CN102844320A - 杂环化合物 - Google Patents

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Abstract

本发明提供可用作癌症的预防剂或治疗剂的化合物。具体地，本发明提供了式(I)所代表的化合物，其中式中的每个符号如说明书所定义，或其盐或其前体药物，其可有效用于预防或治疗癌症。

Description

杂环化合物
技术领域
本发明涉及杂环化合物和其用途。更尤其是，本发明涉及具有强烈的细胞***周期7(Cdc7)抑制活性的稠合的杂环化合物和其用途，该杂环化合物可有效用于预防或治疗癌症，等等。
发明背景
癌症的特征是控制机理受到破坏的异常的细胞增殖。大部分癌细胞比正常组织的细胞生长的更快速。在细胞***周期中，染色体复制是主要的，并且DNA在S期的复制受到严格控制。已经证明，抑制DNA复制可有效用于治疗癌症，例如，在临床实践中，DNA复制抑制剂(例如羟基脲(HU)、吉西他滨和5-氟尿嘧啶的活性代谢产物等等)广泛地用作癌症的治疗剂。
Cdc7是进化上高度-保守的丝氨酸-苏氨酸激酶，并且在DNA复制的起始阶段起重要作用(非专利文献1)。Cdc7的激酶活性通过Cdc7与它的激活因子的结合而受到控制。从G1期的后期至S期，Cdc7与Dbf4(亦称ASK)形成复合物，并且磷酸化Cdc7底物，使G1期至S期的转变受到控制(非专利文献2)。此外，最近的研究报道，Cdc7在DNA复制和DNA损伤信号途径中起到重要的作用(非专利文献3)。
近年来，Cdc7激酶作为癌症治疗的诱人靶标，获得许多注意。在临床肿瘤(例如乳腺癌、结肠直肠癌、肺癌等等)和许多癌细胞系中，观察到Cdc7的过表达(非专利文献4)。在一些癌细胞系中，发现激活因子Dbf4的染色体复制数增加。有趣的是，使用siRNA，癌细胞系和未转变的成纤维细胞系对Cdc7表达的抑制显示了不同的反应。使用siRNA来抑制Cdc7表达，可在癌细胞系中导致S期延滞，并诱导凋亡，而在正常细胞中，它以p53活性依赖性方式诱导G1期延滞(非专利文献5)。此外，在复制应激条件下，Cdc7激酶在细胞中被激活，并且在Cdc7下调的细胞中，羟基脲和依托泊苷引起的细胞凋亡增加(非专利文献6)。由此，作为单一药剂或与其它化学治疗剂联用，Cdc7抑制剂可有效用于选择性的癌症治疗。
作为具有Pim激酶抑制活性的化合物，专利文献1描述了下式所代表的化合物：
Figure BDA00002264979900021
其中A1和A2各自独立地是氢原子、R1、R2、R3、R4或羟基等等；A3是氢原子、R12、R13、R14或R15等等；R1是苯基等等；R2是杂芳烃等等；R3是环烷基等等；R4和R15是烷基等等；R12是苯基等等；R13是杂芳烃等等；R14是环烷基等等；R15是烷基等等。
作为用于治疗与Src家族酪氨酸激酶有关的疾病的化合物，专利文献2描述了下式所代表的化合物：
Figure BDA00002264979900022
其中R1是氢原子或烷基等等；R2是氢原子或烷基等等；R3是氢原子、烷基、氢键供体或与氢键受体交联结合的腙。
专利文献3描述了作为蛋白激酶抑制剂的下式所代表的化合物：
Figure BDA00002264979900023
其中X是氧原子或硫原子；Y是氧原子，硫原子或-NR1-；R1是R，CO2R等等；R是氢原子或C1-6脂族基等等；R2是R，N(R)2等等；R3是R或CN等等；R4是R，N(R)2等等。
作为具有B-Raf激酶抑制活性并且可用于治疗癌症的化合物，专利文献4描述了下式所代表的化合物：
Figure BDA00002264979900031
其中R1是苯基或杂环等等；R2是氢原子或杂芳基等等；R4是氢原子或C1-8烷基等等；R5是氢原子或硝基等等；R7是C1-8烷基等等；X是氮原子等等；X'是硫原子或=C(R3)-等等，Z是硫原子或=C(R3)-，X'和Z中只有一个是=C(R3)-；
Figure BDA00002264979900032
是单键或双键，进一步描述了下式所代表的化合物∶
Figure BDA00002264979900033
其中每个符号如以上所定义。
作为具有IKB激酶β抑制活性并且可用于治疗疾病例如癌症等等的化合物，专利文献5描述了下式所代表的化合物：
其中X是硫原子等等；R1是氢原子或C1-10烷基等等；R2是氢原子或C5-20杂芳基等等；R3是氢原子或C1-10烷基等等；R4和R6各自是氢原子或C1-5烷基等等；R6是氢原子或C1-5烷基等等；
Figure BDA00002264979900042
是单键或双键，进一步描述了下式所代表的化合物∶
Figure BDA00002264979900043
其中每个符号如以上所定义。
作为对Tie2受体酪氨酸激酶具有抑制活性并且对疾病状态(例如癌症等等)具有治疗价值的化合物，专利文献6描述了下式所代表的化合物：
Figure BDA00002264979900044
其中A与其键合的碳原子一起形成稠合的5元杂芳基环，其中上述杂芳基环含有1或2个选自O、N和S的杂原子；包含G的5元环在相对于桥头碳(在式中用#标明)的间位与由A形成的环键合；G选自O，S和NR5；Z是N等等；Q1是芳基，杂芳基等等；R1是氢原子或卤素原子等等；R2是氢原子或氨基等等；R3如R4和R6的独立定义，条件是：当R3不是氢并且与A的氮原子键合时，R3不是卤素；R5如R4和R6的独立定义，条件是：R5不是卤素；R4和R6相同或不同，并且各自是氢，卤素，三氟甲基，三氟甲氧基，氰基等等。
作为有效治疗至少部分地由CDC7、PKA和/或Akt介导的细胞增殖病症的化合物，专利文献7描述了下式所代表的化合物：
其中环A是含有5或6个环原子的含氮杂芳基，1-4个环原子是氮原子；n是选自0或1的整数；m是等于0、1或2的整数；R是氢原子，羟基等等；R1是卤素或氰基等等；R2和R4各自独立地是氢，环烷基等等；R3是氢原子或C1-C5烷基等等；Q是-C(X')NR6-等等，其中X'选自氧和硫，R6是氢，C1-C3烷基，C1-C3取代的烷基等等，或R6与Q、Q键合的碳原子、R4或R4键合的碳原子一起形成杂环基或取代的杂环基等等。
作为有效预防和/或治疗炎症性疾病的化合物，专利文献8描述了下式所代表的化合物：
Figure BDA00002264979900052
其中A1是任选具有取代基的含氮杂芳基；A2是任选具有取代基的芳基或任选具有取代基的环烷基；R1和R2各自独立地是任选具有取代基的低级烷基、任选具有取代基的酰基、任选具有取代基的酰氧基等等；m和n各自是0-2的整数；Q1、Q2、Q3和Q4各自选自C，CH，CH2，C=O，O，N和NH，Q1至Q4中的一或两个是N或NH；
Figure BDA00002264979900053
是双键或单键。
作为具有cGMP特异性磷酸二酯酶抑制作用等的药物，专利文献9描述了下式所代表的化合物：
Figure BDA00002264979900061
其中R1是氢原子或C1-6烷基；R2是任选取代的C3-8环烷基，任选取代的苯基等等；R3是含有1至4个任选被取代的N、O或S的饱和或不饱和杂环基等等；R4是氢原子，C1-6烷基，羟基，C1-6烷氧基，卤素，C1-6卤代烷基，硝基或氰基；R5是氰基，任选取代的苯基，含有1至4个任选被取代的N、O或S的饱和或不饱和杂环基等等。
[文献列表]
[专利文件]
专利文献1∶US2009/0030196
专利文献2∶WO02/057271
专利文献3∶US2003/0096813
专利文献4∶WO2009/059272
专利文献5∶WO2007/102679
专利文献6∶WO2004/013141
专利文献7∶WO2005/095386
专利文献8∶JP-A-2002-105081
专利文献9∶WO02/026745
[非专利文献]
非专利文献1∶EMBO J.1999,18(20),p.5703-5713
非专利文献2∶J Cell Physiol.2002,190(3),p.287-296
非专利文献3∶Oncogene.2008,27(24),p.3475-3482
非专利文献4∶Neoplasia.2008,10(9),p.920-931
非专利文献5∶Cancer Res.2004,64(19),p.7110-7116
非专利文献6∶J Biol Chem.2007,282(1),p.208-215
发明内容
本发明解决的问题
预期在效果表达、药物动力学、溶解性、与其它药学产品的相互作用、安全性和稳定性方面优越的Cdc7抑制剂显示优良的治疗效果。因此，本发明的目的是提供具有Cdc7抑制活性和充分符合药物产品要求的低毒性化合物。
解决问题的手段
本发明人已经发现，下列式(I)所代表的化合物具有优良的Cdc7抑制作用，并且进行进一步的研究，完成了本发明。相应地，本发明涉及下列内容。
[1]下式代表的化合物∶
Figure BDA00002264979900071
其中
X和Y中的一个是硫原子，另一个是CH
R1是任选被卤素原子取代的C1-6烷基，
R2是取代基，
或其盐。
[2]上述[1]的化合物，其中X是硫原子；和
Y是CH，或其盐。
[3]上述[1]的化合物，其中R2是任选具有取代基的烃基团，
任选具有取代基的杂环基，或任选具有取代基的非芳香杂环-羰基，或其盐。
[4]上述[1]的化合物，其中R2是
(1)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷基：
(a)任选被1至3个选自下列的取代基取代的非芳香杂环基：
(i)卤素原子，
(ii)羟基，
(iii)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷基：
(aa)卤素原子，
(bb)羟基，
(cc)C1-6烷氧基，和
(dd)任选被1至3个C1-6烷基取代的C6-14芳基，
(iv)C1-6烷氧基，
(v)任选被1至3个卤素原子取代的C6-14芳基，
(vi)C6-14芳氧基，
(vii)C1-6烷氧基-羰基，
(viii)C1-6烷基-羰基，
(ix)氰基，
(x)C6-14芳基磺酰基，
(xi)羧基，
(xii)任选被C1-6烷基单或二取代的氨基，
(xiii)任选被氧代基取代的非芳香杂环基，和
(xiv)氧代基，
(b)C1-6烷氧基，
(c)任选被选自下列的取代基单或二取代的氨基：
(i)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷基：
(aa)任选被1至3个C1-6烷氧基取代的C6-14芳基，
(bb)C1-6烷氧基-羰基，
(cc)芳香杂环基，
(dd)任选被芳香杂环基取代的C3-8环烷基，和
(ee)羟基，
(ii)任选被1至3个C7-13芳烷基取代的非芳香杂环基，
(iii)任选被1至3个C1-6烷氧基取代的C6-14芳基，和
(iv)C3-8环烷基，
(d)5-或6-元芳香杂环基，
(e)C6-14芳基，和
(f)任选被氨基取代的C3-8环烷基；
(2)任选被1至3个卤素原子取代的C6-14芳基；
(3)任选被1至3个选自下列的取代基取代的非芳香杂环基：
(a)卤素原子，
(b)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷基：
(i)羟基，
(ii)C1-6烷氧基-羰基，和
(iii)氨基甲酰基，
(c)C6-14芳氧基，
(d)C1-6烷氧基-羰基，
(e)C1-6烷基-羰基，
(f)任选被C1-6烷基磺酰基取代的C6-14芳基，
(g)任选被1至3个卤素原子取代的C7-13芳烷基，
(h)羟基，
(i)氨基甲酰基，和
(j)非芳香杂环基；
(4)任选被1至3个C6-14芳基取代的C2-6烯基；
(5)5-或6-元芳香杂环基；
(6)非芳香杂环-羰基；或
(7)任选被氨基取代的C3-8环烷基，或其盐。
[5]上述[1]的化合物，其中R2是
(1)任选被1至3个卤素原子取代的4至6元非芳香杂环-C1-6烷基；
(2)任选被1至3个卤素原子取代的C6-14芳基；或
(3)任选被1至3个选自下列的取代基取代的非芳香杂环基：
(a)卤素原子，和
(b)C1-6烷基，
或其盐。
[6]上述[4]的化合物，其中X是硫原子；
Y是CH；和
R1是C1-6烷基，
或其盐。
[7]上述[1]的化合物，其中R1是C1-6烷基，或其盐。
[8]6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮，或其盐。
[9]6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-哌啶-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮，或其盐。
[10]2-(7-氮杂双环[2.2.1]庚-1-基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮，或其盐。
[11]6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-1,2,3,6-四氢吡啶-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮，或其盐。
[12]2-[(2S)-哌啶-2-基]-6-[5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮，或其盐。
[13]2-[(2S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮，或其盐。
[14]包含上述[1]的化合物或其盐的药物。
[15]上述[14]的药物，其是细胞***周期7(cdc7)抑制剂。
[16]上述[14]的药物，其是预防或治疗癌症的药剂。
[17]在哺乳动物中抑制细胞***周期7的方法，该方法包括：给予哺乳动物有效量的上述[1]的化合物或其盐。
[18]预防或治疗哺乳动物的癌症的方法，该方法包括：给予哺乳动物有效量的上述[1]的化合物或其盐。
[19]上述[1]的化合物或其盐用于制备细胞***周期7抑制剂的用途。
[20]上述[1]的化合物或其盐用于制备预防或治疗癌症的药物的用途。
本发明的效果
本发明的化合物是低毒性的化合物，具有强烈的Cdc7抑制作用，且是有用的，因为其提供预防或治疗癌症的药物、癌症生长抑制剂或癌症转移抑制剂。
发明详述
下面详细说明式(I)中的每个符号的定义。
除非另作说明，否则，本说明书中的“卤素原子”是指氟原子、氯原子、溴原子或碘原子。
在本说明书中，“C1-6烷基(基团)”的实例包括甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，异丁基，仲丁基，叔丁基，戊基，异戊基，新戊基，1-乙基丙基，己基，异己基，1,1-二甲基丁基，2,2-二甲基丁基，3,3-二甲基丁基和2-乙基丁基。
在本说明书中，“C6-14芳基(基团)”的实例包括苯基，萘基，蒽基，菲基，苊基(acenaphthylenyl)和联苯基。
在本说明书中，“C2-6烯基(基团)”的实例包括乙烯基，1-丙烯基，2-丙烯基，2-甲基-1-丙烯基，1-丁烯基，2-丁烯基，3-丁烯基，3-甲基-2-丁烯基，1-戊烯基，2-戊烯基，3-戊烯基，4-戊烯基，4-甲基-3-戊烯基，1-己烯基，3-己烯基和5-己烯基。
在本说明书中，“C2-6炔基(基团)”的实例包括乙炔基，1-丙炔基，2-丙炔基，1-丁炔基，2-丁炔基，3-丁炔基，1-戊炔基，2-戊炔基，3-戊炔基，4-戊炔基，1,1-二甲基丙-2-炔-1-基，1-己炔基，2-己炔基，3-己炔基，4-己炔基和5-己炔基。
在本说明书中，“C1-6烷氧基(基团)”的实例包括甲氧基，乙氧基，丙氧基，异丙氧基，丁氧基，异丁氧基，仲丁氧基，叔丁氧基，戊氧基，异戊氧基和己氧基。
在本说明书中，“C1-6烷基-羰基(基团)”的实例包括乙酰基，乙基羰基，丙基羰基，异丙基羰基，丁基羰基，异丁基羰基，仲-丁基羰基，叔丁基羰基，戊基羰基和己基羰基。
在本说明书中，“C1-6烷氧基-羰基(基团)”的实例包括甲氧羰基，乙氧羰基，丙氧羰基，异丙氧羰基，丁氧羰基，异丁氧羰基和叔丁氧羰基。
在本说明书中，“C3-8环烷基(基团)”的实例包括环丙基，环丁基，环戊基，环己基，环庚基和环辛基。
在本说明书中，“C3-8环烷烃(基团)”的实例包括环丙烷，环丁烷，环戊烷，环己烷，环庚烷和环辛烷。
在本说明书中，“C3-6环烷烃(基团)”的实例包括环丙烷，环丁烷，环戊烷和环己烷。
在本说明书中，“C3-8环烯基(基团)”的实例包括环丙烯基(例如，2-环丙烯-1-基)，环丁烯基(例如，2-环丁烯-1-基)，环戊烯基(例如，2-环戊烯-1-基，3-环戊烯-1-基)和环己烯基(例如，2-环己烯-1-基，3-环己烯-1-基)。
在本说明书中，“C7-13芳烷基(基团)”的实例包括苄基，苯乙基和萘基甲基。
在本说明书中，“C4-10环二烯基(基团)”的实例包括环戊二烯基。
在本说明书中，“杂环基”的实例包括芳香杂环基和非芳香杂环基。
在本说明书中，“芳香杂环基”的实例包括4至7元(优选5或6元)单环芳香杂环基，作为环构成原子，除了碳原子以外，其还含有1至4个选自氧原子、硫原子(硫原子任选氧化)和氮原子的杂原子，和稠合的芳香杂环基。稠合的芳香杂环基的例子包括衍生自稠合环的基团，其中相应于4至7元单环芳香杂环基的环和1或2个选自包含1或2个氮原子的5或6元芳香杂环(例如，吡咯，咪唑，吡唑，吡嗪，吡啶，嘧啶)的环、包含一个硫原子的5元芳香杂环(例如，噻吩)和苯环稠合。
芳香杂环基的优选例子包括：
单环芳香杂环基，例如呋喃基(例如，2-呋喃基，3-呋喃基)，噻吩基(例如，2-噻吩基，3-噻吩基)，吡啶基(例如，2-吡啶基，3-吡啶基，4-吡啶基)，嘧啶基(例如，2-嘧啶基，4-嘧啶基，5-嘧啶基，6-嘧啶基)，哒嗪基(例如，3-哒嗪基，4-哒嗪基)，吡嗪基(例如，2-吡嗪基)，吡咯基(例如，1-吡咯基，2-吡咯基，3-吡咯基)，咪唑基(例如，1-咪唑基，2-咪唑基，4-咪唑基，5-咪唑基)，吡唑基(例如，1-吡唑基，3-吡唑基，4-吡唑基)，噻唑基(例如，2-噻唑基，4-噻唑基，5-噻唑基)，异噻唑基(例如，3-异噻唑基，4-异噻唑基，5-异噻唑基)，
Figure BDA00002264979900121
唑基(例如，2-
Figure BDA00002264979900122
唑基，4-
Figure BDA00002264979900123
唑基，5-唑基)，异
Figure BDA00002264979900125
唑基(例如，3-异
Figure BDA00002264979900126
唑基，4-异
Figure BDA00002264979900127
唑基，5-异唑基)，
Figure BDA00002264979900129
二唑基(例如，1,2,4-
Figure BDA000022649799001210
二唑-5-基，1,3,4-
Figure BDA000022649799001211
二唑-2-基)，噻二唑基(例如，1,3,4-噻二唑-2-基)，***基(例如，1,2,4-***-1-基，1,2,4-***-3-基，1,2,3-***-1-基，1,2,3-***-2-基，1,2,3-***-4-基)，四唑基(例如，四唑-1-基，四唑-5-基)，三嗪基(例如，1,2,4-三嗪-1-基，1,2,4-三嗪-3-基)等等；和
稠合的芳香杂环基，例如喹啉基(例如，2-喹啉基，3-喹啉基，4-喹啉基，6-喹啉基)，异喹啉基(例如，3-异喹啉基)，喹唑啉基(例如，2-喹唑啉基，4-喹唑啉基)，喹喔啉基(例如，2-喹喔啉基，6-喹喔啉基)，苯并呋喃基(例如，2-苯并呋喃基，3-苯并呋喃基)，苯并噻吩基(例如，2-苯并噻吩基，3-苯并噻吩基)，苯并
Figure BDA000022649799001212
唑基(例如，2-苯并
Figure BDA000022649799001213
唑基)，苯并异
Figure BDA000022649799001214
唑基(例如，7-苯并异
Figure BDA000022649799001215
唑基)，苯并噻唑基(例如，2-苯并噻唑基)，苯并咪唑基(例如，苯并咪唑-1-基，苯并咪唑-2-基，苯并咪唑-5-基)，苯并***基(例如，1H-1,2,3-苯并***-5-基)，吲哚基(例如，吲哚-1-基，吲哚-2-基，吲哚-3-基，吲哚-5-基)，吲唑基(例如，1H-吲唑-3-基)，吡咯并吡嗪基(例如，1H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基，1H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-6-基)，咪唑并吡啶基(例如，1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基，1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基，2H-咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)，咪唑并吡嗪基(例如，1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-2-基)，吡唑并吡啶基(例如，1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-基)，吡唑并噻吩基(例如，2H-吡唑并[3,4-b]噻吩-2-基)，吡唑并三嗪基(例如，吡唑并[5,1-c][1,2,4]三嗪-3-基)等等。
在本说明书中，“非芳香杂环基”的实例包括4至7元(优选4至6元)单环非芳香杂环基，作为环构成原子，除了碳原子以外，其还含有1至4个选自氧原子、硫原子(硫原子任选氧化)和氮原子的杂原子，和稠合的非芳香杂环基。稠合的非芳香杂环基的例子包括衍生自稠合环的基团，其中相应于4至7元单环非芳香杂环基的环和1或2个选自包含1或2个氮原子的5或6元芳香杂环(例如，吡咯，咪唑，吡唑，吡嗪，吡啶，嘧啶)的环、包含一个硫原子的5元芳香杂环(例如，噻吩)和苯环稠合，和其中上述基团部分饱和的基团。
非芳香杂环基的优选例子包括单环非芳香杂环基，例如氧杂环丁烷基(例如，2-氧杂环丁烷基，3-氧杂环丁烷基)，吡咯烷基(例如，吡咯烷-1-基，吡咯烷-2-基)，哌啶基(例如，哌啶子基，哌啶-2-基，哌啶-3-基，哌啶-4-基)，吗啉基(例如，吗啉代(morpholino))，硫吗啉基(例如，硫吗啉代)，哌嗪基(例如，哌嗪-1-基，哌嗪-2-基，哌嗪-3-基)，六亚甲基亚胺基(例如，六亚甲基亚胺-1-基)，
Figure BDA00002264979900131
唑烷基(例如，
Figure BDA00002264979900132
唑烷-2-基，
Figure BDA00002264979900133
唑烷-5-基)，噻唑烷基(例如，噻唑烷-2-基)，咪唑烷基(例如，咪唑烷-2-基，咪唑烷-3-基)，
Figure BDA00002264979900134
唑啉基(例如，
Figure BDA00002264979900135
唑啉-2-基)，噻唑啉基(例如，噻唑啉-2-基)，咪唑啉基(例如，咪唑啉-2-基，咪唑啉-3-基)，二氧杂环戊烯基(例如，1,3-二氧杂环戊烯-4-基)，二氧杂环戊烷基(例如，1,3-二氧杂环戊烷-4-基)，二氢
Figure BDA00002264979900136
二唑基(例如，4,5-二氢-1,2,4-二唑-3-基)，2-硫代-1,3-
Figure BDA00002264979900138
唑烷-5-基，吡喃基(例如，4-吡喃基)，四氢吡喃基(例如，2-四氢吡喃基，3-四氢吡喃基，4-四氢吡喃基)，噻喃基(例如，4-噻喃基)，四氢噻喃基(例如，2-四氢噻喃基，3-四氢噻喃基，4-四氢噻喃基)，1-氧代四氢噻喃基(例如，1-氧代四氢噻喃-4-基)，1,1-二氧代四氢噻喃基(例如，1,1-二氧代四氢噻喃-4-基)，四氢呋喃基(例如，四氢呋喃-3-基，四氢呋喃-2-基)，吡唑烷基(例如，吡唑烷-1-基，吡唑烷-3-基)，吡唑啉基(例如，吡唑啉-1-基)，四氢嘧啶基(例如，四氢嘧啶-1-基)，二氢***基(例如，2,3-二氢-1H-1,2,3-***-1-基)，四氢***基(例如，2,3,4,5-四氢-1H-1,2,3-***-1-基)，氮杂环庚烷基(例如，氮杂环庚烷-3-基，氮杂环庚烷-2-基)，氮杂环丁烷基(例如，氮杂环丁烷-1-基，氮杂环丁烷-2-基)，二氢吡啶基(例如，3,6-二氢吡啶-1-基，3,6-二氢吡啶-2-基)，四氢吡啶基(例如，1,2,3,6-四氢吡啶-2-基)，氧代四氢嘧啶基(例如，氧代四氢嘧啶-1-基)等等；
稠合的非芳香杂环基，例如二氢吲哚基(例如，2,3-二氢-1H-吲哚-1-基)，二氢异吲哚基(例如，1,3-二氢-2H-异吲哚-2-基)，二氢苯并呋喃基(例如，2,3-二氢-1-苯并呋喃-5-基)，二氢苯并二氧杂环己二烯基(例如，2,3-二氢-1,4-苯并二氧杂环己二烯基)，二氢苯并二氧杂环庚三烯基(例如，3,4-二氢-2H-1,5-苯并二氧杂环庚三烯基)，四氢苯并呋喃基(例如，4,5,6,7-四氢-1-苯并呋喃-3-基)，色烯基(例如，4H-色烯-2-基，2H-色烯-3-基)，二氢喹啉基(例如，1,2-二氢喹啉-4-基)，四氢喹啉基(例如，1,2,3,4-四氢喹啉-4-基)，二氢异喹啉基(例如，1,2-二氢异喹啉-4-基，3,4-二氢异喹啉-2-基)，四氢异喹啉基(例如，1,2,3,4-四氢异喹啉-4-基)，二氢酞嗪基(例如，1,4-二氢酞嗪-4-基)，八氢吲嗪基(例如，八氢吲嗪-3-基，八氢吲嗪-5-基)，八氢喹嗪基(例如，八氢-2H-喹嗪-4-基)，八氢吡咯并吡嗪基(例如，八氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-3-基)，八氢吲哚基(例如，八氢-1H-吲哚-2-基)，八氢环戊二烯并[b]吡咯基，十氢异喹啉基(例如，十氢异喹啉-1-基)等等。
另外，在本说明书中，“非芳香杂环基”可以是桥联的非芳香杂环基，或螺环非芳香杂环基。
桥联非芳香杂环基的例子包括：氮杂双环[2.1.1]己基(例如，2-氮杂双环[2.1.1]己-1-基)，氮杂双环[3.1.0]己基(例如，3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基，3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基，2-氮杂双环[3.1.0]己-3-基，2-氮杂双环[3.1.0]己-1-基)，氮杂双环[2.2.1]庚基(例如，2-氮杂双环[2.2.1]庚-3-基，7-氮杂双环[2.2.1]庚-1-基)，氮杂双环[2.2.2]辛基(例如，2-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基，1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)，氮杂双环[2.2.1]己基(例如，2-氮杂双环[2.2.1]己-1-基)，氮杂双环[4.1.0]庚基(例如，3-氮杂双环[4.1.0]庚-4-基)等等。
螺环非芳香杂环基的例子包括：1,4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬-7-基，四氢-5H-螺[1,3-
Figure BDA00002264979900141
唑并[3,4-a]吡嗪-1,4'-哌啶]-1'-基，4-氮杂螺[2.4]庚-5-基等等。
当化合物(I)具有互变异构体时，每个异构体也包括在化合物(I)的范围内。
例如，化合物(I)，其中下式的部分结构
Figure BDA00002264979900151
其中每个符号如以上所定义，是下式
Figure BDA00002264979900152
其中每个符号如以上所定义，也包括在化合物(I)范围内。
另外，例如，化合物(I)，其中下式的部分结构
Figure BDA00002264979900153
其中每个符号如以上所定义，是下式
其中每个符号如以上所定义，也包括在化合物(I)范围内。
X和Y中的一个是硫原子，另一个是CH。
优选，X是硫原子，Y是CH。
R1是任选被卤素原子取代的C1-6烷基。
优选，R1是甲基，乙基，三氟甲基等等。
更优选，R1是甲基，三氟甲基等等。
更加优选，R1是甲基等等。
R2是取代基。
R2的“取代基”的例子包括任选具有取代基的烃基团、任选具有取代基的杂环基和下述取代基组A中的(5)-(30)的基团。
上述“任选具有取代基的烃基团”的“烃基团”的例子包括：C1-6烷基，C2-6烯基，C2-6炔基，C3-8环烷基，C3-8环烯基，C4-10环二烯基和C6-14芳基。
上述C3-8环烷基、C3-8环烯基和C4-10环二烯基可以各自与苯环稠合。稠环基团的例子包括茚满基，二氢萘基，四氢萘基和芴基。另外，桥联烃基团，例如降冰片烷基、金刚烷基等等，也包括在上述烃基团范围内。
上述“任选具有取代基的烃基团”的烃基团优选是C1-6烷基(例如，甲基，乙基)，C3-8环烷基(尤其是环戊基，环己基)，C2-6烯基(例如，乙烯基)，或C6-14芳基(例如，苯基)。尤其优选是C1-6烷基(例如，甲基，乙基)和C6-14芳基(例如，苯基)。
作为上述“烃基团”的例子的C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基在可取代的位置可以具有1至5个(优选1至3个)取代基。
取代基的例子包括下列取代基组A。当取代基的数目不小于2时，各取代基可以相同或不同。
(取代基组A)
(1)任选被氨基取代的C3-8环烷基(例如，环丙基，环戊基，环己基)；
(2)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C6-14芳基(例如，苯基，萘基)：
(a)任选被1至3个卤素原子取代的C1-6烷基，
(b)羟基，
(c)任选被1至3个卤素原子取代的C1-6烷氧基，
(d)卤素原子(例如，氟原子)，和
(e)C1-6烷基磺酰基(例如，甲基磺酰基)；
(3)任选被1至3个选自下列的取代基取代的芳香杂环基(例如，噻吩基，呋喃基，吡啶基，吡唑基，咪唑基，四唑基，
Figure BDA00002264979900161
唑基，噻唑基，
Figure BDA00002264979900162
二唑基，噻二唑基，吡咯基)：
(a)任选被1至3个卤素原子取代的C1-6烷基，
(b)羟基，
(c)任选被1至3个卤素原子取代的C1-6烷氧基，和
(d)卤素原子；
(4)任选被1至3个选自下列的取代基取代的非芳香杂环基(例如，四氢呋喃基，吗啉基，硫吗啉基，哌啶基，吡咯烷基，哌嗪基，氮杂环丁烷基，3,4-二氢异喹啉基，四氢异喹啉基，二氢吡啶基，四氢吡啶基，1,3-二氢-2H-异吲哚基，1,4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬-7-基，四氢-5H-螺[1,3-
Figure BDA00002264979900171
唑并[3,4-a]吡嗪-1,4'-哌啶]-1'-基，氮杂双环[3.1.0]己-3-基)：
(a)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷基(例如，甲基)：
(i)卤素原子(例如，氟原子)，
(ii)羟基，和
(iii)任选被下列取代的C6-14芳基(例如，苯基)：
(aa)卤素原子(例如，氟原子)，
(bb)羟基，
(cc)C1-6烷氧基(例如，甲氧基)，和
(dd)1至3个C1-6烷基(例如，甲基)，
(b)羟基，
(c)任选被1至3个卤素原子取代的C1-6烷氧基(例如，甲氧基)，
(d)卤素原子(例如，氟原子)，
(e)氧代，
(f)任选被1至3个卤素原子(例如，氟原子)取代的C6-14芳基(例如，苯基)，
(g)C6-14芳氧基(例如，苯氧基)，
(h)C1-6烷氧基-羰基(例如，乙氧羰基)或C1-6烷基-羰基(例如，乙酰基)，
(i)氰基，
(j)C6-14芳基磺酰基(例如，苯磺酰基)，
(k)羧基，
(l)任选被C1-6烷基(例如，甲基)单或二取代的氨基，和
(m)任选被氧代取代的非芳香杂环基(例如，吡咯烷基，四氢嘧啶基)；
(5)任选被选自下列的取代基单或二取代的氨基：
(a)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷基(例如，甲基，乙基，异丙基)：
(i)卤素原子，
(ii)任选被1至3个C1-6烷氧基(例如，甲氧基)取代的C6-14芳基(例如，苯基)，
(iii)C1-6烷氧基-羰基(例如，乙氧羰基)，
(iv)芳香杂环基(例如，吡啶基)，
(v)任选被1至3个芳香杂环基(例如，噻吩基)取代的C3-8环烷基(例如，环丙基)，和
(vi)羟基，
(b)任选被1至3个卤素原子取代的C1-6烷基-羰基，
(c)任选被1至3个卤素原子取代的C1-6烷氧基-羰基，
(d)任选被1至3个卤素原子取代的C1-6烷基磺酰基(例如，甲基磺酰基)，
(e)任选被C1-6烷基单或二取代的氨基甲酰基，其中C1-6烷基任选被1至3个卤素原子取代，
(f)芳香杂环基(例如，噻吩基，呋喃基，吡啶基，吡唑基，咪唑基，四唑基，
Figure BDA00002264979900181
唑基，噻唑基，
Figure BDA00002264979900182
二唑基，噻二唑基)，
(g)任选被1至3个C7-13芳烷基(例如，苄基)取代的非芳香杂环基(例如，吡咯烷基)，
(h)任选被1至3个C1-6烷氧基(例如，甲氧基)取代的C6-14芳基(例如，苯基)，和
(i)C3-8环烷基(例如，环戊基)；
(6)任选被1至3个卤素原子取代的C1-6烷基-羰基；
(7)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷氧基-羰基(例如，叔丁氧羰基)：
(a)卤素原子，
(b)C1-6烷氧基，
(c)C6-14芳基(例如，苯基)，和
(d)杂环基(例如，四氢呋喃基)；
(8)任选被1至3个卤素原子取代的C1-6烷基磺酰基(例如，甲基磺酰基，乙磺酰基，异丙基磺酰基)；
(9)任选被C1-6烷基单或二取代的氨基甲酰基，其中C1-6烷基任选被1至3个卤素原子取代；
(10)任选被C1-6烷基单或二取代的硫代氨基甲酰基，其中C1-6烷基任选被1至3个卤素原子取代；
(11)任选被C1-6烷基单或二取代的氨磺酰基，其中C1-6烷基任选被1至3个卤素原子取代；
(12)羧基；
(13)羟基；
(14)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷氧基(例如，乙氧基)：
(a)卤素原子，
(b)羧基，
(c)C1-6烷氧基，
(d)任选被1至3个C6-14芳基(例如，苯基)取代的C1-6烷氧基-羰基，
(e)任选被选自C1-6烷基和C1-6烷氧基-羰基的取代基单或二取代的氨基，
(f)杂环基(例如，四氢呋喃基)，和
(g)C3-8环烷基；
(15)任选被1至3个卤素原子取代的C2-6链烯氧基(例如，乙烯氧基)；
(16)C7-13芳烷氧基(例如，苄氧基)；
(17)C6-14芳氧基(例如，苯氧基，萘氧基)；
(18)C1-6烷基-羰基氧基(例如，乙酰氧基，叔丁基羰基氧基)；
(19)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C6-14芳基-羰基(例如，苯甲酰基)：
(a)卤素原子，和
(b)任选被1至3个卤素原子取代的C1-6烷基；
(20)任选被1至3个选自C1-6烷基的取代基取代的芳香杂环基羰基(例如，吡唑基羰基，吡嗪基羰基，异
Figure BDA00002264979900191
唑基羰基，吡啶基羰基，噻唑基羰基)，其中C1-6烷基任选被1至3个卤素原子取代；
(21)任选被1至3个选自C1-6烷基的取代基取代的非芳香杂环基羰基(例如，吡咯烷基羰基，吗啉基羰基)，其中C1-6烷基任选被1至3个卤素原子取代；
(22)C7-13芳烷氧基-羰基(例如，苄氧羰基)；
(23)巯基；
(24)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷硫基(例如，甲硫基，乙硫基)：
(a)卤素原子，和
(b)C1-6烷氧基-羰基；
(25)C7-13芳烷基硫基(例如，苯甲硫基)；
(26)C6-14芳硫基(例如，苯硫基，萘硫基)，
(27)氰基；
(28)硝基；
(29)卤素原子(例如，氯原子)；
(30)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C3-10环烷基氧基(例如，环丙基氧基，环戊基氧基)：
(a)卤素原子(例如，氟原子)，和
(b)C1-6烷氧基(例如，甲氧基)；和
(31)氧代。
作为上述“烃基团”例子的C3-10环烷基、C3-10环烯基、C4-10环二烯基和C6-14芳基在可取代的位置任选具有1至5个(优选1至3个)取代基。
取代基的例子包括下列取代基组B。当取代基的数目不小于2时，各取代基可以相同或不同。
(取代基组B)
(1)上述取代基组A所举例的基团；
(2)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷基：
(a)卤素原子，
(b)羧基，
(c)羟基，
(d)C1-6烷氧基-羰基，
(e)C1-6烷氧基，
(f)任选被C1-6烷基单或二取代的氨基，和
(g)氨基甲酰基；
(3)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C2-6烯基(例如，乙烯基，1-丙烯基)：
(a)卤素原子，
(b)羧基，
(c)羟基，
(d)C1-6烷氧基-羰基，
(e)C1-6烷氧基，和
(f)任选被C1-6烷基单或二取代的氨基；和
(4)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C7-13芳烷基(例如，苄基)：
(a)任选被1至3个卤素原子取代的C1-6烷基，
(b)羟基，
(c)C1-6烷氧基，和
(d)卤素原子。
上述“任选具有取代基的烃基团”的取代基的优选例子包括：
(1)卤素原子(例如，氯原子)，
(2)C1-6烷氧基(例如，甲氧基，乙氧基)，
(3)任选被1至4个选自下列的取代基取代的非芳香杂环基(例如，吡咯烷基，哌啶基，吗啉基，硫吗啉基，哌嗪基，氮杂环丁烷基，四氢异喹啉基，二氢吡啶基，四氢吡啶基，四氢呋喃基，1,3-二氢-2H-异吲哚基，1,4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬-7-基，四氢-5H-螺[1,3-
Figure BDA00002264979900211
唑并[3,4-a]吡嗪-1,4'-哌啶]-1'-基，氮杂双环[3.1.0]己-3-基)：
(a)卤素原子(例如，氟原子)，
(b)羟基，
(c)任选被1至3个选自卤素原子(例如，氟原子)和羟基的取代基取代的C1-6烷基(例如，甲基)，
(d)C1-6烷氧基(例如，甲氧基)，
(e)任选被1至3个卤素原子(例如，氟原子)取代的C6-14芳基(例如，苯基)，
(f)C6-14芳氧基(例如，苯氧基)，
(g)C1-6烷氧基-羰基(例如，乙氧羰基)，
(h)C1-6烷基-羰基(例如，乙酰基)，
(i)氰基，
(j)C6-14芳基磺酰基(例如，苯磺酰基)，
(k)羧基，
(l)任选被C1-6烷基(例如，甲基)单或二取代的氨基，
(m)任选被氧代取代的非芳香杂环基(例如，吡咯烷基，四氢嘧啶基)，和
(n)氧代，
(4)任选被选自下列的取代基单或二取代的氨基：
(a)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷基(例如，甲基，乙基，异丙基)：
(i)任选被C1-6烷氧基(例如，甲氧基)取代的C6-14芳基(例如，苯基)，
(ii)C1-6烷氧基-羰基(例如，乙氧羰基)，
(iii)芳香杂环基(例如，吡啶基)，和
(iv)任选被1至3个芳香杂环基(例如，噻吩基)取代的C3-8环烷基(例如，环丙基)，
(b)任选被1至3个C7-13芳烷基(例如，苄基)取代的非芳香杂环基(例如，吡咯烷基)，和
(c)任选被1至3个C1-6烷氧基(例如，甲氧基)取代的C6-14芳基(例如，苯基)，
(5)氧代，和
(6)5或6元芳香杂环基(例如，咪唑基)。
上述“任选具有取代基的烃基团”的取代基的更优选例子包括：
(1)卤素原子(例如，氯原子)，
(2)任选被1至3个选自下列的取代基取代的4至6元非芳香杂环基(例如，吡咯烷基，哌啶基，吗啉基，哌嗪基，氮杂环丁烷基，四氢呋喃基，二氢吡啶基)：
(a)卤素原子(例如，氟原子)，
(b)羟基，
(c)任选被1至3个选自卤素原子(例如，氟原子)和羟基的取代基取代的C1-6烷基(例如，甲基)，
(d)C1-6烷氧基(例如，甲氧基)，和
(e)C6-14芳基(例如，苯基)，和
(3)C1-6烷氧基(例如，乙氧基)。
上述“任选具有取代基的烃基团”的取代基的尤其优选例子包括：
(1)卤素原子(例如，氯原子)，和
(2)任选被1至3个卤素原子(例如，氟原子，氯原子)取代的4至6元非芳香杂环基(例如，吡咯烷基，二氢吡啶基)。
上述“任选具有取代基的杂环基”的杂环基的优选例子包括非芳香杂环基。非芳香杂环基可以是单环非芳香杂环基或稠合的非芳香杂环基。
上述单环非芳香杂环基的优选例子包括4至7元单环非芳香杂环基(例如，吡咯烷基，吗啉基，哌啶基，哌嗪基，四氢呋喃基，四氢吡啶基，氮杂环丁烷基，氮杂环庚烷基，噻唑烷基)。
上述单环非芳香杂环基优选是5或6元单环非芳香杂环基(例如，吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，吗啉基)。5或6元单环非芳香杂环基更优选是吡咯烷基，哌啶基，吗啉基等等。5或6元单环非芳香杂环基的其它优选例子包括吡咯烷基，哌啶基和四氢吡啶基。
上述稠合的非芳香杂环基的优选例子包括8至10元稠合的非芳香杂环基(例如，八氢吲嗪基，八氢喹嗪基，八氢吡咯并吡嗪基，八氢吲哚基，八氢环戊二烯并[b]吡咯基，四氢喹啉基，四氢异喹啉基，十氢异喹啉基)。
上述非芳香杂环基可以是桥联的非芳香杂环基或螺环非芳香杂环基。
桥联非芳香杂环基的优选例子包括：氮杂双环[3.1.0]己烷基(例如，3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基，2-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)，氮杂双环[2.2.2]辛基(例如，2-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)，氮杂双环[2.2.1]庚基(例如，2-氮杂双环[2.2.1]庚-3-基，7-氮杂双环[2.2.1]庚-1-基)，氮杂双环[2.2.1]己烷基(例如，2-氮杂双环[2.2.1]己-1-基)，氮杂双环[2.2.2]辛基(例如，1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)和氮杂双环[2.1.1]己烷基(例如，2-氮杂双环[2.1.1]己-1-基)。桥联非芳香杂环基的更优选例子包括：氮杂双环[2.2.2]辛基(例如，2-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基，2-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)，氮杂双环[2.2.1]庚基(例如，2-氮杂双环[2.2.1]庚-3-基，2-氮杂双环[2.2.1]庚-1-基)等等。
螺环非芳香杂环基的优选例子包括：氮杂螺[2.4]庚基(4-氮杂螺[2.4]庚-5-基)等等。
上述“任选具有取代基的杂环基”的杂环基优选是4至7元单环非芳香杂环基(例如，吡咯烷基，哌啶基，吗啉基，氮杂环丁烷基，氮杂环庚烷基)，8至10元稠合的非芳香杂环基(例如，八氢吲哚满基(indolinyl))或桥联非芳香杂环基(例如，氮杂双环[3.1.0]己烷基，氮杂双环[2.2.1]庚基，氮杂双环[2.2.2]辛基)。
R2的“任选具有取代基的杂环基”的“杂环基”在可取代的位置可以具有1至5个(优选1至3个)取代基。
这种取代基的例子包括上述取代基组B所举例的基团。当取代基的数目是两个或多个时，各取代基可以相同或不同。
上述“任选具有取代基的杂环基”的取代基的优选例子包括：
(1)卤素原子(例如，氟原子)，
(2)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷基(例如，甲基，乙基)：
(a)羟基，
(b)C1-6烷氧基-羰基(例如，乙氧羰基，叔丁氧羰基)，和
(c)氨基甲酰基，
(3)C1-6烷氧基(例如，甲氧基)，
(4)C6-14芳基(例如，苯基)，
(5)C6-14芳氧基(例如，苯氧基)，
(6)C7-13芳烷氧基(例如，苄氧基)，
(7)C1-6烷氧基-羰基(例如，叔丁氧羰基)，
(8)任选被C1-6烷基磺酰基(例如，甲基磺酰基)取代的C6-14芳基(例如，苯基)，
(9)C1-6烷基-羰基(例如，乙酰基)，
(10)任选被1至3个卤素原子(例如，氟原子)取代的C7-13芳烷基(例如，苄基)，
(11)羟基，
(12)氨基甲酰基，和
(13)非芳香杂环基(例如，哌啶基)。
上述“任选具有取代基的杂环基”的取代基的更优选例子包括：
(1)卤素原子(例如，氟原子)，
(2)C6-14芳氧基(例如，苯氧基)，和
(3)C1-6烷基(例如，甲基)。
优选，R2是任选具有取代基的烃基团、任选具有取代基的杂环基或任选具有取代基的非芳香杂环-羰基。这些当中，优选任选具有取代基的烃基团或任选具有取代基的杂环基。上述“任选具有取代基的非芳香杂环-羰基”的例子包括上述取代基组A中(21)的基团。
更优选，R2是任选具有取代基的C1-6烷基(尤其是甲基，乙基，异丙基，异丁基)，任选具有取代基的C6-14芳基(尤其是苯基)或任选具有取代基的5或6元非芳香杂环基(尤其是吡咯烷基，吗啉基)。这些当中，优选
(1)任选被1至3个卤素原子取代的4至6元非芳香杂环-C1-6烷基；
(2)任选被1至3个卤素原子取代的C6-14芳基；或
(3)任选被1至3个选自下列的取代基取代的非芳香杂环基：
(a)卤素原子，和
(b)C1-6烷基。
R2的具体优选的例子包括
(1)任选具有取代基的C1-6烷基(尤其是甲基，乙基，异丙基，异丁基)，
(2)任选具有取代基的C6-14芳基(尤其是苯基)，
(3)任选具有取代基的非芳香杂环基(尤其是吡咯烷基，吗啉基，哌嗪基，哌啶基，四氢呋喃基，四氢吡啶基，四氢喹啉基，四氢异喹啉基，十氢异喹啉基，氮杂环丁烷基，氮杂环庚烷基，八氢吡咯并吡嗪基，八氢吲哚基，八氢环戊二烯并[b]吡咯基，噻唑烷基，氮杂双环[3.1.0]己烷基，氮杂双环[2.1.1]己烷基，氮杂双环[2.2.1]庚基，氮杂双环[4.1.0]庚基，氮杂双环[2.2.2]辛基，氮杂螺[2.4]庚基)，
(4)任选具有取代基的C2-6烯基(尤其是乙烯基)，
(5)任选具有取代基的5或6元芳香杂环基(尤其是吡啶基，吡唑基，噻唑基)，
(6)任选具有取代基的非芳香杂环-羰基(尤其是吡咯烷基羰基)，和
(7)任选具有取代基的C3-8环烷基(尤其是环戊基，环己基)。
R2的更具体优选的例子包括
(1)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷基(尤其是甲基，乙基，异丙基，异丁基)：
(a)任选被1至3个选自下列的取代基取代的非芳香杂环基(尤其是吡咯烷基，哌啶基，吗啉基，硫吗啉基，哌嗪基，氮杂环丁烷基，四氢异喹啉基，四氢吡啶基，1,3-二氢-2H-异吲哚基，1,4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬-7-基，四氢-5H-螺[1,3-
Figure BDA00002264979900251
唑并[3,4-a]吡嗪-1,4'-哌啶]-1'-基，氮杂双环[3.1.0]己烷基)：
(i)卤素原子(尤其是氟原子)，
(ii)羟基，
(iii)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷基(尤其是甲基)：
(aa)卤素原子(尤其是氟原子)，
(bb)羟基，
(cc)C1-6烷氧基(尤其是甲氧基)，和
(dd)任选被1至3个C1-6烷基(尤其是甲基)取代的C6-14芳基(尤其是苯基)，
(iv)C1-6烷氧基(尤其是甲氧基)，
(v)任选被1至3个卤素原子(尤其是氟原子)取代的C6-14芳基(尤其是苯基)，
(vi)C6-14芳氧基(尤其是苯氧基)，
(vii)C1-6烷氧基-羰基(尤其是乙氧羰基)，
(viii)C1-6烷基-羰基(尤其是乙酰基)，
(ix)氰基，
(x)C6-14芳基磺酰基(尤其是苯磺酰基)，
(xi)羧基，
(xii)任选被C1-6烷基(尤其是甲基)单或二取代的氨基，
(xiii)任选被氧代取代的非芳香杂环基(尤其是吡咯烷基，四氢嘧啶基)，和
(xiv)氧代，
(b)C1-6烷氧基(尤其是乙氧基)，
(c)任选被选自下列的取代基单或二取代的氨基：
(i)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷基(尤其是，甲基，乙基，异丙基)：
(aa)任选被1至3个C1-6烷氧基(尤其是甲氧基)取代的C6-14芳基(尤其是苯基)，
(bb)C1-6烷氧基-羰基(尤其是乙氧羰基)，
(cc)芳香杂环基(尤其是吡啶基)，
(dd)任选被芳香杂环基(尤其是噻吩基)取代的C3-8环烷基(尤其是环丙基)，和
(ee)羟基，
(ii)任选被1至3个C7-13芳烷基(尤其是苄基)取代的非芳香杂环基(尤其是吡咯烷基)，
(iii)任选被1至3个C1-6烷氧基(尤其是甲氧基)取代的C6-14芳基(尤其是苯基)，和
(iv)C3-8环烷基(尤其是环戊基)，
(d)5或6元芳香杂环基(尤其是咪唑基，吡咯基)，
(e)C6-14芳基(尤其是苯基)，和
(f)任选被氨基取代的C3-8环烷基(尤其是环丙基，环戊基，环己基)，
(2)任选被1至3个卤素原子(尤其是氯原子)取代的C6-14芳基(尤其是苯基)，
(3)任选被1至3个选自下列的取代基取代的非芳香杂环基(尤其是吡咯烷基，吗啉基，哌嗪基，哌啶基，四氢呋喃基，四氢吡啶基，四氢喹啉基，四氢异喹啉基，十氢异喹啉基，氮杂环丁烷基，氮杂环庚烷基，八氢吡咯并吡嗪基，八氢吲哚基，八氢环戊二烯并[b]吡咯基，噻唑烷基，氮杂双环[3.1.0]己烷基，氮杂双环[2.1.1]己烷基，氮杂双环[2.2.1]庚基，氮杂双环[4.1.0]庚基，氮杂双环[2.2.2]辛基，氮杂螺[2.4]庚基)：
(a)卤素原子(尤其是氟原子)，
(b)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷基(尤其是甲基，丙基)：
(i)羟基，
(ii)C1-6烷氧基-羰基(尤其是乙氧羰基，叔丁氧羰基)，和
(iii)氨基甲酰基，
(c)C6-14芳氧基(尤其是苯氧基)，
(d)C1-6烷氧基-羰基(尤其是叔丁氧羰基)，
(e)C1-6烷基-羰基(尤其是乙酰基)，
(f)任选被C1-6烷基磺酰基(尤其是甲基磺酰基)取代的C6-14芳基(尤其是苯基)，
(g)任选被1至3个卤素原子(尤其是氟原子)取代的C7-13芳烷基(尤其是苄基)，
(h)羟基，
(i)氨基甲酰基，和
(j)非芳香杂环基(尤其是哌啶基)，
(4)任选被1至3个C6-14芳基(尤其是苯基)取代的C2-6烯基(尤其是乙烯基)，
(5)5或6元芳香杂环基(尤其是吡啶基，吡唑基，噻唑基)，
(6)非芳香杂环-羰基(尤其是吡咯烷基羰基)，和
(7)任选被氨基取代的C3-8环烷基(尤其是环戊基，环己基)。
R2的更具体优选的例子包括
(1)任选被1或2个C1-6烷基(尤其是甲基)取代的氨甲基，
(2)任选被C1-6烷基(尤其是甲基)取代的5或6元非芳香杂环基-甲基(尤其是吡咯烷基甲基，二氢吡啶基甲基)，或
(3)任选被1至3个卤素原子(尤其是氟原子)取代的非芳香杂环基(尤其是吡咯烷基，吗啉基，哌啶基，1,2,3,6-四氢吡啶基，氮杂环庚烷基，3-氮杂双环[3.1.0]己烷基，7-氮杂双环[2.2.1]庚基，2-氮杂双环[2.2.1]庚基，1-氮杂双环[2.2.2]辛基，2-氮杂双环[2.2.2]辛基)。
R2的其它具体优选的例子包括
(1)5或6元非芳香杂环基-甲基(尤其是吡咯烷基甲基)，或
(2)任选被1至3个卤素原子(尤其是氟原子)取代的非芳香杂环基(尤其是吡咯烷基，哌啶基，1,2,3,6-四氢吡啶基，7-氮杂双环[2.2.1]庚基，2-氮杂双环[2.2.1]庚基，1-氮杂双环[2.2.2]辛基)。
R2的其它更具体优选的例子包括
任选被1至3个卤素原子(尤其是氟原子)取代的非芳香杂环基(尤其是吡咯烷基，吗啉基，哌啶基，1,2,3,6-四氢吡啶基，氮杂环庚烷基，3-氮杂双环[3.1.0]己烷基，7-氮杂双环[2.2.1]庚基，2-氮杂双环[2.2.1]庚基，1-氮杂双环[2.2.2]辛基，2-氮杂双环[2.2.2]辛基)。这些当中，优选吡咯烷-2-基，哌啶-2-基，1,2,3,6-四氢吡啶-2-基，7-氮杂双环[2.2.1]庚-1-基，2-氮杂双环[2.2.1]庚-3-基或1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基，每个任选被1至3个卤素原子(尤其是氟原子)取代。
化合物(I)的优选例子包括下列化合物。
[化合物A-2]
化合物，其中
X是硫原子；
Y是CH；
R1是任选被卤素原子取代的C1-6烷基(尤其是甲基，乙基，异丙基，异丁基)；和
R2是
(1)任选具有取代基的C1-6烷基(尤其是甲基，乙基)，
(2)任选具有取代基的C6-14芳基(尤其是苯基)，
(3)任选具有取代基的非芳香杂环基(尤其是吡咯烷基，吗啉基，哌嗪基，哌啶基，四氢呋喃基，四氢吡啶基，四氢喹啉基，四氢异喹啉基，十氢异喹啉基，氮杂环丁烷基，氮杂环庚烷基，八氢吡咯并吡嗪基，八氢吲哚基，八氢环戊二烯并[b]吡咯基，噻唑烷基，氮杂双环[3.1.0]己烷基，氮杂双环[2.1.1]己烷基，氮杂双环[2.2.1]庚基，氮杂双环[4.1.0]庚基，氮杂双环[2.2.2]辛基，氮杂螺[2.4]庚基)，
(4)任选具有取代基的C2-6烯基(尤其是乙烯基)，
(5)任选具有取代基的5或6元芳香杂环基(尤其是吡啶基，吡唑基，噻唑基)，
(6)任选具有取代基的非芳香杂环-羰基(尤其是吡咯烷基羰基)，或
(7)任选具有取代基的C3-8环烷基(尤其是环戊基，环己基)，
或其盐。
[化合物A-1]
化合物，其中
X是硫原子；
Y是CH；
R1是C1-6烷基(尤其是甲基)；和
R2是
(1)任选具有取代基的C1-6烷基(尤其是甲基，乙基)，
(2)任选具有取代基的C6-14芳基(尤其是苯基)，
(3)任选具有取代基的非芳香杂环基(尤其是吡咯烷基，吗啉基，哌啶基，四氢呋喃基，氮杂环丁烷基，氮杂环庚烷基，八氢吡咯并吡嗪基，八氢吲哚基，噻唑烷基，氮杂双环[3.1.0]己-2-基，氮杂双环[2.2.1]庚-3-基，氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)，
(4)任选具有取代基的C2-6烯基(尤其是乙烯基)，或
(5)任选具有取代基的5或6元芳香杂环基(尤其是吡啶基)，
或其盐。
[化合物A]
化合物，其中
X是硫原子；
Y是CH；
R1是C1-6烷基(尤其是甲基)；和
R2是任选具有取代基的C1-6烷基(尤其是甲基，乙基)、任选具有取代基的C6-14芳基(尤其是苯基)或任选具有取代基的5或6元非芳香杂环基(尤其是吡咯烷基，吗啉基)，
或其盐。
[化合物B-2]
化合物，其中
X是硫原子；
Y是CH；
R1是任选被卤素原子(尤其是氟原子)取代的C1-6烷基(尤其是甲基，乙基)；和
R2是
(1)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷基(尤其是甲基，乙基，异丙基，异丁基)：
(a)任选被1至3个选自下列的取代基取代的非芳香杂环基(尤其是吡咯烷基，哌啶基，吗啉基，硫吗啉基，哌嗪基，氮杂环丁烷基，四氢异喹啉基，四氢吡啶基，1,3-二氢-2H-异吲哚基，1,4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬-7-基，四氢-5H-螺[1,3-
Figure BDA00002264979900301
唑并[3,4-a]吡嗪-1,4'-哌啶]-1'-基，氮杂双环[3.1.0]己烷基)：
(i)卤素原子(尤其是氟原子)，
(ii)羟基，
(iii)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷基(尤其是甲基)：
(aa)卤素原子(尤其是氟原子)，
(bb)羟基，
(cc)C1-6烷氧基(尤其是甲氧基)，和
(dd)任选被1至3个C1-6烷基(尤其是甲基)取代的C6-14芳基(尤其是苯基)，
(iv)C1-6烷氧基(尤其是甲氧基)，
(v)任选被1至3个卤素原子(尤其是氟原子)取代的C6-14芳基(尤其是苯基)，
(vi)C6-14芳氧基(尤其是苯氧基)，
(vii)C1-6烷氧基-羰基(尤其是乙氧羰基)，
(viii)C1-6烷基-羰基(尤其是乙酰基)，
(ix)氰基，
(x)C6-14芳基磺酰基(尤其是苯磺酰基)，
(xi)羧基，
(xii)任选被C1-6烷基(尤其是甲基)单或二取代的氨基，
(xiii)任选被氧代取代的非芳香杂环基(尤其是吡咯烷基，四氢嘧啶基)，和
(xiv)氧代，
(b)C1-6烷氧基(尤其是乙氧基)，
(c)任选被选自下列的取代基单或二取代的氨基：
(i)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷基(尤其是，甲基，乙基，异丙基)：
(aa)任选被1至3个C1-6烷氧基(尤其是甲氧基)取代的C6-14芳基(尤其是苯基)，
(bb)C1-6烷氧基-羰基(尤其是乙氧羰基)，
(cc)芳香杂环基(尤其是吡啶基)，
(dd)任选被芳香杂环基(尤其是噻吩基)取代的C3-8环烷基(尤其是环丙基)，和
(ee)羟基，
(ii)任选被1至3个C7-13芳烷基(尤其是苄基)取代的非芳香杂环基(尤其是吡咯烷基)，
(iii)任选被1至3个C1-6烷氧基(尤其是甲氧基)取代的C6-14芳基(尤其是苯基)，和
(iv)C3-8环烷基(尤其是环戊基)，
(d)5或6元芳香杂环基(尤其是咪唑基，吡咯基)，
(e)C6-14芳基(尤其是苯基)，和
(f)任选被氨基取代的C3-8环烷基(尤其是环丙基，环戊基，环己基)，
(2)任选被1至3个卤素原子(尤其是氯原子)取代的C6-14芳基(尤其是苯基)，
(3)任选被1至3个选自下列的取代基取代的非芳香杂环基(尤其是吡咯烷基，吗啉基，哌嗪基，哌啶基，四氢呋喃基，四氢吡啶基，四氢喹啉基，四氢异喹啉基，十氢异喹啉基，氮杂环丁烷基，氮杂环庚烷基，八氢吡咯并吡嗪基，八氢吲哚基，八氢环戊二烯并[b]吡咯基，噻唑烷基，氮杂双环[3.1.0]己烷基，氮杂双环[2.1.1]己烷基，氮杂双环[2.2.1]庚基，氮杂双环[4.1.0]庚基，氮杂双环[2.2.2]辛基，氮杂螺[2.4]庚基)：
(a)卤素原子(尤其是氟原子)，
(b)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷基(尤其是甲基，丙基)：
(i)羟基，
(ii)C1-6烷氧基-羰基(尤其是乙氧羰基，叔丁氧羰基)，和
(iii)氨基甲酰基，
(c)C6-14芳氧基(尤其是苯氧基)，
(d)C1-6烷氧基-羰基(尤其是叔丁氧羰基)，
(e)C1-6烷基-羰基(尤其是乙酰基)，
(f)任选被C1-6烷基磺酰基(尤其是甲基磺酰基)取代的C6-14芳基(尤其是苯基)，
(g)任选被1至3个卤素原子(尤其是氟原子)取代的C7-13芳烷基(尤其是苄基)，
(h)羟基，
(i)氨基甲酰基，和
(j)非芳香杂环基(尤其是哌啶基),
(4)任选被1至3个C6-14芳基(尤其是苯基)取代的C2-6烯基(尤其是乙烯基)，
(5)5或6元芳香杂环基(尤其是吡啶基，吡唑基，噻唑基)，
(6)非芳香杂环-羰基(尤其是吡咯烷基羰基)，或
(7)任选被氨基取代的C3-8环烷基(尤其是环戊基，环己基)，
或其盐。
[化合物B-1]
化合物，其中
X是硫原子；
Y是CH；
R1是C1-6烷基(尤其是甲基)；和
R2是
(1)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷基(尤其是甲基，乙基)：
(a)任选被1至3个选自下列的取代基取代的非芳香杂环基(尤其是吡咯烷基，哌啶基，吗啉基，硫吗啉基，哌嗪基，氮杂环丁烷基，3,4-二氢异喹啉基，二氢吡啶基，1,3-二氢-2H-异吲哚基，1,4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬-7-基，四氢-5H-螺[1,3-
Figure BDA00002264979900331
唑并[3,4-a]吡嗪-1,4'-哌啶]-1'-基，氮杂双环[3.1.0]己-3-基)：
(i)卤素原子(尤其是氟原子)，
(ii)羟基，
(iii)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷基(尤其是甲基)：
(aa)卤素原子(尤其是氟原子)，
(bb)羟基，
(cc)C1-6烷氧基(尤其是甲氧基)，和
(dd)任选被1至3个C1-6烷基(尤其是甲基)取代的C6-14芳基(尤其是苯基)，
(iv)C1-6烷氧基(尤其是甲氧基)，
(v)任选被1至3个卤素原子(尤其是氟原子)取代的C6-14芳基(尤其是苯基)，
(vi)C6-14芳氧基(尤其是苯氧基)，
(vii)C1-6烷氧基-羰基(尤其是乙氧羰基)或C1-6烷基-羰基(尤其是乙酰基)，
(viii)氰基，
(ix)C6-14芳基磺酰基(尤其是苯磺酰基)，
(x)羧基，
(xi)任选被C1-6烷基(尤其是甲基)单或二取代的氨基，
(xii)任选被氧代取代的非芳香杂环基(尤其是吡咯烷基，四氢嘧啶基)，和
(xiii)氧代，
(b)C1-6烷氧基(尤其是乙氧基)，
(c)任选被选自下列的取代基单或二取代的氨基：
(i)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷基(尤其是，甲基，乙基，异丙基)：
(aa)任选被1至3个C1-6烷氧基(尤其是甲氧基)取代的C6-14芳基(尤其是苯基)，
(bb)C1-6烷氧基-羰基(尤其是乙氧羰基)，
(cc)芳香杂环基(尤其是吡啶基)，和
(dd)任选被芳香杂环基(尤其是噻吩基)取代的C3-8环烷基(尤其是环丙基)，
(ii)任选被1至3个C7-13芳烷基(尤其是苄基)取代的非芳香杂环基(尤其是吡咯烷基)，和
(iii)任选被1至3个C1-6烷氧基(尤其是甲氧基)取代的C6-14芳基(尤其是苯基)，
(d)5或6元芳香杂环基(尤其是咪唑基)，和
(e)C6-14芳基(尤其是苯基)；
(2)任选被1至3个卤素原子(尤其是氯原子)取代的C6-14芳基(尤其是苯基)；
(3)任选被1至3个选自下列的取代基取代的非芳香杂环基(尤其是吡咯烷基，吗啉基，哌啶基，四氢呋喃基，氮杂环丁烷基，氮杂环庚烷基，八氢吡咯并吡嗪基，八氢吲哚基，噻唑烷基，氮杂双环[3.1.0]己-2-基，氮杂双环[2.2.1]庚-3-基，氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)：
(a)卤素原子(尤其是氟原子)，
(b)C1-6烷基(尤其是甲基)，
(c)C6-14芳氧基(尤其是苯氧基)，
(d)C1-6烷氧基-羰基(尤其是叔丁氧羰基)，
(e)任选被C1-6烷基磺酰基(尤其是甲基磺酰基)取代的C6-14芳基(尤其是苯基)，和
(f)任选被1至3个卤素原子(尤其是氟原子)取代的C7-13芳烷基(尤其是苄基)；
(4)任选被1至3个C6-14芳基(尤其是苯基)取代的C2-6烯基(尤其是乙烯基)；或
(5)5或6元芳香杂环基(尤其是吡啶基)，
或其盐。
[化合物B]
化合物，其中
X是硫原子；
Y是CH；
R1是C1-6烷基(尤其是甲基)；和
R2是
(1)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷基(尤其是甲基，乙基)：
(a)任选被1至3个选自下列的取代基取代的4至6元非芳香杂环基(尤其是吡咯烷基，哌啶基，吗啉基，哌嗪基，氮杂环丁烷基，四氢呋喃基)：
(i)卤素原子(尤其是氟原子)，
(ii)羟基，
(iii)任选被1至3个选自卤素原子(尤其是氟原子)和羟基的取代基取代的C1-6烷基(例如，甲基)，
(iv)C1-6烷氧基(尤其是甲氧基)，和
(v)C6-14芳基(尤其是苯基)，和
(b)C1-6烷氧基(尤其是乙氧基)，
(2)任选被1至3个卤素原子(尤其是氯原子)取代的C6-14芳基(尤其是苯基)，或
(3)任选被1至3个选自下列的取代基取代的5或6元非芳香杂环基(尤其是吡咯烷基，吗啉基)：
(a)卤素原子(尤其是氟原子)，和
(b)C6-14芳氧基(尤其是苯氧基)，
或其盐。
[化合物C-1]
化合物，其中
X是硫原子；
Y是CH；
R1是C1-6烷基(尤其是甲基)；和
R2是
(1)任选被1至3个卤素原子(尤其是氟原子)取代的4至6元非芳香杂环-C1-6烷基(尤其是吡咯烷基甲基，二氢吡啶基甲基)，
(2)任选被1至3个卤素原子(尤其是氯原子)取代的C6-14芳基(尤其是苯基)，或
(3)任选被1至3个选自下列的取代基取代的非芳香杂环基(尤其是吡咯烷基，吗啉基，哌啶基，氮杂环丁烷基，氮杂环庚烷基，八氢吲哚基，氮杂双环[3.1.0]己-2-基，氮杂双环[2.2.1]庚-3-基，氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)：
(a)卤素原子(尤其是氟原子)，和
(b)C1-6烷基(尤其是甲基)，
或其盐。
[化合物D-2]
化合物，其中
X是硫原子；
Y是CH；
R1是任选被1至3个卤素原子(尤其是氟原子)取代的C1-6烷基(尤其是甲基)；和
R2是
(1)任选被1或2个C1-6烷基(尤其是甲基)取代的氨甲基，
(2)任选被C1-6烷基(尤其是甲基)取代的5或6元非芳香杂环基-甲基(尤其是吡咯烷基甲基，二氢吡啶基甲基)，或
(3)任选被1至3个卤素原子(尤其是氟原子)取代的非芳香杂环基(尤其是，吡咯烷基，吗啉基，哌啶基，1,2,3,6-四氢吡啶基，氮杂环庚烷基，3-氮杂双环[3.1.0]己烷基，7-氮杂双环[2.2.1]庚基，2-氮杂双环[2.2.1]庚基，1-氮杂双环[2.2.2]辛基，2-氮杂双环[2.2.2]辛基)，
或其盐。
[化合物E-2]
化合物，其中
X是硫原子；
Y是CH；
R1是任选被1至3个卤素原子(尤其是氟原子)取代的C1-6烷基(尤其是甲基)；和
R2是
(1)5或6元非芳香杂环基-甲基(尤其是吡咯烷基甲基)，或
(2)任选被1至3个卤素原子(尤其是氟原子)取代的非芳香杂环基(尤其是，吡咯烷基，哌啶基，1,2,3,6-四氢吡啶基，7-氮杂双环[2.2.1]庚基，2-氮杂双环[2.2.1]庚基，1-氮杂双环[2.2.2]辛基)，
或其盐。
[化合物F-2]
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(实施例11)；
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-哌啶-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(实施例83)；
2-(7-氮杂双环[2.2.1]庚-1-基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(实施例116)；
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-1,2,3,6-四氢吡啶-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(实施例145)；
2-[(2S)-哌啶-2-基]-6-[5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(实施例161)；
2-[(2S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(实施例170)
或其盐。
化合物(I)的盐优选是药理学可接受的盐，其实例包括与无机碱成的盐、与有机碱成的盐、与无机酸成的盐、与有机酸成的盐和与碱性或酸性氨基酸成的盐。
与无机碱成的盐的优选例子包括：碱金属盐，例如钠盐，钾盐等等；碱土金属盐，例如钙盐，镁盐等等；铝盐和铵盐铵盐。
与有机碱成的盐的优选例子包括与下列成的盐：三甲胺，三乙胺，吡啶，甲基吡啶，乙醇胺，二乙醇胺，三乙醇胺，氨基丁三醇[三(羟甲基)甲胺]，叔丁胺，环己胺，苄胺，二环己基胺或N,N-二苄基乙二胺。
与无机酸成的盐的优选例子包括：与盐酸、氢溴酸、硝酸、硫酸或磷酸成的盐。
与有机酸成的盐的优选例子包括与下列成的盐：甲酸，乙酸，三氟乙酸，苯二甲酸，富马酸，草酸，酒石酸，马来酸，柠檬酸，琥珀酸，苹果酸，甲磺酸，苯磺酸或对甲苯磺酸。
与碱性氨基酸成的盐的优选例子包括与下列碱性氨基酸成的盐：精氨酸，赖氨酸或鸟氨酸。
与酸性氨基酸成的盐的优选例子包括与下列酸性氨基酸成的盐：天冬氨酸或谷氨酸。
在上述盐之中，优选与无机酸(优选盐酸)或有机酸(优选三氟乙酸)成的盐。
下面解释化合物(I)的制备方法。
下面反应路线中的化合物可以形成盐，这种盐的例子包括与化合物(I)的盐相似的那些盐。
尽管在各步骤中得到的化合物可以以粗品反应混合物形式用于下一个反应，但还可以利用已知的分离方法(例如重结晶，蒸馏，色谱等等)将它们从反应混合物中分离。
化合物(I)可以按照下列反应路线所示的方法或与其类似的方法来获得。
(反应路线1)
Figure BDA00002264979900381
其中Pg是吡唑氮的保护基。保护基的例子包括叔丁氧羰基和N,N-二甲基氨基磺酰基。R3是卤素原子(例如，溴原子，氯原子或碘原子)，R4是硼酸，硼酸酯(例如，4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)，三氟甲磺酰基，或具有取代基的甲锡烷基(例如，三丁基甲锡烷基)，其它符号各自如以上所定义。
在该反应中，使化合物(II)进行通常称为Suzuki反应或Stille反应的反应或与其类似的方法，并且在必要时对该化合物进行脱保护，除去保护基，由此制备化合物(I)。
该反应优选在钯催化剂的存在下进行。
相对于化合物(II)，所使用的化合物(III)的量大约为1-3当量。
该反应可以在碱的存在下进行。
碱的例子包括碳酸钠，碳酸钾和碳酸铯。相对于化合物(II)，所使用的碱的量大约为2至20当量。
钯催化剂的例子包括[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)二氯甲烷络合物和四(三苯基膦)钯(0)。相对于化合物(II)，所使用的钯催化剂的量大约为0.01至1当量。
该反应优选在溶剂中进行。溶剂的例子包括芳香烃(例如，苯，甲苯，二甲苯)，醚(例如，四氢呋喃，二
Figure BDA00002264979900391
烷，1,2-二甲氧基乙烷)，丙酮，乙腈，乙酸乙酯，N,N-二甲基甲酰胺，N,N-二甲基乙酰胺，1-甲基-2-吡咯烷酮，二甲亚砜，水和其混合溶剂。
该反应可以在室温下(大约15至30℃)或在加热下(大约40至150℃)进行。反应时间通常是大约1至50小时，优选大约1至20小时。
化合物(III)可以是商购产品，或可以按照本身已知的方法制备。
化合物(II)可以按照例如下列反应路线所示方法或与其类似的方法获得。
(反应路线2)
Figure BDA00002264979900392
其中R5是羰基氯(carbonyl chloride)基团或羧基，其它符号各自如以上所定义。
(方法A)
在该反应中，化合物(VI)可以通过化合物(IV)与化合物(V)的反应来制备。
相对于化合物(IV)，该反应中所使用的化合物(V)的量通常是1-10当量，优选1-5当量。
该反应优选在溶剂中进行。溶剂的例子包括醚(例如，四氢呋喃，二
Figure BDA00002264979900401
烷，1,2-二甲氧基乙烷)，乙腈，酰胺(例如，N,N-二甲基甲酰胺，N,N-二甲基乙酰胺，N-甲基吡咯烷酮)和其混合溶剂。
当使用R5是羰基氯基团的化合物(V)时，优选该反应在碱的存在下进行。碱的例子包括吡啶，N,N-二甲基吡啶-4-胺，三乙胺和N-甲基-N-(1-甲基乙基)丙烷-2-胺。相对于化合物(IV)，所使用的碱的量是1-100当量，优选1-10当量。当使用R5是羧基的化合物(V)时，该反应可以在已知的缩合反应条件下进行。已知的缩合反应条件的例子包括N,N-二甲基甲酰胺与O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲
Figure BDA00002264979900402
六氟磷酸盐和N-乙基-N-(1-甲基乙基)丙烷-2-胺共同存在的条件，和通常被称为混合酸酐方法的条件，例如，2-甲基丙基氯甲酸酯、三乙胺和四氢呋喃共同存在的条件。
该反应可以在室温下(大约15-30℃)或在加热下(大约40-150℃)进行。反应时间通常是大约1-50小时，优选大约1-5小时。
化合物(IV)和(V)可以是商购的产品，或可以使用本身已知的方法制备。
(方法B)
在该反应中，在碱的存在下，化合物(VI)进行环化，获得化合物(II)。
该反应中碱的例子包括氢氧化钠。相对于化合物(VI)，所使用的碱的量是1-100当量，优选1-10当量。
该反应优选在溶剂中进行。溶剂的例子包括有机溶剂，例如醇(甲醇，乙醇等等)；醚(四氢呋喃，二
Figure BDA00002264979900403
烷，1,2-二甲氧基乙烷等等)；等等，水，和其混合溶剂。
该反应可以在室温下(大约15-30℃)或在加热下(大约40-120℃)进行。反应时间通常是大约1-20小时，优选大约1-4小时。
化合物(II)，其中R2是被氨基取代的甲基，其中氨基任选被选自下列的取代基单或二取代：
(a)任选被1至3个卤素原子取代的C1-6烷基，
(b)任选被1至3个卤素原子取代的C1-6烷基-羰基，
(c)任选被1至3个卤素原子取代的C1-6烷氧基-羰基，
(d)任选被1至3个卤素原子取代的C1-6烷基磺酰基(例如，甲基磺酰基)，
(e)任选被C1-6烷基单或二取代的氨基甲酰基，其中C1-6烷基任选被1至3个卤素原子取代，和
(f)芳香杂环基(例如，噻吩基，呋喃基，吡啶基，吡唑基，咪唑基，四唑基，
Figure BDA00002264979900411
唑基，噻唑基，二唑基，噻二唑基)
可以按照例如下列反应路线所示方法或与其类似的方法来制备。
(反应路线3)
Figure BDA00002264979900413
其中R6是C1-6烷基，R7是卤素原子(例如，氯原子)，其它符号各自如以上所定义。
(方法C)
在该反应中，在酸的存在下，化合物(VII)与化合物(VIII)反应，制备化合物(IX)。
相对于化合物(VII)，该反应中所使用的化合物(VIII)的量通常是1-10当量，优选1-5当量。在该反应中，酸的例子包括盐酸/环戊基甲醚溶液。相对于化合物(VII)，所使用的酸的量通常是1-100当量，优选1-10当量。
该反应优选在溶剂中进行。溶剂的例子包括醚(例如，***，四氢呋喃，二
Figure BDA00002264979900414
烷，1,2-二甲氧基乙烷)。
该反应可以在室温下(大约15-30℃)或在加热下(大约40-120℃)进行。反应时间通常是大约1-20小时，优选大约1-4小时。
(方法D)
在该反应中，在减压下，加热化合物(IX)，可以制备化合物(X)。
该反应可以在加热下(大约40-100℃)进行。反应时间通常是大约1-8小时，优选大约1-4小时。该反应可以在减压下(大约4-10托)进行。化合物(VII)和(VIII)可以是商购的产品，或可以使用本身已知的方法制备。
(方法E)
在该反应中，化合物(II)可以如下制备：用伯胺、仲胺、酰胺、氨基甲酸酯、磺酰胺或脲取代化合物(X)的R7，对应于任选被选自下列的取代基单或二取代的氨基：
(a)任选被1至3个卤素原子取代的C1-6烷基，
(b)任选被1至3个卤素原子取代的C1-6烷基-羰基，
(c)任选被1至3个卤素原子取代的C1-6烷氧基-羰基，
(d)任选被1至3个卤素原子取代的C1-6烷基磺酰基(例如，甲基磺酰基)，
(e)任选被C1-6烷基单或二取代的氨基甲酰基，其中C1-6烷基任选被1至3个卤素原子取代，和
(f)芳香杂环基(例如，噻吩基，呋喃基，吡啶基，吡唑基，咪唑基，四唑基，
Figure BDA00002264979900421
唑基，噻唑基，二唑基，噻二唑基)。
相对于化合物(X)，在该反应中所使用的伯胺、仲胺、酰胺、氨基甲酸酯、磺酰胺或脲的量通常是1-10当量，优选1-3当量。
该反应可以在碱的存在下进行。
碱的例子包括碳酸钾。相对于化合物(X)，所使用的碱的量通常是1-10当量，优选1-5当量。
该反应优选在溶剂中进行。溶剂的例子包括醚(例如，四氢呋喃，二
Figure BDA00002264979900423
烷，1,2-二甲氧基乙烷)，乙腈，乙酸乙酯，N,N-二甲基甲酰胺，N,N-二甲基乙酰胺，1-甲基-2-吡咯烷酮，二甲亚砜，和其混合溶剂。
该反应可以在室温下(大约15-30℃)或在加热下(大约40-120℃)进行。反应时间通常是大约0.5-20小时，优选大约0.5-4小时。
化合物(II)也可以按照例如下列反应路线所示方法或与其类似的方法来制备。
(反应路线4)
Figure BDA00002264979900424
其中每个符号如以上所定义。
在该反应中，在酸的存在下，化合物(VII)与化合物(XI)进行反应，可以制备化合物(II)。
相对于化合物(VII)，该反应中所使用的化合物(XI)的量通常是1-10当量，优选1-5当量。在该反应中，酸的例子包括盐酸/环戊基甲醚溶液。相对于化合物(VII)，所使用的酸的量通常是1-100当量，优选1-10当量。该反应优选在溶剂中进行。在该反应中，溶剂的例子包括醚(例如，***，四氢呋喃，二
Figure BDA00002264979900431
烷，1,2-二甲氧基乙烷)。
该反应可以在室温下(大约15-30℃)或在加热下(大约40-120℃)进行。反应时间通常是大约1-20小时，优选大约1-4小时。
化合物(XI)可以是商购产品，或可以使用本身已知的方法制备。
可以按照例如下列反应路线所示方法或与其类似的方法来制备化合物(I)。
(反应路线5)
Figure BDA00002264979900432
其中
R8是任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷基(例如，甲基，乙基)：
(i)任选被1至3个C1-6烷氧基(例如，甲氧基)取代的C6-14芳基(例如，苯基)，
(ii)芳香杂环基(例如，吡啶基)，和
(iii)任选被芳香杂环基(例如噻吩基)取代的C3-8环烷基(例如环丙基)，和
其它符号各自如以上所定义。
(方法F)
在该反应中，利用与反应路线3所示方法E一样的方法，用伯胺取代化合物(X)的R7，可以制备化合物(XII)。伯胺的例子包括苄胺。
(方法G)
在该反应中，可以通过化合物(XII)与例如甲醛的反应来制备化合物(XIII)。甲醛的例子包括37%甲醛水溶液。
相对于化合物(XII)，该反应中所使用的甲醛的量通常是10-1000当量。
该反应优选在溶剂中进行。在该反应中，溶剂的例子包括芳香烃(例如，苯，甲苯，二甲苯)，醚(例如，四氢呋喃，二烷，1,2-二甲氧基乙烷)，和其混合溶剂。
该反应可以在室温下(大约15-30℃)或在加热下(大约40-150℃)进行。反应时间通常是大约1-50小时，优选大约1-20小时。
(方法H)
在该反应中，可以利用与反应路线1所示方法一样的方法，由化合物(XIII)和化合物(III)制备化合物(XIV)。
(方法I)
在该反应中，在醇的存在下，在三氟乙酸中，加热化合物(XIV)，可以制备化合物(I')。醇的例子包括甲醇，乙醇和其混合溶剂。
相对于化合物(XIV)，该反应中所使用的三氟乙酸的量通常是10-1000当量。
该反应可以在加热下(大约40-80℃)进行。反应时间通常是大约1-20小时，优选大约1-10小时。
可以按照例如下列反应路线所示方法或与其类似的方法来制备化合物(I)。
(反应路线6)
Figure BDA00002264979900451
其中Pg'是内酰胺部分的保护基。保护基的例子包括[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基和2,4-二甲氧基苄基。其它符号各自如以上所定义。
(方法J)
在该反应中，通过将保护基引入到化合物(II)的内酰胺部分上，可以制备化合物(XV)、化合物(XVI)或化合物(XV)和化合物(XVI)的混合物。
在方法J的一个实施方案中，即当[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基被引入到内酰胺部分中时，在碱的存在下，可以通过例如化合物(II)与[2-(氯甲氧基)乙基](三甲基)硅烷的反应，制备化合物(XV)、化合物(XVI)或化合物(XV)和化合物(XVI)的混合物。
该反应中碱的例子包括氢化钠。相对于化合物(II)，所使用的碱的量通常是1-5当量，优选1-2当量。
相对于化合物(II)，在该反应中所使用的[2-(氯甲氧基)乙基](三甲基)硅烷的量通常是1-5当量，优选1-2当量。该反应可以在冷却下(大约0-10℃)、在室温下(大约15-30℃)或在加热下(大约40-80℃)进行。反应时间通常是大约1-20小时，优选大约1-3小时。该反应优选在溶剂中进行。在该反应中，溶剂的例子包括醚(例如，四氢呋喃，二烷，1,2-二甲氧基乙烷)。
在方法J的另一个实施方案中，即当2,4-二甲氧基苄基被引入到内酰胺部分中时，使例如化合物(II)和(2,4-二甲氧基苯基)甲醇进行通常被称为Mitsunobu反应的反应，例如，在溶剂中，与三苯基膦和(E)-二氮烯-1,2-二羧酸二乙基酯反应，可以制备化合物(XV)、化合物(XVI)或化合物(XV)和化合物(XVI)的混合物。
相对于化合物(II)，该反应中所使用的三苯基膦的量大约是1-5当量。
相对于化合物(II)，在该反应中所使用的(E)-二氮烯-1,2-二羧酸二乙基酯的量大约为1-5当量。
相对于化合物(II)，在该反应中所使用的(2,4-二甲氧基苯基)甲醇的量大约为1-5当量。
在该反应中，溶剂的例子包括醚(例如，四氢呋喃，二
Figure BDA00002264979900461
烷，1,2-二甲氧基乙烷)。
该反应可以在冷却下(大约0-10℃)、在室温下(大约15-30℃)或在加热下(大约40-80℃)进行。反应时间通常是大约1-20小时，优选大约1-8小时。
(方法K)
在该反应中，可以利用与反应路线1所示方法一样的方法，由化合物(XV)和化合物(III)制备化合物(XVII)。另外，可以以同样方式由化合物(XVI)和化合物(III)制备化合物(XVII)。此外，以同样方式，可以由化合物(XV)和化合物(XVI)的混合物和化合物(III)制备化合物(XVII)、化合物(XVIII)或化合物(XVII)和化合物(XVIII)的混合物。在该反应期间，有时除去化合物(XVII)和化合物(XVIII)的吡唑氮上的保护基。
(方法L)
在该反应中，按照常规方法，通过除去化合物(XVII)、化合物(XVIII)或化合物(XVII)和化合物(XVIII)的混合物的保护基，可以制备化合物(I)。
在方法L的一个实施方案中，即当吡唑氮上的保护基是叔丁氧羰基时，该叔丁氧羰基可以通过化合物(XVII)、化合物(XVIII)或化合物(XVII)和化合物(XVIII)的混合物与酸进行反应来脱保护。
在该反应中，酸的例子包括三氟乙酸，10%盐酸/甲醇溶液和4M盐酸/乙酸乙酯溶液。相对于化合物(XVII)、化合物(XVIII)或化合物(XVII)和化合物(XVIII)的混合物，所使用的酸的量大约为10-5000当量。
该反应可使用溶剂。溶剂的例子包括醇(例如，甲醇，乙醇)。该反应可以在室温下或在加热下(大约40-80℃)进行。反应时间通常是大约0.5-20小时，优选大约0.5-3小时。
在方法L的另一个实施方案中，即当内酰胺部分的保护基是[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基时，[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基可以通过将化合物(XVII)、化合物(XVIII)或化合物(XVII)和化合物(XVIII)的混合物加入至含氟化物的溶剂中或通过将其与酸反应来脱保护。
在该反应中，含氟化物的溶剂的例子包括1M N,N,N-三丁基丁-1-铵氟化物/四氢呋喃溶液。相对于化合物(XVII)、化合物(XVIII)或化合物(XVII)和化合物(XVIII)的混合物，所使用的氟化物的量大约为5-50当量。优选，该反应可以在加热下(大约40-80℃)进行。反应时间通常是大约1-20小时，优选大约1-8小时。在该反应中，酸的例子包括三氟乙酸，10%盐酸/甲醇溶液和4M盐酸/乙酸乙酯溶液。相对于化合物(XVII)、化合物(XVIII)或化合物(XVII)和化合物(XVIII)的混合物，所使用的酸的量大约为10-5000当量。该反应可以在室温下或在加热下(大约40-80℃)进行。反应时间通常是大约1-20小时，优选大约1-3小时。
在方法L的另一个实施方案中，即当内酰胺部分的保护基是2,4-二甲氧基苄基时，可以通过与酸反应来进行2,4-二甲氧基苄基的脱保护。在该反应中，酸的例子包括三氟乙酸。相对于化合物(XVII)、化合物(XVIII)或化合物(XVII)和化合物(XVIII)的混合物，所使用的酸数量大约为10-5000当量。溶剂可用于该反应。溶剂的例子包括二氯甲烷和水。该反应可以在加热下(大约40-100℃)进行。反应时间通常是大约1-20小时，优选大约1-8小时。
可以按照例如下列反应路线所示方法或与其类似的方法来制备化合物(I)。
(反应路线7)
Figure BDA00002264979900471
其中Pg”是吡唑氮的保护基。保护基的例子包括苄基，叔丁基和4-甲氧苯甲基。其它符号各自如以上所定义。
(方法M)
在该反应中，使化合物(XIX)与1,1-二甲氧基-N,N-二甲基甲胺反应(方法M-1)，而后与具有Pg”基团的肼或其盐反应(方法M-2)，得到化合物(XX)。化合物(XIX)、1,1-二甲氧基-N,N-二甲基甲胺和具有Pg”基团的肼或其盐可以是商购的产品，或可以使用本身已知的方法制备。
(方法M-1)
在该反应中，相对于化合物(XIX)，所使用的1,1-二甲氧基-N,N-二甲基甲胺的量通常是1-10当量，优选1-2当量。该反应可以在加热下(大约60-100℃)进行。反应时间通常是大约1-50小时，优选大约1-5小时。
(方法M-2)
在该反应中，相对于化合物(XIX)，所使用的具有Pg”基团的肼或其盐的量通常是1-5当量，优选1-2当量。该反应优选在溶剂中进行。溶剂的例子包括醚(例如，四氢呋喃，二
Figure BDA00002264979900481
烷，1,2-二甲氧基乙烷)。该反应可以在冷却下(大约0-10℃)、在室温下(大约15-30℃)或在加热下(大约40-100℃)进行。反应时间通常是大约30分钟-5小时，优选大约30分钟-1小时。
(方法N)
在该反应中，使化合物(XX)与Vilsmeier试剂反应(方法N-1)，而后与盐酸羟胺反应(方法N-2)，得到化合物(XXI)。吡唑氮上的保护基可以在方法N-2的反应期间除去。在此情况下，化合物(XXI)可以在碱的存在下、通过与具有Pg”基团的卤化物反应来制备(方法N-3)。
(方法N-1)
相对于化合物(XX)，该反应中所使用的Vilsmeier试剂的量通常是1-10当量，优选1-5当量。Vilsmeier试剂可以在通常已知的条件下、由N,N-二甲基甲酰胺和三氯氧磷来制备。例如，在冰冷却下，将三氯氧磷加入到N,N-二甲基甲酰胺中，并将该混合物在室温下搅拌30分钟-1小时。
该反应可以在室温下或在加热下(大约40-60℃)进行。反应时间通常是大约30分钟-2小时，优选大约30分钟-1小时。
(方法N-2)
相对于化合物(XX)，该反应中所使用的盐酸羟胺的量通常是5-20当量，优选5-10当量。吡唑氮上的保护基可以在该反应期间除去。该反应可以在加热下(大约50-80℃)进行。反应时间通常是大约0.5-8小时，优选大约0.5-2小时。
(方法N-3)
在该反应中具有Pg”基团的卤化物的例子包括(溴甲基)苯和1-(氯甲基)-4-甲氧基苯。相对于化合物(XX)，所使用的具有Pg”基团的卤化物的量通常是1-3当量，优选1-2当量。该反应中碱的例子包括碳酸钾。所使用的碳酸钾的量通常是1-5当量，优选1-3当量。该反应优选在溶剂中进行。溶剂的例子包括N,N-二甲基甲酰胺，N,N-二甲基乙酰胺，1-甲基-2-吡咯烷酮和其混合溶剂。该反应可以在室温下(大约15-30℃)或在加热下(大约40-120℃)进行。反应时间通常是大约2-48小时，优选大约6-24小时。
(方法O)
在该反应中，在碱的存在下，使化合物(XXI)与具有R6基团的巯基乙酸酯(sulfanylacetate)反应，得到化合物(XXII)。
相对于化合物(XXI)，该反应中所使用的具有R6基团的巯基乙酸酯的量通常是1-3当量，优选1-2当量。具有R6基团的巯基乙酸酯可以是商购的产品，或可以使用本身已知的方法制备。在该反应中，碱的例子包括无机碱(例如，氢化钠，碳酸钾，碳酸铯)和有机碱(例如，三乙胺，N-乙基-N-(1-甲基乙基)丙-2-胺)。该反应优选在溶剂中进行。溶剂的例子包括N,N-二甲基甲酰胺。该反应可以在冷却下(大约0-10℃)、在室温下(大约15-30℃)或在加热下(大约40-100℃)进行。反应时间通常是大约30分钟-5小时，优选大约30分钟-2小时。
(方法P)
在该反应中，可以利用与反应路线2所示方法A一样的方法，由化合物(XXII)和化合物(V)制备化合物(XXIII)。
(方法Q)
在该反应中，可以利用与反应路线2所示方法B一样的方法，由化合物(XXIII)制备化合物(XXIV)。
(方法R)
在该反应中，对化合物(XXIV)的Pg”基团进行脱保护，可以制备化合物(I”)。例如，在甲酸中，在氢气氛围下，使具有苄基作为Pg”基团的化合物(XXIV)与氢氧化钯-碳反应，得到化合物(I”)。相对于化合物(XXIV)，在该反应中所使用的氢氧化钯-碳的数量是催化量。在该反应中，氢气氛是1-3atm。该反应可以在室温下(大约15-30℃)或在加热下(大约40-100℃)进行。反应时间通常是大约2-120小时，优选大约8-24小时。
