WO2009092278A1

WO2009092278A1 - 噻吩并哒嗪类化合物及其制备方法、药物组合物及其用途

Info

Publication number: WO2009092278A1
Application number: PCT/CN2009/000021
Authority: WO
Inventors: Zhanggui Wu
Original assignee: Zhejiang Medicine Co., Ltd Xinchang Pharmaceutical Factory
Priority date: 2008-01-08
Filing date: 2009-01-07
Publication date: 2009-07-30
Also published as: BRPI0907228A2; US20130143887A1; RU2010128221A; CA2711629C; BRPI0907228B1; AU2009207968B2; US20110009415A1; AU2009207968A1; KR101512530B1; CN101481380A; EP2241569A4; WO2009092278A8; RU2494103C2; CA2711629A1; US8962626B2; US9249154B2; CN101481380B; US8318740B2; EP2241569A1; US20090275585A1

Description

噻吩并哒嗪类化合物及其制备方法、药物组合物及其用途技术领域

本发明涉及药物化学，具体涉及噻吩并哒嗪类化合物及其制备方法、以及含有它们的药物组合物以及其用途。

说背景技术

癌症是人类健康的一大威胁，人类的大书多数肿瘤都是由外界环境因素造成的，全世界每年死于癌症的人数已不少于 500万。虽然现在已有一些治疗办法，如外科手术、放疗、化疗等可使病人获愈，但治愈率不高。用化学药物预防及治疗癌症，目前是制服肿瘤的最有效方法之一。

噻吩并哒嗪类化合物或其噻吩类似物的某些化合物显示有抗肿瘤的特性。霍夫曼一拉罗奇公司的 WO2005105808 中的公开了一种噻吩并哒嗪类化合物作为 IKK抑制剂，

美国的 Amgen公司在 WO2007124181中公开了一种噻吩并哒嗪类化合物作为酪氨酸激酶中的 p38蛋白酶的抑制剂，

Smithldine Beecham公司在 WO 03029241中的公开了一种 2—脲基噻吩类化合物，在 WO 03028731中的公开了一种 3—脲基噻吩化合物，与噻吩并哒嗪类化合物类似，作为 CHK1抑制剂。阿斯利康（瑞典）有限公司的 WO2005066163 中的公开了一种 3—脲基噻吩改进化合物也作为 CHK1抑制剂。

用化学药物预防及治疗癌症，目前有酪氨酸激酶的受体、非受体抑制剂，其靶点有： VEGFR、 EGFR、 HER2、 SRC、 JAK及 TEK等；还有苏氨酸—丝氨酸激酶抑制剂，靶点有： MEK、 J K、 c-MET、 AKT、 PIM、 TIE, PLK等。本发明所描述的化合物是肿瘤及一类蛋白质激酶抑制剂，包括细胞周期检验点激酶 ( Checkpoint kinase, CHK1/CHK2 )。

通过对细胞周期关卡调控研究发现，封闭 CHK1的表达能够逆转肿瘤细胞耐药，从而提高肿瘤细胞对 DNA损伤治疗的敏感度，可大大提高抗癌药物的活性。另外也可以利用大多数肿瘤通过 p53突变特异性消除 G1/S关卡来获得肿瘤选择性药物。本发明提供了一种新的噻吩并哒嗪类化合物，作为新型肿瘤及生长因子相关的蛋白激酶（包括 CHK1、 CHK2)抑制剂，不但具有一定的抗肿瘤作用，且还能够增强其它抗肿瘤药物的抗肿瘤疗效。发明内容

按照本发明，申请人发现了新的化合物，这些化合物从而具有抗细胞增殖 (例如抗癌）的活性，因此可用于治疗人体或动物。本发明还涉及制备所述化合物的方法、包含它们的药物组合物及其它们在制备用于温血动物如人体中产生抗细胞增殖效应的药物中的用途。

本发明包括这类化合物的药学上可接受的盐或前药，及根据本发明，申请人也提供了药物组合物以及使用这类化合物治疗癌症的方法。

预期这些性质在治疗以下与细胞周期停滞和细胞增殖相关的疾病中具有有用的价值：癌症（实体瘤和白血病）、纤维增殖性及分化性疾病、牛皮癣、类风湿性关节炎、卡波济氏肉瘤、急性和慢性肾病、粉瘤、动脉粥样硬化、动脉再狭窄、自身免疫性疾病、急慢性炎症、骨病和视网膜血管增生性眼病。

根据本发明的一方面，提供了式（I)化合物或其药学上可接受的盐或其水合物，

其中： Rl和 R2各自独立地为 H或 C_M的垸基；

R3为含 N、 S或 0的饱和或不饱和的六元环或五元环，及其光学异构体； R4为任意位置单取代或双取代的卤代苯基。

优选地， R1=R2=H。

优选地， R3为含 N、 S或 0的饱和六元环，及其光学异构体。

优选地， R3 为六氢吡啶基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、四氢吡咯基、四氢呋喃基、或四氢噻吩基，及其光学异构体。

优选地， R3为六氢吡啶基，及其光学异构体。

优选地， R4为单取代的卤代苯基。优选地， R4为 U ，其中， X表示 F、 Cl、 Br、 I。

最好，式（I)化合物选自- 2-(4-氟苯基)斗 (3-哌啶甲基)-噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；

-(4-氯苯基 )-4-(3-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺;

-(4-溴苯基 )-4-(3-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺;

-(4-氟苯基 )-4-(3-四氢吡喃甲基) -噻吩并 [2， 3-d]B达嗪 -7-甲酰胺;

-(4-氯苯基 )-4-(3-四氢吡喃甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺;

γ -(4-溴苯基 )-4-(3-四氢吡喃甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺;

-(4-溴苯基)-4-(3-四氢噻喃甲基)-噻吩并[2, 3-(1]哒嗪-7-甲酰胺_;

-(4-氯苯基 )-4-(2-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺;

-(4-氯苯基 )-4-(4-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺;

-(4-氯苯基 )-4-(R-3-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺;

-(4-氯苯基 )-4-(3-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 _⁷_N-甲基甲酰胺;

-(4-氯苯基 )-4-(3-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-Ν,Ν-二甲基甲酰胺;

-(4-氯苯基 )-4-(3-四氢噻喃甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-N-甲基甲酰胺;

-(4-氯苯基 ) (3-四氢噻喃甲基)-噻吩并 [2, 3-(1]哒 7- 二甲基甲醐安_;

2-(4-氯苯基 )-4-(3-四氢吡喃甲基)-噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -⁷-Ν-甲基甲酰胺;

-(4-氯苯基 )4-(3-四氢吡喃甲基) -噻吩并 [2,3-(1]哒 7^^-二甲基甲'

-(4-氟苯基)-4-(3-四氢吡咯甲基)-噻吩并[2,3-^]哒嗪-7-甲酰胺_;

-(4-氯苯基)-4-(3-四氢吡咯甲基)-噻吩并[2,3-(1]哒嗪-7-甲酰胺_;

-(4-溴苯基)-4-(3-四氢吡咯甲基)-噻吩并[2,3-(1]哒嗪-7-甲酰胺_;

-(4-氟苯基 )-4-(3-四氢呋喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺;

ΧΧΠΙ -(4-氯苯基)-4-(3-四氢呋喃甲基)-噻吩并[2,3-(1]哒嗪-7-甲酰胺_;

-(4-溴苯基)-4-(3-四氢呋喃甲基)-噻吩并[2,3 ]哒嗪-7-甲酰胺_;

-(4-氟苯基)-4-(3-四氢噻吩甲基)-噻吩并[2,3- 哒嗪-7-甲酰胺；

-(4-氯苯基)-4-(3-四氢噻吩甲基)-噻吩并[2,3- 哒嗪-7-甲酰胺；

-(4-氯苯基)-4-(2-四氢吡咯甲基)-噻吩并[2,3-(1]哒嗪-7-甲酰胺_;

-(4-氯苯基)-4-(1-3-四氢吡咯甲基)-噻吩并[2,3^]哒嗪-7-甲酰胺_;

-(4-氯苯基 >4_(3-四氢吡咯甲基) -噻吩并 [ 3-(1]哒 7- ^二甲基甲翻安_;

XXXIII -(4-氯苯基 )-4-(3-四氢噻吩甲基)-噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-N-甲基甲酰胺；

XXXIV

-(4-氯苯基 >4-(3-四氢噻吩甲基)-噻吩并 [2,3- 哒 7- >1-二甲基甲

XXXV

-(4-氯苯基 )-4-(3-四氢呋喃甲基)-噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-N-甲基甲酰胺;

XXXVI

2-(4-氯苯基 4-(3-四無呋喃甲基) -噻吩并 [ 3-(1]哒 7->^-二甲基甲醐安。

χχχνπ 优选地， R3为吡啶基、 α-吡喃基、 γ-吡喃基、 α-噻喃基、 γ-噻喃基、吡咯基、呋喃基、或噻吩基，及其光学异构体。

最好，式（I)化合物选自： -(4-氟苯基)-4-(3-吡啶甲基)-噻吩并[2,3-(1]哒嗪-7-甲酰胺_;

XXXVI-(4-氯苯基)-4-(3-吡啶甲基)-噻吩并[2,3 ]哒嗪-7-甲酰胺；

-(4-溴苯基 )-4-(3-吡啶甲基)-噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；

-(4-氟苯基 )-4-(3-α-吡喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；

-(4-氯苯基 )-4-(3-α-吡喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；

ΧΧΧΧΠ -(4-溴苯基 )-4-(3-α-吡喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺;

XXXXIII-(4-氟苯基)-4-(3-01-噻喃甲基)-噻吩并[2,3-^]哒嗪-7-甲酰胺；

XXXXIV-(4-氯苯基 )-4-(3-α-噻喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；

χχχχν-(4-溴苯基 )-4-(3-α-噻喃甲基)-噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；

XXXXVI

-(4-氯苯基 )-4-(4-吡啶甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺;

-(4-氯苯基 )-4-(3-吡啶甲基)-噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-Ν,Ν-二甲基甲酰胺;

XXXXX

2-(4-氯苯基 )-4-(3-噻喃甲基)-噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-N-甲基甲酰胺;

