KR100548600B1

KR100548600B1 - 1 - 아미노 - 알킬시클로헥산 nmda 수용체 길항물질

Info

Publication number: KR100548600B1
Application number: KR1020027005621A
Authority: KR
Inventors: 골트마르쿠스; 다니스츠보이치에히; 파르존스크리스토퍼그라함라파엘; 칼빈쉬아이바르스; 카우스발레르장스; 지르겐선즈아이가르스
Original assignee: 메르츠 파마 게엠베하 운트 코. 카가아
Priority date: 1999-11-01
Filing date: 1999-11-01
Publication date: 2006-02-01
Also published as: CA2389325A1; UA72558C2; EA005684B1; PL199587B1; CN1264827C; EA200200522A1; CN1374956A; HK1049160A1; HUP0203275A2; DE69936004D1; EP1228052A1; AU1158500A; CZ20021533A3; PT1228052E; PL354519A1; HUP0203275A3; DK1228052T3; ATE361284T1; DE69936004T2; JP2003513083A

Abstract

본 발명은 다음 화학식 Ⅰ 을 갖는 화합물 및 이것의 거울상이성질체, 광학 이성질체, 수화물, 약학적으로 용인가능한 이의 염 중에서 선택한 특정 1 - 사이클릭 아미노 - 알킬시클로헥산을 제공하는데, 이 화합물은 전신적으로 활성인 비경쟁적 NMDA 수용체 길항물질이며 글루타민산염을 통한 전달 장애에서 기인한 증상의 완화에 유용하다 :

화학식 Ⅰ

이 식에서,
R^* 은 - (CH₂)_n - (CR⁶R⁷)_m - NR⁸R⁹ 이고,
n + m = 0, 1 또는 2 이며,
R¹ 내지 R⁷ 은 각각 수소 및 저급 - 알킬(1 - 6C) 중에서 선택된 것이고, 적어도 R¹, R⁴ 및 R⁵ 는 저급 - 알킬이고,
R⁸ 및 R⁹ 는 모두 저급 - 알킬렌 -(CH₂)_x- 이며, 이 중 x 는 2 내지 5 이다.

보다 중요하게, 이들 화합물은 밀접하게 - 관련된 비사이클릭 아미노 화합물이 공유할 수 없는 상당한 항경련 활성 및 항 - 발작 활성을 나타낸다. 또한 본 발명은 상기 화합물을 함유하는 약학적 조성물, 이 조성물을 사용하여 완화시킬 수 있는 증상, 특히 경련 및 발작을 완화시키는 치료방법 및 이에 관여하는 활성 1 - 사이클릭 아미노 - 알킬시클로헥산 화합물의 제조방법과 이 화합물을 함유하는 약제의 제조를 제공한다.

1 - 사이클릭 아미노 - 알킬시클로헥산 화합물, MRZ 2/705, 경련 치료, 발작 치료, 항경련약

Description

1 - 아미노 - 알킬시클로헥산 NMDA 수용체 길항물질 {1 - AMINO - ALKYLCYCLOHEXANE NMDA RECEPTOR ANTAGONISTS}

본 발명은 다음 화학식 Ⅰ 을 갖는 화합물 및 이것의 거울상이성질체, 광학 이성질체, 수화물, 약학적으로 용인가능한 이의 염 중에서 선택한 1 - 사이클릭 아미노 - 알킬시클로헥산 화합물에 관한 것이다 :

이 식에서,

R^* 은 - (CH₂)_n - (CR⁶R⁷)_m - NR⁸R⁹ 이고,

n + m = 0, 1 또는 2 이며,

R¹ 내지 R⁷ 은 각각 수소 및 저급 - 알킬(1 - 6C) 중에서 선택된 것이고,

R⁸ 및 R⁹ 는 모두 저급 - 알킬렌인 -(CH₂)_x- 이며, 이 중 x 는 2 내지 5 이다.

또한 본 발명은 상기 화합물을 함유하는 약학적 조성물 및 이의 제조와 살아있는 동물의 경련이나 발작 치료용 항경련약으로서의 그것의 용도에 관한 것이다.

특정 목적 화합물은 상기 화학식 Ⅰ 을 갖는 화합물에 관한 것으로, 이 식에서, 적어도 R¹, R⁴ 및 R⁵ 는 저급 알킬이고, 특히 이 화합물의 R¹ 내지 R⁵ 는 메틸이고 x 는 4 또는 5 로서, 특히 이 화합물은 N - (1,3,3,5,5 - 펜타메틸시클로헥실) 피롤리딘 및 이것의 광학 이성질체, 거울상이성질체, 수화물 및 약학적으로 용인가능한 이의 염이다.

본 출원인의 공개된 출원인 제 WO 99/01416 호(1999 년 1 월 14 일자로 공개)에서, 우리는 상기 화학식 Ⅰ 을 가지지만, R⁸ 및 R⁹ 는 수소 및 저급 알킬(1 - 6C) 중에서 선택한 화합물 및 이를 함유하는 약학적 조성물과 NMDA - 수용체 길항물질로서의 용도에 관하여 기술하였다. 이제 우리는 상기 화학식 Ⅰ 을 갖는 화합물을 발견하였으며, 이 식에서 R⁸ 및 R⁹ 는 모두 저급 - 알킬렌인 -(CH₂)_x- 이고 이 중 x 는 2 - 5 로서, 특히 이 화합물은 N - (1,3,3,5,5 - 펜타메틸시클로헥실) 피롤리딘 및 이것의 광학 이성질체, 거울상이성질체, 수화물 및 약학적으로 용인가능한 이의 염을 포함한다. 다른 NMDA 길항물질은 높은 NMDA - 길항 특성에도 불구하고 활성적이지 않지만, 이 화합물은 점화 모델에서 NMDA 길항물질 특성 이외에 놀랍게도 높은 항경련 활성을 갖는다.

