JPH10506121A

JPH10506121A - コントラスト剤

Info

Publication number: JPH10506121A
Application number: JP8511474A
Authority: JP
Inventors: ファールヴィック，アンネ，キェルスティ; ネヴスタッド，アンネ; グンダーセン，ヘルゲ; ストランド，パー; クレイヴネス，ジョー; ジャコブセン，アンネ
Original assignee: ニコムドイメージングエイ／エス
Priority date: 1994-09-27
Filing date: 1994-09-27
Publication date: 1998-06-16
Also published as: EP0783325B1; NO971436L; EP0783325B2; ATE187079T1; NO971436D0; EP0783325A1; AU7702994A; ES2139097T3; DE69421943D1; US6207134B1; DE69421943T2; DK0783325T3; WO1996009840A1; AU687093B2; RU2147243C1

Abstract

(57)【要約】本発明は、粒状コントラスト剤、特にＭＲイメージングの為のコントラスト剤に関し、このコントラスト剤は、構造型多糖および合成重合体（特にポリアミノ酸）から選択される、低被覆密度の高分子電解質被覆剤を有する金属酸化物、好ましくは超常磁性鉄酸化物コアを備えている。従来の被覆粒状体とは異なり、この新規粒子は、心臓血管パラメータ、血小板減少、補体活性化および血液凝固への作用が低減されているか、或いは全く無い。

Description

【発明の詳細な説明】コントラスト剤本発明は、コントラスト剤、特にＭＲ、Ｘ線、ＥＩＴおよび磁気計測研究に使用される高分子電解質被覆金属酸化物コントラスト剤粒子、殊にこのような金属酸化物粒子が超常磁性作用を示すものに関する。組織コントラストを増強し、あるいは体内プロセスの研究を促進するための医療診断技術におけるコントラスト剤の使用は、良く確立されている。コントラスト増強がどのようにして起こるかは、イメージング様式によって少しずつ異なるが、磁気共鳴イメージングにおいては、殆どの従来のコントラスト剤が、そのコントラスト増強力を、組織選択時間へのその効果から導き出している。ＭＲイメージングの大きな利点の一つは、組織緩和時間から表れる組織固有コントラストの程度が高いことである。最初は、コントラスト剤を加えなくても、緩和パラメータは、正常組織および悪性組織環の識別に用いることができると信じられていた（Damadian，Science 171：1151-1153(1971)参照）。しかしながら、最初のＭＲイメージがLauterburによって形成（Nature 242:190-191(1973)参照）されて以来、異常組織を正常組織から一貫性をもって区別することは困難であることが明らかとなってきた。したがって、目下、主要なコントラストパラメータに影響を与えることでコントラストを改善する材料の使用に、かなり長い間大きな興味が持たれてきた。Lauterburのグループは、最初に動物におけるＭＲコントラスト剤の使用を説明した(Lauterbur et al．Frontiers of Biological Energetics、New York、Academic Press 1978;752頁)。静脈内投与コントラスト剤の臨床診断の可能性がCarr等によって1984年に示され（Carr et al．AJR 143 :215-224(1984)参照）、1988年には、最初のＭＲコントラスト剤、GdDTPAが、臨床使用の認可を受けた。今日、GdDTPAおよび類似物質、例えばGdDTPA-BMA、GdHPDO3Aおよび GdDOTA等が中枢神経系の増強ＭＲイメージングにとって安全かつ便利であることは、良く立証されている。低分子量で親水性特性を有するために、これら金属キレートは細胞外に分布し、腎臓によって速やかに浄化される。現在では、改善された動的薬理学特性を備え、より特異的器官または疾患分布を可能とする他のコントラスト剤が開発されている。一般的に言えば、標的領域へのＭＲコントラスト剤の送出を改善するために用い得る２つのアプローチがある。従来のアプローチでは、常磁性標識した天然または合成であって、特異的蓄積性または局在性を有する分子または巨大分子（例えば、肝胆汁性剤、血液プール剤、ポルフィリン類等）を用いることに努力が払われている。別のアプローチは、より強い磁性標識、例えば超常磁性粒子を用いることであり、この粒子はその粒子特性によって、或いは標的特異性分子に結合したものを用いることで、所望の部位に蓄積する。一般的に、超常磁性剤の診断上有益な標的／バックグラウンド比は、常磁性剤のものより有意に高く、したがって超常磁性剤は非常に低い組織内濃度でも検出することができる（Weissleder et al．Magn．Reson．Quart 8:55-63(1992))。超常磁性剤のＭＲコントラスト剤としての妥当性は、結果として強力なコントラスト増強を得られる組織信号強度に対する大きな効果と、高度に特異的な標的設定の可能性との理想的な組み合わせから導き出される。粒状剤の潜在的な標的は、粒子材料の投与経路および物理化学的特性（特に粒子サイズおよび表面特性）に応じて、多数存在する。それらの２つの主な使用法は、胃腸の調査のためには小腸投与により、また血液プール区画および／または細網内皮系およびその解剖学上の分布区域（例えば肝臓、脾臓、骨髄およびリンパ節等）の調査のためには非経口投与による。およそ30nm未満の直径を有する超微小酸化鉄粒子は、より大きな従来の酸化鉄粒子と比較した場合に、相対的に長い血管内半減期を有している。酸化鉄粒子に典型的なＴ２短縮に加えて、超微小粒子はＴ１短縮も生じさせ、これによって血管内の信号を増加させる。粒状剤における近年の進歩は、受容体リガンドまたは抗体（複数）／抗体フラグメントを用いた標的化も可能にした。異なる超常磁性剤の上記適用の簡単な概要が、 Fahlvik et al．JMRI 3:187-194（1993）に記載されている。現在まで、超常磁性コントラスト剤における研究の多くが、それらのコントラスト有効性と生体動力学の最適化に集中していた。薬剤処方関連の発行物または粒子調製の安全面に関してはあまり注意が払われていなかった。しかしながら、非経口粒子処方のためには、適当なコントラスト能力および生体動力学そのものだけでは充分ではなく、幾らかの問題に遭遇した。即ち、例えば、臨床試験で試された従来の酸化鉄−デキストラン調剤は、コロイド安定性が低いことが示された。粒子は、使用直前に、再分散および／または希釈し、次いでろ過しなければならないし、かつ調剤は、インラインフィルタを介する低速注入で投与され、重大な毒性作用が回避されている。粒子は、被覆することによって適当な安定性を与えることができる一方で、非経口粒状剤の粒子表面積は相当あり、我々は、従来完全に無害であると考えられていた被覆剤、例えば貯蔵型の多糖類、澱粉、デキストランおよびこれらの誘導体が、それ自身、心臓血管パラメータ、血小板喪失および血液凝固時間に、および補体系に有害な作用を有することを見出した。しかしながら、我々は、これらの粒状剤に伴う問題点が、ある高分子電解質、例えば合成ポリアミノ酸、合成重合体および、特に、構造型多糖類などを、従来の被覆密度より低くして使用することで、回避または低減できることを発見した。すなわち、一つの観点から、本発明は、複合粒状材料からなり、この複合粒状材料は、その粒子が診断に有効な実質的に水不溶性の金属酸化物結晶性材料と多価イオン性被覆剤からなり、前記粒子が300nm未満のサイズを有し、前記結晶性材料が1〜100nmの結晶サイズを有し、前記結晶材料の前記被覆剤に対する重量比が、1000：1〜11：１であり、かつ前記被覆剤が天然または合成構造型多糖、合成ポリアミノ酸、生理学的に許容される合成重合体およびこれらの誘導体から選択される、診断剤を提供する。多糖類は、一般的に、蓄積型多糖類（例えばデンプン、グリコーゲン、デキストランおよびこれらの誘導体等）と、構造型多糖類、例えばペクチンおよびペクチンフラグメント、例えばポリガラクツロン酸、グリコサミノグリカンおよびヘパリン類（例えば、ヘパリン、ヘパラン、ケラタン、デルマタン、コンドロイチンおよびヒアルロン酸等）、セルロースおよび海洋性多糖類、例えばアルギン酸塩、カラゲナンおよびキトサン等、およびこれらの誘導体など、の二つのカテゴリーに分けられる。本発明は第二のカテゴリーに関し、かつ天然形態および合成形態両方のこれら多糖類に関し、これら多糖類は、フラグメント化または化学的に変性された、例えば誘導されて金属酸化物結晶に結合するための結合部位を導入された多糖類を含んでいる。多価イオン性多糖類被覆剤として特に好ましいのは、天然および合成ヘパリン類多糖類、例えばヘパリン、コンドロイチン（例えばコンドロイチン-4-硫酸）、および海洋性多糖類アルギン酸塩、カラゲナンおよびキトサンなどである。好適さは劣るものの、合成多価イオン性重合体、例えばポリアミノ酸、ポリアクリレート、およびポリスチレンスルホネート（およびEP-A-580818で言及される他の合成重合体）を被覆剤として用いることができる。ポリアミノ酸の内では、リジン、グルタミン酸、アスパラギン酸およびこれらのエステル（メチルおよびエチルエステル等）の単独重合体および共重合体が好ましい。一般的に、被覆剤は、多数のイオン性基、たとえばアミン基、カルボキシル基、スルフェート基、スルホネート基、ホスホネート基またはホスフェート基などを有しているべきであり、これら基は重合体にそって間隔を有し、金属酸化物結晶表面に対する多数の結合点を与えるとともに、全体として好ましくは負の正味電荷（ゼータ電位として測定可能）を与える。多価結合は、堅固なオートクレーブ耐性結合および貯蔵安定性を確かなものとし、その一方で正味電荷は、脈管系投与後における粒子の生体許容性を促進することを補助する。多価イオン性被覆剤は、一般的に、500〜2000000 D、殊に1000〜500000、特に 1500〜250000、さらに特に2000〜150000 Dの範囲の分子量を有する。表面結合被覆剤は、複合粒子全体の小部分を形成し、結晶性材料の被覆剤に対する重量比は、好ましくは1000：1〜15：1、殊に500：1〜20：1、特に100：1〜2 5：1、さらに特にヘパリンまたはコンドロイチン被覆に関して、少なくとも20：１である。複合粒子の製造は、一般的に、一または二工程の被覆操作で行なわれる。一工程操作では、結晶性材料は、被覆剤存在下で塩基を用いた、高pH（例えば９より大、好ましくは１１より大）での沈澱によって形成され、一方、二工程操作では、結晶材料は最初に製造され、次いで被覆される。したがって、さらに別の観点から、本発明は本発明のコントラスト剤を製造する方法を提供し、この方法は： (i)９を越えるpHで、診断に有効で実質的に水不溶性の金属酸化物の1〜100nmの結晶と、被覆剤とを共沈させるか、または (ii)診断に有効で実質的に水不溶性の金属酸化物の1〜100nmの結晶を被覆剤で被覆し、これによって、300nm未満のサイズを有し、結晶の表面結合被覆剤に対する重量比が1000：1〜11：1であり、かつ該被覆剤が天然または合成構造型多糖およびその誘導体、合成ポリアミノ酸および生理学的に許容される合成重合体から選択され、しかしながら好ましくは該被覆剤は構造型多糖である複合粒子を製造ことからなる。