KR890003439B1

KR890003439B1 - 뉴클레오시드 및 이의 제조방법

Info

Publication number: KR890003439B1
Application number: KR1019850009042A
Authority: KR
Inventors: 부어 그린데이 제랄드; 왜인 허텔 래리
Original assignee: 일라이 릴리 앤드 캄파니; 매리 앤 터커
Priority date: 1984-12-04
Filing date: 1985-12-03
Publication date: 1989-09-21
Also published as: ATE92499T1; CN85109409A; US5464826A; JPH0637394B2; KR860004920A; ES549547A0; HK113693A; IE60328B1; DE3587500D1; EP0184365A3; DK162965C; PT81559B; IL77133A; DE3587500T2; CA1264738A; EP0184365A2; NZ214364A; PT81559A; DK162965B; IE853038L

Abstract

내용 없음.

Description

뉴클레오시드 및 이의 제조방법

본 발명은 신규한 다음 일반식(Ⅱ)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염, 및 이의 제조방법에 관한 것이다:

상기식에서, R⁶은 수소 또는 C₁-C₄알킬이고 ; R⁷은 일반식

의 파리미딘 또는 퓨린 염기중 어느 하나이며 ; Q는 N, C-(C₂-C₄알킬) 또는 C-아미노이고 ; X는 N 또는 C-R⁴이며 ; R⁸은 수소 또는 C₁-C₄알킬이고 ; R⁴는 수소, C₁-C₄알킬, 아미노, 브로모, 플루오로, 클로로 또는 요오도이며 ; 단, X가 N인 경우에만 R⁶및 R₈은 모두 수소일 수 있다.

한때는 암 치료가 불가능한 것으로 생각되었으나, 과거 10년 동안 이러한 불치병의 참상을 억제하기 위해 대단한 발전이 있어왔다. 현재, 생존율을 증가시키는 어러가지 약물이 임상적으로 사용되고 있다. 가장 통상적으로 사용되는 종양 억제제는 메토트렉세이트, 독소루비신 및 빈카 알칼로이드(예:빈크리스틴)를 포함한다. 그러나, 치료할 환자에게 안정성을 제공하는 보다 효과적인 화합물을 개발하려는 연구가 계속되고 있다. 본 발명은 종양치료에 있어서 중요한 개선방법을 제공한다.

본 발명은 하기 일반식(Ⅰ)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 염의 약제학적 유효량을 포유류에게 투여하여 포유류의 감수성 신생물을 치료하는 방법을 제공한다.

상기식에서, R¹은 수소, C₁-C₄알킬 또는

이고 ; R²는 일반식

의 염기중 어느 하나이며 ; X는 N 또는 C-R₄이고 ; R³는 수소, C₁-C₄알킬 또는

이며 ;

R⁴는 수소, C₁-C₄알킬, 아미노, 브로모, 플루오로, 클로로 또는 요오도이고 ; R⁵는 각각 수소 또는 C₁-C₄알킬이다. 따라서 본 발명은 감수성 신생물 치료용 약제를 제조하기 위한 일반식(Ⅰ)의 화합물의 용도에 관한 것이다.

본 발명은 상기 일반식(Ⅱ)의 화합물 뿐만 아니라, 다음 일반식(Ⅲ)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염도 제공한다 ;

상기식에서, R⁶는 수소 또는 C₁-C₄알킬이고 ; R⁹는

또한, 본 발명은 (a) 일반식 R⁷H의 피리미딘 염기(이는 상술한 바와 같다) 또는 이의 보호된 유도체를 하기 일반식(Ⅳ)의 카보하이드레이트 또는 이의 보호된 유도체와 커플링시키고, 경우에 따라, 존재하는 보호그룹은 제거하여 피리미딘 염기 생성물을 제조하고, (b) 염기가 푸린인 일반식(Ⅱ) 또는 일반식(Ⅲ)의 화합물을 목적하는 경우에는 화합물의 퓨린 부분의 C-2 및/또는 C-6 치환체가 할로겐인 상응하는 퓨린 뉴클레오시드 화합물을 암모니아와 반응시키고, 경우에 따라, 생성물을 알킬화시킴을 특징으로 하여, 상술한 일반식(Ⅱ) 또는 (Ⅲ)의 화합물을 제조하는 방법에 관한 것이다.

상기식에서, R⁶은 상술한 바와 같고 ; Leav는 이탈그룹이다.

본 발명은 또한 일반식(Ⅱ) 또는 (Ⅲ)의 화합물이 약제학적으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제와 혼합된 상태로 함유된, 포유동물의 감수성 신생물을 치료하기에 유용한 약제학적 제제를 제공한다. 또한, 표유류의 화학요법에 사용되는 일반식(Ⅱ) 또는 (Ⅲ)의 화합물을 제공한다.

본 발명에 사용되는 화합물은 바람직하게는 D-글리세르알데히드 케토나이드를 C₁-C₄알킬 브로모디플루오로아세테이트와 반응시켜 알킬 3-디옥솔아닐-2,2-디플루오로-3-하이드록시 프로피오네이트를 수득함으로써 제조한다. 하이드록시프로피오네이트를, 보호되고 환원된 락톤으로 가수분해시켜 2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 또는 크실로즈 유도체를 수득한다. 이 화합물의 하이드록시 그룹에는 이탈그룹이 있으며, 생성된 탄수화물은 적절한 염기와 커플링한다. 마지막으로 생성된 보호된 뉴클레오시드를 탈보호시켜 목적하는 화합물을 수득한다. 전 반응도식을 하기에 나타내었다.

상기식에서, R¹⁰및 R¹¹은 각각 C₁-C₃알킬이고 ; "prot"는 하이드록시 보호그룹이며 ; "Leav"는 이탈그룹이다.

일반적으로, 2-데스옥시-2,2-디플루오로카보하이드레이트 염기와 커플링시키는 동안 유리 하이드록시그룹을 보호된 하이드록시 그룹으로 전환시키는 것이 바람직하다. 보호그룹은 합성 유기화학에 통상적으로 사용되는 그룹이다. 하이드록시그룹상에 유효하게 존재할 수 있고 반응이 완결되면 쉽게 제거될 수 있는 그룹을 선택하는 것이 통상적이다. 적절한 그룹은 하기 문헌에 기술되어 있는 그룹일 수 있다.

[참조 : Protective Groups in Organic Chemistry의 Chapter 3, Mcomie, Ed., Plenum Press, Mew Youk(1973) : 및 Protective Groups in Organic Synthesis의 Chapter 2, Greene, John Wiley & Sons, New York(1981)].

통상적으로 사용되는 하이드록시-보호그룹에는 포르밀,

, 2-클로로아세틸, 벤질, 디페닐메틸, 트리페닐메틸, 4-니트로벤질, 페녹시카보닐, C₁-C₄알킬(예 : t-부틸), 메톡시메틸, 테트라하이드로 피라닐, 알린, 테트라하이드로티에닐, 2-메톡시에톡시메틸, 메톡시아세틸, 페녹시아세틸, 이소부티릴, 에톡시카보닐 및 벤질옥시카보닐이 있다. 실릴 하이드록시 보호그룹은 대부분이 물 또는 알콜과 접촉하여 쉽게 분해되므로 특히 편리하다. 이러한 그룹에는 특히 트리메틸실릴, 및 이소프로필디메틸실릴, 메틸디이소프로필실릴, 또는 트리이소프로필실릴이 포함될 수 있다. t-부틸디메틸실릴 그룹은 특별한 경우이며, 본 발명의 합성에서 보호그룹으로서 바람직하고, 이는 분해되기 어려우므로 하이드록시 그룹으로부터 이를 제거하기 위해서는 할로겐화 수소산과 같은 시약이 필요하다.

리보즈 또는 크실로즈는 환의 1-위치에 하이드록시 그룹을 가진다. 탄수화물을 염기와 반응시켜 본 발명에 사용된 화합물을 형성시키려면 이탈그룹은 1-위치에 존재해야 한다.

이탈그룹은 유기합성에서 통상적으로 사용되는 이탈그룹이다. 바람직한 이탈그룹은 설포네이트이며, 그중 메탄설포네이트가 가장 바람직하다. 톨루엔설포네이트, 에탄설포네이트, 이소프로판설포네이트, 4-메톡시벤젠설포네트, 4-니트로벤젠설포네이트, 2-클로로벤젠설포네이트, 클로로 및 브로모와 같은 통상적인 다른 이탈 그룹도 사용할 수 있다.