발명의 요약

본 발명은 무엇보다도 다음 화학식 Ⅰ을 갖는 화합물 및 이것의 거울상이성질체, 광학 이성질체, 수화물 및 약학적으로 용인가능한 이의 염 중에서 선택한 1 - 사이클릭 아미노 - 알킬시클로헥산 화합물에 관한 것이다 :

화학식 Ⅰ

이 식에서,

R^* 은 - (CH₂)_n - (CR⁶R⁷)_m - NR⁸R⁹ 이고,

n + m = 0, 1 또는 2 이며,

R¹ 내지 R⁷ 은 각각 수소 및 저급 알킬(1 - 6C) 중에서 선택된 것이고, 적어도 R¹, R⁴ 및 R⁵ 는 저급 - 알킬이고,

삭제

이러한 화합물의 R¹ 내지 R⁵ 는 메틸이고 ; x 는 4 또는 5 이며 ; 이러한 화합물은 N - (1,3,3,5,5 - 펜타메틸시클로헥실) 피롤리딘 및 이것의 광학 이성질체, 거울상이성질체, 수화물 및 약학적으로 용인가능한 이의 염 중에서 선택한다.

또한 본 발명은 유효량의 화합물과 함께 하나 또는 그 이상의 약학적으로 용인가능한 희석제, 부형제 또는 담체를 함유하는 약학적 조성물에 관한 것이다. 이러한 약학적 조성물에 있어서 유효량은 항경련성 유효량이고 ; R¹ 내지 R⁵ 는 메틸이며 ; x 는 4 또는 5 이고 ; 화합물은 N - (1,3,3,5,5 - 펜타메틸시클로헥실) 피롤리딘 및 이것의 광학 이성질체, 거울상이성질체, 수화물 및 약학적으로 용인가능한 이의 염 중에서 선택한다.

또한 본 발명은 다음 화학식 Ⅰ을 갖는 화합물 및 이것의 광학 이성질체, 거울상이성질체, 수화물 및 약학적으로 용인가능한 이의 염 중에서 선택한 1 - 사이클릭 아미노 - 알킬시클로헥산 화합물의 유효량을 살아있는 동물에게 투여하는 단계를 포함하는, 살아있는 동물의 경련 또는 발작 치료방법에 관한 것이다 :

화학식 Ⅰ

이 식에서,

R^* 은 - (CH₂)_n - (CR⁶R⁷)_m - NR⁸R⁹ 이고,

n + m = 0, 1 또는 2 이며,

삭제

이러한 방법에 있어서, 적어도 R¹, R⁴ 및 R⁵ 는 저급 - 알킬이고 ; R¹ 내지 R⁵ 는 메틸이고 ; x 는 4 또는 5 이며 ; 화합물은 N - (1,3,3,5,5 - 펜타메틸시클로헥실) 피롤리딘 및 이것의 광학 이성질체, 거울상이성질체, 수화물 및 약학적으로 용인가능한 이의 염 중에서 선택하며 ; 화합물은 하나 또는 그 이상의 약학적으로 용인가능한 희석제, 부형제 또는 담체와 함께 이 화합물을 함유하는 약학적 조성물의 형태로 투여된다.

또한 본 발명은 살아있는 동물의 경련이나 발작을 완화시키기 위한 치료용 의약 제조시, 다음 화학식 Ⅰ을 갖는 화합물 및 이것의 광학 이성질체, 거울상이성질체, 수화물 및 약학적으로 용인가능한 이의 염 중에서 선택한 1 - 사이클릭 아미노 - 알킬시클로헥산의 용도를 제공한다 :

화학식 Ⅰ

이 식에서,

R^* 은 - (CH₂)_n - (CR⁶R⁷)_m - NR⁸R⁹ 이고,

n + m = 0, 1 또는 2 이며,

삭제

이러한 용도에 있어서, 적어도 R¹, R⁴ 및 R⁵ 는 저급 - 알킬이고 ; R¹ 내지 R⁵ 는 메틸이고 ; x 는 4 또는 5 이며 ; 이 화합물은 N - (1,3,3,5,5 - 펜타메틸시클로헥실) 피롤리딘 및 이것의 광학 이성질체, 거울상이성질체, 수화물 및 약학적으로 용인가능한 이의 염 중에서 선택한다.

부가적으로, 이러한 화합물을 제조하는 방법은 다음의 반응 단계를 포함한다 : 해당 1 - 유리 아미노 - 알킬시클로헥산을 (1) 오메가 - 할로알킬니트릴과 반응시켜 생성된 N - (오메가 - 시아노알킬) 화합물을 고리화시켜 해당 1 -사이클릭 아미노 - 알킬시클로헥산 화합물을 제조하거나 또는 (2) 알파, 오메가 - 디할로알킬 화합물과 반응시키는 단계.

