JPH09512434A - 減少した吸着性と増加した加水分解性を有するズブチリシン309変異体 - Google Patents
減少した吸着性と増加した加水分解性を有するズブチリシン309変異体Info
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Abstract
Description
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1. ズブチリシン309野生型アミノ酸配列の改変アミノ酸配列を有してい るズブチリシン309変異体であって、 改変アミノ酸配列が193、194、195、196、197、199、20 0、201、202、203、204、205、206、207、208、20 9、210、211、212、213または214位のうちの1以上における置 換を含んでおり、 a.置換が193位で生じるとき、置換アミノ酸はCys、Ala、His、 Thr、Pro、Gly、Gln、Asn、Ser、AspまたはGluであり 、 b.置換が194位で生じるとき、置換アミノ酸はHis、Thr、Pro、 Gly、Gln、Asn、Ser、AspまたはGluであり、 c.置換が195位で生じるとき、置換アミノ酸はGly、Gln、Asn、 Ser、AspまたはGluであり、 d.置換が196位で生じるとき、置換アミノ酸はPro、Gln、Asn、 Ser、AspまたはGluであり、 e.置換が197位で生じるとき、置換アミノ酸はMet、Cys、Ala、 His、Pro、Gly、Gln、Ser、AspまたはGluであり、 f.置換が199位で生じるとき、置換アミノ酸はMet、Cys、Ala、 His、Thr、Pro、Gly、Gln、Asn、Ser、AspまたはGl uであり、 g.置換が200位で生じるとき、置換アミノ酸はAsnまたはSerであり 、 h.置換が201位で生じるとき、置換アミノ酸はAspまたはGluであり 、 i.置換が202位で生じるとき、置換アミノ酸はPro、Gly、Gln、 Asn、Ser、AspまたはGluであり、 j.置換が203位で生じるとき、置換アミノ酸はIle、Met、Ala、 His、Pro、Gln、Asn、SerまたはAspであり、 k.置換が204位で生じるとき、置換アミノ酸はGly、Gln、Asn、 Ser、AspまたはGluであり、 l.置換が205位で生じるとき、置換アミノ酸はPro、Gln、Asn、 Ser、AspまたはGluであり、 m.置換が206位で生じるとき、置換アミノ酸はAspまたはGluであり 、 n.置換が207位で生じるとき、置換アミノ酸はPro、Gly、Gln、 Asn、SerまたはGluであり、 o.置換が208位で生じるとき、置換アミノ酸はLeu、Ile、Val、 Met、Cys、Ala、His、Pro、Gly、Gln、Asn、Aspま たはGluであり、 p.置換が209位で生じるとき、置換アミノ酸はHis、Thr、Pro、 Gly、Gln、Asn、Ser、AspまたはGluであり、 q.置換が210位で生じるとき、置換アミノ酸はAspまたはGluであり 、 r.置換が211位で生じるとき、置換アミノ酸はIle、Val、Met、 Cys、Ala、His、Thr、Pro、Gly、Gln、Asn、Serま たはAspであり、 s.置換が212位で生じるとき、置換アミノ酸はGluであり、 t.置換が213位で生じるとき、置換アミノ酸はPro、Gln、Asn、 Ser、AspまたはGluであり、および u.置換が214位で生じるとき、置換アミノ酸はPro、Gly、Gln、 Asn、Asp、SerまたはGluであり、 それにより、ズブチリシン309変異体は野生型ズブチリシン309と比較し て不溶性基質に対する減少した吸着性と増加した加水分解性を有しており、 好ましくは i.置換が200位で生じるとき、置換アミノ酸はSerであり、 ii.置換が205位で生じるとき、置換アミノ酸はPro、Gln、Asn、 Ser、AspまたはGluであり、 iii.置換が208位で生じるとき、置換アミノ酸はLeu、Ile、Val、 Met、Cys、Ala、His、Pro、Gly、Gln、Asn、Aspま たはGluであり、 iv.置換が209位で生じるとき、置換アミノ酸はPro、Gln、Asn、 Ser、AspまたはGluであり、および v.置換が210位で生じるとき、置換アミノ酸はAspまたはGluであり 、 更に好ましくは、置換が193、194、195、196、197、199、 201、202、203、204、205、206、207、208、209、 210、211、212、213または214位のうち1以上で生じるとき、1 93、194、195、196、197、199、201、202、204、2 05、206、208、209、210、211、212、213または214 位のいずれに関する置換アミノ酸もAspまたはGluであり;置換が203位 で生じるとき、203位の置換アミノ酸はAspであり;置換が207または2 12位の1以上で生じるとき、207または212位の置換アミノ酸はGluで あることを特徴とする、ズブチリシン309変異体。 