TWI547493B - 作為突變ｉｄｈ之抑制劑之３－嘧啶－４－基－唑啶－２－酮 - Google Patents

Description

作為突變IDH之抑制劑之3-嘧啶-4-基- 唑啶-2-酮

本發明係有關新穎的3-嘧啶基-4-基-唑啶-2-酮化合物、含有此等化合物之組合物、該等化合物用於抑制具有新變體活性(neomorphic activity)之突變IDH蛋白的用途及用於治療與該等突變IDH蛋白相關之疾病或病症(包括(但不限於)細胞增殖病症，諸如癌症)的用途。

異檸檬酸去氫酶(Isocitrate dehydrogenase，IDH)為在細胞代謝中發現之一種關鍵的酶家族。其為NADP⁺/NAD⁺且為酶類別EC 1.1.1.42之金屬依賴性氧化還原酶。野生型蛋白質催化異檸檬酸氧化去羧為α-酮戊二酸，在過程中產生二氧化碳及NADPH/NADH。亦已知該等野生型蛋白質將草醯丁二酸轉化為α-酮戊二酸。已在以下多種癌症類型中鑑別出IDH1(胞溶質)及IDH2(粒線體)之突變，包括(但不限於)神經膠質瘤、多形性神經膠母細胞瘤、副神經節瘤、幕上原始神經外胚層腫瘤、急性骨髓白血病(acute myeloid leukemia，AML)、***癌、甲狀腺癌、結腸癌、軟骨肉瘤、膽管癌、周邊T細胞淋巴瘤及黑素瘤。(參見L.Deng等人，Trends Mol.Med.,2010,16,387；T.Shibata等人，Am.J.Pathol.,2011,178(3),1395；Gaal等人，J.Clin.Endocrinol.Metab.2010；Hayden等人，Cell Cycle,2009；Balss等人，Acta Neuropathol.,2008)。已在活性位點之關鍵殘基處或附近發現此等突變：對於IDH1為 G97D、R100、R132、H133Q及A134D，且對於IDH2為R140及R172。(參見L.Deng等人，Nature,2009,462,739；L.Sellner等人，Eur.J.Haematol.,2011,85,457)。

IDH之此等突變體形式顯示具有新變體活性(亦稱作功能活性之獲得)，將α-酮戊二酸還原為2-羥基戊二酸(2-HG)。(參見P.S.Ward等人，Cancer Cell,2010,17,225)。一般而言，2-HG之產生具對映體特異性，導致產生D-對映異構體(亦稱作R對映異構體或R-2-HG)。正常細胞具有低天然含量之2-HG，而於IDH1或IDH2中具有此等突變之細胞顯示顯著升高含量之2-HG。在具有該等突變之腫瘤中已偵測到高含量之2-HG。舉例而言，在患有含突變IDH之AML之患者的血漿中已偵測到高含量之2-HG。(參見S.Gross等人，J.Exp.Med.,2010,207(2),339)。高含量之2-HG與腫瘤形成高度相關。

突變IDH2亦與罕見神經代謝性病症第II型D-2-羥基戊二酸酸尿症(第II型D-2-HGA)有關。在15名患有第II型D-2-HGA之患者中的IDH2中R140處發現生殖系突變。患有此病症之患者亦在其尿液、血漿及腦脊髓液中具有一致升高含量之D-2-HG(參見Kranendijk,M.等人，Science,2010,330,336)。最終，患有奧利埃氏病(Ollier Disease)及馬富西症候群(Mafucci Syndrome)(易於形成軟骨腫瘤之兩種罕見病症)之患者已顯示對於IDH1及IDH2突變呈體細胞嵌合體形式且展現高含量之D-2-HG。(參見Amary等人，Nature Genetics,2011；及Pansuriya等人，Nature Genetics,2011)。

因此，需要具有新變體活性之突變IDH蛋白之小分子抑制劑來用於治療與此等蛋白質相關之疾病及病症。

在一個態樣中，本發明提供一種式(I)化合物 或其醫藥學上可接受之鹽，其中R¹-R⁶係如本文中所定義。

在第二態樣中，本發明提供一種包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之載劑或賦形劑的醫藥組合物。

在第三態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽作為具有諸如將α-酮戊二酸還原為2-羥基戊二酸之新變體活性(2-HG新變體活性)的突變IDH蛋白之抑制劑的用途。適宜地，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽作為具有新變體活性(諸如2-HG新變體活性)之突變IDH1及/或具有新變體活性(諸如2-HG新變體活性)之突變IDH2之抑制劑的用途。本發明進一步提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽作為在殘基97、100或132處具有突變(例如G97D、R100Q、R132H、R132C、R132S、R132G、R132L及R132V)之IDH1之抑制劑；及/或作為在 殘基140或172處具有突變(例如R172K、R172M、R172S、R172G及R172W)之IDH2之抑制劑的用途。

在第四態樣中，本發明提供一種治療與具有新變體活性之突變IDH蛋白相關之疾病或病症的方法，其包含向有需要之個體投與有效量之根據式(I)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一個實施例中，該疾病或病症為細胞增殖病症，諸如癌症。在另一實施例中，該癌症為腦癌，諸如神經膠質瘤、多形性神經膠母細胞瘤、副神經節瘤及幕上原始神經外胚層腫瘤(pNET)；白血病，諸如急性骨髓白血病(AML)、骨髓發育不良症候群及慢性骨髓性白血病(chronic myelogenous leukemia，CML)；皮膚癌，包括黑素瘤；***癌；甲狀腺癌；結腸癌；肺癌；肉瘤，包括中心性軟骨肉瘤、中心性及骨膜性軟骨瘤；及纖維肉瘤。在另一實施例中，該疾病或病症為D-2-羥基戊二酸尿酸症。

在第五態樣中，本發明提供一種式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽與另一治療劑之組合。

本發明之此等及其他態樣進一步描述於本發明之以下[實施方式]中。

本發明係有關一種式(I)化合物

式(I)化合物 其中：R¹及R²各自獨立地為氫、氘、鹵基、羥基、NH₂、芳基、雜芳基或視情況經取代之C_1-4烷基，其中該C_1-4烷基視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基及NH₂；R^3a為氫、氘、C_1-6烷基、苯基或苄基，及R^3b為氫、氘或C_1-6烷基；或R^3a與R^3b接合在一起而形成視情況經取代之3-7員環烷基環或視情況經取代之4-7員雜環，其中該等環烷基及雜環各自視情況經一或兩個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、側氧基、NH₂及C_1-3烷基；R^4a為氫、C_1-6烷基、視情況經取代之苯基、視情況經取代之苄基、視情況經取代之雜芳基、或亞甲基-二苯，其中該等苯基、苄基及雜芳基環視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、硝基、C_1-4烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、苯基、5-6員雜芳基、5-6員雜環基、苯氧基、-COOR^b、-SO₂R^b、-NHC(O)R^b及-NR^bR^b，及 R^4b為氫、氘或C_1-3烷基；或R^4a與R^4b接合在一起而形成視情況經取代之3-7員環烷基環或視情況經取代之4-7員雜環，其中該等環烷基及雜環視情況經一或兩個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、側氧基、NH₂及C_1-3烷基，其限制條件為R^3a與R^3b以及R^4a與R^4b中之僅一者接合在一起而形成環；R^5a為氫或氘；R^5b為氫、氘、甲基、乙基、CD₃、CF₃、CH₂F或CHF₂，及R⁶為視情況經取代之C_1-6烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜芳基、視情況經取代之雜環基或視情況經取代之C_3-10環烷基，其中該C_1-6烷基視情況經一個選自由以下組成之群的取代基取代：羥基、C_1-3烷氧基及-OR^a，其中該芳基、該雜芳基、該雜環基及該C_3-10環烷基視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基；羥基；氰基；硝基；C_1-4烷氧基；C_1-3鹵烷基；C_1-3鹵烷氧基；C_1-6烷基；C_3-6環烷基，視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：羥基、氰基、C_1-3烷基、C_1-3烷氧基及C_1-3鹵烷基；苯基，視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、5-6員雜芳基、5-6員雜環 基、苯氧基、-COOR^b、-SO₂R^b、-NHC(O)R^b及-NR^bR^b；5-6員雜芳基，視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、C_1-3烷基、C_1-3烷氧基；5-6員雜環基，視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、側氧基、NH₂及C_1-3烷基；-CH₂R^a；-OR^a；-C(O)R^a；-NR^aR^b；-COOR^a；-SO₂R^a；-SO₂R^b；NHC(O)R^a；-NHC(O)R^b；-C(O)NR^aR^b；-C(O)NHR^b；及-SO₂NR^bR^b；或R^5b與R⁶接合在一起而形成視情況經取代之C_3-7環烷基或視情況經取代之式(a)之基團： 其中n為1、2或3，及該C_3-7環烷基及該式(a)之基團視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、5-6員雜芳基、5-6員雜環基、苄氧基、-COOR^b、-SO₂R^b、-NHC(O)R^b及-NR^bR^b；各R^a獨立地為視情況經取代之苯基、視情況經取代之雜芳基、視情況經取代之雜環基或視情況經取代之C_3-7環烷基，其中該苯基及該雜芳基視情況經一至三個各獨立地選自 由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基及C_1-3烷基，其中該雜環基視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、側氧基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基、C_1-4烷基、C_3-5環烷基、-C(O)R^b及-NR^bR^b；及其中該C_3-7環烷基視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、側氧基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基及C_1-3烷基；及各R^b獨立地為氫或C_1-6烷基。

「烷基」係指具有指定碳原子數之單價飽和烴鏈。舉例而言，C_1-6烷基係指具有1至6個碳原子之烷基。烷基可視情況經一或多個如式(I)中所定義之取代基取代。烷基可為直鏈或分支鏈。代表性分支鏈烷基具有一個、兩個或三個分支。烷基之實例包括(但不限於)甲基、乙基、丙基(正丙基及異丙基)、丁基(正丁基、異丁基、第二丁基及第三丁基)、戊基(正戊基、異戊基及新戊基)及己基。

「烷氧基」係指任何經由氧橋連接之烷基部分(亦即-O-C_1-3烷基，其中C_1-3烷基係如本文中所定義)。該等基團之實例包括(但不限於)甲氧基、乙氧基及丙氧基。

「芳基」係指具有芳族環之烴環系統。芳基為單環系統或雙環系統。單環芳基環係指苯基。雙環芳基環係指萘基及其中苯基與如本文所定義之C_5-7環烷基或C_5-7環烯基環稠合之環。芳基可視情況經一或多個如式(I)中所定義之取代 基取代。

「環烷基」係指具有指定碳原子數之飽和烴環系統。環烷基為單環或雙環系統。舉例而言，C_5-10環烷基係指具有5至10個碳原子之環烷基。環烷基可視情況經一或多個如式(I)中所定義之取代基取代。環烷基之實例包括(但不限於)環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基及金剛烷基。

「環烯基」係指具有指定碳原子數且在環內具有碳碳雙鍵之不飽和烴環系統。舉例而言，C_5-7環烯基係指具有5至7個碳原子之環烯基。在某些實施例中，環烯基在環內具有一個碳碳雙鍵。在其他實施例中，環烯基環內具有一個以上碳碳雙鍵。環烯基環不為芳族。環烯基可視情況經一或多個如式(I)中所定義之取代基取代。

「鹵基」係指鹵素基團氟、氯、溴及碘。

「鹵烷基」係指烷基內與碳原子連接之至少一個氫原子經鹵基置換的烷基。鹵基取代基之數目包括(但不限於)1、2、3、4、5或6個取代基。鹵烷基包括(但不限於)單氟甲基、二氟乙基及三氟甲基。

「鹵烷氧基」係指經由氧橋連接之鹵烷基部分(亦即-O-C_1-3鹵烷基，其中C_1-3鹵烷基係如本文中所定義)。鹵烷氧基之實例為三氟甲氧基。

「雜芳基」係指含有1至5個雜原子之芳族環系統。含有一個以上雜原子之雜芳基可含有不同雜原子。雜芳基可視情況經一或多個如式(I)中所定義之取代基取代。雜芳基為 單環系統或為稠合雙環系統。單環雜芳基環具有5至6個環原子。雙環雜芳基環具有8至10個成員原子。雙環雜芳基環包括雜芳基環與苯基環稠合之環系統。雜芳基包括(但不限於)吡咯基、吡唑基、咪唑基、唑基、異唑基、二唑基(包括1,3,4-二唑基及1,2,4-二唑基)、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基、呋喃基、呋呫基、噻吩基、***基、吡啶基(包括2-吡啶基、3-吡啶基及4-吡啶基)、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基、三嗪基、四嗪基、四唑基、吲哚基、異吲哚基、吲哚嗪基、吲唑基、嘌呤基、喹啉基、異喹啉基、喹喏啉基、喹唑啉基、苯并咪唑基、苯并哌喃基、苯并哌喃基、苯并唑基、苯并異唑基、苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并噻吩基、啶基、1H-吡咯并[2,3-b]吡啶基、四唑并[1,5-a]吡啶基、咪唑并[2,1-b][1,3,4]噻二唑基及其類似基團。

「雜原子」係指氮、氧或硫原子。

「雜環基」係指含有1至4個雜原子之3至11員飽和或不飽和單環或雙環。雜環系統不為芳族。含有一個以上雜原子之雜環基團可含有不同雜原子。雜環基包括其中硫原子經氧化形成SO或SO₂之環系統。雜環基團可視情況經一或多個如式(I)中所定義之取代基取代。雜環基團為單環系統、螺環系統、或稠合或橋聯雙環系統。單環雜環具有3至7個環原子。單環雜環基團之實例包括氧雜環丁烷基、四氫呋喃基、二氫呋喃基、1,4-二氧雜環己烷基、嗎啉基、1,4-二噻烷基、哌嗪基、哌啶基、1,3-二氧戊環基、 咪唑啶基、咪唑啉基、吡咯啉基、吡咯啶基、四氫哌喃基、二氫哌喃基、氧硫雜環戊烷基、二硫雜環戊烷基、1,3-二氧雜環己烷基、1,3-二噻烷基、氧硫雜環己烷基、硫代嗎啉基、四氫-硫代哌喃1,1-二氧化物、1,4-二氮雜環庚烷基及其類似基團。稠合雜環系統具有8至11個環原子且包括雜環與苯基環、雜芳基環或另一雜環稠合之基團。稠合雜環之實例包括2,3-二氫苯并[b][1,4]二氧雜環己烯基、八氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪基、八氫-吡啶并[1,2-a]吡嗪基、八氫-吡咯并[3,4-c]吡咯基、5,6,7,8-四氫-[1,2,4]***并[4,3-a]吡嗪基、5,6,7,8-四氫-咪唑并[1,2-a]吡嗪基及其類似基團。橋聯雜環基團之實例包括3,8-二氮雜-雙環[3.2.1]辛基、3,8-二氮雜-雙環[4.2.0]辛基及其類似基團。螺雜環基團之實例包括4,7-二氮雜-螺[2.5]辛基及其類似基團。

「4-7員雜環基」係指具有4至7個環原子且含有1至4個雜原子之如上文所定義之雜環基團。

「5-6員雜環基」係指具有5或6個環原子且含有1至4個雜原子之如上文所定義之雜環基團。

「視情況經取代」指示諸如烷基、環烷基、雜芳基、雜環基、苯基及苄基之基團可未經取代或該基團可經一或多個如式(I)中所定義之取代基取代。

「側氧基」係指C=O基團。

「醫藥學上可接受」意謂適於醫藥用途之化合物。適用於醫藥中之本發明化合物之鹽及溶劑合物(例如水合物及 鹽之水合物)為其中相對離子或相締合之溶劑為醫藥學上可接受者。然而，具有非醫藥學上可接受之相對離子或相締合之溶劑的鹽及溶劑合物在本發明之範疇內，例如用作用於製備其他本發明化合物及其醫藥學上可接受之鹽及溶劑合物的中間物。

關於諸如烷基、苯基、苄基、雜芳基及雜環基之基團的「經取代」指示連接於基團內之原子的一或多個氫原子經選自由所定義取代基組成之群的取代基置換。應瞭解，術語「經取代」包括以下暗示限制條件：該取代係根據經取代原子及取代基之所允許價態，且該取代產生穩定的化合物(亦即不自發經歷例如藉由水解、重排、環化或消除而轉化且足夠穩固以能夠自反應混合物中分離之化合物)。當陳述基團可含有一或多個取代基時，該基團內之一或多個(適當時)原子可經取代。另外，基團內之單個原子可經一個以上取代基取代，只要該取代係根據原子之所允許價態即可。針對各經取代或視情況經取代之基團定義適合之取代基。

熟練技術人員應瞭解，可製備根據式(1)之化合物之鹽，包括醫藥學上可接受之鹽。此等鹽可在化合物之最終分離及純化期間就地製備，或藉由獨立地使呈游離酸或游離鹼形式之經純化化合物與適合之鹼或酸分別反應而製備。

醫藥學上可接受之酸加成鹽可由無機酸及有機酸形成，例如，乙酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、溴化物/氫溴化物、碳酸氫鹽/碳酸鹽、硫酸氫鹽/硫酸鹽、樟腦 磺酸鹽、氯化物/鹽酸鹽、氯茶鹼鹽、檸檬酸鹽、乙烷二磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、葡萄糖醛酸鹽、馬尿酸鹽、氫碘酸鹽/碘化物、羥乙磺酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、月桂基硫酸鹽、蘋果酸鹽、順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、杏仁酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、萘甲酸鹽、萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、十八烷酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、磷酸鹽/磷酸氫鹽/磷酸二氫鹽、聚半乳糖醛酸鹽、丙酸鹽、硬脂酸鹽、丁二酸鹽、磺基水鹽酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽及三氟乙酸鹽。

可衍生形成鹽之無機酸包括例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸及其類似酸。

可衍生形成鹽之有機酸包括例如乙酸、丙酸、乙醇酸、草酸、順丁烯二酸、丙二酸、丁二酸、反丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、杏仁酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、甲苯磺酸、磺基水楊酸及其類似酸。醫藥學上可接受之鹼加成鹽可由無機鹼及有機鹼形成。

可衍生形成鹽之無機鹼包括例如銨鹽及來自週期表第I欄至第XII欄之金屬。在某些實施例中，鹽係衍生自鈉、鉀、銨、鈣、鎂、鐵、銀、鋅及銅；尤其適合之鹽包括銨鹽、鉀鹽、鈉鹽、鈣鹽及鎂鹽。

可衍生形成鹽之有機鹼包括例如一級、二級及三級胺；經取代之胺，包括天然存在之經取代之胺；環胺；鹼性離子交換樹脂；及其類似物。某些有機胺包括異丙胺、苄星 (benzathine)、膽酸鹽、二乙醇胺、二乙胺、離胺酸、葡甲胺、哌嗪及緩血酸胺(tromethamine)。

本發明之醫藥學上可接受之鹽可藉由習知化學方法自鹼性或酸性部分合成。通常，該等鹽可藉由使此等化合物之游離酸形式與化學計量量之適當鹼(諸如Na、Ca、Mg或K氫氧化物、碳酸鹽、碳酸氫鹽或其類似物)反應，或藉由使此等化合物之游離鹼形式與化學計量量之適當酸反應來製備。該等反應典型地在水中或有機溶劑中或水與有機溶劑之混合物中進行。通常，若可行，則使用如***、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈之非水性介質為合意的。其他適合之鹽的清單可見於例如「Remington's Pharmaceutical Sciences」，第20版，Mack Publishing Company,Easton,Pa.,(1985)；及Stahl及Wermuth,「Handbook of Pharmaceutical Salts：Properties,Selection,and Use」(Wiley-VCH,Weinheim,Germany,2002)中。

亦可製備式(I)化合物之溶劑合物，包括醫藥學上可接受之溶劑合物。「溶劑合物」係指由溶質與溶劑形成之可變化學計量之複合物。用於本發明目的之該等溶劑可能不干擾溶質之生物活性。適合之溶劑的實例包括(但不限於)水、MeOH、EtOH及AcOH。其中水為溶劑分子之溶劑合物典型地稱作水合物。水合物包括含有化學計量量之水的組合物以及含有可變量之水的組合物。

式(I)化合物(包括其鹽及溶劑合物)可以結晶形式、非結晶形式或其混合物形式存在。化合物或其鹽或溶劑合物亦 可展現多形現象，亦即以不同結晶形式存在之能力。此等不同結晶形式典型地稱作「多晶型物」。多晶型物具有相同化學組成，但結晶固體狀態之堆積、幾何排列及其他描述性質不同。因此，多晶型物可具有不同的諸如形狀、密度、硬度、可變形性、穩定性及溶解特性之物理性質。多晶型物典型地展現不同熔點、IR光譜及X射線粉末繞射圖案，其所有均用於鑑別。一般技術者應瞭解，不同的多晶型物可例如藉由改變或調節使式(I)化合物結晶/再結晶中所用之條件而製備。

本發明亦包括式(I)化合物之各種異構體。「異構體」係指具有相同組成及分子量但物理及/或化學性質不同的化合物。結構差異可為構造差異(幾何異構體)或偏振光平面旋轉能力差異(立體異構體)。關於立體異構體，式(I)化合物可具有一或多個不對稱碳原子且可以外消旋物、外消旋混合物形式以及個別對映異構體或非對映異構體形式存在。所有該等異構形式(包括其混合物)皆包括於本發明內。若化合物含有雙鍵，則取代基可為E或Z組態。若化合物含有經二取代之環烷基，則環烷基取代基可具有順式或反式組態。亦意欲包括所有互變異構形式。

式(I)化合物之任何不對稱原子(例如碳或其類似物)可以外消旋或對映異構增濃形式存在，例如(R)-、(S)-或(R,S)-組態。在某些實施例中，各不對稱原子在(R)-或(S)-組態中具有至少50%對映異構過量、至少60%對映異構過量、至少70%對映異構過量、至少80%對映異構過量、至少 90%對映異構過量、至少95%對映異構過量或至少99%對映異構過量。具有不飽和雙鍵之原子處的取代基在可能情況下可以順式-(Z)-或反式-(E)-形式存在。

因此，如本文中所用之式(I)化合物可呈可能之異構體、旋轉異構體、滯轉異構體、互變異構體或其混合物中之一者的形式，例如呈實質上純幾何(順式或反式)異構體、非對映異構體、光學異構體(對映體)、外消旋物或其混合物形式。

任何所得異構體混合物可基於組分之物理化學差異，例如藉由層析及/或分步結晶而分離成純或實質上純的幾何或光學異構體、非對映異構體、外消旋物。

任何所得最終產物或中間物之外消旋物可藉由已知方法離析為光學對映體，例如藉由分離用光學活性酸或鹼獲得之其非對映異構鹽，及釋放光學活性酸性或鹼性化合物。詳言之，因此可使用鹼性部分來將本發明化合物離析為其光學對映體，例如藉由使由光學活性酸(例如酒石酸、二苯甲醯基酒石酸、二乙醯基酒石酸、二-O,O'-對甲苯甲醯基酒石酸、杏仁酸、蘋果酸或樟腦-10-磺酸)形成之鹽分步結晶。亦可藉由對掌性層析(例如高壓液相層析(HPLC))使用對掌性吸附劑來離析外消旋產物。

本發明包括式(I)化合物之未經標記形式以及經同位素標記之形式。除了一或多個原子經具有所選原子質量或質量數之原子置換之外，經同位素標記之化合物具有由本文給出之結構式所描繪之結構。可併入本發明化合物中之同位 素之實例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟及氯之同位素，分別為諸如²H、³H、¹¹C、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、¹⁸F、³¹P、³²P、³⁵S、³⁶Cl、¹²⁵I。本發明包括各種如本文中所定義之經同位素標記之化合物，例如存在放射性同位素(諸如³H及¹⁴C)之化合物，或存在非放射性同位素(諸如²H及¹³C)之化合物。該等經同位素標記之化合物可用於代謝研究(用¹⁴C)、反應動力學研究(用例如²H或³H)、偵測或成像技術(諸如正電子發射斷層攝影術(positron emission tomography，PET)或單光子發射電腦斷層攝影術(single photon emission computed tomography，SPECT)，包括藥物或受質組織分配分析法)中，或用於患者之放射性治療中。詳言之，PET或SPECT研究可尤其需要¹⁸F或經標記之化合物。經同位素標記之式(I)化合物通常可藉由熟習此項技術者已知之習知技術或藉由與隨附實例及製備中所述類似之方法，使用適當的經同位素標記之試劑替代先前使用之非標記試劑來製備。

此外，經較重同位素(特定言之氘(亦即²H或D))取代可得到某些由較大代謝穩定性而產生的治療益處，例如增加的活體內半衰期或降低的劑量需求或治療指數改善。應瞭解，本文中之氘被視為式(I)化合物之取代基。該較重同位素(特定言之氘)之濃度可由同位素增濃因數(isotopic enrichment factor)定義。如本文中所用之術語「同位素增濃因數」意謂指定同位素之同位素豐度與天然豐度之間的比率。若本發明化合物中之取代基指示為氘，則該化合物 對於各指定氘原子具有至少3500(在各指定氘原子處52.5%氘併入)、至少4000(60%氘併入)、至少4500(67.5%氘併入)、至少5000(75%氘併入)、至少5500(82.5%氘併入)、至少6000(90%氘併入)、至少6333.3(95%氘併入)、至少6466.7(97%氘併入)、至少6600(99%氘併入)或至少6633.3(99.5%氘併入)之同位素增濃因數。

代表性實施例

本發明之各種實施例描述於本文中。應認識到，各實施例中詳細說明之特徵可與其他詳細說明之特徵組合以提供其他實施例。

本發明之一個實施例為根據式(I)之化合物，其中：各R¹及R²獨立地為氫、氘、鹵基、羥基、NH₂、芳基、雜芳基或視情況經取代之C_1-4烷基，其中該C_1-4烷基視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基及NH₂；R^3a為氫、氘、C_1-6烷基、苯基或苄基，及R^3b為氫、氘或C_1-6烷基；或R^3a與R^3b接合在一起而形成視情況經取代之3-7員環烷基環或視情況經取代之4-7員雜環，其中該等環烷基及雜環視情況經一或兩個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、側氧基、NH₂及C_1-3烷基；R^4a為氫、C_1-6烷基、視情況經取代之苯基、視情況經取代之苄基、視情況經取代之雜芳基、或亞甲基-二苯， 其中該等苯基、苄基及雜芳基環視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、5-6員雜芳基、5-6員雜環基、苯氧基、COOR^b、SO₂R^b、NHC(O)R^b及NR^bR^b，及R^4b為氫、氘或C_1-3烷基；或R^4a與R^4b接合在一起而形成視情況經取代之3-7員環烷基環或視情況經取代之4-7員雜環，其中該等環烷基及雜環視情況經一或兩個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、側氧基、NH₂及C_1-3烷基，其限制條件為R^3a與R^3b以及R^4a與R^4b中之僅一者接合在一起而形成環；R^5a為氫或氘；R^5b為氫、氘、甲基、乙基、CD₃、CF₃、CH₂F或CHF₂，及R⁶為視情況經取代之C_1-6烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜芳基、視情況經取代之雜環基或視情況經取代之C_5-10環烷基，其中該C_1-6烷基視情況經一個選自由以下組成之群的取代基取代：羥基、C_1-3烷氧基及-OR^a；其中該芳基、該芳雜芳基、該雜環基及該C_5-10環烷基視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基；羥基；氰基；硝基；C_1-3烷氧基；C_1-3鹵烷基；C_1-3鹵烷氧基；C_1-6烷基；C_3-6環烷基；苯基，視情況經一 至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、5-6員雜芳基、5-6員雜環基、苯氧基、COOR^b、SO₂R^b、NHC(O)R^b及NR^bR^b；5-6員雜芳基；5-6員雜環基，視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、側氧基、NH₂及C_1-3烷基；-CH₂R^a；-OR^a；-C(O)R^a；-NR^aR^b；-COOR^a；SO₂R^a；NHC(O)R^a；及-SO₂NR^bR^b；或R^5b與R⁶接合在一起而形成視情況經取代之C_3-7環烷基或視情況經取代之式(a)之基團：，其中n為1、2或3，及該C_3-7環烷基及該式(a)之基團視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、5-6員雜芳基、5-6員雜環基、苄氧基、COOR^b、SO₂R^b、NHC(O)R^b及NR^bR^b；各R^a獨立地為視情況經取代之苯基、視情況經取代之雜芳基或視情況經取代之4-7員雜環基，其中該苯基及該雜芳基視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基及C_1-3烷基，其中該4-7員雜環基視情況經一至三個各獨立地選自由 以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、側氧基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基及C_1-3烷基；及各R^b獨立地為氫或C_1-6烷基。

在本發明之另一實施例中，R¹為氫、鹵基或視情況經取代之C_1-4烷基。適宜地，R¹為氫、氟、氯或甲基。在另一實施例中，R¹為氫、氟或氯。適宜地，R¹為氫。

在本發明之另一實施例中，R²為氫、鹵基或視情況經取代之C_1-4烷基。適宜地，R²為氫、氟、氯或甲基。在另一實施例中，R²為氫或氟。在本發明之另一實施例中，R²為氫。

在本發明之另一實施例中，R¹與R²均為氫。

在本發明之另一實施例中，R^3a為氫、C_1-6烷基或苯基。適宜地，R^3a為氫、甲基或苯基。適宜地，R^3a為氫或甲基。適宜地，R^3a為氫。

在本發明之另一實施例中，R^3b為氫或甲基。適宜地，R^3b為氫。

在另一實施例中，R^3a與R^3b均為氫。

在本發明之另一實施例中，R^3a與R^3b接合在一起而形成氧雜環丁烷基或四氫-2H-哌喃基。

本發明之另一實施例為根據式(II)之化合物。

在本發明之另一實施例中，R^4a為氫、C_1-6烷基、視情況經取代之苯基、視情況經取代之苄基、視情況經取代之雜芳基、或亞甲基-二苯，其中該等苯基、苄基及雜芳基環視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、5-6員雜芳基、5-6員雜環基、苯氧基、COOR^b、-SO₂R^b、-NHC(O)R^b及-NR^bR^b。

在本發明之另一實施例中，R^4a為氫、C_1-4烷基、視情況經取代之苯基、視情況經取代之苄基、視情況經取代之雜芳基、或亞甲基-二苯。適宜地，R^4a為氫、C_1-4烷基、視情況經取代之苯基、視情況經取代之苄基、視情況經取代之吡啶基、或亞甲基-二苯。更適宜地，R^4a為氫、甲基、異丙基、異丁基、第三丁基、苯基、4-甲氧基苯基、4-氟苯基、苄基、或亞甲基-二苯。在另一實施例中，R^4a為氫、甲基、乙基、異丙基、苯基、4-氟苯基、4-甲氧基苯基、聯苯基、苄基或吡啶基。適宜地，R^4a為異丙基。

在本發明之另一實施例中，R^4b為氫或甲基。適宜地，R^4b為氫。

在另一實施例中，R^4a為異丙基且R^4b為甲基。在另一實施例中，R^4a為異丙基且R^4b為氫。

在本發明之另一實施例中，R^4a與R^4b接合在一起而形成環戊基。

本發明之另一實施例為根據式(III)之化合物。

在本發明之另一實施例中，R^5a為氫。在另一實施例中，R^5a為氘。

在本發明之另一實施例中，R^5b為氫、甲基、乙基或CF₃。適宜地，R^5b為甲基。

在本發明之另一實施例中，R⁶為異丙基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之吡唑基、視情況經取代之吡啶基、2,3-二氫苯并呋喃基、2,3-二氫苯并[b][1,4]二氧雜環己烯基或視情況經取代之C_5-10環烷基。適宜地，R⁶為異丙基、視情況經取代之苯基、視情況經取代之萘基、吡唑基、吡啶基、2,3-二氫苯并呋喃基、2,3-二氫苯并[b][1,4]二氧雜環己烯基或C_5-10環烷基，其中該苯基及該萘基各自視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：氟、氯、溴、羥基、氰基、甲氧基、三氯甲基、甲基、第三丁基、苯基、吡咯基、哌啶基、4-甲基哌嗪基、嗎啉基、苯氧基及-SO₂NH₂。

在本發明之另一實施例中，R⁶為視情況經取代之雜芳基、視情況經取代之雜環基或視情況經取代之C_5-10環烷基。

在本發明之另一實施例中，R⁶為甲基、C_5-10環烷基、視 情況經取代之苯基、視情況經取代之吡啶基、視情況經取代之嘧啶基、視情況經取代之噠嗪基、視情況經取代之吡嗪基、視情況經取代之***基、視情況經取代之吡唑基、視情況經取代之噻唑基、視情況經取代之1,3,4-二唑基、視情況經取代之1,2,4-二唑基、視情況經取代之異唑基、噻吩基、唑基、喹啉基、視情況經取代之苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并唑基、四唑并[1,5-a]吡啶基、咪唑并[2,1-b][1,3,4]噻二唑基、視情況經取代之哌啶基、視情況經取代之哌嗪基、四氫呋喃基、四氫哌喃基、視情況經取代之四氫-硫代哌喃1,1-二氧化物、1H-吡咯并[2,3-b]吡啶基、2,3-二氫-苯并[1,4]二氧雜環己烯基、5,6,7,8-四氫-[1,2,4]四唑并[4,3-a]吡嗪基、4,5,6,7-四氫-苯并噻唑基或吲哚嗪基，其中該苯基、該吡啶基、該嘧啶基、該噠嗪基、該吡嗪基、該***基、該吡唑基、該噻唑基、該1,3,4-二唑基、該1,2,4-二唑基、該異唑基、該苯并咪唑基、該哌啶基、該哌嗪基及該四氫-硫代哌喃1,1-二氧化物各自視情況經一或兩個如式(I)中所定義之取代基取代。適宜地，R⁶為視情況經一或兩個取代基取代之苯基。適宜地，R⁶為視情況經取代之1,3,4-二唑基或1,2,4-視情況經取代之二唑基。適宜地，R⁶為視情況經一個取代基取代之嘧啶基。

在另一實施例中，R⁶視情況經一或兩個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基；羥基；硝基；C_1-4烷氧基；C_1-3鹵烷基；C_1-3鹵烷氧基；C_1-6烷基；C_3-6環烷 基，視情況經一個由氰基、C_1-3烷基及C_1-3烷氧基組成之群的取代基取代；苯基，視情況經一或兩個各獨立地選自由氟、氯、甲基、氰基及甲氧基組成之群的取代基取代；及5-6員雜芳基(例如，咪唑基、吡唑基、***基及吡啶基)，視情況經一或兩個甲基取代。

在另一實施例中，R⁶經一個-CH₂R^a、-C(O)R^a、-NHC(O)R^a、-NHC(O)R^b、-C(O)NHR^a、-C(O)NHR^b、-OR^a、-NR^aR^b、-SO₂NR^bR^b、-SO₂R^a或-SO₂R^b基團取代。適宜地，R⁶經一個-CH₂R^a、-C(O)R^a或-OR^a基團取代。

在另一實施例中，R⁶為經一個氟或氯基及一個-CH₂R^a、-C(O)R^a或-C(O)NHR^a基團取代之苯基，其中該-CH₂R^a、-C(O)R^a或-C(O)NHR^a基團在苯基環之對位。適宜地，R⁶為經一個氟基及一個-CH₂R^a、-C(O)R^a或-C(O)NHR^a基團取代之苯基，其中該-CH₂R^a、-C(O)R^a或-C(O)NHR^a基團在苯基環之對位。在另一實施例中，R⁶為在對位上經一個-CH₂R^a、-C(O)R^a或-C(O)NHR^a基團取代之苯基。在另一實施例中，R⁶為在對位上經-CH₂R^a取代之苯基。

在另一實施例中，R^a為視情況經一或兩個各獨立地選自由氟、氯及溴組成之群的取代基取代的苯基。

在另一實施例中，R^a為視情況經取代之5-6員雜芳基。適宜地，R^a為視情況經取代之吡啶基或視情況經取代之嘧啶基。適宜地，R^a為視情況經一個三氟甲基取代之吡啶基或嘧啶基。

在另一實施例中，R^a為C_5-7環烷基，其各自視情況經一 或兩個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：氟、羥基、甲基及C_1-3鹵烷氧基。

在另一實施例中，R^a為視情況經取代之雜環基。適宜地，R^a為哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、四氫哌喃基、四氫-硫代哌喃1,1-二氧化物、1,4-二氮雜環庚烷基、4,7-二氮雜-螺[2.5]辛基、3,8-二氮雜-雙環[3.2.1]辛基、3,8-二氮雜-雙環[4.2.0]辛基、八氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪基、八氫-吡啶并[1,2-a]吡嗪基、八氫-吡咯并[3,4-c]吡咯基及5,6,7,8-四氫-咪唑并[1,2-a]吡嗪基，其各自視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：羥基、氟、胺基、二甲胺基、C_1-3鹵烷氧基、C_1-3烷基及C_3-5環烷基。適宜地，R^a為哌啶基、哌嗪基或嗎啉基，其各自視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：羥基、氟、胺基、二甲胺基、C_1-3鹵烷氧基、C_1-3烷基及C_3-5環烷基。

在本發明之另一實施例中，R^5b與R⁶接合在一起而形成視情況經取代之C_3-7環烷基或視情況經取代之式(a)之基團。

在本發明之另一實施例中，各R^b獨立地為氫或甲基。

在另一實施例中，R¹為氫，R²為氟且R^3a、R^3b、^4a及R^4b各自為氫。

本發明之另一實施例為根據式(IV)之化合物。

本發明之另一實施例為根據式(V)之化合物：，其中R^4a為苯基且R^4b為氫。

本發明之所選化合物包括：(S)-4-異丙基-3-(2-(((S)-1-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；N-(4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯基)環己烷甲醯胺；(S)-3-(2-(((S)-1-(3-氟-4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-4-異丙基-3-(2-(((S)-1-(4-((3,3,4-三甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；2-氟-N-(4-羥基-4-甲基環己基)-4-((S)-1-((4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基)胺基)乙基)苯甲醯胺；(S)-3-(2-((S)-1-(4-((4-胺基-4-甲基哌啶-1-基)甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮； (S)-3-(2-((S)-1-(4-((4-(二甲胺基)哌啶-1-基)甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-4-異丙基-3-(2-((S)-1-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(S)-4-異丙基-4-甲基-3-(2-((S)-1-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(S)-4-異丙基-3-(2-((S)-1-(6-苯基吡啶-3-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(4-苯甲醯基苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-4-異丙基-3-(2-(((S)-1-(5-苯基-1,3,4-噻二唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(4S)-4-異丙基-3-(2-(1-(5-苯基嘧啶-2-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；3-(5-氟-2-((1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)吡啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(S)-4-異丙基-3-(2-(((S)-1-(1-(3-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(S)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氟苯基)-1,3,4-二唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-(((S)-1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-4-異丙基-3-(2-(((S)-1-(3-(間甲苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮； (S)-3-(2-(((S)-1-(3-(4-氟苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(5-(4-氟-2-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-4-異丙基-3-{2-[(3-對甲苯基-[1,2,4]二唑-5-基甲基)-胺基]-嘧啶-4-基}-唑啶-2-酮；(S)-4-異丙基-3-(2-((S)-1-(4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(2-氟-4-異丙基苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(4-異丁氧基-3-甲基苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-(((S)-1-(4-異丁氧基苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(5-氟-2-(((S)-1-(4-異丁氧基苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；2-氟-N-(反-4-羥基環己基)-4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯甲醯胺；(S)-3-(5-氟-2-((S)-1-(3-氟-4-(哌啶-1-羰基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；N-環己基-2-氟-4-((S)-1-(5-氟-4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯甲醯胺；N-環己基-2-氟-4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯甲醯胺；及 (S)-3-(5-氟-2-((S)-1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮。

本發明之所選化合物包括：(S)-3-(2-(((S)-1-(3-氟-4-((3,3,4-三甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-(((S)-1-(4-((4,4-二氟哌啶-1-基)甲基)苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(5-氟-2-(1-(4-苯氧基苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(4-(4-氟苯氧基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(4-(((2S,6R)-2,6-二甲基嗎啉基)甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-(((S)-1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-3-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)吡啶-2-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(5-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(5-(4-氟苯氧基)吡嗪-2-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-4-異丙基-3-(2-((S)-1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2- 基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；及(S)-3-(2-((S)-1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮。

本發明之所選化合物包括：(S)-3-(2-(1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4,4-二甲基唑啶-2-酮；(S)-3-(6-氯-2-(1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(2-氟-4-(1-甲基環丙基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；2-氯-N-環戊基-4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯甲醯胺；(S)-3-(2-((S)-1-(4-((3,3-二氟哌啶-1-基)甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(4-(4,7-二氮雜螺[2.5]辛-4-基甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(4-((4-乙醯基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-(((S)-1-(4-異丁氧基苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(5-氟-2-(((S)-1-(4-異丁氧基苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；及 2-氟-N-(反-4-羥基環己基)-4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯甲醯胺。

列舉之實施例

實施例1. 一種式(I)化合物， 其中：各R¹及R²獨立地為氫、氘、鹵基、羥基、NH₂、芳基、雜芳基或視情況經取代之C_1-4烷基，其中該C_1-4烷基視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基及NH₂；R^3a為氫、氘、C_1-6烷基、苯基或苄基，及R^3b為氫、氘或C_1-6烷基；或R^3a與R^3b接合在一起而形成視情況經取代之3-7員環烷基環或視情況經取代之4-7員雜環，其中該等環烷基及雜環各自視情況經一或兩個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、側氧基、NH₂及C_1-3烷基；R^4a為氫、C_1-6烷基、視情況經取代之苯基、視情況經取代之苄基、視情況經取代之雜芳基、或亞甲基-二苯，其中該等苯基、苄基及雜芳基環視情況經一至三個各獨 立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、5-6員雜芳基、5-6員雜環基、苯氧基、COOR^b、SO₂R^b、NHC(O)R^b及NR^bR^b，及R^4b為氫、氘或C_1-3烷基；或R^4a與R^4b接合在一起而形成視情況經取代之3-7員環烷基環或視情況經取代之4-7員雜環，其中該等環烷基及雜環視情況經一或兩個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、側氧基、NH₂及C_1-3烷基，其限制條件為R^3a與R^3b以及R^4a與R^4b中之僅一者接合在一起而形成環；R^5a為氫或氘；R^5b為氫、氘、甲基、乙基、CD₃、CF₃、CH₂F或CHF₂，及R⁶為視情況經取代之C_1-6烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜芳基、視情況經取代之雜環基或視情況經取代之C_5-10環烷基，其中該C_1-6烷基視情況經一個選自由以下組成之群的取代基取代：羥基、C_1-3烷氧基及-OR^a；其中該芳基、該雜芳基、該雜環基及該C_5-10環烷基視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基；羥基；氰基；硝基；C_1-3烷氧基；C_1-3鹵烷基；C_1-3鹵烷氧基；C_1-6烷基；C_3-6環烷基；苯基，視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵 基、羥基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、5-6員雜芳基、5-6員雜環基、苯氧基、COOR^b、SO₂R^b、NHC(O)R^b及NR^bR^b；5-6員雜芳基；5-6員雜環基，視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、側氧基、NH₂及C_1-3烷基；-CH₂R^a；-OR^a；-C(O)R^a；-NR^aR^b；-COOR^a；SO₂R^a；NHC(O)R^a；及-SO₂NR^bR^b；或R^5b與R⁶接合在一起而形成視情況經取代之C_3-7環烷基或視情況經取代之式(a)之基團：，其中n為1、2或3，及該C_3-7環烷基及該式(a)之基團視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、5-6員雜芳基、5-6員雜環基、苄氧基、COOR^b、SO₂R^b、NHC(O)R^b及NR^bR^b；各R^a獨立地為視情況經取代之苯基、視情況經取代之雜芳基或視情況經取代之4-7員雜環基，其中該苯基及該雜芳基視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基及C_1-3烷基，其中該4-7員雜環基視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、側氧基、C_1-3 烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基及C_1-3烷基；及各R^b獨立地為氫或C_1-6烷基；或其醫藥學上可接受之鹽。

