BRPI0613633A2 - composto, composição farmacêutica, e, uso de um composto - Google Patents

Abstract

COMPOSTO, COMPOSIçãO FARMACêUTICA, E, USO DE UM COMPOSTO A presente invenção refere-se a compostos macrocíclicos da fórmula (1), que são úteis como inibidores de protease NS3 do vírus de hepatite C (HCV), a sua síntese, e o seu uso para o tratamento ou a prevenção de infecções por HCV.

Description

"COMPOSTO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, Ε, USO DE UMCOMPOSTO"

A presente invenção refere-se a compostos macrocíclicos, quesão úteis como inibidores de protease NS3 do vírus de hepatite C (HCV), asua síntese e o seu uso para o tratamento ou prevenção de infecção por HCV.

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

A infecção pelo vírus da hepatite C (HCV) é um problemaprincipal, que conduz à doença do fígado crônica, tal que a cirrose e ocarcinoma hepatocelular, em um número substancial de indivíduos infectados,estimados como sendo de 2- 15% da população mundial. Eles são estimadosem 3, 9 milhões de pessoas infectadas apenas nos Estados Unidos, de acordocom o centro U.S para o Controle da doença, a grosso modo cinco vezes onúmero de pessoas infectadas com o vírus da imunodeficiência humana(HIV). De acordo com a Organização Mundial da Saúde, existem mais do que170 milhões de indivíduos infectados sendo que 3 a 4 milhões são infectadosa cada ano. Uma vez infectados, cerca de 20% das pessoas eliminam o vírus,mas o resto hospedam o HCV pelo resto de suas vidas. Dez a vinte por centode indivíduos infectados, de modo crônico, desenvolvem eventualmente acirrose destrutiva do fígado ou o câncer. A doença viral é transmitidaparenteralmente através do sangue e dos produtos sangüíneos contaminados,agulhas contaminadas ou sexualmente e verticalmente a partir de mãesinfectadas ou mães que o veiculam à sua prole.

Tratamentos correntes para a infecção por HCV, que estãorestritos à imunoterapia com interferon -a isoladamente, ou em combinaçãocom o nucleosídeo análogo ribavirina, são de benefício limitado. Além disso,não existe vacina estabelecida para o HCV. Em conseqüência existe umanecessidade urgente quanto a agentes terapêuticos aperfeiçoados, quecombatem, de modo efetivo, a infecção por HCV crônica. O estado correnteda arte no tratamento de infecção por HCV foi discutido nas referências quese seguem: Β. Dymock, et al., "Novel approaches to the treatement ofHepatitis C virus infection" Antiviral Chemistry & Chemotherapy", 11:79-96(2000); H. Rosen, et al. "Hepatitis C virus: current understanding andprospects for future therapies", Molecular Medicine Today, 5: 393-399(1999); D. Moradppour, et al., "Current and evolving therapies for hepatitiesC", European J. Gastroenterol. Hepatol., 11:1189 -1202 (1999); R.Bartenshlager, "Candidate Targets for Hepatitis C Virus- Specific AntiviralTherapy ", Intervirology, 40: 378 -303 (1997); G. M. Lauer and B. D.Walker, "Hepatitis C Virus Infection", N. Engl. J. Med., 345: 41-52 (2001);B.W. Dymock, "Emerging therapies for hepatitis C virus Infection""Emerging Drugs, 6: 13- 42 (2001); e C. Crabb, "Hard-Won Advances SparkExcitement about Hepatitis C", Science: 506 - 507 (2001).

Várias enzimas codificadas viralmente são agentes putativospara a intervenção terapêutica, incluindo uma metaloprotease (NS2- 3), umaserina protease (NS3), uma helicase (NS3), e uma RNA polimerase (NS5B).A NS3 protease está localizada no domínio N- terminal da proteína NS3, e éconsiderada uma um alvo de droga principal, pois ela é responsável pelaclivagem intramolecular no sítio NS3/4 e pelo processamento intermoleculara jusante nas junções NS4A/ 4B, NSB/ 5A e NS5A/ 5B. A pesquisa préviaindicou classes de peptídeos, tais que hexapeptídeos, assim como tripeptídeosdiscutidos nos pedidos de patente US 2005/ 0020503, US2004/ 0229818 e US2004/ 00229776, demonstrando graus de atividade na inibição da NS3protease. O escopo da presente invenção é o de prover compostos adicionais,que exibem atividade contra a Protease NS3 de HCV.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

A presente invenção refere-se a compostos macrocíclicos dafórmula (I) e/ ou a sais farmaceuticamente aceitáveis ou hidratos dos mesmos.Estes compostos são úteis na inibição de HCV (vírus da hepatite C) NS3protease (não- estrutural), para a prevenção ou o tratamento de um ou maissintomas de infecção por HCV, seja como compostos ou como seus sais ouhidratos farmaceuticamente aceitáveis (quando apropriado), ou comoingredientes da composição farmacêutica, estando ou não em combinaçãocom outras substâncias antivirais, antiinfectivas, imunomoduladores,antibióticos ou vacinas de HCV. De modo mais particular, a presenteinvenção refere-se a um composto da fórmula (I) e/ ou a um salfarmaceuticamente aceitável ou a um hidrato do mesmo.

em que:

ρ e q são ambos 1:

R1 é CONRioSO2R6;

R2 é alquila Ci_6 ou alquenila C2-6, em que o referido alquila oualquenila é opcionalmente substituído por 1 a 3 halo;

R3 é alquila Ci.8 ou cicloalquila C3-C8;

R5 éH;

R6 é cicloalquila C3.6;

Y é C(=0);

Zé O;

M é alquileno CM2 ou alquenileno C2_i2; ecada R10 é independentemente H ou alquila CrC6.

A presente invenção também inclui composiçõesfarmacêuticas contendo um composto da presente invenção e métodos para apreparação de tais composições farmacêuticas. A presente invenção incluiainda métodos para a tratamento ou a prevenção de um ou mais sintomas deinfecção por HCV.

Outras modalidades, aspectos e características da presenteinvenção são adicionalmente descritos ou serão evidentes a partir da descriçãoque se segue, exemplos, e reivindicações apensas.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

A presente invenção inclui compostos da fórmula I acima, esais farmaceuticamente aceitáveis ou hidratos dos mesmos. Estes compostos eos seus sais farmaceuticamente aceitáveis e/ ou hidratos são inibidores deHCV protease (por exemplo, inibidores de Protease NS3 de HCV). A presenteinvenção também inclui compostos das fórmulas Il-a e ΙΙΙ-a, em que todas asvariáveis são como definidas para a fórmula I.

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Uma primeira modalidade da presente invenção consiste emum composto da fórmula I, ΙΙ-a ou ΙΙΙ-a, ou um sal farmaceuticamenteaceitável ou hidrato do mesmo, em que R1 é CONHSO2R6, e todas as outrasvariáveis são como originalmente definidas (isto é, como definidas noSumário da Invenção). Em um primeiro aspecto da primeira modalidade, R1 éCONHSO2R6, em que R6 é cicloalquila C3-C5; e todas as outras variáveis sãocomo definidas na primeira modalidade. Em uma característica do primeiroaspecto da primeira modalidade, R1 é CONHSO2R6, em que R6 é ciclopropila;e todas as outras variáveis são como definidas na primeira modalidade.

Uma segunda modalidade da presente invenção consiste emum composto das fórmulas I, ΙΙ-a ou ΙΙΙ-a, ou um sal farmaceuticamenteaceitável ou hidrato dos mesmos, em que R2 é alquila Ci.6 ou alquenila C2^ etodas as outra variáveis são como originalmente definidas ou definidas emqualquer uma das modalidades precedentes. Em um primeiro aspecto dasegunda modalidade, R2 é alquila CrC4 ou alquenila C2.4; e todas as outrasvariáveis são como originalmente definidas ou como definidas em qualqueruma das reivindicações precedentes. Em um segundo aspecto da segundamodalidade, R2 é alquenila C2.4; e todas as outras variáveis são comooriginalmente definidas ou como definidas em qualquer uma das modalidadesprecedentes. Em uma característica do segundo aspecto da segundamodalidade, R2 é vinila; e todas as outras variáveis são como definidas naterceira modalidade ou como definidas em qualquer uma das modalidadesprecedentes. Em um terceiro aspecto da Segunda modalidade, R2 é alquila Ci.4; e todas as outras variáveis são como originalmente definidas ou comodefinidas em qualquer uma das modalidades precedentes. Em umacaracterística do terceiro aspecto da terceira modalidade, R2 é etila; e todas asoutras variáveis são como definidas na terceira modalidade ou como definidasem qualquer uma das modalidades precedentes.

Uma terceira modalidade da presente invenção consiste em umcomposto da fórmula I, ΙΙ-a ou III- a, ou um sal farmaceuticamente aceitávelou hidrato do mesmo, em que R3 é cicloalquila C3-B ou alquila Ci_8; e todas asoutras variáveis são como originalmente definidas ou como definidas emqualquer uma das modalidades precedentes. Em um primeiro aspecto daterceira modalidade, R3 é cicloalquila C3.7 ou alquila Ci.8; e todas as outravariáveis são como definidas na terceira modalidade ou como definidas emqualquer uma das modalidades precedentes. Em um segundo aspecto daterceira modalidade, R3 é cicloalquila C5-C6 ou alquila CrC8; e todas asoutras variáveis são como definidas

Na terceira modalidade ou como definidas em qualquer umadas reivindicações precedentes. Em um terceiro aspecto da terceiramodalidade, R3 é propila ou butila; e todas as outras variáveis são comodefinidas na terceira modalidade ou como definidas em qualquer uma dasreivindicações precedentes. Em uma característica do terceiro aspecto daterceira modalidade, R3 é i- propila, n- butila ou t- butila; e todas as outrasvariáveis são como definidas na terceira modalidade ou como definidas emqualquer uma das reivindicações precedentes. Em uma característica doterceiro aspecto da terceira modalidade, R3 é i- propila, n-butila ou t-butila; etodas as outras variáveis são como definidas na terceira modalidade ou comodefinidas em qualquer uma das modalidade precedentes. Em um quartoaspecto da terceira modalidade, R3 é ciclopentila ou cicloexila; e todas asoutra variáveis são como definidas na terceira modalidade ou como definidasem qualquer uma das modalidades precedentes.

Uma quarta modalidade da presente invenção consiste em umcomposto da fórmula I, II- a ou ΙΙΙ-a, ou um sal farmaceuticamente aceitávelou hidrato do mesmo, em que M é alquileno Cmo ou alquenileno C2.io(incluindo alquileno ou alquenileno de cadeia linear ou ramificada); e todas asoutras variáveis são como originalmente definidas ou como definidas emqualquer uma das reivindicações precedentes. Em um primeiro aspecto daquarta modalidade, M é alquileno Ck8 ou alquenileno C2-g (que incluialquileno ou alquenileno de cadeia linear ou ramificada); e todas as outrasvariáveis são como definidas originalmente ou como definidas em qualqueruma das modalidades precedentes. Em um segundo aspecto da quartamodalidade, M é alquileno C4 ou alquenileno C4 (que inclui alquileno oualquenileno de cadeia linear ou ramificada); e todas as outras variáveis sãocomo definidas na Quarta modalidade ou como definidas em qualquer umadas modalidades precedentes. Em um terceiro aspecto da quarta modalidade,M é alquileno C5 ou alquenileno C5 (que inclui alquileno ou alquenilenolinear ou ramificado);e todas as outras variáveis são como definidas na quartamodalidade ou como definidas em qualquer uma das modalidadesprecedentes. Em um quarto aspecto da quarta modalidade, M é alquileno C6ou alquenileno C6 (que inclui alquileno ou alquenileno linear ou ramificado) etodas as outras variáveis são como definidas na quarta modalidade ou comodefinidas em qualquer uma das modalidades precedentes. Em um quintoaspecto da quarta modalidade, M é alquileno C7 ou alquenileno C7 (que incluiuma cadeia alquileno ou alquenileno linear ou ramificada); e todas as outrasvariáveis são como definidas na quarta modalidade ou como definidas emqualquer uma das modalidades precedentes. Em um sexto aspecto da quartamodalidade, M é alquileno C8 ou alquenileno C8 (que inclui alquileno oualquenileno linear ou ramificado); e todas as outras variáveis são comodefinidas na quarta modalidade ou como definidas em qualquer uma dasreivindicações precedentes. Em um sétimo aspecto da quarta modalidade, M éalquileno C9 ou alquenileno C9 (que inclui alquileno ou alquenileno de cadeiareta ou ramificada); e todas as outras variáveis são como definidas na quartamodalidade ou como definidas em qualquer uma das modalidadesprecedentes. Em um oitavo aspecto da quarta modalidade, M é alquileno Ci0ou alquenileno Ci0 (que inclui alquileno ou alquenileno linear ou ramificado);e todas as ouras variáveis são como definidas na quarta modalidade ou comodefinido em qualquer uma das modalidades precedentes. Em um nono aspectoda quarta modalidade, M é selecionado a partir de um dos seguintes: e todasas outras variáveis são como definidas na quarta modalidade ou comodefinidas em qualquer uma das modalidades precedentes.<formula>formula see original document page 9</formula>

Uma quinta modalidade da presente invenção consiste em umcomposto, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou hidrato do mesmo,selecionado a partir do grupo que consiste dos compostos que se seguem:

<formula>formula see original document page 9</formula><formula>formula see original document page 10</formula><formula>formula see original document page 11</formula><formula>formula see original document page 12</formula><formula>formula see original document page 13</formula><formula>formula see original document page 14</formula>

Outras modalidades da presente invenção incluem o seguinte:

(a) Uma composição farmacêutica, que compreende umaquantidade eficaz de um composto da fórmula I, II- a, ou III- a e um veículofarmaceuticamente aceitável.

(b) A composição farmacêutica de (a), que compreende aindaum segundo agente terapêutico selecionado a partir do grupo, que consiste deum agente antiviral de HCV, um imunomodulador, e um agente antiinfectivo.(c) A composição farmacêutica de (b), em que o agenteantiviral HCV é um agente antiviral selecionado a partir do grupo, queconsiste de um inibidor de protease de HCV e de um inibidor de PolimeraseNS5B de HCV.

(d) Uma composição farmacêutica, que consiste em (i) umcomposto da fórmula I, II- a, ou III- a e (ii) um segundo agente terapêuticoselecionado a partir do grupo, que consiste de um agente antiviral de HCV,um imunomodulador, um agente antiinfectivo, em que o composto dasfórmulas I, II - a ou ΙΙΙ-a e o segundo agente terapêutico são, cada qual,empregados em uma quantidade que torna a combinação eficaz para inibir aProtease NS3 de HCV, ou para tratar ou prevenir a infecção por HCV.

(e) A combinação de (d), em que o agente antiviral de HCV éum agente antiviral selecionado a partir do grupo, que consiste de um inibidorde protease de HCV e um inibidor de Polimerase NS5B de HCV.

(f) Um método para inibir a Protease NS3 de HCV em umpaciente que esteja em necessidade do mesmo, que compreende administrarao paciente uma quantidade eficaz de um composto da fórmula I, II- a ou III-a.

(g) Um método para prevenir ou tratar a infecção por HCV emum paciente, que esteja em necessidade do mesmo, que compreendeadministrar ao paciente uma quantidade eficaz de um composto I, II- a, IlI-a.

(h) O método de (g), em que o composto das fórmula I, II- aou III- a é administrado em combinação com uma quantidade eficaz de pelomenos um segundo agente terapêutico selecionado a partir do grupo queconsiste de um agente antiviral de HCV, um imunomodulador, e um agenteantiinfectivo.

(i) O método de (h), em que o agente antiviral HCV é umagente antiviral selecionado a partir do grupo, que consiste de um inibidor deprotease de HCV e um inibidor de Polimerase NS5B de HCV.(j) Um método para inibir a HCV NS3 em um paciente queesteja em necessidade do mesmo, que compreende administrar ao paciente acomposição ao paciente a composição farmacêutica de (a), (b), ou (c) ou acombinação de (d) ou (e).

(k) Um método para prevenir ou tratar a infecção por HCV emum paciente, que esteja em necessidade do mesmo, que compreendeadministrar ao paciente a composição farmacêutica de (a), (b) ou (c) ou acombinação de (d) ou (e).

A presente invenção também inclui um composto da presenteinvenção (i) para o uso em, (ii) para o uso como um medicamento para, ou(iii) para o uso na preparação de um medicamento para (a) inibir a ProteaseNS3 de HCV5 ou (b) prevenir ou tratar a infecção por HCV. Nestes usos, oscompostos da presente invenção pode ser empregados, de modo opcional, emcombinação com um ou mais agentes terapêuticos, selecionados a partir deagentes antivirais de HCV, agentes antiinfectivos e imunomoduladores.

Modalidades adicionais da invenção incluem as composiçõesfarmacêuticas, combinações e métodos expostos em (a) - (k) acima e os usosexpostos no parágrafo precedente, em que o composto da presente invençãoempregado nesta é um composto de uma das modalidades, aspectos, classes,subclasses, ou características dos compostos acima descritos. Em todas estasmodalidades, o composto pode ser usado, de modo opcional, sob a forma deum sal farmaceuticamente aceitável ou hidrato, conforme apropriado.

Como aqui usado, o termo "alquila" refere-se a qualquer grupoalquila de cadeia reta ou ramificada tendo um número de átomos de carbonona faixa especificada. Deste modo, por exemplo, "alquila Ci.6" (ou "alquilaCrC6") refere-se a todos os isômeros hexil alquila e pentil alquila, tais que n-,iso-, sec- e t-butila, n- e isopropila, n- e isopropila, etila e metila. Como umoutro exemplo, "alquila Cm" refere-se a n- iso, sec- e t-butila, n- e isopropila,etila e metila.O termo "haloalquila" refere-se a um grupo alquila, em queum hidrogênio foi substituído por um halogênio. O termo "alcóxi" refere-se aum grupo "alquila-O-".

O termo "alquileno" refere-se a um grupo alquileno linear ouramificado tendo um número de átomos de carbono na faixa especificada.Deste modo, por exemplo, "alquileno Ci.6" refere-se a qualquer dosalquilenos C1-6 lineares ou ramificados. Uma classe de alquilenos de interesseparticular com respeito à invenção é - (CH2)i_6-, e subclasses de interesseparticular incluem - (CH2)i-4, - (CH2)i-3-, -(CH2)i-2- e -CH2-. É também deinteresse o alquileno -CH (CH3)-.

O termo "alquenileno" refere-se a qualquer grupo alquenilenodivalente de cadeia reta ou ramificada, tendo um número de átomos decarbono na faixa especificada.

Os termos "cicloalquila" referem-se a qualquer anel cíclico deum alcano ou alqueno tendo um número de átomos de carbono na faixaespecificada. Deste modo, por exemplo, "cicloalquila C3.8" (ou "cicloalquilaC3.8") refere-se a ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, cicloexila, cicloeptilae ciclooctila. O termo "cicloalcóxi" refere-se um grupo "cicloalquila- O".

O termo "halogênio" (ou "halo") refere-se a flúor, cloro,bromo e iodo (alternativamente referido como flúor, cloro, bromo e iodo).

A não ser que expressamente mencionado de modo contrário,todas as faixas aqui citadas são inclusivas. Por exemplo, um anel heteroarila,descrito como contendo de "1 a 3 heteroátomos "significa que o anel podeconter 1, 2, ou 3 heteroátomos. Deve ser também entendido que qualquerfaixa aqui citada inclui dentro de seu escopo todas as subfaixas dentro daquelafaixa. As formas oxidadas dos heteroátomos NeS estão também incluídasdentro do escopo da presente invenção.

Quando qualquer variável (por exemplo, R10) ocorre mais doque uma vez em qualquer constituinte ou nas fórmulas I, II- a ou III-a' ouqualquer outra fórmula que ilustre e descreva os compostos da invenção, a suadefinição em cada ocorrência é independente de sua definição em cada ouraocorrência. Além disso, as combinações de substituintes e/ ou variáveis sãopermissíveis apenas se tais combinações resultarem em compostos estáveis.

A não ser que expressamente mencionado de modo contrário,a substituição por um substituinte citado é permitida em qualquer átomo emum anel (por exemplo, arila, um anel heteroaromático, ou um anelheterocíclico saturado), provido que tal substituição no anel sejaquimicamente permitida e resulte em um composto estável. Um composto"estável" é um composto, que pode ser preparado e isolado, e cuja estrutura epropriedades permanecem ou podem ser causadas permanecer essencialmenteinalteradas durante um período de tempo suficiente para permitir o uso docomposto para os propósitos aqui descritos (por exemplo, administraçãoterapêutica ou profilática a um paciente).

Como um resultado da seleção de substituintes e de padrões desubstituintes, certos dos compostos da presente invenção podem Ter centrosassimétricos e podem ocorrer como misturas de estereoisômeros, ou comodiastereômeros individuais, ou enanciômeros. Todas as formas isoméricasdestes compostos, sejam isoladas ou em misturas, estão dentro do escopo dapresente invenção.