2. 置換が a.207位でThrの代わりにGlu、 b.210位でSerの代わりにGlu、または c.210位でSerの代わりにAspである、 単一アミノ酸置換を有している、請求項1に記載のズブチリシン309変異体。 3. ズブチリシン309野生型アミノ酸配列の改変アミノ酸配列を有してい るズブチリシン309変異体であって、 改変アミノ酸配列が193、194、195、196、197、198、19 9、200、201、202、203、204、205、206、207、20 8、209、210、211、212、213または214位のうちの3以上に おける置換を含んでおり、 a.置換が193位で生じるとき、置換アミノ酸はMet、Cys、Ala、 His、Thr、Pro、Gly、Gln、Asn、Ser、AspまたはGl uであり、 b.置換が194位で生じるとき、置換アミノ酸はHis、Thr、Pro、 Gly、Gln、Asn、Ser、AspまたはGluであり、 c.置換が195位で生じるとき、置換アミノ酸はGly、Gln、Asn、 Ser、AspまたはGluであり、 d.置換が196位で生じるとき、置換アミノ酸はPro、Gln、Asn、 Ser、AspまたはGluであり、 e.置換が197位で生じるとき、置換アミノ酸はMet、Cys、Ala、 His、Pro、Thr、Pro、Gly、Gln、Asn、Ser、Aspま たはGluであり、 f.置換が198位で生じるとき、置換アミノ酸はGlu、Gln、Aspま たはSerであり、 g.置換が199位で生じるとき、置換アミノ酸はMet、Cys、Ala、 His、Thr、Pro、Gly、Gln、Asn、Ser、AspまたはGl uであり、 h.置換が200位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Ser、Gluま たはAspであり、 i.置換が201位で生じるとき、置換アミノ酸はAspまたはGluであり 、 j.置換が202位で生じるとき、置換アミノ酸はPro、Gly、Gln、 Asn、Ser、AspまたはGluであり、 k.置換が203位で生じるとき、置換アミノ酸はLeu、Ile、Val、 Met、Cys、Ala、His、Thr、pro、Gly、Gln、Asn、 Ser、AspまたはGluであり、 l.置換が204位で生じるとき、置換アミノ酸はGly、Gln、Asn、 Ser、AspまたはGluであり、 m.置換が205位で生じるとき、置換アミノ酸はPro、Gln、Asn、 Ser、AspまたはGluであり、 n.置換が206位で生じるとき、置換アミノ酸はAspまたはGluであり 、 o.置換が207位で生じるとき、置換アミノ酸はPro、Gly、Gln、 Asn、Ser、AspまたはGluであり、 p.置換が208位で生じるとき、置換アミノ酸はLeu、Ile、Val、 Met、Cys、Thr、Ala、His、pro、Gly、Gln、Asn、 AspまたはGluであり、 q.置換が209位で生じるとき、置換アミノ酸はHis、Thr、Pro、 Gly、Gln、Asn、Ser、AspまたはGluであり、 r.置換が210位で生じるとき、置換アミノ酸はAspまたはGluであり 、 s.置換が211位で生じるとき、置換アミノ酸はIle、Val、Met、 Cys、Ala、His、Thr、Pro、Gly、Gln、Asn、Ser、 GluまたはAspであり、 t.置換が212位で生じるとき、置換アミノ酸はGln、Ser、Aspま たはGluであり、 u.置換が213位で生じるとき、置換アミノ酸はPro、Gln、Asn、 Ser、AspまたはGluであり、および v.置換が214位で生じるとき、置換アミノ酸はPro、Gly、Gln、 Asn、Asp、SerまたはGluであり、 それにより、309変異体は野生型ズブチリシン309と比較して不溶性基質 に対する減少した吸着性と増加した加水分解性を有しており、 好ましくは i.置換が200位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Glu、Aspま たはSerであり、 ii.置換が204位で生じるとき、置換アミノ酸はGly、Gln、Asn、 Ser、AspまたはGluであり、 iii.置換が205位で生じるとき、置換アミノ酸はPro、Gln、Asn、 Ser、AspまたはGluであり、 iv.置換が208位で生じるとき、置換アミノ酸はLeu、Ile、Val、 Met、Cys、Ala、His、Pro、Gly、Gln、Asn、Aspま たはGluであり、 v.置換が209位で生じるとき、置換アミノ酸はPro、Gln、Asn、 Ser、AspまたはGluであり、および vi.置換が210位で生じるとき、置換アミノ酸はGluまたはAspであ ることを特徴とする、ズブチリシン309変異体。 4. 