DE2543310C2 - Einrichtung zum Zählen und Klassifizieren von in einer Flüssigkeit suspendierten Teilchen - Google Patents

Einrichtung zum Zählen und Klassifizieren von in einer Flüssigkeit suspendierten Teilchen

Info

Publication number
DE2543310C2
DE2543310C2 DE2543310A DE2543310A DE2543310C2 DE 2543310 C2 DE2543310 C2 DE 2543310C2 DE 2543310 A DE2543310 A DE 2543310A DE 2543310 A DE2543310 A DE 2543310A DE 2543310 C2 DE2543310 C2 DE 2543310C2
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
jacket
cell
cells
flow
tube
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired
Application number
DE2543310A
Other languages
English (en)
Other versions
DE2543310A1 (de
Inventor
Wolfgang Dr.rer.nat. 3000 Hannover Eisert
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
GESELLSCHAFT fur STRAHLEN- und UMWELTFORSCHUNG MBH 8000 MUENCHEN DE
Original Assignee
GESELLSCHAFT fur STRAHLEN- und UMWELTFORSCHUNG MBH 8000 MUENCHEN DE
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by GESELLSCHAFT fur STRAHLEN- und UMWELTFORSCHUNG MBH 8000 MUENCHEN DE filed Critical GESELLSCHAFT fur STRAHLEN- und UMWELTFORSCHUNG MBH 8000 MUENCHEN DE
Priority to DE2543310A priority Critical patent/DE2543310C2/de
Priority to AT0398576A priority patent/AT365341B/de
Priority to NL7605888A priority patent/NL7605888A/xx
Priority to FR7623711A priority patent/FR2325923A1/fr
Priority to BE169856A priority patent/BE845246A/xx
Priority to CH1157476A priority patent/CH604157A5/xx
Priority to ZA765632A priority patent/ZA765632B/xx
Priority to GB39006/76A priority patent/GB1557691A/en
Priority to US05/726,275 priority patent/US4110043A/en
Priority to SE7610621A priority patent/SE418120B/xx
Publication of DE2543310A1 publication Critical patent/DE2543310A1/de
Application granted granted Critical
Publication of DE2543310C2 publication Critical patent/DE2543310C2/de
Expired legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/10—Investigating individual particles
    • G01N15/14—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry
    • G01N15/1404—Handling flow, e.g. hydrodynamic focusing
    • G—PHYSICS
    • G06—COMPUTING; CALCULATING OR COUNTING
    • G06M—COUNTING MECHANISMS; COUNTING OF OBJECTS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • G06M7/00—Counting of objects carried by a conveyor
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/10—Investigating individual particles
    • G01N15/14—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry
    • G01N15/1404—Handling flow, e.g. hydrodynamic focusing
    • G01N2015/1415—Control of particle position

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Theoretical Computer Science (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)

