AT502717A1

AT502717A1 - Pharmazeutische verwendung einer verbindung

Info

Publication number: AT502717A1
Application number: AT0183305A
Authority: AT
Original assignee: Omnica Gmbh
Priority date: 2005-11-09
Filing date: 2005-11-09
Publication date: 2007-05-15
Also published as: US20090186110A1; WO2007053865A1; JP5717317B2; JP2009514901A; WO2007053865A9

Description

Pharmazeutische Verwendung einer Verbindung
Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf die pharmazeutische Verwendung einer Verbindung der Formel I
<EMI ID=1.1>

(I),
R2O wobei
Ri OH, O-Alkyl aus 1 bis 6 C-Atomen oder O-Glycosyl ist,
R2, R3, Rj, R5und RÖunabhängig voneinander H, OH oder O-Alkyl aus 1 bis 4 C-Atomen sind,
und/oder eines pharmazeutisch akzeptablen Salzes oder Esters davon.
Weiters bezieht sich die vorliegende Erfindung auf einen Extrakt einer Pflanze, die ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus Psidium cattleianum, Psidium cattleianum ssp.

Lucidum, Psidium guajava, Psidium guineense, Psidium littorale, Psidium molle und Psidium schiedeanum.
In den letzten Jahren wurde festgestellt, dass einige mit einer Hyperglykämie in Zusammenhang stehende Erkrankungen, insbesondere zum Beispiel Diabetes mellitus I und II, mit der Aktivität des Dipeptidylpeptidase IV (DP-IV)-Enzyms in Beziehung stehen.
DP -IV ist eine membranassoziierte Peptidase aus 766 Aminosäuren, die in zahlreichen Geweben weit verbreitet ist. DP-IV existiert in Plasma auch in löslicher, zirkulierender Form. Eine erhebliche DP -IV- Aktivität ist im Plasma von Menschen und Nagetieren nachweisbar. Das erste biologische Prinzip einer membranassoziierten DP-IV bezieht sich auf intrazelluläre Signalwege. Die zweite biologische Hauptaktivität von DP-IV besteht in deren enzymatischer Funktion im Plasma.

Als Peptidase bevorzugt DP-IV Substrate mit einem aminoterminalen Prolin oder Alanin an Position 2, kann jedoch an Position 2 auch
NACHGEREICHT Substrate mit nicht bevorzugten Aminosäuren spalten. Beobachtungen in einer Reihe von Laboratorien unterstrichen die Bedeutung einer DP-IV-vermittelten Inaktivierung von GLP1 als wichtigstem bestimmenden Faktor der GLP-1 -Bioaktivität. Mehrere DP-IV-Inhibitoren wurden charakterisiert, und sie scheinen bei diabetischen Nagetieren die Blütglucose über eine Verlängerung der GLP-1- und GIP- Wirkung im Plasma zu senken. Die Verwendung von DP-IV-Inhibitoren bei der Behandlung von Erkrankungen wie z.B.

Diabetes mellitus wurde beispielsweise in der US 6,500,804 B2 vorgeschlagen.
Überraschenderweise wurde nun festgestellt, dass eine spezielle Klasse von chemischen Verbindungen als DP-IV -Inhibitor äusserst effektiv ist, wodurch diese Verbindungen für die Behandlung von Erkrankungen geeignet werden, die mit der DP-IV -Aktivität in Zusammenhang stehen.
Die vorliegende Erfindung bezieht sich daher in einem Aspekt auf die Verwendung einer Verbindung der Formel I
R4
<EMI ID=2.1>

(I),
R, O wobei
Ri OH, O-Alkyl aus 1 bis 6 C-Atomen oder O-Glycosyl ist,
R2, R3, Rt, R5und R6unabhängig voneinander H, OH oder O-Alkyl aus 1 bis 4 C-Atomen sind,
und/oder eines pharmazeutisch akzeptablen Salzes oder Esters davon für die Herstellung eines Medikaments zur Behandlung einer Erkrankung oder eines Zustands, die bzw.