置換が a.207位でThrの代わりにGlu、および210位でSerの代わりに Glu、 b.197位でValの代わりにLeu、および210位でSerの代わりに Glu、 c.199位でValの代わりにLeu、および210位でSerの代わりに Asp、 d.204位でProの代わりにAla、および209位でAlaの代わりに Thr、 e.208位でTyrの代わりにPhe、および211位でLeuの代わりに Asn、 f.74位でAsnの代わりにAsp、および210位でSerの代わりにG lu、または g.207位でLysの代わりにGlu、および210位でAlaの代わりに Gluである、 2つのアミノ酸置換を有する、請求項3に記載のズブチリシン309変異体。 5. ズブチリシン309野生型アミノ酸配列の改変アミノ酸配列を有してい るズブチリシン309変異体であって、 改変アミノ酸配列が193、194、195、196、197、198、19 9、200、201、202、203、204、205、206、207、20 8、209、210、211、212、213または214位のうちの3以上に おける置換を含んでおり、 a.置換が193位で生じるとき、置換アミノ酸はMet、Cys、Ala、 His、Thr、Pro、Gly、Gln、Asn、Ser、AspまたはGl uであり、 b.置換が194位で生じるとき、置換アミノ酸はHis、Thr、Pro、 Gly、Gln、Asn、Ser、AspまたはGluであり、 c.置換が195位で生じるとき、置換アミノ酸はGly、Gln、Asn、 Ser、AspまたはGluであり、 d.置換が196位で生じるとき、置換アミノ酸はPro、Gln、Asn、 Ser、AspまたはGluであり、 e.置換が197位で生じるとき、置換アミノ酸はMet、Cys、Ala、 His、Pro、Thr、Pro、Gly、Gln、Asn、Ser、Aspま たはGluであり、 f.置換が198位で生じるとき、置換アミノ酸はGlu、Gln、Aspま たはSerであり、 g.置換が199位で生じるとき、置換アミノ酸はMet、Cys、Ala、 His、Thr、Pro、Gly、Gln、Asn、Ser、AspまたはGl uであり、 h.置換が200位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Ser、Gluま たはAspであり、 i.置換が201位で生じるとき、置換アミノ酸はAspまたはGluであり 、 j.置換が202位で生じるとき、置換アミノ酸はPro、Gly、Gln、 Asn、Ser、AspまたはGluであり、 k.置換が203位で生じるとき、置換アミノ酸はLeu、Ile、Val、 Met、Cys、Ala、His、Thr、Pro、Gly、Gln、Asn、 Ser、AspまたはGluであり、 l.置換が204位で生じるとき、置換アミノ酸はGly、Gln、Asn、 Ser、AspまたはGluであり、 m.置換が205位で生じるとき、置換アミノ酸はPro、Gln、Asn、 Ser、AspまたはGluであり、 n.置換が206位で生じるとき、置換アミノ酸はAspまたはGluであり 、 o.置換が207位で生じるとき、置換アミノ酸はPro、Gly、Gln、 Asn、Ser、AspまたはGluであり、 p.置換が208位で生じるとき、置換アミノ酸はLeu、Ile、Val、 Met、Cys、Thr、Ala、His、Pro、Gly、Gln、Asn、 AspまたはGluであり、 q.置換が209位で生じるとき、置換アミノ酸はHis、Thr、Pro、 Gly、Gln、Asn、Ser、AspまたはGluであり、 r.置換が210位で生じるとき、置換アミノ酸はAspまたはGluであり 、 s.置換が211位で生じるとき、置換アミノ酸はIle、Val、Met、 Cys、Ala、His、Thr、Pro、Gly、Gln、Asn、Ser、 GluまたはAspであり、 t.置換が212位で生じるとき、置換アミノ酸はGln、Ser、Aspま たはGluであり、 u.置換が213位で生じるとき、置換アミノ酸はPro、Gln、Asn、 Ser、AspまたはGluであり、および v.置換が214位で生じるとき、置換アミノ酸はPro、Gly、Gln、 Asn、Asp、SerまたはGluであり、 それにより、309変異体は野生型ズブチリシン309と比較して不溶性基質 に対する減少した吸着性と増加した加水分解性を有しており、 好ましくは i.置換が200位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Glu、Aspま たはSerであり、 ii.置換が204位で生じるとき、置換アミノ酸はGly、Gln、Asn、 Ser、AspまたはGluであり、 iii.置換が205位で生じるとき、置換アミノ酸はPro、Gln、Asn、 Ser、AspまたはGluであり、 iv.置換が208位で生じるとき、置換アミノ酸はLeu、Ile、Val、 Met、Cys、Ala、His、Pro、Gly、Gln、Asn、Aspま たはGluであり、 v.