CH₃OH), Fp 94 – 96 °C, IR (KBr) ν: 436, 480, 507, 523, 544, 565, 602, 669, 704, 729, 758, 820, 868, 891, 920, 978, 1017, 1036, 1099, 1167, 1262, 1317, 1366, 1398, 1443, 1456, 1549, 1603, 1624, 1651, 1694, 1844, 1869, 2336, 2363, 2834, 2878, 2934, 2974, 3065, 3142, 3190, 3360, 3378, 3420, 3447, 3482, 3567 cm¹, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7,80 – 7,76 (m, 2H, Ar-H), 7,43 – 7,24 (m, 2H, Ar-H), 4,88 – 4,81 (bs, 1H, NH-BnThz), 4,11 – 3,81 (m, 2H, H^α-Pro, CH-Dap), 3,60 – 3,15 (m, 4H, 2×CH₂, 3,45 (s, 3H, OMe), 2,73 – 2,54 (m, 2H, CH-OMe, CH-Me), 2,18 – 1,65 (m, 8H, 4×CH₂, 1,50 – 1,44 (2s, 9H, t-Bu), 1,27 (d, J 7,2 Hz, 3H, CH₃); EIMS m/z (%): 516 (M⁺, 2).
Beispiel II-o
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-methionin-N-2-pyridylamid (6o)
Die Reaktion von N-tert-Boc-Dolaproin (5) mit dem Methioninamidtrifluoracetat (4o) und die anschließende Chromatographie (Hexan-Aceton 3.2) gemäß dem allgemeinen Verfahren H ergaben das Boc-Dipeptidamid (6o) (C₂₄H₃₈N₄O₅S₁, 73%), Rf = 0,20 (Hexan-Aceton 3 : 1, Fp 123 – 125 °C [α]_D ²⁵ = –69,3° (c 0,15, CHCl₃), IR (KBr) ν: 488, 521, 556, 615, 631, 677, 741, 777, 868, 918, 961, 974, 993, 1067, 1111, 1169, 1244, 1296, 1366, 1395, 1435, 1460, 1532, 1578, 1595, 1640, 1694, 1888, 1908, 1944, 2836, 2878, 2932, 2974, 3055, 3123, 3250, 3325 cm¹, ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 9,020, 8,696 (s, 1H, Ar-NH), 8,238 – 8,283 (m, 1H, ARH), 8,121 (d, J, 8,1 Hz, 1H, ArH), 7,627 – 7,690 (m, 1H, ArH), 6,964 – 7,044, 6,531 (m, 1H, NH), 4,6 – 4,8 (m, 1H, H^α), 3,7 – 4,0 (m, 2H, N-CH, CH-OCH₃), 3,431 (s, 3H, OCH₃), 3,2 – 3,6 (m, 2H, N-CH₂), 2,6 – 2,7 (m, 2H, CH₂ ^γ), 2,4 – 2,5 (m, 1H, CH-CH₃), 1,6 – 2,3 (m, 6H, CH₂ ^β, CH₂-CH₂), 2,110 (s, 3H, CH₃ ^ε), 1,432, 1,412 (s, 9H, t-Bu), 1,264 (m, 3H, CH₃); EIMS (70eV) m/z (%): 494 (M⁺, 2).
Beispiel II-p
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-methionin-N-3-chinolinamid (6p)
Die Reaktion von N-tert-Boc-Dolaproin (5) mit dem Methioninamidhydrochlorid (4p) und die anschließende Chromatographie (Hexan-Aceton-Ethylacetat 5:4:1) gemäß dem allgemeinen Verfahren J ergaben das Dipeptidamid (6p) (C₂₈H₄₀N₄O₅S, 60 %), Rf = 0,34 (Hexan-Aceton 3:2), [α]_D ²⁵ = –89,2° (c 0,13, CH₃OH), Fp 228 – 230 °C, IR (KBr) ν: 453, 476, 521, 548, 596, 615, 640, 669, 700, 731, 752, 785, 818, 864, 889, 918, 955, 976, 990, 1015, 1040, 1067, 1107, 1167, 1240, 1283, 1308, 1339, 1368, 1398, 1424, 1456, 1489, 1506, 1541, 1576, 1634, 1684, 1771, 1792, 2338, 2363, 2832, 2874, 2930, 2974, 3042, 3075, 3123, 3223, 3248, 3310 cm^–1; ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 9,47, 4,34 (bs, 1H, NH-Chinolin), 8,79, 8,68 (2s, 2H, Ar-H), 8,01 – 7,25 (m, 4H, Ar-H), 6,66 (bs, 1H, NH-Met), 4,78 – 4,72 (m, 1H, H^α-Met), 3,89 – 3,78 (m, 2H, H^α-Dap, CH-OMe), 3,56 – 3,18 (m, 3H), 3,44 (s, 3H, OMe), 2,74 – 1,68 (m, 8H, 4×CH₂), 2,12 (s, 3H, S-Me), 1,46, 1,39 (2s, 9H, t-Bu), 1,30 (d, J 6,6 Hz, 3H, CH₃); EIMS m/z (%): 544 (M⁺, 4).