另外，例如，在甲氧基苯的存在下，将具有4-甲氧苯甲基作为Pg”基团的化合物(XXIV)在三氟乙酸中加热，得到化合物(I”)。在该反应中所使用的甲氧基苯的量是1-5当量。该反应可以在加热下(大约40-100℃)进行。反应时间通常是大约8-48小时，优选大约8-24小时。
可以按照例如下列反应路线所示方法或与其类似的方法来制备化合物(I)。
(反应路线8)
Figure BDA00002264979900501
其中Pg″′是硫原子上的保护基。保护基的例子包括乙酰基。其它符号各自如以上所定义。
(方法S)
在该反应中，使化合物(XXV)与氯乙酰氯反应(方法S-1)，而后在碱的存在下与具有Pg″′基团的硫醇反应(方法S-2)，得到化合物(XXVI)。
(方法S-1)
相对于化合物(XXV)，该反应中所使用的氯乙酰氯的量通常是2-10当量，优选2-4当量。该反应可以在室温下(大约15-30℃)或在加热下(大约40-120℃)进行。反应时间通常是大约3-24小时，优选大约12-18小时。
(方法S-2)
相对于化合物(XXV)，该反应中所使用的具有Pg″′基团的硫醇的量通常是1-2当量，优选1-1.1当量。相对于化合物(XXV)，该反应中所使用的碱(例如，碳酸钾，三乙胺)的量通常是1-2当量，优选1-1.1当量。该反应优选在溶剂中进行。溶剂的例子包括四氢呋喃。该反应可以在冰冷却下(大约-5-5℃)或在室温下(大约15-30℃)进行。反应时间通常是大约0.1-1小时，优选大约0.1-0.5小时。
化合物(XXV)和氯乙酰氯可以是商购产品，或可以使用本身已知的方法制备。
(方法T)
在该反应中，使化合物(XIX)与1,1-二甲氧基-N,N-二甲基甲胺反应(方法T-1)，而后与叔丁基肼或其盐反应(方法T-2)，得到化合物(XXVII)。化合物(XIX)和叔丁基肼或其盐可以为商购产品。
(方法T-1)
在该反应中，相对于化合物(XIX)，所使用的1,1-二甲氧基-N,N-二甲基甲胺的量通常是1-10当量，优选1-2当量。该反应可以在加热下(大约60-100℃)进行。反应时间通常是大约1-50小时，优选大约1-5小时。
(方法T-2)
在该反应中，相对于化合物(XIX)，所使用的叔丁基肼或其盐的量通常是1-5当量，优选1-2当量。该反应优选在溶剂中进行。溶剂的例子包括醚(例如，四氢呋喃，二
Figure BDA00002264979900511
烷，1,2-二甲氧基乙烷)。该反应可以在冷却下(大约0-10℃)、在室温下(大约15-30℃)或在加热下(大约40-100℃)进行。反应时间通常是大约30分钟-5小时，优选大约30分钟-1小时。
(方法U)
在该反应中，使化合物(XXVII)与Vilsmeier试剂反应(方法U-1)，而后与盐酸羟胺反应(方法U-2)，得到化合物(XXVIII)。
(方法U-1)
相对于化合物(XXVII)，该反应中所使用的Vilsmeier试剂的量通常是1-10当量，优选1-5当量。Vilsmeier试剂可以在通常已知的条件下由N,N-二甲基甲酰胺和三氯氧磷制备(例如，在冰冷却下，将三氯氧磷加入到N,N-二甲基甲酰胺中，并将该混合物在室温下搅拌30分钟-1小时)。
该反应可以在室温下或在加热下(大约40-60℃)进行。反应时间通常是大约30分钟-2小时，优选大约30分钟-1小时。
(方法U-2)
相对于化合物(XXVII)，该反应中所使用的盐酸羟胺的量通常是5-20当量，优选5-10当量。该反应可以在加热下(大约40-60℃)进行。反应时间通常是大约30分钟-2小时，优选大约30分钟-1小时。
(方法V)
在该反应中，在碱的存在下，化合物(XXVIII)与化合物(XXVI)进行反应，可以制备化合物(XXIX)。
相对于化合物(XXVIII)，该反应中所使用的化合物(XXVI)的量通常是1-1.5当量，优选1-1.1当量。相对于化合物(XXVIII)，该反应中所使用的碱(例如，碳酸钾，碳酸铯)的量通常是1-2当量，优选1-1.2当量。该反应优选在溶剂中进行。溶剂的例子包括四氢呋喃，N,N-二甲基甲酰胺和其混合溶剂。该反应可以在冰冷却下(大约-5-5℃)或在室温下(大约15-30℃)进行。反应时间通常是大约0.5-5小时，优选大约0.5-2小时。
(方法W)
在该反应中，可以通过化合物(XXIX)与酸或碱反应来制备化合物(I″)。
在该反应中，酸的例子包括稀盐酸和三氟乙酸。相对于化合物(XXIX)，所使用的酸的量通常是2-20当量，优选5-10当量。该反应中碱的例子包括氢氧化钠水溶液、碳酸钾和氢化钠。相对于化合物(XXIX)，所使用的碱的量通常是1-10当量，优选2-5当量。该反应优选在溶剂中进行。溶剂的例子包括甲醇，N,N-二甲基甲酰胺和其混合溶剂。该反应可以在室温下(大约15-30℃)或在加热下(大约40-120℃)进行。反应时间通常是大约0.2-72小时，优选大约0.2-5小时。
对化合物(I)使用本身已知的方法，使取代基转化(即，引入取代基和使官能团转化)，也可以制备本发明范围内的化合物。
对于取代基的转化，可以使用已知的常规方法。其实例包括：酯水解转化为羧基，羧基酰胺化转化为氨基甲酰基，羧基还原转化为羟甲基，羰基还原或烷基化转化为醇化合物，羰基的还原胺化，羰基的肟化，氨基的酰化，氨基的脲化，氨基的磺酰化，氨基的烷基化，活性卤素被胺取代或胺化，羟基的烷基化，羟基的取代或胺化。
当在引入取代基和官能团转化期间存在能够导致非目标反应的反应性部分时，则根据需要，利用本身已知的方法，将保护基预先引入到反应性部分上，并在目标反应之后，利用本身已知的方法，将保护基除去，由此，也可以制备本发明范围内的化合物。
例如，当原料化合物或中间体具有氨基、羧基或羟基作为取代基时，这些基团可以用肽化学等等通常使用的保护基来保护。在这种情况下，反应之后，根据需要，除去保护基，可以获得目标化合物。
氨基-保护基的例子包括：甲酰基，C1-6烷基-羰基，C1-6烷氧基-羰基，苯甲酰基，C7-10芳烷基-羰基(例如，苄基羰基)，C7-14芳烷氧基-羰基(例如，苄氧羰基，9-芴基甲氧羰基)，三苯甲基，邻苯二甲酰基，N,N-二甲基氨基亚甲基，取代的甲硅烷基(例如，三甲基甲硅烷基，三乙基甲硅烷基，二甲基苯基甲硅烷基，叔丁基二甲基甲硅烷基，叔丁基二乙基甲硅烷基)和C2-6烯基(例如，1-烯丙基)。这些基团任选被1至3个选自卤素原子、C1-6烷氧基和硝基的取代基取代。
羧基保护基的例子包括：C1-6烷基，C7-11芳烷基(例如，苄基)，苯基，三苯甲基，取代的甲硅烷基(例如，三甲基甲硅烷基，三乙基甲硅烷基，二甲基苯基甲硅烷基，叔丁基二甲基甲硅烷基，叔丁基二乙基甲硅烷基)，和C2-6烯基(例如，1-烯丙基)。这些基团任选被1至3个选自卤素原子、C1-6烷氧基和硝基的取代基取代。
羟基保护基的例子包括：C1-6烷基，苯基，三苯甲基，C7-10芳烷基(例如，苄基)，甲酰基，C1-6烷基-羰基，苯甲酰基，C7-10芳烷基-羰基(例如，苄基羰基)，2-四氢吡喃基，2-四氢呋喃基，取代的甲硅烷基(例如，三甲基甲硅烷基，三乙基甲硅烷基，二甲基苯基甲硅烷基，叔丁基二甲基甲硅烷基，叔丁基二乙基甲硅烷基)，和C2-6烯基(例如，1-烯丙基)。这些基团任选被1至3个选自卤素原子、C1-6烷基、C1-6烷氧基和硝基的取代基取代。为了除去上述保护基，可以使用本身已知的方法，例如，描述在Protective Groups inOrganic Synthesis，John Wiley and Sons(1980)中的方法。例如，使用酸、碱、紫外线、肼、苯肼、N-甲基二硫代氨基甲酸钠、四丁基氟化铵、乙酸钯、三烷基甲硅烷基卤(例如，三甲基甲硅烷基碘，三甲基甲硅烷基溴等等)等等的方法，还原法等等。
根据原料化合物的取代基的种类，可以通过起始原料、用上述制备方法制备的化合物的取代基的上述转化来制备具有不同取代基的原料化合物。
化合物(I)(上述反应的产物)可以以单一化合物或混合物形式制备。
可以用本身已知的分离和纯化方法分离和纯化由此获得的化合物(I)，例如，浓缩，减压浓缩，溶剂提取，结晶，重结晶，相转移，色谱等等。
当获得游离态的化合物(I)时，可以利用本身已知的方法或与其类似的方法，将其转变为目标盐；反之，当获得盐形式的化合物(I)时，可以利用本身已知的方法或与其类似的方法，将其转变为游离态或其它目标盐。
当化合物(CI)具有异构体时，例如旋光异构体、立体异构体、区域异构体、旋转异构体等等，这种异构体和其混合物也包括在化合物(I)的范围内。例如，当化合物(I)具有旋光异构体时，由消旋体拆分的旋光异构体也包括在化合物(I)的范围内。可以利用本身已知的合成技术或分离技术(例如，浓缩，溶剂提取，柱色谱，重结晶，等等)，以单一产物形式获得这些异构体。
化合物(I)可以是晶体形式，并且晶体的结晶形式可以是单晶或多晶形式，两者都包括在化合物(I)范围内。晶体可以利用本身已知的结晶方法来制备。
另外，化合物(I)可以是可药用共晶体或共晶体盐。本文中，共晶体或共晶体盐是指晶体物质，其是由两种或多种特定固体构成的，在室温下，每种固体具有不同的物理性能(例如，结构，熔点，熔化热，吸湿性和稳定性)。共晶体和共晶体盐可以按照本身已知的共结晶方法来制备。
化合物(I)可以是水合物、非水合物、溶剂化物或非溶剂化物，所有这些都包括在化合物(I)的范围内。
用同位素(例如，2H，3H，11C，14C，18F，35S，125I等等)等等标记的化合物也包括在化合物(I)的范围内。
本发明的化合物(I)的前体药物是指：在生物体中、在生理条件下由于酶、胃酸等等反应而能够转变为化合物(I)的化合物，也就是说，通过氧化、还原、水解等等而能够转变为化合物(I)的化合物；由于胃酸而能够通过水解等等酶催转变为化合物(I)的化合物，等等。化合物(I)的前体药物可以是通过使化合物(I)中的氨基酰基化、烷基化或磷酸化获得的化合物(例如，使化合物(I)中的氨基二十酰基化、丙氨酰化、戊基氨基羰基化、(5-甲基-2-氧代-1,3-二氧杂环戊烯-4-基)甲氧羰基化、四氢呋喃基化、吡咯烷基甲基化、新戊酰氧基甲基化或叔丁基化等等所获得的化合物)；使化合物(I)中的羟基酰基化、烷基化、磷酸化或硼酸化获得的化合物(例如，使化合物(I)中的羟基乙酰化、棕榈酰化、丙酰化、新戊酰化、琥珀酰化、富马酰化、丙氨酰化或二甲基氨基甲基羰基化所获得的化合物)；使化合物(I)中的羧基酯化或酰胺化获得的化合物(例如，使化合物(I)中的羧基乙酯化、苯酯化、羧甲基酯化、二甲基氨基甲基酯化、新戊酰氧基甲基酯化、乙氧基羰基氧基乙基酯化、酞基酯化、(5-甲基-2-氧代-1,3-二氧杂环戊烯-4-基)甲基酯化、环己基氧基羰基乙基酯化或甲基酰胺化所获得的化合物)，等等。任何这些化合物可以利用本身已知的方法、由化合物(I)来制备。
化合物(I)的前体药物也可以是能够在生理条件下转变为化合物(I)的化合物，例如，描述在下列中的那些：IYAKUHIN no KAIHATSU(Developmentof Pharmaceuticals),第7卷,Design of Molecules,第163-198页,HIROKAWASHOTEN出版(1990)。
化合物(I)或其前体药物(在本说明书中有时缩写为“本发明的化合物”)具有Cdc7抑制活性，其是预防或治疗癌症的药物、癌症生长抑制剂和癌症转移抑制剂。
由于本发明的化合物对Cdc7显示了强烈的抑制活性，并且在效果表达、药物动力学(例如，吸收，分布，代谢，***)、溶解性(例如，水溶性)、与其它药学产品相互作用(例如，药物-代谢酶抑制作用)、安全性(例如，急性毒性，慢性毒性，遗传毒性，生殖毒性，心脏中毒，致癌性)和稳定性(例如，化学稳定性，对酶的稳定性，等等)方面具有优越性，所以它用作药物。
由于本发明的化合物针对非Cdc7的蛋白激酶显示了低抑制活性，所以其用作预防或治疗癌症的药物，其具有对正常细胞降低的毒性。
相应地，本发明的化合物可以用于抑制哺乳动物(例如，小鼠，大鼠，仓鼠，兔，猫，狗，牛，羊，猴子，人)的过度(异常)Cdc7作用。
本发明的化合物用作药物，例如，用于预防或治疗可能受Cdc7影响的疾病，例如，癌症[例如，结肠直肠癌(例如，结肠直肠癌，直肠癌，***癌，家族性结肠直肠癌，遗传性的非息肉性结肠直肠癌，胃肠基质肿瘤)，肺癌(例如，非小细胞肺癌，小细胞肺癌，恶性间皮瘤)，间皮瘤，胰腺癌(例如，胰管癌症，胰腺内分泌肿瘤)，咽癌，喉癌，食道癌，胃癌(例如，***状腺癌，粘液腺癌，腺鳞癌)，十二指肠癌，小肠癌，乳腺癌(例如，渗透性管内癌，非渗透性管内癌，炎症性乳腺癌)，卵巢癌(例如，卵巢上皮癌，性腺外生殖细胞肿瘤，卵巢生殖细胞肿瘤，卵巢低恶性潜在肿瘤)，睾丸肿瘤，***癌(例如，激素-依赖性***癌，非激素依赖性***癌)，肝癌(例如，肝细胞癌，原发性肝癌，肝外胆管癌)，甲状腺癌(例如，甲状腺髓样癌)，肾癌(例如，肾细胞癌，肾盂和泌尿道的移行细胞癌)，子宫癌(例如，子***，子宫体癌，子宫肉瘤)，脑肿瘤(例如，成髓细胞瘤，神经胶质瘤，松果体星形细胞瘤，纤维性星形细胞瘤，弥漫性星形细胞瘤，间变性星形细胞瘤，垂体腺瘤)，成视网膜细胞瘤，皮肤癌(例如，基底细胞瘤，恶性黑色素瘤)，肉瘤(例如，横纹肌肉瘤，平滑肌肉瘤，软组织肉瘤)，恶性骨肿瘤，膀胱癌，血癌(例如，多发性骨骨髓瘤，白血病，恶性淋巴瘤，Hodgkin's疾病，慢性骨髓增殖性疾病)，未知的原发性癌]，癌症生长抑制剂，癌症转移抑制剂，凋亡促进剂，等等。
尤其是，本发明的化合物对于血癌、乳腺癌、结肠直肠癌、肺癌、胰腺癌等等是有效的。
可以按照原状口服或胃肠外给予上述哺乳动物本发明的化合物作为药物，或与药理学可接受的载体混合给予。
下面详细说明包含本发明化合物的药物(有时缩写为“本发明的药物”)。
对于口服给予本发明的化合物，本发明药物的剂型的例子包括口服制剂，例如片剂(包括糖衣片剂，薄膜包衣片剂，舌下片剂，颊含片，迅速分解口服片剂)，丸剂，颗粒剂，粉剂，胶囊剂(包括软胶囊，微胶囊)，糖浆剂，乳剂，混悬剂和薄膜(例如，口腔粘性膜)。对于肠胃外给药，本发明药物的剂型的例子包括：注射剂，浸渍剂，点滴注射剂，透皮剂(例如，离子电渗透皮剂)和栓剂。通过本发明化合物与合适碱(例如，丁酸聚合物，羟基乙酸聚合物，丁酸-羟基乙酸共聚物，丁酸聚合物和羟基乙酸聚合物的混合物，聚丙三醇脂肪酸酯)的组合，可有效制备缓释制剂。
本发明的药物可以利用通常在药物制剂的技术领域使用的已知的制备方法来制备(例如，描述在Japanese Pharmacopoeia中的方法)。另外，在必要时，本发明的药物可以恰当地含有合适量的、通常在药学领域使用的添加剂，例如赋形剂，结合剂，崩解剂，润滑剂，甜味剂，表面活性剂，悬浮剂，乳化剂，着色剂，防腐剂，芳香剂，矫正剂，稳定剂，增稠剂，等等。
上述药理学可接受的载体的例子包括这些添加剂。
例如，可以使用赋形剂、结合剂、崩解剂、润滑剂等等来制备片剂，丸剂和颗粒剂可以使用赋形剂、结合剂和崩解剂来制备。另外，粉剂和胶囊剂可以使用赋形剂等等来制备，糖浆剂可以使用甜味剂等等来制备，乳剂和混悬剂可以使用悬浮剂、表面活性剂、乳化剂等等来制备。
赋形剂的例子包括乳糖，精制糖，葡萄糖，淀粉，蔗糖，结晶纤维素，粉末甘草，甘露糖醇，碳酸氢钠，磷酸钙和硫酸钙。
结合剂的例子包括5-10wt%淀粉液态糊剂，10-20wt%***树胶溶液或明胶溶液，1-5wt%黄芪胶溶液，羧甲基纤维素溶液，海藻酸钠溶液和丙三醇。
崩解剂的例子包括淀粉和碳酸钙。
润滑剂的例子包括硬脂酸镁，硬脂酸，硬脂酸钙和净化滑石粉。
甜味剂的例子包括葡萄糖，果糖，转化糖，山梨糖醇，木糖醇，丙三醇和单糖浆。
表面活性剂的例子包括月桂基磺酸钠，聚山梨酸酯80，脱水山梨糖醇单脂肪酸酯和聚乙二醇40硬脂酸酯。
悬浮剂的例子包括***胶，海藻酸钠，羧甲基纤维素钠，甲基纤维素和膨润土。
乳化剂的例子包括***胶，黄芪胶，明胶，聚山梨酸酯80。
例如，当本发明的药物是片剂形式时，可以按照本身已知的方法制备片剂，例如，向本发明的化合物中加入赋形剂(例如，乳糖，精制糖，淀粉)、崩解剂(例如，淀粉，碳酸钙)、结合剂(例如，淀粉，***胶，羧甲纤维素，聚乙烯吡咯烷酮，羟丙基纤维素)或润滑剂(例如，滑石粉，硬脂酸镁，聚乙二醇6000)，将该混合物压缩模塑，而后，在必要时，利用本身已知的方法进行包衣，以便屏蔽味道、形成肠溶衣或保持持续性。包衣所使用的包衣试剂的例子包括：羟丙基甲基纤维素，乙基纤维素，羟甲基纤维素，羟丙基纤维素，聚氧乙二醇，Tween 80，Pluronic F68，邻苯二甲酸醋酸纤维素，羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯，羟甲基纤维素乙酸琥珀酸酯，Eudragit(Rohm，Germany生产，甲基丙烯酸-丙烯酸共聚物)和染料(例如，氧化铁红，二氧化钛)。由此获得的片剂可以是快速释放制剂和缓释制剂。
上述注射剂的例子包括静脉注射剂以及皮下注射剂、皮内注射剂、肌内注射剂、滴剂等等。
利用本身已知的方法来制备这种注射剂，或将本发明的化合物在灭菌的水溶液或油状液体中溶解、悬浮或乳化。含水液体的例子包括：含有盐水的等渗溶液，葡萄糖及其它助剂(例如，D-SORBITOL，D-甘露醇，氯化钠)等等。含水液体可以含有合适的增溶剂，例如，醇(例如，乙醇)，多元醇(例如，丙二醇，聚乙二醇)，和非离子型表面活性剂(例如，聚山梨酸酯80，HCO-50)。油液体的例子包括芝麻油，大豆油等等。油液体可以含有合适的增溶剂。增溶剂的例子包括苯甲酸苄酯，苄醇等等。另外，注射剂可以含有缓冲剂(例如，磷酸盐缓冲剂，乙酸钠缓冲剂)、抚慰剂(例如，苯扎氯铵，盐酸普鲁卡因)、稳定剂(例如，人血清白蛋白，聚乙二醇)、防腐剂(例如，苯甲醇，苯酚)等等。制备的注射剂一般填充在小瓶中。
尽管本发明化合物在本发明药物中的含量根据药物制剂的形式而变化，但相对于整个制剂，其通常是大约0.01至100wt%，优选大约2至85wt%，更优选大约5至70wt%。
尽管添加剂在本发明药物中的含量根据药物制剂的形式而变化，但相对于整个制剂，其通常是大约1至99.9wt%，优选大约10至90wt%。
本发明的化合物是稳定和低毒性的，并且可以安全地使用。尽管日剂量根据患者的病症和体重、化合物的种类、给药途径等等而变化，但在例如口服给予治疗癌症的患者的情况下，成年人(体重大约60kg)的日剂量是大约1至1000mg本发明的化合物，优选大约3至300mg，更优选大约10至200mg，可以以一次给药给予，或一天给予2或3份。
当胃肠外给予本发明的化合物时，一般以液剂(例如，针剂)形式给予。尽管剂量根据给药对象、靶器官、症状、给药方法等等而改变，但剂量为：例如，相对于1kg体重，大约0.01mg至大约100mg，优选大约0.01至大约50mg，更优选大约0.01至大约20mg，优选以静脉注射形式给药。
本发明的化合物可以与其它药剂同时使用。具体地说，本发明的化合物可以与药物例如激素治疗剂、化疗剂、免疫治疗剂、抑制细胞生长因子或其受体的作用的药物等等一起使用。在下文中，可以与本发明的化合物组合使用的药物缩写为并用药物。
“激素治疗剂”的例子包括：磷雌酚，己烯雌酚(diethylstylbestrol)，氯烯雌醚，醋酸甲羟孕酮，甲地孕酮，氯地孕酮，乙酸环丙孕酮，达那唑，烯丙雌醇，孕三烯酮(gestrinone)，美帕曲星，雷诺昔酚，奥美昔芬(ormeloxifene)，左美洛昔芬，抗***(例如，柠檬酸它莫西芬，柠檬酸托瑞米芬)，丸制剂，美雄烷，睾内酯(testrolactone)，氨鲁米特，LH-RH激动剂(例如，醋酸戈舍瑞林，布舍瑞林，亮丙瑞林)，屈洛昔芬，环硫雄醇，炔雌醇磺酸酯，芳香酶抑制剂(例如，法屈唑盐酸盐，阿那曲唑，来曲唑(retrozole)，依西美坦，伏氯唑，福美坦)，抗雄激素(例如，氟他胺，比卡鲁胺(bicartamide)，尼鲁米特)，5α-还原酶抑制剂(例如，非那雄胺，依立雄胺)，肾上腺皮质激素药物(例如，***，***龙，倍他米松，曲安西龙)，雄激素合成抑制剂(例如，阿比特龙)，类视黄醇和延迟类视黄醇代谢的药物(例如，利阿唑)，甲状腺激素和其DDS(给药***)制剂。
“化疗剂”的例子包括烷基化剂，代谢拮抗剂，抗癌剂抗生素和植物-衍生的抗癌剂。
“烷基化剂”的例子包括：氮芥，氮芥-N-氧化物盐酸盐，苯丁酸氮芥，环磷酰胺，异环磷酰胺，塞替派，卡波醌，英丙舒凡(Improsulfan)甲苯磺酸盐，白消安，嘧啶亚硝脲盐酸盐，二溴甘露醇，苯丙氨酸氮芥，达卡巴嗪，雷莫司汀(Ranimustine)，雌莫司汀磷酸钠，曲他胺，卡莫司汀，环己亚硝脲，链脲霉素，哌泊溴烷，依托格鲁，卡铂，顺铂，米铂，奈达铂，奥沙利铂，六甲蜜胺，氨莫司汀，二溴螺氯铵，福莫司汀，松龙苯芥，嘌嘧替派(Pumitepa)，核糖霉素(ribomustin)，替莫唑胺，曲奥舒凡(treosulphan)，氯乙环磷酰胺，净司他丁斯酯，阿多来新，半胱胺亚硝脲(cystemustine)，比折来新和其DDS制剂。
“代谢拮抗剂”的例子包括：巯基嘌呤，6-巯基嘌呤核糖核苷，硫代肌苷，氨甲喋呤，培美曲塞(Pemetrexed)，依诺他滨，阿糖胞苷，阿糖胞苷十八烷基磷酸钠，安西他滨盐酸盐，5-FU药物(例如，氟尿嘧啶，替加氟，UFT，去氧氟尿苷，卡莫氟，gallocitabine，乙嘧替氟，卡培他滨)，氨喋呤(aminopterine)，奈拉滨(nelzarabine)，亚叶酸钙，tabloid，甘氨硫嘌呤(butocine)，亚叶酸钙，左旋亚叶酸钙，克拉屈滨，乙嘧替氟，氟达拉滨，吉西他滨，羟基脲，喷司他丁，吡曲克辛，碘苷，丙脒腙，thiazophrine，氨莫司汀，苯达莫司汀和其DDS制剂。
“抗癌抗生素”的例子包括：放线菌素D，放线菌素C，丝裂霉素C，色霉素A3，盐酸博来霉素，硫酸博来霉素，硫酸培洛霉素，盐酸柔红霉素，盐酸多柔比星，盐酸阿柔比星，盐酸吡柔比星，盐酸表柔比星，新制癌菌素，光神霉素，肉瘤霉素，嗜癌霉素，米托坦，盐酸佐柔比星，盐酸米托蒽醌，盐酸伊达比星和其DDS制剂。
“植物-衍生的抗癌剂”的例子包括：依托泊苷，磷酸依托泊苷，硫酸长春碱，硫酸长春新碱，硫酸长春地辛，表鬼臼毒噻吩糖苷，紫杉醇，多西他赛，长春瑞宾和其DDS制剂。
“免疫治疗剂”的例子包括：溶链菌制剂(picibanil)，云芝多糖K(krestin)，西佐喃，蘑菇多糖，乌苯美司，干扰素，白介素，巨噬细胞菌落-刺激因子，粒细胞菌落-刺激因子，红细胞生成素，淋巴细胞毒素，BCG疫苗，小棒状杆菌，左旋咪唑，多醣K，苯咪唑丙酸(procodazole)和抗CTLA4抗体。
在“抑制细胞生长因子或其受体作用的药物”中，“细胞生长因子”的例子包括能够促进细胞增殖的任何物质，其通常是能够在低浓度下显示出活性(通过与受体结合)的、具有至多20,000分子量的肽，其具体实例包括：(1)EGF(表皮生长因子)或活性与EGF基本上相同的物质[例如，TGF-α]，(2)胰岛素或活性与胰岛素基本上相同的物质[例如，胰岛素，IGF(***)-1，IGF-2]，(3)FGF(成纤维细胞生长因子)或活性基本上与FGF相同的物质[例如，酸性FGF，碱性FGF，KGF(角质形成细胞生长因子)，FGF-10]，和(4)其它细胞生长因子[例如，CSF(集落刺激因子)，EPO(红细胞生成素)，IL-2(白细胞介素－2)，NGF(神经生长因子)，PDGF(血小板衍生的生长因子)，TGFβ(转化生长因子β)，HGF(肝细胞生长因子)，VEGF(血管内皮生长因子)，heregulin，血管生成素(angiopoietin)]。
“细胞生长因子受体”的例子包括：能够与上述细胞生长因子结合的任何受体，其具体例子包括EGF受体，heregulin受体(HER3，等等)，胰岛素受体，IGF受体-1，IGF受体-2，FGF受体-1或FGF受体-2，VEGF受体，血管生成素(angiopoietin)受体(Tie2等等)，PDGF受体，等等。
“抑制细胞生长因子或其受体作用的药物”的例子包括：EGF抑制剂，TGFα抑制剂，heregulin抑制剂，胰岛素抑制剂，IGF抑制剂，FGF抑制剂，KGF抑制剂，CSF抑制剂，EPO抑制剂，IL-2抑制剂，NGF抑制剂，PDGF抑制剂，TGFβ抑制剂，HGF抑制剂，VEGF抑制剂，血管生成素(angiopoietin)抑制剂，EGF受体抑制剂，HER2抑制剂，HER4抑制剂，胰岛素受体，IGF-1受体抑制剂，IGF-2受体抑制剂，FGF受体-1抑制剂，FGF受体-2抑制剂，FGF受体-3抑制剂，FGF受体-4抑制剂，VEGF受体抑制剂，Tie-2抑制剂，PDGF受体抑制剂，Abl抑制剂，Raf抑制剂，FLT3抑制剂，c-Kit抑制剂，Src抑制剂，PKC抑制剂，Trk抑制剂，Ret抑制剂，mTOR抑制剂，Aurora抑制剂，PLK抑制剂，MEK(MEK1/2)抑制剂，MET抑制剂，CDK抑制剂，Akt抑制剂，ERK抑制剂等等。其更具体的实例包括：抗VEGF抗体(例如，贝伐单抗)，抗HER2抗体(例如，曲妥单抗，帕妥珠单抗(Pertuzumab))，抗EGFR抗体(例如，西妥昔单抗，帕尼单抗(panitumumab)，马妥珠单抗(Matuzumab)，尼妥珠单抗(Nimotuzumab))，抗VEGFR抗体，抗HGF抗体，甲磺酸伊马替尼，埃洛替尼，吉非替尼，索拉非尼(sorafenib)，舒尼替尼(Sunitinib)，达沙替尼，拉帕替尼(lapatinib)，瓦他拉尼(Vatalanib)，4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基氧基)-6-甲氧基-7-[3-(1-吡咯烷基)丙氧基]喹唑啉(AZD-2171)，来他替尼(Lestaurtinib)，帕唑帕尼(Pazopanib)，卡拉替尼(Canertinib)，坦度替尼(Tandutinib)，3-(4-溴-2,6-二氟苄氧基)-5-[3-[4-(1-吡咯烷基)丁基]脲基]异噻唑-4-甲酰胺(CP-547632)，阿西替尼(Axitinib)，N-(3,3-二甲基-2,3-二氢-1H-吲哚-6-基)-2-(吡啶-4-基甲基氨基)吡啶-3-甲酰胺(AMG-706)，尼洛替尼(Nilotinib)，6-[4-(4-乙基哌嗪-1-基甲基)苯基]-N-[1(R)-苯乙基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(AEE-788)，凡德他尼(Vandetanib)，西罗莫司(Temsirolimus)，依维莫司，Enzastaurin，N-[4-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-6-(3-甲基-1H-吡唑-5-基氨基)嘧啶-2-基硫基]苯基]环丙甲酰胺(VX-680)，2-[N-[3-[4-[5-[N-(3-氟苯基)氨基甲酰胺基甲基]-1H-吡唑-3-基氨基]喹唑啉-7-基氧基]丙基]-N-乙基氨基]乙基磷酸酯(AZD-1152)，4-[9-氯-7-(2,6-二氟苯基)-5H-嘧啶并[5,4-d][2]苯并氮杂环庚烷-2-基氨基]苯甲酸(MLN-8054)，N-[2-甲氧基-5-[(E)-2-(2,4,6-三甲氧基苯基)乙烯基磺酰基甲基]苯基]甘氨酸钠盐(ON-1910Na)，4-[8-环戊基-7(R)-乙基-5-甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢蝶啶-2-基氨基]-3-甲氧基-N-(1-甲基哌啶-4-基)苯甲酰胺(BI-2536)，2-羟乙基5-(4-溴-2-氯苯基氨基)-4-氟-1-甲基-1H-苯并咪唑-6-碳异羟肟酸酯(carbohydroxamate)(AZD-6244)，N-[2(R),3-二羟基丙氧基]-3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘代苯基氨基)苯甲酰胺(PD-0325901)，依维莫司(RAD001)等等。
除了上述药物之外，左天冬酰胺酶、醋葡醛内酯、盐酸甲基苄肼、原卟啉-钴络合盐、汞血卟啉-钠、拓扑异构酶I抑制剂(例如，依立替康，托泊替康)、拓扑异构酶II抑制剂(例如，索布佐生)、分化诱导剂(例如，类视黄醇，维生素D)、其它血管生成抑制剂(例如，烟曲霉素，鲨鱼提取物，COX-2抑制剂)、α-阻断剂(例如，盐酸坦洛新)、二膦酸(例如，帕米膦酸盐，唑来膦酸盐)、沙利度胺、5-氮胞苷、地西他滨、蛋白酶体抑制剂(例如，硼替佐米(Bortezomib))、抗肿瘤抗体(例如抗CD20抗体等等)、毒素示踪的抗体等等也可以用作并用药物。
通过本发明化合物和并用药物的组合，可获得下列优良效果，例如：
(1)与单一给予本发明的化合物或并用药物相比较，可以降低剂量，
(2)可以根据患者的病症(轻症、严重情况等等)选择与本发明化合物组合的并用药物，
(3)可以设定更长的疗程，
(4)可以设计持续治疗效果，
(5)通过组合使用本发明的化合物和并用药物等等，可以得到协同效果。
在下文中，联用形式的本发明化合物和并用药物被称为“本发明的组合药物”。
对于本发明组合药物的使用，对本发明化合物和并用药物的给药时间没有限制，可以同时给予患者本发明的化合物和并用药物或其药物组合物，或可以在不同的时间给药。对于交错方式给药，时间差根据所给予的活性组分、剂型和给药方法而变化。例如，当首先给予并用药物时，可以在给予并用药物之后的1分钟至3天给予本发明的化合物，优选10分钟至1天，更优选15分钟至1小时。例如，当首先给予本发明的化合物时，可以在给予本发明的化合物之后的1分钟至1天给予并用药物，优选10分钟至6小时，更优选15分钟至1小时。并用药物的剂量可以按照临床使用的剂量来确定，并且可以适当地根据给药患者、给药途径、疾病、组合等等来选择。
本发明化合物和并用药物的给药模式的例子包括下列：
(1)给予单一制剂，这种制剂是通过同时加工本发明的化合物和并用药物所获得的，
(2)通过相同给药途径同时给予分别制备的本发明化合物和并用药物的两种制剂，
(3)通过相同给药途径以交错方式给予分别制备的本发明化合物和并用药物的两种制剂，
(4)通过不同给药途径同时给予分别制备的本发明化合物和并用药物的两种制剂，
(5)通过不同给药途径以交错方式给予分别制备的本发明化合物和并用药物的两种制剂(例如，按照本发明的化合物和并用药物的次序给药，或按照反顺序给药)，等等。
按照临床上的剂量，可以恰当地确定并用药物的剂量。可以根据给药的患者、给药途径、靶向疾病、症状、联用形式等等来恰当地确定本发明化合物和并用药物的比例。例如，当给药患者是人时，相对于1重量份数的本发明的化合物，可以使用0.01至100(重量份数)的并用药物。
本发明的组合药物是低毒性的药物，并且可以安全地口服或胃肠外(例如，局部，直肠，静脉内)给予哺乳动物(例如，小鼠，大鼠，仓鼠，兔，猫，狗，牛，羊，猴子，人)，例如，按照本身已知的方法，本发明的化合物和/或上述并用药物与药理学可接受的载体混合之后，得到药物组合物，例如片剂(包括糖衣片和薄膜糖衣片)，粉剂，颗粒剂，胶囊剂(包括软胶囊)，液剂，针剂，栓剂和缓释试剂。注射剂可以通过静脉内、肌内、皮下或器官内给药，或直接给予至病变处。
用于制备本发明组合药物的药理学可接受的载体的例子包括与上述药理学可接受的载体(其用于制备本发明的药物)相似的那些载体。
可以按照给药的患者、给药途径、疾病等等来恰当地确定本发明联用药物中的本发明化合物和并用药物的混合比例。
例如，在本发明的组合药物中，本发明化合物的含量根据制剂的形式而变化，并且通常是大约0.01%重量至100%重量，优选大约0.1%重量至50%重量，更优选大约0.5%重量至20%重量(相对于整个制剂)。
在本发明的组合药物中，并用药物的含量根据制剂的形式而变化，并且通常是大约0.01%重量至90%重量，优选大约0.1%重量至50%重量，更优选大约0.5%重量至20%重量(相对于整个制剂)。
在本发明的组合药物中，添加剂的含量根据制剂的形式而变化，并且通常是大约1%重量至99.99%重量，优选大约10%重量至90%重量(相对于整个制剂)。
当分别配制本发明的化合物和并用药物时，可以使用相同的含量。
本发明的组合药物可以利用本身已知的方法制备，这种方法通常在药物制剂的技术领域使用。
优选，将本发明的化合物模制为口服制剂，例如固体制剂(例如，粉剂，颗粒剂，片剂，胶囊剂)等等，或模制为直肠给药制剂，例如栓剂。尤其是，优选口服给药制剂。
根据药物的种类，可以将并用药物制成上述剂型。
本发明组合药物的剂量根据本发明化合物的种类、患者的年龄、体重、病症、剂型、给药方法、给药时间等等的不同而不同，例如，对于一个癌症患者(成年人，体重∶大约60kg)，关于本发明的化合物或并用药物，静脉内给予联用药物，剂量为大约0.01至大约1000mg/kg/天，优选大约0.01至大约100mg/kg/天，更优选大约0.1至大约100mg/kg/天，尤其是大约0.1至大约50mg/kg/天，特别是大约1.5至大约30mg/kg/天，一天一次或一天分开给药若干次。当然，由于上述剂量根据不同病症而变化，所以，小于上述剂量的数量有时也是足够的，进一步的，有时必须给予超过该范围的数量。
可以将并用药物的量设定为任何值，除非有副作用的问题。按照联用药物的日剂量根据症状的严重程度、患者的年龄、性别、体重、敏感性差异、给药时间、间隔时间和药物制剂的性质、处方和种类、有效成份的种类等等而不同，没有特别限制；例如，在口服给药情况下，药物的剂量通常是每1kg(体重)哺乳动物给予大约0.001至2000mg，优选大约0.01至500mg，进一步优选大约0.1至100mg，通常一天给予一至四次分开剂量。
此外，本发明的化合物或本发明的组合药物可以与非药物疗法同时使用。确切地说，本发明的化合物或本发明的组合药物可以与非药物疗法组合，例如，(1)手术，(2)使用血管紧张素II等等的高血压化学治疗，(3)基因治疗，(4)热疗，(5)冷疗，(6)激光烧灼和(7)放疗。
例如，在上述操作等等的前或后、或在其两或三种的组合治疗前或后使用本发明的化合物或本发明的组合药物，可以获得防止耐性的表达、延长无病存活、抑制癌症转移或复发、延长寿命等等效果。
另外，可以用本发明的化合物或本发明的组合药物与支持疗法[(i)对于具有各种传染病的并发症，给予抗生素(例如，(β-内酰胺，例如头孢替安(pansporin)等等，大环内酯，例如克拉霉素等等)，(ii)给予能够改善营养不良的高卡路里输液、氨基酸制剂或常规维生素制剂，(iii)给予能够减轻疼痛的***，(iv)给予能够改善副作用(例如恶心，呕吐，厌食，腹泻，白细胞减少，血小板减少，血红蛋白浓度降低，脱发，肝病，肾病，DIC，发热等等)的药物，和(v)给予能够抑制癌症的多耐药性的药物，等等]进行组合治疗。
优选，口服(包括缓释制剂)、静脉内(包括丸剂、输液剂和包合物)、皮下和肌内(包括丸剂、输液剂和缓释制剂)、透皮、瘤内或大约在进行上述支持治疗的前或后给予本发明的化合物或本发明的组合药物。
在手术等等之前给予本发明的化合物或本发明的组合药物的情况下，例如，可以在手术等等之前大约30分钟至24小时给予一次本发明的化合物或本发明的组合药物，或在手术等等之前大约3至6个月以分开份额的形式给予一次至三次。用这种方法，可以容易地进行手术等等，这是因为，例如，在手术等等之前，通过给予本发明的化合物或本发明的组合药物，可以使癌症组织减小。
在手术等等之后给予本发明的化合物或本发明的组合药物的情况下，例如，可以在手术等等之后大约30分钟至24小时重复给药，给药几个星期至3个月。用这种方法，通过在手术等等之后给予本发明的化合物或本发明的组合药物，可以提高手术等等的效果。
实施例
下面参照实施例、实验实施例和制剂实施例更更详细地解释本发明，但不应该将其理解为限制性的，并且本发明可以在本发明范围内变化。
在下面的实施例中，“室温”通常显示10℃至大约35℃。除非另作说明，否则，混合溶剂的比例表示体积混合比例。除非另作说明，否则，%表示wt%。
在硅胶柱色谱中，碱性硅胶柱色谱方法使用氨基丙基硅烷-结合的硅胶。用傅里叶变换式NMR测定1H-NMR(质子核磁共振波谱)。没有描述羟基、氨基等等中的非常微小的质子峰。
实施例和实验实施例中的缩写按照目前在该技术领域使用的常规实例，并且是指下列。
s∶单峰
d∶双峰
t∶三重峰
q∶四重峰
dd∶双二重峰
m∶多重峰
brs∶宽单峰
J∶偶合常数
DMSO∶二甲亚砜
Hz∶赫兹
CDCl3∶氘氯仿
1H-NMR∶质子核磁共振
SDS∶十二烷基硫酸钠
PAGE∶聚丙烯酰胺凝胶电泳
PVDF∶聚偏二氟乙烯
HRP∶辣根过氧化物酶
在本说明书的序列表中的SEQ ID NOs表示下列序列。
(SEQ ID NO∶1)实验实施例1中使用的引物的碱基序列
(SEQ ID NO∶2)实验实施例1中使用的引物的碱基序列
(SEQ ID NO∶3)实验实施例1中使用的引物的碱基序列
(SEQ ID NO∶4)实验实施例1中使用的引物的碱基序列
实施例1
2-(2-氯苯基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)3-[(三氟乙酰基)氨基]噻吩-2-羧酸甲酯的制备
向3-氨基噻吩-2-羧酸甲酯(50g)的乙腈(650mL)溶液中加入吡啶(31mL)和三氟乙酸酐(58.6mL)，同时在冰冷却下搅拌，并将该混合物在0℃下搅拌5分钟。搅拌之后，使该反应***升温至室温，10分钟以后，倒入冰水(6L)中。搅拌20分钟之后，过滤收集沉淀，用水洗涤，得到标题化合物(80g)淡褐色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ3.86(3H,s),7.72(1H,d,J=5.4Hz),8.03(1H,d,J=5.4Hz),11.17(1H,brs)。
B)5-溴-3-[(三氟乙酰基)氨基]噻吩-2-羧酸甲酯的制备
向二异丙胺(20mL)的四氢呋喃(200mL)溶液中加入1.6M正丁基锂/己烷溶液(82.4mL)，同时在冰冷却下搅拌，并将该混合物在0℃下搅拌15分钟。搅拌之后，将该反应***冷却至-78℃，并逐滴加入3-[(三氟乙酰基)氨基]噻吩-2-羧酸甲酯(10g)的四氢呋喃(50mL)溶液。逐滴加入完毕后，将该混合物在相同温度下搅拌1小时，并加入1,2-二溴乙烷(20.6mL)。在相同温度下搅拌30分钟之后，将该反应***升温至室温，并进一步搅拌30分钟。将该反应***倒入饱和碳酸氢钠水溶液(600mL)中，并将该混合物用乙酸乙酯萃取，用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(5.3g)黄色固体。
1H-NMR(CDCl3)δ3.94(3H,s),8.11(1H,s),11.15(1H,brs)。
C)3-氨基-5-溴噻吩-2-羧酸甲酯的制备
将5-溴-3-[(三氟乙酰基)氨基]噻吩-2-羧酸甲酯(5.3g)、碳酸钾(10g)、甲醇(100mL)和水(25mL)的混合物在室温下搅拌2小时。将该反应***减压浓缩，并将乙酸乙酯和水倾倒于其中。将该混合物用乙酸乙酯萃取，用盐水洗涤，并用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(3.3g)黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ3.70(3H,s),6.68(2H,brs),6.75(1H,s)。
D)3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺的制备
将3-氨基-5-溴噻吩-2-羧酸甲酯(5.76g)、氢氧化钠(2.94g)、水(25mL)和甲醇(100mL)的混合物在70℃搅拌过夜。将该反应***用冰冷却，加入6M盐酸(8.17mL)，并将该混合物减压浓缩。将氯化铵(26.3g)、三乙胺(49.7g)和N,N-二甲基甲酰胺(230mL)加入到残余物中，并将该混合物在室温下搅拌5分钟。向该反应***中加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(28.2g)和1-羟基苯并***(19.9g)，并将该混合物在室温下搅拌5天。将该反应***倒入饱和碳酸氢钠水溶液(700mL)中，并将该混合物用乙酸乙酯(700mL)萃取，用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(4.1g)黄色固体。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ6.56(2H,brs),6.70(1H,s),6.91(2H,brs)。
E)6-溴-2-(2-氯苯基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
将3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(100mg)、2-氯苯甲酰氯(57μL)、N,N-二甲基吡啶-4-胺(55mg)、吡啶(1.0mL)和N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)的混合物在70℃下搅拌1.5小时。将该反应***减压浓缩，将2M氢氧化钠水溶液加入到残余物中，并将该混合物加热至120℃。1小时之后，过滤除去不溶性物质，并将滤液用1M盐酸中和。过滤收集沉淀，用水洗涤，得到标题化合物(120mg)暗橙色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ7.44-7.67(4H,m),7.69(1H,s),13.04(1H,brs)。
F)2-(2-氯苯基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
将6-溴-2-(2-氯苯基)噻吩并[3.2-d]嘧啶-4(3H)-酮(157mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(425mg)、碳酸钠(138mg)、1,2-二甲氧基乙烷(4.0mL)和水(2.0mL)放在烧瓶中，并用氩气吹扫烧瓶中的空气。加入[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(38mg)，并用氩气再次吹扫烧瓶中的空气。将该反应***在100℃下搅拌1小时，加入8M氢氧化钠水溶液(1mL)，并将该混合物在100℃下搅拌30分钟。搅拌之后，用乙酸乙酯/四氢呋喃混合物萃取该混合物，并将萃取物减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，并将获得的浅黄色固体用甲醇/乙酸乙酯结晶，得到标题化合物(43mg)黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.43(3H,brs),7.43-7.69(5H,m),7.92(0.6H,brs),8.30(0.4H,brs),12.78(1H,brs),13.03(1H,brs)。
实施例2
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(吡咯烷-1-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
将实施例1步骤C制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-羧酸甲酯(15g)、氯乙腈(12mL)和4M盐酸/环戊基甲醚溶液(100mL)的混合物在室温下搅拌2小时，在70℃下搅拌1小时。将该反应***减压浓缩，并将饱和碳酸氢钠水溶液加入到残余物中。过滤收集沉淀，用水洗涤。将获得的固体在80℃下减压干燥8小时，得到标题化合物(18g)淡褐色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ4.51(2H,s),7.56(1H,s),13.00(1H,brs)。
B)6-溴-2-(吡咯烷-1-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
向吡咯烷(2.2mL)、碳酸钾(2.5g)、碘化钠(134mg)和N,N-二甲基甲酰胺(40mL)的混合物中加入6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(2.5g)，并将该混合物在70℃下搅拌30分钟。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，并将残余物用少量的乙酸乙酯洗涤，得到标题化合物(1.5g)浅黄色固体。用碱性硅胶柱色谱纯化滤液(甲醇/乙酸乙酯)，得到标题化合物(0.87g)浅黄色固体。标题化合物的总产率是2.37g。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.65-1.77(4H,m),2.52-2.60(4H,m),3.57(2H,s),7.60(1H,s),12.24(1H,brs)。
C)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(吡咯烷-1-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
将6-溴-2-(吡咯烷-1-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(100mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(294mg)、碳酸钠(95mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)放在烧瓶中，并用氩气吹扫烧瓶中的空气。加入[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(26mg)，并用氩气再次吹扫烧瓶中的空气。将该反应***在100℃下搅拌3小时，加入8M氢氧化钠水溶液(1mL)，并将该混合物在100℃下搅拌30分钟。搅拌之后，用乙酸乙酯/四氢呋喃混合物萃取该混合物，并将萃取物用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用碱性硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷和甲醇/乙酸乙酯)，并将获得的浅黄色固体用甲醇/乙酸乙酯结晶，得到标题化合物(44mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.65-1.78(4H,m),2.45(3H,s),2.53-2.59(4H,m),3.57(2H,s),7.37(1H,s),8.00(1H,brs),11.84-13.16(2H,m)。
MS(ESI+):[M+H]+316。
MS(ESI+)，实测值：316。
实施例3
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-苯基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-苯基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例1步骤E一样的方法，由3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(120mg)和苯甲酰氯(0.063mL)、N,N-二甲基吡啶-4-胺(66mg)、吡啶(1.0mL)和N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)获得标题化合物(111mg)黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ7.50-7.61(3H,m),7.70(1H,s),8.07-8.14(2H,m),12.87(1H,brs)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-苯基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例1步骤F一样的方法，由6-溴-2-苯基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(110mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(331mg)、碳酸钠(107mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(29mg)获得标题化合物(51mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.49(3H,brs),7.49(1H,s),7.51-7.65(3H,m),7.94(0.6H,brs),8.10-8.20(2H,m),8.29(0.4H,brs),12.65(1H,brs),13.02(1H,brs)。
实施例4
2-{[(3S)-3-氟吡咯烷-1-基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-{[(3S)-3-氟吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(200mg)、(3S)-3-氟吡咯烷盐酸盐(270mg)、碳酸钾(494mg)、碘化钠(10mg)和N,N-二甲基甲酰胺(4.0mL)获得标题化合物(197mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.75-2.28(2H,m),2.44-2.54(1H,m),2.67-2.98(3H,m),3.61(2H,s),4.96-5.48(1H,m),7.62(1H,s),12.42(1H,brs)。
B)2-{[(3S)-3-氟吡咯烷-1-基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-{[(3S)-3-氟吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(192mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(392mg)、碳酸钠(139mg)、1,2-二甲氧基乙烷(4.0mL)和水(2.0mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(47mg)获得标题化合物(93mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.75-2.30(2H,m),2.45(3H,brs),2.48-2.55(1H,m),2.69-3.04(3H,m),3.61(2H,s),4.97-5.45(1H,m),7.38(1H,s),7.89(1H,brs),12.19(1H,brs),12.99(1H,brs)。
实施例5
2-{[(3R)-3-氟吡咯烷-1-基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-{[(3R)-3-氟吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(200mg)、(3R)-3-氟吡咯烷盐酸盐(270mg)、碳酸钾(494mg)、碘化钠(10mg)和N,N-二甲基甲酰胺(4.0mL)获得标题化合物(192mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.75-2.26(2H,m),2.41-2.51(1H,m),2.67-2.97(3H,m),3.60(2H,s),5.03-5.37(1H,m),7.61(1H,s),12.44(1H,brs)。
B)2-{[(3R)-3-氟吡咯烷-1-基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-{[(3R)-3-氟吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(192mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(392mg)、碳酸钠(139mg)、1,2-二甲氧基乙烷(4.0mL)和水(2.0mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(47mg)获得标题化合物(68mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.75-2.27(2H,m),2.45(3H,brs),2.48-2.57(1H,m),2.69-3.01(3H,m),3.61(2H,s),5.03-5.38(1H,m),7.38(1H,s),7.97(1H,brs),12.17(1H,brs),12.98(1H,brs)。
实施例6
2-{[(3R)-3-羟基吡咯烷-1-基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-{[(3R)-3-羟基吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(180mg)、(3R)-吡咯烷-3-醇(0.16mL)、碳酸钾(178mg)、碘化钠(9.7mg)和N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)获得标题化合物(129mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.40-1.67(1H,m),1.88-2.11(1H,m),2.39-2.49(2H,m),2.65-2.80(2H,m),3.58(2H,s),4.11-4.22(1H,m),4.85(1H,brs),7.60(1H,s),12.27(1H,brs)。
B)2-{[(3R)-3-羟基吡咯烷-1-基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-{[(3R)-3-羟基吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(125mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(257mg)、碳酸钠(91mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(31mg)获得标题化合物(20mg)褐色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.48-1.65(1H,m),1.92-2.12(1H,m),2.41-2.49(5H,m),2.68-2.82(2H,m),3.58(2H,s),4.11-4.25(1H,m),7.35(1H,s),8.02(1H,brs),12.22-13.36(2H,m)。
实施例7
2-{[(3S)-3-羟基吡咯烷-1-基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-{[(3S)-3-羟基吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(180mg)、(3S)-吡咯烷-3-醇(0.16mL)、碳酸钾(178mg)、碘化钠(9.7mg)和N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)获得标题化合物(99mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.49-1.66(1H,m),1.90-2.11(1H,m),2.39-2.49(2H,m),2.65-2.82(2H,m),3.59(2H,s),4.10-4.24(1H,m),4.85(1H,brs),7.60(1H,s),12.11(1H,brs)。
B)2-{[(3S)-3-羟基吡咯烷-1-基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-{[(3S)-3-羟基吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(95mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(195mg)、碳酸钠(69mg)、1,2-二甲氧基乙烷(2.0mL)和水(1.0mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(24mg)获得标题化合物(36mg)褐色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.46-1.67(1H,m),1.92-2.09(1H,m),2.40-2.48(5H,m),2.69-2.83(2H,m),3.57(2H,s),4.11-4.25(1H,m),7.33(1H,s),8.00(1H,brs),12.49-13.20(2H,m)。
实施例8
2-[(3,3-二氟吡咯烷-1-基)甲基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-[(3,3-二氟吡咯烷-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(180mg)、3,3-二氟吡咯烷盐酸盐(277mg)、碳酸钾(445mg)、碘化钠(9.7mg)和N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)获得标题化合物(162mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.13-2.36(2H,m),2.83(2H,t,J=7.0Hz),3.04(2H,t,J=13.5Hz),3.62(2H,s),7.62(1H,s),12.51(1H,brs)。
B)2-[(3,3-二氟吡咯烷-1-基)甲基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-[(3,3-二氟吡咯烷-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(162mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(314mg)、碳酸钠(111mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(38mg)获得标题化合物(103mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.18-2.35(2H,m),2.46(3H,brs),2.85(2H,t,J=6.9Hz),3.06(2H,t,J=13.4Hz),3.63(2H,s),7.39(1H,s),7.90(0.6H,brs),8.26(0.4H,brs),12.25(1H,brs),12.98(1H,brs)。
实施例9
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(哌啶-1-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-(哌啶-1-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(180mg)、哌啶(0.19mL)、碳酸钾(178mg)、碘化钠(9.7mg)和N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)获得标题化合物(175mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.31-1.42(2H,m),1.45-1.56(4H,m),2.35-2.46(4H,m),3.40(2H,s),7.61(1H,s),12.20(1H,brs)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(哌啶-1-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-(哌啶-1-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(175mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(361mg)、碳酸钠(128mg)、1,2-二甲氧基乙烷(4.0mL)和水(2.0mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(44mg)获得标题化合物(56mg)淡褐色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.30-1.44(2H,m),1.44-1.60(4H,m),2.40-2.48(7H,m),3.42(2H,s),7.38(1H,s),8.04(1H,brs),12.61(2H,brs)。
实施例10
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(吗啉-4-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-(吗啉-4-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(180mg)、吗啉(0.17mL)、碳酸钾(178mg)、碘化钠(9.7mg)和N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)获得标题化合物(110mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.44-2.49(4H,m),3.44(2H,s),3.54-3.64(4H,m),7.61(1H,s),12.40(1H,brs)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(吗啉-4-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-(吗啉-4-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(110mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(226mg)、碳酸钠(80mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(27mg)获得标题化合物(34mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.39-2.48(7H,m),3.45(2H,s),3.54-3.64(4H,m),7.38(1H,s),7.88(0.6H,brs),8.23(0.4H,brs),12.11(1H,brs),12.96(1H,brs)。
实施例11
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮单三氟乙酸盐的制备
A)(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
将实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(300mg)、1-(叔丁氧羰基)-L-脯氨酸(700mg)，O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(1.55g)和N-乙基-N-(1-甲基乙基)丙-2-胺(0.713mL)的N,N-二甲基甲酰胺(8mL)溶液在90℃下搅拌16小时。将乙酸乙酯(40mL)和碳酸氢钠水溶液(20mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到(2S)-2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基甲酰基]吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯和3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(起始原料)的不可分离的混合物黄色油。向上面制备的(2S)-2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基甲酰基]吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯和3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺混合物的乙醇(6mL)溶液中加入2M氢氧化钠水溶液(2.04mL)，并将该混合物在70℃下搅拌4小时。将6M盐酸(1mL)、乙酸乙酯(20mL)和碳酸氢钠水溶液(10mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(5mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(175mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.12(9H,s,主要),1.37(9H,s,次要),1.73-2.04(3H,m),2.18-2.36(1H,m),3.32-3.43(1H,m),3.48-3.59(1H,m),4.56(1H,dd,J=7.6,4.8Hz,主要),4.60-4.66(1H,m,次要),7.60(1H,s,次要),7.63(1H,s,主要),12.63(1H,brs,次要),12.72(1H,brs,主要)。观测的异构体的比例是2:1。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮单三氟乙酸盐的制备
将(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(173mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(266mg)、碳酸铯(282mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5mL)和水(0.5mL)放在烧瓶中，并用氩气吹扫烧瓶中的空气。加入[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1，71mg)，并用氩气再次吹扫烧瓶中的空气，将该混合物在80℃下搅拌2小时。将乙酸乙酯(20mL)和水(5mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(5ml×2)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，并将目标级分减压浓缩，得到4-{2-[(2S)-1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基]-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基}-3-甲基-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯和(2S)-2-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的混合物。将上面制备的4-{2-[(2S)-1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基]-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基}-3-甲基-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯和(2S)-2-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的三氟乙酸(10mL)溶液在室温下搅拌1小时，并将该混合物减压浓缩。将残余物用甲醇/乙酸乙酯(1mL/4mL)结晶，得到标题化合物(129mg)淡褐色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.93-2.15(3H,m),2.38-2.44(1H,m),2.46(3H,brs),3.35-3.50(2H,m),4.66(1H,t,J=7.2Hz),7.37(1H,s),7.85-8.48(1H,m),8.99(1H,brs),9.52(1H,brs),12.80(1H,brs),13.06(1H,brs)。
MS(ESI+):[M+H]+302。
MS(ESI+)，实测值：302。
实施例12
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2R)-吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮单三氟乙酸盐的制备
A)(2R)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例11步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(300mg)和1-(叔丁氧羰基)-D-脯氨酸(878mg)和O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲
Figure BDA00002264979900771
六氟磷酸盐(2.06g)和N-乙基-N-(1-甲基乙基)丙-2-胺(0.95mL)和N,N-二甲基甲酰胺(8mL)获得标题化合物(176mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.12(9H,s,主要),1.37(9H,s,次要),1.77-2.02(3H,m),2.19-2.34(1H,m),3.34-3.43(1H,m),3.47-3.59(1H,m),4.56(1H,dd,J=7.6,4.8Hz,主要),4.62(1H,dd,J=7.7,3.4Hz,次要),7.59(1H,s,次要),7.62(1H,s,主要),12.70(1H,brs)。观测的异构体的比例是2:1。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2R)-吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮单三氟乙酸盐的制备
利用和实施例11步骤B一样的方法，由(2R)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(173mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(266mg)和碳酸铯(282mg)和1,2-二甲氧基乙烷(5mL)和水(0.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1∶1)(71mg)获得标题化合物(121mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.94-2.15(3H,m),2.39-2.47(1H,m),2.46(3H,s),3.27-3.43(2H,m),4.66(1H,t,J=7.1Hz),7.37(1H,s),8.09(1H,brs),8.98(1H,brs),9.55(1H,brs),12.80(1H,brs)。
实施例13
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-吡咯烷-1-基乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-(2-吡咯烷-1-基乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
在搅拌下，在室温下，向实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(120mg)、三乙胺(0.083mL)和四氢呋喃(3.0mL)混合物中加入3-氯丙酰基氯(0.057mL)。10分钟之后，加入吡咯烷(0.23mL)，并将该混合物在室温下搅拌10分钟。将该反应***减压浓缩，将2M氢氧化钠水溶液(1.0mL)加入到残余物中，并将该混合物在120℃加热下搅拌1小时。将该混合物用乙酸乙酯萃取，用盐水洗涤，并用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，得到标题化合物(131mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.63-1.70(4H,m),2.43-2.49(4H,m),2.78-2.82(4H,m),7.57(1H,s),12.61(1H,brs)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-吡咯烷-1-基乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例1步骤F一样的方法，由6-溴-2-(2-吡咯烷-1-基乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(125mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(352mg)、碳酸钠(114mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(31mg)获得标题化合物(66mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.51-1.78(4H,m),2.40-2.49(7H,m),2.75-2.89(4H,m),7.34(1H,s),8.02(1H,brs),11.93-13.36(2H,m)。
实施例14
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(4-苯基哌嗪-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-[(4-苯基哌嗪-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(180mg)、1-苯基哌嗪(0.29mL)、碳酸钾(178mg)、碘化钠(9.7mg)和N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)获得标题化合物(180mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.60-2.70(4H,m),3.05-3.19(4H,m),3.52(2H,s),6.72-6.81(1H,m),6.92(2H,d,J=7.9Hz),7.13-7.26(2H,m),7.63(1H,s),12.36(1H,brs)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(4-苯基哌嗪-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-[(4-苯基哌嗪-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(180mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(410mg)、碳酸钠(133mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(36mg)获得标题化合物(86mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.39-2.48(3H,m),2.60-2.70(4H,m),3.08-3.23(4H,m),3.53(2H,s),6.77(1H,t,J=7.2Hz),6.92(2H,d,J=7.2Hz),7.12-7.26(2H,m),7.40(1H,s),7.89(0.6H,brs),8.26(0.4H,brs),12.18(1H,brs),13.00(1H,brs)。
实施例15
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(4-苯基哌啶-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-[(4-苯基哌啶-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(240mg)、4-苯基哌啶(415mg)、碳酸钾(237mg)、碘化钠(13mg)和N,N-二甲基甲酰胺(4.0mL)获得标题化合物(241mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.53-1.82(4H,m),2.14-2.32(2H,m),2.43-2.48(1H,m),2.93-3.03(2H,m),3.50(2H,s),7.10-7.35(5H,m),7.62(1H,s),12.24(1H,brs)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(4-苯基哌啶-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-[(4-苯基哌啶-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(240mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(549mg)、碳酸钠(178mg)、1,2-二甲氧基乙烷(4.0mL)和水(2.0mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(49mg)获得标题化合物(138mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.61-1.83(4H,m),2.14-2.33(2H,m),2.40-2.50(4H,m),2.90-3.08(2H,m),3.50(2H,s),7.10-7.34(5H,m),7.39(1H,s),7.96(1H,brs),12.08(1H,brs),12.97(1H,brs)。
实施例16
2-{[(2S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)6-溴-2-{[(2S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(180mg)、(2S)-吡咯烷-2-基甲醇(0.19mL)、碳酸钾(178mg)、碘化钠(9.7mg)和N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)获得标题化合物(112mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.49-1.92(4H,m),2.21-2.41(1H,m),2.59-2.72(1H,m),2.82-3.00(1H,m),3.19-3.54(3H,m),4.01(1H,d,J=14.7Hz),4.74(1H,brs),7.60(1H,s),12.04(1H,brs)。
B)2-{[(2S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-{[(2S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(112mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(300mg)、碳酸钠(78mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(27mg)获得标题化合物(90mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.67-2.22(4H,m),2.47(3H,s),3.33-3.50(1H,m),3.63-3.91(4H,m),4.37-4.51(1H,m),4.65-4.78(1H,m),7.41(1H,s),8.10(1H,s),10.27(1H,brs),12.77(1H,brs)。
实施例17
2-{[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)6-溴-2-{[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(180mg)、(2R)-吡咯烷-2-基甲醇(0.19mL)、碳酸钾(178mg)、碘化钠(9.7mg)和N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)获得标题化合物(122mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.53-1.91(4H,m),2.23-2.38(1H,m),2.61-2.71(1H,m),2.83-2.98(1H,m),3.20-3.55(3H,m),4.01(1H,d,J=14.7Hz),4.33-5.67(1H,m),7.60(1H,s),11.13-12.68(1H,m)。
B)2-{[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-{[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(122mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(327mg)、碳酸钠(85mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(29mg)获得标题化合物(96mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.69-2.23(4H,m),2.47(3H,s),3.31-3.52(1H,m),3.63-3.94(4H,m),4.35-4.54(1H,m),4.62-4.82(1H,m),7.40(1H,s),8.09(1H,s),10.29(1H,brs),12.76(1H,brs)。
实施例18
2-{[(3S)-3-甲氧基吡咯烷-1-基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-{[(3S)-3-甲氧基吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(180mg)、(3S)-3-甲氧基吡咯烷盐酸盐(265mg)、碳酸钾(445mg)、碘化钠(9.7mg)和N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)获得标题化合物(152mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.59-1.76(1H,m),1.90-2.07(1H,m),2.52-2.59(2H,m),2.60-2.71(1H,m),2.75-2.85(1H,m),3.15(3H,s),3.55(2H,s),3.82-3.95(1H,m),7.61(1H,s),12.36(1H,brs)。
B)2-{[(3S)-3-甲氧基吡咯烷-1-基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-{[(3S)-3-甲氧基吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(150mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(403mg)、碳酸钠(105mg)、1,2-二甲氧基乙烷(4.0mL)和水(2.0mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(36mg)获得标题化合物(56mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.60-1.74(1H,m),1.92-2.07(1H,m),2.45(3H,s),2.52-2.61(2H,m),2.63-2.73(1H,m),2.77-2.87(1H,m),3.16(3H,s),3.56(2H,s),3.81-4.02(1H,m),7.38(1H,s),7.97(1H,brs),12.10(1H,brs),12.96(1H,brs)。
实施例19
2-{[(3R)-3-甲氧基吡咯烷-1-基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-{[(3R)-3-甲氧基吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(180mg)、(3R)-3-甲氧基吡咯烷盐酸盐(265mg)、碳酸钾(445mg)、碘化钠(9.7mg)和N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)获得标题化合物(150mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.57-1.74(1H,m),1.91-2.07(1H,m),2.52-2.59(2H,m),2.61-2.71(1H,m),2.75-2.85(1H,m),3.15(3H,s),3.55(2H,s),3.81-3.96(1H,m),7.61(1H,s),12.36(1H,brs)。
B)2-{[(3R)-3-甲氧基吡咯烷-1-基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-{[(3R)-3-甲氧基吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(150mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(403mg)、碳酸钠(105mg)、1,2-二甲氧基乙烷(4.0mL)和水(2.0mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1∶1)(36mg)获得标题化合物(71mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.60-1.74(1H,m),1.92-2.07(1H,m),2.45(3H,s),2.52-2.61(2H,m),2.62-2.72(1H,m),2.77-2.86(1H,m),3.16(3H,s),3.56(2H,s),3.81-3.97(1H,m),7.38(1H,s),8.00(1H,brs),12.21(1H,brs),12.92(1H,brs)。
实施例20
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1-吡咯烷-1-基乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-(1-吡咯烷-1-基乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
在搅拌下，在室温下，向实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(221mg)、三乙胺(0.15mL)和四氢呋喃(5.0mL)的混合物中加入2-溴丙酰基氯(0.11mL)。10分钟之后，加入吡咯烷(0.42mL)，并将该混合物在70℃下搅拌1小时。将该反应***减压浓缩，将2M氢氧化钠水溶液(1.0mL)加入到残余物中，并将该混合物在120℃加热下搅拌2小时。用乙酸乙酯萃取该混合物，用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用碱性硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷和甲醇/乙酸乙酯)，得到标题化合物(276mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.38(3H,d,J=6.8Hz),1.69(4H,brs),2.40-2.48(2H,m),2.55-2.66(2H,m),3.49(1H,q,J=6.8Hz),7.59(1H,s),12.14(1H,brs)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1-吡咯烷-1-基乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-(1-吡咯烷-1-基乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(270mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(761mg)、碳酸钠(198mg)、1,2-二甲氧基乙烷(6.0mL)和水(3.0mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(67mg)获得标题化合物(145mg)淡褐色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.39(3H,d,J=6.8Hz),1.64-1.75(4H,m),2.40-2.48(5H,m),2.55-2.65(2H,m),3.49(1H,q,J=6.8Hz),7.37(1H,s),8.02(1H,brs),12.00-13.09(2H,m)。