置換が209位で生じるとき、置換アミノ酸はPro、Gln、Asn、 Ser、AspまたはGluであり、および vi.置換が210位で生じるとき、置換アミノ酸はGluまたはAspである ことを特徴とする、ズブチリシン309変異体。 6. 置換が a.200位でGlnの代わりにGlu、205位でGlyの代わりにAla 、および210位でSerの代わりにGlu、 b.199位でValの代わりにLeu、204位でProの代わりにAla 、および207位でThrの代わりにGlu、 c.74位でAsnの代わりにAsp、200位でGlnの代わりにGlu、 および210位でSerの代わりにGlu、または d.200位でGlnの代わりにGlu、207位でThrの代わりにGlu 、および210位でSerの代わりにGluである、 3つのアミノ酸置換を有している、請求項5に記載のズブチリシン309変異体 。 7. 下記4つの置換:204位でProの代わりにAla、207位でTh rの代わりにGlu、210位でSerの代わりにGlu、および74位でAs nの代わりにAspを有している、請求項5に記載のズブチリシン309変異体 。 8. 下記5つの置換:199位でIleの代わりにLeu、204位でPr oの代わりにAla、207位でLysの代わりにGlu、210位でAlaの 代わりにGlu、および74位でAsnの代わりにAspを有している、請求項 5に記載のズブチリシン309変異体。 9. ズブチリシン309野生型アミノ酸配列の改変アミノ酸配列を有してい るズブチリシン309変異体であって、 野生型アミノ酸配列は第一ループ領域、第二ループ領域、第三ループ領域、第 四ループ領域および第五ループ領域を含んでなり、 改変アミノ酸配列は1以上のループ領域において1以上の位置で置換を含んで おり、 A.置換が第一ループ領域で生じるとき、置換は57、58、59、60、61 、63または64位のうち1以上で生じ、 a.置換が57位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gluまた はSerであり、 b.置換が58位で生じるとき、置換アミノ酸はGluであり、 c.置換が59位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、G lu、ProまたはSerであり、 d.置換が60位で生じるとき、置換アミノ酸はAsp、Gln、Gluまた はSerであり、 e.置換が61位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、G lu、ProまたはSerであり、 f.置換が63位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、G lu、ProまたはSerであり、および g.置換が64位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、G lu、Gly、ProまたはSerであり; B.置換が第二ループ領域で生じるとき、置換は93、94、95、96、97 、98、99、100、101、102、103、104または105位のうち 1以上で生じ、 a.置換が93位で生じるとき、置換アミノ酸はAla、Asn、Asp、C ys、Gln、Glu、Gly、His、Met、Pro、SerまたはThr であり、 b.置換が94位で生じるとき、置換アミノ酸はAla、Asn、Asp、C ys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Met、Pro、Ser、T hrまたはValであり、 c.置換が95位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、G lu、ProまたはSerであり、 d.置換が96位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、G lu、Gly、His、Pro、SerまたはThrであり、 e.置換が97位で生じるとき、置換アミノ酸はAspまたはGluであり、 f.置換が98位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、G lu、ProまたはSerであり、 g.置換が99位で生じるとき、置換アミノ酸はAspまたはGluであり、 h.置換が100位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、 Glu、ProまたはSerであり、 i.置換が101位で生じるとき、置換アミノ酸はAspまたはGluであり 、 j.置換が102位で生じるとき、置換アミノ酸はAla、Asn、Asp、 Cys、Gln、Glu、Gly、His、Met、Pro、SerまたはTh rであり、 k.置換が103位で生じるとき、置換アミノ酸はAspまたはGluであり 、 l.置換が104位で生じるとき、置換アミノ酸はAspまたはGluであり 、および m.