共沈被覆または後沈澱被覆の操作は公知であり、以下に説明される文献（例えばUS-A-4795698及びUS-A-4452773参照）で広範に説明されている。全ての被覆剤が沈着するわけではないため、所望の被覆密度を達成するには、１¹/₂〜７、一般的には約２倍過剰（被覆結合が100％であった場合に必要な量に対して）を用いることが必要かもしれない。本発明の組成物における結晶性材料の性質は、勿論意図する機能に依存する。本発明は、非経口投与に次ぐ標的特異的送達または延長された血液プール滞留が望まれる、全ての実質的に不溶性の結晶性材料に適用可能である一方、しかしながら、金属酸化物診断コントラスト剤および特に超常磁性体特性を示す金属酸化物に適用可能である。この場合には、酸化物は、ＥＩＴおよび磁気計測調査における、殊にＭＲイメージングにおける診断コントラスト剤として機能することができる。超常磁性特性を示し、結晶サイズが単一ドメインサイズ未満である金属酸化物が広範囲で公知であり、例えばUS-A-4827945(Groman)、EP-A-525199(Meito Sang yo)およびEP-A-580878（BASF）などに開示されている。例えばBASFによって引用されるような２種以上の金属種を含む混合フェライトが、緩和性の点から特に効果的な結晶を提供できる。これら種々の金属酸化物は、本発明に従って使用することができるが、特に好ましいのは、鉄酸化物超常磁性結晶、例えば式(FeO)_nFe₂O₃（式中ｎは０〜１の範囲である）の化合物、典型的にはマグヘマイト(γ-Fe₂O₃)およびマグネタイト(Fe₃O₄)、さらにこれらの複合体である。このような鉄酸化物結晶を用いると、一般的には細網内皮系によるこれらの取込み代謝で、異常な毒性金属が放出されることがなく、鉄は単に体内鉄レザーバ（body's iron reservoir）に加えられるだけである。超常磁性結晶の結晶サイズは、好ましくは2〜50nm、殊に3〜35nm、特に4〜20n mである。複合結晶／被覆剤粒子は、単結晶または、所望により、多結晶クラスターを含んでいてもよい。後者の場合、複合粒子に対するクラスター「コア」は、望ましくは、100nm未満のサイズである。結晶、クラスターおよび複合体の粒子サイズは、標準的技術、（例えば以下に実施例の前で説明するような）例えば電子顕微鏡、レーザ光散乱またはハイドロダイナミッククロマトグラフィーなどによって容易に測定することができる。被覆剤に対する金属酸化物結晶の重量比は、元素分析、例えば被覆剤の、金属酸化物の金属に対する信号とスルフェート結合基中のイオウに対する信号（或いは、同様に、スルフェートでない場合における被覆剤の他の特徴的な原子または基の信号）とを比較する、例えば誘導結合型プラズマ分析によって容易に決定できる。同様に、この比は、重量分析によって決定することができる。被覆化合物の多価イオン性特性は、この化合物が、結晶表面にポリマー一分子当たり多数の結合部位で結合できるようにする。これはオートクレーブ診断剤に通常用いられる条件（121℃ 15分間）に耐えられる強い被覆：結晶結合を生じさせ、かつデキストラン：鉄酸化物製品で遭遇する上述の低コロイド安定性を有さない製品を提供する。多価イオン性特性の結果、被覆剤は、複合粒子にノンゼロゼータ電位として検出可能な全体的電荷を与える。特に低い被覆密度において、被覆剤の電荷は、金属酸化物結晶の電荷を外れてバランスすることができ、また等電点での粒子安定性が低くなり、1000nmを越えるサイズの凝集体を与える粒子凝集が起こる可能性があることが判った。これは望ましくはないが、粒子サイズにおける被覆レベルの効果は容易に観測でき、このような凝集が回避される。一般的に少なくとも10 mVの絶対値（即ち≦−10mVまたは≧＋10mV)、殊に20〜100mV、特に30〜70mVの絶対値を有するゼータ電位が好ましい。したがって、好ましい態様において、本発明のコントラスト剤は、多価イオン性多糖またはポリアミノ酸によって被覆及び安定化された鉄酸化物コアからなる。被覆鉄酸化物粒子は、高温に付された場合、希釈された場合および長期間良好な安定性を示す。貯蔵型の多糖、デキストラン（またはその誘導体）および澱粉で被覆及び安定化された従来の鉄酸化物調剤と比較して、この新規剤は、低毒性および高生体適合性を有している。特定の化学的組成および構造を有する鉄酸化物調剤を得るためには、調製条件を注意深く制御する必要がある。コロイド状鉄酸化物懸濁物（フェロフルイド）の工業的使用は、記録技術に関して、染料および塗装成分として、および電気化学装置に関して、多数説明されている。工業銘柄の鉄酸化物の合成および安定化のための方法が多数存在するが、主にその非水溶性特性、および／または使用された被膜および界面活性剤の毒性によって、これらは医薬鉄酸化物には適用できない。超常磁性鉄酸化物コントラス剤を合成するために最も一般的に用いられる方法は、生体分子および細胞を標識化および分離するためにMoldayによって最初に解説された操作（MoldayおよびMackinzie，J．Immunol．Meth 52:353-367 (1982)及びUS-A-4,452,773（Moldy）参照）から誘導される。所謂Molday法、または一段階共沈法は、水溶性多糖、好ましくはデキストランを含むアルカリ溶液中での鉄酸化物の沈澱に基づいている。コロイドサイズの複合粒子は、デキストラン中に埋設されるか、またはデキストランで被覆された単一または複数の鉄酸化物結晶からなる。結晶は典型的には3〜30nmのサイズを有するマグネタイトまたはマグネタイト／マグヘマイト構造である。合計粒子直径は、しかしながら、約10nmの低い値から数百nmの高い値までの範囲であってよい。典型的には、Mold ay法によって調製された鉄酸化物調剤は不均一であり、これら調製物には複数の粒子サイズフラグメントが検出される。したがって、遠心分離、ろ過またはゲルろ過法が、より均一なサイズ範囲を有する粒子を単離するために用いられてきた（Weissleder et al．Radiology 175:489-493(1990)参照）。 50〜1000nmの範囲の全体直径を有する従来の被覆鉄酸化物粒子を肝臓および腎臓コントラスト剤として試験的にテストした。より小さい、単離された粒子は、延長された血液半減期と、毛細血管壁透過性を示した。これら剤の可能性のある適用は、例えばリンパ節および骨髄のイメージング、潅流／血液プールイメージングおよび活性標識化のためなど、多数存在する。しかしながら、デキストラン系剤は、比較的不安定で重大な悪影響を与えることが示された。例えば、現在臨床試験に用いられている剤は、すぐ使用できる製品として調剤することができない。投与量の剤は、血圧抑圧、背中下部痛および血液学上の変化などのしばしば起こりかつ重大な悪い現象を低減するために、使用直前に希釈し、インラインフィルタを介する低速注入で注射される。我々は、本発明の粒子が、従来の粒子と比較して、改善された安定性および毒性を有していることを発見した。本発明に従って使用されるこれら粒子は、例えば、工程１がアルカリ溶液からの金属酸化物結晶の沈澱であり、工程２が結晶を高分子電解質特性の重合体で被覆するという単純な二工程操作によって合成することができる。或いはこれら粒子は、金属酸化物結晶と高分子電解質被覆重合体との共沈によっても合成することができる。金属酸化物結晶は、一般的に、金属の可溶性塩の水溶液から塩基を加えることで沈澱させることができる。超常磁性鉄酸化物結晶は、激しく攪拌しながら、または超音波処理中に、急激に塩基を加えてpHを10以上とすることで、鉄塩混合物の水溶液から沈澱させることができる。広範囲の鉄塩、例えばFeCl₂.nH₂O、FeCl₃ nH₂O、Fe(III)クエン酸塩、Fe(II)グルコン酸塩、FeSO₄.nH₂O、Fe₂(SO₄)₃、Fe( II)シュウ酸塩、Fe(NO₃)₃、Fe(II)アセチルアセトネート、Fe(II)エチレンジアンモニウムスルフェート、Fe(II)フマル酸塩、Fe(III)ホスフェート、Fe(III)ピロホスフェート、アンモニウムFe(III)クエン酸塩、アンモニウムFe(II)スルフェート、アンモニウムFe(III)スルフェートおよびアンモニウムF(II)シュウ酸塩などを用いることができる。第一鉄および第二鉄の比は、好ましくは１: 5〜5 : １の範囲内である。このような沈澱鉄酸化物結晶は、以下の式：(FeO)_x・Fe₂O₃ （式中、ｘは≦ｘ≦１の範囲内の数であり得る）で表すことができる。マグヘマイト（γ-Fe₂O₃）は低いｘ値を示し、マグネタイト（Fe₃O₄）は高いｘ値を示す。使用される塩基は、広範囲の強無機または有機塩基、例えばNaOH、NH₄OH、LiO H、KOH、トリエチルアミンおよびグアニジン等から選択される。一般的に、金属および塩基のための対イオンは、沈澱結晶を潜在的に有毒の副生成物の清浄に付す必要性を最小限とするために、生理的に許容されるイオンであるべきである。鉄酸化物の沈澱、または鉄酸化物と重合体の共沈は、水中、水と有機溶媒との混合物中、または粘性媒体中で行なうことができる。例えば、メタノール、エタノール、アセトン、エーテルおよびヘキサンのような有機溶媒を用いることができる。粘性マトリックスは、多糖またはポリアミンのヒドロゲル、三沃化芳香族炭化水素、グリセロールまたはポリエチレン-およびポリプロピレングリコールから構成し得る。勿論、生理学的に許容されない共溶媒を用いない水溶液からの沈澱が、やはり製造後の精製の必要性を低減するためには、好ましい。新規鉄酸化物調製物の一つの成分としての被覆材料は、安定性および毒性の観点からの利点により、高分子電解質構造を有する。高分子電解質は、鉄酸化物表面に多数の結合点を介して強固に結合する、高分子負イオン性化合物、高分子正イオン性化合物およびこれらの混合物を包含する。被覆材料は、その電荷および官能基によってグループ分け、例えばリン原子またはイオウ原子を含む官能基、またはカルボキシ基を有する負の荷電重合体、および窒素原子を含む官能基を有する正の荷電重合体などに分けることができる。負の荷電重合体の例としては、カルボキシセルロースの或る改質物、アルギン酸塩、カラゲナン、ポリガラクツロン酸塩、ヘパリン、ヘパリン類化合物（例えばコンドロイチン-4-硫酸塩、デルマタン硫酸塩、ケラチン硫酸塩およびヒアルロン酸塩等）、合成重合体（例えばポリスチレンスルフォネート等）およびアミノ酸（例えばポリグルタミン酸塩およびポリアスパラギン塩）などを挙げられる。正の荷電重合体は、キトサンおよびポリリジンを包含する。以上説明したように、高分子電解質重合体の置換の程度および荷電密度は、粒子の毒性および安定性が重大な問題となるほど低すぎてはならない。したがって、重合体は、金属酸化物結晶への多数の結合点を確実とし、かつ粒子に荷電表面を与えるために、複数（２以上）の官能基を含む必要がある。超常磁性鉄酸化物コアの直径は、一般的には、約４nm〜約100nmである。小さなコアは、たった一つのサブドメイン超常磁性結晶を含む一方で、大きなコアは結晶のクラスターを含む。