JPS6365369A - 抗原−抗体反応の測定法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、抗原−抗体反応の測定法に関する。

更に詳しくは、抗体又は抗原を感作したラテックス粒子
に、感作した抗体に対する抗原もしくは感作した抗ＭＫ
対する抗体を水溶媒中で反応させ、特定波長を照射し、
その吸光度変化または散乱光の強度を測定する抗原抗体
反応の定量法に関する。

（従来の技術） 現在・免疫診断においてはＲＩＡ法（ラジオイマノアツ
セイ法）、Ｅエム法（エンザイムイムノアツセイ法）、
ラテックス凝集反応を利用した方法の３つの方法が一般
的である。この中でラテックス凝集反応を利用した方法
は安全性や測定時間が短いという利点を有する（たとえ
ば、特公昭ＡＩ−／／ｊ１ｊ号公報参照。）。

一般的に行なわれているラテックス凝集反石を光学的に
測定する方法は、ある平均粒径なもつラテックスに定量
しようとする抗原に対す、る抗体又は定量しようとする
抗体に対する抗原を感作し、この感作ラテツクスをプラ
スチックやガラス等を使用したセル内で患者の尿、血清
又は血漿を含む水溶媒中で反応させる。目的とする物質
がセル中に存在する場合、ラテックスは凝集し、セル外
部より０．３〜コ、ｔμｍの波長力ら選ばれる適当な波
長の光を照射し、吸光度変化または散乱光の強度を測定
することにより、セル中の抗体又は抗原量を定量できる
。実際には、ラテックス凝集反応を光学的に測定する方
法において既知の異なるレベルの検体を測定することに
よって得られる濃度と平均反応速度又は濃度と吸光度変
化等の検量線を使用して、これに未知濃度の検体の反応
速度又は吸光度変化を測定することによりその濃度を定
量することが可能となる。

（発明が解決しようとする問題点） しかしながら、近年、免疫診断では尿、血清、血漿等に
含まれる微量物質、例えば癌マーカーであるαフェトプ
ロティン（ＡＦＰ）やカルテイノエンブリオイックアン
ティジエン（ＯＲＩＡ）などは数ｎｆ／ｒｎｌといった
濃度まで定量することが望まれている。物質によって測
定を必要とする濃度範囲は様々であシ、数ｎｆ／ｍｌか
ら数μｔ／ｍｌまでの広範囲の濃度を定量しなければな
らない。

ラテックス凝集反応試薬の高感度測定を行なうＫは特に （イ）　使用するラテックスとして平均粒径の比較的大
きなものを用い・ （ロ）　ラテックスに対する抗体又は抗原感作量な多く
し、 Ｅｊ　　感作する抗体管たは抗原の特異性、親和性が高
いものを用い、 ｆ−Ｊ　　感作ラテツクス粒子濃度を吸光度の測定が可
能な範囲において高濃度とする ことが有利である。（ロ）、（／１、に）については高
価である抗体又は抗原を多量に使用することになり、試
薬コストの上昇を招き、しかも十分な効果は得られない
。（イ）に関しては例えばＡＰＰの測定では数ｎ＋Ｐ／
ｍ／〜ｊθＯｎｌＦ〜の濃度範囲を必要とするが、ラテ
ックスの平均粒径Ｏ０，２μｍＩｃＡＦＰ抗体を感作し
たラテックスでは測定可能濃度範囲はコｊ　ｎｆ／ｍｌ
〜コ０００ｎｌ？ハｌであるのに対し、Ｏ９ｊμｍのラ
テックスでは、測定可能濃度範囲は、／　Ｏｎｆ／＞ｕ
／　〜コ００　ｎｙ７’ｒｎｌといったように低濃度感
度アップは達成されるが高濃度においては検量線の直線
性がなくなシ、コ００　ｎ？／ｍｌまでと測定範囲が狭
くなるという難点を有する。

（問題点を解決するための手段） 本発明は、このような課題を解決することを目的とし、
低濃度の目的物質の測定を可能とするラテックス凝集反
応による抗原−抗体反応測定法を提供しようとするもの
である。

