JPS5857710B2 - ｐＨ指示薬組成物及びその製法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明（１一般ｔこ凍結により又は選択された凍結点以
ドの温度で色変化の調整された水性ｐＨ指示薬組成物に
関する。

本発明は組成物の凍結点から約９０℃又はそれ以下の範
囲で一温度又は時間、温度指示のための新規組成物を得
るために、この色変化の調整を利用することを目的とす
る。

本発細書中で１凍結」とは、温度を下げる時に、ある場
合（こ起こり得る過冷却とは反対（こ、液体から固体状
態又は懸濁液へ組成物の転移を意味する。

過冷却を阻止するために、組成物へある無機塩、例えは
、ＫＣｌ、ＮａＣｌ等を加えることが可能である。

更（こ、水性系は本発明のため（こ適しているけれども
、その使用に限定されず、また非水性系に又は水性系と
非水性系の混合に適用可能であることが指摘されるべき
である。

つまり、酸が塩基の色と異なる色を有する場合に酸−塩
基対からなるものと記述できるｐＨ指示薬は、一般（こ
溶液中のｐＨ値を測定するため、又は少くともｐＨ値の
概略を与えるために使用される。

このｐＨ指示薬の限界（１、これらが１−２９Ｈ単位に
達する、酸から塩基形へ色変化の間ｌこ変色域、を有す
るので、これらがｐＨ値の正確な測定を与えないことに
なる。

これが近年ｐＨ指示薬が溶液のｐＨ値を一層正確に測定
する電気ｐＨ計によって益装置き換えられる理由である
。

ｐＨ指示薬とｐＨ計（こ共通の更になお重大な限界はこ
れらは凍結溶液、即ち固体状態でのｐＨ値を測定できな
いことになる。

ｐＨ指示薬が一般（こ凍結溶液のｐＨを指示するため１
（使用できない理由は、溶液が凍結する時ｌこｐＨ指示
薬の色が安定ではなく変化し勝ちであることにある。

本発明に関連して、凍結をこよりこの色変化の発現を調
べ、そして通常（こは塩基の色から酸の色に変化するこ
とが判明した。

従って、溶液がｐＨ指示薬の変色域の近く又はすぐ上の
ｐＨ（即ち、変色域のアルカリ性側）を有する場合ｌこ
は、液体溶液の塩基の色から凍結溶液の酸の色へ色変化
が起る。

色変化に対する必要条件（まこの溶液が溶液のイオン強
度のみでなくプロトン組成（即ち比率Ｈ＋：０Ｈ−）ｌ
こ寄与する物質を含有することにある。

この物質は少くとも一つの無機イオンを生じ、かつリン
酸塩緩衝剤のような無機緩衝剤及び有機酸の塩から選択
される緩衝剤である。

酸部分より強い塩基部分（より強い塩基イオン、又は酸
イオンより量的に多い塩基イオンの形で、例えば有機酸
のアルカリ塩、塩基性アミン酸又は他のアミン、アミド
又はアミン化合物）を緩衝系では、凍結ｆこよる色変化
は反対方向に、即ち酸の色から塩基の色へ起こる。

前記の問題と関連しないようにみえる別の問題は、温度
又は温度一時間条件、例えは凍結コンパーメント内の温
度分布を、容易に認知し得る方式で、可視指示すること
ができる利用可能な簡単かつ有効な装置はこれまで存在
しなかったことである。

従って、例えばフリーザー貯蔵庫で、又はフリーザー又
は冷蔵庫の温度を記録するために従来の温度計又は感温
性電気装置がこれまで使用されている。

しかしながら、温度を測定するこれらの公知の装置（ｊ
関連するコンパートメント内の単一点でのみ温度を感知
するという欠点がある。

それ故、コンパートメント内で支配する温度条件ｌこつ
いて一般状態が得られず、その上、よくあることだが、
この感知装置がコンパートメントの最低温の部分、例え
ば冷却コンパ−１−メント内で冷却空気用の供給口ｌζ
隣接して配置される場合ｌこは、誤まった結果（こ導く
。