实施例21
6-(5-乙基-1H-吡唑-4-基)-2-(吡咯烷-1-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)N,N-二甲基-1H-吡唑-1-磺酰胺的制备
在0℃，将氢化钠(50%，8.46g)加入到吡唑(12g)的四氢呋喃(200mL)溶液中，同时搅拌。20分钟之后，逐滴加入二甲基氨磺酰基氯(17mL)，并将该混合物在相同温度下搅拌1小时，用1小时升温至室温。将该反应***倒入饱和碳酸氢钠水溶液中，并将该混合物用乙酸乙酯萃取，用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(25.3g)无色油。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ2.95(6H,s),6.40(1H,m),7.75(1H,m),7.99(1H,d,J=2.7Hz)。
B)5-乙基-N,N-二甲基-1H-吡唑-1-磺酰胺的制备
在-78℃，将1.6M正丁基锂/己烷溶液(99mL)逐滴加入到N,N-二甲基-1H-吡唑-1-磺酰胺(25.3g)的四氢呋喃搅拌溶液(200mL)中。逐滴加入完毕30分钟后，逐滴加入碘乙烷(12.8mL)。在相同温度下搅拌该混合物30分钟，并将该反应***升温至室温。1小时之后，加入四氢呋喃(200mL)，以促进该反应***的搅拌，并将该混合物进一步搅拌2小时。将该反应***倒入饱和碳酸氢钠水溶液(600mL)中，并将该混合物用乙酸乙酯(400mL×2)萃取，用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。对残余物进行硅胶柱色谱(乙酸乙酯/己烷)，并将目标级分减压浓缩，得到标题化合物(19.8g)无色油。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ1.30(3H,t,J=7.8Hz),2.94(2H,dd,J=15.0,7.5Hz),3.03(6H,s),6.13(1H,brs),7.55(1H,brs)。
C)4-溴-5-乙基-N,N-二甲基-1H-吡唑-1-磺酰胺的制备
在室温下，将1-溴吡咯烷-2,5-二酮(20.8g)加入到5-乙基-N,N-二甲基-1H-吡唑-1-磺酰胺(19.8g)的四氢呋喃搅拌溶液(300mL)中。将该反应***加热至50℃，搅拌2小时，并减压浓缩。将残余物倒入饱和碳酸氢钠水溶液中，并将该混合物用乙酸乙酯萃取，用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(26.2g)黄色油。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ1.24(3H,t,J=7.5Hz),2.97(2H,dd,J=15.0Hz,7.8Hz),3.06(6H,s),7.54(1H,s)。
D)5-乙基-N,N-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-磺酰胺的制备
将4-溴-5-乙基-N,N-二甲基-1H-吡唑-1-磺酰胺(13.0g)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(12.3g)、乙酸钾(13.6g)和1,2-二甲氧基乙烷(300mL)放在烧瓶中，并用氩气吹扫烧瓶中的空气。加入[1，1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1，3.76g)，并用氩气再次吹扫烧瓶中的空气，将该混合物在90℃下搅拌过夜。将该反应***冷却至室温。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将乙酸乙酯和己烷(1:1)的混合物加入到残余物中，再次过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(6.32g)白色固体。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ1.25(3H,t,J=7.5Hz),1.31(12H,s),3.03(6H,s),3.17(2H,dd,J=15.0,7.5Hz),7.75(1H,s)。
E)6-(5-乙基-1H-吡唑-4-基)-2-(吡咯烷-1-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
将6-溴-2-(吡咯烷-1-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(100mg)、5-乙基-N,N-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-磺酰胺(210mg)、碳酸铯(311mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5mL)和水(1mL)放在烧瓶中，并用氩气吹扫烧瓶中的空气。加入[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(26.0mg)，用氩气再次吹扫烧瓶中的空气，并将该混合物在90℃下搅拌3小时。将该反应***冷却至室温，并加入碳酸钠(169mg)、5-乙基-N,N-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-磺酰胺(210mg)、水(1mL)和[1,1’-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(26.0mg)。用氩气再次吹扫烧瓶中的空气，并将该混合物在90℃搅拌过夜。将该反应***倒入盐水中，并将该混合物用乙酸乙酯和四氢呋喃的混合物(3:1)萃取，用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。对残余物经受碱性硅胶柱色谱(甲醇/乙酸乙酯)，并将目标级分减压浓缩。将1M盐酸/***溶液(5mL)和甲醇(5mL)加入到残余物中，并将该混合物在60℃下搅拌2小时。将该反应***冷却至室温，并过滤收集沉淀，得到标题化合物(95.9mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.26(3H,t,J=7.5Hz),1.99(4H,m),2.84-2.92(2H,m),3.17-3.25(2H,m),3.64-3.77(2H,m),4.51(2H,s),7.38(1H,s),8.09(1H,s),10.61(1H,brs),12.80(1H,brs)。
实施例22
2-[(2S)-4,4-二氟吡咯烷-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-4,4-二氟吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例11步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(250mg)和1-(叔丁氧羰基)-4,4-二氟-L-脯氨酸(568mg)和O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲
Figure BDA00002264979900861
六氟磷酸盐(1.29g)和N-乙基-N-(1-甲基乙基)丙-2-胺(0.592mL)和N,N-二甲基甲酰胺(5mL)获得标题化合物(286mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.14(9H,s,主要),1.39(9H,s,次要),2.55-2.71(1H,m),2.86-2.97(1H,m),3.80-4.03(2H,m),4.74-4.90(1H,m),7.60(1H,s,次要),7.63(1H,s,主要),12.84(1H,brs)。观测的异构体的比例是3:2。
B)2-[(2S)-4,4-二氟吡咯烷-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例11步骤B一样的方法，由(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-4,4-二氟吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(286mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(404mg)和碳酸铯(427mg)和1,2-二甲氧基乙烷(7mL)和水(0.7mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(107mg)获得标题化合物(163mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.46(3H,s),2.75-2.95(1H,m),3.01-3.21(1H,m),3.89(2H,t,J=12.3Hz),5.05(1H,t,J=8.5Hz),7.41(1H,s),8.11(1H,s),10.32(1H,brs),12.87(1H,brs)。
实施例23
2-[(2S,4R)-4-氟吡咯烷-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)(2S,4R)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例11步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(250mg)和(4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-氟-L-脯氨酸(568mg)和O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲
Figure BDA00002264979900871
六氟磷酸盐(1.29g)和N-乙基-N-(1-甲基乙基)丙-2-胺(0.592mL)和N,N-二甲基甲酰胺(5mL)获得标题化合物(239mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.11(9H,s,主要),1.37(9H,s,次要),2.09-2.35(1H,m),2.54-2.67(1H,m),3.63-3.86(2H,m),4.64-4.76(1H,m),5.38(1H,d,J=53.4Hz),7.58(1H,s,次要),7.61(1H,s,主要),12.79(1H,brs)。观测的异构体的比例是2:1。
B)2-[(2S,4R)-4-氟吡咯烷-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例11步骤B一样的方法，由(2S,4R)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(237mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(348mg)和碳酸铯(368mg)和1,2-二甲氧基乙烷(5mL)和水(0.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(92.3mg)获得标题化合物(139mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.29-2.45(1H,m),2.46(3H,s),2.76-2.93(1H,m),3.50-3.70(2H,m),4.80-4.96(1H,m),5.45-5.69(1H,m),7.37(1H,s),8.10(1H,s),9.38(1H,brs),10.44(1H,brs),12.85(1H,brs)。
实施例24
2-[(2S,4S)-4-氟吡咯烷-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)(2S,4S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例11步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(250mg)和(4S)-1-(叔丁氧羰基)-4-氟-L-脯氨酸(568mg)和O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(1.29g)和N-乙基-N-(1-甲基乙基)丙-2-胺(0.592mL)和N,N-二甲基甲酰胺(5mL)获得标题化合物(106mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.18(9H,s,主要),1.42(9H,s,次要),2.19-2.38(1H,m),2.55-2.82(1H,m),3.57-3.83(2H,m),4.71-4.86(1H,m),5.16-5.41(1H,m),7.59(1H,s,次要),7.62(1H,s,主要),12.61(1H,brs)。观测的异构体的比例是2:1。
B)2-[(2S,4S)-4-氟吡咯烷-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例11步骤B一样的方法，由(2S,4S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(180mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(265mg)和碳酸铯(281mg)和1,2-二甲氧基乙烷(5mL)和水(0.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1∶1)(70.3mg)获得标题化合物(102mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.46(3H,s),2.71-2.96(1H,m),3.47-3.77(3H,m),4.87(1H,brs),5.37-5.61(1H,m),7.37(1H,s),8.10(1H,s),9.40(1H,brs),10.34(1H,brs),12.87(1H,brs)。
实施例25
2-[(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)甲基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B和步骤C一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(160mg)和3,3-二氟氮杂环丁烷盐酸盐(200mg)和碳酸钾(158mg)和碘化钠(8.6mg)和N,N-二甲基乙酰胺(4.0mL)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(353mg)和碳酸铯(373mg)和1,2-二甲氧基乙烷(4.0mL)和水(1mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(26mg)获得标题化合物(93mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.42-2.47(3H,m),3.71-3.82(6H,m),7.36-7.38(1H,m),7.88(0.6H,brs),8.25(0.4H,brs),12.28(1H,brs),12.97(1H,brs)。
实施例26
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-{[(3R)-3-甲基吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-{[(3R)-3-甲基吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(180mg)、(3R)-3-甲基吡咯烷盐酸盐(235mg)、碳酸钾(445mg)、碘化钠(9.7mg)和N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)获得标题化合物(171mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.98(3H,d,J=6.6Hz),1.17-1.37(1H,m),1.85-2.02(1H,m),2.03-2.26(2H,m),2.53-2.61(1H,m),2.62-2.71(1H,m),2.77-2.86(1H,m),3.55(2H,s),7.59(1H,s),12.30(1H,brs)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-{[(3R)-3-甲基吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-{[(3R)-3-甲基吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(170mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(479mg)、碳酸钠(124mg)、1,2-二甲氧基乙烷(4.0mL)和水(2.0mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(42mg)获得标题化合物(36mg)淡褐色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.98(3H,d,J=6.6Hz),1.21-1.37(1H,m),1.87-2.02(1H,m),2.06-2.26(2H,m),2.45(3H,brs),2.53-2.61(1H,m),2.62-2.73(1H,m),2.77-2.89(1H,m),3.55(2H,s),7.37(1H,s),8.03(1H,brs),12.13-12.91(2H,m)。
实施例27
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-{[(3S)-3-甲基吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-{[(3S)-3-甲基吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(180mg)、(3S)-3-甲基吡咯烷盐酸盐(235mg)、碳酸钾(445mg)、碘化钠(9.7mg)和N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)获得标题化合物(186mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.98(3H,d,J=6.6Hz),1.21-1.36(1H,m),1.86-2.03(1H,m),2.05-2.25(2H,m),2.53-2.61(1H,m),2.61-2.74(1H,m),2.76-2.88(1H,m),3.55(2H,s),7.59(1H,s),12.19(1H,brs)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-{[(3S)-3-甲基吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-{[(3S)-3-甲基吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(180mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(507mg)、碳酸钠(132mg)、1,2-二甲氧基乙烷(4.0mL)和水(2.0mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(45mg)获得标题化合物(37mg)淡褐色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.98(3H,d,J=6.6Hz),1.20-1.37(1H,m),1.88-2.03(1H,m),2.05-2.25(2H,m),2.45(3H,s),2.53-2.62(1H,m),2.62-2.72(1H,m),2.78-2.86(1H,m),3.55(2H,s),7.37(1H,s),8.02(1H,brs),11.97-13.06(2H,m)。
实施例28
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-{[3-(三氟甲基)吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-{[3-(三氟甲基)吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(200mg)和3-三氟甲基吡咯烷盐酸盐(377mg)和三乙胺(0.595mL)和碘化钠(10.7mg)和N,N-二甲基甲酰胺(4.0mL)获得标题化合物(220mg)淡褐色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.70-1.84(1H,m),1.95-2.10(1H,m),2.55-2.72(3H,m),2.91(1H,t,J=9.3Hz),3.02-3.19(1H,m),3.58(2H,s),7.58(1H,s),12.37(1H,brs)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-{[3-(三氟甲基)吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-{[3-(三氟甲基)吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(218mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(351mg)、碳酸铯(371mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5.0mL)和水(0.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(93mg)获得标题化合物(57.3mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.71-1.86(1H,m),1.96-2.12(1H,m),2.45(3H,s),2.57-2.78(3H,m),2.93(1H,t,J=9.2Hz),3.01-3.21(1H,m),3.60(2H,s),7.38(1H,s),7.70-8.39(1H,m),12.16(1H,brs),12.97(1H,brs)。
实施例29
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-{[2-(三氟甲基)吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-{[2-(三氟甲基)吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(200mg)和2-三氟甲基吡咯烷(0.247mL)和三乙胺(0.298mL)和碘化钠(10.7mg)和N,N-二甲基甲酰胺(4.0mL)获得标题化合物(35.8mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.68-1.89(3H,m),2.02-2.17(1H,m),2.75-2.86(1H,m),3.03-3.13(1H,m),3.78-3.85(1H,m),3.87(2H,d,J=3.8Hz),7.57(1H,s),12.42(1H,brs)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-{[2-(三氟甲基)吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-{[2-(三氟甲基)吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(34mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(54.8mg)、碳酸铯(58.0mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(0.3mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(14.5mg)获得标题化合物(8.3mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.66-1.92(3H,m),2.06-2.23(1H,m),2.46(3H,s),2.75-2.87(1H,m),3.06-3.16(1H,m),3.80-3.89(1H,m),3.90(2H,s),7.39(1H,s),7.85-8.32(1H,m),12.16(1H,brs),12.99(1H,brs)。
实施例30
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S,4R)-4-苯氧基吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)(2S,4R)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-4-苯氧基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
将(4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-苯氧基-L-脯氨酸(1.04g)、O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲
Figure BDA00002264979900921
六氟磷酸盐(1.29g)和N-乙基-N-(1-甲基乙基)丙-2-胺(0.692mL)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液在室温下搅拌30分钟。向该反应混合物中加入实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(250mg)，并将该混合物在90℃下搅拌1.5小时。将该反应混合物减压浓缩，将乙酸乙酯(20mL)和碳酸氢钠水溶液(10mL)加入到所获得的残余物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(5mL)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，得到不可分离的(2S,4R)-2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基甲酰基]-4-苯氧基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯和具有未确定结构的杂质的混合物浅黄色固体。向上面制备的不可分离的(2S,4R)-2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基甲酰基]-4-苯氧基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯和具有未确定结构的杂质的混合物的乙醇(5mL)溶液中加入2M氢氧化钠水溶液(1.70mL)，并将该混合物在70℃下搅拌2小时。将6M盐酸(0.60mL)加入到该反应混合物中，并过滤收集沉淀的固体，依次用水(5mL)、乙醇(5mL)和***(5mL)洗涤，得到标题化合物(440mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.11(9H,s,主要),1.34(9H,s,次要),2.24-2.37(1H,m),2.43-3.58(1H,m),3.56-3.67(1H,m),3.79-3.91(1H,m),4.67-4.81(1H,m),5.07-5.15(1H,m),6.93-7.02(3H,m),7.27-7.37(2H,m),7.60(1H,s,次要),7.63(1H,s,主要),12.77(1H,brs)。观测的异构体的比例是2:1。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S,4R)-4-苯氧基吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例11步骤B一样的方法，由(2S,4R)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-4-苯氧基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(450mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(564mg)、碳酸铯(596mg)、1,2-二甲氧基乙烷(10mL)和水(1.0mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(149mg)获得标题化合物(310mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.36-2.46(1H,m),2.47(3H,s),2.79(1H,dd,J=14.0,6.8Hz),3.42-3.54(1H,m),3.78-3.92(1H,m),4.84-4.97(1H,m),5.28(1H,t,J=4.5Hz),6.99-7.08(3H,m),7.32-7.38(2H,m),7.39(1H,s),8.11(1H,s),9.42(1H,brs),10.67(1H,brs),12.83(1H,brs)。
实施例31
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-吗啉-4-基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-吗啉-4-基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
将实施例1步骤C制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-羧酸甲酯(200mg)、吗啉-4-甲腈(0.17mL)和4M盐酸/环戊基甲醚溶液(3.0mL)的混合物在110℃下搅拌4小时。将该反应***减压浓缩，并将饱和碳酸氢钠水溶液加入到残余物中。过滤收集沉淀，用水洗涤。将获得的淡褐色固体用乙酸乙酯/己烷(1:1)的混合溶剂洗涤，得到标题化合物(144mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ3.51-3.60(4H,m),3.61-3.71(4H,m),7.29(1H,s),11.50(1H,brs)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-吗啉-4-基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-吗啉-4-基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(140mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(410mg)、碳酸钠(106mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1∶1)(36mg)获得标题化合物(81mg)淡褐色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.33-2.47(3H,m),3.50-3.61(4H,m),3.61-3.72(4H,m),7.11(1H,s),7.83(0.6H,brs),8.19(0.4H,brs),11.35(1H,brs),12.79-13.07(1H,m)。
实施例32
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(四氢呋喃-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)四氢呋喃-2-碳酰氯的制备
将四氢呋喃-2-羧酸(0.19mL)和乙二酰二氯(0.42mL)的混合物在室温下搅拌18小时。将该反应***减压浓缩，得到标题化合物(241mg)浅黄色液体。
1H-NMR(CDCl3)δ2.14-2.46(2H,m),3.50-3.63(1H,m),3.77-4.06(3H,m),4.06-4.16(1H,m)。
B)6-溴-2-(四氢呋喃-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
在搅拌下，在室温下，向实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(120mg)、三乙胺(0.083mL)和四氢呋喃(3.0mL)的混合物中加入四氢呋喃-2-碳酰氯(80mg)。搅拌该反应混合物10分钟，并将该反应***减压浓缩。将2M氢氧化钠水溶液(1.0mL)加入到残余物中，并将该混合物在120℃加热下搅拌2小时。将该混合物用乙酸乙酯萃取，用盐水洗涤，并用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，得到标题化合物(160mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.04-2.33(2H,m),3.22-3.34(1H,m),3.67-3.89(3H,m),3.93-4.01(1H,m),7.32(1H,s)。
C)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(四氢呋喃-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-(四氢呋喃-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(160mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(491mg)、碳酸钠(128mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1∶1)(43mg)获得标题化合物(59mg)淡褐色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.18-2.31(2H,m),2.38-2.48(3H,m),3.38-3.52(1H,m),3.72-3.94(3H,m),3.99-4.06(1H,m),7.38(1H,s),7.89(0.6H,brs),8.25(0.4H,brs),12.38(1H,brs),12.87-13.06(1H,m)。
实施例33
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-{[(2R)-2-甲基吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-{[(2R)-2-甲基吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(180mg)、(2R)-2-甲基吡咯烷盐酸盐(235mg)、碳酸钾(445mg)、碘化钠(9.7mg)和N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)获得标题化合物(205mg)黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.04(3H,d,J=6.0Hz),1.28-1.42(1H,m),1.56-1.74(2H,m),1.80-1.97(1H,m),2.21-2.35(1H,m),2.52-2.57(1H,m),2.88-3.04(1H,m),3.32(1H,d,J=14.2Hz),3.81(1H,d,J=14.2Hz),7.61(1H,s),12.18(1H,brs)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-{[(2R)-2-甲基吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-{[(2R)-2-甲基吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(200mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(564mg)、碳酸钠(146mg)、1,2-二甲氧基乙烷(4.0mL)和水(2.0mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(50mg)获得标题化合物(13mg)黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.06(3H,d,J=6.0Hz),1.27-1.47(1H,m),1.57-1.76(2H,m),1.85-2.00(1H,m),2.24-2.37(1H,m),2.45(3H,s),2.52-2.60(1H,m),2.93-3.04(1H,m),3.33(1H,d,J=14.0Hz),3.81(1H,d,J=14.0Hz),7.37(1H,s),8.03(1H,brs),11.92-13.20(2H,m)。
实施例34
2-(乙氧基甲基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)乙氧基乙酰氯的制备
将乙氧基乙酸(0.19mL)和乙二酰二氯(0.42mL)的混合物在室温下搅拌18小时。将该反应***减压浓缩，得到标题化合物(220mg)浅黄色液体。
1H-NMR(CDCl3)δ1.26(3H,t,J=7.0Hz),3.65(2H,q,J=7.0Hz),4.41(2H,s)。
B)6-溴-2-(乙氧基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例32步骤B一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(120mg)和三乙胺(0.083mL)和四氢呋喃(3.0mL)和乙氧基乙酰氯(74mg)获得标题化合物(140mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.14(3H,t,J=7.0Hz),3.53(2H,q,J=7.0Hz),4.30(2H,s),7.48(1H,s),12.60(1H,brs)。
C)2-(乙氧基甲基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-(乙氧基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(140mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(448mg)、碳酸钠(116mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(40mg)获得标题化合物(59mg)淡褐色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.17(3H,t,J=7.0Hz),2.38-2.50(3H,m),3.56(2H,q,J=7.0Hz),4.38(2H,s),7.39(1H,s),7.89(0.6H,brs),8.26(0.4H,brs),12.34(1H,brs),12.77-13.18(1H,m)。
实施例35
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-{[(2S)-2-甲基吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例2步骤B和步骤C一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(140mg)和(S)-2-甲基吡咯烷盐酸盐(182mg)和碳酸钾(276mg)和碘化钠(7.5mg)和N,N-二甲基乙酰胺(4.0mL)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(308mg)和碳酸钠(265mg)和1,2-二甲氧基乙烷(4.0mL)和水(1mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1∶1)(26mg)获得标题化合物(104mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.41-1.43(3H,m),1.62-1.74(1H,m),1.93-2.03(2H,m),2.17-2.27(1H,m),2.46(3H,s),3.28-3.38(3H,m),4.25-4.64(2H,m),7.40(1H,s),8.10(1H,s),10.24(1H,brs),12.80(1H,brs)。
实施例36
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1-吡咯烷-1-基乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的光学拆分
将6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1-吡咯烷-1-基乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(106mg)用高效液相色谱分级(柱∶CHIRALPAK AD(50mmi.d.×500mm L，DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/乙醇/二乙胺(500/500/1)，流速∶60mL/min，柱温∶30℃)。在上述高效液相色谱条件下，将含有具有较短保留时间的旋光型的级分溶液浓缩，得到6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1-吡咯烷-1-基乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的旋光型(53mg，保留时间10.6min，99.3%ee)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.39(3H,d,J=6.6Hz),1.63-1.77(4H,m),2.38-2.48(5H,m),2.55-2.65(2H,m),3.49(1H,q,J=6.6Hz),7.37(1H,s),8.02(1H,brs),12.09-12.93(2H,m)。
另外，将含有具有较长保留时间的旋光型的级分溶液浓缩，得到6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1-吡咯烷-1-基乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的旋光型(39mg，保留时间12.1min，>99.9%ee)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.39(3H,d,J=6.8Hz),1.60-1.75(4H,m),2.37-2.48(5H,m),2.54-2.66(2H,m),3.49(1H,q,J=6.8Hz),7.37(1H,s),8.02(1H,brs),12.12-13.00(2H,m)。
用高效液相色谱进行分析(柱∶CHIRALPAK AD(4.6mm i.d.×250mmL，DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/乙醇/二乙胺(500/500/1)，流速∶0.5mL/min，柱温∶30℃，检测：220nm)。
实施例37
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和下述实施例83步骤C一样的方法，由实施例11步骤A制备的(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(2.27g)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(2.94g)、碳酸铯(3.11g)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(779mg)、1,2-二甲氧基乙烷(50mL)、水(5mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(10mL)和甲醇(50mL)获得标题化合物(1.39g)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.93-2.16(3H,m),2.37-2.47(1H,m),2.46(3H,s),3.23-3.48(2H,m),4.61-4.74(1H,m),7.37(1H,s),8.10(1H,s),8.98(1H,brs),10.05(1H,brs),12.85(1H,brs)。
实施例38
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(3-苯氧基吡咯烷-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-[(3-苯氧基吡咯烷-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(180mg)、3-苯氧基吡咯烷盐酸盐(385mg)、碳酸钾(445mg)、碘化钠(9.7mg)和N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)获得标题化合物(212mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.72-1.88(1H,m),2.20-2.37(1H,m),2.54-2.64(1H,m),2.69-2.77(1H,m),2.77-2.87(1H,m),2.96-3.06(1H,m),3.54-3.67(2H,m),4.83-4.93(1H,m),6.82-6.95(3H,m),7.19-7.33(2H,m),7.61(1H,s),12.45(1H,brs)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(3-苯氧基吡咯烷-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-[(3-苯氧基吡咯烷-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(210mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(478mg)、碳酸钠(124mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(42mg)获得标题化合物(46mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.73-1.88(1H,m),2.22-2.37(1H,m),2.45(3H,brs),2.55-2.67(1H,m),2.70-2.79(1H,m),2.79-2.90(1H,m),2.96-3.11(1H,m),3.53-3.69(2H,m),4.81-4.98(1H,m),6.80-6.97(3H,m),7.20-7.33(2H,m),7.38(1H,s),7.90(0.6H,brs),8.22(0.4H,brs),12.20(1H,brs),12.97(1H,brs)。
实施例39
2-(1,4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬-7-基甲基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)1,4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬烷-7-羧酸苄基酯的制备
在Dean-Stark装置中，在加热下，将3-氧代吡咯烷-1-羧酸苄基酯(2.00g)、乙二醇(2.85mL)、对甲苯磺酸一水合物(10mg)和甲苯(20mL)的混合物在120℃下搅拌6小时。将该混合物冷却至室温，用乙酸乙酯(10mL)稀释，依次用水(5mL×2)和盐水(5mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(2.1g)浅黄色液体。
1H-NMR(CDCl3)δ2.00-2.13(2H,m),3.42-3.49(2H,m),3.51-3.62(2H,m),3.93-4.02(4H,m),5.13(2H,s),7.28-7.41(5H,m)。
B)1,4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬烷的制备
在室温下，向1,4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬烷-7-羧酸苄基酯(1.1g)的甲醇(30mL)溶液中加入氢氧化钯(II)(100mg)。将该混合物在氢气氛围下(0.4MPa)搅拌2.5小时。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，得到标题化合物(540mg)暗橙色液体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.76(2H,t,J=7.1Hz),2.71(2H,s),2.81(2H,t,J=7.1Hz),3.81(4H,s)。
C)6-溴-2-(1,4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬-7-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(390mg)、1,4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬烷(540mg)、碳酸钾(384mg)、碘化钠(21mg)和N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)获得标题化合物(422mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.87-1.97(2H,m),2.63-2.71(4H,m),3.53(2H,s),3.73-3.87(4H,m),7.61(1H,s),11.63(1H,brs)。
D)2-(1,4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬-7-基甲基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-(1,4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬-7-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(422mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(1.05g)、碳酸钠(271mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5.0mL)和水(2.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(92mg)获得标题化合物(203mg)淡褐色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.94(2H,t,J=6.9Hz),2.45(3H,brs),2.63-2.75(4H,m),3.54(2H,s),3.74-3.88(4H,m),7.38(1H,s),7.89(0.6H,brs),8.19(0.4H,brs),12.17(1H,brs),12.98(1H,brs)。
实施例40
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S,5R)-5-苯基吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮一盐酸盐的制备
A)(2S,5R)-2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基甲酰基]-5-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例11步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(250mg)和(5R)-1-(叔丁氧羰基)-5-苯基-L-脯氨酸(988mg)和O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲
Figure BDA00002264979901011
六氟磷酸盐(1.28g)和N-乙基-N-(1-甲基乙基)丙-2-胺(0.692mL)和N,N-二甲基甲酰胺(5mL)获得标题化合物(434mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.11(9/2H,brs),1.24(9/2H,brs),1.69-1.86(1H,m),2.01(1H,brs),2.13-2.42(2H,m),4.28-4.45(1H,m),4.64-4.96(1H,m),7.16-7.25(1H,m),7.25-7.34(2H,m),7.56(2H,d,J=7.4Hz),7.74(2H,brs),8.13(1H,s),11.51(1H,brs)。
*观察到为旋转异构体的1:1混合物。
B)(2S,5R)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-5-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
向上面制备的(2S,5R)-2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基甲酰基]-5-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(430mg)的乙醇(5mL)溶液中加入2M氢氧化钠水溶液(1.31mL)，并将该混合物在70℃下搅拌2.5小时。在冰冷却下，将该反应混合物用6M盐酸(0.45mL)中和，并在室温下逐滴加入水(4mL)。过滤收集沉淀的固体，得到标题化合物(342mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.94-1.22(9H,m),1.78-2.12(2H,m),2.17-2.41(2H,m),4.62-4.98(2H,m),7.17-7.27(1H,m),7.37(2H,t,J=7.6Hz),7.68(1H,brs),7.74-7.86(2H,m),12.76(1H,brs)。
C)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S,5R)-5-苯基吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮一盐酸盐的制备
利用和下述实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的(2S,5R)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-5-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(340mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(440mg)、碳酸铯(466mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(117mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5mL)和水(0.5mL)获得4-{2-[(2S,5R)-1-(叔丁氧羰基)-5-苯基吡咯烷-2-基]-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基}-3-甲基-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯无色固体。向上面制备的4-{2-[(2S,5R)-1-(叔丁氧羰基)-5-苯基吡咯烷-2-基]-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基}-3-甲基-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯的甲醇(10mL)溶液中加入4M盐酸/乙酸乙酯溶液(2mL)，并将该混合物在50℃下搅拌1.5小时。将该反应混合物减压浓缩，并将获得的残余物用甲醇/水(10mL/10mL)结晶，得到标题化合物(126mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.20-2.47(3H,m),2.47(3H,brs),2.53-2.62(1H,m),4.79(1H,dd,J=10.8,6.6Hz),4.88(1H,dd,J=8.5,4.2Hz),7.42(1H,s),7.43-7.56(3H,m),7.62-7.70(2H,m),7.86-8.44(1H,m),8.80(1/2H,brs),10.91(1/2H,brs),12.46-13.35(2H,m)。
实施例41
2-[(二甲基氨基)甲基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例2步骤B和步骤C一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(140mg)和N-甲基甲胺盐酸盐(203mg)和N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(380mg)和碳酸钠(265mg)和1,2-二甲氧基乙烷(4.0mL)和水(2mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(41mg)获得标题化合物(66mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.47(3H,s),2.95(6H,s),4.40(2H,s),7.40(1H,s),8.10(1H,s),10.40(1H,brs),12.82(1H,brs)。
实施例42
2-[(二乙基氨基)甲基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
将0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)、0.15M碘化钠/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.2mL)和0.12M 6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮/N,N-二甲基乙酰胺溶液(1.0mL)依次加入到碳酸钾(33.2mg)中，并将该混合物在70℃下搅拌2.5小时。过滤除去不溶性物质，并将滤液用高效液相色谱纯化{柱∶YMC CombiPrep Pro C18 RS(20mm i.d.×50mm L)，流动相∶乙腈/10%甲酸铵水溶液}。将获得的化合物溶于1,2-二甲氧基乙烷(0.5mL)中，并加入0.48M 3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯/DME溶液(0.5mL)、0.96M碳酸钙水溶液(0.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1∶1)(10mg)，并将该混合物在100℃下、在氮气氛围下搅拌4小时。过滤除去不溶性物质，并将滤液用高效液相色谱纯化{柱∶YMC CombiPrep Pro C18 RS(20mm i.d.×50mm L)，流动相∶乙腈/10%甲酸铵水溶液}，得到标题化合物(8.5mg)。
MS(ESI+):[M+H]+318。
MS(ESI+)，实测值：318。
实施例43
2-[(4-羟基哌啶-1-基)甲基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M哌啶-4-醇/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(12mg)。
MS(ESI+):[M+H]+346。
MS(ESI+)，实测值：346。
实施例44
2-[(3-羟基哌啶-1-基)甲基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M哌啶-3-醇/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(20.5mg)。
MS(ESI+):[M+H]+346。
MS(ESI+)，实测值：346。
实施例45
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(硫吗啉-4-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M硫吗啉/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(9.7mg)。
MS(ESI+):[M+H]+348。
MS(ESI+)，实测值：348。
实施例46
2-{[(2R)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M(2R)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(17.6mg)。
MS(ESI+):[M+H]+360。
MS(ESI+)，实测值：360。
实施例47
2-{[(2S)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M(2S)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(17.6mg)。
MS(ESI+):[M+H]+360。
MS(ESI+)，实测值：360。
实施例48
2-(1,3-二氢-2H-异吲哚-2-基甲基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M 2,3-二氢-1H-异吲哚/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(12.5mg)。
MS(ESI+):[M+H]+364。
MS(ESI+)，实测值：364。
实施例49
2-{[苄基(甲基)氨基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M N-甲基-1-苯基甲胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(14.1mg)。
MS(ESI+):[M+H]+366。
MS(ESI+)，实测值：366。
实施例50
2-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基甲基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M 1,2,3,4-四氢异喹啉/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(3.6mg)。
MS(ESI+):[M+H]+378。
MS(ESI+)，实测值：378。
实施例51
1-{[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]甲基}哌啶-3-羧酸乙酯的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M哌啶-3-羧酸乙酯/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(23.8mg)。
MS(ESI+):[M+H]+402。
MS(ESI+)，实测值：402。
实施例52
1-{[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]甲基}-4-苯基哌啶-4-甲腈的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M 4-苯基哌啶-4-甲腈一盐酸盐/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(1.4mg)。
MS(ESI+):[M+H]+431。
MS(ESI+)，实测值：431。
实施例53
2-[(4-乙酰基-4-苯基哌啶-1-基)甲基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M 1-(4-苯基哌啶-4-基)乙酮一盐酸盐/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(13.1mg)。
MS(ESI+):[M+H]+448。
MS(ESI+)，实测值：448。
实施例54
1-{[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]甲基}-L-脯氨酸的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M L-脯氨酸苄基酯一盐酸盐/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(20.6mg)。
MS(ESI+):[M+H]+360。
MS(ESI+)，实测值：360。
实施例55
2-{[3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M N,N-二甲基吡咯烷-3-胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(10.3mg)。
MS(ESI+):[M+H]+359。
MS(ESI+)，实测值：359。
实施例56
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(4-(吡咯烷-1-基)哌啶-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M 4-(吡咯烷-1-基)哌啶/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(22.2mg)。
MS(ESI+):[M+H]+399。
MS(ESI+)，实测值：399。
实施例57
2-{[(1-苄基吡咯烷-3-基)(甲基)氨基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M 1-苄基-N-甲基吡咯烷-3-胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(16.2mg)。
MS(ESI+):[M+H]+435。
MS(ESI+)，实测值：435。
实施例58
2-{[4-(2-氟苯基)哌嗪-1-基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M 1-(2-氟苯基)哌嗪/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(1mg)。
MS(ESI+):[M+H]+425。
MS(ESI+)，实测值：425。
实施例59
N-{[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]甲基}-N-(吡啶-2-基甲基)甘氨酸乙酯的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M N-(吡啶-2-基甲基)甘氨酸乙酯/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(1.1mg)。
MS(ESI+):[M+H]+439。
MS(ESI+)，实测值：439。
实施例60
2-{[二(吡啶-3-基甲基)氨基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M 1-(吡啶-3-基)-N-(吡啶-3-基甲基)甲胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(4.5mg)。
MS(ESI+):[M+H]+444。
MS(ESI+)，实测值：444。
实施例61
2-{[4-(二苯甲基)哌嗪-1-基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M 1-(二苯甲基)哌嗪/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(7.3mg)。
MS(ESI+):[M+H]+497。
MS(ESI+)，实测值：497。
实施例62
2-{[(3,5-二甲氧基苯基)氨基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M 3,5-二甲氧基苯胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(1.4mg)。
MS(ESI+):[M+H]+398。
MS(ESI+)，实测值：398。
实施例63
2-{[(2,4-二甲氧基苯基)氨基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M 2,4-二甲氧基苯胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(2.1mg)。
MS(ESI+):[M+H]+398。
MS(ESI+)，实测值：398。
实施例64
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2-苯基硫吗啉-4-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M 2-苯基硫吗啉/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(10.8mg)。
MS(ESI+):[M+H]+424。
MS(ESI+)，实测值：424。
实施例65
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2-苯基吡咯烷-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M 2-苯基吡咯烷/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(10.8mg)。
MS(ESI+):[M+H]+392。
MS(ESI+)，实测值：392。
实施例66
2-{[3-(4-甲基苄基)吡咯烷-1-基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M 3-(4-甲基苄基)吡咯烷一盐酸盐/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(3.5mg)。
MS(ESI+):[M+H]+420。
MS(ESI+)，实测值：420。
实施例67
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-{[4-(2-氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)哌啶-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M 1-(哌啶-4-基)四氢嘧啶-2(1H)-酮/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(10.6mg)。
MS(ESI+):[M+H]+428。
MS(ESI+)，实测值：428。
实施例68
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-({[(1-(噻吩-2-基)环丙基)甲基]氨基｝甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)1-(噻吩-2-基)环丙基腈的制备
在0℃，在氮气氛围下，向氢化钠(19.1g)的DMSO(200mL)悬浮液中逐滴加入噻吩-2-基乙腈(25g)的DMSO(20mL)溶液，并将该混合物搅拌0.5小时。在0℃，在氮气氛围下，向获得的反应混合物中逐滴加入1-溴-2-氯乙烷(25mL)的DMSO(20mL)溶液，并将该混合物在室温下搅拌3天。将水加入到该反应混合物中，并将该混合物用乙酸乙酯萃取。将有机层用无水硫酸镁干燥，并减压蒸发溶剂。将获得的残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物淡棕色油(29.2g)。
1H-NMR(CDCl3)δ1.39-1.46(2H,m),1.71-1.78(2H,m),6.94(1H,dd,J=5.1,3.6Hz),7.06(1H,dd,J=3.6,1.1Hz),7.19(1H,dd,J=5.2,1.2Hz)。
B)1-[1-(噻吩-2-基)环丙基]甲胺一盐酸盐
在室温下，向1-(噻吩-2-基)环丙基腈(14.9g)的四氢呋喃(100mL)溶液中加入1.1M硼烷·四氢呋喃复合物(100mL)，并将该混合物在60℃搅拌过夜。将6M盐酸水溶液(20mL)小心地加入到该反应混合物中，并将该混合物在60℃下搅拌0.5小时。将该反应混合物冷却至室温，并将四氢呋喃减压蒸发。将获得的残余物用水稀释，并用乙酸乙酯洗涤。用8M氢氧化钠水溶液碱化水层，并将该混合物用乙酸乙酯萃取。将萃取物用无水硫酸镁干燥，并减压蒸发溶剂。将获得的残余物溶于乙酸乙酯中，加入4M盐酸/乙酸乙酯溶液(30mL)，并将溶剂减压蒸发。将获得的固体用乙醇-乙酸乙酯重结晶，得到标题化合物(10.5g)白色针形结晶。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.92-1.00(2H,m),1.11-1.22(2H,m),3.08(2H,s),6.98(1H,dd,J=5.1,3.4Hz),7.08(1H,dd,J=3.5,1.2Hz),7.40(1H,dd,J=5.1,1.3Hz),8.05(3H,s)。
C)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[({[1-(噻吩-2-基)环丙基]甲基}氨基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M 1-[1-(噻吩-2-基)环丙基]甲胺一盐酸盐/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(1.9mg)。
MS(ESI+):[M+H]+397。
MS(ESI+)，实测值：397。
实施例69
7-甲基-1'-{[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]甲基}四氢-5H-螺[1,3-
Figure BDA00002264979901111
唑并[3,4-a]吡嗪-1,4'-哌啶]-3-酮的制备
A)4-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁基酯的制备
将1-甲基哌嗪(15g)、三乙胺(22.7mL)和四氢呋喃(300mL)的混合物冷却至0℃，并在搅拌下加入二碳酸二叔丁基酯(22g)。而后，将该反应***在室温下搅拌3小时。将该反应混合物减压浓缩，将4M氢氧化钠水溶液(100mL)加入到残余物中，并用乙酸乙酯(300mL)萃取该混合物。将萃取物用水(200mL)洗涤，并用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将残余物用硅胶柱色谱纯化，得到标题化合物(25.5g)黄色油。
1H-NMR(CDCl3)δ1.40(9H,s),2.25(3H,s),2.31(4H,t,J=4.8Hz),3.40(4H,t,J=4.8Hz)。
B)1'-苄基-7-甲基四氢-5H-螺[1,3-
Figure BDA00002264979901121
唑并[3,4-a]吡嗪-1,4'-哌啶]-3-酮的制备
在氮气氛围下，将4-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(24.2g)、N,N,N',N'-四甲基乙烷-1,2-二胺(21g)和四氢呋喃(500mL)的混合物冷却至-78℃，并用1.5小时逐滴加入仲丁基锂(184mL，1.3M环己烷溶液)，同时搅拌。此外，将该混合物在相同温度下搅拌2小时，将该反应***加热至30℃，并将该混合物搅拌1.5小时。而后，将该反应***再次冷却至-78℃，并用1小时逐滴加入1-苄基哌啶-4-酮(28.3g)的四氢呋喃(50mL)溶液。将该反应***在室温下搅拌过夜，并将该混合物冷却至0℃。加入饱和氯化铵水溶液(100mL)，并将该混合物在室温下搅拌30分钟。用乙酸乙酯(300mL)萃取该混合物，并将萃取物用水(300mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物，得到标题化合物(17.6g)棕色油。
1H-NMR(CDCl3)δ1.62-1.89(6H,m),2.21(3H,s),2.31-2.40(2H,m),2.62(1H,m),2.96(1H,m),3.31(1H,m),3.42(2H,m),3.67(1H,m),7.20-7.28(5H,m)。
C)7-甲基四氢-5H-螺[1,3-唑并[3,4-a]吡嗪-1,4'-哌啶]-3-酮一盐酸盐的制备
将1'-苄基-7-甲基四氢-5H-螺[1,3-
Figure BDA00002264979901123
唑并[3,4-a]吡嗪-1,4'-哌啶]-3-酮(14.6g)、10%Pd/C(2g)和乙醇(100mL)的混合物在室温下、在氢气氛围下搅拌72小时。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将残余物溶于乙酸乙酯(75mL)中，加入4M盐酸/乙酸乙酯溶液(15mL)，并将混合物处理4小时。过滤收集标题化合物(10.45g)白色固体。
1H-NMR(CD3OD)δ2.14-2.18(2H,m),2.19-2.31(2H,m),3.03(3H,s),3.19-3.37(4H,m),3.48-3.59(4H,m),3.75(1H,m),4.03-4.13(2H,m)。
D)7-甲基-1'-{[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]甲基}四氢-5H-螺[1,3-
Figure BDA00002264979901124
唑并[3,4-a]吡嗪-1,4'-哌啶]-3-酮的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M 7-甲基四氢-5H-螺[1,3-
Figure BDA00002264979901131
唑并[3,4-a]吡嗪-1,4'-哌啶]-3-酮一盐酸盐/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(4.1mg)。
MS(ESI+):[M+H]+470。
MS(ESI+)，实测值：470。
实施例70
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-{[3-(苯磺酰基)吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例42一样的方法，只不过使用0.57M 3-(苯磺酰基)吡咯烷/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)来代替0.57M二乙胺/N,N-二甲基乙酰胺溶液(0.7mL)，获得标题化合物(11.8mg)。
MS(ESI+):[M+H]+456。
MS(ESI+)，实测值：456。
实施例71
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(哌啶-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯的制备
在0℃，向(2S)-1-(叔丁氧羰基)哌啶-2-羧酸(518mg)和三乙胺(0.392mL)的四氢呋喃(5mL)溶液中加入2-甲基丙基氯甲酸酯(0.309mL)，并将该混合物在室温下搅拌30分钟。向该反应混合物中加入实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(250mg)的四氢呋喃(5mL)溶液，并将该混合物在60℃下搅拌15小时。将乙酸乙酯(20mL)和碳酸氢钠水溶液(10mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(5mL)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩，得到2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基甲酰基]哌啶-1-羧酸叔丁基酯浅黄色油。向上面制备的2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基甲酰基]哌啶-1-羧酸叔丁基酯的乙醇(5mL)溶液中加入2M氢氧化钠水溶液(1.70mL)，并将该混合物在70℃下搅拌4小时。在冰冷却下，将该反应混合物用6M盐酸(0.6mL)中和，并在室温下逐滴加入水(5mL)。过滤收集沉淀的固体，得到标题化合物(240mg)浅黄色固体。
*光学纯度是2.9%ee。用高效液相色谱进行分析(柱∶CHIRALPAKAD-H(4.6mm i.d.×250mm L，DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/2-丙醇/二乙胺(700/300/1)，流速∶1mL/min，柱温∶30℃，检测：220nm)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.16-1.58(3H,m),1.30(9H,brs),1.59-1.86(2H,m),1.98-2.13(1H,m),3.36-3.53(1H,m),3.76-3.88(1H,m),4.90-5.07(1H,m),7.57(1H,s),12.64(1H,brs)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(哌啶-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和下述实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(232mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(345mg)、碳酸铯(395mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1∶1)(91.5mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5mL)、水(0.5mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)和甲醇(8mL)获得标题化合物(97.4mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.47-1.94(5H,m),2.23-2.35(1H,m),2.46(3H,s),2.96-3.12(1H,m),3.28-3.41(1H,m),4.16-4.28(1H,m),7.34(1H,s),8.12(1H,s),9.07-9.26(1H,m),9.34-9.46(1H,m),12.82(1H,brs)。
实施例72
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(吗啉-3-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吗啉-4-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例71步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(250mg)、(3S)-4-(叔丁氧羰基)吗啉-3-羧酸(548mg)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.309mL)、三乙胺(0.392mL)和四氢呋喃(5mL)、2M氢氧化钠水溶液(1.70mL)和乙醇(5mL)获得标题化合物(271mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.12-1.55(9H,m),3.39-3.52(1H,m),3.53-3.95(3H,m),3.76(1H,dd,J=12.3,4.2Hz),4.09-4.29(1H,m),4.72(1H,brs),7.58(1H,s),12.74(1H,brs)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(吗啉-3-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和下述实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吗啉-4-羧酸叔丁基酯(268mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(397mg)、碳酸铯(420mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1∶1)(105mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5mL)、水(0.5mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)和甲醇(3mL)获得标题化合物(103mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.46(3H,s),3.17-3.42(2H,m),3.68(1H,dd,J=12.1,10.2Hz),3.72-3.85(1H,m),3.93-4.04(1H,m),4.33(1H,dd,J=12.4,3.3Hz),4.44-4.56(1H,m),7.37(1H,s),8.12(1H,s),9.69(1H,brs),10.00(1H,brs),12.92(1H,brs)。
实施例73
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(3-氧代吡咯烷-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
