CN102068598B

CN102068598B - 治疗妇女血亏***的养荣百草丸的检测方法

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Publication number: CN102068598B
Application number: CN200910228363A
Authority: CN
Inventors: 陈坚; 王磊; 赵艳; 李林
Original assignee: Lerentang Pharmaceutical Factory of Tianjin Zhongxin Pharmaceutical Group Co Ltd
Current assignee: Lerentang Pharmaceutical Factory Of Jinyao Darentang Group Co ltd
Priority date: 2009-11-19
Filing date: 2009-11-19
Publication date: 2012-08-29
Anticipated expiration: 2029-11-19
Also published as: CN102068598A

Abstract

本发明属于中成药的技术领域，涉及以中药材为原料制成的一种治疗妇女血亏***的养荣百草丸的质量控制方法，质量标准中设置的陈皮和香附鉴别项目，用高效液相色谱法测定该药物中芍药苷(C₂₃H₂₈O₁₁)的含量；每克含白芍以芍药苷(C₂₃H₂₈O₁₁)计，不得少于3.0mg的定量指标及检验方法，使质量标准较为完善，严格控制药品的质量，确保提高产品质量。

Description

治疗妇女血亏***的养荣百草丸的检测方法

技术领域

本发明属于中成药的技术领域，涉及以中药材为原料制成的一种治疗妇女血亏***的养荣百草丸的检测方法。

背景技术

养荣百草丸是一种经典中成药，***标准WS₃-B-1406-93记载处方及质量标准：

处方：白芍 160g 当归 80g 桑寄生 80g

熟地黄 80g 杜仲(炭) 80g 川芎 60g

香附(醋制) 60g 麦冬 40g 陈皮 40g

茯苓 40g 阿胶 20g 甘草 20g

黑豆 16g

制法：以上十三味，粉碎成细粉，过筛，混匀，用水泛丸，干燥，即得。

目前与上述公开的处方相似或相同，配比不同，功效相似的专利与文献很多，如北京阜康仁生物制药科技有限公司申请号：CN200510134437.5申请日：2005.12.15公开(公告)日：2006.08.30“养荣百草制剂及新的制备方法”本发明涉及一种中药组合物及其制备工艺，特别涉及一种用于妇女血亏，阴虚日久，***，过期不止，行经腹痛，白带时下的组方及其制备工艺。优选制剂为滴丸和软胶囊制剂。

西安安得药业有限责任公司申请(专利)号：CN200410026333.8申请日：2004.07.16公开(公告)日：2006.01.18“妇科养荣胶囊”一种妇科养荣胶囊，包括(用量为重量份)：当归2～20份、白术4～25份、熟地黄3～24份、川芎2～15份、白芍2～20份、香附2～15份、益母草2～16份、黄芪1～10份、杜仲2～14份、艾叶2～16份、麦冬1～8份、阿胶1～8份、甘草3～10份、陈皮1～12份、茯苓2～11份、砂仁1～8。按常规制剂方法制备的药剂。它经临床观察试验，试验结果表明本发明药物治疗崩漏的总有效率为95％，治疗***的总有效率为93.33％，治疗***症的总有效率为47％，治疗药流后***出血的总有效率为90％。主治：用于气血不足、肝郁不舒、***、头晕目眩、血漏血崩、贫血身弱以及***症。

江西汇仁药业有限公司，申请(专利)号：CN03109431.7申请日：2003.04.09，公开(公告)日：2003.09.10，“一种调经养血中药”本发明涉及一种调经养血中药，特别是由以下中药材制成的中药。当归、白芍、川芎、熟地黄、党参、白术、茯苓、甘草、肉桂、益母草、牡丹皮、没药(制)、延胡索(醋制)、藁本、白芷、黄芩、白薇、香附(醋制)、砂仁、陈皮、赤石脂(煅)、鹿角霜、阿胶。

记载有关质量标准的文献有中国现代药物应用2009年3月第3卷第6期记载宋潇潇王淑红熊英“RP2HPLC法测定参桂养荣丸中芍药苷的含量”目的是建立参桂养荣丸中测定芍药苷含量的反相高效液相色谱法分析方法。方法采用Alltima2C18(250mm×416mm，5μm)为分析柱，流动相为乙腈2011％磷酸溶液(145∶86)，流速为018ml/min，检测波长为230nm。结果：芍药苷在01043 16～11726 4mg/ml浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系(r＝1100)。芍药苷的平均回收率为9816％，RSD为116％(n＝6)。本方法的平均回收率为9816％，RSD为116％(n＝6)。结论：该方法操作简便、快捷，结果准确，可用于参桂养荣丸的质量控制。