방법 - 화학

본 발명의 화합물을 제조하기 위한 출발 물질은 본 분야에 공지되어 있다. 공개된 선출원 제 WO 99/01416 호, 제 PCT/EP 98/04026 호에는 다수의 1 - 아미노 - 알킬시클로헥실아민 화합물이 기재되어 있다. 예를 들어, 그 중에서도 상기 문헌의 9 페이지에 기재되어 있는 화합물 5 를 뜻하며 공개 문헌 전반에 걸쳐 다수의 상기 화합물의 예가 나타나 있다. 본 발명에 적합한 출발 화합물은 상기에 설명되어 있는 화학식을 가지며, 여기에서 R⁸과 R⁹는 둘 다 수소이다. 출발 물질로서 특별히 관심있는 화합물은 다음 중에서 선택한 것이다 :

1 - 아미노 - 1,3,5 - 트리메틸시클로헥산,

1 - 아미노 - 1(트랜스),3(트랜스),5 - 트리메틸시클로헥산,

1 - 아미노 - 1(시스),3(시스),5 - 트리메틸시클로헥산,

1 - 아미노 - 1,3,3,5 - 테트라메틸시클로헥산,

1 - 아미노 - 1,3,3,5,5 - 펜타메틸시클로헥산,

1 - 아미노 - 1,3,5,5 - 테트라메틸 - 3 - 에틸시클로헥산,

1 - 아미노 - 1,5,5 - 트리메틸 - 3,3 - 디에틸시클로헥산,

1 - 아미노 - 1,5,5 - 트리메틸 - 시스 - 3 - 에틸시클로헥산,

1 - 아미노 - (1S, 5S)시스 - 3 - 에틸 - 1,5,5 - 트리메틸시클로헥산,

1 - 아미노 - 1,5,5 - 트리메틸 - 트랜스 - 3 - 에틸시클로헥산,

1 - 아미노 - (1R, 5S)트랜스 - 3 - 에틸 - 1,5,5 - 트리메틸시클로헥산,

1 - 아미노 - 1 - 에틸 - 3,3,5,5 - 테트라메틸시클로헥산 및

1 - 아미노 - 1 - 프로필 - 3,3,5,5 - 테트라메틸시클로헥산

및 상기 화합물의 약학적으로 용인가능한 산 부가 염. 본 발명의 화합물은 바람직한 1 - 사이클릭 아미노 - 알킬시클로헥산 화합물(여기에서 1 - 아미노기는 피롤리딘 또는 피페리딘 등과 같은 고리형 기 형태이고, 이 화합물이 본 발명의 주요 물질이다)을 제조하기 위해 중간 물질 N - 시아노알킬 화합물 및 그것의 고리화 반응을 포함한 2 - 단계의 고리화 반응 과정에서, 유리 아민 화합물, 바람직하게는 염산염 등과 같은 산 부가 염의 형태를 전환시키는 부가적인 단계로 제조하였다.

하기에 좀더 상세한 기술 및 상술된 실시예는 이를 설명하고자 함 이지 제한하고자 하는 것은 아니다.

하기의 방법으로 1 - 아미노 - 알킬시클로헥산 화합물[여기에서 1 - 아미노기는 고리형, 즉, R⁸과 R⁹는 함께 저급 - 알킬렌인 -(CH₂)_X- 을 나타내며, 이 중 X 는 2 내지 5 이고 그로 인해 고리 아민 형태인 1 - 아미노기 - NR⁸R⁹ 를 나타냄]을 제조하였다 :

N - (3 - 시아노프로필) - 1,3,3,5,5 - 펜타메틸 - 시클로헥실아민의 제조

테트라히드로푸란(50 ㎖)에 용해된 염화수소산 1,3,3,5,5 - 펜타메틸시클로헥실아민(2.06 g, 10 mmol), 4 - 브로모부티로니트릴(1.55 g, 10.5 mmol) 및 탄산나트륨(3.18 g, 30 mmol)의 혼합물을 85 시간 동안 환류시키고 나서 물(100 ㎖)에 부었으며 에테르(3 * 30 ㎖)로 추출하였다. 결합한 유기상을 염수(20 ㎖)로 세척하고 K₂CO₃ 로 건조시켰다. 그 용액을 여과하고 증발시켰으며 실리카 겔 상에서 크로마토그래피에 의해 조(粗)산물을 정제하고 헥산 - 에테르 (10 : 1), (6 : 1 ), (4 : 1) 로 용리시켜서 무색의 오일 형태인 산물(1.86 g, 86 %)을 수득하였다.

MRZ 2/705, 즉 : 염화수소산 N - (1,3,3,5,5 - 펜타 - 메틸시클로헥실) 피롤리딘의 제조

에탄올 (120 ㎖) 및 농축 HCl (4 ㎖)에 용해된 N - (3 - 시아노프로필) - 1,3,3,5,5 - 펜타메틸시클로헥실아민(1.2 g, 5.1 mmol)을 40 시간 동안 7 바에서 10 % pd/C (250 mg) 로 수소첨가하였다 [24 시간 후에 부가적으로 촉매 일부분(260 mg)을 첨가하였다]. 셀라이트 패드로 여과하여 촉매를 제거하고 용매를 증발시켰다. 잔류물을 아세토니트릴로 처리하고, 고형물을 여과했으며 여과액을 증발시켰다. 조산물을 에테르에 의해 결정화하여 m.p. 156 - 158℃ 인 염화수소산 N - (1,3,3,5,5 - 펜타메틸시클로헥실) 피롤리딘 (0.67 g, 49 %) 을 수득하였다.