すなわち・本発明は平均粒径の異なる。２ａｉ類または
３４ｆ１Ｍ以上のラテックスを混合することによって低
濃度〜高濃度までの広範囲濃度の抗原又は抗体の測定を
可能にするものであり、その要旨は平均粒径の異なる一
種類線上のラテックスに抗体もしくは抗原を感作して混
合した懸濁液又は平均粒径の異なる一種類以上のラテッ
クスを混合した後、抗体または抗原を感作した懸濁液と
、感作した抗体忙対する抗原、もしくは感作した抗原に
対する抗体とを水溶媒中で反応させ、０．３〜．２．Ｉ
Ｉμｍの波長の光を照射し、その吸光度変化または散乱
光の強度を測定して、抗原−抗体反応を測定することを
特徴とする抗原−抗体反応の測定法にある。

本発明において、平均粒径の異なる一種類または３種類
以上のラテックスにそれぞれ抗体又は抗原を感作し、一
定の比率で混合するというラテックス試薬真裏方法では
小粒径ラテックスの測定範囲の広さと、大粒径のラテッ
クスの低濃度域での高感度という一つの性質をもった試
薬を提供することができる。これは平均粒径の明らかに
異なる一種類または３種類以上のラテツクスな一定な比
率で混合した後、抗体又は抗原を感作しても同様な結果
が得られる。

以下、本発明方法を詳細に説明する。

まず、本発明方法において用いられるラテックス凝集反
応における吸光度の変化または散乱光の強度を測定し、
抗原又は抗体を定量する方法は、たとえば特公昭５ｔｒ
−ｉｉｓｔｓ号公報、特開昭ｊダー１０９４１９９号公
報等に記載された方法によることができる。

すなわち、好ましくは、平均粒径が／、６μ以下の不溶
性担体粒子を用い、これに抗体又は抗原を担持させ（感
作し）、これに被検体中の抗原及び／又は抗体を反応せ
しめ、その反応混合物の吸光度を、好ましくは０．　Ａ
〜コ、ｑμの範囲の波長の光線で測定して求めることに
より、該被検体中の抗原及び／又は抗体の童（乃至濃度
）を測定する。用いる光線は、好ましくは該不溶性担体
粒子の平均粒径の少くともへｊ倍であって、少くとも２
倍、特に少くともコ、ｊ倍の波長のものが好適である。

不溶性担体粒子としては、測定を行う時に用いられる液
体媒体に実質的に不溶性で前記平均粒径な有する有機高
分子物質の微粒子、例えばポリスチレン、スチレン−ブ
タジェン共重合体の如き乳化重合によシ得られる有機高
分子のラテックスが好ましい。

かかる不溶性担体粒子（例えばラテックス粒子）に、測
定しようとする被検体中の抗原及Ｗ又は抗体と反応し得
る抗体又は抗原を担持させる（感作する）。この場合、
担体に対して抗体又は抗原を物理的に吸着きせてもよい
し、及Ｗ又は化学的に吸着させてもよい。

未知量の抗原及び／又は抗体を含有する被検体（試料）
中の抗原及び／又は抗体を定量するためには、一定の抗
原及び／又は抗体を一定量含有する標準試料を用いて、
これを種々の倍率で稀釈した樵々の稀釈標準試料を用意
し、これを一定量の一定抗体又は抗原を感作した不溶性
担体粒子と一定条件下で反応させ、この反応混合物の吸
光度を測定して、一定の抗原及び／又−７＝ は抗体と感作担体粒子とについて、該抗原又は抗体の量
（濃度）と吸光度との関係を示す標準曲線を作成してお
く。次に、この標準曲線の作成に用いたと同一の感作担
体粒子を用いて、その作成の場合と実質的に一定条件下
で未知試料と該感作担体とを反応させ、その吸光度を測
定し、この吸光度を前記標準曲線と比較、照合すること
により、該未知試料中の抗原及び／又は抗体の量（又は
濃度）を定量することができる。

また、別法として、前記標準曲線を作成する場合に、例
えば一定の吸光度に達するに要する反応時間あるいは吸
光度の経時変化（反応速度）と使用した標準試料中の抗
原又は抗体の量（濃度）との関係を示す標準曲線を作成
しておけば、これと実質的に同一条件下で、前記感作担
体粒子と未知試料とを反応させて、前記の一定吸光度に
達するに要する反応時間あるいは反応速度を読みとるこ
とによシ、該未知試料中の抗原及び／又は抗体の量（又
は濃度）を定量することもできる。

散乱光の強度の測定においては、平均粒径が／、４ミク
ロン以下の不溶性担体粒子に抗体又は抗原を支持させ、
この支持された抗体及び／又は抗原に抗原又は抗体或い
はその混合物を液体媒体中で反応させ、この反応混合物
に波長が好ましくは０．　ｆｆ〜コ、ダミクロンの範囲
から選ばれる光を反応開始以後７以上の時点において照
射し、該反応混合物の散乱光の強度を測定することによ
って達成される。