Como será reconhecido por aquele de habilidade ordinária naarte, certos dos compostos da presente invenção podem existir comotautômeros. Para os propósitos da presente invenção, a referência a umcomposto das fórmulas I, II a ou III a é uma referência ao composto per se, oua qualquer um de seus tautômeros per se, ou a misturas de dois ou maistautômeros.

Os compostos da presente invenção são úteis na inibição deHCV protease (por exemplo, Protease NS3 de HCV) e para a prevenção ou otratamento de infecção por HCV. Por exemplo, os compostos desta invençãosão úteis no tratamento de infecção por HCV após haver suspeita de que tenhahavido exposição a HCV, ou através de meios tais que a transfusão de sangue,troca de fluidos corpóreos, mordidas, picada de agulha acidental, ouexposição do sangue do paciente durante a cirurgia.

Os compostos desta invenção são úteis na preparação eexecução de ensaios de varredura para compostos antivirais. Por exemplo, oscompostos desta invenção são úteis para isolar mutantes de enzima, que sãoferramentas de varredura excelentes para compostos antivirais potentes. Alémdisso, os compostos desta invenção são úteis em estabelecer ou determinar osítio de ligação de outros agentes antivirais para a HCV protease, porexemplo, através de inibição competitiva. Deste modo, os compostos destainvenção são produtos comerciais para serem vendidos para tais propósitos.

Os compostos da presente invenção podem ser administradossob a forma de sais farmaceuticamente aceitáveis. O termo "salfarmaceuticamente aceitável "refere-se a um sal que possui a eficácia ocomposto de origem e que não é indesejável a partir de um ponto de vistabiológico ou outro (por exemplo, e nem é tóxico ou de outro modo prejudicialpara aquele que o recebe). Sais adequados incluem os sais de adição de ácidoque podem, por exemplo, ser formados através da mistura de uma solução docomposto da presente invenção com uma solução de um ácidofarmaceuticamente aceitável, tal que o ácido clorídrico, ácido sulfurico, ácidoacético, ácido trifluoroacético, ou benzóico. Muitos dos compostos dainvenção portam uma porção ácida, em cujo caso sais farmaceuticamenteaceitáveis da mesma podem incluir sais de metal alcalino (por exemplo, saisde sódio ou potássio), sais de metal alcalino terroso (por exemplo, sais decálcio ou magnésio) e sais formados com ligantes orgânicos adequados, taisque sais de amônio quaternário. Além disso, no caso de um ácido (-COOH)ou um grupo de álcool estando presente, ésteres farmaceuticamente aceitáveispodem ser empregados para modificar as características de solubilidade ouhidrólise do composto.

O termo "administração "e variantes do mesmo (por exemplo,"administrar" um composto) com referência a um composto da invenção,significa prover o composto ou uma pró-droga do composto a um indivíduoque esteja em necessidade tratamento. Quando um composto da invenção, ouuma pró-droga do mesmo, é provido em combinação com um ou mais outrosagentes ativos (por exemplo, agentes antivirais úteis para o tratamento deinfecção por HCV), "administração" e suas variantes são entendidos, cadaqual, como incluindo a provisão concorrente e seqüencial do composto ou sal(ou hidrato) e de outros agentes.

Como aqui usado, o termo "composição" tem a intenção deabranger um produto, que compreenda os ingredientes especificados, assimcomo qualquer produto que resulte, de modo direto ou indireto, a partir dacombinação dos ingredientes especificados.

Por "farmaceuticamente aceitável "é compreendido que osingredientes da composição farmacêutica precisam ser compatíveis entre si enão ser prejudiciais para aquele que a recebe.

O termo "paciente"(de modo alternativo aqui referido como"paciente"), como aqui usado, refere-se a um animal, de modo preferido a ummamífero, de modo mais preferido a um ser humano, que tenha sido objeto deum tratamento, observação ou experimento.

O termo "quantidade eficaz", como aqui usado, significa aquantidade de composto ativo ou de agente farmacêutico, que produz aresposta biológica ou medicinal em um tecido, sistema, animal ou humano,que está sendo buscado por um pesquisador, veterinário, médico ou outroclínico. Em uma modalidade, a quantidade eficaz é uma "quantidadeterapeuticamente eficaz "para o alívio dos sintomas da doença ou condiçãosendo tratada. Em uma outra modalidade, a quantidade eficaz é uma"quantidade profilaticamente eficaz "para a profilaxia dos sintomas da doençaou condição, que é prevenida. O termo também inclui, neste caso, aquantidade de composto ativo suficiente para inibir a Protease NS3 de HCV e,deste modo, produzir a resposta que está sendo buscada (isto é, uma "inibiçãoda quantidade eficaz"). Quando o composto ativo (isto é, o ingrediente ativo)é administrado como o sal, referência à quantidade de ingrediente ativoreferem-se à forma de ácido livre ou de base livre do composto.

Com o propósito de inibir a Protease NS3 de HCV e prevenirou tratar a infecção por HCV, os compostos da presente invenção, de modoopcional sob a forma de um sal ou um hidrato, podem ser administradosatravés de qualquer meio, que produza o contato do agente ativo com o sítiode ação do agente. Eles podem ser administrados através de qualquer meiodisponível para o uso em conjunção com substâncias farmacêuticas, sejacomo agentes terapêuticos individuais ou em uma combinação de agentesterapêuticos. Eles podem ser administrados isoladamente, mas, de modotípico, eles são administrados em conjunto com um veículo farmacêutico,selecionado com base na via de administração selecionada e da práticafarmacêutica padrão. Os compostos d a invenção podem, por exemplo, seradministrados por via oral, parenteral (incluindo injeções subcutâneas,intravenosas, intramusculares, injeção intraesternal ou técnicas de infusão),através de pulverização por inalação, ou por via retal, sob a forma de umadosagem unitária de uma composição farmacêutica contendo uma quantidadeeficaz do composto e de veículos farmaceuticamente aceitáveis não - tóxicos,adjuvantes e veículos. Preparações líquidas, adequadas para a administraçãooral (por exemplo, suspensões, xaropes, elixires e os similares) podem serpreparados de acordo com técnicas conhecidas na arte e podem empregarqualquer dos meios usuais, tais que água, glicóis, óleos, álcoois e os similares.Preparações sólidas, adequadas para a administração oral (por exemplo, pós,pílulas, cápsulas e comprimidos) podem ser preparados de acordo comtécnicas conhecidas na arte e podem empregar excipientes sólidos, tais queamidos, açúcares, caulim, lubrificantes, aglutinantes, agentes de desintegraçãoe os similares. As composições parenterais podem ser preparadas de acordocom as técnicas conhecidas na arte e podem empregar excipientes sólidos, taisque amidos, açúcares, caulim, lubrificantes, algutinantes, agentes dedesintegração, e os similares. As composições parenterais podem serpreparadas de acordo com técnicas conhecidas na arte e empregam, de modotípico, água estéril como um veículo e, de modo opcional, outros ingredientes,tais que um auxiliar de solubilidade. As soluções injetáveis podem serpreparadas de acordo com métodos conhecidos na arte, em que o veículocompreende uma solução salina, uma solução de glicose, ou uma soluçãocontendo uma mistura de solução salina e de glicose. A descrição adicional emétodos adequados para o uso na preparação de composições farmacêuticasda presente invenção e de ingredientes adequados para o uso nas referidascomposições é provida em Remington's Pharmaceutical Sciences, 18 aEdição, editada por A. R. Gennaro, Mack Publishing Co., 1990.

Os compostos desta invenção podem ser administrados por viaoral em uma faixa de dosagem de 0,001 a 1000 mg/ kg de peso corpóreo domamífero (por exemplo, um ser humano), por dia, em uma dose única ou emdoses divididas. Uma faixa de dosagem preferida é de 0,01 a 500 mg/kg depeso corpóreo por dia, por via oral, em um a dose única ou em dosesdivididas. Para a administração oral, as composições podem ser providas sobη a forma de comprimidos ou de cápsulas, contendo de 1,0 a 300 miligramasdo ingrediente ativo, de modo particular 1,5, 10, 15, 20, 15, 50, 75, 100, 150,200, 150, 300, 400 e 500 miligramas de ingrediente ativo para o ajustesintomático da dosagem ao paciente a ser tratado. O nível de dose específico ea freqüência de dosagem para qualquer paciente particular pode ser variado eirá depender de uma variedade de fatores, incluindo a atividade do compostoespecífico empregado, a estabilidade metabólica e a extensão de ação daquelecomposto, a idade, o peso corpóreo, a saúde em geral, sexo, dieta, modo e tipode administração, taxa de excreção, combinação de droga, a severidade dacondição particular, e a terapia a que o hóspede seja submetido.

Como observado acima, a presente invenção refere-se tambéma um método para a inibição de Protease NS3 de HCV, inibição da replicaçãode HCV, ou prevenção ou tratamento da infecção de HCV com um compostoda presente invenção, em combinação com um ou mais agentes terapêuticos euma composição farmacêutica, que compreenda um composto da presenteinvenção e um ou mais agentes terapêuticos selecionados a partir do grupo,que consiste de um agente antiviral de HCV, um imunomodulador, e umagente antiinfectivo. Tais agentes terapêuticos, efetivos contra HCV, incluem,mas não estão limitados a, ribavirina, levovirina, viramidina, alfa-1 timosina,R 7025 (Um interferon reforçado (Roche)), interferon-β, interferon-a,interferon-a pegilado (peginterferon-α), umas combinação de interferon-α eribavirina, uma combinação de peginterferon- α e ribavirina, uma combinaçãode interferon-α e levovirina, e uma combinação de pegiterferon-α elevovirina. O interferon-α inclui, mas não está limitado a, interferon-a2arecombinante (tal que inferferon Roferon, disponível de Hoffmann -LaRoche, Nutley, NJ), interferon-a2a pegilado (Pegasys™), interferon-a2b(tal que interferon Intron- A disponível de Schering Corp., Kenilworth, NJ),interferon -a2b pegilado (Pegintron™), um interferon de consensorecombinante (tal que interferon alfacon-1), albuferon (interferon-α ligado aalbumina de soro humano) (Human GenomeSciences), e um produto deinterferon-α purificado. O interferon de consenso recombinante de Amgenpossui a marca registrada Infergen®. Levovirina é o L-enanciômero deribavirina, que demonstrou atividade imunomodulatória similar a ribavirina.Viramida representa um análogo de ribavirina exposto na WO 01/ 60379(emitido para ICN Pharmaceuticals). De acordo com o método da presenteinvenção, os compostos individuais da combinação podem ser administradosseparadamente, em diferentes momentos, durante o curso da terapia ouconcorrentemente, em forma de combinação divididas ou únicas.

Para o tratamento de infecção por HCV, os compostos dapresente invenção podem ser também administrados em combinação com umagente, que seja um inibidor de HCV NS3 serina protease. HCV NS3 serinaprotease é uma enzima viral essencial e foi descrita como sendo um excelentealvo para a inibição de replicação de HCV. Tanto inibidores à base desubstrato como à base de não substrato de inibidores de HCV NS3 sãoexpostos na WO 98 / 22496, WO 98/ 46630, WO 99 / 07733, WO 99 / 07734,WO 99/38888, WO 99/50230, WO 99/ 64442, WO 00/ 09543, WO 00/59929, GB- 23372 62, WO / 02/ 48116, WO 02/ 48172, e Patente US N_76.323. 180.

Ribavirina, levovirina, e viramidina podem exercer os seusefeitos anti- HCV através da modulação dos reservatórios intracelulares denucleotídeos guanina, através da inibição da enzima intracelular monofosfatode inosina desidrogenase (IMPDH). A ribavirina é prontamente fosforiladaintracelularmente e o derivado monofosfato é um inibidor de IMPDH. Destemodo, a inibição de IMPDH representa outro alvo útil para a descoberta deinibidores de replicação de HCV. Deste modo, os compostos da presenteinvenção podem ser também administrados em combinação um inibidor deIMPDH, tal que VX- 497, que é exposto na WO 97/41211 e na WO 01/00622 (emitida para Vertex); outro inibidor de IMPDH, tal que aqueleexposto na WO 00/ 25780 (emitida para Bristol- Meyers Squibb); ou mofetilmicofenolato [vide A. C. Allison and Ε. M. Eugui, Agents Action, 44(SuppL): 165 (1993)].

Para o tratamento da infecção por HCV, os compostos dapresente podem ser administrados em combinação com o agente antiviralamantadina (1-aminoadamantano) [para uma descrição abrangente desteagente, vide Kirschbaum, Anal. Profíles Drug Subs., 12: 1-36 (1983)].

Para o tratamento da infecção por infecção de HCV, oscompostos da presente invenção podem ser também administrados com oinibidor de polimerase do agente antiviral R7128 (Roche).

Os compostos da presente invenção podem ser tambémcombinados para o tratamento de infecção por HCV com ribonucleosídeos T-C-ramificados antivirais, expostos em R. E. Harry-0'Kuru, et al., J. Org.Chem., 62: 1754-1759 (1997); M. S. Wolfe, et al., Tetrahedron Lett., 36:7611-7614 (1995); Patente US N0 3. 480.613 (25 de novembro de 1969);Número de Publicação Internacional WO 01/ 90121 (29 de novembro de2001); Número de Publicação Internacional WO 091/ 92282 (6 de dezembrode 2001); e Número de Publicação Internacional WO 02/32920 (25 de abril de2002); e Número de Publicação Internacional WO 04/ 002999 (8 de janeiro de2004); e Número de Publicação Internacional WO 04/ 003000 (8 de janeiro de2004); e Número de Publicação Internacional WO 04/ 002422 (8 de janeiro de2004); cujos conteúdos são incorporados a este, a título referencial, em suatotalidade. Tais ribonucleosídeos 2'-C-ramificados incluem, mas não estãolimitados a, 2'-C-metil-citidina, 2'-C-metil-uridina, 2'-C-metil-adenosina, T-C-metil-guanosina, e 9-(2-C-metil-p-D-ribofuranosil)-2,6-diaminopurina, e oéster de aminoácido correspondente da ribose C-2', C-3', e C-5'- hidroxilas eos ésteres de 1,3-propanodiol cíclicos opcionalmente substituídoscorrespondentes dos derivados de 5'-fosfato.

Os compostos da presente invenção podem ser tambémcombinados para o tratamento de infecção por HCV com outros nucleosídeostendo propriedades anti-HCV, tais que aqueles expostos na WO 02/ 51425 (4de julho de 2002), emitida para Mitsubishi Pharma Corp.; WO 01/ 79246,WO 02/ 32920, WO 02/ 48165 (20 de junho de 2002), e WO 20055003147(13 de janeiro de 2005) incluindo R 1656, (2'R)-2'-deóxi-2'-fluoro-2,-C-metilcitidina, apresentados como compostos 3-6 na página 77) emitida paraPharmasset, Ltd.; WO 01/ 68663 (20 de setembro de 2001) emitida para ICNPharmaceuticals; WO 99/ 43691 (2 de setembro de 1999); WO 02/ 18404 (7de março de 2002), US 2005/ 0038240 (17 de fevereiro de 2005) e WO200602341 (2 de março de 2006), incluindo 4'-azido nucleosídeos, tais que R1626, 4'-azidocitidina, emitida para Hoffinann-LaRoche; U.S. 2002/ 0019363(14 de fevereiro de 2002); WO 02/ 100415 (19 de dezembro de 2002); WO03/ 026589 (3 de abril de 2003); WO 03/ 026675 (3 de abril de 2003); WO03/ 093290 (13 de novembro de 2003); US 2003 / 02356216 (25 de dezembrode 2003); US 2004 /0006007 (8 de janeiro de 2004); WO 04/011478 (5 defevereiro de 2004); WO 04/ 013300 (12 de fevereiro de 2004); US 2004/0063658 (1 de abril de 2004); e WO 04/ 028481 (8 de abril de 2004); cujoconteúdo de cada uma é incorporado a esta, a título referencial, em suatotalidade.

Para o tratamento de infecção por HCV, os compostos dapresente invenção podem ser também administrados em combinação com umagente, que é um inibidor de Polimerase NS5B de HCV. Tais inibidores dePolimerase NS 5B de HCV, que podem ser usados como terapia decombinação, incluem, mas não estão limitados àqueles expostos na WO 02/057287, US 6.777. 395, WO 02/057425, US 2004/ 0067901, WO 03/ 068244,WO 2004/ 000858, WO 04/ 003158 e WO 2004/ 007512; cujo conteúdo decada qual é incorporado a este, a título referencial, em sua totalidade. Outrosinibidores de HCV polimerase incluem, mas não estão limitados a,valopicitabina (NM- 283; Idenix) e T- F- 2'- beta-metilcitidina (vide tambéma WO 2005/ 003147, emitida para Pharmasset, Ltd).

Em uma modalidade, os inibidores do nucleosídeo PolimeraseNS5B de HCV, que são usados em combinação com os presentes inibidoresde Protease NS3 de HCV, são selecionados a partir dos compostos que seseguem:

4-amino-7-(2-C-metil-P-D-arabinofuranosil)-7H- pirrol [2,3-d]pirimidina; 4-amino-7-(2-C-metil-p- D- ribofuranosil) -7H- pirrol[2,3-d]pirimidina; 4- metilamino-7- (2-C-metil-p-D-ribofuranosil)-7H- pirrol[2,3- d]pirimidina; 4-dimetilamino-7-(2-C-metil-P-D-ribofuranosil)-7H-pirrol[2,3-d]pirimidina; 4-ciclopropilamino-7-(2-C-metil-p-ribofuranosil)-7H-pirrol[2,3-d]pirimidina; 4-amino-7-(2-C- νίηίΙ-β-D- ribofuranosil)-7H-pirrol [2,3-d]pirimidina; 4-amino-7-(2-C-fluorometil-p-D- ribofuranosil)-7H- pirrol [2,3-d] pirimidina; 4-amino-5-metil-7-(2-C-metil-p-D-ribofuranosil)-7H-pirrol[2,3-d]pirimidina; ácido 4-amino-7-(2-C-metil-p-D-ribofuranosil)-7H-pirrol[2,3-d]pirimidina-5-carboxílico; 4-amino- 5-bromo- 7 (2-C-metil-p-D-ribofuranosil)-7H-pirrol [2,3-d]pirimidina; 4-amino-5-cloro-7- (2-C-metil-p-D-ribofuranosil)-7H-pirrol[2,3-d]pirimidina; pirimidina; 4-amino-5-fluoro-7-(2-C-metil-p-D-ribofuranosil)-7H-pirrol[2,3-d] pirimidina; 2,4-diamino-7-(2-C-metil- P-D-ribofuranosil)-7H-pirrol [2,3 -d] -pirimidina; 2-amino-7-(2-C-metil-p-D- ribofuranosil)-7H-pirrol[2,3-d]pirimidina; 2-amino-4-ciclopropilamino-7-(2-C-metil-p-D-ribofuranosil)-7H-pirrol[2,3-d]pirimidina;2-amino-7-(2-C-metil-p-d-ribofuranosil)-7H- pirrol[2,3-d]pirimidin-4(3H)-15 ona; 4-amino-7- (2-C-etil-p-D-ribofuranosil)-7H- pirrol[2,3-d] pirimidina; 4-amino-7- (2-C, 2-0-dimetil-P-D-ribofiiranosil)-7H- pirrol[2,3-d] pirimidina;7- (2- C-metil-p-D-ribofuranosil)-7H-pirrol[2,3-d] pirimidin-4(3H)-ona; 2-amino-5-metil-7- (2-C, 2-0-dimetil-p-D-ribofuranosil)-7H-piirol[2,3-d]pirimidin-4-(3H)-ona; 4-amino-7-(3-deóxi-2C-metil-P-D-ribofuranosil)-7H- pirrol [2,3-d]pirimidina; 4-amino-7- (3- deóxi-2-C-metil-p-S-arabinofuranosil)-7H-pirrol[2,3-d] pirimidina; 4-amino-2-fluoro-7- (2-C-metil-P-D-ribofuranosil)-7H- pirrol [2,3-d]pirimidina; 4-amino-7- (3-C-metil-p-D-ribofuranosil)-7H-pirrol[2,3-d]pirimidina; 4-amino-7-(3-C-metil-p-D-xilofuranosil)-7H-pirrol[2,3-d]pirimidina; 4-amino-7- (2,4-di-C-metil-P-D-ribofuranosil)-7H- pirrol[2,3-d] pirimidina; 4-amino-7- (3-deóxi-3-fluoro-2-C-metil-p-D-ribofuranosil)-7H-pirrol[2,3-d] pirimidina; e os 5'-trifosfatoscorrespondentes; ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

Os compostos da presente invenção podem ser tambémcombinados para o tratamento da infecção por HCV com inibidores não-nucleosídeo de HCV polimerase, tais que aqueles expostos na WO 01/ 77091(18 de outubro de 2001), emitida para Tularik, Inc.; WO 01/47883 (5 de julhode 2001), emitida para Japan Tobacco, Inc.; WO 02/ 04425 (17 de janeiro de2002), emitida para Boehringer Ingelheim; WO 02 / 06246 (24 de janeiro de2002), emitida para o Instituto de Richerche di Biologia Moleculare P.Angelettí S. P.A.; WOP 02/ 20497 (3 de março de 2002); WO 2005 / 016927(em particular JTK 003), emitida para Japan Tobacco Inc.; cujo conteúdo decada qual é incorporado a este, a título referencial, em sua totalidade; e HCV-796 (Viropharma Inc.).