선택된 알킬 - 치환 시클로헥실아민 (일반적으로 염산염과 같은 산 부가 염 형태임)으로부터 동일한 출발 방법으로 부가적인 1 - 사이클릭 아미노 화합물을 제조하였고, 4 - 브로모부티로니트릴, 3 - 브로모프로피오니트릴, 2 - 브로모아세토니트릴 및 5 - 브로모발레로니트릴과 같은 선택된 ω - 브로모 - 알킬니트릴을 전술한 제조 방법으로 처음으로는 선택된 N - ω - 시아노알킬 - 알킬시클로헥실아민 화합물을 생성하였고 그리고나서 N - ω- 시아노알킬 - 알킬시클로헥실아민 화합물을 고리화시켜 결과적으로 생성된 N - (알킬시클로헥실) 사이클릭 아민 화합물, 즉, 피롤리딘, 피페리딘 또는 다른 사이클릭 아민 화합물을 생성하였고, 여기에서, 질소 원자 및 R⁸ 과 R⁹는 모두 사이클릭 아민 부분을 형성하고 R⁸ 및 R⁹는 모두 화학식 -(CH₂)_X- (여기에서 X 는 2 내지 5 를 포함한다)의 저급 - 알킬렌 사슬을 나타냄을 포함한다.

따라서 반응하기 위해 선택된 알킬 - 치환 시클로헥실아민 출발 물질 및 ω- 브로모알킬니트릴에 의해 염화수소산 N - (1,3,3,5,5 - 펜타메틸시클로헥실) 피페리딘이나 다른 산 부가 염 및 1 - 피롤리디노기 또는 1 - 피페리디노기 또는 다른 1 - 사이클릭 아미노기를 갖는 그밖의 다른 많은 저급 - 알킬 치환 시클로헥산을 본 발명에 의해 제조하였다.

그러므로 본 발명의 방법은 해당 1 - 유리 아미노 - 알킬시클로헥산과 오메가 - 할로알킬니트릴을 반응시켜 생성된 N - (오메가 - 시아노알킬) 화합물을 고리화시켜 해당 1 - 사이클릭 아미노 - 알킬시클로헥산 화합물을 제조하는 단계로 적절하게 기재할 수 있다. 할로겐은 바람직하게 브롬이고 출발 아민은 바람직하게 염산염과 같은 그것의 산 부가 염 형태로 반응한다. 상기에 설명한 바와 같이 바람직한 출발 물질로부터 시작하여, 하기의 화합물을 용이하게 제조하였다 :

N - (1,3,5 - 트리메틸시클로헥실) 피롤리딘 또는 피페리딘,

N - [1(트랜스), 3(트랜스), 5 - 트리메틸시클로헥실] 피롤리딘 또는 피페리딘,

N - [1(시스), 3(시스), 5 - 트리메틸시클로헥실] 피롤리딘 또는 피페리딘,

N - (1,3,3,5 - 테트라메틸시클로헥실) 피롤리딘 또는 피페리딘,

N - (1,3,3,5,5 - 펜타메틸시클로헥실) 피롤리딘 또는 피페리딘,

N - (1,3,5,5 - 테트라메틸 - 3 - 에틸시클로헥실) 피롤리딘 또는 피페리딘,

N - (1,5,5 - 트리메틸 - 3,3 - 디에틸시클로헥실) 피롤리딘 또는 피페리딘,

N - (1,5,5 - 트리메틸 - 시스 - 3 - 에틸시클로헥실) 피롤리딘 또는 피페리딘,

N - [(1S, 5S)시스 - 3 - 에틸 - 1,5,5 - 트리메틸시클로헥실] 피롤리딘 또는 피페리딘,

N - (1,5,5 - 트리메틸 - 트랜스 - 3 - 에틸시클로헥실) 피롤리딘 또는 피페리딘,

N - [(1R, 5S)트랜스 - 3 - 에틸 - 1,5,5 - 트리메틸시클로헥실] 피롤리딘 또는 피페리딘,

N - (1 - 에틸 - 3,3,5,5 - 테트라메틸시클로헥실) 피롤리딘 또는 피페리딘 및

N - (1 - 프로필 - 3,3,5,5 - 테트라메틸시클로헥실) 피롤리딘 또는 피페리딘

및 상기 화합물의 약학적으로 - 용인가능한 염.

따라서 R¹ 부터 R⁷ 까지는, 예를 들어, 메틸, 에틸, 프로필 또는 이러한 저급 - 알킬기의 조합일 것이며 이전에 언급한 바와 같이, 적어도 R¹, R⁴ 및 R⁵ 는 바람직하게 이러한 기 중 하나이고 부가적으로, 가장 바람직한 화합물은 메틸기로서 R¹ 부터 R⁵ 를 갖는다.