小径の単一結晶コアは、少量の低または高分子量重合体によって安定化することができる一方で、クラスターの被覆および安定化には、その密度および粒子毎の高い磁気装荷によって、より大量の重合体を必要とする。鉄酸化物コアおよび重合体被覆層を含む複合粒子全体直径は、調製条件、分子量、構造および重合体量に依存し、一般的に約５nm〜300nmの範囲にある。超常磁性鉄酸化物結晶含有粒子の緩和性（relaxivity）は、サイズおよびコアまたは被覆粒子の組成によって変化する。Ｔ₁緩和性（ｒ₁）は、５以上200以下である一方、Ｔ₂緩和性（ｒ₂）は、0.5Ｔで、5〜500の間を変化する（s^-1mM^-1Fe として得られた緩和性）。ｒ₂／ｒ₁比は、1〜約100、または好ましくは2〜10の間を変化することができる。小さな単一結晶粒子は、低い範囲のｒ₂／ｒ₁比を有する一方で、より大きな粒子および多結晶粒子は、より大きな比を示す。粒子の磁化は、鉄酸化物結晶が超常磁性特性を示すかぎり、粒子および結晶のサイズとは比較的無関係である。１Ｔでは、磁化は約20〜100、好ましくは30〜90emu/g 鉄酸化物である。更なる観点から、本発明は、少なくとも１種の生理学的に許容される担体または賦形剤、例えば注射用水とともに、本発明の診断剤を含む診断用組成物を提供する。本発明の組成物は、従来の如何なる製薬形態、例えば懸濁物、分散物および粉体などであってよく、水性ビヒクル（例えば注射用水）および／または浸透圧、ｐＨ、粘度および安定性を調節する成分を含んでいてもよい。理想的には、組成物は、血液と等張および等水素である懸濁液を用いた懸濁液形態である。例えば、等張懸濁液は、塩、例えば塩化ナトリウム等、低分子量糖、例えばグルコース（デキストロース）、ラクトース、マルトースまたはマンニトール等、重合体被覆剤の可溶性フラクション、またはこれらの混合物を添加することで調製することができる。等水素性は、もし単にｐＨの軽度な調製が要求されている場合には、酸、例えば塩酸等、または塩基、例えば水酸化ナトリウムを加えることで達成できる。緩衝剤、例えばホスフェート、クエン酸塩、酢酸塩、ホウ酸塩、酒石酸塩、およびグルコン酸塩なども用いることができる。粒子懸濁液の化学的安定性は、耐酸化剤、例えばアルコルビン酸またはピロ硫酸ナトリウム等、キレート化剤、例えばクエン酸、EDTAナトリウムおよびEDTAナトリウムカルシウム等を加えることで改質できる。賦形剤を加えて調製剤の物理的安定性を向上させることもできる。非経口懸濁液に最も頻繁に用いられる賦形剤は、界面活性剤、例えばポリソルベート、レシチンまたはソルビタンエステル、粘度改質剤、例えばグリセロール、プロピレングリコールおよびポリエチレングリコール（マクロゴル）、または曇り点改質剤、好ましくは非イオン性界面活性剤等である。本発明の組成物は、金属酸化物を、診断上効果的な金属濃度、一般的には0.1 〜250mg Fe/ml、好ましくは1〜100mg Fe/ml、特に好ましくは5〜75mg Fe/mlで含んでいる。本発明は、更に、ヒトまたはヒト以外、好ましくは哺乳類の身体のコントラスト増強イメージを形成する方法を提供し、この方法は、上記身体に対して、好ましくは非経口で、特に好ましくは血管内に、本発明に係るコントラスト剤の懸濁液を投与し、該剤が分布する身体の少なくとも一部のイメージを、例えばＭＲ、ＥＴまたは磁気計測法によって形成することからなる。本発明の方法のためには、使用される投与量は、用いられるイメージング様式に対するコントラスト効果投与量である。一般的には、これは1〜500μmol Fe/k g、好ましくは2〜250μmol Fe/kg、更に好ましくは5〜50μmol Fe/kgの範囲にある。この技術分野で従来適用される投与量および濃度を用いることができる。従来技術に従って調製された様々な鉄酸化物調製物が、血管内に投与された場合に重大な悪性作用を与えることが知られている。最も頻繁に報告される知見は、全身血圧の抑制および急性血小板喪失である。我々は、これらの副効果が、補体系の粒子に誘発された活性化に対する生理学上および血液学上の反応であることを発見した。従来の鉄酸化物粒子は、補体カスケード（cascade）を強力に活性化する一方で、本発明の複合粒子は循環する血小板の数に全く影響を与えないか、あるいは単に軽度の影響を与えるに過ぎないが、従来の調製物は急性の顕著で一時的な血小板減少症を引き起こす。炭水化物種（例えば未改質デキストランおよびあるデキストラン改質物等）の外側の表面は、多くのグラム陽性およびグラム陰性バクテリアの多くの種と同様に、補体の強力なアクチベータであり得る。この表面は、ＯＨなどの親核性表面基がC3b補体タンパク質と共有結合を形成するために、補体活性化の第二経路を活性化する（Immunology（第二版），Gowe r Medical Publishing，New York，1989：13.3参照）。補体系は感染性因子による侵入等の障害に対する身体反応の重要な部分であるため、敗血症環境下では、補体活性化の結果は有益であり得る。しかしながら、粒状コントラスト剤の注射に次ぐ補体活性化は、有益であるというよりは、有害である。本発明の被覆粒子は、驚くべきことに、補体系または補体関連パラメータ、例えば血圧および血小板数にに全く影響を示さない。選択された被覆材料は、従来の粒子と同様の方法で補体活性化を起こさない粒子表面を生じさせる。同様に、粒子を安定化させるために用いられた少量の高分子電解質重合体は、多分従来の粒子と比較した場合のオプソニン作用における変化（オプソニンの程度およびタイプ）のために、補体活性化において抑制効果を示さない。本発明は、以下の非限定的実施例を参照してより詳細に説明される。以下の実施例では、鉄濃度は鉄酸化物粒子の消化に次ぐICPによる分析で決定した。ｐＨは、Orion Sureflow Ross pH電極を備えたBeckman φ10ｐＨ計測器を用いて測定した。粒子サイズ分布は、ハイドロダイナミッククロマトグラフィー（HDC）によって測定（Small及びLanghorst，Analytical Chem．54:892A-898A(1 982)参照）するか、Malvern Zetasizer ４を用いたレーザ光分散（PCS）によって測定した。ゼータ電位または電気泳動移動度として表される粒子表面電荷は、 Malvern Zetasizer ４で決定した。Ｔ₁およびＴ₂緩和、ｒ₁およびｒ₂、は、水溶液サンプル中、37℃で0.47Ｔ（Minispec PC-20）にて測定した。Ｔ₁に関してはI Rパルスシーケンスを用い、Ｔ₂に関してはCPMGシーケンス（TE=４ms）を用いた。磁化曲線は、室温にて、振動サンプル磁気計測器（Molspin）を用い、＋１〜 −１Ｔの磁場で操作して得られた。参考例１平均分子量が9,000Dであるデキストラン（5g，Sigma）を、水（10ml）に溶解した。60℃の温度で、FeCl₃.6H₂O(1.35g)およびFeCl₂.4H₂O（0.81g）を、炭水化物の溶液に溶解した後、この混合物を、超音波処理しながら、0.18MのNaOH（100 ml）中60℃でゆっくりと沈降させた。この超音波処理をもう10分間続けた後、40 00rpmで５分間遠心分離した。上澄みを集め、フラクションを0.9%のNaCl（5ｘ1L ）に対して透析した。デキストラン粒子は、HDCにより測定すると、12nmより小さいフラクションおよび300nmより大きいフラクションを有する多分散系の粒子サイズを示す。参考例２ (US-A-5314679 の実施例7.3に依る) FeCl₃.6H₂O（1.17g）およびFeCl₂.4H₂O（0.53g）の水溶液（8.5ml）に、 pH2.3になるまで1Mの炭酸ナトリウムを加えた後、平均分子量が9,000Dであるデキストラン（5.00g）を加えた。この溶液を、60-70℃まで加熱した後、およそ40 ℃まで冷却した。7.5%のNH₄OHを加えてpHをおよそ9.5にし、懸濁物を95℃で15分間加熱した。この分散物を、水（5 x 1L）に対して透析した（15,000ダルトンで切捨て）。参考例３ (US-A-54770183 の実施例6.1に依る) 0.28MのFeCl₃、0.16MのFeCl₂および6.25gの平均分子量が70,000Dであるデキストラン（pharmacia，Uppsala，Sweden）の溶液50mlに、50mlの7.5%のNH₄OHを３分かけて加えた。この懸濁物を、５分間攪拌し、700℃で30分間加熱した。この溶液を、5000rpmで15分間遠心分離し、上澄みを水（5 x 1L）に対して透析した。参考例４平均分子量が70,000Dである澱粉(3g，Reppe Glucose，Sweden)を、水(10ml)に溶解した。60℃の温度で、FeCl₃.6H₂O（2.7g）およびFeCl₂.4H₂O(4.5g)を、炭水化物の溶液に溶解した後、この混合物を、超音波処理しながら、1.2MのNaOH（50 ml）中60℃でゆっくりと沈降させた。この超音波処理をもう10分間続けた後、50 00rpmで５分間遠心分離した。上澄みを集め、フラクションを0.9%のNaCl水溶液に対して透析した。磁化曲線は、澱粉粒子が超常磁性体であることを示した。PC Sにより測定すると、粒子サイズは、450nmであった。マグネタイト結晶のサイズは、およそ10nmと測定された。参考例５ a) 実施例１ａにおいて製造したマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子 0.39と等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水（30ml）に溶解させた平均分子量が65,000Dであるカルボキシデキストラン（30mg，Pharmacia Ab，Uppsala， Sweden）を加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。カルボキシデキストラン粒子は、HDCにより測定したところ、88nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、-26mV と測定された。 b) 実施例１ａにおいて製造したマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子 0.39と等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水（5ml）に溶解させた平均分子量が65,000Dであるカルボキシデキストラン（50mg，Pharmacia Ab，Uppsala， Sweden）を加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。カルボキシデキストラン粒子は、HDCにより測定したところ、74nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、-32mV と測定された。r1は、35.2(mM.sec)^-1であり、r2は、358(mM.sec)^-1であった。 c) 実施例１ａにおいて製造したマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子 0.39と等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水（1.5ml）に溶解させた分子量が3,000-4,000Dであるカルボキシデキストラン（15mg）を加える。