JPS63502747A - 腫瘍診断、撮像、定位、または治療用薬剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 Ｍｇ＆誇断、撮像、定位または治療用薬剤一つの新しい試みは陽子照射断面撮影 法である。

ＴｒｏｗｂｒｉｄｇｅおよびＤｏｎｉｎｇｏの結果と対照的に、抗腫瘍剤がトラ ンスフェリンと共役されるときに、その蛋白質部はトランスフェリン受容体と親 和性を保持するだけでなく、さらに抗腫瘍剤はその抗ｍ瘍性を保持する（Ｙｅｈ およびＦａｕｆｋ　、　Ｃｌ１ｎ、ｌ１ｌ１１．　Ｉｎｎｕｎｏｐａｔｈ、　１ ９８４、Ｖｏｌ　、　３２、ｐａｇｅ１〜１１）ことが判った。

ンはＵＳ−Ａ−４４４８７６２に開示されている。放射性ガリウムとトランスフ ェリンの谷合体はＵＳ−＾−４４４８７６３のクレーム２０に放射性製薬組成体 の一成分として提案されている。このような集合体および複合体では金属原子は トランスフェリン分子によりキレート化されている。

このような集合体および複合体は放射線診断法で使用されると提案されてｂ′る が、放射性金属は蛋白質のキレート作用により一般に比較的ゆるく複合体ないし 集合体に結付けられており、そして血流中に生体内で複合体または集合科から開 放されることができる。そこで結合の好ましい特性は最適を若干下まｉ：る、ま た血流中の自由金属イオンの存在は好ましからざる側面の効果をおこ１はＵＳ− Ａ−４３３２７８５中に記録されているが、その調製法については何らの記載も なｄ　Ｎｕｃｌｅａｒの１９８５／１９８６リサーチ　プロダクト　カタログの 中の文獣ＮＥＸ−２１２にＡｐｒｉｌ　１４，１９８５有効として記載されてい る。これは０．１〜１．０　μＣｉ／　μＱ　（７−放射能を含み、約８０．０ ００の分子量をもっと述べられている。放射線免疫電気誘動法（ｒａｄ　ｉｏ　 １ｎｎｕｎｏ−ｅ　１ｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓ　ｉ　ｓ　）を含む試験管内試験 法では、人トランスフェリンに対してうさぎ抗体により認められるような、およ びうさぎ免疫グしピユリンに対する羊抗体により共沈させられるような能力によ って測定させるように、この製品は抗原性性質をもつことを示しているが、製品 はゲルへの１−動放射線写真法で多くの放射線ラベルの汚染物を、また何が放射 線ラベルの影壊産物として現れるかを示している。さらに生体内での実験におけ る腫ｇｊ１１撮Ｃ剤として平凡な特性を示し、また腫瘍の位置に生体内で定位化 されることをイす何らの証拠もない、それ故、腫瘍撮像剤として使用するには、 ありうる汚杯体、破壊産物および共役体の蛋白質部の特性の変化のため、不適当 である。（の共役体は生体内使用できない、またトランスフェリン受容体との共 役体のＶ合に悪い影響を及ぼす、そこで、その性質はトランスフェリンの生体内 にお番：る特性の全てを保持していないので、トランスフェリンの共役体として 商業岨する酸化性カップリング剤を使用するのが好ましい。得られた共役体の正 確な梢造は調べられなかったが、酸化剤の存在では、沃素の原子はトランスフェ リン分子と共有的に結合しており、芳香族アミノ酸のベンゼン環のＷＷＡ基とし て共役されているトランスフェリンはアポトランスフェリン（すなわちトランス るのが好ましい。

局在化しようとする腫瘍細胞の表面にトランスフェリン受容体を結合できるトラ ンスフェリンはどれでも使用することができるであろうが、トランスフェリンは 好ましくは人からのものがよい。

できる、最もフリーなアイソトープは簡単な透析によりトランスフェリン結合定 位、撮像および治療用の試薬キットの提供も含まれている。

することにより調製された。反応はＴｒｉｓ−１１ｃＩバツフア（ｐＨ７，４） およびアルブミンを加えることにより停止された。メーカーの文献によればＢｉ ｏ−Ｒａｄ　Ｅｎｚｙｎｏｂｅａｄｓはラクトペルオキシダーゼ／グルニーズオ キシダーゼの固相形である。

得られた共役体は燐酸塩バッファで透析され、次に共役されていないアイソトど うか（ｂＨｆｉ械の強度設定、および（ｃ）Ｘ−線フィルムが暴露されるカウン ト数のようなスキャニング技術の範囲内で許される。これらの変数の実例が以下 に実施例で提供されている。

れらの基準は：　（ａ））ランスフェリンはトレーサー／トレーターアイソトー 網状赤血球のような正常な細胞上のトランスフェリン受容体中にアポトランウス ）が用いられた、しかしながら、免疫反応のマウンティングは、免疫学的これは 実施例における重大な変化であるようにはみえない、この例ではヌードマウスへ の腹腔内注射の結果だけ提示されている。