본 발명에 사용된 화합물의 합성에 사용된 탄수화물은 하기 일반식의 D-글리세르알데히드 케토나이드를 C₁-C₄알킬 브로모디플루오로아세테이트, 바람직하게는 에틸 에스테르와 반응시켜 제조한다 :

상기식에서, R¹⁰및 R¹¹은 상술한 바와 같다.

바람직한 글리세르알데히드 케토나이드는 R¹⁰및 R¹¹이 둘다 메틸인 아세토나이드이다[참조 : Fischer and Baer, Helv. Chim. Acta. 17, 622(1934)]. 에틸 브로모디플루오로 에세테이트를 우선 제조한다 [참조 : Morel 및 Dawans, Tet. 33 1445(1977)].

케토나이드 및 할로아세테이트의 반응은 마그네슘 또는 바람직하게는 아연과 같은 활성화 금속 존재하에서 수행한다. 반응 혼합물에 초음파 에너지를 적용시키면 가장 쉽게 활성화된다. 이러한 방법으로 활성화시키면 반응 혼합물에 존재하는 소량의 물이 조정되어, 무수 조건을 유지할 필요가 없으며, 활성화 금속을 제조하고 주의깊게 보관할 필요가 없다. 그러나, 경우에 따라, 금속은 그 분야에 공지된 통상적인 방법으로 활성화시킬 수 있다. 금속의 양은 약 동몰량이 가장 바람직하다.

반응은 적절한 온도에서 테트라하이드로푸란 및 디에틸 에테르와 같은 에테르중에서 수행한다. 그러나, 반응조건에 대해 불활성인 다른 유기용매[예 : 할로겐화된 알칸(예 : 클로로포름, 디클로로메탄 또는 트리클로로에탄) 및 방향족 용매(예 : 벤젠, 톨루엔 및 크실렌)를 사용할 수 있다. 약 주위온도 내지 약 150℃ 범위의 온도를 사용할 수 있으나, 약 주위온도 내지 약 80℃의 온도가 바람직하다. 수분 내지 수시간 범위의 반응시간에서 경제적으로 허용되는 수율이 수득된다. 반응이 발열반응이며, 반응의 규모 및 반응물의 첨가속도에 따라 혼합물을 냉각할 필요가 있음을 주의해야 한다.

첫번째 반응의 생성물은 하기 일반식의 알킬 3-디옥솔아닐-2,2-디플루오로-3-하이드록시프로피오네이트이다 :

상기식에서, R¹⁰및 R¹¹은 상술한 바와 같다.

3-S-하이드록시 에난티오머에 대한 3-R-하이드록시 중간체의 비는 일반적으로 약 3:1이다. 3-R-하이드록시 에난티오머는 이의 자연 배위에서 리보즈 유도체를 생성하는 적절한 입체화학을 가지므로 이는 목적하는 첫단계의 에난티오머 생성물이다.

3-R-하이드록시 에난티오머는, 일반적으로 실라카겔상에서 0.5%메탄올을 함유하는 클로로포름으로 용출시키면서 크로마토그래피하면 3-S-에난티오머로부터 쉽게 분리될 수 있다. 각각의 형태의 하이드록시프로피오네이트를 매우 완화된 조건으로 가수분해시켜 하기 구조식으로 락톤을 형성한다 :

가수분해 단계를 적절히 조절하면, 케토나이드 작용기 및 에스테르 그룹이 한 단계내에서 분해되어 락톤이 생성된다. 가수분해 시약은 바람직하게는 약산성이온 교환수지이며, 이중 도웩스(Dowex) 50W-X₁₂(DowChemical Company)가 가장 바람직하다. 다른 온화한 가수분해 시약을 사용할 수 있으나, 다량의 부산물이 수득될 수 있다. 가수분해시키기 위해, 예를들어, 수성아세트산, 또는 프로피온산, 포름산, 클로로아세트산 또는 옥살산과 같이 비교적 강한 산을 사용할 수 있다.

락톤의 하이드록시 그룹은 케토 산소가 환원되기 전에 보호시켜야 한다. 선택된 보호그룹에 따라 통상적인 반응조건을 사용한다. 예를들어, t-부틸디메틸실릴 그룹은 가장 통상적으로 트리플루오로메탄설포네이트 형태로 제공하고, 보호반응은 루티딘, 피리딘 등과 같은 염기 존재하에서 수행한다. 아실 보호그룹(예 : 아세틸, 벤조일)은, 락톤을 아실화제(예 : 아실 클로라이드, 브로마이드, 시아나이드 또는 아지드)와 반응시키거나 적절한 무수물과 반응시킴으로써 부가시킨다. 반응은 통상적으로 염기성 용매(예 : 피리딘, 퀴놀린 또는 이소퀴놀린) 또는 3급 아민 용매(예 : 트리에틸아민, 트리부틸아민 또는 메틸피페리딘)중에서 수행한다.

반응은 또한 산 제거제(예 : 3급 아민)가 가해진 볼활성 용매중에서 수행할 수도 있다. 경우에 따라, 아실화 촉매(예 : 4-디메틸아미노피리딘 또는 4-피롤리디노피리딘)를 반응에 사용할 수 있다. 하이드록시 그룹상에 보호그룹을 제공하는 아실화 반응은 -25℃ 내지 100℃ 범위의 적절한 온도에서 수행한다. 이러한 아실화는 불활성 유기용매 또는 니이트(neat)중에서 적절한 카복실산을 산-촉매 반응시켜 수행할 수도 있다. 산촉매(예 : 황산, 다중인산 또는 메탄설폰산)를 사용할 수 있다.

아실 보호그룹은 적절한 산의 활성 에스테르, 예를 들어 디사이클로헥실 카보디이미드, 아실이미다졸, 니트로페놀, 펜타클롤페놀, N-하이드록시숙신이미드 및 I-하이드록시 벤조트리아졸과 같은 시약과 반응시켜 형성된 에스테르를 생성시키면 제공될 수도 있다.

에테르 형태의 보호그룹은 락톤을, 예를 들어, 적절한 디아조 화합물(예 : 디아조메탄, 페닐디아조메탄 또는 실릴디아조메탄)과 반응시킴으로써 형성시킨다. 이러한 반응은 통상적으로 에스테르(예 : 에틸아세테이트), 할로겐화된 용매(예 : 디클로로메탄 및 클로로포름) 및 에테르(예 : 디에틸에테르 및 테트라하이드로푸란)와 같은 용매중에서 수행한다. 공정은 일반적으로 약 -50℃ 내지 약 0℃의 저온에서 수행한다. 이러한 에테르 형성 반응은 디메틸설폭사이드, 디메틸포름아미드, 헥사메틸포스포르아미드, 아세톤 또는 아세토니트릴과 같은 용매중에서 트리메틸옥소설포늄 하이드록사이드, 트리메틸설포늄 하이드록사이드 및 트리메틸셀레노늄 하이드록사이드와 같은 시약을 사용하여 수행할 수도 있다.

상술한 실릴 보호그룹은 적절한 실릴카복스아미드 또는 비스(치환된-실릴)카복스아미드, 또는 적절하게 치환된 실라잔과 반응시키는 것과 같은 통상적인 방법을 사용하여 하이드록시 그룹상에 위치시킨다. 적절하게 치환된 실릴 메탄설포네이트, 톨루엔설포네이트 등도 유용하다. 염기성 용매를 반응에 사용하지 않을 경우에는, 일반적으로 동량의 염기가 반응 혼합물에 필요하다.

하이드록시 그룹이 보호될 경우에는, 락톤의 케토 산소를 알콜로 환원시켜 보호된 2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 또는 크실로즈를 수득한다. 가장 바람직한 환원제는 디이소부틸 알루미늄 하이드라이드이며, 약 -100℃ 내지 -20℃의 저온에서 사용한다. 산소원자 위치에서 개환될만큼 격렬한 상태가 되지않도록 조심스럽게 반응을 수행해야 한다. 광범위하게 사용되는 수소화 리튬 알루미늄과 같은 다른 금속 수소화물을 환원반응에 사용할 수도 있으나, 매우 낮은 온도를 유지해야 하고 온도가 약 -20℃ 이상으로 되기전에 수소화물이 분해되었는지를 확인해야 한다. 따라서, 매우 낮은 동결점을 가진 용매(예 : 톨루엔)를 환원반응에 사용해야 한다. 또한, 저급알칸올, 특히 에탄올, 또는 에테르(예 : 디에틸 에티르)와 같은 다른 용매를 사용할 수 있다.