Description

a) der Durchmesser des Laserstrahls (18) ist im Kreuzungsbereich gleich oder kleiner ais der Durchmesser der der Länge nach ausgerichteten Teilchen,
b) der Detektor ist im Durchlicht zum Messen der Extinktion angeordnet,
c) die Auswerteschaltung ist für die Messung der Impulslängen, der Impulshöhen und der Impulsintegrale ausgebildet
Die Erfindun6 betrifft eine Einrichtung zum Zählen und Klassifizieren von in einer Flf-sigkeit suspendierten Teilchen, mit einem von der Suspension und einer ersten Mantelflüssigkeit durchflossenen, sich verjüngenden Rohr zum hydrodynamischen Fokussieren der Suspen- »ion zu einem Suspensionsfaden, der nach Verlassen des Rohres zusammen mit der ersten Mantelflüssigkeit und einer beide umgebenden zweiten Mantelflüssigkeit in einem Mantelrohr zu einem Auslaß aus dem Mantelrohr geführt wird, mit einem den Suspensionsfaden in einem Bereich des Mantelrohres mit planparallelen Flächen kreuzenden Laserstrahl und mit einem an eiirj Impulsauswerteschaltung angeschlossenen Detektor für die von den vereinzelten Teilchen ausgehende impulslormige Strahlung. Diese Einrichtung ist aus Rev. Sei. Instrum.. Vol. 44, No. 9, 1973. S. 1301-1310 bekannt.
Die Zählung und Aufnahme der Größenverteilung »on Zellen und/oder Partikeln bei gleichzeitiger Aufschlüsselung nach bestimmten Zellqualitäten ist problematisch. So sieht das o.g. Verfahren vor. eine elektronische Messung des Zellvolumens über die Widerstandsänderung einer Elektrolytflüssigkeit beim Durchtritt der Zellen durch eine Öffnung in einer Trennwand vorzunehmen. Zeilinhaltsstoffe werden mit einem Fluoreszenzfarbstoff angefärbt und mit einem Laserstrahl angeregt, wobei die Anregung an einer Stelle erfolgt, die nicht identisch mit der Coulter-Meßftelle ist. Die Fluoreszenzintensität bildet dabei ein Maß für die Menge des Zeilinhaltsstoffes, an den der Farbstoff gebunden ist Weitere jnfof mationen über das Zellvolumen und über interne Strukturen werden aus dem Streulichtsignal Und dem Fluoreszenzintegral gewönnen.
Bei der Messung nach dem Coüllef<Pfinzip ist der Meßwert aber abhängig von der Geometrie der Durchflußöffnung und von der jeweiligen Lage der Durchtrittsachsen der Zellen in der Durchflußöffnung. Außerdem besteht die Gefahr der Verstopfung der Meßöffnung; der maximale Zelldurchmesser ist auf 50% der Meßöffnung beschränkt Das Impulsintegral des Fluoreszenzimpulses ist zwar ein Maß für die Gesamtmenge des Zellinhaltsstoffes, an den der Farbstoff gebunden ist, jedoch läßt sich hieraus die Zellänge nicht ermitteln. Die Breite des Fluoreszenzimpulses wird dazu
ίο benutzt, zwischen Fluoreszenzimpulsen von F'nzelzellen und solchen von zwei aneinanderhängenden zu unterscheiden, wobei die letzteren für die Auswertung der Zellinhaltsstoffe elektronisch unterdrückt werden müssen. Die Achsenlängen des ellyptischen Laserfokus betragen 180 und 9— ΙΟμπι, wodurch unter günstigen Voraussetzungen das Mengenverhältnis von Zellkern zu Zellplasma festgestellt werden kann. Die Streulichtamplitude ist in gewissen Grenzen proportional dem Coulter-Volumen. Die Zuführung der zweiten Mantelflüssigkeit dient in erster Linie der Kompensation des Druckabfalls in der Coulteröffnung (s. Seite 1302, rechte Spalte, Zeile 8).
Die der Erfindung gestellte Aufgabe besteht nunmehr darin, eine Einrichtung zu schaffen, mit der eine genaue Zellenlängenbestimmung oder/und eine Messung der Zellinhaltsstoffkonzentration ermöglicht wird.
Die Lösung dieser Aufgabe wird mit den kennzeichnenden Merkmalen des Anspruches beschrieben.
Mit der Erfindung ist es erstmals möglich, mit Hilfe einer Extinktionsmessung im Durchflußverfahren mit hydrodynamischer Fokussierung die Partikel bzw. Zellen den Brennpunkt eines Laserstrahls passieren zu lassen, wobei dessen Durchmesser kleiner als die zu messende Zelle ist und die Zellen auf einem Strömungsfaden einzeln derart aufgereiht werden können, daß die Hauptachse der Zellen den Brennpunkt des Laserstrahls durchlaufen bzw. die Hauptachse der Zellen und die optische Achse des Laserstrahls sich schneiden. Als besonderer Vorteil der Erfindung ist anzusehen, daß der maximale Zelldurchmesser sicn lediglich nach der Öffnung der Strömungsdüse (bis übet 500 μπι möglich) richtet und der minimale auflösbare Zelldurchmesser sich aus dem Durchmesser des Brennpunktes, der theoretisch 1 μιτι und realistisch 3 μτη beträgt, ergibt.