置換が105位で生じるとき、置換アミノ酸はAla、Asn、Asp、 Cys、Gln、Glu、Gly、His、Leu、Met、Pro、Ser、 ThrまたはValであり; C.置換が第三ループ領域で生じるとき、置換は124、125、126、12 7、128、129、130または131位のうち1以上で生じ、 a.置換が124位で生じるとき、置換アミノ酸はAla、Asn、Asp、 Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Met、Pro、Ser、 ThrまたはValであり、 b.置換が125位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、 Glu、ProまたはSerであり、 c.置換が126位で生じるとき、置換アミノ酸はAspまたはGluであり 、 d.置換が127位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、 Glu、GlyまたはSerであり、 e.置換が128位で生じるとき、置換アミノ酸はAspまたはGluであり 、 f.置換が129位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、 Glu、GlyまたはSerであり、 g.置換が130位で生じるとき、置換アミノ酸はAspまたはGluであり 、および h.置換が131位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、 Glu、Gly、His、Pro、Ser、Thrであり; D.置換が第四ループ領域で生じるとき、置換は152、153、154、15 5、156、157、158、159、160または161位のうち1以上で生 じ、 a.置換が152位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、 Glu、ProまたはSerであり、 b.置換が153位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、 Pro、GluまたはSerであり、 c.置換が154位で生じるとき、置換アミノ酸はAspまたはGluであり 、 d.置換が155位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、 Glu、ProまたはSerであり、 e.置換が156位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、 Glu、Gly、His、Pro、SerまたはThrであり、 f.置換が157位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、 Glu、ProまたはSerであり、 g.置換が158位で生じるとき、置換アミノ酸はAspまたはGluであり 、 h.置換が159位で生じるとき、置換アミノ酸はAla、Asn、Asp、 Cys、Gln、Glu、Gly、His、Leu、Met、Pro、Ser、 ThrまたはValであり、 i.置換が160位で生じるとき、置換アミノ酸はAspまたはGluであり 、および j.置換が161位で生じるとき、置換アミノ酸はAla、Asn、Asp、 Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Met、Pro、 Ser、ThrまたはValであり; E.置換が第五ループ領域で生じるとき、置換は181、182、183、18 4または185位のうち1以上で生じ、 a.置換が181位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、 Glu、Gly、His、Pro、SerまたはThrであり、 b.置換が182位で生じるとき、置換アミノ酸はAspまたはGluであり 、 c.置換が183位で生じるとき、置換アミノ酸はAla、Asn、Asp、 Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Met、Pro、 Ser、Thr、TyrまたはValであり、 d.置換が184位で生じるとき、置換アミノ酸はAspまたはGluであり 、および e.置換が185位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gluま たはSerであり; それにより、ズブチリシン309変異体は野生型ズブチリシン309と比較し て不溶性基質に対する減少した吸着性と増加した加水分解性を有していることを 特徴とする、ズブチリシン309変異体。 10. ズブチリシン309野生型アミノ酸配列が第六ループ領域を更に含ん でおり、改変アミノ酸配列が第六ループ領域で1以上の置換を更に含み、第六ル ープ領域における置換が193、194、195、196、197、198、1 99、200、201、202、203、204、205、206、207、2 08、209、210、211、212、213または214位のうち1以上で 生じており、 a.