CN101700306A - 一种乳癖消制剂的质量控制方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种乳癖消制剂的质量控制方法，该方法采用薄层色谱法对三七、玄参、赤芍进行鉴别，并用高效液相色谱法以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1作为指标进行含量测定。本发明的质量控制方法中的各种鉴别方法和各种含量测定方法，既可以单独分别使用，也可以联合使用或交叉使用。本发明质量控制方法对产品的质量控制更为有效，方法精密度、灵敏度、稳定性均较高，可确保产品质量的“均一、稳定、有效、可控”。

Description

一种乳癖消制剂的质量控制方法

技术领域

本发明涉及一种中药制剂的质量控制方法，特别涉及乳癖消制剂的质量控制方法。

背景技术

中药制剂的质量控制是制备过程中的关键。乳癖消制剂原料药是由鹿角、蒲公英、昆布、天花粉、鸡血藤、三七、赤芍、海藻、漏芦、木香、玄参、丹皮、夏枯草、连翘、红花组成，其可制成颗粒剂、片剂、胶囊剂等各种剂型。生产实践中，需要用现代药物分析技术，对乳癖消各类剂型的中间产品和/或终产品质量进行检测，以确保终产品质量的“均一、稳定、有效、可控”。

发明内容

本发明要解决技术问题是：克服现有技术的不足，提供一种乳癖消制剂的质量控制方法，

本发明涉及的质量控制方法，包括对原料、半成品和/或终产品的检测，包括鉴别和/或含量测定，具体地说，本发明的质量控制方法包括用薄层色谱法对乳癖消制剂中三七、玄参、赤芍进行鉴别；用高效液相色谱法以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1作为指标，对乳癖消制剂进行含量测定。

为了解决以上技术问题，本发明的一种乳癖消制剂的质量控制方法，其特征在于该质量控制方法中的鉴别方法是以下方法中的一种或几种联用：

a.取乳癖消制剂细粉约10g，研细，加甲醇50ml，回流提取40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使其溶解，转移至分液漏斗中，用水饱和正丁醇提取3次，合并提取液，用30ml氨试液洗涤，弃去氨水层，回收正丁醇，残渣加甲醇1ml使其溶解，作为供试品溶液；另取三七对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取人参皂苷Rg1对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.5mg人参皂苷Rg1的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液2～6ul，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯--甲醇-水以10-20∶35-45∶18-26∶5-15体积比混合后静置，待混合液分层，取下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；

b.取乳癖消制剂50g，研细，加甲醇80ml回流提取40分钟，滤过，溶液蒸干，残渣加水20ml使其溶解，转移至分液漏斗中，用水饱和正丁醇提取3次，合并提取液，用30ml氨试液洗涤，弃去氨水层，回收正丁醇，残渣加甲醇1ml使其溶解，作为供试品溶液；另取玄参对照药材4g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述二种溶液各2～6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以2-8∶1-4氯仿-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；

c.取乳癖消制剂50g，研细，加甲醇80ml回流提取40分钟，滤过，溶液蒸干，残渣加水20ml使其溶解，转移至分液漏斗中，用水饱和正丁醇提取3次，合并提取液，用30ml氨试液洗涤，弃去氨水层，回收正丁醇，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药甙对照品适量，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液及对照品溶液各2～6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以35-45∶1-8∶5-15∶0.1-0.5氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。

上述乳癖消制剂的质量控制方法，其特征在于：

方法a.的展开剂是氯仿-醋酸乙酯--甲醇-水以15∶40∶22∶10的体积比混合，于0-20℃静置，混合液分层后，取下层液进行层析而得；

方法b.的展开剂是氯仿-甲醇以5∶1体积比混合；

方法c.的展开剂是氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸以40∶5∶10∶0.2体积混合。

本发明利用薄层色谱法对乳癖消制剂中三七、玄参、赤芍进行鉴别的方法如下：

本发明乳癖消制剂的质量控制方法，其特征在于该方法中的含量测定方法为高效液相色谱法，含量测定方法如下：

色谱柱，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B；

梯度洗脱：0～12分钟，19％A，81％B，12～60分钟，19→36％A，81→64％B；流速每分钟为1.0ml；检测波长为203nm，理论板数按三七皂苷R1峰计算应不低于20000；

对照品溶液的制备：取人参皂苷Rg1对照品，人参皂苷Rb1对照品和三七皂苷R1对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含人参皂苷Rg1 0.4mg、人参皂苷Rb1 0.2mg、三七皂苷R1 0.1mg的混合溶液，即得；