der mit der Aktivität von DP-IV oder DP-IV-artigen Enzymen in Beziehung steht oder durch solche verursacht wird.
Die Verbindungen der Formel I sind Mitglieder der chemischen Klasse der Flavonole.
NACHGEREICHT Bevorzugte Beispiele für Verbindungen der Formel I sind jene, bei denen Ri O-ss-DGlucopyranosyl, O-ss-D-Galactopyranosyl, O-[alpha]-L-Arabinopyranosyl oder O-[alpha]-LRhamnopyranosyl ist.
Besonders bevorzugt ist die Verwendung von Guaijaverin mit der Formel II
<EMI ID=3.1>

OH
OH
<*>H (II)
<EMI ID=3.2>

OH
O-Ara
Es wird berichtet, dass Verbindungen der Flavonolgruppe eine hemmende Wirkung auf Aldosereductase haben (vgl. Matsuda et al., Pure Appl. Chem. Vol. 74 (2002), Nr. 7, S. 1301-1308; Chaudry et al. Biochem Pharmacol. 1983, 32 (13), 1995-1998; Yoshikawa et al., Chem. Pharm. Bull (Tokyo) 1998, 46 (1), 113-119).

Daher wurden Verbindungen dieser Klasse für die Behandlung von durch Diabetes verursachten Zuständen, wie z.B. retinopathischen Zuständen, vorgeschlagen (insbesondere in Hinblick auf die Heilkräutermedizin, vgl. www.rain-tree . com pedra.htm oder http://www.e2121.com/ffood.html).
Es wurde jedoch eben erst entdeckt, dass Verbindungen dieser Gruppe wirksam gegen die DP-IV -Aktivität sind und folglich an sich für die Behandlung von Diabetes oder verwandten Erkrankungen geeignet sind.
Die Flavonolverbindungen der Formel I sind erhältlich, indem aus diese Verbindungen enthaltenden Pflanzen, wie zum Beispiel Myrcia multiflora, Extrakte hergestellt werden und die gewünschten Verbindungen durch an sich bekannte Verfahren aus diesem Extrakt isoliert werden.
Ein weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung bezieht sich auf einen Extrakt einer Pflanze, die ausgewählt ist aus der Gruppe,

bestehend aus Psidium cattleianum, Psidium cattleianum ssp. Lucidum, Psidium guajava, Psidium guineense, Psidium littorale, Psidium molle und
NACHGEREICHT [ Psidium schiedeanum. Eine bevorzugte Pflanze dieser Gruppe ist Psidium guajava. Psidium guajava ist eine Pflanze der Myrtoideae-F am[iota]lie.
Die Pflanzen der obenstehend aufgelisteten Gruppe, insbesondere Psidium guajava, enthalten erhebliche Mengen an den Flavonolen der Formel I, insbesondere an Guaij averin.
Der erfindungsgemässe Pflanzenextrakt kann ein Extrakt der Blätter, der Früchte und/oder der Rinde der Pflanze sein.
Durch an sich bekannte Verfahren kann der Extrakt mit einem Lösungsmittel, ausgewählt aus der Gruppe, umfassend Wasser, Methanol, Ethanol, Aceton, Ethylacetat und Mischungen davon, hergestellt werden. Weiters kann der Extrakt durch alternative Verfahren, wie z.B.

Membranfiltertechniken, hergestellt werden, wobei z.B. der Saft aus der Frucht der Pflanze verwendet wird.
Vorzugsweise liegt der erfindungsgemässe Extrakt in fester Form vor, wie z.B. als Pulver.
Der erfindungsgemässe Extrakt kann vorzugsweise einen Guaij averinanteil von 0,5 Gew.% oder mehr, vorzugsweise von 10 bis 50 Gew.%, enthalten.
Ein weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung bezieht sich auf den erfindungsgemässen Extrakt zur Verwendung als Medikament.
Der erfindungsgemässe Extrakt kann insbesondere für die Herstellung eines Medikaments zur Behandlung einer Erkrankung und/oder eines Zustands verwendet werden, die bzw.

der mit der Aktivität von DP-IV oder DP-IV-artigen Enzymen in Beziehung steht und/oder durch solche verursacht wird.
Die Verwendung der Verbindungen der Formel I und/oder des erfindungsgemässen Pflanzenextrakts ist besonders geeignet für die Behandlung einer Erkrankung und oder eines Zustands, bei der bzw. bei dem es sich um eine Störung des Glucosestoffwechsels, wie z.B.

