JP5066446B2 - 血管新生阻害物質の効果を予測する方法 - Google Patents
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また、血管新生阻害物質として、4−(3−クロロ−4−(シクロプロピルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミドが知られている(2および3)。
ところで、血管新生阻害物質の効果を判定すること、血管新生阻害物質の効果を示す濃度を決定すること、血管新生阻害物質の効果を投与前に予測することは、血管新生阻害物質を用いた治療を効率よく進め、患者のQOL向上に貢献するために、非常に有用である(4)。前二者については現在、数多くの研究がなされている(5)。具体的には、Dynamic Contrast−Enhanced Magnetic Resonance Imaging(DCE−MRI),Positron Emission Tomograpy(PET),Interstitial Fluid Pressure,serum VEGFなどの方法が知られており、中でもDCE−MRIは、血管新生阻害物質の効果を判定する方法として有効であるとされつつある(6)。
一方で、血管新生阻害物質の効果を投与前に予測することは、治療を受ける患者にとって無効な薬剤の投与の回避、副作用の軽減などを可能とするために、非常に有益であり、かつ重要事項である(4)。しかしながら、血管新生阻害物質の効果を投与前に予測する方法については、未だ有効な方法は、見つかっていない。
参考文献
(1)Bevacizumab plus irinotecan,fluorouracil,and leucovorin for metastatic colorectal cancer,N Engl J Med.2004,350,2335−42
(2)国際公開第02/32872号パンフレット
(3)国際公開第2004/080462号パンフレット
(4)Inhibition of vascular endothelial growth factor(VEGF)signaling in cancer causes loss of endothelial fenestrations,regression of tumor vessels,and appearance of basement membrane ghosts.Am J Pathol.,2004,165,35−52
(5)Direct evidence that the VEGF−specific antibody bevacizumab has antivascular effects in human rectal cancer,Nature Medicine,2004,10,145−147
(6)Dynamic contrast−enhanced magnetic resonance imaging as a biomarker for the pharmacological response of PTK787/ZK 222584,an inhibitor of the vascular endothelial growth factor receptor tyrosine kinases,in patients with advanced colorectal cancer and liver metastases:results from two phase I studies.,J Clin Oncol.,2003,21,3955−64.
本発明者らは、上記課題を解決するため、鋭意検討を重ねた結果、血管新生阻害物質の抗腫瘍効果は、腫瘍中の周皮細胞で覆われた血管数と相関することを初めて見出した。そして、血管新生阻害物質の抗腫瘍効果は、腫瘍中の周皮細胞で覆われた血管数を測定し、周皮細胞で覆われた血管数を指標とすることにより予測することができることを見出した。
すなわち本発明は、以下に関する。
(1)血管新生阻害物質の抗腫瘍効果を予測する方法であって、
腫瘍中の周皮細胞で覆われた血管数を測定する工程と、
周皮細胞で覆われた血管数を指標として、癌患者が血管新生阻害物質に対して高感受性であるか否かを判断する工程と、
を含む、前記方法。
(1)に記載の方法において、腫瘍中の血管数を測定する工程と、腫瘍中の血管数に対する腫瘍中の周皮細胞で覆われた血管数の比率を指標として、癌患者が血管新生阻害物質に対して高感受性であるか否かを判断する工程とをさらに含んでいてもよい。
(2)血管新生阻害物質の抗腫瘍効果を予測する方法であって、
腫瘍中の血管数および腫瘍中の周皮細胞で覆われた血管数を測定する工程と、
腫瘍中の血管数に対する腫瘍中の周皮細胞で覆われた血管数の比率を指標として、当該癌患者が血管新生阻害物質に対して高感受性であるか否かを判断する工程と、
を含む、前記方法。
(1)または(2)に記載の方法において、腫瘍は、癌患者から採取されたものを使用することができる。
(1)または(2)に記載の方法において、周皮細胞で覆われた血管数の測定は、α−SMA、デスミン、コンドロイチン硫酸プロテオグリカン4、カルポニン、カルデスモンおよびPDGF レセプターからなる群から選択される少なくとも一つの発現を指標に行うことができ、中でも、α−SMAおよび/またはデスミンの発現を指標に行うことが好ましい。周皮細胞で覆われた血管数の測定は、例えば、免疫化学的方法、in situハイブリダイゼーションまたは定量的RT−PCRにより行うことができる。
また、(1)または(2)に記載の方法において、腫瘍中の血管数の測定は、CD31、wVF、CD34、CD105、CXCR4、CD146、CD133、KDRおよびKITからなる群から選択される少なくとも一つの発現を指標に行うことができ、中でも、CD31の発現を指標に行うことが好ましい。腫瘍中の血管数の測定は、例えば、免疫化学的方法、in situハイブリダイゼーションまたは定量的RT−PCRにより行うことができる。
(1)または(2)に記載の方法において、血管新生阻害物質は、例えばVEGFレセプターキナーゼ阻害物質である。VEGFレセプターキナーゼ阻害物質の例を以下に示す。
一般式(I)
[式(I)中、Aは、式
(式中、R1は、式−V1−V2−V3(式中、V1は置換基を有していてもよいC1−6アルキレン基を意味する;V2は、単結合、酸素原子、硫黄原子、カルボニル基、スルフィニル基、スルホニル基、式−CONR6−で表される基、式−SO2NR6−で表される基、式−NR6SO2−で表される基、式−NR6CO−で表される基または式−NR6−で表される基を意味する(式中、R6は、水素原子、置換基を有していてもよいC1−6アルキル基または置換基を有していてもよいC3−8シクロアルキル基を意味する。);V3は、水素原子、置換基を有していてもよいC1−6アルキル基、置換基を有していてもよいC2−6アルケニル基、置換基を有していてもよいC2−6アルキニル基、置換基を有していてもよいC3−8シクロアルキル基、置換基を有していてもよいC6−10アリール基、置換基を有していてもよい5〜10員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい3〜10員非芳香族ヘテロ環式基を意味する。)で表される基を意味する;
R2は、シアノ基、置換基を有していてもよいC1−6アルコキシ基、カルボキシル基、置換基を有していてもよいC2−7アルコキシカルボニル基または式−CONVa11Va12(式中、Va11は、水素原子、置換基を有していてもよいC1−6アルキル基、置換基を有していてもよいC2−6アルケニル基、置換基を有していてもよいC2−6アルキニル基、置換基を有していてもよいC3−8シクロアルキル基、置換基を有していてもよいC6−10アリール基、置換基を有していてもよい5〜10員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい3〜10員非芳香族ヘテロ環式基を意味する;Va12は、水素原子、置換基を有していてもよいC1−6アルキル基、置換基を有していてもよいC2−6アルケニル基、置換基を有していてもよいC2−6アルキニル基、置換基を有していてもよいC3−8シクロアルキル基、置換基を有していてもよいC6−10アリール基、置換基を有していてもよい5〜10員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい3〜10員非芳香族ヘテロ環式基、水酸基、置換基を有していてもよいC1−6アルコキシ基または置換基を有していてもよいC3−8シクロアルコキシ基を意味する。)で表される基を意味する;
A1は、置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する;
R11は、水素原子、置換基を有していてもよいC1−6アルキル基、置換基を有していてもよいC2−6アルケニル基、置換基を有していてもよいC2−6アルキニル基、置換基を有していてもよいC3−8シクロアルキル基、置換基を有していてもよいC6−10アリール基、置換基を有していてもよい5〜10員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい3〜10員非芳香族ヘテロ環式基または置換基を有していてもよいモノ−C1−6アルキルアミノ基を意味する;
R12は、水素原子または置換基を有していてもよいC1−6アルキル基を意味する;
Va13は、酸素原子または硫黄原子を意味する;
A11は、置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する;
R13は、水素原子、置換基を有していてもよいC1−6アルキル基または置換基を有していてもよいC3−8シクロアルキル基を意味する;
R14は、式−Va14−Va15(式中、Va14は、単結合またはカルボニル基を意味する;Va15は、水素原子、水酸基、置換基を有していてもよいC1−6アルキル基、置換基を有していてもよいC2−6アルケニル基、置換基を有していてもよいC2−6アルキニル基、置換基を有していてもよいC3−8シクロアルキル基、置換基を有していてもよいC6−10アリール基、置換基を有していてもよい5〜10員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい3〜10員非芳香族ヘテロ環式基、アミノ基、置換基を有していてもよいモノ−C1−6アルキルアミノ基、置換基を有していてもよいジ−C1−6アルキルアミノ基、ホルミル基、カルボキシル基または置換基を有していてもよいC2−7アルコキシカルボニル基を意味する。)で表される基を意味する。)で表される基を意味する;
Xは、酸素原子または硫黄原子を意味する;
Yは、式
(式中、R3は、水素原子、置換基を有していてもよいC1−6アルキル基、置換基を有していてもよいC2−6アルケニル基、置換基を有していてもよいC2−6アルキニル基、置換基を有していてもよいC3−8シクロアルキル基、置換基を有していてもよいC2−7アシル基または置換基を有していてもよいC2−7アルコキシカルボニル基を意味する;
R7およびR8は、それぞれ独立して水素原子、ハロゲン原子、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、置換基を有していてもよいC1−6アルキル基、置換基を有していてもよいC3−8シクロアルキル基、置換基を有していてもよいC1−6アルコキシ基、置換基を有していてもよいC1−6アルキルチオ基、ホルミル基、置換基を有していてもよいC2−7アシル基、置換基を有していてもよいC2−7アルコキシカルボニル基または式−CONVd1Vd2(式中、Vd1およびVd2は、それぞれ独立して水素原子または置換基を有していてもよいC1−6アルキル基を意味する。)で表される基を意味する;
R9は、水素原子、ハロゲン原子または置換基を有していてもよいC1−6アルキル基を意味する;
W1およびW2は、それぞれ独立して置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する。)で表される基を意味する;
R4は、水素原子、置換基を有していてもよいC1−6アルキル基、置換基を有していてもよいC2−6アルケニル基、置換基を有していてもよいC2−6アルキニル基、置換基を有していてもよいC3−8シクロアルキル基、置換基を有していてもよいC2−7アシル基または置換基を有していてもよいC2−7アルコキシカルボニル基を意味する;
R5は、水素原子、置換基を有していてもよいC1−6アルキル基、置換基を有していてもよいC2−6アルケニル基、置換基を有していてもよいC2−6アルキニル基、置換基を有していてもよいC3−8シクロアルキル基、置換基を有していてもよいC6−10アリール基、置換基を有していてもよい5〜10員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい3〜10員非芳香族ヘテロ環式基を意味する]で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物。
(1)または(2)に記載の方法において、VEGFレセプターキナーゼ阻害物質は、4−(3−クロロ−4−(シクロプロピルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物であることが好ましい。
また、(1)または(2)に記載の方法において、血管新生阻害物質は、例えば、抗VEGFレセプター抗体、抗VEGF抗体、FGFレセプターキナーゼ阻害物質、PDGFレセプターキナーゼ阻害物質、EGFレセプターキナーゼ阻害物質、抗FGFレセプター抗体、抗PDGFレセプター抗体、抗EGFレセプター抗体、抗FGF抗体、抗PDGF抗体および抗EGF抗体からなる群から選択される少なくとも一つであってもよい。
(3)(1)または(2)に記載の方法において使用するためのキットであって、
抗α−SMA抗体、抗デスミン抗体、抗コンドロイチン硫酸プロテオグリカン4抗体、抗カルポニン抗体、抗カルデスモン抗体および抗PDGFレセプター抗体からなる群から選択される少なくとも一つを含む、前記キット。
(4)(1)または(2)に記載の方法において使用するためのキットであって、
α−SMA遺伝子、デスミン遺伝子、コンドロイチン硫酸プロテオグリカン4遺伝子、カルポニン遺伝子、カルデスモン遺伝子およびPDGFレセプター遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つの遺伝子の転写産物であるRNAの少なくとも一部に相補的な配列を含むポリヌクレオチドを含む、前記キット。
本発明により、血管新生阻害物質の抗腫瘍効果を予測する方法が提供される。
より詳細には、血管新生阻害物質の抗腫瘍効果は、腫瘍中の周皮細胞で覆われた血管数を測定し、周皮細胞で覆われた血管数を指標とすることにより予測することが可能となった。
本発明に係る方法は、患者に血管新生阻害物質を投与することなく、抗腫瘍効果を予測することが可能となるため、より抗腫瘍効果を期待できる患者を選択して治療することができ、患者のQOLに貢献することが可能となった。
図2は、ヒト癌細胞株移植マウスモデルにおける血管新生阻害物質の抗腫瘍効果と周皮細胞で覆われた血管数との関連を示したものである。図2において、化合物1は、4−(3−クロロ−4−(シクロプロピルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミドを、化合物2は、5−(5−フルオロ−2−オキソ−1,2−ジヒドロインドール−3−イリデンメチル)−2,4−ジメチル−1H−ピロール−3−カルボキシリック アシッド(2−ジエチルアミノエチル)アミドを示す。
図3は、ヒト癌細胞株皮下移植モデルにおける4−(3−クロロ−4−(シクロプロピルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミドの抗腫瘍効果と腫瘍組織中の周皮細胞のマーカーであるデスミンとの相関を示したものである。
なお、本明細書において引用した文献、および公開公報、特許公報その他の特許文献は、参照として本明細書に組み込むものとする。また、2005年8月1日に出願し、本願優先権主張の基礎となる特願JP2005−223440号の特許請求の範囲、明細書、図面および要約書の開示内容は、その全体が参照として本明細書に組み入れられる。
本発明は、血管新生阻害物質の抗腫瘍効果を予測する方法であって、腫瘍中の周皮細胞で覆われた血管数を測定する工程と、周皮細胞で覆われた血管数を指標として、癌患者が血管新生阻害物質に対して高感受性であるか否かを判断する工程とを含む、前記方法を提供する。
1.腫瘍中の周皮細胞で覆われた血管数を測定する工程
本工程において、腫瘍は、癌患者より取り出された腫瘍が好ましい。そして、癌患者より取り出された腫瘍は、例えば、癌患者より外科的処置(例えば、バイオプシーなど)にて摘出することにより得ることができる。
なお、癌患者から採取される腫瘍の大きさは、腫瘍中の周皮細胞で覆われた血管数を測定できる大きさであればよい。例えば、固形癌の場合は、バイオプシーにより採取したときの大きさ(例えば、2〜3mm)でよく、メスにより組織片を切除したときの大きさ(例えば、米粒大)でもよく、限定されるものではない。
腫瘍の種類は、特に限定されず、例えば、脳腫瘍、頚癌、食道癌、舌癌、肺癌、乳癌、膵癌、胃癌、小腸または十二指腸の癌、大腸癌(結腸癌、直腸癌)、膀胱癌、腎癌、肝癌、前立腺癌、子宮癌、卵巣癌、甲状腺癌、胆嚢癌、咽頭癌、肉腫(例えば、骨肉腫、軟骨肉腫、カポジ肉腫、筋肉腫、血管肉腫、線維肉腫など)、白血病(例えば、慢性骨髄性白血病(CML)、急性骨髄性白血病(AML)、慢性リンパ球性白血病(CLL)および急性リンパ性白血病(ALL)、リンパ腫、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫(MM)など)およびメラノーマなどを挙げることができる。
周皮細胞は、ペリサイト(pericyte)ともよばれ、毛細血管や静脈を取り囲むように存在している細胞である。
周皮細胞は、α平滑筋細胞型アクチン(α−smooth muscle actin、以下「α−SMA」と称する場合がある)、デスミン、コンドロイチン硫酸プロテオグリカン4(以下、「NG−2」と称する場合がある)、カルポニン、カルデスモン(Characterization of smooth muscle cell and pericyte differentiation in the rat retina in vivo.Investigative.Ophthalmology.Visual Science.45,2795−2806,2004.)、Platelet−derived growth factor Receptor(以下、「PDGFレセプター」と称する場合がある)(Cellular abnormalities of blood vessels as targets in cancer.Current Opinion in Genetics and Development.15,102−111.2005.)などを発現しており、また、第VIII因子(A new method for isolation of smooth muscle cells from human umbilical cord arteries.Scand J.Clin.Lab.Invest.57,21−29,1997.)およびGFAP(Localization of Brain Endothelial Luminal and Abluminal Transporters with Immunogold Electron Microscopy.NeuroRx.,2,27−43,2005.)を発現していないため、これらの発現の有無を調べることにより、他の細胞と区別することができる。
「周皮細胞で覆われた血管」とは、周皮細胞によって血管の全部または一部が取り囲まれた血管を意味する。
「周皮細胞で覆われた血管数」は、例えば、腫瘍中の単位面積あたりの周皮細胞で覆われた血管数、腫瘍中の単位体積あたりの周皮細胞で覆われた血管数または単位重量あたりの周皮細胞で覆われた血管数として算出することができる。
本工程では、周皮細胞で覆われた血管数は、例えば、周皮細胞に発現するタンパク質および/またはmRNAの発現を指標として測定することができる。
周皮細胞に発現するタンパク質および/または遺伝子は、例えば、α−SMA、デスミン、コンドロイチン硫酸プロテオグリカン4、カルポニン、カルデスモンおよびPDGFレセプターなどがあげられ、好ましくはα−SMAおよびデスミンがあげられる。例えば、患者から採取した腫瘍中のこれらのタンパク質および/またはmRNAの発現を測定すると、腫瘍中に発現するタンパク質および/または遺伝子の種類、発現の有無、発現量などの情報を得ることができ、この情報を指標に用いて周皮細胞で覆われた血管数を算出することができる。
タンパク質の測定は、例えば、免疫化学的方法(例えば、免疫組織化学的方法、ウエスタンブロットなど)、質量分析による方法などがあげられ、好ましくは免疫化学的方法があげられ、特に好ましくは免疫組織化学的方法があげられる。これらの方法は、常法に従い行うことができる。
一方、mRNAの測定は、例えば、in situハイブリダイゼーション、ノーザンブロット解析、DNAマイクロアレイ、RT−PCR、定量的RT−PCRなどの方法があげられ、好ましくはin situハイブリダイゼーションおよび定量的RT−PCRがあげられる。これらの方法は、常法に従い行うことができる。
In situハイブリダイゼーションは、例えば、実験医学別冊 新遺伝子工学ハンドブック 第4章、羊土社、2003に記載の方法により行うことができる。
以下、周皮細胞で覆われた血管数の測定方法の一例について記載する。
周皮細胞で覆われた血管数は、周皮細胞に特異的に発現するタンパク質の発現を指標として免疫組織化学的方法により測定することができる。