염기와의 반응이 효과적으로 되려면, 적절한 이탈그룹이 탄소화물의 1-위치에 존재해야 한다. 바람직한 이탈그룹은 메탄설포닐이고, 이러한 이탈그룹을 가진 화합물은 동량의 적절한 산 제거제(예 : 트리에틸아민 등)의 존재하에서 메탄설포닐 클로라이드와 반응시킴으로써 쉽게 제공된다. 다른 설포닐 이탈그룹은 적절한 설포닐 할라이드와 동일한 방법으로 반응시킴으로써 제공된다.

클로로 또는 브로모 이탈그룹을 사용하는 경우에는, 우선 동량 이상의 산 제거제의 존재하에서 아세트산 무수물 또는 다른 아세틸 그룹원과 반응시켜 1-아세테이트 유도체를 제조하는 것이 바람직하다. 그후, 아세테이트 그룹을 약 -50℃ 내지 약 0℃의 저온에서 브롬화수소 또는 염화수소 기체를 사용하여 치환시킨다. 할로겐화수소 기체는 보호그룹, 특히 실릴 보호그룹을 제거시키는 경향이 있으므로, 이 과정을 저온에서 수행하고 할로겐화 수소를 조금씩 천천히 가해야 한다.

염기 부분이 퓨린 기질로 구성된 본 발명이 화합물은 3-및 5-위치에 보호그룹을 가진 탄수화물의 1-하이드록시 동족체를 디에틸 아조디카복실레이트 및 트리페닐포스핀의 존재하에서 염기와 바람직하게 반응시킴으로써 합성한다. 그후, 경우에 따라, 퓨린 기질을 표준 변형시킨다.

본 발명에 사용된 화합물을 형성시키기 위해 사용되는 염기는 그분야의 전문가에게 공지되어 있으므로 이들의 합성에 대해 논의할 필요가 없다. 그러나, 몇가지 염기상에 존재하는 1차 아미노 그룹은 염기를 탄수화물과 커플링시키기 전에 보호해야 한다. 통상적인 아미노 보호그룹을 사용하며, 상술한 바와같은 실릴그룹 뿐만 아니라 t-부톡시카보닐, 벤질옥시카보닐, 4-메톡시벤질옥시카보닐, 4-니트로벤질옥시카보닐, 포르밀 또는 아세틸과 같은 통상적인 그룹이 포함된다.

염기가 고방향성을 띠도록 염기상의 케토 산소원자를 엔올로 전환시키고, 탄수화물에 의해 염기가 보다 쉽게 작용되도록 하는 것이 바람직하다. 실릴 보호그룹을 형성시키면 가장 편리하게 엔올화된다. 엔올화시키기위해, 상술한 바와같은 통상적인 실릴 보호그룹을 사용할 수 있다.

보호된 탄수화물과 염기의 반응은 약 50℃ 내지 약 200℃ 범위의 온도에서 수행하는 것이 바람직하다. 이러한 반응에는 비교적 높은 비점의 용매(예 : 디메틸포름아미드, 디메틸아세트아미드 또는 헥사메틸포스포르아미드)를 사용할 수 있다. 저비점 용매가 증류되지 않도록 결합반응을 승압에서 수행하는 경우에는 통상적인 불활성 반응용매를 사용할 수 있다.

트리플루오로메탄설포닐옥시실란과 같은 반응억제제를 사용하는 경우 결합반응을 저온에서 수행할 수 있다. 상술한 바와 같은 통상적인 불활성 반응용매는 약 주위온도 내지 약 100℃ 범위의 온도에서 사용할 수 있다.

반응순서의 최종단계는 보호그룹의 제거이다. 대부분의 실릴 보호그룹은 물 또는 알콜과 접촉시키면 쉽게 분해된다. t-부틸디메틸실릴 보호그룹을 제거하기 위해서는 할로겐화 수소 기체와의 접촉과 같은 산 조건이 필요하다.

아실 보호그릅은 대략 주위온도 내지 약 100℃의 온도에서 강염기 또는 적당히 강한 염기(예 : 알칼리 금속수산화물)를 사용하여 간단히 가수분해시켜 제거한다. 각 보호그룹에는 1당량 이상의 염기가 필요하다. 이러한 가수분해는 통상적으로 하이드록실 용매, 특히 수성알칼올중에서 수행한다. 그러나, 반응을 폴리올(예 : 에틸렌글리콜), 에테르(예 : 테트라하이드로푸란), 케톤(예 : 아세톤 및 메틸에틸케톤) 및 다른 극성용매(예 : 디메틸설폭사이드)와 같은 통상적인 용매중에서 수행할 수도 있다. 아실 보호그룹의 분해는 예를들어 나트륨메톡사이드, 칼륨 t-부톡사이드, 하이드라진, 하이드록실아민, 암모니아, 알칼리금속 아미드 및 2급 아민(예 : 디에틸아민)과 같은 다른 염기를 사용하여 수행할 수도있다. 또한, 아실 보호그룹은 메탄설폰산, 염산, 브롬화수소산, 황산과 같은 산 촉매를 사용하거나 산성 이온 교환수지를 사용하여 제거할 수도 있다. 혼합물의 환류온도와 같이 비교적 높은 온도에서 가수분해시키는 것이 바람직하나, 특히 강산을 사용하는 경우에는 주위온도 만큼 낮은 온도에서 수행할 수 있다.

에테르 보호그룹의 제거는 공지된 방법으로, 예를들어 에탄티올 및 염화 알루미늄을 사용하여 수행한다.

하이드록시 또는 아미노아실 또는 알킬 그룹을 가진 본 발명의 화합물은 물론 선택적으로 탈보호시키거나, 이러한 그룹을 제거하고 표준조건으로 선택적으로 대체시킬 수 있다.

통상적이지 않은 양의 반응물이 필요한 반응단계는 없다. 통상적인 유기합성에 있어서, 1.05 내지 2배 과량의 사용이 허용될 수 있다.

본 발명에 사용된 화합물은 약제학적으로 허용되는 부가염을 형성시킬 수 있다. 이러한 염은 본 발명의 범주에 포함되는 것으로 생각되며, 하이드로브로마이드, 하이드로클로라이드, 모노-, 디-또는 트리포스페이트 에스테르 및 이러한 포스페이트, 설페이트의 나트륨염, 나트륨, 칼륨, 리튬 또는 암모늄염 이외의 그 분야의 전문가에게 공지된 다른 염을 포함할 수 있다. "약제학적으로 허용되는 염"은 온혈동물의 화학요법에 유용한 염이다.

본 발명에 사용된 화합물의 구조식은 이의 입체화학을 나타내지 않는다. 모든 배위의 화합물이 유용한 것으로 생각되며, 화합물의 입체화학은 제한하기 위한 것이 아니다. 바람직한 화합물은, 예를들어 하기와 같은 자연발생 리보즈이다 :

리보즈와 염기간 연결부의 배위는 바람직하게는 하기와 같다 :

당해 분야의 전문가는 본 발명에 사용된 뉴클레오시드의 합성에 사용되는 염기를 인지할 것이지만, 본 발명에 사용될 수 있는 제제를 더 상세히 설명하기 위해 하기의 특정 뉴클레오시드를 기술한다 :

1-(2,4-디옥소-1H, 3H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 ; 1-(4-아미노-5-클로로-2-옥소-1H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 ; 1-(4-아미노-5-브로모-2-옥소-1H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 ; 1-(4-아미노-2-옥소-1H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 ; 1-(4-아미노-5-요도-2-옥소-1H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 ; 1-(4-아미노-5-메틸-2-옥소-1H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 ; 1-(2-아미노-6-옥소-1H, 9H-퓨린-9-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 ; 1-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 ; 1-(4-아미노-5-플루오로-2-옥소-1H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 ; 1-(4-아미노-5-클로로-2-옥소-1H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로크실로즈 ; 1-(4-아미노-2-옥소-1H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로크실로즈 ; 1-(4-아미노-5-플루오로-2-옥소-1H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로크실로즈 ; 1-(4-아미노-5-메틸-2-옥소-1H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로크실로즈 ; 1-(2-아미노-6-옥소-1H, 9H-퓨린-9-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로크실로즈 ; 1-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로크실로즈 ; 또는 약학적으로 허용되는 이의 염.