대체적 방법

하기의 전형적인 실시예에 의해, 선택한 알파, 오메가 - 디할로알킬 화합물(예를 들어, 1,3 - 디브로모프로판, 1,4 - 디브로모부탄 또는 1,5 - 디브로모펜탄) 및 해당 1 - 유리 아미노 - 알킬시클로헥산을 반응시킴으로써 동일 화합물을 제조할 수 있다 :

염화수소산 N - (1,3,3,5,5 - 펜타메틸시클로헥실) 피롤리딘

염화수소산 1,3,3,5,5 - 펜타메틸시클로헥실아민 (12 g, 58.3 mmol), 탄산칼륨 (48.4 g, 350 mmol) 및 1,4 - 디브로모부탄 (7.32 ㎖, 61.3 mmol) 을 60 시간 동안 아세토니트릴 (250 ㎖) 에서 환류시켰다. r.t.로 냉각시킨 후에, 혼합물을 여과하고 디에틸 에테르 (600 ㎖) 로 침전물을 세척하였다. 진공에서 회전식 증발에 의해 여과액을 농축시키고 감소된 압력 (11 mm/Hg) 에서 잔류물을 분별하여 증류시켰다. 129 ℃ 에서 분획을 수집하여 무색의 오일 (8.95 g) 을 수득하였다. 이를 디에틸 에테르 (120 ㎖) 에 용해시키고 디에틸 에테르 (30 ㎖) 에 용해된 2.7 M HCl 용액을 첨가하였다. 결과적으로 생성된 침전물을 여과하고 디에틸 에테르 (3 * 30 ㎖) 로 세척하였으며 진공에서 NaOH 로 건조시켜 m.p. 158 ℃ 인 염화수소산 N - (1,3,3,5,5 - 펜타메틸시클로헥실) 피롤리딘 수화물(12.9 g, 68 %) 을 수득하였다.

약리학적 결과

A. 하기의 표 1 및 2 는 본 발명의 화합물 MRZ 2/705 에 관한 약리학적 결과를 나타낸 것이다. 표는 다음과 같다 :

표 1 은 최대 전기충격 (MES) 에 의해 유도된 경련에 관한 MRZ 2/705 의 효과를 나타내고 있다. 값은 ED₅₀ (단위는 mg/kg 임) 으로 나타내었다 (95 % 신뢰 한계는 둥근 괄호안에 나타나 있다). 치료학적 수치 (TI) 는 또한 견인 반사 (Tract.) 악화 또는 로타로드 시험 실패(Rot.) 의 저해에 대한 ED₅₀ 을 MES - 유도 발작 - 유도 경련에 대한 ED₅₀ 으로 나누어 계산한 것이다.

표 2 는 [³H] - (+) - MK - 801 결합, 패치 클램프 실험에서 NMDA - 유도 전류 및 배양한 피질 신경에서의 글루타민산염 독성에 관한 MRZ 2/705 의 효과를 나타내고 있다. 결합 Ki 값은 3 - 5 실험의 평균 ±SEM 을 나타내고 4.6 nM 의 MK - 801 에 대한 Kd 와의 쳉 - 프루소프 (Cheng-Prusoff) 관계에 따라 측정한 것이다. 패치 클램프 실험과 글루타민산염 독성 실험에서의 IC₅₀s (±SEM) 은 15 와 85 % 사이의 저해에서 생산된 적어도 3 농도 및 농도 당 적어도 5 세포/웰에서의 데이터로부터 측정한 것이다.
B. 편도핵 점화 모델에서 MRZ 2/705 의 항경련 활성

삭제

서론

랫의 편도핵 점화 모델에서 물질 MRZ 2/705 를 시험하였다. 이러한 모델에서, 장기간에 걸쳐 편도핵을 전극으로 자극하고 기록한 이식시킨 동물은 반복된 초기의 준경련성 전기자극법에 의해 발작을 더 잘 일으킨다 (Goddard 등의 1969, Sato 등의 1990 참조). 일반화된 운동 발작이 특징적인 증가된 민감성이 나타나게 되면, 동물은 완전히 점화되었다고 한다. 물질 스크리닝 방법의 경우에 자극 위치에서 후발사를 유도하는 각각의 한계 전류를 측정하였다.

물질 및 방법

동물

무게가 200 - 220 g 인 암컷의 위스타르 랫(독일 보헨에 소재하는 할란 빈델만 페르주흐스티에르주크트에서 입수)을 구입하여 표준 실험 음식(알트로민 1324 표준 식이) 및 수도물에 자유로이 접근할 수 있도록 조절된 환경 조건(24 - 25 ℃, 50 - 60 % 습도, 12 시간 간격의 빛/암흑 주기)하에서 사육하였다. 활동일주기 변화의 효과를 가능한 한 최소화하기 위해 모든 실험은 아침 동일 시간내에 시행하였다. 실험 기간 동안에, 동물의 체중은 265 g 내지 414 g 사이였다. 이러한 동물들은 이미 점화되었으며 다른 화합물을 시험하는데 사용하였었다. 이전의 연구와 현재의 연구 사이의 기간은 이전에 시험한 약물이 완전히 없어지는 데 충분한 시간(적어도 한달)이었다.

전극 이식

점화 전극의 이식에서, 랫을 클로랄 수화물(360 mg/kg, 복강내 주입)로 마취시킨 후 두개골 표면을 노출시키고, Paximos 및 Watson 의 도해서(1986)에 따른 하기 정위 좌표를 사용하여 기측부 편도핵을 향하여 이극의 전극을 우반구로 이식하였다 : 2.2 mm 후방, 4.8 mm 측방, 8.5 mm 전방(정수리점에서부터 각각). 전극은 끝부분에서 0.5 mm 길이로 분리된 2 개의 꼬여진 테플론 - 코팅된 스테인레스 강선(250 ㎛ 지름)으로 구성되어 있다. 접지 전극 역할을 하는 스크루우를 좌측 두정부 피질 위에 위치시켰다. 이극 및 접지 전극을 플러그에 연결시키고, 치과 아크릴 시멘트로 노출된 두개골 표면에 전극 조립품과 유지 스크루우를 고정시켰다. 수술 후에, 감염을 예방하기 위해 1 주 동안 항생제를 투여하였다.