将实施例39步骤D制备的2-(1,4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬-7-基甲基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(150mg)、6M盐酸(3mL)和丙-2-醇(3mL)在90℃加热下搅拌5小时。将饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)加入到该反应混合物中，并过滤收集沉淀的固体，用乙酸乙酯(3mL)和水(3mL)依次洗涤。将获得的淡褐色固体用甲醇/丙-2-醇/己烷结晶，得到标题化合物(115mg)淡褐色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.37(2H,t,J=6.9Hz),2.46(3H,brs),3.01(2H,t,J=6.9Hz),3.08(2H,s),3.71(2H,s),7.39(1H,s),7.89(0.6H,brs),8.26(0.4H,brs),12.22(1H,brs),12.99(1H,brs)。
实施例74
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[苯基(吡咯烷-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)5-溴-3-{[苯基(吡咯烷-1-基)乙酰基]氨基}噻吩-2-甲酰胺的制备
在搅拌下，在室温下，向实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(221mg)、三乙胺(0.153mL)和四氢呋喃(5.0mL)中加入氯(苯基)乙酰氯(0.174mL)。将该反应混合物搅拌10分钟，并加入吡咯烷(0.42mL)。将该反应混合物在70℃加热下搅拌1小时，并将该反应***减压浓缩。向残余物中加入2M氢氧化钠水溶液(1.5mL)，并将该混合物在120℃加热下搅拌2小时。用乙酸乙酯萃取该混合物，用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将残余物用碱性硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)。将获得的黄色固体用乙酸乙酯(2mL)洗涤，得到标题化合物(330mg)黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.67-1.80(4H,m),2.32-2.44(2H,m),2.44-2.49(2H,m),3.96(1H,s),7.26-7.45(5H,m),7.70(2H,brs),7.99(1H,s),12.24(1H,s)。
B)6-溴-2-[苯基(吡咯烷-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
将5-溴-3-{[苯基(吡咯烷-1-基)乙酰基]氨基}噻吩-2-甲酰胺(320mg)、2M氢氧化钠水溶液(3mL)和1,2-二甲氧基乙烷(1mL)的混合物在微波反应器中、在150℃、在加热下搅拌30分钟。用乙酸乙酯萃取该混合物，用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用碱性硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷和甲醇/乙酸乙酯)，得到标题化合物(292mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.65-1.85(4H,m),2.34-2.47(4H,m),4.35(1H,s),7.22-7.40(3H,m),7.55-7.65(3H,m),12.47(1H,brs)。
C)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[苯基(吡咯烷-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-[苯基(吡咯烷-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(320mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(758mg)、碳酸钠(197mg)、1,2-二甲氧基乙烷(4.0mL)、水(2.0mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(67mg)获得标题化合物(235mg)淡褐色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.65-1.85(4H,m),2.34-2.48(7H,m),4.34(1H,s),7.20-7.46(4H,m),7.62(2H,d,J=7.2Hz),7.78-8.26(1H,m),12.26(1H,brs),12.94(1H,brs)。
实施例75
2-(3,6-二氢吡啶-1(2H)-基甲基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-(3,6-二氢吡啶-1(2H)-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(180mg)、1,2,3,6-四氢吡啶(0.18mL)，碳酸钾(178mg)、碘化钠(9.7mg)和N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)获得标题化合物(169mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.04-2.16(2H,m),2.57-2.65(2H,m),2.96-3.04(2H,m),3.51(2H,s),5.54-5.78(2H,m),7.61(1H,s),12.36(1H,brs)。
B)2-(3,6-二氢吡啶-1(2H)-基甲基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-(3,6-二氢吡啶-1(2H)-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(169mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(479mg)、碳酸钠(124mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)、水(1.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(42mg)获得标题化合物(81mg)淡褐色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.03-2.18(2H,m),2.45(3H,brs),2.63(2H,t,J=5.7Hz),2.97-3.09(2H,m),3.52(2H,s),5.47-5.90(2H,m),7.38(1H,s),8.02(1H,brs),12.18(1H,brs),12.91(1H,brs)。
实施例76
2-[(2S)-5,5-二甲基吡咯烷-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)(5S)-5-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2,2-二甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例71步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(250mg)、1-(叔丁氧羰基)-5,5-二甲基-L-脯氨酸(577mg)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.324mL)、三乙胺(0.392mL)、四氢呋喃(5mL)、2M氢氧化钠水溶液(2.83mL)和乙醇(5mL)获得标题化合物(431mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.11(9H,s,主要),1.30-1.43(6H,m),1.57(9H,s,次要),1.66-1.88(2H,m),1.90-2.25(2H,m),4.67(1H,dd,J=8.3,3.6Hz,主要),4.70-4.77(1H,m,次要),7.54(1H,s,次要),7.57(1H,s,主要),12.68(1H,brs)。
*观察到为旋转异构体的7:4混合物。
**在手性分析条件下只观察到单峰。用高效液相色谱进行分析(柱∶CHIRALPAK AD-H(4.6mm i.d.×250mm L，DAICEL CHEMICALINDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/2-丙醇/二乙胺(800/200/1)，流速∶1mL/min，柱温∶30℃，检测：220nm)。
B)2-[(2S)-5,5-二甲基吡咯烷-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的(5S)-5-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2,2-二甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(423mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(610mg)、碳酸铯(644mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(162mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5mL)和水(0.5mL)获得4-{2-[(2S)-1-(叔丁氧羰基)-5,5-二甲基吡咯烷-2-基]-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基}-3-甲基-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯浅黄色无定形固体。向上面制备的4-{2-[(2S)-1-(叔丁氧羰基)-5,5-二甲基吡咯烷-2-基]-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基}-3-甲基-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯的甲醇(4mL)溶液中加入4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)，并将该混合物在50℃下搅拌2小时。将乙酸乙酯(50mL)和碳酸氢钠水溶液(10mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。将不溶性物质滤出，减压浓缩滤液，并将获得的残余物用甲醇/乙酸乙酯(0.5mL/4mL)结晶，得到标题化合物(176mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.17(3H,s),1.19(3H,s),1.60(2H,t,J=7.4Hz),1.92-2.05(1H,m),2.23-2.38(1H,m),2.45(3H,s),4.24(1H,dd,J=8.6,6.3Hz),7.37(1H,s),8.02(1H,brs)。
实施例77
2-[(2S)-氮杂环丁烷-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例71步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(267mg)、(2S)-1-(叔丁氧羰基)氮杂环丁烷-2-羧酸(510mg)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.346mL)、三乙胺(0.419mL)、四氢呋喃(5mL)、2M氢氧化钠水溶液(2.83mL)和乙醇(5mL)获得标题化合物(335mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.04-1.51(9H,m),2.20-2.35(1H,m),2.44-2.57(1H,m),3.84(1H,brs),3.91-4.02(1H,m),5.01(1H,dd,J=8.6,5.6Hz),7.64(1H,s),12.74(1H,brs)。
*在手性分析条件下只观察到单个峰。用高效液相色谱进行分析(柱∶CHIRALPAK AD-3(4.6mm i.d.×250mm L，DAICEL CHEMICALINDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/乙醇/二乙胺(700/300/1)，流速∶1mL/min，柱温∶30℃，检测：220nm)。
B)2-[(2S)-氮杂环丁烷-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例76步骤B一样的方法，由上面制备的(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁基酯(328mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(523mg)、碳酸铯(554mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(139mg)、1,2-二甲氧基乙烷(10mL)、水(1mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)和甲醇(5mL)获得标题化合物(42.1mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.41-2.61(2H,m),2.45(3H,s),3.30-3.38(1H,m),3.61(1H,q,J=7.9Hz),4.73(1H,t,J=7.8Hz),7.38(1H,s),8.03(1H,brs)。
实施例78
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S,3aS,7aS)-八氢-1H-吲哚-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)(2S,3aS,7aS)-2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基甲酰基]八氢-1H-吲哚-1-羧酸叔丁基酯的制备
在0℃，向(2S,3aS,7aS)-1-(叔丁氧羰基)八氢-1H-吲哚-2-羧酸(638mg)和三乙胺(0.392mL)的四氢呋喃(5mL)溶液中加入2-甲基丙基氯甲酸酯(0.324mL)，并将该混合物在室温下搅拌30分钟。而后，向该反应***中加入实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(250mg)的四氢呋喃(5mL)溶液，并将该混合物在60℃下搅拌26小时。将乙酸乙酯(20mL)和碳酸氢钠水溶液(10mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(5mL)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，并将目标级分减压浓缩，得到标题化合物(345mg)浅黄色无定形固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.07-1.49(13H,m),1.53-1.67(3H,m),1.85-2.06(2H,m),2.07-2.20(1H,m),2.22-2.36(1H,m),3.70-3.81(1H,m),4.14(1H,dd,J=9.7,7.5Hz),7.72(2H,brs),8.11(1H,s),11.61(1H,brs)。
B)(2S,3aS,7aS)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)八氢-1H-吲哚-1-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例40步骤B一样的方法，由上面制备的(2S,3aS,7aS)-2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基甲酰基]八氢-1H-吲哚-1-羧酸叔丁基酯(340mg)、2M氢氧化钠水溶液(2.83mL)和乙醇(5mL)获得标题化合物(273mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.06-1.48(3H,m),1.09(9H,s,主要),1.34(9H,s,次要),1.53-1.78(4H,m),1.92-2.18(2H,m),2.29-2.41(1H,m),3.40-3.49(1H,m,主要),3.67-3.79(1H,m),4.35(1H,t,J=5.0Hz,次要),4.50-4.62(1H,m),7.55(1H,s,次要),7.60(1H,s,主要),12.71(1H,brs)。
*观察到为旋转异构体的2:1混合物。
C)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S,3aS,7aS)-八氢-1H-吲哚-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例76步骤B一样的方法，由上面制备的(2S,3aS,7aS)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)八氢-1H-吲哚-1-羧酸叔丁基酯(263mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(357mg)、碳酸铯(377mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(94.7mg)、1,2-二甲氧基乙烷(10mL)、水(1mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)和甲醇(5mL)获得标题化合物(84.0mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.10-1.66(8H,m),1.76-1.88(1H,m),1.95-2.10(1H,m),2.25-2.39(1H,m),2.45(3H,s),3.23(1H,q,J=5.2Hz),4.19(1H,dd,J=10.0,5.5Hz),7.38(1H,s),7.89-8.29(1H,m)。
实施例79
2-(氮杂环庚烷-2-基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例71步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(237mg)、1-(叔丁氧羰基)氮杂环庚烷-2-羧酸(547mg)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.306mL)、三乙胺(0.371mL)和四氢呋喃(5mL)获得2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基甲酰基]氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁基酯黄色油。向上面制备的2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基甲酰基]氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁基酯的乙醇(5mL)溶液中加入2M氢氧化钠水溶液(2.68mL)，并将该混合物在70℃下搅拌3小时。将乙酸乙酯(20mL)、6M盐酸(1mL)和水(5mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(5mL)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，并将目标级分减压浓缩，得到标题化合物(438mg)浅黄色无定形固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.12-1.46(12H,m),1.58-1.99(4H,m),2.11-2.35(1H,m),3.16-3.29(1H,m),3.77-3.88(1H,m,次要),3.97(1H,dd,J=14.8,5.2Hz,主要),4.65(1H,dd,J=12.0,4.8Hz,主要),4.83(1H,dd,J=12.1,5.9Hz,次要),7.58(1H,s,次要),7.60(1H,s,主要),12.61(1H,brs)。
*观察到为旋转异构体的5:4混合物。
B)2-(氮杂环庚烷-2-基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例76步骤B一样的方法，由上面制备的2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁基酯(150mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(215mg)、碳酸铯(228mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1∶1)(57.2mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5mL)、水(0.5mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)和甲醇(3mL)获得标题化合物(21.8mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.41-1.89(7H,m),2.07-2.20(1H,m),2.45(3H,s),2.75-2.97(2H,m),3.74-3.87(1H,m),7.34(1H,s),8.00(1H,brs)。
实施例80
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(3-苯基吡咯烷-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-[(3-苯基吡咯烷-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(180mg)、3-苯基吡咯烷盐酸盐(355mg)、碳酸钾(445mg)、碘化钠(9.7mg)和N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)获得标题化合物(182mg)黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.71-1.85(1H,m),2.18-2.32(1H,m),2.55-2.63(1H,m),2.75-2.85(2H,m),3.04(1H,t,J=8.4Hz),3.26-3.40(1H,m),3.65(2H,s),7.14-7.22(1H,m),7.24-7.34(4H,m),7.61(1H,s),12.39(1H,brs)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(3-苯基吡咯烷-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-[(3-苯基吡咯烷-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(182mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(431mg)、碳酸钠(112mg)、1,2-二甲氧基乙烷(4.0mL)、水(2.0mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(38mg)获得标题化合物(106mg)黄色晶体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.72-1.87(1H,m),2.19-2.33(1H,m),2.45(3H,brs),2.55-2.64(1H,m),2.76-2.87(2H,m),3.02-3.11(1H,m),3.27-3.41(1H,m),3.65(2H,s),7.13-7.22(1H,m),7.25-7.34(4H,m),7.38(1H,s),8.03(1H,brs),11.92-13.34(2H,m)。
实施例81
2-{[3-羟基-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)3-(三氟甲基)吡咯烷-3-醇的制备
将3-氧代吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(600mg)、三甲基(三氟甲基)硅烷(0.57mL)、1M N,N,N-三丁基丁烷-1-铵氟化物/四氢呋喃溶液(0.50mL)和四氢呋喃(6mL)的混合物在室温下搅拌30分钟。加入饱和氯化铵水溶液(2mL)和1MN,N,N-三丁基丁烷-1-铵氟化物/四氢呋喃溶液(1mL)，并将该反应混合物在室温下搅拌1小时。将该混合物用乙酸乙酯萃取，用水和盐水依次洗涤，并用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到淡褐色固体。将获得的固体溶于甲醇(1mL)中，并在室温下加入4M盐酸/乙酸乙酯溶液(2mL)。将该反应混合物在室温下搅拌4小时，并将该反应***减压浓缩。将饱和碳酸氢钠水溶液(1mL)加入到残余物中，并将该混合物用乙酸乙酯/四氢呋喃萃取，并用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，得到标题化合物(260mg)褐色固体。
1H-NMR(CDCl3)δ1.80-1.91(1H,m),2.14-2.25(1H,m),2.93-3.10(2H,m),3.12-3.29(2H,m)。
B)6-溴-2-{[3-羟基-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(180mg)、3-(三氟甲基)吡咯烷-3-醇(260mg)、碳酸钾(356mg)、碘化钠(9.7mg)和N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)获得标题化合物(163mg)褐色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.77-1.93(1H,m),2.04-2.17(1H,m),2.59-2.69(1H,m),2.71-2.80(1H,m),2.81-2.99(2H,m),3.62(2H,s),6.28(1H,brs),7.61(1H,s),12.35(1H,brs)。
C)2-{[3-羟基-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-{[3-羟基-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(160mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(371mg)、碳酸钠(96mg)、1,2-二甲氧基乙烷(4.0mL)和水(2.0mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1∶1)(33mg)获得标题化合物(102mg)浅黄色晶体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.79-1.93(1H,m),2.05-2.20(1H,m),2.46(3H,brs),2.60-2.71(1H,m),2.72-2.83(1H,m),2.83-3.00(2H,m),3.63(2H,s),6.28(1H,brs),7.38(1H,s),7.90(0.6H,brs),8.26(0.4H,brs),12.16(1H,brs),12.99(1H,brs)。
实施例82
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-甲基吡咯烷-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
在搅拌下，在室温下，向1-(叔丁氧羰基)-2-甲基脯氨酸(425mg)、三乙胺(0.425mL)和四氢呋喃(10mL)的混合物中加入2-甲基丙基氯甲酸酯(0.2mL)。1小时之后，加入实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(337mg)，并将该混合物在60℃搅拌过夜。而后，将该混合物在微波反应器中、在120℃下搅拌4小时。将该反应混合物冷却至室温，并倒入饱和碳酸氢钠水溶液中。将该混合物用乙酸乙酯萃取，并将萃取物用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将残余物溶于甲醇(5mL)中，加入2M氢氧化钠水溶液(2.04mL)，并将该混合物在60℃下搅拌1小时，在80℃下搅拌1小时。将乙醇(4mL)加入到该反应混合物中，并将该混合物在100℃下搅拌4小时。将该反应混合物冷却至室温，并倒入饱和碳酸氢钠水溶液中，用乙酸乙酯/四氢呋喃混合物萃取该混合物。用无水硫酸镁干燥萃取物。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用碱性硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷和甲醇/乙酸乙酯)，得到标题化合物(109mg)黄色固体。
MS(ESI+):[M+H]+414。
MS(ESI+)，实测值：414。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-甲基吡咯烷-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例11步骤B一样的方法，由2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(109mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(162mg)、碳酸铯(400mg)、1,2-二甲氧基乙烷(4mL)、水(0.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1∶1)(21mg)获得标题化合物(64mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.75(3H,s),1.84-2.40(4H,m),2.46(3H,s),3.30-3.42(2H,m),7.37(1H,s),8.10(1H,brs),9.21(1H,brs),9.75(1H,brs),12.82(1H,brs)。
实施例83
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-哌啶-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯的制备
在10℃，向(2S)-1-(叔丁氧羰基)哌啶-2-羧酸(5.00g)和三乙胺(3.16mL)的四氢呋喃(45mL)溶液中加入2-甲基丙基氯甲酸酯(2.84mL)，并将该混合物在室温下搅拌1小时。而后，向该反应混合物中加入实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(2.19g)的四氢呋喃(5mL)溶液，并将该混合物在室温下搅拌7天。将乙酸乙酯(50mL)和碳酸氢钠水溶液(50mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩，得到(2S)-2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基甲酰基]哌啶-1-羧酸叔丁基酯浅黄色油。向上面制备的(2S)-2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基甲酰基]哌啶-1-羧酸叔丁基酯的乙醇(50mL)溶液中加入2M氢氧化钠水溶液(24.8mL)，并将该混合物在70℃下搅拌3小时。在冰冷却下，将该反应混合物用6M盐酸(8.5mL)中和，并在室温下逐滴加入水(10mL)。过滤收集沉淀的固体，得到标题化合物(3.03g)浅黄色固体。光学纯度是73.8%ee。用高效液相色谱进行分析(柱∶CHIRALPAK AD-H(4.6mm i.d.×250mm L，DAICELCHEMICAL INDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/2-丙醇/二乙胺(700/300/1)，流速∶1mL/min，柱温∶30℃，检测：220nm)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.09-1.45(11H,m),1.46-1.58(1H,m),1.60-1.86(2H,m),1.98-2.14(1H,m),3.38-3.53(1H,m),3.75-3.89(1H,m),4.89-5.10(1H,m),7.58(1H,s),12.64(1H,brs)。
B)(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯的光学拆分
用高效液相色谱分级(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(3.03g，75.5%ee)(柱∶CHIRALPAK AD(50mmi.d.×500mm L，DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES，LTD.制造，流动相∶己烷/2-丙醇/二乙胺(700/300/1)，流速∶80mL/min，柱温∶30℃)。在上述高效液相色谱条件下，获得(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(2.55g，>99.9%ee，保留时间6.1min)和(2R)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(330mg，99.2%ee，保留时间8.1min)。用高效液相色谱进行分析(柱∶CHIRALPAKAD-H(4.6mm i.d.×250mm L，DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/2-丙醇/二乙胺(700/300/1)，流速∶1mL/min，柱温∶30℃，检测：220nm)。
C)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-哌啶-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
将上面制备的(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(2.55g)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(3.79g)、碳酸铯(4.01g)、1,2-二甲氧基乙烷(50mL)和水(5mL)放在烧瓶中，并用氩气吹扫烧瓶中的空气。加入[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(502mg)，用氩气再次吹扫烧瓶中的空气，并将该混合物在80℃下搅拌1.5小时。将乙酸乙酯(75mL)和水(50mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(20ml×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，并将目标级分减压浓缩，得到(2S)-2-{6-[1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基]-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基}哌啶-1-羧酸叔丁基酯浅黄色固体。向上面制备的(2S)-2-{6-[1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基]-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基}哌啶-1-羧酸叔丁基酯的甲醇(50mL)溶液中加入4M盐酸/乙酸乙酯溶液(10mL)，并将该混合物在50℃下搅拌4小时，在室温下搅拌1小时。过滤收集沉淀的固体，得到标题化合物(1.18g)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.48-1.92(5H,m),2.23-2.35(1H,m),2.46(3H,s),2.94-3.12(1H,m),3.29-3.41(1H,m),4.16-4.29(1H,m),7.34(1H,s),8.12(1H,s),9.07-9.25(1H,m),9.46-9.60(1H,m),12.84(1H,brs)。
MS(ESI+):[M+H]+316。
MS(ESI+)，实测值：316。
D)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-哌啶-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
将下述实施例172步骤B制备的(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(3.25g)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(4.83g)、碳酸铯(5.11g)、1,2-二甲氧基乙烷(88mL)和水(8.8mL)放在烧瓶中，并用氩气吹扫烧瓶中的空气。加入[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(574mg)，用氩气再次吹扫烧瓶中的空气，并将该混合物在80℃下搅拌1小时。将乙酸乙酯(100mL)和水(100mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(20ml×2)萃取。用无水硫酸镁干燥合并的有机层。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，并将目标级分减压浓缩，得到(2S)-2-{6-[1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基]-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基}哌啶-1-羧酸叔丁基酯白色固体。向上面制备的(2S)-2-{6-[1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基]-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基}哌啶-1-羧酸叔丁基酯中加入甲醇(50mL)和4M盐酸/乙酸乙酯溶液(17mL)，并将该混合物在50℃下搅拌1小时。加入甲醇(17mL)和乙酸乙酯(85mL)，并将该混合物在50℃下进一步搅拌1小时，在室温下进一步搅拌2小时。将该混合物减压浓缩。将甲醇(50mL)加入到残余物中，并将该混合物在50℃下搅拌1小时，在室温下进一步搅拌1小时。过滤收集沉淀的固体，得到标题化合物(1.77g)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.48-1.91(5H,m),2.24-2.32(1H,m),2.46(3H,s),2.97-3.12(1H,m),3.29-3.41(1H,m),4.14-4.29(1H,m),7.34(1H,s),8.11(1H,s),9.07-9.23(1H,m),9.36-9.48(1H,m),12.81(1H,brs)。
将母液减压浓缩，向残余物中加入甲醇(20mL)，并将该混合物在50℃下搅拌1小时，在室温下进一步搅拌1小时。加入乙酸乙酯(20mL)，并过滤收集沉淀的固体，得到标题化合物(215mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.51-1.91(5H,m),2.25-2.33(1H,m),2.46(3H,s),2.97-3.10(1H,m),3.29-3.40(1H,m),4.16-4.28(1H,m),7.34(1H,s),8.11(1H,s),9.07-9.22(1H,m),9.45-9.56(1H,m),12.83(1H,brs)。
实施例84
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(吡咯烷-3-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例71步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(250mg)、1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-3-羧酸(511mg)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.323mL)、三乙胺(0.392mL)、四氢呋喃(5mL)、2M氢氧化钠水溶液(2.83mL)和乙醇(5mL)获得标题化合物(396mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.40(9H,s),2.12-2.30(2H,m),3.39-3.56(4H,m),3.59-3.69(1H,m),7.60(1H,s)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(吡咯烷-3-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(390mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(601mg)、碳酸铯(635mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1∶1)(159mg)、1,2-二甲氧基乙烷(10mL)、水(1mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)和甲醇(5mL)获得标题化合物(228mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.09-2.24(1H,m),2.29-2.43(1H,m),2.45(3H,s),3.20-3.40(2H,m),3.47-3.66(3H,m),7.36(1H,s),8.05(1H,s),9.18(1H,brs),9.30(1H,brs),12.54(1H,brs)。
实施例85
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2R)-哌啶-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由实施例81步骤B制备的(2R)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(120mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(179mg)、碳酸铯(189mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(47.3mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5mL)、水(0.5mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)和甲醇(3mL)获得标题化合物(60.8mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.48-1.94(5H,m),2.24-2.35(1H,m),2.46(3H,s),2.96-3.13(1H,m),3.29-3.41(1H,m),4.16-4.27(1H,m),7.34(1H,s),8.12(1H,s),9.07-9.25(1H,m),9.35-9.50(1H,m),12.82(1H,brs)。
实施例86
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-{1-[4-(甲基磺酰基)苯基]吡咯烷-2-基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-{1-[4-(甲基磺酰基)苯基]吡咯烷-2-基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
在0℃，向1-[4-(甲基磺酰基)苯基]脯氨酸(512mg)和三乙胺(0.314mL)的四氢呋喃(10mL)溶液中加入2-甲基丙基氯甲酸酯(0.259mL)，并将该混合物在室温下搅拌30分钟。而后，向该反应***中加入实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(200mg)，并将该混合物在60℃下搅拌19小时。将乙酸乙酯(20mL)和碳酸氢钠水溶液(10mL)加入到该反应混合物中，并将分离的有机层用盐水(5mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，并将目标级分减压浓缩，得到N-(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)-1-[4-(甲基磺酰基)苯基]脯氨酰胺浅黄色无定形固体。向上面制备的N-(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)-1-[4-(甲基磺酰基)苯基]脯氨酰胺的乙醇(5mL)溶液中加入2M氢氧化钠水溶液(2.83mL)，并将该混合物在70℃下搅拌10小时。在冰冷却下，将该反应混合物用6M盐酸(0.6mL)中和，并在室温下逐滴加入水(2mL)。过滤收集沉淀的固体，得到标题化合物(208mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.96-2.19(3H,m),2.35-2.48(1H,m),3.03(3H,s),3.36-3.47(1H,m),3.73-3.83(1H,m),4.76(1H,dd,J=8.4,2.0Hz),6.60(2H,d,J=8.9Hz),7.59(1H,s),7.62(2H,d,J=8.9Hz),12.69(1H,brs)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-{1-[4-(甲基磺酰基)苯基]吡咯烷-2-基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
将上面制备的6-溴-2-{1-[4-(甲基磺酰基)苯基]吡咯烷-2-基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(203mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(275mg)、碳酸铯(291mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5mL)和水(0.5mL)放在烧瓶中，并用氩气吹扫烧瓶中的空气。加入[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(73.0mg)，用氩气再次吹扫烧瓶中的空气，并将该混合物在80℃下搅拌1.5小时。将2M氢氧化钠水溶液(1.0mL)加入到该反应混合物中，并将该混合物在80℃下进一步搅拌2小时。将乙酸乙酯(20mL)和1M盐酸(10mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(5mL)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(甲醇/乙酸乙酯)，并将目标级分减压浓缩。将获得的残余物用甲醇(5mL)洗涤，得到标题化合物(130mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.96-2.22(3H,m),2.33-2.47(4H,m),3.03(3H,s),3.37-3.48(1H,m),3.73-3.85(1H,m),4.77(1H,dd,J=8.4,1.6Hz),6.61(2H,d,J=8.9Hz),7.34(1H,s),7.63(2H,d,J=8.9Hz),7.80-8.34(1H,m),12.47(1H,brs),12.83-13.09(1H,m)。
实施例87
2-[(1R*,2S*,5S*)-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)(1R*,2S*,5S*)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例86步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(450mg)、(1R*,2S*,5S*)-3-(叔丁氧羰基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-2-羧酸(974mg)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.584mL)、三乙胺(0.707mL)、四氢呋喃(10mL)、2M氢氧化钠水溶液(3.06mL)和乙醇(5mL)获得标题化合物(354mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.47-0.62(1H,m),0.76-0.92(1H,m),1.07(9H,s,主要),1.35(9H,s,次要),1.62-1.76(1H,m),1.86-1.99(1H,m),3.47-3.59(2H,m),4.27(1H,d,J=5.1Hz,次要),4.77(1H,d,J=5.1Hz,主要),7.61(1H,s,次要),7.65(1H,s,主要),12.44-12.80(1H,m)。
*观察到为旋转异构体的3:2混合物。
B)2-[(1R*,2S*,5S*)-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的(1R*,2S*,5S*)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁基酯(200mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(299mg)、碳酸铯(316mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(79.2mg)、1,2-二甲氧基乙烷(8mL)、水(0.8mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)和甲醇(4mL)获得标题化合物(36.5mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.57-0.73(2H,m),1.83-1.93(1H,m),2.25-2.36(1H,m),2.46(3H,s),3.38-3.47(2H,m),4.92(1H,brs),7.32(1H,s),8.10(1H,s),8.74(1H,brs),10.25(1H,brs),13.03(1H,brs)。
实施例88
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)(2S)-2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基甲酰基]吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例78步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(1.00g)、1-(叔丁氧羰基)-L-脯氨酸(2.04g)，2-甲基丙基氯甲酸酯(1.29mL)、三乙胺(1.57mL)和四氢呋喃(25mL)获得标题化合物(1.67g)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.25(9H,s,主要),1.40(9H,s,次要),1.79-1.97(3H,m),2.12-2.30(1H,m),3.35-3.55(2H,m),4.09-4.21(1H,m),7.72(2H,brs),8.05(1H,s),11.66(1H,s,主要),11.68(1H,s,次要)。
*观察到为旋转异构体的8:7混合物。
B)N-(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)-L-脯氨酰胺盐酸盐的制备
向上面制备的(2S)-2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基甲酰基]吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(1.66g)的甲醇/四氢呋喃(20mL/10mL)溶液中加入4M盐酸/乙酸乙酯(10mL)，并将该混合物在50℃下搅拌1小时。将乙酸乙酯(10mL)加入到该反应混合物中，并过滤收集沉淀的固体，得到标题化合物(1.26g)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.86-2.07(3H,m),2.28-2.41(1H,m),3.17-3.29(2H,m),4.52(1H,t,J=7.5Hz),7.84(2H,brs),7.88(1H,s),9.15(2H,brs),11.46(1H,brs)。
C)6-溴-2-[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
向上面制备的N-(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)-L-脯氨酰胺盐酸盐(1.05g)的甲醇(25mL)溶液中加入***(1.10mL)和氰基硼氢化钠(558mg)，并将该混合物在室温下搅拌1小时。将2M氢氧化钠水溶液(7.40mL)加入到该反应混合物中，并将该混合物在50℃下进一步搅拌5小时。在冰冷却下，用6M盐酸(2.5mL)中和该反应混合物，并减压浓缩至一半体积。将乙酸乙酯(50mL)和盐水(10mL)加入到残余物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(2×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，并将目标级分减压浓缩。将获得的残余物用***(20mL)洗涤，得到标题化合物(892mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.68-1.99(3H,m),2.10-2.39(2H,m),2.24(3H,s),3.08-3.18(1H,m),3.25-3.32(1H,m),7.57(1H,s),11.90(1H,brs)。
D)6-溴-2-[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]-3-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
在冰冷却下，向上面制备的6-溴-2-[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(250mg)的四氢呋喃(5mL)溶液中加入氢化钠(60%，在油中，38.2mg)，并将该混合物在0℃下搅拌15分钟。将[2-(氯甲氧基)乙基](三甲基)硅烷(0.169mL)加入到该反应混合物中，并将该混合物在室温下搅拌1小时。将乙酸乙酯(15mL)和氯化铵水溶液(5mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(5mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用碱性硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，并将目标级分减压浓缩，得到标题化合物(180mg)无色油。
1H-NMR(DMSO-d6)δ-0.03(9H,s),0.82-0.91(2H,m),1.73-2.06(3H,m),2.17-2.29(1H,m),2.21(3H,s),2.35(1H,q,J=8.4Hz),3.05-3.15(1H,m),3.64(2H,t,J=8.1Hz),3.72(1H,dd,J=8.4,7.1Hz),5.62(1H,d,J=10.5Hz),5.72(1H,d,J=10.5Hz),7.65(1H,s)。
E)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的6-溴-2-[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]-3-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(160mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(222mg)、碳酸铯(234mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(58.8mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5mL)和水(0.5mL)获得3-甲基-4-(2-[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]-4-氧代-3-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯浅黄色油。向上面制备的3-甲基-4-(2-[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]-4-氧代-3-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入1M四丁基氟化铵/四氢呋喃溶液(1.44mL)，并将该混合物在90℃下搅拌4小时。将乙酸乙酯(20mL)和盐水(10mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(2×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用碱性硅胶柱色谱纯化残余物(甲醇/乙酸乙酯)，并将目标级分减压浓缩。向残余物的甲醇(1mL)溶液中加入4M盐酸/乙酸乙酯溶液(2mL)和乙酸乙酯(1.5mL)，并过滤收集沉淀，得到标题化合物(15.6mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.92-2.21(3H,m),2.46(3H,s),2.60-2.71(1H,m),2.96(3H,s),3.24-3.38(1H,m),3.67-3.75(1H,m),4.45-4.57(1H,m),7.37(1H,s),8.10(1H,brs),10.08(1H,brs),12.92(1H,brs)。
实施例89
2-[2-(4-氟苄基)吡咯烷-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2-(4-氟苄基)吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例82步骤A一样的方法，由1-(叔丁氧羰基)-2-(4-氟苄基)脯氨酸(466mg)、三乙胺(0.335mL)、四氢呋喃(10mL)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.158mL)、实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(265mg)、2M氢氧化钠水溶液(3mL)和乙醇(5mL)获得标题化合物(53mg)浅黄色固体。
MS(ESI+):[M+H]+508。
MS(ESI+)，实测值：508。
B)2-[2-(4-氟苄基)吡咯烷-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例11步骤B一样的方法，由2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2-(4-氟苄基)吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(53mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(64mg)、碳酸铯(200mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3mL)、水(0.25mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(8mg)获得标题化合物(13mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.75-2.73(7H,m),3.36-3.79(4H,m),7.09-7.12(4H,m),7.19(1H,s),8.07(1H,brs),9.26(1H,brs),9.70(1H,brs),13.05(1H,brs)。
实施例90
2-[(苄基氨基)甲基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮单三氟乙酸盐的制备
A)2-[(苄基氨基)甲基]-6-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(500mg)、1-苯基甲胺(0.58mL)，碳酸钾(495mg)、碘化钠(27mg)和N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)获得标题化合物的粗品(234mg)无色固体。
B)6-苄基-2-溴-6,7-二氢咪唑并[1,5-a]噻吩并[3,2-d]嘧啶-9(5H)-酮的制备
将2-[(苄基氨基)甲基]-6-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的粗品(185mg)、37%甲醛水溶液(1mL)和四氢呋喃(2mL)的混合物在室温下搅拌1小时。过滤收集沉淀，依次用水和乙酸乙酯洗涤，得到标题化合物的粗品(104mg)浅黄色固体。
C)6-苄基-2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-6,7-二氢咪唑并[1,5-a]噻吩并[3,2-d]嘧啶-9(5H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-苄基-2-溴-6,7-二氢咪唑并[1,5-a]噻吩并[3,2-d]嘧啶-9(5H)-酮的粗品(100mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(255mg)、碳酸钠(66mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(23mg)获得标题化合物的粗品(89mg)浅黄色晶体。
D)2-[(苄基氨基)甲基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮单三氟乙酸盐的制备
将6-苄基-2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-6,7-二氢咪唑并[1,5-a]噻吩并[3,2-d]嘧啶-9(5H)-酮的粗品(80mg)、甲醇(2mL)和三氟乙酸(2mL)的混合物在加热下、在70℃下搅拌5小时。减压浓缩该反应***，并将残余物用甲醇/乙酸乙酯结晶，得到标题化合物(43mg)黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.46(3H,brs),4.20(2H,s),4.31(2H,s),7.40(1H,s),7.42-7.58(5H,m),8.05(1H,brs),9.15-10.22(2H,m),13.04(1H,brs)。
实施例91
2-[(1R,3S,4S)-2-氮杂双环[2.2.1]庚-3-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)(1R,3S,4S)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯的制备
在搅拌下，在冰冷却下，向(1R,3S,4S)-2-(叔丁氧羰基)-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-3-羧酸(0.894g)和三乙胺(0.541mL)的四氢呋喃溶液(15mL)中加入氯甲酸异丁酯(0.487mL)。在室温下搅拌30分钟之后，加入实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(0.78g)的四氢呋喃(3mL)溶液。将该反应***在加热下、在60℃下搅拌40小时。将水倒入该反应***中，并将该混合物用乙酸乙酯萃取，用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将2M氢氧化钠水溶液(7.06mL)和乙醇(14mL)加入到残余物中，并将该混合物在70℃下、在加热下搅拌5小时。将该反应***用1M盐酸(4mL)中和，同时在冰冷却下搅拌。过滤除去不溶性物质。将该混合物用乙酸乙酯萃取，用盐水洗涤，并用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用碱性硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(1.06g)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.07-1.83(14H,m),2.00-2.12(1H,m),2.58-2.67(1H,m),4.14(1H,brs),4.17-4.25(1H,m),7.56-7.81(1H,m),12.45-12.79(1H,m)。
B)(1R,3S,4S)-3-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯的制备
将(1R,3S,4S)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯(1.03g)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(1.49g)、碳酸钠(768mg)、1,2-二甲氧基乙烷(8.0mL)和水(4.0mL)放在烧瓶中，并用氩气吹扫烧瓶中的空气。加入[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(197mg)，并用氩气再次吹扫烧瓶中的空气。在100℃下搅拌该反应***3小时，并将该混合物用乙酸乙酯萃取，用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，并将萃取物减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(690mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.04-1.86(14H,m),2.04-2.20(1H,m),2.33-2.48(3H,m),2.60-2.67(1H,m),4.11-4.17(1H,m),4.18-4.26(1H,m),7.34-7.54(1H,m),7.88(0.6H,brs),8.23(0.4H,brs),12.23-12.48(1H,m),12.82-13.09(1H,m)。
C)2-[(1R,3S,4S)-2-氮杂双环[2.2.1]庚-3-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
在搅拌下，在室温下，向(1R,3S,4S)-3-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯(690mg)的甲醇(10mL)溶液中加入4M盐酸/乙酸乙酯溶液(2.0mL)。将该反应***在加热下、在50℃下搅拌30分钟，并将该混合物减压浓缩。用碳酸氢钠水溶液中和残余物。过滤除去不溶性物质。用乙酸乙酯萃取该混合物，用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用碱性硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷和甲醇/乙酸乙酯)，并将获得的无色固体用甲醇/乙酸乙酯结晶，得到标题化合物(220mg)无色固体。光学纯度是86%ee。用高效液相色谱进行分析(柱∶CHIRALPAK OD-H(4.6mm i.d.×250mm L，DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶甲醇，流速∶0.5mL/min，柱温∶30℃，检测：254nm)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.17(1H,s),1.27-1.38(1H,m),1.45-1.73(4H,m),2.45(3H,s),2.66-2.72(1H,m),3.57(1H,s),3.73(1H,s),7.35(1H,s),8.01(1H,brs)。
MS(ESI+):[M+H]+328。
MS(ESI+)，实测值：328。
实施例92
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S,4S)-4-甲基吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)(2S,4S)-2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基甲酰基]-4-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
在0℃，向(4S)-1-(叔丁氧羰基)-4-甲基-L-脯氨酸(491mg)和三乙胺(0.353mL)的四氢呋喃(5mL)溶液中加入2-甲基丙基氯甲酸酯(0.292mL)，并将该混合物在室温下搅拌1小时。而后，向该反应***中加入实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(225mg)，并将该混合物在60℃下搅拌24小时。将乙酸乙酯(20mL)和碳酸氢钠水溶液(10mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(5mL)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，减压浓缩滤液，并将残余物用乙醇(5mL)结晶。将获得的无色固体用高效液相色谱分级(柱∶CHIRALPAK AD(50mmi.d.×500mm L，DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/乙醇(850/150)，流速∶80mL/min，柱温∶30℃)，得到标题化合物(302mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.94-1.03(3H,m),1.22(9H,s,主要),1.39(9H,s,次要),1.41-1.56(1H,m),2.13-2.33(1H,m),2.35-2.48(1H,m),2.82-3.00(1H,m),3.70(1H,dd,J=10.1,7.5Hz),4.13(1H,t,J=8.1Hz),7.71(2H,brs),8.03(1H,s,次要),8.05(1H,s,主要),11.65(1H,s)。
*观察到为旋转异构体的3:2混合物。
B)(2S,4S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-4-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例40步骤B一样的方法，由上面制备的(2S,4S)-2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基甲酰基]-4-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(300mg)、2M氢氧化钠水溶液(1.73mL)和乙醇(5mL)获得标题化合物(240mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.98-1.05(3H,m),1.08(9H,s,主要),1.35(9H,s,次要),1.45-1.66(1H,m),2.18-2.33(1H,m),2.34-2.46(1H,m),2.97-3.13(1H,m),3.57-3.71(1H,m),4.49-4.60(1H,m),7.61(1H,s,次要),7.64(1H,s,主要),12.73(1H,brs)。
*观测为旋转异构体的2:1混合物。
C)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S,4S)-4-甲基吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的(2S,4S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-4-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(238mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(354mg)、碳酸铯(374mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(93.9mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5mL)、水(0.5mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)和甲醇(4mL)获得标题化合物(137mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.07(3H,d,J=6.6Hz),1.59-1.75(1H,m),2.34-2.50(1H,m),2.46(3H,s),2.60-2.76(1H,m),2.82-2.99(1H,m),3.40-3.53(1H,m),4.59-4.76(1H,m),7.37(1H,s),8.10(1H,s),9.04(1H,brs),10.02(1H,brs),12.85(1H,brs)。
实施例93
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-吡啶-2-基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-吡啶-2-基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
在搅拌下，在室温下，向实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(221mg)、三乙胺(0.42mL)和四氢呋喃(15mL)的混合物中加入吡啶-2-碳酰氯盐酸盐(214mg)。将该混合物在室温下搅拌30分钟，在50℃搅拌过夜。将三乙胺(0.42mL)和吡啶-2-碳酰氯盐酸盐(214mg)加入到该反应混合物中。2小时以后，将碳酸氢钠水溶液加入到该反应混合物中，并将该混合物用乙酸乙酯萃取。将分离的有机层用水和盐水(5mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将乙醇(10mL)和2M氢氧化钠水溶液(3.0mL)加入到残余物中，并将该混合物在80℃下搅拌1小时。在冰冷却下，将该反应混合物用6M盐酸中和，并将该混合物用乙酸乙酯萃取。将有机层用盐水(10mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩，得到标题化合物的粗品(300mg)淡橙色固体。
MS(ESI+):[M+H]+309。
MS(ESI+)，实测值：308,310。
B)6-溴-2-吡啶-2-基-3-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例88步骤D一样的方法，由上面制备的6-溴-2-吡啶-2-基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(223mg)、四氢呋喃(10mL)、氢化钠(60％，在油中，70mg)和[2-(氯甲氧基)乙基](三甲基)硅烷(0.31mL)获得标题化合物的粗品(302mg)黄色油。
MS(ESI+):[M+H]+439。
MS(ESI+)，实测值：438,410。
C)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-吡啶-2-基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的6-溴-2-吡啶-2-基-3-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(302mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(425mg)、碳酸铯(1.35g)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1∶1)(25.2mg)、1,2-二甲氧基乙烷(6mL)和水(2mL)获得3-甲基-4-(4-氧代-2-吡啶-2-基-3-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯淡橙色油。向上面制备的3-甲基-4-(4-氧代-2-吡啶-2-基-3-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯中加入1M四丁基氟化铵/四氢呋喃溶液(3.0mL)，并将该混合物在50℃下搅拌1小时。将水加入到该反应混合物中，并将该混合物用乙酸乙酯/四氢呋喃(3:1)萃取。用无水硫酸镁干燥有机层。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将三氟乙酸(3mL)加入到残余物中，并将该混合物在室温下搅拌1小时。将该反应混合物减压浓缩，将碳酸氢钠水溶液加入到残余物中，并用乙酸乙酯/四氢呋喃(3:1)萃取该混合物。用无水硫酸镁干燥有机层。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用碱性硅胶柱色谱纯化残余物(甲醇/乙酸乙酯)，并将目标级分减压浓缩，得到标题化合物(18.6mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.41-2.47(3H,m),7.54(1H,s),7.66(1H,ddd,J=7.6,4.7,1.1Hz),7.95(0.67H,brs),8.08(1H,td,J=7.7,1.5Hz),8.29-8.35(0.33H,m),8.40(1H,d,J=7.9Hz),8.77(1H,d,J=4.2Hz),11.94(1H,brs),13.05(1H,brs)。
实施例94
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-苯基-1-吡咯烷-1-基乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)2-氯-3-苯基丙酰基氯的制备
通过小份额方式向2-羟基-3-苯基丙酸(1.0g)和甲苯(10mL)的混合物中加入亚硫酰氯(1.3mL)。将该反应***在加热下、在40℃下搅拌2小时，并加入N,N-二甲基甲酰胺(0.093mL)。将该反应***在加热下、在40℃下搅拌20小时，并减压浓缩，加入甲苯(20mL)。减压浓缩该混合物，加入甲苯(20mL)。将该混合物再次减压浓缩，得到标题化合物的粗品(1.2g)浅黄色液体。
1H-NMR(CDCl3)δ3.19-3.31(1H,m),3.39-3.57(1H,m),4.65-4.80(1H,m),7.04-7.46(5H,m)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-苯基-1-吡咯烷-1-基乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
在搅拌下，在室温下，向实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(221mg)、三乙胺(0.21mL)和四氢呋喃(5.0mL)的混合物中加入2-氯-3-苯基丙酰基氯(305mg)。将该反应混合物搅拌10分钟，并加入吡咯烷(0.42mL)。将该反应混合物在加热下、在70℃下搅拌2小时，加入碘化钠(2.0mg)，并将该反应混合物在加热下、在70℃下搅拌18小时。用乙酸乙酯萃取该混合物，用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用碱性硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，得到浅黄色固体(285mg)。将获得的浅黄色固体(285mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(435mg)、碳酸钠(126mg)、1,2-二甲氧基乙烷(4.0mL)和水(2.0mL)放在烧瓶中，并用氩气吹扫烧瓶中的空气。加入[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(57mg)，并用氩气再次吹扫烧瓶中的空气。在100℃下搅拌该反应***30分钟，用乙酸乙酯萃取，用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，并将萃取物减压浓缩。用碱性硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷和甲醇/乙酸乙酯)，得到两种浅黄色固体。用硅胶柱色谱纯化较早洗脱的固体(乙酸乙酯/己烷)，得到3-甲基-4-{4-氧代-2-[(E)-2-苯基乙烯基]-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基}-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯的粗品(5.0mg)黄色固体。用硅胶柱色谱纯化随后洗脱的固体(乙酸乙酯/己烷和甲醇/乙酸乙酯)，并将获得的浅黄色固体用甲醇/乙酸乙酯结晶，得到标题化合物(18mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.54-1.72(4H,m),2.24-2.49(7H,m),2.85-3.03(1H,m),3.33-3.40(1H,m),3.91-4.00(1H,m),7.14-7.30(5H,m),7.32(1H,s),7.77-8.38(1H,m),12.21(1H,brs),12.96(1H,brs)。
实施例95
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(E)-2-苯基乙烯基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮一盐酸盐的制备
向实施例94步骤B制备的3-甲基-4-{4-氧代-2-[(E)-2-苯基乙烯基]-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基}-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯的粗品(5.0mg)的甲醇(1.0mL)溶液中加入4M盐酸/乙酸乙酯溶液(0.50mL)。将该反应***在室温下搅拌30分钟，并将该混合物减压浓缩。将残余物用甲醇/乙酸乙酯结晶，得到标题化合物(1.7mg)黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.47(3H,s),7.04(1H,d,J=16.1Hz),7.41(1H,s),7.42-7.51(3H,m),7.63-7.70(2H,m),7.93(1H,d,J=16.1Hz),8.06(1H,s)。
实施例96
2-(1H-咪唑-1-基甲基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-(1H-咪唑-1-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(180mg)、1H-咪唑(131mg)、碳酸钾(178mg)、碘化钠(9.7mg)和N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)获得标题化合物(88mg)黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ5.19(2H,s),6.91(1H,brs),7.21(1H,brs),7.59(1H,s),7.71(1H,brs),12.92(1H,brs)。
B)2-(1H-咪唑-1-基甲基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-(1H-咪唑-1-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(88mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(174mg)、碳酸钠(51mg)、1,2-二甲氧基乙烷(2.0mL)和水(1.0mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(23mg)获得标题化合物(1.8mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.37-2.47(3H,m),5.19(2H,s),6.92(1H,s),7.23(1H,s),7.36(1H,s),7.73(1H,s),7.88(0.6H,brs),8.25(0.4H,brs),12.68(1H,brs),12.88-13.04(1H,m)。
实施例97
2-[(2,2-二甲基吡咯烷-1-基)甲基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-[(2,2-二甲基吡咯烷-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(180mg)、2,2-二甲基吡咯烷一盐酸盐(261mg)、碳酸钾(445mg)、碘化钠(9.7mg)和N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)获得标题化合物(109mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.02(6H,s),1.56-1.76(4H,m),2.65-2.72(2H,m),3.52(2H,s),7.60(1H,s),11.91(1H,brs)。