Diabetes mellitus, Fettleibigkeit und/oder Atherosklerose, handelt.
Weiters können die Verbindungen der Formel I und/oder der erfindungsgemässe Extrakt für andere therapeutische .Zwecke eingesetzt werden, wie z.B. zum Herabsetzen von LDLCholesterin, als Antioxidationsmittel, als schmerzstillendes Mittel und als blutstillendes
NACHGEREICHT Mittel, z.B. zum Erleichtern von Zuständen, die mit der Menstruation von Frauen zusammenhängen.
Mittels im Stand der Technik an sich bekannter Verfahren können die Verbindungen der Formel I und/oder der erfindungsgemässe Extrakt unter Verwendung von pharmazeutisch akzeptablen Arzneimittelträgern in pharmazeutisch akzeptable Zusammensetzungen umgewandelt werden.

Die Verabreichung kann nach verschiedenen, an sich bekannten Methoden erfolgen, zum Beispiel oral, topisch oder als Injektion.
Vorzugsweise beträgt der Gehalt an Verbindungen der Formel I in solchen Zusammensetzungen 0,5 Gew.% oder mehr.
Die Verbindungen der Formel I und oder der erfindungsgemässe Pflanzenextrakt können auch in Form eines Ernährungszusatzstoffs verwendet werden, beispielsweise als Bestandteil in funktioneller Nahrung, in einem alkoholfreien Getränk oder als Bestandteil in einem Kosmetikprodukt.
Weiters können die Verbindungen der Formel I und/oder der erfindungsgemässe Pflanzenextrakt mit anderen Pflanzenextrakten, wie z.B.

Extrakten von Bittermelone, Maulbeerbaumblättern und Banabablättem, vermischt werden.
Nachfolgend wird die Erfindung auf Basis der Figuren und Beispiele detaillierter beschrieben, wobei bevorzugte Ausführungsformen der Erfindung geoffenbart werden:
Fig. 1 zeigt die Hemmung von DP-IV durch den synthetischen Inhibitor P32/98.
Fig. 2 zeigt die Hemmung von DP-IV durch einen Ethanolextrakt von Psidium guajava.
Beispiel 1 - Allgemeine Beschreibung der Herstellung eines Ethanolextrakts von Psidium guafava
Das Produktionsverfahren zum Herstellen eines Extrakts aus den Blättern von Psidium guajava wird durch die folgenden Verfahrensschritte beschrieben:

- das Zermahlen von Psidium gw /<'>[alpha]v[alpha]-Blättem zu einem feinen Pulver,
- das Extrahieren mit Ethanol,
- das Absenken des Drucks der Extraktionsflüssigkeit und das Konzentrieren bis zum
NACHGEREICHT » Verdampfen von Ethanol,
- das Beseitigen unlöslicher Fremdstoffe durch Zentrifugation und das Erhalten einer geklärten Flüssigkeit,
- das Einfüllen der geklärten Flüssigkeit in eine mit einem makroporösen Harz gefüllte Chromatographiesäule, das Entfernen weiterer Fremdstoffe durch Wasser und danach das Desorbieren durch Ethanol und das Auffangen des ethanolischen Eluats,
- das Trocknen des Eluats, um einen Psidium guajava-Extrakt zu erhalten.
1. Extrakt: Pulverisierte Psidium gw [alpha]v[alpha]-Blätter werden bei 60+-2[deg.]C zweimal mit 80%igem Ethanol extrahiert. Die Extraktionszeit beträgt jeweils 2 Stunden.

