MXPA06011398A - Compuestos de quinolinona-carboxamida como agonistas del receptor 5-hidroxitriptamina 4 (5-ht4). - Google Patents

Abstract

La invencion proporciona compuestos agonistas del receptor 5-HT4 novedosos de quinolinona-carboxamida de la formula (I). La invencion tambien proporciona composiciones farmaceuticas que comprende los compuestos, el uso de tales compuestos para tratar enfermedades asociadas con la actividad del receptor 5-HT4 y procesos e intermediarios utiles para preparar tales compuestos. (ver formula I) en donde R1 es hidrogeno, halo, hidroxi, alquilo C1-4, o alcoxi C1-4 R2 es alquilo C3-4, o cicloalquilo C3-6; R3 es hidrogeno o alquilo C1-3; R4 es-S(O)2R6 o -C(O)R7; R5 es hidrogeno, alquilo C1-3 alquilo C2-3 substituido con -OH o alcoxi C1-3, o -CH2-piridilo; R6 es alquilo C1-3; o R5 y R6 se toman juntos a partir de alquilenilo C3-4; y R7 es hidrogeno, alquilo C1-3 o piridilo; o sal o solvato o estereoisomero farmaceuticamente aceptable de los mismos.

Description

(ver, por ejemplo, la revisión por Langlois and Fischmeister, J. Med. Chem. 2003, 46, 319-344). Los agonistas del receptor 5-HT4 son útiles para el tratamiento de trastornos de movilidad reducida del tracto gastrointestinal. Tales trastornos incluyen el síndrome de intestino irritable (IBS) , estreñimiento crónico, dispepsia funcional, vaciado gástrico retardado, enfermedad de reflujo gastroesofagal (GERD) , gastroparesis , ileus post-operativo, pseudoobstrucción intestinal, y tránsito retardado inducido por fármacos. Además, se ha sugerido que algunos compuestos agonistas del receptor 5-HT4 pueden usarse en el tratamiento de trastornos del sistema nervioso central que incluyen trastornos cognitivos, trastornos del comportamiento, trastornos del humor, y trastornos del control de la función autonómica. A pesar de la amplia utilidad de los agentes farmacéuticos para modular la actividad del receptor 5-HT4/ algunos compuestos agonistas del receptor 5-HT4 están en uso clínico en la actualidad. Un agente, cisaprida, que se utiliza extensivamente para el tratamiento de trastornos de movilidad del tracto gastrointestinal se retiró del mercado, debido a que reportaba efectos colaterales cardiacos. Los últimos ensayos de etapa clínica de otro agente, prucaloprida, se han suspendido. En consecuencia, hay una necesidad para agonistas del receptor 5-HT nuevos que alcancen sus efectos deseados con mínimos efectos colaterales . Los agentes preferidos pueden poseer, entre otras propiedades, una selectividad mejorada, potencia, propiedades farmacocinéticas , y/o duración de acción.

Breve Descripción de la Invención La invención proporciona compuestos novedosos que poseen actividad agonista del receptor 5-HT4. Entre otras propiedades, los compuestos de la invención se han encontrado que son agonistas del receptor 5-HT4 potentes y selectivos. Además, los compuestos de la invención se han encontrado que exhiben propiedades farmacocinéticas favorables que son predecibles de una buena biodisponibilidad durante la administración oral. En consecuencia, la invención proporciona un compuesto de la fórmula (I) : (D en donde: R1 es hidrógeno, halo, hidroxi, alquilo Ci_4 ó alcoxi Ci_4 R2 es alquilo C3_4, ó cicloalquilo C3_6; y R3 es hidrógeno o alquilo Ci_3; R4 es -S(0)2RS ó -C(0)R7; R5 es hidrógeno, alquilo Ci_3, alquilo C2-3 substituido con -OH o alcoxi Ci_3, o -CH2-piridilo; R6 es alquilo Ci_3; o, R5 y R6 tomados juntos forman alquilenilo C3_4; y R7 es hidrógeno, alquilo C1-3 ó piridilo; o una sal o solvato o estereoisómero f rmacéuticamente aceptable de los mismos . La invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención y un portador f rmacéuticamente aceptable. La invención también proporciona un método para tratar una enfermedad o condición asociada con la actividad del receptor 5~HT4, por ejemplo, un trastorno de movilidad reducida del tracto gastrointestinal, el método comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de la invención. Además, la invención promociona un método para tratar una enfermedad o condición asociada con la actividad del receptor 5-HT4 en un mamífero, el método comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente efectiva de la composición farmacéutica de la invención. Los compuestos de la invención también pueden usarse como herramientas de investigación, esto es, para estudiar sistemas biológicos o muestras, o para estudiar la actividad de otros compuestos químicos. En consecuencia, en otro de estos aspectos de método, la invención promociona un método para usar un compuesto de la fórmula (I), o una sal o solvato o estereoisómero farmacéuticamente aceptable de los mismos, como una herramienta de desarrollo para estudiar el sistema biológico o muestra o para descubrir nuevos agonistas del receptor 5-HT4, el método comprende poner en contacto el sistema biológico o muestra con el compuesto de la invención y determinar los efectos causados por el compuesto en el sistema o muestra biológica. En aspectos separados y distintos, la invención también proporciona procesos sintéticos e intermediarios descritos en la presente, que son útiles para preparar compuestos de la invención. La invención también proporciona un compuesto de la invención como se describe en la presente para usarse en la terapia médica, así como el uso de un compuesto de la invención en la manufactura de una formulación de medicamento para tratar una enfermedad o condición asociada con la actividad del receptor 5-HT4, por ejemplo, un trastorno de movilidad reducida de tracto-gastrointestinal, en un mamífero .

Descripción Detallada de la Invención La invención proporciona agonistas del receptor 5-HT4 de quinolinona-carboxamida novedosos de la fórmula (I) , o sales o solvatos o estereoisómeros farmacéuticamente aceptables de los mismos. Los siguientes substituyentes y valores se pretende que proporcionen ejemplos representativos de varios aspectos de esta invención. Estos valores representativos se pretenden que definan además tales aspectos y no se pretende que excluyan otros valores o limiten el alcance de la invención. En un aspecto específico de la invención, R1 es hidrógeno, halo, alquilo Ci_4, o alcoxi Ci_4. En otro aspecto específico, R1 es hidrógeno, halo, o alquilo Ci- ; o R1 es hidrógeno ó halo; o R1 es fluoro; o R1 es bromo . Todavía en otro aspecto específico, R1 es hidrógeno. En un aspecto específico, R2 es alquilo C3_4 ó cicloalquilo C3-6. En otro aspecto específico, R2 es alquilo C3-4. Los grupos R2 representativos incluyen n-propilo, isopropilo, ja-butilo, sec-butilo, y tert-butilo. En otro aspecto específico, R2 es isopropilo. En otro aspecto específico, R2 es alquilo C3_4 o cicloalquilo · C4-5,- o R2 es isopropilo o cicloalquilo C4_5. En un aspecto específico, R3 es hidrógeno o alquilo Ci_3.

En otro aspecto específico, R3 es hidrógeno, o R3 es metilo.

En un aspecto específico, R es -S(0)2R6 en donde R6 es alquilo Ci_3. En otro aspecto específico, R4 es -S(0)2CH3. En un aspecto específico, R4 es -C(0)R7 en donde R7 es hidrógeno, alquilo C1-3 o piridilo. En otro aspecto específico, R4 es -C(0)R7 en donde R7 es hidrógeno o alquilo Ci_3; o R4 es -C(0)R7 en donde R7 es hidrógeno o metilo; o R4 es -C(0)R7 en donde R7 es hidrógeno; o R4 es -C(0)R7 en donde R7 es metilo. Todavía en otro aspecto específico, R4 es -C(0)R7 en donde R7 es 3-piridilo o 4-piridilo. En un aspecto específico, R5 es hidrógeno; alquilo Ci_3; alquilo C2-3 substituido con -OH o alcoxi C1-3; o -CH2-piridilo . En otro aspecto específico R5 es hidrógeno, alquilo Ci_3, o -CH2-piridilo; o R5 es hidrógeno o alquilo Ca_3. Todavía en otros aspectos específicos, R5 es -CH2-3-piridilo; o R5 es hidrógeno o metilo; o R5 es hidrógeno; o R5 es metilo . Todavía en otros aspectos específicos, R5 y Rs tomados juntos forman -(CH2)3- ó -(CH2)4; o R5 y R6 tomados juntos forman -(CH2)3-. En otro aspecto, la invención proporciona un compuesto de la fórmula (I), en donde R3 es hidrógeno.

En otro aspecto, la invención proporciona un compuesto de la fórmula (I), en donde R4 es ~S(0)2R6. En otro aspecto, la invención proporciona un compuesto de la fórmula (I) , en donde R4 es -C(0)R7. La invención además proporciona un compuesto de la fórmula (I) en donde R1 es hidrógeno o halo; R2 es isopropilo o cicloalquilo C4-5; y R3, R4, R5, R6 y R7 se definen como en la fórmula (I) . Todavía en otro aspecto, la invención proporciona un compuesto de la fórmula (I) en donde: R1 es hidrógeno; R2 es alquilo C3-4 ó cicloalquilo C4-5; R3 es hidrógeno; R4 es -S(0)2R6 ó -C(0)R7; R5 es hidrógeno o alquilo C1-3; R6 es alquilo Ci_3; y R7 es hidrógeno o alquilo C1-3. Todavía en otro aspecto, la invención proporciona un grupo de los compuestos de la fórmula (II) : en donde R1 es hidrógeno, R2 es isopropilo, y R3, R4, R5 y R6, ó R3, R4, R5 y R7 toman los valores mostrados en la tabla I a II, respectivamente.

Tabla I Tabla II Las convenciones de nombrado químico usadas en la presente se ilustran para los compuestos del Ejemplo 1: que se designa { (1S, 3R, 5R) -8- [2-hidroxi-3~ (metansulfonil-metil-amino) propil] -8-aza-biciclo [3.2.1] oct-3- il}-amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolina-3-carboxílico, de conformidad al software AutoNom, proporcionado por sistemas de información MDL, GmbH (Frankfurt, Alemania). La designación (1S,3R,5R) describe la orientación relativa de los enlaces asociados con el sistema de anillo bicíclico que se describe como cuñas sólidas y punteadas. El compuesto se indica alternativamente como N- [ (3-endo) -8- [2-hidroxi-3- (metansulfonil-metil-amino) propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il] -1- (1-metiletil) -2-oxo-l , 2-dihidro-3-quinolincarbocamida. En todos los compuestos de la invención detallados arriba, el quinolinona-carboxamida es endo para el grupo azabiciclooctano . La mención particular puede hacerse de los siguientes compuestos : { (1S, 3R, 5R) -8- [2-hidroxi-3- (metansulfonil-metil-amino) propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il }amida del ácido 1- isopropil-2-oxo-l , 2~dihidroquinolina-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [2-hidroxi-3- (metansulfonilamino)propil] - 8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2 oxo-1, 2~dihidroquinolina-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [ (R) -2-hidroxi-3- (metansulfonil-metil- amino)propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1 isopropil-2-oxo-l , 2-di idroquinolina-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [ (S) -2- idroxi-3- (metansulfonil-metil- amino)propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-illamida del ácido 1 isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolina-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [3- (acetil-metil-amino) -2-hidroxipropi1] - 8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-1 , 2-dihidroquinolina-3-carboxílico; { (lS,3R,5R)-8-[3- (formil-metil-amino) -2-hidroxipropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il} mida del ácido l-isopropil-2-oxo-1 , 2-dihidroquinolina-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [ (R) -3- (acetil-metil-amino) -2-hidroxipropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1-isopropil-2-oxo-1 , 2-dihidroguinolina-3-carboxílico; { (1S,3R, 5R) -8- [ (R) -3- (formil-metil-amino) -2-hidroxipropi1] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolina-3-carboxílico; y { (1S, 3R, 5R) -8- [ (R) -2-hidroxi-3-(metansulfonilamino) propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-1 , 2-dihidroquinolina-3- carboxílico. Como se ejemplifica por los compuestos particulares listados arriba, los compuestos de la invención pueden contener un centro quiral, específicamente, en el átomo de carbono en las fórmulas (I) ó (II) que llevan el substituyente -0R3. En consecuencia, la invención incluye mezclas racémicas, estereoisomeros puros, y mezclas enriquecidas con estereoisomeros de tales isómeros, salvo que se indique de otra manera. Cuando un estereoisómero particular se muestra, se deberá entender por alguien con habilidad ordinaria en el arte, que cantidades menores de otros estereoisomeros pueden presentarse en las composiciones de la invención salvo que se indique de otra manera, proporcionando que la utilidad de la composición como un todo no se elimina por la presencia de tales isómeros .

Definiciones Cuando se describen los compuestos, composiciones y métodos de la invención, los siguientes términos tienen los siguientes significados, salvo que se indique de otra manera . El término "alquilo" significa grupo de hidrocarburo saturado monovalente, el cual puede ser lineal o ramificado o combinaciones de los mismos. A menos de que se defina de otra manera, tales grupos alquilo típicamente contienen desde 1 hasta 10 átomos de carbono. Los grupos alquilo representativos incluyen, a manera de ejemplo, metilo, etilo, n-propilo (n-Pr) , isopropilo (i-Pr) , n-butilo (n-Bu) , sec- butilo, isobutilo, tert-butilo, n-pentilo, n-hexilo, n- heptilo, n-octilo, n-nonilo, n-decilo y similares. El término "alquilenilo" significa un grupo hidrocarburo saturado divalente el cual puede ser lineal o ramificado o combinaciones de los mismos. A menos de que se define de otra manera, tales grupos alquilenilo típicamente contienen desde 1 hasta 10 átomos de carbono. Los grupos alquilenilo representativos incluyen, a manera de ejemplo, metileno, etileno, n-propileno, n-butileno, propano-1, 2-diil (1-metiletileno) , 2-metilpropan-1 , 2-diil (1 , 1-dimetiletileno) y similares . El término "alcoxi" significa un grupo -O-alquilo monovalente, donde alquilo se define como arriba. Los grupos alcoxi representativos incluyen, a manera de ejemplo, metoxi, etoxi , propoxi, butoxi, y similares. El término "cicloalquilo" significa un grupo carbocíclico saturado monovalente el cual puede ser monocíclico o multicíclico . Salvo que se indique de otra manera, tales grupos cicloalquilo típicamente contiene desde 3 hasta 10 átomos de carbono. Los grupos cicloalquilo representativos incluyen, a manera de ejemplo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclooctilo, y similares. El término "halo" significa flúor, cloro, bromo y yodo.

El término "compuesto" significa un compuesto que se preparó sintéticamente o se preparó en cualquier otra manera, tal como por metabolismo. El término "cantidad terapéuticamente efectiva" significa una cantidad suficiente para efectuar un tratamiento cuando se administra a un paciente que necesita del tratamiento . El término "tratamiento" como se usa en la presente, significa el tratamiento de una enfermedad, trastorno o condición médica en un paciente, tal como un mamífero (particularmente un humano) , que incluye: (a) prevenir que la enfermedad, trastorno, o condición médica se presente, esto es, tratamiento profiláctico de un paciente; (b) aliviar la enfermedad, trastorno, o condición médica, esto es, eliminar o causar una regresión de la enfermedad, trastorno, o condición médica en un paciente,- (c) suprimir la enfermedad, trastorno, o condición médica, esto es, retardar o detener el desarrollo de la enfermedad, trastorno, o condición médica en un paciente; o (d) aliviar los síntomas de la enfermedad, trastorno, o condición médica en un paciente. El término "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a una sal preparada de una base o ácido que es aceptable para la administración a un paciente, tal como un mamífero. Tales sales pueden derivarse de bases inorgánicas u orgánicas farmacéuticamente aceptables y de ácidos inorgánicos u orgánicos farmacéuticamente aceptables. Típicamente, las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la presente invención se preparan de ácidos . Las sales derivadas de ácidos farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, ácido acético, adípico, bencensulfónico, benzoico, canforsulfónico, cítrico, etansulfónico , fumárico, glucónico, glutámico, bromhídrico, clorhídrico, láctico, maléico, málico, mandélico, metansulfónico, múcico, nítrico, pantoténico, fosfórico, succínico, sulfúrico, tartárico, p-toluensulfónico, xinafóico (ácido l-hidroxi-2-naftóico) , naftalen-1, 5-disulfónico y similares . El término "solvato" significa un complejo o agregado formado por una o más moléculas de un soluto, esto es, un compuesto de la invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y una o más moléculas de un solvente. Tales solvatos típicamente son sólidos cristalinos que tienen una relación molar substancialmente fija de soluto y solvente. Los solventes representativos incluyen, a modo de ejemplo, agua, metanol, etanol, isopropanol, ácido acético, y similares. Cuando el solvente es agua, el solvato formado es un hidrato . Se apreciará que el término "o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del estereoisómero del mismo" se pretende que incluye todas las permutaciones de sales, solvatos y estereoisómeros , tal como un solvato de una sal farmacéuticamente aceptable de un estereoisómero del compuesto de la fórmula (I) . El término "grupo amino protector" significa un grupo protector .apropiado para prevenir reacciones indeseables en el nitrógeno amino. Los grupos amino protectores representativos incluyen, pero no se limitan a, formilo; grupos acilo, por ejemplo grupos alcanoilo, tales como acetilo; grupos alcoxicarbonilo , tales como tert-butoxicarbonilo (Boc) ; grupos arilmetoxicarbonilo , tales como benciloxicarbonilo (Cbz) y 9-fluorenilmetoxicarbonilo (Fmoc) ; grupos arilmetilo, tales como bencilo (Bn) , tritilo (Tr) , y 1 , 1-di- ( 4 ' -metoxifenil ) metilo ; grupos sililo, tales como trimetilsililo (TMS) y tert-butildimetilsililo (TBS) ; y similares.

Procedimientos Sintéticos Generales Los compuestos de la invención pueden prepararse a partir de materiales de partida fácilmente disponibles usando los siguientes métodos y procedimientos generales. No obstante que un aspecto particular de la presente invención se ilustra en los esquemas de reacción de abajo, aquellos expertos en la técnica reconocerán que todos los aspectos de la presente invención pueden prepararse usando los métodos descritos en la presente o usando otros métodos, reactivos y materiales de partida conocidos por aquellos expertos en el arte. También se apreciará que donde se dan condiciones de proceso típicas o preferidas (esto es, temperaturas de reacción, tiempos, relacionados molares de reactivos, solventes, presiones, etc) , también pueden usarse otras condiciones de proceso salvo que se establezca de otra manera. Las condiciones de reacción óptimas pueden variar con los reactivos o solventes particulares usados, pero tales condiciones pueden determinarse por alguien experto en la técnica por procedimientos de optimización de rutina. Adicionalmente, como será aparente para aquellos expertos en la técnica, pueden ser necesarios grupos protectores convencionales para prevenir que ciertos grupos funcionales experimenten reacciones indeseadas. La elección del grupo protector apropiados para el grupo funcional particular, así como las condiciones apropiadas para la protección y desprotección, son bien conocidas en el arte. Por ejemplo, numerosos grupos protectores, y su introducción y remoción, se describen en T.W. Greene y G. M. Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis, Third Edition, Wiley, New York, 1999, y referencias citadas en la presente. En un método de síntesis, los compuestos de la fórmula (I) se preparan como se ilustran en el Esquema de Reacción A. (Los substituyentes y variables mostrados en los siguientes esquemas de reacción tienen las definiciones proporcionadas arriba, salvo que se indique de otra manera) .