XXXXXI 24-氯苯基 )-4-(3-噻喃甲基) -噻吩并 [2,3^]哒 7-]^^-二甲基甲翻安_;

ΧΧΧΧΧΙΙ -(4-氯苯基 )-4-(3-吡喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-N-甲基甲酰胺;

XXXXXIII

-(4-氯苯基 )-4-(3-吡喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒 7-N，N-二甲基甲豳安;

XXX XXIV

-(4-氟苯基)-4-(3-吡咯甲基)-噻吩并[2,3- 哒嗪-7-甲酰胺；

-(4-氯苯基 )-4-(3-吡咯甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；

XXXXXVI-(4-溴苯基)-4-(3-吡咯甲基)-噻吩并[2,3^]哒嗪-7-甲酰胺；

-(4-氟苯基 )-4-(3-呋喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺;

XX XX XVIII-(4-氯苯基 )-4-(3-呋喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；

XXXXXIX-(4-溴苯基 )-4-(3-呋喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺;

xxxxxx-(4-氟苯基)-4-(3-噻吩甲基)-噻吩并[2,3-(1]哒嗪-7-甲酰胺；

XXXXXXI -(4-氯苯基)-4-(3-噻吩甲基)-噻吩并[2,3-(1]哒嗪-7-甲酰胺；

ΧΧΧΧΧΧΠ -(4-溴苯基 )-4-(3-噻吩甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺;

ΧΧΧΧΧΧΙΙΙ-(4-氯苯基 )-4-(2-吡咯甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；

-(4-氯苯基 )-4-(3-吡咯甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-N-甲基甲酰胺;

XXXXXXV-(4-氯苯基 )4-(3-吡咯甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒 Π ·7-Ν，Ν-二甲基甲翻安；

X XXX XXVI-(4-氯苯基 )-4-(3-噻吩甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-N-甲基甲酰胺；

XXX XXXVII 2-(4-氯笨基 )4-(3-噻吩甲基) -噻吩并 [2,3-(1]哒 7^, -二甲基甲翻安_;

XXX XX XVIII

2-(4-氯苯基 )-4-(3-呋喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-N-甲基甲酰胺；

ΧΧΧΧΧΧΙΧ 2-(4-氯苯基 )斗(3-呋喃甲基) -噻吩并 [2,3-d]哒ί^7-N，N-二甲基甲醐安；

ΧΧΧΧΧΧΧ

2-(3,5- ：氯苯基) -4-(3-哌啶甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺 c

XXXXXXXI

根据本发明的另一方面，提供了一种药物组合物，包括治疗有效量的式（I) 化合物或其药学上可接受的盐或其水合物、以及药学上可接受的载体。

本发明的药物组合物可以以溶液、混悬液、气雾剂或干粉等形式局部给药，如肺部、头部、结肠等；或者进行***给药，如，以片剂、粉剂等形式口服给药，或以溶液或混悬液形式肠胃外给药，或者皮下给药，或以栓剂形式直肠给药，或者经皮给药。

根据本发明的又一方面，提供了式（I)化合物或其药学上可接受的盐或其水合物在制备用于治疗或预防肿瘤性疾病的药物中的用途。其中，所述肿瘤性疾病包括子宫颈瘤，头部和颈部肿瘤，乳腺、卵巢、肺非小细胞、胰腺、结肠、前列腺或其它组织的癌症，以及白血病和淋巴瘤、中枢和外周神经***肿瘤以及其它肿瘤如黑素瘤、纤维肉瘤和骨肉瘤。

根据本发明的再一方面，提供了式（I) 化合物或其药学上可接受的盐或其水合物在制备用于治疗或预防增生性疾病的药物中的用途。其中，所述增生性疾病包括自身免疫性疾病、炎症、神经性疾病和心血管疾病。

根据本发明的一方面，提供了式（I) 化合物或其药学上可接受的盐或其水合物在制备用于限制人或动物细胞增殖的药物中的用途。

根据本发明的另一方面，提供了式（I) 化合物或其药学上可接受的盐或其水合物在制备用于抑制肿瘤及生长因子相关激酶的药物中的用途。

对于上述用途，给药剂量取决于所用化合物、给药方式、所需治疗和所显示的疾病。

根据本发明的最后一方面，提供了式（I)化合物或其药学上可接受的盐或其水合物的方法，该方法包括- 在碱存在下，用草酸二垸基酯处理式 A的化合物：

接着用肼处理，生成式 B的化合物:

用磷酰氯处理式 B的化合物，生成式 C的化合物:

并且使式 C的化合物与如下化合物 R₃CH₂反应，生产式 D的化合物，

接着与胺 NHR1R2反应，再去 R3上的保护基及加碱处理，生成式（I) 的化合物或其药学上可接受的盐或其水合物，

其中： R为 CM的垸基，并且 R1和 R2各自独立地为 H或 CM的烷基； R3 为含 N、 S或 0的饱和或不饱和的六元环或五元环，及其光学异构体； R4为任意位置单取代或双取代的卤代苯基。

下面介绍本发明的合成工艺：

2-(4-氯苯基 )-4-(3-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺合成工艺。

其中，式 A化合物可以通过本技术领域已知的常规化学方法制备或直接从市场上购买。获得 A化合物后，在碱诸如合成中常用的碱 LDA (二异丙胺基锂）以及常用的有机溶剂如四氢呋喃存在下，与草酸二烷基酯如草酸二乙酯进行缩合反应生成化合物 Y，由于 LDA的存在，该反应需要在低温下进行。其中，碱 LDA 本领域的技术人员可容易制得，一般现用现制，且在低温下制备和使用。

接着化合物 Y与肼如 H₂NNH₂在醇溶剂中进行肼解反应生成式 B化合物。式 B化合物用磷酰氯处理发生酰化反应生成式 C化合物。

在以上三步中参考了霍夫曼一拉罗奇公司的 WO2005105808 中的噻吩并哒嗪类化合物中间体的合成方法。

通过本技术领域已知的常规化学方法制备带有 Boc保护基团的 R3CH₂化合物，并在催化剂诸如 PdCl₂ (dppf), 溶剂诸如磷酸盐 /1， 4-二氧六环存在下，加热（反应温度为 80~90°C ), 将式 C化合物与带有 Boc保护基团的 R3CH₂化合物进行反应，反应时间过夜，可以制得式 D化合物。其中，进行该反应时，化合物 R3C¾需要先用 9-BBN 进行加成处理，参考了在 Tetrahedron Letters 45(2004),p6125-6128中 Suzuki-Miyaum偶联反应。

利用常规方法，将式 D化合物在密闭环境中与化合物 HNR1R2进行氨解反应，反应溶剂可为 1， 4一二氧六环，加热（反应温度为 80°C )，反应时间过夜，之后在酸性条件下除去 R3上的 Boc保护基，得到式（I) 的酸式盐，加碱调节 pH值制得式（I) 的化合物。

上述制备过程中所用到的原料可以从市场上直接购得或可以通过本技术领域已知的常规方法制备。具体实施方式

下面，通过以下实例来对本发明作进一步具体说明，但并不仅限于以下实施例和实施例中的工艺参数范围。

其中，式（I)化合物的结构通过核磁共振（NMR)和质谱技术（MS)确认；质子核磁共振化学位移值用 S标度来测量，峰多重性表示如下： s,单峰； m,多重峰。中间体一般均通过质谱法和 NMR进行了表征。实施例 1: 2-(4-氯苯基 )-4-(3-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d】哒嗪 -7-甲酰胺

第一步、 5-溴 -噻吩 -3-甲酸的合成

12.6g噻吩 -3-甲酸、 96ml醋酸加入 250ml反应烧瓶中，室温搅拌溶解后再加入 8ml氢溴酸，反应液迅速变为淡黄色，室温下分批加入 27g过溴吡啶盐，加入完毕，室温搅拌反应， HPLC跟踪反应进程，反应结束后倾倒入冰水中，搅拌约 30分钟，抽滤得白色粉末状固体，热水重结晶，抽滤、珙干后得 5-漠 -噻吩 -3- 甲酸晶体 10.8g，HPLC测含量为 92%。

12.5g噻吩 -3-甲酸、 83ml醋酸加入 500ml反应烧瓶中，室温搅拌溶解为无色透明液， 5.4mlBr₂溶于 100ml醋酸置于恒压滴液漏斗，室温下逐滴滴加到反应烧瓶中，控制温度 25Ό以下，滴加完毕，室温反应过夜，次日，将反应液倾倒入冰水中，搅拌约 30分钟，抽滤得白色粉末状固体，热水重结晶，抽滤、烘干后得 5-溴 -噻吩 -3-甲酸 (白色晶体) 10g,HPLC测含量为 66%

第二步、 5-溴 -噻吩 -3-甲酸乙酯的合成

18.5g上步所得 5-溴 -噻吩 -3-甲酸、 150无水乙醇、 5ml浓硫酸投入 500ml三口烧瓶中，加热回流反应，反应结束后，减压蒸干溶剂，加入 100ml乙酸乙酯和 200ml饱和食盐水，搅拌，静止分层，分液，水层用 25mlx2乙酸乙酯反萃取 2 次，合并有机相，转移到分液漏斗中，加入 10%碳酸钠溶液，调 PH 8, 分液，有机相用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸镁干燥过夜，次日抽滤，减压蒸干溶剂得 5-溴 -噻吩 -3-甲酸乙酯 (淡黄色油状液) 15g。

第三步、对氯苯硼酸的合成

70.6g对溴氯苯投入 2000ml四口反应烧瓶，接机械搅拌，两个恒压滴液漏斗和温度探头，在氩气保护下加入 588.3ml甲苯和 147ml四氢呋喃，室温搅拌溶解为无色透明液，量取 102.9ml硼酸三异丙酯、 176.4ml正丁基锂（2.5M in hexane) 溶液分别置于两个恒压滴液漏斗中，降温，当内温低于 -78°C时，逐滴滴加正丁基锂溶液至反应烧瓶中，控制滴加速度，保持内温低于 -78°C，滴加完毕，保温反应 lh，然后逐滴滴加硼酸三异丙酯至反应烧瓶中，控制内温低于 -78'C，滴加完毕，保温反应 lh，撤离冷却，自然升温至 -20°C时，加入 360.4ml 2.2M的盐酸溶液，温度升至 10°C左右，静止分层，分液，水相用 58.8mlx2甲苯反萃取，合并有机相，用饱和食盐水洗涤至中性，得无色透明液，无水硫酸钠干燥，抽滤，减压蒸干大部分溶剂，析出白色固体，抽滤得对氯苯硼酸晶体 48g。