免疫組織化学的方法は、常法に従い行うことができる(細胞工学別冊 目で見る実験ノートシリーズ バイオ実験イラストレイテッド 5巻 タンパクなんてこわくない 第5章 免疫染色 p127−p163、秀潤社、1997)。
初めに、癌患者より取り出された腫瘍の組織切片を作製する。組織切片は、例えば、凍結切片、パラフィン切片などがあげられる。
癌患者より取り出された腫瘍は、例えば、未処理でもよく、固定化処理を行ってもよい。また、当該腫瘍は、例えば、OCTコンパウンドなどにより包埋することができる。
固定化処理には、ホルムアルデヒド、好ましくは4%PFA/PBS(−)を用いることができ、その後、20%ショ糖/リン酸緩衝液等で置換することができる。
これらの諸条件は、測定するタンパク質および使用する抗体等に応じて適宜選択することができる。
組織切片は、スライドガラスに保持し、染色が可能な状態に前処理することができる。前処理の方法は、特に限定されず、測定するタンパク質および使用する抗体に応じて適宜選択すればよい。例えば、キシレン、ホルムアルデヒド、アセトン、メタノールなどを含む溶液により組織切片を前処理することができる。また、組織切片は、例えば、BSA、Triton−X100、tween20、スキムミルク(skim milk)、カゼインなどを含む溶液により前処理することも可能である。
次に、前処理した組織切片に測定するタンパク質を認識する抗体(以下、「一次抗体」と称する場合がある)を接触させる。一次抗体は、市販のものを使用してもよく、作製してもよい。また、一次抗体は、標識物質により標識されていてもよく、標識されていなくてもよい。一次抗体が標識されていない場合には、当該一次抗体を認識する抗体(以下、「二次抗体」と称する場合がある)を接触させることができる。二次抗体は、標識物質により標識されていることが好ましい。標識物質は、例えば、アルカリフォスファターゼ、ペルオキシダーゼ、グルコースオキシダーゼ、β−ガラクトシダーゼなどの酵素、FITC(Fluorescein isothiocianate)、Alexa488、PE、Rhodamin、Texas Red、Cy3、Cy5、Allophycocyanin、PharRed、DsRed、AmCyan、ZsGreen、ZsYellow、AsRed、HcRedなどの蛍光物質およびビオチンなどがあげられる。標識物質がビオチンである場合には、さらに、アビジン、ストレプトアビジンなどを接触させることができる。当該アビジン、ストレプトアビジンなどは、標識物質により標識されていることが好ましい。標識物質は、例えば、アルカリフォスファターゼ、ペルオキシダーゼ、グルコースオキシダーゼ、β−ガラクトシダーゼなどの酵素、FITC、Alexa488、PE、Rhodamin、Texas Red、Cy3、Cy5、Allophycocyanin、PharRed、DsRed、AmCyan、ZsGreen、ZsYellow、AsRed、HcRedなどの蛍光物質があげられる。反応の諸条件(例えば、反応溶液、抗体濃度、反応時間、反応温度、洗浄操作など)は、測定するタンパク質および使用する抗体等に応じて適宜選択することができる。
標識物質が酵素である場合には、基質および/または発色試薬を組織切片に接触させて発色させ、当該発色を観察することにより、周皮細胞で覆われた血管数を測定することができる。
酵素がペルオキシダーゼの場合は、例えば、基質としてH2O2などを、発色試薬としてジアミノベンジジン(diaminobenzidine;DAB)などを組織切片に接触させることができる。
酵素がアルカリフォスファターゼの場合には、例えば、基質として5−bromo−4−chloro−3−indolyl phosphateなどを、発色試薬としてニトロブルーテトラゾリウム(nitrobluetetrazorium)などを組織切片に接触させることができる。また、酵素がアルカリフォスファターゼの場合には、例えば、発色基質としてCSPD(disodium 3−(4−methoxyspiro{1,2−dioxetane−3,2’−(5’−chloro)tricyclo[3.3.1.13,7]decan}−4−yl)phenyl phosphate)などを組織切片に接触させることにより化学発光反応を行うこともできる。
また、標識物質が蛍光物質の場合には、励起光を組織切片に照射して発光させ、当該蛍光を観察することにより、周皮細胞で覆われた血管数を測定することができる。
また、前記処理をした組織切片は、ヘマトキシリンまたはメチルグリーンにて核染色を行うことができる。
さらに、前記処理をした組織切片は、水溶性封入剤で封入することができる。
このようにして、腫瘍中の単位面積あたりの周皮細胞で覆われた血管数を算出することができる。また、周皮細胞で覆われた血管数は、腫瘍中の単位体積あたりの値または単位重量あたりの値として算出することもできる。
以下、周皮細胞で覆われた血管数の測定方法の別の一例について記載する。
周皮細胞で覆われた血管数は、周皮細胞に特異的に発現するmRNAの発現を指標として定量的RT−PCRにより測定することができる。
初めに、癌患者より取り出された腫瘍からRNAを精製する。
腫瘍に対してTRIZOL試薬(インビトロジェン社)を添加し、腫瘍組織をホモジナイズする。次に、ホモジナイズした腫瘍にクロロホルムを添加する。この溶液を15秒間激しく振盪、攪拌し、室温で2〜3分間放置後遠心を行う(12,000×g、10分間、4℃)。遠心後、水層を新しいチューブに移し、これにイソプロピルアルコールを加え、室温で10分間放置後遠心を行う(12,000×g、10分間、4℃)。得られた沈殿を75%エタノールにて洗浄することにより、RNAを精製することができる。
定量的RT−PCRの方法は、例えば、遺伝子特異的プローブ(TaqMan Gene Expression Assays mixture(ASSAYS−ON−DEMAND)、アプライドバイオシステムズ社)およびABI Prism 7900 Sequence Detection System(Perkin−Elmer Applied Biosystems社)を用いて、次のように行うことができる。
操作は、逆転写反応およびPCR反応の2段階で行うことができる。最初の段階である逆転写反応は、得られたRNAにdNTP、oligo d(T)16プライマー、RNase Inhibitor、Multiscribe Reverse Transcriptase(Perkin−Elmer Applied Biosystems)を加え、25℃にて10分間保温後、48℃にて30分間加熱することにより行う。反応を95℃5分間加熱することにより停止させる。
得られたcDNAを第2段階のPCR反応に供する。PCR反応は、例えば、4ng cDNA、1xSYBR PCR buffer、3mM MgCl2、各200μM dATP,dCTP,dGTP、400μM dUTP、200nM primer pair、0.01U/μl AmpErase UNG、0.025U/μl AmpliTaq Gold DNA Polymerase(Perkin−Elmer Applied Biosystems)の反応系で行う。反応条件は、50℃ 2分間、95℃ 10分間の反応後、95℃ 20秒間・55℃ 20秒間・72℃ 30秒間のサイクルを40サイクルで行う。プライマーおよびプローブは、例えば、Primer Expression(Perkin−Elmer Applied Biosystems)を用いて設計することができる。また、プライマーおよびプローブは、TaqMan Gene Expression Assays mixture(ASSAYS−ON−DEMAND、アプライドバイオシステムズ社)を用いることもできる。複数検体の比較は、定量値を各検体の転写量に変動の少ないハウスキーピング遺伝子、好ましくはGAPDH、β−actin、18S ribosomal RNAなどのmRNAレベルにより補正して行うことができる。
また、血管内皮細胞に特異的に発現するタンパク質および/またはmRNAの発現を指標として腫瘍中の血管数(周皮細胞で覆われた血管数および周皮細胞で覆われていない血管数の合計)を測定しておくことが好ましい。血管内皮細胞に特異的に発現するタンパク質および/または遺伝子(mRNA)は、例えば、CD31、wVF(von Willebrand Factor)、CD34、CD105、CXCR4、CD146、CD133、KDR(VEGF2型受容体)およびKIT(Vascular and haematopoietic stem cells:novel targets for anti−angiogenesis therapy?Nature Reviews Cancer,2,826−35,2002.)などがあげられ、好ましくはCD31があげられる。血管数は、周皮細胞で覆われた血管数の測定方法と同様に、例えば、免疫化学的方法、in situハイブリダイゼーション、定量的RT−PCRなどの方法により算出することができる。
このとき、周皮細胞で覆われた血管数を全体の血管数(周皮細胞で覆われた血管数および周皮細胞で覆われていない血管数の合計)で補正することにより、癌患者が血管新生阻害物質に対して高感受性であるか否かの判断の精度をより向上することが可能となる。例えば、周辺細胞で覆われた血管数を、全体の血管数(周皮細胞で覆われた血管数および周皮細胞で覆われていない血管数の合計)で除した値を、当該判断の指標とすることができる。
2.癌患者が血管新生阻害物質に対して高感受性であるか否かを判断する工程
本工程では、前工程で測定された周皮細胞で覆われた血管数を指標として、癌患者が血管新生阻害物質に対して高感受性であるか否かを判断することができる。そして、当該感受性の判断結果から、血管新生阻害物質の抗腫瘍効果を予測することができる。
本工程において、周皮細胞で覆われた血管数としては、例えば、腫瘍中の単位面積あたりの周皮細胞で覆われた血管数、腫瘍中の単位体積あたりの周皮細胞で覆われた血管数、腫瘍中の単位重量あたりの周皮細胞で覆われた血管数、腫瘍中の全体の血管数(周皮細胞で覆われた血管数および周皮細胞で覆われていない血管数の合計)に対する周皮細胞で覆われた血管数の比率などを指標とすることができる。
腫瘍中の周皮細胞で覆われた血管数が少ない場合は、癌患者が血管新生阻害物質に対して高感受性であると判断することができる。一方、癌患者から採取された腫瘍中の周皮細胞で覆われた血管数が多い場合は、癌患者が血管新生阻害物質に対して高感受性でないと判断することができる。
周皮細胞で覆われた血管数が少ない場合とは、例えば、血管数(周皮細胞で覆われた血管数および周皮細胞で覆われていない血管数の合計)に対する周皮細胞で覆われた血管数の比率が、25%以下、好ましくは20%以下、より好ましくは15%以下、特に好ましくは10%以下の場合をいうことができる。周皮細胞で覆われた血管数が多い場合は、例えば、上記の「周皮細胞で覆われた血管数が少ない場合」に該当しない場合をいうことができる。
本発明において、抗腫瘍効果の予測は、癌患者において血管新生阻害物質がどの程度抗腫瘍効果を奏するかを投与前に予測することを主目的とするものである。
癌患者が血管新生阻害物質に対して高感受性であると判断されたときは、当該血管新生阻害物質は、より抗腫瘍効果を奏すると予測することができる。より抗腫瘍効果を奏する場合として、例えば、同様の症状の患者における平均的な抗腫瘍効果よりも高い抗腫瘍効果を期待できる場合、同一の癌種に罹患した他の患者よりも高い抗腫瘍効果を期待できる場合、または他の癌種に罹患した患者よりも高い抗腫瘍効果を期待できる場合などをあげることができる。
ただし、後述のように、本発明において血管新生阻害物質は、本来血管新生を阻害する作用を有するために、癌患者が血管新生阻害物質に対して高感受性でないと判断されたときであっても、当該血管新生阻害物質が抗腫瘍効果を奏さないと予測されるものではない。
本発明の別の態様として、周皮細胞で覆われた血管数を指標として、血管新生阻害物質に対して高感受性を示す患者を選択する方法をあげることができる。周皮細胞で覆われた血管数が少ない場合は、上記の通り、当該患者は、血管新生阻害物質に対して高感受性を示すと判断できる。したがって、このような患者を、血管新生阻害物質に対する高感受性を示す患者として選択することができる。
また、本発明の別の態様として、周皮細胞で覆われた血管数を指標として、血管新生阻害物質に対する感受性を分析し、分析結果によって患者を分類する方法をあげることができる。すなわち、本発明の方法において、上記のように血管新生阻害物質に対する感受性を分析し、この分析結果に基づいて、患者を分類することができる。例えば、周皮細胞で覆われた血管数の多いグループと、周皮細胞で覆われた血管数の少ないグループとに分類することができる。
また、本発明の別の態様として、周皮細胞で覆われた血管数を指標として、血管新生阻害物質の投与対象となる患者を選択する方法をあげることができる。周皮細胞で覆われた血管数の少ない患者は、血管新生阻害物質に対して高感受性を示すと予測されるため、血管新生阻害物質の投与対象となる。
また、本発明の別の態様として、周皮細胞で覆われた血管数を指標として、患者に対する血管新生阻害物質の治療効果を予測する方法をあげることができる。本発明の方法において、周皮細胞で覆われた血管数が少ない場合は、血管新生阻害物質に対して高い感受性を示すと判断できるため、当該患者における血管新生阻害物質の治療効果は高いと予測することができる。
また、本発明には、患者の血管新生阻害物質に対する感受性の程度を予測するために、当該患者由来の周皮細胞で覆われた血管数を評価する方法が含まれる。当該評価方法は、上記1.に示すとおりである。
本工程において、血管新生阻害物質は、後述のとおりであるが、好ましくは4−(3−クロロ−4−(シクロプロピルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物である。
本発明に係る方法は、血管新生阻害物質を患者に投与する前に、当該患者における血管新生阻害物質の有効性の程度を予測するのに用いることができる。そして、血管新生阻害物質の有する効果をより期待できる患者を選択して、疾患の治療を行うことができる。したがって、本発明は、臨床上非常に有用である。
3.血管新生阻害物質
本発明において、血管新生阻害物質は、血管新生を阻害する活性を有するものであれば、特には限定されない。
血管新生阻害物質は、例えば、
VEGF阻害物質(例えば、VEGFレセプターキナーゼ阻害物質、抗VEGFレセプター抗体、抗VEGF抗体(Cancer Research.,55,5296−5301,1995))、
FGF(繊維芽細胞増殖因子:fibroblast growth factor)阻害物質(例えば、FGFレセプターキナーゼ阻害物質、抗FGFレセプター抗体、抗FGF抗体(Cancer Research.,51,6180−4,1991))、
PDGF(血小板由来増殖因子:platelet−derived growth factor)阻害物質(例えば、PDGFレセプターキナーゼ阻害物質(J.Clinical Investigation.,111,1287−95)、抗PDGFレセプター抗体、抗PDGF抗体)、
EGF(上皮成長因子:epidermal growth factor)阻害物質(例えば、EGFレセプターキナーゼ阻害物質(Cancer Research.,51,6180−4,1991)、抗EGFレセプター抗体、抗EGF抗体)、
インテグリン阻害物質(例えば、αvβ3インテグリン阻害物質、αvβ5インテグリン阻害物質(Clinical Cancer Research.,6,3056−61,2000))、
内因性阻害物質(例えば、IL−12、Trombospondin−1,Endostatin,Angiostatin(International J.Cancer.,78,361−5,1998)、COX−2阻害物質(Annuals of N.Y.Acad.Science.,84−6,1999))、
マトリックスメタロプロテイン阻害物質(International J.Pancreatol.,21,1−12,1997)、
その他阻害物質(例えば、farnesyltransferase阻害物質、一酸化窒素阻害物質、アンジオテンシン変換酵素阻害物質、HMG−CoA reductase阻害物質、Vascular Target阻害物質、メチオニンアミノペプチダーゼ阻害剤(Science.,282,1324−1327,1998))、
などがあげられ、好ましくはVEGF阻害物質であり、より好ましくはVEGFレセプターキナーゼ阻害物質、抗VEGFレセプター抗体または抗VEGF抗体であり、特に好ましくはVEGFレセプターキナーゼ阻害物質である。
(A)化合物の基の定義
本明細書において、「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子を意味する。
「ハロゲン原子」の好適な例としては、フッ素原子、塩素原子をあげることができる。
本明細書において、「C1−6アルキル基」とは、炭素数が1〜6個の直鎖状または分枝鎖状のアルキル基を意味し、具体例としては、メチル基、エチル基、1−プロピル基(n−プロピル基)、2−プロピル基(i−プロピル基)、2−メチル−1−プロピル基(i−ブチル基)、2−メチル−2−プロピル基(t−ブチル基)、1−ブチル基(n−ブチル基)、2−ブチル基(s(sec)−ブチル基)、1−ペンチル基、2−ペンチル基、3−ペンチル基、2−メチル−1−ブチル基、3−メチル−1−ブチル基、2−メチル−2−ブチル基、3−メチル−2−ブチル基、2,2−ジメチル−1−プロピル基、1−ヘキシル基、2−ヘキシル基、3−ヘキシル基、2−メチル−1−ペンチル基、3−メチル−1−ペンチル基、4−メチル−1−ペンチル基、2−メチル−2−ペンチル基、3−メチル−2−ペンチル基、4−メチル−2−ペンチル基、2−メチル−3−ペンチル基、3−メチル−3−ペンチル基、2,3−ジメチル−1−ブチル基、3,3−ジメチル−1−ブチル基、2,2−ジメチル−1−ブチル基、2−エチル−1−ブチル基、3,3−ジメチル−2−ブチル基、2,3−ジメチル−2−ブチル基などがあげられる。
「C1−6アルキル基」の好適な例としては、メチル基、エチル基、1−プロピル基、2−プロピル基、2−メチル−1−プロピル基、2−メチル−2−プロピル基、1−ブチル基、2−ブチル基、1−ペンチル基、2−ペンチル基、3−ペンチル基、2−メチル−1−ブチル基、3−メチル−1−ブチル基、2−メチル−2−ブチル基、3−メチル−2−ブチル基、2,2−ジメチル−1−プロピル基をあげることができ、より好適な例としては、メチル基、エチル基、1−プロピル基、2−プロピル基、2−メチル−1−プロピル基、2−メチル−2−プロピル基、1−ブチル基、2−ブチル基をあげることができ、さらに好適な例としては、メチル基、エチル基、1−プロピル基、2−プロピル基をあげることができ、最も好適な例としては、メチル基、エチル基をあげることができる。
本明細書において、「C1−6アルキレン基」とは、上記定義「C1−6アルキル基」からさらに任意の水素原子を1個除いて誘導される二価の基を意味し、具体例としては、メチレン基、1,2−エチレン基、1,1−エチレン基、1,3−プロピレン基、テトラメチレン基、ペンタメチレン基、ヘキサメチレン基などがあげられる。
本明細書において、「C2−6アルケニル基」とは、二重結合を1個有する、炭素数が2〜6個の直鎖状または分枝鎖状のアルケニル基を意味し、具体例としては、エテニル基(ビニル基)、1−プロペニル基、2−プロペニル基(アリル基)、1−ブテニル基、2−ブテニル基、3−ブテニル基、ペンテニル基、ヘキセニル基などがあげられる。
本明細書において、「C2−6アルキニル基」とは、三重結合を1個有する、炭素数が2〜6個の直鎖状または分枝鎖状のアルキニル基を意味し、具体例としては、エチニル基、1−プロピニル基、2−プロピニル基、1−ブチニル基、2−ブチニル基、3−ブチニル基、ペンチニル基、ヘキシニル基などがあげられる。
本明細書において、「C3−8シクロアルキル基」とは、炭素数が3〜8個の単環または二環の飽和脂肪族炭化水素基を意味し、具体例としては、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロへプチル基、シクロオクチル基、ビシクロ[2.1.0]ペンチル基、ビシクロ[3.1.0]ヘキシル基、ビシクロ[2.1.1]ヘキシル基、ビシクロ[4.1.0]ヘプチル基、ビシクロ[2.2.1]ヘプチル基(ノルボルニル基)、ビシクロ[3.3.0]オクチル基、ビシクロ[3.2.1]オクチル基、ビシクロ[2.2.2]オクチル基などがあげられる。
「C3−8シクロアルキル基」の好適な例としては、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基をあげることができ、より好適な例としては、シクロプロピル基があげられる。
本明細書において、「C6−10アリール基」とは、炭素数が6〜10個の芳香族性の炭化水素環式基を意味し、具体例としては、フェニル基、1−ナフチル基、2−ナフチル基、インデニル基、アズレニル基などがあげられる。
「C6−10アリール基」の好適な例としては、フェニル基をあげることができる。
本明細書において、「ヘテロ原子」とは、窒素原子、酸素原子または硫黄原子を意味する。
本明細書において、「5〜10員ヘテロアリール基」とは、環を構成する原子の数が5〜10個であり、環を構成する原子中に1〜5個のヘテロ原子を含有する芳香族性の環式基を意味し、具体例としては、フリル基、チエニル基、ピロリル基、イミダゾリル基、トリアゾリル基、テトラゾリル基、チアゾリル基、ピラゾリル基、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、イソチアゾリル基、フラザニル基、チアジアゾリル基、オキサジアゾリル基、ピリジル基、ピラジニル基、ピリダジニル基、ピリミジニル基、トリアジニル基、プリニル基、プテリジニル基、キノリル基、イソキノリル基、ナフチリジニル基、キノキサリニル基、シンノリニル基、キナゾリニル基、フタラジニル基、イミダゾピリジル基、イミダゾチアゾリル基、イミダゾオキサゾリル基、ベンゾチアゾリル基、ベンゾオキサゾリル基、ベンズイミダゾリル基、インドリル基、イソインドリル基、インダゾリル基、ピロロピリジル基、チエノピリジル基、フロピリジル基、ベンゾチアジアゾリル基、ベンゾオキサジアゾリル基、ピリドピリミジニル基、ベンゾフリル基、ベンゾチエニル基、チエノフリル基などがあげられる。