Das Verhältnis des endgültigen Ethanolvolumens zum Gewicht des Rohmaterialpulvers beträgt 8 zu 1.
2. Konzentration: Der Druck wird verringert, und die Extraktionsflüssigkeit wird bei 60+-2[deg.]C konzentriert, bis kein Ethanol zurückbleibt. Das Vakuum sollte besser als -0,08 MPa sein.
3. Chromatographie: Die aus der Zentrifuge erhaltene geklärte Flüssigkeit wird auf ein makroporöses Harz geladen. Ein Teil der Fremdstoffe wird mit Wasser entfernt. Die Elution wird mit 95%igem Ethanol durchgeführt, bis die Flüssigkeit geklärt und die Farbe ein wenig gelblich ist. Die Fliessgeschwindigkeit sollte bei 15-20 ml/min gehalten werden. Der Anteil an Ethanol-desorbierter Flüssigkeit wird aufgefangen.
4. Trocknung: Der Druck wird verringert, und das Eluat wird konzentriert/getrocknet. Das Vakuum sollte besser als -0,08 Mpa sein.

Schliesslich wird ein Pulver erhalten.
Beispiel 2 - Herstellung von Psidium [sigma]ntaiava-[Epsilon]xtrakt
500 g pulverisiertes Rohmaterial (frische Psidium gw /[alpha]v[alpha]-Frucht) werden gewogen und in 2000 ml 80%iges Ethanol (3-halsiger Kochkolben) übertragen. Die Mischung wird bei 60[deg.]C 2 Stunden lang vorsichtig vermischt. Die Lösung wird filtriert. Das Filtrat wird gesammelt, und die Extraktion wird unter denselben Bedingungen mit 2000 ml 80%igem Ethanol wiederholt. Die Lösung wird erneut filtriert, und die beiden Filtrate werden kombiniert.
Das Filtrat wird unter verringertem Druck bei 60[deg.]C konzentriert, bis kein Ethanol zurückbleibt. Der Vakuumgrad beträgt -0,09 MPa.

Die resultierende ethanolfreie Flüssigkeit wird zentrifugiert, um feste Partikel zu entfernen. 200 ml Wasser werden zum Pellet hinzugefügt,
NACHGEREICHT und die Mischung wird erneut zentrifugiert. Die beiden Überstände werden kombiniert. Die geklärte Flüssigkeit wird auf einen makroporösen Harz (Typ Amberlite XAD4) geladen und zuerst mit 800 ml Wasser bei einer Durchflussgeschwindigkeit von 17 ml/min gespült, um einen Teil der Fremdstoffe abzuwaschen. Danach wird zur Desorption auf 1000 ml 95%iges Ethanol bei einer Durchflussgeschwindigkeit von 8,5 ml/min umgeschaltet, und das Eluat wird 2 Stunden lang gesammelt. Das Eluat wird unter verringertem Druck bei 60[deg.]C konzentriert, gefolgt von einer 5-stündigen Trocknung.
1 ,4 g Psidium gw [alpha]v[alpha]-Extrakt wird erhalten.

Es wird festgestellt, dass der Gehalt an Quercetin 0,10% und der Gehalt an Guaij averin 0^82% beträgt.
Beispiel 3 - Herstellung von Psidium guaiava-[Epsilon]xtrakt
20 kg zermahlenes Pulver aus Psidium gw[alpha]/[alpha]v[alpha]-Blättern werden gewogen und in ein 250 1Siedegefass gegeben, danach werden 160 1 80%iges Ethanol hinzugefügt, und die Mischung wird bei 60[deg.]C 2 Stunden lang vermischt. Die Lösung wird filtriert und erneut werden 160 1 80%iges Ethanol in den Rückstand gegossen. Die Mischung wird bei 60[deg.]C für weitere 2 Stunden extrahiert, filtriert, und danach werden die Filtratflüssigkeiten der beiden Extraktionsschritte zusammengemischt. Die resultierende Mischung wird unter verringertem Druck bei 60[deg.]C konzentriert, bis kaum Ethanol zurückbleibt. Der Vakuumgrad beträgt -0,09MPa.