本発明は、凍結溶液へｐＨ指示薬の適用が限定されてい
ることに関連する前記の問題を解決し、そして液体及び
凍結溶液のｐＨ値の指示を確実にすることを目的とする
。

本発明の特に好ましい観点では、容易に認知し得る方法
で、例えばコンパートメントの材料部分の温度条件を可
視的「こ示す指示薬ｆζ関連する問題を解決することを
目的（こしている。

前記を考慮して、本発明（こより、ｐＨ指示物質及び溶
液に少くとも一種の無機イオンを含む緩衝溶液を含むｐ
Ｈ指示薬組成物へ、全組成物のイオン強度及びプロトン
組成の両方ｌこ変化を生ずる調整剤を加えることによっ
て、凍結状態での色表示に関連した前記の問題を解決す
ることが可能になった。

これはまた下記ｌこ詳記するように、簡単な可視温度表
示を与える指示薬を供するための基礎をつくる。

本発明（こより、このｐＨ指示薬組成物は（ａ）ｐＨの
変化により色の変化を示すのに十分な量の少くとも一種
のｐＨ指示薬、（ｂ）溶液に少くとも一種の無機イオン
を含む緩衝溶液で、この緩衝溶液の温度がこの溶液の凍
結点以上の第一温度からこの溶液が凍結状態にある第二
温度に下がる時にこの緩衝剤溶液のｐＨが変化し、及び
（Ｃ）調整剤又は調整剤の前駆体で、この調整剤は前記
の凍結したｐＨ指示薬組成物のイオン強度及びプロトン
組成を変化させて、凍結によりこのｐＨ指示薬組成物の
ｐＨの変化を引き起こすができ、前記の調整剤は、この
ｐＨ指示薬組成物が凍結点より下の選択された温度で、
凍結点より上の温度での前記のｐＨ指示薬組成物の色と
同じ色を示すことができるのに十分な量があることを特
徴とする。

更に本発明により、ｐＨ指示薬組成物を製造する方法は
（ａ）ｐＨの変化ｌこより色の変化を示すのに十分な量
の少くとも一種のｐＨ指示薬、（ｂ）溶液（こ少くとも
一種の無機イオンを含有する緩衝溶液でこの緩衝溶液の
温度が前記の溶液の凍結点以上の第一温度からこの溶液
が凍結状態にある第二温度に下がる時に、この緩衝剤溶
液のｐＨが変化し、そして（ａ）及び（ｂ）に（Ｃ）調
整剤又は調整剤の前１駆体を加え、この調整剤が前記の
凍結したｐＨ指示薬組成物のイオン強度及びプロトン組
成を変えることができるので、凍結Ｉこまり、前記のｐ
Ｈ指示薬組成物のｐＨｌご変化を引き起こし、そして前
記の調整剤を十分な量加えて、前記のｐＨ指示薬組成物
が凍結点より下の選択された温度で凝固点より上の温度
での前記のｐＨ指示薬組成物の色と同じ色を示すことが
できるものよりなる。

本発明による組成物（１また選択的であるが好適な添加
剤としてｎ−ブタノールのような保存剤を含んでもよい
。

初めに示したよう（こ、本発明は水性系に限定されない
けれども、これらが適している。

水性系の外（こ、メタノール、エタノール及びドデカノ
ールのようなアルコールを使用することが可能である。

勿論、指示薬物質、緩衝剤及び調整剤（１選択された媒
体に可溶でなければならない。

特定の理論に本発明を関連させることなしに、前記の凍
結ｌこよるｐＨ指示薬の色変化１１、プロトン組成が凍
結で急激（こ変化するためでこの変化は二つの部分から
作られていると思われる。

最初に、Ｈ＋及びＯＨ−を含む溶液中の異な乙イオンの
移動度が実質上減少したので全伝導率は溶液の凍結ｌこ
より減少する。

第二（こ、Ｈ＋以上ｌこＯＨ−の移動度又は有効度が減
少すると思われ、即ち比率Ｈ＋：０Ｈ−（プロトン組成
）は溶液の凍結（こより（見かけ上）増大する。

これは凍結溶液のｐＨ値は、液体溶液より（見かけ上）
一層低い、又はより酸性である。

ｐＨ指示薬の色の条件は正確ｌこ比率Ｈ＋：０Ｉ（７（
即”ちｐＨ） ｒこ依存するので、溶液が凍結する時ｌ
こ通過するｐＨ指示薬の変色域（こ対して比率Ｈ＋：Ｏ
Ｈが十分変化する場合には、ｐＨ指示薬の色の状態は塩
基の色から酸の色へ変化する。