抗原−抗体反応の実施態様としては、特定の抗体又は抗
原を支持させた担体粒子の懸濁液に抗原又は抗体を含有
する被検液又はその稀釈物或いは濃縮物を反応させる方
法並びに測定すべき抗体又は抗原を含有する被検液に先
ず抗原又は抗体を加えて反応させ、次いでこの反応混合
物に特定の抗原又は抗体を支持させた不溶性担体粒子の
懸濁液を加えて反応させる方法があげられる。

反応開始以後／ｉＪ上の時点において特定の波長の光を
照射し、抗原−抗体反応の混合物の散乱光の強度を測定
するが、具体的な方法として下記のものがあげられる。

（Ａｌ　　一定の抗原及び／又は抗体を一定量含有する
標準試料を用いて、これを種々の倍率で稀釈した櫨々の
稀釈標準試料を用意し、これを一定量の一定抗体又は抗
原を感作した不溶性担体粒子と一定条件下たとえば室温
で反応時間数分〜ａ時間で反応させ、この反応混合物の
散乱光の強度を測定して、一定の抗原反故′又は抗体と
感作担体粒子とについて、該抗原又は抗体の量（濃度）
と散乱光の強度との関係を示す標準曲線を作成しておき
、つぎに、この標準曲線の作成に用いたと同一の感作担
体粒子を用いて、その作成の場合と実質的に一定条件下
で未知試料と該感作担体とを反応させ、その散乱光の強
度を測定し、この散乱光の強度を前記標準曲線と比較、
照合することにより核未知試料中の抗原及び／又は抗体
の蓋（又は濃度）を定量することができる。

（Ｂｌ　　一定の散乱光の強度に達するに要する反応時
間（たとえば室温で数秒ないし７０分）と使用した標準
試料中の抗原又は抗体の量（濃度）との関係を示す標準
曲線を作成しておき、これと実質的に同一条件下で、前
記感作担体粒子と未知試料とを反応させて、前記の一定
の散乱光の強度に達するに要する反応時間を読みとるこ
とによシ、該未知試料中の抗原及び／又は抗体の量（又
は濃度）を定量することもできる。

（０）　　一定の抗原及び／又は抗体を一定量含有する
標準試料を用いて、これを攬々の倍率で稀釈した種々の
稀釈標準試料を用意し、本発明に従ってこれを一定量の
一定抗体又は抗原を感作した不溶性担体粒子と一定条件
下で反応させ、反応開始後はぼ一定時間後（たとえば少
くとも１〜３秒以後、好ましくは約ｊ秒鳩後）であって
、反応混合物の反応状態が安定し、該反応混合物の散乱
光の強度が最初にほぼ定常的に増加する一以上の時点に
おいて散乱光の強度を測定して、一定の抗原及び／又は
抗体と感作担体粒子とＫついて、該抗原又は抗体の量（
濃度）と単位時間当りの散乱光の強度の増加率との関係
を示す標準曲線を作成しておき、つぎに、この標準曲線
０の作成に用いたと同一の感作担体粒子を用いて、その
作成の場合と実質的に一定条件下で、未知試料と該感作
担体とを反応させ、かつ実質的忙同−な方法により単位
時間当シの散乱光の強度の増加率を測定し、この増加率
を前記標準曲線と比較、照合することによシ該未知試料
中の抗原及び／又は抗体のｉ（又は濃度）を定量するこ
とができる。

散乱光の測定は、通常の乳液試料の吸収スペクトル測定
に用いられる積分球を用い、試料セルへの入射光が試料
セルを透過直進して到達する位置にある、積分球内面を
黒色にすることによっても、或いは通常用いられる光散
乱測定装置によっても簡便に行うことができる。

本発明方法においては、上記ラテックスとして、平均粒
径の異なる二種類以上を用いることが必要である。

この平均粒径は、通常Ｏ０θ３−　／、　０μｍ程度か
ら選ばれる。用いる複数のラテックスの粒径の差は、（
＋１測定下限濃度（感度）　、ｉｔ測定範囲（通常、測
定下限濃度の１０００倍程度まで）、（ｔｉｌｌラテッ
クス濃度、θ■）抗原−抗体の反応性等によシ異なるが
、０．１μｍ以上の差が選ばれ、好ましくはＯｏ−μｍ
以上の差が選ばれる。また、少くとも７種はｏ、ｏｓ〜
θ、３μｍと０．３〜／μｍの範囲からそれぞれ選ぶの
が好適である。