Em uma modalidade, os inibidores de Polimerase NS5B deHCV não- nucleosídeo, que são usados em combinação com os presentesinibidores de Protease NS3 de HCV, são selecionados a partir dos compostosque se seguem:

Ácido 14-cicloexil-6-[2-(dimetilamino) etil]-7-oxo-5,6,7,8-tetraidroindol [2,1-a] [2,5] benzodiazocina -11- carboxílico; ácido 14-cicloexil-6- (2-morfolin-4-iletil)-5,6,7,8-tetraidroindol [2,1-a] [2,5]benzodiazocina -11-carboxílico; ácido 14-cicloexil-6-[2-(dimetilamino) etil]-3-metóxi-5,6,7,8-tetraidroindol[2,1 -a] [2,5]benzodiazocina-11 -carboxílico;ácido 14- cicloexil-3-metóxi-6-metil-5,6,7,8-tetraidroindol[2,1 -a] [2,5]benodiazocina-1 l-carboxílico;({ [((14-cicloexil-3-metóxi-6-metil-5,6,7,8-tetraidroindol [2,l-a][2,5] benzodizocin-11-il) carbonil] amino} sulfonil)acetato de metila; ácido ({[(14-cicoexil-3-metóxi-6-metil-5,6,7,8-tetraidroindol[2,1 -a] [2,5] benzodiazocin-11-il) carbonil] amino} sulfonil)acético; 14- cicloexil-N- [(dimetilamino)sulfonil]-3-metóxi-6-metil-5,6,7,8-tetraidroindol[2,1 -a] [2,5] benzodiazocina-11- caqrboxamida; Ácido 3-cloro-14-cicloexil-6-[2-(dimetilamino)etil]-7-oxo-5,6,7,8-tetraidroindol [2,1-a] [2,5]benzodiazocina-11-carboxílico; bis (trifluoroacetato) de N'-(l l-carbóxi-14-cicloexil-7,8-diidro-6H-indol [ 1,2-e] [ 1,5]benzoxazocin-7-il)-N,N-dimetiletano-1,2-diaminio; Ácido 14-cicloexil-7,8- diidro-6H-indol [1,2-e][1,5] benzoxazocina-11-carboxílico; Ácido 14-cicloexil-3-metóxi-6-metil-7-oxo-5,6,7,8- tetraidroindol [2,l-a][2,5] benzodiazocina-11-carboxílico; Ácido14-cicloexil-6-[2-(dimetilamino) etil]-3-metóxi-7-oxo-5, 6,7,8-tetraidroindol[2,1-a] [2,5- benzodiazocina-11-carboxílico; Ácido 14-cicloexil-6- [3-(dimetilamino) propil-7-oxo-5,6,7,8-tetraidroindol [2,1-a] [2,5]benzodiazocina-11-carboxílico; Ácido 14-cicloexil—7-oxo-6-(2-piperidin-l-iletil) -5,6,7,8- tetraidroindol [2,1-a] [2,5] benzodiazocina-11-carboxílico;

Ácido 14-cicloexil-67-(2-morfolin-4-iletil)-7-oxo-5, 6, 7,8-tetraidroindol [2,1-a] [2,5] benzodiazocina-11-carboxílico; Ácido 14-cicloexil-6-[2-(dietilamino)etil]-7-oxo-5,6,7,8-tetraidroindol[2,l-a] [2,5] benzodiazocina-11-carboxílico;

Ácido 14-cicloexil-6- (l-metilpiperidin-4-il)-7-oxo-5,6,7,8-tetraidroindol[2,l-a][2,5]benzodiazocina-l 1- carboxílico; 14-cicloexil-N-[(dimetilamino) sulfonil]-7-oxo- 6- (2- piperidin- l-iletil)-5,6,7,8-tetraidroindol[2,1 -a] [2,5], benzodiazocina-11-carboxamida; 14-cicloexil-6-[2-(dimetilamino) etil]-N- [(dimetilamino) sulfonil]-7- oxo-5,6,7,8-tetraidroindol[2,1-a] [2,5] benzodiazocina-11-carboxamida;

Ácido 14-ciclopentil-6-[2-(dimetilamino) etil]-7-oxo-5,6,7,8-tetraidroindol [2,1-a] [2,5] benzodiazocina-11- carboxílico; Ácido 14-cicloexil-5,6,7,8-tetraidroindol[2,1 -a] [2,5] benzodiazocina-11-carboxílico;

Ácido 6-alil-14-cicloexil-3 -metóxi-5,6,7,8-tetraidroindol [2,1 -a] [2,5] benzodiazocina-11-carboxílico;

Ácido 14-ciclopentil-6-[[2-(dimetilamino)etil]-5,6,7,8-tetraidroindol [2,1-a] [2,5] benzodiazocina-11- carboxílico; Acido 14-cicloexil-6-[2-(dimetilamino)etil]-5,6,7,8-tetraidroindol[2,1 -a] [2,5]benzodiazocina-11-carboxílico; Ácido 13-cicloexil-5-metil-4,5,6,7-tetraidrofluoro [3', 2', 6,7][1,4] diazocino [l,8-a]indol-10-carboxílico; Ácido15-cicloexil-6-[2-(dimetilamino) etil]-7-oxo- 6, 7,8, 9-tetraidro-5H-indol[2,l-a] [2,6] benzodiazonina-12-carboxílico; Ácido 15-cicloexil-8-oxo- 6,7, 8,9-tetraidro-5H-indol[2,1 -α] [2,5] benzodiazoniina-12-carboxílico; Ácido 13-cicloexil-6-oxo-6,7-diidro-5H-indol [1,2-d] [l,4]benzodiazepina -10-carboxílico; e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

Os inibidores de Polimerase NS5B de HCV à base de indoltetracíclicos acima podem ser obtidos segundo os métodos A-E abaixodescritos, em que variáveis diferentes podem ser selecionadas de acordo como composto indol tetracíclico específico a ser preparado:

Método A:

<formula>formula see original document page 30</formula>

O intermediário 2-bromoindol (preparado como descrito nopedido de patente internacional publicado WO 2004087714) foifuncionalizado no nitrogênio indol, de modo a introduzir a funcionalidade depré- cursor W" X" em cada um ou em ambos os elementos W/X do téter. Ametodologia de acoplamento cruzado mediada por Pd (por exemplo, Suzuki,Stille, etc) introduziu então a funcionalidade de pré- cursor aromática C2 Z'/Y' em cada um ou em ambos os elementos Z/ Y do téter. A manipulação dogrupo funcional, seguida pelo fechamento do anel, forneceu o sistematetracíclico. A desproteção do éster forneceu então os ácidos indolcarboxílicos objetivados, com C2 aromático teterado ao nitrogênio indol.Método B

<formula>formula see original document page 31</formula>

Seguindo-se à conjugação do téter para o fechamento de anelmediado por Pd, 2 -haloaromático, apropriado, foi fornecido o sistematetracíclico fundido. A desproteção do éster forneceu então os ácidos indolcarboxílicos objetivados, com o C2 aromático teterado ao nitrogênio indol.

Método C

<formula>formula see original document page 31</formula>

O C2 aromático foi introduzido no início através demetodologia de acoplamento cruzado medido por Pd (Suzuki, Stille, etc.). Otéter foi então formado, com a ciclização sobre o nitrogênio indol finalmentefechando o anel. A desproteção do éster forneceu então os ácidos indolcarboxílicos, com o C2 aromático teterado ao nitrogênio indol.

Método D<formula>formula see original document page 32</formula>

Os intermediários tetracíclicos fundidos originários a partir dosMétodos A-C foram submetidos à manipulação no téter antes da desproteçãodo éster, de modo a fornecer os ácidos indol carboxílicos C2- teteradosobjetivados.

Método E

<formula>formula see original document page 32</formula>

Os ácidos indol carboxílicos C2-teterados, originários dosMétodos A-D, foram adicionalmente derivados através da manipulação dafuncionalidade carboxilato de modo a fornecer compostos contendo umasubstituição carboxilato ou carboxamida. Durante qualquer uma dasseqüências sintéticas acima pode ser necessário e/ ou desejável proteger osgrupos sensíveis ou reativos de qualquer das moléculas em questão. Isto podeser alcançado através de grupos de proteção convencionais, tais que aquelesdescritos em Protective Groups in Organic Chemistry, ed. J, F. W. McOmie,Plenum Press, 1973; e T. W. Greene & P. G. M. Wuts, Protective Groups inOrganie Synthesis, John Wilkey & Sons, 3 a Edição, 1999. Os grupos deproteção podem ser removidos em um estágio subseqüente, usando osmétodos conhecidos na arte.

A atividade inibidora de Protease NS3 de HCV dos presentescompostos pode ser testada usando ensaios conhecidos na arte. Um tal ensaioé o ensaio de fluorescência resolvida por tempo de Protease NS3 de HCV,conforme descrito no Exemplo 56. Outros exemplos de tais ensaios sãodescritos, por exemplo, na Publicação de Patente Internacional WO 2005/046712. Compostos úteis como inibidores de Protease NS3 de HCV teriamum ki inferior a 50 μΜ, de modo mais preferido inferior a 10 μΜ, e de modoainda mais preferido inferior a 100 nM.

A presente invenção também inclui processos para a produçãode compostos da fórmula I, ΙΙ-a, ou ΙΙΙ-a. Os compostos da presente invençãopodem ser prontamente preparados de acordo com os esquemas de reação eexemplos que se seguem, ou modificações dos mesmos, através do uso demateriais de partida prontamente disponíveis, reagentes e procedimentos desíntese convencionais. Nestas reações, é também possível usar variantes quesão, em si mesmas, conhecidas daqueles de habilidade ordinária na arte, masnão são mencionadas em maiores detalhes. Além disso, outros métodos para apreparação dos compostos da invenção serão prontamente evidentes paraaquele de habilidade ordinária na arte, à luz dos esquemas e exemplos dereação que se seguem. A não ser que indicado de outro modo, todas asvariáveis são como acima definidas. Os esquemas de reação e exemplos quese seguem servem apenas para ilustrar a invenção e a sua prática. Osexemplos não devem ser construídos como limitações ao escopo ou aoespírito da invenção.

Descrição Geral da Síntese:

Os compostos da presente invenção podem ser sintetizadoscomo descrito nos Esquemas Geraisl e 2.

ESQUEMA 1<formula>formula see original document page 34</formula>

O esquema 1 (n = 0-9) ilustra a síntese de uma molécularepresentativa. Um derivado 4- hidroxipropina apropriadamente protegido(por exemplo um nitrogênio produzido por carbamato e um ácido protegidopor éster podem ser reagidos com carbonildiimidazol ou reagente equivalentee então reagido com uma isoindolina ou tetraidroisoquinolinaapropriadamente substituída. A funcionalidade alquenila pode ser introduzidaneste estágio ou em um estágio posterior, através de reação catalisada porpaládio de um substituinte de halogeneto, tal que cloreto, brometo e iodeto, ououtra funcionalidade, tal que um triflato com um reagente organometálico, talque vinila ou aliltrialquilestanho. De modo alternativo, a funcionalidade podeser introduzida antes da reação com prolinol protegido.

O esquema 2 descreve a síntese da porção de aminoácidocontendo olefina. Um aminoácido (seja comercialmente disponível oupreparado prontamente usando métodos conhecidos na arte) no qual afuncionalidade do ácido é protegida como um éster (por exemplo, R = metila)podendo ser convertida a amidas A através do acoplamento de um ácidocarboxílico olefínico utilizando uma ampla faixa de agente e acoplamento depeptídeo, conhecidos daqueles versados na arte, tais que DCC, EDC, BOP,TBTU, etc. A preparação de sulfonamidas B pode ser efetuada através dereação com o cloreto de sulfonila apropriado em um solvente orgânico (porexemplo, THF) com uma base amina como o agente de varredura. Osderivados de uréia C podem ser preparados através da reação do aminoéstercom um reagente, tal que carbonil imidazol, de modo a formar umintermediário isocianato (Catalano et al., WO 03/ 062192), seguido pelaadição de uma segunda amina contendo olefina. De modo alternativo,fosgênio, difosgênio, ou trifosgênio pode ser usado em lugar de carbonildiimidazol. Os derivados de cianoguanidina D podem ser preparados atravésda reação do éster de aminoácido com difenil C-cianocarbonimidato em umsolvente orgânico, seguido pela adição de uma segunda amina contendoolefina. Os derivados de carbamato E podem ser preparados através da reaçãode um álcool contendo olefina com carbonil diimidazol I ou fosgênio,trifosgênio ou difosgênio) em um solvente orgânico, seguido pela adição doamino éster.

ESQUEMA 2

<formula>formula see original document page 35</formula>

Seguindo-se à funcionalização da amina, o éster pode serhidrolizado sob uma faixa de condições básicas, conhecidas daquelesversados na arte (Theodora W. Greene, Protective Groups in OrganicSynthesis, Third Edition, John Wiley and Sons, 1999.

A desproteção do grupo de proteção carbamato na porçãoprolina pode ser executada através de uma variedade de métodos, conhecidosde pessoas versadas na arte (Theodora W. Greene, Protective Groups inOrganic Synthesis, Third Edition, John Wiley and Sons, 1999).

De modo a completar a síntese dos compostos desta invenção,o derivado de aminoácido pode ser acoplado ao derivado de prolina através deuma ampla faixa de reagentes de acoplamento de peptídeo, tais que DCC,EDC, BOP, TBTU, etc. (vide Esquema 1). A macrociclização é entãoalcançada através de uma metátese de olefina, usando uma faixa decatalisadores que foram descritos na literatura para este propósito. Nesteestágio, a ligação olefínica produzida na metátese de fechamento de anel podeser opcionalmente hidrogenada, de modo a fornecer uma ligação saturada oufuncionalizada de modos alternativos, tais que a ciclopropanação. O éster deprolina é então hidrolizado sob condições básicas e acoplado com o éster doácido ciclopropilamino (a porção alquenila ou alquilciclopropano apropriadada molécula pode ser preparada como previamente descrito (Llinas-Brunet etal., US 6.323. 180) e submetida a um estágio de hidrólise básico adicional, demodo a prover os compostos finais. O éster de prolina pode ser tambémhidrolizado e diretamente acoplado a uma acil sulfonamida ácida deciclopropilamno apropriadamente funcionalizada (que pode ser preparada deacordo com Wang X. a et al. WO 2003/ 099274) de modo a prover oscompostos finais.

Os catalisadores de metátese de olefina incluem as seguintesespécies à base de rutênio: F: Miller et al. J. Am. Chem. Soe. 1996, 118, 9606;G: Kingsbury et al., J. Am. Chem. Soe. 1999, 121, 791, H: Scholl et al. Org.Lett. 1999, 1, 953; Hoveyda et al. US 2002 /0107138; K: Furstner et al. J.Org. Chem. 1999, 64, 8275. A utilidade destes catalisadores na metátese defechamento de anel é bem conhecida na literaturas (por exemplo, Trnka and<formula>formula see original document page 37</formula>

Catalisador de metátese de rutênio Zhan RC-303(Zhan catalyst 1 B, RC-303, Zannan Pharma Ltd.)

Lista de Abreviações

BOP Hexafluorofosfato de benzotriazol-l-il-oxi-tris-(dimetilamino)-fosfônio

DCC dicicloexilcarbodiimida CH3CN Acetonitrila

DBU 1,8- Diazabicielo [5.4.0] undec-7-eno

DCE Dieloroetano DCM Dielorometano

DMAP 4- Dimetilamino piridina DIPEA Diisopropiletilamina

DMF Dimetilformamida DMSO Sulfóxido de dimetila

EDC N- (3- Dimetilaminopropil) N'- etilcarbodiimida

Et3N Trietilamina Et2O éter dietílico

EtOAe Acetato de etila EtOH Etanol

HATU Hexaflorofosfato de 0-(7- azabenzotriazol-l-il) - Ν, Ν, Ν',Ν'-tetrametilurônio

HBr Ácido bromídrico

HCl Ácido clorídrico HOAc Ácido acético

HOAt l-Hidróxi-7-azabenzotriazol LiOH Hidróxido de Lítio

MeOH Metanol MgSO4 Sulfato de magnésio<table>table see original document page 38</column></row><table>

RT Temperatura ambiente THF Tetraidrofurano

TBTU Tetrafluoroborato de O-Benzotriazol-1-il- N5N5 N', N'-tetrametilurônio

EXEMPLO 1

(Sr, 7s, IOss) -10- Butil-N- ((IR, 2SVl-(r(ciclopropilsulfonil)aminol carboniU -2- vinilciclopropilV3,9,12- trioxo -1. 6, 7, 9, 10, 11, 12,14. 15, 16-decaidro- 5H-2.22: 5, 8- dimetano-4, 13, 1, 8, 11 -benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxamida (III-1)

<formula>formula see original document page 38</formula>

Estágio 1: 4-Cloroisoindolina

<formula>formula see original document page 38</formula>

Uma mistura do anidrido do ácido 3-cloroftálico (9 g, 49,2mmol) e formamida (100 ml) foi aquecida a 125°C e agitada durante 3 horas.Água (300 ml) foi então adicionada e a mistura foi resfriada à temperaturaambiente. A mistura foi filtrada e o sólido branco resultante foi lavado comágua e secado para fornecer 4-cloro-lH-isoindol-l,3(2H)- diona (7,7 g, 86%de rendimento).A 4-cloro-1 H-isoindol-1,3 (2H)-diona sólido (4,0 g, 22,0mmol) foi adicionado o complexo de borano-THF (1 M/ THF, 88,1 ml, 88,1mmol), em gotas, com agitação. Quando a adição foi completada, a mistura dareação foi aquecida até o refluxo (80°C) e agitada durante 6 horas. A misturada reação foi então resfriada a 0°C, metanol (2,8 ml, 88,1 mmol) foicuidadosamente adicionado, em gotas, e a mistura da reação foi aquecida àtemperatura ambiente. HCl (6 N) foi adicionado até que a mistura estivesseácida, e então a mistura foi concentrada. O produto bruto foi dissolvido emHCl 1 M e extraído, duas vezes, com éter dietílico e duas vezes comdiclorometano. O pH da camada aquosa foi ajustado para o pH = 11 comNaOH sólido e extraído, três vezes, com acetato de etila. Os extratos deacetato de etila combinados foram secados com Na2SO4, filtrados econcentrados ara fornecer 4-cloroisoindolina (1,8 g, 53% de rendimento).

LRMS (ESI) ml ζ 154 [(M + H)+; calculado para C8H9CIN: 154].

Estágio 2: (2S, 4R)-4- {[(4-cloro-1,3- diidro-2H-isoindol-2-il)carbonil]óxi} pirrolidina-l,2-dicarboxilato de 1-terc-butil 2-metila

<formula>formula see original document page 35</formula>

A uma solução do éster metílico de N-Boc prolina (2,87 g,11,7 mmol) em DMF (15 ml) a O0C foi adicionado carbonil diimidazol (1,9 g,11,7 mmol). A reação foi aquecida à temperatura ambiente e agitada durante30 minutos. Uma solução de 4-cloroisoindolina (1,8 g, 11,7 mmol) em DMF(10 ml) foi então adicionada e a mistura da reação foi aquecida a 50°C eagitada durante 2 horas. A mistura da reação foi despejada sobre éter etílico eHCl 0,5 M e as camadas foram separados. A camada orgânica foi lavada comágua, secada com Na2SO4, filtrada e concentrada. O produto bruto foipurificado em sílica gel (eluição gradiente de 10% a 90% de acetato de etilaem hexanos) para fornecer

Para fornecer (2S, 4R)-4- {[(4- cloro-1,3- diidro-2H-isoindol—2-il) carbonil] óxi} pirrolidina-1,2- dicarboxilato de 1-terc-butil 2-metila (3,3 g, 66% de rendimento). LRMS (ESI) m/ zx 325 [(M + H -Boc)+;calculado para Ci5H18CIN2O4: 325].

Estágio 3: (2S, 4R)-4- {[(4-vinil-l,3- diidro-2H- isoindol-2-il)carbonil] óxi} pirrolidina-1,2- dicarboxilato de 1-terc-butil 2-metila

Uma solução de (2S, 4R)-4-{[(4-vinil-l,3-diidro-2H-isoindol-2-il) carbonil]oxi}pirrolidina-1,2- dicarboxilato de 1-terc-butil 2-metila (40mg, 0,09 mmol), vinil tributilestano (36 mg, 0,11 mmol) e fluoreto de césio(31 mg, 0,21 mmol) em dioxano (0,5 ml) foi desgaseificado com N2 durante15 minutos. Bis (tributilfosfina) paládio (0) (2 mg, 0,005 mmol) foi entãoadicionado e o vaso da reação foi vedado e aquecido a IOO0C durante 18horas. Após o resfriamento, a mistura da reação foi concentrada e purificadaatravés de cromatografia em sílica gel (10% a 90% de acetato de etila emhexanos) para fornecer (2S, 4R)-4-{[(4- vinil-l,3-diidro-2H- isoindol-2-il)carbonil] oxi} pirrolidina-1,2- dicarboxilato de 1-terc-butil 2-metila (10 mg,25% de rendimento).