완전히 점화시킨 동물에서의 점화 절차 및 실험

2 주간의 회복기간 후에, 적어도 10 번 잇달아 일어나는 완전히 점화된 단계 - 5 발작이 유도될 때까지 하루에 한번(일주일에 5 번) 편도핵에 일정한 전류 자극(500 ㎂, 1 msec, 단상 구형파 펄스, 1s 에 50 Hz)을 가하였다. 발작 정도(Seizure severity ; SS)를 Racine 의 문헌(1972)에 따라 기록하였다 : 1 단계 부동상태, 눈이 감김, 귀의 경련, 수염의 경련, 콧물, 안면 간대성 경련이 일어남 ; 2 단계 더욱 심한 안면 간대성 경련과 함께 머리를 흔듬 ; 3 단계 한쪽 앞다리의 간대성 경련이 일어남 ; 3.5 단계 경직되지 않은 상태에서 양측 앞다리의 간대성 경련이 일어남 ; 4.5 단계 경직되고 쓰러지지 않은 상태에서 일반화된 간대성 발작이 일어남(예를 들어 균형감각을 상실했기 때문임) ; 5 단계 경직되고 쓰러진 상태에서 일반화된 간대성 발작이 일어남. 이러한 완전히 점화시킨 랫에게 1 분 간격으로 연속적인 자극을 가하여 후발사 역치(ADT)를 측정하였다. 이는 앞서 공급한 전류의 약 20 % 가 상승한 단계이다. 후발사 역치는 적어도 5s 동안의 후발사를 야기하는 가장 낮은 전류 강도로 정의한다. 후발사 역치의 측정은 동물에게 항경련성 약물 시험을 하기 전에 재현성을 증명하기 위해 두번 반복하였다.

모든 실험에서 발작 지속 기간 및 후발사 지속 기간은 발작 정도 및 후발성 역치에 따라 기록하였다. 발작 지속 기간 1 (SD1)은 변연계 및/또는 운동성 발작의 기간이다. 두번째로 일반화된 발작의 종료 후에 때때로 발생하는 변연계 발작 활성은 발작 지속 기간에 포함되지 않는다. 발작 지속 기간 2 (SD2)는 자극으로부터 발작후의 억제 단계 끝까지의 기간이다.

후발사 지속 기간 1 (ADD1)은 자극 시간을 포함하는, BLA 전극의 뇌전도 (EEG)에서의 높은 진폭 스파이크(적어도 1 Hz 주파수와 두번의 사전자극 진폭)로 규정한다. 스파이크의 첫번째 기간에 이어 다른 진폭을 가지는 스파이크가 바로 뒤에 온다면, 자극으로부터 높고 낮은 진폭 스파이크의 끝까지의 시간이 후발사 지속 기간 2 (ADD2)가 된다. 침묵 EEG 기간 후에 때때로 발생하는 두번째 후발사는 X 에 의해 표지되는 모든 프로토콜에 존재한다.

약물 실험

물질 MRZ 2/705 를 증류수에 용해시켜 복강내로 투여하였다. 적용된 부피는 3 ml/kg 체중이다. 실험에 사용된 투여량은 5, 10 및 20 mg/kg 이다.

동물을 실험실 환경에 적응시킨 후, 체온을 측정하고 계속 관찰하기 위해 개방 우리에 넣었다. 약물 또는 부형제의 투여 후 15 및 30 분에 행동의 변화 및 체온을 측정하였다. 개방 우리 및 개방 광장에서 관찰하는 동안의 부작용을 기록하였다. 그 외에, 랫에게 로타로드 시험(폴리프로필렌, 거품으로 코팅된 로드, 직경 5 cm, 8rpm)을 실행하였다. 각각 세번의 연속적인 1 - 분 시도시에 로드에서 떨어졌을때 그 동물은 이 시험에 실패한 것으로 간주하였다.

부작용을 다음과 같이 기록하였다 : 운동실조 : 0 = 없음, 1 = 뒷다리의 경미한 운동실조가 나타남, 2 = 다리 끌림과 함께 더 두드러진 운동실조가 나타남, 3 = 더욱 증가된 운동실조 및 더 두드러진 다리 끌림이 나타남, 4 = 현저한 운동실조 및 전진 운동시에 균형 감각 상실함, 5 = 빈번한 균형 감각 상실을 포함하는 매우 현저한 운동실조 및 6 = 정위반사의 영구 상실 ; 진정 ; 0 = 없음, 1 = 전진 운동의 경미한 감소가 나타남, 2 = 운동 기간중에 정지 기간을 가지는 운동의 감소가 나타남, 3 = 더 빈번한 정지 기간을 가지는 운동의 감소 및 4 = 전진 운동의 부재 및 눈을 감고 살짝 앉음 ; 더한 부작용 : 0 = 없음, 1 = 뚜렷하지 않음, 2 = 있음 및 3 = 심함.