ヌードマウスは２０ｘ１０’　Ｋ５６２．％ｌ胞を皮下注射された。これらの人 細胞はトラ直径１０ｎＩｍで突出高さ１５ｎｍの腫瘍かに５６２．ｉｆ！ｌ胞注 射後３週間で後側面に出現したに注射−された、８時間後にマウスはコリメータ ーを固定したイメージアナライを注射されない比較用ヌードないしスイス白マウ スで行われた血液貯留（ｂｌｏｏｄｐｏｏ　Ｉ　）研究から得られたものであっ た。

視ることができるようになった（第４ｂ図）。

■）および平行試験動物にてカウントされた放射性の器官により示された腹部が たまりとして出現した。第２にＭ瘍は容易に大きな後側のかたまりとして腹部の かたまりと区別できた（第５図）。

共役体注射後１００時間後、比較動物から放射を記録することはできなかった。

しかしこの試験マウスの腫瘍は明瞭に目にみえるようになった（第７図）。この 場合、本かたまりは二つの焦点として出現した。他の試験動物で行われた組織病 理学研究は癌の中枢壊死（ｃｅｎｔｒａｌ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ）および核への妥 協した血行（Ｃｏｒａｐｒｏｎｉｓｅｄ　ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ　ｔｏ　ｔｈ ｅ　ｃｏｒｅ）を示し、これはおそらく第７図において記載された２つの焦点を 説明する。比較試験はひきつづきすべての実験で陰性であった。

共役体の注射後１２４時間後、腫瘍はなおイメージアナライザーのコリメーター が適所におかれている時にかたまりの良好な断面定位を与えるよう検出可能であ る（第８ａ図）、シかしながら、コリメーターが取去られ、またマウスが検出結 晶の上におかれると、計数実施中に通過した放射性尿のプールのみならず全体の 動物を撮像することが可能である（第８図ｂ、尿は“汚染体（ｃｏｎｔａＩｌｉ ｌｌａｔｉｏｎ）″と印をつけた。汚染体は放射線ビームがＰａｒａｌｌｅｘに みえるときに撮像されることが銘記さるべきである；適所におかれたコリメータ ーで、尿の汚染は第８図すの下布四分円に前像としてあられれているが、ビーム が千廿とされそこで腫瘍がみえる。

共役体注射１４８時間後、！！８瘍は適所におかれたコリメーターではっきりと 同定された（第９図ａ）、しかしながら残留体および血液貯留放射は非常に強く なるので動物を直接検出結晶上で１０，０００カウント走査するのは不可能であ る（第９図ｂ＞、この処理はまた結晶上で直接にｓ、ｏｏｏカウント走査するこ とが許されない（第９図Ｃ）、適所におかれたコリメーターでは、腫瘍は腫瘍の ない地域が鉛工プロンで覆うことにより集中放射される（第９図ｄ）。

共役像注射後１２４間後マウスはコリメーターなしにＰａｒａｌｌｅＸ放射用に 急激にスキャン（走査）された（第１０図ａ）、同時に強度８００でｉｏ、ｏｏ ｏカウントをあてて、本体および血液貯留照射はなお腫瘍定位に妨害物を提供す ることを記録することができる。しかしながら、残留照射は完全にコリメーター での撮像から除去され、悪性がはっきりとみちれた（第１０図ｂ）、Ｘ線フィル ムがさらされるカウント数の重要性がコリメーターを除き、また通常１０，００ ０カウントを５０．０００カウントに増加することにより示される（第１０図Ｃ ）、これら条件の使用については腫瘍を撮像することは出来ない、ｖ＆器のセッ ト強度の重要度は通常８００のセットを５００に低くし、一方カウントをコリメ ーターなしに１０ｏ、ｏｏｏに増加することにより示される（第１０図ｄ）、こ れらの条件の下ではＩｌ瘍はコリメータなしに撮像することができることが銘記 されるであろう（第１０図ａと比較せよ）、明確には、正確なＩＩ！ｉｓ像は共 役体の特殊活性度によるだけでなく、また照射ビームの幾何学的な配向、Ｘ−線 フィルムがさらされるカウント数、及び機器の強度設定によるものである。しか しながら、これら死後試験は次の結果を与えた。

組繊　ｃｐｍ １、顎下ｍ１２９７６ （ｓｕｂｎａｘｉ　１ｌａｒｙ　ｇｌａｎｄｓ）２、肝臓　７３８９ ３、肋骨ケージおよび胸骨　９０３９ ４、左および右腎臓　２６５７６ ５、肝臓　７１９６４ ６、心臓　１１９４８ ７、肺　１５８７８ ８、膀胱および男性チューブ　５２０８９、甲状腺および喉頭　７２１２１ １０、胃　１４６３３ １１、小腸　４８５８９ １２、大腸盲腸まで　１０５７７ １３、盲ｒＡ１４６３７ １４、脳　１１９６ １５、胃内容物　１４８３１ １６、筋肉かたまり（ふともも）　５０９２（Ｈａｓｃｌｅ　ＩＩａＳＳ） １７、Ｍ癌　２６６７６６ １８、腫瘍　３３８０８５ １９、腫瘍　１５６４４８ ２０、肛ｇ′！！、２２６９Ｇ３ ２１、肝臓に近い未知のかたまり１７８０９未知物質（２１）は明らかに腫瘍の 転移ではない。