Die erhaltene Mischung wird zentrifugiert. 40 1 Wasser werden dann zum Waschen des Rückstands nach der Zentrifugation verwendet, und die Filtratflüssigkeiten werden zusammengemischt. Die kombinierten Filtrate werden durch ein makrovemetztes makroporöses Harz (Typ Amberlite XAD4) getrennt. Zuerst werden 160 1 Wasser zum Waschen des Harzes nach der Absorption verwendet, wodurch ein Teil der Fremdstoffe beseitigt werden kann. Danach werden 350 1 80%iges Ethanol für den Desorptionsschritt verwendet. Die gelbbraune desorbierte Flüssigkeit wird aufgefangen. Die desorbierte Flüssigkeit wird unter verringertem Druck bei 60[deg.]C konzentriert. Danach wird sie in einem Vakuumtrockner 5 Stunden lang getrocknet.
1 ,8 kg Psidium gu /[alpha]v[alpha]-Extrakt wird erhalten.

Der Gehalt an Guaij averin beträgt 12,44% mit 1 ,02% Quercetin, wie durch eine HPLC- Analyse festgestellt.
Das obenstehende Produkt kann weiter konzentriert werden. Das Produkt wird in 200 1 Wasser aufgelöst. Die Lösung wird durch ein Polyamidharz (ein Polyamid 6-Harz von Fa. Sorbent Technologies, Inc.) getrennt: Zuerst werden 40 1 Wasser zum Waschen des Harzes verwendet, um einen Teil der Fremdstoffe zu entfernen. Danach werden 60 1 80%iges
NACHGEREICHT
Ethanol für den Desorptionsschritt verwendet, und die gelbbraune desorbierte Flüssigkeit wird aufgefangen. Die desorbierte Flüssigkeit wird unter verringertem Druck bei 60[deg.]C konzentriert und danach in einem Vakuumtrockner 5 Stunden lang getrocknet.
0,45 kg Psidium guajava-Extr kt wird erhalten.

Der Gehalt an Guaijaverin beträgt 42,09% mit 0,96% Quercetin, wie durch eine HPLC- Analyse festgestellt.
Beispiel 4 -Untersuchung der DP-IV-hemmenden Wirkung eines Psidium gM[alpha] av -Extrakts
Verfahren:
Die DP-IV-Aktivität wurde durch kolorimetrische Analyse gemessen.
Gly-Pro-4-NA (G0513, Sigma, St. Louis, MO), ein (synthetisches) chromogenes DP-IV Substrat, wird durch DP-IV in das Dipeptid Glycin-Prolin und 4-Nitroanilin hydrolysiert, dessen Auftrittsrate bei 405 nm quantitativ verfolgt wurde.
400 [mu]l Analysepuffer (9,5 g HEPES/1 destilliertes Wasser, pH- Wert auf 7,0 eingestellt, H4034, Sigma, St. Louis, MO), 150 [mu]l menschliches Plasma und 100 [mu]l Inhibitorlösung (oder -lösungsmittel) wurden in eine Photometerküvette übertragen, vorsichtig vermischt und bei 37[deg.]C 3 Minuten lang vorinkubiert.

Die Analyse wird danach durch Hinzufügen von 70 [mu]l Substratlösung (8,6 mg Gly-Pro-4-NA in 10 ml Analysepuffer) gestartet. Die Zunahme der Absorption bei 405 nm wurde über einen Zeitraum von 20 min erfasst.
Die DP-IV-Aktivität wird als lineare Veränderung der optischen Dichte über einen Zeitraum von 20 min ([Delta] Abs/min) ausgedrückt.
Vorbereitung der Probe:
Ein gemäss Beispiel 3 erhaltener Psidium gujava-Ex rakt wurde bei 45[deg.]C 24 Stunden lang in destilliertem Wasser unter Bedingungen des Rührens extrahiert. Danach wurde der Extrakt durch Zentrifugation (15.000 rpm, 15 min.), Filtration (Spritzenfilter, 0,45 [mu]M) geklärt, entsprechend verdünnt und der Testanalyse unterzogen.
Die Konzentration des Extrakts betrug 5 g Pulver/100 ml Wasser.