「5〜10員ヘテロアリール基」の好適な例としては、フリル基、チエニル基、ピロリル基、イミダゾリル基、チアゾリル基、ピラゾリル基、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、イソチアゾリル基、ピリジル基、ピリミジニル基をあげることができる。
本明細書において、「3〜10員非芳香族ヘテロ環式基」とは、
(1)環を構成する原子の数が3〜10個であり、
(2)環を構成する原子中に1〜2個のヘテロ原子を含有し、
(3)環中に二重結合を1〜2個含んでいてもよく、
(4)環中にカルボニル基、スルフィニル基またはスルホニル基を1〜3個含んでいてもよい、
(5)単環式または二環式である非芳香族性の環式基を意味し、環を構成する原子中に窒素原子を含有する場合、窒素原子から結合手が出ていてもよい。
具体例としては、アジリジニル基、アゼチジニル基、ピロリジニル基、ピペリジニル基、アゼパニル基、アゾカニル基、ピペラジニル基、ジアゼパニル基、ジアゾカニル基、ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプチル基、モルホリニル基、チオモルホリニル基、1,1−ジオキソチオモルホリニル基、オキシラニル基、オキセタニル基、テトラヒドロフリル基、ジオキソラニル基、テトラヒドロピラニル基、ジオキサニル基、テトラヒドロチエニル基、テトラヒドロチオピラニル基、オキサゾリジニル基、チアゾリジニル基などがあげられる。
「3〜10員非芳香族ヘテロ環式基」の好適な例としては、アジリジニル基、アゼチジニル基、ピロリジニル基、ピペリジニル基、アゼパニル基、ピペラジニル基、ジアゼパニル基、モルホリニル基、チオモルホリニル基、1,1−ジオキソチオモルホリニル基、テトラヒドロフリル基、テトラヒドロピラニル基をあげることができる。
本明細書において、「C1−6アルコキシ基」とは、上記定義「C1−6アルキル基」の末端に酸素原子が結合した基であることを意味し、具体的としては、メトキシ基、エトキシ基、1−プロポキシ基(n−プロポキシ基)、2−プロポキシ基(i−プロポキシ基)、2−メチル−1−プロポキシ基(i−ブトキシ基)、2−メチル−2−プロポキシ基(t−ブトキシ基)、1−ブトキシ基(n−ブトキシ基)、2−ブトキシ基(s−ブトキシ基)、1−ペンチルオキシ基、2−ペンチルオキシ基、3−ペンチルオキシ基、2−メチル−1−ブトキシ基、3−メチル−1−ブトキシ基、2−メチル−2−ブトキシ基、3−メチル−2−ブトキシ基、2,2−ジメチル−1−プロポキシ基、1−ヘキシルオキシ基、2−ヘキシルオキシ基、3−ヘキシルオキシ基、2−メチル−1−ペンチルオキシ基、3−メチル−1−ペンチルオキシ基、4−メチル−1−ペンチルオキシ基、2−メチル−2−ペンチルオキシ基、3−メチル−2−ペンチルオキシ基、4−メチル−2−ペンチルオキシ基、2−メチル−3−ペンチルオキシ基、3−メチル−3−ペンチルオキシ基、2,3−ジメチル−1−ブトキシ基、3,3−ジメチル−1−ブトキシ基、2,2−ジメチル−1−ブトキシ基、2−エチル−1−ブトキシ基、3,3−ジメチル−2−ブトキシ基、2,3−ジメチル−2−ブトキシ基などがあげられる。
「C1−6アルコキシ基」の好適な例としては、メトキシ基、エトキシ基、1−プロポキシ基、2−プロポキシ基、2−メチル−1−プロポキシ基、2−メチル−2−プロポキシ基、1−ブトキシ基、2−ブトキシ基、1−ペンチルオキシ基、2−ペンチルオキシ基、3−ペンチルオキシ基、2−メチル−1−ブトキシ基、3−メチル−1−ブトキシ基、2−メチル−2−ブトキシ基、3−メチル−2−ブトキシ基、2,2−ジメチル−1−プロポキシ基をあげることができ、より好適な例としては、メトキシ基、エトキシ基、1−プロポキシ基、2−プロポキシ基、2−メチル−1−プロポキシ基、2−メチル−2−プロポキシ基、1−ブトキシ基、2−ブトキシ基をあげることができ、さらに好適な例としては、メトキシ基、エトキシ基、1−プロポキシ基、2−プロポキシ基をあげることができ、最も好適な例としては、メトキシ基、エトキシ基をあげることができる。
本明細書において、「C1−6アルキルチオ基」とは、上記定義「C1−6アルキル基」の末端に硫黄原子が結合した基であることを意味し、具体例としては、メチルチオ基、エチルチオ基、1−プロピルチオ基(n−プロピルチオ基)、2−プロピルチオ基(i−プロピルチオ基)、2−メチル−1−プロピルチオ基(i−ブチルチオ基)、2−メチル−2−プロピルチオ基(t−ブチルチオ基)、1−ブチルチオ基(n−ブチルチオ基)、2−ブチルチオ基(s−ブチルチオ基)、1−ペンチルチオ基、2−ペンチルチオ基、3−ペンチルチオ基、2−メチル−1−ブチルチオ基、3−メチル−1−ブチルチオ基、2−メチル−2−ブチルチオ基、3−メチル−2−ブチルチオ基、2,2−ジメチル−1−プロピルチオ基、1−ヘキシルチオ基、2−ヘキシルチオ基、3−ヘキシルチオ基、2−メチル−1−ペンチルチオ基、3−メチル−1−ペンチルチオ基、4−メチル−1−ペンチルチオ基、2−メチル−2−ペンチルチオ基、3−メチル−2−ペンチルチオ基、4−メチル−2−ペンチルチオ基、2−メチル−3−ペンチルチオ基、3−メチル−3−ペンチルチオ基、2,3−ジメチル−1−ブチルチオ基、3,3−ジメチル−1−ブチルチオ基、2,2−ジメチル−1−ブチルチオ基、2−エチル−1−ブチルチオ基、3,3−ジメチル−2−ブチルチオ基、2,3−ジメチル−2−ブチルチオ基などがあげられる。
「C1−6アルキルチオ基」の好適な例としては、メチルチオ基、エチルチオ基、1−プロピルチオ基(n−プロピルチオ基)、2−プロピルチオ基(i−プロピルチオ基)、2−メチル−1−プロピルチオ基(i−ブチルチオ基)、2−メチル−2−プロピルチオ基(t−ブチルチオ基)、1−ブチルチオ基(n−ブチルチオ基)、2−ブチルチオ基(s−ブチルチオ基)をあげることができる。
本明細書において、「C3−8シクロアルコキシ基」とは、上記定義「C3−8シクロアルキル基」の末端に酸素原子が結合した基であることを意味し、具体的としては、シクロプロポキシ基、シクロブトキシ基、シクロペンチルオキシ基、シクロヘキシルオキシ基、シクロヘプチルオキシ基、シクロオクチルオキシ基、ビシクロ[2.1.0]ペンチルオキシ基、ビシクロ[3.1.0]ヘキシルオキシ基、ビシクロ[2.1.1]ヘキシルオキシ基、ビシクロ[4.1.0]ヘプチルオキシ基、ビシクロ[2.2.1]ヘプチルオキシ基(ノルボルニルオキシ基)、ビシクロ[3.3.0]オクチルオキシ基、ビシクロ[3.2.1]オクチルオキシ基、ビシクロ[2.2.2]オクチルオキシ基などがあげられる。
「C3−8シクロアルコキシ基」の好適な例としては、シクロプロポキシ基、シクロブトキシ基、シクロペンチルオキシ基をあげることができ、より好適な例としては、シクロプロポキシ基をあげることができる。
本明細書において、「モノ−C1−6アルキルアミノ基」とは、アミノ基中の1個の水素原子を、上記定義「C1−6アルキル基」で置換した基を意味し、具体例としては、メチルアミノ基、エチルアミノ基、1−プロピルアミノ基(n−プロピルアミノ基)、2−プロピルアミノ基(i−プロピルアミノ基)、2−メチル−1−プロピルアミノ基(i−ブチルアミノ基)、2−メチル−2−プロピルアミノ基(t−ブチルアミノ基)、1−ブチルアミノ基(n−ブチルアミノ基)、2−ブチルアミノ基(s−ブチルアミノ基)、1−ペンチルアミノ基、2−ペンチルアミノ基、3−ペンチルアミノ基、2−メチル−1−ブチルアミノ基、3−メチル−1−ブチルアミノ基、2−メチル−2−ブチルアミノ基、3−メチル−2−ブチルアミノ基、2,2−ジメチル−1−プロピルアミノ基、1−ヘキシルアミノ基、2−ヘキシルアミノ基、3−ヘキシルアミノ基、2−メチル−1−ペンチルアミノ基、3−メチル−1−ペンチルアミノ基、4−メチル−1−ペンチルアミノ基、2−メチル−2−ペンチルアミノ基、3−メチル−2−ペンチルアミノ基、4−メチル−2−ペンチルアミノ基、2−メチル−3−ペンチルアミノ基、3−メチル−3−ペンチルアミノ基、2,3−ジメチル−1−ブチルアミノ基、3,3−ジメチル−1−ブチルアミノ基、2,2−ジメチル−1−ブチルアミノ基、2−エチル−1−ブチルアミノ基、3,3−ジメチル−2−ブチルアミノ基、2,3−ジメチル−2−ブチルアミノ基などがあげられる。
本明細書において、「ジ−C1−6アルキルアミノ基」とは、アミノ基中の2個の水素原子を、それぞれ同一のまたは異なる、上記定義「C1−6アルキル基」で置換した基を意味し、具体例としては、N,N−ジメチルアミノ基、N,N−ジエチルアミノ基、N,N−ジ−n−プロピルアミノ基、N,N−ジ−i−プロピルアミノ基、N,N−ジ−n−ブチルアミノ基、N,N−ジ−i−ブチルアミノ基、N,N−ジ−s−ブチルアミノ基、N,N−ジ−t−ブチルアミノ基、N−エチル−N−メチルアミノ基、N−n−プロピル−N−メチルアミノ基、N−i−プロピル−N−メチルアミノ基、N−n−ブチル−N−メチルアミノ基、N−i−ブチル−N−メチルアミノ基、N−s−ブチル−N−メチルアミノ基、N−t−ブチル−N−メチルアミノ基などがあげられる。
本明細書において、「C2−7アシル基」とは、上記定義の「C1−6アルキル基」が結合したカルボニル基であることを意味し、具体例としては、例えば、アセチル基、プロピオニル基、イソプロピオニル基、ブチリル基、イソブチリル基、バレリル基、イソバレリル基、ピバロイル基などがあげられる。
本明細書において、「C2−7アルコキシカルボニル基」とは、上記定義の「C1−6アルコキシ基」が結合したカルボニル基であることを意味し、具体例としては、例えば、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、1−プロピルオキシカルボニル基、2−プロピルオキシカルボニル基、2−メチル−2−プロポキシカルボニル基などがあげられる。
本明細書において、「置換基を有していてもよい」とは、「置換可能な部位に、任意に組み合わせて1または複数個の置換基を有してもよい」ことを意味し、置換基の具体例としては、例えば、ハロゲン原子、水酸基、チオール基、ニトロ基、シアノ基、ホルミル基、カルボキシル基、アミノ基、シリル基、メタンスルホニル基、C1−6アルキル基、C2−6アルケニル基、C2−6アルキニル基、C3−8シクロアルキル基、C6−10アリール基、5〜10員ヘテロアリール基、3〜10員非芳香族ヘテロ環式基、C1−6アルコキシ基、C1−6アルキルチオ基、C3−8シクロアルコキシ基、モノ−C1−6アルキルアミノ基、ジ−C1−6アルキルアミノ基、C2−7アシル基またはC2−7アルコキシカルボニル基などをあげることができる。ただし、C1−6アルキル基、C2−6アルケニル基、C2−6アルキニル基、C3−8シクロアルキル基、C6−10アリール基、5〜10員ヘテロアリール基、3〜10員非芳香族ヘテロ環式基、C1−6アルコキシ基、C1−6アルキルチオ基、C3−8シクロアルコキシ基、モノ−C1−6アルキルアミノ基、ジ−C1−6アルキルアミノ基、C2−7アシル基およびC2−7アルコキシカルボニル基はそれぞれ独立して下記置換基群からなる群から選ばれる1〜3個の基を有していてもよい。
<置換基群>
ハロゲン原子、水酸基、チオール基、ニトロ基、シアノ基、C1−6アルキル基、C3−8シクロアルキル基、C2−6アルケニル基、C2−6アルキニル基、C6−10アリール基、5〜10員ヘテロアリール基、3〜10員非芳香族ヘテロ環式基、C1−6アルコキシ基およびC1−6アルキルチオ基。
(B)VEGFレセプターキナーゼ阻害物質
本発明において、VEGFレセプターキナーゼ阻害物質は、例えば、
一般式(I)
で表される化合物を挙げることができる。
(i)A
Aは、式
で表される基を意味する。
式中、R1は、式−V1−V2−V3(式中、V1は、置換基を有していてもよいC1−6アルキレン基を意味する;V2は、単結合、酸素原子、硫黄原子、カルボニル基、スルフィニル基、スルホニル基、式−CONR6−で表される基、式−SO2NR6−で表される基、式−NR6SO2−で表される基、式−NR6CO−で表される基または式−NR6−で表される基を意味する(式中、R6は、水素原子、置換基を有していてもよいC1−6アルキル基または置換基を有していてもよいC3−8シクロアルキル基を意味する。);V3は、水素原子、置換基を有していてもよいC1−6アルキル基、置換基を有していてもよいC2−6アルケニル基、置換基を有していてもよいC2−6アルキニル基、置換基を有していてもよいC3−8シクロアルキル基、置換基を有していてもよいC6−10アリール基、置換基を有していてもよい5〜10員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい3〜10員非芳香族ヘテロ環式基を意味する。)で表される基を意味する。
R2は、シアノ基、置換基を有していてもよいC1−6アルコキシ基、カルボキシル基、置換基を有していてもよいC2−7アルコキシカルボニル基または式−CONVa11Va12(式中、Va11は、水素原子、置換基を有していてもよいC1−6アルキル基、置換基を有していてもよいC2−6アルケニル基、置換基を有していてもよいC2−6アルキニル基、置換基を有していてもよいC3−8シクロアルキル基、置換基を有していてもよいC6−10アリール基、置換基を有していてもよい5〜10員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい3〜10員非芳香族ヘテロ環式基を意味する;Va12は、水素原子、置換基を有していてもよいC1−6アルキル基、置換基を有していてもよいC2−6アルケニル基、置換基を有していてもよいC2−6アルキニル基、置換基を有していてもよいC3−8シクロアルキル基、置換基を有していてもよいC6−10アリール基、置換基を有していてもよい5〜10員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい3〜10員非芳香族ヘテロ環式基、水酸基、置換基を有していてもよいC1−6アルコキシ基または置換基を有していてもよいC3−8シクロアルコキシ基を意味する。)で表される基を意味する。
A1は、置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する。
R11は、水素原子、置換基を有していてもよいC1−6アルキル基、置換基を有していてもよいC2−6アルケニル基、置換基を有していてもよいC2−6アルキニル基、置換基を有していてもよいC3−8シクロアルキル基、置換基を有していてもよいC6−10アリール基、置換基を有していてもよい5〜10員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい3〜10員非芳香族ヘテロ環式基または置換基を有していてもよいモノ−C1−6アルキルアミノ基を意味する。
R12は、水素原子または置換基を有していてもよいC1−6アルキル基を意味する。
Va13は、酸素原子または硫黄原子を意味する。
A11は、置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する。
R13は、水素原子、置換基を有していてもよいC1−6アルキル基または置換基を有していてもよいC3−8シクロアルキル基を意味する。
R14は、式−Va14−Va15(式中、Va14は、単結合またはカルボニル基を意味する;Va15は、水素原子、水酸基、置換基を有していてもよいC1−6アルキル基、置換基を有していてもよいC2−6アルケニル基、置換基を有していてもよいC2−6アルキニル基、置換基を有していてもよいC3−8シクロアルキル基、置換基を有していてもよいC6−10アリール基、置換基を有していてもよい5〜10員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい3〜10員非芳香族ヘテロ環式基、アミノ基、置換基を有していてもよいモノ−C1−6アルキルアミノ基、置換基を有していてもよいジ−C1−6アルキルアミノ基、ホルミル基、カルボキシル基または置換基を有していてもよいC2−7アルコキシカルボニル基を意味する。)で表される基を意味する。
(ii)X
Xは、酸素原子または硫黄原子を意味する。
(iii)Y
Yは、式
で表される基を意味する。
式中、R3は、水素原子、置換基を有していてもよいC1−6アルキル基、置換基を有していてもよいC2−6アルケニル基、置換基を有していてもよいC2−6アルキニル基、置換基を有していてもよいC3−8シクロアルキル基、置換基を有していてもよいC2−7アシル基または置換基を有していてもよいC2−7アルコキシカルボニル基を意味する。
R7およびR8は、それぞれ独立して水素原子、ハロゲン原子、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、置換基を有していてもよいC1−6アルキル基、置換基を有していてもよいC3−8シクロアルキル基、置換基を有していてもよいC1−6アルコキシ基、置換基を有していてもよいC1−6アルキルチオ基、ホルミル基、置換基を有していてもよいC2−7アシル基、置換基を有していてもよいC2−7アルコキシカルボニル基または式−CONVd1Vd2(式中、Vd1およびVd2は、それぞれ独立して水素原子または置換基を有していてもよいC1−6アルキル基を意味する。)で表される基を意味する。
R9は、水素原子、ハロゲン原子または置換基を有していてもよいC1−6アルキル基を意味する。
W1およびW2は、それぞれ独立して置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する。
(iv)R4
R4は、水素原子、置換基を有していてもよいC1−6アルキル基、置換基を有していてもよいC2−6アルケニル基、置換基を有していてもよいC2−6アルキニル基、置換基を有していてもよいC3−8シクロアルキル基、置換基を有していてもよいC2−7アシル基または置換基を有していてもよいC2−7アルコキシカルボニル基を意味する。
(v)R5
R5は、水素原子、置換基を有していてもよいC1−6アルキル基、置換基を有していてもよいC2−6アルケニル基、置換基を有していてもよいC2−6アルキニル基、置換基を有していてもよいC3−8シクロアルキル基、置換基を有していてもよいC6−10アリール基、置換基を有していてもよい5〜10員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい3〜10員非芳香族ヘテロ環式基を意味する。
一般式(1)で表される化合物は、公知の方法で製造でき、例えば、国際公開第02/032872号パンフレット(WO02/32872)、国際公開第2004/020434号パンフレット(WO2004/020434)、および国際公開第2005/063713号パンフレット(WO2005/063713)のいずれかに記載された方法によって製造することができる。
本発明において、VEGFレセプターキナーゼ阻害物質は、好ましくは、
一般式(II)
で表される化合物を挙げることができる。一般式(II)は、一般式(I)で表される化合物の好ましい例である。
(i)R1
R1は、前記定義と同じ意味である。
R1の好適な例としては、C1−6アルキル基があげられる。例えば、R1の定義においてV1がC1−6アルキレン基、V2が単結合、V3が水素原子のときは、R1はC1−6アルキル基となる。ただし、この場合、R1は、C1−6アルキル基を有していてもよい3〜10員非芳香族ヘテロ環式基、水酸基、C1−6アルコキシ基、アミノ基、モノ−C1−6アルキルアミノ基およびジ−C1−6アルキルアミノ基から選ばれる置換基を有していてもよい。
R1のより好適な例としては、メチル基または式
(式中、Ra3はメチル基を意味する;Ra1は水素原子または水酸基を意味する;Ra2は、メトキシ基、エトキシ基、1−ピロリジニル基、1−ピペリジニル基、4−モルホリニル基、ジメチルアミノ基またはジエチルアミノ基を意味する。)のいずれかで表される基があげられる。
R1のさらに好適な例としては、メチル基または2−メトキシエチル基があげられる。
(ii)R2
R2は、前記定義と同じ意味である。
R2の好適な例としては、シアノ基または式−CONVa11Va12(式中、Va11およびVa12は、前記定義と同じ意味である。)で表される基があげられる。
R2のより好適な例としては、シアノ基または式−CONHVa16(式中、Va16は、水素原子、C1−6アルキル基、C3−8シクロアルキル基、C1−6アルコキシ基またはC3−8シクロアルコキシ基を意味する。ただし、Va16は、ハロゲン原子、シアノ基、水酸基およびC1−6アルコキシ基から選ばれる置換基を有していてもよい。)で表される基があげられる。
R2のさらに好適な例としては、式−CONHVa17(式中、Va17は、水素原子、C1−6アルキル基またはC1−6アルコキシ基を意味する。)で表される基があげられる。
R2のもっとも好適な例としては、式−CONHVa18(式中、Va18は、水素原子、メチル基またはメトキシ基を意味する。)で表される基があげられる。
(iii)Y1
Y1は、式
(式中、R7、R8、W1およびW2は、前記定義と同じ意味である。)で表される基を意味する。
Y1の好適な例としては、式
(式中、R71は、水素原子またはハロゲン原子を意味する。)で表される基があげられる。
(iv)R3およびR4
R3およびR4は、前記定義と同じ意味である。
R3およびR4の好適な例としては、水素原子があげられる。
(v)R5
R5は、前記定義と同じ意味である。