供试品溶液的制备：乳癖消制剂研细，取10g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃取初滤液，精密量取续滤液25ml，置蒸发皿中蒸干，残渣加水15ml使溶解，用水饱和正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液30ml充分洗涤，弃去氨试液，再用正丁醇饱和的水30ml洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

乳癖消制剂的单位剂量中，含三七以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1的总量计，不得少于5.0mg。

乳癖消制剂是乳癖消颗粒，每袋乳癖消颗粒含三七以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1的总量计，不得少于5.0mg。

本发明的质量控制方法中的各种鉴别方法和各种含量测定方法，既可以单独分别使用，也可以联合使用或交叉使用。本发明质量控制方法对产品的质量控制更为有效，方法精密度、灵敏度、稳定性均较高，可确保产品质量的“均一、稳定、有效、可控”。

具体实施方式

本发明各实验例供试品所用制剂均可采用实施例1所述的乳癖消颗粒制剂，也可用与实施例1所述的乳癖消颗粒剂具有相同原料组成的其他制剂。

实施例1、乳癖消颗粒

【处方】鹿角66.8g        蒲公英44.5g

昆布173.5g               天花粉17.8g

鸡血藤44.5g              三七44.5g

赤芍13.4g        海藻86.8g

漏芦26.7g        木香35.6g

玄参44.5g        丹皮62.3g

夏枯草44.5g      连翘17.8g

红花26.7g

【制法】以上15味，鹿角、三七、玄参粉碎成极细粉，其余蒲公英等12味加水煎煮2次，第一次加8倍水煎4小时，第二次加6倍水煎3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.30～1.35(50℃)的清膏。加蔗糖612g及适量糊精，制成颗粒，干燥即得。

【鉴别】

(1)取本品置显微镜下观察：石细胞黄棕色，类长方形，类园形或形状不规则，层纹明显，直径约至94um不规则块片半透明，边缘折光较强，表面有纤细纹理和小孔及细裂隙。

(2)取本品10g，研细，加甲醇50ml，回流提取40分钟，滤过。滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，转移置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇振摇提取3次(30、20、20ml)，合并提取液，用氨试液30ml洗涤，弃去氨水层，回收正丁醇，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取三七对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取人参皂苷Rg1对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验。吸取上述三种溶液4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点。

(3)取本品50g，研细，加甲醇80ml回流提取40分钟，滤过，溶液蒸干，残渣加水20ml，使溶解，转移至分液漏斗中，用水饱和正丁醇提取3次(30、30、20ml)合并提取液用氨试液30ml洗涤，弃去氨水层，回收正丁醇，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取玄参对照药材4g，同法制成对照材溶液。照薄层色谱法标准操作程序(中国药典2005年一部附录)试验，吸取上述二种溶液各5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇(5∶1)为展开剂，展开，取出晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。

(4)取本品50g，研细，加甲醇80ml回流提取40分钟，滤过，溶液蒸干，残渣加水20ml，使溶解，转移至分液漏斗中，用水饱和正丁醇提取3次(30、30、20ml)合并提取液用氨试液30ml洗涤，弃去氨水层，回收正丁醇，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取芍药甙对照品适量，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液及对照品溶液各4ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2)为展开剂，展开，取出晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。

【含量测定】照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。

色谱条件与***适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；流速每分钟为1.0ml；检测波长为203nm。理论板数按三七皂苷R1峰计算应不低于20000。

对照品溶液的制备取人参皂苷Rg1对照品，人参皂苷Rb1对照品和三七皂苷R1对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含人参皂苷Rg1 0.4mg、人参皂苷Rb1 0.2mg、三七皂苷R1 0.1mg的混合溶液，即得。

供试品溶液的制备取本品装量差异项下的内容物，研细，取10g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率33kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃取初滤液，精密量取续滤液25ml，置蒸发皿中蒸干，残渣加水15ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液30ml充分洗涤，弃去氨试液，再用正丁醇饱和的水30ml洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品含三七以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1的总量计，不得少于5.0mg。

实施例2、乳癖消片

【处方】鹿角66.8g      蒲公英44.5g

昆布173.5g             天花粉17.8g

鸡血藤44.5g            三七44.5g

赤芍13.4g              海藻86.8g

漏芦26.7g              木香35.6g

玄参44.5g              丹皮62.3g

夏枯草44.5g            连翘17.8g

红花26.7g

【制法】以上15味，鹿角、三七、玄参粉碎成极细粉，其余蒲公英等12味加水煎煮2次，第一次加8倍水煎4小时，第二次加6倍水煎3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.30～1.35(50℃)的清膏。加蔗糖612g及适量糊精，制成颗粒，经常规制成片剂，包糖衣或薄膜衣片，0.34g/片(薄膜衣片)或0.67g/片(薄膜衣片)。

