RU2016130016A - Флуоресцентная микроскопия высокого разрешения со структурированным пучком возбуждения - Google Patents

Флуоресцентная микроскопия высокого разрешения со структурированным пучком возбуждения Download PDF

Info

Publication number
RU2016130016A
RU2016130016A RU2016130016A RU2016130016A RU2016130016A RU 2016130016 A RU2016130016 A RU 2016130016A RU 2016130016 A RU2016130016 A RU 2016130016A RU 2016130016 A RU2016130016 A RU 2016130016A RU 2016130016 A RU2016130016 A RU 2016130016A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
light
sample
minimum
fluorescence
substance
Prior art date
Application number
RU2016130016A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2660301C2 (ru
Inventor
Штефан В. ХЕЛЛЬ
Original Assignee
Макс-Планк-Гезелльшафт Цур Фердерунг Дер Виссеншафтен Е.Ф.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Макс-Планк-Гезелльшафт Цур Фердерунг Дер Виссеншафтен Е.Ф. filed Critical Макс-Планк-Гезелльшафт Цур Фердерунг Дер Виссеншафтен Е.Ф.
Publication of RU2016130016A publication Critical patent/RU2016130016A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2660301C2 publication Critical patent/RU2660301C2/ru

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/645—Specially adapted constructive features of fluorimeters
    • G01N21/6456—Spatial resolved fluorescence measurements; Imaging
    • G01N21/6458—Fluorescence microscopy
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01B—MEASURING LENGTH, THICKNESS OR SIMILAR LINEAR DIMENSIONS; MEASURING ANGLES; MEASURING AREAS; MEASURING IRREGULARITIES OF SURFACES OR CONTOURS
    • G01B11/00—Measuring arrangements characterised by the use of optical techniques
    • G01B11/14—Measuring arrangements characterised by the use of optical techniques for measuring distance or clearance between spaced objects or spaced apertures
    • G—PHYSICS
    • G02—OPTICS
    • G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
    • G02B21/00—Microscopes
    • G02B21/0004—Microscopes specially adapted for specific applications
    • G02B21/002—Scanning microscopes
    • G02B21/0024—Confocal scanning microscopes (CSOMs) or confocal "macroscopes"; Accessories which are not restricted to use with CSOMs, e.g. sample holders
    • G02B21/0032—Optical details of illumination, e.g. light-sources, pinholes, beam splitters, slits, fibers
    • G—PHYSICS
    • G02—OPTICS
    • G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
    • G02B21/00—Microscopes
    • G02B21/0004—Microscopes specially adapted for specific applications
    • G02B21/002—Scanning microscopes
    • G02B21/0024—Confocal scanning microscopes (CSOMs) or confocal "macroscopes"; Accessories which are not restricted to use with CSOMs, e.g. sample holders
    • G02B21/0052—Optical details of the image generation
    • G02B21/0076—Optical details of the image generation arrangements using fluorescence or luminescence
    • G—PHYSICS
    • G02—OPTICS
    • G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
    • G02B21/00—Microscopes
    • G02B21/0004—Microscopes specially adapted for specific applications
    • G02B21/002—Scanning microscopes
    • G02B21/0024—Confocal scanning microscopes (CSOMs) or confocal "macroscopes"; Accessories which are not restricted to use with CSOMs, e.g. sample holders
    • G02B21/008—Details of detection or image processing, including general computer control
    • G—PHYSICS
    • G02—OPTICS
    • G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
    • G02B21/00—Microscopes
    • G02B21/16—Microscopes adapted for ultraviolet illumination ; Fluorescence microscopes
    • G—PHYSICS
    • G02—OPTICS
    • G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
    • G02B21/00—Microscopes
    • G02B21/36—Microscopes arranged for photographic purposes or projection purposes or digital imaging or video purposes including associated control and data processing arrangements
    • G02B21/365—Control or image processing arrangements for digital or video microscopes
    • G02B21/367—Control or image processing arrangements for digital or video microscopes providing an output produced by processing a plurality of individual source images, e.g. image tiling, montage, composite images, depth sectioning, image comparison
    • G—PHYSICS
    • G02—OPTICS
    • G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
    • G02B27/00—Optical systems or apparatus not provided for by any of the groups G02B1/00 - G02B26/00, G02B30/00
    • G02B27/58—Optics for apodization or superresolution; Optical synthetic aperture systems
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2201/00—Features of devices classified in G01N21/00
    • G01N2201/06—Illumination; Optics
    • G01N2201/068—Optics, miscellaneous
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2201/00—Features of devices classified in G01N21/00
    • G01N2201/10—Scanning