R5の好適な例としては、水素原子、C1−6アルキル基、C3−8シクロアルキル基またはC6−10アリール基(ただし、R5は、ハロゲン原子およびメタンスルホニル基から選ばれる置換基を有していてもよい)があげられる。
R5のより好適な例としては、メチル基、エチル基またはシクロプロピル基があげられる。
また、一般式(II)で表される化合物の好適な例としては、
N−(4−(6−シアノ−7−(2−メトキシエトキシ)−4−キノリル)オキシ−2−フルオロフェニル)−N’−(4−フルオロフェニル)ウレア、
N−(2−クロロ−4−((6−シアノ−7−((1−メチル−4−ピペリジル)メトキシ)−4−キノリル)オキシ)フェニル)−N’−シクロプロピルウレア、
N−(4−((6−シアノ−7−(((2R)−3−(ジエチルアミノ)−2−ヒドロキシプロピル)オキシ)−4−キノリル)オキシ)フェニル)−N’−(4−フルオロフェニル)ウレア、
N−(4−((6−シアノ−7−(((2R)−2−ヒドロキシ−3−(1−ピロリジノ)プロピル)オキシ)−4−キノリル)オキシ)フェニル)−N’−(4−フルオロフェニル)ウレア、
4−(3−クロロ−4−(シクロプロピルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、
4−(3−クロロ−4−(シクロプロピルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−(2−メトキシエトキシ)−6−キノリンカルボキサミド、
N6−シクロプロピル−4−(3−クロロ−4−(((シクロプロピルアミノ)カルボニル)アミノ)フェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、
N6−(2−メトキシエチル)−4−(3−クロロ−4−(((シクロプロピルアミノ)カルボニル)アミノ)フェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、
N6−(2−フルオロエチル)−4−(3−クロロ−4−(((シクロプロピルアミノ)カルボニル)アミノ)フェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、
N6−メトキシ−4−(3−クロロ−4−(((シクロプロピルアミノ)カルボニル)アミノ)フェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、
N6−メチル−4−(3−クロロ−4−(((シクロプロピルアミノ)カルボニル)アミノ)フェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、
N6−エチル−4−(3−クロロ−4−(((シクロプロピルアミノ)カルボニル)アミノ)フェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、
4−(3−フルオロ−4−(シクロプロピルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−(2−メトキシエトキシ)−6−キノリンカルボキサミド、
4−(3−クロロ−4−(シクロプロピルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−(2−ヒドロキシエトキシ)−6−キノリンカルボキサミド、
4−(3−クロロ−4−(シクロプロピルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−((2S)−2,3−ジヒドロキシプロピル)オキシ−6−キノリンカルボキサミド、
4−(3−クロロ−4−(メチルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、
4−(3−クロロ−4−(エチルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、
N6−メトキシ−4−(3−クロロ−4−(((エチルアミノ)カルボニル)アミノ)フェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、
4−(3−クロロ−4−(シクロプロピルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−(2−エトキシエトキシ)−6−キノリンカルボキサミド、
4−(4−((シクロプロピルアミノ)カルボニル)アミノフェノキシ)−7−(2−メトキシエトキシ)−6−キノリンカルボキサミド、
N−(2−フルオロ−4−((6−カルバモイル−7−メトキシ−4−キノリル)オキシ)フェニル)−N’−シクロプロピルウレア、
N6−(2−ヒドロキシエチル)−4−(3−クロロ−4−(((シクロプロピルアミノ)カルボニル)アミノ)フェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、
4−(3−クロロ−4−(1−プロピルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、
4−(3−クロロ−4−(cis−2−フルオロ−シクロプロピルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、
N6−メチル−4−(3−クロロ−4−(((シクロプロピルアミノ)カルボニル)アミノ)フェノキシ)−7−(2−メトキシエトキシ)−6−キノリンカルボキサミド、
N6−メチル−4−(3−クロロ−4−(((エチルアミノ)カルボニル)アミノ)フェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、
4−(3−クロロ−4−(シクロプロピルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−(2−(4−モルホリノ)エトキシ)−6−キノリンカルボキサミド、
4−(3−クロロ−4−(2−フルオロエチルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、
N6−((2R)テトラヒドロ−2−フラニルメチル)−4−(3−クロロ−4−(((メチルアミノ)カルボニル)アミノ)フェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、
4−(3−フルオロ−4−(エチルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、
4−(3−クロロ−4−(((シクロプロピルアミノ)カルボニル)アミノ)フェノキシ)−7−((2R)−2−ヒドロキシ−3−(1−ピロリジノ)プロポキシ)−6−キノリンカルボキサミド、
N6−メチル−4−(3−クロロ−4−(((メチルアミノ)カルボニル)アミノ)フェノキシ)−7−((2R)−3−ジエチルアミノ−2−ヒドロキシプロポキシ)−6−キノリンカルボキサミド、
N6−メチル−4−(3−クロロ−4−(((エチルアミノ)カルボニル)アミノ)フェノキシ)−7−((2R)−3−ジエチルアミノ−2−ヒドロキシプロポキシ)−6−キノリンカルボキサミド、
N6−メチル−4−(3−クロロ−4−(((メチルアミノ)カルボニル)アミノ)フェノキシ)−7−((2R)−2−ヒドロキシ−3−(1−ピロリジノ)プロポキシ)−6−キノリンカルボキサミド、
N6−メチル−4−(3−クロロ−4−(((エチルアミノ)カルボニル)アミノ)フェノキシ)−7−((2R)−2−ヒドロキシ−3−(1−ピロリジノ)プロポキシ)−6−キノリンカルボキサミド、
N6−メチル−4−(3−クロロ−4−(((メチルアミノ)カルボニル)アミノ)フェノキシ)−7−((1−メチル−4−ピペリジル)メトキシ)−6−キノリンカルボキサミド、
N6−メチル−4−(3−クロロ−4−(((エチルアミノ)カルボニル)アミノ)フェノキシ)−7−((1−メチル−4−ピペリジル)メトキシ)−6−キノリンカルボキサミド、
N−(4−(6−シアノ−7−(2−メトキシエトキシ)−4−キノリル)オキシ−2−フルオロフェニル)−N′−シクロプロピルウレア、
N−(4−(6−シアノ−7−(3−(4−モルホリノ)プロポキシ)−4−キノリル)オキシフェニル)−N′−(3−(メチルスルホニル)フェニル)ウレア、
4−(4−((シクロプロピルアミノ)カルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、
4−(3−フルオロ−4−((2−フルオロエチルアミノ)カルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、
N6−(2−エトキシエチル)−4−(3−クロロ−4−(((メチルアミノ)カルボニル)アミノ)フェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、
4−(4−(3−エチルウレイド)−3−フルオロ−フェノキシ)−7−メトキシキノリン−6−カルボキシリック アシッド(2−シアノエチル)アミド
および
N−(4−(6−(2−シアノエチル)カルバモイル−7−メトキシ−4−キノリル)オキシ−2−フルオロフェニル)−N′−シクロプロピルウレア
を挙げることができる。
さらに、一般式(II)で表される化合物のより好適な例としては、
4−(3−クロロ−4−(シクロプロピルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、
4−(3−クロロ−4−(エチルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、
N6−メトキシ−4−(3−クロロ−4−(((シクロプロピルアミノ)カルボニル)アミノ)フェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、
4−(3−クロロ−4−(メチルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド
および
N6−メトキシ−4−(3−クロロ−4−(((エチルアミノ)カルボニル)アミノ)フェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミドを挙げることができる。
また、一般式(II)で表される化合物のさらに好適な例としては、4−(3−クロロ−4−(シクロプロピルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド(式(IV)参照)を挙げることができる。VEGFレセプターキナーゼ阻害物質の最も好適な例の一つとしては、4−(3−クロロ−4−(シクロプロピルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミドのメタンスルホン酸塩を挙げることができる。
一般式(II)で表される化合物は、公知の方法で製造でき、例えば、国際公開第02/32872号パンフレット(WO02/32872)および国際公開第2005/063713号パンフレット(WO2005/063713)のいずれかに記載された方法によって製造することができる。
本発明において、VEGFレセプターキナーゼ阻害物質は、好ましくは、
一般式(III)
で表される化合物を挙げることができる。一般式(III)は、一般式(I)で表される化合物の好ましい例である。
(i)R11
R11は、前記定義と同じ意味である。
R11の好適な例としては、置換基を有していてもよい3〜10員非芳香族ヘテロ環式基または置換基を有していてもよいモノ−C1−6アルキルアミノ基があげられる。
R11のより好適な例としては、以下の置換基群から選ばれる置換基を有していてもよい式
で表される基から選ばれるいずれか1の基があげられる。
[置換基群]
水酸基、C1−6アルキル基、C3−8シクロアルキル基、式
(式中、RN1およびRN2はそれぞれ独立して水素原子または置換基を有していてもよいC1−6アルキル基を意味する。)で表される基
R11のさらに好適な例としては、式
で表される基から選ばれるいずれか1の基があげられる。
(ii)R12
R12は、前記定義と同じ意味である。
R12の好適な例としては、水素原子があげられる。
(iii)Va13
Va13は、前記定義と同じ意味である。
Va13の好適な例としては、酸素原子があげられる。
(iv)A11
A11は、前記定義と同じ意味である。
A11の好適な例としては、炭素原子があげられる。
(v)R4
R4は、前記定義と同じ意味である。
R4の好適な例としては、水素原子があげられる。
(vi)R5
R5は、前記定義と同じ意味である。
R5の好適な例としては、C1−6アルキル基またはC3−8シクロアルキル基があげられる。
R5のより好適な例としては、メチル基があげられる。
(vii)R9
R9は、前記定義と同じ意味である。
R9の好適な例としては、水素原子があげられる。
また、一般式(III)で表される化合物の好適な例としては、
5−(2−(((4−ヒドロキシ−4−メチルピペリジン−1−イル)カルボニル)アミノ)ピリジン−4−イルオキシ)−1H−インドール−1−カルボン酸メチルアミド、
N1−メチル−5−(2−((4−ヒドロキシピペリジノ)カルボニル)アミノ−4−ピリジル)オキシ−1H−1−インドールカルボキサミド、
N1−メチル−5−(2−(((4−(ピロリジン−1−イル)ピペリジン−1−イル)カルボニル)アミノ)ピリジン−4−イルオキシ)−1H−1−インドールカルボキサミド、
N1−メチル−5−(2−(((4−(ピペリジン−1−イル)ピペリジン−1−イル)カルボニル)アミノ)ピリジン−4−イルオキシ)−1H−1−インドールカルボキサミド
および
N4−(4−(1−(メチルアミノ)カルボニル−1H−5−インドリル)オキシ−2−ピリジル)−4−モルホリンカルボキサミド
を挙げることができる。
一般式(III)で表される化合物は、公知の方法で製造でき、例えば、国際公開第2004/020434号パンフレット(WO2004/020434)に記載された方法によって製造することができる。
また、本発明において、VEGFレセプターキナーゼ阻害物質は、例えば、
(1)N−(4−ブロモ−2−フルオロフェニル)−6−メトキシ−7−[2−(1H−1,2,3−トリアゾール−1−イル)エトキシ]キナゾリン−4−アミン(以下、「ZD4190」ともいう。Cancer Research.,60,970−975,2000、Journal of Medicinal Chemistry.,42:5369−5389,1999.)(式(V)参照)、
(2)N−(4−ブロモ−2−フルオロフェニル)−6−メトキシ−7−[(1−メチルピペリジン−4−イル)メトキシ]キナゾリン−4−アミン(以下、「ZD6474」および「vandetanib」ともいう。Proc.Am.Assoc.Cancer Research.,42,583,2001、Journal of Medicinal Chemistry.,45:1300−1312,2002.)(式(VI)参照)、
(3)3−[(2,4−ジメチルピロール−5−イル)メチレン]−2−インドリノン(以下、「SU5416」および「semaxanib」ともいう。Cancer Research.,59,99−106,1999、Journal of Medicinal Chemistry.,41:2588−2603,1998.、US5792783)(式(VII)参照)、
(4)(Z)−3−[(2,4−ジメチル−5−(2−オキソ−1,2−ジヒドロインドール−3−イリデンメチル)−1H−ピロール−3−イル)−プロピオニック アシッド(以下、「SU6668」ともいう。Cancer Research.,60,4152−4160,2000、Journal of Medicinal Chemistry.,42:5120−5130,1999.)(式(VIII)参照)、
(5)5−(5−フルオロ−2−オキソ−1,2−ジヒドロインドール−3−イリデンメチル)−2,4−ジメチル−1H−ピロール−3−カルボキシリック アシッド(2−ジエチルアミノエチル)アミド(以下、「SU11248」ともいう。Clinical Cancer Research,9,327−337,2003、Journal of Medicinal Chemistry.,46:1116−9,2003.、WO01/060814)(式(IX)参照)、
(6)N,N−ジメチルグリシン 3−{5,6,7,13−テトラヒドロ−9−[(1−メチルエトキシ)メチル]−5−オキソ−12H−インデノ(2,1−a)ピロロ(3,4−c)カルバゾール−12−イル}プロピルエステル(以下、「CEP−7055」ともいう。Pro.Am.Assoc.Cancer Research,43,1080,2002、Journal of Medicinal Chemistry.,46:5375−88,2003.)(式(X)参照)、
(7)3−(4−ブロモ−2,6−ジフルオロ−ベンジルオキシ)−5−[3−(4−ピロリジン−1−イル−ブチル)−ウレイド]−イソチアゾール−4−カルボキシリック アシッド アミド(以下、「CP−547,632」ともいう。Cancer Research.63:7301−9,2003、WO 99/62890)(式(XI)参照)、
(8)N−{2−クロロ−4−[(6,7−ジメトキシ−4−キナゾリニル)オキシ]フェニル}−N’−プロピルウレア(以下、「KRN633」ともいう。Molecular Cancer Therapeutics.,3:1639−49,2004.、WO00/43366)(式(XII)参照)、
(9)1−(4−クロロアニリノ)−4−(4−ピリジルメチル)フタラジン(以下、「PTK787/ZK222584」および「vatalanib」ともいう。Cancer Research,60,2179−2189,2000、J.Med.Chem.,43:2310−23,2000.、WO98/35958)(式(XIII)参照)、
(10)N−{2−クロロ−4−[(6,7−ジメトキシ−4−キノリル)オキシ]フェニル}−N’−(5−メチル−3−イソキサゾリル)ウレア(以下、「KRN951」ともいう。WO02/088110)(式(XIV)参照)、
(11)4−[(4−フルオロ−2−メチルインドール−5−イル)オキシ]−6−メトキシ−7−[3−(ピロリジン−1−イル)プロポキシ]キナゾリン(以下、「AZD2171」ともいう。Cancer Research.65:4389−400,2005、WO00/47212)(式(XV)参照)、
(12)6−[2−(メチルカルバモイル)フェニルスルファニル]−3−E−[2−(ピリジン−2−イル)エテニル]インダゾール(以下、「AG013736」ともいう。American Journal of Pathology.165:35−52,2004.、WO01/002369)(式(XVI)参照)、
(13)5−((Z)−(5−フルオロ−2−オキソ−1,2−ジヒドロ−3H−インドール−3−イリデン)メチル)−N−((2S)−2−ヒドロキシ−3−モルホリン−4−イルプロピル)−2,4−ジメチル−1H−ピロール−3−カルボキサミド(以下、「SU14813」ともいう。Proceedings of the American Association for Cancer Research,46,(Abstract 2031),2005)(式(XVII)参照)、
(14)3−((キノリン−4−イルメチル)アミノ)−N−(4−(トリフルオロメトキシ)フェニル)チオフェン−2−カルボキサミド(以下、「OSI930」ともいう。Molecular Cancer Therapeutics.,4:1186−1197,2005.)(式(XVIII)参照)、
(15)6−(2,6−ジクロロフェニル)−8−メチル−2−フェニルアミノ−8H−ピリド[2,3−d]ピリミジン−7−オン(以下、「TKI−28」ともいう。Cancer Biol Ther.,4,2005.)(式(XIX)参照)、
(16)2−((1,6−ジヒドロ−6−オキソ−ピリジン−3−イルメチル)アミノ)−N−(3−(トリフルオロメチル)フェニル)−3−ピリジン−カルボキサミド(以下、「ABP309」ともいう。EORTC−NCI−AACR Symp Mol Targets Cancer Ther.,2,(Abstract 172),2004.)(式(XX)参照)、
(17)4−(4−(4−クロロ−フェニルアミノ)−フロ[2,3−d]ピリダジン−7−イルオキシメチル)−ピリジン−2−カルボキシリック アシッドメチルアミド(以下、「BAY 57−9352」ともいう。WO01/23375)(式(XXI)参照)、
(18)N−(3−トリフルオロメチル−4−クロロフェニル)−N’−(4−(2−メチルカルバモイルピリジン−4−イル)オキシフェニル)ウレア(以下、「BAY 43−9006」および「sorafenib」ともいう。Cancer Research.,64,7099−7109,2004,Organic Process Res Dev.,6,777−81,2002.)(式(XXII)参照)、
(19)4−アミノ−5−フルオロ−3−(6−(4−メチル−ピペラジン−1−イル)−1H−ベンズイミダゾール−2−イル)−1H−キノリン−2−オン(以下、「CHIR258」ともいう。Clinical Cancer Research.,11,3633−3641,2005.)(式(XXIII)参照)、
(20)4−(4−(1−アミノ−1−メチル−エチル)−フェニル)−2−(4−(2−モルホリン−4−イル−エチル)−フェニルアミノ)−ピリミジン−5−カルボニトリル(以下、「JNJ17029259」ともいう。Molecular Pharmacology.,66,635−647,2004.)(式(XXIV)参照)、
(21)[6−[4−[(4−エチルピペラジン−1−イル)メチル]フェニル]−7H−ピロロ[2,3−d]ピリミジン−4−イル]−((R)−1−フェニルエチル)アミン(以下、「AEE−788」ともいう。Cancer Research.,64,4931−4941,2004.、Cancer Research.,64,7977−7984,2004.)(式(XXV)参照)、