药品鉴定·2009年3月第6卷第9期记载陈波1，温吉辉2，张国峰2(1.大连市第四人民医院，辽宁大连116031；2.沈阳东宇药业有限公司，辽宁沈阳110036)“HPLC法测定浓缩养荣丸中芍药苷的含量”目的：建立HPLC法测定浓缩养荣丸中芍药苷含量的方法。方法：采用Diamonsil-C18色谱柱(200mm×4.6mm，5μm)，流动相为甲醇-0.2％冰醋酸(30∶70)，流速为1.0ml/min，检测波长为230nm。结果：芍药苷浓度在0.0416～0.2080mg/ml范围内线性关系良好(r＝0.9997)，平均回收率为98.19％，RSD为0.97％。结论：本方法分离效果好，简便、快速、准确，可用于该药品的质量控制。

以上公开的与***标准WS₃-B-1406-93养荣百草丸公开的处方相似或相同，配比不同，功效相似的文献很多，但是现有技术中还存在鉴别项目、鉴别手段、含量测定方法不完善等缺点。

发明内容

本发明的目的是提供一种治疗妇女血亏***的养荣百草丸的检测方法，力求研制出完善的质量标准，严格控制药品的质量，确保疗效。

为了达到本发明的目的本发明采用的技术方案是：提供一种治疗妇女血亏***的养荣百草丸的检测方法，其中所述的药物配方由中药材：

白芍 160g 当归 80g 桑寄生 80g

熟地黄 80g 杜仲(炭) 80g 川芎 60g

香附(醋制) 60g 麦冬 40g 陈皮 40g

茯苓 40g 阿胶 20g 甘草 20g

黑 16g组成，上述原料粉碎成细粉，过筛，混匀，用水泛丸，干燥，即得，其特征在于：其方法的步骤是：

(1)以橙皮苷为对照品，以香附为对照药材，薄层色谱法鉴别养荣百草丸处方中是否含有陈皮、香附成分；

(2)以芍药苷为对照品，高效液相色谱法检测养荣百草丸处方中芍药苷的含量。

所述的治疗妇女血亏***的养荣百草丸的检测方法，其特征在于：所述的薄层色谱法鉴别养荣百草丸处方中是否含有陈皮成分的方法为：取本品粉末1g，加水30mL，超声处理15分钟，加***20mL萃取，弃去醚层，水层加正丁醇20mL萃取，弃去水层，醇层蒸干，残渣加甲醇0.5mL使溶解，作为供试品溶液；另取橙皮苷对照品，加甲醇制成每1mL含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版第一部附录VI B)试验，吸取上述五种溶液各5～10μL，分别点于同一用0.5％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰乙酸-水为展开剂，乙酸乙酯∶甲酸∶冰乙酸∶水＝100∶11∶11∶26，展开，取出，晾干，喷以对甲氧基茴香醛溶液，在105摄氏度加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

所述的薄层色谱法鉴别养荣百草丸处方中是否含有香附成分的方法为：取本品粉末5g，加***5mL，放置1h，时时振摇，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯0.5mL使溶解，作为供试品溶液；另取香附药材粉末1g，加***5mL，放置1h，时时振摇，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯0.5mL使溶解，滤液作为香附药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版第一部附录VI B)试验，吸取上述新制备的三种溶液各5～10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯-冰醋酸为展开剂，苯∶乙酸乙酯∶冰醋酸＝92∶5∶5，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的深兰色斑点；喷以二硝基苯肼试液，放置片刻，斑点渐变为橙红色。

所述的治疗妇女血亏***的养荣百草丸的检测方法，其特征在于：

所述的效液相色谱法测定养荣百草丸处方中芍药苷含量的方法为：

(1)色谱条件与***适用性试验：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶填充剂；柱温：30℃；乙腈∶0.1％磷酸溶液＝14∶86为流动相；流速：1.0mL/min；检测波长为230nm；理论板数按芍药苷峰计算应不低于2500；

(2)对照品溶液的制备：称取芍药苷对照品适量，精密称定，置100mL量瓶中，加50％甲醇稀释至刻度，摇匀，即得，每1mL含芍药苷0.1mg；

(3)供试品溶液的制备：称取本品1g，精密称定，置100mL具塞锥形瓶中，加50％乙醇50mL，称定重量，超声处理30分钟，取出放冷，再称重并补足超声减失量，摇匀，经0.45μm滤膜滤过，取续滤液，即得；

