JP2007523175A - 5−ht4レセプターアゴニストとしてのインダゾール−カルボキシアミド化合物 - Google Patents
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Abstract
Description
(本発明の分野)
本発明は、5−HT4レセプターアゴニスト類として有用である、インダゾール−カルボキシアミド化合物に関している。本発明はまた、そのような化合物を含有する薬学的組成物、そのような化合物を5−HT4レセプター活性によって媒介される医学的状態を処置するために使用する方法、ならびにそのような化合物を調製するために有用である、プロセスおよび中間体に関している。
本発明は、5−HT4レセプターアゴニスト類として有用である、インダゾール−カルボキシアミド化合物に関している。本発明はまた、そのような化合物を含有する薬学的組成物、そのような化合物を5−HT4レセプター活性によって媒介される医学的状態を処置するために使用する方法、ならびにそのような化合物を調製するために有用である、プロセスおよび中間体に関している。
(技術の状態)
セロトニン(5−ヒドロキシトリプタミン、5−HT)は、中枢神経系中と末梢神経系中との両方において、身体の至る所に広く分布する神経伝達物質である。少なくとも7つのサブタイプのセロトニンレセプターが、同定されており、そしてこれらの異なるレセプターとセロトニンの相互作用は、広範に多様な生理学的機能と結びつけられる。したがって、特定の5−HTレセプターのサブタイプを標的とする治療因子を開発することにおいて、相当な関心が存在している。
セロトニン(5−ヒドロキシトリプタミン、5−HT)は、中枢神経系中と末梢神経系中との両方において、身体の至る所に広く分布する神経伝達物質である。少なくとも7つのサブタイプのセロトニンレセプターが、同定されており、そしてこれらの異なるレセプターとセロトニンの相互作用は、広範に多様な生理学的機能と結びつけられる。したがって、特定の5−HTレセプターのサブタイプを標的とする治療因子を開発することにおいて、相当な関心が存在している。
とりわけ、5−HT4レセプターのキャラクタリゼーション、およびこれらのレセプターと相互作用する薬学的な因子の同定が、近年の活動の中心である。(例えば、非特許文献1による総説を参照のこと)。5−HT4レセプターアゴニストは、胃腸管の運動性を減少させる障害の処置に対して有用である。そのような障害としては、過敏性腸管症候群(IBS)、慢性の便秘、機能性消化不良、遅延胃内容排出、胃食道逆流疾患(GERD)、胃不全麻痺、手術後の腸閉塞、偽閉塞、および薬剤誘発により遅延される輸送が挙げられる。さらに、いくつかの5−HT4レセプターアゴニスト化合物が、中枢神経系障害(例えば、認知の障害、行動の障害、気分の障害、および自立神経機能の制御障害)の処置において使用され得ると示されている。
Langlois and Fischmeister,J.Med.Chem.2003,46,319−344
Langlois and Fischmeister,J.Med.Chem.2003,46,319−344
5−HT4レセプター活性を調節する薬学的な因子の、広範な実用性にもかかわらず、5−HT4レセプターアゴニスト化合物は、現在、臨床の用途においてほとんど存在しない。胃腸管の運動障害の処置のために広く利用された、一つの因子のシサプリドは、伝えられるところによると心臓への副作用のために、市場から撤退した。別の因子のプルカロプリド(prucalopride)の後期の臨床試験は、延期されている。
したがって、最小の副作用を有し望みの効果を果たす、新規の5−HT4レセプターアゴニストに関する必要性がある。好ましい因子は、とりわけ、改善された選択性、効能、薬物動態学の特性、および/または作用期間を有し得る。
本発明は、5−HT4レセプターアゴニスト活性を有する新規の化合物を提供する。とりわけ、本発明の化合物は、効力がありかつ選択性のある、5−HT4レセプターアゴニストであると見出されている。さらに、本発明の化合物は、経口投与に関する良いバイオアベイラビリティの前兆である、好ましい薬物動態学の特性を示すと、見出されている。
したがって、本発明は、式(I)
R1は、水素、ハロ、ヒドロキシ、C1−4アルキル、またはC1−4アルコキシであり;
R2は、C3−4アルキル、またはC3−6シクロアルキルであり;そして、
Wは、以下から選択され:
(i)式(II)の基:
Raが、C1−3アルキルもしくはテトラヒドロフラニルであり、C1−3アルキルが、−OHもしくはC1−3アルコキシで必要に応じて置換される、NC(O)Ra;
S(O)2;または
Rbが、−OH、C1−3アルコキシ、C5−6シクロアルキル、もしくは−S(O)2−C1−3アルキルで必要に応じて置換されるメチルである、NS(O)2Rbであり;
(ii)式(III)の基:
Ryが、−OHまたはC1−3アルコキシであり;
pが、0または1であり;
nが、1または2であり;そして
Yは:
Rcが、水素もしくはC1−3アルキルであり、かつRdが、−OHもしくはC1−3アルコキシで必要に応じて置換されるC1−3アルキルである、N(Rc)C(O)Rd、
または、Reが水素であり、かつRfが、−OH、C1−3アルコキシ、C5−6シクロアルキル、もしくは−S(O)2−C1−3アルキルで必要に応じて置換されるC1−3アルキルである、N(Re)S(O)2Rfであり;ならびに
(iii)式(IV)の基:
Rzが、水素、C1−3アルキルまたは−OHもしくはC1−3アルコキシで置換されるC2−3アルキルであり;
mが、1または2であり;
qが、1または2であり、mとqとの和が、4と等しくない条件であり;そして
Zは:
Rgが、−OHもしくはC1−3アルコキシで必要に応じて置換されるC1−3アルキルである、NC(O)Rg、
S(O)2;または
Rhが、−OH、C1−3アルコキシ、C5−6シクロアルキル、もしくは−S(O)2−C1−3アルキルで必要に応じて置換されるメチルである、NS(O)2Rhである。
本発明はまた、本発明の化合物と薬学的に受容可能なキャリアとを含有する、薬学的組成物を提供する。
本発明はまた、5−HT4レセプター活性に関連する、疾患または状態(例えば、胃腸管の運動性を減少させる障害)を、処置する方法を提供し、そしてこの方法は、哺乳類動物に、治療的に有効な量の本発明の化合物を投与する工程を包含する。
さらに、本発明は、哺乳類動物において5−HT4レセプター活性と関連する、疾患または状態を、処置する方法を提供し、そしてこの方法は、哺乳類動物に、治療的に有効な量の本発明の薬学的組成物を投与する工程を包含する。
本発明の化合物はまた、研究手段(すなわち、生物学的システムもしくは生物学的サンプルを研究するためか、または他の化合物の活性を研究するため)として使用され得る。したがって、この方法の別の局面において、本発明は、式(I)の化合物、その薬学的に受容可能な塩、その溶媒和物、またはその立体異性体を使用する方法を、生物学的システムもしくは生物学的サンプルを研究するための研究手段、新規の5−HT4レセプターアゴニストを発見するための研究手段として提供する。そして、この方法は、生物学的システムもしくは生物学的サンプルを、本発明の化合物と接触させる工程、および生物学的システムもしくは生物学的サンプルに対する化合物によって引き起こされる効果を決定する工程を包含する。
別の異なる局面において、本発明はまた、本明細書中において記載され、本発明の化合物を調製するために有用である、合成プロセスおよび中間体を提供する。
本発明はまた、本明細書中において記載される場合、本発明の化合物を、医療治療における使用のために提供し、かつ、5−HT4レセプター活性と関連した、疾患もしくは状態(例えば、哺乳類動物において、胃腸管の運動性を減少させる障害)を処置するための、処方物の製造もしくは薬剤の製造に関する、本発明の化合物の使用を提供する。
(本発明の詳細な説明)
本発明は、式(I)の新規のインダゾール−カルボキシアミド5−HT4レセプターアゴニスト、その薬学的に受容可能な塩、その溶媒和物、またはその立体異性体を提供する。以下の置換および値は、本発明の種々の局面についての典型例を提供することを意図される。これらの代表的な値は、そのような局面をさらに定義することを意図し、しかも他の値を除外することを意図せず、本発明の範囲を限定することを意図していない。
本発明は、式(I)の新規のインダゾール−カルボキシアミド5−HT4レセプターアゴニスト、その薬学的に受容可能な塩、その溶媒和物、またはその立体異性体を提供する。以下の置換および値は、本発明の種々の局面についての典型例を提供することを意図される。これらの代表的な値は、そのような局面をさらに定義することを意図し、しかも他の値を除外することを意図せず、本発明の範囲を限定することを意図していない。
本発明の特定の局面において、R1は、水素、ハロ、C1−4アルキルまたはC1−4アルコキシである。
他の特定の局面において、R1が、水素、ハロ、もしくはC1−4アルキルであるか、またはR1が、水素もしくはハロであるか、またはR1が、フルオロである。
さらに別の特定の局面において、R1は、水素である。
特定の局面において、R2が、C3−4アルキルまたはC3−6シクロアルキルである。
別の特定の局面において、R2が、C3−4アルキルである。代表的なR2基としては、n−プロピル、イソプロピル、n−ブチル、sec−ブチル、およびtert−ブチルが挙げられる。
別の特定の局面において、R2が、イソプロピルである。
さらに別の特定の局面において、R2は、シクロブチルまたはシクロペンチルである。
特定の局面において、Wは、全ての可変部分が式(II)におけるように定義される、式(II)の基である。
別の特定の局面において、Wは、RaがC1−3アルキルであり、かつRbがメチルである、式(II)の基である。
別の特定の局面において、Wは、XがNC(O)Raであり、Raが、式(II)におけるように定義される、式(II)の基である。他の特定の局面において、Wは、XがNC(O)Raであり、RaがC1−3アルキル(具体的には、メチル、エチル、n−プロピル、もしくはイソプロピルまたはテトラヒドロフラン−2−イルもしくはテトラヒドロフラン−3−イル)であるか、あるいはRaがC1−3アルキルである、式(II)の基である。
さらに別の特定の局面において、Wは、Xが4−アセチル−ピペラジン−1−イルの値を有するWを形成するNC(O)CH3である、式(II)の基である。
別の特定の局面において、Wは、XがS(O)2である、式(II)の基である。
別の特定の局面において、Wは、XがNS(O)2Rbであり、Rbが式(II)におけるように定義される、式(II)の基である。別の特定の局面において、Wは、XがNS(O)2Rbであって、RbがC5−6シクロアルキルもしくは−S(O)2−C1−3アルキルで必要に応じて置換されるCH3である、式(II)の基である。本局面の範囲内のおける、代表的なRbの値としては、メチル、−CH2シクロペンチル、−CH2シクロヘキシル、−CH2SO2CH3および−CH2SO2C2H5が挙げられる。
さらに別の局面において、Wは、Xが4−メタンスルホニル−ピペラジン−1−イルの値を有するWを形成するNS(O)2CH3である、式(II)の基である。
別の特定の局面において、Wは、Ryが−OHである、式(III)の基である。
別の特定の局面において、Wは、RyがC1−3アルコキシ(例えば、Ryが、−OCH3、−OC2H5、または−OC3H7)である、式(III)の基である。
別の特定の局面において、Wは、pが0であるか、またはpが1である、式(III)の基である。
他の特定の局面において、Wは、nが1である(すなわち、Wが、必要に応じて置換されるピロリジニル環である)か、またはnが2である(すなわちWが、必要に応じて置換されるピペリジニル環である)、式(III)の基である。
他の特定の局面において、Wは、YがN(Rc)C(O)Rdであり、RcおよびRdが、式(III)におけるように定義される、式(III)の基である。他の特定の局面において、Wは、Yが、Rcが水素であり、そしてRdがC1−3アルキルである、N(Rc)C(O)Rdである、式(III)の基である。
別の特定の局面において、Wは、YがN(Rc)C(O)Rdであり、Rdが−OHまたはC1−3アルコキシで必要に応じて置換されるC1−3アルキルである、式(III)の基である。
本局面の範囲内における、代表的なRdの値としては、メチル、エチル、−CH2OH、および−CH(OH)CH3が挙げられる。
別の特定の局面において、Wは、YがNCH3C(O)CH3である、式(III)の基である。
さらに別の特定の局面において、Wは、YがNHC(O)CH3である、式(III)の基である。
別の特定の局面において、Wは、YがN(Re)S(O)2Rfであり、ReおよびRfが式(III)におけるように定義される、式(III)の基である。別の特定の局面において、Wは、YがN(Re)S(O)2Rfであり、RfがC5−6シクロアルキルまたは−S(O)2−C1−3アルキルで必要に応じて置換されるC1−3アルキルである、式(III)の基である。本局面の範囲における、代表的なRfの値としては、メチル、−CH2シクロペンチル、−CH2シクロヘキシル、−CH2SO2CH3および−CH2SO2C2H5が挙げられる。
別の特定の局面において、式(I)の化合物は、Wが、式(III)の基であり、pが0でありかつnが1である、化合物である。さらに別の特定の局面において、式(I)の化合物は、Wが、式(III)の基であり、pが0でありかつnが1であり、そしてYが、N(Rc)C(O)Rdである、化合物である。
別の特定の局面において、Wは、Rzが水素である、式(IV)の基である。
別の特定の局面において、Wは、RzがC1−3アルキル(例えば、メチル、エチルなど)である、式(IV)の基である。別の特定の局面において、Wは、Rzが−OHまたはC1−3アルコキシで置換されるC2−3アルキル(例えば、Rzが、ヒドロキシエチル、メトキシエチルなど)である、式(IV)の基である。別の特定の局面において、Wは、Rzがメチルである、式(IV)の基である。
特定の局面において、Wは、mが1である、式(IV)の基である。
別の特定の局面において、Wは、mが2である、式(IV)の基である。
特定の局面において、Wは、qが1である、式(IV)の基である。
別の特定の局面において、Wは、qが2である、式(IV)の基である。
特定の局面において、Wは、ZがNC(O)Rgであり、Rgが式(IV)におけるように定義される、式(IV)の基である。別の特定の局面において、Wは、ZがNC(O)Rgであり、Rgが−OHで必要に応じて置換されるC1−3アルキルであるか、またはRgがメチルである、式(IV)の基である。
特定の局面において、Wは、ZがS(O)2である、式(IV)の基である。
特定の局面において、Wは、ZがNS(O)2Rhであり、Rhが式(IV)におけるように定義される、式(IV)の基である。他の特定の局面において、Wは、ZがNS(O)2Rhであり、Rhが、C5−6シクロアルキルまたは−S(O)2−C1−3アルキルで必要に応じて置換されるメチルである、式(IV)の基である。代表的なRhの値としては、メチル、−CH2シクロペンチル、−CH2シクロヘキシル、−CH2SO2CH3および−CH2SO2C2H5が挙げられる。さらに別の他の特定の局面において、Wは、ZがNS(O)2CH3である、式(IV)の基である。
別の特定の局面において、式(I)の化合物は、Wが式(IV)の基であり、mが1でありかつqが1である、化合物である。さらに別の特定の局面において、式(I)の化合物は、Wが式(IV)の基であり、mが1であり、qが1であり、そしてRzがメチルである、化合物である。
一つの局面において、本発明は、R1が水素もしくはハロであり;R2がイソプロピルもしくはC4−5シクロアルキルであり;そしてWが式(I)におけるように定義される、式(I)の化合物を提供する。
別の局面において、本発明は式(I)の化合物を提供する。ここで:
R1は、水素またはハロであり;
R2は、C3−4アルキルまたはC4−5シクロアルキルであり;そして
Wは、以下から選択される:
(i)Xが、NC(O)CH3、S(O)2またはNS(O)2CH3である、式(II)の基;
(ii)pが0であり、nが1であり、そしてYがNCH3C(O)CH3である、式(III)の基;および
(iii)Rzがメチルであり、mが1であり、qが1であり、そしてZがNC(O)CH3、S(O)2またはNS(O)2CH3である、式(IV)の基。
R1は、水素またはハロであり;
R2は、C3−4アルキルまたはC4−5シクロアルキルであり;そして
Wは、以下から選択される:
(i)Xが、NC(O)CH3、S(O)2またはNS(O)2CH3である、式(II)の基;
(ii)pが0であり、nが1であり、そしてYがNCH3C(O)CH3である、式(III)の基;および
(iii)Rzがメチルであり、mが1であり、qが1であり、そしてZがNC(O)CH3、S(O)2またはNS(O)2CH3である、式(IV)の基。
別の局面において、本発明は、R1が水素もしくはハロであり、R2がC3−4アルキルもしくはC4−5シクロアルキルであり、そしてWが式(II)の基であり、XがNC(O)CH3、S(O)2もしくはNS(O)2CH3である、式(I)の化合物を提供する。
別の局面において、本発明は、式(V)
特定の言及されるものは、以下の化合物から構成され得る:
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(1,1−ジオキソ−1λ6−チオモルホリン−4−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−メタンスルホニル−ピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(3−(アセチル−メチル−アミノ)ピロリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((R)−3−(アセチル−メチルアミノ)ピロリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((S)−3−(アセチル−メチルアミノ)ピロリジン−1−イル)−エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−[(1−アセチル−ピロリジン−3−イル)−メチルアミノ]エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−[((R)−1−アセチル−ピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−[((S)−1−アセチル−ピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル]−8−アザ−ビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[(1−メタンスルホニル−ピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[((R)−1−メタンスルホニルピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[((S)−1−メタンスルホニルピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((1,1−ジオキソ−テトラヒドロ−1λ6−チオフェン−3−イル)メチルアミノ)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((R)−(1,1−ジオキソ−テトラヒドロ−1λ6−チオフェン−3−イル)メチルアミノ)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;および
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((S)−(1,1−ジオキソ−テトラヒドロ−1λ6−チオフェン−3−イル)メチルアミノ)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド。
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(1,1−ジオキソ−1λ6−チオモルホリン−4−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−メタンスルホニル−ピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(3−(アセチル−メチル−アミノ)ピロリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((R)−3−(アセチル−メチルアミノ)ピロリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((S)−3−(アセチル−メチルアミノ)ピロリジン−1−イル)−エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−[(1−アセチル−ピロリジン−3−イル)−メチルアミノ]エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−[((R)−1−アセチル−ピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−[((S)−1−アセチル−ピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル]−8−アザ−ビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[(1−メタンスルホニル−ピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[((R)−1−メタンスルホニルピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[((S)−1−メタンスルホニルピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((1,1−ジオキソ−テトラヒドロ−1λ6−チオフェン−3−イル)メチルアミノ)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((R)−(1,1−ジオキソ−テトラヒドロ−1λ6−チオフェン−3−イル)メチルアミノ)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;および
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((S)−(1,1−ジオキソ−テトラヒドロ−1λ6−チオフェン−3−イル)メチルアミノ)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド。
上で例示されるように、本発明の化合物は、不斉中心を含み得る。したがって、本発明は、そうでないと示されない限り、ラセミ混合物、純粋な立体異性体、および立体異性体を豊富にしたそのような異性体の混合物を含む。特定の立体異性体が示される場合、少ない量の他の立体異性体が、本発明の組成物中に存在し得ると、当業者によって理解される。そして、そうでないと示されないかぎり、全体として組成物の有用性は、そのような他の異性体の存在によって、排除されないということを条件とする。
(定義)
本発明の、化合物、組成物および方法を説明する場合、以下の用語は、そうでないと示されない限り、以下の意味を有する。
本発明の、化合物、組成物および方法を説明する場合、以下の用語は、そうでないと示されない限り、以下の意味を有する。
「アルキル」との用語は、直鎖か、分枝か、またはそれらの組み合わせであり得る、一価の飽和炭化水素基を意味する。そうでないと定義されない限り、そのようなアルキル基は、典型的に、1〜10個の炭素原子を含む。代表的なアルキル基の例としては、メチル、エチル、n−プロピル(n−Pr)、イソプロピル(i−Pr)、n−ブチル(n−Bu)、sec−ブチル、イソブチル、tert−ブチル、n−ペンチル、n−ヘキシル、n−ヘプチル、n−オクチル、n−ノニル、n−デシルなどが挙げられる。
「アルコキシ」との用語は、上のように定義したアルキル基である、一価の−O−アルキル基を意味する。代表的なアルコキシ基の例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシなどが挙げられる。
「シクロアルキル」との用語は、単環式または多環式であり得る、一価の飽和炭素環式基を意味する。そうでないと定義されない限り、そのようなシクロアルキル基は、典型的に、3〜10個の炭素原子を含む。代表的なシクロアルキル基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロペンチル、シクロオクチルなどが挙げられる。
「ハロ」との用語は、フルオロ、クロロ、ブロモまたはヨードを意味する。
「治療的に有効な量」との用語は、処置の必要性がある患者に投与する場合、処置をもたらす十分な量を意味する。
本明細書中において用いられる場合、「処置」との用語は、患者(例えば、哺乳類動物(特にヒト))における、疾患の、障害の、または医学的状態の処置を意味し、以下:
(a)疾患、障害、または医学的状態を発生することから予防する工程(すなわち、患者の予防処置);
(b)疾患、障害、または医学的状態を改善する工程(すなわち、患者における、疾患、障害、もしくは医学的状態を取り除くか、または、疾患、障害、もしくは医学的状態の後退を引き起こすこと);
(c)疾患、障害、または医学的状態を抑制する工程(すなわち、患者における、疾患、障害、もしくは医学的状態の進行を遅くするか、または、疾患、障害、もしくは医学的状態の進行を止めること);あるいは、
(d)患者における、疾患、障害、または医学的状態の症状を軽減する工程を包含する。
(a)疾患、障害、または医学的状態を発生することから予防する工程(すなわち、患者の予防処置);
(b)疾患、障害、または医学的状態を改善する工程(すなわち、患者における、疾患、障害、もしくは医学的状態を取り除くか、または、疾患、障害、もしくは医学的状態の後退を引き起こすこと);
(c)疾患、障害、または医学的状態を抑制する工程(すなわち、患者における、疾患、障害、もしくは医学的状態の進行を遅くするか、または、疾患、障害、もしくは医学的状態の進行を止めること);あるいは、
(d)患者における、疾患、障害、または医学的状態の症状を軽減する工程を包含する。