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Computer Vision & Pattern Recognition (AREA)
  • Multimedia (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
  • Microscoopes, Condenser (AREA)

Claims (62)

1. Способ определения местоположения (xM) единичных молекул (5) вещества в образце (2),
причем эти единичные молекулы (5) вещества находятся во флуоресцентном состоянии, в котором они способны возбуждаться светом возбуждения (23) для испускания света (27) флуоресценции,
причем расстояние между единичными молекулами (5) вещества в интересующей области (1) образца (2) поддерживается на минимальном значении, и
причем способ включает этапы:
возбуждение единичных молекул (5) вещества светом возбуждения (23) для испускания света (27) флуоресценции, причем распределение интенсивности света возбуждения (23) имеет по меньшей мере один локальный минимум (6), и
регистрация света (27) флуоресценции возбужденных единичных молекул (5) вещества в разных позициях (xN) по меньшей мере одного минимума (6) в интересующей области (1) образца (2),
отличающийся тем, что
минимальное значение расстояний между единичными молекулами вещества (5) в интересующей области (1) образца (2) равно
Figure 00000001
, где
λ - длина волны света возбуждения,
N - показатель преломления оптического материала, в котором образуется по меньшей мере один минимум,
α - половинный угол раствора оптической системы, которая направляет свет возбуждения на образец,
I - максимальная интенсивность света возбуждения (23) в образце (2), и
Is - зависящая от вещества интенсивность света возбуждения при насыщении флуоресценции,
максимальная интенсивность света (27) флуоресценции единичной молекулы (5) в месте локального минимума (6) распределения интенсивности света возбуждения (23) составляет половину значения в местоположении максимальной интенсивности света возбуждения (23) в образце (2),
расстояния (7) между ближайшими соседними позициями (xN) по меньшей мере одного минимума (6), в которых регистрируют свет (27) флуоресценции возбужденных единичных молекул (5) вещества, составляют не больше половины минимального значения d, и
местоположения (xM) единичных молекул (5) вещества выводят из кривой зависимости интенсивности (I) света (27) флуоресценции соответствующей молекулы (5) от позиций (xN) по меньшей мере одного минимума (6) в интересующей области (1) образца (2).
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что кривую зависимости интенсивности (I) света (27) флуоресценции соответствующей молекулы (5) от позиций (xN) по меньшей мере одного минимума (6) аппроксимируют функцией (9) с локальный минимумом, и местоположение (xM) соответствующей молекулы (5) приравнивают к позиции локального минимума аппроксимированной функции (9).
3. Способ по п. 2, отличающийся тем, что функция (9) является квадратичной функцией.
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что местоположение (xM) соответствующей молекулы (5) приравнивают к позиции (xN) по меньшей мере одного минимума (6), которая характеризуется тем, что от соответствующей молекулы (5) регистрируют меньше света (27) флуоресценции, чем в ближайших в различных направлениях соседних позициях (xN) минимума (6).
5. Способ по одному из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что расстояние (7) между ближайшими соседними позициями (xN) по меньшей мере одного минимума (6), в которых регистрируют свет (27) флуоресценции единичных возбужденных молекул (5) вещества, не больше размера слабовозбужденной зоны (32) вокруг минимума (6), в которой соответствующую молекулу (5) возбуждают для испускания света (27) флуоресценции только минимальной интенсивности.
6. Способ по одному из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что интенсивность света возбуждения (23) вблизи по меньшей мере одного минимума (6) устанавливают настолько высокой, чтобы достичь насыщения по интенсивности (I) света (27) флуоресценции, который испускают единичные молекулы (5), возбужденные светом возбуждения (23).
7. Способ по одному из предыдущих пунктов, отличающийся тем,
