MX2007015988A - Derivados de benzofuranilo como inhibidores del receptor 5-ht6. - Google Patents

Abstract

La presente invencion se refiere a compuestos de la formula (I), en la cual R1 y R2 son como se definen en la descripcion; a formulaciones farmaceuticas que comprenden estos compuestos, y al uso de los compuestos para la profilaxis y tratamiento de condiciones medicas relacionadas con obesidad, diabetes tipo II, y/o trastornos del SNC, para lograr reduccion del peso corporal y de la ganancia de peso corporal.

Description

DERIVADOS DE BENZOFURANXLO COMO INHIBIDORES DEL RECEPTOR 5- HT6 CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a compuestos de sulfonamida sustituidos, a formulaciones farmacéuticas que comprenden estos compuestos, y el uso de los compuestos para la profilaxis y tratamiento de condiciones médicas que se relacionan con obesidad, diabetes tipo II, y/o trastornos del sistema nervioso central (SNC) , para lograr la reducción de peso corporal y de ganancia de peso corporal, así como para uso cosmético.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La obesidad es una condición caracterizada por un incremento en el contenido de grasa corporal que da como resultado peso corporal excesivo por encima de normas aceptadas. La obesidad es el trastorno nutricional más importante en el mundo occidental y representa un problema de salud importante en todos los países industrializados. Este trastorno conduce a una mortalidad incrementada debido a incidencias incrementadas de enfermedades tales como enfermedad cardiovascular, enfermedad digestiva, enfermedad respiratoria, cáncer y diabetes tipo II. La búsqueda de compuestos que reduzcan el peso corporal ha sido un esfuerzo continuo durante muchas décadas. Una línea de investigación ha sido la activación de los sistemas serotoninérgicos, ya sea mediante activación directa de los subtipos del receptor de serotonina o mediante inhibición de la reabsorción de serotonina. Sin embargo, se desconoce el perfil del subtipo de receptor exacto requerido. La serotonina (5-hidroxitriptamina o 5-HT) , un transmisor clave del sistema nervioso central y periférico, modula una amplia gama de funciones fisiológicas y patológicas, incluyendo ansiedad, regulación del sueño, agresión, alimentación y depresión. Se han identificado y clonado múltiples subtipos del receptor de serotonina. Uno de estos, el receptor 5-HT6, fue clonado por varios grupos en 1993 (Ruat, M. et al. (1993) Biochem. Biophys. Res. Commun. 193:268-276; Sebben, M. et al. (1994) NeuroReport 5:2553-2557). Este receptor se acopla de manera positiva a la adenilil ciclasa y muestra afinidad hacia antidepresivos tales como clozapina. Recientemente, se reportó el efecto del antagonista de 5-HT6 y de los oligonucleótidos antisentido para 5-HT6 para reducir la ingesta de alimentos en ratas (Bentley, J. C. et al. (1999) Br J Pharmac. Suppl. 126, P66; Bentley, J.C. et al. (1997) J. Psychopharmacol . Suppl. A64, 255; oolley M. L. et al. (2001) Neuropharmacology) . Se han identificado compuestos que tienen una afinidad y selectividad incrementadas para el receptor 5-HTd, por ejemplo en el documento WO 00/34242 y por Isaac, M. et al. (2000) 6-Bicyclopiperazinyl -l -arylsulfonylindoles and 6-Bicyclopiperidinyl-l -arylsulfonylindoles deriva tives as novel , potent and selective 5-HT6 receptor antagonists . Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 10:1719-1721 (2000) . Los documentos WO 2004/000828 y WO 02/ 100822, ambos a nombre de Biovitrum AB, describen derivados de sulfonamida que se unen al receptor 5-HT6 y que se pueden utilizar para el tratamiento de condiciones médicas relacionadas con obesidad, diabetes tipo II, y/o trastornos del SNC. Sin embargo, los derivados de sulfonamida de conformidad con la presente invención no han sido descritos previamente .

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS La figura 1 representa los efectos del tratamiento con el ejemplo 1 sobre el peso corporal. La figura 2 representa los efectos del tratamiento con el ejemplo 1 sobre el consumo de alimentos.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Se ha descubierto en forma sorpresiva que los compuestos de la fórmula (I) muestran afinidad y selectividad para el receptor 5-HT6 como antagonistas a un intervalo nanomolar bajo, cuya afinidad y selectividad son inesperadamente altas en comparación con compuestos cubiertos por la técnica antecedente. Los compuestos de conformidad con la invención y sus sales farmacéuticamente aceptables tienen actividad de antagonista, de agonista y de agonista parcial del receptor 5-HT6 y se cree que tienen uso potencial en el tratamiento o profilaxis de obesidad y diabetes tipo II, para lograr la reducción de peso corporal y de ganancia de peso corporal, así como en el tratamiento o profilaxis de trastornos del sistema nervioso central tal como ansiedad, depresión, ataques de pánico, trastornos de la memoria, trastornos cognitivos, trastornos del sueño, migraña, anorexia, bulimia, trastornos de alimentación en exceso, trastornos obsesivo-compulsivos, psicosis, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, corea de Huntington y/o esquizofrenia, Trastornos Hiperactivos de Déficit de la Atención (ADHD por sus siglas en inglés) , abuso de drogas. La reducción de peso corporal y de ganancia de peso corporal (por ejemplo tratando los trastornos de peso corporal) se logra entre otras cosas mediante reducción de la ingesta de alimentos. Tal como se utiliza en la presente invención, el término "trastornos de peso corporal" se refiere a los trastornos ocasionados por un desequilibrio entre la ingesta de energía y el gasto de energía, lo que da como resultado peso corporal anormal (por ejemplo, excesivo) . Dichos trastornos de peso corporal incluyen obesidad.