「薬学的に受容可能な塩」との用語は、患者(例えば、哺乳類動物)に投与することに対して受容可能である、酸または塩から調製される塩を、意味する。そのような塩類は、薬学的に受容可能な、無機酸または有機酸からと、薬学的に受容可能な塩基からとに由来し得る。一般的に、本発明の化合物の薬学的に受容可能な塩は、酸類から調製される。
薬学的に受容可能な酸類から由来する塩としては、酢酸、アジピン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、ショウノウスルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、硝酸、パントテン酸、リン酸、プロピオン酸、サリチル酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、p−トルエンスルホン酸、キシナホ酸(xinafoic acid)(1−ヒドロキシ−2−ナフトエ酸)、ナフタレン−1,5−ジスルホン酸の塩などが挙げられるが、これらに限定されない。
「溶媒和物」との用語は、一つ以上の溶質分子(すなわち、本発明の化合物、または本発明の化合物の薬学的に受容可能な塩)および一つ以上の溶媒分子によって形成される、複合体または集合体を意味する。そのような溶媒和物は、一般的に、実質的に固定された溶質と溶媒とのモル比を有する結晶性固体である。代表的な溶媒の例としては、水、メタノール、エタノール、イソプロパノール、酢酸などが挙げられる。この溶媒が水である場合、形成される溶媒和物は、水和物である。
当然ながら、「または、薬学的に受容可能な塩、溶媒和物またはその立体異性体」との用語は、塩の、溶媒和物の、および立体異性体の、全ての並び替え(例えば、式(I)の化合物の立体異性体の薬学的に受容可能な塩の溶媒和物)を包含することを意図する。
「アミノ保護基」との用語は、アミノの窒素で望ましくない反応を妨げるために適切な保護基を意味する。代表的なアミノ保護基としては、ホルミル基;アシル基(例えば、アルカノイル基(例えば、アセチル));アルコキシカルボニル基(例えば、tert−ブトキシカルボニル(Boc));アリールメトキシカルボニル基(例えば、ベンジルオキシカルボニル(Cbz)および9−フロオロメトキシカルボニル(Fmoc));アリールメチル基(例えば、ベンジル(Bn)、トリチル(Tr)、および1,1−ジ−(4’−メトキシフェニル)メチル);シリル基(例えば、トリメチルシリル(TMS)およびtert−ブチルジメチルシリル(TBDMS);などが挙げられるが、これらに限定されない。
(一般的な合成手順)
本発明の化合物は、容易に入手できる出発物質から、次の一般的な方法および一般的な手順を用いて調製され得る。本発明の特定の局面は下のスキームにおいて例示されるが、本明細書中において記載される方法か、または当業者に公知の他の、方法、試薬、および出発物質を用いることによって、本発明の全ての局面が調製され得ると、当業者は認識する。当然のことながら、代表的なプロセス条件または好ましいプロセス条件(すなわち、反応温度、反応時間、反応物のモル比、溶媒、圧力など)が与えられた場合、他のプロセス条件はまた、そうでないと言及されない限り、用いられる。そのような条件は、慣用的な最適化手順によって、当業者により決定され得るが、最適な反応条件は、用いられる特定の反応物または特定の溶媒によって変化し得る。
本発明の化合物は、容易に入手できる出発物質から、次の一般的な方法および一般的な手順を用いて調製され得る。本発明の特定の局面は下のスキームにおいて例示されるが、本明細書中において記載される方法か、または当業者に公知の他の、方法、試薬、および出発物質を用いることによって、本発明の全ての局面が調製され得ると、当業者は認識する。当然のことながら、代表的なプロセス条件または好ましいプロセス条件(すなわち、反応温度、反応時間、反応物のモル比、溶媒、圧力など)が与えられた場合、他のプロセス条件はまた、そうでないと言及されない限り、用いられる。そのような条件は、慣用的な最適化手順によって、当業者により決定され得るが、最適な反応条件は、用いられる特定の反応物または特定の溶媒によって変化し得る。
さらに、当業者に明白であるように、従来の保護基は、特定の官能基を、望ましくない反応を受けることから妨げるために必要であり得る。特定の官能基に対する適切な保護基の選択、ならびに、保護および脱保護に対する適切な条件は、当該分野において周知である。例えば、多数の保護基ならびにそれらの概論および除去が、T.W.Greene and G.M.Wuts,Protecting Groups in Organic Synthesis,Third Edition,Wiley,New York,1999およびそこで引用される文献において説明される。
一つの合成方法において、式(I)の化合物は、スキームAにおいて例示されるように調製される。(以下のスキーム中において示される、置換基および可変部分は、そうでないと示されない限り、上で提供される定義を有する。)
スキームAにおいて示されるように、保護されたアミノアザビシクロオクタン、または一般的に、アミノトロパン1が、始めに、置換1H−インダゾールカルボン酸2と反応される。典型的に、この反応は始めに、芳香族希釈剤(例えばトルエン、ベンゼン、キシレンなど)中の、少なくとも1当量(典型的に、約1から約2当量)の活性化剤(例えば、塩化チオニルまたは塩化オキサリル)と接触させることによって、2を酸塩化物に変換させることにより行なわれる。この反応は典型的に、約80℃から約120℃までの温度の範囲で、約15分から約2時間、またはこの反応が実質的に完結するまで行なわれる。
この酸塩化物溶液は、典型的に、約1当量の1のアミノトロパンの2相の混合物に添加され、標準の手順によって抽出される保護された中間体を形成する。1のこの2相の混合物は、一般的に、上で用いられたように芳香族の希釈剤中に溶解され、そして過剰の塩基(例えば、水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウム)(例えば、約2当量から5当量の塩基)を含有する水溶液を添加することによって、調製される。
あるいは、カルボン酸2と中間体1とのアミドカップリングは、2を、活性化エステル(例えば、N−ヒドロキシスクシンイミド(NHS)エステルまたはp−ニトロフェニルエステル)または酸イミダゾールに変換し、次いでアミノトロパン1と反応させることによって行われ得る。さらに別の代わりにおいて、カルボン酸2は、カップリング剤(例えば、必要に応じて1−ヒドロキシ−7−アザベンゾトリアゾール(HOAt)と合わされる、1,3−ジクロロヘキシルカルボジイミド(DCC)、1−(3−ジメチルアミノプロピル)−3−エチルカルボジイミド(EDC)、またはベンゾトリアゾール−1−イルオキシトリピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(PyBop))の存在下、中間体1と反応される。
保護基P1は、標準の手順で取り除かれ、式3の中間体を提供する。例えば、保護基Bocは典型的に、酸(例えば、トリフルオロ酢酸)で処理することによって除去される。例えば、保護基Cbzは慣習的に、適切な金属触媒(例えば、炭素担持のパラジウム)の上で、水素化分解によって除去される。
次いで、中間体3は、ジメトキシアセトアルデヒドとの反応によって、還元的にN−アルキル化され、式4の中間体を提供する。この反応は典型的に、約1当量から約2当量の間の還元剤の存在下、3を、不活性な希釈剤中の約1当量から約4当量の間のジメトキシアセトアルデヒドと接触させ工程によって行なわれる。この反応は典型的に、周囲温度において、約1時間から2時間、またはこの反応が実質的に完結するまで行なう。適切な不活性な希釈剤としては、ジクロロメタン、トリクロロメタン、1,1,2,2−テトラクロロエタンなどが挙げられる。代表的な還元剤としては、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム、水素化ホウ素ナトリウムおよび水素化シアノホウ素ナトリウムが挙げられる。生成物4は、標準の手順によって単離される。
次に、ジメトキシエチル中間体4は、強酸(例えば、3N HClまたは6N HCl)の水溶液中において加水分解され、ジヒドロキシエチルの中間体5を提供する。中間体5が、アルデヒド水和物の形態に関してスキームAにおいて示されるものの、中間体5は、同義的にアルデヒドの形態で示され得ることが理解される。この反応は、典型的に、約50℃から約100℃の範囲中の温度において、約15分から約2時間行なわれるか、またはこの反応が実質的に完結するまで行なわれる。この生成物5は、塩の形態(例えば、HCl塩として)か、または中性種として、アルカリ抽出の後に単離され得る。あるいは、未精製の中間体5は、最終工程において、さらなる操作なしに用いられ得る。
最終的に、この中間体5は、式H−Wの、第1級アミンまたは第2級アミンと還元的に結合され、式(I)の生成物を提供する。典型的に、溶液は、不活性な希釈剤(例えば、ジクロロメタン)中の、約1当量から約3当量の間(例えば、2当量)のアミンおよび還元剤(例えば、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウムなど)から調製される。中間体5は、このアミン混合物に添加される。この反応は、典型的に、周囲温度において、約15分から約2時間行なわれるか、または反応が実質的に完結するまで行なわれる。式(I)の粗生成物は、従来の手順によって抽出される。この生成物は、不活性な希釈剤(例えば、エタノール、イソプロピルアルコール、メタノール、アセトニトリル、ジクロロエタン、またはそれらの混合物)から、結晶化によって塩の形態で精製される。
あるいは、スキームAに従って調製され得る式(I)の化合物は、R2が水素である式(I)の化合物を、N−アルキル化する工程によって調製され得る。このN−アルキル化反応は、典型的に、R2が水素である式(I)の化合物を、約1当量から約4当量までの間の、Lが脱離基(例えば、ヨードまたはブロモ)である式L−R2の化合物と、接触させることによって行なわれる。この反応は、典型的に、極性の非プロトン性溶媒(例えば、ジメチルホルムアミド)中において、約2当量から約4当量の間の強塩基(例えば、tert−ブトキシカリウム)の存在下、行なわれる。典型的に、この反応は、約60℃から約100℃の間の温度において、約6時間から約24時間の間行なわれるか、またはこの反応が実質的に完結するまで行なわれる。
本出願において説明され、この反応において使用される、保護されたアミノトロパン1は、容易に入手できる開始材料から調製される。例えば、保護基P1がBocである場合、保護されたエンドアミノトロパン1’は、スキームBにおいて例示される手順によって調製される。
中間体8は、典型的に、少し過剰なジカルボン酸ジ−tert−ブチル(一般に、(Boc)2O)(例えば、約1.1当量)と、水素雰囲気下、遷移金属触媒存在下反応して、Bocによって保護された中間体9の3−オキソ−8−アザビシクロ[3.2.1]オクタン−8−カルボン酸tert−ブチルエステルを提供する。この反応は、典型的に、周囲温度において、約12時間から約72時間、行なわれる。最終的に、中間体9は、遷移金属触媒の存在下、不活性な希釈剤(例えば、メタノール)中の大いに過剰量(例えば、少なくても約25当量)のギ酸アンモニウムと接触させられ、高い立体特異性を有する(例えば、エンドのエキソに対する比が>99%)エンド配置生成物1’を提供する。この反応は、典型的に、周囲温度において、約12時間から約72時間の間、行なうか、または反応が実質的に完結するまで行なう。ギ酸アンモニウム試薬を、部分ずつ添加することが、有利である。例えば、中間体9は、最初の部分である、約15当量から約25当量のギ酸アンモニウムと接触される。約12時間から約36時間の間隔の後、さらなる部分である、約5当量から約10当量のギ酸アンモニウムが、添加される。次の添加は、同様の間隔の後、繰返され得る。生成物1’は、従来の手順(例えば、アルカリ抽出)によって、精製され得る。
1H−インダゾールカルボン酸2は、当該分野において公知の手順によって、容易に調製される。そしてこの化合物は、例えば、Harada et al. Chem. and Pharm Bull.1995,43,1912−30中の文献、および下の実施例において説明される。
アミン類H−Wは、購入可能であるか、または一般の開始材料から、標準の手順によって、容易に調製される。
さらに、本発明の代表的な化合物または代表的な中間体の調製に関する、特定の反応条件および他の手順に関係する、さらなる細部は、下の実施例において説明される。
したがって、方法の局面において、本発明は、式(I)の化合物、その塩、その立体異性体、またはその保護された誘導体を調製し、そしてこのプロセスは、式5の化合物を、式H−Wのアミンと反応させる工程を包含し、式(I)の化合物、その塩、その立体異性体、またはその保護された誘導体を提供する。
本発明は、さらに、R1およびR2が、式(I)のように定義される式5の化合物、その塩、その立体異性体、またはその化合物の保護された誘導体を提供する。
代わりの合成方法において、スキームCにおいて例示されるように、式(I)の化合物は、置換1H−インダゾールカルボン酸2を、式10の中間体とカップリングすることによって調製される。
式10の中間体は、P1がアミノ保護基を示す、式11
式11の中間体は、容易に入手できる開始材料から、アルキル化、還元的アミノ化、および上記の他の反応に類似の手順を用いて、および/または、当業者に公知の代わりの反応を用いて、調製され得る。中間体11の調製のための例示的なプロセス経路(i)〜(v)は、Lが保護基(例えば、ブロモまたはヨード)を示す、スキームD
さらに別の代わりの合成方法において、式(I)の化合物は、スキームAにおいて示される式3の中間体を、式12の中間体とカップリングすることにより、調製される。スキームDにおいて、中間体12がアルデヒドの形態において示されるが、中間体12は、アルデヒド水和物の形態で、同義的に示され得ることが理解される。
(薬学的組成物)
本発明のインダゾールカルボキサミド化合物は、代表的に薬学的組成物の形態で患者に投与される。そのような薬学的組成物は、限定されないが、経口、経腸、経膣、経鼻、吸入、局所(経皮を含む)および投与の非経口モードを含む受容可能な投与経路のいずれかにより患者に投与され得る。
本発明のインダゾールカルボキサミド化合物は、代表的に薬学的組成物の形態で患者に投与される。そのような薬学的組成物は、限定されないが、経口、経腸、経膣、経鼻、吸入、局所(経皮を含む)および投与の非経口モードを含む受容可能な投与経路のいずれかにより患者に投与され得る。
従って、その組成物の局面の1つにおいて、本発明は、薬学的に受容可能なキャリアまたは賦形剤および式(I)の化合物の処置上効果的な量またはその薬学的に受容可能な塩を含有する薬学的組成物に向けられる。必要に応じて、そのような薬学的組成物は、望まれるなら、他の処置薬剤および/または処方薬剤を含み得る。
本発明の薬学的組成物は、代表的に本発明の化合物またはその薬学的に受容可能な塩の処置的に有効な量を含む。代表的に、そのような薬学的組成物は、約0.1〜約95重量%の活性薬剤;約1〜約70重量%を含む;例えば約5〜60重量%の活性薬剤を含む。
任意の従来のキャリアまたは賦形剤が本発明の薬学的組成物において用いられ得る。特定のキャリアまたは賦形剤の選択、あるいはキャリアまたは賦形剤の組合せは、ある特定の患者または医学的状態のタイプを処置するために用いられている投与モード、または疾患の状態に依存し得る。これに関して、ある特定の投与モードのための適した薬学組成物の調製は、十分に薬学の当業者の範囲内である。加えて、そのような組成物の成分は、例えばSigma、P.O.Box14508、St.Louis、MO 63178から商業的に入手できる。さらなる例として、従来の処方技術はRemington:The Science and Practice of Pharmacy、第20版、Lippincott Williams & White、Baltimore、Maryland(2000);およびH.C.Anselら、Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems、 第7版、Lippincott Williams & White、Baltimore、Maryland(1999)に記載される。
薬学的に受容可能なキャリアとして供給され得る代表的な材料の例は、限定されないが、以下の:(1)乳糖、グルコースおよびショ糖のような糖類;(2)トウモロコシデンプンおよびジャガイモデンプンのようなデンプン類;(3)微結晶性のセルロースのようなセルロース、およびナトリウムカルボキシメチルセルロース、エチルセルロースおよび酢酸セルロースのようなセルロースの誘導体;(4)粉末化したトラガカント;(5)麦芽;(6)ゼラチン;(7)タルク;(8)カカオ脂および坐剤ワックスのような賦形剤;(9)ピーナッツ油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油および大豆油のような油類;(10)プロピレングリコールのようなグリコール類;(11)グリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコールのようなポリオール類;(12)オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチルのようなエステル類;(13)寒天;(14)水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウムのような緩衝化薬剤;(15)アルギン酸;(16)発熱物質なしの水;(17)等張生理食塩水;(18)リンガー溶液;(19)エチルアルコール;(20)リン酸緩衝溶液;(21)薬学的組成物に用いられる他の無毒な適合性物質を含む。
本発明の薬学的組成物は、代表的に本発明の化合物を薬学的に受容可能なキャリアおよび1つ以上の任意の成分と完全におよび密接に混合するまたは混和することにより調製される。もし必要または望まれるならば、結果として生じる均一に混和された混合物は、それから錠剤、カプセル、丸剤および従来の手順や設備を用いるものなどに形成または充填され得る。
本発明の薬学的組成物は、1単位投薬形態で好ましくは包装される。用語「単位投薬形態」は、患者に投与するために適した物理的に別個の単位を称する(すなわち、単独かまたは1つ以上の付加的な単位との組合せで望ましい処置効果を生み出すために算出された予定した活性薬剤の量を含む各単位)。例えば、そのような単位投薬形態はカプセル、錠剤、丸剤などであり得る。
好ましい実施形態において、本発明の薬学的組成物は経口投与に適している。経口投与に適した薬学的組成物は、カプセル、錠剤、丸剤、口内錠、カシェ剤、糖衣錠、散剤、顆粒剤;または水性溶液または非水性溶液中に溶液または懸濁剤として;または水中油型の乳濁剤または油中水型の乳濁剤として;またはエリキシル剤またはシロップ剤として;など;活性成分として本発明の化合物の予定した量をそれぞれ含んでいる形態であり得る。
経口投与のために固形投薬形態(すなわち、カプセル、錠剤、丸剤など)を意図するとき、本発明の薬学的組成物は、代表的に活性成分として本発明の化合物とクエン酸ナトリウムまたは第2リン酸カルシウムのような薬学的に受容可能な1つ以上のキャリアを含有する。必要に応じてまたはあるいは、そのような固形投薬形態はまた:(1)デンプン、微結晶性セルロース、乳糖、ショ糖、グルコール、マンニトールおよび/またはケイ酸のような充填剤またはエクスランダー;(2)カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ショ糖および/またはアカシアのような結合剤;(3)グリセロールのような湿潤剤;(4)寒天−寒天(agar−agar)、炭酸カルシウム、ジャガイモまたはタピオカのデンプン、アルギン酸、あるケイ酸塩および/または炭酸ナトリウムのような崩壊剤;(5)パラフィンのような溶解遅延薬剤;(6)4級アンモニア化合物のような吸収促進剤;(7)セチルアルコールおよび/またはグリセロールモノステアリン酸のような湿潤剤;(8)カオリンおよび/またはベントナイト粘土のような吸収剤;(9)タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体のポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムおよび/またはその混合物のような潤滑剤;(10)着色剤;(11)緩衝化薬剤を含有する。
放出薬剤、湿潤剤、コーティング剤、甘味料、香味料および香料、防腐剤および抗酸化剤はまた本発明の薬学的組成物中に存在する。薬学的に受容可能な抗酸化剤の例は;(1)アスコルビン酸、システイン塩酸塩、重硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムなどのような水溶解性の抗酸化剤;(2)パルミチン酸アスコルビル酸、ブチル化ヒドロキシアニソール(BHA)、ブチル化ヒドロキシトルエン(BHT),レシチン、没食子酸プロピル、αトコフェロールなどのような脂溶性抗酸化剤;および(3)クエン酸、エチレンジアミン四酢酸(EDTA)、ソルビトール、酒石酸、リン酸などのような金属キレート剤を含む。錠剤、カプセル、丸剤などのためのコーティング剤は、酢酸フタル酸セルロース(CAP)、ポリ酢酸フタル酸ビニル(PVAP)、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、メタクリル酸−メタクリル酸エステルコポリマー、酢酸セルローストリメリテート(CAT),カルボキシメチルエチルセルロース(CMEC)、ヒドロキシプロピル酢酸メチルセルロースコハク酸塩(HPMCAS)などのような腸のコーティングに用いられるものを含む。
望ましくは、本発明の薬学的組成物はまた、1例として、さまざまな割合のヒドロキシプロピルメチルセルロース;他のポリマーマトリックス、リポソームおよび/またはマイクロスフィアを用いて、活性成分の遅延放出または制御された放出を提供するために処方され得る。
加えて、本発明の薬学的組成物は、必要に応じて不透明薬剤を含み得、そして処方され得るので、本発明の薬学的組成物は活性薬剤のみを放出し、または好ましくは胃腸管のある部分に必要に応じて遅延様式で放出する。用いられ得る包埋組成物の例は、重合体物質およびワックスを含む。この活性成分はまた、適切な場合、上記に記載した1つ以上の賦形剤とマイクロカプセルに入れた形態であり得る。
経口投与のための適した液体の投与形態は、実例として、薬学的に受容可能なエマルジョン、マイクロエマルジョン、溶液、懸濁剤、シロップ剤およびエリキシル剤を含む。そのような液体の投与形態は、活性成分および例えば水または他の溶媒のような不活性な希釈剤、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、1,3−ブチレングリコール、油(特に、綿実油、ラッカセイ油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油)、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステルおよびその混合物のような可溶化剤および乳化剤を代表的に含む。活性成分に加えて、懸濁剤は、例えばエトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微結晶化セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒天−寒天およびトラガカント、ならびにその混合物を含み得る。
あるいは、本発明の薬学的組成物は吸入により投与するために処方される。吸入により投与するための適した薬学的組成物は、代表的にエアロゾールまたは粉末の形態である。そのような組成物は、一般的に定量吸入器、粉末吸入器、ネブライザーまたは同様な送達デバイスのような周知の送達デバイスを用いて投与される。
加圧容器を用いて吸入により投与されるとき、本発明の薬学的組成物は、代表的に活性成分およびジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素または他の適したガスのような適した噴霧剤を含む。
加えて、薬学的組成物は、カプセルまたは本発明の化合物および粉末吸入器の使用のために適した粉末を含むカートリッジ(例えばゼラチンから形成される)の形態であり得る。適した粉末支持体は、1例として、乳糖またはデンプンを含む。
本発明の化合物はまた、公知の経皮送達システムおよび賦形剤を用いて経皮的に投与され得る。例えば、本発明の化合物は、ポリエチレングリコール、ポリエチレングリコールモノラウレート、アザシクロアルカン−2−オンなどのような浸透促進剤と混合され得、そしてパッチまたは同様な送達システム中に組み入れられ得る。ゲル化薬剤、乳化剤および緩衝液を含む付加的な賦形剤は、必要に応じてそのような経皮組成物に用いられ得る。
以下の処方は本発明の代表的な薬学的組成物を説明する。
(処方例A)
経口投与のための硬質ゼラチンカプセルは以下のように調製される:
経口投与のための硬質ゼラチンカプセルは以下のように調製される:
(処方例B)
経口投与のための硬質ゼラチンカプセルは以下のように調製される:
経口投与のための硬質ゼラチンカプセルは以下のように調製される:
(処方例C)
経口投与のためのカプセルは以下のように調製される:
経口投与のためのカプセルは以下のように調製される:
(処方例D)
経口投与のための錠剤は以下のように調製される:
経口投与のための錠剤は以下のように調製される:
(処方例E)
経口投与のための錠剤は以下のように調製される:
経口投与のための錠剤は以下のように調製される:
(処方例G)
経口投与のための懸濁液は以下のように調製される:
経口投与のための懸濁液は以下のように調製される:
(処方例H)
吸入による投与のための乾燥粉末は以下のように調製される:
吸入による投与のための乾燥粉末は以下のように調製される:
(処方例I)
定量吸入器における吸入による投与のための乾燥粉末は以下のように調製される:
定量吸入器における吸入による投与のための乾燥粉末は以下のように調製される:
代表的手順:5重量%の本発明の化合物および0.1重量%のレシチンを含む懸濁液は、200mLの脱塩水中に0.2gのレシチンが溶解された溶液中に、平均10μmより小さいサイズの微粉末化粒子として10gの活性成分を分散することにより調製される。この懸濁液は噴霧乾燥され、生じる物質は1.5μmより小さい平均直径を有する粒子に微粉末化される。この粒子は加圧した1,1,1,2−テトラフルオロエタンとカートリッジに充填される。
(処方例J)
注射可能な処方は以下のように調製される:
注射可能な処方は以下のように調製される:
(処方例K)
経口投与のためのカプセルは、以下のように調製される:
経口投与のためのカプセルは、以下のように調製される:
(処方例L)
経口投与のためのカプセルは、以下のように調製される:
経口投与のためのカプセルは、以下のように調製される:
特定の投与様式に適する本発明の化合物の形態(例えば、遊離塩基、薬学的塩または溶媒和物)はいずれも上記で考察される薬学的組成物において用いられ得る。
(有用性)
本発明のインダゾールカルボキサミド化合物は、5−HT4レセプターアゴニストであり、そのため5−HT4レセプターにより媒介される医学的状態または5−HT4レセプター活性と関連する医学的状態(すなわち、5−HT4レセプターアゴニストで処置することにより改善される医学的状態)を処置するのに有用であることが予想される。そのような医学的状態は、限定されないが、過敏性腸症候群(IBS)、慢性の便秘、機能性消化不良、胃内容排出の遅延、胃食道逆流症(GERD)、胃不全麻痺、糖尿病および特発性胃疾患、術後の腸閉塞、腸の擬性障害および薬物誘導性の遅延輸送を含む。加えて、いくつかの5−HT4レセプターアゴニスト化合物は、認知障害、行動異常、気分障害および自律神経機能の制御障害を含む中枢神経系障害の処置に用いられ得ることが示唆されてきた。
本発明のインダゾールカルボキサミド化合物は、5−HT4レセプターアゴニストであり、そのため5−HT4レセプターにより媒介される医学的状態または5−HT4レセプター活性と関連する医学的状態(すなわち、5−HT4レセプターアゴニストで処置することにより改善される医学的状態)を処置するのに有用であることが予想される。そのような医学的状態は、限定されないが、過敏性腸症候群(IBS)、慢性の便秘、機能性消化不良、胃内容排出の遅延、胃食道逆流症(GERD)、胃不全麻痺、糖尿病および特発性胃疾患、術後の腸閉塞、腸の擬性障害および薬物誘導性の遅延輸送を含む。加えて、いくつかの5−HT4レセプターアゴニスト化合物は、認知障害、行動異常、気分障害および自律神経機能の制御障害を含む中枢神経系障害の処置に用いられ得ることが示唆されてきた。
特に、本発明の化合物は、胃腸(GI)管の運動性を上昇させ、従ってヒトを含む哺乳動物において減少した運動性により起こるGI管の障害を処置するのに有用であることが予想される。そのようなGI運動性障害は、例として、慢性の便秘、便秘が顕著な過敏性腸症候群(C−IBS)、糖尿病および特発性胃疾患、ならびに機能的消化不良を含む。
そのため、1つの局面において、本発明は哺乳動物における胃腸管の運動性を上昇させる方法を提供し、その方法は哺乳動物に薬学的に受容可能なキャリアおよび本発明の化合物を含む治療的に有効な量の薬学的組成物を投与することを含んでいる。
GI管の減少した運動性の障害または他の5−HT4レセプターにより媒介される状態を処置するために用いられるとき。本発明の化合物は、代表的に1日1回投与または1日あたり複数回投与で経口的に投与されるが、他の投与形態も用いられ得る。用量あたり投与される活性薬剤の量または1日あたり投与される総量は、代表的に処置される状態、選択される投与経路、実際に投与される化合物およびその相対活性、年齢、体重および個々の患者の反応、患者の徴候の重篤度などを含む関連する状況を考慮して医師により決定される。
GI管の減少した運動性の障害または他の5−HT4レセプターにより媒介される障害を処置するのに適した用量は、活性薬剤約0.0007mg/kg/日〜約1mg/kg/日を含む、約0.0007mg/kg/日〜約20mg/kg/日の範囲と予想される。平均70kgのヒトでは、活性薬剤1日あたり約0.05mg〜約70mgに達する。
本発明の1つの局面において、本発明の化合物は、慢性の便秘を処置するために用いられる。慢性の便秘を処置するために用いられるとき、本発明の化合物は、代表的に1日1回投与または1日あたり複数回投与で経口的に投与される。慢性の便秘を処置するための用量は、1日あたり約0.05mg〜約70mgの範囲と予想される。
本発明の別の局面において、本発明の化合物は、過敏性腸症候群を処置するために用いられる。便秘が顕著な過敏性腸症候群を処置するために用いられるとき、本発明の化合物は、代表的に1日1回投与または1日あたり複数回投与で経口的に投与される。便秘が顕著な過敏性腸症候群を処置するための用量は、1日あたり約0.05mg〜約70mgの範囲と予想される。
本発明の別の局面において、本発明の化合物は、糖尿病性の胃不全麻痺を処置するために用いられる。糖尿病性の胃不全麻痺を処置するために用いられるとき、本発明の化合物は、代表的に1日1回投与または1日あたり複数回投与で経口的に投与される。糖尿病性の胃不全麻痺を処置するための用量は、1日あたり約0.05mg〜約70mgの範囲と予想される。
本発明のさらに別の局面において、本発明の化合物は機能的消化不良を処置するために用いられる。機能的消化不良を処置するために用いられるとき、本発明の化合物は、代表的に1日1回投与または1日あたり複数回投与で経口的に投与される。機能的消化不良を処置するための用量は、1日あたり約0.05mg〜約70mgの範囲と予想される。
本発明はまた、5−HT4レセプター活性と関連する疾患または状態を有する哺乳動物を処置する方法を提供し、この方法は哺乳動物に、治療的に有効な量の本発明の化合物または治療的に有効な量の本発明の化合物を含む薬学的組成物を投与することを含んでいる。
上記に記載したように、本発明の化合物は、5−HT4レセプターアゴニストである。そのため、本発明はさらに哺乳動物において5−HT4レセプターをアゴナイズする方法、本発明の化合物を哺乳動物に投与することを含む方法を提供する。加えて、本発明の化合物はまた、5−HT4レセプターを有する生物学的システムまたは生物学的サンプルを調査するまたは研究するため、または新しい5−HT4レセプターアゴニストを探索するための研究ツールとして有用である。さらに、本発明の化合物は、他の5−HTサブタイプのレセプター、特に5−HT3レセプターへの結合と比較して5−HT4レセプターへの結合選択性を示すので、そのような化合物は、生物学的システムあるいは生物学的サンプルにおいて5−HT4レセプターの選択的アゴニズムの効果を研究するために特に有用である。任意の5−HT4レセプターを有する適した生物学的システムまたは適した生物学的サンプルは、インビトロまたはインビボのどちらかで行われるそのような研究において用いられ得る。そのような研究に適した代表的な生物学的システムまたは生物学的サンプルは、限定されないが、細胞、細胞抽出物、原形質膜、組織サンプル、哺乳動物(マウス、ラット、モルモット、ウサギ、イヌ、ブタなどのような)などを含む。
本発明の本局面において、5−HT4レセプターを含む生物学的システムまたは生物学的サンプルは、5−HT4レセプターをアゴナイズする量の本発明の化合物と接触される。5−HT4レセプターをアゴナイズする効果は、その後放射性リガンド結合アッセイおよび機能アッセイのような従来の手順および従来の設備を用いて決定される。そのような機能アッセイは、細胞内のサイクリックアデノシン一リン酸(cAMP)におけるリガンド媒介性の変化、酵素アデニルシクラーゼ(cAMPを合成する)の活性におけるリガンド媒介性の変化、[35S]GTPγS(グアノシン5’−O−(γ−チオ)三リン酸)またはGTP−Euのようなグアノシン三リン酸(GTP)のアナログのGTPアナログのGDPアナログに対する交換を触媒するレセプターを介する単離された膜への取り込みにおけるリガンド媒介性の変化、遊離の細胞内カルシウムイオンにおけるリガンド媒介性の変化(例えば、蛍光連結性のイメージングプレートリーダーまたはMolecular Devices、Inc.のFLIPR(商標登録)で測定される)、およびマイトジェン活性化プロテインキナーゼ(MAPK)の活性の測定を含む。本発明の化合物は、上記に挙げるいずれの機能アッセイまたは同様な性質のアッセイにおいても5−HT4レセプターの活性化をアゴナイズし得るかまたは上昇させ得る。本発明の化合物の5−HT4レセプターアゴナイズする量は、代表的に約1ナノモーラー〜約500ナノモーラーの範囲である。
さらに、本発明の化合物は、新しい5−HT4レセプターアゴニストを探索するための研究ツールとして用いられ得る。本実施形態において、試験化合物または試験化合物群の5−HT4レセプター結合または機能的データは、もしあれば優位な結合活性または機能活性を有する試験化合物を同定するために、本発明の化合物の5−HT4レセプター結合または機能的データと比較される。本発明の本局面は、別個の実施形態として、関心のある試験化合物を同定するために、比較データの生成(適切なアッセイを用いる)および試験データの解析の両方を含む。
他の性質もあるが、本発明の化合物は、5−HT4レセプターの強力なアゴニストであり、放射性リガンド結合アッセイにおいて5−HT3レセプターサブタイプよりも5−HT4レセプターサブタイプに対して実質的に選択性を示すことが見出された。さらに、本発明の化合物は、ラットモデルにおいて、優位な薬物動態学的性質を証明した。本発明の化合物は、このように経口投与において高い生物利用能があることが予想される。加えて、これら化合物は、hERG心臓カリウムチャネルを発現している単離した細胞全体を用いるインビトロ電位固定モデルにおいて、カリウムイオン電流を阻害しないことが証明されている。この電位固定アッセイは、特に心臓の不整脈と関連しているいわゆるQT延長を引き起こす、心臓の再分極のパターンを変える薬学的薬剤の能力を予測する認められた前臨床の方法である(Caveroら、Opinion on Pharmacotherapy、2000、1、947−73、Ferminiら、Nature Reviews Drug Discovery、2003、2、439−447)。従って、本発明の化合物を含む薬学的組成物は、そのような心臓の副作用がないことが予想される。
それらの性質、および本化合物の有用性は、当業者において周知のさまざまなインビトロアッセイおよびインビボアッセイを用いて証明され得る。代表的なアッセイは、以下の実施例においてさらに詳細に記載される。
(実施例)
次に述べる、合成の実施例および生物学的な実施例は、本発明を例示するために示されるのであって、いかなるように、本発明の範囲を限定するように解釈されない。下の実施例において、次の略号は、そうでないと示されない限り、以下の意味を有する。下に定義されない略号は、それらの一般に認められる意味を有する。
Boc=tert−ブトキシカルボニル
(Boc)2O=ジカルボン酸ジ−tert−ブチル
DCM=ジクロロメタン
DMF=N,N−ジメチルホルムアミド
DMSO=ジメチルスルホキシド
EtOAc=酢酸エチル
mCPBA=m−クロロ安息香酸
MeCN=アセトニトリル
MTBE=tert−ブチルメチルエーテル
PyBop=ヘキサフルオロリン酸ベンソトリアゾール−1−イルオキシトリピロリジノホスホニウム
Rf=保持因子
RT=室温
TFA=トリフルオロ酢酸
THF=テトラヒドロフラン
試薬(第二級アミン類を含む)および溶媒は、市販の供給業者(Aldrich、Fluka、Sigmaなど)から購入され、さらなる精製なしに用いられた。反応は、そうでないと言及されない限り、窒素圧下行なわれた。反応混合物の推移は、薄層クロマトグラフィー(TLC)、分析高速液体クロマトグラフィー(anal.HPLC)および質量分析によってモニターされ、これらの詳細は下に示され、そして反応の特定の実施例中において、別々に示される。反応混合物は、各々の反応において明確に記載されるように、処理される;一般に、それらは、抽出および他の精製方法(例えば、温度依存性の結晶化、溶媒依存性の結晶化、および沈殿)によって精製される。さらに、反応混合物は、分取HPLCによって、所定通りに精製される:一般の実験手順が、下に記載される。反応生成物のキャラクタリゼーションは、所定通りに、質量分析法および1H−NMR分光法によって、行なわれる。NMR測定のために、試料を、重水素化された溶媒(CD3OD、CDCl3、またはDMSO−d6)中に溶解し、そして1H−NMRスペクトルは、標準の観察条件下、Varian Gemini 2000 instrument(300MHz)によって得た。質量分析による化合物の同定は、エレクトロスプレーイオン化法(ESMS)によって、Applied Biosystems(Foster City、CA)社製の、モデルAPI 150 EX機器またはAgilent(Palo Alto、CA)モデル1100 LC/MSD機器を使用して、行なわれた。
次に述べる、合成の実施例および生物学的な実施例は、本発明を例示するために示されるのであって、いかなるように、本発明の範囲を限定するように解釈されない。下の実施例において、次の略号は、そうでないと示されない限り、以下の意味を有する。下に定義されない略号は、それらの一般に認められる意味を有する。
Boc=tert−ブトキシカルボニル
(Boc)2O=ジカルボン酸ジ−tert−ブチル
DCM=ジクロロメタン
DMF=N,N−ジメチルホルムアミド
DMSO=ジメチルスルホキシド
EtOAc=酢酸エチル
mCPBA=m−クロロ安息香酸
MeCN=アセトニトリル
MTBE=tert−ブチルメチルエーテル
PyBop=ヘキサフルオロリン酸ベンソトリアゾール−1−イルオキシトリピロリジノホスホニウム
Rf=保持因子
RT=室温
TFA=トリフルオロ酢酸
THF=テトラヒドロフラン
試薬(第二級アミン類を含む)および溶媒は、市販の供給業者(Aldrich、Fluka、Sigmaなど)から購入され、さらなる精製なしに用いられた。反応は、そうでないと言及されない限り、窒素圧下行なわれた。反応混合物の推移は、薄層クロマトグラフィー(TLC)、分析高速液体クロマトグラフィー(anal.HPLC)および質量分析によってモニターされ、これらの詳細は下に示され、そして反応の特定の実施例中において、別々に示される。反応混合物は、各々の反応において明確に記載されるように、処理される;一般に、それらは、抽出および他の精製方法(例えば、温度依存性の結晶化、溶媒依存性の結晶化、および沈殿)によって精製される。さらに、反応混合物は、分取HPLCによって、所定通りに精製される:一般の実験手順が、下に記載される。反応生成物のキャラクタリゼーションは、所定通りに、質量分析法および1H−NMR分光法によって、行なわれる。NMR測定のために、試料を、重水素化された溶媒(CD3OD、CDCl3、またはDMSO−d6)中に溶解し、そして1H−NMRスペクトルは、標準の観察条件下、Varian Gemini 2000 instrument(300MHz)によって得た。質量分析による化合物の同定は、エレクトロスプレーイオン化法(ESMS)によって、Applied Biosystems(Foster City、CA)社製の、モデルAPI 150 EX機器またはAgilent(Palo Alto、CA)モデル1100 LC/MSD機器を使用して、行なわれた。
(分析HPLCに関する、一般のプロトコール)
粗化合物を、50%MeCN/H2O(0.1%TFA含有)中に、0.5〜1.0mg/mLの濃度で溶解し、そして以下の条件を用いて分析した:
カラム:Zorbax Bonus−RP(3.5μmの粒子径、2.1×50mm)
流速:0.5mL/min
検出波長:214nm、254nm、および280nm。
(分取HPLC精製に関する、一般のプロトコール)
粗化合物を、水中の50%酢酸に、50〜100mg/mLの濃度で溶解し、濾過し、そして次の手順を用いて分別した:
カラム:YMC Pack−Pro C18(50a×20mm;ID=5μm)
流速:40mL/min
移動相:A=90%MeCN/10%H2O/0.1%TFA、
B=98%H2O/2%MeCN/0.1%TFA
勾配:10%A/90%Bから50%A/50%Bまで、30分間にわたって(直線)
検出波長:214nm。
粗化合物を、50%MeCN/H2O(0.1%TFA含有)中に、0.5〜1.0mg/mLの濃度で溶解し、そして以下の条件を用いて分析した:
カラム:Zorbax Bonus−RP(3.5μmの粒子径、2.1×50mm)
流速:0.5mL/min
検出波長:214nm、254nm、および280nm。
(分取HPLC精製に関する、一般のプロトコール)
粗化合物を、水中の50%酢酸に、50〜100mg/mLの濃度で溶解し、濾過し、そして次の手順を用いて分別した:
カラム:YMC Pack−Pro C18(50a×20mm;ID=5μm)
流速:40mL/min
移動相:A=90%MeCN/10%H2O/0.1%TFA、
B=98%H2O/2%MeCN/0.1%TFA
勾配:10%A/90%Bから50%A/50%Bまで、30分間にわたって(直線)
検出波長:214nm。
(第2級アミン類の調製)
チオモルホリン−1,1−ジオキサイドを、チオモルホリンから、第2級アミンをN−Bocチオモルホリン((Boc)2O、MeOH)に付けて保護し、スルホンに対する酸化(mCPBA、CH2Cl2、0oC)し、そしてN−Boc基の脱保護によって調製し、遊離アミン(CF3CO2H、CH2Cl2)を得た。(m/z):C4H9NO2Sに関する[M+H]+理論値、136.04;実測値、135.9。
チオモルホリン−1,1−ジオキサイドを、チオモルホリンから、第2級アミンをN−Bocチオモルホリン((Boc)2O、MeOH)に付けて保護し、スルホンに対する酸化(mCPBA、CH2Cl2、0oC)し、そしてN−Boc基の脱保護によって調製し、遊離アミン(CF3CO2H、CH2Cl2)を得た。(m/z):C4H9NO2Sに関する[M+H]+理論値、136.04;実測値、135.9。
ピペラジンのN−スルホニル誘導体を、N−Bocピペラジンから、それぞれの塩化スルホニル(iPr2NEt、CH2Cl2、0oC)と反応させ、N−Boc基(CF3CO2H、CH2Cl2)を脱保護することによって調製した。1−メタンスルホニル−ピペラジン:1H−NMR(CDCl3;中性):δ(ppm)3.1(t,4H)、2.9(t,4H)、2.7(s,3H)。1−(メチルスルホニル)メタンスルホニル−ピペラジン:1H−NMR(CD3OD):δ(ppm)2.90(s,3H),3.02(m,4H),3.38(m,4H),4.61(s,2H)。
3−アセチルアミノピロリジンの、ラセミの不斉異性体または単一の不斉異性体は、塩化アセチル(iPr2NEt、CH2Cl2、0℃)でN1−Boc−3−アミノピロリジン(ラセミ化合物、3Rまたは3S)を処理し、N−Boc基(CF3CO2H、CH2Cl2)を脱保護することによって調製した。3−(アセトアミド)ピロリジン:1H−NMR(DMSO−d6;TFA塩):δ(ppm)4.2(5重線,1H),3.3−3.1(m,3H),2.9(m,1H),2.0(m,1H),1.8(brs,4H)。
3−((R)−2−ヒドロキシプロピオンアミド)ピロリジンは、N1−Boc−3−アミノピロリジン(L−乳酸、PyBOP、DMF、RT)のアミド化およびN−Boc基(CF3CO2H、CH2Cl2)を脱保護した後、調製した。(m/z):C7H14N2O2に関する[M+H]+理論値、159.11;実測値、159.0。1H−NMR(CD3OD;TFA塩):δ(ppm)4.4(5重線,1H),4.1(q,1H),3.5−3.4(m,2H),3.3−3.2(m,2H),2.3(m,1H),2.0(m,1H),1.3(d,3H)。
(3R)−アミノピロリジンのN3−アルカンスルホニル誘導体は、塩化プロピオニルスルホニルまたは塩化シクロヘキシルメチルスルホニル(i−Pr2NEt、CH2Cl2、0oC)でN1−Boc−(3R)−アミノピロリジンを処理し、N−Boc基(CF3CO2H、CH2Cl2)を脱保護することによって得た。
3−(N−アセチル−N−メチルアミド)ピペリジンを、N3−Cbzによって保護された3−アミノ−ピペリジン−1−カルボン酸t−ブチルエステル(De Costa,B.,et al.J.Med.Chem.1992,35,4334−43)から、4つの合成工程後、調製した:i)MeI、n−BuLi、THF、−78℃から室温;ii)H2(1atm)10%Pd/C、EtOH;iii)AcCl、i−Pr2NEt、CH2Cl2;iv)CF3CO2H、CH2Cl2。m/z:C8H16N2Oに関する[M+H]+、理論値:157.13、実測値:157.2。1H−NMR(CD3OD;TFA塩):δ(ppm)4.6(m,1H),3.3(m,1H),3.2(m,1H),3.0(m,1H),2.9(s,3H),2.8(m,1H),2.0(s,3H),1.9−1.7(m,4H)。
3−(N−アセチル−アミド)ピペリジンを、3−アミノ−ピペリジン−1−カルボン酸tert−ブチルエステルから、N−アセチル化そしてN−Boc基の脱保護の後、調製した:i)AcCl、i−Pr2NEt、CH2Cl2;ii)CF3CO2H、CH2Cl2。1H−NMR(CD3OD;TFA塩):δ(ppm)3.9(m,1H),3.3(dd,1H),3.2(m,1H),2.9(dt,1H),2.75(dt,1H),2.0−1.9(m,2H),1.9(s,3H),1.8−1.4(m,2H)。
3−アミノピペリジンのN3−アルカンスルホニル誘導体は、3−アミノ−ピペリジン−1−カルボン酸tert−ブチルエステルの、不斉体またはラセミ体を、それぞれの塩化アルカンスルホニル(i−Pr2NEt、CH2Cl2)と反応させ、N−Boc基(CF3CO2H、CH2Cl2)を脱保護することによって合成した。(3S)−3−(エタンスルホニルアミド)ピペリジン:1H−NMR(CD3OD):δ(ppm)1.29(t,3H,J1=7.4Hz),1.50−1.80(m,2H),1.90−2.10(m,2H),2.89(m,2H),3.05(q,2H,J1=7.4Hz),3.27(m,2H),3.40(dのd(br),1H),3.52(m,1H)。
3S−メチルスルホニルメタンスルホニルアミド−ピペリジン:1H−NMR(CD3OD):δ(ppm)2.13−2.30(m,2H),2.40−2.57(m,2H),2.98(m,2H),3.15(s,3H),3.21(m,2H),3.30(br d,1H),3.74(m,1H)。
3−(メチルアミノ)−1−アセチルピロリジンを、3−(メチルアミノ)−1−ベンジルピロリジン(TCI America)から、4つの工程後、調製した:i)(Boc)2O、MeOH、室温;ii)H2(1atm)、10%Pd/C、EtOH;iii)AcCl、i−Pr2NEt、CH2Cl2;iv)CF3CO2H、CH2Cl2。(m/z):C7H14N2Oに関する[M+H]+理論値、143.12;実測値、143.0。
3−(メチルアミノ)−1−(メタンスルホニル)ピロリジンを、3−(メチルアミノ)−1−ベンジルピロリジンから、4つの工程後、調製した:i)(Boc)2O、MeOH、室温;ii)H2(1atm)、10%Pd/C、EtOH;iii)CH3SO2Cl、i−Pr2NEt、CH2Cl2;iv)CF3CO2H、CH2Cl2。(m/z):C6H14N2O2Sに関する[M+H]+理論値、179.08;実測値、179.2。3R−メチルアミノ−1−(メタンスルホニル)ピロリジンを、(3R)−(メチルアミノ)−1−ベンジルピロリジンから、類似の方法で調製した。
テトラヒドロ−3−チオフェンアミン−1,1−ジオキサイドの誘導体は、下記のプロトコール(Loev,B.J.Org.Chem.1961,26,4394−9)に従い、3−スルホレンを、メタノール中の必要条件の1級アミン(触媒KOH、室温)と反応させることによって調製した。N−メチル−3−テトラヒドロチオフェンアミン−1,1−ジオキサイド(TFA塩):1H−NMR(DMSO−d6):δ(ppm)9.4(brs,2H),4.0−3.8(5重線,1H),3.6−3.5(dd,1H),3.4−3.3(m,1H),3.2−3.1(m,2H),2.5(s,3H),2.4(m,1H),2.1(m,1H)。N−2−(1−ヒドロキシ)エチル−3−テトラヒドロチオフェンアミン−1,1−ジオキサイド:(m/z):C6H13NO3Sに関する[M+H]+理論値、180.07;実測値、180.2。
N−メチル−テトラヒドロ−2H−チオピラン−4−アミン−1,1−ジオキサイドを、テトラヒドロ−4H−チオピラン−4−オンから調製した:i)MeNH2、NaBH4;ii)(Boc)2O、MeOH;iii)mCPBA、CH2Cl2、0oC;iv)CF3CO2H、CH2Cl2。(m/z):C6H13NO2Sに関する[M+H]+理論値、164.07;実測値、164.9。1H−NMR(CD3OD;TFA塩):δ(ppm)3.4−3.1(m,5H),2.7(s,3H),2.4(brd,2H),2.1(brm,2H)。
1−アセチル−3−(メチルアミノ)ピペリジンを、N3−Cbzによって保護された3−メチルアミノ−ピペリジンから調製した:i)AcCl、i−Pr2NEt、CH2Cl2;ii)H2(1atm)、10%Pd/C、EtOH。1H−NMR(CD3OD):δ(ppm)4.0(m,1H),3.6(m,1H),3.4−3.2(m,2H),3.0(m,1H),2.6(s,3H),2.1(s,3H),1.8−1.6(m,4H)。
1−(メタンスルホニル)−3−(メチルアミノ)ピペリジンを、N3−Cbzによって保護された3−メチルアミノ−ピペリジンから、調製した:i)CH3SO2Cl、i−Pr2NEt、CH2Cl2;ii)H2(1atm)、10%Pd/C、EtOH。(m/z):C7H16N2O2Sに関する[M+H]+理論値、193.10;実測値、193.0。1H−NMR(DMSO−d6;TFA塩):δ(ppm)3.4(dd,1H),3.2(m,2H),3.10(s,3H),3.0−2.9(m,2H),2.8(s,3H),1.85−1.75(m,2H),1.6−1.4(m,2H)。
(実施例1.1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミドの合成)
(a.8−ベンジル−8−アザビシクロ[3.2.1]オクタン−3−オンの調製)
濃塩酸(30mL)を、不均一溶液である、水(170mL)中の2,5−ジメトキシテトラヒドロフラン(82.2g、0.622mol)に、攪拌しながら、添加した。0oC(氷浴)に冷却した別のフラスコにおいて、濃塩酸(92mL)を、水(350mL)中のベンジルアミン(100g、0.933mol)の溶液に、ゆっくりと添加した。この2,5−ジメトキシテトラヒドロフラン溶液を、約20分間攪拌し、水(250mL)で希釈し、次いでベンジルアミン溶液を添加し、次いで水(400mL)中の1,3−アセトンジカルボン酸(100g、0.684mol)の溶液を添加し、次いで水(200mL)中のリン酸水素ナトリウム(44g、0.31mol)の溶液を添加した。このpHを、pH1から約pH4.5までに、40%NaOHを用いて調整した。得られた透明でない薄い黄色の溶液を、一晩攪拌した。次いでこの溶液を、50%塩酸を用いてpH3からpH7.5までの酸性にし、85oCに加熱し、2時間攪拌した。この溶液を、室温に冷却し、40%NaOHを用いてpH12の塩基性にし、ジクロロメタン(3×500mL)で抽出した。合わせた有機層を、ブラインで洗浄し、乾燥し(MgSO4)、濾過し、減圧濃縮し、未精製の標題の中間体を、粘度の高い茶色の油(52g)として得た。