實施例2. 如實施例1之化合物，其中R²為氫；或其醫藥學上可接受之鹽。

實施例3. 如實施例2之化合物，其中R¹為氫、鹵基或視情況經取代之C_1-4烷基；或其醫藥學上可接受之鹽。

實施例4. 如實施例3之化合物，其中R¹為氫、氟、氯或甲基；或其醫藥學上可接受之鹽。

實施例5. 如實施例4之化合物，其中R^3a為氫、C_1-6烷基、苯基或苄基且R^3b為氫或C_1-6烷基；或其醫藥學上可接受之鹽。

實施例6. 如實施例5之化合物，其中R^3b為氫或甲基；或其醫藥學上可接受之鹽。

實施例7. 如實施例6之化合物，其中R^3a為氫、甲基或苯基；或其醫藥學上可接受之鹽。

實施例8. 如實施例7之化合物，其中R^4a為氫、C_1-6烷基、視情況經取代之苯基、視情況經取代之苄基、視情況經取代之雜芳基、或亞甲基-二苯，

其中該等苯基、苄基及雜芳基環視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、5-6員雜芳基、5-6員雜環基、苯氧基、COOR^b、SO₂R^b、NHC(O)R^b及NR^bR^b，及R^4a為氫或C_1-3烷基；或其醫藥學上可接受之鹽。

實施例9. 如實施例8之化合物，其中R^4b為氫或甲基；或其醫藥學上可接受之鹽。

實施例10. 如實施例9之化合物，其中R^4a為氫、C_1-4烷基、視情況經取代之苯基、視情況經取代之苄基、視情況經取代之雜芳基、或亞甲基-二苯；或其醫藥學上可接受之鹽。

實施例11. 如實施例10之化合物，其中R^4a為氫、甲基、異丙基、異丁基、第三丁基、苯基、4-甲氧基苯基、4-氟苯基、苄基、或亞甲基-二苯；或其醫藥學上可接受之鹽。

實施例12. 如實施例11之化合物，其中R^5a為H；或其醫藥學上可接受之鹽。

實施例13. 如實施例12之化合物，其中R^5b為氫、甲基、乙基或CF₃。

實施例14. 如實施例13之化合物，其中R⁶為異丙基、視情-況經取代之芳基、視情況經取代之吡唑基、視情況經取代之吡啶基、2,3-二氫苯并呋喃基、2,3-二氫苯并[b][1,4]二氧雜環己烯基或視情況經取代之C_5-10環烷基；或其醫藥學上可接受之鹽。

實施例15. 一種醫藥組合物，其包含如實施例1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接受之載劑或賦形劑。

實施例16. 一種用於治療與具有新變體活性之突變IDH蛋白相關之疾病或病症的方法，其包含向有需要之個體投與治療有效量之如實施例1之化合物或其醫藥學上可接受之 鹽。

實施例17. 一種用於治療與具有新變體活性之突變IDH蛋白相關之疾病或病症的方法，其包含向有需要之個體投與治療有效量之如實施例1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及另一治療劑。

一般合成程序

可藉由包括標準化學之多種方法來製備本發明化合物。下文給出之流程中描繪適合之合成途徑。

可藉由有機合成技術中已知之方法來製備式(I)化合物，如以下合成流程中所部分闡述。在下文描述之流程中，應充分瞭解，必要時可根據一般原則或化學使用針對敏感性或反應性基團之保護基。保護基係根據標準有機合成方法進行操作(T.W.Greene及P.G.M.Wuts,「Protective Groups in Organic Synthesis」，第三版，Wiley,New York 1999)。此等基團係使用熟習此項技術者容易瞭解之方法在化合物合成的適宜階段移除。選擇方法以及反應條件及其執行次序應與式(I)化合物之製備一致。

熟習此項技術者應認識到式(I)化合物中是否存在立構中心。因此，本發明包括兩種可能之立體異構體且不僅包括外消旋化合物但亦包括個別對映異構體及/或非對映異構體。當需要呈單一對映異構體或非對映異構體形式之化合物時，其可藉由立體特異性合成或藉由離析最終產物或任何適宜中間物來獲得。最終產物、中間物或起始物質之離析可藉由此項技術中已知之任何適合方法來實現。參見例 如E.L.Eliel,S.H.Wilen及L.N.Mander,「Stereochemistry of Organic Compounds」(Wiley-Interscience,1994)。

本文所述之化合物可自市售起始物質製備或使用已知的有機、無機及/或酶促方法來合成。

可遵循流程1之程序來製備非商業胺基酸。酮1轉化為相應之咪唑啶-2,4-二酮2，接著水解，得到胺基酸3。

當胺基醇(唑啶酮之前驅體)不可購得時，其可遵循流程2之程序自胺基酸3來製備。當R^3a=R^3b時，經保護之胺基酯5經適當格林納試劑(Grignard reagent)處理，得到經保護之胺基醇6，其經歷鹼性或酸性去保護步驟。當R^3a≠R^3b時，經保護之胺基酸8轉化為韋伯醯胺(Weinreb amide)9，其依序經不同的格林納試劑處理，得到經保護之胺基醇10。10進行鹼性或酸性去保護，得到11。用若干種試劑(包括(但不限於)三光氣、Et₂CO₃或N,N'-羰基二咪唑)實現將CO單元***7或11中，得到唑啶酮12，如流程2中所

在NaH存在下使唑啶酮12與二鹵素-嘧啶13偶合，且所得之14在如流程3中所示之若干不同反應條件下經一級胺15處理，得到16。

或者，中間物14可藉由以下步驟製備：使胺基醇11與二 鹵素-嘧啶13在諸如二異丙基乙胺之鹼存在下偶合，得到中間物17，其可在諸如2,6-二甲基吡啶之鹼存在下經三光氣處理，得到中間物14。

使用方法

本發明之化合物為具有新變體活性之突變IDH蛋白之抑制劑且因此可用於治療與該等蛋白相關之疾病或病症，包括(但不限於)細胞增殖病症，諸如癌症。

具有新變體活性之突變IDH蛋白之實例為突變IDH1及突變IDH2。與突變IDH1及突變IDH2相關之新變體活性為產生2-羥基戊二酸之能力(2-HG新變體活性)，特定言之為R-2-HG(R-2-HG新變體活性)。與2-HG新變體活性(特定言之R-2-HG新變體活性)相關之IDH1中之突變包括在殘基97、100及132處之突變，例如G97D、R100Q、R132H、R132C、R132S、R132G、R132L及R132V。與2-HG新活性(特定言之R-2-HG新變體活性)相關之IDH2中之突變包括在殘基140及172處之突變，例如R140Q、R140G、R172K、R172M、R172S、R172G及R172W。

與具有新變體活性之突變IDH蛋白相關之細胞增殖病症包括(但不限於)癌症。該等癌症之實例包括急性淋巴母細胞性白血病，成人；急性淋巴母細胞性白血病，兒童期；急性骨髓白血病，成人；腎上腺皮質癌；腎上腺皮質癌，兒童期；AIDS相關淋巴瘤；AIDS相關惡性疾病；肛門癌；星形細胞瘤，兒童期小腦；星形細胞瘤，兒童期大腦；膽管癌，肝外；膀胱癌；膀胱癌，兒童期；骨癌，骨 肉瘤/惡性纖維性組織細胞瘤；腦幹神經膠質瘤，兒童期；腦腫瘤，成人；腦腫瘤，腦幹神經膠質瘤，兒童期；腦腫瘤，小腦星形細胞瘤，兒童期；腦腫瘤，大腦星形細胞瘤/惡性神經膠質瘤，兒童期；腦腫瘤，室管膜瘤，兒童期；腦腫瘤，神經管胚細胞瘤，兒童期；腦腫瘤，幕上原始神經外胚層腫瘤，兒童期；腦腫瘤，視覺路徑及下丘腦神經膠質瘤，兒童期；腦腫瘤，兒童期(其他)；乳癌；乳癌及妊娠；乳癌，兒童期；乳癌，男性；支氣管腺瘤/類癌，兒童期；類癌腫瘤，兒童期；類癌腫瘤，胃腸；癌瘤，腎上腺皮質；癌瘤，胰島細胞；未知原發性癌瘤；中樞神經系統淋巴瘤，原發性；小腦星形細胞瘤，兒童期；大腦星形細胞瘤/惡性神經膠質瘤，兒童期；子宮頸癌；兒童期癌症；慢性淋巴細胞性白血病；慢性骨髓性白血病；慢性骨髓增生病症；腱鞘透明細胞肉瘤；結腸癌；結腸直腸癌，兒童期；皮膚T細胞淋巴瘤；子宮內膜癌；室管膜瘤，兒童期；上皮癌，卵巢；食道癌；食道癌，兒童期；尤文氏(Ewing's)腫瘤家族；顱外生殖細胞腫瘤，兒童期；性腺外生殖細胞腫瘤；肝外膽管癌；眼癌，眼內黑素瘤；眼癌，視網膜母細胞瘤；膽囊癌；胃癌；胃癌，兒童期；胃腸類癌腫瘤；生殖細胞腫瘤，顱外，兒童期；生殖細胞腫瘤，性腺外；生殖細胞腫瘤，卵巢；妊娠期滋養細胞腫瘤；神經膠質瘤，兒童期腦幹；神經膠質瘤，兒童期視覺路徑及下丘腦；毛細胞白血病；頭頸癌；肝細胞(肝)癌，成人(原發性)；肝細胞(肝)癌，兒童期(原發性)；霍奇 金氏淋巴瘤(Hodgkin's Lymphoma)，成人；霍奇金氏淋巴瘤，兒童期；霍奇金氏淋巴瘤，妊娠期間；下咽癌；下丘腦及視覺路徑神經膠質瘤，兒童期；眼內黑素瘤；胰島細胞癌(內分泌胰臟)；卡堡氏肉瘤(Kaposi's Sarcoma)；腎癌；喉癌；喉癌，兒童期；白血病，急性淋巴母細胞性，成人；白血病，急性淋巴母細胞性，兒童期；白血病，急性骨髓性，成人；白血病，急性骨髓性，兒童期；白血病，慢性淋巴細胞性；白血病，慢性骨髓性；白血病，毛細胞；唇及口腔癌症；肝癌，成人(原發性)；肝癌，兒童期(原發性)；肺癌，非小細胞；肺癌，小細胞；淋巴母細胞性白血病，成人急性；淋巴母細胞性白血病，兒童期急性；淋巴細胞性白血症，慢性；淋巴瘤，AIDS相關；淋巴瘤，中樞神經系統(原發性)；淋巴瘤，皮膚T細胞；淋巴瘤，霍奇金氏，成人；淋巴瘤，霍奇金氏，兒童期；淋巴瘤，霍奇金氏，妊娠期間；淋巴瘤，非霍奇金氏，成人；淋巴瘤，非霍奇金氏，兒童期；淋巴瘤，非霍奇金氏，妊娠期間；淋巴瘤，原發性中樞神經系統；巨球蛋白血症，瓦爾登斯特倫氏(Waldenstrom's)；男性乳癌；惡性間皮瘤，成人；惡性間皮瘤，兒童期；惡性胸腺瘤；神經管胚細胞瘤，兒童期；黑素瘤；黑素瘤，眼內；梅克爾細胞癌(Merkel Cell Carcinoma)；間皮瘤，惡性；原發灶隱匿性頸部轉移性鱗狀細胞癌；多發性內分泌瘤症候群，兒童期；多發性骨髓瘤/漿細胞贅瘤；蕈樣真菌病；骨髓發育不良症候群；骨髓性白血病，慢性；骨髓白血病，兒童 期急性；骨髓瘤，多發性；骨髓增生病症，慢性；鼻腔及鼻副竇癌症；鼻咽癌；鼻咽癌，兒童期；神經母細胞瘤；非霍奇金氏淋巴瘤(Non-Hodgkin's Lymphoma)，成人；非霍奇金氏淋巴瘤，兒童期；非霍奇金氏淋巴瘤，妊娠期間；非小細胞肺癌；口腔癌，兒童期；口腔及唇癌症；口咽癌；骨肉瘤/骨骼惡性纖維性組織細胞瘤；卵巢癌，兒童期；卵巢上皮癌；卵巢生殖細胞腫瘤；卵巢低惡性潛在腫瘤；胰臟癌；胰臟癌，兒童期；胰臟癌，胰島細胞；鼻副竇及鼻腔癌症；副甲狀腺癌；陰莖癌；嗜鉻細胞瘤；松果體及幕上原始神經外胚層腫瘤，兒童期；垂體腫瘤；漿細胞贅瘤/多發性骨髓瘤；胸膜肺母細胞瘤；妊娠及乳癌；妊娠及霍奇金氏淋巴瘤；妊娠及非霍奇金氏淋巴瘤；原發性中樞神經系統淋巴瘤；原發性肝癌，成人；原發性肝癌，兒童期；***癌；直腸癌；腎臟細胞(腎)癌；腎臟細胞癌，兒童期；腎盂及輸尿管，移行細胞癌；視網膜母細胞瘤；橫紋肌肉瘤，兒童期；唾液腺癌；唾液腺癌，兒童期；肉瘤，尤文氏腫瘤家族；肉瘤，卡堡氏；肉瘤(骨肉瘤)/骨骼惡性纖維性組織細胞瘤；肉瘤，橫紋肌肉瘤，兒童期；肉瘤，軟組織，成人；肉瘤，軟組織，兒童期；賽謝綜合征(Sezary Syndrome)；皮膚癌；皮膚癌，兒童期；皮膚癌(黑素瘤)；皮膚癌，梅克爾細胞；小細胞肺癌；小腸癌；軟組織肉瘤，成人；軟組織肉瘤，兒童期；原發灶隱匿性頸部鱗狀細胞癌，轉移性；胃癌；胃癌，兒童期；幕上原始神經外胚層腫瘤，兒童期；T細胞淋巴 瘤，皮膚；睾丸癌；胸腺瘤，兒童期；胸腺瘤，惡性；甲狀腺癌；甲狀腺癌，兒童期；腎盂及輸尿管移行細胞癌；滋養細胞腫瘤，妊娠期；未知原發性位點，兒童期癌症；反常兒童期癌症；輸尿管及腎盂，移行細胞癌；尿道癌；子宮肉瘤；***癌；視覺路徑及下丘腦神經膠質瘤，兒童期；外陰癌；瓦爾登斯特倫氏巨球蛋白血症；及韋爾姆斯氏腫瘤(Wilms' Tumor)。

在另一實施例中，與具有新變體活性之突變IDH蛋白相關之癌症為腦癌，諸如星形細胞腫瘤(例如囊樣含毛的星形細胞瘤、室管膜下巨細胞星形細胞瘤、彌漫性星形細胞瘤、多形態黃星形細胞瘤、退行性星形細胞瘤、星形細胞瘤、巨細胞神經膠母細胞瘤、神經膠母細胞瘤、繼發性神經膠母細胞瘤、原發性成人神經膠母細胞瘤及原發性小兒科神經膠母細胞瘤)；少枝膠質腫瘤(例如少枝神經膠質瘤及退行性少枝神經膠質瘤)；少突星形細胞腫瘤(例如少突星形細胞瘤及退行性少突星形細胞瘤)；室管膜瘤(例如黏液乳頭型室管膜瘤及退行性室管膜瘤)；神經管胚細胞瘤；原始神經外胚層腫瘤、神經鞘瘤、腦膜瘤、非典型性腦膜瘤、退行性腦膜瘤；及垂體腺瘤。在另一實施例中，腦癌為神經膠質瘤、多形性神經膠母細胞瘤、副神經節瘤或幕上原始神經外胚層腫瘤(sPNET)。

在另一實施例中，與具有新變體活性之突變IDH蛋白相關之癌症為白血病，諸如急性骨髓白血病(AML)、骨髓發育不良症候群(MDS)、慢性骨髓性白血病(CML)、骨髓增 生贅瘤(MPN)、包括慢性骨髓單核細胞性白血病之MDS.MPN、MDS後AML、MPN後AML、MDS/MPN後AML、del(5q)相關之高風險MDS或AML、急變期慢性骨髓性白血病、血管免疫胚細胞淋巴瘤及急性淋巴母細胞性白血病。

在另一實施例中，與具有新變體活性之突變IDH蛋白相關之癌症為皮膚癌，包括黑素瘤。

在另一實施例中，與具有新變體活性之突變IDH蛋白相關之癌症為***癌、甲狀腺癌、結腸癌或肺癌。

在另一實施例中，與具有新變體活性之突變IDH蛋白相關之癌症為肉瘤，包括中心性軟骨肉瘤、中心性及骨膜性軟骨瘤、及纖維肉瘤。

在另一實施例中，與具有新變體活性之突變IDH蛋白相關之癌症為膽管癌。

另一種與具有R-2-HG新變體活性之突變IDH蛋白相關之疾病或病症為D-2-羥基戊二酸尿酸症。

另一種與具有R-2-HG新變體活性之突變IDH蛋白相關之疾病或病症為奧利埃氏病及馬富西症候群。

如本文中所用之術語「新變體活性」係指野生型蛋白不具有或不在顯著程度上展現之新穎蛋白質活性的獲得。舉例而言，與IDH1及IDH2之突變體形式相關之新變體活性為將α-酮戊二酸還原為2-羥基戊二酸(亦即2-HG，特定言之R-2-HG)之能力。IDH1及IDH2之野生型形式不具有將α-酮戊二酸還原為2-羥基戊二酸(亦即2-HG，特定言之R-2- HG)之能力，或若其確實具有此能力，則其不會產生顯著(亦即有害或致病)量之2-HG。

如本文中所用之術語「個體」係指動物。典型地該動物為哺乳動物。個體亦係指例如靈長類動物(例如人類，男性或女性)、牛、綿羊、山羊、馬、狗、貓、兔、大鼠、小鼠、魚、鳥及其類似動物。在某些實施例中，個體為靈長類動物。在其他實施例中，個體為人類。

如本文中所用之關於本發明化合物之術語「治療有效量」意謂化合物在正確醫學判斷範疇內足以治療個體之疾病或病狀、但足夠低以避免嚴重副作用(以合理之效益/風險比)的量。化合物之治療有效量將根據以下因素改變：所選特定化合物(例如考慮化合物之效能、功效及半衰期)；所選投藥途徑；所治療之病狀；所治療之病狀的嚴重程度；所治療之個體的年齡、體型、體重及身體狀況；所治療之個體的病史；治療持續時間；並存療法之性質；所需治療作用；及類似因素，且可由熟練技術人員依常規確定。

如本文中所用之術語「治療」任何疾病或病症在一個實施例中係指改善疾病或病症(亦即減緩或抑止或降低疾病或其至少一種臨床症狀之發展)。在另一實施例中，「治療」係指減輕或改善至少一種身體參數，包括患者可能不可辨別之身體參數。在另一實施例中，「治療」係指在身體上(例如穩定化可辨別之症狀)、在生理上(例如穩定化身體參數)或在該兩個方面上調節疾病或病症。在另一實施 例中，「治療」係指預防或延遲疾病或病症之發作或發展或進展。

如本文中所用，若個體將會在生物學上、在醫學上或在生活品質方面自治療獲益，則該個體「需要」該治療。

本發明之化合物可藉由包括經口及非經腸投與之任何適合途徑投與。非經腸投與係典型地藉由注射或輸注且包括靜脈內、肌肉內及皮下注射或輸注。

本發明之化合物可投與一次或根據給藥方案投與，其中在給定時期內以不同之時間間隔投與多次劑量。舉例而言，劑量可每天投與一次、兩次、三次或四次。可投與劑量直至達到所需治療作用或在長時期內維持所需治療作用。本發明化合物之適合給藥方案取決於該化合物之藥物動力學性質，諸如吸收、分佈及半衰期，該給藥方案可由熟練技術人員確定。另外，本發明化合物之適合給藥方案(包括投與該等方案之持續時間)取決於所治療之疾病或病狀、該疾病或病狀之嚴重程度、所治療之個體的年齡及身體狀況、所治療之個體的病史、並存療法之性質、所需治療作用及在熟練技術人員之知識及技能範圍內的類似因素。該等熟練技術人員應進一步瞭解，考慮到個別個體對給藥方案之反應，適合之給藥方案可能需要調節；或因為個別個體需要變化，所以適合之給藥方案可能需要隨時間調節。典型之日劑量可視所選之特定投藥途徑而改變。對於體重為約70 kg之人，用於經口投與之典型日劑量應在約5 mg至約500 mg式(I)化合物之範圍內。

本發明之一個實施例提供治療與具有新變體活性之IDH之突變體形式相關的疾病或病症的方法，其包含向需要治療之個體投與治療有效量之式(I)化合物。在一個實施例中，與具有新變體活性之IDH之突變體形式相關的疾病或病症為細胞增殖病症。在另一實施例中，細胞增殖病症為癌症。在另一實施例中，癌症為與具有2-HG新變體活性之突變IDH1或具有2-HG新變體活性之突變IDH2相關之癌症。在另一實施例中，新變體活性為R-2-HG新變體活性。在另一實施例中，癌症係與具有2-HG或R-2-HG新變體活性之突變IDH1相關，該突變IDH1在殘基97、100或132處具有突變，諸如G97D、R100Q、R132H、R132C、R132S、R132G、R132L及R132V。在另一實施例中，癌症係與具有2-HG或R-2-HG新變體活性之突變IDH2相關，該突變IDH2在殘基140或172處具有突變，例如R140Q、R140G、R172K、R172M、R172S、R172G及R172W。在另一實施例中，癌症為腦癌、白血病、皮膚癌、***癌、甲狀腺癌、結腸癌、肺癌或肉瘤。在另一實施例中，癌症為神經膠質瘤、多形性神經膠母細胞瘤、副神經節瘤、幕上原始神經外胚層腫瘤、急性骨髓白血病、骨髓發育不良症候群、慢性骨髓性白血病、黑素瘤、***癌、甲狀腺癌、結腸癌、肺癌、中心性軟骨肉瘤、中心性及骨膜性軟骨瘤、纖維肉瘤及膽管癌。

本發明之另一實施例提供治療與具有R-2-HG新變體活性之IDH之突變體形式相關的疾病或病症的方法，其包含 向有需要之個體投與治療有效量之根據式(I)之化合物，其中該疾病或病症為D-2-羥基戊二酸尿酸症、奧利埃氏病或馬富西症候群。

本發明之另一實施例提供式(I)化合物於療法中之用途。在另一實施例中，該療法為與具有新變體活性之IDH之突變體形式相關的疾病或病症。在另一實施例中，該療法為與具有新變體活性之IDH之突變體形式相關的細胞增殖病症。在另一實施例中，該療法為癌症。在另一實施例中，該療法為與具有新變體活性之突變IDH蛋白(諸如具有2-HG新變體活性之突變IDH1或具有2-HG新變體活性之突變IDH2)相關的癌症。在另一實施例中，新變體活性為R-2-HG新變體活性。在另一實施例中，癌症係與具有2-HG或R-2-HG新變體活性之突變IDH1相關，該突變IDH1在殘基97、100或132處具有突變，諸如G97D、R100Q、R132H、R132C、R132S、R132G、R132L及R132V。在另一實施例中，癌症係與具有2-HG或R-2-HG新變體活性之突變IDH2相關，該突變IDH2在殘基140或172具有突變，例如R140Q、R140G、R172K、R172M、R172S、R172G及R172W。在另一實施例中，癌症為腦癌、白血病、皮膚癌、***癌、甲狀腺癌、結腸癌、肺癌或肉瘤。在另一實施例中，癌症為神經膠質瘤、多形性神經膠母細胞瘤、副神經節瘤、幕上原始神經外胚層腫瘤、急性骨髓白血病、骨髓發育不良症候群、慢性骨髓性白血病、黑素瘤、***癌、甲狀腺癌、結腸癌、肺癌、中心性軟骨肉瘤、 中心性及骨膜性軟骨瘤、纖維肉瘤及膽管癌。

本發明之另一實施例提供式(I)化合物於療法中之用途，其中該療法為D-2-羥基戊二酸尿酸症、奧利埃氏病或馬富西症候群。

本發明之另一實施例提供根據式(I)之化合物用於製造供治療與具有新變體活性之IDH之突變體形式相關的疾病或病症的藥物的用途。在一個實施例中，與具有新變體活性之IDH之突變體形式相關的疾病或病症為細胞增殖病症。在另一實施例中，細胞增殖病症為癌症。在另一實施例中，癌症為與具有新變體活性之突變IDH蛋白(諸如具有2-HG新變體活性之突變IDH1或具有2-HG新變體活性之突變IDH2)相關的癌症。在另一實施例中，新變體活性為R-2-HG新變體活性。在另一實施例中，癌症係與具有2-HG或R-2-HG新變體活性之突變IDH1相關，該突變IDH1在殘基97、100或132處具有突變，諸如G97D、R100Q、R132H、R132C、R132S、R132G、R132L及R132V。在另一實施例中，癌症係與具有2-HG或R-2-HG新變體活性之突變IDH2相關，該突變IDH2在殘基140或172具有突變，例如R140Q、R140G、R172K、R172M、R172S、R172G及R172W。在另一實施例中，癌症為腦癌、白血病、皮膚癌、***癌、甲狀腺癌、結腸癌、肺癌或肉瘤。在另一實施例中，癌症為神經膠質瘤、多形性神經膠母細胞瘤、副神經節瘤、幕上原始神經外胚層腫瘤、急性骨髓白血病、骨髓發育不良症候群、慢性骨髓性白血病、黑素瘤、 ***癌、甲狀腺癌、結腸癌、肺癌、中心性軟骨肉瘤、中心性及骨膜性軟骨瘤、纖維肉瘤及膽管癌。

本發明之另一實施例提供根據式(I)之化合物用於製造供治療與具有R-2-HG新變體活性之IDH之突變體形式相關的疾病或病症的藥物的用途，其中該疾病或病症為D-2-羥基戊二酸尿酸症、奧利埃氏病或馬富西症候群。

組合物

在另一態樣中，本發明提供一種包含式(I)化合物及醫藥學上可接受之載劑或賦形劑的醫藥組合物。

本發明之醫藥組合物可以大量形式(bulk form)製備及包裝，其中可提取治療有效量之本發明化合物且隨後給與個體，諸如用散劑或糖漿。或者，本發明之醫藥組合物可以單位劑型製備及包裝，其中各物理個別單元含有治療有效量之本發明化合物。當以單位劑型製備時，本發明之醫藥組合物典型地含有約5 mg至500 mg之式(I)化合物。

如本文中所用，術語「醫藥學上可接受之載劑或賦形劑」意謂例如涉及於給予形式中或與醫藥組合物一致的醫藥學上可接受之物質、組成或媒劑。當混合時，各賦形劑必須與醫藥組合物之其他成分相容，以避免當投與個體時會實質上降低本發明化合物功效的相互作用及會導致醫藥組合物不為醫藥學上可接受的相互作用。另外，各賦形劑當然必須具有足夠高純度以使其為醫藥學上可接受。

本發明化合物及醫藥學上可接受之載劑或賦形劑應典型地調配成適於所需投藥途徑投與個體之劑型。舉例而言， 劑型包括(1)適於經口投與之劑型，諸如錠劑、膠囊、囊片(caplets)、丸劑、片劑(troches)、散劑、糖漿、酏劑、懸浮液、溶液、乳液、藥囊及扁囊劑；及(2)適於非經腸投與之劑型，諸如無菌溶液、懸浮液及復原用粉末。適合的醫藥學上可接受之賦形劑應視所選特定劑型而變化。另外，適合的醫藥學上可接受之賦形劑可針對其在組合物中可能發揮之特定功能選擇。舉例而言，某些醫藥學上可接受之賦形劑可針對其有助於產生均一劑型之能力選擇。某些醫藥學上可接受之賦形劑可針對其有助於產生穩定劑型之能力選擇。某些醫藥學上可接受之賦形劑可針對其在投與個體時有助於一或多種本發明化合物自身體之一個器官或部分載運或轉運至身體之另一器官或另一部分的能力選擇。某些醫藥學上可接受之賦形劑可針對其增強患者順應性之能力選擇。

適合的醫藥學上可接受之賦形劑包括以下類型之賦形劑：稀釋劑、潤滑劑、黏合劑、崩解劑、填充劑、助流劑、成粒劑、塗佈劑、濕潤劑、溶劑、共溶劑、懸浮劑、乳化劑、甜味劑、調味劑、氣味掩蔽劑、著色劑、防結塊劑、保濕劑、螯合劑、塑化劑、增黏劑、抗氧化劑、防腐劑、穩定劑、界面活性劑及緩衝劑。

熟練技術人員具有此項技術中之知識及技能以使其能夠選擇適當量之適合的醫藥學上可接受之載劑及賦形劑以用於本發明中。另外，存在許多為熟練技術人員可用之資源，其描述醫藥學上可接受之載劑及賦形劑且可用於選擇 適合的醫藥學上可接受之載劑及賦形劑。實例包括Remington's Pharmaceutical Sciences(默克出版公司(Mack Publishing Company))；The Handbook of Pharmaceutical Additives(Gower Publishing Limited)；及The Handbook of Pharmaceutical Excipients(美國藥學協會(American Pharmaceutical Association)及英國醫藥出版社(Pharmaceutical Press))。

本發明之醫藥組合物係使用熟習此項技術者已知之技術及方法進行製備。此項技術中通常使用之一些方法描述於Remington's Pharmaceutical Sciences(默克出版公司(Mack Publishing Company))中。

在一個態樣中，本發明係有關一種固體口服劑型，諸如包含治療有效量之本發明化合物及稀釋劑或填充劑的錠劑或膠囊。適合之稀釋劑及填充劑包括乳糖、蔗糖、右旋糖、甘露糖醇、山梨糖醇、澱粉(例如玉米澱粉、馬鈴薯澱粉及預膠凝化澱粉)、纖維素及其衍生物(例如微晶纖維素)、硫酸鈣及磷酸氫鈣。口服固體劑型可進一步包含黏合劑。適合之黏合劑包括澱粉(例如玉米澱粉、馬鈴薯澱粉及預膠凝化澱粉)、明膠、***膠、褐藻酸鈉、褐藻酸、黃蓍膠、瓜爾膠(guar gum)、聚維酮(povidone)、及纖維素及其衍生物(例如微晶纖維素)。口服固體劑型可進一步包含崩解劑。適合之崩解劑包括交聯普維酮(crospovidone)、乙醇酸澱粉鈉、交聯羧甲纖維素(croscarmelose)、褐藻酸及羧甲基纖維素鈉。口服固體劑 型可進一步包含潤滑劑。適合之潤滑劑包括硬脂酸、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣及滑石。

適當時，用於經口投與之劑量單位調配物可經微囊封。組合物亦可經製備以延長或持續釋放，如例如藉由塗佈或包埋微粒物質於聚合物、蠟或其類似物中。

本發明化合物亦可與作為可靶向藥物載劑之可溶性聚合物偶聯。該等聚合物可包括聚乙烯吡咯啶酮、哌喃共聚物、聚羥丙基甲基丙烯醯胺酚、聚羥乙基天冬胺醯胺酚或經軟脂醯基殘基取代之聚氧化乙烯聚離胺酸。此外，本發明化合物可與一類適用於達成藥物之控制釋放的生物可降解聚合物偶聯，例如聚乳酸、聚ε己內酯、聚羥基丁酸、聚原酸酯、聚縮醛、聚二氫哌喃、聚氰基丙烯酸酯及水凝膠之交聯或兩性嵌段共聚物。

在另一態樣中，本發明係有關一種液體口服劑型。諸如溶液、糖漿及酏劑之口服液體可以單位劑型形式製備以使得給定量含有預定量之本發明化合物。糖漿可藉由將本發明化合物溶解於經適當調味之水溶液中來製備；而酏劑係經由使用無毒醇性媒劑來製備。懸浮液可藉由將本發明化合物分散於無毒媒劑中來調配。亦可添加增溶劑及乳化劑，諸如乙氧基化異硬脂醇及聚氧乙烯山梨糖醇醚；防腐劑；調味添加劑，諸如薄荷油或其他天然甜味劑或糖精或其他人造甜味劑；及其類似物。

在另一態樣中，本發明係有關非經腸投與。適於非經腸投與之醫藥組合物包括水性及非水性無菌注射溶液，其可 含有抗氧化劑、緩衝劑、抑菌劑及使調配物與預期接受者之血液等張的溶質；及水性及非水性無菌懸浮液，其可包括懸浮劑及增稠劑。組合物可呈現於單位劑量或多劑量容器(例如密封安瓿及小瓶)中，且可儲存於冷凍乾燥(凍乾)條件下，僅需要在即將使用前添加無菌液體載劑，例如注射用水。即用型注射溶液及懸浮液可自無菌粉末、顆粒及錠劑製備。

組合

本發明化合物可與一或多種其他治療劑同時或之前或之後投與。本發明化合物可藉由與其他藥劑相同或不同之投藥途徑分別投與，或以同一醫藥組合物一起投與。

在一個實施例中，本發明提供一種產品，其包含式(I)化合物及至少一種其他治療劑作為組合製劑以同時、分別或依序用於療法中。在一個實施例中，療法為治療與IDH之突變體形式相關的疾病或病症。以組合製劑形式提供之產品包括一種組合物，其包含一起處於同一醫藥組合物中之式(I)化合物及其他治療劑，或包含呈分開形式(例如呈套組形式)之式(I)化合物及其他治療劑。

在一個實施例中，本發明提供一種包含式(I)化合物及另一治療劑之醫藥組合物。視情況，醫藥組合物可包含如上所述之醫藥學上可接受之賦形劑。

在一個實施例中，本發明提供一種套組，其包含兩種或兩種以上各別醫藥組合物，其中至少一者含有式(I)化合物。在一個實施例中，套組包含用於分開固持該等組合物 之構件，諸如容器、分隔瓶或分隔箔包。該套組之一個實例為泡殼包裝(blister pack)，如典型地用於包裝錠劑、膠囊及其類似物。

本發明之套組可用於投與不同劑型(例如經口及非經腸)，用於以不同給藥間隔投與各別組合物，或用於相對於彼此滴定各別組合物。為有助於順應性，本發明之套組典型地包含投藥說明書。

在本發明之組合療法中，本發明化合物及其他治療劑可由相同或不同製造商製造及/或調配。此外，本發明化合物及其他治療劑可一起產生組合療法：(i)在向醫師發放組合產品之前(例如在包含本發明化合物及其他治療劑之套組的情況下)；(ii)在即將投藥之前由醫師自身(或在醫師指導下)進行；(iii)由患者自身進行，例如在依序投與本發明化合物及其他治療劑期間。

因此，本發明提供式(I)化合物用於治療與IDH之突變體形式相關之疾病或病症的用途，其中藥物經製備以與另一治療劑一起投與。本發明亦提供另一治療劑用於治療與IDH之突變體形式相關之疾病或病症的用途，其中藥物係與式(I)化合物一起投與。

本發明亦提供用於治療與IDH之突變體形式相關之疾病或病症之方法中的式(I)化合物，其中該式(I)化合物經製備以與另一治療劑一起投與。本發明亦提供用於治療與IDH之突變體形式相關之疾病或病症之方法中的另一治療劑，其中該另一治療劑經製備以與式(I)化合物一起投與。本發 明亦提供用於治療與IDH之突變體形式相關之疾病或病症之方法中的式(I)化合物，其中該式(I)化合物係與另一治療劑一起投與。本發明亦提供用於治療與IDH之突變體形式相關之疾病或病症之方法中的另一治療劑，其中該另一治療劑係與式(I)化合物一起投與。

本發明亦提供式(I)化合物用於治療與IDH之突變體形式相關之疾病或病症的用途，其中患者先前(例如在24小時內)已經另一治療劑治療。本發明亦提供另一治療劑用於治療與IDH之突變體形式相關之疾病或病症的用途，其中患者先前(例如在24小時內)已經式(I)化合物治療。

在一個實施例中，其他治療劑係選自：血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)受體抑制劑、拓撲異構酶II抑制劑、平滑抑制劑、烷化劑、抗腫瘤抗生素、抗代謝物、類視黃素及其他細胞毒性劑。

血管內皮生長因子(VEGF)受體抑制劑之實例包括(但不限於)貝伐單抗(bevacizumab)(以商標Avastin®(Genentech/Roche)銷售)、阿西替尼(axitinib)(N-甲基-2-[[3-[(E)-2-吡啶-2-基乙烯基]-1H-吲唑-6-基]硫基]苯甲醯胺，亦稱作AG013736，且描述於PCT公開案第WO 01/002369號中)、丙胺酸布立尼布(Brivanib Alaninate)((S)-((R)-1-(4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基氧基)丙-2-基)2-胺基丙酸酯，亦稱作BMS-582664)、莫特塞尼(motesanib)(N-(2,3-二氫-3,3-二甲基-1H-吲哚-6-基)-2-[(4-吡啶基甲基)胺基]-3-吡啶 甲醯胺，且描述於PCT公開案第WO 02/066470號中)、帕西瑞肽(pasireotide)(亦稱作SOM230，且描述於PCT公開案第WO 02/010192號中)及索拉非尼(sorafenib)(以商品名Nexavar®銷售)。

拓撲異構酶II抑制劑之實例包括(但不限於)依託泊苷(etoposide)(亦稱作VP-16及磷酸依託泊苷，以商品名Toposar®、VePesid®及Etopophos®銷售)及替尼泊苷(teniposide)(亦稱作VM-26，以商品名Vumon®銷售)。

烷化劑之實例包括(但不限於)替莫唑胺(temozolomide)(以商品名Temodar®及Temodal®(Schering-Plough/Merck)銷售)、放線菌素(dactinomycin)(亦稱作放線菌素-D且以商品名Cosmegen®銷售)、美法侖(melphalan)(亦稱作L-PAM、L-溶肉瘤素(L-sarcolysin)及***酸氮芥，以商品名Alkeran®銷售)、六甲蜜胺(altretamine)(亦稱作六甲基三聚氰胺(HMM)，以商品名Hexalen®銷售)、卡莫司汀(carmustine)(以商品名BiCNU®銷售)、苯達莫司汀(bendamustine)(以商品名Treanda®銷售)、白消安(busulfan)(以商品名Busulfex®及Myleran®銷售)、卡鉑(carboplatin)(以商品名Paraplatin®銷售)、洛莫司汀(lomustine)(亦稱作CCNU，以商品名CeeNU®銷售)、順鉑(cisplatin)(亦稱作CDDP，以商品名Platinol®及Platinol®-AQ銷售)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)(以商品名Leukeran®銷售)、環磷醯胺(cyclophosphamide)(以商品名Cytoxan®及Neosar®銷售)、達卡巴嗪(dacarbazine)(亦稱作DTIC、 DIC及咪唑甲醯胺，以商品名DTIC-Dome®銷售)、六甲蜜胺(亦稱作六甲基三聚氰胺(HMM)，以商品名Hexalen®銷售)、異環磷醯胺(ifosfamide)(以商品名Ifex®銷售)、丙卡巴肼(procarbazine)(以商品名Matulane®銷售)、二氯甲基二乙胺(mechlorethamine)(亦稱作氮芥(nitrogen mustard/mustine)及鹽酸氮芥，以商品名Mustargen®銷售)、鏈脲黴素(streptozocin)(以商品名Zanosar®銷售)、噻替派(thiotepa)(亦稱作硫磷醯胺(thiophosphoamide)、TESPA及TSPA，且以商品名Thioplex®銷售)。

抗腫瘤抗生素之實例包括(但不限於)小紅莓(doxorubicin)(以商品名Adriamycin®及Rubex®銷售)、博萊黴素(bleomycin)(以商品名lenoxane®銷售)、道諾黴素(daunorubicin)(亦稱作鹽酸道諾黴素、柔毛黴素(daunomycin)及鹽酸紅比黴素(rubidomycin hydrochloride)，以商品名Cerubidine®銷售)、道諾黴素脂質體(檸檬酸道諾黴素脂質體，以商品名DaunoXome®銷售)、米托蒽醌(mitoxantrone)(亦稱作DHAD，以商品名Novantrone®銷售)、表柔比星(epirubicin)(以商品名Ellence^TM銷售)、艾達黴素(idarubicin)(以商品名Idamycin®、Idamycin PFS®銷售)及絲裂黴素C(mitomycin C)(以商品名Mutamycin®銷售)。

抗代謝物之實例包括(但不限於)克拉屈濱(claribine)(2-氯去氧腺苷，以商品名leustatin®銷售)、5-氟尿嘧啶(以商品名Adrucil®銷售)、6-硫鳥嘌呤(以商品名Purinethol®銷售)、培美曲塞(pemetrexed)(以商品名Alimta®銷售)、阿 糖胞苷(cytarabine)(亦稱作阿糖胞苷(arabinosylcytosine，Ara-C)，以商品名Cytosar-U®銷售)、阿糖胞苷脂質體(亦稱作脂質體Ara-C，以商品名DepoCyt^TM銷售)、地西他濱(decitabine)(以商品名Dacogen®銷售)、羥基脲(以商品名Hydrea®、Droxia^TM及Mylocel^TM銷售)、氟達拉濱(fludarabine)(以商品名Fludara®銷售)、氟尿苷(floxuridine)(以商品名FUDR®銷售)、克拉屈濱(cladribine)(亦稱作2-氯去氧腺苷(2-CdA)，以商品名Leustatin^TM銷售)、甲胺喋呤(methotrexate)(亦稱作胺甲喋呤(amethopterin)、甲胺喋呤鈉(MTX)，以商品名Rheumatrex®及Trexall^TM銷售)及噴司他汀(pentostatin)(以商品名Nipent®銷售)。