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過する。参考例６ a) 実施例１ａにおいて製造したマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子 0.59と等しい）を、水（85ml）で希釈し、これに水（5ml）に溶解させた平均分子量が74,000Dであるリン酸デキストラン（50mg，Pharmacia Ab，Uppsala， Sweden）を加えた。この分散物を、超音波処理し、遠心分離し、上澄みをろ過(0 .22μmフィルタによる）した。磁化曲線は、リン酸デキストラン粒子が超常磁性体であることを示した。PCSにより測定すると、粒子サイズは、74nmであった。 b) 実施例１ａにおいて製造したマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子 0.39と等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水（5ml）に溶解させた平均分子量が71,800Dであるリン酸デキストラン（50mg，TdB Consultancy AS，Uppsala ，Sweden）を加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。リン酸デキストラン粒子は、HDCにより測定すると、48nmの平均直径を示す。ゼータ電位は、-51mVと測定された。r1は、37(mM.sec)^-1であり、r2は、342(mM.sec)^-1であった。 c) 実施例１ａにおいて製造したマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子 0.39と等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水（1.5ml）に溶解させた平均分子量が71,800Dであるリン酸デキストラン（15mg，TdB Consultancy AB，Uppsa la，Sweden）を加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。リン酸デキストラン粒子は、HDCにより測定すると、48nmの平均直径を示す。ゼータ電位は、-36mVと測定された。参考例７実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水に溶解させた平均分子量が500,000Dである硫酸デキストラン（30mg，Sigma，D-6001）を加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。磁化曲線は、硫酸デキストラン粒子が超常磁性であることを示し、 HDCにより測定すると、それらは42nmの平均直径を示す。ゼータ電位は、-57mVと測定された。硫酸デキストランの56%が、粒子表面に吸着した。r1は、37.7(mM.s ec)^-1であり、r2は、307(mM.sec)^-1であった。実施例１ a) マグネタイト粒子を、FeCl₂.4H₂O(12.50g，6.29 x 10^-2mol)およびFeCl₃.6H₂ O(33.99g，1.26 x 10^-1mol)の水溶液から、激しく攪拌しながらNH₄OH（28-30% ，72ml）を素早く添加してpHを10より上にすることで、沈澱させた。この粒子を、磁力により集め、水にてpHが6-7になるまで洗浄した。この粒子を、およそ200 mlの水に分散させた。反応混合物を、デカンテーションし、再分散させた以外は N₂雰囲気下で保持した。HCl(pH3.5)により安定化した裸のマグネタイト粒子は、 97nmの平均流体力学直径を示した。ゼータ電位は、+36mVと測定された。r1は、2 7.8(mM.sec)^-1であり、r2は、324(mM.sec)^-1であった。 b) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.5gと等しい）を、水（70ml）で希釈し、これにヘパリン(2ml，Heparin 5000 IU/ml，Prod.no ．F1 NA，Nycomed Pharma，Oslo，Norway)を加えた。この分散物を、超音波処理し、4000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。磁化曲線は、ヘパリン粒子が超常磁性体であることを示し、HDCにより測定したところ、それらは48nmの平均直径を示した。マグネタイト結晶のサイズは、電子顕微鏡によりおよそ10nmと測定された。ゼータ電位は、-61mVと測定された。ヘパリンの54%が、mg鉄当たり10μg硫黄に対応する粒子表面に吸着した。r1は、 40.5(mM.sec)^-1であり、r2は、304(mM.sec)^-1であった。 c) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.5gと等しい）を、水（90ml）で希釈し、これに分子量が4,000〜6,000Dの低分子量のヘパリン( 0.8ml Fragmin 10,000 IU/ml，Kabi Pharmacia AB，Sweden)を加えた。この分散物を、超音波処理し、4000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過(0.22μmフィルタによる)した。磁化曲線は、ヘパリン粒子が超常磁性体であることを示した。飽和磁化は、78 emu/g 酸化鉄と測定された。粒子サイズは、PCSにより測定したところ、85nmであった。ゼータ電位は、-40mVと測定された。添加された高分子電解質の16%が、粒子表面に吸着された。 d) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.5gと等しい）を、水（70ml）で希釈し、これにヘパリン（1ml，Heparin 5000 IU/ml，Prod.no ．F1NA，Nycomed Pharma，Oslo，Norway）を加えた。この分散物を、超音波処理し、4000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。磁化曲線は、ヘパリン粒子が超常磁性体であることを示し、pcsにより測定したところ、それらは64nmの平均直径を示した。ヘパリンの69%が、mg鉄当たり７ μg硫黄に対応する粒子表面に吸着した。r1は、38(mM.sec)^-1であり、r2は、273 (mM.sec)^-1であった。実施例２実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(5ml)に溶解させたデルマタン硫酸（36mg，Sig ma C-241 3）を加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。デルマタン硫酸粒子は、H DCにより測定したところ、49nmの平均直径を示した。デルマタン硫酸の40%が、粒子表面に吸着した。ゼータ電位は、-58mVと測定された。実施例３実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(6ml)に溶解させたヒアルロン酸（60mg，Sigma H-401 5）を加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。磁化曲線は、ヒアルロン酸粒子が超常磁性体であることを示し、HDCにより測定したところ、それらは123nm の平均直径を示した。ゼータ電位は、-55mVと測定された。r1は、33.7(mM.sec)^- ¹ であり、r2は、318(mM.sec)^-1であった。実施例４実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水（5ml）に溶解させたコンドロイチン-4-硫酸（ 60mg，Sigma C-8529）を加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。磁化曲線は、コンドロイチン-4-硫酸粒子が超常磁性体であることを示し、HDCにより測定したところ、それらは54nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、-52mVと測定された。コンドロイチン-4-硫酸の29%が、粒子表面に吸着した。r1は、40.4(mM.sec)^-1であり、r2は、314(mM.sec)^-1であった。実施例５参考例７の酸化鉄処方物（デキストラン硫酸酸化鉄）および実施例１ｂおよびｄの酸化鉄処方物（ヘパリン酸化鉄）を、ヒト血漿とともに、インビトロで、1m g Fe/kgの投与量と等価の濃度で、インキュベートし、凝固パラメータの活性化部分トロンボプラスチン時間（APTT）へのそれらの影響について、Cephotest^TM( Nycomed Pharma AS)を用いて調べた。実施例１ｂおよびdにおけるヘパリン酸化鉄処方物は、それぞれ4.5および2.5の係数でヘパリン投与量に依存するように、APTTを延長した。これは、明らかに、用いられた被覆密度を最小化することの望ましさを示している。参考例７における処方物は、2.7の係数でAPTTを延長した。実施例６実施例１ｂおよびdの酸化鉄処方物（ヘパリン酸化鉄）を、ラット（n=3）に、１mgFe/kg（１ｂのみ）および２mgFe/kgの投与量で静脈投与し、注射前および注射後10分、30分および60分に、血液サンプルを抜き取った。凝固パラメータの活性化部分トロンボプラスチン時間（APTT）への処方物の影響について、Chepotes t^TM(Nycomed Pharma AS)を用いてインビトロで調べた。処方物は、投与量および時間に依存するようにAPTTを延長した。注射後10分および30分で、投与量2 mgFe /kgの実施例１ｂおよびdの処方物は、それぞれ4および1.5の係数でAPTTを延長した。投与量1 mgFe/kgの実施例１ｂの処方物は、10分で1.3の係数で、APTTを延長した。実施例７実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.1gと等しい）を、水（15ml）で希釈し、これに水に溶解させたヘパラン硫酸（Heparansulphate ）（20mg，Sigma H-7641）を加える。この分散物を、超音波処理し、遠心分離する。上澄みを集める。実施例８実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.1gと等しい）を、水（15ml）で希釈し、これに水に溶解させたケラタン硫酸（Keratansulphate ）（15mg，Sigma K-3001）を加える。この分散物を、超音波処理し、遠心分離する。上澄みを集める。実施例９ a) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(3ml)に溶解させたラムダ-カラゲナン(30mg ，Sigma C-3889)を加える。