하기 실시예는 본 발명을 제한하기 위한 것이 아니며, 보다 상세히 설명하기 위한 것이다.

[실시예 1]

1-(4-아미노-2-옥소-1H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈

무수 1,2-디클로로에탄 940ml 중의 3,5-비스(t-부틸디메틸실옥시)-1-메탄설포닐옥시-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 47.3g(0.1몰)에 비스-트리메틸실릴 N-아세틸시토신 48.0g(0.16몰)을 가한 다음 트리플루오로메탄설포닐옥시트리메틸실란 39.22g(0.177몰)을 가한다. 반응 혼합물을 질소 대기하에서 약 15시간 동안 환류시키고 실온으로 냉각한 다음 메탄올 16ml를 가하여 희석한다. 생성된 혼합물을 30분간 교반하고 원 용적의 약 1/2이 되도록 진공하에서 농축시킨다. 침전된 고체를 여과로써 수거하고, 여액을 10% 중탄산나트륨 약 300ml와 함께 1회 진탕하고, 염수와 함께 1회 진탕한다. 유기층을 분리하고, 진공하에 45℃에서 농축건고시킨다. 잔사를 암모니아로 포화된 메탄올 1.3l에 용해시키고, 생성된 용액을 밤새 교반한다. 휘발성 물질을 진공중에 45℃에서 제거하여 잔사 32g를 수득한다. 잔사를 메탄올 275ml에 용해시키고, 바이오래드(Biorad) 양이온 교환수지(AG 50Wx8) 100g을 생성된 용액에 가한다.

현탁액을 주위온도에서 밤새 교반한다. 수지를 여과로써 제거하고 메탄올 100ml로 1회 세정한다. 여액을 경사시켜 제거하고 수지를 메탄올 100ml 및 농축된 수산화암모늄 50ml에 현탁시킨다. 이 혼합물을 15분동안 격렬하게 교반하고 수지를 여과한다. 또 다른 새로운 메탄올성 암모니아를 사용하여 이 과정을 2회 반복한다. 염기성 메탄올성 여액을 합하고, 진공중에 45℃에서 증발시켜 갈색포움 13.8g을 수득한다. 이 물질을 100% 물로 된 워터즈프레프(Waters Prep) 500C₁₈역상 칼럼을 사용하여 크로마토그래피하여 1-(4-아미노-2-옥소-1H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 1.26g을 수득한다.

NMR(CD₃OD, 90mHz, δ) 3.7-4.65(m, 4H), 4.83(s, 4H), 5.97(d, J=8Hz, 1H), 6.24(t, J=7Hz, 1H), 7.88(d, J=8Hz, 1H).

질량 스펙트럼 m/e=263=P.

[실시예 2]

1-(4-아미노-5-요도-2-옥소-1H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈

무수 1,2-디클로로에탄 35ml중의 3,5-비스(t-부틸디메틸실옥시)-1-메탄설포닐옥시-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 1.99g(0.0042몰)에 트리스-트리메틸실릴-5-요도시토신 2.08g(0.0046몰)을 가한 다음 트리플루오로메탄설포닐옥시트리메틸실란 1.11g(0.005몰)을 가한다. 반응 혼합물을 질소대기하에서 약 16시간 동안 환류하고 실온으로 냉각한다. 메탄올 5ml을 반응혼합물에 가하고, 이 혼합물을 30분 더 교반한다. 혼합물을 여과하고 침전된 고체를 여과로써 수거한다. 여액을 감압하에서 증발건고시키고, 생성된 잔사를 무수브롬화수소로 포화된 디클로로메탄 20ml에 용해시킨다. 이 혼합물을 약 3시간 동안 교반한다.

휘발성 물질을 진공하게 45℃에서 제거한다. 잔사를 물 15ml에 용해시키고, 10% 중탄산나트륨을 사용하여 pH 7 내지 8로 중화시키고, 생성된 용액을 에틸 아세테이트 10ml로 1회 세척한다. 수층을 물/메탄올(9 : 1, v : v)을 사용하여 2.0ml분획으로 와트만 프레프(Whatman Prep) ODS-3역상 칼럼상에서 크로마토그래피하여 1-(4-아미노-5-요도-2-옥소-1H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 30mg을 수득한다.

NMR(CD₃OD, 90mHz, δ) 3.47-4.66(m, 4H), 4.78(s, 4H), 6.14(t, J=7Hz, 1H), 8.32(s, 1H).

질량 스펙트럼 m/e=389=P.

[실시예 3]

1-(2,4-디옥소-1H, 3H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈

빙초산 16ml 및 물 4ml중의 1-(4-아미노-2-옥소-1H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 190mg(0.0007몰) 용액을 약 24시간 동안 환류시킨다. 반응 혼합물을 주위온도로 냉각시키고, 휘발성 물질을 진공하에 약 60°내지 70℃에서 증발시킨다. 잔사를 톨루엔 5.0ml를 사용하여 교반하고, 생성된 용액을 수회 증발시킨다. 잔사를 메탄올 12ml에 용해시키고, 생성된 혼합물을 -15℃로 냉각시킨 다음, 무수암모니아로 포화시킨다. 용액을 주위온도에서 일야 교반한다. 휘발물질을 진공중에 45℃에서 제거한다. 잔사를 온수 약 5.0ml에 현탁시키고 불용성 물질을 여과로써 제거한다. 여액을 용출제로서 물/메탄올(9 : 1, v : v)을 사용하여 와트만 50cm 파티실(Partisil) ODS-3역상 칼럼상에서 크로마토그래피하여 반응되지 않은 출발물질을 미량함유하는 생성물 0.05g을 수득한다. 반응하지 않은 출발물질은 메틸렌 클로라이드/메탄올(9 : 1, v/v)용매용액 약 5.0ml중의 혼합물 0.5g 용액을 워터 실리카 Sep-Pak로 통과시켜 제거한다. 용출물을 진공중에 45℃에서 증발시켜 1-(2,4-디옥소-1H, 3H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 0.036g을 수득한다.

NMR(CD₃OD, 90mHz, δ) 3.54-4.48(m, 4H), 4.83(s, 3H), 5.69(d, J=8Hz, 1H), 6.10(dd, J=7Hz, 9Hz, 1H), 7.8(d, J=8Hz, 1H).

질량 스펙트럼 m/e=264=P.

[실시예 4]

1-(4-아미노-5-메틸-2-옥소-1H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈

무수 메틸렌 클로라이드 37ml중의 3,5-비스(t-부틸디메틸실리옥시)-1-메탄설포닐옥시-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 1.86g(0.0039몰), 비스-트리메틸실릴-5-메틸시토신 1.87g(0.0055몰) 및 트리플루오로메탄설포닐옥시트리메틸실란 1.34g(0.006몰) 용액을 밤새 환류시킨다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고 메탄올 1.0ml를 가한다. 침전된 고체를 여과로써 수거하고, 여액을 진공중 50℃에서 농축시켜 잔사 2.2g을 수득한다. 잔사를 열 아세톤 10ml씩으로 수회 연마한다. 경사시킨 유기층을 합하고, 진공중 45℃에서 증발시켜 황색 오일 1.67g을 수득한다. 이 물질을 메탄올/(물(v : v, 1 : 1) 15ml에 용해시키고 생성용액을 비오라드(Biorad) AG 50Wx85.0g과 함께 밤새 교반한다. 현탄액을 무수 암모니아로 포화시키고 10분동안 교반한다. 수지를 여과로써 수거하고 메탄올/암모니아(v : v, 1 : 1) 30ml에 현탁시킨다. 용액을 10분동안 교반한다. 수지를 진공여과로써 수거하고, 염기성 여액을 합하고, 진공중 50℃에서 농축시켜 오렌지색 오일 1.5g을 수득한다. 오일을 물 10ml에 용해시키고, 용출제로서 물을 사용하여 와트만 파티실 ODS-3 50cm 역상 프레프 칼럼상에서 런(run)당 2.0ml를 크로마토그래피하여 1-(4-아미노-5-메틸-2-옥소-1H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 0.07g을 수득한다.