Esquema de reacción A En el esquema de reacción A, L representa un grupo de partida tal como cloro, bromo, yodo, o etoxi, o el reactivo L—R4 es el ácido carboxílico HO-C(0)R7, esto es, L formalmente representa hidroxi . Las condiciones de reacción óptimas para la reacción del esquema de reacción A pueden variar dependiendo de las propiedades químicas del reactivo L—R4, como se conocen por aquellos de habilidad en el arte. Por ejemplo, cuando L es un grupo de partida halo, tal como cloro, la reacción se conduce típicamente por poner en contacto el intermediario (III) con entre alrededor de 1 y alrededor de 4 equivalentes de un compuesto de la fórmula L— R4 en un diluyente inerte, tal como diclorometano, en la presencia de un exceso de base, por ejemplo entre alrededor de 3 y alrededor de 6 equivalentes de, base, tal como N,N- diisopropiletilamina o 1 , 8-diazabiciclo [5. .0] undec-7-eno (DBU) . Los diluyentes inertes adecuados también incluyen N,N- dimetilformamida, triclorometano, 1, 1, 2, 2-tetracloroetano, tetrahidrofurano, y similares. La reacción se conduce típicamente a una temperatura en el rango de alrededor de - 100 °C hasta alrededor de 30°C durante alrededor de un cuarto de hora hasta alrededor de 2 horas, o hasta que la reacción se completó substancialmente . Los reactivos ejemplares L—R4 en los cuales L es cloro incluyen cloruro de metansulfonilo y cloruro de acetilo. Cuando el reactivo L—R4 es un ácido carboxílico, el esquema de reacción A representa una reacción de acoplamiento de amida el cual se conduce típicamente por poner en contacto el intermediario (III) con entre alrededor de 1 y alrededor de 4 equivalentes de un compuesto de un ácido carboxílico L— R4 en un diluyente inerte, por ejemplo, ?,?-dimetilformamida, en la presencia de un agente de acoplamiento tal como hexafluorofosfato de benzotriazol-l-iloxitripirrolidino-fosfonio (PyBop) . La reacción se conduce típicamente a temperatura ambiente, durante alrededor de un cuarto de hora hasta alrededor de 2 horas, o hasta que la reacción se completó substancialmente. Los agentes de acoplamiento alternativos adecuados incluyen 1 , 3-diciclohexilcarbodiimida (DCC) , 1- (3-dimetilaminopropil) -3-etilcarbodiimida (EDC) , y PyBop combinado con l-hidroxi-7-azabenzotriazol (HOAt) . El acoplamiento de amida del intermediario (III) con el ácido carboxílico L—R4 alternativamente puede llevarse a cabo por convertir L—R4 a un éster activado, tal como un éster de N-hidroxi succinimida ( HS) o un éster de p-nitrofenilo, o un imidazol ácido, el cual luego se hace reaccionar con el intermediario (III) . Alternativamente, cuando el reactivo L—R4 es un líquido, por ejemplo formiato de etilo, la reacción puede llevarse a cabo por disolver (III) en un exceso grande del reactivo L— R4, y se calienta a una temperatura de entre alrededor de 50°C y alrededor de 100 °C durante alrededor de 12 hasta alrededor de 24 horas. El producto de la fórmula (I) se aisló y se purificó por procedimientos convencionales. Por ejemplo, el producto puede concentrarse hasta secarse bajo presión reducida, se toma en una solución débil acuosa y se purifica por cromatografía CLAR. Alternativamente, los compuestos de la fórmula (I) pueden prepararse por N-alquilación de un compuesto de la fórmula (I) en la cual R2 es hidrógeno, el cual puede prepararse de conformidad al esquema, de reacción A. La reacción de N-alquilación se conduce típicamente por poner en contacto un compuesto de la fórmula (I) en el cual R2 es hidrógeno con entre alrededor de 1 y alrededor de 4 equivalentes de un compuesto de la fórmula L ' — 2 en la cual L' es un grupo de partida tal como yodo o bromo. Esta reacción se conduce típicamente en un solvente polar aprótico tal como dimetil formamida en la presencia de entre alrededor de 2 y alrededor de 4 equivalentes de base fuerte, tal como tert-butóxido de potasio. Típicamente, la reacción se llevó a cabo a una temperatura de entre alrededor de 60°C y alrededor de 100°C entre alrededor de 6 y alrededor de 24 horas, o hasta que la reacción se completó subs tancialmente . Todavía en otra alternativa, los compuestos de la fórmula (I) en los cuales R1 es otro diferente a hidrógeno se prepararon por procesos convencionales a partir de los compuestos de la fórmula (I) en los cuales R1 es hidrógeno. Los intermediarios de la fórmula (III) se prepararon a partir de materiales estándar fácilmente disponibles. Por ejemplo, cuando el carbono es el subs ti tuyent e —OR3 no es quiral, un intermediario de la fórmula (III) se preparó por el procedimiento ilustrado en el esquema de reacción B. donde L' independientemente representa un grupo de partida halo tal como bromo, cloro, o yodo. Un contraión cargado negativamente también se presenta asociado con el intermediario cargado positivamente (V) ó (V ) . Primero, un intermediario de la fórmula (IV) se hace reaccionar con un compuesto de oxirano, por ejemplo, 2-bromometiloxirano (comúnmente, epibromohidrina) para formar una sal de azetidina de la fórmula (V) . Esta reacción se conduce típicamente por poner en contacto (IV) con entre alrededor de 2 y alrededor de 4 equivalentes de 2- bromometiloxirano en un diluyente polar, tal como etanol . La reacción se conduce típicamente a temperatura ambiente durante entre alrededor de 24 y alrededor de 48 horas o hasta que la reacción se completa substancialmente . Se entenderá que en el proceso del esquema de reacción B y en otros procesos descritos a continuación usando el intermediario (IV) , el intermediario (IV) puede suministrarse en la forma de base libre o en una forma de sal, con ajuste apropiado de las condiciones de reacción, como sea necesario como se conoce por aquellos de habilidad en el arte. Un intermediario de la fórmula (V) , en el cual R3 es alquilo C1-3, puede prepararse por poner en contacto el intermediario (V) con desde ligeramente menos que un equivalente hasta alrededor de un equivalente de un compuesto de la fórmula L'—R3, donde R3 es alquilo Ci_3, en un diluyente inerte en la presencia de entre alrededor de 1 y alrededor de 3 equivalentes de una base fuerte, tal como tert-butóxido de potasio o hidruro de sodio. La reacción se conduce típicamente a temperatura ambiente durante entre alrededor de un cuarto de hora hasta una hora, o hasta que la reacción se completó substancialmente. Los diluyentes inertes adecuados incluyen dielorómetaño, triclorometano, 1,1,2,2-tetracloroetano, y similares. Siguiendo, el intermediario de azetidina (V) ó (V) se hace reaccionar con una amina de la fórmula ¾NR5 para proporcionar el intermediario (III) . Típicamente, el intermediario de azetidina se disolvió en un diluyente inerte, tal como etanol, y se pone en contacto con entre alrededor de 1 y alrededor de 8 equivalentes de la amina ¾NR5. Por ejemplo, cuando la amina H2NR5 es un reactivo volátil, tal como metilamina, preferiblemente, entre alrededor de 5 y alrededor de 7 equivalentes de la amina se usaron. La reacción se conduce típicamente a una temperatura de entre alrededor de 50°C y alrededor de 100°C durante entre alrededor de 12 y alrededor de 24 horas o hasta que la reacción se completó substancialmente . Un intermediario de la fórmula (III) en el cual R5 es hidrógeno, puede prepararse a partir del intermediario de azetidina (V) ó (V ) usando formiato de amonio en lugar de amoniaco, esto es, en lugar del reactivo ¾NR5 indicado en el esquema de reacción B. Alternativamente, para preparar el intermediario (III) donde R5 es hidrógeno, el anillo de azetidina de (V) o (V ) puede abrirse por la reacción con una azida, tal como azida de sodio, el cual luego seguido por una reacción de reducción para proporcionar el intermediario (III) , o el anillo puede abrirse por la reacción con hidróxido de amonio . Como se describe en detalle en el ejemplo 4a, cuando R3 y R5 son hidrógeno y el carbono es el subs tituyente —OR3 no es quiral, un intermediario de la fórmula (III) puede prepararse por hacer reaccionar el intermediario (IV) con un compuesto de oxiranilmetilo que tiene un átomo de nitrógeno protegido y luego desprotegido. Un reactivo útil es 2 -oxir ni 1metil - isoindol-1, 3-diona, comúnmente epoxipropil ftalimida , el cual se hace reaccionar con el intermediario (IV) para formar un intermediario en el cual un grupo 2~hidroxi propilo substituido con f talimidilo : se une al nitrógeno del anillo de azabicilcooctano de la fórmula (IV) . El grupo ftalimidilo luego se removió por reflujo en hidrazina para formar un intermediario de la fórmula (III) en el cual R3 y R5 son hidrógeno. Un intermediario de la fórmula (III) en el cual R3 y R5 son hidrógeno pueden también prepararse por la reacción de la azetidina (V) con el anión de ftalimida y tratamiento subsecuente con hidrazina. En un método alternativo de síntesis, un intermediario de la fórmula (III) en el cual R3 es hidrógeno, puede prepararse por reacción del intermediario (IV) con un intermediario protegido (VI) : seguido por una etapa de desprotección. En la fórmula (VI) , P1 es un grupo protector amino, L' es un grupo de partida halo, y el asterisco significa un centro quiral . El proceso utiliza un intermediario de la fórmula (VI) que es útil para preparar formas del intermediario (III) en el cual la estereoquímica en el centro marcada por el asterisco es específicamente (R) o (S) así como para preparar formas no quirales del intermediario (III) . Típicamente, el intermediario (IV) se conecta con entre alrededor de 1 y alrededor de 2 equivalentes del intermediario (VI) en un diluyente polar, tal como metanol, en la presencia de más de un equivalente de una base, tal como ?,?-diisopropiletilamina . La reacción se conduce típicamente a una temperatura de entre alrededor de 60°C y alrededor de 100°C por entre alrededor de 12 y alrededor de 24 horas, o hasta que la reacción se completa substancraímente . El grupo protector P1 se removió por procedimientos estándar para proporcionar un intermediario de la fórmula (III) . Un grupo protector útil P1 es Boc, el cual se remueve típicamente por el tratamiento con un ácido, tal como ácido trifluoroacético . Todavía en otro proceso alternativo para la preparación del intermediario (III) , el intermediario (VI) puede primero convertirse a una forma ciclizada (VII) : antes de la reacción con el intermediario (IV) para proporcionar el intermediario (III) . El intermediario (VII) se preparó típicamente por disolver el intermediario (VI) en un diluyente inerte, por ejemplo, tetrahidrofurano, en la presencia de base, por ejemplo hidróxido de sodio. La reacción de (VII) con (IV) para proporcionar el intermediario (III) se lleva a cabo típicamente por poner en contacto el intermediario (IV) con entre alrededor de 1 y alrededor de 4 equivalentes del intermediario (VII) en un diluyente polar, tal como metanol . La reacción se conduce típicamente a una temperatura de entre alrededor de 60°C hasta alrededor de 100°C por entre alrededor de 1 y alrededor de 4 horas, o hasta que la reacción se completa substancialmente. El grupo protector P1 se removió por procedimientos estándar para proporcionar un intermediario de la fórmula (III) . El intermediario protegido (VI) puede prepararse de un oxirano como se ilustra en el esquema de reacción C para el ejemplo particular de formar un intermediario quiral protegido Boc (VI ' ) usando un oxirano quiral . La reacción es igualmente útil para . la preparación de los compuestos no quirales de la fórmula (VI) .

Esquema de reacción C Como se muestra en el esquema de reacción C, una bencilamina 2 se conecta con al menos un equivalente de un oxirano quiral 1 en un diluyente no polar tal como hexano o tolueno para formar la 2-hidroxipropilamina 3. La reacción se conduce típicamente a temperatura ambiente durante entre alrededor de 12 y alrededor de 24 horas, o hasta que la reacción se completó substancialmente. El intermediario 3 se hace reaccionar típicamente con un exceso ligero de dicarbonato de di-tert-butilo (comúnmente (Boc)20), por ejemplo, alrededor de 1.1 equivalentes, bajo una atmósfera de hidrógeno en la presencia de un catalizador de metal de transición para proporcionar el intermediario protegido Boc (VI' ). La reacción se conduce típicamente a temperatura ambiente durante entre alrededor de 8 hasta alrededor de 24 horas . Un proceso para preparar los intermediarios de la fórmula (IV) se muestra en el esquema de reacción D.

Esquema de reacción D (VIH) 5 tfV El aminoazabiciclooctano protegido, o comúnmente, aminotropano 5 primero se hace reaccionar con el ácido carboxílico de quinolinona substituido (VIII) . Típicamente, esta reacción se conduce por convertir primero (VIII) a un cloruro del ácido por poner en contacto (VIII) con al menos un equivalente, preferibleme te entre alrededor de 1 y alrededor de 2 equivalentes de un agente activo, tal como cloruro de tionilo o cloruro de oxalilo en un diluyente aromático, tal como tolueno, benceno, xileno, o similares. La reacción se conduce típicamente a un rango de temperatura desde alrededor de 80°C hasta alrededor de 120°C durante alrededor de 15 minutos hasta alrededor de 4 horas, o hasta que la reacción se completó substancialmente.

La solución de cloruro del ácido se agrega típicamente a una mezcla bifásica de alrededor de 1 equivalente de aminotropano 5 para formar un intermediario protegido, el cual se extrae por procedimientos estándar. La mezcla bifásica de 5 se preparó generalmente por disolver el 5 en un diluyente aromático, tal como se usó arriba, y se agrega una solución acuosa que contiene un exceso de base, tal como hidróxido de sodio o hidróxido de potasio, preferiblemente alrededor de 2 hasta 5 equivalentes de la base. Alternativamente, el acoplamiento de amida del intermediario 5 con el ácido carboxílico (VIII) puede llevarse a cabo en la presencia de un agente de acoplamiento tal como 1,3 diciclohexilcarbodiimida (DCC) , l-(3-dimetilaminopropil) -3-etilcarbodiimida (EDC) , o benzotriazol-hexafluorofosfato de 1-iloxitripirrolidino-fosfonio (PyBop) , opcionalmente combinado con l~hidroxi-7-azabenzotriazol (HOAt) , como se describe arriba por el acoplamiento de amida del intermediario (III) con un ácido carboxílico. Todavía en otra alternativa, el acoplamiento de amida del intermediario 5 con el ácido carboxílico (VIII) puede llevarse a cabo por convertir (VIII) a un éster activado, también descrito arriba . El grupo protector P1 se removió por procedimientos estándar para proporcionar un intermediario de la fórmula (IV) . Por e emplo cuando el grupo protector es Boc, típicamente se removió por el tratamiento con un ácido, tal como ácido trifluoroacético, proporcionando la sal del ácido del intermediario. La sal del ácido del intermediario (IV) puede convertirse a la base libre, si se desea, por tratamiento convencional con la base. El grupo protector Cbz, por otro ejemplo, se remueve convenientemente por hidrogenólisis durante un catalizador de metal adecuado tal como carbono en paladió. El aminotropano protegido 5 empleado en las reacciones descritas en esta solicitud se prepara a partir de materiales de partida fácilmente disponibles. Por ejemplo, cuando el grupo protector P1 es Boc, el aminotropano protegido 5' se prepara por el procedimiento ilustrado en el Esquema de reacción E.

Esquema de reacción E 8 5' Como se describe en detalle en. el ejemplo la a continuación, para preparar el intermediario protegido 5', primero, 2 , 5-dimetoxi tetrahidrofurano 6 se conecta con entre alrededor de 1 y 2 equivalentes, preferiblemente alrededor de 1.5 equivalentes de bencil amina y un exceso ligero, por ejemplo alrededor de 1.1 equivalentes, de ácido 1, 3-acetonedicarboxílico 7 en una solución acuosa ácida en la presencia de un agente amortiguador tal como fosfato ácido de sodio. La mezcla de reacción se calentó a entre alrededor de 60 y alrededor de 100°C para asegurar descarboxilación de cualquiera de los intermediarios carboxilados en el producto, 8-bencil-8- azabiciclo [3.2.1] octan-3-ona 8, comúnmente N-benciltropanona. El intermediario 8 se nace reaccionar típicamente con un exceso ligero de dicarbonato de di-tert-butilo (comúnmente (Boc)20), por ejemplo, alrededor de 1.1 equivalentes, bajo una atmósfera de hidrógeno en la presencia de un catalizador de metal de transición para proporcionar el intermediario protegido Boc 9, éster de tert-butilo del ácido 3-oxo-8-azabiciclo[3.2.l]octane-8-carboxílico. La reacción se conduce típicamente a temperatura ambiente durante alrededor de 12 hasta alrededor de 72 horas. Finalmente, el intermediario 9 se conecta con un exceso grande, por ejemplo al menos alrededor de 25 equivalentes, de formiato de amonio en un diluyente inerte, tal como metanol, en la presencia de un catalizador de metal de transición para proporcionar el producto 5' en la configuración endo con estereoespecificidad, por ejemplo una relación de endo a exo de >99:1. La reacción se conduce típicamente a temperatura ambiente durante alrededor de 12 hasta alrededor de 72 horas o hasta que la reacción se completó substancialmente. Es ventajoso agregar el reactivo de formiato de amonio en porciones. Por ejemplo, el intermediario 9 se conecta con una porción inicial de formiato de amonio de alrededor de 15 hasta alrededor de 25 equivalentes. Después de un intervalo de alrededor de 12 hasta alrededor de 36 horas, una porción adicional de alrededor de 5 hasta alrededor de 10 equivalentes de formiato de amonio se agregó. La adición subsecuente puede repetirse después de un intervalo similar. El producto 5' puede purificarse por procedimientos convencionales, tales como extracción alcalina. En un método alternativo de síntesis, los compuestos de la fórmula (I) se prepararon por acoplar el ácido carboxílico de quinolinona substituido (VET) con un intermediario de la fórmula (IX) como se ilustra en el esquema de reacción F.

Esquema de reacción F La reacción del esquema de reacción F se conduce típicamente bajo las condiciones de acoplamiento de amida descritas arriba por la reacción del ácido carboxílico (VIII) con el intermediario 5.

Los intermediarios de la fórmula (IX) pueden prepararse por desproteger un intermediario de la fórmula (X) : donde P2 representa un grupo protector amino. Los intermediarios de la fórmula (X) pueden prepararse a partir de materiales de partida fácilmente disponibles usando procedimiento análogos a la alquilación y otras reacciones descritas arriba y/o usando reacciones alternativas conocidos por aquellos hábiles en el arte. Por ejemplo, el intermediario (X) puede prepararse usando el intermediario 10 el cual puede formarse por proteger el amino nitrógeno del aminoazobiciclooctano 5 con el grupo amino protector P2 y luego se removió P1 del nitrógeno del grupo azabiciclooctano . Los grupos protectores P1 y P2 se escogen tal como para removerse bajo condiciones diferentes. Por ejemplo cuando P1 se escoge como Boc, luego Cbz puede usarse como P2. El aminotropano protegido substituye el 10 por el intermediario (IV) en las reacciones descritas arriba para la preparación del intermediario (III) proporciona los intermediarios de la fórmula (X) . Todavía en otro método de síntesis, los compuestos de la fórmula (I) en el cual R3 es hidrógeno, representado a continuación como la fórmula (?'), puede prepararse como se ilustra en el esquema de reacción G.

Esquema de reacción G El intermediario (XI) puede contener un centro quiral, como se muestra explícitamente para el intermediario de oxirano protegido (VII) . Típicamente, el intermediario (IV) se conecta con entre alrededor de 1 y alrededor de 2 equivalentes del intermediario de oxirano (XI) en un diluyente polar, tal como etanol para formar el producto (?'). El intermediario (IV) puede suministrase en forma de sal en tal caso un exceso molar ligero de base alcalina se incluye en la mezcla de reacción previa a la adición de oxirano. La reacción se conduce típicamente a una temperatura de alrededor de 60°C hasta alrededor de 100°C durante entre alrededor de 1 y alrededor de 3 horas, o hasta que la reacción se completa substancialmente. El producto puede aislarse por cristalización de un diluyente inerte como la base libre o como una sal ácida. Los intermediarios de la fórmula (XI) pueden prepararse por la reacción del intermediario de oxirano 1, ilustrada en el esquema de reacción C, con la amina secundaria HNlAt5. Típicamente, una solución acuosa de la amina HNR^R5 que contiene alrededor de 1 equivalente de una base, tal como hidróxido de sodio, hidróxido de litio, hidróxido de cesio, o hidróxido de potasio, se conecta con entre alrededor de 1.5 y alrededor de 2.5 equivalentes del intermediario de oxirano 1. La reacción se conduce típicamente a una temperatura de entre alrededor de 0°C y alrededor de 10°C durante entre alrededor de 12 y alrededor de 30 horas, o hasta que la reacción se completa substancialmente. El ácido carboxílico de quinolinona (VIII) se prepara fácilmente por procediinientos similares a aquellos reportados en la literatura en Suzuki et al, Heterocycles, 2000, 55, 2471-2485 y descritos en los ejemplos a continuación. Los reactivos L'-R2, L'-R3, L-R4, ?2?5, y HNR^5 son comercialmente disponibles o se preparan fácilmente por procedimientos estándar a partir de materiales estándar comunes. Detalles adicionales con respecto a condiciones de reacción y otros procedimientos específicos para preparar compuestos representativos de la invención o intermediarios de estos se describen en los ejemplos a continuación.

De conformidad, en un aspecto del método, la invención proporciona un proceso para preparar un compuesto de la fórmula (I) , o una sal o estereoisómero del mismo, el proceso comprende: (a) hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (III ) : con el compuesto de la fórmula L— R en donde L es un grupo de partida, o L— R4 representa HO-C (0) R7 ; o (b) hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (VIII) : con un compuesto de la fórmula (IX) : 0» para proporcionar un compuesto de la fórmula (I) , o una sal o estereoisómero del mismo .

La invención además proporciona un compuesto de la fórmula (III) , o una sal o estereoisómero o derivado protegido del mismo, en donde R1, R2, R3, y R5 se definen como en la fórmula (I) . En un aspecto del método adicional, la invención proporciona un proceso para preparar un compuesto de la fórmula (?') en donde R1, R2, R4, y R5 se definen como en la fórmula (I) , o una sal o estereoisómero del mismo, el proceso comprende hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (IV) : (IV) o una sal del mismo con un compuesto de la fórmula (XI) : para proporcionar un compuesto de la fórmula (II) o una sal o estereoisómero del mismo.

Composiciones farmacéuticas Los compuestos de quinolinona-carboxamida de invención se administran típicamente a un paciente en forma de una composición farmacéutica. Tales composiciones farmacéuticas pueden administrarse al paciente por cualquier ruta aceptable de administración, incluyendo, pero no limitando a, modos oral, rectal, vaginal, nasal, inhalado, tópico (incluyendo transdérmica) y parenteral de administración . De conformidad, en uno de estos aspectos de composición, la invención se dirige a una composición farmacéutica que comprende un portador farmacéuticamente aceptable o excipiente y una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Opcionalmente, tales composiciones f rmacéuticas pueden contener otros agentes terapéuticos y/o formulantes si se desea. Las composiciones farmacéuticas de la invención típicamente contienen una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la presente invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Típicamente, tales composiciones farmacéuticas deberán contener alrededor de 0.1 hasta alrededor de 95% en peso del agente activo; preferiblemente, desde alrededor de 5 hasta alrededor de 70% en peso; y más preferiblemente desde alrededor de 10 hasta alrededor de 60% en peso del agente activo. Cualquier portador convencional o excipiente puede usarse en las . composiciones farmacéuticas de la invención. La elección de un portador o excipiente o combinaciones de portadores o excipientes, dependerá del modo de administración usado para tratar un paciente particular o tipo de condición médica o estado de enfermedad. En este aspecto, la preparación de una composición farmacéuticamente aceptable para un modo particular de administración estará dentro del alcance de aquellos de habilidad en el arte farmacéutico. Adicionalmente , los ingredientes para tales composiciones están comercialmente disponibles de, por ejemplo, Sigma, P. O. Box 14508, St. Louis, MO 63178. A manera de ilustración adicional, las técnicas de formulación convencional se describen en Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Edition, Lippincott Williams & White, Baltimore, Maryland (2000); and H. C. Ansel et al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 7th Edition, Lippincott Williams & White, Baltimore, Maryland (1999) . Los ejemplos representativos de los materiales los cuales pueden servir como portadores farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, los siguientes: (1) azúcares, tales como lactosa, glucosa y sacarosa; (2) almidón, tal como almidón de maíz y almidón de papa; (3) celulosa, tal como celulosa microcristalina, y sus derivados, tales como celulosa de carboximetilo de sodio, celulosa de etilo y acetato de celulosa; (4) tragacanto en polvo; (5) malta; (6) gelatina; (7) talco; (8) excipientes, tales como manteca de cacao y ceras de supositorio; (9) aceites, tales como aceite de cacahuate, aceite de semilla de algodón, aceite de girasol, aceite de ajonjolí, aceite de olivo, aceite de maíz y aceite de soya; (10) glicoles, tales como propalen glicol; (11) polioles, tal como glicerina, sorbitol, manitol y polietilen glicol; (12) ésteres, tales como oleato de etilo y laurato de etilo; (13) agar; (14) agentes amortiguadores, tales como hidróxido de magnesio e hidróxido de aluminio; (15) ácido algínico; (16) agua libre de pirógenos; (17) solución salina isotónica; (18) solución de Ringer; (19) alcohol etílico; (20) soluciones amortiguadoras de fosfato; y (21) otras substancias no tóxicas compatibles empleadas en composiciones farmacéuticas . Las composiciones farmacéuticas de la invención se preparan típicamente por mezclar o combinar completamente o íntimamente un compuesto de la invención con un portador farmacéuticamente aceptable y uno o más ingredientes opcionales. Si es necesario o deseado, la mezcla uniformemente mezclada resultante puede entonces formarse o cargarse en tabletas, cápsulas, pildoras y similares usando procedimientos y equipo convencionales .