(a.8−ベンジル−8−アザビシクロ[3.2.1]オクタン−3−オンの調製)
濃塩酸(30mL)を、不均一溶液である、水(170mL)中の2,5−ジメトキシテトラヒドロフラン(82.2g、0.622mol)に、攪拌しながら、添加した。0oC(氷浴)に冷却した別のフラスコにおいて、濃塩酸(92mL)を、水(350mL)中のベンジルアミン(100g、0.933mol)の溶液に、ゆっくりと添加した。この2,5−ジメトキシテトラヒドロフラン溶液を、約20分間攪拌し、水(250mL)で希釈し、次いでベンジルアミン溶液を添加し、次いで水(400mL)中の1,3−アセトンジカルボン酸(100g、0.684mol)の溶液を添加し、次いで水(200mL)中のリン酸水素ナトリウム(44g、0.31mol)の溶液を添加した。このpHを、pH1から約pH4.5までに、40%NaOHを用いて調整した。得られた透明でない薄い黄色の溶液を、一晩攪拌した。次いでこの溶液を、50%塩酸を用いてpH3からpH7.5までの酸性にし、85oCに加熱し、2時間攪拌した。この溶液を、室温に冷却し、40%NaOHを用いてpH12の塩基性にし、ジクロロメタン(3×500mL)で抽出した。合わせた有機層を、ブラインで洗浄し、乾燥し(MgSO4)、濾過し、減圧濃縮し、未精製の標題の中間体を、粘度の高い茶色の油(52g)として得た。
メタノール(1000mL)中の粗中間体の溶液に、ジカルボン酸ジ−tert−ブチル(74.6g、0.342mol)を、0℃において添加した。この溶液を、室温に温め、一晩攪拌した。メタノールを、減圧下除去し、次いで得られた油を、ジクロロメタン(1000mL)中に溶解した。この中間体を、1M H3PO4(1000mL)中に抽出し、ジクロロメタン(3×250mL)で洗浄した。水層を、NaOH水溶液を用いてpH12の塩基性にし、ジクロロメタン(3×500mL)で抽出した。合わせた有機相を、乾燥し(MgSO4)、濾過し、減圧濃縮し、標題の中間体を、粘性の高い薄い茶色の油(54g)として生成した。1H−NMR(CDCl3)δ(ppm)7.5−7.2(m,5H,C6H5),3.7(s,2H,CH2Ph),3.45(brs,2H,CH−NBn),2.7−2.6(dd,2H,CH2CO),2.2−2.1(dd,2H,CH2CO),2.1−2.0(m,2H,CH2CH2),1.6(m,2H,CH2CH2).(m/z):C14H17NOに関する[M+H]+理論値、216.14;実験値、216.0。
(b.3−オキソ−8−アザビシクロ[3.2.1]オクタン−8−カルボン酸tert−ブチルエステルの調製)
EtOAc(300mL)中の8−ベンジル−8−アザビシクロ[3.2.1]オクタン−3−オン(75g、0.348mol)の溶液に、EtOAc(300mL)中のジカルボン酸ジ−tert−ブチル(83.6g、0.383mol、1.1当量)の溶液を添加した。この得られた溶液およびゆすぎ液(100mLEtOAc)を、窒素の気流下、23gの水酸化パラジウム(20重量%Pd、乾燥基準、炭素担持、約50%の水で湿潤;例、Pearlman触媒)を含む1LのParr社製の水素化反応容器に、添加した。この反応容器を、脱ガス(真空とN2とを5回交換)し、60psiの水素ガスで加圧した。シリカの薄相クロマトグラフィーによってモニターしながら、反応が完結するまで、この反応溶液を2日間攪拌し、60psiのH2圧を保つために必要に応じてH2を再び満した。次いで黒色の溶液を、Celite(登録商標)のパッド(pad)を通して濾過し、減圧濃縮し、標題の中間体を粘性の高い、黄色からオレンジ色の油(51g)として定量的に得た。これを、次の工程において、さらなる処理なしに用いた。1H NMR(CDCl3)δ(ppm)4.5(br,2H,CH−NBoc),2.7(br,2H,CH2CO),2.4−2.3(dd,2H,CH2CH2),2.1(brm,2H,CH2CO),1.7−1.6(dd,2H,CH2CH2),1.5(s,9H,(CH3)3COCON))。
EtOAc(300mL)中の8−ベンジル−8−アザビシクロ[3.2.1]オクタン−3−オン(75g、0.348mol)の溶液に、EtOAc(300mL)中のジカルボン酸ジ−tert−ブチル(83.6g、0.383mol、1.1当量)の溶液を添加した。この得られた溶液およびゆすぎ液(100mLEtOAc)を、窒素の気流下、23gの水酸化パラジウム(20重量%Pd、乾燥基準、炭素担持、約50%の水で湿潤;例、Pearlman触媒)を含む1LのParr社製の水素化反応容器に、添加した。この反応容器を、脱ガス(真空とN2とを5回交換)し、60psiの水素ガスで加圧した。シリカの薄相クロマトグラフィーによってモニターしながら、反応が完結するまで、この反応溶液を2日間攪拌し、60psiのH2圧を保つために必要に応じてH2を再び満した。次いで黒色の溶液を、Celite(登録商標)のパッド(pad)を通して濾過し、減圧濃縮し、標題の中間体を粘性の高い、黄色からオレンジ色の油(51g)として定量的に得た。これを、次の工程において、さらなる処理なしに用いた。1H NMR(CDCl3)δ(ppm)4.5(br,2H,CH−NBoc),2.7(br,2H,CH2CO),2.4−2.3(dd,2H,CH2CH2),2.1(brm,2H,CH2CO),1.7−1.6(dd,2H,CH2CH2),1.5(s,9H,(CH3)3COCON))。
(c.(1S,3R,5R)−3−アミノ−8−アザビシクロ[3.2.1]オクタン−8−カルボン酸tert−ブチルエステルの調製)
メタノール(1L)中の前の工程(75.4g、0.335mol)の生成物の溶液に、ギ酸アンモニウム(422.5g、6.7mol)、水(115mL)および65gの活性炭担持のパラジウム(乾燥基準において10%、約50%の水で湿潤;Degussa E101NE/Wタイプ)を、N2気流の下、メカニカルスターラーによって攪拌しながら添加した。24時間後と48時間後とに、さらなる部分のギ酸アンモニウム(132g、2.1mol)を、各々の時間において添加した。一度、反応の進行を止め、分析HPLCによってモニターする場合、Celite(登録商標)(>500g)を添加し、得られた濃い懸濁液を濾過し、次いで集めた溶液をメタノール(約500mL)でリンスした。この濾過物を合わせて、全てのメタノールを除去するまで、減圧濃縮した。次いで得られた濁った2相の溶液を、pH2、最終体積が約1.5Lから2.0Lになるまで、1Mリン酸で希釈し、ジクロロメタン(3×700mL)で洗浄した。水層を、40%のNaOH水溶液を用いてpH12まで塩基性にし、ジクロロメタン(3×700mL)で抽出した。合わせた有機層を、MgSO4によって乾燥し、濾過し、ロータリーエバポレーターによって濃縮し、次いで高真空に放置し、52g(70%)の標題の中間体(一般にN−Boc−エンド−3−アミノトロパン)を白色から薄い黄色の固体として得た。生成物のアミンのエキソに対するエンドの異性体比は、1H−NMR分析に基づき>99(分析HPLCにより、>96%純度)であった。1H NMR(CDCl3)δ(ppm)4.2−4.0(brd,2H,CHNBoc),3.25(t,1H,CHNH2),2.1−2.05(m,4H),1.9(m,2H),1.4(s,9H,(CH3)3OCON),1.2−1.1(br,2H).(m/z):C12H22N2O2についての[M+H]+理論値、227.18;実測値、227.2。分析HPLC(アイソクラチック法;2:98(A:B)から90:10(A:B)まで、5分間にわたって):保持時間=2.14分。
メタノール(1L)中の前の工程(75.4g、0.335mol)の生成物の溶液に、ギ酸アンモニウム(422.5g、6.7mol)、水(115mL)および65gの活性炭担持のパラジウム(乾燥基準において10%、約50%の水で湿潤;Degussa E101NE/Wタイプ)を、N2気流の下、メカニカルスターラーによって攪拌しながら添加した。24時間後と48時間後とに、さらなる部分のギ酸アンモニウム(132g、2.1mol)を、各々の時間において添加した。一度、反応の進行を止め、分析HPLCによってモニターする場合、Celite(登録商標)(>500g)を添加し、得られた濃い懸濁液を濾過し、次いで集めた溶液をメタノール(約500mL)でリンスした。この濾過物を合わせて、全てのメタノールを除去するまで、減圧濃縮した。次いで得られた濁った2相の溶液を、pH2、最終体積が約1.5Lから2.0Lになるまで、1Mリン酸で希釈し、ジクロロメタン(3×700mL)で洗浄した。水層を、40%のNaOH水溶液を用いてpH12まで塩基性にし、ジクロロメタン(3×700mL)で抽出した。合わせた有機層を、MgSO4によって乾燥し、濾過し、ロータリーエバポレーターによって濃縮し、次いで高真空に放置し、52g(70%)の標題の中間体(一般にN−Boc−エンド−3−アミノトロパン)を白色から薄い黄色の固体として得た。生成物のアミンのエキソに対するエンドの異性体比は、1H−NMR分析に基づき>99(分析HPLCにより、>96%純度)であった。1H NMR(CDCl3)δ(ppm)4.2−4.0(brd,2H,CHNBoc),3.25(t,1H,CHNH2),2.1−2.05(m,4H),1.9(m,2H),1.4(s,9H,(CH3)3OCON),1.2−1.1(br,2H).(m/z):C12H22N2O2についての[M+H]+理論値、227.18;実測値、227.2。分析HPLC(アイソクラチック法;2:98(A:B)から90:10(A:B)まで、5分間にわたって):保持時間=2.14分。
(d.1−イソプロピル−1H−インダソール−3−カルボン酸の調製)
メタノール(700mL)中に懸濁したインダソール−3−カルボン酸(40g、247mmol)に、濃H2SO4(10mL)を、攪拌しながら、ゆっくりと添加した。この混合物を、攪拌し、80℃において24時間還流した。この混合物を、冷却し、濾過し、減圧濃縮し、薄い黄色の固体を得た。この固体を、水(700mL)中に懸濁し、細かい粉に砕き、濾過によって収集し、水(約400mL)でリンスした。この生成物を、トルエン中に懸濁し、減圧下、乾燥状態までエバポレートし、インダソール−3−カルボン酸メチルエステルを薄い黄色の固体(45g、>95%純度)として得た。(m/z):C9H8N2O2に関する[M+H]+理論値、177.07;実測値、177.0。1H−NMR(CD3OD,300MHz):δ(ppm)8.0(1H,d),7.5(1H,d),7.4(1H,t),7.2(1H,t),3.9(3H,s)。
メタノール(700mL)中に懸濁したインダソール−3−カルボン酸(40g、247mmol)に、濃H2SO4(10mL)を、攪拌しながら、ゆっくりと添加した。この混合物を、攪拌し、80℃において24時間還流した。この混合物を、冷却し、濾過し、減圧濃縮し、薄い黄色の固体を得た。この固体を、水(700mL)中に懸濁し、細かい粉に砕き、濾過によって収集し、水(約400mL)でリンスした。この生成物を、トルエン中に懸濁し、減圧下、乾燥状態までエバポレートし、インダソール−3−カルボン酸メチルエステルを薄い黄色の固体(45g、>95%純度)として得た。(m/z):C9H8N2O2に関する[M+H]+理論値、177.07;実測値、177.0。1H−NMR(CD3OD,300MHz):δ(ppm)8.0(1H,d),7.5(1H,d),7.4(1H,t),7.2(1H,t),3.9(3H,s)。
氷浴中に冷やした無水テトラヒドロフラン(700mL)中のインダソール−3−カルボン酸メチルエステル(40.7g、231mmol)の溶液に、ゆっくりと、固体のカリウムtert−ブトキシド(28.3g、252mmol)を添加した。2−ヨードプロパン(iododopropane)(34.4mL、367mmol)を添加する前に、この混合物を、同じ温度において、1時間攪拌した。この最終の混合物を、周囲温度において12時間攪拌し、12時間リフラックスした。室温に冷却後、この混合物を、濾過し、収集した固体を、テトラヒドロフラン(100mL)でリンスした。この濾過物を合わせ、減圧下乾燥状態まで濃縮し、未精製の1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸メチルエステル(49.7g)を薄い黄色の油として得た。この粗材料を、フラッシュシリカゲルクロマトグラフィーによって、ヘキサン/酢酸エチル(9/1から3/1まで)で溶離し精製し、1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸メチルエステル(43g、197mmol、>99%純度)を得た。1H−NMR(CD3OD,300MHz):δ(ppm)8.1−8.0(1H,d),7.6(1H,d),7.4(1H,t),7.2(1H,t),5.0(1H,5重線),3.9(s,3H),1.5(6H,d)。
テトラヒドロフラン(400mL)中に溶解したメチルエステルの溶液に、1M NaOH(400mL)を添加した。この混合物を、周囲温度において、24時間攪拌した。この反応を、酢酸エチル(2×400mL)で洗浄することによって終結し、水層をとっておいた。この水層を、ゆっくりと、氷浴中の濃HCl(約40mL)を添加することによって酸性にし、このことが、薄い黄色の油の生成物の分離を導いた。この生成物を、酢酸エチル(1000mL)で抽出し、次いで有機層を、MgSO4によって乾燥し、減圧下エバポレートし、標題の中間体を薄い黄色から白色の固体(34g、>98%純度)として得た。これは、さらに、酢酸エチルから結晶化することによって精製し、標題の中間体を無色の針状晶として得た。(m/z):C11H12N2O2に関する[M+Na]+理論値、226.07;実測値、226.6。1H−NMR(CD3OD,300MHz):):δ(ppm)8.1−8.0(1H,d),7.6(1H,d),7.4(1H,t),7.2(1H,t),5.0(1H,5重線),1.5(6H,d)。
(e.(1S,3R,5R)−3−[1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボニル)アミノ]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクタン−8−カルボン酸tert−ブチルエステルの調製)
塩化チオニル(30.2mL;0.414mol)の添加の前に、トルエン(500mL)中の1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸(56.35g;0.276mol)の懸濁液を、攪拌し、5分間加熱した。100℃において15分間加熱後、この混合物は均一溶液になり、そしてこの溶液を同じ温度においてさらに90分攪拌し続けた。別の反応フラスコに中に、工程cにおいて調製されたように(1S,3R,5R)−3−アミノ−8−アザビシクロ[3.2.1]オクタン−8−カルボン酸tert−ブチルエステル(62.43g;0.276mol)を、250mLのトルエン中に溶解し、次いで250mLの水中に溶解したNaOH(66.3g)を添加した。この2相の混合物を、氷浴中において冷却した。上で調製されたインダゾールの酸塩化物の溶液を、室温において冷却し、15分にわたってこの2相の溶液に添加し、そしてこの溶液を氷浴中において激しく攪拌した。1.5時間攪拌した後、この反応混合物を、分液漏斗に移した。まず始めに水層をトルエン層(取っておいた)から分離し、EtOAc(2×500mL)で抽出した。このトルエン層を減圧濃縮し、得られた残渣を、有機抽出液(1L;EtOAc)中に溶解した。この溶液を、1M H3PO4(400mL)、飽和NaHCO3(400mL)で洗浄し、次いでブライン溶液(400mL)で洗浄した。MgSO4による乾燥後、この有機溶液を、減圧下乾燥状態までエバポレートし、119.2gの標題の中間体を得た。1H−NMR(DMSO−d6):δ(ppm)1.41(s,9H),1.51(d,6H),1.82(m,2H),1.97(bs,4H),2.09(m,2H),4.10(m,3H),5.10(七重線,1H),7.23(t,1H),7.42(t,1H),7.79(d,1H),7.82(d,1H),8.18(d,1H)。(m/z):C23H32N4O3に関する[M+H]+理論値:413.26;実測値、413.1。保持時間(分析HPLC:2−95%MeCN/H2O、6分にわたって)=4.85分。
塩化チオニル(30.2mL;0.414mol)の添加の前に、トルエン(500mL)中の1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸(56.35g;0.276mol)の懸濁液を、攪拌し、5分間加熱した。100℃において15分間加熱後、この混合物は均一溶液になり、そしてこの溶液を同じ温度においてさらに90分攪拌し続けた。別の反応フラスコに中に、工程cにおいて調製されたように(1S,3R,5R)−3−アミノ−8−アザビシクロ[3.2.1]オクタン−8−カルボン酸tert−ブチルエステル(62.43g;0.276mol)を、250mLのトルエン中に溶解し、次いで250mLの水中に溶解したNaOH(66.3g)を添加した。この2相の混合物を、氷浴中において冷却した。上で調製されたインダゾールの酸塩化物の溶液を、室温において冷却し、15分にわたってこの2相の溶液に添加し、そしてこの溶液を氷浴中において激しく攪拌した。1.5時間攪拌した後、この反応混合物を、分液漏斗に移した。まず始めに水層をトルエン層(取っておいた)から分離し、EtOAc(2×500mL)で抽出した。このトルエン層を減圧濃縮し、得られた残渣を、有機抽出液(1L;EtOAc)中に溶解した。この溶液を、1M H3PO4(400mL)、飽和NaHCO3(400mL)で洗浄し、次いでブライン溶液(400mL)で洗浄した。MgSO4による乾燥後、この有機溶液を、減圧下乾燥状態までエバポレートし、119.2gの標題の中間体を得た。1H−NMR(DMSO−d6):δ(ppm)1.41(s,9H),1.51(d,6H),1.82(m,2H),1.97(bs,4H),2.09(m,2H),4.10(m,3H),5.10(七重線,1H),7.23(t,1H),7.42(t,1H),7.79(d,1H),7.82(d,1H),8.18(d,1H)。(m/z):C23H32N4O3に関する[M+H]+理論値:413.26;実測値、413.1。保持時間(分析HPLC:2−95%MeCN/H2O、6分にわたって)=4.85分。
(f.1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−アザ−ビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミドの調製)
前の工程に関する生成物を、ジクロロメタン(200mL)中に溶解し、氷浴中において冷却し、それから200mLのトリフルオロ酢酸と混合した。この反応混合物を、1時間、周囲温度において攪拌した。次いでこの溶液を、フラスコ中のエチルエーテル(2L)に、攪拌しながら滴下し、モノ(トリフルオロ酢酸)塩(102.7g、乾燥後、2工程について収率87%)として、標題の中間体を得た。1H−NMR(DMSO−d6):δ(ppm)1.54(d,6H),2.05(m,2H),2.24(m,6H),4.03(s,2H),4.12(q,1H),5.09(七重線,1H),7.28(t,1H),7.45(t,1H),7.81(d,1H),8.00(d,1H),8.11(d,1H),8.54(bd,2H).(m/z):C18H24N4Oに関する[M+H]+理論値、313.20;実測値、313.1。保持時間(分析HPLC:2−95%MeCN/H2O、6分間にわたって)=2.65分。
(g.1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−(2,2−ジメトキシエチル)−8−アザ−ビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミドの調製)
500mLのジクロロメタン中に溶解した1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−アザ−ビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド(52.7g;0.124mol)の溶液に、ジイソプロピルエチルアミン(43.1mL)およびtert−ブチルメチルエーテル中のジメトキシアセトアルデヒド(濃度45%;44.5mL、0.173mmol)を添加した。周囲温度において35分間周囲攪拌後、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム(36.7g;0.173mol)を、この混合物に添加した。この反応は、90分後、水(50mL)および飽和NaHCO3溶液(100mL)を、氷浴中においてゆっくりと添加することによって止めた。この混合物を、500mLのジクロロメタンで希釈し、分液漏斗に移した。この有機層を集め、飽和NaHCO3(250mL)およびブライン溶液(350mL)で洗浄した。この溶液を、MgSO4によって乾燥し、減圧下エバポレートし、標題の中間体(58.8g)を得た。1H−NMR(CDCl3):δ(ppm)1.60(d,6H),1.77(m,2H),1.96−2.09(m,4H),2.29(m,2H),2.55(m,2H),3.33(m,2H),3.41(s,6H),4.33(q,1H),4.47(m,1H),4.87(七重線,1H),7.26(t,1H),7.37−7.46(m,2H),7.56(d,1H),8.36(d,1H)。(m/z):C22H32N4O3に関する[M+H]+理論値、401.26;実測値、401.3。保持時間(分析HPLC:2−50%MeCN/H2O6分間にわたって)=4.20分。
前の工程に関する生成物を、ジクロロメタン(200mL)中に溶解し、氷浴中において冷却し、それから200mLのトリフルオロ酢酸と混合した。この反応混合物を、1時間、周囲温度において攪拌した。次いでこの溶液を、フラスコ中のエチルエーテル(2L)に、攪拌しながら滴下し、モノ(トリフルオロ酢酸)塩(102.7g、乾燥後、2工程について収率87%)として、標題の中間体を得た。1H−NMR(DMSO−d6):δ(ppm)1.54(d,6H),2.05(m,2H),2.24(m,6H),4.03(s,2H),4.12(q,1H),5.09(七重線,1H),7.28(t,1H),7.45(t,1H),7.81(d,1H),8.00(d,1H),8.11(d,1H),8.54(bd,2H).(m/z):C18H24N4Oに関する[M+H]+理論値、313.20;実測値、313.1。保持時間(分析HPLC:2−95%MeCN/H2O、6分間にわたって)=2.65分。
(g.1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−(2,2−ジメトキシエチル)−8−アザ−ビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミドの調製)
500mLのジクロロメタン中に溶解した1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−アザ−ビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド(52.7g;0.124mol)の溶液に、ジイソプロピルエチルアミン(43.1mL)およびtert−ブチルメチルエーテル中のジメトキシアセトアルデヒド(濃度45%;44.5mL、0.173mmol)を添加した。周囲温度において35分間周囲攪拌後、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム(36.7g;0.173mol)を、この混合物に添加した。この反応は、90分後、水(50mL)および飽和NaHCO3溶液(100mL)を、氷浴中においてゆっくりと添加することによって止めた。この混合物を、500mLのジクロロメタンで希釈し、分液漏斗に移した。この有機層を集め、飽和NaHCO3(250mL)およびブライン溶液(350mL)で洗浄した。この溶液を、MgSO4によって乾燥し、減圧下エバポレートし、標題の中間体(58.8g)を得た。1H−NMR(CDCl3):δ(ppm)1.60(d,6H),1.77(m,2H),1.96−2.09(m,4H),2.29(m,2H),2.55(m,2H),3.33(m,2H),3.41(s,6H),4.33(q,1H),4.47(m,1H),4.87(七重線,1H),7.26(t,1H),7.37−7.46(m,2H),7.56(d,1H),8.36(d,1H)。(m/z):C22H32N4O3に関する[M+H]+理論値、401.26;実測値、401.3。保持時間(分析HPLC:2−50%MeCN/H2O6分間にわたって)=4.20分。
(h.1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−(2,2−ジヒドロキシエチル)−8−アザ−ビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミドの調製)
前の工程の生成物(55.2g)を、500mLの6M塩酸中に懸濁し、70℃において1時間加熱した。6M NaOH(800mL)のゆっくりとした添加により水層を塩基性にする前に、この反応混合物を0oCに冷却し、ジクロロメタン(500mL)で希釈した。この溶液を、800mLのジクロロメタンでさらに混合し、分液漏斗に移した。有機層を集め、ブラインで洗浄し、MgSO4によって乾燥し、乾燥状態までエバポレートし、標題の中間体を得た(45.1g)。(m/z):C20H28N4O3に関する[M+H]+理論値、373.22;実測値、373.2。保持時間(分析HPLC:2−50%MeCN/H2O、6分間にわたって)=3.77分。
前の工程の生成物(55.2g)を、500mLの6M塩酸中に懸濁し、70℃において1時間加熱した。6M NaOH(800mL)のゆっくりとした添加により水層を塩基性にする前に、この反応混合物を0oCに冷却し、ジクロロメタン(500mL)で希釈した。この溶液を、800mLのジクロロメタンでさらに混合し、分液漏斗に移した。有機層を集め、ブラインで洗浄し、MgSO4によって乾燥し、乾燥状態までエバポレートし、標題の中間体を得た(45.1g)。(m/z):C20H28N4O3に関する[M+H]+理論値、373.22;実測値、373.2。保持時間(分析HPLC:2−50%MeCN/H2O、6分間にわたって)=3.77分。