Compuestos de la fórmula (I) Un objetivo de la presente invención es un compuesto de la fórmula (I): o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la cual puede ser que: R1 sea metoxi y R2 sea metilo; o R1 sea metoxi y R2 sea hidroximetilo; o R1 sea hidroxilo y R2 sea metilo. Los compuestos de la formula (I) se pueden utilizar como tal o, en donde sea apropiado, como sales farmacológicamente aceptables (sales acidas o básicas de adición) de los mismos. Las sales de adición farmacológicamente aceptables como se mencionó anteriormente pretenden comprender las formas salinas acidas y básicas no tóxicas, terapéuticamente activas que los compuestos puedan formar. Los compuestos que tienen propiedades básicas se pueden convertir en sus sales acidas de adición farmacéuticamente aceptables mediante tratamiento de la forma de base con un ácido apropiado. Los ejemplos de ácidos incluyen ácidos inorgánicos, tales como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido yodhídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico; y ácidos orgánicos tales como ácido acético, ácido propanóico, ácido hidroxiacético, ácido láctico, ácido pirúvico, ácido glicólico, ácido maleico, ácido malónico, ácido oxálico, ácido bencensulfónico, ácido toluensulfónico, ácido metansulfónico, ácido trifluoroacético, ácido fumárico, ácido succínico, ácido málico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido salicílico, ácido p-aminosalicílico, ácido pamoico, ácido benzoico, ácido ascórbico y similares. Los ejemplos de formas salinas básicas de adición son las sales de sodio, potasio, calcio, y las sales con aminas farmacéuticamente aceptables tales como, por ejemplo, amoníaco, alquilaminas, benzatina, y aminoácidos, tales como, por ejemplo arginina y lisina. El término sal de adición tal como se utiliza en la presente invención también comprende los solvatos que los compuestos y sales de los mismos puedan formar, tales como, por ejemplo, hidratos, alcoholatos y similares. Para uso clínico, los compuestos de la invención se formulan como formulaciones farmacéuticas para administración por vía oral, rectal, parenteral u otro modo de administración. Las formulaciones farmacéuticas normalmente se preparan mezclando la sustancia activa, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, con excipientes farmacéuticos convencionales. Las formulaciones también se pueden preparar utilizando métodos conocidos tales como granulación, compactación, microencapsulación, revestimiento por aspersión, etc. Las formulaciones se pueden preparar mediante métodos convencionales en forma de dosificación de tabletas, cápsulas, granulos, polvos, jarabes, suspensiones, supositorios o inyecciones. Las formulaciones líquidas se pueden preparar disolviendo o suspendiendo la sustancia activa en agua u otros vehículos apropiados. Las tabletas y granulos se pueden recubrir en una manera convencional. Otro objetivo de la presente invención es un compuesto anterior para uso en terapia. Otro objetivo de la presente invención es un compuesto anterior para uso en el tratamiento o profilaxis de un trastorno relacionado con el receptor 5-HT6, tal como obesidad, diabetes tipo II, y/o trastornos del SNC, para lograr la reducción de peso corporal y de ganancia de peso corporal . Otro objetivo de la presente invención es una formulación farmacéutica que comprende un compuesto anterior como un ingrediente activo, en combinación con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable. Otro objetivo de la presente invención es una formulación farmacéutica que comprende un compuesto anterior para uso en el tratamiento o profilaxis de un trastorno relacionado con el receptor 5-HTe, tal como obesidad, diabetes tipo II, y/o trastornos del sistema nervioso central, para lograr la reducción de peso corporal y de ganancia de peso corporal. Otro objetivo de la presente invención es un método para el tratamiento o profilaxis de un trastorno relacionado con el receptor 5-HT6, tal como obesidad, diabetes tipo II, y/o trastornos del sistema nervioso central, para lograr la reducción de peso corporal y de ganancia de peso corporal, que comprende administrar a un individuo en necesidad de dicho tratamiento una cantidad efectiva de un compuesto anterior. Otro objetivo de la presente invención es un método para modular la actividad del receptor 5-HTd, que comprende administrar a un individuo en necesidad de lo mismo una cantidad efectiva de un compuesto anterior. Otro objetivo de la presente invención es el uso de un compuesto anterior para la fabricación de un medicamento para uso en el tratamiento o profilaxis de un trastorno relacionado con el receptor 5-HTß, tal como obesidad, diabetes tipo II, y/o trastornos del sistema nervioso central, para lograr la reducción de peso corporal y de ganancia de peso corporal. Los ejemplos de trastornos del sistema nervioso central son trastornos cognitivos que incluyen enfermedad de Alzheimer y dificultad cognitiva asociada con esquizofrenia. Los métodos indicados en la presente invención también pueden incluir el paso de identificar que el individuo está en necesidad de tratamiento de obesidad, diabetes tipo II, o trastornos del sistema nervioso central, o en necesidad de reducción de peso corporal y de ganancia de peso corporal. La invención también se refiere al uso cosmético de uno o más compuestos de cualesquiera de las fórmulas descritas en la presente, para ocasionar pérdida de peso, así como a formulaciones cosméticas que contienen a dichos compuestos . Incluso, la invención se refiere a un método no terapéutico para mejorar el aspecto corporal de un mamífero, incluyendo un humano, en el cual el método comprende administrar por vía oral a dicho mamífero uno o más compuestos de cualesquiera de las fórmulas descritas en la presente invención. "Una cantidad efectiva" se refiere a una cantidad de un compuesto que confiere un efecto terapéutico en el individuo tratado. El efecto terapéutico puede ser objetivo (es decir, se puede medir utilizando alguna prueba o marcador) o subjetiva (es decir, el individuo da una indicación de o siente un efecto) . Para uso clínico, los compuestos de la invención se formulan como formulaciones farmacéuticas para administración por vía oral, rectal, parenteral u otro modo de administración. Usualmente, la cantidad de compuestos activos está entre 0.1 y 95% en peso de la preparación, de preferencia entre 0.2 y 20% en peso en las preparaciones para uso parenteral y de preferencia entre 1 y 50% en peso en las preparaciones para administración por vía oral. La dosis típica diaria de la sustancia activa varía dentro de un intervalo amplio y depende de varios factores tales como, por ejemplo, la necesidad individual de cada paciente y la vía de administración. En general, las dosis orales y parenterales están en el intervalo de 50 a 300 mg por día de sustancia activa, de preferencia 50 a 150 mg por día.