Las composiciones farmacéuticas de la invención se empacan preferiblemente en una forma de dosificación unitaria. El término "forma de dosificación unitaria" se refiere a una unidad discreta físicamente adecuada para dosificación, esto es, cada unidad contiene una cantidad de agente activo calculada para producir el efecto terapéutico deseado ya sea solo o en combinación con una o más unidades adicionales. Por ejemplo, tales formas de dosificación unitaria pueden ser cápsulas, tabletas, pildoras y similares . En una modalidad preferida, las composiciones farmacéuticas de la invención son adecuadas para administración oral. Las composiciones farmacéuticas adecuadas para administración oral pueden ser en forma de cápsulas, tabletas, pildoras, saquitos, pastillas, grageas, polvos, gránulos; o como una solución o una suspensión en un líquido acuoso o no acuoso; o como una emulsión líquida de aceite en agua o agua en aceite; o como un elixir o jarabe; y similares; cada uno contiene una cantidad predeterminada de un compuesto de la presente invención como un ingrediente activo. Cuando se pretenden para administración oral en una forma de dosis sólida (esto es, como cápsula, tabletas, pildoras y similares) , las composiciones farmacéuticas de la invención típicamente comprende un compuesto de la presente invención como el ingrediente activo y uno o más portadores farmacéuticamente aceptables, tales como citrato de sodio o fosfato de dicalcio. Opcionalmente o alternativamente, tales formas de dosis sólidas pueden también comprender: (1) rellenos o diluyentes, tales como almidones, celulosa microcristalina, lactosa, sacarosa, glucosa, manitol, y/o ácido silícico; (2) aglutinantes, tales como carboximetilcelulosa, alginatos, gelatina, polivinil pirrolidona, sacarosa y/o acacia; (3) humectantes, tales como glicerol; (4) agentes desintegrantes, tales como agar-agar, carbonato de calcio, almidón de papa o tapioca, ácido algínico, ciertos silicatos y/o carbonato de sodio; (5) agentes que retardan la solución, tal como parafina; (6) aceleradores de absorción, tales como compuestos de amonio cuaternarios; (7) agentes humectantes, tales como alcohol cetílico y/o monoestearato de glicerol; (8) absorbentes, tales como caolín y/o arcilla de bentonita; (9) lubricantes, tales como talco, estearato de calcio, estearato de magnesio, glicoles de polietileno sólidos, lauril sulfato de sodio, y/o mezclas de los mismos; (10) agentes colorantes y (11) agentes amortiguadores . Los agentes de liberación, agentes humectantes, agentes de recubrimiento, humectantes, saborizantes y agentes de perfume, conservadores y antioxidantes pueden también presentarse en las composiciones farmacéuticas de la invención. Los ejemplos de antioxidantes farmacéuticamente aceptables incluyen: (1) antioxidantes solubles en agua, tales como ácido ascórbico, clorohidrato de cisteina, bisulfato de sodio, metabisulfato de sodio, sulfito de sodio y similares; (2) antioxidantes solubles en aceite, tales como palmitato de ascorbilo, hidroxianisol butilado (???) , hidroxitolueno butilado (BHT) , lecitina, galato de propilo, alfa-tocoferol , y similares; y (3) agentes quelantes de metal, tal como ácido cítrico, ácido etilendiamina tetraacético (EDTA) , sorbitol, ácido tartárico, ácido fosfórico, y similares. Los agentes de recubrimiento para tabletas, cápsulas, pildoras y similares, incluyen aquellos usados por recubrimiento entérico, tal como ftalato acetato de celulosa (CAP) , ftalato de acetato de polivinilo (PVAP) , ftalato de hidroxipropil metilcelulosa, ácido metacrílico-copolímero de éster del ácido metacrílico, trimelitato de acetato de celulosa (CAT) , carboximetil etil celulosa (C EC) , succinato de acetato de hidroxipropil metil celulosa (HPMCAS) , y similares. Si se desea, las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden también formularse para proporcionar liberación baja o controlada del ingrediente activo usando, por ejemplo, hidroxipropil metil celulosa en varias proporciones; u otras matrices de polímero, liposomas y/o microesferas Además, las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden opcionalmente contener agentes opacificantes y pueden formularse de manera que liberan el ingrediente activo solamente, o preferentemente, en una cierta porción del tracto gastrointestinal, opcionalmente, en una manera retradada. Los ejemplos de las composiciones incrustadas las cuales pueden usarse incluyen substancias poliméricas y ceras. El ingrediente activo puede también ser en forma de micro-cápsula, si es apropiado, con uno o más de los excipientes arriba descritos . Las formas de dosis líquidas adecuadas para administración incluyen, a manera de ilustración, emulsiones f rmacéuticamente aceptables, microemulsiones , soluciones, suspensiones, jarabes y elixires. Tales formas de dosis líquidas típicamente comprenden el ingrediente activo y un diluyente inerte, tal como por ejemplo, agua u otros solventes, agentes solubilizantes y emulsificantes , tales como alcohol etílico, alcohol isopropílico, carbonato de etilo, acetato de etilo, alcohol bencílico, benzoato de bencilo, propilen glicol, 1,3-butilen glicol, aceites (esp., aceites de semilla de algodón, cacahuate, maíz, germen, olivo, ricino y ajonjolí) , glicerol, alcohol de tetrahidrofurilo , polietilen glicol y éster de ácido graso de sorbitán y mezclas de los mismos. Suspensiones, en adición al ingrediente activo, pueden contener agentes de suspensión tales como, por ejemplo, alcoholes etoxilados de isostearilo, polioxietilen sorbitol y ésteres de sorbitán, celulosa microcristalina, metanhidróxido de aluminio, bentonita, agar-agar y tragacanto, y mezclas de los mismos. Alternativamente, las composiciones farmacéuticas de la invención se formulan por administración por inhalación. Las composiciones farmacéuticas adecuadas para administración por inhalación serán típicamente en la forma de un aerosol o un polvo. Tales composiciones se administran generalmente usando dispositivos de liberación bien conocidos, tales como un inhalador de dosis medidor, un inhalador de polvo seco, un nebulizador o un dispositivo de liberación similar. Cuando se administra por inhalación usando un contenido presurizado, las composiciones farmacéuticas de la invención típicamente comprenden el ingrediente activo y un propelente adecuado, tal como diclorodifluorometano , triclorofluorometano , diclorotetrafluoroetano , dióxido de carbono u otro gas adecuado . Adicionalmente, la composición farmacéutica puede en la forma de una cápsula o cartucho (hacerse, por ejemplo, a partir de gelatina) que comprende un compuesto de la invención y un polvo adecuado para uso en un inhalador de polvo. Las bases de polvo adecuadas incluyen, a manera de ejemplo, lactosa o almidón. Los compuestos de la invención pueden también administrarse transdermalmente usando sistemas de liberación transdérmica conocidos y excipientes. Por ejemplo, un compuesto de la invención puede mezclarse con potenciadores de permeación, tales como propilen glicol, monolaurato de polietilen glicol, azacicloalcan-2-onas y similares, y se incorporan en un lote o sistema de liberación similar. Los excipientes adicionales incluyen agentes gelificantes , emulsificantes y amortiguadores, pueden usarse en tales composiciones transdérmicas si se desea . Las siguientes formulaciones ilustran composiciones farmacéuticas representativas de la presente invención: Ejemplo de formulación A Las cápsulas de gelatina dura para administración oral se preparan como sigue: Ingredientes Compuesto de la invención Lactosa (secado por rocío) Estearato de magnesio Procedimiento representativo: Los ingredientes se mezclan completamente y luego se cargaron en una cápsula de gelatina dura (260 mg de composición por cápsula) .

Ejemplo de formulación B Las cápsulas de gelatina dura para administración oral se preparan como sigue: Ingredientes Cantidad Compuesto de la invención 20 mg Almidón 89 mg Celulosa microcristalina 89 mg Estearato de magnesio 2 mg Procedimiento representativo: Los ingredientes se mezclan completamente y luego se pasan a través de un tamiz de EUA de malla No. 45 y se cargaron en una cápsula de gelatina dura (200 mg de composición por cápsula) .

Ejemplo de formulación C Cápsulas para administración oral se preparan como sigue: Ingredientes Cantidad Compuesto de la invención 10 mg Polioxietilen sorbitán monooleato 50 mg Ingrediente Cantidad Polvo de almidón 250 mg Procedimiento representativo: Los ingredientes se mezclan completamente y luego se cargaron en una cápsula de gelatina (310 mg de composición por cápsula) .

Ejemplo de formulación D Tabletas para administración oral se preparan como sigue: Ingredientes Cantidad Compuesto de la invención 5 mg Almidón 50 mg Celulosa microcristalina 35 mg Polivinilpirrolidona (10 % en peso en agua) 4 mg Almidón de carboximetilo de sodio 4.5 mg Estearato de magnesio 0.5 mg Talco 1 mg Procedimiento representativo: El ingrediente activo, almidón y celulosa se pasa a través de un tamiz de EUA de malla No. 45 y se mezcla completamente. La solución de polivinilpirrolidona se mezcla con los polvos resultantes, y esta mezcla luego se pasa a través de un tamiz de EUA de malla No. 14. Los gránulos se producen, se secan a 50-60°C y se pasan a través de un tamiz de EUA de malla No. 18. El almidón de carboximet ilo de sodio, estearato de magnesio y talco (previamente se pasan a través de un tamiz de EUA de malla No. 60) luego se agregan a los gránulos . Después se mezclan, la mezcla se comprime en una máquina de tabletas para proporcionar una tableta con peso de 100 mg .

Ejemplo de formulación E Las tabletas para administración oral se preparan como sigue : Ingredientes Cantidad Compuesto de la invención 25 mg Celulosa microcristalina 400 mg Dióxido de sílicón fumante 10 mg Ácido esteárico 5 mg Procedimiento representativo: Los ingredientes se mezclan completamente y luego se comprimen para formar tabletas (440 mg de composición por tableta) .

Ejemplo de formulación F Las tabletas de recubrimiento sencillo para administración oral se preparan como sigue: Ingredientes Cantidad Compuesto de la invención 15 mg Almidón de maíz 50 mg Croscarmelosa de sodio 25 mg Lactosa 120 mg Estearato de magnesio 5 mg Procedimiento representativo : Los ingredientes se mezclan completamente y se comprimen para formar una tableta de recubrimiento sencillo (215 mg de composición por tableta) .

Ejemplo de formulación G Una suspensión para administración oral se prepara como sigue : Ingredientes Cantidad Compuesto de la invención 0.1 g Ácido fumárico 0.5 g Cloruro de sodio 2.0 g Parabeno de metilo 0.15 g Parabeno de propilo 0.05 g Azúcar granulada 25.5 g Sorbitol (70% de solución) 12.85 g Veegum k (Vanderbilt Co.) 1.0 g Ingredientes Cantidad Saborizantes 0.035 mL Colorantes 0.5 mg Agua destilada q.s. hasta 100 mL Procedimiento representativo: Los ingredientes se mezclan para formar una suspensión que contiene 10 mg de ingrediente activo por 10 mL de suspensión.

Ejemplo de formulación H Un polvo seco para administración por inhalación se prepara como sigue: Ingredientes Cantidad Compuesto de la invención 1.0 mg Lactosa 25 mg Procedimiento representativo: El ingrediente activo se microniza y luego se mezcla con lactosa. Esta mezcla mezclada luego se cargó en un cartucho de inhalación de gelatina, los contenidos del cartucho se administran usando un inhalador de polvo .

Ejemplo de formulación I Un polvo seco para administración por inhalación en un inhalador de dosis medida se prepara como sigue: Procedimiento representativo: Una suspensión que contiene 5 % en peso de un compuesto de la invención y 0.1 % en peso de lecitina se prepara al dispersar 10 g de compuesto activo 20 como partículas micronizadas con un tamaño medio de menos de 10 µp? en una solución formada de 0.2 g de lecitina disuelta en 200 mL de agua desmineralizada. La suspensión se seca en rocío y el material resultante se microniza hasta partículas que tienen un diámetro medio de -menos de 1.5 µ?. Las partículas se cargaron en cartuchos con 1,1,1,2-tetrafluoroetano presurizado.

Ejemplo de formulación J Una formulación inyectable se prepara como sigue: Ingredientes Cantidad Compuesto de la invención 0.2 g Solución amortiguadora de acetato de sodio (0.4 M) 40 mL HC1 (0.5 N) o NaOH (0.5 N) q.s. hasta pH 4 Agua (destilada, estéril) q.s. hasta 20 mL Procedimiento representativo : Los ingredientes anteriores se mezclan y el pH se ajusta hasta 4 ± 0.5 usando HC1 0.5 N o NaOH 0.5 N.

Ejemplo de formulación K Las cápsulas para administración oral se preparan sigue : Ingredientes Cantidad Compuesto de la invención 4.05 mg Celulosa microcristalina (Avicel PH 103) 259.2 mg Estearato de magnesio 0.75 mg Procedimiento representativo : Los ingredientes se mezclan completamente y luego se cargaron en una cápsula de gelatina (tamaño #1, blanco, opaco) (264 mg de composición por cápsula) .

Ejemplo de formulación L Las cápsulas para administración oral se preparan como sigue : Ingredientes Cantidad Compuesto de la invención 8.2 mg Celulosa microcristalina (Avicel PH 103) 139.05 mg Estearato de magnesio 0.75 mg Procedimiento representativo: Los ingredientes se mezclan completamente y luego se cargaron en una cápsula de gelatina (tamaño #1, blanco, opaco) (148 mg de composición por cápsula) . Se entenderá que cualquier forma de los compuestos de la invención, (esto es, base libre, sal farmacéutica, o solvato) que es adecuado para el modo particular de administración, se pueden usar en las composiciones farmacéuticas discutidas arriba .

Utilidad Los compuestos de quinolinona-carboxamida de la invención son agonistas del receptor 5-HT4 y por lo tanto se espera que sean útiles para el tratamiento de condiciones médicas mediadas por los receptores 5-HT4 o asociadas con el receptor de actividad 5-HT4, esto es, condiciones médicas las cuales se mejoran por el tratamiento con un agonista receptor 5-HT4. Tales condiciones médicas incluyen, pero no se limitan a, síndrome de intestino irritable (IBS) , estreñimiento crónico, dispepsia funcional, vaciado gástrico retardado, enfermedad de reflujo gastroesofagal (GERD) , gastroparesis, íleo postoperativo, pseudo obstrucción intestinal, y tránsito retardado inducido por fármaco. Además, esto sugiere que algunos de los compuestos agonistas del receptor 5-HT4 pueden usarse en el tratamiento de trastornos del sistema nervioso central incluyendo, trastornos cognitivos, trastornos del comportamiento, trastornos del humor, y trastornos del control de la función autonómica.

En particular, los compuestos de la invención incrementan la movilidad del tracto gastrointestinal (GI) y asi se espera que sean útiles para tratar trastornos del tracto GI causado por movilidad reducida en mamíferos, incluyendo humanos . Tales trastornos de movilidad GI incluyen, a manera de ilustración, estreñimiento crónico, síndrome de intestino irritable con constipación predominante (C-IBS) , gastroparesis diabética e idiopática, y dispepsia funcional . En un aspecto, por lo tanto, la invención proporciona un método para incrementar la movilidad del tracto gastrointestinal en un mamífero, el método comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición farmacéutica que comprende un portador farmacéuticamente aceptable y un compuesto de la invención. Cuando se usa para tratar trastornos de movilidad reducida del tracto GI u otras condiciones mediadas por receptores 5~HT4, los compuestos de la invención serán típicamente administrados oralmente en una dosis sencilla diariamente o en dosis múltiple por día, no obstante que otras formas de administración pueden usarse. La cantidad de agente activo administrada por dosis o cantidad total administrada por día será típicamente determinada por un medico, en la claridad de circunstancias relevantes, incluyendo la condición para tratar, la ruta señalada de administración, el compuesto actual administrado y esta actividad relativa, la edad, peso, y respuesta del paciente individual, la severidad de los síntomas del paciente y similares . Las dosis adecuadas para tratar trastornos de movilidad reducida del tracto GI u otros trastornos mediados por receptores 5-HT4 se esperan en el rango desde alrededor de 0.0007 hasta alrededor de 20 mg/kg/día del agente activo, incluyendo desde alrededor de 0.0007 hasta alrededor de 1 mg/kg/día. Para un humano de 70 kg en promedio, esta cantidad será desde alrededor de 0.05 hasta alrededor de 70 mg por día del agente activo . En un aspecto de la invención, los compuestos de la invención se usan para tratar estreñimiento crónico. Cuando se usan para tratar estreñimiento crónico, los compuestos de la invención serán típicamente administrados oralmente en una dosis sencilla diariamente o en dosis múltiple por día. La dosis para tratar estreñimiento crónico, preferiblemente se espera en el rango desde alrededor de 0.05 hasta alrededor de 70 mg por día. En otro aspecto de la invención, los compuestos de la invención se usan para tratar síndrome del intestino irritable. Cuando se usa para tratar síndrome del intestino irritable de constipación predominante, los compuestos de la invención típicamente se administran oralmente en una dosis diaria sencilla o en dosis múltiples por d a. Preferiblemente, la dosis para el tratamiento de síndrome del intestino irritable de constipación predominante se espera a un rango desde alrededor de 0.05 hasta alrededor de 70 mg por día. En otro aspecto de la invención, los compuestos de la invención se usan para tratar gastroparesis diabética. Cuando se usa para tratar gastroparesis diabética, los compuestos de la invención típicamente se administran oralmente en una dosis diaria sencilla o en dosis múltiples por día. Preferiblemente,. la dosis para el tratamiento de gastroparesis diabética se espera a un rango desde alrededor de 0.05 hasta alrededor de 70 mg por día. En todavía otro aspecto de la invención, los compuestos de la invención se usan para tratar dispepsia funcional.

Cuando se usa para tratar dispepsia funcional, los compuestos de la invención típicamente se administran oralmente en una » dosis diaria sencilla o en dosis múltiples por día. Preferiblemente, la dosis para el tratamiento de dispepsia funcional se espera a un rango desde alrededor de 0.05 hasta alrededor de 70 mg por día. La invención también proporciona un método para tratar un mamífero que tiene una enfermedad o condición asociada con actividad del receptor 5-HT4, el método comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la invención o de una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención. Como se describió anteriormente, compuestos de la invención son agonistas del receptor 5-HT4. La invención además proporciona, por lo tanto, un método para agonizar un receptor 5-HT4 en un mamífero, el método comprende administrar un compuesto de la invención al mamífero. Además, los compuestos de la invención son también útiles como herramientas de búsqueda para investigar o estudiar sistemas biológicos o muestras que tienen receptores 5-HT4, o para descubrir nuevos agonistas del receptor 5-HT4. Por otro lado, ya que compuestos de la invención muestran selectividad de enlace para receptores 5-HT4 en comparación con enlace para receptores de otros subtipos 5-HT, particularmente receptores 5-HT3, tales compuestos son particularmente útiles para estudiar los efectos de agonismo selectivo de receptores 5-HT en un sistema o muestra biológica. Cualquier sistema o muestra biológica adecuados que tienen receptores 5-HT4 se pueden emplear en tales estudios que se pueden conducir ya sea in vitro o in vivo. Sistemas o muestras biológicas adecuadas representativos para cada estudio incluyen, pero no se limitan a, células, extractos celulares, membranas de plasma, muestras de tejido, mamíferos (tales como ratones, ratas, conejillos de indias, conejos, perros, cerdos, etc.) y similares .

En este aspecto de la invención, un sistema o muestra biológica comprende un receptor 5-HT4 que se contacta con una cantidad que agoniza el receptor 5-HT4 de un compuesto de la invención. Los efectos de agonizar el receptor 5-HT4 se determinan entonces usando procedimientos convencionales y equipo, tal como ensayos de enlace de radioligando y ensayos funcionales. Tales ensayos funcionales incluyen cambios mediados por ligando en monofosfato de adenosina cíclica intracelular (cAMP) , cambios mediados por ligando en actividad de la enzima adenilil ciclasa (que sintetiza cAMP) , cambios mediados por ligando en incorporación de análogos de trifosfato de guanosina (GTP), tal como [35S]GTPyS (guanosina 5 ' -O- (?-tio) trifosfato) o GTP-Eu, en membranas aisladas por medio del intercambio catalizado del receptor de análogos GTP para análogos GDP, cambios mediados por ligando en iones de calcio intracelulares libres (medidos, por ejemplo, con un lector de placa formador de imagen ligado a la fluorescencia o FLIP ® a partir de Molecular Devices, Inc.), y medida de activación de proteína cinasa (MAPK) activada con mitógeno. Un compuesto de la invención puede agonizar o aumentar la activación de receptores 5-HT4 en cualquiera de los ensayos funcionales enlistados arriba, o ensayos de una naturaleza similar. Una cantidad que agoniza el receptor 5-HT4 de un compuesto de la invención será típicamente en el rango desde alrededor de 1 nanomolar hasta alrededor de 500 nanomolar.