(i.1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチル−ピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザ−ビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド、あるいは、N−[(3−エンド)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル]−1−(1−メチルエチル)−1H−インダゾール−3−カルボキシアミドの合成)
450mLのジクロロメタンを含むフラスコに、1−アセチルピペラジン(19.3g;0.151mol)、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム(34.4g)を添加した。この溶液を、前の工程の生成物(45.1g)を添加する前に、5分間攪拌した。最終の混合物を1時間攪拌し、この時点でこの反応を、HPLCおよび質量分析に基づいて完結させた。水(200mL)をゆっくりと添加し、混合物を600mLのジクロロメタンで希釈し、そして有機層を集める前に漏斗中で振とうした。この溶液を、1M NaOH(400mL)およびブライン(500mL)で洗浄した。MgSO4によって乾燥し、エバポレートし、標題の化合物を無色の固体(47.6g)として得た。粗生成物を、エタノールから、HCl塩(>30g;純度>98%)として、結晶化し精製した。1H−NMR(DMSO−d6;遊離塩基):δ(ppm)1.52(d,6H),1.69(m,2H),1.83(m,2H),1.97(s,3H),1.92−2.10(m,4H),2.33(t,2H),2.42(m,6H),2.50(m,2H),3.21(brs,2H),3.38(m,4H),4.09(q,1H),5.07(七重線,1H),7.26(t,1H),7.43(t,1H),7.79(d,1H),8.12(d,1H)。(m/z):C26H38N6O2に関する[M+H]+理論値、467.31;実測値、467.5。保持時間(分析HPLC:2−50%MeCN/H2O、6分間にわたって)=3.52分。
450mLのジクロロメタンを含むフラスコに、1−アセチルピペラジン(19.3g;0.151mol)、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム(34.4g)を添加した。この溶液を、前の工程の生成物(45.1g)を添加する前に、5分間攪拌した。最終の混合物を1時間攪拌し、この時点でこの反応を、HPLCおよび質量分析に基づいて完結させた。水(200mL)をゆっくりと添加し、混合物を600mLのジクロロメタンで希釈し、そして有機層を集める前に漏斗中で振とうした。この溶液を、1M NaOH(400mL)およびブライン(500mL)で洗浄した。MgSO4によって乾燥し、エバポレートし、標題の化合物を無色の固体(47.6g)として得た。粗生成物を、エタノールから、HCl塩(>30g;純度>98%)として、結晶化し精製した。1H−NMR(DMSO−d6;遊離塩基):δ(ppm)1.52(d,6H),1.69(m,2H),1.83(m,2H),1.97(s,3H),1.92−2.10(m,4H),2.33(t,2H),2.42(m,6H),2.50(m,2H),3.21(brs,2H),3.38(m,4H),4.09(q,1H),5.07(七重線,1H),7.26(t,1H),7.43(t,1H),7.79(d,1H),8.12(d,1H)。(m/z):C26H38N6O2に関する[M+H]+理論値、467.31;実測値、467.5。保持時間(分析HPLC:2−50%MeCN/H2O、6分間にわたって)=3.52分。
(実施例2:1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−(テトラヒドロフラン−2−カルボニル)ピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミドの合成)
ジクロロメタン(1.5mL)中のN−[2−テトラヒドロフロイル]ピペラジン臭化水素酸塩(40mg、0.15mmol)およびN,N−ジイソプロピルエチルアミン(12μL、0.3mmol)の溶液に、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム(64mg、0.3mmol)を添加し、次いで1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−(2,2−ジヒドロキシエチル)−8−アザ−ビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド(HCl塩)(39mg、0.1mmol)を添加した。この混合物を、周囲温度において15分間振とうした。減圧濃縮後、この反応混合物を、50%酢酸水溶液中に溶解し、分取HPLCによって精製し、標題の化合物のトリフロオロ酢酸塩(97%純度)を得た。(m/z):C29H42N6O3,に関する[M+H]+理論値:523.34;実測値、523.2。保持時間(分析HPLC:5−65%MeCN/H2O5分間にわたって)=2.7分。
ジクロロメタン(1.5mL)中のN−[2−テトラヒドロフロイル]ピペラジン臭化水素酸塩(40mg、0.15mmol)およびN,N−ジイソプロピルエチルアミン(12μL、0.3mmol)の溶液に、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム(64mg、0.3mmol)を添加し、次いで1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−(2,2−ジヒドロキシエチル)−8−アザ−ビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド(HCl塩)(39mg、0.1mmol)を添加した。この混合物を、周囲温度において15分間振とうした。減圧濃縮後、この反応混合物を、50%酢酸水溶液中に溶解し、分取HPLCによって精製し、標題の化合物のトリフロオロ酢酸塩(97%純度)を得た。(m/z):C29H42N6O3,に関する[M+H]+理論値:523.34;実測値、523.2。保持時間(分析HPLC:5−65%MeCN/H2O5分間にわたって)=2.7分。
(実施例3〜20)
実施例2のプロセスに類似のプロセスを用いて、適切な第2級アミンで、N−[2−テトラヒドロフロニル]ピペラジン臭化水素酸塩を置換することを除き、実施例3〜20の化合物を調製した。
実施例2のプロセスに類似のプロセスを用いて、適切な第2級アミンで、N−[2−テトラヒドロフロニル]ピペラジン臭化水素酸塩を置換することを除き、実施例3〜20の化合物を調製した。
(実施例3)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(1,1−ジオキソ−1λ6−チオモルホリン−4−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;(m/z):C24H35N5O3Sに関する[M+H]+理論値、474.25;実測値、474.2。保持時間(分析HPLC:5−75%MeCN/H2O、5分間にわたって)=2.20分間。
(実施例4)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−メタンスルホニルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;(m/z):C25H38N6O3Sに関する[M+H]+理論値、503.28;実測値、503.2。保持時間(分析HPLC:5−65%MeCN/H2O、4分間にわたって)=2.12分。
(実施例5)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−シクロヘキシルメタンスルホニルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;(m/z):C31H48N6O3Sに関する[M+H]+理論値、585.35;実測値、585.4。保持時間(分析HPLC:5−75%MeCN/H2O、5分間にわたって)=2.67分。
(実施例6)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−メタンスルホニルメタンスルホニルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;(m/z):C26H40N6O5S2に関する[M+H]+理論値、581.26;実測値、581.2。保持時間(分析HPLC:5−75%MeCN/H2O、5分間にわたって)=2.22分。
(実施例7)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(3−(アセチル−メチルアミノ)ピロリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;(m/z):C27H40N6O2に関する[M+H]+理論値、481.32;実測値、481.3。保持時間(分析HPLC:5−75%MeCN/H2O、5分間にわたって)=2.07分。
(実施例8)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(3−(アセチル−アミノ)ピロリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;(m/z):C26H38N6O2に関する[M+H]+理論値、467.31;実測値、467.4。保持時間(分析HPLC:5−75%MeCN/H2O、5分間にわたって)=1.89分。
(実施例9)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((R)−3−(アセチル−アミノ)ピロリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;(m/z):C26H38N6O2に関する[M+H]+理論値、467.31;実測値、467.4。保持時間(分析HPLC:5−75%MeCN/H2O、5分間にわたって)=2.04分。
(実施例10)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((S)−3−(アセチル−アミノ)ピロリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;(m/z):C26H38N6O2に関する[M+H]+理論値、467.31;実測値、467.4。保持時間(分析HPLC: 5−75% MeCN/H2O、5分間にわたって)=2.07分。
(実施例11)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[3−((S)−2−ヒドロキシプロピルオニルアミノ)ピロリジン−1−イル]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;(m/z):[M+H]+ C27H40N6O3に関する理論値、497.32;実測値、497.2。保持時間(分析HPLC:5−65%MeCN/H2O、5分間にわたって)=2.07分。
(実施例12)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[(3S,4S)−3−(アセチルメチルアミノ)−4−ヒドロキシピロリジン−1−イル]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;(m/z):C27H40N6O3に関する[M+H]+理論値、497.32;実測値、497.2。保持時間(分析HPLC:5−65%MeCN/H2O、5分間にわたって)=2.15分。
(実施例13)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((R)−3−エタンスルホニルアミノピロリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;(m/z):C26H40N6O3Sに関する[M+H]+理論値、517.30;実測値、517.2。保持時間(分析HPLC:5−75%MeCN/H2O、5分間にわたって)=2.12分。
(実施例14)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((R)−3−シクロヘキシルメタンスルホニルアミノピロリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;(m/z):C31H48N6O3Sに関する[M+H]+理論値、585.36;実測値、585.4。保持時間(分析HPLC:5−75%MeCN/H2O、5分間にわたって)=2.52分。
(実施例15)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[3−(アセチル−メチルアミノ)ピペリジン−1−イル]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;(m/z):C28H42N6O2に関する[M+H]+理論値、495.34;実測値、495.4。保持時間(分析HPLC:5−75%MeCN/H2O、5分間にわたって)=1.94分。
(実施例16)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(3−アセチルアミノピペリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;(m/z):C27H40N6O2に関する[M+H]+理論値、481.33;実測値、481.2。保持時間(分析HPLC:5−75%MeCN/H2O、5分間にわたって)=2.01分。
(実施例17)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(3−メタンスルホニルアミノピペリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;(m/z):C26H40N6O3Sに関する[M+H]+理論値、517.30;実測値、517.4。保持時間(分析HPLC:5−75%MeCN/H2O、5分間にわたって)=1.97分。
(実施例18)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((S)−3−メタンスルホニルアミノピペリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;(m/z):C26H40N6O3Sに関する[M+H]+理論値、517.30;実測値、517.4。保持時間(分析HPLC:5−75%MeCN/H2O、5分間にわたって)=1.99分。
(実施例19)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((S)−3−エタンスルホニルアミノピペリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;(m/z):C27H42N6O3Sに関する[M+H]+理論値、531.31;実測値、531.4。保持時間(分析HPLC:5−75%MeCN/H2O、5分間にわたって)=2.04分。
(実施例20)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((S)−3−メタンスルホニルメタンスルホニルアミノピペリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;(m/z):[M+H]+ C27H42N6O5S2に関する理論値、595.27;実測値、595.2。保持時間(分析HPLC:5−75%MeCN/H2O、5分間にわたって)=2.07分。
(実施例21:1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[(1−アセチルピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミドの合成)
ジクロロメタン(1.5mL)中の3−(メチルアミノ)−1−アセチルピロリジン(43mg、0.3mmol)およびN,N−ジイソプロピルエチルアミン(12μL、0.3mmol)の溶液に、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム(128mg、0.6mmol)を添加し、次いで1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−(2,2−ジヒドロキシエチル)−8−アザ−ビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド(HCl塩)(78mg、0.2mmol)を添加した。この混合物を、周囲温度において15分間振とうした。減圧濃縮後、この反応混合物を、50%酢酸水溶液中に溶解し、分取HPLCによって精製し、トリフルオロ酢酸塩の標題の化合物(56mg、99%純度)を得た。(m/z):C27H40N6O2に関する[M+H]+理論値、481.33;実測値、481.2。保持時間(分析HPLC:5−65%MeCN/H2O、5分間にわたって)=2.00分。
ジクロロメタン(1.5mL)中の3−(メチルアミノ)−1−アセチルピロリジン(43mg、0.3mmol)およびN,N−ジイソプロピルエチルアミン(12μL、0.3mmol)の溶液に、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム(128mg、0.6mmol)を添加し、次いで1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−(2,2−ジヒドロキシエチル)−8−アザ−ビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド(HCl塩)(78mg、0.2mmol)を添加した。この混合物を、周囲温度において15分間振とうした。減圧濃縮後、この反応混合物を、50%酢酸水溶液中に溶解し、分取HPLCによって精製し、トリフルオロ酢酸塩の標題の化合物(56mg、99%純度)を得た。(m/z):C27H40N6O2に関する[M+H]+理論値、481.33;実測値、481.2。保持時間(分析HPLC:5−65%MeCN/H2O、5分間にわたって)=2.00分。
(実施例22〜30)
実施例21のプロセスに類似のプロセスを用い、適切な第2級アミンで3−(メチルアミノ)−1−アセチルピロリジンを置換することを除き、実施例22〜30の化合物を、調製した。
実施例21のプロセスに類似のプロセスを用い、適切な第2級アミンで3−(メチルアミノ)−1−アセチルピロリジンを置換することを除き、実施例22〜30の化合物を、調製した。
(実施例22)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[((R)−1−アセチルピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;(m/z):C27H40N6O2に関する[M+H]+理論値、481.33;実測値、481.4。保持時間(分析HPLC:10−50%MeCN/H2O、5分間にわたって)=2.52分。
(実施例23)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[((S)−1−アセチルピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;(m/z):C27H40N6O2に関する[M+H]+理論値、481.33;実測値、481.4。保持時間(分析HPLC:10−50%MeCN/H2O、5分間にわたって)=2.52分。
(実施例24)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[(1−メタンスルホニルピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;(m/z):C26H40N6O3Sに関する[M+H]+理論値、517.30;実測値、517.2。保持時間(分析HPLC:5−75%MeCN/H2O、5分間にわたって)=2.04分。
(実施例25)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[((R)−1−メタンスルホニルピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;(m/z):C26H40N6O3Sに関する[M+H]+理論値、517.30;実測値、517.2。保持時間(分析HPLC:5−65%MeCN/H2O、5分間にわたって)=2.20分。
(実施例26)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[(1,1−ジオキソ−テトラヒドロ−1λ6−チオフェン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;(m/z):C25H37N5O3Sに関する[M+H]+理論値、488.27;実測値、488.2。保持時間(分析HPLC:5−75%MeCN/H2O、5分間にわたって)=2.22分。
(実施例27)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[(1,1−ジオキソ−テトラヒドロ−1λ6−チオフェン−3−イル)−(2−ヒドロキシエチル)アミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;(m/z):C26H39N5O4Sに関する[M+H]+理論値、518.28;実測値、518.2。保持時間(分析HPLC:5−65%MeCN/H2O、5分間にわたって)=2.25分。
(実施例28)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[(1−アセチル−ピペリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;(m/z):C26H38N6O2に関する[M+H]+理論値、495.34;実測値、495.4。保持時間(分析HPLC:5−75%MeCN/H2O、5分間にわたって)=1.95分。
(実施例29)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[(1,1−ジオキソ−ヘキサヒドロ−1λ6−チオピラン−4−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;(m/z):C26H39N5O3Sに関する[M+H]+理論値、502.29;実測値、502.2。保持時間(分析HPLC:5−65%MeCN/H2O、5分間にわたって)=2.12分。
(実施例30)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[(1−メタンスルホニルピペリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;(m/z):C27H42N6O3Sに関する[M+H]+理論値、531.31;実測値、531.4。保持時間(分析HPLC:5−75%MeCN/H2O、5分間にわたって)=2.07分。
(実施例31:5−フルオロ−1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド)の合成)
(a.5−フルオロ−1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸の調製)
5−フルオロ−1H−インダゾール−3−カルボン酸メチルエステルを、(Buu−Hoi,N.P.,et al.J.Hetereocyclic Chem.1964,1,239−41)において記載されたプロトコールにしたがって、調製した。1H−NMR(DMSO−d6):δ(ppm)7.8(dd,2H),7.35(dt,1H),3.8(s,3H)。メチルエステルを、カリウムtert−ブトキシドの存在下、還流しているTHF中で、ヨウ化イソプロピルを用い、N1においてアルキル化した。1H−NMR(CDCl3):δ(ppm)7.8(dd,1H),7.6(dd,1H),7.1(dt,1H),4.8(七重線,1H),1.6(d,6H)。次いでイソプロピルメチルエステルを、加水分解(1MNaOH/THF,RT)し、標題の中間体を提供した。
(a.5−フルオロ−1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸の調製)
5−フルオロ−1H−インダゾール−3−カルボン酸メチルエステルを、(Buu−Hoi,N.P.,et al.J.Hetereocyclic Chem.1964,1,239−41)において記載されたプロトコールにしたがって、調製した。1H−NMR(DMSO−d6):δ(ppm)7.8(dd,2H),7.35(dt,1H),3.8(s,3H)。メチルエステルを、カリウムtert−ブトキシドの存在下、還流しているTHF中で、ヨウ化イソプロピルを用い、N1においてアルキル化した。1H−NMR(CDCl3):δ(ppm)7.8(dd,1H),7.6(dd,1H),7.1(dt,1H),4.8(七重線,1H),1.6(d,6H)。次いでイソプロピルメチルエステルを、加水分解(1MNaOH/THF,RT)し、標題の中間体を提供した。
(b.5−フルオロ−1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−アザ−ビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミドの調製)
標題の中間体を、実施例1の部分のeおよびfの手順に従い、1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸の代わりに、前の工程の中間体を用いて、調製した。1H−NMR(DMSO−d6):δ(ppm)7.9(br,1H),7.7(dd,1H),7.6(dd,1H),7.2(dt,1H),4.9(m,1H),4.2(br,1H),4.0(br,2H),2.3−2.1(brm,8H),1.5(d,6H).(m/z):C18H23FN4Oに関する[M+H]+理論値、331.19;実測値、331.4。保持時間(分析HPLC:10−40%MeCN/H2O、6分間にわたって)=3.43分。