Procedimientos para preparación En un aspecto adicional, la invención se refiere a métodos para elaborar compuestos de cualquiera de las fórmulas en la presente invención, que comprenden hacer reaccionar cualquiera de uno o más de los compuestos de las fórmulas indicadas en la presente invención, incluyendo cualesquiera procedimientos señalados en la presente invención. Los compuestos de las fórmulas anteriores se pueden preparar mediante, o en analogía con, métodos convencionales, y especialmente de conformidad con o en analogía con los siguientes métodos. Los compuestos químicos utilizados en la ruta de síntesis antes descrita pueden incluir, por ejemplo, solventes, reactivos, catalizadores, reactivos de grupo protector y de grupo para desprotección. Los métodos antes descritos también pueden incluir de manera adicional pasos, ya sea antes o después de los pasos descritos específicamente en la presente invención, para agregar o eliminar grupos protectores apropiados con el fin de permitir finalmente la síntesis de los compuestos de cualquiera de las fórmulas descritas anteriormente, sus formas salinas, o formulaciones que incluyan los compuestos o sus formas salinas. Además, se pueden efectuar varios pasos de síntesis en una secuencia u orden alternado para obtener los compuestos deseados. Las transformaciones de química de síntesis y las metodologías de grupo protector (protección y desprotección) útiles para sintetizar compuestos aplicables son conocidas en la técnica e incluyen, por ejemplo, aquellas descritas en R. Larock, Comprehensive Organic Transforma tions, VCH Publishers (1989); T.W. Greene y P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Syn thesis, 2a Ed., John Wiley and Sons (1991); L. Fieser y M. Fieser, Fieser and Fieser ' s Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994); y L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagen ts for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995) y ediciones posteriores de las mismas. Los siguientes ejemplos específicos se deben considerar únicamente como ilustrativos, y no limitativos del remanente de la descripción en ninguna forma. Sin elaboración adicional, se cree que el experto en la técnica puede, tomando como base la descripción en la presente solicitud, utilizar la presente invención en toda su extensión. Todas las publicaciones citadas en la presente invención quedan incorporadas para referencia en su totalidad.

EJEMPLO 1 N- [7- (4-piperidinil) oxi-1-benzofuran-5-il] -2-metoxi-5- metilbencensulfonamida El ejemplo 1 se prepara de la siguiente manera: Se produce 7-yodo-N- (2-metoxi-5-metilfenil) -1-benzofuran-5-sulfonamida partiendo de 2,3-dihidro-benzofurano. El tratamiento con ácido clorosulfónico produce el cloruro de sulfonilo correspondiente, el cual se yoda utilizando monocloruro de yodo. La aromatización se efectúa utilizando NBS, lo que da como resultado 7-yodo-N- (2-metoxi-5-metilfenil) -l-benzofuran-5-sulfonamida después de tratamiento con cresidina. La hidrólisis de 7-yodo-N- (2-metoxi-5-metilfenil) -1-benzofuran-5-sulfonamida en solución alcalina utilizando cobre como catalizador da como resultado 7-hidroxi-N- (2-metoxi-5-metilfenil) -1-benzofuran-5-sulfonamida. La reacción con un mesilato de 4- hidroxipiperidina protegido con carbamato de metilo da como resultado 4- [ (5- { [ (2-metoxi-5-metilfenil) amino] sulfonil }-l-benzofuran-7-il) oxi] piperidin-1-carboxilato de metilo, el cual se hidroliza en solución alcalina para obtener el compuesto del título.