Bei konstanter Strömungsgeschwindigkeit ist die Passagezeit der stets mit der Längsachse in Strömungsrichtung orientierten Zellen ein Maß für die Zellenlänge. Auch ungefärbte Zellen zeigen wegen der Zellorganisation in Kompartimente mit verschiedenen Brechungsindizes Verluste dis transmittierten Lichtes durch Streuung. Die Halbwertsbreite der Extinktionsimpulse ist somit ein Maß für die Zellenlänge. Bei der Färbung spezieller Zellinhaltsstoffe ist die Höhe des Extinktionsinipulses ein Maß für die Konzentration des angefärbten Stoffes in dem betrachteten Zellstreifen. Sind beide Parameter Höhe und Breite des Extinktionsimpulses einer Zelleigenschaft direkt proportional, so lassen sich erfindungsgemäß durch Auswertung der Integrale der Extinktionsimpulse Unterschiede noch klarer darstellen.
Der besondere Vorteil der Erfindung ist darin zu sehen, daß die Größenanalyse auch von unbehandelten Zellen und Partikeln, d, h, keine Anfärbung ist notwendig, ermöglicht wird, da Meßwerte im allgemeinen durch den Färbungsprozeß wesentlich geändert werden können. So kann sich z. B, eine Aggregation von Zellen lösen. Die Verarbeitungsgeschwindigkeit ist nur Vom riachgeschälteten Vielkänälanalysator der AUsWeN teschaltung abhängig. Analysefaten von > als 2ÖÖ 000
Partikeln/secsind möglich.
Die Erfindung wird im folgenden anhand eines Ausführungsbeispiels mittels der Fig, I bis 7 näher erläutert
Fig. 1 zeigt dabei eine schematische Darstellung eines Ausführungsbeispiels der Vorrichtung,
F i g. 2 eine optische Meßanordnung,
F i g. 3 die Signalverarbeitung,
F i g. 4 das Meßergebnis von Tetrahymena Pyriformis ungefärbt,
F i g. 5 ein Ivfeßergebnis der Tetrahymena Pyriformis angefärbt,
F i g. 6 ein Meßergebnis einer gemischten Population yon Tetrahymena Pyriformis und die
F i g. 7 ein MeßergebDis von Blutzellen.
Es hat sich erwiesen, daß in einer laminaren Strömung eines hydrodynamisch fokussierten Systems verteilte Zellen von nicht sphärischer Form in der Strömungsachse :.n Strömungsrichtung orientiert werden. So werden Mammalian Erythrocytes in ellipsoidale Körper umgeformt Das Verhältnis der Elüpsoidachsen variiert von 4 · 1 :1 bis 2 :1 :1 und hängt von der Zusammensetzung des Suspensionsmediums ab. Wenn nun ein Strömungsfaden von senkrecht zur optischen Achse orientierten Zellen erzeugt wird, die den Fokus eines Laserstrahls durchqueren, kann die Absorption in einem scheibenförmigen Schnitt der Zelle nachgewiesen werden. Die Extinktion von Licht, die dem Lambertschen Gesetz folgt, ist nicht alleine der Grund der Verluste des einfallenden Lichtstrahls. Zellbestandteile streuen das Licht Diese sogenannten nichtspezifischen Verluste führen zu einem nachweisbaren Extinktionssignal selbst wenn die Zelle nicht angefärbt ist.
Für den Fall, daß einige Bedingungen beachtet werden, ist die Halbwertsbreite der nachgewiesenen Extinktionsimpulse proportional zur Länge der Zellen oder Teilchen. Diese Bedingungen sind, daß der maximale Durchmesser des Lichtstrahls, durch den die Zellen hindurchtreten, zumindest etwas kleiner als die minimale Breite der Zellen ist, daß die Geschwindigkeit des Teilchenstroms konstant gehalten wird während der Meßperiode und daß die Abweichung der Zelle in der Ebene, welche senkrecht zur Strömungsrichtung steht, nicht größer als ein halber Zellendurchmesser ist.
Die Messung der Zellenlänge kann mit der Messung der Extinktion über die Zellenlänge kombiniert werden, so daß d.".s Integral des Extinktio isimpulses erhalten wird. Zellenlängen von der gleichen Größenverteilung, aber mit unterschiedlicher Färbung, können auf diese Art und Weise auch bestimmt werden. so