標題の中間体を、実施例1の部分のeおよびfの手順に従い、1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸の代わりに、前の工程の中間体を用いて、調製した。1H−NMR(DMSO−d6):δ(ppm)7.9(br,1H),7.7(dd,1H),7.6(dd,1H),7.2(dt,1H),4.9(m,1H),4.2(br,1H),4.0(br,2H),2.3−2.1(brm,8H),1.5(d,6H).(m/z):C18H23FN4Oに関する[M+H]+理論値、331.19;実測値、331.4。保持時間(分析HPLC:10−40%MeCN/H2O、6分間にわたって)=3.43分。
(c.5−フルオロ−1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−(2,2−ジメトキシエチル)−8−アザ−ビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミドの調製)
前の工程の生成物を、実施例1の工程gのプロセスに従い、ジメトキシアセトアルデヒドと反応し、標題の中間体を提供した。(m/z):C22H31FN4O3に関する[M+H]+理論値、419.25;実測値、419.3。
前の工程の生成物を、実施例1の工程gのプロセスに従い、ジメトキシアセトアルデヒドと反応し、標題の中間体を提供した。(m/z):C22H31FN4O3に関する[M+H]+理論値、419.25;実測値、419.3。
(d.5−フルオロ−1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−(2,2−ジヒドロエチル)−8−アザ−ビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミドの調製)
前の工程の中間体(1.0g)を、10mLの6M塩酸中に懸濁させ、70oCにおいて1時間加熱した。この反応混合物を、冷却し、減圧下乾燥状態までエバポレートし、塩酸塩の標題の中間体を得た。(m/z):C20H27FN4O3に関する[M+H]+理論値、391.21;実測値、391.4。
前の工程の中間体(1.0g)を、10mLの6M塩酸中に懸濁させ、70oCにおいて1時間加熱した。この反応混合物を、冷却し、減圧下乾燥状態までエバポレートし、塩酸塩の標題の中間体を得た。(m/z):C20H27FN4O3に関する[M+H]+理論値、391.21;実測値、391.4。
(e.5−フルオロ−1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミドの合成)
40mLのジクロロエタンを含むフラスコに、1−アセチルピペラジン(613mg;4.78mmol)および水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム(1.01g)を添加した。この溶液を、前の工程の生成物(約1g)を添加する前に、5分間攪拌した。この最終の混合物を、1時間攪拌し、この時点において反応は、HPLC分析および質量分析に基づき完結していた。水(20mL)をゆっくりと添加し、この混合物を300mLのジクロロメタンで希釈し、有機層を集める前に漏斗を使って振とうした。この有機層を、1M NaOH(100mL)およびブライン(100mL)で洗浄した。MgSO4による乾燥およびエバポレーションによって、標題の化合物を得、そしてこの化合物を、分取HPLCによって精製し、380mgの純粋なこの生成物をTFA塩として得た。1H−NMR(DMSO−d6;遊離塩基):δ(ppm)8.0(br,1H),7.8(dd,1H),7.6(dd,1H),7.23(dt,1H),5.0(七重線,1H),4.0−3.9(br,3H),3.5(br,2H),3.2−2.8(br,10H),2.2(brm,8H),1.9(s,3H),1.4(d,6H).(m/z):C26H37FN6O2に関する[M+H]+理論値、485.30;実測値、485.5。保持時間(分析HPLC:10−70%MeCN/H2O、6分間にわたって)=2.28分。
40mLのジクロロエタンを含むフラスコに、1−アセチルピペラジン(613mg;4.78mmol)および水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム(1.01g)を添加した。この溶液を、前の工程の生成物(約1g)を添加する前に、5分間攪拌した。この最終の混合物を、1時間攪拌し、この時点において反応は、HPLC分析および質量分析に基づき完結していた。水(20mL)をゆっくりと添加し、この混合物を300mLのジクロロメタンで希釈し、有機層を集める前に漏斗を使って振とうした。この有機層を、1M NaOH(100mL)およびブライン(100mL)で洗浄した。MgSO4による乾燥およびエバポレーションによって、標題の化合物を得、そしてこの化合物を、分取HPLCによって精製し、380mgの純粋なこの生成物をTFA塩として得た。1H−NMR(DMSO−d6;遊離塩基):δ(ppm)8.0(br,1H),7.8(dd,1H),7.6(dd,1H),7.23(dt,1H),5.0(七重線,1H),4.0−3.9(br,3H),3.5(br,2H),3.2−2.8(br,10H),2.2(brm,8H),1.9(s,3H),1.4(d,6H).(m/z):C26H37FN6O2に関する[M+H]+理論値、485.30;実測値、485.5。保持時間(分析HPLC:10−70%MeCN/H2O、6分間にわたって)=2.28分。
(実施例32:1−プロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミドの合成)
(a.1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミドの調製)
標題の中間体を、実施例1の手順に従い、工程eにおける1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸の代わりに、1H−インダゾール−3−カルボン酸を用いて調製した。(m/z):C23H32N6O2に関する[M+H]+理論値、425.27;実測値、425.4。保持時間(分析HPLC:10−40%MeCN/H2O、6分間にわたって)=1.47分。
(a.1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミドの調製)
標題の中間体を、実施例1の手順に従い、工程eにおける1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸の代わりに、1H−インダゾール−3−カルボン酸を用いて調製した。(m/z):C23H32N6O2に関する[M+H]+理論値、425.27;実測値、425.4。保持時間(分析HPLC:10−40%MeCN/H2O、6分間にわたって)=1.47分。
(b.1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミドの代わりの合成)
前の工程の中間体のTFA塩(80mg、0.123mmol)を含む、無水DMF(2mL)溶液に、カリウムtert−ブトキシド(48mg、0.43mmol)およびヨウ化イソプロピル(37μL、0.368mmol)を添加した。この混合物を、85℃において12時間振とうし、次いで乾燥状態までエバポレートし薄い茶色の残渣を得、そしてこの残渣を50%酢酸水溶液中に溶解し、分取HPLCによって分別し、標題の化合物を得た。(m/z):C26H38N6O2に関する[M+H]+理論値、467.31;[M+H]+実測値、467.2。保持時間(分析HPLC:5−65%MeCN/H2O、6分間にわたって)=2.09分。
前の工程の中間体のTFA塩(80mg、0.123mmol)を含む、無水DMF(2mL)溶液に、カリウムtert−ブトキシド(48mg、0.43mmol)およびヨウ化イソプロピル(37μL、0.368mmol)を添加した。この混合物を、85℃において12時間振とうし、次いで乾燥状態までエバポレートし薄い茶色の残渣を得、そしてこの残渣を50%酢酸水溶液中に溶解し、分取HPLCによって分別し、標題の化合物を得た。(m/z):C26H38N6O2に関する[M+H]+理論値、467.31;[M+H]+実測値、467.2。保持時間(分析HPLC:5−65%MeCN/H2O、6分間にわたって)=2.09分。
(c.1−プロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミドの合成)
ヨウ化イソプロピルをヨウ化n−プロピルと置換することを除き、工程bのプロセスと類似のプロセスを用い、標題の化合物を調製した。(m/z):C26H38N6O2に関する[M+H]+理論値、467.31;[M+H]+実測値、467.4。保持時間(分析HPLC:5−65%MeCN/H2O、6分間にわたって)=2.05分。
ヨウ化イソプロピルをヨウ化n−プロピルと置換することを除き、工程bのプロセスと類似のプロセスを用い、標題の化合物を調製した。(m/z):C26H38N6O2に関する[M+H]+理論値、467.31;[M+H]+実測値、467.4。保持時間(分析HPLC:5−65%MeCN/H2O、6分間にわたって)=2.05分。
(実施例33〜35)
ヨウ化イソプロピルを適切なアルキルハロゲン化物で置換することを除き、実施例32のプロセスと類似のプロセスを用い、実施例33〜35の化合物を、調製した。
ヨウ化イソプロピルを適切なアルキルハロゲン化物で置換することを除き、実施例32のプロセスと類似のプロセスを用い、実施例33〜35の化合物を、調製した。
(実施例33)1−ブチル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;(m/z):C27H40N6O2に関する[M+H]+理論値、481.33;実測値、481.4。保持時間(分析HPLC:5−65%MeCN/H2O、6分間にわたって)=2.26分。
(実施例34)1−シクロブチル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;(m/z):C27H38N6O2に関する[M+H]+理論値、479.31;実測値、479.4。保持時間(分析HPLC:5−65%MeCN/H2O、6分間にわたって)=2.20分。
(実施例35)1−シクロペンチル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;(m/z):C28H40N6O2に関する[M+H]+理論値、493.33;実測値、493.2。保持時間(分析HPLC:5−65%MeCN/H2O、6分間にわたって)=2.34分。
(実施例36〜40)
上記のプロセスと類似のプロセスを用いて、実施例36〜40の化合物を、調製した。
上記のプロセスと類似のプロセスを用いて、実施例36〜40の化合物を、調製した。
(実施例36)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((R)−3−(アセチル−メチルアミノ)ピロリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド。
(実施例37)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((S)−3−(アセチル−メチルアミノ)ピロリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド。
(実施例38)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[((S)−1−メタンスルホニルピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド。
(実施例39)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[(R)−(1,1−ジオキソ−テトラヒドロ−1λ6−チオフェン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド。
(実施例40)1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[(S)−(1,1−ジオキソ−テトラヒドロ−1λ6−チオフェン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド。
(実施例41:1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド二塩酸塩の合成)
(a.(1S,3R,5R)−3−[1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボニル)アミノ]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクタン−8−カルボン酸tert−ブチルエステルの調製)
磁気攪拌子、還流冷却器、滴下漏斗(addition funnel)、窒素の引き入れ口、および温度計を装着した、5Lの3つ口丸底フラスコに、1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸(250g、1.224mol、1.1当量)および2.5Lのトルエンを入れた。得られた懸濁液を、攪拌し、70〜80°Cに加熱した。この懸濁液に、塩化チオニル(218.4g、1.836mol、1.65当量)を、40分間にわたって添加した。この混合物を、90〜100℃において1時間加熱し、次いで25℃に冷却した。
(a.(1S,3R,5R)−3−[1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボニル)アミノ]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクタン−8−カルボン酸tert−ブチルエステルの調製)
磁気攪拌子、還流冷却器、滴下漏斗(addition funnel)、窒素の引き入れ口、および温度計を装着した、5Lの3つ口丸底フラスコに、1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸(250g、1.224mol、1.1当量)および2.5Lのトルエンを入れた。得られた懸濁液を、攪拌し、70〜80°Cに加熱した。この懸濁液に、塩化チオニル(218.4g、1.836mol、1.65当量)を、40分間にわたって添加した。この混合物を、90〜100℃において1時間加熱し、次いで25℃に冷却した。
メカニカルスターラー、滴下漏斗、窒素の引き入れ口、および温度計を装着した、別の12Lの3つ口丸底フラスコに、2.5Lのトルエン、3N NaOH(356gの50%NaOHを、1.48Lに水で希釈することによって調製した)、および(1S,3R,5R)−3−アミノ−8−アザビシクロ[3.2.1]オクタン−8−カルボン酸tert−ブチルエステル(251.9g、1.113mol、1当量)入れた。得られた懸濁液を、23℃において10分間攪拌し、次いで5℃に冷却した。この懸濁液に、トルエン中の酸塩化物溶液を、90分間にわたって添加し、添加の間じゅう内部温度を約5℃に保った。この混合物を、30分間攪拌した。この反応物を、25℃まで温めた;次いで水層は、捨てた(1.58L、pH>13)。有機層を、1Lの20重量%ブラインで洗った;そして、水層は、捨てた(1.005L、約pH8)。有機層を集め(5.3L)、半分の体積(約2.6L)に濃縮し、精製なしに次の工程に用いた。
(b.1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−アザ−ビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミドの調製)
メカニカルスターラー、滴下漏斗、窒素の引き入れ口、および温度計を装着した、12Lの3つ口丸底フラスコに、前の工程の生成物を入れた。この溶液に、トリフルオロ酢酸(0.65L)を、10分間にわたって、添加した。得られた混合物を、1時間、周囲温度において攪拌した。
メカニカルスターラー、滴下漏斗、窒素の引き入れ口、および温度計を装着した、12Lの3つ口丸底フラスコに、前の工程の生成物を入れた。この溶液に、トリフルオロ酢酸(0.65L)を、10分間にわたって、添加した。得られた混合物を、1時間、周囲温度において攪拌した。
水(3.3L)を、反応混合物に添加した。得られた懸濁液を、23℃において10分間攪拌し、次いでこの懸濁液を澄ませ、3層の混合物を得た。この上の2層を捨て、そして底の層(820mL)を集め、MTBE(6560mL)に、90分間にわたって添加した。得られた懸濁液を、5℃に冷却し、1時間かきまわした。この懸濁液を濾過し;湿った固まりをMTBE(500mL)で洗い、減圧(80mmHg)下60時間乾燥し、標題の中間体(386g、収率81%、99.2%のHPLC純度)を、砂のような、灰色がかった白色の固体として得た。
(c.1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−(2,2−ジメトキシエチル)−8−アザ−ビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミドの調製)
磁気攪拌子、窒素の引き入れ口、および温度計を装着した、3Lの3つ口丸底フラスコを、前の工程の中間体(84g、0.197mol)、ジクロロメタン(840mL)、および水素化トリアセトキシホウ素(62.6g、0.295mol)を入れた。得られた懸濁液を、10分間攪拌し、10℃に冷却し、次いで60重量%のジメトキシアセトアルデヒド(51.3g、0.295mol)を添加した。この溶液を、30分間攪拌し25℃に温め、1時間攪拌した。この混合物を、Celiteを通して濾過し、ジクロロメタン(150mL)で洗い、次いで5重量%ブライン溶液(400g)で洗った。水層および有機層を分離し、そして有機層を、濃い油(約150mL)になるまで濃縮し、そしてこの生成物を、精製なしに次の工程に用いた。
磁気攪拌子、窒素の引き入れ口、および温度計を装着した、3Lの3つ口丸底フラスコを、前の工程の中間体(84g、0.197mol)、ジクロロメタン(840mL)、および水素化トリアセトキシホウ素(62.6g、0.295mol)を入れた。得られた懸濁液を、10分間攪拌し、10℃に冷却し、次いで60重量%のジメトキシアセトアルデヒド(51.3g、0.295mol)を添加した。この溶液を、30分間攪拌し25℃に温め、1時間攪拌した。この混合物を、Celiteを通して濾過し、ジクロロメタン(150mL)で洗い、次いで5重量%ブライン溶液(400g)で洗った。水層および有機層を分離し、そして有機層を、濃い油(約150mL)になるまで濃縮し、そしてこの生成物を、精製なしに次の工程に用いた。
(d.1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−(2,2−ヒドロキシエチル)−8−アザ−ビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミドの調製)
磁気攪拌子、窒素の引き入れ口、および温度計を装着した、1Lの3つ口丸底フラスコを、前の工程の生成物および水(250mL)を入れ、50〜55℃に温めた。この溶液に、3N HCl(82mL、0.985mol)を添加した。得られた混合物を、75℃において1時間攪拌した。この反応混合物を、25℃に冷却し、25重量%NaOH(159g、0.99mol)で、pH3.51に中和した。約20分後、下の層を集め(約120mL)、標題の中間体を提供し、精製なしに次の工程において用いた。
磁気攪拌子、窒素の引き入れ口、および温度計を装着した、1Lの3つ口丸底フラスコを、前の工程の生成物および水(250mL)を入れ、50〜55℃に温めた。この溶液に、3N HCl(82mL、0.985mol)を添加した。得られた混合物を、75℃において1時間攪拌した。この反応混合物を、25℃に冷却し、25重量%NaOH(159g、0.99mol)で、pH3.51に中和した。約20分後、下の層を集め(約120mL)、標題の中間体を提供し、精製なしに次の工程において用いた。
(e.1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド二塩酸塩の合成)
磁気攪拌子、窒素の引き入れ口、および温度計を装着した、3Lの3つ口丸底フラスコを、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム(84g、0.349mol)およびジクロロメタン(800mL)を入れた。得られた混合物を、25℃において攪拌し、1−アセチルピペラジン(51g、0.394mol)を入れた。この添加の集合物を、ジクロロメタン(20mL)でリンスした。この混合物を5分間攪拌し、次いで内部温度を25℃より低い温度に維持しながら、15分以内に前の工程の生成物(約120mL)を入れた。この混合物を、15分間攪拌し、Celiteを通して濾過し、ジクロロメタン(2×100mL)で洗った。この濾過物を、1N NaOH(500mL)で洗った。この層を分離し、より低い方の層を集め、約150mLまで濃縮した。
磁気攪拌子、窒素の引き入れ口、および温度計を装着した、3Lの3つ口丸底フラスコを、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム(84g、0.349mol)およびジクロロメタン(800mL)を入れた。得られた混合物を、25℃において攪拌し、1−アセチルピペラジン(51g、0.394mol)を入れた。この添加の集合物を、ジクロロメタン(20mL)でリンスした。この混合物を5分間攪拌し、次いで内部温度を25℃より低い温度に維持しながら、15分以内に前の工程の生成物(約120mL)を入れた。この混合物を、15分間攪拌し、Celiteを通して濾過し、ジクロロメタン(2×100mL)で洗った。この濾過物を、1N NaOH(500mL)で洗った。この層を分離し、より低い方の層を集め、約150mLまで濃縮した。
無水エタノール(250mL)を添加し、次いでこの混合物を約200mLまで濃縮した。この混合物に、無水エタノール(800mL)を添加し、この混合物を40℃まで加熱した。この混合物に、3N HCl(33mL、0.396mol)を3分以内に添加した。この混合物を10分間攪拌し、結晶化を始めた。得られた懸濁液を、55℃において2時間攪拌し、25℃に冷却した。この混合物を、Whatman#2濾紙を通して濾過し、湿った固まりを無水エタノール(2×100mL)で洗った。この混合物を、窒素下30分間乾燥し、次いで40〜50℃において、真空下24時間乾燥し、標題の化合物(82g)を得た。
(実施例42:1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド二臭化水素酸塩の合成)
磁気攪拌子、窒素の引き入れ口、および温度計を装着した、500mLの3つ口丸底フラスコに、水(120mL)および1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド二塩酸塩(12g、22.2mmol)を入れた。得られた混合物を、攪拌し、透明の薄い黄色の溶液を得た。この溶液に、25重量%NaOH(7.83g、24.4mmol)を2分間以内に添加し、白い乳白色の懸濁液を得た。ジクロロメタン(120mL)を添加し、この混合物を30分間攪拌し、2層の透明溶液を得た。この層を分離し、水層(113mL)および有機層(125mL)を得、そしてこの溶液を、10%NaBr(120mL)水溶液で洗った。この層を分離し有機層(120mL)を得、それからこの溶液を約4分の1の体積まで濃縮した。無水エタノール(250mL)を添加し、それからこの混合物を蒸留し、約200mLの全体積を得た。この溶液を、58℃において攪拌し、48重量%のHBr(8.2g、49mmol)水溶液を、2分以内に添加した。半分以上のこのHBrを添加した場合、沈殿を観察した。この混合物を、55℃〜62℃において1時間攪拌し、次いで周囲温度において冷却し濾過した。この濾過物を、無水エタノール(40mL)で洗い、窒素下20分間乾燥し、それから真空下45℃において48時間乾燥し、標題の化合物(13.42g)を、白色の固体として得た。
磁気攪拌子、窒素の引き入れ口、および温度計を装着した、500mLの3つ口丸底フラスコに、水(120mL)および1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド二塩酸塩(12g、22.2mmol)を入れた。得られた混合物を、攪拌し、透明の薄い黄色の溶液を得た。この溶液に、25重量%NaOH(7.83g、24.4mmol)を2分間以内に添加し、白い乳白色の懸濁液を得た。ジクロロメタン(120mL)を添加し、この混合物を30分間攪拌し、2層の透明溶液を得た。この層を分離し、水層(113mL)および有機層(125mL)を得、そしてこの溶液を、10%NaBr(120mL)水溶液で洗った。この層を分離し有機層(120mL)を得、それからこの溶液を約4分の1の体積まで濃縮した。無水エタノール(250mL)を添加し、それからこの混合物を蒸留し、約200mLの全体積を得た。この溶液を、58℃において攪拌し、48重量%のHBr(8.2g、49mmol)水溶液を、2分以内に添加した。半分以上のこのHBrを添加した場合、沈殿を観察した。この混合物を、55℃〜62℃において1時間攪拌し、次いで周囲温度において冷却し濾過した。この濾過物を、無水エタノール(40mL)で洗い、窒素下20分間乾燥し、それから真空下45℃において48時間乾燥し、標題の化合物(13.42g)を、白色の固体として得た。
(実施例43:1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミドのフマル酸塩の合成)
50%アセトニトリル/水(1mL)中の1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド(0.1g、0.21mmol)の溶液に、1Mフマル酸のエタノール溶液(0.44mL、0.42mmol)を添加した。得られた溶液を、一晩、凍結乾燥し、次いで酢酸エチル(1mL)と混合した。熱エタノールを、均一の溶液(0.4mL)が得られるまで、加熱しながら添加した。この得られた透明の溶液を、それから、室温において結晶化した。この得られた固体を、濾過し、エタノールで洗い、真空乾燥し、標題の化合物(0.13g)を固体として得た。