Beispiel II-q
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-prolin-N-3-chinolinamid (6q)
Die Reaktion von N-tert-Boc-Dolaproin (5) mit dem Prolinamidhydrochlorid (4q) und die anschließende Chromatographie (Hexan-Aceton 3:2) gemäß dem allgemeinen Verfahren J ergaben das Dipeptidamid (6q) als glasartigen Feststoff (C₂₈H₃₈N₄O₅, 60 %), Rf = 0,21 (Hexan-Aceton 3:2), [α]_D ²⁵ = –163,1° (c 0,16, CH₃OH), Fp 92 – 94 °C, IR (KBr) ν: 475, 544, 565, 598, 615, 669, 691, 748, 781, 820, 866, 901, 953, 970, 988, 1017, 1059, 1099, 1167, 1192, 1221, 1242, 1283, 1366, 1395, 1439, 1456, 1491, 1522, 1559, 1580, 1618, 1653, 1696, 1771, 1792, 1829, 1844, 1867, 1877, 1890, 1917, 1942, 1960, 2338, 2361 2834, 2878, 2934, 2974, 3061, 3098, 3169, 3194, 3250, 3289, 3397, 3424, 3447, 3462, 3482, 3567 cm^–1; ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 10,33 (bs, 1H, NH-Chinolin), 8,78, 8,50 (m, 2H, Ar-H), 8,02 – 7,43 (m, 4H, Ar-H), 4,90 (m, 1H, H^α-Pro), 4,07 – 3,86 (m, 2H, H^α-Dap, CH-OMe), 3,62 – 2,56 (m, 5H), 3,47 (s, 3H, OMe), 2,18 – 1,56 (m, 8H, 4×CH₂), 1,51 – 1,44 (2s, 9H, t-Bu), 1,28 (d, J 7,2 Hz, 3H, CH₃); EIMS m/z (%) : 510 (M⁺, 3).
Beispiel II-r
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-valin-N-3-chinolinamid (6r)
Die Reaktion von N-tert-Boc-Dolaproin (5) mit dem Valinamidhydrochlorid (4r) und die anschließende Chromatographie (Hexan-Aceton 3:1) gemäß dem allgemeinen Verfahren J ergaben das Dipeptidamid (6r) (C₂₈H₄₀N₄O₅, 62 %), Rf = 0, 38 (Hexan-Aceton 3 : 2), [α]_D ²⁵ = –108,0° (c 0, 25, CH₃OH), Fp 209,2 – 210,3 °C, IR (KBr) ν: 449, 478, 581, 613, 644, 679, 706, 718, 754, 785, 856, 899, 924, 939, 959, 974, 991, 1007, 1018, 1063, 1092, 1113, 1144, 1169, 1219, 1265, 1277, 1321, 1368, 1391, 1466, 1491, 1555, 1578, 1643, 1678, 1697, 2832, 2876, 2893, 2934, 2967, 3061, 3127, 3264, 3306 cm^–1; ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 9,35, 9,23 (2bs, 1H, NH-Chinolin), 8,79, 8,69 (2bs, 1H, Ar-H), 8,76, 8,65 (2s, 1H, Ar-H), 7,98 – 7,42 (m, 4H, Ar-H), 6,95, 6,55 (2bd, J 7,2 Hz, 1H, NH-Val), 4,45 – 4,40 (m, 1H, H^α-Val), 3,91 – 3,81 (m, 2H, H^α-Dap, CH-OMe), 3,88 – 3,25 (m, 2H, CH₂ ^δ-Pro), 3,45 (s, 3H OMe), 2,56 – 1,69 (m, 8H), 1,45, 1,38 (2s, 9H, t-Bu), 1,30 (d, J 6,6 Hz, 3H, CH₃), 1,06 (d, J 6,7 Hz, 6H, Me^8,8'-Val); EIMS m/z (%): 512 (M⁺, 4).