NMR(CD₃OD, 90mHz, δ) 1.94(s, 3H), 3.53-4.62(m, 4H), 4.75(s, 4H), 6.17(t, J=8Hz, 1H), 7.67(s, 1H).

질량 스펙트럼 m/e=277=P.

[실시예 5]

1-(4-아미노-2-옥소-1H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로크실로즈

질소대기하에서, 무수 메틸렌 클로라이드 300ml중의 3,5-비스(t-부틸디메틸실옥시)-1-메탄설포닐옥시-2-데스옥시-2,2-디플루오로크실로오즈 17.89g(0.0375몰)에 트리스-트리메틸시토신 23.0g(0.063몰)을 가한 다음 트리플루오로메탄 설포닐 옥시트리메틸실란 10.84g(0.488몰)을 가한다. 용액을 밤새 환류시키고 실온까지 냉각시킨다. 20밀리리터의 메탄올을 반응혼합물에 가하고 생성용액을 약 1시간동안 격렬하게 교반한다. 침전된 고체를 여과로써 회수한다. 여액에 물 100ml를 가하고 현탄액을 30분동안 격렬하게 교반한다. 유기층을 분리하고, 진공중에 45℃에서 농축시켜 갈색오일 11.2g을 수득한다. 오일을 메탄올 95ml에 용해시키고 여기에 비오라드(Biorad)AG 50W×8 양이온 교환수지 33g을 가하고, 현탄액을 주위온도에서 밤새 교반한다. 수지를 여과로써 수거하고, 메탄올 50ml로 세척한다. 수지를 메탄올/암모니아(v : v, 1 : 1)용액 100ml와 함께 격렬하게 교반한다. 수지를 여과로써 수거하고 상기 용액에서 다시 교반한다. 수지를 수거하고, 염기성 여액을 합하고, 진공중 50℃에서 농축시켜 황색 잔사 2.09g을 수득한다. 이 물질을 물 25ml에 현탁시키고 15분동안 격렬하게 교반한다. 불용성 침전물을 여과하여 화합물 A 0.250g을 수득한다. 여액을 진공중 50℃에서 농축시켜 화합물 B 0.86g을 수득한다. 화합물 A를 메탄올 20ml에 용해시키고, 비오라드 AG 50W×8을 사용하여 주위온도에서 3일간 교반한다. 수지를 여과로써 수거하고 메탄올/농축된 수산화암모늄(v : v, 1 : 1)용액 30ml에 슬러리한다. 수지를 여과로써 수거하고 여액을 진공중 50℃에서 농축시켜 1-(2-데스옥시-2,2-디플루오로-β-D-크실로푸라노실)시토신 0.14g을 수거한다.

NMR(CD₃OD, 90mHz, δ) 3.72-4.34(m, 4H), 4.78(s, 4H), 5.86(d, J=8Hz, 1H), 6.17(d, J=15Hz, 1H), 7.78(d, J=8Hz, 1H).

질량 스펙트럼 m/e=263=P.

화합물 B를 용출제로서 물/메탄올(v : v, 1 : 1)을 사용하여 와트만 50cm ODS-3역상 프레프 칼럼상에서 크로마토그래피하여 1-(2-데스옥시-2,2-디플루오로-β-D-크실로푸라노실)시토신 0.06g을 수득한다.

NMR(CD₃OD, 90mHz, δ) 3.53-3.9(m, 2H), 4.1-4.57(m, 2H), 4.83(s, 4H), 5.9(d, J=8Hz, 1H), 6.3(dd, J=7Hz, 12Hz, 1H), 7.55(d, J=8Hz, 1H).

질량 스펙트럼 m/e=263=P.

[실시예 6]

1-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈

A. 1-(6-클로로-9H-퓨린-9-일)-3.5-비스(t-부틸디메틸실옥시)2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈

테트라 하이드로푸란 50ml중의 6-클로로푸린 0.77g(5.0mmol)용액에 트리페닐포스핀 1.31g(5.0mmol) 용액에 트리페닐 포스핀 1.31g(5.0mmol) 및 디에틸 아조디카복실레이트 0.87g(5.0mmol)을 가한다. 이 용액에 테트라하이드로푸란중의 3,5-비스(t-부틸디메틸실옥시)-1-하이드록시-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 1.99g(5,0mmol)용액을 가한다. 반응 혼합물을 실온에서 약 60시간 동안 교반하고 반응 혼합물에 3,5-비스(t-부틸디메틸실옥시)-1-하이드록시-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈0.66g(1.7mmol)을 더 가한다. 혼합물을 실온에서 6시간 동안 더 교반한다. 용매를 진공하에서 증발시키고 잔사를 소량의 디에틸 에테르중에서 밤새 교반한다. 침전된 고체를 진공여과로써 제거하고 여액을 진공하에서 농축 건고시킨다. 잔사를 실리카 70g상에서 크로마토그래피하고 클로로포름으로 용출한다. 주성분을 함유하는 분획을 합하고 용매를 증발시켜 1-(6-클로로-9H-퓨린-9-일)-3,5-비스(t-부틸디메틸실옥시)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 1.0g을 수득한다. 생성물의 구조를 NMR로 확인한다.

질량 스펙트럼=477[534(t-부틸)]

B. 1-(6-아미노-9H-푸린-9-일)-3,5-비스(t-부틸디메틸실옥시)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈

순수한 에탄올 75ml중의 1-(6-클로로-9H-푸린-9-일)-3,5-비스(t-부틸디메틸실옥시)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 0.5g(0.936mmol)용액을 약 0℃에서 수성 암모니아로 포화시킨다. 반응 플라스크를 밀봉하고 혼합물이 실온이 되도록 가온시킨다. 혼합물을 실온에서 약 72시간 동안 교반하고 휘발성 물질을 감압하에서 증발시켜 1-(6-아미노-9H-푸린-9-일)-3,5-비스(t-부틸디메틸실옥시)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 420mg을 수득한다.

질량 스펙트럼=458[515-(t-부틸)]

C. 외부 빙욕으로 약 0℃까지 냉각시킨 메틸렌 클로라이드 25ml중에 용해된 1-(6-아미노-9-푸린-9-일)-3,5-비스(t-부틸디메틸실옥시)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 100mg(0.194mmol)용액을 무수 브롬화수소 기체로 포화시킨다. 혼합물을 약 0℃에서 약 4시간 동안 교반하고 질소를 반응 혼합물을 통해 발포시킨다.

혼합물을 여과하고 수거한 고체를 메탄올로 세척하여 고체 110mg을 수득한다. 고체를 HPLC로 정제하여 β-1-(6-아미노-9H-푸린-9-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 12.1g을 수득한다.

NMR(CD₃OD, 30mHz, δ : 3.8-4.65(m, 4H) ; 4.83(bs, 4H) ; 6.33(dd, 1H) ; 8.22(s, 1H) ; 8.4(s, 1H).

질량 스펙트럼 m/e=287

[실시예 7]

A. 1-(2,6-디클로로-9H-퓨린-9-일)-3,5-비스-(t-부틸디메틸실옥시)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈

테트라하이드로푸란 100ml중의 2,6-클로로푸린 1.89g(10.0mmol)용액에 트리페닐포스핀 2.62g(10.0mmol) 및 디에틸 아조디카복실레이트 1.74g(10.0mmol)을 가한다. 이 혼합물에 테트라 하이드로푸란 25ml중의 3,5-비스(t-부틸디메틸실옥시)-1-하이드록시-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 3.98(10.0mmol)용액을 가하고 혼합물을 실온에서 밤새 교반한다. 침전된 고체를 진공여과로써 제거하고 여액을 진공하에서 농축시킨다.

잔사를 디에틸 에테르 100ml에 용해시키고 용액을 실온에서 밤새 교반한다. 혼합물을 여과하고 여액을 진공하에서 증발 건고시킨다. 잔사를 에틸 아세테이트 25ml에 용해시키고 혼합물을 냉장고에 넣는다. 혼합물을 여과하고 헥산/에틸 아세테이트(4/1, v/v)로 용출하면서 HPLC로 크로마토그래피한다. 첫번째 크로마포어(chromaphore)함유 분획을 합하고, 이로부터 용매를 증발시켜 1-(2,6-디클로로-9H-퓨린-9-일)-3,5-비스(t-부틸디메틸실옥시)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 2.5g을 수득한다. m/e=[568(t-부틸)]=511.