【质量控制方法】

鉴别、含量测定方法同实施例1，其中含三七以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1的总量计，不得少于5.0mg。

实施例3、乳癖消胶囊

【处方】鹿角66.8g      蒲公英44.5g

昆布173.5g             天花粉17.8g

鸡血藤44.5g            三七44.5g

赤芍13.4g            海藻86.8g

漏芦26.7g            木香35.6g

玄参44.5g            丹皮62.3g

夏枯草44.5g          连翘17.8g

红花26.7g

【制法】以上15味，鹿角、三七、玄参粉碎成极细粉，其余蒲公英等12味加水煎煮2次，第一次加8倍水煎4小时，第二次加6倍水煎3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.30～1.35(50℃)的清膏。加蔗糖612g及适量糊精，制成颗粒，经常规制成胶囊剂，0.32g/粒。

【质量控制方法】

鉴别、含量测定方法同实施例1，其中含三七以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1的总量计，不得少于5.0mg。

实施例4、人参皂甙和/或三七皂甙R1的高效液相含量测定方法研究。

(1)仪器、试剂及样品

仪器：岛津LC-2010CHT高效液相色谱仪，Phenomenex(150×4.6mm，5μm)、CAPCELL PAK C18(150×4.6mm，5μm)色谱柱。

试剂：乙腈为色谱纯，水为纯化水，其它试剂均为分析纯。

对照品：中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用，人参皂苷Rg1批号为110703-200322、人参皂苷Rb1批号为110704-200318、三七皂苷R1批号为110745-200414。

(2)样品配制

对照品溶液的配制：

取人参皂苷Rg1对照品，人参皂苷Rb1对照品和三七皂苷R1对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含人参皂苷Rg1 0.4mg、人参皂苷Rb1 0.2mg、三七皂苷R1 0.1mg的混合溶液，即得。

供试品溶液的配制：

取乳癖消颗粒(实施例1)装量差异项下的内容物，研细，取10g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率33kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃取初滤液，精密量取续滤液25ml，置蒸发皿中蒸干，残渣加水15ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液30ml充分洗涤，弃去氨试液，再用正丁醇饱和的水30ml洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

(3)测试条件选择

1.色谱条件(柱温是否重要？如重要，也要列出)

色谱柱：前后试用了两根柱子：CAPCELL PAK C18(150×4.6mm，5μm)色谱柱、Phenomenex(150×4.6mm，5μm)色谱柱。结果，应用CAPCELL PAK C18(150×4.6mm，5μm)色谱柱，人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1色谱峰与其它色谱峰的分离度均可达到1.5以上；应用Phenomenex(150×4.6mm，5μm)色谱柱，人参皂苷Rg1和三七皂苷R1色谱峰与其它色谱峰的分离度也可达到1.0以上。同时取阴性供试品溶液进样，结果表明，阴性供试品在人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1色谱峰位置处无相应峰出现。

2.分离度应大于1，理论板数按三七皂苷R1峰计算应不低于20000。

(4)线性关系

精密量取人参皂苷Rg1浓度为0.4188mg/ml、人参皂苷Rb1浓度为0.187mg/ml、三七皂苷R1浓度为0.1002mg/ml的混合对照品溶液1μl、4μl、7μl、10μl、13μl、17μl、20μl进样，记录色谱图，测定其峰面积，结果见表1、2、3。并以峰面积值(A)对进样量(C)进行回归得标准曲线方程。

表1人参皂苷Rg1对照品测定结果

表2人参皂苷Rb1对照品测定结果

表3三七皂苷R1对照品测定结果

(5)供试品溶液的制备

1.提取溶剂的考察：参照《中国药典》2005年版一部三七的含量测定方法，选取甲醇为提取溶剂。曾根据文献报道选取甲醇、50％甲醇及乙醇三种溶剂对人参皂苷Rg1的含量进行考察，测定其含量，结果表明，甲醇、50％甲醇两种溶剂所提取的人参皂苷Rg1含量相差不多，乙醇提取的含量最少，用甲醇所提取的供试品溶液，杂质峰少，分离效果最好，故采用甲醇为样品的提取溶剂。