類視黃素之實例包括(但不限於)亞利崔托寧(alitretinoin)(以商品名Panretin®銷售)、維甲酸(tretinoin)(全反式視黃酸，亦稱作ATRA，以商品名Vesanoid®銷售)、異維甲酸(Isotretinoin)(13-順式視黃酸，以商品名Accutane®、Amnesteem®、Claravis®、Clarus®、Decutan®、Isotane®、Izotech®、Oratane®、Isotret®及Sotret®銷售)及貝瑟羅汀(bexarotene)(以商品名Targretin®銷售)。

其他細胞毒性劑之實例包括(但不限於)三氧化二砷(以商品名Trisenox®銷售)、天冬醯胺酸酶(亦稱作L-天冬醯胺酸酶及歐文氏(Erwinia)L-天冬醯胺酸酶，以商品名Elspar®及Kidrolase®銷售)。

中間物及實例

以下實例意欲僅具說明性且不以任何方式限制。除非另外說明，否則以下中間物及實例係經由矽膠管柱層析使用來自Teledyne Isco,Inc之RediSep® Rf管柱進行純化。所用縮寫為此項技術中習知之縮寫或以下縮寫：

儀器

LCMS：

LCMS數據(本文中亦簡單報導為MS)係使用Waters系統(Acuity UPLC及Micromass ZQ質譜儀；管柱：Acuity HSS C18 1.8微米，2.1×50 mm；梯度：含0.05% TFA之5-95%乙腈的水溶液，經1.8分鐘之時期；流動速率1.2 mL/min；分子量範圍200-1500；錐電壓20 V；管柱溫度50℃)記錄。除非另外記錄，否則所報導之所有質量為質子化母離子之質量。

高解析度質譜分析(HRMS)：

HRMS方法A：ESI-MS數據係使用具有電噴霧電離源之Synapt G2 HDMS(TOF質譜儀，Waters)記錄。MS系統之解析度約為15000。將白胺酸腦啡肽(Leucine Enkephalin)用作自Lockspary探針輸注之鎖定質量(內標)。藉由UPLC(Acquity，Waters)自樣品探針輸注化合物至質譜儀中。分 離係利用Acquity UPLC BEH C18 1×50 mm管柱(流動速率為0.2 mL/min，梯度為3分鐘內5%至95%)進行。溶劑A為含0.1%甲酸之水且溶劑B為含0.1%甲酸之乙腈。在鎖定質量下測得系統之質量精度<5 ppm。

HRMS方法B：LC-MS/ESI-MS數據係利用Acquity G2 Xevo QTof(Rs(FWHM)>20000，精度<5 ppm)記錄。分離係利用Acquity CSH 1.7 μm 2.1×50 mm(50℃管柱；溶離劑A：水+3.75 mM乙酸銨；溶離劑B：乙腈；梯度：2%至98% B，於4.4分鐘內，流速1.0 mL/min)進行。

HRMS方法A及B在本文中分別稱作HRMS(A)或HRMS(B)。

中間物

中間物A：(R)-4-異丁基唑啶-2-酮

經30分鐘向經冷卻(4℃)之(R)-2-胺基-4-甲基戊-1-醇(2.98 g，25.4 mmol)及三乙胺(7.6 mL，54 mmol，2.1當量)於CH₂Cl₂(80 mL)中之溶液中逐滴添加三光氣(2.52 g，8.49 mmol，0.334當量)於10 ml CH₂Cl₂中之溶液。反應混合物在4℃下攪拌15分鐘，升溫至室溫且再攪拌1小時。混合物經飽和NH₄Cl(25 mL)及CH₂Cl₂(50 mL)依次處理且將所得混合物攪拌20分鐘。分離各層且用水洗滌有機層。經 合併之水層以CH₂Cl₂(50 mL)萃取。經合併之有機層經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮，得到(R)-4-異丁基唑啶-2-酮(3.22 g，產率88%)。粗產物不經純化即用於下一反應。¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 4.53-4.47(m,1 H),4.00-3.92(m,2 H),1.67(ddq,J=13,8.0,6.5 Hz,1 H),1.56-1.48(m,1 H),1.40-1.32(m,1 H),0.95(d,J=6.1 Hz,3 H),0.93(d,J=6.1 Hz,3 H)。

表1中之中間物係藉由與關於中間物A之製備所述類似的方法來製備。

中間物M：4-苯基-1,8-二氧雜-3-氮雜螺[4.5]癸-2-酮

步驟1：製備4-(胺基(苯基)甲基)四氫-2H-哌喃-4-醇

向二氫-2H-哌喃-4(3H)-酮(1001 mg，10 mmol)及三乙胺(0.279 mL，2.00 mmol)中緩慢地添加TMS-CN(1190 mg，12.00 mmol)[注意：放熱反應]。攪拌1小時後，在減壓下濃縮混合物。將溶解於***(10 mL)中之殘餘物逐滴添加至溴化苯基鎂(於***中之3 M溶液，4.33 mL，13.00 mmol)中。再添加約5 mL***且將懸浮液攪拌約4小時。向反應混合物中極緩慢地添加MeOH(3.0 mL)，接著小心且緩慢地以多份添加NaBH₄(454 mg，12.00 mmol)及MeOH(12 mL)(觀測到氣體產生)。將反應混合物攪拌隔夜且小心地添加水(約6 mL)，接著添加10% HCl水溶液(約20 mL)。將混合物劇烈攪拌4小時且添加***。用10% HCl水溶液(1×約20 mL)萃取經分離之有機層。用***(2×)洗滌經 合併之水層。藉由添加6 N NaOH水溶液使酸性層呈鹼性。用DCM(1×)、乙酸乙酯/THF(1：1；1×)及乙酸乙酯(2×)萃取乳白色混合物。有機層(獨立地為DCM及乙酸乙酯溶液)以飽和NaHCO₃水溶液洗滌，經Na₂SO₄乾燥，過濾出且在減壓下濃縮，得到粗製4-(胺基(苯基)甲基)四氫-2H-哌喃-4-醇，其不經進一步純化即直接用於下一反應中。

微黃色液體。產量：451 mg。LCMS m/z 208.2(M+H)⁺，滯留時間0.29分鐘。

步驟2：製備4-苯基-1,8-二氧雜-3-氮雜螺[4.5]癸-2-酮

向CDI(388 mg，2.394 mmol)於THF(1.5 mL)中之混合物中緩慢地添加4-(胺基(苯基)甲基)四氫-2H-哌喃-4-醇(451 mg，2.176 mmol)於THF(3 mL)中之溶液。混合物在氬氣下攪拌約5小時。用飽和NaHCO₃水溶液及DCM稀釋混合物。經分離之水層以DCM(2×)萃取且經合併之有機層以0.5 N HCl水溶液及鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾出且在減壓下濃縮。藉由管柱層析[SiO₂，12 g，0-100%庚烷/乙酸乙酯]純化殘餘物，得到呈白色固體狀之4-苯基-1,8-二氧雜-3-氮雜螺[4.5]癸-2-酮。產量：330 mg。LCMS m/z 234.1(M+H)⁺；滯留時間0.52分鐘。

中間物N：(S)-4-(聯苯-4-基) 唑啶-2-酮

步驟1：製備乙烯基聯苯

在0℃下經約20分鐘向溴化甲基三苯基鏻(5.10 g，14.27 mmol)於THF(26 mL)中之懸浮液中緩慢地添加第三丁醇鉀(1 M溶液於THF中，14.27 mL)。使反應混合物升溫至室溫攪拌10分鐘。將混合物冷卻至0℃且經20分鐘添加4-聯苯甲醛(2.0 g，10.98 mmol)於THF(9 mL)中之溶液。使反應混合物升溫至室溫且攪拌約19小時。過濾混合物且在減壓下濃縮濾液。將殘餘物溶解/懸浮於DCM中且經由二氧化矽墊過濾且在減壓下濃縮濾液。藉由管柱層析[SiO₂，80 g，EtOAc/庚烷]純化殘餘物，得到呈白色固體狀之乙烯基聯苯(1.845 g)。LCMS滯留時間0.79分鐘。

步驟2：製備(S)-1-(聯苯-4-基)-2-羥基乙基胺基甲酸第三丁酯

向胺基甲酸第三丁酯(2.82 g，24.08 mmol)於1-丙醇(30 mL)中之溶液中添加NaOH水溶液(0.38 M，61.5 mL，23.36 mmol)。將混合物攪拌5分鐘且添加1,3-二氯-5,5-二甲基咪唑啶-2,4-二酮(2.351 g，11.93 mmol)。將混合物攪拌10分鐘且添加溶解於1-丙醇(30 mL)中之(DHQ)₂PHAL(0.303 g，0.388 mmol)，接著添加乙烯基聯苯(1.4 g，7.77 mmol)於1-丙醇(60 mL)中之溶液。添加二水合鋨酸鉀(0.114 g，0.311 mmol)於NaOH水溶液(0.38 M，0.613 mL，0.233 mmol)中之懸浮液且將混合物攪拌約16小時。反應混合物以水(200 mL)稀釋且用EtOAc(3×200 mL)萃取。經合併之有機層以鹽水(2×400 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾出且在減壓下濃縮。藉由管柱層析[SiO₂，80 g，EtOAc/庚烷] 純化殘餘物，得到(S)-1-(聯苯-4-基)-2-羥基乙基胺基甲酸第三丁酯(609 mg)。LCMS m/z 258.2(M+H；失去t-Bu)⁺，滯留時間0.97分鐘。

¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ ppm 7.62-7.56(m,4 H),7.45-7.37(m,4 H),7.34-7.2(m,1 H),4.69(t,J=5.8 Hz,1 H),3.76-3.63(m,2H),1.44(br.s.,9 H)

步驟3：製備(S)-2-胺基-2-(聯苯-4-基)乙醇

在室溫下向(S)-1-(聯苯-4-基)-2-羥基乙基胺基甲酸第三丁酯(608 mg，1.940 mmol)於MeOH(3 mL)中之溶液中添加HCl(4 M於二烷中，8 mL)。將混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮。將殘餘物溶解於DCM(10 mL)/水(1.0 mL)中且與NaHCO₃一起攪拌1小時。過濾出混合物且用DCM沖洗。濾液經硫酸鈉乾燥，過濾出且在減壓下濃縮，得到呈白色固體狀之(S)-2-胺基-2-(聯苯-4-基)乙醇(171 mg)。 LCMS m/z 214.2(M+H)⁺，滯留時間0.58分鐘。

步驟4：製備(S)-4-(聯苯-4-基) 唑啶-2-酮

在氬氣氛圍下向(S)-2-胺基-2-(聯苯-4-基)乙醇(171 mg，0.802 mmol)於THF(12 mL)中之溶液中添加CDI(132 mg，0.814 mmol)。在室溫下攪拌溶液2小時。混合物以飽和NaHCO₃水溶液(40 mL)稀釋且用EtOAc(2×30 mL)萃取。經合併之有機層以0.5 M HCl水溶液(30 mL)、鹽水(40 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾出且在減壓下濃縮。將殘餘物溶解於DCM中且在減壓下濃縮，得到呈米色固體狀之粗製(S)-4-(聯苯-4-基)唑啶-2-酮(156 mg)，其不經進一步純 化即使用。LCMS m/z 240.1(M+H)⁺，滯留時間0.80分鐘。

¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ ppm 4.19(dd,J=8.61,6.50 Hz,1 H)4.80(t,J=8.73 Hz,1 H)5.05(dd,J=8.78,6.48 Hz,1 H)7.31-7.38(m,1 H)7.39-7.54(m,4 H)7.55-7.71(m,4 H)。

中間物P：4,4,5,5-四甲基 唑啶-2-酮

步驟1：製備2-(第三丁氧基羰基胺基)-2-甲基丙酸甲酯

在室溫下向2-(第三丁氧基羰基胺基)-2-甲基丙酸(10.03 g，49.4 mmol)於MeOH/DCM(60 mL/140 mL)中之溶液中逐滴添加(三甲基矽烷基)重氮甲烷(37.0 mL，74.0 mmol)。將反應混合物攪拌30分鐘。逐滴添加乙酸以淬滅(三甲基矽烷基)重氮甲烷。在減壓下濃縮反應混合物，得到呈白色固體狀之所需產物(10.56 g)。LCMS m/z 240.2(M+Na)⁺，滯留時間0.71分鐘。

步驟2：製備3-羥基-2,3-二甲基丁-2-基胺基甲酸第三丁酯

在0℃下向2-(第三丁氧基羰基胺基)-2-甲基丙酸甲酯(10.56 g，48.6 mmol)於THF(300 mL)中之溶液中逐滴添加溴化甲基鎂(64.8 mL，194 mmol)。1小時後移除冷浴。在20℃下攪拌反應物4小時。將反應物再冷卻至0℃且用飽和NH₄Cl溶液(10 mL)淬滅。隨後使反應混合物溫至室溫且用EtOAc(100 mL)及水(50 mL)稀釋。分離各相且用EtOAc (2×100 mL)萃取水層。隨後將經合併之有機物乾燥(Na₂SO₄)且濃縮。經由矽膠急驟層析(0-20% EtOAc-己烷)純化殘餘物，得到呈白色固體狀之所需產物(9.02 g)。 LCMS m/z 240.1(M+Na)⁺，滯留時間0.78分鐘。

步驟3：製備4,4,5,5-四甲基 唑啶-2-酮

向3-羥基-2,3-二甲基丁-2-基胺基甲酸第三丁酯(10.02 g，46.1 mmol)於THF(300 ml)中之溶液中逐份添加2-甲基丙-2-醇化鉀(7.24 g，64.6 mmol)。將反應物攪拌五小時且用HCl(1 M，66 mL)淬滅至pH=2。隨後將反應混合物在真空下濃縮至約三分之一的體積，且用水(50 mL)稀釋。隨後用DCM(3×100 mL)萃取水層。經合併之有機物以鹽水(50 mL)洗滌，乾燥(Na₂SO₄)且濃縮，得到呈淺棕褐色油狀之粗產物(6.25 g)。LCMS m/z 144.1(M+H)⁺，滯留時間0.42分鐘。

表2b中之中間物係藉由與關於中間物P之製備所述類似的方法來製備。

中間物1：(R)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-苯基唑啶-2-酮

用NaH(95%，0.4773 g，18.89 mmol，1.046當量)處理(R)-4-苯基唑啶-2-酮(2.9484 g，18.07 mmol)及2,4-二氯嘧啶(3.1872 g，21.39 mmol，1.184當量)於DMF(30 mL)中之溶液，隨後所得混合物(黃色至紅色混濁)在室溫下攪拌3小時。反應混合物以EtOAc(200 mL)稀釋，用飽和NH₄Cl(75 mL)及4% NaCl水溶液(2×100 mL)洗滌，經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至40%)得到(R)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-苯基唑啶-2-酮(2.7020 g，白色黏性固體)，產率為46.9%。¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.47(d,J=5.6 Hz,1 H),8.18(d,J=6.1 Hz,1 H),7.38-7.30(m,5 H),5.81(dd,J=8.6,3.5 Hz,1 H),4.88(t,J=8.6 Hz,1 H),4.37(dd,J=8.6,3.5 Hz,1 H)；MS m/z 276.4(M+H)⁺。

表3中之中間物係藉由與關於中間物1之製備所述類似的方法來製備。

中間物31：(S)-3-(2-氟嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮

在N₂氛圍下將2,4-二氟嘧啶(3.5 mL，41 mmol)及(S)-4-異丙基唑啶-2-酮(5.3 g，41 mmol)於30 mL DMF中之溶液冷卻至0℃。緩慢地添加NaH(2.1 g的60%懸浮液，53 mmol)。觀測到鼓泡放熱。內部溫度保持低於5℃。5分鐘後，移除冷浴。使反應混合物(沙色懸浮液)溫至室溫且攪拌18小時。反應混合物以水(100 mL)稀釋且用(3×75 mL)EtOAc萃取。有機層以各50 mL水及鹽水洗滌。經Na₂SO₄ 乾燥且在真空中於矽膠上濃縮。管柱層析(EtOAc/庚烷10%至100%梯度)得到3.1 g呈結晶白色固體狀之(S)-3-(2-氟嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(IV)(33%)。¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 8.50(dd,J=5.8,2.2 Hz,1H),8.19(dd,J=5.8,3.8 Hz,1H),4.79(dt,J=8.1,3.5 Hz,1H),4.48-4.34(m,2H),2.64(七重峰，J=7.0,3.6 Hz,1H),1.01(d,J=7.0 Hz,3H),0.90(d,J=6.9 Hz,3H)。MS m/z 471.8及471.8(M+H)+。

表4b中之中間物係藉由與關於中間物1及31之製備所述類似的方法來製備。

中間物46：(S)-4-(聯苯-4-基)-3-(2-氯嘧啶-4-基) 唑啶-2-酮

在室溫(水浴)下在約5分鐘內向2,4-二氯嘧啶(46.5 mg，0.312 mmol)及(S)-4-(聯苯-4-基)唑啶-2-酮(74.7 mg，0.312 mmol)於DMF(700 μL)中之溶液中以兩份添加NaH(60重量%，10.49 mg，0.437 mmol)[注意：放熱；產生氣體]。將反應混合物攪拌1.5小時。混合物以EtOAc(25 mL)稀釋，攪拌5分鐘且隨後用稀鹽水(10 mL；1：1鹽水/水)緩慢稀釋。將混合物傾倒入稀鹽水(40 mL)及EtOAc(25 mL)中。經分離之有機相以稀鹽水(3×40 ml)洗滌，經Na₂SO₄乾燥，過濾出且在減壓下濃縮。藉由管柱層析[SiO₂，40 g，EtOAc/庚烷]純化殘餘物，得到(S)-4-(聯苯-4-基)-3-(2-氯嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(49.5 mg)。LCMS m/z 352.2(M+H)⁺，滯留時間1.06分鐘。

中間物47：3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-苯基-1,8-二氧雜-3-氮雜螺[4.5]癸-2-酮

在氬氣下向4-苯基-1,8-二氧雜-3-氮雜螺[4.5]癸-2-酮 (300 mg，1.286 mmol)與2,4-二氯嘧啶(192 mg，1.286 mmol)於DMF(7 mL)中之混合物中以兩份添加NaH(60重量%，67.9 mg，2.83 mmol)。將混合物攪拌約1小時。將反應混合物小心地傾倒入冰冷0.25 N HCl水溶液中。添加DCM及NaHCO₃水溶液。經分離之水層以DCM(3×)及乙酸乙酯(1×)萃取。有機層(獨立地含有DCM及乙酸乙酯之層)以鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且過濾出。合併有機層且在減壓下濃縮，得到呈微黃色液體狀之粗製3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-苯基-1,8-二氧雜-3-氮雜螺[4.5]癸-2-酮(330 mg)，其不經進一步純化即直接用於下一反應中。LCMS m/z 346.1(M+H)⁺，滯留時間0.83分鐘。

中間物48：7-(2-氯嘧啶-4-基)-8-苯基-2,5-二氧雜-7-氮雜螺[3.4]辛-6-酮

使用與上文關於3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-苯基-1,8-二氧雜-3-氮雜螺[4.5]癸-2-酮所述類似之方法製備，但以氧雜環丁烷-3-酮起始。

LCMS m/z 318.1(M+H)⁺，滯留時間0.78分鐘。

中間物50：3-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-5,5-二甲基唑啶-2-酮

步驟1

將2,4-二氯-5-氟嘧啶(2 g，11.98 mmol)於乙腈(10 mL)中之溶液冷卻至-40℃，避免冷凍。向此溶液中添加二異丙胺(3.82 mL，21.88 mmol)，接著添加1-胺基-2-甲基丙-2-醇(1.5 g，16.83 mmol)。自冷卻浴中移出反應混合物，溫至室溫且使其攪拌隔夜(約18小時)。在真空中移除溶劑且將殘餘物溶於最少量的二氯甲烷(約1.5-2 mL)中且用庚烷稀釋直至輕微混濁。將此混合物裝載於40公克BioRad矽膠濾筒上。藉由急驟層析(Analogix系統，20分鐘梯度，0-25%甲醇/二氯甲烷，40 mL/min)純化，得到呈白色固體狀之1-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基胺基)-2-甲基丙-2-醇。LCMS m/z 220.1,221.8(M+H)⁺，滯留時間0.49分鐘。

步驟2

向1-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基胺基)-2-甲基丙-2-醇(400 mg，1.82)於DCM/乙酸乙酯(5 mL)中之懸浮液中添加2,6-二甲基吡啶(1 mL，8.59 mmol)。將反應物冷卻至-78℃且以單份添加三光氣(292 mg，0.983 mmol)。自冷卻浴中移出反應物且使其溫至室溫。反應物此時略帶粉紅色。LCMS指示起始物質消耗完且轉化為中間物1-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基胺基)-2-甲基丙-2-醇之醯基氯甲酸酯加合物。將反應物密封 且攪拌隔夜。反應物在室溫下攪拌隔夜，得到中間物醯基甲酸酯僅部分閉環形成環狀胺基甲酸酯。隨後反應物(密封)在60℃下加熱約4小時直至中間物醯基氯甲酸酯消耗完。將反應物冷卻至室溫，用DCM(約50 mL)稀釋且用水(1×50 mL)及飽和NaHCO₃(1×50 mL)洗滌。水層以DCM(約50 mL)反萃取。經合併之有機物經MgSO₄乾燥，過濾且在真空中濃縮。將固體溶解於DCM(約15 mL)中且添加矽藻土(約4公克)。濃縮混合物且在真空中乾燥，得到固體預裝載物以進行後續純化。藉由急驟層析(Analogix系統，80公克矽膠管柱，25分鐘梯度，0-25%甲醇/二氯甲烷，40 mL/min)純化，得到呈白色固體狀之3-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-5,5-二甲基唑啶-2-酮。¹H NMR(400 MHz，甲醇-d4)δ ppm 1.58(s,8 H)4.02(s,2 H)8.59(d,J=3.13 Hz,1 H)：LCMS m/z(M+H)⁺246.1,247.8.0，滯留時間0.61分鐘

表4d中之中間物係藉由與關於中間物50之製備所述類似的方法來製備。

中間物53：3-(2,6-二氯嘧啶-4-基)-4,4-二甲基唑啶-2-酮

用NaH(60%，0.0429 g，1.07 mmol，1.2當量)處理4,4-二甲基唑啶-2-酮(0.103 g，0.895 mmol)及2,4,6-三氯嘧啶(0.181 g，0.984 mmol，1.10當量)於DMF(3 mL)中之溶液，隨後所得混合物(黃色)在室溫下攪拌1小時。反應混合物以EtOAc(20 mL)稀釋，用飽和NaCl水溶液(2×20 mL)洗滌，經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至40%)得到3-(2,6-二氯嘧啶-4-基)-4,4-二甲基唑啶-2-酮(0.146 g，白色固體)，產率為62.3%。¹H NMR(300 MHz,CDCl₃)δ 8.14(s,1 H),4.16(s,2 H),1.74(s,9H)；LCMS m/z 261.9(M+H)⁺，滯留時間0.91分鐘。

表4f中之中間物係藉由與關於中間物53之製備所述類似的方法來製備。

中間物56：(S)-4-(1-(第三丁氧基羰基胺基)乙基)苯甲酸甲酯

向(S)-4-(1-胺基乙基)苯甲酸甲酯(4.9 g，22.7 mmol)於DCM(114 mL)中之溶液中添加二碳酸二第三丁酯(5.95 g，27.3 mmol)及三乙胺(6.97 mL，50 mmol)。溶液在室溫下攪拌16小時，隨後用水及鹽水洗滌。有機層經Na₂SO₄乾 燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至80%)得到呈白色固體狀之(S)-4-(1-(第三丁氧基羰基胺基)乙基)苯甲酸甲酯(6.35 g，100%產率)。

¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 8.04-7.96(m,2H),7.40-7.33(m,2H),4.83(s,1H),3.91(s,3H),1.43-1.23(m,12H)；MS m/z 224.0(M-56+H)。

中間物57：(S)-1-(4-(羥基甲基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯

向經冷卻(0℃)之(S)-4-(1-(第三丁氧基羰基胺基)乙基)苯甲酸甲酯(6.35 g，22.7 mmol)於THF(114 mL)中之溶液中添加LAH於THF中之溶液(2.0 M，13.64 mL，27.3 mmol)且所得混合物在室溫下攪拌40分鐘。藉由添加1 N NaOH溶液淬滅反應混合物直至氣體逸出停止。將反應混合物過濾，用EtOAc洗滌。分離後，用EtOAc(2×150 mL)洗滌水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至100%)得到呈白色固體狀之(S)-1-(4-(羥基甲基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(5.01 g，84%產率)。

¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 7.35-7.23(m,4H),4.80-4.71(m,1H),4.67(s,2H),2.04(bs,1H),1.47-1.37(m,12H)； MS m/z 196.0(M-56+H)。

中間物58：(S)-1-(4-(氯甲基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯

向(S)-1-(4-(羥基甲基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(503 mg，2 mmol)於DCM(10 mL)中之溶液中添加甲烷磺醯氯(275 mg，2.4 mmol)及三乙胺(0.56 mL，4 mmol)。溶液在室溫下攪拌16小時，隨後用水及鹽水洗滌。分離後，有機相經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至80%)得到呈白色固體狀之(S)-1-(4-(氯甲基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(254 g，47.1%產率)。

¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 7.40-7.24(m,4H),4.79(s,1H),4.58(s,2H),1.50-1.30(br m,12H)；MS m/z 214.0(M-56+H)。

中間物59：(S)-1-(4-((5,6-二氫-[1,2,4]***并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)甲基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯

(S)-1-(4-(氯甲基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(127 mg，0.47 mmol)、5,6,7,8-四氫-[1,2,4]***并[4,3-a]吡嗪(91 mg，0.56 mmol)及DIPEA(183 mg，1.41 mmol)於DMSO(2.3 mL)中之溶液在80℃下加熱16小時。反應混合物以EtOAc(20 mL)稀釋且用水(20 mL)洗滌。分離後，用EtOAc(2×15 mL)洗滌水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。粗產物不經進一步純化即用於下一步驟。

MS m/z 358.3(M+H)

中間物60：(S)-1-(4-((5,6-二氫-[1,2,4]***并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)甲基)苯基)乙胺

在-78℃下向(S)-1-(4-((5,6-二氫-[1,2,4]***并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)甲基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(168 mg，0.47 mmol)於DCM(2 mL)中之溶液中緩慢地添加TFA(2 mL，26 mmol)。反應物在室溫下攪拌1小時，隨後濃縮且用DCM(10 mL)稀釋。溶液與3當量之MP-碳酸酯樹脂(3.28 mmol/g，Biotage)一起在室溫下攪拌1小時。藉由過濾移除樹脂且用DCM(2×5 mL)洗滌。濃縮濾液且粗殘餘物不經進一步純化即用於下一步驟。

MS m/z 258.2(M+H)。

中間物61：(S)-4-(1-(第三丁氧基羰基胺基)乙基)-2-氟苯甲酸

向(S)-4-(1-胺基乙基)-2-氟苯甲酸(5 g，22.76 mmol)於水(66 mL)及THF(66 mL)中之溶液中添加二碳酸二第三丁酯(6.95 g，31.9 mmol)及碳酸鈉(5.74 g，68.3 mmol)。溶液在室溫下攪拌16小時，隨後在減壓下移除THF。水溶液以1 N HCl酸化至pH 3-4且用EtOAc(3×60 mL)萃取。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮，得到白色固體(1.94 g，30.1%產率)。粗產物不經進一步純化即用於下一步驟。

¹H NMR(400 MHz,MeOD)δ 7.89(t,J=7.8 Hz,1H),7.20(dd,J=8.2,1.7 Hz,1H),7.13(dd,J=12.0,1.6 Hz,1H),4.70(d,J=7.1 Hz,1H),1.47-1.35(m,12H)；MS m/z 282.0(M-H)。

中間物62：(S)-1-(3-氟-4-(甲氧基(甲基)胺甲醯基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯

(S)-4-(1-(第三丁氧基羰基胺基)乙基)-2-氟苯甲酸(1.416 g，5 mmol)。N,O-二甲基羥基胺鹽酸鹽(732 mg，7.5 mmol)、HATU(2.85 g，7.5 mmol)及DIPEA(3.49 mL，20 mmol)於DMF(25 mL)中之溶液在室溫下攪拌16小時。反應混合物以EtOAc稀釋且用水洗滌。分離後，用EtOAc(2×75 mL)洗滌水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷12%至100%)得到呈白色固體狀之(S)-1-(3-氟-4-(甲氧基(甲基)胺甲醯基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(1.5 g，92%產率)。

¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 7.40(t,J=7.4 Hz,1H),7.13(dd,J=7.8,1.6 Hz,1H),7.04(dd,J=10.7,1.6 Hz,1H),4.80(br s,1H),3.56(s,3H),3.34(s,3H),1.50-1.29(m,12H)；MS m/z 327.1(M+H)。

中間物63：(S)-1-(3-氟-4-甲醯基苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯

程序1：向經冷卻(0℃)之(S)-1-(3-氟-4-(甲氧基(甲基)胺甲醯基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(1.175 g，3.6 mmol)於THF(36 mL)中之溶液中添加LAH於THF中之溶液(1.0 M，18 mL，18 mmol)且所得混合物在0℃下攪拌20分鐘。藉由添加飽和Na₂SO₄溶液淬滅反應混合物直至氣體逸出停止。 用EtOAc(2×100 mL)萃取反應混合物。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷12%至100%)得到呈白色固體狀之(S)-1-(3-氟-4-甲醯基苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(760 mg，79%產率)。

程序2：將(S)-1-(4-溴-3-氟苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(318 mg，1 mmol)於無水THF(5 mL)中之溶液冷卻至-78℃。逐滴添加BuLi(2.5 M，840 μL，2.1 mmol)且所得溶液在-78℃下攪拌1小時。隨後以整份添加DMF(232 μL，3.00 mmol)。反應物在-78℃下再攪拌30分鐘，隨後用飽和NH₄Cl溶液淬滅。反應物在室溫下再攪拌30分鐘，隨後用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌。經分離之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至80%)得到呈白色固體狀之(S)-1-(3-氟-4-甲醯基苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(70 mg，26.2%產率)。

¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 10.31(s,1H),7.87-7.80(m,1H),7.20(dd,J=8.2,1.3 Hz,1H),7.11(dd,J=11.5,1.4 Hz,1H),4.80(br s,1H),1.45(br s,12H)；MS m/z 212.1(M-56+H)。

中間物64：(S)-1-(3-氟-4-((3,3,4-三甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯

(用於還原胺化之一般程序A)

(S)-1-(3-氟-4-甲醯基苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(267 mg，1 mmol)及1,2,2-三甲基哌嗪二鹽酸鹽(402 mg，2 mmol)於THF(5 mL)中之溶液在室溫下攪拌1小時且用三乙醯氧基硼氫化鈉(848 mg，4 mmol)處理。所得混合物在室溫下攪拌16小時。反應混合物以NaHCO₃飽和水溶液(15 mL)淬滅且用EtOAc(3×25 mL)萃取。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(MeOH/CH₂Cl₂ 0至10%)得到呈白色固體狀之(S)-1-(3-氟-4-((3,3,4-三甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(186 mg，49%產率)。

¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 7.35(t,J=7.7 Hz,1H),7.03(dd,J=7.9,1.9 Hz,1H),6.95(dd,J=11.1,1.8 Hz,1H),4.77(s,1H),3.49(s,2H),2.56(br s,4H),2.24(br s,5H),1.42(br s,12H),1.04(s,6H)；MS m/z 380.4(M+H)。

中間物65：(1S)-1-(4-((3,4-二甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯

(S)-1-(4-甲醯基苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(84.1 mg，0.337 mmol)[獲自(S)-1-(4-溴苯基)乙胺，遵循Hashihayata,Takashi PCT國際申請案2008081910,2008年7月10日之程序]及1,2-二甲基哌嗪(86.3 mg，0.756 mmol， 2.24當量)於THF(1.5 mL)中之溶液在室溫下攪拌65分鐘且用三乙醯氧基硼氫化鈉(277.2 mg，1.308 mmol，3.88當量)處理。所得混合物在室溫下攪拌16小時。反應混合物以NaHCO₃(15 mL)飽和水溶液淬滅且用EtOAc(5×15 mL)萃取。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(MeOH/CH₂Cl₂ 0至20%)得到(1S)-1-(4-((3,4-二甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(90.7 mg)，產率為34.5%。

¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 7.29(s,4 H),4.68(br s,1 H),3.54-3.47(m,2 H),3.37(s,1 H),2.84-2.74(m,3 H),2.38(td,J=12,2.5 Hz,1 H),2.31(s,3 H),2.28-2.22(m,2 H),1.94-1.89(m,1 H),1.40(br s,9 H),1.38(d,J=6.9 Hz,3 H),1.06(d,J=6.3 Hz,3 H)；MS m/z 348.2(M+H)

中間物66：(R,E)-2-甲基-N-((3-甲基-1H-吡唑-4-基)亞甲基)丙烷-2-亞磺醯胺

將3-甲基-1H-吡唑-4-甲醛(2.03 g，18.44 mmol)溶解於THF(30 ml)中且添加(R)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(2.35，19.39 mmol)，接著添加Ti(OEt)₄(8.41 mmol，36.90 mmol)。所得反應混合物在80℃下攪拌18小時。LCMS顯示 主要為產物。反應混合物以EtOAc(300 mL)稀釋，用4% NaCl水溶液(2×150，2×50 mL)洗滌。用EtOAc(100 ml)反萃取經合併之水層。經合併之有機層以鹽水(100 ml)洗滌，經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。藉由管柱層析(REDI 80 g，EtOAc/庚烷20%-100%經33分鐘，100%保持7分鐘)純化，得到標題化合物(2.25 g，10.55 mmol)。

¹H NMR(400 MHz,MeOD)δ 8.55(s,1H),2.53(s,3H),1.25(s,9H)。MS 214.2 m/z(M+H)。

中間物67：(R)-2-甲基-N-((S)-1-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)乙基)丙烷-2-亞磺醯胺

將(R,E)-2-甲基-N-((3-甲基-1H-吡唑-4-基)亞甲基)丙烷-2-亞磺醯胺(2.25 g，10.55 mmol)溶解於THF中且冷卻至0℃。逐滴添加溴化甲基鎂(3 M，12.5 ml，37.5 mmol)且將所得溶液攪拌1小時。移除冰浴且再攪拌反應物15小時。再添加2.5當量的溴化甲基鎂MeMgBr(在0℃下)。根據LCMS無太多變化。用飽和NH₄Cl淬滅反應混合物且用THF(2×)洗滌水層。經合併之有機層以鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮，得到標題化合物(1.79 g，7.80 mmol)。

¹H NMR(400 MHz,MeOD)δ 7.48(s,1H),4.49(qd,J=6.7,4.7 Hz,1H),2.26(s,3H),1.57(dd,J=6.5,1.3 Hz,3H),1.23(s,9H)。MS 230.2 m/z(M+H)。

中間物68：(R)-N-((S)-1-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺

將(R)-2-甲基-N-((S)-1-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)乙基)丙烷-2-亞磺醯胺(290 mg，1.26 mmol)溶解於DMF(5 ml)中且逐滴添加至Cs₂CO₃(458 mg，1.41 mmol)於DMF(4 ml)中之溶液中。所得反應混合物在室溫下攪拌15分鐘。添加苄基溴(216 mg，1.26 mmol)且反應物在室溫下攪拌2小時。LCMS顯示主要為產物及一些起始吡唑。再添加0.1 ml BnBr及135 mg Cs₂CO₃。再在50℃下攪拌24小時。反應混合物以EtOAc(300 mL)稀釋，用4% NaCl水溶液(2×150，2×50 mL)洗滌。用EtOAc(100 ml)反萃取經合併之水層。經合併之有機層以鹽水(100 ml)洗滌，經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠層析(EtOAc/庚烷20-80%)得到標題化合物(區位異構體之混合物，150 mg，0.470 mmol)。

¹H NMR(400 MHz,MeOD)δ 7.54(s,0.6H),7.46(s,0.4H), 7.36-6.99(m,5H),5.31(s,0.8H),5.21(s,1.2H),4.44(t,J=6.9 Hz,1H),2.21(2s,3H),1.54(2dt,3H),1.17(s,9H)。 MS 320.2 m/z(M+H)。

中間物69：

(S)-1-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)乙胺鹽酸鹽

將(R)-N-((S)-1-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺溶解於二烷(5 ml)中且添加含4 N HCl之二烷(1.2 ml，10當量)。在室溫下攪拌1小時。移除溶劑且與CH₂Cl₂一起共蒸發兩次。根據NMR觀測到一些第三丁基。再呈現反應條件且處理，得到標題化合物。

¹H NMR區位異構體之混合物(400 MHz,MeOD)δ 8.00(s,0.7H),7.80(s,0.3H),7.52-6.96(m,5H),5.40(s,0.6H),5.36(s,1.4H),4.47(q,J=6.9 Hz,1H),2.34(s,2.1H),2.32(s,0.9H),1.62(2d,J=6.9 Hz,3H)。

MS 216.3 m/z(M+H)

表4h中之中間物係藉由與關於中間物56至69之製備所述實質上類似的方法來製備。

中間物126：(S)-(4-(1-胺基乙基)-3-氟苯基)甲醇

向經冷卻(0℃)之(S)-4-(1-胺基乙基)-3-氟苯甲酸甲酯鹽酸鹽(0.109 g，0.468 mmol)於THF(15 mL)中之懸浮液中添加LAH於THF中之溶液(2.0 M，1.05 mL，2.10 mmol，4.49當量)且所得混合物在0℃下攪拌2小時20分鐘且在室溫下攪拌2 1/2小時。藉由添加Na₂SO₄十水合物與矽藻土之混合物(1：1，以重量計)來淬滅反應混合物，直至氣體逸出停止。過濾反應混合物，用EtOAc洗滌。濃縮濾液且不經純化即用於下一反應。

¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 7.43(t,J=7.7 Hz,1H),7.15(d,J=8.1 Hz,1 H),7.08(d,J=12 Hz,1 H),4.60(s,2 H),4.32(q,J=6.6 Hz,1 H),1.42-1.40(m,3 H)。

中間物127：4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯甲醛

(S)-3-(2-((S)-1-(4-(羥基甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(285 mg，0.8 mmol)及二氧化錳(2.78 g，32 mmol，40當量)於DCM(16 mL)中之溶液在室溫下攪拌30分鐘。溶液經由矽藻土墊過濾且用DCM洗滌。濃縮濾液且不經進一步純化即用於下一步驟。

中間物128：4-(4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苄基)-2,2-二甲基哌嗪-1-甲酸第三丁酯

向4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯甲醛(71 mg，0.2 mmol)及2,2-二甲基哌嗪-1-甲酸第三丁酯(47.1 mg，0.22 mmol)於MeOH(4 mL)中之溶液中添加乙酸(14.4 mg，0.24 mmol)及5-乙基-2-甲基吡啶硼烷複合物(27 mg，0.2 mmol，sigma aldrich)。溶液在50℃下攪拌4小時，隨後添加5滴水。溶液再在室溫下 攪拌2小時，隨後用EtOAc(10 mL)稀釋且用水(10 mL)洗滌。分離後，用EtOAc(3×10 mL)萃取水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。經由矽膠管柱層析(MeOH/EtOAc 0至10%)純化粗物質，得到呈白色固體狀之4-(4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苄基)-2,2-二甲基哌嗪-1-甲酸第三丁酯(80 mg，72.4%產率)。

¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 8.18(br s,1H),7.44(d,J=5.7 Hz,1H),7.24-7.29(m,4H),5.46(br s,1H),5.03(br s,1H),4.59-4.63(m,1H),4.29(t,J=8.7 Hz,1H),4.22(dd,J=9.1,3.1 Hz,1H),3.44(br s,4H),2.40(s,2H),2.16(s,2H),1.54(d,J=6.9 Hz,3H),1.45(s,9H),1.36(s,6H),0.80-0.57(m,6H)；MS m/z 252.1(M+H)。

中間物129：1-(4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苄基)-4-甲基哌啶-4-基胺基甲酸第三丁酯

藉由與關於中間物128之製備所述類似的方法來製備。

¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)8.17(d,J=5.7 Hz,1H),7.43(d,J=5.7 Hz,1H),7.26(br s,4H),5.40(br s,1H),5.02(br s, 1H),4.60(dt,J=8.2,3.1 Hz,1H),4.34-4.19(m,3H),3.47(br s,2H),2.54(br s,2H),2.26(br s,2H),1.95(br s,3H),1.60(br s,2H),1.53(d,J=6.9 Hz,3H),1.43(s,9H),1.33(s,3H),0.69(br s,3H),0.63(br s,3H)。MS m/z 553.6(M+H)。

中間物130：(S)-1-(4-溴苯基)乙基(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基)胺基甲酸第三丁酯

向(S)-3-(2-((S)-1-(4-溴苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(1.62 g，4 mmol)於THF(20 mL)中之溶液中添加二碳酸二第三丁酯(1.31 g，6 mmol)、DMAP(49 mg，0.4 mmol)及DIPEA(1.40 mL，8 mmol)。溶液在50℃下攪拌7天，隨後在減壓下濃縮。殘餘物以EtOAc(40 mL)稀釋且用水及鹽水洗滌。有機層經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至80%)得到呈白色固體狀之(S)-1-(4-溴苯基)乙基(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基)胺基甲酸第三丁酯(1.03 g，50.9%產率)。

¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 8.57(d,J=5.8 Hz,1H),7.99(d,J=5.8 Hz,1H),7.44-7.39(m,2H),7.33-7.28(m,2H),5.63(q,J=7.2 Hz,1H),4.63(dt,J=8.0,3.3 Hz,1H),4.39- 4.26(m,2H),2.47-2.39(m,1H),1.66(d,J=7.1 Hz,3H),1.30(s,9H),0.84(d,J=7.0,3H),0.83(d,J=7.0,3H)；MS m/z 507.0(M+H)。

中間物131：4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基((S)-1-(4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)乙基)胺基甲酸第三丁酯

在5 mL微波小瓶中，(S)-1-(4-溴苯基)乙基(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基)胺基甲酸第三丁酯(101 mg，0.2 mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-1H-吡唑(50 mg，0.24 mmol)、碳酸氫鈉(0.2 mL，0.4 mmol，2 M水溶液)於二烷(2 mL)中之溶液經N₂鼓泡3分鐘，隨後添加Cl₂Pd(dppf)CH₂Cl₂(16 mg，0.02 mmol)。將蓋封之管加熱至100℃持續16小時。冷卻後，反應混合物以EtOAc(10 mL)稀釋且用水(10 mL)洗滌。分離後，用EtOAc(3×10 mL)萃取水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。經由矽膠管柱層析(含EtOAc之庚烷，12%至100%)純化粗物質，得到白色固體(50 mg，49.3%產率)。

¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 8.57(d,J=5.7 Hz,1H),7.97(d,J=5.8 Hz,1H),7.74(s,1H),7.59(s,1H),7.39(s,4H),5.71(q,J=7.0 Hz,1H),4.65(dt,J=8.1,3.2 Hz,1H),4.36-4.24(m,2H),3.94(s,3H),2.50-2.42(m,1H),1.71(d,J=7.0 Hz,3H),1.29(s,9H),0.82(d,J=7.0 Hz,3H),0.80(d,J=7.0 Hz,3H)；MS m/z 507.1(M+H)。

中間物132：(S)-1-(4-(環己烷甲醯胺基)苯基)乙基(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基)胺基甲酸第三丁酯

在5 ml微波反應小瓶中添加(S)-1-(4-溴苯基)乙基(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基)胺基甲酸第三丁酯(101 mg，0.2 mmol)、環己烷甲醯胺(30 mg，0.24 mol)、碳酸銫(91 mg，0.28 mmol)、XANTPHOS(7 mg，0.012 mmol，strem chemicals)及Pd₂(dba)₃(4 mg，0.02 mmol)。將小瓶密封，抽空且用乾燥氮氣吹掃三次，隨後添加二烷(1.6 mL)。於油浴中加熱反應混合物至100℃持續16小時。冷卻後，反應物以EtOAc(10 mL)稀釋且用水(10 mL)洗滌。分離後，用EtOAc(3×10 mL)萃取水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。經由矽膠管柱 層析(含EtOAc之庚烷，12%至100%)純化粗物質，得到白色固體(65 mg，58.9%產率)。

¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 8.55(d,J=5.8 Hz,1H),7.95(d,J=5.8 Hz,1H),7.48-7.43(m,2H),7.38-7.32(m,2H),7.13(br s,1H),5.66(q,J=7.1 Hz,1H),4.64(dt,J=8.2,3.2 Hz,1H),4.38-4.26(m,2H),2.51-2.43(m,1H),2.20(tt,J=11.8,3.5 Hz,1H),1.95(d,J=13.2,2H),1.87-1.81(m,2H),1.71-1.68(m,4H),1.60-1.47(m,2H),1.33-1.25(m,12H),0.85(d,J=6.9 Hz,3H),0.82(d,J=6.9 Hz,3H)；MS m/z 552.1(M+H)。

中間物133：(S)-2-((4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基)胺基)丙酸甲酯

向(S)-2-胺基丙酸甲酯(270 mg，2.0 mmol，1.2當量，於10 ml DMSO中)及(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(430 mg，1.8 mmol，1.0當量)之溶液中添加DIPEA(805 mg，6.23 mmol，3.5當量)，且在110℃下加熱反應混合物120分鐘。將反應混合物傾倒入水(40 ml)中且用EtOAc(2×30 mL)萃取並用水(30 mL)洗滌。分離後，用EtOAc(3×8 mL)萃取水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾 燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(含乙酸乙酯之庚烷，10%至80%)得到(S)-2-((4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基)胺基)丙酸甲酯(260 mg，白色固體)，產率為47.4%。LCMS m/z 309.1(M+H)⁺滯留時間=1.53分鐘。

中間物134：(S)-2-((4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基)胺基)丙烷醯肼

向(S)-2-((4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基)胺基)丙酸甲酯(120 mg，0.39 mmol，於5 ml MeOH中)之溶液中添加99%水合肼，反應溶液在室溫下攪拌隔夜(24小時)，移除溶劑得到所需產物(99 mg，產率78%)，且不經純化即用於下一步驟。LCMS m/z 309.1(M+H)⁺滯留時間=1.25分鐘。

中間物135：(S)-(1-肼基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸第三丁酯

將肼(234 mg，7.31 mmol，1.5當量，於8 ml THF中)之溶液添加至(S)-2-(第三丁氧基羰基胺基)丙酸甲酯(1000 mg，4.88 mmol，1.0當量)中，於密封管中攪拌且回流(72℃)隔夜(18小時)，移除溶劑得到所需產物(880 mg，白色固體)，產率為84%。

中間物136：(S)-(1-(2-苯甲醯基肼基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸第三丁酯

向(S)-(1-肼基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸第三丁酯(293 mg，1.44 mmol，1.0當量，於3 ml DCM中)之溶液中添加苯甲醯氟(179 mg，1.44 mmol，於2 ml DCM中)，反應溶液在室溫下攪拌50分鐘，移除溶劑得到所需產物。¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 7.89-7.78(m,2H),7.54(t,J=7.4 Hz,1H),7.43(t,J=7.6 Hz,2H),5.32(b,1H),4.45(b,1H),1.46(s,9H)。

中間物137：(S)-(1-(5-苯基-1,3,4-噻二唑-2-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯

向(S)-(1-(2-苯甲醯基肼基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸第三丁酯(155 mg，0.5 mmol，1.0當量，於5 ml THF中)之 溶液中添加拉文森氏試劑(Lawesson's reagent)(36.4 mg，0.5 mmol，1.0當量)，反應混合物在回流下攪拌3小時，過濾反應混合物且移除溶劑，得到粗產物。矽膠管柱層析(含乙酸乙酯之庚烷，10%至50%)，得到(S)-(1-(5-苯基-1,3,4-噻二唑-2-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(114.6 mg，白色固體)，產率為70.7%。¹H NMR(400 MHz,CD₂Cl₂)δ 7.94-7.72(m,2H),7.52-7.26(m,3H),5.59(b,1H),5.11(b,1H),1.57(d,J=7.0 Hz,3H),1.34(s,9H)。

中間物138：(S)-1-(5-苯基-1,3,4-噻二唑-2-基)乙胺

向(S)-(1-(5-苯基-1,3,4-噻二唑-2-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(110 mg，0.4 mmol，於5 ml DCM中)之溶液中添加1 ml TFA，反應混合物在室溫下攪拌3小時，移除溶劑得到所需產物(52 mg)，產率為66.8%。LCMS m/z 206.0(M+H)⁺滯留時間=0.97分鐘。

中間物139：1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙酮

1-(5-溴嘧啶-2-基)乙酮(300 mg，1.49 mmol)、3-(三氟甲基)苯基酸(567 mg，2.98 mmol)、K₃PO₄(950 mg，4.48 mmol)、DavePhos配體[2-二環己基膦基-2'-(N,N-二甲胺基)聯苯](59 mg，0.15 mmol)及Pd(OAc)₂(17 mg，0.075 mmol)於6 mL甲苯中之混濁溶液在100℃下加熱1小時。將混合物冷卻至室溫，且經由矽藻土過濾。用30 mL EtOAc沖洗濾餅。將濾液傾倒入20 mL水中。分離各層，且用EtOAc(20 mL)進一步萃取水相。經合併之有機物以水(20 mL)及鹽水(20 mL)洗滌，經Na₂SO₄乾燥，過濾且直接濃縮於矽膠上。管柱層析(10%-100% EtOAc/庚烷)得到0.26 g呈棕褐色固體狀之1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙酮(V)。MS m/z 267.1(M+H)⁺。¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 9.16(s,2H),7.93-7.69(m,4H),2.87(s,3H)。

使用與關於中間物139之製備所述類似的方法來製備以下中間物。使用分析型RP-HPLC管柱=Inertsil C8管柱，3.0 μm，3.0×30 mm。管柱溫度=50℃。溶離劑=A：水(5 mM甲酸銨，2% ACN)；B：ACN。流動速率=2 mL/min。梯度=0分鐘5% B；5%至95% B，於1.70分鐘內；0.3分鐘95% B；2.1分鐘1% B。

中間物140：1-(5-(3,4-二氯苯基)嘧啶-2-基)乙酮

分析型RP-HPLC滯留時間=1.17分鐘。MS m/z 266.9(M+H)⁺。

中間物141：1-(5-(3-氟-2-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙酮

分析型RP-HPLC滯留時間=1.07分鐘。MS m/z 231.1(M+H)⁺。

中間物142：1-(5-(4-氟-2-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙酮

分析型RP-HPLC滯留時間=1.18分鐘。MS m/z 231.1(M+H)⁺。

中間物143：1-(5-(5-氟-2-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙酮

分析型RP-HPLC滯留時間=1.16分鐘。MS m/z 231.2(M+H)⁺。

中間物144：1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙酮

¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 9.09(s,2H),7.52-7.41(m,2H),7.24-7.16(m,1H),2.85(s,3H),2.41(d,J=2.0 Hz,3H)。分析型RP-HPLC滯留時間=1.20分鐘。MS m/z 231.0(M+H)⁺。

中間物145：1-(5-(2,3-二氯苯基)嘧啶-2-基)乙酮

分析型RP-HPLC滯留時間=1.15分鐘。MS m/z 267.9(M+H)⁺。

中間物146：1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)吡啶-2-基)乙酮

¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 8.88(dd,J=2.3,0.8 Hz,1H),8.13(dd,J=8.1,0.8 Hz,1H),7.98(dd,J=8.1,2.3 Hz,1H),7.50-7.39(m,2H),7.21-7.12(m,1H),2.78(s,3H),2.42-2.36(m,3H)。分析型RP-HPLC滯留時間=1.40分鐘。 MS m/z 230.8(M+H)⁺。

中間物147：1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙胺

將1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙酮(260 mg，0.977 mmol)、NH₄OAc(1.13 g，14.6 mmol)及NaBH₃CN(245 mg，3.91 mmol)溶解於8 mL無水乙醇(200 proof EtOH)中，且於微波裝置中在120℃下加熱5分鐘。濃縮混合物以移除EtOH。將粗物質溶解於30 ml水+25 mL EtOAc中。添加6 N NaOH直至水相pH值為約10。分離各層，且用EtOAc(25 ml)萃取水層。經合併之有機層以25 mL鹽水洗滌且用Na₂SO₄乾燥。過濾且在減壓下濃縮，得到262 mg粗製黃色油狀物，其不經進一步純化即繼續使用。分析型RP-HPLC滯留時間=0.90分鐘。(管柱=Inertsil C8管柱，3.0 μm，3.0×30 mm。管柱溫度=50℃。溶離劑=A：水(5 mM甲酸銨，2% ACN)；B：ACN。流動速率=2 mL/min。梯度 =0分鐘5% B；5%至95% B，於1.70分鐘內；0.3分鐘95% B；2.1分鐘1% B。)MS m/z 268.1(M+H)⁺。

使用與關於中間物147之製備所述類似的方法來製備以下中間物。

中間物148：1-(5-(3,4-二氯苯基)嘧啶-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC滯留時間=1.09分鐘(梯度：2%至98% B，於1.7分鐘內-流速1 mL/min。溶離劑A：水+3.75 mM NH₄Ac+2% ACN。管柱：Acquity CSH 1.7 μm 2.1×50 mm-50℃。)MS m/z 268.4(M+H)⁺。

中間物149：1-(5-(3-氟-2-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC滯留時間=0.99分鐘。(梯度：2%至98% B，於1.7分鐘內-流速1 mL/min。溶離劑A：水+3.75 mM NH₄Ac+2% ACN。管柱：Acquity CSH 1.7 μm 2.1×50 mm- 50℃。)MS m/z 232.4(M+H)⁺。

中間物150：1-(5-(4-氟-2-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC滯留時間=0.87分鐘。(管柱=Inertsil C8管柱，3.0 μm，3.0×30 mm。管柱溫度=50℃。溶離劑=A：水(5 mM甲酸銨，2% ACN)；B：ACN。流動速率=2 mL/min。梯度=0分鐘5% B；5%至95% B，於1.70分鐘內；0.3分鐘95% B；2.1分鐘1% B。)MS m/z 231.0(M)-。

中間物151：1-(5-(5-氟-2-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC滯留時間=0.79分鐘。(管柱=Inertsil C8管柱，3.0 μm，3.0×30 mm。管柱溫度=50℃。溶離劑=A：水(5 mM甲酸銨，2% ACN)；B：ACN。流動速率=2 mL/min。梯度=0分鐘5% B；5%至95%B，於1.70分鐘內；0.3分鐘95% B；2.1分鐘1% B。)MS m/z 232.0(M+H)⁺。

中間物152：1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC滯留時間=0.81分鐘。(管柱=Inertsil C8管柱，3.0 μm，3.0×30 mm。管柱溫度=50℃。溶離劑=A：水(5 mM甲酸銨，2% ACN)；B：ACN。流動速率=2 mL/min。梯度=0分鐘5% B；5%至95% B，於1.70分鐘內；0.3分鐘95% B；2.1分鐘1% B。)MS m/z 231.9(M+H)⁺。

中間物153：1-(5-(2,3-二氯苯基)嘧啶-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC滯留時間=1.01分鐘。(管柱=Inertsil C8管柱，3.0 μm，3.0×30 mm。管柱溫度=50℃。溶離劑=A：水(5 mM甲酸銨，2% ACN)；B：ACN。流動速率=2 mL/min。梯度=0分鐘5% B；5%至95% B，於1.70分鐘內；0.3分鐘95% B；2.1分鐘1% B。)MS m/z 269.0(M+H)⁺。

中間物154：1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)吡啶-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC滯留時間=0.92分鐘。(管柱=Inertsil C8管柱，3.0 μm，3.0×30 mm。管柱溫度=50℃。溶離劑=A：水(5 mM甲酸銨，2% ACN)；B：ACN。流動速率=2 mL/min。梯度=0分鐘5% B；5%至95% B，於1.70分鐘內；0.3分鐘95% B；2.1分鐘1% B。)MS m/z 230.9(M+H)⁺。

中間物155：1-(5-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙胺

步驟1：用碳酸鉀(829 mg，6.0 mmol)處理1-(5-氟嘧啶-2-基)乙酮(700 mg，5.0 mmol)及4-氟酚(616 mg，5.50 mmol)於6 mL DMF中之溶液且加熱至50℃持續3.5小時。將反應混合物傾倒入20 mL水中，且用EtOAc(2×20 mL)萃取。有機物以各20 mL水、鹽水洗滌，且經Na₂SO₄乾燥。過濾混合物且於矽膠上濃縮。管柱層析(10%-100% EtOAc/庚烷)得到295 mg(25%)呈白色固體狀之1-(5-(4-氟苯氧基) 嘧啶-2-基)乙酮，其直接用於後續步驟中。MS m/z 233.2(M+H)⁺。¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 8.55(s,2H),7.23-7.07(m,4H),2.78(s,3H)。

步驟2：將1-(5-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙酮(290 mg，1.25 mmol)、NH₄OAc(1.9 g，24.6 mmol)及NaBH₃CN(314 mg，5.00 mmol)溶解於20 mL無水乙醇中，且於微波裝置中在130℃下加熱3分鐘。濃縮混合物以移除EtOH。將粗物質溶解於30 ml水+25 mL EtOAc中。添加6 N NaOH直至水相pH值為約10。分離各層，且用EtOAc(25 ml)萃取水層。經合併之有機層以25 mL鹽水洗滌且用Na₂SO₄乾燥。過濾且在減壓下濃縮，得到275 mg粗製棕褐色油狀物，其不經進一步純化即繼續使用。主要產物分析型RP-HPLC滯留時間=1.26分鐘。(管柱=Inertsil C8管柱，3.0 μm，3.0×30 mm。管柱溫度=50℃。溶離劑=A：水(5 mM甲酸銨，2% ACN)；B：ACN。流動速率=2 mL/min。梯度=0分鐘5% B；5%至95% B，於1.70分鐘內；0.3分鐘95% B；2.1分鐘1% B。)MS m/z 234.1(M+H)⁺。

使用與關於中間物155之製備所述類似的方法來製備以下中間物。

中間物156：1-(5-(2,4-二氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC滯留時間=0.81分鐘。(管柱=Inertsil C8管柱，3.0 μm，3.0×30 mm。管柱溫度=50℃。溶離劑=A：水(5 mM甲酸銨，2% ACN)；B：ACN。流動速率=2 mL/min。梯度=0分鐘5% B；5%至95% B，於1.70分鐘內；0.3分鐘95% B；2.1分鐘1% B。)MS m/z 252.1(M+H)⁺。

中間物157：1-(5-(5-溴吡啶-3-基氧基)嘧啶-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC滯留時間=1.29分鐘。(管柱=Inertsil C8管柱，3.0 μm，3.0×30 mm。管柱溫度=50℃。溶離劑=A：水(5 mM甲酸銨，2% ACN)；B：ACN。流動速率=2 mL/min。梯度=0分鐘5% B；5%至95% B，於1.70分鐘內；0.3分鐘95% B；2.1分鐘1% B。)MS m/z 297.3(M+H)⁺。

中間物158：1-(5-(3-氯-4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC滯留時間=1.40分鐘。(管柱=Inertsil C8管柱，3.0 μm，3.0×30 mm。管柱溫度=50℃。溶離劑=A：水(5 mM甲酸銨，2% ACN)；B：ACN。流動速率=2 mL/min。梯度=0分鐘5% B；5%至95% B，於1.70分鐘內； 0.3分鐘95% B；2.1分鐘1% B。)MS m/z 268.0(M+H)⁺。

中間物159：1-(5-(吡啶-3-基氧基)嘧啶-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC滯留時間=1.21分鐘。(管柱=Inertsil C8管柱，3.0 μm，3.0×30 mm。管柱溫度=50℃。溶離劑=A：水(5 mM甲酸銨，2% ACN)；B：ACN。流動速率=2 mL/min。梯度=0分鐘5% B；5%至95% B，於1.70分鐘內；0.3分鐘95% B；2.1分鐘1% B。)MS m/z 218.4(M+H)⁺。

中間物160：1-(5-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基氧基)嘧啶-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC滯留時間=1.16分鐘。(管柱=Inertsil C8管柱，3.0 μm，3.0×30 mm。管柱溫度=50℃。溶離劑=A：水(5 mM甲酸銨，2% ACN)；B：ACN。流動速率=2 mL/min。梯度=0分鐘5% B；5%至95% B，於1.70分鐘內；0.3分鐘95% B；2.1分鐘1% B。)MS m/z 285.4(M+H)⁺。

中間物161：4-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-甲腈

在N₂氛圍下將4-氯嘧啶-2-甲腈(0.63 g，4.51 mmol)及4-氟酚(0.51 g，4.51 mmol)於5 mL DMF中之溶液冷卻至0℃。緩慢地添加NaH(0.217 g的60%懸浮液，5.42 mmol)。觀測到鼓泡放熱。內部溫度保持低於5℃。15分鐘後，移除冷浴。使反應混合物溫至室溫且攪拌1小時。反應混合物以水(40 mL)稀釋且用(3×25 mL)EtOAc萃取。用各40 mL水及鹽水洗滌有機層。經Na₂SO₄乾燥，且在真空中於矽膠上濃縮。管柱層析(EtOAc/庚烷10%至100%梯度)得到0.72 g(74%)呈結晶白色固體狀之(4-氟苯氧基)嘧啶-2-甲腈。分析型RP-HPLC滯留時間=1.38分鐘，梯度：2%至98% B，於1.7分鐘內-流速1 mL/min。溶離劑A：水+3.75 mM NH₄Ac+2% ACN。管柱：Acquity CSH 1.7 μm 2.1×50 mm-50℃。MS m/z 216.1(M+H)⁺。

中間物162：1-(4-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙酮

在N₂氛圍下將4-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-甲腈(450 mg，2.09 mmol)懸浮於12 mL無水***中。將容器冷卻至0℃。經5分鐘添加MeMgBr(3.1 mL的1.0 M丁醚溶液，3.10 mmol)。將黃綠色懸浮液攪拌30分鐘，隨後用50 mL飽和NH₄Cl溶液淬滅。用濃鹽酸調節pH值至約6。用(2×40 mL)EtOAc萃取混合物。用30 mL鹽水洗滌有機物，且經Na₂SO₄乾燥。過濾且於矽膠上濃縮。管柱層析(10%-100% EtOAc之庚烷溶液)得到157 mg(32%)呈黃色油狀之1-(4-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙酮。分析型RP-HPLC滯留時間=1.44分鐘。(管柱=Inertsil C8管柱，3.0 μm，3.0×30 mm。管柱溫度=50℃。溶離劑=A：水(5 mM甲酸銨，2% ACN)；B：ACN。流動速率=2 mL/min。梯度=0分鐘5% B；5%至95% B，於1.70分鐘內；0.3分鐘95% B；2.1分鐘1% B。)MS m/z 233.2(M+H)⁺。

中間物163：1-(4-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙醇

將1-(4-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙酮(0.150 g，0.646 mmol)溶解於2.5 mL 4：1 MeOH：DCM中，且冷卻至0℃。添加NaBH₄(49 mg，1.30 mmol)。觀測到起泡(Fizzing)。10分鐘後，移除冷浴，且將反應物攪拌1小時。在真空中移 除溶劑。將白色殘餘物溶解於10 mL水中，且用(2×10 mL)EtOAc萃取。用10 mL鹽水洗滌。經Na₂SO₄乾燥。過濾且濃縮，得到143 mg(95%)呈無色油狀之1-(4-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙醇。分析型RP-HPLC滯留時間=1.38分鐘。(管柱=Inertsil C8管柱，3.0 μm，3.0×30 mm。管柱溫度=50℃。溶離劑=A：水(5 mM甲酸銨，2% ACN)；B：ACN。流動速率=2 mL/min。梯度=0分鐘5% B；5%至95% B，於1.70分鐘內；0.3分鐘95% B；2.1分鐘1% B。)MS m/z 235.1(M+H)⁺。

中間物164：2-(1-疊氮基乙基)-4-(4-氟苯氧基)嘧啶

在N₂氛圍下，將1-(4-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙醇(140 mg，0.598 mmol)溶解於3 mL無水DCM中。添加三乙胺(0.175 mL，1.26 mmol)，且將混合物冷卻至0℃。添加MsCl(0.070 mL，0.897 mmol)，且攪拌混合物15分鐘。維持0℃，在N₂流下移除DCM溶劑。將殘餘物溶解於2 mL無水DMF中。添加NaN₃(78 mg，1.19 mmol)，且在室溫下攪拌反應物24小時。將混合物傾倒入20 mL水中，且用20 mL EtOAc萃取。有機層以20 mL鹽水洗滌且經Na₂SO₄乾燥。 過濾且濃縮，得到120 mg(77%)呈黃色油狀之2-(1-疊氮基乙基)-4-(4-氟苯氧基)嘧啶。¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 8.49(d,J=5.7 Hz,1H),7.16-6.90(m,4H),6.70(d,J=5.7 Hz,1H),4.34(q,J=6.9 Hz,1H),1.55-1.46(m,3H)。

中間物165：1-(4-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙胺

將2-(1-疊氮基乙基)-4-(4-氟苯氧基)嘧啶(120 mg，0.463 mmol)溶解於2 mL純EtOH中。添加24.6 mg(0.023 mmol)的10%鈀/碳催化劑。在劇烈攪拌下，將反應小瓶抽空且用H₂吹掃3次。向反應容器裝配H₂氣球且攪拌2小時。經由矽藻土過濾混合物且在真空中濃縮，得到75 mg(69%)呈棕色油狀之1-(4-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙胺。¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 8.45(d,J=5.7 Hz,1H),7.13-6.92(m,4H),6.59(d,J=5.7 Hz,1H),4.00(q,J=6.8 Hz,1H),1.34-1.30(m,3H)。分析型RP-HPLC滯留時間=1.18分鐘。(管柱=Inertsil C8管柱，3.0 μm，3.0×30 mm。管柱溫度=50℃。溶離劑=A：水(5 mM甲酸銨，2% ACN)；B：ACN。流動速率=2 mL/min。梯度=0分鐘5% B；5%至95% B，於1.70分鐘內；0.3分鐘95% B；2.1分鐘1% B。)MS m/z 234.2(M+H)⁺。

使用與關於中間物161至165之製備所述類似的方法來製備以下中間物。

中間物166：1-(5-(4-氟苯氧基)吡啶-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC滯留時間=0.91分鐘。(管柱=Inertsil C8管柱，3.0 μm，3.0×30 mm。管柱溫度=50℃。溶離劑=A：水(5 mM甲酸銨，2% ACN)；B：ACN。流動速率=2 mL/min。梯度=0分鐘5% B；5%至95% B，於1.70分鐘內；0.3分鐘95% B；2.1分鐘1% B。)MS m/z 233.1(M+H)⁺。

中間物167：1-(5-(4-氟苯氧基)吡嗪-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC滯留時間=1.39分鐘。(管柱=Inertsil C8管柱，3.0 μm，3.0×30 mm。管柱溫度=50℃。溶離劑=A：水(5 mM甲酸銨，2% ACN)；B：ACN。流動速率=2 mL/min。梯度=0分鐘5% B；5%至95% B，於1.70分鐘內；0.3分鐘95% B；2.1分鐘1% B。)MS m/z 217.1(主要片段+H)⁺。

中間物168：1-(2-(4-氟苯氧基)嘧啶-5-基)乙胺

分析型RP-HPLC滯留時間=1.20分鐘。(管柱=Inertsil C8管柱，3.0 μm，3.0×30 mm。管柱溫度=50℃。溶離劑=A：水(5 mM甲酸銨，2% ACN)；B：ACN。流動速率=2 mL/min。梯度=0分鐘5% B；5%至95% B，於1.70分鐘內；0.3分鐘95% B；2.1分鐘1% B。)MS m/z 233.9(M+H)⁺。

中間物169：(S)-4-異丙基-3-[2-((S)-1-甲基-丙-2-炔基胺基)-嘧啶-4-基]-唑啶-2-酮

向化合物(S)-3-(2-氯-嘧啶-4-基)-4-異丙基-唑啶-2-酮(1.03 g，4.3 mmol)於DMSO(12 mL)中之溶液中添加甲基-丙-2-炔基胺鹽酸鹽(450 mg，4.3 mmol)及二異丙基乙胺(2.2 mL，12.6 mmol)。將反應物加熱至110℃持續18小時。反應混合物以EtOAc(50 mL)稀釋且用水(25 mL)及鹽水(25 mL)洗滌。有機層經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。利用矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至75%)純化粗物質，得到(S)-4-異丙基-3-[2-((S)-1-甲基-丙-2-炔基胺基)-嘧啶-4-基]-唑啶-2-酮(360 mg)，產率為31%。

LC-MS m/z：275.1(M-Boc)⁺；滯留時間：1.33分鐘。

中間物170：(S)-4,6-二氟-N-(1-苯基乙基)嘧啶-2-胺

利用冰浴將2,4,6-三氟嘧啶(128.4 mg，0.96 mmol)及異丙基乙胺(0.50 mL，2.9 mmol，3當量)於二烷(5 mL)中之溶液冷卻至0℃。30分鐘後，移除冰浴，且使反應物溫至室溫。攪拌隔夜後，將反應物濃縮成淺棕色油狀物且藉由矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0%至100%)純化，得到(S)-4,6-二氟-N-(1-苯基乙基)嘧啶-2-胺(151.2 mg，白色固體)，產率為45%。¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 7.35-7.40(m,2H),7.29-7.34(m,2H),7.20-7.26(m,1H),5.84(s,1H),5.08(q,J=6.91 Hz,1H),1.52(d,J=7.04 Hz,3H)；LCMS m/z 236.1(M+H)⁺，滯留時間0.95分鐘。

中間物171：(S)-4,6-二氟-N-(1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)嘧啶-2-胺

藉由與關於中間物170之製備所述類似的方法來製備中間物171。¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)7.58(t,J=7.63 Hz, 1H),7.34-7.48(m,2H),5.84(br.s.,1H),5.35(q,J=6.91 Hz,1H),1.54(d,J=7.04 Hz,3H)。MS m/z 321.9(M+H)⁺，滯留時間1.11分鐘。

中間物172：3-羥基-2-甲基丁-2-基胺基甲酸第三丁酯

步驟1：製備1-(甲氧基(甲基)胺基)-2-甲基-1-側氧基丙-2-基胺基甲酸第三丁酯

將2-(第三丁氧基羰基胺基)-2-甲基丙酸(6.62 g，32.6 mmol)、O,N-二甲基羥基胺鹽酸鹽(3.50 g，35.8 mmol)及HATU(14.86 g，39.1 mmol)組合於DMF(100 mL)中。向此溶液中添加胡氏鹼(17.07 mL，98 mmol)。將反應物攪拌隔夜(17小時)。隨後在真空下濃縮反應物且殘餘物以EtOAc(300 mL)稀釋且用水(2×80 mL)洗。有機層以鹽水洗，乾燥(Na₂SO₄)且在減壓下濃縮。經由矽膠急驟層析(10%-50% EtOAc-己烷)純化殘餘物，得到呈白色固體狀之所需產物(6.36 g)。LCMS m/z 247.2(M+H)⁺，滯留時間0.61分鐘。

步驟2：製備2-甲基-3-側氧基丁-2-基胺基甲酸第三丁酯

向1-(甲氧基(甲基)胺基)-2-甲基-1-側氧基丙-2-基胺基甲酸第三丁酯(4.26 g，17.30 mmol)於THF(100 mL)中在-70℃之溶液中逐滴添加甲基鋰(32.4 mL，51.9 mmol)。用-40℃浴置換冷浴且將反應物攪拌4小時。隨後謹慎地添加 飽和NH₄Cl溶液(10 mL)以淬滅反應。隨後使反應混合物溫至室溫，且用EtOAc(100 mL)及水(50 mL)稀釋。分離各相且用EtOAc(2×100 mL)萃取水層。合併之有機物隨後乾燥(Na₂SO₄)且在減壓下濃縮。經由矽膠急驟層析(10%-50% EtOAc-己烷)純化殘餘物，得到呈白色固體狀之所需產物(2.36 g)。LCMS m/z 224.2(M+Na)⁺，滯留時間0.7分鐘。

步驟3：製備3-羥基-2-甲基丁-2-基胺基甲酸第三丁酯

向2-甲基-3-側氧基丁-2-基胺基甲酸第三丁酯(2.36 g，11.73 mmol)於MeOH(30 mL)中在0℃之溶液中逐份添加NaBH₄(0.887 g，23.45 mmol)。移除冷浴且將反應物攪拌1小時。隨後謹慎地添加HCl溶液(1 M，0.2 mL)以淬滅反應。接著濃縮反應混合物且用EtOAc(50 mL)及水(10 mL)稀釋。分離各相且用EtOAc(2×20 mL)萃取水層。合併之有機物隨後乾燥(Na₂SO₄)且在減壓下濃縮。經由矽膠急驟層析(10%-50% EtOAc-己烷)純化殘餘物，得到呈白色固體狀之所需產物(2.12 g)。LCMS m/z 204.1(M+H)⁺，滯留時間0.69分鐘。

中間物173：((3S)-2-羥基-4-甲基戊-3-基)胺基甲酸第三丁酯

步驟1：製備1-(甲氧基(甲基)胺基)-2-甲基-1-側氧基丙-2-基胺基甲酸第三丁酯

在0℃下向(S)-2-(第三丁氧基羰基胺基)-3-甲基丁酸(5.86 g，27.0 mmol)於DCM(100 mL)中之溶液中逐份添加二(1H-咪唑-1-基)甲酮(4.81 g，29.7 mmol)。移除冷浴且在20℃下攪拌反應物30分鐘。隨後添加O,N-二甲基羥基胺鹽酸鹽(3.16 g，32.4 mmol)且接著緩慢添加三乙胺(3.28 g，32.4 mmol)。反應混合物在20℃下攪拌隔夜(18小時)，且用DCM(200 mL)稀釋並用HCl(1 M，2×50 mL)及飽和NaHCO₃溶液(2×50 mL)、H₂O(50 mL)及鹽水(50 mL)洗滌。有機物隨後經乾燥(Na₂SO₄)且在減壓下濃縮，得到粗產物(6.61 g)。LCMS m/z 261.2(M+H)⁺，滯留時間0.77分鐘。

步驟2：製備(S)-2-甲基-4-側氧基戊-3-基胺基甲酸第三丁酯

在-70℃下向(S)-1-(甲氧基(甲基)胺基)-3-甲基-1-側氧基丁-2-基胺基甲酸第三丁酯(4.23 g，16.25 mmol)於THF(100 mL)中之溶液中逐滴添加甲基鋰(1.071 g，48.7 mmol)。用-40℃浴(MeCN於乾冰中)置換移除冷浴且攪拌反應物4小時。隨後謹慎地添加飽和NH₄Cl溶液(10 mL)以淬滅反應。隨後使反應混合物溫至室溫，且用EtOAc(100 mL)及水(50 mL)稀釋。分離各相且用EtOAc(2×100 mL)萃取水層。經合併之有機物隨後經乾燥(Na₂SO₄)且在減壓下濃縮。經由矽膠急驟層析(10-50% EtOAc-己烷)純化殘餘物，得到呈白色固體狀之所需產物(3.01 g)。LCMS m/z 238.2(M+Na)⁺，滯留時間0.78分鐘。

步驟3：製備3-羥基-2-甲基丁-2-基胺基甲酸第三丁酯

在0℃下向(S)-2-甲基-4-側氧基戊-3-基胺基甲酸第三丁酯(2.65 g，12.31 mmol)於MeOH(30 mL)中之溶液中逐份添加NaBH₄(0.931 g，24.62 mmol)。移除冷浴且攪拌反應物1小時。隨後謹慎地添加HCl溶液(1 M，0.3 mL)以淬滅反應。隨後濃縮反應混合物且用EtOAc(50 mL)及水(10 mL)稀釋。分離各相且用EtOAc(2×20 mL)萃取水層。經合併之有機物隨後經乾燥(Na₂SO₄)且濃縮。經由矽膠急驟層析(10-50% EtOAc-己烷)純化殘餘物，得到呈白色固體狀之所需產物(2.05 g)。LCMS m/z 240.2(M+Na)⁺，滯留時間0.69分鐘。

中間物174：(S)-(1-環丙基-2-羥基乙基)胺基甲酸第三丁酯

步驟1：製備1-(甲氧基(甲基)胺基)-2-甲基-1-側氧基丙-2-基胺基甲酸第三丁酯

向(S)-2-(第三丁氧基羰基胺基)-2-環丙基乙酸(5.01 g，23.28 mmol)於MeOH(50 mL)中之溶液中逐滴添加三甲基矽烷基重氮甲烷(18.62 ml，37.2 mmol)直至無氣泡。將反應物攪拌30分鐘且用數滴HOAc(0.1 mL)淬滅。隨後在減壓下濃縮反應混合物，得到呈淺棕褐色油狀之粗產物(5.35 g)。LCMS m/z 252.1(M+Na)⁺，滯留時間0.77分鐘。

步驟2：製備(S)-(1-環丙基-2-羥基乙基)胺基甲酸第三丁酯

向(S)-2-(第三丁氧基羰基胺基)-2-環丙基乙酸甲酯(5.35 g，23.33 mmol)於Et₂O(100 ml)中之溶液中添加LiBH₄(0.762 g，35.0 mmol)，接著逐滴添加甲醇(1.420 ml，35.0 mmol)。反應物在40℃下回流一小時。隨後將反應混合物冷卻至0℃，且用HCl(1 M)淬滅直至水層達到pH=2。分離各相且用DCM(3×100 mL)萃取水層。有機物隨後經乾燥(Na₂SO₄)且在減壓下濃縮，得到最終粗產物(4.16 g)。LCMS m/z 224.1(M+Na)⁺，滯留時間0.62分鐘。

中間物175：(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(1-甲基環丙基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺

步驟1

向具有攪拌棒之經烘乾之圓底燒瓶中添加4-溴-2-氟苯甲醛(5 g，24.6 mmol)、(R)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(3.28 g，27.1 mmol)及DCE(49 mL)。隨後向此混合物中添加硫酸銅(II)(5.90 g，36.9 mmol)。反應混合物於經預熱油浴中加熱至55℃持續18小時。經由矽藻土墊過濾反應混合物，用CH₂Cl₂洗滌固體。濃縮濾液，得到黏性黃色油狀之(R,E)-N-(4-溴-2-氟亞苄基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(7.73 g，25.2 mmol，103%產率)。¹H NMR(400 MHz,CDCL₃)δ 1.27(s,9 H)7.31-7.42(m,2 H)7.87(t,J=7.87 Hz,1 H) 8.83(s,1 H)。LCMS m/z 307.9(M+H)⁺，滯留時間1.01分鐘。

步驟2

在氮氣下向冷卻至0℃(水/冰浴)之(R,E)-N-(4-溴-2-氟亞苄基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(7.73 g，25.2 mmol)於CH₂Cl₂(252 mL)中之溶液中添加含3 M溴化甲基鎂(33.7 mL，101 mmol)之Et₂O。使反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，隨後使其逐漸溫至室溫且在室溫下攪拌1小時。將反應混合物冷卻至0℃，隨後藉由緩慢添加NH₄Cl飽和溶液來淬滅。用EtOAc萃取水性混合物。將有機相合併，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na₂SO₄)，過濾且濃縮於矽膠上。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷40%至100%)得到呈白色結晶固體狀之(R)-N-((S)-1-(4-溴-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(4.93 g，15.3 mmol，60%產率)。¹H NMR(400 MHz,CDCL₃)δ 1.20(s,9 H)1.56(d,J=6.70 Hz,3 H)3.34(br.s.,1 H)4.77-4.87(m,1 H)7.19-7.31(m,3 H)。LCMS m/z 324.0(M+H)⁺，滯留時間0.90分鐘。

步驟3

向具有攪拌棒之微波小瓶中添加(R)-N-((S)-1-(4-溴-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1 g，3.10 mmol)、異丙烯基酸頻哪醇酯(1.51 ml，8.07 mmol)、DME(8 ml)、碳酸鈉(7.76 ml，15.5 mmol)(2.0 M水溶液)及PdCl₂(dppf).CH₂Cl₂加合物(0.127 g，0.155 mmol)。將容器蓋封且藉由微波照射在100℃下加熱20分鐘。用NH₄Cl飽和溶液稀釋反 應混合物。用EtOAc萃取水性混合物。將有機相合併，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na₂SO₄)，過濾且濃縮於矽膠上。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷50%至100%)得到呈淺棕色結晶狀之(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(丙-1-烯-2-基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(830 mg，2.93 mmol，94%產率)。¹H NMR(400 MHz,DMSO)δ 1.08-1.11(m,9 H)1.47(d,J=6.80 Hz,3 H)2.09(d,J=0.54 Hz,3 H)4.61-4.71(m,1 H)5.14(t,J=1.32 Hz,1 H)5.43(d,J=5.58 Hz,1 H)5.49(s,1 H)7.24-7.30(m,1 H)7.31-7.36(m,1 H)7.41-7.47(m,1 H)。LCMS m/z 284.0(M+H)⁺，滯留時間0.93分鐘。

步驟4

在氬氣下在0℃下向含有於DCE(13 mL)中之(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(丙-1-烯-2-基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(0.37 g，1.31 mmol)的圓底燒瓶中添加二乙基鋅(1.0 M於己烷中)(13.1 mL，13.1 mmol)，接著逐滴添加氯碘甲烷(0.95 mL，13.1 mmol)。使反應混合物溫至室溫且攪拌1小時。使反應混合物冷卻至0℃，此時進行二乙基鋅(1.0 M於己烷中)(13.1 mL，13.1 mmol)之第二次添加，接著添加氯碘甲烷(0.95 mL，13.1 mmol)。使反應混合物溫至室溫且在氬氣下攪拌18小時。於冰浴中將反應混合物冷卻至0℃且向冷反應混合物中緩慢地添加NH₄Cl飽和溶液。用EtOAc萃取水性混合物。將有機相合併，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na₂SO₄)，過濾且濃縮於矽膠上。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷20%至100%)得到白色結晶狀之(R)-N-((S)-1- (2-氟-4-(1-甲基環丙基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(89 mg，0.299 mmol，22.92%產率)。¹H NMR(400 MHz,CDCL₃)δ 0.75-0.79(m,2 H)0.85-0.90(m,2 H)1.20(s,9 H)1.55(s,3 H)1.57(d,J=6.80 Hz,1 H)3.34(d,J=5.23 Hz,1 H)4.75-4.85(m,1 H)6.90(dd,J=12.30,1.74 Hz,1 H)6.97(dd,J=8.05,1.78 Hz,1H)7.22(t,J=7.97 Hz,1 H)。LCMS m/z 298.1(M+H)⁺，滯留時間1.01分鐘。

表4k中之中間物係藉由與關於中間物175之製備所述類似的方法來製備。

中間物178：(R)-N-((S)-1-(4-(1-乙氧基環丙基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺

步驟1

向具有攪拌棒之微波小瓶中添加(R)-N-((S)-1-(4-溴-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(500 mg，1.55 mmol)，接著添加三丁基(1-乙氧基乙烯基)錫烷(1.12 g，3.10 mmol)、三乙胺(0.65 ml，4.65 mmol)及PdCl₂(dppf).CH₂Cl₂加合物(63 mg，0.078 mmol)。向固體中添加甲苯(10 ml)。將小瓶蓋封且於經預熱之沙浴中在100℃下加熱1小時。將反應混合物裝載於矽膠管柱上。矽膠管柱層析(MeOH/CH₂Cl₂ 0至10%，含1% NH₄OH緩衝劑)得到呈棕色黏性油狀之(R)-N-((S)-1-(4-(1-乙氧基乙烯基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(498 mg，1.59 mmol，102%產率)，其在靜置後結晶。¹H NMR(400 MHz,CDCL₃)δ 1.20(s,9 H)1.43(t,J=6.97 Hz,3 H)1.58(d,J=6.75 Hz,3 H)3.35(d,J=4.74 Hz,1 H)3.92(q,J=6.96 Hz,2H)4.23(d,J=2.79 Hz,1 H)4.65(d,J=2.79 Hz,1 H)4.79-4.89(m,1 H)7.16-7.20(m,1 H)7.29-7.34(m,1 H)7.39(dd,J=8.07,1.66 Hz,1 H)。

步驟2

在0℃下在氬氣下向含有於甲苯(15 mL)中之(R)-N-((S)- 1-(4-(1-乙氧基乙烯基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(0.49 g，1.56 mmol)及氯碘甲烷(1.14 mL，15.6 mmol)的圓底燒瓶中添加二乙基鋅(1.0 M於己烷中)(15.6 mL，15.6 mmol)。使反應混合物溫至室溫且攪拌1小時。於冰浴中將反應混合物冷卻至0℃且向冷反應混合物中緩慢地添加NH₄Cl飽和溶液。用EtOAc萃取水性混合物。將有機相合併，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na₂SO₄)，過濾且濃縮於矽膠上。矽膠管柱層析(MeOH/CH₂Cl₂ 0至10%)得到呈黏性棕色油狀之(R)-N-((S)-1-(4-(1-乙氧基環丙基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(145 mg，0.44 mmol，28%產率)。¹H NMR(300 MHz,CDCL₃)δ 0.93-0.99(m,2 H)1.14-1.20(m,3 H)1.21(s,9 H)1.22-1.27(m,2 H)1.57-1.61(m,4 H)3.35(d,J=4.98 Hz,1 H)3.45(q,J=7.07 Hz,2 H)4.77-4.87(m,1 H)6.98(dd,J=7.58,1.43 Hz,3 H)7.00-7.03(m,4 H)7.28-7.32(m,1 H)。LCMS m/z 328.1(M+H)⁺，滯留時間0.95分鐘。