この複数のラテックスの混合割合（体積比）はｌ：１０
〜／（７：／、好ましくはｌ：３〜３ニア程度から選は
れる。目的とする測定下限（感Ｋ）は、抗原、抗体の攬
類によっても異なるが−ＩＰ／ｎｌＰ／ゴ程度であシ、
たとえば、ＡＩＦＰでは３〜／θｎｒ／ＩＬｌ、フェリ
チンでは１０ｎ？程度である。

検量線は測定下限の１０００倍程度まで作成するのが一
般的でめる・ さらに具体的に説明すると、たとえば実施例１に示すよ
うにＡＦＰ測定において平均粒径θ０．２μｍのポリス
チレンラテックスと平均粒径０．９５ｍのポリスチレン
ラテックスにそれぞれＡＬＦ抗体（ヒトＡＦＰを動物に
免疫して得られる抗ＡＦＰ特異抗体）を感作し、ｌ：ｌ
及びｌ：コ（体積比）の比率で混合、調製した場合図１
に示すように平均反応速度■、最大反芯速度Ｖ　ｍａｘ
　（／コ秒ごとにＳＯ点測定した反応速度の最大値）と
濃度との検量線は１００ｎｖＡＲ１〜コ０００　ｎｔ／
Ｉｎ１の範囲においてＯ０λμの平均粒径のラテックス
の比率が増えるにつれて、検量線の傾き：が大きくなる
。このことは表３に示すように各々の検量線で濃度既知
の標準検体を測定した場合、Ｏ，コμを多く含むラテッ
クスの試薬の方が測定範囲の上限が高いことを意味する
。各ラテックスの測定範囲の上限を見るとＯ，コμの抗
ＡＦ’Ｐラテックスでは、標準検体濃度コ、０θＯｎｆ
／ｍｌで変動係数０．　Ｖ、　％がへ７７チと低値であ
り、上限はコ、　０００　ｎｉｌ／ｍ！である。

０、ｑμ抗ＡＦＰラテックスでは３ｏθｎｒ／ＩＬｌで
０、Ｖ、％ｔ、λ６係を示し、上限は一〇　〇　ｎｔ／
１１１１と狭くなる。一方、θ、コμ及びＯｏりμのラ
テックスをｌ：ｌで混合した抗ＡＬＰ混合ラテックスで
はＡ　００　ｎｔ／ｄでのＯ，Ｖ、％４１．り６優であ
り、ｌ：コ混合した抗ＡＦＰ混合ラテックスでは、ｊ　
００　ｎｆ／ｍｌでのｏ、ｖ、％　ｓ、　＜ｔ　６　％
である。これらの一種類の混合ラテックスの測定上限は
、ともＩ／ｃｊ００ｎ？／ＩＲ１である。

〕 測定範囲の下限は表〆のブランクの平均反応速度■と標
準検体濃度ｑ、コｎｆの平均反応速度Ｖ値を比較し、こ
の値の差がブランクの平均反応速度Ｖの標準偏差Ｓ、Ｄ
より大きい程、反厄件の高い試薬と言うことができる。

表７に示すように０．４／μの平均粒径のラテックスの
含まれる比率が大きくなるにつれ、低濃度の平均反応速
度Ｖは大きくなる。表３の標準検体の測定値においても
Ｏｌ−μ抗ＡＦＰラテックスの下限はＯ，Ｖ。

ｑｂｉｏｑｂ以下を目安にすればコｊ　ｎｆ／ｍｌであ
り、０．１１７１抗ＡＦＰラテツクスは夕、コｎｔ／ｍ
ｌである。

Ｏｏ−μ及び０．Ｑμのｌ：／、／：コ抗ＡＦＰ混合ラ
テックスもそれぞれＣ，Ｖ、％？、、？　／　％、６．
３２チあり、測定下限はり、コｎ？／ｍｌである。測定
範囲を比較するとＯ０ａμ抗ＡＦＰラテックスではその
測定可能濃度範囲は・、２　ｊ　ｎｔ／ｍｌ〜コ、００
０ｎｆｌ／ｍｌであり、高濃度については十分であるが
低濃度の感度が不足してｂる。θ、ｙμ抗ＡＦＰラテッ
クスでは、その測定可能濃度範囲は、５ｎｆＡＩ　−，
２００ｎｔ／ｎｒｌであシ、高濃度域が狭いという欠点
を有する。一方、／：／及び／：コ抗ＡＦＰ混合ラテッ
クスの場合は、ともにその測定可能濃度範囲は、ｊ　ｎ
ｔ／ｍｌ　−３００ｎＰ／ｍ／であシ、＃上限、下限と
もに現在の臨床における要求を満足するものである。