Beispiel II-s
Synthese von N-tert-Butoxycarbonyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-isoleucin-N-3-chinolinamid (6s)
Die Reaktion von N-tert-Boc-Dolaproin (5) mit dem Isoleucinamidhydrochlorid (4s) und die anschließende Chromatographie (Hexan-Aceton 3:2) gemäß dem allgemeinen Verfahren J ergaben das Dipeptidamid (6s) (C₂₉H₄₂N₄O₅, 59 %), Rf = 0,43 (Hexan-Rceton 3 : 2), [α]_D ²⁵ = –97,0° (c 0,1, CH₃OH), Fp 198,0 – 198,7 °C, IR (KBr) ν: 478, 523, 548, 579, 613, 702, 758, 770, 785, 862, 899, 918, 934, 959, 974, 991, 1042, 1065, 1094, 1111, 1144, 1167, 1217, 1256, 1279, 1368, 1391, 1468, 1491, 1543, 1576, 1642, 1680, 1697, 1792, 1844, 1869, 1890, 1906, 1919, 1942, 2338, 2363, 2832, 2880, 2934, 2974, 3067, 3127, 3264, 3306 cm^–1; ¹H-NMR (CDCl₃) δ: 9,27, 9,03 (2bs, 1H, NH-Chinolin), 8,82, 8,63 (2bs, 1H, Ar-H), 8,73 (s, 1H, Ar-H), 7,99 – 7,44 (m, 4H, Ar-H), 6,96, 6,50 (2d, J 7,8 Hz, 1H, NH-Ile), 4,48 – 4,43 (m, 1H, H^α-Ile), 3,91 – 3,78 (m, 2H, H^α-Dap, CH-OMe), 3,56 – 3,21 (m, 2H, CH₂ ^δ-Pro), 3,45 (s, 3H OMe), 2,55 – 2,45 (m, 1H, CH-Me), 2,22 – 1,33 (m, 7H), 1,45, 1,39 (2s, 9H, t-Bu), 1,30 (d, J 6,7 Hz, 3H, CH₃), 1,04 (d, J 6,7 Hz, 3H, Me^β-Ile), 0,75 (t, J 7,8 Hz, 3H, Me^δ-Ile); EIMS m/z (%): 526 (M⁺, 4).
Beispiel III
Die Synthese der Pentapeptidamide (9a-s) erfolgte gemäß dem allgemeinen Verfahren L, wie im Folgenden angegeben.
Beispiel III-a
Synthese von L-Dolavalyl-L-valyl-N-methyl-(S,S,R)-dolaisoleuinyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-methionin-N-4-fluorphenylamid (9a)
Eine Chromatographie über eine Silicagelsäule mit Hexan-Aceton (1:1) als Elutionsmittel ergab gemäß dem allgemeinen Verfahren L 9a als weißen Feststoff (C₄₂H₇₁N₆O₇S₁F₁, 88 %), Rf = 0,32 (Hexan-Aceton 1 : 1), Fp 95 – 100 °C, [α]_D ²³ = –47,2° (c 0,25, CHCl₃), IR (KBr) v: 517, 546, 586, 610, 629, 683, 719, 775, 814, 835, 961, 976, 1038, 1099, 1159, 1213, 1254, 1304, 1341, 1371, 1387, 1412, 1449, 1510, 1549, 1624, 1649, 2789, 2832, 2876, 2936, 2967, 3067, 3160, 3295 cm^–1; EIMS (70 eV) m/z (%): 823 (M⁺, 2).
Beispiel III-b
Synthese von L-Dolavalyl-L-valyl-N-methyl-(S,S,R)-dolaisoleuinyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-methionin-N-2-chlorphenylamid (9b)
Eine Chromatographie über eine Silicagelsäule mit Hexan-Aceton (1:2) als Elutionsmittel ergab gemäß dem allgemeinen Verfahren L 9b als weißen Feststoff (C₄₂H₇₁N₆O₇S₁Cl₁, 89 %), Rf = 0,33 (Hexan-Aceton 1:1), Fp 95 – 100 °C, [α]_D ²³ = –67,1° (c 0,17, CHCl₃), IR (KBr) v: 550, 561, 611, 631, 691, 719, 752, 837, 860, 961, 976, 1036, 1057, 1099, 1132, 1200, 1244, 1294, 1341, 1385, 1418, 1441, 1532, 1595, 1624, 1643, 1869, 1879, 1888, 1902, 1919, 1929, 1946, 1956, 2787, 2832, 2876, 2934, 2965, 3034, 3111, 3123, 3298, 3389, 3470 cm^–1; EIMS (70 eV) m/z (%): 838 (M⁺, 4).
Beispiel III-c
Synthese von L-Dolavalyl-L-valyl-N-methyl-(S,S,R)-dolaisoleuinyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-methionin-N-3-chlorphenylamid (9c)
Eine Chromatographie über eine Silicagelsäule mit Hexan-Aceton (1:1) als Elutionsmittel ergab gemäß dem allgemeinen Verfahren L 9c (C₄₂H₇₁N₆O₇S₁Cl₁, 88 %), Rf = 0,35 (Hexan-Aceton 1 : 1), Fp 105 – 110 °C, [α]_D ²³ = –49,4° (c 0,16, CHCl₃), IR (KBr) ν: 613, 631, 683, 719, 777, 880, 961, 974, 999, 1009, 1038, 1099, 1132, 1202, 1252, 1267, 1310, 1370, 1387, 1425, 1449, 1483, 1541, 1595, 1624, 1651, 2787, 2832, 2876, 2934, 2967, 3051, 3127, 3295 cm^–1; EIMS (70 eV) m/z (%): 838 (M⁺, 0,88).