(4)测定法：分别吸取上述两种对照品溶液与供试品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每克含白芍以芍药苷(C₂₃H₂₈O₁₁)计，不得少于3.0mg

发明有益效果：质量标准中设置的陈皮和香附鉴别项目，用高效液相色谱法测定该药物中芍药苷(C₂₃H₂₈O₁₁)的含量；每克含白芍以芍药苷(C₂₃H₂₈O₁₁)计，不得少于3.0mg的定量指标及检验方法，使质量标准较为完善，严格控制药品的质量，确保提高产品质量。

附图说明

图1是养荣百草丸中陈皮的薄层色谱图。

图1-1是养荣百草丸中陈皮的薄层色谱图。

图1-2是养荣百草丸中陈皮的薄层色谱图。

图2是养荣百草丸中香附的薄层色谱图。

图2-1是养荣百草丸中香附的薄层色谱图。

图2-2是养荣百草丸中香附的薄层色谱图。

图3-1芍药苷图谱。

图3-2是阴性样品图谱。

图4芍药苷标准回归曲线图。

图5芍药苷对照品(精密度试验)图。

图6-1芍药苷对照品(批号：110736-200525)图。

图6-2养荣百草丸样加标图。

图7养荣百草丸样品(批号：20050401)图。

具体实施方式

下面结合实施例，对本发明进一步说明，实施例1改进后的养荣百草丸质量标准：

处方：白芍 160g 当归 80g 桑寄生 80g

熟地黄 80g 杜仲(炭) 80g 川芎 60g

香附(醋制) 60g 麦冬 40g 陈皮 40g

茯苓 40g 阿胶 20g 甘草 20g

黑豆 16g 以上共计十三味 776g

性状：本品为黄褐色至黑色的水丸；气微香，味甘、苦。

鉴别：薄层色谱鉴别

陈皮的薄层色谱鉴别：取本品粉末1g，加水30mL，超声处理15分钟，加***20mL萃取，弃去醚层，水层加正丁醇20mL萃取，弃去水层，醇层蒸干，残渣加甲醇0.5mL使溶解，作为供试品溶液。另取橙皮苷对照品，加甲醇制成每1mL含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版第一部附录VI B)试验，吸取上述五种溶液各5～10μL，分别点于同一用0.5％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰乙酸-水＝100∶11∶11∶26为展开剂，展开，取出，晾干，喷以对甲氧基茴香醛溶液，在105摄氏度加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

香附的薄层色谱鉴别：取本品粉末5g，加***5mL，放置1h，时时振摇，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯0.5mL使溶解，作为供试品溶液。另取香附药材粉末1g，加***5mL，放置1h，时时振摇，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯0.5mL使溶解，滤液作为香附药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版第一部附录VIB)试验，吸取上述新制备的三种溶液各5～10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯-冰醋酸＝92∶5∶5为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的深兰色斑点；喷以二硝基苯肼试液，放置片刻，斑点渐变为橙红色。

检查：本品应符合中国药典2005年版第一部附录(附录I A)丸剂项下有关的各项规定。

含量测定：照高效液相色谱法(中国药典2005年版第一部附录VID)测定。

色谱条件与***适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.1％磷酸溶液＝14∶86；检测波长为230nm。理论板数按芍药苷峰计算应不低于2500。

对照品溶液的制备称取芍药苷对照品适量，精密称定，置100mL量瓶中，加50％甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。(每1mL含芍药苷0.1mg)

供试品溶液的制备称取本品1g，精密称定，置100mL具塞锥形瓶中，加50％乙醇50mL，称定重量，超声处30分钟，取出放冷，再称重并补足超声减失量，摇匀，经0.45μm滤膜滤过，取续滤液，即得。

测定法分别吸取上述两种对照品溶液与供试品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每克含白芍以芍药苷(C₂₃H₂₈O₁₁)计，不得少于3.0mg。

功能与主治：调经养血，滋肾止带。用于妇女血亏，阴虚日久，月经水调，过期不止，行经腹痛，白带时下。

用法与用量：口服，一次5g，一日2次。规格：每30丸重1g。贮藏：密闭，防潮。

实施例2养荣百草丸质量标准起草说明：为了达到本发明的目的在本品的定性鉴别的研究中，设计对处方中陈皮、香附进行定性鉴别，采用不同的样品处理方法和不同极性的展开***进行分离，在样品处理上进行改进后，再点板鉴别，结果陈皮、香附药味分离较好，在与对照品相同位置上呈相同斑点，且阴性无干扰，重现性好。故建立了处方中陈皮、香附的薄层色谱鉴别方法。本品在定量分析的设计中，首先以处方白芍进行了成分分析的实验。根据文献报导，白芍中含有芍药苷成分，所以采用高效液相色谱法进行芍药苷的含量测定。