что молекулы (4) вещества сигналом настройки с вероятностью перехода, повышающейся с интенсивностью сигнала настройки, можно переводить
из своего флуоресцентного состояния в нефлуоресцентное состояние или
из нефлуоресцентного состояния в их флуоресцентное состояние,
что при рассмотрении всех молекул (4) независимо от их состояния расстояния между ближайшими соседними молекулами (4) вещества в интересующей области (1) образца (2) меньше, чем минимальное значение d, и
что расстояния между единичными молекулами (5) вещества во флуоресцентном состоянии регулируют сигналом настройки.
8. Способ по п. 7, отличающийся тем,
что молекулы (4) вещества против направления их перевода сигналом настройки под действием сигнала обратной связи и/или спонтанно возвращают в их первоначальное состояние с другой вероятностью перехода,
что неоднократно или непрерывно для соответствующих других единичных молекул (5) во флуоресцентном состоянии устанавливают расстояния между ними с минимальным значением d сигналом настройки и при необходимости сигналом обратной связи,
что определяют соответствующие позиции единичных молекул (5) во флуоресцентном состоянии, чтобы получить картину распределения молекул (4) вещества в образце (2).
9. Способ по п. 8, отличающийся тем, что образец (2) непрерывно или прерывисто нагружают сигналом настройки и при необходимости сигналом обратной связи.
10. Способ по одному из пп. 7-9, отличающийся тем, что сигнал настройки является светом настройки.
11. Способ по п. 10, отличающийся тем, что молекулы (4) вещества переводят светом настройки из их флуоресцентного состояния в их нефлуоресцентное состояние.
12. Способ по п. 11, отличающийся тем, что нефлуоресцентное состояние молекулы (4) вещества является электронным состоянием энергии.
13. Способ по п. 11 или 12, отличающийся тем, что свет настройки имеет такую же длину волны, что и свет возбуждения (23).
14. Способ по одному из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что по меньшей мере один минимум (6) является точечным минимумом, позицию которого в интересующей области (1) образца (2) изменяют во всех направлениях протяженности образца (2), и местоположения (xM) единичных молекул (5) вещества выводят во всех направлениях протяженности образца (2) из кривой зависимости интенсивности (I) света (27) флуоресценции соответствующей молекулы (5) от позиций (xN) по меньшей мере одного минимума (6) в интересующей области (1) образца (2).
15. Способ по п. 14, отличающийся тем, что свет (27) флуоресценции регистрируют в области регистрации, окружающей по меньшей мере один минимум (6), с помощью точечного детектора (30), расположенного конфокально минимуму (6).
16. Способ по одному из пп. 1-13, отличающийся тем, что по меньшей мере один минимум (6) проходит вдоль линии или плоскости, его позицию (xN) в интересующей области (1) образца (2) в направлении сканирования (14, 15) изменяют поперек линии или плоскости, и местоположения (xM) единичных молекул (5) вещества в направлении сканирования (14, 15) выводят из кривой зависимости интенсивности (I) света (27) флуоресценции соответствующей молекулы (5) от позиций (xN) по меньшей мере одного минимума (6) в интересующей области (1) образца (2).
17. Способ по п. 16, отличающийся тем, что линию или плоскость по-разному ориентируют относительно образца (2), чтобы определять местоположения (xM) единичных молекул (5) вещества в разных пространственных направлениях.
18. Способ по одному из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что распределение интенсивности света возбуждения имеет несколько минимумов (6), позиции которых в интересующей области (1) образца (2) изменяют совместно, причем свет (27) флуоресценции возбужденных единичных молекул (5) вещества регистрируют отдельно для каждого минимума (6).
19. Способ по одному из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что свет (27) флуоресценции регистрируют матрицей (29) датчиков света, находящейся в состоянии покоя относительно образца (2).