In der F i g. I ist nunmehr ein schematisches Strömungssystem dargestellt, mit welchem diese Messungen arsführbar sind. Fs besteht aus einem Mantelrohr 1 mit einem erweiterten Teil 2 und einem Flachteil 3. Der Übergang zwischen den Teilen 2 und 3 erfolgt konisch. Innerhalt des Mantelrohres ist die Strömungsdüse 4 angeordnet, welche in einer Kapillardüse 5 enaet. deren Spitze im Bereich zweier Öffnungen 6 und 7 im Flachteil 3 des Mantelrohres I steht. Die beiden öffnungen 6 und 7 sind mit zwu Scheiben 8 verschlossen, welche zueinander parallel stehen und plan sind. Sie liegen außerdem senkrecht übereinander, so daß ein Laserstrahl 9 durch die Scheiben 8 hindurchtreten kann.
Die Probe aus Zellen in Suspension enthält ein Probenbehälter 10, die über eine Leitung 11 und eine Einströmdüse 12 in Jen Innenraum 13 der Strömungsdü* Se eingespritzt wird. Außerdem münden in den Innenraum 13 der Strömungsdüse 4 zwei Düsen 14, über welche Wasser oder ein Puffer als Strömungsflüssigkeiten zugesetzt werden.
Die Einströmdüse 12, die Kapillare 5 und die Abführleitung 15 aus dem Flachteil 3 des Mantelrohres 1 Hegen auf einer gemeinsamen Achse 16. Die Mantelflüssigkeit wird über die Zuführung 17 in den erweiterten Teil 2 des Mantelrohres 2 eingeführt.
Die Probe 10 wird durch die Strömungsdüse 12 von einem Innendurchmesser von 0,4 mm in die Strömungsdüse 4 eingeführt und dort mittels der durch die Zuleitungen 14 zugeführten Mantelflüssigkeit zu einer laminaren Strömung ausgebildet Wenn der Druck der einströmenden Flüssigkeit etwas höher ist als der Eingangsdruck der Probenflüssigkeit,dann entsteht eine nahezu horizontale Verjüngung des Strömungsfadens am Auslaß der Kapillare 5. Ein typischer Druckunterschied liegt bei 5 bis 10 mm Wassersäule. Die hydrodynamische Fokussierung wird durch die besondere Formgebung der Strömungsdüse mit Kapillare 5 erreicht.
Die über die Zuleitung 17 hinz.gefügte Mantelströmung umgibt dieses erste Gemiscn ius Proben und Mantelflüssigkeit aus der Kapillare und erzeugt innerhalb des Flachteiles 3 eine laminare Strömung. Außerdem wird dadurch eine Anpassung des optischen Brechungsindex zwischen dem Probenfaden bzw. Strömungsfaden und dem optischen System erreicht. Der Innendurchmesser des Endes der Kapillare 5 beträgt z. B. 0,3 mm, was zu einem Probenstrahldurchmesser von 4 μπι führt. Damit wird der minimalste Durchmesser für den korrekten Fokus des Laserstrahls 9 vorgegeben. Die Begrenzung des maximalen Durchmessers der Zellen wird durch den Innendurchmesser der Kapillarrohre 5 gegeben. Bei Änderung des Glasdurchmessers können auch größere Zellen verwendet werden. Der Strömungsfaden 18 entlang der Achse 16, bestehend aus Probenteilchen und Mantelflüssigkeit, ist über eine Distanz von einigen Millimetern stabil. Die Achse des Laserstrahls 9. sowohl die des einfallenden als auch transmittierten, steht senkrecht auf der Achse 16.
Die optische Anordnung zur Durchführung der Messungen ist in F i g. 2 schematisch dargestellt. Zwei Strahlenteiler werden benutzt, um die optische Kontrolle einer korrekten Strahlenjustierung des Laserstrahls 21 eines He-Ne-Lasers 22 von 1 mW durchführen zu können. Die Korrekturlinse 23 dient zur Adjustierung des Laserfokus in die Bildebene des Mikroskops 24. Das Mikroskop verwendet ein Objektiv 23 mit einer 40fachen Vergrößerung.
Der gesplittete Laserstrahl 26 trifft durch das Okular 27 auf das Auge 21?· eines Beobachters. Zum Schütze des Auges ist zwischen dem Okular 27 und dem Strahlenteiler 19 eine Filteranordnung 36 angeordnet, welche aus sintr !Combination dreier Laserfilter mit Absorptionsmaxima bei 6328 A besteht. Der mit dieser optischen Anordnung resultierende minimalste Durchmesser des das Mikroskop 24 verlassenden fokussierten Laserstrahls 9 ist kleiner als 1 μηι. Der Laserstrahl 9 ist hierbei auf die Achsö 16 fokussie/t, die die Achse des schematisch dargestellten Mantelrohres 1 mit Strömungsdüse 4 und Kapillarrohr 5 ist.
Der das Mantelrohr 1 bzw. dessen plane Öffnungsscheiben 8 verlassende Laserstrahl 29 dringt durch die Linse 30 Und trifft als paralleler Strahl auf den Strahlungsteiler 20. Um Fehler bei der Streulichtmessung auszuschließen, wii'd nur ein Kegel mit dem Öffnungswinkel von 2° des Laserlichts 29 nachgewiesen.