凍結（こよる比率Ｈ＋：ＯＨ−の変化は、一般に使用さ
れるｐＨ指示薬に応じて約２ないし５単位だけ酸性側へ
ｐＨ値が移行することｔこ対応していることがわかった
。

かくして、オリジナルの液体溶液がよりアルカリ性（ご
作られ、又はごく初期からｐＨ指示薬のｐｋ値より約２
ないし５単位上のｐＨを有する場合に１１、この溶液の
凍結により指示薬の色は変化しない。

従って凍結によるｐＨ指示薬の色の変化は溶液のｐＨが
更に酸性の数値の方へ移行することを前記の説明から示
唆される。

凍結によりｐＨが減少するのを補償するため溶液は一層
アルカリ性に作らなければならないので、液体溶液のｐ
Ｈは更ｔこアルカリ性の値の方へ移行する。

これは凍結により更ｔこアルカリ性の値の方へｐｉ−を
指示薬のｐｋ値（変色域）が見かけ上移行すると考えら
れ、そしてこの考察は下記の実施例で使用されよう。

本発明（こ関連して判明したこと（こよれば、ｐＨ指示
薬の色の変化（Ｊ主として液相から固相への転移（この
み依存し、かつ実質上温度（こ無関係であると思われ、
即ち溶液が凍結して指示薬の色が一度移行すると、更ｔ
こ凍結点以下に温度をひき続き下げても色の変化は起こ
らない。

溶液のイオン強度とプロトン組成に寄与する溶液中の物
質（無機緩衝剤又は有機酸の塩）の濃度は、溶液中で物
質（緩衝剤）の濃度が高くなるｌこつれて、溶液は凍結
すると更に酸性（どなるような効果があることもわかっ
た。

前記のよう（こ、凍結した溶液のイオン強度及びプロト
ン組成の変化を引き起こし、そしてより重要なのは、伝
導率の減少並びに凍結により溶液の比率Ｈ＋：０Ｈ−（
即ち、ｐＨ値）が変化することを妨げる調整剤の添加に
より、凍結による変色域の移行に関した問題が本発明に
より解決できる。

この調整剤はそれ自体でプロトン組成を変化する必要は
ないこと（こ注目すべきであるが、しかしながら重要な
事は調整剤の効果が凍結した溶液のプロトン組成を調整
するものであることｔこある。

例えば溶液のｐＨを変えられる又は界面活性作用がある
種種の調整剤を使用することでこの効果が得られる。

本発明ｌこより、特に、アルコール及びカルボン酸が前
記の型の調整剤として有効であることがわかった。

ここでアルコールとは水酸基を有する有機化合物、そし
て更に詳細ｌこは１価の、並び多価のアルコール、例え
ばメタノール、エタノール、種々のグリコール、グリセ
ロール及び炭水化物を意味する。

同様（こ、本発明（こよるカルボン酸調整剤はカルボキ
シル基を有する有機化合物、そして更（こ詳細にはこれ
は「通冨の」脂肪族カルボン酸の外（こ、芳香族カルボ
ン酸、ケト酸、ヒドロキシ酸、及びアミン酸（アミド及
びこれらの酸の塩を含む）を含む七ノー、ジー及びポリ
カルボン酸を含む。

実際に（１、純粋なカルボン酸（１溶液のｐＨを必要以
上に低くするので、調整剤として使用しないが、カルボ
ン酸調整剤を溶液ｌこ添加する前に、ＮａＯＨを添加す
る等ｔこより溶液と同一のｐ出こ調整する。

これは添加するカルボン酸調整剤が遊離酸及びその塩の
溶液に実質上対応することを意味する。

別法で、かつ好ましくは、酸の塩（好適にはアルカリ金
属又はアンモニウム塩）はカルボン酸調整剤として直接
使用でき、ｐＨの調整は例えばＨＣｌで行う。

本発明により、イオン強度及びプロトン組成を変えるた
めに、調整剤として前、躯体物質、即ちイオン強度及び
プロトン組成を変える物質を生ずることができる材料を
使用することが可能である。