表4n中之中間物係藉由與關於中間物178之製備所述類似的方法來製備。

中間物182：(R)-N-((S)-1-(4-(1-氰基環丙基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺

步驟1

向具有攪拌棒之微波小瓶中添加(R)-N-((S)-1-(4-溴-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(300 mg，0.93 mmol)、4-異唑酸頻哪醇酯(218 mg，1.12 mmol)、PdCl₂(dppf).CH₂Cl₂加合物(76 mg，0.09 mmol)、氟化鉀(2.7 mL，1.0 M於水中，2.79 mmol)且最終添加DMSO(9 mL)。藉由用氮氣鼓泡(3分鐘)使反應混合物脫氣且將小瓶蓋封並於預熱油浴中在130℃下加熱18小時。反應混合物以NH₄Cl飽和溶液稀釋且用EtOAc萃取。將有機相合併， 用水、鹽水洗滌，乾燥(Na₂SO₄)，過濾且濃縮於矽膠上。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷40%至100%)得到呈黏性棕色油狀之(R)-N-((S)-1-(4-(氰基甲基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(136 mg，0.48 mmol，52%產率)。¹H NMR(400 MHz,CDCL₃)δ 1.19(s,9 H)1.57(d,J=6.80 Hz,3 H)3.39(d,J=4.35 Hz,1 H)3.74(s,2 H)4.81-4.88(m,1 H)7.04(d,J=10.66 Hz,1H)7.11(d,J=7.97 Hz,1H)7.38(t,J=7.73 Hz,1 H)。LCMS m/z 283.0(M+H)⁺，滯留時間0.72分鐘。

步驟2

向含有(R)-N-((S)-1-(4-(氰基甲基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(86 mg，0.31 mmol)及攪拌棒之閃爍小瓶中添加甲苯(2 mL)。隨後向此混合物中添加溴化四丁銨(19 mg，0.06 mmol)，接著添加NaOH(1.52 ml，1.0 M(水溶液)，1.52 mmol)及1,2-二溴乙烷(0.11 ml，1.22 mmol)。將小瓶蓋封且在室溫下劇烈攪拌反應混合物18小時。隨之添加1,2-二溴乙烷(0.11 ml，1.22 mmol)及溴化四丁銨(19 mg，0.06 mmol)且使反應混合物再攪拌18小時。第三次添加1,2-二溴乙烷(0.11 ml，1.22 mmol)且於預熱鋁盤中再加熱反應混合物至50℃持續18小時。用NH₄Cl飽和溶液淬滅反應混合物且用EtOAc萃取水性混合物。將有機物合併且用水、鹽水洗滌兩次，乾燥(Na₂SO₄)，過濾且濃縮。使粗物質穿過使用10% MeOH：90% DCM之小型矽膠塞以溶離產物。濃縮溶液，得到黏性橙色油狀之(R)-N-((S)-1-(4-(1-氰 基環丙基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(23 mg，0.08 mmol，24%產率)。¹H NMR(400 MHz,CDCL₃)δ 1.20(s,9 H)1.38-1.44(m,2 H)1.56(d,J=6.75 Hz,3 H)1.73-1.79(m,2 H)3.37(d,J=4.45 Hz,1 H)4.78-4.88(m,1 H)6.94(dd,J=11.35,1.91 Hz,1 H)7.09(dd,J=8.07,1.91 Hz,1 H)7.34(t,J=7.90 Hz,1 H)。LCMS m/z 309.2(M+H)⁺，滯留時間0.83分鐘。

中間物183：(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-異丙基苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺

向含有(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(丙-1-烯-2-基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(204 mg，0.72 mmol)及攪拌棒之圓底燒瓶中添加MeOH(7.2 mL)。向此溶液中添加於MeOH(1 mL)中之鈀/碳(77 mg，10%，0.07 mmol)。***氫氣氛圍且所得反應混合物在室溫下攪拌18小時，此時再添加於MeOH(5 mL)中之鈀/碳(300 mg)。再次***氫氣氛圍且使反應混合物再在室溫下攪拌18小時。經由針筒過濾器過濾反應混合物且濃縮，得到淺棕色黏性油狀之(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-異丙基苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(149 mg，0.52 mmol，73%產率)，其在靜置後結晶。¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 1.20(s,9 H)1.24(d,J=5.87 Hz,6 H) 1.58(d,J=6.70 Hz,3 H)2.89(dt,J=13.79,6.90 Hz,1 H)3.35(d,J=5.04 Hz,1 H)4.76-4.85(m,1 H)6.90(dd,J=12.03,1.52 Hz,1 H)6.98(dd,J=7.90,1.54 Hz,1 H)7.24(t,J=7.97 Hz,1 H)。LCMS m/z 286.3(M+H)⁺，滯留時間1.01分鐘。

中間物184：(R)-N-((S)-1-(4-環丙基-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺

向含有攪拌棒之微波小瓶中添加(R)-N-((S)-1-(4-溴-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(100 mg，0.31 mmol)，接著添加環丙基三氟硼酸鉀(459 mg，3.10 mmol)、碳酸銫(506 mg，1.55 mmol)及Pd(OAc)₂(7 mg，0.03 mmol)及二(1-金剛烷基)-正丁基膦(22 mg，0.06 mmol)、甲苯(2.6 mL)且最終添加水(0.5 mL)。將小瓶蓋封且藉由微波照射在100℃下加熱20分鐘，接著於預熱鋁盤中在100℃下加熱18小時。用NH₄Cl飽和溶液稀釋反應混合物。用EtOAc萃取水性混合物。將有機相合併，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na₂SO₄)，過濾且濃縮，得到黃色結晶狀之(R)-N-((S)-1-(4-環丙基-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(116 mg，0.33 mmol，106%產率)。LCMS m/z 284.0(M+H)⁺，滯留時間0.90分鐘。

中間物185：(R)-N-((S)-1-(6-環丙基吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺

用與獲取中間物184所用類似的方法來製備(R)-N-((S)-1-(6-環丙基吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺。MS m/z 267.1(M+H)⁺，滯留時間0.44分鐘。

中間物186：(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺

向兩個具有攪拌棒之微波小瓶中添加(R)-N-((S)-1-(4-溴-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.5 g，4.65 mmol)、1-甲基-4-1H-吡唑酸頻哪醇酯(2.91 g，13.9 mmol)、DME(20 mL)、碳酸鈉(11.6 mL，23.3 mmol，2.0 M水溶液)及PdCl₂(dppf).CH₂Cl₂加合物(190 mg，0.23 mmol)，分配在兩個小瓶之間。分別將小瓶蓋封且藉由微波照射在100℃下加熱20分鐘。將反應混合物合併，用NH₄Cl飽和溶液及EtOAc稀釋。分配各相且用EtOAc萃取水 相。將有機相合併，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na₂SO₄)，過濾且濃縮於矽膠上。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷40%至100%)得到橙色結晶狀之(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.07 g，3.31 mmol，71%產率)。¹H NMR(400 MHz,CDCL₃)δ ppm 1.21(s,9 H)1.60(d,J=6.80 Hz,3 H)3.36(d,J=4.25 Hz,1 H)3.96(s,3 H)4.79-4.91(m,1 H)7.13(dd,J=11.69,1.61 Hz,1 H)7.23(dd,J=8.00,1.64 Hz,1 H)7.30-7.37(m,1 H)7.60(s,1 H)7.74(s,1 H)。LCMS m/z 324.0(M+H)⁺，滯留時間0.74分鐘。

表4q中之中間物係藉由與關於中間物186之製備所述類似的方法來製備。

中間物190：(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺

步驟1

向具有攪拌棒之經烘乾之圓底燒瓶中添加2-氟-4-(三氟甲基)苯甲醛(5 g，26.0 mmol)、(R)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(3.47 g，28.6 mmol)及DCE(52 mL)。隨後向此混合物中添加硫酸銅(II)(6.23 g，39.0 mmol)。反應混合物於預熱油浴中在55℃下加熱18小時。在用DCE洗滌固體之情況下經由矽藻土墊過濾反應混合物。濃縮濾液，得到黏性綠色油狀之(R,E)-N-(2-氟-4-(三氟甲基)亞苄基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(7.3 g，24.7 mmol，95%產率)。物質不經進一步純化即繼續進行下一步驟。¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ ppm 1.29(s,9 H)7.44(d,J=10.08 Hz,1 H)7.51(d,J=8.27 Hz,1 H)8.13(t,J=7.46 Hz,1 H)8.92(s,1 H)。LCMS m/z 296.0(M+H)⁺，滯留時間1.02分鐘。

步驟2

在氮氣下向冷卻至0℃(水/冰浴)之(R,E)-N-(2-氟-4-(三氟甲基)亞苄基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(7.3 g，24.7 mmol)於CH₂Cl₂(247 mL)中之溶液中添加於Et₂O中之3 M溴化甲基鎂(33 mL，99 mmol)。使反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，隨後逐漸使其溫至室溫且在室溫下攪拌1小時。將反應混合物冷卻至0℃，隨後藉由緩慢添加NH₄Cl飽和溶液淬滅。用EtOAc萃取水性混合物。將有機相合併，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na₂SO₄)，過濾且濃縮於矽膠上。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷40%至100%)得到呈白色結晶固體狀之(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(4.68 g，15.0 mmol，61%產率)。¹H NMR(400 MHz,CDCL₃)δ 1.22(s,9 H)1.60(d,J=6.80 Hz,3 H)3.38(d,J=4.01 Hz,1 H)4.87-4.97(m,1 H)7.33(d,J=10.32 Hz,1 H)7.39-7.45(m,1 H)7.49-7.55(m,1 H)。LCMS m/z 312.0(M+H)⁺，滯留時間0.92分鐘。

中間物191：(R)-N-((S)-1-(6-第三丁基吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺

用與製備中間物190所用類似的方法來製備(R)-N-((S)-1-(6-第三丁基吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺。¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 1.22(s,9 H)1.37(s,9 H)1.57(d,J=6.75 Hz,3 H)3.31(d,J=3.37 Hz,1 H)4.56-4.65(m,1 H)7.32(d,J=8.22 Hz,1 H)7.57(dd,J=8.24,2.23 Hz,1 H)8.54(d,J=2.05 Hz,1 H)。MS m/z 283.1(M+H)⁺，滯留時間0.51分鐘。

中間物192：(S)-1-(3-氯-4-(環戊基胺甲醯基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯

步驟1

向具有攪拌棒之圓底燒瓶中添加4-((S)-1胺基乙基-2-氯苯甲酸鹽酸鹽(1.05 g，4.45 mmol)，接著添加THF(40 mL)。向此溶液中添加DIEA(1.86 ml，10.7 mmol)。反應混合物變成混濁白色，接著添加二碳酸二第三丁酯(1.07 g，4.89 mmol)。使所得反應混合物在室溫下攪拌18小時。此時，於油浴中將反應混合物接著加熱至60℃持續2小時。隨後添加二碳酸二第三丁酯(1.07 g，4.89 mmol)及NMP(20 ml)且使所得反應混合物在60℃下攪拌2小時。移除揮發物。用NH₄Cl飽和溶液稀釋所得油狀物且用EtOAc萃取水性混合物。將有機相合併，用水、鹽水洗滌兩次，乾燥(Na₂SO₄)，過濾且濃縮成(S)-4-(1-(第三丁氧基羰基胺 基)乙基)-2-氯苯甲酸(2.32 g，6.19 mmol，139%產率)之黏性黃色油狀物，其含有一些過量的二碳酸二第三丁酯及NMP。LCMS m/z 284.9(M+H)⁺(羧酸片段+CH₃CN加合物)，滯留時間0.75分鐘。

步驟2

向具有攪拌棒之圓底燒瓶中添加(S)-4-(1-(第三丁氧基羰基胺基)乙基)-2-氯苯甲酸(450 mg，1.20 mmol)、環戊胺(355 μL，3.60 mmol)、EDC HCl(460 mg，2.40 mmol)、1-羥基-7-氮雜-苯并***(229 mg，1.68 mmol)及DMF(6 mL)。隨後向此混合物中添加DIEA(629 μL，3.60 mmol)。使反應混合物在室溫下攪拌18小時。反應混合物以水稀釋且用EtOAc萃取。將有機相合併，用水、鹽水洗滌兩次，乾燥(Na₂SO₄)，過濾且濃縮成棕色結晶狀之(S)-1-(3-氯-4-(環戊基胺甲醯基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(476 mg，1.17 mmol，97%產率)。LCMS m/z 367.0(M+H)⁺，滯留時間0.90分鐘。

表4s中之中間物係藉由與關於中間物192之製備所述類似的方法來製備。

中間物195：(S)-1-(3-羥基苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯

在N₂下在室溫下攪拌(S)-3-(1-胺基乙基)苯酚(1.188 g，6.84 mmol)及Boc₂O(1.747 mL，7.53 mmol)於DCM(17.10 mL)中之漿液，同時緩慢添加DIEA(1.434 mL，8.21 mmol)。初始不溶性起始物質緩慢溶解。溶液在室溫下攪拌16小時且隨後濃縮。將油性殘餘物再溶解於EtOAc中且依次用飽和Na₂CO₃及鹽水洗滌。原始水層以EtOAc再萃取，其隨後用鹽水洗滌且與先前之EtOAc批料組合。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮成2.4 g粗製微黃色透明油狀物，藉由矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至30%)純化，得到呈無色透明油狀之(S)-1-(3-羥基苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯，其在靜置後固化(1.79 g，7.55 mmol，110%產率)。¹H NMR(400 MHz,CDCL₃)δ 1.44(br.s.,12 H)4.08-4.18(m,1 H)4.76(br.s.,1 H)6.72(dd,J=7.46,1.83 Hz,1 H)6.78(br.s.,1 H)6.88(br.s.,1 H)7.16-7.24(m,1 H)。LCMS m/z 223.0/182.0(未觀測到母體，僅為Boc片段)(M+H)⁺，滯留時間0.71分鐘。

中間物196：(S)-1-(3-(環戊基氧基)苯基)乙胺鹽酸鹽

步驟1：光延(Mitsunobu)A

在N₂下在室溫下向(S)-1-(3-羥基苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(107.5 mg，0.453 mmol)、PPh₃(238 mg，0.906 mmol)及環戊醇(0.164 ml，1.812 mmol)於THF(2 ml)中之溶液中逐滴添加DEAD(0.143 ml，0.906 mmol)。將所得黃色溶液攪拌4小時且隨後濃縮。將黏性黃色油狀物再溶解於DMSO中且藉由逆相HPLC純化。藉由以分液漏斗添加等量之EtOAc及約250 mg Na₂CO₃而使經合併之產物溶離份脫鹽。分離各相且有機物以鹽水洗滌，經MgSO₄乾燥，過濾且在真空中濃縮，得到呈白色固體膜狀之(S)-1-(3-(環戊基氧基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(75.1 mg，0.246 mmol，54.3%產率)。LCMS m/z 291.1/250.0(未觀測到母體，僅為Boc片段)(M+H)⁺，滯留時間1.07分鐘。

步驟2

將(S)-1-(3-(環戊基氧基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(75.1 mg，0.246 mmol)溶解於4 M HCl之二烷溶液(1 ml，4.00 mmol)且使所得混合物靜置1小時，隨後濃縮，得到呈鹽酸鹽形式之(S)-1-(3-(環戊基氧基)苯基)乙胺(產率假定定量)。LCMS m/z 206.1(M+H)⁺，滯留時間0.61分鐘。

中間物197：(S)-1-(3-(環己基氧基)苯基)乙胺鹽酸鹽

步驟1：光延B

在室溫下在N₂下向(S)-1-(3-羥基苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(100 mg，0.421 mmol)、環己醇(0.180 ml，1.686 mmol)及PPh₃(221 mg，0.843 mmol)於THF(2 ml)中之溶液中逐滴添加DEAD(0.133 ml，0.843 mmol)。將所得黃色溶液攪拌3小時，此時在室溫下添加另一批的環己醇(0.180 ml，1.686 mmol)、PPh₃(221 mg，0.843 mmol)，且10分鐘後添加DEAD(0.133 ml，0.843 mmol)。將反應混合物攪拌16小時且隨後濃縮。將粗製透明油狀物再溶解於DMSO中且藉由逆相HPLC純化。藉由以分液漏斗添加等量之EtOAc及約250 mg Na₂CO₃而使經合併之產物溶離份脫鹽。分離各相且有機物以鹽水洗滌，經MgSO₄乾燥，過濾且在真空中濃縮，得到呈無色透明膜狀之(S)-1-(3-(環己基氧基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(74.1 mg，0.232 mmol，55.0% 產率)。LCMS m/z 305.0/264.0(未觀測到母體，僅為Boc片段)(M+H)⁺，滯留時間1.12分鐘。

步驟2

將(S)-1-(3-(環己基氧基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(74.1 mg，0.232 mmol)溶解於4 M HCl之二烷溶液(1 ml，4.00 mmol)且使所得混合物靜置1小時，隨後濃縮，得到呈鹽酸鹽形式之(S)-1-(3-(環己基氧基)苯基)乙胺(產率假定定量)。LCMS m/z 220.1(M+H)⁺，滯留時間0.66分鐘。

表4v中之中間物係使用關於中間物196或中間物197之製備所述的方法來製備。

中間物205：(S)-1-(3-苯氧基苯基)乙胺

向20 ml微波小瓶中稱量加入1-(吡啶-2-基)丙-2-酮配體(90 mg，0.665 mmol)、苯酚(407 mg，4.32 mmol)、CuBr(47.7 mg，0.332 mmol)及Cs₂CO₃(2166 mg，6.65 mmol)。向混合物中添加DMSO(5 ml)及(S)-1-(3-溴苯基)乙胺(0.5 ml，3.32 mmol)。將管以N₂吹洗，蓋封，且黑色混合物於油浴中在90℃下加熱18小時。非均質混合物以EtOAc稀釋且在用EtOAc及另外5 ml DMSO溶離之情況下經由玻璃燒結漏斗過濾。隨後在真空中移除揮發物且經由1 μm PTFE過濾器過濾粗製棕色液體且藉由逆相HPLC純化。藉由以分液漏斗添加等量之EtOAc及約250 mg Na₂CO₃而使經合併之產物溶離份脫鹽。分離各相且有機物以鹽水洗滌，經MgSO₄乾燥，過濾且在真空中濃縮，得到呈琥珀色油狀之(S)-1-(3-苯氧基苯基)乙胺(361.5 mg，1.678 mmol，50.5%產率)。LCMS m/z 214.1(M+H)⁺，滯留時間0.61分鐘。

中間物206：(S)-1-(2,3-二氟苯基)乙胺

步驟1

向具有攪拌棒之經烘乾之圓底燒瓶中添加2,3-二氟苯甲醛(0.5 g，3.52 mmol)、(R)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(0.469 g，3.87 mmol)及DCE(7.04 mL)。隨後向此混合物中添加硫酸銅(II)(0.842 g，5.28 mmol)。反應混合物於預熱油浴中加熱至55℃持續24小時。在以DCE洗滌固體之情況下經由矽藻土墊過濾反應混合物。濃縮經合併之濾液，得到黏性黃色油狀之(R,E)-N-(2,3-二氟亞苄基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(0.8007 g，3.26 mmol，93%產率)。LCMS m/z 246.1(M+H)⁺，滯留時間0.91分鐘。

步驟2

在N₂下向冷卻至0℃(水/冰浴)之(R,E)-N-(2,3-二氟亞苄基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(0.800 g，3.26 mmol)於DCM(32.6 mL)中之溶液中添加於***中之3 M MeMgBr(4.35 mL，13.05 mmol)。使反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，隨後逐漸使其溫至室溫且在室溫下攪拌30分鐘。將反應混合物冷卻至0℃，隨後藉由緩慢添加NH₄Cl飽和溶液來淬滅且用EtOAc稀釋。分配各相，用EtOAc萃取水相且將有機層合併，用水、鹽水洗滌，用MgSO₄乾燥，過濾且濃縮，得到呈黃色固體狀之(R)-N-((S)-1-(2,3-二氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(0.7868 g，3.01 mmol，92%產率)。LCMS m/z 262.0(M+H)⁺，滯留時間0.70分鐘。

步驟3

向含有(R)-N-((S)-1-(2,3-二氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(786.8 mg，3.01 mmol)之圓底燒瓶中添加二烷(10.000 mL)。向此溶液中添加4.0 M HCl之二烷溶液(1.505 mL，6.02 mmol)且使溶液在室溫下攪拌15分鐘。將反應混合物濃縮，溶解於Et₂O(10 ml)中且再次濃縮。再添加Et₂O且對所得混合物進行音波處理，且將固體物質過濾並乾燥，得到呈白色結晶鹽酸鹽形式之(S)-1-(2,3-二氟苯基)乙胺(0.4213 g，2.176 mmol，72.3%產率)。¹H NMR(400 MHz,D₂O)δ ppm 1.55(d,J=6.99 Hz,3 H)4.71(q,J=6.96 Hz,1 H)7.10-7.26(m,3 H)；LCMS m/z 158.0(M+H)⁺，滯留時間0.37分鐘。

中間物207：(S)-1-(4-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙胺

步驟1：製備1-溴-4-(二氟甲基)-2-氟苯

小心地加熱4-溴-3-氟苯甲醛(2.03 g，10 mmol)及(二乙基胺基)三氟化硫(DAST；1.32 mL，10 mmol)之混合物，直至發生放熱反應，隨後在60℃下加熱15分鐘，且使其冷卻至室溫。將混合物以DCM(20 mL)稀釋且傾倒入冰/水(30 mL)中。用NaHCO₃中和混合物至約pH 8。用DCM(20 mL)萃取經分離之水層。經合併之有機層經Na₂SO₄乾燥，過濾出且在減壓下濃縮。藉由管柱層析[SiO₂，40 g，庚烷/乙酸乙酯]純化殘餘物，得到呈無水透明油狀之1-溴-4-(二氟甲基)-2-氟苯(0.845 g)。

步驟2：製備4-(二氟甲基)-2-氟苯甲醛

在-78℃下經約5分鐘向1-溴-4-(二氟甲基)-2-氟苯(311 mg，1.382 mmol)於THF(2.99 mL)中之溶液中添加丁基鋰(1.6 M溶液於己烷中；0.881 mL，1.410 mmol)。反應混合物在-78℃下攪拌30分鐘，隨後經約1分鐘逐滴添加DMF(0.161 mL，2.073 mmol)。繼續攪拌20分鐘。用1 M HCl水溶液/MeOH(2：1，3 mL)淬滅反應混合物且使其溫至室溫。用5 mL水稀釋混合物。用***(5 mL)萃取經分離之水層。經合併之有機層以1 M NaOH水溶液(10 mL)及飽和鹽 水(10 mL)洗滌，經MgSO₄乾燥，過濾出且在減壓下濃縮。用420 mg 1-溴-4-(二氟甲基)-2-氟苯重複反應且將粗物質合併以進行純化。藉由管柱層析[SiO₂，24 g，庚烷/乙酸乙酯]純化粗物質，得到呈黃色油狀之4-(二氟甲基)-2-氟苯甲醛(162.8 mg)。

步驟3：製備(R,E)-N-(4-(二氟甲基)-2-氟亞苄基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺

向4-(二氟甲基)-2-氟苯甲醛(162 mg，0.930 mmol)及(R)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(124 mg，1.023 mmol)於DCE(3 mL)中之混合物中添加硫酸銅(223 mg，1.396 mmol)。反應混合物於預熱油浴中加熱至55℃持續38小時。使混合物冷卻至室溫，經由矽藻土墊過濾且用DCE洗滌。在減壓下濃縮經合併之濾液，得到呈黃色油狀之(R,E)-N-(4-(二氟甲基)-2-氟亞苄基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(266 mg)，其不經進一步純化即使用。LCMS m/z 278.1(M+H)⁺，滯留時間0.98分鐘。

步驟4：製備(R)-N-((S)-1-(4-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺

在0℃下向(R,E)-N-(4-(二氟甲基)-2-氟亞苄基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(266 mg，0.959 mmol)於DCM(9.6 mL)中之溶液中添加溴化甲基鎂(3 M，於***中；1.20 mL)。使反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，使其逐漸溫至室溫且在室溫下攪拌1小時。將混合物冷卻至0℃，且小心地用飽和NH₄Cl水溶液(3 mL)淬滅。用DCM萃取經分離之水相。經 合併之有機層以鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾出且在減壓下濃縮。藉由管柱層析[SiO₂，40 g，庚烷/乙酸乙酯]純化粗物質，得到呈白色固體狀之(R)-N-((S)-1-(4-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(160.5 mg)。LCMS m/z 294.5(M+H)⁺，滯留時間0.85分鐘。

步驟5：製備(S)-1-(4-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙胺

向(R)-N-((S)-1-(4-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(160 mg，0.545 mmol)中添加4 M HCl之二烷溶液(409 μL)，得到黃色溶液。所得混合物在室溫下攪拌約1小時。向混合物中緩慢地添加***(約20 mL)。將固體過濾出，懸浮於***中，過濾出且用***沖洗，在減壓下乾燥，得到呈灰白色固體狀之(S)-1-(4-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙胺(103 mg)，其不經進一步純化即使用。LCMS m/z 190.1(M+H)⁺，滯留時間0.42分鐘。

中間物208：(S)-1-(4-(嘧啶-5-基氧基)苯基)乙胺

步驟1：製備4-(嘧啶-5-基氧基)苯甲醛

在氬氣下向嘧啶-5-醇(500 mg，5.20 mmol)於DMF(5.20 mL)中之溶液中添加4-氟苯甲醛(0.558 mL，5.20 mmol)、甲烷亞磺酸鈉(133 mg，1.30 mmol)及碳酸鉀(1.079 g，7.81 mmol)。反應混合物在120℃下加熱3小時。使混合物 冷卻至室溫且用水(25 mL)稀釋。用EtOAc(2×25 mL)萃取混合物。經合併之有機層以鹽水(2×50 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾出且在減壓下濃縮。藉由管柱層析[SiO₂，24 g，庚烷/乙酸乙酯]純化殘餘物，得到呈黃色固體狀之4-(嘧啶-5-基氧基)苯甲醛(666 mg)。LCMS m/z 201.0(M+H)⁺，滯留時間0.52分鐘。

步驟2：製備(R,E)-2-甲基-N-(4-(嘧啶-5-基氧基)亞苄基)丙烷-2-亞磺醯胺

4-(嘧啶-5-基氧基)苯甲醛(666 mg，3.33 mmol)、(R)-(+)-第三丁烷亞磺醯胺(450 mg，3.71 mmol)及硫酸銅(796 mg，4.99 mmol)於無水二氯乙烷(7.648 mL)中之混合物在氬氣下在55℃下加熱約21小時。使反應混合物冷卻至室溫。經由矽藻土墊過濾漿液，用DCM(5×10 mL)溶離。在減壓下濃縮經合併之濾液且藉由管柱層析[SiO₂，24 g，庚烷/乙酸乙酯]純化所得微黃色油狀物，得到呈灰白色黏性油狀之(R,E)-2-甲基-N-(4-(嘧啶-5-基氧基)亞苄基)丙烷-2-亞磺醯胺(836 mg)。LCMS m/z 304.0(M+H)⁺，滯留時間0.79分鐘。

步驟3：製備2-甲基-N-((S)-1-(4-(嘧啶-5-基氧基)苯基)乙基)丙烷-2-亞磺醯胺

將(R,E)-2-甲基-N-(4-(嘧啶-5-基氧基)亞苄基)丙烷-2-亞磺醯胺(830 mg，2.74 mmol)於DCM(6.72 mL)中之溶液冷卻至-40℃。經10分鐘向溶液中逐滴添加溴化甲基鎂(3 M於***中；1.81 mL)。再添加DCM(5 mL)以保持攪拌。黃 色懸浮液在-40℃下攪拌約30分鐘，同時升溫至-20℃。將混合物冷卻至-40℃且再添加溴化甲基鎂(3 M於***中；1.8 mL)。將懸浮液攪拌約3小時，同時緩慢地升溫至-20℃。將混合物冷卻至約-40℃，且再添加溴化甲基鎂(3 M於***中；0.4 mL)。將懸浮液攪拌30分鐘且使其升溫至-10℃。經10分鐘緩慢地用飽和NH₄Cl水溶液(10 mL)淬滅混合物。用飽和NH₄Cl水溶液(30 mL)及水(15 mL)稀釋混合物。用DCM(2×75 mL)萃取經分離之水相。經合併之有機層以鹽水(50 mL)洗滌，經Na₂SO₄乾燥，過濾出且在減壓下濃縮。藉由管柱層析[SiO₂，40 g，庚烷/乙酸乙酯，接著為含5% MeOH之EtOAc]純化殘餘物，得到呈灰白色固體狀之2-甲基-N-((S)-1-(4-(嘧啶-5-基氧基)苯基)乙基)丙烷-2-亞磺醯胺(55 mg；純度約87%)。LCMS m/z 320.0(M+H)⁺，滯留時間0.69分鐘。

步驟4：製備(S)-1-(4-(嘧啶-5-基氧基)苯基)乙胺

向2-甲基-N-((S)-1-(4-(嘧啶-5-基氧基)苯基)乙基)丙烷-2-亞磺醯胺(55 mg，0.172 mmol)中添加4 M HCl之二烷溶液(800 μL，3.20 mmol)，得到白色懸浮液。此所得混合物在室溫下攪拌約35分鐘且在減壓下濃縮，得到呈鹽酸鹽形式之粗製(S)-1-(4-(嘧啶-5-基氧基)苯基)乙胺(44 mg)，其不經進一步純化即使用。LCMS m/z 217.1(M+H)⁺，滯留時間0.37分鐘。

中間物209：5-氯-6-(1,1-二氟乙基)菸鹼醛

步驟1：製備5,6-二氯菸鹼酸乙酯

在20℃下向5,6-二氯菸鹼酸(20.01 g，104 mmol)於EtOH(500 mL)中之溶液中添加氯三甲基矽烷(132 mL，1042 mmol)。攪拌反應物72小時。隨後濃縮反應混合物且用EtOAc(500 mL)稀釋，且用飽和NaHCO₃(2×100 mL)及鹽水(100 mL)洗滌。有機物隨後經乾燥(Na₂SO₄)且在減壓下濃縮，得到最終粗產物(21.25 g)。LCMS m/z 220.1(M+H)⁺，滯留時間0.94分鐘。

步驟2：製備6-乙醯基-5-氯菸鹼酸乙酯

向5,6-二氯菸鹼酸乙酯(5.26 g，23.90 mmol)及氯化四乙銨(11.88 g，71.7 mmol)於MeCN(50 mL)中之懸浮液中添加三丁基(1-乙氧基乙烯基)錫烷(9.50 g，26.3 mmol)及PdCl₂(PPh₃)₂(0.671 g，0.956 mmol)。將反應物密封，在80℃下加熱5小時。產生深色澄清溶液。隨後將反應混合物冷卻至20℃，濃縮且用EtOAc(200 mL)稀釋，且用水(50 mL)及鹽水(50 mL)洗滌。有機物隨後經乾燥(Na₂SO₄)且濃縮，得到粗製5-氯-6-(1-乙氧基乙烯基)菸鹼酸乙酯。隨後將殘餘物溶解於THF(100 mL)中且添加HCl(20 mL，3 M於H₂O中)。反應混合物在20℃下攪拌5小時，且添加飽和 NaHCO₃溶液直至pH=8。隨後用EtOAc(200 mL)及水(50 mL)稀釋混合物。分離各相且用EtOAc(2×50 mL)萃取水層。經合併之有機物以鹽水(20 mL)洗滌，乾燥(Na₂SO₄)且濃縮，得到所需產物(3.56 g)。LCMS m/z 228.5(M+H)⁺，滯留時間0.83分鐘。

步驟3：製備5-氯-6-(1,1-二氟乙基)菸鹼酸乙酯

向6-乙醯基-5-氯菸鹼酸乙酯(3.01 g，13.22 mmol)於CHCl₃(7 mL)中之溶液中添加DAST(5.20 mL，39.7 mmol)及乙醇(0.061 g，1.32 mmol)。將反應物密封，在60℃下加熱24小時。產生深色澄清溶液。隨後將反應混合物冷卻至20℃，且謹慎地添加冷的濃縮NaHCO₃水溶液(50 mL)。用DCM(2×100 mL)萃取水層。隨後乾燥(Na₂SO₄)經合併之有機物且濃縮。經由矽膠急驟層析(0-20% EtOAc-己烷)純化殘餘物，得到呈黃色油狀之所需產物(2.88 g)。LCMS m/z 250.1(M+H)⁺，滯留時間0.99分鐘。

步驟4：製備(5-氯-6-(1,1-二氟乙基)吡啶-3-基)甲醇

向5-氯-6-(1,1-二氟乙基)菸鹼酸乙酯(2.68 g，10.74 mmol)於Et₂O(40 mL)中之溶液中添加LiBH₄(0.351 g，16.10 mmol)，接著逐滴添加甲醇(0.653 mL，16.10 mmol)。反應物在40℃下回流一小時。隨後將反應混合物冷卻至0℃，且用HCl(1 M)淬滅直至水層達到pH=2。分離各相且用DCM(3×50 mL)萃取水層。有機物隨後經乾燥(Na₂SO₄)且在減壓下濃縮，得到最終粗產物(2.12 g)。LCMS m/z 208.0(M+H)⁺，滯留時間0.63分鐘。

步驟5：製備5-氯-6-(1,1-二氟乙基)菸鹼醛

向(5-氯-6-(1,1-二氟乙基)吡啶-3-基)甲醇(2.12 g，10.21 mmol)於DCM(100 ml)中之溶液中添加PCC(3.30 g，15.32 mmol)。反應物在20℃下攪拌3小時。產生深色懸浮液。LCMS顯示完全轉化為產物。隨後經由矽藻土墊過濾反應混合物，且用DCM(200 mL)洗滌。接著濃縮濾液，得到粗產物(1.78 g)。LCMS m/z 224.0(M+H₂O+H)⁺，滯留時間0.72分鐘。

中間物210：5-氯-6-(2,2,2-三氟乙氧基)菸鹼醛

步驟1：製備5-氯-6-(2,2,2-三氟乙氧基)菸鹼酸乙酯

在-73℃下向5,6-二氯菸鹼酸乙酯(6.28 g，28.5 mmol)及2,2,2-三氟乙醇(2.71 ml，37.1 mmol)於THF(90 ml)中之溶液中添加NaHMDS(37.1 ml，37.1 mmol)。反應物在-73℃下攪拌30分鐘，隨後在0℃下攪拌5小時。用30 mL飽和NH₄Cl溶液淬滅反應。隨後將反應混合物傾倒入50 mL鹽水中且分離各相。用DCM(2×100 mL)萃取水層。經合併之有機物經乾燥(Na₂SO₄)且濃縮。用100%庚烷至含30% EtOAc之庚烷進行矽膠層析，得到最終產物(7.51 g)。LCMS m/z 284.1(M+H)⁺，滯留時間1.07分鐘。

步驟2：製備(5-氯-6-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-3-基)甲醇

向5-氯-6-(2,2,2-三氟乙氧基)菸鹼酸乙酯(7.51 g，26.5 mmol)於Et₂O(200 mL)中之溶液中添加LiBH₄(0.865 g，39.7 mmol)，接著逐滴添加甲醇(1.611 ml，39.7 mmol)。反應物在40℃下回流一小時。隨後將反應混合物冷卻至0℃，且用HCl(1 M)淬滅直至水層達到pH=2。分離各相且用DCM(3x200 mL)萃取水層。有機物隨後經乾燥(Na₂SO₄)且在減壓下濃縮，得到最終粗產物(6.31 g)。LCMS m/z 242.1(M+H)⁺，滯留時間0.77分鐘。

步驟3：製備5-氯-6-(2,2,2-三氟乙氧基)菸鹼醛

向(5-氯-6-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-3-基)甲醇(4.00 g，16.56 mmol)於EtOAc(15 mL)中之溶液中添加氧化錳(IV)(16.93 g，166 mmol)。用微波在120℃下加熱反應物30分鐘。隨後經由矽藻土墊過濾混合物，且用EtOAc沖洗。濃縮濾液，得到粗產物(3.38 g)。

表4w中之中間物係用與製備中間物210及192所用類似的程序來製備。

中間物213：(S)-3-(2-((S)-1-(4-(氯甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基 唑啶-2-酮

向(S)-3-(2-((S)-1-(4-(羥基甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(71 mg，0.2 mmol)於DCM(2 mL)中之溶液中添加甲烷磺醯氯(27 mg，0.24 mmol)及DIPEA(0.070 mL，0.4 mmol)。溶液在室溫下攪拌16小時，隨後用水及鹽水洗滌。分離後，有機相經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。粗產物不經進一步純化即用於下一步驟。

MS m/z 373.4(M-H)。

中間物214：3-(4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基 唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苄基)-3,8-二氮雜雙環[4.2.0]辛烷-8-甲酸第三丁酯

利用與製備中間物128所用類似的程序，但利用4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯甲醛及3,8-二氮雜雙環[4.2.0]辛烷-8-甲酸第三丁酯，製備呈白色固體狀之標題化合物(64 mg，58.1%產率)。

¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 8.17(dd,J=5.9,0.9 Hz,1H),7.42(d,J=5.7 Hz,1H),7.28-7.23(m,4H),5.39(br s,1H),5.02(br s,1H),4.62-4.59(m,1H),4.28(t,J=8.7 Hz,1H),4.21(dd,J=9.0,3.2 Hz,2H),3.89(td,J=7.7,1.9 Hz,1H),3.54-3.50(m,2H),3.03(d,J=12.2 Hz,1H),2.65-2.60(m,1H),2.54-2.40(m,2H),2.10(br s,1H),1.99-1.88(m,1H),1.79-1.72(m,1H),1.65(br s,1H),1.52(dd,J=6.8,1.9 Hz,3H),1.38(t,J=7.7 Hz,9H),0.71(br s,3H),0.66(br s,3H)。MS m/z 569.1(M+H)。

中間物215：1-(4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基 唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苄基)哌啶-4-基胺基甲酸第三丁酯

利用與製備中間物128所用類似的程序，但利用4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯甲醛及哌啶-4-基胺基甲酸第三丁酯，製備呈白色固體狀之標題化合物(32 mg，59%產率)。MS m/z 539.4(M+H)。

實例

實例1：(S)-5,5-二甲基-4-苯基-3-(2-((S)-1-苯基乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮

(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-5,5-二甲基-4-苯基唑啶-2-酮(33.9 mg，0.112 mmol)及(S)-(-)-1-苯基乙胺(0.15 mL，1.2 mmol，10當量)於DMSO(1 mL)中之溶液在110℃下加熱140分鐘。反應混合物以EtOAc(8 mL)稀釋且用水(30 mL)洗滌。分離後，用EtOAc(3×8 mL)萃取水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷10%至50%)得到(S)-5,5-二甲基-4-苯基-3-(2-((S)-1-苯基乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(37.0 mg，白色固體)，產率為85%。¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.06(d,J=5.8 Hz,1 H),7.43(d,J=5.8 Hz,1 H),7.31-7.24(m,3 H),7.19-7.11(m,5 H),7.01(br s 2 H),5.48(s,1 H),4.86-4.80(m,1 H),1.65(s,3 H),1.43(d,J=7.0 Hz,3 H),0.98(s,3 H)；HRMS(B)m/z 389.1987(M+H)⁺。

替代程序

實例113：(S)-3-(2-((S)-1-(4-羥基苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮

(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(42 mg，0.17 mmol)、(S)-4-(1-胺基乙基)苯酚鹽酸鹽(107 mg，0.616 mmol，3.5當量)及iPr₂Net(0.121 mL，0.695 mmol，4.0當量)於DMSO(1 mL)中之溶液在110℃下加熱3小時且再在130℃下加熱2小時。反應混合物以EtOAc(8 mL)稀釋且用水(30 mL)洗滌。分離後，用EtOAc(3×8 mL)萃取水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷10%至80%)得到(S)-3-(2-((S)-1-(4-羥基苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(3 mg)，產率為5%。¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.11(d,J=5.8 Hz,1 H),7.33(d,J=5.8 Hz,1 H),7.12(d,J 8.1 Hz,2 H),6.72-6.68(m,2 H),4.95(q,J=6.9 Hz,1 H),4.69-4.65(m,1 H),4.35-4.28(m,2 H),1.47(d,J=7.1 Hz,3 H),0.75(br s,3 H),0.62(br s,3H)；HRMS(B)m/z 343.1776(M+H)⁺。

表5中之化合物係使用與關於實例1及113之製備所述類似的方法來製備。

實例170：(4S)-4-異丙基-3-(2-(2,2,2-三氟-1-苯基乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮

(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(163 mg，0.674 mmol)、2,2,2-三氟-1-苯基乙胺(624 mg，3.56 mmol，5.3當量)及單水合對甲苯磺酸(321 mg，1.69 mmol，2.5當量)於n-BuOH(3 mL)中之溶液在110℃下加熱2小時且再用單水合對甲苯磺酸(321 mg，1.69 mmol，2.5當量)處理，隨後在110℃下加熱1½小時。冷卻後，固體反 應混合物以MeCN處理，進行音波處理且過濾。濃縮濾液且藉由矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至30%)純化，得到(4S)-4-異丙基-3-(2-(2,2,2-三氟-1-苯基乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(65 mg)，產率為25%。¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.215(d,J=6.1 Hz,0.5 H),8.212(d,J=6.1 Hz,0.5 H),7.52(t,J=7.1 Hz,2 H),7.46(dd,J=5.8,3.8 Hz,1 H),7.43-7.34(m,3 H),5.86(qd,J=8.2,4.0 Hz,1 H),4.83-4.75(m,1 H),4.42-4.33(m,2 H),2.62(dtd,J=14,7.0,3.8 Hz,0.5 H),2.28(br s,0.5 H),1.02(d,J=7.1 Hz,1.5 H),0.91(d,J=7.1 Hz,1.5 H),0.88(d,J=7.11 Hz,1.5 H),0.73(d,J=7.1 Hz,1.5 H)；HRMS(B)m/z 381.1545(M+H)⁺。

實例171及172

(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(106 mg，0.439 mmol)及1-(3-氟苯基)乙胺(196 mg，1.41 mmol，3.21當量)於DMSO(1 mL)中之溶液在110℃下加熱1½小時。反應混合物以EtOAc(8 mL)稀釋且用水(30 mL)洗滌。分離後，用EtOAc(3×8 mL)萃取水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷10%至50%)得到(S)-3-(2-((R)-1-(3-氟苯基)乙基胺基)嘧啶- 4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮及(S)-3-(2-((S)-1-(3-氟苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮。