EJEMPLO 2 (metabolito del ejemplo 1) N- [7- (4-piperidinil) oxi-l-benzofuran-5-il] -5-hidroximetil- 2-metoxibencensulfonamida EJEMPLO 3 (metabolito del ejemplo 1) N- [7- (4-piperidinil) oxi-1-benzofuran-5-il] -2-hidroxi-5- metilbencensulfonamida Pruebas biológicas Se puede determinar la capacidad de un compuesto de conformidad con la invención para unirse a un receptor 5-HT6, y para ser farmacéuticamente útil, utilizando pruebas in vivo e in vi tro conocidas en la técnica. (a) Prueba de unión a 5-HT6 El experimento de afinidad de unión para el receptor 5-HT6 se efectúa en células HEK293 transfectadas con el receptor 5-HT6 utilizando (3H)-LSD como ligando marcado de conformidad con el método general descrito por Boess F. G et al. Neuropharmacology vol. 36(4/5) 713-720, 1997.

Materiales Cultivo celular La línea celular HEK-293 transfectada con el receptor 5-HT6 se cultiva en medio Eagle modificado de Dulbecco que contiene 5% suero fetal de bovino dializado, (Gibco BRL 10106-169), 0.5 mM de piruvato de sodio y 400 µg/ml de Geneticina (G-418) (Gibco BRL10131-019) . Las células se someten a pasaje 1:10, dos veces por semana.

Químicos El radioligando [3H] LSD 60-240 Ci/mmol, obtenido a partir de Amersham Pharmacia Biotech, (Buckinghamshire, Inglaterra) está en etanol y se almacena a -20°C. los compuestos se disuelven en DMSO al 100% y se diluye con solución reguladora para unión.

Desechable Los compuestos se diluyen en placas de polipropileno con fondo en forma de V de 96 cavidades Costar (Corning Inc. Costar, NY, EE.UU). Las muestras se incuban en Optiplacas Packard (Packard Instruments B. V., Groningen, Los Países Bajos) . La cantidad total de radio-ligando agregado se mide en placas Barex de 24 cavidades de Packard (Packard Instruments B. V., Groningen, Los Países Bajos) en presencia de fluido para centelleo Microscint™ 20 (Packard Bioscience, Meriden, CT, EE.UU.).

Solución reguladora La solución reguladora para unión consiste de HEPES 20 mM, 150 mM de NaCl, 10 mM de MgCl2, y 1 mM de EDTA, pH 7.4.

Métodos Preparación de membrana Las células se cultivan hasta aproximadamente 90% de confluencia en cajas para cultivo NUNC de 24.5 x 24.5.

El medio se aspira, y después de enjuagar con PBS helada, las células se raspan utilizando 25 ml de solución reguladora Tris (Tris-HCl 50 mM, 1 mM de EDTA, 1 mM de EGTA, pH 7. ) y un raspador para ventanas. Las células se rompen después con un homogenizador Polytron, y la materia particulada remanente se elimina mediante centrifugación a baja velocidad, 1000 x g durante 5 minutos. Por último, las membranas se recolectan mediante centrifugación a alta velocidad (20,000 x g) , se suspenden en solución reguladora para unión, y se congelan en alícuotas a -70°C.