50%アセトニトリル/水(1mL)中の1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド(0.1g、0.21mmol)の溶液に、1Mフマル酸のエタノール溶液(0.44mL、0.42mmol)を添加した。得られた溶液を、一晩、凍結乾燥し、次いで酢酸エチル(1mL)と混合した。熱エタノールを、均一の溶液(0.4mL)が得られるまで、加熱しながら添加した。この得られた透明の溶液を、それから、室温において結晶化した。この得られた固体を、濾過し、エタノールで洗い、真空乾燥し、標題の化合物(0.13g)を固体として得た。
(実施例44:1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミドのリン酸塩の合成)
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド(0.2g、0.43mmol)のメタノール(3mL)溶液に、1Mリン酸のエタノール溶液(0.43mL、0.43mmol)を添加した。得られた不均一の溶液を、加熱して可溶化し、濾過し、一晩冷却した。得られた固体を濾過し、エタノールで洗い、真空下乾燥し、標題の化合物(0.08g)を固体として得た。
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド(0.2g、0.43mmol)のメタノール(3mL)溶液に、1Mリン酸のエタノール溶液(0.43mL、0.43mmol)を添加した。得られた不均一の溶液を、加熱して可溶化し、濾過し、一晩冷却した。得られた固体を濾過し、エタノールで洗い、真空下乾燥し、標題の化合物(0.08g)を固体として得た。
(実施例45:1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミドのp−トルエンスルホン酸塩の合成)
イソプロパノール中の1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド(38.7mg、0.08mmol)の溶液(2mL)を75℃の水浴において加熱し、固体のp−トルエンスルホン酸一水和物(32.3mg、0.17mmol)を添加した。得られた溶液を、この固体が溶解するまで加熱し、次いで室温まで冷却した。標題の化合物の結晶が、一晩のうちに形成した。
イソプロパノール中の1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド(38.7mg、0.08mmol)の溶液(2mL)を75℃の水浴において加熱し、固体のp−トルエンスルホン酸一水和物(32.3mg、0.17mmol)を添加した。得られた溶液を、この固体が溶解するまで加熱し、次いで室温まで冷却した。標題の化合物の結晶が、一晩のうちに形成した。
(実施例46:1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミドの酸性塩の合成)
実施例43〜45の手順と類似の手順を用いて、下記の1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミドの酸性塩を、丸かっこ中において示される酸の当量数:酢酸塩(2);安息香酸塩(2);硝酸塩(2);プロピオン酸塩(1);酒石酸塩(2);リン酸塩(0.5)を用いて固体の形態において調製した。
実施例43〜45の手順と類似の手順を用いて、下記の1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミドの酸性塩を、丸かっこ中において示される酸の当量数:酢酸塩(2);安息香酸塩(2);硝酸塩(2);プロピオン酸塩(1);酒石酸塩(2);リン酸塩(0.5)を用いて固体の形態において調製した。
(実施例47:5−HT4(c)ヒトレセプターにおける放射性リガンド結合アッセイ)
(a.5−HT4(c)の膜調製)
ヒト5−HT4(c)レセプターのcDNAを安定にトランスフェクトしたHEK−293(ヒト胎児腎臓)細胞([3H]−GR113808の膜放射性リガンド結合アッセイを用いて決定した場合、Bmax=約6.0pmol/mgタンパク質)を、10%ウシ胎児血清(FBS)(GIBCO−Invitrogen Corp.:カタログ番号10437)、2mM L−グルタミンおよび1mLあたり(100単位)ペニシリン−(100μg)ストレプトマイシン(GIBCO−Invitrogen Corp.:カタログ番号15140)を補った4,500mg/L D−グルコースおよび塩酸ピリドキシンを含むダルベッコ改変イーグル培地(DMEM)(GIBCO−Invitrogen Corp.,Carlsbad CA:カタログ番号11965)中、T−225フラスコに5%CO2、37℃の加湿インキュベーターで培養した。細胞を、培地中に1mLあたり800μgのジェネテシン(geneticin)(GIBCO−Invitrogen Corp.:カタログ番号10131)の添加により連続的な選択圧下で培養した。
(a.5−HT4(c)の膜調製)
ヒト5−HT4(c)レセプターのcDNAを安定にトランスフェクトしたHEK−293(ヒト胎児腎臓)細胞([3H]−GR113808の膜放射性リガンド結合アッセイを用いて決定した場合、Bmax=約6.0pmol/mgタンパク質)を、10%ウシ胎児血清(FBS)(GIBCO−Invitrogen Corp.:カタログ番号10437)、2mM L−グルタミンおよび1mLあたり(100単位)ペニシリン−(100μg)ストレプトマイシン(GIBCO−Invitrogen Corp.:カタログ番号15140)を補った4,500mg/L D−グルコースおよび塩酸ピリドキシンを含むダルベッコ改変イーグル培地(DMEM)(GIBCO−Invitrogen Corp.,Carlsbad CA:カタログ番号11965)中、T−225フラスコに5%CO2、37℃の加湿インキュベーターで培養した。細胞を、培地中に1mLあたり800μgのジェネテシン(geneticin)(GIBCO−Invitrogen Corp.:カタログ番号10131)の添加により連続的な選択圧下で培養した。
細胞をおおよそ60〜80%のコンフルエントまで培養した(35より少ない継代培養数)。播種前の20〜22時間に、細胞を無血清のDMEMで2回洗浄し、提供した。この膜調製のすべての工程を氷上で行った。この細胞単層を、穏やかな機械的振動および25mLピペットを用いる粉砕により取り出した。細胞を1000rpm(5分)の遠心により収集した。
膜調製のために、細胞のペレットを氷冷した50mMの4−(2−ヒドロキシエチル)−1−ピペラジンエタンスルホン酸(HEPES)、pH 7.4(膜調製緩衝液)(40mL/全細胞は、30〜40のT225フラスコから与えられる)中に再懸濁し、そして氷上でポリトロン粉砕機(設定19で10秒を2回)を用いてホモジナイズした。この結果として生じるホモジネートを、4℃、1200gで5分間遠心した。このペレットを捨て、そして上清を40,000g(20分)で遠心した。このペレットを膜調製緩衝液で再懸濁し、40,000g(20分)で遠心することにより1度洗浄した。この最終ペレットを50mM HEPES、pH 7.4(アッセイ緩衝液)(1mLあたり1つのT225フラスコ等量)に再懸濁した。この膜懸濁液のタンパク濃度を、Bradfordの方法(Bradford、1976年)により決定した。膜を−80℃でアリコート中に凍結保存した。
(b.放射リガンド結合アッセイ)
放射リガンド結合アッセイを、0.025%ウシ血清アルブミン(BSA)を含む50mM HEPES pH 7.4に、2μgの膜タンパクを含む総アッセイ容量400μLで、1.1mLの96−ディープウェル ポリプロピレンアッセイプレート(Axygen)において行った。放射リガンドのKd値を決定するための飽和結合実験を、0.001nM〜5.0nMの範囲の8〜12の異なる濃度で[3H]−GR113808(Amersham Inc.,Bucks,UK:カタログ番号TRK944;比活性約82 Ci/mmol)を用いて行った。化合物のpKi値を決定するための置換アッセイを、0.15nMの[3H]−GR113808および10pM〜100μMの範囲の11の異なる化合物濃度で行った。
放射リガンド結合アッセイを、0.025%ウシ血清アルブミン(BSA)を含む50mM HEPES pH 7.4に、2μgの膜タンパクを含む総アッセイ容量400μLで、1.1mLの96−ディープウェル ポリプロピレンアッセイプレート(Axygen)において行った。放射リガンドのKd値を決定するための飽和結合実験を、0.001nM〜5.0nMの範囲の8〜12の異なる濃度で[3H]−GR113808(Amersham Inc.,Bucks,UK:カタログ番号TRK944;比活性約82 Ci/mmol)を用いて行った。化合物のpKi値を決定するための置換アッセイを、0.15nMの[3H]−GR113808および10pM〜100μMの範囲の11の異なる化合物濃度で行った。
試験化合物を、DMSO中に10mMストック溶液として入れ、そして0.1%BSAを含む25℃、50mM HEPES pH 7.4中に400 μMに希釈し、それから系列希釈(1:5)を同じ緩衝液で作った。非特異的結合を1μMの非標識体GR113808の存在によって決定した。アッセイを、室温で60分間インキュベートし、それからこの結合反応を、0.3%ポリエチレンイミンに前もって浸した96−ウェル GF/Bガラス繊維フィルタープレート(Packardb BioScience Co.,Meriden,CT)上に急速濾過することにより停止した。このフィルタープレートを、非結合性の放射活性を除くために、濾過緩衝液(氷冷した50mM HEPES、pH7.4)で3回洗浄した。プレートを乾燥し、35μLのMicroscint−20液体シンチレーション溶液(Packard BioScience Co.,Meriden,CT)を各ウェルに加え、このプレートをPackard Topcount液体シンチレーションカウンター(Packard BioScience Co.,Meriden,CT)で算出した。
結合データを、1部位の競合のための3パラメーターモデルを用いるGraphPad Prism Softwareパッケージ(GraphPad Software,Inc.,San Diego,CA)で、非線形回帰解析により解析した。1μMのGR113808の存在により決定した場合、このBOTTOM(曲線の最小)を非特異的結合の値に固定した。試験化合物のKi値をPrismでベストフィットIC50値から計算し、放射リガンドのKd値を、Cheng−Prusoff式(ChengおよびPrusoff、Biochemical Pharmacology,1973,22,3099〜108)を用いて計算した(Ki=IC50/(1+[L]/Kd)、ここで[L]は[3H]−GR113808の濃度である)。この結果をKi値の10の負対数、pKiとして表す。
本アッセイにおいて高いpKi値を有する試験化合物は、5−HT4レセプターに対して高い結合親和性を有する。本アッセイにおいて試験された本発明の化合物は、約6.3〜約9.0の範囲、代表的には約7.0〜約8.6の範囲でpKi値を有した。
(実施例48:5−HT3Aヒトレセプターにおける放射性リガンド結合アッセイ:レセプターサブタイプ選択性の決定)
(a.5−HT3Aの膜調製)
ヒト5−HT3AレセプターのcDNAを安定にトランスフェクトしたHEK−293(ヒト胎児腎臓)細胞をMichael Bruess博士(University of Bonn,GDR)から得た([3H]−GR65630の膜放射性リガンド結合アッセイを用いて決定した場合、Bmax=約9.0pmol/mgタンパク質)。細胞を、10%加熱非活性化ウシ胎児血清(FBS)(Hyclone,Logan,UT:カタログ番号SH30070.03)および1mLあたり(50単位)ペニシリン−(50μg)ストレプトマイシン(GIBCO−Invitrogen Corp.:カタログ番号15140)を補った50%ダルベッコ改変イーグル培地(DMEM)(GIBCO−Invitrogen Corp.,Carlsbad,CA:カタログ番号11965)および50%ハムF12(GIBCO−Invitrogen Corp.:カタログ番号11765)中T−225フラスコまたは細胞ファクトリー(cell factory)で、5%CO2、37℃の加湿インキュベーターで培養した。
(a.5−HT3Aの膜調製)
ヒト5−HT3AレセプターのcDNAを安定にトランスフェクトしたHEK−293(ヒト胎児腎臓)細胞をMichael Bruess博士(University of Bonn,GDR)から得た([3H]−GR65630の膜放射性リガンド結合アッセイを用いて決定した場合、Bmax=約9.0pmol/mgタンパク質)。細胞を、10%加熱非活性化ウシ胎児血清(FBS)(Hyclone,Logan,UT:カタログ番号SH30070.03)および1mLあたり(50単位)ペニシリン−(50μg)ストレプトマイシン(GIBCO−Invitrogen Corp.:カタログ番号15140)を補った50%ダルベッコ改変イーグル培地(DMEM)(GIBCO−Invitrogen Corp.,Carlsbad,CA:カタログ番号11965)および50%ハムF12(GIBCO−Invitrogen Corp.:カタログ番号11765)中T−225フラスコまたは細胞ファクトリー(cell factory)で、5%CO2、37℃の加湿インキュベーターで培養した。
細胞をおおよそ70〜80%のコンフルエントまで培養した(35より少ない継代培養数)。この膜調製のすべての工程を氷上で行った。細胞を採取するために、培地を吸引し、そして細胞をCa2+、Mg2+を含まないダルベッコリン酸緩衝化生理食塩水(dPBS)で洗った。この細胞単層を穏やかな機械的振動により取り出した。細胞を1000rpm(5分)の遠心により収集した。膜調製のその後の工程は、5−HT4(c)レセプターを発現している膜のための上記に記載するプロトコールに続いた。
(b.放射性リガンド結合アッセイ)
放射性ラジオリガンドアッセイを、0.025%BSAを含む50mM HEPES pH 7.4アッセイ緩衝液中に、1.5〜2μg膜タンパクを含む総アッセイ容量200μLで、96ウェルポリプロピレンアッセイプレートにおいて行った。放射リガンドのKd値を決定するための飽和結合実験を、0.005nM〜20nMの範囲の12の異なる濃度で[3H]−GR65630(PerkinElmer Life Sciences Inc.,Boston,MA:カタログ番号NET1011;比活性約85 Ci/mmol)を用いて行った。化合物のpKi値を決定するための置換アッセイを、0.50nMの[3H]−GR65630および10pM〜100μMの範囲の11の異なる化合物濃度で行った。化合物を、DMSO中に10mMストック溶液として入れ(セクション3.1を参照せよ)、0.1%BSAを含む25℃、50mM HEPES pH 7.4中に400μMに希釈し、次いで系列希釈(1:5)を同じ緩衝液で作った。非特異的結合を10μMの非標識体MDL72222の存在により決定した。アッセイを、室温で60分間インキュベートし、次いでこの結合反応を、0.3%ポリエチレンイミンに前もって浸した96−ウェル GF/Bガラス繊維フィルタープレート(Packard BioScience Co.,Meriden,CT)上に急速濾過することにより停止した。このフィルタープレートを、非結合性の放射活性を除くために、濾過緩衝液(氷冷した50mM HEPES、pH7.4)で3回洗浄した。プレートを乾燥し、35μLのMicroscint−20液体シンチレーション溶液(Packard BioScience Co.,Meriden,CT)を各ウェルに加え、このプレートをPackard Topcount液体シンチレーションカウンター(Packard BioScience Co.,Meriden,CT)で算出した。
放射性ラジオリガンドアッセイを、0.025%BSAを含む50mM HEPES pH 7.4アッセイ緩衝液中に、1.5〜2μg膜タンパクを含む総アッセイ容量200μLで、96ウェルポリプロピレンアッセイプレートにおいて行った。放射リガンドのKd値を決定するための飽和結合実験を、0.005nM〜20nMの範囲の12の異なる濃度で[3H]−GR65630(PerkinElmer Life Sciences Inc.,Boston,MA:カタログ番号NET1011;比活性約85 Ci/mmol)を用いて行った。化合物のpKi値を決定するための置換アッセイを、0.50nMの[3H]−GR65630および10pM〜100μMの範囲の11の異なる化合物濃度で行った。化合物を、DMSO中に10mMストック溶液として入れ(セクション3.1を参照せよ)、0.1%BSAを含む25℃、50mM HEPES pH 7.4中に400μMに希釈し、次いで系列希釈(1:5)を同じ緩衝液で作った。非特異的結合を10μMの非標識体MDL72222の存在により決定した。アッセイを、室温で60分間インキュベートし、次いでこの結合反応を、0.3%ポリエチレンイミンに前もって浸した96−ウェル GF/Bガラス繊維フィルタープレート(Packard BioScience Co.,Meriden,CT)上に急速濾過することにより停止した。このフィルタープレートを、非結合性の放射活性を除くために、濾過緩衝液(氷冷した50mM HEPES、pH7.4)で3回洗浄した。プレートを乾燥し、35μLのMicroscint−20液体シンチレーション溶液(Packard BioScience Co.,Meriden,CT)を各ウェルに加え、このプレートをPackard Topcount液体シンチレーションカウンター(Packard BioScience Co.,Meriden,CT)で算出した。
結合データを、Ki値を決定するために上記に記載する非線形回帰解析を用いて解析した。10μMのMDL72222の存在により決定した場合、このBOTTOM(曲線の最小)を非特異的結合の値に固定した。Cheng−Prusoff式の[L]の量を、[3H]−GR65630の濃度と定義した。
5−HT3レセプターサブタイプに対する5−HT4レセプターサブタイプ選択性を、Ki(5−HT3A)/Ki(5−HT4(c))の比として計算した。本アッセイで試験した本発明のこの化合物は、約25〜約4000の範囲、代表的には約100〜約4000の範囲で5−HT4/5−HT3レセプターサブタイプ選択性を有した。
(実施例49:ヒト5−HT4(c)レセプターを発現しているHEK−293細胞を用いる細胞全体のcAMP蓄積フラッシュプレート(Flashplate)アッセイ)
本アッセイにおいて、5−HT4レセプターを発現しているHEK−293細胞を異なる濃度の試験化合物と接触させたとき、産生されるサイクリックAMPの量を測定することにより、試験化合物の機能的力価を決定した。
本アッセイにおいて、5−HT4レセプターを発現しているHEK−293細胞を異なる濃度の試験化合物と接触させたとき、産生されるサイクリックAMPの量を測定することにより、試験化合物の機能的力価を決定した。
(a.細胞培養)
クローン化ヒト5−HT4(c)レセプターのcDNAを安定にトランスフェクトしたHEK−293(ヒト胎児腎臓)細胞を、2つの異なるレセプター発現密度:(1)[3H]−GR113808の膜放射性リガンド結合アッセイを用いて決定した場合、約0.5〜0.6 pmol/mgタンパク質の密度および(2)約6.0 pmol/mgタンパク質の密度で調製した。この細胞を、10%ウシ胎児血清(FBS)(GIBCO−Invitrogen Corp.:カタログ番号10437)および1mLあたり(100単位)ペニシリン−(100μg)ストレプトマイシン(GIBCO−Invitrogen Corp.:カタログ番号15140)を補った4,500mg/L D−グルコースを含むダルベッコ改変イーグル培地(DMEM)(GIBCO−Invitrogen Corp.:カタログ番号11965)中、T−225フラスコで、5%CO2、37℃の加湿インキュベーターで培養した。細胞を、培地中へのジェネテシン(800μg/mL:GIBCO−Invitrogen Corp.:カタログ番号10131)の添加により連続的に選択圧下で培養した。
クローン化ヒト5−HT4(c)レセプターのcDNAを安定にトランスフェクトしたHEK−293(ヒト胎児腎臓)細胞を、2つの異なるレセプター発現密度:(1)[3H]−GR113808の膜放射性リガンド結合アッセイを用いて決定した場合、約0.5〜0.6 pmol/mgタンパク質の密度および(2)約6.0 pmol/mgタンパク質の密度で調製した。この細胞を、10%ウシ胎児血清(FBS)(GIBCO−Invitrogen Corp.:カタログ番号10437)および1mLあたり(100単位)ペニシリン−(100μg)ストレプトマイシン(GIBCO−Invitrogen Corp.:カタログ番号15140)を補った4,500mg/L D−グルコースを含むダルベッコ改変イーグル培地(DMEM)(GIBCO−Invitrogen Corp.:カタログ番号11965)中、T−225フラスコで、5%CO2、37℃の加湿インキュベーターで培養した。細胞を、培地中へのジェネテシン(800μg/mL:GIBCO−Invitrogen Corp.:カタログ番号10131)の添加により連続的に選択圧下で培養した。
(b.細胞調製)
細胞をおおよそ60〜80%のコンフルエントまで培養した。アッセイ前の20〜22時間に、細胞を4,500mg/L D−グルコースを含む無血清のDMEM(GIBCO−Invitrogen Corp.:カタログ番号11965)で2回洗浄し、提供した。細胞を採取するために、培地を吸引し、10mL Versene(GIBCO−Invitrogen Corp.:カタログ番号15040)を各T−225フラスコに加えた。細胞を室温で5分間インキュベートし、それから機械的振動によりフラスコから取り除いた。この細胞懸濁液を等量の前もって温めた(37℃)dPBSを含む遠心チューブに移し、そして1000rpmで5分間遠心した。この上清を捨て、そしてこのペレットを前もって温めた(37℃)刺激緩衝液(2〜3つのT−225フラスコあたり10mL等量)に再懸濁した。この時間を書きとめ、時間0として記録した。この細胞をコールター(Coulter)カウンターで計測した(8μmより上を数えて、フラスコの収量は、フラスコあたり1〜2×107細胞であった。)。細胞を、前もって温めた(37℃)刺激緩衝液中に、1mLあたり5×105細胞の濃度で再懸濁し(フラッシュプレートキットで提供される場合)、37℃で10分間プレインキュベートした。
細胞をおおよそ60〜80%のコンフルエントまで培養した。アッセイ前の20〜22時間に、細胞を4,500mg/L D−グルコースを含む無血清のDMEM(GIBCO−Invitrogen Corp.:カタログ番号11965)で2回洗浄し、提供した。細胞を採取するために、培地を吸引し、10mL Versene(GIBCO−Invitrogen Corp.:カタログ番号15040)を各T−225フラスコに加えた。細胞を室温で5分間インキュベートし、それから機械的振動によりフラスコから取り除いた。この細胞懸濁液を等量の前もって温めた(37℃)dPBSを含む遠心チューブに移し、そして1000rpmで5分間遠心した。この上清を捨て、そしてこのペレットを前もって温めた(37℃)刺激緩衝液(2〜3つのT−225フラスコあたり10mL等量)に再懸濁した。この時間を書きとめ、時間0として記録した。この細胞をコールター(Coulter)カウンターで計測した(8μmより上を数えて、フラスコの収量は、フラスコあたり1〜2×107細胞であった。)。細胞を、前もって温めた(37℃)刺激緩衝液中に、1mLあたり5×105細胞の濃度で再懸濁し(フラッシュプレートキットで提供される場合)、37℃で10分間プレインキュベートした。
cAMPアッセイを、製品の説明書にしたがって、125I−cAMPを用いるフラッシュプレートアデニル酸シクラーゼ活性アッセイシステム(SMP004B,PerkinElmer Life Sciences Inc.,Boston,MA)を使用してラジオイムノアッセイ形式で行った。
細胞を上記に記載したように培養し、調製した。アッセイ中の最終細胞濃度を、1ウェルあたり25×103細胞とし、最終アッセイ容量を100μLとした。試験化合物をDMSO中に10mMストック溶液として入れ、0.1%BSAを含む25℃、50mM HEPES pH 7.4中に400μMに希釈し、それから同じ緩衝液中に系列(1:5)希釈を作った。サイクリックAMP蓄積アッセイを10pM〜100pM(最終アッセイ濃度)の範囲の11の異なる化合物濃度で行った。5−HT濃度反応曲線(10pM〜100μM)をすべてのプレートで含んだ。この細胞を振盪しながら37℃で15分間インキュベートし、そしてこの反応を、各ウェルに100μLの氷冷検出緩衝液(フラッシュプレートキットで提供される場合)の添加することにより停止した。このプレートを密閉し、そして4℃で一晩インキュベートした。結合した放射活性を、Topcount(Packard BioScience Co.,Meriden,CT)を用いてシンチレーション近接分光法により算出した。
製品使用者マニュアルにおいて提供される説明書に従って、反応の1mLあたりのcAMP産生量をcAMP標準曲線から外挿した。データを3パラメーターシグモイド用量反応モデルを用いてGraphPad Prism Softwareパッケージで非線形回帰解析により解析した(傾きを単一に制約した)。効力のデータを、EC50値の10の負対数であるpEC50値で記録し、ここでEC50値は50%最大反応のための有効濃度である。
本アッセイで高いpEC50値を示す試験化合物は、5−HT4レセプターをアゴナイズする(agonizing)ために高い効力を有する。例えば約0.5〜0.6pmol/mgタンパク質の密度を有する細胞株(1)において、本アッセイで試験した本発明の化合物は、約6.3〜約9.0の範囲、代表的には約7.5〜8.5の範囲のpEC50値を有した。
(実施例50:hERG心臓カリウムチャネルを発現している細胞全体におけるカリウムイオン電流阻害のインビトロ電位固定アッセイ)
hERGのcDNAを安定にトランスフェクトしたCHO−K1細胞を、ウィスコンシン大学のGail Robertsonから得た。細胞を必要とされるまで極低温貯蔵で保管した。細胞を10%ウシ胎児血清および200μg/mLジェネテシンを補ったダルベッコ改変イーグル培地/F12中で増加させ、継代した。単離した細胞が細胞全体の電位固定研究のために選択されることができる密度で、35mm2ディッシュ中(2mL培地を含む)の電位固定研究のためにポリ−D−リシン(100μg/mL)コートしたガラスカバースリップ上に細胞を播種した。このディッシュを加湿した37℃、5%CO2環境で維持した。