B)2-[(2,2-二甲基吡咯烷-1-基)甲基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-[(2,2-二甲基吡咯烷-1-基)甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(109mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(196mg)、碳酸钠(57mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(26mg)获得标题化合物(22mg)褐色晶体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.03(6H,s),1.65(4H,s),2.45(3H,s),2.71(2H,brs),3.53(2H,s),7.37(1H,s),8.02(1H,brs),11.52-13.00(2H,m)。
实施例98
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-丙基吡咯烷-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2-丙基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例82步骤A一样的方法，由1-(叔丁氧羰基)-2-丙基脯氨酸(503mg)和三乙胺(0.454mL)和四氢呋喃(10mL)和2-甲基丙基氯甲酸酯(0.211mL)和实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(360mg)和2M氢氧化钠水溶液(4mL)和乙醇(10mL)获得标题化合物(33mg)浅黄色固体。
MS(ESI+):[M+H]+442。
MS(ESI+)，实测值：442。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-丙基吡咯烷-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例11步骤B一样的方法，由2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2-丙基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(33mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(46mg)和碳酸铯(146mg)和1,2-二甲氧基乙烷(3mL)和水(0.2mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1∶1)(3mg)获得标题化合物(13mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.77-0.89(3H,m),0.90-1.02(1H,m),1.23-1.38(1H,m),1.74-1.89(1H,m),1.93-2.43(5H,m),2.46(3H,s),3.25-3.44(2H,m),7.34(1H,s),8.09(1H,brs),9.32(1H,brs),9.55(1H,brs),12.83(1H,brs)。
实施例99
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(8aR)-八氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-3-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)N-苄基-5-氧代-D-脯氨酰胺的制备
在冰冷却下，将5-氧代-D-脯氨酸(5.0g)、苄胺(4.65mL)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(8.5g)和1-羟基苯并***(6.3g)在乙腈(100mL)中混合，并将该混合物升温至室温，搅拌3小时。将该混合物用乙酸乙酯(200mL)稀释，依次用1M盐酸(50mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)和盐水(50mL)洗涤。将有机层用无水硫酸镁干燥，并减压浓缩。过滤收集沉淀的固体，用***洗涤，减压干燥，得到标题化合物(4.02g)白色粉末。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.82-1.96(1H,m),2.02-2.36(3H,m),3.99-4.09(1H,m),4.29(2H,d,J=5.9Hz),7.18-7.38(5H,m),7.85(1H,s),8.50(1H,t,J=5.9Hz)。
B)1-苯基-N-[(2R)-吡咯烷-2-基甲基]甲胺的制备
在冰冷却下，向氢化锂铝(5.40g)的四氢呋喃(150mL)悬浮液中逐滴加入N-苄基-5-氧代-D-脯氨酰胺(11.0g)的四氢呋喃悬浮液(350mL)，并将该混合物在加热下、在60℃下搅拌14小时。将该反应混合物冷却至0℃，加入水(10.8mL)、1M氢氧化钠水溶液(5.4mL)和水(5.4mL)，并将得到的不溶性物质滤出。将滤液减压浓缩，得到标题化合物(8.95g)浅黄色油。该化合物不用进一步纯化就可用于下一个反应。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.18-1.33(1H,m),1.48-1.81(3H,m),2.09(2H,m),2.30-2.44(2H,m),2.63-2.80(2H,m),3.00-3.12(1H,m),3.68(2H,s),7.13-7.37(5H,m)。
C)(3S,8aR)-2-苄基八氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-3-羧酸甲酯的制备
在冰冷却下，向1-苯基-N-[(2R)-吡咯烷-2-基甲基]甲胺(13.6g)的甲苯(120mL)悬浮液中加入三乙胺(22.9mL)和2,3-二溴丙酸甲酯(13.4g)，并将该混合物在加热下、在90℃下搅拌5小时。将该反应混合物冷却至室温，用***(200mL)和盐水(200mL)稀释。将有机层用无水硫酸镁干燥，并滤出不溶性物质。减压浓缩滤液，用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷=10/80(50/50)，得到标题化合物(6.86g)浅黄色油。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.14-1.28(1H,m),1.53-1.77(3H,m),1.83-2.00(2H,m),2.31(1H,dd,J=10.7,3.9Hz),2.61-2.95(3H,m),3.29(1H,dd,J=10.7,2.0Hz),3.53(1H,dd,J=3.7,1.8Hz),3.62(3H,s),3.89(2H,s),7.17-7.37(5H,m)。
D)3-甲基(3S,8aR)-六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-2,3(1H)-二羧酸2-叔丁基酯的制备
向(3S,8aR)-2-苄基八氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-3-羧酸甲酯(6.80g)的5-10%盐酸-甲醇溶液中加入10%钯-碳(680mg，50%湿润)，并将该混合物在氢气氛围下(1atm)、在室温下搅拌10小时。通过硅藻土垫滤出不溶性物质，并将滤液浓缩，得到浅黄色油。将获得的(3S,8aR)-八氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-3-羧酸甲酯二盐酸盐溶于饱和碳酸氢钠水溶液(25mL)和四氢呋喃(50mL)中，加入二碳酸二叔丁基酯(5.68g)，并将该混合物在室温下搅拌1小时。将该混合物用乙酸乙酯(300mL)稀释，用水(100mL)和盐水(100mL)洗涤。将有机层用无水硫酸镁干燥，并减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷=10/90→20/80)，得到标题化合物(6.50g)无色油。
1H-NMR(CDCl3)δ1.18-1.39(1H,m),1.42-1.51(9H,m),1.61-1.94(4H,m),1.97-2.12(1H,m),1.99-2.11(1H,m),2.22-2.33(1H,m),2.69-2.91(1H,m),2.99-3.09(1H,m),3.48-3.58(1H,m),3.72-3.78(2H,m),3.93-4.13(1H,m),4.56-4.82(1H,m)。
E)(8aR)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1H)-羧酸叔丁基酯的制备
在搅拌下，在室温下，向(8aR)-2-(叔丁氧羰基)八氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-3-羧酸(270mg)、三乙胺(0.18mL)和四氢呋喃(10mL)的混合物中加入2-甲基丙基氯甲酸酯(0.13mL)。2小时之后，加入实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(221mg)，并将该混合物在50℃下搅拌2小时。将该反应混合物倒入饱和碳酸氢钠水溶液中，并用乙酸乙酯萃取。用无水硫酸镁干燥萃取物。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将残余物溶于乙醇(10mL)中，加入2M氢氧化钠水溶液(2mL)，并将该混合物在80℃下搅拌2小时。将该反应混合物冷却至室温，并倒入饱和碳酸氢钠水溶液中。将该混合物用乙酸乙酯/四氢呋喃混合物萃取，并将萃取物用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用碱性硅胶柱色谱纯化残余物(甲醇/乙酸乙酯)，得到标题化合物(65mg)黄色固体。
MS(ESI+):[M+H]+455。
MS(ESI+)，实测值：455。
F)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(8aR)-八氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-3-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例11步骤B一样的方法，由(8aR)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1H)-羧酸叔丁基酯(65mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(88mg)和碳酸铯(279mg)和1,2-二甲氧基乙烷(10mL)和水(1mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(5mg)获得标题化合物(36mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.55-4.06(14H,m),4.57-4.85(1H,m),7.40(1H,s),8.11(1H,s),12.01(1H,brs)。
实施例100
(2S)-2-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁基酯的制备
向实施例83步骤C制备的6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-哌啶-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐(1.05g)的四氢呋喃(35mL)悬浮液中加入三乙胺(1.87mL)和二碳酸二叔丁基酯(0.932mL)，并将该混合物在50℃下搅拌1.5小时。向该混合物中加入乙酸乙酯(50mL)和氯化铵水溶液(30mL)，并将分离的水层用乙酸乙酯(10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，并将目标级分减压浓缩，得到标题化合物(560mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.15-1.60(12H,m),1.60-1.89(2H,m),1.99-2.16(1H,m),2.37-2.48(3H,m),3.41-3.59(1H,m),3.80-3.91(1H,m),5.01(1H,brs),7.37(1H,s),7.84-8.37(1H,m),12.36(1H,brs),12.97(1H,brs)。
实施例101
2-[(2R)-氮杂环庚烷-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁基酯的光学拆分
用高效液相色谱(柱∶CHIRALPAK AD(50mm i.d.×500mm L，DAICELCHEMICAL INDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/乙醇(500/500)，流速∶60mL/min，柱温∶30℃)分级实施例79步骤A制备的2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁基酯(772mg)。在上述高效液相色谱条件下，获得(2R)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁基酯(325mg，>99.9%ee，保留时间11.2min)和(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁基酯(326mg，>99.9%ee，保留时间13.7min)。用高效液相色谱进行分析(柱∶CHIRALPAK AD-H(4.6mm i.d.×250mm L，DAICEL CHEMICALINDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/乙醇(500/500)，流速∶0.5mL/min，柱温∶30℃，检测：220nm)。光学拆分之后，用级分(保留时间13.7min)的X射线晶体结构分析来确定绝对空间构型。
B)2-[(2R)-氮杂环庚烷-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例76步骤B一样的方法，由上面制备的(2R)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁基酯(325mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(468mg)、碳酸铯(495mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(31.0mg)、1,2-二甲氧基乙烷(8mL)、水(0.8mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)和甲醇(5mL)获得标题化合物(68.8mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.42-1.89(7H,m),2.07-2.21(1H,m),2.45(3H,s),2.74-2.96(2H,m),3.82(1H,dd,J=9.5,4.4Hz),7.34(1H,s),8.01(1H,brs)。
实施例102
2-[(2S)-氮杂环庚烷-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例76步骤B一样的方法，由实施例101步骤A制备的(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁基酯(310mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(446mg)、碳酸铯(472mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(29.6mg)、1,2-二甲氧基乙烷(8mL)、水(0.8mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)和甲醇(5mL)获得标题化合物(92.7mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.40-1.89(7H,m),2.05-2.21(1H,m),2.45(3H,s),2.74-2.97(2H,m),3.76-3.86(1H,m),7.34(1H,s),8.01(1H,brs)。
实施例103
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-2-甲基吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例82步骤A一样的方法，由1-(叔丁氧羰基)-2-甲基-L-脯氨酸(1.2g)和三乙胺(1.21mL)和四氢呋喃(20mL)和2-甲基丙基氯甲酸酯(0.566mL)和实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(964mg)和2M氢氧化钠水溶液(10.9mL)和乙醇(20mL)获得标题化合物的粗品(244mg)浅黄色固体。
MS(ESI+):[M+H]+414。
MS(ESI+)，实测值：414。
光学纯度(19.5min，>99.9%ee)∶用高效液相色谱进行分析(柱∶CHIRALPAK AD(4.6mm i.d.×250mm L，DAICEL CHEMICALINDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/乙醇(900/100)，流速∶1.0mL/min，柱温∶30℃，检测：220nm)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-2-甲基吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例11步骤B一样的方法，由(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(239mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(356mg)和碳酸铯(1.13g)和1,2-二甲氧基乙烷(6mL)和水(1.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(21mg)获得标题化合物(54mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.74(3H,s),1.83-2.40(4H,m),2.46(3H,brs),3.27-3.44(2H,m),7.37(1H,s),8.10(1H,brs),9.18(1H,brs),9.62(1H,brs),12.81(1H,brs)。
实施例104
2-(3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基甲基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)2-(3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基甲基)-6-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(180mg)、3-氮杂双环[3.1.0]己烷一盐酸盐(231mg)、碳酸钾(445mg)、碘化钠(9.7mg)和N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)获得标题化合物(90mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.24-0.38(1H,m),0.66-0.75(1H,m),1.31-1.41(2H,m),2.43-2.48(2H,m),2.90(2H,d,J=8.5Hz),3.55(2H,s),7.60(1H,s),12.27(1H,brs)。
B)2-(3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基甲基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由2-(3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基甲基)-6-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(90mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(170mg)、碳酸钠(50mg)、1,2-二甲氧基乙烷(2.0mL)和水(1.0mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(23mg)获得标题化合物(16mg)褐色晶体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.26-0.41(1H,m),0.65-0.78(1H,m),1.31-1.46(2H,m),2.38-2.49(5H,m),2.92(2H,d,J=8.5Hz),3.56(2H,s),7.37(1H,s),7.80-8.42(1H,m),12.01(1H,brs),12.99(1H,brs)。
实施例105
2-{[(4-甲氧苄基)(1-甲基乙基)氨基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(180mg)、N-(4-甲氧苄基)丙-2-胺一盐酸盐(416mg)、碳酸钾(445mg)、碘化钠(9.7mg)和N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)获得6-溴-2-{[(4-甲氧苄基)(1-甲基乙基)氨基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(120mg)黄色固体。利用和实施例2步骤C一样的方法，由所获得的6-溴-2-{[(4-甲氧苄基)(1-甲基乙基)氨基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(120mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(175mg)、碳酸钠(51mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(23mg)获得标题化合物(86mg)黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.05(6H,d,J=6.6Hz),2.44(3H,brs),2.91-3.03(1H,m),3.55-3.64(4H,m),3.66(3H,s),6.79(2H,d,J=8.6Hz),7.27(2H,d,J=8.6Hz),7.32(1H,s),7.73-8.42(1H,m),11.42(1H,brs),12.96(1H,brs)。
实施例106
(3S)-3-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-2-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-羧酸叔丁基酯的制备
A)(3S)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-羧酸叔丁基酯的制备
在冰冷却下，向(3S)-2-(叔丁氧羰基)-2-氮杂双环[2.2.2]辛烷-3-羧酸(0.511g)和三乙胺(0.348mL)的四氢呋喃(5mL)溶液中加入氯甲酸异丁酯(0.26mL)，同时搅拌。在室温下搅拌30分钟之后，加入实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(0.221g)的四氢呋喃(1mL)溶液。将该反应***在加热下、在60℃下搅拌4天。将水倒入该反应***中，并将该混合物用乙酸乙酯萃取，用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将2M氢氧化钠水溶液(3.0mL)和1,2-二甲氧基乙烷(6.0mL)加入到残余物中，并将该混合物在加热下、在微波反应器中、在150℃下搅拌1小时。过滤除去不溶性物质，并将该混合物用乙酸乙酯萃取，用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用碱性硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(193mg)无色固体。光学纯度是70%ee。用高效液相色谱进行分析(柱∶CHIRALPAKAD-H(4.6mm i.d.×250mm L，DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/乙醇(800/200)，流速∶1.0mL/min，柱温∶30℃，检测：220nm)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.07-1.83(16H,m),2.03-2.23(2H,m),3.95-4.08(1H,m),4.51-4.56(1H,m),7.63(1H,s),12.50-12.77(1H,m)。
B)(3S)-3-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-2-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-羧酸叔丁基酯的制备
将(3S)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-羧酸叔丁基酯(190mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(266mg)、碳酸钠(78mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)放在烧瓶中，并用氩气吹扫烧瓶中的空气。加入[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(35mg)，并用氩气再次吹扫烧瓶中的空气。在100℃下搅拌该反应***3小时，并将该混合物用乙酸乙酯萃取，用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，并将萃取物减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，并将获得的浅黄色固体用甲醇/乙酸乙酯结晶，得到标题化合物(146mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.08-1.85(16H,m),2.06-2.22(2H,m),2.39-2.48(3H,m),3.97-4.09(1H,m),4.52-4.56(1H,m),7.39(0.4H,s),7.42(0.6H,s),7.92(0.6H,brs),8.27(0.4H,brs),12.24-12.46(1H,m),12.96(1H,brs)。
实施例107
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S*,5R*)-5-苯基哌啶-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮一盐酸盐的制备
利用和实施例86步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(323mg)、1-(叔丁氧羰基)-5-苯基哌啶-2-羧酸(511mg，购买于ChemImpex，非对映体比例未知)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.418mL)、三乙胺(0.506mL)和四氢呋喃(8mL)、2M氢氧化钠水溶液(2mL)和乙醇(5mL)获得(2S*,5R*)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-5-苯基哌啶-1-羧酸叔丁基酯浅黄色无定形固体。利用和实施例76步骤B一样的方法，由上面制备的(2S*,5R*)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-5-苯基哌啶-1-羧酸叔丁基酯、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(321mg)、碳酸铯(339mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(21.2mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5mL)、水(0.5mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)和甲醇(5mL)获得标题化合物(119mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.66-1.89(2H,m),2.15-2.32(1H,m),2.47(3H,s),2.99-3.13(1H,m),3.34-3.44(2H,m),3.85-4.01(1H,m),4.72(1H,brs),7.23-7.31(3H,m),7.31-7.40(2H,m),7.49(1H,s),8.11(1H,brs),9.29-9.43(1H,m),9.78-9.93(1H,m),12.67(1H,brs)。
实施例108
2-[(3S)-2-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
在搅拌下，在室温下，向实施例106步骤B制备的(3S)-3-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-2-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-羧酸叔丁基酯(143mg)的甲醇(3.0mL)溶液中加入4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1.0mL)。将该反应***在加热下、在50℃下搅拌1小时，并过滤收集沉淀，用乙酸乙酯洗涤，得到标题化合物(128mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.31-2.16(8H,m),2.31-2.38(1H,m),2.47(3H,s),3.51-3.64(1H,m),4.39-4.58(1H,m),7.38(1H,s),8.12(1H,s),8.19-8.40(1H,m),10.08-10.32(1H,m),12.87(1H,brs)。
实施例109
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2R)-2-甲基吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例82步骤A一样的方法，由1-(叔丁氧羰基)-2-甲基-L-脯氨酸(1.5g)和三乙胺(3.0mL)和四氢呋喃(20mL)和2-甲基丙基氯甲酸酯(0.707mL)和实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(1.21g)和2M氢氧化钠水溶液(13.6mL)和乙醇(20mL)获得标题化合物(199mg)淡棕色油。
MS(ESI+):[M+H]+414。
MS(ESI+)，实测值：414。
B)2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的光学拆分
用高效液相色谱(柱∶CHIRALPAK AD(50mm i.d.×500mm L，DAICELCHEMICAL INDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/乙醇(900/100)，流速∶80mL/min，柱温∶30℃)分级2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(180mg)。在上述高效液相色谱条件下，将含有具有较短保留时间的旋光型的级分溶液浓缩，得到(2R)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(88mg，9.25min，>99.9%ee)。另外，将含有具有较长保留时间的旋光型的级分溶液浓缩，得到(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(85mg，19.3min，>99.9%ee)。用高效液相色谱进行分析(柱∶CHIRALPAK AD(4.6mm i.d.×250mm L，DAICEL CHEMICALINDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/乙醇(900/100)，流速∶1.0mL/min，柱温∶30℃，检测：220nm)。与实施例103步骤A制备的(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯相比，确定绝对构型。
C)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2R)-2-甲基吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例11步骤B一样的方法，由(2R)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(88mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(131mg)和碳酸铯(415mg)和1,2-二甲氧基乙烷(2mL)和水(0.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(7.8mg)获得标题化合物(56mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.75(3H,s),1.81-2.40(4H,m),2.46(3H,s),3.30-3.43(2H,m),7.37(1H,s),8.10(1H,brs),9.23(1H,brs),9.77(1H,brs),12.81(1H,brs)。
实施例110
2-[(1S*,2S*,5R*)-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)(1S*,2S*,5R*)-2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基甲酰基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例78步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(338mg)、(1S*,2S*,5R*)-3-(叔丁氧羰基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-2-羧酸(695mg)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.398mL)、三乙胺(0.424mL)和四氢呋喃(5mL)获得标题化合物(400mg)浅黄色无定形固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.46-0.60(1H,m),0.60-0.72(1H,m),1.11-1.48(9H,m),1.63-1.73(1H,m),1.86-1.97(1H,m),3.40-3.47(1H,m),3.48-3.57(1H,m),4.27(1H,d,J=4.9Hz),7.69(2H,brs),8.05(1H,s),11.51(1H,brs)。
B)2-[(1S*,2S*,5R*)-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
向上面制备的(1S*,2S*,5R*)-2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基甲酰基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁基酯(400mg)的乙醇(4mL)溶液中加入2M氢氧化钠水溶液(4.62mL)，并将该混合物在70℃下搅拌54小时。在冰冷却下，将该反应混合物用6M盐酸(1.5mL)中和，并加入乙酸乙酯(30mL)。将分离的有机层用盐水(5mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩，得到(1S,2S,5R)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁基酯浅黄色固体。利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的(1S*,2S*,5R*)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁基酯、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(572mg)、碳酸铯(605mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(38.0mg)、1,2-二甲氧基乙烷(7mL)、水(0.7mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)和甲醇(4mL)获得标题化合物(130mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.56-0.73(2H,m),1.82-1.93(1H,m),2.25-2.36(1H,m),2.46(3H,s),3.38-3.54(2H,m),4.91(1H,brs),7.33(1H,s),8.11(1H,s),8.73(1H,brs),10.50(1H,brs),13.06(1H,brs)。
实施例111
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(4R)-1,3-噻唑烷-4-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)(4R)-4-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-1,3-噻唑烷-3-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例71步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(500mg)、(4R)-3-(叔丁氧羰基)-1,3-噻唑烷-4-羧酸(1.16g)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.647mL)、三乙胺(0.694mL)和四氢呋喃(10mL)、2M氢氧化钠水溶液(5.65mL)和乙醇(10mL)获得标题化合物(774mg)淡褐色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.17(9H,brs,主要),1.41(9H,brs,次要),3.18(1H,brs),3.51(1H,brs),4.60(2H,q,J=8.7Hz),4.90(1H,brs,主要),5.05(1H,brs,次要),7.61(1H,brs),12.77(1H,brs)。
*观察到为旋转异构体的3:2混合物。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(4R)-1,3-噻唑烷-4-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮
利用和实施例76步骤B一样的方法，由上面制备的(4R)-4-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-1,3-噻唑烷-3-羧酸叔丁基酯(250mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(369mg)、碳酸铯(389mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(24.4mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5mL)、水(0.5mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)和甲醇(3mL)获得标题化合物(94mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.47(3H,brs),3.03(1H,dd,J=10.0,7.0Hz),3.21(1H,dd,J=10.0,6.6Hz),3.58(1H,brs),4.11(1H,d,J=8.7Hz),4.19-4.33(2H,m),7.37(1H,s),7.90(1H,brs,主要),8.26(1H,brs,次要),12.28(1H,brs),13.01(1H,brs)。
*观察到为互变异构体的3:2混合物。
实施例112
2-[(1S,2R,5R)-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)(1R*,2S*,5S*)-2-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由实施例87步骤A制备的(1R*,2S*,5S*)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁基酯(293mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(437mg)、碳酸铯(463mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(29.0mg)、1,2-二甲氧基乙烷(7mL)和水(0.7mL)获得(1R*,2S*,5S*)-2-{6-[1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基]-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基}-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁基酯浅黄色无定形固体。向上面制备的(1R*,2S*,5S*)-2-{6-[1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基]-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基}-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁基酯的四氢呋喃(5mL)溶液中加入2M氢氧化钠水溶液(1mL)，并将该混合物在60℃下搅拌2小时。将乙酸乙酯(20mL)和1M盐酸(2mL)加入到该反应混合物中，并分离有机层，用盐水(5mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，减压浓缩滤液，得到标题化合物(156mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.50-0.63(1H,m),0.79-0.96(1H,m),1.07(9H,s,主要),1.36(9H,s,次要),1.63-1.76(1H,m),1.89-2.02(1H,m),2.45(3H,s),3.47-3.63(2H,m),4.77(1H,d,J=5.1Hz),7.38(1H,brs,次要),7.42(1H,s,主要),7.77-8.43(1H,m),12.36(1H,brs),12.96(1H,brs)。
*观察到为旋转异构体的5:2混合物。
B)(1R*,2S*,5S*)-2-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁基酯的光学拆分
用高效液相色谱(柱∶CHIRALPAK AD(50mm i.d.×500mm L，DAICELCHEMICAL INDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/乙醇(900/100)，流速∶80mL/min，柱温∶30℃)分级(1R*,2S*,5S*)-2-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁基酯(205mg)。在上述高效液相色谱条件下，获得(1S,2R,5R)-2-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁基酯(80mg，>99.9%ee，保留时间20.2min)和(1R,2S,5S)-2-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁基酯(77mg，99.8%ee，保留时间30.2min)。用高效液相色谱进行分析(柱∶CHIRALPAK AD-3(4.6mm i.d.×250mmL，DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/乙醇(850/150)，流速∶1mL/min，柱温∶30℃，检测：220nm)。光学拆分之后，用级分(保留时间20.2min)的X-射线晶体照相术来确定绝对空间构型。
C)2-[(1S,2R,5R)-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
向上面制备的(1S,2R,5R)-2-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁基酯(75.0mg)的甲醇(5mL)溶液中加入4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)，并将该混合物在50℃下搅拌2小时。加入乙酸乙酯(4mL)，并过滤收集沉淀的固体，得到标题化合物(53.9mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.55-0.74(2H,m),1.82-1.94(1H,m),2.25-2.36(1H,m),2.46(3H,s),3.37-3.56(2H,m),4.91(1H,brs),7.33(1H,s),8.10(1H,s),8.73(1H,brs),10.43(1H,brs),13.04(1H,brs)。
实施例113
2-[(1R,2S,5S)-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例110步骤C一样的方法，由实施例112步骤B制备的(1R,2S,5S)-2-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁基酯(75.0mg)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)和甲醇(5mL)获得标题化合物(56.9mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.57-0.73(2H,m),1.82-1.93(1H,m),2.25-2.36(1H,m),2.46(3H,s),3.36-3.56(2H,m),4.91(1H,brs),7.32(1H,s),8.10(1H,s),8.73(1H,brs),10.40(1H,brs),13.04(1H,brs)。
实施例114
2-[(2,5-二甲基吡咯烷-1-基)甲基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B和步骤C一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(180mg)、2,5-二甲基吡咯烷(0.170mL)和碳酸钾(178mg)和碘化钠(9.7mg)和N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(252mg)和碳酸钠(130mg)和1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1∶1)(33mg)获得标题化合物(45mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.96-1.06(6H,m),1.28-1.43(2H,m),1.75-1.91(2H,m),2.45(3H,s),2.72-2.85(2H,m),3.67(2H,s),7.37(1H,s),7.84-8.19(1H,m),11.48-12.21(1H,m),12.58-13.18(1H,m)。
实施例115
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1,2,3,4-四氢异喹啉-3-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例71步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(265mg)、(3S)-2-(叔丁氧羰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸(699mg)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.327mL)、三乙胺(0.416mL)和四氢呋喃(5mL)、2M氢氧化钠水溶液(3.00mL)和乙醇(5mL)获得标题化合物(182mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.07-1.53(9H,m),2.97-3.28(2H,m),4.43-5.18(3H,m),7.06-7.32(4H,m),7.43-7.66(1H,m),12.77(1H,brs)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1,2,3,4-四氢异喹啉-3-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁基酯(150mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(200mg)、碳酸铯(211mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(13.3mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5mL)、水(0.5mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)和甲醇(4mL)获得标题化合物(65mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.48(3H,s),3.20(1H,dd,J=16.8,11.9Hz),3.48-3.62(1H,m),4.35-4.52(2H,m),4.62-4.78(1H,m),5.95-7.55(7H,m),8.14(1H,s),9.92-10.17(1H,m),10.40(1H,brs),13.02(1H,brs)。
实施例116
2-(7-氮杂双环[2.2.1]庚-1-基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮一盐酸盐的制备
A)2-[(苯基羰基)氨基]丙-2-烯酸甲酯的制备
向二氯甲烷(400mL)中加入丝氨酸甲酯盐酸盐(45.0g)和三乙胺(132mL)，并逐滴加入苯甲酰氯(77.0mL)。在室温下搅拌过夜之后，将该反应***用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤两次，用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将残余物溶于二氯甲烷(300mL)中，并加入2,3,4,6,7,8,9,10-八氢嘧啶并[1,2-a]氮杂环庚烷(52.0g)。将该混合物在室温下搅拌4小时，并将该反应***用水和饱和碳酸氢钠水溶液洗涤两次，并用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩，得到标题化合物的粗品(67.0g)棕色油。
1H-NMR(CDCl3)δ3.88(3H,s),5.99(1H,s),6.79(1H,s),7.45-7.56(3H,m),7.83(2H,d,J=7.2Hz),8.53(1H,s)。
B)4-氧代-1-[(苯基羰基)氨基]环己烷羧酸甲酯的制备
向上面制备的2-[(苯基羰基)氨基]丙-2-烯酸甲酯的粗品(67.0g)的二氯甲烷(300mL)溶液中加入碘化锌(104g)。向该混合物中加入三甲基[(1-亚甲基丙-2-烯-1-基)氧基]硅烷(173mL)，并将该混合物回流加热24小时。将该反应***冷却至室温，用水洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质。向滤液中加入1M盐酸和四氢呋喃的混合物(1:4,40mL)，并将该混合物在室温下搅拌5小时。用盐水洗涤该反应混合物，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/石油醚)，得到标题化合物(56.0g)。
1H-NMR(CDCl3)δ2.49-2.57(8H,m),3.79(3H,s),6.43(1H,s),7.44-7.48(2H,m),7.53-7.57(1H,m),7.78-7.80(2H,m)。
C)N-(3-氧代-2-氧杂二环[2.2.2]辛-4-基)苯甲酰胺的制备
将上面制备的4-氧代-1-[(苯基羰基)氨基]环己烷羧酸甲酯(56.0g)的四氢呋喃(300mL)溶液冷却至-78℃，逐滴加入1M三(仲丁基)硼氢化锂/四氢呋喃溶液，并将该混合物在相同温度下搅拌15小时，升温至室温过夜。将该反应用氯化铵水溶液淬灭，并减压蒸发大部分四氢呋喃。用乙酸乙酯从残余物中萃取有机产物，并将该萃取物用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/石油醚)，得到标题化合物(26.0g)。
1H-NMR(CDCl3)δ1.72-1.81(2H,m),1.93-2.00(2H,m),2.14-2.20(2H,m),3.25-3.33(2H,m),4.80(1H,t,J=4.0Hz),7.43-7.54(4H,m),7.80-7.82(2H,m)。
D)反式-4-羟基-1-[(苯基羰基)氨基]环己烷羧酸甲酯的制备
向上面制备的N-(3-氧代-2-氧杂二环[2.2.2]辛-4-基)苯甲酰胺(26.0g)的甲醇(200mL)溶液中加入4-甲基苯磺酸(1.90g)，并将该混合物回流加热过夜。将该反应混合物浓缩，得到标题化合物(27.0g)。获得的化合物不用进一步纯化就可用于下一个反应。
1H-NMR(CDCl3)δ1.73-1.85(4H,m),1.94-2.00(2H,m),2.39-2.47(2H,m),3.76(3H,s),3.98(1H,d,J=2.8Hz),6.30(1H,s),7.42-7.54(4H,m),7.72-7.80(2H,m)。
E)7-(苯基羰基)-7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-1-羧酸甲酯的制备
向上面制备的反式-4-羟基-1-[(苯基羰基)氨基]环己烷羧酸甲酯(27.0g)的二氯甲烷(200mL)溶液中加入N-乙基-N-(1-甲基乙基)丙-2-胺(33.8mL)。逐滴加入甲磺酰氯(15.2mL)，并将该混合物在室温下搅拌过夜。依次用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤该反应***，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。将残余物溶于四氢呋喃(300mL)中，并冷却至-78℃。逐滴加入1M 2-甲基丙-2-醇化钾/四氢呋喃溶液(150mL)，并将该混合物在相同温度下搅拌1小时，并将该反应***升温至室温。搅拌过夜之后，用1M盐酸酸化该混合物，并用乙酸乙酯萃取有机产物。用盐水洗涤萃取物，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/石油醚)，得到标题化合物(4.0g)白色固体。
1H-NMR(CDCl3)δ1.53-1.62(2H,m),1.78-1.85(2H,m),1.89-1.96(2H,m),2.32-2.39(2H,m),3.81(3H,s),4.27(1H,t,J=4.8Hz),7.38-7.50(3H,m),7.02-7.23(2H,m)。
F)7-[(苄氧基)羰基]-7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-1-羧酸的制备
将上面制备的7-(苯基羰基)-7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-1-羧酸甲酯(8.0g)和浓盐酸(100mL)的混合物回流加热24小时，并减压浓缩。向残余物中加入水(50mL)，并将该混合物用乙酸乙酯洗涤两次。将获得的水层用碳酸钠、碳酸钠(9.80g)和氯甲酸苄基酯(5.40mL)的1,4-二
Figure BDA00002264979901611
烷(30mL)溶液碱化，并将该混合物在室温下搅拌过夜。将该反应混合物用乙酸乙酯洗涤两次，并用2M盐酸将水层调节至pH3。将有机产物用乙酸乙酯(150mL)萃取3次，并将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到标题化合物(2.45g)黄色固体。
1H-NMR(CDCl3)δ1.49-1.56(2H,m),1.85-1.95(4H,m),2.16-2.20(2H,m),4.47(1H,t,J=4.4Hz),5.14(2H,s),7.32-7.37(5H,m)。
G)1-(氯代羰基)-7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-7-羧酸苄基酯的制备
在室温下，向上面制备的7-[(苄氧基)羰基]-7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-1-羧酸(550mg)、N,N-二甲基甲酰胺(0.02mL)和四氢呋喃(10mL)的混合物中逐滴加入乙二酰二氯(0.80mL)。将该混合物在室温下搅拌30分钟，并将该反应***减压浓缩。向残余物中加入少量的四氢呋喃，并将该混合物再次减压浓缩，得到标题化合物的粗品(2.0mmol)。所获得的标题化合物的粗品不用进一步纯化就可用于下一个反应。
H)1-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-7-羧酸苄基酯的制备
在室温下，向实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(221mg)、上面制备的1-(氯代羰基)-7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-7-羧酸苄基酯的粗品(2.0mmol)和四氢呋喃(10mL)的混合物中加入N-乙基-N-(1-甲基乙基)丙-2-胺(0.70mL)。搅拌1小时之后，将该反应***倒入饱和碳酸氢钠水溶液中，并将该混合物用乙酸乙酯萃取。将萃取物用无水硫酸镁干燥，并减压浓缩。向残余物中加入乙醇(10mL)和2M氢氧化钠(2.5mL)，并将该混合物在100℃搅拌过夜。将该反应***冷却至室温，倒入饱和碳酸氢钠水溶液中，并将该混合物用乙酸乙酯萃取。将萃取物用无水硫酸镁干燥，并减压浓缩。用碱性硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷和甲醇/乙酸乙酯)，得到标题化合物(313mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.50-1.64(2H,m),1.78-1.93(4H,m),2.16-2.29(2H,m),4.37-4.42(1H,m),4.90(2H,s),7.06-7.27(5H,m),7.57(1H,s),12.52(1H,s)。
I)2-(7-氮杂双环[2.2.1]庚-1-基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮一盐酸盐的制备
将上面制备的1-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-7-羧酸苄基酯(313mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(419mg)、碳酸铯(1.33g)、1,2-二甲氧基乙烷(8mL)和水(2.0mL)放在烧瓶中，并用氩气吹扫烧瓶中的空气。加入[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(25mg)，用氩气再次吹扫烧瓶中的空气，并将该混合物在100℃下搅拌1小时。将该反应混合物倒入饱和碳酸氢钠水溶液中，并将该混合物用3:1乙酸乙酯/四氢呋喃混合物萃取。用无水硫酸镁干燥获得的有机层。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，并将目标级分减压浓缩，得到1-{6-[1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基]-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基}-7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-7-羧酸苄基酯(240mg)。将上面制备的1-{6-[1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基]-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基}-7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-7-羧酸苄基酯(240mg)溶于甲醇(10mL)中，加入10%钯-碳(100mg，50%湿润)，并将该混合物在室温下、在氢气氛围下(1atm)搅拌2小时。通过硅藻土垫过滤该反应***，并使甲酸通过硅藻土垫，直到化合物被充分洗脱为止。将滤液减压浓缩，将饱和碳酸氢钠水溶液加入到残余物中，并用乙酸乙酯/四氢呋喃混合物(3:1)萃取该混合物。用无水硫酸镁干燥有机层。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。向残余物中加入10%盐酸/甲醇溶液(5.0mL)，并将该混合物在50℃下搅拌1小时。将该混合物减压浓缩，向残余物中加入热的20:1乙醇/水(15mL)，并滤出不溶性物质。将滤液在室温下静置1小时，并过滤收集沉淀，得到标题化合物(103mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.79-2.14(6H,m),2.37-2.47(5H,m),4.16-4.25(1H,m),7.38(1H,s),7.91-8.40(1H,m),9.71(2H,brs),12.66-13.15(2H,m)。
MS(ESI+):[M+H]+328。
MS(ESI+)，实测值：328。
实施例117
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S,4S)-4-苯基吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)(2S,4S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-4-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例71步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(361mg)、(4S)-1-(叔丁氧羰基)-4-苯基-L-脯氨酸(500mg)和2-甲基丙基氯甲酸酯(0.225mL)和三乙胺(0.239mL)和四氢呋喃(10mL)和乙醇(5mL)和2M氢氧化钠水溶液(3.27mL)获得标题化合物(515mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.15(5.5H,s),1.39(3.5H,s),2.22-2.48(2H,m),3.33-3.39(1H,m),3.54-3.74(1H,m),3.89-4.08(1H,m),4.71-4.87(1H,m),7.18-7.38(5H,m),7.56-7.65(1H,m),12.72(1H,brs)。
B)(2S,4S)-2-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-4-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由(2S,4S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-4-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(250mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(323mg)、碳酸钠(167mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)和[1,1′-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(43mg)获得标题化合物(231mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.17(6H,s),1.40(3H,s),2.21-2.48(5H,m),3.33-3.41(1H,m),3.62-3.79(1H,m),3.93-4.06(1H,m),4.76-4.91(1H,m),7.18-7.38(5H,m),7.43-7.53(1H,m),7.79-8.45(1H,m),12.32-12.59(1H,m),12.84-13.09(1H,m)。
C)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S,4S)-4-苯基吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例108一样的方法，由(2S,4S)-2-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-4-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(230mg)和甲醇(3.0mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1.0mL)获得标题化合物(186mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.42-2.57(4H,m),2.58-2.70(1H,m),3.26-3.44(1H,m),3.55-3.71(1H,m),3.83-3.97(1H,m),4.93-5.05(1H,m),7.24-7.45(6H,m),8.11(1H,s),9.21(1H,brs),10.59(1H,brs),12.66-13.09(1H,m)。
实施例118
2-(6,6-二甲基吗啉-3-基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)5-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2,2-二甲基吗啉-4-羧酸叔丁基酯的制备
向4-(叔丁氧羰基)-6,6-二甲基吗啉-3-羧酸(1.00g)和三乙胺(1.08mL)的四氢呋喃(20mL)溶液中加入2-甲基丙基氯甲酸酯(0.50mL)，同时在冰冷却下搅拌。在室温下搅拌30分钟之后，加入实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(568mg)的四氢呋喃(3mL)溶液。将该反应***在加热下、在60℃下搅拌3小时。将水倒入该反应***中，并将该混合物用乙酸乙酯萃取，用盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。向残余物中加入2M氢氧化钠水溶液(7.7mL)和乙醇(20mL)，并将该混合物在加热下、在80℃下搅拌5小时。将盐水倒入该反应***中，用乙酸乙酯/四氢呋喃的3:1混合物萃取该混合物，并用盐水洗涤萃取物，用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用碱性硅胶柱色谱纯化残余物(甲醇/乙酸乙酯)，得到标题化合物(630mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.05-1.50(15H,m),3.30-3.59(2H,m),3.86-4.03(2H,m),4.68-4.87(1H,m),7.61(1H,brs),12.72(1H,brs)。
B)2-(6,6-二甲基吗啉-3-基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的5-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2,2-二甲基吗啉-4-羧酸叔丁基酯(111mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(154mg)、碳酸铯(489mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(9.1mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3mL)、水(0.75mL)、10%盐酸/甲醇溶液(2mL)和甲醇(2mL)获得标题化合物(75mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.28(3H,s),1.34(3H,s),2.46(3H,s),2.96-3.08(1H,m),3.25-3.36(1H,m),3.87(1H,dd,J=12.8,9.4Hz),4.12-4.24(1H,m),4.32-4.44(1H,m),7.38(1H,s),8.11(1H,s),9.42(1H,brs),10.43(1H,brs),12.88(1H,brs)。
实施例119
2-[(1S,3S,5S)-2-氮杂双环[3.1.0]己-3-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)(1S,3S,5S)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例71步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(255mg)、(1S,3S,5S)-2-(叔丁氧羰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸(550mg)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.315mL)、三乙胺(0.399mL)和四氢呋喃(5mL)、2M氢氧化钠水溶液(2.88mL)和乙醇(5mL)获得标题化合物(215mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.64-0.92(2H,m),1.06-1.43(9H,m),1.49-1.63(1H,m),1.92-2.04(1H,m),2.55-2.77(1H,m),3.37-3.52(1H,m),4.88-5.08(1H,m),7.54-7.67(1H,m),12.63(1H,brs)。
B)2-[(1S,3S,5S)-2-氮杂双环[3.1.0]己-3-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的(1S,3S,5S)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁基酯(200mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(149mg)、碳酸铯(316mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(20.0mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5mL)、水(0.5mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)和甲醇(5mL)获得标题化合物(56mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.83-1.13(2H,m),1.77-1.90(1H,m),2.34(1H,dd,J=13.6,3.8Hz),2.47(3H,s),2.61-2.76(1H,m),3.35-3.44(1H,m),4.97-5.16(1H,m),7.30-7.46(1H,m),8.11(1H,s),9.22(1H,brs),10.64-11.11(1H,m),12.86(1H,brs)。
实施例120
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S,4R)-4-苯基吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)(2S,4R)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-4-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例71步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(361mg)和(4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-苯基-L-脯氨酸(500mg)和2-甲基丙基氯甲酸酯(0.225mL)和三乙胺(0.239mL)和四氢呋喃(10mL)和乙醇(5mL)和2M氢氧化钠水溶液(3.27mL)获得标题化合物(314mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.15(6H,s),1.37(3H,s),2.01-2.21(1H,m),2.58-2.71(1H,m),3.41-3.61(2H,m),3.85-3.98(1H,m),4.64-4.75(1H,m),7.19-7.40(5H,m),7.60-7.67(1H,m),12.81(1H,brs)。
B)(2S,4R)-2-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-4-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由(2S,4R)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-4-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(250mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(323mg)、碳酸钠(167mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(43mg)获得标题化合物(218mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.12(6H,s),1.38(3H,s),2.06-2.23(1H,m),2.38-2.48(3H,m),2.60-2.77(1H,m),3.42-3.62(2H,m),3.87-3.98(1H,m),4.64-4.79(1H,m),7.18-7.47(6H,m),7.79-8.33(1H,m),12.40-12.65(1H,m),12.83-13.09(1H,m)。
C)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S,4R)-4-苯基吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例108一样的方法，由(2S,4R)-2-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-4-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(210mg)和甲醇(3.0mL)和4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1.0mL)获得标题化合物(172mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.16-2.30(1H,m),2.47(3H,s),2.89-3.04(1H,m),3.28-3.45(1H,m),3.59-3.86(2H,m),4.78-4.93(1H,m),7.24-7.44(6H,m),8.11(1H,s),9.36(1H,brs),10.48(1H,brs),12.90(1H,brs)。
实施例121
2-[氨基(环己基)甲基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)[(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)(环己基)甲基]氨基甲酸叔丁基酯的制备
利用和实施例71步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(265mg)、(2S)-[(叔丁氧羰基)氨基](环己基)乙酸(648mg)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.327mL)、三乙胺(0.416mL)和四氢呋喃(5mL)、2M氢氧化钠水溶液(3.00mL)和乙醇(5mL)获得标题化合物(620mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.73-1.88(21H,m),3.71-4.34(1H,m),6.80-7.16(1H,m),12.49(1H,brs)。
B)2-[氨基(环己基)甲基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的[(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)(环己基)甲基]氨基甲酸叔丁基酯(499mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(697mg)、碳酸铯(737mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(46.5mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5mL)、水(0.5mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)和甲醇(4mL)获得标题化合物(125mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.91-2.03(11H,m),2.47(3H,s),3.98-4.18(1H,m),5.99(2H,brs),7.31-7.39(1H,m),8.11(1H,s),8.71(3H,s),12.80(1H,brs)。
实施例122
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-3,4-二氢喹啉-1(2H)-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例71步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(265mg)、(2S)-1-(叔丁氧羰基)-1,2,3,4-四氢喹啉-2-羧酸(699mg)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.327mL)、三乙胺(0.416mL)和四氢呋喃(5mL)、2M氢氧化钠水溶液(3.00mL)和乙醇(5mL)获得标题化合物(245mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.22-1.33(9H,m),1.73-1.90(1H,m),2.24-2.40(1H,m),2.55-2.77(2H,m),5.10(1H,t,J=7.3Hz),6.92-7.03(1H,m),7.08-7.24(2H,m),7.56(1H,s),7.79(1H,d,J=8.1Hz),12.85(1H,brs)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-3,4-二氢喹啉-1(2H)-羧酸叔丁基酯(200mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(267mg)、碳酸铯(282mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(17.8mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5mL)、水(0.5mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)和甲醇(4mL)获得标题化合物(86mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.09-2.24(2H,m),2.46(3H,s),2.63-2.86(2H,m),4.54(1H,t,J=5.8Hz),6.48-7.83(10H,m),8.09(1H,s)。
实施例123
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(3aS,6aS)-八氢环戊二烯并[b]吡咯-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)1-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)乙酮的制备
将戊烷-2,4-二酮(10.01g)和1,1-二甲氧基-N,N-二甲基甲胺(12.51g)的混合物在80℃下搅拌1小时。将四氢呋喃(20mL)加入到该反应混合物中，在冰冷却下通过小份额方式加入水合肼(7.51g)，并将该混合物在室温下搅拌30分钟。将该反应混合物升温至室温，加入乙酸乙酯(100mL)和水(100mL)，并将分离的水层用乙酸乙酯(50mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩，得到1-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)乙酮(12.40g)无色油。将其溶于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中，加入溴甲基苯(18.80g)和碳酸钾(15.20g)，并将该混合物在60℃下搅拌18小时。将该反应混合物升温至室温，加入乙酸乙酯(100mL)和水(100mL)，并将分离的水层用乙酸乙酯(50mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(9.80g)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.36(3H,s),2.49(3H,s),5.24(2H,s),7.04-7.44(5H,m),7.73(1H,s)。
B)(2Z)-3-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-氯丙-2-烯腈的制备
在冰冷却下，通过小份额方式向N,N-二甲基甲酰胺(13.4g)中加入三氯氧磷(28.1g)，并将该混合物在室温下搅拌15分钟。在冰冷却下，通过小份额方式向其中加入上面制备的1-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)乙酮(9.80g)，并将该反应混合物在50℃下搅拌30分钟。在50℃，通过小份额方式向其中加入盐酸羟胺粉末(25.4g)，并将该反应混合物在50℃下搅拌30分钟。将冰水(200mL)加入到该反应混合物中，并将该混合物用1M氢氧化钠水溶液中和，用乙酸乙酯(100ml×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，并将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，用***结晶，得到标题化合物(5.73g)浅黄色粉末。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.39(3H,s),5.22(2H,s),5.65(1H,s),7.02-7.48(5H,m),7.64(1H,s)。
C)3-氨基-5-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩-2-羧酸甲酯的制备
将上面制备的(2Z)-3-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-氯丙-2-烯腈(5.73g)、甲基硫基乙酸酯(methylsulfanyl acetate)(2.95g)、氢化钠(0.80g)和N,N-二甲基甲酰胺(10mL)的混合物在60℃下搅拌2小时。将乙酸乙酯(20mL)和水(10mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，并将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(6.55g)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.33(3H,s),3.65(3H,s),5.23(2H,s),7.04-7.44(6H,m),7.49(1H,s)。
D)(2S,3aS,6aS)-六氢环戊二烯并[b]吡咯-1,2(2H)-二羧酸2-苄基1-叔丁基酯的制备
将(2S,3aS,6aS)-八氢环戊二烯并[b]吡咯-2-羧酸苄基酯盐酸盐(1.00g)、二碳酸二叔丁基酯(1.16g)、三乙胺(0.72g)和四氢呋喃(10mL)的混合物在室温下搅拌18小时。将乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，并将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(1.23g)无色油。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.20-1.57(11H,m),1.57-2.05(5H,m),2.30-2.50(1H,m),2.58-2.73(1H,m),4.08-4.53(2H,m),5.00-5.30(2H,m),7.25-7.45(5H,m)。
E)(2S,3aS,6aS)-1-(叔丁氧羰基)八氢环戊二烯并[b]吡咯-2-羧酸的制备