この前駆体物質の例として、基質に酵素が作用して、必
要な物質をしる酵素−基質混合物が挙げられる。

前記の調整剤は凍結（凝固）時ｌこ更ｌこ酸性になる系
に適している。

原則として、凍結時（こ更に酸性ｌこなる系に対する調
整剤は、強塩基からのイオン及び弱酸からのイオンを含
む物質である一方、凍結時に更にアルカリ性になる系に
対する調整剤は弱塩基のイオン及び強酸のイオンを含む
物質である。

アルコールが両方の系（こ対して調整剤として使用でき
ること（こ注目すべきである。

本発明（こよる調整剤の正確な機構は明白に確立されて
いないが、例えばグリセロールに関して、この調整剤は
水分子を、多分ｐＨ指示薬と共ｔこ、吸引することで作
用し、これがｐＨ指示薬の色を維持させると思われる。

更（こ、グリセロール（１強いプロトン結合性があるの
でＯＨ−と比較してＨの移動度又は接近性が減少する、
即ち（見かけ上の）よりアルカリ性のｐＨ値を生ずる。

このよりアルカリ性のｐＨ値の方へｐＨ値が移行するこ
とは、更（こ酸性値へｐＨ値の移行を妨げ、これは前Ｉ
こ説明したよう（こ、調整剤の添加なしに凍結した溶液
で起る。

プロトン結合性があるので、グリセロースはこのように
（見かけ上）更にアルカリ性値の方へ凍結した溶液のｐ
Ｈ値を変化する。

本発明のカルボン酸調整剤は伝導率、即ち全伝導率及び
相互の比率Ｈ＋：０Ｈ−（プロトン組成や両方でそれ自
体実際ｔど変化する。

選択されたカルボン酸調整剤が特定の緩衝剤系と相互作
用し又は相互作用しないことの何れかｌこ応じて、凍結
によるｐＨ指示薬の変色域の移行を妨げるか又は更に強
調する。

前記の調整剤の使用では、これらは凍結によるｐＨ指示
薬の色の変化が温度依存性によるという予想外の効果が
あり、言いかえれば色の変化は凍結と直接に関連して起
こる必要はないが、溶液の凍結点以下の温度で生ずるこ
とが注目される。

無機衝衝剤又は無機酸の塩が存在する時（ここれをアル
コール調整剤（こ適用し、一方無機緩衝剤（カルボン酸
及びカルボン酸自体のアルカリ塩が緩衝剤系を形成する
）を用いない場合、カルボン酸調整剤で起る。

更に、ｐＨ指示薬の色の変化の温度依存性は、添加した
調整剤及び液体溶液の初期ｐＨに依存している。

かくして、調整剤の濃度が増すと、定のｐＨで色変化は
低温で起り、一方液体溶液の初めのｐＨがよりアルカリ
性なら、調整剤の濃度一定で、色変化は低温で起る。

この結果、ｐＨ指示薬の色が温度により変化すれば、「
遷移温度１以上で一つの色（塩基色）そして「遷移温度
」以下で別の色（酸色）を示す「色温度計」が得られる
ことが可能になった（この外にｐＨ指示薬の色の変化は
、凍結が行なわれる時（こ、調整剤の添加により妨げら
れる）。

この色の変化は非常に明確にかつ認知し得るようｌこな
り、このためこの色温度計は１／２°Ｃのような少しの
温度差を明確に示すことができる。

本発明による上記の型の組成物を細長い管ｌこ充填し、
冷却室又は冷凍室の壁ｌこ配置すれば、充分ｔこ低い温
度レベル以下および高すぎる温度レベル以上を示す細長
い温度計がつくられる。

前記のようにこの溶液を細長い管に充填する代り（こ、
各々溶液を充填し、規則的に配置した透明な室を有する
細長いスＩ−’Ｊツブを製造することが可能である。

この具体例１１細長い管の具体例より更（こ実際的であ
り、この理由はこのストリップは室の間で容易ｌこ切断
されて所望の長さのストリップ部分を生ずる。

更ｔこ、この室は凍結点以下の種種の温度で色変化を示
す異なる溶液で充填されてもよい。

このようｌこして、その色により、中心の温度が、簡単
に見てわかるような温度計が製造できる。

前記の「色温度計−１の別の応用は、特定の温度、例え
ば−１８°Ｃで色が変化する溶液を充填した単一の室又
はカプセルを製造し、そしてこのカプセルを冷蔵製品に
付けることにある。