Adicionalmente, los compuestos de la invención pueden usarse como herramientas de búsqueda para descubrir nuevos agonistas del receptor 5-HT4. En esta modalidad, enlaces del receptor 5~HT4 o datos funcionales para un compuesto de prueba o un grupo de compuestos de prueba se compara al enlace del receptor 5-HT4 o datos funcionales para un compuesto de la invención para identificar compuestos de prueba que tienen enlace superior o actividad funcional, en cualquiera. Este aspecto de la invención incluyen, como modalidades separadas, tanto la generación de datos de comparación (usando los análisis adecuados) como el análisis de los datos de prueba para identificar compuestos de prueba de interés . Entre otras propiedades, los compuestos de la invención se han encontrado para ser agonistas potentes del receptor 5-HT4 y para exhibir selectividad substancial para el subtipo de receptor 5-HT4 sobre el subtipo de receptor 5-HT3 en ensayos de enlace de radioligando . Además, compuestos de la invención han demostrado características farmacocinéticas superiores en un modelo de rata. Compuestos de la invención se esperan así para estar altamente biodisponibles sobre la administración oral. Además, estos compuestos no se han mostrado para inhibir la corriente de ion de potasio en un modelo de pinza de voltaje in vitro usando células enteras aisladas que expresan el canal de potasio cardiaco hERG. El ensayo de pinza de voltaje es un método pre-clínico aceptado de evaluar el potencial para agentes farmacéuticos para cambiar el patrón de repolarización cardiaca, específicamente para causar, prolongación denominada QT, que se ha asociado con arritmia cardiaca. (Cavero et al., Opinión on Pharmacotherapy, 2000, 1, 947-73, Fermini et al., Nature Reviews Drug Discovery, 2003,2, 439-447) En consecuencia, las composiciones farmacéuticas que comprenden compuestos de la invención se esperan para ser libres de tales efectos secundarios cardiacos. Estas características, así como la utilidad de los compuestos de la invención, se pueden demostrar usando diversos ensayos in vitro e in vivo bien conocidos por aquellos expertos en la técnica. Ensayos representativos se describen en detalle adicional en los siguientes ej emplos . EJEMPLOS Los siguientes ejemplos sintéticos y biológicos se ofrecen para ilustrar la invención, y no se construyen de ninguna manera como limitantes para el alcance de la invención. En los ejemplos de abajo, las abreviaturas siguientes tienen el siguiente significado a menos que se indique de otra manera. Las abreviaturas no definidas abajo tienen sus significados generalmente aceptados.

Boc = tert-butoxicarbonilo (Boc)20 = dicarbonato de di-tert-butilo DCM = diclorometano DMF = ?,?-dimetilformamida DMSO = sulfóxido de dimetilo EtOAc = acetato de etilo mCPBA = ácido m-clorobenzóico MeCN = acetonitrilo MTBE = éter de tert-butil metilo PyBop = hexafluorofosfato de benzotriazol-1-íloxitripirrolidino-fosfonio Fr = factor de retención TA = temperatura ambiente TFA = ácido trifluoroacético THF = tetrahidrofurano Los reactivos (que incluyen aminas secundarias) y solventes se compraron de surtidores comerciales (Aldrich, Fluka, Sigma, etc.), y se usan sin purificación adicional. Las reacciones se corrieron bajo atmósfera de nitrógeno, a menos que se indique de otra manera. El progreso de las mezclas de reacción se observó por cromatografía de capa delgada (CCD) , cromatografía líquida de alta resolución analítica (CLAR anal.), y espectrometría de masas, los detalles de los cuales se dan abajo y separadamente en ejemplos específicos de reacciones. Las mezclas de reacción se trabajan como se describe específicamente en cada reacción; se purifican comúnmente por estracción y otros métodos de purificación tal como temperatura-, y solvente- cristalización dependiente, y precipitación. Además, las mezclas de reacción se purificaron rutinariamente por CLAR preparativa: un protocolo general se describe abajo. La caracterización de los productos de reacción se llevaron a cabo rutinariamente por masa y espectrometría 1H-RMN. Para la medida FMN, las muestras se disolvieron en solvente deuterado (CD3OD, CDCI3, o LMSO-de) , y espectro 1H-RMM, se adquirieron con un instrumento Varian Gemini 2000 (300 MHz) bajo condiciones de observación estándar. Identificación espectro-métrica de masa de compuestos se realizó por un método de ionización de electrorocío (ESMS) co un Applied Biosystems (Foster City, CA) instrumento EX modelo API 150 o un Agilent (Palo Alto, CA) instrumento LC/MSD modelo 1100. El contenido de agua se determina por trituración Karl Fischer usando un culombímetro Brinkmann (Westbury, Y) Metrohm Karl Fischer Modelo 813.

Ejemplo 1: Síntesis de { (1S, 3R# 5R) -8- [2-hidroxi~3-(metansulfonil-metil-amino)propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l,2-dihidroqxiinolinona-3-carboxílico a. Preparación de ácido 8-bencil-8-azabiciclo [3.2.1] octan-3-ona El ácido clorhídrico concentrado (30 mL) se agregó a una solución heterogénea de tetrahidrofurano de 2,5-dimetoxi (82.2 g, 0.622 mol) en agua (170 mL) mientras se agita. En un matraz separador se enfria hasta 0°C (baño de hielo) , el ácido clorhídrico concentrado (92 mL) se agrega lentamente a una solución de bencil amina (100 g, 0.933 mol) en agua (350 mL) . La solución de 2 , 5-dimetoxitetrahidrofurano se agitó durante aproximadamente 20 min, se diluye con agua (250 mL) , y luego se agrega la solución de bencil amina, seguido por la adición de una solución de ácido 1 , 3-acetondicarboxílico (100 g, 0.684 mol) en agua (400 mL) y luego la adición de fosfato ácido de sodio (44 g, 0.31 mol) en agua (200 mL) . El pH se ajustó desde pH 1 hasta pH -4.5 usando 40% de NaOH. La solución amarillo pálido y turbia resultante se agitó durante la noche. La solución luego se acidificó hasta pH 3 desde pH 7.5 usando 50% de ácido clorhídrico, se calienta hasta 85°C y se agita durante 2 horas. La solución se enfrió hasta temperatura ambiente, con base hasta pH 12 usando 40% de NaOH, y se extrae con DCM (3 x 500 mL) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secan (MgS04) , se filtran y se concentran bajo presión reducida para producir el intermediario del titulo crudo como un aceite café viscoso (52 g) . A una solución del intermediario crudo en metanol (1000 mL) se agregó dicarbonato de di-tert-butilo (74.6 g, 0.342 mol) a 0°C. La solución se permitió entibiar hasta temperatura ambiente y se agita durante la noche. El metanol se removió bajo presión reducida y el aceite resultante se disolvió en diclorometano (1000 mL) . El intermediario se extrajo en H3PO4 1M (1000 mL) y se lava con diclorometano (3 x 250 mL) La capa acuosa se basificó hasta pH 12 usando NaOH acuoso, y se extrajo con diclorometano (3 x 500 mL) . Las capas orgánicas combinadas se secaron (MgS04) , se filtraron y concentraron bajo presión reducida para producir el intermediario del título como un aceite café ligero, viscoso. ^¦H-NMR (CDCI3) d (ppm) 7.5-7.2 (m, 5H, C6H5) , 3.7 (s, 2H, CH2Ph) , 3.45 (amplio s, 2H, CH-NBn) , 2.7-2.6 (dd, 2H, CH2CO) , 2.2-2.1 (dd, 2H, CH2CO) , 2.1-2.0 (m, 2H, CH2CH2) , 1.6 (m, 2H, CH2CH2) . (m/z) : [M+H]+ calculado para Ci4H17NO 216.14; encontrado, 216.0. b . Preparación de éster de tert-butilo del ácido 3-oxo-8-azabiciclo [3.2.1] octan-8-carboxílico A una solución de 8-bencil-8-azabiciclo [3.2.1] octan-3-ona (75 g, 0.348 mol) en EtOAc (300 mL) se agregó una solución de dicarbonato de di-tert-butilo (83.6 g, 0.383 mol, 1.1 eq) en EtOAc (300 L) . La solución resultante se agregó y se enjuagó (100 mL EtOAc) hasta un recipiente de hidrogenación Parr de 1L que contiene 23 g de hidróxido de paladio (20 % en peso de Pd, bases secas, en carbono, -50% húmedo con agua; por ejemplo catalizador de Pearlman) bajo una corriente de nitrógeno. El recipiente de reacción se desgasificó (alternativamente al vacío y en N2 5 veces) y se presuriza hasta 60 psi (4.218 kg/cm2) de gas H2. La solución de reacción se agitó durante 2 días y se recargó con H2 como se necesita para mantener la presión de ¾ a 60 psi (4.218 kg/cm2) hasta que la reacción se completó como se observa por cromatografía de capa delgada de sílice. La solución negra luego se filtró a través de una almohadilla de Celite® y se concentra bajo presión reducida para proporcionar el intermediario del título cuantitativamente como un aceite amarillo hasta anaranjado, viscoso. Esto se usó en la siguiente etapa sin tratamiento adicional. 1H RMN (CDC13) d (ppm) 4.5 (amplio, 2H, CH-NBoc) , 2.7 (amplio, 2H, CH2CO) , 2.4-2.3 (dd, 2H, CH2CH2) , 2.1 (amplio m, 2H, CH2CO) , 1.7-1.6 (dd, 2H, CH2CH2), 1.5 (s, 9H, (CH3) 3COCON) ) . c . Preparación de éster de tert-butilo del ácido (1S,3R,5R)-3-ammo-8-azabicvclo [3.2.1] octan-8-carboxílico A una solución del producto de la etapa anterior (75.4 g, 0.335 mol) en metanol (1 L) se agregó formiato de amonio (422.5 g, 6.7 mol), agua (115 mL) y 65 g de paladio en carbono activado (10% en bases secas, -50% en peso con agua; tipo Degussa E101NE/W) bajo una corriente de N2 mientras se agita por medio del agitador mecánico. Después de 24 y 48 horas, las porciones adicionales de formiato de amonio (132g, 2.1 mol) se agregaron cada vez. Una vez que el progreso de la reacción se ha detenido, como se observa por CLAR anal., Celite® (>500g) se agregó y la suspensión espesa resultante se filtró y luego el sólido recolectado se enjuagó con metanol (-500 niL) . Los filtrados se combinaron y se concentraron bajo presión reducida hasta que todo el metanol se ha removido. La solución bifásica, turbia resultante luego se diluyó con ácido fosfórico 1M hasta un volumen final de -1.5 hasta 2.0 L a pH 2 y se lava con diclorometano (3 x 700 mL) . La capa acuosa se basificó hasta pH 12 usando 40% de NaOH acuoso, y se extrajo con diclorometano (3 x 700 mL) . Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04, se filtraron, y concentraron por evaporación rotatoria, luego el alto vacío deja 52 g (70%) del intermediario del título, comúnmente N-Boc-endo-3-aminotropano, como un sólido blanco hasta amarillo pálido. La relación de isómero de endo hasta exo amina del producto fue >99:1 basado en análisis 1H-RMM (>96% de pureza por CLAR analítico). ¾ RMN (CDC13) d (ppm) 4.2-4.0 (amplio d, 2H, CHNBoc) , 3.25 (t, 1H, CHNH2), 2.1-2.05 (m, 4H) , 1.9 (m, 2H) , 1.4 (s, 9H, (CH3)3OCON) , 1.2-1.1 (amplio, 2H) . (m/z) : [M+H]+ calculado para C12H22N202) 227.18; encontrado, 227.2. CLAR analítica (método isocrático; 2:98 (A:B) hasta 90:10 (A:B) sobre 5 min) : tiempo de retención = 3.68 min. d. Preparación de ácido l-isopropyl-2-oxo-l, 2-dihidroquinoline-3-carboxí1ico Primero, se agregó acetona (228.2 mL, 3.11 mol) a una suspensión agitada de 2-aminofenilmetanol (255.2 g, 2.07 mol) y ácido acético (3.56 mL, 62 mmol) en agua (2 L) a temperatura ambiente. Después de 4 h, la suspensión se enfrió hasta 0°C y se agita durante unas 2.5 h adicionales y luego se filtra. El sólido se recolectó y se lava con agua y el sólido húmedo se enfría y se seca por liofilización para proporcionar 2,2, -dimetil-1, 4-dihidro-2H-benzo [1,3] oxazina (332.2 g, 98 %) como un sólido completamente blanco. ½ KM (CDCI3 ; 300 MHz) : 1.48 (s, 6H, C(CH3)2), 4.00 (bs, 1H, H) , 4.86 (s, 2H, CH2) , 6.66 (d, 1H, ArH) , 6.81 (t, 1H, ArH) , 6.96 (d, 1H, ArH) , 7.10 (t, 1H, ArH). Una solución de 2 , 2 , ~dimetil-l , 4-dihidro-2H-benzo [1, 3] oxazina (125 g, 0.77 mol) en THF (1 L) se filtró a través un embudo' de escintilación y luego se agregó gota a gota por medio de un embudo adicional, durante un periodo de 2.5 h, a una solución agitada de LiAlH4 1.0 M en THF (800 inL) a 0°C. La reacción se apagó en porciones lentamente de la adición de Na2S04 10 H20 (110 g) , durante un periodo de 1.5 h, a 0°C. La mezcla de reacción se agitó durante la noche, se filtra y las sales sólidas se lavaron completamente con THF. El filtrado se concentró bajo presión reducida para proporcionar 2-isopropilaminofenilmetanol (120 g, 95 %) como un aceite amarillo. ½ RMN (CDCI3 ; 300 MHz): 1.24 (d, 6H, CH(CH3)2), 3.15 (bs, 1H, OH), 3.61 (sept, 1H, CH(CH3)2), 4.57 (s, 2H, CH2) , 6.59 (t, 1H, ArH) 5 6.65 (d, 1H, ArH), 6.99 (d, 1H, ArH), 7.15 (t, 1H, ArH). El dióxido de manganeso (85 % 182.6 g, 1.79 mol) se agregó a una solución agitada de 2-isopropilaminofenilmetanol (118 g, 0.71 mol) en tolueno (800 mL) y la mezcla de reacción se calentó hasta 117°C durante 4 h. La mezcla de reacción se permitió enfriar hasta temperatura ambiente durante la noche y luego se filtra a través de una almohadilla de Celite la cual se eluye con tolueno. El filtrado se concentró bajo presión reducida para proporcionar 2-isopropilaminobenzaldehído (105 g, 90 %) como un aceite anaranjado. ½ RMN (CDC13; 300 MHz) : 1.28 (d, 6H, CH(CH3)2), 3.76 (sept, 1H, CH(CH3)2), 6.65 (t, 1H, ArH) , 6.69 (d, 1H, ArH) , 7.37 (d, 1H, ArH), 7.44 (t, 1H, ArH) , 9.79 (s, 1H, CHO) . El ácido 2 , 2-Dimetil- [1 , 3] dioxan-4, 6-diona, comúnmente ácido de Meldrum, (166.9 g, 1.16 mol) se agregó a una solución agitada de 2-isopropilaminobenzaldehído (105 g, 0.64 mol), ácido acético (73.6 mL, 1.29 mol) y etilendiamina (43.0 mL, 0.64 mol) en metanol (1 L) a 0°C. La mezcla de reacción se agitó durante 1 h a 0°C y luego a temperatura ambiente durante la noche. La suspensión resultante se filtró y el sólido se lava con metanol y se recolecta para proporcionar el intermediario del título, ácido l-isopropil-2-oxo-l, 2-dihidroquinolin-3-carboxílico (146 g, 98 %) como un sólido completamente blanco. ½ RMN (CDC13; 300 MHz): 1.72 (d, 6H, CH(CH3)2), 5.50 (bs, 1H, CH(CH3)2), 7.44 (t, 1H, ArH), 7.75-7.77 (m, 2H, ArH), 7.82 (d, 1H, ArH), 8.89 (s, 1H, CH) . e . Preparación de éster de tert-butilo del ácido (1S,3R,5R)- 3- [l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolin-3-carbonil) amino] -8- azabiciclo [3.2.1] octan-8-carboxílico El cloruro de tionilo (36.6 mL, 0.52 mol) se agregó a una suspensión agitada de ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2- dihidroguinolin-3-carboxílico (80 g, 0.35 mol) en tolueno (600 mL) a 85°C y la mezcla de reacción luego se calienta hasta 95°C durante 2 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y luego se agrega durante 25 min a una solución bifásica agitada vigorosamente de éster de tert-butilo del ácido (1S, 3R, 5R) -3-amino-8-azabiciclo [3.2.1] octan-8-carboxílico (78.2 g, 0.35 mol) e hidróxido de sodio (69.2 g, 1.73 mol) en tolueno/agua (1:1) (1 L) a 0°C. Después de 1 h, las capas se permitieron separarse y la fase orgánica se concentra bajo presión reducida. La fase acuosa se lavó con EtOAc (1 L) y luego (500 mL) y los extractos orgánicos combinados se usan para disolver el residuo orgánico concentrado. Esta solución se lavó con H3P04 1M (500 mL) , NaHC03 acuoso saturado (500 mL) y salmuera (500 mL) , se seca sobre MgS04, se filtra y se concentra bajo presión reducida para proporcionar el intermediario del título (127.9 g, aproximadamente 84%) como un sólido amarillo. ¾ RM (CDC13) .-1.47 (s, 9H) , 1.67 (d, 6H) , 1.78-1.84 (m, 2H) , 2.04-2.18 (mf 6H) , 4.20-4.39 (m, 3H) , 5.65 (bs, 1H) , 7.26 (dd. 1H) , 7.63 (m, 2H) , 7.75 (dd, 1H) , 8.83 (s, 1H) , 10.63 (d, 1H) . f . Preparación de { (1S, 3R, 5R) -8-azabiciclo [3 , .2.1] oct-3- il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolin-3- carboxílico El TFA (300 mL) se agregó a una solución agitada del producto de la etapa previa (127.9 g) en CH2C12 (600 mL) a 0°C. La mezcla de reacción se entibió hasta temperatura ambiente y se agita durante 1 y luego se concentra bajo presión reducida. El residuo café aceitoso luego se vacía en una solución agitada vigorosamente de éter (3 L) y un precipitado sólido formado inmediatamente. La suspensión se agitó durante la noche y luego el sólido se colectó por filtración y se lava con éter para proporcionar el intermediario del título como su sal del ácido trifluoroacético (131.7 g, 86% durante 2 etapas) como un sólido amarillo ligero. ½ RMN (CDC13) : 1.68 (d, 6H) , 2.10 (d, 2H) , 2.33-2.39 (m, 4H) , 2.44-2.61 (m, 2H) , 4.08 (bs, 2H) , 4.41 (m, 1H) , 5.57 (bs, 1H) , 7.31 (m, 1H) , 7.66 (m, 2H) , 7.77 (d, 1H) , 8.83 (s, 1H) , 9.38 (bd, 2H) , 10.78 (d, 1H) . g. Preparación de 3-hidroxi-3 ' - { [l-isopropil-2-oxo-l, 2-dihidroquinolin-3-il) carbonil] amino} espiro [azetidin-1, 8 ' -(IS, 3R, 5R) -8-azabiciclo [3.2.1] octano (Intermediario V) con R1 = H, R2 = isopropilo) El 2-Bromometiloxirano (10.72 mL, 129.5 mmol) se agregó a una solución agitada de la sal de ácido trifluoroacético de { (1S, 3R, 5R) -8-aza-biciclo [3.2.1] oct-3-il} amida del ácido 1- isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolin-3-carboxílico (14.65 g, 43.2 mmol) en etanol (150 mL) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó durante 36 h, a cuyo tiempo se forma un precipitado sólido. El sólido se colectó por filtración y se lava con etanol (70 mL) para proporcionar el intermediario del título como la sal de bromuro (8.4 g) . (m/z) : [M]+ calculado para C23H30 3O3 396.23; encontrado, 396.5. Tiempo de retención (CLAR anal. : 2-50% MeCN/H20 durante 5 min) = 4.13 min. h. Preparación de { (1S, 3R, 5R) -8- [2~hidroxi-3-metilaminopropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l, 2-dihidroquinolinona-3-carboxílico El bromuro de 3-Hidroxi-3 ' - { [l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolin-3-il ) carbonil] amino}espiro [azetidina-1, 8 '- (1S, 3R, 5R) -8-aza-biciclo [3.2.1] octano (678 mg, 1.4 mmol) se disolvió en etanol (10 mL) , y luego metilamina (41% solución en agua) (510 pL, 8.0 mmol) se agregó. La mezcla se calentó a 80°C durante 16 h, y luego se concentró bajo presión reducida para dar el intermediario del título como un aceite crudo, que se usó directamente en la siguiente etapa. i . Síntesis de {(1S,3R,5R) -8- [2- idroxi-3- (metansulfoni1- metil-amino) ropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolinona-3-carboxílico El producto de la etapa previa se disolvió en diclorometano (10 mL) , y luego l,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (763 uL, 5.1 mmol) se agregó, y la mezcla se agitó bajo nitrógeno y se enfrió a 0°C. Cloruro de metansulfonilo (132 uL, 1.7 mmol) se agregó y la mezcla se agitó a 0°C durante 30 min. La reacción se apagó por la adición de agua, y se concentró hasta secarse bajo presión reducida. El producto se tomó en ácido acético/agua (1:1) (10 mL) y se purificó por cromatografía CLAR. Las fracciones purificadas se liofilizaron proporcionando el compuesto del título como la sal del ácido trifluoroacético (340 mg) . (m/z) : [M+H]+ calculado para CssE^^OsS, 505.25; encontrado, 505.4. Tiempo de retención (análisis CLAR: 2-50% MeC /H20 durante 5 min) = 4.17 min.