Um dies zu bewerkstelligen, durchtritt er eine bikonkave Linse 31 mit den Brennweiten von —12,5 mm und eine Irisblende 32. Der durch die Irisblende 32 hindurchgetretene Teil wird wiederum mit der Linse 33 parallel gemacht und durchtritt ein Interferenzfilter 34, das es erlaubt, die Messungen in beleuchteten Räumen vorzunehmen. Anschließend trifft der Laserstrahl 29 auf den Fototransistor 35, der mit einer nicht näher dargestellten Kompensationseinheit mit einer Zeitkonstante von 0,2 μ5εο Verbunden ist.
Die Beleuchtungslampe 36, sowie die Korrekturlinse 37 dienen zur Beleuchtung der Objektebene und zu Justierzwecken.
In der F i g. 3 ist ein schematisches Diagramm für die Signalverarbeitung dargestellt. Auf dem Schirm 38 z. B. eines Oszillographen mit Intensitäts- und Zeitachse ist ein tpyisches Extinktionssignal dargestellt, welches durch die Extinktion des Laserlichtes durch die Teilchen entsteht. Drei einfache Analogcomputer 39, 40 und 41
UcKälUIlcl uauai ι uiuiiuii als ii[ii.riui.w(.iiui(uiig iu,
einen Mehrkanalanalysator 42 von ebenfalls bekannter Bauart Dieser stellt die Verteilung der gewünschten Parameter dar.
Jeder Analogcomputer 39 bis 41 liefert einen Impuls konstanten Aussehens aus der Impulshöhe, aus der Impulsbreite und dem Impulsintegral, wie es schematisch dargestellt ist. Die Impulshöhe kann dabei proportional entweder zur Impulshöhe, zur Impulsbreite oder zum Impulsintegral gemacht werden. Auch eine impulsumformung für die Impulshöhe muß vorgenommen werden bei Impulsen mit langen Halbwertsbreiten und verschiedenem Aussehen. Dies sind Erfordernisse des Mehrkanalanaiysators 42.
Das Strömungssystem nach der Fig. 1 und die Analogcomputer nach F i g. 3 erlauben Impulsraten von mehr als 200 000/sec. Diese Impulsrate wird nur durch die Umsetzrate und die Speicherkapazität des Mehrkanalanaiysators 42 begrenzt
Das System ist für Messungen von z. B. Tetrahymena Pyriformis, rote Blutkörperchen und Blutaggregationen verwendbar. Die Größe z. B. der Tetrahymena wird mit der Proteinmasse in den Zellen in Beziehung gesetzt.
Daher ist eine Beziehung zwischen dem Proteingehalt aus der Länge der ellipsoidal geformten Teilchen feststellbar.
In der Fig.4 ist ein Meßergebnis einer Zellgrößen-
Ί verteilung der ungefärbten Tetrahymena Pyriformis L dargestellt. Aufgetragen ist die Kanalnummer NO des Mehrkanalanialysators 42 über die Teilchenzahl N. Die Kurve 43 zeigt eine Verteilung mit der Größe der Teilchen von 40 μΐη und die Kurve 44 eine mit der
ίο Größe von 80 μηι.
In Fig. 5 ist wiederum die Größenverteilung der Tetrahymena Pyriformis L mit der Größe von 40 um (Kurve 45) und der Größe von 70 u.m (Kurve 46) dargestellt. Jedoch sind die Teilchen mit Naphtol-blauschwarz angefärbt
Ein Vergleich der Information aus der Teilchengröße und einer kombinierten Information aus dem Integral der Extinktionsimpulse ist in Fig.6 dargestellt. Auch hier ist wieder die Kanalnummer NO über der Tsüchsnzsh! N aufgetragen, wjp b?r?i<s festgestellt führt ein höherer Proteingehalt in den Zellen bzw. Teilchen zu höheren Extinktionswerten der gefärbten Zellen bzw. Teilchen. Eine Mischung von zwei verschiedenen Zellpopulationen, weiche schwer in zwei Klassen zur Messung ihrer Zellängen aufgeteilt werden können, sind dahingegen leicht separierbar, wenn die Verteilung der Integralwerte der Extinktionsimpulse betrachtet wird. Die Kurve 47 zeigt die Verteilung der Impu'sweiten und die Kurve 48 die Verteilung des
3ö Impulsintegrals. Wie feststellbar sind jeweils zwei Maxima vorhanden.
Das System kann für Routinekontrollen der Größenverteilungen von Blutteilcher; verwendet werden. Es kann sich dabei um frisches Blut oder Blutkonserven handeln. Bei dieser Anwendung ist es nicht von Vorteil, wenn eine Färbung der Blutzellen erfolgt, da dieses zu einer Agglutiination der Blutzellen führen kann und damit die Größenverteilung beeinflußt Eine derartige Verteilung ist in der Fig.7 mittels der Kurve 49 dargestellt Die ersten beiden Maxima 50 und 51 beziehen sich dabei auf Teilchen der Größe von 7 μηι und 15 μιη.
Hierzu 7 Blatt Zeichnungen