LRMS (ESI) m/ ζ 317 [(M + H - Boc)+; calculado paraC17H21N2O4:317].

Estágio 4: N-[(pent-4-enilóxi)carbonil]-L-norleucil-(4R)-4-{[4-vinil-1,3 -diidro-2H-isoindol-2-il) carbonil] oxi}-L-prolinato de metila<formula>formula see original document page 41</formula>

A um frasco contendo (2S, 4R)-4-{[(4-vinil-l,3-diidro-2H-isoindol-2-il) carboniljóxi} pirrolidina-l,2-dicarboxilato de 1-terc-butila 2-metila (60 mg 0,14 mmol) foi adicionada uma solução 4 M de HCl emdioxano (2 ml). Após 1 hora, a análise de LC-MS indicou o consumocompleto do material de partida e a formação do produto Boc desejado. Oscomponentes voláteis foram então removidos in vácuo, e o material bruto foiabsorvido em DMF (2 ml).

A esta mistura foi adicionado N-[(pent-4-en-l-ilóxi) carbonil]-L-norleucina (41 mg, 0, 17 mmol) (preparado de acordo com o procedimentoabaixo), DIPEA (0,076 ml, 0,43 mmol), EDC (54 mg, 0,28 mmol) e HOAt(44 mg, 0,28 mmol). Após a agitação em temperatura ambiente durante 30minutos, o consumo completo da amina foi evidenciado através de LC- MS.A mistura da reação foi então elaborada com HCl 0,5 N e EtOAc. A camadaorgânica foi lavada com salmoura e secada com MgSO4- O solvente foi entãoremovido in vácuo e o produto bruto foi purificado em sílica (10-90 % deEtOAc/ hexanos) de modo a fornecer 60 mg (79% de rendimento) de N-[(pent-4-enilóxi) carbonil]-L-norleucil-(4R)-4- {[(4-vinil-1,3-diidro-2H-isoindol-2-il)carbonil]óxi}-L-prolinato de metila. LRMS (ESI) m/z 542 [(M +H)+; calculado para C29H40N3O7: 542 ].

Estágio 5; (5R, 7S, 10S)-10-butil-3, 9, 12-trioxo -1, 6, 7,9, 10,11, 12, 14, 15, 16-decaidro-5H-2,22: 5,8- dimetano-4, 13, 2, 8, 11-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxilato de metila<formula>formula see original document page 42</formula>

Uma solução de N-[(pent-4-enilóxi)carbonil]-L-norleucil-(4R)-4- {[(4-vinil-1,3 -diidro -2H-isoindol -2-il) carbonil] óxi}-L-prolinato demetila (60 mg, 0, 11 mmol) em DCE (20 ml) foi desgaseificada com N2durante 15 minutos. O catalisador de metátese de rutênio Zhan RC-301(Catalisador Zhan I (ilustrado como J na página 43), RC-301, Zanna PharmaLtd.) (7 mg, 0, 01 mmol) foi adicionado. A solução foi então aquecida a100°C durante 1 hora. Neste momento, a análise por L-MS e TLC indicou oconsumo completo do material de partida e a formação de um produto quaseúnico, que possuía a massa desejada. O solvente foi então removido in vácuo,e o produto bruto foi purificado em sílica (5-70% de EtOAc/ hexano) parafornecer 45 mg (79% de rendimento) de (5R, 7S, 10S)-10- butil-3, 9, 12-trioxo -1, 6, 7, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 16- decaidro-5H- 2,22: 5, 8 - dimetano-4,13, 2, 8, 11- benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxilato de metila. LRMS(ESI) m/z 514 [(M + H)+; calculado para C27H36N3O7: 514].

Estágio 6: C5R. 7S, 10SV1Q-Butil-N-(T1R, 2SV1-(IYciclopropilsulfoniD aminol carbonil 1-2- vinilciclopropin-3, 9. 12-trioxo- 1,6. 7, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 16-decaidro-5H-2.22: 5.8-dimetano-4, 13, 2, 8, 11-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxamida

A uma solução de (5R, 7S, IOS)-10 -butil-3, 9, 12-trioxo-1, 6,7, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 16-decaidro -5H-2,22:5,8-dimetano-4, 13, 2, 8, 11-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxilato de metila (45 mg, 0,09 mmol) emTHF (2 ml), MeOH (0,5 ml), e água (1 ml) foi adicionado LiOH (21 mg, 0, 87mmol). A mistura da reação foi aquecida a 40°C e agitada durante 1 hora, emcujo momento o consumo completo do material de partícula de éster metílicofoi observado através de LC-MS. A mistura foi então elaborada com HCl 0,5N e EtOAc. A camada orgânica foi secada com K2CO3 e o solvente foiremovido in vácuo. O produto bruto foi absorvido em DMF (1 ml).

À solução acima, foi adicionado cloreto de (IR, 2S)-1-{[(ciclopropilsulfonil) amino] carbonil}-2- vinilciclopropanamínio (Llinas-Brunet et ai. US 03/ 15755 e Wang et al. WO 03/ 099274) (32 mg, 0, 12mmol), TBTU (51 mg, 0,16 mmol) e DIPEA (0,071 ml, 0, 40 mmol) e amistura da reação foi agitada, em temperatura ambiente, durante 2 horas. Amistura da reação foi diretamente purificada através de HPLC de fase reversapara fornecer (5R, 7S, 10 S)-10-butil-N- ((IR, 2S)-1- {[(ciclopropilsulfonil)amino]carbonil}-2-vinilciclopropil)-3, 9, 12-trioxo-l, 6, 7, 9, 10, 11, 12, 14,15, 16-decaidro-5H-2, 22: 5,8-dimetano- 4, 13, 2, 8, 11-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxamida (27 mg, 47% de rendimento).

RMN 1H (500 MHz, ppm, CDCl3 δ 10,01 (s, 1H), 7,27 (m,2H), 7,12 (d, 1H), 7,04 (s, 1H), 6, 40 (d, J = 16,1 Hz, 1H), 6,08 (m, 1H), 5,76(m, 1H), 5,44 (s, 1H), 5,36 (d, 1H), 5, 25 (d, 1H), 5, 14 (d, 1H), 4, 80 - 4, 68(m, 3H), 4,59 (d, 1H) 4,44 (m, 2H), 4,38 (m, 1H), 3,95 (m, 1H), 3, 77 (dd,1H), 2, 94 (m, 1H), 2,43 (m, 1H), 2, 29 (d, 2H) 2, 06 (m, 2H), 1, 94 (m, 1H),1, 78 (m, 4H), 1, 45 (m, 1H), 1, 38 - 1,06 (Μ, 5H), 1,04 (d, 2H), 0, 92 (t, 3H)ppm. LRMS (ESI) mJ ζ 712 [(M + H)+; calculado para C35H46N5O9S: 712].

EXEMPLO 2

(5R. 7S. 1OS)-10-Terc-butil-N- ((IR. 2S)-1 (Γ(ciclopropilsulfonil) aminol carbonin-2-vinilciclopropil)-3.9. 12-trioxo-1.6. 7.9. 10. 11, 12. 14, 15, 16-decaidro-5H-2.22: 5,8-dimetano-4, 13, 2, 8,1 l-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxamida (III-2)O EXEMPLO 2 foi preparado de acordo com o procedimentousado para o EXEMPLO 1, exceto que 3-metil-N-[(pent-4-enilóxi) carbonil]-L-valina (preparado de acordo com o procedimento abaixo) foi usado emlugar de N-[(pent-4-en-l-ilóxi) carbonil]-L-norleucina no Estágio 4.

RMN 1H (500 MHz, ppm, CDCl3) δ 9,90 (s, 1H), 7, 28 (m,2H), 7,13 (m, 2H), 6,31 (d, J = 15, 9 Hz, 1H), 6,04 (m, 1H), 5, 74 (m, 1H),5,45 (Μ, 2H), 5, 27 (d, 1H), 6, 16 (d, 1H), 4, 77 - 4, 66 (m, 3H), 4, 55 (d, 1H),4, 48 (t, 1H), 4, 41 - 4,35 (m, 2H), 4, 27 (m, 1H), 3, 93 (m, 1H), 3, 74 (dd,1H), 2, 93 (m, 1H), 2, 45 (d, 2H), 2,32 (m, 2H), 2, 10 - 1, 95 (m, 2H), 1, 74(m, 1H), 1, 47 (m, 1H), 1, 37 (m, 2H), 1, 07 (s, 9H) ppm. LRMS (ESI) m/ ζ712 [(M + H)+; calculado para C35H46N5O9S: 712].

Exemplo 3

(5R. 7S. 11.S)-10-terc-Butil-N-(Y 1R. 2SV1-{[ciclopropilsulfoniDaminol carbonil) -2-vinilciclopropil V15, 15-_dimetil-3.9.12-trioxo-l. 6. 7. 9. 10. 11. 12. 14, 15. 16-decaidro- 5H- 2. 22: 5. 8-dimetano-4. 13. 2. 8, 11-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxamida (III -8)

EXEMPLO 3

<formula>formula see original document page 44</formula>

Estágio 1: l-Bromo-2,3- bis (bromometil)benzeno<formula>formula see original document page 45</formula>

Uma suspensão de 3-bromo-o-xileno (196 g, 1,06 mol), N-bromossuccinimida (377 g, 2, 15 mol) e peróxido de benzoíla (0,26 g, 1,0mmol) em tetracloreto de carbono (1800 ml) foi aquecida até o refluxo, sobnitrogênio, durante 15 horas. O conteúdo do frasco de reação foi resfriado,filtrado, e o filtrado evaporado. O material bruto destilado estava sob altovácuo. As frações principais foram destiladas entre 88°C e 152°C. Foramrecuperados 108 g de material puro. Foram recuperados 182 g de materialligeiramente puro, que puderam ser usados na reação seguinte.

RMN 1H (CDCl3) δ (ppm) 7,56 (d, J - 8,0 Hz, 1H) 7, 31 (*d, J= 8,0 Hz, 1 H), 7, 26 (s, 1H), 7,16 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4, 84 (s, 2H), 4, 64 (s, 2H).

Estágio 2: 2-Benzil-4-bromoisoindolina

<formula>formula see original document page 45</formula>

Bicarbonato de potássio (204 g, 2, 04 mol) foi suspenso emactonitrila (1 21) e a mistura foi aquecida a 80CC. Soluções de l-bromo-2,3-bis (bromometil) benzeno (280 g, 0, 82 mol em 500 ml de acetonitrila) ebenzilamina (87, 5 g, 0, 82 mol em 500 ml de acetonitrila) foram adicionadosconcorrentemente através de funis de adição, durante 1 hora. A mistura dareação foi agitada Il0C durante 16 horas. O conteúdo do frasco da reação foiresfriado, filtrado e o solvente removido através de evaporação. A reação foidividida entre K2CO3 e EtOAc. As substâncias orgânicas foram lavadas comsalmoura, secadas com Na2SO4 anidro, filtradas e evaporadas. Acromatografia de coluna por cintilação (eluição gradiente: heptano para 10%de EtOAc em heptano) forneceu, após a evaporação, o composto título comoum óleo pálido.RMN 1H: (CDCl3) δ (ppm): 7, 41 - 7, 39 (m, 2Η), 7,37 - 7,34(m, 2H), 7,32 - 7,27 (m, 2H), 7,10 - 7,03 (m, 2H), 4,02 (s, 2H), 3, 97 (s, 2H),3, 91 (s, 2H). LRMS (ESI) m/z 289 [(M + H)+; calculado para Ci5H15BrN:289],

Convertido para sal de HCl em HCl /MeOH. Foi adicionadoMTBE e o sólido filtrado para fornecer 118 g do produto como um sal deHCl.

Estágio 3: 2- Benzil-4-vinilisoindolina

<formula>formula see original document page 46</formula>

Uma solução de 2-benzil-4-bromoisoindolina (16,7 g, 58,0mmol) e tributil (vinil) estanho (20, 3 ml, 69,6 mmol) em tolueno (400 ml) foidesgaseificada pelo borbulhamento de gás de nitrogênio através da soluçãodurante 0, 25 horas. Tetraquis (trifenilfosfina) paládio (0) (1,30 g, 1,16 mmol)foi adicionado e a solução resultante aquecida em um banho de óleo a IOO0C,sob nitrogênio, durante 24 horas. O conteúdo do frasco da reação foiresfriado, evaporado e submetido à cromatografia de coluna por cintilação,eluindo com hexano/ acetato de etila a 95/ 5 para fornecer, após a evaporação,o composto título como um óleo pálido, que tornou-se rosa mediante repouso.LRMS (ESI) m/ ζ 236 [(M + H)+; calculado para CnHi8 N: 236],

Estágio 4: 4-Vinilisoindolina

<formula>formula see original document page 46</formula>

Uma solução de 2-benzil-4-vinilisoindolina (58 mmol) em 1,2-dicloroetano (150 ml) foi colocada em um frasco de fundo redondo, sobnitrogênio. A este, foi ligado um funil de adição contendo uma solução decloroformato de 1-cloroetila (7, 51 ml, 69, 6 mmol) em 1,2-dicloroetano. Ofrasco da reação foi resfriado em um banho de gelo e o conteúdo do funil deadição foi adicionado, em gotas, durante 20 minutos, mantendo a temperaturade reação interna < 5°C. Após a adição ser completada, o frasco da reação foideixado aquecer à temperatura ambiente, e então aquecida até o refluxodurante 45 minutos. O conteúdo do frasco de reação foi resfriado àtemperatura ambiente, e então o solvente foi removido através de evaporação.Metanol (200 ml) foi adicionado e o conteúdo do frasco de reação foiaquecido até o refluxo durante 30 minutos. O frasco de reação foi resfriado eo solvente removido através de evaporação. Água (200 ml) foi adicionada e amistura resultante lavada com acetato de etila (2 χ 250 ml). A camada aquosafoi tomada básica com hidróxido de sódio 2N e extraída com cloreto deetileno (4 χ 250 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secados comsulfato de sódio anidro, filtrados, e o filtrado evaporado. O resíduoremanescente foi submetido à cromatografia de coluna por cintilação, eluindocom cloreto de metileno/ metanol/ hidróxido de amônio a de 97/ 3/0,3 para95/ 5/0,5. A evaporação das frações forneceu o composto título como um óleomarrom, 6,00 g (41, 4 mmol, 71% de rendimento para os dois estágios).LRMS (ESI) m/z 146 [(M + H)+; calculado para Ci0Hi2N: 146].

Uma solução de (2S, 4R)-4-hidroxipirrolidina-l,2-dicarboxilato de 1-terc-butila 2-metila (10,1 g, 41, 4 mmol) em DMF (90 ml)sob nitrogênio foi resfriada a O0C. Ι,Ι'-carbonildiimidazol sólido (6,7 0 g, 41,4 mmol) foi adicionado à reação. O conteúdo do frasco de reação foi aquecidoà temperatura ambiente e, depois de 2 horas, uma solução de 4-vinilisoindolina (6,00 g, 41, 4 mmol) em DMF (10 ml) foi adicionada. Areação foi aquecida em um banho de óleo a 60°C durante 2 horas e então

Estágio 5 (2S, 4R)-4- {[(4- vinil-l,3-diidro-2H-isoindol-2- il)carbonil]oxi } pirrolidina-1,2- dicarboxilato de 1-terc-butila 2-metilaresfriada e despejada em água e 5 % de bissulfato de potássio. A misturaresultante foi extraía com acetato de etila (4 χ 250 ml). As substânciasorgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas com sulfato desódio anidro, filtradas e evaporadas. A cromatografia de coluna por cintilaçãoeluindo com hexano/ acetato de etila a 70/ 30 forneceu o composto títulocomo uma espuma branca, 13, 9 g (33,4 mmol, 81% de rendimento). LRMS(ESI) m/z 417 [(M + H)+; calculado para C227H29N2O6: 417],

Estágio 6: Hidrocloreto de (3R, 5S) -5- (Metoxicarbonil)pirrolidin-3-il-4-vinil-1,3-diidro-2H- isoindol-2- carboxilato

<formula>formula see original document page 48</formula>

Uma solução de (2S, 4R)-4- {[(4-vinil-1,3- diidro-2H-isoindol-2-il)carbonil]oxi} pirrolidina-1,2- dicarboxilato de 1-terc-butila 2-metila (13,9 g, 33,4 mmol) em acetato de etila (700 ml) foi resfriada em um banho degelo saturado com gás de cloreto de hidrogênio. O frasco da reação foi vedadoe deixado aquecer à temperatura ambiente. Após 3,5 horas, o solvente foiremovido através de evaporação para fornecer o composto título como umsólido cinza, 11, 2 g, 95% de rendimento). RMN Ή (500 MHz, ppm,CD3OD) δ 7,47 -7,45 (m, 1H), 7,32-7,31 (m, 1H), 7,26 - 7,21 (m, 1H), 6,79 -6,73 (m, 1H), 5, 79 - 5,73 (m, 1H), 5, 46 (s, 1H), 5,41 - 5,38 (m, 1H), 4,80 -4,72 (m, 4H), 3,91 (s, 3H), 3,74 - 3,63 (m, 2H), 2,77 - 2, 71 (m, 1H), 2, 51 -2, 46 (m, 1H).

LRMS (ESI) m/~z 317 [(M+H)+;calculado para C17H21N2O4:317]

Estagio 7: N-{[(2,2-dimetilpent-4-enil)oxi]carbonil}-3-metil-L-valil-(4R)-4-{[(4-vinil-1,3-diidro-2H-_isoindol-2-ilfcarbonil]oxi}-L-prolinato de metila<formula>formula see original document page 49</formula>

A uma solução de hidrocloreto de 4-vinil-l,3-diidro-2H-isoindol-2-carboxilato de (3R, 5S)-5- (metoxicarbonil) pirrolidin-3-ila (2,00 g,5,67 mmol) e N-{ [(2,2-dimetilpent-4-enil)oxi]carbonil}-3-metil-L-valina(1,54 g, 5,67 mmol) em DMF (100 ml) foi adicionado EDC (1,41 g, 7,37mmol), HOBt (1, 00 g, 7,37 mmol) e DIPEA (3,16 ml, 22,8 mmol). A misturada reação foi agitada, em temperatura ambiente, durante 18 horas, e entãodiluída com acetato de etila e NaHCO3 aquoso. As camadas foram separadase a camada orgânica foi lavada com água e salmoura, secada com Na2SO4,filtrada e concentrada. O resíduo bruto foi purificado em sílica gel (eluiçãogradiente de 5% a 50% de acetato de etila em hexanos) para fornecer N-{[(2,2-dimetilpent-4-enil) oxi] carbonil}-3- metil-L- valil - (4R)-4-{[(4- vinil-1,3- diidro-2H-isoindol-2-il) carbonil] oxi} -L- prolinato de metila (2, 75 g,85% de rendimento) coimo uma espuma branca.

LRMS (ESI) mJ ζ 570 [(M + H)+; calculado para C3IH44N3O7:570],

Estágio 8: Í5R, 7S, 10SV10-terc-butil-15, 15-dimetil-3,9,12-trioxo-1, 6, 7. 9. 10, 11, 12. 14, 15, 16 - decaidro-5H-2.22: 5,8-dimetano- 4,13. 2, 8, ll-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxilato de metila.

<formula>formula see original document page 49</formula>

Uma solução de N-{[2,2-dimetilpent-4-enil)oxi] carbonil}-3-metil-L-valil-(4R)-4 {[(4-vinil-l,3- diidro-2H-isoindol-2-il) carbonil]oxi}-L-prolinato de metila (2,46 g, 4,32 mmol) em diclorometano anidro (450 ml) foipurgado com nitrogênio durante 15 minutos. Uma solução de dicloreto de bis(tricicloexilfosfina)-3-fenil-lH-indeno-l-ilidenorutênio (catalisador NeolystMl adquirido de Strem) (0,40 g, 0,43 mmol) em diclorometano anidro,desgaseificado (50 ml) foi então adicionado, em gotas, durante 30 minutos. Amistura da reação foi agitada em temperatura ambiente, durante cujo tempoporções de 0,2 g do catalisador foram adicionadas em aproximadamente acada 8-12 horas. O progresso da reação foi monitorado por HPLC até que areação fosse completada em 48 horas. O resíduo foi purificado através decromatografia de cintilação em sílica gel, eluindo com 10-70% de EtOAc/Hexano, de modo a fornecer (5R, 7S, 10 S)-10-terc-butil- l,5,15-dimetil-3, 9,12-trioxo-l, 6, 7, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 16- decaidro-5H- 2,22: 5,8-dimetano-4,13, 2, 8, 11 -benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxilato de metila (1,85 G,76% de rendimento). LRMS (ESI) M/ Z [(M + H)+; calculado paraC29H40N3O7: 542].