20. Способ по п. 19, отличающийся тем, что из матрицы (29) датчиков света непрерывно считывают кадры и ставят в соответствие соответствующим позициям по меньшей мере одного минимума (6) в образце (2).
21. Способ по п. 20, отличающийся тем, что по меньшей мере один минимум (6) непрерывно смещают в образце (2).
22. Способ по одному из п.п. 19-21, отличающийся тем, что расстояния между единичными молекулами (5) вещества в интересующей области (1) образца (2) больше, чем дифракционный предел на длине волны света (27) флуоресценции, и местоположения (xM) единичных молекул (5) вещества во флуоресцентном состоянии дополнительно определяют из распределения (13) суммарного света (∑Ι) флуоресценции соответствующей молекулы (5), регистрируемого матрицей (29) датчиков света.
23. Устройство для осуществления способа по одному из предыдущих пунктов, содержащее
источник (22) света возбуждения, выдающий свет возбуждения (23), посредством которого
молекулы (4) вещества, находящиеся во флуоресцентном состоянии, могут быть возбуждены для испускания света флуоресценции, и
молекулы (4) вещества могут быть переведены из флуоресцентного состояния в нефлуоресцентное, темное состояние,
оптическую систему, которая направляет свет возбуждения с распределением интенсивности на образец (2), и
детекторное устройство, которое регистрирует свет (27) флуоресценции, испущенный молекулами (5) вещества, возбужденными светом возбуждения, во флуоресцентном состоянии, отличающееся тем,
что светоформирующая оптика (24) формирует распределение интенсивности света возбуждения (23) в образце (2), которое имеет по меньшей мере один локальный минимум (6), причем максимальная интенсивность света (27) флуоресценции единичной молекулы (5) в месте локального минимума (6) распределения интенсивности света возбуждения (23) составляет не больше половины значения в месте максимальной интенсивности света возбуждения (23) в образце (2),
что предусмотрено сканирующее устройство (26), с помощью которого по меньшей мере один минимум (6) можно позиционировать в разных позициях (xN) в образце (2),
что детекторное устройство, которое регистрирует свет (27) флуоресценции, испускаемый из зоны регистрации, окружающей по меньшей мере один минимум, отдельно от света флуоресценции, испускаемого из других зон образца (2),
что расстояния (7) между ближайшими позициями (xN) по меньшей мере одного минимума (6), в которых детекторное устройство регистрирует свет (27) флуоресценции из зоны регистрации, составляет не больше
Figure 00000002
), где
λ - длина волны света возбуждения,
n - показатель преломления оптического материала, в котором образуется по меньшей мере один минимум,
α - половинный угол раствора оптической системы, которая направляет свет возбуждения на образец,
I - максимальная интенсивность света возбуждения (23) в образце (2), и
Is - зависящая от вещества интенсивность света возбуждения при насыщении флуоресценции.
24. Устройство по п. 23, отличающееся тем, что светоформирующая оптика (24) формирует распределение интенсивности света возбуждения (23) в образце с решеткой минимумов (6), и сканирующее устройство (26) таким образом смещает распределение интенсивности относительно образца (2), чтобы интересующая область (1) образца (2) полностью сканировалась слабовозбужденными зонами (32) вокруг нулевой точки (6), в пределах которых молекулы (4) вещества во флуоресцентном состоянии возбуждают только для испускания света (27) флуоресценции минимальной интенсивности.
25. Устройство по п. 23 или 24, отличающееся тем, что детекторное устройство содержит матрицу (29) датчиков изображений, находящуюся в состоянии покоя относительно образца.
RU2016130016A 2013-12-23 2014-12-12 Флуоресцентная микроскопия высокого разрешения со структурированным пучком возбуждения RU2660301C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE102013114860.3 2013-12-23
DE102013114860.3A DE102013114860B3 (de) 2013-12-23 2013-12-23 Verfahren und Vorrichtung zur Bestimmung der Orte einzelner Moleküle einer Substanz in einer Probe
PCT/EP2014/077527 WO2015097000A1 (de) 2013-12-23 2014-12-12 Hochauflösende fluoreszenz-mikroskopie mit einem strukturierten anregungsstrahl