Aus dem geklärten Extrakt wurden durch Hinzufügen von Wasser verdünnte Lösungen hergestellt.
NACHGEREICHT Zu Vergleichszwecken wurde DP-IV durch P32/98 (3N-[(2S,3S)-2-Amino-3-methyl[rho]entanoyl]-l,3-thiazolidinhemifumarat), einem synthetischen Enzyminhibitor, gehemmt.
Eine Stammlösung von 1,60 mg P32/98/ml- Analysepuffer wurde hergestellt und mit Analysepuffer verdünnt, um Konzentrationen zwischen 0,50 mg/ml und 0,05 mg/ml zu ergeben. 100 [mu]l dieser Lösungen wurden als "Inhibitor" -Lösung zur Analyse hinzugefügt.
In demselben Testanalysesystem wurden Vergleichsversuche durchgeführt, wie weiter unten im Abschnitt "Ergebnisse" beschrieben.
Auswertung der Daten:

Die Ergebnisse sind als % der Hemmung ausgedrückt, welche abgeleitet wurde vom Vergleich der Testergebnisse, die bei Proben ohne hinzugefugten Inhibitor erhalten wurden, mit den Ergebnissen, die bei Proben mit hinzugefügten Inhibitoren oder hinzugefügtem Psidium gw [alpha]v[alpha]-Extrakt (beide in verschiedenen Konzentrationen) erhalten wurden.
Keine Hemmung (0%) in einer Testprobe weist auf dieselbe Zunahme der Absorption im Vergleich zu einer Probe ohne hinzugefügten Inhibitor hin. Eine vollständige Hemmung (100%) weist auf keine ersichtliche Zunahme der Absorption hin.
Alle Testergebnisse stellen den Mittelwert von 2 Proben dar.

Die relative Standardabweichung dieser Wiederholungsproben betrug stets weniger als 7%.
Ergebnisse:
Die Analyse wurde unter Anwendung wohlbekannter Routineverfahren kalibriert:
Es zeigte sich, dass der optimale pH- Wert des Testanalysesystems im Bereich zwischen pH=6,0 und pH=8,0 lag. Ein Analysetemperaturbereich zwischen 32 und 42[deg.]C beeinflusst die Enzymaktivität nicht massgeblich. Jegliche Substratkonzentration zwischen 5 und 10 [mu]g/10 ml erbrachte eine maximale Enzymaktivität. Es zeigte sich, dass die Zunahme der Absorption bei der gewählten Substratkonzentration für bis zu 45 Minuten linear war.

Es zeigte sich, dass Plasmavolumen zwischen 100 und 200 [mu]l unter den gewählten Analysebedingungen eine dosisabhängige Parallelverschiebung der Absorptionszunahme ergaben.
NACHGEREICHT Wiederholungstests unter den endgültigen Bedingungen der Testanalyse ergeben eine relative Standardabweichung von weniger als 7%.
Hemmungen des Enzyms durch wohlbekannte unspezifische Enzyminhibitoren und verschiedene Lösungsmittel erbrachten Ergebnisse, die in Tabelle 1 dargestellt sind.
Tabelle 1, Wirkung eines unspezifischen Enzyminhibitors auf die DP-IV-Aktivität
Enzyminhibitoren (100 mM) % Hemmung DP-IV
Ethylendiamin.HCl 19,0
EDTA 24,0
Thimerosal <[iota],o
Methimazol 10,0
Mercaptoethanol 15,3
Zink<++>19,3
Ethanol 52,8
Methanol 59,7
<EMI ID=10.1>
DMSO 75,3
Wie zu sehen ist, wird das Enzym DP-IV durch die gewählten unspezifischen Enzyminhibitoren nicht massgeblich blockiert.