将上面制备的(2S,3aS,6aS)-六氢环戊二烯并[b]吡咯-1,2(2H)-二羧酸2-苄基1-叔丁基酯(1.23g)、20%氢氧化钯-碳(200mg)和甲醇(5mL)的混合物在氢气氛围下、在室温下搅拌1小时。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，向残余物中加入乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)，并将分离的水层用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，得到标题化合物(0.91g)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.40-1.65(13H,m),1.65-2.00(3H,m),2.15-2.25(1H,m),2.35-2.45(1H,m),2.60-2.75(1H,m),4.12-4.23(1H,m),4.37-4.48(1H,m)。
F)(3aS,6aS)-2-{[5-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(甲氧羰基)噻吩-3-基]氨基甲酰基}六氢环戊二烯并[b]吡咯-1(2H)-羧酸叔丁基酯的制备
将上面制备的(2S,3aS,6aS)-1-(叔丁氧羰基)八氢环戊二烯并[b]吡咯-2-羧酸(766mg)、2-甲基丙基氯甲酸酯(410mg)、三乙胺(304mg)和四氢呋喃(10mL)的混合物在冰冷却下搅拌1小时，在冰冷却下，向获得的反应混合物中加入实施例123步骤C制备的3-氨基-5-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩-2-羧酸甲酯(327mg)，并将该混合物在60℃下搅拌18小时。将乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，并将残余物用碱性硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(340mg)浅黄色油。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.20-1.65(12H,m),1.65-1.85(2H,m),1.90-2.20(4H,m),2.48(3H,s),2.60-3.80(1H,m),3.85(3H,s),4.20-4.35(1H,m),5.24(2H,s),7.10-7.40(6H,m),7.60(1H,s),8.10(1H,s)。
G)(3aS,6aS)-2-[6-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]六氢环戊二烯并[b]吡咯-1(2H)-羧酸叔丁基酯的制备
将上面制备的(3aS,6aS)-2-{[5-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(甲氧羰基)噻吩-3-基]氨基甲酰基}六氢环戊二烯并[b]吡咯-1(2H)-羧酸叔丁基酯(340mg)、2M氢氧化钠水溶液(2mL)和甲醇(10mL)的混合物在60℃下搅拌1小时。在冰冷却下，将该反应混合物用2M盐酸(2mL)中和，加入乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)，并将分离的水层用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将残余物溶于N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中，加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(1.15g)、1-羟基苯并***(810mg)、氯化铵(1.28g)和三乙胺(0.705mL)，并将该混合物在80℃下搅拌18小时。将乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将残余物溶于甲醇(10mL)中，加入2M氢氧化钠水溶液(1mL)，并将该混合物在60℃下搅拌1小时。在冰冷却下，将该反应混合物用1M盐酸中和，加入乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)，并将分离的水层用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，并将残余物用碱性硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(220mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.35-1.55(12H,m),1.60-1.80(4H,m),2.00-2.10(2H,m),2.50(3H,s),2.70-2.85(1H,m),4.20-4.85(1H,m),5.27(2H,s),7.17(1H,s),7.23-7.47(5H,m),7.38(1H,s)。
H)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(3aS,6aS)-八氢环戊二烯并[b]吡咯-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
将上面制备的(3aS,6aS)-2-[6-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]六氢环戊二烯并[b]吡咯-1(2H)-羧酸叔丁基酯(220mg)、甲酸(5mL)和20%氢氧化钯-碳(20mg)在氢气氛围下、在60℃下搅拌18小时。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，并将残余物用碱性硅胶柱色谱纯化(甲醇/乙酸乙酯)，得到标题化合物(62mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.45-1.80(6H,m),1.95-2.05(1H,m),2.46(3H,s),2.62-2.78(1H,m),2.80-2.95(1H,m),4.02(1H,brs),4.41-4.58(1H,m),7.39(1H,s),8.08(1H,brs)。
实施例124
2-(1-乙酰基吡咯烷-2-基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)2-[5-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(甲氧羰基)噻吩-3-基氨基甲酰基)吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例123步骤F一样的方法，由实施例123步骤C制备的3-氨基-5-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩-2-羧酸甲酯(1.00g)、1-(叔丁氧羰基)脯氨酸(1.97g)、2-甲基丙基氯甲酸酯(1.25g)、三乙胺(0.93g)和四氢呋喃(20mL)获得标题化合物(1.20g)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.25-1.55(10H,m),1.85-2.05(2H,m),2.10-2.35(2H,m),2.48(3H,s),3.55-3.70(1H,m),3.87(3H,s),4.25-4.35(1H,m),5.24(2H,s),7.10-7.40(6H,m),7.59(1H,s),8.08(1H,s)。
B)2-[6-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例123步骤G一样的方法，由上面制备的2-[5-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(甲氧羰基)噻吩-3-基氨基甲酰基)吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(1.20g)、2M氢氧化钠水溶液(2mL)、甲醇(10mL)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(4.39g)、1-羟基苯并***(3.10g)、氯化铵(4.90g)、三乙胺(9.27g)、N,N-二甲基甲酰胺(10mL)和2M氢氧化钠水溶液(1mL)和甲醇(10mL)获得标题化合物(0.85g)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.30-1.55(13H,m),1.90-2.10(2H,m),2.50(3H,s),3.15-3.25(1H,m),5.27(1H,s),5.32-5.38(1H,m),7.18(1H,s),7.26-7.38(5H,m),7.61(1H,s)。
C)6-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(吡咯烷-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
在冰冷却下，将上面制备的2-[6-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(0.85g)和三氟乙酸(5mL)的混合物搅拌1小时。将该反应混合物减压浓缩，向残余物中加入乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)，并将分离的水层用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，得到标题化合物(0.67g)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.45-1.90(4H,m),2.49(3H,s),3.05-3.20(2H,m),4.30-4.40(1H,m),5.27(2H,s),5.35-5.40(1H,m),7.10-7.20(1H,m),7.17(1H,s),7.26-7.38(5H,m),7.61(1H,s)。
D)2-(1-乙酰基吡咯烷-2-基)-6-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
将上面制备的6-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(吡咯烷-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(196mg)、醋酸酐(255mg)和吡啶(5mL)的混合物在60℃下搅拌18小时。将乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，并将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(216mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.90-2.20(4H,m),2.17(3H,s),2.50(3H,s),2.75-2.90(1H,m),3.50-3.70(2H,m),5.15-5.40(2H,m),7.17(1H,s),7.26-7.40(5H,m),7.60(1H,s)。
E)2-(1-乙酰基吡咯烷-2-基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例123步骤H一样的方法，由上面制备的2-(1-乙酰基吡咯烷-2-基)-6-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(216mg)、甲酸(5mL)和20%氢氧化钯-碳(20mg)获得标题化合物(65mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.90-2.10(4H,m),2.20(3H,brs),2.45(3H,brs),3.50-3.65(1H,m),3.65-3.80(1H,m),4.77(1H,dd,J=8.3,3.6Hz),7.34(1H,s),7.89(1H,brs)。
实施例125
2-[(1R*,2S*)-2-氨基环己基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)[(1R*,2S*)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)环己基]氨基甲酸叔丁基酯的制备
利用和实施例82步骤A一样的方法，由(1R*,2S*)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]环己烷羧酸(365mg)和三乙胺(0.418mL)和四氢呋喃(10mL)和2-甲基丙基氯甲酸酯(0.195mL)和实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(221mg)和2M氢氧化钠水溶液(3mL)和乙醇(10mL)获得标题化合物的粗品(63mg)白色固体。
MS(ESI+):[M+H]+428。
MS(ESI+)，实测值：428。
B)2-[(1R*,2S*)-2-氨基环己基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的[(1R*,2S*)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)环己基]氨基甲酸叔丁基酯的粗品(63mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(91mg)、碳酸铯(288mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(5.4mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3mL)、水(0.50mL)、10%盐酸/甲醇溶液(2mL)和甲醇(2mL)获得标题化合物(20mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.28-1.88(6H,m),1.93-2.19(2H,m),2.46(3H,s),3.04-3.14(1H,m),3.72(1H,brs),7.38(1H,s),7.99(3H,brs),8.04(1H,brs),12.40(1H,brs)。
实施例126
2-(6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯烷-1-甲酰胺的制备
A)2-(6-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯烷-1-甲酰胺的制备
将实施例124步骤C制备的6-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(吡咯烷-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(196mg)、N,N'-羰二咪唑(162mg)和吡啶(5mL)的混合物在室温下搅拌18小时。将该反应混合物减压浓缩，将残余物溶于8M氨/甲醇溶液中，并将该混合物在室温下搅拌18小时。将乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，并将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(110mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.80-2.25(4H,m),2.25-2.35(1H,m),2.38(3H,s),3.45-3.55(1H,m),4.73(1H,dd,J=7.9,3.2Hz),5.28(2H,s),5.98(2H,s),7.15-7.48(6H,m),8.37(1H,s)。
B)2-(6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯烷-1-甲酰胺的制备
利用和实施例123步骤H一样的方法，由上面制备的2-(6-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯烷-1-甲酰胺(60mg)、甲酸(5mL)和20%氢氧化钯-碳(20mg)获得标题化合物(23mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.90-2.10(3H,m),2.15-2.30(1H,m),2.45(3H,brs),3.50-3.65(1H,m),3.65-3.80(1H,m),4.77(1H,dd,J=8.3,3.6Hz),7.34(1H,s),7.89(1H,brs)。
实施例127
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(吡咯烷-1-基羰基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例11步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(100mg)和氧代(吡咯烷-1-基)乙酸(68mg)和O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲
Figure BDA00002264979901761
六氟磷酸盐(206mg)和N-乙基-N-(1-甲基乙基)丙-2-胺(0.158mL)和N,N-二甲基甲酰胺(2mL)和乙醇(1mL)和2M氢氧化钠水溶液(0.91mL)获得6-溴-2-(吡咯烷-1-基羰基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮黄色固体。利用和实施例2步骤C一样的方法，由上面制备的6-溴-2-(吡咯烷-1-基羰基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(263mg)、碳酸钠(136mg)、1,2-二甲氧基乙烷(2.0mL)和水(1.0mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(35mg)获得标题化合物(30mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.82-1.95(4H,m),2.39-2.48(3H,m),3.44-3.57(2H,m),3.64-3.78(2H,m),7.43(1H,s),7.85-8.45(1H,m),12.47-12.67(1H,m),12.87-13.11(1H,m)。
实施例128
2-[(1R*,3S,4R*,5S)-5-氟-2-氮杂双环[2.2.1]庚-3-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)(1R*,3S,4R*,5S)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-5-氟-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例71步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(200mg)和(1R*,3S,4R*,5S)-2-(叔丁氧羰基)-5-氟-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-3-羧酸(352mg)和2-甲基丙基氯甲酸酯(0.178mL)和三乙胺(0.190mL)和四氢呋喃(6mL)和乙醇(4mL)和2M氢氧化钠水溶液(1.81mL)获得标题化合物(303mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.07-1.67(11H,m),2.00-2.33(2H,m),2.93-3.06(1H,m),4.05-4.24(1H,m),4.63-4.77(1H,m),5.18-5.51(1H,m),7.54-7.79(1H,m),12.59-12.98(1H,m)。
B)(1R*,3S,4R*,5S)-5-氟-3-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯的制备
将(1R*,3S,4R*,5S)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-5-氟-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯(300mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(416mg)、碳酸钠(215mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)放在烧瓶中，并用氩气吹扫烧瓶中的空气。加入[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1∶1)(55mg)，并用氩气再次吹扫烧瓶中的空气。将该反应***在100℃下搅拌3小时，并减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，并将获得的浅黄色固体用高效液相色谱纯化{柱∶L-柱2ODS(20mm i.d.×50mm L)，流动相∶0.1%三氟乙酸水溶液/0.1%三氟乙酸-乙腈溶液}。将目标级分用饱和碳酸氢钠水溶液中和，并将该混合物减压浓缩。过滤收集残余物，用水(3mL)洗涤，得到标题化合物(106mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.12-1.61(11H,m),2.05-2.34(2H,m),2.36-2.48(3H,m),2.93-3.07(1H,m),4.04-4.28(1H,m),4.58-4.83(1H,m),5.17-5.53(1H,m),7.33-7.54(1H,m),7.81-8.34(1H,m),12.31-12.61(1H,m),12.82-13.13(1H,m)。
C)2-[(1R*,3S,4R*,5S)-5-氟-2-氮杂双环[2.2.1]庚-3-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例108一样的方法，由(1R*,3S,4R*,5S)-5-氟-3-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯(80mg)和甲醇(1.5mL)和4M盐酸/乙酸乙酯溶液(0.18mL)获得标题化合物(71mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.66-1.77(1H,m),1.81-2.02(2H,m),2.16-2.34(1H,m),2.46(3H,s),3.25-3.31(1H,m),4.13-4.25(1H,m),4.77-4.87(1H,m),5.23-5.54(1H,m),7.37(1H,s),8.10(1H,s),8.79(1H,brs),10.23(1H,brs),13.09(1H,brs)。
实施例129
2-[(1R*,2R*)-2-氨基环己基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)[(1R*,2R*)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)环己基]氨基甲酸叔丁基酯的制备
利用和实施例82步骤A一样的方法，由(1R*,2R*)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]环己烷羧酸(365mg)和三乙胺(0.418mL)和四氢呋喃(10mL)和2-甲基丙基氯甲酸酯(0.195mL)和实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(221mg)和2M氢氧化钠水溶液(3mL)和乙醇(10mL)获得标题化合物的粗品(61mg)白色固体。
MS(ESI+):[M+H]+428。
MS(ESI+)，实测值：428。
B)2-[(1R*,2R*)-2-氨基环己基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的[(1R*,2R*)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)环己基]氨基甲酸叔丁基酯的粗品(61mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(87mg)、碳酸铯(277mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(5.2mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3mL)、水(0.50mL)、10%盐酸/甲醇溶液(2mL)和甲醇(2mL)获得标题化合物(27mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.16-1.55(4H,m),1.69-1.84(2H,m),2.01-2.15(2H,m),2.45(3H,s),2.75-2.87(1H,m),3.50-3.64(1H,m),7.36(1H,s),7.94(3H,brs),8.05(1H,s),12.45(1H,brs)。
实施例130
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯-1-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B和步骤C一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(180mg)和2,5-二氢-1H-吡咯(0.150mL)和碳酸钾(178mg)和碘化钠(9.7mg)和N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(248mg)和碳酸钠(128mg)和1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1∶1)(33mg)获得标题化合物(46mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.37-2.48(3H,m),5.03(2H,s),6.02(2H,t,J=2.1Hz),6.87(2H,t,J=2.1Hz),7.38(1H,s),7.79-8.31(1H,m),12.63(1H,brs),12.87-13.06(1H,m)。
实施例131
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-吗啉-2-基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吗啉-4-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例118步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(221mg)、4-(叔丁氧羰基)吗啉-2-羧酸(347mg)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.195mL)、三乙胺(0.418mL)和四氢呋喃(10mL)、2M氢氧化钠水溶液(3.0mL)和乙醇(10mL)获得标题化合物(290mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.42(9H,s),2.91-3.06(1H,m),3.09-3.25(1H,m),3.53(1H,td,J=11.4,2.7Hz),3.72-3.80(1H,m),3.92-4.00(1H,m),4.00-4.13(1H,m),4.38(1H,dd,J=10.2,3.0Hz),7.65(1H,s),12.57(1H,brs)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-吗啉-2-基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吗啉-4-羧酸叔丁基酯(290mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(429mg)、碳酸铯(1.34g)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(26mg)、1,2-二甲氧基乙烷(6mL)、水(2mL)、10%盐酸/甲醇溶液(4mL)和甲醇(4mL)获得标题化合物(102mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.46(3H,s),3.04-3.60(4H,m),3.83-4.13(2H,m),4.81(1H,dd,J=10.1,2.7Hz),7.43(1H,s),8.05(1H,s),9.29-9.53(2H,m),12.55(1H,brs)。
实施例132
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2R*,3R*)-3-苯基吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)(2R*,3R*)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-3-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例82步骤A一样的方法，由((2R*,3R*)-1-(叔丁氧羰基)-3-苯基脯氨酸(437mg)和三乙胺(0.418mL)和四氢呋喃(10mL)和2-甲基丙基氯甲酸酯(0.195mL)和实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(221mg)和2M氢氧化钠水溶液(3mL)和乙醇(10mL)获得标题化合物(27mg)白色固体。
MS(ESI+):[M+H]+476。
MS(ESI+)，实测值：476。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2R*,3R*)-3-苯基吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的(2R*,3R*)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-3-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(27mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(35mg)、碳酸铯(111mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(2.1mg)、1,2-二甲氧基乙烷(2mL)、水(0.17mL)、10%盐酸/甲醇溶液(1mL)和甲醇(1mL)获得标题化合物(11mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.41-2.56(5H,m),3.36-3.52(1H,m),3.71-3.83(1H,m),3.95-4.08(1H,m),4.88-4.98(1H,m),7.07-7.23(5H,m),7.36(1H,s),8.09(1H,s),9.20(1H,brs),10.34(1H,brs),12.39(1H,brs)。
实施例133
2-[(甲基氨基)甲基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)[(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)甲基]甲基氨基甲酸叔丁基酯的制备
利用和实施例71步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(473mg)、N-(叔丁氧羰基)-N-甲基甘氨酸(850mg)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.583mL)、三乙胺(0.741mL)和四氢呋喃(5mL)、2M氢氧化钠水溶液(5.35mL)和乙醇(10mL)获得标题化合物(780mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.31-1.49(9H,m),2.77-2.87(3H,m),3.79-3.90(2H,m),7.60(1H,s),12.63(1H,brs)。
B)2-[(甲基氨基)甲基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的[(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)甲基]甲基氨基甲酸叔丁基酯(400mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(659mg)、碳酸铯(696mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1∶1)(44.0mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5mL)、水(0.5mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)和甲醇(5mL)获得标题化合物(50mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.47(3H,s),2.69(3H,brs),4.23(2H,brs),7.31-8.30(5H,m),9.54(2H,brs)。
实施例134
2-(2-氨基-2-甲基丙基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)[2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-1,1-二甲基乙基]氨基甲酸叔丁基酯的制备
利用和实施例71步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(412mg)、3-[(叔丁氧羰基)氨基]-3-甲基丁酸(850mg)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.507mL)、三乙胺(0.646mL)和四氢呋喃(5mL)、2M氢氧化钠水溶液(4.66mL)和乙醇(10mL)获得标题化合物(780mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.24-1.43(15H,m),2.92(2H,s),7.51(1H,s),11.77-12.47(2H,m)。
B)2-(2-氨基-2-甲基丙基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的[2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-1,1-二甲基乙基]氨基甲酸叔丁基酯(700mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(1072mg)、碳酸铯(1134mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(71.6mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5mL)、水(0.5mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)和甲醇(4mL)获得标题化合物(63mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.39(6H,s),2.48(3H,s),3.02(2H,s),6.95(3H,brs),7.39-7.44(1H,m),8.09(1H,s),8.37(3H,brs)。
实施例135
2-(1-氨基-1-甲基乙基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
在0℃，向N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-2-甲基丙氨酸(3.00g)的甲苯(20mL)溶液中加入亚硫酰二氯(0.673mL)，并将该混合物在室温下搅拌3小时。将该反应混合物减压浓缩，向残余物中加入实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(1.70g)、吡啶(729mg)和四氢呋喃(5mL)，并将该混合物在100℃下搅拌15小时。将乙酸乙酯(20mL)和水(10mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(5mL)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩，得到9H-芴-9-基甲基{2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基]-1,1-二甲基-2-氧代乙基}氨基甲酸酯浅黄色油。
向上面制备的9H-芴-9-基甲基{2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基]-1,1-二甲基-2-氧代乙基}氨基甲酸酯的乙醇(50mL)溶液中加入2M氢氧化钠水溶液(19.2mL)，并将该混合物在70℃下搅拌15小时。在冰冷却下，用1M盐酸(38.4mL)中和该反应混合物，并减压浓缩。将残余物溶于四氢呋喃(20mL)中，加入二碳酸二叔丁基酯(1.78mL)，并将该混合物在室温下搅拌15小时。将乙酸乙酯(20mL)和水(10mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(5mL)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩，得到[1-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-1-甲基乙基]氨基甲酸叔丁基酯无色固体。利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的[1-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-1-甲基乙基]氨基甲酸叔丁基酯、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(1.03g)、碳酸铯(1.09g)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(68.9mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5mL)、水(0.5mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)和甲醇(4mL)获得标题化合物(240mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.74(6H,s),2.49(3H,s),7.41(1H,s),7.59-8.99(7H,m)。
实施例136
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1,2,3,6-四氢吡啶-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例82步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(636mg)、(2S)-1-(叔丁氧羰基)-1,2,3,6-四氢吡啶-2-羧酸(980mg)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.559mL)、三乙胺(1.20mL)和四氢呋喃(30mL)、2M氢氧化钠水溶液(8.6mL)和乙醇(30mL)获得标题化合物(663mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.19-1.48(9H,m),2.53-2.68(2H,m),3.93-4.18(2H,m),5.06-5.32(1H,m),5.61-5.83(2H,m),7.54(1H,s),12.65(1H,brs)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1,2,3,6-四氢吡啶-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁基酯(100mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(149mg)、碳酸铯(474mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(8.9mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3mL)、水(0.5mL)、10%盐酸/甲醇溶液(2mL)和甲醇(3mL)获得标题化合物(54mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.35-2.47(4H,m),2.70-2.86(1H,m),3.62-3.84(2H,m),4.35-6.05(3H,m),7.37(1H,s),8.12(1H,s),9.71(2H,brs),12.86(1H,brs)。
实施例137
2-(2-氨基环戊基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)[2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)环戊基]氨基甲酸叔丁基酯的制备
利用和实施例82步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(116mg)、(1R*,2S*)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]环戊烷羧酸(180mg)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.102mL)、三乙胺(0.219mL)和四氢呋喃(6mL)、2M氢氧化钠水溶液(1.57mL)和乙醇(6mL)获得标题化合物的粗品(51mg)白色固体。
MS(ESI+):[M+H]+414。
MS(ESI+)，实测值：414。
B)2-(2-氨基环戊基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的[2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)环戊基]氨基甲酸叔丁基酯(51mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(76mg)、碳酸铯(241mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1∶1)(4.5mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3mL)、水(0.3mL)、10%盐酸/甲醇溶液(2mL)和甲醇(2mL)获得标题化合物(21mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.61-2.34(6H主要的,6H次要的,m),2.45(3H主要的,3H次要的,s),3.13-3.26(1H主要的,m),3.26-3.37(1H次要的,m),3.82-3.92(1H次要的,m),4.02-4.15(1H主要的,m),7.35(1H次要的,s),7.38(1H主要的,s),7.93(3H次要的,brs),8.04(1H主要的,1H次要的,brs),8.13(3H主要的,brs),12.47(1H主要的,1H次要的,brs).*观测的异构体的比例是2.5:1。
实施例138
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1,3-噻唑-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-(1,3-噻唑-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
在0℃，向实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(200mg)、三乙胺(0.19mL)和四氢呋喃(4.0mL)的混合物中加入1,3-噻唑-2-羰基氯(0.22g)，并将该混合物在室温下搅拌2小时。将水倒入该反应***中，并过滤收集沉淀，得到N-(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)-1,3-噻唑-2-甲酰胺(290mg)浅黄色固体。向上面制备的N-(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)-1,3-噻唑-2-甲酰胺中加入2M氢氧化钠水溶液(1.75mL)和1,2-二甲氧基乙烷(4.0mL)，并将该混合物在100℃下搅拌18小时。在0℃，用1M盐酸中和该反应***。过滤收集沉淀，得到标题化合物(236mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ7.73(1H,s),8.03-8.18(2H,m),13.01(1H,brs)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1,3-噻唑-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-(1,3-噻唑-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(230mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(451mg)、碳酸钠(233mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(60mg)获得标题化合物(6mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.43-2.49(3H,m),7.53(1H,s),7.81-8.52(3H,m),12.61-13.20(2H,m)。
实施例139
2-(2-氨基环戊基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)[2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)环戊基]氨基甲酸叔丁基酯的制备
利用和实施例82步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(663mg)、(1R*,2R*)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]环戊烷羧酸(1.03g)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.584mL)、三乙胺(1.25mL)和四氢呋喃(30mL)、2M氢氧化钠水溶液(9.0mL)和乙醇(30mL)获得标题化合物的粗品(610mg)白色固体。
MS(ESI+):[M+H]+414。
MS(ESI+)，实测值：414。
B)2-(2-氨基环戊基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的[2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)环戊基]氨基甲酸叔丁基酯(610mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(907mg)、碳酸铯(2.88g)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(54mg)，1,2-二甲氧基乙烷(7mL)、水(3mL)、10%盐酸/甲醇溶液(6mL)和甲醇(6mL)获得标题化合物(242mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.66-1.89(4H,m),2.07-2.32(2H,m),2.46(3H,s),3.20-3.30(1H,m),4.03-4.15(1H,m),7.39(1H,s),8.05(1H,s),8.28(3H,brs)。
实施例140
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S,3S)-3-甲基吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)(3S)-1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-L-脯氨酸的制备
在室温下，向(3S)-3-甲基-L-脯氨酸(250mg)、四氢呋喃(10mL)和1M氢氧化钠水溶液(2.9mL)的混合物中加入二碳酸二叔丁基酯(0.67mL)，同时搅拌。搅拌过夜之后，将该反应混合物用冰冷却，并通过逐滴加入1M盐酸(2.9mL)将pH值调节至4。用乙酸乙酯(80mL)萃取有机产物，并将获得的有机层用水洗涤，用无水硫酸镁干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。向残余物中加入乙酸乙酯/己烷，并过滤收集沉淀的固体，得到标题化合物(323mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.06-1.11(3H,m),1.33(9H主要的,s),1.39(9H次要的,s),1.41-1.56(1H,m),1.87-2.01(1H,m),2.13-2.25(1H,m),3.20-3.29(1H,m),3.37-3.47(1H,m),3.55-3.62(1H,m),12.49(1H,brs)。观测的旋转异构体的比例是2:1。
B)(2S,3S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-3-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例82步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(208mg)、上面制备的(3S)-1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-L-脯氨酸(323mg)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.183mL)、三乙胺(0.393mL)和四氢呋喃(10mL)、2M氢氧化钠水溶液(2.8mL)和乙醇(10mL)获得标题化合物的粗品(276mg)浅黄色油。
MS(ESI+):[M+H]+414。
MS(ESI+)，实测值：414。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.03-1.07(3H,m),1.09(9H主要的,s),1.33-1.38(9H次要的,m),1.47-1.62(1H,m),1.99-2.11(1H,m),2.24-2.38(1H,m),3.42-3.57(2H,m),4.05-4.15(1H,m),7.61(1Hofminor,s),7.63(1H主要的,s),12.77(1H,brs).观测的旋转异构体的比例是5:2。
C)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S,3S)-3-甲基吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的(2S,3S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-3-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(272mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(405mg)、碳酸铯(1.28g)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(24mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5mL)、水(2mL)、10%盐酸/甲醇溶液(2mL)和甲醇(3mL)获得标题化合物(127mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.17(3H,d,J=6.8Hz),1.60-1.75(1H,m),2.14-2.28(1H,m),2.46(3H,s),2.50-2.59(1H,m),3.36-3.48(2H,m),4.17-4.25(1H,m),7.37(1H,s),8.09(1H,s),9.00(1H,brs),10.25(1H,brs),12.94(1H,brs)。
实施例141
2-(4-羟基-4-苯基吡咯烷-2-基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-4-羟基-4-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
在0℃，向实施例1步骤C制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-羧酸甲酯(1.14g)的四氢呋喃(20mL)溶液中加入1M六甲基二硅基氨基锂-四氢呋喃溶液(4.84mL)，并将该混合物搅拌30分钟。向该反应混合物中加入(1S,4R)-3-氧代-1-苯基-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷-5-羧酸叔丁基酯(700mg)的四氢呋喃(5mL)溶液，并将该混合物在室温下搅拌15小时。在冰冷却下，将该反应混合物用1M盐酸中和，并用乙酸乙酯(20mL)萃取。将有机层用盐水(5mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩，得到2-{[5-溴-2-(甲氧羰基)噻吩-3-基]氨基甲酰基}-4-羟基-4-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯浅黄色油。向上面制备的2-{[5-溴-2-(甲氧羰基)噻吩-3-基]氨基甲酰基}-4-羟基-4-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的乙醇(15mL)溶液中加入2M氢氧化钠水溶液(5.00mL)，并将该混合物在60℃下搅拌2小时。在冰冷却下，用6M盐酸(1.7mL)中和该反应混合物，并减压浓缩。向残余物中加入氯化铵(137mg)、三乙胺(0.520mL)和N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，并将该混合物在室温下搅拌5分钟。向该反应***中加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(399mg)和1-羟基苯并***(278mg)，并将该混合物在室温下搅拌15小时。将该反应***倒入水(10mL)中，并将该混合物用乙酸乙酯(10mL)萃取。将有机层用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，并用无水硫酸镁干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩，得到2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基甲酰基]-4-羟基-4-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯浅黄色油。向上面制备的2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基甲酰基]-4-羟基-4-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的乙醇(5mL)溶液中加入2M氢氧化钠水溶液(1.71mL)，并将该混合物在70℃下搅拌3小时。在冰冷却下，将该反应混合物用1M盐酸(3.4mL)中和，并用乙酸乙酯(10mL)萃取。将有机层用水洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，并将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(62mg)褐色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.11-1.43(9H,m),2.25-2.41(1H,m),2.76-2.91(1H,m),3.70-3.85(2H,m),4.72-4.89(1H,m),6.18-6.44(1H,m),7.21-7.43(3H,m),7.49-7.58(2H,m),7.62-7.70(1H,m),12.28-12.52(1H,m)。
B)2-(4-羟基-4-苯基吡咯烷-2-基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-4-羟基-4-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(58mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(72.6mg)、碳酸铯(77.0mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(4.85mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5mL)、水(0.5mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)和甲醇(4mL)获得标题化合物(21mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.48(3H,s),2.56-5.15(6H,m),7.27-7.60(7H,m),8.12(1H,s),9.12(1H,brs),10.66(1H,brs),12.90(1H,brs)。
实施例142
2-[(1R,3S,4R,5S)或(1S,3S,4S,5S)-5-羟基-2-氮杂双环[2.2.1]庚-3-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)(1R*,3S,4R*,5S)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-5-羟基-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯的制备
在0℃，向(1R*,3S,4R*,5S)-2-(叔丁氧羰基)-5-羟基-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-3-羧酸(349mg)和三乙胺(0.190mL)的四氢呋喃(4mL)溶液中加入2-甲基丙基氯甲酸酯(0.178mL)，并将该混合物在室温下搅拌30分钟。向该反应***中加入实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(200mg)的四氢呋喃(2mL)溶液，并将该混合物在60℃下搅拌18小时。将水加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯萃取。将有机层用盐水洗涤，并用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，减压浓缩滤液，并将残余物用碱性硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)。向所获得的浅黄色无定形固体(307mg)中加入2M氢氧化钠水溶液(1.81mL)和乙醇(4.0mL)，并将该混合物在70℃下搅拌5小时。在0℃，用1M盐酸中和该反应***。向该反应***中加入水(2mL)，并将该混合物用乙酸乙酯萃取。将有机层用盐水洗涤，并用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将残余物用乙酸乙酯(2mL)洗涤，得到标题化合物(211mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.13-1.47(11H,m),1.88-2.15(2H,m),2.56-2.63(1H,m),3.97-4.10(1H,m),4.23-4.34(1H,m),4.79-4.88(1H,m),5.05-5.14(1H,m),7.47-7.74(1H,m),12.25-12.70(1H,m)。
B)(1R*,3S,4R*,5S)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-5-羟基-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯的光学拆分
用高效液相色谱(柱∶CHIRALPAK AD(50mm i.d.×500mm L，DAICELCHEMICAL INDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/乙醇(800/200)和己烷/乙醇(200/800)，流速∶80mL/min，柱温∶30℃)分级(1R*,3S,4R*,5S)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-5-羟基-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯(211mg)。在上述高效液相色谱条件下，获得(1R,3S,4R,5S)或(1S,3S,4S,5S)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-5-羟基-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯(101mg，>99.9%ee，用己烷/乙醇(800/200)洗脱的级分，保留时间6.3min)和(1R,3S,4R,5S)或(1S,3S,4S,5S)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-5-羟基-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯(100mg，>99.9%ee，用己烷/乙醇(200/800)洗脱的级分，保留时间8.9min)。用高效液相色谱进行分析(柱∶CHIRALPAKAD-H(4.6mm i.d.×250mm L，DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/乙醇(850/150)，流速∶1mL/min，柱温∶30℃，检测：220nm)。
C)(1R,3S,4R,5S)或(1S,3S,4S,5S)-5-羟基-3-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由(1R,3S,4R,5S)或(1S,3S,4S,5S)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-5-羟基-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯(100mg，>99.9%ee，用己烷/乙醇(800/200)洗脱的级分，保留时间6.3min)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(139mg)、碳酸钠(72mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(18mg)获得标题化合物(91mg)白色固体。
1H-NMR(CDCl3)δ1.32-2.01(11H,m),2.05-2.23(2H,m),2.42-2.64(3H,m),2.95-3.20(1H,m),4.14-4.39(1H,m),4.51-4.63(1H,m),5.08-5.25(1H,m),7.11-7.23(1H,m),7.73-7.89(1H,m)。
D)2-[(1R,3S,4R,5S)或(1S,3S,4S,5S)-5-羟基-2-氮杂双环[2.2.1]庚-3-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例108一样的方法，由实施例142步骤C制备的(1R,3S,4R,5S)或(1S,3S,4S,5S)-5-羟基-3-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯(90mg)和甲醇(2.0mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(0.457mL)获得标题化合物(59mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.41-1.52(1H,m),1.62-1.72(1H,m),1.77-1.86(1H,m),2.01-2.15(1H,m),2.46(3H,s),2.91-3.01(1H,m),4.01-4.14(1H,m),4.28-4.42(1H,m),4.92-5.02(1H,m),7.35(1H,s),8.08(1H,s),8.57-8.68(1H,m),9.60-9.72(1H,m),12.97(1H,brs)。
实施例143
2-(吡咯烷-1-基甲基)-6-[5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
将实施例2步骤B制备的6-溴-2-(吡咯烷-1-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(372mg)、[3-(三氟甲基)-1-三苯甲基-1H-吡唑-4-基]硼酸(600mg)、碳酸钠(314mg)、乙醇(10mL)和水(1.5mL)放在烧瓶中，并用氩气吹扫烧瓶中的空气。加入四(三苯基膦)钯(0)(68.4mg)，用氩气再次吹扫烧瓶中的空气，并将该混合物在80℃下搅拌5小时。将乙酸乙酯(20mL)和水(10mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，并将目标级分减压浓缩，得到2-(吡咯烷-1-基甲基)-6-[3-(三氟甲基)-1-三苯甲基-1H-吡唑-4-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮无色油。向上面制备的2-(吡咯烷-1-基甲基)-6-[3-(三氟甲基)-1-三苯甲基-1H-吡唑-4-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮中加入盐酸/甲醇溶液(5mL)，并将该混合物在60℃下搅拌6小时。将乙酸乙酯(20mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用碱性硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/甲醇)，并将目标级分减压浓缩，得到标题化合物(3.8mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.66-1.78(4H,m),2.54-2.60(4H,m),3.58(2H,s),7.37(1H,s),8.53(1H,s)。
实施例144
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2R*,3s*)-3-苯基吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮盐酸盐的制备
A)(2R*,3S*)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-3-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例82步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(221mg)、(2R*,3S*)-1-(叔丁氧羰基)-3-苯基脯氨酸(437mg)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.195mL)、三乙胺(0.418mL)和四氢呋喃(10mL)、2M氢氧化钠水溶液(3mL)和乙醇(10mL)获得标题化合物的粗品(345mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.09(9H主要的,s),1.38(9H次要的,s),2.03-2.35(2H主要的,2H次要的,m),3.46-3.70(3H主要的,2H次要的,m),4.00-4.13(1H次要的,m),4.54-4.67(1H主要的,1H次要的,m),7.19-7.36(5H主要的,5H次要的,m),7.59-7.65(1H主要的,1H次要的,m),12.78(1H主要的,1H次要的,brs).观测的旋转异构体的比例是5:2。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2*,3s*)-3-苯基吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮盐酸盐的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的(2R*,3S*)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-3-苯基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(345mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(446mg)、碳酸铯(1.42g)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(27mg)、1,2-二甲氧基乙烷(6mL)、水(2mL)、10%盐酸/甲醇溶液(4mL)和甲醇(5mL)获得标题化合物(185mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.15-2.29(1H,m),2.43-2.60(4H,m),3.45-3.66(2H,m),3.76-3.90(1H,m),4.62(1H,d,J=8.9Hz),7.28-7.38(5H,m),7.43(1H,s),7.86-8.39(1H,m),9.12-10.47(1H,m),13.05(1H,brs)。
实施例145
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-1,2,3,6-四氢吡啶-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁基酯的制备
在室温下，在搅拌下，向(2S)-1-(叔丁氧羰基)-1,2,3,6-四氢吡啶-2-羧酸(1.16g)、三乙胺(1.42mL)和四氢呋喃(12mL)的混合物中加入2-甲基丙基氯甲酸酯(0.662mL)。1小时之后，加入实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(752mg)，并将该混合物在微波反应器中、在100℃下搅拌2小时。将该反应混合物冷却至室温，并倒入饱和碳酸氢钠水溶液中。将该混合物用乙酸乙酯萃取，并将萃取物用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将残余物溶于乙醇(10mL)中，加入2M氢氧化钠水溶液(10.2mL)，并将该混合物在90℃下搅拌2小时。将该反应混合物用冰冷却，并逐滴加入6M盐酸(3.33mL)。将该反应混合物倒入盐水中，并用3:1乙酸乙酯/四氢呋喃混合物萃取。用无水硫酸镁干燥萃取物。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用碱性硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷和甲醇/乙酸乙酯)，得到标题化合物(851mg)白色固体。光学纯度是51.1%ee。用高效液相色谱进行分析(柱∶CHIRALPAK IC(4.6mm i.d.×250mm L，DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/乙醇(900/100)，流速∶1.0mL/min，柱温∶30℃，检测：220nm)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.21-1.47(9H,m),2.53-2.65(2H,m),3.92-4.19(2H,m),5.09-5.31(1H,m),5.62-5.81(2H,m),7.54(1H,s),12.65(1H,brs)。
B)(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁基酯的光学拆分
用高效液相色谱(柱∶CHIRALPAK IC(50mm i.d.×500mm L，DAICELCHEMICAL INDUSTRIES，LTD.制造，流动相∶己烷/乙醇(900/100)，流速∶80mL/min，柱温∶30℃)分级(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁基酯(0.86g，51.1%ee)。在上述高效液相色谱条件下，获得(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(0.54g，99.8%ee，保留时间10.16min)和(2R)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(0.20g，>99.9%ee，保留时间7.31min)。用高效液相色谱进行分析(柱∶CHIRALPAKIC(4.6mm i.d.×250mm L，DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/乙醇(900/100)，流速∶1.0mL/min，柱温∶30℃，检测：220nm)。
C)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-1,2,3,6-四氢吡啶-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
将上面制备的(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁基酯(900mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(1.35g)、碳酸铯(4.27g)、1,2-二甲氧基乙烷(12mL)和水(4mL)放在烧瓶中，并用氩气吹扫烧瓶中的空气。加入[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(80mg)，用氩气再次吹扫烧瓶中的空气，并将该混合物在90℃下搅拌1小时。将该反应混合物倒入饱和碳酸氢钠水溶液中，并将该混合物用3:1乙酸乙酯/四氢呋喃混合物萃取。将获得的有机层依次用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水(20mL)洗涤，用无水硫酸镁干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，并将目标级分减压浓缩，得到(2S)-2-{6-[1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基]-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基}-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁基酯白色固体。向上面制备的(2S)-2-{6-[1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基]-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基}-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁基酯的甲醇(15mL)溶液中加入10%盐酸/甲醇溶液(14mL)，并将该混合物在50℃下搅拌1小时。冷却至室温后，过滤收集沉淀的固体，得到标题化合物(620mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.37-2.53(4H,m),2.71-2.86(1H,m),3.61-3.83(2H,m),4.34-4.51(1H,m),5.74-6.02(2H,m),7.36(1H,s),8.13(1H,brs),9.74(1H,brs),9.85-9.96(1H,m),12.89(1H,brs)。
MS(ESI+):[M+H]+314。
MS(ESI+)，实测值：314。
实施例146
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2R)-1,2,3,6-四氢吡啶-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例145步骤C一样的方法，由实施例145步骤B制备的(2R)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(117mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(175mg)、碳酸铯(555mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(10mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3mL)、水(1mL)、10%盐酸/甲醇溶液(2mL)和甲醇(3mL)获得标题化合物(88mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.38-2.48(4H,m),2.72-2.87(1H,m),3.61-3.85(2H,m),4.36-4.49(1H,m),5.76-6.02(2H,m),7.37(1H,s),8.12(1H,s),9.62-9.94(2H,m),12.88(1H,brs)。
实施例147
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(哌嗪-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮双三氟乙酸盐的制备
A)2-{[5-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(甲氧羰基)噻吩-3-基]氨基甲酰基}哌嗪-1,4-二羧酸二叔丁基酯的制备
利用和实施例123步骤F一样的方法，由实施例123步骤C制备的3-氨基-5-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩-2-羧酸甲酯(327mg)、1,4-二(叔丁氧羰基)哌嗪-2-羧酸(496mg)、2-甲基丙基氯甲酸酯(205mg)、三乙胺(304mg)和四氢呋喃(10mL)获得标题化合物(250mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.41(9H,s),1.57(9H,s),2.47(3H,s),2.92-3.10(2H,m),3.30-3.45(4H,m),3.80-3.90(1H,m),3.85(3H,s),5.24(2H,s),7.10-7.20(1H,m),7.26-7.40(4H,m),7.59(1H,s),8.07(1H,s),10.76(1H,brs)。
B)2-[6-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]哌嗪-1,4-二羧酸二叔丁基酯的制备
利用和实施例123步骤G一样的方法，由上面制备的2-{[5-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(甲氧羰基)噻吩-3-基]氨基甲酰基}哌嗪-1,4-二羧酸二叔丁基酯(250mg)、2M氢氧化钠水溶液(1mL)、甲醇(5mL)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(1.92g)、1-羟基苯并***(1.35g)、氯化铵(2.14g)、三乙胺(4.05g)、N,N-二甲基甲酰胺(5mL)和2M氢氧化钠水溶液(1mL)和甲醇(10mL)获得标题化合物(150mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.41(9H,s),1.58(9H,s),2.49(3H,s),3.20-3.50(4H,m),3.85-4.00(2H,m),5.07-5.17(1H,m),5.27(2H,s),7.12-7.20(2H,m),7.25-7.40(4H,m),7.61(1H,s),10.00(1H,brs)。
C)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-哌嗪-2-基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮双三氟乙酸盐的制备
利用和实施例123步骤H一样的方法，由上面制备的2-[6-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]哌嗪-1,4-二羧酸二叔丁基酯(150mg)、甲酸(5mL)和20%氢氧化钯-碳(20mg)获得6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(哌嗪-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(90mg)无色固体。将其溶于三氟乙酸(5mL)中，减压浓缩该混合物，并将残余物用***结晶，得到标题化合物(35mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.47(3H,s),3.05-3.12(1H,m),3.90-4.01(4H,m),4.22-4.32(1H,m),5.20-5.25(1H,m),7.44(1H,s),8.26(1H,s)。
实施例148
2-(2-氮杂双环[2.1.1]己-1-基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮盐酸盐的制备
A)1-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2-氮杂双环[2.1.1]己烷-2-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例71步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(327mg)、2-(叔丁氧羰基)-2-氮杂双环[2.1.1]己烷-1-羧酸(455mg)、2-甲基丙基氯甲酸酯(273mg)、三乙胺(202mg)和四氢呋喃(10mL)和2M氢氧化钠水溶液(1mL)和甲醇(5mL)获得标题化合物(180mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.02(9H,brs),1.70(2H,dd,J=4.5,1.7Hz),1.97(2H,brs),2.64(1H,t,J=2.9Hz),3.34-3.38(2H,m),7.19(1H,s)。
B)2-(2-氮杂双环[2.1.1]己-1-基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮盐酸盐的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的1-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2-氮杂双环[2.1.1]己烷-2-羧酸叔丁基酯(150mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(270mg)、碳酸铯(290mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(18mg)、1,2-二甲氧基乙烷(10mL)、水(1mL)和4M盐酸/乙酸乙酯溶液(2mL)和甲醇(10mL)获得标题化合物(98mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.80-1.92(2H,m),2.47(3H,s),2.68-2.82(2H,m),2.92-3.02(1H,m),3.28-3.40(2H,m),7.42(1H,s),8.12(1H,s),9.95(2H,brs)。
实施例149
2-[(环戊基氨基)甲基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)[(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)甲基]环戊基氨基甲酸叔丁基酯的制备
利用和实施例71步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(431mg)、N-(叔丁氧羰基)-N-环戊基甘氨酸(996mg)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.531mL)、三乙胺(0.676mL)和四氢呋喃(5mL)、2M氢氧化钠水溶液(4.88mL)和乙醇(5mL)获得标题化合物(620mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.05-2.00(17H,m),3.63-4.52(3H,m),7.57(1H,s),12.42(1H,brs)。
B)2-[(环戊基氨基)甲基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的[(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)甲基]环戊基氨基甲酸叔丁基酯(700mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(1.01g)、碳酸铯(1.07g)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(67.2mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5mL)、水(0.5mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)和甲醇(4mL)获得标题化合物(242mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.46-1.61(2H,m),1.66-1.82(4H,m),1.91-2.06(2H,m),2.47(3H,s),3.56-3.73(1H,m),4.24(2H,qd),7.39(1H,s),8.11(1H,s),9.63(2H,brs)。
实施例150