Estágio 9: Ácido (5R, 7S. IOSV 10-terc-Butil-15,15-dimetil-3.9.12-trioxo-l, 6, 7. 9. 10. 11, 12. 14. 15, 16-decaidro- 5H- 2,22: 5,8-dimetano-4, 13.2. 8, 1 l-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxílico

<formula>formula see original document page 50</formula>

A uma solução de (5R, 7S, 10S)-10-terc-butil-15,15-dimetil-3,9, 12-trioxo-l,6, 7, 9,10, 11, 12, 14, 15, 16-decaidro-5H-2,22: 5,8-dimetano-4, 13, 2, 8, 11 -benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxilato de metila (0,9 g,1,67 mmol) em THF: H20 (2:1, 45 ml) foi adicionado LiOH (0,40, 16,7mmol). A mistura da reação foi aquecida a 40°C e agitada durante 1 hora. Amistura da reação foi diluída com HCl anidro, e extraída com EtOAc. Acamada de EtOAc combinada foi lavada com água, salmoura, secada comNa2SO4, filtrada e concentrada. O produto foi usado sem purificaçãoadicional. LRMN (ESI) m/ ζ 528 [(M + H)+; calculado para C28H38N3O7: 528].

Estágio 10: (5R. 7S. 10SV10- terc-Butil-N- ((IR. 2S) -1-(IYciclopropilsulfonil) aminol carboniü -2- vinilciclopropiD-15. 15-dimetil-3.9.12-trioxo-1. 6. 7. 9. 10. 11. 12. 14. 15. 16-decaidro-5H-2.22: 5. 8 -dimetano-4. 13. 2, 8, 1 l-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxamida

Uma solução de ácido (5R, 7S, 10S)-10-terc-butil- 15, 16-dimetil-3,9, 12- trioxo- 1, 6, 7, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 16- decaidro-5H -2,22:5,8-dimetano-4, 13, 2, 8, 1 l-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxílico(100 mg, 0, 10 mmol), (IR, 2S)-l-{[(ciclopropilsulfonil) amino]carbonil}-2-vinilciclopropanamínio (Llinas- Brunet et al. US 03/ 15755 e Wang et al. WO03/ 099274) (76 mg, 0, 28 mmmol), fosforoexafluoreto de 0_ (7-azabenzotriazol—1-il)- Ν, N, N', N'- tetrametilurônio (HATU, 10 8 mg, 0, 28mmol), DIPEA (0, 073 ml, 0, 42 mmol) e 4- dimetilaminopiridinas (2 mg) emdiclorometano (5ml) foi agitado a 40°C durante 1 hora. A solução da reaçãofoi diluída com NaHCO3 saturado aquoso, e extraído com EtOAc. A camadade EtOAc combinada foi lavada com água, salmoura, secada com Na2SO4,filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado através de cromatografia decintilação, eluindo com 3% de MeOH/ CH2Cl2 para fornecer (5R, 7S, 10S) -10- terc-butil-N- ((IR, 2S)-l-{[(ciclopropilsulfonil) amino] carbonil}-2-vinilciclopropil)-15,15-dimetil-3, 9, 12-trioxo-l,6, 7, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 16-decaidro -5H-2,22: 5, 8 -dimetano-4, 13, 2, 8, 11-0benzodioxatriazacicloicosina-7- carboxamida (80 mg, 57% de rendimento).RMN 1H (400 MHz, ppm, CDCl3) δ 7, 48 (s, 1H), 7,23 (s, 1H), 7,12 (d, 1H),6,23(d, J = 15, 9 Hz, 1H), 5, 94 (m, 1H), 5, 76 (Μ, 1H), 5, 50 (m, 2H), 5, 43(s, 1H), 5, 24 (d, J = 16,6 Hz, 1 H), 5, 11 (d, 1H), 4, 70 (s, 2H), 4, 61 (d, 1H),4, 48 (m, 3 Η), 4, 35 (d, 1Η), 4,14 (d, 1Η), 3, 745 (d, 1H), 3,34 (d, 1H), 2, 89(m, 1H), 2, 43 (dd, 2H), 2, 06 (m, 1H) 1, 93 (m, 1H), 1, 89 (dd, 1H), 1,43 (d,1H), 1, 25 (m, 3H), 1, 09 (s, 3H), 1, 06 (s, 9H), 0, 86 (s, 3 H). LRMS (ESI) m/ζ 740 [(M + H)+; calculado para C37H50N5O9S:740],

EXEMPLO 4

(5R. 7S. 1OS)-10-terc-butil- N- ((IR, 2S) -1-(IYciclopropilsulfonil) aminol carbonill -2- vinilciclopropilV3. 9. 12-trioxo -6. 7. 9. 10, 11. 12. 14, 15. 16. 17-decaidro- IR 5H-2. 23: 5, 8- dimetano- 4,13. 2, 8, 11 - benzodioxatriazacicloenicosina-7-carboxamida (III-12)

<formula>formula see original document page 52</formula>

O composto título foi preparado de acordo com oprocedimento usado para o EXEMPLO 3, exceto que 3-metil-N-[(hex-5-enilóxi) carbonil]-L-valina (preparado de acordo com o procedimento abaixo)foi usado em lugar de N-{[2,2-dimetilpent-4-enil)oxi] carbonil}-3-metil-L-valina no Estágio 7.

RMN 1H (500 MHz, ppm, CD3OD) δ 9, 13 (s, 1H), 7,23 (d,1H), 7,16 (d, 1H), 6, 39 (d, J= 16, 4 Hz, 1H), 6, 08 (m, 1H), 5, 76 (m, 1H), 5,38 (s, 1H), 5, 29 (d, 1H), 512 (d, 1H), 4,79 (d, 1H), 4,73 - 4,63 (m, 4H), 4, 41(s, 1H), 4,37 (q, 1H), 4,24 (d, 1H), 3, 96 (dd, 1H), 3, 77 (luin, 1H), 2, 94 (m,1H), 2, 51 (q, 1H), 2, 29 - 2,13 (m, 4H), 1,87 (dd, 1H), 1,68 (m, 2H), 1,53(quin., 2H), 1,44 (dd, 1H), 1,25 (m, 2H), 1,05 (s, 9H), LRMS (ESI) m/z 726[(M + H) calculado para C36H48N5O9S: 726].

EXEMPLO 5

(5R. 7S, IOSV 10-Butil- N-((1R. 2S)-1-(r(ciclopropilsulfonil)amino1cabonin-2-vinilciclopropil)-3, 9. 12- trioxo- 6,7. 9, 10, 11, 12. 14. 16, 17-decaidro-1H. 5H - 2,23: 5,8-dimetano-4. 13, 2, 8,11- benzodioxatriazacicloenicosina-7-carboxamida (ΊΙΙ-133)

<formula>formula see original document page 53</formula>

O composto título foi preparado de acordo com oprocedimento usado para o EXEMPLO 3, exceto que 3-metil-N-[(hex-5-enilóxi) carbonil]L-norleucina (preparado de acordo com o procedimentoabaixo) foi usado em lugar de N-{[(2,2-dimetilpent-4-enil)oxi]carbonil}-3-metil-L-valina no Estágio 7.

1H), 7,15 (d, 1H), 6, 91 (d, 1H), 6,37 (d, J = 16, 1Hz, 1H), 6,07 (m, 1H), 5, 75(m, 1H), 5, 39 (s, 1H), 5, 29 (d, 1H), 5,12 (d, 1H), 4, 77 (d, 1H), 4, 66 (m,3H), 4, 57 (m, 1H), 4, 47 (q, 1 H), 4, 39 (q, 1H), 4, 27 (d, 1H), 3,90 (dd, 1H),3, 77 (quin., 1H), 2, 96 (m, 1H), 2, 49 (q, 1H), 2, 29 (m, 1H) 2, 22 (m, 3H), 1,88 (dd, 1H), 1, 75 (m, 2H), 1, 64 (m, 2H), 1, 52 (m, 2H), 1, 39 (m, 5H), 1,27(m, 1H) 1,18 (m, 1H), 1, 09 (m, 2H), 0,94 (t, 3H). LRMS (ESI) m/ ζ 726 [(M+ H)+; calculado para C36H48N5O9S: 726].

EXEMPLO 6

(5R. 7S. 10SV10-Butil-N-CriR. 2SH-Wciclopropilsulfonil)aminolcarbonil) -2-vinilciclopropilV3.9. 12- trioxo-1, 6, 7. 9. 10, 11, 12, 14,15. 16, 17, 18- dodecaidro-5H- 2,24: 5,8- dimetano-4, 13. 2, 8, 11 -benzodioxatriazaciclodocosina-7-carboxamida CIII- 198)RMN 1H (500 MHz, ppm CD3OD) δ 7, 24 (t, 1H), 7,23 (d,

<formula>formula see original document page 53</formula>O composto título foi preparado de acordo com oprocedimento usado para o exemplo 3, exceto que N-[(hept-6-en-l-ilóxi)carbonil]-L-norleucina (preparado de acordo com o procedimento abaixo, foiusado em lugar de N-{[(2,2-dimetilpent-4-enil)oxi]carbonil}-3-metil-L-valinano Estágio 7. RMN 1H (500 MHz5 ppm, CD3OD) δ 9, 26 (s, 1H), 7,39 (d, 1H),7,24 (t, 1H), 7,15 (d, 1H), 6, 30 (d, J = 15,9 Hz, 1H), 6, 20 (m, 1H), 5,75 (m,1H), 5,53 (s, 1H), 5, 31 (d, 1H), 5,12 (d, 1H), 4, 70 (m, 4H), 4,43 (dd, 1H),4,34 (m, 2H), 4, 27 (q, 1H), 3,91 (dd, 1H), 3,79 (quin, 1H), 3,31 (Μ, 1H), 2,97 (m, 1H), 2,31 (Μ, 1H), 2,22 (m 3H), 1,89 (dd, 1H), 1, 74 (m, 2H), 1,66 (m,1H), 1, 56 (Μ, 3H), 1, 38 (m, 8H), 1,19 (m, 1H), 1, 09 (m, 2H), 0,94 (t, 3H).

LRMS (ESI) m/~z 740 [(M + H)+; calculado para C37H50N5O9S: 740],EXEMPLO 7

(5R. 7S. 10SV10- terc-Butil- N- ((IR. 2S)-1-(IYciclopropilsulfoniDaminolcarbonilI-2-vinilciclopropil)-15, 15-dimetil-3, 9,12-trioxo- 6, 7. 9. 10. 11, 12. 14. 15, 16. 17-decaidro-lH. 5H-2.23: 5, 8-dimetano-4, 13. 2. 8, 11-benzodioxatriazacicloenicosina-7-carboxamida (III-199)

<formula>formula see original document page 54</formula>

O composto título foi preparado de acordo com oprocedimento usado para o EXEMPLO 3, exceto que N-{[(2,2-dimetilex-5-enil)oxi]carbonil} -3-metil-L-valina (preparado de acordo com o procedimentoabaixo) foi usado em lugar de N-{[(2,2-dimetilpent-4-enil)oxi]carbonil} -3-metil-L- valina no Estágio 7. RMN 1H (500 MHz, ppm, CD3OD) δ 9, 17 (s,1H), 7,27 (t, J= 7, 5 Hz, 1H), 7,21 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 7,16 (d, J = 7,5 Hz, 1H),6, 38 (d, J= 16 Hz, 1H), 6,03 (mn, 1H), 5, 79 (m, 1H), 5, 32 (Μ, 2H), 5, 13(m, 1Η), 4, 82- 4, 77 (Μ, 1Η), 4, 73 - 4, 61 (m, 4Η), 4, 48 (s, 1Η), 4, 39 (Μ,1Η), 4, 19 (d, J = 12 Hz5 1Η), 3, 96 (m, 1H), 2, 96 (m, 1H), 2, 59 - 2, 55 (m,1H), 2,35 - 2,12 (m, 4H) 1, 89 (m, 1H), 1, 49 - 1,23 (m, 6H), 1, 51 -0,98 (m,14H), 0,95 -0,85 (m, 4H). LRMS (ESI) m/ ζ 754 [(M + H)+; calculado paraC38H52N5O9S: 754].

(IYciclopropilsulfoninamino1carbonil)-2-etilciclopropilV 3, 9. 12-trioxo-l,6,7. 9, 10, 11, 12. 14, 15, 16. 17, 18-dodecaidro-5H-2.22: 5,8- dimetano- 4, 13,2. 8, 11- benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxamida (III- 200)sobre carbono (10% em peso, 0,03 g) em EtOAc (10 ml) foi vigorosamenteagitada sob um balão de hidrogênio, durante 1 hora. A mistura da reação foifiltrada e concentrada. O resíduo foi purificado através de HPLC de fasereversa (coluna DeltaPak C18), correndo 40-65% de CH3CN em água (comNH4OAc 1 g/ L). As frações foram concentradas, diluídas com NaHCO3saturado aquoso (20 ml) e extraídas com CH2Cl2 (3 χ 70 ml). As camadas deCH2Cl2 combinadas foram lavadas com água (50 ml), secadas com Na2SO4,filtradas e concentradas para fornecer (5R, 7S, IOS)- 10-terc-butil-N- ((IR,2R)-1 - {[ciclopropilsulfonil) amino] carbonil}-2-etilciclopropil)-3, 9, 12-trioxo- 1, 6, 7, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 16, 17, 18-dodecaidro-5H- 2,22: 5,8-dimetano- 4, 13, 2, 8, 1 l-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxamida (0, 31g, 97% de rendimento). RMN 1H (CD3OD, ppm) δ 7,23 (t, 1H), 7, 14 (d, 1H),7, 10 (d, 1H), 7,02 (d, 1H), 5,52 (s, 1H), 4,74 - 4, 60 (m, 4H), 4, 48 - 4, 30(m, 4H), 3, 88 (d, 1H), 3, 75 (s, 1H) 2, 99 (m, 1H), 2,62 (m, 1H), 2, 41 (m,

EXEMPLO 8

(5R. 7S, IOSV 10-terc-Butil-N-(Y 1R, 2R)-1-ΠΙ-200

Uma solução do EXEMPLO 2 (0,32 mg, 0,45 mmol) e paládio2Η), 2,14 (m, 1Η), 1,79 (m, 1Η), 1,65 - 1,51 (m, 6Η), 1,47 - 1,19 (m, 5Η), 1,07 (s, 9Η), 0,99 (t, 3Η). LRMS (ESI) m/ ζ 716 [(M + Η)+; calculado paraC35H50N5O9S: 716].

EXEMPLO 9

Í5R. 7S. 1OSV10-terc-Butil- N-(T1R. 2R)-l-{IYciclopropilsulfonil) aminolcarbonin-2-etilciclopropil)- 3. 9, 12-trioxo- 6, 7,9. 10. 11. 12. 14, 15, 16, 17, 18, 19-dodecaidro- 1H. 5H-2.23: 5. 8- dimetano-4. 13. 2, 8. 1 l-benzodioxatriazacicloenicosina-7-carboxamida CIII- 201).

<formula>formula see original document page 56</formula>

O composto título foi preparado a partir do EXEMPLO 4,10 usando o procedimento descrito para o EXEMPLO 8. RMN Ή (500 MHz,ppm, CD3OD) δ 7,23 (t, 1H), 7,14 (d, 1H), 7,10 (d, 1H), 7,02 (d, 1H), 5, 36 (s,1H), 4,71 (m, 3H), 4, 64 (t, 1H), 4,56 (m, 1H), 4,40 (m, 2H), 4,24 (d, 1H), 3,96 (dd, 1H), 3, 72 (quin, 1 H), 2, 98 (m, 1H), 2, 58 (m, 1H) 2, 49 (m, 2H),2,15 (t, 1H), 1,69- 1,19 (m, 15H), 1,09 (m, 1H), 1,06 (s, 9H), 0,98 (t, 3H),LRMS (ESI) m/z 730 [(M + H); calculado para C36H52N5O9S; 730].

EXEMPLO 10

(5R._ZS5_1OS V10-Butil-N-(Y 1R,_2R)-1-([rciclopropilsulfonil)amino1carbonil)-2-etilciclopropil)- 3, 9. 12- trioxo- 6,7. 9. 10. 11. 12, 14. 15. 16. 17, 18. 19-dodecaidro- 1 H, 5H-2,23: 5, 8-dimetano- 4, 13. 2, 8. 11 - benzodioxatriazacicloenicosina-7-carboxamidagiI-202).<formula>formula see original document page 57</formula>

O composto título foi preparado a partir do EXEMPLO 5usando o procedimento descrito para o EXEMPLO 8. RMN Ή (500 MHz,ppm, CD3OD) δ 7, 23 (t, 1H), 7,14 (d, 1H), 7,09 (d, 1H), 6, 99 (d, 1H), 5, 39(s, 1H), 4, 76 - 4, 61 (m, 4H), 4,43 (Μ, 3H), 4, 29 (d, 1H), 3, 92 (dd, 1H), 3,69 (quin, 1H), 2, 99 (Μ, 1H), 2, 57 (m, 1H), 2, 51 (m, 2H), 2, 19 (tt, 1H), 1,77 (m, 1H), 1, 70 - 1, 30 (m, 20 Η), 1, 17 (m, 2H), 1, 10 (m, 2H), 0 99 (t, 3H),9,95 (t, 3H). LRMS (ESI) m/ ζ 730 [(M + H)+; calculado paraC36H52N5O9S^O].

EXEMPLO 11

Í5R. 7S. 1QS)-10-Butil-N-(T1R. 2RV1-(IYciclopropilsulfonil)aminolcarboniü-2-etilciclopropil)- 3, 9. 12- trioxo-1,6,7. 9. 10. 11, 12, 14. 15. 16, 17. 18. 19, 20- tetradecaidro-5H-2.24: 5,8-dimetano-4, 13. 2. 8, 11- benzodioxatriazaciclodocosina-7- carboxamida CIII-203)

O composto título foi preparado a partir do EXEMPLO 6usando o procedimento descrito para o EXEMPLO 8. RMN Ή (500 MHz,ppm, CD3OD) δ 7, 25 (t, 1H), 7,15 (d, 1H), 7,11 (d, 1H), 5,55 (s, 1H), 4,70(m, 4H), 4, 49 (m, 1H), 4,38 (t, 1H), 4, 29 (m, 2H), 3,94 (dd, 1H), 3,73 (quin,1H) 3, 00 (Μ, 1H), 2, 63 (quin, 1H), 2,51 (m, 1H), 2,38 (m, 1H), 2, 20 (tt,1H), 1, 76 (quin, 1H), 1, 68 - 1, 07 (m, 24H), 1,00 (t, 3H), 0, 95 (t, 3H).LRMS (ESI) m/ ζ 744 [(M + H)+; calculado para C37H54N5O9S: 744].

EXEMPLO 12

(5R. 7S. 1OS)-10-terc-Butil-N ((IR. 2R)-1-

í|Yciclopropilsulfonil) aminol carboniü-2-etilciclopropiD-15, 15- dimetil-3,9.12-trioxo-l, 6. 7, 9, 10, 11. 12. 14, 15, 16. 17. 18- dodecaidro-5 H-2, 22:5.8-dimetano-4, 13, 2. 8, ll-benzodioxatriazacicloicosina-7- carboxamida(III- 204)

<formula>formula see original document page 58</formula>

O composto título foi preparado a partir do EXEMPLO 3usando o procedimento descrito para o exemplo 8. RMN Ή (400 MHz5 ppm,CD3OD) δ 9,06 (s, 1H), 7,22 (dd, 1H), 7,13 (d, 1H), 7,07 (d, 1H), 5, 51 (s,1H), 4, 72 (d, 2H), 4, 68 (d, 2H), 4,44 (d, 2H), 4, 28 (m, 2H), 3, 87 (dd, 1H),3, 28 (m, 1H), 2, 98 (d, 1H), 2, 85 (m, 3H), 2, 52 (Μ, 1H), 2, 43 (Μ, 2H), 2,15 (m, 1H), 1, 15 - 1, 17 (m, 3H), 1, 41 (m, 2H), 1, 30 (m, 1H), 1,21 (m, 4H),1, 08 (m, 1H), 1, 06 (s, 3H), 1, 05 (s, 9H), 0,98 (t, 3H), 0, 81 (s, 3H). LRMS(ESI) mJ ζ 744 [(M + H)+; calculado para C37H54N5O9S: 744].