Beispiel III-d
Synthese von L-Dolavalyl-L-valyl-N-methyl-(S,S,R)-dolaisoleuinyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-phenylalanin-N-3-chlorphenylamid (9d)
Eine Chromatographie über eine Silicagelsäule mit Hexan-Aceton (1:1) als Elutionsmittel ergab gemäß dem allgemeinen Verfahren L 9d (C₄₆H₇₁N₆O₇Cl₁, 77 %), Rf = 0,41 (Hexan-Aceton 1:1), Fp 115 – 120 °C, [α]_D ²³ = –62,8° (c 0,18, CHCl₃), IR (KBr) ν: 500, 565, 584, 611, 629, 683, 698, 743, 777, 880, 974, 999, 1038, 1099, 1167, 1192, 1250, 1267, 1287, 1306, 1339, 1370, 1387, 1425, 1454, 1483, 1541, 1595, 1624, 1649, 2832, 2876, 2936, 2967, 3030, 3063, 3198, 3300 cm^–1; EIMS (70 eV) m/z (%): 854 (M⁺).
Beispiel III-e
Synthese von L-Dolavalyl-L-valyl-N-methyl-(S,S,R)-dolaisoleuinyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-methionin-N-4-chlorphenylamid (9e)
Eine Chromatographie über eine Silicagelsäule mit Hexan-Aceton (1:1) als Elutionsmittel ergab gemäß dem allgemeinen Verfahren L 9e als glasartigen Feststoff (C₄₂H₇₁N₆O₇S₁Cl₁, 79 %), Rf = 0,35 (Hexan-Aceton 1:1), Fp 100 – 110 °C, [α]_D ²³ = – 53,3° (c 0,27, CHCl₃), IR (KBr) ν: 511, 563, 610, 631, 681, 719, 775, 801, 831, 893, 907, 961, 976, 1013, 1038, 1096, 1132, 1179, 1202, 1248, 1289, 1310, 1341, 1404, 1416, 1451, 1493, 1541, 1649, 1873, 1888, 1917, 1937, 1952, 1973, 2660, 2672, 2789, 2832, 2878, 2936, 2967, 3059, 3123, 3200, 3291 cm^–1; EIMS (70 eV) m/z (%): 838 (M⁺, 0,40).
Beispiel III-f
Synthese von L-Dolavalyl-L-valyl-N-methyl-(S,S,R)-dolaisoleuinyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-phenylalanin-N-4-chlorphenylamid (9f)
Eine Chromatographie über eine Silicagelsäule mit Hexan-Aceton (1:1) als Elutionsmittel ergab gemäß dem allgemeinen Verfahren L 9f (C₄₆H₇₁N₆O₇S₁Cl₁, 93 %), Rf = 0,38 (Hexan-Aceton 1 : 1), [α]_D ²⁵ = –58,7° (c 0,23, CH₃OH), Fp 105 – 110 °C, IR (KBr) ν: 503, 563, 610, 629, 677, 700, 743, 775, 828, 974, 1013, 1038, 1096, 1175, 1194, 1248, 1267, 1289, 1306, 1370, 1387, 1404, 1416, 1564, 1493, 1541, 1624, 1649, 2787, 2832, 2876, 2934, 2965, 3030, 3063, 3123, 3198, 3306 cm^–1; EIMS (70 eV) m/z (%): 855 (M⁺, 1).
Beispiel III-g
Synthese von L-Dolavalyl-L-valyl-N-methyl-(S,S,R)-dolaisoleuinyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-methionin-N-2,5-dichlorphenylamid (9g)
Eine Chromatographie über eine Silicagelsäule mit Hexan-Aceton (2:3) als Elutionsmittel ergab gemäß dem allgemeinen Verfahren L 9g (C₄₂H₇₁N₆O₇S₁Cl₁, 87 %), Rf = 0,41 (Hexan-Aceton 1 : 1), Fp 110 – 120 °C, [α]_D ²⁵ = –64,2° (c 0,24, CHCl₃, IR (KBr) ν: 527, 561, 586, 610, 633, 681, 719, 802, 828, 978, 1038, 1096, 1132, 1175, 1200, 1262, 1304, 1412, 1452, 1526, 1584, 1624, 1645, 1659, 1798, 2787, 2832, 2878, 2936, 2967, 3104, 3117, 3297 cm^–1; EIMS (70 eV) m/z (%): 872 (M⁺, 0,85).
Beispiel III-h
Synthese von L-Dolavalyl-L-valyl-N-methyl-(S,S,R)-dolaisoleuinyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-phenylalanin-N-2,5-dichlorphenylamid (9h)
Eine Chromatographie über eine Silicagelsäule mit Hexan-Aceton (1:1) als Elutionsmittel ergab gemäß dem allgemeinen Verfahren L 9h (C₄₆H₇₀N₆O₇Cl₂, 46 %), Rf = 0,46 (Hexan-Aceton 1 : 1), [α]_D ²³ = –81,5° (c 0,20, CH₃OH, Fp 102 – 105 °C, IR (KBr) ν: 448, 503, 530, 557, 588, 629, 667, 700, 748, 775, 812, 849, 860, 880, 914, 976, 1017, 1040, 1053, 1094, 1134, 1167, 1262, 1285, 1370, 1410, 1454, 1524, 1584, 1622, 1688, 1705, 1842, 2363, 2787, 2832, 2876, 2934, 2969, 3030, 3063, 3298 cm^–1; EIMS (70 eV) m/z (%): 889 (M⁺, 2).