Ejemplo 2: Síntesis de { (1S,3R,5R) -8- [2-metoxi-3- (metansulfonil-metil-amino)propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l,2-dihidroqiainolinona-3-carboxílico a. Preparación de 3-metoxi-3 ' - { [l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolin-3-il) carbonil]amino} espiro [azetidina-1, 8 ' -(1S, 3R, 5R) -8-aza-biciclo [3.2.1] octano (Intermediario (V7) con R1 = H, R2 = isopropil, R3 = metil) El tert-butóxido de potasio (1.63 g, 14.5 mmol) se agregó a una suspensión agitada de bromuro de 3-hidroxi~3 ' - { [l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolin-3- il) carbonil]amino}espiro[azetidina-l, 8'- (1S, 3R, 5R) -8- azabiciclo [3.2.1] octano (3.45 g, 7.25 mmol) en diclorometano (100 mL) a temperatura ambiente. Después de 2 min, yoduro de metilo (0.477 mL, 7.61 mmol) se agregó a la mezcla de reacción. Después de 30 min, agua (2 mL) se agregó hasta apagar la reacción y la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se disolvió en un volumen mínimo de ácido acético/agua (1:1) y se purificó por CLAR preparativa hasta producir el intermediario del título como una sal de ácido trifluoroacético (2.1 g) . (m/z) : [M]+ calculado para C24H32 3O3, 410.24; encontrado 410.5. Tiempo de retención (análisis CLAR: 2-50% MeCN/H20 durante 5 min) = 4.36 min . b. Preparación de { (1S, 3R, 5R) -8- [2~metoxi-3-metilaminopropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolinona-3-carboxílico 3-Metoxi-3 ' -{ [l-isopropil-2-oxo-l, 2-di <droq¿jinolin-3-il) carbonil] amino}espiro [azetidina-1, 8 ' - (1S, 3R, 5R) -8-aza-biciclo[3.2.1] octano sal de ácido trifluoroacético (410 mg, 0.84 mmol) se disolvió en etanol (10 mL) , y luego metilamina . (41% solución en agua, 320 uL, 5 mmol) se agregó. La mezcla se calentó a 80°C durante 16 h, y luego se concentró bajo presión reducida para dar el producto como un aceite crudo que se usó directamente en la siguiente etapa. c . Síntesis de { (1S , 3R, 5R) -8- [2-metoxi-3- (metansulf onil- metil-amino) propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il} amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l, 2-dihidroquinolinona-3-carboxílico El producto de la etapa previa (53.6 mg, 0.12 mmol) se disolvió en diclorometano (1.0 mL) , y luego l,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (89.7 uL, 0.6 mmol) se agregó, y la mezcla se agitó bajo nitrógeno y se enfrió a 0°C. Cloruro de metansulfonilo (18.6 uL, 0.24 mmol) se agregó y la mezcla se agitó a 0°C durante 30 min. La mezcla se apagó por la adición de agua, y se concentró hasta secarse bajo presión reducida. El producto se tomó en ácido acético/agua (1:1) (1.5 mL) y se purificó por cromatografía CIAR. Las fracciones purificadas se liofilizaron para dar el compuesto del título como la sal del ácido trifluoroacético (45.8 mg) . (m/z) : [M+H]+ calculado para Ca^^OsS , 519.27; encontrado 519.2. Tiempo de retención (análisis CLAR: 5-40% MeCN/H^O durante 4 min) = 2.72 min.

Ejemplo 3: Síntesis de { (1S,3R,5R) -8- [3- (metansulfonil-piridin-3-ilmetÍl-amino) -2-metoxipropil] -8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-???-1,2-dihidroquinolina-3-carboxí1ico a. Preparación de { (1S, 3R, 5R) -8- {2-metoxi-3- [ (piridin-3-ilmetil) amino] propil} -8-azabiciclo [3.2.1 J oct-3-il} amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroguinolin-3-carboxílico El 3-Metoxi-3 '-{ [l-isopropil-2-oxo-l, 2-dihidroquinolin-3-il) carbonil] amino}espiro [azetidina-1 , 8 ' - (1S, 3R, 5R) -8-aza- biciclo [3.2.1] octano (410 mg, 0.84 mmol) se disolvió en etanol (10 mL) , y luego 3-aminometilpiridina (153 pL, 1.5 mmol) se agregó. La mezcla se calentó a 60°C durante 16 h, y luego se concentró bajo presión reducida para dar el intermediario del titulo como un aceite crudo que se usó directamente en la siguiente etapa. b. Síntesis de { (1S, 3R, 5R) -8- [3- (metansulfonil-piridin-3- ilmetil-amino) -2-metoxipropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il} amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolina-3-carboxílico El producto de la etapa previa (102.6 mg, 0.2 mmol) se disolvió en diclorometano (1.0 mL) y luego 1,8-diazabiciclo [5.4.0] undec-7-eno (119.6 \iL, 0.8 mmol) se agregó, y la mezcla se agitó bajo nitrógeno y se enfrió a 0°C. El cloruro de metansulfonilo (30.1 L, 0.4 mmol) se agregó y la mezcla se agitó a 0°C durante 30 min. La reacción se apagó por la adición de agua, y la mezcla se concentró hasta secarse bajo presión reducida. El producto se tomó en ácido acético/agua (1:1) (1.5 mL) y se purificó por cromatografía CLAR. Las fracciones purificadas se liofilizaron para dar el compuesto del título como la sal del ácido trifluoroacético (63.5 mg) . (m/z) : [M+H] + calculado para C3iH4i 505S, 596.29; encontrado 596.2. Tiempo de retención (análisis CLAR: 5-40% MeCN/¾0 durante 4 min) = 2.35 min.

Ejemplo 4: Síntesis de { (1S,3R,5R) -8- [2-hidroxi-3- metansulfonilamino)propil] -8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l, 2-dihidroquinolinona-3-carboxílico a. Preparación de { (1S,3R, 5R) -8- [3- (1, 3-dioxo-l, 3- dihidroisoindol-2-il ) -2-hidroxipropil] -8- azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-???- 1 , 2-dihidroquinolina-3-carboxílico La { (1S, 3R, 5R) -8-aza-biciclo [3.2.1 ] oct-3 -il } amida del ácido l-isopropil-2 -oxo-1 , 2 -dihidroquinolina-3 -carboxílico (3.39 g, 10 mmol) se disolvió en etanol (40 mL) , y luego 2-oxiranilmetilisoindol-l , 3 -diona , comúnmente, epoxipropilftalimida, (3.05 g, 15 mmol) se agregó. La mezcla se calentó a 80°C durante 36 h, se enfrió, y luego se concentró bajo presión reducida. El aceite resultante se procesó por cromatografía instantánea (SÍO2, eluyendo con una solución 9:1 de diclorometano/metanol ) para dar el intermediario del título (4.95 g) como un sólido blanco que se usó directamente en la siguiente etapa. b . Preparación de {(lS,3R,5R)-8- [2-hidroxi-3-aminopropil 3 -8-azabiciclo [3.2.l]oct~3~il} amida del ácido l-isopropil-2 -oxo-1 , 2 -dihidroquinolinona-3 -carboxílico El producto de la etapa previa (4.95 g, 9.13 mmol) se disolvió en etanol (40 mL) , y luego hidrazina (860 pL, 27.4 mmol) se agregó. La mezcla se puso a reflujo durante 16 horas, y luego se enfrió a temperatura ambiente. La mezcla se filtró, y el filtrado se concentró para dar el intermediario del título como un aceite crudo, que se usó directamente sin purificación adicional. c. Síntesis de ( (1S, 3R, 5R) -8- [2-hidroxi-3-metansulfonilamino) propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-i}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolinona-3-carboxílico El producto de la etapa previa (82 mg, 0.2 mmol) se disolvió en diclorometano (1.0 mL) , luego 1,8-diazabiciclo [5. .0]undec-7-eno (60 µL, 0.4 mmol) se agregó, y la mezcla se agitó bajo nitrógeno y se enfrió a -78°C. Cloruro de metansulfonilo (15.5 \iL¡, 0.2 mmol) se agregó y la mezcla se agitó y se permitió hasta entibiar a temperatura ambiente durante 30 min. La reacción se apagó por la adición de agua, y la mezcla se concentró hasta secarse bajo presión reducida. El producto se tomó en ácido acético/agua (1:1) (1.5 mL) y se purificó por cromatografía CLAR. Las fracciones purificadas se liofilizaron para dar el compuesto del título como la sal del ácido trifluoroacético (70.7 mg) . (m/z) : [M+H] + calculado para C24H34N4O5 S , 491.23 ; encontrado 491.2. Tiempo de retenció (análisis CLAR: 5-40% MeCN/H20 durante 4 min) = 2.43 min.

Ejemplo 5: Síntesis de { (1S# 3R, 5R) -8- [3- (metansulfonil- piridin-3-ilmetil-amino) -2-hidroxipropil] -8- azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-???- 1, 2-dihidroquinolina-3-carbo Ílico a. Preparación de { (1S, 3R, 5R) -8- {2-hidroxi-3- [ (piridin-3- ilmetil) amino] propil}-8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il)amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolina-3-carboxílico El bromuro de 3-hidroxi-3 ' -{ [l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolin-3-il) carbonil] amino} espiro [azetidina-1 , 8 ' - (1S, 3R, 5R) -8-aza-biciclo [3.2.1] octano (505 mg, 1.27 mmol) se disolvió en etanol (10 mL) , y luego 3- (aminometil) -piridina (193 L, 1.9 mmol) se agregó. La mezcla se calentó a 80°C durante 16 h, y luego se concentró bajo presión reducida para dar el intermediario del título como un aceite crudo que se usó directamente en la siguiente etapa. b. Síntesis de {1S, 3R, 5R) -8- [3- (metansulfonil-piridin-3-ilmetil-amino) -2-hidroxipropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l, 2-dihidroquinolina-3-carboxílico El producto de la etapa previa (42.5 mg, 0.08 mmol) se disolvió en diclorometano (1.0 mL) , 1,8- diazabiciclo [5.4.0] undec-7-eno (74.8 pL, 0.5 mmol) se agregó, y la mezcla se agitó bajo nitrógeno y se enfrió a 0°C. Cloruro de metansulfonilo (6.1 pL, 0.08 mmol) se agregó y la mezcla se agitó a 0°C durante 30 min. La reacción se apagó por la adición de agua, y se concentró hasta secarse bajo presión reducida. El producto se tomó en ácido acético/agua (1:1) (1.5 mL) y se purificó por cromatografía CLAR. Las fracciones purificadas se liofilizaron para dar el compuesto del título como la sal del ácido trifluoroacético (22.8 mg) . (m/z) : [M+H]+ calculado para C30H39N5O5S , 582.28; encontrado 582.2. Tiempo de retención (análisis CLAR: 5-40% MeCN/H20 durante 4 min) = 2.78 min.

Ejemplo 6: Síntesis de ácido l-isopropil-2-oxo-l, 2-dihidroquinolina-3-carboxílico, { (1S,3R,5R) -8- [ (R) -2-hidroxi-3- (metansulfonil-metil-amino)propil] -8-aza-biciclo [3.2. l]oct-3-il}amida a. Preparación de (S) -1- (bencil-metil-amino) -cloropropan-2-ol N-Bencilmetilamina (13.95 mL, 108.1 mmol) y (S)-2-clorometiloxirano, comúnmente (S) -epiclorohidrina (8.48 mL, 108.1 mmol) · se disolvieron en hexano (40 mL) , y se agitó durante 16 h. La solución luego se procesó por cromatografía instantánea (Si02, eluyendo con 10% metanol/90% dielorómeta o) . Las fracciones que contienen el producto se concentraron para dar el intermediario del título como un aceite (19.7 g) . ^-RMN (DMSO d6 , 299.96 MHz ) : d (ppm) 2.01 (s, 3H) , 2.2-2.4 (m, 2H) , 3.21-3.5 (m, 3H) , 3.53-3.6 (m, 1H) , 3.65-3.75 (m, 1H) , 4.95 (d, 1H) , 7.0-7.25 (m, 5H) . (m/z) : [M+H]+ calculado para C H16ClNO, 214.10; encontrado 214.1. b. Preparación de éster de tert-butilo del ácido ( (S)-3- cloro-2-hidroxipropil) etilcarbámico El (S)-l- (bencil-metil-amino)-3-cloropropan-2-ol (8.4 g, 39.3 mmol) se disolvió en acetato de etilo (75 mL) , y luego dicarbonato de di-tert-butilo (9.3 g, 43.23 mmol) e hidróxido de paladio (2.5 g) se agregaron. La mezcla se agitó durante 12 h bajo hidrógeno (60 atm) . La mezcla se filtró a través de un lecho de Celite®, y se concentró hasta secarse bajo presión reducida. El aceite resultante se filtró a través de sílice, eluyendo con hexano, seguido por diclorometano, seguido por éter de dietilo. La capa de éter se concentró para dar el intermediario del título como un aceite (7.1 g) . ^H-KMN (EMSO d6, 299.96 MHz) : d (ppm) 1.35-1.46 (s, 9H) , 2.81-2.85 (s, 3H) , 2.95-3.1 (m, 1H) , 3.3-3.6 (m, 3H) , 3.67-3.85 (m, 1H) , 5.25-5.4 (m, 1H) . (m/z) : [M+H-Boc] + calculado para C9H18C NO3, 123.10; encontrado 123.1. c. Preparación de éster de tert-butilo del ácido ( (R)-2-hidroxi-3- {3- [ (l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolina-3-carbonil) amino] - (1S, 3R, 5R) -8-azabiciclo [3.2.1] oct-8-il}propil) metilcarbámico Éster de tert-butilo del ácido ( (S) -3-cloro-2- hidroxipropil)metilcarbámico (335 mg, 1.5 mmol) y ( (1S, 3 , 5R) -8-aza-biciclo [3.2.1] oct-3-il} amida del ácido 1- isopropil-2-oxo-l, 2-dihidroquinqlina-3-carboxílico (339 mg, 1.0 mmol), se disolvieron en metanol (5 mL) y luego N,N- diisopropiletilamina (523 L, 3.0 mmol) se agregó. La mezcla se calentó a 80 °C durante 16 horas, y luego se concentró bajo presión reducida. El aceite resultante se procesó por cromatografía instantánea (Si02, eluyendo con metanol 10%/diclorometano 90%) . Las fracciones que contienen el producto se concentraron para dar el intermediario del título como un sólido blanco (0.5 g) . (m/z) : [M+H]+ calculado para C29H42 4O5, 527.33; encontrado 527.6. Tiempo de retención (análisis CLAR : MeCN 2-50%/H2O durante 5 min) = 4.75 min. d. Preparación de { (1S, 3R, 5R) -8- [ (S) -2-hidroxi-3-metilaminopropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il} amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolina-3-carboxílico Ester de tert-butilo del ácido ( (R) -2-hidroxi-3~{3- [ (1-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroguinolina-3-carbonil) amino] - (1S, 3R, 5R) -8-azabiciclo [3.2.1] oct-8-il}propil ) metilcarbámico (575 mg, 1.09 mmol) se disolvió en diclorometano (5 mL) y luego ácido trifluoroacético (5 mL) se agregó lentamente. La mezcla se agitó durante 30 min, y luego se concentró bajo presión reducida. El aceite resultante se trituró con éter de dietilo, y luego se filtró. El precipitado se secó bajo vacío para dar el intermediario del título como la sal del ácido trifluoroacético (0.68 g) . (m/z) : [M+H]+ calculado para C24H34N4O3, 427.27; encontrado 427.2. Tiempo de retención (análisis CLAR: MeCN 2-50%/H2O durante 5 min) = 3.40 min. e. Síntesis de { (1S, 3R, 5R) -8- { (R) -2-hidroxi-3- (metansulfonil-metil-amino) propil] -8-aza-biciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolina-3-carboxílico El ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroguinolina-3- carboxílico, { (1S, 3R, 5R) -8- [ (S) -2-hidroxi-3-metilaminopropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida (1.03 g, 1.57 mmol) se disolvió en diclorometano (6.0 mL) , 1,8-diazabiciclo [5.4.0] undec-7-eno (747 µL, 5.0 mmol) se agregó, y la mezcla se agitó bajo nitrógeno y se enfrió a 0°C. El cloruro de metansulfonilo (124.4 pL, 1.6 mmol) se agregó y la mezcla se agitó a 0°C durante 30 min. La reacción se apagó por la adición de agua, y la mezcla se concentró hasta secarse bajo presión reducida. El producto se tomó en ácido acético/agua (1:1) (5 mL) y se purificó por cromatografía CLAR. Las fracciones purificadas se liofilizaron para dar el compuesto del título como la sal del ácido trifluoroacético (0.38 g) . (m/z): [MH+H]+ calculado para C25H36N4O5S , 505.25; encontrado 505.4. Tiempo de retención (análisis CLAR: MeCN 2-50%/H2O durante 5 min) = 4.17 min. Base libre: 1H-R N (DMSO d5, 299.96 MHz) : d (ppm) 1.40-1.68 (d, 6H) , 1.81-2.02 (br s, 4H) , 2.02-2.18 (br m, 2H) , 2.22-2.36 (d, 2H) , 2.78-2.90 (2 s, 6H) , 2.91-3.04 (m, 1H) , 3.10-3.30 (m, 4H) , 3.61-3.78 (br s, 1H) , 4.02-4.17 (m, 1H) , 4.71-4.79 (br s, 1H) , 5.2-5.8 (br s, 1H) , 7.3-7.4 (t, 1H) , 7.67-7.78 (t, 1H) , 7-82-7.94 (d, 1H) , 7.98-8.02 (d, 1H) , 8.80 (s, 1H) , 10.37-10.40 (d, H) .

Ejemplo 7: Síntesis de { (1S,3R, 5R) -8- [ (S) -2~hidroxi-3- (metansulfonil-metil-amino)propil] -8-aza-biciclo [3.2. l]oct-3- il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l,2-dihidroquinolin-3-carboxílico Siguiendo el procedimiento del Ejemplo 6, con la substitución de (R) -2-clorometiloxirano por (S)-2-clorometiloxirano en la etapa a, los intermediarios siguientes y el compuesto del título se prepararon. (R) -1- (bencil-metil-amino) -3-cloropropan-2-ol : 1H-RMN (DMSO de, 299.96 MHz): d (ppm) 2.01 (s, 3H) , 2.2-2.4 (m, 2H) , 3.21-3.5 (m, 3H) , 3.53-3.6 (m, 1H) , 3.65-3.75 (m, 1H) , 4.95 (d, 1H) , 7.0-7.25 (m, 5H) . (m/z) : [M+H]+ calculado para CnHieClNO, 214.10; encontrado 214.1. Ester de tert-butilo del ácido ( (R) -3-cloro-2-hidroxi-propil)metilcarbámico : 1H-RM' (DMSO d6/ 299.96 MHz): d (ppm) 1.35-1.46 (s, 9H) , 2.81-2.85 (s, 3H) , 2.95-3.1 (m, 1H) , 3.3-3.6 (m, 3H) , 3.67-3.85 (m, 1H) , 5.25-5.4 (m, 1H) . (m/z): [M+H-Boc]+ calculado para C9Hi8ClN03, 123.10; encontrado 123.1.

Ester de tert-butilo del ácido ( (S) ~2-hidroxi-3- {3- [ (1- isopropil-2-oxo-l , 2-di idroquinolin-3-carbonil) amino] - (1S, 3R, 5R) -8-azabiciclo [3.2.1] oct-8-il}propil)metilcarbámico: (m/z) : [M+H]+ calculado para C29H42 4O5, 527.33; encontrado 527.6. Tiempo de retención (análisis CLAR: MeCN 2-50%/H2O durante 5 min) = 4.75 min. { (1S, 3R, 5R) -S- [ (R) -2-hidroxi-S-metilaminopropil] -8- azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-???-1 , 2-dihidroquinolina-3-carboxílico : (m/z): [M+H] + calculado para C24H34N4O3, 427.27; encontrado 427.2. Tiempo de retención (análisis CLAR: MeCN 2-50%/¾O durante 5 min) = 3.40 min. { (1S, 3R, 5R) -8- [ (S) -2-hidroxi-3- (metansulfonil-metil-amino) propil] -8-aza-biciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolina-3-carboxilico : (m/z) : [M+H]+ calculado para C25H36 4O5S , 505.25; encontrado 505.4. Tiempo de retención (análisis CLAR: MeCN 2-50%/H2O durante 5 min) = 4.17 min.

Ejemplo 8: Síntesis de { (1S,3R, 5R) -8- [2-hidroxi-3- [metil-(piridina-4-carbonil)amino]propil] -8-azabiciclo [3.2.l]oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l# 2-dihidroquinolinona-3-carboxílico La { (1S, 3R, 5R) -8- [2-hidroxi-3-metilaminopropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-???-1 , 2-dihidroquinolinona-3-carboxílico (71 mg, 0.17' mmol) se disolvió en DMF (0.5 mL) , y luego N,N-diisopropiletilamina (88.9 pL, 0.51 mmol) se agregó. Después, una solución de ácido isonicotínico (41.8 mg, 0.34 mmol) y PyBOP (177 mg, 0.34 mmol) en DMF se agregó. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 min, y luego se concentró hasta secarse bajo presión reducida. El producto se tomó en ácido acético/agua (1:1) (1.5 mL) y se purificó por cromatografía CLAR. Las fracciones purificadas se liofilizaron para dar el compuesto del título como la sal del ácido trifluoroacético (30.8 mg) . (m/z) : [M+H]+ calculado para C3oH37N504, 532.29; encontrado 532.7. Tiempo de retención (análisis CLAR: MeCN 5-40%/H2O durante 4 min) = 2.11 min.

Ejemplo 9: Síntesis de { (1S, 3R, 5R) -8- [2-hidroxi-3- [ (piridina-4-carbonil)amino]propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1-isopropi1-2-oxo-1, 2-dihidroq^tinolinona-3-carboxílico La { ( 1S, 3R, 5R) -8- [2-hidroxi-3-aminopropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-1 , 2-dihidroquinolinona-3-carboxílico (82.4 mg, 0.2 mmol) se disolvió en DMF (0.5 mL) , y luego N,N-diisopropiletilamina (69.7 ]ih, 0.4 mmol) se agregó. Después, una solución de ácido isonicotínico (49.2 mg, 0.4 mmol) y PyBOP (208.2 mg, 0.4 mmol) en DMF se agregó. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 min, y luego se concentró hasta secarse bajo presión reducida. El producto se tomó en ácido acético/agua (1:1) (1.5 mL) y se purificó por cromatografía CLAR. Las fracciones purificadas se liofilizaron para dar el compuesto del título como la sal del ácido trifluoroacético (82.1 mg) . (m/z) : [M+H]+ calculado para C29H35N5O4, 518.28; encontrado 518.2. Tiempo de retención (análisis CLAR: MeCN 5-40%/¾O durante 4 min) = 2.20 min.

Ejemplo 10: Síntesis de { (1S, 3R, 5R) -8- [3- (acetil-metil- amino) -2-metoKÍpropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l, 2-dihidroquinolina-3-carboxílico El ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroguinolinona-3-carboxílico, { (1S, 3R, 5R) -8- [2-metoxi-8-metilaminopropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida (53.6 mg, 0.12 mmol) se disolvió en DMF (1.0 mL) , y luego N,W-diisopropiletilamina (104. pL, 0.6 mmol) se agregó. La mezcla se agitó bajo nitrógeno y se enfrió a 0°C. El cloruro de acetilo (17.1 pL, 0.24 mmol) se agregó y la mezcla se agitó a 0°C durante 30 min, y luego se concentró hasta secarse bajo presión reducida. El producto se tomó en ácido acético/agua (1:1) (1.5 mL) y se purificó por cromatografía CLAR. Las fracciones purificadas se liofilizaron para dar el compuesto del título como la sal del ácido trifluoroacético (40.4 mg) . (m/z): [M+H]+ calculado para C27H38 404, 483.30; encontrado 483.2. Tiempo de retención (análisis CLAR: MeCN 5-40%/H2O durante 4 min) = 2.54 min.