冷蔵製品の取り扱いの各々の段階で指示薬溶液を封入し
たカプセルが選択した温度（例えば−１８℃）より高い
か又は低いかを示す。

各々別の色温度計は、指示薬溶液、ｐＨ値及び調整剤の
種類を選択して組合わせた特性で、ある特定温度でのみ
色が変化することが注目される。

ｐＨ指示薬は代表的（こ約０．０１ないし０．０５重量
／容量％の量で配合される。

しかしながら、これらの要因を好適（こ組合わせること
により、選択した温度で色変化を示す色温度計を供する
ことが可能である。

また強調することは本発明による前記の色温度計は可逆
的であり、即ち選択した色温度計に特有な特定の色の温
度より高いところの温度変化を示すため（こ再び使用で
きる。

本発明を容易に理解するためｌこ幾つかの実施例を下記
に示す。

例１ 本例は凍結の時、二つの異なるｐＨ指示薬物質、ニトラ
ジンイエロー及びブロムチモールブルーの色の変化を示
す。

緩衝剤０．０２ Ｍ Ｎａ２ＨＰＯ。（ｐＨ＝９．４
）を用いてこの指示薬溶液を調整した。

１ＮＨＣｌでｐＨ値を調整した。

結果を第１表に示す。第１表に明示するように、無機緩
衝剤 Ｎａ２ＨＰＯ４で調整した緩衝溶液中のニトラジンイエ
ロー及びブロムチモールブルーの両方とも凍結の時に変
色域の移行を示す。

しかしながら、比較として、０．０２Ｍの有機緩衝剤ト
リス−ヒドロキシメチルアミノメタン（トリス）で調整
した対応する指示薬緩衝溶液について同様の試験を行な
った。

ここで、変色域の移行は殆んど認められず、これは予想
された通りでトリスはプロトン伝導率に対して殆んど寄
与しない実質上非解離の有機化合物のためである。

変色域を移行するかどうかについては、解離の程度は重
要ではないことを示すために、トリス−緩衝剤で調整し
、そしてこれに、イオン強度のみ変え、プロトン組成を
変えない物質であるＮａＣｌを添加した指示薬溶液を使
用して試験をまた行なった。

第１表から明らかなように、この場合にも変色域の移行
は殆んど認められなかった。

例２ 本例では、非常に多くの異なるｐＨ指示薬物質を使用し
て試験を行なって、これらのすべてが凍結により変色域
の移行を示した。

第２表は試験した異なるｐＨ指示薬の＋２０’Ｃ（実線
）及び−２０℃（破線）における通常の変色域をまとめ
たものである。

すべての場合で、指示薬溶液を０．０２ＭＮａ２ＨＰＯ
４で緩衝溶液にし、ｐＨをｌＮＨＣｌ又はＩＭ Ｎａ
ＯＨで調整した。

例３ 本例では、前記のようにリン酸塩緩衝剤で緩衝溶液にし
た異なるｐＨ指示薬溶液へグリセロールを添加したもの
の試験を行なった。

＋２０℃及び１８℃で測定を行ない、ｐＨ値を７．０に
一定に保った。

すべての試料を一１８℃で凍結した。この結果を第３表
に示す。

示しであるグリセルロール濃度は８７％グリセロール溶
液に対してであることに注目すべきである。

例４ 本例はブロムクレゾールグリーンの色の変化に対するｐ
Ｈ，温度及びグリセロール含量の効果を示す。

この指示薬溶液は前記のように、０．０２ＭＮａ２ＨＰ
Ｏ４を含む。

この結果を第４表に示す。例５ 本例はクロロフェノールレッドの色の変化に関するｐＨ
，温度及びグリセロール含量の効果を示す。

前記のようにこの指示薬溶液は０．０２Ｍを含む。

結果を第５表に示す。Ｎａ２ＨＰＯ４ 例６ 本例は本発明による異なる調整剤の色の変化に対する阻
止効果を示す。

この指示薬溶液は０．０２Ｍ Ｎａ２ ＨＰＯ４で調
整した緩衝水溶液中に各々クロロフェノールレッド及び
ブロムクレゾールクリーンを含む。

この溶液のｐＨをＨＣｌ で６．０−６．５に調整した
。

結果を第６表に示す。例７ 、＝−＊ この試験はａ）凍結によるｐＨ指示薬（コンコーレッド
）の転移間隔の移行、及びｂ）この移行は凍結点以下に
引き続き温度を低くしても続かないことを示し、即ち本
発明による調整剤、例えばグリセロールが添加されない
場合には、指示薬組成物が液体又は固相の倒れかである
限り、転移間隔は温度に無関係のままである。