実施例コは抗フェリチンラテックスについてである。表
３は０．３μとＯ，Ｓμの抗ンエリチン混合ラテックス
の検１１＋１１データ及びＯ０Ｓμの抗フェリチンラテ
ックスの検、ｔ＃データを示す。

抗ＡＦＰラテックスと同様、粒径の小さいラテックスを
混合すると低濃度の平均反応速度Ｖは低値となシ、Ｊ　
００　ｍ？／ｍｌとｌ　００　ｎｆ／ｍ１のＶ　ｍａｘ
値の差を比較すると０．３μ及び。、３μの抗フェリチ
ン混合ラテックスの方が大きくなシ・検量線の傾きが大
きく、高濃度域の測定に適してｈることが明らかである
。′ｓｊに０．３μ抗フエリチンラテツクス、０．３μ
とｏ、ｊμの平均粒径の、？：／、／：／抗フェリチン
混合ラテックス、Ｏ０ｊμ抗フェリチンラテックスの低
濃度標準検体の測定値を示す。平均反応速度Ｖはθ、ｊ
μラテックスの混合比が増えるに従って大きくな）、Ｏ
１ｊμの抗フェリチンラテックスは低濃度域の測定に優
れていることがわかる。

以上の結果から、異なる平均粒径なもっ感作ラテツクス
を混合した試薬は混合するもとのラテックスの性質を混
合比の割合に対応して反映したラテックスということが
できる。つまり、粒径の異なる感作ラテツクスの混合比
を変えることＫよって目的とする物質の測定に必要とす
る測定範囲に近づけることができ、自由度の大きい試薬
なり４ｉＲすることができる。

（実施例） 以下、実施例によシ本発明の詳細な説明するが、本発明
はその要旨を越えない限り、以下の実施例によって限定
されるものではない。

〔実施例／〕

（試薬の調製） ／　９６　（ｗ／ｖ）　　の粒径θ、−μポリエチレン
ラテックスにヒトＡｌＰＦを動物に免疫して得られる抗
ＡＩＦＰ特異抗体を緩衝液中で十分攪拌しながら感作さ
せ、遠心分離後上清を除き、沈殿したラテックスを牛血
清アルブミン緩衝溶液によシ、再度分散させ、Ｏ０ａμ
抗ＡＰＰラテックスとする。同様の操作によってｏ、ｔ
ｉμ抗ＡＦＰラテックスを調製し、先に調製したＯ９−
μ抗ＡＦＰラテックスと体積比／：ｌ及びｌ：２で十分
に混合し、抗ＡｌｌＦＦ混合ラテックス試薬とする。

（検量線の作成） 上記抗ＡＦＰ混合ラテックス試薬を既知の濃度の標準検
体（０、Ｑ、ｌ　ｌ’／ｍｌ、ｇ、３ｎｔ／＃、コ３ｎ
ｔ／ｍｌ、　ｓ　０ｎｆ１７１ｎ１．１ｏｏｎ？／ａｔ
、３００Ｈ９７ｔｎｌ、３００ｎ９βム／　０００　ｎ
　Ｐ／ｍ／％−〇〇Ｏｎｆ、Ａｎｔ　）を“ＬＰ工Ａ（
登録商標）／θＯ”システム（三菱化成工業株式会社ａ
ｔ）で測定する。このシステムでは、７０μ１の検ブー ラテックス液をプラスチックセル内に攪拌し、反応させ
・９　ｊ　Ｏｎｍの波長で抗原−抗体反応に基づくラテ
ックス凝集反応による吸光度変化を平均反応速度Ｖ、最
大反応速度Ｖ　ｍａｘとして算出する。

下記表７に０．コμ抗ＡＰＦラテックス、０．２とθ、
４１μ抗ＡＦＰラテックスを／：ｌ及びｌ：コで混合し
た抗ＡＦＰ混合ラテックス及びｏ、ｙμ抗Ａ′ＩＰＰラ
テックスを用いて得られる平均反応速度■の検量線デー
タを示す。