2-[(1R,3S,4R,5S)或(1S,3S,4S,5S)-5-羟基-2-氮杂双环[2.2.1]庚-3-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)(1R,3S,4R,5S)或(1S,3S,4S,5S)-5-羟基-3-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由实施例142步骤B制备的(1R,3S,4R,5S)或(1S,3S,4S,5S)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-5-羟基-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯(100mg，>99.9%ee，用己烷/乙醇(200/800)洗脱的级分，保留时间8.9min)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(139mg)、碳酸钠(72mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(18mg)获得标题化合物(87mg)淡褐色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.10-1.49(11H,m),1.88-2.23(2H,m),2.37-2.48(3H,m),2.57-2.67(1H,m),4.00-4.12(1H,m),4.24-4.40(1H,m),4.78-4.93(1H,m),5.01-5.17(1H,m),7.32-7.55(1H,m),7.77-8.36(1H,m),11.98-12.43(1H,m),12.80-13.12(1H,m)。
B)2-[(1R,3S,4R,5S)或(1S,3S,4S,5S)-5-羟基-2-氮杂双环[2.2.1]庚-3-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例108一样的方法，由实施例150步骤A制备的(1R,3S,4R,5S)或(1S,3S,4S,5S)-5-羟基-3-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯(86mg)和甲醇(2.0mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(0.436mL)获得标题化合物(50mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.39-1.51(1H,m),1.62-1.72(1H,m),1.78-1.88(1H,m),2.01-2.15(1H,m),2.46(3H,s),2.89-2.99(1H,m),4.00-4.13(1H,m),4.29-4.42(1H,m),4.93-5.01(1H,m),7.35(1H,s),8.08(1H,s),8.53-8.71(1H,m),9.46-9.65(1H,m),12.91-13.04(1H,m)。
实施例151
2-(环戊基甲基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)5-溴-3-[(环戊基乙酰基)氨基]噻吩-2-甲酰胺的制备
利用和实施例11步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(200mg)和环戊基乙酸(0.113mL)和O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲
Figure BDA00002264979901981
六氟磷酸盐(413mg)和N-乙基-N-(1-甲基乙基)丙-2-胺(0.316mL)和N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)获得标题化合物(290mg)黄色油。
1H-NMR(CDCl3)δ1.13-1.30(2H,m),1.60(4H,s),1.81-1.94(2H,m),2.24-2.38(1H,m),2.39-2.45(2H,m),5.42(2H,brs),8.28(1H,s),10.86(1H,brs)。
B)6-溴-2-(环戊基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
向5-溴-3-[(环戊基乙酰基)氨基]噻吩-2-甲酰胺(290mg)中加入2M氢氧化钠水溶液(1.75mL)和乙醇(3.0mL)，并将该混合物在70℃下搅拌2小时。在0℃，用1M盐酸中和该反应***。加入水(2mL)，并过滤收集沉淀，得到标题化合物(165mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.12-1.28(2H,m),1.42-1.75(6H,m),2.24-2.35(1H,m),2.60(2H,d,J=7.6Hz),7.57(1H,s),12.52(1H,brs)。
C)2-(环戊基甲基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-(环戊基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(160mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(315mg)、碳酸钠(162mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1∶1)(42mg)获得标题化合物(57mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.09-1.32(2H,m),1.40-1.78(6H,m),2.25-2.40(1H,m),2.45(3H,brs),2.61(2H,d,J=7.4Hz),7.34(1H,s),7.73-8.37(1H,m),12.26(1H,brs),12.95(1H,brs)。
实施例152
{2-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]吡咯烷-1-基}乙酸乙酯的制备
A){2-[6-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]吡咯烷-1-基}乙酸乙酯的制备
将实施例124步骤C制备的6-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(吡咯烷-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(391mg)、2-溴乙酸乙酯(184mg)、N-乙基-N-(1-甲基乙基)丙-2-胺(258mg)和N,N-二甲基甲酰胺(5mL)的混合物在60℃下搅拌2小时。加入乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)，并将分离的水层用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，并将残余物用碱性硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(140mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.26(3H,t,J=7.2Hz),1.73-2.12(3H,m),2.35-2.57(1H,m),2.49(3H,s),2.84(1H,td,J=9.2,6.6Hz),3.28-3.41(1H,m),3.41-3.64(2H,m),4.04(1H,dd,J=9.5,4.1Hz),4.18(2H,q,J=7.2Hz),5.27(2H,s),7.16(1H,s),7.24-7.47(5H,m),7.62(1H,s),10.52(1H,brs)。
B){2-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]吡咯烷-1-基}乙酸乙酯的制备
利用和实施例123步骤H一样的方法，由上面制备的{2-[6-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]吡咯烷-1-基}乙酸乙酯(40mg)、氢氧化钯(10mg)和甲酸(5mL)获得标题化合物(13mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.27(3H,t,J=6.9Hz),1.73-2.14(3H,m),2.39-2.54(1H,m),2.55(3H,s),2.84(1H,td,J=9.2,6.6Hz),3.36(1H,ddd,J=8.9,6.7,2.5Hz),3.42-3.64(2H,m),4.05(1H,dd,J=9.4,4.1Hz),4.19(2H,q,J=7.1Hz),7.22(1H,s),7.83(1H,s)。
实施例153
2-(十氢异喹啉-1-基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例71步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(0.22g)、2-(叔丁氧羰基)-2-氮杂双环[2.1.1]己烷-1-羧酸(0.57g)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.27g)、三乙胺(0.20g)和四氢呋喃(10mL)和2M氢氧化钠水溶液(1mL)和甲醇(5mL)获得1-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)八氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁基酯(180mg)无色固体。利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面获得的化合物、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(270mg)、碳酸铯(290mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(18mg)、1,2-二甲氧基乙烷(10mL)、水(1mL)和4M盐酸/乙酸乙酯溶液(2mL)和甲醇(10mL)获得2-(十氢异喹啉-1-基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮盐酸盐。用碱性硅胶柱色谱纯化(甲醇/乙酸乙酯)，得到标题化合物(36mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.21-1.46(8H,m),1.48-1.70(2H,m),1.83-1.93(1H,m),2.13-2.23(1H,m),2.45(3H,s),2.65-2.85(2H,m),3.80-3.90(1H,m),7.36(1H,s),8.02(1H,s)。
实施例154
2-[2-(1-氨基环丙基)乙基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和下述实施例155步骤G一样的方法，由实施例155步骤F制备的2-(三甲基甲硅烷基)乙基{1-[2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)乙基]环丙基}氨基甲酸酯(57mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(77mg)、碳酸铯(243mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(4.6mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3mL)、水(0.3mL)和10%盐酸/甲醇溶液(5mL)获得标题化合物(18mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.71-0.79(2H,m),0.88-0.96(2H,m),2.00-2.11(2H,m),2.45(3H,s),2.77-2.87(2H,m),7.33(1H,s),8.03(1H,brs),8.34(3H,brs),12.34(1H,brs)。
实施例155
2-(4-氮杂螺[2.4]庚-5-基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)2-(二乙氧基磷酰基)己-5-烯酸乙酯的制备
在氮气氛围下，将氢化钠(60%，在油中，65.0g)悬浮在四氢呋喃(800mL)中，并在室温下用30分钟逐滴加入(二乙氧基磷酰基)乙酸乙酯(200g)。逐滴加入完毕后，将该混合物用机械搅拌器进一步搅拌30分钟。用30分钟将4-溴丁-1-烯(217g)逐滴加入到该反应混合物中。将该反应混合物回流加热5小时，冷却至室温，通过加入1M氯化铵水溶液(300mL)来进行猝灭。将该混合物减压浓缩，向残余物中加入水(500mL)和***(500mL)，并将该混合物进行区分。用氯化钠饱和水层，并将该混合物用***(500mL×2)萃取。将合并的萃取物用盐水洗涤，并用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩，得到标题化合物粗品(241.6g)黄色油。其不用进一步纯化就可用于下一个反应。
1H-NMR(CDCl3)δ1.21-1.30(9H,m),1.80-2.15(4H,m),2.88-2.97(1H,m),4.05-4.20(6H,m),4.91-5.01(2H,m),5.65-5.73(1H,m)。
B)1-丁-3-烯-1-基环丙烷羧酸的制备
在氮气氛围下，将氢化钠(60%，在油中，42g)悬浮在甲苯(500mL)中，并在室温下用1小时逐滴加入上面制备的2-(二乙氧基磷酰基)己-5-烯酸乙酯的甲苯(200mL)溶液。加入催化量的乙醇(0.6mL)，并将该反应混合物在冰浴中冷却至0℃。在用干冰/乙醇冷却的烧瓶中，用小管向该反应混合物中加入氧杂环丙烷(176.6g)。除去冰浴，并将该反应混合物适度地回流加热6小时。在0℃，通过小心地加入1M氯化铵(500mL)，将该反应混合物猝灭，并将该混合物用***(600mL)萃取3次。将合并的萃取物用饱和碳酸氢钠水溶液(400mL)、水(400mL)和盐水(400mL)洗涤，并用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将获得的油溶于乙醇(500mL)中，加入氢氧化钠(90.3g)水溶液(500mL)。搅拌该混合物，并回流加热12小时。冷却至室温后，减压蒸发乙醇。将残余物冷却，逐滴加入浓盐酸，调节至pH 1，同时保持在0℃。用乙酸乙酯(400mL)从所获得的悬浮液中萃取有机产物3次，并将合并的萃取物用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩，得到粗品(88g)标题化合物黄色油。其不用进一步纯化就可用于下一个反应。
1H-NMR(CDCl3)δ1.92-2.37(4H,m),3.53-4.22(4H,m),5.02-5.06(2H,m),5.75-5.87(1H,m),7.81(1H,brs)。
C)2-(三甲基甲硅烷基)乙基(1-丁-3-烯-1-基环丙基)氨基甲酸酯的制备
将上面制备的1-丁-3-烯-1-基环丙烷羧酸的粗品(130.5g)溶于四氢呋喃(1300mL)中，并在氮气氛围下将该混合物冷却至0℃。依次加入三乙胺(263mL)和氯甲酸乙酯(152.0g)，并将该混合物在0℃下搅拌1小时。向该反应混合物中加入叠氮化钠(152g)的水溶液(500mL)，并将该混合物在0℃下搅拌2小时。将乙酸乙酯(500mL)和水(300mL)加入到该反应混合物中，并将该混合物进行区分。将有机层分离，并用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将残余物溶于甲苯(1000mL)中，并将该混合物回流加热1小时。将2-(三甲基甲硅烷基)乙醇(118g)加入到该反应混合物中，并将该混合物进一步回流加热6小时。将该反应混合物用乙酸乙酯(600mL)稀释，并将该混合物依次用饱和碳酸氢钠水溶液、水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/石油醚)，得到标题化合物(148.0g)黄色油。
1H-NMR(CDCl3)δ0.09(9H,m),0.65-1.00(6H,m),1.66-1.68(2H,m),2.18-2.24(2H,m),4.14(2H,t,J=7.2Hz),4.96-5.07(3H,m),5.83-5.87(1H,m)。
D)2-(三甲基甲硅烷基)乙基5-(羟甲基)-4-氮杂螺[2.4]庚烷-4-羧酸酯的制备
向上面制备的2-(三甲基甲硅烷基)乙基(1-丁-3-烯-1-基环丙基)氨基甲酸酯(120.0g)的二氯甲烷(1000mL)溶液中加入3-氯过氧苯甲酸(122.0g)，并将该混合物在室温下搅拌3小时。将该反应混合物用二氯甲烷(500mL)稀释，并将该混合物依次用硫代硫酸钠水溶液(500mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(500mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将残余物溶于乙酸中，并将该混合物在室温下搅拌24小时。减压蒸发溶剂，将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/石油醚)，得到标题化合物(127.0g)无色油。
1H-NMR(CDCl3)δ0.01(9H,s),0.46-1.71(11H,m),3.64-3.69(1H,m),4.06-4.10(3H,m)。
E)4-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]羰基}-4-氮杂螺[2.4]庚烷-5-羧酸的制备
向上面制备的2-(三甲基甲硅烷基)乙基5-(羟甲基)-4-氮杂螺[2.4]庚烷-4-羧酸酯(42.0g)的丙酮(600mL)溶液中加入Jones试剂(257mL)。将获得的悬浮液在室温下搅拌30分钟，并通过加入2-丙醇(30mL)来进行猝灭。滤出不溶性物质。从滤液中分离有机层，用乙酸乙酯稀释，并将该混合物用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/石油醚)，得到标题化合物的粗品(21.0g)黄色油。
1H-NMR(CDCl3)δ0.01-0.05(9H,m),0.47-0.96(4H,m),1.74-1.87(2H,m),2.03-2.51(4H,m),4.06-4.50(3H,m),9.60(1H,s)。
F)2-(三甲基甲硅烷基)乙基5-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-4-氮杂螺[2.4]庚烷-4-羧酸酯的制备
利用和实施例82步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(221mg)、上面制备的4-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]羰基}-4-氮杂螺[2.4]庚烷-5-羧酸的粗品(571mg)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.259mL)、三乙胺(0.418mL)和四氢呋喃(10mL)、2M氢氧化钠水溶液(3mL)和乙醇(10mL)获得标题化合物(133mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ-0.15(9H,s),0.44-0.68(4H,m),1.20-2.37(6H,m),3.79-3.95(2H,m),4.84(1H,dd,J=8.3Hz,3.6Hz),7.61(1H,s),12.70(1H,brs)。
另外，获得2-(三甲基甲硅烷基)乙基{1-[2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)乙基]环丙基}氨基甲酸酯(57mg)。认为上面制备的4-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]羰基}-4-氮杂螺[2.4]庚烷-5-羧酸的粗品含有3-[1-({[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]羰基}氨基)环丙基]丙酸。
1H-NMR(DMSO-d6)δ-0.01(9H,s),0.58(4H,d,J=14.4Hz),0.80-0.92(2H,m),1.79-1.91(2H,m),2.62-2.75(2H,m),3.91-4.02(2H,m),7.33(1H,brs),7.53(1H,s),12.52(1H,brs)。
G)2-(4-氮杂螺[2.4]庚-5-基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
将上面制备的2-(三甲基甲硅烷基)乙基5-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-4-氮杂螺[2.4]庚烷-4-羧酸酯(133mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(174mg)、碳酸铯(553mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5mL)和水(0.8mL)放在烧瓶中，并用氩气吹扫烧瓶中的空气。加入[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(10mg)，用氩气再次吹扫烧瓶中的空气，并将该混合物在90℃下搅拌30分钟。将该反应混合物倒入饱和碳酸氢钠水溶液中，并将该混合物用乙酸乙酯萃取。用无水硫酸镁干燥获得的有机层。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，并将目标级分减压浓缩，得到2-(三甲基甲硅烷基)乙基5-{6-[1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基]-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基}-4-氮杂螺[2.4]庚烷-4-羧酸酯浅黄色固体。向上面制备的2-(三甲基甲硅烷基)乙基5-{6-[1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基]-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基}-4-氮杂螺[2.4]庚烷-4-羧酸酯的甲醇(5mL)溶液中加入10%盐酸/甲醇溶液(5mL)，并将该混合物在60℃搅拌过夜。将该反应混合物减压浓缩，将2-丙醇(5mL)加入到残余物中，并将该混合物在80℃下搅拌30分钟。冷却至室温后，过滤收集沉淀的固体，得到标题化合物(55mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.82-0.95(2H,m),1.19-1.36(2H,m),1.98-2.32(3H,m),2.46-4.89(5H,m),7.38(1H,s),8.10(1H,s),9.22(1H,brs),10.22(1H,brs),12.86(1H,brs)。
实施例156
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-4-哌啶-1-基吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-4-哌啶-1-基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例11步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(200mg)和1-(叔丁氧羰基)-4-哌啶-1-基-L-脯氨酸(270mg)和O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲
Figure BDA00002264979902051
六氟磷酸盐(413mg)和N-乙基-N-(1-甲基乙基)丙-2-胺(0.316mL)和N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)获得(2S)-2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基甲酰基]-4-哌啶-1-基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯淡褐色无定形固体(132mg)。向上面制备的(2S)-2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基甲酰基]-4-哌啶-1-基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯中加入2M氢氧化钠水溶液(0.52mL)和乙醇(1.0mL)，并将该混合物在70℃下搅拌2小时。在0℃，用1M盐酸中和该反应***。将该混合物用乙酸乙酯萃取，并将该混合物用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(63mg)淡褐色无定形固体。
1H-NMR(CDCl3)δ1.23-2.01(16H,m),2.21-2.43(1H,m),2.49-2.74(4H,m),3.18-3.32(1H,m),3.88-4.25(3H,m),7.27(1H,s)。
B)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-4-哌啶-1-基吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-4-哌啶-1-基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(60mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(76mg)、碳酸钠(40mg)、1,2-二甲氧基乙烷(1.5mL)和水(0.75mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(10mg)获得(2S)-2-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-4-哌啶-1-基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯淡褐色固体(57mg)。在室温下，向上面制备的(2S)-2-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-4-哌啶-1-基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的甲醇(1.0mL)溶液中加入4M盐酸/乙酸乙酯溶液(0.26mL)，同时搅拌。将该反应***在加热下、在50℃下搅拌3小时之后，减压浓缩该反应混合物，并向残余物中加入乙酸乙酯(1mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(0.5mL)。滤出不溶性物质，减压浓缩滤液，并将残余物用碱性硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷和甲醇/乙酸乙酯)。将获得的浅黄色固体用甲醇/乙酸乙酯/己烷结晶，得到标题化合物(19mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.02-1.37(2H,m),1.51-1.64(1H,m),1.66-1.91(4H,m),2.09-2.25(1H,m),2.25-2.48(6H,m),2.53-2.64(1H,m),2.78-2.98(2H,m),3.16-3.25(1H,m),3.79-3.91(1H,m),7.34(1H,s),8.01(1H,s)。
实施例157
2-[(1S,5R)-2-氮杂双环[3.1.0]己-1-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)(4S)-4-(2-氯乙基)-1,3,2-二氧杂硫杂环戊烷(dioxathiolane)2,2-二氧化物的制备
在0℃，向(2S)-丁烷-1,2,4-三醇(10.0g)和吡啶(15.2mL)的乙腈(100mL)溶液中加入亚硫酰氯(34.4mL)，并将该混合物在室温下搅拌15小时。将乙酸乙酯(20mL)和0.1M盐酸(10mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，并将目标级分减压浓缩，得到(4S)-4-(2-氯乙基)-1,3,2-二氧杂硫杂环戊烷2-氧化物棕色油。将上面制备的(4S)-4-(2-氯乙基)-1,3,2-二氧杂硫杂环戊烷2-氧化物、高碘酸钠(19.6g)、氯化钌一水合物(172mg)、乙腈(200mL)和水(40mL)的混合物在室温下搅拌15小时。减压蒸发乙腈，并将水层用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，并将目标级分减压浓缩，得到标题化合物(14.2g)无色油。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.87-2.43(2H,m),3.62-3.87(2H,m),4.26-5.40(3H,m)。
B)(1S,5R)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-1-羧酸乙酯盐酸盐的制备
在0℃，向氢化钠(3.21g)的1,2-二甲氧基乙烷(100mL)悬浮液中加入上面制备的(4S)-4-(2-氯乙基)-1,3,2-二氧杂硫杂环戊烷2,2-二氧化物(7.50g)和N-(二苯基亚甲基)甘氨酸乙酯(10.7g)，并将该混合物在回流条件下搅拌15小时。将水(100mL)加入到该反应混合物中，并将该混合物用乙酸乙酯(100mL)萃取。将有机层用无水硫酸镁干燥，并减压蒸发溶剂。将残余物溶于***(100mL)中，加入1M盐酸(48.2mL)，并将混合物在室温下搅拌15小时。将分离的水层用乙酸乙酯(100mL)洗涤，并将溶剂减压蒸发。将残余物溶于乙醇(50mL)中，加入碳酸钾(5.55g)，并将该混合物在室温下搅拌15小时。过滤除去不溶性物质，并将4M盐酸/乙酸乙酯溶液(10mL)加入到滤液中。减压蒸发溶剂。向残余物中加入乙酸乙酯(8mL)和乙醇(2mL)，并过滤收集沉淀的固体，用乙酸乙酯洗涤，得到标题化合物(2.51g)褐色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.23(3H,t,J=7.1Hz),1.48-1.73(2H,m),1.90-2.37(3H,m),2.87-3.02(1H,m),3.26-3.40(1H,m),4.13-4.26(2H,m),10.22(2H,brs)。
C)(1S,5R)-2-(叔丁氧羰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-1-羧酸的制备
将(1S,5R)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-1-羧酸乙酯盐酸盐(1.50g)、二碳酸二叔丁基酯(1.91mL)和三乙胺(2.18mL)的四氢呋喃(15mL)溶液在室温下搅拌15小时。将水(10mL)加入到该反应混合物中，并将该混合物用乙酸乙酯(20mL)萃取。用无水硫酸镁干燥有机层。减压蒸发溶剂。将残余物溶于乙醇(7mL)中，加入8M氢氧化钠水溶液(1mL)，并将该混合物在室温下搅拌2小时。在冰冷却下，将该反应混合物用6M盐酸(1.5mL)酸化，过滤收集沉淀的固体，得到标题化合物(1.20g)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.99(1H,t,J=5.3Hz),1.40(9H,s),1.72(1H,dd,J=8.9,4.7Hz),1.77-1.90(1H,m),1.95-2.06(1H,m),2.10-2.24(1H,m),3.22-3.46(1H,m),3.60(1H,ddd,J=11.0,9.4,6.2Hz),12.35(1H,brs)。
D)(1S,5R)-1-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例71步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(321mg)、上面制备的(1S,5R)-2-(叔丁氧羰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-1-羧酸(495mg)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.283mL)、三乙胺(0.503mL)和四氢呋喃(10mL)、8M氢氧化钠水溶液(1.00mL)和乙醇(10mL)获得标题化合物(330mg)无色油。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.00-1.51(10H,m),1.87-2.05(3H,m),2.17-2.35(1H,m),3.22-3.31(1H,m),3.77(1H,td,J=10.4,4.0Hz),7.54(1H,s),12.65(1H,brs)。
E)2-[(1S,5R)-2-氮杂双环[3.1.0]己-1-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的(1S,5R)-1-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-2-羧酸叔丁基酯(301mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(448mg)、碳酸铯(474mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1∶1)(29.9mg)、1,2-二甲氧基乙烷(5mL)、水(0.5mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)和甲醇(5mL)获得标题化合物(145mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.77(2H,d,J=7.7Hz),2.05-2.30(2H,m),2.46(3H,s),2.64-2.76(1H,m),2.94-3.14(1H,m),3.33-3.48(1H,m),7.38(1H,s),8.12(1H,s),9.82(1H,brs),10.53(1H,brs)。
实施例158
2-[1-(2-羟乙基)吡咯烷-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[1-(2-羟乙基)吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
将实施例152步骤A制备的{2-[6-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]吡咯烷-1-基}乙酸乙酯(80mg)、硼氢化钠(63mg)、四氢呋喃(5mL)和乙醇(5mL)的混合物在室温下搅拌2小时。在冰冷却下，将1M盐酸(2mL)加入到该反应混合物中，并用1M氢氧化钠水溶液(2mL)中和该混合物，加入乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)，并将分离的水层用乙酸乙酯(10ml×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，并将混合物用***结晶，得到标题化合物(73mg)白色粉末。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.55-1.74(2H,m),1.82-2.06(1H,m),2.07-2.26(1H,m),2.27-2.47(5H,m),2.74-2.90(1H,m),3.17-3.35(1H,m),3.39-3.59(3H,m),5.20(2H,s),7.08(1H,s),7.18-7.39(5H,m),7.49(1H,s)。
B)2-[1-(2-羟乙基)吡咯烷-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例123步骤H一样的方法，由上面制备的6-[1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基]-2-[1-(2-羟乙基)吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(73mg)、20%氢氧化钯-碳(20mg)和甲酸(5mL)获得标题化合物(40mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.69-1.98(3H,m),2.15-2.33(1H,m),2.58(3H,s),3.41(1H,brs),3.45-3.59(1H,m),3.65(1H,dd,J=9.2,5.1Hz),3.98-4.17(4H,m),4.75(1H,brs),7.34(2H,s)。
实施例159
2-[(1R,3S,4R,5R)或(1S,3S,4S,5R)-5-氟-2-氮杂双环[2.2.1]庚-3-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)(1R*,3S,4R*,5R)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-5-氟-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯的制备
在0℃，向(1R*,3S,4R*,5R)-2-(叔丁氧羰基)-5-氟-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-3-羧酸(352mg)和三乙胺(0.190mL)的四氢呋喃(4mL)溶液中加入2-甲基丙基氯甲酸酯(0.178mL)，并将该混合物在室温下搅拌30分钟。向该反应***中加入实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(200mg)的四氢呋喃(2mL)溶液，并将该混合物在60℃下搅拌18小时。将水加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯萃取。将有机层用盐水洗涤，并用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，减压浓缩滤液，并将残余物用碱性硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)。向所获得的浅黄色固体(328mg)中加入2M氢氧化钠水溶液(1.81mL)和乙醇(4.0mL)，并将该混合物在70℃下搅拌5小时。在0℃，用1M盐酸中和该反应***。向该反应***中加入水(2mL)，并过滤收集沉淀，得到标题化合物(274mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.13(5H,s),1.39(4H,s),1.47-1.90(2H,m),2.01-2.21(2H,m),2.84-2.94(1H,m),4.02-4.11(1H,m),4.16-4.30(1H,m),4.91-5.20(1H,m),7.64-7.71(1H,m),12.67(1H,brs)。
B)(1R*,3S,4R*,5R)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-5-氟-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯的光学拆分
用高效液相色谱(柱∶CHIRALPAK AD(50mm i.d.×500mm L，DAICELCHEMICAL INDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/乙醇(800/200)，流速∶80mL/min，柱温∶30℃)分级(1R*,3S,4R*,5R)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-5-氟-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯(274mg)。在上述高效液相色谱条件下，获得(1R,3S,4R,5R)或(1S,3S,4S,5R)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-5-氟-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯(130mg，>99.9%ee，保留时间5.4min)和(1R,3S,4R,5R)或(1S,3S,4S,5R)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-5-氟-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯(127mg，>99.9%ee，保留时间7.5min)。用高效液相色谱进行分析(柱∶CHIRALPAK AD-H(4.6mm i.d.×250mm L，DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/乙醇(850/150)，流速∶1mL/min，柱温∶30℃，检测：220nm)。
C)(1R,3S,4R,5R)或(1S,3S,4S,5R)-5-氟-3-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由实施例159步骤B制备的(1R,3S,4R,5R)或(1S,3S,4S,5R)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-5-氟-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯(125mg，>99.9%ee，保留时间5.4min)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(173mg)、碳酸钠(89mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1∶1)(23mg)获得标题化合物(116mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.14(5H,s),1.40(4H,s),1.48-1.87(2H,m),2.04-2.23(2H,m),2.46(3H,brs),2.83-2.95(1H,m),4.02-4.14(1H,m),4.16-4.32(1H,m),4.89-5.21(1H,m),7.39-7.51(1H,m),7.77-8.37(1H,m),12.38(1H,brs),12.96(1H,brs)。
D)2-[(1R,3S,4R,5R)或(1S,3S,4S,5R)-5-氟-2-氮杂双环[2.2.1]庚-3-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例108一样的方法，由实施例159步骤C制备的(1R,3S,4R,5R)或(1S,3S,4S,5R)-5-氟-3-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯(115mg)和甲醇(2.0mL)、4M盐酸/乙酸乙酯溶液(0.581mL)获得标题化合物(66mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.75-1.98(3H,m),2.46(3H,s),2.53-2.64(1H,m),3.18-3.25(1H,m),4.20-4.33(2H,m),4.93-5.19(1H,m),7.35(1H,s),8.09(1H,s),8.62(1H,brs),10.04(1H,brs),12.95(1H,brs)。
实施例160
2-[(1R,3S,4R,5R)或(1S,3S,4S,5R)-5-氟-2-氮杂双环[2.2.1]庚-3-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)(1R,3S,4R,5R)或(1S,3S,4S,5R)-5-氟-3-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯的制备
将实施例159步骤B制备的(1R,3S,4R,5R)或(1S,3S,4S,5R)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-5-氟-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯(125mg，>99.9%ee，保留时间7.5min)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(173mg)、碳酸钠(89mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)放在烧瓶中，并用氩气吹扫烧瓶中的空气。加入[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(23mg)，并用氩气再次吹扫烧瓶中的空气。将该反应***在100℃下搅拌3小时，并加入水。将该混合物用乙酸乙酯萃取，并将萃取物减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(108mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.14(5H,s),1.40(4H,s),1.50-1.87(2H,m),2.04-2.23(2H,m),2.39-2.48(3H,m),2.86-2.95(1H,m),4.03-4.12(1H,m),4.18-4.32(1H,m),4.92-5.18(1H,m),7.37-7.49(1H,m),7.82-8.33(1H,m),12.29-12.47(1H,m),12.88-13.02(1H,m)。
B)2-[(1R,3S,4R,5R)或(1S,3S,4S,5R)-5-氟-2-氮杂双环[2.2.1]庚-3-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
在室温下，在搅拌下，向实施例160步骤A制备的(1R,3S,4R,5R)或(1S,3S,4S,5R)-5-氟-3-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯(105mg)的甲醇(2.0mL)溶液中加入4M盐酸/乙酸乙酯溶液(0.53mL)。将该反应***在加热下、在50℃下搅拌30分钟，并过滤收集沉淀，用乙酸乙酯洗涤，得到标题化合物(65mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.71-2.00(3H,m),2.46(3H,s),2.51-2.61(1H,m),3.18-3.27(1H,m),4.17-4.33(2H,m),4.93-5.19(1H,m),7.35(1H,s),8.09(1H,s),8.63(1H,brs),9.88(1H,brs),12.92(1H,brs)。
MS(ESI+):[M+H]+346。
MS(ESI+)，实测值：346。
实施例161
2-[(2S)-哌啶-2-基]-6-[5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮盐酸盐的制备
将实施例83步骤B制备的(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)哌啶-1-羧酸酯(1.41g)、[3-(三氟甲基)-1-三苯甲基-1H-吡唑-4-基]硼酸(1.72g)、碳酸钠(902mg)、乙醇(15mL)和水(3mL)放在烧瓶中，并用氩气吹扫烧瓶中的空气。加入四(三苯基膦)钯(0)(197mg)，用氩气再次吹扫烧瓶中的空气，并将该混合物在80℃下搅拌15小时。将乙酸乙酯(20mL)和水(10mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用碱性硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，并将目标级分减压浓缩，得到(2S)-2-{4-氧代-6-[3-(三氟甲基)-1-三苯甲基-1H-吡唑-4-基]-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基}哌啶-1-羧酸叔丁基酯无色油。向上面制备的(2S)-2-{4-氧代-6-[3-(三氟甲基)-1-三苯甲基-1H-吡唑-4-基]-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基}哌啶-1-羧酸叔丁基酯的甲醇(4mL)溶液中加入4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)，并将该混合物在60℃下搅拌15小时。过滤收集沉淀的固体，得到标题化合物(530mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.47-1.93(5H,m),2.23-2.36(1H,m),2.95-3.11(1H,m),3.28-3.34(1H,m),4.22-4.34(1H,m),7.39(1H,s),8.64(1H,s),9.13(1H,brs),9.78(1H,brs),13.04(1H,brs),14.30(1H,brs)。
MS(ESI+):[M+H]+370。
MS(ESI+)，实测值：370。
实施例162
6-(5-乙基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-哌啶-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)N,N-二甲基-1H-吡唑-1-磺酰胺的制备
将吡唑(12g)溶于四氢呋喃(200mL)中，并在搅拌下、在氮气氛围下、在0℃加入氢化钠(60％，在油中，8.46g)。20分钟之后，逐滴加入二甲基氨磺酰基氯(17mL)，并将该混合物在相同温度下进一步搅拌1小时，在室温下搅拌1小时。将该反应混合物倒入饱和碳酸氢钠水溶液(400mL)中，并将该混合物用乙酸乙酯(400)萃取，用无水硫酸镁干燥萃取物。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，并将目标级分减压浓缩，得到标题化合物(25.3g)无色油。
1H-NMR(CDCl3)δ2.95(6H,s),6.40(1H,m),7.75(1H,m),7.99(1H,d,J=2.7Hz)。
B)5-乙基-N,N-二甲基-1H-吡唑-1-磺酰胺的制备
将上面制备的N,N-二甲基-1H-吡唑-1-磺酰胺(25.3g)溶于四氢呋喃(200mL)中，并将该混合物冷却至-78℃。在搅拌下，逐滴加入1.6M正丁基锂/己烷溶液(99mL)。逐滴加入完毕后，将该混合物搅拌30分钟，并逐滴加入碘乙烷(12.8mL)。将该反应混合物进一步搅拌30分钟，并升温至室温。1小时之后，由于沉淀而很难搅拌，所以加入四氢呋喃(200mL)，以便溶解沉淀。搅拌2小时之后，将该反应混合物倒入饱和碳酸氢钠水溶液(600mL)中，并将该混合物用乙酸乙酯(400mL)萃取两次，用无水硫酸镁干燥合并的萃取物。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，并将目标级分减压浓缩，得到标题化合物(19.8g)无色油。
1H-NMR(CDCl3)δ1.30(3H,t,J=7.8Hz),2.94(2H,dd,J=15.0Hz,7.5Hz),3.03(6H,s),6.13(1H,brs),7.55(1H,brs)。
C)4-溴-5-乙基-N,N-二甲基-1H-吡唑-1-磺酰胺的制备
将上面制备的5-乙基-N,N-二甲基-1H-吡唑-1-磺酰胺(19.8g)溶于四氢呋喃(300mL)中，并加入1-溴吡咯烷-2,5-二酮(20.8g)。将该混合物在50℃下搅拌2小时。减压浓缩该反应混合物，并将残余物倒入饱和碳酸氢钠水溶液中，用乙酸乙酯(400mL)萃取该混合物。将萃取物用盐水洗涤，并用无水硫酸镁干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，并将目标级分减压浓缩，得到标题化合物(26.2g)黄色油。
1H-NMR(CDCl3)δ1.24(3H,t,J=7.5Hz),2.97(2H,dd,J=15.0Hz,7.8Hz),3.06(6H,s),7.54(1H,s)。
D)5-乙基-N,N-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-磺酰胺的制备
将上面制备的4-溴-5-乙基-N,N-二甲基-1H-吡唑-1-磺酰胺(13.0g)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(12.3g)、乙酸钾(13.6g)和1,2-二甲氧基乙烷(300mL)放在烧瓶中，并用氩气吹扫烧瓶中的空气。加入[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(3.76g)，用氩气再次吹扫烧瓶中的空气，并将该混合物在90℃下搅拌过夜。将该反应混合物冷却至室温，并滤出不溶性物质。将滤液减压浓缩，向残余物中加入1:1乙酸乙酯/己烷溶液，并滤出不溶性物质。减压浓缩滤液，并将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)。减压浓缩目标级分，并将获得的残余物在室温下静置过夜。过滤收集沉淀，用己烷洗涤，得到标题化合物(6.32g)白色固体。
1H-NMR(CDCl3)δ1.25(3H,t,J=7.5Hz),1.31(12H,s),3.03(6H,s),3.17(2H,dd,J=15.0,7.5Hz),7.75(1H,s)。
E)6-(5-乙基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-哌啶-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
将上面制备的5-乙基-N,N-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-磺酰胺(658mg)、实施例83步骤B制备的(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(414mg)、碳酸铯(1.96g)、1,2-二甲氧基乙烷(6mL)和水(2mL)放在烧瓶中，并用氩气吹扫烧瓶中的空气。加入[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(37mg)，用氩气再次吹扫烧瓶中的空气，并将该混合物在90℃下搅拌1小时。将该反应混合物倒入饱和碳酸氢钠水溶液中，并将该混合物用3:1乙酸乙酯/四氢呋喃萃取。将获得的有机层依次用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，并用无水硫酸镁干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用碱性硅胶柱色谱纯化残余物(甲醇/乙酸乙酯)，并将目标级分减压浓缩，得到(2S)-2-{6-[1-(二甲基氨磺酰基)-5-乙基-1H-吡唑-4-基]-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基}哌啶-1-羧酸叔丁基酯白色固体。向上面制备的(2S)-2-{6-[1-(二甲基氨磺酰基)-5-乙基-1H-吡唑-4-基]-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基}哌啶-1-羧酸叔丁基酯的甲醇(10mL)溶液中加入10%盐酸/甲醇溶液(8mL)，并将该混合物在50℃下搅拌1小时。将该反应混合物冷却至室温，加入乙酸乙酯(10mL)。过滤收集沉淀的固体，得到标题化合物(136mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.25(3H,t,J=7.6Hz),1.50-1.92(5H,m),2.24-2.33(1H,m),2.87(2H,q,J=7.6Hz),2.96-3.11(1H,m),3.29-3.40(1H,m),4.15-4.29(1H,m),7.32(1H,s),8.09(1H,s),9.06-9.22(1H,m),9.40-9.52(1H,m),12.82(1H,brs)。
实施例163
2-{2-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]吡咯烷-1-基}乙酰胺的制备
A)2-{2-[6-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]吡咯烷-1-基}乙酰胺的制备
将实施例152步骤A制备的{2-[6-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]吡咯烷-1-基}乙酸乙酯(80mg)、2M氢氧化钠水溶液(1mL)和甲醇(5mL)的混合物在60℃下搅拌2小时。在冰冷却下，将1M盐酸(2mL)加入到该反应混合物中，加入乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)，并将分离的水层用乙酸乙酯(10ml×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将残余物溶于N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中，加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(675mg)、1-羟基苯并***(397mg)、氯化铵(628mg)和三乙胺(1.19g)，并将该混合物在80℃下搅拌18小时。将乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用碱性硅胶柱色谱纯化残余物(甲醇/乙酸乙酯)，得到标题化合物(60mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.81-2.04(2H,m),2.26-2.69(2H,m),2.50(3H,s),2.91-3.04(1H,m),3.19(1H,d,J=16.4Hz),3.48(1H,d,J=16.4Hz),3.62(1H,brs),3.84(1H,dd,J=9.0,6.2Hz),5.28(2H,s),5.58(2H,brs),7.12-7.24(2H,m),7.24-7.47(4H,m),7.65(1H,s),8.13(1H,brs)。
B)2-{2-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]吡咯烷-1-基}乙酰胺的制备
利用和实施例123步骤H一样的方法，由上面制备的2-{2-[6-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]吡咯烷-1-基}乙酰胺(60mg)、20%氢氧化钯-碳(20mg)和甲酸(5mL)获得标题化合物(22mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.75-2.07(4H,m),2.43(3H,s),2.56-2.70(1H,m),2.88-3.05(1H,m),3.15-3.25(2H,m),3.72(1H,brs),7.19(1H,brs),7.32-7.41(2H,m),7.84(1H,brs)。
实施例164
2-[(2R)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮三氟乙酸盐的制备
A)4-(2-羟乙基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯的制备
在0℃，向2-哌啶-4-基乙醇(5.0g)、水(12mL)和2-甲基丙-2-醇(9mL)的混合溶液中加入氢氧化钠(1.6g)，并将该反应***搅拌30分钟。以小份额形式加入二碳酸二叔丁基酯(8.5g)，并将该反应***在室温下搅拌过夜。将该反应***倒入水(100mL)中，并将该混合物用乙酸乙酯(200mL)萃取。用水和盐水洗涤萃取物，浓缩，得到标题化合物(8.8g)。
1H-NMR(CDCl3)δ1.19-1.23(2H,m),1.50(9H,s),1.59-1.61(6H,m),2.68-2.72(2H,m),3.68-3.73(2H,m),4.08(2H,s)。
B)4-(2-氧代乙基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯的制备
在0℃，向氯铬酸吡啶
Figure BDA00002264979902161
(125.0g)和乙酸钠(48.0g)的二氯甲烷(300mL)溶液中加入4-(2-羟乙基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(89.0g)的二氯甲烷(150mL)溶液。将该反应***在25℃下搅拌3小时，加入***(300mL)，过滤收集不溶性物质(通过硅胶柱色谱)，用***(1000mL)和二氯甲烷/***(1000mL)洗涤。浓缩滤液，得到标题化合物(60.0g)。
1H-NMR(CDCl3)δ1.18-1.22(2H,m),1.46(9H,s),1.68-1.72(2H,m),2.08-2.10(1H,m),2.38-2.42(2H,m),2.73-2.77(2H,m),4.06-4.10(2H,m),9.78(1H,s)。
C)4-(2-氰基-2-羟乙基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯的制备
在0℃，利用小份额方式向4-(2-氧代乙基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(60g)的***(150mL)溶液中加入***(32.4g)在水(100mL)和浓盐酸(55mL)中的溶液。将该反应***搅拌4小时，并将有机层用盐水洗涤，干燥，浓缩，得到标题化合物(67.0g)。
1H-NMR(CDCl3)δ1.20-1.24(2H,m),1.50(9H,s),1.79-1.83(5H,m),2.70-2.74(2H,m),3.50-3.54(1H,m),4.11-4.15(2H,m),4.56-4.60(1H,m)。
D)4-{2-氰基-2-[(甲基磺酰基)氧基]乙基}哌啶-1-羧酸叔丁基酯的制备
向4-(2-氰基-2-羟乙基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(67.0g)和三乙胺(35.0g)的二氯甲烷(500mL)溶液中慢慢地加入甲磺酰氯(36.3g)的二氯甲烷(200mL)溶液。将该反应***在室温下搅拌2小时，并加入到冰水(300mL)中。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤除去不溶性物质，并将滤液浓缩，得到标题化合物(80.0g)。
1H-NMR(CDCl3)δ1.18-1.22(2H,m),1.48(9H,s),1.73-1.77(3H,m),1.93-1.97(1H,m),2.03-2.07(1H,m),2.72-2.76(2H,m),3.23(3H,s),4.13-4.15(2H,m),5.27-5.29(1H,m)。
E)1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲腈的制备
向4-{2-氰基-2-[(甲基磺酰基)氧基]乙基}哌啶-1-羧酸叔丁基酯(80.0g)的二氯甲烷(200mL)溶液中加入三氟乙酸(137.0g)的二氯甲烷(200mL)溶液，并将该反应***在室温下搅拌过夜。将该反应***浓缩，将乙腈(200mL)加入到残余物中，并在0℃慢慢地加入三乙胺(98.0g)。将该混合物浓缩，用二氯甲烷稀释残余物，并将该混合物用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液浓缩。将残余物用快速硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/石油醚)，得到标题化合物(13.0g)黄色油。
1H-NMR(CDCl3)δ1.58-1.62(3H,m),1.80-1.84(3H,m),2.00-2.02(1H,m),2.88-2.92(3H,m),3.23-3.27(1H,m),3.86-3.90(1H,m)。
F)(2R)-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-羧酸盐酸盐的制备
利用和文献(Mi，Y.；Corey，E.J.Tetrahedron Lett.2006，47，2515-2516)一样的方法，通过非对映体盐方法进行光学拆分，合成标题化合物。也就是说，在0℃，向1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲腈(20.0g)的甲醇(100mL)溶液中慢慢地加入(+)-酒石酸(22.0g)的甲醇(100mL)溶液。将该反应***搅拌90分钟，浓缩，并将获得的固体用甲醇结晶4次。滤出沉淀，并将滤液浓缩。向残余物中加入水(150mL)，并加入碳酸氢钠，达到pH 8。将该混合物用二氯甲烷(200mL×3)萃取，并将萃取物用盐水洗涤，干燥，浓缩。将获得的白色固体(15.0g)溶于甲醇(100mL)中，在0℃慢慢地加入(-)-酒石酸(16.5g)的甲醇(100mL)溶液。将该反应***搅拌90分钟，浓缩，并将获得的固体用甲醇结晶4次，得到(2R)-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲腈的(-)-酒石酸盐(4.0g，>90%ee)。向获得的固体中加入水(50mL)，并加入碳酸氢钠，达到pH 8。将该混合物用二氯甲烷(100mL×3)萃取，并将萃取物用盐水洗涤，干燥，浓缩。将获得的白色固体(1.75g)溶于浓盐酸(50mL)中，并将该反应混合物回流加热过夜。浓缩之后，在0℃，向残余物中慢慢地加入氢氧化钠(1.04g)的水(10mL)溶液。浓缩该混合物，加入浓盐酸(5mL)，并将该混合物再次浓缩。将获得的白色固体用甲醇(10mL)萃取。滤出不溶性物质，浓缩滤液，得到标题化合物(0.80g)。
1H-NMR(CDCl3)δ1.68-1.72(4H,m),1.88-1.92(1H,m),2.13-2.17(2H,m),3.32-3.36(4H,m),4.43(1H,t,J=9.6Hz),9.89(1H,s),14.15(1H,brs)。
G)2-[(2R)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基]-6-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
在0℃，向实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(200mg)、(2R)-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-羧酸盐酸盐(173mg)和N-乙基-N-(1-甲基乙基)丙-2-胺(0.395mL)的N,N-二甲基甲酰胺(4.0mL)溶液中加入O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲
Figure BDA00002264979902181
六氟磷酸盐(413mg)，并将该反应***在70℃下搅拌20小时。将水加入到该反应混合物中，并将该混合物用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和盐水洗涤，并用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩，得到(2R)-N-(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲酰胺和标题化合物的混合物。将上面制备的(2R)-N-(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲酰胺和标题化合物和乙醇(2.0mL)和2M氢氧化钠水溶液(1.8mL)的混合溶液在70℃下搅拌2小时。在0℃，将该反应混合物用1M盐酸中和，并将混合物用乙酸乙酯萃取。将有机层用盐水洗涤，并用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用碱性硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷和甲醇/乙酸乙酯)，得到标题化合物(114mg)黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.39-1.52(2H,m),1.52-1.66(2H,m),1.73-1.85(1H,m),1.85-1.94(1H,m),2.19-2.32(1H,m),2.59-2.77(2H,m),2.83-2.97(1H,m),3.03-3.16(1H,m),3.93-4.01(1H,m),7.60(1H,s)。
H)2-[(2R)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮三氟乙酸盐的制备
将2-[(2R)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基]-6-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(110mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(199mg)、碳酸钠(103mg)、1,2-二甲氧基乙烷(2.0mL)和水(1.0mL)放在烧瓶中，并用氩气吹扫烧瓶中的空气。加入[1，1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(26mg)，并用氩气再次吹扫烧瓶中的空气。在100℃下搅拌该反应***2小时，加入盐水，并将该混合物用乙酸乙酯萃取。用无水硫酸钠干燥萃取物，过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷和甲醇/乙酸乙酯)，并将获得的淡褐色固体(96mg)用乙酸乙酯/己烷结晶，得到2-[(2R)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的粗品(50mg)淡褐色固体。向上面制备的2-[(2R)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的粗品(50mg)的N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)悬浮液中加入三乙胺(0.020mL)和二碳酸二叔丁基酯(0.034mL)。在室温下搅拌该反应混合物18小时，加入水，并将该混合物用乙酸乙酯萃取。用无水硫酸钠干燥萃取物，过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到4-{2-[(2R)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基]-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基}-3-甲基-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(吡唑环上的Boc的位置未确定)浅黄色固体(22mg)。向上面制备的4-{2-[(2R)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基]-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基}-3-甲基-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯中加入水(0.50mL)和三氟乙酸(51.6mg)，并将该反应***在90℃下搅拌30分钟。将该反应***减压浓缩，并将残余物用甲醇(2mL)和乙酸乙酯(2mL)洗涤，得到标题化合物(4.0mg)橙色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.74-1.97(4H,m),2.06-2.29(2H,m),2.36-2.48(4H,m),3.22-3.29(2H,m),3.42-3.79(2H,m),4.67-4.81(1H,m),7.44(1H,s),7.86-8.29(1H,m),9.83(1H,brs),12.68(1H,brs)。
实施例165
2-(2-氮杂双环[2.1.1]己-1-基)-6-[5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例161一样的方法，由实施例148步骤A制备的1-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-2-氮杂双环[2.1.1]己烷-2-羧酸叔丁基酯(35.0mg)、[3-(三氟甲基)-1-三苯甲基-1H-吡唑-4-基]硼酸(71.7mg)、碳酸钠(22.5mg)、乙醇(5mL)、水(0.5mL)、四(三苯基膦)钯(0)(4.90mg)、甲醇(4mL)和4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1mL)获得标题化合物(12mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.84-1.90(2H,m),2.72-2.81(2H,m),2.94-2.99(1H,m),3.30-3.38(2H,m),7.43(1H,s),8.63(1H,s),9.88-10.26(3H,m),13.03(1H,brs),14.26(1H,brs)。
实施例166
2-环己基-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-环己基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
在0℃，向实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(200mg)、三乙胺(0.19mL)和四氢呋喃(4.0mL)的混合溶液中加入环己基羰基氯(0.18mL)，并将该混合物在室温下搅拌30分钟。将水倒入该反应***中，并将该混合物用乙酸乙酯萃取，用盐水洗涤萃取物，用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩，得到5-溴-3-[(环己基羰基)氨基]噻吩-2-甲酰胺。向上面制备的5-溴-3-[(环己基羰基)氨基]噻吩-2-甲酰胺中加入2M氢氧化钠水溶液(0.90mL)和乙醇(2.0mL)，并将该混合物在70℃下搅拌2小时。在0℃，用1M盐酸中和该反应***。加入水(2mL)，并过滤收集沉淀，得到标题化合物(252mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.14-1.38(3H,m),1.44-1.62(2H,m),1.63-1.95(5H,m),2.55-2.67(1H,m),7.57(1H,s),12.45(1H,brs)。
B)2-环己基-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-环己基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(250mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(492mg)、碳酸钠(254mg)、1,2-二甲氧基乙烷(4.0mL)和水(2.0mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(65mg)获得标题化合物(158mg)浅黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.11-1.97(10H,m),2.45(3H,s),2.54-2.68(1H,m),7.35(1H,s),7.95(1H,brs),12.20(1H,brs),12.96(1H,brs)。
实施例167
2-甲基-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例166步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(200mg)、三乙胺(0.19mL)、四氢呋喃(4.0mL)和乙酰氯(0.096mL)和2M氢氧化钠水溶液(0.45mL)和乙醇(2.0mL)获得标题化合物(131mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.36(3H,s),7.54(1H,s),12.55(1H,brs)。
B)2-甲基-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(130mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(327mg)、碳酸钠(169mg)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(1.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(43mg)获得标题化合物(74mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.36(3H,s),2.44(3H,s),7.31(1H,s),7.98(1H,brs),12.30(1H,brs),12.96(1H,brs)。
实施例168
2-{[(2-羟基-2-甲基丙基)氨基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(300mg)和1-氨基-2-甲基丙-2-醇(191mg)和碳酸钾(445mg)和碘化钠(16mg)和N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)获得6-溴-2-{[(2-羟基-2-甲基丙基)氨基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(160mg)白色固体。将上面制备的6-溴-2-{[(2-羟基-2-甲基丙基)氨基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(130mg)、三乙胺(0.060mL)、二碳酸二叔丁基酯(0.100mL)、N,N-二甲基吡啶-4-胺(4.78mg)和N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)的混合物在50℃下搅拌2小时。将该混合物用碱性硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷和甲醇/乙酸乙酯)，得到[(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)甲基](2-羟基-2-甲基丙基)氨基甲酸叔丁基酯(吡唑环上的Boc的位置未确定)(96mg)白色固体。利用和实施例2步骤C一样的方法，由上面制备的[(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)甲基](2-羟基-2-甲基丙基)氨基甲酸叔丁基酯(95mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(135mg)、碳酸钠(70mg)、1,2-二甲氧基乙烷(2.0mL)和水(1.0mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1∶1)(18mg)获得(2-羟基-2-甲基丙基){[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]甲基}氨基甲酸叔丁基酯(30mg)浅黄色固体。在室温下，向上面制备的(2-羟基-2-甲基丙基){[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]甲基}氨基甲酸叔丁基酯(30mg)的甲醇(3.0mL)溶液中加入4M盐酸/乙酸乙酯溶液(1.0mL)，同时搅拌。将该反应***在加热下、在50℃下搅拌5小时，并减压浓缩。用碱性硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷和甲醇/乙酸乙酯)，并将获得的浅黄色固体用甲醇/乙酸乙酯结晶，得到标题化合物(13mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.09(6H,s),2.41(2H,s),2.45(3H,s),3.70(2H,s),4.38(1H,brs),7.36(1H,s),8.01(1H,brs)。
实施例169
2-{[(2-羟乙基)(甲基)氨基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)6-溴-2-{[(2-羟乙基)(甲基)氨基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤B一样的方法，由实施例2步骤A制备的6-溴-2-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(300mg)和2-(甲基氨基)乙醇(0.172mL)和碳酸钾(445mg)和碘化钠(16mg)和N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)获得标题化合物(128mg)淡褐色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.22(3H,s),2.52-2.57(2H,m),3.50(2H,t,J=5.5Hz),3.55(2H,s),4.63(1H,s),7.60(1H,s),12.10(1H,brs)。
B)2-{[(2-羟乙基)(甲基)氨基]甲基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
利用和实施例2步骤C一样的方法，由6-溴-2-{[(2-羟乙基)(甲基)氨基]甲基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(28mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(54mg)、碳酸钠(28mg)、1,2-二甲氧基乙烷(1.0mL)和水(0.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1∶1)(7mg)获得标题化合物(10mg)淡褐色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.24(3H,s),2.45(3H,s),2.55(2H,t,J=5.6Hz),3.51(2H,t,J=5.6Hz),3.55(2H,s),7.36(1H,s),7.92(1H,brs),12.98(1H,brs)。
实施例170
2-[(2S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮三氟乙酸盐的制备
A)(2S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-羧酸盐酸盐的制备
利用和文献(Mi，Y.；Corey，E.J.Tetrahedron Lett.2006，47，2515-2516)一样的方法，通过非对映体盐方法进行光学拆分，合成标题化合物。也就是说，在0℃，向实施例164步骤E制备的1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲腈(20.0g)的甲醇(100mL)溶液中慢慢地加入(+)-酒石酸(22.0g)的甲醇(100mL)溶液。将该反应***搅拌90分钟，浓缩，并将获得的固体用甲醇结晶4次，得到(2S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲腈的(+)-酒石酸盐(3.0g，>90%ee)。向获得的固体中加入水(50mL)，并加入碳酸氢钠，达到pH 8。将该混合物用二氯甲烷(100mL×3)萃取，并将萃取物用盐水洗涤，干燥，浓缩。将获得的白色固体(1.4g)溶于浓盐酸(50mL)中，并将该反应混合物回流加热过夜。浓缩之后，在0℃，向残余物中慢慢地加入氢氧化钠(0.83g)水(10mL)溶液。浓缩该混合物，加入浓盐酸(5mL)，并将该混合物再次浓缩。将获得的白色固体用甲醇(10mL)萃取。滤出不溶性物质，浓缩滤液，得到标题化合物(1.7g)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.88-1.92(5H,m),2.13-2.17(2H,m),3.32-3.36(4H,m),4.43(1H,t,J=9.6Hz),10.01(1H,s),14.10(1H,brs)。
B)2-[(2S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基]-6-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
在0℃，向实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(600mg)、(2S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-羧酸盐酸盐(520mg)和N-乙基-N-(1-甲基乙基)丙-2-胺(1.19mL)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲
Figure BDA00002264979902241
六氟磷酸盐(1.24g)，并将该反应***在70℃下搅拌20小时。将水加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和盐水洗涤，并用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩，得到(2S)-N-(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲酰胺和标题化合物的混合物。将上面制备的(2S)-N-(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲酰胺和标题化合物在乙醇(4.0mL)和2M氢氧化钠水溶液(2.7mL)中的混合溶液在70℃下搅拌2小时。在0℃，将该反应混合物用1M盐酸中和，并将混合物用乙酸乙酯萃取。将有机层用盐水洗涤，并用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用碱性硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷和甲醇/乙酸乙酯)，得到标题化合物(220mg)黄色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.40-1.63(4H,m),1.73-1.94(2H,m),2.18-2.30(1H,m),2.60-2.71(2H,m),2.83-2.97(1H,m),3.04-3.17(1H,m),3.89-4.01(1H,m),7.60(1H,s)。
C)2-[(2S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮三氟乙酸盐的制备