第四步、 5- (4-氯苯基）噻吩 -3-甲酸乙酯的合成

称量 10.5g 5-溴 -噻吩 -3-甲酸乙酯、 6g对氯苯硼酸、 1.5gPd[P(Ph)₃]₄、 7.5g碳酸钠和 347ml溶剂 [甲苯：水：乙醇（V/V) =4： 2： 1]依次加入 500ml三口烧瓶中，加热，回流反应约 3h， TLC跟踪反应进展，反应完毕，冷却至室温，分层，分液，水相用甲苯 35mlx2反萃取，合并有机相，用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸钠千燥过夜，次日抽滤，减压蒸干溶剂得淡黄色粘稠液，放置后凝结成固体，用无水乙醇重结晶得 5- (4-氯苯基） -3-噻吩甲酸乙酯晶体 8.6g。

iHNMR OOMHz, DMSO ), δ 8.30 (s， 1Η), 7.81(s, 1H), 7.72(m, 2H)， 7.46(m, 2H)， 4.27(m, 2H)， 1.30(m, 3H)

第五步、 5-(4-氯苯基 )-2-乙氧乙二酰基 -噻吩 -3-甲酸乙酯的合成

LDA制备：氩气保护下将 252.6ml 四氢呋喃， 79mlN,N-二异丙基胺投入 1000ml三口烧瓶， 302.8ml正丁基锂（1.6M in hexane)溶液置于 500ml恒压滴液漏斗，当内温小于 -20°C时逐滴滴加到反应烧瓶中，剧烈放热反应，控制滴加速度，使内温保持在 -20°C〜- 30°C之间，滴加完毕，自然升至室温，直接做下列缩合反应。

缩合反应： 28.7g 5- (4-氯苯基）噻吩 -3-甲酸乙酯， 1084ml四氢呋喃， 29.7ml 草酸二乙酯投入 2000ml四口烧瓶中，接机械搅拌， 500ml恒压滴液漏斗和温度计探头，室温搅拌溶解为淡黄色透明液，将上述制备的 LDA溶液在氩气保护下转移到 500ml恒压滴液漏斗中，降温，当内温低于 -78Ό时，逐滴滴加 LDA溶液至反应烧瓶中，控制滴加速度，保持内温低于 -78°C，滴加完毕， TLC跟踪反应进程，反应结束后，加入 2.2M的盐酸溶液，调 PH«3，反应液颜色由红棕色变为桔黄色，温度升至 0 C左右，再加入氯化钠固体，搅拌溶解后静止分层，分液，水层用 143.5mlx2四氢呋喃反萃取，合并有机相，用饱和食盐水洗涤两次后，用稀碳酸钠溶液调 PH«8, 最后用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，抽滤，减压蒸干溶剂得黄色粘稠液，室温放置逐渐凝结成固体，用乙醇重结晶后得 5-(4- 氯苯基 )-2-乙氧乙二酰基 -噻吩 -3-甲酸乙酯纯品（桔黄色晶体） 25.5g。

'HNMRCSOOMHz, CD₃C1 )， δ 7.61 (s, 1H)， 7.59(m, 2H)， 7.42(m, 2H)， 4.37(m, 4H), 1.39(m， 6H)。

第六步、 2-(4—氯苯基) -4-氧代 -4， 5-二氢-噻吩并 [2,3-d】哒嗪 -7-甲酸乙酯的合成

3.0g 5-(4-氯苯基 )-2-乙氧乙二酰基 -噻吩 -3-甲酸乙酯晶体， 45ml无水乙醇投入 100ml反应烧瓶中，室温搅拌为黄色悬浮液， 0.75ml水合肼置于恒压滴液漏斗中，搅拌约 lOmin后滴加入反应烧瓶中，黄色悬浮液溶解为透明清夜，开启加热，设定温度为 70°C，随着温度升高，烧瓶中逐渐析出黄色固体，且反应液越来越粘稠，保温反应 lh，冷却至室温，抽滤，所得淡黄绿色固体用混合溶液 (正己垸: 二氯甲烷 = 1 : l)15mlx2和（甲醇：二氯甲烷 = 1 : 1 ) 15mlx2各洗涤两次，减压烘干得 2- (4-氯苯基） -4-氧代 -4， 5-二氢-噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 2.75g。第七步、 4-氯 -2- (4-氯苯基） -噻吩并 [2， 3-d】哒嗪 -7-甲酸乙酯的合成

1.5g 2- (4-氯苯基）-4-氧代 -4， 5-二氢-噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯， 22.5ml 三氯氧磷加入 100ml三口烧瓶中，设定温度为 95Ό , 保温反应 31ι，逐渐溶解为深红棕色溶液，反应完毕，冷却至室温，减压蒸干溶剂得棕褐色粘稠液，加入四氢呋喃和饱和食盐水搅拌，析出很多黄色固体，过滤，将滤液静止分层，分液，反萃取，合并有机相后用稀碳酸氢钠溶液调最后用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液用活性炭回流脱色，得淡黄绿色透明液，减压蒸干后得 4-氯 -2- (4-氯苯基） -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯（淡绿色絮状固体） iHNMR OOMHz, CD3CI ), δ 7.74 (m， 3H)， 7.59(m， 2H)， 4.65(m, 2H)， 1.55(m, 3H)。 HRMS (high resolution MS ) MW=351.98。

第八步、 N-Boc-3-亚甲基哌啶的合成

22.14g甲基三苯基碘化膦、 135ml甲苯投入 500ml三口烧瓶中，室温搅拌为乳白色悬浮液，5.31g叔丁醇钾加入后，烧瓶中很快变为桔黄色悬浮液， 6.0g N-Boc 一 3—哌啶酮溶于 66ml甲苯置于恒压滴液漏斗，氩气保护下室温滴加到反应烧瓶中，有明显放热现象，控温在 30°C左右，滴加完毕后 TLC跟踪反应进展，反应结束后，抽滤，滤液用 200mlx2饱和食盐水洗涤，再用 1M稀盐酸调 PH«3,最后用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，抽滤，得淡黄色透明液，拌硅胶过柱，（洗脱液石油醚：乙酸乙酯 = 15: 1)得淡黄色油状液 4.2g。

¹HNMR(400MHz， CD3CI ), 5 4.83 (s， 1H)， 4.76(s， 1H)， 3.89(s, 2H)， 3.45(m， 2H)， 2.26(m, 2H) 1.64(s, 2H)， 1.51(s， 9H)。

第九步、 4- (1-叔丁氧羰基 -3-哌啶甲基） -2- (4-氯苯基） -噻吩并 [2， 3-d】哒嗪 -7- 甲酸乙酯的合成

称量 0.4gN-Boc-3-亚甲基哌啶在氩气保护下投入 50ml三口烧瓶中，降温至 0°C，用注射器移取 12ml 9-BBN (0.5M in THF) 溶液注入反应烧瓶中，保温约 30min后自然升至室温，反应 2h，在线减压蒸干溶剂 (25°C)，往反应烧瓶中加入 20ml 1 , 4-二氧六环， 0.05gPdCl₂ (dppf), 0.32g磷酸钾和 0.36g 4-氯- 2- (4-氯苯基） -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯，加热，保持内温 90°C，反应过夜，次日，将反应液冷却至室温，加入 50ml冰水和 50ml乙酸乙酯，搅拌约 15min，静止分层，分液，水层用乙酸乙酯反萃取 3次，合并有机相，用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液拌硅胶，过柱（乙酸乙酯：石油醚 = 1 : 5 )得桔黄色粘稠液 0.6g,加入 2ml乙醇放入冰箱中析晶，得到 4- ( 1-叔丁氧羰基 -3-哌啶甲基） -2- (4-氯苯基） -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯固体 0.3g。

¹HNMR(400MHz, DMSO )， δ 8. 90 (s, 1Η)， 8.03(m， 2Η), 7.63(m， 2H)， 4.54(m, 2H)， 3.73(s， 2H), 3.32(m, 2H), 3.28(m， 1H)， 2.82(m, 2H)， 2.09(s， 1H)， 1.78(s， 1H)， 1.64(s, 1H)， 1.44(m， 3H)， 1.39(s， 1H)， 1.32(s， 9H)。 MS (EI): 515 (M+)， 486, 458, 442， 414, 334, 332, 306， 304， 149，

57。

第十步、 4- (1-叔丁氧羰基 -3-哌啶甲基） -2- (4-氯苯基） -7-氨甲酰基噻吩并 [2, 3-d】哒嗪的合成

0.3g 4- ( 1-叔丁氧羰基 -3-哌啶甲基） -2- (4-氯苯基） -噻吩并 [2， 3-d]P达嗪 -7- 甲酸乙酯， 5ml l， 4-二氧六环和 5ml氨水加入 25ml密封管中，加热，外温保持在 80°C，反应过夜，次日，冷却至室温，将反应液转移至分液漏斗中，加入乙酸乙酯，振荡，静止分层，分液，水层用乙酸乙酯反萃取 2次，合并有机相，用 1M盐酸溶液调 PH 3, 最后用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液拌硅胶过柱（乙酸乙酯：石油醚 = 1 : 5 )得到 4- ( 1-叔丁氧羰基 -3-哌啶甲基） -2- (4-氯苯基） -7-氨甲酰基噻吩并 [2, 3-(1]哒嗪固体0.22_§。

1HNMR(500MHz， CDC1₃ ), δ 8.10 (s, 1H)， 7.77(m, 2H)， 7.66(s， 1H), 7.48(m, 2H),5.90(s， 1H)， 4.05(s， 1H), 3.88(m, 1H), 3.31(m, 1H)， 3.21(m， 1H)， 2.81(m, 2H)， 2.28(s, 1H)， 1.81(s， 1H)， 1.67(s, 3H)， 1.39(s, 9H)。

MS(ESI): 487(M+1)。

第十一步、 2- (4-氯苯基） -4-(3-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺盐酸盐的合成