EXEMPLO 13

(5R. 7S, 1OS)-10-terc-Butil- N-((1R, 2R)-1-(Iciclopropilsulfonil) aminol carbonil)-2-etilciclopropil) -15.15- dimetil-3,9.12-trioxo- 6, 7, 9, 10. 11. 12, 14. 15. 16, 17, 18. 19-dodecaidro- 1H, 5H -2.23: 5,8 - dimetano-4. 13, 2, 8. 1 l-benzodioxatriazacicloenicosina-7-carboxamida (III- 205)<formula>formula see original document page 59</formula>

O composto título foi preparado a partir do EXEMPLO 7usando o procedimento descrito para o EXEMPLO 8. RMN Ή (500 MHz,ppm, CD3OD) δ 9,09 (s, 1H), 7,24 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,15 (d, J 7,5 Hz, 1H),7,10 (d, J, 7,5 Hz, 1H), 5,53 (s, 1H), 4,75 - 4,59 (m, 4H), 4,44 - 4,37 (m, 3H),4,20 (d, J - 12 Hz, 1H), 3,95 - 3,91 (m, 1H), 3,31 (m, 2H), 2,99 - 2,96 (m,1H), 2,62 - 2,46 (m, 3H), 2, 17 - 2,13 (m, 1H), 1, 67 - 1, 50 (m, 6H), 1, 37 -1,18 (Μ, 7H), 1, 15 - 0, 96 (m, 16H), 0,80 (s, 3H). LRMS (ESI) m/z 758 [(M+ H)+; calculado para C38H56N5O9S: 758],

Preparação Alternativa:

Estágio 1: l-Bromo-2,3-bis-(bromometi0benzeno

<formula>formula see original document page 59</formula>

A uma suspensão de 3-bromo-o-xileno (999 g, 5,40 mol) emclorobenzeno (91) em temperatura ambiente, foi adicionado N-bromossuccinimida (1620 g, 9,1 mol) e peróxido de benzoíla (2,6 g, 10,8mmol). A mistura da reação foi aquecida a 80°C e agitada sob nitrogêniodurante 18 horas. A mistura da reação foi resfriada a 70°C e uma porçãoadicional de NBS (302 g, 1,7 mol) foi adicionada. A mistura da reação foiaquecida a 80°C e agitada sob nitrogênio durante 18 horas. A mistura dareação foi resfriada a 70°C e uma porção adicional de NBS (302 g, 1,7 mol)foi adicionada. A mistura da reação foi aquecida a 80°C e agitada sobnitrogênio durante 2 horas. A mistura da reação foi resfriada à temperaturaambiente, diluída com heptano (6 1) e filtrada. A torta do filtro foi lavada comheptano (4 1) e os filtrados combinados foram evaporados. O produto bruto foidissolvido em heptano (2 L) e clorofórmio (200 ml) e filtrado através dealumina básica (500 g). O tampão de alumina foi lavado com heptano (4 1) eos filtrados combinados foram evaporados para fornecer l-bromo-2,3- bis(bromometil) benzeno (1760 g, peso bruto), que foi usado sem purificaçãoadicional. RMN 1H (CDCl3) δ (ppm) 7, 56 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 8,0Hz, 1H), 7,26 (s, 1H), 7,16 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4, 84 (s, 2H), 4, 64 (s, 2H).

Estágio 2: Hidrocloreto de 2-benzil-4-bromoisoindolina

<formula>formula see original document page 60</formula>

Bicarbonato de potássio (657 g, 6,56 mol) foi suspenso emMeCN (17 1) e a mistura foi aquecida a 80°C. Soluções de l-bromo-2,3-bis(bromometil) benzeno bruto (900g, 2,63 mol em 1 1 de MeCN) e benzilamina(281 g, 2, 63 mol em 1 1 de MeCN) foram adicionados, em um modoconcorrente, através de funis de adição, durante 2 horas. A mistura da reaçãofoi agitada a 77°C durante 2 horas e então resfriada à temperatura ambiente eagitada durante 16 horas. O conteúdo do frasco de reação for resfriado,filtrado e o solvente removido através de evaporação. A reação foi divididaentre água (6 1) e EtOAc (2 1). O pH foi ajustado para > 9 através da adição deK2CO3 1M, as camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída com umaporção adicional de EtOAc (2 1). Os produtos orgânicos combinados foramlavados com salmoura, secados com Na2SO4 anidro, filtrados, e evaporados.O óleo bruto foi diluído com EtOH (300 ml) e resfriado a O0C. HClmetanólico foi adicionado até que a mistura estivesse ácida, seguido porMTBE (700 ml) e a mistura foi submetida a tratamento sônico, e entãoagitada durante 15 horas. MTBE (11) foi adicionado e a mistura foi filtrada elavada com 20% de EtOH, seguido por MTBE. O sólido foi secado a ar parafornecer hidrocloreto de 2-benzil-4- bromoisoindolina (211 g). Uma porçãoadicional do produto (86 g) foi isolada através da concentração dos licoresmãe. LRMS (ESI) m/ ζ 289 [(M + H)+; calculado para Ci5H15BrN: 289].

Estágio 3: 4-Bromoisoindolina

<formula>formula see original document page 61</formula>

A uma solução de hidrocloreto de 2-benzil-4-bromoisoindolina(11 g, 30,96 mmol) em 200 ml de EtOAc, foi adicionado NaOH 1 M (100 ml)e a mistura foi agitada durante 30 minutos. A camada orgânica foi separada,lavada com salmoura, secada com Na2SO4 anidro e o solvente evaporado paraum óleo, que foi submetido a tratamento azeotrópico uma vez com tolueno(50 ml). O óleo foi dissolvido em clorobenzeno (50 ml) e peneirasmoleculares 4A (5 g) foram adicionadas à solução agitada. Após 10 minutos,cloroformato de 1-cloroetila (5,6 ml, 51 mmol) foi adicionado, em gotas,durante 5 minutos. A mistura da reação foi então aquecida a 90°C durante 2horas, resfriada à temperatura ambiente e filtrada. Os sólidos foram lavadoscom clorobenzeno (5 ml) e metanol (40 ml). O filtrado foi aquecido a 70°Cdurante 1 hora, deixado resfriar e agitado, em temperatura ambiente, durante anoite. Os sólidos foram filtrados, lavados com clorobenzeno (2 ml) e hexano esecados para fornecer 6, 84 g do composto título. LRMS (ESI) m/ ζ 198,1 [(M+ H)+; calculado para C8H9BrN: 198,0 ].

Estágio 4: (2S, 4R)-4-{[(4-bromo-l,3-diidro-2H- isoindol-2-il)carbonil] oxi} pirrolidina-1,2- dicarboxilato de 1-t-butila 2-metila<formula>formula see original document page 62</formula>

A uma solução do éster metílico de (2S, 4R)-BOC-4-hidroxiprolina (126,3 g, 515 mmol) em DMF (960 ml) a O0C foi adicionadoN,N'-carbonildiimidazol (83,51 g, 515 mmol). A mistura da reação foiagitada, em temperatura ambiente, durante 3 horas. Hidrocloreto de 4-bromoisoindolina (120 g, 515 mmol) e diisopropiletilamina (96,3 ml, 540mmol) foram adicionados e a mistura da reação aquecida a 5 O0C durante 6horas, e então deixada resfriar, à temperatura ambiente e agitada durante anoite. A mistura da reação foi dividida entre EtOAc (3 1 e 10% de KHSO4aquoso (6 1), a fase aquosa novamente extraída com EtOAc (2 1) e as fasesorgânicas combinadas lavadas com 10% de NaHCO3 aquoso, salmoura,secadas com Na2SO4 e o solvente evaporado para formar uma espuma (239g). LRMS (ESI) m/z 471,0 [(M + H)+; calculado para C20H26BrN2O6: 471, 1].

Estágio 5: (2S. 4R)-4-(IT4- vinil-1,3-diidro-2H- isoindol-2-il)carbonill oxü pirrolidina-1.2- dicarboxilato de 1-t-Butila 2-metila

<formula>formula see original document page 62</formula>

A uma solução de (2S, 4R)-4-{[(4-bromo-l,3-diidro-2H-isoindol-2-il) carbonil] oxi} pirrolidina-l,2-dicarboxilato de 1-t-butila 2-metila (10,0 g, 21,3 mmol) em etanol (200 ml), foi adicionado viniltrifluoroborato de potássio (4,28 g, 32 mmol) e trietilamina (4,5 ml, 32 mmol)seguido pelo produto de adição de cloreto de dicloro [l,l-bis(difenilfosfino)ferroceno] paládio (II) (175 mg, 0, 21 mmol). A mistura da reação foiaquecida até o refluxo durante 6 horas, resfriada à temperatura ambiente,diluída com 10 % de KHSO4 aquoso e o etanol removido, através deevaporação, in vácuo. O resíduo aquoso foi extraído com EtOAc e a faseorgânica foi lavada com salmoura, secada com Na2SO4, o solvente evaporadoe o produto bruto purificado através de cromatografia em sílica, eluindo com40-60% de EtOAc/ hexano, para fornecer, após evaporação, o composto título(8, 18 g). LRMS (ESI) m/ ζ 417, 2 [(M + H)+; calculado para C22H29N2O6:417,2],

Estágio 6: Hidrocloreto de 4-vinil-1.3- diidro-2H- isoindol-2-carboxilato de Í3R. 5S)-5-CmetoxicarboniD pirrolidin-3-ila

<formula>formula see original document page 63</formula>

Uma mistura de (2S, 4R)-4-{[(4-vinil-l,3-diidro-2H-isoindol-2-il) carbonil]oxi} pirrolidina-1,2- dicarboxilato de t-butila (18,0 g, 43,2mmol) e HCl/ dioxano (4 M) (43,2 ml, 173 mmol) foi agitada, em temperaturaambiente, durante 2 horas. A mistura da reação foi concentrada para removero dioxano, seguido pela concentração de Et2O para fornecer o hidrocloreto de4-vinil-l,3-diidro-2H- isoindol-2-carboxilato de (3R, 5S)-5-(metoxicarbonil)pirrolidin-3-ila como um sólido bege (15 g), que foi usado sem purificaçãoadicional. LRMS (ESI) m/z 317 [(M + H)+; calculado para CnH2IN2O4: 317].

Estágio 7: N-(IY2,2-dimetilex-5-en-l-iD óxil carboniü-3-metil-L-valil-C4RV4- (IY4-vinil-1.3- diidro-2H- isoindol-2-in carbonilloxü-L-prolinato de metila<formula>formula see original document page 64</formula>

A uma solução de hidrocloreto de 4-vinil-l,3-diidro-2H-isoindol-2-carboxilato de (3R, 5S)-5- (metoxicarbonil) pirrolidin-3-ila (5,0 g,14,2 mmol) e N-{[(2,2-dimetilex-5-enil) oxi] carbonil}-3-metil- L- valina (4,0g, 14,2 mmol) em DMF (20 ml), em temperatura ambiente, foi adicionadoDIPEA (2, 5 ml, 14, 2 mmol), EDC (5,5 g, 28,4 mmol) e HOAt (1,9 g, 14,2mmol). Após 18 horas, a mistura da reação foi despejada em Et2O e extraídacom HCl 1 Ν. A camada aquosa foi extraída com EtOAc, e as fases orgânicascombinadas foram lavadas com HCl 1 N, água, NaHCO3 e salmoura. Acamada orgânica foi secada com MgSO4 e o solvente foi removido in vácuo.

O produto bruto foi purificado em sílica (30% de EtOAc em hexanos), demodo a fornecer 4,2 g do composto título como um óleo espesso. LRMS(ESI) m/z 584,4 [(M + H)+; calculado para C32H46N3O7: 584,3].

Estágio 8: (5R. 7S. 10S. 18EV10-terc-butil-15. 15-dimetil-3,9. 2-trioxo-6.7. 9. 10. 11, 12. 14. 15. 16. 17- decaidro-lH. 5H- 2.23:5,8-dimetano-4.13. 2, 8, 11-benzodioxatriazacicloexnicosina -7- carboxilato demetila

<formula>formula see original document page 64</formula>

A uma solução de N-{[(2,2- dimetilex-5-en-l-il) oxi]carbonil} -3 -metil- L-valil-(4R)-4- {[(4- vinil-1,3 -diidro-2H-isoindol-2-il)carbonil]oxi} -L-prolinato (4,7 g, 8,05 mmol) em DCM (1410 ml)desgaseificado (borbulhamento de nitrogênio durante 30 minutos) foiadicionado o catalisador Zhan 1 B (catalisador Zhan 1B, RC-303, ZannanPharma Ltd.) (0,591 g, 0,805 mmol). A mistura foi então agitada, emtemperatura ambiente, sob uma atmosfera de N2. Após 19 horas, a reação foicompletada e DMSO (57 μΐ, 0,805 mmol) foi adicionado. A mistura foiagitada durante 2 horas e a mistura foi concentrada in vácuo para ~ 70 ml. Oproduto bruto foi então diretamente purificado em sílica (eluição gradiente, 0-50% de EtOAc em hexanos), de modo a fornecer 4,4 g do composto títulocomo um óleo. LRMS (ESI) m/ ζ 556, 3 [(M + H)+; calculado paraC30H42N3O7: 556, 3],

Estágio 9: Í5R. 7S. 10SV10-terc-butil-15.15-dimetil-3. 9, 12-trioxo-6. 7. 9. 10, 11. 12, 14, 15. 16. 17, 18. 19-dodecaidro-lH. 5H, -2.23:5.8-dimetano-4, 13, 2, 8. 11-benzodioxatriazacicloenicosina-_Tzcarboxilato de metila

<formula>formula see original document page 65</formula>

A uma solução de (5R, 7S, 10S, 18E)-10- terc-butil-15, 15-dimetil- 3, 9, 12-trioxo- 6, 7, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 16, 17-decaidro- 1H, 5H-2,23:5,8-dimetano-4, 13, 2, 8, 11-benzotriaza- cicloenicosina-7- carboxilatode metila (4,4 g, 7,92 mmol) em EtOAc (79 ml) foi adicionado Pd/ C (0, 421g, 0, 396 mmol). Um balão de H2 foi então colocado sobre o frasco de reação.O frasco foi rapidamente evacuado e enchido com H2. Após 17 horas, areação foi completada conforme determinado através de LC-MS. O Pd/ C foifiltrado através de lã de vidro e o produto bruto foi purificado em sílica(eluição gradiente, 0-60% de EtOAc em hexanos) para fornecer 4,01 g docomposto título como um pó branco. LRMS (ESI) m! ζ 558, 4 [(M + H)+;calculado para C3OH44N3O7: 558, 3].

Estágio 10; Ácido (5R, 7S. 10SV10- terc-butil-15, 15-dimetil-3. 9. 12-trioxo- 6. 7. 9. 10, 11. 12. 14, 15. 16. 17. 18, 19- dodecaidro -1H, 5H- 2.23: 5,8-dimetano- 4. 13, 2, 8. 11- benzodioxatriazacicloenicosina- 7 -carboxílico

<formula>formula see original document page 66</formula>

A uma solução de (5R, 7S, 10S)-10-terc-butil- 15, 15-dimetil-3, 9, 12-trioxo- 6, 7, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 16, 17, 18, 19-dodecaidro -1H, 5H-2,23:5, 8-dimetano-4, 13, 2, 8, 11 - benzodioxatriazacicloenicosina-7-carboxilato de metila (5,76 g, 10, 33 mmol) em THF (41,3 ml), MeOH (41,3ml) e água 20,7 ml), em temperatura ambiente, foi adicionado LiOH (4,33 g,103 mmol). Após a conversão total (45 minutos), conforme julgado por LC-MS, a reação foi elaborada através da divisão entre Et2O e HCl 1 Ν. Acamada aquosa foi então extraída com EtOAc. As camadas orgânciascombinadas foram secadas com MgSO4 e o solvente foi removido in vácuo,de modo a fornecer 5, 53 g do composto título, que foi usado sem purificaçãoadicional. LRMS (ESI) ml ζ 544, 4 [(M + H)+; calculado para C29H42N3O7;544,3].

Estágio 11: (5R. 7S. 10SV10-terc-Butil-N-(TlR. 2RV1-(IYciclopropilsulfonil) aminol carboniH -2- etilciclopropiD-15. 15-dimetil- 3,9. 12-trioxo- 6, 7, 9, 10. 11. 12, 14. 15. 16, 17, 18. 19-dodecaidro-1H, 5H-2.23:5.8-dimetano- 4, 13. 2. 8, 1 l-benzodioxatriazacicloenicosina-7-carboxamida (III- 205)

A uma solução do Ácido (5R, 7S, 10S)-10-terc-Butil-15,15-dimetil-3, 9, 12-trioxo- 6, 7, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 16, 17, 18, 19-dodecaidro-1H, 5H- 2, 23:5,8-dimetano-4, 13, 2, 8, 11- benzodioxatriazacicloenicosina-7-carboxílico (5,53 g, 10,17 mmol) e hidrocloreto de (IR, 2R)-l-amino- N-(ciclopropilsulfonil)-2-etilciclopropanocarboxamida (3,28 g, 12, 21 mmol) emDMF (50, 9 ml) foi adicionado DIPEA (7, 11 ml, 40,7 mmol) e HATU (5,03g, 13,22 mmol). Após a conversão completa (1 hora), a mistura da reação foidividida entre EtOAc e HCl 1 Ν. A camada orgânica foi lavada comsalmoura, três vezes, secada com MgSO4, e o solvente foi removido in vácuo.

O material bruto foi então purificado em sílica (eluição gradiente, 20-80 % deEtOAc em hexanos) para fornecer 5, 8 g do composto título como um póbranco.

EXEMPLO 14

[5R. 7S, 1OS V10-terc-Butil- N-((1R, 2SV1-([(ciclopropilsulfoninaminolcarboniU-2-viniIciclopropin- 3. 9, 12-trioxo-1. 6. 7. 9,10,11,12.14,15,16,17.18-dodecaidro-5H-2,22; 5. 8-dimetano-4.13, 2, 8,11 - benzodioxatriazacicIoicosina-7-carboxamida (III- 5)

<formula>formula see original document page 67</formula>

Estágio 1: Í5R.7S. lOSVlO-terc-butil-3. 9. 12-trioxo-l, 6, 7, 9,10, 11. 12, 14. 15. 16-decaidro- 5H- 2. 22: 5, 8- dimetano- 4. 13, 2, 8, 11-(5R, 7S, 1OS)-10-terc-butil-3, 9, 12-trioxo- 1, 6, 7, 9, 10, 11,12, 14, 15, 16-decaidro-5H- 2,22: 5,8 - dimetano- 4, 13, 2, 8, 11-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxilato de metila foi preparado de acordocom o procedimento usado para (5R, 7S, 10 S)-10-terc-butil-15, 15-dimetil-3,9, 12-trioxo-l, 6, 7, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 16-decaidro- 5H-2,22: 5,8-dimetano- 4, 13, 2, 8, 11 -benzodioxatriazacicloicosina-7- carboxilato de metila(EXEMPLO 3, Estágio 8), exceto que 3-metil-N-[(pent-4-enilóxi) carbonil]-L-valina (preparado de acordo com o procedimento abaixo) foi usado emlugar de N-{[(2,2-dimetilpent-4-enil) oxi]carbonil}-3-metil-L-valina noEstágio 7. LRMS (ESI) m/ ζ 514 [(M + H)+; calcualdo para C27H36N3O7: 514].

Estágio 2: Í5R, 7S, IOSVlO- terc-butil-3, 9, 12-trioxo- 1, 6, 7,9. 10, 11, 12. 14, 15, 16-decaidro-5H-2.22: 5.8-dimetano-4, 13, 2, 8, 11-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxilato de metila

<formula>formula see original document page 68</formula>

A uma solução de (5R, 7S, 10S)-10-terc-butil-3, 9, 12-trioxo-1, 6, 7, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 16, 17, 18-dodecaidro-5H-2,22: 5,8-dimetano-4,13, 2, 8, 11 -benzodioxatriazacicloicosina- 7-carboxilato de metila (0,10 g,0,20 mmol) em acetato de etila (7 ml) foram adicionados 10% de paládiosobre carbono (0,01 g). A mistura da reação foi agitada sob um balão dehidrogênio durante 5 horas, em temperatura ambiente. O conteúdo do frascoda reação foi filtrado através de celite e o filtrado foi evaporado. O produtobruto foi usado sem purificação adicional (0,09 g, 90% de rendimento).LRMS (ESI) m/z 516 [(M + H)+; calculado para C27H38N3O7: 516],

Estágio 3: (5R. 7S, 10SV10- terc-Butil-N-(TlR. 2SV1-(IYciclopropilsulfonil) aminolcarbonin-2- vinilciclopropilV3. 9, 12-trioxo-l,6. 7, 9, 10, 11. 12, 14, 15. 16. 17, 18-dodecaidro-5H- 2,22: 5,8 - dimetano-4,13,2, 8, ll-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxamida.

A uma solução de (5R, 7S, 10S)-10-terc-butil-3, 9, 12-dioxo-l,6, 7, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 16, 17, 18-dodecaidro-5H-2,22: 5,8-dimetano- 4,13, 2, 8, 11 -benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxilato de metila (90 mg,0,18 mmol) em THF (2 ml) e MeOH (0,5 ml) foi adicionado LiOH (1,75 ml,1 N, 1,75 mmol). A mistura da reação foi aquecida a 40°C e agitada durante 1hora, em cujo tempo foi completado o consumo do material de partida éstermetílico, o que foi observado através de LC-MS. A mistura foi entãoprocessada com HCl 0,5 N e EtOAc. A camada orgânica foi então secada comK2CO3, e o solvente foi removido in vácuo. O produto bruto foi absorvido emDMF (1 ml).