この分散物を、超音波処理し、4000rpmで13分間遠心分離し、ろ過（0.22μmフィルタによる）した。HDCにより測定すると、ラムダ- カラゲナン粒子は53nmの平均直径を示す。ゼータ電位は、-56mVと測定された。 b) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(5ml)に溶解させたラムダ-カラゲナン(50mg ，Sigma C-3889)を加える。この分散物を、超音波処理し、4000rpmで13分間遠心分離し、ろ過（0.22μmフィルタによる）した。HDCにより測定したところ、ラムダ-カラゲナン粒子は61nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、-61mVと測定された。r1は、38.6(mM.sec)^-1であり、r2は、309(mM.sec)^-1であった。 c) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水（1.5ml）に溶解させたラムダ-カラゲナン(1 5mg，Sigma C-3889)を加える。この分散物を、超音波処理し、4000rpmで13分間遠心分離し、ろ過（0.22μmフィルタによる）した。HDCにより測定したところ、ラムダ-カラゲナン粒子は52nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、-50mVと測定された。実施例１０ a) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(3ml)に溶解させたイオタ-カラゲナン(3 0mg，Fluka Prod 22045)を加える。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13 分間遠心分離し、ろ過（0.22μmフィルタによる）した。HDCにより測定したところ、イオタ-カラゲナン粒子は63nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、-47mVと測定された。 b) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(1.5ml)に溶解させたイオタ-カラゲナン（15 mg，Fluka 22045）を加える。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、ろ過（0.22μmフィルタによる）した。HDCにより測定したところ、イオタ-カラゲナン粒子は54nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、-39mVと測定された。実施例１１ a) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.5gと等しい）を、水（80ml）で希釈し、これに水（10ml）に溶解させた平均分子量がおよそ18 0,000Dのアルギン酸塩プロタナールＬＦ１０／６０（alginate Protanal LF 1 0/60）（50mg，Pronova，Drammen，Norway）を加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。HDCにより測定したところ、アルギン酸塩粒子は57nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、-63mVと測定された。r1は、39.9(mM.sec)^-1であり、r2は、305(m M.sec)^-1であった。 b) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.5gと等しい）を、水（80ml）で希釈し、これに水（10ml）に溶解させた平均分子量がおよそ32 5,000Dのアルギン酸塩プロタナールＬＦ６０（alginate Protanal LF 60）（2 5mg，Pronova，Drammen，Norway）を加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。HOCにより測定したところ、アルギン酸塩粒子は67nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、-58mVと測定された。 c) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水（15ml）に溶解させた平均分子量がおよそ38 0,000Dのアルギン酸塩プロタナールＬＦＲ５／６０（alginate Protanal LFR 5/60）（15mg，Pronova，Drammen，Norway）を加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。HDCにより測定すると、アルギン酸塩粒子は62nmの平均直径を示す。ゼータ電位は、-53mVと測定された。実施例１２ a) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水（3ml）に溶解させたカルボキシセルロースナトリウム（30mg）を加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。HDCにより測定したところ、カルボキシセルロース粒子は56nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、 -57mVと測定された。r1は、40.1(mM.sec)^-1であり、r2は、303(mM.sec)^-1であった。 b) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水（1.5ml）に溶解させたカルボキシセルロースナトリウム（15mg）を加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。HDCにより測定したところ、カルボキシセルロース粒子は65nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、-53mVと測定された。実施例１３ a) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに1%酢酸（4.5ml）に溶解させた分子量がおよそ2 000,000Dのキトサン（30mg，Fluka 22743）を加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。磁化曲線は、キトサン粒子が超常磁性体であることを示した。PCSにより測定したところ、その粒子サイズは64nmであった。ゼータ電位は、+48mVと測定された。r1は、35.1(mM.sec)^-1であり、r2は、281(mM.sec)^-1であった。 b) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに1%酢酸（7.5ml）に溶解させた分子量がおよそ2 000,000Dのキトサン（50mg，Fluka 22743）を加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。磁化曲線は、キトサン粒子が超常磁性体であることを示した。PCSにより測定したところ、その粒子サイズは64nmであった。ゼータ電位は、+47mVと測定された。 c) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに1%酢酸（2.25ml）に溶解させた分子量がおよそ 2000,000Dのキトサン（15mg，Fluka 22743）を加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。磁化曲線は、キトサン粒子が超常磁性体であることを示した。PCSにより測定したところ、その粒子サイズは64nmであった。ゼータ電位は、+47mVと測定された。実施例１４ a) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに1%酢酸(7.5ml)に溶解させた分子量がおよそ750 ,000Dのキトサン(50mg，Fluka 22742）を加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。磁化曲線は、キトサン粒子が超常磁性体であることを示した。PCSにより測定したところ、その粒子サイズは62nmであった。ゼータ電位は、+48mVと測定された。r1は、33.4(mM.sec)^-1であり、r2は、279(mM.sec)^-1であった。 b) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに1%酢酸（2.25ml）に溶解させた分子量がおよそ 750,000Dのキトサン（15mg，Fluka 22742）を加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。磁化曲線は、キトサン粒子が超常磁性体であることを示した。PCSにより測定したところ、その粒子サイズは64nmであった。ゼータ電位は、+49mVと測定された。実施例１５ a) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに1%酢酸(4.5ml)に溶解させた分子量がおよそ70, 000Dのキトサン（30mg，Fluka 22741）を加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。磁化曲線は、キトサン粒子が超常磁性体であることを示した。PCSにより測定したところ、その粒子サイズは62nmであった。ゼータ電位は、+49mVと測定された。r1は、34.3(mM.sec)^-1であり、r2は、327 (mM.sec)^-1であった。 b) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに1%酢酸（2.25ml）に溶解させた分子量がおよそ 70,000Dのキトサン（15mg，Fluka 22741）を加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。磁化曲線は、キトサン粒子が超常磁性体であることを示した。PCSにより測定したところ、その粒子サイズは64nmであった。ゼータ電位は、+48mVと測定された。実施例１６ a) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(3ml)に溶解させたポリ（4-スチレンスルホン酸ナトリウム）（30mg，Janssen 22.227.14）を加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。HDCにより測定したところ、ポリ（4-スチレンスルホン酸）粒子は43nm の平均直径を示した。ゼータ電位は、-53mVと測定された。 a) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(1.5ml)に溶解させたポリ（4-スチレンスルホン酸ナトリウム）(15mg，Janssen 22.227.14)を加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。HDCにより測定したところ、ポリ（4-スチレンスルホン酸）粒子は36nm の平均直径を示した。ゼータ電位は、-49mVと測定された。実施例１７ a) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(3ml)に溶解させた分子量が2,000-15,000Dのポリ-L-グルタミン酸(30mg，Sigma P-4636)を加えた。この分散物を、超音波処理し、4000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。磁化曲線は、ポリ-L-グルタミン酸粒子が超常磁性体であることを示し、HDC により測定したところ、それらは37nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、-68m Vと測定された。 b) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(5ml)に溶解させた分子量が2,000-15,000Dのポリ-L-グルタミン酸(50mg，Sigma P-4636)を加えた。この分散物を、超音波処理し、4000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。HDCにより測定したところ、ポリ-L-グルタミン酸粒子は38nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、-66mVと測定された。r1は、40.4(mM.sec)^-1であり、r2は、281(mM.sec)^-1であった。 c) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(1.5ml)に溶解させた分子量が2,000-15,000D のポリ-L-グルタミン酸(15mg，Sigma P-4636)を加えた。この分散物を、超音波処理し、4000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。HDCにより測定したところ、ポリ-L-グルタミン酸粒子は38nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、-65mVと測定された。実施例１８ a) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(3ml)に溶解させた分子量が15,000- 50,000Dのポリ-L-グルタミン酸(30mg，Sigma P-4761)を加えた。この分散物を、超音波処理し、4000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。HDCにより測定したところ、ポリ-L-グルタミン酸粒子は37nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、-66mVと測定された。 b) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(5ml)に溶解させた分子量が15,000-50,000D のポリ-L-グルタミン酸（50mg，Sigma P-4761）を加えた。この分散物を、超音波処理し、4000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。HDCにより測定したところ、ポリ-L-グルタミン酸粒子は36nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、-66mVと測定された。r1は、41.7(mM.sec)^-1であり、r 2は、286(mM.sec)^-1であった。 c) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(1.5ml)に溶解させた分子量が15,000-50,000 Dのポリ-L-グルタミン酸(15mg，Sigma P-4761)を加えた。この分散物を、超音波処理し、4000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過(0.22μmフィルタによる)した。HDCにより測定したところ、ポリ-L-グルタミン酸粒子は36nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、-63mVと測定された。実施例１９ a) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(3ml)に溶解させた分子量が50,000-100,000D のポリ-L-グルタミン酸(30mg，Sigma P-4886)を加えた。この分散物を、超音波処理し、4000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。磁化曲線は、ポリ-L-グルタミン酸粒子が超常磁性体であることを示した。HDCにより測定したところ、その平均直径は40nmであった。ゼータ電位は、-70mVと測定された。r1は、39.6(mM.sec)^-1であり、r2は、289 (mM.sec)^-1であった。 b) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(1.5ml)に溶解させた分子量が50,000-100,00 0Dのポリ-L-グルタミン酸(15mg，Sigma P-4886)を加えた。この分散物を、超音波処理し、4000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過(0.22μmフィルタによる) した。HDCにより測定したところ、その平均直径は39nmであった。ゼータ電位は、-66mVと測定された。実施例２０ a) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(3ml)に溶解させた分子量が15,000-50,000D のポリ-L-アスパラギン酸(30mg，Sigma P-6762)を加えた。この分散物を、超音波処理し、4000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。HDCにより測定したところ、その平均直径は42nmであった。ゼータ電位は、-65mVと測定された。 b) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(5ml)に溶解させた分子量が15,000-50,000D のポリ-L-アスパラギン酸(50mg，Sigma P-6762)を加えた。この分散物を、超音波処理し、4000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。HDCにより測定したところ、ポリ-L-アスパラギン酸粒子は40nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、-67mVと測定された。r1は、40.8(mM.sec)^-1であり、r2は、332(mM.sec)^-1であった。 c) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(1.5ml)に溶解させた分子量が15,000-50,000 Dのポリ-L-アスパラギン酸(15mg，Sigma P-6762)を加えた。この分散物を、超音波処理し、4000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過(0.22μmフィルタによる) した。HDCにより測定したところ、ポリ-L-アスパラギン酸粒子は44nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、-66mVと測定された。実施例２１ a) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(3ml)に溶解させた分子量が5,000-15,000Dのポリ-L-アスパラギン酸(30mg，Sigma P-5387)を加えた。この分散物を、超音波処理し、4000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。HDCにより測定したところ、ポリ-L-アスパラギン酸粒子は38nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、-67mVと測定された。r1は、41.1(mM.sec)^-1であり、r 2は、303(mM.sec)^-1であった。 b) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(5ml)に溶解させた分子量が5,000-15,000Dのポリ-L-アスパラギン酸(50mg，Sigma P-5387)を加えた。この分散物を、超音波処理し、4000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。HDCにより測定したところ、ポリ-L-アスパラギン酸粒子は37nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、-70mVと測定された。 c) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水（1.5ml）に溶解させた分子量が5,000-15,00 0Dのポリ-L-アスパラギン酸（15mg，Sigma P-5387）を加えた。この分散物を、超音波処理し、4000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過(0.22 μmフィルタによる)した。HDCにより測定したところ、ポリ-L-アスパラギン酸粒子は37nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、-65mVと測定された。実施例２２ a) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(3ml)に溶解させた分子量が2,000Dのポリアクリル酸(30mg，Aldrich 32,366-7)を加えた。この分散物を、超音波処理し、50 00rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。HDC により測定したところ、ポリアクリル酸粒子は50nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、-36mVと測定された。r1は、29.1(mM.sec)^-1であり、r2は、323(mM.sec)^-1 であった。 b) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(5ml)に溶解させた分子量が2,000Dのポリアクリル酸(50mg，Aldrich 32,366-7)を加えた。