处方：白芍 160g 当归 80g 桑寄生 80g

熟地黄 80g 杜仲(炭) 80g 川芎 60g

香附(醋制) 60g 麦冬 40g 陈皮 40g

茯苓 40g 阿胶 20g 甘草 20g

黑豆 16g 以上共计十三味 776g

性状：本品为黄褐色至黑色的水丸；气微香，味甘、苦。

薄层色谱鉴别：

1.仪器与试药

1.1仪器：超声仪：KUDOS SK8200LH；电子天平：Sartorius CP225D/CP224S；

1.2试药：硅胶GF₂₅₄薄层板、硅胶G薄层板；对照品：橙皮苷(批号：110721-200512)以上对照品均购自中国药品生物制品检定所；香附药材(批号：000511028)以上药材均购自天津中药饮片厂；甲醇为分析纯；***、正丁醇、乙酸乙酯、碳酸氢钠、冰醋酸、正己烷、无水乙醇为分析纯；盐酸为分析纯；甲酸为分析纯；水为去离子水；养荣百草丸(批号：20050401、20050402、20050403)由天津中新药业集团股份有限公司乐仁堂制药厂提供。

1.3养荣百草丸的薄层色谱鉴别

1.3.1陈皮的薄层色谱鉴别：供试品溶液的制备取本品粉末1g，加水30mL，超声处理15分钟，加***20mL萃取，弃去醚层，水层加正丁醇20mL萃取，弃去水层，醇层蒸干，残渣加甲醇0.5mL使溶解，作为供试品溶液。

陈皮药材溶液的制备取本品粉末1g，加水30mL，超声处理15分钟，加***20mL萃取，弃去醚层，水层加正丁醇20mL萃取，弃去水层，醇层蒸干，残渣加甲醇0.5mL使溶解，作为供试品溶液。

对照品溶液的制备取橙皮苷对照品，加甲醇制成每1mL含2mg的溶液，作为对照品溶液。

阴性对照溶液的制备除陈皮外，按处方配制诸药，照供试品制备工艺操作，取1g研匀，照供试品溶液的制备方法项下操作，作为陈皮阴性对照溶液。

照薄层色谱法(中国药典2005年版第一部附录VIB)试验，吸取上述五种溶液各5～10μL，分别点于同一用0.5％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰乙酸-水＝100∶11∶11∶26为展开剂，展开，取出，晾干，喷以对甲氧基茴香醛溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。说明该方法专属，可靠。(结果见图1-1、1-2)

由于按药典法操作，橙皮苷对照品的展程较短(见图1养荣百草丸中陈皮的薄层色谱图)，故改用以上方法操作。

1.橙皮苷对照品(111524-200503)

2.阴性

3.养荣百草丸(20060401)供试品

4.陈皮药材]

图1-1养荣百草丸中陈皮的薄层色谱图，图1-1：[左→右：橙皮苷对照品(110721-200512)、陈皮药材、养荣百草丸(20060401)供试品、阴性]图1-2：养荣百草丸中陈皮的薄层色谱图，图1-2：[左→右：橙皮苷对照品(110721-200512)、养荣百草丸(20060401)、养荣百草丸(20060402)养荣百草丸(20060403)供试品、阴性]

1.3.2香附的薄层色谱鉴别：

供试品溶液的制备取本品粉末5g，加***5mL，放置1h，时时振摇，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯0.5mL使溶解，作为供试品溶液。

香附药材溶液的制备本品粉末1g，加***5mL，放置1h，时时振摇，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯0.5mL使溶解，滤液作为供试品溶液。

阴性对照溶液的制备除香附外，按处方配制诸药，照供试品制备工艺操作，取5g研匀，照供试品溶液的制备方法项下操作，作为香附阴性对照溶液。

照薄层色谱法(中国药典2005年版第一部附录VIB)试验，吸取上述新制备的三种溶液各5～10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯-冰醋酸＝92∶5∶5为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的深兰色斑点；喷以二硝基苯肼试液，放置片刻，斑点渐变为橙红色。说明该方法专属，可靠。结果见图2-1、2-2)