Unión del radioligando Las membranas celulares congeladas se descongelan, se vuelven a homogenizar inmediatamente con un homogenizador Polytron, y se acoplan a glóbulos de aglutinina de germen de trigo SPA (Amersham Life Sciences, Cardiff, Inglaterra) durante 30 minutos bajo agitación continua de los tubos. Después de acoplar, los glóbulos se centrifugan durante 10 minutos a 1000 g, y posteriormente se suspenden en 20 ml de solución reguladora para unión por cada placa de 96 cavidades. Después se inicia la reacción de unión mediante adición del radioligando y los compuestos de prueba a la suspensión de glóbulos-membrana. Después de incubar a temperatura ambiente, las placas para prueba se someten a conteo por centelleo. Se sigue el método SPA original excepto por el hecho que las membranas se preparan a partir de células HEK293 que expresan al receptor 5-HT6 de humano en lugar de hacerlo a partir de células HeLa (Dinh DM, Zaworski PG, Gill GS, Schlachter SK, Lawson CF, Smith MW. Validation of human 5-HT6 receptors expressed in HeLa cell membranes: saturation binding studies, pharmacological profiles of standard CNS agents and SPA development. Reporte Técnico de la Compañía Upjohn 7295-95-064 1995; 27 de diciembre). La unión específica de [3H]LSD llega a saturación, mientras que la unión no específica se incrementa linealmente con la concentración de radio-ligando agregado. [3H] LSD se une con alta afinidad a los receptores 5-HT6. Se estima que el valor de Kd es de 2.6 ± 0.2 nM con base a cuatro experimentos separados. La unión total a 3 nM de [3H] LSD, la concentración del radioligando utilizada en los experimentos de competición, típicamente es de 6000 dpm, y la unión específica mayor del 70%. 5-HT ocasiona una inhibición dependiente de la concentración de la unión de [3H] LSD con un valor de K¡. promedio total de 236 nM cuando se evalúa contra dos preparaciones diferentes de membrana. La variabilidad entre pruebas en tres experimentos muestra una CV de 10% con un valor promedio de Ki de 173 nM (SD 30) y un coeficiente de Hill de 0.94 (SD 0.09). La variación dentro de pruebas es de 3% (n=4). Los valores de Ki para el ejemplo 1 se presentan en la Tabla 3. Todos lo ligandos no marcados desplazan la unión específica de [3H] LSD en una manera dependiente de la concentración, aunque a potencias diferentes. El orden de rango de la potencia para los compuestos es metiotepina (2 nM) > mianserina (190 nM) « 5-HT (236 nM) > metisergida (482 nM) > mesulergida (1970 nM) .

Determinación de proteína Las concentraciones de proteína se determinan con la Prueba para Proteínas BioRad (Bradford MM. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principie of protein-dye binding. Anal Biochem 1976;72:248- 54). Se utiliza seroalbúmina de bovino como patrón de referencia.

Conteo por centelleo La radioactividad se determina en un contador de centelleo TopCount™ de Packard (Packard Instruments, Meriden, CT, EE.UU.) a una eficiencia de conteo de aproximadamente 20%. La eficiencia de conteo se determina en grupos separados de experimentos.

Experimentos de saturación Se utilizan por lo menos 6 concentraciones por duplicado de radioligando (0.1-20 nM de [3H] LSD) en experimentos de saturación. La unión específica se calcula como la diferencia entre unión total y unión no específica, la cual se determina como la unión de radioligando en presencia de 5 µM de lisurida. Bmáx y la constante de disociación, Kd, se determinan a partir de análisis de regresión no lineal utilizando la ecuación 1. Lu es la concentración de radioligando no unido, y "y" es la cantidad unida.

B . • Lu y = -^—— (ecuación 1) Lu + Kd Experimentos de competición La unión total y la no específica del radioligando se define en ocho repeticiones de cada una. Las muestras que contienen el compuesto de prueba se corren por duplicado a 11 concentraciones. Las incubaciones se efectúan a temperatura ambiente durante 3 horas. El valor de CI50, es decir la concentración de compuesto de prueba que inhibe el 50% de unión específica del radioligando, se determina con análisis de regresión no lineal y el valor de Ki se calcula utilizando el método de la ecuación 2 [Cheng Y.C. Biochem. Pharmacol. 22, 3099-3108, 1973S] .

Cl Ki = 5,0 (ecuación 2) 1 + Kd L = concentración del radioligando Kd = Afinidad del radioligando (b) Prueba de actividad intrínseca para 5-HT6 Los antagonistas para el receptor 5HTß se caracterizan midiendo la inhibición del incremento en AMPc inducido por 5-HT en células HEK 293 que expresan al receptor 5-HTß de humano (véase Boess et al. (1997) Neuropharmacology 36:713-720). En breve, se siembran células HEK293/5-HT6 en placas de 96 cavidades revestidas con polilisina a una densidad de 25, 000/cavidad y se cultivan en DMEM (Medio de Eagle Modificado de Dulbecco) (sin rojo de fenol) que contiene 5% de suero fetal de bovino dializado durante 48 horas a 37 °C en una incubadora con 5% de C02. El medio se aspira después y se reemplaza con 0.1 ml de medio para prueba (solución salina para balance de Hanks que contiene HEPES 20 mM, 1.5 mM de isobutilmetilxantina y 1 mg/ml de seroalbúmina de bovino) . Después de agregar las sustancias de prueba, 50 µl disueltos en medio para prueba, las células se incuban durante 10 minutos a 37 °C en una incubadora con 5% de C02, el medio se aspira de nuevo y se determina el contenido de AMPc utilizando un estuche para AMPc radiactivo (Amersham Pharmacia Biotech, BIOTRAK RPA559) . Se cuantifica la potencia de los antagonistas determinando la concentración que ocasione el 50% de inhibición del incremento en AMPc inducido por 5-HT (a [5-HT]= 8 veces la CE50) , utilizando la fórmula CI50,corr. = CI50/(1 + [5HT]/CE50). El ejemplo 1 tiene una afinidad selectiva para los receptores 5-HT6 , valores de Ki y CI50,Corr entre 0.5 nM y 5 µM o presenta un % de inhibición de [3H] LSD > 20% a 50 nM y es un antagonista, agonista o agonista parcial en 5-HT6. El ejemplo 1 muestra buena selectividad con respecto a 5-HT?a, 5-HT2a, 5-HT2a, 5-HT2b, y 5-HT2c (véase Tabla 3 para los valores) . Se utilizan pruebas adicionales para el ejemplo 1, véase Tabla 1.