Claims (1)

  1. Patentanspruch:
    Einrichtung zum Zählen und Klassifizieren von in einer Flüssigkeit suspendierten Teilchen, mit einem von der Suspension und einer ersten Mantelflüssigkeit durchflossenen, sich verjüngenden Rohr zum hydrodynamischen Fokussieren der Suspension zu einem Suspensionsfaden, der nach Verlassen des Rohres zusammen mit der ersten Mantelflüssigkeit und einer beide umgebenden zweiten Mantelflüssigkeit in einem Mantelrohr zu einem Auslaß aus dem Mantelrohr geführt wird, mit einem den Suspensionsfaden in einem Bereich des Mantelrohres mit planparallelen Flächen kreuzenden Laserstrahl und mit einem an eine Impulsauswerteschaltung angeschlossenen Detektor für die von den vereinzelten Teilchen ausgehende impulsförmige Strahlung, g e kennzeichnet durch folgende Merkmale:
DE2543310A 1975-09-27 1975-09-27 Einrichtung zum Zählen und Klassifizieren von in einer Flüssigkeit suspendierten Teilchen Expired DE2543310C2 (de)

Priority Applications (10)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE2543310A DE2543310C2 (de) 1975-09-27 1975-09-27 Einrichtung zum Zählen und Klassifizieren von in einer Flüssigkeit suspendierten Teilchen
AT0398576A AT365341B (de) 1975-09-27 1976-05-31 Einrichtung zum zaehlen und klassifizieren von teilchen
NL7605888A NL7605888A (nl) 1975-09-27 1976-06-01 Inrichting voor het tellen en classificeren van deeltjes.
FR7623711A FR2325923A1 (fr) 1975-09-27 1976-08-03 Dispositif pour le comptage et la classification de particules
BE169856A BE845246A (fr) 1975-09-27 1976-08-17 Dispositif de comptage et de classification de particules
CH1157476A CH604157A5 (de) 1975-09-27 1976-09-08
ZA765632A ZA765632B (en) 1975-09-27 1976-09-20 Apparatus for counting and classifying particles
GB39006/76A GB1557691A (en) 1975-09-27 1976-09-21 Apparatus for absorption measurement and size investigation of particles
US05/726,275 US4110043A (en) 1975-09-27 1976-09-24 Apparatus for counting and classifying particles
SE7610621A SE418120B (sv) 1975-09-27 1976-09-24 Anordning for rekning och dimensionsklassificering av ickesferiska partiklar

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE2543310A DE2543310C2 (de) 1975-09-27 1975-09-27 Einrichtung zum Zählen und Klassifizieren von in einer Flüssigkeit suspendierten Teilchen

Publications (2)

Publication Number Publication Date
DE2543310A1 DE2543310A1 (de) 1977-03-31
DE2543310C2 true DE2543310C2 (de) 1982-04-29

Family

ID=5957698

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE2543310A Expired DE2543310C2 (de) 1975-09-27 1975-09-27 Einrichtung zum Zählen und Klassifizieren von in einer Flüssigkeit suspendierten Teilchen

Country Status (10)

Country Link
US (1) US4110043A (de)
AT (1) AT365341B (de)
BE (1) BE845246A (de)
CH (1) CH604157A5 (de)
DE (1) DE2543310C2 (de)
FR (1) FR2325923A1 (de)
GB (1) GB1557691A (de)
NL (1) NL7605888A (de)
SE (1) SE418120B (de)
ZA (1) ZA765632B (de)