Ejemplo 11. Síntesis de { (1S, 3R, 5R) -8- [2-metoxi-3- [metil- (piridina-4-carbonil)amino]propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3- il>amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l# 2-dihidroquinolinona- 3-carboxílico La { {lS,3R/5R)-8-[2 -metoxi -3 -metilaminopropil ] - 8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1-isopropil-2- oxo- 1 , 2 -di idroguinol inona-3 -carboxí lico (53.6 mg, 0.12 mmol) se disolvió en DMF (1.0 mL) , y luego N, -diisopropiletilamina (104.5 L, 0.6 mmol) se le agregó. La mezcla se agitó bajo nitrógeno y se enfrió a 0°C. El cloruro de isonicotinilo (42.7 mg, 0.24 mmol) se agregó y la mezcla se agitó a 0°C durante 30 min, y luego se concentró hasta secarse bajo presión reducida. El producto se tomó en ácido acético/agua (1:1) (1.5 mL) y se purificó por cromatografía CLAR. Las fracciones purificadas se liofilizaron para dar el compuesto del título como la sal del ácido tri f luoroacético (54.4 mg) . (m/z) : [M+H]+ calculado para C31H39N5O4, 546.31; encontrado 546.2. Tiempo de retención (análisis CLAR: MeCN 5-40%/H2O durante 4 min) = 2.29 min.

Ejemplo 12. Síntesis de { (1S, 3R, 5R) -8- [3- (acetil-piridin-3- ilmet l-amino) -2-metoxipropil] -8-azabiciclo [3.2. l]oct-3- il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l, 2-di idro-quinolina-3- carboxílico La ( 8- {2~metoxi-3- [ (piridin-3-ilmetil) amino]propil}~8- azabiciclo [3.2.1] oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-2-???- 1 , 2-dihidroquinolina-3-carboxílico (102.6 mg, 0.2 mmol) se disolvió en DMF (1.0 mL) , y luego N,N-diisopropiletilamina (139.4 µL, 0.8 mmol) se agregó. La mezcla se agitó bajo nitrógeno y se enfrió a 0°C. El cloruro de acetilo (28.5 µL, 0.4 mmol) se agregó y la mezcla se agitó a 0°C durante 30 min, y luego se concentró hasta secarse bajo presión reducida. El producto se tomó en ácido acético/agua (1:1) (1.5 mL) y se purificó por cromatografía CLAR. Las fracciones purificadas se liofilizaron para dar el compuesto del título como la sal del ácido trifluoroacético (33.2 mg) . (m/z) : [M+H]+ calculado para C32H41N5O4, 560.33; encontrado 560.4. Tiempo de retención (análisis CLAR: 5-40% MeCN/H20 durante 4 min) = 2.27 min.

Ejemplo 13. Síntesis de { (1S, 3R, 5R) -8- [3-acetilamino-2-hidroxipropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1-isopropil-2-oxo-l,2-di idro-quinolina-3-carboxílico La { (1S, 3R, 5R) -8- [2~hidroxi-3-aminopropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-???- 1 , 2-dihidroquinolinona-3-carboxílico (82.4 mg, 0.2 mmol) se disolvió en DMF (0.5 mL) , y luego N,N-diisopropiletilamina (69.7 µ?-?, 0.4 mmol) se agregó. Después, una solución de ácido acético (22.7 pL, 0.4 mmol) y PyBOP (208.2 mg, 0.4 mmol) en DMF se agregó. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 min, y luego se concentró hasta secarse bajo presión reducida. El producto se tomó en ácido acético/agua (1:1) (1.5 mL) y se purificó por cromatografía CLAR. Las fracciones purificadas se liofilizaron para dar el compuesto del título como la sal del ácido trifluoroacético (79.2 mg) . (m/z) : [M+H] + calculado para C25H34N4O4, 455.27; encontrado 455.2. Tiempo de retención (análisis CLAR: 5-40% MeCN/H20 durante 4 min) = 2.33 min.

Ejemplo 14. Síntesis de { (1S, 3R, 5R) -8- [3- (acetil-metil-amino) -2-hidroxipropil] -8-azabiciclo [3.2.l]oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l,2-dihidro-quinolina-3-carboxílico La { (1S, 3R, 5R) -8- [2-hidroxi-3-metilaminopropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-???-1 , 2-dihidroquinolinona-3-carboxílico (43 mg, 0.1 mmol) se disolvió en DMF (1.0 mL) , y luego N, -diisopropiletilamina (87.? L, 0.5 mmol) se agregó. La mezcla se agitó bajo nitrógeno y se enfrió a 0°C. El cloruro de acetilo (17.8 pL, 0.25 mmol) se agregó y la mezcla se agitó a 0°C durante 30 min. La mezcla se concentró hasta secarse bajo presión reducida. El producto se tomó en ácido acético/agua (1:1) (1.5 mL) y se purificó por cromatografía CLAR. Las fracciones purificadas se liofilizaron para dar el intermediario del título como la sal del ácido trifluoroacético (17.1 mg) . (m/z) : [M+H]+ calculado para C26H36 4O4, 469.28; encontrado 469.2. Tiempo de retención (análisis CLAR: MeCN 5-40%/H2O durante 4 min) = 2.49 min.

Ejemplo 15. Síntesis de { (18,311,51) -8- [3- (formil-metil-amino) -2-hidroxipropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-O O-l,2-dihidro-ciuinolina-3-carboxílico La { (1S, 3R, 5R) -8- [2-hidroxi-3-metilaminopropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-???-1, 2-dihidroquinolinona-3-carboxílico (43 mg, 0.1 mmol) se disolvió en formato de etilo (1.0 mL) . La mezcla se calentó a 65°C durante 16 horas, y luego se concentró hasta secarse bajo presión reducida. El producto se tomó en ácido acético/agua (1:1) (1.5 mL) y se purificó por cromatografía CLAR. Las fracciones purificadas se liofilizaron para dar el intermediario del título como la sal del ácido trifluoroacético (22.7 mg) . (m/z) : [M+H]+ calculado para C25H34N4O4, 455.27; encontrado 455.2. Tiempo de retención (análisis CLAR: MeCN 5-40%/H2O durante 4 min) = 2.37 min.

Ejemplo 16. Síntesis de ácido l-isopropil-2-oxo-l, 2-dihidro- qTiinolina-3-carboxílico, { (1S,3R,5R) -8- [3-formilamino-2- hidroxipropilj -8-azabiciclo[3.2. l]oct-3-il}amida La { (1S, 3R, 5R) -8- [2-hidroxi-3-aminopropil] -8- azabiciclo [3.2.1] oct-3-il} amida del ácido l-isopropil-2-???- 1 , 2-dihidroquinolinona-3-carboxílico (41.2 mg, 0.1 mmol) se disolvió en formato de etilo (1.0 inL) . La mezcla se calentó a 65 °C durante 16 Ta, y luego se concentró hasta secarse bajo presión reducida. El producto se tomó en ácido acético/agua (1:1) (1.5 mL) y se purificó por cromatografía CLAR. Las fracciones purificadas se liofilizaron para dar el intermediario del título como la sal del ácido trifluoroacético (37.5 mg) . (m/z) : [M+H]+ calculado para C24H32 4O4, 441.25; encontrado 441.2. Tiempo de retención (análisis CLAR: MeCN 5-40%/H2O durante 4 min) = 2.89 min.

Ejemplo 17. Síntesis de { (1S, 3R, 5R) -8- [ (R) -3- (acetil-metil-amino) -2-hidroxipropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l,2-dihidro-quinolina-3-carboxílico La { (1S, 3R, 5R) -8- [ (S) -2~hidroxi-3-metilaminopropilJ -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-???-1 , 2-dihidroquinolina-3-carboxílico (200 mg, 0.3 mmol) se disolvió en DMF (1.0 mL) , y luego N,N-diisopropiletilamina (160.3 pL, 0.92 mmol) se agregó. Después, una solución de ácido acético (17.3 L, 0.3 mmol) y PyBOP (159 mg, 0.3 mmol) en DMF se agregó. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 min, y luego se concentró hasta secarse bajo presión reducida. El producto se tomó en ácido acético/agua (1:1) (1.5 mL) y se purificó por cromatografía CLAR. Las fracciones purificadas se liofilizaron para dar el intermediario del título como la sal del ácido trifluoroacético (130 mg) . (m/z) : [M+H]+ calculado para C26H36N4O4, 469.28; encontrado 469.5. Tiempo de retención (análisis CLAR: MeCN 2-50%/H2O durante 5 min) = 3.94 min.

Ejemplo 18. Síntesis de { (1S,3R,5R) -8- [ (R) -3- (formil-metil-amino) -2-hidroxipropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l, 2-dihidro~quinolina-3-carboxílico La { (1S, 3R, 5R) -8- [ (S) -2-hidroxi-3~metilaminopropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-???-1, 2-dihidroquinolina-3-carboxílico (235 mg, 0.36 mmol) se disolvió en formato de etilo (5.0 mL) . La mezcla se calentó a 65 °C durante 16 h, y luego se concentró hasta secarse bajo presión reducida. El producto se tomó en ácido acético/agua (1:1) (1.5 mL) y se purificó por cromatografía CLAR. Las fracciones purificadas se liofilizaron para dar el intermediario del título como la sal del ácido trifluoroacético (97.5 mg) . (m/z): [M+H] + calculado para C25H34N4O4, 455.27; encontrado 455.2. Tiempo de retención (análisis CLAR: MeCN 2-50%/H2O durante 5 min) = 3.87 min.

Ejemplo 19: Síntesis de { (1S, 3R, 5R) -8- [ (R) -2-hidroxi-3- (metansulfonil-metil-amino)propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3- il}amida del ácido 5-bromo-l-isopropil-2-oxo-l, 2- dihidroqTiinolia-3-carbo Ílico A una solución de { ( 1S , 3 R , 5R) - 8- [ ( R) -2 -hidroxi-3 - (metansulfonil -metil-amino ) propi1 ] - 8 - azabiciclo [3.2.1] oct-3-il } amida del ácido 1- isopropil-2 -oxo-1 , 2 -dihidroquinolina-3 -carboxí lico (500 mg, 0.99 mmol) se disolvió en una mezcla de acetonitrilo (5 mL) y ácido acético (10 mL) se agregó bromo (0.30 mL , 5.9 mmol) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 12 h, y se concentró bajo presión reducida, proporcionando un residuo aceitoso amarillo pálido. El residuo se disolvió en acetonitrilo 20% en agua (TFA 0.5%) (5 mL) , y se purificó por CLAR. El compuesto del título se obtuvo como un producto mayor y se aisló como una sal de ácido tifluoroacético (200 mg) 1H-RMN (CD3OD) : d (ppm) 8.64 (s, 1H) , 7.97 (s, 1H) , 7.72-7.70 (m, 2H) 4.18 (br m, 2H) , 4.0 (br s, 1H) , 3.2-3.0 (m) , 2.88 (s, 3H) , 2.79 (s, 3H) , 2.5-2.2 (m, 2H) , 1.56 (d, 6H) . (m/z) : [MH+H]+ calculado para C25H35BrN405S , 583.16; encontrado 583.4. Tiempo de retención (análisis CLAR: MeCN 10-50%/H2O durante 6 min) = 3.90 min .

Ejemplo 20: Síntesis alternativa de éster de tert-butilo del ácido ( (R) -2-hidroxi-3-{3- [ (l-isopropil-2-oxo-l,2- dihidroquinolina-3-carbonil) amino] - (1S 3R, 5R) -8- azabiciclo [3.2.l]oct-8-il}propil)metilcarbámico a. Preparación de éster de tert-butilo del ácido metil- (S) -1- oxiranilmetilcarbámico El éster de tert-butilo del ácido ( (S) -3 -cloro-2-hidroxipropi 1 ) -metilcarbámico (2.23 g, 10 mmol) se disolvió en THF (30 mL) , y luego una solución de hidróxido de sodio acuoso (0.48 g en 10 mL agua) se agregó. La mezcla se agitó durante 2 horas. La mezcla se concentró luego bajo presión reducida para remover más del THF, y la solución acuosa restante se extrajo en acetato de etilo, lavado con agua. El producto se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró bajo presión reducida para dar el intermediario del titulo como un aceite (1.6 g) . (m/z) : [M+Na]+ calculado para C9Hi7N03, 210.10; encontrado 210.1. -"-H-RMN (DMSO d6, 299.96 MHz) : d (ppm) 1.32-1.42 (s, 9H) , 2.69-2.73 (m, 1H) , 2.75-2.85 (s, 3H) , 2.95-3.05 (br s, 1H) , 3.10-3.15 (dm, 1H) , 3.16-3.21 (d, 1H) , 3.37-3.51 (m, 2H) . b. Síntesis de éster de tert-butilo del ácido ( (R) -2-hidroxi- 3- {3- [ (l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolina-3- carbonil) amino] - (1S, 3R, 5R) -8-azabiciclo [3.2.1] oct-8- il}propil) metilcarbámico El éster de tert-butilo del ácido metil- (S ) -1- oxiranilmetilcarbámico (9.53 g, 51.1 mraol) , y { (1S, 3R, 5R) -8-aza-biciclo [3.2.1] oct-3 -il } amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolina-3-carboxílico (8.7 g, 25.6 mmol), se disolvieron en metanol (100 itiL) . La mezcla se calentó a 80°C durante 2 horas, y luego se concentró bajo presión reducida. El aceite resultante se tomó en acetato de etilo y se lavó con bicarbonato de sodio acuoso saturado, seguido por cloruro de sodio acuoso saturado. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y concentraron ba o presión reducida. El aceite resultante se procesó por cromatografía instantánea (SÍO2, eluyendo con metanol 10%/diclorometano 90%) . Las fracciones que contienen el producto se concentraron para dar el intermediario del título como un sólido blanco (13.5 g) . (m/z) : [M+H] + calculado para C29H42N4O5, 527.33; encontrado 527.6. Tiempo de retención (análisis CLAR: MeCN 2-50%/H2O durante 5 min) = 4.75 min .

Ejemplo 21: Síntesis de { (1S, 3R, 5R) -8- [2-hidroxi-3- (metansulfonil-etilamino)propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3- il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l, 2-dihidroqxiinolinona- 3-carboxílico Siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 remplazando metilamina con etilamina en la etapa h, el compuesto del título se preparó, (m/z) : [M+H]+ calculado para C26H38N4O5S , 519.28; encontrado 519.2. Tiempo de retención (análisis CLAR: MeCN 10-70%/H2O durante 6 min) = 2.91 min.

Ejemplo 22: Síntesis de { (1S, 3R, 5R) -8- [ (R) -2-hidroxi-3- (metansulfonilamino) -propil] -8-azabiciclo [3.2. l]oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l,2-dihidroqTiinolinona-3-carboxílico al . Preparación de (S) -2-oxiranilmetilisoindol-l , 3-diona A una solución fría de (S) -1-oxiranilmetanol (5 g, 67.5 mmol) y ftalimida (9.9 g,- 67.3 mmol) en tetrahidrofurano (200 mL) en baño de hielo se agregó trifenilfpsfina (17.9 g, 68.2 mmol) y azodicarboxilato de dietilo (12.3 g, 70.6 mmol). La mezcla se agitó a 0°C durante 2 horas y a temperatura ambiente durante 48 h. La mezcla se concentró bajo vacío, y el residuo aceitoso se purificó por cromatografía de columna en sílice instantánea, proporcionando el producto deseado (10.1 g) como un sólido amarillo pálido: Rf = 0.51 en 1:1 EtOAc/hexano. ^-RMN (CDC13, 300 MHz) : d (ppm) 7.76-7.64 (m, 2H) , 7.63-7.60 (m, 2?) , 3.9-3.8 (dd, 1?) , 3.70-3.65 (dd, 1H) , 3.15 (m, 1H) , 2.70-2.67 (dd, 1H) , 2.58-2.55 (dd, 1H) . bl . Síntesis de ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2- dihidroguinolinona-3-carboxílico , { (1S, 3R, 5R) -8- [ (R) -2- hidroxi-3-metansulfonilamino)propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct- 3 -il} amida Siguiendo el procedimiento del Ejemplo 4, remplazando 2- oxiranilmetil- isoindol-1 , 3-diona racémica con el intermediario guiral de la etapa previa, la sal de trifluoroacetato del compuesto del título se preparó, (m/z) : [M+H]+ calculado para C24H34N4O5S , 491.24; encontrado 491.4. Tiempo de retención (análisis CLAR: MeCN 10-50%/H2O durante 6 min) = 3.69 min. 1H-RMN (CD3OD, 300 MHz) : d (ppm) 8.67 (s, 1H) , 7.74-7.73 (m, 3H) , 7.7-7.6 (dt, 1H) , 7.3-7.2 (t, 1H) , 4.2 (br s, 2H) , 4.0 (br m, 2H) , 3.2-2.9 (m, 4H) , 2.8 (s, 3H) , 2.6-2.3 (br m, 6H) , 2.2-2.1 (br m, 2H) , 1.57-1.55 (d, 6H) . El compuesto del título se preparó también por el siguiente procedimiento. a2. Preparación de N- ( (S) -oxiranilmetil)metanosulfonamida A una solución fría de metanosulfonamida (10 g, 0.105 mol) en agua (100 mL) en un baño de hielo se agregó hidróxido de sodio como peletizados (8.4 g, 0.21 mol) y luego (S)-2-clorometiloxirano (12.4 g, 0.158 mol). La mezcla se agitó a la misma temperatura durante 2 horas, y a temperatura ambiente durante 12 horas y luego se concentró ácido clorhídrico (18 mL) se agregó. El producto se aisló al extraer la capa acuosa con diclorometano (2 x 300 mL) . La capa orgánica se secó sobre MgS04 y luego se evaporó hasta secarse, proporcionando un líquido incoloro (2.5 g) , que se usó directamente en la siguiente etapa. b2. Síntesis de { (1S, 3R, 5R) -8- [ (R) -2-hidroxi-3- (metansulf onilamino)propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l, 2-dihidroquinolinona-3-carboxílico A una solución de ácido l-isopropil-2 -oxo-1 , 2-dihidroquinolina-3 -carboxí lico , { (lS,3R,5R)-8-aza-biciclo [3.2.1] oct-3-il}amida (sal TFA; 4 g, 8.8 mmol) en metanol (150 ' mL ) se agregó N,N-diisopropiletilamina (1.7 mL, 9.5 mmol) , y el producto de la etapa previa (2.5 g, 18.2 mmol) . La mezcla se agitó a 80°C durante 2 días. Después de concentrase bajo vacío, el residuo se purificó por CLAR preparativa, proporcionando la sal de trif luoroacetato del compuesto del título (1.3 g) . (m/z) : [M+H]+ calculado para C24H34 405S, 491.24; encontrado 491.4. Tiempo de retención (análisis CLAR: MeCW 10-50%/H2O durante 6 min) = 3.69 min .

Ejemplo 23: Síntesis de { (1S, 3R, 5R) -8- [2-hidroxi-3- (1, 1- dioxo-2-isotiazolidinil)propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3- il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l, 2-dihidroquinolinona- 3-carboxílico a . Preparación de { (1S, 3R, 5R) -8- [2-hidroxi-3- (3- cloropropansulfonilamino) propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3- il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l, 2-dihidroquinolinona- 3-carboxílico A una solución fría de sal TFA de { (lS,3R,5R)-8-[2-hidroxi-3-aminopropil] -8-azabiciclo[3.2.l]oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l,2-diMdrogjñ.nolinona-3-carboxílico (0.125 g, 0.195 mmol) en diclorometano (2 mL) en un baño de hielo se agregó N,N-diisopropiletilamina (0.119 mL, 0.683 mmol) y cloruro de 3-cloropropanosulfonilo (0.025 mL, 0.205 mmol). Después de agitar a 0°C durante 2 horas, la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Esto se diluyó con diclorometano (50 mL) , y se lavó con salmuera y solución NaHC03 saturada. Después de secar sobre MgS04, la solución orgánica se evaporó hasta secarse, proporcionando un residuo aceitoso. El producto crudo se usó directamente en la siguiente etapa. b. { (1S, 3R, 5R) -8- [2-hidroxi-3- (1, l-dioxo-2-isotiazolidinil ) propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l, 2-dihidroquinolinona-3-carboxílico A una solución de { (1S, 3R, 5R) -8- [2-hidroxi-3- (3-cloropropansulfonilamino)propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3- il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolinona- 3-carboxílico (100 mg, 0.18 mmol) en DMF anhidro (3 mL) se agregó carbonato de potasio (75 mg, 0.56 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 85 °C durante 12 horas, y se concentró bajo vacío. El residuo se disolvió en dielorómeta o (50 mL) , y se lavó con NaHC03 saturado. Después de secarse sobre MgS04, el filtrado se evaporó hasta secarse, y el residuo se purificó por CLAR preparativa hasta producir el compuesto del título, (m/z) : [M+H]+ calculado para C26H36 405S, 517.26; encontrado 517.3.

Ejemplo 24: Síntesis de { ( 1S, 3R, 5R) -8- [ (R) -2-hidroxi-3- (metansulfonil-metil-amino)propil] -8-aza-biciclo [3.2. l]oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l,2-dihidrociuinolina-3-carboxílico a. Preparación de éster de tert-butilo del ácido (1S,3R,5R)-3- [l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolina-3-carbonil) mino] -8-azabiciclo [3.2.1 ] octano-8-carboxílico En un matraz de 3 L, ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolina-3-carboxílico (112.4 g, 0.486 mol, 1.1 eg) se suspendió en tolueno (1 L) . La mezcla se calentó a 85 °C y cloruro de tionilo (86.74 g, 0.729 mol) se agregó gota a gota durante 70 min. La mezcla se calentó a 95°C durante 1.5 h con agitación y luego se permitió hasta enfriar a temperatura ambiente .