(22)9−(1−メチルエトキシ)メチル−12−(3−ヒドロキシプロピル)−6H,7H,13H−インデノ[2,1−a]ピロロ[3,4−c]カルバゾール−5−オン(以下、「CEP−5214」ともいう。Journal of Medicinal Chemistry.,46,5375−5388,2003.、Cancer Research.,63,5978−5991,2003.)(式(XXVI)参照)、
(23)N−(2,4−ジフルオロフェニル)−N’−{4−[(6,7−ジメトキシ−4−キノリル)−オキシ]−2−フルオロフェニル}ウレア(以下、「KI−8751」ともいう。Journal of Medicinal Chemistry.,48,1359−1366,2005.)(式(XXVII)参照)、
(24)N−[4−(3−アミノ−1H−インダゾール−4−イル)フェニル]−N’−(2−フルオロ−5−メチルフェニル)ウレア(以下、「ABT−869」ともいう。Proceedings of the American Association for Cancer Research.,46,1407,(Abstract 5981),2005.)(式(XXIX)参照)、
(25)2−メチル−6−[2−(1−メチル−1H−イミダゾール−2−イル)−チエノ[3,2−b]ピリジン−7−イルオキシ]−ベンゾ[b]チオフェン−3−カルボキシリック アシッド メチルアミド(以下、「AG−028262」ともいう。WO03/06462、US2004/009965)(式(XXX)参照)、
(26)(R)−1−(4−(4−フルオロ−2−メチル−1H−インドール−5−イルオキシ)−5−メチルピロロ[1,2−f][1,2,4]トリアジン−6−イルオキシ)プロパン−2−オール(以下、「BMS−540215」ともいう。Proceedings of the American Association for Cancer Research.,46,(Abstract 3033),2005.)(式(XXXI)参照)、
(27)(S)−((R)−1−(4−(4−フルオロ−2−メチル−1H−インドール−5−イルオキシ)−5−メチルピロロ[1,2−f][1,2,4]トリアジン−6−イルオキシ)プロパン−2−オール)2−アミノプロパノエート(以下、「BMS−582664」ともいう。Proceedings of the American Association for Cancer Research.,46,(Abstract 3033),2005.)(式(XXXII)参照)、
(28)3−[(4−モルホリン−4−イル−フェニルアミノ)−メチレン]−1,3−ジヒドロインドール−2−オン(以下、「AGN−199659」ともいう。WO2003/027102)(式(XXXIII)参照)、
(29)5−[[4−[(2,3−ジメチル−2H−インダゾール−6−イル)メチルアミノ]ピリミジン−2−イル]アミノ]−2−メチルベンゼンスルホンアミド(以下、「pazopanib」または「GW−786034」ともいう。Proc.Am.Soc.Clin.Oncology,(Abstract 3054),2004.)(式(XXXIV)参照)、
(30)(3Z)−3−[6−(2−モルホリン−4−イルエトキシ)キノリン−2(1H)−イリデン]−1,3−ジヒドロ−2H−インドール−2−オン(以下、「YM−231146」ともいう。Biological and Pharmaceutical Bulletin.28:2096−2101,2005.)(式(XXXV)参照)、
(31)2−((2−((4−(4−(4−(tert−ブチル)アニリノ)フェノキシ)−6−メトキシ−7−キノリル)オキシ)エチル)アミノ)−1−エタノール(以下、「KI−23057」ともいう。WO2003/033472)(式(XXXVI)参照)、
などを挙げることができる。
上記ZD4190、ZD6474、SU5416、SU6668、SU11248、CEP−7055、CP−547,632、KRN633、PTK787/ZK222584、KRN951、AZD2171、AG013736、SU14813、OSI930、TKI−28、ABP309、BAY57−9352、BAY43−9006、CHIR258、JNJ17029259、AEE−788、CEP−5214、KI−8751、ABT−869、AG−028262、BMS−540215、BMS−582664、AGN−199659、pazopanib、YM−231146およびKI−23057は、公知の方法で製造することができ、例えば、それぞれの文献に記載された方法で製造することができる。
また、本発明において、VEGFレセプターキナーゼ阻害物質は、例えば、BIBF1120(WO01/27081)、ZK304709(Proceedings of the American Association for Cancer Research,46,(Abstract 5842),2005.)、Exe17647(EORTC−NCI−AACR Symp Mol Targets Cancer Ther.,(Abstract 134),2004.)、AMG706(EORTC−NCI−AACR Symp Mol Targets Cancer Ther.,2,(Abstract 151),2004.)およびGW−654652(Blood.,103,3474−3479,2004.、Proceedings of the American Association for Cancer Research,44,9,(Abstract 39),2003.、Proceedings of the American Asociation for Cancer Research,44,9,(Abstract 40),2003.)などを挙げることができる。BIBF1120、ZK304709、Exe17647、AMG706およびGW−654652は、公知の方法で製造することができる。
(C)抗VEGFレセプター抗体
本発明において、VEGF阻害物質は、例えば、抗VEGFレセプター抗体を挙げることができる。抗VEGFレセプター抗体は、VEGFレセプターまたはその部分断片と親和性を有する抗体である。抗VEGFレセプター抗体は、VEGFレセプターを認識し結合することで、VEGFの活性、例えば、血管内皮細胞増殖活性を阻害する中和抗体であることが好ましい。抗VEGFレセプター抗体の作製は、後述の抗VEGF抗体の製造方法と同様にして作製することができる。抗VEGFレセプター抗体は、ポリクローナル抗体でも、モノクローナル抗体であってもよい。また、当該抗体のアイソタイプは特に限定されない。また、抗VEGFレセプター抗体は、抗体の断片または一本鎖抗体であってもよい(後述の抗VEGF抗体の記載を参照)。
抗VEGFレセプター抗体は、好ましくは2C3 antibody(US6524583,US6676941)、IMC−1121b(US6811779)、IMC−18F1(Proceedings of the American Association for Cancer Research,45,694,(Abstract 3005),2004.)、IMC−1C11(US5747651)、IMC−2C6(Proceedings of the American Association for Cancer Research,44,1479,(Abstract 6454),2003.)などを挙げることができる。2C3 antibody、IMC−1121b、IMC−18F1、IMC−1C11、IMC−2C6は、公知の方法で製造することができ、例えば、それぞれの文献に記載された方法で製造することができる。
(D)その他のVEGF阻害物質
本発明において、VEGF阻害物質は、例えば、PI88、AVE−0005(Proc.Am.Soc.Clin.Oncology,(Abstract 776),2003.)、EG−3306(Biochem Biophys Res Commun.,302,793−799,2003.)、RPI−4610(Angiozyme(登録商標)、US5180818、US6346398)、2−(8−ハイドロキシ−6−メトキシ−1−オキソ−1H−2−ベンゾピラン−3−イル)プロピオニック アシッド(以下、「NM−3」ともいう。WO97/48693)、5−[N−メチル−N−(4−オクタデシルオキシフェニル)アセチル]アミノ−2−メチルチオベンゾイック アシッド(以下、「VGA−1155」ともいう。Anticancer Research.,24,3009−3017,2004.)(式(LII)参照)、
VEGF trap(The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism.86(7),3377−3386,2001.)、pegaptanib sodium(Macugen(登録商標))などを挙げることができる。PI88、AVE−0005、EG−3306、RPI−4610、NM−3、VGA−1155およびVEGF trapは、公知の方法で製造することができ、例えば、それぞれの文献に記載された方法で製造することができる。また、pegaptanib sodiumは、ファイザー社からMacugenを購入することによって、入手することができる。
(E)FGFレセプターキナーゼ阻害物質
本発明において、FGFレセプターキナーゼ阻害物質は、例えば、
(1)1−[2−アミノ−6−(3,5−ジメトキシフェニル)−ピリド(2,3−d)ピリミジン−7−イル]−3−tert−ブチルウレア(以下、「PD166866」ともいう。Journal of Medicinal Chemistry.,40,2296−2303,1997)(式(XXXVII)参照)、
(2)1−tert−ブチル−3−[2−(4−ジエチルアミノ)ブチルアミノ−6−(3,5−ジメトキシフェニル)−ピリド(2,3−d)ピリミジン−7−イル]ウレア(以下、「PD173074」ともいう。EMBO J.,17,5896−5904,1998、US5733913)(式(XXXVIII)参照)、
(3)(S)−((R)−1−(4−(4−フルオロ−2−メチル−1H−インドール−5−イルオキシ)−5−メチルピロロ[1,2−f][1,2,4]トリアジン−6−イルオキシ)プロパン−2−オール)2−アミノプロパノエート(BMS−582664)(式(XXXII)参照)、
(4)4−[4−[N−(4−ニトロフェニル)カルバモイル]−1−ピペラジニル]−6,7−ジメトキシキナゾリン(以下、「CT−052923」ともいう。WO98/14437)(式(XXXIX)参照)、
(5)4−アミノ−5−フルオロ−3−(6−(4−メチル−ピペラジン−1−イル)−1H−ベンズイミダゾール−2−イル)−1H−キノリン−2−オン(CHIR258)(式(XXIII)参照)、
(6)2−((2−((4−(4−(4−(tert−ブチル)アニリノ)フェノキシ)−6−メトキシ−7−キノリル)オキシ)エチル)アミノ)−1−エタノール(KI−23057)(式(XXXVI)参照)、
(7)(Z)−3−[(2,4−ジメチル−5−(2−オキソ−1,2−ジヒドロインドール−3−イリデンメチル)−1H−ピロール−3−イル)−プロピオニック アシッド(SU6668)(式(VIII)参照)などを挙げることができる。
PD166866、PD173074、BMS−582664、CT−052923、CHIR258、KI−23057およびSU6668は、公知の方法で製造することができ、例えば、それぞれの文献に記載された方法で製造することができる。
(F)抗FGFレセプター抗体
本発明において、FGF阻害物質は、例えば、抗FGFレセプター抗体を挙げることができる。抗FGFレセプター抗体は、FGFレセプターまたはその部分断片と親和性を有する抗体である。抗FGFレセプター抗体は、FGFレセプターを認識し結合することで、FGFの活性、例えば、血管内皮細胞増殖活性を阻害する中和抗体であることが好ましい。抗FGFレセプター抗体の作製は、後述の抗VEGF抗体の製造方法と同様にして作製することができる。抗FGFレセプター抗体は、ポリクローナル抗体でも、モノクローナル抗体であってもよい。また、当該抗体のアイソタイプは特に限定されない。また、抗FGFレセプター抗体は、抗体の断片または一本鎖抗体であってもよい(後述の抗VEGF抗体の記載を参照)。
(G)PDGFレセプターキナーゼ阻害物質
本発明において、PDGF阻害物質は、例えば、PDGFレセプターキナーゼ阻害物質を挙げることができる。PDGFレセプターキナーゼ阻害物質は、例えば、
(1)4−(4−メチルピペラジン−1−イルメチル)−N−[4−メチル−3−[4−(3−ピリジル)ピリミジン−2−イルアミノ]フェニル]ベンゼンアミド(以下、「イマチニブ」ともいう。)(式(XL)参照)、
(2)6−[2−(メチルカルバモイル)フェニルスルファニル]−3−E−[2−(ピリジン−2−イル)エテニル]インダゾール(AG013736)(式(XVI)参照)、
(3)1−{2−[5−(2−メトキシ−エトキシ)−ベンゾイミダゾール−1−イル]−キノリン−8−イル}−ピペリジン−4−イルアミン(以下、「CP−673451」ともいう。WO2001/040217、Cancer Research.,65,957−966,2005.)(式(XLI)参照)、
(4)4−[4−[N−(4−ニトロフェニル)カルバモイル]−1−ピペラジニル]−6,7−ジメトキシキナゾリン(CT−052923)(式(XXXIX)参照)、
(5)4−アミノ−5−フルオロ−3−(6−(4−メチル−ピペラジン−1−イル)−1H−ベンズイミダゾール−2−イル)−1H−キノリン−2−オン(CHIR258)(式(XXIII)参照)、
(6)(4−tert−ブチルフェニル){4−[(6,7−ジメトキシ−4−キノリル)オキシ]フェニル}メタンオン(以下、「KI−6896」ともいう。Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters.,7,2935−2940,1997.)(式(XLIII)参照)、
(7)5−メチル−N−[4−(トリフルオロメチル)フェニル]−4−イソキサゾールカルボキサミド(以下、「leflunomide」ともいう。)(式(XLIV)参照)、
(8)trans−4−[(6,7−ジメトキシキノキサリン−2−イル)アミノ]シクロヘキサノール(以下、「RPR−127963E」ともいう。)(式(XLV)参照)、
(9)(Z)−3−[(2,4−ジメチル−5−(2−オキソ−1,2−ジヒドロインドール−3−イリデンメチル)−1H−ピロール−3−イル)−プロピオニック アシッド(SU6668)(式(VIII)参照)、
(10)5−(5−フルオロ−2−オキソ−1,2−ジヒドロインドール−3−イリデンメチル)−2,4−ジメチル−1H−ピロール−3−カルボキシリック アシッド(2−ジエチルアミノエチル)アミド(SU11248)(式(IX)参照)、
(11)1−(4−クロロアニリノ)−4−(4−ピリジルメチル)フタラジン(PTK787/ZK222584)(式(XIII)参照)、
(12)N−[4−(3−アミノ−1H−インダゾール−4−イル)フェニル]−N’−(2−フルオロ−5−メチルフェニル)ウレア(ABT−869)(式(XXIX)参照)などを挙げることができる。
イマチニブ、AG013736、CP−673451、CT−052923、CHIR258、KI−6896、leflunomide、RPR−127963E、SU6668、SU11248、PTK787/ZK222584およびABT−869は、公知の方法で製造することができ、例えば、それぞれの文献に記載された方法で製造することができる。
また、イマチニブは、ノバルティス社からグリベック(登録商標)を購入することによって、入手することができる。
(H)抗PDGFレセプター抗体
本発明において、PDGF阻害物質は、例えば、抗PDGFレセプター抗体を挙げることができる。抗PDGFレセプター抗体は、PDGFレセプターまたはその部分断片と親和性を有する抗体である。抗PDGFレセプター抗体は、PDGFレセプターを認識し結合することで、PDGFの活性、例えば、血管内皮細胞増殖活性を阻害する中和抗体であることが好ましい。抗PDGFレセプター抗体の作製は、後述の抗VEGF抗体の製造方法と同様にして作製することができる。抗PDGFレセプター抗体は、ポリクローナル抗体でも、モノクローナル抗体であってもよい。また、当該抗体のアイソタイプは特に限定されない。また、抗PDGFレセプター抗体は、抗体の断片または一本鎖抗体であってもよい(後述の抗VEGF抗体の記載を参照)。
(I)EGFレセプターキナーゼ阻害物質
本発明において、EGF阻害物質は、例えば、EGFレセプターキナーゼ阻害物質を挙げることができる。EGFレセプターキナーゼ阻害物質は、例えば、ゲフィチニブおよびその誘導体を挙げることができる。ゲフィチニブとは、4−(3−クロロ−4−フルオロフェニルアミノ)−7−メトキシ−6−(3−(4−モルホリノ)プロポキシ−キナゾリン)をいい、その構造式を以下の式(XLVI)に示す。
また、ゲフィチニブの誘導体とは、国際公開第96/33980号パンフレット(WO96/33980)に記載されている化合物を挙げることができる。
ゲフィチニブおよびその誘導体は、公知の方法で製造でき、例えば、国際公開第96/33980号パンフレット(WO96/33980)、特許第3040486号(JP3040486)および米国特許第5770599号明細書(US5770599)のいずれかに記載された方法によって製造することができる。
また、ゲフィチニブは、アストラゼネカ社からIressa(登録商標)を購入することによって、入手することができる。
本発明において、EGFレセプターキナーゼ阻害物質は、例えば、エルロチニブおよびその誘導体を挙げることができる。エルロチニブとは、4−(3−エチニルフェニルアミノ)−6,7−ビス(2−メトキシエトキシ)−キナゾリンをいい、その構造式を以下の式(XLVII)に示す。
また、エルロチニブの誘導体とは、国際公開第96/30347号パンフレット(WO96/30347)に記載されている化合物を挙げることができる。
エルロチニブおよびその誘導体は、公知の方法で製造でき、例えば、国際公開第96/30347号パンフレット(WO96/30347)、特許第3088018号(JP3088018)および特許3420549号(JP3420549)のいずれかに記載された方法によって製造することができる。
また、エルロチニブは、ジェネンテック社(Genentech社)からTarceva(登録商標)を購入することによって、入手することができる。
また、本発明において、EGFレセプターキナーゼ阻害物質は、例えば、
(1)N−[3−クロロ−4−[(3−フルオロベンジル)オキシ]フェニル]−6−[5−[[[2−(メチルスルホニル)エチル]アミノ]メチル]フラン−2−イル]キナゾリン−4−アミン
(N−[3−chloro−4−[(3−fluorobenzyl)oxy]phenyl]−6−[5−[[[2−(methylsulfonyl)ethyl]amino]methyl]furan−2−yl]quinazolin−4−amine)(以下、「lapatinib」ともいう。国際公開第99/35146号パンフレット(WO99/35146)、Cancer Research.,64,6652−6659.2004.)(式(XLVIII)参照)、
(2)N−[4−[N−(3−クロロ−4−フルオロフェニル)アミノ]−7−[3−(4−モルホリニル)プロポキシ]キナゾリン−6−イル]アクリルアミド
(N−[4−[N−(3−chloro−4−fluorophenyl)amino]−7−[3−(4−morpholinyl)propoxy]quinazolin−6−yl]acrylamide)(以下、「canertinib」ともいう。Clinical Cancer Research.,10:691−700,2004.、WO2000/31048)(式(XLIX)参照)、
(3)(2E)−N−[4−[(3−クロロ−4−フルオロフェニル)アミノ]−3−シアノ−7−エトキシ−6−キノリニル]−4−(ジメチルアミノ)−2−ブテンアミド
((2E)−N−[4−[(3−chloro−4−fluorophenyl)amino]−3−cyano−7−ethoxy−6−quinolinyl]−4−(dimethylamino)−2−butenamide)(以下、「pelitinib」ともいう。WO2003/50090)(式(L)参照)
(4)[6−[4−[(4−エチルピペラジン−1−イル)メチル]フェニル]−7H−ピロロ[2,3−d]ピリミジン−4−イル]−((R)−1−フェニルエチル)アミン(AEE−788)(式(XXV)参照)、
(5)(E)−N−{4−[3−クロロ−4−(2−ピリジニルメトキシ)アニリノ]−3−シアノ−7−エトキシ−6−キノリニル}−4−(ジメチルアミノ)−2−ブテンアミド
((E)−N−{4−[3−chloro−4−(2−pyridinylmethoxy)anilino]−3−cyano−7−ethoxy−6−quinolinyl}−4−(dimethylamino)−2−butenamide)(以下、「HKI−272」ともいうCancer Research.,64,3958−3965,2004.、Journal of Medicinal Chemistry.,48,1107−1131,2005.)(式(LI)参照)、
などを挙げることができる。
本発明において、EGFレセプターキナーゼ阻害物質は、4−(3−エチニルフェニルアミノ)−6,7−ビス(2−メトキシエトキシ)−キナゾリン(エルロチニブ:上記式(XLVII))であることが好ましい。