À solução acima, foi adicionado cloreto de (IR, 2S)-1-{[(ciclopropilsulfonil)amino] carbonil}-2- vinilciclopropanamínio (51 mg,0,19 mmol), TBTU (77 mg, 0, 24 mmol) e DIPEA (0, 07 ml, 0, 40 mmol) e amistura da reação foi agitada, em temperatura ambiente, durante 2 horas. Amistura da reação foi diretamente purificada através de HPLC de fase reversapara fornecer (5R, 7S, 10S)-10-terc-butil- N- ((IR, 2S)-1-{[(ciclopropilsulfonil) amino] carbonil}-2-vinilciclopropil)-3, 9, 12-trioxo-l,6, 7, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 16, 17, 18-dodecaidro-5H- 2,22: 5,8-dimetano-4,13, 2, 8, 11-benzodioxatriazacicloicosina - 7- carboxamida (34 mg, 28% derendimento).

RMN 1H (500 MHz, ppm, CD3OD) δ 9,14 (s, 1H), 7,23 (t,1H), 7,13 (d, 1H), 7,10 (d, 1H), 5,75 (quin, 1H), 5,53 (s, 1H), 5,29 (d, 1H),5,12 (d, 1H), 4,75 - 4,59 (m, 5H), 4,42 (m, 2H), 4,34 (s, 1H), 4, 30 (d, 1H),3,88 (dd, 1H), 3,75 (m, 1H), 3,60 (q, 2H), 2,95 (m, 1H), 2, 63 (m, 1H), 2,41(m, 2H), 2, 26 - 2,12 (m, 2H), 1, 88 (dd, 1H), 1,79 (m, 1H), 1,56 (m, 3H),1,41 (m, 3H), 1,25 (m, 2H), 1,7 (t, 2H), 1, 06 (s, 9H). LRMS (ESI) m/ ζ 714[(M + H)+; calculado para C35H48N5O9S: 714].

EXEMPLO 15

[5R. 7S. 1OS V10-terc-butil- N- (Y1R. 2SV1-([(ciclopropilsulfonil) aminolcarbonin-2- vinilciclopropiD-15, 15-dimetil-3,9. 12-trioxo-l, 6, 7, 9, 10, 11, 12. 14. 15, 16, 17, 18-dodecaidro- 5H- 2,22:5.8- dimetano-4. 13, 2, 8, ll-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxamida<formula>formula see original document page 70</formula>

O composto título foi preparado de acordo com oprocedimento usado para o EXEMPLO 14 (usando os estágios 2 e 3), excetoque (5R, 7S, 10S)-10-terc-butil- 15, 15-dimetil- 3, 9, 12-trioxo- 1,6, 7,9, 10,11, 12, 14, 15, 16- DECAIDRO - 5H- 2, 22: 5,8-dimetano- 4, 13, 2, 8, 11-benzodioxatriazacicloicosina- 7-carboxilato de metila (EXEMPLO 3, Estágio1) foi usado em lugar de (5R, 7S, 10S)-10-terc-butil-3, 9, 12-trioxo-1, 6, 7, 9,10, 11, 12, 14, 15, 16-decaidro- 5H-2, 22: 5, 8- dimetano- 4, 13, 2, 8, 11-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxilato de metila no Estágio 2. RMN Ή(400 MHz, ppm, CDCl3) δ 9,91 (S, lh), 7,22 (t, 1H), 7,09 (d, 2H), 7,05 (d,1H), 5, 77 (m, 1H), 5, 60 (s, 1H), 5,45 (d, 1H), 5, 29 (s, 1H), 5, 15 (d, 1H), 4,72 (q, 2H), 4, 40 - 4, 55 (m, 4H), 4, 30 (d, 1H), 4, 25 (d, 1H), 3,78 (dd, 1H),3, 26 (d, 1H), 2, 91 (m, 1H), 2, 50 (m, 3H), 2, 39 (m, 3H), 2, 11 (Μ, 1H), 1,98 (m, 2H), 1, 51 (m, 2H), 1,38 (m, 4H), 1,18 (m, 1H), 1,04 (s, 9H), 1,01 (t,3H), 0,79 (s, 3H). LRMS (ESI) m/z [(M + H)+; calculado para C37H52N5O9S:742].

EXEMPLO 16

(5R.7S. lOSVIO-terc-Butil- N- (Y1R. 2RV1-{[ciclopropilsulfonil)amino1carbonin-2-etilciclopropilV 3, 9. 12-trioxo-1, 6,7, 9, 10, 11, 12. 14. 15, 16-decaidro-5H-2.22: 5, 8-dimetano-4, 13, 2, 8, 11-benzodioxatrioxacicloicosina-7-carboxamida qil- 16)<formula>formula see original document page 71</formula>

A uma solução de (5R, 7S, 10S)-10-terc-butil- 3, 9, 12-trioxo-1, 6, 7, 9, 10, 11, 12, 14, 16, 16-decaidro-5H- 2,22: 5,8- dimetano-4,13, 2, 8,11 -benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxilato de metila (EXEMPLO 14,

Estágio 1) (60 mg, 0,12 mmol) em THF (1 ml) e MeOH (0,5 ml) foiadicionado LiOH (1,17 ml 1 N, 1,17 mmol). A mistura da reação foi aquecidaa 40°C e agitada durante 1 hora, em cujo período de tempo o consumocompleto do material de partida éster metílico foi observado através de LC-MS. A mistura foi então processada com HCl 0,5 N e EtOAc. A camadaorgânica foi então secada com K2CO3 e o solvente foi removido in vácuo. Oproduto bruto foi absorvido em DMF (1 ml).

À solução acima, foi adicionado cloreto de (IR, 2R)-1-{[(ciclopropilsulfonil) amino] carbonil} -2- etilciclopropanamínio (32 mg,0,12 mmol), TBTU (48 mg, 0,15 mmol) e DIPEA (0,044 ml, 0, 25 mmol) e amistura da reação foi agitada, em temperatura ambiente, durante 2 horas. Amistura da reação foi diretamente purificada através de HPLC de fase reversapara fornecer (5R, 7S, 10S)-10-terc-butil-N- ((IR, 2R)-1-{[ciclopropilsulfonil)amino]carbonil}-2-etilciclopropil)-3, 9, 12-trioxo-l, 6, 7,9, 10, 11, 12, 14, 15, 16-decaidro-5H-2, 22: 5,8-dimetano-4, 13, 2, 8, 11-benzodioxatriazacicloicosina -7- carboxamida (55 mg, 67% de rendimento).RMN 1H (500 MHz, ppm, CD3OD) δ 7, 33 (d, 1H), 7, 26 (t, 1H), 7, 16 (d,1H), 6, 39 (d, J= 15,7 Hz, 1H), 6, 13 (Μ, 1H), 5, 37 (s, 1H), 4, 69 (m, 4H), 4,47 - 4, 28 (m, 4H), 3, 89 (m, 1H), 3, 83 (d, 1H), 2, 98 (m, 1H), 2, 40 (Μ, 2H),2, 31 (Μ, 1H), 2, 11 (t, 1H), 1, 99 (s, 1H), 1, 73 (s, 1H) 1, 60 (m, 2H), 1, 52(m, 1H), 1, 29 - 1, 15 (m, 3H), 1, 08 (s, 9H), 0,98 (t, 3H). LRMS (ESI) m/z714 [(M + H)+; calculado para C35H48N5O9S: 714].EXEMPLO 17

[5R. 7S. IOSVl O-terc-Butil-N-C 1R, 2R)-1-(TfciclopropilsulfoniD aminolcarbonin-2-etilciclopropil)- 3. 9, 12-trioxo-6, 7,9, 10. 11, 12. 14, 15, 16, 17-decaidro-1H. 5H-2,23: 5,8-dimetano-4, 13, 2, 8,11- benzodioxatriazacicloenicosina-7-carboxamida CIII- 207)

<formula>formula see original document page 72</formula>

Estágio 1: (5R, 7S. lOSVlO-terc-butil-3. 9, 12-trioxo- 6, 7, 9,10, 11, 12, 14, 15, 16, 17-decaidro - 1H. 5H- 2, 23:5, 8-dimetano- 4, 13, 2, 8,11-benzodioxatriazacicloenicosina-7-carboxilato de metila

<formula>formula see original document page 72</formula>

(5R, 7S, 1OS)-10-terc-butil-3, 9, 12-trioxo - 6, 7, 8, 9, 10, 11,12, 14, 15, 16, 17-decaidro- 1H, 5H- 2,23: 5,8- dimetano-4, 13, 2, 8, 11-benzodioxatriazacicloenieosina-7 carboxilato de metila foi preparado deacordo com o procedimento usando para (5R, 7S, 10S)-10-terc-butil-15, 15-dimetil-3, 9, 12- trioxo- 1, 6, 7, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 16-decaidro-5H-2,22:5,8-dimetano- 4, 13, 2, 8, 11-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxilato demetila (EXEMPLO 3, estágio 8), exceto que 3-metil- N- [(hex- 5-enilóxi)carbonil]-L- valina (preparado de acordo com o procedimento abaixo) foiusado em lugar de N-{[(2, 2- dimetilpent-4- enil) oxi] carbonil}-3-metil- L-valina no Estágio 7. LRMS (ESI) m/ ζ 528 [(M + H)+; calculado paraC28H38N3O7: 528].

Estágio 2: (5R. 7S, lOSVIO-terc-Butil- N-(T1R, 2R)-1-(IYciclopropilsulfonil) aminol carboniU-2- etilciclopropil)-3, 9, 12-trioxo- 6,7.9. 10. 11. 12, 14. 15. 16, 17-decaidro-lH, 5H- 2. 23: 5.8-dimetano-4, 13, 2,8.11-benzodioxatriazacicloenicosina-7-carboxamida

O EXEMPLO 17 foi preparado de acordo com o procedimentousado para o EXEMPLO 16, exceto que usando (5R, 7S, 10S)-10-terc-butil-3, 9, 12-trioxo -6, 7, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 16, 17-decaidro - 1H, 5H- 2,23: 5,8-dimetano-4, 13, 2, 8, ll-benzodioxatriazacicloenicosina-7-carboxilato demetila em lugar de (5R, 7S, 10S)-10-terc-butil-3, 9, 12-trioxo- 1, 6, 7, 9, 10,11, 12, 14, 15, 16-decaidro - 5H- 2, 22: 5,8-dimetano- 4, 13, 2, 8, 11-benzodioxatriazacicloicosina -7-carboxilato de metila (EXEMPLO 14,Estágio 1). RMN 1H (500 MHz, ppm, CD3OD) δ 9, 06 (s, 1H), 7, 27 (t, 1H),7,24 (d, 1H), 7, 18 (d, 1H), 6, 40 (d, J = 16, 4 Hz, 1H), 6, 11 (m, 1H), 2, 98(m, 1H), 2, 50 (q, 1H), 2, 78 (m, 2H), 2, 15 (m, 1H), 1, 77 1, 54 (m, 8H), 1,32-1,19 (m, 4H), 1,11 (m, 1H), 1,07 (s, 9H), 0,98 (t, 3H). LRMS (ESI) m/ ζ 728[(M + H)+; calculado para C36H50N5O9S: 728].

EXEMPLO 18

[5R. 7S. 1QS V10-terc-Butil-N-(Y 1R. 2R)-1-{[(ciclopropilsulfoniDaminolcarbonil}-2-etilciclopropilV15, 15- dimetil-3, 9,12-trioxo- 6. 7. 9. 10. 11. 12. 14, 15. 16. 17-decaidro - 1H, 5H- 2, 23: 5,8-dimetano- 4, 13. 2. 8, 11 -benzodioxatriazacicloenicosina-7-carboxamida (III-208)

Estágio 1: (5R, 7S, 10S)-10-terc-butil-15, 15-dimetil-3, 9, 12-trioxo-6, 7, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 16, 17-decaidro-1H, 55-2,23: 5, 8-dimetano-4, 13, 2, 8, 11 -benzodioxatriazacicloenicosina-7-carboxilatde metila.<formula>formula see original document page 74</formula>

(5R, 7S, 1OS)-10-terc-butil-15, 15-dimetil- 3, 9, 12-trioxo- 6,7, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 16, 17- decaidro-ΙΗ, 5H, 2, 23: 5,8-dimetano-4, 13, 2,8,1l-benzodioxatriazacicloenicosina-7-carboxilato de metila foi preparado deacordo com o procedimento usado para (5R, 7S, 10S)-10- terc-butil- 15, 15-dimetil- 3, 9, 12-trioxo-l, 6, 7, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 16-decaidro-5H- 2,22:5,8-dimetano- 4, 13, 2, 8, 11- benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxilato demetila (EXEMPLO 3, Estágio 8), exceto pelo fato de que N- {[(2,2-dimetilex-5 -enil)oxi] carbonil} -3 -metil- L-valina (preparado de acordo com oprocedimento abaixo) foi usado em lugar de N-{[(2, 2-dimetilpent-4-enil)oxi]carbonil}-3-metil-L-valina no Estágio 7. LRMS (ESI) m/ ζ 556 [(M+ H)+; calculado para C30H42N3O7: 556].

Estágio 2: (5R, 7S, 10S)-10-terc-butil-N- ((IR, 2R)-1-{[(ciclopropilsulfonil) amino] carbonil}-2- etilciclopropil)-15, 15-dimetil- 3,9, 12-trioxo-6, 7,9, 10, 11, 12, 14, 15, 16, 17-decaidro-lH, 5H-2,23: 5, 8-dimetano-4, 13, 2, 8, 1 l-benzodioxatriazacicloenicosina-7-carboxamida.

O EXEMPLO 18 foi preparado de acordo com o procedimentousado para o EXEMPLO 16, exceto pelo uso de (5R, 7S, 10S)-10-terc-butil-15, 15-dimetil- 3, 9, 12-trioxo- 6, 7, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 16, 17-decaidro-lH,5H- 2, 23: 5, 8-dimetano- 4, 13, 2, 8, 11-benzodioxatriazacicloenicosina -7-carboxilato de metila (EXEMPLO 14, Estágio 1).

RMN 1H (500 MHz, ppm, CD3) δ 10,5 (s, 1H), 7,24 (m, 2H),7,17 (d, 1H), 7,11 (d, 1H), 6,61 (s, 1H), 6, 28 (d, J = 16, 4 Hz, 1H), 5,95 (m,1H), 5,58 (m, 1H), 5,31 (s, 1H), 4,71 (m, 2H), 4,55 (m, 2H), 4, 46 (d, 2H),4,29 (dd, 1H, 4,17 (d, 1H), 3, 89 (d, 1H), 3,32 (d, 1H), 2,92 (m, 1H), 2,59 (m,1H), 2, 21 - 2,30 (m, 2H), 2,08 (m, 1H), 1,60-1,78 (m, 6H), 1,22-1,31 (m,5Η), 1, 06 (s, 9Η) 1,04 (t, 3Η), 0,093 (t, 3Η), 0,87 (s, 3Η).

LRMS (ESI) m/z 756 [(M + H)+; calculado para C38H54N5O9S: 756],

Preparação de N-í(Pent-4-eN-l-ilóxi) carbonill-L-norleucina;

<formula>formula see original document page 75</formula>

A uma solução de l-penten-4-ol (0,95 g, 11,0 mmol) em DMF(15 ml) a O0C foi adicionado carbonildiimidazol (1,79 g, 11,0 mmol). Amistura da reação foi aquecida à temperatura ambiente e agitada durante 30minutos. Hidrocloreto de éster metílico de L-norleucina (2,0 g, 11,0 mmol)foi então adicionado, a mistura da reação foi aquecida a 5O0C e agitadadurante 15 minutos. Mediante resfriamento, a mistura da reação foi diluídacom éter etílico e lavada, duas vezes, com água. A camada orgânica foisecada com sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O produto bruto foipurificado através de cromatografia em sílica gel (eluição gradiente de 10 a90% de acetato de etila em hexanos) de modo a fornecer 2,1 g (74% derendimento) de N-[(pent-4-en-l-ilóxi) carbonil]-L-norleucinato de metilacomo um óleo claro.

A uma solução agitada de N-[(pent-4-enilóxi)carbonil]-L-norleucinato de metila (8,50 g, 33,03 mmol) em THF (20 ml) foi adicionadoNaOH 1 N (20 ml). Esta solução da reação foi agitada, em temperaturaambiente, durante 3 horas, e então acidificada para o pH 3 com HCl 1 N, eextraída com EtOAc (3 χ 250 ml). A camada de EtOAc combinada foi lavadacom 50 ml de água, 50 ml e salmoura, secada com sulfato de sódio, filtrada econcentrada para fornecer 7,09 g (88% de rendimento) do produto do títulocomo um óleo claro. LRMS (ESI) m/ ζ 244 [(M + H)+; calculado paraCi2H22NO4: 244].Preparação de 3-MetiI-N-f(pent-4-enilóxi) carbonill-L-valina:

<formula>formula see original document page 76</formula>

Uma solução de 4-pentenol (7,22 g, 83, 8 mmol) e trifosgênio(11,3 g, 38,1 mmol) em dioxano (160 ml) foi resfriada a O0C, seguida pelaadição, em gotas, de DIPEA (9,85 g,76,2 ml). A suspensão branca foi agitada,de modo vigoroso, durante 1 hora a 25°C, e então resfriada a O0C. Umasolução 1 N de NaOH (76, 2 ml) e t-butil glicina (10,0 g, 76, 2 mmol) foiadicionada. A suspensão resultante foi aquecida a 25°C e agitada durante 18horas. Aproximadamente metade do dioxano foi removida in vácuo, a soluçãofoi então acidificada com HCl 6 N e o produto desejado foi extraído comdiclorometano (3 χ 150 ml). Os produtos orgânicos combinados foramsecados com MgSO4 e concentrados para fornecer 13,7 g (73, 9% derendimento) de 3-metil-N-[(pent-4-enilóxi) carbonil] L- valina como um óleoincolor. LRMS (ESI) m/ ζ 244 [(M + H)+; calculado para C12H22NO4: 244].

Preparação de N-[(Hex-5-en-l-ilóxi) carbonill-L-norleucina:

<formula>formula see original document page 76</formula>

acordo com o procedimento para N- [(pent-4- en-l-ilóxi) carbonil]-L-norleucina através do uso de 5-hexenol em vez de 4-pentenol LRMS (ESI) m/z 258 [(M + H)+; calculado para Ci3H24NO4: 258],

N-[(Hex-5-en-l-ilóxi)carbonil]-L-norleucina foi preparado de

Preparação de 3-Metil-N-f(hex-5-enilóxi)carbonill-L-valina:

<formula>formula see original document page 76</formula>3 -Metil-N[(hex-5 -enilóxi) carbonil]-L-valina foi preparado deacordo com o procedimento para 3-metil- N-[(pent-4-enilóxi)carbonil]-L-valina através do uso de 5-hexenol em vez de 4-pentenol. LRMS (ESI) m1 ζ258 [(M + H)+; calculado para Ci3H24NO4: 258].

Preparação de N-fHept-6-en-l-ilóxi)carbonil]-L-norleucina:

<formula>formula see original document page 77</formula>

N- [(hept-6-en-1 -ilóxi) carbonil]-L-norleucina foi preparado deacordo com o procedimento para N-[(pent-4-en-l-ilóxi)carbonil]-L-norleucina através do uso de 6-heptenol em vez de 4-pentenol. LRMS (ESI)m/z 272 [(M + H)+; calculado para C14H26NO4: 272].

Preparação de N-(í(2,2-Dimetilpent-4-eninoxilcarbonil}-3-metil-L-valina:

<formula>formula see original document page 77</formula>

Estágio 1: 2,2-Dimetilpent-4-en-1 -ol

<formula>formula see original document page 77</formula>

Uma solução do ácido 2,2-dimetil 4-pentenóico (6,0 g, 46,8mmol) em THF anidro foi resfriada em um banho de gelo para O0C. Umacorrente lenta de hidreto de alumínio e lítio 1 M em THF (56, 2 ml, 56, 2mmol) foi adicionada e a reação foi deixada aquecer a 25°C. A mistura dareação foi agitada durante 1 hora, antes de ser despejada em HCl 1 N e éterdietílico. A camada orgânica foi separada, secada com MgSO4 e concentradapara prover 2,2-dimetilpent-4-en-l-ol como um óleo claro (4, 7 h, 87, 9% derendimento).