TABLA 1 Pruebas adicionales utilizadas para el ejemplo 1 Referencias en la Tabla 1 LEVIN, M.C., MARULLO, S., MUNTANER, O., ANDERSON, B. y MAGNUSSON, Y. (2002) The myocardium-protective Gly-49 variant of the beta 1-adrenergic receptor exhibits constitutive activity and increased desensitization and down regulation. J. Biol . Chem . 217: 30429-30435. SMITH, C. y TEITLER, M. (1999) Beta-blocker selectivity at cloned human betai- and beta2-adrenergic receptors. Cardiovasc . Drugs Ther. , 13 : 123-126. KINOUCHI, K. y PASTERNAK, G. W. (1991) Evidence for K? opioid receptor multiplicity in the guinea pig cerebellum. Eur . J. Pharmacol . , 201 : 135-141 . HOPE, A.G., PETERS, J.A., BROWN, A.M., LAMBERT, J.J. y BLACKBURN, T.P. (1996) Characterization of a human 5-hidroxitryptamine3 receptor type A (h5-HT3R-As) subunit stably expressed in HEK 293 cells. Bri t . J. Pharmacol . , 118: 1237-1245. (c) Efecto sobre el peso corporal y sobre la ingesta de alimentos Materiales y métodos Compuestos de prueba El ejemplo 1 se disuelve en PEG 400 al 5% (p/v), 0.2% de Tween 80 + solución reguladora de acetato de sodio 10 mM, pH 6. La solución correspondiente se utiliza como un vehículo. La estabilidad de las soluciones se verifica después de almacenamiento durante 14 días. Las soluciones se formulan dos veces por semana y se guardan en el congelador. Las soluciones se analizan respecto a las concentraciones reales y se encuentran similares entre las dos ocasiones.

Animales Se crían cien (100) ratas Sprague-Dawley de género masculino en una dieta alta en grasa en Scanbur BK AB (Sollentuna, Suecia) las cuales después de su llegada al edificio para cuidado animal de Biovitrum están aproximadamente 700 g (17 semanas de edad). Las ratas se acondicionan y pesan durante aproximadamente tres semanas después de su llegada. Las ratas se alojan individualmente en jaulas estándar bajo condiciones ambientales constantes (Temp. 22+/-l°C, humedad 40-60%, ciclo de 12 horas de luz/oscuridad, las luces se apagan a las 10 a.m.) . Las ratas reciben la misma dieta alta en grasa (45 kcal % de grasa, 4.7 kcal/g; D 12451) que la que reciben en Scanbur. Las dietas que se adquieren de Research Diets, Inc., New Jersey, EE.UU, consisten de comprimidos y se almacenan bajo condiciones secas y frías .

Sesión experimental Se seleccionan los animales alimentados con dieta alta en grasa que ganan el peso más alto. Esta población pesa 799 ± 60 g. Las cuarenta y ocho (48) ratas seleccionadas se aleatorizan y dividen en cinco grupos de tratamiento con el fin de obtener tantos grupos homogéneos de acuerdo al peso corporal como sea posible. Cada grupo de tratamiento consiste de 12 ratas: grupo 1 -vehículo, grupo 2 - ejemplo 1 - 5 mg/kg (11 µmoles/kg) , grupo 3 - ejemplo 1 - 15 mg/kg (33 µmoles/kg), grupo 4 -ejemplo 1 - 30 mg/kg (66 µmoles/kg). Se asignan nueve (9) ratas adicionales para medición de exposición al compuesto y farmacocinética en cada grupo de dosis en paralelo durante los días 7 y 29. El estudio se inicia mediante mediciones de línea basal durante cinco días con el fin de acostumbrar las ratas al procedimiento y a los experimentadores. El compuesto de prueba se administra por vía oral una vez por día a las 9-10 a.m. En un volumen de 2.5 ml/kg, es decir, un promedio de 2 ml por rata (800 g) . Se pesan los comprimidos y el cuerpo cada día en conexión con las inyecciones. Los botes de agua se pesan una vez por semana. Las pesadas se efectúan con una báscula Mettler Toledo PR 5002 asistida por computadora. Todos los datos se transfieren a una plantilla Excel. En el día 28, se muestrea sangre del tronco para determinación de glucosa sérica, insulina, leptina, ácidos grasos libres, triglicéridos, colesterol, HDL, LDL, ALAT, ASAT y urea. También se determina el hematocrito. Se extirpan tejido adiposo blanco del epidídimo, hígado y músculo gastrocnemio, y se pesan.