Eine erwähnenswerte Hemmung wurde durch organische Lösungsmittel erzielt. Aufgrund dieser Ergebnisse wurden die verfügbaren Extrakte in Wasser aufgelöst, da sich zeigte, dass organische Lösungsmittel die Enzymaktivität blockieren, folglich hätte das Einbringen dieser Lösungsmittel zu nicht interpretierbaren Ergebnissen geführt.
Die Ergebnisse der mit dem synthetischen Inhibitor P 32/98 und dem Psidium guajavaExtrakt durchgeführten Tests werden in den Figuren 1 und 2 gezeigt, wobei die Konzentration des jeweiligen Inhibitors auf der Abszisse aufgetragen ist und die jeweils beobachtete Hemmung von DP-IV auf der Ordinate aufgetragen ist.
Wie in Fig. 1 dargestellt, ergibt der synthetische Inhibitor P32/98 eine glatte Kurve der Dosis/Reaktionshemmung.

Im gewählten Testanalysesystem erbrachte eine Konzentration von ungefähr 0,10 [mu]g/ Analysevolumen eine DP-TV-Hemmung von etwa 50%.
Wie in Fig. 2 dargestellt, ergibt der Extrakt von Psidium guajava ebenfalls eine glatte Kurve der Dosis/Reaktionshemmung. Im gewählten Testanalysesystem erbrachte eine
NACHGEREICHT Konzentration zwischen 100 und 1.000 [mu]g/ Analysevolumen eine DP-IV-Hemmung von etwa 50%.
Folglich zeigte sich, dass der Psidium guajava-Ex rakt DP-IV wesentlich hemmte. Der Wirksamkeitsunterschied zwischen Psidium guajava und dem synthetischen Inhibitor P 32/98 beträgt ungefähr 1.000.
NACHGEREICHT

Claims

Patentansprüche:

1. Verwendung eines Extrakts einer Pflanze, die ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus Psidium cattleianum, Psidium cattleianum ssp. Lucidum, Psidium guajava, Psidium guineense, Psidium littorale, Psidium molle und Psidium schiedeanum, für die Herstellung eines Medikaments zur Behandlung einer Erkrankung und/oder eines Zustands, die bzw. der mit der Aktivität von DP-IV oder DP-IV-artigen Enzymen in Beziehung steht und/oder durch solche verursacht wird.

1 1. Verwendung eines Extrakts gemäss einem der Ansprüche 4 bis 9 für die Herstellung eines Medikaments zur Behandlung einer Erkrankung und/oder eines Zustands, die bzw. der mit der Aktivität von DP-IV oder DP-IV-artigen Enzymen in Beziehung steht und/oder durch solche verursacht wird.

12. Verwendung gemäss einem der Ansprüche 1 bis 3 oder Anspruch 11 , wobei es sich bei der Erkrankung und/oder bei dem Zustand um eine Störung des Glucosestoffwechsels, wie z.B. Diabetes mellitus, Fettleibigkeit und oder Atherosklerose, handelt.

13. Verwendung einer Verbindung der Formel I <EMI ID=13.1>

R2O wobei

Ri OH, O-Alkyl aus 1 bis 6 C-Atomen oder O-Glycosyl ist,

R2, R3, Rt, R5und R6unabhängig voneinander H, OH oder O-Alkyl aus 1 bis 4 C-Atomen sind, und/oder eines pharmazeutisch akzeptablen Salzes oder Esters davon,

NACHGEREICHT und/oder eines Extrakts gemäss einem der Ansprüche 4 bis 9, als Ernährungszusatzstoff, beispielsweise als Bestandteil in funktioneller Nahrung, in einem alkoholfreien Getränk oder als Bestandteil in einem Kosmetikprodukt.

NACHGEREICHT 12

Geänderte Patentansprüche:

1 Verwendung einer Verbindung der Formel I <EMI ID=12.1>

Re

(I), wobei

R, OH O-Alkyl aus 1 bis 6 C-Atomen oder O-Glycosyl ist,

R2, R3,'R4, R5und R6unabhängig voneinander H, OH oder O-Alkyl aus 1 bis 4 C-Atomen sind,

und/oder eines pharmazeutisch akzeptablen Salzes oder Esters davon für die Herstellung eines Medikaments zur Behandlung einer Erkrankung oder eines Zustands, de bzw. der mt der Aktivität von DP-IV oder DP-IV-artigen Enzymen in Beziehung steht oder durch solche verursacht wird.