Beispiel III-i
Synthese von L-Dolavalyl-L-valyl-N-methyl-(S,S,R)-dolaisoleuinyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-methionin-N-1-(2-p-chlorphenylethyl)amid (9i)
Eine Chromatographie über eine Silicagelsäule mit Hexan-Aceton (1:2) als Elutionsmittel ergab gemäß dem allgemeinen Verfahren L 9i (C₄₄H₇₅N₆O₇S₁Cl₁, 77 %), Rf = 0,26 (Hexan-Aceton 1 : 1), Fp 117 – 120 °C, [α]_D ²³ = –60,0° (c 0,10, CHCl₃), IR (KBr) ν: 505, 523, 544, 567, 610, 627, 679, 719, 777, 801, 816, 831, 961, 974, 1015, 1038, 1096, 1134, 1200, 1248, 1267, 1285, 1306, 1387, 1418, 1445, 1493, 1539, 1628, 1647, 2789, 2832, 2878, 2934, 2967, 3061, 3293 cm^–1; EIMS (70 eV) m/z (%): 866 (M⁺, 1).
Beispiel III-j
Synthese von L-Dolavalyl-L-valyl-N-methyl-(S,S,R)-dolaisoleuinyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-phenylalanin-N-2-(6-fluor)benzothiazolamid (9j)
Eine Chromatographie über eine Silicagelsäule mit Hexan-Aceton (1:1) als Elutionsmittel ergab gemäß dem allgemeinen Verfahren L 9j (C₄₇H₇₀N₇O₇S₁F₁, 58 %), Rf = 0,32 (Hexan-Aceton 1 : 1), [α]_D ²⁵ = –40,8° (c 0,26, CH₃OH), Fp 123 – 125 °C, IR (KBr) ν: 438, 475, 502, 540, 579, 610, 631, 664, 700, 745, 775, 826, 851, 880, 893, 912, 963, 974, 986, 1036, 1051, 1099, 1167, 1198, 1225, 1252, 1285, 1317, 1341, 1370, 1387, 1416, 1458, 1499, 1557, 1622, 1699, 2787, 2830, 2876, 2936, 2967, 3067, 3198, 3297 cm^–1; EIMS (70 eV) m/z (%): 895 (M⁺, 3).
Beispiel III-k
Synthese von L-Dolavalyl-L-valyl-N-methyl-(S,S,R)-dolaisoleuinyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-phenylalanin-N-2-(6-chlor)benzothiazolamid (9k)
Eine Chromatographie über eine Silicagelsäule mit Hexan-Aceton (1:1) als Elutionsmittel ergab gemäß dem allgemeinen Verfahren L 9k (C₄₇H₇₀N₇O₇S₁Cl₁, 83 %), Rf = 0,35 (Hexan-Aceton 1:1), [α]_D ²⁵ = –43,6° (c 0,25, CH₃OH), Fp 127 – 129 °C, IR (KBr) ν: 424, 434, 498, 534, 563, 623, 662, 698, 746, 766, 814, 853, 880, 891, 910, 961, 988, 1038, 1053, 1099, 1169, 1190, 1223, 1260, 1287, 1310, 1370, 1387, 1418, 1445, 1499, 1549, 1599, 1622, 1701, 2787, 2830, 2876, 2934, 2967, 3028, 3063, 3135, 3181, 3204, 3297 cm^–1; EIMS (70 eV) m/z (%): 912 (M⁺, 0,60).
Beispiel III-l
Synthese von L-Dolavalyl-L-valyl-N-methyl-(S,S,R)-dolaisoleuinyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-(p-chlor)phenylalanin-N-2-(6-chlor)benzothiazolamid (9l)
Eine Chromatographie über eine Silicagelsäule mit Hexan-Aceton (1:1) als Elutionsmittel ergab gemäß dem allgemeinen Verfahren L 9l (C₄₇H₆₉N₇O₇S₁Cl₂, 56 %), Rf = 0,37 (Hexan-Aceton 1:1), [α]_D ²⁵ = –30,0° (c 0,22, CH₃OH), Fp 132 – 135 °C, IR (KBr) ν: 525, 563, 610, 621, 633, 642, 669, 698, 766, 814, 855, 880, 909, 930, 959, 988, 1017, 1038, 1053, 1098, 1171, 1182, 1192, 1223, 1262, 1287, 1310, 1339, 1370, 1387, 1416, 1445, 1495, 1549, 1599, 1624, 1638, 1701, 2666, 2787, 2830, 2876, 2934, 2967, 3063, 3136, 3208, 3295 cm^–1; EIMS (70 eV) m/z (%): 945 (M⁺, 0,05).