例８ 本発明によるカルボン酸調整剤が凍結系で、また緩衝剤
なしでｐＨ指示薬の変色域が温度に依存していることを
示すために、５％コハク酸ナトリウム（カルボン酸調整
剤）を含有する浴液、及びｐＨ指示薬としてクロロフェ
ノールレッドを使用して試験を行なった。

＋２０℃、並びに凍結点以下の三つの異なる温度で指示
薬の色を観測し、この結果は下記の通りである： 温度（℃） カラー ＋２０ 赤色 温度（’Ｃ） カラー ６ 赤色 −１０黄赤色 １８ 黄赤色 一６℃ないし一１０℃で起こる色の変化はｐＨ指示薬の
変色域の変化を示している。

例９ 第８表は所望の調整剤の前駆体でありかつ酵素反応によ
り所望の調整剤を生ずる酵素−基質の組合わせの種々の
例を示す。

第８表に示した組合わせは有用な前駆体のみの例示しそ
して当業者は酵素反応による調整剤を生ずるための多く
の他の酵素−基質の組合わせを選択できることは認めら
れよう。

例１０ 本発明の「色温度計」として使用のための組成物は下記
の方法で得られる。

９９．５％グリセロール３５０ｍ１１り四〇フェノール
レッドの０．５％溶液４１及びｎ−ブクノール（保存剤
）８００ｍｌを、Ｎａ２ＨＰＯ４Ｈ２Ｈ２０１４２，５
ｇを含有する水溶液２１に加え、次に生成する混合物を
蒸留水で希釈し、総量を４０１とした。