발작 데이터의 통계적인 유의를 한쌍의 추시에서의 윌콕슨 부호순위검정으로 계산하였다.

결과

물질 MRZ 2/705 는 편도핵이 점화된 동물에서의 투여량 - 의존 항경련성 효과를 보여준다.

다른 투여량으로 인해 제어 역치 이상인 36 % (5 mg/kg), 50 % (10 mg/kg) 및 95 % (20 mg/kg)의 후발사 역치에서 평균이 증가함을 발견하였다. 이러한 증가는 10 및 20 mg/kg 의 유의 투여량에 따라 입증되었다(도 3 참조).

후발사 역치의 증가 외에도 가장 높은 시험 투여량(20 mg/kg)은 발작 정도, 운동성 발작 지속 기간 및 유의 방법에서의 후발사 지속 기간을 감소시킨다. 더 낮은 투여량으로 인해 남아있는 발작 파라미터는 변하지 않거나 단지 약간만 영향을 받는다.

모든 3 가지 투여량으로 인해 진정의 최소한의 징후가 발견되었다. 10 및 20 mg/kg 의 투여량에서 따라 경미한 운동실조가 나타났지만, 로타로드 시험을 통과하는 데는 실패하지 않은 것을 관찰하였다.

결론

본 연구에 있어서 물질 MRZ 2/705 는 완전히 점화시킨 랫에서의 후발사 역치를 효과적으로 증가시킨다. 게다가 높은 투여량으로 인해 시험 물질이 ADT 전류로 기록된 발작 지속 기간, 후발사 지속 기간 및 발작 정도를 현저하게 감소시켰다. MRZ 2/705 가 발작 범위뿐만 아니라 발작 개시를 저해하는 효과적인 항경련성 효과를 지닌다는 사실을 본 결과가 나타내고 있다.

인체에서의 복합 - 부분 발작에 대한 약물 효능에서의 점화시킨 모델의 예상에 관해서는(SATO 등의 문헌, 1990 ; Loscher 및 Schmidt 의 문헌, 1994), 우리의 데이터로 측두엽 간질에서의 MRZ 2/705 의 항경련 활성을 예상하였다. 게다가 이 물질은 투여량을 시험했을 때에 심한 행동 부작용을 유도하지 않으므로, 부작용에 관하여 알맞은 프로필을 가진다.

도 3 은 시험 물질 MRZ 2/705 의 다른 투여량의 점화시킨 데이터를 간략하게 나타낸다. 데이터는 평균값 ± SEM 이다. 각각의 그래프는 후발사 역치(ADT), 발작 정도(SS), 발작 지속 기간(SD) 및 후발사 지속 기간(ADD)의 결과이다.

도 1A 및 도 1B 는 MRZ 2/705 를 사용하여 표 1 및 2 의 결과에서 수득한 값을 나타낸다.

도 2 는 농도에 대한 좌표에 따라 정해진 특이적인 [³H]-MK-801 결합 시험에서의 기준 표준 뿐만 아니라 밀접하게 관련되었지만 다양한 비사이클릭 아미노 화합물 및 MRZ 2/705 에서 수득한 값을 나타낸다.

도 3 은 시험 물질 MRZ 2/705 의 다른 투여량으로 점화시킨 데이터를 간략하게 나타내었다.

본 발명의 화합물은 특히 "점화시킨" 모델에서 보여지는 것과 같은 현저한 항경련 및 항 - 발작 활성 이외에 또, NMDA 및 비 - NMDA 징후를 가지는 살아있는 동물의 신체, 특히 인체의 증상 치료에 적용됨을 발견하였다.

이 점에 있어 선택한 병, 특히 경련 또는 발작을 완화시키기 위해 본 발명의 화합물로 살아있는 동물의 신체를 치료하는 방법은, 완화되기를 원하는 특정한 병의 완화에 효과적이도록 선택한 투여량을 사용하는 특정한 일반적으로 - 용인가능한 약학적 경로에 의한 것이다.

선택한 병, 특히 살아있는 동물의 경련 또는 발작을 완화시키기 위한 약제의 제조 또는 치료에 있어서 본 발명의 화합물의 이용은 약학적으로 용인가능한 희석제, 부형제 또는 담체를 본 발명의 화합물의 유효량과 함께 혼합하는 단계를 포함하는 일반적인 방법으로 실행되며, 치료방법, 약학적 조성물 및 약제 제조시 본 발명의 화합물의 용도는 1 - 비사이클릭 아미노 화합물과 관련된 본 출원인의 공개된 선출원 제 WO 99/01416 호에 따른 것이고, 대표적인 산 부가 염 및 그것의 제조방법도 마찬가지로 해당 1 - 비사이클릭 아미노 - 알킬시클로헥산 화합물에 대해 앞서 공개된 본 출원인의 출원에 기술되어 있다.

적절한 약학적으로 용인가능한 부형제, 희석제 또는 담체의 활성 성분과 함께 혼합하여 제조한 대표적인 약학적 조성물은 정제, 캡슐, 주사 용액, 수성 경구 제제형, 분무 제제형, TDS 제제형 및 나노입자 제제형을 포함하며, 게다가 경구용, 주사용 또는 경피용 약제를 제조하기 위해 또한, 상응하는 1 - 비사이클릭 아미노 - 알킬시클로헥산에 대한 본 출원인의 공개된 출원 제 WO 99/01416 호에 주어진 약학적 조성물의 실시예에 따른다.