2.提取方法的考察：精密称取乳癖消颗粒10g，加甲醇50ml提取，选择三种不同的提取方法，即常温浸泡30分钟、超声提取30分钟及回流提取30分钟。结果见表4。

表4不同提取方法的比较

提取方法	常温浸泡30分钟	超声提取30分钟	回流提取30分钟
				三七皂苷R1含量(mg/g)	0.078	0.086	0.093
人参皂苷Rg1含量(mg/g)	0.332	0.381	0.396
				人参皂苷Rb1含量(mg/g)	0.211	0.265	0.253
总含量(mg/g)	0.621	0.732	0.743

以上结果表明，回流提取30分钟的人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1的总含量最高，常温浸泡总含量最低，为实验操作方便，综合考虑，确定提取方法为超声提取30分钟。

3.提取时间的考察：精密称取乳癖消颗粒10g，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇25ml，称定重量，分别超声处理20分钟、30分钟、40分钟，放冷后用甲醇补足减失的重量，滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液进样，测定其含量，结果超声处理30分钟，含量基本不再增加，故确定提取时间为30分钟。

(6)精密度实验

精密吸取上述混合对照品溶液10μl，重复进样5次，结果人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1峰面积值的RSD小于3％，表明仪器精密度良好，结果见表5。

表5精密度试验结果

实验次数	1	2	3	4	5	X	RSD(％)
								三七皂苷R1峰面积	280350	279890	280380	284340	284450	281882	0.82
人参皂苷Rg1峰面积	1571200	1561900	1560000	1578600	1578500	1570040	0.56
								人参皂苷Rb1峰面积	567170	562780	566760	574670	568210	567918	0.76

(7)稳定性实验

取批号为20070401号样品供试液分别于0小时、2小时、4小时、8小时、16小时进样10μl，测得样品中人参皂苷Rb1和三七皂苷R1峰面积值的RSD均小于3％，人参皂苷Rg1峰面积值的RSD小于4％，测试结果表明供试品中人参皂苷Rb1、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1在16小时内基本稳定，结果见表6。

表6稳定性试验结果

时间(小时)	0	2.5	5	8	16	X	RSD(％)
								三七皂苷R1峰面积	231790	240780	245030	245100	244820	241504	2.37
人参皂苷Rg1峰面积	1423700	1445600	1441800	1424300	1330200	1413120	3.35
								人参皂苷Rb1峰面积	807840	771980	786900	776670	773790	783436	1.89

(8)重现性实验

按含量测定方法，取同一批号样品(批号为20070401)分别制备6份样品供试液，测得峰面积值并计算含量，结果RSD小于3％，表明重现性良好，结果见表7。

表7重现性试验结果

(9)回收率实验

取6份已知含量的样品(批号为20070401)各5g，精密称定，分别加入浓度为1.047mg/ml的人参皂苷Rg1对照品溶液1.90ml、浓度为0.935mg/ml的人参皂苷Rb1对照品溶液1.00ml、浓度为1.002mg/ml的三七皂苷R1对照品溶液0.40ml，按标准正文中样品制备方法和色谱条件，制备加样回收供试品溶液，并注入高效液相色谱仪，以下列公式计算回收率，结果见表8-10。

表8 三七皂苷R1回收率试验结果

表9人参皂苷Rg1回收率试验结果

表10人参皂苷Rb1回收率试验结果

(10)供试品含量测定

分别精密吸取上述混合对照品溶液与乳癖消颗粒样品供试液各10μl，按质量标准正文中的色谱条件测定，结果见表11。

表11样品中含量测定结果(n＝2)

以上数据显示，乳癖消颗粒中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的总含量在5.80毫克/袋～6.42毫克/袋，平均为6.09毫克/袋，考虑到药材的来源、采收时间、贮藏条件及提取、制备等因素，确定乳癖消颗粒中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的总含量每袋不得少于5.0mg。

本实施例用高效液相色谱法，以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1作为指标，对乳癖消颗粒进行含量测定。该含量测定法也适用于其它乳癖消制剂。该高效液相法也适用于对乳癖消制剂的原料、半成品和/或终产品的含量测定。

人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1均为三七中的有效成分，因此，该高效液相法也可用于三七或者其它含三七的药物组合物中这三种皂甙的含量测定。

该高效液相法也可用于其它含人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和/或三七皂苷R1的药物组合物的含量测定。

实施例5、高效液相色谱法测定乳癖消颗粒中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1的总含量

参照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。

色谱条件与***适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；流速每分钟为1.0ml；检测波长为203nm。理论板数按三七皂苷R1峰计算应不低于20000。