En un matraz 12 L separador, éster de tert-butilo del ácido (1S, 3R, 5R) -3-amino-8-azabiciclo [3.2.1] octano-8- carboxílico (100.0 g, 0.442 mol, 1 eg) se suspendió en tolueno (1 L) y NaOH 3 M (4 eq) se agregó. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 10 min y luego se enfrió a alrededor de 5°C. La solución de cloruro ácido se agregó lentamente con agitación durante 40 min manteniendo la temperatura interna bajo 10°C. La mezcla se agitó a 3-5°C durante 30 min y las capas se permitieron separar durante la noche. La capa de tolueno (-2.5 L) se colectó, concentró a alrededor de la mitad (-1.2 L) por evaporación rotatoria, y se usó directamente en la siguiente etapa. b. Preparación de { (1S, 3R, 5R) -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l, 2-dihidroguinolina-3-carboxílico A la solución de tolueno preparada en la etapa previa (-1.2 L) se le agregó ácido trifluoroacético (200 mL) durante 20 min a 20°C con agitación. La mezcla se agitó a 20°C durante 2 horas. Se agregó agua (1.55 L) y la mezcla se agitó durante 30 min a 20°C. Después de 30 min, la mezcla se separó en tres capas. La capa de fondo (-350 mL) , un aceite café viscoso, contiene el intermediario crudo. A un matraz de 12 L cargado con MTBE (2.8 L), el aceite café crudo se le agregó durante 1 h a 1-2 °C con agitación. La suspensión se agitó a la misma temperatura durante 1 h y luego se filtró. El filtrado se lavó con MTBE (2 x 300 mL) y se secó bajo vacío a temperatura ambiente durante 4 días para proporcionar la sal de trifluoroacetato del intermediario del título (163.3 g) como un polvo amarillo pálido. c . Preparación de N-metil-N- [ (5) -2-oxiran-2- ilmetil]metanosulfonamida Un matraz 12 L se cargó con agua (1 L) seguido por la adición de NaOH (50% en agua, 146.81 g, 1.835 mol) . La cubeta que contiene NaOH se lavó con agua (2 x 500 L) y los lavados se agregaron al matraz. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 10 min y se enfrió a ~8°C. (N-metil)metanosulfonamida (200.2 g, 1.835 mol) en agua (500 mL) se agregó durante 5 min. La mezcla se agitó durante 1 h a" ~4°C y (S) -2-clorometiloxirano (339.6 g, 3.67 mol) se agregó. La mezcla se agitó durante 20 h a 3-4°C. Diclorometano (2 L) se agregó y la mezcla se agitó durante 30 min a 5-10°C. Las dos capas se permitieron separar durante 10 min y se colectaron. La capa orgánica (-2.5 L) se agregó nuevamente al matraz 12 L y se lavó con H3P04 1 M (800 mL) y salmuera (800 mL) . El diclorometano se removió por evaporación rotatoria. Al producto crudo, tolueno (400 mL) se le agregó y removió por evaporación rotatoria. Después de tres ciclos adicionales del proceso de tolueno, el intermediario del título se obtuvo (228.2 g) el cual se usó sin purificación adicional en la siguiente etapa. d. Síntesis de { (1S, 3R, 5R) -8- [ (R) -2-hidroxi-3- (metansulfonil- metil-amino) propil] -8-aza-biciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolina-3-carboxílico En un matraz de 3 L, trifluoroacetato de { (1S, 3R, 5R) -8- azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-???- 1 , 2-di idroquinolina-3-carboxílico (105.0 g, 0.232 mol) se suspendió en etanol absoluto (400 mL) . A esta suspensión, NaOH (50% en agua, 0.243 mol. 1.05 eq) se disolvió en etanol absoluto (100 mL) se agregó a temperatura ambiente. La cubeta que contiene el NaOH se lavó con etanol (2 x 50 mL) y los lavados se agregaron a la mezcla de reacción. Después de 30 min de agitación, una solución de N-metil-N- [ (S) -2-oxiran-2-ilmetil]metanosulfonamida (62.0 g, 1.5 eq) en etanol absoluto (100 mL) se agregó. La mezcla se puso a reflujo durante 2 horas, se enfrió a temperatura ambiente y semillas de cristales del compuesto del título se agregaron. Después de alrededor de 5 min de agitación un sólido blanco se formó. La mezcla se enfrió a 3-5°C y se agitó durante 2 h. El sólido blanco se filtró y la torta húmeda se lavó con etanol absoluto frío (3 x 50 mL) . El sólido se secó bajo vacío a 30°C durante 60 h para proporcionar el compuesto del título (93.8 g, contenido de agua por método Karl Fischer 2.03%). ½ RM (CDCI3) d ppm 10.52 (d, 1H) , 8.83 (s, 1H) , 7.75 (d, 2H) , 7.64-7.60 (m, 2H) , 7.28-7.26 m, 1H) , 4.33-4.26 (m, 2H) , 3.78- 3.75 (m, 1H) , 3.27-3.20 (m, 4H) , 3.01 (s, 3H) , 2.88 (s, 3H) , 2.58-2.53 (m, 1H) , 2.30-1.81 (m, llH) , 1.68 (d, 6H) . Los cristales sembrados se obtuvieron a partir de una preparación previa del compuesto del título por el método de este ejemplo en una escala más pequeña, en la cual la cristalización se presenta espontáneamente. Ejemplo 25: Síntesis de clorohidrato de { (1S, 3R, 5R) -8- [ (R) -2- hidroxi-3- (metansulfonil-metil-amino)propil] -8-aza-biciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l, 2-dihidroquxnolina-3-carboxílico En un matraz de 1 L, { (lS,3R,5R)-8-[(R) -2 -hidroxi-3 - (metansulfonil-metil-amino) propil] -8-aza-biciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-???-1 , 2-dihidroquinolina-3-carboxílico (34.7 g, 0.069 mol) se suspendió en etanol absoluto (210 mL) . El HCl concentrado (1.1 eq) se agregó a temperatura ambiente con agitación. La mezcla se agitó a reflujo durante 30 min y se enfrió a temperatura ambiente y se agitó durante 2 h. El sólido se filtró y la torta húmeda se lavó con etanol absoluto frío (3 x 50 mL) . El sólido se secó bajo vacío a 30°C durante 48 h para proporcionar el compuesto del título (34.5 g, 93.7% de rendimiento, contenido de agua por método Karl Fischer 0.13%) .

Ejemplo 26: Síntesis de sal de ácido cítrico de {(1S#3R,5R)- 8- [ (R) -2-hidroxi-3~ (metanosulfonil-metil-amino)propil] -8-aza- biciclo[3.2.l]oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l, 2- dihidroqTainolina-3-carboxílico El ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolina-3- carboxílico, { (1S, 3R, 5R) -8- [ (R) -2-hidroxi-3 - (metansulfonil-metil-amino ) propil ] -8-aza-biciclo [3.2.1] oct-3-il}amida (0.1 g, 0.2 mmol) se suspendió en etanol (1 mL) . A esta suspensión se agregó una solución 1M de ácido cítrico en etanol (0.072 mL, 0.072 mmol, 0.33 eq) . La mezcla se procesó por sonicación brevemente hasta la claridad, se encapsuló, y luego se permitió hasta situarse durante la noche. La capa se removió luego y la mezcla se permitió evaporar bajo condiciones de ambiente hasta que los sólidos se observaron. La mezcla luego se re-encapsuló y se permitió situarse durante 72 h. El sólido resultante se filtró y se lavó con etanol frío para dar el compuesto del título como un sólido (74.3 mg) .

Ejemplo 27: Síntesis de sales de ácido de { (1S,3R,5R) -8- [ (R) -2-hidroxi-3- (metansulfonil-metil-amino)propil] -8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l,2-dihidroquinolina-3-carboxílico Siguiendo el procedimiento del Ejemplo 26, las sales de ácido de { (lS,3R,5R)-8-[ (R) -2-hidroxi-3 - (metansulfonil-metil-amino ) ropil] -8-aza- biciclo [3.2.1] oct-3~il}amida del ácido l-isopropil-2- oxo-1 , 2-di idroquinolina-3-carboxílico enlistado abajo en Tabla III se prepararon en forma sólida usando los equivalentes indicados de ácido.

Tabla III: Sales de Ácido Ejemplo 28: Síntesis de sal del ácido metanosulfónico de { (1S, 3R, 5R) -8- [ (R) -2 -hidroxi -3- (metansulfonil-metil-amino) propil ] -8-aza-biciclo[3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l, 2-dihidroquinolina-3-carboxílico A una solución de { (lS,3R,5R)-8-[ (R)-2 -hidroxi-3 - (metanosulfonil-metil-amino ) propil ] - 8 -aza-biciclo [ 3.2.1 ] oct-3 -il } amida del ácido l-isopropil-2- oxo-1 , 2-di idroguinolina-3 -carboxílico (0.1 g, 0.2 mmol) en 50% acetoni trilo/agua (1 mL) se agregó una solución 1 M de ácido metansulfónico en etanol (0.2 mL , 0.2 mmol, 1 eq) . La mezcla se congeló luego y se liofilizó hasta secarse durante la noche. El sólido resultante se disolvió en isopropanol (1 mL) con calentamiento suave y se permitió hasta enfriar. El sólido resultante se colectó por filtración y se lavó con isopropanol frío para dar el compuesto del título como un sólido (90 mg) .

Ejemplo 29: Síntesis de sales de ácido de {(lS,3R,5R)-8- [ (R) - 2 -hidroxi - 3 - (metansulfonil -metil-amino) propil ] -8-aza-biciclo[3.2.1] oct- 3 - il } mida del ácido l-isopropil-2-oxo-l, 2 -dihidroquinolina-3 -carboxílico Siguiendo el procedimiento del Ejemplo 28, las sales de ácido de { (lS,3R,5R)-8-[ (R)-2 -hidroxi -3 - (metansulfonil-metil- amino ) propil ] -8-aza-biciclo [3.2.1] oct-3-il } amida del ácido l-isopropil-2 -oxo-1, 2 -dihidroquinolina-3 -carboxílico enlistadas abajo en la Tabla IV se prepararon en forma sólida usando los equivalentes indicados de ácido .

Tabla IV: Sales de Ácido Ensayo 1: Ensayo de Enlace de Radioligando en Receptores Humanos 5-HT4(C) a. Preparación de' Membrana 5-HT4íc) Células HEK-293 (riñon embriónico humano) establemente transfectadas con ADNc de receptor 5-HT4(C) humano (Bmax = ~ 6.0 pmol/mg de proteína, como se determina usando el ensayo de enlace de radioligando de membrana [3H] -GR113808) se hacen crecer en matraces T-225 en medio Eagle Modificado de Dulbecco (DMEM) que contiene 4,500 mg/L de D-glucosa y clorohxdrato de piridoxina (GIBCO-Invitrogen Corp., Carlsbad CA: Cat #11965) complementado con suero de bovino fetal al 10% (FBS) (GIBCO-Invitrogen Corp.: Cat #10437), 2 mM de L-glutamina y (100 unidades) penicilina- (100 g) estreptomicina/ml (GIBCO-Invitrogen Corp. : Cat #15140) en un incubador humidificador de C02 al 5% a-37°C. Las células se hacen crecer bajo presión de selección continua por la adición de 800 g/mL de geneticina (GIBCO-Invitrogen Corp.: Cat #10131) al medio. Las células se hacen crecer hasta aproximadamente 60-80% de confluencia (< 35 conductos de subcultivo) . A 20-22 horas antes de cosechar, las células se lavan dos veces y se alimentan con DMEM libre de suero. Todas las etapas de la preparación de membrana se realizan en hielo. La monocapa celular se levanta por agitación mecánica suave y trituración con una pipeta de 25 mL. Las células se colectan por centrifugación a 1000 rpm (5 min) . Para la preparación de membrana, los peletizados celulares se vuelven a suspender en ácido 4- (2-hidroxietil) - 1-piperazinetanosulfónico 50 M enfriado en hielo (HEPES) , pH 7.4 (solución amortiguadora de preparación de membrana) (40 mL/total rendimiento celular de 30-40 matraces T225) y se homogeniza usando un disruptor de politron (establecido 19, 2 x 10 s) en hielo. Los homogeneizados resultantes se centrifugan a 1200 g durante 5 min a 4°C. El peletizado se descarta y el sobrenadante se centrifuga a 40,000 g (20 min) . El peletizado se lava una vez por resuspensión con solución amortiguadora de preparación de membrana y centrifugación a 40,000 g (20 min). El peletizado final se volvió a suspender en HEPES 50 mM, pH 7.4 (solución amortiguadora de ensayo) (equivalente 1 matraz T225/1 mL) . La concentración de proteína de la suspensión de membrana se determina por el método de Bradford (Bradford, 1976) . Las membranas se almacenan congeladas en alícuotas a -80°C.

. Ensayos de Enlace de Radioligando Los ensayos de enlace de radioligando se realizan en placas de ensayo de polipropileno de 96 pozos profundos de 1.1 mL (Axygen) en un volumen de ensayo total de 400 µ:.. que contiene 2 g de proteína de membrana en HEPES 50 mM pH 7.4, que contiene albúmina de suero de bovino al 0.025% (BSA) . Los estudios de enlace de saturación para determinación de los valores a del radioligando se realizaron usando [3H] -GR113808 (Amersham Inc., Bucks, RU: Cat #TRK944; actividad específica ~82 Ci/mmol) a 8-12 concentraciones diferentes en el rango desde 0.001 nM-5.0 nM. Los ensayos de desplazamiento para determinación de valores ?¾ de compuestos se realizaron con [3H] -GR113808 a 0.15 nM y once concentraciones diferentes del compuesto en el rango desde 10 pM~100|iM. Los compuestos de prueba se reciben como soluciones de reserva 10 mM en DMSO y se diluye hasta 400 µ? en HEPES 50 mM pH 7.4 a 25 °C, que contiene BSA al 0.1%, y se hacen diluciones en serie (1:5) en la misma solución amortiguadora. Se determina el enlace no específico en presencia de 1 µ? de GR113808 no etiquetado. Los ensayos se incuban durante 60 min a temperatura ambiente, y luego las reacciones de enlace se terminan por filtración rápida sobre placas filtro de fibra de vidio GF/B de 96 pozos (Packard BioScience Co., Meriden, CT) previamente mojadas en polietilenimina al 0.3%. Las placas filtro se lavan tres veces con solución amortiguadora de filtración (HEPES 50mM enfriado en hielo, pH7.4) para remover la radioactividad no enlazada. Las placas se secan, se agregan 35 L de fluido de escintilación líquida Microscint-20 (Packard BioScience Co., Meriden, CT) a cada pozo y las placas se cuentan en un contador de escintilación líquida Packard Topcount (Packard BioScience Co., Meriden, CT) . Los datos de enlace se analizan por análisis de regresión no lineal con el paquete GraphPad Prism Software (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA) usando el modelo de parámetro 3 para competencia de un sitio. El FONDO (curva mínima) se fija al valor para enlace no específico, ' como se determina en presencia de 1 µ? GR113808. Los valores K± para compuestos de prueba se calculan, en Prisma, de los valores IC50 mejor colocados, y el valor ¾ del radioligando, usando la ecuación Cheng-Prusoff (Cheng and Prusoff, Biochemical Pharmacology, 1973, 22, 3099-108) : ¿ = IC50/ (1 + [L] / d) donde [L] = concentración [3H] -GR113808. Los resultados se expresan como el logaritmo decádico negativo de los valores Ki, pKi. Los compuestos de prueba que tienen un valor pKi más alto en este ensayo tienen una afinidad de enlace más alta para el receptor 5-HT4. Los compuestos de la invención que se prueban en este ensayo tienen un valor pKi en el rango desde alrededor de 6.3 hasta alrededor de 9.0, típicamente en el rango desde alrededor de 7.0 hasta alrededor de 8.6.

Ensayo 2 : Ensayo de Enlace de Radioligando en Receptores Humanos 5-HT3A: Determinación de la Selectividad del Subtipo de Receptor a. Preparación de Membrana 5-HT3A Células HEK-293 (riñon embriónico humano) establemente transfectadas con ADNc del receptor 5-HT3A humano se obtienen del Dr. Michael Bruess (University of Bonn, GDR) (Bmax = ~9.0 pmol/mg proteína, como se determina usando ensayo de enlace de radioligando de membrana [3H] -GR65630) . Las células se hacen crecer en matraces T-225 o fábricas celulares en Medio Eagles Modificado de Dulbecco al 50% (DMEM) (GIBCO-Invitrogen Corp., Carlsbad, CA: Cat #11965) y F12 de Ham al 50% (GIBCO- Invitrogen Corp. : Cat #11765) complementado con suero de bovino fetal inactivado por calor al 10% (FBS) (Hyclone, Logan, UT: Cat #SH30070.03) y (50 unidades) penicilina- (50 g) estreptomicina/ml (GIBCO-Invitrogen Corp.: Cat #15140) en un incubador humidificado con C02 al 5% a 37°C. Las células se hacen crecer hasta aproximadamente 70-80% de confluencia (< 35 pasajes de subcultivo) . Todas las etapas de la preparación de membrana se realizan en hielo. Para cosechar las células, el medio se aspira y las células se enjuagan con Ca2+, solución salina amortiguada en fosfato de Dulbecco libre de Mg2+ (dPBS) . La monocapa celular se levanta por agitación mecánica suave. Las células se colectan por centrifugación a 1000 rpm (5 min) . Las etapas posteriores de la preparación de membrana siguen el protocolo descrito arriba para las membranas que expresan los receptores 5~HT4(C). b. Ensayos de Enlace de Radioligandos Los ensayos de enlace de radioligando se realizan en placas de ensayo de polipropileno de 96 pozos en un volumen de ensayo total de 200 ¡L que contiene 1.5-2 µg de proteína de membrana en HEPES 50 mM pH 7.4, que contiene solución amortiguadora de ensayo BSA al 0.025%. Los estudios de enlace de saturación para determinación de los valores K¿ del radioligando se realizaron usando [3H]-GR65630 (PerkinElmer Life Sciences Inc., Boston, MA: Cat #NET1011, actividad específica -85 Ci/mmol) a doce concentraciones diferentes en el rango desde 0.005 nM to 20 nM. Los ensayos de desplazamiento para determinación de valores K± de compuestos se realizaron con [3H]-GR65630 a 0.50 nM y once concentraciones diferentes del compuesto en el rango desde 10 pM hasta 100 µ?. Los compuestos se reciben como soluciones de reserva 10 mM en DMSO (ver sección 3.1), se diluyen hasta 400 µ? en HEPES 50 mM pH 7.4 a 25 °C, que contiene BSA al 0.1 %, y luego se hacen diluciones en serie (1:5) en la misma solución amortiguadora. Se determina el enlace no específico en presencia de 10 µ? de MDL72222 no etiquetado. Los ensayos se incuban durante 60 min a temperatura ambiente, luego las reacciones de enlace se terminan por filtración rápida sobre placas filtro de fibra de vidrio GF/B de 96 pozos (Packard BioScience Co., Meriden, CT) previamente mojadas en polietilenimina al 0.3%. Las placas filtro se lavan tres veces con solución amortiguadora de filtración (HEPES 50mM enfriado en hielo, pH7.4) para remover la radioactividad no enlazada. Las placas se secan, se agrega 35 L de fluido de escintilación líquida Microscint-20 (Packard BioScience Co., Meriden, CT) a cada pozo y las placas se cuentan en un contador de escintilación líquida Packard Topcount (Packard BioScience Co., Meriden, CT) . Los datos de enlace se analizan usando el procedimiento de regresión no lineal descrito arriba para determinar los valores El FONDO (curva mínima) se fija al valor para enlace no específico, como se determina en presencia de MDL72222 10 µ?. La cantidad [L] en la ecuación Cheng-Prusoff se define como la concentración [3H] -GR65630. La selectividad para el' subtipo del receptor 5-HT4 con respecto al substipo del receptor 5-HT3 se calcula como la relación ¾. (5-HT3A) /¾ (5-HT4{C) ) . Los compuestos de la invención que se prueban en este ensayo tienen una selectividad al subtipo del receptor 5-HT4/5-HT3 en el rango desde alrededor de 50 hasta alrededor de 8000, típicamente en el rango desde alrededor de 100 hasta alrededor de 4000.

Ensayo 3 : Ensayo de Placa Instantánea de Acumulación de cAMP de Célula Completa con Células HEK-293 que expresan Receptores 5-HT4(C) Humanos En este ensayo, la potencia funcional del compuesto de prueba se determina al medir la cantidad de AMP cíclico producido cuando las células HEK-293 que expresan los receptores 5-HT4 se ponen en contacto con concentraciones diferentes del compuesto de prueba, a. Cultivo Celular Células HEK-293 (riñon embriónico humano) establemente transfectadas con ADNc del receptor 5-H 4(C) humano clonado se prepararon de manera que expresan el receptor en dos diferentes densidades: (1) a una densidad de alrededor de 0.5-0.6 pmol/mg proteína, como se determina usando un ensayo de enlace de radioligando de membrana [3H] -GR113808 , y (2) a una densidad de alrededor de 6.0 pmol/mg proteína. Las células se hacen crecer en matraces T-225 en medio Eagles Modificado de Dulbecco (DMEM) que contiene 4,500 mg/L de D-glucosa (GIBCO-Invitrogen Corp. : Cat #11965) complementado con suero de bovino fetal al 10% (FBS) (GIBCO-Invitrogen Corp.: Cat #10437) y (100 unidades) penicilina- (100 g) estreptomicina/ml (GIBCO-Invitrogen Corp. : Cat #15140) en un incubador humidificador de CO2 al 5% a 37°C. Las células se hacen crecer bajo presión de selección continua por la adición de geneticina (800 g/mL: GEBCO-Invitrogen Corp. : Cat #10131) al medio. b. Preparación Celular Las células se hacen crecer hasta aproximadamente 60-80% de confluencia. Veinte hasta veintidós horas antes del ensayo, las células se lavan dos veces, y se alimentan, con DMEM libre de suero que contiene 4,500 mg/L de D-glucosa (GIBCO-Invitrogen Corp. : Cat #11965) . Para cosechar las células, el medio se aspira y 10 mL deVersene (GIBCO- Invitrogen Corp.: Cat #15040) se agregó a cada matraz T-225. Las células se incubaron durante 5 min a temperatura ambiente y luego se descargan del matraz por agitación mecánica. La suspensión celular se transfiere a un tubo centrífugo que contiene un volumen igual de dPBS previamente calentado (37°C) y se centrifuga durante 5 min a 1000 rpm. El sobrenadante se descarta y el peletizado se vuelve a suspender en solución amortiguadora de estimulación previamente calentada (37°C) (10 mL equivalente por 2-3 matraces T-225) . Este tiempo se anota y se marca como tiempo cero. Las células se cuentan con un contador Coulter (cuenta arriba de 8 jim, el rendimiento del matraz fue de 1-2 x 107 células/matraz) . Las células se vuelven a suspender a una concentración de 5 x 105 células /mi en solución amortiguadora de estimulación previamente calentada (37°C) (como se proporciona en el kit de placa instantánea) y se incuba previamente a 37°C durante 10 min. Los ensayos cAMP se · realizan en un formato de radioinmunoensayo usando el sistema de ensayo de activación de adenilil ciclasa de placa instantánea con 125I-cAMP (SMP004B, PerkinElmer Life Sciences Inc., Boston, MA) , de conformidad con las instrucciones del fabricante. Las células se hacen crecer y se preparan como se describe arriba. Las concentraciones celulares finales en el ensayo fueron 25 x 103 células/pozo y el volumen de ensayo final fue 100 L. Los compuestos de prueba se reciben como soluciones de reserva 10 mM en DMSO, se diluyen hasta 400 µ? en HEPES 50 mM pH 7.4 a 25°C, que contiene BSA al 0.1%, y luego se hacen diluciones serie (1:5) en la misma solución amortiguadora. Los ensayos de acumulación AMP cíclicos se realizaron con 11 concentraciones diferentes del compuesto en el rango desde 10 pM hasta 100 µ? (concentraciones del ensayo final) . La curva de respuesta a la concentración 5-HT (10 pM hasta 100 µ?) se incluye en cada placa. Las células se incuban, con agitación, a 37°C durante 15 min y la reacción se termina por la adición de 100 µ? de solución de detección enfriada en hielo (como se proporciona en el kit de placa instantánea) a cada pozo. Las placas se sellan y se incuban a 4°C durante la noche. La radioactividad enlazada se cuantificó por espectroscopia de proximidad de escintilación usando el Topcount (Packard BioScience Co., Meriden, CT) .