實例171第一溶離產物(28 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.11(d,J=5.8 Hz,1 H),7.36-7.27(m,2 H),7.16(d,J=7.6 Hz,1 H),7.07(dt,J=10,2.0 Hz,1 H),6.92-6.88(m,1 H),4.98-4.93(m,1 H),4.42(br s,1 H),4.32(dd,J=9.1,2.8 Hz,1 H),4.26(t,J=8.7 Hz,1 H),2.64(dtd,J=14,7.1,3.5 Hz,1 H),1.50(d,J=7.0 Hz,3 H),0.98(d,J=7.1 Hz,3 H),0.85(d,J=7.0 Hz,3 H)；HRMS(B)m/z 345.1729(M+H)⁺。

實例172第二溶離產物(22 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.13(d,J=5.7 Hz,1 H),7.36(d,J=5.8 Hz,1 H),7.29(td,J=8.1,6.1 Hz,1 H),7.13(d,J=7.6 Hz,1 H),7.06-7.04(m,1 H),6.94-6.87(m,1 H),5.03(q,J=7.1 Hz,1 H),4.64(br s,1 H),4.34-4.26(m,2 H),1.79(br s,1 H),1.50(d,J=7.1 Hz,3 H),0.70(br s,3 H),0.58(br s,3 H)；HRMS(B)m/z 345.1727(M+H)⁺。

實例173及174

(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(90 mg， 0.37 mmol)、iPr₂NEt(0.455 mL，2.61 mmol，7.0當量)及1-(聯苯-4-基)乙胺鹽酸鹽(87 mg，0.37 mmol)於DMSO(1 mL)中之溶液在110℃下加熱2小時。反應混合物以EtOAc(8 mL)稀釋且用水(30 mL)洗滌。分離後，用EtOAc(3×8 mL)萃取水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷10%至50%)得到(S)-3-(2-((R)-1-(聯苯-4-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮及(S)-3-(2-((S)-1-(聯苯-4-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮。

實例173第一溶離產物(17 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.11(d,J=5.8 Hz,1 H),7.59-7.54(m,4 H),7.43-7.28(m,6 H),5.01(q,J=6.8 Hz,1 H),4.49(br s,1 H),4.32(dd,J=9.1,3.0 Hz,1 H),4.26(t,J=8.6 Hz,1 H),2.67(dtd,J=14,7.0,3.5 Hz,1 H),1.55(d,J=7.1 Hz,3 H),1.01(d,J=7.1 Hz,3 H),0.86(d,J=7.0 Hz,3 H)；HRMS(B)m/z 403.2141(M+H)⁺。

實例174第二溶離產物(21 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.14(d,J=5.8 Hz,1 H),7.58-7.52(m,4 H),7.42-7.28(m,6 H),5.06(q,J=7.1 Hz,1 H),4.63(br s,1 H),4.34-4.25(m,2 H),1.79(br s,1 H),1.55(d,J=7.1 Hz,3 H),0.65(br s,3 H),0.53(br s,3 H)；HRMS(B)m/z 403.2139(M+H)⁺。

實例175及176

(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(96 mg，0.40 mmol)及1-(4-氯苯基)乙胺(204 mg，1.31 mmol，3.3當量)於DMSO(1 mL)中之溶液在110℃下加熱3小時。反應混合物以EtOAc(8 mL)稀釋且用水(30 mL)洗滌。分離後，用EtOAc(3×8 mL)萃取水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷10%至50%)得到(S)-3-(2-((R)-1-(4-氯苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮及(S)-3-(2-((S)-1-(4-氯苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮。

實例175第一溶離產物(32 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.10(d,J=5.8 Hz,1 H),7.36-7.28(m,5 H),4.95(q,J=6.7 Hz,1 H),4.45(br s,1 H),4.35-4.26(m,2 H),2.64(dtt,J=11,7.0,3.4 Hz,1 H),1.50(d,J=7.1 Hz,3 H),0.98(d,J=7.1 Hz,3 H),0.85(d,J=7.1 Hz,3 H)；HRMS(B)m/z 361.1430(M+H)⁺。

實例176第二溶離產物(40 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.13(d,J=5.7 Hz,1 H),7.36-7.26(m,5 H),5.00(q,J=7.1 Hz,1 H),4.62(br s,1 H),4.34-4.26(m,2 H),1.77(br s,1 H),1.50(d,J=7.1 Hz,3 H),0.68(br s,3 H),0.59(br s,3 H)；HRMS(B)m/z 361.1431(M+H)⁺。

實例177及178

(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(93 mg，0.38 mmol)及1-(3,4-二氯苯基)乙胺(73.1 mg，0.385 mmol，1.0當量)於DMSO(1 mL)中之溶液在110℃下加熱1½小時。反應混合物以EtOAc(8 mL)稀釋且用水(30 mL)洗滌。分離後，用EtOAc(3×8 mL)萃取水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷10%至50%)得到(S)-3-(2-((R)-1-(3,4-二氯苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮及(S)-3-(2-((S)-1-(3,4-二氯苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮。

實例177第一溶離產物(21 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.12(d,J=5.8 Hz,1 H),7.50(d,J=2.0 Hz,1 H),7.44(d,J=8.2 Hz,1 H),7.37(d,J=5.8 Hz,1 H),7.28(dd,J=8.6,2.0 Hz,1 H),4.94-4.88(m,1 H),4.43(br s,1 H),4.35-4.26(m,2 H),2.68-2.60(m,1 H),1.50(d,J=7.1 Hz,3 H),0.99(d,J=7.1 Hz,3 H),0.85(d,J=7.1 Hz,3 H)；HRMS(B)m/z 395.1035(M+H)⁺。

實例178第二溶離產物(28 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.15(d,J=5.8 Hz,1 H),7.47-7.42(m,2 H),7.37(d, J=5.8 Hz,1 H),7.25(dd,J=8.1,2.0 Hz,1 H),5.01-4.96(m,1 H),4.61(br s,1 H),4.34-4.26(m,2 H),1.72(br s,1 H),1.50(d,J=7.1 Hz,3 H),0.67(br s,3 H),0.60(br s,3 H)；HRMS(B)m/z 395.1044(M+H)⁺。

實例179及180

(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(86 mg，0.36 mmol)及1-(3-(1H-吡咯-1-基)苯基)乙胺(100 mg，0.537 mmol，1.5當量)於DMSO(1 mL)中之溶液在110℃下加熱1½小時。反應混合物以EtOAc(8 mL)稀釋且用水(30 mL)洗滌。分離後，用EtOAc(3×8 mL)萃取水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷10%至50%)得到(S)-3-(2-((R)-1-(3-(1H-吡咯-1-基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮及(S)-3-(2-((S)-1-(3-(1H-吡咯-1-基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮。

實例179第一溶離產物(14 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.11(d,J=5.8 Hz,1 H),7.45(t,J=1.8 Hz,1 H),7.39-7.29(m,3 H),7.23(d,J=7.6 Hz,1 H),7.13(t,J=2.0 Hz,2 H),6.25(t,J=2.1 Hz,2 H),5.03-4.97(m,1 H),4.46(br s,1 H),4.31-4.20(m,2 H),2.64(dtd,J=14,7.0,3.8 Hz,1 H), 1.56(d,J=7.1 Hz,3 H),0.95(d,J=7.1 Hz,3 H),0.84(d,J=7.0 Hz,3 H)；HRMS(B)m/z 392.2092(M+H)⁺。

實例180第二溶離產物(10 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.14(d,J=5.7 Hz,1 H),7.42(br s,1 H),7.38-7.28(m,3 H),7.20(d,J=7.6 Hz,1 H),7.12(t,J=2.3 Hz,2 H),6.25(t,J=2.0 Hz,2 H),5.09(q,J=6.9 Hz,1 H),4.64(br s,1 H),4.32-4.23(m,2 H),1.84(br s,1 H),1.55(d,J=7.1 Hz,3 H),0.54(br s,6 H)；HRMS(B)m/z 392.2090(M+H)⁺。

實例181及182

(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(44 mg，0.18 mmol)及1-(4-(1H-吡咯-1-基)苯基)乙胺(33.9 mg，0.182 mmol，1當量)於DMSO(1 mL)中之溶液在110℃下加熱2小時。反應混合物以EtOAc(8 mL)稀釋且用水(30 mL)洗滌。分離後，用EtOAc(3×8 mL)萃取水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷10%至50%)得到(S)-3-(2-((R)-1-(4-(1H-吡咯-1-基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮及(S)-3-(2-((S)-1-(4-(1H-吡咯-1-基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮。

實例181第一溶離產物(18 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.11(d,J=5.8 Hz,1 H),7.44-7.39(m,4 H),7.35(d,J=5.9 Hz,1 H),7.13(t,J=2.2 Hz,2 H),6.24(t,J=2.0 Hz,2 H),5.02-4.96(m,1 H),4.49(br s,1 H),4.34-4.25(m,2 H),2.66(dtd,J=14,7.0,3.3 Hz,1 H),1.53(d,J=7.1 Hz,3 H),1.00(d,J=7.1 Hz,3 H),0.86(d,J=7.1 Hz,3 H)；HRMS(B)m/z 392.2089(M+H)⁺。

實例182第二溶離產物(9 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.14(d,J=5.8 Hz,1 H),7.39(s,4 H),7.35(d,J=5.9 Hz,1 H),7.12(t,J=2.2 Hz,2 H),6.25(t,J=2.0 Hz,2 H),5.05(q,J=7.1 Hz,1 H),4.64(br s,1 H),4.34-4.26(m,2 H),1.87(br s,1 H),1.53(d,J=7.1 Hz,3 H),0.68(br s,3 H),0.57(br s,3 H)；HRMS(B)m/z 392.2082(M+H)⁺。

實例183及184

利用使用含30% iPrOH之CO₂的管柱(AS-H 4.6×100 mm)離析(4S)-3-(2-((1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮之混合物(實例118)，得到(S)-3-(2-((R)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮及(S)-3-(2-((S)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮。

實例183第一溶離產物(13 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.11(d,J=5.8 Hz,1 H),7.33(d,J=5.8 Hz,1 H),6.97(br d,J=1.5 Hz,1 H),6.92-6.88(m,2 H),4.96(q,J=6.7 Hz,1 H),4.61-4.55(m,1 H),4.35-4.28(m,2 H),3.803(s,3 H),3.800(s,3 H),2.63(dtd,J=14,7.0,3.5 Hz,1 H),1.51(d,J=7.1 Hz,3 H),0.99(d,J=7.1 Hz,3 H),0.86(d,J=7.1 Hz,3 H)；HRMS(B)m/z 387.2031(M+H)⁺。

實例184第二溶離產物(10 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.13(d,J=5.8 Hz,1 H),7.32(d,J=5.7 Hz,1 H),6.94(br d,J=1.1 Hz,1 H),6.89-6.84(m,2 H),4.99(q,J=7.1 Hz,1 H),4.67-4.63(m,1 H),4.36-4.26(m,2 H),3.79(s,6 H),2.01(br s,1 H),1.51(d,J=7.1 Hz,3 H),0.71(d,J=7.1 Hz,3 H),0.63(d,J=7.0 Hz,3 H)；HRMS(B)m/z 387.2029(M+H)⁺。

實例185及186

(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(93 mg，0.38 mmol)及1-(4-(哌啶-1-基)苯基)乙胺(410 mg，2.01 mmol，5.2當量)於DMSO(1 mL)中之溶液在110℃下加熱2小時。反應混合物以EtOAc(8 mL)稀釋且用水(30 mL)洗 滌。分離後，用EtOAc(3×8 mL)萃取水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷10%至100%)得到(4S)-4-異丙基-3-(2-((1-(4-(哌啶-1-基)苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(57 mg)，產率為36%。利用使用含5%至55% MeOH(含有0.2% Et₂NH)之CO₂的管柱(AD-H 4.6×100 mm)離析(4S)-4-異丙基-3-(2-(1-(4-(哌啶-1-基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮的混合物，得到(S)-4-異丙基-3-(2-((R)-1-(4-(哌啶-1-基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮及(S)-4-異丙基-3-(2-((S)-1-(4-(哌啶-1-基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮。

實例185第一溶離產物(16 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.10(d,J=5.8 Hz,1 H),7.31(d,J=5.8 Hz,1 H),7.24-7.20(m,2 H),6.94-6.91(m,2 H),4.93(q,J=7.1 Hz,1 H),4.58-4.54(m,1 H),4.34-4.27(m,2 H),3.11-3.08(m,4 H),2.63(dtd,J=14,7.1,3.5 Hz,1 H),1.73-1.67(m,4 H),1.60-1.54(m,2 H),1.49(d,J=7.1 Hz,3 H),0.98(d,J=7.1 Hz,3 H),0.86(d,J=7.1 Hz,3 H)；HRMS(B)m/z 410.2555(M+H)⁺。

實例186第二溶離產物(16 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.11(d,J=5.8 Hz,1 H),7.31(d,J=5.8 Hz,1 H),7.20-7.16(m,2 H),6.93-6.89(m,2 H),4.98(q,J=6.9 Hz,1 H),4.69-4.65(m,1 H),4.36-4.26(m,2 H),3.10-3.07(m,4 H),2.07(br s,1 H),1.73-1.67(m,J=4 H),1.60-1.54(m,2 H),1.48(d,J=7.1 Hz,3 H),0.75(d,J=7.0 Hz,3 H),0.63(d, J=7.1 Hz,3 H)；HRMS(B)m/z 410.2556(M+H)⁺。

實例187及188

(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(96 mg，0.40 mmol)及1-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)乙胺(387 mg，2.97 mmol，5.2當量)於DMSO(1.5 mL)中之溶液在110℃下加熱1½小時。反應混合物以EtOAc(8 mL)稀釋且用水(30 mL)洗滌。分離後，用EtOAc(3×8 mL)萃取水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷20%至80%)得到(S)-4-異丙基-3-(2-((R)-1-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮及(S)-4-異丙基-3-(2-((S)-1-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮。

實例187第一溶離產物(13 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.16(d,J=5.8 Hz,1 H),8.10(s,1 H),7.70-7.66(m,3 H),7.48-7.43(m,2 H),7.37(d,J=5.7 Hz,1 H),7.32-7.28(m,1 H),5.20(q,J=6.6 Hz,1 H),4.75(dt,J=7.7,4.0 Hz,1 H),4.40-4.33(m,2 H),2.61(dtt,J=11,7.0,3.6 Hz,1 H),1.60(d,J=6.9 Hz,3 H),0.96(d,J=7.1 Hz,3 H),0.87(d,J=6.9 Hz,3 H)；HRMS(B)m/z 393.2029(M+H)⁺。

實例188第二溶離產物(11 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.17(d,J=5.8 Hz,1 H),8.03(s,1 H),7.68-7.62(m,3 H),7.48-7.43(m,2 H),7.37(d,J=5.8 Hz,1 H),7.32-7.27(m,1 H),5.19(q,J=7.1 Hz,1 H),4.74(dt,J=8.5,3.6 Hz,1 H),4.38-4.29(m,2 H),2.37-2.33(m,1 H),1.60(d,J=7.1 Hz,3 H),0.79(d,J=7.1 Hz,3 H),0.73(s,J=7.1 Hz,3 H)；HRMS(B)m/z 393.2039(M+H)⁺。

實例189及190

(R)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-苯基唑啶-2-酮(97 mg，0.35 mmol)、1-(聯苯-4-基)乙胺鹽酸鹽(304 mg，1.30 mmol，3.7當量)及iPr₂NEt(0.307 mL，1.76 mmol，5.0當量)於DMSO(1 mL)中之溶液在110℃下加熱1½小時且在130℃下加熱20小時。反應混合物以EtOAc(8 mL)稀釋且用水(30 mL)洗滌。分離後，用EtOAc(3×8 mL)萃取水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷10%至50%)得到(R)-3-(2-((R)-1-(聯苯-4-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-苯基唑啶-2-酮及(R)-3-(2-((S)-1-(聯苯-4-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-苯基唑啶-2-酮。

實例189第一溶離產物(12 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.10(d,J=5.8 Hz,1 H),7.58-7.55(m,2 H),7.44-7.37(m,6 H),7.33-7.28(m,1 H),7.24-7.14(m,6 H),5.84(dd,J=8.6,3.5 Hz,1 H),4.94(q,J=6.7 Hz,1 H),4.81(t,J=8.6 Hz,1 H),4.22(dd,J=8.8,3.8 Hz,1 H),1.49(d,J=7.1 Hz,3 H)；HRMS(B)m/z 437.1981(M+H)⁺。

實例190第二溶離產物(11 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.10(d,J=5.8 Hz,1 H),7.60-7.54(m,4 H),7.44-7.28(m,11 H),5.60(dd,J=8.6,4.0 Hz,1 H),4.77-4.69(m,2 H),4.19(dd,J=8.6,4.0 Hz,1 H),1.25(d,J=7.0 Hz,3 H)；HRMS(B)m/z 437.1971(M+H)⁺。

實例191及192

利用使用含40% iPrOH之CO₂的管柱(IA 4.6×100 mm)離析(4S)-3-(2-(1-(2,3-二氫苯并[b][1,4]二氧雜環己烯-6-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(實例130，52 mg)，得到(S)-3-(2-((R)-1-(2,3-二氫苯并[b][1,4]二氧雜環己烯-6-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮及(S)-3-(2-((S)-1-(2,3-二氫苯并[b][1,4]二氧雜環己烯-6-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮。

實例191第一溶離產物(7 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.10(d,J=5.6 Hz,1 H),7.33-7.31(m,1 H),6.82-6.74(m,3 H),4.88(q,J=7.1 Hz,1 H),4.58-4.53(m,1 H),4.34-4.28(m,2 H),4.21-4.18(m,4 H),2.63(td,J=7.1,3.5 Hz,1 H),1.47(d,J=7.1 Hz,3 H),0.99(d,J=7.1 Hz,3 H),0.86(d,J=7.1 Hz,3 H)；HRMS(B)m/z 385.1875(M+H)⁺。

實例192第二溶離產物(19 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.12(d,J=5.8 Hz,1 H),7.33-7.31(m,1 H),6.78-6.72(m,3 H),4.93(q,J=6.7 Hz,1 H),4.68-4.64(m,1 H),4.36-4.27(m,2 H),2.08(br s,1 H),1.47(d,J=7.1 Hz,3 H),0.76(d,J=7.1 Hz,3 H),0.65(d,J=7.1 Hz,3 H)；HRMS(B)m/z 385.1873(M+H)⁺。

實例193及194

(R)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-苯基唑啶-2-酮(83 mg，0.30 mmol)及1-(3,4-二氯苯基)乙胺(260 mg，1.37 mmol，4.5當量)於DMSO(1.5 mL)中之溶液在110℃下加熱1½小時。反應混合物以EtOAc(8 mL)稀釋且用水(30 mL)洗滌。分離後，用EtOAc(3×8 mL)萃取水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至40%)得到(R)-3-(2-((R)-1-(3,4-二氯苯基)乙基胺基)嘧啶-4- 基)-4-苯基唑啶-2-酮及(R)-3-(2-((S)-1-(3,4-二氯苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-苯基唑啶-2-酮。

實例193第一溶離產物(13 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.11(d,J=5.6 Hz,1 H),7.44-7.38(m,5 H),7.35-7.31(m,1 H),7.27-7.25(m,2 H),7.18(dd,J=8.3,2.3 Hz,1 H),5.53(dd,J=8.8,3.8 Hz,1 H),4.76(t,J=8.8 Hz,1 H),4.59-4.53(m,1 H),4.18(dd,J=8.8,4.3 Hz,1 H),1.22(d,J=7.1 Hz,3 H)；HRMS(B)m/z 429.0899(M+H)⁺。

實例194第二溶離產物(26 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.13(d,J=5.6 Hz,1 H),7.41(d,J=6.1 Hz,1 H),7.25-7.18(m,5 H),7.09-7.06(m,2 H),6.95-6.93(m,1 H),5.78(dd,J=8.6,3.5 Hz,1 H),4.89(q,J=6.7 Hz,1 H),4.79(t,J=8.6 Hz,1 H),4.18(dd,J=8.8,3.8 Hz,1 H),1.42(d.J=7.1 Hz,3 H)；HRMS(B)m/z 429.0887(M+H)⁺。

實例195及196

利用使用含45% MeOH之CO₂的管柱(IA 4.6×100 mm)離析(4S)-4-甲基-4-苯基-3-(2-(1-(4-(哌啶-1-基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(實例141，51 mg)，得到(S)-4-甲基-4-苯基-3-(2-((S)-1-(4-(哌啶-1-基)苯基)乙基胺基)嘧 啶-4-基)唑啶-2-酮及(S)-4-甲基-4-苯基-3-(2-((R)-1-(4-(哌啶-1-基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮。

實例195第一溶離產物(21.6 mg)¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 8.13(d,J=5.8 Hz,1 H),7.41(d,J=5.8 Hz,1 H),7.36-7.33(m,4 H),7.32-7.26(m,1 H),6.88-6.82(br m,4 H),5.01(br s,1 H),4.30(s,2 H),3.16-3.13(m,4 H),2.20(s,3 H),1.76-1.57(br m,6 H),1.37(d,J=6.7 Hz,3 H)；HRMS(B)m/z 458.2558(M+H)⁺。

實例196第二溶離產物(20.6 mg)¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 8.14(d,J=5.8 Hz,1 H),7.50-7.27(m,6 H),7.05(d,J=8.6 Hz,2 H),6.96-6.92(br m,2 H),5.27(br s,1 H),4.22(s,2 H),3.21-3.13(m,4 H),1.78-1.76(br m,7 H),1.63-1.57(br m,2 H),1.07(d,J=6.1 Hz,3 H)；HRMS(B)m/z 458.2559(M+H)⁺。

實例197及198

利用使用含40% MeOH之CO₂的管柱(IA 4.6×100 mm)離析4,4-二甲基-3-(2-(1-(4-(哌啶-1-基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(實例183，70 mg)，得到(S)-4,4-二甲基-3-(2-(1-(4-(哌啶-1-基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2- 酮及(R)-4,4-二甲基-3-(2-(1-(4-(哌啶-1-基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮。

實例197第一溶離產物(23.8 mg)¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 8.17(br d,J=5.8 Hz,1 H),7.28-7.23(m,3 H),6.93(br d,J=7.7 Hz,2 H),5.44(br s,1 H),4.97(br s,1 H),4.05-3.99(m,2 H),3.15-3.12(m,4 H),1.77-1.70(m,8 H),1.61-1.54(m,5 H),1.32(br s,2 H)；HRMS(B)m/z 396.2413(M+H)⁺。

實例198第二溶離產物(22.3 mg)¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 8.17(br d,J=5.5 Hz,1 H),7.28-7.23(m,3 H),6.94(br d,J=7.5 Hz,2 H),5.48(br s,1 H),4.97(br s,1 H),4.05-3.99(m,2 H),3.15-3.12(m,4 H),1.77-1.70(m,8 H),1.61-1.54(m,5 H),1.31(br s,2 H)；HRMS(B)m/z 396.2410(M+H)⁺。

實例199及200

(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(98 mg，0.41 mmol)、1-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)乙胺鹽酸鹽(502 mg，2.08 mmol，5.1當量)及iPr₂NEt(0.637 mL，3.65 mmol，9.0當量)於DMSO(1.5 mL)中之溶液在110℃下加熱16小時。反應混合物以EtOAc(8 mL)稀釋且用水(30 mL)洗滌。分離後，用EtOAc(3×8 mL)萃取水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷20%至80%)得到(S)-3-(2-((R)-1-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮及(S)-3-(2-((S)-1-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮。

實例199第一溶離產物(49 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.16(d,J=5.8 Hz,1 H),8.06(s,1 H),7.71-7.67(m,3 H),7.37(d,J=5.9 Hz,1 H),7.22-7.16(m,2 H),5.20(q,J=6.6 Hz,1 H),4.74(dt,J=7.6,3.8 Hz,1 H),4.40-4.34(m,2 H),2.60(dtd,J=14,7.0,3.5 Hz,1 H),1.59(d,J=6.9 Hz,3 H),0.96(d,J=7.1 Hz,3 H),0.87(d,J=7.1 Hz,3 H)；HRMS(B)m/z 411.1943(M+H)⁺。

實例200第二溶離產物(27 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.17(d,J=5.8 Hz,1 H),8.00(s,1 H),7.69-7.66(m,2 H),7.61(s,1 H),7.37(d,J=5.9 Hz,1 H),7.22-7.16(m,2 H),5.19(q,J=6.7 Hz,1 H),4.73(dt,J=8.1,3.5 Hz,1 H),4.39-4.30(m,2 H),2.38-2.31(m,1 H),1.59(d,J=6.8 Hz,3 H),0.79(d,J=7.1 Hz,3 H),0.73(d,J=7.0 Hz,3 H)；HRMS(B)m/z 411.1937(M+H)⁺。

實例201及202

(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(93 mg，0.38 mmol)、1-(1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)乙胺鹽酸鹽(514 mg，2.03 mmol，5.3當量)及iPr₂NEt(0.605 mL，3.46 mmol，9.0當量)於DMSO(1.5 mL)中之溶液在110℃下加熱16小時。反應混合物以EtOAc(8 mL)稀釋且用水(30 mL)洗滌。分離後，用EtOAc(3×8 mL)萃取水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷10%至70%)得到(S)-4-異丙基-3-(2-((R)-1-(1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮及(S)-4-異丙基-3-(2-((S)-1-(1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮。

實例201第一溶離產物(17 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.15(d,J=5.8 Hz,1 H),7.98(s,1 H),7.63(s,1 H),7.58-7.54(m,2 H),7.37(d,J=5.8 Hz,1 H),7.03-6.99(m,2 H),5.19(q,J=7.1 Hz,1 H),4.75(dt,J=7.7,4.0 Hz,1 H),4.40-4.33(m,2 H),3.83(s,3 H),2.61(dtd,J=14,7.1,3.5 Hz,1 H),1.59(d,J=7.1 Hz,3 H),0.96(d,J=7.1 Hz,3 H),0.87(d,J=7.1 Hz,3 H)；HRMS(B)m/z 423.2138(M+H)⁺。

實例202第二溶離產物(18 mg)¹H NMR(400 MHz,CD₃OD) δ 8.16(d,J=5.8 Hz,1 H),7.91(s,1 H),7.58-7.53(m,3 H),7.37(d,J=5.9 Hz,1 H),7.03-6.99(m,2 H),5.18(q,J=6.7 Hz,1 H),4.76-4.72(m,1 H),4.39-4.30(m,2 H),3.83(s,3 H),2.31(br s,1 H),1.59(d,J=7.1 Hz,3 H),0.80(d,J=7.1 Hz,3 H),0.73(d,J=7.1 Hz,3 H)；HRMS(B)m/z 423.214(M+H)⁺。

實例203及204

利用使用含30% MeOH(經0.2% Et₂NH改質)之CO₂的管柱(AD-H 4.6×100 mm)離析4-(4-甲氧基苯基)-5,5-二甲基-3-(2-((S)-1-苯基乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(實例54，62 mg)，得到(S)-4-(4-甲氧基苯基)-5,5-二甲基-3-(2-((S)-1-苯基乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮及(R)-4-(4-甲氧基苯基)-5,5-二甲基-3-(2-((S)-1-苯基乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮。

實例203第一溶離產物(22 mg)¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 8.12(br d,J=5.6 Hz,1 H),7.53(d,J=5.7 Hz,1 H),7.37-7.24(m,5 H),7.08-7.05(m,2 H),6.92-6.89(m,2 H),5.47(br s,1 H),5.02(br s,1 H),4.66(br s,1 H),3.83(s,3 H),1.50(s,3 H),1.28(br d,J=6.6 Hz,3 H),1.01(s,3 H)； HRMS(B)m/z 419.208(M+H)⁺。

實例204第二溶離產物(22.2 mg)¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 8.11(br d,J=6.1 Hz,1 H),7.55(d,J=5.8 Hz,1 H),7.28-7.22(m,3 H),7.08(br s,2 H),7.01(d,J=8.6 Hz,2 H),6.79(d,J=8.6 Hz,2 H),5.40(br s,1 H),5.30(s,1 H),4.83(br s,1 H),3.78(s,3 H),1.66(s,3 H),1.51(d,J=6.8 Hz,3 H),1.04(s,2 H)；HRMS(B)m/z 419.2083(M+H)⁺。

實例205

在-78℃下向4-(4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苄基)-2,2-二甲基哌嗪-1-甲酸第三丁酯(78 mg，0.14 mmol)於DCM(1 mL)中之溶液中緩慢地添加TFA(1 mL，12 mmol)。反應物在室溫下攪拌1小時，隨後濃縮且用DCM(10 mL)稀釋。溶液與3當量之MP-碳酸酯樹脂(3.28 mmol/g，Biotage)一起在室溫下攪拌1小時。藉由過濾移除樹脂且用DCM洗滌(2×5 mL)。濃縮濾液且經由HPLC純化，得到呈白色固體狀之(S)-3-(2-(((S)-1-(4-((3,3-二甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(23 mg，36%產率)。

¹H NMR(400 MHz,MeOD)δ 8.07(d,J=5.8 Hz,1H),7.30 (d,J=5.8 Hz,1H),7.26-7.18(m,4H),5.00(q,J=6.9 Hz,1H),4.62(br s,1H),4.36-4.16(m,2H),3.36(s,2H),2.81(br t,J=5.1 Hz,2H),2.30(br s,2H),2.10(br s,2H),1.82(br s,1H),1.45(d,J=7.0 Hz,3H),1.08(s,6H),0.67(br s,3H),0.52(br s,3H)；HRMS(B)m/z 453.2969(M+H)⁺。

實例206

4-(4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苄基)哌嗪-1-甲酸苄酯(190 mg，0.34 mmol)及10% Pd-C(40 mg，0.038 mmol)於乙醇(3.4 ml)中之混合物在1大氣壓力之氫氣下攪拌3小時。過濾混合物且濃縮，得到呈白色固體狀之(S)-4-異丙基-3-(2-(((S)-1-(4-(哌嗪-1-基甲基)苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(97 mg，67.2%產率)。

¹H NMR(400 MHz,MeOD)δ 8.08(d,J=5.8 Hz,1H),7.30(d,J=5.8 Hz,1H),7.28-7.19(m,4H),5.01(q,J=7.0 Hz,1H),4.63(br s,1H),4.37-4.14(m,2H),3.44(s,2H),2.78(t,J=5.0 Hz,4H),2.39(br s,4H),1.89(br s,1H),1.45(d,J=7.0 Hz,3H),0.68(br s,3H),0.52(br s,3H)；HRMS(B)m/z 425.2662(M+H)⁺。

實例207

在5mL微波小瓶中，(S)-3-(2-((S)-1-(4-溴苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(86mg，0.21mmol)、吡啶-4-基酸(26mg，0.21mmol)、碳酸氫鈉(0.21mL，0.42mmol，2M溶液)於二烷(1mL)中之溶液經N₂鼓泡3分鐘，隨後添加Cl₂Pd(dppf).CH₂Cl₂(17mg，0.021mmol)。將蓋封之管加熱至100℃持續16小時。冷卻後，反應混合物以EtOAc(10mL)稀釋且用水(10mL)洗滌。分離後，用EtOAc(3×10mL)萃取水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。經由矽膠管柱層析(含EtOAc之庚烷，12%至100%)純化粗物質，得到呈白色固體狀之(S)-4-異丙基-3-(2-(((S)-1-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(27mg，30.5%產率)。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ 8.35(d,J=5.4Hz,1H),8.08(d,J=5.9Hz,1H),7.64-7.60(m,2H),7.49(br d,J=1.8Hz,1H),7.43-7.39(m,3H),7.30(d,J=5.8Hz,1H),5.02(q,J=6.8Hz,1H),4.55(br s,1H),4.27-4.18(m,2H),2.52(s,3H),1.65(br s,1H),1.49(d,J=7.1Hz,3H),0.55(br s,3H),0.43(br s,3H)；HRMS(B)m/z 418.2227(M+H)⁺。

實例208

在-78℃下向4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基((S)-1-(4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(45 mg，0.09 mmol)於DCM(1 mL)中之溶液中緩慢地添加TFA(1 mL，12 mmol)。反應物在室溫下攪拌1小時，隨後濃縮且用DCM(10 mL)稀釋。用飽和NaHCO₃溶液及鹽水洗滌溶液。分離後，用DCM(3×10 mL)萃取水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮，得到呈白色固體狀之(S)-4-異丙基-3-(2-(((S)-1-(4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(35 mg，97%產率)。

¹H NMR(400 MHz,MeOD)δ 8.09(d,J=5.9 Hz,1H),7.86(s,1H),7.72(d,J=0.8 Hz,1H),7.45-7.41(m,2H),7.30(d,J=5.8 Hz,1H),7.25(d,J=7.9 Hz,2H),4.97(q,J=7.0 Hz,1H),4.58(br s,1H),4.30-4.21(m,2H),3.86(s,3H),1.66(br s,1H),1.48(d,J=7.0 Hz,3H),0.60(br s,3H),0.48(br s,3H)；HRMS(B)m/z 407.2179(M+H)⁺。

實例209

遵循上文關於實例208之程序，自(S)-1-(4-(環己烷甲醯胺基)苯基)乙基(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基)胺基甲酸第三丁酯製備呈白色固體狀之N-(4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯基)環己烷甲醯胺(45 mg，92%產率)。

¹H NMR(400 MHz,MeOD)δ 8.08(d,J=5.9 Hz,1H),7.47-7.41(m,2H),7.30(d,J=5.8 Hz,1H),7.23-7.16(m,2H),4.95(q,J=7.0 Hz,1H),4.60(br s,1H),4.32-4.19(m,2H),2.30(tt,J=11.8,3.3 Hz,1H),1.89-1.72(m,4H),1.72-1.63(m,1H),1.54-1.39(m,5H),1.39-1.14(m,4H),0.67(br s,3H),0.54(br s,3H)；HRMS(B)m/z 452.2636(M+H)⁺。

實例210

向4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯甲醛(35 mg，0.1 mmol)及2-甲基八氫吡咯并[3,4-c]吡咯(14 mg，0.11 mmol)於MeOH(2 mL)中之溶液中添加乙酸(7.2 mg，0.12 mmol)及5-乙基-2-甲基吡啶硼 烷複合物(14 mg，0.1 mmol，sigmaaldrich)。溶液在50℃下攪拌4小時，隨後添加5滴水。溶液再在室溫下攪拌2小時，隨後用EtOAc(10 mL)稀釋且用水(10 mL)洗滌。分離後，用EtOAc(3×10 mL)萃取水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。經由HPLC純化粗物質，得到呈白色固體狀之(4S)-4-異丙基-3-(2-(((1S)-1-(4-((5-甲基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)甲基)苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(10 mg，21.7%產率)。

¹H NMR(400 MHz,MeOD)δ 8.07(d,J=5.8 Hz,1H),7.29(d,J=5.8 Hz,1H),7.25-7.20(m,4H),5.00(q,J=7.0 Hz,1H),4.63(br s,1H),4.31-4.23(m,2H),3.55-3.48(m,2H),2.68(dh,J=13.6,4.3,3.7 Hz,2H),2.64-2.48(m,4H),2.36-2.29(m,4H),2.28(s,4H),1.84(br s,1H),1.45(d,J=7.0 Hz,3H),0.68(br s,3H),0.52(br s,3H)；HRMS(B)m/z 465.2975(M+H)⁺。

實例211

3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(89.1 mg，0.487 mmol)、1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙胺(115.9 mg，0.518 mmol，1.06當量)及DIPEA(0.20 mL，1.1 mmol，2.4當量) 於DMSO(1.5 mL)中之溶液在110℃下加熱100分鐘。反應混合物以EtOAc(8 mL)稀釋且用水(30 mL)洗滌。分離後，用EtOAc(3×8 mL)萃取水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(含MeOH之CH₂Cl₂，0至5%)得到3-(2-(1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(18.2 mg，白色固體)，產率為10.3%。

¹H NMR(400 MHz,DMSO-d ₆)8.21(br s,1 H),8.00-7.97(m,2 H),7.65-7.61(m,2 H),7.30(br s,1 H),5.28(br s,1 H),4.44-4.38(br m,2 H),4.14-4.08(m,1 H),3.99(br s,0.5 H),3.75(br s,0.5 H),1.64(d,J=7.0 Hz,3 H)；HRMS(B)m/z 387.0962(M+H)⁺

實例212

(S)-1-(4-苯氧基苯基)乙胺鹽酸鹽(281 mg，1.125 mmol)、3-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(103 mg，0.379 mmol)及DIPEA(0.331 ml，1.896 mmol)於DMSO中之溶液經加熱至110℃持續1小時。LCMS顯示有少量產物。再加熱16小時。LCMS仍顯示有起始物質。再添加5當量之DIPEA及1當量之KF。加熱至110℃持續2小時。LCMS 顯示有產物。反應混合物以EtOAc(8 mL)稀釋且用水(30 mL)洗滌。分離後，用EtOAc(3×8 mL)萃取水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。藉由管柱層析(10%至50% EtOAc/庚烷)純化，得到(S)-1-(5-氟-2-(1-(4-苯氧基苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-3-氧雜-1-氮雜螺[4.4]壬-2-酮(62 mg，0.138 mmol)。

¹H NMR(400 MHz,MeOD)δ 8.25(d,J=2.8 Hz,1H),7.34(ddd,J=8.7,4.9,2.3 Hz,4H),7.16-7.04(m,1H),7.02-6.90(m,4H),4.96(q,J=7.0 Hz,1H),4.30-4.25(m,2H),2.38(dt,J=13.1,8.4 Hz,1H),2.02(br s,1H),1.80(ddd,J=12.7,7.3,4.2 Hz,1H),1.71-1.63(br m,2H),1.61-1.49(m,3H),1.53(d,J=7.0 Hz,3 H)。HRMS(B)(M+H)449.1984，計算值(M+H)449.1989

表7中之化合物係使用與關於實例1、113、211及212之製備所述實質上類似的方法來製備。

表9中之化合物係使用與關於實例1、113及171至212之製備所述實質上類似的方法(包括對掌性分離以分離兩種非對映異構體)來製備。

實例459

(S)-(4-(1-胺基乙基)苯基)甲醇鹽酸鹽(4.0301 g，21.47 mmol，購自NetChem)、(S)-3-(2-氟嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(5.3648 g，23.82 mmol，1.11當量)及DIPEA(38.0 mL，218 mmol，10.1當量)於DMSO(40 mL)中之溶液在110℃下加熱135分鐘。反應混合物以EtOAc(200 mL)稀釋且用水(200 mL)洗滌。分離後，用EtOAc(2×150 mL)洗滌水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。 矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷30%至100%)得到(S)-3-(2-((S)-1-(4-(羥基甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(6.42 g)，產率為84%。

¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 8.13(d,J=5.8 Hz,1H),7.36-7.28(m,5 H),5.06(q,J=7.0 Hz,1 H),4.68(br s,1 H),4.58(s,2 H),4.37-4.29(m,2 H),1.80(br s,1 H),1.52(d,J=7.1 Hz,3 H),0.74(br s,3 H),0.61(br s,3 H)；MS m/z 355.1(M-H)

實例460

使用與關於實例459之製備所述類似的方法來製備(S)-3-(2-((S)-1-(3-氟-4-(羥基甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮。¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 8.15(d,J=5.9 Hz,1 H),7.51-7.49(m,1 H),7.37(t,J=7.7 Hz,1 H),7.11(d,J=7.8 Hz,1 H),7.01(d,J=11,Hz,1 H),6.09(br s,1 H),5.00(br s,1 H),4.73(s,2 H),4.61-4.55(m,1 H),4.30(t,J=8.7 Hz,1 H),4.25-4.21(m,1 H),3.00(s,1 H),1.89(br s,1 H),1.54(d,J=7.1 Hz,3 H),0.67(br s,6 H)；MS m/z 375.0(M+H)。

實例461

(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(50 mg，0.165 mmol)、2,2,2-三氟-1-苯基乙胺(160 mg，0.913 mmol)及pTsOH(78 mg，0.412 mmol)於2-BuOH中之溶液在110℃下加熱2.5小時。LCMS顯示起始物質以及產物。再添加78 mg pTsOH，接著添加98 mg 2,2,2-三氟-1-苯基乙胺，且在110℃下加熱1.5小時。主要為產物，一些為起始物質。冷卻後，混合物固化。添加乙腈且進行音波處理。過濾出固體(2,2,2-三氟-1-苯基乙胺之對甲苯磺酸鹽)。濃縮母液且藉由管柱層析(0-40% EtOAc/庚烷，接著逆相HPLC(XBridge C18 5 μM 10-85% ACN/水，經12分鐘，含0.01% NH₄OH改質劑)純化，得到(4R)-5,5-二甲基-4-苯基-3-(2-(2,2,2-三氟-1-苯基乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(28 mg，0.063 mmol)。

¹H NMR(400 MHz,MeOD)δ 8.20(d,J=5.8 Hz,1H),7.58(dd,J=11.4,5.8 Hz,1H),7.51(br d,J=6.8 Hz,1H),7.40(dtd,J=15.9,9.2,4.5 Hz,5H),7.33-7.22(m,3H),7.10(br s,1H),5.50(s,0.5H),5.38(s,0.5H),5.29(br s,1 H),1.70(s,1.5H),1.64(s,1.5H),1.04(s,1.5H),1.03(s,1.5H)。HRMS(B)(M+H)443.1682，計算值(M+H)443.1695

實例462及463

(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(163 mg，0.674 mmol)、2,2,2-三氟-1-苯基乙胺(624 mg，3.56 mmol，5.3當量)及單水合對甲苯磺酸(321 mg，1.69 mmol，2.5當量)於n-BuOH(3 mL)中之溶液在110℃下加熱2小時且再用單水合對甲苯磺酸(321 mg，1.69 mmol，2.5當量)處理，隨後在110℃下加熱1½小時。冷卻後，固體反應混合物以MeCN處理，進行音波處理且過濾。濃縮濾液且藉由矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至30%)純化，得到(4S)-4-異丙基-3-(2-(2,2,2-三氟-1-苯基乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(65 mg)，產率為25%。HRMS(B)m/z 381.1545(M+H)⁺。分析型RP-HPLC滯留時間=4.31//4.46分鐘(1.0 mL/min流動速率，梯度為含0.05%甲酸之5%至15%乙腈(5.00分鐘)及隨後含0.05%甲酸之15%至95%乙腈(5.00分鐘至9.50分鐘)，水相以0.1%甲酸改質)。矽膠管柱層析分離兩種非對映異構體(S)-4-異丙基-3-(2-((R)-2,2,2-三氟-1-苯基乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮及(S)-4-異丙基-3-(2-((S)-2,2,2-三氟-1-苯基乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮。