对照品溶液的制备取人参皂苷Rg1对照品，人参皂苷Rb1对照品和三七皂苷R1对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含人参皂苷Rg1 0.4mg、人参皂苷Rb1 0.2mg、三七皂苷R1 0.1mg的混合溶液，即得。

供试品溶液的制备取本品装量差异项下的内容物，研细，取10g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率33kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃取初滤液，精密量取续滤液25ml，置蒸发皿中蒸干，残渣加水15ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液30ml充分洗涤，弃去氨试液，再用正丁醇饱和的水30ml洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每袋含三七以人参皂苷Rg1(C42H72014)、人参皂苷Rb1(C54H92023)和三七皂苷R1(C47H80018)的总量计，不得少于5.0mg。

除上述实施例外，本发明还可以有其他实施方式。凡采用等同替换或等效变换形成的技术方案，均落在本发明要求的保护范围。

Claims (6)

1.一种乳癖消制剂的质量控制方法，其特征在于该质量控制方法中的鉴别方法是以下方法中的一种或几种联用：

a.取乳癖消制剂细粉约10g，研细，加甲醇50ml，回流提取40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使其溶解，转移至分液漏斗中，用水饱和正丁醇提取3次，合并提取液，用30ml氨试液洗涤，弃去氨水层，回收正丁醇，残渣加甲醇1ml使其溶解，作为供试品溶液；另取三七对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取人参皂苷Rg1对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.5mg人参皂苷Rg1的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液2～6μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯--甲醇-水以10-20∶35-45∶18-26∶5-15体积比混合后静置，待混合液分层，取下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；

b.取乳癖消制剂50g，研细，加甲醇80ml回流提取40分钟，滤过，溶液蒸干，残渣加水20ml使其溶解，转移至分液漏斗中，用水饱和正丁醇提取3次，合并提取液，用30ml氨试液洗涤，弃去氨水层，回收正丁醇，残渣加甲醇1ml使其溶解，作为供试品溶液；另取玄参对照药材4g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述二种溶液各2～6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以2-8∶1-4氯仿-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；

c.取乳癖消制剂50g，研细，加甲醇80ml回流提取40分钟，滤过，溶液蒸干，残渣加水20ml使其溶解，转移至分液漏斗中，用水饱和正丁醇提取3次，合并提取液，用30ml氨试液洗涤，弃去氨水层，回收正丁醇，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药甙对照品适量，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液及对照品溶液各2～6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以35-45∶1-8∶5-15∶0.1-0.5氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。

2.根据权利要求1所述乳癖消制剂的质量控制方法，其特征在于：方法a.的展开剂是氯仿-醋酸乙酯--甲醇-水以15∶40∶22∶10的体积比混合，于0-20℃静置，混合液分层后，取下层液进行层析而得；

方法b.的展开剂是氯仿-甲醇以5∶1体积比混合；

方法c.的展开剂是氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸以40∶5∶10∶0.2体积混合。

3.乳癖消制剂的质量控制方法，其特征在于该方法中的含量测定方法为高效液相色谱法，含量测定方法如下：

色谱柱，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B；

梯度洗脱：0～12分钟，19％A，81％B，12～60分钟，19→36％A，81→64％B；流速每分钟为1.0ml；检测波长为203nm，理论板数按三七皂苷R1峰计算应不低于20000；

对照品溶液的制备：取人参皂苷Rg1对照品，人参皂苷Rb1对照品和三七皂苷R1对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含人参皂苷Rg10.4mg、人参皂苷Rb10.2mg、三七皂苷R10.1mg的混合溶液，即得；

供试品溶液的制备：乳癖消制剂研细，取10g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃取初滤液，精密量取续滤液25ml，置蒸发皿中蒸干，残渣加水15ml使溶解，用水饱和正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液30ml充分洗涤，弃去氨试液，再用正丁醇饱和的水30ml洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

4.根据权利要求3所述的乳癖消制剂的质量控制方法，其特征在于，乳癖消制剂的单位剂量中，含三七以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1的总量计，不得少于5.0mg。

5.根据权利要求3所述的乳癖消制剂的质量控制方法，其特征在于，乳癖消制剂是乳癖消颗粒，每袋乳癖消颗粒含三七以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1的总量计，不得少于5.0mg。

6.根据权利要求1-4任意一项所述的乳癖消制剂的质量控制方法，其特征在于所述的乳癖消制剂为乳癖消颗粒剂。