lapatinib、canertinib、pelitinib、AEE−788およびHKI−272は、公知の方法で製造することができ、例えば、それぞれの文献に記載された方法で製造することができる。
また、本発明において、EGFレセプターキナーゼ阻害物質は、例えば、ARRY−334543(Am.Assoc.Cancer Research,A3399,2005.)、MP−412(Am.Assoc.Cancer Research,A3394,2005.、Am.Assoc.Cancer Research,A3405,2005.)などを挙げることができる。ARRY−334543、MP−412は、公知の方法で製造することができる。
(J)抗EGFレセプター抗体
本発明において、EGF阻害物質は、例えば、抗EGFレセプター抗体を挙げることができる。抗EGFレセプター抗体は、EGFレセプターまたはその部分断片と親和性を有する抗体である。抗EGFレセプター抗体は、EGFレセプターを認識し結合することで、EGFの活性、例えば、血管内皮細胞増殖活性を阻害する中和抗体であることが好ましい。抗EGFレセプター抗体の作製は、後述の抗VEGF抗体の製造方法と同様にして作製することができる。抗EGFレセプター抗体は、ポリクローナル抗体でも、モノクローナル抗体であってもよい。また、当該抗体のアイソタイプは特に限定されない。また、抗EGFレセプター抗体は、抗体の断片または一本鎖抗体であってもよい(後述の抗VEGF抗体の記載を参照)。
本発明において、抗EGFレセプター抗体は、好ましくはセツキシマブ(cetuximab)を挙げることができる。
セツキシマブは、特開2002−114710号公報(JP2004−114710)または特開平2−291295号公報(JP2−291295)に記載の方法により入手することができる。
また、セツキシマブは、Merck社からErbitux(登録商標)を購入することによって、入手することができる。
また、本発明において、抗EGFレセプター抗体は、nimotuzumabを挙げることができる。nimotuzumabは、欧州特許第203126号明細書(EP203126)または米国特許第5891996号明細書(US5891996)に記載の方法により入手することができる。
また、本発明において、抗EGFレセプター抗体は、panitumumab(CAS339177−26−3、Clinical Colorectal Cancer.2005;5(1):21−3.)、matuzumab(CAS339186−68−4、Curr Opin Mol Ther.2004;6(1):96−103.)、IMC−11F8(Am.Assoc.Cancer Research,A5353,2005.)、MDX−447(ASCO18:433,1999)などを挙げることができる。
(K)血管新生阻害物質の塩および溶媒和物
本発明において、血管新生阻害物質は、酸または塩基と薬理学的に許容される塩を形成する場合もある。本発明における上記血管新生阻害物質は、これらの薬理学的に許容される塩をも包含する。酸との塩としては、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩などの無機酸塩およびギ酸、酢酸、乳酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、クエン酸、酒石酸、ステアリン酸、安息香酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、p−トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸などの有機酸塩などを挙げることができる。また、塩基との塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩などのアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、ジシクロヘキシルアミン、N,N’−ジベンジルエチレンジアミン、アルギニン、リジンなどの有機塩基塩、アンモニウム塩などを挙げることができる。
また、本発明において、血管新生阻害物質は、これら化合物の溶媒和物および光学異性体が存在する場合には、それらの溶媒和物および光学異性体が含まれる。溶媒和物は、例えば、水和物、非水和物などを挙げることができ、好ましくは水和物を挙げることができる。溶媒は、例えば、水、アルコール(例えば、メタノール、エタノール、n−プロパノール)、ジメチルホルムアミドなどを挙げることができる。
さらに、本発明において、血管新生阻害物質は、結晶でも無結晶でもよく、また、結晶多形が存在する場合には、それらのいずれかの結晶形の単一物であっても混合物であってもよい。
また、本発明において、血管新生阻害物質は、生体内で酸化、還元、加水分解、抱合などの代謝を受ける血管新生阻害物質をも包含する。また、本発明において、血管新生阻害物質は、生体内で酸化、還元、加水分解などの代謝を受けて血管新生阻害物質を生成する化合物をも包含する。
(L)抗VEGF抗体、抗FGF抗体、抗PDGF抗体、抗EGF抗体
本発明において、抗VEGF抗体は、VEGFまたはその部分断片と親和性を有する抗体である。抗VEGF抗体は、VEGFを認識し結合することで、VEGFの血管内皮細胞増殖活性を阻害する中和抗体であることが好ましい。本発明において、抗VEGF抗体は、例えば、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体、一本鎖抗体(scFV)(Huston et la.(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85:5879−83;The Pharmacology of Monoclonal Antibody,vol.113,Rosenburg and Moore ed.,Springer Verlag(1994)pp.269−315)、ヒト化抗体、多特異性抗体(LeDoussal et al.(1992)Int.J.Cancer Suppl.7:58−62;Paulus(1985)Behring Inst.Mitt.78:118−32;Millstein and Cuello(1983)Nature 305:537−9;Zimmermann(1986)Rev.Physiol.Biochem.Pharmacol.105:176−260;Van Dijk et al.(1989)Int.J.Cancer 43:944−9)、ヒト抗体、およびFab、Fab’、F(ab’)2、Fc、Fvなどの抗体断片などがあげられ、好ましくはモノクローナル抗体があげられる。さらに、抗VEGF抗体は、必要に応じ、ポリエチレングリコール(PEG)等により修飾されていてもよい。その他、抗VEGF抗体は、β−ガラクトシダーゼ、MBP、GST、GFP等との融合タンパク質として製造されることができ、ELISA法などにおいて二次抗体を用いずに検出できるようにしてもよい。また、抗VEGF抗体は、ビオチン等により抗体を標識することによりアビジン、ストレプトアビジン等を用いて抗体の回収を行い得るように改変されていてもよい。
抗VEGF抗体は、VEGFまたはその部分断片、もしくはそれらを発現する細胞を感作抗原として常法に従い製造することができる(「Current Protocols in Molecular Biology」(John Wiley & Sons(1987)Section 11.4−11.13))。この場合、VEGFまたはその部分断片は、Fc領域、GST、MBP、GFP、APなどとの融合タンパク質であってもよい。
ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体は、当業者に周知の方法で作製することができる(Antibodies:A Laboratory Manual,E.Harlow and D.Lane,ed.,Cold Spring Harbor Laboratory(Cold Spring Harbor,NY,1988))。
ポリクローナル抗体は、例えば、抗原をマウス、ウサギ、ラットなどの哺乳動物に投与し、該哺乳動物から血液を採取し、採取した血液から抗体を分離、精製することにより得ることができる。免疫感作の方法は当業者に公知であり、例えば抗原を1回以上投与することにより行うことができる。また、抗原(VEGFまたはその部分断片)は、適当な緩衝液、例えば、完全フロイントアジュバントまたは水酸化アルミニウム等の通常用いられるアジュバントを含有する適当な緩衝液に溶解して用いることができるが、投与経路や条件等に応じてアジュバントを使用しない場合もある。
最後の免疫感作から1〜2ケ月後に当該哺乳動物から血液を採取して、該血液を、例えば、遠心分離、硫酸アンモニウムまたはポリエチレングリコールを用いた沈澱、各種クロマトグラフィー等の常法によって分離、精製することにより、ポリクローナル抗血清として、ポリクローナル抗体を得ることができる。
モノクローナル抗体を産生する方法としては、ハイブリドーマ法を挙げることができる。ハイブリドーマ法は、まず、ポリクローナル抗体の産生と同様に哺乳動物を免疫感作する。免疫後、適当な日数を経過した後に部分採血を行い、ELISA法などの公知方法で抗体価を測定することが好ましい。
次いで、感作の終了した免疫動物から脾臓を摘出し、B細胞を得る。次いで、B細胞を常法に従いミエローマ細胞と融合させて抗体産生ハイブリドーマを作製することができる。用いられるミエローマ細胞は特に限定されず、公知のものを使用できる。細胞の融合方法は、センダイウイルス法、ポリエチレングリコール法、プロトプラスト法等、当該分野で公知の方法を任意に選択して用いることができる。得られたハイブリドーマは、常法に従い、HAT培地(ヒポキサンチン、アミノプテリン、およびチミジン含有培地)中で適当な期間培養し、ハイブリドーマの選択を行うことができる。次いで、目的とする抗体産生ハイブリドーマのスクリーニングを行った後、当該ハイブリドーマのクローニングを行うことができる。
スクリーニング法としては、ELISA法やラジオイムノアッセイ法などの公知の抗体検出方法を用いることができ、また、クローニング法としては、当該分野で公知の方法を用いることができ、例えば、限界希釈法およびFACS法等を用いることができる。得られたハイブリドーマは、適当な培養液中で培養するか、あるいはハイブリドーマと適合性のある、例えばマウス腹腔内に投与することができる。こうして得られる培養液中または腹水中から、塩析、イオン交換クロマトグラフィー、ゲル濾過、アフィニティークロマトグラフィー等により、所望のモノクローナル抗体を単離精製することができる。
本発明において、抗VEGF抗体は、好ましくはベバシズマブ(Bevacizumab)を挙げることができる。ベバシズマブは、ヒト抗VEGFモノクローナル抗体であり、Genentech社からAvastin(登録商標)として販売されているものである。
ベバシズマブは、Genentech社からAvastinを購入することによって、入手することができる。
本発明において、抗FGF抗体は、FGFまたはその部分断片と親和性を有する抗体である。抗FGF抗体は、FGFを認識し結合することで、FGFの血管内皮細胞増殖活性を阻害する中和抗体であることが好ましい。抗FGF抗体の作製は、前記抗VEGF抗体の製造方法と同様にして作製することができる。
本発明において、抗PDGF抗体は、PDGFまたはその部分断片と親和性を有する抗体である。抗PDGF抗体は、PDGFを認識し結合することで、PDGFの血管内皮細胞増殖活性を阻害する中和抗体であることが好ましい。抗PDGF抗体の作製は、前記抗VEGF抗体の製造方法と同様にして作製することができる。
本発明において、抗EGF抗体は、EGFまたはその部分断片と親和性を有する抗体である。抗EGF抗体は、EGFを認識し結合することで、EGFの血管内皮細胞増殖活性を阻害する中和抗体であることが好ましい。抗EGF抗体の作製は、前記抗VEGF抗体の製造方法と同様にして作製することができる。
4.キット
本発明は、血管新生阻害物質の抗腫瘍効果を予測する方法において使用するための、抗α−SMA抗体、抗デスミン抗体、抗コンドロイチン硫酸プロテオグリカン4抗体、抗カルポニン抗体、抗カルデスモン抗体および抗PDGFレセプター抗体からなる群から選択される少なくとも一つを含む、キットを提供する。抗体は、好ましくは抗α−SMA抗体である。抗体は、前記抗VEGF抗体の製造方法と同様にして作製することができる。キットに含まれる抗体は、腫瘍中の周皮細胞で覆われた血管数の測定に用いることができる。本発明のキットは、上記抗体に加えて、一般の測定において慣用的な成分を含んでいてもよい。
また、本発明は、血管新生阻害物質の抗腫瘍効果を予測する方法において使用するための、α−SMA遺伝子、デスミン遺伝子、コンドロイチン硫酸プロテオグリカン4遺伝子、カルポニン遺伝子、カルデスモン遺伝子およびPDGFレセプター遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つの遺伝子の転写産物であるRNAの少なくとも一部に相補的なポリヌクレオチドを含む、キットを提供する。遺伝子は、好ましくはデスミン遺伝子である。当該キットの構成成分となるポリヌクレオチドは、例えば、in situハイブリダイゼーション、ノーザンブロット解析、DNAマイクロアレイ、RT−PCR、定量的RT−PCRなどに使用されるプライマーおよび/またはプローブであり、例えば、Primer Expression(Perkin−Elmer Applied Biosystems)を用いて設計することができる。所望のポリヌクレオチドは、公知の方法により作製することができる。キットに含まれるポリヌクレオチドは、腫瘍中の周皮細胞で覆われた血管数の測定に用いることができる。本発明のキットは、上記ポリヌクレオチドに加えて、一般の測定において慣用的な成分を含んでいてもよい。
上記遺伝子の塩基配列は、各種データベースに登録されており、例えば、以下のGenBankアクセッション番号により塩基配列情報を入手することができる。
α−SMA遺伝子:NM_001613
デスミン遺伝子:NM_001927
コンドロイチン硫酸プロテオグリカン4遺伝子:NM_001897
カルポニン遺伝子:NM_001299
カルデスモン遺伝子:NM_033138
PDGFレセプター遺伝子:NM_002609
RNAの少なくとも一部とは、塩基配列として少なくとも15塩基、好ましくは15〜50塩基、より好ましくは20〜35塩基、さらに好ましくは20〜30塩基の配列を有するものであり、配列の長さは当業者が適宜設定することができる。
さらに、本発明のキットは、血管内皮細胞に特異的に発現するタンパク質に対する抗体および/または血管内皮細胞に特異的に発現する遺伝子の転写産物であるRNAの少なくとも一部に相補的なポリヌクレオチドを含んでいてもよい。これらの抗体およびポリヌクレオチドは、腫瘍中の血管数(周皮細胞で覆われた血管数および周皮細胞で覆われていない血管数の合計)の測定に用いることができる。血管内細胞に特異的に発現するタンパク質および/または遺伝子は、例えば、CD31、wVF、CD34、CD105、CXCR4、CD146、CD133、KDR(VEGF2型受容体)およびKITなどがあげられる。
以下に、具体的な例をもって本発明を示すが、本発明はこれに限られるものではない。
ヒト癌細胞株A375(大日本製薬より購入)、SEKI、HMV−1(以上、独立法人医薬基盤研究所 JCRB cell bank より購入)、FEM(The Norwegian Radiumhospital Research Foundation.Dr.Fodstadより譲渡)、LOX(AntiCancerより購入)、AZ−521(財団法人ヒューマンサイエンス振興財団より購入)、MDA−MB−468、DLD−1、HCT116、SW620、PC−3、DU145、AsPC−1、H526、MDA−MB−231、SK−Mel−2、Lovo、A431(以上、ATCCより購入)を5%炭酸ガスインキュベーター内においてRPMI1640(10%FBS含)で約80%コンフルレントとなるまで培養した。培養後、常法に従いトリプシン−EDTAにより、各細胞を回収した。各細胞をリン酸緩衝液で懸濁し、1×108cells/mLまたは5×107cells/mL懸濁液を調製した。そして、細胞懸濁液を0.1mLずつヌードマウス体側皮下に移植した。移植後、腫瘍体積が約100−200mm3になった時点から、4−(3−クロロ−4−(シクロプロピルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド(100mg/kg、1日2回、1週間、経口投与)の投与を開始した。なお、4−(3−クロロ−4−(シクロプロピルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド(メタンスルホン酸塩)は、国際公開第02/32872号パンフレット(WO02/32872)および国際公開第2005/063713号パンフレット(WO2005/063713)の記載に基づいて製造した。腫瘍長径および短径をデジマチックキャリパ(Mitsutoyo)で測定し、以下の式で腫瘍体積およびΔT/Cを算出した。
腫瘍体積(TV)=腫瘍長径(mm)×腫瘍短径2(mm2)/2
ΔT/C=(化合物投与群のday8の腫瘍体積−化合物投与群のday1の腫瘍体積)
/(対照群のday8の腫瘍体積−対照群のday1の腫瘍体積)×100
式中、day1は、投与開始日を示し、day8は、投与開始日から8日目を示す。
4−(3−クロロ−4−(シクロプロピルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミドの抗腫瘍効果の強さにより、各癌細胞株をそれぞれ縮小株、休止株、増殖株に分類した。なお、分類は、ΔT/C<−30%の癌細胞株を縮小株、−30%<ΔT/C<10%の癌細胞株を休止株、10%<ΔT/Cの癌細胞株を増殖株とした。
ヒト癌細胞株A375(大日本製薬より購入)、SEKI、HMV−1(以上、独立法人医薬基盤研究所 JCRB cell bank より購入)、FEM(The Norwegian Radiumhospital Research Foundation.Dr.Fodstadより譲渡)、LOX(AntiCancerより購入)、AZ−521(財団法人ヒューマンサイエンス振興財団より購入)、MDA−MB−468、DLD−1、HCT116、SW620、PC−3、DU145、AsPC−1、H526、MDA−MB−231、SK−Mel−2、Lovo、A431(以上、ATCCより購入)を5%炭酸ガスインキュベーター内においてRPMI1640(10%FBS含)で約80%コンフルレントとなるまで培養した。培養後、常法に従いトリプシン−EDTAにより、各細胞を回収した。各細胞をリン酸緩衝液で懸濁し、1×108cells/mLまたは5×107cells/mL懸濁液を調製した。そして、細胞懸濁液を0.1mLずつヌードマウス体側皮下に移植した。移植後、腫瘍体積が約100−200mm3になった時点で、マウスをCO2にて致死せしめ、移植ヒト腫瘍を外科手術により摘出した。腫瘍組織の周辺部より約5mm内側をナイフで切断し、当該腫瘍組織をOCTコンパウンドで包埋した。その後、ドライアイスで凍結し、−80℃にて凍結組織を作製した。当該腫瘍組織について、厚さ8μmの切片を作製し、スライドガラスに貼り付けた後、流水洗浄を行い、冷アセトン中に4℃で10分間静置した。0.1%Tween20含有0.01Mリン酸緩衝液(以下、洗浄用PBS)で3回洗浄を行い、DAKOビオチンブロッキングキットのアビジンブロッキング溶液にて室温で10分間反応させた。洗浄用PBSで3回洗浄後、DAKOビオチンブロッキングキットのビオチンブロッキング溶液にて室温で10分間反応させた。さらに同様に洗浄後、VECTOR STAIN ABCペルオキシダーゼ ラットIgGキット内の正常血清にて室温で20分間反応させた。溶液を除去後、1%ウシ胎児血清含有0.1Mリン酸緩衝液にて600倍希釈した1次抗体である抗CD31抗体(クローン名:MEC13.3、ラットIgG、PharMingen,BD Biosciences)を4℃で一晩反応させた。洗浄後、VECTOR STAIN ABCペルオキシダーゼ ラットIgGキット内のビオチン標識した2次抗体を室温で30分間反応させ、同様に洗浄を行った後、VECTOR STAIN ABCペルオキシダーゼ ラットIgGキット内のアビジン試薬(試薬AとBの混合液)でさらに室温で30分間反応させた。0.01Mリン酸緩衝液にて3回洗浄後、DABにて発色させ、CD31の染色を行った。
次に、サンプルを流水にて水洗後、トリスバッファーにてさらに3回洗浄を行った。トリスバッファーにて100倍希釈したアルカリフォスファターゼ標識抗α−SMA抗体(クローン名:1A4、マウスIgG、SIGMA−ALDRICH)を室温、1時間反応させた。トリスバッファーにて3回洗浄後、DAKO LSABキット内のフクシン溶液(溶液3および4をそれぞれ2滴ずつ混合した後、1分間撹拌後、溶液5で2mLにボリュームアップした溶液)にて発色させ、α−SMAの染色を行った。
染色サンプルを顕微鏡観察下、CCDカメラHYPER SCOPE(KEYENCE)にて血管数およびペリサイトで覆われた血管数を1サンプルあたり大よそ5ヶ所測定し、その平均を単位面積辺りの血管数またはペリサイトで覆われた血管数として換算した。また、その血管全体に占めるペリサイトで覆われた血管の割合をそれぞれの癌細胞株で算出し、4−(3−クロロ−4−(シクロプロピルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミドの抗腫瘍効果との比較を行った。Dunnett型多重比較検定にて統計解析を行った。