下記表−に前述の９種の抗ＡＦＰラテックスの最大反応
速度Ｖ　ｍａｘの検量線データを示す。

下記表３に４１種の抗ＡＦＰラテックスにより、標準検
体を検体とみなし、測定したデータを示した。検量線は
０．２μの抗ＡＦＰラテックスに１９一 つｂてはｊ　００　ｎ？Ｌ以下を平均反応速度Ｖで３０
０　ｎｆ！、１ｍｌ取上を最大反応速度Ｖ　ｍａｗでプ
ロットし、Ｏ３−μとｏ、ｔｉμの７：ｌ及び／：コ抗
ＡＦＰ混合ラテックスについては／　００　ｎ９７ｍｌ
以下を平均反応速度Ｖ、３００８１７ｍ１以上を最大反
応速度Ｖ　ｒｎａｘでプロットし、Ｏ＋４１μ抗ＡＦＰ
ラテックスについては３０　ｎ９７ｍｌ以下を平均反応
速度Ｖ、　／　００　ｎｌ／ｍ／以上を最大反応速度Ｖ
　ｌｌ１ａＸでプロットし−それぞれ検ｉｔ′線とした
。

図／は各抗ＡＦＰラテックスの検量線を図示した。

〔実施例コ〕

（試薬の調製） ７％（Ｗ／Ｖ）　　の粒径０．３μポリスチレンラテツ
クスにヒトフェリチンを動物に免疫して得られる抗フェ
リチン特異抗体をｌｊＩ衝液中で十分攪拌しながら感作
させ、遠心分離後上清を除き、沈殿したラテックスを牛
血清アルブミン緩衝溶液により、再度分散させ、θ、３
μ抗フェリフエリチンラテックス。同様の操作によって
Ｏ，ｊμ抗７エリチンラテツクスをｖ４製し、先ＫＭ製
した０、３μ抗フエリチンラテツクスと体ａ比／：３及
びｌ；ｌで十分に混合し、抗フェリチン混合ラテックス
試薬とする。

（検ｌ・線の作成） 上記、抗フェリチン混合ラテックス試薬を既知の凍度の
標準検体（Ｏｎｔ７ｔｎｌ、＆３ｎ？７ｆｌｌｌ、ｌλ
３ｎｔ７ｔｎ１２３　ｎｆ／７ｔｎｌ　％ｊ　Ｏｎ？／
ｌｎ！、１００　ｎ？、４ｎｌ　、　３００　ｎｉｌ、
Ａｎｔ、ダＯＱ　ｎｆ／ｍｌ　）を“ＬＰＩＡ（登録商
務″）１００”システム（三菱化成工業製）で測定する
。

表弘に０．３μ及び０．３μのｌ二／抗フェリチン混合
ラテックス及びＯ１ｊμ抗フェリチンラテックスの検量
線テークな示す。検量線は／θＯｎ？、４ｈｔ以下では
、平均反応速度Ｖで、−〇　Ｏｎ９７ｍ１以上では最大
反応速度Ｖ　ｍａｘでプロットした。

表５に０３μ抗７エリチンラテツクス、０．３μ及びθ
、ｊμの３：／及び／：ｌ抗７エリチン混合ラテックス
及び０，３μ抗フエリチンラテツクスの低＃度椋準検対
の平均反応速度Ｖの値を示した。

（発明の効果） 本発明によれば、広い濃度範囲にわたって抗原抗体反応
の測定が可能となる。

【図面の簡単な説明】

図／は、本発明において用いられる抗ＡＦＰラテックス
を用いる場合の最大反応速度の検量線を示す図である。 出　願　人　　三菱化成工業株式会社 代　理　人　　弁理士　長谷用　　− ほか１名 図　１ ＡＦＰ（ダんＩ）

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）平均粒径の異なる２種類以上のラテックスに抗体
   もしくは抗原を感作して混合した懸濁液又は平均粒径の
   異なる２種類以上のラテックスを混合した後、抗体また
   は抗原を感作した懸濁液と、感作した抗体に対する抗原
   もしくは感作した抗原に対する抗体とを水溶媒中で反応
   させ、０．３〜２．４μｍの波長の光を照射し、その吸
   光度変化または散乱光の強度を測定して、抗原−抗体反
   応を測定することを特徴とする抗原−抗体反応の測定法
   。
2. （２）平均粒径０．０５〜０．３μｍの範囲にあるラテ
   ックスと平均粒径０．３〜１．０μｍの範囲にあるラテ
   ックスとを混合することを特徴とする特許請求の範囲第
   １項記載の測定法。
3. （３）平均粒径の異なるラテックスを１：１０から１０
   ：１の範囲で混合することを特徴とする特許請求の範囲
   第１項記載の測定法。