2. Verwendung gemäss Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass die Pflanze Psidium guajava ist.

2 Verwendung gemäss Anspruch 1 , wobei R, O-ss-D-Glucopyranosyl, O-ss-D-

Galactopyranosyl, O-[alpha]-L-Arabinopyranosyl oder O-[alpha]-L-Rhamnopyranosylst.

3. Verwendung gemäss Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass der Extrakt ein Extrakt der Blätter, der Früchte und/oder der Rinde der Pflanze ist.

3.

Verwendung gemäss Anspruch 1, wobei die Verbindung der Formel I Guaijaverin ist.

4. Verwendung gemäss einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, dass der Extrakt ein Extrakt ist, der mit einem Lösungsmittel, ausgewählt aus der Gruppe, umfassend Wasser, Methanol, Ethanol, Aceton, Ethylacetat und Mischungen davon, hergestellt wird.

4 Extrakt einer Pflanze, die ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus Psidum cattleianum, Psidium cattleianum ssp. Lucidum, Psidium guajava, Psidium guineense, Psidium littorale,Psidium molle und Psidium schiedeanum.

5. Verwendung gemäss einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, dass der Extrakt in fester Form vorliegt.

5. Extrakt gemäss Anspruch 4, wobei die Pflanze Psidium guajavast.

6. Verwendung gemäss einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, dass der Extrakt einen Guaij averinanteil von 0,5 Gew.% oder mehr, vorzugsweise von 10 bis 50 Gew.%, enthält.

6. Extrakt gemäss Anspruch 4 oder 5, wobei der Extrakt ein Extrakt der Blätter, der Früchte und/oder der Rinde der Pflanze ist.

NACHGEREICHT

7. Verwendung von Guaj averin und/oder eines pharmazeutisch akzeptablen Salzes oder Esters davon für die Herstellung eines Medikaments zur Behandlung einer Erkrankung oder eines Zustands, die bzw. der mit der Aktivität von DP-IV oder DP-IV-artigen Enzymen in Beziehung steht oder durch solche verursacht wird.

7. Extrakt gemäss einem der Ansprüche 4 bis 6, wobei der Extrakt ein Extrakt ist, der mit einem Lösungsmittel, ausgewählt aus der Gruppe, umfassend Wasser, Methanol, Ethanol, Aceton, Ethylacetat und Mischungen davon, hergestellt wird.

8. Verwendung gemäss einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass es sich bei der Erkrankung und/oder bei dem Zustand um eine Störung des Glucosestoffwechsels, wie z.B. Diabetes mellitus, ,Fettleibigkeit und/oder Athero3klerose, handelt.

NACH<,> 13

8. Extrakt gemäss einem der Ansprüche 4 bis 7, wobei der Extrakt in fester Form vorliegt.

9. Extrakt einer Pflanze, die ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus Psidium cattleianum, Psidium cattleianum ssp. Lucidum, Psidium guajava, Psidium guineense, Psidium littorale, Psidium motte und Psidium schiedeanum zur Verwendung als Medikament.

9. Extrakt gemäss einem der Ansprüche 4 bis 8, dadurch gekennzeichnet, dass er einen Guaij averinanteil von 0,5 Gew.% oder mehr, vorzugsweise von 10 bis 50 Gew.%, enthält.

10. Extrakt gemäss einem der Ansprüche 4 bis 9 zur Verwendung als Medikament.

10. Verwendung von Guajaverin und/oder eines pharmazeutisch akzeptablen Salzes oder Esters davon und/oder eines Extrakts einer Pflanze, die ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus Psidium cattleianum, Psidium cattleianum ssp. Lucidum, Psidium guajava, Psidium guineense, Psidium littorale, Psidium motte und Psidium schiedeanum, als Ernährungszusatzstoff, beispielsweise als Bestandteil in funktioneller Nahrung, in einem alkoholfreien Getränk oder als Bestandteil in einem Kosmetikprodukt. <EMI ID=16.1>