由于用药典法选用GF₂₅₄板，在254(nm)下检视，香附药材对应斑点不明显(见图2)，故选用以上方法。

图2：养荣百草丸中香附的薄层色谱图，图2：[左→右：1.香附药材、2.养荣百草丸(20050401)供试品、3.阴性]

图2-1：养荣百草丸中香附的薄层色谱图，图2-1：[左→右：1.香附药材、2.养荣百草丸(20050401)供试品、3.阴性]

图2-2：养荣百草丸中香附的薄层色谱图，图2-2：[左→右：1.香附药材、2.养荣百草丸(20060101)、3.养荣百草丸(20060202、4.养荣百草丸(20060203)供试品、5.阴性)。

检查：本品应符合中国药典2005年版第一部附录(附录IA)丸剂项下有关的各项规定。

一、仪器与试药

1.仪器条件：仪器：岛津LC-2010A_HT型高效液相色谱仪；检测器：UV/VIS；检测波长：230nm；柱温：30℃；超声仪：KUDOS SK8200LH；电子天平：SartoriusCP225D/CP224S。

2.色谱条件：色谱柱：C18 5μm 4.6×150mm Column流动相：乙腈-0.1％磷酸溶液(14∶86)；流速：1.0mL/min；进样量：5μL

3.试药

芍药苷对照品：购自中国药品生物制品检定所(供含量测定用)

批号：110736-200525

甲醇为色谱纯，其它试剂为分析纯，水为去离子水。

养荣百草丸(批号：20050401、20050402、20050403)

由天津中新药业集团股份有限公司乐仁堂制药厂提供

二、实验方法的考察

1.色谱条件与***适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.1％磷酸溶液(14∶86)甲醇-为流动相；检测波长为230nm。理论板数按芍药苷峰计算应不低于2500。

2.提取条件的考察

2.1提取方法的考察

超声法：本实验采用水、30％、50％、80％乙醇四种不同极性的提取溶媒，利用超声提取方法进行考察；结果见表1

表1不同提取溶媒测定芍药苷的积分面积

热回流法：本实验采用水、30％、50％、80％乙醇四种不同极性的提取溶媒，用热回流方法进行考察；结果见表2

表2不同提取溶媒测定芍药苷的积分面积

虽热回流法提取芍药苷含量较高，但两者相差并不大，出于对实验简单易行的考虑，故遵循药典选用超声法作为芍药苷的提取方法。

2.2提取时间的考察

采用超声法处理，本实验做了一个提取时间的梯度考察，以50％乙醇为提取溶媒，超声处理10、20、30、40分钟进行考察，结果见表3

表3提取时间的考察结果

实验结果表明：超声法处理30min芍药苷即可提取完全。

3.测定条件的选择

3.1流动相的选择：实验表明，选用中国药典2005年版第一部第68页白芍含量测定项下用乙腈-0.1％磷酸溶液(14∶86)为流动相；检测波长为230nm，芍药苷色谱峰与其他成分的色谱峰干扰较小。

3.2波长的选择：照中国药典2005年版第一部第68页白芍含量测定项下选择230nm为检测波长。

3.3对照品溶液的制备：称取芍药苷对照品适量，精密称定，置100mL量瓶中，加50％甲醇稀释至刻度，制成每1mL含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。

3.4供试品溶液的制备：称取养荣百草丸1g，精密称定，置100mL具塞锥形瓶中，加50％乙醇50mL，称定重量，超声处理30分钟，取出放冷，再称重并补足超声减失量，摇匀，经0.45μm滤膜滤过，作为供试品溶液。

3.5阴性对照溶液的制备：除白芍外，按处方配制诸药，照供试品制法工艺操作，取1.0g，照供试品溶液制备方法操作，制备为阴性溶液。

3.6测定法：照高效液相色谱法(附录VID)测定，分别吸取对照品溶液、供试品溶液与阴性对照溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定，用外标法计算，即得。

3.7空白试验：按样品处方称取除白芍的药味适量，按供试品制备方法制成空白对照，用与测定供试品相同的色谱条件测定，同时测定对照品，结果表明阴性样品在芍药苷对照品出峰处无峰。(见图3-1、图3-2)

4.方法学考察实验

4.1线性关系考察：芍药苷对照品溶液的制备：精密称取芍药苷对照品适量，用甲醇制成每1mL含芍药苷90μg的对照品溶液。吸取上述溶液2.0、4.0、5.0、6.0、8.0、10μL，依次进样分析，测定峰面积，结果见表4

表4线性关系考察结果

表5精密度实验结果

以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，经统计学计算得回归方程：Y＝1.360×10⁶X-2.314×10⁴，r＝0.9992。(见图4)。