将2-[(2S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基]-6-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(210mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(571mg)、碳酸钠(196mg)、1,2-二甲氧基乙烷(4.0mL)和水(2.0mL)放在烧瓶中，并用氩气吹扫烧瓶中的空气。加入[1，1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(252mg)，并用氩气再次吹扫烧瓶中的空气。在100℃下搅拌该反应***2小时，加入盐水，并将该混合物用乙酸乙酯萃取。将萃取物减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷和甲醇/乙酸乙酯)，得到2-[(2S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的粗品(96mg)淡褐色固体。向上面制备的2-[(2S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的粗品(96mg)的N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)悬浮液中加入三乙胺(0.039mL)和二碳酸二叔丁基酯(0.065mL)。在50℃下搅拌该反应混合物18小时，加入水，并将该混合物用乙酸乙酯萃取。用无水硫酸钠干燥萃取物，过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到4-{2-[(2S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基]-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基}-3-甲基-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(吡唑环上的Boc的位置未确定)浅黄色固体(49mg)。向上面制备的4-{2-[(2S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基]-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基}-3-甲基-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯中加入水(0.50mL)和三氟乙酸(50.6mg)，并将该反应***在90℃下搅拌30分钟。减压浓缩该反应***，并将残余物用碱性硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷和甲醇/乙酸乙酯)，得到浅黄色固体。将获得的浅黄色固体用高效液相色谱纯化{柱∶L-柱2ODS(20mm i.d.×50mm L)，流动相∶0.1%三氟乙酸水溶液/0.1%三氟乙酸-乙腈溶液}。将目标级分减压浓缩，并将残余物用乙酸乙酯/己烷结晶，得到标题化合物(6mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.70-1.95(4H,m),2.05-2.25(2H,m),2.36-2.48(4H,m),3.21-3.31(2H,m),3.42-3.56(1H,m),3.59-3.78(1H,m),4.57-4.84(1H,m),7.44(1H,s),7.81-8.44(1H,m),9.81(1H,brs),12.43-13.20(2H,m)。
MS(ESI+):[M+H]+342。
MS(ESI+)，实测值：342。
实施例171
2-[(1R*,6R*)-3-氮杂双环[4.1.0]庚-4-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)2-[(叔丁氧羰基)氨基]戊-4-烯酸甲酯的制备
将2-[(叔丁氧羰基)氨基]戊-4-烯酸(20.0g)、碳酸钾(13.2g)和N,N-二甲基甲酰胺(100mL)的混合物搅拌15分钟。将该混合物冷却至0℃，加入碘甲烷(9.2g)，并将该混合物在室温下搅拌2小时。过滤该反应混合物，并将残余物用乙酸乙酯洗涤。依次用5%盐酸和盐水洗涤滤液，用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，减压浓缩滤液，得到标题化合物(21.0g)。
1H-NMR(CDCl3)δ1.45(9H,s),2.47-2.58(2H,m),3.75(3H,s),4.40(1H,q,J=6.4Hz),5.07(1H,d,J=5.6Hz),5.13-5.16(2H,m),5.66-5.74(1H,m)。
B)2-[(叔丁氧羰基)(丙-2-烯-1-基)氨基]戊-4-烯酸甲酯的制备
将上面制备的2-[(叔丁氧羰基)氨基]戊-4-烯酸甲酯(10.5g)的乙醇(50mL)溶液冷却至-20℃，加入3-溴丙-1-烯(6.1g)和氢化钠(60%，在油中，2.0g)，并将该混合物在-20℃下搅拌1.5小时，并通过加入饱和氯化铵水溶液(20mL)进行猝灭。用***萃取有机产物，并将该萃取物用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，减压浓缩滤液，得到标题化合物(9.9g)。
1H-NMR(CDCl3)δ1.47(9H,s),2.59-2.75(2H,m),3.72(3H,s),3.79-4.15(3H,m),5.08-5.36(4H,m),5.74-5.84(2H,m)。
C)[1-(羟甲基)丁-3-烯-1-基]丙-2-烯-1-基氨基甲酸叔丁基酯的制备
在0℃，向上面制备的2-[(叔丁氧羰基)(丙-2-烯-1-基)氨基]戊-4-烯酸甲酯(5.0g)和四氢呋喃(100mL)的混合物中加入1M二异丁基氢化铝/甲苯溶液(60mL)，并将该混合物在相同温度下搅拌15分钟。用酒石酸钾钠水溶液稀释该反应混合物，并将该混合物用乙酸乙酯萃取。将萃取物用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，减压浓缩滤液，得到标题化合物(3.76g)。
1H-NMR(CDCl3)δ1.45(9H,s),2.35-2.37(2H,m),3.49-3.84(5H,m),5.01-5.18(4H,m),5.69-5.87(2H,m)。
D)2-[(叔丁氧羰基)(丙-2-烯-1-基)氨基]戊-4-烯-1-基4-硝基苯甲酸酯的制备
向上面制备的[1-(羟甲基)丁-3-烯-1-基]丙-2-烯-1-基氨基甲酸叔丁基酯(15.0g)、三乙胺(19.0g)和二氯甲烷(150mL)的混合物中加入N,N-二甲基吡啶-4-胺(0.7g)。向该混合物中逐滴加入4-硝基苯甲酰氯(14.2g)的二氯甲烷(30mL)溶液，并将该混合物在0℃下搅拌30分钟。将该反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液稀释，用二氯甲烷萃取该混合物，并将萃取物用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/石油醚)，得到标题化合物(14.1g)。
1H-NMR(CDCl3)δ1.45(9H,s)2.33-2.38(1H,m)2.42-2.47(1H,m),3.73(1H,s),3.84(1H,s),4.38-4.52(3H,m),5.01-5.16(4H,m),5.72-5.79(2H,m),8.19(2H,d,J=8.0Hz),8.26-8.28(2H,m)。
E)2-({[(4-硝基苯基)羰基]氧基}甲基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁基酯的制备
在氮气氛围下，将上面制备的2-[(叔丁氧羰基)(丙-2-烯-1-基)氨基]戊-4-烯-1-基4-硝基苯甲酸酯(14.0g)的苯(300mL)溶液回流加热15分钟，并冷却至10℃。在10℃，加入Grubbs试剂(1.9g)，并将该反应混合物搅拌3小时。加入二甲亚砜(8.6mL)，并将该混合物减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/石油醚)，得到标题化合物(11.3g)。
1H-NMR(CDCl3)δ1.25-1.33(9H,m),2.01-2.09(1H,m),2.51-2.56(1H,m),3.60-3.64(1H,m),4.14-4.44(3H,m),4.75-4.79(1H,m),5.69-5.77(2H,m),8.20(2H,d,J=8.4Hz),8.25(2H,s)。
F)(1R*,4S*,6R*)-4-({[(4-硝基苯基)羰基]氧基}甲基)-3-氮杂双环[4.1.0]庚烷-3-羧酸叔丁基酯的制备
将上面制备的2-({[(4-硝基苯基)羰基]氧基}甲基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁基酯(10.0g)溶于5%重氮甲烷/***(1.4L)中，在10℃加入乙酸钯(689mg)，并将该混合物在相同温度下搅拌40分钟。用硅胶柱色谱纯化该反应混合物(乙酸乙酯/石油醚)，得到2-({[(4-硝基苯基)羰基]氧基}甲基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁基酯和标题化合物的混合物。对获得的混合物进行3次类似的重复反应操作，得到标题化合物(8.4g)。
1H-NMR(CDCl3)δ0.12-0.15(1H,m),0.69-0.74(1H,m),0.95-1.02(2H,m),1.40(9H,s),1.80-1.97(2H,m),3.39-3.43(1H,m),3.82-3.91(1H,m),4.24-4.48(3H,m),8.16-8.20(2H,m),8.27-8.29(2H,m)。
G)(1R*,4S*,6R*)-4-(羟甲基)-3-氮杂双环[4.1.0]庚烷-3-羧酸叔丁基酯的制备
向上面制备的(1R*,4S*,6R*)-4-({[(4-硝基苯基)羰基]氧基}甲基)-3-氮杂双环[4.1.0]庚烷-3-羧酸叔丁基酯(8.2g)、四氢呋喃(70mL)、甲醇(70mL)和水(35mL)的混合物中加入氢氧化锂一水合物(2.7g)。将该混合物在室温下搅拌1小时。将该反应混合物用盐水稀释，并将该混合物用乙酸乙酯萃取。将萃取物用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/石油醚)，得到标题化合物(3.5g)。
1H-NMR(CDCl3)δ0.24(1H,brs),0.61-0.64(1H,m),0.88-0.92(2H,m),1.24-1.29(1H,m),1.45(9H,m),1.73(2H,brs),1.88(1H,brs),3.47(1H,brs),3.58-3.61(1H,m),3.67-3.72(1H,m),4.00-4.13(1H,m)。
H)(1R*,4S*,6R*)-4-甲酰基-3-氮杂双环[4.1.0]庚烷-3-羧酸叔丁基酯的制备
将上面制备的(1R*,4S*,6R*)-4-(羟甲基)-3-氮杂双环[4.1.0]庚烷-3-羧酸叔丁基酯(200mg)和Dess-Martin高碘烷(450mg)的二氯甲烷(10mL)溶液在0℃下搅拌3小时。加入水(10mL)，并将该混合物用二氯甲烷萃取。将萃取物用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/石油醚)，得到标题化合物(160mg)。
1H-NMR(CDCl3)δ0.17-0.27(1H,m),0.67-0.72(1H,m),0.85-1.14(2H,m),1.42-1.48(9H,m),1.66-1.77(1H,m),2.27-2.39(1H,m),3.49-3.89(2H,m),3.97-4.25(1H,m),9.52(1H,s)。
I)(1R*,4S*,6R*)-3-(叔丁氧羰基)-3-氮杂双环[4.1.0]庚烷-4-羧酸的制备
向上面制备的(1R*,4S*,6R*)-4-甲酰基-3-氮杂双环[4.1.0]庚烷-3-羧酸叔丁基酯(700mg)的叔丁醇(20mL)溶液中加入2-甲基丁-2-烯(0.5mL)、亚氯酸钠(367mg)和1.67M磷酸二氢钠水溶液(1.67mL)。将该氧化反应在室温下进行2小时，并用水淬灭。将该混合物用5%盐酸调节至pH 4，并用***萃取。将萃取物用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/石油醚)，得到标题化合物(562mg)。
1H-NMR(CDCl3)δ0.07-0.17(1H,m),0.56-0.62(1H,m),0.88-0.97(1H,m),1.31-1.39(9H,m),1.72-1.76(1H,m),2.16-2.31(1H,m),3.33-3.38(2H,m),3.52-3.63(1H,m),4.02-4.21(1H,m)。
J)(1R*,6R*)-4-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-3-氮杂双环[4.1.0]庚烷-3-羧酸叔丁基酯的制备
利用和实施例82步骤A一样的方法，由实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(663mg)、上面制备的(1R*,4S*,6R*)-3-(叔丁氧羰基)-3-氮杂双环[4.1.0]庚烷-4-羧酸(1.09g)、2-甲基丙基氯甲酸酯(0.584mL)、三乙胺(1.25mL)和四氢呋喃(12mL)、2M氢氧化钠水溶液(9mL)和乙醇(12mL)获得标题化合物(310mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.18-1.37(13H,m),1.87-2.39(2H,m),3.52-4.59(3H,m),7.57-7.63(1H,m),12.63(1H,brs)。
K)2-[(1R*,6R*)-3-氮杂双环[4.1.0]庚-4-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
利用和实施例83步骤C一样的方法，由上面制备的(1R*,6R*)-4-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-3-氮杂双环[4.1.0]庚烷-3-羧酸叔丁基酯(310mg)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(448mg)、碳酸铯(711mg)、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(53mg)、1,2-二甲氧基乙烷(7.5mL)、水(0.75mL)、4M盐酸/环戊基甲醚溶液(2mL)和甲醇(3mL)获得标题化合物(148mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.51-2.27(6H主要的,6H次要的,m),2.42-2.47(3H主要的,3H次要的,m),3.02-4.03(3H主要的,3H次要的,m),7.32(1H次要的,s),7.34(1H主要的,s),8.11-8.12(1H主要的,1H次要的,m),8.99-9.72(2H主要的,2H次要的,m),12.71-12.91(1H主要的,1H次要的,m)。观测的非对映体的比例是3:2。
实施例172
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-哌啶-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮盐酸盐的制备
A)(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯的制备
在冰浴中，将(2S)-1-(叔丁氧羰基)哌啶-2-羧酸(37.8g)的四氢呋喃(375mL)溶液冷却至10℃的内部温度。加入三乙胺(23.0mL)，并将该混合物在相同温度下搅拌10分钟。用30分钟向该混合物中逐滴加入2-甲基丙基氯甲酸酯(21.4mL)(内部温度8-13℃)。除去冰浴，并将该混合物在室温下搅拌1小时。然后，向该反应混合物中加入实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(16.6g)，并将该混合物在60℃下搅拌12小时。将该反应混合物在室温下搅拌8小时，加入乙酸乙酯(750mL)和碳酸氢钠水溶液(750mL)。过滤收集沉淀，用水洗涤，得到(2S)-2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基甲酰基]哌啶-1-羧酸叔丁基酯的粗品(18.6g)白色固体。从母液中分离有机层，并用无水硫酸镁干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。将获得的黄色油残余物(38g)和上面制备的(2S)-2-[(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)氨基甲酰基]哌啶-1-羧酸叔丁基酯的粗品(18.6g)合并，并加入乙醇(375mL)和2M氢氧化钠水溶液(188mL)。将该混合物在75℃下搅拌2小时，在冰浴中冷却，加入水(125mL)。用6M盐酸(117mL)将该混合物调节至pH 7，同时保持内部温度在4-8℃。将该反应混合物在冰浴中搅拌30分钟。过滤收集沉淀，得到标题化合物(24.8g)白色固体。光学纯度是38.7%ee。用高效液相色谱进行分析(柱∶CHIRALPAK AD-H(4.6mm i.d.×250mm L，DAICEL CHEMICALINDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/2-丙醇/二乙胺(700/300/1)，流速∶1mL/min，柱温∶30℃，检测：220nm)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.09-1.45(11H,m),1.46-1.58(1H,m),1.60-1.86(2H,m),1.98-2.14(1H,m),3.38-3.53(1H,m),3.75-3.89(1H,m),4.89-5.10(1H,m),7.58(1H,s),12.64(1H,brs)。
B)(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯的光学拆分
用高效液相色谱(柱∶CHIRALPAK AD(50mm i.d.×500mm L，DAICELCHEMICAL INDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/2-丙醇/二乙胺(700/300/1)，流速∶80mL/min，柱温∶30℃)分级(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(10.1g，38.7%ee)。在上述高效液相色谱条件下，获得(2S)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(6.59g，>99.9%ee，保留时间6.32min)和(2R)-2-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(2.71g，>99.9%ee，保留时间8.6min)。用高效液相色谱进行分析(柱∶CHIRALPAKAD-H(4.6mm i.d.×250mm L，DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/2-丙醇/二乙胺(700/300/1)，流速∶1mL/min，柱温∶30℃，检测：220nm)。
C)6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-哌啶-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮盐酸盐的制备
将实施例83步骤D的结晶步骤所最终获得的母液减压浓缩。向残余物中加入乙醇(7mL)，并将该混合物在搅拌下、在80℃加热。加入水(0.5mL)，并将获得的溶液逐渐地冷却至室温，同时搅拌。2小时之后，过滤收集沉淀的固体，得到标题化合物(75mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.51-1.92(5H,m),2.25-2.33(1H,m),2.46(3H,s),2.97-3.10(1H,m),3.35-3.39(1H,m),4.16-4.25(1H,m),7.34(1H,s),8.00(1H,brs),9.23(1H,brs),13.02(1H,brs)。
MS(ESI+):[M+H]+316。
MS(ESI+)，实测值：316。
实施例173
2-{2-[(2-羟乙基)(甲基)氨基]乙基}-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
向实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(300mg)、三乙胺(0.208mL)和四氢呋喃(7.0mL)的混合物中加入3-氯丙酰基氯(0.143mL)，同时在0℃搅拌。将该反应混合物在室温下搅拌30分钟，并加入2-(甲基氨基)乙醇(0.542mL)。将该反应混合物在加热下、在70℃下搅拌18小时。在0℃，将该反应混合物用1M盐酸水溶液中和，并减压浓缩。用碱性硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷和甲醇/乙酸乙酯)，得到6-溴-2-{2-[(2-羟乙基)(甲基)氨基]乙基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(405mg)浅黄色固体。利用和实施例2步骤C一样的方法，由上面制备的6-溴-2-{2-[(2-羟乙基)(甲基)氨基]乙基}噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(50mg)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(93mg)、碳酸钠(48mg)、1,2-二甲氧基乙烷(1.0mL)和水(0.5mL)和[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(12mg)获得标题化合物(22mg)淡褐色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.24(3H,s),2.39-2.48(5H,m),2.70-2.84(4H,m),3.46(2H,t,J=6.2Hz),4.42(1H,brs),7.33(1H,s),7.67-8.32(1H,m),12.15-13.16(2H,m)。
实施例174
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-哌啶-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
将实施例83步骤D制备的6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-哌啶-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐(255mg)悬浮在甲醇(7mL)中，并加入三乙胺(0.28mL)，得到溶液。向该混合物中加入碱性硅胶(5g)，并将它们混合。减压蒸发溶剂。将残余物用碱性硅胶柱色谱纯化(甲醇/乙酸乙酯)。减压浓缩目标级分，并将乙酸乙酯(10mL)加入到所获得的残余物中。过滤收集沉淀，得到标题化合物(183mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.36-1.62(4H,m),1.77-1.94(2H,m),2.44(3H,s),2.59-2.69(1H,m),2.98-3.08(1H,m),3.60-3.68(1H,m),7.31(1H,s),8.00(1H,brs)。
MS(ESI+):[M+H]+316。
MS(ESI+)，实测值：316。
实施例175
2-[(1R,3S,4R,5R)或(1S,3S,4S,5R)-5-氟-2-氮杂双环[2.2.1]庚-3-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮盐酸盐的制备
A)(1R*,3S,4R*,5R)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-5-氟-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯的制备
在0℃，向(1R*,3S,4R*,5R)-2-(叔丁氧羰基)-5-氟-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-3-羧酸(2.65g)和三乙胺(1.42mL)的四氢呋喃(35mL)溶液中加入2-甲基丙基氯甲酸酯(1.34mL)，并将该混合物在室温下搅拌30分钟。向该反应***中加入实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(1.88g)的四氢呋喃(10mL)溶液，并将该混合物在60℃下搅拌18小时。将水加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯萃取。将有机层用盐水洗涤，并用无水硫酸钠干燥。滤出不溶性物质，减压浓缩滤液，并将残余物用碱性硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)。向所获得的浅黄色固体中加入2M氢氧化钠水溶液(34mL)和乙醇(200mL)，并将该混合物在80℃下搅拌8小时。在0℃，用1M盐酸中和该反应***。向该反应***中加入水(20mL)，并过滤收集沉淀，得到标题化合物(2.82g)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.06-1.45(9H,m),1.50-1.86(2H,m),2.01-2.22(2H,m),2.83-2.95(1H,m),4.03-4.13(1H,m),4.15-4.32(1H,m),4.91-5.20(1H,m),7.57-7.75(1H,m),12.58-12.76(1H,m)。
B)(1R*,3S,4R*,5R)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-5-氟-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯的光学拆分
用高效液相色谱(柱∶CHIRALPAK AD(50mm i.d.×500mm L，DAICELCHEMICAL INDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/乙醇(800/200)，流速∶80mL/min，柱温∶30℃)分级(1R*,3S,4R*,5R)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-5-氟-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯(274mg)。在上述高效液相色谱条件下，获得(1R,3S,4R,5R)或(1S,3S,4S,5R)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-5-氟-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯(1.39g，>99.9%ee，保留时间7.1min)和(1R,3S,4R,5R)或(1S,3S,4S,5R)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-5-氟-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯(1.40g，99.8%ee，保留时间14.2min)。用高效液相色谱进行分析(柱∶CHIRALPAKAD-H(4.6mm i.d.×250mm L，DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES，LTD.制造)，流动相∶己烷/乙醇(800/200)，流速∶1mL/min，柱温∶30℃，检测：220nm)。
C)2-[(1R,3S,4R,5R)或(1S,3S,4S,5R)-5-氟-2-氮杂双环[2.2.1]庚-3-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮盐酸盐的制备
将实施例175步骤B制备的(1R,3S,4R,5R)或(1S,3S,4S,5R)-3-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-5-氟-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯(1.40g，99.8%ee，保留时间14.2min)和3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁基酯(1.94g)、碳酸钠(1.00g)、1,2-二甲氧基乙烷(30mL)和水(15mL)放在烧瓶中，并用氩气吹扫烧瓶中的空气。加入[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(257mg)，并用氩气再次吹扫烧瓶中的空气。将该反应***在100℃下搅拌1小时，并加入水。将该混合物用乙酸乙酯萃取，并将萃取物用无水硫酸钠干燥，过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，得到(1R,3S,4R,5R)或(1S,3S,4S,5R)-5-氟-3-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯(1.39g)浅黄色固体。室温下，向上面制备的(1R,3S,4R,5R)或(1S,3S,4S,5R)-5-氟-3-[6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氢噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁基酯(1.39g)的甲醇(15mL)中加入5%盐酸/甲醇溶液(15mL)，同时搅拌。将该反应***在加热下、在50℃下搅拌3小时，并将该反应混合物减压浓缩。向残余物中加入乙醇(15mL)，并在100℃慢慢地加入水(2mL)。将该溶液冷却至室温，并过滤收集沉淀，得到标题化合物(826mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.75-1.96(3H,m),2.46(3H,s),2.53-2.62(1H,m),3.18-3.26(1H,m),4.19-4.31(2H,m),4.93-5.18(1H,m),7.35(1H,s),8.09(1H,s),8.64(1H,brs),9.98(1H,brs),12.94(1H,brs)。
MS(ESI+):[M+H]+346。
MS(ESI+)，实测值：346。
实施例176
2-(1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)1-(1-叔丁基-5-甲基-1H-吡唑-4-基)乙酮的制备
将戊烷-2,4-二酮(5.01g)和1,1-二甲氧基-N,N-二甲基甲胺(6.26g)的混合物在80℃下搅拌1小时。将四氢呋喃(10mL)加入到该反应混合物中，在冰冷却下通过小份额方式加入盐酸叔丁基肼，并将该混合物在60℃下搅拌30分钟。将该反应混合物冷却至室温，加入乙酸乙酯(100mL)和水(100mL)，并将分离的水层用乙酸乙酯(50mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，并将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(7.47g)无色油。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.67(9H,s),2.42(3H,s),2.77(3H,s),7.76(1H,s)。
B)(2Z)-3-氯-3-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)丙-2-烯腈的制备
在冰冷却下，通过小份额方式向N,N-二甲基甲酰胺(12.1g)中加入三氯氧磷(25.4g)，并将该混合物在室温下搅拌15分钟。在冰冷却下，通过小份额方式向其中加入上面制备的1-(1-叔丁基-5-甲基-1H-吡唑-4-基)乙酮(7.47g)，并将该反应混合物在50℃下搅拌30分钟。在50℃，通过小份额方式向其中加入盐酸羟胺粉末(11.5g)，并将该反应混合物在50℃下搅拌30分钟。将冰水(200mL)加入到该反应混合物中，并将该混合物用1M氢氧化钠水溶液中和，用乙酸乙酯(100mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，并将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，用***结晶，得到标题化合物(3.02g)浅黄色粉末。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.48(3H,s),5.68(1H,s),7.82(1H,s)。
C)3-氨基-5-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩-2-羧酸甲酯的制备
将上面制备的(2Z)-3-氯-3-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)丙-2-烯腈(3.08g)、甲基硫基乙酸酯(2.15g)、氢化钠(1.47g)和N,N-二甲基乙酰胺(10mL)的混合物在60℃下搅拌2小时。将乙酸乙酯(20mL)和水(10mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，并将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(3.57g)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.39(3H,s),3.68(3H,s),6.53(2H,s),6.65(1H,s),7.46-8.26(1H,m),12.83(1H,brs)。
D)3-氨基-5-[1-(4-甲氧苄基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基]噻吩-2-羧酸甲酯和3-氨基-5-[1-(4-甲氧苄基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]噻吩-2-羧酸甲酯的制备
将上面制备的3-氨基-5-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩-2-羧酸甲酯(3.50g)、碳酸钾(2.45g)、1-(氯甲基)-4-甲氧基苯(2.43g)和N,N-二甲基甲酰胺(30mL)的混合物在100℃下搅拌15小时。将乙酸乙酯(20mL)和水(10mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。滤出不溶性物质，减压浓缩滤液，并过滤收集沉淀的固体，得到标题化合物(4.98g)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.29(2H,s),2.39(1H,s),3.68-3.75(6H,m),5.16(1.33H,s),5.29(0.67H,s),6.54(2H,s),6.61-6.67(1H,m),6.86-6.94(2H,m),7.10-7.17(0.67H,m),7.21-7.29(1.33H,m),7.72(0.33H,s),8.15(0.67H,s)。
E)3-[(1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基羰基)氨基]-5-[1-(4-甲氧苄基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基]噻吩-2-羧酸甲酯和3-[(1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基羰基)氨基]-5-[1-(4-甲氧苄基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]噻吩-2-羧酸甲酯的制备
将1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-羧酸(488mg)、亚硫酰氯(5mL)和N,N-二甲基甲酰胺(23mg)的混合物在室温下搅拌15小时。减压浓缩该反应混合物，并将残余物溶于四氢呋喃(5mL)中。加入上面制备的3-氨基-5-[1-(4-甲氧苄基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基]噻吩-2-羧酸甲酯和3-氨基-5-[1-(4-甲氧苄基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]噻吩-2-羧酸甲酯(750mg)和N-乙基-N-(1-甲基乙基)丙-2-胺(0.916mL)，并将该混合物在60℃下搅拌2小时。将乙酸乙酯(20mL)和水(10mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，并将残余物用碱性硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(534mg)无色油。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.31-1.59(4H,m),1.73-1.87(3H,m),2.33(2H,s),2.43(1H,s),2.55-3.11(4H,m),3.54-3.66(1H,m),3.70-3.85(6H,m),5.18(1.33H,s),5.31(0.67H,s),6.84-6.95(2H,m),7.10-7.32(2H,m),7.82(0.33H,s),8.09-8.15(1H,m),8.32(0.67H,s),11.24(1H,s)。
F)N-{2-氨基甲酰基-5-[1-(4-甲氧苄基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基]噻吩-3-基}-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲酰胺和N-{2-氨基甲酰基-5-[1-(4-甲氧苄基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]噻吩-3-基}-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲酰胺的制备
将上面制备的3-[(1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基羰基)氨基]-5-[1-(4-甲氧苄基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基]噻吩-2-羧酸甲酯和3-[(1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基羰基)氨基]-5-[1-(4-甲氧苄基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]噻吩-2-羧酸甲酯(500mg)、8M氢氧化钠水溶液(1mL)和乙醇(7mL)的混合物在60℃下搅拌2小时。在冰冷却下，用6M盐酸(1.4mL)中和该反应混合物，并减压浓缩。向残余物中加入氯化铵(162mg)、三乙胺(0.705mL)和N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，并将该混合物在室温下搅拌5分钟。向该反应***中加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(235mg)和1-羟基苯并***(205mg)，并将该混合物在室温下搅拌15小时。将该反应***倒入水(10mL)中，并将该混合物用乙酸乙酯(10mL)萃取。将有机层用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，并用无水硫酸镁干燥。滤出不溶性物质，减压浓缩滤液，得到标题化合物(316mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.31-1.55(4H,m),1.71-1.86(3H,m),2.33(1H,s),2.41-2.45(2H,m),2.55-3.05(4H,m),3.50-3.59(1H,m),3.70-3.76(3H,m),5.18(0.67H,s),5.30(1.33H,s),6.87-6.96(2H,m),7.10-7.50(4H,m),7.72(0.67H,s),8.06-8.11(1H,m),8.17(0.33H,s),11.85(1H,s)。
G)2-(1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)-6-[1-(4-甲氧苄基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮和2-(1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)-6-[1-(4-甲氧苄基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
将上面制备的N-{2-氨基甲酰基-5-[1-(4-甲氧苄基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基]噻吩-3-基}-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲酰胺和N-{2-氨基甲酰基-5-[1-(4-甲氧苄基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]噻吩-3-基}-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲酰胺(200mg)、2M氢氧化钠水溶液(1mL)和乙醇(3mL)的混合物在80℃下搅拌3小时。在冰冷却下，将该反应混合物用1M盐酸中和，并将该混合物用乙酸乙酯(20mL)萃取。将有机层用盐水(5mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。滤出不溶性物质，减压浓缩滤液，并过滤收集固体，得到标题化合物(142mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.38-3.14(14H,m),3.72-3.75(3H,m),3.92(1H,t,J=8.9Hz),5.19(1.8H,s),5.32(0.2H,s),6.88-6.96(1.8H,m),7.17(0.2H,d,J=8.5Hz),7.27(2H,d,J=8.5Hz),7.38(0.9H,s),7.45(0.1H,s),7.92(0.1H,s),8.32(0.9H,s)。
H)2-(1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
将上面制备的2-(1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)-6-[1-(4-甲氧苄基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮和2-(1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)-6-[1-(4-甲氧苄基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(120mg)、三氟乙酸(3mL)和甲氧基苯(0.3mL)的混合物在70℃下搅拌24小时。减压浓缩该反应混合物，用碳酸氢钠水溶液中和，用乙酸乙酯/四氢呋喃的混合溶剂(20mL×3)萃取。将有机层用水洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，并将残余物用碱性硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/甲醇)，得到标题化合物(52mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.35-1.63(4H,m),1.69-1.81(1H,m),1.83-1.92(1H,m),2.22-2.34(1H,m),2.46(3H,s),2.55-2.67(2H,m),2.79-2.93(1H,m),3.01-3.15(1H,m),3.86-3.97(1H,m),7.44(1H,s),8.04(1H,s),12.21(1H,brs)。
MS(ESI+):[M+H]+342。
MS(ESI+)，实测值：342。
实施例177
6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-1,2,3,6-四氢吡啶-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮盐酸盐的制备
将实施例145步骤C制备的6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-1,2,3,6-四氢吡啶-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐(350mg)悬浮在乙醇(12mL)中，并将该混合物在90℃加热下搅拌。加入水(1.6mL)，得到溶液，并将该溶液冷却至室温。减压浓缩该混合物，将甲醇(8mL)加入到残余物中，并将该混合物在65℃加热下搅拌。加入水(0.8mL)，并将该混合物冷却至室温。过滤收集沉淀，得到标题化合物(169mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.37-2.53(4H,m),2.71-2.86(1H,m),3.62-3.84(2H,m),4.41(1H,dd,J=11.1,4.5Hz),5.77-5.85(1H,m),5.92-6.01(1H,m),7.37(1H,s),7.98(0.6H,brs),8.31(0.4H,brs),9.75(1H,brs),13.06(1H,brs)。
MS(ESI+):[M+H]+314。
MS(ESI+)，实测值：314。
实施例178
2-[(2S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
A)1-(1-苄基-5-甲基-1H-吡唑-4-基)乙酮的制备
将戊烷-2,4-二酮(10.01g)和1,1-二甲氧基-N,N-二甲基甲胺(12.51g)的混合物在80℃下搅拌1小时。将四氢呋喃(20mL)加入到该反应混合物中，在冰冷却下通过小份额方式加入苄基肼二盐酸盐(21.46g)，并将该混合物在60℃下搅拌30分钟。将该反应混合物冷却至室温，加入乙酸乙酯(100mL)和水(100mL)，并将分离的水层用乙酸乙酯(50mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，并将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(13.53g)无色油。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.44(3H,s),2.51(3H,s),5.31(2H,s),7.05-7.15(2H,m),7.18-7.40(3H,m),7.89(1H,s)。
B)(2Z)-3-(1-苄基-5-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-氯丙-2-烯腈的制备
在冰冷却下，通过小份额方式向N,N-二甲基甲酰胺(17.55g)中加入三氯氧磷(36.8g)，并将该混合物在室温下搅拌15分钟。在冰冷却下，通过小份额方式向其中加入上面制备的1-(1-苄基-5-甲基-1H-吡唑-4-基)乙酮(12.86g)，并将该反应混合物在50℃下搅拌30分钟。在50℃，通过小份额方式向其中加入盐酸羟胺粉末(33.40g)，并将该反应混合物在50℃下搅拌30分钟。将冰水(200mL)加入到该反应混合物中，并将该混合物用1M氢氧化钠水溶液中和，用乙酸乙酯(100ml×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，并将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，用***结晶，得到标题化合物(6.71g)浅黄色粉末。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.37(3H,s),5.33(2H,s),5.57(1H,s),7.03-7.19(5H,m),7.73(1H,s)。
C)3-氨基-5-(1-苄基-5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩-2-羧酸甲酯的制备
将上面制备的(2Z)-3-(1-苄基-5-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-氯丙-2-烯腈(5.73g)、甲基硫基乙酸酯(2.95g)、氢化钠(0.80g)和N,N-二甲基甲酰胺(10mL)的混合物在60℃下搅拌2小时。将乙酸乙酯(20mL)和水(10mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，并将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(6.55g)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.33(3H,s),3.65(3H,s),5.23(2H,s),7.04-7.44(6H,m),7.49(1H,s)。
D)3-{[(2S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基羰基]氨基}-5-(1-苄基-5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩-2-羧酸甲酯的制备
向实施例170步骤A制备的(2S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-羧酸盐酸盐(0.62g)的亚硫酰氯(4.93mL)溶液中加入N,N-二甲基甲酰胺(0.038mL)，并将该混合物在室温下搅拌24小时。减压浓缩该反应***，并向残余物中加入实施例178步骤C制备的3-氨基-5-(1-苄基-5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩-2-羧酸甲酯(704mg)和四氢呋喃(7.0mL)。在0℃，向该反应混合物中加入N-乙基-N-(1-甲基乙基)丙-2-胺(0.939mL)，将该混合物在80℃下搅拌1天，并加入水。将该混合物用乙酸乙酯萃取，并将萃取物用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(481mg)橙色无定形固体。
1H-NMR(CDCl3)δ1.43-1.61(4H,m),1.86-1.99(3H,m),2.42(3H,s),2.71-3.18(4H,m),3.47-3.58(1H,m),3.88(3H,s),5.34(2H,s),7.09-7.16(2H,m),7.27-7.38(3H,m),7.75(1H,s),8.18(1H,s),11.35(1H,brs)。
E)2-[(2S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮二盐酸盐的制备
将3-{[(2S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基羰基]氨基}-5-(1-苄基-5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩-2-羧酸甲酯(480mg)、甲醇(15mL)和2M氢氧化钠水溶液(3.1mL)的混合溶剂在60℃下搅拌4小时。在0℃，将该反应混合物用1M盐酸中和，并减压浓缩。向残余物中加入氯化铵(2.2g)、三乙胺(5.74mL)和N,N-二甲基甲酰胺(15mL)，并将该混合物在室温下搅拌5分钟。向该反应***中加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(1.98g)和1-羟基苯并***(1.39g)，并将该混合物在室温下搅拌18小时。将水倒入该反应***中，并将该混合物用乙酸乙酯萃取，用水和盐水洗涤萃取物，用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物，得到(2S)-N-[5-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-氨基甲酰基噻吩-3-基]-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲酰胺的粗品(226mg)黄色固体。向(2S)-N-[5-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-氨基甲酰基噻吩-3-基]-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲酰胺的粗品中加入甲酸(10mL)和20%氢氧化钯-碳(50mg)，并将该混合物在氢气氛围下、在80℃下搅拌3小时。在氢气氛围下，将加入20%氢氧化钯-碳(50mg)和在80℃下搅拌该混合物3小时的操作重复8次(总的反应时间∶27小时，使用的全部氢氧化钯-碳∶450mg)。过滤除去氢氧化钯-碳，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷和甲醇/乙酸乙酯)，得到浅黄色固体。将获得的浅黄色固体用高效液相色谱纯化{柱∶L-柱2ODS(20mmi.d.×50mm L)，流动相∶0.1%三氟乙酸水溶液/0.1%三氟乙酸-乙腈溶液}，并将目标级分减压浓缩。向残余物(91mg)中加入乙醇(1.0mL)和2M氢氧化钠水溶液(0.38mL)，并将该混合物在70℃下搅拌30分钟。减压浓缩该反应混合物，并将残余物用碱性硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷和甲醇/乙酸乙酯)，得到白色固体。向获得的固体中加入甲醇(2mL)和4M盐酸/乙酸乙酯溶液(2mL)，并将该混合物在室温下搅拌30分钟。过滤收集沉淀，得到标题化合物(57mg)白色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.73-1.92(4H,m),2.09-2.29(2H,m),2.37-2.47(4H,m),3.23-3.39(2H,m),3.44-3.56(1H,m),3.61-3.76(1H,m),4.70-4.81(1H,m),7.44(1H,s),8.10(1H,brs),9.99(1H,brs),12.72(1H,brs)。
MS(ESI+):[M+H]+342。
MS(ESI+)，实测值：342。
实施例179
2-(1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)-6-[5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
A)4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3-(三氟甲基)-1-三苯甲基-1H-吡唑的制备
将4-溴-3-(三氟甲基)-1-三苯甲基-1H-吡唑(3.45g)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(5.75g)、乙酸钾(3.70g)和N,N-二甲基甲酰胺(30mL)放在烧瓶中，并用氩气吹扫烧瓶中的空气。加入[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(621mg)，用氩气再次吹扫烧瓶中的空气，并将该混合物在80℃下搅拌15小时。将乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(30mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/己烷)，并将目标级分减压浓缩，得到标题化合物(3.81g)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.23(12H,s),6.99-7.07(6H,m),7.36-7.46(9H,m),7.60(1H,d,J=0.9Hz)。
B)2-(1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)-6-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
将1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-羧酸盐酸盐(2.57g)、亚硫酰氯(10mL)和N,N-二甲基甲酰胺(100mg)的混合物在室温下搅拌15小时。将该反应混合物减压浓缩，将残余物溶于四氢呋喃(30mL)中，加入实施例1步骤D制备的3-氨基-5-溴噻吩-2-甲酰胺(2.00g)和N-乙基-N-(1-甲基乙基)丙-2-胺(4.74mL)，并将该混合物在60℃下搅拌2小时。将乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(30mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤除去不溶性物质，减压浓缩滤液，并将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到N-(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲酰胺。将上面制备的N-(5-溴-2-氨基甲酰基噻吩-3-基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲酰胺在乙醇(10mL)和8M氢氧化钠水溶液(3mL)中的混合物在80℃下搅拌3小时。在0℃，将该反应混合物用1M盐酸中和，并浓缩。向残余物中加入甲醇(5mL)，滤出不溶性物质，并将滤液用碱性硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/甲醇)，得到标题化合物(430mg)无色固体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.40-1.65(4H,m),1.73-1.94(2H,m),2.24(1H,dd,J=12.9,7.8Hz),2.56-2.74(2H,m),2.83-2.97(1H,m),3.05-3.17(1H,m),3.97(1H，t，J=8.8Hz),7.60(1H,s)。
C)2-(1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)-6-[5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的制备
将上面制备的2-(1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)-6-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(400mg)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3-(三氟甲基)-1-三苯甲基-1H-吡唑(889mg)、碳酸铯(766mg)、1,2-二甲氧基乙烷(10mL)和水(1mL)放在烧瓶中，并用氩气吹扫烧瓶中的空气。加入[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)(48.4mg)，用氩气再次吹扫烧瓶中的空气，并将该混合物在80℃下搅拌15小时。将乙酸乙酯(20mL)和水(10mL)加入到该反应混合物中，并将分离的水层用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用碱性硅胶柱色谱(乙酸乙酯/甲醇)和硅胶柱色谱(乙酸乙酯/甲醇)纯化残余物，并将目标级分减压浓缩，得到2-(1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)-6-[3-(三氟甲基)-1-三苯甲基-1H-吡唑-4-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮无色油。向上面制备的2-(1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)-6-[3-(三氟甲基)-1-三苯甲基-1H-吡唑-4-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮的甲醇(4mL)溶液中加入4M盐酸/乙酸乙酯溶液(4mL)，并将该混合物在60℃下搅拌15小时。将该反应混合物减压浓缩，向残余物中加入乙酸乙酯(10mL)和水(10mL)，并将分离的水层用乙酸乙酯(10mL)洗涤。将获得的水层用饱和碳酸氢钠水溶液碱化，并用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。滤出不溶性物质，并将滤液减压浓缩。用碱性硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯/甲醇)，并将目标级分减压浓缩，得到标题化合物(3.0mg)无色固体。
1H-NMR(CDCl3)δ0.72-2.20(7H,m),2.46-2.64(1H,m),2.74-3.18(3H,m),3.80-3.92(1H,m),7.42-7.48(1H,m),7.92(1H,s)。
实施例1-179所描述的化合物的结构式示于下列中。
[表1-1]
Figure BDA00002264979902421
Figure BDA00002264979902431
[表1-2]
Figure BDA00002264979902441
[表1-3]
Figure BDA00002264979902451
[表1-4]
Figure BDA00002264979902462
Figure BDA00002264979902471
[表1-5]
Figure BDA00002264979902472
Figure BDA00002264979902481
[表1-6]
Figure BDA00002264979902482
Figure BDA00002264979902491
[表1-7]
Figure BDA00002264979902492
Figure BDA00002264979902501
[表1-8]
Figure BDA00002264979902502
Figure BDA00002264979902511
[表1-9]
Figure BDA00002264979902521
[表1-10]
Figure BDA00002264979902522
[表1-11]
Figure BDA00002264979902532
[表1-12]
Figure BDA00002264979902542
Figure BDA00002264979902551
[表1-13]
Figure BDA00002264979902561
[表1-14]
Figure BDA00002264979902571
(表1-15)
Figure BDA00002264979902581
(表1-16)
Figure BDA00002264979902591
Figure BDA00002264979902601
(表1-17)
Figure BDA00002264979902611
(表1-18)
Figure BDA00002264979902612
Figure BDA00002264979902621
(表1-19)
Figure BDA00002264979902622
(表1-20)
Figure BDA00002264979902632
Figure BDA00002264979902641
(表1-21)
Figure BDA00002264979902642
Figure BDA00002264979902651
(表1-22)
Figure BDA00002264979902652
Figure BDA00002264979902661
(表1-23)
Figure BDA00002264979902662
Figure BDA00002264979902671
实验实施例1∶制备人由来的MCM2蛋白
如下所述的基因工程方法按照书(Maniatis等人，Molecular Cloning，ColdSpring Harbor Laboratory，1989)中所描述的方法或试剂所附方案中所描述的方法。
将N端His标记的重组体人MCM2蛋白(相当于从N端开始的第10-第294氨基酸)克隆到大肠杆菌表达载体pET-21中。通过将下列6×His标记合成DNA***到pET-21a(+)(Novagen)的Nde I-Not I位点中来制备载体pET21-HH
5’-TATGCATCATCATCATCATCACGGATCCCATCATCATCATCATCACTGAGC-3’(SEQ ID NO:1)；和
5’-GGCCGCTCAGTGATGATGATGATGATGGGATCCGTGATGATGATGATGATGCA-3’(SEQ ID NO:2)
使用下列合成DNA(参考GenBank登记号∶NM_004526所描述的碱基序列来制备)作为引物组、且人睾丸cDNA库(TAKARA BIO INC.)作为模板，通过PCR来克隆编码第10-第294氨基酸(从人MCM2蛋白的N端侧开始)的Mcm2(10-294a.a.)基因。
5’-CGCGGATCCATGGCATCCAGCCCGGCCCA-3’(SEQ ID NO:3)；和
5’-ATTCTTATGCGGCCGCTCACAGCTCCTCCACCAGAGGCA-3’(SEQID NO:4)
按照Pyrobest(TAKARA BIO INC.)所附的方案，进行PCR反应。
用限制酶BamHI和NotI消化所获得的883bp片段(***到pET21-HH的BamHI-NotI位点中)，并证实***的碱基序列得到pET21-HHhMcm2(10-294)质粒。将pET21-HHhMcm2(10-294)质粒引入到大肠杆菌BL21(DE3)细胞系(American Type Culture Collection)中。
将引入上述质粒的大肠杆菌细胞在含有50mg/L氨苄西林的LB培养基(1%胰化蛋白胨(tripton)，0.5%酵母抽提物，0.5%氯化钠)中培养，并通过加入1mM IPTG来诱导MCM2表达6小时。离心(6000rpm，10min)回收表达MCM2的大肠杆菌细胞，用磷酸缓冲盐水洗涤，并在-80℃低温保存。将上述低温保存的大肠杆菌细胞在冰上解冻，并悬浮在加入缓冲剂A(25mM tris-盐酸盐(pH7.4)，2.7mM氯化钾，137mM氯化钠)的Complete EDTA中。用1mg/mL溶菌酶将上述悬浮的大肠杆菌细胞溶解，并在Insonator201M(Kubota)(170W，30秒)中超声处理4次，同时用冰水冷却。将该提取物在15000rpm、在4℃下超速离心20分钟，并使获得的上清液通过0.22μm过滤器，得到不含大肠杆菌细胞的细胞提取物。使不含大肠杆菌细胞的细胞提取物通过镍-NTA超流树脂，并将得到的树脂用缓冲剂A洗涤，用缓冲剂B(25mM tris-盐酸盐(pH7.4)，2.7mM氯化钾，137mM氯化钠，10%甘油，200mM咪唑)洗脱。使用Amicon Ultra 4(5K MWCO，Millipore，MA，U.S.A.)浓缩洗脱液，使用用缓冲剂C(25mM tris-盐酸盐(pH7.4)，2.7mM氯化钾，137mM氯化钠，10%甘油，200mM咪唑)平衡的HiLoad 16/60Superdex 200pg(GE healthcare，Chalfont St.Giles UK)通过凝胶过滤进行纯化。将含有MCM2蛋白的级分浓缩为纯样品，并在-80℃下低温保存。
实验实施例2∶测定Cdc7激酶抑制活性
从Carna Biosciences(Kobe)购买与全长Dbf4共同表达的全长Cdc7。利用均匀时间分辨荧光方法Transcreener ADP试验(Cisbio Inc.,MA，U.S.A.)检测Cdc7/Dbf4复合物的酶活性。在补充有1.0μm ATP和10μg/ml MCM2(在实验实施例1中制备)0.1μg/ml的激酶缓冲剂(20mM HEPES pH7.5，10mM乙酸镁，1mM二硫苏糖醇)中进行酶反应。通过Eu3+-穴状化合物-标记的抗ADP单克隆抗体(与d2-标记的ADP竞争)，检测ATP水解产生的游离ADP，并且测定其产生量。通过EnVision(Perkin Elmer Inc.,MA，U.S.A.)测定所获得的时间分辨荧光共振能量转移信号。用下式计算试验化合物对Cdc7的抑制率(%)。
抑制率(%)=(1-(试验化合物的计数-空白)÷(对照-空白))×100
在不含化合物条件下的Cdc7/Dbf4反应混合物的计数作为对照，在不含化合物和不含Cdc7/Dbf4条件下的计数作为空白。
本发明化合物的Cdc7激酶抑制率示于表2中。
表2
  试验化合物   在1μM下的抑制率(%)
  实施例1   97.0
  实施例2   93.8
  实施例4   102.5
  实施例11   103.0
  实施例23   98.4
  实施例37   102.6
  实施例71   108.7
  实施例72   102.2
  实施例75   107.4
  实施例76   105.8
  实施例77   107.6
  实施例78   86.2
  实施例79   93.3
  实施例82   104.7
  实施例83   125.5
  实施例85   103.2
  实施例87   106.8
  实施例88   100.8
  实施例91   105.6
  实施例92   108.0
  实施例101   96.2
  实施例102   95.9
  实施例103   96.7
  实施例108   103.4
  实施例110   100
  实施例112   105
  实施例113   124
  实施例116   102
  实施例123   97
  实施例129   108
  实施例133   107
  实施例135   111
  实施例136   91
  实施例137   97
  实施例139   106
  实施例140   100
  实施例143   122
  实施例145   126
  实施例146   108
  实施例148   102
  实施例157   92
  实施例160   104
  实施例161   102
  实施例162   104
  实施例164   101
  实施例165   105
  实施例170   95
  实施例172   102
  实施例174   104
  实施例175   105
实验实施例表明，本发明的化合物具有优良的Cdc7抑制活性。
实验实施例3∶测定对人结肠直肠癌细胞Colo205的生长抑制活性
本发明化合物对结肠直肠癌细胞Colo205的生长抑制可以测定如下。
将人结肠直肠癌细胞Colo205(购买于ATCC)(3,000个细胞/孔)的细胞悬液(100μl)铺板在96孔板中，并在5%二氧化碳气体培养箱中、在37℃下培养1天。加入100μl各试验化合物溶液(各自为2μM)，并将该细胞培养3天。将CellTiter-GloTM发光法细胞活力检测试剂(50μl，Promega)加入到96孔板中，用光度计测定发光水平，并将残留的ATP量作为细胞数量。不含铺板的细胞的孔的发光水平作为空白。用下式计算试验化合物的细胞增殖抑制率(%)。
抑制率(%)=(1-(试验化合物的发光水平-空白)÷(对照组的发光水平-空白))×100
每个试验化合物的抑制率示于表3中。
表3
  试验化合物   在1μM下的抑制率(%)
  实施例2   44.1
  实施例37   75.3
  实施例83   76.6
  实施例91   71.7
  实施例116   60.5
  实施例145   78.5
  实施例160   73.3
  实施例161   78.6
  实施例170   69.7
实验实施例表明，本发明的化合物具有优良的癌(结肠直肠癌)细胞增殖抑制作用。
实验实施例4∶测定人结肠直肠癌细胞Colo205中的MCM2磷酸化抑制活性
本发明化合物在人结肠直肠癌细胞Colo205中的MCM2磷酸化抑制作用可以测定如下。
将人结肠直肠癌细胞Colo205(购买于ATCC)(50,000个细胞/孔)的细胞悬液(500μl)铺板在24孔板中，并在5%二氧化碳气体培养箱中、在37℃下培养1天。加入500μl各试验化合物溶液(各自为2μM)，并将该细胞培养8小时。将板用PBS洗涤，将细胞溶解在Laemmli样品缓冲剂(BioRad)中，并在95℃下处理细胞溶胞产物5分钟。然后，进行SDS-PAGE，并使用iBlotTM凝胶转移***(Invitrogen)，将蛋白转移到PVDF膜上。将膜用StartingBlockT20(PBS)封闭缓冲剂(Thermo Scientific)进行封闭，并使其与抗磷酸化的MCM2(Ser40/Ser41)(Bethyl Laboratories，A300-788A)(用Can Get信号免疫反应增强溶液1(TOYOBO)稀释1000倍)反应。用含有0.05%Tween 20(Bio-Rad)的tris-缓冲盐水(BioRad)洗涤膜，并使其在室温下与HRP标记的兔IgG多克隆抗体(Amersham Biosciences，NA9340)(用Can Get信号免疫反应增强溶液2(TOYOBO)稀释10000倍)反应1小时。利用和上面一样的方法洗涤该膜，使用SuperSignal West FemtoMaximum Sensitivity Substrate(PierceBiotechnology)，用lumino图像分析器LAS-1000(Fuji Film)来检测抗体标记的磷酸化的MCM2蛋白的化学发光。
使用抗MCM2抗体(Santa Cruzu Biotechnology，sc-9839)和HRP标记的山羊IgG多克隆抗体(Santa Cruzu Biotechnology，sc-2020)，并且利用和上面一样的方法，测定MCM2蛋白。
用下式计算每个样品的磷酸化的MCM2比活性。
磷酸化的MCM2比活性=(磷酸化的MCM2发光水平-背景)÷(MCM2发光水平-背景)
用下式计算试验化合物的磷酸化的MCM2蛋白抑制率(%)，并示于表中。
抑制率(%)=(1-试验化合物的磷酸化的MCM2比活性÷对照组的磷酸化的MCM2比活性)×100
每个试验化合物的抑制率示于表4中。
[表4]
  试验化合物   在1μM下的抑制率(%)
  实施例2   90.4
  实施例37   98.4
  实施例83   97.6
  实施例91   98.4
  实施例116   98.7
  实施例145   95.8
  实施例160   95.0
  实施例161   96.2
  实施例170   97.3
实验实施例表明，本发明的化合物在癌(结肠直肠癌)细胞中具有优良的MCM2磷酸化抑制作用，即，本发明的化合物在癌(结肠直肠癌)细胞中具有优良的Cdc7抑制作用。
实验实施例5∶在携带人结肠直肠癌细胞Colo205的小鼠中测定肿瘤中的MCM2磷酸化抑制活性
在携带人结肠直肠癌细胞Colo205的小鼠中，可以如下测定本发明化合物在肿瘤中的MCM2磷酸化抑制活性。
将人结肠直肠癌细胞Colo205悬浮在50%Matrigel溶液中，并通过皮下注射以5.0×106个细胞将其移植到6至7周大的雌性BALB/c小鼠(CLEAJapan，Inc.)中。测定移植7至14天的肿瘤的直径，并将通过下式计算肿瘤体积。
肿瘤体积=长直径×短直径×短直径×(1/2)
口服给予具有150-600mm3肿瘤体积的小鼠试验化合物的悬浮液(在0.5%甲基纤维素溶液(Wako Pure Chemical Industries，Ltd.)中)，剂量示于表中。给予试验化合物4小时之后，在***麻醉下，移除肿瘤，并在细胞溶解缓冲剂(Cell Signaling)中均化。使用BCA蛋白试验试剂盒(Thermo Scientific)，定量肿瘤溶胞产物中的蛋白，并调节蛋白量。在95℃，用Laemmli样品缓冲剂(BioRad)处理上述蛋白溶液5分钟。
然后，进行SDS-PAGE，并使用iBlotTM凝胶转移***(Invitrogen)，将蛋白转移到PVDF膜上。将膜用StartingBlock T20(PBS)封闭缓冲剂(ThermoScientific)进行封闭，并使其与抗磷酸化的MCM2(Ser40/Ser41)(BethylLaboratories，A300-788A)(用Can Get信号免疫反应增强剂溶液1(TOYOBO)稀释1000倍)反应。用含有0.05%Tween 20(Bio-Rad)的tris-缓冲盐水(BioRad)洗涤膜，并使其在室温下与HRP标记的兔IgG多克隆抗体(AmershamBiosciences，NA9340)(用Can Get信号免疫反应增强溶液2(TOYOBO)稀释10000倍)反应1小时。利用和上面一样的方法洗涤该膜，使用SuperSignalWest FemtoMaximum Sensitivity Substrate(Pierce Biotechnology)，用lumino图像分析器LAS-1000(Fuji Film)来检测抗体标记的磷酸化的MCM2蛋白的化学发光。
使用抗MCM2抗体(Santa Cruzu Biotechnology，sc-9839)和HRP标记的山羊IgG多克隆抗体(Santa Cruzu Biotechnology，sc-2020)，并且利用和上面一样的方法，测定MCM2蛋白。
用下式计算每个样品的磷酸化的MCM2比活性。
磷酸化的MCM2比活性=(磷酸化的MCM2发光水平-背景)÷(MCM2发光水平-背景)
用下式计算试验化合物的磷酸化的MCM2蛋白抑制率(%)，并示于表中。
抑制率(%)=(1-试验化合物的磷酸化的MCM2比活性÷对照组的磷酸化的MCM2比活性)×100
每个试验化合物的抑制率示于表5中。
[表5]
  试验化合物   剂量(mg/kg)   抑制率(%)
  实施例83   100   71.8
  实施例145   100   68.9
  实施例161   100   80.9
实验实施例表明，本发明的化合物在携带癌(结肠直肠癌)细胞的小鼠中具有优良的MCM2磷酸化抑制作用，而且本发明的化合物在携带癌(结肠直肠癌)细胞的小鼠中具有优良的Cdc7抑制作用。
实验实施例6∶在携带人结肠直肠癌细胞Colo205的小鼠中测定抗肿瘤活性
本发明化合物对携带人结肠直肠癌细胞Colo205的小鼠的抗肿瘤作用可以测定如下。
将人结肠直肠癌细胞Colo205悬浮在50%Matrigel溶液中，并通过皮下注射以5.0×106个细胞将其移植到6至7周大的雌性BALB/c小鼠(CLEAJapan，Inc.)中。测定移植后7至14天的肿瘤的直径，并将通过下式计算肿瘤体积。
肿瘤体积=长直径×短直径×短直径×(1/2)
选择移植肿瘤体积为大约200mm3的小鼠，每组5个小鼠用于该实验。按照表1的剂量口服给予试验化合物的悬浮液(在0.5%甲基纤维素溶液(Wako Pure Chemical Industries，Ltd.)中)，每天两次，给予14天。在开始给药之前的一天和给药完毕后的第二天测定肿瘤直径，并计算肿瘤体积。
将试验化合物给予组与对照物给予组的肿瘤生长率相比较，表示为T/C(%)，并通过下式计算。
T/C(%)=(给药完毕后的试验化合物给予组的肿瘤体积-给药开始之前一天的试验化合物给予组的肿瘤体积)/(给药完毕后的对照物给予组的肿瘤体积-给药开始之前一天的对照物给予组的肿瘤体积))×100
每个试验化合物的T/C示于表6中。
[表6]
  试验化合物   剂量(mg/kg)   T/C(%)
  实施例83   100   5.7
  实施例145   100   -4.7
  实施例161   100   -3.6
  实施例175   50   40.3
实验实施例表明，本发明的化合物具有优良的抗肿瘤作用。
制剂实施例1
可以按照例如下列配方来制备含有本发明化合物作为活性组分的药物。
1.胶囊剂
(1)实施例1获得的化合物：40mg
(2)乳糖：      70mg
(3)微晶纤维素：9mg
(4)硬脂酸镁：  1mg
1个胶囊剂：    120mg
将(1)、(2)、(3)和1/2的(4)混合，并造粒。向其中加入(4)的余下部分，并将全部量填充在明胶胶囊中。
2.片剂
(1)实施例1获得的化合物：40mg
(2)乳糖：               58mg
(3)玉米淀粉：           18mg
(4)微晶纤维素：         3.5mg
(5)硬脂酸镁：           0.5mg
1个片剂：               120mg
将(1)、(2)、(3)、2/3的(4)和1/2的(5)混合，并造粒。将(4)和(5)的余下部分加入到颗粒中，并将混合物挤压模塑为片剂。
制剂实施例2
将实施例1获得的化合物(50mg)溶于Japanese Pharmacopoeia注射用蒸馏水(50ml)中，并向其中加入Japanese Pharmacopoeia注射用蒸馏水，达到100ml体积。将由此获得的溶液在无菌条件下过滤。获取该溶液(1ml)，在无菌条件下填充在注射用的小瓶中，并冷冻干燥，将该小瓶密封。
工业实用性
由于本发明的化合物具有优良的cdc7抑制作用，所以它用作预防或治疗cdc7相关的疾病(例如，癌等等)的药物。另外，由于本发明的化合物在效果表达、药物动力学、溶解性、与其它药物产品相互作用、安全性和稳定性方面具有优越性，所以，它用作药物。
尽管上面已经详细描述了本发明的一些实施方案，然而，在没有显著地背离本发明的讲述和优点的条件下，本领域普通技术人员可以对具体实施方案进行各种修饰和改变。这种修饰和改变包括在附加权利要求列出的本发明的精神和范围之内。
本申请基于在日本提交的专利申请Nos.2010-031899和2010-131950，将其内容全部结合到本文中。

Claims (20)

1.下式代表的化合物或其盐∶
Figure FDA00002264979800011
其中
X和Y中的一个是硫原子，另一个是CH
R1是任选被卤素原子取代的C1-6烷基，
R2是取代基。
2.按照权利要求1的化合物或其盐，其中
X是硫原子；且
Y是CH。
3.按照权利要求1的化合物或其盐，其中R2是任选具有取代基的烃基、任选具有取代基的杂环基、或任选具有取代基的非芳香杂环-羰基。
4.按照权利要求1的化合物或其盐，其中R2是
(1)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷基：
(a)任选被1至3个选自下列的取代基取代的非芳香杂环基：
(i)卤素原子，
(ii)羟基，
(iii)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷基：
(aa)卤素原子，
(bb)羟基，
(cc)C1-6烷氧基，和
(dd)任选被1至3个C1-6烷基取代的C6-14芳基，
(iv)C1-6烷氧基，
(v)任选被1至3个卤素原子取代的C6-14芳基，
(vi)C6-14芳氧基，
(vii)C1-6烷氧基-羰基，
(viii)C1-6烷基-羰基，
(ix)氰基，
(x)C6-14芳基磺酰基，
(xi)羧基，
(xii)任选被C1-6烷基单或二取代的氨基，
(xiii)任选被氧代基取代的非芳香杂环基，和
(xiv)氧代基，
(b)C1-6烷氧基，
(c)任选被选自下列的取代基单或二取代的氨基：
(i)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷基：
(aa)任选被1至3个C1-6烷氧基取代的C6-14芳基，
(bb)C1-6烷氧基-羰基，
(cc)芳香杂环基，
(dd)任选被芳香杂环基取代的C3-8环烷基，和
(ee)羟基，
(ii)任选被1至3个C7-13芳烷基取代的非芳香杂环基，
(iii)任选被1至3个C1-6烷氧基取代的C6-14芳基，和
(iv)C3-8环烷基，
(d)5-或6-元芳香杂环基，
(e)C6-14芳基，和
(f)任选被氨基取代的C3-8环烷基；
(2)任选被1至3个卤素原子取代的C6-14芳基；
(3)任选被1至3个选自下列的取代基取代的非芳香杂环基：
(a)卤素原子，
(b)任选被1至3个选自下列的取代基取代的C1-6烷基：
(i)羟基，
(ii)C1-6烷氧基-羰基，和
(iii)氨基甲酰基，
(c)C6-14芳氧基，
(d)C1-6烷氧基-羰基，
(e)C1-6烷基-羰基，
(f)任选被C1-6烷基磺酰基取代的C6-14芳基，
(g)任选被1至3个卤素原子取代的C7-13芳烷基，
(h)羟基，
(i)氨基甲酰基，和
(j)非芳香杂环基；
(4)任选被1至3个C6-14芳基取代的C2-6烯基；
(5)5或6元芳香杂环基；
(6)非芳香杂环-羰基；或
(7)任选被氨基取代的C3-8环烷基。
5.按照权利要求1的化合物或其盐，其中R2是
(1)任选被1至3个卤素原子取代的4至6元非芳香杂环-C1-6烷基；
(2)任选被1至3个卤素原子取代的C6-14芳基；或
(3)任选被1至3个选自下列的取代基取代的非芳香杂环基：
(a)卤素原子，和
(b)C1-6烷基。
6.按照权利要求4的化合物或其盐，其中
X是硫原子；
Y是CH；和
R1是C1-6烷基。
7.按照权利要求1的化合物或其盐，其中R1是C1-6烷基。
8.6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-吡咯烷-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶
-4(3H)-酮，或其盐。
9.6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-哌啶-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮，或其盐。
10.2-(7-氮杂双环[2.2.1]庚-1-基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮，或其盐。
11.6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[(2S)-1,2,3,6-四氢吡啶-2-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮，或其盐。
12.2-[(2S)-哌啶-2-基]-6-[5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮，或其盐。
13.2-[(2S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基]-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并
[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮，或其盐。
14.包含按照权利要求1的化合物或其盐的药物。
15.按照权利要求14的药物，其是细胞***周期7抑制剂。
16.按照权利要求14的药物，其是预防或治疗癌症的药物。
17.在哺乳动物中抑制细胞***周期7的方法，该方法包括：给予哺乳动物有效量的按照权利要求1的化合物或其盐。
18.预防或治疗哺乳动物的癌症的方法，该方法包括：给予哺乳动物有效量的按照权利要求1的化合物或其盐。
19.按照权利要求1的化合物或其盐用于制备细胞***周期7抑制剂的用途。
20.按照权利要求1的化合物或其盐用于制备预防或治疗癌症的药物的用途。
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