hERGのcDNAを安定にトランスフェクトしたCHO−K1細胞を、ウィスコンシン大学のGail Robertsonから得た。細胞を必要とされるまで極低温貯蔵で保管した。細胞を10%ウシ胎児血清および200μg/mLジェネテシンを補ったダルベッコ改変イーグル培地/F12中で増加させ、継代した。単離した細胞が細胞全体の電位固定研究のために選択されることができる密度で、35mm2ディッシュ中(2mL培地を含む)の電位固定研究のためにポリ−D−リシン(100μg/mL)コートしたガラスカバースリップ上に細胞を播種した。このディッシュを加湿した37℃、5%CO2環境で維持した。
細胞外液を少なくとも7日ごとに調製し、使用しないときは4℃で保存した。この細胞外液は:NaCl(137mM)、KCl(4mM)、CaCl2(1.8mM)、MgCl2(1mM)、グルコース(10mM)、4−(2−ヒドロキシエチル)−1−ピペラジンエタンスルホン酸(HEPES)(10mM)を含み、NaOHでpH7.4にした。試験化合物の存在または非存在下において、この細胞外液を貯蔵器中に包含し、そこから記録チャンバーにおおよそ0.5mL/分で流した。細胞内液を調製、アリコートにし、そして使用する日まで−20℃で保存した。この細胞内液は:KCl(130mM)、MgCl2(1mM)、エチレングリコール−ビス(β−アミノエチルエーテル)N,N,N’,N’−テトラ酢酸塩(EGTA)(5mM)、MgATP(5mM)、4−(2−ヒドロキシエチル)−1−ピペラジンエタンスルホン酸(HEPES)(10mM)を含み、KOHでpH7.2にした。すべての実験を室温(20〜22℃)で行った。
細胞を播種したこのカバースリップを記録チャンバーに移し、連続的に灌流した。ギガオームシールを細胞と電極パッチの間に形成した。一度安定なパッチを完成すると、−80mVの初期保持電位で、電位固定様式において記録を始めた。細胞全体が安定な電流に達したあと、この細胞を試験化合物に曝露した。この標準電位差プロトコールは:−80mVの保持電位から+20mVに4.8秒間上昇させ、−50mVに5秒間再分極し、それから最初の保持電位(−80mV)に戻すというプロトコールであった。この電位差プロトコール15秒ごとに1回(0.067Hz)行った。再分極相中のピーク電流の大きさをpClampソフトウエアを用いて決定した。3μMの濃度で試験化合物を5分間細胞上に灌流し、化合物非存在下において5分間のウォッシュアウト期間をおいた。最終的に、ポジティブコントロール(シサプリド、20nM)を、細胞の機能を試験するために、灌流液中に加えた。−80mVの保持電位から+20mVのステップはhERGチャネルを活性化し、結果として外向きの電流になる。−50mVに戻すステップは、チャネルが不活性化から回復しそして不活化するので、結果として外向きのテール電流になる。
再分極相中のピーク電流の大きさをpCLAMPソフトウエアを用いて決定した。コントロールおよび被験物質のデータを、個々の電流の大きさを化合物の非存在下における初期電流の大きさで標準化するOrigin(商標登録)(OriginLab Corp.,Northampton MA)に移した。各状態についてこの標準化した電流の平均および標準誤差を算出し、この実験の時間経過に対してプロットした。
比較を被験物質またはビヒクルコントロール(通常0.3%DMSO)のいずれかに5分曝露した後、観察されたK+電流の間で行った。実験群間の統計学的比較を2母集団、独立t−検定(Microcal Origin v.6.0)を用いて行った。差をp<0.05で有意とみなした。
本アッセイにおいてカリウムイオン電流の阻害のパーセンテージが小さければ小さいほど、処置薬剤として用いられるとき試験化合物が心臓の再分極のパターンを変える電位は小さい。3μMの濃度で本アッセイにおいて試験した本発明のこの化合物は、約20%より小さい、代表的には約15%より小さいカリウムイオン電流の阻害を示した。
(実施例51:経口バイオアベイラビリティーのインビトロモデル:Caco−2透過アッセイ)
Caco−2透過アッセイを、経口投与後、小腸を通りそして血流に入る試験化合物の能力をモデル化するために行った。溶液中の試験化合物がヒトの小腸単層のタイトジャンクションを模倣するために設計された細胞単層を透過する率を決定した。
(実施例51:経口バイオアベイラビリティーのインビトロモデル:Caco−2透過アッセイ)
Caco−2透過アッセイを、経口投与後、小腸を通りそして血流に入る試験化合物の能力をモデル化するために行った。溶液中の試験化合物がヒトの小腸単層のタイトジャンクションを模倣するために設計された細胞単層を透過する率を決定した。
Caco−2(結腸、腺癌:ヒト)細胞をATCC(American Type Culture Collection;Rockville、MD)から得た。透過の研究のために、細胞をあらかじめ湿らせたトランスウェルポリカーボネートフィルター(Costar;Cambridge、MA)上に63,000細胞/cm2の密度で播種した。細胞単層を培養21日後に形成した。トランスウェルでの細胞培養に続いて、細胞単層を含むこの膜をトランスウェルプレートから分離し、そして拡散チャンバー(Costar;Cambridge、MA)中に挿入した。温度を制御するために、サーモスタットで調節した37℃の水が外部を循環する加熱ブロック中にこの拡散チャンバーを挿入した。拡散チャンバーの各半分に95%O2/5%CO2を送達し、そして細胞単層を横切って薄層を成すフローパターンを作りだす空気分流板は、不撹拌の境界層を減少させるのに効果的であった。
この透過研究を、単層の強度をモニターするために100μMの試験化合物濃度および14C−マンニトールで行った。すべてに実験を37℃、60分間で実施した。サンプルをチャンバーのドナーサイドおよびレシーバサイドの両方から0分、30分および60分に取り出した。サンプルを、試験化合物およびマンニトールの濃度をカウントするHPLCおよび液体シンチレーションカウンターにより解析した。cm/秒を単位とする透過係数(Kp)を計算した。
本アッセイにおいて、約10×10−6cm/秒より大きいKp値を良好なバイオアベイラビリティを示すと考える。本アッセイにおいて試験した本発明の本化合物は、約15×10−6cm/秒と50×10−6cm/秒の間のKp値、代表的には約20×10−6cm/秒と40×10−6cm/秒の間のKp値を示した。
(実施例52:ラットにおける薬物動態学的研究)
試験化合物の水溶液処方物を約5と約6の間のpHで0.1%乳酸中に調製した。雄性SD系ラット(CD血統、Charles River Laboratories,Wilmington,MA)に、2.5mg/kgの用量で静脈内投与(IV)により、または5mg/kgの用量で経口胃管栄養(PO)により試験化合物を投与した。この投薬量は、IV投与で1mL/kgであり、PO投与で2mL/kgであった。連続的な血液サンプルを、投与前および投与後2分(IVのみ)、5分、15分、30分および1時間、2時間、4時間、8時間、24時間に動物から採取した。血漿中の試験化合物濃度を、1ng/mLの定量下限値をもつ液体クロマトグラフ質量分析計解析(LC−MS/MS)(MDS SCIEX,API 400,Applied Biosystems,Foster City,CA)により決定した。
試験化合物の水溶液処方物を約5と約6の間のpHで0.1%乳酸中に調製した。雄性SD系ラット(CD血統、Charles River Laboratories,Wilmington,MA)に、2.5mg/kgの用量で静脈内投与(IV)により、または5mg/kgの用量で経口胃管栄養(PO)により試験化合物を投与した。この投薬量は、IV投与で1mL/kgであり、PO投与で2mL/kgであった。連続的な血液サンプルを、投与前および投与後2分(IVのみ)、5分、15分、30分および1時間、2時間、4時間、8時間、24時間に動物から採取した。血漿中の試験化合物濃度を、1ng/mLの定量下限値をもつ液体クロマトグラフ質量分析計解析(LC−MS/MS)(MDS SCIEX,API 400,Applied Biosystems,Foster City,CA)により決定した。
標準的な薬物動態学的パラメーターを、WinNonlin(Version 4.0.1,Pharsight,mountain View,CA)を用いてノンコンパートメント解析(IVではModel201およびPOではModel200)により評価した。時間に対する血漿中の試験化合物濃度曲線の最大をCmaxと表す。投薬時間から最後に測定可能な濃度までの時間に対する濃度の曲線下面積(AUC(0−t))を線形台形公式により算出した。経口バイオアベイラビリティ(F(%))、すなわちIV投与のAUC(0−t)に対するPO投与のAUC(0−t)の用量で正規化した割合を:
F(%)=AUCPO/AUCIV×用量IV/用量PO×100%
で算出した。
F(%)=AUCPO/AUCIV×用量IV/用量PO×100%
で算出した。
本アッセイにおいてパラメーターCmax、AUC(0−t)およびF(%)が大きい値を示す試験化合物は、経口的に投与するとより大きいバイオアベイラビリティを有することが期待される。本アッセイにおいて試験した本発明の試験化合物は、約0.05μg/mL〜約0.35μg/mLの範囲、代表的には約0.1μg/mL〜約0.35μg/mLの範囲でCmax値を有し、そして約0.15μg・時間/mL〜約0.8μg・時間/mLの範囲、代表的には約0.25μg・時間/mL〜約0.8μg・時間/mLの範囲でAUC(0−t)を有した。一例として、約100%のラットモデルにおいて実施例1の化合物は、0.25μg/mLのCmax値、0.73μg・時間/mLのAUC(0−t)値および経口バイオアベイラビリティ(F(%))を有した。
本発明をその特定の実施形態に関連して記載している一方で、さまざまな変化が生じ得、相当するものを本発明の真の意図および範囲からそれることなしに代用し得ることが、当業者により理解されるはずである。加えて、多くの改変は、特定の状況、材料、組成物、プロセス、プロセスの工程または工程、対象、本発明の意図および範囲に適応させられ得る。そのような改変すべてを、ここに添付される請求項の範囲内に意図する。さらに、上記に引用されるすべての刊行物、特許および特許文献を個々に参考により援用されるようにすべてここに参考として援用される。
Claims (29)
- 式(I)の化合物:
R1は、水素、ハロ、ヒドロキシ、C1−4アルキル、またはC1−4アルコキシであり;
R2は、C3−4アルキル、またはC3−6シクロアルキルであり;そして、
Wは、以下から選択され:
(i)式(II)の基:
Raが、C1−3アルキルもしくはテトラヒドロフラニルであり、C1−3アルキルが、−OHもしくはC1−3アルコキシで必要に応じて置換される、NC(O)Ra;
S(O)2;または
Rbが、−OH、C1−3アルコキシ、C5−6シクロアルキル、もしくは−S(O)2−C1−3アルキルで必要に応じて置換されるメチルである、NS(O)2Rbであり;
(ii)式(III)の基:
Ryが、−OHまたはC1−3アルコキシであり;
pが、0または1であり;
nが、1または2であり;そして
Yは:
Rcが、水素もしくはC1−3アルキルであり、かつRdが、−OH、もしくはC1−3アルコキシで必要に応じて置換されるC1−3アルキルである、NRcC(O)Rd、
または、Reが水素であり、かつRfが、−OH、C1−3アルコキシ、C5−6シクロアルキル、もしくは−S(O)2−C1−3アルキルで必要に応じて置換されるC1−3アルキルである、NReS(O)2Rfであり;ならびに
(iii)式(IV)の基:
Rzが、水素、C1−3アルキルまたは−OHもしくはC1−3アルコキシで置換されるC2−3アルキル、であり;
mが、1または2であり;
qが、1または2であり、mとqとの和が、4と等しくない条件であり;そして
Zは:
Rgが、−OHもしくはC1−3アルコキシで必要に応じて置換されるC1−3アルキルである、NC(O)Rg、
S(O)2;または
Rhが、−OH、C1−3アルコキシ、C5−6シクロアルキル、もしくは−S(O)2−C1−3アルキルで必要に応じて置換されるメチルである、NS(O)2Rhである、化合物。 - 請求項1に記載の化合物であって、R1が、水素またはハロである、化合物。
- 請求項1に記載の化合物であって、R2が、イソプロピルまたはC4−5シクロアルキルである、化合物。
- 請求項1に記載の化合物であって、Wが、式(II)の基である、化合物。
- 請求項4に記載の化合物であって、Raが、C1−3アルキルであり、かつRbが、メチルである、化合物。
- 請求項1に記載の化合物であって、Wが、式(III)の基である、化合物。
- 請求項6に記載の化合物であって、pが0である、化合物。
- 請求項6に記載の化合物であって、nが1である、化合物。
- 請求項1に記載の化合物であって、Wが、式(IV)の基である、化合物。
- 請求項1に記載の化合物であって、mが1であり、かつqが1である、化合物。
- 請求項1に記載の化合物であって、ここで:
R1は、水素またはハロであり;
R2は、C3−4アルキルまたはC4−5シクロアルキルであり;そして
Wは、
(i)Xが、NC(O)CH3、S(O)2、またはNS(O)2CH3である、式(II)の基;
(ii)pが0であり、nが1であり、かつYがNCH3C(O)CH3である、式(III)の基;および
(iii)Rzがメチルであり、mが1であり、qが1であり、かつZがNC(O)CH3、S(O)2、またはNS(O)2CH3である、式(IV)の基からなる群より選択される、化合物。 - 請求項11に記載の化合物であって、Wは、XがNC(O)CH3、S(O)2、またはNS(O)2CH3である、式(II)の基である、化合物。
- 請求項1に記載の化合物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、該化合物の溶媒和物、および該化合物の立体異性体であって、該化合物が、以下:
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)−エチル]8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−(テトラヒドロフラン−2−カルボニル)ピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(1,1−ジオキソ−1λ6−チオモルホリン−4−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−メタンスルホニル−ピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−シクロヘキシルメタンスルホニルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−メタンスルホニルメタンスルホニルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(3−(アセチル−メチルアミノ)ピロリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(3−(アセチル−アミノ)ピロリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((R)−3−(アセチル−アミノ)ピロリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((S)−3−(アセチル−アミノ)ピロリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[3−((S)−2−ヒドロキシプロピオニルアミノ)ピロリジン−1−イル]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[(3S,4S)−3−(アセチルメチルアミノ)−4−ヒドロキシピロリジン−1−イル]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((R)−3−エタンスルホニルアミノピロリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((R)−3−シクロヘキシルメタンスルホニルアミノピロリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[3−(アセチル−メチルアミノ)ピペリジン−1−イル]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(3−アセチルアミノピペリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(3−メタンスルホニルアミノピペリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((S)−3−メタンスルホニルアミノピペリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((S)−3−エタンスルホニルアミノピペリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((S)−3−メタンスルホニルメタンスルホニルアミノピペリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[(1−アセチルピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[((R)−1−アセチルピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[((S)−1−アセチルピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[(1−メタンスルホニルピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[((R)−1−メタンスルホニルピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[(1,1−ジオキソ−テトラヒドロ−1λ6−チオフェン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[(1,1−ジオキソ−テトラヒドロ−1λ6−チオフェン−3−イル)−(2−ヒドロキシエチル)アミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[(1−アセチルピペリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[(1,1−ジオキソ−ヘキサヒドロ−1λ6−チオピラン−4−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[(1−メタンスルホニルピペリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;
5−フルオロ−1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−プロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−ブチル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−シクロブチル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−シクロペンチル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((R)−3−(アセチル−メチルアミノ)ピロリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((S)−3−(アセチル−メチルアミノ)ピロリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[((S)−1−メタンスルホニルピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[(R)−(1,1−ジオキソ−テトラヒドロ−1λ6−チオフェン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[(S)−(1,1−ジオキソ−テトラヒドロ−1λ6−チオフェン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;から選択される、化合物。 - 請求項1に記載の化合物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、および該化合物の溶媒和物、および該化合物の立体異性体であって、該化合物が、以下:
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)−エチル]8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(1,1−ジオキソ−1λ6−チオモルホリン−4−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−メタンスルホニル−ピペラジン−1−イル)−エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(3−(アセチルメチル−アミノ)ピロリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((R)−3−(アセチル−メチル−アミノ)ピロリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((S)−3−(アセチル−メチルアミノ)ピロリジン−1−イル)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−[(1−アセチルピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−[((R)−1−アセチル−ピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−[((S)−1−アセチル−ピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[(1−メタンスルホニル−ピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[((R)−1−メタンスルホニル−ピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸((1S,3R,5R)−8−{2−[((S)−1−メタンスルホニル−ピロリジン−3−イル)メチルアミノ]エチル}−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル)アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((1,1−ジオキソ−テトラヒドロ−1λ6−チオフェン−3−イル)メチルアミノ)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}−アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((R)−(1,1−ジオキソ−テトラヒドロ−1λ6−チオフェン−3−イル)メチルアミノ)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;
1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−((S)−(1,1−ジオキソ−テトラヒドロ−1λ6−チオフェン−3−イル)メチルアミノ)エチル]−8−アザビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミド;から選択される、化合物。 - 1−イソプロピル−1H−インダゾール−3−カルボン酸{(1S,3R,5R)−8−[2−(4−アセチルピペラジン−1−イル)エチル]−8−アザ−ビシクロ[3.2.1]オクト−3−イル}アミドの化合物名を有する請求項1に記載の化合物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該化合物の溶媒和物。
- 薬学的組成物であって、治療的に有効な量の請求項1〜15のうちいずれか一項に記載の化合物と、薬学的に受容可能なキャリアとを含む、薬学的組成物。
- 治療における使用のための、請求項1〜15のうちいずれか一項に記載される、化合物。
- 請求項1〜15のうちいずれか一項に記載される化合物の、薬剤製造のための使用。
- 請求項18に記載の使用であって、前記薬剤が、5−HT4レセプター活性に関連する哺乳類動物の医学的状態の処置に関する、使用。
- 請求項19に記載の使用であって、前記疾患または状態が、胃腸管の運動性を減少させる障害である、使用。
- 5−HT4レセプター活性に関連する医学的状態を有する哺乳類動物を処置する方法であって、該方法は、該哺乳類動物に、治療的に有効な量の薬学的組成物を投与する工程を包含し、該組成物が、薬学的に受容可能なキャリアと、請求項1〜15のうちいずれか一項に記載の化合物とを含有する、方法。
- 哺乳類動物において、胃腸管の運動性を減少させる障害を処置する方法であって、該方法は、該哺乳類動物に、治療的に有効な量の薬学的組成物を投与する工程を包含し、該組成物が、薬学的に受容可能なキャリアと請求項1〜15のうちいずれか一項に記載の化合物とを含有する、方法。
- 請求項22に記載の方法であって、前記運動性を減少させる障害が、慢性の便秘、便秘を主とする過敏性腸管症候群、糖尿病性の胃不全麻痺および特発性の胃不全麻痺、および機能性の消化不良から選択される、方法。
- 請求項24のプロセスによって調製される、生成物。
- (1S,3R,5R)−3−アミノ−8−アザビシクロ[3.2.1]オクタン−8−カルボン酸tert−ブチルエステルを調製するためのプロセスであって、該プロセスは、遷移金属触媒の存在下、3−オキソ−8−アザビシクロ[3.2.1]オクタン−8−カルボン酸tert−ブチルエステルを、少なくとも25当量のギ酸アンモニウムと反応させる工程を包含し、(1S,3R,5R)−3−アミノ−8−アザビシクロ[3.2.1]オクタン−8−カルボン酸tert−ブチルエステルを提供する、プロセス。
- 5−HT4レセプターを含有する、生物学的系または生物学的サンプルを研究する方法であって、該方法は、以下:
(a) 該生物学的系または生物学的サンプルを、請求項1〜15のうちいずれか一項に記載の化合物と接触させる工程;および
(b)該生物的系または生物学的サンプルに対する化合物によって引き起こされる効果を決定する工程を包含する、方法。
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