この分散物を、超音波処理し、50 00rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。HDC により測定したところ、ポリアクリル酸粒子は57nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、-29mVと測定された。 c) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(3ml)に溶解させた分子量が90,000Dのポリアクリル酸(30mg，Aldrich 19,205-8)を加えた。この分散物を、超音波処理し、遠心分離し、上澄みをろ過する。実施例２３ a) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(3ml)に溶解させた分子量が25,000-50,000D のポリガラクツロン酸（30mg，Fluka 81325）を、そこに数滴の1M NaOHを添加しながら加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.45μmフィルタによる）した。HDCにより測定したところ、ポリガラクツロン酸粒子は55nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、-60mVと測定された。 b) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(1.5ml)に溶解させた分子量が25,000-50,000 Dのポリガラクツロン酸（15mg，Fluka 81325）を、そこに数滴の1M NaOHを添加しながら加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.45μmフィルタによる）した。HDCにより測定したところ、ポリガラクツロン酸粒子は61nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、-55mVと測定された。実施例２４ a) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(3ml)に溶解させた分子量が1,000-4,000Dのポリ-L-リジン(30mg，Sigma P-0879)を加えた。この分散物を、超音波処理し、4 000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.45μmフィルタによる）した。PCS により測定したところ、その粒子サイズは102nmであった。ゼータ電位は、+47mV と測定された。 b) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(1.5ml)に溶解させた分子量が 1,000-4,000Dのポリ-L-リジン（15mg，Sigma P-0879）を加えた。この分散物を、超音波処理し、4000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.45μmフィルタによる）した。PCSにより測定したところ、その粒子サイズは108nmであった。ゼータ電位は、+46mVと測定された。実施例２５ a) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(5ml)に溶解させた分子量が15,000-30,000D のポリ-L-リジン(50mg，Sigma P-7890)を加えた。この分散物を、超音波処理し、4000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。磁化曲線は、ポリ-L-リジン粒子が超常磁性体であることを示した。PCSにより測定したところ、その粒子サイズは78nmであった。ゼータ電位は、+56mVと測定された。r1は、38.3(mM.sec)^-1であり、r2は、295(mM.sec)^-1であった。 b) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(1.5ml)に溶解させた分子量が15,000-30,000 Dのポリ-L-リジン(15mg，Sigma P-7890)を加えた。この分散物を、超音波処理し、4000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。 PCSにより測定したところ、その粒子サイズは89nmであった。ゼータ電位は、+57 mVと測定された。実施例２６ a) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(3ml)に溶解させた分子量が70,000-150,000D のポリ-L-リジン(30mg，Sigma P 1274)を加えた。この分散物を、超音波処理し、4000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。PCSにより測定したところ、その粒子サイズは94nmであった。ゼータ電位は、+57mVと測定された。 b) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(5ml)に溶解させた分子量が70,000-150,000D のポリ-L-リジン(50mg，Sigma P-1274)を加えた。この分散物を、超音波処理し、4000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。 PCSにより測定したところ、その粒子サイズは86nmであった。ゼータ電位は、+62 mVと測定された。r1は、36.9(mM.sec)^-1であり、r2は、294(mM.seC)^-1であった。 c) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(1.5ml)に溶解させた分子量が70,000-150,00 0Dのポリ-L-リジン(15mg，Sigma P 1274)を加えた。この分散物を、超音波処理し、4000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μmフィルタによる）した。PCSにより測定したところ、その粒子サイズは96nmであった。ゼータ電位は、+ 61mVと測定された。実施例２７ a) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(3ml)に溶解させた分子量が5,000-15,000Dの 1:1のポリ（Asp-Na，Glu-Na）(30mg，Sigma P 1408)を加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過(0.22μmフィルタによる)した。磁化曲線は、ポリ(Asp.Na，Glu.Na)粒子が超常磁性体であることを示し、HDCにより測定したところ、それらは38nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、-58mVと測定された。r1は、40.4 (mM-sec)^-1であり、r2は、277(mM.sec)^-1であった。 b) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(1.5ml)に溶解させた分子量が5,000-15,000D の 1:1のポリ(Asp-Na，Glu-Na)（15 mg，Sigma P1408）を加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過（0.22μm フィルタによる）した。HDCにより測定したところ、ポリ(Asp.Na，Glu.Na)粒子は、40n mの平均直径を示した。ゼータ電位は、-60mV と測定された。実施例２８実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子０．３９と等しい）を、水（50ml）で希釈し、これにエタノール(3ml)に溶解させた分子量が70,00 0-150,000Dの4:1のポリ(Glu，GluOEt)(30 mg，Sigma P4910)を、そこに数滴のHC lを添加しながら加えた。この分散物を、超音波処理し、遠心分離し、上澄みを集めた。実施例２９ a) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(5.7ml)に溶解させた分子量が150,000-300,0 00D の 1:4のポリ(Glu，Lys)（30 mg，Sigma P0650）を加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過(0.22μmフィルタによる)した。HDCにより測定したところ、ポリ(Glu,Lys)粒子は、79nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、+65mV と測定された。 b) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水(9.5ml)に溶解させた分子量が150,000-3 00,000D の 1:4のポリ(Glu，Lys)（50 mg，SigmaP0650）を加えた。この分散物を、超音波処理し、5000rpmで13分間遠心分離し、上澄みをろ過(0.22μm フィルタによる)した。HOCにより測定したところ、ポリ(Glu,Lys)粒子は、77nmの平均直径を示した。ゼータ電位は、+63mV と測定された。r1は、35.5(mM.sec)^-1であり、r2は、255(mM.sec)^-1であった。実施例３０ a) 実施例１ａのマグネタイト粒子の分散物（マグネタイト粒子0.3gと等しい）を、水（50ml）で希釈し、これに水に溶解させたデンドリマー（US-A-4,507,466 （The Dow Chemlcal Corporation）に従って製造したもの）(30mg)を加える。この分散物を、超音波処理し、5000rpm で13分間遠心分離し、上澄みを集める。安定性実施例３１以下の酸化鉄処方物の安定性を、121℃で15分間オートクレーブすることにより検討した：参考例５ｂおよび６ｂ、実施例１ａ、１ｂ、２、３、４、９ａ、１０ａ、１１ａ、ｂおよびｃ、１２ａ、１３ａ、ｂおよびｃ、１４ｂ、１５ａ、１６ａ、１７ａおよびｂ、１８ｂ、１９ａ、２０ａ、２１ｂ、２２ａ、２３ａ、２５ａ、２６ａ、２７ｂおよび２９ａ。実施例１ａの未被膜の酸化鉄粒子は、実験前に、HClを用いて分散させた。他の処方物に関しては何の調節も行わなかった。オートクレーブ直前および直後、並びに一日後及び一週間後に、処方物を試験した。実施例１ａのサンプルは、オートクレーブ後、完全に分離したことを示した。他の処方物は、極度な加熱によっては影響を受けず、オートクレーブ前およびオートクレーブ後の全経過点でも均一なサイズ分布を示した。実施例３２本発明の高分子電解質の典型的な例、ポリ(4- スチレン硫酸ナトリウム、PSSN a)の吸着を検討した。重合体収縮の関数としての、吸着等温線、並びに電気泳動移動度および粒子サイズの測定を行った。