200mg 4- ( 1-叔丁氧羰基 -3-哌啶甲基） -2- (4-氯苯基） -7-氨甲酰基噻吩并 [2， 3-d]哒嗪， 4ml乙酸乙酯加入 25ml单口烧瓶中，溶解为淡黄色透明溶液，加入 4ml 3M盐酸溶液，即变成白色悬浮液， 30°C保温反应 lh，白色悬浮液液变为透明溶液，点板跟踪反应进展，反应完毕，减压蒸干溶剂得 2- (4-氯苯基） -4-(3- 哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺盐酸盐固体 100mg。

¹HNMR(500MHz， DMSO )， 59.51 (m， 1H)， 9.09(m, 1H)， 8.79 (s， 1H), 8.66(s, 1H)， 8.29(s， 1H)， 8.08(m, 2H)， 7.62(m, 2H)， 3.45(m, 2H)， 3.4(m， 1H)， 3.17(m, 1H)， 2.79(m， 2H)， 2.52(m, 1H)， 1.81(m, 2H)， 1.77(m, 1H)， 1.42(m, 1H)。

MS(ESI):387(M+1)。

第十二步、 2- (4-氯苯基） -4-(3-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺的合成

lOOmg 2- (4-氯苯基） -4-(3-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺盐酸盐加入 25ml单口烧瓶中，加入 5ml水，滴加碳酸钠溶液，调 pH=9〜10，搅拌 30min，用乙酸乙酯萃取，洗漆，减压蒸干溶剂得到 2- (4-氯苯基） -4-(3-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺 70mg。实施例 2

2-(4-氯苯基 )-4-(3-四氢吡喃甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺

第一步：

3-溴甲基四氢吡喃 (24.75g， 0.138mol)中加入 DMPU(225ml)、 FeCl₃ (0.75g)、 CuCl(0.3g), 慢慢滴入 Et₂Zn(106.8ml)， 40~45°C保温反应 45min，制得锌试剂。

4-氯 -2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (30g)中，加入 THF(810ml) 和 PdCl2(dppf)(5.09g), 然后把上述制备得到的锌试剂溶液滴入该 THF溶液中，保温反应 (45°C)4h。将反应液倒入饱和食盐水中，搅拌 15min，抽滤，分液， THF 萃取 (500ml)水相两次，合并有机相，饱和食盐水 (500mlx3)洗涤，无水 Na₂S0₄ 干燥，溶剂蒸千得到 4-(3-四氢吡喃甲基 )-2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3」d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (25g)。

MS (ESI): 417(M+1)

第二步：

4-(3-四氢吡喃甲基 )-2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (3g)， 5ml 1， 4-二氧六环和 5ml氨水加入 25ml密封管中，加热，外温保持在 8(TC，反应过夜，次日，冷却至室温，将反应液转移至分液漏斗中，加入乙酸乙酯，振荡，静止分层，分液，水层用乙酸乙酯反萃 2次，合并有机相，用 1M盐酸溶液调 PH 3, 最后用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液拌硅胶过柱得到 2-(4-氯苯基 )-4-(3-四氢吡喃甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺固体 (2g：)。

MS (ESI): 388(M+1) 实施例 3

2-(4-氯苯基 )-4-(3-四氢噻喃甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺

第一步-

3-溴甲基四氢噻喃 (24.75g， 0.138mol)中加入 DMPU(225ml)、 FeCl₃ (0.75g)、 CuCl(0.3g), 慢慢滴入 Et₂Zn(106.8ml)， 40~45Ό保温反应 45min，制得锌试剂。

4-氯 -2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (30g)中，加入 THF(810ml) 和 PdCl₂(dppf)(5.09g), 然后把上述制备得到的锌试剂溶液滴入该 THF溶液中，保温反应 (45°C)4h。将反应液倒入饱和食盐水中，搅拌 15min，抽滤，分液， THF 萃取 (500ml)水相两次，合并有机相，饱和食盐水 (500mlx3)洗涤，无水 Na₂S0₄ 干燥，溶剂蒸干得到 4-(3-四氢噻喃甲基 )-2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (25g)。

MS (ESI): 433(M+1)

第二步：

4- (3-四氢噻喃甲基 )-2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (3g)， 5ml 1， 4-二氧六环和 5ml氨水加入 25ml密封管中，加热，外温保持在 80°C，反应过夜，次日，冷却至室温，将反应液转移至分液漏斗中，加入乙酸乙酯，振荡，静止分层，分液，水层用乙酸乙酯反萃取 2次，合并有机相，用 1M盐酸溶液调 PH 3, 最后用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液拌硅胶过柱得到 2-(4-氯苯基 )-4-(3-四氢噻喃甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺固体 (2g)。

MS (ESI): 404ΓΜ+1) 实施例 4

2-(4-氯苯基 )-4-(2-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-dj哒嗪 -7-甲酰胺

第一步：

N-Boc-2-溴甲基哌啶 (24.75g， 0.138mol)中加入 DMPU(225ml)、 FeCl₃ (0.75g)、 CuCl(0.3g), 慢慢滴入 Et₂Zn(106.8ml)， 40~45°C保温反应 45min，制得锌试剂。

4-氯 -2-(4-氯苯基)-噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (30g)中，加入 THF(810ml) 和 PdCl₂(dppf)(5.09g)，然后把上述制备得到的锌试剂溶液滴入该 THF溶液中，保温反应 (45°C)4h。将反应液倒入饱和食盐水中，搅拌 15min，抽滤，分液， THF 萃取 (500ml)水相两次，合并有机相，饱和食盐水 (500mlx3)洗涤，无水 Na₂S0₄ 干燥，溶剂蒸干得到 2-(4-氯苯基 )-4-(N-Boc-2-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7- 甲酸乙酯 (25g)。

MS (ESI): 516(M+1)

第二步：

2-(4-氯苯基 )-4-(N-Boc-2-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (3g)， 5ml 1， 4-二氧六环和 5ml氨水加入 25ml密封管中，加热，外温保持在 80°C，反应过夜，次日，冷却至室温，将反应液转移至分液漏斗中，加入乙酸乙酯，振荡，静止分层，分液，水层用乙酸乙酯反萃取 2次，合并有机相，用 1M盐酸溶液调 PH^3 , 最后用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液拌硅胶过柱得到 2-(4-氯苯基 )-4-(N-Boc-2-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺固体 (2g)。

MS (ESI): 487(M+1)

第三步：

200mg 4-(N-Boc-2-哌啶甲基) -2-(4-氯苯基 )-7-氨甲酰基噻吩并 [2， 3-d]哒嗪， 4ml乙酸乙酯加入 25ml单口烧瓶中，溶解为淡黄色透明溶液，加入 4ml 3M盐酸溶液，即变成白色悬浮液， 30Ό保温反应 lh, 白色悬浮液液变为透明溶液，点板跟踪反应进展，反应完毕，减压蒸干溶剂得 2-(4-氯苯基 )-4-( N-Boc-2-哌啶甲基)-噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺盐酸盐固体 100mg。

MS (ESI): 423(M+1)

第四步：

lOOmg 2-(4-氯苯基 )-4-( N-Boc-2-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺盐酸盐加入 25ml单口烧瓶中，加入 5ml水，滴加碳酸钠溶液，调 pH=9〜10，搅拌 30min，用乙酸乙酯萃取，洗涤，减压蒸干溶剂得到 2-(4-氯苯基 )-4-(2-哌啶甲基) - 噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺 70mg。

MS (ESI): 387ΓΜ+1) 实施例 5

2-(4-氯苯基 )-4-(4-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d】哒嗪 -7-甲酰胺

第一步：

N-Boc-4-溴甲基哌啶 (24.75g， 0.138mol)中加入DMPU(225ml)、 FeCl₃ (0.75g)、 CuCl(0.3g), 慢慢滴入 Et₂Zn(106.8ml)， 40~45°C保温反应 45min，制得锌试剂。

4-氯 -2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (30g)中，加入 THF 810ml) 和 PdCl₂(dppf)(5.09g), 然后把上述制备得到的锌试剂溶液滴入该 THF溶液中，保温反应 (45°C)4h。将反应液倒入饱和食盐水中，搅拌 15min，抽滤，分液， THF 萃取 (500ml)水相两次，合并有机相，饱和食盐水 (500mlx3)洗涤，无水 Na₂S0₄ 干燥，溶剂蒸干得到 2-(4-氯苯基 )-4-(N-Boc-4-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]t¾i嗪 -7- 甲酸乙酯 (25g)。

MS (ESI): 515(M+1)

第二步：

2-(4-氯苯基 )-4-(N-Boc-4-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (3g)， 5ml 1， 4-二氧六环和 5ml氨水加入 25ml密封管中，加热，外温保持在 80°C，反应过夜，次日，冷却至室温，将反应液转移至分液漏斗中，加入乙酸乙酯，振荡，静止分层，分液，水层用乙酸乙酯反萃取 2次，合并有机相，用 1M盐酸溶液调 PH«3，最后用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液拌硅胶过柱得到 2-(4-氯苯基 )-4-(N-Boc-4-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺固体 (2g)。

MS (ESI): 487(M+1)

第三步：

200rag 4-(N-Boc-4-哌啶甲基) -2-(4-氯苯基 )-7-氨甲酰基噻吩并 [2， 3-d]哒嗪， 4ml乙酸乙酯加入 25ml单口烧瓶中，溶解为淡黄色透明溶液，加入 4ml 3M盐酸溶液，即变成白色悬浮液， 30°C保温反应 lh，白色悬浮液液变为透明溶液，点板跟踪反应进展，反应完毕，减压蒸干溶剂得 2-(4-氯苯基 )-4-(4-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺盐酸盐固体 100mg。

MS (ESI): 423(M+1)

第四步：

2-(4-氯苯基 )-4-(4-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺盐酸盐加入 25ml单口烧瓶中，加入 5ml水，滴加碳酸钠溶液，调 pH=9〜10，搅拌 30min，用乙酸乙酯萃取，洗涤，减压蒸干溶剂得到 2-(4-氯苯基 )-4-(4-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d] 哒嗪 -7-甲酰胺 70mg。

MS (ESI): 387(M+1) 实施例 6:

2-(4-氯苯基)-4-(3-四氢吡咯甲基)-噻吩并[2, 3 ]哒嗪-7-甲酰胺

第一步：

N-Boc-3-溴甲基四氢吡咯 (24.75g， 0.138mol)中加入 DMPU(225ml)、 FeCl₃ (0.75g)、 CuCl(0.3g), 慢慢滴入 Et₂Zn(106.8ml)， 40~45°C保温反应 45min，制得锌试剂。

4-氯 -2-(4-氯苯基)-噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (30g)中，加入 THF(810ml) 和 PdCl₂(dppf)(5.09g), 然后把上述制备得到的锌试剂溶液滴入该 THF溶液中，保温反应 (45°C)4h。将反应液倒入饱和食盐水中，搅拌 15min，抽滤，分液， THF 萃取 (500ml)水相两次，合并有机相，饱和食盐水 (500mlx3)洗涤，无水 Na₂S0₄ 干燥，溶剂蒸干得到 2-(4-氯苯基 )-4-( N-Boc-3-四氢吡咯甲基)-噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (25g)。

MS (ESI): 502(M+1)

第二步-

2-(4-氯苯基 )-4-(N-Boc-3-四氢吡咯甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (3g)， 5ml 1， 4-二氧六环和 5ml氨水加入 25ml密封管中，加热，外温保持在 80Ό，反应过夜，次日，冷却至室温，将反应液转移至分液漏斗中，加入乙酸乙酯，振荡，静止分层，分液，水层用乙酸乙酯反萃取 2次，合并有机相，用 1M盐酸溶液调 PH=6，最后用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液姅硅胶过柱得到 2-(4-氯苯基 )-4-(N-Boc-3-四氢吡咯甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺固体 (2g)。

MS (ESI): 473(M+1)

第三步： 200mg 4-( -Boc-3-四氢吡咯甲基 )-2-(4-氯苯基 )-7-氨甲酰基噻吩并 [2， 3-d]哒嗪， 4ml乙酸乙酯加入 25ml单口烧瓶中，溶解为淡黄色透明溶液，加入 4ml 3M 盐酸溶液，即变成白色悬浮液， 30Γ保温反应 lh，白色悬浮液液变为透明溶液，点板跟踪反应进展，反应完毕，减压蒸干溶剂得 2-(4-氯苯基 4-(3-四氢吡咯甲基) - 噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺盐酸盐固体 100mg。

MS (ESI): 409(M+1)

第四步：

2-(4-氯苯基 )-4-(3-四氢吡咯甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺盐酸盐加入 25ml单口烧瓶中，加入 5ml水，滴加碳酸钠溶液，调 pH=9〜10，搅拌 30min，用乙酸乙酯萃取，洗涤，减压蒸干溶剂得到 2-(4-氯苯基 )-4-(3-四氢吡咯甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺 70mg。

MS (ESI): 373(M+1) 实施例 7:

2-(4-氯苯基 )-4-(3-四氢呋喃甲基)-噻吩并 [2，3-d】哒嗪 -7-甲酰胺

第一步：

3-溴甲基四氢呋喃 (24.75g， 0.138mol)中加入 DMPU(225ml)、 FeCl₃ (0.75g)、 CuCl(0.3g)，慢慢滴入 Et₂Zn(l 06.8ml)， 40-45 °C保温反应 45min，制得锌试剂。

4-氯 -2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (30g)中，加入 THF(810ml) 和 PdCl₂(dppf)(5.09g), 然后把上述制备得到的锌试剂溶液滴入该 THF溶液中，保温反应 (45°C)4h。将反应液倒入饱和食盐水中，搅拌 15min，抽滤，分液， THF 萃取 (500ml)水相两次，合并有机相，饱和食盐水 (500mlx3)洗涤，无水 Na₂S0₄ 干燥，溶剂蒸干得到 4-(3-四氢呋喃甲基 )-2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (25g)。

MS (ESI): 403(M+1)

第二步：

4-(3-四氢呋喃甲基 )-2-(4-氯苯基)-噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (3g)， 5ml 1， 4-二氧六环和 5ml氨水加入 25ml密封管中，加热，外温保持在 80°C，反应过夜，次日，冷却至室温，将反应液转移至分液漏斗中，加入乙酸乙酯，振荡，静止分层，分液，水层用乙酸乙酯反萃取 2次，合并有机相，用 1M盐酸溶液调 PH«3，最后用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液拌硅胶过柱得到 2-(4-氯苯基 )-4-(3-四氢呋喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺固体 (2g)。

MS (ESI): 374(M+1) 实施例 8:

2-(4-氯苯基)-4-(3-四氢噻吩甲基)-噻吩并[2，3 ]哒嗪-7-甲酰胺

第一步-

3-溴甲基四氢噻吩 (24.75g， 0.138mol)中加入 DMPU(225ml)、 FeCl₃ (0.75g)、 CuCl(0.3g), 慢慢滴入 Et₂Zn(l 06.8ml)， 40~45°C保温反应 45min，制得锌试剂。

4-氯 -2-(4-氯苯基)-噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (30g)中，加入 THF(810ml) 和 PdCl₂(dppf)(5.09g), 然后把上述制备得到的锌试剂溶液滴入该 THF溶液中，保温反应 (45°C)4h。将反应液倒入饱和食盐水中，搅拌 15min，抽滤，分液， THF 萃取 (500ml)水相两次，合并有机相，饱和食盐水 (500mlx3)洗涤，无水 Na₂S0₄ 干燥，溶剂蒸干得到 4-(3-四氢噻吩甲基 )-2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (25g)。

MS (ESI): 419(M+1)

第二步：

4-(3-四氢噻吩甲基 )-2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (3g)， 5ml 1， 4- 二氧六环和 5ml氨水加入 25ml密封管中，加热，外温保持在 80°C，反应过夜，次日，冷却至室温，将反应液转移至分液漏斗中，加入乙酸乙酯，振荡，静止分层，分液，水层用乙酸乙酯反萃取 2次，合并有机相，用 1M盐酸溶液调 PH«3，最后用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液拌硅胶过柱得到 2-(4-氯苯基 )-4-(3-四氢噻吩甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺固体 (2g)。

MS (ESI): 389(M+1) 实施例 9:

2-(4-氯苯基 )-4-(3-吡啶甲基) -噻吩并 [2，3-d】哒嗪 -7-甲酰胺

第一步：

3-溴甲基吡啶 (24.75g， 0.13 中加入 DMPU(225ml)、 FeCl₃ (0.75g)、 CuCl(0.3g), 慢慢滴入 Et₂Zn(106.8ml), 40~45°C保温反应 45min，制得锌试剂。

4-氯 -2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (30g)中，加入 THF(810ml) 和 PdCl₂(dppf)(5.09g), 然后把上述制备得到的锌试剂溶液滴入该 THF溶液中，保温反应 (45°C)4h。将反应液倒入饱和食盐水中，搅拌 15min，抽滤，分液， THF 萃取 (500ml)水相两次，合并有机相，饱和食盐水 (500mlx3)洗涤，无水 Na₂S0₄ 干燥，溶剂蒸干得到 4-(3-吡啶甲基) -2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (25g)。

MS (ESI): 410(M+1)

第二步：

4-(3-吡啶甲基) -2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (3g), 5ml 1 , 4- 二氧六环和 5ml氨水加入 25ml密封管中，加热，外温保持在 80°C，反应过夜，次日，冷却至室温，将反应液转移至分液漏斗中，加入乙酸乙酷，振荡，静止分层，分液，水层用乙酸乙酯反萃取 2次，合并有机相，用 1M盐酸溶液调 ΡΗ«3，最后用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液拌硅胶过柱得到 2-(4-氯苯基 )-4-(3-吡啶甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺固体 (2g)。

MS (ESI): 381ΓΜ+1) 实施例 10:

2-(4-氯苯基)-4-(3-(¾-吡喃甲基)-噻吩并[2，3-(1]哒嗪-7-甲酰胺

3-溴甲基吡喃 (24.75g， 0.138mol)中加入 DMPU(225ml)、 FeCl₃ (0.75g)、 CuCl(0.3g), 慢慢滴入 Et₂Zn(106.8ml)， 40~45°C保温反应 45min，制得锌试剂。

4-氯 -2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (30g)中，加入 THF(810ml) 和 PdCl₂(dppf)(5.09g), 然后把上述制备得到的锌试剂溶液滴入该 THF溶液中，保温反应 (45°C)4h。将反应液倒入饱和食盐水中，搅拌 15min，抽滤，分液， THF 萃取 (500ml)水相两次，合并有机相，饱和食盐水 (500mlx3)洗涤，无水 Na₂S0₄ 干燥，溶剂蒸干得到 4-(3-α-吡喃甲基) -2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (25g)。

MS (ESI): 412(M+1)

第二步：

4-(3-α-吡喃甲基) -2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (3g)， 5ml 1， 4-二氧六环和 5ml氨水加入 25ml密封管中，加热，外温保持在 80°C，反应过夜，次日，冷却至室温，将反应液转移至分液漏斗中，加入乙酸乙酯，振荡，静止分层，分液，水层用乙酸乙酯反萃取 2次，合并有机相，用 1M盐酸溶液调 PH 3, 最后用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液拌硅胶过柱得到 2-(4-氯苯基 )-4-(3-α-吡喃甲基)-噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺固体 (2g)。

MS (ESI): 383(M+1) 实施例 11：

2-(4-氯苯基 )-4-(3-α-噻喃甲基) -噻吩并 [2，3-dl哒嗪 -7-甲酰胺

第一步：

3-溴甲基噻喃（24.75g， 0.138mol)中加入 DMPU(225ml)、 FeCl₃ (0.75g)、 CuCl(0.3g), 慢慢滴入 Et₂Zn(106.8mQ， 40~45°C保温反应 45min，制得锌试剂。

4-氯 -2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (30g)中，加入 THF(810ml) 和 PdCl₂(dppf)(5.09g), 然后把上述制备得到的锌试剂溶液滴入该 THF溶液中，保温反应 (45°C)4h。将反应液倒入饱和食盐水中，搅拌 15min，抽滤，分液， THF 萃取 (500ml)水相两次，合并有机相，饱和食盐水 (500mlx3)洗涤，无水 Na₂S0₄ 干燥，溶剂蒸干得到 4-(3-α-噻喃甲基) -2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙 1 酯 (25g)。