、／’７に、２ ７４７Ｇ、Ｊ： ＲＧ、５ Ｆ７Ｇ、９ａ、　Ｆｔｒ；、　９ｄ Ｆｕｎ、９ｂ、　ＦｔＧ、９ｃ。

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国際調査報告 Ｗ＠’ｌ１ｍ１ｍ自ｊｌＡｓｅｋ＋ｍｓ＊ｗａ、ＰＣＴ／ＧＢ８６１００４６４ ＡＮＮＥＸ　Ｔｏ　’ＬｒｒＥ　ＩＮＴＥＲＮＡＴＩＯＮＡＬ　５ＥＡＲＣＨＲ ＥＰＯＲＴ　ＯＮ

Claims (22)

【特許請求の範囲】
1. １．腫瘍診断、撮像、定位または治療に使用する沃素放射性アイソトープとトラ ンスフェリンの共役体。
2. ２．クレーム１による共役体において、放射性アイソトープが１２５Ｉである。
3. ３．クレーム１またはクレーム２による共役体において、トランスフェリンが人 起原のものである。
4. ４．クレーム１〜３いずれか一つによる共役体において、注射できる溶液の形態 である。
5. ５．クレーム１〜４のいずれか一つによる共役体において、単位適量（ｕｎｉｔ ｄｏｓａｇｅ）の形にある。
6. ６．アイソトープでラベル化したまたはラベル化されていないトランスフェリン の集合体および／または断片から実質的にフリーである１２５Ｉとトランスフェ リンの共役体。
7. ７．クレーム６による共役体にて、トランスフェリン１μｇにつき約０．５×１ ０６ｃｐｍから約２×１０６ｃｐｍの１２５Ｉを含むものである。
8. ８．クレーム６またはクレーム７の共役体にて、トランスフェリンが人起原（ｈ ｕｍａｎｏｒｉｇｉｎ）である。
9. ９．クレーム６〜８のいずれか一つの共役体において、トランスフェリンがアポ トランスフエリンである。
10. １０．クレーム６〜９のいずれか一つの共役体において、放射性アイソトープが １２５Ｉである。
11. １１．腫瘍診断、撮像、定位または治療剤がクレーム６〜１０のいずれか一つに よる共役体を含んでいる。
12. １２．クレーム１１による腫瘍診断、撮像、定位または治療剤が注射液の形にな っている。
13. １３．クレーム１１またはクレーム１２による腫瘍診断、撮像、定位または治療 剤が単位適当量の形になっている。
14. １４．トランスフェリンとクレーム１〜１０のいずれか一つによる共役体を含む 腫瘍の診断、撮像、定位および治療用試薬キット。
15. １５．適当なカップリング剤の存在の下でアイソトープ線源と接触させることに より放射性アイソトープでトランスフェリンをラベル化し、および引続いて集合 した蛋白質分子または蛋白質の断片を含む共役体から本来のトランスフェリンの 得られたラベル化した共役体を分離する最階を含む検出可能なアイソトープでト ランスフェリンの共役体をつくるプロセス。
16. １６．クレーム１５によるプロセスにおいて、検出可能なアイソトープが１２５ Ｉであり、ラベル化はトランスフェリン１μｇにつき約０．５×１０６ｃｐｍか ら約２×１０６ｃｐｍまでの共役体が得られるトランスフェリン１２５Ｉ線源を 用いて行われる。
17. １７．クレーム１６によるプロセスにおいて、１２５Ｉ線源はそれのアルカリ金 属塩である。
18. １８．クレーム１５〜１７のいずれか一つによるプロセスにおいて、トランスフ ェリンがラクトペルオキシダーゼの存在下にＮａ１２５Ｉの形の１２５Ｉと共役 される。
19. １９．クレーム１５〜１８のいずれか一つによるプロセスにおいて、上記共役体 がゲルろ過クロマトグラフィおよび／または透析により分離される。
20. ２０．クレーム１５〜１９のいずれか一つによるプロセスにおいて、トランスフ ェリンが人起原のものである。
21. ２１．クレーム１５〜２０のいずれか一つによるプロセスにおいてトランスフェ リンがアポトランスフェリンである。
22. ２２．クレーム１〜１０のいずれか一つによるトランスフェリンの共役体の薬理 学的に有効な量を患者に投与することを含む癌患者の腫瘍診断、撮像または定位 する方法または患者を治療する方法。