置換が193位で生じるとき、置換アミノ酸はAla、Asn、Asp、 Cys、Gln、GIu、Gly、His、Met、Pro、SerまたはTh rであり、 b.置換が194位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、 Glu、Gly、His、Pro、SerまたはThrであり、 c.置換が195位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、 Glu、GlyまたはSerであり、 d.置換が196位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、 Glu、ProまたはSerであり、 e.置換が197位で生じるとき、置換アミノ酸はAla、Asn、Asp、 Cys、Gln、Glu、Gly、His、Met、Pro、SerまたはTh rであり、 f.置換が198位で生じるとき、置換アミノ酸はAsp、Gln、Gluま たはSerであり、 g.置換が199位で生じるとき、置換アミノ酸はAla、Asn、Asp、 Cys、Gln、Glu、Gly、His、Met、Pro、SerまたはTh rであり、 h.置換が200位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gluま たはSerであり、 i.置換が201位で生じるとき、置換アミノ酸はAspまたはGluであり 、 j.置換が202位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、 Glu、Gly、ProまたはSerであり、 k.置換が203位で生じるとき、置換アミノ酸はAla、Asn、Asp、 Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Met、Pro、 Ser、ThrまたはValであり、 l.置換が204位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、 Glu、GlyまたはSerであり、 m.置換が205位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、 Glu、ProまたはSerであり、 n.置換が206位で生じるとき、置換アミノ酸はAspまたはGluであり 、 o.置換が207位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、 Glu、Gly、ProまたはSerであり、 p.置換が208位で生じるとき、置換アミノ酸はAla、Asn、Asp、 Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Met、Pro、 Ser、ThrまたはValであり、 q.置換が209位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、 Glu、Gly、His、Pro、SerまたはThrであり、 r.置換が210位で生じるとき、置換アミノ酸はAspまたはGluであり 、 s.置換が211位で生じるとき、置換アミノ酸はAla、Asn、Asp、 Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Met、Pro、Ser、 ThrまたはValであり、 t.置換が212位で生じるとき、置換アミノ酸はAsp、Gln、Gluま たはSerであり、 u.置換が213位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、 Glu、ProまたはSerであり、および v.置換が214位で生じるとき、置換アミノ酸はAsn、Asp、Gln、 Glu、Gly、ProまたはSerである、請求項9に記載のズブチリシン3 09変異体。 11. 請求項1〜11のいずれか一項に記載されたズブチリシン309変異 体とクリーニング組成物担体とを含んでなることを特徴とする、硬質表面クリー ニング組成物、皿洗い組成物、口腔クリーニング組成物、義歯クリーニング組成 物、コンタクトレンズクリーニング組成物および布帛クリーニング組成物からな る群より選択されるクリーニング組成物。 12. 改変アミノ酸配列が74位でAsnに対して置換されたHisまたは Aspを更に含む、請求項1〜11のいずれか一項に記載のズブチリシン309 変異体。 13. クリーニング組成物が硬質表面クリーニング組成物である、請求項1 1に記載のクリーニング組成物。 14. クリーニング組成物が布帛クリーニング組成物であり、好ましくは組 成物が液体の形である、請求項11に記載のクリーニング組成物。 15. 請求項1〜11のいずれか一項に記載されたズブチリシン309変異 体をコードするDNA配列309遺伝子。
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