Farmacocinética Como se describió anteriormente, los animales satélite para exposición a plasma (3 animales/dosis) se tratan por vía oral con 5, 15 y 30 mg/kg/día - Ejemplo 1. Las muestras de sangre del día 7 se toman de la vena de la cola en los puntos de tiempo predosis, 10 min, 30 min, 1 h, 2 h, 3 h, 4 h, 6 h, 8 h, y 24 h después de la dosificación. De los animales en el grupo de tratamiento de 15 mg/kg/día, se toman muestras de sangre nuevas en el día 28 en los puntos de tiempo correspondientes a los del día 7. Las muestras de sangre (apr. 150 µl) se muestrean en tubos heparinizados y se colocan en hielo hasta la centrifugación (4000 rpm, 5 min, +4°C). El plasma se almacena a -20°C hasta el análisis. Las muestras de sangre se analizan mediante HPLC y espectrometría de masas en serie por ionización de electroaspersión.

Estadísticas Los datos de ingesta de alimento y agua, y peso corporal se calculan en gramos y en % del valor basal y se expresan como la media +/- Desv. est. y/ o +/- SEM. El valor basal en el día antes del inicio del tratamiento (día 0) se considera representativo debido a que el promediar los valores con respecto a dos días de pretratamiento no cambia los resultados. Los datos de peso corporal e ingesta de alimento se analizan estadísticamente utilizando ANOVA de dos vías, con una sola variable con mediciones repetidas (tratamiento x tiempo) seguido por ANOVA de una vía para comparación entre los grupos de tratamiento en puntos de tiempo seleccionados. Las mediciones de química clínica se analizan mediante ANOVA de una vía seguido por la prueba t de Dunnetts para probar la significancia de los grupos de tratamiento contra control con vehículo. Una diferencia entre los grupos se considera significativa si P<0.05. La evaluación estadística se efectúa utilizando SPSS para Windows.

Resultados Efecto sobre el peso corporal El objetivo del estudio a largo plazo es estudiar si un periodo prolongado de tratamiento durante cuatro semanas puede dar como resultado o no una reducción de peso corporal mantenida y también para poder determinar la dosis mínima efectiva. La dosis se seleccionan tomando como base estudios anteriores cortos y a largo plazo con el ejemplo 1. El peso corporal es reducido en forma significativa por el ejemplo 1 a través de todo el periodo de tratamiento completo (grupos ANOVA repetidos F(3,42) =12.6; P<0.001) (figura 1). Las reducciones en peso corporal son 3.9, 3.7 y 6.9% para las dosis de 5, 15 y 15 mg/kg respectivamente (prueba t de Dunnetts P<0.001 para todos los grupos contra el vehículo) (Véase Tabla 2) .

TABLA 2 Sumario del efecto del tratamiento de 28 días con el ejemplo 1 sobre el peso c DIO La ganancia en peso corporal se calcula como día 28-inicial; reducción significa gramos o % de reducción contra vehículo en el día 28. 10 Los valores de P se basan en valores básales (%) utilizando la prueba t de Dunnetts 15 Efecto sobre la ingesta de alimento El ejemplo 1 reduce la ingesta de alimentos en forma significativa durante los primeros siete días como se muestra en la figura 2 (Grupos de ANOVA repetidos F(3, 42)=9.887; P<0.001). La prueba t de Dunnets muestra que las dosis de 15 y 30 mg/kg son significativamente diferentes del vehículo (P<0.001) mientras que la dosis de 5 mg/kg no lo es. Por lo tanto, la dosis efectiva mínima es 15 mg/kg. El efecto sobre la ingesta de alimentos se atenúa durante los días 8 a 14 pero permanece reducido durante el resto del periodo de tratamiento, abatiendo estadísticamente significativo (Grupos F(3, 42)=2.459; P<0.076). La reducción promedio a lo largo de los días 15 a 28 es de 7-12% pero sólo la dosis más alta alcanza significancia estadística (P<0.035).

TABLA 3 Datos biológicos para la unión in v±tzo del ejemplo 1 en el receptor 5-HT6 TABLA 3 (cont.) En las tablas 4-6, algunos valores como los que se dan en la tabla 3 para el ejemplo 1 se dan para un compuesto cubierto por la técnica antecedente: TABLA 4 Valores dados para el ejemplo 148 (N-(7-piperazin-l-il-benzofuran-5-il) -1-naftilsulfonamida, clorhidrato) en el documento WO 02/ 100822. Para el ejemplo 148, la porción NH- del grupo sulfonamida está unida al anillo de benzofurano.

La tabla 4 muestra que el ejemplo 1 tiene una selectividad superior para 5-HT6 a 5-HT2a, 5-HT2b y 5-HT2c en comparación con el ejemplo 148 descrito en el documento WO 02/100822. Con el fin de lograr una buena selectividad para 5-HT6 a 5-HT2a, 5-HT2b y 5-HT2c, la Ki de unión para estos últimos receptores de ser de por lo menos 100 veces contra la unión de 5-HT6.