第1峰：¹H NMR(400 MHz,MeOD)δ 8.23(d,J=5.8 Hz, 1H),7.62-7.53(m,2H),7.50(d,J=5.8 Hz,1H),7.42(qt,J=5.0,2.2 Hz,3H),5.93-5.86(m,1H),4.80(dt,J=7.5,3.9 Hz,1H),4.48-4.33(m,2H),2.65(ddp,J=10.4,7.0,3.4 Hz,1H),1.05(d,J=7.0 Hz,3H),0.89(d,J=7.0 Hz,3H)。

第2峰：¹H NMR(400 MHz,MeOD)δ 8.23(d,J=5.8 Hz,1H),7.55(dd,J=7.3,2.1 Hz,2H),7.49(d,J=5.8 Hz,1H),7.45-7.32(m,3H),5.92-5.86(m,1H),4.86-4.82(m,1H),4.44-4.38(m,2H),2.26(br s,1H),0.94(d,J=7.0 Hz,3H),0.74(br s,3H)。

實例464

(S)-3-(2-氟嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(1055 mg，4.68 mmol)、1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙胺(1300 mg，5.62 mmol，1.2當量)及二異丙基乙胺(908 mg，7.03 mmol，1.5當量)於DMSO(20 mL)中之溶液在110℃下加熱1小時。將反應混合物傾倒入水(60 mL)中且用EtOAc(2×50 mL)萃取。經合併之有機物以水(40 mL)、鹽水(40 mL)洗滌，經Na₂SO₄乾燥，過濾且直接濃縮於矽膠上。矽膠層析得到(S)-3-(2-(1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮之混合非對映異構體(560 mg)。利用使用含35% MeOH之CO₂的SFC(ID，5 μm， 20×250 mm)進行對掌性分離，得到(S)-3-(2-((S)-1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮及(S)-3-(2-((R)-1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮。

實例464第一溶離產物(302 mg)¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 8.87(s,2H),8.23(d,J=5.8 Hz,1H),7.49(d,J=5.7 Hz,1H),7.43-7.30(m,2H),7.21-7.11(m,1H),6.26(br s,1H),5.31(br s,1H),4.75(dt,J=7.9,3.3 Hz,1H),4.39-4.24(m,2H),2.38(s,3H),2.09(br s,1H),1.66-1.62(m,3H),0.90(dd,J=9.8,6.0 Hz,3H),0.78(br s,3H)。HRMS(B)m/z 437.2093(M+H)⁺。

實例465

(S)-4-異丙基-3-(2-((S)-1-(哌啶-4-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(225 mg，0.675 mmol)、4-氟苯-1-磺醯氯(146 mg，0.750 mmol)及DIPEA(1 ml)於CH₂Cl₂中之溶液在室溫下攪拌2小時。反應混合物以CH₂Cl₂稀釋且用水洗滌。用CH₂Cl₂萃取水層。經合併之有機物以鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。藉由管柱層析純化殘餘物，得到(S)-3-(2-((S)-1-(1-(4-氟苯基磺醯基)哌啶-4-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(4.5 mg，0.009 mmol)。

¹H NMR(400 MHz,MeOD)δ 8.45(d,J=6.0 Hz,1H),8.23-8.15(m,2H),7.73-7.63(m,3H),5.13(dt,J=7.4,3.7 Hz,1H),4.78-4.69(m,2H),4.26(p,J=6.7 Hz,1H),4.17(dddd,J=11.8,6.4,4.7,2.3 Hz,2H),2.89(ddq,J=10.7,7.1,3.5 Hz,1H),2.69(tdd,J=11.6,8.9,2.6 Hz,2H),2.27-2.11(m,2H),1.82(dddt,J=11.9,9.0,5.8,2.9 Hz,1H),1.77-1.64(m,2H),1.52(d,J=6.8 Hz,3H),1.30(d,J=7.1 Hz,3H),1.21(d,J=6.9 Hz,3H)。HRMS(B)(M+H)492.2069，計算值(M+H)492.2081。

使用與關於實例465所述實質上類似的方法來製備以下實例：

實例466

藉由管柱層析(20%%至100% EtOAc/庚烷)純化，接著逆相製備型層析(C18管柱，10-85% ACN/水0.1% NH₄OH改質劑，經12分鐘)，得到(S)-3-(2-((S)-1-(1-(4-氟苯甲醯基)哌啶-4-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(12 mg，0.026 mmol)。

¹H NMR(400 MHz,MeOD)δ 8.12(d,J=5.8 Hz,1H),7.51-7.41(m,2H),7.36(d,J=5.8 Hz,1H),7.25-7.15(m,2H), 4.82(td,J=5.9,3.6 Hz,1H),4.68(br s,1H),4.41(d,J=5.7 Hz,2H),3.98(p,J=6.7 Hz,1H),3.78(br s,1H),3.12(br s,1H),2.82(br s,1H),2.60(pd,J=7.1,6.5,3.7 Hz,1H),1.92(br s,1H),1.80(dtd,J=15.3,9.4,7.0,3.6 Hz,2H),1.31(br s,2H),1.22(d,J=6.8 Hz,3H),0.99(d,J=7.1 Hz,3H),0.88(d,J=6.9 Hz,3H)。HRMS(B)(M+H)456.2384，計算值(M+H)456.2411。

實例467

藉由管柱層析(MeOH/CH₂Cl₂ 0至20%)純化，得到(S)-4-異丙基-3-(2-((S)-1-(1-(四氫-2H-哌喃-4-羰基)哌啶-4-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(15 mg，0.034 mmol)。

¹H NMR(400 MHz,MeOD)δ 8.12(d,J=5.8 Hz,1H),7.36(d,J=5.8 Hz,1H),4.81(td,J=5.6,3.3 Hz,1H),4.59(br s,1H),4.41(d,J=5.7 Hz,2H),4.13(br s,1H),3.96(ddd,J=11.6,4.3,2.2 Hz,3H),3.51(tq,J=11.8,2.8 Hz,2H),3.15-2.89(m,2H),2.69-2.48(m,2H),1.99-1.68(m,5H),1.61(ddt,J=10.7,4.0,2.3 Hz,2H),1.35-1.23(m,1H),1.21(d,J=6.7 Hz,3H),1.19-1.09(m,1H),0.98(dd,J=7.0,1.5 Hz,3H),0.88(d,J=7.0 Hz,3H)。HRMS(B)(M+H)446.2748，計算值(M+H)446.2767。

實例468

藉由管柱層析(50%至100% EtOAc/庚烷，接著0%至20% MeOH/CH₂Cl₂)純化，得到(S)-4-異丙基-3-(2-((S)-1-(1-(嗎啉-4-羰基)哌啶-4-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(21 mg，0.047 mmol)。

¹H NMR(400 MHz,MeOD)δ 8.11(d,J=5.8 Hz,1H),7.36(d,J=5.8 Hz,1H),4.81(td,J=5.8,3.4 Hz,1H),4.41(d,J=5.7 Hz,2H),3.95(p,J=6.8 Hz,1H),3.84-3.70(m,2H),3.68-3.65(m,4H),3.26-3.23(m,4H),2.80(tt,J=12.9,3.1 Hz,2H),2.60(ddq,J=10.4,7.0,3.5 Hz,1H),1.88-1.73(m,2H),1.67(ddt,J=18.5,10.4,3.5 Hz,1H),1.37-1.23(m,2H),1.21(d,J=6.8 Hz,3H),0.99(d,J=7.1 Hz,3H),0.88(d,J=7.0 Hz,3H)。HRMS(B)(M+H)447.2690，計算值(M+H)447.2720。

實例469

藉由管柱層析純化，得到(S)-3-(2-((S)-1-(1-(環己烷羰基)哌啶-4-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮。

¹H NMR(400 MHz,MeOD)δ 8.12(d,J=5.7 Hz,1H),7.36(d,J=5.6 Hz,1H),4.80(dt,J=5.8,2.9 Hz,1H),4.59(br s,1H),4.40(d,J=5.6 Hz,2H),4.18-4.03(m,1H),3.95(p,J=6.8 Hz,1H),3.05(ddd,J=14.1,10.1,6.6 Hz,1H),2.58(td,J=25.1,23.5,13.0 Hz,3H),1.97-1.63(m,8H),1.54-1.08(m,7H),1.21(d,J=6.8 Hz,3H),0.98(d,J=6.8 Hz,3H),0.88(d,J=6.9 Hz,3H)。HRMS(B)(M+H)444.2953，計算值(M+H)444.2975。

實例470

(S)-3-(2-(((S)-1-(4-胺基苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(100 mg，0.30 mmol)、苯磺醯氯(65 mg，0.36 mmol，1.2當量)及吡啶(35 mg，0.45 mmol，1.5當量)於DCM(5 mL)中之溶液在室溫下攪拌15小時。用MeOH淬滅反應混合物，移除溶劑得到粗產物，藉由矽膠管柱層析(EA：MeOH=1：0至9：1)純化，移除溶劑得到純產物(46.8 mg，白色固體)，產率為31.5%。N-(4-((S)-1-((4-((S)-4-異 丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基)胺基)乙基)苯基)苯磺醯胺。¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 8.18-7.90(m,2H),7.74(d,J=7.8 Hz,2H),7.45(t,J=7.4 Hz,1H),7.39-7.35(m,2H),7.10(d,J=8.1 Hz,2H),6.96(d,J=8.0 Hz,2H),6.41(s,1H),4.99-4.79(m,1H),4.62-4.39(m,1H),4.28-3.99(m,2H),1.91-1.65(b,1H),1.40(d,J=7.0 Hz,3H),0.53(b,J=21.1 Hz,6H)。HRMS(B)m/z 482.1847(M+H)⁺。滯留時間=2.60分鐘。

實例471

將(三乙氧基甲基)苯(360 mg，1.6 mmol，5.0當量，於5 mL苯及0.5 mL冰醋酸中)之溶液添加至(S)-2-((4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基)胺基)丙烷醯肼(99 mg，0.30 mmol，1.0當量)中，反應混合物在回流下攪拌1.5小時，移除溶劑得到粗產物。矽膠管柱層析(含乙酸乙酯之庚烷，10%至90%)得到(S)-4-異丙基-3-(2-(((S)-1-(5-苯基-1,3,4-二唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(21.2 mg，白色固體)，產率為15.9%。HRMS(B)m/z 395.1820,(M+H)⁺，滯留時間=2.42分鐘

實例472

向(S)-4-異丙基-3-(2-(((S)-1-(5-(甲硫基)-1,3,4-二唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(102 mg，0.28 mmol，於1.5 ml CH₃COOH中)之溶液中逐滴添加KMnO₄溶液(66.4 mg，0.42 mmol，1.5當量，於2.5 ml水中)。溶液在室溫下攪拌25分鐘，用亞硫酸氫鈉使混合物脫色，所得溶液以DCM萃取，用飽和NaHCO₃洗滌，經Na₂SO₄乾燥，移除溶劑得到呈白色固體狀之所需純產物。(S)-4-異丙基-3-(2-(((S)-1-(5-(甲基磺醯基)-1,3,4-二唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(83 mg，白色固體)，產率為71%。HRMS(B)m/z 397.1281(M+H)⁺。滯留時間=1.80分鐘。

實例473及474

將1-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-乙酮(75 mg，0.468 mmol)、乙酸銨(722 mg，9.36 mmol，20.0當量)及氰基硼 氘化鈉(131 mg，1.999 mmol，4.25當量)組合於丙-2-醇(5 ml)中且在紅外照射下在130℃下加熱4分鐘。反應物以EtOAc(15 ml)及水(15 ml)稀釋且用6 M NaOH溶液(1 ml)處理至約10 pH值。產物1-氘代-1-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)乙胺不經進一步純化即繼續進行下一步驟。

3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(99 mg，0.441 mmol)、1-氘代-1-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)乙胺(72 mg，0.441 mmol，1.0當量)及DIEA(0.154 mL，0.882 mmol，2.0當量)於DMSO(1 mL)中之溶液在130℃下加熱120分鐘。反應混合物以EtOAc(20 mL)稀釋且用水(10 mL)洗滌並在真空中濃縮。經由利用以40-50% MeOH/0.2% DEA/CO₂(v/v)溶離之AI管柱(75 g/min，120巴，20×250 mm)的對掌性SFC層析離析(4S)-3-(2-((1-氘代-1-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮，得到(4S)-3-(2-(((R)-1-氘代-1-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮及(4S)-3-(2-(((S)-1-氘代-1-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮。

第1峰473

¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 10.10(s,1H),8.33(d,J=2.2 Hz,1H),8.21(d,J=5.7 Hz,1H),7.92(d,J=2.3 Hz,1H),7.46(d,J=5.7 Hz,1H),7.35(dd,J=3.5,2.0 Hz,1H),6.47(dd,J=3.4,1.7 Hz,1H),5.82(s,1H),1.66-1.58(m,3H),4.59(dt,J=7.7,3.2 Hz,1H),4.28(t,J=8.8 Hz,1H),4.19 (dd,J=9.2,3.1 Hz,1H),3.51(s,1H),1.78(d,J=28.5 Hz,2H),1.30-1.15(m,1H),0.57(s,6H)。LCMS m/z 368.1(M+H)滯留時間=2.36分鐘。

第2峰474

LCMS m/z 368.1(M+H)滯留時間=2.66分鐘。

實例475

3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(100 mg，0.444 mmol)、(3-(對甲苯基)-1,2,4-二唑-5-基)甲胺(84 mg，0.444 mmol，1.0當量)及TEA(0.186 mL，1.332 mmol，3.0當量)於丁-1-醇(2 mL)中之溶液在100℃下加熱90分鐘。添加丙-1-醇(1 ml)且在150℃下加熱60分鐘。在真空中濃縮反應混合物。藉由用0-30% EtOAc/DCM溶離之急驟管柱(二氧化矽，24 g)，得到(S)-4-異丙基-3-{2-[(3-對甲苯基-[1,2,4]二唑-5-基甲基)-胺基]-嘧啶-4-基}-唑啶-2-酮(95 mg，白色泡沫狀物)，產率為54.2%。HRMS(B)m/z 394.17532.38分鐘。

實例476

向4-{(S)-1-[4-((S)-4-異丙基-2-側氧基-唑啶-3-基)-嘧啶-2-基胺基]-乙基}-哌啶-1-甲酸苄酯(22 mg)於甲醇(5 mL)中之溶液中添加氫氧化鈀/碳(7 mg，0.05 mmol)。反應物隨後在室溫下攪拌16小時。隨後過濾反應物且隨後在真空下濃縮。隨後使用逆相C18 ODB管柱(水-乙腈，0.1% TFA改質劑)純化粗物質，得到(S)-4-異丙基-3-[2-((S)-1-哌啶-4-基-乙基胺基)-嘧啶-4-基]-唑啶-2-酮(11 mg)，產率為70%。

HRMS(B)m/z 333.2165(M+H)⁺；滯留時間：1.09分鐘。

實例477

向(S)-4-異丙基-3-[2-((S)-1-哌啶-4-基-乙基胺基)-嘧啶.4-基]-唑啶-2-酮(28 mg，0.084 mmol)於THF(2 mL)中之溶液添加環丁酮(14 mg，0.20 mmol)及三乙醯氧基硼氫化鈉(28 mg，0.13 mmol)。反應物在室溫下攪拌18小時。隨後在真空下移除溶劑。接著使用逆相C18 ODB管柱(水-乙腈，0.1% TFA改質劑)純化粗物質，得到(S)-3-{2-[(S)-1-(1-環丁基-哌啶-4-基)-乙基胺基]-嘧啶-4-基}-4-異丙基-唑啶-2-酮(20 mg)，產率為62%。

HRMS(B)m/z 388.2717(M+H)⁺；滯留時間：2.32分鐘。

實例478

向(S)-4-異丙基-3-[2-((S)-1-哌啶-4-基-乙基胺基)-嘧啶-4-基]-唑啶-2-酮(20 mg，0.060 mmol)於THF(2 mL)中之溶液中添加環丁酮(10 mg，0.17 mmol)及三乙醯氧基硼氫化鈉(20 mg，0.09 mmol)。反應物在室溫下攪拌18小時。隨後在真空下移除溶劑。接著使用逆相C18 ODB管柱(水-乙腈，0.1% TFA改質劑)純化粗物質，得到(S)-4-異丙基-3-{2-[(S)-1-(1-異丙基-哌啶-4-基)-乙基胺基]-嘧啶-4-基}-唑啶-2-酮(20 mg)，產率為62%。

HRMS(B)m/z 376.2705(M+H)⁺；滯留時間：1.24分鐘。

實例479

向(S)-4-異丙基-3-[2-((S)-1-哌啶-4-基-乙基胺基)-嘧啶-4-基]-唑啶-2-酮(20 mg，0.48 mmol)於二氯甲烷(1 mL)及DMF(1 mL)中之溶液中添加HATU(23 mg，0.06 mmol)及DIPEA(0.03 mL，0.18 mmol)。反應物在室溫下攪拌18小時。隨後在真空下移除溶劑。接著使用逆相C18 ODB管柱(水-乙腈，0.1% TFA改質劑)純化粗物質，得到(S)-4-異丙 基-3-(2-{(S)-1-[1-(吡啶-4-羰基)-哌啶-4-基]-乙基胺基}-嘧啶-4-基)-唑啶-2-酮(2 mg)，產率為8%。

HRMS(B)m/z 438.2379(M+H)⁺；滯留時間：1.82分鐘。

實例480

向(S)-4-異丙基-3-[2-((S)-1-哌啶-4-基-乙基胺基)-嘧啶-4-基]-唑啶-2-酮(16 mg，0.48 mmol)於二氯甲烷(1 mL)及DMF(1 mL)中之溶液中添加HATU(20 mg，0.05 mmol)及DiPEA(0.03 mL，0.15 mmol)。反應物在室溫下攪拌18小時。隨後在真空下移除溶劑。接著使用逆相C18 ODB管柱(水-乙腈，0.1% TFA改質劑)純化粗物質，得到(S)-4-異丙基-3-(2-{(S)-1-[1-(吡啶-4-羰基)-哌啶-4-基]-乙基胺基}-嘧啶-3-基)-唑啶-2-酮(2 mg)，產率為8%。

HRMS(B)m/z 438.2379(M+H)⁺；滯留時間：1.83分鐘。

實例481及482

向(S)-4-異丙基-3-[2-((S)-1-甲基-丙-2-炔基胺基)-嘧啶- 4-基]-唑啶-2-酮(60 mg，0.22 mmol)及苄基疊氮化物(30 mg，0.23 mmol)於水(0.5 mL)及DMSO(3 mL)中之溶液中添加五水合硫酸銅(56 mg，0.23 mmol)及L-抗壞血酸鈉鹽(45 mg，0.23 mmol)。反應物在室溫下攪拌48小時。反應混合物以EtOAc(75 mL)稀釋且用水(15 mL)及1 N碳酸氫鈉溶液(15 mL)洗滌。有機層經MgSO₄乾燥，過濾且濃縮。隨後利用使用C18管柱(水-乙腈，TFA作為改質劑)之逆相層析純化粗物質，其亦實現兩種非對映異構產物(S)-3-{2-[(S)-1-(1-苄基-1H-[1,2,3]***-4-基)-乙基胺基]-嘧啶-4-基}-4-異丙基-唑啶-2-酮及(S)-3-{2-[(R)-1-(1-苄基-1H-[1,2,3]***-4-基)-乙基胺基]-嘧啶-4-基}-4-異丙基-唑啶-2-酮之分離。

第一峰481：HRMS(B)m/z 407.2070(M+H)⁺；滯留時間：2.26分鐘。

第二峰482：HRMS(B)m/z 407.2070(M+H)⁺；滯留時間：2.32分鐘。

實例483及484

向(S)-4-異丙基-3-[2-((S)-1-甲基-丙-2-炔基胺基)-嘧啶-4-基]-唑啶-2-酮(82 mg，0.30 mmol)及疊氮基苯(36 mg， 0.30 mmol)於水(0.5 mL)及DMSO(3 mL)中之溶液中添加五水合硫酸銅(75 mg，0.23 mmol)及L-抗壞血酸鈉鹽(60 mg，0.23 mmol)。反應物在室溫下攪拌48小時。反應混合物以EtOAc(75 mL)稀釋且用水(15 mL)及1 N碳酸氫鈉溶液(15 mL)洗滌。有機層經MgSO₄乾燥，過濾且濃縮。隨後利用使用C18管柱(水-乙腈，TFA作為改質劑)之逆相層析純化粗物質，其亦實現兩種非對映異構產物(S)-4-異丙基-3-{2-[(S)-1-(1-苯基-1H-[1,2,3]***-4-基)-乙基胺基]-嘧啶-4-基}-唑啶-2-酮及(S)-4-異丙基-3-{2-[(R)-1-(1-苯基-1H-[1,2,3]***-4-基)-乙基胺基]-嘧啶-4-基}-唑啶-2-酮之分離。

第一峰483：HRMS(B)m/z 393.1913(M+H)⁺；滯留時間：2.31分鐘。

第二峰484：HRMS(B)m/z 393.1913(M+H)⁺；滯留時間：2.40分鐘。

實例485

3-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-5,5-二甲基唑啶-2-酮(30 mg，0.122 mmol)於DMSO(300 μL)中之室溫溶液以DIPEA(68 μL，0.366 mmol)處理，接著添加(S)-1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙胺(41.4 mg，0.2 mmol)。將反應物密封，在95℃下加熱約18小時。藉由逆相HPLC純化，得到(S)-3-(5-氟-2-(1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-5,5-二甲基唑啶-2-酮之三氟乙酸鹽(6.0 mg，白色固體)。¹H NMR(400 MHz，甲醇-d4)δ ppm 1.44-1.58(m,12 H)3.50-3.74(m,1 H)3.88(d,J=9.8 Hz 1 H)5.29(d,J=7.04 Hz,1 H)7.38-7.45(m,2 H)7.6(t,J=8.22 Hz 1 H)8.16(d,J=3.13 Hz,1 H)；HRMS(A)m/z 417.1360(M+H)⁺，滯留時間2.29分鐘。

表11中之化合物係使用與關於實例485之製備所述類似的方法來製備。

實例508

3-(2,6-二氯嘧啶-4-基)-4,4-二甲基唑啶-2-酮(70.0 mg，0.267 mmol)、(S)-(-)-1-苯基乙胺(0.034 mL，0.267 mmol，1.0當量)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.070 mL，0.401 mmol，1.5當量)於DMSO(1.5 mL)中之溶液在85℃下加熱2-4小時。藉由逆相HPLC純化，得到(S)-3-(6-氯-2-(1-苯基乙基胺基)嘧啶-4-基)-4,4-二甲基唑啶-2-酮之三氟乙酸鹽(20.0 mg，白色固體)，產率為16%。

¹H NMR(300 MHz,CDCl₃)δ 7.36(s,1H),7.33-7.31(m,4H),7.26-7.21(m,1H),5.48(br m,1H),4.02-3.94(m,2H),1.65(s,3H),1.55(d,J=6.9 Hz,3H),1.26(s,3H)； HRMS(A)m/z 347.1274(M+H)⁺，滯留時間2.32分鐘。

表13中之化合物使用與關於實例508之製備所述類似的方法來製備。

實例514：

(S)-3-(2-(1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基胺基)-6-氟嘧啶-4-基)-4,4-二甲基唑啶-2-酮(29.0 mg，0.053 mmol)及1 N鹽酸水溶液(0.70 mL)於1,4-二烷(0.7 mL)中之溶液在100℃下加熱4小時。冷卻至室溫後，反應混合物以二氯甲烷(10 mL)稀釋，用飽和碳酸氫鈉水溶液(10 mL)洗滌，經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。藉由逆相HPLC純化，得到(S)-3-(2-(1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基胺基)-6-羥基嘧啶-4-基)-4,4-二甲基唑啶-2-酮之三氟乙 酸鹽(16 mg，白色固體)，產率為55%。¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ 8.00(d,J=8.5 Hz,2H),7.46(d,J=8.5 Hz,2H),6.71(br s,1H),5.33(br m,1H),4.02-3.99(m,2H),1.83(d,J=7.1 Hz,3H),1.68(s,3H),1.31(s,3H)；HRMS(A)m/z 431.1245(M+H)⁺，滯留時間1.80分鐘。

實例515

步驟1

向含有(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(1-甲基環丙基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(87 mg，0.29 mmol)之圓底燒瓶中添加二烷(2 mL)。向此溶液中添加含鹽酸之二烷(4.0 M，0.15 ml，0.59 mmol)且使溶液在室溫下攪拌10分鐘。移除揮發物。添加Et₂O(10 mL)且對反應混合物進行音波處理。再次移除揮發物。再次添加Et₂O(10 ml)且對懸浮液進行音波處理。收集固體物質且用Et₂O洗滌，得到呈白色固體狀之(S)-1-(2-氟-4-(1-甲基環丙基)苯基)乙胺之鹽酸鹽(42 mg，0.18 mmol，63%產率)。LCMS m/z 194.1(M+H)⁺，滯留時間0.60分鐘。

步驟2

向具有攪拌棒之微波小瓶中添加(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)- 4-異丙基唑啶-2-酮(30 mg，0.12 mmol)及DMSO(1 mL)。向此反應混合物中添加(S)-1-(2-氟-4-(1-甲基環丙基)苯基)乙胺(51 mg，0.22 mmol)及DIEA(0.09 ml，0.50 mmol)。將小瓶蓋封且反應混合物於預熱油浴中在110℃下加熱18小時。藉由逆相HPLC純化溶液。將產物溶離份合併，冷凍且凍乾，得到呈三氟乙酸鹽形式之(S)-3-(2-((S)-1-(2-氟-4-(1-甲基環丙基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(3.3 mg，6.3 μmol，5%產率)。¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 0.58(br.s.,3 H)0.77(td,J=5.23,1.76 Hz,5 H)0.80-0.86(m,2 H)1.38(s,3 H)1.57(d,J=6.94 Hz,3 H)4.34-4.41(m,2 H)4.67(br.s.,1 H)5.33(d,J=7.97 Hz,1 H)6.95-7.05(m,2 H)7.22(t,J=7.97 Hz,1 H)7.67(d,J=6.85 Hz,1 H)8.14(d,J=6.65 Hz,1 H)。LCMS m/z 399.4(M+H)⁺，滯留時間0.93分鐘。HRMS(A)m/z 399.2202(M+H)⁺，滯留時間2.23分鐘。

表15中之化合物係使用與關於實例515之製備所述類似的方法來製備。

表16. 表15中所列之各化合物的化學名稱、NMR化學位移及LCMS信號

實例547

(S)-3-(2-((S)-1-(4-(氯甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4- 異丙基唑啶-2-酮(75 mg，0.2 mmol)及5,6,7,8-四氫咪唑并[1,2-a]吡嗪(25 mg，0.2 mmol)於DMSO(2 mL)中之溶液在80℃下加熱16小時。反應混合物以EtOAc(20 mL)稀釋且用水(20 mL)洗滌。分離後，用EtOAc(2×15 mL)洗滌水相。經合併之有機物經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(含MeOH之CH₂Cl₂，0至10%)得到(S)-3-(2-((S)-1-(4-((5,6-二氫咪唑并[1,2-a]吡嗪-7(8H)-基)甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(58 mg，白色固體)，產率為62.8%。

¹H NMR(400 MHz,MeOD)δ 8.12(d,J=6.0 Hz,1H),7.34(d,J=5.9 Hz,1H),7.33(s,4H),6.99(d,J=1.3 Hz,1H),6.89(d,J=1.4 Hz,1H),5.07(q,J=7.0 Hz,1H),4.68(br s,1H),4.37-4.25(m,2H),4.02(t,J=5.5 Hz,2H),3.72(s,2H),3.63(s,2H),2.90(td,J=5.4,2.6 Hz,2H),1.84(br s,1H),1.51(d,J=7.0 Hz,3H),0.72(br s,3H),0.57(br s,3H)；HRMS m/z 462.2606(M+H)⁺。

以下化合物係使用與關於實例205之製備所述類似的方法來製備。

實例548

(4S)-3-(2-((1S)-1-(4-(3,8-二氮雜雙環[4.2.0]辛-3-基甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮。

¹H NMR(400 MHz,MeOD)δ 8.12-8.08(m,1H),7.37-7.22(m,5H),5.10-5.01(m,1H),4.66(br s,1H),4.37-4.23(m,2H),3.92-3.89(m,1H),3.63-3.54(m,1H),3.54-3.47(m,1H),3.24-3.20(m,1H),3.11-2.95(m,1H),2.95-2.73(m,1H),.2.67-2.59(m,2H),2.49(ddd,J=16.2,12.8,5.3 Hz,1H),2.20-2.08(m,1H),1.99-1.68(m,3H),1.50(d,J=7.0 Hz,3H),0.72(br s,1H),0.56(br s,1H)；HRMS m/z 451.2810(M+H)⁺。

實例549

(S)-3-(2-((S)-1-(4-((4-胺基哌啶-1-基)甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮。

¹H NMR(400 MHz,MeOD)d 8.12(d,J=5.8 Hz,1H),7.34(d,J=5.8 Hz,1H),7.27(q,J=8.2 Hz,4H),5.05(q,J=7.0 Hz,1H),4.67(s,1H),4.38-4.25(m,2H),3.48(s,2H),2.86(brd,J=11.8 Hz,2H),2.71(tt,J=10.9,4.2 Hz,1H),2.05(tt,J=12.0,2.5 Hz,2H),1.90-1.75(m,3H),1.54-1.37(m,5H),0.72(br s,4H),0.55(br s,3H)；HRMS m/z 439.2805(M+H)⁺。

以下化合物係使用與關於實例210之製備所述類似的方法來製備。

實例550

(S)-3-(2-((S)-1-(4-((4-羥基-4-甲基哌啶-1-基)甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮。

¹H NMR(400 MHz,MeOD)δ 8.12(d,J=5.7 Hz,1H),7.34(d,J=5.9 Hz,1H),7.27(t,J=6.6 Hz,4H),5.06(q,J=6.8Hz,1H),4.67(br s,1H),4.37-4.25(m,2H),3.51(d,J=3.2 Hz,2H),2.52(br s,2H),2.44(br s,2H),1.81(br s,1H),1.59(br s,4H),1.50(d,J=7.0 Hz,3H),1.19(s,3H),0.72(br s,3H),0.56(br s,3H)；HRMS m/z 454.2816(M+H)⁺。

實例552

(S)-3-(2-((S)-1-(4-((3,3-二氟哌啶-1-基)甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮。

¹H NMR(400 MHz,MeOD)δ 8.12(d,J=5.8 Hz,1H),7.35 (d,J=5.8 Hz,1H),7.28(q,J=8.2 Hz,4H),5.06(q,J=7.0 Hz,1H),4.67(br s,1H),4.39-4.25(m,2H),3.55(d,J=2.2 Hz,2H),2.56(t,J=11.5 Hz,2H),2.51-2.40(m,2H),1.91-1.81(m,3H),1.78-1.70(m,2H),1.50(d,J=7.0 Hz,3H),0.71(br s,3H),0.56(br s,3H)；HRMS m/z 460.2537(M+H)⁺。

實例553

(S)-3-(2-((S)-1-(4-(4,7-二氮雜螺[2.5]辛-7-基甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮

¹H NMR(400 MHz,MeOD)δ 8.12(d,J=5.8 Hz,1H),7.34(d,J=5.8 Hz,1H),7.32-7.24(m,4H),5.06(q,J=7.0 Hz,1H),4.68(br s,1H),4.37-4.26(m,2H),3.49(s,2H),2.89(t,J=5.0 Hz,2H),2.47(br s,2H),2.28(br s,2H),1.86(br s,1H),1.49(d,J=7.0 Hz,3H),0.72(br s,3H),0.64-0.49(m,5H),0.45(t,J=3.2 Hz,2H)；HRMS m/z 451.2809(M+H)⁺。

實例554

(S)-3-(2-((S)-1-(4-(4,7-二氮雜螺[2.5]辛-4-基甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮。

¹H NMR(400 MHz,MeOD)δ 8.11(d,J=5.8 Hz,1H),7.33(d,J=5.8 Hz,1H),7.24(q,J=8.3 Hz,4H),5.03(q,J=7.0 Hz,1H),4.67(br s,1H),4.37-4.25(m,2H),3.85(s,2H),2.85-2.65(m,6H),1.87(br s,1H),1.48(d,J=7.0 Hz,3H),0.85-0.63(m,5H),0.63-0.46(m,5H)；HRMS m/z 451.2810(M+H)⁺。

實例555

(S)-4-異丙基-3-(2-((S)-1-(4-((3,3,4,4-四氟吡咯啶-1-基)甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮。

HRMS m/z 482.2161(M+H)⁺；滯留時間=2.78分鐘。

實例556

(S)-3-(2-((S)-1-(4-((4-乙醯基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮。

HRMS m/z 467.2752(M+H)⁺；滯留時間=1.92分鐘。

實例557

在0℃下將(S)-4,6-二氟-N-(1-苯基乙基)嘧啶-2-胺(48.8 mg，0.21 mmol)添加至含NaH(95%，6.1 mg，0.25 mmol，1.2當量)之DMF(2 mL)中。5分鐘後，添加(S)-4-異丙基-2-唑啶酮(27.9 mg，0.22 mmol，1.0當量)。反應物在0℃下攪拌10分鐘且隨後溫至室溫。4小時後，反應混合物以水淬滅且傾倒入稀鹽水(1：1飽和鹽水：水)及EtOAc中。用EtOAc萃取水相且用稀鹽水洗滌經合併之有機層。有機層經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮呈粉紅色油狀物。藉由逆相HPLC純化，接著凍乾含有產物之溶離份，得到呈白色固體狀之(S)-3-(6-氟-2-(((S)-1-苯基乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(22.5 mg，三氟乙酸鹽)，產率為31%。¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 7.27-7.39(m,4H),7.17-7.26(m,1H),6.92(s,1H),5.05(q,J=7.04 Hz,1H),4.63(br.s.,1H),4.19-4.41(m,2H),1.77(br.s.,1H),1.51(d,J=7.04 Hz,3H),0.44-0.78(m,6H)；LCMS m/z 345.1(M+H)⁺，滯留時間1.00分鐘；UPLC滯留時間5.038分鐘。

表17中之化合物係使用與關於實例557之製備所述類似的方法來製備。

實例559

(R)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-苯基唑啶-2-酮(55.3 mg，0.20 mmol)、(S)-1-環丙基乙胺(40 μL，0.26 mmol，1.3當量)及iPr₂Net(0.20 mL，1.15 mmol，5.7當量)於NMP(1 mL)中之混合物在微波中在180℃下加熱20分鐘。過濾反應混合物且藉由逆相HPLC純化，得到呈白色固體狀之(R)-3-(2-(((S)-1-環丙基乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-苯基唑啶-2-酮(8.8 mg)，產率為10%。¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 7.72(d,J=6.26 Hz,1H),7.29-7.43(m,6H),5.76(dd,J=4.11,8.80 Hz,1H),4.28(dd,J=4.30,8.61 Hz,1H),3.06-3.19(m,1H),1.39(dd,J=3.52,6.65 Hz,1H),0.88-0.97(m,1H),0.83(br.s.,3H),0.53-0.62(m,1H),0.50(dt,J=4.11,8.51 Hz,1H),0.33(qd,J=4.78,9.54 Hz,1H),0.26(td,J=4.60,9.59 Hz,1H)；HRMS(A)m/z 325.1667(M+H)⁺，滯留時間1.54分鐘；UPLC 2.807分鐘。

表19中之化合物係使用與關於實例559之製備所述類似的方法來製備。

表20. 表19中所列之各化合物的化學名稱、NMR化學位移及LCMS信號

實例563

(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(43.2 mg，0.18 mmol)、(1S)-1-[4-(2-甲基丙氧基)苯基]乙-1-胺(84.0 mg，0.37 mmol，2.0當量)及iPr₂Net(0.30 mL，1.72 mmol，4.7當量)於NMP(1 mL)中之混合物在105℃下加熱24小時。過濾反應混合物且藉由逆相HPLC純化，得到呈白色固體狀之(S)-3-(2-(((S)-1-(4-異丁氧基苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(5.3 mg，三氟乙酸鹽)，產率為4%。¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ 7.68(d, J=6.65 Hz,1H),7.25(d,J=8.61 Hz,2H),6.90(d,J=8.61 Hz,2H),4.41(d,J=5.87 Hz,2H),3.74(d,J=6.26 Hz,2H),1.96-2.15(m,1H),1.58(d,J=7.04 Hz,3H),1.03(d,J=6.65 Hz,6H)；HRMS(A)m/z 399.2399(M+H)⁺，滯留時間2.60分鐘；UPLC 4.223分鐘。

表21中之化合物係使用與關於實例563之製備所述類似的方法來製備。

實例566

向具有攪拌棒之微波小瓶中添加含(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(24.96 mg，0.103 mmol)之DMSO(1653 μL)。向此反應混合物中添加(S)-1-(2,3-二氟苯基)乙胺(40 mg，0.207 mmol)及DIEA(144 μL，0.826 mmol)。將小瓶蓋封且在110℃下加熱保持週末。過濾溶液，隨後藉由逆相HPLC純化。將產物溶離份合併，冷凍且凍乾，得到呈三氟乙酸鹽形式之((S)-3-(2-((S)-1-(2,3-二氟苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(10.2 mg，0.021 mmol，10.26%產率)。¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ ppm0.59(br.s.,3 H)0.75(br.s.,3 H)1.59(d,J=6.99 Hz,3 H)1.69(br.s.,1 H)4.37(d,J=5.67 Hz,2 H)4.66(br.s.,1 H)5.40(d,J=7.38 Hz,1 H)7.06-7.23(m,3 H)7.70(d,J=6.90 Hz,1 H)8.14(d,J=6.46 Hz,1 H)；LCMS m/z 363.3(M+H)⁺，滯留時間0.77分鐘；HRMS(A)m/z 363.1642(M+H)⁺，滯留時間1.89分鐘。

實例567

使用與關於實例566之製備所述類似的方法來製備(S)-3-(2-(1-(2,3-二氟苯基)乙基胺基)-5-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮。1H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ ppm 1.50(d,J=7.04 Hz,3 H)3.91(br.s.,1 H)4.09-4.20(m,1 H)4.42-4.56(m,2 H)5.26(q,J=6.68 Hz,1 H)6.99-7.12(m,2 H)7.16(t,J=7.48 Hz,1 H)8.13(d,J=3.37 Hz,1 H)。HRMS(A)m/z 339.1075(M+H)⁺，滯留時間1.86分鐘。

實例568

2-氟-N-(反-4-羥基環己基)-4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯甲醯胺

步驟1：製備(S)-4-(1-(第三丁氧基羰基胺基)乙基)-2-氟苯甲酸：

向(S)-4-(1-胺基乙基)-2-氟苯甲酸(900 mg，4.10 mmol)中添加DCM(11 ml)、胡氏鹼(2.147 ml，12.29 mmol)及BOC酸酐(1.998 ml，8.61 mmol)。隨後添加NMP(11.00 ml)以幫助溶解。將反應物音波處理10分鐘且在室溫下攪拌22小時，接著進行LCMS。主要濃縮出DCM。隨後向粗反應物中添加120 ml水且用10 ml的5 M NaOH鹼化。用2×50 ml(含15%乙酸乙酯之庚烷)溶液萃取鹼性水溶液。隨後向鹼性水溶液(含產物)中添加150 ml乙酸乙酯且在攪拌下用2 M HCl水溶液酸化至約pH 3。隨後萃取乙酸乙酯，保存且再次用100 ml乙酸乙酯萃取酸性水。將有機層合併且用0.5 M HCl水溶液(1×40 ml)、水(3×40 ml)洗滌，且濃縮至恆定質量，得到1104 mg(S)-4-(1-(第三丁氧基羰基胺基)乙基)-2-氟苯甲酸，其原樣使用。LCMS m/z BOC型式為269.0(M+H-15片段)及弱228.0(M+H-56片段)，與預期284.0(M+H)⁺相比，滯留時間0.72分鐘。

步驟2：製備(S)-1-(3-氟-4-(反-4-羥基環己基胺甲醯基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯：

向(S)-4-(1-(第三丁氧基羰基胺基)乙基)-2-氟苯甲酸(40.8 mg，0.144 mmol)中添加NMP(0.5 ml)、反-4-胺基環己醇(41.5 mg，0.360 mmol)、胡氏鹼(0.101 ml，0.576 mmol)及HATU(110 mg，0.288 mmol)。反應物在室溫下攪拌6小時，接著進行LCMS。向反應物中添加0.5 ml NMP，過濾，藉由製備型LC純化且凍乾，得到33 mg呈三氟乙酸鹽形式之(S)-1-(3-氟-4-(反-4-羥基環己基胺甲醯基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯。LCMS m/z 381.1(M+H)⁺，滯留時間0.70分鐘。

步驟3：製備4-((S)-1-胺基乙基)-2-氟-N-(反-4-羥基環己基) 苯甲醯胺：

向(S)-1-(3-氟-4-(反-4-羥基環己基胺甲醯基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(33 mg，0.087 mmol)中添加於二烷(2 mL，8.00 mmol)及MeOH(0.2 ml)中之4 M HCl。反應物在室溫下攪拌1小時，接著進行LCMS。濃縮溶劑形成殘餘物，得到呈鹽酸鹽形式之4-((S)-1-胺基乙基)-2-氟-N-(反-4-羥基環己基)苯甲醯胺(定量產率，0.087 mmol)。LCMS m/z 281.1(M+H)⁺，滯留時間0.33分鐘。

步驟4：製備2-氟-N-(反-4-羥基環己基)-4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯甲醯胺：

向4-((S)-1-胺基乙基)-2-氟-N-((1r,4S)-4-羥基環己基)苯甲醯胺(0.024 g，0.087 mmol)中添加(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(0.034 g，0.139 mmol)、DMSO(0.6 ml)及胡氏鹼(0.053 ml，0.305 mmol)。反應物在100-105℃下加熱16小時或直至根據LCMS反應完成為止。使反應物冷卻，添加0.5 ml DMSO，過濾，藉由製備型LC純化且凍乾，得到10.1 mg呈三氟乙酸鹽形式之2-氟-N-(反-4-羥基環己基)-4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯甲醯胺。LCMS m/z 486.2(M+H)⁺，滯留時間0.57分鐘。

¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ ppm 8.13(d,J=6.7 Hz,1H),7.70(d,J=6.7 Hz,1H),7.64(t,J=7.8 Hz,1H),7.13-7.28(m,2H),5.16(br.s.,1H),4.67(br.s.,1H),4.37(d,J=5.5 Hz,2H),3.82(br.s.,1H),3.53(d,J=3.9 Hz,1H),1.97(dd,J=5.1,3.1 Hz,4H),1.57(d,J=7.0 Hz,3H),1.38(t,J=8.6 Hz,4H),0.50-0.88(m,6H)；HRMS(A)m/z 486.2523(M+H)⁺。

實例569

(S)-3-(2-((S)-1-(6-(4-氟苯氧基)吡啶-3-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮

向(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(28 mg，0.116 mmol)中添加(S)-1-(6-(4-氟苯氧基)吡啶-3-基)乙胺(46.7 mg，0.174 mmol)、DMSO(0.6 ml)及胡氏鹼(0.071 ml，0.406 mmol)。反應物在105-110℃下加熱24小時或直至根據LCMS反應完成為止。使反應物冷卻，添加0.5 ml DMSO，過濾，藉由製備型LC純化且凍乾，得到7.1 mg呈三氟乙酸鹽形式之(S)-3-(2-((S)-1-(6-(4-氟苯氧基)吡啶-3-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮。LCMS m/z 438.2(M+H)⁺，滯留時間0.82分鐘。

¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ ppm 8.04(d,J=6.3 Hz,1H),8.01(d,J=2.0 Hz,1H),7.73(dd,J=8.6,2.3 Hz,1H),7.53(d,J=6.3 Hz,1H),6.94-7.10(m,4H),6.84(d,J=8.6 Hz,1H),5.05(d,J=7.0 Hz,1H),4.61(d,J=3.9 Hz,1H),4.28 (d,J=5.5 Hz,2H),1.49(d,J=7.0 Hz,3H),0.51-0.78(m,6H)；HRMS(A)m/z 438.1946(M+H)⁺。

實例570

(S)-3-(2-((S)-1-(3-氟-4-(哌啶-1-羰基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮

向(S)-(4-(1-胺基乙基)-2-氟苯基)(哌啶-1-基)甲酮(0.019 g，0.076 mmol)中添加(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(0.028 g，0.114 mmol)、NMP(0.5 ml)及胡氏鹼(0.033 ml，0.190 mmol)。反應物在105-110℃下加熱16小時或直至根據LCMS反應完成為止。使反應物冷卻，添加0.5 ml NMP，過濾，藉由製備型LC純化且凍乾，得到4.0 mg呈三氟乙酸鹽形式之(S)-3-(2-((S)-1-(3-氟-4-(哌啶-1-羰基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮。LCMS m/z 456.1(M+H)⁺，滯留時間0.74分鐘。

¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ ppm 8.13(d,J=6.7 Hz,1H),7.69(d,J=7.0 Hz,1H),7.30-7.38(m,1H),7.23-7.28(m,1H),7.20(d,J=10.6 Hz,1H),5.18(br.s.,1H),4.63-4.74(m,1H),4.33-4.42(m,2H),3.61-3.79(m,2H),1.61-1.76(m,5H),1.57(d,J=7.0 Hz,3H),1.51(br.s.,2H),0.77(br. s.,3H),0.62(br.s.,3H)；HRMS(A)m/z 456.2416(M+H)⁺。

實例571

(S)-3-(5-氟-2-((S)-1-(3-氟-4-(哌啶-1-羰基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮

向(S)-(4-(1-胺基乙基)-2-氟苯基)(哌啶-1-基)甲酮(0.019 g，0.076 mmol)中添加(S)-3-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(0.030 g，0.114 mmol)、NMP(0.5 ml)及胡氏鹼(0.033 ml，0.190 mmol)。反應物在105-110℃下加熱8小時或直至根據LCMS反應完成為止。使反應物冷卻，添加0.5 ml NMP，過濾，藉由製備型LC純化且凍乾，得到4.5 mg呈三氟乙酸鹽形式之(S)-3-(5-氟-2-((S)-1-(3-氟-4.-(哌啶-1-羰基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮。LCMS m/z 474.2(M+H)⁺，滯留時間0.91分鐘。

¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ ppm 8.21(d,J=2.7 Hz,1H),7.22-7.33(m,2H),7.17(d,J=11.0 Hz,1H),4.97(q,J=7.0Hz,1H),4.59(br.s.,1H),4.47(t,J=8.8 Hz,1H),4.20-4.32(m,1H),3.68(br.s.,2H),1.57-1.75(m,5H),1.48(d,J=7.0 Hz,5H),0.69(br.s.,3H),0.62(br.s.,3H)；HRMS(A)m/z 474.2330(M+H)⁺。

實例572

N-環己基-2-氟-4-((S)-1-(5-氟-4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯甲醯胺

向(S)-4-(1-胺基乙基)-N-環己基-2-氟苯甲醯胺(16 mg，0.061 mmol)中添加(S)-3-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(31.4 mg，0.121 mmol)、NMP(0.5 ml)及胡氏鹼(0.032 ml，0.182 mmol)。反應物在125℃下加熱4小時或直至根據LCMS反應完成為止。使反應物冷卻，添加0.5 mlNMP，過濾，藉由製備型LC純化且凍乾，得到2.5 mg呈三氟乙酸鹽形式之N-環己基-2-氟-4-((S)-1-(5-氟-4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯甲醯胺。LCMS m/z 488.2(M+H)⁺，滯留時間0.99分鐘。

¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ ppm 8.21(br.s.,1H),7.62(t,J=7.8 Hz,1H),7.24(dd,J=8.0,1.4 Hz,1H),7.16(d,J=12.1 Hz,1H),4.39-4.54(m,2H),4.23(t,J=7.2 Hz,1H),3.83(t,J=10.4 Hz,1H),1.86-1.97(m,2H),1.76(d,J=12.9 Hz,2H),1.64(d,J=12.9 Hz,1H),1.48(d,J=7.0 Hz,3H),1.12-1.42(m,6H),0.61(br.s.,6H)；HRMS(A)m/z 488.2484(M+H)⁺

實例573

N-環己基-2-氟-4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯甲醯胺

向(S)-4-(1-胺基乙基)-N-環己基-2-氟苯甲醯胺(16 mg，0.061 mmol)中添加(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(29.3 mg，0.121 mmol)、NMP(0.5 ml)及胡氏鹼(0.032 ml，0.182 mmol)。反應物在125℃下加熱4小時或直至根據LCMS反應完成為止。使反應物冷卻，添加0.5 ml NMP，過濾，藉由製備型LC純化且凍乾，得到5.6 mg呈三氟乙酸鹽形式之N-環己基-2-氟-4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯甲醯胺。LCMS m/z 470.2(M+H)⁺，滯留時間0.83分鐘。

¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ ppm 8.12(br.s.,1H),7.57-7.73(m,2H),7.13-7.27(m,2H),5.15(br.s.,1H),4.66(br.s.,1H),4.36(d,J=5.5 Hz,2H),3.76-3.94(m,1H),1.87-1.99(m,2H),1.77(d,J=12.9 Hz,2H),1.65(d,J=13.7 Hz,1H),1.57(d,J=7.0 Hz,3H),1.12-1.50(m,6H),0.73(br.s.,3H),0.62(br.s.,3H)；HRMS(A)m/z 470.2572(M+H)⁺

實例574

(S)-4-異丙基-3-(2-(((S)-1-(4-(嘧啶-5-基氧基)苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮

向(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(43 mg，0.169 mmol)於NMP(0.7 mL)中之溶液中添加(S)-1-(4-(嘧啶-5-基氧基)苯基)乙胺(41 mg，0.169 mmol)及DIEA(88 μL，0.507 mmol)。棕色反應混合物在110℃下攪拌2天。用乙酸乙酯及碳酸氫鈉水溶液稀釋反應混合物。經分離之有機層以飽和碳酸氫鈉水溶液、水及鹽水洗滌。有機相經硫酸鈉乾燥，過濾出且在減壓下濃縮。藉由逆相管柱層析[C-18]純化殘餘物，得到呈三氟乙酸鹽形式之(S)-4-異丙基-3-(2-(((S)-1-(4-(嘧啶-5-基氧基)苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(7 mg)。

MS m/z 421.3(M+H)⁺，滯留時間0.68分鐘。

HRMS(A)m/z 421.1996(M+H)⁺，滯留時間1.54分鐘。

實例575

4-苯基-3-(2-((S)-1-苯基乙基胺基)嘧啶-4-基)-1,8-二氧雜-3-氮雜螺[4.5]癸-2-酮

粗製3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-苯基-1,8-二氧雜-3-氮雜螺[4.5]癸-2-酮(330 mg，0.954 mmol)、(S)-1-苯基乙胺(810 mg，6.68 mmol)、胡氏鹼(1.17 mL，6.68 mmol)於DMA(3.5 mL)中之混合物於密封管中在80℃下加熱約16小時。使混合物冷卻至室溫，用DMSO稀釋且藉由逆相HPLC純化。將所選溶離份合併且凍乾，得到白色固體狀呈三氟乙酸鹽形式的4-苯基-3-(2-((S)-1-苯基乙基胺基)嘧啶-4-基)-1,8-二氧雜-3-氮雜螺[4.5]癸-2-酮。LCMS m/z 431.2(M+H)⁺，滯留時間0.83分鐘。

將固體溶解於乙酸乙酯/飽和NaHCO₃水溶液中。經分離之有機層以飽和NaHCO₃水溶液(2×)、鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾出且在減壓下濃縮，得到4-苯基-3-(2-((S)-1-苯基乙基胺基)嘧啶-4-基)-1,8-二氧雜-3-氮雜螺[4.5]癸-2-酮(120 mg)。

實例576及577

(S)-4-苯基-3-(2-((S)-1-苯基乙基胺基)嘧啶-4-基)-1,8-二氧雜-3-氮雜螺[4.5]癸-2-酮及(R)-4-苯基-3-(2-((S)-1-苯基乙基胺基)嘧啶-4-基)-1,8-二氧雜-3-氮雜螺[4.5]癸-2-酮

將120 mg 4-苯基-3-(2-((S)-1-苯基乙基胺基)嘧啶-4-基)-1,8-二氧雜-3-氮雜螺[4.5]癸-2-酮溶解於EtOH(10 mL)中。

分析型分離：

管柱：CHIRALPAK AD-H(5 μm)100×4.6 mm(Daicel Chemical Industries,LTD.)。

溶劑：正庚烷：乙醇=70：30

流動速率：1.0 mL/min；偵測：UV=220 nm。

溶離份1：滯留時間：5.84分鐘。

溶離份2：滯留時間：10.18分鐘。

製備型分離：

管柱：CHIRALPAK AD製備型(10 μm)2×25 cm。

溶劑：正庚烷：乙醇=70：30

流動速率：20 mL/min；530 psi；注射：4 mL；偵測：UV=210 nm。

在減壓下濃縮溶離份。將殘餘物溶解於乙腈中且經由針筒過濾器過濾，用水稀釋且凍乾。

實例576：峰1：白色粉末。產量：52.0 mg；de=99%(UV，220 nm)。

LCMS m/z 431.3(M+H)⁺，滯留時間0.81分鐘。

實例577：峰2：白色粉末。產量：47.8 mg；de=99% (UV，220 nm)。

LCMS m/z 431.3(M+H)⁺，滯留時間0.81分鐘。

實例578及579

(R)-8-苯基-7-(2-((S)-1-苯基乙基胺基)嘧啶-4-基)-2,5-二氧雜-7-氮雜螺[3.4]辛-6-酮及(S)-8-苯基-7-(2-((S)-1-苯基乙基胺基)嘧啶-4-基)-2,5-二氧雜-7-氮雜螺[3.4]辛-6-酮係使用與關於實例576及577之製備所述類似的方法來製備。

表24中之化合物係使用與關於實例569之製備所述類似的方法來製備。

實例583及584

(S)-4-異丙基-3-(2-((R)-1,1,1-三氟丙-2-基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(S)-4-異丙基-3-(2-((S)-1,1,1-三氟丙-2-基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮

向(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(40 mg，0.166 mmol)於2-丁醇中之溶液中添加1,1,1-三氟丙-2-胺(74.9 mg，0.662 mmol)及單水合對甲苯磺酸(74.9 mg， 0.662 mmol)。混合物在氬氣下在115℃下於密封小管中加熱約7天。獨立地向(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮(100 mg，0.414 mmol)於2-丁醇中之溶液中添加1,1,1-三氟丙-2-胺(187 mg，1.655 mmol)及單水合對甲苯磺酸(157 mg，0.828 mmol)。混合物在氬氣下在115℃下於密封小管中加熱約4天。將兩種反應混合物組合且在減壓下濃縮。殘餘物以DMSO及水(約10體積%之DMSO)稀釋，經由針筒過濾器過濾且藉由逆相HPLC純化。收集所選溶離份且凍乾，得到白色固體狀呈三氟乙酸鹽形式之兩種異構體。

第1峰583：產量：29.1 mg。

¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ ppm 0.90(d,J=7.04 Hz,3 H)0.98-1.02(m,3 H)1.45(d,J=7.04 Hz,3 H)2.59(dtd,J=13.89,6.95,6.95,3.52 Hz,1 H)4.43-4.47(m,2 H)4.76-4.83(m,2 H)7.70(d,J=5.87 Hz,1 H)8.20(d,J=6.26 Hz,1 H)

LCMS m/z 319.3(M+H)⁺，滯留時間0.73分鐘。HRMS(A)m/z 319.1391(M+H)⁺，滯留時間1.89分鐘

第2峰584：產量：38.5 mg。

¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ ppm 0.87(d,J=7.04 Hz,3 H)0.98(d,J=7.04 Hz,3 H)1.45(d,J=7.04 Hz,3 H)2.48-2.60(m,1 H)4.40-4.49(m,2 H)4.88-4.95(m,2 H)7.69(d,J=5.87 Hz,1 H)8.20(d,J=6.65 Hz,1 H)

LCMS m/z 319.3(M+H)⁺，滯留時間0.73分鐘。HRMS(A)m/z 319.1385(M+H)⁺，滯留時間1.88分鐘

實例585

(4S)-4-苯基-3-(2-(1,1,1-三氟丙-2-基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮

(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-苯基唑啶-2-酮(40 mg，0.145 mmol)、1,1,1-三氟丙-2-胺(82 mg，0.725 mmol)、胡氏鹼(0.038 mL，0.218 mmol)於DMSO(0.4 mL)中之混合物在氬氣下在115℃下加熱約3天。隨後使混合物冷卻至室溫。混合物以DMSO及水(約10體積%之DMSO)稀釋，經由針筒過濾器過濾且藉由逆相HPLC純化。收集所選溶離份且凍乾，得到白色固體狀呈三氟乙酸鹽形式之(4S)-4-苯基-3-(2-(1,1,1-三氟丙-2-基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(兩種異構體之比率：7/3)。LCMS m/z 353.2(M+H)⁺，滯留時間0.78分鐘。HRMS(A)m/z 353.1231(M+H)⁺，滯留時間1.92/1.96分鐘。

實例586

(S)-3-(2-((S)-1-環丙基乙基胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-苯基唑啶-2-酮

(S)-3-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-4-苯基唑啶-2-酮(40 mg，0.136 mmol)、(S)-1-環丙基乙胺(34.8 mg，0.409 mmol)、胡氏鹼(0.119 mL，0.681 mmol)於DMSO(0.4 mL)中之混合物在氬氣下在105-115℃下加熱約18小時(替代方案：120-135℃，約90分鐘)。隨後使混合物冷卻至室溫。混合物以DMSO及水(約10體積%之DMSO)稀釋，經由針筒過濾器過濾且藉由逆相HPLC純化。收集所選溶離份且凍乾，得到白色固體狀呈三氟乙酸鹽形式之(S)-3-(2-((S)-1-環丙基乙基胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-苯基唑啶-2-酮(26 mg)。

¹H NMR(400 MHz,CD₃OD)δ ppm-0.14--0.05(m,1 H)0.01-0.08(m,1 H)0.23-0.31(m,1 H)0.36-0.44(m,1 H)0.78-0.86(m,1 H)1.19(d,J=6.65 Hz,3 H)3.05-3.14(m,1 H)4.25-4.32(m,1 H)4.89-4.90(m,1 H)5.77(t,J=8.61 Hz,1 H)7.32-7.39(m,5 H)8.15(d,J=3.52 Hz,1 H)。

LCMS m/z 343.1(M+H)⁺，滯留時間0.88分鐘。HRMS(A)m/z 343.1577(M+H)⁺，滯留時間2.09分鐘。

表26中之化合物係使用與關於實例586之製備所述類似的方法來製備。

表28中之化合物係使用與關於實例568之製備所述類似的方法來製備。

生物資料

突變IDH1生物化學分析法：2-HG之LC-MS偵測。

使用2-HG(NADPH依賴性α-KG還原反應之產物)之定量液相層析/質譜分析(LC-MS)偵測來監測突變IDH1 R132H催化活性。

更特定言之，在室溫下在384孔Greincr平底盤(Costar，目錄號781201)中使用30 μL最終反應體積及以下分析緩衝 液條件來進行生物化學反應：50 mM HEPES pH 7.4、10 mM MgCl₂、50 mM KCl、1 mM DTT、0.02% BSA、5 μM NADPH及100 μM α-KG。

最終反應混合物含有3.3% DMSO及濃度範圍為0.02-50 μM之抑制劑。IDH1酶以0.25 nM之最終濃度使用。培育45分鐘後，藉由添加10 μL的16%甲酸(含有800 nM 5-碳標記之¹³C-2-HG)來淬滅反應混合物。隨後藉由添加2.5體積之乙腈且接著離心(3000×g，20分鐘)使蛋白質沈澱。藉由LC-MS量測所得上清液中2-HG之濃度(參見下文)。

LC-MS方法。利用BiobasicAX管柱(2.1 mm×20 mm，5 μm粒子，Thermo Scientific Inc.)對反應混合物上清液進行層析分離。層析移動相為A)25 mM碳酸氫銨及B)乙腈(0.1%氫氧化銨)。使用85-5% B梯度(經0.9分鐘，Agilent 1200SL LC系統，Thermofisher LX-4自動取樣器)以1 ml/min之速率溶離菸鹼醯胺且利用API4000 QTrap質譜儀(ABSciex，Framingham，MA)以正電噴霧電離(ESI+)模式藉由多反應監測(multiple reaction monitoring，MRM)進行分析。2-HG及¹³C-2-HG之質量相變(mass transition)分別為147→129及152→134。在不同的抑制劑濃度下量測相對反應(2-HG/¹³C-2-HG)且用於計算抑制IC50值(經校正IC50回歸曲線)。

R132蛋白質表現及純化

使用限制位點XmaI/XhoI將IDH1 R132H選殖至pET47b載體中，其產生可由Prescission蛋白酶裂解之同框N端His₆位 點。將此質體轉化至Rosetta^TM 2(DE3)(Novagen)細胞中。在震盪燒瓶中，使8 L細胞在37℃下於Terrific Broth(Teknova)(加上康黴素(kanamycin)50 μg/mL及氯黴素(chloramphenicol)34 μg/mL)中生長至OD₆₀₀為0.8且藉由添加IPTG至濃度為0.20 mM來誘導蛋白質表現。隨後使細胞在18℃下生長18小時。

His ₆ -IDH1(R132H)未切蛋白

MAHHHHHHSAALEVLFQGPGMSKKISGGSVVEMQGDEMTRIIWELIKEKLIFPYVELDLHSYDLGIENRDATNDQVTKDAAEAIKKHNVGVKCATITPDEKRVEEFKLKQMWKSPNGTIRNILGGTVFREAIICKNIPRLVSGWVKPIIIGHHAYGDQYRATDFVVPGPGKVEITYTPSDGTQKVTYLVHNFEEGGGVAMGMYNQDKSIEDFAHSSFQMALSKGWPLYLSTKNTILKKYDGRFKDIFQEIYDKQYKSQFEAQKIWYEHRLIDDMVAQAMKSEGGFIWACKNYDGDVQSDSVAQGYGSLGMMTSVLVCPDGKTVEAEAAHGTVTRHYRMYQKGQETSTNPIASIFAWTRGLAHRAKLDNNKELAFFANALEEVSIETIEAGFMTKDLAACIKGLPNVQRSDYLNTFEFMDKLGENLKIKLAQAKL(終止)(SEQ ID NO：1)

IDH1(R132H)Prescission切斷蛋白(N端gpg為選殖人造物)

GPGMSKKISGGSVVEMQGDEMTRIIWELIKEKLIFPYVELDLHSYDLGIENRDATNDQVTKDAAEAIKKHNVGVKCATITPDEKRVEEFKLKQMWKSPNGTIRNILGGTVFREAIICKNIPRLVSGWVKPIIIGHHAYGDQYRATDFVVPGPGKVEITYTPSDGTQKVTYLVHNFEEGGGVAMGMYNQDKSIEDFAHSSFQMALSKGWPLYLSTKNTILKKYDGRFKDIFQEIYDKQYKSQFEAQKIWYEHRLIDDMVAQAMKSEGGFIWACKNYDGDVQSDSVAQGYGSLGMMTSVLVCPDGKTVEAEAAHGTVTRHYRMYQKGQETSTNPIASIFAWTRGLAHRAKLDNNKELAFFANALEEVSIETIEAGFMTKDLAACIKGLPNVQRSDYLNTFEFMDKLGENLKIKLAQAKL(終止)(SEQ ID NO：2)

純化

將細胞於含有蛋白酶抑制劑(完全不含EDTA之蛋白酶抑制劑錠劑(Roche)，每50 mL緩衝液1錠)、DNA酶及200 μM PMSF之溶解緩衝液中均質化且溶解於微流化器(Microfluidizer)中。溶解後，添加Triton X-100至0.1%且 在4℃下攪拌30分鐘。

將清除之溶胞物裝載於2×5 mL HisTrap FF粗製管柱(GE)上，用溶解緩衝液充分洗滌直至A₂₈₀穩定且用Ni溶離緩衝液溶離。將峰溶離之溶離份濃縮至30 mL，添加EDTA至1 mM且添加GST-Prescission蛋白酶至3 U/100 μg蛋白質。使樣品在4℃下針對2 L透析緩衝液I(MWCO 50 kDa)透析6小時，隨後再針對2 L透析緩衝液II透析至少6小時。經GST-Prescission裂解之樣品與麩胱甘肽瓊脂糖珠粒(Glutathione Agarose Bead)一起搖動，短暫離心且隨後將上清液裝載並穿過5 mL HisTrap HP管柱且收集流過物(flow through)。

隨後用冰冷的20 mM Tris pH 7.4及1 mM TCEP稀釋流過物直至電導率降至小於5 mS/cm(約略三倍稀釋)。隨後使此樣品流過HiTrap Q管柱且將流過物濃縮至10 mL且裝載於經平衡之26/60 Superdex 200管柱(使用SEC緩衝液作為移動相)上。將峰溶離份收集，濃縮且等分。

溶解緩衝液：50 mM Tris pH=7.4、500 mM NaCl、20 mM咪唑及1 mM TCEP

Ni溶離緩衝液：50 mM Tris pH=7.4、150 mM NaCl、200 mM咪唑及1 mM TCEP

透析緩衝液I：20 mM Tris pH=7.4、150 mM NaCl、1 mM TCEP及50 mM咪唑

透析緩衝液II：20 mM Tris pH=7.4、150 mM NaCl及1 mM TCEP

SEC緩衝液：20 mM Tris pH=7.4、150 mM NaCl及1 mM TCEP

突變IDH1生物化學分析法(mIDH R132H)之結果於表30中給出。一些實例於分析法中操作多次且因此IC₅₀值表示為活性範圍形式。

螢光生物化學分析法

IDH1(R132H)突變體催化NADP+之還原形式(NADPH)及α-酮戊二酸(α-KG)以形成菸鹼醯胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP+)及R(-)-2-羥基戊二酸(2HG)。可藉由遵循NADPH至NADP+之氧化以動力學方式監測反應，其係使用螢光(在355 nm激發且在530 nm發射)來量測。使用2101型Perkin-Elmer Envision監測反應。更特定言之，在室溫下在384孔Greiner平底盤(目錄號781076)中使用最終反應體積20 μL及以下分析緩衝液條件來進行生物化學反應：50 mM HEPES pH 7.5、10 mM MgCl₂、1 mM DTT、0.02% BSA、0.02% Tween-20、10 μM NADPH及100 μM α-KG。最終反應混合物含有2.5% DMSO及濃度範圍為0.0000008-25 μM之測試化合物。IDH1(R132H)酶係以10 nM之最終濃度使用。在套裝軟體DAVID之Helios模組中進行關於劑量反應IC50測定結果之曲線擬合。使用4參數邏輯模型：y=最小值+((最大值-最小值)/1+(x/IC₅₀)^斜率)。

IDH細胞分析法

IDH細胞分析法由兩個並行比較分析法組成：1)使用LC-MS(關於LC-MS偵測詳情，參見突變IDH1生物化學分析法)之2HG癌代謝物偵測分析法；及2)用於監測細胞之脫靶殺滅及用於校正2HG含量變化之細胞增殖分析法。用HCT-116細胞株(表現IDH1mut R132H之內源含量，獲自Horizon Discoveries X-Man同基因人類細胞株，目錄號HD104-013)進行IDH1細胞篩選。使細胞於含有10%胎牛血清(Gibco目錄號10099)及1X非必需胺基酸(NEAA LONZA目錄號13-114E)之DMEM(LONZA目錄號12-540F)中生長。在具有不同內源突變之細胞株(HT1080(IDH1mut R132C，EMEM+10% FBS)、SNU-1079(IDH1mut R132C，RPMI+10% FBS+1%丙酮酸鈉)及SW1353(IDH2mut R172S，RPMI+10% FBS+1%丙酮酸鈉))中定期進行面板分析法(Panel assay)以測試化合物活性。

分析過程如下：

第1天：將細胞一式三份地(對於細胞增殖分析法及2HG分析法)接種於384孔盤(Corning目錄號3707)中且在37℃、95%相對濕度、5% CO₂下培育隔夜。

第2天：將化合物以1：3連續稀釋(自10 mM溶液起以DMSO進行10點稀釋)且經由聲學分配器(acoustic dispenser)傳遞至細胞分析盤中，最終濃度範圍為30 μM至1.5 nM。分析盤在處理後移回培育器中且培育48小時。

第4天增殖分析法：添加CTG(cell titer-glo，Promega部件號G755B)至分析盤且利用盤讀取器讀取螢光信號。

第4天2HG分析法：提取樣品製劑由以下組成：自分析盤吸出所有培養基，添加70 μl的90%甲醇之水溶液，乾冰培育15分鐘，在2000 rpm下離心30分鐘以確保所有微粒沈降，且轉移30 μl上清液至LC-MS備用盤。隨後進行LC-MS分析。

某些本發明化合物已於IDH細胞分析法中進行測試。

Claims (30)

1. 一種式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽， 其中：R¹及R²各獨立地為氫、氘、鹵基、羥基、NH₂、芳基、雜芳基或視情況經取代之C_1-4烷基，其中該C_1-4烷基視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基及NH₂；R^3a為氫、氘、C_1-6烷基、苯基或苄基，及R^3b為氫、氘或C_1-6烷基；或R^3a與R^3b接合在一起形成視情況經取代之3-7員環烷基環或視情況經取代之4-7員雜環，其中該等環烷基及雜環各視情況經一或兩個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、側氧基(oxo)、NH₂及C_1-3烷基；R^4a為氫、C_1-6烷基、視情況經取代之苯基、視情況經取代之苄基、視情況經取代之雜芳基、或亞甲基-二苯，其中該等苯基、苄基及雜芳基環視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、硝基、C_1-4烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵 烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、苯基、5-6員雜芳基、5-6員雜環基、苯氧基、-COOR^b、-SO₂R^b、-NHC(O)R^b及-NR^bR^b，及R^4b為氫、氘或C_1-3烷基；或R^4a與R^4b接合在一起形成視情況經取代之3-7員環烷基環或視情況經取代之4-7員雜環，其中該等環烷基及雜環視情況經一或兩個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、側氧基、NH₂及C_1-3烷基，限制條件為R^3a與R^3b以及R^4a與R^4b中僅一者接合在一起形成環；R^5a為氫或氘；R^5b為氫、氘、甲基、乙基、CD₃、CF₃、CH₂F或CHF₂，及R⁶為視情況經取代之C_1-6烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜芳基、視情況經取代之雜環基或視情況經取代之C_3-10環烷基，其中該C_1-6烷基視情況經一個選自由以下組成之群的取代基取代：羥基、C_1-3烷氧基及-OR^a，其中該芳基、雜芳基、雜環基及C_3-10環烷基視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基；羥基；氰基；硝基；C_1-4烷氧基；C_1-3鹵烷基；C_1-3鹵烷氧基；C_1-6烷基；C_3-6環烷基，視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：羥基、氰基、C_1-3烷基、C_1-3烷氧基及C_1-3鹵烷 基；苯基，視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、5-6員雜芳基、5-6員雜環基、苯氧基、-COOR^b、-SO₂R^b、-NHC(O)R^b及-NR^bR^b；5-6員雜芳基，視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、C_1-3烷基、C_1-3烷氧基；5-6員雜環基，視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、側氧基、NH₂及C_1-3烷基；-CH₂R^a；-OR^a；-C(O)R^a；-NR^aR^b；-COOR^a；-SO₂R^a；-SO₂R^b；NHC(O)R^a；-NHC(O)R^b；-C(O)NR^aR^b；-C(O)NHR^b；及-SO₂NR^bR^b；或R^5b與R⁶接合在一起形成視情況經取代之C_3-7環烷基或視情況經取代之式(a)之基團：，其中n為1、2或3，及該C_3-7環烷基及式(a)之基團視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、5-6員雜芳基、5-6員雜環基、苄氧基、-COOR^b、-SO₂R^b、-NHC(O)R^b及-NR^bR^b；各R^a獨立地為視情況經取代之苯基、視情況經取代之雜芳基、視情況經取代之雜環基或視情況經取代之C_3-7環 烷基，其中該苯基及雜芳基視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基及C_1-3烷基，其中該雜環基視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、側氧基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基、C_1-4烷基、C_3-5環烷基、-C(O)R^b及-NR^bR^b；及其中該C_3-7環烷基視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、側氧基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基及C_1-3烷基；及各R^b獨立地為氫或C_1-6烷基。
2. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其具有式(III)
3. 如請求項2之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其具有式(IV)
4. 如請求項3之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R^3a與R^3b均為氫。
5. 如請求項4之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R^5a為氫且R^5b為氫、甲基、乙基或CF₃。
6. 如請求項5之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R^5b為甲基。
7. 如請求項6之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R¹為氫、氟或氯且R²為氫、氟、氯或甲基。
8. 如請求項7之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R¹與R²均為氫。
9. 如請求項8之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R^4a為氫、C_1-6烷基、視情況經取代之苯基、視情況經取代之苄基、視情況經取代之雜芳基、或亞甲基-二苯，其中該等苯基、苄基及雜芳基環視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、5-6員雜芳基、5-6員雜環基、苯氧基、COOR^b、-SO₂R^b、-NHC(O)R^b及-NR^bR^b，及R^4b為氫或C_1-3烷基。
10. 如請求項9之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R^4b為氫或甲基。
11. 如請求項10之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R^4b為氫。
12. 如請求項11之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R^4a為氫、甲基、乙基、異丙基、苯基、4-氟苯基、4-甲氧基苯基、聯苯基、苄基或吡啶基。
13. 如請求項12之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R^4a為異丙基。
14. 如請求項1至13中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R⁶為甲基、C_5-10環烷基、視情況經取代之苯基、視情況經取代之吡啶基、視情況經取代之嘧啶基、視情況經取代之噠嗪基、視情況經取代之吡嗪基、視情況經取代之***基、視情況經取代之吡唑基、視情況經取代之噻唑基、視情況經取代之1,3,4-二唑基、視情況經取代之1,2,4-二唑基、視情況經取代之異唑基、噻吩基、唑基、喹啉基、視情況經取代之苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并唑基、四唑并[1,5-a]吡啶基、咪唑并[2,1-b][1,3,4]噻二唑基、視情況經取代之哌啶基、視情況經取代之哌嗪基、四氫呋喃基、四氫哌喃基、視情況經取代之四氫-硫代哌喃1,1-二氧化物、1H-吡咯并[2,3-b]吡啶基、2,3-二氫-苯并[1,4]二氧雜環己烯基(dioxinyl)、5,6,7,8-四氫-[1,2,4]***并[4,3-a]吡嗪基、4,5,6,7-四氫-苯并噻唑基、吲哚嗪基、環丙基、環戊基 或環己基，其中該苯基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基、***基、吡唑基、噻唑基、1,3,4-二唑基、1,2,4-二唑基、異唑基、苯并咪唑基、哌啶基、哌嗪基及四氫-硫代哌喃1,1-二氧化物各視情況經一或兩個各獨立地選自由以下組成之群之取代基取代：鹵基；羥基；氰基；硝基；C_1-4烷氧基；C_1-3鹵烷基；C_1-3鹵烷氧基；C_1-6烷基；C_3-6環烷基，視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：羥基、氰基、C_1-3烷基、C_1-3烷氧基及C_1-3鹵烷基；苯基，視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、5-6員雜芳基、5-6員雜環基、苯氧基、-COOR^b、-SO₂R^b、-NHC(O)R^b及-NR^bR^b；5-6員雜芳基，視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、C_1-3烷基、C_1-3烷氧基；5-6員雜環基，視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、側氧基、NH₂及C_1-3烷基；-CH₂R^a；-OR^a；-C(O)R^a；-NR^aR^b；-COOR^a；-SO₂R^a；-SO₂R^b；NHC(O)R^a；-NHC(O)R^b；-C(O)NR^aR^b；-C(O)NHR^b；及-SO₂NR^bR^b。
15. 如請求項14之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R⁶為視情況經一或兩個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基；羥基；硝基；C_1-4烷氧基；C_1-3鹵烷 基；C_1-3鹵烷氧基；C_1-6烷基；C_3-6環烷基，視情況經一個選自由以下組成之群的取代基取代：氰基、C_1-3烷基及C_1-3烷氧基；苯基，視情況經一或兩個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：氟、氯、甲基、氰基及甲氟基；及5-6員雜芳基，視情況經一或兩個甲基取代。
16. 如請求項15之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R⁶為視情況經取代之1,3,4-二唑基或視情況經取代之1,2,4-二唑基。
17. 如請求項14之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R⁶係經一個-CH₂R^a、-C(O)R^a、-NHC(O)R^a、-NHC(O)R^b、-C(O)NHR^a、C(O)NHR^b、-OR^a、-NR^aR^b、SO₂NR^bR^b、SO₂R^a或-SO₂R^b基團取代。
18. 如請求項17之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R^a為(a)苯基，視情況經一或兩個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：氧、氯及溴；(b)視情況經取代之5-6員雜芳基；(c)C_5-7環烷基，視情況經一或兩個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：氟、羥基、甲基及C_1-3鹵烷氧基；或(d)雜環基團，選自由以下組成之群：哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、四氫哌喃基、四氫-硫代哌喃1,1-二氧化物、1,4-二氮雜環庚烷基、4,7-二氮雜-螺[2.5]辛基、3,8-二氮雜-雙環[3.2.1]辛基、3,8-二氮雜-雙環[4.2.0]辛基、八氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪基、八氫-吡啶并[1,2-a]吡嗪基、 八氫-吡咯并[3,4-c]吡咯基及5,6,7,8-四氫-咪唑并[1,2-a]吡嗪基，各視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：羥基、氟、胺基、二甲胺基、C_1-3鹵烷氧基、C_1-3烷基及C_3-5環烷基。
19. 如請求項18之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R⁶為視情況經取代之苯基。
20. 如請求項19之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該苯基在對位上經一個CH₂R^a、-C(O)R^a或-C(O)NHR^a基團取代。
21. 如請求項2之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其具有式(V) 其中R^4a為苯基且R^4b為氫。
22. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其選自由以下組成之群：(S)-4-異丙基-3-(2-(((S)-1-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；N-(4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯基)環己烷甲醯胺；(S)-3-(2-(((S)-1-(3-氟-4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮； (S)-4-異丙基-3-(2-(((S)-1-(4-((3,3,4-三甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；2-氟-N-(4-羥基-4-甲基環己基)-4-((S)-1-((4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基)胺基)乙基)苯甲醯胺；(S)-3-(2-((S)-1-(4-((4-胺基-4-甲基哌啶-1-基)甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(4-((4-(二甲胺基)哌啶-1-基)甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-4-異丙基-3-(2-((S)-1-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(S)-4-異丙基-4-甲基-3-(2-((S)-1-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(S)-4-異丙基-3-(2-((S)-1-(6-苯基吡啶-3-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(4-苯甲醯基苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-4-異丙基-3-(2-(((S)-1-(5-苯基-1,3,4-噻二唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(4S)-4-異丙基-3-(2-(1-(5-苯基嘧啶-2-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；3-(5-氟-2-((1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)吡啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(S)-4-異丙基-3-(2-(((S)-1-(1-(3-甲氧基苯基)-1H-吡唑- 4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(S)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氟苯基)-1,3,4-二唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-(((S)-1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-4-異丙基-3-(2-(((S)-1-(3-(間甲苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(S)-3-(2-(((S)-1-(3-(4-氟苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(5-(4-氟-2-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-4-異丙基-3-{2-[(3-對甲苯基-[1,2,4]二唑-5-基甲基)-胺基]-嘧啶-4-基}-唑啶-2-酮；(S)-4-異丙基-3-(2-((S)-1-(4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(2-氟-4-異丙基苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(4-異丁氧基-3-甲基苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-(((S)-1-(4-異丁氧基苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(5-氟-2-(((S)-1-(4-異丁氧基苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；2-氟-N-(反-4-羥基環己基)-4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基- 2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯甲醯胺；(S)-3-(5-氟-2-((S)-1-(3-氟-4-(哌啶-1-羰基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；N-環己基-2-氟-4-((S)-1-(5-氟-4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯甲醯胺；N-環己基-2-氟-4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯甲醯胺；及(S)-3-(5-氟-2-((S)-1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮。
23. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其選自由以下組成之群：(S)-3-(2-(((S)-1-(3-氟-4-((3,3,4-三甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-(((S)-1-(4-((4,4-二氟哌啶-1-基)甲基)苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(5-氟-2-(1-(4-苯氧基苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(4-(4-氟苯氧基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(4-(((2S,6R)-2,6-二甲基嗎啉基)甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-(((S)-1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-3-基)乙 基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)吡啶-2-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(5-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(5-(4-氟苯氧基)吡嗪-2-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-4-異丙基-3-(2-((S)-1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；及(S)-3-(2-((S)-1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮。
24. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其選自由以下組成之群：(S)-3-(2-(1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4,4-二甲基唑啶-2-酮；(S)-3-(6-氯-2-(1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(2-氟-4-(1-甲基環丙基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；2-氯-N-環戊基-4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯甲醯胺；(S)-3-(2-((S)-1-(4-((3,3-二氟哌啶-1-基)甲基)苯基)乙 基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(4-(4,7-二氮雜螺[2.5]辛-4-基甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-((S)-1-(4-((4-乙醯基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(2-(((S)-1-(4-異丁氧基苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；(S)-3-(5-氟-2-(((S)-1-(4-異丁氧基苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-異丙基唑啶-2-酮；及2-氟-N-(反-4-羥基環己基)-4-((S)-1-(4-((S)-4-異丙基-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯甲醯胺。
25. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中各R¹及R²獨立地為氫、氘、鹵基、羥基、NH₂、芳基、雜芳基或視情況經取代之C_1-4烷基，其中該C_1-4烷基視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基及NH₂；R^3a為氫、氘、C_1-6烷基、苯基或苄基，及R^3b為氫、氘或C_1-6烷基；或R^3a與R^3b接合在一起形成視情況經取代之3-7員環烷基環或視情況經取代之4-7員雜環，其中該等環烷基及雜環各視情況經一或兩個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、側氧基、NH₂及C_1-3烷基；R^4a為氫、C_1-6烷基、視情況經取代之苯基、視情況經取 代之苄基、視情況經取代之雜芳基、或亞甲基-二苯，其中該等苯基、苄基及雜芳基環視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、5-6員雜芳基、5-6員雜環基、苯氧基、COOR^b、SO₂R^b、NHC(O)R^b及NR^bR^b，及R^4b為氫、氘或C_1-3烷基；或R^4a與R^4b接合在一起形成視情況經取代之3-7員環烷基環或視情況經取代之4-7員雜環，其中該等環烷基及雜環視情況經一或兩個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、側氧基、NH₂及C_1-3烷基，限制條件為R^3a與R^3b以及R^4a與R^4b中僅一者接合在一起形成環；R^5a為氫或氘；R^5b為氫、氘、甲基、乙基、CD₃、CF₃、CH₂F或CHF₂，及R⁶為視情況經取代之C_1-6烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜芳基、視情況經取代之雜環基或視情況經取代之C_5-10環烷基，其中該C_1-6烷基視情況經一個選自由以下組成之群的取代基取代：羥基、C_1-3烷氧基及-OR^a，其中該芳基、雜芳基、雜環基及C_5-10環烷基視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取 代：鹵基；羥基；氰基；硝基；C_1-3烷氧基；C_1-3鹵烷基；C_1-3鹵烷氧基；C_1-6烷基；C_3-6環烷基；苯基，視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、5-6員雜芳基、5-6員雜環基、苯氧基、COOR^b、SO₂R^b、NHC(O)R^b及NR^bR^b；5-6員雜芳基；5-6員雜環基，視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、側氧基、NH₂及C_1-3烷基；-CH₂R^a；-OR^a；-C(O)R^a；-NR^aR^b；-COOR^a；SO₂R^a；NHC(O)R^a；及-SO₂NR^bR^b；或R^5b與R⁶接合在一起形成視情況經取代之C_3-7環烷基或視情況經取代之式(a)之基團：，其中n為1、2或3，及該C_3-7環烷基及式(a)之基團視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、5-6員雜芳基、5-6員雜環基、苄氧基、COOR^b、SO₂R^b、NHC(O)R^b及NR^bR^b；各R^a獨立地為視情況經取代之苯基、視情況經取代之雜芳基或視情況經取代之4-7員雜環基， 其中該苯基及雜芳基視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基及C_1-3烷基，其中該4-7員雜環基視情況經一至三個各獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、側氧基、C_1-3烷氧基、C_1-3鹵烷基、C_1-3鹵烷氧基及C_1-3烷基；及各R^b獨立地為氫或C_1-6烷基。
26. 如請求項25之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R¹為氫、氟、氯或甲基；R²為氫；R^3a為氫、甲基或苯基；R^3b為氫或甲基；R^4a為氫、C_1-4烷基、視情況經取代之苯基、視情況經取代之苄基、視情況經取代之雜芳基、或亞甲基-二苯；R^4b為氫或甲基；R^5a為H；及R^5b為氫、甲基、乙基或CF₃。
27. 如請求項26之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R⁶為異丙基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之吡唑基、視情況經取代之吡啶基、2,3-二氫苯并呋喃基、2,3-二氫苯并[b][1,4]二氧雜環己烯基或視情況經取代之C_5-10環烷基。
28. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接受之載劑或賦形劑。
29. 一種如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其係用於製造用以治療與具有新變體(neomorphic)活性之突變IDH蛋白相關的疾病或病症的藥物。
30. 一種如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其係用於製造用以治療與具有新變體活性之突變IDH蛋白相關的疾病或病症的藥物，其中該藥物係與另一治療劑組合使用。