Beispiel III-m
Synthese von L-Dolavalyl-L-valyl-N-methyl-(S,S,R)-dolaisoleuinyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-methionin-N-2-benzothiazolamid (9m)
Eine Chromatographie über eine Silicagelsäule mit Hexan-Aceton (3:2) als Elutionsmittel ergab gemäß dem allgemeinen Verfahren L 9m (C₄₃H₇₁N₇O₇S₂, 87 %), Rf = 0,47 (Hexan-Aceton 2 : 3), [α]_D ²⁵ = –45° (c 0,14, CH₃OH), Fp 118 – 120 °C, IR (KBr) v: 548, 561, 610, 629, 687, 729, 758, 801, 816, 829, 868, 880, 959, 976, 1017, 1038, 1098, 1132, 1200, 1225, 1263, 1308, 1316, 1370, 1385, 1418, 1443, 1547, 1622, 1647, 2789, 2832, 2876, 2934, 2969, 3061, 3194, 3212, 3287 cm^–1; EIMS m/z (%): 862 (M⁺).
Beispiel III-n
Synthese von L-Dolavalyl-L-valyl-N-methyl-(S,S,R)-dolaisoleuinyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-prolin-N-2-benzothiazolamid (9n)
Eine Chromatographie über eine Silicagelsäule mit Chloroformmethanol (7:1) als Elutionsmittel ergab gemäß dem allgemeinen Verfahren L 9n (C₄₃H₆₉N₇O₇S, 80 %), Rf = 0,23 (Hexan-Aceton 2 : 3), [α]_D ²⁵ = –100,0° (c 0,22, CH₃OH), Fp 199 – 200 °C, IR (KBr) ν: 434, 559, 604, 615, 642, 679, 704, 729, 756, 810, 835, 855, 868, 893, 918, 951, 966, 980, 1017, 1040, 1053, 1098, 1140, 1161, 1192, 1235, 1262, 1290, 1316, 1370, 1385, 1420, 1445, 1489, 1549, 1638, 1696, 2787, 2830, 2876, 2932, 2961, 3065, 3129, 3169, 3322 cm^–1; EIMS m/z (%): 828 (M⁺, 24).
Beispiel III-o
Synthese von L-Dolavalyl-L-valyl-N-methyl-(S,S,R)-dolaisoleuinyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-methionin-N-2-pyridylamid (9o)
Eine Chromatographie über eine Silicagelsäule mit Hexan-Aceton (1:1) als Elutionsmittel ergab gemäß dem allgemeinen Verfahren L 9o (C₄₁H₇₁N₇O₇S₁, 77 %), Rf = 0,22 (Hexan-Rceton 2 : 3), Fp 100 – 110 °C, [α]_D ²³ = –56,9° (c 0,16, CHCl₃), IR (KBr) ν: 525, 559, 615, 685, 719, 741, 781, 833, 976, 991, 1009, 1038, 1098, 1132, 1152, 1200, 1246, 1298, 1343, 1371, 1385, 1435, 1460, 1534, 1578, 1626, 2789, 2832, 2876, 2934, 2967, 3044, 3113, 3291, 3408 cm^–1; EIMS (70eV) m/z (%): 806 (M⁺, 2).
Beispiel III-p
Synthese von L-Dolavalyl-L-valyl-N-methyl-(S,S,R)-dolaisoleuinyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-methionin-N-3-chinolinamid (9p)
Eine Chromatographie über eine Silicagelsäule mit Chlorformmethanol (7:1) als Elutionsmittel ergab gemäß dem allgemeinen Verfahren L 9p als glasartigen Feststoff (C₄₅H₇₃N₇O₇S, 95 %), Rf = 0,41 (Hexan-Aceton 2:3), [α]_D ²⁵ = –58,2° (c 0,11, CHCl₃), Fp 98 – 100 °C, IR (KBr) ν: 476, 503, 542, 567, 611, 633, 669, 683, 719, 754, 772, 785, 816, 831, 860, 880, 903, 959, 980, 990, 1009, 1038, 1099, 1136, 1159, 1196, 1221, 1285, 1306, 1346, 1370, 1420, 1456, 1491, 1557, 1578, 1624, 1653, 1771, 1792, 2338, 2363, 2473, 2527, 2596, 2660, 2689, 2741, 2789, 2832, 2876, 2936, 2967, 3057, 3291 cm^–1; EIMS m/z (%): 856 (M⁺, 10).
Beispiel III-q
Synthese von L-Dolavalyl-L-valyl-N-methyl-(S,S,R)-dolaisoleuinyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-prolin-N-3-chinolinamid (9q)
Eine Chromatographie über eine Silicagelsäule mit Chloroformmethanol (7:1) als Elutionsmittel ergab gemäß dem allgemeinen Verfahren L 9q (C₄₅H₇₁N₇O₇, 82 %), Rf = 0,11 (Hexan-Aceton 2:3), [α]_D ²⁵ = –108,2° (c 0,11, CH₃OH), Fp 149 – 151 °C, IR (KBr) ν: 476, 509, 527, 565, 613, 667, 691, 719, 754, 772, 903, 990, 1009, 1098, 1134, 1177, 1196, 1242, 1258, 1287, 1343, 1364, 1387, 1420, 1437, 1458, 1489, 1506, 1559, 1576, 1636, 1674, 1697, 1734, 2338, 2363, 2471, 2513, 2531, 2650, 2660, 2724, 2739, 2832, 2878, 2967, 3030, 3268, 3430, 3443, 3588 cm^–1; EIMS m/z (%): 822 (M⁺, 36).