4.2精密度试验

精密吸取芍药苷对照品溶液5μL(浓度为0.09mg/mL)，重复进样5次，按上述色谱条件测定峰面积积分值。计算芍药苷相对标准偏差为RSD＝0.64％。结果见表5(见图5)

4.3回收率试验

称取样品0.5g(批号为20050401，含量为4.257mg/g)，5份，精密称定，置100mL具塞锥形瓶中，加入对照品适量，按供试品制备与测定项下操作，进样，测定，计算。结果平均回收率为100.0％，相对标准偏差RSD＝1.74％。结果见表6

表6回收率实验结果

经实验考察，回收率为100.0％，RSD为1.74％。符合要求。(见图6-1、图6-2)

4.4重现性试验：取同一批号的样品(批号：20060401)，称取5份，按拟定的含量测定方法进行提取，分析，测得峰面积积分值。计算相对标准偏差为0.99％，结果见表7

表7重现性实验结果

4.5稳定性试验：将制备好的供试品溶液进样分析，每隔1小时进样，共4次，按上述色谱条件测定峰面积积分值，计算相对标准偏差为0.23％。结果见表8

表8稳定性实验结果

经实验考察，表明供试品在4小时内稳定，相对标准偏差为0.23％。

4.6样品测定

依照拟定方法，吸取对照品溶液与供试品溶液各5μL，进样，分析。共测定了3批养荣百草丸中芍药苷的含量。结果见表6(见图7)

表6供试品中芍药苷含量测定结果

限度：本品每克含白芍以芍药苷(C₂₃H₂₈O₁₁)计，不得少于3.0mg。

Claims

1.一种治疗妇女血亏***的养荣百草丸的检测方法，其中所述的药物配方由中药材：

白芍 160g 当归 80g 桑寄生 80g

熟地黄 80g 杜仲炭 80g 川芎 60g

醋制香附 60g 麦冬 40g 陈皮 40g

茯苓 40g 阿胶 20g 甘草 20g

黑豆 16g组成，上述原料粉碎成细粉，过筛，混匀，用水泛丸，干燥，即得，其特征在于：其方法的步骤是：

(1)以橙皮苷为对照品，以香附为对照药材，薄层色谱法鉴别养荣百草丸处方中是否含有陈皮、香附成分；薄层色谱法鉴别养荣百草丸处方中是否含有陈皮成分的方法为：取本品粉末1g，加水30mL，超声处理15分钟，加***20mL萃取，弃去醚层，水层加正丁醇20mL萃取，弃去水层，醇层蒸干，残渣加甲醇0.5mL使溶解，作为供试品溶液；另取橙皮苷对照品，加甲醇制成每1mL含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述五种溶液各5～10μL，分别点于同一用0.5％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰乙酸-水为展开剂，乙酸乙酯∶甲酸∶冰乙酸∶水＝100∶11∶11∶26，展开，取出，晾干，喷以对甲氧基茴香醛溶液，在105摄氏度加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

薄层色谱法鉴别养荣百草丸处方中是否含有香附成分的方法为：取本品粉末5g，加***5mL，放置1h，时时振摇，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯0.5mL使溶解，作为供试品溶液；另取香附药材粉末1g，加***5mL，放置1h，时时振摇，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯0.5mL使溶解，滤液作为香附药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述新制备的三种溶液各5～10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯-冰醋酸为展开剂，苯∶乙酸乙酯∶冰醋酸＝92∶5∶5，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的深兰色斑点；喷以二硝基苯肼试液，放置片刻，斑点渐变为橙红色；

(2)以芍药苷为对照品，高效液相色谱法检测养荣百草丸处方中芍药苷的含量的方法：

色谱条件与***适用性试验：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶填充剂；柱温：30℃；乙腈∶0.1％磷酸溶液＝14∶86为流动相；流速：1.0mL/min；检测波长为230nm；理论板数按芍药苷峰计算应不低于2500；

对照品溶液的制备：称取芍药苷对照品适量，精密称定，置100mL量瓶中，加50％甲醇稀释至刻度，摇匀，即得，每1mL含芍药苷0.1mg；

供试品溶液的制备：称取本品1g，精密称定，置100mL具塞锥形瓶中，加50％乙醇50mL，称定重量，超声处理30分钟，取出放冷，再称重并补足超声减失量，摇匀，经0.45μm滤膜滤过，取续滤液，即得；

测定法：分别吸取上述两种对照品溶液与供试品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定，即得。