実施例１ａの未被膜の酸化鉄粒子を、実施例１６で説明したように、PSSNa で被膜したが、この分散物は超音波処理しなかった。酸化鉄に対する重合体の比、9 x 10^-3〜2.5 を与えるPSSNa量を用いた。図１は、酸化鉄結晶に対するPSSNaの吸着等温線を示す。未被膜の酸化鉄粒子は、PCSで測定したところ、130 ±5 nmのサイズであった。5.2 g/lの粒子密度を用いて、以下の式のように粒子の表面積を見積もることができる、表面積（m²/ml）= m.A / ρ.V （式中、mは ml当たりの粒子の質量であり、ρは粒子の密度であり、Ａおよびv は、それぞれ、単一粒子の面積および容積である。懸濁物中で見積もった表面積は、9.5 x 10^-3 m²/mlであることが分かった。最大吸着量は、26 mg/m²に相当し、これは多層の吸着重合体の構築または表面から伸びた重合体のトレイン（trai ns）/ループ(loops)の構築を示す。図２および３は、重合体濃度の関数としての、粒子の電気泳動移動度(E)およびそれらの流体力学直径を示す。電気泳動移動度は、未被膜の酸化鉄粒子に関しては4.2± 0.6 μm.cm/V.sであって、重合体濃度を上げると速やかに減少することが見出された。高い重合体濃度では、電気泳動移動度は約-4 μm.c m/v.sで一様になり、粒子サイズはpcsで測定した 230±20 nmで安定していると思われる。図１〜３における結果を、以下の表１に概略的に説明する。懸濁物のpHに対する、未被膜の酸化鉄、並びにPSSNa被膜酸化鉄の電気泳動移動度の測定結果を、図４に示す。未被膜の酸化鉄表面は、低いpHでの高い正の電気泳動移動性からより高いpHになればなるほど負の値が増加するようになる典型的な両性的性質を示す。等電点は、pH 7辺りに位置する。粒子表面の性質は、PS SNaで被膜したときに、完全に変化して、安定した酸性の性質を示す。この表面は、たとえ低いpHであっても高い負の電気泳動移動性を示し、高いpHでは僅かに幾らかより負の表面へと変化する。図４の結果は、元の酸化物の表面が、この重合体濃度での酸性重合体分子により、完全に被覆された証拠を示す図１〜３と一致する。図１：酸化鉄コロイド上のPSSNaの吸着。PSSNa濃度(mg/ml)に対する吸収量(mg/m l)。■および◆は、遠心によるフラクションであり、▲はろ過によるフラクションである。図２：PSSNa濃度(mg/ml)に対する酸化鉄コロイドの電気泳動移動度（μm.cm/V.s ）。図３：PSSNa濃度(mg/ml)に対する酸化鉄コロイドの粒子サイズ（nm）。図４：pHに対する純粋な酸化鉄コロイド(X)およびPSSNa被膜の酸化鉄コロイド(X )の電気泳動移動度（μm.cm/V.s）。実施例３３典型的な高分子電解質重合体、ヘパリンの酸化鉄粒子への吸着を検討した。ヘパリン濃度の関数としての、酸化鉄粒子の電気泳動移動度および粒子サイズの測定を行った。HClで安定化させた実施例１ａの裸の粒子を、実施例１ｂで説明したように、ヘパリンで被膜したが、この分散物を超音波処理する代わりに30秒間回転混合（whirlmixed）した。図５および６は、ヘパリン濃度に対する電気泳動移動度および粒子サイズを示す。ヘパリン量に対する電気泳動移動度および粒子サイズのプロフィールは、粒子表面への重合体の吸着を示す。正の酸化鉄表面上で負に帯電させた分子の量を増加させることで、先ず電気泳動移動度は減少し、次いで逆になる。懸濁物は、等電点近くで不安定化される。図５：添加したヘパリン濃度（μl/ml）に対する電気泳動移動度（μm.cm/V.s ）。図６：添加したヘパリン濃度（μl/ml）に対する粒子サイズ(μm)。安全性実施例３４参考例４の酸化鉄処方物（澱粉酸化鉄）および実施例１ｂの酸化鉄処方物（ヘパリン酸化鉄）を、ラビット(n=4-5)に、濃縮塊の迅速な静脈注射で投与した。１、2.5および10 mg Fe/kgの投与量を注射し、平均全身動脈圧(SAP)および平均肺動脈圧(PAP)を、注射後60分までで記録した。参考例４の処方物は、PAPに投与量依存の影響を示した。１mg Fe/kgでは何の変化も検出されなかったが、2.5mg Fe/kgについては、20±1 mmHgから23±1 mmHgまでの小さい増加が記録された。1 0mg Fe/kgの投与量は、平均PAPを22±3mmHgから33±6mmHgまで増加させた。より高い投与量は、平均SAPの129±10mmHg から117±8mmHgまでの穏やかな減少も与えた。PAPおよびSAPへの最大の影響は、注射後3-4分で記録され、応答は短期間（10分以下）持続した。実施例１ｂの処方物は、血行力学パラメータに何の影響も有さなかった。実施例３５参考例１の酸化鉄処方物（デキストラン酸化鉄）、４の酸化鉄処方物（澱粉酸化鉄）、５ｂの酸化鉄処方物（カルボキシデキストラン酸化鉄）および６ｂの酸化鉄処方物（リン酸デキストラン酸化鉄）および実施例１ｂの酸化鉄処方物（ヘパリン酸化鉄）、４の酸化鉄処方物（コンドロイチン-4-硫酸酸化鉄）および２５ａの酸化鉄処方物（ポリ-L-リジン酸化鉄）を、ラット(n=2-3)に、1 mg Fe/kg の投与量で、静脈投与した。循環する血小板の数を、投与後3、5、10および15分で記録した。参考例１および４の処方物は、血小板の数において、注射後３および５分で、注射前の値の10-17%までの著しい減少を引き起こした。参考例５ｂおよび６ｂの処方物も、類似して３および５分で、コントロールの50-60%までの有意な減少を与えた。全てのラットに関して、応答は迅速に回復し、コントロール値の75%-100%に等しい血小板数が15分以内で再獲得された。実施例１ｂ、４および２５ａは、循環する血小板の数に全く影響を有さないか、ほんの小さな影響しか有さなかった。実施例３６参考例１の酸化鉄処方物（デキストラン酸化鉄）、４の酸化鉄処方物（澱粉酸化鉄）、５ｂの酸化鉄処方物（カルボキシデキストラン酸化鉄）および６ｂの酸化鉄処方物（リン酸デキストラン酸化鉄）および実施例１ｂ、３ａの酸化鉄処方物（ヘパリン酸化鉄）、４の酸化鉄処方物（コンドロイチン-4-硫酸酸化鉄）、１１ａの酸化鉄処方物（アルギン酸酸化鉄）、１３ａの酸化鉄処方物（キトサン酸化鉄）、１７ａの酸化鉄処方物（ポリ-L-グルタミン酸酸化鉄）および２５ａの酸化鉄処方物（ポリ-L-リジン酸化鉄）を、ヒト血清とともに、インビトロで、１mg Fe/kgの投与量（全ての物質）および10mg Fe/kgの投与量(参考例４および５ｂ)と等価の濃度で、60分間37℃でインキュベートした。全ての処方物を、オートクレーブにより滅菌して、内毒素のないものにした。ヒト SC5b-a補体複合体（TCC）（Bering）に関する酵素免疫アッセイを、補体活性化を検討するために用いた。ザイモサンＡ(Sigma)を、正のコントロールとして、またデキストロース（5%）または水を負のコントロールとして用いた。参考例における処方物の全ては、TCC-レベルを十分に増加させた。この影響は、参考例５ｂにおけるサンプルに関して最も顕著であり、このサンプルは、負のコントロールと比較したとき、より少ない投与量の1 mg Fe/kgであっても、TCCにおいて６倍の増加を与えた。参考例１および４における処方物に関しては、TCCの投与量依存効果が観察された。測定されたTCC-レベルにおいて、低い投与量では２倍、また高い投与量では６倍の増加を与えた。参考例６ｂの処方物は、低い投与量の1 mg Fe/kgで、TCCを３倍増加させた。他の検討した処方物は、負のコントロールと比較したとき、TCCに全く影響をなさないか、またはほんの小さな影響しか有さなかった。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ)，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＬ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者ストランド，パーノールウェーエヌ−0755 オスロ，ノルデングファイエン 78エイ (72)発明者クレイヴネス，ジョーノールウェーエヌ−1166 オスロ，ミッドターセン５ (72)発明者ジャコブセン，アンネノールウェーエヌ−1353 ベルムスヴァーク，ウヴレトッペンハウグ 114

Claims

【特許請求の範囲】１．複合粒状材料からなり、この複合粒状材料は、その粒子が診断に有効な実質的に水不溶性の金属酸化物結晶性材料と多価イオン性被覆剤とからなり、前記粒子が300nm未満のサイズを有し、前記結晶性材料が1〜100nmの結晶サイズを有し、前記結晶材料の前記被覆剤に対する重量比が、1000：1〜11: 1であり、かつ前記被覆剤が天然または合成構造型多糖、合成ポリアミノ酸、生理学的に許容される合成重合体およびこれらの誘導体から選択されることを特徴とする診断剤。２．前記被覆剤が、ペクチン、ポリガラクツロン酸、グリコサミノグリカン、ヘパリン類、セルロースおよび海洋性多糖類から選択される天然または合成構造型多糖である請求項１に記載の診断剤。３．前記被覆剤が、デルマタン、ヘパリン、ヘパラン、ケラタン、ヒアルロン酸、カラゲナンおよびキトサンから選択される請求項２に記載の診断剤。４．前記被覆剤が、コンドロイチンである請求項２に記載の診断剤。５．前記被覆剤が、アルバラギン酸、グルタミン酸またはリジンの単独または共重合体である請求項１に記載の診断剤。６．前記被覆剤が、500〜2000000 Dの範囲の分子量を有する請求項１〜５の何れか１項に記載の診断剤。７．前記金属酸化物結晶の表面結合被覆剤に対する重量比が、少なくとも15： 1である請求項１〜６の何れか１項に記載の診断剤。８．前記金属酸化物結晶の表面結合被覆剤に対する重量比が、500：1〜20 : 1の範囲である請求項１〜６の何れか１項に記載の診断剤。９．前記金属酸化物結晶の表面結合被覆剤に対する重量比が、100：１〜25: 1 の範囲である請求項１〜６の何れか１項に記載の診断剤。 10．前記金属酸化物結晶が、超常磁性である請求項１〜９の何れか１項に記載の診断剤。 11．前記超常磁性結晶が鉄酸化物結晶である請求項１０に記載の診断剤。 12．前記粒子が、−10mV未満、または＋10mVを越えるゼータ電位を示す請求項１〜11の何れか１項に記載の診断剤。 13．少なくとも一種の生理学上許容される担体または賦形剤とともに、請求項１〜12の何れか１項に記載の診断剤を含む診断組成物。 14．請求項１に記載の診断剤の製造方法であって、 (i)９を越えるpHで、診断に有効で実質的に水不溶性の金属酸化物の1〜100nmの結晶と、被覆剤とを共沈させるか、または (ii)診断に有効で実質的に水不溶性の金属酸化物の1〜100nmの結晶を被覆剤で被覆し、これによって、300nm未満のサイズを有し、結晶の表面結合被覆剤に対する重量比が1000：1〜11：１であり、かつ該被覆剤が天然または合成構造型多糖およびその誘導体、合成ポリアミノ酸および生理学的に許容される合成重合体から選択される複合粒子を製造ことからなることを特徴とする診断剤の製造方法。 15．ヒトまたはヒト以外の身体のコントラスト増強イメージを形成する方法であって、上記身体に対して、請求項１〜13の何れか１項に記載の診断剤の懸濁物を投与し、該剤が分布する身体の少なくとも一部のイメージを形成することを特徴とするコントラスト増強イメージの形成方法。