Families Citing this family (46)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4264206A (en) * 1976-09-23 1981-04-28 The Kimmon Electric Co., Ltd. Dust particle analyzer
FR2408117B1 (fr) * 1977-11-07 1982-04-16 Agronomique Inst Nat Rech Procede et appareil de mesure des dimensions de fibres de bois
US4251733A (en) * 1978-06-29 1981-02-17 Hirleman Jr Edwin D Technique for simultaneous particle size and velocity measurement
US4226532A (en) * 1978-07-12 1980-10-07 Berber Viktor A Device for granulometric analysis of particles in fluids
FR2439992A1 (fr) * 1978-10-27 1980-05-23 Tumanov Evgeny Dispositif d'introduction de particules dans un analyseur des poussieres contenues dans un milieu gazeux
FR2460896A1 (fr) * 1979-07-13 1981-01-30 Omnium Assainissement Procede et dispositif de controle en continu de la coagulation-floculation de particules en suspension dans un liquide
US4214901A (en) * 1979-02-16 1980-07-29 Amax Inc. Hydrometallurgical refining of nickeliferous sulfides
DE2922643A1 (de) * 1979-06-02 1980-12-11 Strahlen Umweltforsch Gmbh Vorrichtung zur zaehlung und klassifizierung von teilchen
DE2943116C2 (de) * 1979-10-25 1986-06-19 Gesellschaft für Strahlen- und Umweltforschung mbH, 8000 München Einrichtung zur durchflußcytometrischen Reaktions- und/oder Diffusionsmessung
US4444317A (en) * 1981-08-26 1984-04-24 Georg Wick Observation of immunofluorescene for distinguishing between specific and nonspecific binding of conjugates
US4405509A (en) * 1981-10-09 1983-09-20 Avon Products, Inc. Fragrance-emitting compositions and articles
DE3315195A1 (de) * 1982-04-29 1983-11-03 International Remote Imaging Systems Inc., 91311 Chatsworth, Calif. Verfahren zum ausrichten von teilchen in einer fluidprobe
US4596464A (en) * 1983-10-14 1986-06-24 Ortho Diagnostic Systems, Inc. Screening method for red cell abnormality
US4660971A (en) * 1984-05-03 1987-04-28 Becton, Dickinson And Company Optical features of flow cytometry apparatus
AU563260B2 (en) * 1984-11-29 1987-07-02 International Remote Imaging Systems Inc. Method of operating a microscopic instrument
DE3688679T2 (de) * 1985-09-09 1993-10-14 Commw Scient Ind Res Org Durchflusszelle zum analysieren von stoffen.
US4778657A (en) * 1985-09-10 1988-10-18 Kernforschungszentrum Karlsruhe Gmbh Apparatus for determining the characteristics of particles suspended in liquids
GB8523747D0 (en) * 1985-09-26 1985-10-30 Vg Instr Group Fibre size monitor
JPS62274238A (ja) * 1986-05-22 1987-11-28 ベクトン・デイツキンソン・アンド・カンパニ− フロ−サイトメトリ−装置に用いる光学的結合用ゲル
US4765737A (en) * 1987-03-30 1988-08-23 Cornell Research Foundation Cell size measurements using light in flow cytometry and cell sorting
US4983038A (en) * 1987-04-08 1991-01-08 Hitachi, Ltd. Sheath flow type flow-cell device
US4894529A (en) * 1988-11-03 1990-01-16 High Yield Technology, Inc. Real-time particle counter for liquids with nebulizer and dryer
JPH02212742A (ja) * 1989-02-13 1990-08-23 Kowa Co 液中微粒子測定装置
US5074658A (en) * 1989-07-31 1991-12-24 Syracuse University Laser capillary spectrophotometric acquisition of bivariate drop size and concentration data for liquid-liquid dispersion
IT1239724B (it) * 1990-04-24 1993-11-15 Illycaffe Spa Sistema per controllare la macinazione di caffe' torrefatto
JP3075367B2 (ja) * 1991-04-05 2000-08-14 シスメックス株式会社 粒子分析方法及び装置
US5293219A (en) * 1991-12-31 1994-03-08 Andritz Sprout-Bauer, Inc. Fiber length analyzer
US5559284A (en) * 1995-04-17 1996-09-24 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Method for determining elongational viscosity and dynamic surface tension in liquid solutions
US5671046A (en) * 1996-07-01 1997-09-23 Particle Measuring Systems, Inc. Device and method for optically detecting particles in a free liquid stream
US6067865A (en) * 1997-07-10 2000-05-30 Palas Gmbh Partikel-Und Lasermebtechnik Method and device for determining particle size distribution in aerosol
US7116407B2 (en) * 1998-12-15 2006-10-03 Union Biometrica, Inc. System for axial pattern analysis of multicellular organisms
US6507400B1 (en) 1999-02-27 2003-01-14 Mwi, Inc. Optical system for multi-part differential particle discrimination and an apparatus using the same
US6646742B1 (en) 2000-02-19 2003-11-11 Mwi, Inc. Optical device and method for multi-angle laser light scatter
US6473172B1 (en) 2000-09-20 2002-10-29 International Remote Imaging Systems, Inc. Flow cell and method of operating therefor
US20030044711A1 (en) * 2001-08-24 2003-03-06 Powdertech International Corp. Irregular shaped ferrite carrier for conductive magnetic brush development
US7867778B2 (en) * 2007-02-23 2011-01-11 Visiongate, Inc. Fluid focusing for positional control of a specimen for 3-D imaging
US8154724B2 (en) 2007-12-04 2012-04-10 Particle Measuring Systems, Inc. Two-dimensional optical imaging methods and systems for particle detection
US8090183B2 (en) * 2009-03-12 2012-01-03 Visiongate, Inc. Pattern noise correction for pseudo projections
DE102008029700A1 (de) * 2008-06-24 2010-01-14 Palas Gmbh Partikel- Und Lasermesstechnik Verfahren zum Bestimmen des Eindringens von Prüfpartikeln in einen Messbereich
WO2010010904A1 (ja) * 2008-07-22 2010-01-28 アークレイ株式会社 マイクロチップ及び分析装置
US8254023B2 (en) * 2009-02-23 2012-08-28 Visiongate, Inc. Optical tomography system with high-speed scanner
DE102010053749B4 (de) * 2010-12-08 2015-02-19 Airbus Defence and Space GmbH Vorrichtung zum Identifizieren biotischer Partikel
BR112015021902B1 (pt) 2013-03-15 2021-06-15 Iris International, Inc Líquido para alinhamento de partícula e organela intracelular
US10705008B2 (en) * 2013-03-15 2020-07-07 Iris International, Inc. Autofocus systems and methods for particle analysis in blood samples
US11069054B2 (en) 2015-12-30 2021-07-20 Visiongate, Inc. System and method for automated detection and monitoring of dysplasia and administration of immunotherapy and chemotherapy
CN110108604B (zh) * 2019-05-17 2024-06-14 成都信息工程大学 基于显微放大和视角传感的高空微粒辨识装置及方法