B. 1-(2-클로로-6-옥소-1H, 9H-퓨린-9-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 및 1-(2-클로로-6-브로모-9H-퓨린-9-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈

약 0℃까지 냉각된 메틸렌 클로라이드 100ml에 용해된 1-(2,6-디클로로-9H-퓨린-9-일)-3,5-비스(t-부틸디메틸실옥시)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 0.5g(0.88mmol)용액을 무수브롬화수소 기체로 포화시킨다.

혼합물을 0℃에서 약 7시간 동안 교반한 다음 실온에서 약 16시간 동안 교반한다. 혼합물을 여과하고 침전된 고체를 메탄올에 용해시킨다. 메탄올성 용액을 진공하에서 농축시켜 연황색 고체 1-(2-클로로-6-옥소-1H, 9H-퓨린-9-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 및 1-(2-클로로-6-브로모-9H-퓨린-9-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 혼합물 160mg을 수득한다.

m/e=각각 322, 386.

C. 1-(2-클로로-6-옥소-1H, 9H-퓨린-9-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈

1. 0N 수산화나트륨 11ml에 용해된 1-(2-클로로-6-옥소-1H, 9H-퓨린-9-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 및 1-(2-클로로-6-브로모-9H-퓨린-9-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 1.18g(3mmol)혼합물을 실온에서 3시간동안 교반한다. 혼합물의 pH를 2N 염산을 사용하여 약 7로 낮춘다. 혼합물을 진공하에 약 45℃에서 농축시킨다. 잔사를 열 메탄올에 슬러리시키고 여과한 다음 이 과정을 반복한다. 여액을 합하고 용액을 진공하에 15℃에서 농축시켜 1-(2-클로로-6-옥소-1H, 9H-퓨린-9-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 1.36g을 수득한다.

D. 이 방법이 1-(2-아미노-6-옥소-1H, 9H-퓨린-9-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈의 바람직한 합성법이다. 하기 반응으로 제조된 물질을 생물학적으로 평가할 화합물 합성에 대한 대조용 표본으로 사용한다.

약 0℃의 순수한 에탄올 30ml중의 1-(2-클로로-6-옥소-1H, 9H-퓨린-9-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 1.3g 현탄액에 무수 암모니아를 가한다. 혼합물을 밀폐된 반응용기에 넣고 약 150℃에서 밤새 가열한다. 혼합물을 열 메탄올 15ml에 현탁시키고 혼합물을 다시 여과한다. 여액을 진공하에서 농축시키고 잔사를 4ml/분의 유출율에서 용출제로 물/메탄올(9/1, v/v)을 사용하여 HPLC로 크로마토그래피하여 α-1-(2-아미노-6-옥소-1H, 9H-퓨린-9-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 10mg 및 β-1-(2-아미노-6-옥소-1H, 9H-퓨린-9-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 5mg을 수득한다.

m/e=303.

생물학적으로 시험할 화합물을 하기와 같이 제조한다 :

약 0℃의 순수한 에탄올 10ml중의 1-(2-클로로-6-옥소-1H, 9H-퓨린-9-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 및 1-(2-클로로-6-브로모-9H-퓨린-9-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 혼합물 0.26g에 무수 암모니아를 20분동안 가한다. 플라스크를 밀봉하고 약 150℃의 오일욕에 약 16시간 동안 방치한다. 휘발성 물질을 감압하에서 증발시키고, 잔사를 표준방법으로 정제하여 m/e가 322인 α-1-(2-클로로-6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 9.6mg ; m/e가 322이고, NMR(CD₃OD, 300mHz, δ)이, 3.8-4.65(m, 4H), 4.93(bs, 4H), 6.25(dd, 1H), 8.35(s, 1H)인 β-1-(2-클로로-6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 8.2mg ; (m＋1)/e가 304이고, m/e계산치가 303.1017, 실측치가 303.1009인 α-및 β-1-(2,6-디아미노-9H-퓨린-9-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 혼합물 6.5mg ; (m＋H)/e계산치 304,0857, 실측치 304,0857이고 NMR(CD₃OD, 300mHz, δ)이 3.385 내지 4.658(m, 4H), 4.9(bs, 5H), 6.15(dd, 1H), 7.98(s, 1H)인 1-(2-아미노-6-옥소-1H, 9H-퓨린-9-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 9.0mg ; m/e 304인 α-및 β-1-(2,6-디옥소-1H, 9H-퓨린-9-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보즈 9.0mg을 수득한다.

본 발명은 치료해야할 포유류에게 약제학적 유효량의 일반식(Ⅰ)의 화합물을 투여함을 특징으로 하여 포유류의 신생물을 치료하는 방법에 관한 것이다. 이러한 방법은 경구, 직장, 경피, 피하, 정맥내, 근육내 또는 비내경로와 같은 여러가지 경로로 화합물을 포유류에게 투여함을 포함한다.

용어 "약제학적 유효량"이란 포유류에게 화학요법을 제공할 수 있는 일반식(Ⅰ)화합물의 적당량을 의미한다.

활성 화합물은 광범위한 용량에 걸쳐 유효하다.

예를들어, 1일 용량은 일반적으로, 체중당 약 0.1 내지 약 1200범위이다. 성인을 치료하려면 1회 복용 또는 분복으로 약 0.1 내지 약 50mg/kg범위가 바람직하다.

그러나, 화합물의 실제 투여량은 치료해야할 상태, 투여할 특정화합물, 투여경로, 연령, 체중, 각 환자의 반응 및 환자증상의 정도와 같은 상황을 고려하여 내과의가 결정할 수 있다. 그러므로 상술한 용량범위로써 본 발명의 범위를 제한하려는 것은 아니다.

명세서에 기술한 바와같은 용어 "감수성 신생물"은 일반식(Ⅰ)의 화합물에 의해 치료될 수 있는 포유류의 비정상적인 조직성장을 의미한다. 일반식(Ⅰ)의 화합물은 고체형 및 비고체형의 모든 종양에 대해 효과적인 반면, 화합물에는 세포독성이 있으므로 쉽게 분할하는 세포의 성장을 억제시키는데 효과적이다. 본 발명의 화합물은 광범위한 활성을 가진다는 점이 특징이며, 따라서, 여러가지 조양에 대해 유용하다.

본 방법의 화합물은 약제학적제제로서 투여하는 것이 바람직하다. 그러므로, 본 발명의 또 다른 태양으로서, 포유류의 감수성 신생물 치료용 약제는 일반식(Ⅱ) 또는 (Ⅲ)의 화합물이 약제학적 담체, 희석제 또는 부형제와 혼합된 형태로 제공된다.

활성성분은 약 1중량% 내지 약 90중량% 범위로 제제에 존재할 수 있다. 활성성분은 일반적으로 담체와 혼합하거나, 담체로 희석하거나, 캅셀, 사키, 종이 또는 다른 용기 형태일 수 있는 담체내에 봉입시킬 수 있다.

담체가 희석제로 작용하는 경우, 이는 활성성분에 대해 비히클, 부형제 또는 매질로 작용하는 고체, 반고체 또는 액체 물질일 수 있다. 따라서 조성물은 정제, 환제, 분제, 로젠지제, 사키제, 엘릭시르제, 현탁제, 유제, 용액제, 시럽제, 에어로졸제(고체로서 또는 액체매질중에서), 예를들어 활성 화합물 10중량% 이하를 함유하는 연고제, 연질 및 경질 젤라틴 캅셀제, 좌제, 멸균 주사용액제 및 멸균 포장된 분말제 형태일 수 있다.

적절한 담체, 부형제 및 희석제의 예로는 락토즈, 덱스트로즈, 슈크로즈, 소르비톨, 만니톨, 전분, 아카시아검, 인산칼슘, 알기네이트, 트라가칸즈, 젤라틴, 규산칼슘, 미세결정형 셀룰로오즈, 폴리비닐 피롤리돈, 셀룰로즈, 물, 시럽, 메틸 셀룰로즈, 메틸-및 프로필 하이드록시 벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광유를 들 수 있다. 제제는 부가적으로 윤활제, 습윤제, 유화제 및 현탁제, 방부제, 감미제 또는 향료를 함유할 수 있다. 당해분야에 공지된 방법을 사용하여 환자에게 투여한 후 활성성분이 신속히 지속적으로 방출되도록 본 발명 조성물을 제형화할 수 있다.