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2016130016A true RU2016130016A (ru) 2018-01-30
RU2660301C2 RU2660301C2 (ru) 2018-07-05

Family

ID=52144670

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2016130016A RU2660301C2 (ru) 2013-12-23 2014-12-12 Флуоресцентная микроскопия высокого разрешения со структурированным пучком возбуждения

Country Status (8)

Country Link
US (1) US9719928B2 (ru)
EP (1) EP3087372B1 (ru)
JP (1) JP6452005B2 (ru)
CN (1) CN106030287B (ru)
DE (1) DE102013114860B3 (ru)
HK (1) HK1226479A1 (ru)
RU (1) RU2660301C2 (ru)
WO (1) WO2015097000A1 (ru)

Families Citing this family (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3268715A1 (en) 2015-03-11 2018-01-17 Timothy Ragan System and methods for serial staining and imaging
DE102015109305B9 (de) * 2015-06-11 2016-10-20 MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Rasterlumineszenzlichtmikroskop mit Gittern aus Lumineszenzverhinderungslicht und weiterem Licht
DE102016117096C5 (de) 2015-09-22 2023-11-30 MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Verfahren zum hochaufgelösten lokalen Abbilden einer Struktur in einer Probe
KR101766064B1 (ko) * 2015-11-30 2017-08-08 연세대학교 산학협력단 내부 전반사 형광 현미경
JP7027316B2 (ja) 2016-03-07 2022-03-01 マックス－プランク－ゲゼルシャフト ツア フェルデルング デア ヴィッセンシャフテン イー．ヴイ． 多数の対象の対象固有の場所間の輸送方法
WO2018069283A1 (de) 2016-10-10 2018-04-19 MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Verfahren zum räumlich hochauflösenden bestimmen des orts eines vereinzelten, mit anregungslicht zur emission von lumineszenzlicht anregbaren moleküls in einer probe
DE102016119263B4 (de) 2016-10-10 2018-06-07 MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Verfahren zum räumlich hochauflösenden Bestimmen des Orts eines vereinzelten, mit Anregungslicht zur Emission von Lumineszenzlicht anregbaren Moleküls in einer Probe
DE102016119264B4 (de) 2016-10-10 2018-05-30 MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Verfahren zum räumlich hochauflösenden Bestimmen des Orts eines vereinzelten, mit Anregungslicht zur Emission von Lumineszenzlicht anregbaren Moleküls in einer Probe
DE102016119262B4 (de) 2016-10-10 2018-06-07 MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Verfahren zum räumlich hochauflösenden Bestimmen des Orts eines vereinzelten, mit Anregungslicht zur Emission von Lumineszenzlicht anregbaren Moleküls in einer Probe
DE102017131249A1 (de) 2017-12-22 2019-06-27 Leica Microsystems Cms Gmbh Verfahren zum Abbilden einer Probe unter Verwendung eines Fluoreszenzmikroskops mit stimulierter Emissionsdepletion
WO2020064108A1 (en) 2018-09-27 2020-04-02 MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Method of and apparatus for forming and shifting a light intensity distribution in a focal area of an objective lens
DE102019008989B3 (de) 2019-12-21 2021-06-24 Abberior Instruments Gmbh Verfahren zur Störungskorrektur und Laserscanningmikroskop mit Störungskorrektur
CN111145344B (zh) * 2019-12-30 2023-03-28 哈尔滨工业大学 一种用于雪雕3d重建的结构光测量方法
DE102020113998A1 (de) 2020-05-26 2021-12-02 Abberior Instruments Gmbh Verfahren, Computerprogramm und Vorrichtung zum Bestimmen von Positionen von Molekülen in einer Probe
DE102020116547A1 (de) 2020-06-23 2021-12-23 Abberior Instruments Gmbh Verfahren zur Lokalisation einzelner Moleküle eines Farbstoffs in einer Probe und zum Erzeugen hochaufgelöster Bilder einer Struktur in einer Probe
US20230204514A1 (en) 2020-05-26 2023-06-29 Abberior Instruments Gmbh Method and device for determining positions of molecules in a sample
DE102021100564B4 (de) 2021-01-13 2023-12-28 Abberior Instruments Gmbh Verfahren und Vorrichtung zur hochaufgelösten Ortsbestimmung eines einzelnen Farbstoffmoleküls in mehreren Raumrichtungen
CN116235093A (zh) 2020-08-07 2023-06-06 阿贝锐纳仪器有限公司 用于定位样本中的发射体的方法、设备和计算机程序
EP4067878A1 (en) 2021-04-01 2022-10-05 Abberior Instruments GmbH Method, apparatus and computer program for localizing an emitter in a sample
DE102020127320B3 (de) 2020-10-16 2022-01-27 Abberior Instruments Gmbh Verfahren und Fluoreszenzmikroskop zur Ortsbestimmung einzelner fluoreszierender Farbstoffmoleküle durch adaptive Abtastung
DE102020127385B3 (de) 2020-10-16 2022-03-10 Abberior Instruments Gmbh Verfahren und Vorrichtung zur lichtmikroskopischen Multiskalen-Aufnahme biologischer Proben
DE102020131047A1 (de) 2020-11-24 2022-06-09 Abberior Instruments Gmbh Verfahren und Vorrichtung zur Aufnahme nanoskopischer Bilder mehrfach gefärbter Proben
DE102021107704B4 (de) 2021-03-26 2023-03-09 Abberior Instruments Gmbh Verfahren und Lichtmikroskop zum hochaufgelösten Untersuchen einer Probe
EP4075180A1 (en) 2021-04-13 2022-10-19 Abberior Instruments GmbH Method, device and computer program for determining a position of at least one emitter in a sample
EP4215970A1 (en) 2022-01-21 2023-07-26 Leica Microsystems CMS GmbH Single-particle localization microscope
DE102022119332B3 (de) 2022-08-02 2023-12-28 Abberior Instruments Gmbh Verfahren, lichtmikroskop und computerprogramm zum lokalisieren oder verfolgen von emittern in einer probe
DE102022119304A1 (de) 2022-08-02 2024-02-08 Abberior Instruments Gmbh Verfahren, vorrichtung und computerprogramm zur lokalisierung vereinzelter emitter in einer probe
DE102022119327B4 (de) 2022-08-02 2024-03-14 Abberior Instruments Gmbh Verfahren, vorrichtung und computerprogramm zur lokalisierung vereinzelter emitter in einer probe
DE102022119589B3 (de) 2022-08-04 2023-11-23 Abberior Instruments Gmbh Verfahren, Lichtmikroskop und Computerprogramm zur Lokalisierung einzelner Emitter in einer Probe
DE102022123632A1 (de) 2022-09-15 2024-03-21 Abberior Instruments Gmbh Verfahren, lichtmikroskop und computerprogramm zur lokalisierung oder zum verfolgen von emittern in einer probe