MS (ESI): 428(M+1)

第二步：

4— (3__α_噻喃甲基 )_2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (3g)， 5ml 1 , 4-二氧六环和 5ml氨水加入 25ml密封管中，加热，外温保持在 80°C，反应过夜，次日，冷却至室温，将反应液转移至分液漏斗中，加入乙酸乙酯，振荡，静止分层，分液，水层用乙酸乙酯反萃取 2次，合并有机相，用 1M盐酸溶液调

最后用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液拌硅胶过柱得到 2-(4-氯苯基 )-4-(3-α-噻喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺固体 (2g)。

MS (ESI): 399(M+1) 实施例 12：

2-(4-氯苯基 )-4-(2-吡啶甲基) -噻吩并 [2, 3-d】哒嗪 -7-甲酰胺

第一步：

2-溴甲基吡啶 (24.75g， 0.138mol)中加入 DMPU(225ml)、 FeCl₃ (0.75g)、 CuCl(0.3g), 慢慢滴入 Et₂Zn(106.8ml), 40~45°C保温反应 45min，制得锌试剂。

4-氯 -2-(4-氯苯基)-噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (30g)中，加入 THF(810ml) 和 PdCl₂(dppf)(5.09g), 然后把上述制备得到的锌试剂溶液滴入该 THF溶液中，保温反应 (45°C)4h。将反应液倒入饱和食盐水中，搅拌 15min，抽滤，分液， THF 萃取 (500ml)水相两次，合并有机相，饱和食盐水 (500mlx3)洗涤，无水 Na₂S0₄ 干燥，溶剂蒸干得到 4-(2-吡啶甲基) -2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (25g)。 MS (ESI): 410(M+1)

第二步-

4-(2-吡啶甲基) -2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (3g)， 5ml 1 , 4- 二氧六环和 5ml氨水加入 25ml密封管中，加热，外温保持在 80°C，反应过夜，次日，冷却至室温，将反应液转移至分液漏斗中，加入乙酸乙酯，振荡，静止分层，分液，水层用乙酸乙酯反萃取 2次，合并有机相，用 1M盐酸溶液调 PH«3，最后用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液拌硅胶过柱得到 2-(4-氯苯基 )-4_(2-吡啶甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺固体 (2g；)。

MS (ESI): 381(M+1) 实施例 13：

2-(4-氯苯基 )-4-(4-吡啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺

第一步：

4-溴甲基吡啶 (24.75g， 0.138mol)中加入 DMPU(225ml)、 FeCl₃ (0.75g)、 CuCl(0.3g), 慢慢滴入 Et₂Zn(l 06.8ml)， 40~45°C保温反应 45min，制得锌试剂。

4-氯 -2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (30g)中，加入 THF(810ml) 和 PdCl₂(dppfK5.09g)，然后把上述制备得到的锌试剂溶液滴入该 THF溶液中，保温反应 (45°C)4h。将反应液倒入饱和食盐水中，搅拌 15min，抽滤，分液， THF 萃取 (500ml)水相两次，合并有机相，饱和食盐水 (500mlx3)洗涤，无水 Na₂S0₄ 干燥，溶剂蒸干得到 4-(4-吡啶甲基) -2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (25g)。

MS (ESI): 410(M+1)

敏一一半

4-(4-吡啶甲基) -2-(4-氯苯基)-噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (3g)， 5ml 1 , 4- 二氧六环和 5ml氨水加入 25ml密封管中，加热，外温保持在 80°C，反应过夜，次日，冷却至室温，将反应液转移至分液漏斗中，加入乙酸乙酯，振荡，静止分层，分液，水层用乙酸乙酯反萃取 2次，合并有机相，用 1M盐酸溶液调 PH 3, 最后用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液拌硅胶过柱得到 2-(4-氯苯基 )-4-(4-P比啶甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪-7-甲酰胺固体(2g)。

MS (ESI): 381(M+1) 实施例 14：

2-(4-氯苯基 )-4-(3-吡咯甲基) -噻吩并 [2, 3-d】哒嗪 -7-甲酰胺

第一步：

3-溴甲基吡咯 (24.75g， 0.138mol)中加入 DMPU(225ml)、 FeCl₃ (0.75g)、 CuCl(0.3g)，慢慢滴入 Et₂Zn(l 06.8ml)， 40-45 °C保温反应 45min，制得锌试剂。

4-氯 -2-(4-氯苯基)-噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (30g)中，加入 THF(810ml) 和 PdCl₂(dppf)(5.09g), 然后把上述制备得到的锌试剂溶液滴入该 THF溶液中，保温反应 (45°C)4h。将反应液倒入饱和水中，搅拌 15min，抽滤，分液， THF 萃取 (500ml)水相两次，合并有机相，饱和食盐水 (500mlx3)洗涤，无水 Na₂S0₄ 干燥，溶剂蒸干得到 4-(3-吡咯甲基 )-2-(4-氯苯基 )-噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (25g)。

MS (ESI): 398(M+1)

第二步-

4-(3-吡咯甲基) -2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (3g), 5ml 1 , 4- 二氧六环和 5ml氨水加入 25ml密封管中，加热，外温保持在 80°C，反应过夜，次日，冷却至室温，将反应液转移至分液漏斗中，加入乙酸乙酯，振荡，静止分层，分液，水层用乙酸乙酯反萃取 2次，合并有机相，用 1M盐酸溶液调 PH 3, 最后用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液拌硅胶过柱得到 2-(4-氯苯基 )-4-(3-吡咯甲基)-噻吩并 [2, 3- 哒嗪-7-甲酰胺固体(2_§)。

MS (ESI): 369(M+1) 实施例 15：

2-(⁴-氯苯基 )-4-(3-呋喃甲基) -噻吩并 [², 3-d】哒嗪 -7-甲酰胺

第一步-

3-溴甲基呋喃 (24.75g， 0.138mol)中加入 DMPU(225ml)、 FeCl₃ (0.75g)、 CuCl(0.3g), 慢慢滴入 Et₂Zn(106.8ml)， 40~45°C保温反应 45min，制得锌试剂。 4-氯 -2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (30g)中，加入 THF(810ml) 和 PdCl₂(dppf)(5.09g), 然后把上述制备得到的锌试剂溶液滴入该 THF溶液中，保温反应 (45°C)4h。将反应液倒入饱和食盐水中，搅拌 15min，抽滤，分液， THF 萃取 (500ml)水相两次，合并有机相，饱和食盐水 (500mlx3)洗涤，无水 Na₂S0₄ 干燥，溶剂蒸干得到 4-(3-呋喃甲基) -2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (25g)。

MS (ESI): 399(M+1)

第二步：

4-(3-呋喃甲基) -2-(4-氯苯基)-噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (3g)， 5ml 1， 4- 二氧六环和 5ml氨水加入 25ml密封管中，加热，外温保持在 80°C，反应过夜，次日，冷却至室温，将反应液转移至分液漏斗中，加入乙酸乙酯，振荡，静止分层，分液，水层用乙酸乙酯反萃取 2次，合并有机相，用 1M盐酸溶液调 ΡΒ=β，最后用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液拌硅胶过柱得到 2-(4-氯苯基 )-4-(3-呋喃甲基) -噻吩并 [2, 3- 哒嗪-7-甲酰胺固体(2_§)。

MS (ESI): 370(M+1) 实施例 16:

2-(4-氯苯基)-4-(3-噻吩甲基)-噻吩并[2，3^]哒嗪-7-甲酰胺

第一步：

3-溴甲基噻吩 (24.75g， 0.138mol)中加入 DMPU(225ml)、 FeCl₃ (0.75g)、 CuCl(0.3g), 慢慢滴入 Et₂Zn(106.8ml)， 40~45°C保温反应 45min，制得锌试剂。

4-氯 -2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (30g)中，加入 THF(810ml) 和 PdCl₂(dppf)(5.09g), 然后把上述制备得到的锌试剂溶液滴入该 THF溶液中，保温反应 (45°C)4h。将反应液倒入饱和食盐水中，搅拌 15min，抽滤，分液， THF 萃取 (500ml)水相两次，合并有机相，饱和食盐水 (500mlx3)洗涤，无水 Na₂S0₄ 干燥，溶剂蒸干得到 4-(3-噻吩甲基) -2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (25g)。

MS (ESI): 415(M+1)

第二步： 4-(3-噻吩甲基) -2-(4氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]U达嗪 -7-甲酸乙酯 (3g)， 5ml 1， 4- 二氧六环和 5ml氨水加入 25ml密封管中，加热，外温保持在 80°C , 反应过夜，次日，冷却至室温，将反应液转移至分液漏斗中，加入乙酸乙酯，振荡，静止分层，分液，水层用乙酸乙酯反萃取 2次，合并有机相，用 1M盐酸溶液调 PH-3，最后用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液拌硅胶过柱得到 2-(4-氯苯基 )-4-(3-噻吩甲基)-噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺固体 (2g)。

MS (ESI): 386(M+1) 实施例 17:

2-(4-氯苯基 )-4-(2-吡咯甲基) -噻吩并【2，3-d】哒嗪 -7-甲酰胺

第一步 _:

2-溴甲基吡咯 (24.75g， 0.138mol)中加入 DMPU(225ml)、 FeCl₃ (0.75g)、 CuCl(0.3g)，慢慢滴入 Et₂Zn(106.8ml)， 40~45°C保温反应 45min，制得锌试剂。

4—氯 -2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (30g)中，加入 THF(810ml) 和 PdCl₂(dppfX5.09g)，然后把上述制备得到的锌试剂溶液滴入该 THF溶液中，保温反应 (45°C)4h。将反应液倒入饱和食盐水中，搅拌 15min，抽滤，分液， THF 萃取 (500ml)水相两次，合并有机相，饱和食盐水 (500mlx3)洗涤，无水 Na₂S0₄ 干燥，溶剂蒸干得到 4-(2-吡咯甲基) -2-(4-氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (25g)。

MS (ESI): 398(M+1)

第二步 _:

4-(2-吡咯甲基) -2-(4-氯苯基)-噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (3g)， 5ml 1 , 4- 二氧六环和 5ml氨水加入 25ml密封管中，加热，外温保持在 80Ό , 反应过夜，次日，冷却至室温，将反应液转移至分液漏斗中，加入乙酸乙酯，振荡，静止分层，分液，水层用乙酸乙酯反萃取 2次，合并有机相，用 1M盐酸溶液调 PH 3, 最后用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液拌硅胶过柱得到 2-(4-氯苯基 )-4-(2-吡咯甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺固体 (2g)。 MS (ESI): 369(M+1) 实施例 18:

2-(3，5-二氯苯基) -4-(3-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺

第一步：

称量 10.5g 5-溴 -噻吩 -3-甲酸乙酯、 6g 3,5-二氯苯硼酸、 1.5gPd[P(Ph)₃]4、 7.5g 碳酸钠和 347ml溶剂 [甲苯：水：乙醇 (V/V)=4: 2： 1]依次加入 500ml三口烧瓶中，加热，回流反应约 3h， TLC跟踪反应进展，反应完毕，冷却至室温，分层，分液，水相用甲苯 35mlx2反萃取，合并有机相，用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥过夜，次日抽滤，减压蒸干溶剂得淡黄色粘稠液，放置后凝结成固体，用无水乙醇重结晶得 5-(3,5-二氯苯基) -3-噻吩甲酸乙酯晶体 8.6g。

第二步：

LDA制备：氩气保护下将 252.6ml 四氢呋喃， 79mlN,N-二异丙基胺投入 1000ml三口烧瓶， 302.8ml正丁基锂 (1.6M in hexane)溶液置于 500ml恒压滴液漏斗，当内温小于 -2CTC时逐滴滴加到反应烧瓶中，剧烈放热反应，控制滴加速度，使内温保持在 -20°C〜- 30°C之间，滴加完毕，自然升至室温，直接做下列缩合反应。 00021 缩合反应： 28.7g 5-(3,5-二氯苯基)噻吩 -3-甲酸乙酯, 1084ml四氢呋喃， 29.7ml 草酸二乙酯投入 2000ml四口烧瓶中，接机械搅拌， 500ml恒压滴液漏斗和温度计探头，室温搅拌溶解为淡黄色透明液，将上述制备的 LDA溶液在氩气保护下转移到 500ml恒压滴液漏斗中，降温，当内温低于 -78°C时，逐滴滴加 LDA溶液至反应烧瓶中，控制滴加速度，保持内温低于 -78Ό , 滴加完毕， TLC跟踪反应进程，反应结束后，加入 2.2M的盐酸溶液，调 PH«3,反应液颜色由红棕色变为桔黄色，温度升至 0°C左右，再加入氯化钠固体，搅拌溶解后静止分层，分液，水层用 143.5mlx2四氢呋喃反萃取，合并有机相，用饱和食盐水洗涤两次后，用稀碳酸钠溶液调 PH«8，最后用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，抽滤，减压蒸干溶剂得黄色粘稠液，室温放置逐渐凝结成固体，用乙醇重结晶后得 5-(3,5-二氯苯基) -2-乙氧乙二酰基 -噻吩 -3-甲酸乙酯纯品 (桔黄色晶体 )25.5g。

第三步：

3.0g 5-(3,5-二氯苯基) -2-乙氧乙二酰基 -噻吩 -3-甲酸乙酯晶体， 45ml无水乙醇投入 100ml反应烧瓶中，室温搅拌为黄色悬浮液， 0.75ml水合肼置于恒压滴液漏斗中，搅拌约 lOmin后滴加入反应烧瓶中，黄色悬浮液溶解为透明清夜，开启加热，设定温度为 70°C，随着温度升高，烧瓶中逐渐析出黄色固体，且反应液越来越粘稠，保温反应 lh，冷却至室温，抽滤，所得淡黄绿色固体用混合溶液 (正己垸：二氯甲烷 = 1 : l)15mlx2和 (甲醇：二氯甲烷 = 1 : l)15ml><2各洗涤两次，减压烘干得 2-(3,5-二氯苯基) -4-氧代 -4， 5-二氢-噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 2.75g。

第四步-

1.5g 2-(3,5-二氯苯基) -4-氧代 -4， 5-二氢-噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯， 22.5ml三氯氧磷加入 100ml三口烧瓶中，设定温度为 95°C，保温反应 3h，逐渐溶解为深红棕色溶液，反应完毕，冷却至室温，减压蒸干溶剂得棕褐色粘稠液，加入四氢呋喃和饱和食盐水搅拌，析出很多黄色固体，过滤，将滤液静止分层，分液，反萃取，合并有机相后用稀碳酸氢钠溶液调 PH 9，最后用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液用活性炭回流脱色，得淡黄绿色透明液，减压蒸干后得 4-氯 -2-(3,5-二氯苯基)-噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (淡绿色絮状固体) 1.0g。

第五步：

N-Boc-3-溴甲基哌啶（0.55g)中加入 DMPU(5ml)、 FeCl₃ (0.017g)、 CuCl(0.007g)，慢慢滴入 Et₂Zn(2.5ml)， 40~45°C保温反应 45min，制得锌试剂。

4-氯 -2-(3,5-二氯苯基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (30g)中，加入 THF(18ml)和 PdCl₂(dppi)(0.12g)，然后把上述制备得到的锌试剂溶液滴入该 THF 溶液中，保温反应 (45°C)4h。将反应液倒入饱和食盐水中，搅拌 15min，抽滤，分液， THF萃取 (80ml)水相两次，合并有机相，饱和食盐水 (80ml><3)洗涤，无水 Na₂S0₄干燥，溶剂蒸干得到 2-(3,5-二氯苯基) -4-(N-Boc-3-哌啶甲基)-噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (0.5g)

第六步：

2-(3,5-二氯苯基) -4-(N-Boc-3-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酸乙酯 (0.5g), 1.0ml 1， 4-二氧六环和 1.0ml氨水加入 5ml密封管中，加热，外温保持在 80°C，反应过夜，次日，冷却至室温，将反应液转移至分液漏斗中，加入乙酸乙酯，振荡，静止分层，分液，水层用乙酸乙酯反萃取 2次，合并有机相，用 1M盐酸溶液调 PH«3，最后用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液拌硅胶过柱得到 2-(3,5-二氯苯基) -4-(N-Boc-3-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺固体 (0.3g)。

第七步：

200mg 2-(3,5-二氯苯基) -4-(N-Boc-3-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺， 4ml乙酸乙酯加入 25ml单口烧瓶中，溶解为淡黄色透明溶液，加入 4ml 3M 盐酸溶液，即变成白色悬浮液， 30°C保温反应 lh，白色悬浮液液变为透明溶液，点板跟踪反应进展，反应完毕，减压蒸干溶剂得 2-(3，5-二氯苯基) -4-(3-哌啶甲基) - 噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺盐酸盐固体 100mg。

第八步：

lOOmg 2-(3,5-二氯苯基) -4-(3-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺盐酸盐加入 25ml单口烧瓶中，加入 5ml水，滴加碳酸钠溶液，调 pH=9〜10，搅拌 30min,用乙酸乙酯萃取，洗涤，减压蒸干溶剂得到 2-(4-氯苯基 )-4-(4-哌啶甲基) - 噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺 70mg。

MS (ESI): 421(M+1) 实施例 19:

药物制剂的制备

1、注射剂

( 1 ) 处方

化合物 II 50g

氯化钠 2250g

注射用水加至 250000ml

制成 1000瓶

(2)制备按处方量称取化合物 II置于配料缸内，加入 20万 ml左右的注射用水将其完全溶解，再加入处方量氯化钠溶解完全后继续加注射用水至全量，调节溶液 PH值至 4.0〜5.0之间，加入 250g活性碳吸附 30分钟后用脱碳滤棒脱碳，再用钛滤棒精滤至澄明后灌装成 250ml/瓶， 115°C水浴灭菌 30分钟后即得。

2、片剂

( 1 ) 处方

化合物 XXXIII 50g

淀粉 160g

羟丙纤维素 39g

聚维酮 K30 (5% ) 适量

羧甲淀粉钠 10.4g

硬脂酸镁 1.3g

制成 1000片

(2) 制备

称取处方量化合物 XXXIII、淀粉和羟丙纤维素置于沸腾制粒机料斗内，开主风将物料预热至 38T〜 45°C预混 5分钟，喷入 5 %聚维酮 K30水溶液适量制粒，制粒完成后控制物料温度至 55°C〜60°C干燥 10分钟后出料，整粒后与羧甲淀粉钠、硬脂酸镁混匀后压片即得。

3、胶囊剂

( 1 ) 处方

化合物 XXXXIV 50g

乳糖 194.4g

羧甲淀粉钠 7.8g

微粉硅胶 5.2g

硬脂酸镁 2.6g

制成 1000粒

(2) 制备

按处方量称取化合物 χχχχιν、乳糖、羧甲淀粉钠和微粉硅胶置于混合机内混合 60分钟使其混合均匀，再加入处方量硬脂酸镁混合 10分钟后出料，用普通明胶胶壳填充即得。

对以上制备得到的部分化合物进行了体外与体内抗肿瘤活性试验。其中体外采用了 SRB， MTT法测得细胞毒性；作用时间为 72 h。具体活性数据见表一；化合物对小鼠 S180肉瘤的生长抑制作用见表二；化合物对人结肠癌 HT-99裸小鼠移植瘤的疗效见表三。

表一化合物的体外抗癌活性检测 IC_5Q M)

表二、化合物对小鼠 S180结肠癌的生长抑制作用 N=7 ^：士 SD

说明： ip:腹腔注射给药。表三化合物对人结肠癌 HT-99裸小鼠移植瘤的疗效

dO: 第一次给药时间； dn: 给药后第 17天； RTV: 相对肿瘤体积；对照组 n=10，治疗组 n=6。

ip: 腹腔注射给药

iv: 血管注射给药

GCT为对照药：吉西他滨

ADR为对照药：阿霉素

CPT-11为对照药：伊立替康

从上表中可以看出，本发明化合物本身不但有一定的抗肿瘤作用，且还能够增强细胞毒抗肿瘤药物如吉西他滨、 CPT-11、 ADR等的抗肿瘤疗效。

本发明通过上面的实施例进行举例说明，但是，应当理解，本发明并不限于这里所描述的特殊实例和实施方案。在这里包含这些特殊实例和实施方案的目的在于帮助本领域中的技术人员实践本发明。任何本领域中的技术人员很容易在不脱离本发明精神和范围的情况下进行进一步的改进和完善，因此本发明只受到本发明权利要求的内容和范围的限制，其意图涵盖所有包括在由附录权利要求所限定的本发明精神和范围内的备选方案和等同方案。