조성물은 바람직하게 단위용량형으로 제형화하고, 각 용량형은 활성성분을 약 5 내지 약 500mg, 일반적으로 약 25 내지 약 300mg함유한다.

용어 "단위용량형"은 인체 및 다른 포유류에 대한 단위용량으로 적절한, 물리적으로 분리된 단위를 의미하며, 각 단위는 적절한 약학 담체와 혼합되어 바람직한 치료효과를 내도록 계산된 일정량의 활성물질을 함유한다.

하기 제형실시예는 본 발명에 포함된 화합물을 사용하는 특정 약제를 나타낸다. 제제의 활성성분으로서 어떤 일반식(Ⅰ)의 화합물이라도 사용할 수 있다. 하기 실시예는 기술하기 위한 것이며, 본 발명의 범주를 제한하려는 것은 아니다.

[제형실시예 1]

경질 젤라틴 캅셀은 하기 성분을 사용하여 제조한다 :

양(mg/캅셀)

1-(4-아미노-5-메틸-2-옥소-

1H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-

2,2-디플루오로리보즈 250

건조된 전분 200

마그네슘 스테아레이트 10

상기 성분을 혼합하고, 460mg양으로 경질 젤라틴 캅셀에 충진한다.

[제형실시예 2]

하기 성분을 사용하여 정제를 제조한다 :

양(mg/캅셀)

1-(2-옥소-4-아미노-1H-피리미딘-

1-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로-

리보즈 250

셀룰로즈, 미세결정형 400

훈증된 이산화실리콘 10

스테아르산 5

상기 성분을 혼합하고 각 중량이 665mg인 정제를 제조한다.

[제형실시예 3]

하기 성분을 함유하는 에어로졸 용액을 제조한다 :

중량%

1-(2,4-디옥소-1H, 3H-피리미딘-

1-일)-2-데스옥시-2,2-디플루오로-

리보즈 0.25

에탄올 29.7

추진제 22(클로로디플루오로메탄)70.00

활성 화합물을 에탄올과 혼합하고, 혼합물을 추진체 22일부에 가한 다음, -30℃로 냉각시키고, 충진장치로 옮긴다. 목적하는 양을 스테인레스 강 용기에 넣고 나머지 추진체로 희석한다. 밸브 유니트를 용기에 장치한다.

[제형실시예 4]

활성성분 60mg을 함유하는 정제를 하기와 같이 제조한다 :

1-(4-아미노-2-옥소-1H-피리미딘-

1-일)-데스옥시-2, 2-디플루오로-

리보즈 60mg

전분 45mg

미세결정형 셀룰로즈 35mg

폴리비닐 피롤리돈

(물중의 10% 용액으로서) 4mg

나트륨 카복시메틸 전분 4.5mg

마그내슘 스테아레이트 0.5mg

탈트 1mg

디플루오로 뉴클레오시드 전분 및 셀룰로즈를 45번 메쉬 유.에스.체로 통과시키고 충분히 혼합한다.

폴리비닐 피롤리돈 용액을 생성된 분말과 혼합한 다음 14번 메쉬 유.에스.체로 통과시킨다. 이렇게 제조한 입자를 50 내지 60℃에서 건조시키고 18번 메쉬 유.에스.체로 통과시킨다. 미리 60번 메쉬 유.에스.체로 통과시켜 둔 나트륨 카복시메틸 전분, 마그네슘 스테아레이트 및 탈크를 입자에 가하고 혼합한 다음 정제기상에서 압착하여 각 중량이 150mg인 정제를 수득한다.

[제형실시예 5]

약제 80mg을 함유하는 캅셀을 하기와 같이 제조한다 :

1-(4-아미노-2-옥소-1H-피리미딘-

1-일)-2-데스옥시-2, 2-디플루오로-

크실로즈 80mg

전분 59mg

미세결정형 셀룰로즈 59mg

마그네슘 스테아레이트 2mg

활성성분, 셀룰로즈, 전분 및 마그네슘 스테아레이트를 혼합하고, 45번 메쉬 유.에스.체로 통과시킨 다음 200mg양으로 경질 젤라틴 캅셀에 충진시킨다.

[제형실시예 6]

뉴클레오시드 225mg을 함유하는 좌제를 하기와 같이 제조한다 :

1-(2, 4-디옥소-1H, 3H-피리미딘-

1-일)-2-데스옥시-2. 2-디플루오로-

리보즈 225mg

포화된 지방산 글리세라이드를 가해 2g으로 만든다.

뉴클레오시드를 60번 메쉬 유.에스.체로 통과시키고, 최소 펼요량의 열을 사용하여 미리 용융시켜 둔 포화지방산 글리세라이드에 현탁시킨다. 혼합물을 공정 2g용량의 좌제 주형기에 붓고 냉각시킨다.

[제형실시예 7]

용량 5ml당 약제 50mg을 함유하는 좌제를 하기와 같이 제조한다 :

1-(4-아미노-5-메틸-2-옥소-1H-

피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2, 2-

디플루오로리보즈 50mg

나트륨 카복시메틸 셀룰로즈 50mg

시럽 1.25ml

벤조산 용액 0.10ml

향료 적당량

색소 적당량

정제수를 가해 5ml로 만든다.

약제를 45번 메쉬 유.에스.체로 통과시키고 나트륨 카복시메틸 셀룰로즈 및 시럽과 혼합하여 매끄러운 페이스트를 제조한다. 벤조산 용액, 향료 및 색소를 소량의 물로 희석한 다음 교반하면서 가한다. 충분한 물을 가하여 목적하는 용적으로 만든다.

[제형실시예 8]

정맥내 투여제제를 하기와 같이 제조한다 :

1-(4-아미노-2-옥소-1H-피리미딘-

1-일)-2-데스옥시-2. 2-디플루오로-

리보즈 100mg

등장성 염수 1000mg

상기 성분 용액을 감수성 신생물을 치료할 필요가 있는 포유류에게 1ml/분의 속도로 포유류에게 정맥내로 투여한다.

본 발명에 사용된 대표적 화합물의 활성은, 효능적인 종양억제 활성을 가진 화합물을 시험하기 위해 당해 분야에서 통상적으로 사용하는 표분 스크리인에서 입증되었다. 예를 들어, 이러한 스크리인은 빈카알칼로이드와 같이 시판되고 있는 암 약물의 종양억제 활성을 입증하기 위해 사용되었다.[참조 : 예를 들어, Miller등의 J.Med, Chem, Vol 20, No.3 409(1977) 및 Sweeny등의 Cancer Research 38,2886(1978)].

일반식(I)의 화합물인 인체의 백혈성 세포(CCRF-CEM셀라인)의 성장을 억제한다는 점에 있어서 세포독성이 있다. 하기 표1은 여러가지 대표적인 일반식(I)화합물의 시험결과이다. 표에서 세로행 1은 화합물의 명칭이고, 세로행 2는 IC₅₀(50% 성장억제농도 ; mcg/ml)이다.

[표 1]

포유류의 감수성 신생물을 치료하기 위한 일반식(I)의 화합물의 효능을 입증하기 위해 실시예 1의 화합물, 1-(4-아미노-2-옥소-1II-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2, 2-디플루오로리보즈, 실시예 5의 화합물, 1-(4-아미노-2-옥소-1H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2, 2-디플루오로크실로즈, 및 실시예 6의 화합물, 1-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-데스옥시-2, 2-디플루오로리보즈를, 대표적인 종양계 L1210V 임파성 백혈병을 가진 동물에서 시험한다.

L 1210 V 백혈병에 대한 이들 화합물의 효능을 시험하는 연구는 1×10⁶세포를 IP접종시켜 시작한다.

접종후 24시간에 치료를 시작한다. 요법의 반응은 10마리의 처리군 동물의 평균수명을 10마리의 대조군 동물의 수명과 비교하여 결정한다 ; 대조군 동물의 수명을 능가하는 처리군의 수명연장을 퍼센트로 나타낸다.