La cantidad de cAMP producido por mL de reacción se extrapola de la curva estándar cAMP, de conformidad con las instrucciones proporcionadas en el manual del usuario del fabricante. Los datos se analizan por análisis de regresión no lineal con el paquete GraphPad Prism Software usando el modelo de respuesta a la dosis sigmoidal de 3 parámetros (pendiente contraída para unidad) . Los datos de potencia se reportan como valores pEC50, el logaritmo decádico negativo del valor EC50, donde EC50 es la concentración efectiva para un 50% de respuesta máxima. Los compuestos de prueba que exhiben un valor pEC5o mayor en este ensayo tienen una potencia mayor para agonizar el receptor 5-HT4. Los compuestos de la invención que se prueban en este ensayo, por ejemplo, en la línea celular (1) que tienen una densidad de alrededor de 0.5-0.6 pmol/mg proteína, tienen un valor pECso en el rango desde alrededor de 7.0 hasta alrededor de 9.0, típicamente en el rango desde alrededor de 7.5 hasta alrededor de 8.5.

Ensayo 4: Ensayo de Pinza de Voltaje In vitro de la Inhibición de Corriente de Ion de Potasio en Células Completas que Expresan el Canal de Potasio Cardiaco hERG Se obtienen células CHO-Kl establemente transfectadas con ADNc hERG de Gail Robertson en la University of Wisconsin. Las células se mantienen en almacenado criogénico hasta que es necesario . Las células se expanden y se pasan en medio Eagles Modificado de Dulbecco/Fl2 complementado con suero de bovino fetal al 10% y 200 µg mL de geneticina. Las células se siembran en portaobjetos de vidrio recubiertos con poli-D-lisina (100 µg/mL) , en platos de 35 m 2 (que contienen 2 mL de medio) a una densidad que permite que las células aisladas se seleccionen para estudios de pinza de voltaje de célula completa. Los platos se mantienen en un ambiente de C02 al 5%, humidificado a 37°C. La solución extracelular se prepara al menos cada 7 días y se almacena a 4°C cuando no se usa. La solución extracelular contiene (mM) : NaCl (137), KCl (4), CaCl2 (1.8), MgCl2 (1), Glucosa (10), ácido 4- (2-hidroxietil) -1-piperazinetanosulfónico (HEPES) (10), pH 7.4 con NaOH. La solución extracelular, en ausencia o presencia del compuesto de prueba, se guarda en reservorios, de los cuales se hace fluir en la cámara de registro a aproximadamente 0.5 mL/min. La solución intracelular se prepara, se forma en alícuotas y se almacena a -20°C hasta el día de uso. La solución intracelular contiene (mM) : KCl (130) , MgCl2 (1) , sal del ácido etilen glicol-bis (beta-aminoetil éter) ?,?,?' ,?' -tetra acético (EGTA) (5), MgATP (5), ácido 4- (2-hidroxietil) -1-piperazinetanosulfónico (HEPES) (10), pH 7.2 con KOH. Todos los experimentos se realizaron a temperatura ambiente (20-22°C) . Los portaobjetos en los cuales las células se siembran se transfieren a una cámara de registro y se refusionan continuamente. Los sellos Gigaohm se forman entre la célula y el electrodo de parche. Una vez que se alcanza un parche estable, comienza el registro en el modo de pinza de voltaje, con un potencial de espera inicial a -80 mV. Después de que se alcanza la corriente de célula completa estable, las células se exponen al compuesto de prueba. El protocolo de voltaje estándar fue: etapa del potencial de espera de -80 mV hasta +20 mV durante 4.8 seg, repolarización hasta -50 mV durante 5 seg y luego' regreso al potencial de espera original (-80 mV) . Este protocolo de voltaje se corre una vez cada 15 seg (0.067 Hz) . Las amplitudes de corriente pico durante la fase de repolarización se determinan usando el software pClamp. Los compuestos de prueba a una concentración de 3 µ se perfusan sobre las células durante 5 minutos, seguido por un periodo de lavado de 5 minutos en ausencia del compuesto. Finalmente, el control positivo (cisaprida, 20 nM) se agregó al producto de perfusión para probar la función de la célula. La etapa desde -80 mV hasta +20 mV activa el canal hERG, lo que resulta en una corriente hacia afuera. La etapa regresa a -50 mV lo que resulta en una corriente de cola hacia fuera, como el canal se recupera de la inactivación y se desactiva. Las amplitudes de corriente pico durante la fase de repolarización se determinan usando el software pCLAMP. Los datos de control y artículo de prueba se exportan al Origin® (OriginLab Corp., Northampton ??) donde las amplitudes de corriente individuales se normalizan a la amplitud de corriente inicial en ausencia del compuesto. Las medias de corriente normalizadas y errores estándar para cada condición se calculan y agrupan contra el curso de tiempo del experimento . Se hacen comparaciones entre las inhibiciones de corriente K+ observadas después de la exposición de cinco minutos a ya sea el artículo de prueba o control vehículo (usualmente 0.3% de DMSO) . Las comparaciones estadísticas entre los grupos experimentales se realizan usando una prueba t independiente, de dos poblaciones (Microcal Origin v. 6.0). Las diferencias se consiedran importantes a p < 0.05. Entre más pequeño el porcentaje de inhibición para la corriente de ion de potasio en este ensayo, más pequeño el potencial para compuestos de prueba de cambiar el patrón de repolarización cardiaca cuando se usan como agentes terapéuticos. Los compuestos de la invención que se prueban en este ensayo a una concentración de 3 ? exhiben una inhibición de la corriente de ion de potasio de menos de alrededor de 20%, típicamente, menos de alrededor de 15%.

Ensayo 5: Modelo In vitro de Biodisponibilidad Oral: Ensayo de Permeación Caco-2 El ensayo de permeación Caco-2 se realizó para el modelo de capacidad de los compuestos de prueba para pasar a través del intestino y quedarse en el torrente sanguíneo después de la administración oral. Se determina la relación a la cual los compuestos de prueba en la solución permea la monocapa celular diseñada para imitar la unión estrecha de las monocapas del intestino delgado humano. Se obtienen células Caco-2 (colon, adenocarcinoma; humanas) del ATCC (American Type Culture Collection; Rockville, MD) . Para el estudio de permeación, las células se siembran a una densidad de 63,000 células/cm2 en filtros de policarbonato de pozos transversales previamente humedecidos (Costar; Cambridge, MA) . La monocapa celular se forma después de 21 días en cultivo. Después del cultivo celular en la placa de pozos transversales, la membrana que contiene la monocapa celular se retira de la placa de pozo transversal y se inserta en la cámara de difusión (Costar; Cambridge, MA) . La cámara de difusión se inserta en el bloque de calentamiento que se equipa con agua de circulación externa, termostáticamente regulada a 37°C para control de temperatura 95% 02/5% C02 a cada mitad de la cámara de difusión y se crea un patrón de flujo laminal a través de la monocapa celular, que es efectiva apra reducir la capa de límite sin agitar. El estudio de permeación se realizó con concentraciones de compuesto de prueba a 100 µ? y con 1C-manitol para monitorear la integridad de la monocapa. Todos los experimentos se conducen a 37°C durante 60 min. Las muestras se toman a 0, 30 y 60 min desde los lados tanto donador como receptor de la cámara. Las muestras se analizan por CLAR o conteo de escintilación líquida para el compuesto de prueba y concentraciones de manitol. El coeficiente de permeación (Kp) en cm/seg se calculó. En este ensayo, el valor Kp mayor a alrededor de 10 x 10-6 cm/seg se considera que indica una biodisponibilidad favorable. Los compuestos de la invención que se prueban en este ensayo exhiben valores Kp de entre alrededor de 10 x 10-6 cm/seg y alrededor de 50 x 10"6 cm/seg, típicamente entre alrededor de 20 x 10~6 cm/seg y alrededor de 40 x 10"6 cm/seg.

Ensayo 6 : Estudio Farmacocinético en la Rata Formulaciones de solución acuosa de los compuestos de prueba se preparan en ácido láctico al 0.1 % a un pH de entre alrededor de 5 y alrededor de 6. Se dosifican ratas Sprague-Dawley machos (cepa CD, Charles River Laboratories, Wilmington, MA) con compuestos de prueba por medio de administración intravenosa (IV) a una dosis de 2.5 mg/kg o por cebadura oral (PO) a una dosis de 5 mg/kg. El volumen de dosificación fue 1 mL/kg para IV y 2 mL/kg para administración PO. Se colectan muestras sanguíneas en serie de animales previamente dosificados, y a 2 (sólo IV), 5, 15, y 30 min, y a l, 2, 4, 8, y 24 horas después de la dosis. Las concentraciones de los compuestos de prueba en el plasma sanguíneo se determinaron por análisis de espectrometría de masa-cromatografía líquida (CL-EM/EM) (MDS SCIEX, API 4000, Applied Biosystems, Foster City, CA) con un límite más bajo de cuantificación de 1 ng/mL. Los parámetros farmacocinéticos estándar se evalúan por análisis no computacional (Modelo 201 para IV y Modelo 200 para PO) usando WinNonlin (Versión 4.0.1, Pharsight, Mountain View, CA) . El máximo en la curva de la concentración del compuesto de prueba en el plasma sanguíneo vs . tiempo se denota Cmax. El área bajo la curva concentración vs . tiempo desde el tiempo de dosificación para la última concentración medible (AUC (0-t) ) se calcula por la regla trapezoidal lineal. La biodisponibilidad oral (F(%)), esto es, la relación normalizada de dosis de AUC (0-t) por administración PO para AUC (0-t) por administración IV, se calcula como: F(%) = AUCpo/AUCIV X DOSÍSIV/DOSÍSPO 100% Los compuestos de prueba que exhiben valores más grandes de los parámetros Cmax, ÁUC(O-t), y F(%) en este ensayo se espera que tendan una biodisponibilidad mayor cuando se administran oralmente. Los compuestos de la invención que se prueban en este ensayo tienen valores Cmax en el rango desde alrededor de 0.1 hasta alrededor de 0.25 g/mL, y los valores AUC (0-t) en el rango desde alrededor de 0.4 hasta alrededor de 0.9 µg· r/mL. A modo de ejemplo, el compuesto del Ejemplo 1 tiene un valor Cmax de 0.17 g/mL, un valor AUC(O-t) de 0.66 µg·h.r/mL y biodisponibilidad oral (F(%)) en el modelo de rata de alrededor de 35%. Aunque la presente invención se ha descrito con referencia a modalidades específicas de la misma, se entenderá por aquellos expertos en el arte que pueden hacerse varios cambios y equivalentes pueden susbtituirse sin salirse del espíritu real y alcance de la invención. Además, muchas modificaicones pueden hacerse para adaptar una situación, material, composición de materia, proceso, etapa o etapas de proceso particular, al objetivo, espíritu y alcance de la presente invención. Todas las modificaciones se pretende que estén dentro del alcance de las reivindicaicones adjuntas a esto. Adicionalmente, todas las publicaicones, patentes, y documentos de patente citados anteriormente se incorporan para referencia en la presente por completo, como si bien se incorporan individualmente para referencia. Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (23)

1. Reivindicaciones Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones . 1. Un compuesto de la fórmula (I) : caracterizado porque: R1 es hidrógeno, halo, hidroxi, alquilo Ci_4 ó alcoxi C1-4 R2 es alquilo C3~4/ ó cicloalquilo C3_6; R3 es hidrógeno o alquilo Ci_3; R4 es -S(0)2R6 ó -C(0)R7; R5 es hidrógeno, alquilo Ci_3, alquilo C2-3 substituido con -OH o alcoxi C1-3, o -CH2-piridilo ; R6 es alquilo Ci_3; o, R5 y R6 tomados juntos forman alquilenilo C3-4; y R7 es hidrógeno, alquilo Ci_3 ó piridilo; o una sal o solvato o esteroisómero farmacéuticamente aceptable de los mismos .
2. 2. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque R5 es hidrógeno; alquilo C1-3; alquilo C2~3 substituido con -OH o alcoxi Ci_3; o -CH2-piridilo; y R6 es alquilo Ci_3.
3. 3. El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque R1 es hidrógeno o halo.
4. 4. El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque R2 es alquilo C3_4.
5. 5. El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque R4 es ~S(0)2R6.
6. 6. El compuesto de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque R4 es -S(0)2CH3.
7. 7. El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque R4 es -C(0)R7.
8. 8. El compuesto de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque R7 es hidrógeno o metilo.
9. 9. El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque R5 es hidrógeno o metilo.
10. 10. El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque: R1 es hidrógeno; R2 es alquilo C3_4 o cicloalquilo C4-5; R3 es hidrógeno ; R4 es -S(0)2R6 ó -C(0)R7; R5 es hidrógeno o alquilo Ci_3; R6 es alquilo C1-3 ; y R7 es hidrógeno o alquilo Ci_3.
11. 11. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque se selecciona de: { (1S, 3R, 5R) -8- [2-hidroxi~3- (metansulfonil-metil- amino)propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1- isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolinona-3-carboxílico { (1S, 3R, 5R) -8- [2-metoxi-3- (metansulfonil-metil- amino)propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1- isopropi1-2-oxo-1 , 2-dihidroquinolinona-3-carboxílico; ( (1S, 3R, 5R) -8- [3- (metansulfonil-piridin-3-ilmetil- amino) -2-metoxipropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinoline-3-carboxílico ; { (1S, 3R, 5R) -8- [2-hidroxi-3-metansulfonilamino) propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-???-1 , 2-dihidroquinolinona-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [3- (metansulfonil-piridin-3-ilmetil-amino) -2-hidroxipropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolin-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [ (R) -2-hidroxi-3- (metansulfonil-metil-amino) propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolina-3 -carboxílico,· { (1S, 3R, 5R) -8- [ (S) -2-hidroxi-3- (metansulfonil-metil-amino)propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolina~3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [2-hidroxi-3- [metil- (piridina-4-carbonil ) amino]propil ] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolinona-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [2-hidroxi-3- [ (piridina-4- carbonil) aminojpropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolinona-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [3- (acetil-metil-amino) -2-metoxipropil] -8- azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-???- 1 , 2-dihidroguinolina-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [2-metoxi-3- [metil- (piridina-4-carbonil) aminojpropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-di idrog inolinona-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [3- (acetil-piridin-3-ilmetil-amino) -2-metoxipropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidro-quinolina-3-carboxílico; ( (1S, 3R, 5R) -8- [3-acetilamino-2- idroxipropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-???-1 , 2-dihidro-quinolina-3~carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [3- (acetil-metil-amino) -2-hidroxipropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il} amida del ácido l-isopropil-2-oxo-1, 2-dihidro-quinolina-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [3- (formil-metil-amino) -2-hidroxipropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-1, 2-dihidro-quinolina-3-carboxilico; { (1S, 3R, 5R) -8- [3-formilamino-2-hidroxipropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il } amida del ácido l-isopropil-2-???-1 , 2-dihidro-quinolina-3-carboxílico; ( (1S, 3R, 5R) -8- [ (R) -3- (acetil-metil-amino) -2- hidroxipropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1- isopropil-2-oxo-l , 2-dihidro-quinolina-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [ (R) -3- (formil-metil-amino) -2- hidroxipropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3~il}amida del ácido 1- isopropil-2-oxo-l , 2-dihidro-quinolina-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [ (R) -2-hidroxi-3- (metansulfonil-metil- ammo) propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 5-bromo-l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolina-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [2-hidroxi-3- (metansulfonil- etilamino) propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolinona-3-carboxilico; { (1S, 3R, 5R) -8- [ (R) -2-hidroxi-3- (metansulfonilamino) ropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolinona-3-carboxílico; y { (1S, 3R, 5R) -8- [2-hidroxi-3- (1, l-dioxo-2-isotiazolidinil ) propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolinona-3-carboxílico; y sales farmacéuticamente aceptables y solvatos y estereoisómeros de los mismos.
12. 12. El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque se selecciona de: { (1S, 3R, 5R) -8- [2-hidroxi-3- (metansulfonil-metil-amino) propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1- isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolina-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [2-hidroxi-3- (metansulfonilamino) propil] - 8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2 oxo-1 , 2-dihidroquinolina-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [ (R) -2-hidroxi~3- (metansulfonil-metil-amino)propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1-isopropil-2-oxo-1 , 2-dihidroquinolina-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [ (S) -2- idroxi-3- (metansulfonil-metil-amino) propil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1-isopropil-2-oxo-l , 2~dihidroquinolina-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [3- (acetil-metil-amino) -2-hidroxipropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-1 , 2-dihidroguinolina-3-carboxí1ico; { (1S, 3R, 5R) -8- [3- ( formil-metil-amino) -2-hidroxipropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-1 , 2-dihidroquinolina-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [ (R) -3- (acetil-metil-amino) -2-hidroxipropil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1-isopropi1-2-oxo-1 , 2-dihidroquinolina-3-carboxílico; {(lS,3R,5R)-8-[(R)-3- ( formil-metil-amino ) -2-hidroxipropi 1 ]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il} amida del ácido l-isopropil-2 -oxo-1 , 2 -dihidroquinolina-3 -carboxílico ; {(lS,3R,5R)-8-[(R) -2-hidroxi-3 -(metansulfonilamino ) propil] -8-azabiciclo [3.2.1]oct-3- il}amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolina-3 -carboxí lico y sales farmacéuticamente aceptables y solvatos y es tereoisómeros de los mismos.
13. 13. El compuesto de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque se selecciona de : { (1S, 3R, 5R) -8- [2-hidroxi-3- (metansulfonil-metil-amino ) propil ] -8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il} amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2 -dihidroquinolina-3 -carboxí lico ; {(lS,3R,5R)-8-[(R) -2-hidroxi-3 - (metansulfonil-metil -amino )propil]-8-azabiciclo[3.2.l]oct-3-il} amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2 -dihidroquinolina-3 -carboxí lico ; { (lS,3R,5R)-8-[ (S) -2-hidroxi-3- (metansulfonil-metil- amino ) ropil ] - 8 -azabiciclo [3.2.1]oct-3-il} amida del ácido l-isopropil-2-oxo-l , 2-dihidroquinolina-3-carboxí lico ; {(lS,3R,5R)-8-[(R) -2 -hidroxi-3 - (metansulfonilamino ) propil] - 8 -azabiciclo [3.2.1]oct-3-il}amida del ácido 1 -isopropil-2 -oxo-1 , 2 -dihidroquinolina-3-carboxílico; y sales farmacéuticamente aceptables y solvatos y estereoisómeros de los mismos.
14. 14. Una composición farmacéutica caracterizada porque comprende una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 1 hasta 13 y un portador farmacéuticamente aceptable.
15. 15. Un compuesto de conformidad con cualesquiera dé las reivindicaciones 1 hasta 13, caracterizado porque es para uso en terapia.
16. 16. El uso de un compuesto de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 1 hasta 13 para la manufactura de un medicamento.
17. 17. El uso de conformidad con la reivindicación 16 en donde el medicamento es para el tratamiento de una condición medica en un mamífero asociado con la actividad del receptor 5-HT4.
18. 18. El uso de conformidad con la reivindicación 17 en donde la enfermedad o condición es un trastorno de movilidad reducida por el tracto gastrointestinal.
19. 19. Un proceso para preparar un compuesto de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 1 hasta 13, caracterizado porque comprende: (a) hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (III) : con el compuesto de la fórmula L—R4 en donde L es un grupo de partida, o L—R4 representa HO-C(0)R7; o (b) hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (VIII) : con un compuesto de la fórmula (IX) para proporcionar un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato o es tereoisómero del mismo.
20. 20. Un proceso para preparar un compuesto de la fórmula ( I ' ) , (G) caracterizado porgue R1 , R2, R4 , y R5 de conformidad con la reivindicación 1; o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato o es tereoisómero del mismo, en donde el proceso comprende hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (IV) : O una sal del mismo con un compuesto de la fórmula (XI ) : (XI) para proporcionar un compuesto de la fórmula o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato o es tereoisómero del mismo.
21. 21. El producto caracterizado porque se prepara mediante el proceso de conformidad con la reivindicación 19 o reivindicación 20.
22. 22. Un compuesto de la fórmula (III) : Caracterizado porque: R1 es hidrógeno, halo, hidroxi, alquilo Ci_4/ o alcoxi C1-4; R2 es alquilo C3-4, o cicloalquilo C3-6; R3 es hidrógeno o alquilo C1-3; R4 es -S(0)2R6 o -C(0)R7; y R5 es hidrógeno, alquilo C1-3, alquilo C2-3 substituido con -OH o alcoxi C1-3, o —CH2—piridilo ; o una sal o es tereoisómero o derivado protegido del mismo .
23. 23. Un método que estudia un sistema biológico o muestra que comprende un receptor 5-HT4, caracterizado porque comprende: (a) poner en contacto el sistema biológico o muestra con un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 hasta 13; y (b) determinar el efecto causado por el compuesto en el sistema biológico o muestra.