Beispiel III-r
Synthese von L-Dolavalyl-L-valyl-N-methyl-(S,S,R)-dolaisoleuinyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-valin-N-3-chinolinamid (9r)
Eine Chromatographie über eine Silicagelsäule mit Toluol-ethylacetatmethanol (5:3:2) als Elutionsmittel ergab gemäß dem allgemeinen Verfahren L 9r als weißen Feststoff (C₄₅H₇₃N₇O₇, 86 %), Rf = 0,28 (Hexan-Aceton 2 : 3), [α]_D ²⁵ = –78,7° (c 0,15, CH₃OH), Fp 140 – 142 °C, IR (KBr) ν: 476, 546, 561, 611, 629, 679, 719, 752, 783, 799, 837, 858, 901, 959, 990, 1038, 1099, 1134, 1200, 1219, 1263, 1346, 1370, 1387, 1420, 1466, 1491, 1555, 1580, 1626, 1649, 2789, 2832, 2876, 2936, 2965, 3057, 3289 cm^–1; EIMS m/z (%): 824 (M⁺, 23).
Beispiel III-s
Synthese von L-Dolavalyl-L-valyl-N-methyl-(S,S,R)-dolaisoleuinyl-(S,R,R)-dolaproinyl-L-isoleucin-N-3-chinolinamid (9s)
Eine Chromatographie über eine Silicagelsäule mit Toluol-ethylacetatmethanol (5:3:2) als Elutionsmittel ergab gemä^ß dem allgemeinen Verfahren L 9s als weißen Feststoff (C₄₆H₇₈N₇O₇, 81 %), Rf = 0,34 (Hexan-Aceton 2 : 3), [α]_D ²⁵ = –70,9° (c 0, 11, CH₃OH), Fp 133 – 135 °C, IR (KBr) ν: 476, 538, 611, 629, 669, 683, 719, 752, 783, 801, 837, 901, 980, 1036, 1099, 1134, 1169, 1200, 1217, 1262, 1346, 1370, 1385, 1420, 1458, 1491, 1506, 1541, 1559, 1578, 1624, 1653, 1734, 1771, 1792, 2361, 2789, 2832, 2878, 2936, 2967, 3057, 3133, 3291, 3567, 3588 cm^–1; EIMS m/z (%): 838 (M⁺, 44).
Auf diese Weise wurde die Synthese von mehreren heterocyclischen und Halogenphenylamidderivaten von Dolastatin 10 angegeben. Diese Amidderivate lassen sich gegenüber Dolastatin 10 leichter synthetisieren und sie zeigen wie Dolastatin 10 eine wirksame antineoplastische Aktivität gegenüber verschiedenen humanen Tumor- und Mauszelllinien, wodurch diese Derivate zu möglichen Alternativen für Dolastatin 10 werden.
Aus dem Genannten ist ohne weiteres klar, dass hier eine verwendbare Ausführungsform der vorliegenden Erfindung beschrieben und erläutert wurde, die alle der im Vorhergehenden genannten Aufgaben auf eine bemerkenswert unerwartete Weise erfüllt.
Sequenzprotokoll

Claims

Zusammensetzung mit der im Folgenden angegebenen allgemeinen Struktur:
worin die Substituenten X und Ar wie im Folgenden angegeben sind: a) X = Met, Ar = 4FPh; b) X = Met, Ar = 2ClPh; c) X = Met, Ar = 3ClPh; d) X = Phe, Ar = 3ClPh; e) X = Met, Ar = 4ClPh; f) X = Phe, Ar = 4ClPh; g) X = Met, Ar = 2,5diClPh; h) X = Phe, Ar = 2,5diClPh; i) X = Met, Ar = 4ClPEA; j) X = Phe, Ar = 6FBnThz; k) X = Phe, Ar = 6ClBnThz; l) X = pCl–Phe, Ar = 6ClBnThz; m) X = Met, Ar = BnThz; n) X = Pro, Ar = BnThz; o) X = Met, Ar = 2Py; p) X = Met, Ar = 3Q; q) X = Pro, Ar = 3Q; r) X = Val, Ar = 3Q; und s) X = Ile, Ar = 3Q.
Substanzzusammensetzung, die hier als 9 (a) bezeichnet wird, gemäß Anspruch 1, worin X = Met und Ar = 4FPh.
Substanzzusammensetzung, die hier als 9 (b) bezeichnet wird, gemäß Anspruch 1, worin X = Met und Ar = 2ClPh.
Substanzzusammensetzung, die hier als 9 (c) bezeichnet wird, gemäß Anspruch 1, worin X = Met und Ar = 3ClPh.