Claims

权利要求书

1、式（I)化合物或其药学上可接受的盐或其水合物，

其中-

R1和 R2各自独立地为 H或 C_M的烷基；

R3为含 N、 S或 O的饱和或不饱和的六元环或五元环，及其光学异构体； R4为任意位置单取代或双取代的卤代苯基。

2、根据权利要求 1所述的化合物或其药学上可接受的盐或其水合物，其中，

3、根据权利要求 1或 2所述的化合物或其药学上可接受的盐或其水合物，其中， R3为含 N、 S或 0的饱和六元环或五元环，及其光学异构体。

4、根据权利要求 3所述的化合物或其药学上可接受的盐或其水合物，其中， R3为六氢吡啶基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、四氢吡咯基、四氢呋喃基、或四氢噻吩基，及其光学异构体。

5、根据权利要求 4所述的化合物或其药学上可接受的盐或其水合物，其中， R3为六氢吡啶基，及其光学异构体。

6、根据权利要求 1所述的化合物或其药学上可接受的盐或其水合物，其中，

R4为单取代的卤代苯基

，其中， X表示 F、 Cl、 Br、 I。

7、根据权利要求 3所述的化合物或其药学上可接受的盐或其水合物，其中， R3为吡啶基、 α-吡喃基、 γ-吡喃基、 α-噻喃基、 γ-噻喃基、吡咯基、呋喃基、或噻吩基，及其光学异构体。

8、根据权利要求 1所述的化合物或其药学上可接受的盐或其水合物，其中，式（I)化合物选自：

2-(4-氟苯基 )-4-(3-哌啶甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；

2-(4-氯苯基 )-4-(3-哌啶甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；

2-(4-溴苯基 )-4-(3-哌啶甲基)-噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺； -(4-氟苯基 )-4-(3-四氢吡喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-氯苯基 )-4-(3-四氢吡喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-溴苯基 )-4-(3-四氢吡喃甲基)-噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-氟苯基 )-4-(3-四氢噻喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-氯苯基 )-4-(3-四氢噻喃甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-溴苯基)-4-(3-四氢噻喃甲基)-噻吩并[2, 3^]哒嗪-7-甲酰胺；-(4-氯苯基 )-4-(2-哌啶甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；

-(4-氯苯基 )-4-(4-哌啶甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；

-(4-氯苯基 )-4-(S-3-哌啶甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；

-(4-氯苯基 )-4-(R-3-哌啶甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-氯苯基 )-4-(3-哌啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-N-甲基甲酰胺；-(4-氯苯基 )-4-(3-哌啶甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-Ν,Ν-二甲基甲酰胺;-(4-氯苯基 )-4-(3-四氢噻喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-Ν-甲基甲酰胺;-(4-氯苯基 )4-(3-四氢噻喃甲基) -B塞吩并 [2, 3-d]哒 7-Ν,Ν-二甲基甲翻安；-(4-氯苯基 )-4-(3-四氢吡喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪-7-N-甲基甲酰胺_;-(4-氯苯基)-4-(3-四氢吡喃甲基)-噻吩并[2, 3-d]哒R ·7-N,N-二甲基甲細安；-(4-氟苯基)-4-(3-四氢吡咯甲基)-噻吩并[2, 3^]哒嗪-7-甲酰胺；-(4-氯苯基)-4-(3-四氢吡咯甲基)-噻吩并[2, 3 ]哒嗪-7-甲酰胺；-(4-溴苯基 )-4-(3-四氢吡咯甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪-7-甲酰胺；-(4-氟苯基)-4-(3-四氢呋喃甲基)-噻吩并[2, 3-d]哒嗪-7-甲酰胺；-(4-氯苯基)-4-(3-四氢呋喃甲基)-噻吩并[2, 3-(1]哒嗪-7-甲酰胺；-(4-溴苯基 )-4-(3-四氢呋喃甲基)-噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-氟苯基 )-4-(3-四氢噻吩甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-氯苯基 )-4-(3-四氢噻吩甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-溴苯基 )-4-(3-四氢噻吩甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-氯苯基)-4-(2-四氢吡咯甲基)-噻吩并[2, 3- 哒嗪-7-甲酰胺；-(4-氯苯基 )-4-(S-3-四氢吡咯甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-氯苯基)-4-(1 -3-四氢吡咯甲基)-噻吩并[2, 3 1哒嗪-7-甲酰胺；-(4-氯苯基 )-4-(3-四氢吡咯甲基)-噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-N-甲基甲酰胺;-(4-氯苯基 4-(3-四氢吡咯甲基) -噻吩并 [2, 3- 哒 7- >1-二甲基甲翻安；-(4-氯苯基 )-4-(3-四氢噻吩甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-N-甲基甲酰胺;-(4-氯¾¾>4-(3-四氢噻吩甲基) -噻吩并 [2, 3-(1]哒 7-1«^-二甲基甲醐安；-(4-氯苯基 )-4-(3-四氢呋喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-N-甲基甲酰胺;-(4-氯¾¾)4-(3-四氢呋喃甲基) -P塞吩并 [2， 3-d]哒 7-Ν，Ν-二甲基甲醐安； -(4-氟苯基 )-4-(3-吡啶甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-氯苯基 )-4-(3-吡啶甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-溴苯基 )-4-(3-吡啶甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-氟苯基 )-4-(3-α-吡喃甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-氯苯基 )-4-(3-α-吡喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-溴苯基 )-4-(3-α-吡喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-氟苯基 )-4-(3-α-噻喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-氯苯基 )-4-(3-α-噻喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-溴苯基 )-4-(3-α-噻喃甲基) -噻吩并 [2， 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-氯苯基 )-4-(2-吡啶甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-氯苯基 )-4-(4-吡啶甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-氯苯基 )-4-(3-吡啶甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-N-甲基甲酰胺；-(4-氯苯基 )-4-(3-吡啶甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-N，N-二甲基甲酰-(4-氯苯基 )-4-(3-噻喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-N-甲基甲酰胺；-(4-氯苯基 )-4-(3-噻喃甲基) -噻吩并 [2，3- 哒 7- ,1^-二甲基甲翻安；-(4-氯苯基 )-4-(3-吡喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-N-甲基甲酰胺；-(4-氯¾¾ 4-(3-吡喃甲基) -噻吩并 [2, 3-(1]哒 7- 1^二甲基甲翻安；-(4-氟苯基; HK3-吡咯甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-氯苯基 )-4-(3-吡咯甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-溴苯基 )-4-(3-吡咯甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-氟苯基 )-4-(3-呋喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-氯苯基 )-4-(3-呋喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-溴苯基 )-4-(3-呋喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-氟苯基)-4-(3-噻吩甲基)-噻吩并[2, 3-(1]哒嗪-7-甲酰胺；-(4-氯苯基)-4-(3-噻吩甲基)-噻吩并[2, 3-(1]哒嗪-7-甲酰胺；-(4-溴苯基 )-4-(3-噻吩甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-氯苯基 )-4-(2-P比咯甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺；-(4-氯苯基 )-4-(3-吡咯甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-N-甲基甲酰胺；-(4-氯苯基 )-4-(3-吡咯甲基) -噻吩并 [ 3-d]哒B ■7-N,N-二甲基甲細安；-(4-氯苯基)-4-(3-噻吩甲基)-噻吩并[2, 3-d]哒嗪 -7-N-甲基甲酰胺；-(4-氯苯基 )4-(3-噻吩甲基)-噻吩并 [2, 3-(1]哒 7- 1^二甲基甲醐安；-(4-氯苯基 )-4-(3-呋喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-N-甲基甲酰胺；-(4-氯苯基 )-4-(3-呋喃甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒 7-N，N-二甲基甲翻安；-(3,5-二氯苯基) -4-(3-哌啶甲基) -噻吩并 [2, 3-d]哒嗪 -7-甲酰胺。

9、药物组合物，包括权利要求 1~8中任一的权利要求所述的治疗有效量的式（I)化合物或其药学上可接受的盐或其水合物、以及药学上可接受的载体。

10、权利要求 1~8中任一项权利要求的化合物或其药学上可接受的盐或其水合物在制备用于治疗或预防肿瘤性疾病的药物、治疗或预防增生性疾病的药物、限制人或动物细胞增殖的药物、抑制肿瘤及生长因子相关激酶的药物中的用途。

11、根据权利要求 10所述的用途，其中，所述肿瘤性疾病包括子宫颈瘤，头部和颈部肿瘤，乳腺、卵巢、肺非小细胞、胰腺、结肠、 ***或其它组织的癌症，以及白血病和淋巴瘤、中枢和外周神经***肿瘤以及其它肿瘤如黑素瘤、纤维肉瘤和骨肉瘤。

12、根据权利要求 10所述的用途，其中，所述增生性疾病包括自身免疫性疾病、炎症、神经性疾病和心血管疾病。

13、制备权利要求 1~8中任一所述的式（I) 化合物或其药学上可接受的盐或其水合物的方法，该方法包括：

在碱存在下，用草酸二烷基酯处理式 A的化合物：

接着用肼处理，生成式 B的化合物:

用磷酰氯处理式 B的化合物，生成式 C的化合物:

并且使式 C的化合物与如下化合物 R3CH₂反应，生产式 D的化合物，

接着与胺 ΝΗ 反应，再去 R3上的保护基及加碱处理，生成式（I)的化合物或其药学上可接受的盐或其水合物，

其中：！为。₁₄的烷基，并且 R1和 R2各自独立地为 Η或。^的烷基； R3 为含 N、 S或 0的饱和或不饱和的六元环或五元环，及其光学异构体； R4为任意位置单取代或双取代的 ¾代苯基。