これらの結果から、4−(3−クロロ−4−(シクロプロピルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミドの抗腫瘍効果は、腫瘍組織中における周皮細胞で覆われた血管数と関連することが明らかになった(表1および図1)。よって、腫瘍中の周皮細胞で覆われた血管数を測定し、周皮細胞で覆われた血管数を指標とすることにより、患者に血管新生阻害物質を投与することなく、血管新生阻害物質の抗腫瘍効果を予測することが可能となった。そのため、本発明に係る方法は、患者に血管新生阻害物質を投与することなく、より抗腫瘍効果を期待できる患者を選択することができ、患者のQOLに貢献することが可能となった。
ヒト癌細胞株AsPC−1、H526(いずれもATCCより購入)を5%炭酸ガスインキュベーター内においてRPMI1640(10%FBS含)で約80%コンフルレントとなるまで培養した。培養後、常法に従いトリプシン−EDTAにより、各細胞を回収した。各細胞をリン酸緩衝液で懸濁し、5×107cells/mL懸濁液を調製した。そして、細胞懸濁液を0.1mLずつヌードマウス体側皮下に移植した。移植後、腫瘍体積が約50−200mm3になった時点から、5−(5−フルオロ−2−オキソ−1,2−ジヒドロインドール−3−イリデンメチル)−2,4−ジメチル−1H−ピロール−3−カルボキシリック アシッド(2−ジエチルアミノエチル)アミド(100mg/kg、1日1回、1週間、経口投与)の投与を開始した。なお、5−(5−フルオロ−2−オキソ−1,2−ジヒドロインドール−3−イリデンメチル)−2,4−ジメチル−1H−ピロール−3−カルボキシリック アシッド(2−ジエチルアミノエチル)アミドは、国際公開第01/060814号パンフレット(WO01/060814)の記載に基づいて製造した。腫瘍長径および短径をデジマチックキャリパ(Mitsutoyo)で測定し、以下の式で腫瘍体積、比腫瘍体積を算出した。
腫瘍体積(TV)=腫瘍長径(mm)×腫瘍短径2(mm2)/2
比腫瘍体積(RTV)=測定日の腫瘍体積/投与開始日の腫瘍体積
その結果、(5−(5−フルオロ−2−オキソ−1,2−ジヒドロインドール−3−イリデンメチル)−2,4−ジメチル−1H−ピロール−3−カルボキシリック アシッド(2−ジエチルアミノエチル)アミド)(化合物2)投与群では、4−(3−クロロ−4−(シクロプロピルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド(化合物1)投与群と同様に、腫瘍の増殖が、実施例1で休止株に分類されたAsPC−1では休止し、また、増殖株に分類されたH526では遅延した(図2)。すなわち、化合物2では、化合物1と同様の抗腫瘍効果の程度を示すことが示された。したがって、化合物1のみならず他の血管新生阻害物質においても周皮細胞で覆われた血管数を指標として、抗腫瘍効果を予測できることが明らかとなった(図2)。よって、腫瘍中の周皮細胞で覆われた血管数を測定し、周皮細胞で覆われた血管数を指標とすることにより、患者に血管新生阻害物質を投与することなく、血管新生阻害物質の抗腫瘍効果を予測することが可能となった。そのため、本発明に係る方法は、患者に血管新生阻害物質を投与することなく、より抗腫瘍効果を期待できる患者を選択することができ、患者のQOLに貢献することが可能となった。
1.ヒト癌細胞株皮下移植モデルにおける腫瘍組織中の全RNAの精製
ヒト癌細胞株MDA−MB−468、DLD−1、HCT116、SW620、PC−3、DU145、AsPC−1、H526、MDA−MB−231、MDA−MB−435、SK−OV−3、Lovo、7860、22Rv(以上、ATCCより購入)、HMV−1(独立法人医薬基盤研究所JCRB cell bankより購入)、Colo320DM、A549、A375(大日本製薬より購入)、FEM(The Norwegian Radiumhospital Research Foundation.Dr.Fodstadより譲渡)、LOX(AntiCancerより購入)を5%炭酸ガスインキュベーター内においてRPMI1640(10%FBS含)で約80%コンフルレントとなるまで培養した。培養後、常法に従いトリプシン−EDTAにより、各細胞を回収した。各細胞をリン酸緩衝液で懸濁し、1×108cells/mLまたは5×107cells/mL懸濁液を調製した。そして、細胞懸濁液を0.1mLずつヌードマウス体側皮下に移植した。移植後、腫瘍体積が約100−200mm3になった時点で、マウスをCO2にて致死せしめ、移植ヒト腫瘍を外科手術により摘出した。腫瘍組織を2つに分け、重量を測定し、一方の腫瘍について、腫瘍重量50mgに対してTRIZOL試薬(インビトロジェン社製)1mLを添加し、腫瘍組織をホモジナイズし、−20℃にて保存した。
次に、TRIZOL試薬1mLに対して0.2mLの割合でクロロホルム(純正化学社より購入)を添加した。この溶液を15秒間激しく振盪、攪拌し、室温で2〜3分間放置後遠心を行った(12,000×g、10分間、4℃)。遠心後水層を新しいチューブに移し、使用したTRIZOL試薬1mLに対して0.2mLの割合でイソプロピルアルコール(和光純薬社より購入)を加え、室温で10分間放置後遠心を行った(12,000×g、10分間、4℃)。得られた沈殿を75%エタノール(和光純薬社より購入)にて洗浄した後風乾した。このようにして得られた全RNAを以降の測定に供した。
2.RNAの定量
定量的RT−PCRは、遺伝子特異的プローブ(TaqMan Gene Expression Assays mixture(ASSAYS−ON−DEMAND)、アプライドバイオシステムズ社より購入)およびABI Prism 7900 Sequence Detection System(Perkin−Elmer Applied Biosystems社より購入)を用いて、以下のように行った。
操作は、逆転写反応およびPCR反応の2段階で行った。最初の段階である逆転写反応は、得られた100ng/μLのRNA 3μLにdNTP 6μL、oligo d(T)16プライマー 1.5μL、RNase Inhibitor 0.6μL、Multiscribe Reverse Transcriptase 0.75μL、25mM MgCl2 6.6μL(Perkin−Elmer Applied Biosystems社より購入)およびDEPC water 6μLを加え、25℃にて10分間保温後、48℃にて30分間加熱することにより行った。反応液を95℃5分間加熱することにより反応を停止させ、PCR用cDNA液を得た。
得られたcDNAを第2段階のPCR反応に供した。PCR反応は、DEPC waterで5倍希釈したPCR用cDNA液5μL、TaqMan Universal PCR Master Mix 6.25μL、200nM TaqMan Gene Expression Assaysプローブ0.625μL、H2O 0.625μLの反応系で行った。反応条件は、50℃2分間および95℃10分間の反応を行い、次いで、95℃20秒間、55℃20秒間、72℃30秒間を40サイクル行った。プローブおよびプライマーは、デスミン測定用にはTaqMan Gene Expression Assays mixture(ASSAYS−ON−DEMAND、Mm00802455_s1、アプライドバイオシステムズ社より購入)を用い、β−actin測定用にはTaqMan Gene Expression Assays mixture(ASSAYS−ON−DEMAND、Mm00607939_s1、アプライドバイオシステムズ社より購入)を用いた。
3.データ解析方法
各遺伝子の定量解析を行なうため、検量線の作成は、SK−OV−3のmRNAサンプルを用いて行なった。各癌細胞株での遺伝子発現量は、検量線からCt(threshold cycle値の略であり、PCR産物がある一定の濃度に達するのに必要なPCRのサイクル数である)を算出した。各癌細胞株におけるデスミンの発現量をβ−actin発現量で補正した値を各癌細胞株におけるデスミンの発現量比とし、比較解析に用いた。各細胞株の分類は、実施例1にて行ったものを用いた。なお、縮小株および休止株をまとめた群を感受性株として分類した。
感受性株と増殖株との比較をpermutation testにより行い、P<0.05のものを有意差ありと判断した。
その結果、デスミンは、感受性株(2.5)に比べて増殖株(5.6)において有意に発現量が多いことが明らかとなった(図3)。
以上の結果から、血管新生阻害物質の抗腫瘍効果は、デスミンなどの周皮細胞のマーカーの発現を指標として腫瘍中の周皮細胞で覆われた血管数を測定し、周皮細胞で覆われた血管数を指標とすることにより予測することが可能となった。
より詳細には、血管新生阻害物質の抗腫瘍効果は、腫瘍中の周皮細胞で覆われた血管数を測定し、周皮細胞で覆われた血管数を指標とすることにより予測することが可能となった。
本発明に係る方法は、患者に血管新生阻害物質を投与することなく、抗腫瘍効果を予測することが可能となるため、より抗腫瘍効果を期待できる患者を選択することができ、患者のQOLに貢献することが可能となった。
Claims (5)
- 血管新生阻害物質の抗腫瘍効果を予測する方法であって、
癌患者より採取した腫瘍中の血管数および腫瘍中の周皮細胞で覆われた血管数を測定する工程と、
腫瘍中の血管数に対する腫瘍中の周皮細胞で覆われた血管数の比率を、周皮細胞で覆われた血管数の比率が25%以下のときは当該癌患者が血管新生阻害物質に対して高感受性であるとする基準と比較することにより、当該癌患者の血管新生阻害物質に対する高感受性を検査する工程と、
を含む、前記方法。 - 血管新生阻害物質が、VEGFレセプターキナーゼ阻害物質である、請求項1に記載の方法。
- VEGFレセプターキナーゼ阻害物質が、
4−(3−クロロ−4−(シクロプロピルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、
4−(3−クロロ−4−(エチルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、
N6−メトキシ−4−(3−クロロ−4−(((シクロプロピルアミノ)カルボニル)アミノ)フェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、
4−(3−クロロ−4−(メチルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド
および
N6−メトキシ−4−(3−クロロ−4−(((エチルアミノ)カルボニル)アミノ)フェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド
からなる群から選択される少なくとも一つの化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物である、請求項2に記載の方法。 - VEGFレセプターキナーゼ阻害物質が、4−(3−クロロ−4−(シクロプロピルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミド、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物である、請求項2に記載の方法。
- VEGFレセプターキナーゼ阻害物質が、4−(3−クロロ−4−(シクロプロピルアミノカルボニル)アミノフェノキシ)−7−メトキシ−6−キノリンカルボキサミドのメタンスルホン酸塩である、請求項2に記載の方法。
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WO2007026864A1 (ja) * | 2005-09-01 | 2007-03-08 | Eisai R & D Management Co., Ltd. | 崩壊性の改善された医薬組成物の製造方法 |
CA2626326C (en) | 2005-11-04 | 2021-02-16 | Wyeth | Antineoplastic combinations with mtor inhibitor, herceptin, and/or hki-272 |
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US20090247576A1 (en) * | 2005-11-22 | 2009-10-01 | Eisai R & D Management Co., Ltd. | Anti-tumor agent for multiple myeloma |
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WO2008026748A1 (fr) | 2006-08-28 | 2008-03-06 | Eisai R & D Management Co., Ltd. | Agent antitumoral pour cancer gastrique non différencié |
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WO2008127719A1 (en) * | 2007-04-13 | 2008-10-23 | Osi Pharmaceuticals, Inc. | Biological markers predictive of anti-cancer response to kinase inhibitors |
US8022216B2 (en) | 2007-10-17 | 2011-09-20 | Wyeth Llc | Maleate salts of (E)-N-{4-[3-chloro-4-(2-pyridinylmethoxy)anilino]-3-cyano-7-ethoxy-6-quinolinyl}-4-(dimethylamino)-2-butenamide and crystalline forms thereof |
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WO2012166899A2 (en) | 2011-06-03 | 2012-12-06 | Eisai R&D Management Co., Ltd. | Biomarkers for predicting and assessing responsiveness of thyroid and kidney cancer subjects to lenvatinib compounds |
CN103505727A (zh) * | 2012-06-28 | 2014-01-15 | 中国科学院生物物理研究所 | 靶向作为vegfr-2共受体cd146的新功能在抗肿瘤血管新生治疗中的应用 |
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JP2017206437A (ja) * | 2014-08-18 | 2017-11-24 | エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 | 4−アミノピリジン誘導体 |
KR20230043234A (ko) | 2014-08-28 | 2023-03-30 | 에자이 알앤드디 매니지먼트 가부시키가이샤 | 고순도의 퀴놀린 유도체 및 이를 제조하는 방법 |
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KR20170122809A (ko) | 2015-03-04 | 2017-11-06 | 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 | 암을 치료하기 위한 pd-1 길항제 및 vegfr/fgfr/ret 티로신 키나제 억제제의 조합 |
CA2988707C (en) | 2015-06-16 | 2023-10-10 | Eisai R&D Management Co., Ltd. | Combination of cbp/catenin inhibitor and immune checkpoint inhibitor for treating cancer |
US20190000797A1 (en) | 2015-08-20 | 2019-01-03 | Eisai R&D Management Co., Ltd. | Tumor therapeutic agent |
US10336767B2 (en) | 2016-09-08 | 2019-07-02 | Kala Pharmaceuticals, Inc. | Crystalline forms of therapeutic compounds and uses thereof |
US10392399B2 (en) | 2016-09-08 | 2019-08-27 | Kala Pharmaceuticals, Inc. | Crystalline forms of therapeutic compounds and uses thereof |
WO2018048747A1 (en) | 2016-09-08 | 2018-03-15 | Kala Pharmaceuticals, Inc. | Crystalline forms of therapeutic compounds and uses thereof |
EP3581183B1 (en) | 2017-02-08 | 2023-11-29 | Eisai R&D Management Co., Ltd. | Tumor-treating pharmaceutical composition |
WO2019222075A1 (en) | 2018-05-14 | 2019-11-21 | Merck Sharp And Dohme Corp. | Biomarkers for a combination therapy comprising lenvatinib and a pd-1 antagonist |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2002032872A1 (en) * | 2000-10-20 | 2002-04-25 | Eisai Co., Ltd. | Nitrogenous aromatic ring compounds |
WO2004080462A1 (ja) * | 2003-03-10 | 2004-09-23 | Eisai Co., Ltd. | c-Kitキナーゼ阻害剤 |
Family Cites Families (76)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US574751A (en) * | 1897-01-05 | Handle-bar grip for bicycles | ||
US749104A (en) * | 1904-01-05 | Concentrator | ||
US761092A (en) * | 1902-04-07 | 1904-05-31 | Charles B Mcdonald | Vacuum-machine for cans, &c. |
US4526988A (en) * | 1983-03-10 | 1985-07-02 | Eli Lilly And Company | Difluoro antivirals and intermediate therefor |
EP0154434B1 (en) * | 1984-02-17 | 1993-01-27 | Genentech, Inc. | Human transforming growth factor and precursor or fragment thereof, cells, dna, vectors and methods for their production, compositions and products containing them, and related antibodies and diagnostic methods |
ATE92499T1 (de) * | 1984-12-04 | 1993-08-15 | Lilly Co Eli | Tumorbehandlung bei saeugetieren. |
JPS62168137A (ja) * | 1985-12-20 | 1987-07-24 | Fuji Photo Film Co Ltd | ハロゲン化銀カラ−写真感光材料およびその処理方法 |
AU4128089A (en) * | 1988-09-15 | 1990-03-22 | Rorer International (Overseas) Inc. | Monoclonal antibodies specific to human epidermal growth factor receptor and therapeutic methods employing same |
US5180818A (en) * | 1990-03-21 | 1993-01-19 | The University Of Colorado Foundation, Inc. | Site specific cleavage of single-stranded dna |
US5750376A (en) * | 1991-07-08 | 1998-05-12 | Neurospheres Holdings Ltd. | In vitro growth and proliferation of genetically modified multipotent neural stem cells and their progeny |
AU678764B2 (en) * | 1992-06-03 | 1997-06-12 | Case Western Reserve University | Bandage for continuous application of biologicals |