Substanzzusammensetzung, die hier als 9 (d) bezeichnet wird, gemäß Anspruch 1, worin X = Phe und Ar = 3ClPh.
Substanzzusammensetzung, die hier als 9 (e) bezeichnet wird, gemäß Anspruch 1, worin X = Met und Ar = 4ClPh. 7, Substanzzusammensetzung, die hier als 9 (F) bezeichnet wird, gemäß Anspruch 1, worin X = Phe und Ar = 4ClPh.
Substanzzusammensetzung, die hier als 9 (g) bezeichnet wird, gemäß Anspruch 1, worin X = Met und Ar = 2,5diClPh.
Substanzzusammensetzung, die hier als 9 (h) bezeichnet wird, gemäß Anspruch 1, worin X = Phe und Ar = 2,5diClPh.
Substanzzusammensetzung, die hier als 9 (i) bezeichnet wird, gemäß Anspruch 1, worin X = Met und Ar = 4ClPEA.
Substanzzusammensetzung, die hier als 9 (j) bezeichnet wird, gemäß Anspruch 1, worin X = Phe und Ar = 6FBnThz.
Substanzzusammensetzung, die hier als 9 (k) bezeichnet wird, gemäß Anspruch 1, worin X = Phe und Ar = 6ClBnThz.
Substanzzusammensetzung, die hier als 9 (1) bezeichnet wird, gemäß Anspruch 1, worin X = pCl–Phe und Ar = 6ClBnThz.
Substanzzusammensetzung, die hier als 9 (m) bezeichnet wird, gemäß Anspruch 1, worin X = Met und Ar = BnThz.
Substanzzusammensetzung, die hier als 9 (n) bezeichnet wird, gemäß Anspruch 1, worin X = Pro und Ar = BnThz.
Substanzzusammensetzung, die hier als 9 (o) bezeichnet wird, gemäß Anspruch 1, worin X = Met und Ar = 2Py.
Substanzzusammensetzung, die hier als 9 (p) bezeichnet wird, gemäß Anspruch 1, worin X = Met und Ar = 3Q.
Substanzzusammensetzung, die hier als 9 (q) bezeichnet wird, gemäß Anspruch 1, worin X = Pro und Ar = 3Q.
Substanzzusammensetzung, die hier als 9 (r) bezeichnet wird, gemäß Anspruch 1, worin X = Val und Ar = 3Q.
Substanzzusammensetzung, die hier als 9 (s) bezeichnet wird, gemäß Anspruch 1, worin X = Ile und Ar = 3Q.
Verfahren zur Synthese der Zusammensetzungen nach Anspruch 1, das umfasst: (a) die Reaktion eines Amins, das ausgewählt ist aus der Gruppe von: 4-Fluoranilin (2a); 2-Chloranilin (2b); 3-Chloranilin (2c); 4-Chloranilin (2d); 2,5-Dichloranilin (2e); 4-Chlorphenethylamin (2f); 2-Amino-6-fluorbenzothiazol (2g); 2-Amino-6-chlorbenzothiazol (2h); 2-Aminobenzothiazol (2i); 2-Aminopyridin (2j); und 3-Aminochinolin (2k), mit einer Boc-L-Aminosäure, die ausgewählt ist aus der Gruppe von: N-tert-Boc-Methionin (1a); N-tert-Boc-Phenylalanin (1b); N-tert-Boc-Prolin (1c); N-tert-Boc-Valin (1d); N-tert-Boc-Isoleucin (1e); N-tert-Boc-p-Chlor-phenylalanin (1f), in Gegenwart eines Kondensationsmittels, das ausgewählt ist aus der Gruppe von: 2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1,2-dihydrochinolin (EEDQ); Isobutylchlorformiat; und 1,3-Dicyclohexylcarbodiimid, wobei ein Amid gebildet wird; (b) das Entfernen der Schutzgruppe von dem Amid mit einem Reagens, das ausgewählt ist aus der Gruppe von: Chlorwasserstoff in Essigsäure; Chlorwasserstoff in Dioxan; und Trifluoressigsäure in Methylenchlorid, wobei das entsprechende Hydrochlorid/Trifluoracetatsalz gebildet wird; (c) das Koppeln des entschützten N-tert-Butyloxycarbonyl-L-aminosäureamids mit Dolaproin in Gegenwart von Diethylphosphorocyanidat und Triethylamin, wobei ein geschütztes Dipeptidamid gebildet wird; (d) das Entfernen der Schutzgruppe des geschützten Dipeptidamids mit Trifluoressigsäure, wobei ein entsprechendes Trifluoracetatsalz gebildet wird; und (e) das Koppeln der einzelnen Trifluoracetatsalze mit einem Tripeptidtrifluoracetat (TFA* Dov-Val-Dil-OH) in Gegenwart von Diethylphosphorocyanidat, wobei die synthetische Zusammensetzung gebildet wird.
Verwendung einer Zusammensetzung gemäß einem der Ansprüche 1 bis 20 zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung einer Krankheit.
Verwendung gemäß Anspruch 22, wobei die Krankheit Krebs ist.