Estágio 2: N-(r(2.2-Dimetilpent-4-eniQoxi]carbonil^3-metil-L-valinaDIPEA (2, 48 g, 19,2 mmol) foi adicionado, em gotas, a umasolução a O0C de 2,2- dimetilpent-4-en-l-ol (2,24 g, 19,6 mmol) e trifosgênio(2,56 g, 8,64 mmol) em 60 ml de dioxano. A suspensão branca resultante foiagitada durante 5 minutos a O0C3 e então deixada aquecer a 25°C durante 1hora. A suspensão foi resfriada a O0C com um banho de gelo, seguida pelaadição de NaOH 1 N (19, 2 ml) e L-Terc- butil glicina (2,52 g, 19,2 mmol). Amistura da reação foi aquecida a 25°C e agitada durante 72 horas. O dioxanofoi removido in vácuo e a mistura da reação foi tornada básica para um pH de12, com NaOH 1 Ν. A camada aquosa foi extraída com diclorometano (3 χ150 ml) e então acidificada para o pH ~1 com HCl 6 Ν. A camada aquosa foiextraída com diclorometano (3 χ 150 ml). As camadas orgânicas combinadasforam secadas com MgSO4 e concentradas para fornecer N-{ [(2,2-dimetilpent-4-enil) oxi] carbonil}-3-metil-L-valina como um pó branco (4,26g, 827% de rendimento). LRMS (ESI) m/ ζ 272 [(M + H)+; calculado paraC14H26NO4:272],

Preparação de N-(f(2.2-Dimetilex-5-enir)oxilcarbonil}-3-metil-L-valina:

<formula>formula see original document page 78</formula>

Estágio 1: 2.2- dimetilex-5-enoato de etila

<formula>formula see original document page 78</formula>

A uma solução agitada de diisopropilamina (13, 38 ml, 94, 70mmol) em THF anidro (50 ml), a -IQ0C e sob nitrogênio, foi lentamenteadicionado n-BuLi 2,5 M em éter (36,50 ml, 91, 15 mmol). Agitada durante15 minutos, a esta reação foi então lentamente adicionado, em gotas,isobutirato de etila (11,51 ml, 86,09 mmol) em THF (50 ml), agitada durante20 minutos antes de que seja adicionado, em gotas, 4- bromo-l-buteno (9, 79ml, 96, 42 mmol) em HMPA (20 ml). A solução da reação foi então agitada a-5O0C em 5 horas, subitamente resfriada com HCL 1 M (10 ml) e água (100ml), e então extraída com éter (3 χ 125 ml). A camada de éter combinada foilavada com água (4 χ 70 ml), NaHCO3 saturado aquoso (2 χ 70 ml), secadacom Na2SO4, filtrada e concentrada. O produto bruto foi cromatografado porcintilação em 120 g de sílica gel 60, eluindo com 1- 20% de EtOAc/ Hexano,para fornecer o composto título como um óleo claro (11,01 g, 75% derendimento). LRMS (ESI) ml ζ 171 [(M + H)+; calculado para Ci0Hi9O2: 171].

Estágio 2: 2.2-Dimetilex-5-en-1 -ol

A uma solução agitada de LAH 1 M em éter (142,14 ml,142,14 mmol), a O0C e sob nitrogênio, foi adicionado, em gotas, 2,2-dimetilex-5-enoato de etila (11, 00 g, 64,61 mmol), dissolvido em 100 ml deéter anidro durante 1 hora. Esta solução da reação foi agitada a 22°C durante20 horas, e então subitamente resfriada com água (3 ml), NaOH 1 M (11 ml) eágua (9 ml), secada com Na2SO4, filtrada e concentrada para fornecer ocomposto título (7,22 g, 87, 09%). RMN 1H (500 MHz, CDCl3) δ 5, 85 - 5,77 (m, 1H); 5,01 (d, 1H); 4, 93 (d, 1H); 3, 33 (d, 2H); 2, 03 (m, 2H); 1, 34 (M,2H); 0, 89 (Μ, 6H) ppm.

Estágio 3: N-(r(2,2-Dimetilex-5-enil)oxi1carbonin-3-metil-L-valina

A uma solução agitada de 2,2-dimetilex-5-en-l-ol (10,75 g,83,85 mmol) em 1,4-dioxano anidro (100 ml), a O0C e sob nitrogênio, foiadicionado trifosgênio (13, 69 g, 46,12 mmol) e então DIPEA (14, 61 ml, 83,85 mmol), cuidadosamente. Esta solução da reação foi agitada a 22°C durante1 hora, resfriada a O0C e foram então adicionados, lentamente, NaOH 1 N (83,85 ml, 83,85 mmol) e L- terc- leucina (11, 00 g, 83, 85 mmol) e então agitadaa 22°C durante 20 horas. A solução da reação foi tornada básica para o pH 10com NaOH 1 N, lavada com CH2Cl2 (3 χ 100 ml), acidificada para o pH 5com HCl IN e extraída com CH2Cl2 (3 χ 150 ml). A camada de CH2Cl2combinada foi lavada com água (100 ml), secada com Na2SO4, filtrada econcentrada para fornecer o produto do título (20, 26 g, 84, 66%). RMN Ή(500 MHz, CDCl3) δ 5, 85 - 5,77 (m, 1H); 5, 24 (d, 1H); 5, 01 (d, 1H); 4, 93(d, 1H); 4, 20 (d, 1H); 3, 86 (d, 1H); 3, 79 (d, 1H); 2, 01 (m, 2H); 1, 36 (M,2H); 1, 04 (s, 9H); 0, 92 (Μ, 6H) ppm. LRMS (ESI) m/ ζ 286 [(M + H)+;calculado para Ci5H28NO4: 286].

Preparação de Cloreto de (IR, 2R)-1-(r(cicIopropilsulfoninaminolcarbonil}-2-etilciclopropanamínio;

<formula>formula see original document page 80</formula>

Uma mistura de cloreto de (1E, 2S)-l-{[(ciclopropilsulfonil)amino] carbonil} -2- vinilcicloproanamínio (Llinas-Brunet et al. US 03/15755e Wang et al. WO 03/ 099274) (),05 g, 0, 187 mmol) e paládio sobrecarbono (10% em peso, 0,01 g) em EtOAc (5 ml) foi vigorosamente agitadasob atmosfera de nitrogênio provida por um balão de hidrogênio durante 1hora. A mistura da reação foi filtrada e concentrada para fornecer cloreto de(IR, 2R)-1- {[(ciclopropilsulfonil) amino] carbonil} -2- etilciclopropanamino(0,045 g, 89% de rendimento).

EXEMPLO 19

(5R. 7S, 1OS)-10-terc-Butil-N-CC 1R. 2SV1-(IYciclopropilslfonil) aminol carbonin-2-vinilciclopropil)-15J5- dimetil-3, 9,12-trioxo- 6. 7. 9. 10, 11. 12. 14, 15. 16. 17. 18. 19-dodecaidro-lH. 5H- 2,23:5.8- dimetano- 4. 13. 2, 8. 1 l-benzodioxatriazacicloenicosina-7- carboxamidaqil-210)<formula>formula see original document page 81</formula>

O EXEMPLO 19 foi preparado a partir do ácido (5R, 7S,1OS)-10-terc-butil-15, 15-dimetil-3,9, 12-trioxo- 6, 7, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 16,17, 18, 19-dodecaidro -1H, 5H-2,33: 5,8-dimetano-4, 13, 2, 8, 11-benzodioxatriazacicloenicosina-7-carboxílico (EXEMPLO 13, PreparaçãoAlternativa, Estágio 4) usando o procedimento para o Exemplo 3, Estágio 10.RMN 1H (500 MHz, CD3OD, ppm) δ 7, 25- 7, 09 (m, 3H), 5, 82 - 5, 74 (m,1H), 5, 35 - 5, 29 (m, 2H), 5,15-5,12 (Μ, 1H), 4, 75 - 4, 59 (m, 3H), 4, 45 -4, 38 (m, 2H), 4,21 - 4, 12 (m, 1H), 4, 13 - 4, 09 (Μ, 1H), 3, 95 - 3, 92 (M,1H), 2, 98 - 2, 94 (m, 1H), 2, 62 - 2,54 (m, 1H), 2, 49 - 2, 46 (m, 2H), 2, 25 -2, 21 (Μ, 1H), 2, 19 - 2, 13 (m, 1H), 1,90 - 1,88 (m, 1H) 1, 52 (m, 2H), 1, 48- 1, 45 (m, 1H), 1, 40- 1, 18 (m, 6H), 1, 15 - 1,00 (m, 15 H), e 0, 81 (m, 4H).LRMS (ESI) m/ ζ 756, 4 [(M + H)+; calculado para C38H53N5O9S: 755, 9].

EXEMPLO 20

[5R. 7S. 10SV10- Cicloexil- N ((IR. 2S)_=Iz(IYciclopropilsulfonil) aminol carboniü -2- vinilciclopropilV15, 15-dimetil-3,9. 12^trioxo- 6. 7. 9, 10.11. 12. 14, 15. 16. 17-decaidro - IR 5H-2, 23: 5, 8- dimetano- 4. 13. 2. 8. 1 l-benzodioxatriazacicloenicosina-7-carboxamida(III- 225)

<formula>formula see original document page 81</formula>

O EXEMPLO 20 foi preparado através do uso dosprocedimentos a partir do EXEMPLO 13, Preparação Alternativa, Estágios 1,2, 4, e 5, usando o ácido (2S)-cicloexil ({[(2,2-dimetilex—5-en-l-il) oxi]carbonil} amino) acético no Estágio 1 e cloreto de (IR, 2S)-1-{[(ciclopropilsulfonil) amino] carbonil}-2-vinilciclopropanamínio no Estágio5. RMN 1H (500 MHz5 CD3OD5 ppm) δ 7, 26 (m, 1H), 7, 20 (t, J = 7,5 Hz51H), 7,15 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 6, 38 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 5, 99 - 6,02 (m, 1H),5, 74 - 5, 80 (m, 1H), 5,29-5,34 (m, 2H), 5, 11 - 5,14 (m, 1H), 4,79 - 4,81 (m,2H), 4,64 - 4, 72 (m, 3H), 4,56 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 4, 36 - 4, 40 (m, 2H), 4,18 (d, J= 11, 5 Hz, 1H), 4, 10 (d, J = 5, 5 Hz, 0,5 H) 3, 91-3, 94 (dd, J= 11,5, 3, 5 Hz, 1H), 3,34 (d, J = 11, 0 Hz, 1H), 2, 95 - 2, 97 (m, 1H), 2, 52 - 2,56(m, 1H), 2, 16 - 2, 35 (m, 5H), 1,65-1,82 (m, 8H), e 0, 85 - 1,43 (m, 17 H).LRMS (ESI) m/ ζ 780, 4 [(M + H)+; calculado para C40H53N5O9S: 780, 9].

EXEMPLO 21

(5R, 7S, lOSVlO-cicloexil- N-((1R, 2R)-1-{[(ciclopropilsulfonil) aminol carbonin-2-etilciclopropil)-15, 15-dimetil-3,9,12-trioxo - 6. 7. 9,10,11.12,14,15,16.17,18,19-dodecaidro - 1H, 5H, -2, 23: 5, 8 - dimetano- 4, 13, 2, 8, ll-benzodioxatriazacicloenicosina-7-carboxamida (III- 226)

<formula>formula see original document page 82</formula>

O EXEMPLO 21 foi preparado a partir do EXEMPLO 20,usando o procedimento descrito para o EXEMPLO 8. RMN Ή (500 MHz,CDCl3, ppm) δ 10, 13 (s, 1H), 7,22 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7, 10 (d, J = 7,5 Hz,1H), 7,05 (d, J = 7,5 Hz, 1 H), 6,73 (s, 1H), 5,40 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 5, 36 (m,1H), 4, 67 - 4,39 (m, 2H), 4, 16 (d, J = 11, 0 Hz, 1H), 3,82 - 3,85 (dd, J =11,5, 3,5 Hz, 1H), 3, 25 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 2,95 (m, 1H), 2,51- 2, 59 (m,2H), 2,36 - 2,44 (m, 2H), 1,73 - 1,76 (m, 5H), e 0,79 (br s, 2H). LRMS (ESI)ml ζ, 784, 4 [(M + H)+; calculado para C40H57N5O9S: 784, 4].

Preparação Alternativa de Hidrocloreto de (IR, 2RV1-amino-N-(ciclopropilsulfoniD-2- etilciclopropanocarboxamida

<formula>formula see original document page 83</formula>

Um vaso de hidrogenação foi carregado com uma suspensão(f(ciclopropilsulfonil)aminolcarboniU-2-etilciclopropin carbamato dede metanol (100 ml) de ((IR, 2S) -l-{[(ciclopropilsulfonil) amino] carbonil}-2-vinilciclopropil) carbamato de terc-butila (164 g, O, 50 mol) (Wang et al.,US 6.995.174) e 5% de Ru/C (seco, 7,5 % em peso, 12,4 g) e colocado sobagitação. O vaso foi colocado sob nitrogênio (20 psig) (138 kPa) e ventilado àpressão atmosférica, três vezes, para remover o oxigênio residual. O vaso foientão colocado sob hidrogênio (50 psig) (345 kPa). Após 20 horas, o vaso foiventilado para a pressão atmosférica. A suspensão da reação foi entãotransferida para fora da reação e filtrada através de flocos de soja (34 gramas,umectado com 100 ml de metanol, em peso), de modo a fornecer uma soluçãocastanho clara. Os flocos de soja foram enxaguados com metanol (200 ml χ2). As soluções de metanol combinadas foram concentradas sob pressãoreduzida, de modo a fornecer um produto bruto como um sólido branco (153g). O produto bruto foi suspenso em acetato de etila (800 ml), aquecido a40°C e então curado durante 30 minutos. A solução foi então semeada, curadadurante 30 minutos, e heptano (500 ml) foi adicionado através de um funil deadição, durante 30 minutos. O sólido parcialmente cristalizado foi resfriado àtemperatura ambiente e curado durante a noite após o que heptano adicionalterc-butila

<formula>formula see original document page 83</formula>(500 ml) foi adicionado. Após uma hora, heptano adicional (250 ml) foiadicionado através de um funil de adição, e a suspensão branca curadadurante uma hora. A solução foi filtrada e o sólido foi enxaguado comheptano / EtOAc (500 ml, 4: 1) e secado, sob pressão reduzida, para fornecer((IR, 2R)-1 -{[(ciclopropilsulfonil) amino] carbonil} -2- etilciclopropil)carbamato de terc-butila (125, 9 g).

Estágio 2: Hidrocloreto de (IR, 2R)-l-amino-N-(ciclopropilsulfonil)-2-etilciclopropanocarboxamida:

Uma solução do produto do Estágio 1 acima (92 g, 0,28 mol)em DCM (1200 ml) foi resfriada a O0C e HCl foi borbulhado através dasolução durante 10 minutos, o banho de resfriamento foi removido e a misturada reação agitada durante 2 horas. Nitrogênio foi borbulhado através damistura da reação durante 5 minutos, e os produtos voláteis foramevaporados. O resíduo foi submetido a um tratamento azeotrópico com DCM(3 x), de modo a fornecer um pó branco (75 g).

LRMS (M + H)+ Calculado = 233; encontrado = 233.

Preparação do ácido (2SÍ-cicloexil (ír(2,2-dimetilex-5-en-l-il) oxil carbonil) amino) acético:

<formula>formula see original document page 84</formula>

Ácido (2S)-Cicloexil({[(2,2-dimetilex-5-en-l-il) oxi] carbonil}amino)acético foi preparado de acordo com o procedimento para 3-metil-N-[(pent-4-enilóxi) carbonil]-L-valina, usando (2S)-amino (cicloexil) acético e2,2-dimetilex-5-en-1 -ol. LRMS (ESI) mI ζ 312,3 [(M + H)+; calculado paraC17H30NO4: 312, 2].

EXEMPLO 22

Ensaio de fluorescência resolvida por tempo (TRF) deProtease NS3 de HCV

O ensaio de TRF de NS3 protease foi efetuado em um volumefinal de 100 μΐ, em um tampão de ensaio contendo HEPES 50 mM, pH 7 5,NaCl 150 mM, 15% de glicerol, 0,15% de Triton X- 100, DTT 10 mM, e 0,1% de PEG 8 000. A NS3 protease foi previamente incubada com váriasconcentrações de inibidores durante 10- 30 minutos. O substrato do peptídeopara o ensaio é Ac- C (Eu) - DDMEE - Abu -[COO] - XSAK (QSY7) -NH2, em que Eu é um grupo rotulado com európio, ABU é um ácido 1-aminobutanóico que conecta uma ligação éster com o ácido 2-hidróxipropanóico (X). A hidrólise do peptídeo pela atividade de NS3 protease causaa separação do fluoróforo a partir do agente de resfriamento súbito, resultandoem um aumento na fluorescência. A atividade da protease foi iniciada atravésda adição do substrato de peptídeo TRF (concentração final de 50- 100 nM).A reação foi subitamente resfriada após 1 hora em temperatura ambiente, com100 μl de MES 500 mM, pH 5, 5. A fluorescência do produto foi detectadausando ou um fluorímetro Victor V2 ou um fluorímetro de fusão (PerkinElmer Life and Analytical Sciences) com excitação a 340 nm e emissão a 615nm, com 50- 400 με de atraso. As concentrações de teste de diferentes formasde enzima foram selecionadas com um sinal para a razão de fundo de 10-30.As constantes de inibição foram derivadas usando um ajuste de quatroparâmetros.

Os compostos nos Exemplos 1-21 foram testados de modo aTer um valor KI de menos que 100 nM(por exemplo, de menos que 1 nM) noensaio de TRF de NS3 protease, como acima descrito.

Claims (19)

1. Composto, caracterizado pelo fato de ser da fórmula (I):<formula>formula see original document page 86</formula>ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:ρ e q são ambos 1;R1 é CONR10SO2R6;R2 é alquila C^ ou alquenila C2.6, em que o referido alquila oualquenila é opcionalmente substituído por 1 a 3 halo;R3 é alquila Ci.g ou cicloalquila C3.8;R5 é H;R6 é cicloalquila C3.6;Y é C (=0);Z é O;M é alquileno Cm2 ou alquenileno C2-12; ecada R10 é independentemente H ou alquila Ci^.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizadopelo fato de que o composto pertence à fórmula IlI-a:<formula>formula see original document page 86</formula>ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

3. Composto de acordo com a reivindicação 2, caracterizadoque R1 é CONHSO2R6.

4. Composto de acordo com a reivindicação 3, caracterizadoque R6 é ciclopropila.

5. Composto de acordo com a reivindicação 4, caracterizadoque R2 é alquila C1.4 ou alquenila C2-4.

6. Composto de acordo com a reivindicação 5, caracterizadoque R3 é cicloalquila C5.6 ou alquila C 1.4.

7. Composto de acordo com a reivindicação 6, caracterizadoque M é alquileno C4.10 ou alquenileno C4. i0.

8. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizadoque o composto é selecionado a partir dos seguintes:<formula>formula see original document page 87</formula><formula>formula see original document page 88</formula><formula>formula see original document page 89</formula><formula>formula see original document page 90</formula><formula>formula see original document page 91</formula><formula>formula see original document page 92</formula> ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

9. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de quecompreende uma quantidade eficaz de um composto como definido emqualquer das reivindicações 1-8, ou um sal farmaceuticamente aceitável domesmo e um veículo farmaceuticamente aceitável.

10. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação-9, caracterizada pelo fato de que compreende ainda um segundo agenteterapêutico, selecionado a partir de um grupo que consiste de um agenteantiviral de HCV, um imunomodulador, e um agente antiinfectivo.

11. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 10, caracterizada pelo fato de que o agente antiviral de HCV é um agenteantiviral selecionado a partir do grupo, que consiste de um inibidor deprotease de HCV e de um inibidor de Polimerase NS5B de HCV.

12. Uso de um composto como definido em qualquer uma dasreivindicações 1-8, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,caracterizado pelo fato de ser na preparação de um medicamento para inibiratividade de protease NS3 de HCV em um paciente em necessidade domesmo.

13. Uso de um composto como definido em qualquer uma dasreivindicações 1-8, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,caracterizado pelo fato de ser na preparação de um medicamento paraprevenir ou tratar a infecção por HCV em um paciente que esteja emnecessidade do mesmo.

14. Uso de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelofato de que o referido medicamento compreende ainda pelo menos umsegundo agente terapêutico, selecionado a partir do grupo que consiste de umagente antiviral para HCV, um imunomodulador, e de um agenteantiinfectivo.

15. Uso de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelofato de que o agente antiviral para HCV é um agente antiviral selecionado apartir do grupo, que consiste de um inibidor de protease de HCV e de uminibidor de Polimerase NS5B de HCV.

16. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizadopelo fato de que o referido composto é:<formula>formula see original document page 94</formula>ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

17. Composição farmacêutica caracterizada pelo fato de quecompreende uma quantidade efetiva do composto como definido nareivindicação 16 e um veículo farmaceuticamente aceitável.

18. Uso de uma quantidade efetiva do composto comodefinido na reivindicação 16, caracterizado pelo fato de ser na preparação deum medicamento para inibir atividade de protease NS3 de HCV em umpaciente em necessidade do mesmo.

19. Uso de uma quantidade efetiva do composto comodefinido na reivindicação 16, caracterizado pelo fato de ser na preparação deum medicamento para prevenir ou tratar infecção por HCV em um pacienteem necessidade do mesmo.