US6811779B2 (en) * | 1994-02-10 | 2004-11-02 | Imclone Systems Incorporated | Methods for reducing tumor growth with VEGF receptor antibody combined with radiation and chemotherapy |
US5656454A (en) * | 1994-10-04 | 1997-08-12 | President And Fellows Of Harvard College | Endothelial cell-specific enhancer |
JP3207058B2 (ja) * | 1994-11-07 | 2001-09-10 | 財団法人国際超電導産業技術研究センター | 超電導体薄膜及びその製造方法 |
IL115256A0 (en) * | 1994-11-14 | 1995-12-31 | Warner Lambert Co | 6-Aryl pyrido (2,3-d) pyrimidines and naphthyridines and their use |
US5658374A (en) * | 1995-02-28 | 1997-08-19 | Buckman Laboratories International, Inc. | Aqueous lecithin-based release aids and methods of using the same |
US5624937A (en) * | 1995-03-02 | 1997-04-29 | Eli Lilly And Company | Chemical compounds as inhibitors of amyloid beta protein production |
GB9508538D0 (en) * | 1995-04-27 | 1995-06-14 | Zeneca Ltd | Quinazoline derivatives |
US5880141A (en) * | 1995-06-07 | 1999-03-09 | Sugen, Inc. | Benzylidene-Z-indoline compounds for the treatment of disease |
US6346398B1 (en) * | 1995-10-26 | 2002-02-12 | Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. | Method and reagent for the treatment of diseases or conditions related to levels of vascular endothelial growth factor receptor |
US6143764A (en) * | 1995-11-07 | 2000-11-07 | Kirin Beer Kabushiki Kaisha | Quinoline and quinazoline derivatives inhibiting platelet-derived growth factor receptor autophosphorylation and pharmaceutical compositions containing the same |
US5891966A (en) * | 1997-12-11 | 1999-04-06 | Eastman Chemical Company | Waterborne silicon hydride crosslinkable latex compositions and methods of preparing the same |
WO1999001738A2 (en) * | 1997-06-30 | 1999-01-14 | University Of Maryland, Baltimore | Heparin binding-epidermal growth factor in the diagnosis of interstitial cystitis |
DE60033857T2 (de) * | 1999-01-22 | 2007-10-25 | Kirin Beer K.K. | Derivate des N-((Chinolinyl)oxy)-phenyl)-Harnstoffs und des N-((Chinazolinyl)oxy)-phenyl)-Harnstoffs mit Antitumor Aktivität |
PL205557B1 (pl) * | 1999-02-10 | 2010-05-31 | Astrazeneca Ab | Pochodne indolu |
YU13200A (sh) * | 1999-03-31 | 2002-10-18 | Pfizer Products Inc. | Postupci i intermedijeri za dobijanje anti-kancernih jedinjenja |
CN101073668A (zh) * | 1999-04-28 | 2007-11-21 | 德克萨斯大学董事会 | 用于通过选择性抑制vegf来治疗癌症的组合物和方法 |
WO2001012600A1 (en) * | 1999-08-12 | 2001-02-22 | Cor Therapeutics, Inc. | INHIBITORS OF FACTOR Xa |
US6762180B1 (en) * | 1999-10-13 | 2004-07-13 | Boehringer Ingelheim Pharma Kg | Substituted indolines which inhibit receptor tyrosine kinases |
US20080241835A1 (en) * | 1999-11-01 | 2008-10-02 | Genentech, Inc. | Differentially expressed genes involved in angiogenesis, the polypeptides encoded thereby, and methods of using the same |
MXPA02006263A (es) * | 1999-12-22 | 2004-02-26 | Sugen Inc | Metodos de modulacion de la funcion de la cinasa de tirosina c-kit de la proteina con compuestos de indolinona. |
WO2001047890A1 (fr) * | 1999-12-24 | 2001-07-05 | Kirin Beer Kabushiki Kaisha | Quinoline, derives de la quinazoline et medicaments contenant ces substances |
DE60018216T2 (de) * | 1999-12-24 | 2006-02-16 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Kondensierte purinderivate |
ME00415B (me) | 2000-02-15 | 2011-10-10 | Pharmacia & Upjohn Co Llc | Pirol supstituisani 2-indol protein kinazni inhibitori |
JP2004512023A (ja) * | 2000-06-09 | 2004-04-22 | コリクサ コーポレイション | 結腸癌の治療および診断のための組成物および方法 |
TWI283575B (en) * | 2000-10-31 | 2007-07-11 | Eisai Co Ltd | Medicinal compositions for concomitant use as anticancer agent |
WO2002041882A2 (en) * | 2000-11-22 | 2002-05-30 | Novartis Ag | Combination comprising an agent decreasing vegf activity and an agent decreasing egf activity |
TWI324154B (ja) * | 2001-04-27 | 2010-05-01 | Kyowa Hakko Kirin Co Ltd | |
AU2002342335B2 (en) * | 2001-05-16 | 2006-02-02 | Novartis Ag | Combination comprising N-{5-[4-(4-methyl-piperazino-methyl)-benzoylamido]-2-methylphenyl}-4-(3-pyridyl)-2pyrimidine-amine and a chemotherapeutic agent |
GB0119467D0 (en) * | 2001-08-09 | 2001-10-03 | Smithkline Beecham Plc | Novel compound |
WO2003023360A2 (en) * | 2001-09-10 | 2003-03-20 | Meso Scale Technologies, Llc | Methods and apparatus for conducting multiple measurements on a sample |
EP1435959A2 (en) * | 2001-10-09 | 2004-07-14 | University of Cincinnati | Inhibitors of the egf receptor for the treatment of thyroid cancer |
GB0201508D0 (en) * | 2002-01-23 | 2002-03-13 | Novartis Ag | Organic compounds |
EP1481678A4 (en) * | 2002-03-05 | 2009-12-30 | Eisai R&D Man Co Ltd | ANTITUMORAL AGENT CONTAINING A SULFONAMIDE-CONTAINING HETEROCYCLIC COMPOUND AND AN ANGIOGENESIS INHIBITOR |
UA77303C2 (en) * | 2002-06-14 | 2006-11-15 | Pfizer | Derivatives of thienopyridines substituted by benzocondensed heteroarylamide useful as therapeutic agents, pharmaceutical compositions and methods for their use |
MXPA05001536A (es) * | 2002-08-30 | 2005-04-19 | Eisai Co Ltd | Derivados aromaticos que contienen nitrogeno. |
US8697094B2 (en) * | 2002-10-16 | 2014-04-15 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Stable solid preparations |
AR042042A1 (es) * | 2002-11-15 | 2005-06-08 | Sugen Inc | Administracion combinada de una indolinona con un agente quimioterapeutico para trastornos de proliferacion celular |
WO2004078144A2 (en) * | 2003-03-05 | 2004-09-16 | Celgene Corporation | Diphenylethylene compounds and uses thereof |
JPWO2004081047A1 (ja) * | 2003-03-14 | 2006-06-29 | 大正製薬株式会社 | モノクローナル抗体及びこれを産生するハイブリドーマ |
JP2005008534A (ja) * | 2003-06-17 | 2005-01-13 | Soc De Conseils De Recherches & D'applications Scientifiques (Scras) | 抗癌剤及び癌の治療方法 |
ATE395052T1 (de) * | 2003-08-15 | 2008-05-15 | Ab Science | Verwendung von c-kit-inhibitoren für die behandlung von typ-2-diabetes |
US7485658B2 (en) * | 2003-08-21 | 2009-02-03 | Osi Pharmaceuticals, Inc. | N-substituted pyrazolyl-amidyl-benzimidazolyl c-Kit inhibitors |
CA2535896A1 (en) * | 2003-08-21 | 2005-03-10 | Osi Pharmaceuticals, Inc. | N-substituted benzimidazolyl c-kit inhibitors |
WO2005044788A1 (ja) * | 2003-11-11 | 2005-05-19 | Eisai Co., Ltd. | ウレア誘導体およびその製造方法 |
RS54033B1 (en) | 2003-12-25 | 2015-10-30 | Eisai R&D Management Co. Ltd. | CRYSTAL FORM OF THE SALTS 4- (3-CHLORO-4- (CYCLOPROPYLAMINOCARBONYL) AMINO-PHENOXY) -7-METHOXY-6-HINOLINKARBOXAMIDE OR ITS SOLVATES AND THE PROCESS FOR THEIR PRODUCTION |
CA2543859A1 (en) * | 2004-02-27 | 2005-09-09 | Eisai Co., Ltd. | Novel pyridine derivative and pyrimidine derivative (1) |
WO2005110399A2 (en) * | 2004-04-29 | 2005-11-24 | The Regents Of The University Of California | Zinc-binding groups for metalloprotein inhibitors |
US8772269B2 (en) * | 2004-09-13 | 2014-07-08 | Eisai R&D Management Co., Ltd. | Use of sulfonamide-including compounds in combination with angiogenesis inhibitors |
KR20070053205A (ko) * | 2004-09-17 | 2007-05-23 | 에자이 알앤드디 매니지먼트 가부시키가이샤 | 의약 조성물 |
US20060079494A1 (en) * | 2004-09-27 | 2006-04-13 | Santi Daniel V | Specific kinase inhibitors |
JP5106098B2 (ja) * | 2005-02-28 | 2012-12-26 | エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 | スルホンアミド化合物の抗癌剤との新規併用 |
US7550483B2 (en) * | 2005-06-23 | 2009-06-23 | Eisai R&D Management Co., Ltd. | Amorphous salt of 4-(3-chloro-4-(cyclopropylaminocarbonyl)aminophenoxy)-7-methoxy-6-quinolinecarboxamide and process for preparing the same |
WO2007015578A1 (ja) * | 2005-08-02 | 2007-02-08 | Eisai R & D Management Co., Ltd. | 血管新生阻害物質の効果を検定する方法 |
WO2007023768A1 (ja) * | 2005-08-24 | 2007-03-01 | Eisai R & D Management Co., Ltd. | 新規ピリジン誘導体およびピリミジン誘導体(3) |
US20090053236A1 (en) * | 2005-11-07 | 2009-02-26 | Eisai R & D Management Co., Ltd. | USE OF COMBINATION OF ANTI-ANGIOGENIC SUBSTANCE AND c-kit KINASE INHIBITOR |
US20090247576A1 (en) * | 2005-11-22 | 2009-10-01 | Eisai R & D Management Co., Ltd. | Anti-tumor agent for multiple myeloma |
AR059066A1 (es) * | 2006-01-27 | 2008-03-12 | Amgen Inc | Combinaciones del inhibidor de la angiopoyetina -2 (ang2) y el inhibidor del factor de crecimiento endotelial vascular (vegf) |
KR100728926B1 (ko) * | 2006-03-20 | 2007-06-15 | 삼성전자주식회사 | 3축 힌지 구조를 갖는 휴대용 전자기기 |
EP2062886B1 (en) * | 2006-08-23 | 2011-11-30 | Eisai R&D Management Co., Ltd. | Salt of phenoxypyridine derivative or crystal thereof and process for producing the same |
WO2008026748A1 (fr) * | 2006-08-28 | 2008-03-06 | Eisai R & D Management Co., Ltd. | Agent antitumoral pour cancer gastrique non différencié |
CN101616671A (zh) * | 2007-01-19 | 2009-12-30 | 卫材R&D管理有限公司 | 胰腺癌治疗用组合物 |
CN101600694A (zh) * | 2007-01-29 | 2009-12-09 | 卫材R&D管理有限公司 | 未分化型胃癌治疗用组合物 |
JP5638244B2 (ja) * | 2007-11-09 | 2014-12-10 | エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 | 血管新生阻害物質と抗腫瘍性白金錯体との併用 |
JP5399926B2 (ja) * | 2008-01-29 | 2014-01-29 | エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 | 血管阻害物質とタキサンとの併用 |
CA2753844A1 (en) * | 2008-03-05 | 2009-09-11 | Vicus Therapeutics, Llc | Compositions and methods for mucositis and oncology therapies |
-
2006
- 2006-08-01 US US11/997,543 patent/US20100105031A1/en not_active Abandoned
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- 2006-08-01 EP EP06782407A patent/EP1925941B1/en active Active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2002032872A1 (en) * | 2000-10-20 | 2002-04-25 | Eisai Co., Ltd. | Nitrogenous aromatic ring compounds |
WO2004080462A1 (ja) * | 2003-03-10 | 2004-09-23 | Eisai Co., Ltd. | c-Kitキナーゼ阻害剤 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2007015569A1 (ja) | 2007-02-08 |
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Smith et al. | Endocrinology. First published December 22, 2005 as doi: 10.1210/en. 2005-1073 | |
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