Family Cites Families (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SE9800360D0 (sv) * 1998-02-06 1998-02-06 Goeteborg University Science I Method, apparatus and flow cell for high sensitivity detection of fluorescent molecules
AT410718B (de) * 1998-10-28 2003-07-25 Schindler Hansgeorg Dr Vorrichtung zur visualisierung von molekülen
DE10105391B4 (de) 2001-02-06 2004-11-25 Leica Microsystems Heidelberg Gmbh Scanmikroskop und Modul für ein Scanmikroskop
AU2002357016A1 (en) * 2001-11-28 2003-06-10 James W. Overbeck Scanning microscopy, fluorescence detection, and laser beam positioning
US20060275182A1 (en) * 2002-05-24 2006-12-07 Hudson Gordon S Fluorescence validation microplate and method of use
DE10325459A1 (de) * 2003-04-13 2004-11-18 MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Räumlich hochaufgelöstes Erzeugen einer dauerhaften Struktur
US7539115B2 (en) 2003-04-13 2009-05-26 MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Creating a permanent structure with high spatial resolution
EP3203235A1 (en) * 2005-05-23 2017-08-09 Harald F. Hess Optical microscopy with phototransformable optical labels
US7485875B2 (en) 2005-07-22 2009-02-03 Carl Zeiss Microimaging Gmbh Resolution-enhanced luminescence microscopy
DE102005034443A1 (de) * 2005-07-22 2007-02-22 Carl Zeiss Jena Gmbh Auflösungsgesteigerte Lumineszenz-Mikroskopie
DE102006009831B4 (de) * 2006-03-01 2013-07-04 Leica Microsystems Cms Gmbh Verfahren und Mikroskop zur räumlich hochauflösenden Untersuchung von Proben
US7679741B2 (en) * 2006-03-01 2010-03-16 Leica Microsystems Cms Gmbh Method and microscope for high spatial resolution examination of samples
DE102006062823B4 (de) 2006-03-01 2010-11-25 Leica Microsystems Cms Gmbh Verfahren und Mikroskop zur räumlich hochauflösenden Untersuchung von Proben
DE102006026204A1 (de) * 2006-05-31 2007-12-06 Carl Zeiss Microimaging Gmbh Mikroskop mit erhöhter Auflösung
DE102006047912A1 (de) 2006-10-06 2008-04-10 Carl Zeiss Microimaging Gmbh Verfahren und Anordnung zur parallelisierten mikroskopischen Bildgebung
US9656271B2 (en) * 2007-12-04 2017-05-23 Headway Technologies, Inc. Guided transport of magnetically labeled biological molecules and cells
DE102008009216A1 (de) 2008-02-13 2009-08-20 Carl Zeiss Microimaging Gmbh Vorrichtung und Verfahren zum räumlich hochauflösenden Abbilden einer Struktur einer Probe
US8174692B2 (en) * 2008-05-21 2012-05-08 Max-Planck-Gesellschaft Zur Foerderung Der Wissenschaften E.V. High spatial resolution imaging of a structure of interest in a specimen
DE102008054317A1 (de) * 2008-11-03 2010-05-06 Carl Zeiss Microlmaging Gmbh Kombinationsmikroskopie
DE102009008646A1 (de) * 2009-02-12 2010-08-19 Dodt, Hans-Ulrich, Dr. Vorrichtung zum optischen Abbilden einer Probe
DE102009055216A1 (de) * 2009-12-22 2011-06-30 Carl Zeiss Microlmaging GmbH, 07745 Lumineszenzmikroskopie
DE102010028138A1 (de) * 2010-04-22 2011-10-27 MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Bestimmen der Verteilung einer Substanz durch Abtasten mit einer Messfront
WO2012171999A1 (en) * 2011-06-15 2012-12-20 MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Method and apparatus for imaging a structure marked with a fluorescent dye
US9291562B2 (en) 2011-11-15 2016-03-22 Max-Planck-Gesellschaft Zur Foerderung Der Wissenschaften E.V. Method and apparatus for tracking a particle, particularly a single molecule, in a sample
DE102011055367B4 (de) * 2011-11-15 2017-02-09 MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Verfahren und Vorrichtung zum Verfolgen einer Bewegung eines Partikels, insbesondere eines einzelnen Moleküls, in einer Probe