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2732753A (en) * 1956-01-31 o konski
US2775159A (en) * 1952-02-20 1956-12-25 Joseph C Frommer Method and apparatus for the counting of particles per unit volume in a fluid
US3028501A (en) * 1959-06-01 1962-04-03 Rieter Joh Jacob & Cie Ag Method for measuring the volume or the weight of bodies having different size and irregularly passing through a channel or of accumulations of such bodies, particularly of fibre tufts
NL129608C (de) * 1967-07-31
DE1919628C3 (de) * 1969-04-18 1975-04-10 Wolfgang Prof. Dr. Dittrich Anordnung zum automatischen Zählen und/oder Klassifizieren von in einem strömungsfähigen Medium dispergierten Teilchen
US3873204A (en) * 1970-01-14 1975-03-25 Bio Physics Systems Inc Optical extinction photoanalysis apparatus for small particles
US3705771A (en) * 1970-01-14 1972-12-12 Bio Physics Systems Inc Photoanalysis apparatus
AT304756B (de) * 1970-03-23 1973-01-25 Max Planck Gesellschaft Meßvorrichtung zur Messung bestimmter Eigenschaften in Flüssigkeit suspendierter Partikel
US3662176A (en) * 1970-04-06 1972-05-09 Bio Physics Systems Inc Photo-optical particle analysis method and apparatus
US3661460A (en) * 1970-08-28 1972-05-09 Technicon Instr Method and apparatus for optical analysis of the contents of a sheathed stream
DE2058125A1 (de) * 1970-11-26 1972-05-31 Cornel Schmidt Eisen U Stahlwe Ventilator mit Grobabscheider
US3790760A (en) * 1971-09-27 1974-02-05 Cornell Aeronautical Labor Inc Apparatus for counting, differentiating and sorting particles according to their microstructure variations
BE793185A (fr) * 1971-12-23 1973-04-16 Atomic Energy Commission Appareil pour analyser et trier rapidement des particules telles que des cellules biologiques
US3984307A (en) * 1973-03-05 1976-10-05 Bio/Physics Systems, Inc. Combined particle sorter and segregation indicator
US3871770A (en) * 1973-06-04 1975-03-18 Nuclear Data Inc Hydrodynamic focusing method and apparatus

Also Published As

Publication number Publication date
ZA765632B (en) 1977-08-31
BE845246A (fr) 1976-12-16
SE7610621L (sv) 1977-03-28
GB1557691A (en) 1979-12-12
AT365341B (de) 1982-01-11
ATA398576A (de) 1981-05-15
CH604157A5 (de) 1978-08-31
NL7605888A (nl) 1977-03-29
US4110043A (en) 1978-08-29
FR2325923A1 (fr) 1977-04-22
SE418120B (sv) 1981-05-04
DE2543310A1 (de) 1977-03-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE2543310C2 (de) Einrichtung zum Zählen und Klassifizieren von in einer Flüssigkeit suspendierten Teilchen
DE69017144T2 (de) Vorrichtung zum Zählen und zur Bestimmung mindestens einer Leukozytensubpopulation.
DE1958101C3 (de) Verfahren und Vorrichtung zur qualitativen Bestimmung von in einem Trägermedium enthaltenen mikroskopischen Teilchen
DE69012837T2 (de) Messgerät.
DE2261695A1 (de) Teilchensortiervorrichtung
DE2142237C3 (de) Vorrichtung zur optischen Analyse eines flüssigen Probenstroms
DE2943116A1 (de) Einrichtung zur durchflusscytometrischen reaktions- und/oder diffusionsmessung
DE69209886T2 (de) Gerät zur Zellenanalyse im Urin
DE2340843A1 (de) System zur teilchenunterscheidung
DE2551026C3 (de) Verfahren zur Analysieren von Teilchen
DE102007031244B3 (de) Vorrichtung und Verfahren zur Durchführung statischer und dynamischer Streulichtmessungen in kleinen Volumina
DE1815352A1 (de) Automatisches Mess- und Zaehlgeraet fuer die Teilchen einer Dispersion
DE2656654B2 (de) Vorrichtung zur Messung des Volumens und bestimmter optischer Eigenschaften von Partikeln
DE2349271A1 (de) Vorrichtung zum ermitteln von parametern von blutzellen
DE2460434A1 (de) Flud-analysator
DE2050672C3 (de) Durchflußküvette zur mikroskopfotometrischen Messung von in einer Flüssigkeit suspendierten Teilchen
DE69000332T2 (de) Messen eines spaltes zwischen einer roehre und einem schwimmer.
EP2572182A2 (de) Anordnung zum messen der optischen eigenschaften von partikeln einer dispersion
DE2922643A1 (de) Vorrichtung zur zaehlung und klassifizierung von teilchen
DE2701523A1 (de) Verfahren und vorrichtung zur zaehlung und klassifizierung von teilchen
DE2853703A1 (de) Kuevette zur mikroskopischen beobachtung und/oder optisch- elektrischen messung von in einer fluessigkeit suspendierten teilchen
DE2405839C2 (de) Anordnung zum Messen der Flexibilität von Teilchen
DE3718407A1 (de) Anordnung fuer die optische analyse von partikelpopulationen in gasen und fluessigkeiten
DE60204735T2 (de) Verfahren zum Kalibrieren der Probenhöhe in einem Analysegerät
DE2733409A1 (de) Verfahren und vorrichtung zur bestimmung der osmotischen zellresistenz

Legal Events

Date Code Title Description
D2 Grant after examination
8339 Ceased/non-payment of the annual fee