TABLA 5 Valores dados para el compuesto A (ácido 5-clorotiofen-2-sulfónico, [7- (piperidin-4-iloxi) -benzofuran-5-il] amida, clorhidrato) y compuesto B (N-[7-(4-piperidiniloxi) -l-benzofuran-5-il] -2-trifluorometilbencen-sulfonamida) cubiertos por no describirse específicamente en el documento WO 2004/000828. Para ambos compuestos A y B, la porción NH- del grupo sulfonamida está unida al anillo de benzofurano.

TABLA 5 (cont.) La tabla 5 muestra que el ejemplo 1 tiene tanto una selectividad superior hacia 5-HT6 para 5-HTla, 5-HTlb, 5-HT2a, 5-HT2b y 5-HT2c así como valores de inhibición superiores de ßl, ß2, K (KOP) y 5-HT3 en comparación con los compuestos A y B cubiertos por el documento WO 2004/000828. Con el fin de obtener una buena selectividad hacia 5-HT6 para ßl, ß2, K (KOP) y 5-HT3, el % de inhibición para estos últimos debe ser < 70% a 1 µM.

TABLA 6 Valores dados para el compuesto C (N-[7-(4-piperidinil) oxi-l-benzofuran-5-il] -2-metoxi-6-metilbencen-sulfonamida) y compuesto D (N-[7-(3- piperidinil) oxi-1-benzofuran-5-il] -2-metoxi-5-metilbencensulfonamida) cubiertos por no describirse específicamente en el documento WO 2004/000828. Para ambos compuestos C y D, la porción S02- del grupo sulfonamida está unida al anillo de benzofurano.

La tabla 4 muestra que el ejemplo 1 tiene una selectividad superior hacia 5-HT6 para 5-HT2a, 5-HT2b y 5-HT2c en comparación con los compuestos A y B cubiertos por el documento WO 2004/000828.

Claims (16)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN Habiendo descrito el presente invento se considera como novedad y por lo tanto se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes: REIVINDICACIONES

1.- Un compuesto de la fórmula (I] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la cual puede ser que: R1 sea metoxi y R2 sea metilo; o R1 sea metoxi y R2 sea hidroximetilo; o R1 sea hidroxilo y R2 sea metilo.

2.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 para uso en terapia.

3.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 para uso en el tratamiento o profilaxis de un trastorno relacionado con el receptor 5-H?6, , tal como obesidad, diabetes tipo II, para lograr la reducción de peso corporal y de ganancia de peso corporal.

4.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 para uso en el tratamiento o profilaxis de un trastorno relacionado con el receptor 5-HT6 que se selecciona a partir de trastornos del sistema nervioso central .

5. - Un compuesto de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque los trastornos del sistema nervioso central son trastornos cognitivos incluyendo enfermedad de Alzheimer y dificultad cognitiva asociada con esquizofrenia.

6.- Una formulación farmacéutica que comprende un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 como un ingrediente activo, en combinación con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

7. - Una formulación farmacéutica que comprende un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 para uso en el tratamiento o profilaxis de un trastorno relacionado con el receptor 5-HT6, tal como obesidad, diabetes tipo II, para lograr la reducción de peso corporal y de ganancia de peso corporal .

8.- Una formulación farmacéutica que comprende un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 para uso en el tratamiento o profilaxis de un trastorno relacionado con el receptor 5-HT6 que se selecciona a partir de trastornos del sistema nervioso central.

9.- Una formulación farmacéutica de conformidad con la reivindicación 8, caracterizada porque los trastornos del sistema nervioso central son trastornos cognitivos incluyendo enfermedad de Alzheimer y dificultad cognitiva asociada con esquizofrenia.

10.- Un método para el tratamiento o profilaxis de un trastorno relacionado con el receptor 5-HT6, tal como obesidad, diabetes tipo II, para lograr la reducción de peso corporal y de ganancia de peso corporal, que comprende administrar a un individuo en necesidad de dicho tratamiento una cantidad efectiva de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1.

11.- Un método para el tratamiento o profilaxis de un trastorno relacionado con el receptor 5-HT6 que se selecciona a partir de trastornos del sistema nervioso central, que comprende administrar a un individuo en necesidad de dicho tratamiento una cantidad efectiva de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1.

12.- Un método de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque los trastornos del sistema nervioso central son trastornos cognitivos incluyendo enfermedad de Alzheimer y dificultad cognitiva asociada con esquizofrenia.

13.- Un método para modular la actividad del receptor 5-HT6, que comprende administrar a un individuo en necesidad de lo mismo una cantidad efectiva de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1.

14.- El uso de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 para la fabricación de un medicamento para uso en el tratamiento o profilaxis de un trastorno relacionado con el receptor 5-HT6, tal como obesidad, diabetes tipo II, para lograr la reducción de peso corporal y de ganancia de peso corporal.

15.- El uso de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 para la fabricación de un medicamento para uso en el tratamiento o profilaxis de un trastorno relacionado con el receptor 5-HT6 que se selecciona a partir de trastornos del sistema nervioso central.

16.- El uso de conformidad con la reivindicación 15, caracterizado porque los trastornos del sistema nervioso central son trastornos cognitivos incluyendo enfermedad de Alzheimer y dificultad cognitiva asociada con esquizofrenia .