Also Published As

Publication number Publication date
JP6452005B2 (ja) 2019-01-16
CN106030287A (zh) 2016-10-12
DE102013114860B3 (de) 2015-05-28
WO2015097000A1 (de) 2015-07-02
CN106030287B (zh) 2019-04-16
EP3087372A1 (de) 2016-11-02
US9719928B2 (en) 2017-08-01
JP2017501402A (ja) 2017-01-12
RU2660301C2 (ru) 2018-07-05
EP3087372B1 (de) 2021-01-06
US20160305884A1 (en) 2016-10-20
HK1226479A1 (zh) 2017-09-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2016130016A (ru) Флуоресцентная микроскопия высокого разрешения со структурированным пучком возбуждения
US11988604B2 (en) Optical microscopy with phototransformable optical labels
Hess et al. Ultra-high resolution imaging by fluorescence photoactivation localization microscopy
Hafi et al. Fluorescence nanoscopy by polarization modulation and polarization angle narrowing
US10830643B2 (en) Spectral microscope
US20160195705A1 (en) Microscopy with structured plane illumination and point accumulation for imaging and nanoscale topography
JP5120873B2 (ja) 分光計測装置及び分光計測方法
US8633432B2 (en) Reflective focusing and transmissive projection device
Jenei et al. Picosecond multiphoton scanning near-field optical microscopy
Reilly et al. Advances in confocal microscopy and selected applications
NL2023860B1 (en) Pattern activated structured illumination localization microscopy
Duocastella et al. S electable light‐sheet uniformity using tuned axial scanning
KR101703543B1 (ko) 디지털 홀로그래피 방법을 결합한 다중모드 sted 현미경시스템
CN107490566A (zh) 基于二元光学元件的艾里光束光片照明显微成像装置
Zhong et al. Ns-scaled time-gated fluorescence lifetime imaging for forensic document examination
Smeets et al. Application of Three-Dimensional Structured Illumination Microscopy in Cell Biology: Pitfalls and Practical Considerations
US9134240B2 (en) System and method for evaluating material in rotary motion
CN107655859A (zh) 周期材料成像方法及其装置
Ma et al. Particle localization with total internal reflection illumination and differential detection
Yang et al. A cost-effective time-gated fluorescence imaging system and its bioimaging applications
JPWO2020114930A5 (ru)
Stiehm et al. Nanoantenna-controlled radiation pattern of the third-harmonic emission
Hao et al. Using subtraction strategy to enhance the resolution of concofcal microscopy
Merk et al. An attempt to see chromatin structure change after heavy ion irradiation at the GSI microbeam
WO2019012776A1 (ja) 試料観察装置及び試料観察方法