得られた溶液をｐＨ７，５にｌＮＨＣｌ！で調整した。

次にこの溶液を前記のようにスＩ−ＩＪツブの透明な室
へ注入した。

これは試験すると約−１８℃以上の温度で紫色、そして
約−１８℃以下の温度で黄色を示す色温度計となる。

例１１ 例１０の色温度計溶液１０１にＮａ２ＨＰＯ４Ｈ２Ｈ２
０３５，６、！７及び９９．５％グリセロール５０ｒｒ
Ｌｌを添加した。

溶液のｐＨは７．９６であった。前記の方法でつくった
溶液を色温度計として使用すると、温度が約−２４℃以
下になると紫色から黄色へ変色した。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 選択された凍結点以下の温度で、調整された可逆性
   の色変化を示す酸−塩基（ｐＨ）指示薬組成物であって
   、 （ａ） ｐＨめ変化により色変化を示しかつ下記の（
   ｂ）緩衝溶液のｐｋ値に近似したｐｋ値を有するの（こ
   十分な量の少なくとも一種の酸−塩基（ｐＨ）指示薬、 （ｂ） 解離（こより酸性又はアルカリ性を呈しかつ
   液体から固体、凍結状態に変ることにより酸−塩基バラ
   ンスのシフト（このシフトにより使用したｐＨ指示薬の
   色変化をおこす）を示す少なくとも一種の無機酸又は有
   機酸の塩を含む緩衝溶液、および、 （Ｃ） アルコール、カルボン酸およびその誘導体か
   ら成る群から選ばれた調整剤又はその前１駆体（この調
   整剤は凍結状態でプロトンを示し又はプロトンを結合す
   ることができ、また選択された凍結点以下の温度で凍結
   状態のｐＨ指示薬−緩衝剤組成物の色変化を液体、未凍
   結状態でｐＨ指示薬−緩衝剤組成物により示された色変
   化に変えるのに十分な量で存在する）を包含することを
   特徴とする、上記ｐＨ指示薬組成物。 ２ 緩衝溶液が水溶液である特許請求の範囲１記載のｐ
   Ｈ指示薬組成物。 ３ ｐＨ指示薬はｐＨ指示薬組成物中でｐｋ値を有し
   、調整剤はプロトン組成に変化を引き起こす有効量であ
   り、 （ａ） ｐＨ指示薬組成物（こついては、凍結により
   一層酸性になり、プロトン組成は前記のｐｋ値以上の値
   ｌこ変化し、そして （ｂ） ｐＨ指示薬組成物ｌこついては、凍結により
   一層アルカリ性になり、プロトン組成は前記のｐｋ値以
   下の値に変化することを特徴とする特許請求の範囲１又
   は２記載のｐＨ指示薬組成物。 ４ 調整剤がアルコール又はその前駆体であることを特
   徴とする特許請求の範囲１記載のｐＨ指示薬組成物。 ５ 調整剤が少くとも一つの水酸基を含み、そしてメタ
   ノール、エタノール、グリコール、グリセロール及び炭
   水化物からなる群から選択されることを特徴とする特許
   請求の範囲４記載のｐＨ指示薬組成物。 ６ 炭水化物が蔗糖、ソルビトール及びデキストロール
   からなる群から選択されることを特徴とする特許請求の
   範囲５記載のｐＨ指示薬組成物。 ７ ｐＨ指示薬組成物（こついて、凍結（こより一層
   酸性ｔこなり、調整剤が強アルカリからのイオン及び弱
   酸からのイオンからなる物質であることを特徴とする特
   許請求の範囲３記載のｐＨ指示薬組成物。 ８ 調整剤がカルボン酸の塩であることを特徴とする特
   許請求の範囲７記載のｐＨ指示薬組成物。 ９ カルボン酸部分が少くとも一つのカルボキシル基を
   含むカルボン酸から誘導されそして脂肪族及び芳香族カ
   ルボン酸、ケト酸、ヒドロキシ酸及びアミン酸からなる
   群から選択されることを特徴とする特許請求の範囲８記
   載のｐＨ指示薬組成物。 １０ カルボン酸がギ酸、酢酸、コノ＼り酸、・クエ
   ン酸及びグルタミン酸からなる群から選択される特許請
   求の範囲９記載のｐＨ指示薬組成物。 １１ ｐＨ指示薬組成物について、凍結ｌこより一層ア
   ルカリ性Ｉこなり、調整剤が弱アルカリのイオン及び弱
   酸のイオンからなる物質であることを特徴とする特許請
   求の範囲３記載のｐＨ指示薬組成物。 １２調整剤の前駆体が酵素反応により調整剤を生ずる酵
   素−基質混合物であることを特徴とする特許請求の範囲
   １記載のｐＨ指示薬組成物。 １３前駆体がホスファターゼ／グルコース−６−ホスフ
   ェート、ホスファターゼ／β−グリセロホスフェート、
   エステラーゼ／エチルブチレート及びリパーゼ／トリグ
   リセリドからなる群から選択されることを特徴とする特
   許請求の範囲１２記載のｐＨ指示薬組成物。 １４組組成物、 （ａ） ｐＨ指示薬としてクロロフェノールレッド、
   （１））緩衝剤としてＮ ａ２ＨＰＯ４、及び（Ｃ）
   調整剤としてグリセロール を含む水性組成物であることを特徴とする特許請求の範
   囲１記載のｐＨ指示薬組成物。 １５液体絹成物１リットル当り約： Ｎａ２ＨＰＯ４・２Ｈ２０の０．４Ｍ水溶液５０ｍ１１
   ０．５％クロロフェノール溶液１００ｍ１゜グリセロー
   ル（９９，５％） ９ｍｌ。 選択的保存剤としてｎ−ブタノール２０ｍ１１全体積を
   １．１！こする蒸留水、 及びｐＨを７．５に調整するＩＭＨＣｌ を含むことを特徴とする特許請求の範囲１４記載のρＩ
   ］指示薬組我物。 １６液体組成物１リットル当り更にＮａ２ＨＰＯ４・２
   ２Ｈ２Ｏ３５６及びグリセロール（９９，５％）５ｒｄ
   を添加することを特徴とする特許請求の範囲１５記載の
   ｐＨ指示薬組成物。