게다가 일반적인 약학적 조성물을 하기 성분들의 혼합물과 함께 본 발명의 1 - 사이클릭 아미노 - 시클로헥산 활성 성분이 결합하는 정제 제제형으로 제조하였다.

정제 제제형

10 mg 의 활성 성분을 함유하는 정제에서의 적절한 제제형은 다음과 같다 ;

본 발명에서 본 분야의 기술자들에 의해 분명한 변형 및 등가물이 생길 것이 명백하므로, 효력의 정확한 세부 사항 또는 정확한 조성물, 방법, 제조 과정 또는 이를 나타내고 기술한 실시예로 제한하지 않으며, 따라서 본 발명은 부가된 청구항에 따라 합법적으로 허용되는 자세한 범주에 의해서만 제한됨을 인지해야 한다.

요약

특정한 1 - 사이클릭 아미노 - 알킬시클로헥산은 전신적으로 활성인 비경쟁 NMDA 수용체 길항물질이며 글루타민산염을 통한 전달 장애에서 기인한 증상의 완화에 유용하다. 보다 중요하게, 이들 화합물은 밀접하게 - 관련된 비사이클릭 아미노 화합물이 공유할 수 없는 상당한 항경련 및 항 - 발작 활성을 나타낸다.

본 발명은 상기 화합물을 함유하는 약학적 조성물 및 이 조성물을 사용하여 완화시킬 수 있는 증상, 특히 경련 및 발작을 완화시키는 치료 방법 및 이에 관여하는 활성 1 - 사이클릭 아미노 - 알킬시클로헥산 화합물의 제조 방법과 이 화합물을 함유하는 약제의 제조를 제공한다.

Claims

다음 화학식 Ⅰ 을 갖는 화합물 및 이것의 수화물 및 약학적으로 용인가능한 이의 염 중에서 선택한 1 - 사이클릭 아미노 - 알킬시클로헥산 화합물

화학식 Ⅰ

이 식에서,

R^* 은 피롤리딘 또는 피페리딘이고,

R¹ 내지 R⁵ 는 각각 수소 및 C_1-6 알킬 중에서 선택된 것이다.
제 1 항에 있어서, R¹ 내지 R⁵ 는 메틸임을 특징으로 하는 화합물.
삭제
삭제
제 1 항에 있어서, 화합물은 N - (1,3,3,5,5 - 펜타메틸시클로헥실) 피롤리딘 및 이것의 수화물 및 약학적으로 용인가능한 이의 염 중에서 선택함을 특징으로 하는 화합물.
제 1 항의 화합물의 유효량을 하나 또는 그 이상의 약학적으로 용인가능한 희석제, 부형제 또는 담체와 함께 함유하는, 경련이나 발작 치료용 약학적 조성물.
제 6 항에 있어서, 유효량은 항경련성 유효량임을 특징으로 하는 약학적 조성물.
제 6 항에 있어서, R¹ 내지 R⁵ 는 메틸임을 특징으로 하는 약학적 조성물.
삭제
삭제
제 6 항에 있어서, 화합물은 N - (1,3,3,5,5 - 펜타메틸시클로헥실) 피롤리딘 및 이것의 수화물 및 약학적으로 용인가능한 이의 염 중에서 선택함을 특징으로 하는 약학적 조성물.
다음 화학식 Ⅰ 을 갖는 화합물 및 이것의 수화물 및 약학적으로 용인가능한 이의 염 중에서 선택한 1 - 사이클릭 아미노 - 알킬시클로헥산 화합물의 유효량을 동물에게 투여하는 단계를 포함하는, 인체를 제외한 동물의 경련 또는 발작 치료방법

화학식 Ⅰ

이 식에서,

R^* 은 피롤리딘 또는 피페리딘이고,

R¹ 내지 R⁵ 는 각각 수소 및 C_1-6 알킬 중에서 선택된 것이다.
제 12 항에 있어서, 적어도 R¹, R⁴ 및 R⁵ 는 C_1-6 알킬임을 특징으로 하는 방법.
제 13 항에 있어서, R¹ 내지 R⁵ 는 메틸임을 특징으로 하는 방법.
삭제
삭제
제 12 항에 있어서, 화합물은 N - (1,3,3,5,5 - 펜타메틸시클로헥실) 피롤리딘 및 이것의 수화물 및 약학적으로 용인가능한 이의 염 중에서 선택함을 특징으로 하는 방법.
제 17 항에 있어서, 상기 화합물은 하나 또는 그 이상의 약학적으로 용인가능한 희석제, 부형제 또는 담체와 함께 이 화합물을 함유하는 약학적 조성물 형태로 투여함을 특징으로 하는 방법.
삭제
삭제
삭제
삭제
삭제
삭제
해당 1 - 유리 아미노 - 알킬시클로헥산을 오메가 - 할로알킬니트릴과 반응시켜 생성된 N - (오메가 - 시아노알킬) 화합물을 고리화시켜 해당 1 - 사이클릭 아미노 - 알킬시클로헥산 화합물을 제조하거나 또는 상기 1 - 유리 아미노 - 알킬시클로헥산을 알파, 오메가 - 디할로알킬 화합물과 반응시키는 단계를 포함하는 제 1 항의 화합물의 제조방법.