표 2는 이러한 종양을 가진 마우스에 여러가지 실험을 행한 결과이다. 표에서 세로행 1은 시험 화합물의 실시예 번호 ; 세로행 2는 실험번호 ; 세로행 3은 화합물의 용량(mg/kg) ; 세로행 4는 투여경로 ; 세로행 5는 복용일정, 즉 마우스에게 화합물을 투여하는 시기(일) ; 세로행 6은 대조군 마우스와 비교한 처리군 마우스 수명의 평균적인 증가율 ; 세로행 7은 각 그룹의 마우스 수중의 독성사(死) ; 세로행 8은 생존수, 즉, 45일 지난후 각 그룹의 생존수를 나타낸다.

[표 2]

실시예 1의 화합물, 1-(4-아미노-2-옥소-1H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2, 2-디플루오로리보즈, 및 실시예 5의 화합물, 1-(4-아미노-2-옥소-1H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2, 2-디플루오로크실로즈는 또다른 종양 시험계에서도 활성이 입증된다. 이러한 종양 시험계에는 가드너(Gardner) 임파육종으로 알려진 6C 3HED 임파육종(6C 3HED), CA-755 선암(CA 755), P 1534 J 임파성 백혈병(P 1534 J) 및 X 5563혈장세포 골수종(X5563)이 포함된다. 이러한 각 계를 하기에 상세히 기술한다.

6C 3HED-6C 3HED 임파육종은 1979년 이.지. 및 지.메이슨 리써치 [E.G.and G.Mason Research(Worchester, MA)]에 보존된 종양 은행(the Division of Cancer Treatment, N.C.I)으로부터 수득되었다. 첫번째 계대 접종종양을 표준기술을 사용하여 액체질소에 저장한다. 이식된 종양을 6개월마다 또는 필요에 따라 종양 은행으로부터 복구시킨다. 종양을 1주에 2회 정기적으로 계대 배양 시켜 C3H마우스에 유지시킨다(Charles River : Wilmington, MA).

CA 755-선암 755는 1980년에 이.지 및 지.메이슨 리써치[E.G and G. Mason Research(Worchester, MA)]에 보존된 종양은행(the Division of Cancer Treatment, N.C.I)으로부터 수득된 분화된 포유류 암이다. 첫번째 계대 배양종양을 표준기술을 사용하여 액체질소에 저장한다. 이식된 종양은 6개월마다 또는 필요에 따라 종양은행으로부터 복구시킨다.

종양을 1주에 1회 정기적으로 계대 배양시켜 C 57 BL/6 암컷 마우스에 유지시킨다.(Jackson Laboratory : Bar Harbor, ME).

P 1534 J-P 1534 J 임파성 백혈병(고체 형태)1974년에 잭슨 래보러토리(Jackson Laboratory : Bar Harbor, ME)로부터 수득되었다. 첫번째 계대 접종종양을 표준기술을 사용하여 액체 질소에 저장한다.

첫번째 계대 배양종양으로 종양은행을 상기 종양으로 보충시킨다. 이식된 종양은 6개월마다 또는 필요에 따라 종양은행으로부터 복구시킨다. 종양은 1주에 1회 정기적으로 계대 배양시켜 DBA/2 마우스에 유지시킨다.(Charles River ; Wilmington, MA).

x 5563 Myeloma-종양을 C3H 마우스에 유지시킨다.

종양계에 대한 본 발명 화합물의 활성을 입증하기 위해 하기 과정을 사용한다. 종양을 계대접종 동물로부터 제거하고 멸균 기술을 사용하여 1 내지 3m㎡ 단편으로 잘게 저민다. 항생배지 1 및 뇌심장 침출액(Difco : Detroit, MI)을 사용하여 종양 단편의 멸균성을 검사한다. 수용체 마우스를 면도하고 종양 단편을 투관침을 사용하여 액와 부위에 피하로 이식시킨다. 종양 이식시킨 다음날 적절한 일정에 따른 약물요법을 시작한다. 모든 실험에서 화합물을 염수에 용해시킨다. 약물 치료 초기 및 말기의 동물 체증을 단다. 임의량의 음식물 및 물을 제공한다. 10내지 12일째에 버어니어 캘리퍼스를 사용하여 모든 종양의 두가지 칫수(길이 및 폭)를 측정한다. 종양의 중량은 하기식을 사용하여 계산한다 :

종양 중량(mg)=종양길이(mm)×종양폭(m㎡)²/2

모든 데이타에서 종양중량은 거의 10그람이다.

치료활성에 대한 분석에서, 약물독성에 의한 독성사(死)가 처리군의 30퍼센트를 초과하는 그룹은 없다.

표 3에서 세로행 1은 시험화합물의 실시예 번호, 세로행 2는 종양계 : 세로행 3은 용량 정도 : 세로행 4는 투여경로 : 세로행 5는 용량 일정 : 세로행 6은 종양억제 퍼센트 : 및 세로행 7은 연구를 완성하기 전에 측정된 독성사를 나타낸다.

[표 3]

본 발명에 사용된 화합물은 비루스성 감염증을 치료, 특히 헤르페스 속의 비루스에 의해 유발된 감염증을 치료하는데 유용하다. 화합물은 경구로, 국소적으로 또는 비경구적으로 투여하는 것이 효과적이다. 일반적으로 약 5mg/kg 내지 약 500mg/kg범위의 용량이 유용하다. 약 10mg/kg 내지 약 100mg/kg범위로 투여하는 것이 특히 바람직하다.

Claims

하기일반식(II)의 보호된 뉴클레오시드로부터 보호그룹을 제거함을 특징으로 하여, 일반식(II)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염을 제조하는 방법.

상기식에서, R⁶수소 또는 C₁-C₄알킬이고, R₇은 일반식

피리미딘 염기이며,

Q는 N, C-(C₂-C₄알킬) 또는 C-아미노이고, X는 N 또는 C-R⁴이며, R⁸은 수소 또는 C₁-C₄알킬이고, R₄는 수소, C₁-C₄알킬, 아미노, 브로모, 플루오로, 클로로 또는 요오도이며, 단, X가 N인 경우에만 R⁶및 R⁸은 모두 수소일 수 있다.
일반식 R⁷H의 피리미딘 염기 또는 이의 보호된 유도체를 하기일반식(IV)의 탄수화물 또는 이의 보호된 유도체와 커플링시키고, 존재하는 보호그룹을 제거하여 피리미딘 염기 생성물을 제조함을 특징으로 하여, 하기 일반식(II)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염을 제조하는 방법.

상기식에서, R⁶및 R⁷은 제1항에서 정의한 바와같고, Leav는 이탈그룹이다.
감수성 신생물을 치료하는 약제를 제조하기 위한 하기일반식(I)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염.

상기식에서, R¹은 수소, C₁-C₄알킬 또는
이고, R²는 일반식

의 염기이며, X는 N 또는 C-R⁴이고, R³은 수소, C₁-C₄알킬 또는 |
이며, R⁴는 수소, C₁-C₄알킬, 아미노, 브로모, 플루오로, 클로로 또는 요오도이고, R⁵는 각각 수소 또는 C₁-C₄알킬이다.
제3항에 있어서, 1-(4-아미노-2-옥소-1H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2, 2-디플루오로리보즈, 1-(4-아미노-2-옥소-1H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2, 2-디플루오로크실로즈, 1-(2, 4-디옥소-1H, 3H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2, 2-디플루오로리보즈, 또는 1-(4-아미노-5-메틸-2-옥소-1H-피리미딘-1-일)-2-데스옥시-2, 2-디플루오로리보즈인 일반식(I)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염.
일반식(II)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염.

상기식에서, R⁶및 R⁷은 제1항에서 정의한 바와같다.
포유류의 화학요법에서 사용하기 위한 제5항에 따르는 일반식(II)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염.
포유류에서 감수성 신생물을 치료하는데 사용하기 위한 제5항에 따르는 일반식(II)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염.
제5항에 따르는 일반식(II)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염을 약제학적으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제와 함께 함유함을 특징으로 하는, 포유류에서 감수성 신생물을 치료하는데 사용하기 위한 약제학적 제제.
제2항에 있어서, 제조된 피리미딘 염기 생성물을 추가로 알킬화시키는 방법.
제1항, 2항 또는 9항의 방법에 따라 제조된 일반식(II)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염.